TW591036B - Novel compound F-15078 - Google Patents

Description

591036 A7 B7 五、發明說明（ 本發明。 民卩，本發明爲以提供具有抗真菌活性之化合物、該化 合物的製，法、該化合物所構成之醫藥、該化合物作爲有 效成分之真菌感染症的治療劑及預防劑、該化合物之生 產菌、該化合物之使用、將該化合物之藥理有效量投與 動物之真菌感染症的治療方法及預防方法等爲其目的。 本發明爲關於 (1 ) 一種下述式（I )所示之化合物或其鹽， H3Η 0 〇4HaC λf'CHa Η3〇 (CH3 h3^ H3C PH3 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製

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(i (2 ) —種具有下述理化學性狀之化合物或其鹽 1 )物質之性狀：鹼性脂溶性粉末 2)分子式·· C5 5H9sN8〇14 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297 —- 591036 A7 _B7_ 五、發明說明（4 ) 3 )分子量：1 094 (FAB-MS 法） 4) 高分解能 FAB-MS[M + H] + (以 C55H99N8〇m 型式） 實測値：.1 0 9 5 . 7 3 6 5 計算値：1 0 9 5 . 7 2 8 1 5) 紫外線吸收光譜：終端吸收 6) 紅外線吸收光譜：（溴化鉀錠劑中、cm1 ): 343 4 , 3 3 3 5， 2962， 29 3 7， 287 5 , 2806， 1 7 50, 1 684, 1641. 1 509, 1 469， 1412， 1371， 13 14, 1 294, 1271， 1 204， 1156, 1128, 1 074 , 1020 7 )旋光度：[ a ]〇25- 120。（c 1.0、 甲醇） 8 ) 1 H- 核磁共-光譜 :(5 、 ppm ) 重氯仿中，以四甲基矽烷作爲內部標準所測定之核磁共 振光譜（ 500MHz)爲如下所示。 0.78(3Η),0·79(3Η),0·80(3Η),0.82(3Η),0·87(3Η)，0.88(1Η),0·92(3Η),0· 93(：3Η), 0.94(3Η), 0.96(3Η), 0.97(3Η), 0.98(3Η), 1.01(3Η), 1.02(3Η), 1.0 3(3Η), 1. 06 (3Η), 1. 21 (1Η), 1. 41 (3Η), 1. 41 (1Η), 1. 48(1Η), 1. 48(1Η), 1. 49 (1Η), 1. 52 (3Η), 1. 55 (1Η), 1. 65(1Η), 1. 66(1Η), 1. 70 (2Η), 1. 73(1Η), 1· 81 (1 Η),1·87(1Η), 2·28(1Η), 2·31(1Η), 2.37(1Η), 2.48(3Η), 2.89(3Η), 2·94(3Η), 2.96(1Η), 3.29(3Η), 3.56(1Η), 4.06(1Η), 4. 14(1Η), 4.77(1Η), 4.78(1Η), 4.84(1Η), 4.9Κ1Η), 4.96(1Η), 5.2Κ1Η), 5.25(1Η), 5.53(1Η), 6.39(1Η), 7. 83(1Η), 7.94(1Η), 8.28(1Η) 9) 13C-核磁共振光譜：（5、ρρπι) 重氯仿中，以四甲基矽烷作爲內部標準所測定之核磁共 振光譜（ 500MHz)爲如下所示。 -5 - 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公爱） (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) _ i I I、—--- 訂！ 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 591036 A7 B7

(4 ) 一種具有下述理化學性狀之化合物： 1 ) 物質之性狀：中性脂溶性無色粉末 2 )分子式：C 57 Η 1。。N 8 0 1 5 3 )分子量：1136(FAB-MS 法） 4) 高分解能 FAB-MS[M + H] + (以 C57Hi(nN8〇15 型式） 實測値：1 1 3 7 . 7 4 1 0 計算値：1 1 3 7 . 7 3 8 7 5) 紫外線吸收光譜：終端吸收 6) 紅外線吸收光譜：（溴化鉀錠劑中、cnT1): 3433， 3333， 2963， 2937， 2875， 1751， 1686， 1642, 1516, 1469， 1409， 1388， 1372， 1311， 1292， 1272, 1201, 1156, 1128,^1074, 1017 7) 旋光度：[a ]D25-131。（c 1 ·〇、甲醇） 8) 核磁共振光譜：（占、PPm) 重氯仿中，以四甲基矽烷作爲內部標準所測定之核磁共 振光譜（ 500MHz)爲如下所示。 -7 - 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公爱） (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) · 11 L—--I 訂·！--1!

經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 591036 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 A7 -- ___B7 _ 五、發明說明（7 ) 檢測波長：λ 2 1 0 n m 保持時間：9 . 0 5分鐘 1 1 )溶解性：二甲基亞砜、甲醇、氯仿中可溶 1 2 )胺基酸分析：以水解物型式察見蘇胺酸、丙胺酸、 異白胺酸 (5 ) —種如（1 )至（4 )任一項記載之化合物之製法，其特 徵爲培養屬於Phoma屬之（1 )至（4)任一項記載之化合物 之生產菌，並由其培養物中採集（4)至（4)任一項記載之 化合物。 (6 )如記載之製法，其中屬於Phoma屬之（1 )至（4)任 •項記載之化合物之生產菌爲Phoma sp. SANK 1 3 8 99 (FERM BP- 68 5 1 )株。 (7 ) —種醫藥，其爲由（1 )至（4 )任一項記載之化合物或 其鹽所構成。 (8 ) —種真菌感染症之治療劑或預防劑，其爲含有（}) 至（4 )任一項記載之化合物或其鹽作爲有效成分。 (9). 一種 Phoma sp. SANK 1 3 89 9 (FERM BP- 68 5 1 )株。 (1 0 ) —種（1 )至（4 )任一項記載之化合物或其鹽之使用、 及、 (1 1 )-―種真菌感染症之治療方法或預防方法，其爲將（1 ) 至（4 )任一項記載之化合物或其鹽之藥理有效量投與動 物。 本發明爲提供上述至所記載之化合物。其中，上 述（1)及（3)記載之化合物可由下述一般式（瓜）表示： -9 - 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公爱） (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁)

