TW202330525A - 稠環取代的六員雜環化合物及其製法和用途 - Google Patents

稠環取代的六員雜環化合物及其製法和用途 Download PDF

Info

Publication number
TW202330525A
TW202330525A TW112100190A TW112100190A TW202330525A TW 202330525 A TW202330525 A TW 202330525A TW 112100190 A TW112100190 A TW 112100190A TW 112100190 A TW112100190 A TW 112100190A TW 202330525 A TW202330525 A TW 202330525A
Authority
TW
Taiwan
Prior art keywords
alkyl
membered
group
cycloalkyl
heteroaryl
Prior art date
Application number
TW112100190A
Other languages
English (en)
Inventor
趙吉辰
周福生
林崇懶
彭靈
何宛
楊華彬
李震
張濤
馬凱
炯 蘭
強 呂
Original Assignee
大陸商勁方醫藥科技(上海)有限公司
大陸商浙江勁方藥業有限公司
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Priority claimed from PCT/CN2022/079153 external-priority patent/WO2022184152A1/zh
Application filed by 大陸商勁方醫藥科技(上海)有限公司, 大陸商浙江勁方藥業有限公司 filed Critical 大陸商勁方醫藥科技(上海)有限公司
Publication of TW202330525A publication Critical patent/TW202330525A/zh

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/4353—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom ortho- or peri-condensed with heterocyclic ring systems
    • A61K31/437—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom ortho- or peri-condensed with heterocyclic ring systems the heterocyclic ring system containing a five-membered ring having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. indolizine, beta-carboline
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/44—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof
    • A61K31/4427—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof containing further heterocyclic ring systems
    • A61K31/444—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof containing further heterocyclic ring systems containing a six-membered ring with nitrogen as a ring heteroatom, e.g. amrinone
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/505—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim
    • A61K31/517—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim ortho- or peri-condensed with carbocyclic ring systems, e.g. quinazoline, perimidine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/505—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim
    • A61K31/519—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim ortho- or peri-condensed with heterocyclic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/55—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having seven-membered rings, e.g. azelastine, pentylenetetrazole
    • A61K31/551—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having seven-membered rings, e.g. azelastine, pentylenetetrazole having two nitrogen atoms, e.g. dilazep
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/55—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having seven-membered rings, e.g. azelastine, pentylenetetrazole
    • A61K31/554—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having seven-membered rings, e.g. azelastine, pentylenetetrazole having at least one nitrogen and one sulfur as ring hetero atoms, e.g. clothiapine, diltiazem
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings
    • C07D401/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D403/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00
    • C07D403/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D405/00—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom
    • C07D405/14—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D471/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D471/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00
    • C07D471/02—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D471/04—Ortho-condensed systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D487/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D487/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00
    • C07D487/02—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D487/04—Ortho-condensed systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D498/00—Heterocyclic compounds containing in the condensed system at least one hetero ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D498/02—Heterocyclic compounds containing in the condensed system at least one hetero ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D498/04—Ortho-condensed systems

Abstract

本發明揭示了式(IA)或式(IC)所示化合物或其藥學上可接受的鹽、立體異構體、溶劑化物或前藥，式中各基團定義詳見說明書。本發明還揭示了包含上述化合物的藥物組合物和它們在製備預防和/或治療與HPK1活性相關的疾病或病症的藥物中的用途。

Description

稠環取代的六員雜環化合物及其製法和用途
本發明屬於醫藥領域，具體關於稠環取代的六員雜環化合物及其製法和用途。
造血祖細胞激酶1(HPK1，又稱為MAP4K1)是造血系統特異性絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶，屬於哺乳動物ste20相關蛋白激酶的MAP4K家族。HPK1主要在造血組織和細胞中表達。HPKl存在3種激活方式，即絲氨酸磷酸化、蘇氨酸磷酸化或酪氨酸磷酸化。已有研究表明體外HPK1-/-T細胞具有較低的TCR激活閾值，增殖穩健，產生更多的Th1細胞因子。在小鼠實驗性自身免疫性腦脊髓炎(EAE)模型中，當使用由髓鞘少突膠質細胞糖蛋白(MOG)衍生的肽免疫HPK1-/-小鼠時，會出現更嚴重的自身免疫性症狀。此外，在產生PGE2的路易士(Lewis)肺癌腫瘤模型中，與野生型小鼠相比，HPK1敲除小鼠的腫瘤發展顯著緩慢。另外大量研究結果表明，HPKl可與許多接頭蛋白結合，如SLP-76家族、CARD11、HIS、HIP-55、GRB2家族、LAT、CRK家族等相互作用，活化造血幹細胞的JNK/SAPK訊號途徑，從而對TCR通路進行負向調節。因HPK1在免疫方面的重要作用，HPKl抑制劑在惡性實體腫瘤或者血液癌(如急性髓性白血病、膀胱上皮癌、乳腺癌、結腸癌、肺癌、胰腺癌、黑色素瘤)、自身免疫性疾病(如系統性紅斑狼瘡、銀肩病關節炎)和炎症反應中均扮演重要的角色。目前尚無針對HPKl靶點的藥物上市，為了能更好地滿足巨大的臨床需求，我們旨在開發出更有效的HPKl抑制劑。
本發明提供了一種結構新穎的高效HPKl抑制劑，其具有活性高，選擇性好且毒副作用低等優點，具有良好的理化性質和成藥特性。
本發明第一方面提供了式(IA)化合物或其藥學上可接受的鹽、立體異構體、溶劑化物或前藥： (IA)
式中，
Y為CH或N；
R 1為H、C 1-6烷基、-C 1-4烷基-羥基、-C 1-4烷基-氰基、-C 1-4烷基-羧基、-C 1-4烷基-C 1-6烷基、-C 1-4烷基-C 1-6烷氧基、C 3-20環烷基、3到20員雜環基、C 6-14芳基、5或6員單環雜芳基、8至10員雙環雜芳基、-C 1-4烷基-C 3-20環烷基、-C 1-4烷基-O-C 3-20環烷基、-C 1-4烷基-3到20員雜環基、-C 1-4烷基-O-3到20員雜環基、-C 1-4烷基-C 6-14芳基、-C 1-4烷基-O-C 6-14芳基、-C 1-4烷基-5或6員單環雜芳基、-C 1-4烷基-O-5或6員單環雜芳基、-C 1-4烷基-8至10員雙環雜芳基、-C 1-4烷基-O-8至10員雙環雜芳基、-C 1-4烷基-NR aR b、-C 1-4烷基-NR d-C(=O)-R c、-C 1-4烷基-NR d-C(=O)-NR aR b、-C 1-4烷基-NR d-S(=O) 2-R c、-C 1-4烷基-NR d-S(=O) 2-NR aR b、-C 1-4烷基-C(=O)-NR aR b、-C 1-4烷基-S(=O) 2-R c、-C 1-4烷基-S(=O) 2-NR aR b、-C(=O)-C 1-6烷基、-C(=O)-C 3-20環烷基、-C(=O)-3到20員雜環基、-C(=O)-C 6-14芳基、-C(=O)-5或6員單環雜芳基、-C(=O)-8至10員雙環雜芳基、-C(=O)-NR aR b、-S(=O) 2-R c或-S(=O) 2-NR aR b；其中，所述C 1-6烷基、所述C 1-6烷氧基各自獨立地任選地被鹵素、氘、氰基或羥基取代；所述C 3-20環烷基、所述3到20員雜環基、所述C 6-14芳基、所述5或6員單環雜芳基、所述8至10員雙環雜芳基各自獨立地任選地被1、2、3或4個選自S1組的基團所取代；所述3到20員雜環基、所述5或6員單環雜芳基、所述8至10員雙環雜芳基各自獨立地含有1、2、3或4個獨立地選自N、O、S的雜原子作為環原子；
Z、L 1、R 4選自下組組合中的一種：
(a) Z為N；-L 1-R 4不存在；
(b) Z為C；
L 1為一個鍵、-C 1-4烷基-、-C 3-6單環環烷基-、-O-、-S-、-NH-、-C(=O)-、-S(=O)-或-S(=O) 2-；
R 4選自下組：H、鹵素、氰基、羥基、羧基、硝基、C 1-6烷基、C 1-6烷氧基、C 3-20環烷基、3到20員雜環基、C 6-14芳基、5或6員單環雜芳基、8至10員雙環雜芳基、-C 1-4烷基-羥基、-C 1-4烷基-氰基、-C 1-4烷基-羧基、-C 1-4烷基-C 1-6烷基、-C 1-4烷基-C 1-6烷氧基、-C 1-4烷基-C 3-20環烷基、-C 1-4烷基-O-C 3-20環烷基、-C 1-4烷基-3到20員雜環基、-C 1-4烷基-O-3到20員雜環基、-C 1-4烷基-C 6-14芳基、-C 1-4烷基-O-C 6-14芳基、-C 1-4烷基-5或6員單環雜芳基、-C 1-4烷基-O-5或6員單環雜芳基、-C 1-4烷基-8至10員雙環雜芳基、-C 1-4烷基-O-8至10員雙環雜芳基、-C 1-4烷基-NR aR b、-C 1-4烷基-C(=O)-NR aR b、-C 1-4烷基-NR d-C(=O)-R c、-C 1-4烷基-NR d-C(=O)-NR aR b、-C 1-4烷基-S(=O) 2-R c、-C 1-4烷基-NR d-S(=O) 2-R c、-C 1-4烷基-S(=O) 2-NR aR b、-C 1-4烷基-NR d-S(=O) 2-NR aR b、-C(=O)-C 1-6烷基、-C(=O)-C 3-20環烷基、-C(=O)-3到20員雜環基、-C(=O)-C 6-14芳基、-C(=O)-5或6員單環雜芳基、-C(=O)-8至10員雙環雜芳基、-C(=O)-NR aR b、-NR d-C(=O)-R c、-NR d-C(=O)-NR aR b、-S(=O) 2-R c、-NR d-S(=O) 2-R c、-S(=O) 2-NR aR b、-NR d-S(=O) 2-NR aR b、-NR aR b、-OR c；所述C 1-6烷基、所述C 1-6烷氧基各自獨立地任選地被鹵素、氘、氰基或羥基取代；所述C 3-20環烷基、所述3到20員雜環基、所述C 6-14芳基、所述5或6員單環雜芳基、所述8至10員雙環雜芳基各自獨立地任選地被1、2、3或4個選自S1組的基團所取代；所述3到20員雜環基、所述5或6員單環雜芳基、所述8至10員雙環雜芳基各自獨立地含有1、2、3或4個獨立地選自N、O、S的雜原子作為環原子；
為苯基或5或6員單環雜芳基；所述5或6員單環雜芳基含有1、2或3個獨立地選自N、O、S的雜原子作為環原子；
所述苯基或5或6員單環雜芳基各自獨立地任選地被m1個R 2取代；m1為1、2、3或4；
所述R 2為 ；其中，
R 2a為H、氘、C 1-6烷基、苯基或氘代C 1-6烷基和R 2b為H、氘、C 1-6烷基或氘代C 1-6烷基；或者R 2a和R 2b與和它們連接的碳原子共同構成C 3-6單環環烷基；且R 2a與碳原子之間的鍵為單鍵；R 2c為H、氘、C 1-6烷基、氘代C 1-6烷基、-C 1-4烷基-C 3-6單環環烷基或C 3-6單環環烷基；R 2d為H、氘、C 1-6烷基、氘代C 1-6烷基、C 3-20環烷基或3到20員雜環基；
或當R 2a和R 2d與和它們相連的氮原子共同構成3到20員雜環基、5或6員單環雜芳基或8至10員雙環雜芳基時，R 2c為H、氘、C 1-6烷基或氘代C 1-6烷基；R 2b為H、氘、C 1-6烷基或氘代C 1-6烷基且R 2a與碳原子之間的鍵為單鍵或R 2b為無且R 2a與碳原子之間的鍵為雙鍵；所述3到20員雜環基、所述5或6員單環雜芳基或所述8至10員雙環雜芳基各自獨立地含有一個氮原子和任選地1或2個獨立地選自N、O、S的雜原子作為環原子；且所述3到20員雜環基、所述5或6員單環雜芳基、所述8至10員雙環雜芳基各自獨立地任選地被1、2、3或4個選自S1組的基團所取代；
