TWI532496B - 經修飾ｎ末端胺基酸的促胰島素胜肽衍生物 - Google Patents

經修飾ｎ末端胺基酸的促胰島素胜肽衍生物 Download PDF

Info

Publication number
TWI532496B
TWI532496B TW101140650A TW101140650A TWI532496B TW I532496 B TWI532496 B TW I532496B TW 101140650 A TW101140650 A TW 101140650A TW 101140650 A TW101140650 A TW 101140650A TW I532496 B TWI532496 B TW I532496B
Authority
TW
Taiwan
Prior art keywords
exenatide
peptide
ser
glu
gly
Prior art date
Application number
TW101140650A
Other languages
English (en)
Other versions
TW201311272A (zh
Inventor
鄭聖燁
林昌基
宋大海
裴城敏
金永勳
權世昌
李寬淳
Original Assignee
韓美科學有限公司
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by 韓美科學有限公司 filed Critical 韓美科學有限公司
Publication of TW201311272A publication Critical patent/TW201311272A/zh
Application granted granted Critical
Publication of TWI532496B publication Critical patent/TWI532496B/zh

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • C07K14/575—Hormones
    • C07K14/65—Insulin-like growth factors (Somatomedins), e.g. IGF-1, IGF-2
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • C07K14/575—Hormones
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • C07K14/46—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • A61K38/22—Hormones
    • A61K38/26—Glucagons
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/08—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
    • A61P3/10—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis for hyperglycaemia, e.g. antidiabetics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • C07K14/575—Hormones
    • C07K14/57563—Vasoactive intestinal peptide [VIP]; Related peptides
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • C07K14/575—Hormones
    • C07K14/605—Glucagons
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides

Description

經修飾N末端胺基酸的促胰島素胜肽衍生物
發明背景
本發明係關於具有改良促胰島素活性及血液穩定性之促胰島素胜肽衍生物，及包含促胰島素胜肽衍生物之用於治療糖尿病之醫藥組合物。詳言之，本發明之特徵在於N-末端胺基酸經修飾之促胰島素胜肽。
因為胜肽歸因於其低穩定性而趨向於容易變性，由活體內蛋白水解酶降解，因此喪失活性，且具有相對小的尺寸，從而易通過腎。因此，為維持包含作為醫藥有效組分之胜肽之藥物的血液含量及效價，須頻繁向患者投與胜肽藥物以維持所要血液含量及效價。然而，胜肽藥物通常以可注射製劑形式投與且用於維持生理活性胜肽之血液含量之該頻繁投藥對患者而言引起嚴重疼痛。為解決該等問題，已進行許多努力。作為該等努力之一，已建議一種增加胜肽藥物穿過生物膜之透過率，且隨後藉由口服或鼻吸入使胜肽藥物傳遞至體內之方法。然而，與可注射製劑相比，由於顯著較低之活體內傳遞效率，該方法在維持胜肽藥物之活體內活性方面仍具有困難。
另一方面，已進行許多努力以改良胜肽藥物之血液穩定性，且維持血液中之藥物濃度處於高含量歷時延長時期，從而最大化藥物之醫藥功效。因此需要該胜肽藥物之長期作用製劑以增加胜肽藥物之穩定性，且維持效價處於 足夠高之水準而不引起患者之免疫反應。
作為用於穩定胜肽且抑制蛋白水解酶降解之方法，已進行一些試驗來修飾對蛋白水解酶敏感之特定胺基酸序列。舉例而言，起降低血液中葡萄糖濃度之作用以用於治療2型糖尿病之GLP-1(7-37或7-36醯胺)，具有約4分鐘或4分鐘以下之短的生理活性半衰期(Kreymann等人，1987)，其歸因於GLP-1之效價經由在第8胺基酸(Ala)與第9胺基酸(Asp)之間藉由二肽基肽酶IV(DPP IV)裂解而損失。因此，已對具有針對DPP IV之抵抗力之GLP-1類似物進行各種研究，且已關於用Gly(Deacon等人，1998；Burcelin等人，1999)或Leu或D-Ala(Xiao等人，2001)取代Ala8，從而增強對DPP IV之抵抗力，同時維持其活性進行試驗。GLP-1之N-末端胺基酸His7為GLP-1活性之關鍵且充當DPP IV之標靶。因此，美國專利第5,545,618號描述將N-末端用烷基或醯基修飾，且Gallwitz等人描述使His7經受N-甲基化，或α-甲基化，或將整個His用咪唑取代以增加對DPP IV之抵抗力，且維持生理活性。雖然增強對二肽基肽酶之抵抗力以改良其穩定性，但發現His7經修飾之衍生物在相同濃度下，具有顯著降低之受體親和力及較低之cAMP刺激(Gallwitz.等人，Regulatory Peptide 79：93-102(1999),Regulatory Peptide86：103-111(2000))。
除GLP-1外，艾塞那肽(exendins)為在希拉毒蜥(glia monster)(一種亞利桑那州及北墨西哥常見之蜥蜴)之毒液中發現之胜肽。艾塞那肽-3存在於珠狀毒蜥(Heloderma horridum)之毒液中，且艾塞那肽-4存在於鈍尾毒蜥(Heloderma suspectum)之毒液中。艾塞那肽與GLP-1具有53%的高同源性(Goke等人，J.Bio.Chem.,268：19650-55(1993))。據報導艾塞那肽-4對特定分泌胰島素之細胞上之GLP-1受體，對來自天竺鼠(guinea pig)胰腺之分散腺泡細胞及來自胃之腔壁細胞起作用，且據稱胜肽亦刺激生長抑素釋放且抑制分離胃中之胃泌素釋放。另外，據報導發現艾塞那肽-3及艾塞那肽-4刺激胰腺腺泡細胞中之cAMP產生且刺激澱粉酶自胰腺腺泡細胞釋放。因為艾塞那肽-4(美國專利第5,424,686號)具有His-Gly而非在GLP-1中充當二肽基肽酶之底物的His-Ala之序列，所以其具有對DPP IV之抵抗力及比GLP-1高的生理活性。因此，其具有比GLP-1長的2至4小時之活體內半衰期。儘管天然艾塞那肽具有相比於GLP-1增加之活體內半衰期，但其生理活性並非得到足夠保持。舉例而言，在市售艾塞那肽-4(艾塞那肽(exenatide))之狀況下，需要向患者每天注射兩次，其對患者而言仍存在困難。
為改良天然艾塞那肽之治療功效，已進行許多試驗來製備其衍生物。如本文中所使用之術語“衍生物”係指藉由自天然胜肽取代及/或缺失一或多個胺基酸及/或將一或多個胺基酸插入天然胜肽中所製備之胜肽。該衍生物亦指藉由烷基化、醯化、酯化或醯胺化天然胜肽中之一或多個胺基酸而製備之經化學修飾的胜肽。
新穎艾塞那肽促效劑化合物描述於PCT申請案第 PCT/US98/16387號中，且之後，對其主張優先權，一種使用艾塞那肽降低食物攝入之方法揭示於US6956026及EP0996459中。另外，艾塞那肽促效劑化合物揭示於美國專利第7157555號中。然而，其中僅揭示艾塞那肽類似物之一些胺基酸序列。此外，並未提及關於所主張類似物之活性及性質，其亦未由實施方式支持。
因此，本發明者發現His1經修飾艾塞那肽衍生物顯示比天然艾塞那肽高之血液穩定性及促胰島素活性，從而完成本發明。
發明概要
本發明之一目標為提供具有改良血液穩定性及促胰島素活性之促胰島素胜肽衍生物。
本發明之另一目標為提供包含具有改良血液穩定性及促胰島素活性之促胰島素胜肽衍生物之用於治療糖尿病的醫藥組合物。
較佳具體實例之描述
根據一態樣，本發明係關於具有改良血液穩定性及促胰島素活性之促胰島素胜肽衍生物。
本發明之促胰島素胜肽衍生物為其N-末端組胺酸(His)殘基或N-末端組胺酸殘基之胺基經化學修飾之衍生物。
較佳地，促胰島素胜肽可為艾塞那肽-4、艾塞那肽-3 或其衍生物。艾塞那肽-4或艾塞那肽-3之衍生物係指藉由自天然胜肽取代及/或缺失一或多個胺基酸及/或將一或多個胺基酸插入天然胜肽中所製備之胜肽。該等衍生物亦係指藉由烷基化、醯化、酯化或醯胺化天然胜肽中之一或多個胺基酸而製備之經化學修飾的胜肽。該等衍生物具有與天然胜肽相同之活性。WO97/46584揭示艾塞那肽變異體，其缺失艾塞那肽-4之C末端之部分，或取代成非天然胺基酸正白胺酸，且WO99/07404揭示藉由取代艾塞那肽之胺基酸而製備之艾塞那肽變異體，其包括非天然胺基酸(諸如戊基甘胺酸、高脯胺酸(homoproline)、第三丁基甘胺酸)。US2008/0119390亦揭示艾塞那肽變異體，其為藉由缺失C末端胺基酸之部分而製備之長度比天然艾塞那肽短的變異體及藉由取代成其他胺基酸而製備之變異體。關於艾塞那肽-3或艾塞那肽-4衍生物，該等公開案完全以引用之方式併入本文中，包括其中所引用之所有參考文獻。本發明之促胰島素胜肽更佳為艾塞那肽-4或其衍生物。
特定言之，促胰島素胜肽為其藉由缺失N-末端胺基而製備之衍生物(去胺基-組胺醯基衍生物)、其藉由用羥基取代胺基而製備之衍生物(β-羥基咪唑丙醯基衍生物)、其藉由用2個甲基殘基修飾胺基而製備之衍生物(二甲基-組胺醯基衍生物)、其藉由用羧基取代胺基而製備之衍生物(β-羧基咪唑丙醯基衍生物)或其胺基之正電荷經移除之衍生物，其中移除N-末端組胺酸殘基之α碳以僅保留咪唑乙醯基(咪唑乙醯基衍生物)及其他N-末端胺基經修飾之衍 生物。
較佳地，本發明提供具有經化學修飾N-末端胺基及胺基酸殘基之艾塞那肽4衍生物，且其更佳藉由移除或取代艾塞那肽-4之His1殘基之α碳中存在之α胺基或α碳來製備，且尤其較佳為N-末端胺基經移除之去胺基-組胺醯基-艾塞那肽-4(DA-艾塞那肽-4)、藉由用羥基取代胺基而製備之β-羥基咪唑丙醯基-艾塞那肽-4(HY-艾塞那肽-4)、藉由用羧基取代胺基而製備之β-羧基咪唑丙醯基-艾塞那肽-4(CX-艾塞那肽-4)、藉由用2個甲基殘基修飾胺基而製備之二甲基-組胺醯基-艾塞那肽-4(DM-艾塞那肽-4)及N-末端組胺酸殘基之α碳經移除之咪唑乙醯基-艾塞那肽-4(CA-艾塞那肽-4)。
根據一特定態樣，本發明係關於包含下式1之胺基酸之促胰島素胜肽衍生物。
R1-X-R2<式1>
其中R1係選自由去胺基-組胺醯基、二甲基-組胺醯基、β-羥基咪唑丙醯基、4-咪唑乙醯基及β-羧基咪唑丙醯基組成之群， R2係選自由-NH2、-OH及-Lys組成之群， X係選自由Gly-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Leu-Ser-Y-Gln-Met-Glu-Glu-Glu-Ala-Val-Arg-Leu-Phe-Ile-Glu-Trp-Leu-Z-Asn-Gly-Gly-Pro-Ser-Ser-Gly-Ala-Pro-Pro-Pro-Ser、Gly-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Leu-Ser-Y-Gln-Met-Glu-Glu-Glu-Ala-Val-Arg-Leu-Phe-Ile-Glu-Trp-Leu-Z-Asn-Gly-Gly及Ser-Asp-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Leu-Ser-Y-Gln-Met-Glu-Glu-Glu-Ala-Val-Arg-Leu-Phe-Ile-Glu-Trp-Leu-Z-Asn-Gly-Gly-Pro-Ser-Ser-Gly-Ala-Pro-Pro-Pro-Ser組成之群，Y係選自由Lys、Ser及Arg組成之群，且Z係選自由Lys、Ser及Arg組成之群。
較佳促胰島素胜肽衍生物具有式1，其中R1係選自由去胺基-組胺醯基、二甲基-組胺醯基、β-羥基咪唑丙醯基、4-咪唑乙醯基及β-羧基咪唑丙醯基組成之群，Y為Lys或Ser，Z為Lys且R2為-NH2。
根據另一特定態樣，本發明係關於包含下式2之胺基 酸之促胰島素胜肽衍生物。
R3-X’-R4<式2>
其中R3為4-咪唑乙醯基，X'為Gly-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Leu-Ser-Y-Gln-Met-Glu-Glu-Glu-Ala-Val-Arg-Leu-Phe-Ile-Glu-Trp-Leu-Z-Asn-Gly-Gly-Pro-Ser-Ser-Gly-Ala-Pro-Pro-Pro-Ser或Gly-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Leu-Ser-Y-Gln-Met-Glu-Glu-Glu-Ala-Val-Arg-Leu-Phe-Ile-Glu-Trp-Leu-Z-Asn-Gly-Gly，R4為-NH2，Y係選自由Lys、Ser及Arg組成之群，且Z係選自由Lys、Ser及Arg組成之群。
就其活性而言，艾塞那肽-4之N-末端組胺酸殘基中之化學修飾具有與其他促胰島素胜肽GLP-1中之彼化學修飾不同的效應。可預期GLP-1之N-末端組胺酸殘基中之化學修飾(例如α-甲基-GLP-1、n-甲基-GLP-1或imi-GLP-1)抑制二肽基肽酶之降解，從而增加穩定性，且報導降解速率之實際降低。然而，亦報導與天然GLP-1相比，其具有相對降低之受體親和力及較低之cAMP刺激。相反，因為艾塞那肽-4不受二肽基肽酶裂解，所以難以預測N-末端組胺酸殘基中之化學修飾對其活性之效應，尤其為其對受體親和力及血液中葡萄糖濃度之效應。
因此，本發明提供具有經化學修飾N-末端組胺酸殘基 或具有N-末端組胺酸殘基之經化學修飾胺基之艾塞那肽-4衍生物，其顯示出乎意料極佳之血液穩定性及促胰島素活性。該等衍生物顯示極佳試管內促胰島素活性(圖2)且實際上，在糖尿病db/db小鼠中發現，與天然艾塞那肽4相比，其顯示極佳的降低血液中葡萄糖濃度之效應(圖3)。
據認為，由於N-末端組胺酸殘基之胺基中之修飾引起的淨電荷改變或組胺酸殘基之尺寸改變引起對血液中之蛋白水解攻擊之敏感性的差異或影響受體親和力。然而，仍需要對其進行更廣泛的分子研究。預期該性質最大化艾塞那肽-4之固有促胰島素活性，亦即，對2型糖尿病之治療效應，且誘導食物攝入降低，延遲胃排空或其類似情形。
艾塞那肽-4衍生物係選自由本發明之去胺基-組胺醯基-艾塞那肽-4(DA-艾塞那肽-4)、β-羥基咪唑丙醯基-艾塞那肽-4(HY-艾塞那肽-4)、β-羧基丙醯基-艾塞那肽-4(CX-艾塞那肽-4)、二甲基-組胺醯基-艾塞那肽-4(DM-艾塞那肽-4)及咪唑乙醯基-艾塞那肽-4(CA-艾塞那肽-4)組成之群，其藉由移除及取代N-末端組胺酸殘基之α胺基或藉由移除N-末端組胺酸殘基之α碳來製備。因此，其他胺基酸序列不受限制，只要維持其活性即可。另外，對熟習此項技術者而言明顯的為，艾塞那肽-4衍生物藉由典型方法來修飾，該方法包括修飾諸如PEG之聚合物及糖鏈及與白蛋白或運鐵蛋白融合，以便增強其治療效應，使其優於天然艾塞那肽-4。
根據另一態樣，本發明提供包含促胰島素胜肽衍生物 之用於治療糖尿病之醫藥組合物。
如本文中所使用之術語“投藥”意謂藉由某種適合方法將預定量之物質引入患者中。本發明之組合物可經由任何常見路線投與，只要其能夠到達所要組織即可。涵蓋多種投藥模式，包括腹膜內、靜脈內、肌肉內、皮下、皮內、經口、局部、鼻內、肺內及直腸內，但本發明不限於該等所例示之投藥模式。然而，因為胜肽在經口投藥後被消化，所以用於經口投藥之組合物之活性成分應經包衣或調配以保護免於在胃內降解。較佳地，當前組合物可以可注射形式投與。另外，本發明之醫藥組合物可使用某種能夠將活性成分傳輸至標靶細胞中之設備投與。
包含本發明之衍生物之醫藥組合物可另外包含醫藥學上可接受之載劑。對經口投藥而言，醫藥學上可接受之載劑可包括黏合劑、潤滑劑、崩解劑、賦形劑、增溶劑、分散劑、穩定劑、懸浮劑、著色劑及香料。對可注射製劑而言，醫藥學上可接受之載劑可包括緩衝劑、防腐劑、止痛劑、增溶劑、等張劑及穩定劑。對用於局部投藥之製劑而言，醫藥學上可接受之載劑可包括基質、賦形劑、潤滑劑及防腐劑。本發明之醫藥組合物可與上述醫藥學上可接受之載劑組合調配成多種劑型。舉例而言，對經口投藥而言，醫藥組合物可調配成錠劑、片劑、膠囊、酏劑、懸浮液、糖漿劑或糯米紙囊劑。對可注射製劑而言，醫藥組合物可調配成單位劑型，諸如多劑量容器或呈單劑量劑型之安瓿。醫藥組合物亦可調配成溶液、懸浮液、錠劑、丸劑、 膠囊及持續釋放型製劑。
另一方面，適於醫藥調配物之載劑、賦形劑及稀釋劑之實例包括乳糖、右旋糖、蔗糖、山梨糖醇、甘露醇、木糖醇、赤藻糖醇、麥芽糖醇、澱粉、阿拉伯膠、海藻酸鹽、明膠、磷酸鈣、矽酸鈣、纖維素、甲基纖維素、微晶纖維素、聚乙烯吡咯啶酮、水、甲基羥基苯甲酸酯、丙基羥基苯甲酸酯、滑石、硬脂酸鎂及礦物油。另外，醫藥調配物可另外包括填充劑、抗凝結劑、潤滑劑、保濕劑、香料及防腐劑。
本發明之醫藥組合物之投藥頻率及劑量可藉由若干相關因素確定，該等因素包括欲治療疾病之類型、投藥路線、患者之年齡、性別、體重及疾病嚴重性以及作為活性組分之藥物之類型。因為本發明之醫藥組合物具有極佳活體內功效及效價持續時間，所以其可顯著降低本發明之醫藥藥物之投藥頻率及劑量。
與促胰島素胜肽衍生物有關之本發明尚未由其他先前發明者以艾塞那肽-4衍生物形式揭示，且其序列尚未明確指定。又，未報導將其活性與天然艾塞那肽-4、其他衍生物或其變異體之活性相比較。此外，不可預期與天然艾塞那肽-4相比，N-末端α胺基或α碳經移除或取代之艾塞那肽-4衍生物具有顯著極佳之活性。因此，最大化根據本發明之促胰島素胜肽衍生物之極佳血液穩定性及促胰島素活性，亦即，對2型糖尿病之治療效應為適用的。
本發明之模式
在下文中，對本發明之更好理解可經由以下實施例獲得，陳述該等實施例以說明本發明，而不欲解釋為限制本發明。
實施例1.艾塞那肽-4衍生物之血漿穩定性
為量測艾塞那肽-4衍生物之血漿穩定性，使天然艾塞那肽-4及艾塞那肽-4衍生物中之每一者暴露於血漿，且藉由逆相HPLC量測剩餘未變性蛋白質之量以執行對依據暴露時間之變性之測試。
在當前實驗中，為分析暴露於血漿之樣本，使血漿混合樣本脫除蛋白質且隨後分析。
分別以1 mg/ml之濃度製備天然艾塞那肽-4、去胺基-組胺醯基-艾塞那肽-4(DA-艾塞那肽-4)、β-羥基咪唑丙基-艾塞那肽-4(HY-艾塞那肽-4)及咪唑乙醯基-艾塞那肽-4(CA-艾塞那肽-4)。將200 μl各艾塞那肽-4衍生物樣本與200 μl大鼠血清混合，且在37℃下及在各取樣時間執行反應。在0 hr、1 hr、2 hr、4 hr、6 hr、8 hr、18 hr及24 hr之各時間點取100 μl各樣本。將400 μl冰冷甲醇添加至100 μl樣本中以終止反應，接著渦旋20秒。在15,000 rpm下將各混合物離心30 min，且取上清液用於分析。
使用TFA於ACN中之梯度作為移動相且使用C18管柱執行逆相HPLC。
自艾塞那肽-4之主峰面積與總峰面積之比率(%)計算結果，且將在0 hr時間點時之各衍生物之結果視為100%，得到繪示主峰面積之比率隨暴露時間增加而降低之圖案之 圖。
達到24 hr之時間點時，天然艾塞那肽-4之純度降低約70%，而3種衍生物DA-艾塞那肽-4、HY-艾塞那肽-4及CA-艾塞那肽-4之純度分別降低約77%、78%、77%(圖1)。
實施例2.艾塞那肽-4衍生物之試管內活性之量測
為量測艾塞那肽-4衍生物之功效，檢測其試管內細胞活性。天然艾塞那肽-4及艾塞那肽-4衍生物係由American Peptide Corporation合成。將通常用於量測GLP-1之試管內活性之胰島瘤細胞或郎格罕氏島(islets of Langerhans)分離，且在GLP-1處理後分析cAMP產生之改變。
在當前實驗中，使用RIN-m5F(ATCC CRL-11605)量測試管內活性，該RIN-m5F稱為大鼠胰島瘤細胞且具有GLP-1受體，從而通常用於量測GLP-1之試管內活性。用天然艾塞那肽-4及艾塞那肽-4衍生物(包括DA-艾塞那肽-4(去胺基-組胺醯基-艾塞那肽-4)、DM-艾塞那肽-4(二甲基-組胺醯基-艾塞那肽-4)、CA-艾塞那肽-4(4-咪唑乙醯基-艾塞那肽-4)及HY-艾塞那肽-4(β-羥基咪唑丙醯基-艾塞那肽-4))，以變化濃度處理RIN-m5F細胞，且隨後檢測歸因於測試物質之cAMP產生以確定EC50值。
實施例3.艾塞那肽-4衍生物之促胰島素活性之量測
在RINm5F細胞中比較艾塞那肽-4衍生物之促胰島素活性。將RINm5F細胞解凍，且次培養至少一次，接著以1×105個細胞/孔之密度用含有FBS之培養基(Gibco,#11082)接種至96孔培養板中。隨後，在5% CO2恆溫箱中，在37℃下將細胞培養48 hr。將培養基用含有0.5% FBS之新鮮培養基置換，且隨後培養1 hr。用含有0.5% FBS及葡萄糖之培養基稀釋CA-艾塞那肽-4及艾塞那肽-4(byetta,Amylin)中之每一者以產生10 nM至0.001 nM之濃度。除艾塞那肽樣本外，製備稀釋溶液且用作對照組。移除RINm5F細胞之培養基，且向其中添加所製備之樣本，接著在5% CO2恆溫箱中，在37℃下培養1 hr。隨後，自各孔回收培養基。使用大鼠胰島素ELISA套組(Mercodia)來測定所回收培養基之胰島素濃度，且結果展示於圖2及表2中。
如圖2及表2中所示，發現艾塞那肽-4衍生物中之一者CA艾塞那肽-4在相同濃度下，顯示比天然艾塞那肽-4高約2倍之促胰島素活性。
實施例4.艾塞那肽-4衍生物之活體內功效之比較
為量測艾塞那肽-4衍生物之活體內功效，在糖尿病動物模型中，量測其與天然艾塞那肽-4相比之降血糖效應。 將db/db小鼠(Jackson Lab，10-12週齡)禁食2 hr，且隨後分別以0.01-1000 mcg/kg之量投與艾塞那肽-4及CA艾塞那肽-4。1hr後，自尾部血管收集血液樣本以使用糖度計量測血糖含量。經由皮下路線投與艾塞那肽-4、CA艾塞那肽-4及媒劑，且計算在各濃度下之血糖相對媒劑之變化百分比。在各濃度下，使用Prism程式計算降血糖效應之ED50(圖3及表3)。
如圖3及表3中所示，發現在糖尿病動物模型中，CA艾塞那肽-4顯示比天然艾塞那肽-4高約5倍之降血糖效應。
本發明之效應
根據本發明之促胰島素胜肽衍生物最大化艾塞那肽之固有促胰島素活性，亦即，對2型糖尿病之治療效應，且誘導食物攝入降低，延遲胃排空或其類似方面，其優於天然及其他促胰島素胜肽類似物。因此，可有效提供根據本發明之促胰島素胜肽衍生物及包含其之醫藥組合物以用於治療疾病。
圖1.表示艾塞那肽-4衍生物及天然艾塞那肽-4依據暴露時間之血漿穩定性。(A：艾塞那肽-4，D：DA-艾塞那肽-4，H：HY-艾塞那肽-4，C：CA-艾塞那肽-4)
圖2.表示艾塞那肽-4衍生物中之一者CA-艾塞那肽-4及艾塞那肽-4之促胰島素活性。
圖3.表示艾塞那肽-4衍生物中之一者CA-艾塞那肽-4及艾塞那肽-4在糖尿病動物模型中之降血糖功效。
<110> 韓美科學有限公司(HANMI SCIENCE CO.,LTD.)
<120> 經修飾N末端胺基酸的促胰島素胜肽衍生物
<130> TW 097126905
<150> KR 10-2007-0071071
<151> 2007-07-16
<150> US 60/991,155
<151> 2007-11-29
<160> 6
<170> PatentIn 3.4版
<210> 1
<211> 39
<212> PRT
<213> 鈍尾毒蜥
<400> 1
<210> 2
<211> 39
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> DM艾塞那肽-4
<220>
<221> 雜項特徵
<222> (1)..(1)
<223> Xaa是二甲基-組胺醯基
<400> 2
<210> 3
<211> 39
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> DA艾塞那肽-4
<220>
<221> 雜項特徵
<222> (1)..(1)
<223> Xaa是去-胺基-組胺醯基
<400> 3
<210> 4
<211> 39
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> HY艾塞那肽-4
<220>
<221> 雜項特徵
<222> (1)..(1)
<223> Xaa是β-羥基-咪唑-丙醯基
<400> 4
<210> 5
<211> 39
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> CA艾塞那肽-4
<220>
<221> 雜項特徵
<222> (1)..(1)
<223> Xaa是咪唑-乙醯基
<400> 5
<210> 6
<211> 31
<212> PRT
<213> 智人
<400> 6

