TW204300B - - Google Patents

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TW204300B TW078109297A TW78109297A TW204300B TW 204300 B TW204300 B TW 204300B TW 078109297 A TW078109297 A TW 078109297A TW 78109297 A TW78109297 A TW 78109297A TW 204300 B TW204300 B TW 204300B
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Description

6 6 A B 五、發明說明（） 本發明偽有鬨新穎脱脂酸神經節糖苷脂衍生物.持別 傜有閟新穎N-醯基-脱脂酸神經節糖苷脂，其中韹基係從 一或多®極性基之脂肪族酸衍生而得者。 脫脂駿神缇節糖苷脂為經由將神經節搪苷脂之西拉邁. 基脱醯基化所得之衍生物，其中僅保有抱合搪脂醇殘基。 神經節糖苷脂為一般具有如下示之多種整塍化合物之混合 物：
==o* 唾 IIIIOI «OHIOHOH tlllll2H:-
Mil (請先閲讀背面之注意事项再填寫本頁) 唐 顔 寡
•裝· •訂· 線· 此等分子含有寡醣部份（對各値神經節搪苷脂而言， 通常已有明確之化學定義），唾液酸部份（亦即由—或多 値唾液酸組成）及西拉邁部份，最後三値部份通常偽由不 同的唾液酸及不同的西拉邁殘基之混合物所組成。 唾液§3為如下示神經胺酸之證基衍生物 經濟部中央標準局印裝 甲 4(210X297 公潑） 3 78. 8. 3,000 五、發明説明（） 修正 魅 A6 B6
(II) 式中胺基使用乙酸或乙酵酸睦基化，及羥基也可使用此種 酸酯化。西拉遇基代表對應於如下任一式之N-醛基抱合糖 脂酵：
CH2—〇— CH一NH一乙輕基I CH—OH CH % CHI (CH2)n—CH3 CH2一Ο—I CH一NH—乙酵基 CH—OHI CH2 CH2I (CH2)n—CH3 經 濟 部 中 標 準 局 印 裂 式中N為6至18 ,韹基偽從具有16至22之碩原子之飽和或不 飽和脂肪酸或從對應之羥基酸衍生而得。如上所述，神經 節糖苷脂_ (下文稱之為“ GS”）中唾液酸及西拉邁殘基為 具有如1¾混合基圑，對文獻中所述之纯GS而言亦如此。 GS中所存在之唾液·酸數目為1至5。唾液酸殘基利用2-位置 之羥基與寡韹之羥基所生成之銅糖苷鍵而與寡耱結合當 數IS唾液酸结合在一起時，刖傜由2屆唾液敢之2 -及8-位 置之羥基間所生成的溺糖苷鍵而结合在一起。GS之唾液酸 及如前述纯化之GS之唾篏酸為多種化學结合薛之混合物. , ......................................一：……….SL..............................ίτ:…、…：* ...............疼 {請先聞讀背面之注意事項再填鸾本页) 甲 4(210X297 公沒） 4 例如，N-乙韹基神經胺酸及N-乙醇醯基神經胺酸，其中以 前者佔大多數，且可為其〇-醯基衍生物，例如8-0-韹基衍 生物之混合物。 寡醏係由至多5値單蘢或其具有醛胺基之衍生物，持 別為己糖及前述類別衍生物所組成。因此，寡醻經常至少 存在一個《萄糖分子或半乳糖分子，最常出現作為前述糖 之醯胺基衍生物者為N-乙醯基葡萄糖胺及N-乙醯基半乳糖 胺。脱脂酸神經節糖苷脂（下文簡稱為LGS )偽如前文所 定義.可箜由庳作用 m 、係以化學芳式#ί，例: 隨 ψψ 拉遇之氮將其脱醯基化而得。若 食水解進行，則^他醒化. 脱醯基化德胺基或羧i tM 脱醯基化，例如持別為神經肢酸 氮上所存在之醯基，或可能（通常較少量）存在於此種酸 之羥基上之醯基。 如前所述，存在於GS之神經胺酸氮上之醯基偽從乙酸 衍生而得，也可能有遠更小量偽從乙醇酸衍生而得。選擇 15 性再度醯基化反應，例如將抱合糖脂醇（下文稱之為SS) 之胺基暫時保護後，進行選擇性再度醛基化反應，可獲得 %脱醯基化所得之該型LGS産物，此種産物之差異僅在神 經胺酸氮上绝對存在有乙醯基，以及可能神經胺酸之羥基 上不存在有醯基化基。此種脱醯基化衍生物之基，可作為 2〇 製備新穎N-醯基LGS之基質，本案所用之“ LGS” _詞代表 酶脱醯基化産物及藉上述方式以化學脱韹基化所得之産物 Ο 本發明化合物為GS之半合成類似物且其差異僅在於SS 部份上存在有一艏經過明確定義之H-舔基且含有與天然産 肀 4 ( 210 X 297 公厘） 裝 打 線 5 10 15 20 物不同之謖。此種産物雖然屬於天然GS但為新穎産物 解時可生成由羥基所取代之高级脂肪族酸（因此由極 、'ϋ 取代/{^/如本發明化合物）。然而這些對應産物未曾分離 出說明過。本發明也包括新穎N-醯基LGS之唾液酸 羧基之官能衍生物，亦卽酯及醛胺，同時也包括於唾液酸 羧基與寡醏羥基間具内酯鍵之内酯，GS之類似物之乙酯衍 生物，以及GS之羥基之全醯基化衍生物，Ν-ϋ基LGS本身 及如前述之官能衍生物二者。 本發明之主要目的偽有關Ν-鏗基LGS其中醯基偽從具 有2至24磺原子且取代有選自下列之一或多値極性基的脂 肪族酸衍生而得： 一氣，溴及氟； -游離羥基或以有機酸或無機酸酯化之羥基； 一醚化羥基； 一從低级脂肪族醇或芳脂族醇衍生而得之酮基，縮酮基及 縮醛基； -非必要的取代有低级烷基或芳烷基之詷眄，醛眄或歧； 一游離氫硫基或以低级族酸或芳脂族酸酯化或以低级 脂肪族醇或芳脂族醇硫基; -游離或酯化羧基； 一游離以低级脂肪族醇或芳脂族醇酯化之磺酸基； 一 5黄韹代有低级烷基或芳烷基或低鈒次烷基之磺韹 胺基； -從低级烷基或芳烷基衍生而得之亞砚基或砚基； 裝 打 線 甲’4 ( 210 X 297 公厘） 1 -腈基； -游離或取代之胺基及此等胺基之四级铵衍生物；或 -N-醛基LGS之唾液酸羧基之酯及/或醯胺，N-醯基LGS之 内酯，具有酸基之N-醯基LGS之金屬鹽或有機鹼鹽，N-5 醛基LGS之加成鹽，及N-醛基LGS混合物之對應衍生物。 本發明也含有一種或多種前述LGS衍生物或其混合物 之藥物製劑，或個別鹽，及其治療用法及製法。 LGS之醯基化作用為己知且已經製得類似本發明之N-醯基衍生物；參見公開文獻“脱脂酸神經節糖苷脂：合成 10 及用於製備經標_神經節糖苷脂之用法”作者Gunther Schwarzmann 及 Konrad Sandhoff 於“酶學方法” 138期 3 19-341頁1 98 7年。曽經使用經過適當標_之醯基用於神 經節糖苷脂對於細胞膜作用相關之生物化學研究。此公開 文獻所述之N-醯基LGS持別是從非脂肪族酸或由得自本發 15 明由不同基所取代之脂肪族酸衍生物而得者。但所述LGS (具有明確定義SS鏈，不像本發明衍生物）之製法中，是 用SS其中羥基於3-位置使用苯甲醯基保護，及2-位置之胺 基氮是用衍生自二氯乙酸之醯基所保護。此化學劑經由與 得自GS Gfh之寡醏-唾液酸部份之殘基縮合而成，由N-二 20 氯乙醯基L GS Gih於前述SS殘基位置經苯甲證基化者所構 成的中間物。述於實施例3之本發明之二氛乙醯基脱脂酸 GM t並未由該合成法製備，上述苯甲醯基之二氮乙酸基同 時於隨後之階段中被去除。 分別由類似之苯甲韹基及二氮乙醛基所保護之衍生物 甲 4 ( 210 X 297 公厘）
1 也述於Schwarzmann等人之公開文獻有關脱脂酸GM3 GS之 製備中，但此例中也未製得脱脂酸GH3二氨乙趋基。 作為製備根據本發明之新穎N-醛基衍生物之LGS可經 由從天然産物待別從脊椎動物之中揠或周邊神經条統組織 5 抽取而得之GS經過脱醯基化而得，但此等组織也可來自腎 裝 上腺链質，來自红血球，脾臓或其他器官。可_為純GSM 如文獻所逑者，可追溯回有顔醸部份之整體結構，或可為 GS混合物。用作本發明新穎衍生物起始物料之最重要GS例 如為其中寡醏傜由至多四艢己糖基所生成者，且其中此種 10 醻部份為化學一整體者。己糖較好選自N-乙_基葡萄糖胺 訂 及N-乙醯基半乳糖胺（GS A群）。屬於此群之GS例如有從脊 椎動物腦中抽取者，例如述於文獻“神經条統之神經節糖 苷脂”於“糖脂質方法”，Lloyd A. Witting编輯，美國 石油化學家協會，平原鎮，m . 187-2 14 1976 (持別參考 15 表1 )。其中包括神經節糖苷脂gm〇 gm3, gm2,
Gmi-G1cNAc, Gd2, G01a-GalN ac; GTic, G0, GTi .持別為 其中寡醸部份至少含有一値葡萄糖基或半乳搪基及一脑N-乙醯基葡萄糖胺及N-乙醯基半乳搪胺者，尤其為下列各者 (GS B群）： 20 甲 4 ( 210 X 297 公厘） 5
1C 15 GM1 Gal(l- 3)GalNAC(l-
Gd1a Gal(l —3)GalNAC(l 3 个 ! 2 NANA 4)Gal(l- 4)Glc(l ~1)西拉邁
NANA
4)Gal(l ·4)01<=(1 —1)西拉邁 3 2 NANA
GDlb Gal (1 —r3 ) GalNAC (1—t-4 ) Gal ( X —；4 ) Glc (1 —；1)西拉邁 3个 2 NANA
8 t 2 NANA GT1b Gal(l—3) GalNAC (1—4) Gal (1— 4) Glc (1 — 1) 西拉邁 3 3 了 Γ 2 2 NANA NANA 8 小 I 2 NANA 甲 4 ( 210 X 297 公厘） 裝 訂 線 式中Glc代表葡萄糖，GalNAC代表N-乙醛基半乳糖胺，Gal 代表半乳糖及NANA代表N-乙醯基神經胺酸。 欲求明確說明如上式GS之结構式，此等GS大髏與本發 明之衍生物相同及醣部份為唾液酸及西拉遇之結構式，以 下為含有箪一唾液酸（由N-乙醯基神經胺酸或N-乙諄韹基 神經胺酸代表之）之“純”神經節糖苷脂GhU之完整化學 式：
15 該式對於根據本發明之神經節糖苷脂GfK之衍生物也有價 值，西拉邁之殘基由對應之“人工”西拉邁所取代，其中 N-醯基偽衍生自取代有極性基之脂肪族酸者。同時含括於 本發明者為新潁N-醯基L GS混合物，特別為衍生自神經節 20 糖苷脂混合物者，例如存在於多種動物組織抽取物例如“ 全體”油取物或多種部份者，例如文獻所述者。此等抽取 物及部分逑於上列文章同時見於下列文章：“含有與脂質 結合的唾液酸之物料之抽取與分析”，同書，159- 186頁 ( 1 9 7 6年）及“神經糸統之神經節搪苷脂”，同書，187- 甲 4 ( 210 X 297 公厘） —10 — 裝 訂 線 _— 1 2 14頁及德國專利案第25 4 9 680號。此等混合物中，神經 節糖苷脂之N-醯基部分偽由一艏醯基所取代。此等衍生物 可依本發明之程序而得，如本文所報告者，將神經節糖苷 脂混合物脱醯基化與隨後再度醛基化；非必要地偽於神經 5 節糖苷脂之唾液酸部分中之其它脱醯基化基被再度釀基化 之後進行。用作原料之最重要神經節耱苷脂混合物為得自 神绖条統，持別得自腦且含神經節糖苷脂GMt, , Gplb及GTlb之神經節糖苷脂抽取物。 已知神經節糖苷脂於神經糸統中扮有要角，近來驗證 10 神經節糖苷脂可用於侵害周邊神經条統及中植神經糸統之 病薆療法〔Acta Psychiat. Scand., 55，102，（ 1 9 7 7); Eur. Medicophys., 13, 1, (1977); Ric. Sci. Educ, Perm. Suppl. 9, 115, (1978); Adv. Exp. Med. Biol. 71, 275， （1976); Electronyogr. Clin. Neurophysiol·, 15 19, 353, (1979); Minerva Medica, 69, 3277, (1978); Minerva Stomat., 27, 177, (1978); Med. del Lavoro, 68, 296 (1977); Brain Res. 197, 236, (1980)] 〇 GS之治療作用似乎牽涉神經細胞之剌激性發芽現象， 及活化牽涉神經細胞傳導之細胞膜酶.例如酶（Na· , K * ) 20 ATPase C Brain Res., 197, 236 (1980), J. of Neurochem. 37，3 5 0 ( 1 9 8 1 )〕。GS刺激神經元發穿可促 成受影镨之神經組織恢復。 進一步進行研究來尋找比GS用於神經条統疾病療法更 有效之化合物。此等研究例如導致發現GS内酯，其中醣部 甲 4 ( 210 X 297 公 4 ) ~ 11 ~ 份之一個或多偭羥基由唾液酸之一或多値羧基所酯化（分 子内反應）結果生成等數目内酯環者，比較GS本身用來促 ►.....·ν 5 進神經元發芽神經剌激傳導相關的細胞膜酶方面更 具活性。其範A^Ha'KOATPase (參見美國專利案 4,476,119, 4,593,091及4,716,223)。
1C 對GS之“外”酯也可觀察到改良之神經元發芽活性及 神經刺激傳導，外酯為唾液酸之羧基官能基與各種脂肪族 ,芳脂族，環脂族或雜環族条列酵所生成之酯。GS醯胺也 具有相同性質，醯胺及酯之全醯基化衍生物及簡單GStfe具 有相同性質。所有此等衍生物皆述於美國專利案4,713,3 74 ，也考盧為本發明衍生物之基礎物質。 本發明之新穎GS衍生物具有令人感興趣之藥理性質， 15
裝 訂. 持別對蛋白質激酶C活化之抑制作用，該活化作用證實對 牽涉到正經傳遞功能不平衡的某些情況偽不期望且具 有負面影鶴^舌化作用係田素瀲發性胺基酸例如麩胺酸及 /或天冬酸濃度昇高所引發；此等酸於異常條件下對神經 元細胞具有直接毒性作用。本發明産物之一大優點且與其 他蛋白質激酶C抑制劑例如GS本身或SS不同者在於可預防 及對抗神經毒性作用。必須強調本發明産物不像鈣結抗劑 及麩胺酸酯受器拮抗劑（特別NMDA)僅於異常情況下發揮 作用，因此會限制神經毒性且維持神經元之塑性，藉 得受損之神經功能更容易恢復。前述新穎N-醯基LGSSJ. 性質可由如下對N-二氮乙醛基脱脂酸GM1及ί^- -脱脂酸GMi所進行之實驗來說明。 甲 4 ( 210 X 297 公廑） —12 — 1 Ν-ϋ甚LGS對激發袢胺甚酴夕袖嬅塞袢作用夕侫譁功故 大鼠皮質及腦神經元之一次培養中，激發性胺基酸（ EAA )可調節蛋白質激酶C (PKC)之活化及轉位且誘使細 胞死亡。持別將麩胺酸酯加入細胞培養内會誘出由於Ca*a 5 所引起，麩胺酸酯本身所誘出，接著轉位及隨後活化PKC 所可能引起之損害。V a c c a r i η 〇 e t. a 1 [ P r 〇 c . N a 11. Acad. Sci. USA 84, 8707-8711 (1987)], Hannun Y.A. et al. [J. Biol. Chen. 261, 12604-12609 (1986)], Merrill A.H. et al. [J. Biol. Chem. 261, 12610- 1Λ 12615 (1986)], Wilson E. et al. [J. Biol. Chem. 261, 12616-12623 (1986)】，及 Hannun Y.A. et al.[ 科學235 , 6 70-673 ( 1 987)】報告将腦顆粒細胞曝露於GS (三唾液糖基-N-四糖基西拉遇-GTib或一唾液糖基-N-四 糖基西拉邁-GM:)可抑制麩胺酸酯引起之轉位及PKC活化 作用。此等GS可防止麩胺酸酯與其高度親和力辨識位置及 與[3H】 PDBu結合位置之交互作用。此外此種GS可保護不 出現麩胺酸酯所誘出之細胞損害。使用新穎GS衍生物N-二 氣乙醯基脱脂酸tJMtSN-—氛乙醯基脱脂酸GM1與GS部份（ GM1及GTlb)比較進行研究説明如下。特別研究本發明衍 20 生物於試管試驗及活體試驗中對麩胺酸酯誘生之神經毒性 及對腦顆粒細胞一次培養中PKC之轉位的影堪。 材料好方法 試皆試驗研究 1.a.得自8日龄史伯格拉利大鼠腦顆粒細胞之一次培 甲 4 ( 210 X 297 V厘） -13 —
1 餐（Zivic Mi 1 ler) [Ua 1 Ιο V. et a 1., Proc. Nat 1. Acad. Sci. USA 79 , 7 9 1 9-7 92 3 ( 1 982)]。此種培養含有 >90%顆粒細胞，<5% GABA-撖性神經元及<5%神經膠 質cells [Vaccarino F.H. et al., J. Neurosci. 7， 5 65-76 (1987)]。細胞用於第八及第九日培養研究。 l.b.加入培餐内之物質（方法及參數）。 培養之第8及第9日，加入濃度介於7至100 wb範圍 之下列物質：N-二氛乙醛基脱脂酸GL , N-—氰乙醛基脱 脂酸GTlh, GIU。待別單層顆粒細胞預先與化合物於 10 洛克式溶液（lml)中於37°C培養120分鐘（或介於0至120 分鐘之期間）。GS及衍生物事先溶解且若有所需随後稀釋 於甲酵：Ha0/95:5内。溶液於、流中乾燥及隨同適當體積 之洛克氏溶液收集至達到最終灌度為止。 l.c麩胺酸酯誘生之神經毒性 15 麩胺酸酯誘生之神經毒性作用係於下列實驗條件下評 估： -暴露於麩胺酸酯之前物霣培育時間（0-1201C)之影 饗：完整細胞事先與Ν-二氣乙醯基脱脂酸GM, , Ν-—氣乙 醯基脱脂酸GihG WM)及GTlb(60 WM)於37TC培育。洗滌 20 去除過量化合物後細胞於50 w Μ麩胺酸酯於無Mg *a共存之 下於室溫培育15分鐘，隨後細胞又洗三次然後置於介質内 。24小時後利用組織化學技術評估細胞存活率，或使用碘 -螢光素二乙酸鹽染色，將活細胞染成錄色螢光而非活細 胞染成红色。 裝 訂 甲 4 ( 21 0 X 297 公厘） _ 14 — 2〇43〇〇 1 -使用GS衍生物或GS本身進行預先處理至暴露於麩胺 酸酯間之時間間隔之影蜜：完整顆粒細胞於37T與N-二氛 乙醛基脱脂酸GMt(7 tflOGTu及GMiUOO WH)預先培育2 小時。藉洗滌去除過量化合物，經不等時間間隔（1，2,4，6 5 ,12,18,24及48小時）後細胞暴S於50 « H麩胺酸酯（無
Hg〃共存）15分鐘。 -同時使用麩胺酸酯及GS處理之影響：完整顆粒細胞 使用50 wM麩胺酸酯及GS N-二氛乙醯基脱脂酸GM〆？〆） ,GTlb及GMiUOOpM)處理（15及35分鐘）。第一類實驗中（ 10 共同處理15分鐘）洗滌去除過*化合物，然後根據所述方 法評估細胞存活率。第二類實驗中（共同處理30分鐘）共 同處理又延長35分鐘暴霉於GS。 -間歃暴露於麩胺酸酯後，二氮乙醛基脱脂酸GL 之影谨：顆粒細胞間歇暴霉於麩胺酸酯且使用N-二氣乙醛 15 基脱脂酸GM“7 /i M)處理20分鐘（無Mg"共存）。洗滌去除 過量産物。 -細胞缺氣（於。室）後，N-二氣乙醯基脱脂酸Gll1對 於保護不出現内生性麩胺酸酯所誘生的神經毒性之影辑。 細胞存活率於24小時後以比色法評估（MTT僅能染色活細胞 2〇 )〇 l.d.麩胺酸酯所誘生之PKC轉位： [3H]-佛爾醇酯與完整細胞結合之評估： [3H]-佛爾醇酯結合之影鎏偽於下列二不同類型實駿 條件下評估。 甲 4 ( 21 0 X 297 公厘） -15 - 204300
使用50 «Μ您胺酸酯GS及N-二氛乙醛基脱脂酸GK 7 wM), 611>»及（5»11(100 衍生物同時處理15分鐘。 -使用50 麩胺酸酯及M-二氯乙醛基脫脂酸GM“ 7 wM), 6了1|>及0111(100 ί/Μ)衍生物同時處理30分鐘，接 著又蜃露（35分鐘）於GS。共同處理後洗滌细胞，於Mg"共 存之下評估[3H】-PDBu之結合作用。顆粒細胞於直徑35賴 之圓盤上生長，然後洗滌及與含有4-B-PH]-佛爾酵-12, 13-二丁酸酯[3H]-P(Bto)a, 12.5 Ci/BB〇l(l Ci = 37 GB, ;新英格蘭核公司），於0.1%不含脂肪酸之牛白蛋白血清 (Sigana化學公司）之洛克氏溶液共同培育。由於初步實 驗顯示10分鐘内逹到平衡，細胞與[3H]-P(BtQ)aM22TC共 同培育15分鐘。結合穩定經歴1小時。培育後細胞使用冷 洛克氏溶液洗3次且以NaOH 0.1M懸浮。懸浮液分用於蛋 15 白質測定〔Lowry O.H.等人，J. Biol. Chem_ 193，256 -275 (195 1)〕。非持異性结合係於2 «Μ佛爾醇12-十四酸 酯13-乙酸酯（ΡΤΑ)共存之下評估。 2 . a .細胞培養 小鼠神經母細胞瘤細胞（HaA)於第18Q天之繼代培養時 f, 0 0 0細胞/孔（C0STAR-24)之濃度放置於孔内。次日 換以 350 " 1 DMEM + P/G + 10% FCS。 2.b.加入培養之化合物：添加方法及觀察得之參數。 所有化合物溶解於氛仿/甲醇2: 1於1流中乾燥及再 度懸浮於DHEM + P/G + 10% FCS内。24小時後評估軸突 數目。 甲 4 C 210 X 297 公厘） 一 16 — 5 10 15 20 活體試驗研究。 重約13g之新生大鼠（7日龄）注射25 nnol NMDA i.c.v.。此等條件下激發性毒素誘使注射之腦半球重量減 少28%及死亡率為53.6%。化合物之投藥：注射方法及參 數觀察值。 大鼠於注射NMDA之前1小時及注射之後立刻使用N-二 氛乙醛基脱脂酸GMi及《-—氛乙醛基脱脂酸GMt以200 w mol /動物s.c.之劑量處理。化合物溶解於PBS内。N-二 氰乙醛基脱脂酸(^^及H-—氯乙醛基脱脂酸Gh衍生物經試 驗且與下列各化合物比較：硫酸鎂MK-801(NMDA受器之非 競争性同效剤）[G. McDonald 等人，Eur. J. Pharmacol. 14 0: 15 3- 15 7 (1 987)]及激尿酸[P. Andine,神經科學文 件，9 0: 208- 2 1 2 ( 1 988)】係可消除腦損害者。NMDA注射後 五日評估死亡率。 结果 實驗顯示於試管中於腦顆粒細胞： -預先使用N-二氣乙醛基脱脂酸GM1(LIGA20)及GTlb 處理2小時幾乎可全然胺酸酯所誘生之神經毒性（ 第1圖）。必須注意N-.g_脱脂酸GMtOiiM)所提供之保 護於預先培育後5分鐘即已明顯，而於GTlb(6〇uM)之例中 ，則於培育6Q分鐘後才頭著且程度較低。也值得注意者為 N-二氛乙醛基脱脂酸GfU所呈現之最大功效要求濃度比 GTlb高8倍（7WM相對於60UM)。 N-二氯乙醯基脱脂酸GM,對麩胺酸酯所誘生之神經毒 性之保護作用於移開介質後仍可持績至少24小時，而 GTlb之作用持續4小時（第2圖）及卩)11持頜不超過1小時 甲 4 C 210 X 297 公厘） —17 — 204300 (GKGThCH-二氣乙醯基脱脂酸GIM 。 -使用麩胺酸酯及N-二氛乙醯基脱脂酸GL共同處理 (15分鐘）可有效保護細胞不受麩胺酸酯之神經毒性影蜜 而使用處理則否（第3圖）。平行地，使用N-二氛乙醯基脱脂酸及麩胺酸酯共同處理可抑制麩胺酸 酯所誘出之PKC轉位，最高活性出現於30分鐘後（第4圖） 。另外有效者為共同處理35分鐘（第5圖），隨後使用GS 進行長期培育可有效保護不受神經毒性影響及抑制PKC轉 位。此等實驗條件中，使用N-二氯乙醯基脱脂酸GhU所得 10 之值可與6»^及Gl b所得者相比較注意N-二氮乙醯 基脱脂酸GMi之功效優於GM,及因於所用剤量遠更 低（7uM相對於lQQuM)。 -使用N-二氛乙醛基脱脂酸GMt進行後處 20分鐘 )也可有效逆轉間歇投予麩胺酸酯所誘生之神影響（ 第6圖） 裝 訂 15 -H-二氛乙醯基脱脂酸GMi及N——氛乙蕤基脱脂酸 (LIGA 21 )於無氧條件下可有效保護不受内生性麩胺酸 酯所誘出之神經毒性影饗（第7圔）。 -N-一氛乙醛基脱脂酸(5«1顯示可與H-二氣乙醛基脱 脂酸GJU相比擬之藥理作用（於10uM範圍内保護> .活體試驗研究中N-二氯乙醯基脱脂酸GM1及N-—氮乙 醛基脱脂酸GM*可保護試驗動物於i . c . v .注射NMDA後不死 亡,NMDA會誘生與缺血所引起者相仿之損害。▲ N-二氛乙醛 基脱脂駿GHt及N-—氮乙韹基脫脂酸GM t之功效相仿.由 W3或激尿酸可證（表3)。 線 肀 4 ( 210 X 297 公厘） —18 — o G LIGA, 21 “N-l 難 21驟_洚舔隳0^11 43UGA 2 2 = N- -^ZMms 邮骤 §1 20:nd"^m光莛砘 LIGA 22Ε0Λ1 <5 nd nd
LIGA 2 二 χ1〇Λΐ 5X10』M 5XS-M
您涵+ DMS GM 二 XIOhM 80-90 80 90 Λ 5 <5 Λ01 70-80 加埘撐浪N·番篚 14256±1S4 36016 ±S30 43035 ±487 40271 ±3584 {n=6) nd 4§34±188s ωΗ Tdz48hr) n=3 眾Z2 a番固N-slm銎浪ii许部谇 ml 0.15ro±0_01 0_243 ±0.008 0.324 ±0.01 0.284 ± 0.01 {n=-nd 0.259 ±0.007 MTT-8h「)n”3 19
B奸扔薛 .—+Μ<3^ GMi (18μΜ,60 35·) N- U濰[Ν躡··gEi-(51,omin) Ni 瓣^藏 S^sgliOH. (5 μπι, 10 min) Μπο.ρ (570-55 0.145 ±0007 (100%) 0.160±0·010(110%) 0.1 s± 0.012 {112%) 0.152±οο13{105%) (1)益溆萏31邻鹋BI拚簕a猱菸漭荔，浮1筇銪诚窈笤T (溶¾¾吾)， 猱菸皎固钶苈冷鸩：24/>思菸BHTT沌頃0踅婢1¾瘀筇親Hg¥准动NT耢邙 N2ls?[^ (想gi皆茴) 新生大Η ίΠ内由NMDA所誘生之神绖羞性 劑m 死亡率 (死亡/ 處理） 相對死亡率 nMoli/ 蝕物 mg/kg (佔處理之％) gi 水 icv + PBS sc - 1/32 3Λ NMDA icv + PBS sc - 22/41 53.6 NMDA + AGF2 sc 200 25 3/17 17.6 NMDA + AGF2 sc 100 25 0/9 0 NMDA + AGF2 sc 15 1.85 0/8 0 NMDA icv + LIGADE 20 sc . 200 28 1/8 12.5 NMDA icv + LIGADE 21 sc 200 21 0/8 0 NMDA icv + MK 801 Lp. 75 2 6/16 37 勑物（7 口龄迢13克）以表中所示？ίϊΜ及途徑宓理，係於注射NMDA(25nHoli i . c . v .)前1小時及注射後再度刻處理Q處理後5日 评佔死亡率〇 LIGADE 20 = Ν-<二氣乙認Κ脱脂巧'釭Η, LIGADE21=N-—氣乙韹基脱脂龄GM, 21 04300
5 10 盡件 1. 兔血之溶血 方法：1QQU化合物於溶液於lml新鮮兔血（5Q0USP單 位肝素納/12ffll血液）於室溫培育5分鐘。離心（3000rpn .,3Bin.)後以分光計量法（波長545nm)測量稀釋血漿 。溶血活性表示為SS誘生之溶血百分率。 結果：ΪΙ-韹基脱脂酸衍生物高逹IidM之濃度於兔體内 不引起溶血。 2. 神經毒性： 61之N -醛基脱脂酸衍生物之神經毒性偽於腦顆粒 細胞一次培養中試驗。24小時後及與化合物培育2小時後 進行FDA-PI染色。 結果：受試之N-醯基脱脂酸衍
洽至少兩倍活性濃 i質故本發明之N- 裝 訂 15 20 度之濃度時誘出神經毒性。由於前 醯基L GS可用作下列疾病之蕖物：腦缺血，代謝性腦病變 例如低血糖及低血氣，毒性來源之腦病變，外傷，老化， 癲癇，神經變性疾病例如巴金生氏病，亨亭頓氏舞蹈病及 精神病。 本發明之韹基LGS之所有衍生物例如酯，内酯，韹 胺及全醯基化物可藉先前技藝對GS相關衍生物所述之相同 程序而得。本發明待別含括此等衍生物之混合物例如從根 據本發明之N-g基LGS混合物而得者.後者又從GS之混合 線 甲 4 ( 21〇 X 297 公厘） —22 204300 物獲得。 裝 新穎N-韹基LGS衍生物中之酯基特別偽從脂肪族糸列 ,尤其至多具有12特別至多6 5X原子之醇衍生而得；或從 芳脂族条列較好具有一痼苯環非必要地取代有1至3低级烷 基（C,-4),例如甲基且脂肪族鏈至多具有4硪原子，或 取代有琿脂族或脂肪族-環脂族系列酵且僅具有一値環脂 族環及至多14碳原子；或雜環族条列醇至多具有12 ,待別 至多6碩原子且僅有一個雜環族環含有選自N, 0及S中之任 —雜原子衍生而得。 本發明N-醯基LGS衍生物中之羧基官能基之醯胺基係 從氛或從較好至多具有12碩原子之任一類胺衍生而得。 打 醇及胺可無取代或經取代，特別由選自下列之任一種 官能基所取代：羥基，胺基，烷氧基且烷基部分至多具有 4碳原子者，羧基或甲醯烷氣基且烷基部分至多具有4碩原 子者，烷胺基或二烷胺基而烷基部分至多具有4碩原子者 ，可為飽和或不飽和，待別僅具有一艏雙鍵。 酯化本發明N-醯基LGS之羧基的醇可為一價或多價， 持別為二價。 脂肪族条列醇中，待別值得一提者為至多具有6磺原 子之低级醇例如甲醇，乙醇，丙醇及異丙醇，正-丁醇， 異丁醇，三级-丁醇；及二價醇例如乙二醇及丙二醇。芳 脂族糸列醇中特別值得一提者為僅具有一値苯殘基如> 醇 甲 4 ( 210 X 297 公厘） —23 一 g〇43〇〇 i 及苯乙醇。環脂族条列醇中，較佳者為僅具有一値瓌脂族 .： 環者，例如琛己醇或烯祗酵，例如蓋·酵，番芹i醇或在品 i 醇或在品烯酵或胡椒醇。雜環族系列酵中待別值得一提者 i 為四氫<喃醇及四氪《匕喃酵。欲求酯化N-醛基LGS之羧基 ; 5 也可使用脂肪族醇例如由胺基所取代者，如至多具有4碩 ： 原子之胺基酵，待別為具有二烷基（(^一4)-胺基之胺基醇 ^ 如二乙胺醇。 i 根據本發明之羧醛胺官能基傜從氨（及酵胺，本例為 ：丨 無取代醛胺-C0NH)或從一级或二级胺，特別為至多含12碩 $
10 原子之胺衍生而得。此等胺可為芳香族，雜琛族，琛脂族 I
者，但特別為脂肪族。本發明之較佳具體例為至多具有12 I 硪原子之脂肪族胺之羧醛胺衍生物。此等胺可具有開放直 i 訂. 鐽或支鐽，或可為琛狀例如從具有1至6硪原子之烷基衍生 ί 而得之烷胺，例如甲胺，乙胺，丙胺，己胺，二甲胺，二 i 15 乙胺，二乙丙胺，二己胺；或從具有3至6碩原子之直鍵次 ： 烷基或取代有1至3甲基之對應鐽之次烷胺衍生而得，例如 f ι»比咯呢dk啶及吖丁啶。此等肢之烷基或次烷基也可於碩原 ; 子鏈中插有或取代有其它雜原子持別為氮原子。本發明之 j 醯胺於本例中係從二胺例如次乙二胺，三亞甲二胺或巧&_ ： 20 衍生而得。若烷基或次烷基插有或取代有氧或硫原子，則 醛胺代表胺基醇例如胺基乙醇或胺基丙醇之衍生物；或為 i 嗎《ft或為硫嗎*»揉衍生物。本發明持別令人烕興趣者為從前 i 述A及B群GS衍生而得之N-醯基LGS之酯及醛胺及其混合 | 物。 ·: 甲 4 ( 210 X 297 公厘） —24 — 204300 ίο 20 本發明也包括本文所述酯及醯胺之酷部分，唾液酸及 西拉邁之羥基之全醯基化衍生物。此種衍生物中醛基可從 脂肪族，芳香族，芳脂族，琛脂族或雜琛族条列酸衍生而 得。此等酸較好為至多具10碩原子，待別至多6碩原子之 脂肪族条列酸，例如甲酸，乙酸，丙酸，丁酸，戊酸，己 酸或癸酸。也可例如從具有等數硪原子但取代，有待別取 代有羥基酸如乳酸，取代有胺基酸例如甘胺酸或取代有二 齡基酸例如丁二酸，丙二酸或順丁烯二酸之酸衍生而得。 芳香族酸中特別令人1S興趣者為僅具有一艏苯核者，待別 為苯甲酸及其具有甲基，羥基，胺基或羧基之衍生物，例 如對-胺基苯甲酸，水揚酸或苯二甲酸。 本發明也包括N-醯基LGS之全醛基化衍生物或前述混 合物且具有游離羧基官能基之全醛基化衍生物。對此等衍 生物而言，特別重要者也羼於本文所引述之酸之醛基化衍 生物。一組重要的新穎衍生物為包括酯化或轉成醛胺或於 羥基被全醛基化之GS。 此種衍生物之酯基偽從至多具有6磺原子之脂肪族飽 和醇衍生而得，此種醇為無取代或取代有羥基，至多4硪 原子之烷氧基，胺基，烷基部分至多具有4硪原子之烷胺 基或二烷胺基，羧基，烷基部分至多4磺原子之甲醛烷氧 基，及取代有至多一個雙鍵之對應醇，或取代有僅有一苯 環之芳脂族醇，此苯環為無取代或取代有1至3甲基者 代有環脂族或脂肪族-環脂族醇，此種醇具有環己烷 取代或取代有1至3甲基及脂肪族部分至多4碩原子者，取
裝 訂. 線 甲 4 ( 210 X 297 Y 厘） 一 25 — 1 代有四氫呔喃醇或四氫喃醇。 此種衍生物之醛胺基係從氛或從烷胺二烷胺或次烷胺 衍生而得，此等胺之烷基部分至多具有6磺原子及次烷基 具有4至8碩原子及其中烷基或次烷基可於硪鐽中插有選自 5 氮，氣及硫之雜原子，胺基-ΝΗ;以有餌原子共存者為例 ,可取代有至多4硝原子之烷基及/或取代有S自胺基， 烷胺基或二烷胺基而其烷基部分至多4碩原子中之任一基 ,或取代有羥基或烷氯基而其烷基部分至多4硪原子，或 取代有僅具有一値苯環之芳脂族胺，非必要地至多取代有 10 3甲基且於脂肪族部分至多具有4碩原子。 其它衍生物包括酯化羥基用之醛基係從飽和或不飽和 脂肪族酸且至多6硪原子者衍生而得，該酸可取代有萑自 羥基，胺基或羧基之任一官能基。 本發明也含括Ν-醯基LGS及其衍生物之藥物可接受性 15 S 0 前述Ν-醯基為本發明化合物之特點，Ν-醯基偽衍生自 具有2至245男原子之脂肪族酸。此等酸可為多元者但較好 為僅具一個羥基官能基。較好為直鏈。於直鐽基圃中，側 鏈較好為至多4碩原子之低级烷基，特別為甲基。醯基尤 20 其具有支鏈者，較好至多12碩原子，更好至多6碩原子。 醯基較好為飽和但也可具有雙鍵，較好介於一至二値間。 取代於Ν-醛基上之極性基較好介於1至3脑且可相同或相異 。較佳者為醯基取代於α-位置之化合物，特別為具有較 高含量磺原子及/或不飽和化合物者。 裝 訂 線 甲 4 ( 21 0 X 297 公厘） —26 — £04300 極性基為游離官能基.例如羥基或胺基，或官能衍生 物例如酯，_,缩銅等。酯，例如羥基酯可從脂肪族，芳 香族，芳脂族，環脂族或雜環族糸列酸衍生而得。此種酯 基較好從治療可接受性酸衍生而得。脂肪族酸較好為至多 85炭原子之低级酸例如乙酸，丙酸，丁酸或戊酸，如異戊 酸或其取代衍生物如羥基酸，例如乙醇酸或羥基丁酸及乳 ίο 酸；胺基酸如天然胺基酸如甘胺酸，丙胺酸，纈胺酸或苯 基丙胺酸或二元酸。二元酸也可經取代例如丙二酸，丁二 酸，順丁烯二酸及蘋果蓮。芳香族条列酸例如有苯甲胺或 其衍生物且取代有1至3傾低级烷基，羥基或低级烷氣基或 15 鹵基例如氣，氟或麵溴者。芳脂族醇中持別值得一提者為 乙酸或苯基丙酸且非必要地如前 有5或5磺原子環如己垸碳酸或己 烷二碩酸。雜璟族酸，較好為僅具有一艏雜環基之簡單化 合物洌如。比啶或〇系啶衍生物例如菸鐵酸或異Β銨酸或cc -吡咯啶碩酸。 酯化羥基可從前述就酯化唾液酸基所述之醇衍生而得 。較好為使用至多4碳原子之脂肪族酸或脂肪族部分至多4 踴原子且具有苯基且非必要地如前述取代之芳脂族醇所酯 僅具有一艏苯環者 述取代者。環脂族
訂 線 化之基 酯化胺基也可從上列就唾液酸之醯胺基所述者衍生而 得。較好為取代有至多4碩原子之烷基或脂肪族部分至多 4磺原子及苯基非必要地如前述所取代的芳烷基之胺基。 取代之胺基tt包活韹基化胺基，例如使用前述就酯化羥基 肀 4 ( 210 X 297 公厘） -27 - 导〇4_ 所述之酸，特別至多具有4碳原子之脂肪族酸所醛基化者 本文所逑之脂肪族或芳脂族低级烴基且有關酮基，莛 基，醛牦，氫硫基，磺醛基，磺醯胺，石座及亞部分所述 之取代至多具8碩原子，較好1至4碩原子。基也可從烴 基衍生而得包括苯基歧基。 酯化羧基例如根據本發明之N-醯基上之極性取代基可 為前述就GS衍生物之唾液_酯所述者，但較好衍生自至 v之脂肪族醇^『前沭數目碳原子/ 多8磺原子且f其4硪原子其中衍生得N-醯基之低级飽 10 和酸中特別值得一提者為鹵化者，尤其為氛化或氟化酸， 特別為2-位置二氛化者，特別值得注意者為二氨乙酸，三 氛乙酸及其氟化或溴化類似物，2, 2-二氛_丙酸，2, 3 -二氣丙酸，2, 2, 3-三氣丙酸，正-2, 2-二氯丁酸，，2 ,2-二氯戊酸，2-氮異戊酸,2, 3-二氣戊酸，五氟丙酸，3- 15 3- 二氛戊酸，3-氛-2, 2-二甲基丙酸，氛二氟乙酸，2, 2 -二氯己酸 ，2-—氮丙酸，2-—氮-正-丁酸，2-—氯戊 酸，2-—氮己酸，及此等酸之氟化或溴化類似物，2-氮掠 撊酸，2-氯硬脂酸，2-氯油酸，2-氯月桂酸，2-氯山ft酸， 4- 氯苯氧基乙酸，2-羥基丙酸（乳酸），3-羥基丙酸，2-羥基丁酸，2-羥基戊酸，3-羥基戊酸，2, 3-二羥基丁酸 ，及2, 3-二羥基戊酸或其與至多4碩原子之低级脂肪醇所 生成之酯，或其與至多4碩原子之低级脂肪族酸所生成之 羥基酯，或與前述芳香族，芳脂族，環脂族或雜環族尨所 生成之酯。此等酸包括甲氧基乙酸，12-羥基硬脂酸，2- 甲 4 ( 210 X 297 公厘） —28 21)4300 1 (4-羥基苯氣基）丙酸，2-羥基異己酸，2-羥基異丁酸， 4-氟苯氣基乙酸，乙氧基乙酸，丙酮酸，乙鞺基乙酸，乙 醛基丙酸及其與至多4碩原子之低级脂肪族醇所生成之縮 酮及/或其眄或取代肟，其烷基至多4硪原子，氫硫基乙 5 酸，2-氫硫基丙酸，2-氫硫基丁酸或2-氫硫基戊酸及其與 至多4磺原子之脂肪族一價醇所生成之酯，或其餘至多4磺 原子之低级脂肪族酸所生成之酯。同時令人烕興趣者為2-氫硫基月桂酸，油酸及棕撋酸及前述類別之酯或醚，丙二 酸，戊二酸，一甲基戊二酸，3-羥基-3-甲基戊二酸，順 10 丁烯二酸，蘋果酸、丁二酸，尽丁烯二酸，癸二酸及其與 至多4碩原子之脂肪族醇所生成之酯，硫基乙酸，2-硫基 丙酸，2-硫基丁酸，2-硫基戊酸及其與至多4磺原子之脂 肪族醇所生成之酯。取代有磺酸基之高级酸中值得一提者 有2-硫基月桂酸，2-硫基油酸，2-硫基棕撊酸，2-硫基硬 15 脂酸及前述類別之酯，以及對應之磺醛胺或取代有至多4 碩原子之低级烷基或取代有4或55g原子之次烷基之磺醯胺 ，乙酸，丙酸，丁酸及戊酸而於2-位置取代有烷基亞ί私或 烷基基者，其中烷基至多具有4磺原子，氡基乙酸，2-氰基丙酸，2-氰基丁酸，2-氰基成酸，胺基乙酸，2-胺基 20 丙酸，2-胺基丁酸，3-胺基丁酸，4-胺基丁酸，2-胺基戊. 酸，4-胺基戊酸，及其衍生物具有至多4磺原子之一或二 個烷基取代於胺氫上，或具有4或5硝原子之次烷基，或此 等酸之衍生物具有使用1至4磺原子之低级脂肪族酸或使用 前述芳香族，環脂族或雜環族酸所醛基化之胺基。此等衍 甲 4 ( 210 X 297 父厘） -29 - γ. ·τ> 1 生物包括從至多4磺原子之烷基衍生而得之三级胺基之四 級銨鹽。其它酸包括ethionine ,二甲基甘胺酸，3-二甲 胺基丙酸，肉毒鹼及半胱胺酸。 也可製備具有游離羧基官能基之根據本發明之N-醯基 5 LGS之金屬鹽或有機驗鹽，此等化合物也構成本發明之一 裝 部分。也可製得本發明之其它衍生物之金屬鹽或有機驗留 ,此等衍生物也具有游離酸官能基例如酯或使用二元酸全 醛基化之醯胺。同時也構成本發明者為含有鹼性官能基例 如游離胺基之GS衍生物之酸加成鹽，例如具有胺基醇之酯 10 。金屬鹽或有機鹼鹽中特別值ίΐ 一提者為可用於治療者， 訂 例如鹼或鹼土金屬鹽如鉀，鈉，銨，鈣或鎂鹽，或鋁鹽及 有機鹼鹽例如脂肪族或芳香族或雜琛族一级，二级或三级 胺如甲胺，乙胺，丙胺啶嗎麻黃鹼，糠胺，膽齡 ，次乙二胺及胺基乙醇。可生成根據本發明之GS之酸加成 15 鹽之該等酸中持別值得一提者為含氳酸，例如氫氮酸，氫 線 溴酸，磷酸，硫酸，至多7磺原子之低级脂肪族酸例如甲 酸，乙酸，或丙酸，丁二酸及順丁烯二酸。非供治療用之 酸或鹸例如苦味酸可用來純化本發明之GS衍生物者也構成 本發明之一部分。 20 由於游離形式及鹽形式之衍生物間存在有密切閱偽， 故本文中除非有做相反的說明以及除非排除此種可能性， 否則對此二形式並未恃別區分。 本發明之新穎N-醯基LGS或其官能衍生物中之持別值 得一提者為具有從前述取代酸衍生而得之醛基且具有選自 甲 4 ( 210 X 297 公厘） —30 —
下列任何一者做為鹼性GS者：GMt, GM3, GMla, GDlb, GMlb衍生自乙醇，丙醇，異丙醇，正-丁醇.異丁醇，三 级-丁酵，千醇，丙烯醇，乙氧羰基甲酵或環己醇衍生而 得之其唾液酸酯，唾液酸醛胺及從甲胺，乙胺，丙胺，二 甲胺，二乙胺比咯啶.喊啶，略$ ,嗎够，硫嗎成衍生 而得之醯胺，其金醛基化物，全丙醯基化物，金丁醯基化 物，全順丁 基化物，金丙二醛基化物，全丁二醛基 化物及該等及醯胺之金醯基化類似物。同時也值得 一提者為N-醯胺LGS混合物，其中主要含有衍生至GS, Gh, GM3, GDla, GDlb, GDlb，使用前述酸N-醯基化者及 如前述對單一 GS衍生物所述之官能衍生物者。持別值得注 意者為下列N-醯基LGS :二氛乙醯基脱脂酸GMt ,氛乙醯 基脱脂酸GiU, 3-氮戊醯基脱脂酸GMt.羥基乙篚基脱脂酸 GMt ，三氟乙醯基脱脂酸GMt，三氮乙醛基脱脂酸GhU , 三溴乙醯基脱脂酸Gl^,氫硫基乙醯基脫脂酸Gih ，順丁 播二醛基脱脂酸GL, 12-羥基硬脂酸醯基脱脂酸GM^ 2-矮基異丁醯基脱脂酸G»U,氟乙醛基脱脂酸Gih, 2-氟乙醯 酵基脱脂酸GM,, 3-胺基丙醛基脱脂酸GM,,氮基乙醯基脫 脂酸GMi, 3-二乙胺基丙鏗基脱脂酸GMt，胺基乙醯基脱脂 酸及前述之酯及醯胺及全醯基化類似物。 本發明之新穎LGS衍生物可藉已知方式製備。可於SS 氣上使用適當酶將GS進行選擇性脱醛基化，此種酶可直接 權得L GS而維持其它醛基，待別為神經胺酸之胺基上之韹 基不受影饗者。Μ已知方式醯基化可得N-醯基-LGS。另外 裝 訂 線 甲 4 ( 210 X 297 公厘） -31 1 GS可以化學方式脫醯基化因而獲得脱-N-乙醛基-LGS ,亦 即其中SS及神經胺酸之胺基被脱裔基化者，且可能具有酯 化羥基。此等産物可藉已知方式醯基化因而獲得脱-N-乙 鏗基-N-醯基-LGS。隨後可對神經胺酸之胺基進行乙鏗基 5 化作用。 此種程序之一變化法傜中間保護SS之胺基，可利用使 用磷脂瞻鹼之疏水性交互作用來保護，或使用保護基醯基 化來保護，隨後於神經胺酸氮上進行乙醛基化作用。及非 必要地將SS氮保護，最後於SS氮上進行醯基化。所 10 有此等操作也1¾對所述之GS混合物進行。幸表] N-醯基LGS中若有所需可將唾液酸之羧基或酸之羥基 例如將羧基轉成酯或醯胺，或羥基轉成與酸所生成之酯化 基（全醯基化作用）。因此另一方面於官能基轉化之前， 同時或之後，無論具有官能與否，可將西拉邁殘基之醛基 15 上所存在之極性基例如轉成酯化羥基或烷基化胺基，或與 0-烷基羥胺轉成反應性羰基。也可將所得化合物轉成鹽。 因此本發明程序主要包括將L GS或脱-N-乙醯基-LGS或 此等化^^混合物醯基化.非必要地係於使用具有2至 24碩原子\^代有選自下列之—或多値極性基之脂肪族酸 20 暫時性保^化組分中之游離官能基之後進行： - 氣，溴及氣； -游離羥基或以有機酸或無機酸酯化之羥基； -_化羥基； -從低级脂肪族或芳脂族醇衍生而得之_基，縮酮及 甲 4 ( 210 X 297 公厘） 一32 — 5 10 15 20 縮醛基； -非必要地取代有低级烷基或芳烷基之酮聆，醛8¾或 眩基； -游離氫硫基或以低级脂肪族或芳脂族酸酯化或以低 级脂肪族或芳脂族醇醚化之氫硫基； -游離或酯化羧基； -游離磺酸基或以低级脂肪或芳脂族醇酯化之磺酸基 -磺醯胺或取代有低级烷基或芳烷基或低级次烷基之 磺醯胺基； -從低级烷基或芳烷基衍生而得之亞>5®*或ill·基； -at 基； -游離或取代胺基及此等胺基之四级銨衍生物。 本發明程序也包括乙醯基化，如此所得之脱-N-乙醯 基-N-醯基-LGS或此型化合物之混合物，及若有所需將所 得醯基-LGS轉成酯或醛胺或轉成内酯或羥基金醯基化物 或此型化合物之混合物，及/或非必要地轉換取代於N-醯 基上之極性基，以及若有所需將所得産物轉成適宜之鹽。 if!根據前述程序之N-醛基化作用可藉習知方式進行，例 起始産物與醯基化劑，持別酸之反應性官能衍生物且、
殘基偽有待引進者反應。如此可使用鹵化物或酸酐做酸之 官能衍生物，及較好於三级鹼如ott啶或可力啶共存之下進 行韹基化作用。操作可於無水涤件下於室溫或加熱下進行 ，同時有利地可根據修頓-鲍曼法於無水條件下，於無機 甲 4 ( 210 X 297 公>$ ) -33 裝 訂 線 1 鹸共存之下進行。某些例中也可使用酸之酯做為反應性官 能衍生物。也可使用牽涉活化羧基衍生物之方法來醯基化 ，例如职·化學界己知者，例如使用混合酐或以甲二醯胺或 異》兮唑鹽所能獲得之衍生物。 5 多種製法中，最適合者如下： 1. LGS衍生物與酸之叠氮化物反應； 2. LGS衍生物與從酸與羰基二咪唑所能獲得之 酸之醯基眯唑反應； 3. LGS衍生物與酸之混合酐及三氟乙酸之混合肝反應 10 9 4. LGS衍生物與酸之氨化物反應； 5. LGS衍生物與酸與甲二醯亞胺（例如二環己基甲二 醛亞胺）以及非必要地有例如1-羥基本駢三唑共存 之下反應； 15 6. LGS衍生物與酸藉加熱反應； 7. LGS衍生物與酸之甲基酯於高溫反應； 8. LGS衍生物與酸之酚酯，例如與對-硝基酚所生成 之酯反應；及 9. LGS衍生物與酸之鹽與1-甲基-2-氛啶鹼或類似 20 産物間交換衍生而得之酯反應。 甲 4 ( 210 X 297 公厘） -34 —
5 10 s-N-(NESg -N-Iils -LGS, 5菏结雜Nr^^it^, K〇ll ,¾、π·;ίΓΓ^逛 ® ⑤醯基化
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甲 4 ( 210 X 297 公厘） -35 1 從含有游離羥基或氫硫基或羧基或一级或二级胺基之 酸衍生而得之産物之製備持例中，較好於醯基化反應期間 使用較好肤·化學界所用之保護法保護此等基。此種保護基 當然必須於反應結束時容易去除者，例如苯二甲醛基或年 5 氣羰基而可有利地用來保護胺基者。如此例如於含L-胺基 丁酸衍生物之製備中首先製得此種酸之衍生物，其中胺基 與苯二甲醯基結合，與LGS衍生物醯基化之後，苯二甲醯 基被狀分解作用去除。；氣羧基可藉氬解去除。此種殘基 也可保護羥基。羧基可藉酯化例如使用&化學界所用之醇 10 保護。 如前所述起始LGS可使用所謂之西拉邁脫醯基iftr對氮 進行Sgj：脱醛基化作用而從GS製得。此種方法例如述於J. Biochem. 1 0 3, 1 (1 988)。也可用作起始産物之脱-N-乙醯 基- LGS可使用鹼性水解劑從GS獲得，水解劑例如有四烷基 15 胺之氫氯化物，鉀水合物及其它〔參見Biochemistry 24, 525, (1985); J. Biol. Chen. 255, 7657, (1980); Biol. Chen. Hoppe Seyler 3 6 7 , 24 1 ( 1 986)； Carbohydr. Res. 1 7 9, 3 9 3 ( 1 988); Bioch. Bioph. Res. Conra. 147， 127 (1987)〕。 20 脱-N-乙醯基-LGS及前述變化法中之起始物料也可構 成另一種變化法起始物料製備中之起始物料，亦即用來製 備LGS。由表4可見此種轉化作用可根據部分（3)及（4)進 行。方法（3)之反應（a)及（b)及方法（4)之（a), (b)及（c) 皆已知。可根據已知方法從根據此程序所得之新穎N-醯基 甲 4 ( 210 X 297 公度） —36 — -L GS製備羧基或羥基衍生物，但此種方法會改變基本GS结 構，例如使用高度酸性劑或於高度鹼性或酸性條件下進行 ;或該等方法會導致醏部分之羥基出現非所欲之烷基化作 用。 N-醯基GS之羧基之酯化作用或轉成醯胺例如可如美國 專利案4, 713, 374對GS所述進行。生成本發明衍生物之 内酯也可以相同方式如GS内酯之製備方式而進行，例如美 國專利案4 , 593, 09 1及EP0專利案0072 722所述而進行。 此等内醋不僅包括經由使用羥基耱内酯化唾液酸羧基所生 ίο 15 成之化合物，同時也包括唾液酸羧基與唾胶酸羧基間所生 成之含内酯環者，後者又與_部分結合及其它可能之内酯 結構。專利案中所述可生成内酯之程序包括於無水篠件下 使用内酯化劑處理GS於非水性有機溶劑。適宜之有機溶劑 包括二甲亞;6备，二甲基甲醛胺，四亞甲妇私，四氫味喃，二 甲氧基乙比啶或其混合物•適宜之内酯化劑包括可溶 於有機溶劑之甲二醛亞胺，例如二環己基甲二醯亞胺，年 基異丙基甲二醯亞胺·亨基乙基甲二醯亞胺，2-氛-1-甲
及反應時 裝 線 基淀鹽，乙氣基乙炔及Woodward劑（N-乙基-5-苯基異 4唑-3_-磺酸鹽）。更早之方法牽涉GS與乙酸或三氯乙酸 間之反應或與可溶於水或水性介質内之甲二醯亞胺之反應 。所有此等方法皆可用來生成新潁N-黯基-LGS之内酯c 至於羧基之“外部”酯化作用，換言之使用前述糸列 醇進行酯化，可令N-醯基-LGS與所需醇_ 交換剤例如 樹脂如Dowex 50共存之下反應；由於同時： 甲 4 ( 210 X 297 公厘） -37 - 5 10 15 間相當長故産率有限。另一種酯化法包括將醇通過樹脂如 ^^(10 0- 20 0篩號形式H>及於相同醇内使用對 #離物。另一種適宜之酯製法包括使用_化劑
Dowex-5 應之重 處理US衍生物之金屬發。使用鹼金靥鹽或鹼土金屬鹽或
任一種其它金屬鹽。至於醚化劑可使用文獻中所報告者。 待別為多種無機酸或有基磺酸如含氫酸之酯，換言之烴基 鹵化物例如甲基或乙基碘等，或中性硫酸鹽或烴基酸，亞 硫酸鹽，磺酸鹽，矽酸鹽，亞磷酸鹽或烴基磺酸鹽例如苯 駢-或對甲苯駢磺酸鹽。反應可於適宜之溶劑如醇内進行 ，較好溶劑對應於有待引進之烷基，但也可於非極性溶劑 如酮，醚如二0¾烷或二甲亞内進行。特別優異之酯化法 包括使用所需醇與對應醇酸鹽之混合物處理LGS衍生物之 内酯。反應可於對應於醇沸點之溫度下進行但也可於較低 溫進行，此時反應時間較長。 本發明衍生物LGS之醯胺可藉己知方法持別藉下列方 法製備： a) N-醯基LGS衍生物内酯與氨或胺反應； b) N-醯基LGS衍生物之羧基酯與氛或胺反應； c) 具有活化醯基之N-醯基LGS衍生物與氨或胺反應； 反應（a)可使用或未使用溶劑，使用氨或使用將製得其酷' 胺之該種胺直接處理GS内酯來進行。反應&可於相富低溫 例如-5至+10。，但較好於室溫或30至120°之溫度下進行 。至於溶劑可使用酮，芳香族烴，二甲基甲醯胺，二甲亞 ^ 4 ( 210 X 297 乂厘） —38 — 1 ί®·,二·琴烷或四氫咏喃。反應（b)也較好於（a)所逑之條件 ； 下進行。 ; 對本發明所述之酯，也可使用其它酯例如與酚所生成 ΐ 之酯。欲求活化方法（c)反應中之羧基，必須使用拆化學 i 5 界已知之方法，但避免需要太過酸性或太過齡性條件之方 i 法，如此將導致GS分子之崩潰。若起始GS例如偽呈納鹽形 i 式則推薦首先使用杜威型離子交換剤或另一種酸性離子交 j 換劑處理a。例如可使用缩合方法，此種方法中有甲二醛 ：丨 亞胺共存例如二環己基甲二醛亞胺，$基異丙基甲二醛亞 $
10 胺或年基乙基甲二醛亞胺，有1-羥基苯駢三唑共存，或於 I n,v-羰基二咪唑共存之下缩合。 i 醏或唾液酸部分以及非必要地西拉遇殘基之羧基之醛 ：: 打 基化作用可藉已知方式進行，例如使用酸之鹵化物或酸酐 ； 進行醯基化作用，較好於三级齡例如收1：啶或可力啶共存之 ：: 15 下進行。如此獲得全醯基化衍生物。 ： 根據本發明程序之定義也可對脱-N-乙醯基-LGS進行 f 醯基化及醯基化反應之後回復神經胺酸内之乙醯胺基。此 ί
種乙醯基化反應也可藉已知方式進行。本例中對N-醯基化 選用相當溫和之方法，其中神經胺酸之羥基保持未改變。 I 20 於SS氮上進行醯基化反應之後可使用激烈方法，特別使用. ΐ 乙酐進行此基之乙醯基化作用。根據此程序所得之化合物 ί 中，若有所霈可_互換N-醯基内所存在之官能基。例如可 i 使用溫和化學劑及條件選擇性醯基化羥基而保留其它羥基 i 例如唾液酸基不變。 ·: 肀 4 ( 210 X 297 公厘） -39 - 20^w___ i 可醚化羥基或氫硫基或烷基化胺基或醛基化胺基。最 後於根據本法所得之所有化合物中，其中存在有可鹽化基 者，此基可藉已知方式鹽化。 本發明也包括新穎衍生物製備程序之修改例，該程序 5 中於任一階段中斷，或其中由中間化合物開始然後進行其 餘各階段；或其中起始産物傜原地生成。 裝 本發明之另一目的偽有關含括一種或多種新穎N-醛基 -LGS衍生物且待別為前述衍生物做活性物質之藥物製劑。 藥物製劑可_為供口服，直腸，非經胃腸道，局部或經皮 10 使用之製劑。因此僳呈固體或半固黼形式例如九剤，錠劑 打 ，明膠膠囊，膠囊，栓劑或軟明騙睡囊。供非經爾賎道使 用可用肌肉。皮下或經皮投蕖用之劑型，或適合供輸注或 靜脈注射者。因此此等製劑可呈活性化合物之溶液形式， 或活性化合物之冷凍乾燥粉末有待與一種或多種藥物可接 15 受性賦形劑或稀釋剤混合者，此種製劑適合供所述用途且 具有可與生理流體相容之滲透度。供局部使用可考廉噴霧 劑例如鼻噴蓀，局部用之乳霜或软眘剤，或較好製成供绖 皮投藥之黏性硬膏。 * 本發明製劑適合投予人體及動物體以溶液劑，噴霧劑 20 ，軟膏及乳霜劑為例，較好含有0.01%至10%重量比之活. 性化合物及以固體形式製劑為例，較好含有1%至100%重 量比，且更好5%至50%重量比之活性化合物。投藥劑量 將依據値別需求，所需功效及所選用之投藥途徑而定。經 由注射（皮下或肌肉注射）或經皮或口服途徑投予新穎N- 甲 4 ( 210 X 297 公厘） 一 40 — 5 10 15 20 醯基-LGS投予人體之毎日劑量介於0.05 Bg至5 Bg活性物 質/kg體重。 如下實施例3-16及18-32例示說明根據本發明之新穎 衍生物之製備。實施例33-34例示説明蕖物製劑。實施例 1, 2及17説明本發明程序所需若干起始物質之裂備。 實施例1 脱-a/-乙醛基脱脂酸Gl^ 10 g GM*溶解於2 0 0 ml KOH 3U,於90¾進行水解反 應72小時。然後將溶液冷卻且以鹽酸諝整至PH S.5。於 放置18小時然後過濾去除沈澱脂肪酸。對水滲析，鼸 縮至500 ml及沈澱於5 乂二丙酮。 ^ 産物經乾燥，然後使用氛仿/甲酵/NHa5H (55·· 45 :10)之混合物做溶離劑進行高度解析矽騵層析。乾燥含 産物之溶離分，然後再度溶解於水中。以NaOH 0.01N讁整 至PH10,滲析，濃缩至100 ·£/ο1及於5倍髓稹之丙酮内沈 澱。脱-N-乙酵基脱脂酸産率5.7g (70%理論值）。 矽膝層析〔使用«仿/甲酵/NH35H (55 : 45 : 10)之 混合物做溶剤〕顯示産物為一醱之産物具有Rf=〇.05 ( GMt =0.35) 〇 實施例2 脱脂酸GMi 10g (6.37nM) 溶解於 200ml KOH 3N 及於 90Ϊ：水解 7 2小時。 然後冷卻溶液，以氫氛酸讕整至pH 6.5。於4TC放置 裝 打 線 肀 4 ( 210 X 297 公厘） -41 1 18小時，然後過濾去除沈澱處之脂肪酸。對水滲析，澳缩 至500Β1及於5丙酮中沈澱。 含脱-Ν-乙酵基-LGS及脫-Ν-乙醯基-GS(20%)之産物 經真空乾燥，然後再度溶解於100B1二甲基甲醛胺内。其 5 中缓慢加入2.15g (6.37 bM) 9-芴基甲氣羰基-N-羥基丁 二醛亞胺溶解於20al四氫咪喃及於室溫反應1小時。最後 加入 3nl (31.85 nM)乙酐及 〇.9nl (63.7 bM)三乙胺。30 分鐘後加入12. 啶來去除保護基。於室溫中反應18小 時及於2升丙酮内沈澱與乾燥。如此所得物料溶解於 10 NaaC〇3 1M且於60t!維持1小時。經滲析，濃縮至l〇〇Dg/Bl 及於5倍鼸積丙酮中沈濺。由脱脂酸61^(70%)及脱-N-乙 醯基脱脂酸GL所組成之産物通過以甲酵平衡之S.西法羅 斯柱（H +形式）上。以甲酵溶離，播得脱脂酸GiU ,使用 NH«C1 ΙΟβΜ與甲酵溶離。 15 含産物之溶離分經乾燥，然後再度溶解於水中。使用 NaOH 0.01Ν諏整至ΡΗ10及滲析，濃縮至lOOiDg/ml及於5倍 體積丙酮中沉澱。所得産物：約5g(理論值之60%)。 矽膠層析〔使用氰仿/甲醇/HH35N(55:45 : 10)之混 合物做溶劑〕顯示産物為一體，Rf = 〇.11。 20 實施例3 二氰乙醛基脱脂酸GiU 5 00mg(().38inM)脱脂酸GMi (根據實施例2製得）溶解於 0TC之1b1二甲基甲醯胺/甲醇1:1内，加入528iil(3.8mM) 三乙胺及579μ1(3.8πιΜ)二氮乙酐及於室溫反應72小時。於 裝 訂 肀 4 ( 210 X 297 公厘） 一 42 一 1 2Q倍體積之乙酸乙酯中沉澱，過濾及乾燥。 然後産物藉矽膠層析純化，使用氛仿/甲醇/水（6 0 :35 : 8)之混合物做溶離劑。 再度合併純溶離分，蒸發，使用NaaC〇3 1N收集，對 5 蒸皤水滲析，然後濃缩至5nl及於5Qb1雙丙酮中沉澱。 所得産物：423 mg (78.0%理論值）。 矽睡層析〔使用氮仿/甲酵/CaCla 0.2% (50: 42 :11)之混合物做溶劑〕顯示産物為單一化合物，Rf = 0.35 〇)^=0.43;脱脂酸 6^^=0.24)0 實施例4 N-—氰乙酿基脱脂酸(JMi 5 00mg (0.38nM)脱脂酸(根據實施例2製得） 溶解之Ini二甲基甲醛胺/甲酵1:1内，於0°C之溫度加入 528«1(3.81«»1)三乙胺及64^^(3.81»〇—氯乙酐及於室溫 15 反應72小時。於20倍《積g酯中沈澱.過濾及乾燥。 然後産物藉矽膠層析純化，使用《仿/甲酵/水（60: 35:8)之混合物做溶離劑。 再度合併純溶離分，蒸發，使用NaaC03lN收集，對 蒸皤水滲析，然後濃縮至5nl及於5Qnl丙酮中沉澱。 2〇 所得産物：394«(74.0：!：理論值）〇 矽膠層析〔使用氱仿/甲醇/CaC 1,0.23： (50 :42:1 1) 之混合物做溶劑〕顯示産物為單一化合物，Rf = Q.3G (GL = 0.43;脱脂酸 GM — 0.24)。 實施例5 甲 4 ( 210 X 297 公度） 一43 一 ^〇43〇〇
N氟乙醛基脱脂酸GMt ίο 15 5 00mg (Q.38BM)脱脂酸GMi (根據實施例2而製備 )溶解於2·5β1二甲基-甲醛胺内且於其中加入528ιι1(3,8 bM)三乙胺，193Bg(3.8nM)氣乙酸納鹽及 194.2bM(0.76 bM)卜甲基-2-氯utkl啶碘溶解於2.5b1二甲基甲醛胺。 於室溫反應18小時然後沈澱於50nl飽和以水之乙酸乙 酯。經乾燥及進行矽膠層析，使用氛仿/甲酵/水（60:35 :8)之混合物做溶離劑。 再度合併純溶離分，蒸發，使用NaaC03lU收集，對蒸 脯水滲析，然後濃縮至5nl及於50α1丙酮沈澱。 所得産物：481ug (92«理論值）。 矽謬層析〔使用氛仿/甲醇/CaCla 0.3S； (50 : 42 : 11 )之混合物做溶劑〕顯示産物為單一化合物，Rf = 0.33 (GL = 0.43 ;脱脂酸 GMt = 0.24)。 實施例6 N-二氰乙酵基脱脂酸GMx 500mg (0.38BH)脱脂酸GMt (根據實施例2而製備 )溶甲基-甲酵胺内且於其中加入δ28**1。·8 .ΈΖΜ >1?« mg ( 3.8 inM), 194.2πΗ(0.76βΜ)卜甲基-2·氣此啶碘溶 解於2.5ml二甲基甲醯胺 於室溫反應18小時然後沈澱於50ml飽和以水之乙酸乙 酯。經乾燥及進行矽膠層析，使用氛仿/甲酵/水（60: 35 :8)之混合物做溶離剤。 再度合併純溶離分，蒸發，使用NaaC〇3lN收集，對蒸 裝 打 線 肀 4 ( 210 X 297 公厘） ~44 ~ 2〇43〇(L? 10 15 皤水滲析，然後濃缩至5nl及於50nl丙酮中沈澱。 所得産物：365mg (84X理論值）0 矽®層析〔使用《仿/甲酵/CaCla 0.3S： (50 : 42:1 1 )之混合物做溶爾〕顯示産物為單一化合物，Rf = 〇.35 (GMi = 0.43 ;脱脂酸 GMrO.24)。 實施例7 N-甲氧基乙醯基脱脂酸GMi 50〇Bg (0.38bM)脱脂酸GiU (根據實施例2而製備 )溶解於2.5B1二甲基-甲醯胺内且於其中加入16U1( 1. 14·Μ)三乙胺，293ul(3.8nM)甲氧基乙酸及 194.2mM( 0.76bM)卜甲基-2-氯*此«碘溶解於2.5ml二甲基甲醛 胺。 於室溫反應18小時然後沈殺於5 0b1飽和以水之乙酸乙 酯。經乾燥及進行矽膠層析，使用氯仿/甲醇/水（60:35 :8)之混合物做溶離薄|。 再度合併純溶離分，蒸發，使用NaaC03lN收集，對蒸 蹓水滲析，然後濃縮至5nl及於5〇1111丙_中沈澱。 所得産物：3 25Bg (74%理論值）。 矽I®層析〔使用氮仿/甲酵/CaCla 0.3X (50:42:11 )之混合物做溶剤〕顯示産物為單一化合物，Rf = 0.36 (GMi = 〇·43 ;脱脂酸 GMrO.24)。 實施例8 N- (3-二乙胺基丙醯基）脱脂酸GMi 500i»g (0·38πΜ)脱脂酸GM,(根據實施例2而製備 甲 4 ( 210 X 297 公厘） -45 - 裝 打 線 204300
1 )溶解於2.5al二甲基-甲醯胺内 3.81^)三乙胺，35〇1^(1.911|1〇3-二乙胺基丙酸及194.2 bH (0.76dM) 1-甲基-2-氛咕匕淀碘溶解於2.5nl二甲基 甲醛胺。 i 5 於室溫反應18小時然候沉濺於50ml於100ml丙酮中沉 ： 避。經乾燥及進行矽膠層析，使用氛仿/甲酵/水（60:35 ： :8)之混合物做溶離剤。 i 再度合併純溶離分，蒸發，使用NaaC03lR收集對蒸皤 ：丨 水滲析.然後濃縮至5b1及於50b1丙酮中沉澱。 $ 1() 所得産物：411ng(75%理論值）。 ； 矽腠層析〔使用氯仿/甲酵/CaCl»0.3^(50 : 42: 11) ； 之混合物做溶劑〕顯示産物為單一化合物，Rf=〇.22(GMi ： ij =0.43 ;脱脂酸 GMi = 0.24)。 ί 實施例9 15 Ν-三瓤乙醛基脱脂酸Gl^ 5 0 0ng(0.38DM)脱脂酸GM^ (根據實施例2而製備）溶解 於lml二甲基甲醯胺/甲醇1: 1内及於0¾於其中加入161U (1.14ΠΜ)三乙胺及161«1(1·14πΜ)三氰乙酐，混合物於 室溫反應72小時。於20倍體積乙酸乙酯中沉澱，過濾及乾 20 燥。 然後産物藉矽膠層析純化，使用氦仿/甲酵/水（ 60 : 35:8)之混合物做溶離劑。 再度合併純溶離分，蒸發，使用UaaC03 1Ν收集，對 蒸餾水谚析，然後禳縮至5b1及於50b1丙酮中沈澱。 甲 4 ( 210 X 297 公厘） —.46 ~ 204300 1 所得産物：292ng (55.0%理論值）。 矽膠J1析〔使用氰仿/甲酵/CaCla0.3% (5 0 : 42 : 11) 之混合物做溶薄I〕顯示産物為單一化合物，Rf =0.37 ( GiU = 0.43 ;脱脂酸 GM, = 0.24)。 5 實施例10 N-三氛乙醛基脱脂酸GHt 裝 5 0〇1^(0.381|1〇脱脂酸6«1(根據實施例2而製備）溶解 於Ini二甲基甲醛胺/甲醇1:1内及於0¾於其中加入528ttl (3.8ιπΜ)三乙胺及16U1(1.14bM)三氟乙酐，混合物於 10 室溫反應72小時。於20倍鼸積乙酸乙酯中沉豳，過濾及乾 燥。 然後産物藉矽醪層析純化，使用氯仿/甲酵/水（ 訂 60 : 35 :8)之混合物做溶離劑。 再度合併純溶離分，蒸發，使用NaaC03 1N收集，對 15 蒸皤水滲析，然後濃缩至5b1及於50b1丙酮中沉澱。 所得産物：358ng (65.0%理論值）。 矽謬層析〔使用氱仿/甲酵/CaCla0.3%(50:42:ll) 之混合物做溶剤〕顯示産物為單一化合物，Rf=0.37 ( Gh: 0.43 ;脱脂酸 GMt= 0.24)。 20 實施例11 N-氰基乙醛基脱脂酸GMt 5 0 0ng(0. 3 8mM)脱脂酸Gfh (根據實施例2而製備）溶解 於2.5nl二甲基甲醛胺及於0C於其中加入i〇6ttl(〇.76niM) 三乙胺及氰基乙酐〔恰於使用之前經由620iDg(7.6 bM)氰 中 4 ( 210 X 297 公厘） -47 1 基乙酸與939Bg (9.12BH)二琛己基甲二醯亞胺溶解於20β1 四氳吟喃起反應及2小時後過濾去除所生成之二環己flgt而 製備〕。 於於搜動下進行缠合反應經歷18小時。一旦反應 5 完成，將溶液濃编成lnl於lOnl丙酮中沉澱及真空乾燥。 然後産物藉矽騵層析純化，使用氛仿/甲酵/水（ 60:35:8)之混合物做溶離劑。 再度合併纯溶雔分，蒸發，使用NaaC03 1N收集，對 蒸餾水滲析，然後濃縮至5ιπ1及於50ml丙酮中沉澱。 10 所得産物：2 73Bg (52%理論值）〇 矽睡層析〔使用氛仿/甲酵/CaCla 0.3% (50:42:11) 之混合物做溶劑]顯示産物為單一化合物，Rf=〇.40 ( GMi: 0.43 ;脱脂酸 GM,= 0.24)。 實施例12 15 N -馬來醛基脱脂酸GM, 50〇Bg(0.38BM)脫脂酸GtU (根據實施例2而製備）溶解 於1b1二甲基甲酵胺且於其中加入53.6« 1(0. 3aM)三乙胺及 37au(0 . 38HM)馬來酐及於室溫反蘸72小時。於20倍體積乙 酸乙酯内沉澱，過濾及乾燥。 20 。 然後産物藉矽膠層析纯化，使用氯仿/甲醇/水（ 60:35: 8)之混合物做溶離劑。 再度合併純溶離分，蒸發，使用NaaC03 1N收集，對 蒸皤水滲析，然後濃縮至5ml观於DOrt及於25al丙酮中沉 澱。 甲 4 ( 210 X 297 公厘） 所得産物：492Bg (85%理論值）。 矽醪層析〔使用氰仿/甲酵/CaCla 0.3% (50:42 : 11) 之混合物做溶劑〕顯示産物為單一化合物，Rf=0.27 ( GMi = 0.43 ;脱脂酸 GMt = 0.24)。 5 實施例13 N-羥基乙醛基脱脂酸GMi 50〇Bg(0.38nM)脱脂酸GM* (根據實施例2而製備）溶解 於2.5b1二甲基甲醛胺及於01C於其中加入106«1(1.14ιπΜ) 三乙胺，及羥基乙酐〔恰於使用之前經由173Bg(2.28nM)羥 1° 基乙酸與939Bg(9.12BM)二琿己基甲二酵亞胺溶解於20»1 四喃起反應及2小時後過濾去除所生成之二琛己而 製備〕。 0¾於攪動下進行縮合反驩經歴1δ小時。一旦反應完 成，將溶液灌縮成U1於10Β1丙酮中沉锻及真空乾燥。 15 然後産物鞴矽謬層析純化，使用氯仿/甲醇/水（ 60:35:8)之混合物做溶離劑。 再度合併純溶離分，蒸發，使用NaaC〇3 1H收集，對 蒸餾水滲析，然後濃缩至5ml及於50nljftf-g~frTirt丙酮中沉 澱。 20 所得産物：261ng (50¾理論值）。 矽睡層析〔使用氮仿/甲酵/CaCla0. 3% (5 0:42:11) 之混合物做溶劑〕顯示産物為單一化合物，Rf=〇.33 ( 0.43 ;脱脂酸 GfU: 0.24)。 實施例14 ' 甲 4 ( 210 X 297 公厘） •49
N-三溴乙醛基脱脂酸GiL s 5 0 0πg(0.38lDM)脱脂酸GM1(根據實施例2而製備）溶解 於2.5nl二甲基甲醛胺及於〇υ於其中加入528ttl(3.8BM) 三乙胺及三溴乙酐〔恰於使用之前經由2.25Bg(7.6BM)三 溴乙酸與93 9«(9. 12ηΜ)二環己基甲二醯亞胺溶解於20ml 四氳味喃起反應及2小時後過濾去除所生成之二琛己蝝而 製備]。 10 於»動下進行结合反應經歷18小時。一旦反應完 成，将溶液濃结成1b1於IQbI丙酮中沉澱及真空乾燥。 然後産物箱矽謬靥析鈍化，使用《仿/甲酵/水（ 60:35:8)之混合物做溶雕劑。 再度合併純溶離分，蒸發，使用NaaC〇3 1N收集，對 蒸餾水滲析，然後濃縮至5b1及於50ml及於SSrl·丙酮中沉 濺。 15 所得産物：26 7Bg (44%理論值）。 矽腰層析〔使用氛仿/甲醇/ CaCU0.3% (5 0:4 2:1 1) 之混合物做溶劑〕顯示産物為單一化合物，Rf =0.37 ( Gls 0.43 ;脱脂酸 6Μ1= 0.24)。 實施例15 20 Ν-(12-羥基硬脂醯基）脱脂酸GMt 5 0〇1^(0.3 71111〇脱-[<-乙醛基脱脂酸(5»11(根據實施例1 而製備）溶解於5ml二甲基甲醛胺内且於其中加入Ini Triton X 100及104w1(0.75bid)三乙胺。維持搜動至獲得 澄清溶液為止。然後於其中加入25al四氫*欠喃其中含有 甲 4 ( 210 X 297 公厘） _ 50 一 s〇4|&^ 1 598mg(1.5)DM) N-羥基丁二醯亞胺與12-羥基硬脂酸所生成 ； 之酯〔經由870軺羥基硬脂酸溶解於15ffll無水四氫呔喃與 | 10.5ng二（N-丁二醛亞胺基）硪酸酯及550 W 1三乙胺於40nl :
丙酮於室溫反應18小時而製備〕。 I 5 於室溫反應24小時。最後將溶液濃縮及於乙酸乙鹿内 ：丨
重覆沉澱。 I 粗産物藉矽睡層析純化，使用《仿/甲酵/水（60:30 ! :6)之混合物做溶劑。 ：丨 然後如此所得之中間物脱-Mt-乙睡基-Ha-(12-羥基硬 $ 10 脂醛基）脱脂酸Gl^使用乙酐溶解於氱仿/甲酵1:1採用 | 1:1: 1之其耳比進行N-乙醛基化。 ：丨 一旦反應完成，將産物乾燥使用2b1氦仿/甲醇1:1收 ί *r 集及於Hnl丙酮中沉醱。 ^ 然後産物藉矽醪層析純化，使用氰仿/甲醇/水（ ：: 15 60:35:8)之混合物做溶離劑。再度合併纯溶離分，蒸發， ί 使用NaaC03 IN收集，對蒸蹓水滲析，然後濃縮至5ml及 + 及於50nl丙酮中沉澱。 ί N-(12-羥基硬脂醯基）脱脂酸GiL之産率：217mg (34.5 ί %理論值）。 ： 20 矽膠層析〔使用氮仿/甲醇/CaCla0.3% (6 0:35 : 8) ΐ 之混合物做溶劑〕顯示産物為單一化合物，Rf= 0.39 ( ! (脱-N-乙醯基脱脂酸GMt= 0·05 ,脱-N-乙醯基GMi= 0.20 j ,GMi 0,40)。 ； 實施例16 ·: 甲 4 ( 210 X 297 么，厘） 一 51 — ^04300 _ 1 N- ( 3-氱待戊趦基）脱脂酸GMt ： 500ng(0.38BM)脱脂酸Glh (根據實施例2而裂備）溶解 ί 於lBl二甲基甲醯胺/甲酵1:1内且於室溫於其中加入 i 1.160μ1(7.6βΜ)三乙胺及 99〇μ1(7.6πΜ)3-氮持戊醯氮。 ^
5 於室溫進行縮合反應經歴4小時。一旦反龌完成溶液 I 於l〇Bl飽和以水之乙酸乙酯内沈澱，過濾及真空乾燥β 丨: 然後産物籍矽謬層析純化，使用氯仿/甲酵/水（60: : 35: 8)之混合物做溶離劑。 ：丨 再度合併純溶離分，蒸發，使用NaaC03lN收集，對蒸 ^ 10 播水滲析，然後濃缩至5η1及於50nl丙醑中沈澱。 ί 所得産物：404ng ( 743；理論值）。 ί 矽踴層析〔使用氛仿/甲酵/CaCla 0.32 (50:42 : 11 ： ir )之混合物做溶商(〕顯示産物為單一化合物.Rh〇.33 ( GMt ： = 0.43 ;脱脂酸 61^=0.24) β :: 15 實施例17 ： 經由從牛腦組鐵抽取而製備GS混合物（GA) f 從動物體取得之定量牛腦皮質於磷酸鹽缓衝液於ΡΗ ί 7.6中均化，然後加入6倍體積四氳 < 喃，將所得混合物 ·ί 離心。上清液再度使用四氫《«久喃抽取兩次。離心後非極性 i 20 物料經由使用乙醚分配而去除•含水一四氫咲喃相引進離 | 子交換柱，以5乙醇平衡。氫氣化鋇加入來自管柱之流 ΐ 出流，同時加入四倍體積冰冷乙醇。於冰冷條件下經歴18 ί 小時後收集沈澱，然後沈澱溶解於水中後略微以鹽酸酸化 ί 。如此所得溶液經滲析及冷凍乾燥。此時産率約為Q.6ing ： 一52 一 肀 4 ( 210 X 297 公厘） £04300 ίο GS粗製混合物/ g所用神經組織。 冷凍乾燥粉末分散於20倍饈積氮仿一甲酵2:1内。一 旦所得溶液過濾而變成完全澄清之後，經由加入〇 . 2倍髓 積第化鉀於水之0.88%溶液而分配。上相經分離，逡析及 冷凍乾燥。终産率約為〇.3ng GS鹽純混合物/g腦组嫌。 所得GS混合物可使用矽酸柱及使用甲酵一氰仿混合物溶離 f隹於各部分中分別代表純GS (如上述）。平*^^^組成 苷脂 Gw , ^40%神經節耱苷脂G/h，21%神逢節糖苷 16%神經節糖苷脂 實施例18 LGS混合物之N-二氯乙醯基衍生物 裝 15 1UGS之製備 l〇g根據例17所得之GS混合物溶解於200ml KOH 3N内 及於901C水解72小時。然後將溶液冷卻及以鹽酸調整為PH 6.5。於4¾放置18小時，然後過濾去除沉澱出之脂肪酸。 對水摻析及濃縮成50 On 1,於5升丙酮中沉澱。 含有脱-N-乙醯基-LGS及脱-N-乙醯基-GS(20% )之産 物經真空乾燥然後再度溶解於l〇〇nl二甲基甲醛胺内。然 後其中缓慢加入2. 15g(6.37nM)9-芴基甲氣羰基-N-羥基丁 二醛亞胺溶解於20ml四氳吹喃，全體於室溫反應1小時。 最後其中加入3β1(31.85πΜ)乙酐及0.9Bl(63.7mM)三 乙胺。30分鐘^入12.5BlHfei淀來去除保護基。於室溫反 應18小時及於中沉澱與乾燥。如此所得物料溶解於 NaaC〇3及於60°維持1小時。經滲析，瀑縮成l〇〇mg/nl及 訂 線 甲 4 ( 210 X 297 公厘） -53 - 5 10 15 20 於5倍醱積丙酮中沉澱。 由LGS(70% )及脱-H-乙醛基-LGS所組成之産物通過於 甲酵中平衡之S.西法羅斯柱（H +型）。脱乙醯基-LGS使 用甲酵溶離而LGS使用ΝΗ“1 ΙΟπΜ於甲酵溶離。 含産物之溶離分經乾燥然後再度溶解於水中。使用 NaOH 0.01Ν諝整為ΡΗ10,滲析.濃缩成l〇〇Bg/Bl及於5倍 體積丙酮中沉澱。 所得産物：4.7g(55%理論值）。 2)二氯乙醛基衍生物之裂備 5 0 0nig(0.31iDM)先前製得之LGS混合物溶解於ini二甲 基甲醯胺-甲醇1: 1,於〇它溫度加入4 30 «1(3.1bM)三乙 胺基及4 72 wl(3.1aM)二氯乙酐。然後全鼸經過過濾及乾 燥。 經由於甲酵平衡的S-西法羅斯（H +型）柱上層析而從未 反應之化合物中分離醛基化産物。二氮乙醛基衍生物於甲 醇中溶離，乾燥，使用NaaC〇3收集，滲析，澳缩成2.5ml 及於25ml丙酮中沉澱。 所得産物：345ing(64%理論值）。 實施例1 9 N-甲氣基乙醯基脱脂酸GM1之甲基酯 5 0 0衫（0.36181〇恥甲縝基乙醒基脱脂酸0«1鈉鹽（根據 實施例7而製備）溶解於5nl N-甲基》成咯烷酮，於其中加 入44.5«1(0.72〇|)〇甲基碘。 於室溫反應3小時，於乙酸乙酯内沉澱，過濾及真空 裝 訂 線 甲 4 ( 210 X 297 公厘） -54 - 然後産物藉矽膠層析純化，使用氮仿/甲醇/水 60:3 0:6)之混合物做溶雞劑。 再度合併纯溶離分，蒸發，再度溶解於2.5al氮仿/ 5 甲酵1:1及於25b1丙酮中沉澱。 所得産物：457ag(74%理論值）。 矽膠層析〔使用氛仿/甲酵/CaCla 0.3%(50:42 : 11 )之混合物做溶離劑〕顯示産物為單一化合物，Ri =0.4 (N-甲氣基乙酵基脱脂酸GM1= 0.36)。 10 實施例20 N-甲氱基乙醛基脱脂酸GH1之内酯 5 0 0η£(0.3 6αΜ) N-甲氣基乙醛基脱脂酸GH1納鹽（根據 實施例7而製備）溶解於4¾之5al 甲基B比咯烷酮，於其 中加入44.5W l(〇.72aM)甲基碘烷酮及與55w 1(0.4πΜ)三 15 乙胺及10 0ng(0.41mM)卜甲基-2-氰岵10®碘反應。 反應進行4小時且有定量産率。産物經由加入50ml丙 酮沉澱，然後過濾及使用5b1氰仿/異丙醇1:1收集，然後 於25nl丙酮中再度沉澱。 所得産物：483ng(98%理論值）。 2〇 矽膠層析〔使用氱仿/甲醇/paCl2 0.3% (50:42 : 1 1 )之混合物做溶離劑〕顯示産物為單一化合物，Rf =0.43 (N-甲氧基乙醛基脱脂酸GM1= 0.36)。 莨施例2 1 N-甲氱基乙醯基脱脂酸GM1之2-丁醯胺 f 4 ( 210 X 297 公厘） -55 -
Js^L__ 1 5 0 0Bg(0.36nM) N-甲氧基乙醯基脱脂酸GMl之甲基酯 ； 溶解於5b1峨啶且於其中加入2.5nl 2-丁肢。於室溫反應 | 72小時然後於旋轉蒸發器内乾燥，使用5nl氛仿/甲醇1:1 ： 收集及於25»1丙酮中沉澱，然後過濾及真空乾燥。 ί 5 然後産物藉矽腰層析純化，使用氯仿/甲酵/水（ i 6 0 : 25 : 4)之混合物做溶離劑。 ί 再度合併純溶離分，收集，再度溶解於2.5ml氮仿/ : 甲醇1: 1及於25b1丙酮中沉澱。 1 所得産物：371mg(72%理論值）。 φ 10 矽睡層析〔使用氰仿/甲酵/CaCla 0.3% (50: 42 : 11 ； )之混合物做溶離劑〕顯示産物為單一化合物，Rf= 0.48 ： (N-甲氣基乙醛基脱脂酸GM1之甲基酯=0.4)。 ί
iT 實施例22 ； 甲氧基乙醯基脱脂酸GM1之甲基酯之金乙醯基化物 ξ 15 500ng(0.36inH) Ν-甲氱基乙醛基脱脂酸GH1之甲基酯 i 溶解於且於其中加入2.5b1新餾乙酐，混合物於室 f 溫榭動72小時。一旦反應完成藉旋轉蒸發去除溶液，殘渣 分配於10nl冰冷水及ΙΟβΙ乙酸乙酯間；乙酸乙酯於冷HC1 ： 1M使用水及NaaC0a 1M溶液洗滌。有機相以硫酸鈉脱水， ：: 20 經蒸發，殘渣藉矽膠層析純化，僳使用氣甲烷/乙酸乙酯 /異丙醇（7 0:30·· 45)之混合物。 j
重新合併純溶離分，收集，再度溶解於5nl乙基酯内 I 及於25ml正-己烷中沉澱。 ί 所得産物：450mg(61%理論值）。 ·: -56 - 甲 4 ( 210 X 297 公厘） _ 1 矽膠層析〔使用氛仿/甲醇/乙酸乙酯（70: 10:30)之 混合物做溶離劑及乙酸乙酯/異丙酵（95: 5)之混合物做溶 離〕顯示産物為單一化合物分別具有Rf =〇.45及0.26。 實施例23 5 LGS混合物之N-二第乙醛基衍生物之内酯 50〇Bg(0.29nM)LGS納S (實施例18)之混合物之N-二氛 乙醯基衍生物溶解於4^0之5b1 H-甲基咯烷酮内及與 44.5 wl(〇.32nM)三乙胺及 82.2ng(〇.32：U-甲基-2-氰》上匕 啶碘反應。於反臛4小時獲得定量産率。産物經沉溉加 1〇 入50β1丙酮，過濾，使用5b1二氛甲烷/異丙酵1:1收集， 然後於25b1丙銅中再度沉澱。 所得産物：457ng。 由紅外光薄及薄層層析證實存在有内_。 使用KBr粒進行IR光譜術證實1750CB·1存在有典型之 15 酯鍵。 矽膠層析〔使用氛仿/甲醇/CaCla 0.3%(50 : 4 2 : 1 1 )之溶劑〕顯示産物具有Rf=〇.43-0.60。所得産物之Rf 高於起始化合物混合物（<〇·35)。 因此層析驗證完全不存在有最初産物。使用〇. IN 2〇 NaaC03之溶液於60Ό處理1小時，使得酯鍵水解因而獲得 原始GS衍生物之混合物。 實施例24 LGS混合物之N-二氣乙醯基衍生物之甲基酯 50〇1^(0.3〇11»〇1^3混合物之^-二氛乙醛基衍生物之内 甲 4 ( 210 X 297 公厘） —57 _
1 酯混合物（如實施例2 3而製備）溶解於2 0ια1亞甲基氮及甲酵 4:1之無水混合物内。 此溶液中加入32.4ng (0.60ΠΜ)甲酵酸納溶解於5b1無 水甲醇，混合物回流2小時。 5 一旦完成反應混合物使用DOWEX AG 50x8無水樹脂（ H +型）中和，遇濾分離樹脂且以甲酵洗滌，將溶液蒸乾， 殘渣收集於5b1亞甲基氛/甲酵1:1 ,反應産物經由倒入 25nl丙酮内而沉澱。 然後粗産物於西法笛斯-DEAE乙酸酯型Α-25上藉層析 10 純化，使用氱仿/甲酵/水30 : 60:8之混合物做溶劑 Ο 收集中性溶離分，經蒸發於水中滲析及再度蒸乾。殘 渣溶解於15β1氯仿/甲酵1:1内，産物以75β1丙酮沉澱。 産率430ng。 15 於KBr粒上進行之IR光譜術顙示於1750 cn 有典型 之酯鍵。 矽膠屬析〔使用氛仿/甲醇/CaCU 0.3% (5 0 : 4 2:1 1 )混合物做溶劑〕顯示産物代表LGS之N-二氛乙醯基衍生 物之甲基酯混合物，具有Rf為0.40-0.54 (GS衍生物，納發 20 之混合物之Rf彡0.35。 完全轉移酯化作用可藉下述方法獲得證實：經由測定 所得烷氣基與唾液酸基間之分子比例，經由定量上方空間 氣相層析測定於60T使用0 . IN Na2 (：03溶液處理1小時後所 放出之甲醇（該處理使得所有酯鍵皆切斷），及經由 裝 訂 線 甲 4 ( 210 X 297‘;i：厘） -58 £04300
5 10 15 20
Svennerhola方法來測定N-乙睡基神經胺酸。 實施例25 LGS混合物之N-二氨乙酵基衍生物之2-丁睡胺 如實施例23所製備之500ng(0.30BM)LGS混合物之N-二 氰乙醛基衍生物之内酯混合物溶解於2.5b1無水《比啶。溶 液中加入1.25ml 2-丁胺，混合物於25^於無水條件維持 播動24小時。 一旦反應完成，蒸發去除溶劑，使用5d1氮仿/甲酵 1:1收集殘渣及使用251111丙_沉澱。 如此所得粗産物使用l〇ml NaaC03 1%於25C處理30 分鐘來水解殘餘酯基，然後於水中滲析。溶液經真空乾燥 ，殘渣使用西法雷斯-DEAE A-25(乙酸酯型）使用《仿/甲 醇/水30:60:8之混合物做溶劑層析純化。 中性溶離分經蒸乾，滲析，再度蒸發溶解於氨仿/甲 酵1: 1内，産物使用25ml丙酮沉澱。産率425mg。 IR譜於1750 cm·1不再具有典型酯鍵。 矽膠層析，使用氯仿/甲酵/CaCla 0.3%(50 : 42:1 1 )之混合物做溶劑及使用間苯二酚試劑测定顯示産物代表 LGS之N-二氣乙醛基衍生物之2-丁醯胺混合物，具有Rf = 0.48-0.71(GS衍生物混合物之Rf,鈉鹽，<0.35)。 實施例26 LGS混合物之N-二氮乙醯基衍生物之甲基酯之 全乙醯基化衍生物 5 0 0188(0.2 91«»1)1^3混合物之11-二氮乙醛基衍生物之甲 裝 打 線 甲 4 ( 210 X 297 公>4 ) —59 一 1 基酯混合物（於實施例24而製備）溶解於5ml ，其中加 ： 入2·5β1新餾乙酐，混合物於室溫攪動72小時。 ί —旦反應完成旋轉蒸發去除溶劑，殘渣分配於l〇Bl冰 ：: 冷水與l〇Dl乙酸乙酯間。乙酸乙酯使用冷HC1 1M,水及 ί 5 NaHC〇3 1M溶液洗滌。有機相使用硫酸納脱水，蒸發，殘 ：: 渣藉砂膠靥析純化，係使用二氣甲烷/乙酸乙酯/異丙酵 I 70:30:45之混合物。 ：: 重新合併純溶離分，收集，再度溶解於5nl乙酸内及 ：: 於25nl正-己烷中沉溅。 ^ 10 所得産物：435ng。 i 矽醪層析，使用氯仿/甲酵/乙酸乙酯70 : 10 : 30)之 ·| 混合物做溶劑及乙酸乙酯/異丙酵95: 5之混合物做溶繭， I *ϊ 顯示産物分別具有Rf 0.23-0.54及0.01-0.52。 ：. 實施例2 7 ： 15 N-(3,3-二氯特戊睡基）-脱脂酸GM1 ： 50〇Bg(0.38nM)脱脂酸GM1溶解於2.5ml二甲基甲醛胺 且於其中加入 528 w 1(3.8ηΜ)三乙胺，65〇Bg(3.8nM) 3, 3- ： 二氮待戊酸及194.2mg(0.7 6inM)氯甲基•比啶碘溶解於2.5ml ： 二甲基甲醛胺。於室溫反應18小時然後於飽和以水之乙酸 I 2〇 乙酯内沉澱。産物經乾燥然後藉矽膠層析純化，使用氛仿 I /甲醇/水60:35:8之混合物做溶離劑。 i 匯集純溶離分，經蒸發然後使用NaaC(D3 IN收集，對 ί 蒸餾水滲析然後濃縮成5ml及於5Qml丙酮中沉澱。所得産 i 物：365ng(84%理論值）。 ： 甲 4 ( 210 X 297 公厘） 一 60 — ao«oo
矽膠層析〔使用氛仿/甲酵/CaCla 0.3% 50 : 42 : 11 所生成之溶劑〕顯示單一化合物，Rf=0.36。 實施例28 H-(飫哝酿甚）-脫酴GM1
S 裝 500mg(0.38nM)脱脂酸GM1溶解於2.5nl二甲基甲醒胺 内，於室溫加入528 w1(3.8bM)三乙胺，S48Bg(1.9BM) FH0C-酥胺酸及194.2mg(0.76Bi〇氰甲基处》：啶碘溶解於2.5 Bl二甲基甲醛胺。於室溫反應18小時，然後加入2BlCi!K啶 來去除保護基（FM0C)。再度於室溫反應3小時然後於100B1 10 丙酮中沉澱。遇濾産物及乾燥。然後所得産物拜矽膠層析 純化，使用氰仿/甲酵/水60:35:8之混合物溶離。 打 匯集純溶離分，經蒸發然後使用NaaC〇3 1N收集，對 蒸皤水滲析然後濃缩成5»1及於50·1丙酮中沉澱。所得産 物：323Bg(60%理論值）。 15 矽醪層析〔使用氛仿/甲酵/CaCla 0.3% 50 : 42 :11 線 所生成之溶劑〕顯示單一化合物，Rf=〇.29。 實施例29 N-f二田甚甘粧醣酴GM1 5 0 0ng(0.38aM)脱脂酸GM1溶解於2·5β1二甲基甲醯胺 20 内，於室溫加入 528w 1(3.8βΜ)三乙胺，196ng(1.9nM)二 甲基酑胺酸及194.2|^(0.7 61«1〇氮甲基|^啶碘溶解於2.51111 二甲基甲醯胺。於室溫反應18小時，然後加入100ml丙酮 中沉澱。過濾産物及乾燥。然後所得産物藉矽膠層析純化 ，使用氛仿/甲醇/水60: 35: 8之混合物溶離。 甲 4 ( 210 X 297 公厘） —61 — 1 匯集純溶離分，經蒸發然後使用NaaC03 IN收集，對 蒸餾水接析然後濃缩成5nl及於50ml丙酮中沉澱。所得産 物·· 309ng(58% 理論值）。 矽膠層析〔使用氮仿/甲酵/CaCla 0.3% 50:42:1 1 5 所生成之溶劑〕顙示單一化合物，Rf= 0.11。 實施例30 «-(戍二醣甚卜脫8»酴「1><1 5 00ng(0.38BM)脱脂酸GM1溶解於1b1二甲基甲醛胺/μ 1 甲酵1:1,及於Ot：加入uitl.l4aM)三乙胺及130ng(1.14 10 BM)戊二酐。於室溫反應72小時，然後於20倍臞積乙酸 乙酯内沉澱，過濾及乾燥。 然後産物藉矽睡層析純化，使用氦仿/甲醇/水 60 : 35 :8之混合物溶雜。 匯集純溶離分，經蒸發然後使用Na,C03 1N收集，對 15 蒸蹯水滲析然後瀑縮成5b1及於5QB1丙酮中沉澱。所得産 物：217ng(40.0% 理論值）。 矽膠層析[使用氛仿/甲酵/CaCla 0.3% 50 : 42:11 所生成之溶劑〕顯示單一化合物，Rf=〇.30。 實施例31 2〇 N-(氣二藴乙瞇甚脫脂酴GM1 5 0 0ng(0.38nM)脱脂酸GM1溶解於lnl二甲基甲醯胺/μΛ 甲酵1:1,及於ου加入16lfl.l4iBM)三乙胺及2 7 7mg(1.14 nH)氛二氣乙酐。於室溫反應72小時，然後於2 0倍體積 乙酸乙酯内沉濺，遇濾及乾燥。 裝 訂 線 肀 4 ( 210 X 297 公厘） -62 - 1 然後産物藉矽謬層析純化，使用氣仿/甲醇/水 60:35 : 8之混合物溶離。 匯集純溶離分，绖蒸發然後使用NaaC〇3 1H收集，對 蒸蹯水滲析然後灌缩成5nl及於50al丙酮中沉澱。所得産 5 物：333ig(62,0炻理論值）。 矽膠層析〔使用氯仿/甲酵/CaCla 0.2% 50:42:1 1 所生成之溶劑〕顯示單一化合物，Rf=〇.37。 實施例3 2 N- f里白胺醣甚）-脱酴ΠΜ】 10 500ng(0.38BK)脱脂酸GK1溶解於2.5al二甲基甲醛胺 内.於室溫加入528 w1(3.8bM)三乙胺，671ng(1.9iaM) FMOC-異白胺酸及194.2ng(0.76inM)氰甲基从啶碘溶解於 2.5b1二甲基甲醯胺。於室溫反應18小時，然後加入2Bliilk 啶來去除保護基（FMOC)。再度於室溫反應3小時然後於 15 lOOal丙酮中沉锻。過濾産物及乾燥。然後所得産物藉矽 膠層析純化，使用氯仿/甲酵/水60:35:8之混合物溶離 Ο 匯集純溶離分，經蒸發然後使用NaaC〇3 1N收集，對 蒸蹓水滲析然後瀑縮成5b1及於50al丙酮中沉澱。所得産 20 物：298Bg(55% 理論值）。 矽暖層析〔使用氛仿/甲酵/CaCU 0.3% 5 0 : 4 2 : 1 1 所生成之溶劑〕顯示單一化合物，Rf= 0.28。 實施例33 呈注射用溶液之藥物製備 裝 打 甲 4 ( 210 X 297 公廑） —63 —
1 製劑1號-2nl小瓶含有： -活性物質 mg 5 -氯化納 -檸樣酸鹽缓衝液 PH6於 ng 16 5 蒸皤水至睡積為 ml 2 活性物質偽S自實施例3,4及18中之任一 製劑2號-2b1小瓶含有： 種GS衍生物。 -活性物質 Bg 50 -氛化納 ng 16 10 -檸檬酸發缓衡液 PH6於 蒸皤水至»稹為 η 1 2 活性物質傜選自實施例5,6及7中之任一種GS衍生物。 製劑3號-4inl小瓶含有·· -活性物質 ng 100 15 -氯化納 -檸樣酸鹽缓衝液 ΡΗ6於 ml 32 蒸蹓水至睡積為 ml 4 活性物質偽蘧自實施例9,1〇及14中之任一 種GS衍生物。 製劑1,2及3號可藉前逑任一種途徑直接投予動物膜或 20 人體。此外調配可含蕖物活性物質。 實施例34 呈雙瓶形式而製備之藥物組成物 本例之製劑係以雙瓶形式製備。第一 瓶含有呈冷凍乾 燥粉末形式之活性物質其數量介於10%至90%重量比間， 甲 4 ( 210 X 297 公厚） 一64 一 1 連同藥物可接受性賦形劑及甘胺酸或甘露耱酵。第二瓶含 有溶劑呈氛化納及檸樣酸發缓衝液之溶液。兩瓶内容物恰 於使用前混合，冷凍乾燥活性物質， 快速溶解而生成注射 液。含活性物質冷凍乾燥粉末之玻璃瓶所代表之第物劑型 5 為本發明之較佳劑型。 条统1號 a.2nl 小瓶冷凍乾燥物質含有： -活性物質 ng 5 -甘胺酸 虜g 30 10 b.2nl 小瓶溶劑含有： -氣化鈉 16 -擰樺酸發级衝液於蒸皤水至 1 2 活性物質係S自實施例19,20及2 2中之任一種GS衍生物。 条统2號 15 a.3ml 小瓶冷癉乾燥物質含有： -活性物質 mg 5 -甘霉糖醇 mg 40 b.2ml 小瓶溶劑含有： -氛化鈉 ng 16 20 -掙樺酸鹽緩衝液於蒸餾水至 ml 2 活性物質係選自實施例2 3及24中之任 一種GS衍生物。 条統3號 a.3»l 小瓶冷凍乾燥物質含有： -活性物質 isg 50 乎 4 ( 21.0 X 297 公厘） 一 65 —
1 -甘胺酸 Qg 25 b . 3 π 1 小瓶溶劑含有： -氛化納 mg 24 -檸檬酸鹽缓衝液於蒸皤水至 ο 1 3 5 活性物質偽選自資施例26 GS之衍生物。 条統4號 a.3nl 小瓶冷凍乾燥物質含有： -活性物質 mg 50 -甘露糖酵 ng 20 k 10 b.3inl 小瓶溶劑含有： -氯化鈉 mg 24 -檸様酸鹽缓衝液於蒸餾水至 活性物質偽選自實施例26之GS衍生物。 条統5號 n 1 3 ir 15 a.5nl注射瓶冷凍乾燥物質含有： -活性物質 mg 150 -甘胺酸 mg 50 b.4ml 小瓶溶劑含有： -氛化納 mg 32 20 -檸樣酸鹽缓衡液於蒸餾水至 ml 4 活性物質係選自實施例23及24中之任一 種GS衍生物。 糸統6號 a.5ml 小瓶冷凍乾燥物質含有： -活性物質 mg 100 肀 4 ( 210 X 297 公厘） 一6 6 1 -甘露糖酵 ng 40 b.4ml注射瓶溶劑含有： -氛化納 ag 3 2 -檸樺酸鹽缓衝液於蒸皤水至 al 4 5 活性物質偽選自實施例23 , 24/及26中之任一種GS衍生物。 10 15 20 裝 打 線 甲 4 ( 210 X 297 公厘） -67

Claims (1)

  1. A7 B7 C7 D7 π、申請專利範团 第78109297號申請案申請專利範团修正本 修正日期：81年4月 1. 一種Ν-醛基-脱脂酸神經節糖苷脂，其中之醛基傺由 選自下列之一或多個搔性基所取代之脂肪族之Ca-12 醛基： -氰，溴及氰； -游離羥基； -ChS烷氣基； -游離氲硫基或以(^-*脂肪族酵醚化之氳硫基； -羧基； -游離磺基； -IS 基； -游離或以“-s烷基取代之胺基； 或匕_6烷基或苯基-Ctq烷基之醏類及/或醛胺類， 該藏胺類偽衍生自氨或該N-醛基-脱脂酸神經節醣苷 酯之唾液酸羧基之C:-la烷基胺、該N-醛基-脱脂酸 神經節糖苷脂之内酯類、該N-醛基-脱脂酸神經節苷 糖脂金醛基化衍生物、具有酸基之^醛基-脱脂酸神 經節苷脂之金屬鹽或有基鹼鹽，該N-醯基-脱脂酸神 經節糖脂之酸加成鹽及該N-醛基-脱脂酸神經節糖苷 脂混合物之對應衍生物。 2. 如申謓專利範圍第1項之N-醛基-脱脂酸神經節糖苷 脂，其中該醛基偽從至多具有12硪原子之直鐽酸衍生 而得。 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)甲4规格（210 X 297公釐〉 (請先閩讀背面之注意事項再塡寫本頁) _裝_ 訂. 烴濟部中央標準局8工消#合作社印製 -68- 絰濟部中央標準局R工消費合作社印製 汕4_ .: A7 ------D7_六、申請專利範困 3. 如申請専利範圍第1項之Ν-醛基-脱脂酸神經節糖苷 . 脂，其中該醛基僳從支鐽酸衍生而得，其中側鐽為至 多4硪原子之烷基及酸至多具有12硪原子。 4. 如申請專利範圍第1、2或3項之Ν-醛基-脱脂酸神 經節糖苷脂，其中1至3極性基取代於醛基上。 5. 如申請專利範圍第1項之Ν-醛基-脱脂酸神經節糖苷 脂，其中該Ν-醛基偽衍生自一二-或三氮酸或衍生 自一 二-或三氣酸。 6. 如申請專利範圍第5項之Ν-醛基-脱fl旨酸神經節糖苷 脂，其中該N-酵基僳衍生自2-位置具有氯原子或溴原 子之酸。 7. 如申請專利範圍第6項之N-醯基-脱脂酸神經節糖苷 f旨，其中該H-醛基係衍生自二氮乙酸，三氮乙酸或其 氣或溴類似物。 8. 如申諳專利範圍第1項之N-醛基-脱脂酸神經節糖苷 脂，其中該N-醛基偽衍生自一-羥基丙酸，一-羥基丁 酸或一-羥基戊酸或衍生自其與Cps脂肪族酵所生成 之醚。 9. 如申請專利範圍第1項之醛基-脱脂酸神經節糖苷 脂，其中該N-醛基偽衍生自選自下列之任一種一-胺 基酸：胺基乙酸，2-胺基丙酸，2-胺基丁酸，3-胺基 丁酸，2-胺基戊酸，4-胺基丁酸及4-胺基戊酸。 10·如申謓專利範圍第1項之N-醯基-脱脂酸神經節糖苷 脂，其中該醯基偽衍生自氫硫基乙酸，2-氳硫基丙 (請先閱讀背面之注意事項再蟥寫*.頁) ί裝· 訂· f 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)甲4规格（210 X 297公釐> -69- 經濟部中央螵準局R工消费合作社印製 Α7 Β7 C7 D7 穴、申請專利範团 酸或2-氳硫基戊酸或衍生自其與低级脂肪族一價酵所 生成之_。 Π.如申請專利範圍第1項之N-醛基-脱脂酸神經節糖苦 脂，其中該N-醛基偽衍生自丙二酸，戊二酸，順丁嫌 二酸，蘋果酸，丁二酸，反丁烯二酸或其與低级脂肪 族酵所生成之18。 12. 如申誚專利範圍第1項之N-醛基-脱脂酸神經節糖苦 脂，其中該N-醛基偽衍生自硫基乙酸，2-氫硫丙酸， 2-硫基丁酸或2-硫基戊酸及其與匕-^脂肪族酵所生成 之酯。 13. 如申請專利範圍第1項之N-醛基-脱脂酸神經節糖苷 脂，其中該N-醛基傺衍生自氰基乙酸，2-氰硫丙酸， 2-氰基丁酸或2-氰基戊酸。 14. 如申請專利範圍第1項之N-醛基-脱脂酸神經節糖苷 脂，其唾液酸羧基酯偽衍、生自至多6磺原子之脂肪族 酵或苯甲酵。 15. 如申請專利範圍第1項之N-醛基-脱脂酸神經節糖苦 脂，其唾液酸羧基酵胺係衍生自至多12硪原子之胺類 Ο 16. 如申請專利範圍第14項之N-醛基-脫脂酸神經節糖苷 脂，其唾液酸醋傜衍生自至多4硪原子之脂肪族酵。 17. 如申諳專利範圍第15項之N-醛基-脱脂酸神經節糖苷 脂，其唾掖酸醛胺傷衍生自以具有至多4磺原子之院 基所取代之胺。 本·纸張尺度適用中國國家標準（CNS)甲4规格（210 X 297公釐> -70- (請先聞讀背面之注意事項再填寫本頁) ·—裝· 訂. A7 B7 C7 D7 a、申請專利範团 13.如申請専利範圔第1項之N-醛基-脱脂酸神經節耱苦 脂，其内酯傷經由以醏羥基内酯化唾液酸羧塞而生成 者。 19. 如申請專利範圍第1項之N-醛基-脱脂酸神經節糖苷 脂，其内酯含有唾液酸羧基舆唾液酸羥基間所生成之 丙酯環。 20. 如申請專利範圍第18或19項之醛基-脱脂酸神經節 糖苷脂，其内酷傜經由於非水性有機溶劑内於無水條 件下，内酯化劑作用於申請專利範圍第1項中所定義 之N-醛基-脱脂酸神經節糖苷脂而得者。 21. 如申請專利範圍第18或19項之N-趦基-脱脂酸神經節 糖苷脂.其内酯傷經由乙酸或三氛乙酸或可溶於水或 水性介質之甲二醛亞胺，作用於如申請專利範圍第1 項中所定義之N-醛基-脱脂酸神經節糖苷脂而得者。 22. 如申請專利範圍第1項之醛基-脱脂酸神經節糖苷 脂.其金醛基化衍生物.偽衍生自至多6磺原子之脂肪 酸。 23. 如申諳專利範圍第22項之N-醛基-脱脂酸神經節糖苷 脂，其金酵基化衍生物傜衍生自甲酸，乙酸.丙酸， 丁酸，戊酸，己酸或癸酸。 24. 如申請專利範圍第1項之M-醛基-脱脂酸神經節糖苷 脂，其具有選自Gmi，Gm 3，GDia, Gdii>及G"Tlb中之任 一神经節糖苷脂做為基底神經節糖苷脂。 25. 如申謓專利範圍第24項之醛基-脱脂酸神經節糖苷 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)甲4规格（210 X 297公釐} (請先«讀背面之注意事項再塡寫本荑) .裝. 訂· 經濟部中夫揉準局8工消费合作社印製 缦濟部中央標準居S工消费合作社印製 〜 A7 B7 ___D7__ 六、申請專利範困 脂之混合物。 _ 26.—種N-醛基-脱脂酸神經節糖苷脂，偽選自下列任一 者： -N-二氯乙醛基脱脂酸 Gm1 -N-氮乙酷基脱脂酸 Gm1 -N-3-氯特戊酵基脱脂酸 Gm1 -N-羥基乙醛基脱脂酸 Gm1 -N-三《乙醛基脱脂酸 GM1 -N-三溴乙醛基脱脂酸 Gm1 -N-氳硫基乙醛基脱脂酸 GM1 -H-順丁烯二醛基脱脂酸 GM j -NM2-羥基硬脂趦基脱脂酸 GM1 -H-2-羥基丁醛基脱脂酸 Gm! -Η-想乙醛基脱脂酸 GM1 -N-二《乙醛基脱脂酸 Gmi -M-3-胺基丙醛基脱脂酸 Gm1 -N-«基乙醛基脱脂酸 GM1 -N- (3-二乙胺基丙醛基）脱脂酸 Gm1 -N-胺基乙醛基脱脂酸 Gm1 27. —種如申請専利範圍第26項所述之化合物之酯，傣經 由使用S自下列之任一種醇酷化該化合物之唾液酸羧 基而生成者：乙醇.丙酵，異丙醇，正-丁酵，異丁 酵，三级-丁酵，苄醇。 28. —種如申諳專利範圍第26項所述之化合物之酷胺，偽 本紙張尺度適用中8國家揉準（CNS)甲4規格（210 X 297公;ίΗ 72- (請先閲讀背®之注意事項再塡寫本買) 丨裝. 訂. 經濟部中央揉準局R工消费合作社印製 ^04300 A7 I---- D7 六、申請專利範圍 經由使用選自下列之任一種胺，醛胺化該化合物之唾 液酸羧基而生成者：甲胺，乙胺.丙胺.二甲胺和， 二乙胺。 29. —種如申請專利範圍第26, 27或28項所述之化合物之 金乙醛基化物，金丙酵基化物，金丁醛基化物，金順 丁烯二酵基化物，金丙二醛基化物及全丁二·醯基化物 Ο 30. 如申請專利範圍第1項之H-醛基-脱脂酸神經節糖苷 脂或其儲別混合物，其傷治療可接受性金屬鹽，其於 分子内具有至少一値酸性官能基者。 31. 如申請專利範圍第30項之H-醅基-脱脂酸神經節糖苷 脂，其偽鈉，鉀，銨，鈣，鎂或鋁鹽。 32. 如申請專利範圍第1項之N-酵基-脱脂酸神經節糖苷 脂或其鏟別混合物，其偽治療可接受性有機鹺鹽，其 於分子内具有至少一値酸性官能基者。 33. 如申請專利範圍第1項之N-匿基-脱脂酸神經節糖苷 脂或其値別混合物，其偽治療可接受性酸添加，其成 於分子内具有至少一傾齡性官能基者。 34. —種製備如申請專利範圍第1項所定義之N-醛基-脱 脂酸神經節糖苷脂之方法，該方法包括非必要地於保 護醛基化組分中之官能基後，使用具有2至20硪原子 且取代有選自下列之一或多個極性基之脂肪酸醛基化 脱脂酸神經節糖苷脂或脱-N-乙醛基-脱脂酸神經節糖 苷脂或此等化合物之混合物： 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)甲4规格（210 X 297公货〉 (請先閲4^面之注意事項再蜞寫本頁) 丨裝· 訂. 埵濟部中央標準局R工消费合作社印製 S04300 六、申請專利範面 -«,溴及》; -游離羥基； -CU-7烷氣基； -游離氫硫基或以匕-*脂肪族酵脂化之氮硫基； -羧基； -磺基； -膀基； -游離或以烷基取代之胺基及此種胺基之四级銨 衍生物； 以及若有所需將所得産物之羧基轉成酯或醯胺，或製 得神经節糖苷脂内酯或將所存在之羥基金醛基化；以 及若有所需將N-醛基中所存在之棰性基彼此轉換；以 及若有所需所得産物被轉成其鹽。 35. 如申諳專利範圍第34項之方法，其中之起始物料與酸 之反應性官能衍生物反應。 36. 如申請專利範围第34項之方法.包括選自下列任一種 反應之方法： ⑴脱脂酸神經節糖苷脂衍生物與酸叠氰化物之反應； ⑵脱脂酸神經節糖苷脂衍生物與醛基眯唑化物之反應 » (3)脱脂酸神經節糖苷脂衍生物與酸之混合酐及三無乙 酸之混合酐反應； ⑷脱脂酸神經節糖苷脂衍生物與酸之氛化物反應； (5)脱脂酸神經節糖苷酯衍生物與酸於甲二醛亞胺及非 本紙張尺度通用中ΗΗ家標準（CNS)甲4規格（210 X 297公釐> (請先Η讀背面之注意事項再填寫本頁) --裝· 訂- 缦濟部中央標準局員工消♦合作社印製 π、申請專利範園 必要地於1-羥苯駢三唑共存之下反應； (6)脫脂酸神經節糖苷酷衍生物舆酸於高溫之反應； ⑺脱脂酸神經節糖苷酯衍生物與酸之甲基酯於高溫反 應； ⑻脫脂酸神經節糖苷酯衍生物與酸之酚酯於高溫之反 應；或 ⑼脱脂酸神經節糖苷酯衍生物舆從酸之鹽與1-甲基-2-氣吡啶碘或其類似産物間進行交換衍生物而得之 酯之反應。 37. 如申請專利範困第34、35或36項之方法，其中羥基， 一级或二级胺基或游離羥基於醛基化期間暫時受到保 Hi。 38. 如申請專利範圍第34、35或36項之方法，其中當脫-N -乙屘基-脱脂酸神經節糖苷脂用作起始物料及未改變 之神經胺酸之胺基被乙醛基化時使用溫和的醛基化筷 件。 如申誚專利範圍第38項之方法，其中使用乙酐做乙醯 基化劑。 40. 如申請專利範圍第34、35或36項之方法.其中唾液酸 羧基被酯化或轉成醛胺，或製得所得化合物之内酷或 全醛基化衍生物。 41. 如申請專利範圍第34、35或36項之方法，其中該方法 於任一階段中斷或其中該方法始於中間階段然後進行 随後各階段。 本纸張尺度適用中國國家標準（CNS)甲4規格（210 X 297公# > 一 75- (請先聞讀背面之注意事項再塡寫本買) i裝· 訂- 04的0 '—"7 ~9 Α7 Β7 C7 D7 夂、申請專利範团 42. —種用以治療神經糸統病變之藥學組成物，其中含有 t 如申請專利範圍第1項所述之N-醛基-脱脂酸神經節 糖苷脂做活性成分連同藥物可接受性賦形劑。 43. 如申請專利範圍第42項之藥學組成物，其中之活性成 分為如申請專利範圍第2-33項中任一項所述之化合物 44.如申請專利範圍第1項之醛基-脱脂酸神經節糖苷 脂，用於預防麩氛酸鹽誘發之神經性和保護免於局部 缺血所造成之傷害之治療使用。 (請先《讀背面之注意事項再壜窝本頁) .丨裝. 訂· 經濟部中央標準局R工消費合作社印製 本紙張尺度適用中國國家樣準（CNS)甲4规格（210 X 297公* >
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Families Citing this family (24)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
IT1235011B (it) * 1988-07-26 1992-06-16 Fidia Farmaceutici Sintesi di derivati di glicosfingolipidi ed in particolare di gangliosidi utilizzabili per la preparazione di immunoadsorbenti ed adsorbenti per affinita' impiegabili per la purificazione di anticorpi e di tossine specifiche, e per uso diagnostico
US5466675A (en) * 1992-02-04 1995-11-14 Piljac; Goran Immunological activity of rhamnolipids
TW261533B (zh) * 1992-07-16 1995-11-01 Kirin Brewery
FR2711138B1 (fr) * 1993-10-12 1995-11-24 Oreal Céramides, leur procédé de préparation et leurs applications en cosmétique et en dermopharmacie.
EP0725772B1 (en) * 1993-10-28 2003-08-20 Cosmoferm B.V. Phytosphingosine-based ceramide i analogs
US5663151A (en) * 1994-03-04 1997-09-02 Bristol-Myers Squibb Company Sulfated α-glycolipid derivatives as cell adhesion inhibitors
US5651981A (en) * 1994-03-29 1997-07-29 Northwestern University Cationic phospholipids for transfection
EP0706509B1 (en) * 1994-04-27 2000-01-05 Dsm N.V. Short chain 2-hydroxycarboxylic acid-based derivatives of ceramides
DE69503016T2 (de) * 1994-07-21 1998-10-15 Takara Shuzo Co Glycolipid-Ceramiddeacylase
US6428999B1 (en) 1994-07-21 2002-08-06 Takara Shuzo Co., Ltd. Sphingolipid ceramide N-deacylase, methods for producing sphingolipids and sphingolipid derivatives, and spingolipid ceramide N-deacylase gene
JP4101320B2 (ja) * 1996-10-11 2008-06-18 高砂香料工業株式会社 一級アミド誘導体の製造方法
JP3485232B2 (ja) * 1997-01-31 2004-01-13 高砂香料工業株式会社 光学活性化合物及びその製造方法
US6063387A (en) * 1997-04-17 2000-05-16 Elizabeth Arden Co., Division Of Conopco, Inc. Anhydrous cosmetic composition with ceramides for firming skin
CN1360567A (zh) * 1999-03-09 2002-07-24 科斯莫弗姆有限公司 鞘氨基醇碱衍生物和其用途
NZ531139A (en) 2001-08-29 2007-09-28 Neose Technologies Inc Synthetic ganglioside derivatives and compositions thereof
FR2839310A1 (fr) * 2002-05-03 2003-11-07 Pasteur Institut Nouveau procede de preparation d' alpha-glycosylceramides, nouveaux derives alpha-glycosylceramide et leurs applications
WO2004064820A2 (en) * 2003-01-20 2004-08-05 Nederlandse Organisatie Voor Toegepast- Natuurwetenschappelijk Onderzoek Tno Use of sphingolipids for reducing plasma cholesterol and triacylglycerol levels
NL1022443C2 (nl) 2003-01-20 2004-07-22 Tno Sphingolipiden voor verbetering van de samenstelling van de darmflora.
US7888331B2 (en) 2003-03-06 2011-02-15 Seneb Biosciences, Inc. Ganglioside compositions and methods of use
EP1729597B1 (en) * 2004-03-16 2011-03-09 Nederlandse Organisatie voor toegepast -natuurwetenschappelijk onderzoek TNO The use of sphingolipids in the treatment and prevention of type 2 diabetes mellitus, insulin resistance and metabolic syndrome
WO2006059897A1 (en) 2004-11-30 2006-06-08 Nederlandse Organisatie Voor Toegepast- Natuurwetenschappelijk Onderzoek Tno Sphingolipids in treatment and prevention of steatosis and of steatosis or of hepatotoxicity and its sequelae
WO2010111530A1 (en) 2009-03-25 2010-09-30 Seneb Biosciences, Inc. Glycolipids as treatment for disease
US11426371B2 (en) 2017-04-28 2022-08-30 University Of Virginia Patent Foundation Compositions and methods for treating cancer
KR102640816B1 (ko) 2021-02-17 2024-02-23 곽영민 식별선이 구비된 파이프라인

Family Cites Families (9)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
IT1171432B (it) * 1981-08-03 1987-06-10 Fidia Farmaceutici Amidi organiche derivate da lipidi azotati utilizzabili come farmaci
AU546872B2 (en) * 1982-06-16 1985-09-26 Unilever Plc Skin treatment compositions containing a fatty acid or ester
CH679209A5 (en) * 1983-12-05 1992-01-15 Solco Basel Ag New neutral glyco-sphingolipid derivs.
EP0146810A3 (de) * 1983-12-05 1987-05-13 Solco Basel AG Verfahren zur Herstellung von Sphingosinderivaten
EP0212400B1 (de) * 1985-08-13 1992-01-02 Solco Basel AG Neues Verfahren zur Herstellung von Sphingosinderivaten
JPS6239597A (ja) * 1985-08-13 1987-02-20 ソルコ　バ−ゼル　アクチエンゲゼルシヤフト スフインゴシン誘導体の製造方法
JPH0692349B2 (ja) * 1986-03-06 1994-11-16 和光純薬工業株式会社 光学活性不飽和アミノアルコール誘導体の新規な製法
US4816450A (en) * 1986-09-15 1989-03-28 Duke University Inhibition of protein kinase C by long-chain bases
US4937232A (en) * 1986-09-15 1990-06-26 Duke University Inhibition of protein kinase C by long-chain bases

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