TWI649319B - 雙環雜環化合物及其治療用途 - Google Patents

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Abstract

本發明有關新穎的雙環雜環化合物、包含此化合物之醫藥組成物、及此化合物於治療疾病例如癌症之用途。

Description

雙環雜環化合物及其治療用途
本發明有關新穎的雙環雜環化合物、包含該化合物之醫藥組成物、及該化合物於治療疾病例如癌症之用途。
IAP家族
細胞凋亡抑制蛋白(inhibitor of apoptosis protein，IAP)家族包括八個成員：XIAP、cIAP1、cIAP2、NAIP、ILP2、ML-IAP、生存素(survivin)及BRUCE(亦稱為apollon)。雖然IAP家族所有八個成員之確切機制尚未完全了解，但已知IAP家族成員可透過對細胞凋亡酵素之半胱天冬酶(caspase)家族成員直接抑制之能力，以抑制計畫性細胞死亡。所有IAP家族成員之共通結構特徵係為具有一至三重複之含約70個胺基酸之鋅結合摺疊單元，亦稱之桿狀病毒IAP重複(BIR)區域。
IAP與其他蛋白間之許多作用，係透過BIR區域之表面溝槽(groove)。BIR區域可依其胜肽鍵結專一性做分類。其中，BIR區域有三種類型：第III型區域，其透過第三位置(P3)之脯胺酸(proline)，而可專一性的與半胱天冬酶(及半胱天冬酶相似)胜肽鏈結合(例如XIAP BIR3)；第II型區域，係與第III型區域相似但不一定有脯胺酸(例如XIAP BIR2)；以及第I型區域，其不會與半胱天冬酶或其相似胜肽鏈結合(例如XIAP BIR1) (Eckelman et al. Cell Death and Differentiation 2008；15：920-928)。BIR係為小型Zn-配位的區域(約70個胺基酸)，且多種蛋白係使用其N端以與BIR區域溝槽作用。BIR拮抗劑(antagonist)可防止半胱天冬酶與BIR結合，進而增加半胱天冬酶活性，而導致IAP之自動泛素化作用(auto-ubiquitination)及蛋白酶體降解。
IAP在許多癌症中係過度表現，包括腎癌、黑色素瘤、大腸癌、肺癌、乳癌、卵巢癌及前列腺癌(Tamm et al., Clin. Cancer Research 2000；6(5)：1796-803)，且與腫瘤生長、致病機轉、及化學療法與放射線療法抗性相關(Tamm 2000)。
XIAP
XIAP係為分子量57kDa之蛋白質，其具有三個BIR區域(其第二及第三個BIR區域係與半胱天冬酶結合)及一個RING-型鋅手指(E3接合酶)。XIAP還會與多種除了半胱天冬酶以外之蛋白質結合，包括如TAK1及協同因子TAB1之接合酶受體、與銅體內平衡相關之MURR1 (Burstein et al., EMBO 2004；23：244-254)、如第二粒線體衍生之半胱天冬酶啟動劑(SMAC)之內生抑制劑、及如MAGE-D1、NRAGE等功能尚不清楚之蛋白質(Jordan et al., J. Biol. Chem. 2001；276：39985-39989)。
BIR3區域係結合並抑制半胱天冬酶-9，其係半胱天冬酶活化之粒線體路徑中之前端(apical)半胱天冬酶。BIR3區域之表面溝槽與半胱天冬酶-9小次單元之N端作用，使半胱天冬酶-9的活化位置無效而以非活化單體形式存在(Shiozaki et al., Mol. Cell 2003；11：519-527)。
除了半胱天冬酶結合外，XIAP亦透過其他機制抑制細胞凋亡。XIAP會與TAK1激酶及其協同因子TAB1形成一複合體(complex)，而活化JNK及MAPK訊息傳導路徑，進而造成NF-κB活化(Sanna et al., Mol Cell Biol 2002；22：1754-1766)。XIAP亦透過促進NF-κB移位至細胞核及促進IκB之降解作用(degradation)，而活化NFκB (Hofer-Warbinek et al., J. Biol. Chem. 2000；275：22064-22068, Levkau et al., Circ. Res. 2001；88：282-290)。
將細胞以XIAP轉染(transfected)後，可抑制對各種細胞凋亡刺激所產生之計畫性細胞死亡(Duckett et al., EMBO 1996；15：2685-2694, Duckett et al., MCB 1998；18：608-615, Bratton, Lewis, Butterworth, Duckett and Cohen, Cell Death and Differentiation 2002；9：881-892)。
XIAP在所有正常組織中泛素化表現，但在許多急性及慢性白血病、前列腺癌、肺癌、腎癌及其他癌症中病理上之表現有提升(Byrd et al., 2002；Ferreira et al., 2001；Hofmann et al., 2002；Krajewska et al., 2003；Schimmer et al., 2003；Tamm et al., 2000)。在原發性急性骨髓性白血病(AML)中，XIAP表現係與骨髓單核細胞白血病French-American-British(FAB)亞型M4/M5 (P＜0.05)相關，並與AML芽細胞(blast)中單核細胞標記表現相關。此外，亦發現XIAP在正常單核細胞中有過度表現，但此現象未見於顆粒型細胞中。在AML中，XIAP在細胞遺傳學上較有利的病患的表現，相較於在細胞遺傳學上較中等或差的病患的表現，明顯為低(n=74；P＜0.05) (Tamm et al., Hematol. J. 2004；5(6)：489-95)。
過度表現會造成細胞對多試劑療法產生抗藥性，並造成較差之疾病臨床治療效果，包括AML、腎癌、黑色素瘤(Tamm et al., Clin. Cancer Research 2000；6：1796-1803)及肺癌(Hofmann et al., J. Cancer Res. Clin. Oncology 2002；128 (10)：554-60)。
XIAP係透過轉錄起始作用之端帽非依類型機制(cap-independent mechanism)進行轉錄，其係透過在5’非轉錄區域之獨特的內部核糖體進入位點(IRES)序列單元進行。當多數的細胞蛋白合成受到抑制時，在細胞受到壓力的過程中，此機制可使XIAP mRNA活化轉錄。對細胞壓力所產生XIAP轉錄上升調節反應，會增加對誘發細胞死亡之放射線之抗性(Holcik et al., Oncogene 2000；19：4174-4177)。
XIAP抑制機制已經過數種技術進行體外研究，包括RAN基因沉默試驗、基因剔除試驗、胜肽配體模擬試驗及小分子拮抗劑等技術，且已被證實可以單一療法幫助細胞凋亡病提升多種腫瘤對化療的敏感性，包括膀胱癌(Kunze et al., 2008；28(4B)：2259-63)。XIAP基因剔除小鼠可在預期之孟德爾頻率(expected Mendelian frequency)下出生，而無顯著的生理或組織缺陷，並具有正常的壽命(Harlin et al., Mol. Cell Biol. 2001；21 (10)：3604-3608)。此結果顯示，當缺乏XIAP活性並不會對正常組織造成毒性，而可作為腫瘤細胞之治療窗(therapeutic window)。更深入的研究顯示，XIAP對於包括肝細胞之1型及2型細胞凋亡之間有很臨界性的區分，因此對於有肝症狀背景的病人應小心使用(Jost et al., Nature, 2009, 460, 1035-1041)。曾有人指出，在XIAP剔除小鼠中，cIAP1及cIAP2量係上升調節，而可透過補償機制以保護病變，故泛抑制(pan-inhibition)對於功能性的剔除(functional knockout)而言可能為必須。類似的，cIAP1及cIAP2剔除小鼠亦無病症(Conze et al., Mol. Biol. Cell 2005；25(8)：3348-56)。雖然IAP任一項缺乏並未在老鼠中造成明顯病症，但cIAP1及cIAP2或XIAP刪除卻會導致中期胚胎死亡(Moulin, EMBO J., 2012)。
如SMAC之內生IAP拮抗劑已用以使此家族成員做為治療劑標靶。SMAC胜肽使腫瘤細胞化療增敏，將SMAC胜肽與含鉑藥物及異體移植之腫瘤壞死因子α相關的誘導凋亡配體(TRAIL)共同使用時，可延遲腫瘤細胞生長(Fulda et al., Nat. Med. 2002；808-815；Yang et al., Cancer Res. 2003；63：831-837)。
信筒子醌(embellin)之天然物，係被認為可與XIAP之BIR3區域之表面溝槽結合，且其結合親和力係與天然SMAC胜肽相似。信筒子醌在體外可導致細胞株細胞凋亡，而延遲異體移植之腫瘤生長(Nikolovska-Coleska et al., J. Med. Chem. 2004；47(10)：2430-2440；Chitra et al., Chemotherapy 1994；40：109-113)。
XIAP反股寡核苷酸(antisense oligonucleotides)已被發展作為治療固態瘤及血液惡性腫瘤之治療藥劑。於體外試驗中，這些反股寡核苷酸可阻斷約70%之蛋白質表現，造成細胞凋亡，並使細胞具有化療敏感性，並可延遲體內試驗中之腫瘤生長。於這類藥劑中之其中一者AEG351156，已進行臨床試驗(Hu et al., Clin. Cancer Res. 2003；9：2826-2836；Cummings et al., Br. J. Cancer 2005；92：532-538)。
已發展之小分子XIAP拮抗劑包括擬胜肽及合成藥劑。擬胜肽係標靶BIR3區域，模擬半胱天冬酶-9結合至XIAP之SMAC阻斷，且被證實可以單一藥劑之形式誘導各種腫瘤細胞株之細胞凋亡，同時亦可作為化療增敏劑，且目前更進行臨床試驗中(Oost et al., J. Med. Chem. 2004；47：4417-4426；Sun et al., Bioorg. Med. Chem. Lett.2005；15：793-797)。
合成之BIR3及BIR2區域小分子拮抗劑，亦在各種不同模型中具有抗腫瘤效果，包括annexin-V染色之細胞凋亡誘導試驗、及在NCI60細胞株檢測盤中超過三分之一之IC50為＜10 μM。XIAP拮抗劑亦造成初級培養白血病細胞之計量相關細胞死亡，五種慢性淋巴性白血細胞株之五種均有細胞死亡，而五種急性骨髓性白血細胞株中之四種均觀察到細胞死亡(Schimmer et al., Cancer Cell 2004；5：25-35；Berezovskaya et al., Cancer Res. 2005；65(6)：2378-86)。
腫瘤細胞株中XIAP蛋白質量相當高，且與部份抗癌藥物之敏感性呈現負相關，特別是賽德薩(cytarabine)及其他核苷藥物(Tamm et al., Clin. Cancer Research 2000；6：1796-1803)。於兩種胰腺癌之預臨床模型體內試驗中，XIAP抑制可能與TRAIL-誘導抗癌活性相關(Vogler 2008)。基因表現及轉染研究顯示，細胞凋亡抑制劑XIAP表現量增加，係與失巢凋亡(anoikis)抗性相關，亦與人類循環性前列腺癌細胞存活有關，進而導致癌症轉移。小分子拮抗劑則被發現可在此等模型中達到抗轉移之效果(Berezovskaya et al., Cancer Res. 2005；65(6)：2378-86)。
亦已發現XIAP與癌症及其他疾病相關的其他路徑有關，且此發現有利於XIAP標靶藥劑之發展。XIAP之RING手指區域之E3接合酶活性可與TAB1及BMP受體(第一型)上游區域結合，表示XIAP可在TGF-β介導(TGF-β-mediated)路徑進行訊息傳遞(Yamaguchi et al., EMBO 1999；179-187)。黏著斑激酶(FAK)過度表現會導致XIAP表現上升調節(Sonoda et al., J. Biol. Chem. 2000；275：16309-16315)。E3接合酶可做為治療標靶，且目前已發展出能在其他蛋白質中(如MDM2)標靶E3接合酶活性之分子(Vassilev et al., Science 2004；303：844-848)。直接或間接抑制XIAP接合酶活性，亦可有效於治療癌症或其他疾病。細胞凋亡訊息傳遞調節異常，其可能導因於控制計畫性細胞死亡之IAP功能受到抑制，且與多種疾病相關，包括與細胞聚集(如，癌症、自體免疫、發炎反應、及再狹窄(restenosis))或失調，因過度細胞凋亡導致細胞損失之疾病(如，中風、心臟衰竭、神經變性(如阿茲海默症、帕金森氏症、亨丁頓舞蹈症、肌萎縮性脊髓側索硬化症)、AIDS、局部缺血(中風、心肌梗塞)及骨質疏鬆)。
XIAP係在實驗性自體免疫腦脊髓炎之重要的細胞凋亡調節因子及治療如多發性硬化(MS)之自體免疫疾病之潛在標靶藥物(Moore et al., 2004；203(1)：79-93)。在MS動物模式中，XIAP之反義-介導(antisense-mediated)剔除使癱瘓動物站起，暗示靶定XIAP及其他可能IAP可用在MS治療中 (Hebb et al., Curr. Drug Disc. Tech. 2008；5(1)：75-7)。
cIAP1、cIAP-2、XIAP及生存素在惡性胸膜間皮瘤會過度表現，且與人工培養的間皮瘤細胞對順鉑之抗藥性極度相關。循環之TNF-α量在間皮瘤患者中在進行手術腫瘤切除前，大幅高於進行手術後。TNF-α會造成IAP-1、IAP-2及XIAP之mRNA及蛋白質量增加(Gordon et al., 2007)。對暴露在石棉纖維下所造成之發炎反應而言，NF-κB上升調節則與間皮瘤存活與否高度相關(Sartore-Bianchi et al., 2007)。IAP拮抗劑具有反向調節TNF-α促生存效應(pro-survival effect)之潛力。
一但cIAP1及cIAP2減少，細胞株調節TNF-α表現之能力增加足以以自體分泌反應方式並殺死細胞，而此現象被認為對IAP活性相當重要(Nature Reviews Cancer (2010), 10(8), 561-74, Gryd-Hansen, M)。然而，於活體試驗上，特定腫瘤類型會被促發炎細胞因子網路包圍，因此腫瘤細胞在cIAP1/2減少時會轉為藉由細胞凋亡以殺死細胞，可透過TNF-α(或其他致死接受器細胞因子拮抗劑)啟動細胞凋亡，其中TNF-α(或其他致死接受器細胞因子拮抗劑)係在腫瘤微環境中被周圍細胞(如腫瘤相關巨噬細胞)或腫瘤細胞本身所生成。如乳癌、卵巢癌及黑色素瘤之特定腫瘤類型會顯示上述”發炎表現型”，其具有可作為IAP拮抗劑標靶之潛力。
cIAP1及cIAP2
細胞IAP(cIAP)1及2為密切相關的IAP家族成員，具有三個BIR區域、一個RING區域及一個半胱天冬酶募集(CARD)區域。功能性核輸出訊號係存在於cIAP1之CARD區域中，其與細胞分化高度相關(Plenchette et al., Blood 2004；104：2035-2043)。此CARD區域係特殊存在於蛋白質IAP家族中之cIAP1及cIAP2中。此兩個基因係前後存在於11q22染色體上，且其高度基因相似性被視為透過基因複製所造成。
如同XIAP及生存素，cIAP1係廣泛表現在腫瘤細胞株中，且特別在大腸直腸癌、肺炎、卵巢癌、腎癌、CNS及乳癌中高度表現(Tamm et al., Clin. Cancer Res. 2000；6：1796-1803)。cIAP2表現則一般較受到限制，且被認為受到cIAP1構成性的泛素化(ubiquitination)及降解而受到調節(Conze et al., Mol. Biol. Cell 2005；25(8)：3348-56；Mahoney et al., PNAS 2008；105：11778-11783)。用於判斷cIAP1及cIAP2是否為潛在致癌基因之免疫組織分析及西方墨點分析，顯示在多種肺癌中，cIAP1及cIAP2均以高或低基因拷貝數之方式過度表現(Dia et al., Human Mol. Genetics 2003；12(7)：791-801)。cIAP1表現量似乎與前期腺癌高度相關(Hofmann et al., J. Cancer Res. Clin. Oncology 2002；128(10)：554-60)。
與XIAP相同，cIAP1及cIAP2表現量增加及內源性抑制劑表現量減少，均與抗藥性有關。在體外試驗中發現，cIAP過度表現與對DNA烷基化試劑(如卡鉑定(carboplatin)、順鉑(cisplatin)及拓樸異構酶抑制劑VP-16)之抗藥性相關(Tamm et al., Clin. Cancer Res. 2000；6：1796-1803)。在順鉑及阿黴素(doxorubicin)治療後，發現於甲狀腺癌細胞中有較多之cIAP1及生存素。細胞對於如紫杉醇之化學治療藥劑的抗藥性，會造成SMAC表現減少，並造成粒線體分泌少量之SMAC蛋白質。cIAP1及生存素之下降調節能增加順鉑及阿黴素之細胞毒性，然而SMAC過度表現則可提升紫杉醇療效。然而，以RNA干擾所造成之cIAP1及生存素基因沉默，則會恢復順鉑及阿黴素之藥物敏感性(Tirrò et al.；Cancer Res. 2006；66(8)：4263-72)。
如LBW242之SMAC模擬物起先被認為主要標靶XIAP。然而，研究顯示cIAP1能透過細胞中自體泛素化而造成細胞降解(Yang et al., J. Biol. Chem. 2004；279(17)：16963-16970)，且可能與細胞凋亡相關。cIAP1及腫瘤壞死因子(TNF)-α誘導(或刺激)之siRNA，被發現具有合併協合性 (synergistically)，使得細胞株更具有藥物敏感性(Gaither et al. Cancer Res. 2007；67(24)：11493-11498)。
cIAP1及cIAP2係為NF-κB訊息傳遞路徑的重要調節因子，其參予了多種生物程序，特別是先天及後天免疫反應、及細胞增生與存活等。NF-κB路徑去調控(deregulation)則與發炎反應及癌症相關，包括肝炎及潰瘍性結腸炎、胃炎、肝細胞癌、結腸直腸癌及胃癌、及血管新生及癌症轉移等(Shen et al., Apoptosis 2009；14：348-363)。
在配位體結合上，TNF受體(TNFR)會募集TNFR-相關死亡區域(TRADD)及受體相互作用蛋白(RIP)1。而後，TRAF2及cIAP1/cIAP2被募集而形成大細胞膜複合體。RIP1經泛素化後，此些聚泛素鏈則作為下游激酶結合位址，而造成NF-κB路徑訊息傳遞效果(Ea et al., Mol. Cell 2006；22：245-257；Wu et al., Nat. Cell Biol. 2006；8：398-406)。雖然衍生作用相當複雜且仍未完全清楚，但cIAP1及cIAP2被認為是TNF-α介導NF-κB訊息調控及配位體非依賴/典型NF-κB訊息傳遞之關鍵因子(Varfolomeev et al., Cell 2007；131(4)：669-81)。cIAP1及cIAP2可與TRAF2結合，其中TRAF2係為一在典型及交互NF-κB訊息傳遞路徑、及MAPK訊息傳遞路徑之銜接蛋白(Rothe et al., Cell 2005；83：1243-1252)。在體外試驗上，cIAP1及cIAP2可直接標靶RIP1進行泛素化(Betrand et al., Mol.Cell 2008；30：689-700)。
TNF-α調控許多細胞功能，包括細胞凋亡、發炎反應、免疫反應及細胞生長與分化(Trace et al., Annu. Rev. Med.1994；45：491-503)，且治療用IAP拮抗劑則在這些細胞功能受到影響的情況下可有效。
許多惡性腫瘤會產生TNF-α，是癌症相關炎症的關鍵驅動者之一，其驅動腫瘤發展及/或進展。 cIAPs保護癌細胞免於TNF-α的致死作用。
NAIP
NAIP係第一個被發現之IAP (Roy et al., Cell 1995；80：167-178)。NAIP在IAP中相當特殊，因其具有核苷酸結合及寡聚化區域且富含白胺酸(leucine)重複序列，此富含白胺酸重複序列與一般先天免疫相關蛋白中之富含亮氨酸重複序列相似。目前顯示，NAIP亦在包含乳癌及食道癌之部份癌症中過度表現(Nemoto et al., Exp. Mol. Pathol. 2004；76(3)：253-9)，且在MS中亦過度表現(Choi et al., J. Korean Med. 2007；22 Suppl：S17-23；Hebb et al., Mult. Sclerosis 2008；14(5)：577-94)。
ML-IAP
黑色素瘤細胞凋亡抑制蛋白(ML-IAP)包含單一BIR及RING手指結構。於死亡受體及化學治療藥劑所導致之細胞凋亡中，ML-IAP係為相當有效之抑制劑，且可作為下游效應子半胱天冬酶(downstream effector caspase)之直接抑制劑(Vucic et al., Curr. Biol. 2000；10(21)：1359-66)。ML-IAP亦稱為含桿狀病毒IAP重複段之蛋白7 (BIRC7)、腎臟細胞凋亡抑制蛋白(KIAP)、RING手指蛋白50 (RNF50)及凋亡抑制劑(Livin)。ML-IAP之BIR區域具有抗細胞凋亡活性必須之演化上保守結構(evolutionarily conserved fold)。目前發現，大部分的黑色素瘤細胞株表現高量的ML-IAP，但初級黑色細胞之ML-IAP表現幾乎偵測不到。黑色素瘤細胞對藥物導致之細胞凋亡更有顯著抗性。ML-IAP表現增加會造成黑色素瘤細胞對細胞凋亡刺激之抗性，並與其惡性腫瘤之致病機制潛在相關。
ILP2
ILP-2，亦稱為BIRC8，係具有單一BIR區域以及RING區域。ILP-2僅表現在睪丸正常細胞中，且與半胱天冬酶9結合(Richter et al, Mol. Cell. Biol. 2001；21：4292-301)。
生存素
生存素，亦稱為BIRC5，係抑制半胱天冬酶3及半胱天冬酶7，但其主要功能係為細胞有絲分裂調控，而非細胞凋亡調控。生存素可幫助有絲分裂紡綞體中微小管生成，且在細胞週期中參與細胞凋亡。生存素之細胞凋亡抑制在大腸直腸癌(Kawasaki et al., Cancer Res. 1998；58(22)：5071-5074)及第三期胃癌(Song et al., Japanese J. Clin. Oncol. 2009；39(5)：290-296)中效果不佳。
BRUCE
BRUCE(含BIR重複段之泛素化結合酵素)係為反式高爾基體網絡結構(trans-Golgi network)周圍膜蛋白，其具有單一BIR區域，並與生存素最為相似。BRUCE可透過三種機制加以抑制：(i) SMAC結合、(ii) HtrA2蛋白酶及(iii)半胱天冬酶介導裂解。此外，BRUCE亦可透過其泛素化結合(UBC)區域，而作為E2/E3泛素接合酶。
本發明提供化學式(I)化合物。本發明提供可用於治療之化合物，特別是用於癌症治療。化學式(I)化合物可為IAP蛋白家族之拮抗劑，尤其是XIAP及/或cIAP (如cIAP1 及/或cIAP2)之拮抗劑，可用於治療IAP介導之異常身體狀況。
依據本發明之第一態樣，提供化學式(I)化合物：(I) 或其互變異構物、其立體化學異構物、其醫藥上可接受之鹽、或其溶劑合物； 其中， X為CR4 、N或NR3 ； 其中， 當X為CR4 ，則U表示氮及R6 表示側氧基(oxo)；或 當X為N，則U表示碳及R6 表示羥甲基或-CH(ORx )CH2 ORz ；或 當X為NR3 ，則U表示碳及R6 表示側氧基； 虛線鍵(dashed bond) (-------)表示單鍵或雙鍵，其中該等虛線鍵之至少二者表示雙鍵； R1 及R2 係獨立表示氫或甲基； R3 表示氫、甲基或–NH2 ； R4 表示氫、甲基、羥甲基、–NH2 或氟； R5 表示未經取代之正丁基、或在苯基上有一或二個氟取代之苯甲基；以及 Rx 及Rz 係獨立表示氫或甲基。
於本發明之另一態樣，提供化學式(I)化合物以用於預防或治療如本文中所述之疾病或病徵、一種包括化學式(I)化合物之醫藥組成物、及合成化學式(I)化合物的方法。
定義
除非說明書中另有指明，否則，本發明說明書中全部章節所指之化學式(I)(包括本發明之用途、方法或其他態樣)均包括本文中所定義之所有其他次化學式(sub-formula)、次群組(sub-group)、較佳態樣(preference)、實施例及實驗例。
“IAP”吾人係指IAP家族成員XIAP、cIAP (cIAP1及/或cIAP2)、NAIP、ILP2、ML-IAP、生存素及/或BRUCE之任一者，較佳為XIAP、cIAP1、cIAP2、ML-IAP，更佳為XIAP、cIAP1及/或cIAP2，最佳為XIAP及/或cIAP1。特別是，意指IAP之BIR區域，較佳為XIAP、cIAP1或cIAP2之BIR區域。
“一或多個IAP家族成員”吾人係指IAP家族成員中之任一者，較佳為XIAP、cIAP1及/或cIAP2，更佳為XIAP及/或cIAP1。
“藥效”係指藥物活性之測量，其係以能產生預定強度效果的量來表示。強效藥在低濃度時可引發較大的反應。藥效係與親和力(affinity)與功效(efficacy)成正比。親和力係指藥物結合受體之能力。功效係受體佔有與引發分子、細胞、組織或系統反應之能力間的關係。
“拮抗劑”係指能阻斷或抑制增效劑介導生物反應之受體配體或藥物之類型。拮抗劑具有對其同源受體之親和力，但不具有對其同源受體之促效力，且結合後會阻斷在受體上之任何配體(如：內源性配體或受質、促效劑或返效劑)之相互作用，及阻斷其功能。拮抗作用可直接或間接引起，並可在任何生理階段中被任何機制所介導。間接拮抗作用之例子，可為cIAP之間接拮抗作用，造成cIAP泛素化而降解。因此，配體之拮抗作用可在不同環境下以不同的作用方式進行。拮抗劑係與受體之活性位點(active site)或異位(allosteric site)結合以產生拮抗作用，或者可與非一般之和受體活性生理調節相關之特定結合位點相互作用。拮抗劑活性可為可逆或不可逆，其係取決於拮抗劑-受體複合體之維持時間長短，而此係與拮抗劑受體結合特性有關。
於本文中，“治療”係指無論是針對人類或動物(即獸醫應用)在處理異常身體狀況(如：病徵、異常或疾病)之領域上，一般係與治療或療法有關，其中達成某種所欲的療效，例如抑制異常身體狀況發展，其包含減緩疾病發展速度、暫停疾病發展速度、改善異常身體狀況、消除或減緩與異常身體狀況相關或由異常身體狀況所引起之至少一症狀、及治癒異常身體狀況。例如，治療可為失調(disorder)之一或多種症狀的消除、或失調之完全根除。
“預防”(即，化合物作為預防措施之用途)，係指無論是針對人類或動物(即獸醫應用)在處理異常身體狀況(如：病徵、異常或疾病)之領域上，一般係與預防或防止有關，其中達到某種所欲之防止效果，例如防止疾病發生或不受疾病感染。預防包括不定期完全及整體阻止失調的所有症狀，減緩疾病一或多種症狀發作，或使不易發病。
在此所指之預防或治療如癌症之疾病狀態或異常身體狀況，包括減緩或減少癌症之發生率。
於本文中，所述之與IAP連用之”介導(mediated)”一詞(同時亦使用於如各種生理程序、疾病、狀態、異常身體狀況、療法、治療或介入)，意在限縮，使得使用該詞的各種生理程序、疾病、狀態、異常身體狀況、療法、治療及介入為彼等有蛋白質於其中發揮生物學作用者。當”介導”一詞用於疾病、狀態或異常身體狀況時，蛋白質之生物學作用係直接或間接的，且必須及/或足以使疾病、狀態或異常身體狀況(或其病因或進展)之症狀表現出來。因此，蛋白質作用(特別是作用異常，如過度或過少表現)並不一定是疾病、狀態或異常身體狀況之近因；反而是可以設想此等被介導的疾病、狀態或異常身體狀況包括彼等具有多重病因和複雜發展者，其中問題中的蛋白質僅部分參與。當”介導”一詞用於治療、預防或介入時，蛋白質之作用可為直接或間接，且必須及/或足以造成治療、預防或介入之結果。因此，由蛋白質所介導之疾病狀態或異常身體狀況，包括對任何特定癌症藥物或治療之抗性發展。
相對於個別化合物/藥劑個別投藥的治療效果，發明的結合可產生治療有效(efficacious)的效果。
“有效(efficacious)”一詞包括有利的效果，如加成、協同、降低副作用、降低毒性、增加疾病進展的時間、增加存活時間、使一藥劑對另一藥劑具敏感性或復敏性(resensitization)、或增進回應速度。有利的是，有效的效果可使各成份投藥給病人的劑量降低，藉以降低化療毒性，而產生及/或維持相同療效。“協同”效果一詞於本文中意指當藥劑組合時所製造的療效大於其個別存在時之總合的療效。“加成”效果一詞於本文中意指當藥劑組合時所製造的療效大於其任一個別存在時的療效。本文中“反應率(response rate)”，在固態瘤的情形下，意指在所給時間點(例如12週)腫瘤尺寸減少的程度。因此，例如，50%反應率意指腫瘤尺寸減少50%。本文“臨床反應(clinical response)”意指50%或更大的反應率。“部分反應(partial response)”於本文中定義為小於50%的反應率。
如本文所使用的“組合”一詞，適用於兩種或多種化合物及/或藥劑，意在界定其中有兩種或更多種藥劑相關聯的材料。“被組合(的)”及“組合”於本文中將被相應的解釋。
於一組合中，兩種或多種化合物及/或藥劑的締合可為物理或非物理性。物理性締合的化合物/藥劑的實例包括： •包含有二或更多種化合物/藥劑混合在一起(例如在相同單元劑量內)的組成物(例如單一配方)； •包含有其中二或更多種化合物/藥劑為化學/物理性連結(例如交聯、分子聚集、或結合至一共同載劑部分)之材料的組成物； •包含有其中二或更多種化合物/藥劑為化學/物理性共同封裝(例如，置放於脂質載劑、顆粒(例如微米或奈米顆粒)、或乳液液滴上或內)的組成物； •其中有二或更多種化合物/藥劑共同封裝或共同呈現(例如，作為單位劑量陣列的一部分)之藥學套組、藥學包或病患包。
非物理性締合的化合物/藥劑的實例包括： •包含二或多種化合物/藥劑中之至少一者之材料(例如非單一配方)，並連同供至少一種化合物之臨場締合(extemporaneous association)以形成二或多種化合物/藥劑之物理性締合用之教示； •包含二或多種化合物/藥劑中之至少一者之材料(例如非單一配方)，並連同供二或多種化合物/藥劑進行組合療法之教示； •包含二或多種化合物/藥劑中之至少一者之材料，並連同供投藥予病患(其中二或多種化合物/藥劑中之其它者業已(或正在)投藥)用之教示； •包含二或多種化合物/藥劑中之至少一者之材料，其量或其形式乃特別適於與二或多種化合物/藥劑中之其它者組合使用。
如本文所用之“組合治療”一詞意指包含使用二或多種化合物/藥劑之組合(如上述定義)。因此，參照“組合治療”，於本申請案中，“組合”及化合物/藥劑以“組合方式”使用，可指作為同一整體治療方案中之一部分之所投服之化合物/藥劑。就此而言，二或多種化合物/藥劑中之每一者之劑量學可能互異：每一者可在相同時間或在不同時間投藥。因此，可知組合中之化合物/藥劑可接續(例如前後)或同時，以同一藥學配方(即，一起)、或以不同之藥學配方(即，個別)投藥。同一配方同時投藥者為單一配方，而不同藥學配方同時投藥則為非單一。組合療法中之二或多種化合物/藥劑中之每一者之劑量學，相對於投藥路徑而言，亦可不同。
如本文所用之“藥學套組”一詞定義為一陣列之一或多種單位劑量之藥學組成物，連同計量裝置(例如測量裝置)及/或遞送器具(例如吸入器或注射器)，且選擇性的全部含在共同之外包裝內。在含有二或多種化合物/藥劑之組合之藥學套組中，個別之化合物/藥劑可為單一或非單一配方。單位劑量可含於罩板包裝(blister pack)內。藥學套組可選擇性的另包含使用教示。
如本文所用之“藥學包”乃定義為一陣列之一或多種單位劑量之藥學組成物，且選擇性的包含在共同外包裝內。在含有二或多種化合物/藥劑之組合之藥學包中，個別之化合物/藥劑可為單一或非單一配方。單位劑量可含於罩板包裝(blister pack)內。藥學包可選擇性的另包含使用教示。
本文中所使用之“正丁基”一詞指含有4個碳原子之線性烷基。
本文中所使用之“側氧基(oxo)”一詞指=O基。
虛線鍵(-------)表示完成被化學鍵連接的原子的價所需要的單鍵或雙鍵。應理解的是在一些情況下，該鍵具有芳族特性。虛線鍵(-------)表示單鍵或雙鍵，使得含X及U的環含有至少二個雙鍵。
由化學式(I)可了解本發明之化合物可以下列表示：
其中，Q表示下列A、B或C之任一者：
於一具體實施例中，Q表示A。於一具體實施例中，Q表示B。於一具體實施例中，Q表示C。
於一具體實施例中，X表示CR4 或N。於另一具體實施例中，X表示CR4 或NR3 。於另一具體實施例中，X表示N或NR3 。於又一具體實施例中，X表示CR4 。於又另一具體實施例中，X表示N。另仍又另一具體實施例中，X表示NR3 。
於一具體實施例中，R1 及R2 之一者表示氫及另一者表示甲基，或R1 及R2 二者均表示氫。於一具體實施例中，R1 及R2 之一者表示氫及另一者表示甲基。 於又一具體實施例中，R1 表示甲基及R2 表示氫。於另一具體實施例中，R1 表示氫及R2 表示甲基。於又另一具體實施例中，R1 及R2 二者均表示氫。
於一具體實施例中，R3 表示氫或甲基。於另一具體實施例中，R3 表示氫或–NH2 。於又另一具體實施例中，R3 表示甲基或–NH2 。於又一具體實施例中，R3 表示氫。於又另一具體實施例中，R3 表示甲基。於仍又另一具體實施例中，R3 表示–NH2 。
於一具體實施例中，R4 表示氫或甲基。於又一具體實施例中，R4 表示氫。於另一具體實施例中，R4 表示甲基。
於一具體實施例中，R5 表示未經取代之正丁基或在苯基之位置2、3及/或4上有一或二個氟取代之苯甲基。於一具體實施例中，R5 表示未經取代之正丁基。於另一具體實施例中，R5 表示在苯基上有一或二個氟取代之苯甲基。於又一具體實施例中，R5 表示在苯基之位置2、3及/或4上有一或二個氟取代之苯甲基。於又一具體實施例中，R5 表示在苯基之位置2、3及/或4上有一個氟取代之苯甲基(即，R5 表示2-氟苯甲基、3-氟苯甲基或4-氟苯甲基)。於又一具體實施例中，R5 表示在苯基之位置4上有一個氟取代之苯甲基(即，R5 表示4-氟苯甲基)。於又一具體實施例中，R5 表示在苯基之位置2與3、3與4、或2與4上有二個氟取代之苯甲基(即，R5 表示2,3-二氟苯甲基、3,4-二氟苯甲基或2,4-二氟苯甲基)。於仍又一具體實施例中，R5 表示在苯基之位置2、4上有二個氟取代之苯甲基(即，R5 表示2,4-二氟苯甲基)。
於又一具體實施例中，R5 表示未經取代之正丁基、4-氟苯基或2,4-二氟苯基。於再一具體實施例中，R5 表示4-氟苯基。
於一具體實施例中，R6 表示羥甲基或-CH(ORx )CH2 ORz 。於一具體實施例中，R6 表示羥甲基。
於一具體實施例中，R6 表示-CH(ORx )CH2 ORz 。於一具體實施例中，Rx 及Rz 之一者表示氫及另一者表示甲基或Rx 及Rz 二者均表示氫。於又一具體實施例中，Rx 表示甲基及Rz 表示氫。於另一具體實施例中，Rx 表示氫及Rz 表示甲基。於又另一具體實施例中，Rx 及Rz 二者均表示氫。於又一具體實施例中，Rx 表示氫或甲基及Rz 表示氫。於又另一具體實施例中，Rx 及Rz 二者均表示甲基。
於一具體實施例中，R6 表示羥甲基、-CH(OH)CH2 OH、-CH(OMe)CH2 OH或-CH(OH)CH2 OMe。於又一具體實施例中，R6 表示羥甲基、-CH(OH)CH2 OH或-CH(OMe)CH2 OH。於仍又一具體實施例中，R6 表示羥甲基。
於一具體實施例中，R6 表示側氧基 (即，=O)。
次化學式(Sub-Formulae)
於一具體實施例中，化學式(I)化合物為其中： X為CR4 、N或NR3 ； 其中， 當X為CR4 ，則U表示氮及R6 表示側氧基；或 當X為N，則U表示碳及R6 表示羥甲基或-CH(ORx )CH2 ORz ；或 當X為NR3 ，則U表示碳及R6 表示側氧基； 虛線鍵(-------)表示單鍵或雙鍵，其中該虛線鍵之至少二者表示雙鍵； R1 及R2 之一者表示氫及另一者表示甲基或R1 及R2 二者均表示氫； R3 表示氫、甲基或–NH2 ； R4 表示氫或甲基； R5 表示未經取代之正丁基或在苯基之位置2、3及/或4上有一或二個氟取代之苯甲基；及 Rx 及Rz 之一者表示氫及另一者表示甲基或Rx 及Rz 二者均表示氫。
於又一具體實施例中，化學式(I)化合物為其中： X為CR4 、N或NR3 ； 其中， 當X為CR4 ，則U表示氮及R6 表示側氧基；或 當X為N，則U表示碳及R6 表示羥甲基或-CH(ORx )CH2 ORz ；或 當X為NR3 ，則U表示碳及R6 表示側氧基； 虛線鍵(-------)表示單鍵或雙鍵其中該虛線鍵之至少二者表示雙鍵； R1 及R2 之一者表示氫及另一者表示甲基或R1 及R2 二者均表示氫； R3 表示氫、甲基或–NH2 ； R4 表示氫或甲基； R5 表示未經取代之正丁基、4-氟苯甲基或2,4-氟苯甲基； Rx 表示氫或甲基；及 Rz 表示氫。
於一具體實施例中，化學式(I)化合物為化學式(Ia)化合物：(Ia) 或其互變異構物、其立體化學異構物、其醫藥上可接受之鹽、或其溶劑合物；其中，R1 、R2 、R4 及R5 如具體實施例之任一者所定義。
於化學式(Ia)化合物之一具體實施例中，R1 及R2 之一者表示氫及另一者表示甲基或R1 及R2 二者均表示氫。於化學式(Ia)化合物之又一具體實施例中，R1 表示氫及R2 表示甲基或R1 及R2 二者均表示氫。
於化學式(Ia)化合物之再一具體實施例中，R1 表示甲基及R2 表示氫。於化學式(Ia)化合物之另一具體實施例中，R1 表示氫及R2 表示甲基。
於化學式(Ia)化合物之一具體實施例中，R4 表示氫或甲基。
於化學式(Ia)化合物之一具體實施例中，R5 表示未經取代之正丁基或在苯基之位置2、3及/或4上有一或二個氟取代之苯甲基。於化學式(Ia)化合物之一具體實施例中，R5 表示未經取代之正丁基。於化學式(Ia)化合物之另一具體實施例中，R5 表示在苯基上有一或二個氟取代之苯甲基。於化學式(Ia)化合物之又一具體實施例中，R5 表示在苯基之位置2、3及/或4上有一或二個氟取代之苯甲基。於化學式(Ia)化合物之又一具體實施例中，R5 表示在苯基之位置4上有一個氟取代之苯甲基(即，R5 表示4-氟苯甲基)。於化學式(Ia)化合物之又一具體實施例中，R5 表示在苯基之位置2、4上有二個氟取代之苯甲基(即，R5 表示2,4-二氟苯甲基)。
於一具體實施例中，化學式(I)化合物為化學式(Ib)化合物：(Ib) 或其互變異構物、其立體化學異構物、其醫藥上可接受之鹽、或其溶劑合物； 其中，R1 、R2 、R5 、R6 、Rx 及Rz 如此等具體實施例之任一者所述。於一具體實施例中，R6 表示羥甲基或-CH(ORx )CH2 ORz 。
於化學式(Ib)化合物之一具體實施例中，R1 表示甲基及R2 表示氫或R1 及R2 二者均表示氫。
於化學式(Ib)化合物之又一具體實施例中，R1 及R2 二者均表示氫。
於化學式(Ib)化合物之一具體實施例中，R5 表示未經取代之正丁基或在苯基之位置2、3及/或4有一或二個氟取代之苯甲基。於化學式(Ib)化合物之一具體實施例中，R5 表示未經取代之正丁基。於化學式(Ib)化合物之另一具體實施例中，R5 表示在苯基上有一或二個氟取代之苯甲基。於化學式(Ib)化合物之又一具體實施例中，R5 表示在苯基之位置2、3及/或4上有一或二個氟取代之苯甲基。於化學式(Ib)化合物之又一具體實施例中，R5 表示在苯基之位置2、3及/或4上有一個氟取代之苯甲基(即，R5 表示2-氟苯甲基、3-氟苯甲基或4-氟苯甲基)。於化學式(Ib)化合物之又一具體實施例中，R5 表示在苯基之位置2、4上有二個氟取代之苯甲基(即，R5 表示2,4-二氟苯甲基)。於化學式(Ib)化合物之仍又一具體實施例中，R5 表示在苯基之位置4上有一個氟取代之苯甲基(即，R5 表示4-氟苯甲基)。
於化學式(Ib)化合物之一具體實施例中，R6 表示羥甲基、-CH(OH)CH2 OH、-CH(OMe)CH2 OH或-CH(OH)CH2 OMe。
於化學式(Ib)化合物之又一具體實施例中，R6 表示羥甲基、-CH(OH)CH2 OH或-CH(OMe)CH2 OH。
於化學式(Ib)化合物之仍又一具體實施例中，R6 表示羥甲基。
於一具體實施例中，化學式(I)化合物為化學式(Ic)化合物：(Ic) 或其互變異構物、其立體化學異構物、其醫藥上可接受之鹽、或其溶劑合物；其中，R1 、R2 、R4 及R5 如具體實施例之任一者所定義。
於化學式(Ic)化合物之一具體實施例中，R1 及R2 之一者表示氫及另一者表示甲基或R1 及R2 二者均表示氫。於化學式(Ic)化合物之又一具體實施例中，R1 表示甲基及R2 表示氫或R1 及R2 二者均表示氫。
於化學式(Ic)化合物之一具體實施例中，R3 表示氫或甲基。於化學式(Ic)化合物之另一具體實施例中，R3 表示氫或-NH2 。於化學式(Ic)化合物之又另一具體實施例中，R3 表示甲基或-NH2 。於化學式(Ic)化合物之又一具體實施例中，R3 表示氫。於化學式(Ic)化合物之又另一具體實施例中，R3 表示甲基。於化學式(Ic)化合物之仍又另一具體實施例中，R3 表示-NH2 。
於化學式(Ic)化合物之一具體實施例中，R5 表示未經取代之正丁基或在苯基之位置2、3及/或4有一或二個氟取代之苯甲基。於化學式(Ic)化合物之一具體實施例中，R5 表示未經取代之正丁基。於化學式(Ic)化合物之另一具體實施例中，R5 表示在苯基上有一或二個氟取代之苯甲基。於化學式(Ic)化合物之又一具體實施例中，R5 表示在苯基之位置2、3及/或4上有一或二個氟取代之苯甲基。於化學式(Ic)化合物之又一具體實施例中，R5 表示在苯基之位置2或4上有一個氟取代之苯甲基(即，R5 表示2-氟苯甲基或4-氟苯甲基)。於化學式(Ic)化合物之又一具體實施例中，R5 表示在苯基之位置2上有一個氟取代之苯甲基(即，R5 表示4-氟苯甲基)。於化學式(Ic)化合物之又一具體實施例中，R5 表示在苯基之位置2、4上有二個氟取代之苯甲基(即，R5 表示2,4-二氟苯甲基)。
於一具體實施例中，化學式(I)化合物為化學式(Id)化合物：(Id) 或其互變異構物、其立體化學異構物、其醫藥上可接受之鹽、或其溶劑合物；其中R5 如具體實施例之任一者所定義。
於化學式(Id)化合物之一具體實施例中，R5 表示未經取代之正丁基或在苯基之位置2、3及/或4上有一或二個氟取代之苯甲基。於一化學式(Id)化合物之具體實施例中，R5 表示未經取代之正丁基。於化學式(Id)化合物之另一具體實施例中，R5 表示在苯基上有一或二個氟取代之苯甲基。於化學式(Id)化合物之又一具體實施例中，R5 表示在苯基之位置2、3及/或4上有一或二個氟取代之苯甲基。於化學式(Id)化合物之又一具體實施例中，R5 表示在苯基之位置2、3及/或4上有一個氟取代之苯甲基(即，R5 表示2-氟苯甲基、3-氟苯甲基或4-氟苯甲基)。於化學式(Id)化合物之又一具體實施例中，R5 表示在苯基之位置2、4上有二個氟取代之苯甲基(即，R5 表示2,4-二氟苯甲基)。於化學式(Id)化合物之仍又一具體實施例中，R5 表示在苯基之位置4上有一個氟取代之苯甲基(即，R5 表示4-氟苯甲基)。
於一具體實施例中，化學式(I)化合物為化學式(I)、(Ia)、(Ib)或(Ic)化合物，其中R1 表示甲基及R2 表示氫。
於一具體實施例中，化學式(I)化合物為化學式(I)、(Ia)、(Ib)或(Ic)化合物，其中R1 及R2 二者均表示氫。
於一具體實施例中，化學式(I)化合物為化學式(I)、(Ia)、(Ib)或(Ic)化合物，其中R1 表示氫及R2 表示甲基。
於一具體實施例中，化學式(I)化合物為化學式(I)、(Ia)、(Ib)、(Ic)或(Id)化合物，其中R5 表示未經取代之正丁基。
於一具體實施例中，化學式(I)化合物為化學式(I)、(Ia)、(Ib)、(Ic)或(Id)化合物，其中R5 表示在苯基之位置2、3及/或4上有一或二個氟取代之苯甲基。
於一具體實施例中，化學式(I)化合物為化學式(I)、(Ia)、(Ib)、(Ic)或(Id)化合物，其中R5 表示在苯基之位置上有一或二個氟取代之苯甲基。
於一具體實施例中，化學式(I)化合物為化學式(I)、(Ia)、(Ib)、(Ic)或(Id)化合物，其中R5 表示在苯基上有二個氟取代之苯甲基，例如2,3二取代、2,4二取代、2,5二取代、3,5二取代、2,6二取代或3,4二取代。
於一具體實施例中，化學式(I)化合物為化學式(I)、(Ia)、(Ib)、(Ic)或(Id)化合物，其中R5 表示在苯基之位置2、3及/或4上有一或二個氟取代之苯甲基。
於一具體實施例中，化學式(I)化合物為化學式(I)、(Ia)、(Ib)、(Ic)或(Id)化合物，其中R5 表示在苯基之位置2、3或4上有一個氟取代之苯甲基(即，R5 表示2-氟苯甲基、3-氟苯甲基或4-氟苯甲基)。
於一具體實施例中，化學式(I)化合物為化學式(I)、(Ia)、(Ib)、(Ic)或(Id)化合物，其中R5 表示在苯基之位置2與3、3與4、或2與4有二個氟取代之苯甲基(即，R5 表示2,3-二氟苯甲基、3,4-二氟苯甲基或2,4-二氟苯甲基)。
於一具體實施例中，化學式(I)化合物為化學式(I)、(Ia)、(Ib)、(Ic)或(Id)化合物，其中R5 表示在苯基之位置2、4上有二個氟取代之苯甲基(即，R5 表示2,4-二氟苯甲基)。
於一具體實施例中，化學式(I)化合物為化學式(I)、(Ia)、(Ib)、(Ic)或(Id)化合物，其中R5 表示2,4-二氟苯甲基或4-氟苯甲基。
於一具體實施例中，本發明提供化學式(I)化合物，其包括實例1~37之化合物之自由鹼或其互變異構物、其立體化學異構物、其醫藥上可接受之鹽、或其溶劑合物。
於一具體實施例中，本發明提供化學式(I)化合物，其為實例1~37之化合物之自由鹼或其互變異構物、其立體化學異構物、其醫藥上可接受之鹽、或其溶劑合物。
於一具體實施例中，本發明提供化學式(I)化合物，其包括實例1~37之化合物或其互變異構物、其立體化學異構物、或其溶劑合物。
於又一具體實施例中，化合物為選自實例1至34之自由鹼或其互變異構物、其立體化學異構物、其醫藥上可接受之鹽、或其溶劑合物。
於又一具體實施例中，本發明提供化學式(I)化合物，其包括選自下列之化合物：
1-{6-[(4-氟苯基)甲基]-5-(羥甲基)-3,3-二甲基-1H,2H,3H-吡咯並[3,2-b]吡啶-1-基}-2-[(2R,5R)-5-甲基-2-{[(3R)-3-甲基嗎啉-4-基]甲基}哌嗪-1-基]乙-1-酮 (1-{6-[(4-Fluorophenyl)methyl]-5-(hydroxymethyl)-3,3-dimethyl-1H,2H,3H-pyrrolo[3,2-b]pyridin-1-yl}-2-[(2R,5R)-5-methyl-2-{[(3R)-3-methylmorpholin-4-yl]methyl}piperazin-1-yl]ethan-1-one)；
6-[(4-氟苯基)甲基]-3,3,4-三甲基-1-{2-[(2R,5R)-5-甲基-2-{[(3R)-3-甲基嗎啉-4-基]甲基}哌嗪-1-基]乙醯基}-1H,2H,3H,4H,5H-吡咯並[3,2-b]吡啶-5-酮(6-[(4-Fluorophenyl)methyl]-3,3,4-trimethyl-1-{2-[(2R,5R)-5-methyl-2-{[(3R)-3-methylmorpholin-4-yl]methyl}piperazin-1-yl]acetyl}-1H,2H,3H,4H,5H-pyrrolo[3,2-b]pyridin-5-one)；
6-[(2,4-二氟苯基)甲基]-3,3-二甲基-1-{2-[(2R,5R)-5-甲基-2-{[(3R)-3-甲基嗎啉-4-基]甲基}哌嗪-1-基]乙醯基}-1H,2H,3H,4H,5H-吡咯並[3,2-b]吡啶-5-酮(6-[(2,4-Difluorophenyl)methyl]-3,3-dimethyl-1-{2-[(2R,5R)-5-methyl-2-{[(3R)-3-methylmorpholin-4-yl]methyl}piperazin-1-yl]acetyl}-1H,2H,3H,4H,5H-pyrrolo[3,2-b]pyridin-5-one)；
6-[(2,4-二氟苯基)甲基]-3,3,4-三甲基-1-{2-[(2R,5R)-5-甲基-2-{[(3R)-3-甲基嗎啉-4-基]甲基}哌嗪-1-基]乙醯基}-1H,2H,3H,4H,5H-吡咯並[3,2-b]吡啶-5-酮(6-[(2,4-Difluorophenyl)methyl]-3,3,4-trimethyl-1-{2-[(2R,5R)-5-methyl-2-{[(3R)-3-methylmorpholin-4-yl]methyl}piperazin-1-yl]acetyl}-1H,2H,3H,4H,5H-pyrrolo[3,2-b]pyridin-5-one)；
1-[5-((R或S)-1,2-二羥乙基)-6-[(4-氟苯基)甲基]-3,3-二甲基-1H,2H,3H-吡咯並[3,2-b]吡啶-1-基]-2-[(2R,5R)-2-{[(3R,5R)-3,5-二甲基嗎啉-4-基]甲基}-5-甲基哌嗪-1-基]乙-1-酮(1-[5-((R or S)-1,2-Dihydroxyethyl)-6-[(4-fluorophenyl)methyl]-3,3-dimethyl-1H,2H,3H-pyrrolo[3,2-b]pyridin-1-yl]-2-[(2R,5R)-2-{[(3R,5R)-3,5-dimethylmorpholin-4-yl]methyl}-5-methylpiperazin-1-yl]ethan-1-one)；
6-[(2,4-二氟苯基)甲基]-1-{2-[(2R,5R)-2-{[(2S,5R)-2,5-二甲基嗎啉-4-基]甲基}-5-甲基哌嗪-1-基]乙醯基}-3,3-二甲基-1H,2H,3H,5H,6H-吡咯並[2,3-c]吡啶-5-酮(6-[(2,4-Difluorophenyl)methyl]-1-{2-[(2R,5R)-2-{[(2S,5R)-2,5-dimethylmorpholin-4-yl]methyl}-5-methylpiperazin-1-yl]acetyl}-3,3-dimethyl-1H,2H,3H,5H,6H-pyrrolo[2,3-c]pyridin-5-one)；
4-胺基-6-[(4-氟苯基)甲基]-3,3-二甲基-1-{2-[(2R,5R)-5-甲基-2-{[(3R)-3-甲基嗎啉-4-基]甲基}哌嗪-1-基]乙醯基}-1H,2H,3H,4H,5H-吡咯並[3,2-b]吡啶-5-酮(4-Amino-6-[(4-fluorophenyl)methyl]-3,3-dimethyl-1-{2-[(2R,5R)-5-methyl-2-{[(3R)-3-methylmorpholin-4-yl]methyl}piperazin-1-yl]acetyl}-1H,2H,3H,4H,5H-pyrrolo[3,2-b]pyridin-5-one)；
1-{6-[(4-氟苯基)甲基]-5-((R或S)-2-羥-1-甲氧乙基)-3,3-二甲基-1H,2H,3H-吡咯並[3,2-b]吡啶-1-基}-2-[(2R,5R)-5-甲基-2-{[(3R)-3-甲基嗎啉-4-基]甲基}哌嗪-1-基]乙-1-酮(1-{6-[(4-Fluorophenyl)methyl]-5-((R or S)-2-hydroxy-1-methoxyethyl)-3,3-dimethyl-1H,2H,3H-pyrrolo[3,2-b]pyridin-1-yl}-2-[(2R,5R)-5-methyl-2-{[(3R)-3-methylmorpholin-4-yl]methyl}piperazin-1-yl]ethan-1-one)；
4-胺基-6-丁基-1-{2-[(2R,5R)-2-{[(3R,5R)-3,5-二甲基嗎啉-4-基]甲基}-5-甲基哌嗪-1-基]乙醯基}-3,3-二甲基-1H,2H,3H,4H,5H-吡咯並[3,2-b]吡啶-5-酮(4-Amino-6-butyl-1-{2-[(2R,5R)-2-{[(3R,5R)-3,5-dimethylmorpholin-4-yl]methyl}-5-methylpiperazin-1-yl]acetyl}-3,3-dimethyl-1H,2H,3H,4H,5H-pyrrolo[3,2-b]pyridin-5-one)；
