TW482678B - New scleroglucans and cosmetic compositions containing the new compounds - Google Patents

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482678 1 112 8 8 A7 B7

W 規請委員一 •索修II後是否變更原實質内容 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 五、發明說明（/ ) 本發明係關於新穎化合物、製造該新穎化合物的方法 、以及含有此穎化合物作爲活性成分的化妝品組成物。 在GB-A-2 050 825中，說明一種水含油型的皮膚化妝 品組成物，包括一乳化劑、一油、以及水，該乳化劑之組 成爲a)至少一特定之甘草化合物，以及b)至少一水溶性之 多醣，選自果膠、梧桐膠、莢豆膠與黃原膠。 GB-A-2 050 825中所用之多醣有某些缺點，即其包含 酸性基團，使其對鹽形成及/或pH變化很敏感，並缺乏適 當溫度範圍內之穩定性。 在JP030167109中，說明一種包含平均分子量大於 1χ10ό之β-l，3-聚葡糖之化妝品材料。然而，平均分子量 大於lxl〇6之β-l，3-聚葡糖外觀不佳，且其分子量無法利 用傳統光散射方法測定。 現在已發現某些新的硬聚葡糖可用作化妝品組成物中 之活性成分以及賦形劑，而沒有GB-A-2 〇5〇 825中使用多 醣或JP030167109中之(Μ，3_聚葡糖之問題。而且，本發 明組成物中所用之硬聚葡糖，在乾燥時形成彈性膜，其雖 不溶於水，但很容易在裏面膨潤。此形成膜的能力代表著 另一個於化妝品配方中使用硬聚葡糖的優點。甚至，已發 現該新穎硬聚葡糖具有非常有價値的抗炎性質，使其在作 爲例如日灼處理之曬後製劑中之活性成分上很有價値。 因此，本發明之第一方面提供一種化妝品組成物，包 括： A)—種化妝品上可接受的載體;以及 3 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） -4 —It — — — — — — - I I I I I J I »11— — — — — — (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 482678 A7 B7 五、發明説明（二） B)以總組成物之重量爲準· 0.05至3.0，較洼0.2至 1.0%重量之卩-1，3-硬聚葡糖♦其具有三維交聯之三螺旋結 構，並具有lxl〇6至12X丨06，較佳2χ10ό至10x10°之平均 分子量。 該叱妝品組成物可組成如洗髮精及或潤髮組成物，其 中該硬聚葡糖組分Β)可表現出一或多種以下功能： i) 改善該洗髮精/潤髮乳處理過之頭髮之可梳性： ii) 改善其它組分在該洗髮精/潤髮乳中之分散性： ^ ni)作爲該洗髮精/潤髮乳處理過之頭髮之滑順劑:以及 IV) 改善該洗髮精/潤髮乳中如染料或紫外光吸收劑等添 加劑之固定程度。 根據本發明之化妝品組成物亦可組成一護膚組或物， 如一乳劑或乳霜，其中該硬聚葡糖可表現出一或多種以下 功能： i)具潤滑作用，藉以幫助該組成物在皮膚上的擴散； 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) Π)用作一膜形成劑，藉以於皮膚上提供一保護膜，接& 觸時幾乎偵測不到的該膜，給皮膚一種絲狀的感覺； π)藉由減少角質層最外層的鱗片而使皮膚平滑： w)具皮膚之抗炎效果： V) 改善該護膚組成物之其它組分之分散;以及 vi)作爲該護膚組成物之乳化劑或共乳化劑。 該護膚組成物可調配晈一含水乳液、一油含水或水含 油乳劑、一油或油-醇乳液、一陰離子或非離子親雨性脂質 之囊泡分散物、一含水、含水-醇、醇或油-醇膠體、一固 4 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X 297公釐） 482678 Α7 Β7 五、發明説明（3 ) 態條或一氣溶膠配方。 當調配或一油含水或水含油之乳劑時，該[匕妝品上可 接受的載體A)包括5到50%之油相，以及47到94.95%之 水，各以該組成物之總重量爲準。 該油相可包括任何已知適用於ft：妝品組成物上之油或 其混合物。 此等油之實例包括脂肪族碳水化合物，如液態鏈烷烴 、鯊烷、凡士林與地蠛;植物油，如橄欖油、杏仁、芝麻油 、酪梨油、篦麻油、可可奶油與棕櫚油:動物油，如鯊魚肝 油、鱈魚肝油、鯨魚油、牛油與奶油脂肪:蠘，包括蜂蠘、 巴西棕櫚蠛、鯨蠟與羊毛脂;脂肪酸，如月桂酸、肉豆蔻酸 、棕櫚酸、硬脂酸、油酸與二十二酸;脂肪醇，如月桂醇、 硬脂醇、鯨蠟醇與油醇;以及脂肪酯，如肉豆蔻酸異丙基-， 異鯨蠟基-，或十八烷基酯、硬脂酸丁酯、月桂酸己酯、己 二酸二異丙基酯、或癸二酸二異丙基酯。 