TW589378B - Pharmaceutical composition for the prevention and/or the treatment of allergy - Google Patents

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589378 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 A7 ____B7________ 五、發明說明（（） #明領域 本發明傺關於一種用於預防及/或治療過敏及/或過 敏性來源疾病，特別即發型過敏性過敏之新穎化合物及 新穎方法。 p明背景 即發型過敏是一型過敏反應其出現相當快速，換言之 於病人暴露於病因過敏原之數秒或數分鐘内發生。此種 即發型反應之後可能接著為延遲發作的繼發反應，可能 導致目標器官的發炎變化而表現成慢性症狀如氣喘或異 位性皮虜炎。 即發型過敏僳由主要羼於但非排它地IgE同型抗體媒 介。IgE抗體結合至細胞例如噠鹸性細胞、肥大細胞或 蘭氏細胞上的特定受體。當暴露於過敏原時，表面結合 的IgE轉導信號進入細胞内部，接著為細胞活化，以喃 鹸性及肥大細胞為例，伴隨著釋放出事先生成的媒介物 質例如組織胺及酶，且合成花生四烯酸代謝産物。此等 媒介物造成過敏徽象及症狀發生例如支氣管氣喘、血管 擴張、黏液分泌過度、以及感覺神經末梢受剌激而造成 癢感。 接收適當活化信號之B淋巴細胞産生的IgE抗體。IgE 抗體産生機轉之完整說明可參考適當綜論（例如參考 Vercelli D·，過敏議事錄 14,413-416頁（1993))。 目前過敏症狀的治療包括避開過敏原，藥物治療及免 疫治療。完全避開暴露於過敏原是最合邏輯的方法，但 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） (請先閱讀背面之注咅？事項再填寫本頁) --------訂--------- U.. 589378 A7 _____B7__ 五、發明說明（> ) 於大半例中仍極難達成或幾乎無法達成。藥物治療有用 但只能改善症狀而無法影響其起因。此外藥物治療常受 限於非期望的副作用。 目前之免疫治療辦法有 1) 習知減敏辦法，僳對病人投與漸增劑量之病人會發 生敏感的過敏原之治療； 2) 變更過敏原，針對於減少由特定抗體識別的過敏原 特別為I g Ε ; 3) 過敏原衍生肽用來干擾特定B細胞及T細胞間之交 互辨識作用或含IgE結合性B細胞抗原決定部位。 此種過敏原衍生肽含有一個或少數T細胞抗原決定部 位用於動物實驗及人體實驗嘗試抑制待定T細胞活化， 以及誘發T細胞無反應狀態，述於專利申請案WD9 3 / 0 8 2 7 9。 此種構想應用於人體之一例偽對貓敏感病人皮下注射 存在於Fel dl過敏原之T細胞抗原決定部位順序衍生得 之敗（||^1111614,8.?.，66以61'，}(.1^，過敏 49,302-308頁 (1994))。此種構想之互補辦法也曾經用於動物實驗。 使用之肽經改質而保有結合至特定B細胞上之MHC — 11類 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁)

I 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 I cc 1 /fv bb 能 ί 之 6 ϊ 2 胞 〇〇 細9- 1X T 8 應3, 對學 化疫 活免 失際 喪國 經， 已人 但等 5 · 力E· \R1 R 链 的ir 子eh 定·Η 決(0 生 産 物 介 媒 放 釋 胞 s g 細 I 標對 目其 由胞 像細 應大 反肥 敏或 過胞 知細 己性 0 嚙 如 例 體 受 面 表 之 力 和 親 高 有 具 兩果 為結 求 * 要體 低受 最聯 之交 物又 介其 媒 ， 放聯 釋交 ❶子* 據分4 佔gE_所W E®抗 I 種 由一 體同 受識 等辨 該個 本紙張尺度it用巾關家標準（CNS)A4規格⑽X 297公釐） 589378 A7 B7 五、發明說明（4 導致將活化信號轉導入細胞内部。若僅有一種1 gE分子可 結合過敏原，則不會促成細胞活化，而僅1 g E之結合位置 被佔據，可避免細胞暴露於自然過敏原時被活化。因此 據稱使用單一 IgE結合之抗原決定部位乃治療過敏疾病 之適當方法（Ball T.等人，生物化學期刊2 6 9,2 8 3 2 3 -28328頁（1994),EP-A-0714662)o 業界頊 美國專利4,946, 945説明一種可用於免疫治療之蛋白 質接合物，其僳由生物反應性改質劑（BRM)及過敏原組 成。接合物可結合醫藥可接受性載劑〇細胞激肽，細菌 性、真菌性及病毒性免疫增強劑及胸腺激素於該文件被 掲示作為適當BRM。 專利申請案W095/31480敘逑製備及使用二cr -螺旋製 成的合成蛋白質，具有多種胺基酸之特定排列。該化合 物可用作功能單位特別抗原決定部位B及/或T之結合 擔體。 宏義 「特異反應性」僳指一個値體其具有免疫条統響應暴 露於過敏原産生過量羼於IgE同型之抗體，其傺羼於値 人體質主要是基因來源。具有此種特性的個體被稱作 「特異反應性」。 「過敏原」定義為一種物質通常為蛋白質組成之巨分 子，其可於好發的較佳為基因上好發個體（特異反應性） 提引産生IgE抗體。 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 0 « — — — — — — I* 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 589378 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 A7 ______B7_五、發明說明（4 ) 類似定義示於下列參考文獻：臨床實驗過敏，2 6期， 4 9 4 -516頁（ 1 9 9 6 );過敏及免疫學之分子生物學，编輯 R· Bush,(免疫及過敏診所，北美条列（ 1 9 9 6年8月）。 此等過敏原較佳為重要過敏原選自包括： -食物過敏原存在於花生、鱈魚、蛋白、黃豆、蝦、 乳及小麥， -家塵媒過敏原來自剌皮蝶種屬（Dermatophagoides spp)、歐洲家塵蟎、美洲家塵蠘及microceras、 Euroglyphus或 Blomia, -來自昆蟲的過敏原存在於蟑螂或膜翅目昆蟲， -得自花粉之過敏原，特別樹、青草及雜草之花粉， -存在於動物之過敏原，特別貓、犬、馬及齧齒類， -存在於真鋪之過敏原特別得自麴菌（Aspergillus)、 交替徽菌屬（Alternaria)或分枝芽胞薗（Cladosporiuin) ，以及 -職業過敏原存在於膠乳、澱粉酶等産物。 過敏原亦可為主要存在於霉或多種藥物例如激素、抗 生素、酶等之過敏原。 「過敏」為特異反應性個體遇到其已經敏感的過敏原 時觀察到的徽象與症狀的集合，可能導致出現多種疾病 之症狀例如過敏性鼻炎、支氣管氣喘、異位性皮虜炎等。 「過敏」為一種敏感性個體當暴露於其己經被敏化的 抗原時産生的非期望反應；即發型過敏與IgE抗體的産生 有闋因此等於過敏（allergy)。 (請先閱讀背面之注咅3事項再填寫本頁)

I 訂--------- l· . 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） 589378 A7 B7 五、發明說明（r ) 「抗原決定部位」或「抗原決定子」等詞表示抗原（巨 分子結構，包括過敏原主要像由蛋白質組合物組成，但 也可由一或多種半抗原或部分翳藥活性化合物組成）之 一或多値部分（定義為保形抗原決定部位）特別可由抗體 或B或T淋巴細胞細胞表面受體辨識與結合。 發明槪沭 本發明之目的僳提供一種免疫接種策略，藉此策略， 特異反應性値體對過敏原所做抗體反應僳偏離由待異反 應性個體自動辨識的過敏原主要決定子，成為相同分子 上的決定子但傺由非特異反應性個體之抗體自動辨識， 或變成不會由大半値體自動辨識的決定子而與該等個體 之特異反應性狀態無關。 本發明僳關於一種化合物包含 -至少過敏原抗原決定子，其可由非特異反應性（對 某種過敏原）値體之B細胞或B細胞分泌抗體所辨識（包 括低溫決定子其不會由特異反應性値體辨識且最少由非 特應性個髏辨識），且較佳不會由T細胞辨識，以及至 少一種與該過敏原不同的抗原之抗原決定子，該抗原決 定子可觸發T細胞活化，或 -一核苜酸序列編碼二抗原決定子，該序列可聯結至 於病人細胞具有活性之一或多種調節順序。 對已知主要過敏原存在的特定過敏原抗原決定子易由 業者人士辨識，其可選擇過敏原之抗原決定部位或抗原 決定子，該等抗原決定部位或抗原決定子僳由非特異反 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 Χ 297公釐） (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁)

-· ϋ ϋ ϋ ϋ ϋ ϋ 一：口、· ϋ 1 1 ϋ ^1 el I 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 589378 A7 B7 五、發明說明（^ ) 應性値體（對該過敏原之非特異反應性個體）辨識，且像 與特異反應性個體如前述産生抗體之其它抗原決定部位 不同。同理，業者人士可選擇任何抗原（與過敏原不同） 之待定抗原決定子，其已知可觸發T細胞活化。較佳抗 原非為過敏原。較佳抗原決定部位之選擇述於後述實例。 根據本發明之化合物將於特異反應性病人出現抗過敏 原免疫反應移位，朝向無法由特異反應性病人抗髏自動 辨識或僅能極小辨識之抗原決定部位或抗原決定子遷移β 根據本發明之化合物，過敏原之抗原決定子及非過敏 性抗原之抗原決定子較佳為肱序列，以化學方式結合（呈 線性啣接形式或分支形式），較佳藉肽鍵聯做化學結合， 較佳至少由兩値胺基酸組成。本發明化合物為線性或環 狀，含或不含額外部分例如嵌段肽-肽交互作用。 較佳過敏原僳選自包括家塵蟎歐洲家塵蟎之Der Pi及 Der pll,煙燻麴鯖之主要抗原，葡萄球菌B内毒素（SEB) 及牛冷-乳球蛋白或參考文獻臨床實驗過敏26期494-516 頁（ 1 9 9 6 );過敏及免疫分子生物學，编輯R. Bush免疫 及過敏診所，北美条列（1996年8月）敘述的過敏原。 較佳本發明化合物中，可觸發T細胞活化之抗原之抗 原決定子為破傷風類毒素、白喉、徽菌、流行性感冒或 麻疹病毒抗原之T細胞抗原決定部位（較佳為輔助者T 細胞抗原決定部位）（其它T細胞抗原決定部位之例逑於 參考文獻W095/26365之表II)。 較佳本發明化合物僳選自包括據如下胺基酸序列之肽： 一 8 一 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁)

I « — — — — — — I — 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 589378 A7 _B7_ 五、發明說明（7 ) 序列識別溢號1 : QYIKANSKFIGITELGGHEIKKVLVPGCHGS 序列識別編號2 : HEIKKVLVPGCHGS 序列識别編號3 : DQYIKANSKFIGITELG6QYIKANSKFIGITELSSCHGSE PCIIHRGKPFGGCHGSEPCIIHRGKPFSSCHGSEPCIIHR GKPFGGCHGSEPCIIHRGKPFSSCHGSEPCIIHRGKPFGG CHGSEPCI IHRGKPFSR 序列識別溢號4 : PKYVKQNTLKLATGKKGPKYVKQNTLKLATGKKGVI1

GIK 席列識別溢號5 :

QYIKANSKFIGITELGGCHGSEPCNIHRGKPF 或编碼至少一種該等胺基酸序列之核苷酸序列，較佳

為核甘酸序列序列識別編號6: 6AATTCCCACCATGGATCAGT

ATATAAAAGCAAATTCTAAATTTATAGGTATAACTGAACTAGGAGGTT

GCCATGGTTCAGAACCATGTATCATTCATCGTGGTAAACCATTCGGCG

GTT6TCACGGAAGTGAGCCTTGCATTATACACAGAGGAAAGCCGTTCT AAGCGGCCGC0 本發明之另一方面僳有關一種醫藥、化妝品、食品 及/或飼料組合物，包含如本發明之化合物及醫藥、 化妝品、食品及/或飼料可接受性載劑。 較佳翳藥組合物為疫苗，其包含醫藥可接受性載劑 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁)

I 訂--------- 589378 A7 B7 五、發明說明（# ) ，其可為任一種相容無毒物質適合將本發明組合物（疫 苗）投與病人且獲得預定治療或預防性質。根據本發明 之醫藥可接受性載劑其適合經口投藥者為業者人士眾所 周知例如錠劑，包衣或未包衣丸劑，膠囊劑，溶液劑或 糖漿劑。其它適當醫藥載劑或媒介可隨投藥模式改變（經 皮，上皮，皮下，皮内，吸入，貼布，靜脈，肌肉，腸 外，口服等）。 當本發明化合物為核甘酸序列時，本發明化合物可淨 投藥或於適當醫藥載劑如「載體」用於轉移威染、轉導 及由病人細胞表現該序列（包括表現及於細胞外側分泌 由該核甘酸序列编碼之肱序列）。「載體」較佳選自包 括質體，病毒（反錄病毒，腺病毒···），脂質載體（例如 陽離子性囊泡，脂小體···），分子或可導致被轉移感染 細胞出現化學或物理修改之裝置（葡萄聚糖磷酸鹽，磷 酸鈣，顯微注射裝置，電穿孔裝置等）或包含根據本發 明化合物之改質重組有機體衍生自例如沙門氏菌或分枝 桿薗種条，包囊呈微粒子或奈粒子之核酸例如開洛森 ((^11»〇3&11)，逑於^3^等人，自然醫藥5,387-391頁 (1 9 9 9 )等。 用於活體外或活體内治療之病人細胞基因修改可由業 者人士根據基因治療領域已知方法獲得（例如述於參考 文獻 W091/02805， W091/18088， W091/15501)。 根據本發明之醫藥組合物或疫苗也包含業者人士眾所 周知之佐劑（包括輔助因子病毒），其可調節病人免疫条 -10- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁)

I ·11111111 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 378 A7 ___B7__ 五、發明說明（9 ) 統之體液、局部、黏液及/或細胞反應且改良根據本發 B月化合物之用途。 佐劑可具有不同形式，但適合投與人類。佐劑之例為 礦物或植物來源之油乳液；礦物化合物例如鋁磷酸鹽或 氫氧化物或磷酸鈣；細_性産物或衍生物例如P40(衍生 自肉芽棒狀桿菌（Corynebacterium granulosuiB)細胞壁） ，犟磷醯脂質A(MPL，LPS衍生物）及胞壁基肽衍生物及 其接合物（得自分枝桿菌成分之衍生物），礬土，不完全 佛洛得氏（Freund’s)佐劑，理桕辛（lip0Syn),皂素， 角鯊烯等。晚近有關人類投藥用佐劑之綜論述於Gupta Κ·Κ·等人（疫苗 11 ,293-306頁（1993))及 Johnson A.G. (臨床微生物綜論7, 277-289頁（1994))。 根據本發明之醫藥組合物僳經由業者人士一般應用於 製備多種醫藥組合物特別疫苗之方法製備，其中活性化 合物/醫藥可接受性載劑百分比僳於寬廣範圍内變化（通 常適當劑型含有約0.00 5微克至約1毫克化合物/千克病 人體中），僅受病人對該化合物之忍受性及適應性 (accointance)程度所限^該限度特別僳由投藥頻率以 及接受治療的特定疾病或症狀決定。 較佳，化合物存在於翳藥組合物之濃度為許可至少減 少或壓抑過敏及/或過敏原疾病之徼象及症狀（較佳即發 型過敏徽象及症狀）。 根據本發明之化妝品組合物包含根據特定投藥模式選 擇之化妝品可接受性載劑。例如用於皮虜衛生，化妝品 -11- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) β 訂--------- 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 589378 五、發明說明（1〇) 組合物可呈乳霜、軟膏或香精形式。 根據本發明之食品或飼料組合物可爲任一種包含常見 液態食品或飼料成份之食品、飼料或飮料可接受性載劑 其中含括本發明化合物。 本發明之另一方面係有關使用根據本發明之化合物作 爲醫藥。 本發明亦係關於使用根據本發明化合物或根據本發明 之醫藥組合物用於製造藥物而用於預防及/或治療過敏或 過敏來源疾病，特別即發型過敏。 本發明之另一方面係有關治療及/或預防過敏或過敏來 源疾病特別即發型過敏之方法，包含將根據本發明之化 合物或醫藥組合物投與病人較佳爲人類病人特別對過敏 原具特異反應性個體步驟，俾便提引出或增加對過敏原 之抗原決定子產生抗體，而該等決定子並非由特異反應 性個體的免疫系統所自然辨識或僅能最低辨識者。 此等疾病包括過敏來源之鼻炎及鼻竇炎，支氣管氣 喘’異位性皮膚炎，某些形式之急性及慢性奪麻疹，攝 取食物過敏原例如/3 -乳球蛋白關聯的胃腸症狀，同樣來 源之所謂之口咽症候群，藥物過敏關聯之無防衛性過敏 反應（anaphylactic reaction)0 本發明將於下列實例參照附圖說明。此等實例作爲本 發明之各具體例之非限制性說明。 圖式之簡單說明 第1圖爲純株顯性現象，表示B a 1 b / c小鼠以兩周間隔 皮下注射兩次1· D e r p I I ( 1 0微克於佛洛得氏佐劑）免疫接 -12- 589378 五、發明說明（11 ) 種。將小鼠放血，使用一組涵蓋D e r p 1 I序列或T 細胞 佐劑（F I S )重疊肽評估抗體反應性。可識別肽1 1之小鼠 (參考第1圖點2 )進一步使用1 0微克肽21接種兩次， 顯然現在可辨識肽2 1而抗體濃度降至肽1 1之5 0 % (圖中 點3 )。進一步投與r D e r p I I維持對肽2 1之反應性，同 時進一步降低對肽1 1之抗體濃度（點4 )。 第2 圖爲Der PII肽與人類IgE之反應性，表示以生 物素標記之肽於磷酸鹽緩衝鹽水 pH7. 4 (PBS)稀釋至 2 微克/毫升濃度。5 0微升稀釋液添加至中性抗生物素 (n e u t r a v i d i η )塗布板且於室溫（R T )培育 1小時。板以 PBS洗滌，剩餘結合部位藉加入1 00微升酪蛋白於 PBS 稀釋至5 毫克/毫升飽和。於室溫經3 0分鐘後，平板再 度洗滌及於室溫與得自特異反應性個體之1 / 5血淸稀釋 液共同培育2 小時，再度洗滌及與對人類I gE之特異性 山羊抗體（其偶合至過氧基酶）共同培育。經新鮮洗滌後 平板與酶基質共同培育，割裂酶後著色。孔內著色（於 4 9 0毫微米以於 Y 軸之吸光率顯示）係與存在於血淸樣 本之特定I gE抗體量成比例。對照檢定分析未含肽或抗 體稀釋液。 第3 圖爲De r PI I與非特異反應性個體之I gG之反應 性，表示如對第2圖進行之檢定分析，但使用得自非特 異反應性個體之100倍血淸稀釋液及使用對人IgG之山 -V- -η- 芊抗體。 第4 圖爲De r I I肽與特異反應性病人之IgG之反應 性，表示恰如第3圖所示進行之檢定分析，但使用得自 特異反應性個體血淸。 -13- 589378 Α7 Β7 五、發明說明（α) 第5圖：25毫升血液藉靜脈穿剌收集於肝素化試管内 且以RPMI培養基稀釋兩倍，接種於法可-海派克（Ficoll-Hypaque)密度梯度。試管於l，000g離心兩分鐘。得自介 面的細胞藉袖吸收集且再度懸浮於RPMI,以相同培養基 洗兩次及最終再度以1〇6細胞/毫升懸浮於相同培養基。 50微升含10微克/毫升肽11-22或22-33稀釋於培養基加 入其中，於37°C培育6日。加入ΡΗΑ(10微克/毫升）之陽 性對照。Τ細胞之增生偽藉使用BrdU特異反應性値體評 估溴尿啶（BrdU)合併於細胞DN A程度決定。結果僳以於 4 9 0毫微米之吸光率表示。高於背景值之T細胞增生數 目於肽1 1-22可見。 發明之詳細說昍 特異反應性以及非特異反應性個體對璟境過敏原産生抗 體。抗體羼於至目前為止發現的所有同型包括IgE(Saint -Remy JU.等人免疫學期刊43期，3 3 8 - 3 4 7頁（ 1 9 8 8 )) 。通常發現待異反應性個體産生的IgE抗體量比非特異 反應性個體多10至1〇〇倍，至少可以說明為何特異反應 性個體當其受到其敏化的過敏原時會有症狀的原因。 出乎意外地發現過敏原如Der pi或Der pll(家塵蜞歐 洲家塵蟎之兩大過敏原）之抗原決定子可由特異反應性 個體之抗髏辨識並非與非特異反應性値體辨識的抗原決 定子相同。經由使用一条列於小鼠對純化D e r p I或D e r Pll分子提引出的單一抗體獲得此種結論〇於競爭免疫 撿定分析中，發明人判定某些抗原決定子可由得自特異 -14- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） (請先閱讀背面之注音？事項再填寫本頁) i — — — — — — — — — 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 589378 A7 B7 五、發明說明（θ 可步 子一 定進 決 。 原識 抗辨 它體 其抗 而原 ，敏 識過 辨抗 體之 抗生 原産 敏體 過値 抗性 之應 體反 個異 性特 應非 反由 性生 應産 反子 異定 特決 的原 善抗 改之 而識 療辨 治所 因體 由個 或性 動 II- 自反 論異 無特 狀非 症對 敏始 過開 示人 顯病 可 其 肽 之 區1 某 子 分 〇 原 體敏 抗過 的自 先生 原衍 生用 産使 少於 減關 時傺 同明 ，發 體本 抗 引體 提個 法性 無應 能反 可異 或特 ，與 識投 辨肽 體等 抗此 的將 出 〇 做肽 體之 個區 性應 應反 反體 異抗 特發 非自 由出 敏體特 過抗非 於的對 露生之 暴産例 然然比 白白 人人 病病 於由 證 削 8B 4Jr 抗限 等可 此果病 c結性 體 ，應 抗原反 定敏異 特過特 生合些 産結某 果將 C 結時近 ，原接 量 小 生 産 外 額 人 ，中 中應 例反 案疫 等免 此原 〇 敏 讓 遇 抗抗 的於 子其 定使 決而 原因 抗例 之比 識體 辨抗 體加 個增 性將 應肽 反與 異投 敏 過 抗 法 方 該 藉 法 方 —1 種1 供 提 像 的 巨 之 明 發 本 〇此 性因 顯 的 法 生 方 産 它 人 其 病 C於 性位優 應部供 反定提 異決其 特原法 由抗方 非的種 向識接 朝辨疫 引小免 導微括 度僅包 再或 被識 應辨 反然 疫自 免體 原抗 的 百 之 明 發 本 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) ---------tr---------^

經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 安 法 方 -*11 種 接 疫 免 之 明 發 本 據由 根可 〇 ，有 點先帶 優首不 之 肽

子 定 決 之 識 辨 體 抗 E S 之 用 使 於 由 全 出 導 誘 法 無 此 因 式 較 形 比 變 數 改 次 或 射 然 注 天 及 用 量 使 C 質 與反物 僳相種 質法接 性方疫 種種免 此接之 C 疫明 應免發 反之本 敏子據 過分根 性原 ， 衛敏次 防過其 無之 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 589378 A7 _B7_ 五、發明說明（Μ ) 其它免疫治療方法顯著減低，理由如下： (1) 本發明産生之肽不含IgE結合決定子，可一次給予 免疫原劑量之肽，因此可顯著縮短治療時間。混合或同 時投與佐劑可提高肽的免疫原性，如此減少注射次數（以 及需要的劑量）至可能僅霈注射一次； (2) 特異反應性個體實際上可能産生小量針對非特異 反應性個體所辨識之抗原決定部位的抗體，因此注射本 發明所得肽可增強二次免疫反應（二次免疫反應將産生 比一次免疫反應遠更高的抗體力價）； (3) 因投與肽於早期改變對過敏原之免疫反應，亦即 過敏原辨識作用，由抗原呈現分子處理並呈現給T細胞 ，故僅需有限劑量即可達成本發明之目的。 前述特點表示優於習知減敏的一大優點減敏必須進行 數月或數年且需使用高劑量過敏原。於替代治療中例如 使用肽來觸發T細胞，治療需要遠更高量之游離肽來補 償肽的高速異化代謝速率，且需重複投藥才能維持此種 激發狀態。 第三，接受本發明治療病人持續暴露於自然環境中存 在的過敏原可充分維持對應於免疫接種用肽之抗原決定 子的免疫反應。實驗證據顯示小鼠使用衍生自抗原之肽 免疫接種，於隨後使用全抗原挑釁時仍保有其反應性（純 株顯性現象）（Benjaffiini E.等人免疫學期刊141期，55-63 頁（1988)及 Schutze M.P.等人免疫期刊 142 期，2635-2 6 4 0頁（ 1 9 8 9 ))及掲示於第1圖。 -16- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) ---------;叮---------_ 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 589378 A7 __B7__ 五、發明說明（< ) 根據本發明之方法也代表一種明顯優於其它療法之優 點，藉此尋求對過敏原的忍受性而非對新穎抗原決定子 之免疫化。於前者重複投與忍受原（tolerogens)才能維 持無反應狀態。 本發明之精確作用模式尚未完全説明。 於過敏原上可由抗體辨識之可能的抗原決定子數目高。 但因過敏原通常為小分子，故其限制同時可結合至過敏 原之抗體分子數目。抗體以最高濃度存在及/或具有最 高親和力將偏好結合至過敏原。對特異性B細胞其於細 胞膜表面表現與其分泌相同的免疫球蛋白分子。因此抗 原被具有最高親和力及/或最高頻率的B細胞捕捉。如 此可防止辨識同一分子上其它抗原決定部位的B細胞活 化，此種現象稱作「純株顯性現象」（Schutze Μ·Ρ·等 人免疫期刊142期，2635-2640頁（1989))。 若於特異反應性値體對於非自然形成抗體所辨識或僅 微弱辨識之抗原決定子誘發偏好免疫反應，則純株顯性 現象指出抗過敏原免疫反應現在傺針對新決定子而減少 最初辨識的抗原決定子。由兩条列實驗證據證實此種構 想。第一，去除抗原上的免疫顯性Β細胞抗原決定部位 ，暴露出於完整抗原上不會被辨識的抗原決定部位，而 抗體反應現在傜針對該抗原決定部位（Scheerlinck J.P. Y等人分子免疫學30 ,733-739頁（1993))。第二，使用抗 原免疫接種的小鼠僅使用部分可能的B細胞來獲得特定 免疫反應；使用肽免疫接種可活化特定B細胞；即使動 -17- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) --------訂---------*^1

卿378 A7 •-_____B7___ 五、發明說明（4 ) 物稱後使用天然抗原挑釁仍可維持反應性（Benjamini Ε· 等人免疫學期刊141期，55-63頁（1988)。 此兩組實驗說明根據本發明化合物投藥結果。進一步 支持純株顯性構想及其應用於過敏的實驗中，Balb/C* 鼠注射重組（r )過敏原D e r p I I。小鼠産生抗髏之精確特 異性傺由涵蓋整體Der pll序列之15元體肽且由5種胺 基酸重畳反應決定。 第1圖所示實例中，小鼠産生對rDer pll及對！feU-25 之抗體。進一步使用肽21-35免疫接種誘發對21-35之免 疫反應而對肽11-25的結合顯箸下降。因此對Der pll之 免疫反應重新針對最初無法辨識的抗原決定子。進一步 本實驗顯示誘生「重新導向J免疫反應可對抗使用全 rDer pll過敏原進一步免疫接種。 但為了産生更完整效果，帶有B細胞抗原決定部位之 肽必須連同T細胞辨識之抗原決定部位一起投藥，如此 使B細胞具有所需信號而可完全分化成為成熟的可産生 抗體的漿細胞。T細胞抗原決定部位無需衍生自B細胞 的相同分子。因此含有衍生自指定過敏原之B細胞抗原 決定部位及另一來源之T細胞抗原決定部位之非同質肱 可維持B細胞層面的要求特異性，如此確保存在有T細 胞供應的所需信號。此等信號包括B-T辨識及抗原非特 異性信號如介白素産生，CD40與其配基交互作用，B7 (CD80)與CD28交互作用（Austyn及Wood，細胞及分子免 疫學原理，牛津大學出販社（1993))。 -18- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁)

I 訂--------- 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 589378 A7 B7 五、發明說明（17) 用於本發明之T細胞抗原決定部位係根據其活化大半 病人的T細胞選擇。較佳衍生自常用於例行免疫接種的 抗原例如破傷風類毒素或白喉抗原。有兩大優點。第一 ，此等分子曾經找出多種環球公眾T細胞抗原決定部位 ，亦即可由大半病人辨識的抗原決定部位（Reece J.C· 等人，免疫學期刊151期，6175-6184頁（1993))。第二 ，因大致上全部個體皆曾經接受破傷風類毒素或白喉疫 苗，因此使用本發明之T細胞抗原決定部位初次接種己 經完成，如此可提高免疫接種效率而減少劑量及注射次 數。 用於本發明免疫接種之肽已利用合成生産（例如參考 Grant编輯合成肽）使用應用生物条統公司肱合成儀型號 4 3 0 A或43 1生産或使用重組DN A技術編碼核酸序列。 含肽組合物僳呈適合藉皮下、肌肉或皮内途徑注射的 劑型。但吸入劑型，攝食或直接施用於皮虜或黏膜之劑 型亦屬可行。 肽可為線性或環狀形式，含或未含額外部分。例如為 了封阻肽-肱交互作用。肽也可整合為短肽結構而形成 特定的3-D構型例如α -螺旋。 組合物可含有fe以外之物質例如佐劑。 本發明所逑方法可用於治療人類或動物疾病其中驗證 IgE抗體且IgE似乎於症狀觸發上扮演某種角色的疾病。 本發明也可應用於對動物或植物來源之過敏原敏感病 人或對化學及醫藥化合物，例如抗生素（青徽素）敏感的 -1 9- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) ---------訂·--------· 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 589378 A7 B7 五、發明說明（1) 病人。 啻例 奮例丄 一種31胺基酸肽，傺由15胺基酸代表破傷風類毒素抗 原決定部位（重鏈胺基酸83D至844)及14胺基酸含Der pll B細胞抗原決定部位組成，兩個抗原決定部位由二甘胺 酸殘基伸展分開且傺藉合成獲得。其序列為序列識別編 號1 QYIKANSKFIGITELGGHEIKKVLVPGCHGSo Ife恃件 11紬_杭鹿決宙部位無法由ΙκΕ抗體辨識 肽無法由對天然蛋白質敏感個體製造的IgE抗體辨識 。此可經由如下進行之免疫檢定分析確定。肽於聚苯乙 烯微力價平板上不溶解化，加入一組對Der P11敏感的 特應性値體血清樣本；藉加入同型特異性反應劑來偵測 特異性IgE抗體結合作用。 如此使用業者人士眾所周知之固相合成方法獲得對應 於 Der pll 胺基酸 11-24之序列 HEIKKVLVPGCHGSgfe (序列 識別編號2),其胺基端附有生物素部分。制動於塗有 中性抗生物素之平板上且任其與待異反應性個體血清反 應。實驗結果示於第2圖。如此帶有Der pll IgE抗體 之特異反應性個體血清加至塗有中性抗生物素平板，該 平板事先與12元體肽共同培育，該12元體肽涵蓋Der pll 之序列7-39且有11種胺基酸重叠。對於22種肽皆未見任 -20- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁)

I ·1111111 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 589378 A7 B7 五、發明說明（β ) 何結合高於背景值，表示不存在有IgE抗體可結合至此 種序列。 2、 R紬_杭鹿浓宙部位偽由非特里砭應桦翻體之 體辨識 此點像使用如上對IgE抗體所逑檢定分析程序確定， 但使用山羊抗人IgG抗體來偵測IgG抗體，以及使用1/1〇ϋ 稀釋血清。本實驗之代表性結果示於第3圖，由此可見 胺基酸11與24以及胺基酸22與34間出現顯著結合。因此 Der pll之7-39區含有對非特異反應性個體IgG的兩個結 合部位。 3、 B細朐抗Μ沣宙部位無法由特里砭應袢槭鵲之丄S-EJL 體辨識 此點傺由如上對非特異反應性値體所逑檢定分析相同 的檢定分析程序確定，但血清現在傺得自Der Pll過敏 病人。結果如第4圖所示，待異反應性個體之IgG不會 結合1卜24 Der pll區。少數病人帶有可與8-19肽反應 之抗體。 4、 11-24Der dTT區不含T細_抗鹿決亲部位 此點偽使用業者人士眾所眉知之方法藉T細胞增生檢 定分析確定（例如參考目前免疫學方略編輯Coligan JEKruisbeek AM , Margulies D H , Shevach EM及 Strober, W，第3章，格林出版協會及約翰威利父子公司，1992 -1998)。周邊血液單核細胞（PBMC)藉密度梯度離心與全 血分離。然後PBMC懸浮液與rDer pll或與Der pll 7-39 -21- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) --------訂--------I *^ 一

經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 589378 A7 _____ B7_ 五、發明說明（％ ) 區所含12元體肽共同培育4至6日。表5結果指出添加 肽11-22至PBMC懸浮液不會造成T細胞增生，而使用肱 2 2 - 3 3及PHA觀察得大量增生，後者用作陽性對照。 混成體之使用 肽（序列識別編號1 )混合適合人類投藥的佐劑俥便提 高免疫原性。如此根據公開方法使用胞壁基二肽（MDP) 且共價偶合至肽（Matsumoto K.等人，免疫剌激劑：今 日與明日，編輯 I. Aziinia 及 G. Jolles，79-97 頁（ 1 9 8 7 ) ，日本科學會印刷社東京/ Springer - Veriag桕林）〇 然後含肽及MDP之混合物投與對Der pll敏感病人。如 此製成含1QG徹克/毫升肽之懸浮液於含0.3%人血清白蛋 白及0.4%酚之鹽水。1毫升溶液藉皮下路徑注入手臂。 啻例2 本發明化合物可藉重組cDNA技術製備，生産由一条列 含T及B細胞抗原決定部位肽之重複單位組成的多肽。 由衍生自TT之重複T細胞抗原決定部位（重鏈之胺基酸 830至844)及六個衍生自Der pll之重複B細胞抗原決定 部位組成之多肱傺藉DNA技術生産。二胺基酸殘基序列 嵌入各抗原決定部位。該序列為： D-(QYIKANSKFIGITELX) 2 - ( CHGSEPCI IHRGKPFX) 5 -CHGSEPCIIHRGKPFSR，其中 X 為 GG或 SS。 此等多肽之獲得方式如後。對應於QYIKANSKFIGITEL· (序列識別編號1 3 )之Τ Τ抗原決定部位之核苜酸序列及對 應於CHGSEPCIIHRGKPF(序列識別編號14)之Der pll抗原 -22- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) --------tT---------· 589378 A7 B7 五、發明說明（w ) 決定部位2卜3 5之核甘酸序列經演譯出。理論組合方式 傜由一方面對應於序列TT抗原決定部位-6G-TT抗原決定 部位（T亞單位）之核甘酸，它方面傺由G G序列隔開的兩 套Der pll抗原決定部位複本（B亞單位）進行。合成涵 蓋各亞單位（一個T亞單位及一個B亞單位）完整序列之 寡核甘酸。二亞單位編碼完整DNA序列僳經由聚合酶連 鎖反應獲得。 對二TT亞單位，訊息引子為： GTATCTCTCGAGAAAAGAGATCAATACATTAAG6CTAACA6TAAGTT C A T T G G (序列識別編號 7 );及反訊息引子為 AAACAGCCTCTA6AGAGTTCGGTAATGCCGATAAACTTTGAATTG6C TTTGATGTACTGACCGCCAAGCTCTGTGATTCCAATGAACTTACTGTT AGCC (序列識別编號 8)。 對二B亞單位而言，訊息引子為： GTATCTACTAGTTGCCATGGTTCAGAACCATGTATCATTCATCGTGGT AAACCATTCGGCGGTTGTCACGGAAGTGAGCCTTGCATTATACACAGA G G A A A G C (序列識別編號 9 );及抗反訊息引子為 CGTATGTGTCGACCCGCTATCTAGAGAACGGCTTTCCTCTGTGTATAATGC (序列識別編號 1 〇 )。 對應多肱之完整DNA序列僳經由使用由限剪酶位置旁 出序列其可産生相容端，經由直接多元聚合亞單位獲 得。 最終1 3 7胺基酸多肽序列為·.

DQYIKANSKFIGITELGGQYIKANSKFIGITELSSCHGSEPCIIHRGKP -23- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁)

I 訂--------- 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 589378 A7 __B7_ 五、發明說明（-) FGGCHGSEPCIIHRGKPFSSCHGSEPCIIHRGKPFGGCHGSEPCIIHRG KPFSSCHGSEPCIIHRGKPFGGCHGSEPCIIHRGKPFSR(序列識別 編號 3)。 對應 Der pll 之 21-35 胺基酸序列之 IfeCHGSEPCIIHRGKPF (序列識別編號 1 4 )如第2圖以類似檢定分析驗證，不含 IgG結合抗原決定部位。但確實含有可由非特異反應性 個體之IgG抗體但非由特異反應性値體之IgG抗體所辨識 的抗原決定部位，如分別使用類似第3及4画所示檢定 分析条統测定。 137胺基酸多肽傺於酵母培養使用業者人士眾所周知 之方法製造，可參考教科書如分子生物學之目前方略編 輯 Ausubel FM, Brent R，Kingston RE, Moore DD，Seidman JG，Smith JA及Struhl Κ，16·13章約翰威利父子公司 1994-1997)。多肽吸附於氫氧化鋁，以100微克劑量經皮 下注射投藥。間隔3周投藥2次。 奮例3 本發明化合物之編碼核甘酸序列可用於直接基因免疫 接種。基於DNA之疫苗可使用「裸」DNA、包囊DNA或呈 微粒子或奈粒子形式如甲殼聚糖以不同途徑投藥（例如 肌肉、皮内、皮下、口服）（K.Roy等人自然醫藥1999;5; 3 8 7 - 3 9 1 ) 〇 核甘酸構成體傺如實例2製造，但含有編碼衍生自T T 之一個T細胞抗原決定部位及2値衍生自Der pll之B細 胞抗原決定部位之DNA序列，各抗原決定部位偽由編碼 -2 4 - 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) t 訂--------- 589378 A7 B7 五、發明說明（w ) 抗體，以及對全長天然D e r p I 1分子抗體。 啻例4 以合成方式獲得40胺基酸肽，該肽之組成為13個代 表流行性感冒之A型病毒之T細胞抗原決定部位之胺基 酸，對應 canonical蛋白解酶（canonical protease)敏 感位置之GKKG序列，重複且完全相同之T細胞抗原決 定部位，第二GKKG,及含有Der pi之B細胞抗原決定 部位6値胺基酸。其順序為 PKYVKQNTLKLATGKKGPKYVKQNTLKLATGKKGVUGIK(序列識別 編號4) 使用類似檢定分析条統可驗證如實例1之相同特性。 啻例5 含B細胞抗原決定部位部分之野生型序列可以下述方 式改變，因而消除特有的T細胞抗原決定部位，同時維 持B決定子的完整免疫原性，原因在於免疫接種肽存在 有另一個功能性T細胞抗原決定部位故。 如此藉如實例1之合成方式製造3 2胺基酸長肽，及序 列為 QYIKANSKFIGITELGGCHGSEPCNIHRGKPF(序列識別編 號5)。此肽對應於衍生自TT(胺基酸830至844)之T細胞 抗原決定部位及衍生自Der pll之Β細胞抗原決定部位 而由G G伸展隔開。Β細胞抗原決定部位順序於位置2 8有 個點取代，亦即取代I至Ν，藉由如第5圖所示檢定分析 条統顯示可去除主要Τ細胞抗原決定部位。 肽用於小鼠免疫接種。六頭Balb/c小鼠其足掌注射50 -26- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) ftp. Γ - I 1_ I I ϋ ϋ ϋ ^ a _1 ϋ ϋ ·ϋ 1 ^1 ^1 · -V一口

經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 589378 A7 _ B7 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 五、發明說明（>〇 微升乳液含有5 0微克肱於完整彿洛得氏佐劑。相同注射 程序以兩周間隔重複使用兩次，但使用不完全佛洛得氏 佐劑。末次注射後二周，小鼠放血，血清含有對免疫接 種使用之合成life所含Der Pll B細胞抗原決定部位的特 異性抗體，以及對全長Der PII蛋白質之抗體。獲得區 域排液淋巴節用於準備T細胞懸浮液。後者顯示於T T存 在下可增生，但於Der pll或對應免疫接種使用的B細 胞部分之肽存在下無法增生。 窨例fi 多重抗原肽可用於利用免疫原性增高作免疫接種，且 可使用衍生自不同的且可能無關的過敏原分子之含B抗 原決定部位之免疫原作免疫接種。多重抗原肽例如分支 肽傺根據業者人士已知方法合成。該方法之適當說明可 參考例如 Tam J.P.， Proc· Natl· Acad· Sci USA 1988; 8 5 : 5 4 0 9 - 5 4 1 3 〇 8離胺酸（K)殘基製造之核心肱僳以化學方式製成。各 個K £-胺基可藉以肽鍵聯聯結至K主鍵的特定肽取代。 如此首二殘基以對應TT (胺基酸8 3 0至8 4 4 )之T細胞抗原 決定部位之序列Q Y I K A N S K F I G I T E L (序列識別編號1 3 )取 代。殘基3及4以對應Der pll衍生B細胞抗原決定部位 且帶有1 2 8 N取代之序列C H G S E P C I I H R G K P F (序列識別編號 14)取代。殘基5及6以如實例4所示含有衍生自Der pi 之B細胞抗原決定部位之序列VIIGIK取代。殘基7及8 以對應流行性感冒A型病毒之主要T細胞抗原決定部位 -27- (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 0 訂---------

本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） 589378 A7 _B7_ 五、發明說明（V ) 奮例8 本發明化合物用於人類之免疫原性可於人類化動物模 式進行評估。如此嚴重組合免疫缺損（SCID)小鼠使用人 類來源之免疫競爭性細胞重建。得自對Der pll敏感性 特應性供血者之眉邊血液單核細胞（PBMC;每頭小鼠 15X106)注入SCID小鼠之腹膜。藉此方式重新構成基 因的六頭小鼠於第1、第1 5及第3 0日注射實例2所逑5 0 微克重組多肽。小鼠於免疫接種程序開始前以及開始後 六周放血。評估血清是否存在有對重組多肽之抗體，使 用類似第4圖所示直接結合檢定分析發現免疫接種前為 陰性而免疫接種後為陽性。 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) -4^^^-------->叮--------- 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 -29- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） 589378 A7 _B7 五、發明說明（j) 實例9 :皮虜衛生用化妝品組合物. %重量 油相 BRIJ 721(史迪瑞斯 4.00 (Steareth)21) 鯨蠟醇 10.00 礦油 5.00 對羥苯甲酸丙酯 0.02 水相 卡博普（CARBOPOL)943(卡 0.10 博馬（Carbomer)934) 氫氧化鈉（10%溶液） 0.10 對羥苯甲酸甲酯 0.18 實例1至3之化合物 0.50-5.00 去礦物質水 75.60-80.10 總量： 100 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) f — — — — — — — — — 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 根據本發明之化妝品組合物可以乳膏形式直接用於病 人皮嫌。根據本發明化合物也可攙混於油相而非溶解於 水相。 奮例1 0 :龠品紺会物（酴化乳清乳） 含乳桿菌菌株以及兩株鏈球_的乳清乳傳統上用於生 一30- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） 589378 A7 _B7_ 五、發明說明（4 ) 産優酪乳，傺由乳清粉末於水中重新調整為1 2 . 5 3：獲得。 4 0升乳清於9 2 °C經巴氏滅菌6分鐘，於約7 5 °C及1 5 0巴 (兩種程度）均化及冷卻至約4 2 °C溫度。 其中攙混本發明化合物（實例1至3之肽）之乳清粉於 42°C及pH約5培育然後冷卻至約5°C溫度。 根據本發明之食品組合物可由病人直接口服。 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) ϋ ϋ .- > ·ϋ ·ϋ Ml i·— ·ϋ .^1 . 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐）

Claims (1)

1. ~.t；六、申請專利範圍 第88 1 1 2444號「預防及/或治療過敏之醫藥組成物」專利 案 (9 3年4月修正） 六申請專利範圍： 1. 一種用於預防及/或治療過敏之醫藥組成物，其包括 由一種或一種以上選自家塵蠘 pteronyssinus)之 Der pll Der pll 之過敏原杭原 決定子，其可由Β細胞辨識或由對該過敏原非特異 反應性個體之Β細胞分泌的抗體辨識，結合一種或 一種以上選自破傷風類毒素之Τ細胞抗原決定部位 及流行性感冒病毒之主要Τ細胞抗原決定部位且與 該過敏原不同之抗原之抗原決定子可觸發Τ細胞的 活化所組成之胜肽，以及一種醫藥可接受載劑。 2. —種用於預防及/或治療過敏之醫藥組成物，其包括 一種核苷酸序列編碼一種胜肽組成自一種或一種以 上選自家塵蠘歐洲家塵觸 {De rma t ophago i de s pteronyssinus)之 Der pIR Der pll 之過敏原杭原 決定子，其可由B細胞辨識或由對該過敏原非特異 反應性個體之Β細胞分泌的抗體辨識，結合一種或 一種以上選自破傷風類毒素之Τ細胞抗原決定部位 及流行性感冒病毒之主要Τ細胞抗原決定部位且與 該過敏原不同之抗原之抗原決定子可觸發Τ細胞的 活化，該序列可聯結至一種或一種以上病人細胞內具 589378 六、申請專利範圍 有活性之調節序列。 3.如申請專利範圍第1或2項之醫藥組成物，其中 該過敏原抗原決定子無法由T細胞辨識。 4· $D前述申請專利範圍第1項之醫藥組成物，其中該 @敏原抗原決定子及抗原之抗原決定子爲胜肽序列 ’可藉肽聯結基（p e p t i d i c 1 i n k e r )結合在一起。 5·如申請專利範圍第4項之醫藥組成物，其中該聯結 基係由兩個以上胺基酸組成。 6. 如申請專利範圍第丨項之醫藥組成物，其中該胜肽 係選自具有如下胺基酸序列之胜肽： 011識別編號1 : QYIKANSKFIGITELGGHEIKKVLVPGCHGS 列識別編號3 : DQYIKANSKFIGITELGGQYIKANSKFIGITELSSCHGSE PCIIHRGKPFGGCHGSEPCIIHRGKPFSSCHGSEPCIIHR GKPFGGCHGSEPCIIHRGKPFSSCHGSEPCIIHRGKPFGG CHGSEPCIIHRGKPFSR 序列識別編號4 : PKYVKQNTLKLATGKKGPKYVKQNTLKLATGKKGVI I GIK 序列識別編號5 : QYIKANSKFIGITELGGCHGSEPCNIHRGKPF 。 7. 如申請專利範圍第2項之醫藥組成物，其中該核苷

   589378 六、申請專利範圍 酸序列係選自具有如下所示之核苷酸序列 SEQ ID NO. 6: GAATTCCCAC ATTTATAGGT GAACCATGT乡 GTCACGGAAC GTTCTAAGCG SEQ ID NO. 18: ATG GAT CAG TAT ATA AAA GCA AAT TCT AAA TTT ATA GGT ATA ACT GAA CTA GGA GGT TGC CAT GGT TCA GAA CCA TGT AAC ATT CAT CGT GGT AAA CCA TTC GGC GGT TGT CAC GGA AGT GAG CCT TGC AAT ATA CACAGA GGA AAG CCG TTC TAA 。 8. 如申請專利範圍第1或2項之醫藥組成物，其可用 於化粧品組合物。 9. 如申請專利範圍第1或2項之醫藥組成物，其可用 於飮料、食品及/或飼料組成物。 瓜如申請專利範圍第1或2項之醫藥組成物，其中之過 敏或過敏性來源之疾病爲即發型高度敏感性過敏。 11.如申請專利範圍第1或2項之醫藥組成物，其中該 疾病係選自包括過敏源性鼻炎及鼻竇炎，支氣管氣 喘，異位性皮膚炎，某些形式之急性及慢性蓴麻疹 ，攝取食物過敏原關聯的胃腸道症狀群，同樣來源 之所謂之口咽症候群，與藥物高度敏感關聯之無防 衛性過敏反應（a n a p h y 1 a c t i c r e a c t i ο η )及/或其混 合症狀。 CATGGATCAC ATAACTGAAC TCATTCATCG TGAGCCTTGC GCCGC;以及 TATATAAAAC TAGGAGGTTC TGGTAAACC/ ATTATACACA CAAATTCTAA CCATGGTTCA TTCGGCGGTT GAGGAAAGCC