RU2442792C2 - Производное инсулинотропного пептида, содержащее модифицированную n-концевую аминокислоту - Google Patents
Производное инсулинотропного пептида, содержащее модифицированную n-концевую аминокислоту Download PDFInfo
- Publication number
- RU2442792C2 RU2442792C2 RU2010101232/10A RU2010101232A RU2442792C2 RU 2442792 C2 RU2442792 C2 RU 2442792C2 RU 2010101232/10 A RU2010101232/10 A RU 2010101232/10A RU 2010101232 A RU2010101232 A RU 2010101232A RU 2442792 C2 RU2442792 C2 RU 2442792C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- exendin
- ser
- derivative
- glu
- gly
- Prior art date
Links
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 title claims description 13
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 title description 41
- 230000002473 insulinotropic effect Effects 0.000 title description 31
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 title 1
- JUFFVKRROAPVBI-PVOYSMBESA-N chembl1210015 Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(=O)N[C@H]1[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O[C@H]2[C@@H]([C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO[C@]3(O[C@@H](C[C@H](O)[C@H](O)CO)[C@H](NC(C)=O)[C@@H](O)C3)C(O)=O)O2)O)[C@@H](CO)O1)NC(C)=O)C(=O)NCC(=O)NCC(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](C)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](CO)C(N)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCSC)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC=1C=CC=CC=1)NC(=O)[C@@H](NC(=O)CNC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@@H](N)CC=1NC=NC=1)[C@@H](C)O)[C@@H](C)O)C(C)C)C1=CC=CC=C1 JUFFVKRROAPVBI-PVOYSMBESA-N 0.000 claims abstract description 82
- 229960001519 exenatide Drugs 0.000 claims abstract description 79
- 108010011459 Exenatide Proteins 0.000 claims abstract description 53
- 230000000694 effects Effects 0.000 claims abstract description 28
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 claims abstract description 19
- 239000008280 blood Substances 0.000 claims abstract description 19
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims abstract description 15
- 206010012601 diabetes mellitus Diseases 0.000 claims abstract description 8
- HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N histidine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 3
- 239000012634 fragment Substances 0.000 claims abstract 2
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 claims description 6
- 125000000729 N-terminal amino-acid group Chemical group 0.000 claims 1
- LEIKGVHQTKHOLM-IUCAKERBSA-N Pro-Pro-Gly Chemical compound OC(=O)CNC(=O)[C@@H]1CCCN1C(=O)[C@H]1NCCC1 LEIKGVHQTKHOLM-IUCAKERBSA-N 0.000 claims 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 7
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 abstract description 2
- DTHNMHAUYICORS-KTKZVXAJSA-N Glucagon-like peptide 1 Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(N)=O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC=1C=CC=CC=1)NC(=O)[C@@H](NC(=O)CNC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](N)CC=1N=CNC=1)[C@@H](C)O)[C@@H](C)O)C(C)C)C1=CC=CC=C1 DTHNMHAUYICORS-KTKZVXAJSA-N 0.000 description 16
- 101710198884 GATA-type zinc finger protein 1 Proteins 0.000 description 15
- 102400000322 Glucagon-like peptide 1 Human genes 0.000 description 15
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 15
- 125000003277 amino group Chemical group 0.000 description 14
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 14
- 125000000487 histidyl group Chemical group [H]N([H])C(C(=O)O*)C([H])([H])C1=C([H])N([H])C([H])=N1 0.000 description 14
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 13
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 11
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 10
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 8
- 102100025012 Dipeptidyl peptidase 4 Human genes 0.000 description 7
- 238000000034 method Methods 0.000 description 7
- 108010067722 Dipeptidyl Peptidase 4 Proteins 0.000 description 6
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 6
- 108010015174 exendin 3 Proteins 0.000 description 6
- LMHMJYMCGJNXRS-IOPUOMRJSA-N exendin-3 Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)NCC(=O)NCC(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](C)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](CO)C(N)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCSC)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC=1C=CC=CC=1)NC(=O)[C@@H](NC(=O)CNC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](N)CC=1N=CNC=1)[C@H](C)O)[C@H](C)O)C(C)C)C1=CC=CC=C1 LMHMJYMCGJNXRS-IOPUOMRJSA-N 0.000 description 6
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 6
- 125000003275 alpha amino acid group Chemical group 0.000 description 5
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 description 5
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 5
- NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N insulin Substances N1C(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(NC(=O)CN)C(C)CC)CSSCC(C(NC(CO)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CCC(N)=O)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CSSCC(NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2C=CC(O)=CC=2)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(C)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2NC=NC=2)NC(=O)C(CO)NC(=O)CNC2=O)C(=O)NCC(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CCCNC(N)=N)C(=O)NCC(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC(O)=CC=3)C(=O)NC(C(C)O)C(=O)N3C(CCC3)C(=O)NC(CCCCN)C(=O)NC(C)C(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(O)=O)=O)NC(=O)C(C(C)CC)NC(=O)C(CO)NC(=O)C(C(C)O)NC(=O)C1CSSCC2NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CC(N)=O)NC(=O)C(NC(=O)C(N)CC=1C=CC=CC=1)C(C)C)CC1=CN=CN1 NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- -1 pentyl glycine Chemical compound 0.000 description 5
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 5
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 5
- 108091005804 Peptidases Proteins 0.000 description 4
- 102000035195 Peptidases Human genes 0.000 description 4
- 125000004432 carbon atom Chemical group C* 0.000 description 4
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 4
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 4
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 4
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 4
- 230000037406 food intake Effects 0.000 description 4
- 235000012631 food intake Nutrition 0.000 description 4
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 4
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 4
- 230000001766 physiological effect Effects 0.000 description 4
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 description 4
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 4
- 208000001072 type 2 diabetes mellitus Diseases 0.000 description 4
- 108090000194 Dipeptidyl-peptidases and tripeptidyl-peptidases Proteins 0.000 description 3
- 102000003779 Dipeptidyl-peptidases and tripeptidyl-peptidases Human genes 0.000 description 3
- 102000004877 Insulin Human genes 0.000 description 3
- 108090001061 Insulin Proteins 0.000 description 3
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 230000009471 action Effects 0.000 description 3
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 3
- 238000007385 chemical modification Methods 0.000 description 3
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 description 3
- RAXXELZNTBOGNW-UHFFFAOYSA-N imidazole Natural products C1=CNC=N1 RAXXELZNTBOGNW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229940125396 insulin Drugs 0.000 description 3
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 3
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 3
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 3
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 3
- 210000002784 stomach Anatomy 0.000 description 3
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 3
- HTQBXNHDCUEHJF-XWLPCZSASA-N Exenatide Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)NCC(=O)NCC(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](C)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](CO)C(N)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCSC)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC=1C=CC=CC=1)NC(=O)[C@@H](NC(=O)CNC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@@H](N)CC=1NC=NC=1)[C@@H](C)O)[C@@H](C)O)C(C)C)C1=CC=CC=C1 HTQBXNHDCUEHJF-XWLPCZSASA-N 0.000 description 2
- 102000007446 Glucagon-Like Peptide-1 Receptor Human genes 0.000 description 2
- 108010086246 Glucagon-Like Peptide-1 Receptor Proteins 0.000 description 2
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 206010021518 Impaired gastric emptying Diseases 0.000 description 2
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 2
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 2
- 125000001429 N-terminal alpha-amino-acid group Chemical group 0.000 description 2
- 230000010933 acylation Effects 0.000 description 2
- 238000005917 acylation reaction Methods 0.000 description 2
- 239000000556 agonist Substances 0.000 description 2
- 230000029936 alkylation Effects 0.000 description 2
- 238000005804 alkylation reaction Methods 0.000 description 2
- 230000009435 amidation Effects 0.000 description 2
- 238000007112 amidation reaction Methods 0.000 description 2
- 230000036765 blood level Effects 0.000 description 2
- 230000003491 cAMP production Effects 0.000 description 2
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 2
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 description 2
- 230000008859 change Effects 0.000 description 2
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 2
- 238000012217 deletion Methods 0.000 description 2
- 230000037430 deletion Effects 0.000 description 2
- 238000004925 denaturation Methods 0.000 description 2
- 230000036425 denaturation Effects 0.000 description 2
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 2
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 2
- 230000032050 esterification Effects 0.000 description 2
- 238000005886 esterification reaction Methods 0.000 description 2
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 2
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 description 2
- 238000003780 insertion Methods 0.000 description 2
- 230000037431 insertion Effects 0.000 description 2
- 206010022498 insulinoma Diseases 0.000 description 2
- HQKMJHAJHXVSDF-UHFFFAOYSA-L magnesium stearate Chemical compound [Mg+2].CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O.CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O HQKMJHAJHXVSDF-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 2
- 125000002496 methyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 description 2
- 238000007069 methylation reaction Methods 0.000 description 2
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 2
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 2
- 208000021255 pancreatic insulinoma Diseases 0.000 description 2
- 239000002304 perfume Substances 0.000 description 2
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 2
- 229940024999 proteolytic enzymes for treatment of wounds and ulcers Drugs 0.000 description 2
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 2
- 238000004007 reversed phase HPLC Methods 0.000 description 2
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 2
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 2
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 description 2
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 2
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 2
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 2
- 239000003826 tablet Substances 0.000 description 2
- 230000000699 topical effect Effects 0.000 description 2
- 239000003981 vehicle Substances 0.000 description 2
- TXHAHOVNFDVCCC-UHFFFAOYSA-N 2-(tert-butylazaniumyl)acetate Chemical compound CC(C)(C)NCC(O)=O TXHAHOVNFDVCCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FHVDTGUDJYJELY-UHFFFAOYSA-N 6-{[2-carboxy-4,5-dihydroxy-6-(phosphanyloxy)oxan-3-yl]oxy}-4,5-dihydroxy-3-phosphanyloxane-2-carboxylic acid Chemical compound O1C(C(O)=O)C(P)C(O)C(O)C1OC1C(C(O)=O)OC(OP)C(O)C1O FHVDTGUDJYJELY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000009027 Albumins Human genes 0.000 description 1
- 108010088751 Albumins Proteins 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N Alpha-Lactose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)O[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N 0.000 description 1
- 239000004382 Amylase Substances 0.000 description 1
- 102000013142 Amylases Human genes 0.000 description 1
- 108010065511 Amylases Proteins 0.000 description 1
- 241000700199 Cavia porcellus Species 0.000 description 1
- PTHCMJGKKRQCBF-UHFFFAOYSA-N Cellulose, microcrystalline Chemical compound OC1C(O)C(OC)OC(CO)C1OC1C(O)C(O)C(OC)C(CO)O1 PTHCMJGKKRQCBF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N D-Glucitol Natural products OC[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N D-Mannitol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N D-glucitol Chemical compound OC[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N 0.000 description 1
- 238000008157 ELISA kit Methods 0.000 description 1
- 239000004386 Erythritol Substances 0.000 description 1
- UNXHWFMMPAWVPI-UHFFFAOYSA-N Erythritol Natural products OCC(O)C(O)CO UNXHWFMMPAWVPI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102400000921 Gastrin Human genes 0.000 description 1
- 108010052343 Gastrins Proteins 0.000 description 1
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 description 1
- 101000930822 Giardia intestinalis Dipeptidyl-peptidase 4 Proteins 0.000 description 1
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 description 1
- FRJIAZKQGSCKPQ-FSPLSTOPSA-N His-Ala Chemical compound OC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](N)CC1=CN=CN1 FRJIAZKQGSCKPQ-FSPLSTOPSA-N 0.000 description 1
- LYCVKHSJGDMDLM-LURJTMIESA-N His-Gly Chemical group OC(=O)CNC(=O)[C@@H](N)CC1=CN=CN1 LYCVKHSJGDMDLM-LURJTMIESA-N 0.000 description 1
- 108010041872 Islet Amyloid Polypeptide Proteins 0.000 description 1
- 102000036770 Islet Amyloid Polypeptide Human genes 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 1
- 241000270322 Lepidosauria Species 0.000 description 1
- 229930195725 Mannitol Natural products 0.000 description 1
- 229920000168 Microcrystalline cellulose Polymers 0.000 description 1
- 102000005157 Somatostatin Human genes 0.000 description 1
- 108010056088 Somatostatin Proteins 0.000 description 1
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 1
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 1
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 1
- 102000004338 Transferrin Human genes 0.000 description 1
- 108090000901 Transferrin Proteins 0.000 description 1
- TVXBFESIOXBWNM-UHFFFAOYSA-N Xylitol Natural products OCCC(O)C(O)C(O)CCO TVXBFESIOXBWNM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000002252 acyl group Chemical group 0.000 description 1
- 229940072056 alginate Drugs 0.000 description 1
- 235000010443 alginic acid Nutrition 0.000 description 1
- 229920000615 alginic acid Polymers 0.000 description 1
- 125000000217 alkyl group Chemical group 0.000 description 1
- 150000001408 amides Chemical class 0.000 description 1
- 239000003708 ampul Substances 0.000 description 1
- 235000019418 amylase Nutrition 0.000 description 1
- 230000000202 analgesic effect Effects 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 1
- 230000002421 anti-septic effect Effects 0.000 description 1
- 239000003146 anticoagulant agent Substances 0.000 description 1
- 229940127219 anticoagulant drug Drugs 0.000 description 1
- 229940064004 antiseptic throat preparations Drugs 0.000 description 1
- 230000004888 barrier function Effects 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 1
- 239000011230 binding agent Substances 0.000 description 1
- 239000006172 buffering agent Substances 0.000 description 1
- 229940084891 byetta Drugs 0.000 description 1
- 239000001506 calcium phosphate Substances 0.000 description 1
- 229910000389 calcium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000011010 calcium phosphates Nutrition 0.000 description 1
- 239000000378 calcium silicate Substances 0.000 description 1
- 229910052918 calcium silicate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000012241 calcium silicate Nutrition 0.000 description 1
- OYACROKNLOSFPA-UHFFFAOYSA-N calcium;dioxido(oxo)silane Chemical compound [Ca+2].[O-][Si]([O-])=O OYACROKNLOSFPA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000001913 cellulose Substances 0.000 description 1
- 235000010980 cellulose Nutrition 0.000 description 1
- 229920002678 cellulose Polymers 0.000 description 1
- AOXOCDRNSPFDPE-UKEONUMOSA-N chembl413654 Chemical compound C([C@H](C(=O)NCC(=O)N[C@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@H](CCSC)C(=O)N[C@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@H](CC=1C=CC=CC=1)C(N)=O)NC(=O)[C@@H](C)NC(=O)[C@@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)NC(=O)[C@H]1N(CCC1)C(=O)CNC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O)C1=CC=C(O)C=C1 AOXOCDRNSPFDPE-UKEONUMOSA-N 0.000 description 1
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 1
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 description 1
- 239000003086 colorant Substances 0.000 description 1
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 1
- 238000004132 cross linking Methods 0.000 description 1
- 239000003405 delayed action preparation Substances 0.000 description 1
- 239000008121 dextrose Substances 0.000 description 1
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 1
- 239000007884 disintegrant Substances 0.000 description 1
- 239000002270 dispersing agent Substances 0.000 description 1
- UNXHWFMMPAWVPI-ZXZARUISSA-N erythritol Chemical compound OC[C@H](O)[C@H](O)CO UNXHWFMMPAWVPI-ZXZARUISSA-N 0.000 description 1
- 235000019414 erythritol Nutrition 0.000 description 1
- 229940009714 erythritol Drugs 0.000 description 1
- 239000012737 fresh medium Substances 0.000 description 1
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 description 1
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 1
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 description 1
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 description 1
- 229940065186 gila monster venom Drugs 0.000 description 1
- 229920000591 gum Polymers 0.000 description 1
- 229940057331 heloderma horridum venom Drugs 0.000 description 1
- 108010040030 histidinoalanine Proteins 0.000 description 1
- 239000003906 humectant Substances 0.000 description 1
- 230000028993 immune response Effects 0.000 description 1
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 1
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 description 1
- 230000003914 insulin secretion Effects 0.000 description 1
- 238000007918 intramuscular administration Methods 0.000 description 1
- 238000007912 intraperitoneal administration Methods 0.000 description 1
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 1
- 210000004153 islets of langerhan Anatomy 0.000 description 1
- 239000007951 isotonicity adjuster Substances 0.000 description 1
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 1
- 230000000670 limiting effect Effects 0.000 description 1
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 1
- 239000000314 lubricant Substances 0.000 description 1
- 235000019359 magnesium stearate Nutrition 0.000 description 1
- 239000000845 maltitol Substances 0.000 description 1
- 235000010449 maltitol Nutrition 0.000 description 1
- VQHSOMBJVWLPSR-WUJBLJFYSA-N maltitol Chemical compound OC[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]([C@H](O)CO)O[C@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1O VQHSOMBJVWLPSR-WUJBLJFYSA-N 0.000 description 1
- 229940035436 maltitol Drugs 0.000 description 1
- 239000000594 mannitol Substances 0.000 description 1
- 235000010355 mannitol Nutrition 0.000 description 1
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 1
- HEBKCHPVOIAQTA-UHFFFAOYSA-N meso ribitol Natural products OCC(O)C(O)C(O)CO HEBKCHPVOIAQTA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920000609 methyl cellulose Polymers 0.000 description 1
- 239000001923 methylcellulose Substances 0.000 description 1
- 235000010981 methylcellulose Nutrition 0.000 description 1
- LXCFILQKKLGQFO-UHFFFAOYSA-N methylparaben Chemical compound COC(=O)C1=CC=C(O)C=C1 LXCFILQKKLGQFO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000008108 microcrystalline cellulose Substances 0.000 description 1
- 235000019813 microcrystalline cellulose Nutrition 0.000 description 1
- 229940016286 microcrystalline cellulose Drugs 0.000 description 1
- 239000002480 mineral oil Substances 0.000 description 1
- 108091005601 modified peptides Proteins 0.000 description 1
- 238000007479 molecular analysis Methods 0.000 description 1
- 210000004498 neuroglial cell Anatomy 0.000 description 1
- 210000001711 oxyntic cell Anatomy 0.000 description 1
- 210000000496 pancreas Anatomy 0.000 description 1
- 239000006187 pill Substances 0.000 description 1
- HXEACLLIILLPRG-UHFFFAOYSA-N pipecolic acid Chemical compound OC(=O)C1CCCCN1 HXEACLLIILLPRG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 1
- 239000001267 polyvinylpyrrolidone Substances 0.000 description 1
- 235000013855 polyvinylpyrrolidone Nutrition 0.000 description 1
- 229920000036 polyvinylpyrrolidone Polymers 0.000 description 1
- 238000004321 preservation Methods 0.000 description 1
- 230000002335 preservative effect Effects 0.000 description 1
- QELSKZZBTMNZEB-UHFFFAOYSA-N propylparaben Chemical compound CCCOC(=O)C1=CC=C(O)C=C1 QELSKZZBTMNZEB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960003415 propylparaben Drugs 0.000 description 1
- 235000019833 protease Nutrition 0.000 description 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 1
- 230000002797 proteolythic effect Effects 0.000 description 1
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 1
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 1
- 230000007017 scission Effects 0.000 description 1
- 230000003248 secreting effect Effects 0.000 description 1
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 1
- NHXLMOGPVYXJNR-ATOGVRKGSA-N somatostatin Chemical compound C([C@H]1C(=O)N[C@H](C(N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CSSC[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC=2C=CC=CC=2)C(=O)N[C@@H](CC=2C=CC=CC=2)C(=O)N[C@@H](CC=2C3=CC=CC=C3NC=2)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@H](C(=O)N1)[C@@H](C)O)NC(=O)CNC(=O)[C@H](C)N)C(O)=O)=O)[C@H](O)C)C1=CC=CC=C1 NHXLMOGPVYXJNR-ATOGVRKGSA-N 0.000 description 1
- 229960000553 somatostatin Drugs 0.000 description 1
- 239000000600 sorbitol Substances 0.000 description 1
- 235000010356 sorbitol Nutrition 0.000 description 1
- 230000000087 stabilizing effect Effects 0.000 description 1
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 1
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 1
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 1
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 1
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 1
- 239000000375 suspending agent Substances 0.000 description 1
- 235000020357 syrup Nutrition 0.000 description 1
- 239000006188 syrup Substances 0.000 description 1
- 239000000454 talc Substances 0.000 description 1
- 229910052623 talc Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000012222 talc Nutrition 0.000 description 1
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 1
- 239000012581 transferrin Substances 0.000 description 1
- QORWJWZARLRLPR-UHFFFAOYSA-H tricalcium bis(phosphate) Chemical compound [Ca+2].[Ca+2].[Ca+2].[O-]P([O-])([O-])=O.[O-]P([O-])([O-])=O QORWJWZARLRLPR-UHFFFAOYSA-H 0.000 description 1
- 210000003462 vein Anatomy 0.000 description 1
- 239000002435 venom Substances 0.000 description 1
- 210000001048 venom Anatomy 0.000 description 1
- 231100000611 venom Toxicity 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000811 xylitol Substances 0.000 description 1
- 235000010447 xylitol Nutrition 0.000 description 1
- HEBKCHPVOIAQTA-SCDXWVJYSA-N xylitol Chemical compound OC[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)CO HEBKCHPVOIAQTA-SCDXWVJYSA-N 0.000 description 1
- 229960002675 xylitol Drugs 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/575—Hormones
- C07K14/65—Insulin-like growth factors, i.e. somatomedins, e.g. IGF-1, IGF-2
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/575—Hormones
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/46—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- A61K38/22—Hormones
- A61K38/26—Glucagons
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
- A61P3/08—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
- A61P3/10—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis for hyperglycaemia, e.g. antidiabetics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/575—Hormones
- C07K14/57563—Vasoactive intestinal peptide [VIP]; Related peptides
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/575—Hormones
- C07K14/605—Glucagons
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Toxicology (AREA)
- Endocrinology (AREA)
- Diabetes (AREA)
- Public Health (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Vascular Medicine (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Immunology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Obesity (AREA)
- Hematology (AREA)
- Emergency Medicine (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
Abstract
Изобретение относится к области биотехнологии, а именно к производному эксендина-4 и фармацевтической композиции для лечения диабета. Производное эксендина-4 получают с помощью замены N-концевого остатка гистидина эксендина-4 фрагментом, выбранным из группы, состоящей из N-диметилгистидила, бета-гидрокси-имидазопропионила, 4-имидазоацетила и бета-карбоксиимидазопропионила. Предложенное изобретение проявляет увеличенную стабильность в крови и улучшенную активность по сравнению с эксендином-4. 2 н. и 5 з.п. ф-лы, 3 ил., 3 табл.
Description
Область техники
Настоящее изобретение относится к производному инсулинотропного пептида, обладающему улучшенной инсулинотропной активностью. Конкретно, настоящее изобретение относится к инсулинотропному пептиду, содержащему модифицированную N-концевую аминокислоту, обладающему высокой стабильностью и инсулинотропной активностью.
Уровень техники
Пептиды имеют тенденцию легко подвергаться денатурации по причине их низкой стабильности, они разлагаются in-vivo под действием протеолитических ферментов, теряя, таким образом, свою активность, и имеют относительно небольшой размер, благодаря чему легко проходят через почечный барьер. Соответственно, с целью поддержания уровня в крови и титра лекарственного средства, включающего пептид в качестве эффективного компонента, необходимо часто вводить пептидное лекарственное средство пациенту для поддержания его целевого уровня в крови и для поддержания целевого титра. Однако пептидные лекарственные средства обычно вводят в форме инъецируемых препаратов, и такое частое введение, предназначенное для поддержания уровня физиологически активных пептидов в крови, вызывает у пациентов сильную боль. Для разрешения этих проблем было сделано много попыток. В качестве одной из таких попыток был предложен способ, при котором увеличивалось прохождение пептидного лекарственного средства через биологическую мембрану, и затем осуществлялся перенос пептидного лекарственного средства в организм с помощью ротоглоточной или носоглоточной ингаляции. Однако этот способ все еще является трудным для поддержания in-vivo-активности пептидного лекарственного средства благодаря значительно более низкой in-vivo-эффективности переноса по сравнению с инъецируемыми препаратами.
С другой стороны, было сделано много попыток для улучшения стабильности пептидных лекарственных средств в крови и для поддержания высокого уровня лекарственных средств в крови в течение продолжительного периода времени, за счет чего достигается их максимальная фармацевтическая эффективность. Таким образом, для препарата продолжительного действия такого пептидного лекарственного средства требуется увеличение стабильности пептидного лекарственного средства и поддержание титра на достаточно высоком уровне, чтобы не вызывать при этом иммунного ответа у пациентов.
В качестве метода стабилизации пептидов и ингибирования деградации протеолитическими ферментами были осуществлены некоторые попытки модификации определенной аминокислотной последовательности, которая является чувствительной к протеолитическому ферменту. Например, GLP-1 (7-37 или 7-36 амид), функция которого заключается в уменьшении концентрации глюкозы в крови при лечении диабета Типа 2, имеет короткий полупериод физиологической активности, составляющий примерно 4 минуты или менее (Kreymann et al., 1987), благодаря потере титра GLP-1 в результате расщепления между 8-й аминокислотой (Ala) и 9-й аминокислотой (Asp) с помощью дипептидил пептидазы IV (DPP IV). В результате, были осуществлены разнообразные исследования на аналогах GLP-1, имеющих устойчивость к DPP IV, и были осуществлены попытки замены Ala8 на Gly (Deacon et al., 1998; Burcelin et al., 1999), или на Leu или D-Ala (Xiao et al., 2001), таким образом, увеличивая устойчивость к DPP IV, поддерживая при этом активность аналогов. N-концевая аминокислота His7 в GLP-1 является критической для активности GLP-1, и служит в качестве мишени для DPP IV. Соответственно, в Патенте US №5545618 описано, что N-конец модифицируют с помощью алкильной или ацильной группы, и у Gallwitz, et al. описано, что His7 подвергают N-метилированию или альфа-метилированию, или His полностью заменяют на имидазол для увеличения устойчивости к DPP IV, и для поддержания физиологической активности. В связи с тем, что устойчивость к депептидил пептидазе увеличивают для улучшения стабильности производных, модифицированные по His7 производные, как обнаружено, обладают заметно меньшей аффинностью к рецептору с меньшим стимулированием cAMP при той же концентрации (Gallwitz. et al., Regulatory Peptide 79:93-102 (1999), Regulatory Peptide 86:103-111 (2000)).
Дополнительно к GLP-1, эксендины представляют собой пептиды, которые обнаружены в яде ящерицы (glia monster), широко распространенной в Аризоне и в северной Мексике. Эксендин-3 присутствует в яде Heloderma horridum, и эксендин-4 присутствует в яде Heloderma suspectum. Эксендины имеют высокую степень гомологии, составляющую 53%, с GLP-1 (Goke, et al., J. Bio. Chem., 268:19650-55 (1993)). Эксендин-4, согласно имеющимся сведениям, действует на GLP-1-рецепторы на определенных секретирующих инсулин-клетках, на диспергированных ацинарных клетках поджелудочной железы морской свинки и на париетальных клетках желудка, и также сообщается, что пептид стимулирует высвобождение соматостатина и ингибирует высвобождение гастрина в изолированных желудках. Кроме того, согласно имеющимся сведениям было обнаружено, что эксендин-3 и эксендин-4 стимулируют продуцирование cAMP в панкреатических ацинарных клетках и стимулируют высвобождение амилазы из панкреатических ацинарных клеток. Так как эксендин-4 (Патент US №5424686) содержит последовательность His-Gly вместо His-Ala, которая функционирует в качестве субстрата дипептидил пептидазы в GLP-1, то он обладает устойчивостью к DPP IV, и более высокой физиологической активностью, чем GLP-1. В результате, in-vivo он имеет период полужизни, составляющий 2-4 часа, который продолжительнее, чем у GLP-1. Хотя нативный эксендин in-vivo имеет увеличенный период полужизни по сравнению с GLP-1, его физиологическая активность не поддерживается в достаточной степени. Например, в случае коммерчески доступного эксендина-4 (эксенатид (exenatide)), его необходимо инъецировать пациенту дважды в день, что является затруднительным для пациентов.
Для улучшения терапевтической эффективности нативного эксендина были сделаны попытки получения его аналогов, производных и вариантов. Термин "аналог или вариант" обычно обозначает пептид, полученный с помощью замены, делеции или вставки одной или более аминокислот в нативный пептид или из нативного пептида. Термин "производное" обозначает химически модифицированный пептид, полученный с помощью алкилирования, ацилирования, этерификации или амидирования одной или более аминокислот в нативном пептиде.
Новые соединения - агонисты эксендина описаны в Заявке PCT № PCT/US 98/16387. В Патенте US №6956026, имеющем приоритет по этой заявке, раскрыт способ уменьшения приема пищи с применением эксендина. Кроме того, в EP 0996459 с приоритетом, основанным на заявке PCT, раскрыто применение эксендинов и их аналогов для уменьшения приема пищи, и в Патенте US №7157555 описаны соединения - агонисты эксендина. Однако они раскрывают только последовательности аналогов эксендина. Кроме того, не упоминаются активность и свойства указанных аналогов, что также не подтверждено подробным описанием.
Описание
Техническая задача
Соответственно, авторы настоящего изобретения обнаружили, что производные эксендина, содержащие модифицированный His1, демонстрируют более высокую стабильность в крови и инсулинотропную активность по сравнению с нативным эксендином, и таким образом создали настоящее изобретение.
Техническое решение
Целью настоящего изобретения является предложение производных инсулинтропного пептида, обладающих улучшенной стабильностью в крови и улучшенной инсулинотропной активностью.
Другой целью настоящего изобретения является предложение фармацевтической композиции, предназначенной для лечения диабета, включающей производное инсулинотропного пептида, обладающее улучшенной инсулинотропной активностью.
Описание чертежей
На Фиг.1 продемонстрирована стабильность производных эксендина-4 в сыворотке. A:эксендин-4, D:DA-эксендин-4, H:HY-эксендин-4, C:CA-эксендин-4.
На Фиг.2 продемонстрированы инсулинотропные активности эксендина-4 и производного эксендина-4, CA-эксендина 4.
На Фиг.3 продемонстрирован эффект понижения уровня глюкозы в крови в результате действия эксендина-4 и CA-эксендина-4 у животных моделей диабета.
Лучший способ осуществления изобретения
Согласно аспекту, настоящее изобретение относится к производному инсулинотропного пептида, обладающему улучшенной стабильностью в крови и улучшенной инсулинотропной активностью.
Производное, согласно настоящему изобретению, представляет собой производное, содержащее химически модифицированный N-концевой остаток гистидина, или производное, содержащее химически модифицированную аминогруппу N-концевого остатка гистидина.
Предпочтительно, инсулинотропный пептид согласно настоящему изобретению представляет собой эксендин-4, эксендин-3 или их производные. При использовании здесь термин "производное эксендина-4 или эксендина-3" обозначает пептид, полученный путем замены, делеции и/или вставки одной или более аминокислот в эксендине-4 или в эксендине-3, или пептид, содержащий один или более химически модифицированные аминокислотные остатки, например модифицированные с помощью алкилирования, ацилирования, этерификации или амидирования, причем активность этого пептида эквивалентна активности нативного эксендина-4.
В качестве примеров производных эксендина-3 или эксендина-4 в WO 97/46584 раскрыто получение производного эксендина-4 с помощью делетирования C-конца эксендина-4 или замены аминокислоты эксендина-4 на синтетическую аминокислоту Норлейцин. Также, в WO 99/07404 раскрыты производные эксендина, в которых аминокислоты заменены на синтетические аминокислоты, например пентил-глицин, гомопролин или трет-бутил-глицин, и в US 2008/0119390 раскрыты производные эксендина, состоящие из укороченных по сравнению с нативным эксендином-4 аминокислотных последовательностей, полученные путем делетирования некоторых аминокислотных остатков в эксендине-4, и полученные путем замены некоторых аминокислотных остатков в эксендине-4 на другие аминокислотные остатки. Эти публикации введены в настоящее описание с помощью ссылок.
Конкретно, настоящее изобретение также может охватывать его производное с удаленной аминогруппой N-концевого гистидина (дезамино-гистидил-производное), его производное, полученное путем замены аминогруппы на гидроксильную группу (бета-гидрокси-имидазопропионил-производное), его производное, полученное путем модификации аминогруппы с помощью двух метильных остатков (диметил-гистидил-производное), его производное, полученное путем замены аминогруппы на карбоксильную группу (бета-карбокси-имидазопропионил-производное) или его производное с удаленным положительным зарядом аминогруппы, в которой альфа-атом углерода N-концевого остатка гистидина удален с сохранением только имидазоацетильной группы (имидазоацетил-производное), и другие производные, содержащие модифицированную N-концевую аминогруппу.
Предпочтительно, в настоящем изобретении предлагаются производные эксендина-4, содержащие химически модифицированную N-концевую аминогруппу или аминокислотный остаток, более предпочтительно, производное эксендина-4, в котором альфа-аминогруппа или альфа-атом углерода N-концевого остатка гистидина (первая аминокислота эксендина-4) заменена или удалена, и еще более предпочтительно, дезамино-гистидил-эксендин-4 (DA-Эксендин-4) с удаленной N-концевой аминогруппой, бета-гидрокси-имидазопропионил-эксендин-4 (HY-эксендин-4), полученный путем замены аминогруппы на гидроксильную группу, бета-карбокси-имидазопропионил-эксендин-4 (CX-эксендин-4), полученный путем замены аминогруппы на карбоксильную группу, диметил-гистидил-эксендин-4 (DM-эксендин-4), полученный путем модификации аминогруппы с помощью двух метильных остатков, и имидазоацетил-эксендин-4 (CA-эксендин-4) с удаленным альфа-атомом углерода N-концевого остатка гистидина.
Согласно определенному аспекту, настоящее изобретение относится к производному инсулинотропного пептида, включающего аминокислотную последовательность следующей Формулы 1.
R1-X-R2 <Формула 1>,
где R1 выбирают из группы, состоящей из дезаминогистидила, N-диметилгистидила, бета-гидрокси-имидазопропионила, 4-имидазоацетила и бета-карбокси-имидазопропионила;
R2 выбирают из группы, состоящей из -NH2, -OH и -Lys;
X выбирают из группы, состоящей из Gly-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Leu-Ser-Y-Gln-Met-Glu-Glu-Glu-Ala-Val-Arg-Leu-Phe-Ile-Glu-Trp-Leu-Z-Asn-Gly-Gly-Pro-Ser-Ser-Gly-Ala-Pro-Pro-Pro-Ser, Gly-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Leu-Ser-Y-Gln-Met-Glu-Glu-Glu-Ala-Val-Arg-Leu-Phe-Ile-Glu-Trp-Leu-Z-Asn-Gly-Gly и Ser-Asp-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Leu-Ser-Y-Gln-Met-Glu-Glu-Glu-Ala-Val-Arg-Leu-Phe-Ile-Glu-Trp-Leu-Z-Asn-Gly-Gly-Pro-Ser-Ser-Gly-Ala-Pro-Pro-Pro-Ser;
Y выбирают из группы, состоящей из Lys, Ser и Arg; и
Z выбирают из группы, состоящей из Lys, Ser и Arg.
Предпочтительное производное инсулинотропного пептида имеет Формулу 1, где R1 выбирают из дезаминогистидила, N-диметил-гистидила, бета-гидрокси-имидазопропионила, 4-имидазоацетила и бета-карбокси-имидазопропионила, Y представляет собой Lys или Ser, Z представляет собой Lys, и R2 представляет собой -NH2.
Согласно другому определенному аспекту, настоящее изобретение относится к производному инсулинотропного пептида, включающего аминокислоту следующей Формулы 2.
R3-X'-R4 <Формула 2>,
где R3 представляет собой 4-имидазоацетил;
X' представляет собой Gly-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Leu-Ser-Y-Gln-Met-Glu-Glu-Glu-Ala-Val-Arg-Leu-Phe-Ile-Glu-Trp-Leu-Z-Asn-Gly-Gly-Pro-Ser-Ser-Gly-Ala-Pro-Pro-Pro-Ser или
Gly-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Leu-Ser-Y-Gln-Met-Glu-Glu-Glu-Ala-Val-Arg-Leu-Phe-Ile-Glu-Trp-Leu-Z-Asn-Gly-Gly;
R4 представляет собой -NH2;
Y выбирают из группы, состоящей из Lys, Ser и Arg; и
Z выбирают из группы, состоящей из Lys, Ser и Arg.
В отношении их активности химическая модификация в N-концевом остатке гистидина эксендина-4 имеет отличный эффект по сравнению с другим инсулинотропным пептидом GLP-1. Можно ожидать, что GLP-1, содержащий химическую модификацию в N-концевом остатке гистидина, например, α-метил-GLP-1, n-метил-GLP-1 или imi-GLP-1, будет ингибировать деградацию с помощью дипептидил пептидазы, посредством чего увеличится стабильность, и, собственно, имеются сообщения о практическом уменьшении степени деградации. Однако также имеются сообщения о том, что такие модифицированные соединения обладают относительно низкой аффинностью к рецептору с уменьшенным стимулированием cAMP по сравнению с нативным GLP-1.
Напротив, так как эксендин-4 не расщепляется с помощью дипептидил пептидазы, трудно предсказать эффект химической модификации в N-концевом остатке гистидина на активность модифицированного соединения, конкретно, на его влияние на аффинность к рецептору и на концентрацию глюкозы в крови.
Соответственно, в настоящем изобретении предлагается производное эксендина-4, содержащее химически модифицированный N-концевой остаток гистидина, или содержащее химически модифицированную аминогруппу N-концевого остатка гистидина, которое демонстрирует неожиданно превосходную инсулинотропную активность по сравнению с нативным эксендином-4. Эти производные in vitro демонстрируют превосходную стабильность в крови и превосходную инсулинотропную активность по сравнению с эксендином-4 (Фиг.2). Практически, было обнаружено для диабетических мышей db/db, что эти производные демонстрируют превосходный эффект уменьшения концентрации глюкозы в крови по сравнению с нативным эксендином-4 (Фиг.3). Считается, что изменение общего заряда благодаря модификации аминогруппы N-концевого остатка гистидина вызывает различия в чувствительности к протеолитическому воздействию в крови или влияет на аффинность к рецептору. Однако все еще существует необходимость более широких молекулярных исследований производных. Ожидается, что такое свойство усиливает собственную инсулинотропную активность эксендина-4, а именно терапевтический эффект при диабете типа 2, и индуцирует уменьшение приема пищи, задержку опорожнения желудка и тому подобное.
Производные эксендина-4, включающие дезамино-гистидил-эксендин-4 (DA-эксендин-4), бета-гидрокси-имидазопропионил-эксендин-4 (HY-эксендин-4), бета-карбокси-имидазопропионил-эксендин-4 (CX-эксендин-4), диметил-гистидил-эксендин-4 (DM-эксендин-4) и имидазоацетил-эксендин-4 (CA-эксендин-4) по настоящему изобретению, получают путем удаления и замены альфа-аминогруппы N-концевого остатка гистидина или путем удаления альфа-атома углерода N-концевого остатка гистидина. Таким образом, присутствие других аминокислотных последовательностей не ограничивается при условии сохранения их активности. Кроме того, специалисту в данной области понятно, что производные эксендина-4 модифицируют с помощью обычного метода, включающего модификацию полимера, такого как PEG и сахарная цепь, и сшивку с альбумином или трансферрином для того, чтобы усилить их терапевтический эффект, превосходящий терапевтический эффект эксендина-4.
Согласно другому аспекту, в настоящем изобретении предлагается фармацевтическая композиция, предназначенная для лечения диабета, включающая производное инсулинотропного пептида.
При использовании в настоящем описании термин "введение" обозначает введение определенного количества вещества пациенту с помощью определенного подходящего метода. Конъюгат по настоящему изобретению вводится посредством любого из обычных путей введения при условии, что он способен достигать целевой ткани. Предполагаются разнообразные способы введения, включающие внутрибрюшинное введение, внутривенное, внутримышечное, подкожное, внутрикожное, пероральное, местное, интраназальное, интрапульмонарное и интраректальное, но настоящее изобретение не ограничено этими приведенными в качестве примера способами введения. Однако поскольку пептиды гидролизуются при пероральном введении, активные ингредиенты композиции для перорального введения должны быть покрыты оболочкой или в композицию должны быть включены компоненты для защиты против деградации в желудке. Предпочтительно, композиция по настоящему изобретению может вводиться в инъецируемой форме. Кроме того, фармацевтическая композиция по настоящему изобретению может вводиться с использованием определенного приспособления, способного транспортировать активные ингредиенты в клетку-мишень.
Фармацевтическая композиция, включающая конъюгат по настоящему изобретению, может дополнительно включать фармацевтически приемлемый носитель. Для перорального введения фармацевтически приемлемый носитель может включать связующее вещество, скользящее вещество, дезинтегратор, вспомогательное вещество, солюбилизатор, диспергирующий агент, стабилизатор, суспендирующий агент, красящий агент и отдушку. Для инъецируемых препаратов фармацевтически приемлемый носитель может включать буферный агент, консервирующий агент, анальгетик, солюбилизатор, изотонический агент и стабилизатор. Для препаратов местного введения фармацевтически приемлемый носитель может включать основу, вспомогательное вещество, скользящее вещество и консервирующий агент. Фармацевтическая композиция по настоящему изобретению может быть включена в разнообразные лекарственные формы в комбинации с вышеуказанными фармацевтически приемлемыми носителями. Например, для перорального введения фармацевтическая композиция может быть включена в таблетки, пастилки, капсулы, эликсиры, суспензии, сиропы или пластинки. Для инъецируемых препаратов фармацевтическая композиция может быть включена в единую дозированную форму, такую как многоразовый контейнер, или ампула в качестве одноразовой лекарственной формы. Фармацевтическая композиция также может быть включена в растворы, суспензии, таблетки, пилюли, капсулы и препараты пролонгированного действия.
С другой стороны, примеры носителя, вспомогательного вещества и разбавителя, подходящего для фармацевтических композиций, включают лактозу, декстрозу, сахарозу, сорбит, маннит, ксилит, эритрит, мальтит, крахмал, камедь, альгинат, желатин, фосфат кальция, силикат кальция, целлюлозу, метилцеллюлозу, микрокристаллическую целлюлозу, поливинилпирролидон, воду, метилгидроксибензоат, пропилгидроксибензоат, тальк, стеарат магния и минеральные масла. Кроме того, фармацевтические композиции могут дополнительно включать наполнители, антикоагулирующие агенты, скользящие вещества, влагоудерживающие вещества, отдушки и антисептики.
Частота введения и дозировка фармацевтической композиции по настоящему изобретению может определяться с помощью нескольких связанных факторов, включающих типы заболеваний, которые необходимо подвергнуть лечению, пути введения, возраст пациента, пол, вес и тяжесть состояния, а также с помощью типов лекарственного средства в качестве активного компонента. Так как фармацевтическая композиция по настоящему изобретению in-vivo обладает превосходной продолжительной эффективностью и титром, то поэтому можно значительно уменьшать частоту введения и дозировку фармацевтических лекарственных средств по настоящему изобретению.
Инсулинотропные производные по настоящему изобретению не раскрыты заявителями прежних изобретений, или приблизительно раскрыты без представления определенных аминокислотных последовательностей, и никогда не проводили сравнения их активностей с активностью нативного эксендина-4, других производных и вариантов. Таким образом, никогда ранее не ожидалось, что производные эксендина-4, чья альфа-аминогруппа или альфа-атом углерода N-конца заменены или делетированы, могут проявлять заметно превосходные активности. Соответственно, превосходная стабильность в сыворотке и инсулинотропная активность производных инсулинотропного пептида согласно настоящему изобретению максимально усиливают терапевтический эффект на диабет типа 2.
Способ осуществления изобретения
В дальнейшем в этом документе для лучшего понимания настоящего изобретения представлены следующие примеры, которые приведены для иллюстрации, и которые не следует понимать как ограничение настоящего изобретения.
Пример 1. Стабильность в плазме производного эксендина-4
Для измерения стабильности в плазме производных эксендина-4, каждое из веществ - нативный Эксендин-4 и производные Эксендина-4, экспонировали в плазме, и количества оставшихся не денатурированных белков измеряли с помощью ВЭЖХ с обращенной фазой для осуществления теста денатурации в зависимости от времени экспонирования.
В настоящем эксперименте для анализа образцов, экспонированных в плазме, образцы, смешанные с плазмой, депротеинизировали и затем анализировали.
Нативный эксендин-4, дезамино-гистидил-эксендин-4 (DA-Эксендин-4), бета-гидрокси-имидазопропионил-эксендин-4 (HY-эксендин-4), бета-карбокси-имидазопропионил-эксендин-4 (CA-эксендин-4), диметил-гистидил-эксендин-4 (DM-эксендин-4) и имидазоацетил-эксендин-4 (CA-эксендин-4) получали соответственно в концентрации 1 мг/мл. 200 мкл каждого образца производного эксендина-4 смешивали с 200 мкл крысиной сыворотки и проводили реакцию при 37°C в течение каждой из продолжительностей измерения. 100 мкл каждого образца брали в каждый момент времени, соответствующий 0 ч, 1 ч, 2 ч, 4 ч, 6 ч, 8 ч, 18 ч и 24 ч. 400 мкл охлажденного метанола добавляли к 100 мкл образца для терминации реакции с последующим встряхиванием в течение 20 сек. Каждую смесь центрифугировали при 15000 об/мин в течение 30 мин, и супернатант использовали для анализа.
ВЭЖХ с обращенной фазой проводили с использованием градиента TFA в ACN в качестве подвижной фазы с использованием колонки C18.
Результаты рассчитывали на основании соотношения (%) площади основного пика эксендина-4 к общей площади пика, и результат каждого производного в момент времени 0 ч принимали равным 100%, в результате чего строили график данных образца, демонстрирующий, что соотношение площади основного пика уменьшается при увеличении времени экспонирования.
До момента времени, соответствующего 24 ч, в то время как чистота нативного эксендина-4 уменьшается примерно до 70%, чистота трех производных (формы D, H, C) уменьшилась примерно до 77%, 78%, 77%, соответственно (ФИГ.1).
Пример 2. Измерение in vitro-активности производного эксендина-4
Для измерения эффективности производных эксендина-4, включающих дезамино-гистидил-эксендин-4, оценивали их in-vitro-клеточную активность. Нативный эксендин-4 и производные эксендина-4 синтезировали в American Peptide Corporation. Выделяли клетки инсулиномы или островки Лангерганса, которые, как правило, используют для измерения in-vitro-активности GLP-1, и анализировали изменения продуцирования cAMP при обработке с помощью GLP-1.
В настоящем эксперименте in-vitro-активность измеряли с использованием RIN-m5F (ATCC CRL-11605), которые известны как крысиные клетки инсулиномы, содержащие рецептор GLP-1, благодаря чему их, как правило, используют для измерения in-vitro-активности GLP-1. Клетки RIN-m5F обрабатывали с помощью GLP-1, нативного эксендина-4 и производных эксендина-4, включающих N-концевой-α-дезамино-гистидил-Эксендин-4 в различных концентрациях, и затем оценивали продуцирование cAMP с использованием тестируемых веществ для определения величин EC50.
| Таблица 1 | ||
| Тестируемые вещества | EC50 (нМ) | Отношение к Эксендину-4 |
| Эксендин-4 | 1,21 | 100 |
| Дезамино-гистидил (DA)-Эксендин-4 | 0,95 | 127,4 |
| Диметил-гистидил (DM)-Эксендин-4 | 1,31 | 92,4 |
| Имидазоацетил (СА)-эксендин-4 | 1,2 | 100 |
| Бета-гидроксипропионил (HY)-эксендин-4 | 1,3 | 92,4 |
Пример 3. Измерение инсулинотропной активности производного эксендина-4
Инсулинотропные активности производных эксендина-4 сравнивали в клетках RINm5F. Клетки RINm5F размораживали и субкультивировали, по меньшей мере, один раз, с последующей инокуляцией в 96-луночные планшеты с плотностью 1×105 клеток/на лунку в культуральной среде, содержащей FBS (Gibco, #11082). Затем клетки культивировали в инкубаторе в присутствии 5% CO2 при 37°C в течение 48 часов. Культуральную среду меняли на свежую среду, содержащую 0,5% FBS, и затем инкубировали в течение 1 часа. Каждое из веществ, CA-эксендин-4 и эксендин-4 (byetta, Amylin) разводили в культуральной среде, содержащей 0,5% FBS и глюкозу, с получением концентраций от 10 нМ до 0,001 нМ. За исключением образцов эксендина, получали разведенные растворы и использовали в качестве контрольной группы. Удаляли культуральную среду для клеток RINm5F и добавляли к клеткам полученные образцы с последующим культивированием в инкубаторе в присутствии 5% CO2 при 37°C в течение 1 часа. Затем среду извлекали из каждой лунки. Для определения концентраций инсулина в извлеченной среде использовали набор реагентов ELISA для крысиного инсулина, и полученные результаты продемонстрированы на фиг.2 и в Таблице 2.
| Таблица 2 | |
| Образец | Отношение максимальной секреции инсулина к контрольной группе |
| СА Эксендин-4 | 83,6% |
| Эксендин-4 | 43,3% |
Как продемонстрировано на фиг.2 и в Таблице 2, обнаружено, что одно из производных эксендина-4, CA эксендин-4 демонстрирует примерно 2-кратное превышение инсулинотропной активности по отношению к нативному эксендину-4 при одной и той же концентрации.
Пример 4. Сравнение in vivo-эффективности производных эксендина-4
Для измерения in vivo-эффективности производных эксендина-4 в крови животных моделей диабета измеряли эффект понижения уровня глюкозы в результате действия производных эксендина-4 по сравнению с нативным эксендином-4. Мышей db/db (Jackson Lab, возраст 10-12) не кормили в течение 2 часов, и затем им вводили эксендин-4 и CA эксендин-4 в количестве 0,01-1000 мкг/кг, соответственно. Через 1 ч собирали образцы крови из хвостовой вены для измерения уровня глюкозы в крови с использованием глюкометра. Эксендин-4, CA эксендин-4 и носитель вводили посредством подкожного пути введения, и рассчитывали % изменения уровня глюкозы в крови по отношению к носителю при каждой концентрации. При каждой концентрации с использованием программы Prism рассчитывали ED50 для эффекта понижения уровня глюкозы (фиг.3, Таблица 3).
| Таблица 3 | ||
| Образец | ED50 (мкг/кг) | R2 |
| CA эксендин-4 | 2,3 | 0,99 |
| Эксендин-4 | 9,92 | 0,98 |
Как продемонстрировано на фиг.3 и в Таблице 3, обнаружено, что CA эксендин-4 демонстрирует примерно 5-кратное превышение эффекта понижения уровня глюкозы в крови по отношению к нативному эксендину-4 у животных моделей диабета.
Промышленная применимость
Производные инсулинотропного пептида согласно настоящему изобретению максимально усиливают собственную инсулинотропную активность эксендина, а именно терапевтический эффект на диабет типа 2, и индуцируют уменьшение приема пищи, задержку опорожнения желудка и тому подобное, превосходя в этом нативный и другие аналоги инсулинотропного пептида. Таким образом, производные инсулинотропного пептида и включающая их фармацевтическая композиция согласно настоящему изобретению могут эффективно использоваться для лечения заболеваний.
Claims (7)
1. Производное эксендина-4, где N-концевой остаток гистидина эксендина-4 заменен фрагментом, выбранным из группы, состоящей из N-диметилгистидила, бета-гидрокси-имидазопропионила, 4-имидазоацетила и бета-карбоксиимидазопропионила, которое проявляет увеличенную стабильность в крови и улучшенную активность по сравнению с эксендином-4.
2. Производное эксендина-4 по п.1, где производное эксендина-4 состоит из аминокислотной последовательности следующей формулы 1:
(1)
где R1 выбирают из группы, состоящей из N-диметилгистидила, бета-гидрокси-имидазопропионила, 4-имидазоацетила и бета-карбоксиимидазопропионила;
R2 выбирают из группы, состоящей из -NH2 или -ОН;
Х выбирают из группы, состоящей из Gly-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Leu-Ser-Y-Gln-Met-Glu-Glu-Glu-Ala-Val-Arg-Leu-Phe-Ile-Glu-Trp-Leu-Z-Asn-Gly-Gly-Pro-Ser-Ser-Gly-Ala-Pro-Pro-Pro-Ser и Gly-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Leu-Ser-Y-Gln-Met-Glu-Glu-Glu-Ala-Val-Arg-Leu-Phe-Ile-Glu-Trp-Leu-Z-Asn-Gly-Gly;
Y выбирают из группы, состоящей из Lys, Ser и Arg; и
Z выбирают из группы, состоящей из Lys, Ser и Arg.
где R1 выбирают из группы, состоящей из N-диметилгистидила, бета-гидрокси-имидазопропионила, 4-имидазоацетила и бета-карбоксиимидазопропионила;
R2 выбирают из группы, состоящей из -NH2 или -ОН;
Х выбирают из группы, состоящей из Gly-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Leu-Ser-Y-Gln-Met-Glu-Glu-Glu-Ala-Val-Arg-Leu-Phe-Ile-Glu-Trp-Leu-Z-Asn-Gly-Gly-Pro-Ser-Ser-Gly-Ala-Pro-Pro-Pro-Ser и Gly-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Leu-Ser-Y-Gln-Met-Glu-Glu-Glu-Ala-Val-Arg-Leu-Phe-Ile-Glu-Trp-Leu-Z-Asn-Gly-Gly;
Y выбирают из группы, состоящей из Lys, Ser и Arg; и
Z выбирают из группы, состоящей из Lys, Ser и Arg.
3. Производное эксендина-4 по п.2, где R1 представляет собой N-диметилгистидил, Y представляет Lys или Ser, Z представляет собой Lys и R2 представляет собой -NH2.
4. Производное эксендина-4 по п.2, где R1 представляет собой 4-имидазоацетил, Y представляет Lys или Ser, Z представляет собой Lys и R2 представляет собой -NH2.
5. Производное эксендина-4 по п.2, где R1 представляет собой бета-гидрокси-имидазопропионил, Y представляет Lys или Ser, Z представляет собой Lys и R2 представляет собой -NH2.
6. Производное эксендина-4 по п.2, где R1 представляет собой бета-карбокси-имидазопропионил, Y представляет Lys или Ser, Z представляет собой Lys и R2 представляет собой -NH2.
7. Фармацевтическая композиция для лечения диабета, включающая эффективное количество производного эксендина-4 по п.1 и фармацевтичесчки приемлемый носитель.
Applications Claiming Priority (4)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| KR20070071071 | 2007-07-16 | ||
| KR10-2007-0071071 | 2007-07-16 | ||
| US99115507P | 2007-11-29 | 2007-11-29 | |
| US60/991,155 | 2007-11-29 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2010101232A RU2010101232A (ru) | 2011-07-27 |
| RU2442792C2 true RU2442792C2 (ru) | 2012-02-20 |
Family
ID=40260219
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2010101232/10A RU2442792C2 (ru) | 2007-07-16 | 2008-07-16 | Производное инсулинотропного пептида, содержащее модифицированную n-концевую аминокислоту |
Country Status (22)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US9422349B2 (ru) |
| EP (4) | EP2537861B1 (ru) |
| JP (7) | JP2009019027A (ru) |
| KR (1) | KR101231431B1 (ru) |
| CN (2) | CN104672319B (ru) |
| AR (1) | AR067555A1 (ru) |
| AU (1) | AU2008276762A1 (ru) |
| BR (1) | BRPI0814097A8 (ru) |
| CA (3) | CA2693154C (ru) |
| DK (1) | DK2390265T3 (ru) |
| ES (3) | ES2528347T3 (ru) |
| HK (1) | HK1207088A1 (ru) |
| IL (1) | IL203288A (ru) |
| MY (1) | MY167486A (ru) |
| NZ (3) | NZ582471A (ru) |
| PH (2) | PH12014500923A1 (ru) |
| PT (1) | PT2390265E (ru) |
| RU (1) | RU2442792C2 (ru) |
| SG (3) | SG10201510245SA (ru) |
| TW (3) | TWI454276B (ru) |
| WO (1) | WO2009011544A2 (ru) |
| ZA (1) | ZA201000125B (ru) |
Families Citing this family (34)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2009019027A (ja) * | 2007-07-16 | 2009-01-29 | Hanmi Pharmaceutical Co Ltd | アミノ末端のアミノ酸が変異したインスリン分泌ペプチド誘導体 |
| BRPI1013626B8 (pt) * | 2009-03-20 | 2021-05-25 | Hanmi Holdings Co Ltd | método para preparar conjugado de polipeptídeo fisiologicamente ativo em sítio específico |
| WO2011063414A1 (en) | 2009-11-23 | 2011-05-26 | Amylin Pharmaceuticals, Inc. | Polypeptide conjugate |
| KR101382593B1 (ko) * | 2010-07-21 | 2014-04-10 | 한미사이언스 주식회사 | 신규한 지속형 글루카곤 결합체 및 이를 포함하는 비만 예방 및 치료용 약학적 조성물 |
| EA201390450A1 (ru) | 2010-09-28 | 2013-07-30 | Амилин Фармасьютикалс, Ллк. | Полипептиды с увеличенной продолжительностью действия |
| WO2012050925A2 (en) | 2010-09-28 | 2012-04-19 | Amylin Pharmaceuticals, Inc. | Highly soluble leptins |
| JP2014521594A (ja) | 2011-05-25 | 2014-08-28 | アミリン・ファーマシューティカルズ，リミテッド・ライアビリティ・カンパニー | 長持続期間デュアルホルモンコンジュゲート |
| UA113626C2 (xx) | 2011-06-02 | 2017-02-27 | Композиція для лікування діабету, що містить кон'югат інсуліну тривалої дії та кон'югат інсулінотропного пептиду тривалої дії | |
| PT2729160T (pt) | 2011-07-08 | 2019-07-08 | Aegerion Pharmaceuticals Inc | Polipéptidos modificados com uma maior duração da ação e uma imunogenicidade reduzida |
| US9382304B2 (en) | 2011-07-08 | 2016-07-05 | Amylin Pharmaceuticals, Llc | Engineered polypeptides having enhanced duration of action with reduced immunogenicity |
| KR20130049671A (ko) | 2011-11-04 | 2013-05-14 | 한미사이언스 주식회사 | 생리활성 폴리펩타이드 결합체 제조 방법 |
| AR090281A1 (es) | 2012-03-08 | 2014-10-29 | Hanmi Science Co Ltd | Proceso mejorado para la preparacion de un complejo polipeptidico fisiologicamente activo |
| CN103130889A (zh) * | 2012-06-15 | 2013-06-05 | 中国药科大学 | 一种Exendin-4类似物及其制备方法和应用 |
| AR092862A1 (es) | 2012-07-25 | 2015-05-06 | Hanmi Pharm Ind Co Ltd | Formulacion liquida de insulina de accion prolongada y un peptido insulinotropico y metodo de preparacion |
| AR094821A1 (es) | 2012-07-25 | 2015-09-02 | Hanmi Pharm Ind Co Ltd | Formulación líquida de un conjugado de péptido insulinotrópico de acción prolongada |
| US10441665B2 (en) | 2012-07-25 | 2019-10-15 | Hanmi Pharm. Co., Ltd. | Liquid formulation of long acting insulinotropic peptide conjugate |
| KR20140088837A (ko) * | 2013-01-03 | 2014-07-11 | 한미약품 주식회사 | Ｎ-말단 전하가 변형된 인슐린 분비 펩티드 유도체 |
| AR096891A1 (es) | 2013-07-12 | 2016-02-03 | Hanmi Pharm Ind Co Ltd | Conjugado de monómero polipéptido biológicamente activo y conjugado de fragmento fc de inmunoglobulina, que muestra aclaramiento mediado por receptor reducido, y el método para la preparación del mismo |
| AR096890A1 (es) | 2013-07-12 | 2016-02-03 | Hanmi Pharm Ind Co Ltd | Conjugando fc de inmunoglobulina, que mantiene la afinidad de unión del fragmento fc de la inmunoglobulina a fcrn |
| MA39301A1 (fr) | 2014-01-20 | 2018-01-31 | Hanmi Pharmaceutical Co Ltd | Insuline à action prolongée et utilisation associée |
| MY192248A (en) | 2014-03-31 | 2022-08-10 | Hanmi Pharm Ind Co Ltd | Method for improving solubility of protein and peptide by using immunoglobulin fc fragment linkage |
| AR100639A1 (es) | 2014-05-29 | 2016-10-19 | Hanmi Pharm Ind Co Ltd | Composición para tratar diabetes que comprende conjugados de análogos de insulina de acción prolongada y conjugados de péptidos insulinotrópicos de acción prolongada |
| AR100695A1 (es) | 2014-05-30 | 2016-10-26 | Hanmi Pharm Ind Co Ltd | Composición para el tratamiento de diabetes mellitus que comprende insulina y un agonista dual glp-1 / glucagón |
| JP6987741B2 (ja) | 2015-07-24 | 2022-01-05 | ハンミ ファーマシューティカル カンパニー リミテッド | 生理活性ポリペプチド結合体の製造方法 |
| UY36870A (es) | 2015-08-28 | 2017-03-31 | Hanmi Pharm Ind Co Ltd | Análogos de insulina novedosos |
| CA3003465A1 (en) * | 2015-10-28 | 2017-05-04 | Krishna Kumar | Novel polypeptides with improved proteolytic stability, and methods of preparing and using same |
| JP7158378B2 (ja) | 2016-09-23 | 2022-10-21 | ハンミ ファーマシューティカル カンパニー リミテッド | インスリン受容体との結合力が減少された、インスリンアナログ及びその用途 |
| KR20180064321A (ko) | 2016-12-05 | 2018-06-14 | 한미약품 주식회사 | 면역반응이 약화된 결합체 |
| AU2018215840A1 (en) | 2017-02-03 | 2019-08-01 | Hanmi Pharm. Co., Ltd. | Long-Acting Conjugate Of A Physiologically Active Material And Use Thereof |
| US11752216B2 (en) | 2017-03-23 | 2023-09-12 | Hanmi Pharm. Co., Ltd. | Insulin analog complex with reduced affinity for insulin receptor and use thereof |
| WO2022266467A2 (en) | 2021-06-17 | 2022-12-22 | Dana-Farber Cancer Institute, Inc. | Recombinant histone polypeptide and uses thereof |
| KR20230000682A (ko) | 2021-06-25 | 2023-01-03 | 한미약품 주식회사 | 심혈관 질환 또는 신장 기능장애 발생의 위험을 감소시키기 위한 에페글레나타이드 |
| KR20230010571A (ko) | 2021-07-12 | 2023-01-19 | 한미약품 주식회사 | Glp-1 유사체를 함유하는 경구 투여 제형 조성물 |
| WO2023194390A1 (en) * | 2022-04-08 | 2023-10-12 | Danmarks Tekniske Universitet | Histidine methyltransferase for increased peptide and protein stability |
Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US7A (en) * | 1836-08-10 | Thomas blanchard | ||
| RU2005113291A (ru) * | 2002-10-02 | 2006-01-20 | Зилэнд Фарма А/С (Dk) | Стабилизированные соединения эксендина-4 |
| WO2006097538A1 (en) * | 2005-03-18 | 2006-09-21 | Novo Nordisk A/S | Extended glp-1 compounds |
| WO2007024700A2 (en) * | 2005-08-19 | 2007-03-01 | Amylin Pharmaceuticals, Inc. | Exendin for treating diabetes and reducing body weight |
Family Cites Families (31)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5545618A (en) | 1990-01-24 | 1996-08-13 | Buckley; Douglas I. | GLP-1 analogs useful for diabetes treatment |
| US5424286A (en) | 1993-05-24 | 1995-06-13 | Eng; John | Exendin-3 and exendin-4 polypeptides, and pharmaceutical compositions comprising same |
| US5424686A (en) | 1994-04-20 | 1995-06-13 | Philips Electronics North America Corporation | Negative-resistance-compensated microwave buffer |
| US5512549A (en) * | 1994-10-18 | 1996-04-30 | Eli Lilly And Company | Glucagon-like insulinotropic peptide analogs, compositions, and methods of use |
| US6767887B1 (en) | 1996-06-05 | 2004-07-27 | Roche Diagnostics Gmbh | Exendin analogues, processes for their preparation and medicaments containing them |
| PT944648E (pt) * | 1996-08-30 | 2007-06-26 | Novo Nordisk As | Derivados do glp-1. |
| JP2002507188A (ja) | 1996-08-30 | 2002-03-05 | イーライ・リリー・アンド・カンパニー | グルカゴン様ペプチド―１（ｇｌｐ―１）またはその同族体における外科処置後の異化変調を防止するための使用 |
| US6006753A (en) | 1996-08-30 | 1999-12-28 | Eli Lilly And Company | Use of GLP-1 or analogs to abolish catabolic changes after surgery |
| US7235627B2 (en) | 1996-08-30 | 2007-06-26 | Novo Nordisk A/S | Derivatives of GLP-1 analogs |
| ATE304864T1 (de) | 1997-01-07 | 2005-10-15 | Amylin Pharmaceuticals Inc | Verwendung von exedinen und deren antagonisten zur verminderung der lebensmittelaufnahme |
| NZ502592A (en) | 1997-08-08 | 2002-03-28 | Amylin Pharmaceuticals Inc | Exendin agonist peptides and their use in the treatment of type I and II diabetes |
| EP1938831A1 (en) | 1997-08-08 | 2008-07-02 | Amylin Pharmaceuticals, Inc. | Novel exendin agonist compounds |
| US7157555B1 (en) | 1997-08-08 | 2007-01-02 | Amylin Pharmaceuticals, Inc. | Exendin agonist compounds |
| US7220721B1 (en) * | 1997-11-14 | 2007-05-22 | Amylin Pharmaceuticals, Inc. | Exendin agonist peptides |
| US6703359B1 (en) * | 1998-02-13 | 2004-03-09 | Amylin Pharmaceuticals, Inc. | Inotropic and diuretic effects of exendin and GLP-1 |
| AU3247799A (en) * | 1998-02-27 | 1999-09-15 | Novo Nordisk A/S | Glp-1 derivatives of glp-1 and exendin with protracted profile of action |
| AR022368A1 (es) | 1998-08-28 | 2002-09-04 | Lilly Co Eli | Procedimiento para administrar peptidos insulinotropicos |
| SI1355942T1 (sl) | 2000-12-07 | 2009-02-28 | Lilly Co Eli | Glp-1 fuzijski proteini |
| IL141647A0 (en) * | 2001-02-26 | 2002-03-10 | Yeda Res & Dev | Synthetic human peptides and pharmaceutical compositions comprising them for the treatment of systemic lupus erythematosus |
| US6573237B2 (en) * | 2001-03-16 | 2003-06-03 | Eli Lilly And Company | Protein formulations |
| MXPA04008068A (es) | 2002-02-20 | 2004-11-26 | Lilly Co Eli | Metodo para administrar moleculas de glp-1. |
| US7790681B2 (en) * | 2002-12-17 | 2010-09-07 | Amylin Pharmaceuticals, Inc. | Treatment of cardiac arrhythmias with GLP-1 receptor ligands |
| JP2006514035A (ja) * | 2002-12-17 | 2006-04-27 | アミリン・ファーマシューティカルズ，インコーポレイテッド | 心不整脈の予防および治療 |
| JP2006514649A (ja) * | 2003-12-17 | 2006-05-11 | アミリン・ファーマシューティカルズ，インコーポレイテッド | 腎症の治療および予防のための組成物 |
| TW200611704A (en) | 2004-07-02 | 2006-04-16 | Bristol Myers Squibb Co | Human glucagon-like-peptide-1 modulators and their use in the treatment of diabetes and related conditions |
| EP1961764B1 (en) | 2005-11-30 | 2011-05-11 | Shionogi Co., Ltd. | Sugar chain adduct of peptide and pharmaceutical comprising the same as active ingredient |
| US8501693B2 (en) | 2006-08-04 | 2013-08-06 | Amylin Pharmaceuticals, Llc | Use of exendins and exendin agonists and GLP-1 receptor agonists for altering the concentration of fibrinogen |
| JP2008169195A (ja) * | 2007-01-05 | 2008-07-24 | Hanmi Pharmaceutical Co Ltd | キャリア物質を用いたインスリン分泌ペプチド薬物結合体 |
| WO2008145721A2 (en) * | 2007-06-01 | 2008-12-04 | Novo Nordisk A/S | N-terminal modification of polypeptides for protection against degradation by aminopeptidases |
| JP2009019027A (ja) * | 2007-07-16 | 2009-01-29 | Hanmi Pharmaceutical Co Ltd | アミノ末端のアミノ酸が変異したインスリン分泌ペプチド誘導体 |
| US9816387B2 (en) | 2014-09-09 | 2017-11-14 | United Technologies Corporation | Attachment faces for clamped turbine stator of a gas turbine engine |
-
2007
- 2007-10-03 JP JP2007259853A patent/JP2009019027A/ja active Pending
-
2008
- 2008-07-16 MY MYPI2010000187A patent/MY167486A/en unknown
- 2008-07-16 AR ARP080103043A patent/AR067555A1/es active IP Right Grant
- 2008-07-16 TW TW097126905A patent/TWI454276B/zh active
- 2008-07-16 US US12/669,372 patent/US9422349B2/en active Active
- 2008-07-16 ES ES12185376.6T patent/ES2528347T3/es active Active
- 2008-07-16 ES ES11162132.2T patent/ES2444622T3/es active Active
- 2008-07-16 SG SG10201510245SA patent/SG10201510245SA/en unknown
- 2008-07-16 EP EP12185376.6A patent/EP2537861B1/en active Active
- 2008-07-16 WO PCT/KR2008/004170 patent/WO2009011544A2/en active Application Filing
- 2008-07-16 EP EP12185370.9A patent/EP2537860B1/en active Active
- 2008-07-16 EP EP08778827A patent/EP2176289A4/en not_active Withdrawn
- 2008-07-16 RU RU2010101232/10A patent/RU2442792C2/ru active
- 2008-07-16 NZ NZ582471A patent/NZ582471A/en unknown
- 2008-07-16 KR KR1020080069234A patent/KR101231431B1/ko active IP Right Grant
- 2008-07-16 CN CN201510053063.8A patent/CN104672319B/zh active Active
- 2008-07-16 ES ES12185370.9T patent/ES2528346T3/es active Active
- 2008-07-16 AU AU2008276762A patent/AU2008276762A1/en not_active Abandoned
- 2008-07-16 CA CA2693154A patent/CA2693154C/en active Active
- 2008-07-16 TW TW101140650A patent/TWI532496B/zh active
- 2008-07-16 SG SG2012052114A patent/SG183033A1/en unknown
- 2008-07-16 BR BRPI0814097A patent/BRPI0814097A8/pt not_active Application Discontinuation
- 2008-07-16 SG SG10201510249PA patent/SG10201510249PA/en unknown
- 2008-07-16 TW TW101140652A patent/TWI524896B/zh active
- 2008-07-16 CA CA2789123A patent/CA2789123C/en active Active
- 2008-07-16 NZ NZ596828A patent/NZ596828A/en unknown
- 2008-07-16 DK DK11162132.2T patent/DK2390265T3/da active
- 2008-07-16 PT PT111621322T patent/PT2390265E/pt unknown
- 2008-07-16 CA CA2789112A patent/CA2789112C/en active Active
- 2008-07-16 NZ NZ594853A patent/NZ594853A/en unknown
- 2008-07-16 JP JP2010516925A patent/JP5481377B2/ja active Active
- 2008-07-16 CN CN200880024892A patent/CN101778863A/zh active Pending
- 2008-07-16 EP EP11162132.2A patent/EP2390265B1/en active Active
-
2010
- 2010-01-07 ZA ZA2010/00125A patent/ZA201000125B/en unknown
- 2010-01-13 IL IL203288A patent/IL203288A/en active IP Right Grant
-
2012
- 2012-09-03 JP JP2012193520A patent/JP6023515B2/ja active Active
- 2012-09-03 JP JP2012193521A patent/JP6023516B2/ja active Active
-
2013
- 2013-12-20 JP JP2013264258A patent/JP2014094948A/ja active Pending
-
2014
- 2014-04-25 PH PH12014500923A patent/PH12014500923A1/en unknown
- 2014-04-25 PH PH12014500922A patent/PH12014500922A1/en unknown
-
2015
- 2015-05-07 JP JP2015095145A patent/JP2015166368A/ja not_active Withdrawn
- 2015-05-07 JP JP2015095154A patent/JP2015172058A/ja not_active Withdrawn
- 2015-08-05 HK HK15107509.2A patent/HK1207088A1/xx unknown
Patent Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US7A (en) * | 1836-08-10 | Thomas blanchard | ||
| RU2005113291A (ru) * | 2002-10-02 | 2006-01-20 | Зилэнд Фарма А/С (Dk) | Стабилизированные соединения эксендина-4 |
| WO2006097538A1 (en) * | 2005-03-18 | 2006-09-21 | Novo Nordisk A/S | Extended glp-1 compounds |
| WO2007024700A2 (en) * | 2005-08-19 | 2007-03-01 | Amylin Pharmaceuticals, Inc. | Exendin for treating diabetes and reducing body weight |
Also Published As
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| RU2442792C2 (ru) | Производное инсулинотропного пептида, содержащее модифицированную n-концевую аминокислоту | |
| AU2018203300B2 (en) | Insulinotropic peptide derivative with modified N-terminal charge |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PC41 | Official registration of the transfer of exclusive right |
Effective date: 20121106 |