JP2001139597A - 新規化合物ｆ−１５０７８ - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 【課題】抗真菌活性を有する新規化合物を提供するこ
と。 【解決手段】下記式（Ｉ） 【化１】

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【発明の属する技術分野】本発明は、抗真菌活性を有す
る新規化合物、該化合物生産菌を培養することによる該
化合物の製造法、該化合物を有効成分として含有する医
薬、該化合物を有効成分とする真菌感染症の治療剤及び
予防剤、該化合物の生産菌等に関する。

【０００２】

【従来の技術】現在臨床に用いられている抗真菌化合物
としては、アンフォテリシンＢ、フルシトシン、アゾー
ル系化合物等を挙げることができる。これらの化合物に
は、細胞毒性や耐性菌の出現が問題になってきているも
のが多い。

【０００３】微生物が生産する抗真菌化合物としては、
ザレリオン（Zalerion）属等が生産するニューモカンジ
ン（pneumocandin）類（Schmatz, D. M., et al., J. A
ntibiotics 45, 1886(1992)）、アスペルギルス（Asper
gillus）属等が生産するエキノカンジン（echinocandi
n）類（Nyfeler, R. and Keller-Schierlein, W., Hel
v. Chim. Acta 57, 2459(1974)）、又、オーレオバシジ
ウム（Aureobasidium）属が生産するオーレオバシジン
(aureobasidin)類（Ikai, K., et al., J. Antibiotics
44, 925(1991)）等が報告されているが、これらは臨床
への適用に至っていない。

【０００４】

【発明が解決しようとする課題】本発明者らは、東京都
小笠原村父島において採集した土壌より採取されたホー
マ・エスピー（Ｐｈｏｍａ ｓｐ．）ＳＡＮＫ１３８９
９株の培養物中に新規化合物を見出し、該化合物が抗真
菌活性を有することを確認し、本発明を完成した。

【０００５】すなわち、本発明は、（１）下記式（Ｉ）

【０００６】

【化３】 で表される化合物又はその塩、（２）下記の理化学的性
状を有する化合物又はその塩： １）物質の性状：塩基性脂溶性粉末 ２）分子式：Ｃ₅₅Ｈ₉₈Ｎ₈Ｏ₁₄ ３）分子量：1094（ＦＡＢ−ＭＳ法） ４）高分解能ＦＡＢ−ＭＳ［Ｍ＋Ｈ］⁺（Ｃ₅₅Ｈ₉₉Ｎ₈Ｏ
₁₄として）： 実測値：1095.7365 計算値：1095.7281 ５）紫外線吸収スペクトル：末端吸収 ６）赤外線吸収スペクトル（臭化カリウム錠剤中、ｃｍ
^-1）：3434, 3335, 2962, 2937, 2875, 2806, 1750, 16
84, 1641, 1509, 1469, 1412,1371, 1314, 1294, 1271,
1204, 1156, 1128, 1074, 1020 ７）旋光度：［α］_D ²⁵−１２０°（ｃ １．０、メタ
ノール） ８）¹Ｈ−核磁気共鳴スペクトル：（δ、ｐｐｍ） 重クロロホルム中、テトラメチルシランを内部標準とし
て測定した核磁気共鳴スペクトル（５００ ＭＨｚ）
は、次に示す通りである。 0.78(3H), 0.79(3H), 0.80(3H), 0.82(3H), 0.87(3H),
0.88(1H), 0.92(3H), 0.93(3H), 0.94(3H), 0.96(3H),
0.97(3H), 0.98(3H), 1.01(3H), 1.02(3H), 1.03(3H),
1.06(3H), 1.21(1H), 1.41(3H), 1.41(1H), 1.48(1H),
1.48(1H), 1.49(1H),1.52(3H), 1.55(1H), 1.65(1H),
1.66(1H), 1.70(2H), 1.73(1H), 1.81(1H),1.87(1H),
2.28(1H), 2.31(1H), 2.37(1H), 2.48(3H), 2.89(3H),
2.94(3H), 2.96(1H), 3.29(3H), 3.56(1H), 4.06(1H),
4.14(1H), 4.77(1H), 4.78(1H), 4.84(1H), 4.91(1H),
4.96(1H), 5.21(1H), 5.25(1H), 5.53(1H), 6.39(1H),
7.83(1H), 7.94(1H), 8.28(1H) ９）¹³Ｃ−核磁気共鳴スペクトル：（δ、ｐｐｍ） 重クロロホルム中、テトラメチルシランを内部標準とし
て測定した核磁気共鳴スペクトル（５００ ＭＨｚ）
は、次に示す通りである。 10.9(q), 11.9(q), 15.0(q), 15.1(q), 16.0(q), 16.6
(q), 17.4(q), 18.3(q),18.6(q), 18.7(q), 19.1(q), 2
1.0(q), 21.4(q), 22.1(q), 23.1(q), 23.51(q),23.54
(q), 24.2(t), 24.6(d), 24.8(d), 25.4(d), 25.5(t),
27.7(d), 29.5(q), 29.8(d), 30.2(q), 36.1(q), 36.5
(t), 37.7(t), 38.3(d), 38.4(d), 39.7(t), 40.9(q),
46.2(d), 51.8(d), 53.1(d), 54.7(d), 55.1(d), 63.9
(d), 64.7(d), 68.1(d), 70.1(d), 73.4(d), 74.3(d),
77.1(d), 169.03(s), 169.04(s), 169.6(s), 169.8(s),
169.9(s), 170.3(s), 172.0(s), 173.4(s), 173.8(s),
174.0(s) １０）高速液体クロマトグラフィー： カラム ：Ｓｈｏｄｅｘ Ａｓａｈｉｐａｋ Ｃ８Ｐ
５０ ４Ｅ（直径４．６ｍｍ×長さ２５０ｍｍ：昭和電
工（株）製） 移動相 ：アセトニトリル：１０ｍＭ炭酸水素アンモニ
ウム水＝１３：７ 流 速：０．７ｍｌ／分 検出波長：λ２１０ｎｍ 保持時間：１０．２０分 １１）溶解性：ジメチルスルホキシド、メタノール、ク
ロロホルムに可溶。１２）アミノ酸分析：加水分解物と
してスレオニン、アラニン、イソロイシンが認められ
た、（３）下記式（ＩＩ）