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 較佳之用於一油-醇乳液或一油-醇或醇膠體中之單或_ 多醇包括乙醇、異丙醇、丙二醇、己二醇、甘油與山梨糖 醇。 當使用β_1，3_硬聚葡糖作爲共乳化劑時，所用之其它 乳化劑可爲任何傳統上用於化妝品配方中之乳化劑，如一 或多種天然油衍生物之乙氧基酯，如氫化篦麻油之聚乙氧 基酯;一種矽酮油乳化劑，如矽酮多醇:一種視情況乙氧基化 之脂肪酸皂:一種乙氧基化之脂肪醇;一種視情況乙氧基化之 山梨糖酯：一種乙氧基化之脂肪酸:或一種乙氧基化之甘油 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) Α4規格（210X 公釐） 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 482678 A7 . r.:.. ‘........- ：-：B7 _ - "*1 ； m ^ ^ . 五、發明說明（n一 一 一 ___—........ 酯。 根據本發明之化妝品組成物可成爲一種抗炎護膚製劑 ，尤其是日曬後護膚製劑之組成分。 根據本發明之化妝品組成物亦可成爲一種口腔保護製 劑，如齒膠、假牙固定助劑或牙膏;一種黏膜潤滑配方，如 陰道霜或膠;或一種眼藥製劑，如眼藥水;其中，該聚葡萄 糖組分B)可表現出一或多種以下功能： i)進行乾燥黏膜之潤滑； Π)進行液體製劑之增稠； iii) 利用黏膜表面上膜之形成而使活性成分留滯;以及 iv) 改善該組成物中其它組分之分散。 當於眼藥製劑中使用β-l，3-硬聚葡糖時，可與其它組 分一起使用，如： a) 眼藥活性成分，如慶大黴素硫酸鹽（Gentamicin sulphate)、洛蒙佛勒克薩辛氫氯酸鹽（Lomefloxacin hydrochloride)、氯黴素（Chloramphenicol)、二氯苯胺苯乙 酸鈉（Sodium Diclofenac)、二氯苯胺苯乙酸鉀（Potassium Diclofenac)、地塞米松磷酸二鈉鹽（Dexamethason di-sodium phosphate) 、 蔡 Π坐林硝酸鹽 （Naphazolin nitrate) 、 四 氫奈Π坐琳氫氯酸鹽(Tetryzolin hydrocloride)、安它哩琳氫氯 酸鹽（Antazolin hydrochloride)、安它哩啉硫酸鹽（Antazolin sulphate)、氯化毛果芸香驗(Pilocarpin chloide)、維它命 A 棕櫚酸鹽(Vitamin A-palmitate)、以及硫酸鋅； b) 眼藥緩衝液，如硼酸、硼砂、醋酸、醋酸鈉、磷酸 6 尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） .4.-----------------^丨訂--------- ♦ (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 482678 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 A7 __ _，·；--ΒΖ-. '粉 五、發明說明（f ) 、磷酸二氫鈉、磷酸氣二鈉、磷酸鈉、三經甲基胺基甲垸 、檸檬酸、以及檸檬酸鈉； c) 眼藥防腐劑，如氯化苄基烷基銨、氯化苯氫、二硬 葡萄酸雙氯苯雙胍己烷酯、氯丁醇、苯基乙基醇、以及乙 亲硫代水楊酸鈉； d) 溶劑，如乙醇、甘油、聚乙二醇與水、以及其混合 物； e) 助溶劑，如克瑞摩佛EL(Ci*emoph〇r EL)、克瑞摩佛 RH(Cremophor RH)、吐恩 20 (Tween 20)、以及吐恩 80 (Tween 80); f) 等滲壓劑，如氯化鈉、甘露醇、以及山梨糖醇； g) 嵌合形成劑，如EDTA二鈉； h) 抗氧化劑，如α-生育酚乙酸酯、抗壞血酸、N-乙醯 基-胱氨酸、亞硫酸氫鈉、硫代硫酸鈉、以及鎵酸丙酯;及 i) 增黏化合物，如甲基羥基丙基纖維素、蔗糖、卡博 波 934P (Carbopol 934P)、卡博波 940 (Carbopol 940)、卡 博波980 (Carbopol 980)、以及普拉客斯摩F127 (Polaxomer F127) 〇 根據本發明之化妝品組成物亦可用作潤滑劑。 本發明之化妝品組成物亦可進一步包括已知可於一化 妝品組成物中表現出一有用效果之組分。此種其它組分的 實例包括如鎭痛劑、皮膚溼潤劑、如草乙醯苯胺、三啡或 三聘唑等UV吸收劑、如黃原膠等額外增稠劑、如甘油等 保溼劑、膜形成劑、防腐劑、香料以及上色劑。 7 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） Ί-----------------:丨訂/--------- (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 482678

-89.12. 2§ i / ----.............w …一 五、發明說明 本發明化妝品組成物之β-1，3-硬聚葡糖組分具有交聯 三螺旋之三維結構，且在其結構中包含β-1，3_鍵結之吡喃 葡萄糖作爲主鏈，而β-l，6-鍵結之吡喃葡萄糖作爲支鏈， 並具有以下的結構式：

其中η爲提供該β-1，3-硬聚葡糖組分具有lxlO6至 12χ10ό，較佳2xl06至ΙΟχΙΟ6之平均分子量之數字，其係 利用以下的馬克-胡溫克(Mark-Houwink)方程式從快速測得 之史道丁格指數η而決定： MW=[n/4x45xl(r7]1/149 較佳者，該β-l，3-硬聚葡糖之0.3g/l水溶液具有低於 O.lgA之葡萄糖含量，以及20。(：、0.3s·1之剪切率下，50 至190mPa.s之黏度。 該具有lxlO6至12xl06，較佳2xl06至ΙΟχΙΟ6之平均 分子量’並具有三維交聯三螺旋結構之該β—i，3_硬聚葡糖 事實上爲一新組成物，因此，組成本發明之第二方面。 該β-l ’ 3-硬聚葡糖之分子特徵鑑定可藉由光散射技術 ’利用適合溶劑，如0.01Ν氫氧化鈉水溶液中之不同聚合 物濃度下方便地進行。舉例而言，可由冷凍乾燥之粉末狀 8 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（21〇 χ 297公釐） I I ί I — — — — — I - — — 1114— βί I I I I I I I (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 482678 ^公告本 A7 B7 .................\ ' V· 五、發明說明（7 ) 匕―—…… β-1，3-硬聚葡糖樣品製得貯備溶液，然後可將該貯備溶液 於25。0下攪拌1-2天。接著決定靜態與動態光散射參數。 從這些値，可衍生得旋轉半徑(Rg)對流力半徑(Rh)之比率 (Rg/Rh)。此比率(Rg/Rh)係作爲測試樣品形狀之指標。 然後利用氫氧化鈉水溶液或二甲亞礪作爲溶劑，於 25°C下對各種貯備溶液之稀釋樣品進行黏度量測。一種適 用於進行黏度量測之儀器爲優倍得-毛細管I (Ubbelohde-Capillary I;毛細常數Κ=0·009693)，並應用海根貝克校正法 (Hagenbach correction) 〇 這些分子特徵鑑定技術證明該新穎之β-1，3-硬聚葡糖 於25°C下，以物性連結之三股螺旋存在。 該β-l，3-硬聚葡糖係利用植物病原性不完全菌綱之整 齊小核菌OSWero加m⑺//Wz·」ATCC 15205製得。此方法形 成本發明之第三方面。 本發明方法之特徵在於該植物病原性不完全菌網之整 齊小核菌ATCC 15205形式之微生物係 於一微好氧條件下，於一培養介質中培養。 所用之基礎培養介質可爲美國專利第3，301，848號 中所說明者，包括一碳源;一氮源，如銨鹽，或較佳爲硝酸 鈉;一磷酸鹽源，如三水合磷酸氫二鉀;氯化鉀;七水合硫酸 鎂；七水合硫酸鐵；以及酵母萃出物。以三水合磷酸氫二鉀 用作磷酸鹽源之優點爲使介質酸化，因此避免需要另外一 種酸，以調整該介質之pH至約2。 在一較佳實施例中，係以葡萄糖作爲碳源。該葡萄糖 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） — j------- (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 訂 _,i-----0. 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 482678

Α7 Β7 im 五、發明說明（1) 被轉化爲β-l ’ 3-硬聚葡糖、生物團、c〇2、以及草酸，其 爲唯一可偵測到之副產物。 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 較佳於此基礎培養介質中加入檸檬酸水合物，其量較 佳在〇·2至1.5g/l之範圍內;硫胺素或其一礦物酸鹽，其量 較佳在0.3至30mg/l之範圍內;以及鋅鹽，如硫酸鋅，其量 較佳在0.3至30mg/l之範圍內。該酵母萃出物本質上既爲 硫胺素源’亦爲鋅源，酵母萃出物所提供這些成分之量不 足以提供所欲β-l，3-硬聚葡糖之最適產率。 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 已發現藉由降低所使用之氧量，可減少所形成之C02 與生物團量，因而增加所欲β-l，3-硬聚葡糖之形成。因此 ，較佳藉由0.01至0.081Τ1範圍內之特定氧攝入率（氧攝 入率係以生物團里爲基準）進行操作。令人驚課的是所欲 β-l，3-硬聚葡糖產物之產率於培養程序期間之氧攝入率持 續減少時增加，致使供應至細胞之氧氣供應持續惡化。一 種解釋可能爲，因爲有機體較喜歡微好氧環境，其以一種 黏膜外皮包圍自身’甚至於”活體試驗中”，明顯抑制了氧 的轉移。因此，其對氧的真實需求遠比反應器中之微好氧 氧氣供應少。此與所觀察到的結果一致，增加氧供應量至 反應器中時，氧氣因呼吸而過度消耗葡萄糖，導致生長增 加，產率係數(每克硬聚葡糖之生物量克數)減少。 較佳者，使用一種限氮培養物預培養（接種）。令人驚 訝的是，已發現限氮預培養之使用，於培養物中接種，導 致改善之產物對生物團量比。 藉由限制培養介質中之氮源量，所欲β-l，3-硬聚葡糖 10 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） 482678

五、發明說明（ (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 產物對生物團量之比明顯比利用標準接種進行培養時大。 已知高C/Ν比對微生物多醣產生期間之產物濃度具有正面 效果。本觀察之”逆限N”(逆向，因爲供應至該介質之限N 接種培養，接著不限N，因爲其後介質包含足夠之N源)之 良好效果從未被報導過。一種對於”逆限N”良好效果之解 釋可能爲當限N時，有機體因包含氮作爲N-乙醯基糖蛋白 單元之幾丁質的缺乏，而無法使細胞壁多醣固定在壁內。 因此，該細胞壁多醣之釋入該介質中達一較大程度。 據此，較佳利用使培養介質中之氮源量在0.2至0.8 g N/1之範圍內進行本發明之方法。 如已陳明者，草酸爲唯一可偵測到之本發明方法副產 物。在本發明培養過程中pH値的下降係與所形成之草酸 量成正比。該β-l，3-硬聚葡糖產物與生物團濃度並不受初 始用於本發明方法中之pH値的影響。此觀察與先前據報 導基本上有害產物與生物團之形成係利用低於3之pH値 之發現相反。因爲此pH値限制不適用於整齊小核菌，故 根據本發明之培養方法可於pH 2下之完全不滅菌的條件下 操作，除了酵母萃出物之個別滅菌外。 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 較佳者，根據本發明之培養方法於15至40°C攪拌下 進行;然後使培養液與細胞體分離;並以傳統方式單離出所 得之β-l，3-硬聚葡糖產物。 利用該不完全菌綱之整齊小核菌 ATCC 15205所進行之微生物產製與培養期間反應器中介 質黏度之大幅增加有關。此外，該培養懸浮液表現出僞塑 11 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） 482678 A7 B7 夺Λ 五、發明說明 8¾- 性流動之現象。該有機體以及該β-l，3-硬聚葡糖產物均對 剪切敏感。 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 當反應器尺寸增加時，高黏度介質適度混合之重要性 隨之升高。低度的混合會導致培養期間生長與多醣形成速 率的大幅減少。爲了達成在大反應器中之適度混合，標準 的實施方式爲以高攪拌速度操作。然而，在產製硬聚葡糖 之例中，反應器中之高平均剪切率與最大攪拌速度會使多 醣變質。現在已發現，利用極高的氣化率可在相當的時間 內得致同樣良好的混合。以此方式，氣化主要接管介質軸 向混合之任務。高氣化率亦確保高黏度反應器體積之選轉 直達培養終了。此一較不劇烈之混合可產製較高分子產物 。該攪拌裝置導致該多醣必須切離細胞表面。反應器中之 平均剪切率較佳在18至25s·1之範圍內，而最大攪拌速度 較佳在0.7至1.0 m/s之範圍內。另外，液體中之高比例氣 體導致總系統密度之降低，因此造成黏度降低。 以下實例進一步說明本發明。 實例1 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 利用自位於美國MD，Rockville之ATCC取得之植 物病原，絲狀生長真菌之整齊小核菌 ATCC 15205進行培養。 調配以下之標準培養介質： 38.5 g/1 3.0 g/1 1.3 g/1 單水合葡萄糖

NaN03 KH2P〇4 12 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） 482678

