TW412529B - Isopropyl 2-methoxyethyl 4-(2-chloro-3-cyano-phenyl)-1,4-dihydro-2,6-dimethyl-pyridine-3,5-dicarboxylate - Google Patents

Description

412529 專利申請案第84101294號 ROC Patent AppIn. No.84101:制 中文赛明書修正頁-附件(4軔, > of Ρΐβ Chinese Sn^ci f icat ion 84 9.】δ T ---^IgDggd^Paqes of ftie Chinese Speni f icaMon -Fn 五、發明説明（) 二乂（民國心—年5月i分曰送i) ^ v } (Submitted on September ^ , 1995) 一本發明涉及新化合物外消旋4-(2—氯-3-氰基-苯基)_1,4-—氫~2,6-二甲基-叱啶_3,5-二甲酸異丙酯2-甲氧基乙酯及其 純對映體’它們的製備方法及其作為藥物應用，特別是用 於治療大腦和神經元疾病，以及製備它們時用到的新的中 間體p ' 業已披露，某些Ί，4-二氫吡啶(例如硝苯吡酯）具有大腦 居险(參見德國公開專利説明書.(German 〇ffen!en丨零哪sc_)2 815 578)。還在—般意義上，有時也作為具體的個別化合 物k到在第4位上帶有苯環的二氫吡啶衍生物，該苯環可 任意地被南素和/或氰基取代（參見德國公開專利説明書 1963188、2117573和印4-026317)。但是，此前已知的任何 —氫吡呢都未提到在第4位上有特定的2_氣_3_氰基苯基基 圈第4位上的這一特定的取代基是利用同樣是新化合物 的2-鼠-3-氰基笨甲越通過適當的環合反應引入的，它是本 發明的基本要素。 - 本發明涉及式（I)的化合物外消旋4_(2_氯—3—氰基苯基卜 1’4〜二氫—2,6-二基吡啶_3,5_二甲酸異丙酯甲氧基乙酯及 其對映體，

{请先閱讀背面之注意事項再填寫本I) 裝. 訂 經濟部中央標準局負工消费合作社印製

CN CI C02-CH(CH3)2 (I) 本紙張尺度適用中國@1家梯準（CNS)八4胁（210><297公爱） 412529 專利申請案第84101294號 ROC Patent AppIn. No.84101:制 中文赛明書修正頁-附件(4軔, > of Ρΐβ Chinese Sn^ci f icat ion 84 9.】δ T ---^IgDggd^Paqes of ftie Chinese Speni f icaMon -Fn 五、發明説明（) 二乂（民國心—年5月i分曰送i) ^ v } (Submitted on September ^ , 1995) 一本發明涉及新化合物外消旋4-(2—氯-3-氰基-苯基)_1,4-—氫~2,6-二甲基-叱啶_3,5-二甲酸異丙酯2-甲氧基乙酯及其 純對映體’它們的製備方法及其作為藥物應用，特別是用 於治療大腦和神經元疾病，以及製備它們時用到的新的中 間體p ' 業已披露，某些Ί，4-二氫吡啶(例如硝苯吡酯）具有大腦 居险(參見德國公開專利説明書.(German 〇ffen!en丨零哪sc_)2 815 578)。還在—般意義上，有時也作為具體的個別化合 物k到在第4位上帶有苯環的二氫吡啶衍生物，該苯環可 任意地被南素和/或氰基取代（參見德國公開專利説明書 1963188、2117573和印4-026317)。但是，此前已知的任何 —氫吡呢都未提到在第4位上有特定的2_氣_3_氰基苯基基 圈第4位上的這一特定的取代基是利用同樣是新化合物 的2-鼠-3-氰基笨甲越通過適當的環合反應引入的，它是本 發明的基本要素。 - 本發明涉及式（I)的化合物外消旋4_(2_氯—3—氰基苯基卜 1’4〜二氫—2,6-二基吡啶_3,5_二甲酸異丙酯甲氧基乙酯及 其對映體，

{请先閱讀背面之注意事項再填寫本I) 裝. 訂 經濟部中央標準局負工消费合作社印製

CN CI C02-CH(CH3)2 (I) 本紙張尺度適用中國@1家梯準（CNS)八4胁（210><297公爱） 412529 A7 B7 五、發明説明（ msa 本年月 本發明還涉及許多種製備本發明（丨）化合物的方法，該 方法的特徵在於： - [A]式(丨I)的2~氣_3_氰基苯甲醛先與式(丨||)的乙醯乙酸2_曱 氧基乙自旨反應

CI CHO

CN (II) H3C-C〇-CH2-C〇2(ch2) 2och3 (III) 如果合適’分離出相應的式(IV)亞基化合物 經濟部中央標準局負工消費合作社印装 'Cl CH (IV) I! C-C〇2-(CH2)2〇CH3 co-ch3 隨後與式(V)的乙酿乙酸異丙醋以及與氨或按鹽反應1 ch3-c〇-ch2-co2-ch(ch3)2 (V) 或者在惰性溶劑中直接與式(VI)的胺基-2-丁烯酸異丙酯（它 可由氨和(V)製備)反應， H3C\^CH-C〇2-CH(CH3)2Γ (VI) NH, 本紙張尺度逋用中國國家揉準（CNS ) A4规格（210X297公釐） ^^^1- li^n l^n ^Jm I ϋ t^i^i M 1 U3. 言 - « (請先閲讀背面之注意事項再填寫本瓦) 412529 A7 B7 五、發明説明（ msa 本年月 本發明還涉及許多種製備本發明（丨）化合物的方法，該 方法的特徵在於： - [A]式(丨I)的2~氣_3_氰基苯甲醛先與式(丨||)的乙醯乙酸2_曱 氧基乙自旨反應