6-[(2,4-二氟苯基)甲基]-3,3,4-三甲基-1-{2-[(2R,5R)-5-甲基-2-{[(3R)-3-甲基嗎啉-4-基]甲基}哌嗪-1-基]乙醯基}-1H,2H,3H,5H,6H-吡咯並[2,3-c]吡啶-5-酮(6-[(2,4-Difluorophenyl)methyl]-3,3,4-trimethyl-1-{2-[(2R,5R)-5-methyl-2-{[(3R)-3-methylmorpholin-4-yl]methyl}piperazin-1-yl]acetyl}-1H,2H,3H,5H,6H-pyrrolo[2,3-c]pyridin-5-one)；
6-丁基-1-{2-[(2R,5R)-2-{[(3R,5R)-3,5-二甲基嗎啉-4-基]甲基}-5-甲基哌嗪-1-基]乙醯基}-3,3-二甲基-1H,2H,3H,4H,5H-吡咯並[3,2-b]吡啶-5-酮(6-Butyl-1-{2-[(2R,5R)-2-{[(3R,5R)-3,5-dimethylmorpholin-4-yl]methyl}-5-methylpiperazin-1-yl]acetyl}-3,3-dimethyl-1H,2H,3H,4H,5H-pyrrolo[3,2-b]pyridin-5-one)；及
6-丁基-1-{2-[(2R,5R)-2-{[(2S,5R)-2,5-二甲基嗎啉-4-基]甲基}-5-甲基哌嗪-1-基]乙醯基}-3,3-二甲基-1H,2H,3H,4H,5H-吡咯並[3,2-b]吡啶-5-酮(6-Butyl-1-{2-[(2R,5R)-2-{[(2S,5R)-2,5-dimethylmorpholin-4-yl]methyl}-5-methylpiperazin-1-yl]acetyl}-3,3-dimethyl-1H,2H,3H,4H,5H-pyrrolo[3,2-b]pyridin-5-one)；
或其互變異構物、其立體化學異構物、其醫藥上可接受之鹽、或其溶劑合物。
於又一具體實施例中，本發明提供選自下列之化合物：
1-{6-[(4-氟苯基)甲基]-5-(羥甲基)-3,3-二甲基-1H,2H,3H-吡咯並[3,2-b]吡啶-1-基}-2-[(2R,5R)-5-甲基-2-{[(3R)-3-甲基嗎啉-4-基]甲基}哌嗪-1-基]乙-1-酮二氫氯酸鹽( 1-{6-[(4-Fluorophenyl)methyl]-5-(hydroxymethyl)-3,3-dimethyl-1H,2H,3H-pyrrolo[3,2-b]pyridin-1-yl}-2-[(2R,5R)-5-methyl-2-{[(3R)-3-methylmorpholin-4-yl]methyl}piperazin-1-yl]ethan-1-one dihydrochloride) (E2)；
6-[(4-氟苯基)甲基]-3,3,4-三甲基-1-{2-[(2R,5R)-5-甲基-2-{[(3R)-3-甲基嗎啉-4-基]甲基}哌嗪-1-基]乙醯基}-1H,2H,3H,4H,5H-吡咯並[3,2-b]吡啶-5-酮二氫氯酸鹽(E6)；
6-[(2,4-二氟苯基)甲基]-3,3-二甲基-1-{2-[(2R,5R)-5-甲基-2-{[(3R)-3-甲基嗎啉-4-基]甲基}哌嗪-1-基]乙醯基}-1H,2H,3H,4H,5H-吡咯並[3,2-b]吡啶-5-酮二氫氯酸鹽(E8)；
6-[(2,4-二氟苯基)甲基]-3,3,4-三甲基-1-{2-[(2R,5R)-5-甲基-2-{[(3R)-3-甲基嗎啉-4-基]甲基}哌嗪-1-基]乙醯基}-1H,2H,3H,4H,5H-吡咯並[3,2-b]吡啶-5-酮二氫氯酸鹽(E19)；
1-[5-((R或S)-1,2-二羥乙基)-6-[(4-氟苯基)甲基]-3,3-二甲基-1H,2H,3H-吡咯並[3,2-b]吡啶-1-基]-2-[(2R,5R)-2-{[(3R,5R)-3,5-二甲基嗎啉-4-基]甲基}-5-甲基哌嗪-1-基]乙-1-酮二氫氯酸鹽(E21)；
6-[(2,4-二氟苯基)甲基]-1-{2-[(2R,5R)-2-{[(2S,5R)-2,5-二甲基嗎啉-4-基]甲基}-5-甲基哌嗪-1-基]乙醯基}-3,3-二甲基-1H,2H,3H,5H,6H-吡咯並[2,3-c]吡啶-5-酮二氫氯酸鹽(E22)；
4-胺基-6-[(4-氟苯基)甲基]-3,3-二甲基-1-{2-[(2R,5R)-5-甲基-2-{[(3R)-3-甲基嗎啉-4-基]甲基}哌嗪-1-基]乙醯基}-1H,2H,3H,4H,5H-吡咯並[3,2-b]吡啶-5-酮二氫氯酸鹽(E24)；
1-{6-[(4-氟苯基)甲基]-5-((R或S)-2-羥-1-甲氧乙基)-3,3-二甲基-1H,2H,3H-吡咯並[3,2-b]吡啶-1-基}-2-[(2R,5R)-5-甲基-2-{[(3R)-3-甲基嗎啉-4-基]甲基}哌嗪-1-基]乙-1-酮三氫氯酸鹽(E27)；
4-胺基-6-丁基-1-{2-[(2R,5R)-2-{[(3R,5R)-3,5-二甲基嗎啉-4-基]甲基}-5-甲基哌嗪-1-基]乙醯基}-3,3-二甲基-1H,2H,3H,4H,5H-吡咯並[3,2-b]吡啶-5-酮二氫氯酸鹽(E30);
6-[(2,4-二氟苯基)甲基]-3,3,4-三甲基-1-{2-[(2R,5R)-5-甲基-2-{[(3R)-3-甲基嗎啉-4-基]甲基}哌嗪-1-基]乙醯基}-1H,2H,3H,5H,6H-吡咯並[2,3-c]吡啶-5-酮二氫氯酸鹽(E31);
6-丁基-1-{2-[(2R,5R)-2-{[(3R,5R)-3,5-二甲基嗎啉-4-基]甲基}-5-甲基哌嗪-1-基]乙醯基}-3,3-二甲基-1H,2H,3H,4H,5H-吡咯並[3,2-b]吡啶-5-酮二氫氯酸鹽(E32)及
6-丁基-1-{2-[(2R,5R)-2-{[(2S,5R)-2,5-二甲基嗎啉-4-基]甲基}-5-甲基哌嗪-1-基]乙醯基}-3,3-二甲基-1H,2H,3H,4H,5H-吡咯並[3,2-b]吡啶-5-酮二氫氯酸鹽(E37)
或其互變異構物、其立體化學異構物、或其溶劑合物。
於又一具體實施例中，化合物為選自實例2、6、19、21、22、24、27、30、31及32之自由鹼，或其互變異構物、其立體化學異構物、其醫藥上可接受之鹽、或其溶劑合物。
於仍又一具體實施例中，本發明提供化學式(I)化合物，其包括1-{6-[(4-氟苯基)甲基]-5-(羥甲基)-3,3-二甲基-1H,2H,3H-吡咯並[3,2-b]吡啶-1-基}-2-[(2R,5R)-5-甲基-2-{[(3R)-3-甲基嗎啉-4-基]甲基}哌嗪-1-基]乙-1-酮(1-{6-[(4-Fluorophenyl)methyl]-5-(hydroxymethyl)-3,3-dimethyl-1H,2H,3H-pyrrolo[3,2-b]pyridin-1-yl}-2-[(2R,5R)-5-methyl-2-{[(3R)-3-methylmorpholin-4-yl]methyl}piperazin-1-yl]ethan-1-one)或其互變異構物、其立體化學異構物、其醫藥上可接受之鹽、或其溶劑合物。
於仍又一具體實施例中，本發明提供化學式(I)化合物，其包括1-{6-[(4-氟苯基)甲基]-5-(羥甲基)-3,3-二甲基-1H,2H,3H-吡咯並[3,2-b]吡啶-1-基}-2-[(2R,5R)-5-甲基-2-{[(3R)-3-甲基嗎啉-4-基]甲基}哌嗪-1-基]乙-1-酮氫氯酸鹽或其互變異構物、其立體化學異構物、或其溶劑合物。
於仍又一具體實施例中，本發明提供化學式(I)化合物，其包括1-{6-[(4-氟苯基)甲基]-5-(羥甲基)-3,3-二甲基-1H,2H,3H-吡咯並[3,2-b]吡啶-1-基}-2-[(2R,5R)-5-甲基-2-{[(3R)-3-甲基嗎啉-4-基]甲基}哌嗪-1-基]乙-1-酮二氫氯酸鹽(E2)。
於仍又一具體實施例中，本發明提供1-{6-[(4-氟苯基)甲基]-5-(羥甲基)-3,3-二甲基-1H,2H,3H-吡咯並[3,2-b]吡啶-1-基}-2-[(2R,5R)-5-甲基-2-{[(3R)-3-甲基嗎啉-4-基]甲基}哌嗪-1-基]乙-1-酮乳酸鹽(1-{6-[(4-Fluorophenyl)methyl]-5-(hydroxymethyl)-3,3-dimethyl-1H,2H,3H-pyrrolo[3,2-b]pyridin-1-yl}-2-[(2R,5R)-5-methyl-2-{[(3R)-3-methylmorpholin-4-yl]methyl}piperazin-1-yl]ethan-1-one lactate salt)或其互變異構物、其立體化學異構物、或其溶劑合物。
於仍又一具體實施例中，本發明提供1-{6-[(4-氟苯基)甲基]-5-(羥甲基)-3,3-二甲基-1H,2H,3H-吡咯並[3,2-b]吡啶-1-基}-2-[(2R,5R)-5-甲基-2-{[(3R)-3-甲基嗎啉-4-基]甲基}哌嗪-1-基]乙-1-酮L-(+)-乳酸鹽(1-{6-[(4-Fluorophenyl)methyl]-5-(hydroxymethyl)-3,3-dimethyl-1H,2H,3H-pyrrolo[3,2-b]pyridin-1-yl}-2-[(2R,5R)-5-methyl-2-{[(3R)-3-methylmorpholin-4-yl]methyl}piperazin-1-yl]ethan-1-one L-(+)-lactate salt)或其互變異構物、其立體化學異構物、或其溶劑合物。
於仍又一具體實施例中，化合物選自實例38~42。
於仍又一具體實施例中，本發明提供1-{6-[(4-氟苯基)甲基]-5-(羥甲基)-3,3-二甲基-1H,2H,3H-吡咯並[3,2-b]吡啶-1-基}-2-[(2R,5R)-5-甲基-2-{[(3R)-3-甲基嗎啉-4-基]甲基}哌嗪-1-基]乙-1-酮L-(+)-乳酸鹽(lactate) (A型) (E39)。
於仍又一具體實施例中，本發明提供1-{6-[(4-氟苯基)甲基]-5-(羥甲基)-3,3-二甲基-1H,2H,3H-吡咯並[3,2-b]吡啶-1-基}-2-[(2R,5R)-5-甲基-2-{[(3R)-3-甲基嗎啉-4-基]甲基}哌嗪-1-基]乙-1-酮L-(+)-乳酸鹽(B型) (E40)。
於仍又一具體實施例中，本發明提供1-{6-[(4-氟苯基)甲基]-5-(羥甲基)-3,3-二甲基-1H,2H,3H-吡咯並[3,2-b]吡啶-1-基}-2-[(2R,5R)-5-甲基-2-{[(3R)-3-甲基嗎啉-4-基]甲基}哌嗪-1-基]乙-1-酮 L-(+)-乳酸鹽(C型) (E43)。
於仍又一具體實施例中，本發明提供1-{6-[(4-氟苯基)甲基]-5-(羥甲基)-3,3-二甲基-1H,2H,3H-吡咯並[3,2-b]吡啶-1-基}-2-[(2R,5R)-5-甲基-2-{[(3R)-3-甲基嗎啉-4-基]甲基}哌嗪-1-基]乙-1-酮硫酸鹽(1-{6-[(4-Fluorophenyl)methyl]-5-(hydroxymethyl)-3,3-dimethyl-1H,2H,3H-pyrrolo[3,2-b]pyridin-1-yl}-2-[(2R,5R)-5-methyl-2-{[(3R)-3-methylmorpholin-4-yl]methyl}piperazin-1-yl]ethan-1-one sulfate salt)或其互變異構物、其立體化學異構物、或其溶劑合物。
於仍又一具體實施例中，本發明提供1-{6-[(4-氟苯基)甲基]-5-(羥甲基)-3,3-二甲基-1H,2H,3H-吡咯並[3,2-b]吡啶-1-基}-2-[(2R,5R)-5-甲基-2-{[(3R)-3-甲基嗎啉-4-基]甲基}哌嗪-1-基]乙-1-酮硫酸鹽(F型) (E41)。
於仍又一具體實施例中，本發明提供1-{6-[(4-氟苯基)甲基]-5-(羥甲基)-3,3-二甲基-1H,2H,3H-吡咯並[3,2-b]吡啶-1-基}-2-[(2R,5R)-5-甲基-2-{[(3R)-3-甲基嗎啉-4-基]甲基}哌嗪-1-基]乙-1-酮甲基磺酸鹽(1-{6-[(4-Fluorophenyl)methyl]-5-(hydroxymethyl)-3,3-dimethyl-1H,2H,3H-pyrrolo[3,2-b]pyridin-1-yl}-2-[(2R,5R)-5-methyl-2-{[(3R)-3-methylmorpholin-4-yl]methyl}piperazin-1-yl]ethan-1-one mesylate salt)或其互變異構物、其立體化學異構物、或其溶劑合物。
於仍又一具體實施例中，本發明提供1-{6-[(4-氟苯基)甲基]-5-(羥甲基)-3,3-二甲基-1H,2H,3H-吡咯並[3,2-b]吡啶-1-基}-2-[(2R,5R)-5-甲基-2-{[(3R)-3-甲基嗎啉-4-基]甲基}哌嗪-1-基]乙-1-酮甲磺酸鹽(mesylate) (B型) (E42)。
於又一具體實施例中，所選之化合物係為實例35以外者、或其互變異構物、其立體化學異構物、其醫藥上可接受之鹽、或其溶劑合物。
於又一具體實施例中，所選之化合物為實例2以外者、或其互變異構物、其立體化學異構物、其醫藥上可接受之鹽、或其溶劑合物。
為免生質疑，應理解的是一取代基的各一般和特定的較佳例、實施例和實例，可與一或多個取代基、特別是如本文所定義之所有其它取代基之各一般和特定的較佳例、實施例和實例結合，並且全部之此等實施例均涵蓋於本申請案。
鹽、溶劑合物、互變異構物、異構物、N-氧化物、酯、前驅藥物、及同位素
所指之化學式(I)化合物及其次群組，亦包括其離子形式、鹽、溶劑合物、異構物(包括幾何異構物和立體化學異構物)、互變異構物、N-氧化物、酯、前驅藥物、同位素、及其保護形式，例如下述；較佳為其鹽或互變異構物或異構物或N-氧化物或溶劑合物；更佳為其鹽或互變異構物或N-氧化物或溶劑合物；甚至更佳為其鹽或互變異構物或溶劑合物。
鹽
多種化學式(I)化合物可以鹽的形式存在，例如，酸加成鹽，或者於特定例子中係為有機及無機鹼之鹽，如羧酸鹽、磺酸鹽及磷酸鹽。所有這類鹽類均在本發明之範疇中，且對化學式(I)化合物之引用可包括這些化合物之鹽類形式。
本發明之鹽可透過如習知化學方法，從含鹼性或酸性基團之母化合物合成而得，例如Pharmaceutical Salts：Properties, Selection, and Use, P. Heinrich Stahl (Editor), CamilleG. Wermuth (Editor), ISBN：3-90639-026-8, Hardcover, 388 pages, August 2002所述之方法。一般而言，這類鹽類可藉由將化合物之自由酸或鹼形式與適當的鹼或酸，於水或有機溶液中或其混合物中加反應而得；一般而言，係使用非水性溶質，如醚、乙酸乙酯、乙醇、異丙醇、或丙腈。
可與廣泛各種酸(包括無機及有機酸)形成酸加成鹽類(單或雙鹽)。酸加成鹽之例子包括與酸形成之單或雙鹽，且酸係選自由乙酸、2,2-二氯乙酸、己二酸(adipic)、藻酸(alginic)、抗壞血酸(ascorbic)(如，L-抗壞血酸)、L-天門冬胺酸(L-aspartic)、苯磺酸(benzenesulfonic)、安息香酸(benzoic)、4-乙醯胺基苯甲酸(4-acetamidobenzoic)、丁酸(butanoic)、(+)樟腦酸((+)camphoric)、樟腦磺酸(camphor-sulfonic)、(+)-(1S)-樟腦-10-磺酸、葵酸(capric)、己酸(caproic)、辛酸(caprylic)、肉桂酸(cinnamic)、檸檬酸(citric)、環拉酸(cyclamic)、十二烷基硫酸(dodecylsulfuric)、乙烷-1,2-雙硫酸 (ethane-1,2-disulfonic)、乙烷硫酸(ethanesulfonic)、2-羥基乙烷硫酸(2-hydroxyethanesulfonic)、蟻酸(formic)、反丁烯二酸(fumaric)、黏酸(galactaric)、龍膽酸(gentisic)、葡庚糖酸(glucoheptonic)、D-葡糖酸(D-gluconic)、葡糖醛酸(glucuronic)(如，D-葡糖醛酸)、麩胺酸(glutamic)(如，L-麩胺酸)、α-酮戊二酸(α-oxoglutaric)、甘醇酸(glycolic)、馬尿酸(hippuric)、氫鹵酸(hydrohalic acid)(如，氫溴酸、氫氯酸、氫碘酸)、羥乙磺酸(isethionic)、乳酸(lactic)(如，(+)-L-乳酸、(±)-DL-乳酸)、乳糖酸(lactobionic)、馬來酸(maleic)、蘋果酸(malic)、(-)-L-蘋果酸、丙二酸(malonic)、(±)-DL-杏仁酸((±)-DL-mandelic)、甲烷磺酸(methanesulfonic)、萘-2-磺酸(naphthalene-2-sulfonic)、萘-1,5-二磺酸(naphthalene-1,5-disulfonic)、1-羥基-2-萘酸(1-hydroxy-2-naphthoic)、菸鹼酸(nicotinic)、硝酸、油酸(oleic)、乳清酸(orotic)、草酸(oxalic)、棕櫚酸(palmitic)、撲酸(pamoic)、磷酸(phosphoric)、丙酸(propionic)、丙酮酸(pyruvic)、L-焦麩胺酸(L-pyroglutamic)、水楊酸(salicylic)、4-胺基-水楊酸(4-amino-salicylic)、癸二酸(sebacic)、硬脂酸(stearic)、琥珀酸(succinic)、硫酸(sulfuric)、鞣酸(tannic)、(+)-L-酒石酸((+)-L-tartaric)、硫氰酸(thiocyanic)、對甲苯磺酸(p -toluencsulfonic)、十一烯酸(undecylenic)及戊酸(valeric acid)所組成之群組、以及醯化胺基酸(acylated amino acid)及陽離子交換樹脂。
一特別之鹽群組，係由以下之酸所形成的鹽所組成：乙酸、氫氯酸、氫碘酸、磷酸、硝酸、硫酸、檸檬酸、乳酸、琥珀酸、馬來酸、蘋果酸、羥乙磺酸、反丁烯二酸、苯磺酸、甲苯磺酸、甲烷磺酸(又稱甲磺酸(mesylate))、乙烷磺酸、萘磺酸、戊酸、乙酸、丙酸、丁酸、丙二酸、葡糖醛酸及乳糖酸。一特別之鹽次群組，係由以下之酸所形成的鹽所組成：氫氯酸、乳酸(如，(+)-L-乳酸、(-)-D-乳酸或(±)-DL-乳酸)、硫酸及甲烷磺酸(甲磺酸)。一更特別之鹽次群組，係由以下之酸所形成的鹽所組成：乳酸(如，(+)-L-乳酸、(-)-D-乳酸或(±)-DL-乳酸)及硫酸。一特別之鹽是氫氯酸鹽。一更特別之鹽是乳酸鹽(例如實例39、40、及43之化合物)。一更特別之鹽是硫酸鹽(例如實施例41之化合物)。一更特別之鹽是甲磺酸鹽(例如實施例42之化合物)。一更特別之鹽是乳酸鹽(例如實例39、40、及43之化合物，特別是實例43之化合物)，例如L-(+)-乳酸鹽。
若化合物為一陰離子或具有一可為陰離子之官能基時(如，-COOH可為-COO‑ )，則可與能產生適合陽離子之有機或無機鹼一同形成鹽。適合的無機陽離子例子包括，但不限於：如Li+ 、Na+ 及K+ 之鹼金屬陽離子、如Ca2+ 及Mg2+ 之鹼土金屬陽離子、及其他如Al3+ 或Zn+ 之陽離子。適合的有機陽離子例子包括，但不限於：銨離子(即，NH4+ )及經取代之銨離子(如，NH3 R+ 、NH2 R2 + 、NHR3 + 、NR4 + )。部份適當的經取代之銨離子之例子，係衍生自：甲基胺、乙基胺、二乙基胺、丙基胺、二環己基胺、三乙基胺、丁基胺、乙二胺、乙醇胺、二乙醇胺、哌嗪(piperazine)、苯甲胺、苯基苯甲胺、膽鹼、葡甲胺(meglumine)及胺丁三醇(tromethamine)、以及胺基酸，如賴胺酸及精胺酸。常見的四級銨離子之例子為N(CH3 )4 + 。
當化學式(I)化合物含有一胺基官能基時，則可形成四級銨鹽，例如依據本技術領域者已知之方法，透過與烷基化試劑反應以形成四級銨鹽。這類的四級銨鹽化合物亦包含在化學式(I)之範圍中。
本發明之化合物，依據從而形成鹽之酸的pKa值，可以單-、雙-或三-鹽形式存在，特別是單-或雙-鹽。
本發明化合物之鹽形式為一般之醫藥上可接受之鹽，而醫藥上可接受之鹽之例子係如Berge et al., 1977, "Pharmaceutically Acceptable Salts, "J. Pharm. Sci., Vol. 66, pp.1-19中所述。然而，非醫藥上可接受之鹽，亦可製備作為一中間形式化合物，以後續轉換成醫藥上可接受之鹽。這類非醫藥上可接受之鹽，例如在純化或分離本發明化合物時，亦有用途，亦為本發明之一部份。
於本發明之一具體實施例中，提供一種醫藥組成物，其包括一包含化學式(I)化合物之溶液(如，水溶液)及其次群組，而在本文所述之例子中，其鹽濃度不超過10 mg/ml，一般係大於15 mg/ml，且較佳係大於20 mg/ml。
N-氧化物
含胺基官能基之化學式(I)化合物亦可形成N-氧化物。本文中所指之含胺基官能基之化學式(I)化合物亦包括N-氧化物。
當化合物含有多個胺基官能基時，一或更多氮原子可被氧化而形成N-氧化物。N-氧化物之特別例子為三級胺或含氮雜環之氮原子之N-氧化物。
N-氧化物可藉由將對應的胺以氧化劑(如過氧化氫或高酸(per-acid) (例如過氧羧酸))處理後所形成，如Advanced Organic Chemistry, by Jerry March, 4th Edition, Wiley Interscience, pages所示。更佳為，N-氧化物可透過L. W. Deady (Syn. Comm. 1977, 7, 509-514)所述製程製作，其中使胺化合物與間氯過氧苯甲酸 (m-chloroperoxybenzoic acid, MCPBA)於如二氯甲烷之惰性溶劑中進行反應。
幾何異構物或互變異構物
化學式(I)化合物亦可以多種不同幾何異構物及互變異構物之形式存在，且所指之化學式(I)化合物係包括所有此等形式。為避免質疑，化合物可以多種幾何異構物或互變異構物形式之中之一者存在，且僅對其中一例具體描述或顯示，然而，其他形式亦涵括在化學式(I)之範圍內。
例如，於化學式(I)化合物中，當X表示NH及U表示碳時，化合物的苯環能存在如下所示之互變異構形式。為了簡潔起見，一般化學式(I)顯示一形式1，但該一般式視為涵括二種互變異構的形化學式(1及2)。
1 2
互變異構形式之其他實例包括例如酮(keto-)、烯醇(enol-)、及烯醇鹽形化學式(enolate-forms)，例如下列成對之互變異構物：酮/烯醇(下示)、亞胺/烯胺(imine/enamine)、醯胺/亞胺醇、脒/烯二胺(amidine/enediamine)、亞硝基/肟(nitroso/oxime)、硫酮/烯硫醇(thioketone/enethiol)及硝基/異硝基(nitro/aci-nitro)。
立體異構物
除非另有提及或說明，否則化合物化學命名即表示所有可能立體化學異構物形式之混合物。
立體中心(Stereocentres)以通常的樣式使用短劃線(hashed line)或楔形線繪製。例如：
Boc-N-甲基丙胺酸 (S)-(+)-2-羥基-2-苯基丙酸
當化合物為二個非鏡像異構物/表異構物之混合物時，立體中心的構形並不被特別指出，而是以直線表示。
除非另有提及或說明，否則當化學式(I)化合物包含一或多個掌性中心(chiral centres)時，則可以兩種或更多光學異構物形式存在，對化學式(I)化合物之引用包括，除非說明書特別說明，所有其光學異構物形化學式(即，掌性異構物、表異構物(epimer)及非鏡像異構物)，亦可為個別光學異構物或其混合物(如，外消旋混合物)或兩個或更多光學異構物。
光學異構物可藉其光學活性定性及鑑別(即，+及-異構物、或d及l異構物)，或可使用”R及S”命名法以其絕對立體化學來表示，此命名法係由Cahn、Ingold及Prelog所發展出，可參見Advanced Organic Chemistry by Jerry March, 4th Edition, John Wiley & Sons, New York,1992, pages 109-114及Cahn, Ingold & Prelog, Angew. Chem. Int. Ed. Engl., 1966, 5, 385-415。
光學異構物可藉由數種技術來分離，包括掌性層析法(chiral chromatography)(使用掌性擔體之管柱層析)，此技術領域者已知此類技術。
除了掌性層析法外，光學異構物亦可藉由與掌性酸形成非鏡像異構物(diastereoisomer)鹽、再藉由優選結晶法分離非鏡像異構物鹽、而後將鹽解離而得到自由鹼之個別鏡像異構物之方式加以分離，其中掌性酸係如(+)-酒石酸(tartaric acid)、(-)-焦麩胺酸(pyroglutamic acid)、(-)-二-甲苯甲醯基-L-酒石酸((-)-di-toluoyl-L-tartaric acid)、(+)-苯乙醇酸(mandelic acid)、(-)-蘋果酸(malic acid)、及(-)-樟腦磺酸(camphorsulfonic)。
再者，亦可透過將鏡像異構之純的掌性輔助劑與化合物共價鍵結後，再使用如層析之習知方法進行非鏡相異構物分離，而達到鏡像異構物分離。而後，再將前述共價鍵結切除而可得到適當的純的鏡像異構物產物。
當化學式(I)化合物以二或以上光學異構物形式存在時，一對鏡像異構物之其中之一者可展現較另一鏡像異構物較佳之特性，例如生物活性。因此，於特定情形下，會想使用一對鏡像異構物之其中一者或是多個非鏡像異構物之其中一者作為治療試劑。因此，本發明提供一種含具有一或多個掌性中心(chiral center)之化學式(I)化合物之組成物，其中化學式(I)化合物中之至少55% (如，至少60%、65%、70%、75%、80%、85%、90%或95%)係為單一光學異構物(如，鏡像異構物或非鏡像異構物)。於一個一般的具體實施例中，化學式(I)化合物之總量的99%或更多(如，基本上為全部)可為單一光學異構物(如，鏡像異構物或非鏡像異構物)。
含有雙鍵之化合物於雙鍵處可具有一E(反側)或Z(同側)立體化學。在雙價環或(部分)飽和的基(radical)上之取代基，可為順式或反式構形之一者。在此所使用之順式及反式之詞係根據Chemical Abstracts nomenclature (J. Org. Chem. 1970, 35 (9), 2849-2867)，且係指環狀基團上取代基之位置。
令人特別感興趣的是彼等化學式(I)化合物具有純的立體化學特性者。例如當某化學式(I)化合物以R標示時，意謂此化合物實質上不包括S型異構物。若某化學式(I)化合物以E標示時，意謂此化合物實質上不包括Z型異構物。順式、反式、R、S、E及Z均為本技術領域已知之詞。
同位素變化
本發明包括所有醫藥上可接受之同位素標定之本發明之化合物，即，化學式(I)化合物中一或更多原子經具有相同原子序但其原子量或質量數與天然中一般常見之原子量或質量數不同之原子所取代。
適用於本發明化合物之同位素例子包括：氫之同位素，如2 H(D)及3 H(T)；碳之同位素，如11 C、13 C及14 C；氯之同位素，如36 Cl；氟之同位素，如18 F；碘之同位素，如123 I、125 I及131 I；氮之同位素，如13 N及15 N；氧之同位素，如15 O、17 O及18 O；磷之同位素，如32 P；及硫之同位素，如35 S。
於特定同位素標定之化學式(I)化合物中，例如含有放射性同位素者，可適用於藥物及/或受質組織分布研究。化學式(I)化合物亦可具有可貴的診斷性質，其可用以偵測或判定標定化合物與其他分子、胜肽、蛋白質、酵素或受體間複合體之形成。偵測或標定方法可使用經標定試劑標定之化合物，其中標定試劑可為放射性同位素、酵素、螢光物質、化學發光物質(如，發光胺(luminol)、發光胺衍生物、螢光素(luciferin)、水母發光蛋白(aequorin)及螢光酵素 (luciferase))等。放射性同位素氚(即3 H(T))及碳-14 (即，14 C)，因其可容易使用並為常見之偵測方法，而特別適用於此目的。
具較重同位素之取代基，如氘(即2 H(D))亦可有特定治療優點，而造成更大的代謝穩定性，例如，其活體內半衰期可提升或降低劑量需求，因而可適用於若干情形中。
具發射正電子(positron)同位素之取代基，如11 C、18 F、15 O及13 N可應用在正電子放射斷層掃描(PET)研究上，以檢測標的佔有率。
同位素標定之化學式(I)化合物一般可以本技術領域已知之習知技術製備，或以實施例或製備例相似製程但使用適當的同位素標定試劑取代前述所使用之非標定試劑而製備。
酯
含有羧酸基或羥基之酯類之化學式(I)化合物，如羧酸酯、醯氧基酯(acyloxy ester)及磷酸酯等，亦包含在化學式(I)中。酯類之例子包括含有-C(=O)OR基之化合物，其中R係為酯取代基，例如C1-7 烷基、C3-12 雜環基或C5-12 芳基，較佳為C1-6 烷基。酯基之特別例子包括，但不限於，-C(=O)OCH3 、-C(=O)OCH2 CH3 、-C(=O)OC(CH3 )3 及-C(=O)OPh。醯氧基(逆酯)基團例子係如-OC(=O)R所示，其中R係為醯氧基取代基，例如C1-6 烷基、C3-12 雜環基或C5-12 芳基，較佳為C1-6 烷基。醯氧基之特別例子包括，但不限於，-OC(=O)CH3 (乙醯氧基)、-OC(=O)CH2 CH3 、-OC(=O)C(CH3 )3 、-OC(=O)Ph、及-OC(=O)CH2 Ph。磷酸酯之例子係衍生自磷酸。
於本發明一具體實施例中，化學式(I)包括含有羧酸基或羥基之酯類之化學式(I)化合物之範圍。於本發明另一具體實施例中，化學式(I)不包括含有羧酸基或羥基之酯類之化學式(I)化合物之範圍。
水合物及結晶形式
化學式(I)亦包含化合物之任何多形體形化學式(polymorphic form)，以及溶劑合物，例如水合物、醇化物及其相似物。
本發明之化合物可形成溶劑合物形式，例如，可與水(即，水合物)或常見的有機溶劑形成溶劑合物。於本文中，“溶劑合物”一詞係指本發明之化合物與一或多個溶劑分子之物理締合(physical association)。此物理締合牽涉到不同程度之離子及共價鍵結，包括氫鍵。於特定情形下可將溶劑合物分離，例如，當一或多個溶劑分子摻併於晶狀固體之晶體晶格中時。亦將“溶劑合物”一詞包含溶劑態(solution-phase)及可分離之溶劑合物二者。適合之溶劑合物之非限定例子包括：本發明之化合物與水、異丙醇、乙醇、甲醇、DMSO、乙酸乙酯、乙酸或乙醇胺之組合，及其相似物。本發明之化合物儘管在溶劑中，亦可展現其生理效應。
溶劑合物在藥物化學中已廣為人知。溶劑化合物對於物質之製備製程(如，與其純化有關)、物質儲存(如，其穩定性)及物質操作簡易度而言是重要的，且溶劑化合物經常為化學合成之分離或純化階段之一部分。本發明所屬技術領域者，可根據標準及長時間使用之技術手段加以決定所使用之分離條件或純化條件是否有水合物或其他溶劑合物形成，以製備預定化合物。這類技術包括熱重分析儀(TGA)、示差掃描熱量儀(DSC)、X光晶體分析(如，單晶X光晶體分析或X光粉末繞射)、及固態NMR (SS-NMR，亦稱之魔角旋轉(Magic Angle Spinning) NMR或MAS-NMR)。這類技術亦可為本技術領域者已知之標準分析工具一部分，如NMR、IR、HPLC及MS。
另一方面，本發明所屬技術領域者更可使用結晶條件以刻意形成溶劑合物，其中結晶條件包括一用以形成特定溶劑合物之溶劑量。之後，上述之標準方法可用以確定是否形成溶劑合物。
於一具體實施例中，1-{6-[(4-氟苯基)甲基]-5-(羥甲基)-3,3-二甲基-1H,2H,3H-吡咯並[3,2-b]吡啶-1-基}-2-[(2R,5R)-5-甲基-2-{[(3R)-3-甲基嗎啉-4-基]甲基}哌嗪-1-基]乙-1-酮之鹽具有＜10%之溶劑合物存在(例如不超過下述量：9、8、7、6、5、4、3、2、1、0.5、0.1、0.05或0.01%之任一者)，例如水合物、醇化物、乙酸異丙酯(isopropylacetate)、乙酸甲酯(methyl acetate)、或烷類(alkanes)，例如庚烷類(heptanes)。
於一具體實施例中，1-{6-[(4-氟苯基)甲基]-5-(羥甲基)-3,3-二甲基-1H,2H,3H-吡咯並[3,2-b]吡啶-1-基}-2-[(2R,5R)-5-甲基-2-{[(3R)-3-甲基嗎啉-4-基]甲基}哌嗪-1-基]乙-1-酮之鹽為無水物。於又一具體實施例中，1-{6-[(4-氟苯基)甲基]-5-(羥甲基)-3,3-二甲基-1H,2H,3H-吡咯並[3,2-b]吡啶-1-基}-2-[(2R,5R)-5-甲基-2-{[(3R)-3-甲基嗎啉-4-基]甲基}哌嗪-1-基]乙-1-酮之無水鹽(anhydrous salt)含有不大於5重量% (例如不大於下列量4、3、2、1、0.5、0.1、0.05或0.01%之任一者)的水。
於一具體實施例中，1-{6-[(4-氟苯基)甲基]-5-(羥甲基)-3,3-二甲基-1H,2H,3H-吡咯並[3,2-b]吡啶-1-基}-2-[(2R,5R)-5-甲基-2-{[(3R)-3-甲基嗎啉-4-基]甲基}哌嗪-1-基]乙-1-酮之鹽含有單鍵結晶形，且其他結晶形不超過5重量% (例如不超過下列量4、3、2、1、0.5、0.1、0.05或0.01%之任一者。
於一具體實施例中，1-{6-[(4-氟苯基)甲基]-5-(羥甲基)-3,3-二甲基-1H,2H,3H-吡咯並[3,2-b]吡啶-1-基}-2-[(2R,5R)-5-甲基-2-{[(3R)-3-甲基嗎啉-4-基]甲基}哌嗪-1-基]乙-1-酮之鹽為結晶形。
於一具體實施例中，1-{6-[(4-氟苯基)甲基]-5-(羥甲基)-3,3-二甲基-1H,2H,3H-吡咯並[3,2-b]吡啶-1-基}-2-[(2R,5R)-5-甲基-2-{[(3R)-3-甲基嗎啉-4-基]甲基}哌嗪-1-基]乙-1-酮之鹽為非晶形。
再者，本發明之化合物可具有一或多種多形體(polymorph)或非晶形之晶體形態，並將其包括於發明範疇內。
本文中所指“多形體”係指化學式(I)化合物存在多於一種結晶結構。化學化合物結晶成多於一種晶體形態的能力，可對所述之化合物的性質有所作用，例如物化性質、保質期(shelf life)、溶解度、配方性質、毒性、生物可用率、吸水性及加工性。此外，醫藥化合物之治療作用可被藥物分子之同質多晶形現象(polymorphism)所影響。
於一具體實施例中，化學式(I)化合物包括1-{6-[(4-氟苯基)甲基]-5-(羥甲基)-3,3-二甲基-1H,2H,3H-吡咯並[3,2-b]吡啶-1-基}-2-[(2R,5R)-5-甲基-2-{[(3R)-3-甲基嗎啉-4-基]甲基}哌嗪-1-基]乙-1-酮或其鹽之多形體。
於又一具體實施例中，化學式(I)化合物包括1-{6-[(4-氟苯基)甲基]-5-(羥甲基)-3,3-二甲基-1H,2H,3H-吡咯並[3,2-b]吡啶-1-基}-2-[(2R,5R)-5-甲基-2-{[(3R)-3-甲基嗎啉-4-基]甲基}哌嗪-1-基]乙-1-酮之鹽之多形體。
於又一具體實施例中，化學式(I)化合物包括1-{6-[(4-氟苯基)甲基]-5-(羥甲基)-3,3-二甲基-1H,2H,3H-吡咯並[3,2-b]吡啶-1-基}-2-[(2R,5R)-5-甲基-2-{[(3R)-3-甲基嗎啉-4-基]甲基}哌嗪-1-基]乙-1-酮 L-(+)-乳酸鹽之A型多形體(Form A polymorph)。此化合物可如本文中實例39所述而製備。
於仍又一具體實施例中，1-{6-[(4-氟苯基)甲基]-5-(羥甲基)-3,3-二甲基-1H,2H,3H-吡咯並[3,2-b]吡啶-1-基}-2-[(2R,5R)-5-甲基-2-{[(3R)-3-甲基嗎啉-4-基]甲基}哌嗪-1-基]乙-1-酮 L-(+)-乳酸鹽(1-{6-[(4-fluorophenyl)methyl]-5-(hydroxymethyl)-3,3-dimethyl-1H,2H,3H-pyrrolo[3,2-b]pyridin-1-yl}-2-[(2R,5R)-5-methyl-2-{[(3R)-3-methylmorpholin-4-yl]methyl}piperazin-1-yl]ethan-1-one L-(+)-lactate)之1 H NMR光譜特徵如圖1所示。
化合物的X光粉末繞射圖形以X光繞射光譜之繞射角(diffraction angle) (2θ)及晶面間距(interplanar spacing) (d)為其特徵。此等與下列布拉格方程化學式(Bragg's equation)有關：nλ=2d Sin θ，(此處，n=1；λ=所使用陰極的波長；d=晶面間距；及θ=繞射角)。本文中，晶面間距、繞射角及總圖形對於X光粉末繞射中之晶體鑑定是重要的，此係由於資料特性之故。由於相對強度隨晶體生長方向、粒徑、及測量條件而異，所以應不做嚴格解讀。此外，繞射角通常指與角度2θ±0.2°符合的角度。波峰指主要波峰，並包括在上述以外之繞射角不大於中數的波峰。
於仍又一具體實施例中，1-{6-[(4-氟苯基)甲基]-5-(羥甲基)-3,3-二甲基-1H,2H,3H-吡咯並[3,2-b]吡啶-1-基}-2-[(2R,5R)-5-甲基-2-{[(3R)-3-甲基嗎啉-4-基]甲基}哌嗪-1-基]乙-1-酮L-(+)-乳酸鹽之A型多形體之特徵為具有XRPD圖形波峰位置如下：6.5 ± 0.5°, 7.1 ± 0.5°, 7.9 ± 0.5°, 9.3 ± 0.5°, 10.2 ± 0.5°, 11.0 ± 0.5°, 11.6 ± 0.5°, 13.3 ± 0.5°, 14.4 ± 0.5°, 15.0 ± 0.5°, 16.7 ± 0.5°, 18.0 ± 0.5°, 18.4 ± 0.5°, 20.0 ± 0.5°, 21.0 ± 0.5°, 23.4 ± 0.5°, 25.2 ± 0.5°及26.1 ± 0.5° (2θ, 1d.p)。
於仍又一具體實施例中，1-{6-[(4-氟苯基)甲基]-5-(羥甲基)-3,3-二甲基-1H,2H,3H-吡咯並[3,2-b]吡啶-1-基}-2-[(2R,5R)-5-甲基-2-{[(3R)-3-甲基嗎啉-4-基]甲基}哌嗪-1-基]乙-1-酮L-(+)-乳酸鹽之A型多形體之特徵為具有XRPD圖形波峰位置如下：6.5 ± 0.2°, 7.1 ± 0.2°, 7.9 ± 0.2°, 9.3 ± 0.2°, 10.2 ± 0.2°, 11.0 ± 0.2°, 11.6 ± 0.2°, 13.3 ± 0.2°, 14.4 ± 0.2°, 15.0 ± 0.2°, 16.7 ± 0.2°, 18.0 ± 0.2°, 18.4 ± 0.2°, 20.0 ± 0.2°, 21.0 ± 0.2°, 23.4 ± 0.2°, 25.2 ± 0.2°及26.1 ± 0.2° (2θ, 1d.p)。
於仍又一具體實施例中，1-{6-[(4-氟苯基)甲基]-5-(羥甲基)-3,3-二甲基-1H,2H,3H-吡咯並[3,2-b]吡啶-1-基}-2-[(2R,5R)-5-甲基-2-{[(3R)-3-甲基嗎啉-4-基]甲基}哌嗪-1-基]乙-1-酮L-(+)-乳酸鹽之A型多形體之特徵為具有XRPD圖形波峰位置如下：6.5 ± 0.1°, 7.1 ± 0.1°, 7.9 ± 0.1°, 9.3 ± 0.1°, 10.2 ± 0.1°, 11.0 ± 0.1°, 11.6 ± 0.1°, 13.3 ± 0.1°, 14.4 ± 0.1°, 15.0 ± 0.1°, 16.7 ± 0.1°, 18.0 ± 0.1°, 18.4 ± 0.1°, 20.0 ± 0.1°, 21.0 ± 0.1°, 23.4 ± 0.1°, 25.2 ± 0.1°及26.1 ± 0.1° (2θ, 1d.p)。
於仍又一具體實施例中，1-{6-[(4-氟苯基)甲基]-5-(羥甲基)-3,3-二甲基-1H,2H,3H-吡咯並[3,2-b]吡啶-1-基}-2-[(2R,5R)-5-甲基-2-{[(3R)-3-甲基嗎啉-4-基]甲基}哌嗪-1-基]乙-1-酮L-(+)-乳酸鹽之A型多形體之特徵為具有XRPD圖形波峰位置如下：6.5°, 7.1°, 7.9°, 9.3°, 10.2°, 11.0°, 11.6°, 13.3°, 14.4°, 15.0°, 16.7°, 18.0°, 18.4°, 20.0°, 21.0°, 23.4°, 25.2°及26.1° (2θ, 1d.p)。
於仍又一具體實施例中，1-{6-[(4-氟苯基)甲基]-5-(羥甲基)-3,3-二甲基-1H,2H,3H-吡咯並[3,2-b]吡啶-1-基}-2-[(2R,5R)-5-甲基-2-{[(3R)-3-甲基嗎啉-4-基]甲基}哌嗪-1-基]乙-1-酮L-(+)-乳酸鹽之A型多形體之XRPD圖形特徵實質上如圖2所示。
於仍又一具體實施例中，1-{6-[(4-氟苯基)甲基]-5-(羥甲基)-3,3-二甲基-1H,2H,3H-吡咯並[3,2-b]吡啶-1-基}-2-[(2R,5R)-5-甲基-2-{[(3R)-3-甲基嗎啉-4-基]甲基}哌嗪-1-基]乙-1-酮L-(+)-乳酸鹽之A型多形體之特徵為具有與圖2中XRPD圖形相同繞射角(2θ)之波峰，及選擇性的，其中此等波峰具有與圖2中波峰相同的相對強度。
此技術領域者應知本文中所指XRPD波峰的“強度”係指相對強度，其已考量背景雜訊及其他此等參數的正規化(normalisation)。
於仍又一具體實施例中，1-{6-[(4-氟苯基)甲基]-5-(羥甲基)-3,3-二甲基-1H,2H,3H-吡咯並[3,2-b]吡啶-1-基}-2-[(2R,5R)-5-甲基-2-{[(3R)-3-甲基嗎啉-4-基]甲基}哌嗪-1-基]乙-1-酮L-(+)-乳酸鹽之A型多形體之特徵為具有如圖2中XRPD圖形所示之主要波峰之繞射角(2θ)及強度。
於仍又一具體實施例中，1-{6-[(4-氟苯基)甲基]-5-(羥甲基)-3,3-二甲基-1H,2H,3H-吡咯並[3,2-b]吡啶-1-基}-2-[(2R,5R)-5-甲基-2-{[(3R)-3-甲基嗎啉-4-基]甲基}哌嗪-1-基]乙-1-酮L-(+)-乳酸鹽之A型多形體之特徵為其晶面間距(d)值為：13.59 ± 0.5Å, 12.44 ± 0.5Å, 11.19 ± 0.5Å, 9.50 ± 0.5Å, 8.67 ± 0.5Å, 8.04 ± 0.5Å, 7.62 ± 0.5Å, 6.65 ± 0.5Å, 6.15 ± 0.5Å, 5.90 ± 0.5Å, 5.31 ± 0.5Å, 4.93 ± 0.5Å, 4.82 ± 0.5Å, 4.44 ± 0.5Å, 4.23 ± 0.5Å, 3.80 ± 0.5Å, 3.53 ± 0.5Å及3.41 ± 0.5Å (d, 2d.p.)。
於仍又一具體實施例中，1-{6-[(4-氟苯基)甲基]-5-(羥甲基)-3,3-二甲基-1H,2H,3H-吡咯並[3,2-b]吡啶-1-基}-2-[(2R,5R)-5-甲基-2-{[(3R)-3-甲基嗎啉-4-基]甲基}哌嗪-1-基]乙-1-酮L-(+)-乳酸鹽之A型多形體之特徵為其晶面間距(d)值為：13.59 ± 0.2Å, 12.44 ± 0.2Å, 11.19 ± 0.2Å, 9.50 ± 0.2Å, 8.67 ± 0.2Å, 8.04 ± 0.2Å, 7.62 ± 0.2Å, 6.65 ± 0.2Å, 6.15 ± 0.2Å, 5.90 ± 0.2Å, 5.31 ± 0.2Å, 4.93 ± 0.2Å, 4.82 ± 0.2Å, 4.44 ± 0.2Å, 4.23 ± 0.2Å, 3.80 ± 0.2Å, 3.53 ± 0.2Å及3.41 ± 0.2Å (d, 2d.p.)。
於仍又一具體實施例中，1-{6-[(4-氟苯基)甲基]-5-(羥甲基)-3,3-二甲基-1H,2H,3H-吡咯並[3,2-b]吡啶-1-基}-2-[(2R,5R)-5-甲基-2-{[(3R)-3-甲基嗎啉-4-基]甲基}哌嗪-1-基]乙-1-酮L-(+)-乳酸鹽之A型多形體之特徵為其晶面間距(d)值為：13.59 ± 0.1Å, 12.44 ± 0.1Å, 11.19 ± 0.1Å, 9.50 ± 0.1Å, 8.67 ± 0.1Å, 8.04 ± 0.1Å, 7.62 ± 0.1Å, 6.65 ± 0.1Å, 6.15 ± 0.1Å, 5.90 ± 0.1Å, 5.31 ± 0.1Å, 4.93 ± 0.1Å, 4.82 ± 0.1Å, 4.44 ± 0.1Å, 4.23 ± 0.1Å, 3.80 ± 0.1Å, 3.53 ± 0.1Å及3.41 ± 0.1Å (d, 2d.p.)。
於仍又一具體實施例中，1-{6-[(4-氟苯基)甲基]-5-(羥甲基)-3,3-二甲基-1H,2H,3H-吡咯並[3,2-b]吡啶-1-基}-2-[(2R,5R)-5-甲基-2-{[(3R)-3-甲基嗎啉-4-基]甲基}哌嗪-1-基]乙-1-酮L-(+)-乳酸鹽之A型多形體之特徵為其晶面間距(d)值為：13.59Å, 12.44Å, 11.19Å, 9.50Å, 8.67Å, 8.04Å, 7.62Å, 6.65Å, 6.15Å, 5.90Å, 5.31Å, 4.93Å, 4.82Å, 4.44Å, 4.23Å, 3.80Å, 3.53Å及3.41Å (d, 2d.p.)。
於又一具體實施例中，1-{6-[(4-氟苯基)甲基]-5-(羥甲基)-3,3-二甲基-1H,2H,3H-吡咯並[3,2-b]吡啶-1-基}-2-[(2R,5R)-5-甲基-2-{[(3R)-3-甲基嗎啉-4-基]甲基}哌嗪-1-基]乙-1-酮L-(+)-乳酸鹽之A型多形體之特徵為其DSC波峰溫度為78.69ºC ± 0.5ºC及/或113.91ºC ± 0.5ºC (例如78.69ºC ± 0.2ºC及/或113.91ºC ± 0.2ºC，特別是78.69ºC ± 0.1ºC及/或113.91ºC ± 0.1ºC，更特別是78.69ºC及/或113.91ºC)。
於仍又一具體實施例中，1-{6-[(4-氟苯基)甲基]-5-(羥甲基)-3,3-二甲基-1H,2H,3H-吡咯並[3,2-b]吡啶-1-基}-2-[(2R,5R)-5-甲基-2-{[(3R)-3-甲基嗎啉-4-基]甲基}哌嗪-1-基]乙-1-酮L-(+)-乳酸鹽之A型多形體之特徵為DSC起始溫度為72.3ºC ± 0.5ºC (吸熱，寬波峰) 及/或102ºC ± 0.5ºC (吸熱，寬波峰) (例如72.3ºC ± 0.2ºC及/或102ºC ± 0.2ºC，特別是72.3ºC ± 0.1ºC及/或102ºC ± 0.1ºC，更特別是72.3ºC及/或102ºC)。
於仍又一具體實施例中，1-{6-[(4-氟苯基)甲基]-5-(羥甲基)-3,3-二甲基-1H,2H,3H-吡咯並[3,2-b]吡啶-1-基}-2-[(2R,5R)-5-甲基-2-{[(3R)-3-甲基嗎啉-4-基]甲基}哌嗪-1-基]乙-1-酮L-(+)-乳酸鹽之A型多形體之特徵為如圖3所示之DSC溫度圖(thermogram)。
於又一具體實施例中，化學式(I)化合物包括1-{6-[(4-氟苯基)甲基]-5-(羥甲基)-3,3-二甲基-1H,2H,3H-吡咯並[3,2-b]吡啶-1-基}-2-[(2R,5R)-5-甲基-2-{[(3R)-3-甲基嗎啉-4-基]甲基}哌嗪-1-基]乙-1-酮L-(+)-乳酸鹽之B型多形體。此化合物可如本文中實例40所述而製備。
於仍又一具體實施例中，1-{6-[(4-氟苯基)甲基]-5-(羥甲基)-3,3-二甲基-1H,2H,3H-吡咯並[3,2-b]吡啶-1-基}-2-[(2R,5R)-5-甲基-2-{[(3R)-3-甲基嗎啉-4-基]甲基}哌嗪-1-基]乙-1-酮L-(+)-乳酸鹽之1 H NMR光譜特徵如圖4所示。
於仍又一具體實施例中，1-{6-[(4-氟苯基)甲基]-5-(羥甲基)-3,3-二甲基-1H,2H,3H-吡咯並[3,2-b]吡啶-1-基}-2-[(2R,5R)-5-甲基-2-{[(3R)-3-甲基嗎啉-4-基]甲基}哌嗪-1-基]乙-1-酮L-(+)-乳酸鹽之B型多形體之特徵為具有XRPD圖形波峰位置如下：6.6 ± 0.5°, 9.4 ± 0.5°, 11.0 ± 0.5°, 13.2 ± 0.5°, 14.3 ± 0.5°, 15.8 ± 0.5°, 17.4 ± 0.5°, 18.4 ± 0.5°, 19.1 ± 0.5°, 20.9 ± 0.5°, 21.8 ± 0.5°, 23.1 ± 0.5°, 24.9 ± 0.5°, 26.7 ± 0.5°及27.8 ± 0.5° (2θ, 1d.p)。
於仍又一具體實施例中，1-{6-[(4-氟苯基)甲基]-5-(羥甲基)-3,3-二甲基-1H,2H,3H-吡咯並[3,2-b]吡啶-1-基}-2-[(2R,5R)-5-甲基-2-{[(3R)-3-甲基嗎啉-4-基]甲基}哌嗪-1-基]乙-1-酮L-(+)-乳酸鹽之B型多形體之特徵為具有XRPD圖形波峰位置如下：6.6 ± 0.2°, 9.4 ± 0.2°, 11.0 ± 0.2°, 13.2 ± 0.2°, 14.3 ± 0.2°, 15.8 ± 0.2°, 17.4 ± 0.2°, 18.4 ± 0.2°, 19.1 ± 0.2°, 20.9 ± 0.2°, 21.8 ± 0.2°, 23.1 ± 0.2°, 24.9 ± 0.2°, 26.7 ± 0.2°及27.8 ± 0.2° (2θ, 1d.p)。
於仍又一具體實施例中，1-{6-[(4-氟苯基)甲基]-5-(羥甲基)-3,3-二甲基-1H,2H,3H-吡咯並[3,2-b]吡啶-1-基}-2-[(2R,5R)-5-甲基-2-{[(3R)-3-甲基嗎啉-4-基]甲基}哌嗪-1-基]乙-1-酮L-(+)-乳酸鹽之B型多形體之特徵為具有XRPD圖形波峰位置如下：6.6 ± 0.1°, 9.4 ± 0.1°, 11.0 ± 0.1°, 13.2 ± 0.1°, 14.3 ± 0.1°, 15.8 ± 0.1°, 17.4 ± 0.1°, 18.4 ± 0.1°, 19.1 ± 0.1°, 20.9 ± 0.1°, 21.8 ± 0.1°, 23.1 ± 0.1°, 24.9 ± 0.1°, 26.7 ± 0.1°及27.8 ± 0.1° (2θ, 1d.p)。
於仍又一具體實施例中，1-{6-[(4-氟苯基)甲基]-5-(羥甲基)-3,3-二甲基-1H,2H,3H-吡咯並[3,2-b]吡啶-1-基}-2-[(2R,5R)-5-甲基-2-{[(3R)-3-甲基嗎啉-4-基]甲基}哌嗪-1-基]乙-1-酮L-(+)-乳酸鹽之B型多形體之特徵為具有XRPD圖形波峰位置如下：6.6°, 9.4°, 11.0°, 13.2°, 14.3°, 15.8°, 17.4°, 18.4°, 19.1°, 20.9°, 21.8°, 23.1°, 24.9°, 26.7°及27.8° (2θ, 1d.p)。
於仍又一具體實施例中，1-{6-[(4-氟苯基)甲基]-5-(羥甲基)-3,3-二甲基-1H,2H,3H-吡咯並[3,2-b]吡啶-1-基}-2-[(2R,5R)-5-甲基-2-{[(3R)-3-甲基嗎啉-4-基]甲基}哌嗪-1-基]乙-1-酮L-(+)-乳酸鹽之B型多形體之XRPD圖形特徵實質上如圖5所示。
於仍又一具體實施例中，1-{6-[(4-氟苯基)甲基]-5-(羥甲基)-3,3-二甲基-1H,2H,3H-吡咯並[3,2-b]吡啶-1-基}-2-[(2R,5R)-5-甲基-2-{[(3R)-3-甲基嗎啉-4-基]甲基}哌嗪-1-基]乙-1-酮L-(+)-乳酸鹽之B型多形體之特徵為具有與圖5中XRPD圖形相同繞射角(2θ)之波峰，及選擇性的，其中此等波峰具有與圖5中波峰相同的相對強度。
於仍又一具體實施例中，1-{6-[(4-氟苯基)甲基]-5-(羥甲基)-3,3-二甲基-1H,2H,3H-吡咯並[3,2-b]吡啶-1-基}-2-[(2R,5R)-5-甲基-2-{[(3R)-3-甲基嗎啉-4-基]甲基}哌嗪-1-基]乙-1-酮L-(+)-乳酸鹽之B型多形體之特徵為具有如圖5中XRPD圖形所示之主要波峰之繞射角(2θ)及強度。
