TWI438003B - 臨床無症狀之豬環狀病毒性疾病（ｐｃｖｄ）之預防及治療 - Google Patents

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Description

臨床無症狀之豬環狀病毒性疾病(PCVD)之預防及治療
本發明係關於使用包含豬第二型環狀病毒(PCV2)抗原之免疫原性組合物來預防及治療動物(較佳為豬)臨床無症狀(慢性)之PCV2感染。
本申請案含有書面格式及電腦可讀格式之序列表，其教示及內容以引用方式併入本文中。該序列表與併入WO 06/072065中者相同。
豬第二型環狀病毒(PCV2)係小的(直徑為17－22奈米)、二十面體的、含有單鏈環狀基因組之無包被DNA病毒。PCV2與豬第一型環狀病毒(PCV1)共享大約80%之序列一致性。然而，與通常係非病毒性之PCV1形成對比，豬之PCV2感染最近已與許多疾病症候群有關，該等疾病症候群共同稱為豬環狀病毒性疾病(PCVD)(亦稱為豬環狀病毒相關疾病(PCVAD))(Allan等人，2006，IPVS會議)。斷乳後多系統消耗性症候群(PMWS)通常視為PCVD之主要臨床表現(Harding等人，1997,Swine Health Prod；5：201－203；Kennedy等人，2000,J Comp Pathol；122：9－24)。文獻中報導之其他潛在相關病狀包括豬呼吸系統疾病綜合徵(PRDC)、豬皮膚病及腎病症候群(PDNS)、繁殖障礙、肉芽腫性腸炎及(潛在地)先天性震顫(CT－AII)及圍產期心肌炎(Chae,Veterinary J.,2005；169：326－336)。
PCVD侵襲在5－22週齡間的豬。PCVD之臨床特徵在於消瘦、皮膚蒼白、生長遲滯、呼吸窘迫、腹瀉、黃疸(icterus)、及黃疸病(jaundice)。在一些受侵襲之豬中，會明顯出現所有症狀之組合，而另一些受侵襲之豬僅會具有一種或兩種該等症狀(Muirhead,2002,Vet.Rec；150：456)。感染PCV2之豬之死亡率可能接近50%。在屍體剖檢中，顯微鏡可見及肉眼可見之損傷亦會出現在多個組織及器官中，其中淋巴器官係損傷之最普遍部位(Allan及Ellis，2000；J Vet.Diagn.Invest.,12:3－14)。已觀察到PCV2核酸或抗原的量與顯微鏡可見之淋巴損傷之嚴重性間之強烈相關性(Brunborg,2004)。此外，亦已發現血液中核酸或抗原的量與臨床症狀之嚴重性間之相關性(Brunborg,2004；Liu,2000；Olvera,2004)。已顯示患有PCVD之豬具有高於106 基因組當量數/毫升之病毒負荷。
與臨床上明顯疾病表現之PCV2感染相比，吾人認為臨床無症狀之PCV2感染存在於彼等感染PCV2但在臨床上無症狀之動物中。一般而言，該等PCV2感染形式間存在相關性，因為臨床無症狀之感染可容易地轉變成PCVD，且因為恢復期之動物可能繼續持久地(慢性地)受感染(參見圖1)。
最近之觀察已證實臨床無症狀之PCV2感染係頻繁事件。已藉由實驗及田間研究二者證實存在臨床無症狀之感染。在實驗室研究中，可顯示個體豬之PCV2感染並非總伴隨臨床徵兆或損傷(Harms等人，2001,Vet.Pathol., 38：528－539)。另外，數項田間研究顯示感染PCV2、血清陽性畜群之發生率高於受PCVD侵襲之畜群之發生率(Olvera等人，2004,J.Virol.Methods,117：75－80)。通常，經歷PCVD急性發作之畜群仍然感染PCV2而不顯示任何明顯臨床徵兆。根據文獻，畜群內之該臨床無症狀(持久的)感染形式亦稱為"慢性"感染(Burch D.,2006,Pig International)。
吾人未知在受感染但臨床無症狀之畜群中PCV2之經濟影響(若存在)且迄今為止從未闡述過。具體而言，吾人仍未知PCV2感染之臨床無症狀情形是否對動物之生長性能、或概言之對受侵襲動物之總體健康狀況具有影響且以往未給出指示。
基於DNA疫苗治療PCV2感染之方法闡述於美國專利第6,703,023號中。在WO 03/049703中闡述包含PCV1骨架之活嵌合疫苗之生產，在該PCV1骨架中病原性PCV2菌株之免疫原性基因代替PCV1骨架之基因。WO 99/18214提供數種PCV2菌株及製備死PVC2疫苗之程序。然而，未報導功效數據。在WO 06/072065中報導有效之基於ORF－2之亞單位疫苗。任何該等疫苗皆擬用於大於3週齡之豬(swine或pig)之接種疫苗/治療。任何該等疫苗皆未闡述用於預防(prophylaxis)或治療感染PCV2但臨床無症狀之動物。而且，未闡述該等疫苗賦予受感染但臨床無症狀之動物群組抵抗PCV2感染之免疫性及改良其生長性能。
臨床明顯之PCV2感染會伴隨不同之疾病症候群。端視PCV2相關疾病之表現形式，急性PCV2感染之臨床徵兆可能為一種或多種以下所見：a)死亡率顯著升高(高4－20%)，b)侏儒頻率顯著增加(多5－50%)及c)其他臨床明顯徵兆，例如呼吸系統症狀、腹瀉、皮膚蒼白、黃疸、生長遲滯(發病率4－60%)。另外，大於106 或107 /毫升血清或組織之高病毒效價係大多數具有PCVD急性徵兆之動物之特有所見。除該急性PCV2感染外，特徵在於無或低發病率之臨床無症狀之PCV2感染變得越來越顯著。在一些情形下，急性PCV2感染狀況可能轉變成臨床無症狀之PCV2感染。然而，臨床無症狀之感染亦可無任何急性PCV2感染先前徵兆而發生。
已令人驚奇地發現，臨床無症狀之PCV2感染對表面上健康之豬的性能參數(尤其豬之生長性能)具有重要影響。即使受感染但臨床無症狀之動物未出現使得能夠確定PCVD之典型臨床症狀或確實僅顯示較低之發病率，彼等動物亦嚴重受臨床無症狀之PCV2感染影響。豬之臨床無症狀之PCV2感染導致重量增加之嚴重損失(例如參見實例3)。如先前所述，在先前技術中迄今為止未給出臨床無症狀之PCV2感染對豬之健康(尤其對豬之生長性能)具有任何影響之證據。
而且，亦已令人驚奇地發現，由臨床無症狀之PCV2感染所引起之重量增加之減小可藉由對受感染但臨床無症狀之動物用PCV2抗原實施治療/接種疫苗而降低(例如參見實 例3)。因此，不僅發現臨床無症狀之PCV2感染影響豬之生長性能，且亦有證據表明該負面影響可藉由用PCV2抗原來治療/接種疫苗而顯著降低。換言之，即使臨床無症狀感染之現象在先前技術中已有闡述，但現在第一次有證據表明：－偶爾在田間觀察到之臨床無症狀之PCV2感染對豬之生長性能具有重要影響；－用PCV2抗原對受感染但臨床無症狀之豬或畜群接種疫苗可顯著降低該臨床無症狀之PCV2感染之負面影響。
因此，根據一個態樣，本發明提供預防及治療動物或動物群組臨床無症狀之PCV2感染之方法，其包含向需要投與之動物投與治療有效量之PCV2抗原或包含PCV2抗原之免疫原性組合物的步驟。
本文所用"臨床無症狀之PCV2感染"之特徵在於：i)整個生命期間保留於個體動物中之病毒負荷低於106 個PCV2基因組拷貝/毫升血清，ii)在群組或畜群內較低比例之PCV2陽性動物具有大於106 個基因組拷貝/毫升血清之病毒效價，iii)病毒在群組或畜群中存留至少6週，較佳至少8週，更佳至少10週，最佳至少12週，iv)在PCV2陽性動物中無典型臨床症狀，v)PCV2陽性動物動物群組或畜群內無或僅較低之發病率及/或vi)PCV2陽性動物群組或畜群內死亡率較低。
上文標準ii)中所用之術語"較低比例之PCV2陽性動物"意指在動物群組或畜群內小於20%，較佳小於15%，甚至較 佳小於10%，甚至較佳小於8%，甚至較佳小於6%，甚至較佳小於4%，最佳小於3%之PCV－2陽性動物具有大於106 個基因組拷貝/毫升血清之病毒效價。換言之，術語"在群組或畜群內較低比例之PCV2陽性動物具有大於106 個基因組拷貝/毫升血清之病毒效價"亦意指動物群組或畜群之大於80%，較佳大於85%，甚至較佳大於90%，甚至較佳大於92%，甚至較佳大於94%，甚至較佳大於96%，最佳大於97%之PCV2陽性動物具有小於106 個PCV2基因組拷貝/毫升血清之病毒效價。
本文所用術語"PCV2陽性"意指但不限於樣品(1毫升血清或1毫克組織)中包含可檢測量之PCV2基因組當量數(＝病毒拷貝)之動物。可檢測量之PCV2基因組當量數意指PCV2基因組當量數可藉由聚合酶鏈反應(PCR)分析來檢測。若在該分析中兩個單獨樣品產生陽性PCR結果，則樣品被視為PCR陽性。
經由PCR分析來量化PCV2之方法已為業內所熟知。實際上，PCV2基因組當量數之量化一直藉由闡述於Brunborg等人，2004；J.Virol Methods 122：171－178中之方法實施。對於PCV2擴增，一直使用引物PCV2－84－1265U21及PCV2－84－1319L21。該方法將在有疑問之任何情形下起參考分析之作用。
本文所用術語"病毒存留"意指在該時間段受感染動物具有至少104 個PCV2病毒拷貝/毫升血清之病毒負荷，即如上文所定義之至少6週或更長時間。
本文所用術語"在PCV2陽性動物中無典型臨床症狀"意指無通常伴隨臨床明顯之PCV2感染之任何明顯臨床症狀，其使得僅藉由PCV2感染之典型臨床表現即可準確且無疑地確定PCV2感染。該等臨床症狀係彼等稱為PCVD者，尤其為皮膚蒼白、生長遲滯、呼吸窘迫、腹瀉、黃疸、或黃疸病。
本文所用術語"低發病率"係無臨床徵兆之指標，此使得可藉由急性PCV2感染之臨床表現來確定急性PCV2感染。因此低發病率係存在臨床無症狀之PCV2感染之指標。本文所用術語"低發病率"係指具有改變之總體健康狀況之動物之百分比。本文所用改變之總體健康狀況定義為出現一種或多種PCVD相關臨床徵兆，例如出現侏儒(本文定義為動物體重比相同齡期之其動物群組之平均重量小25%)、皮膚蒼白、生長遲滯、呼吸窘迫、腹瀉、黃疸、或黃疸病。因此，本文所用"低發病率"意指動物群組或畜群之小於25%、較佳小於20%、更佳小於15%、甚至較佳小於12%、甚至較佳小於10%、甚至較佳小於8%、甚至較佳小於6%、最佳小於4%之動物確實顯示一種或多種PCVD臨床症狀，較佳確實顯示出現如上文所定義之侏儒、皮膚蒼白、生長遲滯、呼吸窘迫、腹瀉、黃疸、或黃疸病。
本文所用術語"無發病率"意指動物群組或畜群之小於1%之PCV2陽性動物確實顯示一種或多種PCVD臨床症狀，較佳確實顯示出現如上文所定義之侏儒、皮膚蒼白、生長遲滯、呼吸窘迫、腹瀉、黃疸、或黃疸病。
本文所用術語"低死亡率"意指但不限於在動物群組或畜群內PCV2陽性動物之死亡率小於20%，較佳小於15%，更佳小於12%，甚至更佳小於10%，甚至更佳小於8%，甚至更佳小於6%，最佳小於4%。
本文所用術語"需要該投與"或"需要該投與治療"意指該投與/治療可對接受PCV2抗原之動物實施保健預防或產生對該等動物健康有益之任何其他醫學效果。
根據較佳實施例，當上文提及之至少標準i)"整個生命期間保留於個體動物中之病毒負荷低於106 個PCV2基因組拷貝/毫升血清"，標準ii)"在群組或畜群內較低比例之PCV2陽性動物具有大於106 個基因組拷貝/毫升血清之病毒效價"，或標準iii)"病毒在群組或畜群中存留至少6週，較佳至少8週，更佳至少10週，最佳至少12週"適用時，則可確定為PCV2感染之臨床無症狀情形。最佳地，當上文提及之標準i)及ii)適用時，則可確定為PCV2感染之臨床無症狀情形。
在將標準i)及/或標準ii)與標準iii)"病毒在群組或畜群中存留至少6週，較佳至少8週，更佳至少10週，最佳至少12週"組合之情形下，或在任何其他包含如上文所定義之標準iii)之情形下，該臨床無症狀感染視為"慢性臨床無症狀PCV2"感染。
根據又一態樣，本發明提供預防及治療臨床無症狀之PCV2感染之方法，其中該臨床無症狀之PCV2感染之特徵在於個體動物中之病毒負荷低於106 個PCV2基因組拷貝/毫 升血清，該方法包含向需要投與之動物投與治療有效量之PCV2抗原或包含PCV2抗原之免疫原性組合物的步驟。較佳地，該臨床無症狀之PCV2感染之又一特徵在於動物群組或畜群內存在小於20%之動物具有大於106 (較佳為大於107 )個PCV2病毒拷貝/毫升血清及/或病毒在該群組或畜群中存留至少6週，較佳至少8週，更佳至少10週，最佳至少12週。更佳地，該臨床無症狀感染之又一特徵在於如上文所定義之在個體PCV2陽性動物中無任何臨床徵兆、如上文所定義之無或低發病率及/或如上文所定義之低死亡率。
根據又一態樣，本發明提供預防及治療臨床無症狀之PCV2感染之方法，其中該臨床無症狀之PCV2感染之特徵在於在無任何PCV2抗原投與情況下整個生命期間會保留於個體動物中之病毒負荷低於106 個PCV2基因組拷貝/毫升血清，該方法包含向需要投與之動物投與治療有效量之PCV2抗原或包含PCV2抗原之免疫原性組合物的步驟。較佳地，該臨床無症狀之PCV2感染之又一特徵在於動物群組或畜群內存在小於20%之動物具有大於106 (較佳為大於107 )個PCV2病毒拷貝/毫升血清及/或病毒在該群組或畜群中存留至少6週，較佳至少8週，更佳至少10週，最佳至少12週。更佳地，該臨床無症狀感染之又一特徵在於如上文所定義之在個體PCV2陽性動物中無任何臨床徵兆、如上文所定義之無或低發病率及/或如上文所定義之低死亡率。
根據又一態樣，本發明提供預防及治療臨床無症狀之PCV2感染之方法，其中該臨床無症狀之PCV2感染之特徵在於動物群組或畜群內存在小於20%之動物具有大於106 (較佳為大於107 )個PCV2病毒拷貝/毫升血清，該方法包含向需要投與之動物投與治療有效量之PCV2抗原或包含PCV2抗原之免疫原性組合物的步驟。較佳地，該臨床無症狀之PCV2感染之又一特徵在於病毒在該群組或畜群中存留至少6週，較佳至少8週，更佳至少10週，最佳至少12週。更佳地，該臨床無症狀感染之又一特徵在於如上文所定義之在個體PCV2陽性動物中無任何臨床徵兆、如上文所定義之無或低發病率及/或如上文所定義之低死亡率。
根據又一態樣，本發明提供預防及治療臨床無症狀之PCV2感染之方法，其中該臨床無症狀之PCV2感染之特徵在於病毒在PCV2陽性動物群組或畜群中存留至少6週，較佳至少8週，更佳至少10週，最佳至少12週。較佳地，該臨床無症狀之PCV2感染之又一特徵在於如上文所定義之在個體PCV2陽性動物中無任何臨床徵兆、如上文所定義之無或低發病率及/或如上文所定義之低死亡率。
根據又一態樣，本發明亦提供預防及治療臨床無症狀之PCV2感染之方法，其中該臨床無症狀之PCV2感染之特徵在於如上文所定義之在個體PCV2陽性動物中無任何臨床徵兆，該方法包含向需要投與之動物投與治療有效量之PCV2抗原或包含PCV2抗原之免疫原性組合物的步驟。較佳地，該臨床無症狀之PCV2感染之又一特徵在於如上文 所定義之無或低發病率及/或如上文所定義之低死亡率。更佳地，該臨床無症狀之PCV2感染之又一特徵在於整個生命期間保留於個體動物中之病毒負荷低於106 個PCV2基因組拷貝/毫升血清及/或在群組或畜群內較低比例之PCV2陽性動物具有大於106 個基因組拷貝/毫升血清之病毒效價。
根據又一態樣，本發明亦提供預防及治療臨床無症狀之PCV2感染之方法，其中該臨床無症狀之PCV2感染之特徵在於在動物群組或畜群內無或低發病率(較佳如上文所定義之小於25%或更低)，該方法包含向需要投與之動物投與治療有效量之PCV2抗原或包含PCV2抗原之免疫原性組合物的步驟。較佳地，該臨床無症狀之PCV2感染之又一特徵在於整個生命期間保留於個體動物中之病毒負荷低於106 個PCV2基因組拷貝/毫升血清及/或在群組或畜群內較低比例之PCV2陽性動物具有大於106 個基因組拷貝/毫升血清之病毒效價。
根據又一態樣，本發明亦提供預防及治療臨床無症狀之PCV2感染之方法，其中該臨床無症狀之PCV2感染之特徵在於如上文所定義之低死亡率(較佳為小於20%或更低)，該方法包含向需要投與之動物投與治療有效量之PCV2抗原或包含PCV2抗原之免疫原性組合物的步驟。較佳地，該臨床無症狀之PCV2感染之又一特徵在於整個生命期間保留於個體動物中之病毒負荷低於106 個PCV2基因組拷貝/毫升血清及/或在群組或畜群內較低比例之PCV2陽性動物 具有大於106 個基因組拷貝/毫升血清之病毒效價。
向感染PCV2但臨床無症狀之動物或動物群組投與有效量之PCV2抗原可提高彼等動物之重量增加、育肥、減少病毒負荷為104 至106 個基因組拷貝/毫升血清之動物的數量、減少病毒鼻排毒及/或縮短病毒血症持續時間。
因此根據又一態樣，本發明亦提供降低感染PCV2但臨床無症狀之動物之重量增加損失的方法，其包含向需要投與之動物投與治療有效量之PCV2抗原或包含PCV2抗原之免疫原性組合物的步驟。較佳地，與未接種疫苗之動物相比平均重量增加在10至22週齡內增大多於1.5 kg。本文所用術語"育肥期間"意指但不限於彼等動物之1至36週齡，較佳10至28週齡。
本文所用術語"在感染PCV2但臨床無症狀之動物中"意指變得感染PCV2但臨床無症狀之個體動物，且亦係指群組中大多數動物變得感染PCV2但臨床無症狀之動物群組。因此，術語"在感染PCV2但臨床無症狀之動物中"應理解為i)"在感染PCV2但臨床無症狀之動物中"及ii)"在畜群動物中，其中該畜群感染PCV2但臨床無症狀"。
根據又一態樣，本發明亦提供減少病毒負荷為104 至106 個基因組拷貝/毫升血清之感染PCV2動物的數量的方法，其包含向需要投與之動物投與治療有效量之PCV2抗原或包含PCV2抗原之免疫原性組合物的步驟。較佳地，具有104 至106 個基因組拷貝/毫升血清之動物的數量可由於用PCV2抗原接種疫苗減少至小於30%，較佳小於20%，甚至 更佳至小於10%，最佳至小於5%，然而在受感染但臨床無症狀之動物(病毒負荷包含104 至106 個基因組拷貝/毫升血清)之未接種疫苗對照組中大於40%具有104 至106 個基因組拷貝/毫升血清之PCV2效價。
根據又一態樣，本發明亦提供在感染PCV2但臨床無症狀之動物群組(畜群)中減少具有臨床相關病毒負荷(大於106 個基因組拷貝/毫升血清)之動物的數量的方法，其包含向需要投與之動物投與治療有效量之PCV2抗原或包含PCV2抗原之免疫原性組合物的步驟。較佳地，具有大於106 個基因組拷貝/毫升血清之病毒負荷之動物的數量可由於用PCV2抗原接種疫苗減少至小於10%，較佳小於5%，甚至更佳至小於4%，甚至更佳至小於3%，甚至更佳至小於2%，最佳至小於0.5%。
根據又一態樣，本發明亦提供在感染PCV2但臨床無症狀之動物中減少鼻病毒排毒、縮短病毒血症持續時間之方法，其包含向需要投與之動物投與治療有效量之PCV2抗原或包含PCV2抗原之免疫原性組合物的步驟。如上所述，與未接種疫苗之對照動物相比，對感染PCV2但臨床無症狀之動物實施接種疫苗/治療達成病毒血症期縮短。與未接種疫苗之相同物種之對照動物相比，病毒血症持續時間之平均縮短時間為17天。因此，根據又一態樣，本發明亦提供縮短感染PCV2但臨床無症狀之動物病毒血症持續時間之方法，其包含向需要投與之動物投與治療有效量之PCV2抗原或包含PCV2抗原之免疫原性組合物的步驟， 其中與未經治療之相同物種之對照組動物相比該治療或預防達成5天或更多天之病毒血症期縮短，較佳6天或更多天，甚至更佳7天或更多天，甚至更佳8天或更多天，甚至更佳9天，甚至更佳10天，甚至更佳12天，甚至更佳14天，最佳多於16天。
本文所用術語"抗原"係指在宿主中引發免疫反應之胺基酸序列。本文所用抗原包括任何PCV2蛋白質之全長序列、其類似物或其免疫原性片段。術語"免疫原性片段"係指包括一或多個抗原決定部位且因此可在宿主中引發免疫反應之蛋白質片段。可使用任何數量之業內熟知之抗原決定部位定位技術來鑑別該等片段。參見(例如)Epitope Mapping Protocols in Methods in Molecular Biology，第66卷(Glenn E.Morris編輯，1996)Humana Press,Totowa,New Jersey。舉例而言，可藉由下述方法來確定線性抗原決定部位：例如在固態支撐體上同時合成大量肽，該等肽對應於蛋白質分子之部分，並在該等肽仍附著於支撐體上時使該等肽與抗體反應。該等技術為業內所習知且闡述於(例如)美國專利第4,708,871號；Geysen等人(1984)Proc.Natl.Acad.Sci.USA 81：3998－4002；Geysen等人(1986)Molec.Immunol.23：709－715中。類似地，構象性抗原決定部位可藉由用(例如)x射線結晶照相術及二維核磁共振確定胺基酸空間構象容易地加以鑑別。參見(例如)上文Epitope Mapping Protocols。
定義中亦可包括合成抗原，例如多抗原決定部位、側翼 抗原決定部位及其他重組或合成來源抗原。參見(例如)Bergmann等人(1993)Eur.J.Immunol.23：2777－2781；Bergmann等人(1996),J.Immunol.157：3242－3249；Suhrbier,A.(1997),Immunol.and Cell Biol.75：402－408；Gardner等人，(1998)第12屆世界AIDS會議(World AIDS Conference)，Geneva,Switzerland,1998年6月28日－7月3日。
"免疫反應"意指(但不限於)在宿主中出現對於目標抗原、免疫原性組合物或疫苗之細胞及/或抗體介導之免疫反應。通常，"免疫反應"包括(但不限於)一或多種下述效應：產生或激活特別針對目標組合物或疫苗中所包括之抗原之抗體、B細胞、輔助性T細胞、抑制性T細胞及/或細胞毒素T細胞。較佳地，宿主會表現治療性或保護性免疫(記憶)反應以增強對新感染之抵抗及/或降低疾病之臨床嚴重性。該保護可藉由PCV2感染有關之症狀之數量減少或嚴重性減輕、或缺失一或多種該等症狀、病毒血症發作延遲、病毒存留時間縮短、總病毒負荷減少及/或病毒排泄減少來證明。
本文所用術語"免疫原性組合物"或"疫苗"(兩個術語同義使用)係指含有PCV2抗原之任何醫藥組合物，此組合物可用於預防或治療個體中PCV2感染有關之疾病或病狀。較佳之免疫原性組合物能夠誘發、刺激或增強抵抗PCV2之免疫反應。因此，該術語涵蓋如下文所述之亞單位免疫原性組合物，以及含有完全殺死或減毒及/或不活化PCV2之組合物二者。
因此，根據另一態樣，本發明提供預防及治療臨床無症狀之PCV2感染之方法、增大感染PCV2但臨床無症狀之動物或動物群組(畜群)平均重量增加之方法、減少病毒負荷為104 至106 個基因組拷貝/毫升血清之動物的數量的方法、減少受感染但臨床無症狀之畜群內具有大於106 基因組/毫升血清之病毒負荷之動物的數量的方法、減少鼻病毒排毒之方法、縮短感染PCV2但臨床無症狀之動物病毒血症持續時間之方法、降低受感染但臨床無症狀之畜群內發病率之方法、降低受感染但臨床無症狀之畜群內死亡率之方法，該等方法皆包含向需要該治療之動物投與治療有效量之PCV2抗原或包含PCV2抗原之免疫原性組合物的步驟，其中該免疫原性組合物係亞單位免疫原性組合物、含有完全殺死或減毒及/或不活化PCV2之組合物。
本文所用術語"亞單位免疫原性組合物"係指含有源自PCV2或與PCV2抗原同源之至少一種免疫原性多肽或抗原(但並非所有抗原)之組合物。此組合物基本上無完整之PCV2。因此，"亞單位免疫原性組合物"係自至少部分純化或分級分離(較佳為基本上純化)之PCV2免疫原性多肽或其重組類似物製備。亞單位免疫原性組合物可包含基本上不含來自PCV2之其他抗原或多肽、或呈經分級分離形式之(若干)亞單位目標抗原。較佳之免疫原性亞單位組合物包含如下文所述之PCV2 ORF－2蛋白質。最佳者係包含在WO 06/072065中提供之任何PCV2抗原之免疫原性亞單位組合物，其全文皆以引用方式併入本文中。
根據又一態樣，本文所用免疫原性組合物最佳包含藉由PCV2之ORF－2表現之多肽或其片段。本文所用於製備該等組合物且在本文所提供之方法範圍內之PCV2 ORF－2 DNA及蛋白質係PCV2分離物中之高保守結構域且因此，任何PCV2 ORF－2作為本文所用之PCV2 ORF－2 DNA及/或多肽之來源會係有效的。較佳之PCV2 ORF－2蛋白質係WO 06/072065之SEQ ID NO：11之PCV2 ORF－2蛋白質。另一較佳之PCV ORF－2多肽係以WO 06/072065之SEQ ID NO：5提供。然而，彼等熟習此項技術者應瞭解，該序列之序列同源性可改變至多6－10%且仍保持使其可用於免疫原性組合物之抗原性特徵。免疫組合物之抗原性特徵可(例如)藉由如WO 06/072065之實例4所提供之攻擊實驗評估。而且，當經改性抗原與PCV2 ORF－2蛋白質相比賦予至少70%(較佳80%，更佳90%)保護性免疫性時，仍保留經改性抗原之抗原性特徵，該PCV2 ORF－2蛋白質由WO 06/072065所提供之SEQ ID NO：3或SEQ ID NO：4多核苷酸序列編碼。
因此，根據另一態樣，本發明提供預防及治療臨床無症狀之PCV2感染之方法、增大感染PCV2但臨床無症狀之動物或動物群組(畜群)平均重量增加之方法、減少病毒負荷為104 至106 個基因組拷貝/毫升血清之動物的數量的方法、減少受感染但臨床無症狀之畜群內具有大於106 基因組/毫升血清之病毒負荷之動物的數量的方法、減少鼻病毒排毒之方法、縮短感染PCV2但臨床無症狀之動物病毒血症持續時間之方法、降低受感染但臨床無症狀之畜群內發病率 之方法、降低受感染但臨床無症狀之畜群內死亡率之方法，該等方法皆包含向需要投與之動物投與治療有效量之PCV2抗原或包含PCV2抗原之免疫原性組合物的步驟，其中該PCV2抗原係與由WO 06/072065所提供之SEQ ID NO：3或SEQ ID NO：4多核苷酸序列編碼之PCV2 ORF－2蛋白質相比具有至少70%(較佳80%，甚至更佳90%)保護性免疫性之抗原PCV2 ORF－2蛋白質。較佳地，該PCV2 ORF－2具有WO 06/072065之SEQ ID NO：11或SEQ ID NO：5之序列。
在某些形式中，PCV2 ORF－2蛋白質之免疫原性部分用作包含PCV2抗原之免疫原性組合物中之抗原性組份。本文所用術語"免疫原性部分"分別係指PCV2 ORF－2蛋白質及/或多核苷酸之經截短及/或經取代形式或片段。較佳地，該等經截短及/或經取代形式或片段會包含至少6個全長ORF－2多肽之鄰近胺基酸。更佳地，該等經截短或經取代形式或片段會具有至少5個(較佳8個、更佳10個、更佳至少15個、且仍更佳至少19個)全長PCV ORF－2多肽之鄰近胺基酸。在此態樣中之兩個較佳序列係以WO 06/072065之SEQ ID NO：9及SEQ ID NO：10提供。應進一步瞭解，該等序列可係較大片段或經截短形式之一部分。
如上所述，另一較佳之PCV2 ORF－2多肽係由SEQ ID NO：3或SEQ ID NO：4核苷酸序列編碼之任何PCV2 ORF－2多肽。然而，彼等熟習此項技術者應瞭解，該序列之序列同源性可改變至多6－20%且仍保持使其可用於免疫原性組合物之抗原性特徵。在某些形式中，該PVC2 ORF－2多肽 之經截短或經取代形式或片段用作該組合物中之抗原性組份。較佳地，該等經截短或經取代形式或片段會包含至少18個(例如)SEQ ID NO：3或SEQ ID NO：4之全長PCV2 ORF－2核苷酸序列之鄰近核苷酸。更佳地，該等經截短或經取代形式或片段會具有至少30個(更佳至少45個、且仍更佳至少57個)(例如)SEQ ID NO：3或SEQ ID NO：4之全長PCV2 ORF－2核苷酸序列之鄰近核苷酸。
如業內已知，"序列一致性"係指兩個或更多個多肽序列或兩個或更多個多核苷酸序列間之關係，即參考序列與相比於該參考序列之指定序列間的關係。序列一致性係對指定序列與參考序列實施能產生最高程度序列相似性(藉由該等序列串間之匹配確定)之最佳比對後藉由比較該等序列來確定。對於該比對，序列一致性係基於位置對位置原理確定，例如若在特定位置上核苷酸或胺基酸殘基係一致的，則序列在該位置係"一致"的。隨後用該等位置一致性之總數量除以參考序列中核苷酸或殘基之總數量得到%序列一致性。序列一致性可容易地藉由已知方法計算，該等已知方法包括但不限於彼等闡述於以下中者：Computational Molecular Biology,Lesk,A.N.編輯，Oxford University Press,New York(1988)；Biocomputing：Informatics and Genome Projects,Smith,D.W.編輯，Academic Press,New York(1993)；Computer Analysis of Sequence Data,Part I,Griffin,A.M.及Griffin,H.G.編輯，Humana Press,New Jersey(1994)；Sequence Analysis in Molecular Biology, von Heinge,G.,Academic Press(1987)；Sequence Analysis Primer,Gribskov,M.及Devereux,J.,編輯，M.Stockton Press,New York(1991)；及Carillo,H.及Lipman,D.,SIAM J.Applied Math.,48：1073(1988)，其教示以引用方式併入本文中。確定序列一致性之較佳方法經設計可給出所測試序列間之最大匹配。將確定序列一致性之方法編入可公開獲得之確定指定序列間序列一致性之電腦程序中。該等程序之實例包括(但不限於)GCG程序包(Devereux,J.等人，Nucleic Acids Research,12(1)：387(1984))、BLASTP、BLASTN及FASTA(Altschul,S.F.等人，J.Molec.Biol.,215：403－410(1990))。該BLASTX程序可自NCBI及其他來源公開獲得(BLAST Manual,Altschul,S.等人，NCVI NLM NIH Bethesda,MD 20894,Altschul,S.F.等人，J.Molec.Biol.,215：403－410(1990)，其教示以引用方式併入本文中)。該等程序利用缺省空位權重最佳地比對序列以在指定序列與參考序列間產生最高程度之序列一致性。作為例示，就具有相對參考核苷酸序列具有至少(例如)85%、較佳90%、甚至更佳95%"序列一致性"之核苷酸序列之多核苷酸而言，意味著除指定多核苷酸序列可能包括至多15個、較佳至多10個、甚至更佳至多5個點突變/參考核苷酸序列之每100個核苷酸外，該指定多核苷酸之核苷酸序列與參考序列一致。換言之，在具有相對於參考核苷酸序列具有至少85%、較佳90%、甚至更佳95%一致性之核苷酸序列之多核苷酸中，參考序列中至多15%、較佳10%、甚 至更佳5%之核苷酸可能經刪除或經另一核苷酸取代，或參考序列中總核苷酸之至多15%、較佳10%、甚至更佳5%數量之核苷酸可能插入參考序列中。參考序列之該等突變可發生在參考核苷酸序列之5'或3'末端位置或彼等末端位置間之任何地方，其各散佈於參考序列中之核苷酸中或散佈於參考序列內之一或多個鄰近基團中。類似地，就具有相對參考胺基酸序列具有至少(例如)85%、較佳90%、甚至更佳95%序列一致性之指定胺基酸序列之多肽而言，意味著除指定多肽序列可能包含至多15個、較佳至多10個、甚至更佳至多5個胺基酸改變/參考胺基酸序列之每100個胺基酸外，多肽之指定胺基酸序列與參考序列一致。換言之，為獲得與參考胺基酸序列具有至少85%、較佳90%、甚至更佳95%序列一致性之指定多肽序列，參考序列中至多15%、較佳至多10%、甚至更佳至多5%之胺基酸殘基可能經刪除或經另一胺基酸取代，或參考序列中胺基酸殘基總數量之至多15%、較佳至多10%、甚至更佳至多5%數量之胺基酸可能插入參考序列中。參考序列之該等改變可能發生在參考胺基酸序列之胺基或羧基末端位置或彼等末端位置間之任何地方，其各散佈於參考序列中之殘基中或散佈於參考序列內之一或多個鄰近基團中。較佳地，不一致之殘基位置係因保守的胺基酸取代而不同。然而，在確定序列一致性時保守取代並不作為匹配包括在內。
本文所用"序列同源性"係指確定兩個序列相關性之方法。為確定序列同源性，將兩個或更多個序列進行最佳比 對，且若需要引入空位。然而，與"序列一致性"相比，在確定序列同源性時保守胺基酸取代作為匹配計數。換言之，為獲得與參考序列具有95%序列同源性之多肽或多核苷酸，參考序列中85%、較佳90%、甚至更佳95%之胺基酸殘基或核苷酸必須匹配或包含經另一胺基酸或核苷酸之保守取代，或參考序列中總胺基酸殘基或核苷酸(不包括保守取代)之至多15%、較佳至多10%、甚至更佳至多5%數量之胺基酸或核苷酸可能插入參考序列中。較佳地，同源序列包含至少50個、甚至更佳至少100個、甚至更佳至少250個，且甚至更佳至少500個核苷酸之片段。
"保守取代"係指胺基酸殘基或核苷酸經另一具有相似特徵或特性(包括尺寸、疏水性等)之胺基酸殘基或核苷酸取代，以使整體功能未顯著改變。
"經分離的"意指"人工"使其自其天然狀態改變，即，若其天然存在，將其自其起始環境改變或移出，或二者。例如，天然存在於活生物體內之多核苷酸或多肽不是"經分離的"，但是自其天然狀態之共存物質分離出之相同的多核苷酸或多肽係"經分離的"，如本文所使用術語。
因此，根據另一態樣，本發明提供預防及治療臨床無症狀之PCV2感染之方法、增大感染PCV2但臨床無症狀之動物或動物群組(畜群)平均重量增加之方法、減少病毒負荷為104 至106 個基因組拷貝/毫升血清之動物的數量的方法、減少受感染但臨床無症狀之畜群內具有大於106 基因組/毫升血清之病毒負荷之動物的數量的方法、減少鼻病毒排毒 之方法、縮短感染PCV2但臨床無症狀之動物病毒血症持續時間之方法、降低受感染但臨床無症狀之畜群內發病率之方法、降低受感染但臨床無症狀之畜群內死亡率之方法，該等方法皆包含向需要投與之動物投與治療有效量之PCV2 ORF－2蛋白質的步驟，其中該PCV2 ORF－2蛋白質係上述彼等之任一者。較佳地，該PCV2 ORF－2蛋白質係i)包含WO 06/072065之SEQ ID NO：5、SEQ ID NO：6、SEQ ID NO：9、SEQ ID NO：10或SEQ ID NO：11序列之多肽；ii)與i)之多肽具有至少80%同源性之任何多肽；iii)i)及/或ii)之多肽之任何免疫原性部分；iv)iii)之免疫原性部分，其包含至少5個、較佳8個、更佳、甚至更佳10個包括於WO 06/072065之SEQ ID NO：5、SEQ ID NO：6、SEQ ID NO：9、SEQ ID NO：10或SEQ ID NO：11序列中之鄰近胺基酸；v)藉由包含WO 06/072065之SEQ ID NO：3或SEQ ID NO：4序列之DNA編碼之多肽；vi)藉由與v)之多核苷酸具有至少80%同源性之多核苷酸編碼之任何多肽；vii)藉由v)及/或vi)之多核苷酸編碼之多肽之任何免疫原性部分；viii)vii)之免疫原性部分，其中編碼該免疫原性部分之多核苷酸包含至少30個包括於WO 06/072065之SEQ ID NO：3或SEQ ID NO：4序列中之鄰近核苷酸。
較佳地，任何彼等免疫原性部分具有藉由WO 06/072065之SEQ ID NO：3或SEQ ID NO：4序列編碼之PCV2 ORF－2蛋白質之免疫原性特徵。
根據又一態樣，PCV2 ORF－2蛋白質係以可有效治療感染PCV2但臨床無症狀之動物之抗原包括濃度提供於免疫原性組合物中。較佳地，該PCV2 ORF－2蛋白質包括濃度係至少0.2微克抗原/毫升最終免疫原性組合物(微克/毫升)，更佳為約0.2至約400微克/毫升，仍更佳為約0.3至約200微克/毫升，甚至更佳為約0.35至約100微克/毫升，仍更佳為約0.4至約50微克/毫升，仍更佳為約0.45至約30微克/毫升，仍更佳為約0.6至約15微克/毫升，甚至更佳為約0.75至約8微克/毫升，甚至更佳為約1.0至約6微克/毫升，仍更佳為約1.3至約3.0微克/毫升，甚至更佳為約1.4至約2.5微克/毫升，甚至更佳為約1.5至約2.0微克/毫升，且最佳為約1.6微克/毫升。
根據又一態樣，該PCV ORF－2抗原包括濃度係至少0.2微克如上所述之PCV2 ORF－2蛋白質/劑量最終抗原性組合物(微克/劑量)，更佳為約0.2至約400微克/劑量，仍更佳為約0.3至約200微克/劑量，甚至更佳為約0.35至約100微克/劑量，仍更佳為約0.4至約50微克/劑量，仍更佳為約0.45至的30微克/劑量，仍更佳為約0.6至約15微克/劑量，甚至更佳為約0.75至約8微克/劑量，甚至更佳為約1.0至約6微克/劑量，仍更佳為約1.3至約3.0微克/劑量，甚至更佳為約1.4至約2.5微克/劑量，甚至更佳為約1.5至約2.0微克/劑量， 且最佳為約1.6微克/劑量。
用於本發明免疫原性組合物之PCV2 ORF－2多肽可以包括PCV2 ORF－2之分離及純化、標準蛋白質合成及重組方法之任何方式獲得。用於獲得PCV2 ORF－2多肽之較佳方法在WO 06/072065中提供，其教示及內容之全文以引用方式併入本文中。簡言之，將易受感染細胞經含有PCV2 ORF－2 DNA編碼序列之重組病毒載體感染，PCV2 ORF－2多肽藉由重組病毒表現，且該經表現之PCV2 ORF－2多肽藉由過濾自上清液回收並藉由任何習用方法(較佳使用二元氮丙啶，其隨後經中和以終止不活化過程)不活化。
本文所用免疫原性組合物亦係指包含以下之組合物：i)任何上述PCV2 ORF－2蛋白質，較佳以上述濃度；及ii)至少一部分表現該PCV2 ORF－2蛋白質之病毒載體(較佳為重組杆狀病毒)。而且，該免疫原性組合物可包含i)任何上述PCV2 ORF－2蛋白質，較佳以上述濃度；及ii)至少一部分表現該PCV2 ORF－2蛋白質之病毒載體(較佳為重組杆狀病毒)；及iii)一部分細胞培養物上清液。
因此，根據另一態樣，本發明提供預防及治療臨床無症狀之PCV2感染之方法、增大感染PCV2但臨床無症狀之動物或動物群組(畜群)平均重量增加之方法、減少病毒負荷為104 至106 個基因組拷貝/毫升血清之動物的數量的方法、減少受感染但臨床無症狀之畜群內具有大於106 基因組/毫升血清之病毒負荷之動物的數量的方法、減少鼻病毒排毒之方法、縮短感染PCV2但臨床無症狀之動物病毒血症持 續時間之方法、降低受感染但臨床無症狀之畜群內發病率之方法、降低受感染但臨床無症狀之畜群內死亡率之方法，該等方法皆包含向需要該治療之動物投與治療有效量之PCV2抗原或包含PCV2抗原之免疫原性組合物的步驟，其中該PCV2抗原係重組PCV2 ORF－2，較佳為經杆狀病毒表現之PCV2 ORF－2。較佳為彼等重組或經杆狀病毒表現之具有上述序列之PCV2 ORF－2。
本文所用免疫原性組合物亦係指包含以下之組合物：i)任何上述PCV2 ORF－2蛋白質，較佳以上述濃度；ii)至少一部分表現該PCV2 ORF－2蛋白質之病毒載體(較佳為重組杆狀病毒)；及iii)一部分細胞培養物，其中約90%之組份具有小於1微米之尺寸。
本文所用免疫原性組合物亦係指包含以下之組合物：i)任何上述PCV2 ORF－2蛋白質，較佳以上述濃度；ii)至少一部分表現該PCV2 ORF－2蛋白質之病毒載體；iii)一部分細胞培養物；iv)及使重組病毒載體不活化之不活化劑，較佳為BEI，其中約90%之i)至iii)組份具有小於1微米之尺寸。較佳地，BEI係以可有效使杆狀病毒不活化之濃度存在，較佳以2至約8 mM BEI的量，較佳為約5 mM BEI。
本文所用免疫原性組合物亦係指包含以下之組合物：i)任何上述PCV2 ORF－2蛋白質，較佳以上述濃度；ii)至少一部分表現該PCV2 ORF－2蛋白質之病毒載體；iii)一部分細胞培養物；iv)使重組病毒載體不活化之不活化劑，較佳為BEI；及v)終止由不活化劑所介導之不活化作用之中和 劑，其中約90%之i)至iii)組份具有小於1微米之尺寸。較佳地，若不活化劑係BEI，則該組合物包含與BEI等效量之硫代硫酸鈉。
將多肽納入可投與給易受PCV2感染之動物之組合物中。在較佳形式中，該組合物亦可包括彼等熟習此項技術者所習知之其他組份(亦參見Remington's Pharmaceutical Sciences.(1990).第18版，Mack Publ.,Easton)。另外，該組合物可包括一或多種獸醫學可接受之載劑。本文所用"獸醫學可接受之載劑"包括任何及全部溶劑、分散介質、塗佈劑、佐劑、穩定劑、稀釋劑、防腐劑、抗細菌及抗真菌劑、等滲劑、吸附延遲劑及諸如此類。在較佳實施例中，該免疫原性組合物包含此處提供之PCV2 ORF－2蛋白質(較佳以上述濃度，其與佐劑(較佳為Carbopol)混合)及生理鹽水。
彼等熟習此項技術者會瞭解，本文所用組合物可納入已知之可注射之生理學上可接受之無菌溶液。對於製備用於非經腸注射或輸注之即用溶液，可容易地利用水性等滲溶液(例如鹽水或相應之血漿蛋白質溶液)。另外，本發明之免疫原性及疫苗組合物可包括稀釋劑、等滲劑、穩定劑或佐劑。稀釋劑可包括水、鹽水、葡萄糖、乙醇、甘油及諸如此類。等滲劑可尤其包括氯化鈉、葡萄糖、甘露醇、山梨醇及乳糖。穩定劑尤其包括白蛋白及乙二胺四乙酸之鹼金屬鹽。
本文所用"佐劑"可包括氫氧化鋁及磷酸鋁；皂苷，例如 Quil A、QS－21(Cambridge Biotech公司，Cambridge MA)、GPI－0100(Galenica Pharmaceuticals公司，Birmingham,AL)；油包水乳液；水包油乳液；水包油包水乳液。該乳液可尤其基於輕質液體石蠟油(歐洲藥典類型(European Pharmacopea type))；類異戊二烯油，例如由烯烴(尤其係異丁烯或癸烯)寡聚產生之角鯊烷或角鯊烯油；含有直鏈烷基之酸或醇之酯，更具體而言為植物性油、油酸乙酯、丙二醇二－(辛酸酯/癸酸酯)、甘油三－(辛酸酯/癸酸酯)或丙二醇二油酸酯；具支鏈脂肪酸或醇之酯，尤其係異硬脂酸酯。油可與乳化劑組合使用以形成乳液。乳化劑較佳係非離子型表面活性劑，具體而言係山梨醇酐、二縮甘露醇(例如無水甘露醇油酸酯)、二醇、聚甘油、丙二醇與油酸、異硬脂酸、蓖麻油酸或羥基硬脂酸之視情況經乙氧基化之酯，及聚氧丙烯－聚氧乙烯共聚物嵌段，具體而言係普流尼克(Pluronic)產品，尤其係L121。參見Hunter等人，The Theory and Practical Application of Adjuvants(Ed.Stewart－Tull,D.E.S.).John Wiley and Sons,NY,第51－94頁(1995)及Todd等人，Vaccine 15：564－570(1997)。
例如，可使用闡述於"Vaccine Design,The Subunit and Adjuvant Approach"(M.Powell及M.Newman編輯，Plenum Press,1995)第147頁上之SPT乳液及闡述於該書第183頁上之乳液MF59。
佐劑之另一實例係選自丙烯酸或甲基丙烯酸之聚合物及馬來酸酐與烯基衍生物之共聚物之化合物。
較佳之佐劑化合物係丙烯酸或甲基丙烯酸之聚合物，其尤其與糖類或多元醇之聚烯基醚交聯。已知此等化合物之名稱為聚羧乙烯製劑(carbomer)(Pharmeuropa，第8卷，第2期，1996年6月)。熟習此項技術者亦可參考美國專利第2,909,462號，其闡述與聚羥基化化合物交聯之該等丙烯酸系聚合物，該聚羥基化化合物具有至少3個(較佳不多於8個)羥基，至少3個羥基之氫原子經具有至少2個碳原子之不飽和脂防族基團取代。較佳基團係彼等含有2至4個碳原子者，例如乙烯基、烯丙基及其他乙烯系不飽和基團。不飽和基團自身可含有諸如甲基等其他取代基。以名稱Carbopol(BF Goodrich,Ohio,USA)出售之產品尤其適合。其可與烯丙基蔗糖或與烯丙基異戊四醇交聯。其中可提及者係Carbopol 974P、934P及971P。最佳者係使用Carbopol，尤其係使用Carbopol 971P，較佳以約500微克至約5毫克/劑量的量使用，甚至更佳以約750微克至約2.5毫克/劑量的量使用且最佳以約1毫克/劑量的量使用。
其他適宜佐劑尤其包括(但不限於)RIBI佐劑系統(Ribi公司)、嵌段共聚物(CytRx,Atlanta GA)、SAF－M(Chiron,Emeryville CA)、單磷醯脂質A、阿夫立定(Avridine)脂質－胺佐劑、自大腸桿菌(E.coli)(重組的或其他方式)之不耐熱腸毒素、霍亂毒素、IMS 1314或胞壁醯二肽。
較佳地，該佐劑係以約100微克至約10毫克/劑量的量添加。甚至更佳地，該佐劑係以約100微克至約10毫克/劑量的量添加。甚至更佳地，該佐劑係以約500微克至約5毫 克/劑量的量添加。甚至更佳地，該佐劑係以約750微克至約2.5毫克/劑量的量添加。最佳地，該佐劑係以約1毫克/劑量的量添加。
另外，該組合物可包括一或多種醫藥上可接受之載劑。本文所用"醫藥上可接受之載劑"包括任何及全部溶劑、分散介質、塗佈劑、穩定劑、稀釋劑、防腐劑、抗細菌及抗真菌劑、等滲劑、吸附延遲劑及諸如此類。最佳地，此處提供之組合物含有自活體外經培養細胞之上清液回收之PCV2 ORF－2蛋白質，其中該等細胞經含有PCV2 ORF－2 DNA且表現PCV2 ORF－2蛋白質之重組病毒載體感染，且其中該細胞培養物係用不活化病毒載體之約2至約8 mM BEI(較佳用約5 mM BEI)及等效濃度之中和劑(較佳為硫代硫酸鈉溶液，最終濃度為約2至約8 mM，較佳為約5 mM)處理。
本發明亦關於免疫原性組合物之用途，其用於增加感染PCV2之臨床無症狀之動物或動物群(畜群)平均重量增加、減少病毒負荷為104 至106 個基因組拷貝/毫升血清之動物的數量、減少受感染之臨床無症狀之畜群內具有病毒負荷大於106 基因組/毫升血清之動物的數量、減少鼻病毒排出、縮短感染PCV2之臨床無症狀之動物病毒血症持續時間、降低受感染之臨床無症狀之畜群內之發病率、降低受感染之臨床無症狀之畜群內之死亡率，其中該免疫原性組合物包含i)任何上述PCV2 ORF－2蛋白質，較佳以上述濃度；ii)至少一部分表現該PCV2 ORF－2蛋白質之病毒載體；iii)一 部分細胞培養物；iv)使重組病毒載體不活化之不活化劑，較佳為BEI；及v)終止不活化劑所介導之不活化作用之中和劑，較佳為與BEI等量之硫代硫酸鈉；及vi)適宜佐劑，較佳為上述量之Carbopol 971；其中約90%之i)至iii)組份具有小於1微米之尺寸。
根據另一態樣，該免疫原性組合物進一步包含醫藥上可接受之鹽，較佳為生理學上可接受濃度之磷酸鹽。較佳地，將該免疫原性組合物之pH值調節至生理學pH值，意指介於約6.5與7.5之間。
本文所用之免疫原性組合物亦指每1毫升包含以下之組合物：i)至少1.6微克上述PCV2 ORF－2蛋白質；ii)至少一部分表現該PCV2 ORF－2蛋白質之杆狀病毒；iii)一部分細胞培養物；iv)約2至8 mM BEI；v)與BEI等量之硫代硫酸鈉；及vi)約1毫克Carbopol 971；及vii)生理學上可接受濃度之磷酸鹽；其中約90%之i)至iii)組份具有小於1微米之尺寸，且該免疫原性組合物之pH值調節至約6.5至7.5。
該等免疫原性組合物可進一步包括一或多種其他免疫調節劑，例如介白素、干擾素或其他細胞因子。該等免疫原性組合物亦可包括慶大黴素(Gentamicin)及硫柳汞(Merthiolate)。雖然熟習此項技術者可容易地確定用於本發明範圍之佐劑及添加劑的量及濃度，但本發明涵蓋包含約50微克至約2000微克佐劑且較佳約250微克/毫升劑量疫苗組合物之組合物。因此，本文所用之免疫原性組合物亦係指包含約1微克/毫升至約60微克/毫升抗生素，且更佳為 小於約30微克/毫升抗生素之組合物。
本文所用之免疫原性組合物亦係指包含以下之組合物：i)任何上述PCV2 ORF－2蛋白質，較佳以上述濃度；ii)至少一部分表現該PCV2 ORF－2蛋白質之病毒載體；iii)一部分細胞培養物；iv)使重組病毒載體不活化之不活化劑，較佳為BEI；及v)終止由不活化劑所介導之不活化作用之中和劑，較佳為與BEI等效量之硫代硫酸鈉；vi)適宜佐劑，較佳為上述量之Carbopol 971；vii)醫藥上可接受之濃度之鹽水(較佳為磷酸鹽)緩衝劑；及viii)抗微生物活性劑；其中約90%之i)至iii)組份具有小於1微米之尺寸。
本文所用之免疫原性組合物亦係指IngelvacCircoFLEXTM (Boehringer Ingelheim Vetmedica公司，St Joseph,MO,USA)、CircoVac(Merial SAS,Lyon,France)、CircoVent(Intervet公司，Millsboro,DE,USA)、或Suvaxyn PCV－2 One Dose(Fort Dodge Animal Health,Kansas City,KA,USA)。因此，根據另一態樣，本發明提供預防及治療臨床無症狀之PCV2感染之方法、增大感染PCV2但臨床無症狀之動物或動物群組(畜群)平均重量增加之方法、減少病毒負荷為104 至106 個基因組拷貝/毫升血清之動物的數量的方法、減少受感染但臨床無症狀之畜群內具有大於106 個基因組/毫升血清之病毒負荷之動物的數量的方法、減少鼻病毒排毒之方法、縮短感染PCV2但臨床無症狀之動物病毒血症持續時間之方法、降低受感染但臨床無症狀之畜群內發病率之方法、降低受感染但臨床無症狀之 畜群內死亡率之方法，該等方法皆包含向需要投與之動物投與有效量之PCV2抗原的步驟，其中該包含PCV2抗原之免疫原性組合物係IngelvacCircoFLEXTM 、CircoVac、CircoVent及/或Suvaxyn PCV－2 One Dose，較佳地，其係IngelvacCircoFLEXTM 。
本文所用術語"有效量之PCV2抗原"意指但不限於引發或能夠引發投與該有效量之PCV2抗原之動物中免疫反應之PCV2抗原的量。
有效量端視疫苗成份及投與方案而定。一般而言，當將不活化病毒或經改性之活病毒製備品用於組合疫苗時，特定.量疫苗中含有約102.0 至約109.0 TCID50 /劑量，較佳為約103.0 至約108.0 TCID50 /劑量，更佳為約104.0 至約108.0 TCID50 /劑量。具體而言，當將經改性之活PCV2用於疫苗時，擬向易受感染之動物投與之推薦劑量較佳係約103.0 TCID50 (50%終點之組織培養物感染劑量)/劑量至約106.0 TCID50 /劑量且更佳為約104.0 TCID50 /劑量至約105.0 TCID50 /劑量。一般而言，當使用經純化之抗原時，抗原的量會介於0.2與5000微克之間，及介於102.0 與109.0 TCID50 之間，較佳介於103.0 與106.0 TCID50 之間，更佳介於104.0 與105.0 TCID50 之間。
亞單位疫苗一般以至少0.2微克抗原/劑量之抗原包括濃度投與，較佳以約0.2至約400微克/劑量，仍更佳以約0.3至約200微克/劑量，甚至更佳以約0.35至約100微克/劑量，仍更佳以約0.4至約50微克/劑量，仍更佳以約0.45至 約30微克/劑量，仍更佳以約0.6至約16微克/劑量，甚至更佳以約0.75至約8微克/劑量，甚至更佳以約1.0至約6微克/劑量，仍更佳以約1.3至約3.0微克/劑量之抗原包括濃度投與。
已顯示源自母體之免疫性賦予一定程度之抵抗PCV2感染及伴隨PCV2感染之臨床疾病之保護。已顯示該保護係效價依賴性的：較高之效價通常係保護性的，而較低之效價則不然(McKeown等人，2005；Clin.Diagn.Lab.Immunol.；12：1347－1351)。估計斷乳幼畜中之平均抗體半衰期為19.0天且在群組內PCV2－被動性抗體衰減期限相對較寬(Opriessnig等人，2000,J.Swine Health Prod.12：186－191)。源自母體之抗體的存在不僅可賦予一定程度之抵抗病毒感染之保護(然而其係不可預測的)，且亦獲知會削弱免疫作用之功效。已令人驚奇地發現，抗PCV2抗體(尤其抗PCV2抗體效價高達1：1000)的存在不會影響PCV2治療之功效。
因此，根據另一態樣，本發明提供預防及治療臨床無症狀之PCV2感染之方法、增大感染PCV2但臨床無症狀之動物或動物群組(畜群)平均重量增加之方法、減少病毒負荷為104 至106 個基因組拷貝/毫升血清之動物的數量的方法、減少受感染但臨床無症狀之畜群內具有大於106 基因組/毫升血清之病毒負荷之動物的數量的方法、減少鼻病毒排毒之方法、縮短感染PCV2但臨床無症狀之動物病毒血症持續時間之方法、降低受感染但臨床無症狀之畜群內發病率 之方法、降低受感染但臨床無症狀之畜群內死亡率之方法，該等方法皆包含向需要投與之動物投與治療有效量之PCV2抗原或包含PCV2抗原之免疫原性組合物的步驟，其中該等動物在接種疫苗時具有抗PCV2抗體，較佳地，其中該等動物在接種疫苗時具有高達1：100(較佳大於1：100，甚至更佳大於1：250，甚至更佳大於1：500，甚至更佳為1：640；甚至更佳大於1：750，最佳大於1：1000)之可檢測之抗PCV2抗體效價。較佳地，該等抗PCV2抗體效價在特異性抗PCV2免疫分析中(較佳在如實例2中所述之分析中)係可檢測且可定量的。
抗PCV2抗體之檢測及定量方法已為業內所熟知。例如PCV2抗體之檢測及定量可藉由闡述於Magar等人，2000,Can.J.Vet Res.；64：184－186或Magar等人，2000,J.Comp.Pathol.；123：258－269中之間接免疫螢光法實施。用於定量抗PCV2抗體之其他分析闡述於Opriessnig等人，2006，第37屆美國豬獸醫協會年會中。而且，實例2亦闡述可由熟習此項技術者使用之間接免疫螢光法分析。在結果有爭議之情形下及在有疑問之任何問題中，本文所提及之抗PCV2效價係指彼等係/可藉由實例2中所述之分析進行評估者。
因此，根據另一態樣，本發明提供預防及治療臨床無症狀之PCV2感染之方法、增大感染PCV2但臨床無症狀之動物或動物群組(畜群)平均重量增加之方法、減少病毒負荷為104 至106 個基因組拷貝/毫升血清之動物的數量的方法、 減少受感染但臨床無症狀之畜群內具有大於106 基因組/毫升血清之病毒負荷之動物的數量的方法、減少鼻病毒排毒之方法、縮短感染PCV2但臨床無症狀之動物病毒血症持續時間之方法、降低受感染但臨床無症狀之畜群內發病率之方法、降低受感染但臨床無症狀之畜群內死亡率之方法，該等方法皆包含向需要投與之幼小動物投與治療有效量之PCV2抗原或包含PCV2抗原之免疫原性組合物的步驟。
本文所用術語"幼小動物"係指1至22日齡之動物。較佳地，術語幼小動物意指1至20日齡之動物。更佳地，術語幼小動物係指1至15日齡之動物，甚至更佳為1日齡至14日齡之動物，甚至更佳為1至12日齡之動物，甚至更佳為1至10日齡之動物，甚至更佳為1至8日齡之動物，甚至更佳為1至7日齡之動物，甚至更佳為1至6日齡之動物，甚至更佳為1至5日齡之動物，甚至更佳為1至4日齡之動物，甚至更佳為1至3日齡之動物，甚至更佳為1或2日齡之動物，最佳為1日齡之動物。
由於PCV2在該領域普遍存在，因此大多數仔豬就PCV2而言係血清陽性的。因此，根據又一態樣，該等幼小動物在接種疫苗/治療之日具有高達1：100(較佳大於1：100，甚至更佳大於1：250，甚至更佳大於1：500，甚至更佳為1：640，甚至更佳大於1：750，最佳為在接種疫苗/治療之日大於1：1000)之可檢測之抗PCV2抗體效價。
本發明組合物可經真皮內、經氣管內或經陰道內施用。 該組合物較佳可經肌內或經鼻內施用，最佳為經肌內施用。在動物體內，可證明經由靜脈內或藉由直接注射至目標組織中來施用該等上述醫藥組合物係有利的。對於全身施用，靜脈內、血管內、肌內、鼻內、動脈內、腹膜內、口服或鞘內途徑係較佳的。更局部施用可經皮下、經真皮內、經皮內、經心臟內、經葉內(intralobally)、經髓內、經肺內或直接在或靠近擬治療之組織(結締組織、骨組織、肌肉組織、神經組織、上皮組織)實現。端視治療所期望之持續時間及有效性，本發明組合物可投與一次或數次，亦可間歇投與，例如以每日計投與數天、數週或數月且以不同劑量。
較佳地，至少一劑量之上述免疫原性組合物係經肌內投與至需要其之個體。根據又一態樣，該PCV2抗原或包含上述任何該PCV2抗原之免疫原性組合物係裝入瓶中並以一(1)毫升至五(5)毫升/劑量(較佳1毫升/劑量)投與。因此，根據又一態樣，本發明亦提供1毫升至5毫升(較佳1毫升)包含上述PCV2抗原之免疫原性組合物，其用於預防及治療動物或動物群組(畜群)臨床無症狀之PCV2感染、增大感染PCV2但臨床無症狀之動物或動物群組(畜群)平均重量增加、減少病毒負荷為104 至106 個基因組拷貝/毫升血清之動物的數量、減少受感染但臨床無症狀之畜群內具有大於106 個基因組/毫升血清之病毒負荷之動物的數量、減少鼻病毒排毒及縮短感染PCV2但臨床無症狀之動物病毒血症持續時間、降低受感染但臨床無症狀之畜群內之發病率、 降低受感染但臨床無症狀之畜群內之死亡率，該等皆包含向需要投與之動物投與治療有效量之PCV2抗原或包含PCV2抗原之免疫原性組合物的步驟。本發明亦係關於預防及治療動物或動物群組(畜群)臨床無症狀之PCV2感染之方法、增大感染PCV2但臨床無症狀之動物或動物群組(畜群)平均重量增加之方法、減少病毒負荷為104 至106 個基因組拷貝/毫升血清之動物的數量的方法、減少受感染但臨床無症狀之畜群內具有大於106 個基因組/毫升血清之病毒負荷之動物的數量的方法、減少鼻病毒排毒之方法、縮短感染PCV2但臨床無症狀之動物病毒血症持續時間之方法、降低受感染但臨床無症狀之畜群內發病率之方法、降低受感染但臨床無症狀之畜群內死亡率之方法，該等方法皆包含向需要投與之動物投與1至5毫升(較佳1毫升)治療有效量之PCV2抗原或包含PCV2抗原之免疫原性組合物的步驟。
根據又一態樣，至少向需要之個體另外投與一次至少一劑量之上述免疫原性組合物，其中第二次或任何另外投與係在初始或任何以前投與之後至少14天給予。較佳地，該免疫原性組合物係與免疫刺激劑一起投與。較佳地，該免疫刺激劑給予至少兩次。較佳地，在第一次與第二次或任何另外免疫刺激劑之投與中間有至少3天，更佳為至少5天，甚至更佳為至少7天。較佳地，該免疫刺激劑係在本文所提供之免疫原性組合物之初始投與之後至少10天，較佳15天，甚至更佳20天，甚至更佳至少22天給出。較佳之 免疫刺激劑係(例如)鑰孔蟲戚血蘭素(KLH)，較佳為經不完全弗羅因德氏(Freund’s)佐劑乳化之鑰孔蟲戚血蘭素(KLH/ICFA)。然而，同此應瞭解，亦可使用熟習此項技術者所習知之任何其他免疫刺激劑。本文所用術語"免疫刺激劑"意指可觸發免疫反應(較佳地)而不引發或增加特定免疫反應(例如抵抗特定病原體之免疫反應)之任何試劑或組合物。進一步指示應以適宜劑量投與該免疫刺激劑。
本發明亦係關於PCV2抗原或包含PCV2抗原之免疫原性組合物的用途，其用以製備用於以下之藥劑：預防及治療動物或動物群組(畜群)慢性PCV2感染、增大感染PCV2但臨床無症狀之動物或動物群組(畜群)平均重量增加、減少病毒負荷為104 至106 個基因組拷貝/毫升血清之動物的數量、減少受感染但臨床無症狀之畜群內具有大於106 基因組/毫升血清之病毒負荷之動物的數量、減少鼻病毒排毒及縮短感染PCV2但臨床無症狀之動物病毒血症持續時間、降低受感染但臨床無症狀之畜群內之發病率、降低受感染但臨床無症狀之畜群內之死亡率。較佳地，該PCV2抗原係重組抗原，較佳為PCV2 ORF－2，甚至更佳為IngelvacCircoFLEXTM 。
本文所用"動物"意指豬(swine或pig)或仔豬。因此，根據另一態樣，本發明提供預防及治療豬臨床無症狀之PCV2感染之方法、增大感染PCV2但臨床無症狀之動物或動物群組(畜群)平均重量增加之方法、減少病毒負荷為104 至106 個基因組拷貝/毫升血清之動物的數量的方法、減少 受感染但臨床無症狀之畜群內具有大於106 個基因組/毫升血清之病毒負荷之動物的數量的方法、減少鼻病毒排毒之方法、縮短感染PCV2但臨床無症狀之動物病毒血症持續時間之方法、降低受感染但臨床無症狀之畜群內發病率之方法、降低受感染但臨床無症狀之畜群內死亡率之方法，該等方法皆包含向需要投與之豬投與治療有效量之PCV2抗原或包含PCV2抗原之免疫原性組合物的步驟。較佳地，該PCV2抗原或包含PCV2抗原之免疫原性組合物係上文所述彼等之任一者，最佳地，該PCV2抗原係IngelvacCircoFLEXTM 。
以下實例闡明本發明之較佳材料及程序。儘管任何類似或等效於彼等本文所述者之方法及材料可用於本發明之實踐或測試中，但目前所述者係較佳之方法、裝置及材料。然而，應瞭解，該等實例僅為闡釋提供，且其中任何皆不應視為對本發明總範圍之限制。
實例1
PCV2 ORF－2抗原之製備 在持續攪拌下使來自液氮儲存器之初始SF＋細胞培養物在Excell 420培養基(JRH Biosciences公司，Lenexa,KS)中在無菌旋轉燒瓶中之懸浮液中生長。使該等培養物在含有25至150毫升Excell 420無血清培養基之100毫升至250 mL旋轉燒瓶中生長。當細胞增殖至細胞密度為1.0－8.0×106 細胞/毫升時，將其以0.5－1.5×106 細胞/毫升之種植密度分至 新容器中。使隨後之擴展培養物在至多36公升尺寸之旋轉燒瓶中或在至多300公升之不銹鋼生物反應器中於25－29℃下生長2－7天時間。
接種後，將該等燒瓶在27℃下培育4小時。隨後，用含有PCV2 ORF－2基因(SEQ ID NO：4)之重組杆狀病毒對每個燒瓶進行接種。含有PCV2 ORF－2基因之重組杆狀病毒係如WO 06/072065中所述產生。在接種杆狀病毒後，隨後將該等燒瓶在27±2℃下培育7天且在此期間亦以100 rpm攪拌。該等燒瓶使用通風蓋以容許空氣流動。
培育後，收穫所得上清液，將其過濾以移除細胞碎片並不活化。上清液係藉由使其溫度至37±2℃不活化並添加二元氮丙啶(BEI)至上清液中使得最終濃度為5 mM。隨後將樣品持續攪拌72至96小時。添加可使最終最小濃度為5 mM之1.0 M硫代硫酸鈉溶液以中和任何剩餘之BEI。在不活化後，將經磷酸鹽緩衝劑及Carpopol緩衝之PCV2 ORF－2添加至約0.5至2.5毫克/劑量。最終劑量包含約16微克PCV2 ORF－2抗原。
實例2
抗PCV－2免疫分析 將闡述於WO 02/07721中之PK15(例如ATCC CCL－33)或VIDO R1細胞接種至96孔板上(約20.000至60.000個細胞/孔)。當單層約65%至85%鋪滿時，將細胞用PCV2分離物感染。將經感染細胞培育48小時。移除培養基並用PBS將孔洗滌兩次。丟棄洗滌緩衝劑並將細胞在約－20℃下用冷 50/50甲醇/丙酮固著劑(約100微升/孔)處理約15分鐘。丟棄固著劑並空氣乾燥該等板。在PBS中製備豬血清樣品之連續稀釋液，添加至該等板中並在36.5±1℃下將其培育約1小時以容許結合抗體(若存在於血清樣品中)。此外，抗PCV2陽性及陰性對照樣品(陽性對照及陰性對照樣品)之連續稀釋液並行進行。隨後將該等板用PBS洗滌三次。丟棄PBS。隨後將該等板用在PBS中以1：100經稀釋之市售山羊抗豬FITC偶聯物染色並在36.5±1℃下培育約1小時，此容許檢測結合至經感染細胞之抗體。在培育完成後，自培育箱中移出微板，丟棄偶聯物並用PBS將該等板洗滌兩次。使用UV顯微術進行平板讀數且各孔以陽性或陰性報告。陽性對照及陰性對照樣品用以監測試驗系統。若對照在預期範圍內，則在試驗方法參數方面試驗結果係可接受的。使用顯示特異性IFA反應性之最高稀釋液計算血清抗體效價且使用適合之Reed－Muench公式計算每一稀釋液之陽性孔數量或50%終點。
實例3
PCV2 ORF－2(Ingelvac CircoFLEX TM )在治療慢性PCV2感染中之功效 研究目的及設計 該研究包括來自連續五週組之常用仔豬，每個組包含約300只動物。將動物根據初始體重及同胎幼仔分派(litter assignment)平均分配於兩個治療組中。在斷乳之日，將一個組(n＝775)用含有最小釋放抗原含量之IngelvacCircoFLEX接種疫苗且另一個仔豬組(n＝773)接受對照產品(生理鹽水)。當仔豬約21日齡時，在右側頸部以單一1毫升劑量肌內給予疫苗及對照產品(CP)。收集所有研究動物之個體活體重。對PCV2相關症狀實施臨床觀察並以個體動物為基礎記錄與正常總體健康狀況之偏差。
藉由聚合酶鏈反應(PCR)對血清樣品及鼻分泌物針對PCV2存在進行定量分析。另外，接種疫苗時所有研究動物及所有研究動物中5%的預選定研究動物之PCV2抗體效價藉由如實例2中所述之間接螢光抗體滴定(Indirect Fluorescent Antibody Titration)(IFAT)試驗進行分析。
研究場所之慢性(臨床無症狀)狀況之證實： 在研究實施之前4個月在農場上實施PCVD之最初診斷。確定死亡率為14.1%且在育肥群組中存在侏儒。生長性能相當低(644克/天)。藉由組織學檢查證實存在PCV2感染。肺樣品顯示間質性肺炎且藉由IHC鑑別損傷中之PCV－2。
在查看圖1時，可以看出育肥中之死亡率自14.1%顯著降低至8.1%，此表明急性PCVD感染轉變為臨床無症狀感染。
研究動物臨床無症狀感染之證實 農場上至臨床無症狀感染之轉變藉由研究期間所獲得之結果來證實。該等研究動物之特徵在於突出之臨床無症狀病毒負荷、低死亡率(低於10%)及低發病率(低於10%)。
結果病毒血症 在研究第14週觀察病毒血症動物之最高比例，其中在經CP治療之組中病毒血症動物佔55.5%且在接種疫苗組中病毒血症動物約佔10%。如圖4及5中所示，兩個治療組中之大多數動物僅具有臨床無症狀病毒負荷(定義為104 －106 基因組當量數/毫升)。具有臨床相關PCV2負荷(>106 基因組當量數/毫升)之動物的最高比例對於經CP治療之動物係2.52%且對於接種疫苗之動物係0.87%。
死亡率 在病毒血症發作之前及之後死亡率相當低。在病毒血症發作之前，接種疫苗之動物之死亡率係1.55%且經CP治療之動物之死亡率係2.19%。在病毒血症發作之後，可觀察到經CP治療之動物之死亡率升高(自1.55%至3.02%)，而接種疫苗之動物之死亡率與病毒血症發作之前時相比略微降低(自2.19%至1.98%)。在病毒血症發作之前及之後兩個治療組間之死亡率差異未達成統計顯著性。
臨床徵兆 在病毒血症發作之前在兩個治療組中僅可檢測到少數臨床徵兆，對於每個分析參數發生率低於1%。病毒血症發作伴隨PRRSV及豬肺炎支原體(Mycoplasma hyopneumoniae )共感染。然而，PCV2及任何其他共感染病原體皆未引起嚴重臨床徵兆。因此，具有諸如咳嗽及/或呼吸困難等呼吸系統症狀之動物的比例在經CP治療之組中僅為3.9%及0.7%且在接種疫苗組中為3.0%及0.4%。其他臨床所見之頻率始終低於1%且治療組間無差異。
侏儒頻率 在任何分別稱重時間點上接種疫苗組與經安慰劑治療之組間皆未觀察到"侏儒"頻率之顯著差異。在PCV2病毒血症全面發作之後，"侏儒"頻率在兩個治療組中通常均較低(3.3－4.7%)。
臨床無症狀感染對生長性能之影響 到研究第17週為止接種疫苗組比經CP治療之組體重增加高2.36公斤且直至研究第19週為止高2.39公斤。如圖3中所示，體重差異在病毒血症發作之時(研究第12週)開始略微增大。在研究第17週，該差異已達至2.36公斤。由於較高之重量增加，接種疫苗之動物比經CP治療之動物之自斷乳至屠殺之平均時間短1.9天。
病毒血症在血液中之持續時間 當比較兩個治療組之病毒血症總平均值與中值持續時間時，可發現在經CP治療之動物中病毒血症持續時間顯著較長(p＝0.0003)。該IVP組之病毒血症平均持續時間為5.8天，而該CP組顯示平均持續時間為21.8天。此相當於在該IVP組中病毒血症持續時間縮短73%。
結論 該研究在於實施該研究之前不久自急性轉變成慢性臨床無症狀感染狀況之農場上進行。研究期間研究動物之病毒負荷證實該假定。極少數研究動物(<2.19%)在血清中具有大於"106 個基因組拷貝/毫升之截斷值"之病毒負荷。
接種疫苗成功地極大降低了接種疫苗組中受感染動物之百分比。因此，該接種疫苗使得能夠比較未受感染之動物(接種疫苗組)與受感染但臨床無症狀之動物(安慰劑組)。接種疫苗之動物展示較受感染但臨床無症狀之動物為好之生長性能。在研究第17週，差異已達至2.36公斤。與未接種疫苗組相比，接種疫苗之動物之病毒血症持續時間縮短多於16天。
可斷定儘管受感染動物表面上仍然健康，但臨床無症狀 PCV2感染能夠對生長性能具有相關性負面影響。
圖1：PCV2感染之不同形式。
圖2：在研究開始之前及之後研究農場上育肥中之死亡率及平均日重量增加。
圖3：在研究過程中相對體重差異(IVP－CP)及平均病毒負荷之發展。
圖4：兩個治療組中具有>106 基因組當量數/毫升血清之病毒負荷之動物之百分比的比較。
圖5：兩個治療組中具有104 －10E6 基因組當量數/毫升血清之病毒負荷之動物之百分比的比較。
<110> 美商百靈佳殷格翰家畜藥品公司<120> 臨床無症狀之豬環狀病毒性疾病(PCVD)之預防及治療<130> 1－2179 <140> 097104856 <141> 2008－02－12 <150> 07102250.3 <151> 2007－02－13 <160> 11 <170> PatentIn version 3.3 <210> 1 <211> 8 <212> DNA <213> 人工序列<220> <223> 此係經修飾之Kozak序列。<400> 1<210> 2 <211> 6 <212> DNA <213> 人工序列 <220> <223> 此係重組Eco R1序列。<400> 2<210> 3 <211> 713 <212> DNA <213> 豬環狀病毒<400> 3<212> DNA <213> 豬環狀病毒<400> 4<210> 5 <211> 233 <212> PRT <213> 豬環狀病毒<400> 5 <210> 6 <211> 233 <212> PRT <213> 豬環狀病毒<400> 6 <210> 7 <211> 756 <212> DNA <213> 人工序列<220> <223> 此序列係來自豬第二型環狀病毒，開放閱讀框2，同時具有來自pGEM T－易載體(T－easy vector)之一部分。 <400> 7 <210> 8 <211> 10387 <212> DNA <213> 人工序列<220> <223> 此係豬第二型環狀病毒，ORF－2構建體，其包括杆狀病毒及pGEM T－易編碼序列。<400> 8 <210> 9 <211> 20 <212> PRT <213> 豬環狀病毒<400> 9<210> 10 <211> 19 <212> PRT <213> 豬環狀病毒<400> 10<2]0> 11 <211> 233 <212> PRT <213> 人工序列<220> <223> 此係豬第二型環狀病毒開放閱讀框2之胺基酸序列。<400> 11
(無元件符號說明)

Claims (4)

  1. 一種豬第二型環狀病毒(PCV2)之ORF-2蛋白質或包含PCV2之ORF-2蛋白質之免疫原性組合物的用途，其用以製備用於治療豬之臨床無症狀之PCV2感染之藥劑，其中將治療有效量之該藥劑投予該豬可降低生長減損或減少鼻排出病毒及/或病毒血症持續時間，且其中該臨床無症狀之PCV2感染之特徵在於臨床無症狀之受感染豬中病毒量低於106 個PCV2基因組拷貝(copies)/毫升血清以及該豬之1毫升血清或1毫克組織之樣品中包含可檢測量之PCV2基因組當量數。
  2. 如請求項1的用途，其中由於臨床無症狀之PCV2感染所引起之生長減損降低。
  3. 如請求項1或2的用途，其中感染PCV2之臨床無症狀之豬中鼻排出病毒及/或病毒血症持續時間減少。
  4. 如請求項1或2之用途，其中該PCV2之ORF-2蛋白質係一種重組桿狀病毒表現之PCV2之ORF-2蛋白質。
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Families Citing this family (21)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US7833707B2 (en) 2004-12-30 2010-11-16 Boehringer Ingelheim Vetmedica, Inc. Methods of overexpression and recovery of porcine circovirus type 2 ORF2
UA95602C2 (ru) 2004-12-30 2011-08-25 Берингер Ингельхейм Ветмедика, Инк. Иммуногенная композиция цвс2 и способы приготовления такой композиции
US8834891B2 (en) 2005-03-14 2014-09-16 Boehringer Ingelheim Vetmedica, Inc. Immunogenic compositions comprising Lawsonia intracellularis
MX356667B (es) 2005-12-29 2018-06-08 Boehringer Ingelheim Vetmedica Inc Uso de una composicion inmunogenica de pcv2 para reducir los sintomas clinicos en cerdos.
KR101436794B1 (ko) 2005-12-29 2014-09-04 베링거잉겔하임베트메디카인코퍼레이티드 다가 ｐｃｖ2 면역원성 조성물 및 이러한 조성물의 제조방법
US20100136060A1 (en) * 2006-11-22 2010-06-03 Boehringer Ingelheim Vetmedica, Inc. Methods of reducing porcine circovirus-associated disease outbreaks
WO2008073464A2 (en) 2006-12-11 2008-06-19 Boehringer Ingelheim Vetmedica, Inc. Effective method of treatment of porcine circovirus and lawsonia intracellularis infections
DK2094872T4 (da) * 2006-12-15 2020-05-18 Boehringer Ingelheim Animal Health Usa Inc Behandling af anti-PCV2-antistofseropositive svin med PCV2-antigen
EP1941903A1 (en) 2007-01-03 2008-07-09 Boehringer Ingelheim Vetmedica Gmbh Prophylaxis and treatment of PRDC
EP1958644A1 (en) 2007-02-13 2008-08-20 Boehringer Ingelheim Vetmedica Gmbh Prevention and treatment of sub-clinical pcvd
US7829274B2 (en) 2007-09-04 2010-11-09 Boehringer Ingelheim Vetmedica, Inc. Reduction of concomitant infections in pigs by the use of PCV2 antigen
WO2009126356A2 (en) 2008-01-23 2009-10-15 Boehringer Ingelheim Vetmedica, Inc. Pcv2 mycoplasma hyopneumoniae immunogenic compositions and methods of producing such compositions
WO2009103037A1 (en) * 2008-02-15 2009-08-20 Boehringer Ingelheim Vetmedica, Inc. Methods and compositions for reducing the impact of enteric diseases
KR20110092316A (ko) * 2008-11-19 2011-08-17 래보래토리오 아비-멕스, 에스.에이. 데 씨.브이. 재조합 불활성화 바이러스 벡터 백신
TWI627281B (zh) 2009-09-02 2018-06-21 百靈佳殷格翰家畜藥品公司 降低ｐｃｖ－２組合物殺病毒活性之方法及具有改良免疫原性之ｐｃｖ－２組合物
KR101675185B1 (ko) 2010-07-08 2016-11-10 유나이티드 바이오메디칼 인크. 디자이너(designer) 펩티드-기반 pcv2 백신
WO2014182872A1 (en) 2013-05-08 2014-11-13 Protatek International, Inc. Vaccine for pcv2 and mycoplasma
WO2014187822A1 (en) * 2013-05-22 2014-11-27 Boehringer Ingelheim Espana, S.A. Method for the reduction of pcv-2 in a herd of swine
CA2924228C (en) 2013-10-02 2024-01-16 Boehringer Ingelheim Vetmedica, Inc. Pcv2 orf2 protein variant and virus like particles composed thereof
RU2712155C2 (ru) * 2013-12-03 2020-01-24 Интервет Интернэшнл Б.В. Вакцина против цирковируса свиней 2 типа
JP6629975B2 (ja) * 2015-12-28 2020-01-15 アグリカルチュラル テクノロジー リサーチ インスティテュート ブタシルコウイルス２型キャプシドタンパク質の調製方法及びそれを含む医薬組成物

Family Cites Families (105)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US2909462A (en) 1955-12-08 1959-10-20 Bristol Myers Co Acrylic acid polymer laxative compositions
JPS60500673A (ja) 1983-03-08 1985-05-09 コモンウエルス　セラム　ラボラトリ−ズ　コミツシヨン 抗原活性を有するアミノ酸配列
ES2052685T3 (es) * 1987-03-17 1994-07-16 Akzo Nv Metodo para producir un adyuvante libre.
US5069901A (en) 1988-02-03 1991-12-03 Jones Elaine V Preparation of a recombinant subunit vaccine against pseudorabies infection
DK0454735T3 (da) 1989-01-23 1996-10-07 Auspharm Int Ltd Vaccine sammensætning
US5155037A (en) 1989-08-04 1992-10-13 The Texas A&M University System Insect signal sequences useful to improve the efficiency of processing and secretion of foreign genes in insect systems
US5202430A (en) 1990-01-16 1993-04-13 University Of Tennessee Transmissible gastroenteritis virus genes
WO1991018627A1 (en) 1990-05-29 1991-12-12 Smithkline Beecham Corporation Swine pneumonia vaccine and method for the preparation thereof
US5565205A (en) 1990-08-16 1996-10-15 Solvay Animal Health, Inc. Inactivated Mycoplasma hypopneumoniae bacterin and method of use thereof
GB9023111D0 (en) 1990-10-24 1990-12-05 Wellcome Found Expression system
DE69132274T2 (de) 1990-11-01 2000-12-14 Iowa State University Research Foundation, Inc. Methode der bakteriellen attenuierung und impfstoff
US6042830A (en) 1992-08-05 2000-03-28 Boehringer Ingelheim Vetmedica, Inc. Viral agent associated with mystery swine disease
CA2076744C (en) 1991-08-26 2000-06-27 Danny W. Chladek Viral agent associated with mystery swine disease
US5580557A (en) 1991-10-09 1996-12-03 Iowa State University Research Foundation, Inc. Live, avirulent salmonella choleraesuis vaccine used for inducing an immune response in animals
US5338543A (en) 1992-02-27 1994-08-16 Ambico, Inc. Thimerosal inactivated mycoplasma hyopneumoniae vaccine
KR100374434B1 (ko) 1994-05-10 2003-06-09 와이어쓰 변형된소호흡관련합포체바이러스(brsv)생백신조성물
US5885823A (en) 1995-06-05 1999-03-23 Nobl Laboratories, Inc. Lawsonia intracellularis cultivation, anti-Lawsonia intracellularis vaccines and diagnostic agents
CA2264953C (en) 1996-08-16 2008-09-30 The Texas A & M University System Modifying insect cell gylcosylation pathways with baculovirus expression vectors
PT835930E (pt) 1996-10-09 2001-06-29 Akzo Nobel Nv Estirpes europeias de vacina do virus do sindroma reprodutivo e respiratorio porcino (prrsv)
US7211379B2 (en) 1997-10-03 2007-05-01 Merial Sas Prevention of myocarditis, abortion and intrauterine infection associated with porcine circovirus-2
UA78180C2 (uk) 1997-10-03 2007-03-15 Меріаль Кільцевий вірус свині типу ii, вакцини та діагностичні реагенти
US6517843B1 (en) * 1999-08-31 2003-02-11 Merial Reduction of porcine circovirus-2 viral load with inactivated PCV-2
US7192594B2 (en) 1997-10-03 2007-03-20 Merial Limited Postweaning multisystemic wasting syndrome and porcine circovirus from pigs
US20060029617A1 (en) 1997-10-03 2006-02-09 Charreyre Catherine E Porcine circovirus and Helicobacter combination vaccines and methods of use
US6391314B1 (en) 1997-10-03 2002-05-21 Merial Porcine circoviruses vaccines diagnostic reagents
FR2781159B1 (fr) 1998-07-06 2000-10-06 Merial Sas Vaccin circovirus et parvovirus porcin
FR2772047B1 (fr) 1997-12-05 2004-04-09 Ct Nat D Etudes Veterinaires E Sequence genomique et polypeptides de circovirus associe a la maladie de l'amaigrissement du porcelet (map), applications au diagnostic et a la prevention et/ou au traitement de l'infection
US20040062775A1 (en) * 1997-12-05 2004-04-01 Agence Francaise De Securite Sanitaire Des Aliments Circovirus sequences associated with piglet weight loss disease (PWD)
DK1037909T3 (da) 1997-12-11 2007-10-08 Univ Saskatchewan Postweaning multisystemisk wasting-syndromvirus (PMWS) fra svin
US6287856B1 (en) 1998-03-13 2001-09-11 University Of Georgia Research Foundation, Inc. Vaccines against circovirus infections
US6294176B1 (en) 1998-07-10 2001-09-25 Schering-Plough Veterinary Corp. Recombinant raccoonpox virus and uses thereof as a vaccine in mammalian and avian species
WO2000031275A1 (fr) 1998-11-19 2000-06-02 Azwell Inc. Phosphatase de recombinaison d'acide lysophosphatidique
FR2789695B1 (fr) 1999-02-11 2003-03-07 Merial Sas Vecteurs et vaccins viraux a base d'adenovirus porcins recombines et replicatifs
US6943152B1 (en) 1999-06-10 2005-09-13 Merial DNA vaccine-PCV
US6497883B1 (en) 1999-06-10 2002-12-24 Merial Porcine circovirus recombinant poxvirus vaccine
GB9921147D0 (en) 1999-09-07 1999-11-10 Smithkline Beecham Biolog Novel composition
WO2001017556A1 (fr) 1999-09-07 2001-03-15 Shionogi & Co., Ltd. Préparations vaccinales administrables par les muqueuses
GB9921146D0 (en) 1999-09-07 1999-11-10 Smithkline Beecham Biolog Novel composition
US6656478B1 (en) 1999-11-12 2003-12-02 Samuel D. Charles Cross-protective salmonella vaccines
PT1248646E (pt) 1999-12-21 2008-03-19 Merial Sas Composições e vacinas contendo antigénio(s) de cryptosporidium parvum e de outro patógeno entérico
WO2001096377A2 (en) 2000-06-15 2001-12-20 Purdue Research Foundation Vaccine for congenital tremors in pigs
US6808900B2 (en) * 2000-06-15 2004-10-26 Manitoba, University Of Cryptosporidium parvum antigens, antibodies thereto and diagnostic and therapeutic compositions thereof
EP1303265B1 (en) 2000-07-20 2007-07-11 Lauras AS Use of cox-2 inhibitors as immunostimulants in the treatment of hiv or aids
MY129765A (en) 2000-12-19 2007-04-30 Wyeth Corp Improved mycoplasma hyopneumoniae bacterin vaccine
US7018638B2 (en) 2000-12-19 2006-03-28 Wyeth Mycoplasma hyopneumoniae bacterin vaccine
JP2002247979A (ja) 2001-02-23 2002-09-03 Nippon Biologicals Inc マレック病ワクチンおよびその製造方法
EP1379671B1 (en) 2001-03-27 2009-05-06 University of Saskatchewan Methods to culture circovirus
US20030096377A1 (en) 2001-06-28 2003-05-22 Virginia Tech Intellectual Properties, Inc. Differential PCR-RFLP assay for detecting and distinguishing between nonpathogenic PCV-1 and pathogenic PCV-2
PT2842569T (pt) 2001-07-02 2019-06-17 Zoetis Services Llc Vacinação de dose única com mycoplasma hyopneumoniae
US7361352B2 (en) 2001-08-15 2008-04-22 Acambis, Inc. Influenza immunogen and vaccine
US7279166B2 (en) 2001-12-12 2007-10-09 Virginia Tech Intellectual Properties, Inc. Chimeric infectious DNA clones, chimeric porcine circoviruses and uses thereof
US7276353B2 (en) 2001-12-12 2007-10-02 Virginia Tech Intellectual Properties, Inc. Chimeric infectious DNA clones, chimeric porcine circoviruses and uses thereof
US6841364B2 (en) 2002-01-22 2005-01-11 Protatek International, Inc. Infectious cDNA clones of porcine reproductive and respiratory syndrome virus and expression vectors thereof
WO2003068993A1 (en) 2002-02-14 2003-08-21 Novavax, Inc. Method for isolation and purification of expressed gene products in vitro
WO2003077860A2 (en) 2002-03-13 2003-09-25 Biophysica, Inc. BOSWELLIN COMPOSITIONS ENHANCED WITH 3-β-ACETYL-11-KETO-β-BOSWELLIC ACID (“AKBA”), INDUSTRIAL MANUFACTURE AND THEIR USES
US20030215455A1 (en) * 2002-05-14 2003-11-20 Bailey Reynolds Vaccine stabilizer and method of use
US7335362B2 (en) 2002-07-19 2008-02-26 Beth Israel Deaconess Medical Center Methods of treating pre-eclampsia or eclampsia
US7223207B1 (en) 2002-09-13 2007-05-29 Simon Basyuk Exercise and massage device
AU2002951692A0 (en) 2002-09-23 2002-10-17 Vital Biotech (Hong Kong) Limited Improvements in or relating to vaccines
US7408636B2 (en) 2002-10-31 2008-08-05 Chemimage Corporation Method and apparatus for dark field chemical imaging
CA2514576C (en) 2003-02-03 2015-07-21 Cerebus Biologicals, Inc. Methods for treating, preventing and diagnosing helicobacter infection
US7563449B2 (en) 2003-04-21 2009-07-21 Pfizer Inc, Methods for reducing cattle reproductive diseases
CN1458167A (zh) 2003-06-02 2003-11-26 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所 截短表达的猪圆环病毒ⅱ型衣壳蛋白抗原及其应用
US7335361B2 (en) * 2003-06-09 2008-02-26 Animal Technology Institute Taiwan Fusion antigen used as vaccine
DE602004013331T2 (de) 2003-07-24 2009-07-16 Merial Ltd. Vakzin-formulierungen mit einer öl-in-wasser-emulsion
MXPA06000994A (es) * 2003-07-25 2006-05-15 Boehringer Ingelheim Vetmed Lawsonia intracellularis de origen europeo y vacunas, agentes de dagnostico y metodos de uso de los mismos.
FR2861731B1 (fr) * 2003-10-30 2006-02-24 Centre Nat Rech Scient Nouvelle proteine de fixation du phosphate, compositions pharmaceutiques la contenant et ses utilisations
CN1942204A (zh) 2004-04-26 2007-04-04 株式会社中央疫苗研究所 用于猪呼吸病的灭活混合疫苗及其制备方法
CN1579553A (zh) 2004-05-18 2005-02-16 浙江大学 Ii型猪圆环病毒核酸疫苗的制备方法及其应用
KR100478845B1 (ko) 2004-06-22 2005-03-24 채찬희 돼지 이유자돈 전신성 소모성 증후군 예방 및 치료용 생물학적 조성물
EP1778283A2 (en) 2004-06-30 2007-05-02 ID Biomedical Corporation of Quebec Vaccine compositions for treating coronavirus infection
US7700285B1 (en) * 2005-12-29 2010-04-20 Boehringer Ingelheim Vetmedica, Inc. PCV2 immunogenic compositions and methods of producing such compositions
US7833707B2 (en) * 2004-12-30 2010-11-16 Boehringer Ingelheim Vetmedica, Inc. Methods of overexpression and recovery of porcine circovirus type 2 ORF2
UA95602C2 (ru) 2004-12-30 2011-08-25 Берингер Ингельхейм Ветмедика, Инк. Иммуногенная композиция цвс2 и способы приготовления такой композиции
CN101189027A (zh) 2005-01-13 2008-05-28 贝林格尔·英格海姆维特梅迪卡有限公司 改良的prrs疫苗
US7300785B2 (en) 2005-02-03 2007-11-27 Universiteit Ghent Culturing circular ssDNA viruses for the production of vaccines
US8834891B2 (en) 2005-03-14 2014-09-16 Boehringer Ingelheim Vetmedica, Inc. Immunogenic compositions comprising Lawsonia intracellularis
HUE028343T2 (en) 2005-04-13 2016-12-28 Merial Inc Method for the production of porcine circovirus
US7691368B2 (en) 2005-04-15 2010-04-06 Merial Limited Vaccine formulations
RU2389506C2 (ru) 2005-09-09 2010-05-20 Интервет Интернэшнл Б.В. Вакцина против рсv-2
MX356667B (es) 2005-12-29 2018-06-08 Boehringer Ingelheim Vetmedica Inc Uso de una composicion inmunogenica de pcv2 para reducir los sintomas clinicos en cerdos.
KR101436794B1 (ko) 2005-12-29 2014-09-04 베링거잉겔하임베트메디카인코퍼레이티드 다가 ｐｃｖ2 면역원성 조성물 및 이러한 조성물의 제조방법
US20100136060A1 (en) 2006-11-22 2010-06-03 Boehringer Ingelheim Vetmedica, Inc. Methods of reducing porcine circovirus-associated disease outbreaks
WO2008073464A2 (en) 2006-12-11 2008-06-19 Boehringer Ingelheim Vetmedica, Inc. Effective method of treatment of porcine circovirus and lawsonia intracellularis infections
DK2094872T4 (da) * 2006-12-15 2020-05-18 Boehringer Ingelheim Animal Health Usa Inc Behandling af anti-PCV2-antistofseropositive svin med PCV2-antigen
EP1941903A1 (en) * 2007-01-03 2008-07-09 Boehringer Ingelheim Vetmedica Gmbh Prophylaxis and treatment of PRDC
EP1958644A1 (en) * 2007-02-13 2008-08-20 Boehringer Ingelheim Vetmedica Gmbh Prevention and treatment of sub-clinical pcvd
GB0712160D0 (en) * 2007-06-22 2007-08-01 Univ Ghent Methods and compositions in the treatment of procine circoviral infection
US20090017064A1 (en) 2007-07-10 2009-01-15 Wyeth Methods and Compositions for Immunizing Pigs Against Porcine Circovirus
US7829274B2 (en) 2007-09-04 2010-11-09 Boehringer Ingelheim Vetmedica, Inc. Reduction of concomitant infections in pigs by the use of PCV2 antigen
WO2009126356A2 (en) 2008-01-23 2009-10-15 Boehringer Ingelheim Vetmedica, Inc. Pcv2 mycoplasma hyopneumoniae immunogenic compositions and methods of producing such compositions
WO2009103037A1 (en) 2008-02-15 2009-08-20 Boehringer Ingelheim Vetmedica, Inc. Methods and compositions for reducing the impact of enteric diseases
US8444989B1 (en) 2008-04-18 2013-05-21 Boehringer Ingelheim Vetmedica Gmbh One dose vaccination against mycoplasma infections of pigs
US20100150959A1 (en) 2008-12-15 2010-06-17 Vectogen Pty Ltd. PCV 2-Based Methods and Compositions for the Treatment of Pigs
TWI627281B (zh) 2009-09-02 2018-06-21 百靈佳殷格翰家畜藥品公司 降低ｐｃｖ－２組合物殺病毒活性之方法及具有改良免疫原性之ｐｃｖ－２組合物
WO2011075379A1 (en) 2009-12-18 2011-06-23 Boehringer Ingelheim Vetmedica, Inc. Multivalent vaccine against porcine teschovirus and other disease causing organisms in swine
SI2547770T1 (sl) 2010-03-16 2020-07-31 Virginia Tech Intellectual Properties, Inc. Vakcina atenuiranega živega himernega prašičjega virusa
WO2012033911A2 (en) 2010-09-08 2012-03-15 The Johns Hopkins University Polyionic papilloma virus-like particle (vlp) vaccines
CN103122352B (zh) 2012-09-27 2015-02-11 华中农业大学 一种猪圆环病毒2型重组杆状病毒及制备方法和应用
WO2014134561A2 (en) 2013-03-01 2014-09-04 Boehringer Ingelheim Vetmedica, Inc. Quantification of vaccine compositions
WO2014179200A1 (en) 2013-04-30 2014-11-06 Boehringer Ingelheim Vetmedica, Inc. Orf2 protein of pcv2 subtype a (pcv2a) for use in cross-protection
WO2014187822A1 (en) 2013-05-22 2014-11-27 Boehringer Ingelheim Espana, S.A. Method for the reduction of pcv-2 in a herd of swine
EP3035958B1 (en) 2013-08-23 2022-10-26 Boehringer Ingelheim Animal Health USA Inc. Porcine circovirus type 2 (pcv2) subunit vaccine
CA2924228C (en) 2013-10-02 2024-01-16 Boehringer Ingelheim Vetmedica, Inc. Pcv2 orf2 protein variant and virus like particles composed thereof
US10555994B2 (en) 2015-03-30 2020-02-11 Boehringer Ingelheim Animal Health USA Inc. PCV2 ORF2 carrier platform

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