CZ286752B6 - Peptide and pharmaceutical preparation containing thereof - Google Patents

Peptide and pharmaceutical preparation containing thereof Download PDF

Info

Publication number
CZ286752B6
CZ286752B6 CZ19951575A CZ157595A CZ286752B6 CZ 286752 B6 CZ286752 B6 CZ 286752B6 CZ 19951575 A CZ19951575 A CZ 19951575A CZ 157595 A CZ157595 A CZ 157595A CZ 286752 B6 CZ286752 B6 CZ 286752B6
Authority
CZ
Czechia
Prior art keywords
group
alkyl
xdm
formula
xaa
Prior art date
Application number
CZ19951575A
Other languages
English (en)
Other versions
CZ157595A3 (en
Inventor
Andreas Haupt
Bernd Janssen
Kurt Ritter
Dagmar Klinge
Gerhard Keilhauer
Cynthia Romerdahl
Teresa Barlozzari
Xiao-Dong Qian
Original Assignee
Basf Ag
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Basf Ag filed Critical Basf Ag
Publication of CZ157595A3 publication Critical patent/CZ157595A3/cs
Publication of CZ286752B6 publication Critical patent/CZ286752B6/cs

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K7/00—Peptides having 5 to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K7/02—Linear peptides containing at least one abnormal peptide link
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/02—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing at least one abnormal peptide link
    • C07K5/0205—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing at least one abnormal peptide link containing the structure -NH-(X)3-C(=0)-, e.g. statine or derivatives thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Crystallography & Structural Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Cephalosporin Compounds (AREA)
  • Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
  • Agricultural Chemicals And Associated Chemicals (AREA)
  • Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
  • Window Of Vehicle (AREA)
  • Measurement And Recording Of Electrical Phenomena And Electrical Characteristics Of The Living Body (AREA)
  • Plural Heterocyclic Compounds (AREA)
  • Heterocyclic Carbon Compounds Containing A Hetero Ring Having Oxygen Or Sulfur (AREA)