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五、發明說明（J

CH H3C CH3 h3c (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) (I I I ) (式中，R爲表不氨原子或COCH3)，於本發明中，將上 述一般式（m )所示之化合物總稱爲F- 1 507 8。 上述（1)記載之化合物爲上述一般式（瓜）所示且R爲 氫原子之化合物。於本發明中，將上述（1 )記載之化合 物、或、具有上述（1 )記載之物理化學性狀之化合物稱爲 F-15078A ° 上述（3)記載之化合物爲上述一般式（m )所示且 R二COCH;之化合物。於本發明中，將上述（3 )記載之化合 物、或、具有上述（4 )記載之物理化學性狀之化合物稱爲 F- 1 5 07 8B ° 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 F - 1 5 0 7 8 A可依常法作成鹽。F - 1 5 0 7 8 A之鹽於醫學用 途、獸醫學用途及其以外之用途均可應用。 將F-15078A之鹽應用於醫學用途和/或獸醫爲用途 時，該化合物之鹽若爲藥理上所容鹽即可，並無特別限 定，其可列舉例如鹽酸鹽般之無機鹽、棕櫚酸酸鹽般之 有機酸鹽等。 -10 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） 591036 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 A7 _____ Β7___ 五、發明說明（9 ) F-15078A之鹽於醫學用途及獸醫學用途以外之用途， 例如使用作爲合成中間體時並無特別限定。此類鹽可列 舉例如醋酸鹽、溴化物鹽、氯化物鹽、鹽酸鹽、溴酸鹽、 碘化物鹽、硫酸鹽、磷酸鹽、二磷酸鹽等之無機鹽；檸檬 酸鹽、順丁烯二酸鹽、棕櫚酸鹽、酒石酸鹽等之有機酸 鹽等。 又，本發明F- 1 5 078爲具有各種異構物。於本發明中， 此些異構物全部以單一式表示。因此，本發明亦包含全 部此些異構物及此些異構物之混合物。 更且，本發明於F_15〇78形成溶劑化物（例如水合物） 時，亦包含其全部溶劑化物。 例如，本發明記載F- 1 5078放置於大氣中，或進行 再結晶，則吸收水分，並且附著有吸附水，形成水合 物。本發明亦包含此類溶劑化物。 又，本發明亦包含全部於生體內經代謝而轉變成 F- 1 5078的前體藥物化合物。 f Φ產菌1

L —/—t-L-J J F- 1 5078可由生產該化合物之真菌培養物中取得。 F- 1 5078生產菌可列舉例如屬如Phama屬之真菌株等， 較佳爲Phoma sp . SANK 1 3 89 9株（以下，單稱爲「SANK 1 3 8 9 9株」）。SANK 1 3 8 9 9株爲由東京都小笠原村父島所 採集之土壤中被單離出來。 爲了觀察本菌的菌學性狀，乃於下列各培養基上進行 培養。 -11 - 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁)

591036 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 A7 B7 五、發明說明（I。） 以下記載所使用各培養基的組成。 PDA培養基[馬鈴薯葡萄糖洋菜（Potato Dextrose Agar) 培養基]、

Nissui 馬鈴薯葡萄糖洋培養基（日水製藥 3 9克 (株）製） 蒸餾水 1 000毫升 CMA培養基（玉米粉洋菜（Corn Meal Agar)培養基） 玉米粉洋菜（日水製藥（株）製） 1 7克 蒸餾水 1 000毫升 WSH培養基 桂格燕麥粉 1 0克 硫酸鎂七水合物 1克 磷酸二氫鉀 1克 硝酸鈉 1克 洋菜 20克 蒸餾水 1 000毫升 三浦培養基 葡萄糖 1克 磷酸二氫鉀 1克 硫酸鎂七水合物 0 . 2克 氯化鉀 0 . 2克 酵母萃取物 0 . 2克 硝酸鈉 2克 洋菜 2 0克 -12 - 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) _1_| ϋ ϋ »1— ϋ I mi-^-r°JI ϋ ϋ ϋ ϋ ϋ I I # 591036 A7 B7 五、發明說明（ 蒸餾水 1 000毫升 CYA 培養基{(Czapek Yeast Extract Agar)培養基} 磷酸二氧鉀 1 . 0克 C z a p e k濃縮液 1 0克 酵母萃取物 5克 蔗糖 30克 洋菜 1 5克 蒸餾水 1 000毫升 MEA培養基{麥芽萃取物洋菜（Malt Extract Agar)培養 基} 麥芽萃取物 蛋白 葡萄糖 洋菜 蒸餾水 20克 1克 20克 20克 0 0 0毫升 G25N 培養基{25%甘油硝酸（25%Glycei"〇l Nitrate Agar) 培養基} (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 磷酸二氫鉀 C z a p e k濃縮液 酵母萃取物 甘油 洋菜 蒸餾水 C z a p e k濃縮液爲表示以下組成之溶液 〇.7 5克 7 . 5毫升 3 · 7克 2 5 0克 1 2克 7 5 0毫升 -13 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） W1036 A7 B7 五、 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 發明說明（ 硝酸鈉 氯化鉀 硫酸鎂七水合物 硫酸鐵（Π )七水合物 硫酸鋅七水合物 硫酸銅五水合物 蒸餾水 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 30克 5克 5克 〇 · 1克 0 . 1克 .05克 100毫升 色調的表示爲根據「Methuen Handbook of Colour」 (Kornerup，A.和 Wanscher，J.H. (1 978 ) Methuen handbook of colour(第 3 版），Erye Methuen， London) o SANK 1 3 899株培養下的菌學性狀爲如下。 於PDA培養基上的成長爲於23t、2週培養成直徑 1 3至1 7mm。菌落爲綿毛狀、中央部隆起成羊毛狀，且菌 落之邊緣部稍爲齒狀。菌落表面爲灰色（3B1)至白色。裏 面爲棕色（6E5至4)。 於CMA培養基上的成長爲於23 °C、2週培養成直徑 1 5至1 7mm。菌落爲粉狀，且菌落之邊緣部爲齒狀。菌落 裏面爲灰帶綠（27E5)至暗綠色（27E4)。裏面爲深綠色 (27E4)。 於三浦培養基上的成長爲於23°C、2週培養成直徑22 至33mm。菌落爲壓扁，且菌落之邊緣部爲全緣（邊緣完 整）。菌落表面爲白色。裏面爲黃帶白（3八2)至白色。 於WSH培養基的成長爲於23°C、2週培養成直徑33 至3 4mm。菌落爲壓，且菌落之邊緣剖爲全緣。菌落裏面 -14 表紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） 591036 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 A7 _____B7___ 五、發明說明（4 ) 爲微黃（3A3)至黃帶白（3A2)。裏面爲與菌落表面同色。 於CYA培養基的成長爲於23 °C、2週培養成直徑34 至3 5mm。、菌落爲綿毛狀，中央部爲隆起成羊毛狀，且分 泌弱的可溶性色素。菌落之邊緣部爲壓扁、且全緣。菌 落表面爲灰帶橙（6B3)。裏面爲棕帶橙（6CB)至棕色 (6D8)。 於MEA培養基上的成長爲於23 °C、2週培養成直徑 15至23mm。菌落爲綿毛狀，且中央部爲隆起成羊毛狀。 菌落之邊緣剖爲壓扁，且全緣或稍有齒狀。菌落表面爲 白色至灰色（3B1)。裏面爲深綠色（28F4至3)。 於G25N培養基上不生長。 菌絲爲直徑0 . 5 ’至3 // m ,屢呈束狀，薄壁或厚壁，且 爲滑面或粗糙面，無色或褐色。 SANK 1 3 899株於0DA培養基和三浦培養基等繼續培養 1個月以上，則形成扁形，於其部分之洋菜培養基內形 成埋沒的分子孢子殻。其菌學性狀爲如下。 分子孢子殼爲直徑100至200 μ m，爲完全埋沒或一部 分埋沒於洋菜培養基，爲球形至亞球形且爲褐色至黑色 。未觀察到開口部。分子孢子形成細胞爲7 . 5至9 mx 1 . 3至1 . 8 // m，於球形分子孢子殼層細胞上形成，爲單 細胞且爲圓筒形至筆尖形，爲無色。F U r 〇型分子孢子 爲3 · 5至4 . 7 // m X 1 . 3至1 . 8 // m，爲圓筒形、單細胞且 無色。菌絲爲直徑0 . 5至3 // m ,屢呈束狀，薄壁或厚壁， 滑面或粗糙面，無色或褐色。參考小林之文獻 -15 - 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 裝 訂-------r 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 591036 A7 _____Β7 五、發明說明（β ) (Kobayashi，Μ . , J. Antibact. Antifung. Agents, 22, 7 5 7 ( 1 9 94 ))等，結果將 SAMK 13899 株鑑定爲 Phoma sp·。 尙，SANK 13899爲於平成Π年8月20日於日本茨城 縣築波市東1 - 1 - 3之通商產業省工業技術院生命工學 工業技術硏究所中予以國際寄存，且被賦以寄存編號 FERM BP-6851 。 如所周知，真菌類爲於自然界中，或經由人工操作 (例如，紫外線照射、放射線照射、化學藥品處理等）， 則可輕易引起變異，且本發明之SANK 1 3 899株、其變異 株及與其無法明確區別之菌株全部被包含於SANK 1 3 899 株中。 [培養法及精製法] 如上述F-15078生產菌培養，可在一般生產醱酵產 物所用之培養基中進行。此類培養基爲含有微生物可資 化的碳源、氮源、無機鹽、微量之生長因子、微量金屬 等。 碳源可列舉例如葡萄糖、果糖、麥芽糖、蔗糖、甘露 糖、甘油、糊精、燕麥、裸麥、玉米澱粉、馬鈴薯、玉 米粉、大豆油、綿籽油、糖蜜、檸檬酸、酒石酸等。此 些碳源可單獨或組合使用二種以上之碳源。 培養基中所用之碳源量雖根據培養基中之其他成分等 而異，但通常爲1至10重量％ 。 氮源可列舉例如大豆粉、米糠、花生粉、綿籽粉、酪 蛋白水解物、F a m a m i η、玉米條浸液、蛋白、肉萃取物 -16 - 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） -1.----------裝--------訂---------. (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 591036 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 A7 _____B7__ 五、發明說明（β ) 、酵母、酵母萃取物、麥芽萃取物、硝酸鈉、硝酸銨、 硫酸銨等。此些氮源可單獨或組合使用二種以上之氮 源。 〜 培養基中所用之氮源量雖根據培養基中之其他成分等 而異，但通常爲0.2至6重量％。 碳源及氮源並非必須爲純度高之物質，且即使比含有 微量生長因子、維生素、無機營養等更低純度者亦可。 又，亦可於培養基中加入可取得鈉、鉀、鎂、銨、鈣、 磷酸、硫酸、鹽酸、碳酸等離子之鹽類。 更且，亦可於培養基中加入菌體可資化的維生素B 1、 屯物素等之維生素類、硫胺等之促進菌體增殖之物質、 錳、鉬等之金屬鹽。 又，於液體培養基之情況，爲了防止起泡，亦可於培 養基中加入矽油、聚伸烷基二元醇醚、植物油、動物油、 界面活性劑等之消泡劑。 F - 1 5 078生產菌之培養中所用之液體培養基的pH爲 依據菌株、F - 1 5 0 7 8之pH安定性等而異，但於該生產菌 SANK 13899時，將液體培養基的pH調整至pH5.0至7.0。 F- 1 5078生產菌的培養溫度爲依據菌株、F- 1 507 8之 熱安定性等而異，但於該生產菌爲SANK 1 3 899時，爲 15至37°C，較佳爲22至35t。製造F- 1 5 0 7 8所用之 SANK 1 3 899株之培養溫度較佳爲22至26°C，更佳爲 2 3〇C。 F- 1 5078生產菌之培養方法並無特別限定，可列舉例 -17 - 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁)