或當R 2c和R 2d與和它們相連的氮原子共同構成3到20員雜環基、5或6員單環雜芳基或8至10員雙環雜芳基時，R 2a為H、氘、C 1-6烷基或氘代C 1-6烷基，R 2b為H、氘、C 1-6烷基或氘代C 1-6烷基，且R 2a與碳原子之間的鍵為單鍵；所述3到20員雜環基、所述5或6員單環雜芳基或所述8至10員雙環雜芳基各自獨立地含有一個氮原子和任選地1或2個獨立地選自N、O、S的雜原子作為環原子；且所述3到20員雜環基、所述5或6員單環雜芳基、所述8至10員雙環雜芳基各自獨立地任選地被1、2、3或4個選自S1組的基團所取代；
或所述R 2為 ； 為含有一個氮原子且藉由該氮原子與分子其餘部分連接的3到20員雜環基、5或6員單環雜芳基或8至10員雙環雜芳基； 還任選地含有1或2個獨立地選自N、O、S的雜原子作為環原子；所述3到20員雜環基、所述5或6員單環雜芳基、所述8至10員雙環雜芳基各自獨立地任選地被1、2、3或4個選自S1組的基團所取代；
為苯基或5或6員單環雜芳基；所述5或6員單環雜芳基含有1、2或3個獨立地選自N、O、S的雜原子作為環原子；所述苯基、所述5或6員單環雜芳基各自獨立地任選地被m2個R 3取代；
m2為1、2、3或4；各個R 3各自獨立地選自下組：H、氧代(=O)、鹵素、氰基、羥基、羧基、硝基、C 1-6烷基、C 1-6烷氧基、C 3-20環烷基、3到20員雜環基、C 6-14芳基、5或6員單環雜芳基、8至10員雙環雜芳基、-O-C 3-20環烷基、-O-3到20員雜環基、-O-C 6-14芳基、-O-5或6員單環雜芳基、-O-8至10員雙環雜芳基、-C 1-4烷基-羥基、-C 1-4烷基-氰基、-C 1-4烷基-C 1-6烷基、-C 1-4烷基-C 1-6烷氧基、-C 1-4烷基-C 3-20環烷基、-C 1-4烷基-O-C 3-20環烷基、-C 1-4烷基-3到20員雜環基、-C 1-4烷基-O-3到20員雜環基、-C 1-4烷基-C 6-14芳基、-C 1-4烷基-O-C 6-14芳基、-C 1-4烷基-5或6員單環雜芳基、-C 1-4烷基-O-5或6員單環雜芳基、-C 1-4烷基-8至10員雙環雜芳基、-C 1-4烷基-O-8至10員雙環雜芳基、-C 1-4烷基-NR aR b、-C 1-4烷基-C(=O)-NR aR b、-C 1-4烷基-NR d-C(=O)-R c、-C 1-4烷基-NR d-C(=O)-NR aR b、-C 1-4烷基-S(=O) 2-R c、-C 1-4烷基-NR d-S(=O) 2-R c、-C 1-4烷基-S(=O) 2-NR aR b、-C 1-4烷基-NR d-S(=O) 2-NR aR b、-C 1-4烷基-羧基、-C(=O)-C 1-6烷基、-C(=O)O-C 1-6烷基、-C(=O)-C 1-4烷基-羥基、-C(=O)-C 1-4烷基-C 1-6烷氧基、-C(=O)-C 1-4烷基-O-C 3-20環烷基、-C(=O)-C 3-20環烷基、-C(=O)O-C 3-20環烷基、-C(=O)-C 1-4烷基-C 3-20環烷基、-C(=O)-3到20員雜環基、-C(=O)-C 1-4烷基-3到20員雜環基、-C(=O)-C 6-14芳基、-C(=O)-5或6員單環雜芳基、-C(=O)-8至10員雙環雜芳基、-C(=O)-NR aR b、-NR d-C(=O)-R c、-NR d-C(=O)-NR aR b、-S(=O) 2-R c、-NR d-S(=O) 2-R c、-S(=O) 2-NR aR b、-NR d-S(=O) 2-NR aR b、-NR aR b、-OR c、-C 1-4烷基-P(=O)(C 1-6烷基) 2、-P(=O)(C 1-6烷基) 2；其中，所述C 1-6烷基、所述C 1-6烷氧基各自獨立地任選地被1、2、3或4個選自鹵素、氘、氰基、5到6員雜環基和羥基取代；所述C 3-20環烷基、所述3到20員雜環基、所述C 6-14芳基、所述5或6員單環雜芳基、所述8至10員雙環雜芳基各自獨立地任選地被1、2、3或4個選自S2組的基團所取代；所述3到20員雜環基、所述5或6員單環雜芳基、所述8至10員雙環雜芳基各自獨立地含有1、2、3或4個獨立地選自N、O、S的雜原子作為環原子；
或者 為C 5-7單環環烷基或5、6或7員單環雜環基；所述5、6或7員雜環基各自獨立地含有1、2或3個獨立地選自N、O、S的雜原子作為環原子；所述C 5-7單環環烷基、所述5、6或7員單環雜環基各自獨立地任選地被m2個R 3取代；
m2為1、2、3或4；各個R 3各自獨立地選自下組：H、氧代(=O)、鹵素、氰基、羥基、羧基、硝基、C 1-6烷基、C 1-6烷氧基、C 3-20環烷基、3到20員雜環基、C 6-14芳基、5或6員單環雜芳基、8至10員雙環雜芳基、-O-C 3-20環烷基、-O-3到20員雜環基、-O-C 6-14芳基、-O-5或6員單環雜芳基、-O-8至10員雙環雜芳基、-C 1-4烷基-羥基、-C 1-4烷基-氰基、-C 1-4烷基-C 1-6烷基、-C 1-4烷基-C 1-6烷氧基、-C 1-4烷基-C 3-20環烷基、-C 1-4烷基-O-C 3-20環烷基、-C 1-4烷基-3到20員雜環基、-C 1-4烷基-O-3到20員雜環基、-C 1-4烷基-C 6-14芳基、-C 1-4烷基-O-C 6-14芳基、-C 1-4烷基-5或6員單環雜芳基、-C 1-4烷基-O-5或6員單環雜芳基、-C 1-4烷基-8至10員雙環雜芳基、-C 1-4烷基-O-8至10員雙環雜芳基、-C 1-4烷基-NR aR b、-C 1-4烷基-C(=O)-NR aR b、-C 1-4烷基-NR d-C(=O)-R c、-C 1-4烷基-NR d-C(=O)-NR aR b、-C 1-4烷基-S(=O) 2-R c、-C 1-4烷基-NR d-S(=O) 2-R c、-C 1-4烷基-S(=O) 2-NR aR b、-C 1-4烷基-NR d-S(=O) 2-NR aR b、-C 1-4烷基-羧基、-C(=O)-C 1-6烷基、-C(=O)O-C 1-6烷基、-C(=O)-C 1-4烷基-羥基、-C(=O)-C 1-4烷基-C 1-6烷氧基、-C(=O)-C 1-4烷基-O-C 3-20環烷基、-C(=O)-C 3-20環烷基、-C(=O)O-C 3-20環烷基、-C(=O)-C 1-4烷基-C 3-20環烷基、-C(=O)-3到20員雜環基、-C(=O)-C 1-4烷基-3到20員雜環基、-C(=O)-C 6-14芳基、-C(=O)-5或6員單環雜芳基、-C(=O)-8至10員雙環雜芳基、-C(=O)-NR aR b、-NR d-C(=O)-R c、-NR d-C(=O)-NR aR b、-S(=O) 2-R c、-NR d-S(=O) 2-R c、-S(=O) 2-NR aR b、-NR d-S(=O) 2-NR aR b、-NR aR b、-OR c、-C 1-4烷基-P(=O)(C 1-6烷基) 2、-P(=O)(C 1-6烷基) 2、=CR 3aR 3b；其中，2個R 3可以同時取代一個碳上的2個氫原子使得2個R 3和與它們相連的碳原子共同形成C 3-6單環環烷基或3到6員單環雜環基；或者2個R 3分別取代不同碳上的2個氫原子且2個R 3相連形成-CH 2-、-CH 2CH 2-或-CH 2CH 2CH 2-；其中，所述C 1-6烷基、所述C 1-6烷氧基各自獨立地任選地被1、2、3或4個選自鹵素、氘、氰基、5到6員雜環基和羥基取代；所述C 3-20環烷基、所述3到20員雜環基、所述C 6-14芳基、所述5或6員單環雜芳基、所述8至10員雙環雜芳基各自獨立地任選地被1、2、3或4個選自S2組的基團所取代；所述3到20員雜環基、所述5或6員單環雜芳基、所述8至10員雙環雜芳基各自獨立地含有1、2、3或4個獨立地選自N、O、S的雜原子作為環原子；其中，R 3a、R 3b各自獨立地為氫、鹵素、氰基、C 1-6烷基、鹵代C 1-6烷基、C 6-14芳基或5或6員單環雜芳基；所述C 6-14芳基或5或6員單環雜芳基任選地被1、2、3個選自鹵素、氰基、C 1-4烷基、C 1-4烷氧基、鹵代C 1-4烷基、鹵代C 1-4烷氧基的基團取代；或者R 3a、R 3b與相連的碳原子共同構成C 3-6單環環烷基或3到6員單環雜環基；所述C 3-6單環環烷基或3到6員單環雜環基任選地被1、2、3個選自鹵素、氰基、C 1-4烷基、C 1-4烷氧基、鹵代C 1-4烷基、鹵代C 1-4烷氧基、C 6-14芳基、5或6員單環雜芳基的基團取代；
上述各基團中，各個S1組的基團各自獨立地選自下組：氧代(=O)、鹵素、氰基、羥基、羧基、硝基、C 1-6烷基、C 2-6烯基、C 2-6炔基、C 1-6烷氧基、C 3-20環烷基、3到20員雜環基、C 6-14芳基、5或6員單環雜芳基、8至10員雙環雜芳基、-O-C 3-20環烷基、-O-3到20員雜環基、-O-C 6-14芳基、-O-5或6員單環雜芳基、-O-8至10員雙環雜芳基、-C≡C-C 3-20環烷基、-C≡C-3到20員雜環基、-C≡C-C 6-14芳基、-C≡C-5或6員單環雜芳基、-C≡C-8至10員雙環雜芳基、-C 1-4烷基-羥基、-C 1-4烷基-氰基、-C 1-4烷基-C 1-6烷基、-C 1-4烷基-C 1-6烷氧基、-C 1-4烷基-C 3-20環烷基、-C 1-4烷基-O-C 3-20環烷基、-C 1-4烷基-3至20員雜環基、-C 1-4烷基-O-3至20員雜環基、-C 1-4烷基-C 6-14芳基、-C 1-4烷基-O-C 6-14芳基、-C 1-4烷基-5或6員單環雜芳基、-C 1-4烷基-O-5或6員單環雜芳基、-C 1-4烷基-8至10員雙環雜芳基、-C 1-4烷基-O-8至10員雙環雜芳基、-S(=O) 2-C 1-6烷基、-S(=O) 2-C 3-20環烷基、-S(=O) 2-3至20員雜環基、-S(=O) 2-5或6員單環雜芳基、-S(=O) 2-8至10員雙環雜芳基、-C(=O)O-C 1-6烷基、-C(=O)O-C 3-20環烷基、-C(=O)O-3至20員雜環基、-C(=O)O-5或6員單環雜芳基、-C(=O)O-8至10員雙環雜芳基、-C(=O)-C 1-6烷基、-C(=O)-C 3-20環烷基、-C(=O)-C 6-14芳基、-NR a1R b1、-C(=O)-NR a1R b1、-OR c1、-C 1-4烷基-S(=O) 2-C 1-6烷基、-C 1-4烷基-S(=O) 2-C 3-20環烷基、-C 1-4烷基-S(=O) 2-3至20員雜環基、-C 1-4烷基-C(=O)O-C 1-6烷基、-C 1-4烷基-C(=O)O-C 3-20環烷基、-C 1-4烷基-C(=O)-C 1-6烷基、-C 1-4烷基-C(=O)-C 3-20環烷基、-C 1-4烷基-C(=O)-C 6-14芳基、-C(=O)-5或6員單環雜芳基、-C(=O)-8至10員雙環雜芳基、-C 1-4烷基-NR a1R b1、-C 1-4烷基-C(=O)-NR a1R b1、-C≡C-C(=O)-NR a1R b1、-C≡C-C 1-4烷基-C(=O)-NR a1R b1、-C 1-4烷基-OR c1、-C 1-4烷基-P(=O)-(C 1-6烷基) 2、-P(=O)-(C 1-6烷基) 2、-C 1-4烷基-NR d1-C(=O)-R c1、-C 1-4烷基-NR d1-C(=O)-NR a1R b1、-C 1-4烷基-NR d1-S(=O) 2-R c1、-C 1-4烷基-S(=O) 2-NR a1R b1、-C 1-4烷基-NR d1-S(=O) 2-NR a1R b1、-NR d1-C(=O)-R c1、-NR d1-C(=O)-NR a1R b1、-NR d1-S(=O) 2-R c1、-S(=O) 2-NR a1R b1、-NR d1-S(=O) 2-NR a1R b1；其中，所述C 1-6烷基、所述C 1-6烷氧基、所述C 2-6烯基、所述C 2-6炔基各自獨立地任選地被1個、2個或3個選自鹵素、氘、氰基或羥基的基團所取代；所述C 3-20環烷基、所述3到20員雜環基、所述C 6-14芳基、所述5或6員單環雜芳基、所述8至10員雙環雜芳基各自獨立地任選地被1、2、3或4個選自S3組的基團所取代；所述3到20員雜環基、所述5或6員單環雜芳基、所述8至10員雙環雜芳基各自獨立地含有1、2、3或4個獨立地選自N、O、S的雜原子作為環原子；
上述各基團中，各個S2組的基團各自獨立地選自下組：氧代(=O)、鹵素、氰基、羥基、羧基、硝基、C 1-6烷基、C 2-6炔基、C 1-6烷氧基、C 3-20環烷基、3到20員雜環基、C 6-14芳基、5或6員單環雜芳基、8至10員雙環雜芳基、-O-3到20員雜環基、-O-5或6員單環雜芳基、-O-8至10員雙環雜芳基、-C 1-4烷基-羥基、-C 1-4烷基-氰基、-C 1-4烷基-C 1-6烷基、-C 1-4烷基-C 1-6烷氧基、-C 1-4烷基-C 3-20環烷基、-C 1-4烷基-O-C 3-20環烷基、-C 1-4烷基-3至20員雜環基、-C 1-4烷基-O-3至20員雜環基、-C 1-4烷基-5或6員單環雜芳基、-C 1-4烷基-O-5或6員單環雜芳基、-C 1-4烷基-8至10員雙環雜芳基、-C 1-4烷基-O-8至10員雙環雜芳基、-S(=O) 2-C 1-6烷基、-S(=O) 2-C 3-20環烷基、-S(=O) 2-3至20員雜環基、-S(=O) 2-5或6員單環雜芳基、-S(=O) 2-8至10員雙環雜芳基、-C(=O)O-C 1-6烷基、-C(=O)O-C 3-20環烷基、-C(=O)O-3至20員雜環基、-C(=O)O-5或6員單環雜芳基、-C(=O)O-8至10員雙環雜芳基、-NR a1R b1、-C(=O)-NR a1R b1、-OR c1、-C 1-4烷基-C(=O)O-C 1-6烷基、-C 1-4烷基-C(=O)O-C 3-20環烷基、-C 1-4烷基-NR a1R b1、-C 1-4烷基-C(=O)-NR a1R b1、-C≡C-C(=O)-NR a1R b1、-C≡C-C 1-4烷基-C(=O)-NR a1R b1、-C 1-4烷基-OR c1、-C 1-4烷基-P(=O)-(C 1-6烷基) 2、-P(=O)-(C 1-6烷基) 2、-C 1-4烷基-NR d1-C(=O)-R c1、-C 1-4烷基-NR d1-C(=O)-NR a1R b1、-C 1-4烷基-NR d1-S(=O) 2-R c1、-C 1-4烷基-S(=O) 2-NR a1R b1、-C 1-4烷基-NR d1-S(=O) 2-NR a1R b1、-NR d1-C(=O)-R c1、-NR d1-C(=O)-NR a1R b1、-NR d1-S(=O) 2-R c1、-S(=O) 2-NR a1R b1、-NR d1-S(=O) 2-NR a1R b1；其中，所述C 1-6烷基、所述C 1-6烷氧基、所述C 2-6炔基各自獨立地任選地被1個、2個或3個選自鹵素、氘、氰基或羥基的基團所取代；所述C 3-20環烷基、所述3到20員雜環基、所述C 6-14芳基、所述5或6員單環雜芳基、所述8至10員雙環雜芳基各自獨立地任選地被1、2、3或4個選自S3組的基團所取代；所述3到20員雜環基、所述5或6員單環雜芳基、所述8至10員雙環雜芳基各自獨立地含有1、2、3或4個獨立地選自N、O、S的雜原子作為環原子；
上述各基團中，各個R a、各個R b、各個R a1、各個R b1各自獨立地為H、C 1-6烷基、鹵代C 1-6烷基、氘代C 1-6烷基、-C 1-4烷基-羥基、-C 1-4烷基-氰基、-C 1-4烷基-鹵代C 1-6烷基、-C 1-4烷基-氘代C 1-6烷基、-C 1-4烷基-C 1-6烷氧基、-C 1-4烷基-鹵代C 1-6烷氧基、-C 1-4烷基-氘代C 1-6烷氧基、C 3-6單環環烷基、-C 1-4烷基-C 3-6單環環烷基、-C 1-4烷基-O-C 3-6單環環烷基、3至6員單環雜環基、-C 1-4烷基-3至6員單環雜環基、-C 1-4烷基-O-3至6員單環雜環基、苯基、-C 1-4烷基-苯基、5或6員單環雜芳基、-C 1-4烷基-5或6員單環雜芳基、8至10員雙環雜芳基、-C 1-4烷基-8至10員雙環雜芳基、-S(=O) 2-C 1-6烷基、-S(=O) 2-C 3-6單環環烷基、-S(=O) 2-3至6員單環雜環基、-C(=O)-C 1-6烷基、-C(=O)-C 3-6單環環烷基、-C(=O)-3至6員單環雜環基；其中，所述C 3-6單環環烷基、所述3至6員單環雜環基、所述苯基、所述5或6員單環雜芳基、所述8至10員雙環雜芳基任選地被1或2個選自下組的基團所取代：鹵素、羥基、羧基、硝基、C 1-6烷基、鹵代C 1-6烷基、氘代C 1-6烷基、C 1-6烷氧基、鹵代C 1-6烷氧基、氘代C 1-6烷氧基、-NH 2、-NHC 1-6烷基、-N(C 1-6烷基) 2、-C 1-4烷基-P(=O)-(C 1-6烷基) 2、-P(=O)-(C 1-6烷基) 2；或
各個R a和R b與和它們相連的氮原子共同形成3到20員雜環基；各個R a1和R b1與和它們相連的氮原子共同形成3到20員雜環基；其中，所述3到20員雜環基各自獨立地任選地被1或2個選自下組的基團所取代：鹵素、羥基、羧基、硝基、C 1-6烷基、鹵代C 1-6烷基、氘代C 1-6烷基、C 1-6烷氧基、鹵代C 1-6烷氧基、氘代C 1-6烷氧基、-NH 2、-NHC 1-6烷基、-N(C 1-6烷基) 2、-C 1-4烷基-P(=O)-(C 1-6烷基) 2、-P(=O)-(C 1-6烷基) 2；
上述各基團中，各個R d、各個R d1各自獨立地為H、C 1-6烷基或氘代C 1-6烷基；