CI CHO

CN (II) H3C-C〇-CH2-C〇2(ch2) 2och3 (III) 如果合適’分離出相應的式(IV)亞基化合物 經濟部中央標準局負工消費合作社印装 'Cl CH (IV) I! C-C〇2-(CH2)2〇CH3 co-ch3 隨後與式(V)的乙酿乙酸異丙醋以及與氨或按鹽反應1 ch3-c〇-ch2-co2-ch(ch3)2 (V) 或者在惰性溶劑中直接與式(VI)的胺基-2-丁烯酸異丙酯（它 可由氨和(V)製備)反應， H3C\^CH-C〇2-CH(CH3)2Γ (VI) NH, 本紙張尺度逋用中國國家揉準（CNS ) A4规格（210X297公釐） ^^^1- li^n l^n ^Jm I ϋ t^i^i M 1 U3. 言 - « (請先閲讀背面之注意事項再填寫本瓦) 412529 at ΙΠ 五、發明説明（ 、 專利申請案第84101294號 ! ROC Patent Appln. No. 84101294 中文說明書修正頁第10,12及13頁-附件(三） Amended Pages 10, 12 and 13 of the Chinese Specification — Enel. ΠΙ '^ (民國 88 (Amended & Submitted on January 21, 1999) 式(HI)、（V)、（VI)和(VIII}化合物是本身已知的化合物。 式（丨丨)的2-氣-3-氰基-苯甲醛是新化合物，可以用例如 以下方法製備：在惰性溶劑中和催化劑存在下，利用在保 護性氣氛和輻照下的溴化反應，先將式(X丨)的2_氣-3_氰基 甲苯轉化成式(XII)化合物2_氣-3-氰基亞苄基二溴。

CI CH,

CN (XI)

CI C, H，丨 'Br Br

CN (XII) I 1·^^— ^ 1 , 牙-5 • ' - ("先間讀背而之注&事項-"填^?本頁) 經巧-部中央標卑局負工消资合作社印裝 在第二步中用銀鹽在醇溶液中處理此產物粗品’反應後得 到醛。 . 第一步反應的合適溶劑優選上述的齒代烴’例如二氯 甲虼或四氯化碳。特別優選四氣化碳。 合適的溴化劑優選Ν-溴代琥珀亞胺或溴。特別優選Ν-溴代琥珀亞胺 此方法的第二步的合適溶劑是冰或上述的醇’例如甲 醇、乙醇、丙醇或異丙醇，或者它們的混合物。優選乙醇 〇 合適的催化劑是例如偶氮異丁腈或過氧化二苯甲醯。 10 適用中國國家標隼（CNM Λ4现枯（公I; 412529 A7 B7 五、發明説明（3) 或者 [B]式(丨丨)的2-氯-3-氰基苯甲醛先與式(v)化合物反應，如 果合適，分離出式(VII)的亞基化合物

CN

Cl CH II C-C〇2-CH(CH3)2 (VII) CO-CH, (請先間讀背面之注意事項再填寫本頁) 裝 (νπΐ) 接著與式（丨丨丨）化合物以及與氨或銨鹽反應，或者在惰性溶 劑中直接與式(VNI)的胺基丁烯酸2-甲氧基乙酯（可由氨 和(III)製備)反應， H3C^CH-C〇2-(CH2)2-OCH3 NH„ 或者 [Cl通式（IX)化合物與輔助劑在惰性溶劑中反應，如果 合適，在驗存在下反應， 訂. 經濟部中央標準局員工消費合作社印製

Cl COOH ⑽) ch3

本紙張尺度適用中國S家標準(CNS)A4規格(210 X 297公釐)

() 出口的動物數目的增加。 根據Porsolt的鼠游泳試驗 在預備性試驗期間’將幼鼠放在裝有17(；01高的四^水 玻璃舡（高40cm、直徑2〇cm)内。在水中20分鐘後，取出動 物在燈下暖和30分鐘。在這一頂備性試驗中，所有的鼠都 試圖爬出玻璃缸’直到約15分鐘後保持不動("行為絕望"，放 棄行動）。24小時後開始試驗，像前一天一樣將鼠放在玻 璃缸中’但是這次只放5分鐘。記下在這5分鐘内鼠保持不 動的時間。在這種情形下，若是鼠直立地浮在水中，只進 行最小的動作以保持頭部高出水面，則認為它是不動的。 與安慰劑相比，試驗物質組的不動時間減小，由此可見.它 的抗抑鬱作用。 本發明的化合物及其純對映體在提高學習和記憶的效 果方面比已知的二氮p比咬類優越。例如’（+)4~(2_氣-3-氛基 苯基Η ,4-二氫-2,6-二甲基吡啶-3,5-二羧酸異丙基2-甲氧乙 基二酯在水迷宮模型動物試驗（老鼠）中，在口服0.1-1.0mg 的範圍内顯著提高了識別能力，而硝苯咐:酯只在口服 15mg/kg時才起作用》同時，本發明化合物不顯示或者顯示 出明顯低於已知化合物（如硝苯吡酯）的血壓降低。在正常 血壓模型的動物鼠中，硝苯吡酯在口服3〇mg/kg時血壓的降 低約比(+)4-(2-氣-3-氰基苯基卜1二氫二甲基吡啶-3,5-二羧酸異丙基2-甲氧乙基二酯強3倍；對自發高血壓模型 的動物鼠(3和1 〇mg/kg ，口服）也得到類似結果。因此’在 -13" 本紙张尺度適用中國國家標準（CNS ) μΛ ( 210x7^*^ ) ^ 412529 A7 B7 五、發明説明（4) 其中A代表式-CH(CH3)2或-(CH2)2-OCH3的基圈’得到 活化的羧酸衍生物，可以任選地將其分離，然後與式(X}的 醇反應’如果合適，在用無機鹼將醇轉化成醇盥之後反應 ， E-OH (X) 其中E根據取代基A的定義代表式-CH(CH3>2或 -((^2)2-0(^3的基團， 為了製備對映體，用合適的旋光性羧酸衍生物與適當 的醇反應，或者用層析法在對掌性固定相上分離外消旋物 〇 本發明的方法可以用以下反應示意圖示例説明： IA] ί:.......-..........束—.............ΐτ (請先間讀背面之注意事項再填寫本頁)

Cf CHO

CN H2C"CO*CH2*C〇2'(CH2)2~^^^3 乙酸

9C CH + we—C=CH^CO^CH{CH3)2 i NH, 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 H3C-0C-C*C02-(CH2)2-0CH3