591036 A7 B7 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 五、發明說明（4) 如使用固體培養基之培養法、攪拌培養法、振g培去、 通氣培養法、通氣攪拌培養法等，且較佳爲M丨半±音_ 法、振盪培養法、通氣培養法、通氣攪拌培養法，更佳 爲振盪培養法。以工業性規模培養上，更佳爲通氣擅J半 培養法。 用以生產F-15078之該化合物生產菌的培養通常爲 將該菌生長之斜面，接種至少量的培養基進行種培養肖 開始，視需要，以更大規模再度進行種培養後，於最後 階段以更大規模進行本培養。 進行F - 1 5 078生產菌之小規模培養時，使用三角燒 瓶等進行種培養，且視需要，再度進行更大規模之種培 養後，使用三角燒瓶進行本培養。 · 進行F- 1 5078生產菌之大規模培養時，較佳使用附 有攪拌裝置及通氣裝置的醱酵缸或醱酵槽。若使用此類 裝置，則可在醱酵缸或醱酵槽中調製培養基並且滅菌。 此方法適於F - 1 5 0 7 8的大規模製法。 SANK 1 3 899株所生產的F - 1 5 078，通常於144至1 92 小時之培養到達最高値。 培養物中所存在的F- 1 5 07 8，可由培養物、培養物以 矽藻土作爲助濾劑之過濾操作所得之培養上淸液、將培 養物供於離心分離操作所得之培養濾液、和/或菌體’ 並且利用F - 1 5 0 7 8的物理化學性狀，則可予以萃取精 製。 於培養濾液或培養上淸液中存在的F-1 5 07 8，可於中 -18 - 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公楚） (請先閱讀背面之注意事 4 裝·——I—— 寫本頁) 訂----.---l·-#· 591036 A7

五、發明說明（7 ) 性p Η條件下，以不與水混合之有機溶劑例如醋酸乙酯、 氯仿、二氯乙烷、二氯甲烷、丁醇等單獨或其二種以上 之混合溶劑進行萃取。又，將培養濾液或培養上淸液， 以及吸附劑，例如，活性碳、A m b e r 1 i t e X A D - 2、

Amberlite XAD-4(以上，R〇hm & Haad 公司製）、Diaion HP-10、 Diaion HP-20、 Diaion CHP-20P、 Diaion HP- 50 、 Sepabe ads SP -207(以上 ，三 菱化學 （株）製）等接 觸， 令夾雜物吸附且除去，或者，將F - 1 5078與吸附之夾 雜物分離後，使用甲醇水、丙酮水、丁醇水等，則可令 F- 1 5078 溶出。 菌體中存在的F - 1 5 0 7 8可經由5 0至9 0%含水丙酮或 含水甲醇予以萃取，並以矽藻土等作爲助濾劑進行過濾 操作，由所得濾液中將有機溶劑除去後，進行與培養濾 液或培養上淸液情況同樣的萃取精製操作則可取得。 培養物中存在的F- 1 507 8可於培養終了後，添加適 量、較佳爲終濃度50 % (容積/容積）之丙酮或甲醇，進 行萃取。萃取終了後，進行以矽藻土作爲助濾劑的過濾 操作，並且對於所得之濾液，進行與培養濾液或培養上 淸液之情況同樣的萃取精製操作。 如此所得之F- 1 5078的粗製餾分可經由使用TSK Ge 1 Toyopearl HW-40F(東梭（株）製）、Sephadex LH-20 (Amersham-Pharmacia公司製等）之分配柱層析、 Cosmosil 140C18(Nacaritesc(株）製）等之逆相柱層析 等予以再精製。視需要，將如此所精製之含F- 1 5 07 8餾 -19 - 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） (請先閱讀背面之注意事 裝 -------訂--------r 項再填寫本頁) 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 591036 A7 __B7__ 五、發明說明（β ) 於真菌感染症之預防藥或治療，本發明爲提供將 F-15078或其鹽之藥理有效量投與動物之真菌感染症的 治療方法及預防方法、F- 1 5078或其鹽所構成之醫藥、 F- 1 5078或其鹽之使用。 將F - 1 5078或其鹽使用於真菌感染症之預防藥或治 療藥時，其投與形態並無特別限定，可根據製劑、年齢、 性別、疾病種類、疾病程度等而適當選擇。 例如，錠劑、九劑、散劑、顆粒劑、糖漿劑、液劑、 懸浮劑、乳劑、顆粒劑、膠囊劑等可被經口投與。注射 劑可爲單獨或與葡萄糖、胺基酸等輔助液之混合液，或 與聚乙烯山梨糖醇酐脂肪酸酯類混合之乳劑型式，進行 靜脈內投與、肌肉內投與、皮內投與、皮下投與和/或 腹腔內投與。栓劑可用於直腸內投與。 此些各種製劑可於至藥中加上使用賦形劑、黏合劑、 崩散劑、潤滑劑、溶解劑、矯味矯臭劑、塗覆劑等該領 域中所用的公知輔助劑則可製得。 形成錠劑時，可使用該領域所公知之物質作爲載體， 且可例示如葡萄糖、尿素、澱粉、碳酸鈣、高嶺土、結 晶纖維素、矽酸等之賦形劑；水、乙醇、丙醇、單糖漿、 葡萄糖液、澱粉液、明膠溶液、羧甲基纖維素、蟲膠、 甲基纖維素、磷酸鉀、聚乙烯吼咯烷酮等之黏合劑；乾燥 澱粉、藻酸鈉、洋菜粉末、昆布多糖粉末、碳酸氫鈉、 碳酸鈣、聚氧乙烯山梨糖醇酐脂肪酸酯類、月桂基硫酸 鈉、硬脂酸單甘油酯、澱粉、乳糖等之崩散劑；白糖、 -21 - 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） ---— — — — — — — · I I I I I I 1 I I------ (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 591036 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 A7 一 _B7___ 五、發明說明（/ ) 硬脂精、可可脂、氫化油等之崩散抑劑、四級錠鹼、月 桂基硫酸鈉等。吸收促進劑，甘油、澱粉等之保濕劑，澱 粉、乳糖…高嶺土、膨潤土、膠體狀矽酸等之吸附劑；精 製滑石、硬脂酸鹽、硼酸粉末、聚乙二醇等之潤滑劑等。 錠劑之情況，視需要，可作成施以通常劑皮的錠劑，例 如，糖衣錠、明膠包被錠、腸溶被錠、薄膜塗覆錠、雙 重錠、多重錠等。 形成九劑時，可使用該領域所公知之物質作爲載體， 且可例示如葡萄糖、乳糖、可可粉、澱粉、硬化植物油、 高嶺土、滑石等之賦形劑；阿拉伯膠粉末、黃蓍膠粉末。 明膠、乙醇等之黏合劑、昆布多糖洋菜等之崩散劑等。 形成栓劑時，可使用該領域所公知之物質作爲載體， 且可例示如聚乙二醇、可可脂、高級醇、高級醇之酯類、 明膠、半合成甘油酯等。於注射劑爲液劑、乳劑或懸浮 劑時，較佳爲被殺菌、且與血液等張，且於形成此些液 劑、乳劑及懸浮劑之形態時，可使用此領域所慣用之物 質作爲稀釋劑，其可列舉例如水、乙醇、丙二醇、環氧 化異硬脂醇、聚化異硬脂醇、聚氧乙烯山梨糖醇酐脂肪 酸酯類等。亦可含有令注射劑與血液等張之充分量的食 鹽、葡萄糖、甘油等，且亦可含有通常的溶解輔助劑、 緩衝劑、無痛化劑等。 於此些各種製劑中，視需要，亦可含有著色劑、保存 劑、香料、風味劑、甜味劑、其他藥劑等。 此些各種製劑中所含之F - 1 5 0 7 8之份量雖依據劑型、 -22 - 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） I— — — — — — — — — —Aw · I I l· I I I I ^ *ΙΙΙΓΙΙι — (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) A7

591036 五、發明說明（Μ ) 投與方法等而異，但通常爲丨至7 0重量％，較佳爲i 至3 0重量％ 。 F - 1 5 0 7 8之投與量依據疾病種類、疾病程度、年齡、 體重、投與方法、劑型等而異，對於成人1日投與量之 上限爲20至2000毫克，下限爲0.000 1至〇.丨毫克，較 佳之範圍爲0.01至200毫克，更佳之範圍爲〇」至2〇 毫克。 含有F- 1 5078之醫藥的投與次數雖依據劑型、疾病種 類、疾病程度、體重等而異，但並無特別限定，可角齡 日1回、1日1回、或1日數回。 场敷 [用以實施發明的最佳型態】 以下列舉實施例、試驗例及製造例，更加詳細說明本 發明，但本發明不被其所限定。 窗施例1，F- 1 5078A之製造（1) [SANK 1 3 899 株之培養（1 )] 將SANK 1 3 899株，於含有121°C滅菌30分鐘，具有 表1記載組成之種培養培養基100毫升之3個500毫 升容量三角燒瓶中，接種一白金耳，並於2 3 °C、 2 1 0 r pm (迴轉半徑7公分）之條件下培養5日。將所得之 培養液，含有相同組成培養基400毫升之9個2公升 容量三角燒瓶中，接種5 %，且於2 3 °C、2 1 0 r p m (迴轉半 徑7公分）之條件下培養2日。將所得之種培養液，於 含有1 2 1 °C滅菌3 0分鐘、具有表2記載組成之本培養培 養基（1)15公升之4個30公升容量缸或培養機中，植菌 5%，並於23°C、通氣量Iwm、100至420 rpm、溶存氧量 -23 - -II----------裳----^-----訂----·----Γ — (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公爱） 591036 A7 B7 發明說明（P) 5 . Oppm之條件下培養7日。 表1種培養培養基之培養基組成 甘油 - 30克 葡萄糖 30克 可溶性澱粉 20克 大豆粉 10克 明膠 2 . 5克 酵母萃取物（D 1 f c 〇 ) 2 . 5克 NH4NO3 2.5克 消泡劑λ 0. 1毫升 自來水 1 000毫升 (pH未調整） * Nissan D i s f o r m CB - 4 4 2 (日本油脂（株）製） 表2 本培養培養基Π )之培養基組成 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 糊精（D 1 f c 〇 ) 10克 甘油 20克 葡萄糖 30克 麥芽萃取物（D i f c 〇 ) 10克 酵母萃取物（D 1 f c 0 ) 2克 膜蛋曰 （Difco) 1克 HN4NO3 1克 NaN0B 1克 KH2PO4 1克 MgS〇4 · 7H2〇 1克 -24 - 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） -------丨丨丨丨·丨丨丨丨--—訂---I--I-- (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) ^1036 ^1036 五、 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 發明說明（>4 14 0C18(Nacari tesc(株）製）柱中◦該柱以10公升相同之 溶劑洗淨，並以乙腈：〇 . 〇 5%三氟醋酸水=6 : 4展開。分 取溶出液各2公升，並於餾分no . 2 ( 2公升）中回收 F-1 507 8 °將所得之餾分減壓濃縮至8〇〇毫升後，以 6 . 25當量之氫氧化鈉調整至pH7，加入醋酸乙酯1公升 並萃取活性物質，洗淨、脫水、減壓濃縮乾燥，取得 2 3 4 . 3 克之粗精製物。將此粗精製物溶解於4毫克之 甲醇後，依據以下所示之HPLC條件進行HPLC，取得含 有F- 1 5078A之餾分。 HPLC之條件（1 )

木 1: : YMC Pak 0DS-AM 直徑30mmx長度3 00mm( YMC(株）製） 溶劑：乙腈，乙胺磷酸水（pH6 . 0) = 3 : 1 檢测波長：UV210nm 流速：1 0 . 4毫克/分鐘 溫度：室溫 保持時間：7 7至9 8分鐘 將所得之含F- 1 5 0 7 8A餾分如上述，使用醋酸乙酯， 以脫鹽，並且減壓濃縮乾燥，則可取得3 4 . 1毫克記賊 l·、- 1 5 〇 7 8 A。 實施例2. F- 1 5078A之製造（2 ) [SANK 1 3 8 9 9 株之培養（2 )] 將SANK 1 3 899株，於含有1 2 1 °C滅菌30分鐘，具有 實施例1之表1記載組成之種培费培養基500毫升之6 -26 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公爱） f , l·--I--丨丨—丨i ί ----訂------I-- (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 591036 A7 B7 五、發明說明（/ ) (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 個2公升容量三角燒瓶中，接種一白金耳，並於23 °C、 2 1 0 r pm (迴轉半徑7公分）之條件下培養6日。將所得之 種培養液，於含有相同組成培養基30公升之2個60公 升之培養機中，植菌5%，且於23°C、通氣量1 vvm、 2 1 0 r p m、溶存氧量5 0 p p m之條件下培養2日。將所得之 種培養液，於含有1 2 1 °C滅菌3 0分鐘、具有表2記載組 成之本培養培養基 300公升之1個600公升容量缸或 培養機中，植菌5%，並於23°C、通氣量lwm、83至 240rpm、溶存氧量5.0ppm之條件下培養7曰。 表3本培養培養基（2)之培養基組成_ 甘油 80克 麥芽萃取物（D i f c 〇 ) 20克 酵母萃取物（Difco) 2克 胰蛋白 （Difco) 10克 HN4N〇3 1克 NaN〇3 1克 KH2PO4 1克 MgS〇4 · 7H.2〇 1克 消泡劑# 0 . 1毫升 自來水 1 000毫升 (pH未調整） 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 * Nissan Dis form CB- 442 (曰本油脂（株）製） [F- 1 507 8A 之單離（2)] 於所得之培養物3 7 0公> 中加入助濾劑（Cell te 5 45: -27 - 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐〉 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 591036 A7 B7______ 五、發明說明（>〇

柱：Shodex asahipak C8P 90 2F (直徑20mmx 250mm:昭和電工（株）製） 溶劑：乙腈：1 0 m Μ碳酸氣錢水=6 : 4 檢測波長：UV21 Onm 流速：1 4毫升/分鐘 溫度：室溫 保持時間：1 9 . 2分鐘 實施例3, F- 1 5078B之製造 [SANK 1 3 899 株之培養（3)] 將SANK 1 3 899株，於含有121 °C滅菌30分鐘，具有 實施例1之表1記載組成之種培養培養基5 0 0毫升之6 個2公升容量三角燒瓶中，接種一白金耳，並於2 3 °C、 2 1 0 r p m (迴轉半徑7公分）之條件下培養6日。將所得Z 種培養液，於含有相同組成培養基3 0公升之2個6 0公 升容量槽式培養機中，植菌5%，且於2 3 °C、通氣量 lvvm、lOOrpm、溶存氧量5.0ppm之條件下培養2曰。 將所得之種培養液，於含有1 2 1 °C滅菌3 0分鐘、具有實 施例2之表2記載組成之本培養培養基 3 00公升之1 個6 0 0公升容量缸或培養機中，植菌5 %，並於2 3 °c、通 氣量1 wm、83至240 rpm、溶存氧量5 . Oppm之條件下培 養7曰。 [F- 1 5 0 7 8B 之單離] 於所得之培養物3 7 0公升中加入助濾劑（c e 1 1 t e 5 4 5 : Celite Corporation公司製）15公斤，進行濾器加壓過 -30 - 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS>A4規格（210 X 297公爱） —r--I------—Awi I I -----訂--I I ί I I J » (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 591036 A7 B7___ 五、發明說明（V ) (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁)

性物質萃取。萃取液以5 0公升以飽和食鹽水洗淨，以無 水硫酸鈉進行脫水後，進行減壓濃縮乾燥，取得3 2 . 3 克之油狀物質。將此油狀物質溶於甲醇200毫升，並將 所得溶液中之5 0毫升依據實施例2記載之HPLC條件 進行HPLC。對於該溶液剩餘的150毫升亦各以30毫升， 分成5回，進行相同條件的HPLC。其結果，取得含有 F-15078B之餾分26公升。於此餾分中添加10公升水， 再加入1 0公升之醋酸乙酯，並萃取活性物質。將萃取液 洗淨、脫水、減壓濃縮乾燥，取得粗精製物7 . 78克。將 此粗精製物中之2 . 1 0克溶於5毫升之甲醇中，並且添 加 Cosmosil 140 C18-OPN(Nacaritesc(株）製）5 克。蒸 除溶劑後，將剩餘的Cosmos 1 1 140 Cl 8-0PN 經濟部智慧財產局員Η消費合作社印製 (Nacaritesc(株）製）於乙腈：0.05%三氟醋酸水二4:6預 先平衡化之170毫升容量之Cosmosil 140 C18-0PN (Nacan t esc (株）製）柱上重疊。將該柱以相同溶劑300 毫升洗淨後，以乙腈：0.05%三氟醋酸水=4: 6 300毫升 洗、及、乙腈：0 . 05%三氟醋酸水=9 : 1 20毫升展開，且 各分取1 0毫升時，於餾分No . 6 4至7 2 (合計9 0毫升）中 回收F- 1 5 07 8B。將所得之餾分減壓濃縮後，冷凍乾燥， 取得109毫克之黃白色粉末。將此粉末100毫克溶解於 1微升之甲醇中，將此溶液各以200微升，分成5回， 依據以下所示之HPLC條件（4)進行HPLC。將所得之餾分 予以減壓濃縮、冷凍乾燥，則取得69 . 5毫克之F- 1 507 8B 白色粉末。 -32 - 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公爱了 591036 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 A7 ^B7 五、發明說明〇 駿_劑例1.經口用膠囊劑 F- 1 5078A 30毫克 乳糖 170毫克 玉米澱粉 150毫克 硬脂酸鎂 2毫克 合計 3 5 2毫克 將上述配方之粉末混合，通過3 0篩孔之篩後，將此 粉末裝入明膠膠囊中，作成膠囊劑。 [產業上之可利用性] 本發明爲提供具有抗真菌活性之新穎化合物。 本發明所提供之化合物可被包含於真菌感染症之治療 劑及預防劑等醫藥中，可用於治療及預防真菌感染症。 -34 - 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） •丨，----------裝—**—訂—.—*線· (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁)

Claims (1)

1. 591036 公告本 六、申請專利範圍 第89 1 1 7866號「新穎化合物F- 1 5 078」專利案 (93年4月5日修正） 六申請專利範圍： 1 . 一種下述式（I )所示之化合物或其鹽

   H3C 2.—種具有下述理化學性狀之化合物或其鹽： 1) 物質之性狀：鹼性脂溶性粉末 2) 分子式：C55H98N8014 3) 分子量：1 094(FAB-MS 法） 4) 高分解能 FAB-MS[M + H] +(作爲 C55H99N8014) 實測値：1 0 9 5.7 3 6 5 1- 591036 六、申請專利範圍 計算値：1 095.728 1 5) 紫外線吸收光譜：終端吸收 6) 紅外線吸收光譜：（溴化鉀錠劑中、cm·1): 3434，3335, 2962，2937, 2875，2806，1 750，1 684， 1641，1 509，1 469，1412，1371，1314，1 294，1271， 1204，1156，1 1 28, 1 074，1020 7) 旋光度：[a]D2M20° (c 1.0、甲醇） 8) !Η-核磁共振光譜··（δ、ppm) 重氯仿中，以四甲基矽烷作爲內部標準所測定之核磁 共振光譜（500MHz)爲如下所示： 0.78(3H), 0.79(3Η), 0.80(3Η), 0.82 (311), 0. 87 (3Η), 0. 88 (1Η), 0.92(3Η), 0. 93(3Η), 0.94(3Η), 0.96(3Η), 0.97(3Η), 0.98(3Η), 1.01(3Η), 1.02(3Η), 1.0 3(3Η), l.〇6(3H), 1.2Κ1Η), 1.4Κ3Η), 1.4Κ1Η), 1.48(1Η), 1.48(1Η), 1.49 (1Η), 1. 52(3Η), 1.55(1Η), 1.65(1Η), 1.66(1Η), 1.70(2Η), 1.73(1Η), 1.81(1 Η),1·87(1Η), 2·28(1Η), 2·31(1Η), 2·37(1Η), 2.48(3Η), 2.89(3Η), 2·94(3Η), 2.96(1Η), 3.29(3Η), 3.56(1Η), 4.06(1Η), 4. 14(1Η), 4.77(1Η), 4.78(1Η), 4.84(1Η), 4.9Κ1Η), 4.96(1Η), 5.21(1Η), 5.25(1Η), 5.53(1Η), 6.39(1Η), 7. 83(1Η), 7.94(1Η), 8.28(1Η) 9) 13C-核磁共振光譜：（5、ppm) 重氯仿中，以四甲基矽烷作爲內部標準所測定之核磁 共振光譜（500MHz)爲如下所示： -2- 591036 六、申請專利範圍 I0.9(q), 11.9(q)t 15.0(d), l5.1(q), 16.0(q), 16.6(q), I7.4(q), 18.3(q), i8.6(q), 18.7(q), 19. l(ci), 21.0(q), 21.4(q), 22. l(q), 23. 1 (q), 23.51 (ci), 23. 54 (q), 24.2(t), 24.6(d), 24.8(d), 25.4(d), 25.5(t)，27.7(d), 29. 5(C), 29.8(d), 30.2(d), 36. Kq). 36.5(0, 37.7(t), 38.3(d), 38.4(d), 39. 7(t), 40.9(q), 46.2(d), 51.8(d), 53.1(d), 54.7(d), 55.1(d), 63.9(d), 64. 7(d), 68.1(d), 70.1(d), 73.4(d)，74.3(d), 77.1(d), 169· 03(s), 169.04 (S)， lB9.6(s), 169.8(s), 1B9.9(s), 170.3(s), 172.0(s), 173.4(s), 173.8(s), ΠΑ. 0(s) l〇) 高速液體層析： 管柱：Shodex Asahipak C8P 50 4E (直徑4.6mmx長度250mm:昭和電工（株）製） 移動相：乙腈：10mM碳酸氫銨水=13:7 流速：0.7毫升/分鐘 檢測波長：λ 210nm 保持時間：1 0.2 0分鐘 11) 溶解性：二甲基亞碾、甲醇、氯仿中可溶 12) 胺基酸分析：察見爲水解物之蘇胺酸、丙胺酸、 異白胺酸。 3.—種下述式（Π )所示之化合物 一 3- 591036 t、申請專利範圍