上述各基團中，各個R c、各個R c1各自獨立地為H、C 1-6烷基、鹵代C 1-6烷基、氘代C 1-6烷基、C 1-6烷氧基、鹵代C 1-6烷氧基、氘代C 1-6烷氧基、-C 1-4烷基-鹵代C 1-6烷基、-C 1-4烷基-氘代C 1-6烷基、-C 1-4烷基-C 1-6烷氧基、-C 1-4烷基-鹵代C 1-6烷氧基、-C 1-4烷基-氘代C 1-6烷氧基、C 3-6單環環烷基、-C 1-4烷基-C 3-6單環環烷基、-C 1-4烷基-O-C 3-6單環環烷基、3至6員單環雜環基、-C 1-4烷基-3至6員單環雜環基、-C 1-4烷基-O-3至6員單環雜環基、苯基、-C 1-4烷基-苯基、5或6員單環雜芳基、-C 1-4烷基-5或6員單環雜芳基、8至10員雙環雜芳基或-C 1-4烷基-8至10員雙環雜芳基；所述C 3-6單環環烷基、所述3至6員單環雜環基、所述苯基、所述5或6員單環雜芳基、所述8至10員雙環雜芳基任選地被1或2個選自下組的基團所取代：鹵素、羥基、羧基、硝基、C 1-6烷基、鹵代C 1-6烷基、氘代C 1-6烷基、C 1-6烷氧基、鹵代C 1-6烷氧基、氘代C 1-6烷氧基、-NH 2、-NHC 1-6烷基、-N(C 1-6烷基) 2、-C 1-4烷基-P(=O)-(C 1-6烷基) 2、-P(=O)-(C 1-6烷基) 2；
上述各基團中，各個S3組的基團各自獨立地選自下組：氧代(C=O)、氰基、鹵素、羥基、羧基、硝基、C 1-6烷基、鹵代C 1-6烷基、氘代C 1-6烷基、C 1-6烷氧基、鹵代C 1-6烷氧基、氘代C 1-6烷氧基、-NH 2、-NHC 1-6烷基、-N(C 1-6烷基) 2、-C 1-4烷基-P(=O)-(C 1-6烷基) 2、-P(=O)-(C 1-6烷基) 2、3至6員單環雜環基；
上述各基團中，所述-C 1-4烷基-或-C 3-6單環環烷基-為未取代的；或者-C 1-4烷基-上的氫原子各自獨立地被選自鹵素、氰基、羥基、C 1-6烷基、鹵代C 1-6烷基、氘代C 1-6烷基、-CH 2-羥基、-CH 2-氰基、苯基的基團所取代或者C 1-4烷基上同一個碳原子的兩個氫原子同時被-(CH 2) j-取代進而形成環烷基，其中j為2、3、4、5或6；-C 3-6單環環烷基-上的氫原子各自獨立地被選自鹵素、氰基、羥基、C 1-6烷基、鹵代C 1-6烷基、氘代C 1-6烷基的基團所取代。
在一實施方案中，所述化合物為式(IA-1)化合物；
式中，R 1、Y、 、R 2、m1、 、R 3、m2定義同式(IA)；
L 1為一個鍵、-C 1-4烷基-、-C 3-6單環環烷基-、-O-、-S-、-NH-、-C(=O)-、-S(=O)-或-S(=O) 2-；
R 4選自下組：H、鹵素、氰基、羥基、羧基、硝基、C 1-6烷基、C 1-6烷氧基、C 3-20環烷基、3到20員雜環基、C 6-14芳基、5或6員單環雜芳基、8至10員雙環雜芳基、-C 1-4烷基-羥基、-C 1-4烷基-氰基、-C 1-4烷基-羧基、-C 1-4烷基-C 1-6烷基、-C 1-4烷基-C 1-6烷氧基、-C 1-4烷基-C 3-20環烷基、-C 1-4烷基-O-C 3-20環烷基、-C 1-4烷基-3到20員雜環基、-C 1-4烷基-O-3到20員雜環基、-C 1-4烷基-C 6-14芳基、-C 1-4烷基-O-C 6-14芳基、-C 1-4烷基-5或6員單環雜芳基、-C 1-4烷基-O-5或6員單環雜芳基、-C 1-4烷基-8至10員雙環雜芳基、-C 1-4烷基-O-8至10員雙環雜芳基、-C 1-4烷基-NR aR b、-C 1-4烷基-C(=O)-NR aR b、-C 1-4烷基-NR d-C(=O)-R c、-C 1-4烷基-NR d-C(=O)-NR aR b、-C 1-4烷基-S(=O) 2-R c、-C 1-4烷基-NR d-S(=O) 2-R c、-C 1-4烷基-S(=O) 2-NR aR b、-C 1-4烷基-NR d-S(=O) 2-NR aR b、-C(=O)-C 1-6烷基、-C(=O)-C 3-20環烷基、-C(=O)-3到20員雜環基、-C(=O)-C 6-14芳基、-C(=O)-5或6員單環雜芳基、-C(=O)-8至10員雙環雜芳基、-C(=O)-NR aR b、-NR d-C(=O)-R c、-NR d-C(=O)-NR aR b、-S(=O) 2-R c、-NR d-S(=O) 2-R c、-S(=O) 2-NR aR b、-NR d-S(=O) 2-NR aR b、-NR aR b、-OR c；所述C 1-6烷基、所述C 1-6烷氧基各自獨立地任選地被鹵素、氘、氰基或羥基取代；所述C 3-20環烷基、所述3到20員雜環基、所述C 6-14芳基、所述5或6員單環雜芳基、所述8至10員雙環雜芳基各自獨立地任選地被1、2、3或4個選自S1組的基團所取代；所述3到20員雜環基、所述5或6員單環雜芳基、所述8至10員雙環雜芳基各自獨立地含有1、2、3或4個獨立地選自N、O、S的雜原子作為環原子；其中，R a、R b、R c、R d、S1組各自定義同式(IA)。
在一實施方案中，所述化合物為式(IA-1)化合物；式中，R 1、Y、 、R 2、m1、 、R 3、m2定義同式(IA)；L 1為一個鍵或-C(=O)-；R 4為C 3-20環烷基、3到20員雜環基、C 6-14芳基、5或6員單環雜芳基或8至10員雙環雜芳基；其中，所述C 3-20環烷基、所述3到20員雜環基、所述C 6-14芳基、所述5或6員單環雜芳基、所述8至10員雙環雜芳基各自獨立地任選地被1、2、3或4個選自S1組的基團所取代；或者L 1為一個鍵；R 4為H。
在一實施方案中，式(IA-1)中，Y為碳原子。
在一實施方案中，所述化合物為式(IA1)化合物、式(IA2)化合物、式(IA3)化合物、式(IA4)化合物、式(IA5)化合物或式(IA6)化合物； 各式中，Y、L 1、R 1、R 2、 、R 3、R 4、m2各自獨立地定義同式(IA-1)。
在一實施方案中，式(IA1)化合物、式(IA2)化合物、式(IA3)化合物、式(IA4)化合物、式(IA5)化合物或式(IA6)化合物中，Y各自獨立地為碳原子。
在一實施方案中，所述化合物為式(IB)化合物； 式中，R 1、 、R 2、m1、 、R 3、m2定義同式IA。
在一實施方案中，所述化合物為式(IB1)化合物、式(IB2)化合物、式(IB3)化合物、式(IB4)化合物、式(IB5)化合物或式(IB6)化合物； 各式中，R 1、R 2、 、R 3、m2各自獨立地定義同式IB。
在一實施方案中，R 1為 ；其中，R 1a為C 1-6烷基、鹵代C 1-6烷基、氘代C 1-6烷基、C 1-6烷氧基、鹵代C 1-6烷氧基、氘代C 1-6烷氧基、-C 1-4烷基-羥基、-C 1-4烷基-氰基、-C 1-4烷基-C 1-6烷氧基、-C 1-4烷基-鹵代C 1-6烷氧基、或-C 1-4烷基-氘代C 1-6烷氧基；R 1b為H、鹵素、C 1-3烷基、鹵代C 1-3烷基、氘代C 1-3烷基、C 1-3烷氧基、鹵代C 1-3烷氧基、或氘代C 1-3烷氧基。
在一實施方案中，R 1為 ；其中，R 1a為C 3-6單環環烷基、3到6員單環雜環基、苯基、5或6員單環雜芳基、或8至10員雙環雜芳基；R 1b為H、鹵素、C 1-3烷基、鹵代C 1-3烷基、氘代C 1-3烷基、C 1-3烷氧基、鹵代C 1-3烷氧基、或氘代C 1-3烷氧基；其中，所述C 3-6單環環烷基、所述3到6員單環雜環基、所述苯基、所述5或6員單環雜芳基、所述8至10員雙環雜芳基各自獨立地任選地被1、2、3或4個選自S1組的基團所取代。
在一實施方案中，R 1為H、C 1-4烷基、C 1-4烷氧基、-C 1-2烷基-羥基、-C 1-2烷基-氰基、-C 1-2烷基-羧基、-C 1-2烷基-C 1-4烷基、-C 1-2烷基-C 1-4烷氧基、C 3-6單環環烷基、3到6員單環雜環基、7至11員螺雜環基、6至10員稠雜環基、6到14員橋雜環基、苯基、5或6員單環雜芳基、8至10員雙環雜芳基、-C 1-2烷基-C 3-6單環環烷基、-C 1-2烷基-O-C 3-6單環環烷基、-C 1-2烷基-3到6員單環雜環基、-C 1-2烷基-O-3到6員單環雜環基、-C 1-2烷基-7至11員螺雜環基、-C 1-2烷基-O-7至11員螺雜環基、-C 1-2烷基-6至10員稠雜環基、-C 1-2烷基-O-6至10員稠雜環基、-C 1-2烷基-6到14員橋雜環基、-C 1-2烷基-O-6到14員橋雜環基、-C 1-2烷基-苯基、-C 1-2烷基-O-苯基、-C 1-2烷基-5或6員單環雜芳基、-C 1-2烷基-O-5或6員單環雜芳基、-C 1-2烷基-8至10員雙環雜芳基、-C 1-2烷基-O-8至10員雙環雜芳基、-C 1-2烷基-NR aR b、-C 1-2烷基-NR d-C(=O)-R c、-C 1-2烷基-NR d-C(=O)-NR aR b、-C 1-2烷基-NR d-S(=O) 2-R c、-C 1-2烷基-NR d-S(=O) 2-NR aR b、-C 1-2烷基-C(=O)-NR aR b、-C 1-2烷基-S(=O) 2-R c、-C 1-2烷基-S(=O) 2-NR aR b、-C(=O)-C 1-4烷基、-C(=O)-C 3-6單環環烷基、-C(=O)-3到6員單環雜環基、-C(=O)-7至11員螺雜環基、-C(=O)-6至10員稠雜環基、-C(=O)-6到14員橋雜環基、-C(=O)-苯基、-C(=O)-5或6員單環雜芳基 、-C(=O)-8至10員雙環雜芳基、-C(=O)-NR aR b、-S(=O) 2-R c或-S(=O) 2-NR aR b；其中，所述C 1-4烷基、所述C 1-4烷氧基各自獨立地任選地被1個、2個或3個選自鹵素、氘、氰基或羥基的基團所取代；所述C 3-6單環環烷基、所述3到6員單環雜環基、所述7至11員螺雜環基、所述6至10員稠雜環基、所述6到14員橋雜環基、所述苯基、所述5或6員單環雜芳基、所述8至10員雙環雜芳基各自獨立地任選地被1、2、3或4個選自S1組的基團所取代。
在一實施方案中，R 1為苯基；所述苯基任選地被1、2、3或4個選自S1組的基團所取代。
在一實施方案中，R 4為C 3-6單環環烷基、3到6員單環雜環基、苯基、5或6員單環雜芳基或8至10員雙環雜芳基；其中，所述C 3-6單環環烷基、所述3到6員單環雜環基、所述苯基、所述5或6員單環雜芳基、所述8至10員雙環雜芳基各自獨立地任選地被1、2、3或4個選自S1組的基團所取代。
在一實施方案中，R 4為3到6員單環雜環基；所述3至6員單環雜環基選自：氮丙環、環氧乙烷、氮雜環丁烷、氧雜環丁烷、四氫呋喃、四氫噻吩、四氫吡咯、呱啶、呱嗪、嗎啉、硫代嗎啉、硫代嗎啉-1,1-二氧化物、四氫吡喃；所述3到6員單環雜環基任選地被1、2、3或4個選自S1組的基團所取代。
在一實施方案中，R 4為5或6員單環雜芳基；所述5或6員單環雜芳基選自下組：噻吩、N-烷環吡咯、呋喃、噻唑、異噻唑、咪唑、噁唑、吡咯、吡唑、三唑、1,2,3-三唑、1,2,4-三唑、1,2,5-三唑、1,3,4-三唑、四唑、異噁唑、噁二唑、1,2,3-噁二唑、1,2,4-噁二唑、1,2,5-噁二唑、1,3,4-噁二唑、噻二唑、吡啶、噠嗪、嘧啶、吡嗪；所述5或6員單環雜芳基任選地被1、2、3或4個選自S1組的基團所取代。
在一實施方案中，式(IA)化合物或其藥學上可接受的鹽、立體異構體、溶劑化物或前藥藉由包括以下步驟的方法製備得到： 其中，Y、Z、R 1、L 1、R 4、R 2、 、 、m1、m2、R 3的定義同前。
R 6、R 7為不同的基團，任選自-CHO、-COCH2、-COOC2H5、-OCH3、-CN、-NO2、-F、-Cl、Br、硼酸基或硼酸酯基。
所述式(IA)化合物或其藥學上可接受的鹽、立體異構體、溶劑化物或前藥藉由式(IA7)化合物上的R 6與式(IA8化合物)上的R 7在鈀催化劑催化下經過鈴木反應製備得到，或， 藉由不具有式(IA7)化合物中-R 1、-R 1-NH、-L 1-R 4或-R 4基團中的一個或多個的化合物與不具有式(IA8)化合物中-R 2和/或-R 3基團的化合物藉由鈴木反應製備得到不含該些基團的中間體，再藉由中間體與含該些基團的化合物取代反應得到。
本發明第二方面提供了式(IC)化合物或其藥學上可接受的鹽、立體異構體、溶劑化物或前藥：
式中，
X為CR 5或N；Y為CH或N；且X和Y不能同時為N；R 5為H、C 1-6烷基或C 3-6單環環烷基；
為苯基或5或6員單環雜芳基；所述5或6員單環雜芳基含有1、2或3個獨立地選自N、O、S的雜原子作為環原子；所述苯基或5或6員單環雜芳基各自獨立地任選地被m1個R 2取代；m1為1、2、3或4；
所述R 2為 ；其中，
R 2a為H、氘、C 1-6烷基、苯基或氘代C 1-6烷基和R 2b為H、氘、C 1-6烷基或氘代C 1-6烷基或者R 2a和R 2b與和它們連接的碳原子共同構成C 3-6單環環烷基，且R 2a與碳原子之間的鍵為單鍵；R 2c為H、氘、C 1-6烷基、氘代C 1-6烷基、-C 1-4烷基-C 3-6單環環烷基或C 3-6單環環烷基；R 2d為H、氘、C 1-6烷基、氘代C 1-6烷基、C 3-20環烷基或3到20員雜環基；
或當R 2a和R 2d與和它們相連的氮原子共同構成3到20員雜環基、5或6員單環雜芳基或8至10員雙環雜芳基時，R 2c為H、氘、C 1-6烷基或氘代C 1-6烷基；R 2b為H、氘、C 1-6烷基或氘代C 1-6烷基且R 2a與碳原子之間的鍵為單鍵或R 2b為無且R 2a與碳原子之間的鍵為雙鍵；所述3到20員雜環基、所述5或6員單環雜芳基或所述8至10員雙環雜芳基各自獨立地含有一個氮原子和任選地1或2個獨立地選自N、O、S的雜原子作為環原子；且所述3到20員雜環基、所述5或6員單環雜芳基、所述8至10員雙環雜芳基各自獨立地任選地被1、2、3或4個選自S1組的基團所取代；
或當R 2c和R 2d與和它們相連的氮原子共同構成3到20員雜環基、5或6員單環雜芳基或8至10員雙環雜芳基時，R 2a為H、氘、C 1-6烷基或氘代C 1-6烷基；R 2b為H、氘、C 1-6烷基或氘代C 1-6烷基；且R 2a與碳原子之間的鍵為單鍵；所述3到20員雜環基、所述5或6員單環雜芳基或所述8至10員雙環雜芳基各自獨立地含有一個氮原子和任選地1或2個獨立地選自N、O、S的雜原子作為環原子；且所述3到20員雜環基、所述5或6員單環雜芳基、所述8至10員雙環雜芳基各自獨立地任選地被1、2、3或4個選自S1組的基團所取代；
或所述R 2為 ； 為含有一個氮原子且藉由該氮原子與分子其餘部分連接的3到20員雜環基、5或6員單環雜芳基或8至10員雙環雜芳基； 還任選地含有1或2個獨立地選自N、O、S的雜原子作為環原子；所述3到20員雜環基、所述5或6員單環雜芳基、所述8至10員雙環雜芳基各自獨立地任選地被1、2、3或4個選自S1組的基團所取代；
為苯基或5或6員單環雜芳基；所述5或6員單環雜芳基、含有1、2或3個獨立地選自N、O、S的雜原子作為環原子；所述苯基、所述5或6員單環雜芳基各自獨立地任選地被m2個R 3取代；
m2為1、2、3或4；各個R 3各自獨立地選自下組：H、氧代(=O)、鹵素、氰基、羥基、羧基、硝基、C 1-6烷基、C 1-6烷氧基、C 3-20環烷基、3到20員雜環基、C 6-14芳基、5或6員單環雜芳基、8至10員雙環雜芳基、-O-C 3-20環烷基、-O-3到20員雜環基、-O-C 6-14芳基、-O-5或6員單環雜芳基、-O-8至10員雙環雜芳基、-C 1-4烷基-羥基、-C 1-4烷基-氰基、-C 1-4烷基-C 1-6烷基、-C 1-4烷基-C 1-6烷氧基、-C 1-4烷基-C 3-20環烷基、-C 1-4烷基-O-C 3-20環烷基、-C 1-4烷基-3到20員雜環基、-C 1-4烷基-O-3到20員雜環基、-C 1-4烷基-C 6-14芳基、-C 1-4烷基-O-C 6-14芳基、-C 1-4烷基-5或6員單環雜芳基、-C 1-4烷基-O-5或6員單環雜芳基、-C 1-4烷基-8至10員雙環雜芳基、-C 1-4烷基-O-8至10員雙環雜芳基、-C 1-4烷基-NR aR b、-C 1-4烷基-C(=O)-NR aR b、-C 1-4烷基-NR d-C(=O)-R c、-C 1-4烷基-NR d-C(=O)-NR aR b、-C 1-4烷基-S(=O) 2-R c、-C 1-4烷基-NR d-S(=O) 2-R c、-C 1-4烷基-S(=O) 2-NR aR b、-C 1-4烷基-NR d-S(=O) 2-NR aR b、-C 1-4烷基-羧基、-C(=O)-C 1-6烷基、-C(=O)O-C 1-6烷基、-C(=O)-C 1-4烷基-羥基、-C(=O)-C 1-4烷基-C 1-6烷氧基、-C(=O)-C 1-4烷基-O-C 3-20環烷基、-C(=O)-C 3-20環烷基、-C(=O)O-C 3-20環烷基、-C(=O)-C 1-4烷基-C 3-20環烷基、-C(=O)-3到20員雜環基、-C(=O)-C 1-4烷基-3到20員雜環基、-C(=O)-C 6-14芳基、-C(=O)-5或6員單環雜芳基、-C(=O)-8至10員雙環雜芳基、-C(=O)-NR aR b、-NR d-C(=O)-R c、-NR d-C(=O)-NR aR b、-S(=O) 2-R c、-NR d-S(=O) 2-R c、-S(=O) 2-NR aR b、-NR d-S(=O) 2-NR aR b、-NR aR b、-OR c、-C 1-4烷基-P(=O)(C 1-6烷基) 2、-P(=O)(C 1-6烷基) 2；其中，所述C 1-6烷基、所述C 1-6烷氧基各自獨立地任選地被1、2、3或4個選自鹵素、氘、氰基、5到6員雜環基和羥基取代；所述C 3-20環烷基、所述3到20員雜環基、所述C 6-14芳基、所述5或6員單環雜芳基、所述8至10員雙環雜芳基各自獨立地任選地被1、2、3或4個選自S2組的基團所取代；所述3到20員雜環基、所述5或6員單環雜芳基、所述8至10員雙環雜芳基各自獨立地含有1、2、3或4個獨立地選自N、O、S的雜原子作為環原子；