Description

Peptid a farmaceutický prostředek s jeho obsahem
Oblast techniky
Zde popsaný vynález se týká nových peptidů a farmaceutických prostředků s jejich obsahem, které jsou vhodné k ošetřování neoplastických onemocnění.
Dosavadní stav techniky
Z odborné a patentové literatury jsou známy sloučeniny, které nacházejí uplatnění při potlačování neoplastických onemocnění. V této souvislosti se poukazuje na článek, který zveřejnil R. Bai a kol., Biochem. Pharmakol. 40(8), 1859-1864 /1990/, E. Giralt a kol., „Peptides 1990“, Escom, Leiden, 1991, str. 104 až 106, R. Bai a kol., Biochem. Pharmakol. 45(7), 1503-1515 /1993/, stejně jako na WO 93/03054-A, EP 0 222 283-A a EP 0 357 332-A.
V citované literatuře jsou popsány účinné látky známé pod označením dolastatin-10, bleomycin, doxorubicin nebo taxol, které byly zavedeny v klinické terapii nádorů.
Vhodnou substancí zjmenovaných látek je dolastatin-10, jehož výraznou nevýhodou je mimořádně vysoká toxicita. Dolastatinu-10 se získává poměrně komplikovaným a náročným postupem (Biochem. Pharmacol. 40, 1859-1864 (1990), obzvláště str. 1860, vpravo nahoře).
V důsledku dolafeninového zbytku se nedaří tuto látku vyrábět s technicky použitelným výtěžkem. Kromě toho dolastatin-10 musí být laboratorně čištěn ze zřídka se vyskytujících přírodních zdrojů. Jeho další nevýhodou je, že je nestabilní vůči kyselinám. Bylo totiž popsáno, že i jen malá změna ve struktuře může být příčinou úplné ztráty aktivity (Biochemical Pharmacology, 40 (8), 1859-1864 /1990/).
Trvá proto poptávka po méně toxických peptidech podobných známých substancím, zejména dolastinu-10, které by byly ve srovnání s ním výhodněji použitelné a daly se vyrobit v technicky použitelném výtěžku.
Cílem tohoto vynálezu je prostřednictvím nových sloučenin rozšířit spektrum možných prostředků.
Podstata vynálezu
Předmětem tohoto vynálezu je peptid obecného vzorce I
R1 \
N-CHX-CO-A-NR3-CHB-CHD-CHE-CO-(R7)b-M-Q /
R2 (I), ve kterém
R1 znamená alkylovou skupinu s 1 až 7 atomy uhlíku nebo fluorethyl,
R2 znamená atom vodíku nebo alkylovou skupinu s 1 až 4 atomy uhlíku nebo
R'-N-R2 dohromady mohou znamenat pyrrolidinový kruh,
- 1 CZ 286752 B6
X představuje alkylovou skupinu s 1 až 5 atomy uhlíku, cykloalkylovou skupinu se 3 až 7 atomy uhlíku, -CH2-cyklohexyl nebo benzyl,
A je vybrán ze souboru zahrnujícího valylový, isoleucylový, leucylový, allo-isoleucylový, 3terc.-butylalanylový, 2-terc.-butylglycylový, 2-ethylglycylový nebo 2-cyklohexylglycylový zbytek,
R3 znamená atom vodíku, methyl nebo ethyl,
B představuje alkylovou skupinu s 1 až 5 atomy uhlíku, cykloalkylovou skupinu se 3 až 7 atomy uhlíku, -CH2-cyklohexyl nebo benzyl,
D znamená atom vodíku, hydroxyskupinu, acetoxyskupinu nebo alkoxyskupinu s 1 až 5 atomy uhlíku,
E znamená atom vodíku nebo alkylovou skupinu s 1 až 5 atomy uhlíku,
R7 znamená skupinu vzorce -NR4-CHG-CHK-CHL-CO~, kde R4 znamená atom vodíku nebo methyl,
G znamená atom vodíku, alkylovou skupinu s 1 až 4 atomy uhlíku, cyklohexyl, -CH2cyklohexyl nebo benzyl,
K znamená atom vodíku, hydroxyskupinu, acetoxyskupinu nebo alkoxyskupinu s 1 až 5 atomy uhlíku,
L znamená atom vodíku nebo alkylovou skupinu s 1 až 5 atomy uhlíku, nebo
R4 a G znamenají dohromady skupinu vzorce -(^2)4-, -(CH2)3- nebo -CH2CH(OH)CH2-,
M je zvolen ze souboru zahrnujícího 1-aminopentyl-l-karbonylový, valylový, 2-tercbutylglycylový, prolylový, hydroxypropylový, isoleucylový, leucylový, 3-cyklohexylalanylový, fenylalanylový, tetrahydroisochinolyl-2-karbonylový, 3-thiazolylalanylový, 3thienylalanyl, histidylový, 2-aminoindyl-2-karbonylový, tyrosylový, 3-pyridylalanylový, 3-terc.-butylalanylový, 2-cyklohexylglycylový nebo 3-naftylalanylový zbytek, b představuje nulu nebo číslo 1,
Q představuje hydroxyskupinu, alkoxyskupinu s 1 až 5 atomy uhlíku, fenoxyskupinu, benzyloxyskupinu nebo aminoskupinu vzorce NR5R6, kde R5 znamená atom vodíku, hydroxyskupinu, benzyloxyskupinu, alkylovou skupinu s 1 až 7 atomy uhlíku, fluorethyl, difluorethyl nebo trifluorethyl,
R6 znamená atom vodíku, alkylovou skupinu s 1 až 7 atomy uhlíku, fenyl, kteiý je popřípadě substituován jedním substituentem zvoleným ze souboru zahrnujícího trifluormethyl, nitroskupinu, atom halogenu, alkylovou skupinu s 1 až 4 atomy uhlíku, jež může tvořit cyklický systém, nebo alkoxyskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku, dále znamená benzyl, který je popřípadě substituován jedním substituentem zvoleným ze souboru zahrnujícího trifluormethyl, nitroskupinu, atom halogenu, alkylovou skupinu s 1 až 4 atomy uhlíku, jež může tvořit cyklický systém, nebo alkoxyskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku, dále znamená pyridyl,
-2CZ 286752 B6 pikolyl, benzisothiazolyl, benzopyrazolyl, benzoxazolyl, pyrimidyl nebo 5-člennou heteroarylovou skupinu zvolenou ze souboru zahrnujícího skupiny vzorce
nebo
R5 a R6 dohromady s atomem dusíku, ke kterému jsou připojeny, tvoří arylovou skupinu zvolenou ze souboru zahrnujícího
a jeho soli s fyziologicky přijatelnými kyselinami.
Výhodnou sloučeninou obecného vzorce I je svrchu uvedený peptid, ve kterém R‘-N-R2 znamená pyrrolidinovou skupinu.
Jinou výhodnou sloučeninou obecného vzorce I je svrchu uvedený peptid, ve kterém Q znamená aminoskupinu vzorce R5-N-R6, kde
R5 znamená atom vodíku, hydroxyskupinu, benzyloxyskupinu, alkylovou skupinu s 1 až 7 atomy uhlíku, fluorethyl, difluorethyl nebo trifluorethyl,
R6 znamená atom vodíku, alkylovou skupinu s 1 až 7 atomy uhlíku, fenyl, který může být substituován jedním substituentem, jímž může být CF3, nitroskupina, atom halogenu, alkylová skupina s 1 až 4 atomy uhlíku, která může mít formu cyklického systému, alkoxyskupina s 1 až 4 atomy uhlíku, dále znamená benzyl, který může být substituován jedním substituentem, jímž může být CF3, nitroskupina, atom halogenu, alkylová skupina s 1 až 4 atomy uhlíku, která může mít formu cyklického systému nebo alkoxyskupina s 1 až 4 atomy uhlíku, dále znamená pyridyl, pikolyl, benzisothiazolyl, benzopyrazolyl, benzoxazolyl, pyrimidyl nebo pětičlennou heteroarylovou skupinu definovanou v nároku 1.
Ještě jinou výhodnou sloučeninou obecného vzorce I je svrchu uvedený peptid, ve kterém Q znamená aminoskupinu vzorce R5-N-R6, která tvoří struktury zvolené ze souboru sestávajícího z
-/Ί \__/ \^N
Další výhodnou sloučeninou obecného vzorce I je svrchu uvedený peptid, ve kterém b představuje nulu.
Ještě další výhodnou sloučeninou obecného vzorce I je svrchu uvedený peptid, ve kterém b představuje nulu, R7 znamená skupinu vzorce -NR4-CHG-CHK-CHL-CO- a Q představuje fenoxyskupinu, benzyl- oxyskupinu nebo aminoskupinu vzorce NR5R6.
Ještě jinou výhodnou sloučeninou obecného vzorce I je svrchu uvedený peptid, ve kterém b znamená nulu a Q představuje fenoxyskupinu, benzyloxyskupinu nebo aminoskupinu vzorce NR5R6.
Konečně ještě jinou výhodnou sloučeninou obecného vzorce I je svrchu uvedený peptid, ve kterém b znamená 1 a Q představuje hydroxyskupinu, alkoxyskupinu s 1 až 5 atomy uhlíku nebo benzyloxyskupinu.
Předmětem tohoto vynálezu je také farmaceutický prostředek k ošetřování neoplastických onemocnění, který obsahuje farmaceuticky přijatelnou nosnou látku a terapeuticky účinné množství sloučeniny popsané svrchu.
Sloučeniny obecného vzorce I jsou výhodně odvozeny od L-aminokyselin nebo jejich derivátů, ale mohou být odvozeny od jedné nebo většího počtu D-aminokyselin nebo jejich derivátů.
Zvláště výhodné fyziologicky přijatelné kyseliny jsou kyselina chlorovodíková, kyselina citrónová, kyselina vinná, kyselina mléčná, kyselina fosforečná, kyselina methansulfonová, kyselina octová, kyselina mravenčí, kyselina maleinová, kyselina fumarová, kyselina jablečná, kyselina jantarová, kyselina malonová, kyselina sírová, kyselina L-glutamová, kyselina Laspartová, kyselina pyrohroznová, kyselina muková, kyselina benzoová, kyselina glukuronová, kyselina oxalová, kyselina askorbová a acetylglycin.
