TW414801B - Crystalline forms of pyrrolidine derivatives and crystalline solvated forms thereof - Google Patents

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經濟部中央橾串局負工消費合作社印製 414801 Α7 Β7 五、發明説明（1 ) 本發明係闞於吡咯啶衍生物，且更特定言之偽為由式I 所顯示之化合物m-i-[(s_)-2-u-甲氧基笨羧醯胺基） -3-甲基丁醮基卜間-[(SL)-2-甲基-1-(三氟乙醃基）丙基 吡咯啶-2-羧醢胺（詳述於後文）

及具有由符號X與ί*所確認，於對掌中心之S姐態，及其 溶劑合物•該化合物為一種人類白血球彈性蛋白酶（HLE) 之抑制繭•此豳亦稱為人類晴中性白血球禪性蛋白_ (HKE)，其係有價值的，例如作為在藥理學上、診斷上及 相鼷研究上之研究工具*及在哺乳動物中與HLE有期嫌疾 病之治療上使用。例如HLE已經有原因地與下述病症之發 病有闢除，急性呼吸困難戡候簇（ARDS)、風湄性闞節炎、 動瞞粥瘤硬化、肺氣腫及其他炎性病症*包括Μ壜加及異 常之氣道分泌物為特微之氣道炎性疾病，例如急性與慢性 支氣管炎及膽囊期維變性。而且* HLE已經有原因地牽連 某些血管疾病及相關情況（及其療法）·其中係涉及或牽連 晴中性白血球之參與，例如在伴隨著急性非-淋巴球白血 病之出血中，以及在伴陳著例如心肌絪血之再灌注傷窖中 ，及伴随著冠吠動脈疾病之相U狀況，例如狡痛與梗寒形 成；曬血管鳐血*例如暫時絕血性發作與猝發*末梢閉塞 -4- 本紙張尺度適用中國圏家樣準（CNS ) Α4規格（210X297公釐> ^1Τ.^ (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 414801 A7 ____B7 五、發明説明（2 ) 血管疾病，例如間敗性跛行與臨界肢絕血，靜脈櫬能不全 ，例如靜脈高血S、曲張靜脈及靜賑潢瘍，Μ及損害之再 灌注吠態，例如伴阐著改造血管手術、血栓溶解及血管造 形術者。本發明亦關於治療一或多種此等疾病吠況之方法 ，及此化合物（或其溶劑合物）在使用於一或多種該狀況之 藥劑製造上之用途。本發明係進一步關於含有此化合物或 其溶劑合物作為活性成份之Κ藥姐合物·Κ及製造此化合 物（或其溶劑合物）之方法，可用於該方法中之新_中間物 及製備該中間物之方法。 由於HLE之顬著角色，故在近年來已經有相當可觀之研 究努力，針對HLE抑制劑之發展。於美國専利4,910,190 中係捐示一系列结構上相閫之肽釀基三氟甲烷衍生物，其 係為HLE抑制爾。吾人目前已發現上文所稱之转定％咯 瘦衍生物•係為一種H LE之有效抑制劑•其具有一項令人 設之優點，在於其為一種具有结晶形式之軍一非對映立 鵂異構物。埴提供本發明之基礎。在使用一種HLE抑制劑 時·若其不能被單離成结晶形式，以作為用K治摒上文所 、-· 栴疾病吠況之藥麵或藥劑配方•則會產生顯著問題，例如 於製造化合物或ffi方Μ達管理上認可所需要之純度程度及 均勻性時。因此，一般萵度期望發現一種析_结晶性H LE 抑制劑，且甚至更期望獲得一種軍一非對映立《異構物之 新穎结晶性HLE抑制劑。本發明化合物之另一項優點，係 為巳烴發琨當Μ 口眼方式投藥時•其係具有HLE抑制活性 。在本發明之前，上文所指稱之特定吡咯啶衍生物*並未 -5- 本纸張尺度適用中國國家標隼（CNS ) A4規格（210X297公釐） . I . , I ^ n 1 n 妹 (請先鬩讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部中央橾牟局貝工消費合作社印装 414801 A7 B7 五、發明説明（3 ) 在先前被製備過|因此並不明確地知道其物理、化學、或 藥理學性霣。 根據本發明，其係提供化合物（5>1-[(^3-2-(4-甲氧基 苯梭醣胺基）-3-甲基丁鏞基]-!L-[(SJ-2-甲基-1-(三氟乙 醣基）丙基卜吡咯啶-2-羧醣胺或其溶劑合物。 本發明之化合物，亦可Μ式la表示

CF, Η 〇 1< (請先W讀背面之注意事項再填寫本頁) •裝· 經濟部中央樣準局負工消资合作社印装 ί其中加粗埭係表示一個突出紙平面前方之鍵结），其係為 一種孽一非對映立體異構物，後文稱為”式I之SSS非對映 立體異構物"或”SSS非對映立體異媾物” •以將其輿在式I 中藉X及ίί所指示，於對掌中心處具有不同姐態之其他可 能的非對映立體異構物作區別，例如在式I中*於對掌中 心棟記X之非對映立體異構物係有S姐態*而在對箪中心 標記it者係為R構形（後文稱為”式I之SSR非對映立艚異 構物”或” S S R非對映立體異構物”）。 式I之SSS非對映立艚異構物係為一種结晶性固《，其 係以實W上或基本上不含溶爾之形式存在（後文稱為"無水 "形式），或作成溶劑化之形式。此溶麵化形式可為例如水 合形式，其可K一種三氟嗣官能基之孿-二酵存在•意即 成為式lb化合物 6- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4说格（210X297公釐} 、^1 Μ 414801 Α7 Β7 五、發明説明（4 ) Η

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b X 經濟部t央樣準局貝工消費含作社印製 及/或一種捿入水分子作為晶格一部份之形式。例如，此 攣-二酵π本身可進一步被水合。可獲得之结晶性SSS非 對映立«異構物*其中無水形式對溶劑化（例如經水合）形 式之比例，係為例如約1:1或較大，例如4:1或較大。當 本發明之化合物係為例如實質上或基本上不含溶劑之單離 形式時，其無水形式對溶劑化(例如纆水合）形式之比例， 係為例如約19:1或更佳，意即9 5%或更多重里比之化合物 係里其無水形式。 應明瞭的是，極難以獲得一種完全不含其他可能的非對 映異構物形式之單一非對映立艄異構物之化合物，待別是 一種具有三僩對掌中心之化合物。因而*本發明係包括一 種式I之SSS非對映立體異構物之结晶形式，或其溶劑合 物，其含有在式I中MX及#所表示，在其對掌中心處具 有不同姐態之其他可能的非對映立體異構物。已發規式I 之结晶性SSS非對映立體異構物或其溶劑合物，可以含有 2 5%或較少之式I之SSR非對映立體舆構物之形式獲得， 意即此结晶性物霣具有SSS: SSR形式之比例為約3:1或更 大。因此，本發明你包括具有至少7 5% SSS非對映立«興 構物含Μ之式I化合物之結晶形式。例如•可獏得具有 ^I 0 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 本紙張尺度適用中國國家搮準（CNS ) Λ4现格（210 X 297公釐） 經濟部中失橾準局員工消費合作社印装