或者 為C 5-7單環環烷基或5、6或7員單環雜環基；所述5、6或7員雜環基各自獨立地含有1、2或3個獨立地選自N、O、S的雜原子作為環原子；所述C 5-7單環環烷基、所述5、6或7員單環雜環基各自獨立地任選地被m2個R 3取代；
m2為1、2、3或4；各個R 3各自獨立地選自下組：H、氧代(=O)、鹵素、氰基、羥基、羧基、硝基、C 1-6烷基、C 1-6烷氧基、C 3-20環烷基、3到20員雜環基、C 6-14芳基、5或6員單環雜芳基、8至10員雙環雜芳基、-O-C 3-20環烷基、-O-3到20員雜環基、-O-C 6-14芳基、-O-5或6員單環雜芳基、-O-8至10員雙環雜芳基、-C 1-4烷基-羥基、-C 1-4烷基-氰基、-C 1-4烷基-C 1-6烷基、-C 1-4烷基-C 1-6烷氧基、-C 1-4烷基-C 3-20環烷基、-C 1-4烷基-O-C 3-20環烷基、-C 1-4烷基-3到20員雜環基、-C 1-4烷基-O-3到20員雜環基、-C 1-4烷基-C 6-14芳基、-C 1-4烷基-O-C 6-14芳基、-C 1-4烷基-5或6員單環雜芳基、-C 1-4烷基-O-5或6員單環雜芳基、-C 1-4烷基-8至10員雙環雜芳基、-C 1-4烷基-O-8至10員雙環雜芳基、-C 1-4烷基-NR aR b、-C 1-4烷基-C(=O)-NR aR b、-C 1-4烷基-NR d-C(=O)-R c、-C 1-4烷基-NR d-C(=O)-NR aR b、-C 1-4烷基-S(=O) 2-R c、-C 1-4烷基-NR d-S(=O) 2-R c、-C 1-4烷基-S(=O) 2-NR aR b、-C 1-4烷基-NR d-S(=O) 2-NR aR b、-C 1-4烷基-羧基、-C(=O)-C 1-6烷基、-C(=O)O-C 1-6烷基、-C(=O)-C 1-4烷基-羥基、-C(=O)-C 1-4烷基-C 1-6烷氧基、-C(=O)-C 1-4烷基-O-C 3-20環烷基、-C(=O)-C 3-20環烷基、-C(=O)O-C 3-20環烷基、-C(=O)-C 1-4烷基-C 3-20環烷基、-C(=O)-3到20員雜環基、-C(=O)-C 1-4烷基-3到20員雜環基、-C(=O)-C 6-14芳基、-C(=O)-5或6員單環雜芳基、-C(=O)-8至10員雙環雜芳基、-C(=O)-NR aR b、-NR d-C(=O)-R c、-NR d-C(=O)-NR aR b、-S(=O) 2-R c、-NR d-S(=O) 2-R c、-S(=O) 2-NR aR b、-NR d-S(=O) 2-NR aR b、-NR aR b、-OR c、-C 1-4烷基-P(=O)(C 1-6烷基) 2、-P(=O)(C 1-6烷基) 2、=CR 3aR 3b；其中，2個R 3可以同時取代一個碳上的2個氫原子使得2個R 3和與它們相連的碳原子共同形成C 3-6單環環烷基或3到6員單環雜環基；或者2個R 3分別取代不同碳上的2個氫原子且2個R 3相連形成-CH 2-、-CH 2CH 2-或-CH 2CH 2CH 2-；其中，所述C 1-6烷基、所述C 1-6烷氧基各自獨立地任選地被1、2、3或4個選自鹵素、氘、氰基、5到6員雜環基和羥基取代；所述C 3-20環烷基、所述3到20員雜環基、所述C 6-14芳基、所述5或6員單環雜芳基、所述8至10員雙環雜芳基各自獨立地任選地被1、2、3或4個選自S2組的基團所取代；所述3到20員雜環基、所述5或6員單環雜芳基、所述8至10員雙環雜芳基各自獨立地含有1、2、3或4個獨立地選自N、O、S的雜原子作為環原子；其中，R 3a、R 3b各自獨立地為氫、鹵素、氰基、C 1-6烷基、鹵代C 1-6烷基、C 6-14芳基或5或6員單環雜芳基；所述C 6-14芳基或5或6員單環雜芳基任選地被1、2、3個選自鹵素、氰基、C 1-4烷基、C 1-4烷氧基、鹵代C 1-4烷基、鹵代C 1-4烷氧基的基團取代；或者R 3a、R 3b與相連的碳原子共同構成C 3-6單環環烷基或3到6員單環雜環基；所述C 3-6單環環烷基或3到6員單環雜環基任選地被1、2、3個選自鹵素、氰基、C 1-4烷基、C 1-4烷氧基、鹵代C 1-4烷基、鹵代C 1-4烷氧基、C 6-14芳基、5或6員單環雜芳基的基團取代；
為5至7員雜芳環；其中， 上m3個氫原子任選地被m3個R 4’取代；m3為1、2、3或4；R 4’選自下組：H、氧代(C=O)、鹵素、氰基、羥基、羧基、硝基、C 1-6烷基、C 2-6烯基、C 2-6炔基、C 1-6烷氧基、C 3-20環烷基、3到20員雜環基、5或6員單環雜芳基、8至10員雙環雜芳基、-C≡C-C 3-20環烷基、-C≡C-3到20員雜環基、-C≡C-C 6-14芳基、-C≡C-5或6員單環雜芳基、-C≡C-8至10員雙環雜芳基、-C≡C-C(=O)-NR aR b、-C≡C-C 1-4烷基-C(=O)-NR aR b、-C 1-4烷基-羥基、-C 1-4烷基-氰基、-C 1-4烷基-羧基、-C 1-4烷基-C 1-6烷基、-C 1-4烷基-C 1-6烷氧基、-C 1-4烷基-C 3-20環烷基、-C 1-4烷基-O-C 3-20環烷基、-C 1-4烷基-3到20員雜環基、-C 1-4烷基-O-3到20員雜環基、-C 1-4烷基-C 6-14芳基、-C 1-4烷基-O-C 6-14芳基、-C 1-4烷基-5或6員單環雜芳基、-C 1-4烷基-O-5或6員單環雜芳基、-C 1-4烷基-8至10員雙環雜芳基、-C 1-4烷基-O-8至10員雙環雜芳基、-C 1-4烷基-NR aR b、-C 1-4烷基-C(=O)-NR aR b、-C 1-4烷基-NR d-C(=O)-R c、-C 1-4烷基-NR d-C(=O)-NR aR b、-C 1-4烷基-S(=O) 2-R c、-C 1-4烷基-NR d-S(=O) 2-R c、-C 1-4烷基-S(=O) 2-NR aR b、-C 1-4烷基-NR d-S(=O) 2-NR aR b、-C(=O)-C 1-6烷基、-C(=O)-C 3-20環烷基、-C(=O)-3到20員雜環基、-C(=O)-C 6-14芳基、-C(=O)-5或6員單環雜芳基、-C(=O)-8至10員雙環雜芳基、-C(=O)-NR aR b、-NR d-C(=O)-R c、-NR d-C(=O)-NR aR b、-S(=O) 2-R c、-NR d-S(=O) 2-R c、-S(=O) 2-NR aR b、-NR d-S(=O) 2-NR aR b、-NR aR b、-OR c、-C 1-4烷基-P(=O)-(C 1-6烷基) 2、-P(=O)-(C 1-6烷基) 2；其中，所述C 1-6烷基、所述C 1-6烷氧基、所述C 2-6烯基、所述C 2-6炔基各自獨立地任選地被1個、2個或3個選自鹵素、氘、氰基或羥基的基團所取代；所述C 3-20環烷基、所述3到20員雜環基、所述C 6-14芳基、所述5或6員單環雜芳基、所述8至10員雙環雜芳基各自獨立地任選地被1、2、3或4個選自S1組的基團所取代；所述3到20員雜環基、所述5或6員單環雜芳基、所述8至10員雙環雜芳基各自獨立地含有1、2、3或4個獨立地選自N、O、S的雜原子作為環原子；
或者 為5至7員雜環；其中， 上m3個氫原子任選地被m3個R 4’取代；m3為1、2、3或4；R 4’選自下組：H、氧代(C=O)、鹵素、氰基、羥基、羧基、硝基、C 1-6烷基、C 2-6烯基、C 2-6炔基、C 1-6烷氧基、C 3-20環烷基、3到20員雜環基、C 6-14芳基、5或6員單環雜芳基、8至10員雙環雜芳基、-C≡C-C 3-20環烷基、-C≡C-3到20員雜環基、-C≡C-C 6-14芳基、-C≡C-5或6員單環雜芳基、-C≡C-8至10員雙環雜芳基、-C≡C-C(=O)-NR aR b、-C≡C-C 1-4烷基-C(=O)-NR aR b、-C 1-4烷基-羥基、-C 1-4烷基-氰基、-C 1-4烷基-羧基、-C 1-4烷基-C 1-6烷基、-C 1-4烷基-C 1-6烷氧基、-C 1-4烷基-C 3-20環烷基、-C 1-4烷基-O-C 3-20環烷基、-C 1-4烷基-3到20員雜環基、-C 1-4烷基-O-3到20員雜環基、-C 1-4烷基-C 6-14芳基、-C 1-4烷基-O-C 6-14芳基、-C 1-4烷基-5或6員單環雜芳基、-C 1-4烷基-O-5或6員單環雜芳基、-C 1-4烷基-8至10員雙環雜芳基、-C 1-4烷基-O-8至10員雙環雜芳基、-C 1-4烷基-NR aR b、-C 1-4烷基-C(=O)-NR aR b、-C 1-4烷基-NR d-C(=O)-R c、-C 1-4烷基-NR d-C(=O)-NR aR b、-C 1-4烷基-S(=O) 2-R c、-C 1-4烷基-NR d-S(=O) 2-R c、-C 1-4烷基-S(=O) 2-NR aR b、-C 1-4烷基-NR d-S(=O) 2-NR aR b、-C(=O)-C 1-6烷基、-C(=O)-C 3-20環烷基、-C(=O)-3到20員雜環基、-C(=O)-C 6-14芳基、-C(=O)-5或6員單環雜芳基、-C(=O)-8至10員雙環雜芳基、-C(=O)-NR aR b、-NR d-C(=O)-R c、-NR d-C(=O)-NR aR b、-S(=O) 2-R c、-NR d-S(=O) 2-R c、-S(=O) 2-NR aR b、-NR d-S(=O) 2-NR aR b、-NR aR b、-OR c、-C 1-4烷基-P(=O)-(C 1-6烷基) 2、-P(=O)-(C 1-6烷基) 2；所述C 1-6烷基、所述C 1-6烷氧基、所述C 2-6烯基、所述C 2-6炔基各自獨立地任選地被1個、2個或3個選自鹵素、氘、氰基或羥基的基團所取代；所述C 3-20環烷基、所述3到20員雜環基、所述C 6-14芳基、所述5或6員單環雜芳基、所述8至10員雙環雜芳基各自獨立地任選地被1、2、3或4個選自S1組的基團所取代；所述3到20員雜環基、所述5或6員單環雜芳基、所述8至10員雙環雜芳基各自獨立地含有1、2、3或4個獨立地選自N、O、S的雜原子作為環原子；
上述各基團中，各個S1組的基團各自獨立地選自下組：氧代(=O)、鹵素、氰基、羥基、羧基、硝基、C 1-6烷基、C 2-6烯基、C 2-6炔基、C 1-6烷氧基、C 3-20環烷基、3到20員雜環基、C 6-14芳基、5或6員單環雜芳基、8至10員雙環雜芳基、-O-C 3-20環烷基、-O-3到20員雜環基、-O-C 6-14芳基、-O-5或6員單環雜芳基、-O-8至10員雙環雜芳基、-C≡C-C 3-20環烷基、-C≡C-3到20員雜環基、-C≡C-C 6-14芳基、-C≡C-5或6員單環雜芳基、-C≡C-8至10員雙環雜芳基、-C 1-4烷基-羥基、-C 1-4烷基-氰基、-C 1-4烷基-C 1-6烷基、-C 1-4烷基-C 1-6烷氧基、-C 1-4烷基-C 3-20環烷基、-C 1-4烷基-O-C 3-20環烷基、-C 1-4烷基-3至20員雜環基、-C 1-4烷基-O-3至20員雜環基、-C 1-4烷基-C 6-14芳基、-C 1-4烷基-O-C 6-14芳基、-C 1-4烷基-5或6員單環雜芳基、-C 1-4烷基-O-5或6員單環雜芳基、-C 1-4烷基-8至10員雙環雜芳基、-C 1-4烷基-O-8至10員雙環雜芳基、-S(=O) 2-C 1-6烷基、-S(=O) 2-C 3-20環烷基、-S(=O) 2-3至20員雜環基、-C(=O)O-C 1-6烷基、-C(=O)O-C 3-20環烷基、-C(=O)-C 1-6烷基、-C(=O)-C 3-20環烷基、-C(=O)-C 6-14芳基、-NR a1R b1、-C(=O)-NR a1R b1、-OR c1、-C 1-4烷基-S(=O) 2-C 1-6烷基、-C 1-4烷基-S(=O) 2-C 3-20環烷基、-C 1-4烷基-S(=O) 2-3至20員雜環基、-C 1-4烷基-C(=O)O-C 1-6烷基、-C 1-4烷基-C(=O)O-C 3-20環烷基、-C 1-4烷基-C(=O)-C 1-6烷基、-C 1-4烷基-C(=O)-C 3-20環烷基、-C 1-4烷基-C(=O)-C 6-14芳基、-C(=O)-5或6員單環雜芳基、-C(=O)-8至10員雙環雜芳基、-C 1-4烷基-NR a1R b1、-C 1-4烷基-C(=O)-NR a1R b1、-C≡C-C(=O)-NR a1R b1、-C≡C-C 1-4烷基-C(=O)-NR a1R b1、-C 1-4烷基-OR c1、-C 1-4烷基-P(=O)-(C 1-6烷基) 2、-P(=O)-(C 1-6烷基) 2、-C 1-4烷基-NR d1-C(=O)-R c1、-C 1-4烷基-NR d1-C(=O)-NR a1R b1、-C 1-4烷基-NR d1-S(=O) 2-R c1、-C 1-4烷基-S(=O) 2-NR a1R b1、-C 1-4烷基-NR d1-S(=O) 2-NR a1R b1、-NR d1-C(=O)-R c1、-NR d1-C(=O)-NR a1R b1、-NR d1-S(=O) 2-R c1、-S(=O) 2-NR a1R b1、-NR d1-S(=O) 2-NR a1R b1；其中，所述C 1-6烷基、所述C 1-6烷氧基、所述C 2-6烯基、所述C 2-6炔基各自獨立地任選地被1個、2個或3個選自鹵素、氘、氰基或羥基的基團所取代；所述C 3-20環烷基、所述3到20員雜環基、所述C 6-14芳基、所述5或6員單環雜芳基、所述8至10員雙環雜芳基各自獨立地任選地被1、2、3或4個選自S3組的基團所取代；所述3到20員雜環基、所述5或6員單環雜芳基、所述8至10員雙環雜芳基各自獨立地含有1、2、3或4個獨立地選自N、O、S的雜原子作為環原子；
上述各基團中，各個S2組的基團各自獨立地選自下組：氧代(=O)、鹵素、氰基、羥基、羧基、硝基、C 1-6烷基、C 2-6炔基、C 1-6烷氧基、C 3-20環烷基、3到20員雜環基、C 6-14芳基、5或6員單環雜芳基、8至10員雙環雜芳基、-O-3到20員雜環基、-O-5或6員單環雜芳基、-O-8至10員雙環雜芳基、-C 1-4烷基-羥基、-C 1-4烷基-氰基、-C 1-4烷基-C 1-6烷基、-C 1-4烷基-C 1-6烷氧基、-C 1-4烷基-C 3-20環烷基、-C 1-4烷基-O-C 3-20環烷基、-C 1-4烷基-3至20員雜環基、-C 1-4烷基-O-3至20員雜環基、-C 1-4烷基-5或6員單環雜芳基、-C 1-4烷基-O-5或6員單環雜芳基、-C 1-4烷基-8至10員雙環雜芳基、-C 1-4烷基-O-8至10員雙環雜芳基、-S(=O) 2-C 1-6烷基、-S(=O) 2-C 3-20環烷基、-S(=O) 2-3至20員雜環基、-S(=O) 2-5或6員單環雜芳基、-S(=O) 2-8至10員雙環雜芳基、-C(=O)O-C 1-6烷基、-C(=O)O-C 3-20環烷基、-C(=O)O-3至20員雜環基、-C(=O)O-5或6員單環雜芳基、-C(=O)O-8至10員雙環雜芳基、-NR a1R b1、-C(=O)-NR a1R b1、-OR c1、-C 1-4烷基-C(=O)O-C 1-6烷基、-C 1-4烷基-C(=O)O-C 3-20環烷基、-C 1-4烷基-NR a1R b1、-C 1-4烷基-C(=O)-NR a1R b1、-C≡C-C(=O)-NR a1R b1、-C≡C-C 1-4烷基-C(=O)-NR a1R b1、-C 1-4烷基-OR c1、-C 1-4烷基-P(=O)-(C 1-6烷基) 2、-P(=O)-(C 1-6烷基) 2、-C 1-4烷基-NR d1-C(=O)-R c1、-C 1-4烷基-NR d1-C(=O)-NR a1R b1、-C 1-4烷基-NR d1-S(=O) 2-R c1、-C 1-4烷基-S(=O) 2-NR a1R b1、-C 1-4烷基-NR d1-S(=O) 2-NR a1R b1、-NR d1-C(=O)-R c1、-NR d1-C(=O)-NR a1R b1、-NR d1-S(=O) 2-R c1、-S(=O) 2-NR a1R b1、-NR d1-S(=O) 2-NR a1R b1；其中，所述C 1-6烷基、所述C 1-6烷氧基、所述C 2-6炔基各自獨立地任選地被1個、2個或3個選自鹵素、氘、氰基或羥基的基團所取代；所述C 3-20環烷基、所述3到20員雜環基、所述C 6-14芳基、所述5或6員單環雜芳基、所述8至10員雙環雜芳基各自獨立地任選地被1、2、3或4個選自S3組的基團所取代；所述3到20員雜環基、所述5或6員單環雜芳基、所述8至10員雙環雜芳基各自獨立地含有1、2、3或4個獨立地選自N、O、S的雜原子作為環原子；
上述各基團中，各個R a、各個R b、各個R a1、各個R b1各自獨立地為H、C 1-6烷基、鹵代C 1-6烷基、氘代C 1-6烷基、-C 1-4烷基-羥基、-C 1-4烷基-氰基、-C 1-4烷基-鹵代C 1-6烷基、-C 1-4烷基-氘代C 1-6烷基、-C 1-4烷基-C 1-6烷氧基、-C 1-4烷基-鹵代C 1-6烷氧基、-C 1-4烷基-氘代C 1-6烷氧基、C 3-6單環環烷基、-C 1-4烷基-C 3-6單環環烷基、-C 1-4烷基-O-C 3-6單環環烷基、3至6員單環雜環基、-C 1-4烷基-3至6員單環雜環基、-C 1-4烷基-O-3至6員單環雜環基、苯基、-C 1-4烷基-苯基、5或6員單環雜芳基、-C 1-4烷基-5或6員單環雜芳基、8至10員雙環雜芳基、-C 1-4烷基-8至10員雙環雜芳基、-S(=O) 2-C 1-6烷基、-S(=O) 2-C 3-6單環環烷基、-S(=O) 2-3至6員單環雜環基、-C(=O)-C 1-6烷基、-C(=O)-C 3-6單環環烷基、-C(=O)-3至6員單環雜環基；其中，所述C 3-6單環環烷基、所述3至6員單環雜環基、所述苯基、所述5或6員單環雜芳基、所述8至10員雙環雜芳基任選地被1或2個選自下組的基團所取代：鹵素、羥基、羧基、硝基、C 1-6烷基、鹵代C 1-6烷基、氘代C 1-6烷基、C 1-6烷氧基、鹵代C 1-6烷氧基、氘代C 1-6烷氧基、-NH 2、-NHC 1-6烷基、-N(C 1-6烷基) 2、-C 1-4烷基-P(=O)-(C 1-6烷基) 2、-P(=O)-(C 1-6烷基) 2；或