於仍又一具體實施例中，1-{6-[(4-氟苯基)甲基]-5-(羥甲基)-3,3-二甲基-1H,2H,3H-吡咯並[3,2-b]吡啶-1-基}-2-[(2R,5R)-5-甲基-2-{[(3R)-3-甲基嗎啉-4-基]甲基}哌嗪-1-基]乙-1-酮L-(+)-乳酸鹽之B型多形體之特徵為其晶面間距(d)值為：13.39 ± 0.5Å, 9.40 ± 0.5Å, 8.04 ± 0.5Å, 6.70 ± 0.5Å, 6.19 ± 0.5Å, 5.61 ± 0.5Å, 5.09 ± 0.5Å, 4.82 ± 0.5Å, 4.64 ± 0.5Å, 4.25 ± 0.5Å, 4.07 ± 0.5Å, 3.85 ± 0.5Å, 3.57 ± 0.5Å, 3.34 ± 0.5Å及3.21 ± 0.5Å (d, 2d.p.)。
於仍又一具體實施例中，1-{6-[(4-氟苯基)甲基]-5-(羥甲基)-3,3-二甲基-1H,2H,3H-吡咯並[3,2-b]吡啶-1-基}-2-[(2R,5R)-5-甲基-2-{[(3R)-3-甲基嗎啉-4-基]甲基}哌嗪-1-基]乙-1-酮L-(+)-乳酸鹽之B型多形體之特徵為其晶面間距(d)值為：13.39 ± 0.2Å, 9.40 ± 0.2Å, 8.04 ± 0.2Å, 6.70 ± 0.2Å, 6.19 ± 0.2Å, 5.61 ± 0.2Å, 5.09 ± 0.2Å, 4.82 ± 0.2Å, 4.64 ± 0.2Å, 4.25 ± 0.2Å, 4.07 ± 0.2Å, 3.85 ± 0.2Å, 3.57 ± 0.2Å, 3.34 ± 0.2Å及3.21 ± 0.2Å (d, 2d.p.)。
於仍又一具體實施例中，1-{6-[(4-氟苯基)甲基]-5-(羥甲基)-3,3-二甲基-1H,2H,3H-吡咯並[3,2-b]吡啶-1-基}-2-[(2R,5R)-5-甲基-2-{[(3R)-3-甲基嗎啉-4-基]甲基}哌嗪-1-基]乙-1-酮L-(+)-乳酸鹽之B型多形體之特徵為其晶面間距(d)值為：13.39 ± 0.1Å, 9.40 ± 0.1Å, 8.04 ± 0.1Å, 6.70 ± 0.1Å, 6.19 ± 0.1Å, 5.61 ± 0.1Å, 5.09 ± 0.1Å, 4.82 ± 0.1Å, 4.64 ± 0.1Å, 4.25 ± 0.1Å, 4.07 ± 0.1Å, 3.85 ± 0.1Å, 3.57 ± 0.1Å, 3.34 ± 0.1Å及3.21 ± 0.1Å (d, 2d.p.)。
於仍又一具體實施例中，1-{6-[(4-氟苯基)甲基]-5-(羥甲基)-3,3-二甲基-1H,2H,3H-吡咯並[3,2-b]吡啶-1-基}-2-[(2R,5R)-5-甲基-2-{[(3R)-3-甲基嗎啉-4-基]甲基}哌嗪-1-基]乙-1-酮 L-(+)-乳酸鹽之B型多形體之特徵為其晶面間距(d)值為：13.39Å, 9.40Å, 8.04Å, 6.70Å, 6.19Å, 5.61Å, 5.09Å, 4.82Å, 4.64Å, 4.25Å, 4.07Å, 3.85Å, 3.57Å, 3.34Å及3.21Å (d, 2d.p.)。
於又一具體實施例中，1-{6-[(4-氟苯基)甲基]-5-(羥甲基)-3,3-二甲基-1H,2H,3H-吡咯並[3,2-b]吡啶-1-基}-2-[(2R,5R)-5-甲基-2-{[(3R)-3-甲基嗎啉-4-基]甲基}哌嗪-1-基]乙-1-酮L-(+)-乳酸鹽之B型多形體之特徵為DSC波峰溫度為85.25ºC ± 0.5ºC及/或106.72ºC ± 0.5ºC (如85.25ºC ± 0.2ºC及/或106.72ºC ± 0.2ºC，特別是85.25ºC ± 0.1ºC及/或106.72ºC ± 0.1ºC，更特別是85.25ºC及/或106.72ºC)。
於仍又一具體實施例中，1-{6-[(4-氟苯基)甲基]-5-(羥甲基)-3,3-二甲基-1H,2H,3H-吡咯並[3,2-b]吡啶-1-基}-2-[(2R,5R)-5-甲基-2-{[(3R)-3-甲基嗎啉-4-基]甲基}哌嗪-1-基]乙-1-酮L-(+)-乳酸鹽之B型多形體之特徵為DSC起始溫度為68ºC ± 0.5ºC (大吸熱，寬波峰)及/或102ºC ± 0.5ºC (很小的吸熱，寬波峰) (例如68ºC ± 0.2ºC及/或102ºC ± 0.2ºC，特別是68ºC ± 0.1ºC及/或102ºC ± 0.1ºC，更特別是68ºC及/或102ºC)。
於仍又一具體實施例中，1-{6-[(4-氟苯基)甲基]-5-(羥甲基)-3,3-二甲基-1H,2H,3H-吡咯並[3,2-b]吡啶-1-基}-2-[(2R,5R)-5-甲基-2-{[(3R)-3-甲基嗎啉-4-基]甲基}哌嗪-1-基]乙-1-酮L-(+)-乳酸鹽之B型多形體之DSC溫度圖特徵為如圖6所示。
於又一具體實施例中，化學式(I)化合物包括1-{6-[(4-氟苯基)甲基]-5-(羥甲基)-3,3-二甲基-1H,2H,3H-吡咯並[3,2-b]吡啶-1-基}-2-[(2R,5R)-5-甲基-2-{[(3R)-3-甲基嗎啉-4-基]甲基}哌嗪-1-基]乙-1-酮硫酸鹽之F型多形體。此化合物可如本文中實例41所述而製備。
於仍又一具體實施例中，1-{6-[(4-氟苯基)甲基]-5-(羥甲基)-3,3-二甲基-1H,2H,3H-吡咯並[3,2-b]吡啶-1-基}-2-[(2R,5R)-5-甲基-2-{[(3R)-3-甲基嗎啉-4-基]甲基}哌嗪-1-基]乙-1-酮硫酸鹽之1 H NMR光譜特徵如圖7所示。
於仍又一具體實施例中，1-{6-[(4-氟苯基)甲基]-5-(羥甲基)-3,3-二甲基-1H,2H,3H-吡咯並[3,2-b]吡啶-1-基}-2-[(2R,5R)-5-甲基-2-{[(3R)-3-甲基嗎啉-4-基]甲基}哌嗪-1-基]乙-1-酮硫酸鹽之F型多形體之特徵為具有XRPD圖形波峰位置如下：8.5 ± 0.5°, 13.5 ± 0.5°, 13.9 ± 0.5°, 14.3 ± 0.5°, 16.2 ± 0.5°, 17.3 ± 0.5°, 20.1 ± 0.5°, 21.3 ± 0.5°, 23.3 ± 0.5°, 24.4 ± 0.5°及27.9 ± 0.5° (2θ, 1d.p)。
於仍又一具體實施例中，1-{6-[(4-氟苯基)甲基]-5-(羥甲基)-3,3-二甲基-1H,2H,3H-吡咯並[3,2-b]吡啶-1-基}-2-[(2R,5R)-5-甲基-2-{[(3R)-3-甲基嗎啉-4-基]甲基}哌嗪-1-基]乙-1-酮硫酸鹽之F型多形體之特徵為具有XRPD圖形波峰位置如下：8.5 ± 0.2°, 13.5 ± 0.2°, 13.9 ± 0.2°, 14.3 ± 0.2°, 16.2 ± 0.2°, 17.3 ± 0.2°, 20.1 ± 0.2°, 21.3 ± 0.2°, 23.3 ± 0.2°, 24.4 ± 0.2°及27.9 ± 0.2° (2θ, 1d.p)。
於仍又一具體實施例中，1-{6-[(4-氟苯基)甲基]-5-(羥甲基)-3,3-二甲基-1H,2H,3H-吡咯並[3,2-b]吡啶-1-基}-2-[(2R,5R)-5-甲基-2-{[(3R)-3-甲基嗎啉-4-基]甲基}哌嗪-1-基]乙-1-酮硫酸鹽之F型多形體之特徵為具有XRPD圖形波峰位置如下：8.5 ± 0.1°, 13.5 ± 0.1°, 13.9 ± 0.1°, 14.3 ± 0.1°, 16.2 ± 0.1°, 17.3 ± 0.1°, 20.1 ± 0.1°, 21.3 ± 0.1°, 23.3 ± 0.1°, 24.4 ± 0.1°及27.9 ± 0.1° (2θ, 1d.p)。
於仍又一具體實施例中，1-{6-[(4-氟苯基)甲基]-5-(羥甲基)-3,3-二甲基-1H,2H,3H-吡咯並[3,2-b]吡啶-1-基}-2-[(2R,5R)-5-甲基-2-{[(3R)-3-甲基嗎啉-4-基]甲基}哌嗪-1-基]乙-1-酮硫酸鹽之F型多形體之特徵為具有XRPD圖形波峰位置如下：8.5°, 13.5°, 13.9°, 14.3°, 16.2°, 17.3°, 20.1°, 21.3°, 23.3°, 24.4°及27.9° (2θ, 1d.p)。
於仍又一具體實施例中，1-{6-[(4-氟苯基)甲基]-5-(羥甲基)-3,3-二甲基-1H,2H,3H-吡咯並[3,2-b]吡啶-1-基}-2-[(2R,5R)-5-甲基-2-{[(3R)-3-甲基嗎啉-4-基]甲基}哌嗪-1-基]乙-1-酮硫酸鹽之F型多形體之XRPD圖形特徵實質上如圖8所示。
於仍又一具體實施例中，1-{6-[(4-氟苯基)甲基]-5-(羥甲基)-3,3-二甲基-1H,2H,3H-吡咯並[3,2-b]吡啶-1-基}-2-[(2R,5R)-5-甲基-2-{[(3R)-3-甲基嗎啉-4-基]甲基}哌嗪-1-基]乙-1-酮硫酸鹽之F型多形體之特徵為具有與圖8中XRPD圖形相同繞射角(2θ)之波峰，及選擇性的，其中此等波峰具有與圖8中波峰相同的相對強度。
於仍又一具體實施例中，1-{6-[(4-氟苯基)甲基]-5-(羥甲基)-3,3-二甲基-1H,2H,3H-吡咯並[3,2-b]吡啶-1-基}-2-[(2R,5R)-5-甲基-2-{[(3R)-3-甲基嗎啉-4-基]甲基}哌嗪-1-基]乙-1-酮硫酸鹽之F型多形體之特徵為具有如圖8中XRPD圖形所示之主要波峰之繞射角(2θ)及強度。
於仍又一具體實施例中，1-{6-[(4-氟苯基)甲基]-5-(羥甲基)-3,3-二甲基-1H,2H,3H-吡咯並[3,2-b]吡啶-1-基}-2-[(2R,5R)-5-甲基-2-{[(3R)-3-甲基嗎啉-4-基]甲基}哌嗪-1-基]乙-1-酮硫酸鹽之F型多形體之特徵為其晶面間距(d)值為：10.40 ± 0.5Å, 6.56 ± 0.5Å, 6.37 ± 0.5Å, 6.19 ± 0.5Å, 5.47 ± 0.5Å, 5.12 ± 0.5Å, 4.42 ± 0.5Å, 4.17 ± 0.5Å, 3.82 ± 0.5Å, 3.65 ± 0.5Å及3.20 ± 0.5Å (d, 2d.p.)。
於仍又一具體實施例中，1-{6-[(4-氟苯基)甲基]-5-(羥甲基)-3,3-二甲基-1H,2H,3H-吡咯並[3,2-b]吡啶-1-基}-2-[(2R,5R)-5-甲基-2-{[(3R)-3-甲基嗎啉-4-基]甲基}哌嗪-1-基]乙-1-酮硫酸鹽之F型多形體之特徵為其晶面間距(d)值為：10.40 ± 0.2Å, 6.56 ± 0.2Å, 6.37 ± 0.2Å, 6.19 ± 0.2Å, 5.47 ± 0.2Å, 5.12 ± 0.2Å, 4.42 ± 0.2Å, 4.17 ± 0.2Å, 3.82 ± 0.2Å, 3.65 ± 0.2Å及3.20 ± 0.2Å (d, 2d.p.)。
於仍又一具體實施例中，1-{6-[(4-氟苯基)甲基]-5-(羥甲基)-3,3-二甲基-1H,2H,3H-吡咯並[3,2-b]吡啶-1-基}-2-[(2R,5R)-5-甲基-2-{[(3R)-3-甲基嗎啉-4-基]甲基}哌嗪-1-基]乙-1-酮硫酸鹽之F型多形體之特徵為其晶面間距(d)值為：10.40 ± 0.1Å, 6.56 ± 0.1Å, 6.37 ± 0.1Å, 6.19 ± 0.1Å, 5.47 ± 0.1Å, 5.12 ± 0.1Å, 4.42 ± 0.1Å, 4.17 ± 0.1Å, 3.82 ± 0.1Å, 3.65 ± 0.1Å及3.20 ± 0.1Å (d, 2d.p.)。
於仍又一具體實施例中，1-{6-[(4-氟苯基)甲基]-5-(羥甲基)-3,3-二甲基-1H,2H,3H-吡咯並[3,2-b]吡啶-1-基}-2-[(2R,5R)-5-甲基-2-{[(3R)-3-甲基嗎啉-4-基]甲基}哌嗪-1-基]乙-1-酮硫酸鹽之F型多形體之特徵為其晶面間距(d)值為：10.40Å, 6.56Å, 6.37Å, 6.19Å, 5.47Å, 5.12Å, 4.42Å, 4.17Å, 3.82Å, 3.65Å及3.20Å (d, 2d.p.)。
於又一具體實施例中，1-{6-[(4-氟苯基)甲基]-5-(羥甲基)-3,3-二甲基-1H,2H,3H-吡咯並[3,2-b]吡啶-1-基}-2-[(2R,5R)-5-甲基-2-{[(3R)-3-甲基嗎啉-4-基]甲基}哌嗪-1-基]乙-1-酮硫酸鹽之F型多形體之特徵為DSC波峰溫度為80.31ºC ± 0.5ºC及/或149.07ºC ± 0.5ºC (例如80.31ºC ± 0.2ºC及/或149.07ºC ± 0.2ºC，特別是80.31ºC ± 0.1ºC及/或149.07ºC ± 0.1ºC，更特別是80.31ºC及/或149.07ºC)。
於仍又一具體實施例中，1-{6-[(4-氟苯基)甲基]-5-(羥甲基)-3,3-二甲基-1H,2H,3H-吡咯並[3,2-b]吡啶-1-基}-2-[(2R,5R)-5-甲基-2-{[(3R)-3-甲基嗎啉-4-基]甲基}哌嗪-1-基]乙-1-酮硫酸鹽之F型多形體之特徵為DSC起始溫度為51.2ºC ± 0.5ºC (吸熱，寬波峰)及/或136ºC ± 0.5ºC (吸熱，寬波峰) (例如51.2ºC ± 0.2ºC及/或136ºC ± 0.2ºC，特別是51.2ºC ± 0.1ºC及/或136ºC ± 0.1ºC，更特別是51.2ºC及/或136ºC)。
於仍又一具體實施例中，1-{6-[(4-氟苯基)甲基]-5-(羥甲基)-3,3-二甲基-1H,2H,3H-吡咯並[3,2-b]吡啶-1-基}-2-[(2R,5R)-5-甲基-2-{[(3R)-3-甲基嗎啉-4-基]甲基}哌嗪-1-基]乙-1-酮硫酸鹽之F型多形體之DSC溫度圖特徵如圖9所示。
於又一具體實施例中，化學式(I)化合物包括1-{6-[(4-氟苯基)甲基]-5-(羥甲基)-3,3-二甲基-1H,2H,3H-吡咯並[3,2-b]吡啶-1-基}-2-[(2R,5R)-5-甲基-2-{[(3R)-3-甲基嗎啉-4-基]甲基}哌嗪-1-基]乙-1-酮甲磺酸鹽之B型多形體。此化合物可如本文中實例42所述而製備。
於仍又一具體實施例中，1-{6-[(4-氟苯基)甲基]-5-(羥甲基)-3,3-二甲基-1H,2H,3H-吡咯並[3,2-b]吡啶-1-基}-2-[(2R,5R)-5-甲基-2-{[(3R)-3-甲基嗎啉-4-基]甲基}哌嗪-1-基]乙-1-酮甲磺酸鹽之1 H NMR光譜特徵如圖10所示。
於仍又一具體實施例中，1-{6-[(4-氟苯基)甲基]-5-(羥甲基)-3,3-二甲基-1H,2H,3H-吡咯並[3,2-b]吡啶-1-基}-2-[(2R,5R)-5-甲基-2-{[(3R)-3-甲基嗎啉-4-基]甲基}哌嗪-1-基]乙-1-酮甲磺酸鹽之B型多形體之特徵為具有XRPD圖形波峰位置如下：6.6 ± 0.5°, 8.0 ± 0.5°, 11.8 ± 0.5°, 13.2 ± 0.5°, 14.3 ± 0.5°, 15.0 ± 0.5°, 15.6 ± 0.5°, 17.1 ± 0.5°, 17.4 ± 0.5°, 17.7 ± 0.5°, 19.2 ± 0.5°, 20.3 ± 0.5°, 21.2 ± 0.5°, 22.3 ± 0.5°, 23.0 ± 0.5°, 24.0 ± 0.5°, 25.8 ± 0.5°, 26.8 ± 0.5°及28.9 ± 0.5° (2θ, 1d.p)。
於仍又一具體實施例中，1-{6-[(4-氟苯基)甲基]-5-(羥甲基)-3,3-二甲基-1H,2H,3H-吡咯並[3,2-b]吡啶-1-基}-2-[(2R,5R)-5-甲基-2-{[(3R)-3-甲基嗎啉-4-基]甲基}哌嗪-1-基]乙-1-酮甲磺酸鹽之B型多形體之特徵為具有XRPD圖形波峰位置如下：6.6 ± 0.2°, 8.0 ± 0.2°, 11.8 ± 0.2°, 13.2 ± 0.2°, 14.3 ± 0.2°, 15.0 ± 0.2°, 15.6 ± 0.2°, 17.1 ± 0.2°, 17.4 ± 0.2°, 17.7 ± 0.2°, 19.2 ± 0.2°, 20.3 ± 0.2°, 21.2 ± 0.2°, 22.3 ± 0.2°, 23.0 ± 0.2°, 24.0 ± 0.2°, 25.8 ± 0.2°, 26.8 ± 0.2°及28.9 ± 0.2° (2θ, 1d.p)。
於仍又一具體實施例中，1-{6-[(4-氟苯基)甲基]-5-(羥甲基)-3,3-二甲基-1H,2H,3H-吡咯並[3,2-b]吡啶-1-基}-2-[(2R,5R)-5-甲基-2-{[(3R)-3-甲基嗎啉-4-基]甲基}哌嗪-1-基]乙-1-酮甲磺酸鹽之B型多形體之特徵為具有XRPD圖形波峰位置如下：6.6 ± 0.1°, 8.0 ± 0.1°, 11.8 ± 0.1°, 13.2 ± 0.1°, 14.3 ± 0.1°, 15.0 ± 0.1°, 15.6 ± 0.1°, 17.1 ± 0.1°, 17.4 ± 0.1°, 17.7 ± 0.1°, 19.2 ± 0.1°, 20.3 ± 0.1°, 21.2 ± 0.1°, 22.3 ± 0.1°, 23.0 ± 0.1°, 24.0 ± 0.1°, 25.8 ± 0.1°, 26.8 ± 0.1°及28.9 ± 0.1° (2θ, 1d.p)。
於仍又一具體實施例中，1-{6-[(4-氟苯基)甲基]-5-(羥甲基)-3,3-二甲基-1H,2H,3H-吡咯並[3,2-b]吡啶-1-基}-2-[(2R,5R)-5-甲基-2-{[(3R)-3-甲基嗎啉-4-基]甲基}哌嗪-1-基]乙-1-酮甲磺酸鹽之B型多形體之特徵為具有XRPD圖形波峰位置如下：6.6°, 8.0°, 11.8°, 13.2°, 14.3°, 15.0°, 15.6°, 17.1°, 17.4°, 17.7°, 19.2°, 20.3°, 21.2°, 22.3°, 23.0°, 24.0°, 25.8°, 26.8°及28.9° (2θ, 1d.p)。
於仍又一具體實施例中，1-{6-[(4-氟苯基)甲基]-5-(羥甲基)-3,3-二甲基-1H,2H,3H-吡咯並[3,2-b]吡啶-1-基}-2-[(2R,5R)-5-甲基-2-{[(3R)-3-甲基嗎啉-4-基]甲基}哌嗪-1-基]乙-1-酮甲磺酸鹽之B型多形體之XRPD圖形特徵實質上如圖11所示。
於仍又一具體實施例中，1-{6-[(4-氟苯基)甲基]-5-(羥甲基)-3,3-二甲基-1H,2H,3H-吡咯並[3,2-b]吡啶-1-基}-2-[(2R,5R)-5-甲基-2-{[(3R)-3-甲基嗎啉-4-基]甲基}哌嗪-1-基]乙-1-酮甲磺酸鹽之B型多形體之特徵為具有與圖11中XRPD圖形相同繞射角(2θ)之波峰，及選擇性的，其中此等波峰具有與圖11中波峰相同的相對強度。
於仍又一具體實施例中，1-{6-[(4-氟苯基)甲基]-5-(羥甲基)-3,3-二甲基-1H,2H,3H-吡咯並[3,2-b]吡啶-1-基}-2-[(2R,5R)-5-甲基-2-{[(3R)-3-甲基嗎啉-4-基]甲基}哌嗪-1-基]乙-1-酮甲磺酸鹽之B型多形體之特徵為具有如圖11中XRPD圖形所示之主要波峰之繞射角(2θ)及強度。
於仍又一具體實施例中，1-{6-[(4-氟苯基)甲基]-5-(羥甲基)-3,3-二甲基-1H,2H,3H-吡咯並[3,2-b]吡啶-1-基}-2-[(2R,5R)-5-甲基-2-{[(3R)-3-甲基嗎啉-4-基]甲基}哌嗪-1-基]乙-1-酮甲磺酸鹽之B型多形體之特徵為其晶面間距(d)值為：13.39 ± 0.5Å, 11.05 ± 0.5Å, 7.50 ± 0.5Å, 6.70 ± 0.5Å, 6.19 ± 0.5Å, 5.90 ± 0.5Å, 5.68 ± 0.5Å, 5.18 ± 0.5Å, 5.09 ± 0.5Å, 5.01 ± 0.5Å, 4.62 ± 0.5Å, 4.37 ± 0.5Å, 4.19 ± 0.5Å, 3.98 ± 0.5Å, 3.86 ± 0.5Å, 3.71 ± 0.5Å, 3.45 ± 0.5Å, 3.32 ± 0.5Å及3.09 ± 0.5Å (d, 2d.p.)。
於仍又一具體實施例中，1-{6-[(4-氟苯基)甲基]-5-(羥甲基)-3,3-二甲基-1H,2H,3H-吡咯並[3,2-b]吡啶-1-基}-2-[(2R,5R)-5-甲基-2-{[(3R)-3-甲基嗎啉-4-基]甲基}哌嗪-1-基]乙-1-酮甲磺酸鹽之B型多形體之特徵為其晶面間距(d)值為：13.39 ± 0.2Å, 11.05 ± 0.2Å, 7.50 ± 0.2Å, 6.70 ± 0.2Å, 6.19 ± 0.2Å, 5.90 ± 0.2Å, 5.68 ± 0.2Å, 5.18 ± 0.2Å, 5.09 ± 0.2Å, 5.01 ± 0.2Å, 4.62 ± 0.2Å, 4.37 ± 0.2Å, 4.19 ± 0.2Å, 3.98 ± 0.2Å, 3.86 ± 0.2Å, 3.71 ± 0.2Å, 3.45 ± 0.2Å, 3.32 ± 0.2Å及3.09 ± 0.2Å (d, 2d.p.)。
於仍又一具體實施例中，1-{6-[(4-氟苯基)甲基]-5-(羥甲基)-3,3-二甲基-1H,2H,3H-吡咯並[3,2-b]吡啶-1-基}-2-[(2R,5R)-5-甲基-2-{[(3R)-3-甲基嗎啉-4-基]甲基}哌嗪-1-基]乙-1-酮甲磺酸鹽之B型多形體之特徵為其晶面間距(d)值為：13.39 ± 0.1Å, 11.05 ± 0.1Å, 7.50 ± 0.1Å, 6.70 ± 0.1Å, 6.19 ± 0.1Å, 5.90 ± 0.1Å, 5.68 ± 0.1Å, 5.18 ± 0.1Å, 5.09 ± 0.1Å, 5.01 ± 0.1Å, 4.62 ± 0.1Å, 4.37 ± 0.1Å, 4.19 ± 0.1Å, 3.98 ± 0.1Å, 3.86 ± 0.1Å, 3.71 ± 0.1Å, 3.45 ± 0.1Å, 3.32 ± 0.1Å及3.09 ± 0.1Å (d, 2d.p.)。
於仍又一具體實施例中，1-{6-[(4-氟苯基)甲基]-5-(羥甲基)-3,3-二甲基-1H,2H,3H-吡咯並[3,2-b]吡啶-1-基}-2-[(2R,5R)-5-甲基-2-{[(3R)-3-甲基嗎啉-4-基]甲基}哌嗪-1-基]乙-1-酮甲磺酸鹽之B型多形體之特徵為其晶面間距(d)值為：13.39Å, 11.05Å, 7.50Å, 6.70Å, 6.19Å, 5.90Å, 5.68Å, 5.18Å, 5.09Å, 5.01Å, 4.62Å, 4.37Å, 4.19Å, 3.98Å, 3.86Å, 3.71Å, 3.45Å, 3.32Å及3.09Å (d, 2d.p.)。
於又一具體實施例中，1-{6-[(4-氟苯基)甲基]-5-(羥甲基)-3,3-二甲基-1H,2H,3H-吡咯並[3,2-b]吡啶-1-基}-2-[(2R,5R)-5-甲基-2-{[(3R)-3-甲基嗎啉-4-基]甲基}哌嗪-1-基]乙-1-酮甲磺酸鹽之B型多形體之特徵為具有DSC波峰溫度為98.63ºC ± 0.5ºC及/或177.11ºC ± 0.5ºC (例如98.63ºC ± 0.2ºC及/或177.11ºC ± 0.2ºC，特別是98.63ºC ± 0.1ºC及/或177.11ºC ± 0.1ºC，更特別是98.63ºC及/或177.11ºC)。
於又一具體實施例中，1-{6-[(4-氟苯基)甲基]-5-(羥甲基)-3,3-二甲基-1H,2H,3H-吡咯並[3,2-b]吡啶-1-基}-2-[(2R,5R)-5-甲基-2-{[(3R)-3-甲基嗎啉-4-基]甲基}哌嗪-1-基]乙-1-酮甲磺酸鹽之B型多形體之特徵為具有DSC起始溫度為73.3ºC ± 0.5ºC (吸熱，寬波峰)及/或160.8ºC ± 0.5ºC (吸熱，寬波峰) (例如73.3ºC ± 0.2ºC及/或160.8ºC ± 0.2ºC，特別是73.3ºC ± 0.1ºC及/或160.8ºC ± 0.1ºC，更特別是73.3ºC及/或160.8ºC)。
於仍又一具體實施例中，1-{6-[(4-氟苯基)甲基]-5-(羥甲基)-3,3-二甲基-1H,2H,3H-吡咯並[3,2-b]吡啶-1-基}-2-[(2R,5R)-5-甲基-2-{[(3R)-3-甲基嗎啉-4-基]甲基}哌嗪-1-基]乙-1-酮甲磺酸鹽之B型多形體之DSC溫度圖特徵如圖12所示。
於又一具體實施例中，化學式(I)化合物包括1-{6-[(4-氟苯基)甲基]-5-(羥甲基)-3,3-二甲基-1H,2H,3H-吡咯並[3,2-b]吡啶-1-基}-2-[(2R,5R)-5-甲基-2-{[(3R)-3-甲基嗎啉-4-基]甲基}哌嗪-1-基]乙-1-酮L-(+)-乳酸鹽之C型多形體。此化合物可如本文中實例43所述而製備。
於仍又一具體實施例中，1-{6-[(4-氟苯基)甲基]-5-(羥甲基)-3,3-二甲基-1H,2H,3H-吡咯並[3,2-b]吡啶-1-基}-2-[(2R,5R)-5-甲基-2-{[(3R)-3-甲基嗎啉-4-基]甲基}哌嗪-1-基]乙-1-酮L-(+)-乳酸鹽之1 H NMR光譜特徵如圖15所示。
於仍又一具體實施例中，1-{6-[(4-氟苯基)甲基]-5-(羥甲基)-3,3-二甲基-1H,2H,3H-吡咯並[3,2-b]吡啶-1-基}-2-[(2R,5R)-5-甲基-2-{[(3R)-3-甲基嗎啉-4-基]甲基}哌嗪-1-基]乙-1-酮L-(+)-乳酸鹽之C型多形體之特徵為具有XRPD圖形波峰位置如下：7.4 ± 0.5°, 7.9 ± 0.5°, 8.3 ± 0.5°, 8.7 ± 0.5°, 9.0 ± 0.5°, 10.4 ± 0.5°, 11.2 ± 0.5°, 11.6 ± 0.5°, 12.3 ± 0.5°, 13.1 ± 0.5°, 13.9 ± 0.5°, 14.7 ± 0.5°, 15.8 ± 0.5°, 16.5 ± 0.5°, 17.1 ± 0.5°, 17.9 ± 0.5°, 18.4 ± 0.5°, 18.9 ± 0.5°, 19.6 ± 0.5°, 20.4 ± 0.5°, 21.0 ± 0.5°, 21.8 ± 0.5°, 22.9 ± 0.5°, 23.3 ± 0.5°, 23.6 ± 0.5°, 24.0 ± 0.5°, 24.9 ± 0.5°及26.4 ± 0.5° (2θ, 1d.p)。
於仍又一具體實施例中，1-{6-[(4-氟苯基)甲基]-5-(羥甲基)-3,3-二甲基-1H,2H,3H-吡咯並[3,2-b]吡啶-1-基}-2-[(2R,5R)-5-甲基-2-{[(3R)-3-甲基嗎啉-4-基]甲基}哌嗪-1-基]乙-1-酮L-(+)-乳酸鹽之C型多形體之特徵為具有XRPD圖形波峰位置如下：7.4 ± 0.2°, 7.9 ± 0.2°, 8.3 ± 0.2°, 8.7 ± 0.2°, 9.0 ± 0.2°, 10.4 ± 0.2°, 11.2 ± 0.2°, 11.6 ± 0.2°, 12.3 ± 0.2°, 13.1 ± 0.2°, 13.9 ± 0.2°, 14.7 ± 0.2°, 15.8 ± 0.2°, 16.5 ± 0.2°, 17.1 ± 0.2°, 17.9 ± 0.2°, 18.4 ± 0.2°, 18.9 ± 0.2°, 19.6 ± 0.2°, 20.4 ± 0.2°, 21.0 ± 0.2°, 21.8 ± 0.2°, 22.9 ± 0.2°, 23.3 ± 0.2°, 23.6 ± 0.2°, 24.0 ± 0.2°, 24.9 ± 0.2°及26.4 ± 0.2° (2θ, 1d.p)。
於仍又一具體實施例中，1-{6-[(4-氟苯基)甲基]-5-(羥甲基)-3,3-二甲基-1H,2H,3H-吡咯並[3,2-b]吡啶-1-基}-2-[(2R,5R)-5-甲基-2-{[(3R)-3-甲基嗎啉-4-基]甲基}哌嗪-1-基]乙-1-酮L-(+)-乳酸鹽之C型多形體之特徵為具有XRPD圖形波峰位置如下：7.4 ± 0.1°, 7.9 ± 0.1°, 8.3 ± 0.1°, 8.7 ± 0.1°, 9.0 ± 0.1°, 10.4 ± 0.1°, 11.2 ± 0.1°, 11.6 ± 0.1°, 12.3 ± 0.1°, 13.1 ± 0.1°, 13.9 ± 0.1°, 14.7 ± 0.1°, 15.8 ± 0.1°, 16.5 ± 0.1°, 17.1 ± 0.1°, 17.9 ± 0.1°, 18.4 ± 0.1°, 18.9 ± 0.1°, 19.6 ± 0.1°, 20.4 ± 0.1°, 21.0 ± 0.1°, 21.8 ± 0.1°, 22.9 ± 0.1°, 23.3 ± 0.1°, 23.6 ± 0.1°, 24.0 ± 0.1°, 24.9 ± 0.1°及26.4 ± 0.1° (2θ, 1d.p)。
於仍又一具體實施例中，1-{6-[(4-氟苯基)甲基]-5-(羥甲基)-3,3-二甲基-1H,2H,3H-吡咯並[3,2-b]吡啶-1-基}-2-[(2R,5R)-5-甲基-2-{[(3R)-3-甲基嗎啉-4-基]甲基}哌嗪-1-基]乙-1-酮L-(+)-乳酸鹽之C型多形體之特徵為具有XRPD圖形波峰位置如下：7.4°, 7.9°, 8.3°, 8.7°, 9.0°, 10.4°, 11.2°, 11.6°, 12.3°, 13.1°, 13.9°, 14.7°, 15.8°, 16.5°, 17.1°, 17.9°, 18.4°, 18.9°, 19.6°, 20.4°, 21.0°, 21.8°, 22.9°, 23.3°, 23.6°, 24.0°, 24.9°及26.4° (2θ, 1d.p)。
於仍又一具體實施例中，1-{6-[(4-氟苯基)甲基]-5-(羥甲基)-3,3-二甲基-1H,2H,3H-吡咯並[3,2-b]吡啶-1-基}-2-[(2R,5R)-5-甲基-2-{[(3R)-3-甲基嗎啉-4-基]甲基}哌嗪-1-基]乙-1-酮L-(+)-乳酸鹽之C型多形體之XRPD圖形特徵實質上如圖16之標示1所示。
於仍又一具體實施例中，1-{6-[(4-氟苯基)甲基]-5-(羥甲基)-3,3-二甲基-1H,2H,3H-吡咯並[3,2-b]吡啶-1-基}-2-[(2R,5R)-5-甲基-2-{[(3R)-3-甲基嗎啉-4-基]甲基}哌嗪-1-基]乙-1-酮L-(+)-乳酸鹽之C型多形體之特徵為具有與圖16中標示1之XRPD圖形相同繞射角(2θ)之波峰，及選擇性的，其中此等波峰具有與圖16中標示1之波峰相同的相對強度。
於仍又一具體實施例中，1-{6-[(4-氟苯基)甲基]-5-(羥甲基)-3,3-二甲基-1H,2H,3H-吡咯並[3,2-b]吡啶-1-基}-2-[(2R,5R)-5-甲基-2-{[(3R)-3-甲基嗎啉-4-基]甲基}哌嗪-1-基]乙-1-酮L-(+)-乳酸鹽之C型多形體之特徵為具有如圖16中標示1之XRPD圖形所示之主要波峰之繞射角(2θ)及強度。
於仍又一具體實施例中，1-{6-[(4-氟苯基)甲基]-5-(羥甲基)-3,3-二甲基-1H,2H,3H-吡咯並[3,2-b]吡啶-1-基}-2-[(2R,5R)-5-甲基-2-{[(3R)-3-甲基嗎啉-4-基]甲基}哌嗪-1-基]乙-1-酮L-(+)-乳酸鹽之C型多形體之特徵為具有以XRPD測得之主要波峰為：8.7 ± 0.5º, 17.1 ± 0.5°, 17.9 ± 0.5°及18.9 ± 0.5° (2θ, 1d.p)。
於仍又一具體實施例中，1-{6-[(4-氟苯基)甲基]-5-(羥甲基)-3,3-二甲基-1H,2H,3H-吡咯並[3,2-b]吡啶-1-基}-2-[(2R,5R)-5-甲基-2-{[(3R)-3-甲基嗎啉-4-基]甲基}哌嗪-1-基]乙-1-酮L-(+)-乳酸鹽之C型多形體之特徵為具有以XRPD測得之主要波峰為：8.7 ± 0.2º, 17.1 ± 0.2°, 17.9 ± 0.2°及18.9 ± 0.2° (2θ, 1d.p)。
於仍又一具體實施例中，1-{6-[(4-氟苯基)甲基]-5-(羥甲基)-3,3-二甲基-1H,2H,3H-吡咯並[3,2-b]吡啶-1-基}-2-[(2R,5R)-5-甲基-2-{[(3R)-3-甲基嗎啉-4-基]甲基}哌嗪-1-基]乙-1-酮L-(+)-乳酸鹽之C型多形體之特徵為具有以XRPD測得之主要波峰為：8.7 ± 0.1º, 17.1 ± 0.1°, 17.9 ± 0.1°及18.9 ± 0.1° (2θ, 1d.p)。
於仍又一具體實施例中，1-{6-[(4-氟苯基)甲基]-5-(羥甲基)-3,3-二甲基-1H,2H,3H-吡咯並[3,2-b]吡啶-1-基}-2-[(2R,5R)-5-甲基-2-{[(3R)-3-甲基嗎啉-4-基]甲基}哌嗪-1-基]乙-1-酮L-(+)-乳酸鹽之C型多形體之特徵為具有以XRPD測得之主要波峰為：8.7°, 17.1°, 17.9°及18.9° (2θ, 1d.p)。
於仍又一具體實施例中，1-{6-[(4-氟苯基)甲基]-5-(羥甲基)-3,3-二甲基-1H,2H,3H-吡咯並[3,2-b]吡啶-1-基}-2-[(2R,5R)-5-甲基-2-{[(3R)-3-甲基嗎啉-4-基]甲基}哌嗪-1-基]乙-1-酮L-(+)-乳酸鹽之C型多形體之特徵為其晶面間距(d)值為：11.94 ± 0.5Å, 11.19 ± 0.5Å, 10.65 ± 0.5Å, 10.16 ± 0.5Å, 9.82 ± 0.5Å, 8.50 ± 0.5Å, 7.90 ± 0.5Å, 7.62 ± 0.5Å, 7.19 ± 0.5Å, 6.75 ± 0.5Å, 6.37 ± 0.5Å, 6.02 ± 0.5Å, 5.61 ± 0.5Å, 5.37 ± 0.5Å, 5.18 ± 0.5Å, 4.95 ± 0.5Å, 4.82 ± 0.5Å, 4.69 ± 0.5Å, 4.53 ± 0.5Å, 4.35 ± 0.5Å, 4.23 ± 0.5Å, 4.07 ± 0.5Å, 3.88 ± 0.5Å, 3.82 ± 0.5Å, 3.77 ± 0.5Å, 3.71 ± 0.5Å, 3.57 ± 0.5Å及3.37 ± 0.5Å (d, 2d.p.)。
於仍又一具體實施例中，1-{6-[(4-氟苯基)甲基]-5-(羥甲基)-3,3-二甲基-1H,2H,3H-吡咯並[3,2-b]吡啶-1-基}-2-[(2R,5R)-5-甲基-2-{[(3R)-3-甲基嗎啉-4-基]甲基}哌嗪-1-基]乙-1-酮L-(+)-乳酸鹽之C型多形體之特徵為其晶面間距(d)值為：11.94 ± 0.2Å, 11.19 ± 0.2Å, 10.65 ± 0.2Å, 10.16 ± 0.2Å, 9.82 ± 0.2Å, 8.50 ± 0.2Å, 7.90 ± 0.2Å, 7.62 ± 0.2Å, 7.19 ± 0.2Å, 6.75 ± 0.2Å, 6.37 ± 0.2Å, 6.02 ± 0.2Å, 5.61 ± 0.2Å, 5.37 ± 0.2Å, 5.18 ± 0.2Å, 4.95 ± 0.2Å, 4.82 ± 0.2Å, 4.69 ± 0.2Å, 4.53 ± 0.2Å, 4.35 ± 0.2Å, 4.23 ± 0.2Å, 4.07 ± 0.2Å, 3.88 ± 0.2Å, 3.82 ± 0.2Å, 3.77 ± 0.2Å, 3.71 ± 0.2Å, 3.57 ± 0.2Å及3.37 ± 0.2Å (d, 2d.p.)。
於仍又一具體實施例中，1-{6-[(4-氟苯基)甲基]-5-(羥甲基)-3,3-二甲基-1H,2H,3H-吡咯並[3,2-b]吡啶-1-基}-2-[(2R,5R)-5-甲基-2-{[(3R)-3-甲基嗎啉-4-基]甲基}哌嗪-1-基]乙-1-酮L-(+)-乳酸鹽之C型多形體之特徵為其晶面間距(d)值為：11.94 ± 0.1Å, 11.19 ± 0.1Å, 10.65 ± 0.1Å, 10.16 ± 0.1Å, 9.82 ± 0.1Å, 8.50 ± 0.1Å, 7.90 ± 0.1Å, 7.62 ± 0.1Å, 7.19 ± 0.1Å, 6.75 ± 0.1Å, 6.37 ± 0.1Å, 6.02 ± 0.1Å, 5.61 ± 0.1Å, 5.37 ± 0.1Å, 5.18 ± 0.1Å, 4.95 ± 0.1Å, 4.82 ± 0.1Å, 4.69 ± 0.1Å, 4.53 ± 0.1Å, 4.35 ± 0.1Å, 4.23 ± 0.1Å, 4.07 ± 0.1Å, 3.88 ± 0.1Å, 3.82 ± 0.1Å, 3.77 ± 0.1Å, 3.71 ± 0.1Å, 3.57 ± 0.1Å及3.37 ± 0.1Å (d, 2d.p.)。
於仍又一具體實施例中，1-{6-[(4-氟苯基)甲基]-5-(羥甲基)-3,3-二甲基-1H,2H,3H-吡咯並[3,2-b]吡啶-1-基}-2-[(2R,5R)-5-甲基-2-{[(3R)-3-甲基嗎啉-4-基]甲基}哌嗪-1-基]乙-1-酮L-(+)-乳酸鹽之C型多形體之特徵為其晶面間距(d)值為：11.94Å, 11.19Å, 10.65Å, 10.16Å, 9.82Å, 8.50Å, 7.90Å, 7.62Å, 7.19Å, 6.75Å, 6.37Å, 6.02Å, 5.61Å, 5.37Å, 5.18Å, 4.95Å, 4.82Å, 4.69Å, 4.53Å, 4.35Å, 4.23Å, 4.07Å, 3.88Å, 3.82Å, 3.77Å, 3.71Å, 3.57Å及3.37Å (d, 2d.p.)。
於又一具體實施例中，1-{6-[(4-氟苯基)甲基]-5-(羥甲基)-3,3-二甲基-1H,2H,3H-吡咯並[3,2-b]吡啶-1-基}-2-[(2R,5R)-5-甲基-2-{[(3R)-3-甲基嗎啉-4-基]甲基}哌嗪-1-基]乙-1-酮L-(+)-乳酸鹽之C型多形體之特徵為其DSC波峰溫度為174.37ºC ± 0.5ºC (例如174.37ºC ± 0.2ºC，特別是174.37ºC ± 0.1ºC，更特別是174.37ºC)。
於仍又一具體實施例中，1-{6-[(4-氟苯基)甲基]-5-(羥甲基)-3,3-二甲基-1H,2H,3H-吡咯並[3,2-b]吡啶-1-基}-2-[(2R,5R)-5-甲基-2-{[(3R)-3-甲基嗎啉-4-基]甲基}哌嗪-1-基]乙-1-酮L-(+)-乳酸鹽之C型多形體之特徵為DSC起始溫度為171.6ºC ± 0.5ºC (吸熱，尖波峰) (例如171.6ºC ± 0.2ºC，特別是171.6ºC ± 0.1ºC，更特別是171.6ºC)。
於仍又一具體實施例中，1-{6-[(4-氟苯基)甲基]-5-(羥甲基)-3,3-二甲基-1H,2H,3H-吡咯並[3,2-b]吡啶-1-基}-2-[(2R,5R)-5-甲基-2-{[(3R)-3-甲基嗎啉-4-基]甲基}哌嗪-1-基]乙-1-酮L-(+)-乳酸鹽之C型多形體之DSC溫度圖特徵如圖17標示1所示。
於一具體實施例中，1-{6-[(4-氟苯基)甲基]-5-(羥甲基)-3,3-二甲基-1H,2H,3H-吡咯並[3,2-b]吡啶-1-基}-2-[(2R,5R)-5-甲基-2-{[(3R)-3-甲基嗎啉-4-基]甲基}哌嗪-1-基]乙-1-酮之乳酸鹽(例如L-(+)-乳酸鹽))，其為晶體狀，且其特徵為具有下列參數之一或多個(以任何組合)或全部： (a) 圖15所示之1 H NMR光譜；及/或 (b) XRPD圖形，其具有波峰於：7.4 ± 0.5°, 7.9 ± 0.5°, 8.3 ± 0.5°, 8.7 ± 0.5°, 9.0 ± 0.5°, 10.4 ± 0.5°, 11.2 ± 0.5°, 11.6 ± 0.5°, 12.3 ± 0.5°, 13.1 ± 0.5°, 13.9 ± 0.5°, 14.7 ± 0.5°, 15.8 ± 0.5°, 16.5 ± 0.5°, 17.1 ± 0.5°, 17.9 ± 0.5°, 18.4 ± 0.5°, 18.9 ± 0.5°, 19.6 ± 0.5°, 20.4 ± 0.5°, 21.0 ± 0.5°, 21.8 ± 0.5°, 22.9 ± 0.5°, 23.3 ± 0.5°, 23.6 ± 0.5°, 24.0 ± 0.5°, 24.9 ± 0.5°及26.4 ± 0.5° (2θ, 1d.p)；及/或 (c) 實質上如圖16標示1所示之XRPD圖形；及/或 (d) 具有與圖16中標示1之XRPD圖形相同繞射角(2θ)之波峰，及選擇性的，其中此等波峰具有與圖16中標示1之波峰相同的相對強度；及/或 (e) 具有如圖16中標示1之XRPD圖形所示之主要波峰之繞射角(2θ)及強度；及/或 (f) 具有XRPD測得之主要波峰於8.7 ± 0.5º, 17.1 ± 0.5°, 17.9 ± 0.5°及18.9 ± 0.5° (2θ, 1d.p)；及/或 (g) 晶面間距(d)值為：11.94 ± 0.5 Å, 11.19 ± 0.5 Å, 10.65 ± 0.5 Å, 10.16 ± 0.5 Å, 9.82 ± 0.5 Å, 8.50 ± 0.5 Å, 7.90 ± 0.5 Å, 7.62 ± 0.5 Å, 7.19 ± 0.5 Å, 6.75 ± 0.5 Å, 6.37 ± 0.5 Å, 6.02 ± 0.5 Å, 5.61 ± 0.5 Å, 5.37 ± 0.5 Å, 5.18 ± 0.5 Å, 4.95 ± 0.5 Å, 4.82 ± 0.5 Å, 4.69 ± 0.5 Å, 4.53 ± 0.5 Å, 4.35 ± 0.5 Å, 4.23 ± 0.5 Å, 4.07 ± 0.5 Å, 3.88 ± 0.5 Å, 3.82 ± 0.5 Å, 3.77 ± 0.5 Å, 3.71 ± 0.5 Å, 3.57 ± 0.5 Å及3.37 ± 0.5 Å (d, 2d.p.)；及/或 (h) DSC波峰溫度為174.37ºC ± 0.5ºC (例如174.37ºC ± 0.2ºC，特別是174.37ºC ± 0.1ºC，更特別是174.37ºC)；及/或 (i) DSC起始溫度為171.6ºC ± 0.5ºC (吸熱，尖波峰) (如171.6ºC ± 0.2ºC，特別是171.6ºC ± 0.1ºC，更特別是171.6ºC)；及/或 (j) 如圖17標示1所示之DSC溫度圖。
特別是，1-{6-[(4-氟苯基)甲基]-5-(羥甲基)-3,3-二甲基-1H,2H,3H-吡咯並[3,2-b]吡啶-1-基}-2-[(2R,5R)-5-甲基-2-{[(3R)-3-甲基嗎啉-4-基]甲基}哌嗪-1-基]乙-1-酮L-(+)-乳酸鹽之多形體C型提供關於穩定性與結晶性的優點。
複合物(complex)
化學式(I)亦包含此等化合物的複合物於其範圍內，其中複合物例如為具有化合物的包合物(inclusion complex)或籠合物(clathrates)，例如環糊精，或金屬錯合物。包合物、籠合物及金屬錯合物可由此技術領域者藉由熟知之方法形成。
前驅藥物(Prodrug)
化學式(I)亦包括化學式(I)化合物之任何前驅藥物。“前驅藥物”意指例如於活體內轉化為生物活性之化學式(I)化合物的任何化合物。
例如，若干前驅藥物係為活性化合物之酯類(如，生理可接受可代謝不穩定酯類)。在代謝過程中，酯基(-C(=O)OR)可被切割而形成活性藥物。這類酯類可透過例如將母化合物中之羧酸基(-C(=O)OH)之任一者酯化而形成，若適當時，先於母化合物中存在的任一其他反應基進行保護，接著如需要再進行去保護。
這類可代謝不穩定酯類之例子包括式-C(=O)OR之化合物，其中R為：C1-7 烷基(如，-Me、-Et、-nPr、-iPr、-nBu、-sBu、-iBu、-tBu)；C1-7 胺烷基(如，胺乙基；2-(N,N-二乙基胺基)乙基；2-(4-嗎啉)乙基)；以及醯氧基-C1-7 烷基(如，醯氧基甲基；醯氧基乙基；三甲基乙醯氧基甲基(pivaloyloxymethyl)；乙醯氧基甲基(acetoxymethyl)；1-乙醯氧基乙基；1-(1-甲氧基-1-甲基)乙基-羰基氧基乙基(1-(1-methoxy-1-methyl)ethyl-carbonxyloxyethyl)；1-(苯甲醯基氧基)乙基(1-(benzoyloxy)ethyl)；異丙氧基-羰基氧基甲基(isopropoxy-carbonyloxymethyl)；1-異丙氧基-羰基氧基乙基(1-isopropoxy-carbonyloxyethyl)；環己基-羰基氧基甲基(cyclohexyl-carbonyloxymethyl)；1-環己基-羰基氧基乙基(1-cyclohexyl-carbonyloxyethyl)；環己基氧基-羰基氧基甲基(cyclohexyloxy-carbonyloxymethyl)；1-環己基氧基-羰基氧基乙基(1-cyclohexyloxy-carbonyloxyethyl)；(4-四氫吡喃基氧基)羰基氧基甲基((4-tetrahydropyranyloxy)carbonyloxymethyl)；1-(4-四氫吡喃基氧基)羰基氧基乙基(1-(4-tetrahydropyranyloxy)carbonyloxyethyl)；(4-四氫吡喃基)羰基氧基甲基((4-tetrahydropyranyl)carbonyloxymethyl)；以及1-(4-四氫吡喃基)羰基氧基乙基)(1-(4-tetrahydropyranyl)carbonyloxyethyl)。
又，若干前驅藥物可經酵素活化而得到活性化合物、或者是一化合物在進一步的化學反應時產生活性化合物(例如，抗原-定向酵素前驅藥物治療法(ADEPT)、基因-定向酵素前驅藥物治療法(GDEPT)、及配位體-定向酵素前驅藥物治療法(LIDEPT)等)。例如，前驅藥物可為糖類衍生物或其他葡萄糖結合物，或可為胺基酸酯類衍生物。於一實施例中，化學式(I)不包括此範圍中之化學式(I)化合物之前驅藥物。
本發明之化合物優點
化學式(I)化合物具有數個相對於先前技術化合物之優點。
本發明之化合物於下列之一或多個面向具有特別優點： (i)對IKr (hERG)心臟離子通道優異的選擇性； (ii)優異的代謝穩定性； (iii)較低的P450抑制責任(inhibitory liability)； (iv)優異的口服生物可用率；及/或 (v)優異的體內藥效。
對IKr (hERG)心臟離子通道優異的選擇性
在1990年代晚期，有一些美國食品及藥物管理局所認可之藥物發現牽涉到心臟異常而致死，而在美國必需停售。繼而發現此等藥物之副作用為阻斷心臟細胞之hERG通道而導致發展成心律不整。hERG通道為鉀離子通道家族之一成員，鉀離子通道家族之第一成員係在1980年代晚期於突變之黑腹果蠅 (Drosophila melanogaster fruitfly)中鑑定出(參見Jan, L.Y. and Jan, Y.N. (1990). A Superfamily of Ion Channels. Nature, 345(6277):672)。hERG鉀離子通道之生物物理性質敘述於Sanguinetti, M.C., Jiang, C., Curran, M.E., and Keating, M.T. (1995). A Mechanistic Link Between an Inherited and an Acquired Cardiac Arrhythmia: HERG encodes the Ikr potassium channel. Cell, 81:299-307, 及 Trudeau, M.C., Warmke, J.W., Ganetzky, B., and Robertson, G.A. (1995). HERG, a Human Inward Rectifier in the Voltage-Gated Potassium Channel Family. Science, 269:92-95. 因此，消除hERG阻斷活性仍為任何新穎藥物發展上之重要考量。
已發現化學式(Ⅰ)的許多化合物具有降低的hERG活性及/或一個良好的IAP活性及hERG活性之間的分隔(較大的“治療窗”)。hERG活性測量之一方法為膜片箝制電生理學方法。功能性hERG活性測量的其他的方法包括hERG結合測定，其可使用從穩定表達hERG通道的細胞分離的市售膜或表達hERG通道的市售細胞株。
有許多化學式(I)化合物具有改善的心臟安全指數(Cardiac Safety Index, CSI) [CSI=hERG IC 50/Cmax(未結合)] (Shultz et al, J. Med. Chem., 2011; Redfern et al, Cardiovasc. Res., 2003)。這可能是由於效能所需的hERG IC 50增加或Cmax降低之故(由於較佳的IAP效力及/或PK)。
特定之化學式(I)化合物具有降低的hERG離子通道阻斷(blocking)活性。特定之化學式(I)化合物具有之對抗hERG之平均IC50 值係大於細胞增殖分析法中化合物IC50 值之30倍、或者大於40倍、或者大於50倍。特定之化學式(I)化合物具有之對抗hERG之平均IC50 值係大於10μM，更尤其大於20μM，且更佳大於30μM。本發明之若干化合物之對抗hERG之平均IC50 值係大於40μM，或是顯示抑制%以表示在濃度10、30、或300μM之IC50 。本發明之若干化合物具有較最小推薦值(30倍)高的平均CSI。
由本文之表1中的資料可見，實例1~34之化合物均具有較WO 2012/143726之化合物實例259 (262及263亦如此)為低的hERG可靠性。特別地，本發明之實例1~2、11、及34之化合物顯示對抗於hERG之≥40µM之IC50 ，然而WO 2012/143726之化合物實例259 (262及263亦如此)顯示於10µM下hERG之42%抑制。因此，對於hERG之優異的選擇性係本發明之化合物優於先前技術(特別是WO 2012/143726所揭露者)所揭露之IAP拮抗劑化合物之關鍵優點。
優異的代謝穩定性
化學式(I)化合物可具有有利的ADMET性質，例如，較佳的代謝穩定性(例如以小鼠肝臟微粒體所測定)、較佳的P450概況(profile)及/或有利的清除率(clearance) (例如低的清除率)。此等特點使得更多的藥物可在系統循環中到達作用的適當部位，以發揮其治療效果，是為優點。腫瘤中藥物濃度增加以發揮藥物作用，可能可增進效力，因而亦可降低投藥劑量。如此，化學式(I)化合物會表現出減少的劑量要求，並更容易地進行調配與投藥。此外，該化合物可降低P450 (例如3A4)的更新(turnover)。
較低的P450抑制責任(inhibitory liability)
許多化學式(I)化合物具有對P450酵素不同的敏感性而有利。例如，特定之化學式(I)化合物具有對抗於各細胞色素P450酵素1A2、2C9、2C19、3A4及2D6 (特別是3A4)之大於10 µM的IC50 值。此外特別是該等化合物並非P450抑制劑。
優異的口服生物可用率
本發明之化合物潛在具有適合口腔接觸(oral exposure) (口腔接觸或AUC)之物化性質。特別是，化學式(I)化合物可呈現改善的口服生物可用率。口服生物可用率可定義為當以口服途徑給藥時化合物之血漿接觸量(plasma exposure)對當以靜脈注射(i.v.)途徑給藥時化合物之血漿接觸量之比率(F)，以百分比表示。
具有口服生物可用率(F值，F%)大於30%、更特別是大於40%的化合物特別有利於口服投藥，而不使用非口服投藥，或者也可使用非口服投藥的方式。
優異的體內藥效
本發明之化合物由於具有對抗XIAP及/或cIAP增進的藥效，而可對於癌細胞株及體內模型(in vivo models)具有增進的體內藥效。
化學式(I)化合物之製法
此章節一如本申請案之其他章節，除非文中另有指出，否則化學式(I)所指亦包括如本文中所定義之所有其他之亞群及其實例。
化學式(I)化合物可依據此技術領域者已知之合成方法而製備。
依據本發明之另一態樣，提供一種製備如前述之化學式(I)化合物之方法，其包括：
(a) (i)將化學式(II)化合物：(II) 其中，R5 、R6 、U及X如前為化學式(I)化合物所述者，L1 表示適合的離去基(leaving group)，如鹵原子(如，氯)及P1 表示氫或適合的保護基，如第三丁氧羰基(tBoc)，與化學式(III)化合物反應：(III) 或其選擇性經保護之衍生物；其中，R1 及R2 如前為化學式(I)化合物所述者，然後進行適合移除P1 保護基，及，若需要的話，任何其他保護基，之去保護反應；或
(ii)將化學式(IV)化合物：(IV) 其中，R5 、R6 、X及U如前為化學式(I)化合物所述者，及L2 表示適合的離去基，如鹵(如，氯)，與化學式(V)化合物反應：(V) 或其選擇性經保護之衍生物；其中，R1 及R2 如前為化學式(I)化合物所述者，及P2 表示氫或適合的保護基，例如第三丁氧羰基(tBoc)，然後進行適合移除P2 保護基，及，若需要的話，任何其他保護基，之去保護反應；及/或
(b)化學式(I)化合物之經保護之衍生物之去保護反應；及/或
(c)化學式(I)化合物或其經保護之衍生物之相互轉化(interconversion)為又一化學式(I)化合物或其經保護之衍生物；及