Nové sloučeniny se mohou vyrábět známými způsoby. Tak sloučeniny mohou být sestaveny sekvenčně nebo vázáním vhodných malých fragmentů. Při sekvenčním sestavování, které vychází od uhlíkatého konce peptidového řetězce, se provádí prodloužení po stupních, vždy o jednu aminokyselinu, nebo o stavební blok v každém čase. Při kondenzaci fragmentu je možné vázat dohromady fragmenty o rozdílných délkách a fragmenty naopak se mohou získávat sekvenčním sestavením z aminokyselin nebo stavebních bloků.
Jak při sekvenčním sestavení, tak při fragmentové kopulaci je nezbytné vázat jednotky vytvářející amidovou vazbu. K tomu jsou vhodné enzymatické a chemické způsoby.
Chemické způsoby vytváření amidové vazby podrobně popsal Můller, Methoden der organischen Chemie, sv. XV/2, str. 1 až 364, Thieme Verlag, Stuttgart /1974/, Stewart a Young, Solid Phase Peptide Synthesis, str. 31 až 34 a 71 až 82, Pierce Chemical Company, Rockford /1984/, Bodanszky, Klausner a Ondetti, Peptide Synthesis, str. 85 až 128, John Wiley & Sons, New York /1976/, ajsou také uvedeny v jiných základních pracech týkajících se chemie peptidů. Zvláštní přednost se dává azidové metodě, metodě na bázi symetrického a smíšeného anhydridu, in šitu
-4CZ 286752 B6 generovaným nebo předem připraveným aktivním esterům, použití urethanem chráněných Nkarboxyanhydridů aminokyselin a tvorbě amidové vazby za použití kopulačních činidel, zvláště dicyklohexylcarbodiimidu (DCC), diisopropylkarbodiimidu (DIC), l-ethoxykarbonyl-2ethoxy-l,2-dihydrochinolinu (EEDQ), hydrochloridu l-ethyl-3-(3-dimethylaminopropyl)karbodiimidu (EDCI), anhydridu kyseliny n-propanfosfonové (PPA), N,N-bis(2-oxo-3oxazolidinyl)amidofosfoiylchloridu (BOP-C1), brom-tris-pyrrolidinofosfoniumhexafluorfosfátu (PyBrop), difenylfosforylazidu (DPPA), Castrova reakčního činidla (BOP, PyBop), O-benzotriazolyl-N,N,N',N'-tetramethyluroniových solí (HBTU), diethylfosforylkyanidu (DEPCN), 2,5difenyl-2,3-dihydro-3-oxo—4-hydroxythiofendioxidu (Steglichova reakčního činidla, HOTDO) a l,l'-karbonyldiimidazolu (CDI). Kopulační činidlo se může použít samotné nebo v kombinaci s přísadami, jako je Ν,Ν-dimethyl—4-aminopyridin (DMAP), N-hydroxybenzotriazol (HOBt), N-hydroxybenzotriazin (HOOBt), N-hydroxysukcinimid (HOSu) nebo 2-hydroxypyridin.
I když je obvykle možné netrvat na ochranných skupinách při enzymatické syntéze peptidů, reversibilní ochrana reaktivních skupin nepostihující tvorbu amidové vazby je nezbytná u obou reakčních činidel, použitých pro chemickou syntézu. K chemické syntéze peptidů jsou vhodné tři běžné technické postupy s ochrannou skupinou a to technický způsob využívající benzyloxykarbonylovou (Z) skupinu, terc.-butoxykarbonylovou (Boc) skupinu a 9-fluorenylmethoxykarbonylovou (Fmoc) skupinu. Identifikována v každém případě je chránící skupina na aaminoskupině jednotky s prodlužovaným řetězcem. Podrobný přehled skupinu chránících aminokyseliny udává Miiller, Methoden der organischen Chemie, sv. XV/1, str. 20 až 906, Thieme Verlag, Stuttgart /1974/. Jednotky použité pro vytvoření peptidového řetězce se mohou nechat reagovat v roztoku, suspenzi nebo způsobem podobným způsobu, který popsal Merrifield v J. Amer. Chem. Soc. 85, 2149 /1963/. Zvláště výhodné jsou takové způsoby, při kterých dochází k sestavení peptidů postupně nebo fragmentovou kopulací za využití technického postupu používajícího chránící skupinu benzyloxykarbonylovou (Z), terc.-butoxykarbonylovou (Boc) nebo 9-fluorenylmethoxykarbonylovou (Fmoc), s jedním z reakčních činidel vhodných za použití Merrifieldova technického postupu, při kterém se vázání provádí na nerozpustný polymemí základ (který se zde dále také označuje jako pryskyřice). To obvykle má za následek peptid, který je sestaven sekvenčně na polymemím základu za využití technického postupu používajícího chránící skupinu terc.-butoxykarbonylovou (Boc) nebo 9-fluorenylmethoxykarbonylovou (Fmoc), přičemž rostoucí peptidový řetězec je kovalentně vázán na uhlíkatém konci k částicím nerozpustné pryskyřice (srov. obr. 1 a 2). Tento postup umožňuje odstranit reakční činidla a vedlejší produkty filtrací a tak rekiystalizace meziproduktů je nadbytečná.
Chráněné aminokyseliny nebo stavební bloky se mohou vázat na libovolné vhodné polymery, které toliko mají být nerozpustné v použitých rozpouštědlech a mají mít vhodnou fyzikální formu, která usnadňuje filtraci. Polymer musí obsahovat funkční skupinu, ke které se nejprve chráněná aminokyselina může pevně připojit kovalentní vazbou. K tomuto účelu jsou vhodné široce různorodé polymery, například celulóza, polyvinylalkohol, polymethakrylát, sulfonovaný polystyren, kopolymer chlormethylovaného styrenu a divinylbenzenu (Merrifieldova pryskyřice), 4-methylbenzhydrylaminová pryskyřice (MBHA-pryskyřice), fenylacetamidomethylová pryskyřice (Pam-pryskyřice), p-benzyloxybenzylalkoholová pryskyřice, benzhydrylaminová pryskyřice (BHA-pryskyřice), 4-(hydroxymethyl)benzoyloxymethylová pryskyřice, pryskyřice, kterou popsal Breipohl a kol. (Tetrahedron Letters 28, 565 /1987/, dodává BACHEM), 4-(2,4dimethoxyfenylaminomethyl)fenoxylová pryskyřice (dodává Novabiochem) nebo ochlortritylová pryskyřice (dodává Biohellas).
Pro vytvoření amidové vazby v roztoku jsou vhodná všechna rozpouštědla, která jsou inertní za reakčních podmínek, zvláště voda, Ν,Ν-dimethylformamid (DMF), dimethylsulfoxid (DMSO), acetonitril, dichlormethan (DCM), 1,4-dioxan, tetrahydrofuran (THF), N-methyl-2-pyrrolidon (NMP) a směsi těchto rozpouštědel. Syntéza na polymemím nosiči se může provádět ve všech inertních organických rozpouštědlech, ve kterých použité deriváty aminokyselin jsou rozpustné,
-5CZ 286752 B6 avšak výhodná rozpouštědla mají kromě toho vlastnosti způsobující nabotnání pryskyřice. Vhodným rozpouštědlem je například Ν,Ν-dimethylformamid, dichlormethan, N-methyl-2pyrrolidon, acetonitril nebo dimethylsulfoxid a směsi těchto rozpouštědel. Poté co je syntéza ukončena, peptid se odštěpí od polymemího základu. Podmínky, za kterých je možné dosáhnout odštěpení od různých typů pryskyřice, jsou uvedeny v literatuře. Ke štěpícím reakcím se nejběžněji používá štěpení katalyzované kyselinou a palladiem, zvláště štěpení v kapalném bezvodném fluorovodíku, v bezvodé kyselině trifluormethansulfonové, ve zředěné nebo koncentrované kyselině trifluoroctové, štěpení katalyzované palladiem v tetrahydrofuranu nebo směsi tetrahydrofuranu a dichlormethanu v přítomnosti slabé báze, jako je morfolin nebo štěpení ve směsi kyseliny octové, dichlormethanu a trifluorethanolu. V závislosti na zvolených chránících skupinách, se tyto skupiny mohou zachovat nebo podobně odštěpit za štěpících podmínek. Parciální odstranění chránících skupin může být také užitečné, pokud se mají také provést určité derivatizační reakce. Sloučeniny dialkylované na dusíkatém konci se mohou vyrobit buď kopulací vhodných N,N—dialkylaminokyselin v roztoku nebo na polymemím základu nebo reduktivní alkylací v roztoku (například natriumkyanborhydridem v methanolu) nebo reduktivní alkylací sloučeniny vázané na pryskyřici v 1% kyselině octové v dimethylformamidu s natriumkyanborhydridem a příslušnými aldehydy. Sloučeniny s τ- nebo δlaktamovými můstky se mohou vyrobit zavedením vhodných laktamových můstkových dipeptidových jednotek (R. Freidinger, J. Org. Chem., 104-109 /1982/) do peptidového řetězce. Sloučeniny s bloky tvořícími dipeptid, které obsahují zbytek thiazolidu, oxazolu, thiazolinu nebo oxazolinu, se mohou vyrobit zavedením příslušných dipeptidových jednotek (U. Schmidt a kol., Synthesis, 233-236 /1978/, P. Jouin a kol., Tetrahedron Letters, 2807-2810 /1992/, P. Wipf a kol., Tetrahedron Letters, 907-910 /1992/, W. R. Tully, J. Med. Chem. 2065 /1991/, Synthesis 235 /1987/, T. Shioiri a kol., J. Org. Chem., 1252-1255 /1987/, R. Pettit a kol., J. Am. Chem. Soc., 5463-5465 /1989/) do peptidového řetězce. Stavební bloky obsahující strukturu -NR3CHB-CHD-CHE-CO a -NR4-CHG-CHK-CHL-CO- se mohou vyrobit podle literatury reakcí například odpovídajících chráněných aldehydů aminokyselin s vhodnými alkylačními látkami jako fosfonáty, ylidy obsahujícími fosfor, Evansovým reakčním činidlem a podobně (S. Shibuya a kol., Heterocycles, 1597-1600 /1990/, M. Braun a kol., Angew. Chem., 24-37 /1987/, Angew. Chem., 10.104 /1992/, T. Shioiri a kol., Peptide Chemistry /1989/. N. Yanaihara (vyd.) 291-296, Pettit a kol., J. Am. Chem. Soc., 111, 5463 /1989/, T. Shioiri a kol., J. Org. Chem., 931-934 /1987/ a K. Koga, Tetrahedron Letters 2395-2397 /1991/).