各個R a和R b與和它們相連的氮原子共同形成3到20員雜環基；各個R a1和R b1與和它們相連的氮原子共同形成3到20員雜環基；其中，所述3到20員雜環基各自獨立地任選地被1或2個選自下組的基團所取代：鹵素、羥基、羧基、硝基、C 1-6烷基、鹵代C 1-6烷基、氘代C 1-6烷基、C 1-6烷氧基、鹵代C 1-6烷氧基、氘代C 1-6烷氧基、-NH 2、-NHC 1-6烷基、-N(C 1-6烷基) 2、-C 1-4烷基-P(=O)-(C 1-6烷基) 2、-P(=O)-(C 1-6烷基) 2；
上述各基團中，各個R d、各個R d1各自獨立地為H、C 1-6烷基或氘代C 1-6烷基；
上述各基團中，各個R c、各個R c1各自獨立地為H、C 1-6烷基、鹵代C 1-6烷基、氘代C 1-6烷基、C 1-6烷氧基、鹵代C 1-6烷氧基、氘代C 1-6烷氧基、-C 1-4烷基-鹵代C 1-6烷基、-C 1-4烷基-氘代C 1-6烷基、-C 1-4烷基-C 1-6烷氧基、-C 1-4烷基-鹵代C 1-6烷氧基、-C 1-4烷基-氘代C 1-6烷氧基、C 3-6單環環烷基、-C 1-4烷基-C 3-6單環環烷基、-C 1-4烷基-O-C 3-6單環環烷基、3至6員單環雜環基、-C 1-4烷基-3至6員單環雜環基、-C 1-4烷基-O-3至6員單環雜環基、苯基、-C 1-4烷基-苯基、5或6員單環雜芳基、-C 1-4烷基-5或6員單環雜芳基、8至10員雙環雜芳基或-C 1-4烷基-8至10員雙環雜芳基；所述C 3-6單環環烷基、所述3至6員單環雜環基、所述苯基、所述5或6員單環雜芳基、所述8至10員雙環雜芳基任選地被1或2個選自下組的基團所取代：鹵素、羥基、羧基、硝基、C 1-6烷基、鹵代C 1-6烷基、氘代C 1-6烷基、C 1-6烷氧基、鹵代C 1-6烷氧基、氘代C 1-6烷氧基、-NH 2、-NHC 1-6烷基、-N(C 1-6烷基) 2、-C 1-4烷基-P(=O)-(C 1-6烷基) 2、-P(=O)-(C 1-6烷基) 2；
上述各基團中，各個S3組的基團各自獨立地選自下組：氧代(C=O)、氰基、鹵素、羥基、羧基、硝基、C 1-6烷基、鹵代C 1-6烷基、氘代C 1-6烷基、C 1-6烷氧基、鹵代C 1-6烷氧基、氘代C 1-6烷氧基、-NH 2、-NHC 1-6烷基、-N(C 1-6烷基) 2、-C 1-4烷基-P(=O)-(C 1-6烷基) 2、-P(=O)-(C 1-6烷基) 2、3至6員單環雜環基；
上述各基團中，所述-C 1-4烷基-或-C 3-6單環環烷基-為未取代的，或者-C 1-4烷基-上的氫原子各自獨立地被選自鹵素、氰基、羥基、C 1-6烷基、鹵代C 1-6烷基、氘代C 1-6烷基、-CH 2-羥基、-CH 2-氰基、苯基的基團所取代或者C 1-4烷基上同一個碳原子的兩個氫原子同時被-(CH 2) j-取代進而形成環烷基，其中j為2、3、4、5或6；-C 3-6單環環烷基-上的氫原子各自獨立地被選自鹵素、氰基、羥基、C 1-6烷基、鹵代C 1-6烷基、氘代C 1-6烷基的基團所取代。
在一實施方案中，R 4’為C 1-6烷基或C 1-6烷氧基；所述C 1-6烷基、所述C 1-6烷氧基各自獨立地任選地被1個、2個或3個選自鹵素、氘、氰基或羥基的基團所取代；
在一實施方案中，R 4’為C 3-6單環環烷基、3到6員單環雜環基、苯基、5或6員單環雜芳基或8至10員雙環雜芳基；其中，所述C 3-6單環環烷基、所述3到6員單環雜環基、所述苯基、所述5或6員單環雜芳基、所述8至10員雙環雜芳基各自獨立地任選地被1、2、3或4個選自S1組的基團所取代。
在一實施方案中，R 4’為3到6員單環雜環基時，所述3至6員單環雜環基選自：氮丙環、環氧乙烷、氮雜環丁烷、氧雜環丁烷、四氫呋喃、四氫噻吩、四氫吡咯、呱啶、呱嗪、嗎啉、硫代嗎啉、硫代嗎啉-1,1-二氧化物、四氫吡喃；所述3到6員單環雜環基任選地被1、2、3或4個選自S1組的基團所取代。
在一實施方案中，R 4’為5或6員單環雜芳基時，所述5或6員單環雜芳基選自下組：噻吩、N-烷環吡咯、呋喃、噻唑、異噻唑、咪唑、噁唑、吡咯、吡唑、三唑、1,2,3-三唑、1,2,4-三唑、1,2,5-三唑、1,3,4-三唑、四唑、異噁唑、噁二唑、1,2,3-噁二唑、1,2,4-噁二唑、1,2,5-噁二唑、1,3,4-噁二唑、噻二唑、吡啶、噠嗪、嘧啶、吡嗪；所述5或6員單環雜芳基任選地被1、2、3或4個選自S1組的基團所取代。
在一實施方案中，所述化合物為式(IC1)化合物；
式中，X、Y、 、R 2、m1、 、R 3、m2定義同式IC；B 1為CH或N；
R 4’選自下組：H、氧代(C=O)、鹵素、氰基、羥基、羧基、硝基、C 1-6烷基、C 2-6烯基、C 2-6炔基、C 1-6烷氧基、C 3-20環烷基、3到20員雜環基、5或6員單環雜芳基、8至10員雙環雜芳基、-C≡C-C 3-20環烷基、-C≡C-3到20員雜環基、-C≡C-C 6-14芳基、-C≡C-5或6員單環雜芳基、-C≡C-8至10員雙環雜芳基、-C≡C-C(=O)-NR aR b、-C≡C-C 1-4烷基-C(=O)-NR aR b、-C 1-4烷基-羥基、-C 1-4烷基-氰基、-C 1-4烷基-羧基、-C 1-4烷基-C 1-6烷基、-C 1-4烷基-C 1-6烷氧基、-C 1-4烷基-C 3-20環烷基、-C 1-4烷基-O-C 3-20環烷基、-C 1-4烷基-3到20員雜環基、-C 1-4烷基-O-3到20員雜環基、-C 1-4烷基-C 6-14芳基、-C 1-4烷基-O-C 6-14芳基、-C 1-4烷基-5或6員單環雜芳基、-C 1-4烷基-O-5或6員單環雜芳基、-C 1-4烷基-8至10員雙環雜芳基、-C 1-4烷基-O-8至10員雙環雜芳基、-C 1-4烷基-NR aR b、-C 1-4烷基-C(=O)-NR aR b、-C 1-4烷基-NR d-C(=O)-R c、-C 1-4烷基-NR d-C(=O)-NR aR b、-C 1-4烷基-S(=O) 2-R c、-C 1-4烷基-NR d-S(=O) 2-R c、-C 1-4烷基-S(=O) 2-NR aR b、-C 1-4烷基-NR d-S(=O) 2-NR aR b、-C(=O)-C 1-6烷基、-C(=O)-C 3-20環烷基、-C(=O)-3到20員雜環基、-C(=O)-C 6-14芳基、-C(=O)-5或6員單環雜芳基、-C(=O)-8至10員雙環雜芳基、-C(=O)-NR aR b、-NR d-C(=O)-R c、-NR d-C(=O)-NR aR b、-S(=O) 2-R c、-NR d-S(=O) 2-R c、-S(=O) 2-NR aR b、-NR d-S(=O) 2-NR aR b、-NR aR b、-OR c、-C 1-4烷基-P(=O)-(C 1-6烷基) 2、-P(=O)-(C 1-6烷基) 2；其中，所述C 1-6烷基、所述C 1-6烷氧基、所述C 2-6烯基、所述C 2-6炔基各自獨立地任選地被1個、2個或3個選自鹵素、氘、氰基或羥基的基團所取代；所述C 3-20環烷基、所述3到20員雜環基、所述C 6-14芳基、所述5或6員單環雜芳基、所述8至10員雙環雜芳基各自獨立地任選地被1、2、3或4個選自S1組的基團所取代；所述3到20員雜環基、所述5或6員單環雜芳基、所述8至10員雙環雜芳基各自獨立地含有1、2、3或4個獨立地選自N、O、S的雜原子作為環原子；其中，R a、R b、R c、R d、S1組各自定義同式IC。
在一實施方案中，所述化合物為式(IC1a)化合物、式(IC1b)化合物、式(IC1c)化合物、式(IC1d)化合物、式(IC1e)化合物或式(IC1f)化合物； 各式中，X、Y、R 2、 、R 3、m2、B 1和R 4’各自獨立地定義同式IC1。
在一實施方案中，式(IC1)化合物、式(IC1a)化合物、式(IC1b)化合物、式(IC1c)化合物、式(IC1d)化合物、式(IC1e)化合物或式(IC1f)化合物中，X和Y各自獨立地為CH。
在一實施方案中，式(IC1)化合物、式(IC1a)化合物、式(IC1b)化合物、式(IC1c)化合物、式(IC1d)化合物、式(IC1e)化合物或式(IC1f)化合物中，X為N；Y為CH。
在一實施方案中，式(IC1)化合物、式(IC1a)化合物、式(IC1b)化合物、式(IC1c)化合物、式(IC1d)化合物、式(IC1e)化合物或式(IC1f)化合物中，B 1各自獨立地為CH。
在一實施方案中，式(IC1)化合物、式(IC1a)化合物、式(IC1b)化合物、式(IC1c)化合物、式(IC1d)化合物、式(IC1e)化合物或式(IC1f)化合物中，B 1各自獨立地為N。
在一實施方案中，式(IC1)化合物、式(IC1a)化合物、式(IC1b)化合物、式(IC1c)化合物、式(IC1d)化合物、式(IC1e)化合物或式(IC1f)化合物中，B 1各自獨立地為C(-鹵素)。較佳地為C-F或C-Cl。
在一實施方案中，式(IC1)化合物、式(IC1a)化合物、式(IC1b)化合物、式(IC1c)化合物、式(IC1d)化合物、式(IC1e)化合物或式(IC1f)化合物中，R 4’為甲基。
在一實施方案中，式(IC1)化合物、式(IC1a)化合物、式(IC1b)化合物、式(IC1c)化合物、式(IC1d)化合物、式(IC1e)化合物或式(IC1f)化合物中，R 4’為甲基、三氟甲基、乙基、乙烯基、乙炔基、異丙基、氰基、鹵素(例如氟或氯)。
在一實施方案中，所述化合物為式(IC3)化合物；
式中，X、Y、 、R 2、m1、 、R 3、m2定義同式IC；B 2為N或CH；
R 4’選自下組：H、氧代(C=O)、鹵素、氰基、羥基、羧基、硝基、C 1-6烷基、C 2-6烯基、C 2-6炔基、C 1-6烷氧基、C 3-20環烷基、3到20員雜環基、C 6-14芳基、5或6員單環雜芳基、8至10員雙環雜芳基、-C≡C-C 3-20環烷基、-C≡C-3到20員雜環基、-C≡C-C 6-14芳基、-C≡C-5或6員單環雜芳基、-C≡C-8至10員雙環雜芳基、-C≡C-C(=O)-NR aR b、-C≡C-C 1-4烷基-C(=O)-NR aR b、-C 1-4烷基-羥基、-C 1-4烷基-氰基、-C 1-4烷基-羧基、-C 1-4烷基-C 1-6烷基、-C 1-4烷基-C 1-6烷氧基、-C 1-4烷基-C 3-20環烷基、-C 1-4烷基-O-C 3-20環烷基、-C 1-4烷基-3到20員雜環基、-C 1-4烷基-O-3到20員雜環基、-C 1-4烷基-C 6-14芳基、-C 1-4烷基-O-C 6-14芳基、-C 1-4烷基-5或6員單環雜芳基、-C 1-4烷基-O-5或6員單環雜芳基、-C 1-4烷基-8至10員雙環雜芳基、-C 1-4烷基-O-8至10員雙環雜芳基、-C 1-4烷基-NR aR b、-C 1-4烷基-C(=O)-NR aR b、-C 1-4烷基-NR d-C(=O)-R c、-C 1-4烷基-NR d-C(=O)-NR aR b、-C 1-4烷基-S(=O) 2-R c、-C 1-4烷基-NR d-S(=O) 2-R c、-C 1-4烷基-S(=O) 2-NR aR b、-C 1-4烷基-NR d-S(=O) 2-NR aR b、-C(=O)-C 1-6烷基、-C(=O)-C 3-20環烷基、-C(=O)-3到20員雜環基、-C(=O)-C 6-14芳基、-C(=O)-5或6員單環雜芳基、-C(=O)-8至10員雙環雜芳基、-C(=O)-NR aR b、-NR d-C(=O)-R c、-NR d-C(=O)-NR aR b、-S(=O) 2-R c、-NR d-S(=O) 2-R c、-S(=O) 2-NR aR b、-NR d-S(=O) 2-NR aR b、-NR aR b、-OR c、-C 1-4烷基-P(=O)-(C 1-6烷基) 2、-P(=O)-(C 1-6烷基) 2；所述C 1-6烷基、所述C 1-6烷氧基、所述C 2-6烯基、所述C 2-6炔基各自獨立地任選地被1個、2個或3個選自鹵素、氘、氰基或羥基的基團所取代；所述C 3-20環烷基、所述3到20員雜環基、所述C 6-14芳基、所述5或6員單環雜芳基、所述8至10員雙環雜芳基各自獨立地任選地被1、2、3或4個選自S1組的基團所取代；所述3到20員雜環基、所述5或6員單環雜芳基、所述8至10員雙環雜芳基各自獨立地含有1、2、3或4個獨立地選自N、O、S的雜原子作為環原子；其中，R a、R b、R c、R d、S1組各自定義同式IC。
在一實施方案中，所述化合物為式(IC3a)化合物、式(IC3b)化合物、式(IC3c)化合物、式(IC3d)化合物、式(IC3e)化合物或式(IC3f)化合物； 各式中，X、Y、R 2、 、R 3、m2、B 2、R 4’各自獨立地定義同式IC3。
在一實施方案中，式(IC3)化合物、式(IC3a)化合物、式(IC3b)化合物、式(IC3c)化合物、式(IC3d)化合物、式(IC3e)化合物或式(IC3f)化合物中，X和Y各自獨立地為碳原子。
在一實施方案中，式(IC3)化合物、式(IC3a)化合物、式(IC3b)化合物、式(IC3c)化合物、式(IC3d)化合物、式(IC3e)化合物或式(IC3f)化合物中，B 2各自獨立地為CH。
在一實施方案中，式(IC3)化合物、式(IC3a)化合物、式(IC3b)化合物、式(IC3c)化合物、式(IC3d)化合物、式(IC3e)化合物或式(IC3f)化合物中，B 2各自獨立地為N。
在一實施方案中，所述化合物為式(IC4)化合物；
式中，X、Y、 、R 2、m1、 、R 3、m2定義同式IC；B 3為CHR 4’’’、NR 4’’’或O；
R 4’、R 4’’、R 4’’’各自獨立地選自下組：H、氧代(C=O)、鹵素、氰基、羥基、羧基、硝基、C 1-6烷基、C 2-6烯基、C 2-6炔基、C 1-6烷氧基、C 3-20環烷基、3到20員雜環基、C 6-14芳基、5或6員單環雜芳基、8至10員雙環雜芳基、-C≡C-C 3-20環烷基、-C≡C-3到20員雜環基、-C≡C-C 6-14芳基、-C≡C-5或6員單環雜芳基、-C≡C-8至10員雙環雜芳基、-C≡C-C(=O)-NR aR b、-C≡C-C 1-4烷基-C(=O)-NR aR b、-C 1-4烷基-羥基、-C 1-4烷基-氰基、-C 1-4烷基-羧基、-C 1-4烷基-C 1-6烷基、-C 1-4烷基-C 1-6烷氧基、-C 1-4烷基-C 3-20環烷基、-C 1-4烷基-O-C 3-20環烷基、-C 1-4烷基-3到20員雜環基、-C 1-4烷基-O-3到20員雜環基、-C 1-4烷基-C 6-14芳基、-C 1-4烷基-O-C 6-14芳基、-C 1-4烷基-5或6員單環雜芳基、-C 1-4烷基-O-5或6員單環雜芳基、-C 1-4烷基-8至10員雙環雜芳基、-C 1-4烷基-O-8至10員雙環雜芳基、-C 1-4烷基-NR aR b、-C 1-4烷基-C(=O)-NR aR b、-C 1-4烷基-NR d-C(=O)-R c、-C 1-4烷基-NR d-C(=O)-NR aR b、-C 1-4烷基-S(=O) 2-R c、-C 1-4烷基-NR d-S(=O) 2-R c、-C 1-4烷基-S(=O) 2-NR aR b、-C 1-4烷基-NR d-S(=O) 2-NR aR b、-C(=O)-C 1-6烷基、-C(=O)-C 3-20環烷基、-C(=O)-3到20員雜環基、-C(=O)-C 6-14芳基、-C(=O)-5或6員單環雜芳基、-C(=O)-8至10員雙環雜芳基、-C(=O)-NR aR b、-NR d-C(=O)-R c、-NR d-C(=O)-NR aR b、-S(=O) 2-R c、-NR d-S(=O) 2-R c、-S(=O) 2-NR aR b、-NR d-S(=O) 2-NR aR b、-NR aR b、-OR c、-C 1-4烷基-P(=O)-(C 1-6烷基) 2、-P(=O)-(C 1-6烷基) 2；所述C 1-6烷基、所述C 1-6烷氧基、所述C 2-6烯基、所述C 2-6炔基各自獨立地任選地被1個、2個或3個選自鹵素、氘、氰基或羥基的基團所取代；所述C 3-20環烷基、所述3到20員雜環基、所述C 6-14芳基、所述5或6員單環雜芳基、所述8至10員雙環雜芳基各自獨立地任選地被1、2、3或4個選自S1組的基團所取代；所述3到20員雜環基、所述5或6員單環雜芳基、所述8至10員雙環雜芳基各自獨立地含有1、2、3或4個獨立地選自N、O、S的雜原子作為環原子；或者
R 4’、R 4’’與和它們相連的碳原子共同形成羰基(C=O) ；
其中，R a、R b、R c、R d、S1組各自定義同前。
在一實施方案中，所述化合物為式(IC4a)化合物、式(IC4b)化合物、式(IC4c)化合物、式(IC4d)化合物、式(IC4e)化合物或式(IC4f)化合物； 各式中，X、Y、R 2、 、R 3、m2、B 3、R 4’、R 4’’各自獨立地定義同式IC4。
在一實施方案中，式(IC4)化合物、式(IC4a)化合物、式(IC4b)化合物、式(IC4c)化合物、式(IC4d)化合物、式(IC4e)化合物或式(IC4f)化合物中，X和Y各自獨立地為碳原子。
在一實施方案中，式(IC4)化合物、式(IC4a)化合物、式(IC4b)化合物、式(IC4c)化合物、式(IC4d)化合物、式(IC4e)化合物或式(IC4f)化合物中，B 3各自獨立地為CHR 4’’’；R 4’’’定義同前。
在一實施方案中，式(IC4)化合物、式(IC4a)化合物、式(IC4b)化合物、式(IC4c)化合物、式(IC4d)化合物、式(IC4e)化合物或式(IC4f)化合物中，B 3各自獨立地為NR 4’’’；R 4’’’定義同前。