【０００７】

【化４】 で表される化合物、（４）下記の理化学的性状を有する
化合物： １）物質の性状：中性脂溶性無色粉末 ２）分子式：Ｃ₅₇Ｈ₁₀₀Ｎ₈Ｏ₁₅ ３）分子量：1136（ＦＡＢ−ＭＳ法） ４）高分解能ＦＡＢ−ＭＳ［Ｍ＋Ｈ］⁺（Ｃ₅₇Ｈ₁₀₁Ｎ₈
Ｏ₁₅として）： 実測値：1137.7410 計算値：1137.7387 ５）紫外線吸収スペクトル：末端吸収 ６）赤外線吸収スペクトル（臭化カリウム錠剤中、ｃｍ
^-1）：3433, 3333, 2963, 2937, 2875, 1751, 1686, 16
42, 1516, 1469, 1409, 1388,1372, 1311, 1292, 1272,
1201, 1156, 1128, 1074, 1017 ７）旋光度：［α］_D ²⁵−１３１°（ｃ １．０、メタ
ノール） ８）¹Ｈ−核磁気共鳴スペクトル：（δ、ｐｐｍ） 重クロロホルム中、テトラメチルシランを内部標準とし
て測定した核磁気共鳴スペクトル（５００ ＭＨｚ）
は、次に示す通りである。 0.78(3H), 0.79(3H), 0.80(3H), 0.83(3H), 0.87(1H),
0.87(3H), 0.90(3H), 0.92(3H), 0.93(3H), 0.95(3H),
0.95(3H), 0.98(3H), 0.98(3H), 1.01(3H), 1.01(3H),
1.03(1H), 1.05(3H), 1.28(3H), 1.37(1H), 1.40(1H),
1.46(1H), 1.47(1H), 1.49(1H), 1.51(3H), 1.64(1H),
1.65(1H), 1.66(1H), 1.86(1H), 1.72(1H), 1.78(1H),
2.12(3H), 2.13(1H), 2.26(1H), 2.31(1H), 2.37(1H),
2.88(3H),2.93(3H), 2.97(3H), 3.28(3H), 3.56(1H),
4.03(1H), 4.15(1H), 4.73(1H), 4.78(1H), 4.82(1H),
4.83(1H), 4.91(1H), 4.97(1H), 5.15(1H), 5.28(1H),
5.50(1H), 6.37(1H), 6.87(1H), 7.86(1H), 8.29(1H) ９）¹³Ｃ−核磁気共鳴スペクトル：（δ、ｐｐｍ） 重クロロホルム中、テトラメチルシランを内部標準とし
て測定した核磁気共鳴スペクトル（５９９ ＭＨｚ）
は、次に示す通りである。 10.5(q), 10.9(q), 14.9(q), 15.1(q), 15.6(q), 16.6
(q), 16.7(q), 18.3(q),18.6(q), 18.7(q), 19.0(q), 2
0.8(q), 21.4(q), 22.0(q), 22.1(q), 23.1(q),23.6
(q), 23.6(q), 24.1(t), 24.6(t), 24.7(d), 24.8(d),
25.4(d), 27.7(d),29.5(q), 29.8(d), 30.2(q), 31.6
(d), 31.8(q), 36.1(t), 37.6(t), 38.4(d),39.6(t), 4
0.9(q), 46.1(d), 51.8(d), 53.1(d), 54.7(d), 54.7
(d), 61.2(d),63.9(d), 64.6(d), 68.1(d), 73.1(d), 7
4.3(d), 77.0(d), 168.9(s), 168.9(s), 169.1(s), 16
9.9(s), 169.9(s), 170.3(s), 170.6(s), 171.7(s), 17
2.0(s),173.3(s), 173.8(s) １０）高速液体クロマトグラフィー：カラム ：Ｓｈｏ
ｄｅｘ Ａｓａｈｉｐａｋ Ｃ８Ｐ ５０ ４Ｅ（直径
４．６ｍｍ×長さ２５０ｍｍ：昭和電工（株）製） 移動層 ：アセトニトリル：１０ｍＭ炭酸水素アンモニ
ウム水＝１３：７ 流 速：０．７ｍｌ／分 検出波長：λ２１０ｎｍ 保持時間：９．０５分 １１）溶解性：ジメチルスルホキシド、メタノール、ク
ロロホルムに可溶 １２）アミノ酸分析：加水分解物としてスレオニン、ア
ラニン、イソロイシンが認められた、（５）ホーマ（Ｐ
ｈｏｍａ）属に属する、（１）乃至（４）のいずれか一
つに記載の化合物の生産菌を培養し、その培養物より
（１）乃至（４）のいずれか一つに記載の化合物を採取
することを特徴とする、（１）乃至（４）のいずれか一
つに記載の化合物の製造方法、（６）ホーマ（Ｐｈｏｍ
ａ）属に属する、（１）乃至（４）のいずれか一つに記
載の化合物の生産菌がホーマ・エスピー（Ｐｈｏｍａ
ｓｐ．） ＳＡＮＫ １３８９９（ＦＥＲＭ ＢＰ−６
８５１）株である、（５）に記載の製造方法、（７）
（１）乃至（４）のいずれか一つに記載の化合物又はそ
の塩を有効成分として含有する医薬、（８）（１）乃至
（４）のいずれか一つに記載の化合物若しくはその塩を
有効成分として含有する真菌感染症の治療剤又は予防
剤、及び、（９）ホーマ・エスピー（Ｐｈｏｍａ ｓ
ｐ．） ＳＡＮＫ １３８９９（ＦＥＲＭＢＰ−６８５
１）株、に関する。

【０００８】本発明の化合物は上記（１）乃至（４）に
記載されている。このうち、上記（１）及び（３）記載
の化合物は、下記一般式（ＩＩＩ）

【０００９】

【化５】 （式中、Ｒは水素原子又はＣＯＣＨ₃を示す。）により
表すことができ、本発明においては上記一般式（ＩＩ
Ｉ）で表される化合物を総称してＦ−１５０７８とい
う。

【００１０】上記（１）記載の化合物は、上記一般式
（ＩＩＩ）で表され且つＲが水素原子である化合物であ
る。本発明においては、上記（１）記載の化合物、又
は、上記（２）記載の物理化学的性状を有する化合物
を、Ｆ−１５０７８Ａという。

【００１１】上記（３）記載の化合物は、上記一般式
（ＩＩＩ）で表され且つＲ＝ＣＯＣＨ ₃である化合物で
ある。本発明においては、上記（３）記載の化合物、又
は、上記（４）記載の物理化学的性状を有する化合物
を、Ｆ−１５０７８Ｂという。

【００１２】Ｆ−１５０７８Ａは、常法に従って塩にす
ることができる。Ｆ−１５０７８Ａの塩は、医学用途、
獣医学用途及びそれ以外の用途のいずれにも適用され得
る。

【００１３】Ｆ−１５０７８Ａの塩が医学用途及び／又
は獣医学用途に適用される場合、該化合物の塩として
は、薬理上許容されるものであれば特に限定されるもの
ではなく、例えば、塩酸塩のような無機塩、パモ酸塩の
ような有機酸塩等を挙げることができる。

【００１４】Ｆ−１５０７８Ａの塩が医学用途及び獣医
学用途以外の用途、例えば、合成中間体として使用され
る場合は特に限定はない。その様な塩としては、例え
ば、酢酸塩、臭化物塩、塩化物塩、塩酸塩、臭酸塩、ヨ
ウ化物塩、硫酸塩、リン酸塩、ニリン酸塩のような無機
塩；クエン酸塩、マレイン酸塩、パモ酸塩、酒石酸塩の
ような有機酸塩等を挙げることができる。

【００１５】また、本発明のＦ−１５０７８は種々の異
性体を有する。本発明においては、これらの異性体がす
べて単一の式で示されている。従って、本発明はこれら
の異性体及びこれらの異性体の混合物をもすべて含むも
のである。

【００１６】さらに、本発明は、Ｆ−１５０７８が溶剤
和物（例えば水和物）を形成する場合には、これらもす
べて含むものである。

【００１７】例えば、本発明のＦ−１５０７８が、大気
中に放置されたり、または再結晶をすることにより、水
分を吸収し、吸着水が付着したり、水和物を形成する場
合がある。本発明にはこのような溶剤和物も含まれる。

【００１８】また、本発明は、生体内において代謝され
てＦ−１５０７８に変換される化合物、いわゆるプロド
ラッグもすべて含むものである。

【００１９】

【発明の実施の形態】［生産菌］Ｆ−１５０７８は該化
合物を生産する真菌の培養物より得ることができる。Ｆ
−１５０７８の生産菌としては、例えば、ホーマ（Ｐｈ
ｏｍａ）属に属する真菌株等を挙げることができ、好適
にはホーマ・エスピー（Ｐｈｏｍａ ｓｐ．）ＳＡＮＫ
１３８９９株（以下、単に「ＳＡＮＫ１３８９９株」と
いう。）である。ＳＡＮＫ１３８９９株は、東京都小笠
原村父島において採集した土壌より単離された。

【００２０】本菌の菌学的性状を観察するため、次の各
培地上で培養を行った。

【００２１】使用した各培地の組成を以下に記載する。 ＰＤＡ培地（ホ゜テトテ゛キストロース寒天（Potato Dextrose Agar）培地） ニッスイ ホ゜テトテ゛キストロース寒天培地（日水製薬（株）製） 39g 蒸留水 1000ml ＣＭＡ培地（コーンミール寒天（Corn Meal Agar）培地） コーンミールアカ゛ール（日水製薬（株）製） 17g 蒸留水 1000ml ＷＳＨ培地 クエーカーオートミール 10g 硫酸マグネシウム七水和物 1g リン酸二水素カリウム 1g 硝酸ナトリウム 1g 寒天 20g 蒸留水 1000ml 三浦培地 グルコース 1g リン酸二水素カリウム 1g 硫酸マグネシウム七水和物 0.2g 塩化カリウム 0.2g イーストエキス 0.2g 硝酸ナトリウム 2g 寒天 20g 蒸留水 1000ml ＣＹＡ培地（サ゛ヘ゜ックイーストエキス寒天（Czapek Yeast Extract Agar）培地） リン酸水素ニカリウム 1.0g ザペック濃縮液＊ 10ml イーストエキス 5g シュークロース 30g 寒天 15g 蒸留水 1000ml ＭＥＡ培地（モルトエキス寒天（Malt Extract Agar）培地） モルトエキス 20g ペプトン 1g グルコース 20g 寒天 20g 蒸留水 1000ml Ｇ２５Ｎ培地（25%ク゛リセロール硝酸（25% Glycerol Nitrate Agar）培地） リン酸水素ニカリウム 0.75g ザペック濃縮液＊ 7.5ml イーストエキス 3.7g グリセロール 250g 寒天 12g 蒸留水 750ml ＊ザペック濃縮液とは、以下の組成の溶液を示す。