(d) 選擇性形成化學式(I)化合物之醫藥上可接受之鹽。
步驟(a) (i)通常包括使化學式(II)化合物與化學式(III)化合物，選擇性於適合的添加劑如碘化鉀及適合的鹼如碳酸鉀之存在下，於適合的溶劑(如乙腈)中反應。此種步驟可於周圍溫度或升高的溫度例如70ºC下進行。
步驟(a) (ii)通常包括使化學式(IV)化合物與化學式(V)化合物，選擇性於適合的添加劑如碘化鉀及適合的鹼如碳酸鉀之存在下，於適合的溶劑(如乙腈)中反應。
步驟(b)通常包括任何適合的去保護反應，其條件將依保護基的本質而定。當保護基為tBoc時，此種去保護反應將通常包含使用適合的酸於適合的溶劑中。例如，酸可適合的包含三氟乙酸或氯化氫，及溶劑可適合的包含二氯甲烷乙酸乙酯、1,4-二惡烷(dioxane)、甲醇或水。可選擇性的使用溶劑混合物，例如甲醇水溶液或乙酸乙酯/1,4-二惡烷。
應可理解當保護基為tBoc時，使用如上述之適合的酸去保護時，可產生為醫藥上可接受之鹽之化學式(I)化合物，可將其直接分離。或者，可使用此技術領域所習知之方法將化學式(I)化合物以自由鹼的形式分離，及然後選擇性依步驟(d)轉化為醫藥上可接受之鹽。
步驟(c)通常包括此技術領域者所知之相互轉化(interconversion)步驟。例如，於化學式(I)化合物中，可將第一取代基以此技術領域者所知之方法轉化成第二即另一個取代基。此技術領域者知道許多已知的官能基相互轉化反應，以將先驅化合物轉化為化學式(I)化合物，其可參見Advanced Organic Chemistry by Jerry March, 4th Edition, John Wiley & Sons, 1992。例如， 可能之如使用有機錫試劑(施蒂勒反應(Stille reaction))之金屬催化官能基化反應、格里納試劑(Grignard Reagent)及與氮親核基團之反應見述於‘Palladium Reagents and Catalysts’ [Jiro Tsuji, Wiley, ISBN 0-470-85032-9]以及Handbook of OrganoPalladium Chemistry for Organic Synthesis [Volume 1, Edited by Ei-ichi Negishi, Wiley, ISBN 0-471-31506-0]。
步驟(d)之進行可為將自由鹼形式之化學式(I)化合物溶於適當溶劑中，以化學劑量或過量之醫藥上可接受之有機或無基酸處理，再將所得之鹽以此技術領域習知之方法(如，溶劑蒸發或結晶法)加以分離。
若適當，則前述步驟(a)、(b)及(c)之反應之後或之前可接著此技術領域者已知之一或更多之反應，以適當順序進行以在前述定義之R1 、R2 、R5 、及R6 上得到必要的取代，以製得其他化學式(I)化合物。這類反應之條件已記載於文獻上，且其非限定例子包括： 反應性官能基保護反應； 反應性官能基去保護反應； 鹵化反應； 去鹵化反應； 去烷基化反應； 胺、苯胺、醇及酚之烷基化反應及芳基化反應； 羥基上之光延反應(Mitsunobu reaction)； 適當基團上之環加成反應； 硝基、酯基、氰基、醛基之還原反應； 過渡金屬-催化之偶合反應； 乙醯化反應； 磺醯化反應/磺醯基導入反應； 皂化反應/酯基之水解反應； 酯基之醯胺化反應或轉酯反應(transesterification)； 羧基之酯化反應或醯胺化反應； 鹵原子交換反應(halogen exchange)； 使用胺、硫醇或醇之親核取代反應； 還原性胺化反應； 於羰基或羥胺基上之肟形成反應(oxime formation)； S-氧化反應； N-氧化反應；以及 鹽化反應(salification)。
可依據下列流程1 (Scheme 1)由化學式(IV)化合物製備化學式(II)化合物： 流程1其中，X、U、R5 、R6 、L1 、L2 及P1 如前述之定義。
流程(1)之步驟(i)通常包含使化學式(IV)與化學式(VI)化合物，選擇性於適合的添加劑如碘化鉀及適合的鹼如碳酸鉀之存在下，於適合的溶劑(如乙腈)中反應。
當L1 表示氯時，流程1之步驟(ii)通常包含在鹼(如三乙胺)的存在下使化學式(VII)化合物與能夠將羥基轉化成良好離去基之試劑(如甲磺醯氯)反應。
可依據下列流程2製備化學式(IV)化合物，其中X表示N、U表示碳及R6 表示羥甲基： 流程2
其中，L3 、L4 、L5 及L6 表示適合的離去基，如鹵原子(即，氟、溴或氯)及R5 及L2 係如前述。
當L3 及L4 二者均表示氟時，流程2之步驟(i)通常包含使化學式(VIII)化合物與鹼，如雙(三甲矽)醯胺化鈉(sodium bis(trimethylsilyl)amide，於四氫呋喃(tetrahydrofuran)及異丁腈之存在下，於適合的溶劑(如甲苯)中反應。此種反應之一例顯示於本文之製備例11。
流程2之步驟(ii)涉及與適合的還原劑反應，通常包含使化學式(IX)化合物與硼烷-四氫呋喃複合物，於如四氫呋喃之適合的溶劑存在下反應。此種反應之一例顯示於本文之製備例12。流程2之步驟(ii)亦可通常包含使化學式(IX)化合物與氯化鎳(II)六水合反應，然後添加硼氫化鈉(sodium borohydride)。此種反應之一例顯示於本文之製備例12，另一步驟選項。
流程2之步驟(iii)通常包含化學式(X)化合物之環化作用(cyclisation)，使用適合的鹼，如碳酸鉀，及適當的溶劑，如NMP。此種反應之一例顯示於本文之製備例13。
流程2之步驟(iv)通常包含使化學式(XI)化合物與式R5 -M之化合物反應，其中，R5 如上述，M表示有機金屬類的殘基，使得R5 -M表示親核性有機金屬試劑，如有機鋅的鹵化物(organozinc halide)。步驟(iv)通常亦包含使用溴化鋰、催化劑如二氯化[1,3-雙(2,6-二異丙基苯基)咪唑-2-亞基](3-氯吡啶基)鈀(II) ([1,3-bis(2,6-diisopropylphenyl)imidazol-2-ylidene](3-chloropyridyl)palladium(II) dichloride)，其於適合的溶液系統例如四氫呋喃及NMP中。此種反應之一例顯示於本文之製備例15。
流程2之步驟(v) 通常包含化學式(XII)化合物之鹵化，例如於二甲基甲醯胺中使用N-溴琥珀醯亞胺(N-bromosuccinimide)進行鹵化。此種反應之一例顯示於本文之製備例16。
流程2之步驟(vi)涉及鋰化作用(lithiation)及與適合的親電子劑(electrophile)反應以導入甲醯基，及通常包含使化學式(XIII)化合物與MeLi於THF中反應，然後添加於己烷中的tBuLi，然後添加二甲基甲醯胺。此種反應之一例顯示於本文之製備例17。
流程2之步驟(vii)涉及使用適合的還原劑將甲醯基還原，及通常包含使化學式(XIV)化合物與硼氫化鈉於甲醇中反應。此種反應之一例顯示於本文之製備例17。
當L2 表示鹵原子，如氯，流程2之步驟(viii)通常包含使化學式(XV)化合物與鹵代乙醯基鹵(haloacetyl halide)如氯乙醯基氯於MeCN中反應，然後添加於甲醇中的碳酸鉀。此種反應之一例顯示於本文之製備例18。另一種選項，可遵循類似於涵括製備例25~29所述之序列，使化學式(XIII)化合物轉化成化學式(XV)化合物。
應理解的是，化學式(XV)化合物，其中R6 表示CH(ORx )CH2 ORz ，其可藉由改變流程2之步驟(v)起之步驟，以類似於上述流程2之方式製備。適合的反應序列之例子顯示於本文之製備例38~42。
化合物，其中X表示NR3 、U表示碳及R6 為=O，能夠使用對流程2之適當的中間體或其經保護的衍生物進行官能基相互轉化而合成，例如製備例22~24、30~35及50所顯示。
應理解到，化學式(IV)化合物，其中R5 表示未經取代之正丁基或另一種情形是經取代的苯甲基，藉著改變流程2之步驟(iv)所使用之有機金屬試劑，可以類似於流程2之方式製備。此種反應之一例顯示於本文之製備例15A、15B及15C。
化合物，其中X表示CR4 、U表示氮及R6 表示側氧基，能夠使用類似於製備例43~49及51~58所述之序列予以合成。
化學式(V)化合物、或其經選擇性保護之衍生物，可依據下列流程3製備： 流程3
其中，R1 、R2 及P2 如前述為化學式(V)化合物所定義者，L7 表示適合的離去基，如鹵原子，(例如氯)，及P3 表示適合的保護基，如苯甲基。
當P3 表示苯甲基時，流程3之步驟(i)通常包括使化學式(XVI)化合物與苯甲醛在適合的還原劑如三乙醯氧基硼氫化鈉(sodium triacetoxyborohydride)及1,2-二氯乙烷之存在下反應。此種反應之一例顯示於本文之製備例5。
當L7 表示氯時，流程3之步驟(ii)通常包括使化學式(XVII)化合物與甲磺醯氯於三乙胺及二氯甲烷的存在下反應。此種反應之一例顯示於本文之製備例6。
流程3之步驟(iii)通常包括使化學式(XVIII)與(XIX)化合物於鹼(如碳酸鉀)、添加劑(如碘化鉀)之存在下於適合的溶劑(如乙腈)中反應。此種反應之一例顯示於本文之製備例7。
流程3之步驟(iv)通常包括去保護反應。例如，當P3 表示苯甲基時，步驟(iv)通常包含化學式(XX)化合物之氫化反應，其係於適合的催化劑(如鈀碳(palladium on carbon))存在下、於適合的溶劑系統(如乙醇或乙酸與乙醇之混合物中進行。此種反應之一例顯示於本文之製備例8。
或者，化學式(I)化合物可藉由使化學式(XXI)化合物或其選擇性經保護的衍生物：(XXI) 其中，R1 及R2 如為前述化學式(I)化合物所定義者，及P2 表示適合的保護基，如第三丁氧羰基(tBoc)，與化學式(XXII)化合物反應而合成：(XXII) 其中，X、U、R5 及R6 如前述，然後進行適合移除保護基P2 及任何其他保護基之去保護反應。
適合的化學式(XXII)化合物之一例包括如前述之化學式(XV)化合物。
此反應通常包含使化學式(XXI)化合物與化學式(XXII)化合物，如化學式(XV)化合物，在適合的溶液中及適合的溫度(例如周圍溫度)下，於能夠將化學式(XXI)化合物具有的羧基活化之適合的鹼及試劑存在下反應。適合的溶劑(例如二氯甲烷)對於所使用之試劑應為惰性。適合的鹼之例子為三乙胺及N,N-二異丙基乙基胺(DIPEA)。適合的活化劑的例子為三吡咯烷基溴化鏻六氟磷酸鹽(bromo-tris-pyrrolidino-phosphonium hexofluorophosphate，PyBrop)、O-苯並三唑-N,N,N’,N’-四甲基-脲陽離子-六氟磷酸鹽(O-benzotriazole-N,N,N',N'-tetramethyl-uronium-hexafluoro-phosphate，HBTU)、1,1’-羰基二咪唑(1,1’-carbonyldiimidazole)、1-乙基-3-(3’-二甲基胺基丙基)- 碳二亞胺氫氯酸鹽(1-ethyl-3-(3’-dimethylaminopropyl)-carbodiimide hydrochloride，EDC)、及2-(7-氮-1H-苯並三唑-1-基)-1,1,3,3-四甲基脲陽離子六氟磷酸鹽(2-(7-aza-1H-benzotriazole-1-yl)-1,1,3,3-tetramethyluronium hexafluorophosphate，HATU)。此方法可選擇性的於催化量或化學計量的適合的共活化試劑如1-羥基苯並三唑(1-hydroxybenzotriazole，HOBt)或1-羥基氮苯並三唑(1-hydroxyazabenzotriazole，HOAt)存在下進行。
化學式(XXI)化合物或其選擇性經保護的衍生物可由如上述之化學式(V)化合物或其選擇性經保護的衍生物以此技術領域習知之方法製備，例如，與單鹵乙酸之酯(如溴乙酸苯甲酯)於適合的鹼(如碳酸鉀)的存在下在適合的溶劑(如乙腈)中反應；及然後進行酯解(ester hydrolysis)反應(或是在苯甲酯的情形下選擇性進行氫解反應)。化學式(I)化合物可依循類似於製備例1~5中所述之序列製備。
化學式(XXII)化合物可使用類似於流程2或下列製備例：38~42；22~24、30~35及50；或43~49及51~58所述之序列而製備。
應該理解特定的化合物，例如化學式(I)、(II)、(III)、(V)、(VI)、(VII)、(XVI)、(XVII)、(XVIII)、(XIX)、(XX)、(XXI)及(XXII)化合物，能夠以不同的非鏡像異構物及/或鏡像異構物形式存在，及其製備方法可利用合成為純鏡像異構物之先驅物。
或者，可使用外消旋(racemic)先驅物，於此等方法中產生的非鏡像異構物(diastereoisomers)之混合物，可藉由此技術領域者已知之方法分離，例如使用非掌性或掌性製備型層析或使用非鏡像異構物衍生物之解析：例如，與一純鏡像異構性的酸(enantiomerically pure acid) (例如L-酒石酸)形成鹽的結晶；或是將一純鏡像異構性的掌性輔助劑與化合物共價鍵聯而形成非鏡像異構性衍生物，然後使用習知方法如掌性層析法(chiral chromatography)予以分離，然後將前述共價鍵聯切斷以產生適當之純鏡像異構物產物(enantiomerically pure product)，而達成鏡像異構物分離。
所需要的中間物，例如化學式(III)、(VI)、(VIII)、R5 -M、(XVI)及(XIX)化合物，可購得、文獻中已知、以類似於文獻所述之方法製備、或以類似於下列實例之實驗步驟所述之方法製備。其他化合物可藉由使用此技術領域所熟知之方法對R1 、R2 、R5 及R6 基進行官能基相互轉化而製備。
於又一具體實施例中，本發明提供一種新穎之中間體(intermediate)。於一具體實施例中，本發明提供新穎之具有化學式(II)或(IV)或(V)或(VII)或(XX)之中間體。於另一具體實施例中，本發明提供一種新穎之具有化學式(XXI)或(XXII)之中間體。
保護基
於上述之許多反應中，可能需要保護一或更多基，以防止於分子上不為所欲的位置發生反應。保護基團之例子、及保護及去保護官能基之方法，可參見Protective Groups in Organic Synthesis (T. Green and P. Wuts；3rd Edition；John Wiley and Sons, 1999)。
特別是，R1 及R2 基可以被保護的形式合成，而將保護基移除可產生化學式(I)化合物。
羥基可例如以醚(-OR)或酯(-OC(=O)R)的方式被保護，舉例而言，可形成：第三丁基醚；四氫吡喃(THP)醚；苯甲基、二苯甲基(benzhydryl) (diphenylmethyl)、或三苯甲基(trityl) (triphenylmethyl)醚；三甲基矽基或第三丁基二甲基矽基醚；或乙醯酯(-OC(=O)CH3 )。
醛或酮基可被保護，舉例而言，可分別形成縮醛(acetal) (R-CH(OR)2 )或縮酮(ketal) (R2 C(OR)2 )，其中羰基 (＞C=O)係以例如一級醇處理。在酸的存在下，使用大量過量的水進行水解反應，可便利的再生成醛或酮基。
胺基可被保護，舉例而言，可形成醯胺(-NRCO-R)或胺甲酸酯(carbamate) (-NRCO-OR)，舉例而言，可形成：甲醯胺(-NHCOCH3 )；苯甲基胺甲酸酯(-NHCO-OCH2 C6 H5 、-NH-Cbz或NH-Z)；第三丁基胺甲酸酯(-NHCO-OC(CH3 )3 、-NH-Boc)；2-二苯基-2-丙基胺甲酸酯(-NHCO-OC(CH3 )2 C6 H4 C6 H5 、-NH-Bpoc)；9-芴甲基胺甲酸酯(9-fluorenylmethyl carbamate) (-NH-Fmoc)；6-硝基藜蘆基(nitroveratryl)胺甲酸酯(-NH-Nvoc)；2-三甲基矽基乙基胺甲酸酯(-NH-Teoc)；2,2,2-三氯乙基胺甲酸酯(-NH-Troc)；烯丙基胺甲酸酯(-NH-Alloc)；或2(-苯基碸基)乙基胺甲酸酯(-NH-Psec)。
舉例而言，若化學式(II)化合物含有胺基時，當欲導入額外官能基時，胺基可藉由前述所定義之保護基加以保護，其一特別的保護基即第三丁氧羰基(Boc)。當胺基無須後續修飾反應時，可接上保護基通過反應序列，給予化學式(I)化合物N-保護形式，然後可使用一般方法(如，在Boc基時可以酸處理)進行去保護，而得到化學式(I)化合物。
胺基之其他保護基，如環胺及雜環N-H基，係包括甲苯碸(tosyl)及甲烷碸(mesyl)基團、苯甲基(如，對甲氧基苯甲基(PMB))基團及四氫吡喃(THP)基團。
羧酸基團可以酯之方式被保護，舉例而言，可形成：C1-7 烷基酯(如，甲基酯；第三丁基酯)；C1-7 鹵烷基酯(如，C1-7 三鹵烷基酯)；三C1-7 烷基矽基-C1-7 烷基酯；或C5-20 芳基-C1-7 烷基酯(如，苯甲基酯；硝基苯甲基酯；對-甲氧基苯甲基酯)。巰基(thiol)亦可以例如硫醚(-SR)之方式被保護，舉例而言，可形成：苯甲基硫醚；乙醯胺基甲基醚(acetamidomethyl ether) (-S-CH2 NHC(=O)CH3 )。
本發明之化合物之分離與純化
本發明化合物可以本技術領域者已知之一般技術加以分離及純化，而此方法之例子包括層析技術，例如管柱層析法(如，快速層析法)及HPLC。化合物純化之一特別有用之技術係製備型液相層析法，其使用質譜法的方式對層析管柱流出之化合物偵測。
製備型LC-MS係為一般常見且有效之純化小分子有機化合物(如本文所述之化合物)之方法。液相層析法(LC)及質譜法(MS)之方法可以變化，以提供更佳之粗產物分離且提升MS之樣品偵測。製備型梯度LC方法最佳化條件包括使用不同管柱、揮發性沖提液及修飾劑、及沖提梯度。可利用本技術領域已知之最佳化製備型LC-MS方法，用這些方法純化化合物。此些方法係如Rosentreter U, Huber U.; Optimal fraction collecting in preparative LC/MS; J Comb Chem.; 2004; 6(2), 159-64以及Leister W, Strauss K, Wisnoski D, Zhao Z, Lindsley C., Development of a custom high-throughput preparative liquid chromatography/mass spectrometer platform for the preparative purification and analytical analysis of compound libraries; J Comb Chem.; 2003; 5(3); 322-9中所述。透過製備型LC-MS純化化合物之系統之例子係如本發明下述實施例部分所述(標題”質量指引純化LC-MS系統”)。
化學式(I)化合物及其鹽之再結晶方法可使用本技術領域者已知之方法進行，請參見，例如，P. Heinrich Stahl (Editor), Camille G. Wermuth (Editor), ISBN: 3-90639-026-8, Handbook of Pharmaceutical Salts: Properties, Selection, and Use, Chapter 8, Publisher Wiley-VCH。由有機反應獲得的產物若是直接從反應混合物分離時，很少是純的。若化合物(或其鹽)為固體時，則可從適當溶劑中透過再結晶法純化及/或結晶。好的再結晶溶劑須為在升高的溫度下可溶解適量之待純化物質，但在低溫下僅溶解少量物質。其在低溫下亦須溶解不純物，或不完全溶解不純物。最後，溶劑應須容易地從純化產物中移除。此通常係指此溶劑具有相對低沸點以及本技術領域者將了解特定物質用之再結晶溶劑；或是若該資訊無法取得時，則須測試多種溶劑。為了得到良好產率之純化物質，要使用最低量的熱溶劑去溶解所有的不純物。實際上，係使用較所需使用量多3~5%之溶劑，以使溶液為不飽和狀態。若不純化合物中含有無法溶於溶劑中之不純物時，則後續可透過過濾法移除，再使溶液進行結晶。此外，若不純化合物含有少量非化合物本身之有顏色物質時，則可於熱溶液中添加少量去色劑(如，活性碳)，經過濾後再使溶液進行結晶。通常在冷卻溶液時，結晶會自發性進行。但若無自發性進行，則可將溶液冷卻至室溫以下或添加純物質之單晶(晶種)以促使結晶進行。亦可進行再結晶，及/或使用反溶劑(anti-solvent)或共溶劑(co-solvent)使產率最佳化。於此情形下，化合物係於升溫下溶解在適合的溶劑中，過濾後再添加另一溶劑以幫助再結晶，其中所欲之化合物對此再添加之另一溶劑具有低溶解度。而後，所得之晶體一般可使用真空過濾法分離，經清洗後再於如烘箱或乾燥法進行乾燥。
純化方法之其他例子包括：昇華法，其包括於真空環境下加熱之步驟(例如，使用冷指(cold finger)冷凝器)；以及從熔融態之結晶法(Crystallization Technology Handbook 2nd Edition, edited by A. Mersmann, 2001)。
生物效應(BIOLOGICAL EFFECTS)
本發明之化合物、次群組及其實施例係作為細胞凋亡抑制蛋白(IAP)之拮抗劑，且其可有效預防或治療本文所述之疾病狀態或異常身體狀況。此外，本發明之化合物及其次群組亦有效於預防或治療由IPA所介導之疾病或異常身體狀況。所指之例如癌症之疾病狀態或異常身體狀況之預防或抑制或治療，包括減緩或降低癌症誘發於其範圍內。
因此，舉例而言，本發明化合物將可用於減緩或降低癌症發病率。
本發明之化合物係可用於成人治療上。本發明化合物亦可用於孩童治療上。
更特別是，化學式(I)化合物及其次群組係對於IAP之拮抗劑。舉例而言，本發明之化合物具有對XIAP、cIAP1及/或cIAP2之親和力，且特別是選自XIAP及cIAP1之IAP。
特定之化合物係對一或更多選自XIAP、cIAP1及cIAP2之IAP具有親和力之化合物。本發明之具體化合物為IC50 值低於0.1 μM之化合物。
拮抗劑化學式(I)化合物係可與IAP結合並對於IAP呈現效力。於一具體實施例中，拮抗劑化學式(I)化合物係可對IAP家族成員中一或更多IAP展現選擇性，相較與IAP其他家族成員結合及/或展現親和力，拮抗劑式(I)化合物較會與XIAP及/或cIAP結合及/或對XIAP及/或cIAP展現親和力。
此外，本發明之許多化合物對XIAP較cIAP具有選擇性，或反之亦然，即對cIAP較XIAP具有選擇性(特別是cIAP1)，且本發明一具體實施例中係說明此些化合物。特別是，相較於其他IAP家族成員，本發明之化合物可對一或更多、特別是XIAP、cIAP1及/或cIAP2之IAP家族成員展現至少十倍以上之親和力。此可以本文所述之方法加以測定。於再一具體實施例中，本發明之化合物可具有對XIAP、cIAP1及/或cIAP2相當之親和力，特別是對XIAP及cIAP1具有相當之親和力(即，親和力差異低於10倍)。
對於XIAP及cIAP1的活性可特別有利。要拮抗具有相同效力之XIAP及cIAP1，應能透過活化半胱天冬酶-8以啟動細胞凋亡反應，以由促-生存NF-κB訊息傳遞轉往細胞凋亡方向進行；且XIAP之可能拮抗作用可確保在任何用以阻斷此過程之固有阻抗機制上升調節(upregulated)前達到細胞凋亡作用。透過自泛素化反應及蛋白酶體降解以耗盡cIAP1時，NF-κB訊息傳遞會暫時上升調節，其係對敏感細胞株中TNF-α之表現回應，且亦對如cIAP2及c-FLIP之抗- 細胞凋亡因子之上升調節回應。因此，需要有效的XIAP拮抗機制以使效應子半胱天冬酶活化(effector caspase activation)和細胞死亡，而不是允許cIAP2-介導的抗性聚積。一般認為，於體內施予此些化合物所造成之毒性反應是源自於暫時誘發NF-κB訊息傳遞，結果使促-發炎細胞因子上升調節，此反應係由cIAP1/2拮抗機制單獨所介導。因此，此雙重效果應能夠在劑量限制毒性反應發生前，形成一治療窗口。
IAP在控制程序性(programmed)細胞死亡之功能上，亦與多種疾病有關，包括與細胞聚集相關之失調(如，癌症、自體免疫失調、發炎反應及心血管再狹窄(restenosis))、過度細胞凋亡導致細胞損失之失調(如，中風、心臟衰竭、神經變性，如阿茲海默症、帕金森氏症、亨丁頓舞蹈症、肌萎縮性側索硬化症、AIDS、局部缺血(中風、心肌梗塞)及骨質疏鬆症，或治療自體免疫疾病，如多發性硬化症(MS)。
因此，亦設想本發明之化合物可用於處理其他異常身體狀況，如發炎(例如包括類風濕性關節炎之關節炎)、肝炎、潰瘍性結腸炎、胃炎、自體免疫性疾病、心血管再狹窄、中風、心臟衰竭、神經變性(neurodegenerative)異常身體狀況(如，阿茲海默症、帕金森氏症、亨丁頓舞蹈症、強直性肌營養不良、及肌萎縮性側索硬化症)、AIDS、局部缺血(如，創傷性腦損傷、脊隨損傷、腦缺血、腦缺血/灌注(I/R)損傷、急性及慢性CNS損傷局部缺血、中風或心肌梗塞)、肌肉骨骼系統如骨質疏鬆症的退行性疾病、自體免疫疾病(如，多發性硬化症(MS)及第一型糖尿病)、以及眼病(如，程序性細胞死亡控制失調所導致之視網膜退行性疾病)。於一具體實施例中，本發明之化合物可用於治療病毒感染如皰疹病毒、痘病毒，Epstein-Barr病毒、Sindbis病毒、腺病毒、HIV、HPV、肝炎例如乙型肝炎病毒(HBV)或丙型肝炎病毒(HCV)及HCMV或分枝桿菌感染如結核病(TB)。
由於本發明之化合物對IAP之親和性，將可用以作為控制程序性細胞死亡之手段。因此預料化合物可用以治療或預防增生型失調，如癌症。此外，本發明化合物可用於與細胞聚集相關失調或過度細胞凋亡導致細胞損失之失調等疾病治療上。
可被治療(或抑制)之癌症(及其良性組織)之例子包括，但不限於，上皮起源(epithelial origin)腫瘤(各種形式之腺瘤及惡性腫瘤，包括腺癌、鱗狀細胞癌、移行細胞癌或其他惡性腫瘤)，如膀胱及尿道、乳房、腸胃道(包括食管、胃、小腸、大腸、直腸及肛門)、肝臟(肝癌)、膽囊及膽管系統、胰外分泌腺、腎臟、肺臟(如，腺癌、小細胞肺癌、非小細胞肺癌、細支氣管肺泡癌(bronchioalveolar carcinomas)及間皮瘤)、頭頸部(如，舌、口腔、喉、咽、鼻咽、扁桃腺、唾液腺、鼻腔及鼻竇)、卵巢、輸卵管、腹膜、陰道、外陰、陰莖、子宮頸、子宮肌層、子宮內膜、甲狀腺(如，甲狀腺濾泡性癌)、腎上腺、前列腺、皮膚及皮膚屬件(如，黑色素瘤、基底細胞瘤、鱗狀細胞瘤、角化棘皮瘤、發育不良痣)等之惡性腫瘤；血液惡性腫瘤(即，白血病、淋巴瘤)、及包括血液惡性腫瘤及淋巴系統之癌前血液疾病及交界性惡性腫瘤(如，急性淋巴細胞白血病[ALL]、慢性淋巴細胞白血病[CLL]、如瀰漫性大B細胞淋巴癌[DLBCL]之B細胞淋巴癌、濾泡性淋巴瘤、Burkitt's淋巴瘤、套細胞淋巴瘤、T細胞淋巴瘤及白血病、自然殺手細胞[NK]淋巴瘤、Hodgkin's淋巴瘤、毛細胞白血病、未知意義之單株免疫球蛋白症(monoclonal gammopathy)、漿細胞瘤、多發性骨髓瘤、及移植後淋巴增生性失調、及血液惡性腫瘤及骨髓系統相關病症(例如，急性骨髓性白血病[AML]、慢性骨髓性白血病[CML]、慢性骨髓單核球性白血病[CMML]、嗜酸性細胞增多症(hypereosinophilic syndrome)、如真性紅血球增多症(polycythaemia vera)之骨髓增生性疾病(myeloproliferative disorders)、原發性血小板增多症及原發性骨髓纖維化、骨髓增生性症候群、骨髓發育不良症候群及早幼粒細胞白血病)等惡性腫瘤；間葉來源腫瘤，例如軟組織、骨骼或軟骨之肉瘤，如骨肉瘤、纖維瘤、軟骨肉瘤、橫紋肌肉瘤、平滑肌肉瘤、脂肪肉瘤、血管肉瘤、Kaposi'肉瘤、尤文氏(Ewing)肉瘤、滑膜細胞瘤、上皮肉瘤、腸胃道基質瘤、良性及惡性組織細胞瘤、及隆突性皮膚纖維瘤；中央或周圍神經系統腫瘤(例如，星型細胞瘤、膠質瘤或膠狀母細胞瘤、腦膜瘤、室管膜瘤、松果體腫瘤及許旺細胞瘤)；內分泌瘤(例如，腦下垂體瘤、腎上腺瘤、胰島細胞瘤、甲狀旁腺腫瘤、類癌瘤及甲狀腺髓質瘤)；眼部及眼部屬件瘤(例如，視網膜母細胞瘤)；生殖細胞及滋養細胞瘤(例如，畸胎瘤、精原細胞瘤、惡性胚胎瘤、水囊狀胎塊(hydatidiform moles)及絨毛膜癌)；以及兒童及胚胎瘤(如，髓母細胞瘤、神經母細胞瘤、威爾姆氏腫瘤(Wilms tumor)及原始性神經外胚細胞瘤(primitive neuroectodermal tumors)；或症候群，先天或容易造成增生情形之病症(如，著色性乾皮病)。
細胞生長是一種緊密控制的作用。癌症係一非正常細胞生長情形，當細胞以不受控制的方式複製(數量增加)、細胞不受控制的成長(變大)、及/或因細胞凋亡(程序性細胞死亡)、壞疽或脫落所致的細胞死亡減少，癌症即產生。於一具體實施例中，不正常之細胞生長係選自：不受控制之細胞增生、過度細胞生長或減少程序性細胞死亡。特別是，不正常細胞生長之情況或疾病是癌症。因此，於本發明之治療包含異常細胞生長(即，不受控制及/或快速細胞生長)之疾病或異常身體狀況之醫藥組成物、用途或方法中，一具體實施例中之含有不正常細胞生長之疾病或異常身體狀況係為癌症。
於一具體實施例中，惡性血液疾病係白血病。於另一具體實施例中，惡性血液疾病係為淋巴癌。
於一具體實施例中，要治療的疾病是白血病，如急性及慢性白血病、急性骨髓性白血病(AML)、及慢性淋巴細胞白血病(CLL)。於一具體實施例中，白血病為難治性DLBCL。
於一具體實施例中，淋巴瘤為MALT淋巴瘤。於一具體實施例中，白血病為AML。
於一具體實施例中，惡性血液疾病是多發性骨髓瘤。
許多疾病係具有持續不斷且未受調控血管新生之特徵。慢性增生疾病一般係與血管新生高度相關，其可能造成或維持在發炎及/或增生狀態，或因侵入性增生至血管而導致組織損傷。腫瘤生長及轉移已被證實與血管新生有關。因此，本發明之化合物可用於防止及擾亂腫瘤血管新生之起始。特別是，本發明之化合物可用於治療轉移及轉移性癌症。
轉移或轉移性疾病係為疾病從一器官或部位轉移至另一非相鄰器官或部位。可透過本發明之化合物治療之癌症包括原發性腫瘤(即，在原發性位置之腫瘤細胞)、區域性侵入癌症(癌症細胞在一局部區域中穿過或浸潤周圍正常組織)、及轉移(或繼發性)腫瘤，即，腫瘤會從惡性細胞開始形成，其中惡性細胞係透過血流(血液型擴散)或透過淋巴或穿過體腔(空間性轉移)至身體其他區域及組織而進行循環。
具體癌症包括肝癌、黑色素瘤、食道癌、腎臟癌、結腸癌、直腸癌、肺癌(如，間皮瘤或肺腺癌)、乳癌、膀胱癌、胃癌、卵巢癌及前列腺癌。
具體癌症之例子包括腎臟癌、黑色素瘤、結腸癌、肺癌、乳癌、卵巢癌及前列腺癌。於一具體實施例中，癌症係選自黑色素瘤、結腸癌、乳癌及卵巢癌。於一具體實施例中，癌症係黑色素瘤。於一具體實施例中，癌症係為發炎性乳癌。
於一具體實施例中，癌症是肺癌，例如間皮瘤，其包括惡性腹膜間皮瘤或惡性胸膜間皮瘤。
於一具體實施例中，癌症是乳癌，特別是三陰性(triple-ve)乳癌。
於一具體實施例中，癌症是直腸癌。
本發明之再一態樣包括本發明之化合物於一患者上預防或治療癌症之用途，其中患者係選自由具有高度發炎情形之癌症之次族群。這類癌症已知亦為”發炎性表現”且包括上升細胞活素訊息傳遞(如，TNF)之癌症。於一具體實施例中，癌症係為發炎性腫瘤，舉例而言，係為黑色素瘤、結腸癌、乳癌及卵巢癌，且特別是黑色素瘤。
於一具體實施例中，黑色素瘤是ras基因突變黑色素瘤。
某些癌症係對特殊藥物治療具有抗藥性。此原因可能與腫瘤種類(最常見係為上皮惡性腫瘤本身即具有化學抗藥性)，或者抗性可因疾病進展或治療結果而自發性產生。在這方面，間皮瘤抗藥性之例子包括間皮瘤對拓樸異構酶毒物、甲基化試劑、抗微管蛋白試劑、抗葉酸試劑(antifolate)、鉑化合物及放射治療等抗藥性，特別是抗順鉑(cisplatin)之間皮瘤。類似的，多發性骨髓瘤之例子包括硼替左米(bortezomib)-敏感多發性骨髓瘤或難治性多發性骨髓瘤，以及，慢性骨髓性白血病之例子包括依麥替尼布(imitanib)-敏感慢性骨髓性白血病及難治性慢性骨髓性白血病。
癌症可為對選自XIAP、cIAP1、cIAP2、NAIP、ILP2、ML-IAP、生存素及BRUCE之任一或更多IAP之拮抗反應具有敏感性者，較佳為XIAP、cIAP1、cIAP2、ML-IAP，且更佳為XIAP。
進一步設想本發明之化合物，特別是具有IAP親合性之化合物可特別用在與IAP量增加或11q22擴增相關癌症之治療或預防上，且癌症的例子係如本文先前技術所述。
於多種癌症中，發現有因IAP過度表現所導致之IAP量增加，且IAP量增加會造成預後(prognosis)較差。此外，與11q22擴增相關之癌症，亦對IAP拮抗劑敏感。IAP量增加及11q22擴增可使用本文所述之技術鑑定。無論一特定癌症是否對IAP功能敏感，均可以本文中”診斷方法”一段所述之方法加以檢測。
本發明之再一態樣係提供一種化合物之用途，其係用以製造本文所述之疾病或異常身體狀況之治療藥物，特別是癌症。
本發明之化合物亦可用以治療腫瘤生長、發生、對化學療法敏感化細胞之化學及放射性治療抗藥性、並作為抗轉移試劑。
所有類型之治療抗癌干預必須能增加對目標腫瘤細胞之壓力。在減緩此種壓力所造成之有害反應時，IAP係直接抵抗癌症藥物及治療法之效果。因此，IAP的拮抗劑代表是一種具有下述能力之化療藥劑：(i)增加有害細胞對抗癌藥物及/或治療之敏感性；(ii)緩和或減少對抗癌藥物及/或治療之抗性發生率；(iii)改變抗癌藥物及/或治療之抗性；(iv)展現抗癌藥物及/或治療之活性；(V)延遲或防止對抗癌藥物及/或治療之抗性產生。
以其對IAP親合性之結果，化合物可用於控制程序性細胞死亡之方法。因此，可以設想本發明之化合物可用以治療其他異常身體狀況：如肝炎、潰瘍性結腸炎及胃炎所導致之發炎反應；如阿茲海默症、帕金森氏症、亨丁頓舞蹈症、強直性肌營養不良及肌萎縮性側索硬化之神經變性異常身體狀況；AIDS；如心血管再狹窄、創傷性腦損傷、脊髓損傷、腦缺血、腦缺血/灌注(I/R)損傷、急性及慢性CNS損傷局部缺血、中風或心肌梗塞等局部缺血；如骨質疏鬆症之肌肉骨骼系統退化性疾病；如多發性硬化症(MS)及第一型糖尿病之自體免疫疾病；及如視網膜退化之眼病。
本發明之化合物作為IAP的拮抗劑，其親和力可使用本文實施例所述之生物及生物物理試驗方法加以測定，化合物所呈現之親和力程度則可以IC50 值一詞加以定義。本發明之具體化合物係IC50 值小於1 μM，更特別是小於0.1 μM之化合物。
於一實施例中，本發明提供一種化合物，係用於治療以IAP (如，XIAP及/或cIAP(如cIAP1))作為介導之疾病或異常身體狀況之用途。於又一具體實施例中，本發明提供一種化合物於治療IAP (如，XIAP及/或cIAP(如cIAP1))過度表現所造成之疾病或異常身體狀況之用途。
於一具體實施例中，本發明提供一種化合物用於治療IAP介導之疾病或異常身體狀況之用途，其中化合物係作為IAP的拮抗劑，並於至少一試驗中(如，結合置換試驗(displacement binding))對IAP之IC50 係小於50μM。特別是，IAP係為XIAP、cIAP1及/或cIAP2。於又一具體實施例中，以IAP介導之疾病或異常身體狀況為癌症，係以過度表現IAP至少一者及/或11q22擴增為特徵。
於一具體實施例中，本發明提供一種化合物用於治療IAP介導之疾病或異常身體狀況之用途，其中化合物於對IAP試驗中(如，結合置換試驗)對至少一IAP之IC50 係小於10 μM。
本發明又一實施態樣係提供一種化合物用於製做治療IAP介導之疾病或異常身體狀況之藥物之用途，其中化合物係為一IAP的拮抗劑，並於試驗中(如，結合置換試驗)對至少一IAP之IC50 係小於50 μM。
診斷方法
在施予化學式(I)化合物前，患者並需經過篩選，以判定患者是否罹患或可能罹患能以對IAP具有親和力之化合物加以治療之疾病或異常身體狀況。”患者”一詞包括人類及獸醫。
例如，從病患取得之生物樣品可加以分析，以判定患者所罹患或可能罹患之疾病或異常身體狀況(如，癌症)，是否為以基因異常或蛋白質異常表現為特徵之病症，其中基因異常或蛋白質異常表現導致IAP量上升調節或對正常IAP功能路徑敏感或對IAP活化之生化路徑下游之上調。
造成IAP活化或敏感之異常例子，為喪失或抑制細胞凋亡路徑、受體或配體上升調節、受體或配體細胞遺傳異常或突變。IAP上升調節腫瘤，特別是IAP過度表現，可對IAP拮抗劑特別敏感。例如，多種癌症已發現有XIAP及cIAP過度表現，如先前技術中所述。
染色體11q22擴增可於細胞株中、於食道(Imoto et al., 2001)及子宮頸(cervix) (Imoto et al., 2002)之麟狀細胞癌之原發性腫瘤中、以及原發性肺癌/細胞株(Dai et al., 2003)中偵測到。免疫組織化學法及西方墨點測試已鑑定出cIAP1及cIAP2二者因在不容易放大之癌症中過度表現，故於此區域內為潛在致癌基因。
上升調節一詞包括表現增加或過度表現，包括基因放大(即，多基因複製數)、細胞遺傳異常及轉錄導致之表現增加。因此，可對患者進行診斷測試以偵測IAP上升調節之標記(marker)特性。診斷一詞包括篩選。以標記而言，其包括基因標記，而基因標記包括測量DNA組成以檢測是否有IAP突變或11q22擴增。標記一詞亦包括IAP上升調節特徵的標記，包括前述蛋白質之蛋白質量、蛋白質狀態及mRNA量。
診斷試驗或篩選一般係在生物樣品(即，體組織或體液)上進行，生物樣品係選自腫瘤切片樣品、血液樣品(分離且多量之剝落腫瘤細胞)、腦脊髓液、血漿、血清、唾液、糞便檢測樣品、痰、染色體分析、胸水、腹水、頰塗片(buccal spears)、皮膚切片或尿液。
細胞遺傳異常、基因放大、突變及蛋白質上升調節之檢測及分析方法係為此技術領域者已知。篩選方法可包括， 但不限於，如反轉錄酶聚合酶連鎖反應(RT-PCR)之標準法、或如螢光原位雜交法(FISH)之原位雜交法。
於RT-PCR篩檢中，腫瘤中之mRNA量係藉由產生mRNA之cDNA複製後再以PCR將cDNA放大後所評估。PCR放大之方法、引子之選擇及放大之反應條件，係為此技術領域者已知。核酸操作及PCR係以一般方法進行，例如Ausubel, F.M. et al., eds. (2004) Current Protocols in Molecular Biology, John Wiley & Sons Inc.、或Innis, M.A. et al., eds. (1990) PCR Protocols: a guide to methods and applications, Academic Press, San Diego中所述。與核酸技術相關之反應及操作，亦於Sambrook et al., (2001), 3rd Ed, Molecular Cloning: A Laboratory Manual, Cold Spring Harbor Laboratory Press中所述。或者，亦可使用市售RT-PCR套組(如，Roche Molecular Biochemicals)，或者使用如美國專利第4,666,828、4,683,202、4,801,531、5,192,659、5,272,057、5,882,864及6,218,529號中所述之方法，且其內容均納入本文中以供參考。
用以評估mRNA表現之原位雜交法技術之例子可為螢光原位雜交法(FISH) (請參見Angerer (1987) Meth. Enzymol., 152: 649)。
一般而言，原位雜交法包括下列主要步驟：(1)固定待分析組織；(2)預雜交處理樣品，以增加目標核酸之雜交機率並減少非專一性結合；(3)對核酸混合物以及生物結構或組織中之核酸進行雜交；(4)雜交後清洗，以移除未連接雜交之核酸片段；以及(5)偵測雜交核酸片段。於此應用中所使用之探針一般係經例如放射性同位素或螢光報導試劑標明。較佳之探針具有足夠長度，例如，約50、100或200個核苷酸至約1000或更多個核苷酸，以於嚴峻的條件下可專一性的與目標核酸進行雜交。進行FISH的一般方法見述於Ausubel, F.M. et al., eds. (2004) Current Protocols in Molecular Biology, John Wiley & Sons Inc and Fluorescence In Situ Hybridization: Technical Overview by John M.S. Bartlett in Molecular Diagnosis of Cancer, Methods and Protocols, 2nd ed.; ISBN: 1-59259-760-2; March 2004, pps. 077-088; Series: Methods in Molecular Medicine。
基因表達圖譜之方法係如DePrimo et al. (2003), BMC Cancer, 3:3中所述。簡言之，此方法如下所述：使用用於引出第一股cDMA合成之(dT)24寡聚體，從總RNA中合成雙股cDNA，而後使用隨機六聚體引子合成第二股cDNA。雙股cDNA係用以作為使用生物素化核醣核苷酸之體外cRNA轉錄之模板。cRNA係使用Affymetrix (Santa Clara, CA, USA)所述之步驟(protocol)以化學法切割成片段，而後於人類基因組陣列(Human Genome Array)上進行隔夜雜交。
或者，從mRNA表現的蛋白質產物，可藉由對腫瘤樣品以免疫組織化學法、使用微量滴定板之固相免疫檢測、西方墨點法、二維SDS聚丙烯醯胺膠體電泳法、ELISA、流式分析法及此技術領域已知之偵測特定蛋白質之其他方法，進行測定。偵測方法可包括使用區域專一性抗體。本技術領域者應知道，IAP上升調節之偵測、IAP變異或突變之偵測、或11q22擴增之偵測等這類習知技術，均可應用於本情形。
如IAP之蛋白異常量，可使用一般蛋白質檢測法測量，例如，本文所述之方法。量增加或過度表現均可在組織樣品中檢測，例如，可使用例如來自Chemicon International之測定方法測量腫瘤組織中之蛋白質量。從樣品溶解液(lysate)中可使目標蛋白免疫沉澱，並測量其量。
對包含IAP異構體之過度表現或增加量之另一種測量方法，包括微血管密度測量法。例如，可使用Orre and Rogers (Int J Cancer (1999), 84(2), 101-8)所述之方法進行測量。檢測方法亦包括使用標記。
因此，此些方法均可用以鑑定特別適用於使用本發明之化合物治療之腫瘤。
因此，本發明之又一態樣包括依據本發明之化合物於製做治療或預防病患之疾病狀態或異常身體狀況藥物之用途，其中此病患係經篩選及檢測而被認為已罹患疾病或異常身體狀況或具有罹患風險之患者，且此疾病或異常身體狀況係為能以具有IAP親和力之化合物(即，IAP拮抗劑)治療之疾病或病症。
又一具體實施例提供一種治療罹患或有風險罹患本文所述之疾病或異常身體狀況(例如癌症)之病患的方法，包括投予有效量之化學式(I)化合物。
本發明之另一態樣包括一種本發明之化合物之用途，其係用於預防或治療病患之癌症，病患係選自過度表現一或更多IAP家族成員(如，cIAP及/或XIAP)之次族群。
本發明之另一態樣包括一種本發明之化合物之用途，其係用於預防或治療病患之癌症，病患係選自患有細胞基因遺傳異常而導致IAP過度表現之病患，例如，選自罹患11q22擴增之病患。
血管正規化之MRI測定(例如，使用MRI梯度回波、自旋回波、及對比增強方式以測量血液體積、相對血管尺寸及血管滲透性)與循環生物標記之合併使用，可用以檢測本發明之化合物之治療。
因此，本發明之再一態樣係一種IAP介導之疾病狀態或異常身體狀況之診斷及治療方法，此方法包括(i)對一患者進行篩選，以判斷此患者是否為已罹患或可能罹患疾病或異常身體狀況之患者，其中此疾病或異常身體狀況係能以對IAP具有親和力之化合物進行治療；以及(ii)若結果顯示患者罹患此病症或疾病係能進行治療的，則對此患者施予如本文所述之化學式(I)及次群組之化合物或其實施例。
藥物配方
若活性化合物可單獨投藥，則較佳以醫藥組成物的方式(如，配方)呈現。於一具體實施例中，此係無菌的醫藥組成物。
因此，本發明更提供如前述之醫藥組成物、及製做醫藥組成物之方法，包括(如，混合)至少一化學式(I)化合物(及本文所定義之其次群組)與一或更多個醫藥上可接受之賦形劑(excipient)，且選擇性的包括其他治療或預防劑，如本文所述。
醫藥上可接受之賦形劑可選自如載體(如，固態、液態或半固態載體)、佐劑、稀釋劑、填充劑(filler)或增容劑(bulking agent)、成粒劑、包覆劑、控制釋放劑、黏著劑(binding agent)、崩解劑、潤滑劑、防腐劑(preservative)、抗氧化劑、緩衝劑、懸浮劑、增稠劑、增香劑(flavouring agent)、甜味劑、遮味劑(taste masking agent)、穩定劑或任何其他醫藥組成物常用之賦形劑。用於種種醫藥組成物之賦形劑之例子將於下列詳述。
本文所使用之“醫藥上可接受”一詞與化合物、材料、組成物及/或藥劑形式(dosage form)均相關，其均在深思熟慮之醫療決定之範圍中，而適用於與主體(如，人類)之組織接觸，而不會造成過度毒性、刺激、過敏反應、或其他問題或併發症，且可得到合理的效益/風險比。每一載體、賦形劑等亦須為”可接受”，與配方中其他成份均可相容。
含有化學式(I)化合物之醫藥組成物可以已知技術加以調配，請參見例如Remington’s Pharmaceutical Sciences, Mack Publishing Company, Easton, PA, USA。
醫藥組成物可為任何適合口服、非腸胃道、局部、鼻腔吸入、支氣管內、舌下、眼、耳、直腸、陰道內或皮膚投藥。當組成物用以非腸胃道投藥，則可調配成靜脈內、肌肉內、腹腔內、皮下投藥，或以注射、灌注或其他投藥方式直接遞送至目標器官或組織。遞送亦可採用推注(bolus injection)、短期灌注或長時間灌注，並可透過被動遞送或使用適當之灌注幫浦或注射器驅動器。
適用於非腸胃道投藥之醫藥配方包括水性或非水性無菌注射溶液，其可含有抗氧化劑、緩衝溶液、抗菌劑、共溶劑、表面活性劑、有機溶劑混合物、環糊精複合劑、乳化劑(用以形成及穩定乳劑配方)、用以形成微脂體之微脂體成份、用以形成聚合膠體之可膠體化聚合物、冷凍保護劑及，尤其是，在可溶形式下使活性成份穩定、且可使配方物與預期接受處的血液等滲透壓之劑之組合。非腸道投藥之醫藥配方亦可為水性或非水性無菌懸浮液的形式，其可包括懸浮劑及增稠劑(R. G. Strickly, Solubilizing Excipients in oral and injectable formulations, Pharmaceutical Research, Vol 21(2) 2004, p 201-230)。
配方物可存放在單一劑量或多劑量容器中，例如密封安瓿(ampoule)、小瓶(vial)及預填充注射劑，且可存放在冷凍乾燥(freeze-dried)(凍乾(lyophilised))狀態下，僅需在使用前立即添加無菌液態載體(例如注射用水)。於一具體實施例中，配方為置於瓶中之活性醫藥成份，其使用適當之稀釋劑於後續中還原。
醫藥配方可透過將化學式(I)化合物或其次群組以凍乾法製備。凍乾法係指冷凍乾燥組成物之步驟。因此，本文所使用冷凍乾燥(freeze-dried)及凍乾(lyophilisation)係為同義字。
直接注射溶液(extemporaneous injection solution)及懸浮液，可從無菌粉末、顆粒或錠片製備。
本發明之用於非腸胃道注射之醫藥組成物亦可包括醫藥上可接受之無菌水溶液或非水溶液、分散劑、懸浮劑或乳化劑，以及恰於使用前還原成無菌注射溶液或懸浮劑之無菌粉末。
適用之水溶性或非水溶性載體、稀釋劑、溶劑或載劑之例子包括，水、乙醇、多元醇(如，甘油、丙二醇、聚乙二醇及其相似物)、羧甲基纖維素及其適合的混合物、植物油(如，葵花油、紅花油、玉米油或橄欖油)、及可注射的有機酯(如，油酸乙酯)。如須維持適當流動性，例如，可透過使用如卵磷脂之增稠或包覆物質、在分散液情形下維持所需顆粒尺寸、及使用介面活性劑。
本發明之組成物亦可含有佐劑，如防腐劑、增濕劑、乳化劑及分散劑。亦可透過添加種種抗菌劑或防霉劑以防止微生物生長，例如，對羥苯甲酸酯(paraben)、氯丁醇、苯酚、山梨酸及其相似物。亦可添加可調整張力之劑，如糖類、氯化鈉及其相似物。注射醫藥劑型之長效吸收可透過添加能延遲吸收之劑達成，如單硬脂酸鋁及明膠。
於本發明一特別具體實施例中，醫藥組成物係為適用於靜脈內(i.v.)投藥(如，注射或灌注)之劑型。以靜脈內投藥而言，溶液可以本身給藥，或在投藥前注射於灌注袋(含有醫藥上可接受之賦形劑，如0.9%生理食鹽水或5%葡萄糖)中。
於另一特別具體實施例中，醫藥組成物係為一適用於皮下注射(s.c.)投藥之劑型。
適合於口服投藥之醫藥劑型包括錠片(包覆或未包覆)、膠囊(硬殼或軟殼)、圓形藥錠、丸劑、菱形錠、藥漿、溶液、藥粉、顆粒、馳劑(elixir)及懸浮劑、舌下錠片、薄片或貼片(如，口頰貼片)。
因此，錠片組成物可含有單一劑量之活性化合物及惰性稀釋劑或載體，如糖類或糖醇，如：乳糖、蔗糖、山梨醇或甘露醇；及/或非糖類衍生稀釋劑，如碳酸鈉、磷酸鈣、碳酸鈣、或纖維素或其衍生物，如微晶纖維素(MCC)、甲基纖維素、乙基纖維素、羥丙基甲基纖維素及如玉米澱粉之澱粉。錠片亦可含有一般成份，如聚乙烯吡咯啶酮之黏著劑及成粒劑、崩解劑(如，可膨脹交聯聚合物，如交聯羧甲基纖維素)、潤滑劑(如，硬脂酸酯)、防腐劑(如，對羥基苯甲酸酯(paraben))、抗氧化劑(如，BHT)、緩衝劑(如，磷酸鹽或檸檬酸鹽緩衝溶液)、及起泡劑(如，檸檬酸鹽/碳酸氫鹽混合物)。這類賦形劑係為已知，故在此不再贅述。
錠劑可設計成在與胃液接觸時釋放藥物(立即釋放錠劑)，或控制在一段長時間後或與腸胃道特定區域接觸時釋放藥物(控制釋放錠劑)。
膠囊配方可為硬明膠或軟明膠類型，可含有固態、半固態或液態之活性成分。明膠膠囊可由動物明膠、或其合成或植物衍生之相當物所製成。
固態藥劑形式(如，錠片、膠囊等)可經包覆或未包覆。包覆膜可作為保護膜(如，聚合物、蠟或清漆)，或作為控制釋放藥物之機制，或用於外觀或辨識目的。包覆膜(如，EudragitTM 型聚合物)可設計成在腸胃道預定地方釋放活性成分。因此，所選擇之包覆膜須在腸胃道特訂pH條件下降解(degrade)，藉以選擇性的在胃或迴腸、十二指腸、空腸或大腸釋放化合物。
此外，若不使用包覆膜，或除了包覆膜，則藥物可以固態基質的形式呈現，其包括一釋放控制劑，例如可用以控制化合物於腸胃道釋放之釋放延遲劑。或者，藥物亦可設置在聚合物包覆膜中，如聚甲基丙烯酸聚合物(polymethacrylate polymer)包覆膜，其可用以在腸胃道不同的酸性或鹼性環境下選擇性的釋放化合物。或者，基質材料或釋放延遲包覆膜亦可為可侵蝕聚合物形式(如，馬來酸酐聚合物)，當藥劑通過腸胃道時，其基本上可持續被侵蝕。於另一態樣中，包覆膜可設計成在透過腸道內微生物作用而碎裂的形式。再另一態樣中，活性化合物可製備成遞送系統，其可以滲透方式控制化合物釋放。滲透釋放或其他延遲釋放或持續釋放配方(如，離子交換樹脂之配方)，可依照此技術領域者已知之方法製備。
化學式(I)化合物可與載體一同調配且以奈米粒子形式投藥，奈米粒子之較大表面積可幫助其吸收。此外，奈米粒子可直接穿過細胞。奈米粒子藥物遞送(delivery)系統見述於“Nanoparticle Technology for Drug Delivery”, edited by Ram B Gupta and Uday B. Kompella, Informa Healthcare, ISBN 9781574448573, published 13th March 2006。藥物遞送之奈米粒子亦見述於J. Control. Release, 2003, 91(1-2), 167-172，以及見述於Sinha et al., Mol. Cancer Ther. August 1, (2006) 5, 1909。
醫藥組成物基本上包括約1% (w/w)至約95% (w/w)活性成份，且99% (w/w)至5% (w/w)之醫藥上可接受之賦形劑或賦形劑之組合。特別是，組成物包括約20% (w/w)至約90% (w/w)活性成分，及80% (w/w)至10%之醫藥上可接受之賦形劑或賦形劑之組合。醫藥組成物包括約1%至約95%，特別是約20%至約90%活性成分。例如，依據本發明之醫藥組成物可為單一劑型，如安瓿、小瓶、栓劑、預填充注射劑、糖衣錠(dragee)、錠劑或膠囊的形式。