在一實施方案中，式(IC4)化合物、式(IC4a)化合物、式(IC4b)化合物、式(IC4c)化合物、式(IC4d)化合物、式(IC4e)化合物或式(IC4f)化合物中，B 3各自獨立地為O。
在一實施方案中， 為 或 ；式中，X 1為CH或N；R 12、R 14各自獨立地為氫、鹵素、氰基、C 1-6烷基、C 2-6烯基、C 2-6炔基、C 1-6烷氧基、3到20員雜芳基、-C(=O)-C 1-6烷基、C 3-20環烷基、3到20員雜環基；其中，所述C 1-6烷基、所述C 1-6烷氧基、所述C 2-6烯基、所述C 2-6炔基各自獨立地任選地被選自鹵素、氘、氰基、羥基和3到20員雜芳基的基團取代；所述C 3-20環烷基、所述3到20員雜環基、所述3到20員雜芳基各自獨立地任選地被1、2、3或4個選自S1組的基團所取代；所述3到20員雜環基、所述3到20員雜芳基各自獨立地含有1、2、3或4個獨立地選自N、O、S的雜原子作為環原子。
在一實施方案中， 選自下組：
各式中，R 10為C 1-6烷基、3到20員雜芳基、3到20員雜環基、-S(O) 2-C 1-6烷基或-S(O) 2-C 3-20環烷基；其中，所述C 1-6烷基任選地被1、2、3或4個選自鹵素、氘、氰基、5到6員雜環基、C 1-6烷氧基和羥基的基團取代；所述C 3-20環烷基、所述3到20員雜芳基、所述3到20員雜環基各自獨立地任選地被1、2、3或4個選自S2組的基團所取代；所述3到20員雜芳基、所述3到20員雜環基各自獨立地含有1、2、3或4個獨立地選自N、O、S的雜原子作為環原子。
在一實施方案中，所述化合物為式(ID)化合物
式中，X 1為CH或N；R 12為氫、鹵素、氰基、C 1-6烷基、C 2-6烯基、C 2-6炔基、C 1-6烷氧基、3到20員雜芳基、-C(=O)-C 1-6烷基、C 3-20環烷基、3到20員雜環基；其中，所述C 1-6烷基、所述C 1-6烷氧基、所述C 2-6烯基、所述C 2-6炔基各自獨立地任選地被選自鹵素、氘、氰基、羥基和3到20員雜芳基的基團取代；所述C 3-20環烷基、所述3到20員雜環基、所述3到20員雜芳基各自獨立地任選地被1、2、3或4個選自S1組的基團所取代；所述3到20員雜環基、所述3到20員雜芳基各自獨立地含有1、2、3或4個獨立地選自N、O、S的雜原子作為環原子；R 10為C 1-6烷基、3到20員雜芳基、3到20員雜環基、-S(O) 2-C 1-6烷基或-S(O) 2-C 3-20環烷基；其中，所述C 1-6烷基任選地被1、2、3或4個選自鹵素、氘、氰基、5到6員雜環基、C 1-6烷氧基和羥基的基團取代；所述C 3-20環烷基、所述3到20員雜芳基、所述3到20員雜環基各自獨立地任選地被1、2、3或4個選自S2組的基團所取代；所述3到20員雜芳基、所述3到20員雜環基各自獨立地含有1、2、3或4個獨立地選自N、O、S的雜原子作為環原子。
本發明還提供用於製備式(ID)化合物的如下中間體化合物：式(ID-2)化合物或式(ID-3)化合物： 各式中，X 1、R 10、R 12各自定義同式(ID)化合物。
在一實施方案中，X 1為CH或N。
在一實施方案中，R 12為氫、鹵素、氰基、甲基、乙基、丙基、異丙基、環丙基、乙烯基、乙炔基、甲氧基、三氟甲基、吡啶基、咪唑基或苯并咪唑基；其中，所述乙炔基任選地被吡啶基取代；所述吡啶基、所述咪唑基、所述苯并咪唑基各自獨立地任選地被1、2、3或4個選自S1組的基團所取代。
在一些實施方案中，R 12為氯、甲基、甲氧基、氰基、三氟甲基、乙醯基、乙炔基或二甲基氨基。在一實施方案中， R 14為氫、鹵素、氰基、甲基、乙基、丙基、異丙基、環丙基、乙烯基、乙炔基、甲氧基、三氟甲基、吡啶基、咪唑基或苯并咪唑基；其中，所述乙炔基任選地被吡啶基取代；所述吡啶基、所述咪唑基、所述苯并咪唑基各自獨立地任選地被1、2、3或4個選自S1組的基團所取代。
在一實施方案中，R 12為氫、氟、氯或甲基。
在一實施方案中，R 14為氫、氟、氯或甲基。
在一實施方案中，R 10選自甲基、異丁基、環丙基、甲氧基以及下組基團：
     
在一實施方案中，當 選自下組： 、 、 、 時，R 11為H；
在一實施方案中，當 選自下組： 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 時，R 11為 。在一實施方案中，式(ID)化合物或其藥學上可接受的鹽、立體異構體、溶劑化物或前藥的製備方法，其包括以下製備步驟：
步驟1：將(R)-3-(6-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(5a)與式(ID-4)化合物進行反應形成式(ID-1)化合物；
步驟2：將式(ID-1)化合物與聯硼酸頻哪醇酯進行反應形成式(ID-2)化合物；
步驟3：將式(ID-2)化合物與式(ID-5)化合物進行反應形成式(ID-3)化合物；
步驟4：將式(ID-3)化合物進行脫Boc反應形成式(ID)化合物；
上述各式中， 各式中，X 1、R 10、R 12各自定義同式(ID)化合物；R 13為鹵素(例如氯)。
在一實施方案中， 選自下組： 各式中，各個R 3、各個m2各自獨立地定義同前。
在一實施方案中， 選自下組： 各式中，各個R 3各自獨立地定義同前。
在一實施方案中， 選自下組： 。
在一實施方案中， 選自下組： 。
在一實施方案中， 為 、 、 、 或 ；其中R 3定義同前。
較佳地，R 3選自下組： 。
在一實施方案中， 選自下組： 。
在一實施方案中， 選自下組：
。
在一實施方案中， 選自下組： 。
在一實施方案中，R 2選自下組：
上述各個基團中的氫原子可以各自獨立地任選地被1、2、3或4個選自S1組的基團所取代。
在一實施方案中，R 2選自下組： ；其中，各個n1、各個n2各自獨立地為0、1、2或3；上述各個基團中的氫原子可以各自獨立地任選地被1、2、3或4個選自S1組的基團所取代。
在一實施方案中，R 2選自下組： ；其中，各個n1、各個n2各自獨立地為0、1、2或3；上述各個基團中的氫原子可以各自獨立地任選地被1、2、3或4個選自S1組的基團所取代。
在一實施方案中，R 2為 ；其中，R 2b為H或甲基；
R 2c、R 2d各自獨立地為H、C 1-6烷基、C 3-6單環環烷基或3到6員單環雜環基；或者R 2c和R 2d與和它們相連的氮原子共同構成3到6員單環雜環基、5或6員單環雜芳基或8至10員雙環雜芳基；所述3到6員單環雜環基、所述5或6員單環雜芳基、所述8至10員雙環雜芳基各自獨立地含有一個氮原子和任選地1或2個獨立地選自N、O、S的雜原子作為環原子；且所述3到6員單環雜環基、所述5或6員單環雜芳基、所述8至10員雙環雜芳基各自獨立地任選地被1、2、3或4個選自S1組的基團所取代。
在一實施方案中， 為苯基或5或6員單環雜芳基；R 3選自下組：H、氧代(=O)、鹵素、氰基、羥基、羧基、硝基、C 1-4烷基、C 1-4烷氧基、C 3-6單環環烷基、3到6員單環雜環基、7至11員螺雜環基、6至10員稠雜環基、6到14員橋雜環基、苯基、5或6員單環雜芳基、8至10員雙環雜芳基、-O-C 3-6單環環烷基、-O-3到6員單環雜環基、-O-7至11員螺雜環基、-O-6至10員稠雜環基、-O-6到14員橋雜環基、-O-苯基、-O-5或6員單環雜芳基、-O-8至10員雙環雜芳基、-C 1-2烷基-羥基、-C 1-2烷基-氰基、-C 1-2烷基-C 1-4烷基、-C 1-2烷基-C 1-4烷氧基、-C 1-2烷基-C 3-6單環環烷基、-C 1-2烷基-O-C 3-6單環環烷基、-C 1-2烷基-3到6員單環雜環基、-C 1-2烷基-O-3到6員單環雜環基、-C 1-2烷基-7至11員螺雜環基、-C 1-2烷基-6至10員稠雜環基、-C 1-2烷基-6到14員橋雜環基、-C 1-2烷基-O-7至11員螺雜環基、-C 1-2烷基-O-6至10員稠雜環基、-C 1-2烷基-O-6到14員橋雜環基、-C 1-2烷基-苯基、-C 1-2烷基-O-苯基、-C 1-2烷基-5或6員單環雜芳基、-C 1-2烷基-O-5或6員單環雜芳基、-C 1-2烷基-8至10員雙環雜芳基、-C 1-2烷基-O-8至10員雙環雜芳基、-C 1-2烷基-NR aR b、-C 1-2烷基-C(=O)-NR aR b、-C 1-2烷基-NR d-C(=O)-R c、-C 1-2烷基-NR d-C(=O)-NR aR b、-C 1-2烷基-S(=O) 2-R c、-C 1-2烷基-NR d-S(=O) 2-R c、-C 1-2烷基-S(=O) 2-NR aR b、-C 1-2烷基-NR d-S(=O) 2-NR aR b、-C 1-2烷基-羧基、-C(=O)-C 1-4烷基、-C(=O)-C 3-6單環環烷基、-C(=O)-3至6員單環雜環基、-C(=O)-7至11員螺雜環基、-C(=O)-6至10員稠雜環基、-C(=O)-6到14員橋雜環基、-C(=O)-苯基、-C(=O)-5或6員單環雜芳基、-C(=O)-8至10員雙環雜芳基、-C(=O)-NR aR b、-NR d-C(=O)-R c、-NR d-C(=O)-NR aR b、-S(=O) 2-R c、-NR d-S(=O) 2-R c、-S(=O) 2-NR aR b、-NR d-S(=O) 2-NR aR b、-NR aR b、-OR c、-C 1-2烷基-P(=O)(C 1-4烷基) 2、-P(=O)(C 1-4烷基) 2；其中，所述C 1-4烷基、所述C 1-4烷氧基各自獨立地任選地被鹵素、氘、氰基或羥基取代；所述C 3-6單環環烷基、所述3至6員單環雜環基、所述7至11員螺雜環基、所述6至10員稠雜環基、所述6到14員橋雜環基、所述苯基、所述5或6員單環雜芳基、所述8至10員雙環雜芳基各自獨立地任選地被1、2、3或4個選自S2組的基團所取代；所述3至6員單環雜環基、所述7至11員螺雜環基、所述6至10員稠雜環基、所述6到14員橋雜環基、所述5或6員單環雜芳基、所述8至10員雙環雜芳基各自獨立地含有1、2、3或4個獨立地選自N、O、S的雜原子作為環原子；R a、R b、R d、R c定義同前。
在一實施方案中， 為C 5-7單環環烷基或5、6或7員單環雜環基；R 3選自下組：H、氧代(=O)、鹵素、氰基、羥基、羧基、硝基、C 1-4烷基、C 1-4烷氧基、C 3-6單環環烷基、3到6員單環雜環基、7至11員螺雜環基、6至10員稠雜環基、6到14員橋雜環基、苯基、5或6員單環雜芳基、8至10員雙環雜芳基、-O-C 3-6單環環烷基、-O-3到6員單環雜環基、-O-7至11員螺雜環基、-O-6至10員稠雜環基、-O-6到14員橋雜環基、-O-苯基、-O-5或6員單環雜芳基、-O-8至10員雙環雜芳基、-C 1-2烷基-羥基、-C 1-2烷基-氰基、-C 1-2烷基-C 1-4烷基、-C 1-2烷基-C 1-4烷氧基、-C 1-2烷基-C 3-6單環環烷基、-C 1-2烷基-O-C 3-6單環環烷基、-C 1-2烷基-3到6員單環雜環基、-C 1-2烷基-O-3到6員單環雜環基、-C 1-2烷基-7至11員螺雜環基、-C 1-2烷基-6至10員稠雜環基、-C 1-2烷基-6到14員橋雜環基、-C 1-2烷基-O-7至11員螺雜環基、-C 1-2烷基-O-6至10員稠雜環基、-C 1-2烷基-O-6到14員橋雜環基、-C 1-2烷基-苯基、-C 1-2烷基-O-苯基、-C 1-2烷基-5或6員單環雜芳基、-C 1-2烷基-O-5或6員單環雜芳基、-C 1-2烷基-8至10員雙環雜芳基、-C 1-2烷基-O-8至10員雙環雜芳基、-C 1-2烷基-NR aR b、-C 1-2烷基-C(=O)-NR aR b、-C 1-2烷基-NR d-C(=O)-R c、-C 1-2烷基-NR d-C(=O)-NR aR b、-C 1-2烷基-S(=O) 2-R c、-C 1-2烷基-NR d-S(=O) 2-R c、-C 1-2烷基-S(=O) 2-NR aR b、-C 1-2烷基-NR d-S(=O) 2-NR aR b、-C 1-2烷基-羧基、-C(=O)-C 1-4烷基、-C(=O)-C 3-6單環環烷基、-C(=O)-3至6員單環雜環基、-C(=O)-7至11員螺雜環基、-C(=O)-6至10員稠雜環基、-C(=O)-6到14員橋雜環基、-C(=O)-苯基、-C(=O)-5或6員單環雜芳基、-C(=O)-8至10員雙環雜芳基、-C(=O)-NR aR b、-NR d-C(=O)-R c、-NR d-C(=O)-NR aR b、-S(=O) 2-R c、-NR d-S(=O) 2-R c、-S(=O) 2-NR aR b、-NR d-S(=O) 2-NR aR b、-NR aR b、-OR c、-C 1-4烷基-P(=O)(C 1-4烷基) 2、-P(=O)(C 1-4烷基) 2；其中，2個R 3可以同時取代一個碳上的2個氫原子使得2個R 3和與它們相連的碳原子共同形成C 3-6單環環烷基或3到6員單環雜環基；或者2個R 3分別取代不同碳上的2個氫原子且2個R 3相連形成-CH 2-或-CH 2CH 2-；其中，所述C 1-4烷基、所述C 1-4烷氧基各自獨立地任選地被鹵素、氘、氰基或羥基取代；所述C 3-6單環環烷基、所述3至6員單環雜環基、所述7至11員螺雜環基、所述6至10員稠雜環基、所述6到14員橋雜環基、所述苯基、所述5或6員單環雜芳基、所述8至10員雙環雜芳基各自獨立地任選地被1、2、3或4個選自S2組的基團所取代；所述3至6員單環雜環基、所述7至11員螺雜環基、所述6至10員稠雜環基、所述6到14員橋雜環基、所述5或6員單環雜芳基、所述8至10員雙環雜芳基各自獨立地含有1、2、3或4個獨立地選自N、O、S的雜原子作為環原子；R a、R b、R d、R c定義同前。
在一實施方案中， 選自下組：
     
在一實施方案中，各個S1組的基團各自獨立地選自下組：氧代(=O)、鹵素、氰基、羥基、羧基、硝基、C 1-4烷基、C 2-4烯基、C 2-4炔基、C 1-4烷氧基、C 3-6單環環烷基、3到20員雜環基、苯基、5或6員單環雜芳基、8至10員雙環雜芳基、-O-C 3-6單環環烷基、-O-3到20員雜環基、-O-苯基、-O-5或6員單環雜芳基、-O-8至10員雙環雜芳基、-C≡C-C 3-6單環環烷基、-C≡C-3到20員雜環基、-C≡C-苯基、-C≡C-5或6員單環雜芳基、-C≡C-8至10員雙環雜芳基、-C 1-2烷基-羥基、-C 1-2烷基-氰基、-C 1-2烷基-C 1-4烷基、-C 1-2烷基-C 1-4烷氧基、-C 1-2烷基-C 3-6單環環烷基、-C 1-2烷基-O-C 3-6單環環烷基、-C 1-2烷基-3至20員雜環基、-C 1-2烷基-O-3至20員雜環基、-C 1-2烷基-苯基、-C 1-2烷基-O-苯基、-C 1-2烷基-5或6員單環雜芳基、-C 1-2烷基-O-5或6員單環雜芳基、-C 1-2烷基-8至10員雙環雜芳基、-C 1-2烷基-O-8至10員雙環雜芳基、-S(=O) 2-C 1-4烷基、-S(=O) 2-C 3-6單環環烷基、-S(=O) 2-3至20員雜環基、-C(=O)O-C 1-4烷基、-C(=O)O-C 3-6單環環烷基、-C(=O)-C 1-4烷基、-C(=O)-C 3-6單環環烷基、-C(=O)-苯基、-NR a1R b1、-C(=O)-NR a1R b1、-OR c1、-C 1-2烷基-S(=O) 2-C 1-4烷基、-C 1-2烷基-S(=O) 2-C 3-6單環環烷基、-C 1-2烷基-S(=O) 2-3至20員雜環基、-C 1-2烷基-C(=O)O-C 1-4烷基、-C 1-2烷基-C(=O)O-C 3-6單環環烷基、-C 1-2烷基-C(=O)-C 1-4烷基、-C 1-2烷基-C(=O)-C 3-6單環環烷基、-C 1-2烷基-C(=O)-苯基、-C(=O)-5或6員單環雜芳基、-C(=O)-8至10員雙環雜芳基、-C 1-2烷基-NR a1R b1、-C 1-2烷基-C(=O)-NR a1R b1、-C≡C-C(=O)-NR a1R b1、-C≡C-C 1-2烷基-C(=O)-NR a1R b1、-C 1-2烷基-OR c1、-C 1-2烷基-P(=O)-(C 1-4烷基) 2、-P(=O)-(C 1-4烷基) 2、-C 1-2烷基-NR d1-C(=O)-R c1、-C 1-2烷基-NR d1-C(=O)-NR a1R b1、-C 1-2烷基-NR d1-S(=O) 2-R c1、-C 1-2烷基-S(=O) 2-NR a1R b1、-C 1-2烷基-NR d1-S(=O) 2-NR a1R b1、-NR d1-C(=O)-R c1、-NR d1-C(=O)-NR a1R b1、-NR d1-S(=O) 2-R c1、-S(=O) 2-NR a1R b1、-NR d1-S(=O) 2-NR a1R b1；其中，所述C 1-4烷基、所述C 1-4烷氧基、所述C 2-4烯基、所述C 2-4炔基各自獨立地任選地被1個、2個或3個選自鹵素、氘、氰基或羥基的基團所取代；所述C 3-6單環環烷基、所述3到20員雜環基、所述苯基、所述5或6員單環雜芳基、所述8至10員雙環雜芳基各自獨立地任選地被1、2、3或4個選自S3組的基團所取代；所述3到20員雜環基、所述5或6員單環雜芳基、所述8至10員雙環雜芳基各自獨立地含有1、2、3或4個獨立地選自N、O、S的雜原子作為環原子。
在一實施方案中，各個R a、各個R b、各個R a1、各個R b1各自獨立地為H、C 1-4烷基、鹵代C 1-4烷基、氘代C 1-4烷基、-C 1-2烷基-羥基、-C 1-2烷基-氰基、-C 1-2烷基-鹵代C 1-4烷基、-C 1-2烷基-氘代C 1-4烷基、-C 1-2烷基-C 1-4烷氧基、-C 1-2烷基-鹵代C 1-4烷氧基、-C 1-2烷基-氘代C 1-4烷氧基、C 3-6單環環烷基、-C 1-2烷基-C 3-6單環環烷基、-C 1-2烷基-O-C 3-6單環環烷基、3至6員單環雜環基、-C 1-2烷基-3至6員單環雜環基、-C 1-2烷基-O-3至6員單環雜環基、苯基、-C 1-2烷基-苯基、5或6員單環雜芳基、-C 1-2烷基-5或6員單環雜芳基、8至10員雙環雜芳基、-C 1-2烷基-8至10員雙環雜芳基、-S(=O) 2-C 1-4烷基、-S(=O) 2-C 3-6單環環烷基、-S(=O) 2-3至6員單環雜環基、-C(=O)-C 1-4烷基、-C(=O)-C 3-6單環環烷基、-C(=O)-3至6員單環雜環基；其中，所述C 3-6單環環烷基、所述3至6員單環雜環基、所述苯基、所述5或6員單環雜芳基、所述8至10員雙環雜芳基任選地被1或2個選自下組的基團所取代：鹵素、羥基、羧基、硝基、C 1-4烷基、鹵代C 1-4烷基、氘代C 1-4烷基、C 1-4烷氧基、鹵代C 1-4烷氧基、氘代C 1-4烷氧基、-NH 2、-NHC 1-4烷基、-N(C 1-4烷基) 2、-C 1-2烷基-P(=O)-(C 1-4烷基) 2、-P(=O)-(C 1-4烷基) 2；或
各個R a和R b與和它們相連的氮原子共同形成3到20員雜環基；各個R a1和R b1與和它們相連的氮原子共同形成3到20員雜環基；其中，所述3到20員雜環基各自獨立地任選地被1或2個選自下組的基團所取代：鹵素、羥基、羧基、硝基、C 1-4烷基、鹵代C 1-4烷基、氘代C 1-4烷基、C 1-4烷氧基、鹵代C 1-4烷氧基、氘代C 1-4烷氧基、-NH 2、-NHC 1-4烷基、-N(C 1-4烷基) 2、-C 1-2烷基-P(=O)-(C 1-4烷基) 2、-P(=O)-(C 1-4烷基) 2。
在一實施方案中，各個R d、各個R d1各自獨立地為H、C 1-4烷基或氘代C 1-4烷基。
在一實施方案中，各個R c、各個R c1各自獨立地為H、C 1-4烷基、鹵代C 1-4烷基、氘代C 1-4烷基、C 1-4烷氧基、鹵代C 1-4烷氧基、氘代C 1-4烷氧基、-C 1-2烷基-鹵代C 1-4烷基、-C 1-2烷基-氘代C 1-4烷基、-C 1-2烷基-C 1-4烷氧基、-C 1-2烷基-鹵代C 1-4烷氧基、-C 1-2烷基-氘代C 1-4烷氧基、C 3-6單環環烷基、-C 1-2烷基-C 3-6單環環烷基、-C 1-2烷基-O-C 3-6單環環烷基、3至6員單環雜環基、-C 1-2烷基-3至6員單環雜環基、-C 1-2烷基-O-3至6員單環雜環基、苯基、-C 1-2烷基-苯基、5或6員單環雜芳基、-C 1-2烷基-5或6員單環雜芳基、8至10員雙環雜芳基或-C 1-2烷基-8至10員雙環雜芳基；所述C 3-6單環環烷基、所述3至6員單環雜環基、所述苯基、所述5或6員單環雜芳基、所述8至10員雙環雜芳基任選地被1或2個選自下組的基團所取代：鹵素、羥基、羧基、硝基、C 1-4烷基、鹵代C 1-4烷基、氘代C 1-4烷基、C 1-4烷氧基、鹵代C 1-4烷氧基、氘代C 1-4烷氧基、-NH 2、-NHC 1-4烷基、-N(C 1-4烷基) 2、-C 1-2烷基-P(=O)-(C 1-4烷基) 2、-P(=O)-(C 1-4烷基) 2。
在一實施方案中，各個S3組的基團各自獨立地選自下組：氧代(C=O)、鹵素、羥基、羧基、硝基、C 1-4烷基、鹵代C 1-4烷基、氘代C 1-4烷基、C 1-4烷氧基、鹵代C 1-4烷氧基、氘代C 1-4烷氧基、-NH 2、-NHC 1-4烷基、-N(C 1-4烷基) 2、-C 1-2烷基-P(=O)-(C 1-4烷基) 2、-P(=O)-(C 1-4烷基) 2。
在一實施方案中，所述-C 1-2烷基-或-C 3-6單環環烷基-為未取代的；或者-C 1-2烷基-上的氫原子各自獨立地被選自鹵素、氰基、羥基、C 1-4烷基、鹵代C 1-4烷基、氘代C 1-4烷基、-CH 2-羥基、-CH 2-氰基、苯基的基團所取代或者C 1-2烷基上同一個碳原子的兩個氫原子同時被-(CH 2) j-取代進而形成環烷基，其中j為2、3、4、5或6；-C 3-6單環環烷基-上的氫原子各自獨立地被選自鹵素、氰基、羥基、C 1-4烷基、鹵代C 1-4烷基、氘代C 1-4烷基的基團所取代。
在一實施方案中，上述各個基團中，所述3到20員雜環基選自下組：3到6員單環雜環基、7至11員螺雜環基、6至10員稠雜環基、6到14員橋雜環基。
如本文所述， 可以被稱為Cy2環。 可以被稱為Cy1環。 可以被稱為Cy3環。 可以被稱為Cy4環。
在一實施方案中，式(IC)化合物或其藥學上可接受的鹽、立體異構體、溶劑化物藉由包括以下步驟的方法製備得到：
其中，X、Y、R 2、R 3、R 4’、 、 、 m1、m2、m3的定義同前。
R 6、R 7為不同的基團，任選自-CHO、-COCH 2、-COOC 2H 5、-OCH 3、-CN、-NO2、-F、-Cl、Br、硼酸基或硼酸酯基。
所述式(IC)化合物或其藥學上可接受的鹽、立體異構體、溶劑化物或前藥藉由式(IC5)化合物上的R 6與式(IC6化合物)上的R 7在鈀催化劑催化下經過鈴木反應製備得到，或，藉由不具有式(IC5)化合物中-R 4基團的化合物與不具有式(IC6)化合物中-R 2和/或-R 3基團的化合物藉由鈴木反應製備得到不含該些基團的中間體，再藉由中間體與含該些基團的化合物取代反應得到。
在一實施方案中，式(IC)化合物或其藥學上可接受的鹽、立體異構體、溶劑化物或前藥的製備方法，其包括以下製備步驟：
其中，X、Y、 、 、 m1、m2、m3的定義同前。
R 2a選自R 2或形成R 2的中間體基團；R 3a選自R 3或形成R 3a的中間體基團；R 4a’選自R 4a或形成R 4a的中間體基團；R X和R X’選自鹵素原子、硼酸基或硼酸酯基；條件是：R X選自鹵素原子時，R X’選自硼酸基或硼酸酯基，R X’選自鹵素原子時，R X選自硼酸基或硼酸酯基。
較佳地，所述硼酸基或硼酸酯基選自 或-B(OH) 2。
在一實施方案中，式(IA)化合物選自下組：
。
在一實施方案中，式(IC)化合物選自下組：
在一實施方案中，式(ID)化合物選自下組：
     
。
本發明第三方面提供了一種藥物組合物，所述藥物組合物包括上述第一或二方面所述化合物或其藥學上可接受的鹽、立體異構體、溶劑化物或前藥；以及藥學可接受的載體。
如本文所用，術語“藥學可接受的載體” 是指能夠遞送本發明有效量活性物質、不干擾活性物質的生物活性並且對宿主或者受試者無毒副作用的任何製劑或載體介質代表性的載體，包括水、油、蔬菜和礦物質、膏基、洗劑基質、軟膏基質等。這些基質包括懸浮劑、增黏劑、透皮促進劑等。它們的製劑為化妝品領域或局部藥物領域的技術人員所周知。
在本發明的實施方案中，所述藥物組合物可以以下的任意方式施用：口服，噴霧吸入，直腸用藥，鼻腔用藥，頰部用藥，局部用藥，非腸道用藥，如皮下，靜脈，肌內，腹膜內，鞘內，心室內，胸骨內和顱內注射或輸入，或借助一種外植儲器用藥。其中較佳口服、腹膜內或靜脈內給藥方式。當口服用藥時，本發明的化合物可製成任意口服可接受的製劑形式，包括但不限於片劑、膠囊、水溶液或水懸浮液。片劑使用的載體一般包括乳糖和玉米澱粉，另外也可加入潤滑劑如硬脂酸鎂。膠囊製劑使用的稀釋劑一般包括乳糖和乾燥玉米澱粉。水懸浮液製劑則通常是將活性成分與適宜的乳化劑和懸浮劑混合使用。如果需要，以上口服製劑形式中還可加入一些甜味劑、芳香劑或著色劑。當局部用藥時，特別是治療局部外敷容易達到的患面或器官，如眼睛、皮膚或下腸道神經性疾病時，可根據不同的患面或器官將本發明化合物製成不同的局部用藥製劑形式，當眼部局部施用時，本發明的化合物可配製成一種微粉化懸浮液或溶液的製劑形式，所使用載體為等滲的一定pH的無菌鹽水，其中可加入也可不加防腐劑如氯化苄基烷醇鹽。對於眼用，也可將化合物製成膏劑形式如凡士林膏。當皮膚局部施用時，本發明的化合物可製成適當的軟膏、洗劑或霜劑製劑形式，其中將活性成分懸浮或溶解於一種或多種載體中。軟膏製劑可使用的載體包括但不限於：礦物油，液體凡士林，白凡士林，丙二醇，聚氧化乙烯，聚氧化丙烯，乳化蠟和水；洗劑或霜劑可使用的載體包括但不限於：礦物油，脫水山梨糖醇單硬脂酸酯，吐溫60，十六烷酯蠟，十六碳烯芳醇，2-辛基十二烷醇，苄醇和水。本發明的化合物還可以無菌注射製劑形式用藥，包括無菌注射水或油懸浮液或無菌注射溶液。可使用的載體和溶劑包括水、林格氏溶液和等滲氯化鈉溶液。此外滅菌的非揮發油也可用作溶劑或懸浮介質，如單甘油酯或二甘油酯。
本發明另一方面提供了上述第一或第二方面所述化合物或其藥學上可接受的鹽、立體異構體、溶劑化物或前藥或上述第三方面所述藥物組合物在製備預防和/或治療疾病或病症的藥物中的用途；所述疾病或病症與HPK1活性相關的疾病或病症。
本發明另一方面提供了上述第一或第二方面所述化合物或其藥學上可接受的鹽、立體異構體、溶劑化物或前藥或如上述第三方面所述藥物組合物在製備HPK1抑制劑中的用途。
本發明另一方面提供了一種治療癌症的方法，其包括向有此需要的受試者施用治療有效量的上述第一或第二方面所述的化合物或其藥學上可接受的鹽、立體異構體、溶劑化物或前藥，或上述的任意組合，或施用上述第三方面所述的藥物組合物的步驟。
本發明提供藉由使HPK1與本發明的化合物或其藥學上可接受的鹽接觸來調節(例如，抑制或激活)HPK1活性的方法。在一些實施方案中，接觸可以是對患者施用本文提供的化合物或其藥學上可接受的鹽。在某些實施方案中，本發明的化合物或其藥學上可接受的鹽可用於治療性施用以在癌症中增強、刺激和/或增加免疫力。例如，治療與HPK1活性相關的疾病或病症的方法可包括對有需要的患者施用治療有效量的本文提供的化合物或其藥學上可接受的鹽。本發明的化合物可單獨使用，與其它藥劑或療法組合使用，或者作為佐劑或新佐劑用於治療包括癌症在內的疾病或病症。對於本文所述的用途，可使用本發明的任何化合物，包括其任何實施方案。
在一些實施方案中，所述HPK1活性相關的疾病或病症為癌症。
在一些實施方案中，所述癌症的實例包括但不限於骨癌、胰腺癌、皮膚癌、頭頸癌、皮膚或眼內惡性黑色素瘤、子宮癌、卵巢癌、直腸癌、肛區癌、胃癌、睾丸癌、子宮癌、輸卵管癌、子宮內膜癌、子宮內膜癌、宮頸癌、陰道癌、外陰癌、霍奇金病、非霍奇金淋巴瘤、食道癌、小腸癌、內分泌系統癌、甲狀腺癌、甲狀旁腺癌、腎上腺癌、軟組織肉瘤、尿道癌、陰莖癌、慢性或急性白血病(包括急性骨髓樣白血病、慢性骨髓樣白血病、急性成淋巴細胞性白血病、慢性淋巴細胞性白血病)、兒童期實體腫瘤、淋巴細胞性淋巴瘤、膀胱癌、腎癌或尿道癌、腎盂癌、中樞神經系統(CNS)腫瘤、原發性CNS淋巴瘤、腫瘤血管生成、脊椎軸腫瘤、腦幹神經膠質瘤、垂體腺瘤、卡波西氏肉瘤、表皮樣癌、鱗狀細胞癌、T細胞淋巴瘤、環境誘發的癌症(包括由石棉誘發的癌症))以及所述癌症的組合。
在一些實施方案中，所述癌症的實例包括但不限於黑色素瘤(例如，轉移性惡性黑色素瘤)、腎癌(例如透明細胞癌)、前列腺癌(例如激素難治性前列腺腺癌)、乳腺癌、三陰性乳腺癌、結腸癌和肺癌(例如非小細胞肺癌和小細胞肺癌)。
在一些實施方案中，所述癌症的實例包括但不限於實體腫瘤(例如，前列腺癌、結腸癌、食道癌、子宮內膜癌、卵巢癌、子宮癌、腎癌、肝癌、胰腺癌、胃癌、乳腺癌、肺癌、頭頸癌、甲狀腺癌、成膠質細胞瘤、肉瘤、膀胱癌等)、血液學癌症(例如，淋巴瘤、白血病，如急性成淋巴細胞性白血病(ALL)、急性骨髓性白血病(AML)、慢性淋巴細胞性白血病(CLL)、慢性骨髓性白血病(CML)、DLBCL、套細胞淋巴瘤、非霍奇金淋巴瘤(包括復發或難治性NHL和復發性濾泡性淋巴瘤)、霍奇金淋巴瘤或多發性骨髓瘤)以及所述癌症的組合。
在一些實施方案中，所述癌症的實例包括但不限於血液學癌症、肉瘤、肺癌、胃腸癌、泌尿生殖道癌、肝癌、骨癌、神經系統癌症、婦科癌症和皮膚癌。
示例性血液學癌症包括淋巴瘤和白血病，如急性成淋巴細胞性白血病(ALL)、急性骨髓性白血病(AML)、急性早幼粒細胞性白血病(APL)、慢性淋巴細胞性白血病(CLL)、慢性骨髓性白血病(CML)、彌漫性大B細胞淋巴瘤(DLBCL)、套細胞淋巴瘤、非霍奇金淋巴瘤(包括復發或難治性NHL和復發性濾泡性淋巴瘤)、霍奇金淋巴瘤、骨髓增殖性疾病(例如，原發性骨髓纖維化(PMF)、真性紅細胞增多症(PV)、原發性血小板增多症(ET))、骨髓增生異常症候群(MDS)、T細胞急性成淋巴細胞性淋巴瘤(T-ALL)、多發性骨髓瘤、皮膚T細胞淋巴瘤、華氏巨球蛋白血症、毛細胞淋巴瘤、慢性骨髓性淋巴瘤和伯基特淋巴瘤。
示例性肉瘤包括軟骨肉瘤、尤文氏肉瘤、骨肉瘤、橫紋肌肉瘤、血管肉瘤、纖維肉瘤、脂肪肉瘤、黏液瘤、橫紋肌瘤、橫紋肌肉瘤、纖維瘤、脂肪瘤、錯構瘤和畸胎瘤。示例性肺癌包括非小細胞肺癌(NSCLC)、小細胞肺癌、支氣管癌(鱗狀細胞、未分化小細胞、未分化大細胞、腺癌)、肺泡(細支氣管)癌、支氣管腺瘤、軟骨瘤樣錯構瘤和間皮瘤。
示例性胃腸癌包括食道癌、胃癌、胰腺癌、小腸癌、大腸癌和結腸直腸癌。
示例性泌尿生殖道癌包括腎癌、膀胱和尿道癌、前列腺癌和睾丸癌。
示例性肝癌包括肝細胞瘤(肝細胞癌)、膽管癌、肝母細胞瘤、血管肉瘤、肝細胞腺瘤和血管瘤。
示例性骨癌包括例如骨原性肉瘤(骨肉瘤)、纖維肉瘤、惡性纖維組織細胞瘤、軟骨肉瘤、尤因氏肉瘤、惡性淋巴瘤(網狀細胞肉瘤)、多發性骨髓瘤、惡性巨細胞瘤脊索瘤、骨軟骨纖維瘤(骨軟骨性外生骨疣)、良性軟骨瘤、軟骨母細胞瘤、軟骨黏液纖維瘤、骨樣骨瘤和巨細胞瘤。
示例性神經系統癌症包括顱骨癌(骨瘤、血管瘤、肉芽腫、黃瘤、變形性骨炎)、腦膜癌(腦膜瘤、腦膜肉瘤、神經膠質瘤病)、腦癌(星形細胞瘤、成神經管細胞瘤、神經膠質瘤、室管膜瘤、胚組織瘤(松果體瘤)、膠質母細胞瘤、多形性膠質母細胞瘤、少突膠質細胞瘤、許旺氏細胞瘤、視網膜母細胞瘤、先天性腫瘤)和脊髓癌(神經纖維瘤、腦膜瘤、神經膠質瘤、肉瘤)以及神經母細胞瘤和Lhermitte-Duclos病。
示例性婦科癌症包括子宮癌(子宮內膜癌)、宮頸癌、卵巢癌、粒層-膜細胞腫瘤、Sertoli-Leydig細胞腫瘤、無性細胞瘤、惡性畸胎瘤)、外陰癌(鱗狀細胞癌、上皮內癌、腺癌、纖維肉瘤、黑色素瘤)、陰道癌(透明細胞癌、鱗狀細胞癌、葡萄樣肉瘤(胚胎橫紋肌肉瘤)和輸卵管癌)。
示例性皮膚癌包括黑色素瘤、基底細胞癌、鱗狀細胞癌、卡波西氏肉瘤、梅克爾細胞皮膚癌、發育不良痣、脂肪瘤、血管瘤、皮膚纖維瘤和瘢痕瘤。
在一些實施方案中，所述HPK1活性相關的疾病或病症包括但不限於鐮狀細胞病(例如，鐮狀細胞貧血)、三陰性乳腺癌(TNBC)、骨髓增生異常症候群、睾丸癌、膽道癌、食道癌和尿路上皮癌。
示例性頭頸癌包括成膠質細胞瘤、黑色素瘤、橫紋肌肉瘤、淋巴肉瘤、骨肉瘤、鱗狀細胞癌、腺癌、口腔癌、喉癌、鼻咽癌、鼻癌和鼻側癌、甲狀腺癌和甲狀旁腺癌。
如本文所用，術語“受試者”是指動物，特別是哺乳動物。較佳人。
如本文所用，術語“有效量”或“治療有效量”是指無毒的但能達到預期效果的藥物或藥劑的足夠用量。在本發明的實施方式中，在根據本發明對患者進行治療時，給定藥物的量取決於諸多因素，如具體的給藥方案、疾病或病症類型及其嚴重性、需要治療的受治療者或宿主的獨特性(例如體重)，但是，根據特定的周圍情況，包括例如已採用的具體藥物、給藥途徑、治療的病症、以及治療的受治療者或宿主，施用劑量可由本領域已知的方法常規決定。通常，就成人治療使用的劑量而言，施用劑量典型地在0.02-5000mg/天，例如約1-1500mg/天的範圍。該所需劑量可以方便地被表現為一劑、或同時給藥的(或在短時間內)或在適當的間隔的分劑量，例如每天二、三、四劑或更多分劑。本領域技術人員可以理解的是，儘管給出了上述劑量範圍，但具體的有效量可根據患者的情況並結合醫師診斷而適當調節。
如本文所用，術語“藥學上可接受的鹽”是指在製藥上可接受的並且具有母體化合物藥理學活性的本發明化合物的鹽。這類鹽包括：與無機酸或與有機酸形成的酸加成的鹽，所述的無機酸諸如硝酸，磷酸，碳酸等；所述的有機酸諸如丙酸，己酸，環戊丙酸，乙醇酸，丙酮酸，葡糖酸，硬脂酸，黏康酸等；或在母體化合物上存在的酸性質子被金屬離子，例如鹼金屬離子或鹼土金屬離子取代時形成的鹽；或與有機鹼形成的配位化合物，所述的有機鹼諸如乙醇胺等。本發明的藥學上可接受的鹽可由含有酸根或鹼基的母體化合物藉由常規化學方法合成。一般情況下，這樣的鹽的製備方法是：在水或有機溶劑或兩者的混合物中，經由游離酸或鹼形式的這些化合物與化學計量的適當的鹼或酸反應來製備。一般地，較佳醚、乙酸乙酯、乙醇、異丙醇或乙腈等非水介質。除了鹽的形式，本發明所提供的化合物還存在前藥形式。本文所描述的化合物的前藥容易地在生理條件下發生化學變化從而轉化成本發明的化合物。此外，前體藥物可以在體內環境中藉由化學或生化方法被轉換到本發明的化合物。
如本文所用，術語“溶劑化合物”和“溶劑化物”是指本發明化合物與製藥上可接受的溶劑結合形成的物質。製藥上可接受的溶劑包括乙酸等。溶劑化合物包括化學計算量的溶劑化合物和非化學計算量的溶劑化合物。本發明的某些化合物可以以非溶劑化形式或者溶劑化形式存在。一般而言，溶劑化形式與非溶劑化的形式相當，都包含在本發明的範圍之內。
如本文所用，術語“立體異構體”包括構象異構體和構型異構體，其中構型異構體主要包括順反異構體和旋光異構體。本發明所述化合物可以以立體異構體的形式存在，並因此涵蓋所有可能的立體異構體形式，包括但不限於順反異構體、互變異構體、對映異構體、非對映異構體、阻轉異構體等，本發明所述化合物也可以以前述的立體異構體的任何組合或任何混合物，例如內消旋體、外消旋體、阻轉異構體的等量混合物等形式存在。例如單一對映異構體，單一非對映異構體或以上的混合物，或單一阻轉異構體或其混合物。當本發明所述的化合物含有烯烴雙鍵時，除非特別說明，否則其包括順式異構體和反式異構體，以及其任何組合。本發明的阻轉異構體為基於分子內旋轉受限制而產生的軸向或平面手性的立體異構體。且作為藥物，具有優異活性的立體異構體是較佳的。本發明化合物具有源於不對稱碳等的光學異構體，必要時單一異構體可藉由本領域已知的方法，例如結晶或手性色譜等方法進行拆分獲得。