【００２２】 硝酸ナトリウム 30g 塩化カリウム 5g 硫酸マグネシウム七水和物 5g 硫酸鉄（ＩＩ）七水和物 0.1g 硫酸亜鉛七水和物 0.1g 硫酸銅五水和物 0.05g 蒸留水 100ml 色調の表示は「メチューン・ハンドブック・オブ・カラ
ー」 (Kornerup, A. and Wanscher, J. H. (1978) Meth
uen handbook of colour(3rd. edition). EryeMethuen,
London.)に従った。

【００２３】ＳＡＮＫ１３８９９株の培養下での菌学的
性状は次の通りである。

【００２４】ＰＤＡ培地上での成長は、２３℃、２週間
の培養で直径１３乃至１７ｍｍである。コロニーは綿毛
状、中央部で羊毛状に隆起し、コロニーの縁辺部はやや
歯状である。コロニー表面は、グレー（３Ｂ１）乃至白
色である。裏面はブラウン（６Ｅ５乃至４）である。

【００２５】ＣＭＡ培地上での成長は、２３℃、２週間
の培養で直径１５乃至１７ｍｍである。コロニーは粉状
で、コロニーの縁辺部は歯状である。コロニー表面はグ
レーイッシュグリーン（２７Ｅ５）乃至ダルグリーン’
（２７Ｅ４）である。裏面はダークグリーン（２７Ｆ
４）である。

【００２６】三浦培地上での成長は、２３℃、２週間の
培養で直径２２乃至３３ｍｍである。コロニーは圧伏
し、コロニーの縁辺部は全縁である。コロニー表面は白
色である。裏面はイエローイッシュホワイト（３Ａ２）
乃至白色である。

【００２７】ＷＳＨ培地上での成長は、２３℃、２週間
の培養で直径３３乃至３４ｍｍである。コロニーは圧伏
し、コロニーの縁辺部は全縁である。コロニー表面はペ
ールイエロー（３Ａ３）乃至イエローイッシュホワイト
（３Ａ２）である。裏面はコロニー表面と同色である。

【００２８】ＣＹＡ培地上での成長は、２３℃、２週間
の培養で直径３４乃至３５ｍｍである。コロニーは綿毛
状であり、中央部で羊毛状に隆起し、弱い可溶性色素を
分泌する。コロニーの縁辺部は圧伏し、全縁である。コ
ロニー表面はグレーイッシュオレンジ（６Ｂ３）であ
る。裏面はブラウニッシュオレンジ（６Ｃ８）乃至ブラ
ウン（６Ｄ８）である。

【００２９】ＭＥＡ培地上での成長は、２３℃、２週間
の培養で直径１５乃至２３ｍｍである。コロニーは綿毛
状、中央部で羊毛状に隆起する。コロニーの縁辺部は圧
伏し、全縁乃至やや歯状である。コロニー表面は白色乃
至グレー（３Ｂ１）である。裏面はダークグリーン（２
８Ｆ４乃至３）である。

【００３０】Ｇ２５Ｎ培地上では生育しない。

【００３１】菌糸は直径０．５乃至３μｍであり、しば
しば束状になり、薄壁乃至厚壁で、滑面乃至粗面で、無
色乃至褐色である。

【００３２】ＳＡＮＫ１３８９９株は、ＯＤＡ培地や三
浦培地などで１ヶ月間以上培養を継続することにより、
セクターを形成し、その部分の寒天培地内に埋没した分
生子殻を形成した。その菌学的性状は次の通りである。

【００３３】分生子殻は直径１００乃至２００μｍ、寒
天培地にすべて埋没乃至一部埋没し、球形乃至亜球形で
褐色乃至黒色である。開口部は観察されなかった。分生
子形成細胞は７．５乃至９μｍ×１．３乃至１．８μｍ
で、球形の分生子殻内層細胞の上に形成され、単細胞で
円筒形乃至ペン先形であり、無色である。フィアロ型分
生子は３．５乃至４．７μｍ×１．３乃至１．８μｍ
で、円筒形、単細胞で無色である。菌糸は直径０．５乃
至３μｍで、しばしば束状になり、薄壁乃至厚壁で、滑
面乃至粗面であり、無色乃至褐色である。小林の文献
（Kobayashi, M., J. Antibact. Antifung. Agents, 2
2, 757(1994)）などを参考にした結果、ＳＡＮＫ１３８
９９株をホーマ・エスピーと同定した。

【００３４】なお、ＳＡＮＫ１３８９９株は、平成１１
年８月２０日付けで日本国茨城県つくば市東１−１−３
の通商産業省工業技術院生命工学工業技術研究所に国際
寄託され、受託番号 ＦＥＲＭ ＢＰ−６８５１を付与
された。

【００３５】周知の通り、真菌類は自然界において、ま
たは人工的な操作（例えば、紫外線照射、放射線照射、
化学薬品処理等）により、変異を起こしやすく、本発明
のＳＡＮＫ１３８９９株も同様である。本発明において
ＳＡＮＫ１３８９９株はその全ての変異株を包含する。
また、これらの変異株の中には、遺伝的方法、たとえば
組み換え、形質導入、形質転換等によりえられたものも
包含される。即ち、Ｆ−１５０７８を生産するＳＡＮＫ
１３８９９株、それらの変異株およびそれらと明確に区
別されない菌株は全てＳＡＮＫ１３８９９株に包含され
る。［培養法及び精製法］上述の如きＦ−１５０７８生
産菌の培養は、一般に発酵生成物を生産するために用い
られるような培地中で行なわれる。このような培地は、
微生物が資化出来る炭素源、窒素源、無機塩、微量の生
育因子、微量金属等を含有する。

【００３６】炭素源としては、例えば、グルコース、フ
ラクトース、マルトース、シュークロース、マンニトー
ル、グリセリン、デキストリン、オート麦、ライ麦、ト
ウモロコシデンプン、ジャガイモ、トウモロコシ粉、大
豆油、綿実油、糖蜜、クエン酸、酒石酸等を挙げること
ができる。これらの炭素源は単独で又は２つ以上の炭素
源を組み合わせて用いることができる。

【００３７】培地に用いる炭素源の量は、培地中の他の
成分等に依存するが、通常１乃至１０重量％である。

【００３８】窒素源としては、例えば、大豆粉、フス
マ、落下生粉、綿実紛、カゼイン加水分解物、ファーマ
ミン、コーンスチープリカー、ペプトン、肉エキス、イ
ースト、イーストエキス、マルトエキス、硝酸ナトリウ
ム、硝酸アンモニウム、硫酸アンモニウム等を挙げるこ
とができる。これらの窒素源は単独で又は２つ以上の窒
素源を組み合わせて用いることができる。

【００３９】培地に用いる炭素源の量は、培地中の他の
成分等に依存するが、通常０．２乃至６重量％である。

【００４０】炭素源及び窒素源は、純度の高いものであ
る必要はなく、微量の生育因子、ビタミン、無機栄養等
を含むより純度の低いものであってもよい。

【００４１】また、ナトリウム、カリウム、マグネシウ
ム、アンモニウム、カルシウム、リン酸、硫酸、塩酸、
炭酸等のイオンを得ることのできる塩類を培地中に加え
てもよい。

【００４２】さらに、菌の資化しうるビタミンＢ１、ビ
オチンのようなビタミン類、チアミンのような菌体増殖
促進物質、マンガン、モリブデンのような金属の塩を培
地に添加してもよい。

【００４３】また、液体培地の場合、培地の泡立ちを防
ぐため、シリコンオイル、ポリアルキレングリコールエ
ーテル、植物油、動物油、界面活性剤のような消泡剤を
培地に添加してもよい。。

【００４４】Ｆ−１５０７８生産菌の培養に用いる液体
培地のｐＨは、菌株、Ｆ−１５０７８のｐＨ安定性等に
依存するが、該生産菌がＳＡＮＫ１３８９９の場合、液
体培地のｐＨをｐＨ５．０乃至ｐＨ７．０に調整する。

【００４５】Ｆ−１５０７８生産菌の培養温度は、菌
株、Ｆ−１５０７８の熱安定性等に依存するが、該生産
菌がＳＡＮＫ１３８９９の場合、１５乃至３７℃であ
り、好適には２２乃至３５℃である。Ｆ−１５０７８を
製造するるためのＳＡＮＫ１３８９９株の培養温度は、
好適には２２乃至２６℃であり、より好適には２３℃で
ある。

【００４６】Ｆ−１５０７８生産菌の培養方法として
は、特に限定はなく、例えば、固形培地を用いた培養
法、攪拌培養法、振とう培養法、通気培養法、通気攪拌
培養法等を挙げることができ、好適には、攪拌培養法、
振とう培養法、通気培養法、通気攪拌培養法であり、よ
り好適には振とう培養法である。工業的スケールで培養
するには、通気攪拌培養法がより好適である。

【００４７】Ｆ−１５０７８を生産するための該化合物
生産菌の培養は、通常、該菌を生やしたスラントを少量
の培地に接種した種培養から始まり、必要に応じより大
きな規模で種培養を再度行なった後、最終段階としてよ
り大きな規模での本培養を行なうことによりなされる。

【００４８】Ｆ−１５０７８生産菌の小規模な培養を行
なう場合、三角フラスコ等を用いて種培養を行い、必要
に応じより大きな規模の種培養を再度行った後、三角フ
ラスコ等を用いて本培養を行う。

【００４９】Ｆ−１５０７８生産菌の大規模な培養を行
なう場合、攪拌装置及び通気装置を付けたジャーファー
メンター又はタンクを用いることが好ましい。このよう
な装置を用いれば、培地をジャーファーメンター又はタ
ンクの中で調製及び滅菌することができる。この方法
は、Ｆ−１５０７８の大規模な製造に適している。

【００５０】Ｆ−１５０７８のＳＡＮＫ１３８９９株に
よる生産は、通常１４４乃至１９２時間の培養で最高値
に達する。

【００５１】培養物中に存在するＦ−１５０７８は、培
養物、培養物を珪藻土等を過助剤とするろ過操作に供す
ることにより得られる培養上清、培養物を遠心分離操作
に供することにより得られる培養ろ液、及び／又は菌体
から、Ｆ−１５０７８の物理化学的性状を利用して、抽
出精製することができる。

【００５２】培養ろ液又は培養上清中に存在するＦ−１
５０７８は、中性ｐＨ条件下で水と混和しない有機溶
剤、例えば、酢酸エチル、クロロホルム、塩化エチレ
ン、塩化メチレン、ブタノール等単独で又はそれら２つ
以上の混合溶媒により抽出することができる。また、培
養ろ液又は培養上清を、吸着剤、例えば、活性炭、アン
バーライトＸＡＤ−２、アンバーライトＸＡＤ−４（以
上、ローム・アンド・ハース社製）、ダイアイオンＨＰ
−１０、ダイアイオンＨＰ−２０、ダイアイオンＣＨＰ
−２０Ｐ、ダイアイオンＨＰ−５０、セパビーズＳＰ−
２０７（以上、三菱化学（株）製）等に接触させ、夾雑
物を吸着させて取り除くか、又は、Ｆ−１５０７８を吸
着させ夾雑物と分離した後、メタノール水、アセトン
水、ブタノ−ル水等を用いてＦ−１５０７８を溶出させ
ることができる。。

【００５３】菌体中に存在するＦ−１５０７８は、５０
乃至９０％含水アセトン又は含水メタノールにより抽出
し、珪藻土等を過助剤とするろ過操作を行い、得られた
ろ液から有機溶剤を除去した後、培養ろ液又は培養上清
の場合と同様な抽出精製操作を行なうことにより得るこ
とができる。

【００５４】培養物中に存在するＦ−１５０７８は、培
養終了後、適当量、好ましくは終濃度５０％（容積／容
積）のアセトン又はメタノールを添加し、抽出すること
ができる。抽出終了後、珪藻土をろ過助剤とするろ過操
作を行ない、得られたろ液液について、培養ろ液又は培
養上清の場合と同様な抽出精製操作に供することができ
る。

【００５５】このようにして得られたＦ−１５０７８の
粗画分は、ＴＳＫゲルトヨパールＨＷ−４０Ｆ（東ソー
（株）製）、セファデックスＬＨ−２０（アマシャムフ
ァルマシア社製）等を用いた分配カラムクロマトグラフ
ィー、コスモシール１４０Ｃ１８（ナカライテスク
（株）製）等を用いた逆層カラムクロマトグラフィー等
によりさらに精製することができる。必要に応じ、この
ようにして精製されたＦ−１５０７８含有画分を、Ｓｈ
ｏｄｅｘ ａｓａｈｉｐａｋ Ｃ８Ｐ５０−４Ｅ（昭和
電工（株）製）、ＹＭＣパックＯＤＳ−ＡＭ（ワイエム
シィ（株）製）、カプセルパックＵＧ１２０（資生堂
（株）製）等の逆層カラムを用いた高速液体クロマトグ
ラフィー等（ｈｉｇｈ ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅ ｌｉ
ｑｕｉｄ ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ：以下、「Ｈ
ＰＬＣ」という。）によりさらに精製することができ
る。

【００５６】これらの抽出手段及び単離手段は、単独で
又は適宜組み合わせて、必要があれば同じ手段を反復
し、Ｆ−１５０７８の単離に使用することができる。

【００５７】上述のＦ−１５０７８生産菌の培養工程、
及び、Ｆ−１５０７８Ａ又はＢの精製工程におけるＦ−
１５０７８Ａ又はＢの挙動は、次に示す１）又は２）の
方法により追跡することができる。 １）ＨＰＬＣ分析による方法：ＨＰＬＣを用いた方法で
あれば特に限定されないが、例えば、下記のＨＰＬＣ条
件を適用することができる。

【００５８】カラム ：Ｓｈｏｄｅｘ Ａｓａｈｉｐａ
ｋ Ｃ８Ｐ ５０ ４Ｅ（直径４．６ｍｍ×２５０ｍ
ｍ：昭和電工（株）製） 移動層 ：アセトニトリル：１０ｍＭ炭酸水素アンモニ
ウム水＝１３：７ 流 速：０．７ｍｌ／分 検出波長：λ２１０ｎｍ Ｆ−１５０７８Ａの保持時間：１０．２０分 Ｆ−１５０７８Ｂの保持時間：９．０５分 ２）抗真菌活性を測定することによる方法：抗真菌活性
を測定する方法であれば特に限定されないが、例えば、
Yamagichiらのブロス希釈法（Yamaguchi,H., etal., J.
Med. Mycol. 36, 61(1995)）を適用することができ
る。本発明のＦ−１５０７８又はその塩は抗真菌作用を
有し、真菌感染症の予防薬または治療薬として有用であ
る。

【００５９】Ｆ−１５０７８又はその塩を真菌感染症の
予防薬又は治療薬に用いる場合、その投与形態は特に限
定されるものではなく、製剤、年齢、性別、疾患の種
類、疾患の程度等に応じて適宜選択され得る。

【００６０】例えば、錠剤、丸剤、散剤、顆粒剤、シロ
ップ剤、液剤、懸濁剤、乳剤、顆粒剤、カプセル剤等は
経口投与され得る。注射剤は単独で若しくはグルコー
ス、アミノ酸等の補液との混合液として、又はポリオキ
シエチレンソルビタン脂肪酸エステル類等と混和したエ
マルジョンとして、静脈内投与、筋肉内投与、皮内投
与、皮下投与及び／又は腹腔内投与され得る。坐剤は直
腸内投与され得る。

【００６１】これらの各種製剤は、主薬に加え、賦形
剤、結合剤、崩壊剤、滑沢剤、溶解剤、矯味矯臭剤、コ
ーティング剤等、当該分野で公知の補助剤を用いて製造
することができる。

【００６２】錠剤の成形に際しては、担体として当該分
野で公知のもの、例えば、乳糖、白糖、塩化ナトリウ
ム、グルコース、尿素、澱粉、炭酸カルシウム、カオリ
ン、結晶セルロース、珪酸等の賦形剤、水、エタノー
ル、プロパノール、単シロップ、グルコース液、澱粉
液、ゼラチン溶液、カルボキシメチルセルロース、セラ
ック、メチルセルロース、リン酸カリウム、ポリビニル
ピロリドン等の結合剤、乾燥澱粉、アルギン酸ナトリウ
ム、寒天末、ラミナラン末、炭酸水素ナトリウム、炭酸
カルシウム、ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エス
テル類、ラウリル硫酸ナトリウム、ステアリン酸モノグ
リセリド、澱粉、乳糖等の崩壊剤、白糖、ステアリン、
カカオバター、水素添加油等の崩壊抑制剤、第四級アン
モニウム塩基、ラウリル硫酸ナトリウム等の吸収促進
剤、グリセリン、澱粉等の保湿剤、澱粉、乳糖、カオリ
ン、ベントナイト、コロイド状珪酸等の吸着剤、精製タ
ルク、ステアリン酸塩、硼酸末、ポリエチレングリコー
ル等の滑沢剤等を使用することができる。錠剤の場合、
必要に応じ、通常の剤皮を施した錠剤、例えば、糖衣
錠、ゼラチン被包錠、腸溶被錠、フィルムコーティング
錠、二重錠、多重錠等とすることができる。

【００６３】丸剤の成形に際しては、担体として当該分
野で公知のもの、例えば、グルコース、乳糖、澱粉、カ
カオ脂、硬化植物油、カオリン、タルク等の賦形剤、ア
ラビアゴム末、トラガント末、ゼラチン、エタノール等
の結合剤、ラミナラン、寒天等の崩壊剤を使用すること
ができる。

【００６４】坐剤の成形に際しては、担体として当該分
野で公知のもの、例えば、ポリエチレングリコール、カ
カオ脂、高級アルコール、高級アルコールのエステル
類、ゼラチン、半合成グリセライド等を使用することが
できる。

【００６５】注射剤が液剤、乳剤又は懸濁剤である場
合、滅菌され且つ血液と等張であることが好ましく、こ
れら液剤、乳剤及び懸濁剤の成形に際しては、希釈剤と
して当該分野で公知のもの、例えば、水、エチルアルコ
ール、プロピレングリコール、エポキシ化イソステアリ
ルアルコール、ポリオキシ化イソステアリルアルコー
ル、ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル類等
を使用することができる。注射剤を血液と等張にするた
めに充分な量の食塩、グルコース、グリセリン等を含有
せしめてもよく、通常の溶解補助剤、緩衝剤、無痛化剤
糖を含有せしめてもよい。

【００６６】これらの各種製剤には、必要に応じ、着色
剤、保存剤、香料、風味剤、甘味剤、他の薬剤等を含有
せしめてもよい。

【００６７】これらの各種製剤中に含まれるＦ−１５０
７８の量は、剤形、投与方法等に依存するが、通常１乃
至７０重量％であり、好ましくは１乃至３０重量％であ
る。

【００６８】Ｆ−１５０７８の投与量は、疾患の種類、
疾患の程度、年齢、体重、投与方法、剤形等に依存する
が、成人に対しては、１日に投与する量の上限が２０乃
至２０００ｍｇ、下限が０．００１乃至０．１ｍｇであ
り、好適な範囲は０．０１乃至２００ｍｇ、より好適な
範囲は０．１乃至２０ｍｇである。

【００６９】Ｆ−１５０７８を含有する医薬の投与回数
は、剤形、疾患の種類、疾患の程度、体重等に依存する
が、特に限定されるものではなく、数日に１回、１日１
回、又は１日数回である。

【００７０】

【実施例】次に、実施例、試験例及び製造例を挙げ、本
発明をさらに具体的に説明するが、本発明はこれらに限
定されるものではない。 実施例１．Ｆ−１５０７８Ａの製造（１） ［ＳＡＮＫ１３８９９株の培養（１）］ＳＡＮＫ１３８
９９株を、１２１℃にて３０分間滅菌した、表１記載の
組成を有する種培養培地１００ｍｌを含む５００ｍｌ容
三角フラスコ３本に１白金耳接種し、２３℃、２１０ｒ
ｐｍ（回転半径７ｃｍ）の条件下で５日間培養した。得
られた培養液を、同じ組成の培地４００ｍｌを含む２Ｌ
容三角フラスコ９本に５％接種し、２３℃、２１０ｒｐ
ｍ（回転半径７ｃｍ）の条件下で２日間培養した。得ら
れた種培養液を、１２１℃にて３０分間滅菌した、表２
記載の組成を有する本培養培地（１）１５Ｌを含む３０
Ｌ容ジャー培養機４基に５％を植菌して、２３℃、通気
量１ｖｖｍ、１００乃至４２０ｒｐｍ、溶存酸素量５．
０ｐｐｍの条件下で７日間培養した。 表１．種培養培地の培地組成 ―――――――――――――――――――――――――――――――――――― グリセリン ３０ｇ グルコース ３０ｇ 可溶性澱粉 ２０ｇ 大豆粉 １０ｇ ゼラチン ２．５ｇ イーストエキス（Ｄｉｆｃｏ） ２．５ｇ ＮＨ４ＮＯ３ ２．５ｇ 消泡剤＊ ０．１ｍｌ 水道水 １０００ｍｌ （ｐＨは調整せず。） ―――――――――――――――――――――――――――――――――――― 表２．本培養培地（１）の培地組成 ―――――――――――――――――――――――――――――――――――― デキストリン（Ｄｉｆｃｏ） １０ｇ グリセリン ２０ｇ グルコース ３０ｇ マルトエキス（Ｄｉｆｃｏ） １０ｇ イーストエキス（Ｄｉｆｃｏ） ２ｇ トリプトン（Ｄｉｆｃｏ） １ｇ ＮＨ₄ＮＯ₃ １ｇ ＮａＮＯ₃ １ｇ ＫＨ₂ＰＯ₄ １ｇ ＭｇＳＯ₄・７Ｈ₂Ｏ １ｇ 消泡剤＊ ０．１ｍｌ 水道水 １０００ｍｌ （ｐＨは調整せず。） ―――――――――――――――――――――――――――――――――――― ＊ニッサン・ディスフォームＣＢ−４４２（日本油脂（株）製） ［Ｆ−１５０７８Ａの単離（１）］得られた培養物６０
Ｌにアセトン６０Ｌを加えて４０分間攪拌し、この抽出
液にろ過助剤（セライト５４５：セライト・コーポレー
ション社製）を３ｋｇ加え、フィルタープレスろ過を行
なった。更にろ液に酢酸エチル５０Ｌを加えて抽出を行
ない、得られた有機層４９Ｌを５０Ｌの飽和食塩水及び
５０Ｌの精製水で洗浄した後、５ｋｇの無水硫酸ナトリ
ウムを加えて１時間脱水した。フィルタープレスろ過に
より硫酸ナトリウムを除去した後、ろ液を減圧濃縮乾固
し、油状物９５．９ｇが得られた。該油状物を、メタノ
ール：０．０４％トリフルオロ酢酸水＝８：２ １００
ｍｌに溶解して、同じ溶媒で予め平衡化した２２Ｌ容の
トヨパールＨＷ−４０Ｆ（東ソー（株）製）カラムに供
与した。該カラムを同じ溶媒で展開し、溶出液を５００
ｍｌずつ分取し、フラクション番号１３乃至２５（合計
６．５Ｌ）中にＦ−１５０７８Ａが回収された。得られ
た画分を２Ｌまで減圧濃縮した後、６．２５規定の水酸
化ナトリウムでｐＨ７に調整した。この濃縮液に酢酸エ
チル３．１Ｌを加えて活性物質を抽出した。抽出液を３
Ｌの飽和食塩水にて洗浄し、無水硫酸ナトリウムによる
脱水を行なった後、減圧濃縮乾固を行ない６６．５ｇの
油状物質を得た。この油状物質をメタノール：０．０５
％トリフルオロ酢酸水＝８：２ １６０ｍｌに溶解し、
アセトニトリル：０．０５％トリフルオロ酢酸水＝４：
６で予め平衡化した３Ｌ容のコスモシール１４０Ｃ１８
（ナカライテスク（株）製）カラムに供与した。該カラ
ムを１０Ｌの同じ溶媒で洗浄し、アセトニトリル：０．
０５％トリフルオロ酢酸水＝６：４で展開した。溶出液
を２Ｌずつ分取し、フラクション番号２（２Ｌ）中にＦ
−１５０７８Ａが回収された。 得られた画分を８００
ｍｌまで減圧濃縮した後、６．２５規定の水酸化ナトリ
ウムでｐＨ７に調整し、酢酸エチル１Ｌを加えて活性物
質を抽出し、洗浄、脱水、減圧濃縮乾固し、粗精製物を
２３４．３ｍｇ得た。この粗精製物を４ｍｌのメタノー
ルに溶解した後、以下に示すＨＰＬＣの条件（１）に従
ってＨＰＬＣを行ない、Ｆ−１５０７８Ａを含有する画
分が得られた。 ＨＰＬＣの条件（１）： カラム ：ＹＭＣパックＯＤＳ−ＡＭ 直径３０ｍｍ×長さ３００ｍｍ（ワイエムシー（株）製） 溶 媒：アセトニトリル：１％トリエチルアミンリン酸水(pH 6.0)＝３：１ 検出波長：ＵＶ ２１０ｎｍ 流 速：１０．４ｍｌ／分 温 度：室温 保持時間：７７乃至９８分 得られたＦ−１５０７８Ａ含有画分を、上述の如く、酢
酸エチルを用いて脱塩し、減圧濃縮乾固することによ
り、Ｆ−１５０７８Ａが３４．１ｍｇ得られた。 実施例２．Ｆ−１５０７８Ａの製造（２） ［ＳＡＮＫ１３８９９株の培養（２）］ＳＡＮＫ１３８
９９株を、１２１℃、にて３０分間滅菌した、実施例１
の表１記載の組成を有する種培養培地５００ｍｌを含む
２Ｌ容三角フラスコ６本に一白金耳接種し、２３℃、２
１０ｒｐｍ（回転半径７ｃｍ）の条件下で６日間培養し
た。得られた種培養液を、同じ組成の培地３０Ｌを含む
６０Ｌ容タンク培養機２基に５％植菌し、２３℃、通気
量１ｖｖｍ、１００ｒｐｍ、溶存酸素量５．０ｐｐｍの
条件下で２日間培養した。得られた培養液を、１２１℃
にて３０分間滅菌した、表３記載の組成を有する本培養
培地（２）３００Ｌを含む６００Ｌ容タンク培養機１基
に５％を植菌し、２３℃、通気量１ｖｖｍ、８３乃至２
４０ｒｐｍ、溶存酸素量５．０ｐｐｍの条件下で７日間
培養した。 表３．本量培養培地（２）の培地組成 ―――――――――――――――――――――――――――――――――――― グルコース ８０ｇ マルトエキス（Ｄｉｆｃｏ） ２０ｇ イーストエキス（Ｄｉｆｃｏ） ２ｇ トリプトン（Ｄｉｆｃｏ） １０ｇ ＮＨ₄ＮＯ₃ １ｇ ＮａＮＯ₃ １ｇ ＫＨ₂ＰＯ₄ １ｇ ＭｇＳＯ₄・７Ｈ₂Ｏ １ｇ 消泡剤＊ ０．１ｍｌ 水道水 １０００ｍｌ （ｐＨは調整せず。） ―――――――――――――――――――――――――――――――――――― ＊ ニッサン・ディスフォームＣＢ−４４２（日本油脂（株）製） ［Ｆ−１５０７８Ａの単離（２）］得られた培養物３７
０Ｌにろ過助剤（セライト５４５：セライトコーポレー
ション社製）を１５ｋｇ加え、フィルタープレスろ過を
行なった。得られた菌体にメタノール：水＝１：１ ４
００Ｌを加えて攪拌した後、得られた抽出液に６規定の
塩酸を加え、ｐＨ２に調整した。この抽出液をフィルタ
ープレスろ過した。

【００７１】得られたろ液４６５Ｌのうち２７０Ｌをメ
タノール：０．０５％トリフルオロ酢酸水＝１：１で予
め平衡化した３０Ｌ容のコスモシール１４０ Ｃ１８−
ＯＰＮ（ナカライテスク（株）製）カラムに供与した。
該カラムを同じ溶媒２７０Ｌで洗浄し、アセトニトリ
ル：０．０５％トリフルオロ酢酸水＝４：６ １００Ｌ
で洗浄した後、アセトニトリル：０．０５％トリフルオ
ロ酢酸水＝６：４で展開した。初めの溶出液１５Ｌをフ
ラクション番号１として分取し、次に溶出液を１０Ｌず
つ５画分（フラクション番号２乃至６）分取したとこ
ろ、フラクション番号２乃至４（合計３０Ｌ）中にＦ−
１５０７８Ａが回収された。

【００７２】上述のろ液の残り１９５Ｌを、メタノー
ル：０．０５％トリフルオロ酢酸水＝１：１で予め平衡
化した３０Ｌ容のコスモシール１４０ Ｃ１８−ＯＰＮ
（ナカライテスク（株）製）カラムに供与し、該カラム
を同じ溶媒２００Ｌで洗浄し、アセトニトリル：０．０
５％トリフルオロ酢酸水＝４：６ １００Ｌで洗浄した
後、アセトニトリル：０．０５％トリフルオロ酢酸水＝
６：４で展開した。初めの溶出液１０Ｌをフラクション
番号１として分取し、次に溶出液５Ｌをフラクション番
号２として分取し、次に溶出液を１５Ｌずつ２画分（フ
ラクション番号３及び４）分取し、次に溶出液１０Ｌを
フラクション番号５として分取したところ、フラクショ
ン番号３乃至５（合計４０Ｌ）中にＦ−１５０７８Ａが
回収された。

【００７３】２回のコスモシール１４０ Ｃ１８−ＯＰ
Ｎ（ナカライテスク（株）製）カラム分画により得られ
た合計７０ＬのＦ−１５０７８Ａ含有画分を６規定の水
酸化ナトリウムでｐＨ７に調整し、さらに酢酸エチル５
０Ｌを加えて活性物質を抽出した。抽出液を５０Ｌの飽
和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムによる脱水を行
った後、減圧濃縮乾固を行い３２．３ｇの油状物質が得
られた。この油状物質をメタノール２００ｍｌに溶解
し、得られた溶液のうち５０ｍｌを以下に示すＨＰＬＣ
の条件（２）に従ってＨＰＬＣに供与した。該溶液の残
りの１５０ｍｌについても、３０ｍｌずつ、５回に分
け、同じ条件のＨＰＬＣに供与した。その結果、Ｆ−１
５０７８Ａを含む画分２６Ｌが得られた。この画分に１
０Ｌの水を添加し、さらに１０Ｌの酢酸エチルを加え
て、活性物質を抽出した。抽出液を洗浄、脱水、減圧濃
縮乾固し、粗精製物が７．７８ｇ得られた。この粗精製
物のうち３２６ｍｇを２ｍｌのメタノールに溶解した。
この溶液を２００μｌずつ、１０回に分け、以下に示す
ＨＰＬＣの条件（３）に従ってＨＰＬＣに供与した。得
られた画分を濃縮、凍結乾燥することにより、Ｆ−１５
０７８Ａが２７５ｍｇ得られた。 ＨＰＬＣの条件（２） カラム ：ＹＭＣパックＯＤＳ−ＡＭ 直径１００ｍｍ×長さ５００ｍｍ（ワイエムシー（株）製） 溶 媒：アセトニトリル：１％トリエチルアミンリン酸水(pH 6.0)＝３：１ 検出波長：ＵＶ ２１０ｎｍ 流 速：２４０ｍｌ／分 温 度：室温 保持時間：６４分 ＨＰＬＣの条件（３） カラム ：Ｓｈｏｄｅｘ Ａｓａｈｉｐａｋ Ｃ８Ｐ ９０ ２Ｆ 直径２０ｍｍ×長さ２５０ｍｍ（昭和電工（株）製） 溶 媒：アセトニトリル：１０ｍＭ炭酸水素アンモニウム水 ＝６：４ 検出波長：ＵＶ ２１０ｎｍ 流 速：１４ｍｌ／分 温 度：室温 保持時間：１９．２分 実施例３．Ｆ−１５０７８Ｂの製造 ［ＳＡＮＫ１３８９９株の培養（３）］ＳＡＮＫ１３８
９９株を、１２１℃にて３０分間滅菌した、実施例１の
表１記載の組成を有する種培養培地５００ｍｌを含む２
Ｌ容三角フラスコ６本に一白金耳接種し、２３℃、２１
０ｒｐｍ（回転半径７ｃｍ）の条件下で６日間培養し
た。得られた種培養液を、同じ組成の培地３０Ｌを含む
６０Ｌ容タンク培養機２基に５％植菌し、２３℃、通気
量１ｖｖｍ、１００ｒｐｍ、溶存酸素量５．０ｐｐｍの
条件下で２日間培養した。得られた培養液を、１２１
℃、３０分間滅菌した、実施例２の表３記載の組成を有
する本培養培地（２）３００Ｌを含む６００Ｌ容タンク
培養機１基に５％を植菌し、２３℃、通気量１ｖｖｍ、
８３乃至２４０ｒｐｍ、溶存酸素量５．０ｐｐｍの条件
下で７日間培養した。 ［Ｆ−１５０７８Ｂの単離］得られた培養物３７０Ｌに
ろ過助剤（セライト５４５：セライトコーポレーション
社製）を１５ｋｇ加え、フィルタープレスろ過を行なっ
た。得られた菌体にメタノール：水＝１：１ ４００Ｌ
を加えて攪拌した後、得られた抽出液に６規定の塩酸を
加え、ｐＨ２に調整した。この抽出液をフィルタープレ
スろ過した。

【００７４】得られたろ液４６５Ｌのうち２７０Ｌをメ
タノール：０．０５％トリフルオロ酢酸水＝１：１で予
め平衡化した３０Ｌ容のコスモシール１４０ Ｃ１８−
ＯＰＮ（ナカライテスク（株）製）カラムに供与した。
該カラムを同じ溶媒２７０Ｌで洗浄し、アセトニトリ
ル：０．０５％トリフルオロ酢酸水＝４：６ １００Ｌ
で洗浄した後、アセトニトリル：０．０５％トリフルオ
ロ酢酸水＝６：４で展開した。初めの溶出液１５Ｌをフ
ラクション番号１として分取し、次に溶出液を１０Ｌず
つ５画分（フラクション番号２乃至６）分取したとこ
ろ、フラクション番号２乃至４（合計３０Ｌ）中にＦ−
１５０７８Ｂが回収された。

【００７５】上述のろ液の残り１９５Ｌを、メタノー
ル：０．０５％トリフルオロ酢酸水＝１：１で予め平衡
化した３０Ｌ容のコスモシール１４０ Ｃ１８−ＯＰＮ
（ナカライテスク（株）製）カラムに供与し、該カラム
を同じ溶媒２００Ｌで洗浄し、アセトニトリル：０．０
５％トリフルオロ酢酸水＝４：６ １００Ｌで洗浄した
後、アセトニトリル：０．０５％トリフルオロ酢酸水＝
６：４で展開した。初めの溶出液１０Ｌをフラクション
番号１として分取し、次に溶出液５Ｌをフラクション番
号２として分取し、次に溶出液を１５Ｌずつ２画分（フ
ラクション番号３及び４）分取し、次に溶出液１０Ｌを
フラクション番号５として分取したところ、フラクショ
ン番号３乃至５（合計４０Ｌ）中にＦ−１５０７８Ｂが
回収された。

【００７６】２回のコスモシール１４０ Ｃ１８−ＯＰ
Ｎ（ナカライテスク（株）製）カラム分画により得られ
た合計７０ＬのＦ−１５０７８Ｂ含有画分を６規定の水
酸化ナトリウムでｐＨ７に調整し、さらに酢酸エチル５
０Ｌを加えて活性物質を抽出した。抽出液を５０Ｌの飽
和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムによる脱水を行
った後、減圧濃縮乾固を行い３２．３ｇの油状物質が得
られた。この油状物質をメタノール２００ｍｌに溶解
し、得られた溶液のうち５０ｍｌを実施例２記載のＨＰ
ＬＣの条件（２）に従ってＨＰＬＣに供与した。該溶液
の残りの１５０ｍｌについても、３０ｍｌずつ、５回に
分け、同じ条件のＨＰＬＣに供与した。その結果、Ｆ−
１５０７８Ｂを含む画分２６Ｌが得られた。この画分に
１０Ｌの水を添加し、さらに１０Ｌの酢酸エチルを加え
て、活性物質を抽出した。抽出液を洗浄、脱水、減圧濃
縮乾固し、粗精製物が７．７８ｇ得られた。この粗精製
物のうち２．１０ｇをメタノール５ｍｌに溶解し、コス
モシール１４０ Ｃ１８−ＯＰＮ（ナカライテスク
（株）製）５ｇを添加した。溶媒を留去した後、残った
コスモシール１４０ Ｃ１８−ＯＰＮ（ナカライテスク
（株）製）を、アセトニトリル：０．０５％トリフルオ
ロ酢酸水＝４：６で予め平衡化した１７０ｍｌ容のコス
モシール１４０ Ｃ１８−ＯＰＮ（ナカライテスク
（株）製）カラムに重層した。該カラムを同じ溶媒３０
０ｍｌで洗浄した後、アセトニトリル：０．０５％トリ
フルオロ酢酸水＝６：４ ３００ｍｌ、及び、アセトニ
トリル：０．０５％トリフルオロ酢酸水＝９：１ ２０
ｍｌで展開し、１０ｍｌずつ分取したところ、フラクシ
ョン番号６４乃至７２（合計９０ｍｌ）中にＦ−１５０
７８Ｂが回収された。得られた画分を減圧濃縮した後、
凍結乾燥し、１０９ｍｇの黄白色粉末が得られた。この
粉末１００ｍｇを１ｍｌのメタノールに溶解し、この溶
液を２００μｌずつ、５回に分け、以下に示すＨＰＬＣ
の条件（４）に従ってＨＰＬＣに供与した。得られた画
分を減圧濃縮、凍結乾燥することにより、Ｆ−１５０７
８Ｂの白色粉末が６９．５ｍｇ得られた。 ＨＰＬＣの条件（４） カラム ：Ｓｈｏｄｅｘ Ａｓａｈｉｐａｋ Ｃ８Ｐ ９０ ２Ｆ 直径２０ｍｍ×長さ２５０ｍｍ（昭和電工（株）製） 溶 媒：アセトニトリル：１０ｍＭ炭酸水素アンモニウム水＝６：４ 検出波長：ＵＶ２１０ｎｍ 流 速：１４ｍｌ／分 温 度：室温 保持時間：１７．８分 試験例１．Ｆ−１５０７８Ａ及びＢの抗真菌活性 Ｆ−１５０７８Ａ及びＢの抗真菌活性、すなわち被検菌
に対する最小生育阻止濃度測定は、０．１６５Ｍ ３−
［Ｎ−モルフォリノ］プロパンスルホン酸（シグマ社
製）緩衝液を含むＲＰＭＩ１６４０培地を用いた、９６
穴マイクロタイタープレートによるブロス希釈法（Yama
guchi,H., et al., J. Med. Mycol. 36, 61(1995)）に
より行なった。測定結果を表４に示す。

【００７７】 表４．Ｆ−１５０７８Ａ及びＢの抗真菌活性 ―――――――――――――――――――――――――――――――――――― 被検菌 最小生育阻止濃度（μｇ／ｍｌ） ―――――――――――――――――――― Ｆ−１５０７８Ａ Ｆ−１５０７８Ｂ ―――――――――――――――――――――――――――――――――――― Candida albicans ATCC90028 2.5 >50 Aspergillus fumigatus IAM2034 1.3 >50 Cryptococcus neoformans IAM4772 0.31 1.56 ―――――――――――――――――――――――――――――――――――― 表４に示す通り、Ｆ−１５０７８Ａ及びＢは抗真菌活性
を示した。 製剤例１．経口用カプセル剤 Ｆ−１５０７８Ａ ３０ｍｇ 乳糖 １７０ｍｇ トウモロコシ澱粉 １５０ｍｇ ステアリン酸マグネシウム ２ｍｇ ――――――――――――――――――――――― 合計 ３５２ｍｇ 上記処方の粉末を混合し、３０メッシュのふるいを通し
た後、この粉末をゼラチンカプセルに入れ、カプセル剤
とする。

【００７８】

【発明の効果】本発明の提供する新規化合物Ｆ−１５０
７８Ａ及びその塩並びにＦ−１５０７８Ｂは抗真菌作用
を有し、各種真菌感染症の予防又は治療に有用である。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁷ 識別記号 ＦＩ テーマコート゛(参考） Ｃ１２Ｐ 1/02 Ｃ１２Ｐ 1/02 Ａ 21/04 21/04 //(Ｃ１２Ｎ 1/14 (Ｃ１２Ｎ 1/14 Ｂ Ｃ１２Ｒ 1:645） Ｃ１２Ｒ 1:645） (72)発明者 高津 敏夫 東京都品川区広町１丁目２番58号 三共株 式会社内 (72)発明者 田中 一新 茨城県つくば市御幸が丘33 三共株式会社 内

Claims (9)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】下記式（Ｉ） 【化１】 で表される化合物又はその塩。
2. 【請求項２】下記の理化学的性状を有する化合物又はそ
   の塩： １）物質の性状：塩基性脂溶性粉末 ２）分子式：Ｃ₅₅Ｈ₉₈Ｎ₈Ｏ₁₄ ３）分子量：1094（ＦＡＢ−ＭＳ法） ４）高分解能ＦＡＢ−ＭＳ［Ｍ＋Ｈ］⁺（Ｃ₅₅Ｈ₉₉Ｎ₈Ｏ
   ₁₄として）： 実測値：1095.7365 計算値：1095.7281 ５）紫外線吸収スペクトル：末端吸収 ６）赤外線吸収スペクトル（臭化カリウム錠剤中、ｃｍ
   ^-1）：3434, 3335, 2962, 2937, 2875, 2806, 1750, 16
   84, 1641, 1509, 1469, 1412,1371, 1314, 1294, 1271,
   1204, 1156, 1128, 1074, 1020 ７）旋光度：［α］_D ²⁵−１２０°（ｃ １．０、メタ
   ノール） ８）¹Ｈ−核磁気共鳴スペクトル：（δ、ｐｐｍ） 重クロロホルム中、テトラメチルシランを内部標準とし
   て測定した核磁気共鳴スペクトル（５００ ＭＨｚ）
   は、次に示す通りである。 0.78(3H), 0.79(3H), 0.80(3H), 0.82(3H), 0.87(3H),
   0.88(1H), 0.92(3H), 0.93(3H), 0.94(3H), 0.96(3H),
   0.97(3H), 0.98(3H), 1.01(3H), 1.02(3H), 1.03(3H),
   1.06(3H), 1.21(1H), 1.41(3H), 1.41(1H), 1.48(1H),
   1.48(1H), 1.49(1H),1.52(3H), 1.55(1H), 1.65(1H),
   1.66(1H), 1.70(2H), 1.73(1H), 1.81(1H),1.87(1H),
   2.28(1H), 2.31(1H), 2.37(1H), 2.48(3H), 2.89(3H),
   2.94(3H), 2.96(1H), 3.29(3H), 3.56(1H), 4.06(1H),
   4.14(1H), 4.77(1H), 4.78(1H), 4.84(1H), 4.91(1H),
   4.96(1H), 5.21(1H), 5.25(1H), 5.53(1H), 6.39(1H),
   7.83(1H), 7.94(1H), 8.28(1H) ９）¹³Ｃ−核磁気共鳴スペクトル：（δ、ｐｐｍ） 重クロロホルム中、テトラメチルシランを内部標準とし
   て測定した核磁気共鳴スペクトル（５００ ＭＨｚ）
   は、次に示す通りである。 10.9(q), 11.9(q), 15.0(q), 15.1(q), 16.0(q), 16.6
   (q), 17.4(q), 18.3(q),18.6(q), 18.7(q), 19.1(q), 2
   1.0(q), 21.4(q), 22.1(q), 23.1(q), 23.51(q),23.54
   (q), 24.2(t), 24.6(d), 24.8(d), 25.4(d), 25.5(t),
   27.7(d), 29.5(q), 29.8(d), 30.2(q), 36.1(q), 36.5
   (t), 37.7(t), 38.3(d), 38.4(d), 39.7(t), 40.9(q),
   46.2(d), 51.8(d), 53.1(d), 54.7(d), 55.1(d), 63.9
   (d), 64.7(d), 68.1(d), 70.1(d), 73.4(d), 74.3(d),
   77.1(d), 169.03(s), 169.04(s), 169.6(s), 169.8(s),
   169.9(s), 170.3(s), 172.0(s), 173.4(s), 173.8(s),
   174.0(s) １０）高速液体クロマトグラフィー： カラム ：Ｓｈｏｄｅｘ Ａｓａｈｉｐａｋ Ｃ８Ｐ
   ５０ ４Ｅ（直径４．６ｍｍ×長さ２５０ｍｍ：昭和電
   工（株）製） 移動相 ：アセトニトリル：１０ｍＭ炭酸水素アンモニ
   ウム水＝１３：７ 流 速：０．７ｍｌ／分 検出波長：λ２１０ｎｍ 保持時間：１０．２０分 １１）溶解性：ジメチルスルホキシド、メタノール、ク
   ロロホルムに可溶。 １２）アミノ酸分析：加水分解物としてスレオニン、ア
   ラニン、イソロイシンが認められた。
3. 【請求項３】下記式（ＩＩ） 【化２】 で表される化合物。
4. 【請求項４】下記の理化学的性状を有する化合物： １）物質の性状：中性脂溶性無色粉末 ２）分子式：Ｃ₅₇Ｈ₁₀₀Ｎ₈Ｏ₁₅ ３）分子量：1136（ＦＡＢ−ＭＳ法） ４）高分解能ＦＡＢ−ＭＳ［Ｍ＋Ｈ］⁺（Ｃ₅₇Ｈ₁₀₁Ｎ₈
   Ｏ₁₅として）： 実測値：1137.7410 計算値：1137.7387 ５）紫外線吸収スペクトル：末端吸収 ６）赤外線吸収スペクトル（臭化カリウム錠剤中、ｃｍ
   ^-1）：3433, 3333, 2963, 2937, 2875, 1751, 1686, 16
   42, 1516, 1469, 1409, 1388,1372, 1311, 1292, 1272,
   1201, 1156, 1128, 1074, 1017 ７）旋光度：［α］_D ²⁵−１３１°（ｃ １．０、メタ
   ノール） ８）¹Ｈ−核磁気共鳴スペクトル：（δ、ｐｐｍ） 重クロロホルム中、テトラメチルシランを内部標準とし
   て測定した核磁気共鳴スペクトル（５００ ＭＨｚ）
   は、次に示す通りである。 0.78(3H), 0.79(3H), 0.80(3H), 0.83(3H), 0.87(1H),
   0.87(3H), 0.90(3H), 0.92(3H), 0.93(3H), 0.95(3H),
   0.95(3H), 0.98(3H), 0.98(3H), 1.01(3H), 1.01(3H),
   1.03(1H), 1.05(3H), 1.28(3H), 1.37(1H), 1.40(1H),
   1.46(1H), 1.47(1H), 1.49(1H), 1.51(3H), 1.64(1H),
   1.65(1H), 1.66(1H), 1.86(1H), 1.72(1H), 1.78(1H),
   2.12(3H), 2.13(1H), 2.26(1H), 2.31(1H), 2.37(1H),
   2.88(3H),2.93(3H), 2.97(3H), 3.28(3H), 3.56(1H),
   4.03(1H), 4.15(1H), 4.73(1H), 4.78(1H), 4.82(1H),
   4.83(1H), 4.91(1H), 4.97(1H), 5.15(1H), 5.28(1H),
   5.50(1H), 6.37(1H), 6.87(1H), 7.86(1H), 8.29(1H) ９）¹³Ｃ−核磁気共鳴スペクトル：（δ、ｐｐｍ） 重クロロホルム中、テトラメチルシランを内部標準とし
   て測定した核磁気共鳴スペクトル（５００ＭＨｚ）は、
   次に示す通りである。 10.5(q), 10.9(q), 14.9(q), 15.1(q), 15.6(q), 16.6
   (q), 16.7(q), 18.3(q),18.6(q), 18.7(q), 19.0(q), 2
   0.8(q), 21.4(q), 22.0(q), 22.1(q), 23.1(q),23.6
   (q), 23.6(q), 24.1(t), 24.6(t), 24.7(d), 24.8(d),
   25.4(d), 27.7(d),29.5(q), 29.8(d), 30.2(q), 31.6
   (d), 31.8(q), 36.1(t), 37.6(t), 38.4(d),39.6(t), 4
   0.9(q), 46.1(d), 51.8(d), 53.1(d), 54.7(d), 54.7
   (d), 61.2(d),63.9(d), 64.6(d), 68.1(d), 73.1(d), 7
   4.3(d), 77.0(d), 168.9(s), 168.9(s), 169.1(s), 16
   9.9(s), 169.9(s), 170.3(s), 170.6(s), 171.7(s), 17
   2.0(s),173.3(s), 173.8(s) １０）高速液体クロマトグラフィー： カラム ：Ｓｈｏｄｅｘ Ａｓａｈｉｐａｋ Ｃ８Ｐ
   ５０ ４Ｅ（直径４．６ｍｍ×長さ２５０ｍｍ：昭和電
   工（株）製） 移動層 ：アセトニトリル：１０ｍＭ炭酸水素アンモニ
   ウム水＝１３：７ 流 速：０．７ｍｌ／分 検出波長：λ２１０ｎｍ 保持時間：９．０５分 １１）溶解性：ジメチルスルホキシド、メタノール、ク
   ロロホルムに可溶 １２）アミノ酸分析：加水分解物としてスレオニン、ア
   ラニン、イソロイシンが認められた。
5. 【請求項５】ホーマ（Ｐｈｏｍａ）属に属する、請求項
   １乃至４のいずれか一つに記載の化合物の生産菌を培養
   し、その培養物より請求項１乃至４のいずれか一つに記
   載の化合物を採取することを特徴とする、請求項１乃至
   ４のいずれか一つに記載の化合物の製造方法。
6. 【請求項６】ホーマ（Ｐｈｏｍａ）属に属する、請求項
   １乃至４のいずれか一つに記載の化合物の生産菌がホー
   マ・エスピー（Ｐｈｏｍａ ｓｐ．） ＳＡＮＫ １３
   ８９９（ＦＥＲＭ ＢＰ−６８５１）株である、請求項
   ５に記載の製造方法。
7. 【請求項７】請求項１乃至４のいずれか一つに記載の化
   合物又はその塩を有効成分として含有する医薬。
8. 【請求項８】請求項１乃至４のいずれか一つに記載の化
   合物若しくはその塩を有効成分として含有する真菌感染
   症の治療剤又は予防剤。
9. 【請求項９】ホーマ・エスピー（Ｐｈｏｍａ ｓｐ．）
   ＳＡＮＫ １３８９９（ＦＥＲＭＢＰ−６８５１）
   株。