   4.一種具有下述理化學性狀之化合物： 1) 物質之性狀：中性脂溶性無色粉末 2) 分子式： 3) 分子量：1 136(FAB-MS 法） 4) 高分解能 FAB-MS[M + H] +(作爲 C57H1Q1N8015 ) 實測値：1 1 3 7.74 1 0 計算値：1137.7387 5) 紫外線吸收光譜：終端吸收 6) 紅外線吸收光譜：（溴化鉀銳劑中、cm·1): 343 3, 3 3 3 3，2963，293 7, 2875，1751，1 686，1 642, 1516，1469, 1409，1 3 8 8，1 372，1311，1 292，1 272, -4- 91036 六、申請專利範圍 1201，1 156，1 128，1 074，1017 7) 旋光度：U ]D25-13 1。（c 1.〇、甲醇） 8) 核磁共振光譜：、ppm) 重氯仿中，以四甲基矽烷作爲內部標準所測定之核磁 共振光譜（500MHz)爲如下所示： 0.78(3H), 0.79(3H), 0.80(3H), 0.83C3H), 0.87(lH), 0.87(3H), 0.90(3H), 0. 0.9：5(3H)r 0.95 011), 0.95(：j||), 0.9HCUI), 1.01(311), l.〇 K3H). 1.0：HIH), 1.05C3H), 1.28 (311), 1.37 (iH)f Γ.40(1Η), 1.46(1H), i.47 (1H)，I.49(IH)f l.hl(3H), 1.64(^), 1.65(iH), 1.66(1H), 1.86(1H), 1.72 (1H), 1.78(1Η), 2.12(3H), 2.13(1H), 2.26(1H), 2.31(1H), 2.37(1H), 2.88 (3H), 2.93(3H), 2.97(3H), 3.28(3H), 3.56(1H), 4.03(1H), 4. 15(1H), 4.73 (1H), 4.78(1H), 4.82(1H), 4.83(1H), 4.91(1H), 4.97(1H), 5. 15(1H), 5.28 (1H), 5.50(lH)f 6.370H), 6.87(1H), 7.86(1H), 8.29(1H) 9) 13C-核磁共振光譜：（5、ppm) 重氯仿中，以四甲基矽烷作爲內部標準所測定之核磁 共振光譜（500MHz)爲如下所示： 10.5(q), 10.9(q), 14.9(q), 15. Kq), 15.6(q), 16.6(q), 16.7(q), 18.3(q), 18.6(q), I8.7(q), 19.0(q), 2〇.8(ci), 21.4(q), 22.0(q), 22. l(q), 23. l(q), 23.6(g), 23.6(g), 24. l(t), 24.6(0, 24.7(d), 24.8(d), 25.4(d), 27.7(d), 29.5(q), 29.8(d), 30.2(q), 31.6(d)，31.8(q), 36. l(t), 37.6(t), 38.4(d), :39·6(〇, 40.9(c 丨），46.1(d), 51.8(d)，53.1(d), 54.7(d), 54.7(d), 61.2(d), 6.19(d), 6-1.6(d), 68.1(d), 73.1(d), 74.3(d), 77.0(d), 168.9(s), 168.9 (s), 169. 1( s), 169.9( s), 169.9( s), 170. 3 (s), 170.6(5), 171.7(s),172.0 (s), 173. 3(s), 173. 8(s) 10) 高速液體層析： 一 5一 591036 六、申請專利範圍 管柱：Shodex Asahipak C8P 50 4E (直徑4.6mmx長度250mm:昭和電工（株）製） 移動相：乙腈：10mM碳酸氫銨水=13:7 流速：0.7毫升/分鐘 檢測波長：又2 1 Onm 保持時間：9.05分鐘 11) 溶解性··二甲基亞碾、甲醇、氯仿中可溶 12) 胺基酸分析：察見爲水解物之蘇胺酸、丙胺酸 、異白胺酸。 5 ·—種如申請專利範圍第1至4項中任一項之化合物之製 法，其特徵爲培養屬於莖點黴屬（Phoma sp.)之如申請專 利範圍第1至4項中任一項之化合物之生產菌，並由其 培養物中採集如申請專利範圍第1至4項中任一項之 化合物。 6 ·如申請專利範圍第5項之製法，其中屬於莖點黴屬之如 申請專利範圍第1至4項中任一項之化合物之生產菌爲 Phoma sp. SANK 1 3 899(FERM BP-685 1 )株，CCRC 930044 株。 7 · —種真菌感染症之治療用醫藥組成物，其含有如申請專 利範圍第1至4項中任一項之化合物或其鹽作爲有效 成分。 一 6一