CN Cf C〇2OH(CH3)2 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS)A4规格(2丨0X297公釐)

412529 A7 ----一______B7 五、發明説明（） 一般來説，為達到所要求的效果，每kg體重每24小時 施用的式⑴活性化合物總量宜為約0 〇1至约5〇mg，優選0.1mg 至1〇mg ’如果合適’分幾次施用。 但是’偏離上述劑量有時是有利的，這取決於治療對 象的體重和類型、對藥物的個體反應、病症的性質和嚴重 程度、製劑及給藥的類型以及給藥的次數和間隔。 若無另外説明，每種情形裡列出的|^値均用矽膠上的 薄層層析法測定（銘羯、矽膠60F254、E. Merck公司）。通過 在紫外光下觀察並且/或者用1%濃度高錳酸鉀溶液或磷鉬 酉义溶液噴霧使物質的色斑顯影。 在矽膠60(0·040-0·〇64ιμ，E. Merck)上進行加壓快速層析 法。用溶劑梯度法洗脱：開始用純的非極性溶劑混合物组分，混 入極性洗脱劑组分使其含量漸增，直到洗脱出所要的產物（ 薄層色°=晋檢驗）。對於所有產物，都在最終約0.1 mmHg下蒸 除溶劑。

起始化合物 實施例I 2 -乙酿基-3-(匕氯-3-氰基)_2_丙烯酸2_甲氧基乙酯 m Hi tl^l· tm tttf I 1 ml TJ , . US, i (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部中央標準局員工消費合作社印製

I

H3C-〇C^C〇2-(CH2)2-〇CH3 •〜15〜 本紙張適用中國國家榡芈（c .八4規格（2 i 〇 X 297公瘦） 412529 A7 B7 五、發明説明（5 ) [巳1

CI

CN CHII C-C02-CH(CH3)2 C0-CH3

3c—c=ch-co2-(ch2)2,och3 hh2 CN fcCI C02-(CH^)2-OCH3

/^N —VJ HO-CH{CH3)2 oc h3co-(ch2)2-o2c' CN Cl C02-CH(CH3)2 ——：-----,,..........裝...............t............... ^ (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁)

NIH 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 適合用於本文方法[A]和[B]的溶劑是在反應條件下不發 生變化的所有惰性有機溶劑。這些溶劑中優包括醇類（如 甲醇、乙醇、丙醇或異丙醇）、醚類（如乙醚、二噁烷、四 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS)A4規格(210X297公釐) 412529 A7 B7 五、發明説明（

將0.5m丨眼峻和0.3ml冰乙酸溶在4ml異丙醇中，然後加 到13.0g(78,5mm〇l)2_氯_3_氰基苯甲越和13,8g(86mmol)乙醯乙 酸2_甲氧基乙酯在13〇ml異丙醇中的溶液裡。在40°C下攪拝 過夜，將混合物濃縮，殘餘物溶在曱笨中，溶液經矽膠 過涑濾(溶劑：甲苯/乙酸乙酯梯度1:〇至1〇:1)。蒸發後得 淺黃色油狀物’不經進一步純化進行下一步反應。

實施例II 2_氯-3-氰基亞节基二溴 1.1^---：----策-- (請先閱读背齑之注意事項其填寫本頁)

經濟部中央標準局員工消費合作社印製 將100g(0.66mol)2-氯-3-氰基甲苯(CAS 15013-71 -5)在氬氣 下溶在1.0L四氯化碳中，用28〇g(1.6mol)N-溴代琥珀醯亞胺 和〇.65g偶氮異丁腈處理。將混合物在劇烈攪拌下加熱回流 ’在此期間用燈照射(3〇〇w，Osram.Ultra-Vita丨ux®)。在21小 時和36小時後，每次都再加入5〇gN-溴代號珀酿亞胺和0.5g 偶氮異丁腈。在總計6〇小時後反應完成。冷卻後濾出不溶 性物質；沈澱物隨後用四氣化碳洗幾次，丟掉。濾液濃縮後 本紙張尺度適用中國國家操準（CNS ) A4現格（210X 297公釐） 412529 Α7 Β7 經濟部中央標準局員工消費合作杜印製 五、發明説明（6) 氫呔喃、乙二醇二甲醚或二甘醇二甲醚）、乙腈、醯胺類（ 如六甲基磷醯胺或二甲基甲醯胺}、乙酸、南代烴類(如二 氣甲统，四氣化碳）或烴類(如苯或甲苯）。也可以使用上述 溶劑的混合物。特別優選的是異丙醉、四氫呋喃、甲醇、 二噁蟓和二甲基甲醯胺。 適合用於方法[C]的溶劑是除了醇類和乙酸以外的上述 溶劑。 適合用於方法[A]和[B]的鹼優選環胺(如酿啶）、Crq-三和二烷基胺（如二乙胺和三乙胺）、吡啶或二甲基胺基吡 症，特別是狼喊、二T基胺基p比攻和比淀。 優選使用縮合劑作為活化羧酸（IX)用的輔助劑，這裡 最好使用常用的縮合劑，例如碳化二亞胺類（如Ν,Ν·-二乙 基一、Ν,Ν’-二丙基-、Ν,Ν’-二異丙基-和Ν,Ν1-二環己基碳化二 亞胺，Ν-(3-二甲基胺基異丙基)-仏乙基碳化二亞胺鹽酸鹽） 、或羰基化合物(如羰基二咪唑）、或1,2-噁唑鏘化合物(如2-乙基-5-苯基-1,2-噁唑鏺-3-磺酸鹽或2-第三丁基-5-甲基異 噁唑错高氣酸鹽）、或醯胺基化合物（如2_乙氧基-1-乙氧羧 基-1,2-二氫喹啉、或丙膦酸酐、或氯甲酸異丁酯、或苯並 三唑基氧三（二f基胺基）六氟膦酸鱗。優選Ν,Ν’-二環己基 碳化二亞胺和羰基二咪唑。 適合用於方法[C]的磁是驗金屬碳酸麋（如碳酸朝或碳 酸鉀)或有機鹼，例如三烷基胺如三'乙胺、Ν-乙基嗎啉、Ν-甲基哌啶、二異丙基乙胺' 或二甲基胺基吡啶、1,8-二氮 雜二環[5.4,0]十一碳-7-烯(DBU)或1,5-二氮雜二環[4.3.0〗壬 〜8〜 本纸張尺度適用中國國家標準(CNS)A4規格(210X297公釐) I- J— 裝 11 I — -?Γ (請先閲讀背面之注意事項再本頁) 412529 A7 B7

五、發明説明（） 知到180g作為產物粗品的標題化合物（根據結果，复 中口力2/。的相應的苄基溴和12%相應的三溴甲苯）。實施例III 2-亂-3-散基苯甲链 經濟部中央標準局貝工消費合作社印製 將實施例I丨的混合物產物粗品溶在彳乩g5。/。乙醇中’溫 ，到60。〇在此溫度下向其中逐滴快速加入I86g(1.1m叫硝 酸銀在已混有750ml乙醇的38〇ml水中的溶液。加完後攪拌 混合物1小時，然後與50m|飽和氣化鈉溶液混合。冷卻後 遽出銀鹽，將滤液濃縮。殘餘物溶在二氯曱虎中，經過一 根短矽膠柱過濾純化（洗脱液：二氯甲烷）。將產物餾份濃 縮後得到88g(81%)標題化合物。溶點：86-89°C。 1 H-NMR (CHCg： δ -7.55 ppm (t, 1H); 7.95 {dd, 1H); 8.20 (dd, 1H)；10.5(s, 1H).製備實施例 實施例1 外消旋4-(2-氯_3-氰基苯基)-1,4-二氫-2,6-二甲基吡啶-3,5-二 〜17〜 本紙伕尺度適用中國國家榇準（CNS ) A4规格U10 X 297公釐} :. I~. 神衣 訂 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁} 412529

經濟部中央標準局員工消費合作社印製 烯(DBN)。優選二甲基胺基吡啶。 鹼的用量一般為1莫耳式(丨χ)化合物 ，優選0.〇5莫耳至〇.1莫耳。 旲今旲斗 方法[c]中的輔助劑用量一般莫耳式(ΙχΗ匕合物… 莫耳至3莫耳，優選從1莫耳至彳5莫耳。 方法丨C】中使用無機檢是驗金屬或其氩化物。優選使用 鈉和氫化物。方法丨C]中無機鹼用量一般為每莫耳式丨v化合 物用ο·1至1〇莫耳，優選〇2至2莫耳。 方法[A〗、[B丨和[CI的反應溫度可以在相當寬的範圍内變 化。一般説來，反應在—2〇。(：至2〇〇°c、優選〇1至11〇。(：的 範圍内進行。 這些方法可以在常壓 '加壓或減壓下進行{例如從0·5 至5巴）’優選在常壓下進行。 當進行本發明的方法時，參加反應的各物質的比例隨 意。但是通常使用莫耳數量的反應物進行反應。 純對映體形式是另外得到的，例如，將外消旋體在有 對掌性固定相的層析柱上分離。 通式（IX)的活性酸衍生物在某些情形下羌已知的，或 者是新化合物，那時可按照常用方法製備。 通式(X)化合物是已知化合物。 式（丨V)的亞基化合物是新化合物’可以按照上述方法 製備。 ’ 式（VII)的亞基化合物是新化合物’可以按照[Α]中所述 通過式(V)化合物與式(II)的2-氯-3-氰基-苯甲醛反應製備。 〜9〜 本紙張尺度適用中國固家標準(CNS)A4規格(21〇X297公釐) -----：................^................,tr (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 412529 A7 B7

§a

CI C〇2-(CH2)2-OCH3 五、發明説明（） 羧酸異丙基2_甲氧乙基

CN 將18.6g(60.5mol)實施例丨起始化合物和8.7g(60，5mol) 氨基-2-丁烯酸異丙酯在250ml異丙醇中加熱回流4小時， 濃縮後得到囡體’將其用乙醚（18.〗g)溶解’然後與同樣 數量的環己烷在180ml的甲苯中在蒸發熱下混合。冷卻至 室溫後得到晶體，在循環空氣乾燥箱中於8〇ec下乾燥。 產率：17.6g(67%)。熔點：148-149°C。 實施例2和實施例3 (+)-外消旋4-(2-氯-3-氛基苯基)-1,4-二氮-2,6-二甲基11比淀-3,5-二羧酸異丙基2-甲氧乙基二酯 ㈠-外消旋4-(2-氯~3_氰基苯基)-1,4_二氫-2,6-二.曱基吡啶-3,5-二羧酸異丙基2-甲氧乙基二酯 ^^1 ^^^1 ^^^1 ^^^1 ^^^1 ^^1 nn m n^— 1 .、 - , J3. 、\=口 (請先鬩讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部中央標準局員工消費合作社印製

，18, 本紙張尺度適用中國國家椟準（CNS ) A4規格（210X297公釐） 412529 at ΙΠ 五、發明説明（ 、 專利申請案第84101294號 ! ROC Patent Appln. No. 84101294 中文說明書修正頁第10,12及13頁-附件(三） Amended Pages 10, 12 and 13 of the Chinese Specification — Enel. ΠΙ '^ (民國 88 (Amended & Submitted on January 21, 1999) 式(HI)、（V)、（VI)和(VIII}化合物是本身已知的化合物。 式（丨丨)的2-氣-3-氰基-苯甲醛是新化合物，可以用例如 以下方法製備：在惰性溶劑中和催化劑存在下，利用在保 護性氣氛和輻照下的溴化反應，先將式(X丨)的2_氣-3_氰基 甲苯轉化成式(XII)化合物2_氣-3-氰基亞苄基二溴。

CI CH,

CN (XI)

CI C, H，丨 'Br Br

CN (XII) I 1·^^— ^ 1 , 牙-5 • ' - ("先間讀背而之注&事項-"填^?本頁) 經巧-部中央標卑局負工消资合作社印裝 在第二步中用銀鹽在醇溶液中處理此產物粗品’反應後得 到醛。 . 第一步反應的合適溶劑優選上述的齒代烴’例如二氯 甲虼或四氯化碳。特別優選四氣化碳。 合適的溴化劑優選Ν-溴代琥珀亞胺或溴。特別優選Ν-溴代琥珀亞胺 此方法的第二步的合適溶劑是冰或上述的醇’例如甲 醇、乙醇、丙醇或異丙醇，或者它們的混合物。優選乙醇 〇 合適的催化劑是例如偶氮異丁腈或過氧化二苯甲醯。 10 適用中國國家標隼（CNM Λ4现枯（公I; 412529 .ί'，- Λ7 : i .. ! in Ί ·· . j. - | 五、發明就柄:） 專利申請案第84101294號 ROC Patent Appln. No. 84101294 補充之試驗資料中文本-附件一 Supplemental Test Data in Chinese - Enel. I (民写88年1月21日送呈) (Submitted on January 21 , 1999) 圖1 水迷宮中實施例2對錯誤次數之影響(使用老年Wistar鼠) 水迷宮中實施例2對老年Wistar鼠之影響 ο 5 2 1sLUs+t ο 5 載劑對，照組 （n = 15)HU-毫克/公片d服實施例 2 (η =14) ρ < 0.05對載劑

I ,Γ Ϊ I ~H ..... H .~^訂 f ri r'" (誚"閱讀背而之注意市項搏填艿本頁) 經消部中央標卑局於工消费合作社印奴

C 丁 2 T 3 T 4 T 6 試驗序次 -20 -

本紙張尺度適用中國國家椋準（CNS ) 格（2lOX2Q7-:>iM 412529 Τ'^ _— ¥_ 五、發明說明-- 優選偶氨異丁腈。 催化劑的用量一般為每莫耳式(Χ〇化合物用0.0005莫耳 至0.05莫耳’優選_5莫耳至〇〇2莫耳。 ^ Ν~溴代琥珀醯亞胺的用量為每莫耳式(XI)化合物用2至5 莫耳，優選2.2到3莫耳。 ?臭化反應的溫度為4〇*>C到各溶劑的回流溫度，優選在 回洗溫度下進行。 轉化成醛的反應在2〇°CM〇〇*>c的溫度範圍内進行，優 選 40°C-70°c。 反應一般在常壓下進行，但是也可以在加壓或減壓下 進行(例如在0.5至5巴的範圍内” ^合適的銀鹽一般是諸如硝酸銀、碳酸銀或四氟硼酸銀 等鹽類。優選硝酸銀。 式(X丨)的2~氣-3-氰基甲基是已知化合物(CAS15015-71 -5) 〇 · 式(XII)的L氣_3_氰基亞苄基二溴是新化合物，可以用 例如上述方法製備。 上述的製備方法僅供解释用。通式⑴的化合物及其對 映體的製備不限這些方法，任何對這些方法的修改和常用 的其它替代方法都可按照同樣的方式用來製備本發明化合 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 ......—..........裝................訂 (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 物。 '本發明化合物及其純的對映體‘示出乎預料的'有效 的燊理作用範圍。正如它在典型的學習和記憶模式（例如 水迷宮、被動回避反應或者自動化斯金鈉箱記憶試驗）中 〜11〜 本紙張尺度適用中國國豕標準(CNS)A4規格(210Χ 297公愛) 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 .412529 A7 . ：. _B7_____ 五、發明説明（） 專利申請案第84101294號 ROC Patent Appln. No. 84101294 補充之試驗資料中文本-附件一 Supplemental Test Data in Chinese - Enel. I 民國88,年2月i曰 送呈 (Submitted ipn February ι , 1999) I 1 . 藉由超過濾（Ultrafiltration)測定蛋白質之結合 1. 方法之原理 經蛋白質結合及未經結合之經放射標記之試驗化合 物或帶有放射活性之試驗化合物之分離藉由含窄孔 徑之膜的超過濾裝置進行。過濾之驅動力藉由離心 取得。 進行蛋白質結合研究前，藉由溶於超過濾液之試驗 化合物的過濾檢視試驗化合物於超過濾裝置之吸附 及試驗化合物通過膜之能力。 2. 封料 實驗室搖動器 KS 500 (Janke und Kunkel，IKA Labortechnik, Staufen,德國） 具有YMT超過濾膜之Centrifree®微分配系統 (Amicon GmbH, Witten,德國） 實驗室過渡器Sigma 4K10 (Sigma Laborzentrifugen, Osterode,德國） 3. 研究程序 血漿、含蛋白質之缓衝液或超過濾液與經放射活性 -ι - B83364WC-SD1(9BAYER) 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4规格（210X297公: K^IKi ^i·^— ^^^^1 m^i In 1. —^ϋ it —^1·— nn·Ί (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 41 公52¥ Λ7 in 五、發明説明（） 的記憶增強效果所顯示的’它們對學習和記憶能力有正性 作用。這些化合物在Porsolt鼠游泳試驗中的活性證實*它 們具有抗抑鬱的潛在能力。 結合性測定 按 Ramp D.R., Mutledge A.，Janis R.A. Triggle D.丄:Can. Journ·

Physiol. Pharmacol,翌,（1987)1452測定鼠腦或鼠心的 PN 2〇〇-110 結合位點的結合親和力。 水迷宮 將老年Wistar鼠放在裝滿冷水的塑料槽中起始位置， 用垂直的擋板將槽隔成小間。為了到達一個能使動物從水 中逃出的梯子，它們必須繞著這些擋板游泳，記下發現出 口所需的時間和在行進中的錯誤次數。在這種情形裡，錯 誤規定為游到了死胡同，·或者是游過了槽中沿遠離出口的 方向分隔成的假想方塊的邊界。 經濟部中央桴丨趵月工消费合作.社印裝 ---：---；----,4 — f (誚尤閲讀背而之注意事項丹填艿本頁) 使鼠呆在迷宮裡直到找到出口，但是最長呆300秒》 然後取出鼠，在紅燈下乾燥和溫熱。然後放回到它們的飼 養籠中。 在一項典型的試驗中，借助預試驗確定兩組相當的動物 組（安慰劑和試驗物質組各n=15) ^然後令動物完成六次試 驗，每天兩次。試驗物質或安慰劑‘在試驗前30分鐘口服 。與安慰劑相比，試驗物質提高學習和記憶作用的度量標 準是到達出口所需時間的縮短、錯誤次數減少和眞正找到 ' 12 - 本紙张尺度適用中國國家標準（CNS ) Λ4圯梢（2丨〇χ29ϋ i

() 出口的動物數目的增加。 根據Porsolt的鼠游泳試驗 在預備性試驗期間’將幼鼠放在裝有17(；01高的四^水 玻璃舡（高40cm、直徑2〇cm)内。在水中20分鐘後，取出動 物在燈下暖和30分鐘。在這一頂備性試驗中，所有的鼠都 試圖爬出玻璃缸’直到約15分鐘後保持不動("行為絕望"，放 棄行動）。24小時後開始試驗，像前一天一樣將鼠放在玻 璃缸中’但是這次只放5分鐘。記下在這5分鐘内鼠保持不 動的時間。在這種情形下，若是鼠直立地浮在水中，只進 行最小的動作以保持頭部高出水面，則認為它是不動的。 與安慰劑相比，試驗物質組的不動時間減小，由此可見.它 的抗抑鬱作用。 本發明的化合物及其純對映體在提高學習和記憶的效 果方面比已知的二氮p比咬類優越。例如’（+)4~(2_氣-3-氛基 苯基Η ,4-二氫-2,6-二甲基吡啶-3,5-二羧酸異丙基2-甲氧乙 基二酯在水迷宮模型動物試驗（老鼠）中，在口服0.1-1.0mg 的範圍内顯著提高了識別能力，而硝苯咐:酯只在口服 15mg/kg時才起作用》同時，本發明化合物不顯示或者顯示 出明顯低於已知化合物（如硝苯吡酯）的血壓降低。在正常 血壓模型的動物鼠中，硝苯吡酯在口服3〇mg/kg時血壓的降 低約比(+)4-(2-氣-3-氰基苯基卜1二氫二甲基吡啶-3,5-二羧酸異丙基2-甲氧乙基二酯強3倍；對自發高血壓模型 的動物鼠(3和1 〇mg/kg ，口服）也得到類似結果。因此’在 -13" 本紙张尺度適用中國國家標準（CNS ) μΛ ( 210x7^*^ ) ^ 經濟部中夬標準局員工消費合作社印製 412529 一 A 7 --------- B7____ 五、發明説明（12) 本發明化合物的情形，可以預期產生更有效的專一的中樞 神經系統作用’同時對心血管系統的不良影響較小。 -由於它的藥理性能，本發明化合物可以用來製備用於 治療中樞神經系統變性型障礙，例如在痴呆症（多發梗死 型旅呆MID、原發變性型痴呆FDDD、早衰型和衰老塑阿爾 茨氐病、艾滋病病毒痴呆和其它形式的痴呆 >、帕金森氏 病或肌萎縮脊髓側索硬化病中發生的失調症狀。 它還適合於治療老年性大腦功能障礙、器質性腦综合 症(OBS)和與2年紀有關的記憶衰退(MMI)。 它也適合於預防和控制大腦循環障礙（例如大腦局部 缺血、中風)的後遣症和蛛網膜下出血。 它適合於治療抑鬱症和躁狂症。其它的應用領域包括 治療偏頭痛、由例如代謝障礙（如糖尿病、到傷、中毒、 微生物或自身免疫障礙）引起的精神病，以及治療上癌症 和脱癮症。 . ’ 本發明還包括藥物製劑及其製備方法，謗製劑除了惰 性、無毒的藥學上適用的輔助劑和賦形劑以外，還^有通 式(丨)化合物。 這些製劑中式⑴活性化合物的濃度應為總的混合物重 量的 0.1-99.5%，優選0.5-95%。 除了式（丨）活性化合物之外，這些藥物製劑中還可以含 有其它的藥學活性化合物。 上述的藥物製劑可以用已知方法按常用方式製備，例 如使用賦形劑或輔助劑。 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS)A4規格(210Χ 297公釐) —^.....-..........^................訂 (請先Μ讀背面之注意事項再填寫本頁)

412529 A7 ----一______B7 五、發明説明（） 一般來説，為達到所要求的效果，每kg體重每24小時 施用的式⑴活性化合物總量宜為約0 〇1至约5〇mg，優選0.1mg 至1〇mg ’如果合適’分幾次施用。 但是’偏離上述劑量有時是有利的，這取決於治療對 象的體重和類型、對藥物的個體反應、病症的性質和嚴重 程度、製劑及給藥的類型以及給藥的次數和間隔。 若無另外説明，每種情形裡列出的|^値均用矽膠上的 薄層層析法測定（銘羯、矽膠60F254、E. Merck公司）。通過 在紫外光下觀察並且/或者用1%濃度高錳酸鉀溶液或磷鉬 酉义溶液噴霧使物質的色斑顯影。 在矽膠60(0·040-0·〇64ιμ，E. Merck)上進行加壓快速層析 法。用溶劑梯度法洗脱：開始用純的非極性溶劑混合物组分，混 入極性洗脱劑组分使其含量漸增，直到洗脱出所要的產物（ 薄層色°=晋檢驗）。對於所有產物，都在最終約0.1 mmHg下蒸 除溶劑。

起始化合物 實施例I 2 -乙酿基-3-(匕氯-3-氰基)_2_丙烯酸2_甲氧基乙酯 m Hi tl^l· tm tttf I 1 ml TJ , . US, i (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部中央標準局員工消費合作社印製

I

H3C-〇C^C〇2-(CH2)2-〇CH3 •〜15〜 本紙張適用中國國家榡芈（c .八4規格（2 i 〇 X 297公瘦） 412529 A7 B7 五、發明説明（

將0.5m丨眼峻和0.3ml冰乙酸溶在4ml異丙醇中，然後加 到13.0g(78,5mm〇l)2_氯_3_氰基苯甲越和13,8g(86mmol)乙醯乙 酸2_甲氧基乙酯在13〇ml異丙醇中的溶液裡。在40°C下攪拝 過夜，將混合物濃縮，殘餘物溶在曱笨中，溶液經矽膠 過涑濾(溶劑：甲苯/乙酸乙酯梯度1:〇至1〇:1)。蒸發後得 淺黃色油狀物’不經進一步純化進行下一步反應。

實施例II 2_氯-3-氰基亞节基二溴 1.1^---：----策-- (請先閱读背齑之注意事項其填寫本頁)

經濟部中央標準局員工消費合作社印製 將100g(0.66mol)2-氯-3-氰基甲苯(CAS 15013-71 -5)在氬氣 下溶在1.0L四氯化碳中，用28〇g(1.6mol)N-溴代琥珀醯亞胺 和〇.65g偶氮異丁腈處理。將混合物在劇烈攪拌下加熱回流 ’在此期間用燈照射(3〇〇w，Osram.Ultra-Vita丨ux®)。在21小 時和36小時後，每次都再加入5〇gN-溴代號珀酿亞胺和0.5g 偶氮異丁腈。在總計6〇小時後反應完成。冷卻後濾出不溶 性物質；沈澱物隨後用四氣化碳洗幾次，丟掉。濾液濃縮後 本紙張尺度適用中國國家操準（CNS ) A4現格（210X 297公釐） 412529 A7 B7

五、發明説明（） 知到180g作為產物粗品的標題化合物（根據結果，复 中口力2/。的相應的苄基溴和12%相應的三溴甲苯）。實施例III 2-亂-3-散基苯甲链 經濟部中央標準局貝工消費合作社印製 將實施例I丨的混合物產物粗品溶在彳乩g5。/。乙醇中’溫 ，到60。〇在此溫度下向其中逐滴快速加入I86g(1.1m叫硝 酸銀在已混有750ml乙醇的38〇ml水中的溶液。加完後攪拌 混合物1小時，然後與50m|飽和氣化鈉溶液混合。冷卻後 遽出銀鹽，將滤液濃縮。殘餘物溶在二氯曱虎中，經過一 根短矽膠柱過濾純化（洗脱液：二氯甲烷）。將產物餾份濃 縮後得到88g(81%)標題化合物。溶點：86-89°C。 1 H-NMR (CHCg： δ -7.55 ppm (t, 1H); 7.95 {dd, 1H); 8.20 (dd, 1H)；10.5(s, 1H).製備實施例 實施例1 外消旋4-(2-氯_3-氰基苯基)-1,4-二氫-2,6-二甲基吡啶-3,5-二 〜17〜 本紙伕尺度適用中國國家榇準（CNS ) A4规格U10 X 297公釐} :. I~. 神衣 訂 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁} 412529 A7 B7

§a

CI C〇2-(CH2)2-OCH3 五、發明説明（） 羧酸異丙基2_甲氧乙基

CN 將18.6g(60.5mol)實施例丨起始化合物和8.7g(60，5mol) 氨基-2-丁烯酸異丙酯在250ml異丙醇中加熱回流4小時， 濃縮後得到囡體’將其用乙醚（18.〗g)溶解’然後與同樣 數量的環己烷在180ml的甲苯中在蒸發熱下混合。冷卻至 室溫後得到晶體，在循環空氣乾燥箱中於8〇ec下乾燥。 產率：17.6g(67%)。熔點：148-149°C。 實施例2和實施例3 (+)-外消旋4-(2-氯-3-氛基苯基)-1,4-二氮-2,6-二甲基11比淀-3,5-二羧酸異丙基2-甲氧乙基二酯 ㈠-外消旋4-(2-氯~3_氰基苯基)-1,4_二氫-2,6-二.曱基吡啶-3,5-二羧酸異丙基2-甲氧乙基二酯 ^^1 ^^^1 ^^^1 ^^^1 ^^^1 ^^1 nn m n^— 1 .、 - , J3. 、\=口 (請先鬩讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部中央標準局員工消費合作社印製

，18, 本紙張尺度適用中國國家椟準（CNS ) A4規格（210X297公釐） 412529 A7 B7 五、發明説明（17) 實施例1的純對映體可以通過在對掌性柱上層析法分 離得到（例如Chiracel®OD-H，洗脱液：95%正庚烷/5%/混合 液(1%水和0.2%三氟乙酸在乙醇中)）。 實施例2 : 熔點：138-140°C [α]2^ =+13.9(0=1, CHCI3) 實施例3 : 熔點：138-140°C [a]2^=-12.1{c=0.9, CHClg)· ----r...............^................訂...................^ (諳先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 〜19〜 本紙張尺度適用中國国家標準(CNS)A4規格(210X297公釐) 412529 .ί'，- Λ7 : i .. ! in Ί ·· . j. - | 五、發明就柄:） 專利申請案第84101294號 ROC Patent Appln. No. 84101294 補充之試驗資料中文本-附件一 Supplemental Test Data in Chinese - Enel. I (民写88年1月21日送呈) (Submitted on January 21 , 1999) 圖1 水迷宮中實施例2對錯誤次數之影響(使用老年Wistar鼠) 水迷宮中實施例2對老年Wistar鼠之影響 ο 5 2 1sLUs+t ο 5 載劑對，照組 （n = 15)HU-毫克/公片d服實施例 2 (η =14) ρ < 0.05對載劑

I ,Γ Ϊ I ~H ..... H .~^訂 f ri r'" (誚"閱讀背而之注意市項搏填艿本頁) 經消部中央標卑局於工消费合作社印奴

C 丁 2 T 3 T 4 T 6 試驗序次 -20 -

本紙張尺度適用中國國家椋準（CNS ) 格（2lOX2Q7-:>iM 412529 Λ7 H7 _ 五、發明説明（) 圖2 硝笨吡酯與實施例2對正常血壓之鼠的血壓之影響 正常血壓之鼠