醫藥上可接受之賦形劑之選擇可依照配方所欲之物理形式，例如，可選自稀釋劑(如，固態稀釋劑，如填充劑及增容劑；以及液態稀釋劑，如溶劑及共溶劑)、崩解劑、緩衝劑、潤滑劑、流動輔劑、釋放控制劑(如，釋放減速或延遲聚合物或蠟)、黏著劑、成粒劑、色素、塑化劑、抗氧化劑、防腐劑、增香劑、遮味劑、張力調整劑及包覆劑。
此技術領域者均可選擇用於配方中之適當成份量。例如，錠劑及膠囊一般含有0~20%崩解劑、0~5%潤滑劑、0~5%流動輔劑及/或0~99% (w/w)填充劑/或增容劑(依據藥劑劑量(drug dose)而定)。其亦可含有0~10% (w/w)聚合物黏著劑、0~5% (w/w)抗氧化劑、0~5% (w/w)色素。緩釋放錠劑可額外含有0~99% (w/w)釋放控制(如，延遲)聚合物(依據劑量而定)。錠劑或膠囊之包覆膜一般含有0~10% (w/w)聚合物、0~3% (w/w)色素、及/或0~2% (w/w)塑化劑。
非腸道配方(parenteral formulation)一般含有0~20% (w/w)緩衝溶液、0~50% (w/w)共溶劑、及/或0~99% (w/w)注射用水(WFI) (依據劑量及是否冷凍乾燥而定)。肌肉內注射(intramuscular depots)之配方亦可含有0~99% (w/w)油。
口服投藥之醫藥組成物可藉由將活性成份與固態載體混合而得，若需要，則將所得之混合物小粒化，以及，對混合物加工，若想要或是需要，則在添加適當賦形劑後，將混合物加工成錠劑、糖衣錠核心或膠囊。亦可將其與聚合物或蠟基質摻合，而使活性成份可以所計算之量擴散或釋放。
本發明之化合物亦可調配成固態分散劑型。固態分散劑型為二或多個固體之均質細微分散相。固態溶液(分子分散系統)，其為固態分散之形式之一，係常用於製藥技術中(請參見Chiou and Riegelman, J. Pharm. Sci., 60, 1281-1300 (1971))，且可用於增加難水溶性藥物之溶解率及增加生物可利用率。
本發明亦提供一種固態藥劑形式，其包括前述之固態溶液。固態藥劑形式包括錠劑、膠囊、可嚼錠劑及可分散或起泡錠劑。已知之賦形劑可與固態溶液混合，而提供所需藥劑形式。例如，膠囊可含有與(a)崩解劑及潤滑劑、或(b)崩解劑、潤滑劑及界面活性劑摻混之固態溶液。此外，膠囊可含有增容劑，如乳糖或微晶纖維素。錠劑可含有與崩解劑、潤滑劑、界面活性劑、增容劑及助流劑之至少一者摻混之固態溶液。可嚼錠片可含有與增容劑、潤滑劑摻混之固態溶液，且如想要亦可額外添加甜味劑(如人工甘味劑)、及適當的增香劑。固態溶液亦可藉由將藥物溶液與適當的聚合物噴灑在如糖珠(非糖心(non-pareils))之惰性載體表面上而形成。然後可將此等糖珠填充於膠囊中或壓錠成錠劑。
醫藥配方可以”患者藥包”形式呈現給患者，其單一包裝中包含有完整治療進程，且通常為罩板包裝(blister pack)。患者藥包具有優於傳統處方之優點，傳統處方中藥劑師係從總體供應量分成病患供給量，但患者藥包之優點在於病患一定會看到藥包中之藥物說明書(package insert)，此點一般在患者處方中缺失。藥包中含有藥物說明書，可使患者更容易服從醫師之指示。
局部及鼻腔遞送之組成物包括藥膏、乳霜、噴霧、貼片、凝膠、液滴及置入劑(如，眼內置入劑(intraocular insert))。此組成物可以習知方法調配。
直腸或陰道內投藥配方實例包括子宮托(pessaries)及栓劑，例如，其可由包含活性化合物之可塑造或蠟質材料而形成。活性化合物溶液亦可用於直腸投藥。
以吸入方式投藥之組成物可為吸入型粉末組成物、液體、或粉末噴劑，且可使用粉末吸入裝置或氣霧分散裝置等一般形式進行投藥。此些裝置均為已知。針對吸入方式投藥，粉末配方一般包括活性藥物及惰性的固體粉末稀釋劑，如乳糖。
化學式(I)化合物一般可以單一劑量形式呈現，如此，一般將含有足夠量的化合物以提供所需之生物活性。例如，配方可含有1 ng (nanogram)至2 g (gram)之活性成份，例如1 ng至2 mg (milligram)之活性成分。在此範圍中，化合物之特殊次範圍係0.1 mg至2 g之活性成份(一般較常為10 mg至1 g，如，50 mg至500 mg)、或1 μg (microgram)至20 mg(例如，1 μg至10 mg，如0.1 mg至2 mg之活性成份)。
於口服組成物中，單一劑量形式可含有1 mg至2 g，一般較常為10 mg至1 g，例如50 mg至1g，如100 mg至1 g之活性化合物。
活性化合物可施予一足夠達到所欲之治療效果之劑量至所需之病患(如，人類或動物患者)。
治療方法
本文中所定義之化學式(I)化合物及其次群組可用於預防或治療由IAP介導之許多疾病狀態或異常身體狀況。因此，依據本發明之又一態樣，是提供一種治療由IAP (如，XIAP 及/或cIAP)介導之疾病狀態或異常身體狀況(例如癌症)之方法，包括對所需投予之主體投予如本文所述之化學式(I)化合物。依據本發明之又一態樣，提供一種治療IAP (如，XIAP 及/或cIAP)過度表現之疾病狀態或異常身體狀況(例如癌症)之方法，包括對所需投予之主體投予如本文所述之化學式(I)化合物。此種疾病狀態及異常身體狀況之例子係如前所述，特別是包括癌症。
化合物一般係施予一所需投予之主體，例如人類或動物患者，特別是人類。
化合物一般所投予的量係為治療上或預防上有效之量，且一般不會產生毒性。然而，於某些情形下(例如，威脅生命之疾病)，投予化學式(I)化合物之利益則較任何毒性反應及副作用之缺點重要，於此情形下，則可考慮施予會造成一定程度之毒性之化合物量。
化合物可以長時期投藥以維持有效之治療效果，或僅短暫期間投藥。或是，其可持續投藥，或以間歇性給藥方式投藥(如，週期性方式)。
雖然可依照需求投予較高或較低的劑量，但化學式(I)化合物一般每日劑量可為體重每公斤100 pg (picogram)至100 mg，一般常為體重每公斤5 ng至25 mg，且通常為體重每公斤10 ng至15 mg (如，每公斤10 ng至10 mg，且一般常為每公斤1 μg至每公斤20 mg，例如，每公斤1 μg至10 mg)。例如，化學式(I)化合物可每天或每2、或3、或4、或5、或6、或7、或10、或14、或21、或28天之重複週期投藥。
本發明之化合物口服劑量範圍係如，1至1500 mg、2至800 mg、或5至500 mg，如2至200 mg或10至1000 mg，且劑量之特殊例子包括10、20、50及80 mg。化合物可以每天一次或超過一次之方式投藥。化合物可以持續方式投藥(即，治療療程期間每天服用不間斷)。或是，化合物可以間歇性方式投藥(即，在整個治療療程期間，持續服用一段時間(如，一週)，而後停用一段時間(如，一週)，再持續服用另一段時間(如，一週)等)。使用間歇性投藥之治療療程之例子包括：一週投藥一週停藥之週期；或兩週投藥一週停藥之週期；或三週投藥一週停藥之週期；或兩週投藥兩週停藥之週期；或四週投藥兩週停藥之週期；或一週投藥三週停藥之週期，並進行一或更多個週期，如2、3、4、5、6、7、8、9或10或更多個週期。
於一特定劑量時程中，將施予病患化學式(I)化合物灌注每天一小時，最多十天，特別為每週最多五天，且此治療以預定間隔重複，如二至四週，特別為每三週。
更特別是，施予病患化學式(I)化合物灌注每天一小時，並進行五天，且每三週重複治療。
於另一特定劑量時程中，係施予病患灌注30分鐘至1小時，然後施予維持灌注(maintenance infusion)一段時間，如1至5小時(如，3小時)。
於又一特定劑量時程中，係施予病患持續灌注12小時至5天，特別是持續灌注24小時至72小時。
於另一特定劑量時程中，係施予病患一週一次口服的化合物。
於另一特定劑量時程中，係施予病患一天一次口服的化合物，達7與28天之間，例如7、14、或28天。
於另一特定劑量時程中，係施予病患一天一次口服的化合物，達1天、2天、3天、5天、或1週，然後停藥預定的天數，完成一或二週循環。
於另一特定劑量時程中，係施予病患一天一次口服的化合物達2週，然後停藥2週。
於另一特定劑量時程中，係施予病患一天一次口服的化合物達2週，然後停藥1週。
於另一特定劑量時程中，係施予病患一天一次口服的化合物達1週，然後停藥1週。
然而，施予之化合物量及所使用之組成物形式最終仍與待治療之疾病或生理異常身體狀況特性相關，且由醫師進行判斷。
已發現IAP拮抗劑可做為單一藥劑(agent)或與其它抗癌藥劑(agent)一同使用。例如，將可誘發細胞凋亡之拮抗劑與另一透過不同機制調節細胞生長之藥劑合併使用，如此治療癌症發展之兩種病徵，這樣是有益處的。合併試驗例如Chou TC, Talalay P. Quantitative analysis of dose-effect relationships: the combined effects of multiple drugs or enzyme inhibitors. Adv Enzyme Regulat 1984; 22: 27-55中所述。
本發明所定義之化合物可以單獨治療劑方式投藥，或可與一或更多其它化合物(或療法)之組合療法投藥，以治療特定疾病狀態，舉例而言，如前述之癌症之腫瘤疾病。於治療前述異常身體狀況時，本發明之化合物可有利的與一或以上其他醫藥劑合併使用，特別是在癌症治療上與其他抗癌藥劑或佐劑(治療上輔劑)一同使用。可與化學式(I)化合物一起投藥(無論同時或不同時間間隔)之其它治療藥劑或治療法之例子包括，但不限於： 拓樸異構酶I抑制劑； 抗代謝藥物； 微管蛋白標的劑； DNA結合及拓樸異構酶II抑制劑； 甲基化試劑； 單株抗體； 抗荷爾蒙試劑； 信號傳遞抑制劑； 蛋白質體抑制劑； DNA甲基轉移酶抑制劑； 細胞活素及類視色素(retinoid)； 染色質(chromatin)標的治療法； 放射性療法；以及 其他治療或預防劑。
抗癌試劑或佐劑(或其鹽)之特殊例子包括，但不限於，任一選自下列群組(i)-(xlvi)、及選擇性群組(xlvii)之劑：
(i)鉑化合物，例如順鉑(選擇性與阿米福汀(amifostine)合併使用)、卡鉑(carboplatin)或益樂鉑(oxaliplatin)；
(ii)紫杉烷類(Taxane)化合物，例如太平洋紫杉醇(paclitaxel)、紫杉醇蛋白結合粒子(AbraxaneTM )、紫杉寧(docetaxel)、卡巴他賽(cabazitaxel)或拉洛他賽(larotaxel)；
(iii)拓樸異構酶I抑制劑，例如喜樹鹼(camptothecin)化合物，如，喜樹鹼、依立替康(irinotecan)(CPT11)、SN-38、或拓撲替康(topotecan)；
(iv)拓樸異構酶II抑制劑，例如抗腫瘤表鬼臼毒素(epipodophyllotoxin)或鬼臼毒(podophyllotoxin)衍生物，如，依託泊甙(etoposide)、或鬼臼噻吩苷(teniposide)；
(v)長春花生物鹼(Vinca alkaloids)，例如長春花鹼(vinblastine)、長春新鹼(vincristine)、長春新鹼脂質體(liposomal vincristine) (Onco-TCS)、長春瑞濱(vinorelbine)、長春花鹼醯胺(vindesine)、長春氟寧(vinflunine)或vinvesir；
(vi)核苷酸(nucleoside)衍生物，例如5-氟脲嘧啶(5-FU，選擇性與亞葉酸(leucovorin)合併使用)、吉西他濱(gemcitabine)、卡培他濱(capecitabine)、替加氟(tegafur)、UFT、S1、克拉屈濱(cladribine)、阿糖胞苷(cytarabine) (Ara-C，cytosine arabinoside)、氟達拉濱(fludarabine)、克羅拉濱(clofarabine)、或奈拉濱(nelarabine)；
(vii)抗代謝藥物，如克羅拉濱(clofarabine)、胺基蝶呤(aminopterin)、甲氨蝶呤(methotrexate)、阿紮胞苷(azacitidine)、阿糖胞苷(cytarabine)、氟尿苷(floxuridine)、噴司他丁(pentostatin)、硫鳥嘌呤(thioguanine)、硫嘌呤(thiopurine)、6-巰嘌呤(6-mercaptopurine)、或羥基脲(hydroxyurea) (hydroxycarbamide)；
(viii)烷基化試劑，如，氮芥子氣(nitrogen mustards)或亞硝基脲(nitrosourea)，如，環磷醯胺(cyclophosphamide)、氯氨布西(chlorambucil)、卡莫司汀(carmustine，BCNU)、苯達莫司汀(bendamustine)、塞替派(thiotepa)、美法侖(melphalan)、曲奧舒凡(treosulfan)、洛莫司汀(lomustine，CCNU)、六甲蜜胺(altretamine)、白消安(busulfan)、達卡巴仁(dacarbazine)、雌莫司汀(estramustine)、福莫司汀(fotemustine)、異環磷醯胺(ifosfamide) (選擇性與美司鈉(mesna)合併使用)、哌泊溴烷(pipobroman)、甲基苄肼 (procarbazine)、鏈佐星(streptozocin)、替莫唑胺(temozolomide)、尿嘧啶(uracil)、氮芥(mechlorethamine)、甲基環己基氯乙基亞硝基脲(methylcyclohexylchloroethylnitrosurea)、或尼莫司汀(nimustine，ACNU)；
(ix)蒽環類(anthracyclines)、蒽醌類(anthracenediones)及其相關藥物，如，道諾黴素(daunorubicin)、阿黴素(doxorubicin) (其係選擇性與右雷佐生(dexrazoxane)合併使用)、阿黴素之微脂體配方(如，CaelyxTM 、MyocetTM 、DoxilTM )、艾達黴素(idarubicin)、米托蒽醌(mitoxantrone)、表柔比星(epirubicin)、胺苯丫啶(amsacrine)、或戊柔比星(valrubicin)；
(x)埃博黴素(epothilones)，如，伊沙匹隆(ixabepilone)、帕土匹龍(patupilone)、BMS-310705、KOS-862及ZK-EPO、埃博黴素A (epothilone A)、埃博黴素B、脫氧埃博黴素B (desoxyepothilone B) (亦稱為埃博黴素D或KOS-862)、氮雜埃博黴素B (亦稱為BMS-247550)、aulimalide、isolaulimalide、或伊留塞羅賓(luetherobin)；
(xi) DNA甲基轉移酶抑制劑，如，替莫唑胺(temozolomide)、氮雜胞苷(azacytidine)或地西他濱(decitabine)、或SGI-110；
(xii)抗葉酸劑(antifolates)，如，甲氨蝶呤(methotrexate)、培美曲塞二鈉(pemetrexed disodium)、或拉替群司德(raltitrexed)；
(xiii)細胞毒抗生素，如，抗黴素D (antinomycin D)、博萊黴素(bleomycin)、絲裂黴素C (mitomycin C)、更生黴素(dactinomycin)、洋紅黴素(carminomycin)、道諾黴素(daunomycin)、左旋咪唑(levamisole)、普卡黴素(plicamycin)、或光神黴素(mithramycin)；
(xiv)微管蛋白結合劑，如，考布他丁(combrestatin)、可樂喜定(colchicines)或諾考達唑(noeodazole)；
(xv)信號傳遞(signal transduction)抑制劑，如激酶抑制劑(如，EGFR(內皮生長因子受體)抑制劑、VEGFR(血管內皮生長因子受體)抑制劑、PDGFR(血小板衍生生長因子受體)抑制劑、MTKI(多標的激酶抑制劑)、Raf抑制劑、mTOR抑制劑，如，甲磺酸伊馬替尼(imatinib mesylate)、厄洛替尼(erlotinib)、吉非替尼(gefitinib)、達沙替尼(dasatinib)、拉帕替尼(lapatinib)、多韋替尼(dovotinib)、阿西替尼(axitinib)、尼洛替尼(nilotinib)、凡德他尼(vandetanib)、瓦他拉尼(vatalinib)、帕唑帕尼(pazopanib)、索拉非尼(sorafenib)、舒尼替尼(sunitinib)、坦西莫司(temsirolimus)、依維莫司(everolimus) (RAD 001)、威羅菲尼(vemurafenib) (PLX4032/RG7204)、dabrafenib、encorafenib、或IκB激酶抑制劑，如，SAR-113945、巴多索隆(bardoxolone)、BMS-066、BMS-345541、IMD-0354、IMD-2560、或IMD-1041、或MEK抑制劑，如，司美替尼(Selumetinib) (AZD6244)及特拉馬替尼(Trametinib) (GSK121120212)；
(xvi) 極光激酶抑制劑(aurora kinase inhibitors)，如，AT9283、巴拉澤替(barasertib) (AZD1152)、TAK-901、MK0457 (VX680)、cenisertib (R-763)、达努塞替(danusertib) (PHA-739358)、alisertib (MLN-8237)、或MP-470；
(xvii) CDK抑制劑，如AT7519、羅斯維汀(roscovitine)、賽利西克里布(seliciclib)、阿沃西地貝(alvocidib) (夫拉平度(flavopiridol))、地那西克里布(dinaciclib) (SCH-727965)、7-羥基-星形孢菌素(7-hydroxy-staurosporine) (UCN-01)、JNJ-7706621、BMS-387032(亦稱為SNS-032)、PHA533533、PD332991、ZK-304709、或AZD-5438；
(xviii) PKA/B抑制劑及PKB (akt)路徑抑制劑，如，KRX-0401 (哌立福新(perifosine) / NSC 639966)、ipatasertib (GDC-0068；RG-7440)、afuresertib (GSK-2110183；2110183)、MK-2206、MK-8156、AT13148、AZD-5363、磷酸曲西立濱(triciribine phosphate) (VQD-002；磷酸曲西立濱單水合(triciribine phosphate monohydrate) (API-2；TCN-P；TCN-PM；VD-0002)、RX-0201、NL-71-101、SR-13668、PX-316、AT13148、AZ-5363、Semaphore、SF1126、或Enzastaurin HCl (LY317615)，或 MTOR抑制劑，如，雷帕黴素(rapamycin)類似物，如RAD 001 (依維莫司(everolimus))、CCI 779 (temsirolemus)、AP23573及瑞達弗莫司(ridaforolimus)、西羅莫司(sirolimus) (最初稱為雷帕黴素(rapamycin))、AP23841及AP23573，鈣調素(calmodulin)抑制劑，如，CBP-501 (叉頭轉位抑制劑(forkhead translocation inhibitors))、enzastaurin HCl (LY317615)，或PI3K 抑制劑如，達托里斯( dactolisib) (BEZ235)、布帕里斯(buparlisib) (BKM-120；NVP-BKM-120)、BYL719、克盤利昔(copanlisib)、(BAY-80-6946)、ZSTK-474、CUDC-907、apitolisib (GDC-0980；RG-7422)、pictilisib (皮特里斯(pictrelisib)，GDC-0941，RG-7321)、GDC-0032、GDC-0068、GSK-2636771、艾迪昔布(idelalisib) (之前稱CAL-101，GS 1101，GS-1101)、MLN1117 (INK1117)、MLN0128 (INK128)、IPI-145 (INK1197)、LY-3023414、ipatasertib、afuresertib、MK-2206、MK-8156、LY-3023414、LY294002、SF1126 或PI-103、或sonolisib (PX-866)；
(xix) Hsp90抑制劑，如，AT13387、除莠黴素(herbimycin)、格爾德黴素(geldanamycin) (GA)、17-丙烯胺基-17-去甲氧基格爾德黴素(17-allylamino-17-desmethoxygeldanamycin) (17-AAG)，如NSC-330507、Kos-953及CNF-1010、17-二甲基胺基乙基胺基-17-去甲氧基格爾德黴素氫氯酸(17-dimethylaminoethylamino-17-demethoxygeldanamycin hydrochlorid) (17-DMAG)，如NSC-707545及Kos-1022、NVP-AUY922 (VER-52296)、NVP-BEP800、CNF-2024 (BIIB-021，口服嘌呤)、ganetespib (STA-9090)、SNX-5422 (SC-102112)或IPI-504；
(xx)單株抗體(與放射性同位素、毒素或其他劑未接合(unconjugated)或接合(conjugated))、抗體衍生物及相關劑，如，抗-CD、抗-VEGFR、抗-HER2、抗-CTLA4、抗-PD-1、或抗-EGFR抗體，如，利妥昔(rituximab) (CD20)、奧法木單抗(ofatumumab) (CD20)、替伊莫單抗(ibritumomab tiuxetan) (CD20)、GA101 (CD20)、托西莫單抗(tositumomab) (CD20)、依帕珠單抗(epratuzumab) (CD22)、林妥珠單抗(lintuzumab) (CD33)、吉妥單抗(gemtuzumab ozogamicin) (CD33)、阿來組單抗(alemtuzumab) (CD52)、加利昔單抗(galiximab) (CD80)、曲妥珠單抗(trastuzumah) (HER2抗體)、帕妥珠單抗(pertuzumab) (HER2)、曲妥珠單抗-DM1 (HER2)、厄馬索單抗(ertumaxomab) (HER2及CD3)、西妥昔單抗(cetuximab) (EGFR)、帕尼單抗(panitumumab) (EGFR)、奈昔木單抗(necitumumab) (EGFR)、尼妥珠單抗(nimotuzumab) (EGFR)、貝伐單抗(bevacizumab) (VEGF)、卡妥索單抗(catumaxumab) (EpCAM及CD3)、阿巴伏單抗(abagovomab) (CA125)、法利珠單抗(farletuzumab) (葉酸受體)、埃羅妥珠單抗(elotuzumab) (CS1)、地諾單抗(denosumab) (RANK配體)、figitumumab (IGF1R)、CP751,871 (IGF1R)、馬帕木單抗(mapatumumab) (TRAIL受體)、metMAB (met)、米妥莫單抗(mitumomab) (GD3神經節苷酯(ganglioside))、那他莫單抗(naptumomab estafenatox) (5T4)、司妥昔單抗(siltuximab) (IL6)，或免疫調節劑，如，CTLA-4阻斷抗體及/或對抗PD-1及PD-L1及/或PD-L2的抗體，如，依莫單抗(ipilimumab) (CTLA4)、MK-3475 (pembrolizumab，之前稱為拉姆珠單抗(lambrolizumab)，抗-PD-1)、尼沃單抗(nivolumab) (抗-PD-1)、BMS-936559 (抗- PD-L1)、MPDL320A、AMP-514或MEDI4736 (抗-PD-L1)、或曲美木單抗(tremelimumab) (之前稱為替西莫單抗(ticilimumab)，CP-675,206，抗-CTLA-4)；
(xxi)雌激素受體拮抗劑或選擇性雌激素受體調節劑(SERMs)或雌激素合成抑制劑，例如它莫西芬(tamoxifen)、氟維司群(fulvestrant)、托瑞米芬(toremifene)、屈洛昔芬(droloxifene)、法洛德(faslodex)、或雷洛西芬(raloxifene)；
(xxii)芳香酶(aromatase)抑制劑及相關藥物，如依西美坦(exemestane)、阿那曲唑(anastrozole)、來曲唑(letrazole)、睪內酯氨魯米特(testolactone aminoglutethimide)、米托坦(mitotane)或伏氯唑(vorozole)；
(xxiii)抗雄激素(antiandrogens) (即，雄激素受體拮抗劑)及相關藥劑，如，比卡魯胺(bicalutamide)、尼魯米特(nilutamide)、氟他胺(flutamide)、環丙孕酮(cyproterone)、或酮康唑(ketoconazole)；
(xxiv)荷爾蒙及其類似物，如，醋酸甲羥孕酮(medroxyprogesterone)、乙烯雌酚(diethylstilbestrol)(亦稱為二乙基己烯雌酚(diethylstilboestrol))或奧曲肽(octreotide)；
(xxv)類固醇，如，屈他雄酮丙酸酯(dromostanolone propionate)、醋酸甲地孕酮(megestrol acetate)、諾龍(nandrolone) (癸酸酯(decanoate)、苯丙酸酯(phenpropionate))、fluoxymestrone、或棉子酚(gossypol)；
(xxvi)類固醇類染色體P450 17α-羥化酶-17,20-裂解酶抑制劑(CYP17)，如，阿比特龍(abiraterone)；
(xxvii)促性腺激素(gonadotropin)釋放荷爾蒙促效劑或拮抗劑(GnRA)，如，阿巴瑞克(abarelix)、醋酸戈含瑞林(goserelin acetate)、醋酸組氨瑞林(histrelin acetate)、醋酸亮丙瑞林(leuprolide acetate)、曲譜瑞林(triptorelin)、布舍瑞林(buserelin)、或德含瑞林(deslorelin)；
(xxviii)糖皮質激素(Glucocorticoids)，如，潑尼松(prednisone)、潑尼松龍(prednisolone)、地塞米松(dexamethasone)；
(xxix)分化劑，如維甲酸(retinoid)、rexinoid、維生素D或維他命A酸(retinoic acid)及維他命A酸代謝阻斷劑(retinoic acid metabolism blocking agents, RAMBA)，如，異維A酸(accutane)、阿利維甲酸(alitretinoin)、蓓薩羅丁(bexarotene)、或維A酸(tretinoin)；
(xxx)脂肪酸轉移酶抑制劑(Farnesyltransferase inhibitors)，如，替吡法尼(tipifarnib)；
(xxxi)如組蛋白去乙醯酶(HDAC)抑制劑之染色質標的療法，如，帕比司他(panobinostat)、瑞西司他(resminostat)、阿貝司他(abexinostat)、伏立諾他(vorinostat)、羅米地辛(romidepsin)、貝林司他(belinostat)、恩替諾特(entinostat)、quisinostat、布西諾泰(pracinostat)、tefinostat、莫思司他(mocetinostat)、吉維司他(givinostat)、CUDC-907、CUDC-101、ACY-1215、MGCD-290、EVP-0334、RG-2833、4SC-202、羅米地辛(romidepsin)、AR-42 (Ohio State University)、CG-200745、丙戊酸(valproic acid)、CKD-581、丁酸鈉(sodium butyrate)、辛二醯苯胺異羥肟酸(suberoylanilide hydroxamide acid，SAHA)、聯合阿糖胞苷(depsipeptide) (FR 901228)、達諾司他(dacinostat) (NVP-LAQ824)、R306465/JNJ-16241199、JNJ-26481585、曲古菌素A (trichostatin A)、厚膜素(chlamydocin)、A-173、JNJ-MGCD-0103、PXD-101、或芹菜苷配基(apicidin)；
(xxxii)蛋白質體抑制劑，如，硼替左米(bortezomib)、卡非佐米(carfilzomib) (CEP-18770)、伊薩佐米(ixazomib) (MLN-9708)、oprozomib (ONX-0912)、或marizomib；
(xxxiii)光動力治療藥，如，卟吩姆鈉(porfimer sodium)或替莫泊芬(temoporfin)；
(xxxiv)海洋有機體衍生抗癌劑，如，曲貝替定(trabectidin)；
(xxxv)用以放射線免疫療法之放射線標定藥物，如，標定有β粒子釋放同位素(如，碘-131、釔-90)、或α粒子釋放同位素(如，鉍-213或錒-225)，如，替伊莫單抗(ibritumomab)、或托西莫單抗碘(Iodine tositumomab)；
(xxxvi)端粒酶抑制劑，如，端粒酶素(telomestatin)；
(xxxvii)基質金屬蛋白酶抑制劑，如，巴馬司他(batimastat)、馬立馬司他(marimastat)、匹諾司他(prinostat)或美他司他(metastat)；
(xxxviii)重組干擾素(如，干擾素-γ及干擾素α)及介白素(如，介白素2)，如，阿地白介素(aldesleukin)、白介素融合毒素(denileukin diftitox)、干擾素α2a、干擾素α2b、或聚乙二醇干擾素α2b (peginterferon alfa 2b)；
(xxxix)選擇性免疫反應調節劑，如，沙利竇邁(thalidomide)、或雷利米得(lenalidomide)；
(xl)治療疫苗，如sipuleucel-T (Provenge)或OncoVex；
(xli)細胞活素活化劑，包括必醫你舒(Picibanil)、羅莫泰德(Romurtide)、西佐糖(Sizofiran)、維魯利秦(Virulizin)、或胸腺素(Thymosin)；
(xlii)三氧二砷(Arsenic trioxide)；
(xliii) G-蛋白偶合性受體(GPCR)抑制劑，如，阿曲生坦(atrasentan)；
(xliv)酶，如L-天冬醯胺酸酶(L-asparaginase)、培門冬酶(pegaspargase)、拉布立酶(rasburicase)、或培加酶(pegademase)；
(xlv) DNA修復抑制劑，如，PARP抑制劑，如，奧拉帕尼(olaparib)、velaparib、iniparib、INO-1001、AG-014699、或ONO-2231；
(xlvi)死亡受體促效劑(如，TNF-相關細胞凋亡誘導配體(TRAIL)受體)，如，馬帕木單抗(mapatumumab) (之前稱為HGS-ETR1)、可那木單抗(conatumumab) (之前稱為AMG 655)、PRO95780、來沙木單抗(lexatumumab)、杜拉樂明(dulanermin)、CS-1008、阿樸嗎啡(apomab)、或重組TRAIL配體，如重組人類TRAIL/Apo2配體；
(xlvii)預防劑(佐劑)；即，可減少或緩和與化學療法相關之若干副作用之劑，如： -抗催吐劑(anti-emetic agent)； -可防止或減少化學療法相關之嗜中性球減少症(neutropenia)持續發生以及防止血小板、紅血球或白血球漸少所引發之併發症之劑，例如介白素-11(如，奧普瑞白介素(oprelvekin))、紅血球生成素(erythropoietin，EPO)及其類似物(如，阿法達貝泊汀(darbepoetin alfa))，群落刺激因子相似物(colony-stimulating factor analog)，如，顆粒球巨噬細胞株(granulocyte macrophage)-群落刺激因子(GM-CSF) (如，沙格司亭(sargramostim))、及顆粒球-群落刺激因子(G-CSF)及其類似物(如，非格司亭(filgrastim)、乙二醇化非格司亭(pegfilgrastim))； -抑制骨質再吸收劑，如，地諾單抗(denosumab)或雙膦酸鹽(bisphosphonates)，如唑來膦酸鹽(zoledronate)、唑來膦酸(zoledronic acid)、帕米德諾內(pamidronate)及伊班膦酸鹽(ibandronate)； -抑制發炎反應之劑，如，地塞米松(dexamethasone)、潑尼松(prednisone)、及潑尼松龍(prednisolone)； -用以減少肢端肥大症或其他罕見荷爾蒙導致癌症之患者中血液中生長荷爾蒙量及IGF-1(及其他荷爾蒙)量之試劑，如，荷爾蒙體抑 素(somatostatin)之合成形式，如乙酸奧曲肽(octreotide acetate)； -可減少葉酸量之藥物解毒劑，如，甲醯四氫葉酸(leucovorin)、或亞葉酸(folinic acid)； -疼痛用劑，例如鴉片類(opiates)，如，嗎啡(morphine)、二乙醯嗎啡(diamorphine)、及芬太尼(fentanyl)； -非類固醇抗發炎藥物(NSAID)，如，COX-2抑制劑，如，西樂葆(celecoxib)、依託昔布(etoricoxib)、及羅美昔布(lumiracoxib)； -黏膜炎用藥劑，例如，帕利夫明(palifermin)； -治療包含厭食(anorexia)、惡病質(cachexia)、水腫(oedema)或風濕熱(thromoembolic episodes)等副作用之試劑，如醋酸甲地孕酮(megestrol acetate)。
於一具體實施例中，抗癌劑是選自重組干擾素(如干擾素-γ及干擾素α)及介白素(例如，介白素2)，例如，阿地白介素、白介素融合毒素、干擾素α2a、干擾素α2b、或聚乙二醇干擾素α2b；干擾素α2 (500 μ/ml)，特別是干擾素β；及訊息傳遞抑制劑，如激酶抑制劑(例如，EGFR(內皮生長因子受體)抑制劑、VEGFR(血管內皮生長因子受體)抑制劑、PDGFR(血小板衍生生長因子受體)抑制劑、MTKI (多標的激酶抑制劑)、Raf抑制劑、mTOR抑制劑，如，甲磺酸伊馬替尼(imatinib mesylate)、厄洛替尼(erlotinib)、吉非替尼(gefitinib)、達沙替尼(dasatinib)、拉帕替尼(lapatinib)、多韋替尼(dovotinib)、阿西替尼(axitinib)、尼洛替尼(nilotinib)、凡德他尼(vandetanib)、瓦他拉尼(vatalinib)、帕唑帕尼(pazopanib)、索拉非尼(sorafenib)、舒尼替尼(sunitinib)、坦西莫司(temsirolimus)、依維莫司(everolimus) (RAD 001)、威羅菲尼(vemurafenib) (PLX4032/RG7204)、dabrafenib、encorafenib、或IκB激酶抑制劑，如，SAR-113945、巴多索隆(bardoxolone)、BMS-066、BMS-345541、IMD-0354、IMD-2560、或IMD-1041、或MEK抑制劑，如，司美替尼(Selumetinib) (AZD6244)及特拉馬替尼(Trametinib) (GSK121120212)，特別是Raf抑制劑(例如，威羅菲尼(vemurafenib))或MEK抑制劑(例如特拉馬替尼(trametinib))。
本發明之組合中的每一化合物可以個別不同劑量並透過不同路徑給藥。如此，於二或以上藥劑之各個藥物劑量可能不同：每一藥物可在同時間投藥或在不同時間投藥。本技術領域者可透過其通常一般知識，得知欲使用之投藥劑量及合併療法。例如，本發明化合物可與一或更多其他藥劑合併使用，且根據此等藥劑已存在之合併療法進行投藥。一般合併療法之例子提供如下述。
紫杉烷類化合物於每一療程中，較佳係以體表面積每平方公尺投予50至400 mg (mg/m2 )的劑量(例如75至250 mg/m2 )，特別是紫杉醇劑量約175至250 mg/m2 ，及紫杉寧(docetaxel)之劑量約75至150 mg/m2 。
喜樹鹼(camptothecin)化合物於每一療程中，較佳係以體表面積每平方公尺投予0.1至400 mg (mg/m2 )的劑量(例如1至300 mg/m2 )，特別是依立替康(irinotecan)劑量約100至350 mg/m2 ，且拓撲替康(topotecan)之劑量約1至2 mg/m2 。
抗腫瘤鬼臼毒(podophyllotoxin)衍生物於每一療程中，較佳係以體表面積每平方公尺投予30至300 mg (mg/m2 )的劑量(例如50至250 mg/m2 )，特別是依託泊甙(etoposide)劑量約35至100 mg/m2 ，且鬼臼噻吩苷(teniposide)之劑量約50至250 mg/m2 。
抗腫瘤長春花生物鹼(Vinca alkaloid)於每一療程中，較佳係以體表面積每平方公尺投予2至30 mg (mg/m2 )的劑量，特別是長春花鹼(vinblastine)劑量約3至12 mg/m2 ，長春新鹼(vincristine)之劑量約1至2 mg/m2 ，且長春瑞濱(vinorelbine)之劑量約10至30 mg/m2 。
抗腫瘤核苷酸衍生物於每一療程中，較佳係以體表面積每平方公尺投予200至2500 mg (mg/m2 )的劑量，(例如700至1500 mg/m2 )，特別是5-FU劑量約200至500 mg/m2 ，吉西他濱(gemcitabine)劑量約800至1200 mg/m2 ，而卡培他濱(capecitabine)劑量約1000至2500 mg/m2 。
如氮芥子氣(nitrogen mustards)或亞硝基脲(nitrosourea)之烷基化劑於每一療程中，較佳係以體表面積每平方公尺投予100至500 mg (mg/m2 )的劑量(例如120至200 mg/m2 )，特別是環磷醯胺(cyclophosphamide)劑量約100至500 mg/m2 ，氯氨布西(chlorambucil)劑量約0.1至0.2 mg/m2 ，卡莫司汀(carmustine)劑量約150至200 mg/m2 ，而洛莫司汀(lomustine)劑量約100至150 mg/m2 。
抗腫瘤蒽環類(anthracycline)衍生物於每一療程中，較佳係以體表面積每平方公尺投予10至75 mg (mg/m2 )的劑量(例如15至60 mg/m2 )，特別是阿黴素(doxorubicin)劑量約40至75 mg/m2 ，道諾黴素(daunorubicin)劑量約25至45 mg/m2 ，而艾達黴素(idarubicin)劑量約10至15 mg/m2 。
抗雌激素劑之投藥係依特殊藥劑及待治療異常身體狀況而定，且較佳係以每天1至100 mg之劑量投藥。它莫西芬(tamoxifen)較佳係以口服方式投藥，其劑量為5至50 mg，特別是10至20 mg，每天服用兩次，並持續治療一足夠時間以達到或維持治療效果。托瑞米芬(toremifene)較佳係以口服方式投藥，其劑量約為60 mg，且每天服用一次，並持續治療一足夠時間以達到或維持治療效果。阿那曲唑(anastrozole)較佳係以口服方式投藥，其劑量約為1 mg，且每天服用一次。屈洛昔芬(droloxifene)較佳係以口服方式投藥，其劑量約為20~100 mg，且每天服用一次。雷洛西芬(raloxifene)較佳係以口服方式投藥，其劑量約為60 mg，且每天服用一次。依西美坦(exemestane)較佳係以口服方式投藥，其劑量約為25 mg，且每天服用一次。
抗體較佳係以體表面積每平方公尺投予約1至5 mg (mg/m2 )的劑量，或如欲改變，可如本技術領域已知劑量方式投藥。曲妥珠單抗(trastuzumab)於每一療程中，較佳係以體表面積每平方公尺投予1至5 mg (mg/m2 )的劑量，特別是以2至4 mg/m2 之劑量投藥。
當化學式(I)化合物與一、二、三、四或更多(較佳為一或二，且更特別是一)其他治療藥劑合併治療時，化合物可同時或依序施予。於依序施予之情形下，二或更多化合物可在一段時間內以一定量及投藥方式投藥，以足以確保可達到較佳或協同作用。當依序投藥時，其可在相當短的間隔時間內投藥(如，約5~10分鐘)或較長的時間間隔(如，相距1、2、3、4或更多小時，或如需要可相距更長一段時間)，且精確劑量治療須與治療藥劑特性相符合。於每一療程中，藥劑劑量可以例如一次、兩次或多次方式投藥，且可例如每7、14、21或28天重複投藥。
於一具體實施例中，提供一種化學式(I)化合物，供製造用於治療之醫藥，其中，此化合物是與一、二、三、或四種其他治療劑組合使用。於另一具體實施例中，提供一種治療癌症之醫藥，其包括一種化學式(I)化合物，其中此醫藥是與一、二、三、或四種其他治療劑組合使用。本發明更提供一種化學式(I)化合物之用途，用於製造使正以一、二、三、或四種其他治療劑治療之癌症病患其反應率增強或促使具有反應率之醫藥。
應了解的是，特別的投藥方法及順序、以及合併治療中每一成分之個別劑量及治療方式，係與欲投予之特定其他醫藥劑及本發明化合物、其投藥路徑、特定待治療腫瘤及特定待治療主體有關。此技術領域者可使用習知方法，並參考本文所提供之資訊，容易決定最佳投藥方法及順序、以及劑量與治療方式。
當進行組合時，此技術領域者可決定依據本發明之化合物與一或更多其他抗癌藥劑之重量比。此技術領域者已熟知，此投藥比例、實際劑量及頻率係依本發明之特定化合物及其他使用之抗癌藥劑、特定待治療異常身體狀況、待治療病症嚴重程度、年齡、體重、性別、飲食、投藥時間、及特定患者平時生理狀況而定，且與投藥方式及個體其他可能正在服用之藥物有關。再者，顯然有效每日劑量可依據治療主體的反應(respone)及/或處方本發明之化合物之醫師之評估而增加或減少。本發明之化學式(I)化合物與其他抗癌藥劑之特定重量比，可在1/10至10/1之範圍，較特定在1/5至5/1之範圍，且更特定在1/3至3/1之範圍。
本發明之化合物亦可與非化學治療療法一同進行投藥，如放射性療法、光動力療法、基因療法；手術及飲食控制。
本發明之化合物亦可應用於使腫瘤細胞對放射性治療及化學治療敏感化之治療用途上。因此，本發明之化合物可用以作為”放射性增敏劑”及/或”化學增敏劑”或可與其他”放射性增敏劑”及/或”化學增敏劑”合併投藥。於一具體實施例中，本發明之化合物係用以作為化學增敏劑。
“放射性增敏劑”一詞係指，投予一患者治療上有效量之分子，以提升細胞對離子化放射線之敏感性及/或提升能以離子化放射線治療之疾病治療效果。
“化學增敏劑”一詞係指，投予一患者治療上有效量之分子，以提升細胞對化學療法之敏感性及/或提升能以化學療法治療之疾病治療效果。
於一具體實施例中，本發明之化合物係與"放射性增敏劑"及/或"化學增敏劑"投藥。於一具體實施例中，本發明之化合物係與"免疫增敏劑"投藥。
"免疫增敏劑"一詞係指，投予一患者治療上有效量之分子，以增加細胞對IAP拮抗劑之敏感性，例如，藉由例如啟動TNF的釋放以提升或增加免疫反應。
現今許多癌症治療療程係將放射性增敏劑與X光射線一同使用。X光活化放射性增敏劑之例子包括，但不限於，下述：甲硝唑(metronidazole)、米索硝唑(misonidazole)、去甲基醚醇硝唑(desmethylmisonidazole)、哌莫硝唑(pimonidazole)、依他硝唑(etanidazole)、尼莫唑(nimorazole)、絲裂黴素C (mitomycin C)、RSU 1069、SR 4233、EO9、RB 6145、烟醯胺(nicotinamide)、5-溴去氧尿苷(5-bromodeoxyuridine，BUdR)、5-碘去氧尿苷(5-iododeoxyuridine，IUdR)、溴脫氧胞嘧啶(bromodeoxycytidine)、氟脫氧尿苷(fluorodeoxyuridine，FudR)、羥基脲(hydroxyurea)、順鉑、及治療上有效之類似物及其衍生物。
癌症之光動力療法(PDT)係使用可見光作為增敏劑之放射線啟動劑。光動力放射性增敏劑之例子包括下述，但不限於：血卟啉(hematoporphyrin)衍生物、光敏素(Photofrin)、苯並卟啉(benzoporphyrin)衍生物、錫初卟啉(tin etioporphyrin)、脫鎂葉綠酸酯-a(pheoborbide-a)、菌綠素-a(bacteriochlorophyll-a)、萘酞菁(naphthalocyanines)、酞菁鉑(phthalocyanines)、酞氰化鋅(zinc phthalocyanine)、及治療上有效之類似物及其衍生物。
放射性增敏劑可與一或更多治療上有效量之其他化合物一同投藥，其中其他化合物包括，但不限於：本發明之化合物；提升放射性增敏劑摻併至目標細胞之化合物；控制治療藥劑、營養劑、及/或氧氣流至目標細胞之化合物；需要或無需額外放射線即可作用於腫瘤上之化學治療劑；或其他用於治療癌症或其他疾病之治療上有效之化合物。
化學增敏劑可與一或更多治療上有效量之其他化合物一同投藥，其中其他化合物包括，但不限於：本發明之化合物；提升化學增敏劑摻併至目標細胞之化合物；控制治療藥劑、營養劑、及/或氧氣流至目標細胞之化合物；作用於腫瘤之化學治療藥劑或其他於治療癌症或其他疾病之治療上有效之化合物。鈣拮抗劑，如維拉帕米(verapamil)，係被證實可與抗腫瘤藥劑合併使用，以使對所接受之化學治療藥劑具有抗藥性之腫瘤細胞產生化學敏感性，並使該些化合物對藥物敏感腫瘤產生功效。
免疫增敏劑的例子包括下列，但不限於，免疫調節劑，例如，單株抗體，如，免疫查核點抗體[例如，CTLA-4阻斷抗體及/或對抗PD-1及PD-L1及/或PD-L2的抗體，如，依莫單抗(ipilimumab) (CTLA4)、MK-3475 (pembrolizumab，之前稱為拉姆珠單抗(lambrolizumab)，抗-PD-1)、尼沃單抗(nivolumab) (抗-PD-1)、BMS-936559 (抗- PD-L1)、MPDL320A、AMP-514或MEDI4736 (抗-PD-L1)、或曲美木單抗(tremelimumab) (之前稱為替西莫單抗(ticilimumab)，CP-675,206，抗-CTLA-4)；或訊息傳遞抑制劑；或細胞活素(如，重組干擾素)；或溶瘤病毒(oncolyte virus)；或免疫佐劑(例如BCG)。
免疫增敏劑可與一或更多治療上有效量之其他化合物一同投藥，其中其他化合物包括，但不限於：本發明之化合物；提升免疫增敏劑摻併至目標細胞之化合物；控制治療藥劑、營養劑、及/或氧氣流至目標細胞之化合物；作用於腫瘤上之治療劑；或其他用於治療癌症或其他疾病之治療上有效之化合物。
於與另一化學治療藥劑合併使用時，化學式(I)化合物可與一、二、三、四或更多之其他治療劑例如一同調配成一藥劑形式，其中含有二、三、四或更多之治療劑，即，單一醫藥組成物中含有所有成分。於另一具體實施例中，個別的治療劑可分開配製並以一套組方式一起呈現，且選擇性的包含其使用方法之說明書。
於一具體實施例中，提供一種化學式(I)化合物與一或更多種(例如1或2)其他治療劑(例如上述之抗癌劑)組合使用。於又一具體實施例中，提供一種如本文所述之IAP拮抗劑與選自下列之PI3K/AKT途徑抑制劑之組合使用：apitolisib、布帕里斯(buparlisib)、克盤利昔(copanlisib)、pictilisib (皮特里斯(pictrelisib)、ZSTK-474、CUDC-907、GSK-2636771、LY-3023414、ipatasertib、afuresertib、MK-2206、MK-8156、艾迪昔布(Idelalisib)、BEZ235 (達托里斯(dactolisib))、BYL719、GDC- 0980、GDC-0941、GDC-0032及GDC-0068。
於另一具體實施例中，提供一種化學式(I)化合物與一或更多種(例如1或2)其他治療劑(例如抗癌劑)組合而使用於治療，如癌症之預防或治療。
於一具體實施例中，醫藥組成物包含化學式(I)化合物與醫藥可接受之載體，並選擇性的包含一或更多的治療劑。
於另一實施例中，本發明有關一種依據本發明之合併用途，其係用於製作抑制腫瘤細胞生長之醫藥組成物。
於又一具體實施例中，本發明係關於一種含有化學式(I)化合物及一或更多抗癌劑之產物，其為一合併製備產物，以同時、分開或依序使用於癌症患者之治療上。
實例
現在參考下列實例所述之特定具體實施例以說明本發明，但不受限於此等實例。化合物係使用如AutoNom (MDL)之自動命名套裝軟體所命名，或是如化學藥品供應商所命名。
提供下列合成步驟以說明所使用之方法；對於其中某一製備或步驟來說，所使用之先驅物不必然衍生自依據敘述中之步驟所合成的個別批次。於此等實例中，使用下列縮寫。
NMR數據：除非另有說明，否則1 H NMR光譜是於Bruker Avance I spectrometer上在25°C下以400 MHz操作所記錄。使用Topspin 2.1軟體處理及分析數據。於NMR數據中，當選定之質子數量少於分子中質子理論數量時，則認為顯然消失的訊號係由溶劑及/或水的波峰訊號所遮蓋。此外，當光譜是於質子性NMR溶劑中獲得時，會發生NH及/或OH質子與溶劑交換，因而一般無法觀察到此種訊號。
分析型與製備型LC-MS系統(Analytical and Preparative LC-MS systems)
分析型LC-MS系統及方法敘述
於下述實施例中，係使用下述系統及操作條件，以質譜儀對化合物定性。當具有不同同位素之原子存在並引用單一質量時，化合物引用質量則為單一同位素質量(monoisotopic mass) (即，35 Cl；79 Br等)。
Waters Platform LC-MS系統： HPLC系統：Waters 2795 質譜偵測器：Micromass Platform LC PDA偵測器：Waters 2996 PDA Platform MS條件： 毛細管電壓：3.6 kV(3.40 kV於ES陰極(negative)) 錐(cone)電壓：30 V 來源(source)溫度：120℃ 掃描範圍：125-800 amu 離子化方式：電噴霧陽性(ElectroSpray Positive)或電噴霧陰性(ElectroSpray Negative)或電噴霧陽性及陰性
Waters Fractionlynx LC-MS系統： HPLC系統：2767自動取樣器-2525二元梯度幫浦 質譜偵測器：Waters ZQ PDA偵測器：Waters 2996 PDA Fractionlynx MS條件： 毛細管電壓：3.5 kV (3.25 kV於ES陰極) 錐(cone)電壓：40 V (25 V於ES陰極) 來源(source)溫度：120℃ 掃描範圍：125-800 amu 離子化方式：電噴霧陽性或電噴霧陰性或電噴霧陽性及陰性
Agilent 1200SL-6140 LC-MS系統- RAPID： HPLC系統：Agilent 1200系列SL 質譜偵測器：Agilent 6140單四極(single quadrupole) 第二偵測器：Agilent 1200 MWD SL Agilent MS條件： 毛細管電壓：4000V於ES陽極(ES pos) (3500V於ES陰極(ES Neg)) 碎裂電壓(Fragmentor)/增益(Gain)：100 增益：1 乾燥氣體流速：7.0 L/min 氣體溫度：345℃ 噴霧壓力(Nebuliser Pressure)：35 psig 掃描範圍：125-800 amu 離子化方式：電噴霧陽性-陰性交換(ElectroSpray Positive-Negative switching)
製備型LC-MS系統及方法描述
製備型LC-MS係為一標準且有效之方法，用於如本文所述化合物之小分子有機化合物之純化。液相層析(LC)法及質譜法(MS)之方法可進行改變，以提供更佳之粗產物分離，藉由MS增進樣品偵測。可透過改變層析管柱、揮發性沖提液及修飾劑、及梯度，而使製備型梯度LC方法最佳化。此些方法為此技術領域已知之最佳化製備型LC-MS之方法，並可使用此些方法純化化合物。這類方法敘述於Rosentreter U, Huber U.; Optimal fraction collecting in preparative LC/MS;J Comb Chem. ; 2004; 6(2), 159-64及Leister W, Strauss K, Wisnoski D, Zhao Z, Lindsley C., Development of a custom high-throughput preparative liquid chromatography/mass spectrometer platform for the preparative purification and analytical analysis of compound libraries;J Comb Chem. ; 2003; 5(3); 322-9。
下列敘述多種透過製備型LC-MS純化化合物之系統，然而此技術領域者知道可使用另外的系統及方法。由本文所提供之資訊，或使用其他層析系統，此技術領域者可透過製備型LC-MS純化本文所述之化合物。
Waters Fractionlynx系統： 硬體： 2767雙迴圈自動取樣器/分液收集器(2767 Dual Loop Autosampler/Fraction Collector) 2525製備型幫浦(2525 preparative pump) 用於管柱選擇之CFO (管柱流體組裝器(column fluidic organiser)) 作為補償幫浦之RMA(水試劑管理器(Waters reagent manager) as make up pump) Waters ZQ質譜儀 Waters 2996光二極體陣列檢測器(Photo Diode Array detector) Waters ZQ質譜儀 Waters MS運轉條件： 毛細管電壓：3.5 kV (3.2 kV於ES陰極) 錐電壓(cone voltage)：25 V 來源(source)溫度：120℃ 掃描範圍：125-800 amu 離子化方式：電噴霧陽性(ElectroSpray Positive)或電噴霧陰性(ElectroSpray Negative)
Agilent 1100 LC-MS製備型系統： 硬體： 自動取樣器：1100系列“prepALS” 幫浦：製備型流動梯度用之1100系列“PrepPump”及預流幫浦修改器(pumping modifier in prep flow)用之1100系列“QuatPump” UV偵測器：1100系列“MWD”多波長偵測器 MS偵測器：1100系列“LC-MSD VL” 分液收集器：2 x“Prep-FC” 補償幫浦(Make Up pump)：“Waters RMA” Agilent主動分流器(Agilent Active Splitter) Agilent MS運轉條件： 毛細管電壓：4000 V(3500 V於ES陰極) 碎裂電壓(fragmentor)/增益(gain)：150/1 乾燥氣體流速：12.0 L/min 氣體溫度：350℃ 噴霧壓力：50 psig 掃描範圍：125-800 amu 離子化模式：電噴霧陽性(ElectroSpray Positive)或電噴霧陰性(ElectroSpray Negative)
管柱：
可使用市售之許多管柱，包括非掌性及掌性管柱，並搭配不同的移動相、有機修飾劑及pH，而可達到大範圍之選擇性。所有的管柱係根據製造商建議之操作條件使用。一般而言，係使用5微米粒徑之管柱。例如，可使用Waters (包括，但不限於，XBridgeTM Prep OBDTM C18及Phenyl, Atlantis® Prep T3 OBDTM 及SunfireTM Prep OBD C18 5μm 19 x 100 mm)、Phenomenex(包括，但不限於，Synergy MAX-RP及LUXTM Cellulose-2)、Astec (ChirobioticTM 管柱，包括，但不限於，V、V2及T2)以及Diacel® (包括，但不限於，Chiralpak® AD-H)所提供之管柱以用於篩選(screening)。
沖提液：
與管柱製造商推薦的靜止相限制配合來選擇流動相沖提液，以便使管柱分離效能最佳化。
方法：
非掌性製備型層析法
對所述化合物實例進行了HPLC純化，其處的說明，係依照Snyder L. R., Dolan J. W., High-Performance Gradient Elution The Practical Application of the Linear-Solvent-Strength Model, Wiley, Hoboken, 2007敘述中所推薦之方法進行。
掌性製備型層析法
使用掌性靜止相(CSPs)之製備型分離係應用鏡像異構物混合物之解析的天然技術。同樣方式，可應用於非鏡像異構物及非掌性分子的分離。將CSPs上之製備型掌性分離最佳化之方法，係此技術領域中所熟知，然後使用此等方法將化合物純化。這類方法見述於Beesley T. E., Scott R.P.W.; Chiral Chromatography; Wiley, Chichester, 1998。
如本文中所提供之化合物中鹽化學計量或酸含量之值為實驗所得，會依所使用之分析方法改變。若未指明是鹽形式時，所得之化合物係自由鹼的形式。
製備例1：(R)-2-((S)-2-苯甲氧基羰基胺基-3-羥基-丙醯基-胺基)-丙酸甲基酯((R)-2-((S)-2-Benzyloxycarbonylamino-3-hydroxy-propionyl-amino)-propionic acid methyl ester)
將二異丙基乙基胺(Diisopropylethylamine) (375 mL)滴入至(R)-2-胺基-丙酸甲基酯氫氯酸鹽(100 g，0.716莫耳)、EDC (165 g，0.86莫耳)、苯甲氧羰基-L-絲胺酸(carbobenzyloxy-L-serine) (171.4 g，0.716莫耳)及DCM (3.6 L)之冷的混合物(cooled mixture)中。將所得之混合物於氮氣下及周圍溫度(ambient temperature)下攪拌16小時。於40o C真空下(in vacuo)移除溶劑後，將殘留物以飽和碳酸鈉(1 L)、水(1 L)稀釋，並以EtOAc (2 L，2 x 1 L)萃取。將有機相混合並以2M氫氯酸(1 L)、飽和鹽水溶液(1L)清洗，以硫酸鎂乾燥，於40o C下真空濃縮，得到標題化合物(172 g)，為無色固體。1 H NMR(Me-d3-OD)：7.44-7.28 (6H, m), 5.13 (2H, s), 4.46 (1H, d), 4.43 (1H, d), 4.25 (1H, t), 3.82-3.68 (5H, m), 1.39 (3H, d)。
製備例2：(3S,6R)-3-羥甲基-6-甲基-哌嗪-2,5-二酮((3S,6R)-3-Hydroxymethyl-6-methyl-piperazine-2,5-dione)
在氮氣下於(R)-2-((S)-2-苯甲氧基羰基胺基-3-羥基-丙醯基-胺基)-丙酸甲基酯(其可如製備例1所述而製備) (172 g，0.53莫耳)中添加10% Pd/C (8.6 g)、MeOH (530 mL)及環己烯(344 mL)。將混合物加熱迴流17小時。添加MeOH (500 mL)，及繼續迴流1小時。將熱反應混合物以矽藻土墊(a pad of celite)過濾，以熱MeOH (2 x 500 mL)清洗塊狀物。將混合的濾液濃縮。將所得固體於2-丁酮(2-butanone) (400 mL)中製成漿料，並以10分鐘的時間(over 10 min)逐漸添加petrol (400 mL)。於攪拌30 min後，將固體過濾，並以2：1之petrol/2-丁酮(300 mL)清洗濾餅(cake)。將濾餅於40℃下真空乾燥，得到標題化合物(68.3 g)，為米白色(off white)固體。1 H NMR (DMSO-d6)：8.08 (1H, s), 7.90 (1H, s), 5.11 (1H, t), 3.92 (1H, q), 3.80-3.71 (1H, m), 3.71-3.60 (1H, m), 3.58-3.47 (1H, m), 1.24 (3H, d)。
製備例3：((2R,5R)-5-甲基-哌嗪-2-基)-甲醇氫氯酸鹽(((2R,5R)-5-methyl-piperazin-2-yl)-methanol hydrochloride)
於(3S,6R)-3-羥甲基-6-甲基-哌嗪-2,5-二酮(其可如製備例2所述而製備) (34 g，0.215莫耳) 中添加硼烷(borane)於THF中之溶液(1 M，1.6 L，1.6莫耳)，及將混合物加熱至70℃持續18小時。將溶液於冰浴中冷卻，再逐漸添加MeOH (425 mL)，而後再添加5 M氫氯酸(113 mL)。將混合物加熱至70℃持續2小時，而後冷卻至周圍溫度。過濾所得固體，以THF (200 mL)清洗塊狀物，並於40℃真空乾燥，得到標題化合物(39.3 g)，為無色固體。1 H NMR (DMSO-d6)：9.79 (3H, s), 5.59 (1H, s), 3.76-3.40 (5H, m), 3.19-2.94 (2H, m), 1.28 (3H, d)。
製備例4：(2R,5R)-5-羥甲基-2-甲基-哌嗪-1-羧酸第三丁酯((2R,5R)-5-Hydroxymethyl-2-methyl-piperazine-1-carboxylic acid tert-butyl ester)
在0℃下(冰浴)，於MeOH (96 mL)中之((2R,5R)-5-甲基-哌嗪-2-基)-甲醇氫氯酸鹽(其可如製備例3所述而製備) (20 g，119毫莫耳)中添加三乙胺(48.7 mL，357毫莫耳)。以30 min的時間添加溶於MeOH (145 mL)之第三丁基二碳酸酯(tert-Butyl dicarbonate) (61 g，280毫莫耳)。將反應溫度維持在＜10℃持續1小時，並以1小時的時間加溫至周圍溫度，然後加熱至50℃持續18小時。濃縮反應溶液，再將殘留物溶於乙醇(397 mL)中。添加溶於水(397 mL)之NaOH (23.8 g，595毫莫耳)溶液，將反應加熱至100℃持續18小時，而後冷卻至周圍溫度。以1M HCl (~300 mL)將混合物中和至pH 9 (使用pH計)，而後以氯仿(3 x 700 mL)萃取，以硫酸鈉乾燥、過濾並濃縮。將殘留物再溶於MeOH中並濃縮，而後於40℃下真空乾燥，得到標題化合物(21 g，75%)，為無色固體。1 H NMR (Me-d3-OD)：4.20-4.07 (1H, m), 3.79 (1H, dd), 3.71-3.58 (2H, m), 3.54 (1H, dd), 3.24 (1H, dd), 3.18-3.01 (1H, m), 3.01-2.89 (1H, m), 2.55 (1H, dd), 1.48 (9H, s), 1.25 (3H, s)。
製備例5：(2R,5R)-4-苯甲基-5-羥甲基-2-甲基-哌嗪 -1-羧酸第三丁酯 ((2R,5R)-4-Benzyl-5-hydroxymethyl-2-methyl-piperazine-1-carboxylic acid tert-butyl ester)
將(2R,5R)-5-羥甲基-2-甲基-哌嗪-1-羧酸第三丁酯(其可如製備例4所述而製備) (3.48 g，15.1毫莫耳)、苯甲醛(1.76 g，16.6毫莫耳)、三乙醯氧基硼氫化鈉(sodium triacetoxyborohydride) (3.84 g，18.1毫莫耳)及1,2-二氯乙烷 (30 mL)之混合物於20o C下攪拌持續18小時，然後使其在飽和的NaHCO3 水溶液(150 mL)及DCM (3 x 50 mL)之間分配(partitioned)。將混合之有機萃取液乾燥(Na2 SO4 )，然後真空蒸發，可得到油狀物。經過層析(chromatography) (SiO2 ，0~30% EtOAc/petrol)，得到標題化合物(4.588 g，74%)，為無色固體。MS：[M+H]+ = 321。
製備例6：(2R,5R)-4-苯甲基-5-氯甲基-2-甲基-哌嗪-1-羧酸第三丁酯 ((2R,5R)-4-Benzyl-5-chloromethyl-2-methyl-piperazine-1-carboxylic acid tert-butyl ester)
於0 °C下，將甲磺醯氯(570 µL，7.35毫莫耳)添加至含有TEA (2.6 mL，18.4毫莫耳)之(2R,5R)-4-苯甲基-5-羥甲基-2-甲基-哌嗪 -1-羧酸第三丁酯(其可如製備例5所述而製備) (1.9 g，6.12毫莫耳)溶於DCM (30 mL)中之溶液。於室溫下攪拌溶液18小時。使反應溶液在NH4 Cl水溶液與DCM之間分配。收集有機相，以MgSO4 乾燥，過濾，及真空濃縮。經過層析(SiO2 ，30% EtOAc/petrol)，得到標題化合物(1.6 g)，為白色固體。MS：[M+H]+ = 339。
製備例7：(2R,5S)-4-苯甲基-2-甲基-5-((R)-3-甲基-嗎啉-4-基甲基)-哌嗪 -1-羧酸第三丁酯((2R,5S)-4-Benzyl-2-methyl-5-((R)-3-methyl-morpholin-4-ylmethyl)-piperazine-1-carboxylic acid tert-butyl ester)
將K2 CO3 (81.6 g，591毫莫耳)及KI (73.6 g，443毫莫耳)添加至(2R,5R)-4-苯甲基-5-氯甲基-2-甲基-哌嗪-1-羧酸第三丁酯(其可如製備例6所述而製備) (50 g，147.9毫莫耳)於乙腈(400 mL)中之溶液，接著添加(R)-3-甲基-嗎啉氫氯酸鹽((R)-3-methyl-morpholine hydrochloride) (26.4 g，192毫莫耳)。將反應溶劑於70 °C下攪拌18小時。過濾移除固體，及真空移除溶劑。以層析(使用矽氧墊(using a pad of silica)，20% EtOAc/Petrol)純化粗產物，得到標題化合物(41.3 g)，為白色固體。MS：[M+H]+ = 404。
製備例8：(2R,5S)-2-甲基-5-((R)-3-甲基-嗎啉-4-基甲基)-哌嗪-1-羧酸第三丁酯((2R,5S)-2-Methyl-5-((R)-3-methyl-morpholin-4-ylmethyl)-piperazine-1-carboxylic acid tert-butyl ester)
將Pd/C (palladium on carbon) (10%) (33 g)及乙酸(220 mL)添加至(2R,5S)-4-苯甲基-2-甲基-5-((R)-3-甲基-嗎啉-4-基甲基)-哌嗪 -1-羧酸第三丁酯(其可如製備例7所述而製備) (41.3 g，102毫莫耳)於EtOH (300 mL)中之溶液。在H2 (一大氣壓)下於室溫下攪拌混合物18小時。然後將反應混合物通過矽藻土墊過濾以移除催化劑，及真空移除溶劑。將粗產物於飽和NaHCO3 水溶液與DCM之間分配，及以DCM (3x)萃取產物。以MgSO4 乾燥有機相，過濾，及真空濃縮，得到標題化合物，為淺黃色(pale yellow)油狀物。1 H NMR (400 MHz, CDCl3)：4.43-3.87 (1H, m), 3.78 (1H, d), 3.73-3.55 (3H, m), 3.32 (1H, dd), 3.22 (1H, dd), 3.16-2.93 (3H, m), 2.93-2.72 (1H, m), 2.55-2.35 (2H, m), 2.35-2.15 (2H, m), 1.89 (1H, dd), 1.45 (9H, s), 1.26 (3H, d), 0.96 (3H, d)。
另一方法：
於配備著攪拌子之密封10L燒瓶(flange flask)中加入(2R,5S)-4-苯甲基-2-甲基-5-((R)-3-甲基-嗎啉-4-基甲基)-哌嗪 -1-羧酸第三丁酯(500g，1.24莫耳，1.0當量(eq)) (其可如製備例7所述而製備)及乙醇(Stock, 5L)。將燒瓶置於氮氣下，及添加乙醇中的漿料形式的10% Pd/C (Aldrich，50g，0.124莫爾，0.1當量)。使用隔膜式真空幫浦(di-vac pump)清洗燒瓶數次，及將燒瓶置於使用4個氣球的氫氣下(The flask was purged several times with a di-vac pump and placed under a hydrogen atmosphere using 4 balloons)。將反應加溫至30°C，隔夜，以NMR確認起始材料完全耗盡。將反應混合物冷卻至室溫，及於氮氣下通過矽藻土墊過濾。將濾液蒸發至乾燥，得到標題產物，為無色油狀物。
1 H NMR(MeOD)：1.00 (3H, d), 1.25 (3H, d), 1.48 (9H, s), 2.08-2.14 (1H, m), 2.28-2.35 (1H, m), 2.42-2.48 (1H, m), 2.49-2.55 (1H, dd), 2.80-3.06 (4H, m), 3.22-3.28 (2H, m), 3.61-3.78 (4H, m), 4.12-4.16 (1H, m).
13 C NMR(MeOD)：14.6, 15.7, 28.8, 40.8, 44.8, 48.3, 50.3, 53.2, 54.3, 57.5, 68.5, 73.9, 81.1, 157.0.
製備例9：(2R,5S)-4-苯甲基-5-((3R,5R)-3,5-二甲基-嗎啉-4-基甲基)-2-甲基-哌嗪 -1-羧酸第三丁酯((2R,5S)-4-Benzyl-5-((3R,5R)-3,5-dimethyl-morpholin-4-ylmethyl)-2-methyl-piperazine-1-carboxylic acid tert-butyl ester)
將K2 CO3 (2.7 g，19.5毫莫耳)及KI (1.83 g，11.05毫莫耳)添加至(2R,5R)-4-苯甲基-5-氯甲基-2-甲基-哌嗪-1-羧酸第三丁酯(其可如製備例6所述而製備) (2.2 g，6.5毫莫耳)於乙腈(30 mL)之溶液，接著添加(3R, 5R)-3,5-二甲基-嗎啉(0.80 g，7.0毫莫耳)。將反應於70 °C攪拌18小時。過濾以將固體移除，及真空移除溶劑。使殘留物於水與二氯甲烷之間分配。將有機相乾燥，過濾，及使溶劑蒸發。以矽氧層析(0-40% EtOAc於Petrol中)純化粗產物，得到標題化合物(2.56 g，94%)，為白色固體。MS：[M+H]+ = 418.
製備例10：(2R,5S)-5-((3R,5R)-3,5-二甲基-嗎啉-4-基甲基)-2-甲基-哌嗪 -1-羧酸第三丁酯((2R,5S)-5-((3R,5R)-3,5-Dimethyl-morpholin-4-ylmethyl)-2-methyl-piperazine-1-carboxylic acid tert-butyl ester)
將Pd/C (10%) (1.6 g)及乙酸(10 mL)添加至(2R,5S)-4-苯甲基-5-((3R,5R)-3,5-二甲基-嗎啉-4-基甲基)-2-甲基-哌嗪 -1-羧酸第三丁酯(其可如製備例9所述而製備) (2.5 g，6.0毫莫耳)於EtOH (70 mL)中之溶液。將混合物於室溫下於H2 (1大氣壓)下攪拌三小時。然後將反應混合物通過矽藻土墊過濾以移除催化劑，及真空移除溶劑。將粗產物於飽和NaHCO3 水溶液與DCM之間分配，及以DCM (3x)萃取產物。以MgSO4 乾燥有機相，過濾，及真空濃縮，得到標題化合物，為淺黃色(pale yellow)油狀物。1 H NMR (400 MHz, CDCl3)：4.16 (1H, s), 3.79-3.59 (3H, m), 3.44-3.19 (3H, m), 3.08 (1H, dd), 2.99-2.69 (4H, m), 2.52 (1H, dd), 2.29 (1H, dd), 1.47 (9H, s), 1.27 (3H, d), 1.00 (6H, d).
下列化合物遵循製備例9及10之類似步驟製造：
10A：(2R,5S)-5-((2S,5R)-2,5-二甲基-嗎啉-4-基甲基)-2-甲基-哌嗪 -1-羧酸第三丁酯((2R,5S)-5-((2S,5R)-2,5-Dimethyl-morpholin-4-ylmethyl)-2-methyl-piperazine-1-carboxylic acid tert-butyl ester)，MS：[M + H]+ = 328。
製備例11：2-(5-氯-3-氟-吡啶-2-基)-2-甲基-丙腈 (2-(5-Chloro-3-fluoro-pyridin-2-yl)-2-methyl-propionitrile)
將雙(三甲矽)醯胺化鈉(sodium bis(trimethylsilyl)amide)溶液(610 mL，40%於四氫呋喃中，1.326莫耳)添加至5-氯-2,3-二氟吡啶(198.2 g，1.326莫耳)及異丁腈(238 mL，2.65莫耳)於甲苯(2 L)中之冰冷溶液。將混合物於室溫及氮氣下攪拌隔夜，然後添加飽和氯化銨水溶液(1 L)。相分離，及以乙酸乙酯(2 x 1 L)萃取水層。將混合的有機萃取液乾燥(MgSO4 )及於40o C真空濃縮，得到標題化合物(259.8 g，95%)。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d6)：8.57 (1H, dd), 8.24 (1H, dd), 1.74 (6H, 寬)。
製備例12：2-(5-氯-3-氟吡啶-2-基)-2-甲基丙基胺 (2-(5-Chloro-3-fluoropyridin-2-yl)-2-methylpropylamine)
將硼烷-四氫呋喃複合物(Borane-tetrahydrofuran complex) (1 M，1.37 L，1.365莫耳)添加至2-(5-氯-3-氟-吡啶-2-基)-2-甲基-丙腈(其可如製備例11所述而製備) (135.6 g，0.683莫耳)於四氫呋喃(670 mL)之冷涼溶液中。將混合物於室溫及氮氣下攪拌隔夜，然後於冰中冷卻。添加5M氫氯酸(335 mL)使混合物反應驟冷(quench)。將所得之混合物以40%氫氧化鉀水溶液(460 mL)鹼化，及予以相分離。使用乙酸乙酯(2 x 670 mL)萃取鹼性水相，及將混合的有機萃取液以鹽水(670 mL)清洗，乾燥(MgSO4 )及於40o C真空濃縮，得到標題化合物(102.9 g，74%)。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d6)：8.44 (1H, t), 7.95 (1H, dd), 2.85 (2H, d), 1.29 (6H, d)。
製備例12，另一步驟：2-(5-氯-3-氟吡啶-2-基)-2-甲基丙基胺
於10 L凸緣燒瓶(flange flask)中，添加2-(5-氯-3-氟-吡啶-2-基)-2-甲基-丙腈(其可如製備例11所述而製備) (200 g，1.00莫耳)、氯化鎳(II)六水合(239.4 g，1.00莫耳)及乙醇(3.0 L)。將所得之綠色溶液於氮氛圍下以乾冰/丙酮浴冷卻至0 °C。以使反應溫度維持於6°C以下的速率逐份添加硼氫化鈉(114.3 g，3.02莫耳) (添加時間= 1¾小時)，得到黑色懸浮液(suspension)。添加完成，立即將冷浴置換為冰/水浴，然後使反應升溫至室溫，隔夜。將反應混合物冰浴冷卻至0至4 °C。使用滴液漏斗(dropping funnel)添加25%之氨水溶液(2680 mL)，俾使反應溫度維持於10°C以下(添加時間 = 1小時)。添加完成即於約0°C下繼續攪拌30分鐘，然後將混合物通過矽藻土過濾，及以乙醇(2 × 750 mL)清洗殘留物。(注意！勿使濾墊乾掉。總過濾時間約2小時。)將淺黃/棕色濾液轉置於大的旋轉蒸發器，濃縮，直到移除所有乙醇。將所得之綠色油狀物轉置於5 L分液漏斗(separating funnel)及添加25%氨水溶液，直至油狀物變成黃色(200 mL)。將油狀物分離，以甲苯(2 × 300 mL)萃取水相。以1：1之25%氨水溶液/鹽水(300 mL)清洗混合的有機萃取物，以硫酸鈉過濾，及於旋轉蒸發器濃縮(浸浴溫度上達70°C)，得到粗產物，為黃色油狀物(161 g)，資料與上述一致。此將於下一步驟使用，不必純化。
製備例13：6-氯-3,3-二甲基-2,3-二氫-1H-吡咯並[3,2-b]吡啶 (6-chloro-3,3-dimethyl-2,3-dihydro-1H-pyrrolo[3,2-b]pyridine)
將2-(5-氯-3-氟吡啶-2-基)-2-甲基丙基胺(其可如製備例12及製備例12另一步驟所述而製備) (33 g，0.163莫耳)、碳酸鉀(122 g，0.884莫耳)及NMP (100 mL)之混合物加熱至150o C持續4小時。將冷卻的混合物以水(330 mL)稀釋及以甲苯(3 x 300 mL)萃取。將混合的有機萃取液以鹽水(160 mL)清洗，乾燥(MgSO4 )及於40o C真空濃縮，得到粗產物(24.8 g)。矽氧(silica)層析，以5-30% 乙酸乙酯/petrol洗提，得到標題化合物(21 g，71%)。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d6)：7.61 (1H, d), 6.75 (1H, d), 6.06 (1H, bs), 3.31 (2H, s), 1.21 (6H, s).
製備例14：6-氯-3,3-二甲基-2,3-二氫吡咯並[3,2-b]吡啶-1-羧酸第三丁酯(6-Chloro-3,3-dimethyl-2,3-dihydropyrrolo[3,2-b]pyridine-1-carboxylic acid tert-butyl ester)
將第三丁基二碳酸酯(3.7 g，17.1毫莫耳)添加至6-氯-3,3-二甲基-2,3-二氫-1H-吡咯並[3,2-b]吡啶(其可如製備例13所述而製備) (2.6 g，14.2毫莫耳)、四氫呋喃(26 mL)及2 M氫氧化鈉(11.4 mL，22.8毫莫耳)之混合物中，持續攪拌過2日。以水(20 mL)稀釋此二相混合物及以乙酸乙酯(2 x 20 mL)萃取。將混合之有機萃取液乾燥(MgSO4 )及於40o C真空濃縮，得到粗產物(6.02 g)。矽氧(silica)層析，以5-30% 乙酸乙酯/petrol洗提，得到標題化合物 (2.23g, 55%)；1 H NMR (400 MHz, DMSO-d6)：8.11 (1H, d), 7.85 (1H, bs), 3.77 (2H, s), 1.52 (9H, s), 1.28 (6H, s)。
製備例15：6-(4-氟苯甲基)-3,3-二甲基-2,3-二氫-1H-吡咯並[3,2-b]吡啶(6-(4-Fluorobenzyl)-3,3-dimethyl-2,3-dihydro-1H-pyrrolo[3,2-b]pyridine)
將氯化4-氟苯甲基鋅(4-fluorobenzylzinc chloride) (2L之0.5M THF溶液，1莫耳)溶液於20o C下添加至6-氯-3,3-二甲基-2,3-二氫-1H-吡咯並[3,2-b]吡啶(其可如製備例13所述而製備) (91.3 g，0.5莫耳)、溴化鋰(130.3 g，1.5莫耳)及二氯化[1,3-雙(2,6-二異丙基苯基)咪唑-2-亞基](3-氯吡啶基)鈀(II) ([1,3-bis(2,6-diisopropylphenyl)imidazol-2-ylidene](3-chloropyridyl)palladium(II) dichloride) (6.8 g，0.01莫耳)於THF (685 mL)及NMP (910 mL)之脫氣(degassed)混合物中，放熱。將所得之暗色的混合物於氮氣下及室溫下攪拌18小時。使用2.5 %之檸檬酸水溶液(900 mL)使反應驟冷，及使用甲苯(2 x 900 mL)萃取。將混合之有機相以水(3 x 900 mL)、鹽水(900 mL)清洗，使用MgSO4 乾燥，過濾及真空濃縮。將所得之固體於petrol (450 mL)及甲苯(100 mL)中製成漿液。在攪拌30 min後，將固體過濾，以petrol (2 x 90 mL)清洗濾餅。將濾餅於40o C真空乾燥，得到標題化合物(107.3 g)，為灰色固體。1 H NMR (DMSO-d6)：7.60 (1H, d), 7.30-7.22 (2H, m), 7.15-7.06 (2H, m), 6.53 (1H, d), 5.64 (1H, s), 3.78 (2H, s), 3.22 (2H, d), 1.19 (6H, s)。
以類似於製備例15所述之方式製備下列化合物：
15A：6-[(4-氟苯基)甲基]-3,3-二甲基-1H,2H,3H-吡咯並[3,2-b]吡啶-1-羧酸第三丁酯(tert-Butyl 6-[(4-fluorophenyl)methyl]-3,3-dimethyl-1H,2H,3H-pyrrolo[3,2-b]pyridine-1-carboxylate)，MS：[M + H]+ = 357。
15B：6-(3-氟苯甲基)-3,3-二甲基-2,3-二氫-1H-吡咯並[3,2-b]吡啶，MS：[M + H]+ = 257。
15C：6-丁基-3,3-二甲基-2,3-二氫-1H-吡咯並[3,2-b]吡啶，MS：[M+H]+ = 205。
15D：6-(2-氟苯甲基)-3,3-二甲基-2,3-二氫-1H-吡咯並[3,2-b]吡啶，MS：[M + H]+ = 257。
15E：6-(2,4-二氟苯甲基)-3,3-二甲基-2,3-二氫-1H-吡咯並[3,2-b]吡啶
製備例16：5-溴-6-(4-氟苯甲基)-3,3-二甲基-2,3-二氫-1H-吡咯並[3,2-b]吡啶(5-Bromo-6-(4-fluorobenzyl)-3,3-dimethyl-2,3-dihydro-1H-pyrrolo[3,2-b]pyridine)
將6-(4-氟苯甲基)-3,3-二甲基-2,3-二氫-1H-吡咯並[3,2-b]吡啶 (其可如製備例15所述而製備) (88.5 g，0.345莫耳)於DMF (1.67 L)中之溶液冷卻至-5o C。將固體N-溴琥珀醯亞胺(N-bromosuccinimide) (61.5 g，0.345莫耳)分做數部分添加，放熱。將混合物攪拌1小時，同時升溫至室溫。添加水(2.66 L)，放熱，及將所得之混合物於室溫攪拌18小時。過濾固體，及以水(270 mL)清洗濾餅。將濾餅溶解於THF (1.5 L)中，以MgSO4 乾燥，過濾，及真空濃縮，得到標題化合物(109.7 g)，為黃色固體。1 H NMR (DMSO-d6)：7.29-7.20 (2H, m), 7.20-7.03 (2H, m), 6.64 (1H, s), 5.88 (1H, s), 3.89 (2H, s), 3.26 (2H, d), 1.20 (6H, s)。
下列化合物以類似於製備例16的方式製備：
16A：5-溴-6-(3-氟苯甲基)-3,3-二甲基-2,3-二氫-1H-吡咯並[3,2-b]吡啶(5-Bromo-6-(3-fluorobenzyl)-3,3-dimethyl-2,3-dihydro-1H-pyrrolo[3,2-b]pyridine)，MS：[M + H]+ = 335, 337。
16B：5-溴-6-(2-氟苯甲基)-3,3-二甲基-2,3-二氫-1H-吡咯並[3,2-b]吡啶，MS：[M + H]+ = 335, 337。
16C：5-溴-6-丁基-3,3-二甲基-2,3-二氫-1H-吡咯並[3,2-b]吡啶，MS：[M+H]+ = 283, 285。
16D：5-溴-6-(2,4-二氟苯甲基)-3,3-二甲基-2,3-二氫-1H-吡咯並[3,2-b]吡啶
製備例17：[6-(4-氟-苯甲基)-3,3-二甲基-2,3-二氫-1H-吡咯並[3,2-b]吡啶-5-基]-甲醇([6-(4-Fluoro-benzyl)-3,3-dimethyl-2,3-dihydro-1H-pyrrolo[3,2-b]pyridin-5-yl]-methanol)
於冷至-78 °C 的5-溴-6-(4-氟苯甲基)-3,3-二甲基-2,3-二氫-1H-吡咯並[3,2-b]吡啶(其可如製備例16所述而製備) (22.8 g，68.2毫莫耳)於THF (300 mL)中以15分鐘時間(over 15 minutes)添加MeLi (1.6 M於Et2 O中；51.1 mL，91.8毫莫耳)。然後以30分鐘時間添加第三丁基鋰(1.7 M於己烷中；96 Ml，164毫莫耳)。15分鐘後，添加DMF (26 mL)，及將混合物於-78 °C下再攪拌50分鐘。添加飽和NH4 Cl (450 mL)水溶液，及將混合物於室溫下攪拌10分鐘。分離有機層，及以EtOAc (2 x 150 mL)萃取水層。將有機的部分混合一起，以鹽水(200 mL)清洗，乾燥(MgSO4 )及蒸發，得到6-(4-氟-苯甲基)-3,3-二甲基-2,3-二氫-1H-吡咯並[3,2-b]吡啶-5-甲醛(6-(4-fluoro-benzyl)-3,3-dimethyl-2,3-dihydro-1H-pyrrolo[3,2-b]pyridine-5-carbaldehyde)，為黃色固體，使用時不必進一步任何純化。MS：m/z = 285 (M+H+ )+ . 將此產物(~ 68毫莫耳)懸浮於MeOH (250 mL)中，及冰浴冷卻。以5分鐘的時間一部份一部份逐份的添加NaBH4 (3.4 g，81.8毫莫耳)。移除冷卻裝置，及將混合物再攪拌另20分鐘。將混合物於冰浴中冷卻，然後以10分鐘時間小心添加10%的KHSO4 水溶液(注意：冒泡)。 在將混合物於室溫(RT)攪拌5分鐘後，使用冰浴重新冷卻。添加50%的NaOH水溶液(~ 18 mL)將混合物鹼化，及然後真空濃縮至約三分之一體積(~ one third volume)。將所得之混合物水溶液使用CH2 Cl2 (1 x 200 Ml，2 x 100 mL)萃取，及將CH2 Cl2 層混合在一起，乾燥(MgSO4 )。將CH2 Cl2 溶液真空濃縮至約30 mL，及然後以甲苯(70 mL)稀釋以使產物開始結晶。過濾收集，得到無色結晶固體產物(10.6 g)。由濾液收集第二次的產物(second crop) (2.1 g)。將濾液濃縮，及將所餘之材料以SiO2 層析純化(使用25-50% EtOAc/己烷類洗提)，得到第三批料(2.1 g)；得到標題化合物，總產率14.8 g (76%，經過2步驟)，MS：[M + H]+ = 287。
另一種步驟涉及使用異丙醇進行後續的再結晶。
以相似於製備例17之方式製備下列化合物：
(6-丁基-3,3-二甲基-2,3-二氫-1H-吡咯並[3,2-b]吡啶-5-基)-甲醇，MS：[M+H]+ = 235。
製備例18： 2-氯-1-{6-[(4-氟苯基)甲基]-5-(羥甲基)-3,3-二甲基-1H,2H,3H-吡咯並[3,2-b]吡啶-1-基}乙-1-酮(2-Chloro-1-{6-[(4-fluorophenyl)methyl]-5-(hydroxymethyl)-3,3-dimethyl-1H,2H,3H-pyrrolo[3,2-b]pyridin-1-yl}ethan-1-one)
於[6-(4-氟-苯甲基)-3,3-二甲基-2,3-二氫-1H-吡咯並[3,2-b]吡啶-5-基]-甲醇(其可如製備例17所述而製備) (11.8 g，41.3毫莫耳)於MeCN (175 mL)之冷卻(~ 5 °C)懸浮液中添加氯乙醯氯(chloroacetyl chloride) (6.9 mL，86.7毫莫耳)。將冷卻設備移除，及將混合物於室溫攪拌30分鐘。然後使混合物真空蒸發，並使溶解於MeOH (200 mL)中。添加K2 CO3 溶液(12 g於100 mL H2 O中)，及將混合物於室溫攪拌20分鐘，然後，真空濃縮至約四分之一的體積(~ one quarter volume)。將混合物水溶液使用CH2 Cl2 (1 x 100 mL，2 x 30 mL)萃取，及將CH2 Cl2 層混合在一起，乾燥(MgSO4 )。真空蒸發，得到無色結晶固體產物(12.1 g，~ 100%)，MS：[M + H]+ = 363。
以類似於製備例18之方法製備下列化合物：
18A：1-(2-氯乙醯基)-6-[(4-氟苯基)甲基]-3,3-二甲基-1H,2H,3H,4H,5H-吡咯並[3,2-b]吡啶-5-酮，MS：[M + H]+ = 349。
18B：2-氯-1-{6-[(2-氟苯基)甲基]-5-(羥甲基)-3,3-二甲基-1H,2H,3H-吡咯並[3,2-b]吡啶-1-基}乙-1-酮，MS：[M + H]+ = 363。
18C：1-(2-氯乙醯基)-6-[(4-氟苯基)甲基]-3,3,4-三甲基-1H,2H,3H,4H,5H-吡咯並[3,2-b]吡啶-5-酮，MS：[M + H]+ = 363。
18D：1-(2-氯乙醯基)-6-[(2,4-氟苯基)甲基]-3,3-二甲基-1H,2H,3H,4H,5H-吡咯並[3,2-b]吡啶-5-酮，MS：[M + H]+ = 367。
18E：1-(2-氯乙醯基)-6-[(2-氟苯基)甲基]-3,3,4-三甲基-1H,2H,3H,4H,5H-吡咯並[3,2-b]吡啶-5-酮，MS：[M + H]+ = 363。
18F：2-氯-1-{6-[(2,4-二氟苯基)甲基]-5-(羥甲基)-3,3-二甲基-1H,2H,3H-吡咯並[3,2-b]吡啶-1-基}乙-1-酮，MS：[M + H]+ =381。
18G：2-氯-1-[5-(1,2-二羥基ethyl)-6-[(4-氟苯基)甲基]-3,3-二甲基-1H,2H,3H-吡咯並[3,2-b]吡啶-1-基]乙-1-酮，MS：[M + H]+ = 393。
18H：2-氯-1-{6-[(3-氟苯基)甲基]-5-(羥甲基)-3,3-二甲基-1H,2H,3H-吡咯並[3,2-b]吡啶-1-基}乙-1-酮，MS：[M + H]+ = 363。
18I：1-(2-氯-乙醯基)-6-(4-氟-苯甲基)-3,3-二甲基-1,2,3,6-四氫-吡咯並[2,3-c]吡啶-5-酮，MS：[M+H]+ = 349。
18J：1-(2-氯-乙醯基)-6-(2,4-二氟-苯甲基)-3,3-二甲基-1,2,3,6-四氫-吡咯並[2,3-c]吡啶-5-酮，MS：[M + H]+ = 367。
18K：2-氯-1-[5-((R或S)-1,2-二羥基乙基)-6-[(4-氟苯基)甲基]-3,3-二甲基-1H,2H,3H-吡咯並[3,2-b]吡啶-1-基]乙-1-酮，得自較慢洗提的先驅物(slower eluting precursor)。MS：[M+H]+ = 393。
18L：1-(2-氯乙醯基)-6-[(2,4-氟苯基)甲基]-3,3,4-三甲基-1H,2H,3H,4H,5H-吡咯並[3,2-b]吡啶-5-酮，MS：[M+H]+ = 381。
18M：2-氯-1-{6-[(4-氟苯基)甲基]-5-(R或S)-1-羥基-2-甲氧乙基)-3,3-二甲基-1H,2H,3H-吡咯並[3,2-b]吡啶-1-基}乙-1-酮，得自較快洗提的先驅物(faster eluting precursor)，MS：[M+H]+ = 407。
18N：2-氯-1-{6-[(4-氟苯基)甲基]-5-(R或S)-1-甲氧基-2-羥基乙基)-3,3-二甲基-1H,2H,3H-吡咯並[3,2-b]吡啶-1-基}乙-1-酮，得自較快洗提的先驅物，MS：[M+H]+ = 407。
18O：2-氯-1-{6-[(4-氟苯基)甲基]-5-(R或S)-1-羥基-2-甲氧乙基)-3,3-二甲基-1H,2H,3H-吡咯並[3,2-b]吡啶-1-基}乙-1-酮，得自較慢洗提的先驅物，MS：[M+H]+ = 407。
18P：2-氯-1-{6-[(4-氟苯基)甲基]-5-(R或S)-1-甲氧基-2-羥基乙基)-3,3-二甲基-1H,2H,3H-吡咯並[3,2-b]吡啶-1-基}乙-1-酮，得自較慢洗提的先驅物，MS：[M+H]+ = 407。
18Q：1-(2-氯-乙醯基)-6-(2,4-二氟-苯甲基)-3,3,4-三甲基-1,2,3,6-四氫-吡咯並[2,3-c]吡啶-5-酮，MS：[M + H]+ = 381。
18R：6-丁基-1-(2-氯-乙醯基)-3,3-二甲基-1,2,3,4-四氫-吡咯並[3,2-b]吡啶-5-酮，MS：[M + H]+ = 297。
18S：1-[6-丁基-5-(羥甲基)-3,3-二甲基-1H,2H,3H-吡咯並[3,2-b]吡啶-1-基]-2-氯乙-1-酮，MS：[M + H]+ = 311。
18T：6-丁基-1-(2-氯-乙醯基)-3,3-二甲基-1,2,3,6-四氫-吡咯並[2,3-c]吡啶-5-酮，MS：[M + H]+ = 297。
製備例19：(2R,5S)-4-(2-{6-[(4-氟苯基)甲基]-5-(羥甲基)-3,3-二甲基-1H,2H,3H-吡咯並[3,2-b]吡啶-1-基}-2-側氧基乙基)-2-甲基-5-{[(3R)-3-甲基嗎啉-4-基]甲基}哌嗪-1-羧酸第三丁酯(tert-Butyl (2R,5S)-4-(2-{6-[(4-fluorophenyl)methyl]-5-(hydroxymethyl)-3,3-dimethyl-1H,2H,3H-pyrrolo[3,2-b]pyridin-1-yl}-2-oxoethyl)-2-methyl-5-{[(3R)-3-methylmorpholin-4-yl]methyl}piperazine-1-carboxylate)
將(2R,5S)-2-甲基-5-((R)-3-甲基-嗎啉-4-基甲基)- 哌嗪-1-羧酸第三丁酯 (其可如製備例8所述而製備) (15.5 g，46.4毫莫耳)、KI (12.8 g，77.4毫莫耳)及K2 CO3 (21.4 g，155毫莫耳)於MeCN (70 mL)中攪拌，並於冰浴中冷卻。然後加入2-氯-1-{6-[(4-氟苯基)甲基]-5-(羥甲基)-3,3-二甲基-1H,2H,3H-吡咯並[3,2-b]吡啶-1-基}乙-1-酮(其可如製備例18所述而製備) (14.0 g，38.7毫莫耳)於MeCN (100 mL)中之溶液。將混合物於室溫攪拌2小時，及然後真空濃縮至約四分之一體積。使混合物於EtOAc (150 mL)及H2 O (150 mL)之間分配(partitioned)，然後再用EtOAc (1 x 75 mL)萃取水層。將EtOAc層混合一起以10%的KH2 PO4 水溶液(4 x 100 mL)、然後鹽水(70 mL)清洗。將有機層乾燥(MgSO4 )，及蒸發，得到無色固體產物(25.8 g，98%)，MS：[M + H]+ = 640。
以類似於製備例19之方法製備下列化合物：
(2R,5S)-5-{[(3R,5R)-3,5-二甲基嗎啉-4-基]甲基}-4-(2-{6-[(4-氟苯基)甲基]-5-(羥甲基)-3,3-二甲基-1H,2H,3H-吡咯並[3,2-b]吡啶-1-基}-2-側氧基乙基)-2-甲基哌嗪-1-羧酸第三丁酯(tert-Butyl (2R,5S)-5-{[(3R,5R)-3,5-dimethylmorpholin-4-yl]methyl}-4-(2-{6-[(4-fluorophenyl)methyl]-5-(hydroxymethyl)-3,3-dimethyl-1H,2H,3H-pyrrolo[3,2-b]pyridin-1-yl}-2-oxoethyl)-2-methylpiperazine-1-carboxylate)，MS：[M + H]+ = 654。
(2R,5S)-5-{[(3R,5R)-3,5-二甲基嗎啉-4-基]甲基}-4-(2-{6-[(4-氟苯基)甲基]-3,3-二甲基-5-側氧基-1H,2H,3H,4H,5H-吡咯並[3,2-b]吡啶-1-基}-2-側氧基乙基)-2-甲基哌嗪-1-羧酸第三丁酯，MS：[M + H]+ = 640。
(2R,5S)-4-(2-{6-[(2-氟苯基)甲基]-5-(羥甲基)-3,3-二甲基-1H,2H,3H-吡咯並[3,2-b]吡啶-1-基}-2-側氧基乙基)-2-甲基-5-{[(3R)-3-甲基嗎啉-4-基]甲基}哌嗪-1-羧酸第三丁酯，MS：[M + H]+ = 640。
(2R,5S)-4-(2-{6-[(4-氟苯基)甲基]-3,3-二甲基-5-側氧基-1H,2H,3H,4H,5H-吡咯並[3,2-b]吡啶-1-基}-2-側氧基乙基)-2-甲基-5-{[(3R)-3-甲基嗎啉-4-基]甲基}哌嗪-1-羧酸第三丁酯，MS：[M + H]+ = 626。
(2R,5S)-4-(2-{6-[(4-氟苯基)甲基]-3,3,4-三甲基-5-側氧基-1H,2H,3H,4H,5H-吡咯並[3,2-b]吡啶-1-基}-2-側氧基乙基)-2-甲基-5-{[(3R)-3-甲基嗎啉-4-基]甲基}哌嗪-1-羧酸第三丁酯，MS：[M + H]+ = 640。
(2R,5S)-4-(2-{6-[(2,4-二氟苯基)甲基]-3,3-二甲基-5-側氧基-1H,2H,3H,4H,5H-吡咯並[3,2-b]吡啶-1-基}-2-側氧基乙基)-5-{[(3R,5R)-3,5-二甲基嗎啉-4-基]甲基}-2-甲基哌嗪-1-羧酸第三丁酯，MS：[M + H]+ = 658。
(2R,5S)-4-(2-{6-[(2,4-二氟苯基)甲基]-3,3-二甲基-5-側氧基-1H,2H,3H,4H,5H-吡咯並[3,2-b]吡啶-1-基}-2-側氧基乙基)-2-甲基-5-{[(3R)-3-甲基嗎啉-4-基]甲基}哌嗪-1-羧酸第三丁酯，MS：[M + H]+ = 644。
(2R,5S)-4-(2-{6-[(2-氟苯基)甲基]-3,3,4-三甲基-5-側氧基-1H,2H,3H,4H,5H-吡咯並[3,2-b]吡啶-1-基}-2-側氧基乙基)-2-甲基-5-{[(3R)-3-甲基嗎啉-4-基]甲基}哌嗪-1-羧酸第三丁酯，MS：[M + H]+ = 640。
(2R,5S)-5-{[(3R,5R)-3,5-二甲基嗎啉-4-基]甲基}-4-(2-{6-[(4-氟苯基)甲基]-3,3,4-三甲基-5-側氧基-1H,2H,3H,4H,5H-吡咯並[3,2-b]吡啶-1-基}-2-側氧基乙基)-2-甲基哌嗪-1-羧酸第三丁酯，MS：[M + H]+ = 654。
(2R,5S)-4-(2-{6-[(2,4-二氟苯基)甲基]-5-(羥甲基)-3,3-二甲基-1H,2H,3H-吡咯並[3,2-b]吡啶-1-基}-2-側氧基乙基)-2-甲基-5-{[(3R)-3-甲基嗎啉-4-基]甲基}哌嗪-1-羧酸第三丁酯，1H NMR (400 MHz, Me-d3-OD)：8.12 (1H, s), 7.27-7.16 (1H, m), 7.06-6.86 (2H, m), 4.76 (2H, s), 4.17 (1H, s), 4.10-4.07 (2H, m), 3.99 (1H, d), 3.74-3.49 (5H, m), 3.30-3.22 (2H, m), 2.97-2.77 (4H, m), 2.59-2.43 (2H, m), 2.43-2.32 (1H, m), 2.32-2.21 (1H, m), 1.47 (9H, s), 1.43 (6H, s), 1.22 (3H, d), 1.00 (3H, d) 。
(2R,5S)-4-{2-[5-(1,2-二羥基乙基)-6-[(4-氟苯基)甲基]-3,3-二甲基-1H,2H,3H-吡咯並[3,2-b]吡啶-1-基]-2-側氧基乙基}-2-甲基-5-{[(3R)-3-甲基嗎啉-4-基]甲基}哌嗪-1-羧酸第三丁酯，MS：[M+H]+ = 670；掌性HPLC (chiral HPLC) (庚烷/乙醇，80：20，0.2 % DEA，chiralPAk-IC管柱)，得到較快洗提的非鏡像異構物A，MS：[M + H]+ = 670及較慢洗提的非鏡像異構物B，MS：[M + H]+ = 670。
(2R,5S)-4-(2-{6-[(3-氟苯基)甲基]-5-(羥甲基)-3,3-二甲基-1H,2H,3H-吡咯並[3,2-b]吡啶-1-基}-2-側氧基乙基)-2-甲基-5-{[(3R)-3-甲基嗎啉-4-基]甲基}哌嗪-1-羧酸第三丁酯，MS：[M + H]+ = 640。
(2R,5S)-5-{[(3R,5R)-3,5-二甲基嗎啉-4-基]甲基}-4-(2-{6-[(4-氟苯基)甲基]-3,3-二甲基-5-側氧基-1H,2H,3H,5H,6H-吡咯並[2,3-c]吡啶-1-基}-2-側氧基乙基)-2-甲基哌嗪-1-羧酸第三丁酯，MS：[M + H]+ = 640。
(2R,5S)-4-(2-{6-[(4-氟苯基)甲基]-3,3-二甲基-5-側氧基-1H,2H,3H,5H,6H-吡咯並[2,3-c]吡啶-1-基}-2-側氧基乙基)-2-甲基-5-{[(3R)-3-甲基嗎啉-4-基]甲基}哌嗪-1-羧酸第三丁酯，MS：[M + H]+ = 626。
(2R,5S)-5-{[(2S,5R)-2,5-二甲基嗎啉-4-基]甲基}-4-(2-{6-[(4-氟苯基)甲基]-3,3,4-三甲基-5-側氧基-1H,2H,3H,4H,5H-吡咯並[3,2-b]吡啶-1-基}-2-側氧基乙基)-2-甲基哌嗪-1-羧酸第三丁酯，MS：[M + H]+ = 654。
(2R,5S)-4-(2-{6-[(2,4-二氟苯基)甲基]-3,3-二甲基-5-側氧基-1H,2H,3H,5H,6H-吡咯並[2,3-c]吡啶-1-基}-2-側氧基乙基)-5-{[(3R,5R)-3,5-二甲基嗎啉-4-基]甲基}-2-甲基哌嗪-1-羧酸第三丁酯，MS：[M + H]+ = 658。
(2R,5S)-4-{2-[5-((R或S)-1,2-二羥基乙基)-6-[(4-氟苯基)甲基]-3,3-二甲基-1H,2H,3H-吡咯並[3,2-b]吡啶-1-基]-2-側氧基乙基}-5-{[(3R,5R)-3,5-二甲基嗎啉-4-基]甲基}-2-甲基哌嗪-1-羧酸第三丁酯，MS：[M+H]+ = 684。
(2R,5S)-4-(2-{6-[(2,4-二氟苯基)甲基]-3,3-二甲基-5-側氧基-1H,2H,3H,5H,6H-吡咯並[2,3-c]吡啶-1-基}-2-側氧基乙基)-5-{[(2S,5R)-2,5-二甲基嗎啉-4-基]甲基}-2-甲基哌嗪-1-羧酸第三丁酯，MS：[M + H]+ = 658。
(2R,5S)-4-(2-{4-胺基-6-[(2,4-二氟苯基)甲基]-3,3-二甲基-5-側氧基-1H,2H,3H,4H,5H-吡咯並[3,2-b]吡啶-1-基}-2-側氧基乙基)-2-甲基-5-{[(3R)-3-甲基嗎啉-4-基]甲基}哌嗪-1-羧酸第三丁酯，MS：[M + H]+ = 659。
(2R,5S)-4-(2-{4-胺基-6-[(4-氟苯基)甲基]-3,3-二甲基-5-側氧基-1H,2H,3H,4H,5H-吡咯並[3,2-b]吡啶-1-基}-2-側氧基乙基)-2-甲基-5-{[(3R)-3-甲基嗎啉-4-基]甲基}哌嗪-1-羧酸第三丁酯，MS：[M + H]+ = 641。
(2R,5S)-4-(2-{6-[(2,4-二氟苯基)甲基]-3,3,4-三甲基-5-側氧基-1H,2H,3H,4H,5H-吡咯並[3,2-b]吡啶-1-基}-2-側氧基乙基)-5-{[(2S,5R)-2,5-二甲基嗎啉-4-基]甲基}-2-甲基哌嗪-1-羧酸第三丁酯，MS：[M + H]+ = 672。
(2R,5S)-4-(2-{6-[(4-氟苯基)甲基]-5-((R或S)1-羥基-2-甲氧乙基)-3,3-二甲基-1H,2H,3H-吡咯並[3,2-b]吡啶-1-基}-2-側氧基乙基)-2-甲基-5-{[(3R)-3-甲基嗎啉-4-基]甲基}哌嗪-1-羧酸第三丁酯(得自較快洗提的異構物(faster eluting isomer))，MS：[M+H]+ = 684。
(2R,5S)-4-(2-{6-[(4-氟苯基)甲基]-5-((R或S)1-羥基-2-甲氧乙基)-3,3-二甲基-1H,2H,3H-吡咯並[3,2-b]吡啶-1-基}-2-側氧基乙基)-2-甲基-5-{[(3R)-3-甲基嗎啉-4-基]甲基}哌嗪-1-羧酸第三丁酯(得自較慢洗提的異構物(slower eluting isomer))，MS：[M+H]+ = 684。
(2R,5S)-4-(2-{6-[(4-氟苯基)甲基]-5-((R或S)1-甲氧基-2-羥基乙基)-3,3-二甲基-1H,2H,3H-吡咯並[3,2-b]吡啶-1-基}-2-側氧基乙基)-2-甲基-5-{[(3R)-3-甲基嗎啉-4-基]甲基}哌嗪-1-羧酸第三丁酯(得自較快洗提的異構物)，MS：[M+H]+ = 684。
(2R,5S)-4-(2-{6-[(4-氟苯基)甲基]-5-((R或S)1-甲氧基-2-羥基乙基)-3,3-二甲基-1H,2H,3H-吡咯並[3,2-b]吡啶-1-基}-2-側氧基乙基)-2-甲基-5-{[(3R)-3-甲基嗎啉-4-基]甲基}哌嗪-1-羧酸第三丁酯(得自較慢洗提的異構物)，MS：[M+H]+ = 684。
(2R,5S)-4-(2-{4-胺基-6-丁基-3,3-二甲基-5-側氧基-1H,2H,3H,4H,5H-吡咯並[3,2-b]吡啶-1-基}-2-側氧基乙基)-5-{[(3R,5R)-3,5-二甲基嗎啉-4-基]甲基}-2-甲基哌嗪-1-羧酸第三丁酯，MS：[M + H]+ = 603。
(2R,5S)-4-(2-{6-[(2,4-二氟苯基)甲基]-3,3,4-三甲基-5-側氧基-1H,2H,3H,5H,6H-吡咯並[2,3-c]吡啶-1-基}-2-側氧基乙基)-2-甲基-5-{[(3R)-3-甲基嗎啉-4-基]甲基}哌嗪-1-羧酸第三丁酯，MS：[M + H]+ = 658。
(2R,5S)-4-(2-{6-丁基-3,3-二甲基-5-側氧基-1H,2H,3H,4H,5H-吡咯並[3,2-b]吡啶-1-基}-2-側氧基乙基)-5-{[(3R,5R)-3,5-二甲基嗎啉-4-基]甲基}-2-甲基哌嗪-1-羧酸第三丁酯，MS：[M + H]+ = 588。
(2R,5S)-4-(2-{6-丁基-3,3,4-三甲基-5-側氧基-1H,2H,3H,4H,5H-吡咯並[3,2-b]吡啶-1-基}-2-側氧基乙基)-5-{[(3R,5R)-3,5-二甲基嗎啉-4-基]甲基}-2-甲基哌嗪-1-羧酸第三丁酯，MS：[M + H]+ = 602。
(2R,5S)-4-{2-[6-丁基-5-(羥甲基)-3,3-二甲基-1H,2H,3H-吡咯並[3,2-b]吡啶-1-基]-2-側氧基乙基}-5-{[(3R,5R)-3,5-二甲基嗎啉-4-基]甲基}-2-甲基哌嗪-1-羧酸第三丁酯，MS：[M + H]+ = 602。
(2R,5S)-4-(2-{6-丁基-3,3-二甲基-5-側氧基-1H,2H,3H,5H,6H-吡咯並[2,3-c]吡啶-1-基}-2-側氧基乙基)-5-{[(3R,5R)-3,5-二甲基嗎啉-4-基]甲基}-2-甲基哌嗪-1-羧酸第三丁酯，MS：[M + H]+ = 588。
(2R,5S)-5-{[(3R,5R)-3,5-二甲基嗎啉-4-基]甲基}-4-(2-{6-[(4-氟苯基)甲基]-5-((R或S)-2-羥基-1-甲氧乙基)-3,3-二甲基-1H,2H,3H-吡咯並[3,2-b]吡啶-1-基}-2-側氧基乙基)-2-甲基哌嗪-1-羧酸第三丁酯，MS：[M+H]+ = 698。
(2R,5S)-4-(2-{6-丁基-3,3-二甲基-5-側氧基-1H,2H,3H,4H,5H-吡咯並[3,2-b]吡啶-1-基}-2-側氧基乙基)-5-{[(2S,5R)-2,5-二甲基嗎啉-4-基]甲基}-2-甲基哌嗪-1-羧酸第三丁酯，MS：[M + H]+ = 588。
製備例20：(2R,5S)-4-{2-[6-(2,4-二氟-苯甲基)-3,3,4-三甲基-5-側氧基-2,3,4,5-四氫-吡咯並[3,2-b]吡啶-1-基]-2-側氧基-乙基}-5-((3R,5R)-3,5-二甲基-嗎啉-4-基甲基)-2-甲基-哌嗪-1-羧酸第三丁酯((2R,5S)-4-{2-[6-(2,4-Difluoro-benzyl)-3,3,4-trimethyl-5-oxo-2,3,4,5-tetrahydro-pyrrolo[3,2-b]pyridin-1-yl]-2-oxo-ethyl}-5-((3R,5R)-3,5-dimethyl-morpholin-4-ylmethyl)-2-methyl-piperazine-1-carboxylic acid tert-butyl ester)
將(2R,5S)-4-{2-[6-(2,4-二氟-苯甲基)-3,3-二甲基-5-側氧基-2,3,4,5-四氫-吡咯並[3,2-b]吡啶-1-基]-2-側氧基-乙基}-5-((3R,5R)-3,5-二甲基-嗎啉-4-基甲基)-2-甲基-哌嗪-1-羧酸第三丁酯(146 mg，0.22毫莫耳)溶解於DMF (3 mL)中。添加氫化鈉(60%，11 mg，0.27毫莫耳)，及將混合物攪拌30分鐘。添加碘甲烷(0.017 mL，0.27毫莫耳)，及將混合物於室溫攪拌30分鐘，然後使其於水(10 mL)與EtOAc (2 x 10 mL)之間進行分配。將有機份以鹽水清洗，以硫酸鎂乾燥，及濃縮。將殘留物藉由管柱層析，其使用0-10% MeOH於EtOAc中的洗提液洗提，然後藉由製備型HPLC，以純化，得到標題化合物(17.6 mg)。MS：[M+H]+ = 672。
製備例21：(2R,5S)-4-{2-[6-(2,4-二氟-苯甲基)-3,3,4-三甲基-5-側氧基-2,3,4,5-四氫-吡咯並[3,2-b]吡啶-1-基]-2-側氧基-乙基}-2-甲基-5-((R)-3-甲基-嗎啉-4-基甲基)-哌嗪-1-羧酸第三丁酯((2R,5S)-4-{2-[6-(2,4-Difluoro-benzyl)-3,3,4-trimethyl-5-oxo-2,3,4,5-tetrahydro-pyrrolo[3,2-b]pyridin-1-yl]-2-oxo-ethyl}-2-methyl-5-((R)-3-methyl-morpholin-4-ylmethyl)-piperazine-1-carboxylic acid tert-butyl ester)
將(2R,5S)-4-{2-[6-(2,4-二氟-苯甲基)-3,3-二甲基-5-側氧基-2,3,4,5-四氫-吡咯並[3,2-b]吡啶-1-基]-2-側氧基-乙基}-2-甲基-5-((R)-3-甲基-嗎啉-4-基甲基)-哌嗪-1-羧酸第三丁酯(670 mg，1.04毫莫耳)溶於THF (20 mL)中。添加第三丁醇鋰(lithium tert-butoxide) (170 mg，2.08毫莫耳)，然後添加碘甲烷(0.16 mL，2.60毫莫耳)。將反應於室溫攪拌隔夜，然後使其於水(30 mL)與EtOAc (2 x 30 mL)之間進行分配。將有機份以鹽水清洗，以硫酸鎂乾燥，及濃縮。將殘留物藉由管柱層析純化，其使用0-10% MeOH於DCM中的洗提液洗提，得到標題化合物(350 mg)。MS：[M+H]+ = 658。
以類似於製備例21之方法製備下列化合物：
21A：(2R,5S)-4-[2-(6-丁基-3,3,4-三甲基-5-側氧基-2,3,4,5-四氫-吡咯並[3,2-b]吡啶-1-基)-2-側氧基-乙基]-5-((3R,5R)-3,5-二甲基-嗎啉-4-基甲基)-2-甲基-哌嗪-1-羧酸第三丁酯，MS：[M+H]+ = 602。
製備例22：6-[(4-氟苯基)甲基]-3,3-二甲基-4-氧基-1H,2H,3H-吡咯並[3,2-b]吡啶-1-羧酸第三丁酯(tert-Butyl 6-[(4-fluorophenyl)methyl]-3,3-dimethyl-4-oxy-1H,2H,3H-pyrrolo[3,2-b]pyridine-1-carboxylate)
於周圍溫度下之6-[(4-氟苯基)甲基]-3,3-二甲基-1H,2H,3H-吡咯並[3,2-b]吡啶-1-羧酸第三丁酯(其可如製備例15A所述而製備) (3.88 g，10.9毫莫耳)於DCM (30 mL)之攪拌溶液中，以0.1小時的時間分批逐份添加3-氯過苯甲酸(chloroperbenzoic acid) (77%, 2.7 g，12.0毫莫耳)。將混合攪拌3小時，然後於飽和NaHCO3 水溶液(150 mL)與DCM (3 x 30 mL)之間進行分配。將有機萃取液混合一起，乾燥(Na2 SO4 )及真空蒸發。將殘留物由醚-petrol中予以結晶，得到標題化合物(2.62 g)。1H NMR (400 MHz, Me-d3-OD)：7.74 (1H, s), 7.35-7.24 (2H, m), 7.13-7.02 (2H, m), 3.96 (2H, s), 3.79 (2H, s), 1.57 (6H, s), 1.53 (9H, s) 。
製備例23：6-[(4-氟苯基)甲基]-3,3-二甲基-5-側氧基-1H,2H,3H,4H,5H-吡咯並[3,2-b]吡啶-1-羧酸第三丁酯(tert-Butyl 6-[(4-fluorophenyl)methyl]-3,3-dimethyl-5-oxo-1H,2H,3H,4H,5H-pyrrolo[3,2-b]pyridine-1-carboxylate)
於105o C 加熱6-[(4-氟苯基)甲基]-3,3-二甲基-4-氧基-1H,2H,3H-吡咯並[3,2-b]吡啶-1-羧酸第三丁酯(其可如製備例22所述而製備) (0.6 g，1.6毫莫耳)及乙酐(acetic anhydride) (4 mL)之混合物持續2小時，然後於140o C持續3小時，冷卻，然後將所得溶液倒進冰-水(~100 g)中。過濾收集所得之無色固體，使懸浮於甲醇(15 mL)中。添加NaOH水溶液(1 M, 1.8 mL)，及攪拌混合物持續0.25小時。將溶液真空濃縮至12 mL，然後以水(20 mL)稀釋，及過濾收集所得之固體，得到標題化合物(0.6 g)。MS：[M+H]+ = 373。
以相似於製備例23之方式製備下列化合物：
23A：6-[(2-氟苯基)甲基]-3,3-二甲基-5-側氧基-1H,2H,3H,4H,5H-吡咯並[3,2-b]吡啶-1-羧酸第三丁酯
製備例24：6-[(4-氟苯基)甲基]-3,3-二甲基-5-側氧基-1H,2H,3H,4H,5H-吡咯並[3,2-b]吡啶(6-[(4-Fluorophenyl)methyl]-3,3-dimethyl-5-oxo-1H,2H,3H,4H,5H-pyrrolo[3,2-b]pyridine)
將6-[(4-氟苯基)甲基]-3,3-二甲基-5-側氧基-1H,2H,3H,4H,5H-吡咯並[3,2-b]吡啶-1-羧酸第三丁酯(其可如製備例23所述而製備) (0.6 g，1.6毫莫耳)、甲醇(20 mL)及5 M之HCl水溶液(20 mL)之混合物加熱並回流(reflux)持續16小時，冷卻，然後以水處理。過濾收集所得之固體，得到標題化合物(0.255 g)。MS：[M+H]+ = 273。
製備例25：1-[5-溴-6-(3-氟-苯甲基)-3,3-二甲基-2,3-二氫-吡咯並[3,2-b]吡啶-1-基]-乙酮(1-[5-Bromo-6-(3-fluoro-benzyl)-3,3-dimethyl-2,3-dihydro-pyrrolo[3,2-b]pyridin-1-yl]-ethanone)
於5-溴-6-(3-氟-苯甲基)-3,3-二甲基-2,3-二氫-1H-吡咯並[3,2-b]吡啶 (其可如製備例16A所述而製備) (4.5 g，13.43毫莫耳)於甲苯(50 mL)中之溶液添加乙醯氯(acetyl chloride) (1.05 mL，14.78毫莫耳)，及將反應混合物於室溫攪拌隔夜。添加飽和NaHCO3 水溶液(50 mL)，及以EtOAc (2x40 mL)萃取產物。以鹽水清洗有機相，乾燥，過濾，及使溶劑蒸發，得到標題化合物(4.99 g)。MS：[M+H]+ = 377。
以相似於製備例25所述之方式製備下列化合物：
25A：1-[5-溴-6-(4-氟-苯甲基)-3,3-二甲基-2,3-二氫-吡咯並[3,2-b]吡啶-1-基]- 乙酮，MS：[M+H]+ = 377。
製備例26：1-[6-(3-氟-苯甲基)-3,3,5-三甲基-2,3-二氫-吡咯並[3,2-b]吡啶-1-基]- 乙酮(1-[6-(3-Fluoro-benzyl)-3,3,5-trimethyl-2,3-dihydro-pyrrolo[3,2-b]pyridin-1-yl]-ethanone)
於1-[5-溴-6-(3-氟-苯甲基)-3,3-二甲基-2,3-二氫-吡咯並[3,2-b]吡啶-1-基]-乙酮 (其可如製備例25所述而製備) (4.9 g，13.0毫莫耳)、LiBr (3.35 g，39.0毫莫耳)及二氯化[1,3-雙(2,6-二異丙基苯基)咪唑-2-亞基](3-氯吡啶)鈀(II) ([1,3-bis(2,6-diisopropylphenyl)imidazol-2-ylidene](3-chloropyridyl)palladium(II) dichloride) (180 mg, 0.26毫莫耳)於THF (30 mL)及NMP (30 mL)中之脫氣溶液中添加氯化甲基鋅(methylzinc chloride) (於THF中，2M，10 mL，20毫莫耳)，及將反應混合物於室溫攪拌隔夜。將反應混合物倒入水(20 mL)及5%之檸檬酸水溶液中(3 mL)，及使用甲苯– EtOAc (1：1，2x40 mL)萃取產物。將有機相以鹽水清洗，乾燥，過濾，及使溶劑蒸發，得到標題化合物(4.05 g)。MS：[M+H]+ = 313。
製備例27：1-[6-(3-氟-苯甲基)-3,3,5-三甲基-4-氧基-2,3-二氫-吡咯並[3,2-b]吡啶-1-基]-乙酮(1-[6-(3-Fluoro-benzyl)-3,3,5-trimethyl-4-oxy-2,3-dihydro-pyrrolo[3,2-b]pyridin-1-yl]-ethanone)
於1-[6-(3-氟-苯甲基)-3,3,5-三甲基-2,3-二氫-吡咯並[3,2-b]吡啶-1-基]-乙酮(其可如製備例26所述而製備) (4.05 g，13.0毫莫耳)之DCM (50 mL)溶液中以小份逐份添加的方式添加間-氯-過苯甲酸(77%, 4.4 g，19.5毫莫耳)，及將反應混合物於室溫攪拌2小時。添加Na2 S2 O3 (10%，50 mL)，及攪拌30分鐘。以DCM (3x40 mL)萃取產物，將有機層混合一起，以1M NaOH清洗，乾燥，過濾，及使溶劑蒸發，得到標題化合物(4.22 g)。MS：[M+H]+ = 329。
製備例28：乙酸1-乙醯基-6-(3-氟-苯甲基)-3,3-二甲基-2,3-二氫-1H-吡咯並[3,2-b]吡啶-5-基甲酯(Acetic acid 1-acetyl-6-(3-fluoro-benzyl)-3,3-dimethyl-2,3-dihydro-1H-pyrrolo[3,2-b]pyridin-5-ylmethyl ester)
將1-[6-(3-氟-苯甲基)-3,3,5-三甲基-4-氧基-2,3-二氫-吡咯並[3,2-b]吡啶-1-基]-乙酮(其可如製備例27所述而製備) (4.22 g，12.86毫莫耳)於乙酐(25 mL)中之溶液於110o C下加熱2小時。使反應混合物冷卻，倒至冰上，及攪拌2小時。使用Na2 CO3 將混合物中和，及使用DCM (3x30 mL)萃取產物。將有機相乾燥，過濾，以及使溶劑蒸發。將粗產物於矽氧上純化，使用petrol– EtOAc 0-50%洗提，得到標題化合物(3.49 g)。MS：[M+H]+ = 371。
製備例29：[6-(3-氟-苯甲基)-3,3-二甲基-2,3-二氫-1H-吡咯並[3,2-b]吡啶-5-基]-甲醇([6-(3-Fluoro-benzyl)-3,3-dimethyl-2,3-dihydro-1H-pyrrolo[3,2-b]pyridin-5-yl]-methanol)
將乙酸1-乙醯基-6-(3-氟-苯甲基)-3,3-二甲基-2,3-二氫-1H-吡咯並[3,2-b]吡啶-5-基甲酯(其可如製備例28所述而製備) (3.49 g，9.43毫莫耳)及NaOH (6.0 g，150毫莫耳)於EtOH (60 mL)及水(60 mL)之溶液加熱並回流隔夜。使EtOH蒸發，使用5 M HCl將pH調整至pH=8，及DCM (3x30 mL)萃取產物。將有機相乾燥，過濾，及使溶劑蒸發。將粗產物於矽氧上純化，使用petrol– EtOAc 0-100%洗提，得到標題化合物(2.04 g)。MS：[M+H]+ = 287。
以相似於製備例25~29所述之序列製備下列化合物：
[6-(2-氟-苯甲基)-3,3-二甲基-2,3-二氫-1H-吡咯並[3,2-b]吡啶-5-基]-甲醇，[M+H]+ = 287。
[6-(4-氟-苯甲基)-3,3-二甲基-2,3-二氫-1H-吡咯並[3,2-b]吡啶-5-基]-甲醇，[M+H]+ = 287。
[6-(2,4-二氟-苯甲基)-3,3-二甲基-2,3-二氫-1H-吡咯並[3,2-b]吡啶-5-基]-甲醇，1 H NMR (400 MHz, Me-d3-OD)：7.22-7.12 (1H, m), 7.00-6.82 (2H, m), 6.67-6.59 (1H, m), 4.72-4.61 (2H, m), 4.04 (2H, s), 1.34 (6H, s) 。
製備例30：1-[6-(4-氟-苯甲基)-3,3-二甲基-2,3-二氫-吡咯並[3,2-b]吡啶-1-基]-乙酮(1-[6-(4-Fluoro-benzyl)-3,3-dimethyl-2,3-dihydro-pyrrolo[3,2-b]pyridin-1-yl]-ethanone)
在約10 °C下於6-(4-氟-苯甲基)-3,3-二甲基-2,3-二氫-1H-吡咯並[3,2-b]吡啶(其可如製備例15所述而製備) (10.1 g，39毫莫耳)之MeCN (130 mL)溶液中添加乙醯氯(3.6 mL，51毫莫耳)。將混合物於室溫攪拌隔夜，及然後於真空蒸發。使殘留物於CH2 Cl2 與1N NaOH水溶液之間進行分配。將CH2 Cl2 層乾燥 (MgSO4 )及蒸發，得到標題化合物(12.3 g)，為結晶固體。MS：m/z = 299 (M+H+ )+ .
製備例31：1-[6-(4-氟-苯甲基)-3,3-二甲基-4-氧基-2,3-二氫-吡咯並[3,2-b]吡啶-1-基]-乙酮(1-[6-(4-Fluoro-benzyl)-3,3-dimethyl-4-oxy-2,3-dihydro-pyrrolo[3,2-b]pyridin-1-yl]-ethanone)
將1-[6-(4-氟-苯甲基)-3,3-二甲基-2,3-二氫-吡咯並[3,2-b]吡啶-1-基]-乙酮(其可如製備例30所述而製備) (12.2 g，41毫莫耳)及mCPBA (77%，12g，~ 53毫莫耳)溶解於CH2 Cl2 (150 mL)中，及攪拌3小時。然後添加20% Na2 S2 O3 水溶液，將混合物攪拌25分鐘。以再一批CH2 Cl2 萃取水層，及然後將CH2 Cl2 層混合一起以2 x 1N NaOH水溶液清洗。將有機層乾燥(MgSO4 )，及真空蒸發，得到標題化合物(12 g)，為黃色結晶固體。MS：m/z = 315 (M+H+ )+ 。
製備例32：乙酸1-乙醯基-6-(4-氟-苯甲基)-3,3-二甲基-2,3-二氫-1H-吡咯並[3,2-b]吡啶-5-基酯(Acetic acid 1-acetyl-6-(4-fluoro-benzyl)-3,3-dimethyl-2,3-dihydro-1H-pyrrolo[3,2-b]pyridin-5-yl ester)
將1-[6-(4-氟-苯甲基)-3,3-二甲基-4-氧基-2,3-二氫-吡咯並[3,2-b]吡啶-1-基]-乙酮 (其可如製備例31所述而製備) (11.55 g，37毫莫耳)於Ac2 O (70 mL)中加熱5小時。然後使混合物冷卻，及倒入冰/水(500 g)中。將混合物攪拌1小時，及過濾收集所得之沉澱，得到標題化合物(12. 1 g，92%)，為灰色固體。MS：m/z = 357 (M+H+ )+ 。
製備例33：1-乙醯基-6-(4-氟-苯甲基)-3,3-二甲基-1,2,3,4-四氫-吡咯並[3,2-b]吡啶-5-酮(1-Acetyl-6-(4-fluoro-benzyl)-3,3-dimethyl-1,2,3,4-tetrahydro-pyrrolo[3,2-b]pyridin-5-one)
使乙酸1-乙醯基-6-(4-氟-苯甲基)-3,3-二甲基-2,3-二氫-1H-吡咯並[3,2-b]吡啶-5-基酯(其可如製備例32所述而製備) (6 g，19毫莫耳)懸浮於EtOH (60 mL)中，及使用2N NaOH (42 mL)水溶液處理。將混合物攪拌隔夜，然後使用5N HCl水溶液予以酸化。使用CH2 Cl2 萃取產物，及將有機層乾燥(MgSO4 )。以SiO2 層析進行純化(以50-100% EtOAc/己烷類洗提)，得到黃色固體。將其與甲苯一起研製(triturated)，收集固體，得到標題化合物(2.4 g，44%)。MS：m/z = 315 (M+H+ )+ 。
以相似於製備例30~33所述之方式製備下列化合物：
1-乙醯基-6-(2,4-二氟-苯甲基)-3,3-二甲基-1,2,3,4-四氫-吡咯並[3,2-b]吡啶-5-酮，MS：[M+H]+ = 333。
1-乙醯基-6-丁基-3,3-二甲基-1,2,3,4-四氫-吡咯並[3,2-b]吡啶-5-酮，MS：[M+H]+ = 263。
製備例34：1-乙醯基-6-(4-氟-苯甲基)-3,3,4-三甲基-1,2,3,4-四氫-吡咯並[3,2-b]吡啶-5-酮(1-Acetyl-6-(4-fluoro-benzyl)-3,3,4-trimethyl-1,2,3,4-tetrahydro-pyrrolo[3,2-b]pyridin-5-one)
在約0o C下於1-乙醯基-6-(4-氟-苯甲基)-3,3-二甲基-1,2,3,4-四氫-吡咯並[3,2-b]吡啶-5-酮(其可如製備例33所述而製備) (3.1 g，9.9毫莫耳)及K2 CO3 (2.7 g，20毫莫耳)於DMF (30 mL)中之混合物中添加碘甲烷(0.74 mL，11.9毫莫耳)。將混合物於室溫攪拌5小時，然後使混合物於EtOAc與水之間進行分配。以鹽水清洗EtOAc層，及乾燥(MgSO4 )。以SiO2 層析純化(使用0-10% MeOH/EtOAc洗提)，得到標題化合物(960 mg，29%)，為無色結晶固體。MS：[M + H]+ = 329。
製備例35：6-(4-氟-苯甲基)-3,3,4-三甲基-1,2,3,4-四氫-吡咯並[3,2-b]吡啶-5-酮(6-(4-Fluoro-benzyl)-3,3,4-trimethyl-1,2,3,4-tetrahydro-pyrrolo[3,2-b]pyridin-5-one)
將1-乙醯基-6-(4-氟-苯甲基)-3,3,4-三甲基-1,2,3,4-四氫-吡咯並[3,2-b]吡啶-5-酮 (其可如製備例34所述而製備) (960 mg，2.9毫莫耳)溶解於EtOH (10 mL)及5N HCl水溶液(10 mL)之混合物中，及在95o C及N2 氣下加熱1小時。然後使混合物冷卻，及真空濃縮。添加冰及濃NH3 水溶液，及以CH2 Cl2 萃取所得之水性混合物。將CH2 Cl2 溶液乾燥(MgSO4 )及蒸發，得到標題化合物，立即使用。MS：[M + H]+ = 287。
以相似於製備例30~35所述之方式製備下列化合物：
6-(2,4-二氟-苯甲基)-3,3,4-三甲基-1,2,3,4-四氫-吡咯並[3,2-b]吡啶-5-酮，MS：[M + H]+ = 269。
以相似於製備例35所述之方式製備下列化合物：
6-(4-氟-苯甲基)-3,3,-二甲基-1,2,3,4-四氫-吡咯並[3,2-b]吡啶-5-酮，MS：[M + H]+ = 273。
6-丁基-3,3-二甲基-1,2,3,4-四氫-吡咯並[3,2-b]吡啶-5-酮，MS：[M+H]+ = 221。
6-[(2,4-二氟苯基)甲基]-3,3-二甲基-5-側氧基-1H,2H,3H,4H,5H-吡咯並[3,2-b]吡啶，MS：[M+H]+ = 291.
製備例36：6-(2-氟-苯甲基)-3,3,4-三甲基-5-側氧基-2,3,4,5-四氫-吡咯並[3,2-b]吡啶-1-羧酸第三丁酯(6-(2-Fluoro-benzyl)-3,3,4-trimethyl-5-oxo-2,3,4,5-tetrahydro-pyrrolo[3,2-b]pyridine-1-carboxylic acid tert-butyl ester)
使用相似於製備例34所述之方法由6-[(2-氟苯基)甲基]-3,3-二甲基-5-側氧基-1H,2H,3H,4H,5H-吡咯並[3,2-b]吡啶-1-羧酸第三丁酯製備。MS：[M + H]+ = 387。
製備例37：6-(2-氟-苯甲基)-3,3,4-三甲基-1,2,3,4-四氫-吡咯並[3,2-b]吡啶-5-酮(6-(2-Fluoro-benzyl)-3,3,4-trimethyl-1,2,3,4-tetrahydro-pyrrolo[3,2-b]pyridin-5-one)
使用相似於製備例34所述之方法由6-(2-fluoro-benzyl)-3,3,4-三甲基-5-側氧基-2,3,4,5-四氫-吡咯並[3,2-b]吡啶-1-羧酸第三丁酯 (其可如製備例36所述而製備)製備。MS：[M + H]+ = 287。
製備例38：1-[6-(4-氟-苯甲基)-3,3-二甲基-5-乙烯基-2,3-二氫-吡咯並[3,2-b]吡啶-1-基]-乙酮(1-[6-(4-Fluoro-benzyl)-3,3-dimethyl-5-vinyl-2,3-dihydro-pyrrolo[3,2-b]pyridin-1-yl]-ethanone)
將1-[5-溴-6-(4-氟-苯甲基)-3,3-二甲基-2,3-二氫-吡咯並[3,2-b]吡啶-1-基]-乙酮(其可如製備例25A所述而製備) (7.64 g，20.27毫莫耳)、第三丁基乙烯基錫(tributylvinyltin) (6.22 mL，21.28毫莫耳)及雙(三第三丁基膦)鈀(0) (bis(tri-tert-butylphosphine)palladium(0)) (0.104 g，0.20毫莫耳)溶解於甲苯(39 mL)中。使用氮脫氣後，將反應加熱至85o C持續2小時。將反應混合物真空濃縮，及以矽膠管柱層析(column chromatography on silica gel)純化粗產物，(梯度洗提，0-100%，乙酸乙酯/petrol 40-60o C)，得到標題化合物(3.64 g)。MS：[M+H]+ = 325。
製備例39：(RS)-1-[5-(1,2-二羥基-乙基)-6-(4-氟-苯甲基)-3,3-二甲基-2,3-二氫-吡咯並[3,2-b]吡啶-1-基]-乙酮((RS)-1-[5-(1,2-Dihydroxy-ethyl)-6-(4-fluoro-benzyl)-3,3-dimethyl-2,3-dihydro-pyrrolo[3,2-b]pyridin-1-yl]-ethanone)
於1-[6-(4-氟-苯甲基)-3,3-二甲基-5-乙烯基-2,3-二氫-吡咯並[3,2-b]吡啶-1-基]- 乙酮(其可如製備例38所述而製備) (3.64 g，11.23毫莫耳)置於丙酮(76 mL)及水 (8.5 mL)中之混合物中添加氫氧化鈉水溶液(2.5 M，13.48 mL，11.23毫莫耳)，及使反應冷卻至0o C (冰浴)。添加過錳酸鉀(1.78 g，11.23莫耳)至反應中，及攪拌持續1小時。使反應升溫至室溫，及攪拌持續20小時。再添加另外的過錳酸鉀(1.77 g，33.7毫莫耳)，及將反應通過矽藻土過濾後，使用丙酮和水清洗。將濾液濃縮，得到水性混合物，使用乙酸乙酯(3x)萃取。將有機層混合一起，使用硫酸鈉乾燥，過濾，及真空濃縮。以矽膠管柱層析純化粗產物，(梯度洗提，0-100%，乙酸乙酯/petrol 40-60o C)，得到標題化合物(1.5 g)。MS：[M+H]+ = 359。
掌性純化(Chiral purification)
將(RS)-1-[5-(1,2-二羥基-乙基)-6-(4-氟-苯甲基)-3,3-二甲基-2,3-二氫-吡咯並[3,2-b]吡啶-1-基]-乙酮(其可如製備例39所述而製備) (1.5 g)以掌性(chiral)製備型(preparative) HPLC (ChiralPAK AD-H，庚烷/乙醇)純化，得到39A (R或S)-1-[5-(1,2-二羥基-乙基)-6-(4-氟-苯甲基)-3,3-二甲基-2,3-二氫-吡咯並[3,2-b]吡啶-1-基]-乙酮(快流出的異構物) (0.5 g)及38B (R或S)-1-[5-(1,2-二羥基-乙基)-6-(4-氟-苯甲基)-3,3-二甲基-2,3-二氫-吡咯並[3,2-b]吡啶-1-基]-乙酮(慢流出的異構物) (0.6 g)。
製備例40：(RS)-1-[6-(4-氟-苯甲基)-3,3-二甲基-2,3-二氫-1H-吡咯並[3,2-b]吡啶-5-基]-乙-1,2-二醇((RS)-1-[6-(4-Fluoro-benzyl)-3,3-dimethyl-2,3-dihydro-1H-pyrrolo[3,2-b]pyridin-5-yl]-ethane-1,2-diol)
將(RS)-1-[5-(1,2-二羥基-乙基)-6-(4-氟-苯甲基)-3,3-二甲基-2,3-二氫-吡咯並[3,2-b]吡啶-1-基]-乙酮(其可如製備例39所述而製備) (0.250 mg, 0.70毫莫耳) 溶解於乙醇(4.37 mL)及水(4.37 mL)中。添加氫氧化鈉(0.447 g，11.2毫莫耳)，及將反應加熱回流持續4小時。在冷卻至室溫後，將反應混合物濃縮。添加水，使用乙酸乙酯(3x)萃取水相。將有機萃取液混合一起，以硫酸鈉乾燥，過濾及濃縮，得到標題化合物(171 mg)。MS：[M+H]+ = 317。
以相似於製備例40所述之方式製備下列化合物：
40A：(R或S)-1-[6-(4-氟-苯甲基)-3,3-二甲基-2,3-二氫-1H-吡咯並[3,2-b]吡啶-5-基]-乙-1,2-二醇，得自較慢洗提的異構物(from slower eluting isomer) 39B。MS：[M+H]+ = 317。
40B：(R或S)-1-[6-(4-氟-苯甲基)-3,3-二甲基-2,3-二氫-1H-吡咯並[3,2-b]吡啶-5-基]-2-甲氧基-乙醇，得自較快洗提的先驅物，MS：[M+H]+ = 331。
40C：(R或S)-1-[6-(4-氟-苯甲基)-3,3-二甲基-2,3-二氫-1H-吡咯並[3,2-b]吡啶-5-基]-2-甲氧基-乙醇，得自較慢洗提的先驅物，MS：[M+H]+ = 331。
40D：(R或S)-2-[6-(4-氟-苯甲基)-3,3-二甲基-2,3-二氫-1H-吡咯並[3,2-b]吡啶-5-基]-2-甲氧基-乙醇，得自較快洗提的先驅物，MS：[M+H]+ = 331。
40E：(R或S)-2-[6-(4-氟-苯甲基)-3,3-二甲基-2,3-二氫-1H-吡咯並[3,2-b]吡啶-5-基]-2-甲氧基-乙醇(得自較慢洗提的先驅物)，MS：[M+H]+ = 331。
製備例41：(RS)-甲磺酸2-[1-乙醯基-6-(4-氟-苯甲基)-3,3-二甲基-2,3-二氫-1H-吡咯並[3,2-b]吡啶-5-基]-2-羥基-乙酯((RS)-Methanesulfonic acid 2-[1-acetyl-6-(4-fluoro-benzyl)-3,3-dimethyl-2,3-dihydro-1H-pyrrolo[3,2-b]pyridin-5-yl]-2-hydroxy-ethyl ester)
於冷至0o C之(RS)-1-[5-(1,2-二羥基-乙基)-6-(4-氟-苯甲基)-3,3-二甲基-2,3-二氫-吡咯並[3,2-b]吡啶-1-基]-乙酮(其可如製備例39所述而製備) (1.48 g，4.13莫耳)於二氯甲烷(20.7 mL)的混合物中添加三乙胺(0.502 g，4.96毫莫耳)及甲烷磺醯氯(0.34 mL，4.34毫莫耳)。將反應加溫至室溫，及攪拌2小時。將反應混合物倒入水中，以DCM (3x)萃取。將有機萃取液混合一起，以硫酸鈉乾燥，過濾及真空濃縮。以矽膠管柱層析純化粗產物，(梯度洗提，0-100%，乙酸乙酯/petrol 40-60o C)，得到標題化合物(1.25 g) MS：[M+H]+ = 437。
製備例42：1-[6-(4-氟-苯甲基)-5-(1-羥基-2-甲氧基-乙基)-3,3-二甲基-2,3-二氫-吡咯並[3,2-b]吡啶-1-基]-乙酮(1-[6-(4-Fluoro-benzyl)-5-(1-hydroxy-2-methoxy-ethyl)-3,3-dimethyl-2,3-dihydro-pyrrolo[3,2-b]pyridin-1-yl]-ethanone) (42A)及1-[6-(4-氟-苯甲基)-5-(2-羥基-1-甲氧基-乙基)-3,3-二甲基-2,3-二氫-吡咯並[3,2-b]吡啶-1-基]-乙酮(1-[6-(4-fluoro-benzyl)-5-(2-hydroxy-1-methoxy-ethyl)-3,3-dimethyl-2,3-dihydro-pyrrolo[3,2-b]pyridin-1-yl]-ethanone) (42B)
於(RS)-甲磺酸2-[1-乙醯基-6-(4-氟-苯甲基)-3,3-二甲基-2,3-二氫-1H-吡咯並[3,2-b]吡啶-5-基]-2-羥基-乙酯(其可如製備例41所述而製備) (1.24 g，2.84毫莫耳)於甲醇(9.48 mL)中之混合物中添加甲醇鈉(sodium methoxide) (25%)於甲醇(1.23 mL，5.69毫莫耳)中之混合物。攪拌6小時後，再添加另外的甲醇鈉(25%)於甲醇(1.23 mL)中之混合物。將混合物攪拌18小時，然後添加甲醇鈉(25%)於甲醇(1.23 mL)中之混合物。再攪拌22小時，添加水，及以乙酸乙酯(3x)萃取反應混合物。將有機萃取液混合一起真空濃縮，及以矽膠管柱層析純化粗產物，(梯度洗提，0-100%，乙酸乙酯/petrol 40-60o C)，個別得到二標題化合物，為外消旋混合物(racemic mixtures)。如下進行掌性HPLC分離：
42A：ADH管柱，80/20庚烷/乙醇，0.2% DEA，得到較快洗提的42A1及較慢洗提的42A2。
42B：LUX-2管柱，80/20庚烷/乙醇，0.2% DEA，得到較快洗提的42B1 [1H NMR (400 MHz, Me-d3-OD)：8.18 (1H, s), 7.19 (2H, dd), 7.03 (2H, t), 4.66 (1H, dd), 4.21-4.05 (2H, m), 4.05-3.82 (3H, m), 3.63 (1H, dd), 3.13 (3H, s), 2.24 (3H, s), 1.42 (6H, s)]及較慢洗提的42B2。
製備例43：(6-甲氧基-4-甲基-吡啶-3-基)-胺甲酸第三丁酯((6-Methoxy-4-methyl-pyridin-3-yl)-carbamic acid tert-butyl ester)
於5-胺基-2-甲氧基-4-甲吡啶(5-amino-2-methoxy-4-picoline) (5.0 g，36.2毫莫耳)於THF (80 mL)及飽和Na2 CO3 水溶液(20 mL)之溶液中添加二第三丁基二碳酸酯(di-tert-butyl-dicarbonate) (7.9 g，36.2毫莫耳)，及將反應混合物攪拌隔夜。將反應混合物濃縮，以DCM萃取，以鹽水清洗，乾燥，過濾，及使溶劑蒸發，得到標題化合物(8.8 g)。MS：[M+H]+ = 239。
製備例44：(5-第三丁氧羰基胺基-2-甲氧基-吡啶-4-基)-乙酸((5-tert-Butoxycarbonylamino-2-methoxy-pyridin-4-yl)-acetic acid)
在-78o C下，將(6-甲氧基-4-甲基-吡啶-3-基)-胺甲酸第三丁酯(其可如製備例43所述而製備) (2.8 g，11.9毫莫耳)溶於THF (100 mL)中，添加第二丁基鋰(1.4 M，於環己烷中，28 mL，39.3毫莫耳)。將反應混合物攪拌10分鐘，然後經由插管通入CO2 氣泡1小時(1 h)。等待反應混合物升溫至室溫，使用2N HCl使驟冷。使用1 N NaOH將pH調整至pH=4，及以EtOAc萃取產物。以鹽水清洗有機層，乾燥，過濾，及使溶劑蒸發，得到標題化合物(4.4 g)。MS：[M+H]+ = 283。
製備例45：5-甲氧基-2-側氧基-2,3-二氫-吡咯並[2,3-c]吡啶-1-羧酸第三丁酯(5-Methoxy-2-oxo-2,3-dihydro-pyrrolo[2,3-c]pyridine-1-carboxylic acid tert-butyl ester)
將(5-第三丁氧羰基胺基-2-甲氧基-吡啶-4-基)-乙酸(其可如製備例44所述而製備) (3.4 g，11.9毫莫耳)、二異丙基-乙基-胺(4.6 mL、26.18毫莫耳)、EDC (2.5 g，13.09毫莫耳)及HOAt (1.78 g，13.09毫莫耳)於DCM (50 mL)中之混合物攪拌3小時。將反應混合物使用飽和NaHCO3 水溶液、水、鹽水清洗，然後乾燥，過濾，及使溶劑蒸發。使用矽氧層析將粗產物純化，其以petrol – EtOAc 0-50%洗提，得到標題化合物(2.2 g)。MS：[M+H]+ = 265。
製備例46：5-甲氧基-3,3-二甲基-2-側氧基-2,3-二氫-吡咯並[2,3-c]吡啶-1-羧酸第三丁酯(5-Methoxy-3,3-dimethyl-2-oxo-2,3-dihydro-pyrrolo[2,3-c]pyridine-1-carboxylic acid tert-butyl ester)
將5-甲氧基-2-側氧基-2,3-二氫-吡咯並[2,3-c]吡啶-1-羧酸第三丁酯 (其可如製備例45所述而製備) (1.94 g，7.35毫莫耳)、K2 CO3 (2.33 g，18.57毫莫耳)及碘甲烷(1.14 mL，18.57毫莫耳)於丙酮(25 mL)中之混合物加熱回流3小時。使反應混合物冷卻，使溶劑蒸發，使殘留物於水與DCM之間進行分配。將有機相乾燥、過濾、及使溶劑蒸發。使用矽氧層析將粗產物純化，其以petrol – EtOAc 0-20%洗提，得到標題化合物(1.47 g)。MS：[M+H]+ = 293。
製備例47：6-(4-氟-苯甲基)-3,3-二甲基-2,5-二側氧基-2,3,5,6-四氫-吡咯並[2,3-c]吡啶-1-羧酸第三丁酯(6-(4-Fluoro-benzyl)-3,3-dimethyl-2,5-dioxo-2,3,5,6-tetrahydro-pyrrolo[2,3-c]pyridine-1-carboxylic acid tert-butyl ester)
將5-甲氧基-3,3-二甲基-2-側氧基-2,3-二氫-吡咯並[2,3-c]吡啶-1-羧酸第三丁酯(其可如製備例46所述而製備) (1.43 g，4.9毫莫耳)、NaI (1.47 g，9.8毫莫耳)及4-氟苯甲基溴(4-fluorobenzyl bromide) (0.67 mL，5.4毫莫耳)於乙腈(50 mL)中之混合物加熱回流5小時，於室溫攪拌隔夜，及再加熱回流又6小時。使反應混合物冷卻，倒入10% Na2 S2 O3 水溶液中，以DCM萃取，將有機相乾燥，過濾，及使溶劑蒸發。使用矽氧層析將粗產物純化，其使用petrol – EtOAc 0-100%洗提，得到標題化合物(910 mg)。MS：[M+H]+ = 387。
以類似於製備例47所述之步驟製備下列化合物：
47A：6-(2,4-二氟-苯甲基)-3,3-二甲基-2,5-二側氧基-2,3,5,6-四氫-吡咯並[2,3-c]吡啶-1-羧酸第三丁酯。MS：[M+H]+ = 405。
製備例48：6-(4-氟-苯甲基)-3,3-二甲基-1,6-二氫-3H-吡咯並[2,3-c]吡啶-2,5-二酮(6-(4-Fluoro-benzyl)-3,3-dimethyl-1,6-dihydro-3H-pyrrolo[2,3-c]pyridine-2,5-dione)
將6-(4-氟-苯甲基)-3,3-二甲基-2,5-二側氧基-2,3,5,6-四氫-吡咯並[2,3-c]吡啶-1-羧酸第三丁酯(其可如製備例47所述而製備) (910 mg，2.36毫莫耳)於TFA (5 mL)及DCM (5 mL)中之溶液攪拌1小時。使溶劑蒸發，使殘留物於DCM與飽和NaHCO3 水溶液之間進行分配，將有機相乾燥，使溶劑蒸發，得到標題化合物(0.67 g)。MS：[M+H]+ = 287。
製備例49：6-(4-氟-苯甲基)-3,3-二甲基-1,2,3,6-四氫-吡咯並[2,3-c]吡啶-5-酮(6-(4-氟-苯甲基)-3,3-dimethyl-1,2,3,6-tetrahydro-pyrrolo[2,3-c]pyridin-5-one)
於6-(4-氟-苯甲基)-3,3-二甲基-1,6-二氫-3H-吡咯並[2,3-c]吡啶-2,5-二酮(其可如製備例48所述而製備) (526 mg, 1.84毫莫耳)溶於THF (30 mL)之溶液中添加BH3 .Me2 S溶液(2M，9.7 mL，18.4毫莫耳)，及將混合物加熱回流3小時。冷卻，小心添加MeOH (10 mL)，加熱回流2小時。使溶劑蒸發，使殘留物於DCM與飽和NaHCO3 水溶液之間進行分配。將有機相乾燥，過濾，及使溶劑蒸發，得到標題化合物(494 mg)。使用時不經純化。MS：[M+H]+ = 273。
以類似於製備例49所述之步驟製備下列化合物：
49A：6-(2,4-二氟-苯甲基)-3,3,4-三甲基-1,2,3,6-四氫-吡咯並[2,3-c]吡啶-5-酮，MS：[M+H]+ = 305。
以類似於製備例47~49所述之步驟製備下列化合物：
49B：6-(2,4-二氟-苯甲基)-3,3-二甲基-1,2,3,6-四氫-吡咯並[2,3-c]吡啶-5-酮，MS：[M+H]+ = 291。
製備例50：4-胺基-1-(2-氯-乙醯基)-6-(2,4-二氟-苯甲基)-3,3-二甲基-1,2,3,4-四氫-吡咯並[3,2-b]吡啶-5-酮(4-Amino-1-(2-chloro-acetyl)-6-(2,4-difluoro-benzyl)-3,3-dimethyl-1,2,3,4-tetrahydro-pyrrolo[3,2-b]pyridin-5-one)
於1-(2-氯-乙醯基)-6-(2,4-二氟-苯甲基)-3,3-二甲基-1,2,3,4-四氫-吡咯並[3,2-b]吡啶-5-酮(其可如製備例18D所述而製備) (117 mg, 0.32毫莫耳)溶於DMF (2 mL)之溶液中添加碳酸鉀(88 mg，0.64毫莫耳)及鄰-(2,4-二硝苯基)-羥基胺 (O-(2,4-dinitrophenyl)-hydroxylamine) (95 mg，0.48毫莫耳)。將所得之混合物於室溫攪拌2小時。添加1 M氫氧化鈉水溶液(5 mL)，及以EtOAc (2 x 10 mL)萃取混合物。以水清洗有機份(organic fractions)，以MgSO­4 乾燥，及濃縮。使用管柱層析將殘留物純化，以20~65% EtOAc於petrol中為洗提液，得到標題化合物(79 mg)，為橘色固體。MS：[M+H]+ = 382。
以類似於製備例50所述之步驟製備下列化合物：
50A：4-胺基-1-(2-氯-乙醯基)-6-(4-氟-苯甲基)-3,3-二甲基-1,2,3,4-四氫-吡咯並[3,2-b]吡啶-5-酮，MS：[M+H]+ = 364。
50B：4-胺基-1-(2-氯-乙醯基)-6-丁基-3,3-二甲基-1,2,3,4-四氫-吡咯並[3,2-b]吡啶-5-酮，MS：[M+H]+ = 312。
製備例51：4-溴-6-(2,4-二氟-苯甲基)-3,3-二甲基-2,5-二側氧基-2,3,5,6-四氫-吡咯並[2,3-c]吡啶-1-羧酸第三丁酯(4-Bromo-6-(2,4-difluoro-benzyl)-3,3-dimethyl-2,5-dioxo-2,3,5,6-tetrahydro-pyrrolo[2,3-c]pyridine-1-carboxylic acid tert-butyl ester)
添加N-溴琥珀醯亞胺(529 mg，2.97毫莫耳)至6-(2,4-二氟-苯甲基)-3,3-二甲基-2,5-二側氧基-2,3,5,6-四氫-吡咯並[2,3-c]吡啶-1-羧酸第三丁酯(其可如製備例47A所述而製備) (1.0 g，2.47毫莫耳)溶於DMF之溶液中。將溶液於60 °C下攪拌1.5小時。使反應混合物冷卻至室溫，添加水，及使用DCM (3x)萃取產物。收集有機相，以Na2 SO4 乾燥，過濾，及真空濃縮。以急速層析法(flash chromatography)純化殘留物，得到1.1 g之標題化合物，為黃色固體。MS：[M+H]+ = 484。
製備例52：6-(2,4-二氟-苯甲基)-3,3,4-三甲基-1,6-二氫-3H-吡咯並[2,3-c]吡啶-2,5-二酮(6-(2,4-Difluoro-benzyl)-3,3,4-trimethyl-1,6-dihydro-3H-pyrrolo[2,3-c]pyridine-2,5-dione)
將Me2 Zn之庚烷溶液(1M，5.8 mL，5.8毫莫耳)緩慢添加至4-溴-6-(2,4-二氟-苯甲基)-3,3-二甲基-2,5-二側氧基-2,3,5,6-四氫-吡咯並[2,3-c]吡啶-1-羧酸第三丁酯(其可如製備例51所述而製備) (935 mg，1.93毫莫耳)及Pd(dppf)2 Cl2 (282 mg，0.38毫莫耳)溶於二惡烷(10mL)之溶液中。將反應混合物於密封溶器內在70 °C及N2 下攪拌1小時。然後添加第二份(aliquot) Me2 Zn (5.8 mL，5.8毫莫耳)，及持續攪拌2小時。使反應混合物冷卻至室溫，以飽和NaHCO3 水溶液使其驟冷，及以DCM萃取。將有機相以Na2 SO4 乾燥，過濾，及真空濃縮。以急速層析法將粗產物純化，得到200 mg之標題化合物，為黃色半固體。MS：[M+H]+ = 319。
製備例53：5-甲氧基-3,3-二甲基-1,3-二氫-吡咯並[2,3-c]吡啶-2-酮(5-Methoxy-3,3-dimethyl-1,3-dihydro-pyrrolo[2,3-c]pyridin-2-one)
使用相似於製備例48所述之步驟，由5-甲氧基-3,3-二甲基-2-側氧基-2,3-二氫-吡咯並[2,3-c]吡啶-1-羧酸第三丁酯製備。MS：[M+H]+ = 193。
製備例54：5-甲氧基-3,3-二甲基-2,3-二氫-1H-吡咯並[2,3-c]吡啶(5-Methoxy-3,3-dimethyl-2,3-dihydro-1H-pyrrolo[2,3-c]pyridine)
於5-甲氧基-3,3-二甲基-1,3-二氫-吡咯並[2,3-c]吡啶-2-酮(其可如製備例53所述而製備) (2.8 g，14.6毫莫耳)溶於THF (60 mL)之溶液中添加BH3 .THF溶液(1M，150 mL，150毫莫耳)，及將混合物於室溫攪拌隔夜。小心添加MeOH (50 mL)，及加熱回流1小時。使溶劑蒸發，使殘留物於DCM與飽和NaHCO3 水溶液之間進行分配。將有機相乾燥，過濾，及使溶劑蒸發。使用矽氧層析將粗產物純化，其以petrol – EtOAc 0-60%洗提，得到標題化合物(2.27 g)。MS：[M+H]+ = 179。
製備例55：5-甲氧基-3,3-二甲基-2,3-二氫-吡咯並[2,3-c]吡啶-1-羧酸第三丁酯(5-Methoxy-3,3-dimethyl-2,3-dihydro-pyrrolo[2,3-c]pyridine-1-carboxylic acid tert-butyl ester)
於5-甲氧基-3,3-二甲基-2,3-二氫-1H-吡咯並[2,3-c]吡啶(其可如製備例54所述而製備) (534 mg , 3.0毫莫耳)溶於THF (10 mL)及飽和Na2 CO3 水溶液(4 mL)之溶液中添加二第三丁基二碳酸酯(780 mg，3.6毫莫耳)，及將反應混合物攪拌隔夜，然後以水稀釋，以EtOAc萃取，以鹽水清洗，乾燥，使溶劑蒸發，得到標題化合物(760 mg)。MS：[M+H]+ = 279。
製備例56：6-((E)-丁-2-烯基)-3,3-二甲基-5-側氧基-2,3,5,6-四氫-吡咯並[2,3-c]吡啶-1-羧酸第三丁酯(6-((E)-But-2-enyl)-3,3-dimethyl-5-oxo-2,3,5,6-tetrahydro-pyrrolo[2,3-c]pyridine-1-carboxylic acid tert-butyl ester)
將5-甲氧基-3,3-二甲基-2,3-二氫-吡咯並[2,3-c]吡啶-1-羧酸第三丁酯(其可如製備例55所述而製備) (760 mg，2.7毫莫耳)、NaI (410 mg，2.7毫莫耳)、及巴豆基溴(crotyl bromide) (0.33 mL，3.24毫莫耳)於乙腈(25 mL)中之混合物加熱回流5小時。使反應混合物冷卻，倒於10% Na2 S2 O3 上(on 10% Na2 S2 O3 )，以DCM萃取，將有機相乾燥，過濾，及使溶劑蒸發。使用矽氧層析將粗產物純化，其以petrol – EtOAc 0-70%洗提，得到標題化合物(433 mg)。MS：[M+H]+ = 319。
製備例57：6-丁基-3,3-二甲基-5-側氧基-2,3,5,6-四氫-吡咯並[2,3-c]吡啶-1-羧酸第三丁酯(6-Butyl-3,3-dimethyl-5-oxo-2,3,5,6-tetrahydro-pyrrolo[2,3-c]pyridine-1-carboxylic acid tert-butyl ester)
將6-((E)-丁-2-烯基)-3,3-二甲基-5-側氧基-2,3,5,6-四氫-吡咯並[2,3-c]吡啶-1-羧酸第三丁酯(其可如製備例56所述而製備) (433 mg，1.36毫莫耳)及Pd/C (10%，100 mg)於EtOH (15 mL)中之混合物進行氫化1小時。將催化劑過濾，將濾液蒸發，及使用矽氧層析將殘留物純化，其以petrol – EtOAc 0-50%洗提，得到標題化合物(387 mg)。MS：[M+H]+ = 321。
製備例58：6-丁基-3,3-二甲基-1,2,3,6-四氫-吡咯並[2,3-c]吡啶-5-酮(6-Butyl-3,3-dimethyl-1,2,3,6-tetrahydro-pyrrolo[2,3-c]pyridin-5-one)
將6-丁基-3,3-二甲基-5-側氧基-2,3,5,6-四氫-吡咯並[2,3-c]吡啶-1-羧酸第三丁酯(380 mg，1.19毫莫耳)溶於TFA (5 mL)及DCM (5 mL)之溶液攪拌1小時。使溶劑蒸發，使殘留物於DCM與飽和NaHCO3 水溶液之間進行分配，將有機相乾燥，使溶劑蒸發，及使用矽氧層析將殘留物純化，其以petrol – EtOAc 0-100%洗提，得到標題化合物(170 mg)。MS：[M+H]+ = 221。
實例1~37
下述步驟說明下表中所列之實例1~37之製備。
將(2R,5S)-4-(2-{6-[(4-氟苯基)甲基]-5-(羥甲基)-3,3-二甲基-1H,2H,3H-吡咯並[3,2-b]吡啶-1-基}-2-側氧基乙基)-2-甲基-5-{[(3R)-3-甲基嗎啉-4-基]甲基}哌嗪-1-羧酸第三丁酯(tert-butyl (2R,5S)-4-(2-{6-[(4-fluorophenyl)methyl]-5-(hydroxymethyl)-3,3-dimethyl-1H,2H,3H-pyrrolo[3,2-b]pyridin-1-yl}-2-oxoethyl)-2-methyl-5-{[(3R)-3-methylmorpholin-4-yl]methyl}piperazine-1-carboxylate) (0.47 g)、乙酸乙酯(10 mL)、及HCl –二惡烷(dioxane) (4 M；10 mL)之混合物在20o C下攪拌18小時，過濾收集所得之固體，得到1-{6-[(4-氟苯基)甲基]-5-(羥甲基)-3,3-二甲基-1H,2H,3H-吡咯並[3,2-b]吡啶-1-基}-2-[(2R,5R)-5-甲基-2-{[(3R)-3-甲基嗎啉-4-基]甲基}哌嗪-1-基]乙-1-酮二氫氯酸鹽(實例2，0.43 g)。
藉由相似及/或類似於上述之方法，由對應的經N-Boc保護的衍生物製備下表中所列之化合物，並於下說明任何的顯著變化。於下表中標示(藉由製備號碼或名稱)經N-Boc保護的衍生物的先驅物。標題化合物係直接分離為自由鹼或是適當的鹽而無進一步純化，或者是，例如使用質量-導向的製備型HPLC、結晶、或研製(trituration)而經純化。
1H NMR係於400 MHz所產生，且於Me-d3-OD中，除非另有說明。
