TW400335B

TW400335B - Novel peptides, the preparation and use thereof

Info

Publication number: TW400335B
Application number: TW082110574A
Authority: TW
Inventors: Andreas Haupt; Bernd Janssen; Kurt Ritter; Dagmar Klinge; Gerhard Keilhauer
Original assignee: Basf Ag
Priority date: 1992-12-16
Filing date: 1993-12-14
Publication date: 2000-08-01
Also published as: IL107987A; FI952961A; BR1100019A; HRP931504B1; FI952961A0; CN1095724A; AU679479B2; SG67935A1; IL107987A0; WO1994013695A1; RU95115135A; NO952366L; DE69329425T2; SI9300661A; JPH08504415A; CA2151953A1; ES2151921T3; HUT72067A; EP0674652B1; HRP931504A2

Description

第82110574號專利申請案中1T输明軎修IF頁（84年1 @

五、發明説明（）煩請委負咕示·，本案修正後是否變更原實質内Ά 經濟部令央榀準局员工消費合作杜印製细胞毒物四唑箱 MC e t a 1 按指數生的培養物 20,000個於3 7 t!生性可用標準鏟定（ΜΤΤ ,,Cancer 長的瘸细胞製成微滴定種於96個凹的方法Μ粘附 )。此鑑定的 Research 48: (如HT- 29大皿培養物。將的皿中（皿内長過夜。加試驗化合物，然後將细胞培 1 0 - 4 Μ 至 10 - 10 Η I 的活细胞時，加ΜΤΤ染料（50微升 4,5 —二甲基噻唑一 2 —基）一 2, 细胞線測定，如微培養细節已公佈（A 1 ley， 589-6 0 1 , 1 988 ) ° 用腸癌或LX-1肺癯细胞）细胞以每凹5,000 _ 有150微升培養基）’ 化合物作10倍稀釋，從育48小時。測定每凹内之3毫克/毫升3 — （ 5 —二苯基四唑銪澳化物於1毫升生 5小時，然後再培育過夜後率。用％ T/C 重複凹所得的纆

理鹽水内之瑢液）。將此混合物於371C培育加50微升25%的SDS ，pH2 ，於每一凹中。，用ELISA讀數器於5 50微毫米每凹之吸收 (經治療的活细胞/對照的百分數）計算由數據的平均+ / — SD值。治療细胞的光密度 -X 100 = % T/C 照細胞的光密度受阻的T/C值的試驗化合物的濃度設定為 .對使50%生長 I C S 〇 ° 實例1之化合物顯示之ICs〇值為1 X 10_7及實例2之化合物為 2 X 10~β。 Β . 活體内方法本發明化合物堪可進一步Μ前臨床鑑定作試驗*以测定 81 本紙張尺度適用中國國彖標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） 83.3.10,000 -------------裝---------訂---------線 - (請先閱讀背面之注意$再填寫本頁) 經濟部中央標準局員工消费合作社印製 A6 B6 五、發明説明（i ) 此處說明之發明提供新穎肽及其衍生物，與多拉斯太停一 10 ( Do lasta tin-ΙΟ )相比，此新穎肽及其衍生物在治療腫瘤疾病上有改良的治療用途。而且不像拉斯太停-10那樣必須花大力氣從稀有的天然來源純化，本發明化合物可很方便地用下述方法合成。此外，多拉斯太停一 10對酸不安定。據報告，即使结構上的極小改變也會使其完全失去活性（Biochemical Pharmacology, vol. 40, no. 8, 1859-64, 1990)。本發明化合物包括式I之新穎肽 R1

^N-CHX-C0-(A)a-HR3-CHB-CHD-CHE-CO-(R'7)b-(M)<1-Q R2 I 其中 R1 是烷氧基、較佳是G-4烷氧基；烷基，較佳是

Ci-7烷基；環烷基，較佳是c3-e環烷基；烷基磺醢基•較佳是匕-»烷基磺釀基；三氟基；氟乙基 ;二氟乙基；三氟乙醢基；脒基；尿基；六氫吡啶磺醸基；嗎福啉磺醢基；苄氧羰基；烷氧羰基，較佳是Ci -4烷氧羰基；胺磺醢基，可能是經烷基，較佳是（^-5烷基，取代的；羥基；笨磺醢基，此笨磺皤基可能有達三個取代基，此等取代基獨立選自烷基（較佳是烷基）、-n(ch3)2、硝基、鹵素及CF3 ;或NRaRs ，此處R8&Re可各 -3 -

本紙張又度通用中围國家標準（CNS)甲4現格（210父297公釐I

............1 _---------rV....................................................................訂...................線 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁J A6 B6 五、發明説明（2 ) 是氫或烷基•較佳 R2 是氫 ; 院基較佳 C3 ：-7 環烷基醢基或苄基 > 可有達三素烷基 ( 較佳是是 Cl -4 ，烧氧基 ) ♦ » R^H-R2 可共同是 5- 或 6- 員的或經一個或多個立選白苯基 N 苄基 N (CH 3 ) 2 硝基、 COOMe 及 COOEt X 是氫 t 燒基 ( 較佳是環己基 ) 9 -ch2 A 選 S 異纈草胺醢基丙基異白胺醢基 9 — 丁基丙胺醸基 9 — 環己基丙胺醢基己基甘胺釀基殘基 R3 是氫或烷基 ( 較佳 B 是氫 $ 焼基 ( 較佳是環己基 ) 9 -CHz D 是氫 » 乙醯氧基 t Cl -5 综氧基 ) « t E 是簠 t 或烷基 ( 較 .............Γ:-.: . ri......................ί........................裝......................訂....................線 {請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 噬濟部中央標準局貝工消费合作社印製是Ci-4烷基；是Ci-4烷基；環烷基，較佳是，較佳是Ci-8醣基；苯甲醢基個取代基，獨自選自硝基、鹵 Ci-4烷基）、及烷氧基（較佳或的雜環，此雜環可是未經取代取代基取代的，此等取代基獨、烷基（較佳是Ci-4烷基）、氧基、噻吩基、cohh2 、是烷基）*環烷基（較佳 -環己基或苄基；，異白胺醸基，白胺醣基，烯 ot —胺基異丁醢基，3 —三级 2 -三级—丁基甘胺醯基，3 *2 —乙基甘胺醯基或2 —環 » 是Ci-5焼基）；是Ci-5烷基），環烷基（較佳 —環己基或苄基；羥基，或烷氧基（較佳是佳是“-5烷基）；或 4-

本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)甲4規格（210x297公釐I A6 _B6_ 五、發明説明（3 ) B及 E 共同是-(CH2)3-，- (CH2)2-，-CH (CH3)CH2CH2-，-CH(CH3)CH2-，-C(CH3)2CH2CH2-，或 -C (CH3)2ch2-； R7 是-NR4-CHG-CHK-CHL-C〇-，或 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部中央標準局員工消费合作杜印製其中V是氧或硫；Y1是氫；Z1是氫或低烷基（較佳是烷基）；或Y1及Z1共同形成一鐽；W1是氫，烷基（較佳是Ci-e烷基）或苯基； R4 是氫或烷基（較佳是（^-5烷基）； G 是氫，烷基（較佳是烷基）*環己基， -CH2-環己基，或苄基； K 是氫，乙醢氧基，羥基，或烷氧基（較佳是 Ci-5烷氧基）； L 是氫，或烷基（較佳是Ca-5烷基）；或 R4及 G 共同是-(CH2)4-，- (CH2)3-，或 -CHZ-CH (OH)-CH2 ; M 選自1—胺基一戊基—1 一羰基，纈胺釀基，2 —三级- 丁基甘胺醯基，脯胺醢基，羥脯胺醢基，異白胺醢基，白胺醸基，3 —環己基丙胺醢基 -5 - -裝 .、π ¥

本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)甲4規格（210x297公釐） A6 B6 五、發明説明（4 ) ，苯丙胺醯基，四氫異喹啉基一2 —羰基，3 — 噻唑丙胺醸基，3 -噻吩丙胺醯基，姐胺醯基， 2 —胺基一吲哚基一 2 —羰基，酪胺醯基，3 — 吡啶丙胺皤基，3 —三级一丁基丙胺醸基，2 — 環己甘胺醢基，或3 —萘基丙胺醢基殘基；或RH-CHX-CO-及A共同是

Ri *Ν· R2 Ο 或

X

其中 T . 經濟部中央標準局員工消t合作社印製是氫或低烷基（較佳是甲基或乙基）；υ是氫或低烷基（較佳是Ci-5烷基）是1 >2 ，或3 ;V是氧或硫；Υ是氫；Ζ是氫或低烷基（較佳是甲基）：或Υ及Ζ共同形成一鐽；W是氫，低烷基（較佳是匕-*烷基）或笨基；及d各獨立是0或1 ; 是羥基，烷氧基（較佳是（^-5烷氧基），笨氧基，苄氧基或經取代的未經取代的胺基；一 6 一

本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)甲4规格（210x297公釐I :——「!--…................................................裝...................--,.11.--;............. (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) A6 B6 五、發明説明（5 ) 前題是b及d是0 ，Q不是羥基或烷氧基部分；及其與生理上可酎受的酸所成的鹽。本發明也提供製備式I化合物、含此化合物及翳藥上可接受的載劑的B蕖姐合物，及使用此等姐合物治療哺轧動物癌症的方法。本發明化合物的次類之一包括式I化合物，其中 Ri-N-R2是5-或6-員的如下式的雜環 -0 -0 -ο -Λ

S II 0

:s 0y/ % 經濟部中央標準局Μ工消費合作社印製此等雜環可Μ是未經取代的或由一個或多個各獨立選自Μ 下取代基取代的；苯基，苄基•烷基（較佳是Ci -4烷基），N(CH3)2 ，硝基，噻吩基，C0NH2 ，COOEt或氧基；本發明化合物的另一次類式I化合物，其中Q為 Rs-N-Re的胺基部分，其中 R5 是Η ，羥基，或Ci-7烷氧基，或苄氧基，或Ci-?烷基，或氟乙基，或二氟乙基，或三氣乙基，或C3-7環烷基， 7 -

本紙張尺度適用中园國家標準（CNS)甲4规格（210X297公釐J .......J--J-.............................1,........................裝......................訂................. '叙 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部中央標準局員工消t合作社印製 A6 B6 五、發明説明（6 )

Re 是Η，或（^-7烷基，或苯基（此苯基可是由達三個取代基取代的，而此取代基各獨立是CF3 ，硝基，鹵素，CONHBzl ，CON(Bzl)2 ，Ci-4烷基（此烷基可形成環系統），Ci-4烷氧基，笨氧基，苄氧基，或Ci-7烷基磺醢基），或苄基（可是由達三個取代基取代的*而此取代基各獨立是CF3 ，硝基，鹵素，CONHBzl ， C0H(Bzl)2 .，烷基（此烷基可形成環糸统）•Ci-*烷氧基，笨氧基，苄氧基，或Ck烷基磺醸基），或萘基（可是由達二個取代基取代的，而此取代基各獨立是 CF3 ，硝基，鹵素 * CONHBzl ， C0H(Bzl)2 ， Ca-4病基，烷氧基，苄氧基，苯氧基*或“-7烷基磺醢基），或二笨甲基（可是由達二個取代基取代的，而此取代基各獨立是CF3 ，硝基，鹵素，CONHBzl ，C0N(Bzl)2 ，Ci-4烷基，Ci-4烷氧基，笨氧基，苄氧基，或 Ci-7烷基磺醯基），或聯笨基（可是由達二個取代基取代的’而此取代基各獨立是 CF3 ，硝基，鹵素，CONHBzl ，C0N(Bzl)2 ，烷基，Ci-4烷氧基，笨氧基*苄氧基，或“-v烷基磺醢基），或三笨基甲基（可是由達三個取代基取代的，而此取代基各獨立是CF3 ，硝基，鹵素，COHHBzl ， C0H(Bzl)2 ，Ci-4烷基，“-4烷氧基*笨氧基’苄氧一 8 — i紙張尺度適用中國國家標準（CNS)甲4規格（210X297公釐厂 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) -裝 •訂 a濟部中央標準局員工消费合作社印製 A6 B6 五、發明説明（7 ) 基，或Ci-7烷基磺醢基），或二苯甲基乙基（可是由達二個取代基取代的，而此取代基各獨立是CF3 ，硝基，鹵素，CONHBzl ， C0N(Bzl)2 ，C：i-4烷基，烷氧基，苯氧基，节氧基，或烷基磺醢基），或二苯甲基甲基（可是由達二個取代基取代的，而此取代基各獨立是CF3 ，·硝基，鹵素’ CONHBzl ， C0H(Bzl)2 ，C1-4综基* C1-4综氧基’本氧基，卞'氧基，或Ck烷基磺豳基），或萘甲基（可是由逹二個取代基取代的，而此取代基各獨立是 CP3 ·硝基，鹵素，COHHBzl ， C0N(Bzl)2 ， (^-4烷基，Ci-4烷氧基，笨氧基，苄氧基，或燒基磺醢基），或苊基（可是由達二個取代基取代的，而此取代基各獨立是 CF3 ，硝基，鹵素，CONHBzl ，C0N(Bzl)2 ，烷基* Ci-4烷氧基，苯氧基，苄氧基，或“-7烷基磺醢基），或魅基甲基（可是由達二個取代基取代的，而此取代基各獨立是CP3 ，硝基，鹵素， CONHBzl ，C0N(Bzl)2 ，“-4烷基，烷氧基•苯氧基，苄氧基，或“-7烷基磺睡基），或吡啶基（可是由達二個取代基取代的，而此取代基各 « 獨立是 CF3 ，硝基，鹵素，COHHBzl ，C0H(Bzl)2 ， Ci-4烷基，Ci-4烷氧基，笨氧基，苄氧基，或Ci-7烷基磺醚基），或 —9 — 本紙張尺度通用中國國家標準（CNS)甲4规格（210X297公釐1 (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 裝 .訂 m濟部中央標準局員工消t合作杜印製 A6 B6 五、發确説明（8 ) 皮考基（可是由達二個取代基取代的’而此取代基各獨立是 CF3 ，硝基，鹵素，CONHBzl ，CON(Bzl)2 ， Cl-4烷基，“-4烷氧基’笨氧基，苄氧基’或Ci-7综基磺皤基），或笨#唾唑基（可是由達二個取代基取代的，'而此取代基各獨立是CF3 ，硝基，鹵素，CONHBzl ， C0N(Bzl)2 ，Ci_4烷基，Ci-4烷氧基，苯氧基，苄氧華，或Ci-τ烷基磺醢基），或苯并異喹唑基（可是由達二涸取代基取代的，而此取代基各獨立是CF3 ，硝基，鹵素，COHHBzl ， C0N(BZ1)2 ，Ci-4烷基’ Ci-4烷氧基’苯氧基’苄氧基，或烷基磺醯基），或苯丹吡唑基（可是由達二個取代基取代的，而此取代基各獨立是CF3 ，硝基，鹵素’ COHHBzl ’ C0N(Bzl)2 ，Ci-4烷基，“-4烷氧基*笨氧基’苄氧基，或Ci-7烷基磺醢基），或 .笨井噚唑基（可是由達二個取代基取代的，而此取代基各獨立是CF3 ，硝基，鹵素，CONHBzl ， C 0 N (B z 1) 2 ，C i 4烷基，C i - *烷氧基’苯氧基，苄氧基，或Ct-v烷基磺醢基），或芴基（可是由達二個取代基取代的’而此取代基各獨立是 CF3 ，硝基，齒素，CONHBzl ，C0N(Bzl)2 ， Ci-4烷基，烷氧基，笨氧基，苄氧基，或“-7烷基磺醯基），或 —1 〇 — 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS) T4規格（210X297公釐1 -!…：TL........[;:...................ί........................裝.............--訂...................% (請先閱讀背面之注意事項再填窝本頁) A6 _B6_ 五、發明説明（9 ) 胺基芴基（可是由達二個取代基取代的，而此取代基各獨立是CF3 ，硝基，鹵素，CONHBzl ，CON(Bzl)2 ，烷基，Ci-4烷氧基，苯氧基，节氧基，或 Ci-7烷基磺醢基），或嘧啶基（可是由達二個取代基取代的，而此取代基各獨立是CF3 ，硝基，鹵素，COOEt ，CONHBzl ， C0N(Bzl)2 ，烷基，Ci-4烷氧基•苯氧棊，苄氧基，或Ci-7烷基磺醢基），或 5 -員的雜芳基〔可是由達三個取代基取代的，而此取代基各獨立是CF3 •硝基，鹵素，氰基* COOMe ， COOEt ，硫甲基，硫乙基，硫苯基，皮考基，乙醢基，-CH2-C00Et，C0NHz CONHBzl，CON (Bzl)2 ，Ci-4 烷基（可形成環糸統），Ci-4烷氧基，苯氧基，苄氧基，苯基（可是由達四個取代基取代的，而此取代基各獨立是硝基，CF3 ，鹵素，或（^-4烷基），苄基（可是由達四個取代基取代的，而此取代基各獨立是硝基，C F 3 ，鹵素，C i - 4烷基，萘基，C i 7烷基磺醢基，苯基磺醢基，或（^-4二垸基胺基）〕，或 -CHR7-5-員的雜芳基（可是由達二個取代基取代的，而此取代基各獨立是CF3 ，硝基，鹵素，CONHBzl ， C0H(Bzl)2 ， COOMe ， COOEt ， C00CH(CH3)2 ，經濟部中央標準局員工消#合作社印製 {請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) .裝 C0HH2 ，COOBzl，烷基，烷氧基，苯氧基，苄氧基，苯基，苄基，萘基，或烷基-磺釀基〔 R7 = H，線性的或支_的烷基，苄基；或R7與R5共 -11 -

本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)甲4規格（210x297公釐J 五、發明説明（10 ) A6 B6 同形成-(CH2)3-或-(CH2)4-基團〕）本發明化合物的另一次類式I化合物中同形成選自下列基團的構造 -N-Re會共 {請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) N SO, •Ν - Ο ./Λ Ν

IN Ν 〇

經濟部中央標準局員工消f合作社印製

och3 12 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)甲4規格（210x 297公釐） A6 B6 五、發明説明（11)

(請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 裝此等基團可是未經取代的或經由一個或多個取代基取代的，此等取代基獨立選自cf3 ，硝基，鹵素，氧基，氰基， Ν,Ν -二甲胺基，CONHBzl ，CON(Bzl)2 ，Ci-e 烷基（可形成環系統）•Ci-*烷氧基，苯氧基，苄氧基，萘基，嘧啶基，COOEt ，COOBzl，C3-e環烷基，吡咯烷基，六氫吡啶基，唾吩基，吡咯基，-CH2-C〇-HCH(CH3)2-， -CH2-C0-N(CH2)4-，-ch2-co-n(ch2)4o，苄基（可是由達三個取代基取代的，而此取代基各獨立是硝基，鹵素， cf3 ，硫甲基或對應的亞碘基或砸，硫乙基或對應的亞砸基或«，Ci-4烷基，及Ci-4烷氧基），及笨基（可是由達三個取代基取代的，而此取代基各獨立是硝基，鹵素， CF3 ，硫甲基，硫乙基，烷基，及烷氧基）。本發明化合物的另一次類化合物包括式I化合物之b為 -13- J；纸張尺度適用中國國家標準（CNS)甲4规格（210X297公釐1 .訂經濟部中央標準局員工消f合作社印製 A6 B6 五、發明説明（12 ) 零者。本發明化合物的另一次類化合物包括式I化合物之d為零、b 為-〇4-(：11〇-(：111(-(：1^-(：〇-、Q 不為羥基或烷氧基。本發明化合物的又一次類化合物包括式I化合物之b及 d為零、而Q不為羥基或烷氧基。本發明化合物的又一次類化合物包括式I化合物之d為零、而R7是下式構造者。

經濟部中央標準局員工消费合作社印製本發明化合物的又一次類化合物包括式I化合物之a為零者。本發明化合物的又一次類化合物包括式I化合物之a及 d為零者。本發明化合物的又一次類化合物包括式I化合物之b及 d為1而Q為羥基、Ci-4烷氧基或苄氧基部分者。較佳的化合物是其取代基為下述意義者： R1 是乙基，甲基，三氟乙基，氟乙基，二氟乙基，異丙基，正丙基，正丁基，正戊基，環丙基，環戊基，尿基，甲磺醢基，甲苯磺醢基，萘磺醢基，苯磺醯基， 2,4,6 —三甲基磺醯基*苄基氧羰基，三級丁氧羰基 ....……V..V Γ11.......................ί..................装......................訂.................線一請先閲讀背面之注意事項再蜞寫本頁) 一 1 4 — 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)甲4規格（210x297公寶Ί~ 五、發明説明（13 A6 B6

，甲氧羰基，嗎福啉磺醯基*三级丁胺基磺醯基，甲胺基磺豳基，三氣乙醢基，NH2 ，H(CH3)2 ， N(CH2CH3)2， N[CH(CH3)2]2，眯基或 CH3〇-， R2 是H ，甲基，乙基，異丙基，正丙基·正丁基，環丙基，甲醯基，乙酿基，丙醯基，（CH3)2CHCO-，新戊醯基，笨甲醯基或 V (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部中央標準局員工消費合作社印製

或R 1 - N - R 2共同S 15 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)甲4规格（210x297公釐）經濟部中央標準局員工消费合作社印製

'J........<—.......-—»—......—........./ί—.....1.....................................'可.................. {請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)甲4規格（210x297公釐）五、發明説明（15 ) A6 B6 經濟部中央標準局員工消費合作社印製

本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)甲4規格（210x297公釐） .......-I .* ...........I..... ./*' .................................. ' 一sOJ.................. (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 A6 _______B6_ 五、發明説明（16 ) X 是氫，甲基，乙基，異丙基，-CH2CH (CH3) 2， -CH(CH3)CH2CH3，三级丁基，-ch2-環己基，或苄基； A 是異纈箪胺釀基，異白胺醯基，白胺醯基，別異白胺醯基，3 -三級—丁胺基丙藤基，2 —三级丁甘胺豳基，3 —環己基丙肢醢基，2 —乙甘胺醸基* 或2 —環己基甘胺醢基； R3 是氫，甲基，或乙基； B 是氫，甲基，乙基，異丙基，-CH2CH (CH3) 2， -CH(CH3)CH2CH3，三级丁基，-CH2-瓌己基.，或苄基； D 是氫，羥基，甲氧基，乙氧基，異丙氧基，或三级丁氧基； E 是氫，甲基，乙基，異丙基，或三级丁基；或 B及 E 共同形成-(CH2) 2-，- (CH2) 3 …-CH (CH3)-CH2-，或-C (CH3)2-CH2-; R7 是-NR4-CHG-CHK-CHL-CO-，或 .................................................-............................-:…裝......................訂............. 線, . * - V (請先闌讀膂面之注惫事項再填寫本頁)—"

一 1 8 一本紙張尺度適用中國國家標準（CNS}甲4規格（210X297公釐) 禮濟部中央標準局W工消t合作社印製 A6 _B6_ 五、發明説明（17 ) 此處 V 是氧或硫；Y1是氫；Z1是氫或甲基；或Y1及Z1共同形成一鍵；W1是氫，甲基，乙基，異丙基，三級丁基或苯基； R4 是氫或甲基； G 是氫，甲基，乙基，異丙基，-CH2CH (CH3) 2， -CH(CH3)CH2CH3，三級丁基，-CHZ-環己基，或苄基： K 是氫，羥基，甲氧基，乙氧基，異丙氧基，或三級丁氣基； L 是氫，甲基，乙基或異丙基；或 R4及 G 共同形成-(CH2)4-， -(CH2)3-，或 -CHZ-CH (OH)-CH2-； M 是選自異纈草胺醸基，2~三级丁基甘胺醯基，脯胺醯基，羥基脯胺醯基，異白胺醯基，白胺醸基， 3 -環己基胺丙醯基，苯胺丙酶基，四氫異陸啉基 —2 -羰基，3 _噻唑胺丙醢基，3 —噻唑胺丙醯基，2 —胺基吲哚基一 2 —羰基，酪胺醢基，3 — 此定丙按醯基，3 -三級-丁基丙胺醢基，2 -環己甘胺醢基，或3 -萘基胺丙釀基殘基； a ，1>及（1各自獨立是0或1 ; 或RH-CHX-CO-及A共同是 .........................-…：................---…ί:ί........................裝......................訂....................綠 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) -19- 本紙張尺度適用中國國家標準丨CNS)甲4規格（210X297公釐）五、發明説明（18 ) A6 B6

C(CH3)3 C_3 R1、技•nVVc〇- R2

CH3 N

CO- Ri- R’-

R2

CH3 N R、

,N\ /CO-

CO- R2

CH3

CfCHO,

C(CH3)3 '..........* -........M r........................./1...............................1................1可'............ (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部中夬標準局Μ工消费合作社印製

本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)甲4規格（210X 297公釐) 五、發明説明（19 ) A6B6 經濟.部中央標準局W工消#合作社印製

....----------------Γ. . -........ ..............'{-.....................裝......................訂..................%- (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)甲4规格（210x297公釐）五、發明説明（20) A6 B6 經濟部中央標準局員工消费合作社印製

本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)甲4規格（210X297公釐1 五、發明説明（21 ) A6 B6 經濟部中央標準局員工消費合作社印製

..........."::r................................../.c;............................................訂.................^ t請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁)

-23 本紙条尺度適用t—國國家¥1"(—咖)甲4規格（210 X297公釐I 五、發明説明（22 )

A6 B6

CH,

{請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) -裝

.、tT 經濟部中央標準局員工消#合作社印31 CH RiRZN'

CO- 0

R!R2N

CO- 〇 CH3 -24 - 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)甲4規格（210X297公釐）五、發明説明（23 )

RB

Re A6 B6

RlRi?

N. 〇 C(CH3)3 是羥基· C ϊ - 5烷氧基•苄氣基或胺基部分N R B R e此處 ^ 是氙，甲基，乙基*三铽乙基，铽乙基，二氣. 乙基•丙基，異丙基•或 -<ι -〇 ~0 是氫.甲基，乙凿，三氟乙越，丙基，異丙基 •三级丁基 > 或

cf3

經濟部中央標準局員工消費合作社印製

OMe 〇Bu

25

CH(CH3)2 ....................-::…J................................................^.................…：•訂.................^ r - - · f, (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)甲4規格（210X297公釐） A6B6 經濟部中央標準局員工消t合作杜印製

(請先閲讀—面之ii-4事項再填寫本頁) 本紙張尺度逋用中國國家標準（CNS)甲4規格（210X297公釐) -裝 .'ΤΓ 線. A6B6 唆濟部中央標準局員工消费合作社印製

> ........*··!4·ί....................../1..............................I................'可 ........... (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 本紙張尺度適用中围國家標準（CNS)甲4規格（210X297公釐）五、發明説明（26 ) A 6 B6 CH(CH3)2 CH(CH3)2 CH(CH3)人々^COOEt少？，

COOBzJ 經濟部中央標準局負工消f合作杜印製

一 28 一本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)甲4規格（210X297公釐） (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) A6B6 經濟部中央標準局員工消费合作社印製

(請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) -裝

_、1T 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)甲4規格（210X297公釐）五、發明説明（28) A6 B6 經濟部中央標準局員工消f合作社印製

............T--W-----------------......................(……-.................裝......................訂...................4 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 本纸張尺度適用中國國家標準（CNS)甲4規格（210X297公釐）五、發明説明（29 ) A6 B6 經濟部中央標準局員工消f合作社印製

。.........1---1........*.........................— tit,............I...........I.....I...............'1τ................... (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)甲4規格（210x297公釐）五、發明説明（30 ) A6 B6 經濟部中央標準局員工消费合作社印製

本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)甲4规格（210X297公釐} .....................................，k.....................裝......................訂.....................絲 ~請先閱讀背面之注意事項再場寫本頁) 五、發明説明（31 A6 B6

OMe CH3 CFj f

Ό C(CH3)3 0

CH3

,CF3 八 CT .........i-Γ.Λ……[........................i.....................裝......................訂.....................Μ (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部中央標準局員工消費合作社印製

CFj >OMe

OMe OMe

OMe I 0Me OMe

CF, 33 本紙張尺度逋用t國國家標準（CNS)甲4規格（210x297公釐）五、發明説明（32 ) A6B6

OMe 或R6-H-Re共同是

::........Γ-..........................f-................裝..................…-訂.....................% (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 -34- 本纸張尺度適用中國國家標準（CNS)甲4規格（210x297公釐）五、發明説明（33 ) A6 B6

............* ........Γ-Γ:.......................(:……-.........-…裝-.....................訂...................4 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部中央標準局員工消f合作杜印製本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)甲4規格（210x297公釐）五、發明説明（34 )

翁 I A6 B6

CH(CH3)2 COOEt c(ch3)3 cho

N

IN

N

IN <請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) .裝 CHyNYΝ，CH3

Ν

Γ4

，訂 Ν

Ν

ΙΝ 經濟部中央標筚局員工消费合作社印製 ίΝ

ίΝ

Ν

OMe 36 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)甲4規格（210X297公釐）五、發明説明（35 ) A6 B6 經濟部中央標準局員工消费合作社印製

j........Ti-........r.r\......................,ί........................裝-.....................訂........-..........4 f請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)甲4規格（210X 297公釐） A6 B6 五、發明説明（36 ) 更佳的化合物是其取代基為下述意義者： R1 是乙基•甲基，三氟乙基，氟乙基，二氟乙基，異丙基，丙基，環丙基，苄基氧羰基，甲氧羰基，乳醯基，甲胺基磺醢基，甲苯磺醢基，腺基，甲磺醢基， N (CH3) 2 ，甲胖基或 CH3〇-， R2 是Η ，甲基，乙基，異丙基，丙基，丁基，環丙基，甲醢基，乙醣基，丙醚基，三甲基乙醯基，苯甲醢基或苄基；或 R iN-R2共同是 ό ch3 ch3-亡 ο

Ό ............Γ->......................... :,ί............. ...........^ .......................訂.................% (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) Ο S =0 Ν 〇經濟部中央標準局員工消f合作社印製 χ 是氫，甲基，異丙基，-ch2ch (CH3) 2 38 本纸張尺度適用中國國家標準（CNS)甲4规格（210 χ 297公釐1 A6 B6 五、發明説明（37 ) -CH(CH3)CH2CH3*三级丁基，或节基； A 是異纈草胺醯基，異白胺醢基，白胺醢基·2 —三级丁基甘胺醯基*或2 -乙甘胺醢基； R3 是氫，甲基，或乙基； Β 是氫，甲基，乙基，異丙基，-CH2CH (CH3) 2， -CH(CH3)CH2CH3，三级丁基，或苄基； D 是氫，羥基，甲氧基，或三级丁氧基； E 是氫，甲基，乙基，異丙基，或三级丁基，或乙基；或 B及 E 共同形成-(CH2)3-，- (CH2)2-; …-……................... it……-...........-…裝-.....................訂...................線 (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁一經濟部中央標準局員工消费合作社印製 -39- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)甲4規格（210x297公釐)~ 五、發明説明（38) A6B6

..................--.r.........................ί.......................裝............-.........訂....................4 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部中央標準局員工消#合作社印製

-40 - 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)甲4規格（210x297公釐} 五、發明説明（39 ) —N Οί3

ch3 co-

•Ν^γ^ CH, OH CO- CH(CH3)2 (CH3)3c •N ch3

A6 B6 一 Ν’ CH3 —N ch3 c(ch3)

CO-

CH(CH3)2 cjj.

(chT ch3 —N^^^CO-

N CH CH,

OH CO-

.......................................................裝......................訂................線 (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部中央標準局員工消费合作社印製 c(ch3)3 c(ch3)3 一 n广丫人 co- ->r CH3 OH CH3 M 是選自腩胺醯基，羥基M胺醯基，異顯草胺酿基’ 與白胺醯基，2 —三鈒一丁甘胺醯驻’笨站丙胺酿 •M，四Μ找昤啉站一2 -羰Μ，2 —胺越Π彳丨丨1¾驻一 2 —拟驻，酩胺随®，3 —萘丙胺醯越殘基-; a ，b及d各自獨立是0或1 ; 或RH-CHX-CO-及A共同是

•NH *CO- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)甲4規格（210x297公釐丨 A6B6 經濟部中央標準局員工消費合作社印製

.......::-........;- V, :*........................,/1,.........................裝......................訂................ (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 本纸張尺度適用中國國家標準（CNS)甲4規格（210X297公釐）五、發明説明（41 ) A6 B6

(請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) -裝 -訂 ^. 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 -43 - 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS)甲4規格（210x297公釐）五、發明説明（42 )

N CO-〇 CHi

A6 B6

hCH, CH3

0 ch3 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁一 -裝線· 經濟部中央標準局員工消費合作社印製是羥基’ C1-4烷氧基，苄氧基或胺基部分此處是氮，甲辅，乙基，三氟乙越，氣乙基，二氟乙基，丙基，異丙基，瑁丙基.環戊基，環己 m 是Μ，甲基，乙基，丙骓，異丙基，三级丁基，苄基，4 ~笨氧节基，4 —节氧苄基， 3，Ί，5 — ' Φ铽千坫，笨秈· 4 -笨铽采毡， 4 一苄氧苯基，3,4,5 -三甲氧笨基，或 -44 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)甲4規格（210X297公釐） A6 B6 經濟部中央標準局員工消費合作社印製

本紙張尺度適用中1國家標準（CNS)甲4規格（210x297公釐1 :.........: ........' i........................../1........................裝......................訂................ 線 (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) A6 B6 經濟部中央標準局員工消费合作社印製

..........:Γ、-:…Γ-r-................--::,c........................裝......................訂...................% (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)甲4規格（210x 297公釐）五、發明説明（45) 〇 *0 A6 B6 N S 一〆 och3 •N 0 ch3 〇CH3

N

N-

N

13 ό COOEt ό ό

N

O60 0¾ 0¾ *..........*.· -，-------了，、......................./IV:;.....................裝......................訂..................4 {請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部中央標準局員工消費合作社印繁

本纸張尺度適用中國國家標準（CNS)甲4規格（210x297公釐) 五、發明説明（46 )

N

•N

N

N^N

A6 B6

N

〇"Ν Οό〇 (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部中夬標準局員工消费合作社印製此等實式I化的成分構酸的衍生特別適，乳酸，，蘋果酸冬胺酸，抗壤血酸此等新可依排序中，由C 。於碎片片又可由在排序例說明，合物較佳成，但也物。合於生理瞵酸，甲，丁二酸三聚氰酸及乙醢基穎化合物姐合，也端開始，偁合時，胺基酸或組合及碎但並不限制，本發明範圍。是由左旋胺基酸或由左旋胺基酸衍生物可含一個或多涸右旋胺基酸或右旋胺基耐受性的酸是：鹽酸，檸檬酸，酒石酸烷磺酸，醋酸，甲酸，馬來酸，富馬酸，丙二酸，硫酸，L _毅胺酸，L 一天，粘液酸，苯甲酸•葡萄醛酸，草酸，甘胺酸。可用已知的方法製備。是以此等化合物可睇合合逋的小碎片组合。在排序姐合每次加一個胺基酸或鍵節，使肽鏈延伸可將不同長度的碎片聪到一起，而各碎链節排序姐合姐合而成。片偁合中，都需藉形成醢胺鏈將各單位 48 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)甲4規格（210X297公釐）裝 •訂經濟部中央標準局Λ工消費合作社印製 A6 ____B6_ 五、發明説明（47 ) 瞄到一起。此可用酶及化學方法完成。 Muller於其 Methoden der organischen Chemie Vol. XV/2’ 第1 至364 頁（Thieme Verlag, Stuttgart, 1974 ) ; Stewart, Young,於.Solid Phase Peptide Synthesis,第 31 — 34及 71 — 82頁（Pierce Chemica 1 Company, Rockford, 1984 ) ； Bodanszky, Klausner, OndetU 於 Peptide Synthesis 第 85— 128 頁（John Wiley & Sons, Hew York, 1976)及其他肽化學的標準工作中曾詳细敘述過醢胺鍵形成的化學方法。特佳的方法是疊氮化物法，對稱及混合酐法，現場生產的或預先製備的活性酯，娌尿烷保護的胺基酸的N —羧基酐的使用及使用偁合劑形成醯胺鍵·偶合劑K二環己基碳化二亞胺（DCC )、二異丙基碳化二亞胺（DIC) 、1一乙氧羰基一 2 — 乙氧基一 1,2 —二氫喹啉（EEDQ) 、1 一乙基一3 — （3 一二甲胺丙基）碳化二亞胺鹽酸鹽（EDCI)、正一丙烷膦酐（PPA ) 、N,N —雙（2 -氧基-3 -噚唑烷基）一胖醣氯（B0P-C1)、溴-參-吡咯烷辚六氟瞵酸鹽（ PyBrop)、二苯磷釀基蟠氮化物（DPPA)、卡斯楚試劑（ BOP，PyBop ) 、0 -苯并三唑基一Ν,Ν,Ν ' ,ίΓ -四甲基腺鹽（HBTU)、二乙基磷醚基氰化物（DEPCN ) 、2,5 _ 二苯基一 2,3 -二氫一 3 —氧基一4 —羥基唾吩二氧化物 (斯特格里氏試劑，H0TD0 )、及1,1’-羰基二咪唑（ CDI)。偶合劑可單獨使用，也可與添加劑合并使用，添加劑的例有Ν,Ν —二甲基一4 一胺基吡啶（DMAP) 、Ν -

(請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁J .裝，11 -49- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)甲4規格（210X297公發） A6 B6 經濟部中央標準局員工消費合作社印製五、發明説明（48 ) 羥基-笨并三唑（HOBt) 、N -羥基—苯并三嗪（HOOBt · )—羥基丁二亞醢胺（HOSu)或2 —羥基吡啶。雖則酶呔合成中一般可不需使用保護基，但在化學合成 · 中二反應物的不介入醸胺鍵形成的可逆轉的反應基的保護卻是必需的。在化學肽合成中，有三種較佳的傳統保護基技術：苄基氧羰基（Z)技術一丁氧羰基（Boc )技術 ( 及9 一笏基甲氧羰基（Fmoc)技術。每一情況都證明保護基是於链延伸單位的α —胺基上。Mill ler於其Meth oden d e r o r g a η ί s c h e n C h e m i e V ο 1 . X V / 1，第 2 0 至 9 0 6 頁（ T h i e m e V e r 1 a g , S t u 11 g a r t，1 9 7 4)中有詳细的說明。用以姐合肽鏈的單位可在溶液中、懸浮液中反應，或者用類似 Merrifield於 J, Aner. Chen. Soc. 85 (1963) 2149所述的方法反應。特佳的方法是用Z 、Boc或Finoc保護基技術排序姐合成肽鏈或用碎片偁合成肽鏟，使用前述 Merrifield技術將反應物之一鍵於不溶解的聚合物支撐（之後也稱樹脂）上。這須用Boc或Fmoc技術使要組合的肽按順序傳給聚合物支撐，增長中的肽鍵以共價於C端鑑於·* 不溶解的樹脂顆粒上（參考圖1及2 )。此法可使用過滹法除去試劑及副產物成為可能，不需重結晶中間體。經保護了的胺基酸或鐽節可聯成任何合適的聚合物，此聚合物只須不溶於所用溶劑中，並有安定的物理形狀使容易過滤。此聚合物必須含一官能基，使第一個經保護的胺基酸能以共價堅固地聯於官能基上。適合作此使用的聚合物有多種，如纖維素、聚乙烯酵、聚甲基丙烯酸酯、磺化 -50- 本纸張尺度適用中國國家標準丨CNS)甲4规格（210x297公釐丨 t請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁> 裝 -訂. 線 A6 B6 經濟部中央標準局員工消t合作社印製五、發明説明（49 ) 聚苯乙烯、氛甲基化苯乙烯/二乙烯苯共聚合物（ Merrifield樹脂）、4-甲基二苯甲基胺樹脂（MBHA -樹脂）、苯基乙醯胺基甲基一樹脂（Pam —樹脂）、p —窄基氧笮基一酵樹脂、二苯甲基胺樹腊（BHA樹脂）、4 一 (羥甲基）笨甲醣基氧甲基樹脂、Breipohl樹脂（ T e t r a h e d r* ο n L e 11 e r s 2 8 ( 1 9 8 7 ) 5 6 5 ，B A C Η E Μ 供應）， 4 一（2,4 —二甲氧苯基胺甲基）笨氧基樹脂（由 Movabiochen供應）或〇 -氛三苯甲基樹脂（由 Biohellas 供應）。於溶液中使醢胺寄形成的合適的溶劑是所有在反應條件下為憧性的溶劑，特別是水、Ν,Ν -二甲基甲醯胺（DMF )、二甲基亞砸（DMS0)、乙腈、二氛甲烷（DCM)、 1,4 一二噚烷、四氫呋喃（THF ) 、Ν —甲基一2 -吡咯烷酮（ΝΜΡ)、及此等溶劑的混合物。於聚合物支撐上的合成可於所有惰性有機溶劑中進行，胺基酸衍生物可溶於此等溶劑內；但是，較佳的溶劑堪有使樹脂膨脹的性質，如DMF 、DCM 、ΝΜΡ 、乙腈及DMS0，及此等溶劑的混合物。合成完了後，使化合物從聚合物支撐裂解。能使從各種樹脂裂解出來的條件見於此文獻。最常用的裂解反應是酸一及鈀催化劑裂解，特別是在液體無水氟化氫中、在無水三氟甲烷磺酸中、在稀或濃三氟醋酸中的裂解，在THF中 *或THF-DCM混合物中有弱鹼如嗎福啉之存在下之鈀催化裂解，在醋酸/二氛甲烷/三氟乙酵混合物中的裂解。視所選用的保護基而定，保護基可保留在化合物上，也可在 ...........* -........Γ.·::.....................-f..............................裝......................訂...................線 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁} -51 - 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)甲4規格（210x297公货)~~ A6 B6 經濟部中央標準局員工消费合作社印製五、發明説明（50 ) 裂解條件下去除。在進行某些衍化反應時，使肽作部分去保護也是有價值的。於N —端二烷基化的化合物可藉在溶液中行堪原烷基化（例如用HaCNBH3於MeOH内〉或在聚合物支撐上使鍵於樹脂上的化合物在DMF /1 %醋酸内用 NaCNBH3行堪偶合合適的_二—烷基胺基酸與合適的酐製備。具7 —或δ —內醸胺橋的化合物可藉將合適的内藤胺橋二狀單位（R . F r e i d i n g e r，J . 0 r g，C h e m .( 1 982) 104 — 109 )併於肽鏈製備。具含噻唑基、晖唑基、唾唑啉基、或嗶唑啉基二肽鏈節的化合物，可藉將合適的二妝單位（I) . S c h m i d t e t a 1 .，S y n t h e s i s ( 19 8 7)， 233-236 ； P. Jouin et al., Tetrahedron Letters ( 1992) > 2807— 2810 ； P. Wipf et al., Tetrahedron Letters ( 1992) ，907-910 ； W. R. Tully, J. Med. Chem. ( 1991) ，2065 ； Synthesis ( 1987) ，235 ； T. Shioiri et al., J. Org. Chem. (1987) ， 1252— 1 2 5 5 ； R. Pettit et al., J. Am. Chem. Soc. ( 1989) ，5463— 65)併於肽鐽製備。具-NR3-CHB-CHD-CHE-C0-及 -NR4-CHG-CHK-CHL-CO-構造的鐽節，可根據文獻的方法將，例如，對應的經保護的胺基酸醛與合適的烷基化劑|如膦酸蘧、磷内錨鹽、Evans氏試劑等（S. Shibuya et al., Heterocycles ( 19 9 0) * 1597— 1600； M. Braun e t al., Angev. Chen. ( 1987) ，24—37; Angew. Chem. 1992, 104, No. 10； T. Shioiri et al., Peptide Chemistry 1989, H. Yanaihara (Ed.). ------------*.‘ 一........Γ _ ·........................./ί..........-....................................訂.................. ί請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) _ 5 2 — 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)甲4規格（210X297公釐)~~ A6 B6 經濟部中央標準局員工消费合作杜印製五、發明説明（51 ) 291 -296 ； Pettit et a 1. , J. Am. Chem. Soc. 1 989, 111, 5463； T. Shioiri, Tetrahedron Letters 1991, 9 31 -934 ； K. Koga, Tetrahedron Letters 1 99 1, 2395 —2398)反應製備。本發明化合物可藉給予哺乳動物此化合物用以抑制或治療實體瘤（如肺腫瘤、乳房瘤、大腸瘤、前列腺瘤、膀胱瘤、直腸瘤、或子宮内膜瘤）或血液惡性流瘤（如白血病或啉巴瘤）。給予方法可Μ是任何傳统上的給予槩物，特別是給予腫瘤槩物，的方法，包括經口給予和非經給予方法，如皮下給予、靜脈内給予、肌肉内給予、腹腔内給予。此化合物可單獨給予•也可用含式I化合物及發藥上可接受的適合給予途徑的載劑所成的»藥姐合物的形式給予。此種醫藥姐合物可Μ是合併產物*即可也含其他治療有效成分。給予哺乳動物的劑量含有效抑制瘤量的有效成分，此量取決於傳统的因素*包括所用特定化合物的生物活性；給予方法；接受藥物者的年龄、健康、體重；病的性質及嚴重程度；治療頻率；其他治療劑的給予；及所需效果。每天的典型劑量，經口給予時為5 — 250毫克/公斤體重，非經口給予時為1一 100毫克/公斤艄重。合適的劑董形式每單位含約10至500奄克的有效成分。有效成分一般佔姐合物缌重量的1 一 90%。此新穎化合物可用傳统的固體或液體《蕖給予形式給予，例如未塗覆的或（膜）塗覆的錠劑，膠囊，散劑，顆粒 ...................Γ.Γ: ....................................{.........................裝.....................訂...................線 (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) -53- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)甲4規格（210乂297公龙_)"" A6 B6 五、發明説明（52 ) ，塞劑或溶液。此等劑形係用傳有效物質可用傳統的B藥助劑’ 防腐劑、錠劑崩濱劑、流調節劑劑、乳化劑、溶劑、延時釋出組唄霧氣（參考H. Sucker et al. Technologie. Thiene-Verlag · 。K此法所製得的給予形式一般效成分。 K下諸實例用Μ說明本發明。基酸係用三個字母的縮寫碼縮寫三氟醋酸，Ac=醋酸，Bu= 丁基統方式製造。作此使用的如錠劑结合劑、填充劑、、增塑劑、濕潤劑、分散合物、抗氧化劑、及/或 :Pharmazeut i sche Stuttgart, 1978 )加工含1 — 90重量百分比的有實例中的生成蛋白質的胺。其他的意義是：TFA = ，Et=乙基，Me=甲基，請先閲. 讀t .背之注意事. 項瑱寫本頁裝缰濟部中央標準局員工消費合作社印製 B 2 1 =苄基〇 A· 一般方法 I · 申請專利範圍第 1項之化合物可用正统的溶液合成法 ( 用上述標準的 Z- -及 Boc — 法）合成，也可用標準的固體相合成法 ( 用手操作或用 APPLIED BI0SYSTEMS供應的全白動化 ,431A型合成器 ) 合成 0 Boc 及Fmoc保護基的不同合成循環丨技術如下 ♦ ♦ a) B( 3 C保護基合成循環技術 1 30% 三氟醋酸於 DCM 内之溶液 1 X 3 分鐘 2 50% 三氟醋酸於 DCM 内之溶液 1 X 1 分鐘 a DCH 洗 5 X 1 分 m 4 5 % 二異丙基乙基胺於 DCM内之溶液 1 X 1 分鐘 & 5 % 二異丙基乙基胺於 NMP内之溶液 1 X 1 分鐘 54 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)甲4规格（210X297公釐）訂線五、發明説明（53 ) G. 7. 8.a ία 1L 12.ia Η. 15. 16. 17. A6 B6

HMP洗加預先活化的經保護的胺基酸（Ml 當量DCC及1當童HOBt於HMP/DCM内之溶液活化）；肽偶合（第一部分）反應混合物中加DMS0 *至含20容量比的 DHS0 肽偶合（第二部分）加3.8當1之二異丙基乙基胺至反應混合物中肽偶合（第三部分） DCM洗如轉化未完全，重複偶合（返回&) 10%醋酸酐，5 %二異丙基乙基胺於 DCM内之溶液 10%醋酸酐於DCM内之溶液 DCM洗返回L 5 X 1分鐘 X 30分鐘 1δ分鐘分鐘分鐘 2分鐘 4分鐘 1分鐘 ..........i .--------Γ:Γ:......................(........................裝....................................訂...................4 (請先閲讀背面之注意事項再填窝本頁) 經濟部中央標準局員工消費合作社印製在Ν —甲基胺基酸或鏈節帶有Ν —甲基後•用Bop-C1及 PyBrop作試劑偶合胺基酸。反應時間作相應的增加。在溶液合成中，此偶合以用Boc —氨基酸-MCAs ( H —三级一丁氧羰基一胺基酸一 N —羧基一酐）或Z _胺基酸一 NCAs(N -苄氧羰基-胺基酸一N -羧基一酐）最佳。 b) FB〇c保護基合成循環技術 1· DMP洗 1 X 1分鐘 55 本紙張尺度適用中國國家標準{CNS)甲4規格（210X297公釐）五、發明説明（54 ) A6 B6 …·」，：-Γ -.........................f.......................裝… ........訂....................僉 t請先閱讀背面之注意事項再蜞寫本頁) 經濟部中央標準局員工消费合作社印製 2- 20%六氫吡 a 20%六氫吡 4. DMF 洗 5. 加預先活化當量ΤΒΤϋ及溶液活化） Β- DMF 洗 7. 如轉化未完 a 10%醏酸酐 a DMF 洗 10. 返回2· 在Η —甲基胺 P y B r ο ρ作試劑偶 II . N端之堪原將Ala或Alb 4步驟及Ala之在DMF/ 1%醋酸應。反應完了（酵、DMF 、及二 III. Ia及 II所將肽樹脂於減 TEFLON HF )( ，較·佳是茴香醚酸的硫酵呔除去啶於DMF內之溶液啶於DMF内之溶液的經保護的胺基酸（Ml 1 . 5當最DIPEA於DMF内之 ;肽偶合（第一部分）全，重複偁合（返回&) 於DMF内之溶液基酸或鐽節帶有N —甲基合胺基酸。反應時間作相烷基化製得的肽樹脂於 1 一 6步驟）， (並加3當量的 Kaiser試驗陰性氯甲烷洗幾次。得肽樹脂之收取壓下乾燥，再移由 PENINSULA 購 (每克樹脂加1 吲哚甲醸基時， N端去保然後與超 NaCNBHa )後，將入氫氟酸得）反應奄升/克較佳是加 1 5 後，應的 56 本紙張尺度適用中1國家標準（CNS1甲4規格(.210X297公釐） X 4分鐘 X 16分鐮 X 1分鐘 X 6 1分鐘 X 1分鐘 X 8分鐘 X 1分鐘用Β 〇 p - C 1及增加。護（Alb之2 -遇3 )内樹脂倍莫耳量的的醛或酮反用水、異丙鐵弗龍（器内。加淨化劑 )，如係含色胺乙烷二醇（0. 5

6 6 A B ®濟部中央標準局員工消费合作社印製五、發明説明（55) 毫升/克樹脂），然後在氟化氪（10毫升/克樹脂）濃縮，同時用液體氮冷卻。再將混合物升溫至0 〇，並於此溫度攪拌45分鐘。然後在減壓下汽提去氟化氫，殘餘物用醋酸乙醏洗Μ除去剌餘的淨化爾。化合物用3 0%強度的醋酸洗，過濾，將濾過物凍晶。 IV. Ib及II所得肽樹脂之收取將肽樹脂於減壓下乾煉，再作下述裂解手續之一 •視胺基酸姐合物而定（Wade, Tregear·，Howard Florey Fmoc Workshop Manual, Melbourne 1985 )。裂解條件 TFA 淨化劑反應時間 1 9596 5 96 Hz〇 1 . 5小時 2 9596 5%乙烷二硫酵 /茴香醚（1 :3) 1. 5時將肽樹脂於合適的TFA内的混合物於室溫按所述時間攪拌，然後濾除樹脂，用TFA及DCM洗。將濾過物及洗液澹縮，加乙链使化合物沉澱。於冰浴内冷郤後，濾除沉澱物 -57- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS) f 4規格（210x297公釐） -..................V....，.........................f.........................裝.......................^...................線 (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) A6 B6 五、發明説明（56 ) ，溶於30% _酸内·凍晶。 V. 在使用〇 —氛三苯甲基一樹脂（由Biohellas供應）時，是將肽-樹脂於醋酸/三氟甲酵/二氛甲烷混合物（ 1:1:3 )内的懸浮液於室溫攪拌1小時。然後吸»除樹脂 •並用此裂解溶液檄底洗。將合併之濉過物於真空濃縮並用水處理。遇濾或離心移除沉澱固體，用乙醚洗，減壓下乾堍。 VI. 化合物的鈍化與檢定純化是用膠色層分析（SEPHADEX G-10 ，G-15/10% HOAc* SEPHADEX LH20/Me0H)完成，陲後可作或不作中壓色層分析（固定相：HD—SIL C-18，20—45微米，100A ;移動相·· A 成分= 0.1% TFA/MeOH ，B 成分= 0.1 % TFA/ H2〇)。终產物純度用分析用HPLC (固定相：100 2.1 微米 VYDAC C-18, 5 1, 300 A ;移動相：CH3CH/H2〇成分*K0.1% TFA緩衝，40t)。檢定係用炔原子撞擊薄f及1 Η -或13C-光譜。 B . 特定方法實例1 (請先^f背•面之注¾.事項再填寫本頁一ί 裝訂 …線經濟部中央標準局員工消费合作社印¾ 二甲基卜Val~Val CH(CH3)2 ch3 〇Me〇

58 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS丨f 4規格（210X297公釐丨經濟部中央標準局員工消费合作社印繁 A6 _B6_ 五、發明説明（57 ) 將0.4克苯丙胺酸醢胺鹽酸化物（2奄莫耳）及0.55克 Boc-H (CH3)-CH [CH (CH3)2]-CH (0CH3)-CH2-C00H (2 毫莫耳；根據文獻：S. Shibuya et al., Heterocycles, Vol. 31) no. 9, 1597-1600 ( 1990)合成溶於 DMF 内。加0.4克DEPCN (2.2奄莫耳）及1.4毫升二異丙基胺（ DIPEA )後，將混合物於室溫攫拌過夜，減壓蒸發溶劑，將殘餘物溶於醋酸乙酯中，用5 %檸樣酸水溶液、水、5 %NaHC03、及NaCl溶液激底洗。有櫬曆於Na2S04上乾煉，遇濾，蒸發至乾。殘餘物於真空乾燦，用5毫升TFA/ DCM ( 1 :1 )去保_ 2小時，蒸發至乾。將這樣得到的去保護的碎片溶於DMF内，與0.44克H —三级一丁氧羰基一纈胺酸一 N —羧基酐（1.8毫莫耳）於45 "C反應。攪拌5 小時後，真空蒸發溶劑，加醋酸乙酯，有機層用5 %檸樣酸水溶液、5 %NaHC03水溶液、水、及NaCl水溶液徹底洗，於Na2S0 4上乾燥。減壓蒸發溶劑，殘餘物（0.7克， 1.3毫莫耳）用5毫升TFA/DCM (1:1 )處理2小時。蒸發溶劑後，將混合物於Κ0Η上乾燥*將殘餘物溶於DMF中，加0.19克Ν,Ν _二甲基纈胺酸（1.3奄莫耳；根據文獻 R.E. Bowmann， J. Chem. Soc. 1959， 1342之實例合成） *0.25克DEPCN (1.5毫莫耳）及0.7奄升DIPEA 。將反應混合物於室溫播拌過夜*蒸發至乾，於SEPHADEXLH — 20柱上作色層分析。收取產物部分，蒸發溶劑*得0.46克化合物1 。實例2 -----------......——Γ.ΓΓ.................,ί.........................裝......................訂...................線 <請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) — 59 — 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)甲4規格（210X297公釐，五、發明説明（58 )

N»N_ 二甲基一Val-Val-N A6 B6 CH(CH3)2 將0.29克苄基胺（2亳莫耳）及0.55克Boc-N(CH3)-CH[CH(CH3)2]-CH(0CH3)-CH2-C00H (2 莫耳；根據文獻：S. Shibuya et al., Heterocycles, Vol. 31, no. 9，1597-1600 ( 1990)合成）溶於 DMF 内。加0.4 克 DEPCN (2.2莫耳）及1.4毫升DIPEA後，將混合物於室溫攪拌過夜*滅®蒸發溶劑，將殘餘物溶於醋酸乙酯中，用5 %檸樺酸水溶液、、水、5 %NaHC03、及NaCl溶液激底洗。有機層於Na2S0 4上乾煉，過濾，蒸發至乾。殘餘物 (0.51克）於真空乾堍，用5奄升TPA /DCM (1:1 )去保護2小時，蒸發至乾。將這樣得到的去保護的碎片溶於

DMF內，與0.4克N —三级一丁氧羰基一纈胺酸一N 羧 ..............…ί.........................裝.......................叮.................k {請先閱讀背面之注意事項再填窝本頁) 經濟部中央標準局員工消費合作社印製基酐（1.6奄莫耳）於45¾反應。攪拌5小時後，真空蒸發溶劑，加醋酸乙酯，有機層用5 %檸樣酸水溶液、5 % HaHC〇3水溶液、水、及NaCl水溶液徹底洗，於Na2S(U上乾嫌。減壓蒸發溶劑，殘餘物（0.51克，1.1毫莫耳）用5 奄升TFA/DCM (1:1 )處理2小時。蒸發溶劑後*將混合物於K0H上乾煉，將殘餘物溶於DMF中，加0· 16克K，N — 二甲基纈胺酸（1.1毫萁耳），0.23克DEPCN (1.4毫莫 60 本紙張尺度適用t國國家標準（CNS)T4規格（210X297公釐）經濟部中央標準局員工消費合作社印製 A6 _B6_ 五、發明説明（59 ) 耳）及0.7毫升DIPEA 。將反應混合物於室溫攪拌過夜，蒸發至乾，於SEPHADEXLH — 20柱上作色層分析。收取產物部分，蒸發溶劑，得0.36克化合物1 。已製備下列諸化合物，此諸化合物可用實例1及2方法 ...........::」：-·!....................……..................裝......................訂...................森 {請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 製備： 3 . Xaa Val Xd n Xcx Xab 4 . Xaa Va 1 Xdm Xcx X a c 5 . Xaa Val Xdm Xcx Xat 6 . Xaa Val Xdm Xcx Xbp 7 . Xaa Val Xdm Xcx Xbt 8 . Xaa Val Xdm Xcx Xbu 9 . Xaa Val Xdm Xcx Xbv 10. Xaa Val Xdm Xcx Xbw 11. Xaa Val Xdm Xcx Xby 12 . Xaa Val Xdm Xcx Xca 13. Xaa Val Xdh Xcx Xbq 14. Xaa Val Xdh Xcx Xbs 15 . Xaa Val Xdm Xat 16 . Xaa Val Xdm Xbp 17 . Xa v Val Xdm Xbq 18 . Xa v Val Xdm Xbs 19 . Xbo Val Xdm Xbt 20 . Xbo Val Xdm Xbu 21 . Xaa Xaf Xdm Xbv 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)甲4規格（210X297公釐）五、發明説明（60 ) A6 B6 經濟部中央標準局®C工消#合作社印製 22. Xa a Xaf Xdm Xbw 23 . Xa v Leu Xdm Xby 24. Xaa Leu Xdm Xca 25 . Xa a Va 1 Xdm X c x Xcf 26 . Xaa Va 1 Xdm X c x X a o 27 . Xa x Va 1 Xdm NHZ 28. Xa x Va 1 Xdm Xcf 29 . X a x Va 1 Xdm X a o 30 . Xaa Xclni NHZ 31 . Xa x Xdm nh2 32. Xaa Xdn Xcf 33. Xa x Xd o Xcf 34. Xaa Xdm Phe Xcf 35 . Xa x Xdm Phe Xcf 36 . Xaa Va 1 Xda Xda HH2 37 . Xaa Va 1 Xda Xda Phe NH 38 . Xaa Va 1 Xdh Xdh NH2 39. Xaa Va 1 Xdh Xdh Phe NH 40 . Xaa Va 1 Xda NH2 41 . Xaa Va 1 Xdb NH2 42 . Xaa Va 1 Xdc NHZ 43 . Xaa Va 1 Xdd NH2 44. Xaa Va 1 Xde nh2 45 . Xaa Va 1 Xdf nh2 一 62 — 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)甲4規格（210x297公釐） ...........r ............................ί.........................裝…...........--:訂.................4 {請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 五、發明説明（61 ) A6 B6 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 46 . Xa a Va 1 Xdg MHz 47 . X a a V a 1 Xdh HHZ 48 . X a a Va 1 Xd i nh2 49 . Xaa Va 1 Xdk nh2 50 . Xa a Va l Xd 1 nh2 51 . Xaa Va 1 Xdn nh2 52. Xaa Va 1 Xdo nh2 53 . Xaa Va 1 Xdp nh2 54. Xaa Va 1 Xdq nh2 55. Xaa Va 1 Xdm Xc x NH 2 56. Xaa Va 1 Xdn X c y NH 2 57. Xaa Va 1 Xdm Xc z NH Z 58 . Xaa Va 1 Xdm Xds NH 2 59. Xaa V a 1 Xdm Xc w NH Z 60 . Xaa Va 1 Xdm Xda NH 2 61 . Xaa Va 1 Xa r HH2 62 · Xaa Va 1 Xdm Xdc NH 2 63 . Xaa Va 1 Xdm Xbf NH 2 64. Xaa Va 1 Xdm Xbg NH 2 65. Xaa Va 1 Xdm Xck 66 . Xaa Va 1 Xdm Xc 1 67. Xaa Va 1 Xdm Xcx Ph e NH2 68 . Xaa Va 1 Xdm X c x Ph e Xcf 69 . Xaa Va 1 Xdm Xcx Ph e Xa o 一 6 3 — 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)甲4规格（210X297公釐） (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) .裝

.,1T 叙. 五、發明説明（62 ) A6 B6 經濟部中央標準局員工消費合作杜印製 70 . Xa a Va 1 Xdm Xcx Xad HH 71 . Xa a Va 1 Xdm Pro nh2 72 . X a a Va 1 Xdm Xcx X d r NH 73 . Xa a Va 1 Xdm Xcx X c u NH 74. Xa v Va 1 Xdm Xcx Phe NH 75 . Xa x Va 1 Xdm Xcx Phe NH 76. Xa a Va 1 Xdm Phe NHZ 77. Xa v Va 1 Xdm Phe NH2 78. X a x Va 1 Xdm Phe nh2 79 . Xa s Va 1 Xdm Phe HHz 80 . Xaa Va 1 Xdm Xab 81. Xa a Va 1 Xdm Xa c 82 . Xbh Xdm NH2 83 . Xbi Xdm Xcx NH2 84. Xbk Xdm Xc x Phe HHZ 85 . Xbl Xdh HHa 86. Xbm Xdh Xcx NH2 87. Xbn Xdh Xcx Phe nh2 88. Xaa Xdm Phe nh2 89. Xa s Xdm Phe Xa o 90 . Xa v Xdm Phe Xcf 91 . Xa x Xdm Phe nh2 92. Xaa Val Xdm OH 93 . Xaa Va 1 Xdm 0 B 2 1 ...................-—......................{.........................裝，：：-................訂.....................森 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) — 64 — 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)甲4規格1210父297公&)~ 五、發明説明（6 3 ) A6 B6 經濟部中央標準局員工消费合作社印製

94. Xa a Va 1 Xdm nh2 95 . Xa a Va 1 Xdm Xan 96 . Xaa Va 1 X d in X a o 97 . Xa a Va 1 Xdm X a p 98 . Xaa Va 1 Xdm Xa u 99 . Xaa Va 1 Xdm Xa q 100. Xaa Va 1 Xa r Pro NH 101 . Xaa Va 1 Xdm Xbz 102. Xaa Val Xdm Xcb 103. Xaa Va 1 Xdm X c c 104. Xaa Val Xdm Xcd 105 . Xaa Val Xdm Xce 106 . Xaa Val Xdm Xcf 107 . Xaa Val Xdm Xcg 108 . Xaa Val Xdm Xch 109. Xaa Val Xdm Xci 110. Xaa Val Xdm Xc m Ill . Xaa Val Xdm Xcn 112. Xaa Val Xdm Xco 113. Xaa Val Xdm， Xcp 114. Xaa Val Xdm Xcq 115 . Xaa Val Xdm X c r 116. Xaa Val Xdm Xa o 117. Xa g Val Xdm NHZ 一 65 — 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)甲4規格（210x297公f) --......................................,(.........................裝...................：訂..................森 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) A6 B6 經濟部中央標準局員工消f合作杜印製五、發明説明（64 ) 118. Xah Va 1 Xdin NHZ 119. X a g Va 1 Xd m NHa 120 . Xa i Va 1 Xdm NHa 121 . Xak Xaf Xd m NH2 122 . Xa 1 Xaf Xdm hh2 123. X a m Xaf Xdm nh2 124. Xas Xaf Xdm hh2 125. X a v Xaf Xdm NHz 126. Xa w Va 1 Xdm NHZ 127 . Xax Va 1 Xdm NHZ 128. Xa y Va 1 Xdm NH2 12 9、. Xa z Va 1 Xdm kh2 130 . Xba Xaf Xdm Xcf 131 . Xbb Xaf Xdm Xcf 132. Xbc Va 1 Xdm HH2 133 . Xbd Va 1 Xdm nh2 134. Xbe Va 1 Xdm NHZ 135 . Xbo Xaf Xdm nh2 136. X c s Xaf Xdm NHZ 137. Xct Val Xdm NH2 138. X C V Va 1 Xdm nh2 139. Xa a Val Xdt Xc x Phe NH 140. Xaa Va 1 Xdt Xc x NHZ 141 . Xa a Val Xdt nh2 (請先閲讀背面之注意事項再媾寫本頁) .裝 '?τ 線. -66 _ 本纸張尺度適用中國國家標準（CNS)甲4規格（210x297公釐>~~

五、發明説明（65 ) A6 B6 142 . X a a Va 1 Xdu Xc x HH 143 . Xaa Va 1 Xdu NH 2 144. Xdv Va 1 Xd m Xc f 145 . Xdw Va 1 Xdm Xc f 146 . Xdx Va 1 Xdm Xc f 147 . Xaa Va 1 Xar Xa e 148. Xaa Va 1 Xa r Xd y

表I 根诎赏例1及2所製丨/ι丨的化合物的排序證踅化合物煸號排序證實編號： 3-14, 25-26, 70, 12, 73 1 15-20, 28-29, 36, 38, 55-60, 62-66, 80-81, 95-99, 101-116, 140, 142, 144-148 2 21-22, 131 3 23-24 4 37, 39, 67-69, 74-75, 139 5 34-35, 89-90 6 76-79 7 84, 87 8 71, 100 9 -67 -

本紙張尺度剌中_家料（哪）^4麟⑽x29^D

A6 B6 五、發明説明（66 )

Xa a 3各苻號在此概述中有如下的S義 Xaa: KN-·二甲基纈胺的

Xab:

Xac:

Xad:四鉍與B2啉梭的 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁)

Xae：

N

OH

Xaf ：經濟部中央標準局員工消f合作社印製 :三级一白胺酸或2—三级-丁基甘胺酸本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)甲4規格（210X297公釐）五、發明説明（6 7

Xag: N-N- 甲華|異白胺觖 Xah: Ν,Ν-二甲举甶胺骼 Xai: Ν,Ν-二甲孝一三鈒一白胺酸 Xak: Ν-;胖基-燥胺酸Xal: N-.乙醯基一N-甲基纈胺拥.Xam: N-甲基一 N—至基纈胺酸 —NH

Xan: I)

Xao ：

Xap：

A6 B6

Xag:

HN

JO CH(CH3)2xar： — ΝΗγ^\€〇. och3 xas: N-甲基一h—異丙越纈胺酸 -:.............................ί........................裝......................-可.....................春 (請先閲讀背面之注意事項再填窝本頁} 經濟部中央標準局Μ工消f合作社印製 Ο

Xat： Xau：

本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)甲4規格（210X297公釐）五、發明説明（68 )

Xav: Ν,Ν-·二甲基纈胺

Xaw Xax Xay

Xaz ： N-:氛乙基纈胺酸 N,N-二丙基纈胺酸 Ν-環丙基纈胺酸^NY^c〇.ch(ch3)2

Xba ：

Xbb：

Xbc：

0 'Y^co-CH(CH3)2

Xbd：

CO— CH(CH3)2 A6 B6 (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) ,經濟部t央標準局Μ工消费合作社印製

Xbe：

本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)甲4规格（210X297公釐） A6B6 經濟部中央標準局員工消f合作社印製

(請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 裝本紙張尺度通用中國國家標準（CNS)甲4規格（210X297公釐）五、發明説明（70)

Xbo: N,N-Dipropyl-tert**leucine A6 B6 經濟部中央標準局員工消#合作社印製

............广、…：：[.........................ί........................裝.....................訂...................線 (請先閲讀背面之注意事項再填窝本頁} 本紙張尺度通用中國國家標準（CNS)甲4規格（210X297公釐）五、發明説明（71) A6B6 經濟部中央標準局員工消f合作社印製

Ό -73 - 本纸張尺度適用中國國家標準（CNS)甲4規格（210x297公釐） ’ * - »............-............ί:....................裝......................訂....................線 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 五、發明説明（72 )

Xbz ：

Xca：

N cf3

Xcb: s ch3 A6 B6

Xcc：

Xcd：

Xce：經濟部中央標準局員工消费合作社印製

Xcf ：

-74 - 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)甲4規格（210X297公釐） (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁)

五、發明説明（73 )

Xcg：

Xch:

Xci：

Xck:

A6 B6

Xcl：

Xcm：

Xcn：

::—,.-L........r.r....................-ii.......................裝......................訂...................4 {請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部中央標準局員工消费合作社印製

Xco：

-75 - 本纸張尺度適用中國國家標準（CNS)甲4规格（210x297公釐1 A6 B6 五、發明説明（74

Xcp：

Xcq；

(請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 裝

Xcr:

，、可 :線經濟部中央標準局員工消f合作社印製 XCS: N-脲站-缒胺酸

Xct: KN-:二甲基笨基丙胺肽

Xcu: 3-僻吩基丙胺酸 XCV: N-!甲基_N_異丙基-兰级一甶胺·时本紙張尺度逋用中國國家標準（CNS)甲4规格（210x297公釐）五、發明説明（75

Xcw：

Xcx;

A6 B6

Xcy ： CO-

Xcz ：

Xda： .IT CH3 CO-

Xdb：

.............rL........[..:...................:t......................裝........-.............訂...................線 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁)

Xdc 經濟部中央標準局員工消f合作社印製

Xdd:

本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)甲4規格（210X297公釐1 A6 B6 五、發明説明（76

Xde：

Xdf ：

CH(CH3)2

Xdg：

{請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁)

Xdh： xdi：經濟部中央標準局員工消费合作社印製 xdk： •N# ch3

CH(CH3)2 ch3 (CH3)3c CO- -78

本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)甲4規格（210X297公釐I 五、發明説明（77 )

Xdl：

ch(ch3)

Xdm

,ΙΤch3 oh A6 B6 <請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁)

Xdn： C(CH3)3•>r ch3 oh .裝

Xdo：

..βτ

Xdp：經濟部中央標準局員工消费合作社印製

Xdq：

CH(CH3)2CH3 〇C(CH3)3 79 - 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)甲4規格（210X297公釐1 A6 B6 五、發明説明（78

Xdr·· 3~萘基丙胺酸

Xds ：

Xdt：

Xdu： CH3-1tOn ch3 (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁' -裝

Xdv: N-甲胺磺醯基一纈胺敁

Xdw: Ν-!·ιρ胺二n —甲碲醯Μ _纈胺侦

Xdx:N 乳醯基一 Ν—甲基一纈胺胂 I lar

Xdy：

線經濟部中央標準局Μ工消費合作社印51 结尾一 NH2意為C -端胺基酸或鏈節是醢胺形式。本發明化合物可用傳統方法作抗癌活性鑑定，此等方法包括下述的方法。 A. 活‘體外方法 80 本紙張尺度適用中国國家標準（CNS)甲4規格（210X297公釐）第82110574號專利申請案中1T输明軎修IF頁（84年1 @

理鹽水内之瑢液）。將此混合物於371C培育加50微升25%的SDS ，pH2 ，於每一凹中。，用ELISA讀數器於5 50微毫米每凹之吸收 (經治療的活细胞/對照的百分數）計算由數據的平均+ / — SD值。治療细胞的光密度 -X 100 = % T/C 照細胞的光密度受阻的T/C值的試驗化合物的濃度設定為 .對使50%生長 I C S 〇 ° 實例1之化合物顯示之ICs〇值為1 X 10_7及實例2之化合物為 2 X 10~β。 Β . 活體内方法本發明化合物堪可進一步Μ前臨床鑑定作試驗*以测定 81 本紙張尺度適用中國國彖標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） 83.3.10,000 -------------裝---------訂---------線 - (請先閱讀背面之注意$再填寫本頁) Α6 Β6 五、發明説明（8〇 ) 其活體內活性，此活體内活性是臨床應用的指標。此鑑定使用裸體鼠，將瘤姐織，較佳是取自人的，移植（異種移植）於鼠體内，此移植是此技藝界所熟知的。給予帶有異種移植物的鼠以試驗化合物，評估其抗腫瘤效果。更特定地說，將生長在無胸腺裸鼠體內的人的腫瘤碎片 (大小約50毫克）移植於新接受鼠。將移植的當天定為0 天。6至10天後，Μ試驗化合物治療鼠•化合物係以靜脈注射或腹腔注射給予•每一劑量給予5 — 10隻鼠。每天給予化合物，連續5天、10天、15天，劑量錚10 — 100毫克 /公斤體重。每二星期測量鼠的體重及瘤的大小。使用 Vernier測徑器測出直徑，Μ此直徑用下式計算瘤的容積 (長度X寬度2) /2 =瘤重的毫克數每一治療姐都計算出瘤的平均重量，Μ未治療的腫瘤作對照測出每組的T/C值。 {請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) .裝 .訂線. 經濟部t央標準局員工消費合作社印製 -82 - 本纸張尺度適用中國國家標準（CNS)甲4規格（210X297公釐） A6 B6 經濟部中央標準局員工消費合作社印製五、發明説明（si ) (i ) 申請人： (A) 姓名：BASF Aktiengesellschaft (B) 街：Carl-Bosch-Strasse 38 (C) 城市：Ludwigshafen (E )國家：F e d e r a 1 R e p u b 1 i c o f G e r m a n y (F) 郵區：D-67056 (G) 電話：0621/6048526 (H) 傅真：0621/6043123 (I) Telex : 1762175170 (ii ) 發明題目：新穎肽，其製備及用途 (iii ) 排序數目：9 (iv ) 電腦可讀形式： (A) 介質型：軟碟 (B) 電腦：與IBM個人電腦相容者

(C) 操作系統：PC-D0S/MS-D0S (D) 軟體：專利 In Release # 1.0, Version It 1.2 5 (EPO) ⑵排序證明1號資料： (i ) 排序特徵： (A) 長度：5個胺基酸 (B) 型：胺基酸 (C) 股：單股 -8 3 - 本纸張尺度適用中國國家標準（CNS)甲4規格（210x297公釐） ..........「….......ί ….........................,/1...............................................訂.............. . 線 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) A6 B6 五、發明説明（82 ) 經濟部中央標準局員工消f合作社印製 (D) 托樸學線性 (ϋ ) 分子型：肽 (xi) 排序說明 ί 排序證明 1 X a a Va 1 Xaa Xa 1 a Xa a 1 5 排序證明 2號資料 (i ) 排序特激： (A) 長度 • 5 個胺基酸 (B) 型：胺基酸 (Ο 股：單股 (D) 托樸學線性 (ii ) 分子型呔 (xi) 排序說明排序證明 2 號 Xa a Va 1 Xaa Xa a Xa a 1 5 排序證明 3號資料： (i ) 排序特激： (A) 長度 4 個胺基酸 (B) 型：胺基酸 (C) 股：單股 (D) 托樸學線性 (ii ) 分子型肽 (xi) 排序說明排序證明 3 號 Xaa Xaa Xaa Xa a -84- {請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) -裝

、ST 線. 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)甲4規格（210X297公釐）毯濟部中央標準曷員工消費合作社印製 A6 _B6 五、發明説明（83) ⑵排序證明4號資料： (i ) 排序特徽： (A) 長度：4個胺基酸 (B) 型：胺基酸 (C) 股：單股 (D) 托樸學：線性 (ϋ ) 分子型：肽 (xi) 排序說明：排序證明4號： Xaa Leu X a a X a a 1 ⑵排序證明5號資料： (i ) 排序特徵： (A) 長度：5個胺基酸 (B) 型：胺基酸 (C) 股：單股 (D) 托樸學：線性 (ϋ ) 分子型：肽 (xi) 排序說明：排序證明5號： Xaa Va 1 Xaa Xaa Phe 1 5 ⑵排序證明6號資料： (i ) 排序特徴： (A)長度：4個胺基酸 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) —8 5 — 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)甲4規格（210x297公釐）經濟部中央標準局員工消費合作社印製 A6 __B6 五、發明説明（84 ) (B) 型：胺基酸 (C) 股：單股 (D) 托樸學：線性 (ϋ ) 分子型：肽 (xi) 排序說明：排序證明6號：

Xaa Xaa Phe Xaa 1 ⑵排序證明7號資料： (i ) 排序特激： (A)長度：4個胺基酸 (B )型：胺基酸 (C) 股：單股 (D) 托樸學：線性 (ϋ ) 分子型：肽 (xi) 排序說明：排序證明7號：

Xaa Val Xaa Phe 1 ⑵排序證明8號資料： (i ) 排序特徵： (A) 長度：4個胺基酸 (B) 型：胺基酸 (C) 股：單股 (D) 托樸學：線性 (ϋ ) 分子型：肽一 8 6 — 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)甲4規格（210x297公釐） ..................................Γ.::.....................裝：：：-...............訂..............:線 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) A6 B6 五、發明説明（85 ) (xi) 排序說明：排序證明8號： Xaa Xaa Xaa Phe 1 ⑵排序證明9號資料： (i ) 排序特激： (A) 長度：4個胺基酸 (B) 型：胺基酸 (C) 股：單股 (D) 托樸學：線性 (ϋ ) 分子型：肽 (xi) 排序說明：排序證明9號： Xaa Va 1 Xaa Pro 1 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) .裝 _訂經濟部中央標準局Μ工消费合作社印^ — 87 — 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)甲4規格（210X297公釐） A6 B6 五、發明説明（86 ) 阃1.聚合物支撐上的Boc保諫g技術

Boc-NH-CH-C〇_ 樹脂 I

PG-R

1) TFA 2) «ί ^ Γ H2N-CH-CO-

PG-R

Boc—NH—CH—COOH —活化劑 PG-R n

Boc—NH—CH_CO_HN_CH - CO-樹脂

I I

PG-R PG-R HF- w

HF x H2N-CH-CO-[-NH-CH-CO-]n-NH-CH-COOH

1 I I R R r 缓濟部中夬標準局員工消費合作社印製 {請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) B〇c = t- PG=側鐽保說鞋 , R =胺基肽側鏈 -88 - 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)甲4規格（210X297公釐）五、發明説明（87 ) 圖2.聚合物支撐上的FB0C保_基技術 A6 B6

Fmoc—NH—CH—CO-樹賭 PG-R

六Μ吡啶:/DMF

H2N_(j：H-CO-懸 PG-R

Fraoc - NH - CH - COOH I PG-R 活化劑

Fraoc-NH— (JH—CO - HN—CH-CO—樹脂 PG_R PG-R

TFA (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁)

Q

TFAxH2N-CH-CO-[-NH-CH-CO-Jn-NH-CH-COC 1 I IR R R 經濟部中夬標準局Μ工消费合作社印製

Fmoc = 9_苊甲氧羰基保諫基 PG =側鐽保護基 R=<胺基酸脷鏈 89 - 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)甲4規格（210x297公釐1 ζαχ分析第82110574號專利申請案中文補充說明書(88年12月）委託號：95Ρ01881-2219 試驗編號：27518-168 質譜測定法 2AX/PS - Μ 325

SPEC

η 2219£b 27Sia-168 sevl.8 rlOOO cyc5 xe6.5kV FAB *VE +LMR BSCAN (EXP) UP I»R ole Client ： Hahn 3.00.3 Incen : 14413876 100.3 RIC : 4S2GG440 1000.00 irnnu +1>5

09-Kar-9S 衍生之光譜開始：11:40:51

Inlet Hasses* 务 40 > 1100 1068 !

Jo. 3

E十07 1.4A

40〇33c ^ 第82110574號專利申請案英文補充說明書（88年12月） ROC (Taiwan) Patent Application No. 82110574 __Supplementary Snecification fPecember 1999") ZAX Analyiik

Massenspektrometne 2AX/PS‘M325

Auftragsnummer t 95P01 明 1 ·2219 Probenbezeichnung : 27518-168

An^lysenergebnis r

Komp· Mr. Mr11 Strukturvorschlag 1 a 1 675.6 Zielprodukt 2 1} KV = Mons!sc!op!«ch^ MolekGtmasse (dimensionslos); (±〇«3} (Mittlere relative MoleKOlmassen sind unterstrfchen) 2) I a IdentifSzicrunQsmothode (SchlOssel siehe Seite 1)

9 9 -2-

EC.s;de-er.3rm--s: SSC^^BNPD 09-Kar-9S OEJUtVBD SPECTRUM Start : 11:40:51

Inlet ： Masses： ipeaks： 40 > 1100 1088

40033, 2751Β-16Θ eevl.8 rlOQO cyc5 xe6.5kV FAB j-VE ♦LMR BSCAM (BXP) UP LR glc Client: Hahn 100.3 Incen : 14413876 100.3 RJC ·· 452^6440 1000.00 mncu +1>5 — _ 400SS5 -3 -

l3 *1 · s tpsir 5 a E A"· ct 3- 0 A. s-3s 12* 0009’J s 0£C. CM -t· f β s § _clvst 02 i ACSIS-US a_ sfr-4*·»·Β43 s aD I,51*dp 204s °r,luvpt 00210211 ^ φ H2SS.IO llcl,*_Me^u"5'c·· s 0 1 C ~00 20 "* 3-0 Is (GH3)2-<o}l<al-Dil-0he-NH2TFA-Salt (0 « f\3 9 400335 -4- o U1

<0ϊ! S fn

i fgr .4 = gK S§uebS*!!s»S£ eS i τ ΠΡ!中 e S < ,s 9 為-PHIS· 2qu*n2: fZpul

Pr.=s-2SS?/I3*u 3 # f 250-3

GESflflT .SE I TEN 05

Claims

六巧11〇574號專利申請案400335韶中文申請專利範圍修正本(89年5月）申請專利範_ 一種具下式的肽 R1R2/ 其中 R1 是（：丨_7烷基是c 是c 是c 是C 是C 年月曰S ‘.89. = j| 補充

/R4 N-CHX-CO-Val-NR3-CHB-CHD-CH2-CO-(M)d-N.\r5 R2 X R3 B D Μ R4 R5 經濟部中夫標準局®;工消费合作社印製 -4烷基 _5烷基 -4烷基 .5虎基 .5燒氧基；為表丙胺酿基；為Η ; 為Η或芊基； d是0或1 ; 及其與生理上可耐受的酸所成的鹽。一種用以治療腫瘤之醫藥组合物’包括醫藥上可接受的載劑及治療上有效量的根據申請專利範園第1項之化合物。本紙伕尺度適用中國菌家搞準（CNS ) A4規格（210X297公釐） (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 衣· -訂六巧11〇574號專利申請案400335韶中文申請專利範圍修正本(89年5月）申請專利範_ 一種具下式的肽 R1R2/ 其中 R1 是（：丨_7烷基是c 是c 是c 是C 是C 年月曰S ‘.89. = j| 補充

/R4 N-CHX-CO-Val-NR3-CHB-CHD-CH2-CO-(M)d-N.\r5 R2 X R3 B D Μ R4 R5 經濟部中夫標準局®;工消费合作社印製 -4烷基 _5烷基 -4烷基 .5虎基 .5燒氧基；為表丙胺酿基；為Η ; 為Η或芊基； d是0或1 ; 及其與生理上可耐受的酸所成的鹽。一種用以治療腫瘤之醫藥组合物’包括醫藥上可接受的載劑及治療上有效量的根據申請專利範園第1項之化合物。本紙伕尺度適用中國菌家搞準（CNS ) A4規格（210X297公釐） (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 衣· -訂