I % T -5 •硝苯比酯 △實施例2

— X > L I_I I 3 7 10 30 70 100宅克/公斤口服 自發高血壓之鼠 經滴部中央標卑局男τ-消费合作社印製

經濟部中央標準局員工消費合作社印製 .412529 A7 . ：. _B7_____ 五、發明説明（） 專利申請案第84101294號 ROC Patent Appln. No. 84101294 補充之試驗資料中文本-附件一 Supplemental Test Data in Chinese - Enel. I 民國88,年2月i曰 送呈 (Submitted ipn February ι , 1999) I 1 . 藉由超過濾（Ultrafiltration)測定蛋白質之結合 1. 方法之原理 經蛋白質結合及未經結合之經放射標記之試驗化合 物或帶有放射活性之試驗化合物之分離藉由含窄孔 徑之膜的超過濾裝置進行。過濾之驅動力藉由離心 取得。 進行蛋白質結合研究前，藉由溶於超過濾液之試驗 化合物的過濾檢視試驗化合物於超過濾裝置之吸附 及試驗化合物通過膜之能力。 2. 封料 實驗室搖動器 KS 500 (Janke und Kunkel，IKA Labortechnik, Staufen,德國） 具有YMT超過濾膜之Centrifree®微分配系統 (Amicon GmbH, Witten,德國） 實驗室過渡器Sigma 4K10 (Sigma Laborzentrifugen, Osterode,德國） 3. 研究程序 血漿、含蛋白質之缓衝液或超過濾液與經放射活性 -ι - B83364WC-SD1(9BAYER) 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4规格（210X297公: K^IKi ^i·^— ^^^^1 m^i In 1. —^ϋ it —^1·— nn·Ί (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 412529 A7 B7 五、發明説明（) 標記之試驗化合物一起培育。樣本隨後填充於超過 濾裝置中並在1800 X g及周溫下離心10分鐘。通 常1毫升血漿產生100 - 150微升超過濾液。為計 算未經結合之部份，在血漿、含蛋白質之緩衝液或 離心前之超過濾液（C)及離心後之超過濾液（CO中測 定經放射標記之化合物或帶有放射活性之化合物的 濃度。為計算所用放射活性之回收，另外測定濾膜 中及過濾後血漿中之放射活性量。 4. 評估 經放射標記之試驗化合物的未經結合部份或帶有放 射活性之試驗化合物根據下式計算： fu = Cu/C x 100 [%] 式中 C=血漿中、緩衝液中或超過濾液中之總濃度 Cu =未經結合之濃度（超過濾液中之濃度） 結合至血漿蛋白質（fb)之放射活性的部份可藉由 fb = 100 - fu [%]取得。 5. . 1 裝 - Ί (請先閱讀背面之注意事項再填寫本買) 本案實施例2 U.ti4,51(UlU(對應 EP 026 317)之實施例5 結合至人類血清 麵策切施毫純升） 8. 02/9. 23 8. 1 游離部分[%] 1. 78/2. 25 1.29 結合至人類血清清蛋白 細毫以毫升） 0. 999 0. 710 游離部分[%] 7. 11 3. 88 -2- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X 297公釐）

Claims (1)

1. 4125^9 - C8 ' D8 六、申請專利範圍 專利申請案第84101294號 ROC Patent Appln. No. 84101294 修正之申請專利範圍中文本-附件二 Amend Claims in Chinese - Enel. Π (民國88年1月21曰送呈） (Submitted on January 21, 1999) 1. 一種為外消旋物形式或其對映體形式的式（I )之4-(2-氣-3-亂基-本基)-1，4-二風-2,6-二甲基-Bth咬-3,5-二缓酸異丙g旨2-甲氧基乙酯。 , ,n n 訂 (請先Η讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 2. —種用於控制痴呆症和抑鬱症的醫藥組成物，其係含有如 申請專利範圍第1項的化合物。 3·—種式（Π)之2-氯-3-氰基笨甲醛。

   -22 -

   本紙張尺度適用中國國家標率（CNS ) 規格（210Χ297公釐） 4125^9 - C8 ' D8 六、申請專利範圍 專利申請案第84101294號 ROC Patent Appln. No. 84101294 修正之申請專利範圍中文本-附件二 Amend Claims in Chinese - Enel. Π (民國88年1月21曰送呈） (Submitted on January 21, 1999) 1. 一種為外消旋物形式或其對映體形式的式（I )之4-(2-氣-3-亂基-本基)-1，4-二風-2,6-二甲基-Bth咬-3,5-二缓酸異丙g旨2-甲氧基乙酯。 , ,n n 訂 (請先Η讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 2. —種用於控制痴呆症和抑鬱症的醫藥組成物，其係含有如 申請專利範圍第1項的化合物。 3·—種式（Π)之2-氯-3-氰基笨甲醛。

   -22 -

   本紙張尺度適用中國國家標率（CNS ) 規格（210Χ297公釐） 412529 ABCD 六、申請專利範圍 4.—種製備如申請專利範圍第3項之2-氣-3-氰基笨甲醛的方 法’其特徵在於’在惰性落劑中和催化劑存在下，利用在 保護性氣氛和輻照下的溴化反應，先將式ρα)的2_氣_3-氰 基苯轉化成式(XII)化合物2-氣-3-氰基亞+基二溴， CN (XI) CI

   ch3

   Br CN Cl (ΧΙΓ) ^^1 I 1 ^^1 ^^1 I— it. I I— - ί請先聞讀背面之注意事項再填寫本I) 經濟部中央標隼局員工消費合作社印製 在第二步中用銀鹽在醇溶液中處理此產物粗品，反應 後得到醛，其中 第一步反應的合適溶劑係為二氣甲烷或四氣化瑞， 合適的溴化劑係為N-溴代琥珀亞胺或漠， 第二步反應的合適溶劑是水或曱醇、乙醇、丙醇或異 丙醇，或者它們的混合物， 合適的催化劑是偶氮異丁腈或過氧化二苯甲醯， 溪化反應的溫度為40°C到各溶劑的回流溫度， 轉化成搭的反應在20°C-100°C的溫度範圍内進行， -23 - 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS > Α4規格（210X29?公釐） 412529 A8 B8 C8 D8 申請專利範圍 反應一般在常壓下進行，但是也可以在加壓或減壓下 進行(例如在0.5至5巴的範圍内）， 合適的銀鹽一般是硝酸銀、碳酸銀或四氟硼酸銀等鹽 類。 (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部中央標隼局員工消費合作社印裝 24 本紙張尺度逍用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐）