TWI306097B

TWI306097B - 18-membered macrocycles and analogs thereof

Info

Publication number: TWI306097B
Application number: TW094115942A
Authority: TW
Inventors: Youe-Kong Shue; Chan-Kou Hwang; Yu Hung Chiu; Alex Romero; Farah Babakhani; Pamela Sears; Franklin Okumu
Original assignee: Optimer Pharmaceuticals Inc
Priority date: 2005-01-31
Filing date: 2005-05-17
Publication date: 2009-02-11
Also published as: KR20070110504A; WO2006085838A1; CA2596387C; AU2005327308B2; AU2005327308A1; MX340742B; CA2596387A1; CN102614207B; JP2008528582A; CN101128114B; KR101203118B1; JP5166040B2; TW200626585A; EP1848273A4; MX2007009196A; BRPI0519890A2; CN102614207A; EP1848273A1; CN101128114A

Description

1306097 # 九、發明說明：【發明所屬之技術領域】本發月係關於18員大環抗菌劑，稱為Tiacumicins，特別 ‘ *R-Tiacumicin B或Tiacumicin B及其相關化合物。明確而 s，實質上純粹的R_Tiacumiein B作為有效抗菌劑供細菌感染之治療’特別是由梭菌屬difficile(c difficile)、金黃色葡萄球菌（S.aureus)包括抗曱氧西林金黃色葡萄球菌 (MRSA)及梭菌屬 perfringens(C. perfringens)之毒素產生菌 _種造成之GI感染。【先前技術】大環為一種重要抗菌劑之治療種類。此等化合物時常作為费切相關的生物同源物屬產生^ Tiacumicins為一系列 1 8-員大環抗菌劑’其中大環係以配糖方式接附至一或二個糖。7碳糖係在各種位置下用小脂肪酸酯化。其他糖， §存在時’係用全部取代的苯甲酸’扁枝衣酸西旨化。 (Journal of Liquid Chromatogrphy，1988,ll:191-201) °

Tiacumicins為相關化合物屬，其包含下式i顯示之is·員

101495.doc 1306097 (TiaCUmicin A_F)由其取代基Rl、“及R3之特定圖案界定 (美國專利4,918，174 號；J.Antibiotics，1987,4〇.575 588)，如表1所示。表1.存在於Tiacumcins A-F之取代基

之檢視顯示特定科屬之員在結構上為相關異構體及/或因 101495.doc 1306097 特定基團之之存在或不存在而不同。其他在其酯基之性質方面不同。

Tiacumicins係由細菌產生，包括橙黃色指孢囊菌屬亞屬 hamdenensis，其可獲自 ARS Patent Collection of the

Northern Regional Research Center,United States Department of Agriculture，1815 North University Street,Peoria,IL 61604,登記號NRRL 1 8085。菌種AB 718C-41之特性提供於 J.Anibiotics,l987,40:567-574及美國專利 4,918,174號。 C. difficile關聯的腹瀉（CDAD)為一種具有嚴重又痛苦腹瀉特徵的疾病。C. difficile回應約抗菌關聯腹瀉（ADD)之情況之20%及抗菌關聯結腸炎（AAC)之大部分情況。此等疾病通常由C_ difficile,S.aureus包括抗曱氧西林 S.aureus(MRSA)及梭菌屬 perfringens(C. perfringens)之毒素產生菌種造成。ADD代表一種對衛生保健系統之主要經濟負擔，其保守估計僅在美國一地之過量醫院成本在每年 30-60億美元。對腸集群提供恆定感染槽之抗萬古霉素腸球菌亦顯示作為與增加衛生保健成本與死亡率相關之大部分醫院病原體。VRE可出現為感染有C. difficile之病患的共同感染，或更通常造成特定高危險病患如血液學及腫瘤學病患、在密集保健單元之病患及接受固態器官移植之病患之感染。抗甲氧西林葡萄球菌如MRSA在醫院及團體設備之發病率增加。葡萄球菌發現在皮膚上及在消化與呼吸道内但可感染打開的傷口及燒傷並可進展至嚴重系統性感染。抗多 10l495.doc 1306097 重藥物葡萄球菌之出現，尤其是在抗菌用途普遍及對於抗藥物生物體之選擇性壓力高之醫院經證實對治療此等病患具有挑戰性。MRSA在病患及衛生保健工作者之皮膚上之存在可促進抗多重藥物生物體之輸送。類似疾病包括但不限於梭菌小結腸炎、新生兒腹瀉、抗菌相關小結腸炎、突發性小結腸炎及醫院小結腸炎，在若干動物類型中亦為顯著問題。 _ ADD在醫院及長期保養設備及團體為顯著問題。^ difficile為ADD在醫院裝置之主要原因，引起約aDD病情之20。/〇及大部分抗菌相關結腸炎病情（ACC)之結果。梭菌 - dlfflclle^s關腹瀉（CDAD)之上升傳染範圍歸因於寬光譜抗菌劑對住院病患之時常處方。疾病之最嚴重形式為假膜結腸炎（PMC)，其係由結腸炎與黏膜斑以組織學上以及由嚴重腹瀉、腹部痙攣及系統毒性珍斷上顯示。自CDAD之總死亡率低，但在引起嚴重結 φ 腸炎或系統毒性之病患中大得多。近期研究顯示即使死亡並非直接歸因於C. difficile，惟CDAD病患之死亡率較病情匹配對照組仍大得多。腹瀉及結腸炎係由一種或多種C. difficile毒性之同化作用造成。生物體在已經提供寬光譜抗菌劑或較不通常地癌症化學治療之病患結腸中之增殖。CDAD被診斷於約20〇/〇住院病患’其在用该劑治療後顯示腹填。目前對CDAD有二種主要療法：萬古霉素及 metronidazole。萬古霉素未被推薦供CDAD之第一線治 101495.doc 1306097 _ 療，主要乃因為其為僅抗菌活性對抗若干嚴重威脅生命抗多重藥物細菌。因此，在使抗萬古霉素腸球菌（v剛或抗萬古霉素s.aureus(VRSA)之出現降至最低的努力中，除了邑對萬要時，醫藥團體不鼓勵使用此等藥物。

Metronidaz〇ie被推薦作為最初療法，無關於抗萬古霉素腸菌株，尤其是腸球菌之促進及選擇。不管c·心历抗性之頻率在有些國家中可為>6%之報導，編⑺仙㈣^仍 _幾+與萬苦霉素一樣效$、相當便宜且可口服或靜脈内使用。Metronidazole與不良反應相關，包括噁心、神經病、白細胞減少症、癲癇發作及對醇之毒性反應。此外，對孩 .童或懷孕婦女之使用亦不安全。臨床再發在用萬古霉素或 .Metronidazole治療後最多20〇/〇病情内發生。經報導用 Metronidazole之療法對VRE移植及感染為重要危險因素。目前對抗腸胃感染如梭菌difficile相關腹瀉（CDAD)之治療體制相當繁雜’需要高達5 〇〇毫克每曰4次歷1〇至14曰。因 • 此，對CDAD之病情及其他抗菌相關腹瀉（AAD)及抗菌相關結腸炎（AAC)之病情需要較佳治療。

Tiacumicins ’特別是Tiacumicin B對抗各種細菌病原，特別是C.difficile ’格蘭氏陽性細菌顯示活性 (Antimicrob.Agent Chem〇ther，1991,1108-llll)〇 C.difficile 為造成腹部感染之厭氧芽孢形成細菌。腹瀉為最通常症候群但腹痛及發燒亦會發生。C.difficile為結腸炎（結腸發炎）腹馮之主要病因劑，其會根據抗菌攝入發生。此細菌主要在醫院及慢性保養設備中獲得。因為Tiacumicin B顯示對 10l495.doc -10· 1306097 抗C.difficile之突出活性，一般預期可用於治療細菌感染’尤其是哺乳動之腸胃道。該治療之例包括但不限於結腸炎之治療及刺激性腸症候群之治療。Tiacumicins亦可發現用於腸胃癌之治療。丁18〇1111^(^11抗菌劑敘述於美國專利4,918，174號（1990/4/17 印出），J.Antibiotics 1987,40:575-588, J. Antibiotics 1987,40:567-574,J.Li quid Chromatography 1988,11:191-鲁 201,Antimicrobial Agents and Chemotherapy 1991,35:1108- 1111，美國專利5,583，115號（1996/12/10印出）及美國專利 5,767,096號（1998/6/16印出），其皆以引例方式併入本文。 - 相關化合物為閏年霉素抗菌劑（參照J.Chem.Soc.Perkin -. Trans.I，1987，1353-1357及 J.Antibiotics 1988,41:308-315)及 • 梭菌霉素抗菌劑（J.Antibiotics 1986,39:1407-1412)，其皆以引例方式併入本文。【發明内容】 ^ 本發明係關於包含R-Tiacumicin B，明確而言，光學上純粹的R-Tiacumicin B之新穎醫藥組合物，以及關於此等新賴組合物結合現存藥物之用途以治療由格蘭氏陽性厭氧函造成之感染。本發明之一具體例係針對在Tiacumicin B之C-19之對掌中心對生物活性具有很大影響之發現。頃發現實質上純粹的較高活性Tiacumicin B之製劑，其具有在c-19之R-羥基具有較光學上純粹的Tiacumicin B之S -異構體及其他

Tiacumicin B相關化合物更低的MIC值。 10I495.doc 1306097 在本發明之另一具體例中，實質上純粹的R Tiacumicin B具有不尋常長的抗菌後活性（PAE)。本發明藉由微升物體澄黃色指孢囊菌屬亞屬 hamdenensis之浸水厭氧發酵涵蓋具有實質上純粹的R_ Tiacumicin B之新穎抗處劑之組合物。生產方法係由wo 2004/014295涵蓋。術語’’抗菌相關條件”意指當抗菌療法干擾腸之微生物菌 _ 株之平衡’谷許病原有機體如C.difficile、S.aureus及 C.perfringens之腸毒素產生菌型繁生時之條件結果。此等有機體可造成腹?寫、假膜結腸炎及結腸炎以及由腹满、緊 • 急情況、腹部痙攣、後墜及發燒以及其他症候群。當腹瀉 .- 嚴重時會造成脫水以及與脫水相關之醫藥併發症。 .術s吾”不對稱取代”意指分子結構，其中具有四個四面體價之原子接附至四個不同原子或基團。最通常情況涉及碳原子。在该情況下，互相為非可重疊鏡像之每碳原子結果 φ二個光學異構體（D-及L-對映異構體或R-及S-對映異構體）。許多化合物具有超過一個不對稱碳。此導致許多光學異構體之可能性，其數目由式2n決定，其中11為不對稱碳之數目。本文所用之術語"流體培養基"意指在發酵期間或之後所得之流體培養基。流體培養基包含水、所欲抗菌劑、新營養物、活的或死的有機體、新陳代謝產物及具有或不具有吸附性產物之吸附劑之混合物。術語"C-19酮"意指以下式Π所示之Tiacumcin B相關化合 I0I495.doc -12- 1306097 物：

術語”非對映體"意義指互相為非鏡像之立體異構體。術語”對映體"意指本身之非重疊鏡像。光學活性異構體之對映體係以最初異構體之相等但相對方向旋轉平面極化光°等份之光學活性異構體之溶液及其對映體已知為外消旋溶液並具有零之平面極化光之淨旋轉。對映體具有互相相對詞頭D-變成L-或R-變成S-。通常在生物系統中僅一個

對映體為活性’因為大部分生物反應為酶性而酶僅可接附至對映體之一。術語"賦形劑"意指加入藥理組合物以進一步便利化合物之服用之惰性物質。賦形劑之例包括但不限於碳酸鈣、磷酸鈣、各種糖及澱粉類、纖維素衍生物、明膠、植物油及聚乙二醇。術語”鹵素π包括F、Cl、Br及I。術語”異構混合物”意指一種具有相同化學式之二種或多種構型上相異種類之混合物。異構混合物為一種包含各個異構種類之屬。異構混合物之例包括立體異構體（對映體 101495.doc 1306097 或非對映體）、區異構體，例如’自周環反應之可能結果。本發明之化合物包含不對稱取代的碳原子。該不對稱取代的碳原子可造成在特定不對稱取代的碳原子之立體異構體或單一立體異構體之混合物。因此，外消旋混合物、非對映體之混合物以及本發明化合物之單一非對映體包括於本發明内。術語”閏年霉素"A4"意指下式m所示之Tiacumicin b相關化合物：

式III 術π低奴烧基"無論單獨或結合意指視需要取代的直鏈或視需要取代的支鏈，具有i至約8個碳原子（例如， 1， 2, c3，c4，c5’ c6，C7，c8s),更佳為1至4個碳原子（例如，Ci C2，C' CO。烷基之例包括甲基、乙基、正丙基、異丙基正丁基、異丁基、第二丁基、第三丁基。”低碳烧基” 通常為較短烷基，例如，包含i至約4個碳原子（例如， C2，C3，C4，）之燒基。術π大環思扣通吊包含超過丨0個原子之大環結構之有機分子。 101495.doc ]4· 1306097 術語"18員大環，，意指子0 包含18個原子之環結構之有機分包括上述碳環及雜之數目。因此，P比呋喃及嘧吩為5員術語”員環"可包含任何環狀結構，環。術語”員，，意指構成環之架構原子 °定、吡喃及硫代吡喃為6員環及吡，各、術語"MIC"或"最低抑制濃晨度意私抑制試管中分離菌生抗菌劑之最低濃度。測定抗菌劑之霞之共同方離若干包含系列抗菌劑稀釋液之管，㈣用有關分離滴培育。抗菌劑之MIC可自且有顯- .y 』目八有顯不無濁度（無生長）之豉低濃度之管測定。術語"MIC50"意指抑制在規定細菌類内試驗之菌株之蕭生長率所需之抗菌劑之最低濃度。術語”MIC90”意指抑制在規定細菌類内試驗之菌株之卿生長率所需之抗菌劑之最低濃度。術語”OPT-80”意指包含約7(M00%，較佳為9〇%(針對整個抗菌物質，依照HPLC分析法）光學純粹 B(其具有R-經基在C_19,參照式IV)。其餘部分主要由小量 Tiacumicin B相關化合物（包括但不限於閏年霉素八4及匸_19 酮）組成。此類製劑詳述於PCT申請案pcT/US〇3/2i977，具有國際公告案號數為W0 2004/0 14295及其製備方法皆以引例方式併入本文。然而，對於專用於非人類，可使用包含低於70%(針對整個抗菌物質，依照hplc分析法）光學純粹 R-Tiacumicin B之粗製 ”〇PT-80”。 101495.doc -15- 1306097 術語’ORTEP"指以Fortran書寫，供繪製結晶結構圖解之 Oak Ridge Thermal Ellipsoid Plot電腦程式。品質適於公告之球棒型圖解係用在原子位置上自各向異性溫度因素參數衍生之球體或熱運動或然率橢圓體產生。此程式亦產生立體圖解對’其有助於複雜原子排列及其有關熱運動圖案之視覺化。術語’’PAE"或"抗菌後功效"意指成立良好的藥物動力參數’其反映在抗菌暴露後細菌生長之持久抑制性。術語”病患"意指需要藥物治療之人類或動物。為了本發明之目的’病患通常在初級醫護設施如醫院或療養所内予以治療。然而’與使用抗菌劑或癌症化學治療或抗病毒治療相關之疾病治療可在自初級醫護設施出院後以門診病患為基礎’或可由未與初級醫護設施相關之家護醫生指定。需要醫藥治療之動物通常在獸醫之照顧下。術語"醫藥上可接受載體，，意指醫藥上可接受載體或稀釋劑。術語醫藥上可接受鹽，，意指自醫藥上可接受無機及有機鹼何生者。自適當鹼衍生之鹽包括鹼金屬（例如，鈉或鉀）、鹼土金屬（例如，鎂）、銨及n(Ci_C4烷基）4+鹽等。其例不例包括氫氧化鈉、氫氧化鉀、氫氧化膽鹼、碳酸鈉等。尔、也σ切思指一種具有一種或多種上述 Tiacumieins之混合物，或其生理上可接受鹽與其他化學成刀士生理上可接受载體及/或賦形劑之混合物。冑藥組合 101495.doc -16 - 1306097 物之目的為便利化合物對有機體之服用。術語”生理上可接受載體"意指一種載體或稀釋劑，其不會對有機體造成顯著刺激且不會消除服用化合物之生物活性及特性。術語”假膜結腸炎”或’'腸炎"意指由於小與大腸之粘膜之發炎，假膜物質（即，由纖維蛋白、粘液、壞死上皮細胞及白血球所組成之物質）之形成。術語”R"與”S"構型，如本文所用，係由IUPAC 1974 Recommendaitons for Section E,Fundamental Stereochemistry,Pure Appl.Chem_(1976)45,13-30定義。對掌分子可根據原子或原子群之原子數，接附至對掌中心之配位子取名。配位子給予優先次序（原子數愈高優先次序愈高），若優先次序以順時鐘方向增加時，其稱為R-。反之，若其係以逆時鐘方向優先次序時，其稱為S-。術語”R-Tiacumicin B"意指 Tiacumicin B與（R)-經基在 C-k 19下之光學純粹（R)-異構體，如下式IV所示：

式IV 101495.doc -17- 1306097 術語，，S-Tia_idn B，，意指 Tiacumicin B與⑻經 19下之光學純粹（s)·異構體，如下式v所示. 土

術語"立體異構體"意指化合物，其分子具有相同數目i 種類之原子與相同原子排列，但其空間排列卻不同。- 術語”糖••通常指單、二或低糖類。糖化物可被取代，例如’葡萄糖胺、半乳糖胺、乙醯葡萄糖、乙酿半乳糖、N_ 乙醯葡萄糖胺、N-乙醯半乳糖胺、半乳糖基_N_乙醯葡萄糖胺、N·乙醯神經胺糖酸(唾液酸)等，以及硫酸化與磷酸化糖。為了此定義之㈣’糖化物呈現其蚍喃糖或趺喃糖形式。本文所用之術語”Tiacumicin"意指化合物屬，其皆包含下式I所示之18員大環： 101495.doc -18· 1306097

所用之術語”Tiacumicin B”意指下式VI所示之18員大環：

式VI 本文所用之術語"產率"意指甲醇中再組成之粗製 Tiacumicin對最初發酵培養基相同體積之量。產率係由標 # 準HPLC技術測定。產率係以毫克/升單元紀錄。本發明包含新穎抗生物劑，Tiacumicins，藉由微生物撥 κ色#曰抱囊滷屬亞類hamdenensis之浸泡厭氧發酵之組人物。此製造方法係由WO 2004/014295 A2涵蓋。本發明係關於新穎抗菌組合物，包含R_Tiacuinicins，特別是R-Tiacumicin B(其具有R-羥基在C_19)，及關於此等新賴組合物結合現存藥物之使用以治療由格蘭氏陽性厭氧造成之感染。 101495.doc -19- 1306097 本發明進一步係關於新穎OPT_80製劑，其包含70_ 1 00% ’較佳為90%(針對整個抗菌物質，由hplc分析法） R-Tiacumicin Β。其餘部分主要由小量Tiacumicin β相關化合物（包括但不限於閏年霉素A4及C-19酮）。此類製劑詳述於PCT申請案PCT/US03/21977，具有國際公告案號數為 WO 2004/014295 A2。然而，對於專用於非人類，可使用包含低於70%(針對整個抗菌物質，依照hPLC分析法）R_

Tiacumicin B之粗製 OPT-80。根據本發明提供一種具有下式VII結構之化合物：

式VII 其中： X係選自低碳烷基，且其中本文所用之術語"低碳烷基" 意指包含1至2個碳原子之支鏈或直鏈烷基’包括曱基、乙基、正丙基、異丙基等；及 Y係選自OH或酮（=0);及 Z係選自Η或低碳烷基，且其中本文所用之術語"低碳烷基''意指包含1至5個碳原子之支鏈或直鏈烷基，包括甲 101495.doc •20- 1306097 基、乙基、丙基、異丙基、正丁基、異丁基等。本發明之較佳化合物為式VII之化合物，其中χ為甲基或乙基，Y為酮（=0)或OH而Z為異丙基。本發明之更佳化合物為式VII之化合物，其中χ為乙基， Y為酿!（=〇)或OH而Z為異丙基。本發明之最佳化合物為式νπ之化合物，其中χ為乙基、 Υ為OH R而Ζ為異丙基。本發明之一具體例為針對一項發現，即，在Tiacumicin B之C-19之對掌中心對生物活性具有很大影響。頃發現在 C-19具有 R-羥基之 R_ Tiacumicin B 具有較 s_ Tiacumicin b . 及其他Tiacumicin B相關化合物（閏年霉素A4&c_19酮）更高活性。較高活性係由低得多MIC值顯示，其可參照以下只例 3、表 3 及 4 供 c.diffiCile，S.aureus,E.faecalis 及 E.faecium。（^9對掌中心對生物活性之影響為一项意外又新穎發現。 • 載本發明之另一具體例中，〇PT-80(其幾乎全部由R_ Tiacumicin B組成）具有不尋常長的抗菌後功效（pA幻。此敘述於實例4，其中，〇ρτ_8〇具有pAE為大於Μ小時。此 PAE具有較一般抗菌PAE長1-5小時。本發明亦關於醫藥組合物之揭示，其包含一種本發明化合物與醫藥上可接受載體之結合。本發明之另一態樣揭示一種抑制或治療人類之細菌感染 ^方法，包括將治療上有效量之本發明化合物或與另一抗函或抗真滷劑之結合給藥至病患。 101495.doc -21 - 1306097 製造 18員大環及其類似物係由發酵製造。澄黃色指孢囊菌屬亞屬 hamdenensis AB 718C-41 NRRL 18085 之培育供 Tiaciimicins之製造係在包含碳源、無機鹽及其他有機成分之培養基中與一種或多種吸收劑在適當厭氧條件下實施並在诮毒環境中混合。製活性抗涵劑之k生物證實為屬於Actinoplanaceae 屬’指孢囊菌屬（Journal of Antibiotics, 1987,40:567-574及美國專利4,918,174) ^其標示為澄黃色指孢囊菌屬亞屬 hamdenensis 718C-41。次培養物係獲自 ARS Patent

Collection of the Northern Regional Research Center, United States Department of Agriculture, 1815 North University 81代61，？6〇1^，11^61604，11.8.八.，其中其被分配登記號NRRL 18085。菌株AB 718C-41之特徵敘述於Journal of Antibiotics，1987,40:567-574及美國專利 4,918,174。

本發明包含新穎抗菌劑，Tiacumicins，藉由微生物澄黃色指孢囊菌屬亞屬hamdenensis之浸泡的厭氧發酵。製造方法敘述於WO 2004/014295 A2，其係以引例方式併入本文。醫藥調配物及給藥本發明之Tiacumicin化合物之醫藥組合物，明確而言，〇?丁-80(其幾乎全部由尺_1^<：11111丨(^116組成），根據本發明可調配以在給藥時實質上立刻或在任何預定時間或在給藥後一段時間釋放抗菌劑。 101495.doc -22- 1306097 後者組合物類已知為改良釋放調配物，其包括在胃道内產生實質上一定藥物濃度一段長時間之調配物，及根據暫時或環境標準具有改良釋放特性之調配物，如敘述於 Modified-Release Drug Delivery Technology, ed. M. J. Rathbone, J.Hodgraft and M.S.Roberts. Marcel Dekker,Inc.New York。任何口服生物上可接受劑量形式或其結合皆可用於本發明之方法中。該劑量形式之例包括但不限於可嚼錠劑、快溶錠劑、起泡錠劑、可再組合粉劑、驰劑、液體、栓劑、 • 乳膏、溶液、懸浮液、乳液、錠劑、多層錠劑、雙層錠劑、膠囊、軟明膠膠曩、硬明膠膠囊、滲透性膠囊、 . caplets、錠片、可嚼錠片、珠狀物、粉劑、顆粒、粉粒、微粒、可分散顆粒、可攝食物、浸劑、保健條（health * bars)、混合藥劑、動物進料、縠物、榖物溶衣、食物、營養食物、功能性食物及其結合。任何上述劑量形式之製劑為熟悉此技藝者已知。此外，醫藥調配物亦可設計成當到 ^ 達目標位置時提供抗菌劑之直接或經控制釋放。直接或經控制釋放組合物之選擇端視各種因素而定，包括欲治療格蘭氏陽性菌之種類及抗菌容易性及治療法之抑菌/殺菌特性。此技藝已知製造調配物之方法揭示於，例如， Remington:The Science and Practice of Pharmacy (20th ed.)5 ed. A. R. Gennaro, 2000，Lippincott Williams & Wilkins,費城，或於 Encuclopedia of Pharmaceutical Technology, eds. J. Swarbrick and J. C. Boylan, 1988-1999, Marcel Dekker，紐約。口服用之直接釋放調配物包括錠劑或膠囊，其包含活性 101495.doc -23- 1306097 成:於與無毒醫藥上可接受賦形劑之混合物内。此等賦形 '、、例如’惰性稀釋劑或填充劑（例如，蔗糖、山梨酉享、儀* sc·*" 路醇、微晶纖維素、包括馬鈴薯澱粉之澱粉、石厌Sx鈣、氯化鈉、乳糖、磷酸鈣、硫酸鈣、或磷酸納）；粒化或崩解劑(例⑹，纖維素衍生物，包括微晶纖維素、包括馬鈴薯殿粉之澱粉、交聯之幾曱基纖維素鋼、海藻酸鹽或海藻酸）；枯合劑（例如，荒糖、葡萄糖、甘露醇、山 4醇、阿拉伯膠、海藻酸、海藻酸鈉、明膠、澱粉、預膠化澱粉、微晶纖維素、矽酸鋁鎂、羧曱基纖維素鈉、甲基纖維素、羥基丙基甲基纖維素、乙基纖維素、聚乙烯吡咯烧綱或聚乙二醇）；及潤滑劑、助流劑及抗黏著劑（例如，硬月θ酸鎂、硬脂酸鋅、硬脂酸、矽石、氫化植物油或滑石）°其他醫藥上可接受賦形劑可為著色劑、風味劑、塑化4彳保濕劑、緩衝劑等揭示於Handbook of Pharmaceutical Excipients,third edition,edited by Arthur H.Kibbe.American

Pharmaceutical Association Washington DC o 溶解或擴散控制釋放可由化合物之錠劑、膠囊、柱劑或顆粒調配物之適當塗料或藉由加入化合物於適當基質内達成。經控制釋放塗料可包括一種或多種上述塗佈物質及/ 或蟲膠、蜂蠟、糖蠟、蓖麻油蠟、巴西棕櫊蠟、硬脂醇、單硬脂酸甘油酯、棕橺硬脂酸甘油醇、乙基纖維素、丙烯酸樹脂、二聚醋酸、丁酸纖維素醋酸酯、聚乙烯氯、聚醋酸乙烯酯、乙烯吡咯烷酮、聚乙烯、聚甲基丙烯酸酯、甲基丙稀酸甲醋、2 -經基甲基丙稀酸g旨、甲基丙稀酸g旨水凝 101495.doc •24- 1306097 膠、1，3-丁二醇、乙二醇曱基丙稀酸酯、及/或聚乙二醇。在經控制釋放基質調配物中’基材亦可包括，例如，水合甲基纖維素、巴西棕櫚蠟及硬脂醇、聚羧乙烯934、矽酮、三硬脂酸甘油酯、丙烯酸曱酯_甲基丙烯酸甲酯、聚乙烯氣、聚乙烯、及/或氫化氟碳。經控制釋放組合物亦可呈現浮懸錠劑或膠囊形式（即，口服時，浮在胃内含物之頂上一段特定時間之錠劑或膠囊）。化合物之浮懸錠劑調配物可由粒化抗菌劑與賦形劑之混合物及20-75%w/w水解膠體如羥基乙基纖維素、羥基丙基纖維素或絲丙基甲基纖維素製備。錢，所得顆粒可壓成為錠劑。在接觸胃汁時’鍵劑環繞胃表面形成一種實質上不滲透水凝膠障壁物。此凝膠障壁物保持低於!之密度’藉此容許鍵劑仍浮懸於胃汁内。其他有用經控制釋放組合物為此技藝者已知（參照’例如’美國專利 4,946,685及 6,261，601)。 ,“：釋放組口物可由壓塗核組成，其幾何構型控制包膠

是opt，可在腸溶衣内包膠，並 >部由R-Tiacumicin組成），其明之Tiacumicin化合物，特別 ’其包防止釋放降解及發生在 101495.doc •25- 1306097 胃内之釋放，但容易溶解於小腸内之弱酸性或中和pH環境内為了釋放抗菌劑至結腸之調配物，亦可使用技術如依 ’、、、夺間而又、依照而定或聚合物基質或塗料之酶侵姓。包含本發明之Tiacumicin化合物之目標輸送特性，特別是OPT 80(其幾乎全部由R_Tiacumicin b組成）之調配物可由其他方式改良。例如，抗菌劑可由摻雜、離子締合、氫粘合、疏水粘合或共價粘合錯合。此外，易於酶或微生物 _ 水解之聚合物或錯合物亦可用作輸送藥物之物質。本發明之Tiacumicin化合物，特別是〇ρτ·8〇(其幾乎全部由R-TiaCumicin Β組成）之小球包膠為另一有用醫藥調配物 •供目標抗菌釋放。含抗菌劑之小球可單獨用於抗菌輸送或 ' 作為二階段釋放調配物之一成分。適當階段式釋放調配物 - 可由包膠本發明之化合物，特別是ΟΡΤ-80(其幾乎全部由 R-Tiacumicin β組成）之酸穩定性小球組成，以隨後於下方腸道内釋放，與直接釋放調配物摻合以輸送抗菌劑至胃及 φ 上方十二指腸。小球可由適當方法或由任何醫藥上可接受物質製得。特別有用者為類蛋白小球（參照，例如，美國專利5,6〇1，846 或5,792,451)及含PLGA小球（參照，例如，美國專利 6,235’224或5,672,659)。共用於小球形成之其他聚合物包括，例如，聚_ε -己内酯、聚（e-己内酯_c〇_DL_乳酸）、聚 (DL-乳酸）、聚（DL_乳酸-Co_乙醇酸）及聚（s_己内醋_c〇-乙醇酸K參照’例如’ pm等人，j. pha〇n. Sei， 68:1534，1979)。小球可由此技藝已知之程序包括喷霧乾 101495.doc -26- 1306097 燥、凝聚及乳化（參照，例如，Davis等人，Microsphere and Drug Therapy, 1984， Elsevier; Benoit 等人， Biodegradable Micro spheres: Advances in Production

Technologies, Chapter 3, ed. Benita, S. 1996, Dekker, New York; Micro encapsulation and Related Drug Processes, Ed. Deasy, 1984, Dekker,New York;美國專利 6,365,187)。適合製備本發明之1^3〇1111^(^11化合物，特別是0?丁-80(其幾乎全部由R-Tiacumicin B組成）之溶液或懸浮液之加水之粉劑、可分散粉劑或顆粒為口服用之方便劑量形式。作為懸浮液之調配物提供活性成分於與分散或濕潤劑、懸浮劑及一種或多種防腐劑之混合物内。適當分散或濕潤劑為，例如，天然產生之磷脂（卵磷脂或環氧乙烷與脂肪酸、長鏈脂肪醇或自脂肪酸衍生之局部酯之縮合產物）及己糖醇或己糖醇酐（例如，聚氧乙烯硬脂酸酯、聚氧乙烯山梨醇單油酸I旨、花楸丹單油酸S旨等）。適當懸浮劑為，例如，羧曱基纖維素鈉、曱基纖維素、海藻酸鈉等。【實施方式】實例以下實例藉說明本發明之特定例提供而絕無限制本發明之範圍。實例1-R-Tiacumicin B之真正結構 R-Tiacumicin B(主要活性成分為OPT-80)之真正結構示於下式IV。R-Tiacumicin B之X射線晶體結構獲自生長於甲醇内之無色平行管狀晶體（0.08x0.14x0.22毫米）並作為 101495.doc -27· 1306097 ORTEP圖表顯示於圖丨。此χ射線結構證實卞式IV所示之結構。正式化學名稱為3-[[[6-Deoxy-4-〇-(3,5-二氯-2-乙基-4,6-二羥基苯甲醯基）_2_〇_甲基-召-D_甘露p比喃糖基]氧基]_ 甲基]-12(R)-[[6-de〇xy_5-C-甲基-4-0-(2-甲基小氧丙基）-β-D-基氧代-己糖吡喃糖基]氧基]_n(s)_匕基_8(S)_羥基-18(S)-(1(R)-羥基乙基）―9」3」5·三甲基崎環十八_ 3,5,9，13，15-戊烯-2-酉同。

式IV 實例2-OPT-80與相關物質之分析數據〇卩丁80之釦析數據（其幾乎全部由尺_丁丨&(;1；111：1丨(：^113組成，其最活性成分為OPT-80)及三種相關化合物（s_Tiacumicin B，閏年霉素A4及C-19酮）概述如下。此等化合物之結構顯示於下式VIII及表2。 101495.doc -28- 1306097

式 VIII

表2 : R-Tiacumicin B之結構（主要最活性成分為OPT-80) 及相關物質化合物 X Y Z R-Tiacumicin B 乙基 (R)-OH 異丙基 S-Tiacumicin B 乙基 (S)-OH 異丙基閏年霉素A4 甲基 (S)-OH 異丙基 C_19 酮乙基 =〇異丙基 R-Tiacumicin Β之分析數據 mp 166-1 69°C (自異丙醇之白色針狀物） [a]D20-6.9 (c2.0, MeOH); MS m/z (ESI) 1079.7(M + Na)+; !H ]H NMR NMR (400 MHz, CD3OD) δ 7.21 (d, 1H), 6.59 (dd, 1H), 5.95 (ddd，1H)，5.83 (br s，1H)，5.57 (t，1H)，5.13 (br d，1H), 5.09 (t，1H)，5.02 (d, 1H), 4.71 (m, 1H), 4.71 (br s, 1H), 4.64 (br s, 1H), 4.61 (d, 1H), 4.42 (d, 1H), 4.23 (m, 1H), 4.02 (pentet, 1H), 3.92 (dd, 1H), 3.73 (m, 2H), 3.70 (d, 1H), 3.56 (s, 3H), 3.52-3.56 (m, 2H), 2.92 (m, 2H), 2.64-2.76 (m, 3H), 2.59 (heptet, 1H), 2.49 (ddd, 1H), 2.42 (ddd, 1H), 2.01 (dq5 1H), 1.81 (s, 3H), 1.76 (s, 3H), 1.65 (s, 3H), 1.35 (d, 3H), 1.29 (m, 1H), 1.20 (t, 3H), 1.19 (d, 3 H), 1.17 (d, 101495.doc -29- 1306097

1.17 (d，3H)，1.16 (d, 3 H)，1_14 (s，3H)，1_12 (s，3H)，0.87 (t，3H); 13C NMR (100 MHz, CD3OD) 178.4, 169.7, 169.1, 154.6, 153.9, 146.2, 143.7, 141.9, 137.1, 137.0, 136.4, 134.6, 128.5, 126.9, 125.6, 124.6, 114.8, 112.8, 108.8, 102.3, 97.2, 94.3, 82.5, 78.6, 76.9, 75.9, 74.5, 73.5, 73.2, 72.8, 71.6, 70.5, 68.3, 63.9, 62.2, 42.5, 37.3, 35.4, 28.7, 28.3, 26.9, 26.4, 20.3, 19.6, 19.2, 18.7, 18.2, 17.6, 15.5, 14.6,14.0, 11.4 S-Tiacumicin B之分析數據

HPLC分離在MeOH中之 NaBH4

式 II(C-19 酮）式 V(S-Tiacumicin B) ‘ 三份NaBH4(9eq，48毫克）加入C-19酮（150毫克）於3毫升 MeOH内之溶液中。1小時後，加入飽和NH4CI溶液。混合物係用CHC13萃取，然後濃縮。S-Tiacumicin B係由YMC-包 ODS-A75X30 毫米 I.D·柱（H20:MeOH:AcOH 28:72:1)純馨化，可得純粹3 5毫克純S-Tiacumicin B。 MS m/z 1074.5 (Μ + NH4)+; !H NMR (400 MHz, CDC13) . 7.15 (d, J= 11.4 Hz, 1H)S 6.58 (άά, J = 14.1, 11.4 Hz, 1H), 5.82 (ddd, J= 14.1, 10.6, 3.5 Hz, 1H), 5.78 (s, 1H), 5.40 (dd, J= 7.8, 7.8 Hz, 1H), 5.15 (dd, J= 9.5, 9.5 Hz, 1H), 5.01 (d, J= 9.9 Hz, 1H)，5.01 (d，*/= 9·9 Hz，1H), 4.77 (ddd, «/= 5.8, 5.3, 5.3 Hz，1H)，4.68 (d，·/= 11.6 Hz, 1H), 4.65 (br s, 1H), 4.62 (br s5 1H), 4.42 (d, 7= 11.6 Hz, 1H), 4.28 (br s, 1H), 4.07-3.97 (m, 2H), 3.74-3.58 (m, 4H), 3.61 (s, 3H), 3.52 (dq, J = 101495.doc -30- 1306097 9.5, 5.8 Hz, 1H), 3.08 (dq, J= 12.6, 6.1 Hz, 1H), 3.01 (dq, J= 12.6, 6.1 Hz, 1H), 2.77-2.65 (m, 2H), 2.60 (heptet, J = 6.9 Hz, 1H), 2.55-2.44 (m, 3H), 1.95-1.84 (m, 1H), 1.80 (s, 3H), 1.76 (s, 3H), 1.66 (s, 3H), 1.34 (d, J= 5.8 Hz, 3H), 1.29-1.24 (m, 1H), 1.27 (d, J= 6.6 Hz, 3H), 1.21 (t,J= 6.1 Hz, 3H), 1.19 (d, J= 6.9 Hz, 3H), 1.18 (d, J= 6.9 Hz, 3H), 1.15 (s, 3H), 1.10 (s, 3H), 0.84 (t,J= 7.2 Hz, 3H); 13C NMR (100 MHz, CDC13) 177.4, 170.1, 168.8, 157.6, 152.8, 144.4, 143.1, 141.1, 136.7, 136.2, 134.9, 133.8, 128.7, 125.7, 125.2, 123.0, 113.9, 107.5, 107.2, 101.7, 94.9, 92.6, 80.8, 79.2, 76.6, 74.8, 73.5, 72.7, 71.9, 71.7, 70.2, 70.1, 69.5, 63.5, 62.3, 41.5, 36.6, 34.3, 29.5, 28.2, 26.2, 26.0, 19.4, 19.3, 18.9, 18.5, 17.8, 17.3, 15.3, 14.1, 13.7, 11.1 ；

Lipiarmycin A4之分析數據 MSm/zl060.5 (M + NH4)+;

!H NMR (400 MHz, CDC13) 7.12 (d, J= 11.6 Hz, 1H), 6.59 (dd, J = 14.1, 11.6 Hz, 1H), 5.85 (br s, 1H), 5.83 (ddd, J= 14.1, 10.6, 4.8 Hz, 1H), 5.47 (dd，《/= 8.3, 8.3 Hz，1H)，5.12 (dd，《/= 9.6, 9.6 Hz，1H)，5.00 (d, 10.1

Hz, 1H), 4.98 (br d, J= 10.6 Hz, 1H), 4.75-4.69 (m, 1H), 4.68 (d, /= 11.4 Hz, 1H)，4.66 (br s，1H)，4.62 (br s，1H)，4.40 (d，J= 11.4 Hz，1H)，4.26 (br s，1H)， 4.07-4.00 (m, 1H), 4.02 (br d,J= 3.3 Hz, 1H), 3.75-3.61 (m, 4H), 3.62 (s, 3H), 3.55 (dq, J= 9.6, 6.1 Hz, 1H), 2.82-2.45 (m, 6H), 2.60 (s, 3H), 2.07-1.97 (m, 1H), 1.92 (s, 3H), 1.81 (s, 3H), 1.67 (s, 3H), 1.32 (d, J= 6.1 Hz, 3H), 1.30-1.22 (m, 1H), 1.21 (d, 7= 6.6 Hz, 3H), 1.19 (d,J= 7.1 Hz, 3H), 1.18 (d, J= 7.1 Hz, 3H), 1.15 (s, 3H), 1.10 (s, 3H), 0.83 (t5 J= 7.2 Hz, 3H); 13C NMR (100 MHz, CDC13) 177.4, 170.5, 168.9, 157.8, 153.0, 144.3, 101495.doc 31 - 1306097 140.9, 137.7, 137.0, 136.3, 134.6, 134.4, 129.1，127.9, 125.3, 123.2, 114.5, 107.4, 107.0, 101.8, 94.7, 92.5, 80.3, 79.6, 76.7, 74.9, 73.5, 72.7, 71.9, 71.6, 70.2, 70.1, 69.1, 63.6, 62.3, 41.9, 36.9, 34.4, 28.8, 28.2, 25.9, 20.0, 19.3, 19.0, 18.6, 18.5,17.8, 17.2,15.5, 13.8. 11.2; C-19酮之分析數據 MS m/z 1072.5 (Μ + NH4)+; !H NMR (400 MHz, CDC13) . 7.27 (d, /= 11.4 Hz, 1H), 6.61 (dd, J = 14.7, 11.4 Hz, 1H), 5.91 (ddd, J= 14.7, 9.1, 5.8 Hz, 1H), 5.83 (s, 1H), 5.31

(dd, J= 7.9, 7.9 Hz, 1H), 5.14 (dd, J= 9.7, 9.7 Hz, 1H), 5.06 (d, J= 10.6 Hz, 1H), 5.00 (d, J= 10.1 Hz, 1H), 4.98 (dd, J= 7.1, 4.8 Hz, 1H), 4.67 (d, J = 11.9 Hz, 1H), 4.66 (br s, 1H), 4.61 (br s, 1H), 4.42 (d, J= 11.9 Hz, 1H), 4.30 (br s, 1H), 4.02 (br d, J= 3.3 Hz, 1H), 3.63-3.60 (m, 4H), 3.62 (s, 3H), 3.51 (dq, J= 9.7, 6.1 Hz, 1H), 3.09 (dq, J= 14.4, 7.3 Hz, 1H), 3.03 (dq5 J= 14.4, 7.3 Hz, 1H), 2.76-2.50 (m, 6H), 2.21 (s, 3H), 1.93-1.87 (m, 1H), 1.87 (s, 3H), 1.75 (s, 3H), 1.63 (s, 3H), 1.32 (d5 J= 6.1 Hz, 3H), 1.27-1.22 (m, 1H), 1.21 (t, J= 7.3 Hz, 3H), 1.19 (d, J= 7.1 Hz, 3H), 1.18 (d, 7.1 Hz, 3H), 1.14 (s, 3H), 1.10 (s, 3H), 0.84 (t, 7.3 Hz, 3H); 13C NMR (100 MHz, CDC13) 205.5, 177.4, 170.1, 166.9, 157.6, 152.8, 145.7, 143.1, 142.0, 137.1, 136.8, 135.5, 133.7, 128.3, 124.8, 124.0, 122.8, 113.9, 107.3, 107.2, 101.3, 94.8, 92.4, 80.4, 77.7, 76.6, 74.7, 73.5, 72.6, 71.8, 71.7, 70.2, 70.0, 63.0, 62.3, 41.5, 36.5, 34.3, 29.6, 28.1, 26.2, 26.1, 26.0, 19.2, 18.9, 18.5, 17.8, 17.3, 15.2, 14.0, 13.3, 11.0 實例3:生物活性對若干C.difficile菌株測定之MIC值 101495.doc -32- 1306097 測試ΟΡΤ-80(其幾乎全部由R-Tiacumicin B組成）及其相關化合物對抗C.difficile。MIC值敘述於下表3。可看出， OPT-80在相較於S-Tiacumicin B及閏年霉素 A4時特別活性效。表3:MIC(微克/毫升）對C.difficile菌株 C. difficile 菌株 OPT-80(幾乎全部由R· Tiacumicin Β 組成） S-Tiacumicin B 閏年霉素 A4 C-19 酮 ATCC 9689 0.03 0.125 0.06 0.06 ATCC 43255 0.125 1 0.5 0.5 ATCC 17857 0.03 0.25 0.06 nd LC# 1 (臨床隔離物） 0.125 1 0.5 0.5

對若干各種微生物測定之MIC值測試OPT-80(其幾乎全部由R-Tiacumicin B組成）及其相關化合物對抗若干其他病原。MIC值敘述於下表4。可看出，OPT-80比較S-Tiacumicin B及閏年霉素 A4時，特別有效。表4:MIC(微克/毫升）對其他為生物

菌株 ID# 有機體 OPT-80 (幾乎全部由R-Tiacumicin B 組成） S-Tiacumicin B 閏年霉素 A4 1 金黃色葡萄球菌 (ATCC 29213) 4 64 8 2 金黃色葡萄球菌 (MRSA) 4 64 16 3 金黃色葡萄球菌 (MRSA) 4 64 8 4 E. faecalis (ATCC 29212) 2 8 2 5 E. faecalis Vane, resistant 4 32 16 6 E. faecalis Vane, resistant 1 16 4 7 E. faecium Vane, resistant 1 8 4 8 E. faecium Vane, resistant 1 32 32 101495.doc -33 - 1306097 實例4:ΟΡΤ-80於C.difficile内之抗菌後功效對二菌株之C.difficile,ATCC 43255及臨床隔離物，LC3測定OPT-80(其幾乎全部由R-Tiacumicin B組成）之抗菌後功效（PAE)。另外對LC3試驗萬古霉素及利福平。可觀察PAE在4xMIC極長：對二菌株大於24小時。由於此功效之時間長，無法計算真正PAE。另一方面，萬古霉素當用在4xMIC對菌株LC3時具有更常PAE為低於1小時。實例5:OPT-80之試管中活性 ΟΡΤ-80(其幾乎全部由R-Tiacumicin Β組成）、 metronidazole及萬古霉素之試管中效率係對11 0遺傳上不同臨床隔離物之C.difficile藉由瓊脂稀釋評估。MIC數據呈現於表5及6。

表5.幾何平均值，MIC範圍，MIC5〇及MIC9〇值供OPT-80對抗llOC.difficile臨床隔離物、萬古霉素及metronidazole(微克/毫升）範圍幾何平均值 MICso MIC9〇 OPT-80 0.015-0.25 0.08 0.125 0.125 Metronidazole 0.025 - 0.5 0.15 0.125 0.25 萬古霉素 0.06 - 4 0.8 1 1 表 6.供 OPT-80、萬古霉素（VAN)及 metronidazole(MTZ)對抗llOC.difficile臨床隔離物（微克/毫升）之粗製MIC數據。 ORGID OPT-80 ΜΤΖ VAN ORGID OPT-80 MTZ VAN A1 1535 0.125 0.25 1 CO 1 4652 0.25 0.125 1 B1 832 0.06 0.125 1 CPI 5491 0.125 0.25 1 D1 1360 0.03 0.25 1 61 5930 0.03 0.25 1 El 816 0.06 0.125 1 63 6029 0.25 0.25 0.06 101495.doc -34- 1306097

FI 1015 0.125 0.125 1 64 5940 0.125 0.25 1 G11077 0.125 0.125 1 65 5967 0.06 0.25 0.5 11 1389 0.125 0.125 1 66 6366 0.015 0.125 0.5 J1 5971 0.06 0.25 1 67 6367 0.125 0.25 1 J7 4224 0.03 0.125 1 68 6368 0.03 0.125 0.06 J94478 0.06 0.125 1 69 6370 0.25 0.25 0.5 K1 4305 0.125 0.25 0.5 70 6376 0.125 0.25 2 K14 5780 0.125 0.125 1 71 6379 0.125 0.25 1 LI 1423 0.125 0.125 0.5 72 6380 0.125 0.25 2 N1 471 0.125 0.125 0.5 73 6382 0.25 0.25 1 Ol 1861 0.06 0.125 1 75 6388 0.125 0.125 0.5 ORG ID OPT-80 MTZ VAN OR ID OPT-80 MTZ VAN R1397 0.125 0.125 1 76 6389 0.125 0.25 0.5 R6 6015 0.015 0.25 2 77 6390 0.06 0.125 1 VI1521 0.125 0.125 0.5 78 6392 0.015 0.03 0.5 W1 3931 0.125 0.5 1 80 6327 0.125 0.125 0.5 XI1890 0.125 0.125 1 81 6328 0.125 0.125 0.5 Y1 5639 0.06 0.125 0.5 82 6329 0.06 0.03 0.5 Y2 1459 0.06 0.125 1 83 6330 0.06 0.125 0.5 Z13036 0.03 0.125 1 84 6331 0.125 0.25 0.5 AA2 4380 0.015 0.125 1 85 6332 0.06 0.125 1 AB2 1725 0.06 0.125 1 86 6333 0.03 0.125 0.5 AC1 1546 0.06 0.125 1 87 6334 0.125 0.125 0.5 AF11808 0.125 0.125 0.5 88 6335 0.125 0.25 0.5 AG1 3044 0.125 0.125 1 89 6336 0.25 0.5 1 AH1 3430 0.125 0.25 0.5 90 6338 0.125 0.125 1 AJ11557 0.06 0.125 1 91 6339 0.125 0.125 1 AL11753 0.06 0.125 0.5 93 6341 0.125 0.125 1 AN1 464 0.125 0.125 0.5 94 6343 0.015 0.06 0.5 AOl 287 0.125 0.125 1 95 6347 0.125 0.125 1 AS1 4099 0.125 0.125 1 96 6348 0.06 0.125 0.5 ATI 1216 0.125 0.125 1 97 6349 0.25 0.125 1 AVI 941 0.25 0.125 0.5 98 6350 0.125 0.5 1 CJ1 893 0.125 0.025 1 101 6354 0.015 0.06 1 AW1 4501 0.125 0.125 1 102 6355 0.016 0.125 1 BE1 4307 0.125 0.25 1 103 6068 0.06 0.125 1 BH1 4506 0.06 0.06 0.5 104 6060 0.03 0.25 1 BI1 1675 0.125 0.125 1 105 6071 0.03 0.125 0.5 BK1 4291 0.125 0.125 0.5 106 6078 0.03 0.25 0.5 BL1 716 0.125 0.125 1 107 6079 0.06 0.125 0.5 BM1 1453 0.06 0.125 1 109 6274 0.015 0.125 1 301495.doc -35 - 1306097 BN1 1322 0.125 0.25 1 111 6279 0.03 0.125 1 BR1 1321 0.06 0.125 1 112 6280 0.06 0.125 0.5 BT1 706 0.06 0.125 1 113 6304 0.06 0.125 1 BV1 1183 0.125 0.25 1 114 386 0.06 0.125 4 BW1 3130 0.125 0.125 1 115 5985 0.015 0.25 2 BX1 4271 0.125 0.25 1 116 5702 0.06 0.125 1 CN1 667 0.25 0.25 1 117 6026 0.06 0.125 2 CB1 1584 0.25 0.125 1 120 6057 0.03 0.25 1 CF1 5922 0.125 0.125 1 121 6072 0.06 0.25 0.5 CG1 1566 0.125 0.125 1 122 6111 0.25 0.25 0.5 CL1 3851 0.25 0.125 1 1 ⑽ 6353 0.125 0.25 1 實例6:ΟΡΤ-80比較對抗選擇性厭氧類之活性 ΟΡΤ-80之試管中活性係對抗350厭氧微生物測定。其實驗程序概述於 Antimicrobial Agents and Chemotherapy，2004, 48:4430-4434，其整個以引例方式併入本文。所有有機體，包括21C.difficile菌株為分離隔離物並在無性系上無關。每次進行包括由NCCLS推薦之所有品質控制格蘭氏陰性及陽性菌株：在每一情況中，其結果（可行性）在範圍内。 MIC試驗之結果呈現於表7。表7 OPT-80之MICs(微克/毫升）有機體 MIC範圍 MICs〇 MIC90 Bacteroides fragilis (19) 64->128 >128 >128 Ήοη-fragilis B. fragilis group species (38) 64->128 >128 >128 Prevotella/Porphyromonas species (42) 16->128 >128 >128 Fusobacterium nucleatum (14) 64->128 >128 >128 Fusobacterium mortiferum (10) 64->128 >128 >128 Fusobacterium species? miscellaneous (14) 16->128 >128 >128 Peptostreptococcus tetradius (16) 0.25 - 2.0 1.0 1.0 Peptostreptococcus asaccharolyticus (15) 0.25-1.0 0.5 1.0 Peptostreptococcus anaerobius (15) <0.016-0.03 <0.016 <0.016 Finegoldia magna (15) 0.25-2.0 1.0 1.0 Micromonas micros (14) <0.016-0.06 0.03 0.06 101495.doc -36- 1306097

Peptostreptococcus prevotii (3) 0.25-1.0 ΝΑ ΝΑ Propionibacterium acnes (20) 0.5-1.0 4.0 4.0 Eggerthella lenta (10) <0.016-0.06 <0.016 <0.03 厭氧格蘭氏陽性非孢子形成桿(20) <0.016-16 <0.125 16 Clostridium perfringens (35) <0.016-0.06 <0.016 0.03 Clostridium difficile (21) <0.016-0.25 <0.016 0.125 Clostridium tertium (10) <0.016-0.06 <0.016 0.03 Clostridium species (19) <0.016-0.06 <0.016 0.03 Clostridium spp. (all) (85) <0.016 — 0.06 <0.016 0.06 實例7:opt-80對抗腸菌之試管中活性評估OPT-80對抗腸菌之試管中活性。其實驗程序概述於 Antimicrobial Agents and Chemotherapy, 2004,48:4898-4902，其整個以引例方式併入本文。選擇抗微生物濃度範圍以涵蓋或超越在腸内達成之濃度 (至此資料可行之程度），進行藥物於試驗培養基内之溶解度限制。試驗期間所用之OPT-80之濃度範圍為0.03微克/毫升至1024微克/毫升。關於分析，試驗之細菌通常放入類、屬或其他具有至少 10隔離物之群中。測定範圍及抑制隔離物在50%與90%之 MICs，除了僅紀錄範圍之具有低於10試驗菌株之有機體以外（表8)。 OPT-80對抗大部分厭氧格蘭氏陽性非孢子形成桿及厭氧格蘭氏陽性球菌具有良好活性。OPT-80對抗腸球菌及葡萄狀球菌亦顯示良好活性。表8 OPT-80對抗453細菌隔離物之試管内活性 101495.doc -37- 1306097 有機體 MIC範圍 MICso Π MICso Bacteroides fragilis group spp. (50) 256->1024 256 >1024 Veillonella spp. (10) 16-128 32 128 其他厭氧格蘭氏陰性桿(51) 0.06-1024 1024 >1024 所有厭氧格蘭氏陰性菌屬(111) 0.06->1024 256 >1024 Clostridium bifermentans (9) 0.06 ΝΑ ΝΑ Clostridium bolteae (7) 1-64 ΝΑ ΝΑ Clostridium clostridioforme (4) 4-128 ΝΑ ΝΑ Clostridium difficile (23) 0.06-2 0.12 0.25 Clostridium glycolicum (9) 0.06-1 ΝΑ ΝΑ Clostridium innocuum (9) 32-128 ΝΑ ΝΑ Clostridium paraputrificum (8) 0.06-8 ΝΑ ΝΑ Clostridium perfrin^ens (14) 0.06 0.062 0.062 Clostridium ramosum (10) 256-512 512 512 Clostridium sordellii (5) 0.06 ΝΑ ΝΑ 其他 clostridial 菌屬（9) 0.06->1024 ΝΑ ΝΑ 所有 CfosinWwm 菌屬（107) 0.06->1024 0.062 128 厭氧非孢子形成格蘭氏陽性桿(63) 0.06->1024 1 32 厭氧格蘭氏陽性cocci (49) 0.06->1024 0.5 2 所有厭氧格蘭氏陽性菌屬(219) 0.06->1024 0.12 64 Sifre/加coccn/j，正式稱為 iS./wiZ/erigroupiM) 16-64 32 32 其他•Sfrepiococcw 菌屬（9) 16-128 ΝΑ ΝΑ Entervcoccus 菌屬（21) 2.0-16 8 8 Staphylococcus aureus and Staphylococcus epidermidis (19) 0.25 - 2 0.5 2 所有菌株（453) 0.06->1024 8 1024

其他具體例上述所有參考例整個以引例方式併入本文。雖然本發明特別參照其較佳具體例顯示並說明，惟熟悉此技藝者當可明白在不脫離所附請求項界定之本發明之精神及範圍以外，可對其作形式與細節之各種改變。【圖式簡單說明】圖 1顯示 R-Tiacumicin B 之 Oak Ridge Thermal Ellipsoid Plot Program(ORTEP)化學結構。 101495.doc -38-

Claims

1 ^^^42號專利申請案一*中1义屮清^利範圍替換本(％年11月）十、申請專利範圍：

】.一種組合物，其係由7〇〇/。_1〇〇%式VII之化合物

式VII 組成其中 X為低碳烷基，其選自曱基、乙基、正丙基及異丙基所組成之群；及 Y為0H或酮（=〇);及 Z為Η或低碳烷基’其選自曱基、乙基、丙基、異丙基、正丁基、第三丁基及戊基所組成之群。 2,如請求項1之組合物，其中該組合物進一步由0%_30% Tiacumicin β相關化合物組成。 3'如凊求項1之組合物，其中該組合物係由75%式VII組成。 4.如請求項丨之組合物，其中該組合物係由8〇%式組成。 5-如請求項1之組合物，其中該組合物係由85%式vn組成。 6.如請求項丨之組合物，其中該組合物係由9〇〇/。式組 10l495-961127.doc C S' 1306097 成。 7. 如請求項1之組合物，其中該組合物係由95%式VII組成。 8. 如請求項1之組合物，其中該 X為甲基或乙基；及 Y為OH或酮（=0);及 Z為異丙基。 9. 如請求項8之組合物，其中該 ’ X為乙基；及 Y為OH或酮（=0);及 , Z為異丙基。 10. 如請求項9之組合物，其中該 X為乙基；及 Y為OH ;及 Z為異丙基。 — 11. 一種組合物，其係由70-100%式IV之化合物組成

式IV 101495-961127.doc 1306097 1 2.如明求項11之組合物，其中該組合物進一步由〇〇/〇_3〇〇/〇丁iacumicin b相關化合物組成。 ]3·如μ求項1 2之組合物’其中該Tiacumicin B相關化合物係選自閏年霉素A4與C-19酮所組成之群。 1 4 如請求項丨2之組合物，其中該組合物包含 (a) ^ 90%該式IV之化合物；及 (b) 各100/。該丁iacumicin B相關化合物。 .ϋ如請求項14之組合物，其中該Tiacumicin b相關化合物係選自閏年霉素A4與C-1 9酮所組成之群。 ]6.種用於治療哺乳動物之細菌感染之醫藥組合物，其係由以下組成： (a) 70-100%式VII之化合物其中 X為低碳烷基，其選自曱基、乙基、正丙基及異丙基所組成之群；及 Y為OH或酮（ = 〇);及 2為Η或低碳烷基，其選自甲基、乙基、丙基、異丙基、正丁基'第三丁基及戊基所組成之群；及 (b) 0%-30%TiacumicinB相關化合物；及 (c) 醫藥上可接受載體。 17. 如叫求項I 6之醫藥組合物’其進一步由選自抗微生物劑與抗真菌劑組成之群之添加劑所組成。 18. 如請求項16之醫藥組合物，其中該 X為甲基或乙基；及 I0M95-961l27.doc 1306097 Y為OH或酮（=0);及 Z為異丙基。 1 9.如晴求項1 8之醫樂組合物，其中該 X為乙基；及 Y為OH或酮（=0);及 Z為異丙基。 2 0.如清求項1 9之醫樂組合物，其中該 _ X為乙基；及 Y為OH ;及 Z為異丙基。 21 · 如請求項20之醫藥組合物，其中該Tiacumicin B相關化合物係選自閏年霉素A4與C-19酮所組成之群。 22. 一種用於治療哺乳動物之細菌感染之醫藥組合物，其係由以下組成： (a) 70-100%式IV之化合物 (b) 0。/。-3 0〇/。Tiacumicin B相關化合物；及 (c) 醫藥上可接受載體。 23 ·如μ求項22之醫藥組合物，其中該醫藥組合物係由以下組成 (a) g 90%該式IV之化合物；及 (b) Sl〇%該TiacumicinB相關化合物；及 (c) 該醫藥上可接受載體。 24.如叫求項23之組合物’其中該Tiacumicjn b相關化合物係選自閏年霉素A4與C-1 9_所組成之群。 I01495-961127.doc .1306097 -5.種如仴求項】6之醫藥組合物用於製造治療哺乳動物之細菌感染之藥物之用途。 26_如請求項25之用途，其中該 X為曱基或乙基；及 Y為OH或酮（=〇）；及 Z為異丙基。 2 7如請求項2 6之用途，其中該 X為乙基；及 Y為OH或酿](=〇);及 Z為異丙基。 28.如請求項27之用途，其中該 X為乙基；及 Y為OH ;及 z為異丙基。 29·如請求項28之料，其中該Tiacumicin B相關化合物精選自閏年霉素八4與(：-19酮所組成之群。 ’ “求項28之用途’其中醫藥組合物係由該請求項η之醫藥組合物組成。、士 D月求項30之用途，其中該丁^ — — b相關化合物^ 選自閏年霉素A4與C-19_所組成之群。 η 32·=求項30之用途’其中該醫藥組合物具有咖值，^ @#MTiacumicin _關化合物之歐值。 ’、 R如請求項32之用途，其中該Ti_miein _關化選自閏年霉素A4與C-19酮所組成之群。〇物令 101495-961127.doc .1306097 34.如請求項32之用途，其中該MIC值係使用選自菌測定。 35.如請求項3〇之用途，其中該醫藥組合物具有大於24小時之抗菌後功效（PAE)。 3 6.如請求項30之用途，其該醫藥組合物進一自抗微生物劑與抗真菌劑組成之一步包含-種選

添加劑所組成。

I01495-961127.doc