TW321599B - - Google Patents

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A7 321599 ___B7_ 五、發明説明（1 ) 巨噬细胞經由與膜和分泌事項有醆之不同效懕物機制可 在宿主防禦中扮演中樞角色（Gordon等人，Curr. Qpin. Lbub.ujijjJ. . , L, 25, 1992； Fuller, Brit. Med.—J_. , iS_, 65, 1992)。呑噬作用、趨化作用與抗原表現作用係有關 膜之處理過程，其涉及宿主存活所需之免疫防禦機制。已 在選擇性刪酴巨噬细胞之人與動物範例中考證巨噬细胞之 重要性係防禦微生物、免疫監督、腫瘤细胞之破壊輿清除 褒老的紅血球（Claassen等人，J. Tnmunol Meth . 134. 153, 1990)。經由抑菌蛋白與殺菌蛋白之分泌、细胞素 與脂質介體Μ及氧與氮之反應中間物，巨噬细胞亦會幫助 宿主防禦。巨噬细胞之分蔽能力重要性在於它的功能*如 同這些细胞分泌超過百種不同之介體且位在每個器官内 (Nathan, J. Clin. Invest. , 79. 319, 1987)° 巨噬细胞功能之異常激活與自體免疫疾病Μ及慢性和急 性發炎過程有關，相反情況，巨噬细胞效應物功能之壓抑 與阐機和非随機病原之再發感染有關且增加罹病率和死亡 率之因素。與免疫妥協狀態有闞之人群包括燒傷病患、移 植病患、感染HIV之個人、進行化學療法之癌症病患與手 術病患，特別注意是那些胸與腹部之病患帶有感染較高之 危櫬。 目前對這些病患之療法包括靜脈内灌流衍生自细胞素（ 尤其是群落剌激因子G-CSF，GM-CSF ，與M-CSF)之巨噬细 胞（Nemunaitis， Transfusion 33: 70， 1993)。亦可用帶 有抗生素與液體之支持性療法然而證實這些方法受限於免 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 笨. 丁 言 經濟部中央揉準局貝工消费合作社印製 五、發明説明（2 疫妥協病患持鑛感染問題與出 性之菌種。另外，免疫妥協病 囊蟲鼷（Pneumocystis)與陳球 使用不同抗生素療程仍導致併 臨床處理上，能選擇性加強巨 主防禦之新穎療法將扮演重要 據報導雔激素能增加選擇巨 Fc調介之吞噬作用，第II類抗 女對不同感染較有抵抗傾向的 P_aLh_. , L2X, 531, 1985)建議 巨噬细胞效應物之功能因而/對 會有助益。 本發明提供增加巨噬细胞功 下式I化合物投與所'須之人 A7 B7 現更致命且對抗 患受到機會性病 菌）之感染依然 發症。顯然，在 噬细胞效應物功 角色。 噬细胞效應物之 原表現與IL -1分 觀察（Ahmed等人 類似_激素之化 宿主防禦衰減有 生素有抗藥 原（包括肺 明顳，僅管 這些病患之 能Μ強化宿 功能包括 泌。结合婦 » An» J. 合物可增加 闞疾病狀態 能之方法，包括將有效量的 (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) r 訂 經濟部中央橾準局®;工消费合作社印装

其中R1及R3分別為氫、-CH3 、-CMCi-Ce烷基），或 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210 X 297公釐） 321599 A7 B7 五、發明説明（3 ) 0

II -C-Ar，式中Ar係任意經取代之苯基； R2係選自N-吡咯啶基、六亞甲亞胺基及N-六氫吡啶基， 及其》藥上可接受之鹽及溶劑合物。 本發明亦包含治療免疫妥協病患之方法，包括投輿式I 化合物給該病患。 本發明係關發現式I笨并噻吩類中2-笨基-3-芳醸基苯 并噻吩之選擇性基團可增加巨噬细胞功能。咸信所揭示之 笨并噻吩類能增加巨噬细胞功能，包括第II類抗原表現（ 因而使抗原呈現），Fc調介之呑噬作用及/或细胞素釋放 。實施本發明之治療與預防方法係將有效增加巨噬细胞功 能之式I化合物或其醫藥上可接受之鹽或溶劑合物之劑量 投與所須之人。 術語”抑制巨噬细胞功能”定義包括增強或強化巨噬细胞 功能或活化速率Μ加強人類防禦。 式I化合物應可用於預防與治療性處理免疫妥協病人且 特別用於胸與腹部手術感染，化學療法後#雜消減之病患 *燒傷病患，受HIV感染之個人，與進行免疫妥協療法之 移植病患。額外用途可包括預防與治療用途Κ供復發细菌 、原蟲、與真菌感染Μ及脊熥發甭不全症候簇與再生不能 貧血（其中骨髄細胞大多無功能）之病患。預期任何臨床實 體在用群落剌激因子時，式I化合物亦會有用。 羅西芬係本發明較佳化合物且它是式I化合物之鹽酸鹽 ，其中R1與R3係氫且R2係卜六氫吡啶基。 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 訂 經濟部中央標準局貝工消費合作社印装 經濟部中央標準局貝工消費合作社印裝 321599 Α7 Β7 五、發明説明（4 ) 一般，至少一種式I化合物與常用賦形劑、稀釋劑或載 劑調配且慝擠成錠劑，或調配成酏劑或溶液K便利口服、 肌内投蕖或靜脈内投藥。本化合物可Μ穿皮投蕖且可調配 成持續釋出劑型等。 依已建立程序如美國專利4,133,814 ，4,418,068及 4,380,635等專利之詳细程度（併入本文參考）可製造本發 明方法.所用之化合物。一般，本方法係Μ具有6-羥基及 2-(4 -羥笨基）之笨并[b]噻吩起始。起始化合物受保護、 _ 酺化及去保護K形成式I化合物。製備此化合物之實例係 如上討論之美國專利。術語”任意經取代笨基"包括苯基及 一或二次用％-(：β烷基、Ci-L烷氣基、羥基、硝基、氯 、氟或三（氛或氟）甲基取代之苯基。 本發明方法所用化合物以廣泛有機及無機酸與形成B 藥上可接受酸及鐮加成鹽且包括常用於藥化界之生理可接 受馥。此鹽亦是本發明之部份。用於形成此Μ之典型無機 酸包括氫氛酸、氫溴酸、氫碘酸、硝酸、磙酸、璘酸、低 磷酸等。亦可使用有機酸如脂族單及二羧酸、纆苯基取代 之鍵烷酸、羥基鍵烷酸及羥基鍵烷二酸、芳族酸、脂肪及 芳族之磺酸所衍生之鹽。此Β槩上可接受之鹽包括乙酸鹽 、苯乙酸鹽、三氛乙酸鹽、丙烯酸鹽、抗塘血酸獼、苯甲 酸鹽、氯苯甲酸_、二硝基苯甲酸鹽、羥基苯甲酸鹽、甲 氧基苯甲酸鹽、甲基笨甲酸鹽、邮乙醢氧基苯甲酸鹽、萘 -2-苯甲酸翮、溴化物、異丁酸盥、苯基丁酸鹽、召-羥 基丁酸馥、丁炔-1,4-二酸鹽、己炔-1,4-二酸鹽、癸酸邇 -7- 本紙張尺度適用中國國家梯準（CNS ) A4規格（210X297公釐） (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) I I 111 . I —LI I - i I. I — 1^1 - - . r 訂 經濟部中央橾準局貝工消费合作社印製 A7 B7_ 五、發明説明（5 ) 、辛酸鹽、氯化物、桂皮酸鹽、檸檬酸鹽、甲酸鹽、延胡 索酸體、羥乙酸鹽、庚酸體、馬尿酸鹽、乳酸邇、蘋果酸 翹、順丁烯二酸鹽、羥基順丁烯二酸鹽、丙二酸鹽、苦杏 仁酸鹽、甲磺醢酸鹽、菸驗酸鹽、異菸埯酸鹽、硝酸鹽、 草酸a、邮苯二甲酸鹽、對苯二甲酸鹽、磷酸鹽、簞氫磷 酸鹽、二氫磷酸驩、偏磷酸a、焦磷酸邇、丙炔酸鹽、丙 酸鹽、苯基丙酸s、水楊酸鹽、癸二酸邇、琥珀酸籩、辛 二酸鹽、疏酸鹽、硫酸氫蘧、焦硫酸鹽、亞硫酸鹽、亞硫 酸氫邇、磺酸鹽、笨碌酸鹽、對-溴苯基磺酸鹽、氛苯磺 酸體、乙磺酸鹽、2-羥基乙磺酸邇、甲磺酸醱、萘-1-磺 酸鹽、萘-2-磺酸》、對甲笨磺酸鹽、二甲笨磺酸鹽、酒 石酸鹽等。較佳鹽係鹽酸期。 轚藥上可接受之酸加成鹽典型係由式ϊ化合物輿等莫耳 或過量之酸反應而形式。反應物一般结合於互溶劑如乙醚 或笨。鹽一般係於1小時至10天由溶液中沈澱且可藉遇濾 分隔或可以昔知方式汽提溶劑。 一般用於形成鹽之鹼包括氫氧化銨、齙金靨及鐮土金屬 之氫氧化物、碳酸鹽μ及脂肪族胺與一级胺、二级胺和三 级胺、脂肪族二胺。用於製備加成蘧特佳之瞼包括氫氧化 銨、碳酸鉀、甲胺、二乙胺、乙二胺及環己胺。 與彼等衍生化合物相較，路藥上可接受之鹽一般具有增 進溶解度特性，且因而常調κ成液劑或乳劑。 鼸 Κ槩姐合物可Μ巳知技8之步IR製備。例如，可用一般 賦型劑、稀釋劑或載劑調配化合物而形成錠劑、膠囊、懸 -8- 本紙張尺度適用中國國家揉準（CNS ) A4規格（210X297公釐） -------1裝------訂丨--.--< i (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部中央標準局貝工消费合作社印製 A7 ____B7_ 五、發明説明（6 ) 浮劑、粉劑等。逋用於此姐合物之賦型劑、稀釋劑及載劑 的實例包括下列：填充劑及填材如澱粉、糖、甘a酵及矽 酸衍生物；结合劑如狻甲基嫌維素及其它嫌维素衍生物、 海薄酸鹽、明膠及聚乙烯吡咯啶鼷；潤濕劑如甘油；崩解 劑如碳酸鈣及碳酸氫納，減緩溶解劑如鍵烷烴；促進吸收 劑如四級铵彳t合物；界面活性劑如鯨蟠酵、甘油單硬脂酸 酯；吸收性載劑如高嶺土及漿土，及潤滑劑如滑石、硬脂 酸鈣及鎂及固態聚乙二酵。 . 化合物亦可調配成酗劑或溶液以便利口服或逋宜非腸系 投藥（如肌內、皮下或靜踞内路徑）之溶液。另外、化合物 通宜調配成持續性釋放劑型.等。故姐合物可被構成於一段 時期，僅僅或最好在腸道特定部份釋出活性成份。例如從 聚合物物質或撖可製造塗層、被膜及保護基質。 須增加巨噬细胞功能或治療免疫妥協個人之本發明式I 化合物之特別劑量，由看護之B師依病況嚴重性、投第路 徑及相闞因子來決定。一般•接受及有效每日Μ量從約 0.1至約1000毫克/天，且更典型約50至約20 0毫克/天 。此劑量可投予須治療之主體每天1至約3次，或視所需 有效治療或預防該病或症狀投與更多次數。 通常較佳投與式I化合物之型式為酸加成邇，一般投與 藥品帶有基團如Ν-六氫吡啶環。最好投本發明化合物給 女性Μ及老年人（如停經後之女性）。供此目的之下列口服 劑型係可用的。 -9- 本紙張;ί度適用中國國家標準（CNS ) Α4規格（210X297公釐） (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 訂 經濟部中央標準局貝工消費合作社印製 A7 ___B7_ 五、發明説明（7 ) 姐合物 下列姐合物中，"活性成份”意指式I化合物。 姐合物1 :明膠囊 用下列來製備硬殻明膠囊： 成份 量（毫克/膠囊） 活性成份 0.1-1000 澱粉N F 0 - 650 澱粉可流動之粉末 0 - 650 矽氧烷液350厘史 ， 0 - 15 混合成份、通過45號網美國篩 ，及填充至硬殻明膠囊。 羅西芬（raloxifene)特定膠囊姐合物之實例業已製造並 包括如下所示： 姐^1觀2 :羅西芬膠囊 成份 量（奄克/膠囊） 羅西芬 1 澱粉，NF 112 澱粉可流動之粉末 225.3 矽氧烷液350厘史 1.7 -10- 本紙張尺度適用t國國家梯準（CNS ) A4規格（210X297公釐） --------< '策------ΐτ (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 321599 A7 B7 五、發明説明（8 ) 組L金羅西芬膠囊 成份 量 (毫克/膠囊） 羅西芬 5 澱粉，H F 108 澱粉可流動之粉末 225.3 矽氧烷液350厘史 1.7 姐合物4 :羅西芬膠囊 成份 量 (奄克/膠囊） 羅西芬 10 澱粉，NF 103 澱粉可流動之粉末 225.3 矽氧烷液350厘史 1.7 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) I I ^^1 --*- ! II IV II —--I - - --.....I ^ ,

、1T 經濟部中央標準局員工消費合作社印袋 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210 X 297公釐） A7 B7 經濟部中央標準局員工消費合作杜印製 五、發明説明（9 ) 姐羅西芬膠囊 成份 量（毫克/膠囊） 羅西芬 50 澱粉，NF 150 •源粉可流動之粉末 397 矽氧烷液350厘史 3.0 上列特定姐合物可依所提供之合理變化而改變。 用下列成份製備錠劑姐含物 ： 1合―物i :錠劑 成份 量（毫克/錠劑） 活性成份 0.1 - 1000 微晶纖維素 0 - 650 發煙之二氧化矽 0 - 650 硬脂酸 0 - 15 混合各成份且歷擠成錠劑。 另外，含0 .卜1000毫克活性成份之每一錠劑製備如下： -12- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） I.------上 .哀-----^--訂 (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) A7 B7 五、發明説明（10 ) I会:錠劑 成份 量（奄克/錠劑） 活性成份 0.1 - 1000 澱粉 45 微晶纖維素 35 聚乙烯吡咯啶鬭 4 (如10%溶於水之溶液） 羧甲基纖維素納 4.5 硬脂酸鎂 0.5 滑石 1 (請先閲讀背面之注意事項再填寫本.頁) 訂 經濟部中央標準局貝工消费合作社印製 活性成份、澱粉及纖維素通過45號級美國篩且充份混合 。用所得粉爾混合聚乙烯吡咯啶酮之溶液然後通過14號網 美國篩。所製粒劑在50-60TC乾譟且通過18號網美國篩。 先將羧甲基級維素納，硬脂酸鎂及滑石通過60號美國篩， 然後加入粒劑，混合後於錠劑機中壓擠產生錠劑。 每5毫升劑量含0.卜1000毫克藥品之每一懸浮液製備如 下： -13- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） A7 B7 經濟部中央橾準局員工消費合作杜印製 五、發明説明（ii) 成份 量（奄克/ 5毫升） 活 性 成 份 0.1 - 1000 毫 克 羧 甲 基 缠 維素納 50 毫 克 耱 漿 1.25 奄 克 笨 甲 m 溶 液 0.10 奄 升 調 味 爾 所要 之 量 色 劑 所要 之 量 純 水 加 至 ' 5 毫 升 蓁品通過45號網美國篩且用羧甲基纖維素納及糖漿混合 形成一平滑糊體。苯甲酸溶液、調味劑及色劑加入一些水 稀釋並播拌。然後加入足夠水Μ製造所需體積。 試豔 依 Freidnan等人，J . Clin. Invest. . L5_. 162-167 (1 985)之程序（併入本文參考）並做某些修改來進行。每天 給5至100隻老鼠口服1至10奄克/公斤之式I化合物之 劑量。接著投槩後*收取巨噬细胞且Μ偶合酵母粒之螢光 素（依 Ragsdale, .1 Ti.unol Heth. 1 23 : 259 , (1 989 )製備 )定最免疫（Fc調介）與非免疫呑噬作用中巨噬细胞之變動 。就免疫調介呑噬作用而言，先用促進調理作用之老鼠血 -14- 本紙張尺度適用中國國家梯準（CNS ) A4規格（210X297公釐） --------{^.------tT (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 A7 __B7_ 五、發明説明（12 ) 清預先掊養已偁合酵母之螢光素。藉螢光放射（分別使用 482與520 nm激發與放射之波長）之增加來定量巨噬细胞 在螢光攝取之增加量。此程序使用活體外或試管内巨噬细 胞之培養且定量螢光單位之變化。 螢光單位之增加（比較控制姐）表示式I化合物之活性。 依 Zuckerman等人，Cell Immunol. 103:207, (1986)； J T m-υη〇 1 . lAi: 978 (1988)之程序（併人本文參考）進行 、。誘等第II類抗原之能力與接績提昇抗原呈現之能力係決 定於活骽外原發性腹膜之巨噬细胞與試管内有醞之巨噬细 胞糸P38 8D1。將式I化合物.投與5至100隻老鼠間，收成 巨噬细胞並用對抗D單棋檷本之第II類抗原之抗體探拥。 使活合宜之第二種抗體，Μ流式细胞儀決定所增加第II類 抗原之表現。試管內研究靠流式细胞儀評估化合物在增加 基本含量與7 -干擾素誘使第II類抗原之表現的作用。第 II類抗原表現之増加反映出巨噬妞胞活化之增加。 依 Seow 等人，J . iBBuno 1 . Heth . . 113 (1 987 > 之 程序（併入文中參考）進行。該試驗係用2-去氧葡萄糖攝取 之測最來評估巨噬细胞效應物功能之堆加。活體外與活體 内巨噬细胞置於96榷盤中（每檐有10β细胞）且在0.78微居 里/毫升3Η-去氧葡萄糖存在下培育於緩衝食鹽水中，並 &將式ΐ化合物放人槽内。细胞外葡萄糖量之減少反映出 此非代謝葡萄糖相似物之攝取，因而提供一獨立試驗以测 -15- 本紙張度適用中國國家橾準（CNS ) Α4規格（21&Χ297公釐） 1 ΙΙΜ, ^ n n I ~~~~IT (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 599 Α7Β7 五、發明説明（13 ) 經濟部中央標準局員工消背合作社印製 定式I化合物所調介巨噬细胞活化的狀態。化合物增加去 氧葡萄糖攝取證明該化合物有埔加巨喵细胞活化狀態之能 力。 依 Zuckernan, Circ Shock. 2_9_，279 (1989)之程序（ 併入本文參考）進行，Μ描述式I化合物能在鼠之敗血症 及內毒素致死範例中有所保護。在敗血症誘發前將1至 10毫克/公斤式I化合物，給5至100隻老鼠口服1星期 。在達到LD100之情形下（200微克脂多釀）用巨九IV内毒 素注射來進誘發。外來20毫克/公斤之耱皮質激素如地塞 米松（dexanethasone)在邋加存活上可視為正面控剌姐。 式I化合物之作用亦可用涉及盲腸结紮與穿剌之敗血範例 來測定。僅管使用抗生素，由革蘭氏陽性菌與陰性菌引起 敗血症會在48小時導致LD100 。比較控制姐，存活動物之 數量增加或存活時間之增加證實化合物之活性。 實 使用市售特定對老鼠TNF之TNF ELISAs之血清測法來活 體内定量式I化合物增加细胞素（如TNF)之分泌的能力。 在注射致死或低於致死劑量之脂多_ (分別為200及1微 克）前，先給5至100隻老鼠口服1至10毫克/公斤之式 I化合物達一遇之久。LPS注射一小時後，抽出老鼠血並 測定血清TNF之#本量與LPS誘生量。照例，注射LPS前 所觀察TNP含量低於10微微克/亳升，接著LPS後達到5 至20毫微克/奄升的含量。測定化合物調整TNF之基本量 -16- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) Α4規格（210X297公釐） 1^1 In - 1 —L- In ml- m. I— ^^1 (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁)

、1T 321599 a7 ___B7__ 五、發明説明（U ) 或誘生含量之能力。在經化合物處理老鼠中，增加基本的 TNF不會引發大量全身性TNF釋放證實了化合物促進细胞 素分泌之能力。最後•由腹膜巨噬细胞（曝露在試管内1 至5« Μ化合物）釋放TNF之活體外與試管内測量亦靠 ELISA進行，Μ測定式I化合物調介细胞素增加之程度。 Μ_Μ_6. 選~5至50位婦女作臨床研究。這些婦女偽免疫妥協的。 由於這些病症之特異體質與主觀性質，該研究具有安慰劑 、控制姐即彼等婦女被區分成二姐，其中一姐接受式I化合 物當作活性劑而另外一姐接受安慰劑。試驗組婦女每天口 服50至200毫克藥物。彼等持鑛此種治療3至12個月。正 確記錄二姐徴狀之數目與嚴重性且在研究終了時比較研究 結果。該结果係比較各姐彼此成員且各病患之结果係比較 研究開始前各病患所報導之症狀。 在至少上述任一試驗中，Μ正面影響作用描述式I化合 物之用途。 (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 袈.

'•IT 經濟部甲央標準局貞工消費合作社印装 -17- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210 X 297公釐）

Claims (1)

1. 第83111833號專利申請案 A8 — __ 請專利範圍修正本(_ι。月）墨—“6.^0. p日费早 ----------捕·无 六、申請專利範圍 1. 一種適合增加巨噬细胞Pc受體表現之S藥组合物，包括 具下式（I)之化合物當作活性成份

   (I) 其中R 1及R 3分別為氫；且 R2像選自K-吡咯琬基及H-六氫吡啶基；或其®藥上可 接受之發或溶劑合物。 2. 根撺申請專利範圍第1項之S藥姐合物，其中該化合物 係其謅酸鹽。 3. 根撺申請專利範圍第1項之發藥组合物，其中該化合物 係 (請先閱讀背面之注f項再壌寫本頁) 裝· -訂---

   衣紙張尺度適用中國國家梂率（CNS ) A4规格（210X297公釐） 321599 申請專利範圍 B8 C8 D8. 鹽 酸 鹽其或 I ,-------(-裝 — I (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 訂 經濟部中央揉隼局βς工消费合作社印装 2 未紙張尺度適用中國國家梂牟（CNS ) Α4規格（2丨0Χ297公釐）