五、發明說明（（丨） 單水合檸檬酸 0.7 g/1 KC1 0.5 g/1 七水合MgS04 0.5 g/1 七水合FeS〇4 O.Od -ί 硫胺氫氯酸 3.3 mg/i 七水合ZnSCU 3.3 mg/1 酵母萃出物 1.0 g/1 初始pH値 2.0 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本可 該培養基之pH調整^ . ’鸣滅菌前、 以85%磷酸爲之。該營養基於121°C，1巴遍„ 菌20分鐘。將該硫胺素與ZnS04溶二:以 至培養液中。另外，將1 g/Ι之消泡劑邡至g 中。 就第一預培養而言，1〇〇 mis之上述標準傍—』一 500 ml之附有擋板並經滅菌之錐形瓶_7 .乂以一片取 洋菜基斜面培養之菌絲組織接種該第一預培養物，亚於好 氧條件下，在黑暗27°C以及搖晃機上100 rpm的速度下， 於一 40%相對溼度之培養室中培養一星期。 就第二預培養而言，500 mis之上述標準培養基置於一 2000 ml之附有擋板並經滅菌之錐形瓶中。然後以一 5%(w/v)之第一預培養物接種該滅菌後之培養基。因爲整齊 小核菌在低剪切條件下於該搖晃瓶中形成大沉澱顆粒，因 此首先必須於滅菌條件下使該第一預培養物均質化（20， 13 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） ----訂i 線」 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 482678 B7 五、發明說明（1 000 rpm，30s)。然後於第一預培養物所述相同條件下培 養該第二預培養物3-4天。 於一附有4個INTERMIG攪拌器並具有以下尺寸之反 應器中，在200 rpm之攪拌速度與0.067 Wvm之氣化率下 進行培養。 總體積 工作體積 內徑 總商度 塡充高度 攪拌器直徑 攪拌器葉片高度 斷流件寬度 斷流件壁間隔 塡充高度對內徑比 攪拌器直徑對內徑 比 1 500 1 1000 1 860 mm 2760 mm 1 800 mm 5 80 mm 12 5mm 7 0 mm 1 7 mm 2.1 0.68 1 — — 1— — — — — — · I I I I I i I — — — (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 最大攪拌速度爲2.0 m/s，而平均剪切率爲50.0，。 就一 77 h的程序期間而言，達到2.9 g/1 d的產率，而產物 濃度爲9。2 g/Ι。表觀密度(於0.3 g/Ι多醣與γ=0.3，下量測 )爲29 mPa s，而該多醣之分子量爲3.0 X 106 g/mol。 β-l，3-硬聚葡糖產物之分子鑑定係利用五種以0.01N 氫氧化鈉水溶液作爲溶劑之不同聚合物濃度，藉由光散射 技術進行。貯備溶液之製得係將適量冷凍乾燥的粉末狀(Μ ，3-硬聚葡糖樣品溶解，而個別貯備溶液於25°C下攪拌1- 14 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） 482678 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 A7 B7 89. 12. 2¾ 五、發明說明^ ι — & 2天。接著測定靜態與動態光散射數據。從這些數據，可 衍算得旋轉半徑(Rg)對流力半徑(Rh)之比率(Rg/Rh)。此比 率(Rg/Rh)係作爲測試樣品形狀之指標。在11天的儲存時 間後，所得到的比率(Rg/Rh)爲0.87，其較接近球形之値 (0.76) ’非桿狀之値(>2)，而說明散射密度之濃度依存關係 之第一滲透維里係數（virial coefficient)爲 4x1x1 CT4 3 9 cm molg- 〇 黏度量測係於25。(：下以含水氫氧化鈉或二甲亞風作 爲溶劑對各種不同的稀釋貯備溶液進行測量。用以進行黏 度量測之設備爲優倍得-毛細管I (Ubbelohde-Capillary I;毛 細常數Κ=0·009693)，並應闱海根貝克校正法（Hagenbach correction) ° 流變量測係以鮑林CS-50流變計於25。0下對該β-l， 3-硬聚葡糖樣品進行測量。該圓柱系統CS-25用作該量測 系統。於四種聚合物濃度（〇·5%， ι〇/〇 , I·5%及2%)下讀 取讀數。所用之溶劑爲加入2-苯氧乙醇作爲安定劑之水。 所有溶液在分析前至少儲存2星期。然後利用旋轉器 ”Rotavap”於60°C下餾除水以濃縮該等溶液。 在17天的儲存時間後，β-l，3-硬聚葡糖之0.01N NaOH溶液形式之史道丁格指數η/100(：ηι3/§爲3.64，而β—i ，3-硬聚葡糖之二甲亞硼溶液之史道丁格指數^ioocn^/g 爲 5·51 0 這些結果證實該(Μ，3-硬聚葡糖具有三維交聯之三螺 旋結構。 15 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) Μ 丨I丨訂--------- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公爱） 482678 A7 B7 五、發明説明（/▲) 實例2 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 利用實例1中所述之步驟，於實例丨中所用之相同反 應器中，以[OOrpm之攪拌速度與l.Ovvm之氣叱速率進行 培養。