Claims (3)

  1. 一種艾塞那肽(exendin)-4胜肽，其由以下式1組成：R1-X-R2<式1>其中R1係N-二甲基-組胺醯基；R2係選自由-NH2或-OH組成之群；X係選自由Gly-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Leu-Ser-Y-Gln-Met-Glu-Glu-Glu-Ala-Val-Arg-Leu-Phe-Ile-Glu-Trp-Leu-Z-Asn-Gly-Gly-Pro-Ser-Ser-Gly-Ala-Pro-Pro-Pro-Ser或Gly-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Leu-Ser-Y-Gln-Met-Glu-Glu-Glu-Ala-Val-Arg-Leu-Phe-Ile-Glu-Trp-Leu-Z-Asn-Gly-Gly組成之群，Y係選自由Lys、Ser及Arg組成之群，且Z係選自由Lys、Ser及Arg組成之群。
  2. 如申請專利範圍第1項之艾塞那肽-4胜肽，其中R1為N-二甲基-組胺醯基，Y為Lys或Ser，Z為Lys且R2為-NH2。
  3. 一種用於治療糖尿病之醫藥組合物，其包含如申請專利範圍第1或2項之艾塞那肽-4胜肽。
TW101140650A 2007-07-16 2008-07-16 經修飾ｎ末端胺基酸的促胰島素胜肽衍生物 TWI532496B (zh)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
KR20070071071 2007-07-16
US99115507P 2007-11-29 2007-11-29

Publications (2)

Publication Number Publication Date
TW201311272A TW201311272A (zh) 2013-03-16
TWI532496B true TWI532496B (zh) 2016-05-11

Family

ID=40260219

Family Applications (3)

Application Number Title Priority Date Filing Date
TW101140652A TWI524896B (zh) 2007-07-16 2008-07-16 經修飾ｎ末端胺基酸的促胰島素胜肽衍生物
TW101140650A TWI532496B (zh) 2007-07-16 2008-07-16 經修飾ｎ末端胺基酸的促胰島素胜肽衍生物
TW097126905A TWI454276B (zh) 2007-07-16 2008-07-16 經修飾ｎ末端胺基酸的促胰島素胜肽衍生物

Family Applications Before (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
TW101140652A TWI524896B (zh) 2007-07-16 2008-07-16 經修飾ｎ末端胺基酸的促胰島素胜肽衍生物

Family Applications After (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
TW097126905A TWI454276B (zh) 2007-07-16 2008-07-16 經修飾ｎ末端胺基酸的促胰島素胜肽衍生物

Country Status (22)

Country Link
US (1) US9422349B2 (zh)
EP (4) EP2537860B1 (zh)
JP (7) JP2009019027A (zh)
KR (1) KR101231431B1 (zh)
CN (2) CN104672319B (zh)
AR (1) AR067555A1 (zh)
AU (1) AU2008276762A1 (zh)
BR (1) BRPI0814097A8 (zh)
CA (3) CA2789112C (zh)
DK (1) DK2390265T3 (zh)
ES (3) ES2444622T3 (zh)
HK (1) HK1207088A1 (zh)
IL (1) IL203288A (zh)
MY (1) MY167486A (zh)
NZ (3) NZ596828A (zh)
PH (2) PH12014500922A1 (zh)
PT (1) PT2390265E (zh)
RU (1) RU2442792C2 (zh)
SG (3) SG10201510245SA (zh)
TW (3) TWI524896B (zh)
WO (1) WO2009011544A2 (zh)
ZA (1) ZA201000125B (zh)

Families Citing this family (34)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2009019027A (ja) 2007-07-16 2009-01-29 Hanmi Pharmaceutical Co Ltd アミノ末端のアミノ酸が変異したインスリン分泌ペプチド誘導体
US8895281B2 (en) * 2009-03-20 2014-11-25 Hanmi Science Co., Ltd Method for preparing a site-specific physiologically active polypeptide conjugate
AU2010321587A1 (en) 2009-11-23 2012-06-07 Amylin Pharmaceuticals, Inc. Polypeptide Conjugate
KR101382593B1 (ko) * 2010-07-21 2014-04-10 한미사이언스 주식회사 신규한 지속형 글루카곤 결합체 및 이를 포함하는 비만 예방 및 치료용 약학적 조성물
CA3138758A1 (en) 2010-09-28 2012-04-19 Amylin Pharmaceuticals, Llc Highly soluble leptins
EA201390450A1 (ru) 2010-09-28 2013-07-30 Амилин Фармасьютикалс, Ллк. Полипептиды с увеличенной продолжительностью действия
JP2014521594A (ja) 2011-05-25 2014-08-28 アミリン・ファーマシューティカルズ，リミテッド・ライアビリティ・カンパニー 長持続期間デュアルホルモンコンジュゲート
UA113626C2 (xx) 2011-06-02 2017-02-27 Композиція для лікування діабету, що містить кон'югат інсуліну тривалої дії та кон'югат інсулінотропного пептиду тривалої дії
JP6006309B2 (ja) 2011-07-08 2016-10-12 アミリン・ファーマシューティカルズ，リミテッド・ライアビリティ・カンパニーＡｍｙｌｉｎ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ，Ｌｌｃ 作用持続期間が増大し、免疫原性が減少した操作されたポリペプチド
JP6040464B2 (ja) 2011-07-08 2016-12-07 アエゲリオン・ファーマシューティカルズ・インコーポレイテッドＡｅｇｅｒｉｏｎ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ， Ｉｎｃ． 作用持続期間が増大し、免疫原性が減少した操作されたポリペプチド
KR20130049671A (ko) 2011-11-04 2013-05-14 한미사이언스 주식회사 생리활성 폴리펩타이드 결합체 제조 방법
AR090281A1 (es) 2012-03-08 2014-10-29 Hanmi Science Co Ltd Proceso mejorado para la preparacion de un complejo polipeptidico fisiologicamente activo
CN103130889A (zh) * 2012-06-15 2013-06-05 中国药科大学 一种Exendin-4类似物及其制备方法和应用
US10441665B2 (en) 2012-07-25 2019-10-15 Hanmi Pharm. Co., Ltd. Liquid formulation of long acting insulinotropic peptide conjugate
AR094821A1 (es) 2012-07-25 2015-09-02 Hanmi Pharm Ind Co Ltd Formulación líquida de un conjugado de péptido insulinotrópico de acción prolongada
AR092862A1 (es) 2012-07-25 2015-05-06 Hanmi Pharm Ind Co Ltd Formulacion liquida de insulina de accion prolongada y un peptido insulinotropico y metodo de preparacion
KR20140088837A (ko) * 2013-01-03 2014-07-11 한미약품 주식회사 Ｎ-말단 전하가 변형된 인슐린 분비 펩티드 유도체
AR096891A1 (es) 2013-07-12 2016-02-03 Hanmi Pharm Ind Co Ltd Conjugado de monómero polipéptido biológicamente activo y conjugado de fragmento fc de inmunoglobulina, que muestra aclaramiento mediado por receptor reducido, y el método para la preparación del mismo
AR096890A1 (es) 2013-07-12 2016-02-03 Hanmi Pharm Ind Co Ltd Conjugando fc de inmunoglobulina, que mantiene la afinidad de unión del fragmento fc de la inmunoglobulina a fcrn
MX369656B (es) 2014-01-20 2019-11-15 Hanmi Pharm Ind Co Ltd Insulina de accion prolongada y uso de la misma.
US20170128589A1 (en) 2014-03-31 2017-05-11 Hanmi Pharm. Co., Ltd. Method for improving solubility of protein and peptide by using immunoglogulin fc fragment linkage
AR100639A1 (es) 2014-05-29 2016-10-19 Hanmi Pharm Ind Co Ltd Composición para tratar diabetes que comprende conjugados de análogos de insulina de acción prolongada y conjugados de péptidos insulinotrópicos de acción prolongada
TWI684458B (zh) 2014-05-30 2020-02-11 南韓商韓美藥品股份有限公司 包含胰島素及ｇｌｐ-１/昇糖素雙重促效劑之治療糖尿病之組成物
JP6987741B2 (ja) 2015-07-24 2022-01-05 ハンミ ファーマシューティカル カンパニー リミテッド 生理活性ポリペプチド結合体の製造方法
UY36870A (es) 2015-08-28 2017-03-31 Hanmi Pharm Ind Co Ltd Análogos de insulina novedosos
BR112018008681A2 (pt) * 2015-10-28 2018-10-30 Tufts Medical Center novos polipeptídeos com estabilidade proteolítica melhorada, e métodos para preparar e usar os mesmos
CN110546161B (zh) 2016-09-23 2024-01-26 韩美药品股份有限公司 对胰岛素受体具有降低的结合力的胰岛素类似物及其用途
US20200078470A1 (en) 2016-12-05 2020-03-12 Hanmi Pharm. Co., Ltd. Conjugate with attenuated immune response
KR102645064B1 (ko) 2017-02-03 2024-03-08 한미약품 주식회사 지속성이 증가된 생리활성 물질의 결합체 및 이의 용도
KR102629006B1 (ko) 2017-03-23 2024-01-25 한미약품 주식회사 인슐린 수용체와의 결합력이 감소된 인슐린 아날로그의 결합체 및 이의 용도
WO2022266467A2 (en) 2021-06-17 2022-12-22 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Recombinant histone polypeptide and uses thereof
KR20230000682A (ko) 2021-06-25 2023-01-03 한미약품 주식회사 심혈관 질환 또는 신장 기능장애 발생의 위험을 감소시키기 위한 에페글레나타이드
KR20230010571A (ko) 2021-07-12 2023-01-19 한미약품 주식회사 Glp-1 유사체를 함유하는 경구 투여 제형 조성물
WO2023194390A1 (en) * 2022-04-08 2023-10-12 Danmarks Tekniske Universitet Histidine methyltransferase for increased peptide and protein stability

Family Cites Families (35)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US7A (en) * 1836-08-10 Thomas blanchard
US5545618A (en) 1990-01-24 1996-08-13 Buckley; Douglas I. GLP-1 analogs useful for diabetes treatment
US5424286A (en) 1993-05-24 1995-06-13 Eng; John Exendin-3 and exendin-4 polypeptides, and pharmaceutical compositions comprising same
US5424686A (en) 1994-04-20 1995-06-13 Philips Electronics North America Corporation Negative-resistance-compensated microwave buffer
US5512549A (en) * 1994-10-18 1996-04-30 Eli Lilly And Company Glucagon-like insulinotropic peptide analogs, compositions, and methods of use
KR100600457B1 (ko) 1996-06-05 2006-07-13 로셰 디아그노스틱스 게엠베하 엑센딘 유사체, 이의 제조방법 및 이를 함유한 약제
US6006753A (en) 1996-08-30 1999-12-28 Eli Lilly And Company Use of GLP-1 or analogs to abolish catabolic changes after surgery
CZ300837B6 (cs) * 1996-08-30 2009-08-26 Novo Nordisk A/S Deriváty GLP-1(7-37) nebo jeho analogy, farmaceutický prostredek je obsahující a jejich použití
JP2002507188A (ja) 1996-08-30 2002-03-05 イーライ・リリー・アンド・カンパニー グルカゴン様ペプチド―１（ｇｌｐ―１）またはその同族体における外科処置後の異化変調を防止するための使用
US7235627B2 (en) 1996-08-30 2007-06-26 Novo Nordisk A/S Derivatives of GLP-1 analogs
ES2425559T5 (es) 1997-01-07 2018-02-02 Amylin Pharmaceuticals, Llc Composiciones farmacéuticas que comprenden las exendinas y los agonistas de las mismas
US7157555B1 (en) * 1997-08-08 2007-01-02 Amylin Pharmaceuticals, Inc. Exendin agonist compounds
EP1938831A1 (en) * 1997-08-08 2008-07-02 Amylin Pharmaceuticals, Inc. Novel exendin agonist compounds
AU749914B2 (en) * 1997-08-08 2002-07-04 Amylin Pharmaceuticals, Inc. Novel exendin agonist compounds
US7220721B1 (en) * 1997-11-14 2007-05-22 Amylin Pharmaceuticals, Inc. Exendin agonist peptides
US6703359B1 (en) * 1998-02-13 2004-03-09 Amylin Pharmaceuticals, Inc. Inotropic and diuretic effects of exendin and GLP-1
WO1999043708A1 (en) * 1998-02-27 1999-09-02 Novo Nordisk A/S Glp-1 derivatives of glp-1 and exendin with protracted profile of action
CN1314818A (zh) 1998-08-28 2001-09-26 伊莱利利公司 服用促胰岛素肽的方法
MXPA03005036A (es) 2000-12-07 2003-09-05 Lilly Co Eli Proteinas de fusion glp-1.
IL141647A0 (en) 2001-02-26 2002-03-10 Yeda Res & Dev Synthetic human peptides and pharmaceutical compositions comprising them for the treatment of systemic lupus erythematosus
US6573237B2 (en) * 2001-03-16 2003-06-03 Eli Lilly And Company Protein formulations
US20050148497A1 (en) 2002-02-20 2005-07-07 Khan Mohammed A. Method for administering glp-1 molecules
MXPA05003335A (es) * 2002-10-02 2005-07-05 Zealand Pharma As Compuestos de exendina-4 estabilizados.
US7790681B2 (en) * 2002-12-17 2010-09-07 Amylin Pharmaceuticals, Inc. Treatment of cardiac arrhythmias with GLP-1 receptor ligands
EP1610811A4 (en) * 2002-12-17 2008-03-26 Amylin Pharmaceuticals Inc PREVENTING AND TREATING CARDIAC ERRORS
JP2006514649A (ja) * 2003-12-17 2006-05-11 アミリン・ファーマシューティカルズ，インコーポレイテッド 腎症の治療および予防のための組成物
TW200611704A (en) 2004-07-02 2006-04-16 Bristol Myers Squibb Co Human glucagon-like-peptide-1 modulators and their use in the treatment of diabetes and related conditions
EP1863521B1 (en) * 2005-03-18 2014-05-07 Novo Nordisk A/S Extended glp-1 compounds
NZ566763A (en) * 2005-08-19 2011-06-30 Amylin Pharmaceuticals Inc Exendin-4 for treating diabetes, obesity and reducing body weight
JPWO2007063907A1 (ja) 2005-11-30 2009-05-07 塩野義製薬株式会社 ペプチド糖鎖付加体およびそれを有効成分とする医薬
US8501693B2 (en) * 2006-08-04 2013-08-06 Amylin Pharmaceuticals, Llc Use of exendins and exendin agonists and GLP-1 receptor agonists for altering the concentration of fibrinogen
JP2008169195A (ja) * 2007-01-05 2008-07-24 Hanmi Pharmaceutical Co Ltd キャリア物質を用いたインスリン分泌ペプチド薬物結合体
WO2008145721A2 (en) * 2007-06-01 2008-12-04 Novo Nordisk A/S N-terminal modification of polypeptides for protection against degradation by aminopeptidases
JP2009019027A (ja) 2007-07-16 2009-01-29 Hanmi Pharmaceutical Co Ltd アミノ末端のアミノ酸が変異したインスリン分泌ペプチド誘導体
US9816387B2 (en) 2014-09-09 2017-11-14 United Technologies Corporation Attachment faces for clamped turbine stator of a gas turbine engine

Also Published As

Publication number Publication date
TW200922615A (en) 2009-06-01
TWI454276B (zh) 2014-10-01
CN101778863A (zh) 2010-07-14
CA2789112A1 (en) 2009-01-22
KR101231431B1 (ko) 2013-02-07
ES2528346T3 (es) 2015-02-09
CA2789123A1 (en) 2009-01-22
WO2009011544A2 (en) 2009-01-22
ES2528347T3 (es) 2015-02-09
SG10201510249PA (en) 2016-01-28
IL203288A (en) 2016-02-29
PH12014500923A1 (en) 2016-03-07
SG183033A1 (en) 2012-08-30
JP5481377B2 (ja) 2014-04-23
CA2693154C (en) 2014-09-09
JP2009019027A (ja) 2009-01-29
ZA201000125B (en) 2011-04-28
DK2390265T3 (da) 2014-02-10
CN104672319A (zh) 2015-06-03
RU2442792C2 (ru) 2012-02-20
AU2008276762A1 (en) 2009-01-22
TW201311272A (zh) 2013-03-16
ES2444622T3 (es) 2014-02-26
SG10201510245SA (en) 2016-01-28
EP2537860A1 (en) 2012-12-26
US20100204451A1 (en) 2010-08-12
EP2176289A2 (en) 2010-04-21
EP2390265A3 (en) 2012-03-21
JP2014094948A (ja) 2014-05-22
EP2176289A4 (en) 2010-10-27
TW201311273A (zh) 2013-03-16
PH12014500922A1 (en) 2016-03-07
KR20090008151A (ko) 2009-01-21
JP2013010779A (ja) 2013-01-17
CN104672319B (zh) 2020-03-10
NZ594853A (en) 2012-03-30
CA2693154A1 (en) 2009-01-22
RU2010101232A (ru) 2011-07-27
MY167486A (en) 2018-08-30
WO2009011544A3 (en) 2009-03-19
BRPI0814097A8 (pt) 2016-01-12
EP2390265A2 (en) 2011-11-30
EP2537860B1 (en) 2014-11-26
CA2789112C (en) 2015-01-20
CA2789123C (en) 2015-01-06
JP6023515B2 (ja) 2016-11-09
EP2390265B1 (en) 2013-11-06
US9422349B2 (en) 2016-08-23
JP2015172058A (ja) 2015-10-01
NZ596828A (en) 2012-03-30
JP2013014598A (ja) 2013-01-24
AR067555A1 (es) 2009-10-14
JP6023516B2 (ja) 2016-11-09
HK1207088A1 (zh) 2016-01-22
PT2390265E (pt) 2014-02-12
NZ582471A (en) 2012-01-12
TWI524896B (zh) 2016-03-11
EP2537861B1 (en) 2014-11-26
BRPI0814097A2 (pt) 2015-02-03
JP2010533709A (ja) 2010-10-28
EP2537861A1 (en) 2012-12-26
JP2015166368A (ja) 2015-09-24

Similar Documents

Publication Publication Date Title
TWI532496B (zh) 經修飾ｎ末端胺基酸的促胰島素胜肽衍生物
KR20190119676A (ko) 글루카곤 및 glp-1 공-효능제 화합물
US20170114115A1 (en) Glucagon receptor agonists
US20170226175A1 (en) Insulinotropic peptide derivative with modified n-terminal charge