414801 A7 _B7_五、發明説明（5 ) SSS: SSR之比例為約4:1 (或較大），及無水：水合形式之 比例為約4:1 (或較大）之结晶性物質。此式I之结晶性 SSS非對映立體異構物或其港劑合物，較佳涤實質上或基 本上為鈍的*意即其含有低於5 %之一或多種其他可能的 非對映立體異辫物*例如其含有低於5 %之式I之SSR非 對映立體異構物*較佳偽低於3 %之式I之SSR非對映立 體異構物*且更佳為低於2 %之式I之SSR非對映立«異 構物。 式I之SSS非對映立體異構物，較佳係里其無水彤式， 意即實質上或基本上不含其溶劑化（例如經水合）形式。於 此形式中，SSS非對映立體異構物具有之有利性質是其係 為非-吸水性。其亦具有之有利性霣是，於其固態下•其 具有良好之差向立體異構安定性。因此，式I之SSS非對 映立體異構物之一種特佳形式•係為一種含有低於2 %之 式ΐ之SSR非對觖立體異構物•且於無水形式中為9 5%或 更大之形式。 式I之SSS非對映立腾異構物之熔點，一般係依其鈍度 而定，且可藉此項技蘸中所热知之習用程序测定，例如藉 示差掃描卡計法（DSC)。典型上*式I之SSS非對映立體 異構物，當其實質上或基本上圼無水形式•且實質上或基 本上不含SSR非對映立體異構物時，其所具有之熔點，係 在147-lfilt範園内，例如約148 - 150 t： *特別是妁147-1 49 t：(加热速率5T! /分鐘）。但是，當其以無水與水合形 式之大的1:】琨合物存在，且侏實霄上或基本上不含SSR {請先鬩讀背面之注意事項再填寫本頁) 本紙伕尺度適用中國國家標準{ CNS ) A4規格（210 X297公釐） 經濟部中央樣率局員工消资合作社印楚 414801 A7 B7 五、發明説明（6) 非對映立體異構物時，其可Μ具有典型上熔點為約116-m f之形式播得。 式I之SSS非對映立艚異構物*當其實霣上或基本上呈 無水形式且實霣上或基本上不含SSR非對映立體異構物時 ’涤具有一種X-射線粉末鏡射圖樣，其包括特定峰在約 2Θ=8.95> 11.17* 11.47- 13.86- 15.49- 17.86* 18 _ 22，19 · 24，21 .58及 21·92。。 式I之SSS非對映立體異構物，當其Κ具有熔點約 Π6-Π71之無水與水合形式之實質上1:1混合物存在時， 係具有一種X-射線粉末繞射画樣，其包括特定峰在約20 =6.20， 9.81， 10.29， 12.33， 12.44， 14.22及 17.92° 。 此外，該式I之SSS非對映立體異構物*可Μ一種结晶 性水合形式獲得，其偽實霣上或基本上不含SSR非對映立 體異構物，且其藉示差揷描卡計法澜定（加热速率2 Ό / 分鏟1，係具有圾熱事件開始於約9卜921：下（具有一 «在 約99-1001C下之峰），接著為放热事件開始於約109-100 它下ί具有一偭在約下之峰），接著為另一俚吸 熱事件開始於約148-149'〇下（具有一涠在約150-151<〇下 之峰值）。此水合形式具有一種X-射嫌粉末嫌射圓樣，包 括特定峰在約 2Θ =6.62，10.43，13.30，16.17，19.51， 21 . 37及22. 80β 。其DSC數據 > 與热重量分析（TGA)數據 及1aP NMR光繒數據，一起表示此形式换實質上為其孿-二酵（式lb)之簞水合物。應明瞭的是•上文所引用之開始 及峰之數值•可根據所採用之撺描速度稍微改變。例如在 -9- 本紙伕尺度適用中國國家梯準（CNS ) Α4規格（2Ι〇Χ297公釐） ^裝 I n H Μ (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 414801 A7 B7 經濟部中央標準局貝工消費合作社印製 五、發明説明（7 ) 5 τη /分鑌之掃描速度下所進行之類似0SC掃描，顯示第 一辋吸熱車件之開始悌在約95-96 t下（具有一俚在 1 0 5 -〗〇 6笱下之峰）。 X-射媒粉末繞射光譜係使用Scintas XDS-2000 X-射線 鐃射計進行測定，其具有一個EC&G固態光子偵檢器，藉 Microvax霉腦所裸作之GLP系列（緒），及使用由Scintag 公司（Sunnydale, California, USA)所提供之编射苷理系 铳軟賴。所使用之X-射線管，係為一種於450及40 m A下具 有波長為1.5 40 6/\之（：1^-〇1。接收细域係設定為2與4毫 米，及發散细链係設定為0.5與0.2奄米，相關於入射光 束之路徑。此光譜係以達鑕掃描棋式，使用0.02之切光器 增量獲得。將各試樣暴露於每分鏟1度2-Θ下（進行時間 38分鐘），並從2至40度2-β進行收集，而產生對於此範 圃強度之間鉅軌跡。 為進行繞射分析，將試樣包裝在圃形鋁合金試樣盤中， 該盤具有直徑25奄米及深度2毫米。將粉末試樣置於盤中 Μ致使其霣超遇該淺盤所存在之體欖•接著使用玻璃製顗 微鏑載玻Η抹平至淺盤》緣。使用矽類型-NBS 640b作為 外檷準。 式I之SSS非對映立《異構物典型試樣之X-射線粉末燒 射光譜，當其實質上或基本上不含溶_時，當其為無水與 水合形式之大約1:1涫合物時*及當其呈水合（攣-二酵 隳水合物）形式時，你艚別顧示於後文顯1、2及3中。 紅外光繒_係於下述情況下對式I之SSS非對映立艚興 -10- 本紙張尺度適用中國國家揉準（CNS ) A4規格（210X297公釐） I— I I — n n . II^1 n —I ^ n I n I n Μ (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 414801 A7 經濟部中央標率局肩工消费合作杜印袈 ______B7_五、發明説明（8 ) 構物獲得，當其為實質上或基本上不含溶劑時，當其為無 水與水合形式之大約混合物時，及當其為式Ib之軍水 合物時。此魟外光_醣係藉此項技藝中所熟知之溶劑鑄膜 抟術*自試樣在薷（例如ZnSe或KBr>製視窗上之乙腈鑲膜 ，鶊直接透射而得。此紅外光譜圈係在波數範圃40 00至 400公分-1下測定。 式I之SSS非對映立體異檐物試樣之紅外線光譜，當其 為實質上或基本上不含溶劑時，係顯示於圈4中。圖4之 光譜圖係包括在約 2968， 1761， 1629* 1607* 1533» 1503， 1443 * 1259， 1209 · 1178， 1158， 1032 * 845 及 767公分-1下之尖峰。式I之SSS非對映立臑異嫌物試樣 之紅外埭光譜，當其為無水與水合形式之大約1:1混合物 時，以及在其為式lb之攀-二酵單水合物之試漾時之情況 下*並未因溶劑鐮膜技術及所採用溶麵之本性而與圜4有 顯著不同。 鼴明瞭的是· X -射埭粉末繞射麵樣之20值及紅外光譜 鼸之波長•可因機器不同而稍微改變，故所引述之數值不 得被解釋為絕對的。 _明瞭的是，式lb攣-二《之羥基之氬原子•係為酸性 *因此·此種化合物可使用習用程序，形成結晶性藥學上 可接受之體，例如使用可獲得生理學上可接受之限雕子之 餘，例如齣金屬（例如納或鉀）、鹹土金鼷或有櫬胺釀。因 此·本發明係包抦式lb孿-二酵之结基性藥學上可接受之 薷或其水合物。 I¢IT------Μ (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) -11 - 本紙張尺度適用中國國家橾準（CNS } A4規格（210X297公釐） 經濟部中央梯準局員工消費合作杜印装 414801 A7 ___87 五、發明説明（9 ) 式ΐ之SSS非對映立艚異構物*或其溶劑合物，可賴下 述方法轉得|其係為本發明之進一步個別方面。 含有低於25% SSR非對映立體異構物之結晶性SSS非對 映立體異構物，可得自SSS與SSR非對映立體異構物之非 结晶性（非晶質）非對映異構物潖合物，此混合物含有大約 等最之SSS與SSR非對映立體異構物（意即約1:1至約 3:2比例之SSS:SSR)，其方式是自一種遴當非極性溶劑 结晶，例如乙醚、二-正-丙基醚或二-正-丁基醚•或溶蘭 之混合物，例如甲基第三-丁基醚與己烷之混合物*或較 佳為醣酸乙酸與己烷之混合物。為起始結晶作用，需要使 用結晶性SSS非對映立體異溝物作為晶種。一種較佳之此 稱结晶方法，係包括藉蒸發或蒸嫌，使SSS與SSR非對映 立體異構物之非结晶性非對映異構物混合物於_酸乙_中 之溶液之體積降低，添加己烷至該熱溶液中，並保持透明 溶液，使用實質上純SSS非對映立體異構物作為晶種，並 使其镘慢冷卻。此方法之一項修正，係包括在一種對該醋 酸乙賄而言為較低沸點之溶劑（例如甲基第三-丁基_)中 使用SSS輿SSR非對映立艚異構物之非結晶性非對映異構 物涓合物之溶液•例如其可直接得自製備該非结晶性混合 物（討論於下文）之處理上，並以此溶劑替換醱酸乙_ *其 方式是添加_釀乙IS，及在大氣壓下，藉蒸發或蒸餾以澹 縮此溶液，然後再添加己烷。 視所使用之溶謂及Μ於结晶所使用之精確條件而定•可 在*初將此產物翬雕成無水與水合非對映立β興媾物之港 -12- 本紙伕尺度適用中國國家標孳{ CNS ) Α4規格（210 X 297公釐） (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁} -裝_ 訂 Μ 經濟部中央橾隼局貝工消費合作社印製 414801 A7 _ _B7_ 五、發明説明) 合物，例如具有無水：水合形式之比例為約1:1或較大。 例如•可獲得具有無水：水合形式之比例為約4:1之结晶 性產物。 式I之苜宵上或基本上純结晶性SSS非對映立體異構物 ，係實質上或基本上圼無水形式*例如含有約5 %或較少 之水合形式，可藉由含有SSR非對映立體異構物之结晶性 SSS非對映異構物之重複再结晶而得。通常係採用一種會 輿水形成共沸混合物之非極性溶劑，供此項目的使用。這 將有肋於自此条铳中移除水，此時係將含有SSR非對映立 髑異構物之式ΐ之SSS非對映立體異構物，藉由於结晶用 溶劑中加熱或煮沸而溶解，其中較佳係在添加第二種溶劑 (若需要時）之前*將溶液澹縮，並允許结晶作用發生。甲 笨為一種供此項目的使用之特別適合溶粼*或_酸乙酯與 己烷之琨合物，其中係在從醋酸乙酯溶液中共沸移除水之 後，添加己烷。實質上或基本上純的且實質上或基本上呈 無水形式之结晶性SSS非對映立體異構物，亦可接著自替 代之溶_再结晶*包括正-釀酸丁酸異丙醅、 U2-二甲氧基乙烷、2,2-二甲氧基丙烷、第三-丁酵、第 三-戍*甲某醚，及二氯甲烷與己烷、甲基乙基酮與己烷 、Ν,Ν -二甲基羧醣胺與甲基第三-丁基酵、二丙基醚輿乙 瞵、1,4-二氣六_與己烷、甲基乙基酮輿異己烷、四Μ呋 喃輿環己烷、醣酸乙酯與異己烷、四«呋哺與己烷、四氫 呋_與異己烷、乙醚輿明酸乙酯、及第三-戊基甲基醚與 乙W之港合物。從任何上述溶两之單獨結晶作用，已足Μ -13- 本紙張尺度適用中國圃家橾窣（CNS ) A4規格{ 210X 297公釐） t------ΐτ------^ (請先聞讀背面之注意事項再填寫本頁) 414801 A7 B7 _ '發明説明（11) 胃得含有5 %或較少SSR非對映立體異構物之SSS非對映 構物。在所有再结晶作用中·藉接種起始結晶作用 係為較佳的。 或者，實質上或基本上純水合形式（其敝據顧示偽為一 -二酵軍水合物）可使用丙酮與水之混合物，或第三 -丁酵與水之混合物作為溶劑，藉由含有SSR非對映立體 _構物之结晶性SSS非對映立體異構物之重複再结晶而得 〇 常進行上文所指之結晶或再结晶作用時，溶劑體積（以 毫升表示）對含有SSS非對映立體異構物之SSS非對映立 賴異檎物電鼍（M克表示）之比例，較佳係在例如2:1至 Hi之範圃内，且可合宜地為約& :1至ι〇··ι。 如上文所指之SSS與SSR非對映立體異嫌物之非-结晶 性（非晶質〉非對映異構物混合物，可按美_專利 4,910,190之苜例20中所述之方法，或賴圚式1中所示之 頬似方法獲得。 ---------1 — (請先聞讀背面之注意事項再填寫本I) 經濟部中央橾準局員工消費合作社印製 穎酸基化程法析< 新胺甲氧用方此用 將脯-用習此。作 搽L-T 習之。酵罐 中S-基之應中基保 其11胺物反ο 胺去 ，U3-產化19該及 法U與酵氧o’入合 方U ， 此及91摻偶 _ U面行合4,中、 新-方進偶利段用 之-L1 著似專陏作 示S)另接類覼後嫌 所11之，於美稍保 中 W明合Μ於在去 2 + 發偶。及許性 式Η本酵酮中允擇 HW為戊應文其S 用"係2-相本於用 使，其»-其於在使 可f4,£«得述點可 ,N-!i)_ 而描優物 者物.1，係項W 或間W.1用-一中 中(37作序之潁 本紙張尺度適用中國囷家標牟（CNS ) A4規格（210 X 297公釐） 經濟部中央橾率局負工消费合作社印裝 414801 at _B7_ 五、發明説明（12 ) _式2 ，步驟U)-(c))之習用步驟而獲得•如在後文程 序1中所示者。或者，將R.-第三-丁氧基羰基纈胺酸與脯 胺_苄基_偁合，例如，使用1L-羥基笨并三唑及二環己基 碳化二亞胺，於二氛甲烷中•在0 t：下，接著使用三«醣 酸移除第三-丁氧基羰基保護基•而得L-異纈草胺酸基 _丨/鋪胺酸苄基_。然後將其與例如氣化大茴香甲釀•於 二氛甲烷中•在約環境溫度下，於三乙胺存在下進行偶合 *然後藕篚解移除該苄基保護基。使用此等方法所獲得之 非對映異構物棍合物，係具有SSS: SSR比例為約1:1至 3:2 ，&僅被單離成非-結晶形式，钶如泡床物或油。 或者，一種W於製造此新潁中間物1L- (4-甲氧基笨甲釀 萆）-L-異纈箄胺藹基-L-脯胺酸之特別有利方法，其偽為 本發明之另一方面，其特激在於下列步驟： Π) L-異纈草胺鼸基-L-脯胺酸（或其»)與三（1-4C)烷基 鹵基矽烷（例如，三甲基氛矽烷）或雙（三（1-4C)烷基矽烷 基）乙酿胺ί例如•雙（三甲基矽烷基）乙醢胺）之反應，而 得L-異纈草胺醣基-L-脯胺酸三（1-4C)皖基矽烷基_ (例 如L-異纈箄胺酸基-L-脯胺酸三甲基矽烷基W);接著 (!丨）此1-異纈草胺醣基-丨.-脯胺酸三（1-4〇烷基矽烷基酯 與一種4-甲氣笨甲酸之活化衍生物（例如，一種氯化醯， 臀如氮化4-甲氧苯甲醯（亦稱為氛化大藺香甲醢）或一播酐 )之反應，而得Η_-(4-甲氧苯甲》基）-L-異钃箄胺»*-脯除酸三（1-4C)烷基矽烷基ft ;接著 ίΐΠ)該三（1-4C)烷基矽烷基保謂基之移除。 -1 5 一 本紙張尺度適用中國國家榡準（CNS ) Α4現格（210X 297公釐） ---------裝------ΪΤ------Μ (請先鬩讀背面之注意事項再填寫本頁) 414801 經濟部中央標隼局貝工消費合作社印製 A7 B7 五、發明説明（15 ) 步皤（i)可合宜地在逋當侑性溶劑或稀釋劑中進行，例 如醋醆乙醋、醚性溶挪或稀釋_(例如四氬呋喃或1,4-二 氣陸两）*或烴溶繭*例如甲笨，於有機驗存在下•例如 ，三乙胺，吡啶或較佳為IL-甲基嗎福啉，或無機，例如 納或鉀之碳酸醱。此反應係於溫度範圍例如-10至50TC · a較佳為0至30 υ下進行。每當量L-異纈草胺豔基-L-脯 胺酸*較佳係使用約二當量鐮（或若使用一種鹽，例如 1,-異顯箄胺醣基-L-脯胺酸鹽酸鹽，則使用3當量鐮> 。 每當最卜異纈箪胺醢基-L- _胺酸，較佳係使用約2當量 或更多之矽烷基化劑。 步嫌係在無水條件下，使用習用方法進行。例如使 闬氡化4 -甲氣基苯甲醣•及採用類似步驟（i)之條件。於 此情況中，係使用約一當量氛化鼸對一當量驗（或稍微過 晕）。步味Π)之產物•較佳係未绠軍離·但當場«由添 加其他當最與步驟（Π所使用者相同之鐮進行反應，接著 添加一當量氛化_。 步驟iiii)係使用醑於矽烷基保護基之去保護作用之習 闬程序進行，例如於含水條件下藉水解作用進行。矽烷基 保諸基可合宜地在步驟（ii)之處理程序期間移除。應明瞭 的是*其他習用矽烷基化劑，可使用於步嫌（i)中，K形 成L-異钃草胺醣基-L-脯胺酸之相應矽烷基酸，然後可將 其使用於步明（ii)中，及接著按步嫌（ΠΠ移除該矽烷基 保g«萆。 為《得SSS明SSI?非對映立體異構物之非蛣晶性（非晶 -16- 本紙張尺度適用中國國家標隼（〇奶）人4規格（210乂297公釐） (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) -裝· 訂- 經濟部中夬標準局員工消費合作杜印製 414801 A7 B7 五、發明説明（ 宵）非對映異嫌物琨合物，w作為製備本發明化合物之起 姶物筲使用，可在步软（i) - (ii㈠之後進行1 “ V)R_ (4-甲氣苯甲釀基）-L-異纈草胺醯基-L-脯胺酸與 3-肢萆-4 -甲基- 〗，Ί,卜三氟_2 -戊酵之反應，而得 (SJ _〗-「（SJ -2- (4-甲氧基苯羧醣胺基）-3-甲基丁醚基]- 間-「2 -甲箪-1-(2,2,2-三®-：l -羥基乙基）丙基]吡咯啶 -2-羧醻胺；接著 U) (S_)-卜「（&)- 2_( 4-甲氧基苯羧醢胺基）-3-甲基丁釀基 ](L-[2 -甲基-1-(2 ,2,2 -三氟-1-羥基乙基）丙基]吡咯啶 -2-羧醯胺之氧化反應*相應於β(式2中之步驟（d)與（e> 〇 步嫌Πν)係使用闥於使羧酸偶合至胺Μ形成醣胺鐽结之 習用方法進行，例如在美_専利4,910,190中所描述者。 特別合逋者*係使用一種氛甲酸酯，例如氣甲酸烷_ (譬 如氰甲酸異丁賄），於一種三级胺（譬如三乙胺或較佳為 Ν-甲基嗎福啉）存在下，在«當溶劑或稀釋麵中，例如一 種經氛化之溶劑或稀釋劑·臀如二氛甲烷* 一種醚性溶劑 或稀釋繭，譬如四氫呋喃或甲基第三-丁基醚，或烴溶劑 或稀釋繭蓍如甲苯。可使用溶_或稀釋劑之港合物•例如 甲苯與四埴呋哺之混合物。此反應一般係在溫度範_例如 -15Τ·至30TD · &較佳係在- lOt至20Τ；下進行。將預先形 成之混合酐逆添加至該胺基酵之漿液中，例如使用甲基第 三-T*格作為溶劑•亦可採用。 步嫌（v)係使用闞於使羥基縳化成酮基之習用氧化劑進 -17- 本紙張尺度適用中國國家標率（CNS ) A4規格（210X297公釐） ---------^------1T------^ (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部中矢埭华馬貝工消费合作；ϋ印set 414801 at _B7_ 五、發明説明（〗5 ) 行。缠當氣化劑及條件，係包括例如使用二氯化乙二醢、 二甲亞砸及三鈒胺；使用酷酐與二甲亞限：使用三氧化鉻 吡啶鞯合物，於二氛甲烷中；使用高價碘試爾，例如 1.1.1-三乙醯氧基-2,卜苯并氣跺- 3(3H)-酮與三氟乙酸， 於二氣甲烷中；使用過量二甲亞礒輿一種水溶性碳化二亞 胺*於二氛乙酸存在下；或驗性過结酸鉀水溶液。特別逋 常之氧化爾為所指出之後述兩個，尤其是«(性過錳酸钾水 溶液*例如氣氧化納與過錳酸鉀之混合物。 3-胺基-4-甲基-1 , 1, 1-三氟-2-戊酵·可按美國專利 4.910, 190中所述或按實例中所示獲得。 或者|若將（SJ-1-[ (SJ-2-U-甲氣基笨羧酸胺基>-3-甲 基丁醚基]!L-[(S)-2-甲基- l-((R3-2,2,2-三氟-1-羥基乙 某）-丙基]吡咯唯—2-羧醣胺（其可使用例如類似晒式1 或2中所示之程序獲得，但使用經解析之胺基酵2 (RJ· 3 iSJ-3-胺基-4-甲基-1,1,1-三氟-2-戊酵，而其本身則 抟美_專利4,910,190中所述或按後文實例中所述獲得） 氣化，刖可將所軍離之非晶形物質結晶而得實質上或基本 上纯结晶性SSS非對映立體興構物*其係為無水與水合形 式之溷合物（例如•若使用乙醚作為结晶之溶爾），或實霣 上為無水形式（例如，若將此物質自甲苯结晶或再结晶）。 此氧化作用可使用類似上文步》(v )中所述之條件進行 〇 闢於製造式I之SSS非對映立«異構物之一種特別有利 -18" 本紙張尺度適用中國囷家標準（CNS ) A4現格（2[〇Χ 297公釐） I---------------ir------Μ (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) L_________ 經濟部中央標準局貝工消費合作社印製 414801 at Β7 五、發明説明（16 ) 之程序，其係為本發明之又另一方面，其特激為將式I之 SSS與SSR非對映立Si異構物之非结晶性（非晶霣）非對映 辱構物混合物，輿逋當鹼一起加熱，該鹼例如三級鹼，例 如Η-Π-4Π烷基嗎福啉（例如JL-甲基嗎福啉）、1-(1-4C)烷 箪六氣吡啶（例如H -乙基六氫吡啶 >、吡啶或五異丙基胍* 於適當非榷性溶劑或稀釋劑中，例如甲基第三-丁基_、 己烷，或較佳為具有沸點在100 - 120TC範圃内之烴混合物 ί例如石油鑲份，沸點1 00-120T： ·例如” ESS0CHEM 30”（商 禰）），或其潖合物，或醵酸乙_與己烷之混合物。當使此 溶液慢慢冷卻時，SSS非對映立體異構物會自溶液中结晶 ，且會發生該留在煞或潘热溶液中之富含SSR非對映異樽 物混合物之差向興構化作用，於是產生會结晶之其他SSS 非對映立體異構物。因此，平衡係镅向有利於SSS-非對映 立餺異構物之方向。因此，此差尚異構化作用/结晶化作 闬之稈序，允許SSR非對映立贈異構物轉化成SSS非對映 立捕異構物，或使富含SSR非對映立體異構物之母液循壤 而產生其他數最之SSS非對映立體興構物。因此，此方法 具有之一項利益是·其可使用富含SSS或SSR之非對映異 構物混合物。一禰供使用於此差向異構化作用/結晶化作 闱稈序之較佳觭，偽為（L-甲基嗎福啉。 依所採用之溶劑或稀釋_而定，加熱作業一般係在例如 50-130Τ：範圃内之溫度下進行，且可合宜地在允許反應混 合物《慢冷卻及SSS非對映立體異構物發生结晶化作用之 前，·在溶_或稀釋劑之回涑粗度下開始。較佳悌在冷卻之 -19- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) Α4規格（210Χ297公釐） ----------裝------，玎------^ (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁：5 經濟部中央標準局貝工消費合作杜印袋 414801 A7 _ B7 五、發明説明（17 ) 前，將反應渴合物加熱，Μ致發生溶劑之蒸鎇。可將一棰 可棍舍之非極性溶劑或稀釋劑（其中SSS非對映立體異構 物較不可溶），添加至該經加熱之溶液中，以幫肋结晶化 作用。此項添加作業可合宜地在最初溶劑或稀釋劑正在進 行蒸餾時進行* Μ防止產物之過早結晶。或者，可將最初 之溶劑f非對映異媾物涓合物及鹼係於其中被加热）·於慢 得冷卻之前，賁質上被一棰具有較高沸點之可混合非極性 溶劑f其中SSS非對映立體異構物係較不可溶）取代。例如 ，當使用甲基第三-丁基醚作為溶劑時*可添加具有沸點 在100-1 20 10範園内之烴混合物（例如一種石油謅份•沸點 1 00 - 1 20，例如SSS0CHEM 30)，視情況添加一或多種其他 此棟溶繭I例如甲苯，並於冷卻之前，藉蒸_同時移除較 低沸點溶劑。應明瞭的是，此項修正可允許最初在實質上 非棟性溶性中Μ溶液單離之非對映異構物混合物，直接使 用，以獲得结晶性SSS非對映立«I異構物。 為起始結晶化作用，係需要使用结晶性SSS非對映立體 異構物。較佳结晶化作用係Μ下述方式進行•允許混合物 之溫度慢懵冷卻至瑁境禰度，例如允許溫度M l〇t之數個 步嫌下降*及保持於各潲度下約一小時。較佳係以每當量 非晶形起始物質，使用0.5-1當最驗•尤其是約1當量。 眈禰可使W製備式I之SSS非對映立體異構物之差向異 構化作用/结晶化作用方法之一項修正•侏為該SSS與 SSR非對映立«異構物之非结晶性涓合物*自«當非極性 溶劑之结晶化作用（如上文所引述者），例如釅酸乙釀與己 -20- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) 格（210X297公釐） (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 裝-

，1T 經濟部中央標牟局負工消f合作社印裝 414801 A7 ______B7_五、發明説明（Ίδ ) 烷之涓合物，於觸媒虽（例如約10奠耳％>之一種鹼（如上 文定義）存在下，例如IL-甲基嗎福啉。 使用此差向異構化作用/結晶化作用程序*則最初所軍 離之结晶性物質，係為含有低於25¾ SSR非對映立體異構 物之结晶性SSS非對映立體異構物，例如一般偽獲得具有 SSS: SSR比例為4:1或更佳之結晶性物霣。此物質通常最 初係Μ無水與水合形式之琨合物單雛。式I之實質上或基 本上純结晶性SSS非對映立體異構物*實質上或基本上圼 無水形式，例如含有約5 %或較少水合形式*或结晶性水 合形式*可賴此物筲之再结晶而得，如前述。 較佳悌在進一步藉再结晶纯化之前•自已從該差向異構 化作用/结晶化作用程序單離之產物中，移除任何殘留驗 ，Κ避免產物之差向異構化作用而回復至非對映異構物混 合物。此係Μ下述方式達成*例如將經軍«之產物使用稀 含水酸洗滌•例如稀鹽酸或稀硫酸。 本發明化合物之利用性，可藉隳準試驗與臨床研究證實 *包栝下文所述者。 抑.1作用度_量—丄_ 本發明化合物充作對於低分子量肽受質甲氧基-琥珀釀 某-丙胺醣基-丙胺釀基-脯胺醢基-纈胺酸-對-硝基 «8萆笨胺h之人類S血球彌性蛋白_MHLE)之抑制_之功 效，係按美阐專利4,910, 190中所述進行蒯定。此化合物 之功效係Μ下述方式進行評估·自該抑制鮞興H LE之交互 作用所形成之措合物* «得其解離常數1^之動力學澜定值 {請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) .裝· 訂 Μ -21 - 本紙張尺度適用中國國家梂準（CNS ) Α4规格（2丨Ο X 297公釐） 4801 A7 Β7 經濟部中央樣準扃貝工消費合作杜印製 五、發明説明（19 ) 。發現本發明之化合物具有Κι為6.7 nM。 惫後1傷害JtA丄— 氣膊之動物模式，係包括一種彌性質溶解的蛋白_之氣 管内（i.t.)投藥，K造成肺部之慢性發展之破壊性損傷。 此等損傷通常係在最初損傷後數遇至數月進行評估。但是 此等蛋白_亦會誘發一種損傷，其係顯著地在最初數小時 内發生。早期損傷為首先出血，在最初2 4小時结束之前， 發展成炎性損傷，於損傷後第一遇消裡。為利用此種早期 損傷*可使用下述棋式。 首先將大頰鼠使用BrevUal輕微麻醉。然後，將磷酸鹽 練衝之薷水fPBS)出值7.4 *無論是單獮或含有人類白血 球镅性蛋白梅（HLE)，直接投蕖至其氣管内。二十四小時 後，殺死動物，並將其肺臓移除及小心修剪其外部姐嫌。 於測定瀰肺重最後，將肺使用PBS灌洗•並測定所回收之 幸部可灌洗之紅色與白色细胞。闞於爾肺重量、全部可灌 洗之紅色細胞與全部可灌洗之白色®胞之值，係於HLE投 II後，K劑量-依存方式提高。有效的彈性蛋白酶抑制劑 之化合物，可防止或滅少_所誘發損傷之嚴重性*而造成 較低涵肺甫鼉及降低W於全部可灌洗细胞（包括紅色與白 色）之數倌，此係相對於H LE單獮投蕖而言。化合物可K 下述方式進行評估，在HLE激發之前•同時或於各種時間 下，將其Κ在PBS中之溶液或懸浮液· Μ氣管内方式投藥 (4 0 0微克），或在HL Ε激發之前，於各種時間下，將其以 髁脈内或Π限方式，以溶液眼藥Π 00微克以測定其在 -22- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) Α4说格（210 X 297公釐） ----------^裝-- (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 訂- Μ 414801 A7 B7_ 五、發明説明（2〇 ) 防ih H L E損傷上之利用性。本發明化合物之溶液’可合宜 地使用10%聚乙二酵400/ PBS製成。 急性出..血..分._析_丄.. ft項分析係依據人類晡中性白血球彈性蛋白_(ΗΝΕ)之 氣管内投藥後•僅監測肺中之出血量。出血係Μ下述方式 定量，將在肺灌洗流體中所回收之紅血球瓦解，並與整個 大頰鼠血液之稀釋液作比較。篩選之擬案*類似 F!etche「等人，於美_爾呼吸疾病回顧（ΐ99〇) * ULL, 672-677中所述者，如下。經證實可作為活體外HLE抑制 劑之化合物，可合宜地製備’ Μ按照上述W於急性肺傷害 樺式進行脯鞴。將雄性敘利亞大頰鼠（於使用之前，禁食 16-18小時），使用Brevita]納（30毫克/公斤•腹_腔内 >輕微麻醉。然後，在50微克/動物HNE於300微升磷酸 薷緩衝薷水（PBS) pH值7.4中之氣管内投蕖之前•於固定 時間下，例如30或90分鐘’將此化合物Μ靜赈内方式或口 腋方式投藥至大頰鼠。於酵素投藥後四小時，將動物使用 劑量遇度之戊Ε比妥納殺死*將胸部打開並將肺臓與心臓 移除，及淸除肺臟之外部物質。將已切除之肺臓使用三次 替換之2毫升PBS ，經由氣管套管進行灌洗。將所回收之 潲洗物曄集，並記錄其體播（約5毫升）*及在4 t下儲存 灌洗物苜到檢測為丨t。為計算血液在各試樣中之最*將巳 解凍之_洗物與整個大頰鼠血液之試樣音振，K瓦解魟血 球，肺於9β-井微滴定板之倨別井中缠當地稀釋。經瓦解 灌洗物與血液試樣之光畢密度（01))*係於5 40奄微米下測 -23- 本紙張尺度適用中國困家標準（CNS ) Α4規格（210X297公釐） I [ ^1τ^ (請先Μ讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部中央標準局負工消费合作社印製 經濟部中夬梂率局負工消費合作社印«. 414801 A7 __B7_ 五、發明説明（2<1 ) 审。鞛由Irh較牝試驗試樣之0[)與製自整倨大頰鼠血液之標 準曲棵之（]1)，測定（微升血液當量）/(毫升灌洗物 >。所回 收血液之伞部微升當鼍•係藉由將所同收之灌洗物體積， 乘W,各試樣之（微升血液當量）/ (毫升灌洗物）。其结果係 W常試驗化合物於HNE投藥之前，在特定劑量及時間下投 予時，相闞於PBS所治療之對照姐，對於HNE-所誘發之出 血之抑制作用％作報告。本發明化合物之ED B〇 *經發現係 為5.2牽克/公斤（於口狼用藥後）及〇.59竈克/公斤（於 靜鼸內投蕖後）。 當本發明之化合物於上文中，於活體内試驗中投藥時， 未發琨明顳毒性。 應明瞭的是化合物之活性於急性肺傷害棋式或急性出血 分析上之Μ嫌性，並不限於氣腫，而是此項試驗提供HLE —般活《內抑制作用之證據。 根據本發明之另一項特徵，係提供一種Β藥姐合物，其 包栝鞴學上有效最之本發明化合物，或其溶_合物，及一 獮辏學上可接受之稀釋劑或載劑。如上文所指出者•本發 明之另一項特徵，偽為一種使用本發明化合物或其溶劑合 物於治療浦乳動物尤其是人類中之疾病或症狀之方法，其 中係明HLE有醑明I，例如上文所引述者且特別是急性與 慢性支氣管炎、肺氣腫、再灌注傷害、成人呼吸困難激候 箱、瞻囊期維變性或罔爾血管疾病（例如路界肢涵血或間 敗性跛行）。 可將本發明化合物投槩至獬要其治療之溫血動物，特別 -24- 本紙張尺度適用t國國家標準（CNS ) Α4規格（210X29?公釐） I 裝 訂 餐 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部中央標準局貝工消費合作社印裝 414801 a? _ B7 五、發明説明（22 ) 是人镅，W治療其中與HLE有關聯之疾病*以習用B藥姐 合物之形式進行，例如作成一般性地在美國専利 4.910.190中所犋示者。一種投藥横式，可經由粉狀或液 鵂氣溶睽。於粉吠氣溶膠中*可將本發明之化合物，以如 同（'romrilyri納之方式，經由” Spinhaler” （商檷）渦輪式吸 入器裝置，此装置係得自Fisons公司（Bedford, Massachusets)，於每膠囊約0.1至50奄克之比率下進行 ，對一般人而言，每日投予1至8儷膠II。欲被使用於渦 輪式吸入器中之各膠囊，係含有所箱要量之本發明化合物 ，且此20毫克膠囊之其餘部份，係為一種藥學上可接受之 載劑•例如轧耱。於液備氣溶膠中*可將本發明之化合物 •使用曠霧器例如” Retec” （商檷）啧霧器進行投蕖*其中 溶液係使用1?縮空氣贖霧。可將此氣溶暖K例如毎天一至 約八次之速率投藥，如下：於_靄器中充填此化合物之溶 液，例如含有1〇奄克/毫升之3.5牽升溶液；將嗶霧器中 之溶液使用呢縮空氣嗔霧；且病人在其嘴巴中，使用此哦 霉器以正常方式砰吸（潮流體積）八分鐘。 或者*投藥模式可為非經腸方式，包括賴由滲透泵之皮 下沉楢，或較佳為口腋。可將本發明之化合物以習用方式 辋配成Π服或非經陽劑虽形式，其方式是將毎單位劑里約 10至250毫克與習用媒液、賦形_、黏结劑、防腐劑、安 定_、調味劑或其類似物一起接配·其係採用所接受之强 藥*作進行，例如在美國專利3,755,340中所述者。對非 銲矚捋蜗而言，係投予1至V0毫升靜脈内、肌内或皮下注 -25- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS) A4規格（210X297公釐） I--------^------tr------Μ (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) —I_______ 經濟部中央標準局貝工消費合作杜印袈 414801 Α7 Β7 五、發明说明（β ) 射*其中含有約0.02亳克至10牽克/公斤體重之本發明化 合物，每天3或4次。此注射液係在等潑無菌水溶液或懸 浮液中含有本發明化合物，視情況使用一種防腐劑，例如 酚或一種增溶劑，例如乙二胺四乙酸（EDTA)。對非經腸投 鞲或使用在氣溶膠中而言，可製備含水配方，例如將此化 合物溶解於5-10%聚乙二酵400/瞵酸鹽媛衝鹽水中 > 接著 賴由無菌過濾，及無菌儲存，使用標準程序進行。 一般而言，本發明之化合物係Μ下述範圍之日眼劑量投 予人類，例如5至100毫克此化合物，藉氣溶膠；或50至 1 000毫克，Μ靜脈内或口服方式，或其併用方式。但是， 易於明瞭的是，可能必須根據習知Β學實作改變所投予化 合物之劑量•考慮所治療疾病之本性與嚴重性、共同進行 之治療法，及接受治療病人之年齡、體重及性別。同樣應 明瞭的是*可使用大致相等量之此化合物之溶劑合物（例 如經水合）形式。闞於HLE抑制劑之投藥及評估病人之擬 察係描述於歡洲專利申請案中，其公告案號為4585 35、 4585 36、458537及46 3811，個別關於治療或預防膽囊嫌維 變件、ARDS、支氣管炎及伴皤著急性非淋巴球白血病之出 rfn.或其療法；且本發明之化合物可Μ同樣方式使用，或較 佳係藉口服投蕖使用，Κ治療該等疾病及症狀*無論是單 钃或併用另一種習用上經指示用Μ治療該特定症狀之治療 檗？《。對於在晡乳動物中涉及或有關聯嗜中性白血球之血 菁疾病或相關症狀之治療或預防治療而言，可將本發明化 合物合宜地賴口眼或非蛵腸途徑投蕖，無諭是軍獮或同時 -26- 本紙張尺度適用中國國家搮準（CNS ) A4規格（210X297公釐） ----------^------ΐτ------Μ (請先聞讀背面之注^|^項再填寫本頁) 經濟部中央標準局貝工消費合作社印裝 414801 A7 ____ B7 五、發明説明（24 ) 或連使用其他習用上針對此病症所投予之治療活性藥繭 。太發明化合物於血管疾病及相闞症狀之此種治療上之利 用性*可使用國際專利申請案公告編號W0 92 /22309中所 沭之稈序譖管。 本發明之各方而I規在將K下列非限制性實例說明，其 中除非另有述及否則： (Π溫度係以攝氏度敝表示（Ί0);操作係於室溫或瑁境 溫摩下進行，意即於18-25 t範圃內之溫度下； (Π)有橢溶液係使用無水硫酸鎂乾燥；溶劑之蒸發係使 用迴轉式蒸發器，於滅壓（600-4000巴斯卡；4,5-30奄米 Ηκ)下，使用至高60 t之浴溫進行； (ΠΠ鼷析係意謂”急驟式麕析"（Still方法於 Merck Kieselgel(品號 9385，得自 E. Merck Darmstadt， 德_)卜.進行*使用階次與傾斜梯度之溶離，偽藉插人詞 ”梯度”表示，接著為關姶及最後溶贿比例；薄層層析 (TLC)係在矽膠板上進行，例如0.25毫米矽膠GHLF板（品 號 21521，得自 Anal tech, Newark, DE, USA); Πν)—般而言，反應遇程係藉TLC追瞇，且所示之反應 時問，俺為銳明： (v)熔點偽未择校正，且（dec)表示分解；所示之熔點 ί集對於抟所述製成之物臀而獲得；多晶型現象可造成在一 鸣製備法中具有不同熔點之物霣之軍蘼；

Ui)饅終_物具有令人滿意之核磁共振（NMR)光譜；及 於檢驗時，賴HPLC顧示為實霣上純物質； -27- 本紙張度通用中國國家樣隼（CNS ) Α4規格（210X297公釐） I 装 I ^ — Μ (請先閱讀背面之注意事項其填寫本頁〕 經濟部中央樣準局員工消費合作社印策 414S01 a7 B7 五、發明説明（25 ) (v i i)所示之產率僅為說明，且未必是可賴由费心方法 發展所得之结果；若需要更多物質，則重複製備； (v i丨i)當示出NMR數據時，其係主要診斷質子之s值形 式，Μ相對於作為内棵準之四甲基矽烷（TMS)之每百萬分 之一之份數（ppm)表示，於250 MHz下使用DMSO-de作為 溶酬；使用鼸於信號形狀之習用縮寫；對光譜而言，係 報告言接觏察到之位移； (ix)化舉符號具有其常用意義；使用SI箪位與符號； (X)減毈係為絕對磨力| W巴斯卡（Pa>表示；提高®力 係為錶顢* Μ E5表示； (xi)溶劑比例係Μ體積：體積U/v)術語表示； (χΠ)質譜（MS)偽使用70轚子伏特之電子能鼉，於化學 離子化椹式中•使用直接暍蕗探針進行操作；其中所指示 之離子化作用藉罨子衝擊（EI)或快速原子撞擊（FAB)達成 ;一般而言，僅報告顯示原始質量之峰；及 (χΠΠ使用HPLCM建立在單離物質中式I之SSS: SSR非 對映立艚異構物之比例，使用Hypers il C18，3微米， 10公分x4.6毫米管柱，及流動相為0.02M四丁基磷酸銨 /乙瞵（75:25) ·於pH值7.5下。流速為1.5奄升/分鐘 •注射髑稽為20撤升，賴閥諝節，及掄测波長為254奄微 米。對SSS非對映立體異構物之滯留時間，典型上為 12-13分棟，而對SSR非對映立體興構物典型上為20-21 分練。或者，可使用S丨丨PELCO LC-18逆相，25公分χ4.β 菊米管柱，使用水：乙臃（60:40)作為溶離劑|使用1.0 本紙悵尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） —Ϊ I i I n ^ n n 111 ~ (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) A7 __B7 五、發明説明（26 ) 毫井/分轉之流速。 實._例_丄 將SSS非對映立體異檎物與SSR非對映立體異構物之结 晶性非對映異檐物混合物（0.67克）·呈約85:15 SSS:SSR 之f±例*添加至甲笨（4.5毫升）中，並加熱至80TC而得透 明溶液。將此溶液冷卻至55TC，歷經30分鐘，並使用鈍 SSS非對映立艚異嫌物作為晶種。然後使溶液冷卻至25 T： *醪辉一小時•再於冰浴中冷卻一小時。將结晶性產物藉 遇濾收集•使闬冷甲笨（2棄升）洗滌逋於50C下乾嫌。重 祷此稈序而得式Τ之结晶性Sy非對映立體異構物（0.43 克）*藉HPLC分析，其係含有低於2郑SSR非對映立體興 構物； 2S[« ln-90° (c = ].50，於乙酵中）；熔點 147.5-148.5^ ；HMR (de-0MS0) ： 0.92 (*,12H), 1.76(»,1H), 1.81-2.15ί·,5H). 3.61(m,lH), 3.80(s.3H), 3.91(b,1H), 4.44(*,2H), 4.62(t,lH), 6.96(d,2H), 7.91fd,2H), 8.34(d,lH), 8.60(d,lH)； NHR (de-DMSO/D^O) ： 0.75(d,3H)r 〇.89(m,9H), 1 . 70-2 . 19 f in, 6H) , 3.56(m,lH), 3.75(s,3H), 3.98(d, 1H), 4.37(n,2H), 6.94(d,2H), 7.7R fH . 2H )； 皙筆光辑i化學離子化作用）：500 (H + H);微量分析，實 鷗倌：C，57.72; Η, 6·62; H，8.36SS; C24H32FaNs0e1R S ： Γ, 57.70 ； Η, 6.45； Ν, 8.41Χ ° -29- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） ----------¾------tr------d. (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) L........... ..... 經濟部t央樣準局負工消费合作社印製 414801 at B7 五、發明説明（2?) 使用示莘掃描卡計法.，此物質顯示最初改變係於約〗49.5 T下，具有峰值在約U1P下。 「類似结果係使用一種具有SSS: SSR比例為76:24之结晶 拌非對映異構物混合物，並自甲笨再结晶兩次而得。 類似結果亦使用醋酸乙酯與己烷作為溶劑而得。將SSS與 SSR非對映立體異構物之结晶性非對映異構物混合物·溶 解於醑酸乙酯中，體積藉蒸餾而降低，並將熱溶液（6〇t： )使用己烷稀釋，保持透明溶液。將此溶液冷卻至50 t：， 使用純SSS非對映立體異構物作為晶種•及使其冷卻。所 使用之起始物質與溶劑之比例，係類似實例5中所使用者 作為起姶物質使用之SSS與SSR非對映立體異檐物之结 晶性非對映異構物琨合物，係K下文實例4或5中所述獲 得。 奮..里_2. 將0 . 6M氣氧化納溶液（260毫升），於0 t：下，添加至 (S) -1 _「（SJ-2-(4-甲氧基笨羧釀胺基）-3-甲基丁醸基] -8-『（$_)-2-甲基-卜（（8_>-2,2,2-三氟-：1-羥基乙基）丙基 卜吡咯啶-2-羧醯胺（25.7克）於第三-丁酵（205毫升）與水 (255毫升）之混合物中之溶液內。逐滴添加過錳酸鉀 (24.2克1於水（38 5毫升）中之溶液，並攪拌一小時，將所 形成之反應溷合物於0 下再攙拌一小時。然後，添加甲 «Π00奄升），並將混合物於0 t：下再攪拌兩小時。將反 «涌合物焯《矽蘸土遇濾，並將仍冷卻之»液使用1MM酸 -30- 本紙張尺度適用中國國家標準（CMS ) A4规格（210Χ2Ϊ»7公釐） ---------d------IT------Μ (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部中央標準局貝工消费合作社印製 414801 A7 _B7 五、發明説明（28 ) ί200毫升）酸化，其會造成贈積大的白色沉澱物形成。於 此渴合物中添加固膊氣化納，至飽和點*接著添加乙醚 (200毫升）與醋酸乙醋（200毫升）。將混合物播拌直到全 部固聘均已溶解為止。分離有機相•並將水層使用乙醚： 醋酸乙醋（1:1)萃取。將合併之有機相使用_水洗滌，乾 煉（HsS〇4) *並於真空下藉蒸發移除溶劑。將所形成之泡 沫物溶於溫熱甲笨（150奄升）中，並使其在環境溫度下靜 置〗6小時。藉過濾收集巳結晶之固體，使用乙醚洗滌，並 於40 f下 > 在真空中乾燦3小時而得式I之结晶性SSS非 對映立體異構物Π6.5克），其含有<0.5炻之式I之SSR非 對映立體異構物；熔點149M 511 (濾液之研製造成回收額 外收穫之SSS非對映立體異構物（6.24克）。） 當使用乙醚作為結晶溶劑，替代甲苯時，獲得類Μ鈍度 之结晶性SSS非對映立體異溝物，其係為無水與水合形式 (比例1 ··〗1之涓合物；熔點U 6 t；;微鼉分析，實驗值： C, 56,48； H, 6.49； N, 8.20¾；

Ca4H3HF3N30e.0.5H20需要：C, 56.68; H, 6.54; 8.26¾° 起始胺基酵係按下述獲得： Π)於01下•將三氟乙酸（200毫升）加至苄氧羰基 -1,-興纈草胺蘸基-L-脯胺酸第三-丁基酯（80.0克）與二氯 甲烷（300毫升）之混合物中，歴經大約30分鐘。於0 下 攪拌一小時後，使反應港合物上升至環境灌度，並再攪拌 3小時。然後，將反應棍合物於真空下濃縮•及自甲苯再 -31 - 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） — n^I I —1r— I I I I - ^ (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部中央標準局貝工消资合作社印裝 414801 A7 ___B7_ 五、發明説明（29 ) 漘縮四次，以移除殘留之三氟乙酸。將所形成之黏稱油， 於真空下乾嫌16小時。將粗製產物於矽膠上藉餍析純化， 使用二氛甲烷作為溶離_，而得ϋ-苄氣羰基-L-異纈草胺 醣基-1,-_胺酸（/\) (63.6克為淡黃色黏稠油； HMRide-DMSO)： 0.92(2d,6H), 1.65-2.05 ί2*,4H), 2.25f*.lH), 3.60ίι,1Η), 3.80(b,1H), 4.05(dd,1H), 4.25(·，1Η), 5.02i2d,2H), 7.35(n,5H), 7.50(d,lH)。 (Π)將H-甲基嗎福啉（16.6奄升）一次添加至化合物A與四 氫呋喃（THF; 550奄升）之羥攒拌溶液中，並將此溶液冷卻 至-3 5 。然後，將氛甲酸異丁酷（18.9毫升）逐滴添加至 該經冷卻之溶液中。當添加完成時，將反懕混合物攪拌一 小時，然後逐滴添加2(R)，3(SJ-3-胺基-4-甲基 三氟-2-戊酵（24,5克）與THF(160毫升）之溶液，歷經30分 鐮。將反懕琨合物於-35 *C下再攪拌一小時，然後使其潘 熱至環境潘度並攪拌16小時。將混合物過漶，及將濾液使 用飽和碳酸氫納水溶液洗滌兩次。將水層Μ乙醚萃取兩次 ，及將合併之有櫬匾使用鹽水洗滌及乾煉。藉蒸發移除溶 劑，並將粗產物藉矽臛暦析純化，使用二氮甲烷：甲笨 (9:1)作為溶離劑*而得（U-l-[(SJ-2-(苄氧羰基胺基） -3-甲基丁 醢基]-N-[(SJ_2-甲基-1-[Π〇-2,2,2-三氟-1-鞸某乙基）丙基]吡咯啶-2-羧醯胺（55.1克）（&) |為無色泡 沫物；NMR (300 MHz, de-DMS0): 0·90(9*，12Η), 1.6 3- 2.03ί*,5Η), 3.55(«,1Η), 3.75(ι«,2Η), 4 . 07im . 2Η) , 4.45 (m, 1 Η ), 5.02(2d,2H)r 7.35(·,5Η), -32- 本紙乐尺度通用中國國家揉準（CNS ) Α4規格（210 X 297公釐） ^?τΜ (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部中央標準局員工消费合作社印製 4ί48〇17______ΒΤ___ 五、發明説明（3〇 ) 7.45(d,lH), 7.65(d,lH) 〇 (iii) 將化合物B (55克）於乙酵（300亳升）中之溶液，於 10%鈀/碳觸媒（5. 5克 > 上，於氫壓力為55 ps丨下氣化3 小時。將反應混合物經過砂薄土過滹，並將漶液於真空下 媾擁而得黏稠油。將此油以乙醚（250·毫升）研製16小時， 並藉過濾收集所形成之固體，而得（SJ-l_[(SJ-2 -胺基 -3-甲基丁 _ 基]甲基-1-[α)_2,2,2-三氟-1-稃蔫乙棊）丙基1吡咯啶-2-羧釀胺（CM25.6克），為白色固 髏；NMR (300 MHz, de-DMS0): 0.75-0.97(η.12Η)， 1 , 4 2 (s . 1 Η ) , 1 . 6 5 - 2 0 (in, 5 Η ) , 2 · 7 8 , 3 · 2 0 (各 d，全部 1只），3.45,3.60(各111，全部11〇，3.82(1«,11〇， 4.10(111.：1}〇,4.45，4.57(各_，全部^,6.45(1>「 d，1H) , 7.45, 7.60(各 d ·全部 1H)。 (iv) 將化合物C懸浮於THF (350亳升）中·及添加粉末狀 碳酸納Π8. 5克）。將混合物冷卻至-5 ΐ；，並添加氣化大茴 番甲醢（1 1 . 9克）與THF (50毫升）之溶液，並攪拌。將反應 棍合物於0 下再攪拌2小畤，然後使其升溫至環境溫度 。將反應混合物過濾，及將濾液使用1 Μ鹽酸溶液（20奄升 )馥化•並Μ水洗滌。將水隳使用乙»萃取兩次，合併之 有機膊使用50%飽和碳酸氫納溶液、醱水洗滌，及乾煉。 藉蒸發柊除溶酬，而得無色泡沫物。將此泡沫物以乙醚研 製，《過濾收集所形成之固髑*並於真空下，在40它下乾 嫌3小時，而得（SJM-[(SJ-2-(4 -甲氧基笨羧醵胺基） -3二甲蓽丁»基]-1[(3」-2-甲基-1-(83-2,2,2-三氟-；1-羥 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210X297公釐） (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 裝.

、1T 絲 414801 A7 B7 五、發明説明（) 蓽乙某）丙某卜吡咯啶-2-羧醢胺，為白色固熥，熔點 168-I70t! ； NHR (300 MHz, de-DMS0)： 0.82-1.05(β,12Η), 1.65-2.05(3i,5H), 2.05-2.25 ί», 1H)f 3.60 (m, 1H), 3.82(s,3H + t.lH), 3.93fm,IH), 4.12f»,lH), 4.45(m.2H), 6.45(d,lH), 6.98id,2H), 7.65(d.lH), 7.90(d,2R), 8.35(d,lH)〇 2 (R)，3 -3-胺基-4-甲基-1,1,卜三氟-2-戊酵，偽按下 述獲得： 將酒石酸（50.7克）與乙酵（200毫升）之溶液添加 荦 2 (B.SJ，3 (SiJ -3-胺基-4-甲基 Μ , 1 , ：!-三氟-2-戊酵 (57.8克）與乙酵（200毫升）之溶液中。將此溶硖趁热過滅 *並使其於環境溫度下靜置16小時。賴過濾收集已分離之 白色固體 > 並使用小體積冷乙酵洗滌。將此固體於真空下 乾燁並自熱乙酵再结晶三次*而得2 (R>，3 (SD-3-胺基 -4-甲基-1 , 1 ,卜三氟-2-戊酵D-(-)-酒石酸鹽（8.3克 > ;熔 點 1 35-137Τ。 或者，可使用下述程序： 將三光氣（2 3克）一次添加至2(L&_)，3(UJ-3-胺基 -4-甲基-1,1，1-三氟-2-戊酵半草酸Η (50克）與甲笨（2 50 毫升）及2«氣氧化納溶液（350毫升）之經良好攪拌灌合物 中。此反晒開始敉熱，並將其置於冰浴中。於0.5小時後 *使反應湄熱至25它，TLC顯示有大量未反應之胺存在。 使用50%氮氣化納溶液，使溶液之出值再調整至約12。添 加其他部份之三光氣（8克），並將溶液攪拌1小時。使用 -34- 本紙張尺度適用中國國家橾準（（^)六4規格（2【0'犬297公釐） ---------批衣------、ΤΓ------4 (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部中央梯準局系工消背合作社印装 414801 經濟部中央標準局負工消費合作社印製 A7 B7 五、發明説明（32 ) 1M镧醚*使反應疱合物之cH值，降低至pH值7 並以醚萃 取兩次。將合併之醚醑以水、鹽水洗滌並乾燥（MgS(U)。 賴蒸發移除溶繭，嫌得油狀物，其係於靜置時结晶。將所 形成之固體韉遇濾收集及使用継：己烷（1:1)洗滌，而得 2 7克4(LSJ，5 (SJJ -4-異丙基-5-三氟甲基-2-噚唑啶醑· 為白色固體 * 熔點 7 卜 72Ϊ：。M NMR (300 MHz, DKS0): 8.45 fs, 1H), 5.11 fiD.lH), 3.61 (m, 1H), 1.72 (. 1H). 0.8fi (d. 6H)。 (m將]E - 丁萋鋰（20¾升10M溶液，於己烷中}添加至 4 (US.)，5 (SJJ -4-異丙基-5-三氟甲基-2-嗶唑啶_ (35. 8 克1拥ΤΗΡ (B00璨升）於-78 1C下之溶液中•接著攪拌 0. 5小時。添加（-)-氢甲酸篕基醅（41毫升，醣蒸皤），接 著於_78勺下連績攢拌0.5小時。將此溶液溫熱至25t：，及 藉由添加飽和碳酸氫納水溶液使反應中止。將產物於醚中 萃取•及以水與薷水洗滌。將此溶液乾燥（MgS04)，並於 真空下移除溶劑◊所形成之油狀物會在靜置下結晶，而得 固艚*藉過濾收集之。將此固體使用醚：己烷（1:1)洗灞 ，並乾烽而得 4(SJ，5(gJ-4-異丙基- 3-[l (R) , 2(S> , 5 (R> -盖氣基羰基]-5-三氟甲基-2-啤唑啶醑（23.15克）； 熔點 138-14010 ; NMR (300 MKz, DMS0): 5.51 (dd, 1H), 4.68 fm, 1H), 4.26 fm. 1H), 2.27 (mt 1H). 1.94 N , 1H) , 1 .78 (m , 1H) , 1.62 (d, 2H), 1. 42 (IB , 2H), 1.01 i d d , 2H) ' ,0.95-0.84 (*, 24H), 0.71 (d； 3H), 1BFNMR (376.5 MHz, DHSO) J -76.9910； 99% -35- 本紙張尺度適用中國國家梯準（CNS ) A4規格（210X297公釐） —I ——— — — ^ n (t n n n ϋ Μ (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) A7 414801 B7 五、發明説明（刃） d . « . ί另一份收穫4.3克（99% d.e.)係得自母液>。[ 注意：4fR)· 5fS)異構物具有熔點80-82*C，及19FHHR (376.5 MHz, DHS0)： -77.0019 〇 ΠΠ)將 4(SJ * 5(KJ-4-異丙基-3-[l(R), 2(S). 5(BJ-S 氣基羰基]-5-三氟甲基-2-噚唑啶酮（27克）於二氧六圜 (70«升）R50%氫氣化鉀溶液（80毫升）中之溶液，於100 它下加熱2天。將反應冷卻，使甩醸（40 0毫升）稀釋*並 分雛有橢_。使用6Μ鹽鹽，使此水溶液之出值調整至9 ( 最初約14)。將水層Μ醚（300奄升）萃取3次。將有機相 合併，乾慊（MsS〇4) ·及添加至草酸二水合物（4. 5克）與 乙睛Π 00毫升）之經良好攪拌溶液中。藉«濾收集巳沉澱 之固髑，使用醚洙滌，於真空下乾蜾（60Τ；)而得15.9克白 色固體。将ft固髑使用醚（300奄升）研製，藉過濾收集並 乾燥而得2(R) * 3(SJ-3-胺基-4-甲基-1,1,1-三氟-2-戊 酵半草ft蘸（13.4克，88%產率 > ，為白色固熔點 1 84-1 86T： ； 'H HHR (300 MHz, DHS0) ： 5.71 (bs, 3H). 4.08 (ddd, 1H), 2.88 (*, 1H), 1.81 (», 1H), 0.92 (m, 6H);對CeH12P3N0.0.5C2H204之分析值：C, 38.89; H, 6.06; N, 6.48;實驗值：C, 38.75; H, 5.95; N, 6.47° W.例3 將式Ϊ之SSS與SSR非對映立體異構物（0.5克）呈約 1:1 例之非结晶性（非晶質）非對映興構物混合物（泡沫 物成油）溶解於乙醚（2.5毫升）中·使用實質上鈍SSS非 -36 - 本紙張Λ度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐} I--------1------.訂------Μ (请先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部中央標準局貝工消費合作社印製 經濟部中央橾準局負工消費合作社印袈 4ί480ί A 7 Β7 五、發明説明（¾ ) 對映立體異構物之晶镅作為晶捕，並使其靜置16小時。賴 碑濾收集已结晶之固艚，使用乙務洗滌*並使其乾埭而得 含有SSR非對映立賴異構物之结晶性SSS非對映立體異檐 物，30-45 %產率（SSS: SSR比例為88:12 ;無水形式： 水合形式1 : 1 )(當使用SSS : SSR 3 : 2之非結晶性非葑映異 構物涓合物時，«得類似結果）。 將式ΐ之SSS與SSR非對映立體異構物之非结晶性非對 映異構物港合物（SSS: SSR比例48.5:51.5; 5.18克），溶 解於第三-丁基甲醚（23奄升）中·並添加1L-甲基嗎福_ Π.3橐升）。將混合物加熱至回流*並慢慢添加具有沸點 為100-120 Τ!之烴琨合物（ESS0CHEM 30; 60毫升），同時 保持反應裾合物之溫度於98 t下。在收集25¾升蒸餾物後 ，使溫度降低至，並添加一些實霣上純SSS-非對映立 體異構物之晶種。將反應混合物於70”下攪拌一小時•於 60T下再攪拌一小時，及最後在瑁境溫度下攫拌16小時。 藉遇·嫌收集所形成之结晶固體•使用ESS0CHEM 30洗滌’ 並使其乾燥而得SSS與SSR非對映立®異構物之结晶性混 合物f4.8克 >，其具有SSS: SSR之比例為76:24 。將此物 霣加至水Π 7奄升）中·並攒拌及添加2M鹽酸（2毫升於 爾埦溫度下檷拌90分嫌後*賴遇濾收集结晶性固厢> Μ水 洗滌妝乾嫌（3.88克）。（其藉HPLC顯示係具有相同SSS : SSR比例）。 檢用類似稈序，但在添加*質上纯SSS-非對映立異構 -37- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) Α4規格（210 X 297公釐） ---------^------1Τ------線’ (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部中央標準局貝工消费合作社印製 414801 A? 、B7 五、發明説明（35 ) 物之晶檷之前•將溶液冷卻至651，並於65t：下播拌*然 後W +摩陏次冷卻，於各溫度下保持一小時*及最後在環 堉锶度下播拌16小時，以約85%產率，獲得式I之SSS與 SSR非對映立膊異構物之结晶性混合物（SSS:SSR之比例為 8 5 ： 1 5 ) » 實15- 將式I之SSS與SSR非對映立體異檐物之非结晶性（非 晶質）非對映異構物混合物（29.4克）於醋酸乙磨（200毫升 )中，在大氣壓下蒸艚K移除1〇〇奄升蒸籣物。然後•添 加其他醱酸乙酷Π66毫升），及再一次於大氣壓下蒸觴此 溶液，以移除166毫升蒸餵物。將此程序重複。然後將溶 液冷卻至，並在“ΐ；下添加己烷（166毫升），歷垤 30分鐮，而得透明溶液。將此溶液冷卻至50 t： >使用實質 上纯结晶性SSS非對映立體異構物（0.1克）作為晶種*並 使其冷卻至瑁堉溫度•歷經小時。將琨合物於0 Ί〇下再 攪拌18小時，潘熱至20T；及在十分鐘内添加其他己烷（33 毫升）。於環境溫度下攪拌3小時後•添加其他己烷（50 奄开）•並將混合物於瑁境潙度下再攪拌18小時》藉過濾 收集结晶性產物，並於真空下乾嫌四小時*而得SSS與 SS1?非對映立體異構物之结晶性混合物（39%產率）·其具 有SSS: SSR之比例為85:15 ，藉HPLC拥定。 Γ使闬額似程序，但在蒸钃之前（或之後）將Η二甲基嗶福啉 (0.8奄升）添加至__乙醏中，並使用稀藤酸及然後使用 水•洗滌經過«之结晶性產物（於真空下乾嫌之前），獲得 -3 8- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS丨A4規格（210 X M7公釐） ----------襄------?τ------d. (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) A7 B7 414801 五、發明説明（36 ) SSS與SSR非對映立體異構物之结晶性琨合物，具有類似 之 SSS : SSRfrb 例· 60% 產率。] 實....例...6.., 将使用實例5之程序所獲得· SSS: SSR之比例為約 85 : 15之SSS與SSR非對映立體異構物之结晶性混合物， 在丙酮（15毫升）中配成漿液，及溫熱至40Τί。添加水（10 牽升），及將禰合物加熱至55-60 ΐ： ·歷經90分鏡。將混 濁溶液冷卻至35-40 t：，及進一步添加水（5奄升）。使溫 合物冷卻至環境溫度，並攪拌16小時。藉過滤收集結晶性 固體，並重複此程序。將所形成之结晶性固體於40 t：及真 空下乾燥而得結晶性SSS非對映立體異構物（含有低於2 % SSR非對映立體異構物），呈水合形式，具有水含fi為 6.69% (75%產率）。此结晶性物霣之DSC热解曲線（加熱 速率2T： /分鐘），顯示吸熱事件係開始於約91-92 〇下 ，接著為放熱事件開始於約109-110 T!下·接著另一偁吸 熱事件係在約丨48-149 1C。此數據，伴醣著TG A數據及 ieF NMR光譜數據，顯示此结晶形式係為實質上孿-二酵 寻式ib)，其具有理論上（經計算）水含量為 B:73%。 宕宕眾$ 於奮例3、4及5中作為起始物質使用之SSS與SSR非對 映立艚異構物之非結晶性非對映異構物琨合物1係使用下 述程序1或2 «得： 程皮丄 -39 - 本紙張尺度適用中國國家揉準（CNS)A4規格（210x297公釐） ---------t.— (請先閲讀背面之注i項再填寫本頁) 訂 d. 經濟部中央標準局真工消費合作社印* Α7 4ΐ48〇ί Β7 五、發明説明（37 ) (ί)將N-苄氧羰基-L-異鑼草胺醢基-L-脯胺酸第三-丁基 酯（20克）與甲酵（300毫升）之溶液，於50 psi下，在10% 鈀/碳觸媒（2克）上氫化12小時。然後將反應混合物經過 矽薄土遇»，並將濾胼使用甲酵洗滌。使濾液蒸發而得 異纈草胺醣基-L-脯胺酸第三-丁酯（A)(12克），為油狀 物；NMR (300 MHz, de-DMS0): 0.80(d,3H), 0.92 fd.3H), 1.74is,9H), 1.79"2.15im,5H), 3,22(d,lH)r 3.30fbs,2H), 3.40 in , 1H) , 3.62(i,lH), 4.16(dd,lH)° (ii)將此醋（A) (12.5克）溶解於四氫呋喃（THF; 100奄升 )中，並冷卻至0 1C。添加氮化大茴香甲醢（8.37克 >興 THF(200毫升）之溶液*並攪拌，接著添加三乙胺（18毫升 )。於一小時後，藉蒸發移除揮發性物質。將所形成之物 脣使用酯酸乙醋稀釋•及連續使用水、飽和氣化銨溶液、 飽和碳酸氫納溶液及鼸水洗滌。將有機溶液乾燥（MgS〇4) ，及藉蒸發移除溶劑。將所形成之物質藉矽膠曆析純化， 使用甲醉：二氛甲烷（3:97)作溶離劑，而得4-(甲氧笨甲 醢基）-丨,-異纈草胺醯基-L-_睽酸第三-丁 _(B)，為泡 沫物；HMR (300 MHz, “-DMS0): 0.94 (d,3H), 0 · 9 9 ( d · 3 Η ) , 1 , 3 0 i s，9 f〇 , 1.7 6 (in, 1 ΙΟ , 1 . 8 0 (η，2 Η > , 2.13(m.2H). 3 . 6 T f κι, 1 Η ) , 3.80(s,3H). 3.93(»,1Η), 4.17(dd,lH), 4.46ft,lH), 6.96(d,2H), 7.90(d,2H), 8 . 35 fd , 1 H) ° fii‘H將(7.13克）溶解於三氟乙酸（85毫升）中* -40- 本紙張尺度適用中國圃家標準（CNS)A4規格（210X297公釐） I ^n 1 1 -^ (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁} . 丨： 經濟部中央標準局兵工消費合作社印求 Α7 Β7 414801 五：發明説明（38 ) 並將所形成之溶液攒拌3〇分鐘。藉蒸發移除揮發性物質’ 並將雜留物溶解於醋酸乙酯中，Μ水洗滌。將有機曆乾燥 ，及藉蒸發移除溶劑。將所生成之物質藉砂膠曆 析純化，使用甲酵：二氛甲烷：醋酸97:2:1溶離而得 (^(轸甲氣苯甲麵基卜卜異顦箄胺醢基-^脯胺酸“^克 )ic)，将其肓接使用無需進一步純化；HMR (300 MHz， (U-DMSO): 〇.87(d,3H)，0.99id.3H), 1·88(ιβ，3Η). 2.15ίη.2Η), 3.64(n,lH). 3.80fs,3H), 3.97(m,lH), 4.24(dd,lH), 4.44(t,lH). 6.96(d,2H), 7.90(d,2H), 8 ‘ 37 (d , 1H)。 Πν)將化合物（CM7.1克）、2(R5J’ 3(SiJ-3-胺基-4-甲基 -1,1，1-三氟-2-戊酵（3.8克，自由態|«|)及11_-羥基笨并三 唑水合物（5·5克）溶解於二甲基羧醢胺（DMF;40毫升）中 ，及添加三乙胺（7·1毫升}，並攪拌。然後•添加1-(3-二甲胺基丙基卜3-乙基碳化二亞胺（5.9克），並將所形成 之琨合物攪拌12小時。將反應涓合物使用_酸乙酷稀釋* 及使用1 MU «Μ兩次）、水1M氫氣化納溶液及鹽水洗滌。將 有機溶液乾埔，及藉蒸發移除溶劑。將所形成之物質藉矽 P曙析纯化（梯度液溶鐮，醣酸乙酷：二氯甲烷（30: 70) 罕甲酵：二氯甲烷（5:95)) *而得（Sj-l-[(SJ_2-(4-甲氧 萆荣羧醣胺蓽）-3 -甲基丁醯*] - 1- [2 -甲基-1-(2,2,2-三 氟-1-珲寒乙*)丙基]吡咯啶-2-羧醯胺（6.6克）（D>，為 白色泡沫物；N M R (d β - D H S 0 ) : 0 . 9 3 ( β , 1 2 Η ), 1 .73-2 . 1 5 (m,6Η) , 3.62(n,lH), 3.76iB,3H), -41- 本紙張尺度適用中國國家標丰（CNS ) A4規格（2丨0X297公釐） -裝 I I 訂 I I" (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部中央標準局貝工消费合作社印装 經濟部中央標準局員工消費合作社印装 414801 A7 ____B7 五、發明説明（39 ) 4. ιοί*., 1H) , 4.42(m,2H)i 6.41(d,lH), 6.57(d.lH), 6.98(d.2H), 7.24(d,lH), 7.61(d.lH), 7.87(df2H), 8 ‘ 33(t，1 (v)将0.6M氣氣化納溶液（10奄升）添加至胺基醇（D) Π.0克）、第三-丁基酵（8毫升）及水（10毫升）之溶液中 ，並將潖舍物冷卻至5 t。然後*添加過錳酸鉀（1.0克 )與木（20毫升）之溶液，同時保持溫度低於10C。於2小 時後，添加甲酵（4毫升）·並將反應棍合物攪拌直到紫色 已消失為lh。然後，將此反應混合物烴過矽薄土過濾，並 將固髑氣化納Π1克）加入濾液中。將混合物使用第三-丁 寒甲基醚萃取，並將水相使用第三-丁基甲基《與甲基乙 基酮之混合物洗滌。將合併之有機萃液，使用飽和碳酸氫 納溶液、0.5H鹽鹽、水洗滌，然後乾嫌。將溶劑藉蒸發移 除，而得式J之SSS與SSR非爵映立體異構物之非對映興 構物潖合物，為泡沫物（SSS: SSR之比例為3:2)。 或者，步驟U)係按下述進行：

將1-(3-二甲胺基丙基）-3-乙基碳化二亞胺（12.6克）， 接著將二氛乙酸（2·2毫升）添加至（53-1-[(5_)_2-(4-甲氧 孳苯羧醻胺基）-3-甲基丁醣基]-H-[2-甲基-1-(2,2,2-三 氟-1-羥*乙基）丙基]吡咯啶-2-羧皤胺（6.6克>、DMS0 (30毫升）及甲苯（30毫升）之冷溶液中。使反應溫熱至瑁境 滞度，#共搢拌2.5小時。將反應混合物倒入醋酸乙醏中 ，使用1HW_溶液、鉋和碳酸氫納及·水洗滌。將溶液乾 燁/MsSiK) ，_藉蒸發移除溶莆•而得式I之SSS與SSR 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X 297公釐） I---------^------ΐτ------d. (請先鬩讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部中央標率扃負工消费合作社印裂 414801 A7 B7 五、發明説明（矽） 非對映立艄異構物之混合物，為油狀物。 程_，序 Π)將N-甲某嗎福啉（46毫升）添加至L-異纈草胺醃基-L-辅胺酸薷酸薷（34克）與THFi850毫井）之琨合物中，接著添 加三甲基氛基矽烷（41毫升），保持溫度低於30Ϊ：。將此混 含物襦伴2小時，然後冷卻至〇 t °進一步添加N -甲基嗎 福啉（16. 5毫升），接著添加氛化4-大茴香甲醯（18奄升）與 THF (25毫升）之溶液，保持溫度低於5 t；°於15分鐘後， 將滔合物過濾，並將濉液於真空中濃鋪成黃色油。將此油 溶解於醋酸乙醏（100牽升）中，並使用飽和碳酸氫鉀溶液 (100毫升）鹼化至出值卜8 。將水層分離及使用醋酸乙酯 (50奄升）洗滌。然後使用2»4鹽_溶液，將水曆酸化至出值 2-3 ，及使用醋酸乙酷（150毫升）萃取。將有櫬萃液於真 空下澥縮，及添加甲笨Π50毫升）。膊此溶液再一次於真 空中_縮，直到收集約50毫升甲苯為止。然後，將此溶液 逐滴添加至己烷（400毫升）中*並播拌而得白色固體*將 其過濾，使用己烷洗滌並於真空中乾埔而得N-(4-甲氧苯 甲醣萆）-L-異纈草胺醢基-L-脯胺酸（40克 >，其具有類似 上文稈序1 ，步嫌（i i i)中所予之NMR。 Π ί )將N-甲基嗎福啉（36. 8奄升）添加至N - (4-甲氧笨甲醢 蓽）-丨,-_繃箄胺嫌基-1-_胺酸（34.8克）輿1'評（100奄升 )及甲萆第三-丁基醚（150毫升）之溶液中，並將此港合 物冷卻辛-。添加氢甲酸異丁酗Π4.4毫升）與甲基第三 -十*18 (30亳升）之溶液，歷經30分鐘，於添加期間保持 -43- 本紙張尺度適用中國國家梯準（CNS ) Α4規格（210X 297公釐） I 裝 訂 線 (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部中央榡準局員工消费合作社印«. 414801 at B7 五、發明説明U!) 消庠存-5 V下。將反應混合物於-5 t下再播拌30分鐘’然 後添加2 HiS)，3 (SRJ - 3-胺基-4 -甲基-1 , 1 , 1 -三氟-2-戊 觭草酴薷（22.3克 >，並使琨合物之溫度上升至20t)，歷經 一小時。添加水（100毫升）及碳酸氫納（5克），並將琨合 物攫拌10分鐘。分離有機相，使用2N鹽酸溶液（50毫升） 、薷水洗滌*及在減壓下•於港度低於50 t；下•進行蒸發 而得（S)-卜[(S_.)-2- U-甲氧基苯羧醣胺基）-3-甲基丁釀基 [2-甲基-1-(2 ,2,2-三氟-卜羥基乙基）丙基]吡咯啶 -2-羧醻胺（42克），為泡沫物，其具有類似上文程序1 ， 步陳Π v)中所予之NMR。 (Hi)將第三-丁酵（60奄升）、水（360牽升）及48%重量 /窜最氣氣化納溶液Π3.9毫升）添加至（S_)-l_[(SJ-2-ί4-甲氧某笨羧釀胺基）-3-甲基丁醸基]-H-[2-甲基 -1-(2.2,2-三氟-1-羥基乙基）丙基]吡咯啶-2-羧釀胺 ί 42克）輿第三-丁酵（3 40奄升）之溶液中。將此溶液冷卻 辛5 TC，並添加過錳酸鉀（40.1克）與水（750亳升）之溶液 ，於5-10它下歷經一小時。將反應琨合物於此溫度下再攪 拌一小時，然後添加甲酵（100毫升），及將混合物於 5 -下播拌2小時。將反應涓合物經過矽蒲土a濾，將 濾胼使闬水（fit)毫升）洗滌。將氛化納（400克）及甲基第三 -丁某醚（200毫升）添加至濾液中，將混合物攪拌1〇分鐘 ，及分離有橢相。將水相K甲基第三-丁基醚（50毫升）萃 取*合併之有機相《鱅使用2M_酸、水、碳酸氫納溶液及 薷水洗滌。將有機溶液乾燦（HsS04> ，及藉蒸發移除揮發 -44- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） ---------^------.玎------^ (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部中央樣準局貝工消費合作杜印製 ___4^8Q1 ab]_五、發明説明（w) 件物膂，而得式Τ之SSS與SSR非對映立體異梅物之非對 映異構物涓合物，為泡沫物（SSS: SSR之比例為約l:u。 於稈序1 ，步驟（iv)及於程序2 *步驟（Π)中所使用之 2US)，3iSH)-3-胺基-4-申基-1,1,1-三氟-2-戊酵，可按 美_專利4,910，190中所述獲得，或3-胺基-4-甲基 -1,1,1-三氟-2 -戊酵（為非對映立體異構物之混合物，其 可替代使用）係按下述獲得： Π)將尿素（72克）與DMF (810毫升）之溶液添加至亞硝酸 納（90克）中，播拌10分鏞，然後冷卻至15=。於30分鐘内 ，添加碘化異丁烷（97. 2毫升），並將反應琨合物於環境溫 度下播拌20小時。使混合物再冷卻至15TD *及慢慢添加水 (810毫升）。將涓合物於瓖境溫度下攪拌5分鐘，然後使 闬甲基第三-丁*醚萃取兩次。合併之有機萃液*使用 20¾碕代碕酸納水溶液洗滌兩次，於真空下墉縮而得2-甲 箪-硝基丙烷（39克）|其係S接使用未進一步鈍化。 (ΓΠ將3Α分子篩（27.04克）於120TC及真空下加熱20小畤》 並添加至2-甲基-卜硝基丙烷（13.0克}與甲基第三-丁基醚 ί 420毫升）之溶液中。將混合物攪拌5分鑪，添加碳酸鉀 (64.5克1，及將渇合物再搢拌30分》。使混合物冷卻至 15” ·並添加氟醛水合物（2 2.0克），歷經30分鏡。將反應 溷合物於瑁境獮度下檯拌16小時•然後冷卻至15TC，及添 加水（270毫升）。於環堍溫度下攪拌5分鐘後，將有檐相 分雕，及使用10%碳酸押水溶液、2Μ鹽酸溶液及水洗嫌。 然&赖蒸發移除溶繭•於減壓及灌度低於40Χ：下進行•及 (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) .裝. 訂 4 '45- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) Α4規格（2丨ΟΧ297公釐） d80 a7414S〇1 :ΙΒ7 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 五、發明説明（ 於溫度低於5 0 t下，將此油與異丙基醇共沸乾燥，而得 4 -甲基-3 - E肖基-1 , 1 ,卜三氟-2 -戊酵ί 2 1 . 3克）*為油吠抱 ，其涤直接使用未進一步純化： (Π Π將4 -甲基-3 -睹基-1 , 1 , ；1 -三氟-2 -戊醇（1 7 · 1克）與 異丙§1 ( 1 1 5毫升）及韻段（〇 , 4 3毫升）之溶寂，於1 0 %钯/ 5炭（2 · 4克）上，於3 · 5巴壓力下氫化•直到氫之吸妝完成 為止。經過矽藻土過瀘，移除.媒•並將漶餅使用異丙醇 洗滌。將濾液於真空下蒸發，直到無進一步異丙醇蔡餾出 為止*並將殘留物溶解於乙腈（4 0毫升）中：添加箄酸 丨_ 3 . 9 4克）與乙腈（8 0毫升）之溶液，並攪拌，使琨合物冷 至5 ;C :·藉過瀘收集已结晶之產物，使甩冷乙睛洗胯並於 5 0 :C下乾燥而得3 -胺基-4 -甲基-1 , 1，1 -三氟-2 -戊醇，為 其草酸顗（9 · 0 8克）。 圖式簡Μ銳明 圔1為式I之SSS非對映立體異構物之典型試樣當其實 質上或基本上不含溶劏時之X -射線粉末繞射光譜。 圖2為式I之SSS非對映立體異構物之典型試樣當其為 無水與水合彤式之大約1 : 1混合物時之！(-射線粉末繞射光 譜。 圖3為式I之S S S非對映立體異構物之典型試樣當其圼 水合（孿-二醇單水合物）形式時之X -射線粉末繞射光譜。 圖4為式I之SSS非對映立體異構試樣當其為賁質上或 基本上不含溶劑時之紅外線光譜= -4 6 本紙铁尺度適用中國國家標準{ CNS ) A4規格（210X297公釐） ---------^------t------/ (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) ^14801 Λ7 〜 Α7 Β7 五、發明説明（ 圃盂1

SSS與SSR非對映立體異構物之非晶質，非對映異構物混合物 {請先閣讀背面之注意Ϋ項再¾寫本頁) -裝. -a 經濟部中央標準局員工消費合作社印裝 =苄氣羰基 迪當試劑包括： (a)三«乙酸 (bl氣甲醆異丁醋，N-甲基嗎福啉* THF (cV氣* 10%鈀/碳•乙糖 (d)氯化大茴香甲醣，碳酸納，THF ie) KMn04，NaOH * 第三-丁酵，水或 卜（3-二甲胺*丙基）-3-乙基碳化二亞胺，CUCH.COaH, DMS0,甲苯 -47- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） 五、發明説明（45 ) 414001 A7 B7

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SSS ®SSR非對映立賴異構物之非晶質非對映異構物混合物 Ck =苄氣羰基 -4 8 - 本紙張尺度適用中國國家樣率（CNS > A4規格（210X297公釐） I i 裝 , 訂 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁)

Claims (1)

1. 第 84102596號 1 中文申請專利範圍修正本(86年9月) ABCD

   2. 根撺申請專利範圍第1項之结晶形式，或其结晶性溶劑 合物，其具有95%或更多在檷記X與it之對掌性中心處 具有S姐態之非對映立體異構物含量，或其结晶性溶劑 合物形式。 3. 根據申請專利範圍第1或2項之结晶形式*其偽實質上 或基本上不含溶劑，或為一種结晶性溶劑化形式，其係 為一種结晶性水合形式。 4· 根撺申請專利範圍第1或2項之结晶性溶劑化形式，其 係為一種式lb化合物 經濟部中央梯隼局貝工消费合作社印裝

   或其水合形式，或其结晶性藥學上可接受之鹽。 本紙張尺度逋用中國围家揉率（CNS )八4規格（2〗0X297公釐） 第 84102596號 1 中文申請專利範圍修正本(86年9月) ABCD

   2. 根撺申請專利範圍第1項之结晶形式，或其结晶性溶劑 合物，其具有95%或更多在檷記X與it之對掌性中心處 具有S姐態之非對映立體異構物含量，或其结晶性溶劑 合物形式。 3. 根據申請專利範圍第1或2項之结晶形式*其偽實質上 或基本上不含溶劑，或為一種结晶性溶劑化形式，其係 為一種结晶性水合形式。 4· 根撺申請專利範圍第1或2項之结晶性溶劑化形式，其 係為一種式lb化合物 經濟部中央梯隼局貝工消费合作社印裝

   或其水合形式，或其结晶性藥學上可接受之鹽。 本紙張尺度逋用中國围家揉率（CNS )八4規格（2〗0X297公釐） 經濟部中央標隼局貝工消费合作社印繁 AS BS C8 DS六、申請專利範圍 5. 根薄申請專利範圍第1或2項之结晶形式，其係實質上 或基本上不含溶劑*且其具有一種X-射線粉末鏡射國樣 ，其中特定蜂在於 2-0=8.95, 11.17，11.47, 13.86, 15.49, 17.86, 18,22, 19.24, 21.58及 21.92° 。 6. 根撺申請專利範諝第1或2項之结晶性溶劑化形式*其 係為一種水合形式，其具有一種X-射線粉末繞射圖樣， 其中特定峰在於 2-0=6.62，10.43· 13.30, 16.17, 19.51, 21.37及 22.80* 。 7. 根據申請專利範圍第1或2項之结晶性溶劑化形式•其 係為一種水合形式•其具有一種X-射線粉末鐃射圔樣， 其中特定峰在於 2-0=6.20, 9.81, 10.29, 12.33， 12.44, 14.22及 17.92。。 S. 根撺申請專利範圍第1或2項之结晶形式，其具有一種 紅外線先譜，其係藉溶劑鑲膜技術，自一種鹽製視窗上 之乙腈鏑膜而獲得•該光諶具有尖峰值在於2968， 1761,1629， 1607. 1533, 1503* 1443, 1259, 1209, 1 178, 1 158，1032, 845 及 767 公分-1。 9- 根撺申請專利範圍第1或2項之结晶形式，其具有 147-151 t：範圍内之熔點。 10.根撺申請專利範圍第1或2項之结晶形式，其具有藉示 差掃描卡計法（加熱速率2 t：/分鐘）所測定之一涠吸熱 事件於約91-92 10下，接著為一個放熱事件開始於約 1 09下，接著為一假吸熱事件開始於約148-1491 下。 414801 (請先聞讀背面之注^^項再填窝本頁) 本紙蒗尺度適用中國國家標率（CNS ) Α4規格（210X297公釐） 414801 齧 α D8 六、申請專利範圍 Π二根搏申請專利範圍第1或2項之结晶形式t其具有熔點 為 116-117T。 12. —種用Μ作為人類白血球彌性蛋白酶抑制劑之醫藥姐合 物*其包含根搪申請專利範藺第1或2項之結晶形式* 以及藥學上可接受之稀釋劑或載劑。 13. ~種製造根據申請專利範圍第1項之结晶形式或溶劑化 彤式之方法*其包括自式I之實質上SSS與SSR非對映 立餚異構物或其溶劑合物之非结晶性混合物，於下述溶 劑之溶液中形成结晶物•該溶劑係選自乙醚、二•正·丙 基醚及二-正-丁基鲢，或下述溶劑，其偽為甲基第三-丁基醚與己烷之混合钧，或醋酸乙酯與己烷之混合物* 視情況於觸媒量之一種三级鹸存在下進行。 14. 根據申請專利範圍第13項之方法·其係烴修正為Μ —種 SSS與SSR非對映立體異構物或其溶劑合物之非结晶性 混合物之溶液開始，於一種具有低於醋酸乙酯沸點之溶 劑中，將醋酸乙酯添加至此溶液中，並於添加己烷之前 ，藉蒸發或蒸餾使該溶液滬縮。 經濟部中央標準局貝工消费合作社印製 (請先《讀背面之注意^項再填寫本頁) 15. —種製造根撺申請專利範園第1項之式I化合物之結晶 彤式或溶劑化形式之方法，其包括將式I之葚質上SSS 與SSR非對映立體異構物或其溶劑合物之非-结晶性混 合物加熱，使用一種鹼*選用H-(1-4C)烷基嗎福啉、 N-(1_4C)烷基六氫吡啶、吡啶及五異丙基胍，於一種溶 劑中*選自甲基第三-丁基醚、己烷、或具有沸點範圍 在100-120 Ϊ；内之烴混合物，或其琨合物，或醋酸乙酯 本紙張尺度速用中國國家橾率（CNS ) A4坑格（210X297公釐） A8 B8 C8 D8 經濟部中央標準局貞工消费合作社印製 六、申請專利範圍 —與弓烷之混合物*於此溶液中添加晶種，及使溶液冷卻 0 16· —種製造根據申請專利範圍第2項之結晶彤式或溶劑化 形式之方法，其包括將得自根據申諝專利範圍第12、 13、14成15項方法之產物，使用一種溶劑再结晶一或多 次，該溶劑係選自甲苯*醋酸乙酯與己烷之混合物，丙 酮與水之涓合物，及第三-丁酵與水之渴合物。 17. -種製造式I之SSS與SSf?非對映立體異構物之非結晶 性非對映異構物混合物或其溶劑合物之方法，其包括： (a) 將ϋ-(4-甲氧苯甲瞌基）-L-異纈草胺醸基-L-脯胺酸 或其薷，與3-胺基-4-甲基-1,1,1-三氟-2-戊醇偶合而 得（SJ-l-[(SJ-2-(4-甲氧基苯羧醸胺基）-3-甲基丁醢基 ]·Ί [2-甲基-1-(2,2,2-三氟-1-羥基乙基）丙基]吡咯啶 -2-羧醯胺；接著 (b) (aJ-l-[(SJ-2-(4-甲氧基苯羧醯胺基）-3-甲基丁 _ 基][2-甲基-1-(2,2,2-三氟-卜羥基乙基）丙基]吡咯 啶-2-羧醯胺之氧化作用。 18. ~種甲氧苯甲睡基）-L-異纈箄胺醯基脯胺酸化 合物或其鹽。 19. ~種製造根據申請專利範園第18項之化合物之方法，其 包栝以下步驟： (i) L-異纈箪胺臨基脯胺酸或其鹽*與三（1-4C)烷 基鹵基矽垸或雙（三（1-4C)烷基矽烷基）乙醯胺之反應， 而得L-異鑕萆胺醯基-L-脯胺酸三（1-4C)烷基矽烷基酯 ---------士私— (請先H讀背面之注意事項再填寫本頁) . 本紙張尺度遘用中國國家揉準（CNS ) A4规格（210X297公釐） 414801 A8 B8 C8 D8 六、申請專利範圍 (iU該L-異纈草鞍醯基-L-脯胺酸三（1-4C)烷基矽烷基 酯與一種4-甲氣基苯甲酸之活化衍生物之反應•而得 iL-(4-甲氧苯甲瞌基）-L-異纈草胺豳基-L-脯胺酸三 (1-4C)烷基矽烷基酯；及 (Hi)該三（1-4C)烷基矽烷基保護基之移除。 ---------装-- (請先閏讀背面之注意事項再填寫本頁) 訂 經濟部中央揉隼局負工消费合作社印$L 本紙張尺度適用中國國家梂率（CNS ) A4洗格（210X297公釐）