最大攪拌速度爲1.0 m/s ·而平均剪切率爲25.0 。就一 98h的程序期間而言，達到3」g/1 d的產率，而產 物終濃度爲12.6 g/Ι。表觀密度(於0.3 g/Ί多醣與y=0.3 y 下量測:)爲37 mPa s，而該多醣之分子量爲4.1 χ 10β g/moi ο 利用實例i中所述之條件，以鮑林CS-50流變計於 25^^下對實例2所得(M，3-硬聚葡糖樣品進行流變量測。 圓柱系統CS-25用作該量測系統。於三種聚合物濃度(0.5% ，1%及1.5%)下讀取讀數。所用之溶劑爲加入2-苯氧乙 醇作爲安定劑之水。所有溶液在分析前至少儲存2星期。 然後利用旋轉器”Rotavap”於60°C下餾除水以濃縮該等溶 液。於20/s或100/s之剪切率下進行轉動量測。結果見於 下表中。 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 1 ! 測試化合物濃度i 1 重量％ 丨 1 r I 黏度η m P a s i 剪切率20[1./ s]丨剪句 i m io〇[i ;s] 丨 0.5 i 231.6 j 57.16 ! 1.0 1 573.5 i i 13 8.2 ! 1.5 ; 1226.0 1 i 291.5 ! 16 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X 297公釐） 482678 A7 B7 五、發明説明（/ Y ) 由愈高剪切率處較低之簡切黏度結果證實測視[t合物 之僞塑性流體行爲。爲了達到最終產物（如化妝品配方 之良好儲存安定性，可利用本發明β-i，3-硬聚葡糖之良好 增稠特性。在此方面，該新穎β-l，3-硬聚葡糖於低剪切率 下之流變行爲適切的。亦可藉由低剪切率下得到高黏度値 之黏度發展而達成高儲存安定性。在需要磨擦皮膚之化妝 品材料例中，會發生高達iOOO/s之剪切率。爲了達成材料 於皮膚上分佈之最大均勻度，該材料之黏度於此一高剪切 率下必須要低。表中之結果淸楚證實，根據本發明之新穎 β-l，3-硬聚葡糖滿足這些需求。 實例3 .從以下成分調配一按摩霜： 2 %蜂蠛 45%液態鏈烷烴 3%鯨蠛醇 2.5 %果膠 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 46.5%去離子水 0.2%對羥基苯甲酸甲酯 0.5%實例1之β-l，3-硬聚葡糖 0.3%香料 均爲以乳霜總重爲基礎之重量百分比。 將杲膠、對羥基苯甲酸甲酯與聚葡糖於80°C下均相溶 解於去離子水中以製得第一溶液。加熱蜂蠟、液態鏈烷烴 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X 297公釐） 482678 A7 B7 五、發明説明（d) 與鯨鱲醇混合物至8(^C，使之融化而製得第二溶液，於均 相混台機中攪拌第一溶液的同時，將第二溶液加入其中· 並使之分散於其中，一旦溫度降至30°C即停止攪拌。如此 製得之水含油形式之按摩霜具有良好的質地與光澤，且於 2-60°C下6個月內很安定： 實例4 從以下成分調配一水性眼科製劑： img實例1之β，1，3-硬聚葡糖 1 mg ·二氯苯胺苯乙酸納（Sodium Diclofenac) 5〇mg助溶劑（克瑞摩佛EL: Cremophor EL) 6mg眼藥緩衝液(三羥甲基胺基甲烷） .19mg硼酸 〇4mg眼藥防腐劑（乙汞硫代水楊酸鈉） 注射用之水達1.00ml 實例5 . 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 自含10%重量硬脂酸乾油酯與0,05%或0.50%重量實 例1之β-l，3-硬聚葡糖之水性懸浮液調配治療皮膚粗糙之 水性乳液。 皮膚粗糙度之測定係根據德國標準DIN 4768ff而進行 。皮膚粗糙度藉由取矽酮爲基礎之皮膚凹痕，並利用電腦 輔助外形測定器量測該等凹痕的表面外形。從多個測良點( 每平方毫米1〇〇個點)計算皮膚粗糙度。自願受試者的數目 爲10名。在施用測試乳液前與施用測試乳液後8小時均進 18 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X 297公釐） 482678 A7 B7 五、發明説明（ί]) 行皮膚粗糙度之測定。利用前臂作爲皮膚測試區域，_了 比較，利闬空白對照劑進行控制實驗組： 所得結果顯示，就包含0.05%重量之實例[之β-1 · 3-硬聚葡糖之乳液而言，皮膚粗糙度降低32%，相對於未經處 理之皮膚而言），而就包含0.50%重量之實例1之(3-1，3-硬 聚葡糖之乳液而言，皮膚粗糙度降低35%。該控制實驗組 顯示僅22%的皮膚粗糙度降低(相對於未經處理之皮膚而言 實例6 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 溶於水中實例i之β-l，3-硬聚葡糖(0]%或0.5%)之皮 膚溼潤活性在限定氣候條伴(22°C，60%相對溼度）下進行 調查。將該等測試溶液施用至前臂。在施用測試溶液前、 施用1小時後、以及施用8小時後測定皮膚溼潤度的等級 。該等測定係利用一角質計(Corneometer:型號CM820-德 國Courage & Khazuka公司）進行。計算相對於未經處理之. 皮膚而言，在經處理皮膚範圍內皮膚溼潤度的增加百分比 。自願受試者的數目爲i〇名。 皮膚溼潤度的增加，在施用實例1之β-i，3-硬聚葡糖 之0.1%水溶液1小時後，增加27%，在施用實例1之β-i ，3-硬聚葡糖之0.5%水溶液1小時後，增加29%。皮膚溼 潤度的增加，在施用實例1之β-l，3-硬聚葡糖之0.1%水溶 液8小時後，增加17%，在施用實例1之β-l，3-硬聚葡糖 之0.5%水溶液8小時後，增加22%。 19 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) Α4規格（210Χ 297公釐） 482678 一 Α7 Β7 五、發明説明（在） 這些結果證明實例1之β-i.，3-硬聚葡糖表現出強a立 即的皮膚溼潤度增加。在施甩測試產物8小時後，0.5%溶 液顯示出優異的水留滯皮膚上的持久性。此持久表現優於 使用0.1%玻尿酸或0.25%膠原作爲活性或分所得之比較結 實例7 檢視溶於水中之實例1之β-l，3_硬聚葡糖之抗炎活性 〇 在本硏究開始前三天，禁止五位自願受試者在測試皮 膚區域上施用化妝品。利用暴露至UV燈下（Ultm-Vitalux 燈：Osram)在該等自願受試者的背上誘發UV紅斑。所施 加之能量對應於1.5倍最小紅斑劑量(MED)，其於誘發紅斑 前針對每一自願受試者作決定。在輻射暴露6小時後立即 施用測試產品。在接下來的五天期間，每天以該測試產物 治療紅斑雨次。於首次施用該測試產品72小時與120小時_ 後利用色度計(Minolta)測定紅斑的發紅程度。 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 在24小時後，比起未經處理之控制組紅斑而言，紅色 減退17%; 72小時後，23%;而120小時後，31%。這些 結果類似於，並確實於120小時後優於使用已知抗炎藥劑 D-泛醇（D-panthenol，2.0%乳液型式）或蘆薈（10%之1:1膠 質）之比較試驗中所得之結果。當使用溶於水中之0.5%實 例1之β-l，3-硬聚葡糖所製之乳液時，比起未經處理之控 制組紅斑而言，120小時後紅色減退40%，其遠優於使用 20 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) Α4規格（210Χ 297公釐） 482678 一 A7 B7 五、發明説明（d ) D-泛醇（D_panthenol，2.0%乳液型式）或蘆薈（10%之I:丨膠 質）所觀測到之値。 實例8:漱口水西R方 0.03-0. 1 % b. vv. —^ 二厂、 ——'氧/ 主V裏)^ λΓ 10-20 % b. w. 醇（食品級乙議 Ρ). 5-10%b.w. 首油 l-2%b.w. 界面活性劑， 如聚山梨酸酯20/氧聚费? (Poloxymer) 407/月桂基硫酸鈉 0.02-0.0 5%b. w. 糖精鈉 0-0.05%b.w. 氟化鈉 q.s. 香料 q. s . 色劑 ad 100% 去離子水 調整至pH5-7 1 -5%b. w. 實例1之β -1， 3 -硬聚薄糖 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 製備方法:將二氯苯氯氯酚溶於醇中，然後加入界面活 性劑成爲溶液。將甘油及約20%的水加至此溶液中。接著 加入所有其它成分，攪拌直至均相爲止。然後加水至100% 。接著調整pH値並攪拌，直到該溶液變澄淸。 若二氯苯氧氯酚無法完全溶解，必須增加醇及/或界面 活性劑的含量。 實例9:牙膏西R方 21 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X29?公釐） 482678 五、發明説明（ 成分 0.1-0.3% 0.1 -1.0 0 〇 1.0 0 〇 b. w. 1 0 - 2 0 0 〇 b. w, 15-20% 0.1-0.2%b·、 1.0- 1.5%b.^ 1.0- 2.0%b.' 0. l-0.5%b.、 q. s. ad 100% 5-1 0%b. w. 增甜劑，如糖精 香料、如綠薄荷 早柄 界面活性劑，如 A7 B7 抗齒艱炎/抗菌芯二氯云氧氯驗 抗蛀劑、恕氟化納、s氨P酸鈉 膠化劑.芯羧基字基纖維素、羥基乙基纖推 素或黃原膠， 稀釋劑、如甘丨白、山梨塘醇70%、或丙二醇 硏磨劑，釦碳酸鈣、水合矽氧、磷酸二鈣二 水合韩、或鋁氧 ‘ 榻椒薄荷、薄荷醇、或香 桂基硫酸鈉、月佳薩基 (sacrosinate)酸_、或月桂基硫代乙酸鈉 防腐劑、如對羥基苯Φ酸酯 色劑 水 實例1之β-l，3-硬聚葡糖 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 22 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) Α4規格（210X 297公釐）

Claims (1)

1. 482678

   經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 1. 一種化妝品組成物，其包括： A) —種化妝品上可接受的載體;以及 B) 以總組成物之重量爲準，〇.〇5至3.0%重量之β-l， 3-硬聚葡糖，其具有三維交聯之三螺旋結構，並具有1 X 106至12 X 10ό之平均分子量，其係在微好氧條件下於一培 養介質中培養植物病原性不完全菌整齊小核菌 ATCC 15205 而獲得。 2. 根據申請專利範圍第1項之組成物，其中該組成物 係組成一洗髮精及/或潤髮組成物。 3. 根據申請專利範圍第1項之組成物，其中該組成物 係一護膚組成物。 4. 根據申請專利範圍第3項之組成物，其中該護膚組 成物係調配爲一含水乳液、一油含水或水含油乳劑、一油 或油-醇乳液、一陰離子或非離子親兩性脂質之囊泡分散物’ 、一含水、含水-醇、醇或油-醇膠體、一固態條或一氣溶 膠。 5·根據申請專利範圍第4項之組成物，其中在一油含 水或水含油乳劑中，該化妝品上可接受的載體A)包括5到 50%之油相，以及47到94.95%之水，各以該組成物之總 重量爲準。 6·根據申請專利範圍第1項之組成物，其中該組成物 組成一抗炎護膚製劑。 7.根據申請專利範圍第6項之組成物，其中該抗炎護 膚製劑係一日曬後護膚製劑。 1 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁)

   本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） 482678 A8 § D8 六、申請專利範圍 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 8. 根據申請專利範圍第1項之組成物，其中該組成物 組成包括一載體之一口腔保護製劑;一黏膜潤滑配方；或一 眼藥製劑。 9. 一種製造β-1，3-硬聚葡糖化合物之方法，其包括 在微好氧條件下，於一培養介質中，培養該植物病原性不 完全菌綱之整齊小核菌ATCC 15205。 10. 根據申請專利範圍第9項之方法，其中該所用之 基礎培養介質包括一碳源;一氮源;一磷酸鹽源;氯化鉀;七水 合硫酸鎂;七水合硫酸鐵;以及酵母萃出物。 11. 根據申請專利範圍第10項之方法，其中該氮源爲 硝酸鈉;而該磷酸鹽源爲三水合磷酸氫二鉀。 12. 根據申請專利範圍第9項之方法，其中該碳源爲 葡萄糖。 13. 根據申請專利範圍第9項之方法，其中於該基礎 介質中加入檸檬酸水合物;硫胺素或其一礦物酸鹽;以及一 鋅鹽。 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 14. 根據申請專利範圍第13項之方法，其中加入該基 礎介質中之檸檬酸水合物量在0.2至1.5 gM之範圍內;硫胺 素或其礦物酸鹽之量在0.3至30 mg/1之範圍內;以及鋅鹽 之量在0.3至30 rngd之範圍內。 15. 根據申請專利範圍第9項之方法，其中該方法係 利用一特定之氧攝入率（氧攝入率係以生物團量爲基準） 進行操作，其範圍在〇.〇1至008 L1內。 16. 根據申請專利範圍第9項之方法，其中利用一限 2 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） 482678 A8 B8 C8 D8 六、申請專利範圍 氮預培養物作爲一接種物。 17.根據申請專利範圍第9項之方法，其中該方法於 15至40°C攪拌下進行;然後將培養液與細胞團分離;且單離 出如此得致之β-l，3-硬聚葡糖產物。 n n I ·ϋ ϋ n n m n 0 a— n n ϋ an n ϋ J M · an ·1 ϋ n ϋ n el I (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐）