TWI260222B - Anthranilic acid amides and pharmacological use thereof - Google Patents

Description

1260222 ⑴ 玫、發明說明 (發明說明應敘明：發明所屬之技術領或、先前技術、内容、實施方式及圖式簡單說明) 本發明係關於新鄰胺苯甲酸醯胺衍生物，其製備方法， 其供治療人或動物身體的使用，其一單獨的或與其他一或 多種醫藥活性化合物的混合物一在治療，特別是腫瘤疾病 如腫瘤，網膜病變或與年齡有關的斑退化，上的用途；治 療動物，特別是人，的此類疾病的方法，及此類化合物--單獨的或與其他一或多種醫藥活性化合物的混合物…在 製造醫藥製劑以治療腫瘤疾病，網膜病變或與年齡有關的 斑退化，上的用途。 現已知有些疾病與失去調節的血管發生有關，例如由眼 睛新血管生成導致的疾病，如網膜病變（包括糖尿病性網 膜病變），與年齡有關的斑退化，牛皮癬，成血管細胞瘤 ，血管瘤，動脈硬化，發炎性疾病，如類風濕或風濕性發 炎疾病，特別是關節炎，如類風濕關節炎，或其他慢性發 炎性疾病，如慢性氣喘，動脈或移植後動脈粥樣硬化，子 宮内膜異位，及特別是腫瘤疾病，例如所謂實體瘤及液體 腫瘤（如白血病）。 在胚胎發育過程中，於調節生長及血管系統及其構成物 的分化中，正常生長及多數病理的不正常與疾病的網路中 心，於其細胞受體處有一血管生成因子，稱作π血管内皮 生長因子π ( V G E F )，即二聚物的聯於二硫化物的4 6 -千道爾 頓糖蛋白（見 Breier, G·，et al·, Trends in Cell Biology i， 454-6 [ 1 996])。 VEGF受體是跨膜受體酪胺酸激酶。現已之有各種型的 1260222 (?) 番崩致申續頁， VEGF 受體，例如 VEGFR-1，VEGFR-2，及 VEGFR-3。 多數人腫瘤，特別是神經膠質瘤，表達高度的V E G F及 其受體。這導引出一種學說，由腫瘤細胞釋出的VEGF可 刺激微血管的生長及腫瘤内皮以旁分泌方式增生，是以透 過血液供應的改良，加速腫瘤的生長。VEGF作為活體内 腫瘤血管生成因子角色的直接證據可由對抗體抑制V £ g F 活性的研究取得。 血管生成被認作是腫瘤長至最大直徑約1 - 2毫米之外的 必需條件；達此限度前，氧及營養物可藉擴散供應腫戶。 血管生成抑制劑對腫瘤的有三個重要的機制：1 )對血$ ，特別是微血管，生長入富血管的腫瘤的抑制，复& β ~結果是 由於細胞的編程性細胞死亡（apoptosis)與細胞增生達到 平衡，腫瘤無淨生長（nettumorgrowth); 2)由於益1 、…、血液流 入腫瘤及從腫瘤流出，防止了腫瘤細胞的移動；；5，、 夂j )抑制 内皮細胞增生，從而避免了正常下襯於血管内面的如1 J内皮細 胞對週圍組織所發揮的旁分泌生長刺激作用。 WO 00/27 82 0内將化合物分類於鄰胺苯甲酸醯脸 ^ $頰，據 報告此等化合物抑制VEGF受體酪胺酸激酶活性，陆十 腫瘤生 長及VEGF-依鉉α ,二』t 取賴性細胞增生。 令人&奇的是，現已發現式I鄰胺苯曱酸醯胺衍生 如下戶斤述，目 士 , 具有有益的藥理學性質，抑制，例如，4 ^ VEGF文體路胺醆激酶活性，腫瘤生長及vegf •依 胞增生。 肖性細 式I郝如：笨甲酸酿胺衍生物適於，例如， Q療疾病

1260222 ，特別是適於治療及預防抑制血管生成及/或VE GF受體酪 胺酸激酶有益的疾病。 本發明係關於式I鄰胺笨甲酸醯胺，

其中 R i代表Η或低烷基， R2代表Η或低炔基， 113代表全氟低烷基，及 X是〇或S， 關於其Ν -氧化物及其互變異構物， 及關於此類鄰胺苯曱酸醯胺的鹽，其Ν-氧化物及其互變 異構物。 此前及之後所用一般詞，除非另有說明，在本揭示說明 中較佳是有如下意義： 字頭”低”是指有達並包括最大7個碳原子的基團，特別 是有達並包括最大4個碳原子的基團，所述的基團是線性 或有一或多個分支的。 在多數形式用於化合物、鹽等時，也包括單數化合物、 鹽等。 簽典說1磺、頁 1260222 (4) 任何不對稱碳原子（例如於式I化合物中R9是低烷基時） 可見於（R)-，（S)-或（R，S)構形，較佳是（R-)或（S)構形。是 以此等化合物可為異構物混合物或為純異構物，較佳是對 映體純非鏡像立體異構物。 本發明也關於式I化合物的可能的互變異構物。此處所 謂，’互變異構物’f 一詞特別是關於這樣的式I化合物，其中 Ri代表Η及X是〇或S，此等化合物在某種程度上，縱非全 部，是如下（I -互變異構物）所示的互變異構物形式，其中 其他的基團及符號如此處所述。 -