Využitelnost
Sloučeniny podle tohoto vynálezu se mohou používat k inhibici nebo jinému ošetření tuhých nádorů (například tumorů plic, prsu, tračníku, prostaty, močového měchýře, konečníku nebo děložních nádorů) nebo hematologického zhoubného bujení (například leukémie, lymfomasy) podáváním sloučeniny savci. Podávání se může provádět libovolným způsobem, který je obvyklý pro farmaceutické prostředky, výhodně prostředky používané v onkologii, včetně orálních a parenterálních prostředků, jako subkutánně, intravenózně, intramuskulámě a intraperitoneálně. Sloučeniny se mohou podávat samotné nebo ve formě farmaceutických prostředků, které obsahují sloučeninu obecného vzorce I dohromady s farmaceuticky přijatelnou nosnou látkou vhodnou pro požadovanou cestu podání. Takové farmaceutické prostředky mohou být kombinovanými produkty, to znamená, že mohou také obsahovat jiné terapeuticky účinné složky.
Dávka určená k podání savci bude obsahovat účinné množství aktivní látky inhibující nádor, které bude záviset na obvyklých okolnostech, včetně biologické aktivity jednotlivé použité sloučeniny, způsobu podání, věku, zdravotnímu stavu a tělesné hmotnosti pacienta, povaze a rozsahu příznaků, četnosti ošetřování, podávání jiných terapeuticky účinných látek a požadovaném účinku. Obvyklá denní dávka bude přibližně od 5 až do 250 mg na kilogram tělesné
-6CZ 286752 B6 hmotnosti při orálním podání a přibližně od 1 do 100 mg na kilogram tělesné hmotnosti při parenterálním podání.
Vhodné dávkové formy obsahují přibližně od 10 až do 500 mg účinné látky na jednotku. Účinná látka tak bude tvořit přibližně od 1 do 90 % hmotnosti, vztaženo na celkovou hmotnost prostředku.
Nové sloučeniny se mohou podávat v obvyklých pevných nebo kapalných formách pro farmaceutické podávání, například nepovlečených nebo (filmem) povlečených tabletách, kapslích, prášcích, granulích, čípcích nebo roztocích. Tyto prostředky se vyrábějí obvyklým způsobem. Účinná látka se může k tomuto účelu zpracovat s obvyklými farmaceutickými pomocnými látkami, jako jsou pojivá pro tablety, plniva, konzervační látky, látky způsobující rozpad tablet, regulátory tekutosti, plastifíkátory, smáčedla, dispergační činidla, emulgátory, rozpouštědla, složky způsobující uvolňování, antioxidační prostředky a/nebo vynášecí plyny (srov. H. Sucker a kol., Pharmazeutische Technologie, Thieme-Verlag, Stuttgart /1978/). Formy pro podání, získané tímto způsobem, obvykle obsahují od 1 do 90 % hmotnostních účinné látky.
Příklady provedení vynálezu
Dále uvedené příklady jsou zamýšleny k ilustraci vynálezu. Proteinogenní aminokyseliny se v některých případech v příkladech zkracují za použití známých třípísmenových kódů. V některých případech se také používá zkratek, které mají tyto významy:
TFA = kyselina trifluoroctová, Ac = kyselina octová, Bu = butyl, Et = ethyl, Me = methyl a Bzl = benzyl.
A. Obecné postupy
I.
Peptidy nárokované v patentovém nároku 1 jsou buď vyrobeny synteticky klasickou syntézou v roztoku za použití standardní Z- a Boc-metodologie jak je popsáno výše nebo standardními způsoby syntézy v tuhé fázi na zcela automatickém syntetizéru, model 431 A, který dodává firma Applied Biosystems. Aparát používá rozdílných syntetických cyklů pro technický postup využívající Boc a Fmoc chránící skupinu.
a) Syntetický cyklus pro techniku s Boc chránící skupinou
1. 2.
3.
4.
5.
6.
7.
8.
9.
10.
30% kyselina trifluoroctová v DCM 50% kyselina trifluoroctová v DCM promývání DCM
5% diisopropylethylamin v DCM 5% diisopropylethylamin v NMP promývání NMP adice předaktivované chráněné aminokyseliny (aktivace 1 ekvivalentem
DCC a 1 ekvivalentem HOBt v NMP/DCM), peptidová kopulace (první část) adice DMSO na reakční směs až obsahuje 20 % objemových DMSO peptidová kopulace (druhá část) adice 3,8 ekvivalentů diisopropylethylaminu na reakční směs x 3 minuty x 1 minuta 5x1 minuta x 1 minuta lxl minuta 5 x 1 minuta
1x30 minut
1x16 minut
11. peptidová kopulace (třetí část)
12. promývání DCM
13. pokud je konverze neúplná, opakuje se kopulace (zpět na 5)
14. 10% anhydrid kyseliny octové,
5% diisopropylethylamin v DCM
15. 10% anhydrid kyseliny octové v DCM
16. promývání DCM
17. zpět na 1.
x 7 minut x 2 minuty
1x4 minuty
4x1 minuta
BOP-C1 a PyBrop se používají jako reakční činidla pro kopulaci aminokyseliny a poté Nmethylaminokyseliny. Reakční doby se odpovídajícím způsobem zvyšují. V roztoku pro syntézu je nejvýhodnější pro tento typ kopulace použití buď Boc-chráněné NCAs aminokyseliny (anhydridu kyseliny N-terc.-butyloxykarbonylamino-N-karboxylové) nebo Z-chráněné NCAs aminokyseliny (anhydridu kyseliny N-benzyloxykarbonylamino-N-karboxylové).
b) Syntetický cyklus pro techniku s Fmoc chránící skupinou
1. DMF promývání 1 x 1 minuta
2. 20% piperidin v DMF 1 x 4 minuty
3. 20% piperidin v DMF 1x16 minut
4. DMF promývání 5 x 1 minuta
5. adice předaktivované chráněné aminokyseliny (aktivace 1 ekvivalentem TBTU a 1,5 ekvivalentu DIPEA v DMF), peptidová kopulace 1x61 minuta
6. promývání DCM 3 x 1 minuta
7. pokud je konverze neúplná, opakuje se kopulace (zpět na 5)
8. 10% anhydrid kyseliny octové v DMF 1 x 8 minut
9. promývání DCM 3 x 1 minuta
10. zpět na 2.
BOP-C1 a PyBrop se používají jako reakční činidla pro kopulaci aminokyseliny a potom Nmethylaminokyseliny nebo stavebních bloků obsahujících N-methylovou skupinu. Reakční doby se odpovídajícím způsobem zvyšují.
Π. Reduktivní alkylace dusíkaté koncové skupiny
Peptid vázaný na pryskyřici, vyrobený jako v příkladu Ala nebo Alb, se zbaví chránící skupiny na dusíkaté koncové skupině (stupně 2 až 4 v případě Alb nebo stupně 1 až 6 v případě Ala) a poté se nechá reagovat s trojnásobným molámím přebytkem aldehydu nebo ketonu v Ν,Νdimethylformamidu, který obsahuje 1 % kyseliny octové, s přídavkem 3 ekvivalentů natriumkyanborhydridu. Poté co je reakce úplná (podle negativního Kaiserova testu), pryskyřice se několikrát promyje vodou, isopropanolem, Ν,Ν-dimethylformamidem a dichlormethanem.
III. Zpracování peptidu vázaného na pryskyřici, získaného jako v příkladu Ia a II
Peptid vázaný na pryskyřici se vysuší za sníženého tlaku a přenese do reakční nádoby zařízení TEFLON HF (dodává firma Peninsula). Poté se přidá zachycovací činidlo, výhodně anisol (1 ml/g pryskyřice), a v případě thiolových peptidů obsahujících tryptofan, k odstranění indolformylové skupiny se výhodně přidá ethandiol (v množství 0,5 ml/g pryskyřice), potom se provede kondenzace ve fluorovodíku (v množství 10 mg/g pryskyřice), za chlazení kapalným dusíkem. Směs se nechá ohřát na teplotu 0 °C a míchá se při této teplotě po dobu 45 minut.
-8CZ 286752 B6
Stripováním za sníženého tlaku se potom odstraní fluorovodík a odparek se promyje ethylacetátem, k odstranění zbývajícího zachycovacího činidla. Sloučenina se extrahuje 30% kyselinou octovou a filtruje a filtrát se potom lyofilizuje.
IV. Zpracování peptidu vázaného na pryskyřice, získaného jako v příkladu lb a II
Peptid vázaný na pryskyřici se vysuší za sníženého tlaku a potom se podrobí jednomu z dále uvedených způsobů štěpení, v závislosti na složení aminokyseliny (Wade, Tregear a Howard Florey, Fmoc Workshop Manual, Melboume /1985/).
Podmínky štěpení
kyselina trifluoroctová zachycovací činidlo reakční doba
1 95% 5% H2O 1,5 h
2 95% 5% ethandithiol/ 1,5 h
anisol (1:3)
Suspenze peptidu vázaného na pryskyřici v příslušné směsi kyseliny trifluoroctové se míchá za teploty místnosti po uvedenou dobu a poté se pryskyřice odfiltruje a promyje kyselinou trifluoroctovou a dichlormethanem. Filtrát a promývací kapalina se odpaří a peptid se vysráží přídavkem diethyletheru. Po ochlazení na ledové lázni se sraženina odfiltruje, vyjme 30% kyselinou octovou a lyofilizuje.
V.
Pokud se použije o-chlortritylované pryskyřice (dodává forma Biohellas), suspenze peptidu vázaného na pryskyřici se míchá ve směsi kyseliny octové, trifluorethanolu a dichlormethanu v poměru 1:1:3 za teploty místnosti po dobu 1 hodiny. Pryskyřice se potom odfiltruje za odsávání a důkladně promyje roztokem použitým ke štěpení. Spojené filtráty se odpaří za sníženého tlaku a uvedou do styku s vodou. Vysrážená tuhá látka se odfiltruje nebo odstředí, promyje diethyletherem a vysuší za sníženého tlaku.
VI. Čištění a charakterizace sloučenin
Čištění se provádí gelovou chromatografíi (Sephadex G-10, G-15 s 10% kyselinou octovou, Sephadex LH20 s methanolem) s nebo bez následující středotlaké chromatografie (stacionární fáze: HD-SIL C-18, 0,341 až 0,833 mm, 1000 nm, mobilní fáze: gradient s A = 0,1% kyselinou trifluoroctovou v methanolu, s B = 0,1% kyselinou trifluoroctovou ve vodě). Čistota výsledných produktů se stanovuje analyticky vysokotlakou kapalinovou chromatografíi (stacionární fáze: 100 2,1 mm Vydac C-18, 5 litrů, 3000 nm, mobilní fáze: gradient acetonitrilu a vody, pufrováno 0,1% kyselinou trifluoroctovou, teplota 40 °C). Charakterizace se provádí hmotnostní spektroskopií využívající techniky rychlého bombardování atomů a *H nebo 13C spektroskopií.
-9CZ 286752 B6
B. Jednotlivé postupy
Příklad 1
0,4 g (2 mmol) hydrochloridu fenylalaninamidu a 0,55 (2 mmol) Boc-N(CH3)-CH[CH(CH3)2]CH(OCH3)-CH2-COOH (syntetizován podle literatuiy, viz S. Shibuya a kol., Heterocycles 31(9), 1597-1600 /1990/) se rozpustí v dimethylformamidu. Po přidání 0,4 g (2,2 mmol) DEPCN a 1,4 ml diisopropylaminu (DIPEA) se reakční směs míchá za teploty místnosti přes noc, rozpouštědlo se odpaří za sníženého tlaku, odparek se vyjme ethylacetátem a důkladně promyje 5% vodnou kyselinou citrónovou, vodou, 5% roztokem hydrogenuhličitanu sodného a roztokem chloridu sodného. Organická vrstva se vysuší síranem sodným, filtruje a odpaří dosucha. Odparek o hmotnosti 0,66 g se vysuší za sníženého tlaku, zbaví chránící skupiny pomocí 5 ml kyseliny trifluoroctové a dichlormethanu v poměru 1:1 během 2 hodin a odpaří za sníženého tlaku. Takto získaný fragment zbavený chránící skupiny se rozpustí v dimethylformamidu a nechá reagovat s 0,44 g (1,8 mmol) N-terc.-butoxykarbonyl-valin-N-karboxyanhydridu za teploty 45 °C. Vše se míchá po dobu 5 hodin a rozpouštědlo se odpaří za sníženého tlaku, k odparku se přidá ethylacetát a organická vrstva se důkladně promyje 5% vodnou kyselinou citrónovou, 5% roztokem hydrogenuhličitanu sodného, vodou a vodným roztokem chloridu sodného a organická vrstva se vysuší síranem sodným. Rozpouštědlo se odpaří za sníženého tlaku a odparek o hmotnosti 0,7 g (1,3 mmol) se zpracuje s 5 ml kyseliny trifluoroctové a dichlormethanu v poměru 1:1 během 2 hodin. Po odpaření směsi rozpouštědel se odparek vysuší hydroxidem draselným. Získaný odparek se rozpustí v dimethylformamidu a 0,19 g (1,3 mmol) Ν,Ν-dimethylvalinu (syntetizován podle literatury, viz například R. E. Bowman, J. Chem. Soc. 1342, /1959/ a přidá 0,25 (1,5 mmol) DEPCN a 0,7 ml DIPEA. Reakční směs se míchá přes noc za teploty místnosti, odpaří dosucha a chromatografuje na koloně naplněné Sephadexem LH-20. Frakce vyprodukované látky se zachytí a rozpouštědlo odpaří. Tak se dostane 0,46 g sloučeniny 1.
Příklad 2
N,N-Dimethyl-Val- VaP-N
CH(CH3)2
0,29 g (2 mmol) benzylaminu a 0,55 g Boc-N(CH3)-CH[CH(CH3)2]-CH(OCH3)-CH2-COOH (syntetizován podle literatury, viz S. Shibuya a kol., Heterocycles 31(9), 1597-1600 /1990/) se rozpustí v dimethylformamidu. Po přidání 0,4 g (2,2 mmol) DEPCN a 1,4 ml DIPEA se reakční směs míchá za teploty místnosti přes noc, rozpouštědlo se odpaří za sníženého tlaku, odparek se
-10CZ 286752 B6 vyjme ethylacetátem a důkladně promyje 5% vodnou kyselinou citrónovou, vodou, 5% roztokem hydrogenuhličitanu sodného a roztokem chloridu sodného. Organická vrstva se vysuší síranem sodným, filtruje a odpaří dosucha. Odparek o hmotnosti 0,51 g se vysuší za sníženého tlaku, zbaví chránící skupiny působením 5 ml kyseliny trifluoroctové a dichlormethanu v poměru 1:1 během 2 hodin a odpaří za sníženého tlaku. Takto získaný fragment zbavený chránící skupiny se rozpustí v dimethylformamidu a nechá reagovat s 0,4 g (1,6 mmol) N-terc.-butyloxykarbonylvalin-N-karboxyanhydridu za teploty 45 °C. Vše se míchá po dobu 5 hodin, rozpouštědlo se odpaří za sníženého tlaku, k odparku se přidá ethylacetát a organická vrstva se důkladně promyje 5% vodnou kyselinou citrónovou, 5% roztokem hydrogenuhličitanu sodného, vodou a vodným roztokem chloridu sodného a potom vysuší síranem sodným. Rozpouštědlo se odpaří za sníženého tlaku a odparek o hmotnosti 0,51 g (1,1 mmol) se zpracuje s 5 ml kyseliny trifluoroctové a dichlormethanu v poměru 1:1 během 2 hodin. Po odpaření směsi rozpouštědel a vysušení odparku hydroxidem draselným se odparek rozpustí v dimethylformamidu a ke vzniklému roztoku se přidá 0,16 g (1,1 mmol) N,N-dimethylvalinu, 0,23 g (1,4 mmol) DEPCN a 0,7 ml DIPEA. Reakční směs se míchá přes noc za teploty místnosti, odpaří dosucha a chromatografuje na koloně Sephadexu LH-20. Frakce vyprodukované látky se zachytí a rozpouštědlo odpaří. Dostane se 0,36 g sloučeniny 1.
Dále uvedené sloučeniny se mohou vyrobit podle příkladů 1 a 2.
3. Xaa Val Xdm Xcx Xab
4. Xaa Val Xdm Xcx Xac
5. Xaa Val Xdm Xcx Xat
6. Xaa Val Xdm Xcx Xbp
7. Xaa Val Xdm Xcx Xbt
8. Xaa Val Xdm Xcx Xbu
9. Xaa Val Xdm Xcx Xbv
10. Xaa Val Xdm Xcx Xbw
11. Xaa Val Xdm Xcx Xby
12. Xaa Val Xdm Xcx Xca
13. Xaa Val Xdh Xcx Xbq
14. Xaa Val Xdh Xcx Xbs
15. Xaa Val Xdm Xat
16. Xaa Val Xdm Xbp
17. Xav Val Xdm Xbq
18. Xav Val Xdm Xbs
19. Xbo Val Xdm Xbt
20. Xbo Val Xdm Xbu
21. Xaa Xaf Xdm Xbv
22. Xaa Xaf Xdm Xbw
23. Xav Leu Xdm Xby
24. Xaa Leu Xdm Xca
25. Xaa Val Xdm Xcx Xcf
26. Xaa Val Xdm Xcx Xao
27. Xax Val Xdm nh2
28. Xax Val Xdm Xcf
29. Xax Val Xdm Xao
30. Xaa Xdm nh2
31. Xax Xdm nh2
32. Xaa Xdm Xcf
33. Xax Xdm Xcf
34. Xaa Xdm Phe Xcf
35. Xax Xdm Phe Xcf
-11CZ 286752 B6
36. Xaa Val Xda Xda nh2
37. Xaa Val Xda Xda Phe nh2
38. Xaa Val Xdh Xdh nh2
39. Xaa Val Xdh Xdh Phe nh2
40. Xaa Val Xda nh2
41. Xaa Val Xdb nh2
42. Xaa Val Xdc nh2
43. Xaa Val Xdd nh2
44. Xaa Val Xde nh2
45. Xaa Val Xdf nh2
46. Xaa Val Xdg nh2
47. Xaa Val Xdh nh2
48. Xaa Val Xdi nh2
49. Xaa Val Xdk nh2
50. Xaa Val Xdl nh2
51. Xaa Val Xdn nh2
52. Xaa Val Xdo nh2
53. Xaa Val Xdp nh2
54. Xaa Val Xdq nh2
55. Xaa Val Xdm Xcx nh2
56. Xaa Val Xdm Xcy nh2
57. Xaa Val Xdm Xcz nh2
58. Xaa Val Xdm Xds nh2
59. Xaa Val Xdm Xcw nh2
60. Xaa Val Xdm Xda nh2
61. Xaa Val Xar nh2
62. Xaa Val Xdm Xdc nh2
63. Xaa Val Xdm Xbf nh2
64. Xaa Val Xdm Xbg nh2
65. Xaa Val Xdm Xck
66. Xaa Val Xdm Xcl
67. Xaa Val Xdm Xcx Phe nh2
68. Xaa Val Xdm Xcx Phe Xcf
69. Xaa Val Xdm Xcx Phe Xao
70. Xaa Val Xdm Xcx Xad nh2
71. Xaa Val Xdm Pro nh2
72. Xaa Val Xdm Xcx Xdr nh2
73. Xaa Val Xdm Xcx Xcu nh2
74. Xav Val Xdm Xcx Phe nh2
75. Xax Val Xdm Xcx Phe nh2
76. Xaa Val Xdm Phe nh2
77. Xav Val Xdm Phe nh2
78. Xax Val Xdm Phe nh2
79. Xas Val Xdm Phe nh2
80. Xaa Val Xdm Xab
81. Xaa Val Xdm Xac
82. Xbh Xdm nh2
83. Xbi Xdm Xcx nh2
84. Xbk Xdm Xcx Phe nh2
85. Xbh Xdh nh2
86. Xbm Xdh Xcx nh2
87. Xbn Xdh Xcx Phe nh2
-12CZ 286752 B6
88. Xaa Xdm Phe nh2
89. Xas Xdm Phe Xao
90. Xav Xdm Phe Xcf
91. Xax Xdm Phe nh2
92. Xaa Val Xdm OH
93. Xaa Val Xdm OBzl
94. Xaa Val Xdm nh2
95. Xaa Val Xdm Xan
96. Xaa Val Xdm Xao
97. Xaa Val Xdm Xap
98. Xaa Val Xdm Xau
99. Xaa Val Xdm Xaq
100. Xaa Val Xar Pro
101. Xaa Val Xdm Xbz
102. Xaa Val Xdm Xcb
103. Xaa Val Xdm Xcc
104. Xaa Val Xdm Xcd
105. Xaa Val Xdm Xce
106. Xaa Val Xdm Xcf
107. Xaa Val Xdm Xcg
108. Xaa Val Xdm Xch
109. Xaa Val Xdm Xci
110. Xaa Val Xdm Xcm
111. Xaa Val Xdm Xcn
112. Xaa Val Xdm Xco
113. Xaa Val Xdm Xcp
114. Xaa Val Xdm Xcq
115. Xaa Val Xdm Xcr
116. Xaa Val Xdm Xao
117. Xag Val Xdm nh2
118. Xah Val Xdm nh2
119. Xag Val Xdm nh2
120. Xai Val Xdm nh2
121. Xak Xaf Xdm nh2
122. Xal Xaf Xdm nh2
123. Xam Xaf Xdm nh2
124. Xas Xaf Xdm nh2
125. Xav Xaf Xdm nh2
126. Xaw Val Xdm nh2
127. Xax Val Xdm nh2
128. Xay Val Xdm nh2
129. Xaz Val Xdm nh2
130. Xba Xaf Xdm Xcf
131. Xbb Xaf Xdm Xcf
132. Xbc Val Xdm nh2
133. Xbd Val Xdm nh2
134. Xbe Val Xdm nh2
135. Xbo Xaf Xdm nh2
136. Xcs Xaf Xdm nh2
137. Xct Val Xdm nh2
138. Xcv Val Xdm nh2
139. Xaa Val Xdt Xcx
NH2
-13CZ 286752 B6
140. Xaa Val Xdt Xcx
141. Xaa Val Xdt nh2
142. Xaa Val Xdu Xcx
143. Xaa Val Xdu nh2
144. Xdv Val Xdm Xcf
145. Xdw Val Xdm Xcf
146. Xdx Val Xdm Xcf
147. Xaa Val Xar Xae
