KR20100119768A

KR20100119768A - 아이에이피 억제제

Info

Publication number: KR20100119768A
Application number: KR1020107018102A
Authority: KR
Inventors: 스티븐 엠. 콘돈; 매튜 지. 라포르테; 이쥔 덩; 수잔 알. 리핀; 유-화 이; 토마스 하이모위츠
Original assignee: 테트랄로직 파마슈티칼스 코포레이션
Priority date: 2008-01-24
Filing date: 2009-01-15
Publication date: 2010-11-10
Also published as: IL207066A0; JP2011520770A; MX2010007948A; ZA201005618B; EP2242362A1; US20110288116A1; CA2712604A1; WO2009094287A1; CN101951766A; BRPI0906785A2; EP2242362A4; AU2009206588A1

Abstract

본 발명은 하기 화학식 I의 화합물, 이의 제조방법, 이를 함유하는 약제학적 조성물 및 이것의 치료에의 용도에 관한 것이다:
화학식 I

본 발명의 화합물은 IAP(아폽토시스 단백질의 억제제)를 억제하며, 따라서 아폽토시스의 결함과 관련된 암, 자가면역 질환 및 다른 장애의 치료에 유용하다.

Description

아이에이피 억제제{IAP INHIBITORS}

본 발명은 IAP(inhibitors of apoptosis proteins; 아폽토시스 단백질의 억제제)를 억제하는 화합물, 이의 제조방법, 이를 함유하는 약제학적 조성물 및 이의 치료에서의 용도에 관한 것이다. 본 발명의 화합물은 아폽토시스의 결함과 관련된 암, 자가면역 질환 및 다른 장애의 치료에 유용하다.

아폽토시스(프로그램된 세포 사멸)는 모든 다세포 유기체의 발생 및 항상성에서 중요한 역할을 한다. 아폽토시스는 케모카인과 같은 외부 요인(외인성 경로)으로부터 또는 DNA 손상과 같은 세포내 사건(내인성 경로)을 통해 세포 내에서 개시될 수 있다. 아폽토시스 경로의 변경은 발생학적 장애, 암, 자가면역 질환 뿐만 아니나 신경-퇴행성 장애를 비롯한 많은 종류의 사람의 병리증상과 관련되어 왔다. 화학요법 약물의 하나의 작용 방식은 아폽토시스를 통한 세포 사멸이다.

아폽토시스는 종을 넘어서 보존되며, 이의 기질에 아스파르테이트 특이성을 갖는 시스테인 프로테아제 계열인 활성화된 카스파제에 의해 주로 수행된다. 상기 시스테인 함유 아스파르테이트 특이적 프로테아제("카스파제")는 촉매적 불활성화 효소원으로서 세포에서 생성되고, 단백질적으로 분해되어 아폽토시스 동안 활성 프로테아제가 된다. 일단 활성화되면, 효과기(effector) 카스파제는 궁극적으로 세포 사멸을 유도하는 광범위한 세포 표적의 단백질분해적 절단을 담당한다. 아폽토시스 자극을 받지 않은 정상적인 생존 세포에서, 대부분의 카스파제는 불활성으로 존재한다. 카스파제가 비정상적으로 활성화될 경우, 이들의 단백질분해 활성은 IAP(아폽토시스 단백질의 억제제)로 지칭되는 진화적으로 보존된 단백질 계열에 의해 억제될 수 있다.

IAP 계열의 단백질은 프로카스파제의 활성화의 방지 및 성숙 카스파제의 효소 활성의 억제에 의해 아폽토시스를 억제한다. XIAP, c-IAP1, c-IAP2, ML-IAP, NAIP(신경 아폽토시스 억제 단백질), 브루스(Bruce) 및 서르비빈을 비롯한 수개의 특징적인 포유동물의 IAP가 확인되었으며, 이들 모두는 세포 배양물에서 항아폽토시스 활성을 나타낸다. IAP는 원래 바쿨로바이러스에서 항아폽토시스 유전자인 P35 단백질을 대체하는 이의 기능적 능력에 의해 발견되었다. IAP는 드로소필라(Drosophila)에서 사람에 이르기까지의 유기체에서 기술되었으며, 많은 사람의 암에서 과발현되는 것으로 알려져 있다. 일반적으로 말하자면, IAP는 1 내지 3개의 바쿨로바이러스 IAP 반복(BIR) 도메인을 포함하며, 이들 대부분은 또한 카복실-말단 RING 핑거 모티프를 갖는다. BIR 도메인 자체는 아연 이온에 배위된 시스테인 및 히스티딘 잔기를 갖는, 4개의 알파-나선 및 3개의 베타 가닥을 포함하는 약 70개 잔기의 아연 결합 도메인이다. BIR 도메인은 카스파제를 억제하고 이에 따라 아폽토시스를 억제함으로써 항아폽토시스 효과를 유발하는 것으로 여겨진다. XIAP는 대부분의 성인 및 태아 조직에서 국소적으로 발현된다. 종양 세포에서의 XIAP의 과발현은 다양한 프로-아폽토시스 자극에 대한 보호를 제공하며 화학요법에 대한 내성을 촉진하는 것으로 입증되었다. 이와 일치하게, 급성 골수성 백혈병을 앓는 환자에게서 XIAP 단백질 수준과 생존력 사이의 강한 상관관계가 입증되었다. 안티센스 올리고뉴클레오티드에 의해 XIAP 발현을 하향-조절하면 시험관내 및 생체내 둘 다에서 종양 세포가 광범위한 프로-아폽토시스 제제에 의해 유도된 사멸에 대해 감작화되는 것으로 나타났다.

그러나, 아폽토시스가 진행되도록 신호화된 정상 세포에서, Smac(카스파제의 제2 미토콘드리아 활성제)로 지칭되는 미토콘드리아 단백질에 의해 적어도 부분적으로 수행되는 과정인 IAP-매개된 억제 효과가 제거되어야 한다. Smac(또는 DIABLO)는 239개의 아미노산의 전구체 분자로서 합성되며, N-말단 55개 잔기는 유입 후에 제거되는 미토콘드리아 표적화 서열로서 기능한다. Smac의 성숙 형태는 184개의 아미노산을 함유하며, 용액에서 올리고머로서 작용한다. Smac 및 이의 다양한 단편은 치료제 동정용 표적으로서의 용도로 제안되어 왔다.

Smac는 세포질에서 성숙 폴리펩티드로 성숙하는 동안 단백질분해로 제거되는 N-말단 미토콘드리아 표적화 서열로 합성되며, 이어서 미토콘드리아의 막간 공간으로 표적화된다. 아폽토시스의 유도시, Smac는 시토크롬 c와 함께 미토콘드리아로부터 세포질로 방출되어 IAP에 결합하고 카스파제를 활성화시키며, 거기에서 아폽토시스에 대한 IAP의 억제 효과를 제거한다. 시토크롬 c가 Apaf-1의 다량체화를 유도하여 프로카스파제-9 및 프로카스파제-3을 활성화시키는 반면, Smac는 다수의 IAP의 억제 효과를 제거한다. Smac는 XIAP, c-IAP1, c-IAP2, ML-IAP 및 서르비빈을 비롯한 지금까지 조사된 실질적으로 모든 IAP와 상호작용한다. 따라서, Smac는 포유동물에서 아폽토시스의 주요한 조절자로 보인다.

Smac는 프로카스파제의 단백질분해 활성화 뿐만 아니라 성숙 카스파제의 효소 활성을 촉진하는 것으로 알려졌는데, 상기 단백질분해 활성화 및 성숙 카스파제의 효소 활성 둘 다는 IAP와 물리적으로 상호작용하는 이들의 능력에 좌우된다. X-선 결정학은 성숙 Smac의 첫번째 4개의 아미노산(AVPI)이 IAP의 일부분에 결합하는 것으로 나타났다. 상기 N-말단 서열은 IAP의 결합 및 이것의 항아폽토시스 효과의 차단에서 필수적이다.

암 약물 설계에서의 현재의 경향은 정상적인 세포를 남겨두면서 종양 내의 아폽토시스 신호전달 경로를 활성화시키는 선택적 표적화에 초점을 맞추고 있다. TRAIL(tumor necrosis factor-related apoptosis-inducing ligand: 종양 괴사 인자-관련 아폽토시스 유도 리간드)과 같은 특정 화학요법제의 종양 특이성이 보고되고 있다. TRAIL은 사멸 수용체의 결합을 통해 아폽토시스를 유도하는 종양 괴사 인자(TNF) 상과의 몇몇 구성원 중 하나이다. TRAIL은 사람에게서 2개의 사멸 수용체 및 3개의 유인 수용체를 포함하는 특이한 복합 수용체 시스템과 상호작용한다. TRAIL은 단독으로, 그리고 이온화 방사선을 비롯한 다른 제제와 병용하여 항암제로서 사용되어 왔다. TRAIL은 생존 인자 Bcl-2 및 Bcl-XL을 과발현하는 세포에서 아폽토시스를 개시할 수 있으며, 화학요법 약물에 대한 후천적 내성을 갖는 종양에 대한 치료 전략을 제시할 수 있다. TRAIL은 이것의 동족 수용체에 결합하며, TRADD(TNF Receptor-Associated Death Domain: TNF 수용체-관련 사멸 도메인)와 같은 어댑터 분자를 이용하여 카스파제 캐스케이드를 활성화시킨다. TRAIL 신호전달은 신호전달 경로에서 이들 단백질에 중요한 역할을 하는 cIAP-1 또는 cIAP-2의 과발현에 의해 억제된다. 현재, 5개의 TRAIL 수용체가 확인되고 있다. 2개의 수용체인 TRAIL-R1(DR4) 및 TRAIL-R2(DR5)는 아폽토시스 신호전달을 매개하며, 3개의 비-기능성 수용체인 DcR1, DcR2 및 오스테오프로테게린(OPG)은 유인 수용체로서 작용할 수 있다. DR4 및 DR5의 발현을 증가시키는 제제가 TRAIL과 병용될 경우 상승적 항종양 활성을 나타낼 수 있다.

현재, 암 및 자가 면역 질환과 같은 아폽토시스의 결함과 관련된 질환 상태에서 IAP의 작용을 방해하는 화합물을 확인하는 것을 목적으로 하는, 약물 발견에 대한 노력이 이루어지고 있다.

발명의 개요

본 발명은 IAP 억제제 및 이러한 억제제를 사용하여 아폽토시스를 조절하는 치료 방법을 제공한다.

하나는 양태에서, 본 발명은 하기 화학식 I의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염을 제공한다:

화학식 I

상기 화학식 I에서,

R1은 H, 하이드록시, 알킬, 알케닐, 사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬, 아릴, 알콕시, 아릴옥시 또는 헤테로아릴이며;

R2 및 R2'는 각각 독립적으로 H, 알킬, 사이클로알킬 또는 헤테로사이클로알킬이거나, 또는 R2'가 H인 경우, R2 및 R1은 함께 아지리딘 또는 아제티딘 환을 형성하며;

R3 및 R4는 각각 독립적으로 H, 알킬, 사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴이거나, 또는 R3 및 R4는 둘 다, 공유 결합에 의해 연결되거나 1 내지 8개의 탄소 원자를 갖는 알킬렌 또는 알케닐렌 그룹(여기서, 1 내지 3개의 탄소 원자는 O, S(O)_n 또는 N(R8)에 의해 대체될 수 있다)에 의해 연결된 탄소 원자이며;

R5는 H, 하이드록시, 알콕시, 아릴옥시, 알킬, 사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴이며;

R6은 H, 하이드록시, 알콕시, 아릴옥시, 알킬, 사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴이며;

R7은 알킬, 사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴이며;

R8은 H, 하이드록시, 알콕시, 아릴옥시, 알킬, 사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴이며;

M은 결합 또는 1 내지 5개의 탄소 원자를 갖는 알킬렌 그룹이며;

n은 1 또는 2이며,

단, R5 및 R6이 둘 다 H인 경우 또는 R5가 아릴옥시이고 R6이 H인 경우, (1) R3 및 R4가 둘 다, 공유 결합에 의해 연결되거나 1 내지 8개의 탄소 원자를 갖는 알킬렌 또는 알케닐렌 그룹(여기서, 1 내지 3개의 탄소 원자는 O, S(O)_n 또는 N(R8)에 의해 대체될 수 있다)에 의해 연결된 탄소 원자이거나, 또는 (2) R7이

또는

(여기서, R9, R1O, R12, R13 및 R14는 하이드록시, 알콕시, 아릴옥시, 알킬 또는 아릴로부터 독립적으로 선택된다)로부터 선택된다.

또 다른 양태에 있어서, 본 발명은 하기 화학식 II의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염을 제공한다:

화학식 II

상기 화학식 II에서,

n은 1 또는 2이며,

단, R5가 H 또는 아릴옥시인 경우, (1) R3 및 R4가 둘 다, 공유 결합에 의해 연결되거나 1 내지 8개의 탄소 원자를 갖는 알킬렌 또는 알케닐렌 그룹(여기서, 1 내지 3개의 탄소 원자는 O, S(O)_n 또는 N(R8)에 의해 대체될 수 있다)에 의해 연결된 탄소 원자이거나, 또는 (2) R7이

또는

여전히 또 다른 양태에서, 본 발명은 하기 화학식 IV의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염을 제공한다:

화학식 IV

상기 화학식 IV에서,

R2 및 R2'는 각각 독립적으로 H, 알킬, 사이클로알킬 또는 헤테로사이클로알킬이거나, 또는 R2'가 H인 경우, R2 및 R1은 함께 아지리딘 또는 아제티딘을 형성하며;

R6은 하이드록시, 알콕시, 아릴옥시, 알킬, 사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴이며;

M은 결합이거나, 또는 1 내지 5개의 탄소 원자를 갖는 알킬렌 그룹이며;

n은 1 또는 2이다.

간결함 및 예시적인 목적을 위해, 본 발명의 원리는 이것의 예시적인 특정 실시 양태를 주로 언급함으로써 기술된다. 또한, 하기 기술에서, 다수의 구체적인 세부 사항은 본 발명의 완전한 이해를 제공하기 위해 기술된 것이다. 그러나, 당업자에게는, 이러한 구체적인 세부 사항에 한정됨이 없이 본 발명을 실시할 수 있음이 분명하다. 다른 경우에서, 널리 공지된 방법 및 구조는 본 발명을 불필요하게 모호하게 하지 않도록 하기 위해 상세히 기술하지 않았다.

정의

"알킬"(일가) 및 "알킬렌"(이가)은, 단독으로 또는 다른 용어(예, 알콕시)의 일부로서 사용되는 경우, 달리 특정되지 않는다면 12개 이하의 탄소 원자를 갖는 분지 또는 비분지, 포화 지방족 탄화수소 그룹을 의미한다. 특정 알킬 그룹의 예에는, 메틸, 에틸, n-프로필, 이소프로필, n-부틸, 이소부틸, 2급-부틸, 3급-부틸, n-펜틸, 2-메틸부틸, 2,2-디메틸프로필, n-헥실, 2-메틸펜틸, 2,2-디메틸부틸, n-헵틸, 3-헵틸, 2-메틸헥실 등이 포함되지만, 이것으로 한정되는 것은 아니다. 용어 "저급 알킬", "C₁-C₄ 알킬" 및 "1 내지 4개의 탄소 원자를 갖는 알킬"은 동의어로서 상호교환적으로 사용되며, 메틸, 에틸, 1-프로필, 이소프로필, 사이클로프로필, 1-부틸, 2급-부틸 또는 t-부틸을 의미한다. 알킬렌 그룹에는 메틸렌, 에틸렌, n-프로필렌, n-부틸렌 및 2-메틸-부틸렌이 포함되지만, 이것으로 한정되지 않는다. 용어 "알킬"은 "비치환된 알킬" 및 "치환된 알킬"(문맥상 분명하게 다르게 지시되지 않는 한) 둘 다를 포함하며, 후자인 "치환된 알킬"은 탄화수소 골격의 하나 이상(종종 4개 이하) 탄소 원자 상에 하나 이상의 수소가 치환된 치환기를 갖는 알킬 잔기를 지칭한다. 상기 치환기는 할로(예: I, Br, Cl, F), 하이드록시, 알케닐, 알키닐, 아미노, 시아노, 알콕시(예를 들어, C₁-C₆ 알콕시), 아릴옥시(예를 들어, 페녹시), 니트로, 카복실, 옥소, 카바모일, 사이클로알킬, 아릴(예를 들어, 아르알킬 또는 아릴알킬), 헤테로사이클릴, 헤테로아릴, 알킬설포닐, 아릴설포닐 및 -OCF₃으로 이루어진 그룹으로부터 독립적으로 선택된다. 예시적인 치환된 알킬 그룹에는 시아노메틸, 니트로메틸, 하이드록시메틸, 트리틸옥시메틸, 프로피오닐옥시메틸, 아미노메틸, 카복시메틸, 카복시에틸, 카복시프로필, 2,3-디클로로펜틸, 3-하이드록시-5-카복시헥실, 아세틸[에틸 그룹의 -CH₂ 부분 상의 2개의 수소 원자가 옥소(=0)에 의해 치환됨], 2-아미노프로필, 펜타클로로부틸, 트리플루오로메틸, 메톡시에틸, 3-하이드록시펜틸, 4-클로로부틸, 1,2-디메틸-프로필, 펜타플루오로에틸, 알킬옥시카보닐메틸, 알릴옥시카보닐아미노메틸, 카바모일옥시메틸, 메톡시메틸, 에톡시메틸, t-부톡시메틸, 아세톡시메틸, 클로로메틸, 브로모메틸, 요오도메틸, 트리플루오로메틸, 6-하이드록시헥실, 2,4-디클로로(n-부틸), 2-아미노(이소-프로필) 및 2-카바모일옥시에틸이 포함된다. 특정의 치환된 알킬은 치환된 메틸 그룹이다. 치환된 메틸 그룹의 예에는 하이드록시메틸, 보호된 하이드록시메틸(예: 테트라하이드로피라닐-옥시메틸), 아세톡시메틸, 카바모일옥시메틸, 트리플루오로메틸, 클로로메틸, 카복시메틸, 카복실[메틸 상에 3개의 수소 원자가 치환된 경우, 2개의 수소는 옥소(=O)에 의해 치환되고, 나머지 수소는 하이드록시(-OH)에 의해 치환됨], 브로모메틸 및 요오도메틸과 같은 그룹이 포함된다. 용어 알킬렌은 "비치환된 알킬렌" 및 "치환된 알킬렌" 둘 다를 포함한다(문맥상 분명하게 달리 지시되지 않는 한). 알킬렌 그룹은 상기에서 알킬에 대해 기술된 바와 같은 그룹에 의해 유사하게 치환될 수 있다.

"알케닐"(일가) 및 "알케닐렌"(이가)는, 단독으로 또는 다른 용어의 일부로서 사용되는 경우, 하나 이상의 탄소-탄소 이중 결합, 전형적으로 1 또는 2개의 탄소-탄소 이중 결합을 함유하며, 선형 또는 분지형일 수 있는 불포화 탄화수소 그룹을 의미한다. 대표적인 알케닐 그룹에는 예시로서 비닐, 알릴, 이소프로페닐, 부트-2-엔일, n-펜트-2-엔일 및 n-헥스-2-엔일이 포함된다. 용어 알케닐 및 알케닐렌에는 "비치환된 알케닐" 및 "치환된 알케닐" 둘 다 뿐만 아니라 "비치환된 알케닐렌" 및 "치환된 알케닐렌" 둘 다가 포함된다(문맥상 분명하게 달리 지시되지 않는 한). 치환된 변형체는 탄화수소 골격의 하나 이상(종종 4개 이하) 탄소 원자 상에서 하나 이상의 수소가 치환된 치환기를 갖는 알케닐 및 알케닐렌 잔기를 지칭한다. 이러한 치환기는 할로(예: I, Br, Cl, F), 하이드록시, 아미노, 시아노, 알콕시(예를 들어, C₁-C₆ 알콕시), 아릴옥시(예를 들어, 페녹시), 니트로, 카복실, 옥소, 카바모일, 사이클로알킬, 아릴(예, 아르알킬), 헤테로사이클릴, 헤테로아릴, 알킬설포닐, 아릴설포닐 및 -OCF₃으로 이루어진 그룹으로부터 독립적으로 선택된다.

"알키닐"은 하나 이상의 탄소-탄소 삼중 결합, 전형적으로 1개의 탄소-탄소 삼중 결합을 함유하며, 선형 또는 분지형일 수 있는 일가의 불포화 탄화수소 그룹을 의미한다. 대표적인 알키닐 그룹에는 예시로서 에티닐, 프로파길 및 부트-2-이닐이 포함된다.

"사이클로알킬"은, 단독으로 또는 또 다른 용어의 일부로서 사용되는 경우, 달리 특정되지 않는 한 12개 이하의 탄소 원자를 갖는 포화 또는 부분적으로 불포화된 환식 지방족 탄화수소 그룹(카보사이클 그룹)을 의미하며, 융합 사이클로알킬을 비롯한 환식 및 다환식을 포함한다. 용어 사이클로알킬은 "비치환된 사이클로알킬" 및 "치환된 사이클로알킬" 둘 다를 포함하며(문맥상 명확하게 달리 지시되지 않는 한), 후자는 탄화수소 골격의 하나 이상(종종 4개 이하) 탄소 원자 상에 하나 이상의 수소가 치환된 치환기를 갖는 사이클로알킬 잔기를 의미한다. 이러한 치환기는 할로(예: I, Br, Cl, F), 하이드록시, 아미노, 시아노, 알콕시(예를 들어, C₁-C₆ 알콕시), 아릴옥시(예를 들어, 페녹시), 니트로, 카복실, 옥소, 카바모일, 알킬(트리플루오로메틸과 같은 치환된 알킬 포함), 아릴, 헤테로사이클릴, 헤테로아릴, 알킬설포닐, 아릴설포닐 및 -OCF₃으로 이루어진 그룹으로부터 독립적으로 선택된다. 사이클로알킬의 예에는 사이클로프로필, 사이클로부틸, 사이클로펜틸, 사이클로헥실, 테트라하이드로나프틸 및 인다닐이 포함된다.

"아미노"는 1급(즉, -NH₂), 2급(즉, -NHR) 및 3급(즉, -NRR) 아민을 의미하며, 여기서 R 그룹은 다양한 잔기, 통상적으로 알킬 또는 아릴일 수 있다. 특정 2급 및 3급 아민은 알킬아민, 디알킬아민, 아릴아민, 디아릴아민, 아르알킬아민 및 디아르알킬아민이다. 특정 2급 및 3급 아민은 메틸아민, 에틸아민, 프로필아민, 이소프로필아민, 페닐아민, 벤질아민, 디메틸아민, 디에틸아민, 디프로필아민 및 디이소프로필아민이다.

"아릴"은, 단독으로 또는 또 다른 용어의 일부로서 사용되는 경우, 지정된 탄소 원자의 수, 또는 수가 지정되지 않은 경우 6 내지 14까지의 탄소 원자를 갖는 융합된 또는 융합되지 않은 방향족 카보사이클릭 그룹을 의미한다. 특정 아릴 그룹에는 페닐, 나프틸, 바이페닐, 페난트레닐, 나프타세닐 등이 포함된다(문헌[Lang's Handbook of Chemistry(Dean, J. A., cd) 13^th ed. Table 7-2[1985]] 참조). 페닐 그룹이 일반적으로 바람직하다. 용어 아릴은 "비치환된 아릴" 및 "치환된 아릴" 둘 다를 포함하며(문맥상 명확하게 달리 지시되지 않는 한), 후자는 탄화수소 골격의 하나 이상(종종 6개 이하)의 탄소 원자 상에 하나 이상의 수소가 치환된 치환기를 갖는 아릴 잔기를 의미한다. 이러한 치환기는 할로(예: I, Br, Cl, F), 하이드록시, 아미노, 시아노, 알콕시(예를 들어, C₁-C₆ 알콕시), 아릴옥시(예를 들어, 페녹시), 니트로, 카복실, 옥소, 카바모일, 알킬(예를 들어, 트리플루오로메틸), 아릴, -OCF₃, 알킬설포닐, 아릴설포닐, 헤테로사이클릴 및 헤테로아릴로 이루어진 그룹으로부터 독립적으로 선택된다. 상기 치환된 페닐의 예에는 모노- 또는 디(할로) 페닐 그룹, 예를 들어 2-클로로페닐, 2-브로모페닐, 4-클로로페닐, 2,6-디클로로페닐, 2,5-디클로로페닐, 3,4-디클로로페닐, 3-클로로페닐, 3-브로모페닐, 4-브로모페닐, 3,4-디브로모페닐, 3-클로로-4-플루오로페닐, 2-플루오로페닐; 모노- 또는 디(하이드록시) 페닐 그룹, 예를 들어 4-하이드록시페닐, 3-하이드록시페닐, 2,4-디하이드록시페닐, 이들의 보호된-하이드록시 유도체; 니트로페닐 그룹, 예를 들어 3- 또는 4-니트로페닐; 시아노페닐 그룹, 예를 들어 4-시아노페닐; 모노- 또는 디(저급 알킬)페닐 그룹, 예를 들어 4-메틸페닐, 2,4-디메틸페닐, 2-메틸페닐, 4-(이소-프로필)페닐, 4-에틸페닐, 3-(n-프로필)페닐; 모노- 또는 디(알콕시) 페닐 그룹, 예를 들어 3,4-디메톡시페닐, 3-메톡시-4-벤질옥시페닐, 3-메톡시-4-(1-클로로메틸)벤질옥시-페닐, 3-에톡시페닐, 4-(이소프로폭시)페닐, 4-(t-부톡시)페닐, 3-에톡시-4-메톡시페닐; 3- 또는 4-트리플루오로메틸페닐; 모노- 또는 디카복시페닐 또는 (보호된 카복시)페닐 그룹, 예를 들어 4-카복시페닐; 모노- 또는 디(하이드록시메틸)페닐 또는 (보호된 하이드록시메틸)페닐, 예를 들어 3-(보호된 하이드록시메틸)페닐 또는 3,4-디(하이드록시메틸)페닐; 모노- 또는 디(아미노메틸)페닐 또는 (보호된 아미노메틸)페닐, 예를 들어 2-(아미노메틸)페닐 또는 2,4-(보호된 아미노메틸)페닐; 또는 모노- 또는 디(N-(메틸설포닐아미노))페닐, 예를 들어 3-(N-메틸설포닐아미노)페닐이 포함되지만, 이것으로 한정되는 것은 아니다. 또한, 이치환된 페닐 그룹과 같은 치환기는 동일하거나 상이할 수 있으며, 예를 들어 3-메틸-4-하이드록시페닐, 3-클로로-4-하이드록시페닐, 2-메톡시-4-브로모페닐, 4-에틸-2-하이드록시페닐, 3-하이드록시-4-니트로페닐, 2-하이드록시-4-클로로페닐을 들 수 있을 뿐만 아니라, 치환기가 상이한 삼치환된 페닐 그룹은 예를 들어 3-메톡시-4-벤질옥시-6-메틸 설포닐아미노, 3-메톡시-4-벤질옥시-6-페닐 설포닐아미노를 들 수 있으며, 치환기가 상이한 사치환된 페닐 그룹은 예를 들어 3-메톡시-4-벤질옥시-5-메틸-6-페닐 설포닐아미노를 들 수 있다. 특정 치환된 페닐 그룹은 2-클로로페닐, 2-아미노페닐, 2-브로모페닐, 3-메톡시페닐, 3-에톡시-페닐, 4-벤질옥시페닐, 4-메톡시페닐, 3-에톡시-4-벤질옥시페닐, 3,4-디에톡시페닐, 3-메톡시-4-벤질옥시페닐, 3-메톡시-4-(1-클로로메틸)벤질옥시-페닐, 3-메톡시-4-(1-클로로메틸)벤질옥시-6-메틸 설포닐아미노페닐 그룹이다. 융합된 아릴 환은 또한 치환된 알킬 그룹에서와 동일한 방식으로 본 명세서에 특정된 치환된 치환기, 예를 들어 1, 2 또는 3개의 치환기로 치환될 수 있다.

"헤테로사이클릭 그룹", "헤테로사이클릭", "헤테로사이클", "헤테로사이클릴", "헤테로사이클로알킬" 또는 "헤테로사이클로"는 단독으로 및 복합 그룹에서의 잔기로서 사용되는 경우, 상호교환적으로 사용될 수 있으며, 지정된 원자의 수 또는 수가 특별하게 지정되지 않은 경우 5 내지 약 14개의 원자를 갖는 임의의 사이클로알킬 그룹, 즉 모노-, 바이-, 또는 트리사이클릭, 포화 또는 불포화, 비방향족 헤테로 원자 함유의 환 시스템을 의미하되, 상기 환의 원자는 탄소 및 하나 이상의 헤테로 원자, 통상적으로 4개 이하의 헤테로 원자(질소, 황 또는 산소)이다. 이 정의에는 임의의 바이사이클릭 그룹이 포함되며, 상기 헤테로사이클릭 환의 어떤 것은 방향족 환[즉, 아릴(예, 벤젠) 또는 헤테로아릴 환]에 융합된다. 특정 실시 양태에서, 상기 그룹에는 1 내지 4개의 헤테로 원자가 결합된다. 전형적으로, 5원 환은 0 내지 1개의 이중 결합을 가지며, 6원 또는 7원 환은 0 내지 2개의 이중 결합을 가지며, 질소 또는 황 헤테로원자가 임의적으로 산화될 수 있으며(예: SO, SO₂), 임의의 질소 헤테로 원자는 임의로 사급화될 수 있다. 특정 비방향족 헤테로사이클에는 모르폴리닐(모르폴리노), 피롤리디닐, 옥시라닐, 인돌리닐, 이소인돌리닐, 테트라하이드로퀴놀리닐, 테트라하이드로이소퀴놀리닐, 옥세타닐, 테트라하이드로푸라닐, 2,3-디하이드로푸라닐, 2H-피라닐, 테트라하이드로피라닐, 아지리디닐, 아제티디닐, 1-메틸-2-피롤릴, 피페라지닐 및 피페리디닐이 포함된다. 용어 "헤테로사이클로"는 "비치환된 헤테로사이클로" 및 "치환된 헤테로사이클로" 둘 다를 포함하며(문맥상 명확하게 달리 지시되지 않는 한), 후자인 "치환된 헤테로사이클로"는 헤테로사이클로 골격의 하나 이상(종종 6개 이하)의 원자 상에 하나 이상의 수소가 치환된 치환기를 갖는 헤테로사이클로 잔기를 의미한다. 이러한 치환기는 할로(예: I, Br, Cl, F), 하이드록시, 아미노, 시아노, 알콕시(예를 들어, C₁-C₆ 알콕시), 아릴옥시(예를 들어, 페녹시), 니트로, 카복실, 옥소, 카바모일, 알킬(예를 들어, 트리플루오로메틸), -OCF₃, 아릴, 알킬설포닐 및 아릴설포닐로 이루어진 그룹으로부터 독립적으로 선택된다.

"헤테로아릴"은 단독으로 및 복합 그룹에서 잔기로서 사용되는 경우, 지정된 원자의 수를 갖거나, 또는 수가 특별하게 지정되지 않은 경우에는 하나 이상의 환이 5원, 6원 또는 7원 환이고, 원자의 총수가 5 내지 약 14개이고, 질소, 산소 및 황으로 이루어진 그룹으로부터 선택된 1 내지 4개의 헤테로원자를 함유하는 임의 아릴 그룹, 즉 모노-, 바이- 또는 트리사이클릭 방향족 환 시스템을 의미한다(상기 문헌[Lang's Handbook of Chemistry] 참조). 이 정의 내에는 임의의 바이사이클릭 그룹이 포함되며, 상기 헤테로아릴 환의 어떤 것은 벤젠 환에 융합된다. 하기 환 시스템은 용어 "헤테로아릴"로 나타내는 헤테로아릴(치환되든 또는 비치환되든) 그룹의 예이다: 티에닐(대안적으로, 티오페닐로 불리움), 푸릴, 이미다졸릴, 피라졸릴, 티아졸릴, 이소티아졸릴, 옥사졸릴, 이속사졸릴, 트리아졸릴, 티아디아졸릴, 옥사디아졸릴, 테트라졸릴, 티아트리아졸릴, 옥사트리아졸릴, 피리딜, 피리미딜, 피라지닐, 피리다지닐, 티아지닐, 옥사지닐, 트리아지닐, 티아디아지닐, 옥사디아지닐, 디티아지닐, 디옥사지닐, 옥사티아지닐, 테트라지닐, 티아트리아지닐, 옥사트리아지닐, 디티아디아지닐, 이미다졸리닐, 디하이드로피리미딜, 테트라하이드로피리미딜, 테트라졸로[1,5-b]피리다지닐 및 푸리닐 뿐만 아니라, 벤조-융합된 유도체, 예를 들어 벤족사졸릴, 벤조푸릴, 벤조티에닐, 벤조티아졸릴, 벤조티아디아졸릴, 벤조트리아졸릴, 벤조이미다졸릴 및 인돌릴. 용어 헤테로아릴은 "비치환된 헤테로아릴" 및 "치환된 헤테로아릴" 둘 다를 포함하며(문맥상 명확하게 달리 지시되지 않는 한), 후자는 헤테로아릴 골격의 하나 이상(종종 6개 이하)의 원자 상에 하나 이상의 수소가 대체된 치환기를 갖는 헤테로아릴 잔기를 의미한다. 이러한 치환기는 할로(예: I, Br, Cl, F), 하이드록시, 아미노, 시아노, 알콕시(예를 들어, C₁-C₆ 알콕시), 아릴옥시(예를 들어, 페녹시), 니트로, 카복실, 옥소, 카바모일, 알킬(예를 들어, 트리플루오로메틸), -OCF₃, 아릴, 알킬설포닐 및 아릴설포닐로 이루어진 그룹으로부터 독립적으로 선택된다. 특정의 "헤테로아릴"에는 1H-피롤로[2,3-b]피리딘, 1,3-티아졸-2-일, 4-(카복시메틸)-5-메틸-1,3-티아졸-2-일, 1,2,4-티아디아졸-5-일, 3-메틸-1,2,4-티아디아졸-5-일, 1,3,4-트리아졸-5-일, 2-메틸-1,3,4-트리아졸-5-일, 2-하이드록시-1,3,4-트리아졸-5-일, 2-카복시-4-메틸-1,3,4-트리아졸-5-일, 1,3-옥사졸-2-일, 1,3,4-옥사디아졸-5-일, 2-메틸-1,3,4-옥사디아졸-5-일, 2-(하이드록시메틸)-1,3,4-옥사디아졸-5-일, 1,2,4-옥사디아졸-5-일, 1,3,4-티아디아졸-5-일, 2-티올-1,3,4-티아디아졸-5-일, 2-(메틸티오)-1,3,4-티아디아졸-5-일, 2-아미노-1,3,4-티아디아졸-5-일, 1H-테트라졸-5-일, 1-메틸-1H-테트라졸-5-일, 1-(1-(디메틸아미노)에트-2-일)-1H-테트라졸-5-일, 1-(카복시메틸)-1H-테트라졸-5-일, 1-(메틸설폰산)-1H-테트라졸-5-일, 2-메틸-1H-테트라졸-5-일, 1,2,3-트리아졸-5-일, 1-메틸-1,2,3-트리아졸-5-일, 2-메틸-1,2,3-트리아졸-5-일, 4-메틸-1,2,3-트리아졸-5-일, 피리드-2-일 N-옥사이드, 6-메톡시-2-(n-옥사이드)-피리다즈-3-일, 6-하이드록시피리다즈-3-일, 1-메틸피리드-2-일, 1-메틸피리드-4-일, 2-하이드록시피리미드-4-일, 1,4,5,6-테트라하이드로-5,6-디옥소-4-메틸-아스-트리아진-3-일, 1,4,5,6-테트라하이드로-4-(포르밀메틸)-5,6-디옥소-아스-트리아진-3-일, 2,5-디하이드로-5-옥소-6-하이드록시-아스-트리아진-3-일, 2,5-디하이드로-5-옥소-6-하이드록시-아스-트리아진-3-일, 2,5-디하이드로-5-옥소-6-하이드록시-2-메틸-아스-트리아진-3-일, 2,5-디하이드로-5-옥소-6-하이드록시-2-메틸-아스-트리아진-3-일, 2,5-디하이드로-5-옥소-6-메톡시-2-메틸-아스-트리아진-3-일, 2,5-다이드로-5-옥소-아스-트리아진-3-일, 2,5-디하이드로-5-옥소-2-메틸-아스-트리아진-3-일, 2,5-디하이드로-5-옥소-2,6-디메틸-아스-트리아진-3-일, 테트라졸로[1,5-b]피리다진-6-일 및 8-아미노테트라졸로[1,5-b]-피리다진-6-일이 포함된다. "헤테로아릴"의 대안적인 군에는 4-(카복시메틸)-5-메틸-1,3-티아졸-2-일, 1,3,4-트리아졸-5-일, 2-메틸-1,3,4-트리아졸-5-일, 1H-테트라졸-5-일, 1-메틸-1H-테트라졸-5-일, 1-(1-(디메틸아미노)에트-2-일)-1H-테트라졸-5-일, 1-(카복시메틸)-1H-테트라졸-5-일, 1-(메틸설폰산)-1H-테트라졸-5-일, 1,2,3-트리아졸-5-일, 1,4,5,6-테트라하이드로-5,6-디옥소-4-메틸-아스-트리아진-3-일, 1,4,5,6-테트라하이드로-4-(2-포르밀메틸)-5,6-디옥소-아스-트리아진-3-일, 2,5-디하이드로-5-옥소-6-하이드록시-2-메틸-아스-트리아진-3-일, 2,5-디하이드로-5-옥소-6-하이드록시-2-메틸-아스-트리아진-3-일, 테트라졸로[1,5-b]피리다진-6-일 및 8-아미노테트라졸로[1,5-b]피리다진-6-일이 포함된다.

"IAP 억제제" 또는 "IAP 길항제"는 예를 들어 IAP 단백질의 카스파제 단백질에의 결합을 감소 또는 방지함으로써 IAP 단백질의 카스파제 단백질에의 결합을 비롯한 IAP 단백질의 생리학적 작용을 방해하거나, IAP 단백질에 의한 아폽토시스의 억제를 감소 또는 방지하거나, 또는 Smac의 아미노 말단 부분과 유사한 방식으로 IAP BIR 도메인에 결합하는 화합물을 의미한다.

본 명세서에 사용된 용어 "약제학적으로 허용되는", "생리학적으로 허용되는" 및 이것의 문법적 변형 용어는, 이들이 조성물, 부형제, 담체, 희석제 및 제제를 지칭할 경우, 상호교환적으로 사용되며, 이 물질들이 사람에게 투여될 수 있음을 나타낸다.

"약제학적으로 허용되는 염"은 산 부가염 및 염기 부가염 둘 다를 포함한다.

"약제학적으로 허용되는 산 부가염"은 유리 염기의 생물학적 효능 및 필수적인 특성을 보유하고, 생물학적으로 또는 그 외의 것으로도 바람직하며, 무기 산 및 유기 산으로 형성된 비독성 염을 의미한다. 염기성 화합물의 산부가염은 유리 염기 형태의 화합물을 충분한 양의 목적하는 산과 접촉시켜 통상의 방법으로 염을 생성시킴으로서 제조된다. 유리 염기 형태는 염 형태를 염기와 접촉시키고 유리 염기를 통상의 방법으로 분리시킴으로써 재생될 수 있다. 유리 염기 형태는 일반적으로 극성 용매에서의 용해도와 같은 소정의 물리적 성질이 이들의 각각의 염 형태와 다소 다르다.

"약제학적으로 허용되는 염기 부가염"은 알칼리 금속 수산화물 및 알칼리 토금속 수산화물과 같이 금속 또는 아민, 또는 유기 아민을 사용하여 형성된다. 산 화합물의 염기 부가염은 유리 산 형태를 충분한 양의 바라는 염기와 접촉시켜 통상의 방법으로 염을 생성시킴으로서 제조된다. 유리 산 형태는 염 형태를 산과 접촉시키고 유리 산을 통상의 방법으로 분리시킴으로써 재생될 수 있다. 유리 산형태는 통상적으로 극성 용매에서의 용해도와 같은 소정의 물리적 성질이 이들의 각각의 염 형태와 다소 다르다.

본 명세서에 사용된 "대상체" 또는 "환자"는 사람, 개, 고양이, 말, 소, 돼지, 양, 염소, 닭, 원숭이, 토끼, 래트 및 마우스 등을 포함하나 이것으로 한정되지 않는 동물 또는 포유동물을 지칭한다.

본 명세서에 사용된 용어 "치료"는 환자의 원하지 않는 상태 또는 질환의 경감, 예방, 개선 또는 하나 이상의 증후의 개시의 지연을 의미한다. 본 발명의 실시 양태는 아폽토시스를 촉진하며 이에 따라 세포 사멸을 촉진하는 치료법에 관한 것이다.

본 명세서에 사용된 용어 "치료학적 유효량" 또는 "유효량"은 특정 대상체 또는 대상체군의 치료를 위해 단독으로 투여하거나 또는 또 다른 약제학적 제제와 병용하여 투여할 때, 치료될 질환의 억제, 중단, 질환 개시의 지연 또는 질환 개선 유발에 충분한 양의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염을 의미한다. 예를 들어 사람 또는 기타 포유동물에서 치료학적 유효량은 실험실 또는 임상 환경에서 실험적으로 결정될 수 있거나, 특정 질환 및 치료될 대상체를 위한 미국 식품 의약국 또는 동등 외국 기관의 지침에 필요한 양일 수 있다.

발명의 상세한 설명

본 발명의 IAP-결합 화합물은 세포의 아폽토시스를 촉진할 수 있다는 것이 본 발명에 따라 입증되었다.

본 발명의 화합물은 이것의 유리 염기 또는 유리 산 형태로, 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염 형태로 사용될 수 있다. 본 발명의 실시에서, 유리 염기 또는 유리 산 형태의 본 발명의 화합물은 일반적으로 분자량이 1000 이하, 가장 종종 분자량이 800 이하, 종종 분자량이 600 이하일 것이다.

하기 제조 및 반응식은 본 발명의 화합물의 합성을 예시하는 것이다. 이러한 반응식 전반에서와 응용에서 일반적으로 사용되는 약어를 하기 표에 나타낸다:

하기 실시예에 기재된 NMR 데이터에 대한 약어는 다음과 같다: s=단일선, d=이중선, t=삼중선, q=사중선, m=다중선, dd=이중선 2개, ddd=이중선 2개의 반복, dt=삼중선 2개, app=겉보기, br=넓은 피크, J는 헤르쯔(Hertz)로 측정된 NMR 커플링 상수를 나타냄.

아래 열거된 화합물의 XIAP BIR-3 또는 cIAP-1 BIR-3에 대한 결합 친화도는 실질적으로 형광 기질로서 형광적으로 표지된 펩티드 AbuRPF-K(5-Fam)-NH2를 사용하여 문헌[Nikolovska-Coleska, Z. et.al. (Analytical Biochemistry (2004), vol. 332:261-273)]에 기술된 바에 따라 측정하였다. 화합물의 결합 친화도는 Kd 값으로 기록된다. 간단하게 말하자면, 여러 농도의 시험 펩티드를 100 mg/ml의 소 g-글로불린을 함유한 0.1M 인산 칼륨 완충액 100 mL(pH 7.5) 중에서 15분 동안 실온에서 5 nM의 형광적으로 표지된 펩티드(즉, 성숙된 N-말단 Smac 펩티드 - AbuRPF-K(5-Fam)-NH2) 및 40 nM의 BIR3와 혼합시켰다. 항온처리 후, 485 nm의 여기 필터 및 520 nm의 방출 필터를 사용하여 빅터2V(Victor2V)[퍼킨엘머 라이프 사이언스(PerkinElmer Life Sciences)로부터 구매 가능]에서 분극 값(mP)을 측정하였다. 기록된 Kd 값은 범위 값(A = 0.1μM 미만, B = 0.1μM 내지 1μM, C = 1μM 초과 내지 lOμM, D = 10μM 초과)으로 제공되며, 달리 지시되지 않는 한, XIAP BIR-3에 대한 Kd 값이다.

반응식 I

2-{3-[아세틸-(3- 브로모 -피리딘-2-일)-아미노]- 프로페닐 }-4-(3급-부틸-디메틸- 실라닐옥시 )- 피롤리딘 -1- 카복실산 벤질 에스테르(2):

0℃의 질소 대기 하에서, NaH(0.89 g, 23.0 mmol)를 DMF(30 mL) 중에 2-아세틸아미노-3-브로모피리딘(4.12 g, 19.2 mmol)을 함유한 용액에 분획 첨가하였다. 0℃에서 15분 후와 주위 온도에서 1시간 후, 반응 혼합물을 0℃로 다시 냉각시키고, DMF(10 mL) 중에 화합물 1(8.99 g, 19.2 mmol; 문헌[Ohtake, N., et al . J. Antibiotics 1997, 50, 586-597] 참조)을 함유한 용액을 적가하였다. 이어서, 반응 혼합물을 주위 온도에서 2시간 동안 교반시켰고, 이때 TLC 분석에 의해 화합물 1의 완전한 소비를 확인하였다[1:1 헥산/EtOAc, R_f(1) = 0.6; R_f(2) = 0.3]. 반응 혼합물을 0℃로 냉각시킨 후, 포화 수성 NH₄Cl을 적가하였다. 생성물을 디에틸 에테르로 추출하였다. 합한 에테르 추출물을 물 및 염수로 세척하고, 무수 Na₂SO₄에서 건조시킨 후 여과시키고 농축시켰다. 조악한 생성물을 플래시 실리카 겔 크로마토그래피(20% EtOAc/헥산)에 의해 정제하여 6.0 g(54%)의 화합물 2를 백색 고체로서 수득하였다.

반응식 II

4- 아세톡시 -2-(1-아세틸-1H- 피롤로[2,3-b]피리딘 -3- 일메틸 )- 피롤리딘 -1- 카복실산 벤질 에스테르(3):

질소 대기 하에서, 무수 DMF(50 ml) 중의 화합물 2(5.92 g, 10.1 mmol)를 함유한 용액을 주위 온도에서 (n-Bu)₄NCl(2.8 g, 10.1 mmol), K₂CO₃(1.4 g, 10.1 mmol), NaHCO₂(0.68 g, 10.1 mmol) 및 Pd(OAc)₂(0.045 g, 0.20 mmol)로 채웠다. 비균질 혼합물을 예열된(85℃) 오일 욕에 침지시켰다. 3시간 후, TLC 분석에 의해 약간의 화합물 2가 남아 있음을 확인하였으며, 따라서 추가적인 Pd(OAc)₂ 촉매(0.01 g)를 첨가하였다. 추가적으로 1시간 동안 가열시킨 후, TLC 분석에 의해 화합물 2의 완전한 소비를 확인하였다[1:1 EtOAc/헥산, R_f(2) = 0.3; R_f(3) = 0.8]. 따뜻한 반응 혼합물을 빙욕에서 냉각시키고, 이어서 디에틸 에테르로 희석시키고, 셀라이트(Celite)® 패드를 통해 여과시켰다. 고형물을 디에틸 에테르로 세척하고, 여액을 물로 여러번 세척하여 과량의 DMF를 제거하고, 이어서 염수로 한번 세척한 후, 무수 Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 여과시키고, 농축시켜 5.1 g의 조악한 화합물 3을 수득하고, 이것을 플래시 실리카 겔 크로마토그래피(20% EtOAc/헥산)에 의해 정제하여 3.0 g(59%)의 화합물 3을 백색 고체로서 수득하였다.

반응식 III

2-(1-아세틸-1H- 피롤로[2,3-b]피리딘 -3- 일메틸 )-4- 하이드록시 - 피롤리딘 -1- 카복실산 벤질 에스테르(4):

0℃에서 THF(20 ml) 중에 화합물 3(2.99 g, 5.88 mmol)을 함유한 용액에 TBAF(THF 중의 1 M, 11.8 ml, 11.8 mmol) 용액을 적가식으로 첨가하였다. 1.5시간 후, TLC 분석에 의해 화합물 3의 완전한 소비를 확인하였다[1:1 헥산/EtOAc, R_f(3) = 0.64; R_f(4) = 0.3]. 용매를 진공에서 제거하고, 잔류물을 EtOAc에서 용해시킨 후, 물 및 염수로 세척하고, 무수 Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 여과시키고, 농축시켜 2.11 g의 조악한 화합물 4를 수득하고, 이것을 추가의 정제 없이 사용하였다.

반응식 IV

4- 하이드록시 -2-(1H- 피롤로[2,3-b]피리딘 -3- 일메틸 )- 피롤리딘 -1- 카복실산 벤질 에스테르(5):

0℃에서 MeOH(30 ml) 중에 화합물 4(2.11 g, 5.36 mmol)를 함유한 용액에 1M NaOH(8.1 ml, 8.05 mmol)를 적가식으로 첨가하였다. 1시간 후, TLC 분석에 의해 화합물 4의 완전한 소비를 확인하였다[EtOAc, R_f(4) = 0.4; R_f(5) = 0.2]. MeOH를 진공에서 제거하고, 잔류물을 EtOAc에 용해시키고, 묽은 수성 HCl, 물 및 염수로 세척하고, 무수 Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 여과시키고, 농축시켜 1.99 g의 조악한 화합물 5를 수득하고, 이것을 추가의 정제 없이 다음 단계에 사용하였다.

반응식 V

4-(4-니트로- 벤조일옥시 )-2-(1H- 피롤로[2,3-b]피리딘 -3- 일메틸 )- 피롤리딘 -1-카복실산 벤질 에스테르(6):

0℃에서 THF(35 mL) 중에 화합물 5(1.99 g, 5.66 mmol), p-니트로벤조산(1.23 g, 7.36 mmol) 및 Ph₃P(2.07 g, 7.92 mmol)를 함유한 용액에 DIAD(1.6 mL, 8.2 mmol)를 첨가하였다. 첨가의 완결 후, 빙욕을 제거하고, 반응 혼합물을 주위 온도에서 2시간 동안 교반시켰고, 이때 TLC 분석에 의해 화합물 5의 완전한 소비를 확인하였다[EtOAc, R_f(5) = 0.2; R_f(6) = 0.6]. 용매를 진공에서 제거하고, 잔류물을 EtOAc에 용해시키고, 포화 수성 NaHCO₃ 및 염수로 세척하고, 무수 Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 여과시키고, 농축시켜 7 g의 조악한 화합물 6을 수득하고, 이것을 플래시 실리카 겔 크로마토그래피(20% EtOAc/헥산)에 의해 정제하여 2.68 g의 화합물 6(95%)을 백색 고체로서 수득하였다.

반응식 VI

4-하이드록시-2-(1H-피롤로[2,3-b]피리딘-3-일메틸)-피롤리딘-1-카복실산 벤질 에스테르(7):

0℃에서 MeOH/DCM 3:1 혼합물(40 mL) 중에 화합물 6(2.8 g, 5.6 mmol)을 함유한 용액에 1N NaOH(8.5 mL)를 첨가하고, 반응 혼합물을 주위 온도에서 15분 동안 교반시켰으며, 이때 TLC 분석에 의해 화합물 6의 완전한 소비를 확인하였다[1:1 EtOAc/헥산; R_f(6) = 0.3; R_f(7) = 0.02]. 용매를 진공에서 제거하고, 잔류물을 EtOAc에 용해시키고, 묽은 수성 HCl, 물 및 염수로 세척하고, 무수 Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 여과시키고, 농축시켜 2.7 g의 조악한 화합물 7을 수득하고, 이것을 플래시 실리카 겔 크로마토그래피(50% EtOAc/헥산)에 의해 정제하여 1.6 g의 화합물 7(94%)을 백색 고체로서 수득하였다.

반응식 VII

4-아세톡시-2-(1H-피롤로[2,3-b]피리딘-3-일메틸)-피롤리딘-1-카복실산 벤질 에스테르(8):

0℃에서 DCM(20 mL) 중에 화합물 7(1.6 g, 4.55 mmol)을 함유한 용액에 트리에틸아민(1.3 mL, 9.1 mmol)을 첨가한 후, Ac₂O(0.64 mL, 6.82 mmol) 및 촉매량의 DMAP를 적가하였다. 반응 혼합물을 질소 대기 하에서 30분 동안 교반시켰으며, 이때 TLC 분석에 의해 화합물 7의 완전한 소비를 확인하였다[EtOAc: R_f(7) = 0.2, R_f(8) = 0.4]. 반응 혼합물을 분리 깔대기로 옮기고, DCM으로 희석시키고, 물, 묽은 수성 HCl, 물 및 염수로 연속적으로 세척하고, 이어서 무수 Na₂SO₄상에서 건조시키고, 여과시키고, 농축시켜 1.96 g의 조악한 화합물 8을 수득하고, 이것을 추가의 정제 없이 사용하였다.

반응식 VIII

아세트산 5-(1H-피롤로[2,3-b]피리딘-3-일메틸)-피롤리딘-3-일 에스테르(9):

MeOH/EtOAc 1:1 혼합물(14 mL) 중에 화합물 8(0.5 g, 1.27 mmol)을 함유한 용액에 촉매량의 탄소(C)상 Pb 5%를 첨가하고, 비균질 혼합물을 50 PSI(3.4기압) 수소 압력 하의 파르(Parr) 장치 상에 2시간 동안 위치시켰다. TLC 분석에 의해 화합물 8의 완전한 소비를 확인하였다[EtOAc: R_f(8) = 0.4, R_f(9) = 0.04]. 탄소 상 Pb 촉매를 셀라이트® 패드를 통한 여과에 의해 제거하고, 정제된 여액을 진공에서 농축시켰다. LC/MS로 화합물 9의 형성을 확인하였다: 질량 스펙트럼, m/z = 260.1[(M + H)+]. 조악한 생성물 9를 추가의 정제 없이 사용하였다.

반응식 IX

아세트산 1-(2-3급-부톡시카보닐아미노-3-메톡시-부티릴)-5-(1H-피롤로[2,3-b]피리딘-3-일메틸)-피롤리딘-3-일 에스테르(10):

0℃에서 NMP(10 mL) 중에 조악한 화합물 9(0.33 g, 1.27 mmol) 및 Boc-L-Thr(Me)-OH(0.30 g, 1.27 mmol)를 함유한 용액에 DIPEA(0.22 mL, 1.27 mmol)를 첨가한 후, HATU(0.48 g, 1.27 mmol)를 첨가하고, 반응 혼합물을 주위 온도에서 12 시간에 걸쳐 교반시켰으며, 이때 TLC 분석에 의해 화합물 9의 완전한 소비를 확인하였다[1:1 EtOAc/헥산; R_f(9) = 0.01, R_f(1O) = 0.4]. 반응 혼합물을 디에틸 에테르로 희석시키고, 묽은 수성 HCl, 물, 포화 수성 NaHCO₃, 물(5X) 및 염수로 연속적으로 세척하고, 무수 Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 여과시키고, 농축시켜 0.5 g의 조악한 화합물 10을 수득하고, 이것을 플래시 실리카 겔 크로마토그래피(20% EtOAc/헥산)에 의해 정제하여 0.37 g(61%)의 화합물 10을 백색 고체로서 수득하였다.

반응식 X

아세트산 1-(2-아미노-3-메톡시-부티릴)-5-(1H-피롤로[2,3-b]피리딘-3-일메틸)-피롤리딘-3-일 에스테르(11):

0℃에서 DCM(16 mL) 중의 화합물 10(0.20 g, 0.42 mmol) 용액에 TFA(4 mL)를 첨가하였다. 45분 후, TLC 분석에 의해 화합물 10의 완전한 소비를 확인하였다[1:1 EtOAc/헥산; R_f(1O) = 0.5, R_f(11) = 0.04]. 진공에서 농축시킨 후, 잔류물을 EtOAc에 용해시키고, 포화 수성 NaHCO₃, 물 및 염수로 연속적으로 세척하고, 이어서 무수 Na₂SO₄상에서 건조시키고, 여과시키고, 농축시켜 0.16 g의 조악한 화합물 11을 수득하고, 이것을 추가의 정제 없이 사용하였다.

반응식 XI

아세트산 1-{2-[2-(3급- 부톡시카보닐 - 메틸 -아미노)- 프로피오닐아미노 ]-3- 메톡시 - 부티릴 }-5-(1H- 피롤로[2,3-b]피리딘 -3- 일메틸 )- 피롤리딘 -3-일 에스테르(13):

0℃에서 NMP(5 mL) 중에 화합물 11(0.16 g, 0.42 mmol) 및 Boc-L-N(Me)-Ala-OH(0.09 g, 0.42 mmol)를 함유한 용액에 DIPEA(0.07 mL, 0.42 mmol)를 첨가한 후, HATU(0.16 g, 0.42 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 천천히 주위 온도로 가온시켰다. 12시간 후, TLC 분석에 의해 화합물 11의 완전한 소비를 확인하였다[EtOAc; R_f(11) = 0.1, R_f(12) = 0.4]. 반응 혼합물을 디에틸 에테르로 희석시키고, 이어서 묽은 수성 HCl, 물, 포화 수성 NaHCO₃, 물(5X) 및 염수로 연속적으로 세척하였다. 유기 추출물을 무수 Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 여과시키고, 농축시켜 0.23 g의 화합물 12를 수득하고, 이것을 추가의 정제 없이 사용하였다.

반응식 XII

(1-{1-[4- 하이드록시 -2-(1H- 피롤로[2,3-b]피리딘 -3- 일메틸 )- 피롤리딘 -1- 카보닐 ]-2- 메틸 - 프로필카바모일 }-에틸)- 메틸 - 카밤산 3급-부틸 에스테르(13):

MeOH/DCM 5:1 혼합물(6 mL) 중에 화합물 12(0.16 g, 0.28 mmol)를 함유한 용액에 0℃에서 1M NaOH(0.3 mL, 0.3 mmol)를 첨가하였다. 90분 후, TLC 분석에 의해 화합물 12의 완전한 소비를 확인하였다[20% MeOH/DCM; R_f(12) = 0.55, R_f(13) = 0.51]. 용매를 진공에서 제거한 후, 잔류물을 EtOAc에 용해시키고, 묽은 수성 HCl, 물 및 염수로 연속적으로 세척하였다. 유기 추출물을 무수 Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 여과시키고, 농축시켜 0.15 g의 화합물 13을 수득하고, 이것을 추가의 정제 없이 사용하였다.

반응식 XIII

N-{1-[4- 하이드록시 -2-(1H- 피롤로[2,3-b]피리딘 -3- 일메틸 )- 피롤리딘 -1- 카보닐 ]-2- 메톡시 -프로필}-2- 메틸아미노 - 프로피온아미드 (14):

0℃에서 DCM(16 mL) 중에 화합물 13(0.29 g, 0.56 mmol)을 함유한 용액에 TFA(4 mL)를 첨가하였다. 1.5 시간 후, TLC 분석에 의해 화합물 13의 완전한 소비를 확인하였다[20% MeOH/DCM, R_f(13) = 0.5, R_f(14) = 0.2]. 반응 혼합물을 진공에서 농축시키고, 잔류물을 EtOAc에 용해시키고 포화 수성 NaHCO₃, 물 및 염수로 연속적으로 세척하였다. 유기 추출물을 무수 Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 여과시키고, 농축시켰다. 조악한 생성물을 C18 RP-HPLC[용매 A: 물 w/0.1% v/v HOAc, 용매 B: ACN w/0.1% v/v HOAc. 다이나맥스 마이크로소브(Dynamax Microsorb) C18 60Å, 8 μ, 41.4 mm x 25 cm[베리안 인코포레이티드(Varian, Inc)]; 유량: 40 mL/분; 검출기: 254 nm]에 의해 정제하였다. 생성물을 함유한 분획물을 모아서 냉동시키고, 동결건조시켜 0.13 g의 화합물 14(표 1에 화합물 A로서 나타냄)를 수득하였다.

반응식 I 내지 XIII에 기술된 일반적인 절차와 아미노산 시약 Boc-Thr(Me)-OH 및 Boc-N(Me)Ala-OH와 유사한 적절한 아미노산을 사용하여 표 1에 기재된 화합물을 제조하고 이들의 XIAP BIR-3 또는 cIAP-1 BIR-3에 대한 결합 친화도(Kd)를 시험하였다.

반응식 XIV

3-(1- 벤질옥시카보닐 - 피롤리딘 -2- 일메틸 )-1H- 피롤로[2,3-b]피리딘 N- 옥사이드 (16):

DCM(15 mL) 중에 화합물 15(600 mg, 1.8 mmol)를 함유한 용액을 0℃로 냉각시켰다. mCPBA(500 mg, 1.7 mmol)를 분획 첨가하였다. 2시간 후, 반응 혼합물을 DCM으로 희석시키고, 수성 NaHCO₃(2X) 및 염수로 연속적으로 세척하고, 무수 Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 여과시키고, 농축시켰다. 조악한 생성물을 플래시 실리카 겔 크로마토그래피(5% MeOH/DCM)에 의해 정제하여 530 mg(83%)의 화합물 16을 수득하였다. 질량 스펙트럼, m/z = [352.0](M)+.

반응식 I 내지 XIV에 기술된 일반적인 절차와 아미노산 시약 Cbz-Hyp-OH, Boc-Thr(Me)-OH 및 Boc-N(Me)Ala-OH와 유사한 적절한 아미노산을 사용하여 표 2에 기재된 화합물을 제조하고 이들의 XIAP BIR-3 또는 cIAP-1 BIR-3에 대한 결합 친화도(Kd)를 시험하였다.

반응식 XV

3-(1- 벤질옥시카보닐 - 피롤리딘 -2- 일메틸 )-1- 메틸 -1H-피롤로[2,3-b]피리딘(17):

무수 THF(25 mL) 중에 화합물 15(1.7 g, 5.07 mmol)를 함유한 용액을 0℃로 냉각시켰다. NaH(60%, 230 mg, 6.08 mmol)를 분획 첨가하였다. 첨가 후에, 반응 혼합물을 주위 온도로 가온시켰다. THF(2 mL) 중의 MeI(720 mg, 5.07 mmol)를 적가하였다. 30분 후, 반응 혼합물을 진공에서 농축시키고 잔류물을 EtOAc에 용해시켰다. 유기 용액을 물 및 염수로 연속적으로 세척하고, 무수 Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 여과시키고, 농축시켰다. 조악한 생성물을 플래시 실리카 겔 크로마토그래피(2:1 헥산/EtOAc)에 의해 정제하여 1.38 g(77%)의 화합물 17을 수득하였다. 질량 스펙트럼, m/z = [350.0](M + H)+.

반응식 I 내지 XIII 및 반응식 XV에 기술된 일반적인 절차와 아미노산 시약 Cbz-Hyp-OH, Boc-Thr(Me)-OH 및 Boc-N(Me)Ala-OH와 유사한 적절한 아미노산을 사용하여 표 3에 기재된 화합물을 제조하고 이들의 XIAP BIR-3 또는 cIAP-1 BIR-3에 대한 결합 친화도(Kd)를 시험하였다.

반응식 XVI

2-(1- 메틸 -2- 페닐 -1H- 피롤로[2,3-b]피리딘 -3- 일메틸 )- 피롤리딘 -1- 카복실산 벤질 에스테르(18):

DMA(0.2 mL) 중에 화합물 17(300 mg, 0.86 mmol), CsOAc(16시간 동안 높은 진공 하에 120℃에서 건조됨, 329 mg, 1.72 mmol), Pd(OAc)₂(1 mg, 0.5 mol%), Ph₃P(4.5 mg, 2 mol%) 및 PhI(211 mg, 1.03 mmol)를 함유한 혼합물을 125℃로 가온시켰다. 16시간 후, 반응 혼합물을 주위 온오돌 냉각시키고, DCM으로 희석시켰다. 비균질 혼합물을 셀라이트®를 통해 여과시키고, 여액을 진공에서 농축시켰다. 조악한 생성물을 플래시 실리카 겔 크로마토그래피(4:1 헥산/EtOAc)에 의해 정제하여 62 mg(17%)의 화합물 18을 128 mg(43%)의 미반응된 화합물 17과 함께 수득하였다. 질량 스펙트럼, m/z = [426.1](M + H)+.

반응식 I 내지 XIII 및 반응식 XVI에 기술된 일반적인 절차와 아미노산 시약 Cbz-Hyp-OH, Boc-Thr(Me)-OH 및 Boc-N(Me)Ala-OH와 유사한 적절한 아미노산을 사용하여 표 4에 기재된 화합물을 제조하고, 이들의 XIAP BIR-3 또는 cIAP-1 BIR-3에 대한 결합 친화도(Kd)를 시험하였다.

반응식 XVII

3-하이드록시피롤리딘-1,2-디카복실산 1-3급-부틸 에스테르 2-메틸 에스테르(20):

DMF(100 mL) 중에 3-하이드록시-피롤리딘-1,2-디카복실산 1-3급-부틸 에스테르(화합물 19, 16 g, 71 mmol. 문헌[Hodges, J.A.; Raines, R.T. J. Am . Chem . Soc. 2005, 45, 15923] 참조)를 함유한 용액을 0℃로 냉각시켰다. 상기 용액에 K₂CO₃(16 g, 116 mmol)을 첨가한 후, 요오도메탄(5.4 mL, 87 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 1시간에 걸쳐 주위 온도로 가온시켰으며, 이때 이 혼합물은 황색 비균질 용액이 되었다. 상기 혼합물을 1시간 동안 90℃로 가열시키고, 이어서 주위 온도로 냉각시켰다. 상기 용액을 염수로 희석시키고, 디에틸 에테르로 추출시키고, 무수 Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 여과시키고, 농축시켜 14.8 g(87%)의 화합물 20을 황색 오일로서 수득하였다(문헌[Demange, L.; Cluzeau, J.; Menez, A.; Dugave, C. Tetrahedron Lett. 2001, 42, 651] 참조).

반응식 XVIII

3-(3급- 부틸디메틸실라닐옥시 ) 피롤리딘 -1,2- 디카복실산 1-3급-부틸 에스테르 2-메틸 에스테르(21):

DCM(150 mL) 중에 알콜 화합물 20(14.8 g, 60 mmol)을 함유한 용액을 0℃로 냉각시켰다. 상기 용액에 이미다졸(5.4 g, 79 mmol)과 이어서 t-부틸-디메틸실릴-클로라이드(10 g, 66 mmol)를 두 분획으로 첨가하였다. 반응 혼합물을 1시간에 걸쳐 주위 온도로 가온시켰다. 5시간 후, 용액을 1M HCl로 희석시키고, DCM으로 두번 추출하였다. 합한 유기 추출물을 무수 Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 여과시키고, 농축시켜 21.2 g(99%)의 화합물 21을 황색 오일로서 수득하였다.

반응식 XIX

3-(3급- 부틸디메틸실라닐옥시 )-2- 하이드록시메틸피롤리딘 -1- 카복실산 3급-부틸 에스테르(22):

THF(50 mL) 중에 화합물 21(12 g, 33 mmol)을 함유한 용액을 0℃로 냉각시켰다. THF 중의 LiBH4(2M, 20 mL)를 적가식으로 첨가하였다. 1시간 후, 상기 용액을 주위 온도로 가온시켰다. 2시간 후, 상기 용액을 MeOH 및 이어서 H₂O로 희석시키고 농축시켰다. 잔류물을 EtOAc로 추출하고, 1M HCl, 포화 수성 NaHCO₃ 및 염수로 세척하고, 무수 Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 여과시키고, 농축시켜 9.5 g(87%)의 화합물 22를 무색 오일로서 수득하였다(문헌[Herdeis, C; Hubmann, H. P.; Lotter, H. Tetrahedron: Asymmetry, 1994, 5, 1 19] 참조).

반응식 XX

3-(3급- 부틸디메틸실라닐옥시 )-2- 포르밀피롤리딘 -1- 카복실산 3급-부틸 에스테르(23):

DCM(22 mL) 중에 2M 옥살일 클로라이드를 함유한 용액을 DCM(40 mL)에서 -78℃로 냉각시켰다. DCM(20 mL) 중에 DMSO(3.2 mL, 45 mmol)를 함유한 용액을 적가식으로 첨가하였다. 45분 후, DCM(50 mL) 중의 알콜 화합물 22(9.5 g, 29 mmol)를 적가식으로 첨가하였다. 45분 후, TEA(16 mL, 115 mmol)를 적가식으로 첨가하였다. 반응 혼합물을 가온시키고, 15분 동안 0℃에서 유지시켰다. 용액을 1M HCl로 희석시키고, DCM으로 추출시키고, 염수로 세척한 후, 무수 Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 여과시키고, 농축시켜 9.5 g(100%)의 화합물 23을 황색 오일로서 수득하였다.

반응식 XXI

3-(3급- 부틸디메틸실라닐옥시 )-2-(2- 에톡시카보닐비닐 ) 피롤리딘 -1- 카복실산 3급-부틸 에스테르(24):

THF(50 mL) 중에 NaH(60%, 1.9 g, 46 mmol)를 함유한 현탁액에 0℃에서 THF(20 mL) 중에서 트리에틸포스포노아세테이트(7.5 mL, 38 mmol)를 천천히 첨가하였다. 30분 후, THF(40 mL) 중에 알데하이드 화합물 23(9.5 g, 29 mmol)을 함유한 용액을 이어서 적가식으로 첨가하였다. 상기 용액은 오렌지색이 되었고, 0.5시간 동안 교반을 계속하였다. 반응 혼합물을 염수로 희석시키고, EtOAc로 추출시킨 후, 무수 Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 여과시키고, 농축시켜 8.6 g(74%)의 화합물 24를 황색 오일로서 수득하였으며, 이것을 추가의 정제 없이 사용하였다.

반응식 XXII

3-(3급- 부틸디메틸실라닐옥시 )-2-(3- 하이드록시프로페닐 ) 피롤리딘 -1- 카복실산 3급-부틸 에스테르(25):

DCM(80 mL) 중에 화합물 24(8.6 g, 22 mmol)를 함유한 용액을 -78℃로 냉각시켰다. 상기 용액에 보론 트리플루오라이드 에테레이트(2.8 mL, 22 mmol)를 천천히 첨가한 후, DCM(60 mL) 중에서 1M DIBAL를 첨가하였다. 용액을 -78℃에서 1시간 동안 교반시켰다. 이어서, 반응 혼합물을 EtOAc로 처리하고, 30분 동안 교반시켰다. 반응 혼합물을 -5℃로 가온시켰다. 1M HCl를 적가하여 반응을 급냉시켰다. 혼합물을 DCM 및 H₂O로 희석시키고, 층들을 분리시켰다. 수성 층을 DCM으로 추출하였다. 합한 유기 추출물을 무수 Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 여과시키고, 농축시켜 8.5 g의 화합물 25를 명황색 오일로서 수득하고, 이것을 추가의 정제 없이 사용하였다.

반응식 XXIII

트랜스-2R-[3-(3급- 부틸디메틸실라닐옥시 )]-2-(3- 메탄설포닐옥시프로페닐 ) 피롤리딘-1- 카복실산 3급-부틸 에스테르(26):

DCM(30 mL) 중에 알콜 화합물 25(8.5 g, 24 mmol)를 함유한 용액에 트리에틸아민(4.0 mL, 29 mmol)을 첨가하였다. 상기 용액을 빙욕에서 냉각시키고, 메탄설포닐 클로라이드(2 mL, 26 mmol)를 적가식으로 첨가하였다. 반응 혼합물을 30분 동안 주위 온도로 교반시켰다. 물(10 mL)을 첨가하고, 생성물을 DCM(3 x 50 mL)로 추출시켰다. 유기 추출물들을 합하고, 1M HCl 및 염수로 세척하고, 무수 Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 여과시키고, 농축시켜 8.9 g의 화합물 26(두 단계에 걸쳐 92%)을 오렌지 오일로서 수득하고, 이것을 추가의 정제 없이 사용하였다.

.

반응식 XXIV

2-{3-[아세틸-(3- 브로모 -피리딘-2-일)-아미노]- 프로페닐 }-3-(3급-부틸-디메틸- 실라닐옥시 )- 피롤리딘 -1- 카복실산 3급-부틸 에스테르(27):

0℃에서 DMF(8 mL) 중의 N-(3-브로모-피리딘-2-일)-아세트아미드(2.24 g, 10.4 mmol)의 잘 교반된 용액에 NaH(522 mg, 13.0 mmol, 광물성 오일 중 60% 분산)를 한꺼번에 첨가하였다. 즉시, 기체 방출이 나타났다. 용액을 0℃에서 30분 동안 교반시킨 후, 이것을 실온으로 가온시키고 추가적으로 45분 동안 교반시켰다. 반응을 0℃로 다시 냉각시키고, DMF(12 mL) 중의 화합물 26(4.31 g, 10.4 mmol)의 용액을 10분에 걸쳐 적가하였다. 반응을 점차적으로 실온으로 가온시키면서 추가적으로 4시간 동안 교반시켰다. 염수를 사용하여 반응을 급냉시키고 EtOAc로 추출하였다. 유기물을 대량의 물 및 염수로 세척하고, Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 여과시키고, 농축시켰다. 조악한 잔류물을 플래시 크로마토그래피(SiO₂, 1:1 EtOAc/헥산)에 의해 정제하여 화합물 27(2.53 g, 44%)을 오렌지색 오일로서 수득하였다. 질량 스펙트럼, m/z = [556.0](M)+.

반응식 XXV

2-(1-아세틸-1H- 피롤로[2,3-b]피리딘 -3- 일메틸 )-3-(3급-부틸-디메틸- 실라닐옥시 ) 피롤리딘 -1- 카복실산 3급-부틸 에스테르(28):

DMF(23 mL) 중의 화합물 27(2.53 g, 4.56 mmol)의 잘 교반된 용액에 테트라-n-부틸 암모늄 클로라이드(1.27 g, 4.56 mmol), 포름산나트륨(310 mg, 4.56 mmol), K₂CO₃(818 mg, 5.93 mmol) 및 Pd(OAc)₂(20 mg, 0.09 mmol)를 첨가하였다. 생성된 용액을 85℃에서 2.5시간 동안 가열시켰으며, 이 동안에 색상이 오렌지색으로부터 흑색으로 변하였다. 이어서, 반응을 실온으로 냉각시키고, 염수를 사용하여 급냉시키고, EtOAc로 추출하였다. 유기 상을 물 및 염수로 세척하고, Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 여과시키고, 농축시켰다. 조악한 잔류물을 플래시 크로마토그래피(SiO₂, 4:1 Hex/EtOAc)에 의해 정제하여 화합물 28(1.32 g, 61%)을 무색 오일로서 수득하였다. 질량 스펙트럼, m/z = [474.1](M)+.

반응식 XXVI

3-(3급-부틸-디메틸- 실라닐옥시 )-2-(1H- 피롤로[2,3-b]피리딘 -3- 일메틸 )- 피롤리딘 -1- 카복실산 3급-부틸 에스테르(29):

MeOH(15 mL) 중의 화합물 28(1.32 g, 2.79 mmol)의 잘 교반된 용액에 1M NaOH(5 mL)를 첨가하였다. 반응을 실온에서 30분 동안 교반시킨 후, 이것을 농축시켰다. 잔류물을 CH₂Cl₂에 용해시키고, 염수로 세척하고, Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 여과시키고, 농축시켜 화합물 29(1.12 g, 93%)를 거품상 백색 고체로서 수득하고, 이것을 이후에 추가의 정제 없이 사용하였다. 질량 스펙트럼, m/z = [432.1](M)+.

반응식 XXVII

3-하이드록시-2-(1H-피롤로[2,3-b]피리딘-3-일메틸)-피롤리딘-1-카복실산 3급-부틸 에스테르(30):

실온에서 THF(13 mL) 중의 화합물 29(1.12 g, 2.59 mmol)의 잘 교반된 용액에 THF 중의 TBAF 1.0M 용액(3.9 mL, 3.9 mmol)을 첨가하였다. 반응을 밤새 교반시킨 후, 반응을 농축시키고, 잔류물을 플래시 크로마토그래피(SiO₂, 100% EtOAc)에 의해 정제하여 화합물 30(730 mg, 89%)을 거품상 백색 고체로서 수득하였다. 질량 스펙트럼, m/z = [318.4](M)+.

반응식 XXVIII

3-아세톡시-2-(1H-피롤로[2,3-b]피리딘-3-일메틸)-피롤리딘-1-카복실산 3급-부틸 에스테르(31):

0℃에서 CH₂Cl₂(10 mL) 중의 화합물 30(620 mg, 1.95 mmol)의 잘 교반된 용액에 DMAP(촉매)를 첨가한 후, Ac₂O(184 uL, 1.95 mmol)를 첨가하였다. 반응을 실온으로 점차 가온시키면서 밤새 교반을 계속하였다. 반응을 농축시키고, 잔류물을 플래시 크로마토그래피(SiO₂, 1:1 EtOAc/Hex)에 의해 정제하여 화합물 31(690 mg, 98%)을 백색 거품상 고체로서 수득하였다. 질량 스펙트럼, m/z = [360.0](M)+.

반응식 XXIX

아세트산 2-(1H- 피롤로[2,3-b]피리딘 -3- 일메틸 )- 피롤리딘 -3-일 에스테르(32):

0℃에서 CH₂Cl₂(8 mL) 중의 화합물 31(726 mg, 2.02 mmol)의 잘 교반된 용액에 TFA(2 mL)를 첨가하였다. 반응을 추가적으로 5시간 동안 교반시켰다. 반응을 농축시키고, 조악한 잔류물을 10% MeOH/CH₂Cl₂에 흡수시키고, NaHCO₃(포화) 및 염수로 세척하고 농축시켰다. 이어서, 잔류물을 MeOH에 흡수시키고, 여과시키고, 농축시켜 화합물 32(485 mg, 93%)를 백색 고체로서 수득하였다. 질량 스펙트럼, m/z = [260.0](M)+.

반응식 XXX

아세트산 1-(2-3급- 부톡시카보닐아미노 -3,3-디메틸- 부티릴 )-2-(1H- 피롤로[2,3-b]피리딘 -3- 일메틸 )- 피롤리딘 -3-일 에스테르(33):

0℃에서 DMF(1 mL) 중의 Boc-Tle-OH(206 mg, 0.89 mmol)의 잘 교반된 용액에 iPr₂NEt(220 uL, 1.28 mmol) 및 HATU(339 mg, 0.89 mmol)를 첨가하였다. 생성된 담황색 용액을 0℃에서 추가적으로 20분 동안 교반시킨 후, DMF(2 mL) 중의 화합물 32(220 mg, 0.85 mmol)의 용액을 첨가하였다. 반응을 실온으로 점차 가온시키면서 밤새 교반시켰다. 반응을 EtOAc로 희석시키고, 물 및 염수로 세척하고, Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 여과시키고, 농축시켰다. 조악한 생성물을 플래시 크로마토그래피(SiO₂, 1:1 EtOAc/Hex로부터 100% EtOAc로 구배)에 의해 정제하여 화합물 33(390 mg, 97%)을 황백색 고체로서 수득하였다. 질량 스펙트럼, m/z = [473.1](M)+.

반응식 XXXI

아세트산 1-(2-아미노-3,3-디메틸-부티릴)-2-(1H-피롤로[2,3-b]피리딘-3-일메틸)-피롤리딘-3-일 에스테르(34):

0℃에서 CH₂Cl₂(8 mL) 중의 화합물 33(390 mg, 0.83 mmol)의 잘 교반된 용액에 TFA(2 mL)를 첨가하였다. 반응을 20분 동안 0℃에서 교반시키고, 이어서 추가적으로 2시간 동안 실온으로 가온시켰다. 이어서, 반응 혼합물을 농축시키고, 잔류물을 10% MeOH/CH₂Cl₂에 용해시키고, NaHCO₃(포화) 및 염수로 세척하고 농축시켰다. 이어서, 잔류물을 CH₂Cl₂에 용해시키고, Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 여과시키고, 농축시켜 화합물 34(255 mg, 83%)를 갈색 거품으로서 수득하고, 이것을 추가의 정제 없이 이후에 사용하였다. 질량 스펙트럼, m/z = [373.1](M)+.

반응식 XXXII

아세트산 1-{2-[2-(3급- 부톡시카보닐 - 메틸 -아미노)- 프로피오닐아미노 ]-3,3-디메틸- 부티릴 }-2-(1H- 피롤로[2,3-b]피리딘 -3- 일메틸 )- 피롤리딘 -3-일 에스테르(35):

0℃에서 DMF(1 mL) 중의 Boc-N(Me)Ala-OH(72 mg, 0.35 mmol)의 잘 교반된 용액에 iPr₂NEt(90 uL, 0.35 mmol) 및 HATU(133 mg)를 첨가하였다. 반응을 20분 동안 계속 교반시키고, 그 후 DMF(2 mL) 중의 화합물 34(125 mg, 0.34 mmol)의 용액을 첨가하였다. 반응을 실온으로 점차 가온시키면서 밤새 교반시켰다. 이어서, 반응을 EtOAc로 희석시키고, 물 및 염수로 세척하고, Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 여과시키고, 농축시켜 화합물 35(150 mg, 79%)를 황백색 고체로서 수득하고, 이것을 추가의 정제 없이 이후에 사용하였다. 질량 스펙트럼, m/z = [558.2](M)+.

반응식 XXXIII

아세트산 1-[3,3-디메틸-2-(2- 메틸아미노 - 프로피오닐아미노 )- 부티릴 ]-2-(1H-피롤로[ 2,3-b]피리딘 -3- 일메틸 )- 피롤리딘 -3-일 에스테르(36):

0℃에서 CH₂Cl₂(6 mL) 중의 화합물 35(150 mg, 0.27 mmol)의 잘 교반된 용액에 TFA(1 mL)를 첨가하고, 반응을 1시간 동안 0℃에서 교반시키고, 이어서 1시간 동안 실온으로 가온시켰다. 반응 혼합물을 농축시키고, 잔류물을 10% MeOH/CH₂Cl₂에 용해시키고, NaHCO₃(포화) 및 염수로 세척하고 농축시켰다. 이어서, 잔류물을 MeOH에 흡수시키고, 여과시키고, 농축시켜 화합물 36(128 mg, ＞100%)을 황색 오일로서 수득하고, 이것을 추가의 정제 없이 이후에 사용하였다. 질량 스펙트럼, m/z = [458.2](M)+.

반응식 XXXIV

N-{1-[3- 하이드록시 -2-(1H- 피롤로[2,3-b]피리딘 -3- 일메틸 ) 피롤리딘 -1- 카보닐 ]-2,2-디메틸-프로필}-2- 메틸아미노 - 프로피온아미드 (37):

0℃에서 MeOH(3 mL) 중의 화합물 36(128 mg, 0.28 mmol)의 잘 교반된 용액에 1M NaOH(1 mL)를 첨가하였다. 반응을 1.5시간 동안 교반시키고, 이어서 농축시켰다. 잔류물을 역상 HPLC(C18, 10 내지 70% MeCN/H₂0, 30분)를 통해 직접적으로 정제하였다. 적절한 분획물을 모아서 동결건조시켜 화합물 37(69 mg, 59%)을 양모 형상의 백색 고체로서 수득하였다.

질량 스펙트럼, m/z = [415.2](M)+.

반응식 XVII 내지 XXXIV에 기술된 일반적인 절차와 아미노산 시약 Boc-Tle-OH 및 Boc-N(Me)Ala-OH와 유사한 적절한 아미노산을 사용하여 표 5에 기재된 화합물을 제조하고 이들의 XIAP BIR-3 또는 cIAP-1 BIR-3에 대한 결합 친화도(Kd)를 시험하였다.

반응식 XXXV

3-메톡시-피롤리딘-1,2-디카복실산 1-벤질 에스테르(39):

실온에서 THF(180 mL) 중의 N-Cbz-3-하이드록시프롤린(화합물 38, 14.4 g, 54.5 mmol)의 용액에 NaH(7.6 g, 190.7 mmol)를 3분획으로 첨가하였으며, 이 동안에 약간의 발열과 기체 방출이 나타났다. 1시간 후, CH₃I(13.3 mL, 109.0 mmol)를 첨가하고, 반응을 환류 하에 가열시켰다. 4시간 후, 황색 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고 밤새 교반시켰다. 반응 혼합물을 농축시키고, 잔류물을 EtOAc에 용해시키고, H₂O로 추출하였다. 3M HCl을 사용하여 밝은 황색 수성 층을 pH 2로 산성화시키고, EtOAc로 추출시켰다. 상기 황색 유기 층을 염수로 세척하고, 무수 Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 여과시키고, 농축시켜 화합물 39(13.4 g, 88%)를 점성의 오렌지색 오일로서 수득하고, 이것을 추가의 정제 없이 사용하였다. 질량 스펙트럼, m/z = [279.9](M)+.

반응식 XXXVI

2-하이드록시메틸-3-메톡시-피롤리딘-1-카복실산 벤질 에스테르(40):

실온에서 THF(160 mL) 중의 화합물 39(13.4 g, 48.1 mmol)의 용액에 THF 중의 BH₃ㆍDMS 2M 용액(125 mL, 250.2 mmol)을 한꺼번에 첨가하였으며, 이동안에 약간의 거품 현상이 나타났다. 이어서, 생성된 연한색 용액을 환류 하에 가열시켰다. 3시간 후, 반응 혼합물을 0℃로 냉각시키고, MeOH의 적가에 의해 급냉시켰고, 이 동안에 격렬한 기체 방출이 나타났다. 반응 혼합물을 농축시키고, 결과의 잔류물을 EtOAc에 흡수시키고, H₂O 및 염수로 연속적으로 세척하였다. 합한 수성 상을 EtOAc로 다시 추출하고, 합한 유기 추출물을 무수 Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 여과시키고, 농축시켰다. 조악한 생성물을 플래시 실리카 겔 크로마토그래피(1:1 EtOAc/헥산)에 의해 정제하여 10.5 g(83%)의 화합물 40을 수득하였다.

반응식 XX 내지 XXXVI에 기술된 일반적인 절차와 아미노산 시약 Boc-Tle-OH 및 Boc-N(Me)Ala-OH와 유사한 적절한 아미노산을 사용하여 표 6에 기재된 화합물을 제조하고 이들의 XIAP BIR-3 또는 cIAP-1 BIR-3에 대한 결합 친화도(Kd)를 시험하였다.

반응식 XXXVII

2-포르밀-3-메틸-피롤리딘-1-카복실산 3급-부틸 에스테르(42):

오버헤드(overhead) 교반기 및 질소 주입구가 구비된 500-mL 3구 플라스크를 DCM(20.5 mL, 0.041 mol) 중의 옥살릴 클로라이드 1M 용액 및 무수 DCM(100 mL)으로 충전시키고, -78℃로 냉각시켰다. DCM(20 mL) 중의 무수 DMSO(3.45 mL, 0.044 mol) 용액을 교반하면서 적가하였다. 30분 후, 알콜 화합물 41(7.35 g, 0.034 mol. 문헌[Herdeis, C; Hubmann, H. P. Tetrahedron Asymmetry 1992, 3, 1213-1221]; 및 문헌[Ohfune, Y.; Tomita, M. J. Am . Chem . Soc. 1982, 104, 3511-3513]] 참조)을 DCM(40 mL)에 적가식으로 첨가하였다. 30분 후, Et₃N(23.7 mL, 0.17 mol)을 첨가하여 백색 현탁액을 형성하였다. 반응 혼합물을 0℃의 얼음/물 욕으로 옮기고, 30분 동안 유지시켰다. 물을 첨가하여 반응 혼합물을 급냉시켰다. 생성물을 DCM으로 추출시키고, 합한 유기 추출물을 물, 1M HCl 및 염수로 연속하여 세척하였다. 유기 상을 무수 Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 여과시키고, 농축시켜 7.05 g(99%)의 알데하이드 화합물 42를 수득하고, 이것을 추가의 정제 없이 사용하였다.

반응식 XXXVIII

2-(2- 에톡시카보닐 -에틸-3- 메틸 - 피롤리딘 -1- 카복실산 3급-부틸 에스테르(43):

500-mL의 3구 환저 플라스크를 질소 하에 무수 THF(100 mL) 중의 수소화나트륨(60%, 1.77 g, 0.044 mol)으로 충전시키고, 10℃로 냉각시켰다. THF(50 mL) 중의 트리에틸 포스포노 아세테이트(9.15 g, 0.041 mol) 용액을 NaH/THF 현탁액에 적가하였다. 첨가 후에, THF(15 mL) 중의 조악한 알데하이드 화합물 42(7.25 g, 0.034 mol)를 적가식으로 첨가하였다. 1시간 후, 반응의 완결을 TLC 분석으로 확인하였다[30% EtOAc/헥산: R_f(42) = 0.7; R_f(43) = 0.75]. 포화 수성 NH₄Cl을 첨가하여 반응 혼합물을 급냉시켰다. 생성물을 EtOAc로 추출시키고, 1M HCl, 물 및 염수로 세척하고, 무수 Na₂SO₄상에서 건조시키고, 여과시키고, 농축시켜 13.3 g의 조악한 화합물 43(정량적)을 수득하고, 이것을 추가의 정제 없이 사용하였다.

반응식 XXXIX

2-(3-하이드록시-프로페닐)-3-메틸-피롤리딘-1-카복실산 3급-부틸 에스테르(44):

DCM(150 mL) 중에 조악한 화합물 43(16.7 g, 0.059 mol)을 함유한 용액을 -78℃로 냉각시켰다. BF₃ㆍEt₂O(8.9 mL, 0.07 mol)를 첨가한 후, DIBAL(2M/DCM, 200 mL, 0.4 mol)을 적가하였다. 2시간 후, TLC 분석으로 화합물 43의 완전한 소비를 확인하였다[TLC 분석: 1:1 헥산/EtOAc, R_f(44) = 0.3]. EtOAc(40 mL)를 첨가하고, 반응 혼합물을 -15℃로 가온시켰다. pH가 2가 될 때까지 1M HCl을 사용하여 반응 혼합물을 주의 깊게 급냉시켰다. 생성물을 DCM으로 추출하였다. 유기 추출물을 1M HCl, 물 및 염수로 세척하고, 무수 Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 여과시키고, 농축시켰다. 조악한 생성물을 실리카 겔 크로마토그래피(2:1 헥산/EtOAc)에 의해 정제하여 7.2 g(51%)의 화합물 44를 수득하였다.

반응식 XL

2-(3- 메탄설포닐옥시 - 프로페닐 )-3- 메틸피롤리딘 -1- 카복실산 3급-부틸 에스테르(45):

0℃에서 DCM(25 mL) 중에 화합물 44(6.0 g, 0.025 mol)을 함유한 용액에 Et₃N(4.5 mL, 0.032 mol)을 첨가하였다. 5분 후, DCM(5 mL) 중에 메탄설포닐클로라이드(2.33 mL, 0.03 mol)를 함유한 용액을 적가하였다. 2시간 후, TLC 분석으로 화합물 44의 완전한 소비를 확인하였다[1:1 헥산/EtOAc, R_f(45) = 0.5; R_f(44) = 0.4]. 반응 혼합물을 얼음-물 상에 붓고 DCM으로 추출하였다. 유기 추출물을 물 및 염수로 세척하고, 무수 Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 여과시키고, 농축시켜 7.05 g(89%)의 조악한 화합물 45를 담갈색 오일로서 수득하고, 이것을 추가의 정제 없이 사용하였다.

반응식 XLI

2-{3-[아세틸-(2- 브로모 -5- 플루오로 - 페닐 )-아미노]- 프로페닐 }-3- 메틸 - 피롤리딘 -1- 카복실산 (46):

0℃에서 DMF(15 mL) 중의 NaH(60%, 1.44 g, 0.036 mol)의 현탁액에 DMF(10 mL) 중에 2-브로모-5-플루오로아세트아닐리드(8.35 g, 0.036 mol)를 함유한 용액을 첨가하였다. 30분 후, DMF(10 mL) 중에 조악한 화합물 45(9.58 g, 0.03 mol)를 함유한 용액을 첨가하고, 반응 혼합물을 밤새 주위 온도로 가온시켰다. 반응을 1M HCl을 함유한 얼음-물 상에 부어 급냉시켰다. 생성물을 디에틸 에테르로 추출시키고, 물 및 염수로 세척하고, 무수 Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 여과시키고, 농축시켰다. 생성물을 플래시 실리카 겔 크로마토그래피(2:1 헥산/EtOAc)에 의해 정제하여 5.41 g(45%)의 화합물 46을 담갈색의 점성질 오일로서 수득하였다.

질량 스펙트럼, m/z = [354.3](M - Boc)+.

반응식 XLII

2-(1-아세틸-6-플루오로-1H-인돌-3-일메틸)-3-메틸-피롤리딘-1-카복실산 3급-부틸 에스테르(47):

DMF(20 mL) 중에 화합물 46(5 g, 0.011 mol), n-Bu₄NCl(3.3 g, 0.012 mol), K₂CO₃(1.65 g, 0.012 mol) 및 NaHCO₂(0.81 g, 0.012 mol)를 함유한 용액을 높은 진공 하에서 탈기시켰다. 아세트산팔라듐(0.49 g, 0.002 mol)을 첨가하고, 비균질 반응 혼합물을 예열된(80 내지 85℃) 오일 욕에 침지시켰다. 3시간 후, TLC분석에 의해 화합물 46의 완전히 소비를 확인하였다[1:1 헥산/EtOAc, R_f(46) = 0.4, R_f(47) = 0.5]. 반응 혼합물을 빙욕에서 냉각시키고, 디에틸 에테르(100 mL)를 첨가하였다. 혼합물을 셀라이트®를 통해 여과시키고, 고형물을 디에틸 에테르로 세척하였다. 여액을 물 및 염수로 세척하고, 무수 Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 여과시키고, 농축시켰다. 조악한 생성물을 표준 상 HPLC(10 내지 100% EtOAc/헥산, 50 분에 걸쳐서)에 의해 정제하여 2.2 g(54%)의 화합물 47을 갈색의 점성질 오일로서 수득하였다.

질량 스펙트럼, m/z = [274.5](M - Boc)+.

반응식 XLIII

2-(6-플루오로-1H-인돌-3-일메틸)-3-메틸-피롤리딘-1-카복실산 3급-부틸 에스테르(48):

MeOH(15 mL) 중에 화합물 47(2.2 g, 0.006 mol)을 함유한 용액에 1M NaOH(6 mL, 0.006 mol)를 0℃에서 첨가하였다. 30분 후, TLC 분석에 의해 화합물 47의 완전한 소비를 확인하였다[EtOAc/헥산 1:1, R_f(47) = 0.6; R_f(48) = 0.5]. 용매를 진공에서 제거하고, 잔류물을 EtOAc에 용해시켰다. 유기 상을 1M HCl, 물 및 염수로 세척하고, 무수 Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 여과시키고, 농축시켜 2.11 g(정량적) 의 조악한 화합물 48을 수득하고, 이것을 추가의 정제 없이 다음 단계에서 사용하였다.

반응식 XLIV

6-플루오로-3-(3-메틸-피롤리딘-2-일메틸)-1H-인돌(49):

0℃에서 DCM(20 mL) 중에 화합물 48(0.89 g, 0.0024 mol)을 함유한 용액에 TFA(4 mL)를 첨가하였다. 2시간 후, TLC 분석에 의해 화합물 48의 완전한 소비를 확인하였다[10% MeOH/DCM, R_f(48) = 0.7, R_f(49) = 0.3]. 반응 혼합물을 진공에서 농축시키고, DCM으로 희석시키고, 수성 NaHCO₃ 및 염수로 세척하고, 무수 Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 여과시키고, 농축시켜 0.6 g(86%)의 화합물 49를 수득하고, 이것을 추가의 정제 없이 사용하였다.

반응식 XLV

{1-[2-(6- 플루오로 -1H-인돌-3- 일메틸피롤리딘 -1- 카보닐 ]-2- 메톡시 -프로필} 카 밤산 3급-부틸 에스테르(50):

0℃에서 NMP(5 mL) 중에 조악한 화합물 49(0.3 g, 1.1 mmol) 및 Boc-Thr(Me)-OH(0.31 g, 1.3 mmol)를 함유한 용액에 DIPEA(0.25 mL, 1.44 mmol)를 첨가한 후, HATU(0.5 g, 1.3 mmol)를 첨가하고, 반응 혼합물을 주위 온도에서 6시간 동안 교반시켰다. 반응 혼합물을 EtOAc에 희석시키고, 묽은 수성 HCl, 물, 포화 수성 NaHCO₃, 물 및 염수로 연속적으로 세척하였다. 유기 상을 무수 Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 여과시키고, 농축시켰다. 생성물을 역상 HPLC(C18; 50 내지 100% ACN/물 v/v 0.1% AcOH)에 의해 정제하였다. 생성물을 함유한 분획물을 진공에서 농축시켜 0.28 g(48%)의 화합물 50을 백색 고체로서 수득하였다.

질량 스펙트럼, m/z = [447.7](M)+.

반응식 XLVI

2-아미노-1-[2-(6-플루오로-1H-인돌-3-일메틸)-3-메틸피롤리딘-1-일]-3-메톡시-부탄-온(51):

0℃에서 DCM(20 mL) 중에 화합물 50(0.28 g, 0.63 mmol)을 함유한 용액에 TFA(4 mL)를 첨가하였다. 2시간 후, TLC 분석에 의해 화합물 50의 완전한 소비를 확인하였다[10% MeOH/DCM, R_f(50) = 0.6, R_f(51) = 0.2]. 반응 혼합물을 진공에서 농축시키고, 잔류물을 DCM에 용해시키고, 포화 수성 NaHCO₃ 및 염수로 연속적으로 세척하였다. 유기 추출물을 무수 Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 여과시키고, 농축시켜 0.36 g(정량적)의 조악한 화합물 51을 수득하고, 이것을 추가의 정제 없이 사용하였다.

반응식 XLVII

{1-{1-2-(6- 플루오로 -1H-인돌-3- 일메틸 )-3- 메틸 - 피롤리딘 -1- 카보닐 ]-2- 메톡시프로필카바모일 }-에틸}- 메틸 - 카밤산 3급-부틸 에스테르(52):

0℃에서 NMP(3 mL) 중에 화합물 51(0.09 g, 0.26 mmol) 및 Boc-N(Me)Ala-OH(0.063 g, 0.31 mmol)를 함유한 용액에 DIPEA(0.075 mL, 0.43 mmol)를 첨가한 후, HATU(0.13 g, 0.34 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 주위 온도에서 16시간 동안 교반시켰다. 반응 혼합물을 EtOAc로 희석시키고, 이어서 1M HCl, 포화 수성 NaHCO₃, 물 및 염수로 세척하였다. 유기 추출물을 무수 Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 여과시키고, 농축시켰다. 조악한 생성물을 RP HPLC(C18; 50 내지 100% ACN/물 v/v 0.1% HOAc)에 의해 정제하여 0.052 g(38%)의 화합물 52를 수득하였다.

질량 스펙트럼, m/z = [532.8](M)+.

반응식 XLVIII

N-{1-{1-2-(6-플루오로-1H-인돌-3-일메틸)-3-메틸-피롤리딘-1-카보닐]-2-메톡시-프로필}-2-메틸아미노-프로피온아미드(53):

0℃에서 DCM(20 mL) 중에 화합물 52(0.052 g, 0.1 mmol)를 함유한 용액에 TFA(4 mL)를 첨가하였다. 1시간 후, TLC 및 질량 스펙트럼 분석에 의해 화합물 52의 완전한 소비를 확인하였다[10% MeOH/DCM, R_f(52) = 0.6, R_f(53) = 0.2]. 반응 혼합물을 진공에서 농축시키고, 포화 수성 NaHCO₃를 첨가하여 잔류물을 중화시켰다. 수성 용액을 역상 HPLC(물/ACN v/v 0.1% HOAc)에 의해 정제하여 순수한 산 부가 염 화합물 53ㆍHOAc(0.058 g)를 수득하였다

질량 스펙트럼, m/z = [432.7](M)+.

반응식 XXXVII 내지 XLVIII에 기술된 일반적인 절차를 사용하고 아미노산 시약 Boc-Thr(Me)-OH 및 Boc-N(Me)Ala-OH와 유사한 적절한 아미노산을 사용하여 표 7에 기재된 화합물을 제조하고 이들의 XIAP BIR-3 또는 cIAP-1 BIR-3에 대한 결합 친화도(Kd)를 시험하였다.

반응식 XLIX

트랜스 - 2R -[2-{3-[아세틸-(2- 브로모 -5- 플루오로페닐 )아미노] 프로페닐 }]-3-(3급- 부틸디메틸실라닐옥시 ) 피롤리딘 -1- 카복실산 3급-부틸 에스테르(54):

DMF(30 mL) 중에 N-(2-브로모-5-플루오로페닐)아세트아미드(5.7 g, 24 mmol)를 함유한 용액에 0℃에서 NaH(60%, 1.2 g, 30 mmol)를 첨가하였다. 30분 후, 용액을 가온시키고, 30분 동안 주위 온도에서 유지시켰다. 상기 용액에 DMF(30 mL) 중의 메실레이트 화합물 26(반응식 XXIII 참조)(8.9 g, 24 mmol)을 0℃에서 천천히 첨가하였다. 반응을 1시간에 걸쳐 주위 온도로 천천히 가온시켰다. 2시간 후, 용액을 염수로 희석시키고, 디에틸 에테르로 추출시키고, 염수로 2번 세척하고, 무수 Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 여과시키고, 농축시켜 12 g의 조악한 화합물 54(생성물은 TLC 상에서 함께 존재하는 미반응된 아세트아닐리드를 함유함)를 수득하고, 이것을 추가의 정제 없이 사용하였다.

반응식 L

트랜스 - 2R -[2-{3-[아세틸(2-브로모-5-플루오로페닐)아미노]프로페닐}]-3-하이드록시피롤리딘-1-카복실산 3급-부틸 에스테르(55):

THF(30 mL) 중에 조악한 화합물 54(11 g, 약 19 mmol)를 함유한 용액에 1M TBAF/THF(25 mL)를 주위 온도에서 첨가하였다. 1시간 후, 용액을 EtOAc로 희석시키고, 1M HCl 및 염수로 세척하고 무수 Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 여과시키고, 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 상에 흡수시키고, 플래시 실리카 겔 크로마토그래피(1:1 헥산/EtOAc 내지 5% MeOH/DCM)에 의해 정제하여 4.2 g의 알콜 화합물 55를 오렌지색 거품으로서 수득하였다.

반응식 LI

트랜스 -2 R -[2-(1-아세틸-6-플루오로-1H-인돌-3-일메틸)]-3-하이드록시피롤리딘-1-카복실산 3급-부틸 에스테르(56):

DMF(40 mL) 중에 화합물 55(5.7 g, 12.5 mmol)를 함유한 용액에 K₂CO₃(1.7 g, 12.3 mmol), 포름산나트륨(0.86 g, 12.7 mmol), 테트라부틸암모늄 클로라이드(3.5 g, 12.7 mmol) 및 Pd(OAc)₂(0.32 g, 1.4 mmol)를 주위 온도에서 첨가하였다. 반응 혼합물을 90℃로 예열된 오일 욕에 침지시켰다. 4시간 후, 반응 혼합물을 빙욕에서 냉각시키고, 염수로 희석시키고, EtOAc로 추출시키고, 염수로 두 번 세척하고, 무수 Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 여과시키고, 농축시켜 4.5 g의 조악한 인돌 화합물 56을 오렌지색 거품으로서 수득하고, 이것을 추가의 정제 없이 사용하였다.

반응식 LII

트랜스 - 2R -[2-(6-플루오로-1H-인돌-3-일메틸)]-3-하이드록시피롤리딘-1-카복실산 3급-부틸 에스테르(57):

MeOH(15 mL) 중에 아세테이트 화합물 56(2.5 g, 6.6 mmol)을 함유한 용액에 1M NaOH(8 mL)를 주위 온도에서 첨가하였다. 40분 후, 용액을 농축시키고, EtOAc로 희석시키고, 염수로 세척하고, 무수 Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 여과시키고, 농축시켰다. 잔류물을 NP-HPLC(SiO₂, 30분에 걸쳐 40% EtOAc/헥산으로부터 EtOAc로 증가시킴)에 의해 정제하여 1.3 g의 인돌 화합물 57을 담황색 거품으로서 수득하였다.

반응식 LIII

트랜스 - 2R -[3-아세톡시-2-(6-플루오로-1H-인돌-3-일메틸)]피롤리딘-1-카복실산 3급-부틸 에스테르(58):

DCM(10 mL) 중에 인돌 화합물 57(0.35 g, 1.1 mmol)을 함유한 현탁액에 주위 온도에서 아세트산 무수물(0.15 mL, 1.5 mmol)을 첨가한 후, DMAP(10 mg, 0.08 mmol)를 첨가하였다. 30분 후, 상기 용액은 균질하게 되었다. 1시간 후, 상기 용액을 1M HCl로 희석시키고, DCM으로 추출하고, 무수 Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 여과시키고, 농축시켜 0.36 g(87%)의 화합물 58을 황색 오일로서 수득하였다.

반응식 LIV

트랜스 - 2R -[아세트산 2-(6-플루오로-1H-인돌-3-일메틸)]피롤리딘-3-일 에스테르(59):

0℃에서 DCM(15 mL) 중에 카바메이트 화합물 58(0.48 g, 1.3 mmol)을 함유한 용액에 TFA(3 mL)를 첨가하였다. 15분 후, 반응을 가온시키고, 주위 온도에서 1시간 동안 유지시켰다. 상기 용액을 농축시키고, EtOAc로 희석시키고, 포화 NaHCO₃로 세척하고, 무수 Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 여과시키고, 농축시켜 0.32 g(89%)의 아민 화합물 59를 오렌지색 오일로서 수득하고, 이것을 추가의 정제 없이 사용하였다.

반응식 LV

트랜스 - 2R -[아세트산 1-(2-3급-부톡시카보닐아미노-3-메톡시부티릴)-2-(6-플루오로-1H-인돌-3-일메틸)]피롤리딘-3-일 에스테르(60):

0℃에서 NMP(4 mL) 중에 Boc-L-Thr(Me)-OH(105 mg, 0.45 mmol)를 함유한 용액에 HATU(169 mg, 0.44 mmol)를 첨가한 후, DIPEA(0.1 mL, 0.57 mmol)를 첨가하였다. 5분 후, NMP(5 mL) 중의 아민 화합물 59(124 mg, 0.45 mmol)를 적가식으로 첨가하였다. 반응 혼합물을 주위 온도로 가온시켰다. 1시간 후, 용액을 EtOAc로 희석시키고, 1M HCl, 포화 수성 NaHCO₃ 및 염수로 세척하고, 무수 Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 여과시키고, 농축시켜 260 mg의 아미드 화합물 60을 오렌지색 오일로서 수득하고, 이것을 추가의 정제 없이 사용하였다.

반응식 LVI

트랜스 - 2R -[아세트산 1-(2-아미노-3-메톡시부티릴)-2-(6-플루오로-1H-인돌-3-일 메 틸)] 피롤리딘 -3-일 에스테르(61):

0℃에서 DCM(15 mL) 중에 화합물 60(0.26 g, 0.53 mmol)을 함유한 용액에 TFA(3 mL)를 첨가하였다. 15분 후, 반응 혼합물을 주위 온도로 가온시켰다. 1시간 후, 상기 용액을 농축시키고, EtOAc로 희석시키고, 포화 수성 NaHCO₃로 두 번 세척하고, 무수 Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 여과시키고, 농축시켜 0.20 g(97%)의 아민 화합물 61을 오렌지색 오일로서 수득하고, 이것을 추가의 정제 없이 사용하였다.

질량 스펙트럼, m/z = [391.6](M+).

반응식 LVII

트랜스 - 2R -[아세트산 1-{2-[2-(3급- 부톡시카보닐메틸아미노 ) 프로피오닐아미노 ]-3- 메톡시부티릴 }-2-(6- 플루오로 -1H-인돌-3- 일메틸 )] 피롤리딘 -3-일 에스테 르(62):

0℃에서 NMP(4 mL) 중에 Boc-L-N(Me)-Ala-OH(47 mg, 0.23 mmol)를 함유한 용액에 HATU(88 mg, 0.23 mmol)를 첨가한 후, DIPEA(0.1 mL, 0.57 mmol)를 첨가하였다. 5분 후, NMP(5 mL) 중의 아민 화합물 61(90 mg, 0.23 mmol)를 적가식으로 첨가하였다. 반응 혼합물을 주위 온도로 가온시켰다. 1시간 후, 용액을 EtOAc로 희석시키고, 1M HCl, 포화 수성 NaHCO₃ 및 염수로 세척하고, 무수 Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 여과시키고, 농축시켜 120 mg의 아미드 화합물 62를 오렌지색 오일로서 수득하고, 이것을 추가의 정제 없이 사용하였다.

반응식 LVIII

트랜스 - 2R -[아세트산 2-(6- 플루오로 -1H-인돌-3- 일메틸 )-1-[3- 메톡시 -2-(2- 메틸아미노프로피오닐아미노 ) 부티릴 ]] 피롤리딘 -3-일 에스테르(63):

0℃에서 DCM(15 mL) 중에 카바메이트 화합물 62(120 mg, 0.21 mmol)를 함유한 용액에 TFA(3 mL)를 첨가하였다. 15분 후, 반응 혼합물을 주위 온도로 가온시켰다. 1시간 후, 상기 용액을 농축시키고, EtOAc로 희석시키고, 포화 수성 NaHCO₃로 두 번 세척하고, 무수 Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 여과시키고, 농축시켜 89 mg(89%)의 아민 화합물 63을 갈색 오일로서 수득하고, 이것을 추가의 정제 없이 사용하였다. 질량 스펙트럼, m/z = [476.5](M)+.

반응식 LIX

트랜스 - 2R -[N-{1-[2-(6- 플루오로 -1H-인돌-3- 일메틸 )-3- 하이드록시 - 피롤리딘 -1-카 보 닐]-2- 메톡시 -프로필}]-2- 메틸아미노 - 프로피온아미드 (64):

MeOH(10 mL) 중에 화합물 63(89 mg, 0.19 mmol)을 함유한 용액에 1M NaOH(1 mL)를 주위 온도에서 첨가하였다. 20분 후, 용액을 농축시키고, 0.1% HOAc를 함유한 물로 희석시키고, 10% ACΝ/물 w/0.1% v/v HOAc로부터 시작하여 70% HOAc/물 w/0.1% v/v HOAc까지의 30분 구배 방법을 사용하는 RP-HPLC(다이나맥스 마이크로솔브 C18 60Å, 8 μ, 41.4 mm x 25 cm; 유량: 40 mL/분; 검출기: 272 nm)에 의해 정제하였다. 생성물을 함유하는 분획물을 냉동시키고, 동결건조시켜 화합물 64(44 mg)를 황백색 고체로서 수득하였다.

질량 스펙트럼, m/z = [434.5](M)+.

반응식 XLIX 내지 LIX에 기술된 일반적인 절차 및 아미노산 시약 Boc-Thr(Me)-OH 및 Boc-N(Me)Ala-OH와 유사한 적절한 아미노산을 사용하여 표 8에 기재된 화합물을 제조하고 이들의 XIAP BIR-3 또는 cIAP-1 BIR-3에 대한 결합 친화도(Kd)를 시험하였다.

반응식 LX

3-아세톡시-2-(2-클로로-6-플루오로-1H-인돌-3-일메틸)-피롤리딘-1-카복실산 3급-부틸 에스테르(65):

CCl₄(30 mL) 중에 화합물 58(반응식 LIII 참조)(1.8 g, 4.8 mmol)을 함유한 용액을 주위 온도에서 벤조일 퍼옥사이드(21 mg, 0.09 mmol)로 처리한 후, NCS(649 mg, 4.9 mmol)로 처리하였다. 반응 혼합물을 환류 하에 가온시켰다. 1시간 후, 반응 혼합물을 실리카켈 상에서 농축시키고, 크로마토그래피(3:1 헥산/EtOAc)하여 1.2 g(63%)의 화합물 65를 호박색 거품으로서 수득하였다.

반응식 LXI

아세트산 2-(2-클로로-6-플루오로-1H-인돌-3-일메틸)-피롤리딘-3-일 에스테르(66):

0℃에서 DCM(20 mL) 중에 화합물 65(1.2 g, 2.92 mmol)를 함유한 용액을 TFA(5 mL)로 처리하였다. 4시간 후, 반응 혼합물을 진공에서 농축시키고, 잔류물을 EtOAc에 용해시키고, 수성 NaHCO₃(2X) 및 염수로 연속적으로 세척하고, 무수 Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 여과시키고, 농축시켜 0.9 g(99%)의 화합물 66을 수득하고, 이것을 추가의 정제 없이 사용하였다. 질량 스펙트럼, m/z = [310.9](M)+.

반응식 LXII

아세트산 1-(2-3급-부톡시카보닐아미노-3-메톡시-부티릴)-2-(2-클로로-6-플루오로-1H-인돌-3-일메틸)-피롤리딘-3-일 에스테르(67):

0℃에서 NMP(4 mL) 중에 아민 화합물 66(225 mg, 0.72 mmol), Boc-Thr(Me)-OH(177 mg, 0.75 mmol) 및 HATU(289 mg, 0.76 mmol)를 함유한 용액에 DIPEA(110 mg, 0.86 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 주위 온도로 가온시켰다. 2시간 후, 반응 혼합물을 디에틸 에테르로 희석시키고, 묽은 수성 1M HCl, 물(5X), 수성 NaHCO₃, 물(2X), 이어서 염수로 연속적으로 세척하였다. 유기 상을 무수 Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 여과시키고, 농축시켜 조악한 생성물을 수득하고, 이것을 플래시 실리카 겔 크로마토그래피(1:1 헥산/EtOAc)에 의해 정제하여 146 mg(38%)의 화합물 67을 황갈색 거품으로서 수득하였다. 질량 스펙트럼, m/z = [526.0](M)+.

반응식 LXIII

아세트산 1-(2-아미노-3-메톡시-부티릴)-2-(2-클로로-6-플루오로-1H-인돌-3-일메틸)-피롤리딘-3-일 에스테르(68):

0℃에서 DCM(10 mL) 중에 화합물 67(145 mg, 0.27 mmol)를 함유한 용액을 TFA(5 mL)로 처리하였다. 40분 후, 반응 혼합물을 진공에서 농축시키고, 잔류물을 EtOAc에 용해시키고, 수성 NaHCO₃(2X) 및 염수로 연속적으로 세척하고, 무수 Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 여과시키고, 농축시켜 101 mg(86%)의 화합물 68을 수득하고, 이것을 추가의 정제 없이 사용하였다. 질량 스펙트럼, m/z = [425.9](M)+.

반응식 LXIV

아세트산 1-{2-[2-(3급- 부톡시카보닐 - 메틸 -아미노)- 프로피오닐아미노 ]-3- 메톡시 - 부티릴 }-2-(2- 클로로 -6- 플루오로 -1H-인돌-3- 일메틸 )- 피롤리딘 -3-일 에스테 르(69):

0℃에서 NMP(3 mL) 중에 아민 화합물 68(50 mg, 0.12 mmol), Boc-N(Me)Ala-OH(25 mg, 0.12 mmol) 및 HATU(47 mg, 0.12 mmol)를 함유한 용액에 DIPEA(15 mg, 0.12 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 주위 온도로 가온시켰다. 2시간 후, 반응 혼합물을 디에틸 에테르로 희석시키고, 묽은 수성 1M HCl, 물(5X), 수성 NaHCO₃, 물(2X), 이어서 염수로 연속적으로 세척하였다. 유기 상을 무수 Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 여과시키고, 농축시켜 조악한 생성물을 수득하고, 이것을 플래시 실리카 겔 크로마토그래피(1:1 헥산/EtOAc)에 의해 정제하여 72 mg(99%)의 화합물 69를 수득하고, 이것을 추가의 정제 없이 사용하였다. 질량 스펙트럼, m/z = [611.1](M)+.

반응식 LXV

N-{1-[2-(2- 클로로 -6- 플루오로 -1H-인돌-3- 일메틸 )-3- 하이드록시 - 피롤리딘 -1-카보닐]-2- 메톡시 -프로필}-2- 메틸아미노 - 프로피온아미드 (70):

0℃에서 DCM(10 mL) 중에 화합물 69(72 mg, 0.12 mmol)를 함유한 용액을 TFA(2 mL)로 처리하였다. 1시간 후, 반응 혼합물을 진공에서 농축시키고, 잔류물을 EtOAc에 용해시키고, 수성 NaHCO₃(2X) 및 염수로 연속적으로 세척하고, 무수 Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 여과시키고, 농축시켰다. 질량 스펙트럼, m/z = [51 1](M)+.

잔류물을 MeOH(5 mL)에 용해시키고, 0℃로 냉각시켰다. 수성 NaOH(1M, 0.14 mL)를 첨가하였다. 30분 후, 반응 혼합물을 주위 온도로 가온시켰다. 30분 후, 용매를 진공에서 제거하고, 잔류물을 동결건조시킨 후, 역상 HPLC(2" 다이나맥스 C18 칼럼; A: 물 w/0.1% v/v HOAc; B: ACN w/0.1% v/v HOAc; 방법: 10 내지 70% B(30 분간에 걸쳐서); 유량: 40 mL/분)에 의해 정제하여 16 mg의 화합물 70을 백색 고체로서 수득하였다. 질량 스펙트럼, m/z = [468.9](M)+.

반응식 LX 내지 LXV에 기술된 일반적인 절차 및 아미노산 시약 Boc-Thr(Me)-OH 및 Boc-N(Me)Ala-OH와 유사한 적절한 아미노산을 사용하여 표 9에 기재된 화합물을 제조하고, 이들의 XIAP BIR-3 또는 cIAP-1 BIR-3에 대한 결합 친화도(Kd)를 시험하였다.

반응식 LXVI

[2-(2,2-디메틸-4,6-디옥소-[1,3]디옥산-5-일리덴)-2-하이드록시-1-(1H-인돌-3-일메틸)-에틸]-카밤산 3급-부틸 에스테르(72):

0℃에서 CH₂Cl₂(205 mL) 중의 Boc-D-Trp-OH(화합물 71, 12.5 g, 41.0 mmol) 및 멜드럼산(5.92 g, 41.0 mmol)의 잘 교반된 현탁액에 DMAP(11.8 g, 61.6 mmol) 및 EDCI(7.55 g, 61.6 mmol)를 첨가하였으며, 이때 반응은 담황색 균질 용액이 되었다. 반응 혼합물을 주위 온도로 천천히 가온시켰다. 16시간 후, 반응 혼합물을 CH₂Cl₂로 희석시키고, 10% KHSO₄ 및 염수로 세척하였다. 유기 상을 무수 Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 여과시키고, 농축시켜 화합물 72(17.1 g, 96%)를 황백색 고체로서 수득하고, 이것을 추가의 정제 없이 사용하였다.

반응식 LXVII

3-하이드록시-2-(1H-인돌-3-일메틸)-5-옥소-2,5-디하이드로-피롤-1-카복실산 3급-부틸 에스테르(73):

EtOAc(300 mL) 중의 화합물 72(17.1 g, 39.6 mmol)의 잘 교반된 용액을 예열된 오일 욕에서 환류 하에 가열시켰다. 1시간 후, 반응 혼합물을 주위 온도로 냉각시켰다. EtOAc 용액을 5 x 100 mL NaHCO₃(포화)로 추출시키고, 합한 수성 추출물을 3M HCl을 사용하여 pH 2까지 산성화시켰다. 결과의 수성 상을 4 x EtOAc로 추출시키고, 합한 추출물을 염로 세척하고, 무수 Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 여과시키고, 농축시켜 화합물 73(13.5 g, 100% 초과)을 거품상 백색 고체로서 수득하고, 이것을 추가의 정제 없이 이후에 사용하였다.

질량 스펙트럼, m/z = [328.1](M)+.

반응식 LXVIII

3-하이드록시-2-(1H-인돌-3-일메틸)-5-옥소-피롤리딘-1-카복실산 3급-부틸 에스테르(74):

0℃에서 CH₂Cl₂(200 mL) 및 AcOH(25 mL) 중의 화합물 73(13.0 g, 39.6 mmol)의 잘 교반된 용액에 NaBH₄(3.27 g, 83.2 mmol)를 분획 첨가하였다. 반응 혼합물을 0℃에서 2.5시간 동안 계속 교반하고, 그 후 반응 혼합물을 H₂O로 급냉시켰다. 층들을 분리시키고, 수성 상을 CH₂Cl₂로 추출하였다. 합한 유기 추출물을 3 x H₂O 및 염수로 연속적으로 세척하고, 무수 Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 여과시키고, 농축시켜 황백색 고체를 수득하였다. 조악한 물질을 SiO₂ 플러그(1:1 EtOAc/헥산으로 충전)를 통해 정제하여 화합물 74(11.9 g, 91%)를 거품상 백색 고체로서 수득하였다.

질량 스펙트럼, m/z = [330.2](M)+.

반응식 LXIX

3-하이드록시-2-(1H-인돌-3-일메틸)-피롤리딘-1-카복실산 3급-부틸 에스테르(75):

주위 온도에서 THF(180 mL) 중의 화합물 74(11.9 g, 36.0 mmol)의 잘 교반된 용액에 BH₃ㆍDMS(54 mL, 108.1 mmol)의 2.0 M/THF 용액을 30분에 걸쳐 적가하였으며, 이 동안에 가스 방출이 관측되었다. 생성된 황색 용액을 예열된 오일 욕에서 환류 하에 가열시켰다. 4시간 후, 담녹색의 반응 혼합물을 주위 온도로 냉각시키고, Et₂O(600 mL)에 붓고, NH₄Cl(포화)로 급냉시켰다. 층들을 분리시키고, 유기 상을 5% 시트르산, H₂O 및 염수로 연속적으로 세척하였다. 생성된 유기 상을 무수 Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 여과시키고, 농축시켜 화합물 75(8.09 g, 71%)를 거품상 백색 고체로서 수득하고, 이것을 추가의 정제 없이 사용하였다.

질량 스펙트럼, m/z = [316.8](M)+.

반응식 LXX

3-아세톡시-2-(1H-인돌-3-일메틸)-피롤리딘-1-카복실산 3급-부틸 에스테르(76):

CH₂Cl₂(125 mL) 중의 화합물 75(8.09 g, 25.5 mmol)의 잘 교반된 현탁액에 DMAP(촉매) 및 Ac₂O(3.63 mL, 38.3 mmol)를 첨가하였으며, 이때 반응은 황색으로 균질하였다. 반응 혼합물을 18시간 동안 계속 교반하였으며, 이 동안에 색상이 황색으로부터 적색으로 변하였다. 반응 혼합물을 CH₂Cl₂로 희석시키고, 1M HCl, NaHCO₃(포화) 및 염수로 연속적으로 세척하였다. 생성된 유기 층을 무수 Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 여과시키고, 농축시켰다. 거품상 갈색 고체를 SiO₂ 상에 흡착시키고, 플래시 크로마토그래피(SiO₂, 2:1 헥산/EtOAc)에 의해 정제하여 화합물 76(4.73 g, 52%)을 거품상 백색 고체로서 수득하였다.

질량 스펙트럼, m/z = [358.8](M)+.

반응식 LXXI

아세트산 2-(1H-인돌-3-일메틸)-피롤리딘-3-일 에스테르(77):

0℃에서 CH₂Cl₂(35 mL) 중의 화합물 76(2.61 g, 7.28 mmol)의 잘 교반된 용액에 TFA(8 mL)를 첨가하였다. 생성된 암녹색 용액을 추가적으로 2시간 동안 교반시키고, 그 후 반응을 농축시켰다. 잔류물을 CH₂Cl₂에 흡수시키고, 2 X NaHCO₃(포화) 및 염수로 세척하였다. 생성된 유기 상을 무수 Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 여과시키고, 농축시켜 화합물 77(1.78 g, 95%)을 거품상 담황색 고체로서 수득하고, 이것을 추가의 정제 없이 사용하였다.

질량 스펙트럼, m/z = [258.8](M)+

반응식 LXXII

3- 아세톡시 -2-(2- 브로모 -1H-인돌-3- 일메틸 )- 피롤리딘 -1- 카복실산 3급-부틸 에스테르(78):

0℃에서 CHCl₃(215 mL) 중에 화합물 76(7.62 g, 21.3 mmol)을 함유한 용액에 KOAc(6.26 g, 63.7 mmol)를 첨가한 후, CHCl₃(8 mL) 중에서 Br₂(4.07 g, 25.4 mmol)를 적가하였다. 15분 후, 비균질 반응 혼합물을 염수 및 DCM으로 희석시켰다. 층들을 분리시키고, 유기 상을 10% 수성 Na₂S₂O₃ 및 염수로 연속적으로 세척하고, 무수 Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 여과시키고, 농축시켰다. 조질의 브롬화물을 플래시 실리카 겔 크로마토그래피(2:1 헥산/EtOAc 내지 1:3 헥산/EtOAc)에 의해 정제하여 6.31 g(68%)의 화합물 78을 수득하였다. 질량 스펙트럼, m/z = [436.8](M)+.

반응식 LXXIII

아세트산 2-(2-브로모-1H-인돌-3-일메틸)-피롤리딘-3-일 에스테르(79):

DCM(20 mL) 중에 화합물 78(3.24 g, 7.40 mmol)을 함유한 용액을 0℃에서 TFA(4 mL)로 처리하였다. 추가적인 TFA를 7시간에 걸쳐 필요한 만큼 첨가하였다. 화합물 78이 완전히 소비되자 마자, 반응 혼합물을 진공에서 농축시켰다. 조악한 생성물을 역상 HPLC(2" 다이나맥스 C18 칼럼; A: 물 w/0.1% v/v HOAc; B: ACN w/0.1% v/v HOAc; 방법: 10% 내지 100% B(30분간에 걸쳐서); 유량: 40 mL/분)에 의해 정제하였다. 생성물을 함유한 분획물을 합하고, 진공에서 농축시켜 ACN을 제거하였다. 수성 용액을 EtOAc로 분배시키고, 수성 NaHCO₃ 및 염수로 연속적으로 세척하였다. 수성 세척물을 EtOAc로 다시 추출시키고, 합한 유기 추출물을 Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 여과시키고, 농축시켜 1.09 g(44%)의 화합물 79를 수득하였다.

반응식 LXXIV

아세트산 2-(2-브로모-1H-인돌-3-일메틸)-1-(2-3급-부톡시카보닐아미노-2-사이클로헥실-아세틸)-피롤리딘-3-일 에스테르(80):

0℃에서 NMP(5 mL) 중에 아민 화합물 79(0.34 g, 1.00 mmol), Boc-Chg-OH(285 mg, 1.11 mmol) 및 HATU(460 mg, 1.21 mmol)를 함유한 용액에 DIPEA(169 mg, 1.31 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 주위 온도로 밤새 가온시켰다. 반응 혼합물을 디에틸 에테르로 희석시키고, 묽은 수성 1M HCl, 물(5X), 수성 NaHCO₃, 물(2X), 이어서 염수로 연속적으로 세척하였다. 수성 세척물을 디에틸 에테르로 다시 추출시키고, 합한 유기 추출물을 무수 Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 여과시키고, 농축시켜 0.66 g(100% 초과)의 조악한 화합물 80을 수득하고, 이것을 추가의 정제 없이 사용하였다.

반응식 LXXV

아세트산 1-(2-아미노-2-사이클로헥실-아세틸)-2-(2-브로모-1H-인돌-3-일메틸)-피롤리딘-3-일 에스테르(81):

DCM(10 mL) 중에 조악한 화합물 80(0.66 g)을 함유한 용액을 0℃에서 TFA(2 mL)로 처리하였다. 1시간 후, 반응 혼합물을 진공에서 농축시켰다. 조악한 잔류물을 EtOAc로 희석시키고, 수성 NaHCO₃(2X) 및 염수로 연속적으로 세척하였다. 합한 수성 세척물을 EtOAc로 다시 추출시키고 합한 유기 추출물을 무수 Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 여과시키고, 농축시켜 0.16 g(33%, 두 단계)의 화합물 81을 수득하고, 이것을 추가의 정제 없이 직접적으로 사용하였다.

반응식 LXXVI

아세트산 1-{2-[2-( 벤질옥시카보닐 - 메틸 -아미노)- 프로피오닐아미노 ]-2- 사이클로헥실 -아세틸}-2-(2- 브로모 -1H-인돌-3- 일메틸 )- 피롤리딘 -3-일 에스테르(82):

0℃에서 NMP(5 mL) 중에 조악한 아민 화합물 81(0.16 g, 0.33 mmol), Cbz-N(Me)Ala-OH(87 mg, 0.36 mmol) 및 HATU(153 mg, 0.40 mmol)를 함유한 용액에 DIPEA(56 mg, 0.43 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 주위 온도로 밤새 가온시켰다. 반응 혼합물을 디에틸 에테르로 희석시키고, 묽은 수성 1M HCl, 물(5X), 수성 NaHCO₃, 물(2X), 이어서 염수로 연속적으로 세척하였다. 수성 세척물을 디에틸 에테르로 다시 추출시키고, 합한 유기 추출물을 무수 Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 여과시키고, 농축시켜 0.27 g(100% 초과)의 조악한 화합물 82를 수득하고, 이것을 추가의 정제 없이 사용하였다. 질량 스펙트럼, m/z = [697.0](M + H)+.

반응식 LXXVII

N-{1-사이클로헥실-2-[3-하이드록시-2-(1H-인돌-3-일메틸)-피롤리딘-1-일]-2-옥소-에틸}-2-메틸아미노-프로피온아미드(83):

MeOH(20 mL) 중에 조악한 화합물 82(0.27 g) 및 탄소상 Pd 10%(약 0.1 g)을 함유한 혼합물을 파르 병(Parr bottle)에 놓고, 50 내지 55PSI(3.4 내지 3.7 atm)수소로 가압시켰다. 파르 장치 상에서의 진탕 2시간 후, 반응 혼합물을 여과시키고, 고형물을 MeOH로 세척하였다. 여액을 진공에서 농축시키고 잔류물을 MeOH(10 mL)에서 용해시켰다. 0℃에서, 수성 NaOH(1M, 2 mL)를 첨가하였다. 2시간 후, 빙초산(4 mL)을 첨가하고, 반응 혼합물을 진공에서 농축시켰다. 잔류물을 0.1% v/v HOAc를 함유한 물/ACN에 용해시키고, 생성물을 동결건조시킨 후 역상 HPLC(2" 다이나맥스 C18 칼럼; A: 물 w/0.1% v/v HOAc; B: ACN w/0.1% v/v HOAc; 방법: 10 내지 70% B(30분간에 걸쳐서); 유량: 40 mL/분)에 의해 정제하여 67.4 mg(39%, 두 단계)의 산 부가염 화합물 83ㆍHOAc를 백색 고체로서 수득하였다. 질량 스펙트럼, m/z = [441.0](M)+.

반응식 LXVI 내지 LXXVII에 기술된 일반적인 절차 및 아미노산 시약 Boc-Chg-OH 및 Cbz-N(Me)Ala-OH와 유사한 적절한 아미노산을 사용하여 표 10에 기재된 화합물을 제조하고 이들의 XIAP BIR-3 또는 cIAP-1 BIR-3에 대한 결합 친화도(Kd)를 시험하였다.

반응식 LXVI 내지 LXXVII에 기술된 일반적인 절차 및 아미노산 시약 Boc-Chg-OH 및 Cbz-N(Me)Ala-OH와 유사한 적절한 아미노산을 사용하여 표 11에 기재된 화합물을 제조하고 이들의 XIAP BIR-3 또는 cIAP-1 BIR-3에 대한 결합 친화도(Kd)를 시험하였다.

반응식 LXXVIII

2-[2-(4- 플루오로 - 페닐 )-1H-인돌-3- 일메틸 ]-3- 하이드록시 - 피롤리딘 -1- 카복실산 3급-부틸 에스테르(84):

화합물 78(반응식 LXXII 참조)(1.1 g, 2.52 mmol), K₂CO₃(1.22 g, 8.82 mmol), 4-F-페닐붕소산(458 mg, 3.27 mmol) 및 (Ph₃P)₄Pd(145 mg, 5 mol%)의 혼합물을 5시간 동안 85℃에서 가열하였다. 반응 혼합물을 주위 온도로 냉각시키고 EtOAc로 희석시켰다. 유기 용액을 1N HCl 및 염수로 연속적으로 세척하고, 무수 Na₂SO₄상에서 건조시키고, 여과시키고, 농축시켰다. 조악한 생성물을 실리카 겔 크로마토그래피에 의해 정제하여 920 mg(81 %)의 화합물 84를 황색 고체로서 수득하였다. 질량 스펙트럼, m/z = [452.9](M)+.

반응식 LXXIII 내지 LXXVII에 기술된 일반적인 절차 및 아미노산 시약 Boc-Chg-OH 및 Cbz-N(Me)Ala-OH와 유사한 적절한 아미노산을 사용하여 표 12에 기재된 화합물을 제조하고 이들의 XIAP BIR-3 또는 cIAP-1 BIR-3에 대한 결합 친화도(Kd)를 시험하였다.

반응식 LXXIX

4-(3급-부틸-디메틸- 실라닐옥시 )- 피롤리딘 -1,2- 디카복실산 1-벤질 에스테르 2-메틸 에스테르(86):

Z-Hyp-OMe(화합물 85, 49.4 g, 177 mmol) 및 이미다졸(14.5 g, 214 mmol)의 용액을 DCM(215 mL)에 용해시키고, 0℃로 냉각시켰다. DCM(100 mL) 중에 3급-부틸디메틸실릴 클로라이드(TBS-Cl, 29.8 g, 198 mmol)을 함유한 용액을 4℃ 이하의 온도에서 약 68분간에 걸쳐서 첨가하였다. 반응을 가온시키고, 실온에서 밤새 교반시켰다. TLC 분석으로 미량의 출발 물질 만이 존재함을 확인하였다. 반응을 물(150 mL)로 급냉시켰다. 유기 층을 진한 HCl(2 내지 3 mL, pH는 약 1임)을 함유한 물(150 mL) 및 이어서 염수(113 g)로 세척하였다. 농축시킨 후, 조악한 생성물(86)을 오일(93 g)로서 수득하고, 이것을 추가의 정제 없이 사용하였다.

반응식 LXXX

4-(3급-부틸-디메틸- 실라닐옥시 )- 피롤리딘 -1,2- 디카복실산 1-벤질 에스테르(87):

앞선 단계에서 수득된 오일(화합물 86, 93 g, 177 mmol), THF(350 mL) 및 물(173 g)을 합하여 실온에서 LiOH 일수화물(7.8 g, 186 mmol)로 처리하였다. 7시간 후, 반응의 완결을 TLC 분석으로 확인하였다. 반응 혼합물을 물(350 mL)로 희석시키고, 이소프로필 아세테이트(690 mL)로 추출하였다. 유기 층을 물(170 mL)로 추출하였다. 합한 수성 층들을 진한 HCl(19.7 g)로 pH 2로 산성화시키고, 생성물을 톨루엔(350 mL)으로 추출하였다. 유기 층을 진한 HCl(1 g, pH 2)를 함유한 물(350 mL)로 세척하였다. 유기 층을 회전 증발기에서 농축시키고 진공 펌프 상에서 건조시켜 왁스성 고체(화합물 87, 62.9 g, 93%, 두 단계)를 수득하였다.

반응식 LXXXI

4-(3급-부틸-디메틸- 실라닐옥시 )-2-(6- 플루오로 -1H-인돌-3- 카보닐 )- 피롤리딘 -1-카 복실 산 벤질 에스테르(88):

Z-Hyp(OTBS)-OH(화합물 87, 55.5 g, 145 mmol)를 톨루엔(265 mL)에 용해시켰다. DMF(0.1 mL) 및 옥살일 클로라이드(22.4 g, 174 mmol)를 실온에서 첨가하였다. 2 내지 3시간 후, 거품 형성이 중단되었다. 4시간 후, 혼합물을 회전 증발기(65℃ 욕, 약 30분)에서 농축시켜 95 g의 담황색 용액을 수득하였으며, 이것은 ¹H NMR 분석에 의해 미량의 불순물이 존재하는 투명한 산 염화물임을 확인하였다.

6-플루오로인돌(39.2 g, 290 mmol)을 클로로벤젠(무수물, 300 mL) 및 톨루엔(200 mL)에 용해시키고, 용액을 얼음/아세톤 욕에서 -4℃로 냉각시켰다. 디에틸 에테르 중의 3M EtMgBr 용액(101 g, 294 mmol)을 2.5℃ 이하의 온도에서 31분간에 걸쳐 첨가하여 옅은 호박색 용액을 수득하였다. 30분 후, 상기에서 수득한 산 염화물/톨루엔 용액을 2℃ 미만의 온도에서 약 45분간에 걸쳐 점적시켰다. 반응을 1시간 동안 차가운 상태로 유지시킨 후, 천천히 가온시켰다. 약 4시간(10.6℃) 후, 반응 혼합물을 HOAc(9 g, 17.5℃에서 발열) 및 이어서 물(발열)로 급냉시켰다. 합쳐서 200 mL 물 및 300 mL EtOAc를 첨가하였다. 유기 층을 분리시키고 물(100 mL, 느린 분리)로 세척하였다. 유기 층을 농축시켜 227 g의 화합물 88을 호박색 오일로서 수득하고, 이것을 추가의 정제 없이 사용하였다.

반응식 LXXXII

2-(6- 플루오로 -1H-인돌-3- 카보닐 )-4- 하이드록시 - 피롤리딘 -1- 카복실산 벤질 에스테르(89):

앞선 단계에서 수득한 오일(화합물 88, 227 g)을 THF(600 mL)로 희석시켰다. 1M TBAF/THF 용액(160 mL)을 첨가하고, 실온에서 교반시켰다. 9시간 후, 또 다른 20 mL의 1M TBAF/THF 용액을 첨가하고, 반응을 주말에 걸쳐 방치시켰다. 혼합물을 농축시키고, EtOAc(600 mL)에 재용해시켰다. 용액을 물(310 mL)로 세척하자 마자, 생성물이 침전하여 짙은 현탁액이 형성되었다. 혼합물을 여과(천천히)시키고, 고형물을 EtOAc(165 mL 분획으로)로 세척하고 건조시켜 43 g의 화합물 89[Z-Hyp(OTBS)-OH를 기본으로 한 두 단계 동안 전체 수율 77%]를 수득하였다. 건조시킨 후 합한 여액을 농축시키면 부가의 4.8 g(8.6%)의 화합물 89가 침전되었다.

반응식 LXXXIII

2-(6- 플루오로 -1H-인돌-3- 카보닐 )-4-(4-니트로- 벤조일옥시 )- 피롤리딘 -1- 카복실산 벤질 에스테르(90):

무수 THF(700 mL) 및 DMF(175 mL) 중에 화합물 89(51.1 g, 134 mmol), 4-니트로벤조산(27.9 g, 167 mmol) 및 트리페닐포스핀(48.9 g, 187 mmol)을 함유한 용액을 2℃로 냉각시켰다. DIAD(37.4 mL, 194 mmol)를 2 내지 3℃의 온도에서 1시간에 걸쳐 첨가하였다. 1시간 후, 용액을 실온으로 가온시키고 밤새 교반시켰다. HPLC 분석에 의해 반응의 완결을 확인하였다. 반응 혼합물을 진공에서 농축시키고, MeOH(250 mL)를 첨가하고, 농축시켜 짙은 현탁액(322 g)을 수득하였다. MeOH(250 mL)를 다시 첨가하고, 진공에서 농축시켜 짙은 현탁액(420 g)을 수득하고, 이것을 약 1.5시간 동안 빙욕에서 차게 하였다. 생성물을 진공 필터에서 모아서 차거운 MeOH(190 mL)로 세척하였다. 생성물을 필터 상에서 공기 건조시켜 82.9 g(100% 초과)의 화합물 90을 담황색 고체로서 수득하였으며, 이것은 여전히 약간의 잔류 MeOH를 함유하였다.

반응식 LXXXIV

2-(6- 플루오로 -1H-인돌-3- 카보닐 )-4- 하이드록시 - 피롤리딘 -1- 카복실산 벤질 에스테르(91):

앞선 단계에서의 축축한 고형물(화합물 90, 82.9 g)을 THF(600 mL), 메탄올(200 mL) 및 물(100 mL)의 혼합물에 현탁시켰다. 50% 수성 NaOH 용액(16.0 g, 200 mmol)을 첨가하였다(23.7℃ 내지 25.9℃에서 약간 발열). 2시간 후, TLC 분석에 의해 반응의 완결을 확인하였다. HOAc(5.3 g)를 첨가하여 pH를 7 내지 8로 조절하고(오렌지색 용액의 색상이 담황색으로 변함), 반응 혼합물을 진공에서 농축시켰다. 물(500 mL)을 첨가하고, 짙은 현탁액이 형성(736 g)될 때까지 계속 농축시켰다. 생성물을 진공 필터에 모아서 물(400 mL 분획으로)로 세척하였다. 생성물을 55℃의 진공 오븐에서 건조시켜 42.6 g(83%, 두 단계)의 화합물 91을 회백색 고체로서 수득하였다.

반응식 LXXXV

2-(6- 플루오로 -1H-인돌-3- 카보닐 )-4- 하이드록시 - 피롤리딘 -1- 카복실산 3급-부틸 에스테르(92):

MeOH(50 mL) 중의 화합물 91(3.8 g, 10 mmol), Boc₂O(2.4 g, 11 mmol) 및 10% 탄소상의 Pd(0.5 g, 5 mol%) 현탁액을 40 PSI(2.72 atm) 수소 압력의 파르 장치를 사용하여 2시간 동안 진탕시켰다. 반응 혼합물을 여과시키고, 여액을 진공에서 농축시켜 조악한 화합물 92를 백색 고체로서 수득하고, 이것을 추가의 정제 없이 사용하였다. 질량 스펙트럼, m/z = [348.7](M)+.

반응식 LXXXVI

(6-플루오로-1H-인돌-3-일)-(4-하이드록시-피롤리딘-2-일)-메탄온(93):

DCM(20 mL) 중에 조악한 화합물 92를 함유한 용액을 0℃로 냉각시켰다. TFA(4 mL)를 첨가하였다. 2시간 후, 반응 혼합물을 진공에서 농축시키고, 동결건조시킨 후, 조악한 생성물을 역상 HPLC(2" 다이나맥스 C18 칼럼; A: 물 w/0.1% v/v HOAc; B: ACN w/0.1% v/v HOAc; 방법: 10 내지 70% B(39분간에 걸쳐서); 유량: 40 mL/분)에 의해 정제하여 2.3 g(95%, 두 단계)의 화합물 93을 담황색 거품으로서 수득하였다. 질량 스펙트럼, m/z = [248.7](M)+.

반응식 LXXXVII

{1-[2-(6- 플루오로 -1H-인돌-3- 카보닐 )-4- 하이드록시 - 피롤리딘 -1- 카보닐 ]-2,2-디메틸-프로필}- 카밤산 3급-부틸 에스테르(94):

0℃에서 NMP(13 mL) 중에 아민 화합물 93(0.30 g, 1.20 mmol), Boc-Tle-OH(0.31 g, 1.32 mmol) 및 HATU(0.50 g. 1.32 mmol)를 함유한 용액에 NMM(0.15 g, 1.44 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 주위 온도로 밤새 가온시켰다. 반응 혼합물을 디에틸 에테르로 희석시키고 묽은 수성 HCl, 물(5X), 수성 NaHCO₃, 물(2X), 이어서 염수로 연속적으로 세척하였다. 수성 세척물을 디에틸 에테르로 다시 추출시키고, 합한 유기 추출물을 무수 Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 여과시키고, 농축시켜 조악한 생성물을 수득하고, 이것을 표준 상 HPLC(2" 다이나맥스 SiO₂ 칼럼(베리안 인코포레이티드); A: 헥산; B: EtOAc; 방법: 100% B(30분간에 걸쳐서); 유량: 40 mL/분)에 의해 정제하였다. 생성물을 함유한 분획물을 합하여 진공에서 농축시켜 0.33 g(60%)의 화합물 94를 수득하였다. 질량 스펙트럼, m/z = [462.0](M)+.

반응식 LXXXVIII

2-아미노-1-[2-(6- 플루오로 -1H-인돌-3- 카보닐 )-4- 하이드록시 - 피롤리딘 -1-일]-3,3-디메틸-부탄-1-온(95):

DCM(3 mL) 중에 화합물 94(0.33 g, 0.72 mmol)를 함유한 용액을 0℃로 냉각시켰다. TFA(1 mL)를 첨가하였다. 2시간 후, 반응 혼합물을 진공에서 농축시키고, 동결건조시킨 후 조악한 생성물을 역상 HPLC(2" 다이나맥스 C18 칼럼; A: 물 w/0.1% v/v HOAc; B: ACN w/0.1% v/v HOAc; 방법: 10 내지 70% B(30분간에 걸쳐서); 유량: 40 mL/분)에 의해 정제하여 0.19 g(73%)의 화합물 95를 수득하였다. 질량 스펙트럼, m/z = [361.8](M)+.

반응식 LXXXIX

(1-{1-[2-(6- 플루오로 -1H-인돌-3- 카보닐 )-4- 하이드록시 - 피롤리딘 -1- 카보닐 ]-2,2-디메틸- 프로필카바모일 }-에틸)- 메틸 - 카밤산 벤질 에스테르(96):

0℃에서 NMP(14 mL) 중에 아민 화합물 95(0.19 g, 0.53 mmol), Cbz-N(Me)Ala-OH(140 mg, 0.58 mmol) 및 HATU(220 mg. 0.58 mmol)를 함유한 용액에 NMM(60 mg, 0.64 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 주위 온도로 밤새 가온시켰다. 반응 혼합물을 디에틸 에테르로 희석시키고 묽은 수성 HCl, 물(5X), 수성 NaHCO₃, 물(2X), 이어서 염수로 연속적으로 세척하였다. 수성 세척물을 디에틸 에테르로 다시 추출시키고, 합한 유기 추출물을 무수 Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 여과시키고, 농축시켰다. 동결건조시킨 후, 조악한 생성물을 역상 HPLC(2" 다이나맥스 C18 칼럼; A: 물 w/0.1% v/v HOAc; B: ACN w/0.1% v/v HOAc; 방법: 30 내지 70% B(30분간에 걸쳐서); 유량: 40 mL/분)에 의해 정제하여 0.10 g(35%)의 화합물 96을 수득하였다. 질량 스펙트럼, m/z = [581.0](M )+.

반응식 XC

N-{1-[2-(6- 플루오로 -1H-인돌-3- 카보닐 )-4- 하이드록시 - 피롤리딘 -1- 카보닐 ]-2,2-디메틸-프로필}-2- 메틸아미노 - 프로피온아미드 (97):

MeOH(20 mL) 중에 화합물 96(0.1 g, 0.17 mmol) 및 10% 탄소상의 Pd(30 mg)를 함유한 용액을 45 PSI(3.06 atm) 수소 압력 하의 파르 장치 상에서 진탕시켰다. 2시간 후, 반응 혼합물을 여과시키고, 농축시켰다. 동결건조시킨 후, 조악한 생성물을 역상 HPLC(2" 다이나맥스 C18 칼럼; A: 물 w/0.1% v/v HOAc; B: ACN w/0.1% v/v HOAc; 방법: 10 내지 70% B(30분간에 걸쳐서); 유량: 40 mL/분)에 의해 정제하여 69.4 mg(90%)의 화합물 97ㆍHOAc를 수득하였다. 질량 스펙트럼, m/z = [447.0](M)+.

반응식 LXXIX 내지 XC에 기술된 일반적인 절차 및 아미노산 시약 Boc-Tle-OH 및 Cbz-N(Me)Ala-OH와 유사한 적절한 아미노산을 사용하여 표 13에 기재된 화합물을 제조하고 이들의 XIAP BIR-3 또는 cIAP-1 BIR-3에 대한 결합 친화도(Kd)를 시험하였다.

반응식 XCI

4-아세톡시-2-(2,3-디하이드로-1H-인돌-3-일메틸)-피롤리딘-1-카복실산 벤질 에스테르(99 및 10O):

TFA(100 mL)를 0℃로 냉각시켰다. 당해 이상(biphasic) 용액을 강하게 교반하면서 트리에틸실란(7.7 g, 66.5 mmol)을 한꺼번에 첨가한 후, DCM(10 mL) 중에서 화합물 98(8.7 g, 22.1 mmol)을 적가하였다. 2시간 후, 반응 혼합물을 진공에서 농축시켰다. 잔류물을 EtOAc에 용해시키고 포화 수성 NaHCO₃로 세척(기체 방출이 관측되지 않을 때까지)하고, 이어서 염수로 연속적으로 세척하고, 무수 Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 여과시키고, 농축시켰다. 조악한 생성물을 표준상 HPLC[2" 다이나맥스 SiO₂, 헥산 중의 10 내지 100% EtOAc(30분간에 걸쳐서)]에 의해 정제하여 화합물 99 및 화합물 100의 약 1:1 혼합물 6.5 g(75%)을 수득하고, 이것을 다음 반응에서 직접적으로 사용하였다.

반응식 XCII

4-아세톡시-2-(1-아세틸-2,3-디하이드로-1H-인돌-3-일메틸)-피롤리딘-1-카복실산 벤질 에스테르(101 및 102):

DCM(100 mL) 중에 화합물 99 및 화합물 100의 약 1:1 혼합물(6.5 g, 16.4 mmol), TEA(2.5 g, 24.7 mmol) 및 DMAP(촉매)를 함유한 용액을 0℃로 냉각시켰다. 아세틸클로라이드(1.44 g, 18.1 mmol)를 주사기를 통해 첨가하였다. 2시간 후, 비균질 반응 혼합물을 DCM으로 희석시키고, 수성 NaHCO₃, 물 및 염수로 연속적으로 세척하고, 무수 Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 여과시키고, 농축시켰다. 조악한 생성물을 표준상 HPLC(2" 다이나맥스 SiO₂, 34% EtOAc/헥산)에 의해 정제하여 1.5 g(21%)의 화합물 101 및 2.8 g(39%)의 화합물 102를 수득하였다. 질량 스펙트럼, m/z = [436.6](M)+

반응식 XCII

아세트산 5-(1-아세틸-2,3-디하이드로-1H-인돌-3-일메틸)-피롤리딘-3-일 에스테르(103):

EtOAc(20 mL) 중에 인돌린 화합물 101(0.2 g, 0.45 mmol) 및 10% 탄소상의 Pd(50 mg)를 함유한 용액을 50 PSI(3.4 atm) 수소 대기 하의 파르 장치 상에서 진탕시켰다. 5시간 후, 반응 혼합물을 셀라이트®를 통해 여과시키고, 고형물을 EtOAc로 세척하였다. 여액을 농축시켜 0.26 g(이론치 초과)의 조악한 화합물 103을 수득하고, 이것을 추가의 정제 없이 사용하였다.

반응식 XCI 내지 XCIII 및 LXXXVIII 내지 XC 기술된 일반적인 절차 및 적절한 아미노산 시약을 사용하여 표 14에 기재된 화합물을 제조하고 이들의 XIAP BIR-3 또는 cIAP-1 BIR-3에 대한 결합 친화도(Kd)를 시험하였다.

반응식 XCIII

4- 아세톡시 -2-(1-아세틸-5- 브로모 -2,3- 디하이드로 -1H-인돌-3- 일메틸 )- 피롤리딘 -1- 카복실산 벤질 에스테르(104):

CHCl₃(30 mL) 중에 화합물 101(0.8 g, 1.83 mmol) 및 KOAc(635 mg, 6.45 mmol)을 함유한 용액을 0℃로 냉각시켰다. CHCl₃(30 mL) 중에서 브롬(0.35 g, 2.19 mmol)을 적가식으로 첨가하였다. Br₂의 첨가 후, LC/MS 분석으로 화합물 101 및 화합물 104 둘 다가 존재함을 확인하였으며, 따라서 추가 분량의 KOAc(680 mg) 및 Br₂(5 mL CHCl₃ 중의 0.31 g)를 첨가하였다. 첨가 후, 수성 Na₂S₂O₃의 첨가에 의해 반응을 급냉시켰다. 반응 혼합물을 DCM으로 희석시키고, 층들을 분리시켰다. 유기 상을 염수로 세척하고, 무수 Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 여과시키고, 농축시켰다. 조악한 생성물을 표준상 HPLC(2" 다이나맥스 SiO₂, 34% EtOAc/헥산)에 의해 정제하여 화합물 104를 수득하였다. 질량 스펙트럼, m/z = [516.6](M)+.

반응식 XCIV

4-아세톡시-2-(1-아세틸-5-비닐-2,3-디하이드로-1H-인돌-3-일메틸)-피롤리딘-1-카복실산 벤질 에스테르(105):

4:1 DME/물 중에 화합물 104(0.32 g, 0.62 mmol), (Ph₃P)₄Pd(7 mg, 0.01 mol%), 2,4,6-트리비닐사이클로보록산 피리딘 착체(150 mg, 0.62 mmol), K₂CO₃(86 mg, 0.62 mmol)을 함유한 혼합물을 90℃로 가온시켰다. 8시간 후, 반응 혼합물을 냉각시키고, EtOAc로 희석시켰다. 유기 용액을 물 및 염수로 연속적으로 세척하고, 무수 Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 여과시키고, 농축시켰다. 조악한 생성물을 0.35 mmol 스케일 상에서 실시된 제2 반응으로부터의 조악한 생성물과 합하고, 표준 상 HPLC[2" 다이나맥스 SiO₂, 헥산 중의 60 내지 100% EtOAc(30분간에 걸쳐서)]에 의해 정제하여 260 mg(59%)의 화합물 105을 수득하였다. 질량 스펙트럼, m/z = [462.6](M)+.

반응식 XCV

아세트산 5-(1-아세틸-5-에틸-2,3-디하이드로-1H-인돌-3-일메틸)-피롤리딘-3-일 에스테르(106):

EtOAc(20 mL) 중에 인돌린 화합물 105(0.26 g, 0.56 mmol) 및 10% 탄소상의 Pd(100 mg)를 함유한 용액을 50 PSI(3.4 atm) 수소 대기 하의 파르 장치 상에서 진탕시켰다. 8시간 후, 반응 혼합물을 셀라이트®를 통해 여과시키고, 고형물을 EtOAc로 세척하였다. 여액을 농축시켜 0.26 g(이론치 초과)의 조악한 화합물 106을 수득하고, 이것을 추가의 정제 없이 사용하였다. 질량 스펙트럼, m/z = [330.6](M)+.

반응식 XCIII 내지 XCV 및 LXXXVIII 내지 XC에 기술된 일반적인 절차 및 적절한 아미노산 시약을 사용하여 표 15에 기재된 화합물을 제조하고 이들의 XIAP BIR-3 또는 cIAP-1 BIR-3에 대한 결합 친화도(Kd)를 시험하였다.

본 발명의 화합물은 비용매화 형태 뿐만 아니라 수화 형태를 비롯한 용매화 형태로서 존재할 수 있다. 본 발명의 화합물(예를 들어, 화학식 I의 화합물)은 또한 산 부가염 및/또는 염기염(이것으로 한정되지 않음)을 포함하는 약제학적으로 허용되는 염 둘 다를 형성할 수 있다. 더욱이, 본 발명의 화합물은 무정형(비정질 형태) 및 포접화합물, 전구약물, 다형체, 생-가수분해성 에스테르, 라세미 혼합물 형태로서, 또는 광학적으로 순수한 거울상이성체 및 부분입체이성체를 포함하지만, 이것으로 한정되지 않는 정제된 입체이성체로서 존재할 수 있다. 일반적으로, 상술한 바와 같이, 이러한 모든 형태가 당해 화합물의 유리 염기 또는 산 형태에 대한 대안적인 형태로서 사용될 수 있으며, 본 발명의 범위 내에 포함되는 의도를 갖는다.

"다형체"는 화합물의 고체 결정 형태를 의미한다. 동일 화합물의 상이한 다형체는 상이한 물리적, 화학적 및/또는 분광적 특성을 나타낼 수 있다. 상이한 물리적 특성에는 안정성(예를 들어, 열 또는 빛에 대한 안정성), 압축성 및 밀도(제형화 및 생성물 제조에서 중요) 및 용해 속도(생체이용율에 영향을 줄 수 있음)가 포함되지만, 이것으로 한정되지 않는다. 다형체의 상이한 물리적 특성은 이것의 가공에 영향을 줄 수 있다. "포접화합물"은, 게스트 분자(예를 들어, 용매 또는 물)가 포획되어 있는 공간(예를 들어, 채널)을 함유한 결정 격자 형태의 화합물 또는 이의 염을 의미한다. 용어 "전구약물"은 예를 들어 혈액에서의 가수분해에 의해 상기 화학식들의 모 화합물을 생성하도록 생체 내에서 빠르게 변환되는 화합물을 의미한다. 상세한 논의는 문헌[T. Higuchi and V. Stella, "Pro-drugs as Novel Delivery Systems," Vol 14 of the A.C.S. Symposium Series] 및 문헌[Bioreversible Carriers in Drug Design, ed. Edward B. Roche, American Pharmaceutical Association and Pergamon Press, 1987]에 기술되어 있으며, 이들 둘 다의 문헌이 본 명세서에 참고로 인용되어 있다.

본 발명의 화합물 및 염은 또한 예를 들어 엔올 및 이민 형태와 대응하는 케토 및 엔아민 형태와 같은 토토머 형태 및 기하이성체 및 이들의 혼합물로 존재할 수 있다. 토토머들은 용액 중에서 토토머 세트의 혼합물로서 존재한다. 고체 형태에서는, 통상적으로 하나의 토토머가 우세하다. 비록 하나의 토토머만이 상기 화학식들에 의해 기재될 수 있다고 할지라도, 본 발명은 본 화합물의 모든 토토머를 포함한다.

본 발명의 화합물은 환자에게 단독으로서든 또는 약제학적 조성물의 일부로서든 어느 것이라도 투여될 수 있다. 당해 화합물 및 관련 조성물을 환자에게 투여하는 다양하고 비제한적인 방법은 경구, 직장, 비경구(정맥내, 근육내 또는 피하), 수조내, 질내, 복강내, 방광내, 국소(분말, 연고 또는 드롭제)적 투여 또는 협측내 또는 비내 분무를 포함한다.

사용될 약제학적 조성물은 상기한 치료학적 유효량의 화합물 또는 약제학적으로 허용되는 이의 염 또는 다른 형태를 약제학적으로 허용되는 부형제와 함께 포함한다. 구절 "약제학적 조성물"은 의학적 또는 수의학적 용도로 투여하기 적합한 조성물을 의미한다. 적당한 투여 형태, 투여량 및 투여 경로는 약제학적 및 의학적 기술 분야에서 통상의 기술 수준 내에서 결정된다는 것을 이해하여야 한다.

비경구 투여에 적합한 조성물은 바람직하게는 수용자의 혈액과 등장성인 본 발명의 화합물 또는 조성물의 멸균 수성 제제를 포함하는 것이 편리하다. 상기 수성 제제는 적합한 분산제 또는 습윤제, 유화제 및 현탁제를 사용하여 공지된 방법에 따라 제제화될 수 있다. 다양한 항균 및 항진균제, 예를 들어 파라벤, 클로로부탄올, 페놀 및 소르브산이 또한 포함될 수있다. 멸균 주사가능한 제제는 또한 무독성의 비경구-허용가능한 희석제 또는 용매 중의 멸균 주사가능한 용액 또는 현탁액, 예를 들어 1,3-부탄 디올 중의 용액일 수 있다. 사용될 수 있는 허용되는 비히클 및 용매 중에는 물, 링거(Ringer) 용액 및 등장성 염화나트륨 용액이 있다. 또한, 멸균 고정유(fixed oil)이 용매 또는 현탁 매질로서 편리하게 사용된다. 상기 목적을 위해, 합성 모노- 또는 디-글리세라이드를 비롯한 임의의 부드러운 고정유가 사용될 수 있다. 또한, 올레산과 같은 지방산이 주사가능한 제제에 사용될 수 있다. 주사가능한 약제학적 형태의 연장 흡수는 흡수 지연제, 예를 들어 알루미늄 모노스테아레이트 및 젤라틴의 사용에 의해 초래될 수 있다. 피하, 정맥내, 근육내 등의 투여에 적합한 담체 제제는 문헌[Remington's Pharmaceutical Sciences, Mack Publishing Co., Easton, PA]에서 볼 수 있으며, 상기 문헌 전체가 참고로 본 명세서에 인용되어 있다.

경구 투여용 고체 투여형은 캡슐, 정제, 환제, 분말 및 과립을 포함한다. 이러한 고체 투여형에서, 당해 화합물은 (a) 충전제 또는 증량제, 예를 들어 전분, 락토즈, 슈크로즈, 글루코즈, 만니톨 및 규산, (b) 결합제, 예를 들어 카복시메틸셀룰로즈, 알기네이트, 젤라틴, 폴리비닐피롤리돈, 슈크로즈 및 아카시아, (c) 보습제, 예를 들어 글리세롤, (d) 붕해제, 예를 들어 아가-아가, 탄산칼슘, 감자 또는 타피오카 전분, 알긴산, 특정 규산염 착체 및 탄산나트륨, (e) 용해 지연제, 예를 들어 파라핀, (f) 흡수 촉진제, 예를 들어 4급 암모늄 화합물, (g) 습윤제, 예를 들어 세틸 알콜 및 글리세롤 모노스테아레이트, (h) 흡착제, 예를 들어 카올린 및 벤토나이트 및 (i) 윤활제, 예를 들어 활석, 스테아르산칼슘, 스테아르산마그네슘, 고체 폴리에틸렌 글리콜, 나트륨 라우릴 설페이트 또는 이들의 혼합물과 같은 하나 이상의 불활성 약제학적으로 허용되는 부형제와 혼합된다. 캡슐, 정제 및 환제의 경우, 투여형은 또한 완충제를 포함할 수 있다. 정제, 당의정, 캡슐, 환제 및 과립과 같은 고체 투여형은 또한 제피 및 외피(shell), 예를 들어 장용 제피 및 당해 기술 분야에 공지된 다른 물질로 제조될 수 있다. 고체 투여형은 또한 불투명제를 함유할 수 있으며, 또한 장관의 소정 부분에서 활성 화합물 또는 화합물들을 지연 방식으로 방출하는 그러한 조성물일 수 있다. 사용될 수 있는 매립 조성물의 예는 중합성 물질 및 왁스이다. 활성 화합물은 또한 적절하다면 하나 이상의 상술된 부형제와의 마이크로캡슐 형태일 수 있다. 이러한 고체 투여형은 일반적으로 활성 화합물을 1 내지 95 중량%로 함유할 수 있다. 특정 양태에서, 활성 화합물은 5 내지 70 중량%이다.

경구 투여용 액체 투여형은 약제학적으로 허용되는 유탁액, 용액, 현탁액, 시럽 및 엘릭시르를 포함한다. 당해 화합물 또는 조성물 이외에, 액체 투여형은 당해 기술 분야에서 통상적으로 사용되는 불활성 희석제, 예를 들어 물 또는 기타 용매, 가용화제 및 유화제, 예를 들어 에틸 알콜, 이소프로필 알콜, 에틸 카보네이트, 에틸 아세테이트, 벤질 알콜, 벤질 벤조에이트, 프로필렌글리콜, 1,3-부틸렌글리콜, 디메틸포름아미드, 오일, 특히 면화씨유, 땅콩유, 옥수수유, 올리브유, 피마자유 및 호마유, 글리세롤, 테트라하이드로푸르푸릴 알콜, 폴리에틸렌글리콜 및 소르비탄의 지방산 에스테르 또는 이들 물질의 혼합물을 함유할 수 있다. 상기 불활성 희석제 이외에, 당해 조성물은 또한 보조제, 예를 들어 습윤제, 유화제, 현탁제, 감미제, 향미제 및 방향제를 포함할 수 있다.

직장 투여용 조성물은 바람직하게는 본 발명의 화합물을 통상의 온도에서는 고체이지만 체온에서는 액체이고, 따라서 직장 또는 질강에서는 용해하여 활성 화합물을 방출하는 적합한 무자극 부형제 또는 담체, 예를 들어 코코아 버터, 폴리에틸렌글리콜 또는 낮은 융점의 좌약용 왁스와 혼합하여 제조될 수 있는 좌약이다.

본 발명의 화합물의 국소 투여용 투여형은 연고, 분말, 분무제 및 흡입제를 포함한다. 활성 화합물은, 요구되는 바에 따라, 멸균 조건 하에서 생리학적으로 허용되는 담체 및 임의의 방부제, 완충제 또는 추진제와 혼합된다. 안과 제제, 안 연고, 분말 및 용액이 또한 본 발명의 범주 내에 있는 것으로 고려된다.

본 발명의 화합물 및 조성물은 또한 시간-방출, 지연 방출 또는 지속 방출 전달 시스템을 비롯한 다양한 전달 시스템의 잇점을 가질 수 있다. 이러한 선택은 특히 당해 화합물 및 조성물이 하기에 더욱 상세하게 기술되는 바와 같이 다른 치료 프로토콜과 병용하여 사용될 때 특히 유리하다.

많은 종류의 방출 전달 시스템이 이용가능하고 당업자에게 공지되어 있다. 이에는 폴리(락티드-글리콜리드), 코폴리옥살레이트, 폴리카프로락톤, 폴리에스테르아미드, 폴리오르토에스테르, 폴리하이드록시부티르산 및 폴리무수물과 같은 중합체 기재 시스템이 포함된다. 약물을 함유하는 상기 중합체의 마이크로캡슐은 예를 들어 미국 특허 제5,075,109호에 기재되어 있다. 전달 시스템은 또한 스테롤, 예를 들어 콜레스테롤, 콜레스테롤 에스테르, 및 지방산 또는 중성 지방, 예를 들어 모노-, 디- 및 트리-글리세라이드를 비롯한 지질; 하이드로겔 방출 시스템; 실라스틱(sylastic) 시스템; 펩티드 기재 시스템; 왁스 제피; 통상적인 결합제 및 부형제를 이용한 압축 정제; 부분적으로 융합된 이식물 등인 비-중합체 시스템을 포함한다. 이것의 특정 예에는 (a) 미국 특허 제4,452,775호, 제4,667,014호, 제4,748,034호 및 제5,239,660호에 기재된 바과 같이 활성 화합물이 매트릭스 내에 하나의 형태로 함유된 침식 시스템 및 (b) 미국 특허 제3,832,253호 및 제3,854,480호에 기재된 바와 같이 활성 성분이 중합체로부터 제어된 속도로 침투하는 확산 시스템이 포함되지만, 이것으로 한정되지 않는다. 또한, 펌프-기재 하드웨어 전달 시스템이 사용될 수 있으며, 이 중 일부는 이식물에 적용된다.

장기 지속 방출 이식물의 사용이 요구될 수 있다. 본 명세서에 사용된 장기 방출은 이식물이 30일 이상 및 바람직하게는 60일 동안 치료 수준의 활성 화합물을 전달하도록 구성되고 배열되는 것을 의미한다. 장기 지속 방출 이식물은 당업자에게 널리 공지되어 있으며, 상기 기재된 방출 시스템의 일부를 포함한다.

본 발명의 방법의 실시에 있어서, 본 발명의 화합물 및 조성물은 일반적으로 치료학적 유효량으로 투여된다. 일반적으로, 활성 화합물의 투여량은 약 0.01 mg/kg/일 내지 1000 mg/kg/일일 것이다. 50 내지 500 mg/kg 범위의 투여량을 바람직하게는 정맥내, 근육내 또는 진피내로 1일당 1회 또는 수회 투여하는 것이 적합할 것으로 예상된다. 하기에 더욱 상세하게 기술되는 공동 또는 병용 치료를 실시하는 경우, 화학요법제 또는 방사선이 당해 시스템을 본 발명의 화합물 및 조성물에 대해 감작화시키는 한, 본 발명의 화합물 및 조성물은 화학요법 또는 방사선과 동시에, 그 이후에 또는 그 전에 투여될 수 있다.

일반적으로, 본 발명의 특정 화합물 및 조성물 및 각각의 투여 프로토콜에 대한 최적 치료 효과를 위한 특정 범위를 임상 시험에서의 통상적인 실험으로 결정할 것이며, 특정 환자에 대한 투여는 환자 상태 및 초기 투여에 대한 반응에 따라 효과적이고 안전한 범위 내에서 조정될 것이다. 그러나, 궁극적인 투여 프로토콜은 환자의 연령, 상태 및 사이즈, 당해 화합물 또는 조성물의 효능, 치료의 지속기간 및 치료될 질환의 중증도와 같은 인자를 고려하여 주치의인 임상의의 판단에 따라 조절될 것이다. 예를 들어, 당해 화합물 또는 조성물의 투여량 처방은 종양 성장을 감소시키기 위해서 1 mg/일 내지 2000 mg/일, 바람직하게는 1 mg/일 내지 1000 mg/일, 보다 바람직하게는 50 mg/일 내지 600 mg/일을 2 내지 4(바람직하게는 2) 분할 투여로 경구 투여하는 것일 수 있다. 간헐적 요법(예를 들어, 3주에 1회 또는 4주에 3회)이 또한 사용될 수 있다.

대상체에서의 반응이 적용된 초기 투여량에서 불충분한 경우, 보다 높은 투여량(또는 보다 국소적인 상이한 전달 경로에 의한 효과적으로 보다 높은 투여량)이 환자 용인성이 허용하는 정도로 사용될 수 있다. 1일당 다회 투여량이 화합물의 적절한 체계 수준을 달성하기 위해 고려된다. 일반적으로, 최대 투여량, 즉 건전한 의학적 판단에 따른 최고 안전한 투여량이 사용된다. 그러나, 당업자는 환자가 의학적 이유, 심리학적 이유 또는 실질적으로 임의의 다른 이유 때문에 보다 낮은 투여량 또는 용인가능한 투여량을 주장할 수 있음을 이해할 것이다.

본 발명의 화합물 및 본 발명의 화합물을 포함하는 약제학적 조성물은 아폽토시스의 결함과 관련된 암, 자가면역 질환 또는 또 다른 장애로 고통받고 있는 대상체에게 투여될 수 있다. 이러한 치료와 관련하여, 환자는 질환의 성질에 따라 본 발명의 화합물 및 조성물을 사용하여 예방적으로, 급성적으로 또는 만성적으로 치료될 수 있다. 전형적으로, 이러한 방법 각각에서 호스트 또는 대상체는 사람이지만, 다른 포유 동물이 또한 본 발명의 화합물의 투여로부터 이점을 얻을 수 있다.

참고로 본 명세서에 그의 기술 내용을 도입하고 있는 미국 특허 제7,244,851호에 기재된 바와 같이, IAP 길항제는 아폽토시스에 실패한 모든 암 종류의 치료에 사용될 수 있다. 따라서, 본 발명의 화합물은 암종, 육종[카포시(Kaposi) 육종 포함], 적모구종, 교모세포종, 수막종, 성상세포종, 흑색종 및 근모세포종을 포함하지만, 이것으로 한정되지 않는 많은 종류의 고형 종양의 치료에 대한 치료법을 제공하기 위해 사용될 수 있다. 백혈병과 같은 비-고형 종양의 치료 또는 예방도 또한 본 발명에 고려되고 있다. 증상에는 뇌암, 피부암, 방광암, 난소암, 유방암, 위암, 췌장암, 결장암, 혈액암, 폐암 및 골암이 포함되지만, 이것으로 한정되지 않는다. 이러한 암 종류의 예에는 신경모세포종, 장 암종, 예를 들어 직장 암종, 결장 암종, 가족성대장폴립증 암종 및 유전성 비-폴립증 결장직장 암, 식도 암종, 입술 암종, 후두 암종, 후두인두 암종, 혀 암종, 침샘 암종, 위 암종, 샘 암종, 수질성 갑상샘 암종, 유두 갑상샘 암종, 신장 암종, 신장 실질 암종, 난소 암종, 자궁경부 암종, 자궁체 암종, 자궁내막 암종, 융모막 암종, 췌장 암종, 전립선 암종, 고환 암종, 유방 암종, 비뇨기 암종, 흑색종, 뇌종양, 예를 들어 교모세포종, 성상세포종, 수막종, 속질모세포종 및 말초원시신경외배엽 종양, 호지킨(Hodgkin) 림프종, 비-호지킨 림프종, 버킷 림프종, 급성 림프성 백혈병(ALL), 만성 림프성 백혈병(CLL), 급성 골수성 백혈병(AML), 만성 골수성 백혈병(CML), 성인 T-세포 백혈병 림프종, 간세포 암종, 담낭 암종, 기관지 암종, 소세포 폐 암종, 비-소세포 폐 암종, 다발골수종, 기저세포암, 기형종, 망막모세포종, 맥락막흑색종, 고환종, 횡문근육종, 두개인두종, 골육종, 연골육종, 근육종, 지방육종, 섬유육종, 유잉(Ewing) 육종 및 형질세포종을 포함한다.

본 발명가들은, 본 발명의 IAP 길항제가 cIAP1 및 cIAP2가 과발현된 사람의 악성종양[예, 폐암(문헌[Dai et al, Hu. Molec. Genetics, 2003 v 12 pp791-801] 참조), 백혈병(참조 문헌 다수) 및 다른 암(문헌[Tamm et al, Clin Cancer Res, 2000, v 6, 1796-1803] 참조)]의 치료에 대해 특히 활성일 것으로 믿는다. 본 발명가들은 또한 본 발명의 IAP 길항제가 프로-서바이벌 역할(pro-survival role)을 하는 TNF(예를 들어, 위암에서와 유사하게 난소 암종에서 생존 인자로서 작용하는 TNF에 대한 역할은 잘 규정되어 있다; 문헌[Kulbe, et al, Cancer Res 2007, 67, 585-592)] 참조)와 같이 염증성 사이토킨에 의해 촉진될 수 있는 장애에서 활성일 것으로 기대하고 있다.

종양에서 발견되는 아폽토시스 결함 이외에, 아폽토시스 내성에 기인한 면역계의 자가-반응성 세포를 제거하는 능력의 결함은 자가면역 질환의 병인에 중요한 역할을 하는 것으로 여겨진다. 자가면역 질환은 면역계의 세포가 그 자신의 기관 및 분자에 대한 항체를 생성하거나 후자의 파괴를 초래하는 조직을 직접 공격하는 것을 특징으로 한다. 아폽토시스를 겪는 자가-반응성 세포의 부전이 질환의 징후를 초래한다. 아폽토시스 조절의 결함은 전신성 홍반성 루푸스 또는 류마티스성 관절염과 같은 자가면역 질환에서 확인되었다.

이러한 자가면역 질환의 예에는 콜라겐 질환, 예를 들어 류마티스성 관절염, 전신성 홍반성 루푸스, 샤프(Sharp) 증후군, 크레스트(CREST) 증후군[석회증, 레이노(Raynaud) 증후군, 식도 운동장애, 모세혈관확장], 피부근육염, 혈관염[모르부스 베게너(Morbus Wegener)] 및 쇼그렌(Sjogren) 증후군, 신장 질환, 예를 들어 굿파스쳐(Goodpasture) 증후군, 급속-진행성 사구체신염 및 막-증식성 사구체신염 제II형, 내분비선 질환, 예를 들어 제I형 당뇨병, 자가면역 다중내분비병증-칸디다증-외배엽 이상증(APECED: autoimmune polyendocrinopathy-candidiasis-ectodermal dystrophy), 자가면역 부갑상선 기능항진증, 악성 빈혈, 성선 부전, 특발성 모르부스 애디슨(Morbus Addison), 갑상선 비대증, 하시모또(Hashimoto) 갑상선염 및 원발성 점액부종, 피부 질환, 예를 들어 심상성 천포창, 수포성 유천포창, 임신 포진, 수포성 표피박리증 및 대형 다형 홍반, 간 질환, 예를 들어 원발성 담관성 간경화증, 자가면역 담관염, 자가면역 제1형 간염, 자가면역 제2형 간염, 원발성 경화성 담관염, 신경 질환, 예를 들어 다발성 경화증, 중증 근육무력증, 람버트-이튼(Lambert-Eaton) 근무력증 증후군, 후천성 신경근무력증, 길랑-바르(Guillain-Barre) 증후군[뮐러-피셔(Muller-Fischer) 증후군], 근강직(stiff-man) 증후군, 소뇌 변성증, 운동실조증, 안구진탕, 감각성 신경병증 및 이완불능증, 혈액 질환, 예를 들어 자가면역 용혈성 빈혈, 특발성 혈소판감소성 자반증[모르부스 베를호프(Morbus Werlhof)], 자가면역 반응과 관련된 감염성 질환, 예를 들어 AIDS, 말라리아 및 샤가스병(Chagas disease)이 포함된다.

본 발명은 또한 다른 치료법와 함께 화학증강제(chemopotentiating agent)로서의 당해 화합물 및 조성물의 용도에 관한 것이다. 용어 "화학증강제"는 화학 화합물 또는 치료, 즉 "화학요법제(chemotherapeutic agent)" 또는 "화학 약물"에 대해 또는 방사선 치료에 대해 유기체, 조직 또는 세포의 민감성을 증가시키는 작용을 하는 제제를 의미한다. 따라서, 본 발명의 화합물 또는 조성물은 이것을 생물학적 또는 화학요법제와 병용하여 투여함으로써, 또는 이것을 화학방사선과 병용하여 사용함으로써 생체 내에서 종양 성장을 억제하는데 사용될 수 있다. 이러한 적용에서, 본 발명의 화합물 및 조성물은 투여될 자리의 감작화를 유발하기 전에 충분한 시간으로 투여될 수 있다. 대안적으로, 본 발명의 화합물 및 조성물은 방사선 및/또는 부가적인 항암 화학 치료제(하기 참조)와 동시에 사용될 수 있다. 이러한 시스템은 본 발명의 화합물 및 조성물의 반복된 투여를 피하여 대상체 및 의사에 대한 편리성을 증가시킬 수 있으며, 본 발명의 소정의 조성물에 특히 적합할 수 있다.

생물학적 및 화학요법제/항신생물제 및 방사선은 외인성 또는 내인성 아폽토시스 경로를 활성화시킴으로써 아폽토시스를 유도하며, 본 발명의 화합물 및 조성물이 아폽토시스 단백질의 억제제(IAP)를 경감시키고, 따라서 아폽토시스의 차단을 제거하기 때문에, 화학요법제/항신생물제 및 방사선과 본 발명의 화합물 및 조성물의 병용은 아폽토시스를 용이하게 하도록 상승적으로 작용해야 한다.

본 발명의 화합물과 내인성 경로를 활성화시키는 임의의 종류의 화학요법제/항신생물제 및/또는 방사선 요법의 병용은 종양 세포를 파괴하는 보다 효과적인 치료법을 제공할 수 있다. 본 발명의 화합물은 XIAP, cIAP-1, cIAP-2, ML-IAP 등과 같은 IAP와 상호작용하고 아폽토시스의 IAP 매개화 억제성을 차단하는 반면, 화학요법제/항신생물제 및/또는 방사선 요법은 아폽토시스 및 세포 사멸을 유도하는 내인성 아폽토시스 경로를 활성화시킴으로써 활발하게 분열하는 세포를 사멸시킨다. 하기에 보다 상세히 기재되는 바와 같이, 본 발명의 실시 양태는 원하지 않는 세포 증식에 대하여 상승 작용을 제공하는, 본 발명의 화합물과 화학요법제/항신생물제 및/또는 방사선의 병용을 제공하는 것이다. 본 발명의 화합물과 화학요법제/항신생물제 및/또는 방사선 요법 사이의 이러한 상승 작용은 화학요법제/항신생물제 및/또는 방사선 요법의 효율을 개선시킬 수 있다. 이로 인해 현행 화학요법제/항신생물제 또는 방사선 치료의 효과를 증가시켜 화학요법제/항신생물제의 투여량을 감소시키고, 거기에 화학요법제/항신생물제 및/또는 방사선의 보다 효과적인 투여 스케줄 뿐만 아니라 보다 용인가능한 투여량 사용 둘 다를 제공할 것이다.

본 발명의 양태에 있어서, 방광암, 유방암, 전립선암, 폐암, 췌장암, 위암, 결장암, 난소암, 신장암, 간암, 흑색종, 림프종, 육종 및 이들의 조합(이것으로 한정되지 않음)과 같은 종양의 신생증식성 병리 치료를 위해 동시의 또는 선행의 방사선 또는 화학요법을 받을 때 환자는 본 발명의 화합물 또는 약제학적 조성물을 투여함으로써 치료된다.

본 발명의 또 다른 양태에서, 본 발명의 화합물 또는 조성물은 화학요법제와 병용하고/하거나 방사선요법, 면역요법 및/또는 광역학적 요법과 병용하여 사용하기 위해 투여되어 아폽토시스를 촉진하고, 화학요법, 방사선요법, 면역요법 및/또는 광역학 요법의 효과를 증가시킬 수 있다.

본 발명의 양태는 또한 화학요법제의 동시적 또는 공존적 투여에 의해 암 환자를 치료하는 방법을 포함한다. 이러한 화학요법제에는 문헌["Modern Pharmacology with Clinical Applications", Sixth Edition, Craig & Stitzel, Chpt. 56, pg 639-656(2004)](본 명세서에 참고로 인용됨)에 기술된 화학요법제가 포함되지만, 이것으로 한정되지 않는다. 화학요법제에는 알킬화제, 항대사물, 항종양 항생제, 식물-유래 산물, 예를 들어 탁산, 효소, 호르몬제, 기타 제제, 예를 들어 시스플라틴, 모노클로날 항체, 글루코코르티코이드, 유사분열 억제제, 토포이소메라제 I 억제제, 토포이소메라제 II 억제제, 면역조절제, 예를 들어 인터페론, 세포 성장 인자, 시토킨 및 비-스테로이드성 항염증 화합물, 세포 성장 인자 및 키나제 억제제가 포함되지만, 이것으로 한정되지 않는다. 다른 적합한 화학요법제 부류에는 유사분열 억제제 및 비-스테로이드성 항에스트로겐 유사체가 포함된다.

적합한 생물학적 및 화학요법제의 특정 예에는 시스플라틴, 카르무스틴(BCNU), 5-플루오로우라실(5-FU), 시타라빈(Ara-C), 겜시타빈, 메토트렉세이트, 다우노루비신, 독소루비신, 덱사메타손, 토포테칸, 에토포시드, 파클리탁셀, 빈크리스틴, 타목시펜, TNF-알파, TRAIL, 인터페론(알파 및 베타 형태 둘 다), 탈리도미드 및 멜팔란이 포함되지만, 이것으로 한정되지 않는다. 적합한 화학요법제의 다른 특정 예에는 질소 머스타드, 예를 들어 사이클로포스파미드, 알킬 설포네이트, 니트로소우레아, 에틸렌이민, 트리아젠, 엽산 길항제, 퓨린 유사체, 피리미딘 유사체, 안트라사이클린, 블레오마이신, 미토마이신, 닥티노마이신, 플리카마이신, 빈카 알카로이드, 에피포도필로톡신, 탁산, 글루코코르티코이드, L-아스파라기나제, 에스트로겐, 안드로겐, 프로게스틴, 황체형성 호르몬, 옥트레오티드 아세테이트, 하이드록시우레아, 프로카르바진, 미토탄, 헥사메틸멜라민, 카보플라틴, 미토크산트론, 모노클로날 항체, 레바미솔, 인터페론, 인터루킨, 필그라스팀 및 사르그라모스팀이 포함된다. 화학요법 조성물은 또한 TNF 상과의 화합물의 다른 구성원(즉, TRAIL 이외)을 포함한다.

본 발명의 또 다른 양태는 아폽토시스 유도 효과를 증강시키는 토포이소메라제 억제제와 병용하여 본 발명의 화합물 또는 조성물을 사용하는 것에 관한 것이다. 토포이소메라제 억제제는 DNA 복제 및 복구를 억제하고, 그럼으로써 아폽토시스를 촉진하고 화학요법제로서 사용되어 왔다. 토포이소메라제 억제제는 DNA 복구 과정에 필요한 효소를 억제함으로써 DNA 손상을 촉진시킨다. 그러므로, 미토콘드리아로부터 세포의 세포질로의 Smac의 방출은 토포이소메라제 억제제에 의해 유발된 DNA 손상에 의해 유도된다. 제I군[캄프토테신, 토포테칸, SN-38(이리노테칸 활성 대사산물)] 및 제II군(에토포시드) 둘 다의 토포이소메라제 억제제가 본 발명의 화합물과 강력한 상승 작용을 보여줄 것으로 예상된다. 사용될 수 있는 토포이소메라제 억제제의 추가적인 예에는 이리노테칸, 토포테칸, 에토포시드, 암사크린, 엑사테칸, 기마테칸 등이 포함되지만, 이것으로 한정되지 않는다. 다른 토포이소메라제 억제제는 예를 들어 아클라시노마이신 A, 캄프토테신, 다우노루비신, 독소루비신, 엘립티신, 에피루비신 및 미타크산트론이 포함된다.

본 발명의 또 다른 양태에서, 본 발명의 화합물 및 조성물과 병용하여 사용하기 위한 화학요법제/항신생물제는 백금 함유 화합물일 수 있다. 본 발명의 하나의 양태에서, 백금 함유 화합물은 시스플라틴이다. 시스플라틴은 본 발명의 화합물과 상승작용하여 XIAP, cIAP-1, c-IAP-2, ML-IAP 등(이것으로 한정되지 않음)과 같은 IAP의 억제를 증강시킬 수 있다. 또 다른 실시 양태에서, 백금 함유 화합물은 카보플라틴이다. 카보플라틴은 본 발명의 화합물과 상승작용하여 XIAP, cIAP-1, c-IAP-2, ML-IAP 등을 포함하지만, 이것으로 한정되지 않는 IAP의 억제를 증강시킬 수 있다. 또 다른 실시 양태에서, 백금 함유 화합물은 옥살리플라틴이다. 옥살리플라틴은 본 발명의 화합물과 상승작용하여 XIAP, cIAP-1, c-IAP-2,ML-IAP 등을 포함하지만, 이것으로 한정되지 않는 IAP의 억제를 증강시킬 수 있다

백금 화학요법 약물은 일반 군의 DNA 변형제에 속한다. DNA 변형제는 핵산 및 단백질에서 다양한 친핵성 그룹과 결합하는 고반응성의 임의의 화학 화합물일 수 있으며, 돌연변이유발, 발암 또는 세포독성 효과를 유발한다. DNA 변형제는 동일한 최종 결과를 달성하는 여러 기전, 즉 DNA 기능의 파괴 및 세포 사멸; DNA 손상/DNA에서 원자들 간의 가교 또는 결합의 형성; 및 돌연변이를 초래하는 뉴클레오티드의 짝짓기 오류(mispairing)의 유도에 의해 작용한다. 백금 함유 DNA 변형제의 3개의 비한정적인 예는 시스플라틴, 카보플라틴 및 옥살리플라틴이다.

시스플라틴은 DNA에 결합하고 그의 복구 기전을 방해하여 결과적으로 세포 사멸을 초래함으로써 암 세포를 사멸시키는 것으로 믿어진다. 카보플라틴 및 옥살리플라틴은 동일한 작용 기전을 공유하는 시스플라틴 유도체이다. 고반응성의 백금 착물은 세포내에서 형성되며, DNA 분자를 공유 결합시켜 가닥내 및 가닥간 DNA 가교를 형성함으로써 DNA 합성을 억제한다.

비-스테로이드성 항염증 약물(NSAID)은 결장직장 세포에서 아폽토시스를 유도하는 것으로 나타났다. NSAID는 미토콘드리아로부터의 Smac의 방출을 통해 아폽토시스를 유도하는 것으로 보인다(문헌[PNAS, November 30, 2004, vol. 101:16897-16902] 참조). 따라서, 본 발명의 화합물 및 조성물과 병용하여 NSAID를 사용하면 어느 한 약물의 활성에 비해 각각의 약물의 활성을 독립적으로 증가시킬 것으로 기대된다.

세균, 식물 및 동물로부터 분리된 다수의 천연 발생 화합물은 항암 및 항신생물 활성을 비롯한 사람에서의 강력하고 선택적인 생물학적 활성을 나타낼 수 있다. 사실상, 항암 활성을 갖는 많은 천연 산물 또는 이것의 반합성 유도체는 이미 치료제로서 통상적으로 사용되고 있으며, 이것에는 그 중에서도 파클리탁셀, 에토포시드, 빈크리스틴, 및 캄프토테신이 포함된다. 또한, 항암제로서 임상적 평가를 받은 다수의 다른 종류의 천연 산물, 예를 들어 인돌로카바졸 및 에포틸론이 있다. 다수의 천연 산물에서 재발생 구조의 모티프는 아글리콘 코어 구조 상의 하나 이상의 당 잔기의 부착이다. 몇몇 경우에서, 천연 산물의 당 부위는 활성 자리에서 별도의 단백질-리간드 상호 작용을 형성(즉, 약동학)하는데 중요하고, 당 잔기를 제거하면 생물학적 활성이 상당히 감소한다. 다른 경우, 당 잔기 또는 잔기들은 분자의 물리적 및 약동학적 특성을 조절하는데 중요하다. 레베카마이신 및 스타우로스포린은 증명된 항키나제 활성 및 항토포이소메라제 활성을 갖는 당-결합된 인돌로카바졸 계열의 항암 천연 산물의 대표이다.

탁산은 항유사분열제, 유사분열 억제제 또는 미세소관 중합화제이다. 탁산은 튜불린 해중합을 억제하여 중심체 손상, 비정상적 방추사의 유도 및 방추사 미세소관 활동의 억제를 통해 세포 주기 진행을 차단함으로써 미세소관의 집합을 촉진하는 화합물임을 특징으로 한다. 탁산에는 도세탁셀 및 파클리탁셀이 포함되지만, 이것으로 한정되지 않는다. 탁산의 고유한 작용 기전은 튜불린 중합을 억제하는 빈카 알카로이드, 콜히친 및 크립토피신과 같은 다른 미세소관 독과는 대조적이다. 미세소관은 알파-베타-튜불린으로 이루어진 매우 활동적인 세포 중합체이며, 분리된 DNA의 완전성을 보장하는 방추사의 조직화 및 기능에 참여함으로써 유사분열 동안 중요한 역할을 하는 회합된 단백질이다. 그러므로, 이것은 암 치료에 대한 효과적인 표적을 제공한다.

본 발명의 여전히 또 다른 양태는, 본 발명의 화합물 또는 조성물과 TRAIL 또는 TRAIL 수용체(들)에 결합하고 이를 활성화시키는 다른 화학적 또는 생물학적 제제와 병용하는 치료적 병용제 또는 치료적 용도이다. 많은 암 세포 종류가 TRAIL-유도된 아폽토시스에 민감한 반면, 대부분의 정상적인 세포는 TRAIL의 상기 작용에 내성인 것으로 보인다는 발견 때문에, TRAIL은 최근에 상당히 주목을 받고 있다. TRAIL-내성 세포는 수용체의 상실, 유인 수용체의 존재 또는 DISC 형성 동안 효소원 카스파제-8 결합과 경쟁하는 FLIP의 과발현을 비롯한 다양한 여러 기전에 의해 발생될 수 있다. TRAIL 내성에 있어서, 본 발명의 화합물 또는 조성물은 세포 사멸을 증진시키는 TRAIL에 대한 종양 세포의 민감성을 증가시킬 수 있으며, 이들의 임상적 상관 관계에 의해 TRAIL 내성 종양에서 아폽토시스 활성을 증가시키고, 임상적 반응을 개선시키고, 반응 지속시간을 증가시키고, 궁극적으로 환자 생존률을 증진시킬 것으로 예상된다. 이를 뒷받침하자면, 시험관내 안티센스 치료에 의해 XIAP 수준을 감소시키면 내성의 흑색종 세포 및 신장 암종 세포의 TRAIL에 대한 감작화가 유발되는 것으로 나타났다(문헌[Chawla-Sarkar, et al., 2004] 참조). 본 발명의 화합물은 IAP에 결합하여 카스파제와의 상호작용을 억제하고, 거기에서 TRAIL-유도된 아폽토시스를 증강시킨다.

본 발명의 화합물 및 조성물은 또한 악성 세포를 제어하는 암 치료의 일부로서 방사선 요법(또는 방사선요법), 즉 이온화 방사선의 의학적 용도를 증강시키는데 사용될 수 있다. 방사선요법이 종종 치료 요법의 일부로서 사용된다고 할지라도, 이것은 때때로 치료가 불가능하고 그 목적이 증상 경감을 위한 것인 완화 치료(palliative treatment)로서 사용된다. 방사선요법은 통상적으로 종양의 치료에 사용된다. 이것은 일차적 요법으로서 사용될 수 있다. 또한, 방사선요법을 수술 및/또는 화학요법과 병용하는 것이 통상적이다. 방사선요법으로 치료되는 가장 통상적인 종양은 유방암, 전립선암, 직장암, 두경부암, 부인과 종양, 방광암 및 림프종이다. 방사선 요법은 통상적으로 종양이 있는 국소 영역에만 적용된다. 종종, 방사선 조사 영역은 또한 배출 림프절을 포함한다. 통상적이지는 않지만, 방사선요법을 전신 또는 전체 피부 표면에 사용하는 것이 가능하다. 방사선 요법에서는 통상적으로 35 내지 38 이하의 프랙션(fraction)까지 매일 투여된다(일일 투여량이 하나의 프랙션임). 이러한 적은 빈도의 투여량에 의해 건강한 세포가 다시 성장하며, 방사선에 의해 유발된 손상이 복구된다. 방사선요법의 3개의 주요 분야는 외부 빔 방사선요법 또는 원격치료, 근접치료 또는 밀봉선원 방사선요법 및 비밀봉선원 방사선요법이며, 이것들은 모두 본 발명의 치료 프로토콜의 적합한 예이다. 차이점은 방사선원의 위치와 관련되는데, 외부 방사선요법에서는 방사선원이 신체의 외부에 있는 반면, 밀봉 및 비밀봉선원 방사선요법에서는 방사성 물질이 내부에서 전달된다. 근접치료 밀봉선원은 통상적으로 나중에 추출되는 반면, 비밀봉선원은 신체 내로 주입된다.

본 발명의 화합물 및 조성물의 투여는 병용 치료 프로토콜 전에, 그와 동시에 또는 그 이후에 수행될 수 있다. 다양한 투여 경로가 이용가능하다. 선택되는 특정 방식은 물론 선택되는 특정 화학요법 약물, 치료될 상태의 중증도 및 치료 효능을 위해 요구되는 투여량에 의존할 것이다. 일반적으로 말하자면, 본 발명의 방법은 임상적으로 허용될 수 없는 부작용을 유발하지 않고 활성 화합물의 유효 수준을 산출하는 임의의 방식을 의미하는, 의학적으로 허용될 수 있는 임의의 투여 방식을 사용하여 실시될 수 있다. 이러한 투여 방식에는 경구, 직장, 국소, 비내, 진피내, 흡입, 복강내, 또는 비경구 경로가 포함되지만, 이것으로 한정되지 않는다. 용어 "비경구"에는 피하, 정맥내, 근육내 또는 주입이 포함된다. 정맥내 또는 근육내 경로가 본 발명의 목적에 특히 적합하다.

본 명세서에 기재된 실시예 및 실시 양태는 단지 예시적인 목적을 가진 것으로, 이것들의 견지에서 당업자에게 다양한 변형 또는 변화가 제시될 것이며, 본 출원의 정신 및 범위와 첨부된 청구범위 내에 상기 변형 또는 변화가 포함됨을 이해할 것이다. 예를 들어, 당해 화합물의 추가적인 하부 군은 화학식 I, II, III 또는 VIII 중 어느 것에서 R5가 하이드록시이고, R6이 H이고, (1) R3 및 R4 둘 다가 공유 결합에 의해 연결되거나 1 내지 8개의 탄소 원자를 갖는 알킬렌 또는 알케닐렌 그룹[여기서, 1 내지 3개의 탄소 원자는 O, S(O)_n 또는 N(R8)(여기서, R8은 H, 하이드록시, 알콕시, 아릴옥시, 알킬, 사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬, 아릴, 또는 헤테로아릴임)에 의해 치환될 수 있다]에 의해 연결된 탄소 원자이거나 또는 (2) R7이

또는

(여기서, R9, R1O, R12, R13 및 R14는 하이드록시, 알콕시, 아릴옥시, 알킬 또는 아릴로부터 독립적으로 선택된다)로부터 선택된 화합물이다.

Claims

하기 화학식 I의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염:
화학식 I

상기 화학식 I에서,
R1은 H, 하이드록시, 알킬, 알케닐, 사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬, 아릴, 알콕시, 아릴옥시 또는 헤테로아릴이며;
R2 및 R2'는 각각 독립적으로 H, 알킬, 사이클로알킬 또는 헤테로사이클로알킬이거나, 또는 R2'가 H인 경우, R2 및 R1은 함께 아지리딘 또는 아제티딘 환을 형성하며;
R3 및 R4는 각각 독립적으로 H, 알킬, 사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴이거나, 또는 R3 및 R4는 둘 다, 공유 결합에 의해 연결되거나 1 내지 8개의 탄소 원자를 갖는 알킬렌 또는 알케닐렌 그룹(여기서, 1 내지 3개의 탄소 원자는 O, S(O)_n 또는 N(R8)에 의해 대체될 수 있다)에 의해 연결된 탄소 원자이며;
R5는 H, 하이드록시, 알콕시, 아릴옥시, 알킬, 사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴이며;
R6은 H, 하이드록시, 알콕시, 아릴옥시, 알킬, 사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴이며;
R7은 알킬, 사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴이며;
R8은 H, 하이드록시, 알콕시, 아릴옥시, 알킬, 사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴이며;
M은 결합 또는 1 내지 5개의 탄소 원자를 갖는 알킬렌 그룹이며;
n은 1 또는 2이며,
단, R5 및 R6이 둘 다 H인 경우 또는 R5가 아릴옥시이고 R6이 H인 경우, (1) R3 및 R4가 둘 다, 공유 결합에 의해 연결되거나 1 내지 8개의 탄소 원자를 갖는 알킬렌 또는 알케닐렌 그룹(여기서, 1 내지 3개의 탄소 원자는 O, S(O)_n 또는 N(R8)에 의해 대체될 수 있다)에 의해 연결된 탄소 원자이거나, 또는 (2) R7이
또는
(여기서, R9, R1O, R12, R13 및 R14는 하이드록시, 알콕시, 아릴옥시, 알킬 또는 아릴로부터 독립적으로 선택된다)로부터 선택된다.
제1항에 있어서, 하기 화학식 II를 갖는 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염:
화학식 II

상기 화학식 II에서,
R1은 H, 하이드록시, 알킬, 알케닐, 사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬, 아릴, 알콕시, 아릴옥시 또는 헤테로아릴이며;
R2 및 R2'는 각각 독립적으로 H, 알킬, 사이클로알킬 또는 헤테로사이클로알킬이거나, 또는 R2'가 H인 경우, R2 및 R1은 함께 아지리딘 또는 아제티딘 환을 형성하며;
R3 및 R4는 각각 독립적으로 H, 알킬, 사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴이거나, 또는 R3 및 R4는 둘 다, 공유 결합에 의해 연결되거나 1 내지 8개의 탄소 원자를 갖는 알킬렌 또는 알케닐렌 그룹(여기서, 1 내지 3개의 탄소 원자는 O, S(O)_n 또는 N(R8)에 의해 대체될 수 있다)에 의해 연결된 탄소 원자이며;
R5는 H, 하이드록시, 알콕시, 아릴옥시, 알킬, 사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴이며;
R7은 알킬, 사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴이며;
R8은 H, 하이드록시, 알콕시, 아릴옥시, 알킬, 사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴이며;
M은 결합 또는 1 내지 5개의 탄소 원자를 갖는 알킬렌 그룹이며;
n은 1 또는 2이며,
단, R5가 H 또는 아릴옥시인 경우, (1) R3 및 R4가 둘 다, 공유 결합에 의해 연결되거나 1 내지 8개의 탄소 원자를 갖는 알킬렌 또는 알케닐렌 그룹(여기서, 1 내지 3개의 탄소 원자는 O, S(O)_n 또는 N(R8)에 의해 대체될 수 있다)에 의해 연결된 탄소 원자이거나, 또는 (2) R7이
또는
(여기서, R9, R1O, R12, R13 및 R14는 하이드록시, 알콕시, 아릴옥시, 알킬 또는 아릴로부터 독립적으로 선택된다)로부터 선택된다.
제2항에 있어서, R7이 하기로부터 선택되는 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염:

,
,
또는

상기 화학식에서,
R9, R1O, R11, R12, R13 및 R14는 하이드록시, 알콕시, 아릴옥시, 알킬 또는 아릴로부터 독립적으로 선택된다.
제3항에 있어서, R7이 하기로부터 선택되는 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염:

.
제3항에 있어서, R1이 메틸 또는 에틸이며, R2가 메틸, 에틸 또는 하이드록시메틸이며, R3이 이소프로필, 3급-부틸, 사이클로헥실, R-MeCHOMe, R-MeCHOH이며, R5가 H 또는 하이드록시이며, R6이 H, 하이드록시, 메틸 또는 메톡시인 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염.
제2항에 있어서, 하기 화학식 III의 구조를 갖는 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염:
화학식 III
제1항에 있어서, 하기 화학식 IV를 갖는 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염:
화학식 IV

상기 화학식 IV에서,
R1은 H, 하이드록시, 알킬, 알케닐, 사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬, 아릴, 알콕시, 아릴옥시 또는 헤테로아릴이며;
R2 및 R2'는 각각 독립적으로 H, 알킬, 사이클로알킬 또는 헤테로사이클로알킬이거나, 또는 R2'가 H인 경우, R2 및 R1은 함께 아지리딘 또는 아제티딘을 형성하며;
R3 및 R4는 각각 독립적으로 H, 알킬, 사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴이거나, 또는 R3 및 R4는 둘 다, 공유 결합에 의해 연결되거나 1 내지 8개의 탄소 원자를 갖는 알킬렌 또는 알케닐렌 그룹(여기서, 1 내지 3개의 탄소 원자는 O, S(O)_n 또는 N(R8)에 의해 대체될 수 있다)에 의해 연결된 탄소 원자이며;
R6은 하이드록시, 알콕시, 아릴옥시, 알킬, 사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴이며;
R7은 알킬, 사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴이며;
R8은 H, 하이드록시, 알콕시, 아릴옥시, 알킬, 사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴이며;
M은 결합이거나, 또는 1 내지 5개의 탄소 원자를 갖는 알킬렌 그룹이며;
n은 1 또는 2이다.
제7항에 있어서, R7이 하기로부터 선택되는 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염:

상기 화학식에서,
R9, R1O, R11, R12, R13 및 R14는 하이드록시, 알콕시, 아릴옥시, 알킬 또는 아릴로부터 독립적으로 선택된다.
제8항에 있어서, R7이 하기로부터 선택되는 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염:
제9항에 있어서, R1이 메틸 또는 에틸이며, R2가 메틸, 에틸 또는 하이드록시메틸이며, R3이 이소프로필, 3급-부틸, 사이클로헥실, R-MeCHOMe 또는 R-MeCHOH이며, R5가 H 또는 하이드록시이며, R6이 H, 하이드록시, 메틸 또는 메톡시인, 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염.
제7항에 있어서, 하기 화학식 V를 갖는 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염:
화학식 V
제11항에 있어서, 하기 화학식 VI을 갖는 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염:
화학식 VI
제11항에 있어서, 하기 화학식 VII을 갖는 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염:
화학식 VII
제1항에 있어서, 하기 화학식 VIII을 갖는 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염:
화학식 VIII
제1항에 있어서, 하기 화학식을 가지며, 하기 표에서 확인되는 화합물들로 이루어진 그룹으로부터 선택되는, 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염:
제1항에 있어서, *에 의해 표시된 탄소에서의 입체화학이 절대 (R) 배열을 가지며, 하기 표에서 확인되는 화합물들로 이루어진 그룹으로부터 선택되는, 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염:
제1항에 있어서, *에 의해 표시된 탄소에서의 입체화학이 절대 (S) 배열을 가지며, 하기 표에서 확인되는 화합물들로 이루어진 그룹으로부터 선택되는, 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염:
제1항에 있어서, 하기 화학식을 가지며, 하기 표에서 확인되는 화합물들로 이루어진 그룹으로부터 선택되는, 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염:
제1항에 있어서, 하기 화학식을 가지며, 하기 표에서 확인되는 화합물들로 이루어진 그룹으로부터 선택되는, 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염:
제1항 내지 제19항 중 어느 한 항으로부터 선택된 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염 및 약제학적으로 허용되는 부형제를 포함하는, 약제학적 조성물.
세포에서 아폽토시스를 유도하기에 충분한 양의 제1항 내지 제19항 중 어느 한 항으로부터 선택된 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염을 세포와 접촉시키는 것을 포함하는, 세포에서 아폽토시스를 유도하는 방법.
제21항에 있어서, 상기 세포가 암 세포인 방법.
제1항 내지 제19항 중 어느 한 항으로부터 선택된, 치료학적 유효량의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염을 육종, 방광암, 난소암, 유방암, 뇌암, 췌장암, 결장암, 혈액암, 피부암, 폐암 및 골암 치료가 필요한 환자에게 투여하는 것을 포함하는, 육종, 방광암, 난소암, 유방암, 뇌암, 췌장암, 결장암, 혈액암, 피부암, 폐암 및 골암으로 이루어진 그룹으로부터 선택된 암을 치료하는 방법.
제23항에 있어서, 상기 암이 결장직장암, 신장 암종, 난소 암종, 췌장 암종, 전립선 암종, 유방 암종, 흑색종, 교모세포종, 급성 골수성 백혈병(AML), 소세포 폐 암종, 비-소세포 폐 암종, 횡문근육종 및 기저세포 암종으로부터 선택되는 방법.
제23항에 있어서, 방사선, 화학요법, 면역요법, 광역학 요법 및 이들의 조합으로부터 선택된 이차적 치료를 실시하는 것을 추가적으로 포함하는 방법.
제1항 내지 제19항 중 어느 한 항으로부터 선택된, 치료학적 유효량의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염을 전신성 홍반성 루푸스, 건선 및 특발성 혈소판감소성 자반병[모르부스 베를호프(Morbus Werlhof)]으로 이루어진 그룹으로부터 선택된 자가면역 질환 치료가 필요한 환자에게 투여하는 것을 포함하는, 전신성 홍반성 루푸스, 건선 및 특발성 혈소판감소성 자반병(모르부스 베를호프)으로 이루어진 그룹으로부터 선택된 자가면역 질환을 치료하는 방법.