於較佳具體實施例中，烷基有達1 2個碳原子，特別是低 烧基。 低烷基較佳是有並包括1至達並包括7個碳原子，較佳是 有並包括1至達並包括4個碳原子，且是線性的或分支的； 低烷基較佳是丁基，如正-丁基，第二-丁基，異丁基，第 三-丁基，丙基，如正-丙基或異丙基，乙基或較佳是曱 基。 此處所謂”全氟低烷基π意謂所有的氫原子都以氟原子 取代的低烧基。 -10- 1260222 (5) 鹵素是氟，氯，溴和蛾，特別是氟，氯或溴。 此等鹽是酸加成鹽，較佳是有鹼性氮原子的式I化合物 與有機或無機酸所成的鹽，特別是醫藥上可接受的鹽。適 宜的無機酸是，例如，鹵素酸，如鹽酸，硫酸，碳酸。適 宜的有機酸是，例如，羧酸，膦酸，磺酸或胺基磺酸，例 如醋酸，丙酸，辛酸，癸酸，十二烷酸，乙醇酸，乳酸， 富馬酸，丁二酸，己二酸，庚二酸，辛二酸，壬二酸，蘋 果酸，酒石酸，檸檬酸，胺基酸，如穀胺酸或天冬胺酸， 馬來酸，羥基馬來酸，曱基馬來酸，環己烷羧酸，金剛烷 羧酸，苯曱酸，水楊酸，4 -胺基水楊酸，間苯二曱酸，笨 基醋酸，扁桃酸，肉桂酸，曱烷-或乙烷磺酸，二羥基乙 烧磺酸，乙烧-1，2 -二磺酸，苯石黃酸，2 -苔石黃酸，1，5 -莕二 磺酸，2 -，3 -或4 -曱基苯磺酸，曱基硫酸，乙基硫酸，十 二碳烷基硫酸，N-環己基胺基磺酸，N-曱基-N-乙基-或 N -丙基胺基磺酸，或其他有基質子酸，如抗壞血酸。 以分離或純化為目的時，也可用醫藥上不能接受的鹽， 例如苦味酸鹽或高氯酸鹽。作治療使用時，只使用醫藥上 可接受的鹽或自由態化合物（在可用於醫藥製劑的形式時） ，所以以此等較佳。 有鑑於此自由態的新穎化合物及其鹽，包括可用作中間 體的鹽，例如純化或確證此新穎化合物所用的中間體，之 間的密切關係，為方便起見，應了解到此前或之後提及自 由態化合物時，都包括其對應的鹽。 如此前或之後所述，式I化合物及其N-氧化物具有價值 1260222 ⑹

的藥理性質。 本發明化合物作為VEGF -受體酷胺酸激酶活性抑制劑 的功效可如下顯出： 對抗V E G F -受體酪胺酸激酶的活性的試驗。此試驗是用 F 11 -1 V E G F -受體酷胺酸激酶進行。詳細步驟如下：將3 0 微升激酶溶液（1 〇毫微克F 11-1激酶域，s h丨b u y a e t a 1.， Oncogene 1，5 19-24 [ 1 990]於 20 mM Tris.HCl 内的溶液， pH 7.5，3 mM二氯化錳（MnCl2)，3 mM氯化鎂（MgCl2)， 1 0 μ M 飢酸納 ’ 0.25¾ 克/ 宅升 5^乙'一^酵（PEG) 20000 ’ ImM二硫· 蘇糖醇及3微克/微升聚（Glu，Tyr) 4 : 1 (Sigma，Buchs，

Switzerland)，8 μΜ [UPI-ATP (0.2微居里）’ 1〇/ί>二曱基亞石風’及 0至1 00 μΜ要試驗的化合物於室溫一起培育1 〇分鐘。然後加1 0 · 微升0.25 Μ伸乙基二胺四醋酸酯（EDTA) pH 7使反應停止。用多_ 管分配器（LAB SYSTEMS，USA)將20微升整份經由Millipore微 滴定過濾器歧管施於PVDF(=二氟化聚乙稀）Immobilon P膜 (Millipore，USA)上，並聯於真空。待液體完全排出後，此膜用 含0.5%磷酸（H3P〇4)的浴相繼洗4次，用乙醇洗一次，每次洗後· 在搖動下培育10分鐘，然後載於Hewlett Packard TopCount Manifold上，加1 0微升Microscint® (β -閃爍計數器液）測定其放射 活性。分析每一化合物三種濃度（都是〇·〇1，〇·1，及1微莫耳）的· 抑制百分比的線性退縮，測出IC50值。以式I化合物可測出的IC5〇 值為0·001至1 μΜ ’較佳是o.ooi至o.i μΜ範圍内。 本發明化合物之抗腫瘤功效可以如下活體内測定·· 於裸鼠異種移植模型之活體内活性：將雌性B A L B / c裸 •12- 1260222 ⑺

鼠（8-12 星期大）Novartis Animal Farm, Sisseln, S w i t z e r 1 a n d)關於無菌條件下，任其自由進食。以皮下注 射腫瘤細胞入鼠内（例如Du 1 45前列腺癌細胞系（at cc No. HTB 8 1 ；見 Cancer Research 3_7_5 4049-58 (1978))或藉將腫 瘤碎片（約25¾克）用13-號套針在Forene®麻醉（Abbott， S witz erl and)下植入鼠之左肤皮下使鼠生瘤。在腫瘤達i 〇〇 立方宅米大小日守立即開始以試驗化合物治療。於最後一次 治療2 4小時及每星期測量腫瘤生長，測量的方法是測量其 各二個垂直軸的長度。根據已公佈的方法（Evans et Brit· J. Cancer ϋ_，466·8 [ 1 9 82])計算腫瘤大小。以治療 的試驗動物腫瘤平均增大的容積除以未治療的試驗動物（ 對照）腫瘤平均增大的容積再乘以100作為T/C%，測定其 抗腫瘤功效。腫瘤的退縮（以％)表示）是以最小平均腫瘤體 積與開始治療時腫瘤的平均體積相比表示。試驗化合物是 每天灌入給予。 或者，以同一方式使用其他細胞系，例如： -MCF-7乳腺癌細胞系（ATCC No. ΗΤΒ 22 ;見 J. Natl. Cancer Inst. (Bethesda)红，1409-16 [1973]); -MDA-MB 468 乳腺癌細胞系（ATCC No. HTB 132;見 Vitro J_4.? 9 11-15 [ 1 9 7 8])； -MDA-MB 23 1 乳腺癌細胞系（ATCC No· HTB 26 ;見 J. Natl. Cancer Inst. (Bethesda) 5 3, 6 6 1 -74 [1974]); -Colo 205 結腸癌細胞系（ATCC No· CCL 222 ；見 Cancer Res. !!_，1 3 4 5 - 5 5 [ 1 9 7 8 ]); 1260222 ⑻

-HCT 116結腸癌細胞系（AT CC No. CCL 247 ；見 Cancer Res. 41, 175 1-6 [1981])； -DU 145前列腺癌細胞系 DU 145 (ATCC No. HTB 81 ;見 m

Cancer Res. 3 7., 4049-5 8 [ 1 97 8])；及 -PC-3 前列腺癌細胞系 PC-3 (ATCC No. CRL 1 43 5 ；見 Cancer Res. 40_? 524-34 [ 1 9 80])。 VEGF-引起的KDR-受體自體磷醯化抑制可進一步細胞 活體外實驗確證：將轉染的CHO細胞，其永久表達人VEGF 受體（KDR)，種於6-凹細胞培養碟内的完全培養基（含10 % Φ 胎牛血清=FCS)内，於37°C在5% C02下培養至約80%匯合 。然後將試驗化合物於培養基（無F C S，但有0.1 %牛血清 白蛋白）内稀釋，加於細胞内。（對照只含培養基而無試驗 -化合物）。於37°C培養二小時後，加重組VEGF ; VEGF終 ‘ 濃度為2 0毫微克/毫升。再於3 7 °C培養五分鐘後，將細胞 用冰冷的PBS (磷酸鹽緩衝的生理鹽水）洗二次，立即於每 凹内的1 0 0微升溶解緩衝液内溶解。然後將溶解物離心除 去細胞核，用商用蛋白質鑑定（BIORAD)測定上清液内的鲁 蛋白質濃度。此溶解物可立即使用，或儲於-2 0 °C備用。 作三明治ELISA以測定KDR-受體磷醯化··將KDR單克隆 " 抗體（例如Mab 1 495.1 2· 14 ; H. Towbin製備）固定於黑色 ‘ ELISA碟上（〇ptiPlateTM HTRF-96，購自 Packard)。將碟洗 過，殘留的無蛋白質結合位用P B S内的1 % B S A飽和。然 後將細胞溶解物（20微克蛋白質/凹）於此等碟内在4 °C共 同以偶合有鹼性磷酸鹽的抗磷酸酪胺酸抗體（PY20: AP， -14-

1260222 ⑺ 購自Transduction Laboratories)培養過夜。（再將碟洗過） 然後用發光A P基質（C D P - S t a r，即可用的，含E m e r a 1 d 11 ;TROPIX)顯示抗磷酸酪胺酸抗體與已捕捉的磷醯化受體 m 的結合。發光是以 Packard Top Count Microplate Scintillation Counter (Top Count)測定。正對照（以 VEGF 刺激的）信號與負對照（未以VEGF刺激的）信號間的差別 動應於VEGF引起的KDR-受體磷醯化（=100%)。試驗物質 的活性以抑制VEGF引起的KDR-受體磷醯化的百分比（〇/〇) 計算，其中引起一半最大抑制的物質的濃度定義為ED50鲁 (50%抑制的有效劑量）。 式I化合物或其N -氧化物也同程度地抑制其他涉及信號 傳導的酪胺酸激酶，此種信號傳導係由營養因子，例如

Src系的激酶，特別是C-Src激酶，Lck，及Fyn ;以及EGF 系的激酶，例如C-erbB2激酶（HER-2)，c_erbB3激酶， c-erbB4激酶；類胰島素生長因子激酶（IGIM激酶），特別

是PDGF-受體酪胺酸激酶系，如pdgF-受體激酶，csf·^ 受體激酶，Kit-受體激酶及VEGF_受體激酶；還有絲胺酸 /蘇胺酸激酶，所引致 所有此等因子在生長調節及哺乳 動物，包括人，之轉化上都扮演角色。 以此等研究為基礎，本發明式丨化合物顯示有治療效果 ’特別是對蛋白質激酶依賴疾病’尤其是增生性疾病有治 療效果。 可以發炎性風濕或 式I化合物在治療關節炎上的用途 類風濕疾病為例說明如下： -15 - .¾¾¾月缘頁 1260222 (10) 使用週知的鼠輔助關節炎（adjuvant arthritis)模型 (Pearson, Proc. Soc. Exp. Biol. 9 1, 9 5 - 1 0 1 (1956))試驗式 I化合物或其鹽的抗關節炎活性。輔助關節炎可以二種不 同的投藥方案治療··（ i)以佐劑由免疫時間開始（預防投藥） ;或在關節炎反應已確立後第1 5天開始（治療投藥）。較佳 ~ 是用治療投藥。作為比較，另一組給予環氧酶-2抑制劑， 如5-溴-2-(4-氟苯基）-3-[4-(甲基磺醯基）苯基]4吩或二氯 胺苯乙酸。 詳言之，給雄性Wistar鼠（每組5隻動物，重約200克， · 由Iffa Credo, France供應）於其尾巴基底部皮内注射0.1毫 升礦物油，内含0.6克凍乾的熱殺的結核分枝桿菌。此等 鼠由第1 5天至第2 2天（治療投藥時間表）以試驗化合物（3 · ，1 0或3 0毫克/公斤，經口 ，每曰一次）或載體（水）治療。 實驗完了時，用微卡尺測量其驸關節腫脹。其爪腫脹之抑 _ 制百分比係以用載體治療的關節炎動物（0%抑制）及載體 治療的正常動物（100%抑制）計算。 以此等研究為基礎，式I化合物令人驚奇地可用於治療 · 發炎（特別是風濕或類風濕）疾病。 以其作為VEGF受體酪胺酸激酶活性抑制劑的效果為基 ~ 礎，式I化合物主要用於抑制血管的生長，是以對許多與 ▼ 血管生成失控有關的疾病，特別是由新血管生成導致的疾 病，尤其是網膜病變，如糖尿病性網膜病變或與年齡有關 的斑退化，牛皮癖，成血管細胞瘤，如血管瘤，血管細胞 增生疾病，如慢性或急性腎病，例如糖尿病性腎病，惡性 -16- 概 1260222 〇〇 腎硬化，血栓性微血管病徵或移植排斥，或特別是發炎性 腎病，如腎小球性腎炎，特別是血管細胞增生性腎小球腎 炎，溶血性尿血病徵，糖尿病性腎病，高血塵性腎硬化， φ 動脈粥樣硬化，動脈狹窄，自體免疫疾病，急性發炎，纖 維性疾病（例如肝硬化），糖尿病，子宮内膜異位，慢性氣 喘，動脈或移植後動脈粥樣硬化，神經退化疾病及特別是 腫瘤疾病，如白血病，特別是急性淋巴細胞白血病，急性 聽細胞性白血病及慢性體細胞性白血病，及其他"液體病" ，特別是表達c-kit，KDR或flt-Ι的液體病，及實體腫瘤，· 特別是乳癌，結腸癌，肺癌（特別是小細胞肺癌）前列腺癌 或K a ρ 〇 s i1 s肉瘤。式I化合物（或其N -氧化物）抑制腫瘤生長 ，特別適用於預防腫瘤的擴散及微轉移的生長。 . 式I化合物可單獨給予或與其他一或多種治療劑混合給 _ 予，可能的混合治療可以是固定混合的形式，或是相繼或 ^ 獨立給予本發明化合物及其他一或多種治療劑，或是以固 定的混合物及一或多種治療劑混合給予。此外，式I化合 物特別適用於與化學治療，放射治療，免疫治療，外科治 φ 療結合作腫瘤治療。其他可能的治療是於腫瘤退縮後，維 護病人的身體狀況，甚至是作化學預防治療，例如用於有 · 此疾病危險的病人。 — 可與其混合的治療劑是一或多種抑制細胞的或細胞毒 性化合物，例如化學治療劑或數種選自包括但不限於下述 的劑··聚胺生物合成抑制劑，蛋白激酶，特別是絲胺酸/ 蘇胺酸蛋白激酶，如蛋白激酶C，或酪胺酸蛋白激酶，如 -17-

1260222 〇2) 上皮生長因子受體路胺酸激酶，抑制劑，細胞因子，負生 長調節劑，如T G F - β或IF N - β，芳香酶（a r 〇 m a t a s e)抑制劑 ，S H 2域與磷醯化蛋白質交互作用抑制劑，抗雌激素，I 型拓普異構酶抑制劑，II型拓普異構酶抑制劑，微管活性 劑，烷基化劑，抗腫瘤抗代謝物，鉑化合物，其他抗血管 e 生成化合物，性激素（g ο n a d 〇 r e 1 i η)激動劑，抗雄激素，雙 膦酸鹽及trastuzumab。 後述式I化合物及其N-氧化物之基團方面，其取代基是 合理地使用前述一般定義，例如，以特定的定義取代更廣 _ 泛的定義，或是使用更特定的定義。 此外，本發明係關於式I化合物，其中各基團及符號具 前述意義，或其N-氧化物或其醫藥上可接受的鹽在製備 . 醫藥產物以治療網膜病變或與年齡有關的斑退化上的用 途。 ' 此外，本發明係關於治療腫瘤疾病的方法，此等疾病對 VEGF受體酪胺酸激酶活性的抑制有反應，此法包括給予 式I化合物，或其N-氧化物或其醫藥上可接受的鹽，其中鲁 各基團及符號具前述意義，給予需治療的溫血動物的量是 對抗該疾病的有效量。 此外，本發明係關於治療網膜病變或與年齡有關的斑退 _ 化的方式，此法包括給予式I化合物，或其N-氧化物或其 醫藥上可接受的鹽，其中各基團及符號具前述意義，給予 需治療的溫血動物的量是對抗該疾病的有效量。 本發明特別關於式I化合物，其中 -18- 奋神說:明蜻頁: 1260222 (13) R i代表Η或低烷基， R2代表Η或低烷基， R3代表三氟甲基，及 螓 X是〇，

關於其N-氧化物或互變異構物， V 及關於此化合物的鹽，其N-氧化物或其互變異構物。 較佳本發明特別關於式I化合物，其中 R i代表Η或甲基， 112代表Η或甲基， _ R3代表三氟甲基，及 X是Ο， 關於其互變異構物， . 及關於此化合物或其互變異構物的鹽。 更特定地說，較佳是如下的式I化合物： 2-[[6 -甲氧基-3-<啶基]曱基]胺基-Ν-[3-(三氟曱基）苯基] 苯曱醯胺鹽酸鹽， 2-[[6 -曱氧基-3-咕啶基]曱基]胺基-Ν-[2 -曱基- 3-(三氟曱 · 基）苯基]苯甲醯胺， 2-[[1，6-二氫-6-氧-3-说啶基）曱基]胺基]-N-[3-(三氟曱基）〜 笨基]苯甲醯胺，及 - 2-[[1,6-二氫-6-氧-3-口比啶基）甲基]胺基]-N-[2 -曱基- 3-(三 氟甲基）笨基]苯甲醯胺， 及其互變異構物， 或此化合物或其互變異構物的鹽。 -19- 1260222 本 合物 化合 I化^

saw :頁: 發明化合物係以已知方法，但尚未用於本發明新穎化 的方法，製備，特別是此法的特點是合成本發明式I 物，其中Ri代表低烷基，其餘的符號112及R3如前述式 -物内所界定，此是用式11化合物

其中 合物 112及R3如前述式I化合物内所界定，與式III之羰基化

其中 應， 如有 護的 團及 其中 以及 化合 將式 或將 X代表Ο或S，及R 1是低烷基，在有還原劑之存在下反 必要，其中式11及111起始化合物也可以是官能基被保 形式，及/或其鹽的形式，先決條件是有生成鹽的基 以鹽的形式的反應是可能的； 再移除式I化合物的經保護的衍生物的保護基； ，如有必要，再將製得的式I化合物轉化成另一式I 物或其N -氧化物，將自由態的式I化合物轉化成鹽， I化合物的鹽轉化成自由態化合物或另一種鹽，及/ 式I化合物的異構物混合物分離成個別的異構物。 -20- N<、·*·V 冷 衫*· * 、 ·· Λ-Λ ·>· % V 爱頻說閉續夏 1260222 (,) 還原性烷基化詳述： 於下更詳細的製法說明中，Ri，R2，R3及X之定義，除 非另有說明，如式I化合物所示。 0 式111之羰基化合物可以是易反應的衍生物形式；但較 蟓 佳是醒·或酮。 式111化合物之易反應的衍生物是，例如，帶醇的式111 化合物，例如，低烧醇的對應的亞硫酸氫鹽加合物或特別 是半縮醛，縮醛，半縮酮或縮酮；或帶硫醇的式111化合 物，如低烷硫醚，的硫縮醛或硫縮酮。 ® 還原性烧基化較佳是在有催化劑，特別是貴金屬催化劑 ，如#和特別是妃，其較佳是鍵合於載劑物質如碳上，或 重金屬催化劑如阮尼鎳，之存在下正常壓力或於0 . 1至1 0 - 兆帕（MPa)下氫化進行，或以氫化物複合物手段，如硼氫 化物，特別是鹼金屬氰基棚氫化物，例如氰基氫化納， 在有適宜的酸，較佳是弱酸，如低烧叛酸，特別是醋酸， 或磺酸，如對-曱苯磺酸的存在下，於習用溶劑，例如醇 ，如曱醇或乙醇，或謎，例如環形醚，如四氫咬喃，内在 I 有或無水之存在下進行。 保護基 如果一或多個其他官能基團，例如羧基，羥基，胺基，< 或硫氫基，在式11或111化合物需要保護時，因為此等基不 應介入反應，此等基團是在肽化合物，及環孢黴素及青黴 素化合物，以及核酸衍生物及糖中常用的。 此等保護基可能已存在於前體内，應保護關的官能基使 -21 - 發F興閉積頁 1260222 (16) 不發生二次反應，如醯化，醚化，酯化，氧化，溶劑分解 ，及類似反應。保護基的特點是其適合，即不發生不必的 二次反應，由溶劑分解，還原，光解或酶作用所移除，例 如在類似生理條件下所發生者，此等保護基也不存在於終 產物。專家們知道，或易於建立’哪些保護基適於此前及 後述反應。

以此類保護基對官基的保護，保護基本身，及其移除反 應見於標準文獻，例如 J· F· W· McOmie，’’Protective Groups in Organic Chemistry’’，Plenum Press，London and New York 1973， 見於 T. W. Greene，"Protective Groups in Organic Synthesis’’， Wiley，New York 1981，見於丨丨The Peptides丨Volume 3(編輯： E. Gross and J. Meienhofer), Academic Press, London and New York 1981，見於’’Methoden der organischen Chemie”（Methods of Organic Chemistry), Houben Weyl, 4th edition, Volume 15/1, Georg Thieme Verlag，Stuttgart 1974，見於H.-D Jakubke and H. Jescheit，nAminosauren, Peptide, Proteine'1 (Amino acids, peptides, proteins)，Verlag Chemie, Weinheim, Deerfield Beach, and Basel 1982，及見於 Jochen Lehmann, nChemie der Kohlenhydrate:

Monosaccharide und Derivate” (Chemistry of carbohydrates:-monosaccharides and derivatives), Georg Thieme Verlag, ★ Stuttgart 1974 0 另外的製法步驟 有鹽生成基的式I化合物的鹽可以已知方法製備。是以 式I化合物的酸加成鹽可用酸與或適宜的陰離子交換試劑 處理製備。有二個酸分子的鹽（例如式I化合物的二鹵素化 .22 - 222 ⑼ 222 ⑼ 赘明規:明績f 物）也可每一化合物用一個酸分子轉化成鹽（例如單ii素 化物）；這可藉加熱至熔點，或例如於高真空及高溫，例 如1 3 0 - 1 7 0 °C ，加熱，每一分子式1化合物可排出一分子 * 酸。 Μ 鹽一般可轉化成自由態的化合物，例如以適宜的驗性劑 ，如驗金屬碳酸鹽，鹼金屬碳酸氫鹽，或驗金屬氫氧化物 ，一般是碳酸鉀或氫氧化鈉，處理。 以式11及式111化合物製得的式I之鄰胺苯曱酸醯胺，其 中R i代表低烷基，其餘的符號R2及R3如式I化合物所述，® 可進一步根據下述方法反應生成式I之鄰胺苯甲酸醯胺， 其中Ri代表Η。將式I之鄰胺苯甲酸醯胺，其中Ri代表烷 基，以三曱基甲矽烷碘化物於4 5 °C至7 0 °C在適宜的溶劑，-例如鹵素化烷，如氯仿，内處理約2 0至3 5小時，視需要再 以曱醇處理。 一般製法條件 此處所說的所有步驟可在已知條件下實行，較佳是在特 別說明的條件下再無或一般有對試劑是惰性的及能溶解# 試劑的溶劑或稀釋劑的存在下，在無或有催化劑、縮合劑 或中和劑，例如離子交換劑，一般是陽離子交換劑，例如 H +形式的離子交換劑，之存在下進行，視反應型及/或反 ， 應物而定，於降低、正常、或高溫，例如-1 0 0 °C至約1 9 0 °C ，較佳是-8 0 °C至約1 5 0 °C ，例如在-8 0至-6 0 °C ，室溫，於 -2 0至約4 0 °C ，或於所用溶劑的沸點，在大氣壓下或於封 閉容器内進行，適宜時在壓力下，及/或於惰性氣體下， -23- 1260222 (18) 例如氬氣或氮氣下進行。 所有起始物質及瞬變物中可有鹽，如果此起始物及瞬變 物中有鹽生成基團。在此類化合物反應中也可有鹽，先決 條件是反應不會被其干擾。 此反應中可選用的溶劑包括，例如，水，S旨，一般是低 烷基低烷酸酯，例如，醋酸二乙酯，醚，一般是脂肪族醚 ，例如二乙醚，或環形醚，例如四氫呋喃，液體芳香族烴 屬，一般是苯或甲苯，醇，一般是甲醇，乙醇或1-或2-丙醇，腈，一般是乙腈，鹵素化烴屬，一般是二氣甲烧，鲁 酸醯胺，一般是二甲基甲醯胺，鹼，一般是雜環形氮鹼， 例如说σ定，叛酸，一般是低烧叛酸，例如醋酸，叛酸酐， 一般是低烷羧酸酐，例如醋酸酐，環形的、線性的、或分 · 支的烴屬，一般是環己烷，己烷，或異戊烷，或此等溶劑， 的混合物，例如水溶液，除非在製法中另有說明。此類溶 劑混合物可用於製法中的，例如，色層分析或分布。 式I化合物，包括其鹽，可製成水合物形式，或其晶體 内可包括，例如，結晶所用溶劑（以溶劑合物形式存在）。鲁 於較佳具體實施例中，式I化合物是根據或類似實例中 界定的方法及方法步驟製備。 Λ 活性成份的劑量取決於各種因素，包括病人的體型，人 * 種，年齡，體重，性別及健康情況；要治療的疾病的嚴重 性；給予途徑；病人的腎及肝功能；及所用的特定化合物 。一般醫生，臨床醫生或獸醫即可決定及處方要治療及預 防，或停止疾病進行所需的有效量的藥物。達到藥物濃度 -24- 4 4 發明說明續頁 1260222 (,) 產生效果而無毒性的適宜準確性需以藥物在目標位的利 用率為基準動力學。這包括藥物分布，平衡，及排出方面 的考慮。 本發明也關於醫藥組合物，其含有效量的，特別是治療 上述疾病有效量的式I鄰胺苯甲酸醯胺和其N -氧化物或互 變異構物及醫藥上可接受的載劑，此等載劑適於作局部， 經腸，例如經口或經直腸，非經腸給予，而且此等載劑可 以是無機的或有機的，固體的或液體的。 有供經口給予的，特別是錠或明膠膠囊，其含活性成分 Φ 與稀釋劑，例如乳糖，右旋糖，甘露糖醇，及/甘油，及/ 或滑潤劑及/或聚乙二醇。錠也可含結合劑，例如矽酸鎂 鋁，澱粉，如玉米、小麥或米澱粉，明膠，曱基纖維素，-羧甲基纖維素鈉及/或聚乙烯吡咯酮，以及，如有需要， 崩解劑，例如澱粉，瓊脂，藻酸或其鹽，如藻酸鈉，及/ 或起泡劑混合物，或吸附劑，染料，續味劑，及甘味劑。 本發明藥理活性化合物也可以非經腸給予形式的組合物 或輸液形式使用。此等醫藥組合物可以是滅菌的及/或可 · 含賦形劑，例如防腐劑，安定劑，濕潤劑及/或乳化劑， 助溶劑，調整滲透壓的鹽及/或緩衝劑。本發明醫藥組合 g 物必要時可含其他藥理活性物質，係以已知方式製備，例 一 如以習用的混合，顆粒化，成形化，溶解或凍乾方法，並 含約1 %至9 5 %，特別是約1 %至約2 0 %，活性成分。 此外，本發明係關於治療溫血動物，包括人，腫瘤的醫 藥組合物，其含抗腫瘤有效劑量的前述式I化合物或此類 -25- 臟W貢’ 1260222 ㈣ 化合物的醫藥上可接受的鹽及醫藥載劑。 此外，本發明提供式I鄰胺苯甲酸醯胺或其N -氧化物或 互變異構物，或此類化合物的醫藥上可接受的鹽，供用於 人或動物身體的方法。 本發明也關於式I鄰胺苯甲酸醯胺或其N-氧化物或互變 異構物，或此類化合物的醫藥上可接受的鹽，供用於製成 醫藥產物以治療腫瘤疾病，網膜病變或與年齡有關的斑退 化上的用途。 此外，本發明教導治療對VEGF受體酪胺酸激酶活性受 抑制其反應的腫瘤的方法，此法包括給予需治療的溫血動 物對抗該疾病有效量的式I鄰胺苯曱酸醯胺或其N-氧化物 或互變異構物，或此類鄰胺苯甲酸醯胺的醫藥上可接受的 鹽，其N-氧化物或互變異構物。 起始物質 新起始物質及/或中間體，及其製備方法，也是本發明 主題。於較佳具體實施例中，使用此類起始物質並選用此 反應條件以製得較佳化合物。 式III，IV及V起始物質是已知的，可商業上購得的，或 可以此技藝已知方法或類似方法合成的。 例如，式11化合物可用式IV硝基化合物還原製備，

-26- y*、 ' ^ X 發明說明續頁 ϋΓ 一f … 1260222 (21) 其中112及R3之定義如式I所給予。 此還原較佳是在有適宜的還原劑，如氯化錫（11)或氫之 存在下及有適宜的催化劑，如阮尼鎳（此時氫須在加壓下 使用，例如2至2 0巴）或P t〇2，之存在下於適宜的溶劑，例 如醇，如曱醇，内進行。反應溫度較佳是0至8 0 °C ，特別 是 1 5 至 3 0 °C。 式IV硝基化合物可用式VI之活化的酸衍生物

其中Y是鹵素或另一適宜的離去基，與式V之胺

R2 (V) 其中R 2及R 3之定義如式I所述，在例如有偶合劑，如二環 @ 己基碳化二亞醯胺，之存在下於0 °C至5 0 °C間，較佳是室 溫，反應製備。 4 所有其餘的起始物質都是已知的，可用已知方法製備或 一 由市場上購得；特別是，其可用實例中所述方法製備。 於起始物質製備中，以有的不介入反應的官能基，必要 時，需加保護，較佳的保護基，其引入，及其移除見於’’ 保護基π段或實例中。 -27 - 貪画績頁 1260222 ㈤ 所有其餘的起始物質都是已知的，可用已知方法製備或 由市場上購得；特別是，其可用實例中所述方法製備。 下述實例用以說明本發明而非限制本發明範圍。 溫度是以攝氏度（°c )測定。除非另有說明，反應是室溫 下進行。 實例 參考實例1 : 2-「「6 -曱氧基-3-说啶基1甲基1胺基-N-「4-溴 -3-(三氟甲基）笨基1笨曱醯胺（未申請） 將氰基硼氫化鈉（8.8 0克，9 5 %，1 3 3毫莫耳）於2 5 °C費時 30分鐘分批加於攪拌的醋酸（3.8毫升），6 -曱氧基-3-p比啶 魏酸（Fluka，Buchs，Switzerland; 7.80 克，57毫莫耳）及 2-胺基-N-(4-溴-3-三氟曱基苯基）苯曱醯胺（步驟1.2 ; 13.65 克，3 8毫莫耳）於曱醇（3 8 0毫升）的混合物中。將此混合物 攪拌1 6小時。減壓蒸發去溶劑，殘餘物用飽和碳酸氫鈉水 溶液（500毫升）處理，用二氯曱烷（3x150毫升）萃取。將合 併之萃取物乾燥（Na2S04)，過濾，減壓蒸發去溶劑得精製 產物，再於二氧化碎膠柱上作色層分析純化，洗離劑5 % 醋酸乙酯/二氯曱烷，用二乙醇-己烷重結晶，得標題化合 物，為米色晶體，熔點1 0 1 -1 0 3 °C。 步驟1.1 : 2-硝基-N-(4-溴-3-三氟曱基苯基）苯曱醯胺 將3 -胺基-6-漠苯并三氟化物（Fluka，Buchs，Switzerland ;24.0克，100毫莫耳）於醋酸乙酯（240毫升）内的溶液於室 溫加於攪拌的氫氧化鈉水溶液（1 1 0毫升，1 M)内。然後將 攪拌的溶液費時30分鐘以2-硝基苯曱醯氯（Fluka，Buchs， -28-

1260222 (23)

Switzerland ; 14·5毫升，110毫莫耳）於醋酸乙酯（15〇毫升） 内的溶液一滴滴處理。然後將所得混合物於室溫搜拌3 〇 分鐘。此混合物用醋酸乙酯（3 X 1 0 〇毫升）萃取，合併之萃 取物相繼用鹽酸（2 X 100毫升，2 M)，水（2 X ：ι 00毫升），飽 和石反酸氫納水溶液（2 X 1 〇 〇毫升）及飽和氯化鈉水溶液（1 χ 1 0 0毫升）洗，乾燥（M g S〇4 )，過濾，減壓蒸發去溶劑得粗 製產物，用醋酸乙酯-己烷重結晶純化，得標題化合物， 為米色晶體，熔點1 5 7 - 1 5 8 °C 。 步驟1.2 : 2-胺基-N-(4-溴-3-三氟甲基）苯基]苯甲醯胺 將2-硝基-N_(4-溴-3-三氟甲基）苯基]苯曱醯胺（中間體 la，32克，82毫莫耳）於曱醇（1000毫升）内的溶液在大氣 壓下用阮尼鎳（6克）於2 1 °C氫化。7小時後吸收計算量的氫 。將混合物過濾，減壓蒸發去溶劑得粗製產物，用二乙醚 -己烷重結晶純化，得標題化合物，為無色晶體，熔點 1 42- 1 44°C。 實例2 : 2-「「6 -甲氫基-3-晚啶基1曱基1胺基- Ν-η-(三氟曱 基）笨基1笨曱醯胺鹽酸鹽 標題化合物是用類似實例1方法用步驟2.2所得中間體 及 6-曱氧基- 3-ρ比咬魏曱駿（Fluka，Buchs，Switzerland)製 備；熔點 1 3 3 - 1 3 5 °C。 步驟2.1 : 2-胺基- N-[3-(三氟曱基）苯基]苯曱醯胺 標題化合物是用類似步驟1 . 1方法用3 -(三氟甲基）苯甲 醯胺（Aldrich，Buchs, Switzerland)製備；炫點 134-135 °C。 步驟2.2: 2-胺基-N-[(3-三氟曱基）苯基]笨曱醯胺

1260222 (24) 標題化合物是用類似步驟1 . 2方法用2 -硝基-N - [ (3 -三氟 甲基）笨基]苯曱醯胺（步驟2· 1)製備；熔點132_ 133艺。 ^ΐΧΐ^Ι-「6 -曱氧基-3-吡啶基1甲基胺基- N-「2 -甲某- 3-基）茉基1笨曱醯胺 標題化合物是用類似實例1方法用步驟3.2所得中間體 及 6-甲氧基-3-外匕咬叛甲酸（Aldrich，Buchs, Switzerland) 製備；熔點1 3 4 - 1 3 5 °C。 步驟3.1 : 2-硝基-N-[2-曱基-3-(三氟甲基）笨基]苯曱醯胺 標題化合物是用類似步驟1 _ 1方法用2 -甲基-3 -(三氟曱 基）苯曱酿胺，（Fluorochem, Derbyshire, England)製備； 熔點 1 8 8 - 1 8 9 °C。 步驟3.2 : 2-胺基- N-[2 -曱基- (3-三氟甲基）笨基]苯曱醯胺 標題化合物是用類似步驟1 ·2方法用2-硝基-N-[2 -曱基 -3 -(三氟曱基）笨基]苯曱醯胺（步驟2 ·丨）製備；熔點1 2 8 -129〇C。 參考_—實_^-1 : ^LJXL^-二氫-6-氣-3-吡啶某）甲篡]脖基1 -N-『4-丙培一基曱基）苯基1茉甲醯胺（夫申譆、 將2-[[6-曱氧基·3·吡啶基）甲基]胺基·ν·[4·(ι•丙炔基） -3-(二氟甲基）-笨基]苯甲醯胺（步驟41 ; ι1〇克，25毫莫 耳）及二甲基甲石夕院基碘（Fluka，Buchs，Switzerland; i.〇 爱升’ 7.5毫莫耳）於氣仿（30毫升）内的混合物在氬氣下於 6 0 C攪拌1 6 ]、日寸。然後將冷卻之混合物以甲醇（2毫升）處 理，於室溫攪拌10分鐘。減壓蒸發去溶劑，殘餘物用氨水 浴液（d %，1 0 0耄升）處理，用醋酸乙酯（3 X丨〇 〇毫升）萃取。 -30- 1260222 (25)

合併之萃取物用飽和氯化納水溶液（5 0毫升）洗，乾燥 (M g S〇4 )，過濾，減壓蒸發去溶劑得粗製產物，再於二氧 化石夕膠柱上作色層分析純化，洗離劑醋酸乙酯，用熱醋 酸乙酯重結晶，得標題化合物，為無色晶體，熔點2 0 8 -2 12。。。 步驟4·1: 2-[[6 -曱氧基-3-吡啶基]曱基]胺基- N-[4-(l -丙炔 基）-3-(三氟曱基）苯基]苯曱醯胺 ^ 將攪拌的2-[[6 -曱氧基-3-吡啶基]曱基]胺基-N-[4-溴 -3-(三氟甲基）苯基]苯甲醯胺（參考實例1; 3.98克，8.3毫 莫耳）於無水甲苯（200毫升）内的溶液以氬氣於25 °C清洗 2 0分鐘。然後加三丁基-1 -丙炔基錫烷（4 . 1克，8 0 %，9.9 6 毫莫耳）及肆（二苯基膦）鈀（0)(260毫克），將所得混合物於 1 0 0 °C在氬氣下加熱1 7小時。然後將混合物冷卻，用氫氧 化鈉水溶液（8 5毫升，0.1 M)處理，再用空氣清洗2小時。 所得混合物用醋酸乙酯（3 X 1 0 0毫升）萃取。有機相相繼用 水（2 X 4 0毫升）及飽和氯化鈉水溶液（1 X 4 0毫升）洗，乾燥 (Na2S〇4)，過濾，減壓蒸發去溶劑，得粗製產物，再於二 氧化矽膠柱上作色層分析純化，洗離劑3 3 %己烷内的醋酸 乙酯，用二乙醚-己烷重結晶，得標題化合物，為無灰黃 晶體，熔點1 2 3 - 1 2 4 °C。 實例5 : 2-「「Π,6-二氫-6-氧-3-外匕啶基）曱基1胺基1-Ν-「3-(三 氟曱基）笨基1笨曱醯胺 此標題化合物是用類似實例4所述方法用2-[[(6 -曱氧基 -3-吡啶基]曱基]胺基-N-[3-(三氟甲基）苯基]苯甲醯胺（實 1260222 (26) 例2 )製備；熔點1 7 1 - 1 7 2 °C。 實例6: 2-(ΊΠ,6-二氫-6-氧-3-吡啶基）曱基1胺基1-NJ2 -曱基 -3“三氟曱基）笨基1笨曱醯胺 此標題化合物是用類似實例6所述方法用2 - [[(6 -甲氧基 -3-吡啶基]曱基]胺基-N-[2 -甲基- 3-(三氟甲基）苯基]苯甲 醯胺（實例3 )製備；熔點1 9 1 - 1 9 2 °C。 實例7 :軟膠囊 製備5 0 0 0顆軟膠囊，每膠囊含活性成分0.0 5克前述實例 之一種式I化合物，成分如下： 成分 活性成分 2 5 0克 月桂二醇 2公升 製備方法：將磨成粉狀的活性成分懸浮於Lauroglykol® (丙二醇月桂酸醋,Gattefosse S.A., Saint Priest, France) 内，於濕磨碎機上磨成約1至3微米大小的微粒。然後用裝 膠囊機將0.4 1 9克此混合物引入軟膠囊内。 -32-

Claims (1)

1. 年 第091132669號專利申請案 中文申請專利範圍替換本(95年4月） 拾、申請專利範圍 1. 一種式I鄰胺苯甲酸醯胺

   R3 _ 其中 R i代表Η或低烷基， R2代表Η或低烷基， 以3代表全氟低烷基，及 X是Ο或S， 或其Ν -氧化物或互變異構物， 或此類鄰胺苯曱酸醯胺的鹽，其Ν -氧化物或其互變異 構物。 2.根據申請專利範圍第1項之式I鄰胺苯曱酸醯胺，其中 R i代表Η或低烷基， R2代表Η或低烷基， R3代表三氟甲基，及 X是0， 或其N -氧化物或互變異構物， 或此類鄰胺苯曱酸醯胺的鹽，其N -氧化物或其互變異 構物。

   1260222 3. 根據申請專利範圍第1項之式I鄰胺苯甲酸醯胺，其中 R i代表Η或甲基， R2代表Η或甲基， R3代表三氟曱基，及 X是0， 或其互變異構物， 或此類鄰胺苯曱酸醯胺的鹽或其互變異構物。 4. 根據申請專利範圍第1項之式I鄰胺苯曱酸醯胺，其係 , 選自 2-[[6 -甲氧基-3-吡啶基]甲基]胺基-N-[3-(三氟甲基）苯 基]苯甲醯胺鹽酸鹽， 2-[[6 -甲氧基-3-吡啶基]甲基]胺基-N-[2 -甲基- 3-(三氟 曱基）苯基]苯甲醯胺， 2-[[1，6-二氫-6-氧-3-吡啶基）曱基]胺基]-N-[3-(三氟曱 基）苯基]苯曱醯胺，及 -二氫-6-氧-3-吡啶基）曱基]胺基]-N-[2 -甲基 -3-(三氟曱基）苯基]苯曱醯胺， 或其N -氧化物或互變異構物， 或此類鄰胺苯甲酸醯胺的鹽，其N -氧化物或其互變異 構物。 5. 根據申請專利範圍第1至4項任一項之式I鄰胺苯甲酸 醯胺，或其N-氧化物或其互變異構物，或此類化合物 醫藥上可接受的鹽，其係用於治療人或動物身體之方 法0 申:雜纖 1260222 6. —種式I鄰胺苯甲酸醯胺、或其N-氧化物或互變異構物 、或此類化合物醫藥上可接受的鹽之用途，其中其基 團及符號有申請專利範圍第1項所述之意義，其係用於 製備用於治療腫瘤疾病的藥物。 7. —種式I鄰胺苯甲酸醯胺、或其N-氧化物或互變異構物 、或此類化合物醫藥上可接受的鹽之用途，其中其基 團及符號有申請專利範圍第1項所述之意義，其係用於 製備用於治療網膜病變及與年齡有關的斑退化的藥物 〇 8. —種式I鄰胺苯甲酸醯胺、或其N·氧化物或互變異構物 、或此類鄰胺苯甲酸醯胺的醫藥上可接受的鹽、其N-氧化物或互變異構物之用途，其中其基團或符號有申 請專利範圍第1項所述之意義，其係用於製備治療需此 治療的溫血動物對VEGF受體酪胺酸激酶活性受抑制 有反應的腫瘤疾病的藥物。 9. 一種用於治療腫瘤疾病、網膜病變或年齡有關的斑退 化之醫藥製劑，其含根據申請專利範圍第1至4項任一 項之式I鄰胺苯甲酸醯胺，或其N_氧化物或互變異構物 ，或此類化合物醫藥上可接受的鹽，其水合物或溶劑 合物，及至少一種醫藥上可接受的載劑。 10. —種製備式I鄰胺苯曱酸醯胺的方法 1260222 攀録#€議

   _ 圍第1項所界定， 其中，此是用式II化合物

   其中112及R3如式I化合物者所界定，與式III之羰基化合

   其中X代表Ο或S，1^是低烷基，在有還原劑之存在下 反應， 其中，如有必要，式11及111起始化合物也可呈經保護 形式及/或鹽的形式的官能基團，先決條件是存有鹽生 成基及呈鹽的形式之反應是可能的； 其中式I化合物經保護的衍生物中的保護基團已除去； 及，如有必要，將製得的式I化合物轉化成另一式I化合 1260222

   物或其N -氧化物，將自由態 製得的式I化合物的鹽轉化 鹽，及/或將式I異構化合物 構物。 的式I化合物轉化成鹽，將 成自由態化合物或另一種 之混合物分離成個別的異