148. Xaa Val Xar Xdy
Tabulka I
Identifikace sekvencí sloučenin vyrobených podle příkladů 1 a 2
Sloučenina číslo Identifikační číslo sekvence
3-14, 25-26, 70, 72, 73 1
15-20, 28-29,36,38, 55-60, 62-66, 80-81, 95-99, 101-116, 140, 142, 144-148 2
21-22, 131 3
23-24 4
37, 39, 67-69, 74-75, 139 5
34-35, 89-90 6
76-79 7
84, 87 8
71,100 9
-14CZ 286752 B6
Symboly Xaa ... v souhrnu mají tyto významy:
Xaa: N/N-dimethylvalin
Xad: kyselina tetrahydroisochinolinkarboxylová
Xaf: terc.-leucin nebo 2-terc.-butylglycin
Xag: N,N-dimethylisoleucin
Xah: N,N-dimethylleucin
Xai: Ν,Ν-dimethyl-terc.-leucin
Xak: N-amidinovalin
Xal: N-acetyl-N-methylvalin
Xam: N-methyl-N-benzylvalin
Xan:
-15CZ 286752 B6
Xas; N-methyl-N-isopropylvalin
O
NH s F
N-n f
Xav: NfN-diethylvalin
Xaw: N-fluorethylvalin
Xax: N,N-dipropylvalin
Xay: N-cyklopropylvalin
-16CZ 286752 B6
Xba:
Xbe:
Xaz:
CH(CH3)2
CH(CH3)2
Xbbí
CH(CH3)2
Xbc:
Xbd:
CH(CH3)2
CH(CH3)2
-17CZ 286752 B6
Xbk:
Xbl:
Xbf:
Xbg:
Xbh:
Xbi:
r )
ch3
CH
•V coXbm:
CHj ch3 ch3 \/^N r1 CH,
ch3
-18CZ 286752 B6
Xbo:
Xbp:
Xbq:
Xbs;
COOEt
Xbní
Xbr:
-19CZ 286752 B6
Xbt:
Xbu:
Xbv:
Xbw:
Xbx:
CH(CH3)2
-20CZ 286752 B6
Xcb:
Xby:
Xbz:
Xca:
Xcc:
Xcd:
Xce:
Xcf:
n-n — NH S
-21CZ 286752 B6
Xcg:
Xch;
Xci:
Xck:
Xcl:
Xcm:
Xcn:
Xco:
-22CZ 286752 B6
Xcp:
Xcq:
Xcr:
Xcs: N-ureylvalin
Xct: N,N-diinethylfenylalanin
Xcu: 3-thíenylalanin
Xcv: N-uiethyl-N-isopropyl-terc. -leucin
-23CZ 286752 B6
Xcw:
Xcx:
Xcz:
Xda:
Xdb:
Xdc:
CH3 'CO-
Xdd:
( OH ch3
-24CZ 286752 B6
Xde:
— N čh3 (CH3)2CH CIÍ3
OH coXdf:
(CH3)3C
Xdg:
CH(CH3)2
Xdh:
CH(CH3)2 —- CO— čh3
Xdi:
(ch3)3c
Xdk:
CHÍCHah
coch3
-25CZ 286752 B6
Xdm:
Xdn:
Xdo:
Xdp:
Xdl:
CH(CH3)2
CH3 OH
COcích3)3
CH3 OH
COCH(CH3)2
—- N CO—
CH3 OH
COXdq:
CH(CH3)2 —jy^Y^coČH3 OC(CH3)3
-26CZ 286752 B6
Xdr: 3-naftylalanin
Xds:
Xdt:
ČH3
Xdu:
—N
CH5
Xdv: N-methylaminosulfonylvalin
Xdw: N-me thy 1 -N-ine thy 1 sul f ony lva 1 in
Xdx: N-laktyl-N-methylvalin
Xdy:
Koncová aminoskupina (-NH2) znamená, že uhlíkaté zakončení aminokyseliny nebo stavebního blokuje ve formě amidu.
Sloučeniny podle tohoto vynálezu se mohou zkoušet na protirakovinovou aktivitu obvyklými způsoby včetně například metod popsaných dále.
A. Metodologie in vitro
Cytotoxicita se může měřit za použití standardní metodologie pro adherentní buněčné linie, jako tetrazoliovým testem mikrokultury (MTT). Detaily této zkoušky publikoval M. C. Alley a kol. v Cancer Research 48, 589-601 /1988/. Exponenciálně rostoucí kultury nádorových buněk, jako tračníkový karcinom HT-29 nebo plicní nádor LX-1, se použijí k přípravě kultivační 15 mikrotitrační plotny. Buňky se vloží v počtu 5000 až 20 000 buněk na jamku do plotny s 96 jamkami (ve 150 μΐ prostředí) a nechají růst za teploty 37 °C přes noc. Poté se přidá testovaná sloučenina při desetinásobném ředění, které se mění od 10^ do 10“10 mol. Buňky se potom inkubují po dobu 48 hodin. Ke stanovení počtu životaschopných buněk v každé jamce se přidá barvivo MTT (50 μΐ z 3 mg/ml roztoku 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-difenyl
-27CZ 286752 B6 tetrazoliumbromidu ve fyziologickém roztoku). Tato směs se inkubuje za teploty 37 °C po dobu 5 hodin a potom se do každé jamky přidá 50 μΐ 25% SDS, při hodnotě pH 2. Vše se inkubuje přes noc a potom se odečte absorbance každé jamky při vlnové délce 550 nm, za použití vyhodnocovacího zařízení ELISA. Spočítají se střední hodnoty a ± směrodatné odchylky z replikovaných jamek, za použití vzorce % T/C (% životaschopných buněk u ošetřeného a kontrolního vzorku):
OD ošetřených buněk
--------------------x 100 = % T/C
OD kontrolních buněk
Koncentrace testovaných sloučenin, které poskytují poměr T/C odpovídající 50 % inhibice růstu se označují jako IC50.
B. Metodologie in vivo
Sloučeniny podle tohoto vynálezu mohou být dále testovány při libovolném z různých předklinických testů pro stanovení aktivity in vivo, které jsou indikativní pro stanovení klinické použitelnosti. Takové testy se provádějí na holých myších, kterým byla transplantována nádorová tkáň, s výhodou lidského původu (došlo k zavedení xenoimplantátu), jako jsou dobře známy v této oblasti. Testované sloučeniny se hodnotí na svou protinádorovou účinnost po podání myším se zavedením xenoimplantátem.
Uvedeno přesněji, lidské nádory, které rostly myším (athymic nudě mice), se transplantují novým zvířecím příjemcům, za použití nádorových fragmentů o hmotnosti přibližně 50 mg. Den transplantace se označí jako den 0. O 6 až 10 dnů později se myši ošetří testovanými sloučeninami podávanými jako intravenózní nebo intraperitoneální injekce, při skupině 5 až 10 myší pro každou dávku. Sloučeniny se podávají denně po dobu 5 dnů, 10 dnů nebo 15 dnů, v dávce od 10 do 100 mg na kilogram tělesné hmotnosti. Průměr nádoru a tělesná hmotnost se stanovují dvakrát týdně. Objemy nádorů se vypočítají za použití průměrů změřených Vemierovými kalipery podle vzorce (délka x šířka2)/2 = hmotnost nádoru v mg
Pro každou ošetřenou skupinu se vypočítá střední hmotnost nádoru a pro každou skupinu se také určí hodnoty T/C, vzhledem k neošetřeným kontrolním nádorům.
SEKVENČNÍ ZÁZNAM
1) OBECNÉ INFORMACE:
i) PŘIHLAŠOVATEL:
A) BASF Aktiengesellschaft
B) ULICE: Carl-Bosch-Strasse 38
C) MĚSTO: Ludwigshafen
E) ZEMĚ: Spolková republika Německo
F) PSČ: D-67056
G) TELEFON: 0621/6048526
H) TELEFAX: 0621/6043123
I) DÁLNOPIS: 1762175170 ii) NÁZEV VYNÁLEZU: Nové peptidy, způsob jejich výroby a jejich použití
-28CZ 286752 B6 iii) POČET SEKVENCÍ: 9 iv) FORMA DOSTUPNÉHO POČÍTAČE:
A) TYP MÉDIA: Disketa
B) POČÍTAČ: IBM PC-kompatibilní
C) OPERAČNÍ SYSTÉM: PC-DOS/MS-DPS
D) SOFTWARE: Patentln Release #1.0, verze # 1.25 (EPO)
2) INFORMACE PRO SEKVENCI IDENTIFIKAČNÍ ČÍSLO 1 (sekv. ID čís. 1):
i) SEKVENČNÍ CHARAKTERISTIKA:
A) DÉLKA: 5 aminokyselin
B) TYP: aminokyselina
C) SVINUTELNOST: jednoduchá
D) TOPOLOGIE: lineární ii) TYP MOLEKULY: peptid xi) POPIS SEKVENCE: Sekv. ID čís. 1:
Xaa Val Xaa Xaa Xaa
5
2) INFORMACE PRO SEKVENCI IDENTIFIKAČNÍ ČÍSLO 2 (sekv. ID čís. 2):
i) SEKVENČNÍ CHARAKTERISTIKA:
A) DÉLKA: 5 aminokyselin
B) TYP: aminokyselina
C) SVINUTELNOST: jednoduchá
D) TOPOLOGIE: lineární ii) TYP MOLEKULY: peptid xi) POPIS SEKVENCE: Sekv. ID čís. 2:
Xaa Val Xaa Xaa Xaa
5
2) INFORMACE PRO SEKVENCI IDENTIFIKAČNÍ ČÍSLO 3 (sekv. ID čís. 3):
i) SEKVENČNÍ CHARAKTERISTIKA:
A) DÉLKA: 4 aminokyseliny
B) TYP: aminokyselina
C) SVINUTELNOST: jednoduchá
D) TOPOLOGIE: lineární ii) TYP MOLEKULY: peptid xi) POPIS SEKVENCE: Sekv. ID čís. 3:
Xaa Xaa Xaa Xaa
-29CZ 286752 B6
2) INFORMACE PRO SEKVENCI IDENTIFIKAČNÍ ČÍSLO 4 (sekv. ID čís. 4):
i) SEKVENČNÍ CHARAKTERISTIKA:
A) DÉLKA: 4 aminokyseliny
B) TYP: aminokyselina
C) SVINUTELNOST: jednoduchá
D) TOPOLOGIE: lineární ii) TYP MOLEKULY: peptid xi) POPIS SEKVENCE: Sekv. ID čís. 4:
Xaa Leu Xaa Xaa
2) INFORMACE PRO SEKVENCI IDENTIFIKAČNÍ ČÍSLO 5 (sekv. ID čís. 5):
i) SEKVENČNÍ CHARAKTERISTIKA:
A) DÉLKA: 5 aminokyselin
B) TYP: aminokyselina
C) SVINUTELNOST: jednoduchá
D) TOPOLOGIE: lineární ii) TYP MOLEKULY: peptid xi) POPIS SEKVENCE: Sekv. ID čís. 5:
Xaa Val Xaa XaaPhe
5
2) INFORMACE PRO SEKVENCI IDENTIFIKAČNÍ ČÍSLO 6 (sekv. ID čís. 6):
i) SEKVENČNÍ CHARAKTERISTIKA:
A) DÉLKA: 4 aminokyseliny
B) TYP: aminokyselina
C) SVINUTELNOST: jednoduchá
D) TOPOLOGIE: lineární ii) TYP MOLEKULY: peptid xi) POPIS SEKVENCE: Sekv. ID čís. 6:
Xaa Xaa Phe Xaa
2) INFORMACE PRO SEKVENCI IDENTIFIKAČNÍ ČÍSLO 7 (sekv. ID čís. 7):
i) SEKVENČNÍ CHARAKTERISTIKA:
A) DÉLKA: 4 aminokyseliny
B) TYP: aminokyselina
C) SVINUTELNOST: jednoduchá
D) TOPOLOGIE: lineární ii) TYP MOLEKULY: peptid
-30CZ 286752 B6 xi) POPIS SEKVENCE: Sekv. ID čís. 7:
Xaa Val Xaa Phe
2) INFORMACE PRO SEKVENCI IDENTIFIKAČNÍ ČÍSLO 8 (sekv. ID čís. 8):
i) SEKVENČNÍ CHARAKTERISTIKA:
A) DÉLKA: 4 aminokyseliny
B) TYP: aminokyselina
C) SVINUTELNOST: jednoduchá
D) TOPOLOGIE: lineární ii) TYP MOLEKULY: peptid xi) POPIS SEKVENCE: Sekv. ID čís. 8:
Xaa Xaa Xaa Phe
2) INFORMACE PRO SEKVENCI IDENTIFIKAČNÍ ČÍSLO 9 (sekv. ID čís. 9):
i) SEKVENČNÍ CHARAKTERISTIKA:
A) DÉLKA: 4 aminokyseliny
B) TYP: aminokyselina
C) SVINUTELNOST: jednoduchá
D) TOPOLOGIE: lineární ii) TYP MOLEKULY: peptid xi) POPIS SEKVENCE: Sekv. ID čís. 9:
Xaa Val Xaa Pro

Claims (9)

1. Peptid obecného vzorce I
R1 \
N-CHX-CO-A-NR^HB-CHD-CHE-COARÝ-M-Q / (I),
R2 ve kterém
R1 znamená alkylovou skupinu s 1 až 7 atomy uhlíku nebo fluorethyl,
-31CZ 286752 B6
R2 znamená atom vodíku nebo alkylovou skupinu s 1 až 4 atomy uhlíku nebo
R'-N-R2 dohromady mohou znamenat pyrrolidinový kruh,
X představuje alkylovou skupinu s 1 až 5 atomy uhlíku, cykloalkylovou skupinu se 3 až 7 atomy uhlíku, -CHr-cyklohexyl nebo benzyl,
A je vybrán ze souboru zahrnujícího valylový, isoleucylový, leucylový, allo-isoleucylový, 3terc.-butylalanylový, 2-terc.-butylglycylový, 2-ethylglycylový nebo 2-cyklohexylglycylový zbytek,
R3 znamená atom vodíku, methyl nebo ethyl,
B představuje alkylovou skupinu s 1 až 5 atomy uhlíku, cykloalkylovou skupinu se 3 až 7 atomy uhlíku, -CH2-cyklohexyl nebo benzyl,
D znamená atom vodíku, hydroxyskupinu, acetoxyskupinu nebo alkoxyskupinu s 1 až 5 atomy uhlíku,
E znamená atom vodíku nebo alkylovou skupinu s 1 až 5 atomy uhlíku,
R7 znamená skupinu vzorce -NR4-CHG-CHK-CHL-CO-, kde R4 znamená atom vodíku nebo methyl,
G znamená atom vodíku, alkylovou skupinu s 1 až 4 atomy uhlíku, cyklohexyl, -CH2cyklohexyl nebo benzyl,
K znamená atom vodíku, hydroxyskupinu, acetoxyskupinu nebo alkoxyskupinu s 1 až 5 atomy uhlíku,
L znamená atom vodíku nebo alkylovou skupinu s 1 až 5 atomy uhlíku, nebo
R4 a G znamenají dohromady skupinu vzorce -(CH2)4-, -(CH2)3- nebo -CífyCH(OH)CH2M je zvolen ze souboru zahrnujícího 1-aminopentyl-l-karbonylový, valylový, 2-tercbutylglycylový, propylový, hydroxypropylový, isoleucylový, leucylový, 3-cyklohexyIalanylový, fenylalanylový, tetrahydroisochinolyl-2-karbonylový, 3-thiazolylalanylový, 3thienylalanyl, histidylový, 2-aminoindyl-2-karbonylový, tyrosylový, 3-pyridylalanylový, 3-terc.-butylalanylový, 2-cyklohexylglycylový nebo 3-naftylalanylový zbytek, b představuje nulu nebo číslo 1,
Q představuje hydroxyskupinu, alkoxyskupinu s 1 až 5 atomy uhlíku, fenoxyskupinu, benzyloxyskupinu nebo aminoskupinu vzorce NR5R6, kde R5 znamená atom vodíku, hydroxyskupinu, benzyloxyskupinu, alkylovou skupinu s 1 až 7 atomy uhlíku, fluorethyl, difluorethyl nebo trifluorethyl,
R6 znamená atom vodíku, alkylovou skupinu s 1 až 7 atomy uhlíku, fenyl, který je popřípadě substituován jedním substituentem zvoleným ze souboru zahrnujícího trifluormethyl, nitroskupinu, atom halogenu, alkylovou skupinu s 1 až 4 atomy uhlíku, jež může tvořit cyklický systém, nebo alkoxyskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku, dále znamená benzyl, který je
-32CZ 286752 B6 popřípadě substituován jedním substituentem zvoleným ze souboru zahrnujícího trifluormethyl, nitroskupinu, atom halogenu, alkylovou skupinu s 1 až 4 atomy uhlíku, jež může tvořit cyklický systém, nebo alkoxyskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku, dále znamená pyridyl, pikolyl, benzisothiazolyl, benzopyrazolyl, benzoxazolyl, pyrimidyl nebo 5-člennou heteroarylovou skupinu zvolenou ze souboru zahrnujícího skupiny vzorce nebo
R5 a R6 dohromady s atomem dusíku, ke kterému jsou připojeny, tvoří aiylovou skupinu zvolenou ze souboru zahrnujícího a jeho soli s fyziologicky přijatelnými kyselinami.
2. Sloučenina obecného vzorce I, podle nároku 1, kde R!-N-R2 znamená pyrrolidinovou skupinu.
3. Sloučenina obecného vzorce I, podle nároku 1, kde Q znamená aminoskupinu vzorce R5-N-R6, kde
R5 znamená atom vodíku, hydroxyskupinu, benzyloxyskupinu, alkylovou skupinu s 1 až 7 atomy uhlíku, fluorethyl, difluorethyl nebo trifluorethyl,
R6 znamená atom vodíku, alkylovou skupinu s 1 až 7 atomy uhlíku, fenyl, který může být substituován jedním substituentem, jímž může být CF3, nitroskupina, atom halogenu, alkylová skupina s 1 až 4 atomy uhlíku, která může mít formu cyklického systému, alkoxyskupina s 1 až 4 atomy uhlíku, dále znamená benzyl, který může být substituován jedním substituentem, jímž může být CF3, nitroskupina, atom halogenu, alkylová skupina
-33CZ 286752 B6 s 1 až 4 atomy uhlíku, která může mít formu cyklického systému nebo alkoxyskupina s 1 až 4 atomy uhlíku, dále znamená pyridyl, pikolyl, benzisothiazolyl, benzopyrazolyl, benzoxazolyl, pyrimidyl nebo pětičlennou heteroarylovou skupinu definovanou v nároku 1.
4. Sloučeniny obecného vzorce I, podle nároku 1, kde Q znamená aminoskupinu vzorce R5-N-R6, která tvoří struktury zvolené ze souboru sestávajícího z
-
5. Sloučenina obecného vzorce I, podle nároku 1, kde b představuje nulu.
6. Sloučenina obecného vzorce I, podle nároku 1, kde b představuje nulu, R7 znamená skupinu vzorce -NR4-CHG-CHK-CHL-CO- a Q představuje fenoxyskupinu, benzyloxyskupinu nebo aminoskupinu vzorce NR5R6.
7. Sloučenina obecného vzorce I, podle nároku 1, kde b znamená nulu a Q představuje fenoxyskupinu, benzyloxyskupinu nebo aminoskupinu vzorce NR5R6.
8. Sloučenina obecného vzorce I, podle nároku 1, kde b znamená 1 a Q představuje hydroxyskupinu, alkoxyskupinu s 1 až 5 atomy uhlíku nebo benzyloxyskupinu.
9. Farmaceutický prostředek k ošetřování neoplastických onemocnění, vyznačující se tím, že obsahuje farmaceuticky přijatelnou nosnou látku a terapeuticky účinné množství sloučeniny podle nároku 1.
CZ19951575A 1992-12-16 1993-12-04 Peptide and pharmaceutical preparation containing thereof CZ286752B6 (en)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US99130992A 1992-12-16 1992-12-16

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CZ157595A3 CZ157595A3 (en) 1996-01-17
CZ286752B6 true CZ286752B6 (en) 2000-06-14

Family

ID=25537082

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CZ19951575A CZ286752B6 (en) 1992-12-16 1993-12-04 Peptide and pharmaceutical preparation containing thereof

Country Status (24)

Country Link
US (1) US5502032A (cs)
EP (1) EP0674652B1 (cs)
JP (1) JPH08504415A (cs)
CN (1) CN1057095C (cs)
AT (1) ATE196296T1 (cs)
AU (1) AU679479B2 (cs)
BR (1) BR1100019A (cs)
CA (1) CA2151953A1 (cs)
CZ (1) CZ286752B6 (cs)
DE (1) DE69329425T2 (cs)
ES (1) ES2151921T3 (cs)
FI (1) FI952961A0 (cs)
HR (1) HRP931504B1 (cs)
HU (1) HUT72067A (cs)
IL (1) IL107987A (cs)
NO (1) NO952366D0 (cs)
NZ (1) NZ258882A (cs)
PL (1) PL178766B1 (cs)
RU (1) RU2132334C1 (cs)
SG (1) SG67935A1 (cs)
SI (1) SI9300661A (cs)
TW (1) TW400335B (cs)
WO (1) WO1994013695A1 (cs)
ZA (1) ZA939389B (cs)

Families Citing this family (32)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5599902A (en) * 1994-11-10 1997-02-04 Arizona Board Of Regents Acting On Behalf Of Arizona State University Cancer inhibitory peptides
US5663149A (en) * 1994-12-13 1997-09-02 Arizona Board Of Regents Acting On Behalf Of Arizona State University Human cancer inhibitory pentapeptide heterocyclic and halophenyl amides
US5807984A (en) * 1995-11-09 1998-09-15 Basf Aktienegesellschaft Oligopeptides, the preparation and use thereof
US20010009901A1 (en) * 1996-12-11 2001-07-26 Basf Aktiengesellschaft Germany Antineoplastic peptides
TW474946B (en) * 1995-12-15 2002-02-01 Basf Ag Novel compounds, the preparation and use thereof
US5741892A (en) * 1996-07-30 1998-04-21 Basf Aktiengesellschaft Pentapeptides as antitumor agents
US5939527A (en) * 1996-07-30 1999-08-17 Basf Aktiengesellschaft Tetrapeptides as antitumor agents
US5965537A (en) * 1997-03-10 1999-10-12 Basf Aktiengesellschaft Dolastatin 15 derivatives with carbonyl and heterocyclic functionalities at the C-terminus
US6103698A (en) 1997-03-13 2000-08-15 Basf Aktiengesellschaft Dolastatin-15 derivatives in combination with taxanes
US6143721A (en) * 1997-07-18 2000-11-07 Basf Aktiengesellschaft Dolastatin 15 derivatives
US6015790A (en) * 1997-10-06 2000-01-18 Basf Aktiengesellschaft Methods and compositions for treating rheumatoid arthritis
US5985837A (en) * 1998-07-08 1999-11-16 Basf Aktiengesellschaft Dolastatin 15 derivatives
CA2360305A1 (en) 1999-02-09 2000-08-17 Bristol-Myers Squibb Company Lactam inhibitors of fxa and method
US6323315B1 (en) 1999-09-10 2001-11-27 Basf Aktiengesellschaft Dolastatin peptides
AU775373B2 (en) 1999-10-01 2004-07-29 Immunogen, Inc. Compositions and methods for treating cancer using immunoconjugates and chemotherapeutic agents
US6511973B2 (en) 2000-08-02 2003-01-28 Bristol-Myers Squibb Co. Lactam inhibitors of FXa and method
JP2004518688A (ja) 2001-01-30 2004-06-24 ブリストル−マイヤーズ　スクイブ　カンパニー ファクターＸａ阻害剤のスルホンアミドラクタムおよびその方法
JP2005509616A (ja) * 2001-10-16 2005-04-14 センジェント・セラピューティクス・インク チロシンホスファターゼに対する有機硫黄阻害剤
WO2003075853A2 (en) 2002-03-08 2003-09-18 Bristol-Myers Squibb Company Cyclic derivatives as modulators of chemokine receptor activity
EP1636220A1 (en) * 2003-05-12 2006-03-22 Pfizer Products Inc. Isoxazole and isothiazole compounds for the treatment of neurodegenerative disorders
EP1765332A2 (en) * 2004-06-17 2007-03-28 Cengent Therapeutics, Inc. Trisubstituted nitrogen modulators of tyrosine phosphatases
US20060135483A1 (en) * 2004-07-09 2006-06-22 Cheruvallath Zacharia S Oxygen/nitrogen heterocycle inhibitors of tyrosine phosphatases
EP1841749A1 (en) * 2004-09-02 2007-10-10 Metabasis Therapeutics, Inc. Derivatives of thiazole and thiadiazole inhibitors of tyrosine phosphatases
CA2614436C (en) * 2005-07-07 2016-05-17 Seattle Genetics, Inc. Monomethylvaline compounds having phenylalanine side-chain modifications at the c-terminus
WO2012171020A1 (en) 2011-06-10 2012-12-13 Mersana Therapeutics, Inc. Protein-polymer-drug conjugates
US10226535B2 (en) 2012-12-10 2019-03-12 Mersana Therapeutics, Inc. Auristatin compounds and conjugates thereof
MX368258B (es) 2013-03-15 2019-09-25 Zymeworks Inc Compuestos citotoxicos y antimitoticos y metodos de uso de los mismos.
CA2935064C (en) 2013-12-27 2023-06-27 Zymeworks Inc. Var2csa-drug conjugates
CN106255513B (zh) 2013-12-27 2022-01-14 酵活有限公司 用于药物偶联物的含磺酰胺连接系统
IL287645B2 (en) 2014-09-17 2024-04-01 Zymeworks Bc Inc Cytotoxic and anti-mitotic compounds and methods for their use
US10517958B2 (en) 2016-10-04 2019-12-31 Zymeworks Inc. Compositions and methods for the treatment of platinum-drug resistant cancer
MX2024002571A (es) 2021-09-03 2024-03-20 Toray Industries Composicion farmaceutica para tratamiento y/o prevencion de cancer.

Family Cites Families (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE3540495A1 (de) * 1985-11-15 1987-05-21 Merck Patent Gmbh Aminosaeurederivate
DE3787403D1 (de) * 1986-05-09 1993-10-21 Pulverer Gerhard Verwendung von spezifischen Monosacchariden zur Herstellung eines Arzneimittels zur Verhinderung von Metastasen maligner Tumore.
JP2714402B2 (ja) * 1988-07-13 1998-02-16 日清製粉株式会社 癌転移抑制剤
DK414389A (da) * 1988-08-24 1990-02-26 Merck & Co Inc Farmaceutisk praeparat indeholdende et aminosyrederivat med renin-inhibitorisk virkning
US4978744A (en) * 1989-01-27 1990-12-18 Arizona Board Of Regents Synthesis of dolastatin 10
US5138036A (en) * 1989-11-13 1992-08-11 Arizona Board Of Regents Acting On Behalf Of Arizona State University Isolation and structural elucidation of the cytostatic cyclodepsipeptide dolastatin 14
DK0934950T3 (da) * 1991-08-09 2002-07-29 Teikoku Hormone Mfg Co Ltd Tetrapeptidderivat

Also Published As

Publication number Publication date
IL107987A (en) 1999-10-28
TW400335B (en) 2000-08-01
FI952961A (fi) 1995-06-15
BR1100019A (pt) 2000-07-25
HRP931504B1 (en) 2001-04-30
FI952961A0 (fi) 1995-06-15
CN1095724A (zh) 1994-11-30
AU679479B2 (en) 1997-07-03
SG67935A1 (en) 1999-10-19
IL107987A0 (en) 1994-04-12
WO1994013695A1 (en) 1994-06-23
RU95115135A (ru) 1997-06-10
NO952366L (no) 1995-06-15
DE69329425T2 (de) 2001-01-18
SI9300661A (en) 1994-06-30
JPH08504415A (ja) 1996-05-14
CA2151953A1 (en) 1994-06-23
ES2151921T3 (es) 2001-01-16
HUT72067A (en) 1996-03-28
EP0674652B1 (en) 2000-09-13
HRP931504A2 (en) 1997-02-28
PL309353A1 (en) 1995-10-02
ATE196296T1 (de) 2000-09-15
PL178766B1 (pl) 2000-06-30
CZ157595A3 (en) 1996-01-17
CN1057095C (zh) 2000-10-04
US5502032A (en) 1996-03-26
ZA939389B (en) 1995-06-15
NO952366D0 (no) 1995-06-15
HU9501754D0 (en) 1995-08-28
EP0674652A1 (en) 1995-10-04
NZ258882A (en) 1997-06-24
DE69329425D1 (de) 2000-10-19
RU2132334C1 (ru) 1999-06-27
AU5695994A (en) 1994-07-04

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CZ286752B6 (en) Peptide and pharmaceutical preparation containing thereof
AU725164B2 (en) Novel dolastatin derivatives, their preparation and use
JP5122429B2 (ja) ドラスタチン１５誘導体
EP0642530B1 (en) Derivatives of dolastatin
JP2001514659A (ja) ドラスタチン−１５誘導体とタキサンとの併用
IL166853A (en) Antineoplastic peptides, their preparation and various uses thereof

Legal Events

Date Code Title Description
IF00 In force as of 2000-06-30 in czech republic
MM4A Patent lapsed due to non-payment of fee

Effective date: 20021204