實例38：1-{6-[(4-氟苯基)甲基]-5-(羥甲基)-3,3-二甲基-1H,2H,3H-吡咯並[3,2-b]吡啶-1-基}-2-[(2R,5R)-5-甲基-2-{[(3R)-3-甲基嗎啉-4-基]甲基}哌嗪-1-基]乙-1-酮(1-{6-[(4-Fluorophenyl)methyl]-5-(hydroxymethyl)-3,3-dimethyl-1H,2H,3H-pyrrolo[3,2-b]pyridin-1-yl}-2-[(2R,5R)-5-methyl-2-{[(3R)-3-methylmorpholin-4-yl]methyl}piperazin-1-yl]ethan-1-one)(自由鹼(Free Base))
將1-{6-[(4-氟苯基)甲基]-5-(羥甲基)-3,3-二甲基-1H,2H,3H-吡咯並[3,2-b]吡啶-1-基}-2-[(2R,5R)-5-甲基-2-{[(3R)-3-甲基嗎啉-4-基]甲基}哌嗪-1-基]乙-1-酮二氫氯酸鹽(1.00g，1.0當量(eq.)，1.00 wt.) (其可如實例2所述而製備)進料至RB燒瓶，溶解於水(10.0 mL，10.0 vol，10.00 wt.)，及於氮氣下及18至23°C下攪拌，得到秸稈色(straw coloured)溶液(pH = 4.73，T = 19.3°C)。添加乙酸乙酯(10.0 mL，10.0 vol)至水溶液中，及於18至23°C下攪拌此二相混合物5分鐘。將層分離，及將水層(pH = 4.58，19.6°C)倒回燒瓶中。(謹慎的)添加碳酸氫鈉(388.2mg，3 x 1.05 eq.，0.4 wt.)，可觀察到冒泡(effervescence)。將混合物攪拌20分鐘(pH = 7.51，18.2°C)，添加二氯甲烷(5.0 mL，5.0 vol)，及於相同條件下再攪拌混合物5分鐘。將層分離，保留二氯甲烷層，將水層(pH = 7.66，T = 17.7°C)倒回燒瓶。使用二氯甲烷(2 x 5.0 mL，2 x 5.0 vol)再進行二次萃取(pH = 8.25，T = 18.5°C & pH = 8.47，T = 18.3°C)，將有機層混合一起以硫酸鈉(1.0g，1.0wt.)乾燥，過濾，及於減壓40°C (400毫巴(mbar))下濃縮至乾燥。然後將濃縮物於40°C (＜20毫巴)下乾燥2小時，得到白色發泡物(white foam) (850.2mg，102%th.，100% corr. 輸入及輸出w/w化驗)，94.3% w/w osfb (針對TCNB)，其含有乙酸乙酯(3.4% w/w)及二氯甲烷(0.8% w/w)。
實例39：1-{6-[(4-氟苯基)甲基]-5-(羥甲基)-3,3-二甲基-1H,2H,3H-吡咯並[3,2-b]吡啶-1-基}-2-[(2R,5R)-5-甲基-2-{[(3R)-3-甲基嗎啉-4-基]甲基}哌嗪-1-基]乙-1-酮 L-(+)-乳酸鹽(形式A)
將1-{6-[(4-氟苯基)甲基]-5-(羥甲基)-3,3-二甲基-1H,2H,3H-吡咯並[3,2-b]吡啶-1-基}-2-[(2R,5R)-5-甲基-2-{[(3R)-3-甲基嗎啉-4-基]甲基}哌嗪-1-基]乙-1-酮(500.0mg，1.0 wt) (其可如實例38所述而製備)之自由鹼進料至25 mL容器中，及溶解於乙醇(1.0 mL，2.0 vol)中。添加L-(+)-乳酸(106.2mg，1.0 eq)，及於18至23°C下攪拌容器的內容物1小時，得到黃色溶液。此時之後，將TBME (9.0 mL，18.0 vol)進料至容器，及於18至23°C下繼續攪拌混合物。以XRPD監測鹽結晶之進展。於18至23°C下攪拌16小時後，溶液中留有乳酸鹽。此時之後，將溶液濃縮至原始體積的大約¼，添加TBME (9.0 mL，18.0 vol)，得到膠彈固體(gummy solid)及澄清液(clear supernatant)，其在音波振動處理及進一步攪拌(在18至 23°C下大約20小時)後，變成微細顆粒的懸浮液。過濾以分離固體，在氮氣流下乾燥，得到365 mg白色固體，以XRPD鑑定為形式B。將固體以烘箱於40至45°C下乾燥67小時，得到白色固體(325mg，56%th.)，98.8% w/w oasfb (針對TCNB)，其含有TBME (1.0% w/w)及水(0.6% w/w)，經XRPD測定顯示為形式A。實例39的詳細特徵資料(1 H NMR、XRPD及DSC)示於圖1~3。
實例40：1-{6-[(4-氟苯基)甲基]-5-(羥甲基)-3,3-二甲基-1H,2H,3H-吡咯並[3,2-b]吡啶-1-基}-2-[(2R,5R)-5-甲基-2-{[(3R)-3-甲基嗎啉-4-基]甲基}哌嗪-1-基]乙-1-酮 L-(+)-乳酸鹽(形式B)
依據實例39所述之步驟進行反應，但不用烘箱乾燥，得到白色固體 (529.1mg，90%th.)，96.1% w/w oasfb (針對TCNB)，其含有TBME (5.9% w/w)及水(3.8% w/w)，及經XRPD測定顯示為形式B。亦可對於實例40使用的另一種步驟，以避免使用乙醇。實例40的詳細特徵資料(1 H NMR、XRPD及DSC)示於圖4~6。
實例41：1-{6-[(4-氟苯基)甲基]-5-(羥甲基)-3,3-二甲基-1H,2H,3H-吡咯並[3,2-b]吡啶-1-基}-2-[(2R,5R)-5-甲基-2-{[(3R)-3-甲基嗎啉-4-基]甲基}哌嗪-1-基]乙-1-酮硫酸鹽 (形式F)
將1-{6-[(4-氟苯基)甲基]-5-(羥甲基)-3,3-二甲基-1H,2H,3H-吡咯並[3,2-b]吡啶-1-基}-2-[(2R,5R)-5-甲基-2-{[(3R)-3-甲基嗎啉-4-基]甲基}哌嗪-1-基]乙-1-酮(500.0mg，1.0 wt) (其可如實例38所述而製備)之自由鹼裝料至10 mL容器，及溶解於乙醇(1.0 mL，2.0 vol)中。於18至23°C下以及在攪拌下，以10分鐘的時間添加硫酸(103.2mg，1.0 eq.)於乙醇 (4.0 mL，8.0 vol)中之溶液，得到透明膠狀物(clear gel)。在相同溫度下攪拌容器的內容物1小時，在此期間膠狀物溶解，得到黃色溶液。持續攪拌16小時，產生白色懸浮液。以XRPD監測鹽結晶的進展。然後添加乙醇(2.0 mL，4.0 vol)以使懸浮液可適當的鬆動(mobilise)，及過濾分離產物，在氮氣流下乾燥，得到白色固體 (465.2mg，79%th.)，94.9% w/w oasfb (針對TCNB)，其含有乙醇(2.9% w/w)及水(3.6% w/w)，經XRPD測定顯示為形式F。實例41的詳細特徵資料(1 H NMR、XRPD及DSC)示於圖7~9。
實例42：1-{6-[(4-氟苯基)甲基]-5-(羥甲基)-3,3-二甲基-1H,2H,3H-吡咯並[3,2-b]吡啶-1-基}-2-[(2R,5R)-5-甲基-2-{[(3R)-3-甲基嗎啉-4-基]甲基}哌嗪-1-基]乙-1-酮甲磺酸鹽(形式B)
將1-{6-[(4-氟苯基)甲基]-5-(羥甲基)-3,3-二甲基-1H,2H,3H-吡咯並[3,2-b]吡啶-1-基}-2-[(2R,5R)-5-甲基-2-{[(3R)-3-甲基嗎啉-4-基]甲基}哌嗪-1-基]乙-1-酮(500.0mg，1.0 wt) (其可如實例38所述而製備)之自由鹼裝料至25 mL容器中，及溶於2-丙醇(2.5 mL，5.0 vol)中。添加甲磺酸(276.0mg，3.0 eq.) (觀察到少量放熱)，及於18至23°C下攪拌所得之油狀-膠彈(gummy)混合物。以10分鐘時間緩慢添加正庚烷(10.0 mL，20.0 vol)，得到白色懸浮液及少量膠彈固體(gummy solid)。以XRPD監測鹽結晶的進展。在溫和條件下(於18至23°C下攪拌3天)該鹽並未結晶，因此將溫度增加到40至45°C，得到黏的膠彈固體(sticky gummy solid)及澄清液(clear supernatant)。將此混合物冷卻到18至23°C，以刮勺使其鬆動(mobilise)，並音波振動處理20分鐘，得到白色懸浮液，其含有一些膠彈固體(gummy solid)。在相同溫度下攪拌懸浮液20小時，過濾，及在氮氣流下乾燥，得到米色固體(beige solid) (402.9mg，63%th.)，99.0% w/w oasfb (針對TCNB)，其含有2-丙醇(2.3% w/w)、正庚烷(0.2% w/w)、水(1.9% w/w)，經XRPD測定顯示為形式B。實例42的詳細特徵資料(1 H NMR、XRPD及DSC)示於圖10~12。
實例43：1-{6-[(4-氟苯基)甲基]-5-(羥甲基)-3,3-二甲基-1H,2H,3H-吡咯並[3,2-b]吡啶-1-基}-2-[(2R,5R)-5-甲基-2-{[(3R)-3-甲基嗎啉-4-基]甲基}哌嗪-1-基]乙-1-酮 L-(+)-乳酸鹽 (形式C)
第一批次
1-{6-[(4-氟苯基)甲基]-5-(羥甲基)-3,3-二甲基-1H,2H,3H-吡咯並[3,2-b]吡啶-1-基}-2-[(2R,5R)-5-甲基-2-{[(3R)-3-甲基嗎啉-4-基]甲基}哌嗪-1-基]乙-1-酮 (10.0g, corr.) (其可如實例38所述而製備)之自由鹼溶解於乙酸異丙酯(80.0mL，8.0vol)，得到淺黃色溶液。將固態、無水L-(+)-乳酸(1.67g，1.0eq.)以一份之方式裝料至同一燒瓶中，於燒瓶底部明顯看到少量膠彈體(gum)。然後將混合物快速攪拌以使膠彈體鬆動(mobilise)，混合物自發性成核，而固體沉澱。以XRPD分析固體沉澱物的樣品，其與形式B一致。添加正庚烷(12.0vol)，於氮氣下40°C下攪拌混合物4天，顯示混合物會轉變成形式C，以XRPD監測其進展(圖13)。將混合物溫度提高至55°C，及持續攪拌24小時以完成轉換(圖14)。過濾分離產物(快速＜0.5分鐘)，以乙酸異丙酯/正丁烷(2.0/3.0，v/v，5.0vol)清洗，及在氮氣流下乾燥20小時，得到標題化合物，為白色粉末(8.89g，79%th.)，91.6% w/w (osfb)，形式C，m.p. 172°C。
第二批次
將1-{6-[(4-氟苯基)甲基]-5-(羥甲基)-3,3-二甲基-1H,2H,3H-吡咯並[3,2-b]吡啶-1-基}-2-[(2R,5R)-5-甲基-2-{[(3R)-3-甲基嗎啉-4-基]甲基}哌嗪-1-基]乙-1-酮(10.0g，corr.)(其可如實例38所述而製備)之自由鹼溶解於乙酸異丙酯(60.0mL，6.0vol)中，得到淺黃色溶液。於其中添加無水L-(+)-乳酸(1.67g，1.0eq.)溶於乙酸異丙酯(10.0mL，1.0vol)之溶液。進行乙酸異丙酯(10.0mL，1.0vol)的線沖洗(line rinse)，於18~23℃下攪拌混合物，得到淺黃色溶液。
以40分鐘時間逐滴添加正庚烷(120mL，12.0vol)，而於燒瓶底上形成膠彈體(gum)。攪拌1小時40分鐘後，混合物外觀改善，但燒瓶底上仍出現膠彈體(gum)。
於18~23℃下攪拌混合物16小時，在此期間，膠彈體鬆動(mobilised)，形成顆粒狀微細的懸浮液。於氮氣下將懸浮液過濾(快速過濾)，及對濾餅取樣，及以XRPD分析(形式C)。以乙酸異丙酯/正庚烷(2.0/3.0，v/v，5.0vol)清洗濾餅，取樣，以XRPD分析(形式C)，在氮氣流下使濾餅留置過濾器上抽乾(pull dry)16小時。產物由略米白色(slightly off-white)的粉末狀固體(11.36g，91% corr.)所組成，形式C，94.3%w/w(oasfb)，形式C，m.p.172℃及含有乙酸異丙酯(1.0%ww)。
實例43的詳細特徵資料(1H NMR、XRPD及DSC)示於圖15~17。
實例44：1-{6-[(4-氟苯基)甲基]-5-(羥甲基)-3,3-二甲基-1H,2H,3H-吡咯並[3,2-b]吡啶-1-基}-2-[(2R,5R)-5-甲基-2-{[(3R)-3-甲基嗎啉-4-基]甲基}哌嗪-1-基]乙-1-酮L-(+)-乳酸鹽(形式C)
步驟1
於冷卻至<10℃之(2R,5S)-4-(2-{6-[(4-氟苯基)甲基]-5-(羥甲基)-3,3-二甲基-1H,2H,3H-吡咯並[3,2-b]吡啶-1-基}-2-側氧基乙基)-2-甲基-5-{[(3R)-3-甲基嗎啉-4-基]甲基}哌嗪-1-羧酸第三丁酯(1.0 wt) (其可如製備例19所述而製備)之甲醇(10 vol)溶液中，緩慢添加4M HCl之1,4-二惡烷(1,4-dioxane) (3 vol)溶液，接著進行甲醇(0.5 vol)之線沖洗(line rinse)。將混合物升溫到15至25°C，及於此溫度下攪拌至少12小時。然後將反應混合物升溫到30至40°C，及攪拌，直到反應以HPLC檢測為反應完全(一般＞ 2小時)。反應完全時，於高達40°C下將反應溶液濃縮至乾燥。將殘留物溶解於純化水(8 vol)中，及使用乙酸乙酯(2 x 4 vol)清洗。使用4M NaOH (依所需)將水相的pH調整至pH 12至13，之後以乙酸乙酯(3 x 5 vol)萃取。將有機相混合一起以氯化鈉溶液(5 vol)清洗，及以硫酸鎂(1.0 wt)至少10分鐘。過濾移除固體，及以乙酸乙酯(2 x 2 vol)清洗濾餅。將濾液於高達40°C下於旋轉蒸發器上濃縮，將所得之濃縮液溶解於乙酸甲酯(5 vol)中，及如上述將溶液濃縮，產生1-{6-[(4-氟苯基)甲基]-5-(羥甲基)-3,3-二甲基-1H,2H,3H-吡咯並[3,2-b]吡啶-1-基}-2-[(2R,5R)-5-甲基-2-{[(3R)-3-甲基嗎啉-4-基]甲基}哌嗪-1-基]乙-1-酮之自由鹼。
步驟2
於1-{6-[(4-氟苯基)甲基]-5-(羥甲基)-3,3-二甲基-1H,2H,3H-吡咯並[3,2-b]吡啶-1-基}-2-[(2R,5R)-5-甲基-2-{[(3R)-3-甲基嗎啉-4-基]甲基}哌嗪-1-基]乙-1-酮(1.0 wt) (其可如步驟1所述而製備)之自由鹼之乙酸甲酯(3 vol)溶液中，添加L-(+)-乳酸(0.085 wt)之乙酸甲酯(0.75 vol)溶液。然後加入1-{6-[(4-氟苯基)甲基]-5-(羥甲基)-3,3-二甲基-1H,2H,3H-吡咯並[3,2-b]吡啶-1-基}-2-[(2R,5R)-5-甲基-2-{[(3R)-3-甲基嗎啉-4-基]甲基}哌嗪-1-基]乙-1-酮L-(+)-乳酸鹽(形式C) (0.01 wt)於乙酸甲酯(0.08 vol)中之晶種漿料(seed slurry)，然後加入L-(+)-乳酸(0.085 wt)之乙酸甲酯(0.75 vol)溶液，及進行乙酸甲酯(0.5 vol)之線沖洗(line rinse)。將懸浮液攪拌約30分鐘，之後以至少1小時的時間添加正庚烷(12.0 vol)，溫度維持於15至 25°C。將混合物維持於15至 25°C下並攪拌至少2小時。過濾移除固體，使用2：3之乙酸甲酯/正丁烷(5 vol)清洗濾餅。將材料於過濾器上乾燥，直到適合處理為止，然後於高達80°C的烘箱中乾燥，直到乙酸甲酯含量≤ 0.5% w/w為止，得到標題化合物，為米白色(off-white)至米色(beige)固體。
實例45：醫藥配方(Pharmaceutical Formulations)之實例
(i)錠劑配方
將適量之化學式(I)化合物(例如50-250 mg)與適當之稀釋劑、崩解佐劑(disintegrant)、壓縮劑(compression agent)、及/或助流劑(glidant)混合，製備含有化學式(I)化合物之錠劑組成物。一種可能性是錠劑包含有50 mg之該化合物，以及做為稀釋劑之197 mg之乳糖(BP)、及做為潤滑劑(lubricant)之3 mg之硬脂酸鎂，而以已知之方式壓縮形成錠。可將壓製之錠包覆膜衣。
(ii)膠囊配方
將100-250 mg之化學式(I)化合物與等量之乳糖混合，將所得之混合物裝填於標準硬明膠膠囊中，而製備膠囊配方。可依需要包含適當之崩解佐劑及/或助流劑。
(iii)注射配方I
可藉由將化學式(I)化合物(例如鹽的形式)溶解於含有10%之丙二醇之水中，得到活性化合物濃度為1.5重量%，而製備注射用非口服組成物。然後將溶液形成等張、過濾滅菌或終端滅菌，填入安瓿或小瓶、或預填充針筒(pre-filled syringe)，密封。
(iv)注射配方II
可藉由將化學式(I)化合物(例如鹽的形式) (2 mg/ml)及甘露醇(50 mg/ml)溶解於水中，而製備注射用非口服組成物，將溶液過濾滅菌或終端滅菌，填入可密封之1 ml小瓶或安瓿、或預填充針筒(pre-filled syringe)。
(v)注射配方III
將化學式(I)化合物(例如鹽的形式)溶解於水中(2 mg/ml)，然後調整等張性，以製備經由注射或灌注(infusion)之靜脈注射輸送(i.v. delivery)配方。然後將小瓶密封及高壓蒸氣滅菌(autoclaving)或填入安瓿或小瓶中、或預填入針筒、過濾滅菌及密封。
(vi)注射配方IV
將化學式(I)化合物(例如鹽的形式)以2 mg/ml的量溶解於含有緩衝液(例如0.2M之乙酸根，pH 4.6)之水中，(2 mg/ml)，以製備經由注射或灌注之靜脈輸送(i.v. delivery)配方。然後將小瓶、安瓿、或預填充針筒密封及高壓蒸氣滅菌(autoclaving)、或過濾滅菌及密封。
(vii) 皮下(Subcutaneous)或肌內(Intramuscular)注射配方
將化學式(I)化合物與醫藥級玉米油混合而製備皮下投藥組成物，得到5~50 mg/ml的濃度。將組成物滅菌，填入適合的容器中。
(viii)冷凍乾燥配方I
將經調配之化學式(I)化合物分裝入50 ml小瓶，並冷凍乾燥。於冷凍乾燥期間，將組成物以一步驟冷凍之方法(one-step freezing protocol)於–45 ºC冷凍。將溫度上升至–10 ºC以退火(for annealing)，然後降低溫度以於–45 ºC下冷凍，接著於+25 ºC下初步乾燥約3400分鐘，接著隨著溫度階梯漸增至50 ºC進行第二次乾燥。在初步乾燥與第二次乾燥期間之壓力，設定為80毫托耳(millitor)。
(ix)冷凍乾燥配方II
將經調配之化學式(I)化合物或其鹽(如本文之定義)分裝入50 ml小瓶，並冷凍乾燥。於冷凍乾燥期間，將組成物以一步驟冷凍之方法(one-step freezing protocol)於–45 ºC冷凍。將溫度上升至–10 ºC以退火(for annealing)，然後降低溫度以於–45 ºC下冷凍，接著於+25 ºC下初步乾燥約3400分鐘，接著隨著溫度階梯漸增至50 ºC進行第二次乾燥。在初步乾燥與第二次乾燥期間之壓力，設定為80毫托耳(millitor)。
(x)用於靜脈投藥之冷凍乾燥配方III
將化學式(I)化合物溶解於緩衝液中以製備水性緩衝溶液(buffered solution)。將緩衝溶液過濾移除顆粒物質並裝入容器(如型1 (Type 1)之玻璃小瓶)中，然後部份密封(例如，藉由Fluorotec塞)。若該化合物及配方安定度夠，則可將配方在121ºC下以一段合適的時間高壓蒸氣滅菌。若配方對高壓蒸氣滅菌不安定，則可使用適合的過濾器滅菌，在滅菌狀況下裝入經滅菌的小瓶。使用適合的循環將溶液冷凍乾燥。冷凍乾燥循環完成時，將小瓶反填充(back fill)氮氣至大氣壓，塞住塞子，並且予以確實關緊(例如，用鋁捲曲線(aluminium crimp))。就經靜脈內投藥而言，冷凍乾燥固體可在藥學上可接受的稀釋劑(諸如，0.9%鹽水或5%右旋糖)內，恢復原狀。該溶液可以其本來的形式給藥，或是在投藥之前，注入一輸注袋(infusion bag) (含有藥學上可接受的稀釋劑，諸如，0.9%鹽水或5%右旋糖(dextrose))。
(xi) 瓶裝活性醫藥成份
於瓶中或小瓶中裝填化學式(I)化合物以製備口服投藥的組成物。然後，以適合的稀釋劑例如水、果汁或市售賦形劑，如OraSweet或Syrspend，使組成物還原。可取還原溶液裝至計量杯或口腔注射器供投藥。
生物試驗(Biological Assays)
XIAP、cIAP-1及cIAP-2 BIR3區域
使人類XIAP(殘基252-350)與His-tag融合、人類cIAP-1(殘基267-363)與GST-tag融合、及人類cIAP-2(殘基244-337)與His-tag融合之重組BIR3區域，於TB培養基中生長的大腸桿菌細胞中過度表現(overexpress)。使用Ni-NTA親和層析(XIAP/cIAP-2)或穀胱苷肽sepharase 4B親和層析(cIAP-1)，從細胞裂解液中分離出蛋白質。XIAP及cIAP-1之親和性標誌(tag)係以凝血酶(thrombin)於25mM HEPES pH 7.5、100mM NaCl、50uM Zn(OAc)2 及1mM Ca(OAc)2 中切開，然後以粒徑篩析層析法(size-exclusion chromatography)純化BIR3區域。cIAP-2之His-tag未切除，且由於聚集誘導共價自-寡合之問題(aggregation induced covalent self-oligomerization issues)，故不使蛋白濃縮超過3 mg/ml的濃度。將純化後之蛋白存放於-80℃下之25mM Tris pH 7.5, 100mM NaCl中。
XIAP、cIAP-I及cIAP-2之體外競爭置換結合試驗(In vitro Competitive Displacement Binding Assays)
測試經修飾之SMAC胜肽及化合物其從XIAP、cIAP-1或cIAP-2置換螢光追蹤子(fluorescent tracer)之能力。將cIAP-1、cIAP-2及XIAP之BIR3區域與測試化合物或SMAC為主的胜肽與其對應胜肽探針(Peptide Protein Research)於測試緩衝液(50mM Hepes pH 7.5，0.025% Tween-20，0.01% BSA，及1mM DTT)中培養(incubate)。正控制組係由BIR3蛋白與追蹤子(無抑制)所組成，而負控制組則僅含有追蹤子(100%抑制)。於室溫下將樣品培養(incubate) 1小時(XIAP及cIAP-2)或3小時(cIAP-1)，然後以BMG Pherastar以螢光偏光分析模化學式(Fluorescence Polarization mode) (FP 485nm, 520nm, 520nm)判讀。IC50 值係由使用非線性最小平方分析(nonlinear least-squares analysis)的劑量-反應作圖來決定。
XIAP、cIAP-1及cIAP-2試驗之最終條件
抗增生活性
細胞生長抑制係使用Alamar Blue試驗(Nociari, M. M, Shalev, A., Benias, P., Russo, C. Journal of Immunological Methods 1998, 213, 157-167)。此方法係基於活細胞將刃天青(resazurin)還原(reduce)成其螢光產物試鹵靈(resorufin)之能力。對於每一增生試驗，將細胞於96孔盤中進行平板培養(plating)，先使細胞恢復16小時，而後再添加抑制化合物(於0.1% DMSO v/v)再經72小時。於培養期間結束時，添加10% (v/v) Alamar Blue，再培養6小時，然後以535nM ex/590nM em偵測螢光產物。
本發明之化合物之抗增生活性，係透過測量化合物抑制三個癌細胞株生長之能力來判定： ．EVSA-T (人類乳癌) DSMZ cat. no. ACC 433 ．MDA-MB-231 (人類乳癌) ECACC cat. no. 92020424 ．HCT116 (人類大腸癌) ECACC cat. no. 91091005 (非敏感型細胞株，其用於非專一性細胞毒性(non-specific cytoxicity)中作為控制組)
於使用EVSA-T細胞株之試驗中，實例1~34之EC50 係小於0.01μM。特別是，實例1~3、5~8、10~14、16、18~25、27~28及30~32之EC50 係小於0.001μM。於使用MDA-MB-231細胞株之試驗中，實例1~34之EC50 係小於0.1μM。特別是，實例1~8、10~14、及18~32之EC50 係小於0.01μM。更特別是，實例7~8之EC50 係小於0.001μM。本發明之化合物之此等試驗資料列於表1。
誘導細胞凋亡(Apoptosis Induction)
下表綜述對於一組9個人類黑色素瘤細胞株之誘導細胞凋亡之敏感性的評估，其係於1 ng/ml TNF-α之存在下進行誘導細胞凋亡24小時，1 ng/ml TNF-α係與1 µM之實例2同時添加。以顯示最小敏感性(24小時後細胞凋亡＜ 20%的細胞)的三個細胞株(SK-MEL-24、WM-266-4及WM-115)來觀察敏感性範圍。表中詳述在以1 µM之實例2加上1 ng/ml TNF-α處理24小時後，藉由使用螢光性半胱天冬酶-3基質(NucView488 – Biotium)之細胞計數法(cytometry)，得到之對於裂解-半胱天冬酶-3活性為陽性(positive)之細胞總數百分比。
HEK293-XIAP-半胱天冬酶-9免疫沉澱法(IP) MSD試驗方法(Assay Protocol)
將穩定的HEK293-XIAP-半胱天冬酶-9細胞置於96-孔盤進行平板培養(plating) [200 µl/孔，1 x106 細胞/mL於培養完全的培養基(cultured complete medium) (DMEM + 10% FBS + 0.5 mg/mL Geneticin (Invitrogen)中]，及於37 °C隔夜以恢復。於37 °C下，將於0.1% DMSO中之化合物添加至培養孔(二重複)(duplicate wells)2小時。將細胞置於50 µl 1 x MSD溶胞緩衝液 (1% Triton X-100於20 mM Tris.Cl (pH 7.6)中，包含蛋白酶抑制劑之150 mM NaCl)中而於室溫下搖盪(rocking) 20分鐘以溶解(lysed)。將鏈抗生物素(streptavidin)高結合MSD盤(L15SB-2)塗覆生物素化anti-FLAG M2抗體(Sigma F9291)，量為25 µl/孔，稀釋為5 µg/mL之抗體於PBS中，搖晃1小時，然後以150 µl 3% BSA/TBST阻斷1小時。將細胞溶解液(cell lysate) (25 µl)添加至該96孔之塗覆著anti-FLAG之MSD盤，並置於室溫下之搖晃器上4小時。以150 µl TBST (20 mM Tris.Cl (pH 7.6)，150 mM NaCl，0.1% Tween-20)清洗4次後，添加以MSD阻斷緩衝液(3% BSA/TBST)稀釋至5 µl/mL之抗-半胱天冬酶-9 [CST#9505]，於4° C下隔夜。在以150 µl TBST清洗盤4次後，於室溫下添加以MSD阻斷緩衝液稀釋至2 µg/mL之抗兔磺標(anti-rabbit-sulfo tag) (MSD cat no. R32AB-1)過2小時。以150 µl TBST清洗盤4次，以及，在判讀各盤之前添加150 µl/孔1 x MSD判讀緩衝液(R92TC-2)。
EC50 值係由使用非線性最小平方分析(nonlinear least-squares analysis)的劑量-反應作圖來決定。實例1~37之EC50 係小於0.1μM。特別是，實例1~13、15、18~25、27~28、30~34及36~37之EC50 係小於0.01μM。更特別是，實例10、12、23~24及31之EC50 係小於0.001μM。本發明之化合物之此試驗資料列於表1。
於MDA-MB-231細胞內之cIAP1降解MSD試驗方法(Protocol for cIAP1 Degradation MSD Assay in MDA-MB-231 Cells)
將MDA-MB-231細胞置於96-孔盤進行平板培養(plating) [200 µl/孔，4 x105 細胞/mL於培養完全的培養基(cultured complete medium) (DMEM + 10% FBS)中]，及於37 °C隔夜以恢復。於37 °C下，將於0.1% DMSO之化合物添加至兩重複培養孔(duplicate wells)中2小時。將細胞置於50 µl 1 x MSD溶胞緩衝液 (1% Triton X-100於20 mM Tris.Cl (pH 7.6)中，包含蛋白酶抑制劑之150 mM NaCl)中而於室溫下搖盪(rocking) 20分鐘以溶解(lysed)。將鏈抗生物素(streptavidin)高結合MSD盤(L15SB-2)塗覆生物素化anti- cIAP1抗體(R&D Systems cat no. AF8181 – 內部生物素化(biotinylated in house))，量為25 µl/孔，稀釋為5 µg/mL之抗體於PBS中，搖晃1小時，然後以150 µl 3% BSA/TBST阻斷1小時。將細胞溶解液(cell lysate) (25 µl)添加至該96孔之塗覆著anti- cIAP1之MSD盤，並置於4° C下隔夜。以150 µl TBST (20 mM Tris.Cl (pH 7.6)，150 mM NaCl，0.1% Tween-20)清洗4次後，於室溫下添加以MSD阻斷緩衝液稀釋至6 µl/mL之抗-cIAP1-磺標(anti-cIAP1-sulfo tag)偵測抗體(R&D Systems cat no. AF8181 – 內部磺標(sulfo-tagged in house))過2小時。以150 µl TBST清洗盤4次，以及，在判讀各盤之前添加150 µl/孔1 x MSD判讀緩衝液(R92TC-2)。
IC50 值係由使用非線性最小平方分析的劑量-反應作圖來決定。實例1~37之EC50 係小於0.01μM。特別是，實例1~8、10~14、16、18~27、30~34及37之EC50 係小於0.001μM。更特別是，實例7之EC50 係小於0.0001μM。本發明之化合物之此試驗資料列於表1。
族群膜片箝制試驗方法(Population patch clamp (PPC) assay protocol)
以自動膜片箝制試驗測量CHO K1細胞內hERG通道的抑制，此等CHO K1細胞係被穩定的轉染hERG離子通道。使用IonWorks Quattro儀器(Molecular Devices Corporation，Union City，CA)(其係使用384孔PatchPlate (Molecular Devices Corporation)，每孔具有64個開口(aperture))進行PPC測量。於孔中測試受測化合物的濃度(二重複)。使用雙性殺黴素B (amphotericin B)以獲得對細胞內部的電性通路(electrical access)，其最終濃度為200μg/mL。使用由-80mV的保持電位(holding potential)至+40 mV (2 s)的前脈衝(prepulse)測量人類ether-à-gogo相關基因(Human ether-à-gogo related gene，hERG)電流，然後一步至-50 mV (2 s)，以引出失活尾電流(deactivating tail currents)，然後回到保持電位1秒鐘(1 s)。在化合物添加前判讀與化合物添加後判讀(between the pre- and post-compound reads)之間將化合物培養600秒。所使用之外部記錄溶液為130mM葡萄糖酸鈉(Na Gluconate)、20mM NaCl、4mM KCl、1mM MgCl2 、1.8mM CaCl2 、10mM Hepes、5mM葡萄糖、以NaOH調整pH至7.3。針對密封品質(seal quality)、密封降(seal drop)、及電流幅值(current amplitude)過濾全部資料。計算添加化合物前(Pre)與後(Post)之第三脈衝尾電流之最大電流幅值，以及，藉由將添加化合物後的電流幅值除以添加化合物後的電流幅值以評估阻斷量。使用此試驗所產生的資料詳述於表1。
手動膜片箝制試驗方法(Manual Patch Clamp (MPC) assay protocol)
以手動膜片箝制試驗測量HEK293細胞內hERG通道的抑制，此等HEK293細胞係被穩定的轉染hERG離子通道。使用HEKA EPC10增幅器與PatchMaster軟體以收集及分析此計畫的資料。
將細胞置於玻璃蓋玻片上以進行平板培養，安置於倒裝顯微鏡(inverted microscope)上並持續浸浴於控制溶液(137mM NaCl、4mM KCl、1mm MgCl2 、1.8mM CaCl2 、10mM Hepes、10mM葡萄糖、pH7.35)中。
在將細胞電箝制後，靜置平衡，進行一脈衝方案(pulse protocol)。脈衝方案包含由-80mV的保持電位(holding potential)步進至+40 mV達4秒(4 s)，以使hERG通道失活，然後使膜電位一步回至-50 mV達4秒(4 s)，以引出尾電流(tail current)，然後回到保持電位。以脈衝間20秒間隔重複此序列動作。在整個實驗中進行一電位方案(voltage protocol)，實驗係於給藥(0.33% DMSO控制組)之前及漸升的化合物濃度累積添加之後開始。在整個實驗中持續監測誘發尖峰電流幅值(evoked peak current amplitudes)。
在測量化合物效應之前先對受測化合物施加電位5分鐘或直到狀態穩定為止，可視何者先到，在各化合物添加前後測量尖峰尾電流。將個別細胞的結果分別依其各自的載體控制組(vehicle control)予以正規化(normalize)。重複測量各化合物濃度。使用0.1µM Cisapride做為參考抑制劑(reference inhibitor)。
表1
除非另有說明，否則數據是單一實驗的結果。在得到超過一個數據點時，前表中係以此等數據點之平均值(即，幾何平均數或算數平均數)表示至二個有效數字。
細胞凋亡的合併療法(Combination Protocol for Apoptosis)
在治療的前一天，將黑色素瘤細胞株(0.5 x 106 細胞/ml)置於24-孔盤之孔中進行平板培養(二重複)，以使其固著。在37 °C的CO2 培育箱、使用或不使用1 ng/ml TNF-α (R&D Systems)、以化合物培育細胞24小時後，以胰蛋白酶處理(trypsinisation)而收取細胞。將得自24-孔盤的細胞沉澱(cell pellet)置於100 µl FACS緩衝液(PBS + 1%胎牛血清(fetal bovine serum))中使其再懸浮。添加 NucView488試劑(來自Biotium)至最終濃度為2 µM。將盤於黑暗中培養30分鐘之後，於Guava easyCyte HT細胞計數儀(cytometer) (Millipore)中測量螢光染色之細胞。於FL1波道(FL1 channel)中記錄裂解半胱天冬酶-3，使用未染色及DMSO控制組以設置閘控染色(gated stained)或未染色細胞群體。
表2綜述在SK-MEL-28或者是A375之任一者與所示包含在內的藥劑與實例2加上1 ng/ml TNF-α的組合中培養24小時，而觀察到細胞凋亡%增加(the % apoptosis increases)。單獨使用表格第一欄中顯示之組合藥劑(有或無TNF-α)時，於此時間尺度(time scale)及期間並未觀察到細胞凋亡增加–資料未示出。
表2：在使用所示之組合(相關於僅使用實例2 + TNF-α*)進行培養後凋亡細胞百分比增加
細胞增殖合併療法(Combination Protocol for Cell Proliferation)
化學式(I)化合物(化合物I)與抗癌劑(化合物II)組合的效應能夠藉由下列技術予以評估。將來自人類細胞株(例如MDA-MB-231及EVSA-T)的細胞，分別以2.5x103 、6.0 x103 、或4.0 x103 細胞/孔的濃度，撒播(seeded)於96-孔組織培育盤上。在如下述添加化合物或載劑控制組(vehicle control) (0.35% DMSO)之前，先給細胞48小時恢復時間：
同時添加諸化合物96小時。在總合96小時的化合物培育之後，使用冰冷的10% (w/v)之三氯乙酸將細胞固定於冰上1小時，然後使用盤清洗器(plate washer) (Labsystems Wellwash Ascent)以dH2 O清洗四次，風乾。於室溫下使用0.4% (w/v) 磺酸玫瑰紅B(Sulforhodamine B) (Sigma) (於1% 醋酸)將細胞染色20分鐘，然後使用1% (v/v) 醋酸清洗四次，風乾，然後添加10mM Tris buffer以將染料溶解。將比色產物(colourmetric product)於Wallac Victor2 盤判讀機(plate reader) (1420多標簽計數器(multilabel counter)，Perkin Elmer Life Sciences)上以Abs490nm判讀，藉以定量。測定在不同劑量之化合物I存在下的化合物II的IC50 。當亞效劑量(sub-effective doses)的化合物I存在下，化合物II的IC50 向下遷移時，判定有協同效應(Synergy)。當對化合物I及化合物II在一起的反應結果與對此二個化合物個別時反應的總和效應相當時，判定有加成性(additivity)。將拮抗效應定義為使IC50 向上遷移者，即，對二種化合物的回應小於此二種化合物個別效應的總和。
無
[圖1] 為實例39之1 H NMR；樣品係於DMSO-D6 中獲得，並校準至非氘取代溶劑殘餘DMSO為δ = 2.50 ppm；所含的內部參考標準體(TCNB)呈現單峰δ = 8.5 ppm。 [圖2] 為實例39之XRPD。 [圖3] 為實例39之DSC。 [圖4] 為實例40之1 H NMR；樣品係於DMSO-D6 中獲得，並校準至非氘取代溶劑殘餘DMSO為δ = 2.50 ppm；所含的內部參考標準體(TCNB)呈現單峰δ = 8.5 ppm。 [圖5] 為實例40之XRPD。 [圖6] 為實例40之DSC。 [圖7] 為實例41之1 H NMR；樣品係於DMSO-D6 中獲得，並校準至非氘取代溶劑殘餘DMSO為δ = 2.50 ppm。 [圖8] 為實例41之XRPD。 [圖9] 為實例41之DSC。 [圖10] 為實例42之1 H NMR；樣品係於DMSO-D6 中獲得，並校準至非氘取代溶劑殘餘DMSO為δ = 2.50 ppm。 [圖11] 為實例42之XRPD。 [圖12] 為實例42之DSC。 [圖13] 為XRPD，其顯示實例40之L-(+)-乳酸鹽形式B (繞射圖標示1)產物、於t=0h的反應混合物(繞射圖標示2)、4天後(繞射圖標示3)、相較於實例43之L-(+)-乳酸鹽形式C (繞射圖標示4)。 [圖14] 為XRPD，其顯示實例43之相同結構(iso-structural)形式B產物，於t=0h (繞射圖標示1)、反應混合物的進展(繞射圖標示2~6)、加熱t=5天後內部轉換完成而得到形式C (繞射圖標示7)。 [圖15] 為實例43之1 H NMR；樣品係於DMSO-D6 中獲得，並校準至非氘取代溶劑殘餘DMSO為δ = 2.50 ppm；所含的內部參考標準體(TCNB)呈現單峰δ = 8.5 ppm。 [圖16] 為實例43之XRPD，(繞射圖標示1)與無水L-(+)-乳酸(繞射圖標示2)重疊。 [圖17] 為實例43之DSC，(熱分析圖標示1)與無水L-(+)-乳酸(熱分析圖標示2)重疊。

Claims (61)

  1. 一種化合物，如化學式(I)所示：
    Figure TWI649319B_C0001
    或其互變異構物、其立體化學異構物、其醫藥上可接受之鹽、或其溶劑合物；其中，X為CR4、N或NR3；其中，當X為CR4，則U表示氮及R6表示側氧基(oxo)；或當X為N，則U表示碳及R6表示羥甲基或-CH(ORx)CH2ORz；或當X為NR3，則U表示碳及R6表示側氧基；虛線鍵(dashed bond)(-------)表示單鍵或雙鍵，其中該等虛線鍵之至少二者表示雙鍵；R1及R2係獨立表示氫或甲基；R3表示氫、甲基或-NH2；R4表示氫、甲基、羥甲基、-NH2或氟；R5表示未經取代之正丁基、或在苯基上有一或二個氟取代之苯甲基；及Rx及Rz係獨立表示氫或甲基。
  2. 如申請專利範圍第1項所述之化合物，其中R1及R2之一者表示氫及另一者表示甲基、或R1及R2二者均表示氫。
  3. 如申請專利範圍第1項所述之化合物，其中R1及R2二者均表示氫。
  4. 如申請專利範圍第1項所述之化合物，其中R4表示氫或甲基。
  5. 如申請專利範圍第1項所述之化合物，其中R5表示未經取代之正丁基或在苯基之位置2、3及/或4有一或二個氟取代之苯甲基。
  6. 如申請專利範圍第5項所述之化合物，其中R5表示未經取代之正丁基。
  7. 如申請專利範圍第5項所述之化合物，其中R5表示在苯基之位置2、3或4有一個氟取代之苯甲基。
  8. 如申請專利範圍第5項所述之化合物，其中R5表示2-氟苯甲基、3-氟苯甲基或4-氟苯甲基。
  9. 如申請專利範圍第5項所述之化合物，其中R5表示在苯基之位置4有一個氟取代之苯甲基。
  10. 如申請專利範圍第5項所述之化合物，其中R5表示在苯基之位置2與3、3與4、或2與4有二個氟取代之苯甲基。
  11. 如申請專利範圍第5項所述之化合物，其中R5表示2,3-二氟苯甲基、3,4-二氟苯甲基或2,4-二氟苯甲基。
  12. 如申請專利範圍第5項所述之化合物，其中R5表示在苯基之位置2與4有二個氟取代之苯甲基。
  13. 如申請專利範圍第5項所述之化合物，其中R5表示4-氟苯甲基或2,4-二氟苯甲基。
  14. 如申請專利範圍第13項所述之化合物，其中R5表示2,4-二氟苯甲基。
  15. 如申請專利範圍第13項所述之化合物，其中R5表示4-氟苯甲基。
  16. 如申請專利範圍第1項所述之化合物，其中Rx及Rz之一者表示氫及另一者表示甲基，或Rx及Rz二者均表示氫。
  17. 如申請專利範圍第16項所述之化合物，其中Rx表示氫或甲基，及Rz表示氫。
  18. 如申請專利範圍第1項所述之化合物，其為化學式(Ia)化合物：
    Figure TWI649319B_C0002
    或其互變異構物、其立體化學異構物、其醫藥上可接受之鹽、或其溶劑合物；其中R1、R2、R4及R5如申請專利範圍第1至15項中之任一項所述。
  19. 如申請專利範圍第1項所述之化合物，其為化學式(Ib)化合物：
    Figure TWI649319B_C0003
    或其互變異構物、其立體化學異構物、其醫藥上可接受之鹽、或其溶劑合物；其中R6表示羥甲基或-CH(ORx)CH2ORz，及其中R1、R2、R5、Rx及Rz如申請專利範圍第1至3及5至17項中之任一項所述。
  20. 如申請專利範圍第1項所述之化合物，其為化學式(Ic)化合物：
    Figure TWI649319B_C0004
    或其互變異構物、其立體化學異構物、其醫藥上可接受之鹽、或其溶劑合物；其中R1、R2、R3及R5如申請專利範圍第1至3及5至15項中之任一項所述。
  21. 如申請專利範圍第1項所述之化合物，其為化學式(Id)化合物：
    Figure TWI649319B_C0005
    或其互變異構物、其立體化學異構物、其醫藥上可接受之鹽、或其溶劑合物；其中R5如申請專利範圍第1及5至15項中之任一項所述。
  22. 一如申請專利範圍第1項所述之化合物，其中該化合物係選自實例1至37(Examples 1 to 37)：
    Figure TWI649319B_C0006
    Figure TWI649319B_C0007
    Figure TWI649319B_C0008
    Figure TWI649319B_C0009
    Figure TWI649319B_C0010
    Figure TWI649319B_C0011
    Figure TWI649319B_C0012
    Figure TWI649319B_C0013
    Figure TWI649319B_C0014
    Figure TWI649319B_C0015
    Figure TWI649319B_C0016
    或其互變異構物、其立體化學異構物、其醫藥上可接受之鹽、或其溶劑合物。
  23. 如申請專利範圍第1項所述之化合物，其中該化合物為實例2(Example 2)：
    Figure TWI649319B_C0017
    之自由鹼、或其互變異構物、其立體化學異構物、其醫藥上可接受之鹽、或其溶劑合物。
  24. 如申請專利範圍第1項所述之化合物，其中該化合物為1-{6-[(4-氟苯基)甲基]-5-(羥甲基)-3,3-二甲基-1H,2H,3H-吡咯並[3,2-b]吡啶-1-基}-2-[(2R,5R)-5-甲基-2-{[(3R)-3-甲基嗎啉-4-基]甲基}哌嗪-1-基]乙-1-酮之乳酸鹽、甲磺酸鹽、或硫酸鹽。
  25. 如申請專利範圍第1項所述之化合物，其中該化合物為1-{6-[(4-氟苯基)甲基]-5-(羥甲基)-3,3-二甲基-1H,2H,3H-吡咯並[3,2-b]吡啶-1-基}-2-[(2R,5R)-5-甲基-2-{[(3R)-3-甲基嗎啉-4-基]甲基}哌嗪-1-基]乙-1-酮之L-(+)-乳酸鹽。
  26. 如申請專利範圍第1項所述之化合物，其中該化合物為1-{6-[(4-氟苯基)甲基]-5-(羥甲基)-3,3-二甲基-1H,2H,3H-吡咯並[3,2-b]吡啶-1-基}-2-[(2R,5R)-5-甲基-2-{[(3R)-3-甲基嗎啉-4-基]甲基}哌嗪-1-基]乙-1-酮L-(+)-乳酸鹽(C型)。
  27. 一種醫藥組成物，其包括如申請專利範圍第1至26項中之任一項所述之化學式(I)化合物及醫藥上可接受之賦形劑。
  28. 一種醫藥組成物，其包括如申請專利範圍第1至26項中之任一項所述之化學式(I)化合物、及一或更多之治療藥劑。
  29. 如申請專利範圍第1至26項中之任一項所述之化合物，其係用於治療。
  30. 如申請專利範圍第1至26項中之任一項所述之化合物，其係用於治療IAP所引發之疾病狀態或異常身體狀況。
  31. 如申請專利範圍第1至26項中之任一項所述之化合物，其係用於治療XIAP及/或cIAP所引發之疾病狀態或異常身體狀況。
  32. 如申請專利範圍第1至26項中之任一項所述之化合物，其係用於治療IAP過度表現之疾病狀態或異常身體狀況。
  33. 如申請專利範圍第1至26項中之任一項所述之化合物，其係用於治療XIAP及/或cIAP過度表現之疾病狀態或異常身體狀況。
  34. 一種如申請專利範圍第1至26項中之任一項所述之化合物之用途，其係用於製備治療癌症之藥物。
  35. 如申請專利範圍第34項所述之用途，其中，該癌症係上皮起源腫瘤；血液惡性腫瘤及癌前血液疾病及交界性惡性腫瘤；間葉來源腫瘤；中央或周圍神經系統腫瘤；內分泌瘤；眼部及眼部屬件瘤；生殖細胞及滋養細胞瘤；兒童及胚胎瘤。
  36. 如申請專利範圍第34項所述之用途，其中，該癌症係膀胱及尿道、乳房、腸胃道、肝臟、膽囊及膽管系統、胰外分泌腺、腎臟、肺臟、頭頸部、卵巢、輸卵管、腹膜、陰道、外陰、陰莖、子宮頸、子宮肌層、子宮內膜、甲狀腺、腎上腺、前列腺、皮膚或皮膚屬件之惡性腫瘤。
  37. 如申請專利範圍第36項所述之用途，其中，該肺臟之惡性腫瘤係腺癌、小細胞肺癌、非小細胞肺癌、細支氣管肺泡癌或間皮瘤。
  38. 如申請專利範圍第34項所述之用途，其中，該癌症係間皮瘤。
  39. 如申請專利範圍第34項所述之用途，其中，該癌症係肝癌、黑色素瘤、食道癌、腎臟癌、結腸癌、直腸癌、肺癌、乳癌、膀胱癌、胃癌、卵巢癌或前列腺癌。
  40. 如申請專利範圍第34項所述之用途，其中，該癌症係腎臟癌、黑色素瘤、結腸癌、肺癌、乳癌、卵巢癌或前列腺癌。
  41. 如申請專利範圍第34項所述之用途，其中，該癌症係黑色素瘤、結腸癌、乳癌或卵巢癌。
  42. 如申請專利範圍第34項所述之用途，其中，該癌症係黑色素瘤。
  43. 如申請專利範圍第34項所述之用途，其中，該癌症係乳癌。
  44. 如申請專利範圍第34項所述之用途，其中，該癌症係發炎性乳癌。
  45. 如申請專利範圍第34項所述之用途，其中，該癌症係發炎性腫瘤。
  46. 如申請專利範圍第45項所述之用途，其中，該發炎性腫瘤係黑色素瘤、結腸癌、乳癌或卵巢癌。
  47. 如申請專利範圍第45項所述之用途，其中，該發炎性腫瘤係黑色素瘤。
  48. 如申請專利範圍第34項所述之用途，其中，該癌症係血液惡性腫瘤。
  49. 如申請專利範圍第34項所述之用途，其中，該癌症係白血病或淋巴瘤。
  50. 如申請專利範圍第49項所述之用途，其中，該淋巴瘤係MALT淋巴瘤。
  51. 如申請專利範圍第34項所述之用途，其中，該癌症係選自由急性淋巴細胞白血病(ALL)、慢性淋巴細胞白血病(CLL)、B細胞淋巴癌、濾泡性淋巴瘤、Burkitt's淋巴瘤、套細胞淋巴瘤、T細胞淋巴瘤及白血病、自然殺手細胞(NK)淋巴瘤、Hodgkin's淋巴瘤、毛細胞白血病、未知意義之單株免疫球蛋白症(monoclonal gammopathy)、漿細胞瘤、多發性骨髓瘤、及移植後淋巴增生性失調所組成之群組。
  52. 如申請專利範圍第51項所述之用途，其中，該B細胞淋巴癌係瀰漫性大B細胞淋巴癌(DLBCL)。
  53. 如申請專利範圍第51項所述之用途，其中，該B細胞淋巴癌係難治性DLBCL。
  54. 如申請專利範圍第34項所述之用途，其中，該癌症係選自急性骨髓性白血病(AML)、慢性骨髓性白血病(CML)、慢性骨髓單核球性白血病(CMML)、嗜酸性細胞增多症(hypereosinophilic syndrome)、骨髓增生性疾病(myeloproliferative disorders)、骨髓增生性症候群、骨髓發育不良症候群及早幼粒細胞白血病。
  55. 如申請專利範圍第1至26項中之任一項所述之化合物，其係與：一或多種其他治療藥劑；或1或2種其他治療藥劑；或一或多種其他抗癌劑；或1或2種其他抗癌劑組合。
  56. 如申請專利範圍第1至26項中之任一項所述之化合物，其係與：一或多種其他治療藥劑；或1或2種其他治療藥劑；或一或多種其他抗癌劑；或1或2種其他抗癌劑組合以用於治療。
  57. 如申請專利範圍第1至26項中之任一項所述之化合物，其係與：一或多種其他治療藥劑；或1或2種其他治療藥劑；或一或多種其他抗癌劑；或1或2種其他抗癌劑組合以用於治療癌症。
  58. 一種製備如申請專利範圍第1項之化學式(I)化合物之方法，包括：(a)(i)將化學式(II)化合物：
    Figure TWI649319B_C0018
    其中，R5、R6、U及X如申請專利範圍第1項化學式(I)化合物所述者，L1表示適合的離去基(leaving group)，及P1表示氫或適合的保護基，與化學式(III)化合物反應：
    Figure TWI649319B_C0019
    或其選擇性經保護之衍生物；其中，R1及R2如申請專利範圍第1項化學式(I)化合物所述者，然後進行適合移除P1保護基，及，若需要的話，任何其他保護基，之去保護反應；或(ii)將化學式(IV)化合物：
    Figure TWI649319B_C0020
    其中，R5、R6、X及U如申請專利範圍第1項化學式(I)化合物所述者，及L2表示適合的離去基，與化學式(V)化合物反應：
    Figure TWI649319B_C0021
    或其選擇性經保護之衍生物；其中，R1及R2如申請專利範圍第1項化學式(I)化合物所述者，及P2表示氫或適合的保護基，然後進行適合移除P2保護基，及，若需要的話，任何其他保護基，之去保護反應；及/或(b)化學式(I)化合物之經保護之衍生物之去保護反應；及/或(c)化學式(I)化合物或其經保護之衍生物之相互轉化(interconversion)為又一化學式(I)化合物或其經保護之衍生物；及(d)選擇性形成化學式(I)化合物之醫藥上可接受之鹽。
  59. 如申請專利範圍第58項所述之方法，其中，L1及L2表示鹵原子。
  60. 如申請專利範圍第58項所述之方法，其中，L1表示氯。
  61. 如申請專利範圍第58項所述之方法，其中，P1及P2表示第三丁氧羰基(tBoc)。
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