如本文所用，術語“烷基”指直鏈或支鏈飽和脂肪族烴基基團。術語“C 1-20烷基”指具有1到20個碳原子的直鏈或支鏈烷基。較佳是C 1-10烷基。更佳是C 1-6烷基(即具有1、2、3、4、5或6個碳原子的直鏈或支鏈烷基)。更佳是C 1-4烷基。更佳是C 1-3烷基。具體實例包括但不限於甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、叔丁基、仲丁基、正戊基、1,1-二甲基丙基、1,2-二甲基丙基、2,2-二甲基丙基、1-乙基丙基、2-甲基丁基、3-甲基丁基、正己基、1-乙基-2-甲基丙基、1,1,2-三甲基丙基、1,1-二甲基丁基、1,2-二甲基丁基、2,2-二甲基丁基、1,3-二甲基丁基、2-乙基丁基、2-甲基戊基、3-甲基戊基、4-甲基戊基、2,3-二甲基丁基，及其各種支鏈異構體等。
如本文所用，術語“烷氧基”指具有-O-烷基結構的基團，其中烷基的定義如上所述。術語“C 1-10烷氧基”指具有1到10個碳原子的烷氧基。較佳是C 1-6烷氧基。更佳是C 1-4烷氧基。更佳是C 1-3烷氧基。具體實例包括但不限於甲氧基、乙氧基、正丙氧基、異丙氧基、正丁氧基、叔丁氧基、異丁氧基、正戊氧基等。
如本文所用，術語“烯基”指在鏈的任何位點上具有一個或多個碳-碳雙鍵的如上定義的烷基，術語“C 2-8烯基”指具有2到8個碳原子和至少一個(例如1到2個)碳-碳雙鍵的烯基。較佳為C 2-6烯基(即具有2到6個碳原子和1到2個碳-碳雙鍵的烯基)。更佳為C 2-4烯基(即具有2到4個碳原子和1到2個碳-碳雙鍵的烯基)。具體實例包括但不限於乙烯基、1-丙烯基、2-丙烯基、1-、2-或3-丁烯基、戊烯基、己烯基、丁間二烯基等。
如本文所用，術語“炔基”指在鏈的任何位點上具有一個或多個碳-碳三鍵的如上定義的烷基，術語“C 2-8炔基”指具有2到8個碳原子和至少一個(例如1到2個)碳-碳三鍵的炔基。較佳為C 2-6炔基(即具有2到6個碳原子和1到2個碳-碳三鍵的炔基)。更佳為C 2-4炔基(即具有2到4個碳原子和1到2個碳-碳三鍵的炔基)。具體實例包括但不限於乙炔基、1-丙炔基、2-丙炔基、1-、2-或3-丁炔基等。
如本文所用，術語“鹵素”指氟、氯、溴或碘。
如本文所用，術語“鹵代”指氟代、氯代、溴代或碘代。
如本文所用，術語“鹵代烷基”指一個或多個(如1、2、3、4或5個)氫原子被鹵素取代的烷基，其中烷基的定義如上所述。術語“鹵代C 1-10烷基”指具有1到10個碳原子的鹵代烷基。較佳為鹵代C 1-6烷基。更佳為鹵代C 1-4烷基。更佳為鹵代C 1-3烷基。具體實例包括但不限於一氯甲基、二氯甲基、三氯甲基、一氯乙基、1,2-二氯乙基、三氯乙基、一溴乙基、一氟甲基、二氟甲基、三氟甲基、一氟乙基、二氟乙基、三氟乙基等。
如本文所用，術語“鹵代烷氧基”指一個或多個(如1、2、3、4或5個)氫原子被鹵素取代的烷氧基，其中烷氧基的定義如上所述。術語“鹵代C 1-10烷氧基”指具有1到10個碳原子的鹵代烷氧基。較佳為鹵代C 1-6烷氧基。更佳為鹵代C 1-4烷氧基。更佳為鹵代C 1-3烷氧基。具體實例包括但不限於三氟甲氧基、三氟乙氧基、一氟甲氧基、一氟乙氧基、二氟甲氧基、二氟乙氧基等。
如本文所用，術語“氘代”是指某基團中一個或多個氫原子被氘原子所取代。
如本文所用，術語“氘代烷基”指一個或多個(如1、2、3、4或5個)氫原子被氘原子取代的烷基，其中烷基的定義如上所述。術語“氘代C 1-10烷基”指具有1到10個碳原子的氘代烷基。較佳為氘代C 1-6烷基。更佳為氘代C 1-4烷基。更佳為氘代C 1-3烷基。具體實例包括但不限於一氘甲基、二氘甲基、三氘甲基、一氘乙基、1,2-二氘乙基、三氘乙基等。
如本文所用，術語“氘代烷氧基”指一個或多個(如1、2、3、4或5個)氫原子被氘原子取代的烷氧基，其中烷氧基的定義如上所述。術語“氘代C 1-10烷氧基”指具有1到10個碳原子的氘代烷氧基。較佳為氘代C 1-6烷氧基。更佳為氘代C 1-4烷氧基。更佳為氘代C 1-3烷氧基。具體實例包括但不限於三氘甲氧基、三氘乙氧基、一氘甲氧基、一氘乙氧基、二氘甲氧基、二氘乙氧基等。
如本文所用，術語“環烷基”和“環烷基環”可互換使用，指飽和單環或多環的環狀烴基，例如包括單環環烷基、螺環烷基、稠環烷基和橋環烷基。本發明中所述環烷基的環碳原子可任選地被1、2或3個氧代基取代形成環酮結構。術語“3到20員環烷基”或“C 3-20環烷基”指具有3到20個環碳原子的環烷基，包括單環環烷基、螺環烷基、稠環烷基和橋環烷基。較佳為C 3-12環烷基、C 5-20螺環烷基、C 5-20稠環烷基或C 5-20橋環烷基。更佳C 3-8單環環烷基。
術語“C 3-8單環環烷基”和“3到8員單環環烷基”指具有3到8個環碳原子的飽和單環環狀烴基。較佳為C 3-6單環環烷基(即3至6員單環環烷基)或C 4-6單環環烷基(即4至6員單環環烷基)。更佳為C 3、C 4、C 5或C 6單環環烷基。單環環烷基的具體實例包括但不限於環丙基、環丁基、環戊基、環己基、環庚基、環辛基等。
如本文所用，術語“螺環烷基”和“螺環烷基環”指兩個或兩個以上的單環之間共用一個碳原子(稱螺原子)形成的多環環狀烴基。根據環與環之間共用螺原子的數目將螺環烷基分為單螺環烷基、雙螺環烷基和多螺環烷基。術語“5到20員螺環烷基”或“C 5-20螺環烷基”指具有5到20個環碳原子的多環環狀烴基，其中共用螺原子的單環為3到8員單環環烷基環。較佳為6到14員(即C 6-14)螺環烷基。更佳為6到14員單螺環烷基。更佳為7到11員(即C 7-11)螺環烷基。更佳為7到11員單螺環烷基。最佳為7員(4員單環環烷基環/4員單環環烷基環)、8員(4員單環環烷基環/5員單環環烷基環)、9員(4員單環環烷基環/6員單環環烷基環，5員單環環烷基環/5員單環環烷基環)、10員(5員單環環烷基環/6員單環環烷基環)或11員(6員單環環烷基環/6員單環環烷基環)單螺環烷基。螺環烷基的具體實例包括但不限於： 。
這些螺環烷基可藉由任意一個環原子與分子其餘部分連接。
如本文所用，術語“稠環烷基”和“稠環烷基環”指兩個或兩個以上的單環藉由共用毗鄰的一對碳原子形成的多環環狀烴基。根據形成環的數目可以分為雙環、三環、四環或多環稠環烷基。術語“5到20員稠環烷基”或“C 5-20稠環烷基”指具有5到20個環碳原子的多環環狀烴基，其中共用毗鄰碳原子對的單環為3到8員單環環烷基環。較佳為6到14員(即C 6-14)稠環烷基。更佳為6到14員雙稠環烷基。更佳為7到10員(即C 7-10)稠環烷基。更佳為7到10員雙稠環烷基。最佳為8員(5員單環環烷基環與5員單環環烷基環稠合)、9員(5員單環環烷基環與6員單環環烷基環稠合)或10員(6員單環環烷基環與6員單環環烷基環稠合)雙稠環烷基。稠環烷基的具體實例包括但不限於： 。
這些稠環烷基可藉由任意一個環原子與分子其餘部分連接。
如本文所用，術語“橋環烷基”和“橋環烷基環”指兩個或兩個以上的單環之間藉由共用兩個不直接連接的碳原子形成的多環環狀烴基。根據形成環的數目可以分為雙環、三環、四環或多環橋環烷基。術語“5到20員橋環烷基”和“C 5-20橋環烷基”指具有5到20個環碳原子的多環環狀烴基，其中任意兩個環共用兩個不直接連接的碳原子。較佳為6到14員(即C 6-14)橋環烷基。更佳為7到10員(即C 7-10)橋環烷基。橋環烷基的具體實例包括但不限於： 。
這些橋環烷基可藉由任意一個環原子與分子其餘部分連接。
如本文所用，術語“鹵代環烷基”指一個或多個(如1、2、3、4或5個)氫原子被鹵素取代的環烷基，其中環烷基的定義如上所述。
如本文所用，術語“鹵代C 3-8單環環烷基”指具有3到8個環碳原子的鹵代單環環烷基。較佳為鹵代C 3-6單環環烷基。更佳為鹵代C 3、鹵代C 4、鹵代C 5或鹵代C 6單環環烷基。具體實例包括但不限於三氟環丙基、一氟環丙基、一氟環己基、二氟環丙基、二氟環己基等。
如本文所用，術語“雜環基”和“雜環基環”可互換使用，指飽和或部分不飽和單環或多環的環狀烴基，例如包括單環雜環基、螺雜環基、稠雜環基和橋雜環基。本發明中所述雜環基的環碳原子可任選地被1、2或3個氧代基取代形成環酮、環內酯或環內醯胺結構。術語“3到20員雜環基”指具有3到20個環原子的飽和或部分不飽和單環或多環的環狀烴基，其中一個或多個(較佳為1、2、3或4個)環原子為選自氮、氧或S(=O) m' (其中m'是整數0至2)的雜原子，但不包括-O-O-、-O-S-或-S-S-的環部分，其餘環原子為碳。其中當環原子為氮原子時，其可以是被取代的或未取代的(即N或NR，R為氫或本文已經定義過的其他取代基)。本發明所述的3到20員雜環基包括單環雜環基(例如3到8員單環雜環基)、5到20員螺雜環基、5到20員稠雜環基和5到20員橋雜環基。
如本文所用，術語“3到8員單環雜環基”和“3到8員單環雜環基環”指具有3到8個環原子，其中1、2或3個環原子為選自氮、氧或S(=O) m' (其中m'是整數0至2)的雜原子的飽和或部分不飽和單環環狀烴基。較佳為具有3到6個環原子，其中1或2個環原子為雜原子的3至6員單環雜環基。更佳為具有4到6個環原子，其中1或2個環原子為雜原子的4至6員單環雜環基。更佳為具有5或6個環原子，其中1或2個環原子為雜原子的5或6員單環雜環基。當雜原子為氮原子時，氮原子可以是被取代的或未取代的(即N或NR，R為氫或本文已經定義過的其他取代基)。當雜原子為硫原子時，硫原子可以為任選地被氧化(即S(=O) m'，m'是整數0至2)。所述單環雜環基的環碳原子可任選地被1、2或3個氧代基取代形成環酮、環內酯或環內醯胺結構。單環雜環基的具體實例包括但不限於氮丙環、環氧乙烷、氮雜環丁烷、氮雜環丁烷-2-酮、氧雜環丁烷、氧雜環丁烷-2-酮、噁唑烷、吡咯烷-2-酮、吡咯烷-2,5-二酮、1,3-二氧戊環、二氫呋喃-2(3H)-酮、二氫呋喃-2,5-二酮、呱啶-2-酮、呱啶-2,6-二酮、四氫-2H-吡喃-2-酮、咪唑烷、四氫呋喃、四氫噻吩、四氫吡咯、1,3-二氧戊環-2-酮、噁唑烷-2-酮、咪唑烷-2-酮、呱啶、呱嗪、呱嗪-2-酮、嗎啉、嗎啉-3-酮、嗎啉-2-酮、硫代嗎啉-3-酮1,1-二氧化物、硫代嗎啉、硫代嗎啉-1,1-二氧化物、四氫吡喃、1,2-二氫氮雜環丁二烯、1,2-二氫氧雜環丁二烯、2,5-二氫-1H-吡咯、2,5-二氫呋喃、2,3-二氫呋喃、2,3-二氫-1H-吡咯、3,4-二氫-2H-吡喃、1,2,3,4-四氫吡啶、3,6-二氫-2H-吡喃、1,2,3,6-四氫吡啶、1,3-噁嗪烷、六氫嘧啶、1,4-二噁烷、四氫嘧啶-2(1H)-酮、1,4-二噁烷-2-酮、5,6-二氫-2H-吡喃-2-酮、5,6-二氫嘧啶-4(3H)-酮、3,4-二氫吡啶-2(1H)-酮、5,6-二氫吡啶-2(1H)-酮、5,6-二氫嘧啶-4(1H)-酮、嘧啶-4(3H)-酮、嘧啶-4(1H)-酮、4,5-二氫-1H-咪唑、2,3-二氫-1H-咪唑、2,3-二氫噁唑、1,3-二氧雜環戊烯、2,3-二氫噻吩、2,5-二氫噻吩、3,4-二氫-2H-1,4-噁嗪、3,4-二氫-2H-1,4-噻嗪1,1-二氧化物、1,2,3,4-四氫吡嗪、1,3-二氫-2H-吡咯-2-酮、1,5-二氫-2H-吡咯-2-酮、1H-吡咯-2,5-二酮、呋喃-2(3H)-酮、呋喃-2(5H)-酮、1,3-二氧雜環戊烯-2-酮、噁唑-2(3H)-酮、1,3-二氫-2H-咪唑-2-酮、呋喃-2,5-二酮、3,6-二氫吡啶-2(1H)-酮、吡啶-2,6-(1H，3H)-二酮、5,6-二氫-2H-吡喃-2-酮、3,6-二氫-2H-吡喃-2-酮、3,4-二氫-2H-1,3-噁嗪、3,6-二氫-2H-1,3-噁嗪、1,2,3,4-四氫嘧啶等。
如本文所用，術語“3至6員含氮雜環基”指具有3到6個環原子，其中1個環原子為氮原子，其他1個或2個環原子為選自氮、氧或S(=O) m' (其中m'是整數0至2)的雜原子的飽和或部分不飽和單環環狀烴基。具體實例包括但不限於氮雜丙環基、氮雜環丁烷基、氮雜戊環基(即四氫吡咯)、氮雜己環基(即六氫吡啶)、嗎啉基、呱嗪基、噁唑烷。
如本文所用，術語“3到8員單環雜環烷基”指具有3到8個環原子，其中1或2個環原子為雜原子的飽和單環環狀烴基。較佳為3至6員單環雜環烷基，即具有3到6個環原子，其中1或2個環原子為雜原子的飽和單環環狀烴基。雜環烷基具體實例包括但不限於氮丙環基、環氧乙烷基、氮雜環丁烷基、氧雜環丁烷基、噁唑烷基、1,3-二氧戊環基、二氧六環基、咪唑烷基、四氫呋喃基、四氫噻吩基、四氫吡咯基、呱啶基、呱嗪基、嗎啉基、硫代嗎啉基、硫代嗎啉-1,1-二氧化物基、四氫吡喃基、1,4-氧氮雜環庚烷基、1,3-氧氮雜環庚烷基、1,3-噁嗪烷基、六氫嘧啶基、1,4-二噁烷基。
上述單環雜環基環上相連的2個環原子，包括C-C、N-C均可任選地與本發明所定義的單環環烷基環、單環雜環基環、單芳基環、5或6員單環雜芳基環等環烷基、雜環基、芳基或雜芳基稠合形成稠合多環。與其他環形成稠合環的單環雜環基上相連的2個環原子較佳地為C-C。
如本文所用，術語“螺雜環基”和“螺雜環基環”指兩個或兩個以上的飽和或部分不飽和單環之間共用一個碳原子(稱螺原子)形成的多環雜環基，其中一個或多個(如1、2或3個)環原子為選自氮、氧或S(=O) m'(其中m'是整數0至2)的雜原子，其餘環原子為碳。當雜原子為氮原子時，氮原子可以是被取代的或未取代的(即N或NR，R為氫或本文已經定義過的其他取代基)。每個單環中可以含有一個或多個雙鍵，但沒有一個環具有完全共軛的π電子系統。根據環與環之間共用螺原子的數目將螺雜環基分為單螺雜環基、雙螺雜環基或多螺雜環基。術語“5到20員螺雜環基”指具有5到20個環原子的螺雜環基，其中共用螺原子的單環中一個單環為3到8員單環雜環基環，另一個單環為3到8員單環雜環基環或3到8員單環環烷基環。較佳為具有6到14個環原子，其中1或2個環原子為雜原子的6到14員螺雜環基。更佳為具有7到11個環原子，其中1或2個環原子為雜原子的7至11員螺雜環基。最佳為7員(4員單環雜環基環/4員單環雜環基環或4員單環雜環基環/4員單環環烷基或4員單環環烷基環/4員單環雜環基環)、8員(4員單環雜環基環/5員單環雜環基環)、9員(4員單環雜環基環/6員單環雜環基環，5員單環雜環基環/5員單環雜環基環)、10員(5員單環雜環基環/6員單環雜環基環)或11員(6員單環雜環基環/6員單環雜環基環)單螺雜環基。螺雜環基的具體實例包括但不限於： 和 。
這些螺雜環基可藉由任意一個合適的環原子與分子其餘部分連接。
如本文所用，術語“稠雜環基”和“稠雜環基環”指兩個或兩個以上的飽和或部分不飽和單環藉由共用毗鄰的一對環原子形成的多環雜環基，其中一個或多個(如1、2或3個)環原子為選自氮、氧或S(=O) m'(其中m'是整數0至2)的雜原子，其餘環原子為碳。當雜原子為氮原子時，氮原子可以是被取代的或未取代的(即N或NR，R為氫或本文已經定義過的其他取代基)。每個單環中可以含有一個或多個雙鍵，但沒有一個環具有完全共軛的π電子系統。共用的毗鄰環原子對可以是C-C或N-C。根據組成環的數目可以分為雙環、三環、四環或多環稠雜環基。術語“5到20員稠雜環基”指具有5到20個環原子的稠雜環基，其中共用毗鄰環原子對的單環為3到8員單環雜環基環。較佳為具有6到14個環原子，其中1或2個環原子為雜原子的6到14員稠雜環基。更佳為具有6到10個環原子，其中1或2個環原子為雜原子的6至10員稠雜環基。更佳為具有8到10個環原子，其中1或2個環原子為雜原子的8到10員稠雜環基。最佳為8員(5員單環雜環基環與5員單環雜環基環稠合)、9員(5員單環雜環基環與6員單環雜環基環稠合)或10員(6員單環雜環基環與6員單環雜環基環稠合)雙環稠雜環基。稠雜環基的具體實例包括但不限於： 。
這些稠雜環基可藉由任意一個合適的環原子與分子其餘部分連接。
如本文所用，術語“橋雜環基”和“橋雜環基環”指兩個或兩個以上的飽和或部分不飽和單環藉由共用兩個不直接連接的環原子形成的多環雜環基，其中一個或多個(如1、2或3個)環原子為選自氮、氧或S(=O) m'(其中m'是整數0至2)的雜原子，其餘環原子為碳。根據形成環的數目可以分為雙環、三環、四環或多環橋環烷基。術語“5到20員橋雜環基”指具有5到20個環原子的飽和或部分不飽和多環雜環基團，其中任意兩個環共用兩個不直接連接的環原子，每個單環中可以含有一個或多個雙鍵，但沒有一個環具有完全共軛的π電子系統。較佳為6到14員橋雜環基。更佳為7到10員橋雜環基。橋雜環基的具體實例包括但不限於： 。
這些橋雜環基可藉由任意一個合適的環原子與分子其餘部分連接。
在本發明中，上述各類雜環基可以是任選取代的，當被取代時，取代基較佳為一個或多個本申請中所記載的取代基團。
如本文所用，術語“芳基”，“芳基環”和“芳環”可互換使用，指全碳單環、全碳非稠合多環(環與環藉由共價鍵連接，非稠合)或全碳稠合多環(也就是共用毗鄰碳原子對的環)基團，基團中至少一個環為芳香性的，即具有共軛的π電子體系。術語“C 6-14芳基”是指具有6到14個環原子的芳基。較佳為C 6-10芳基。本發明中C 6-14芳基包括單環芳基、非稠合多環芳基和芳香稠合多環，其中單環芳基的實例包括苯基，非稠合多環芳基的實例包括聯苯基等。
本發明中，當C 6-14芳基為芳香稠合多環時，所述的芳香稠合多環可以為單芳基環與一個或多個單芳基環稠合形成的多環基團，其非限制性實例包括萘基，蒽基等。
在本發明的一些實施方案中，當C 6-14芳基為芳香稠合多環時，所述的芳香稠合多環也可以為單芳基環(如苯基)與一個或多個非芳香環稠合形成的多環基團，其中與母體結構連接的環為芳香環或非芳香環。所述非芳香環包括但不限於3至6員單環雜環基環(較佳為5或6員單環雜環基環，所述單環雜環基環的環碳原子可被1至2個氧代基取代，形成環內醯胺或環內酯結構)，3至6員單環環烷基環(較佳為5或6員單環環烷基環，所述單環環烷基環的環碳原子可被1或2個氧代基取代，形成環酮結構)。上述單芳基環與一個或多個非芳香環稠合的多環基團可藉由氮原子或碳原子與其他基團或母體結構連接，與母體結構連接的環為單芳基環或非芳香環。
在本發明中，上述各類芳基可以是取代的或非取代的，當被取代時，取代基較佳為一個或多個本申請中所記載的取代基團。
如本文所用，術語“雜芳基”，“雜芳基環”和“雜芳環”可互換使用，指環原子被至少一個獨立選自氮、氧或硫的雜原子取代的單環或稠合多環(即共用毗鄰環原子對，共用的毗鄰環原子對可以是C-C或N-C)基團，其中氮和硫原子可任選地被氧化，氮原子可任選地被季銨化。所述雜芳基具有共用的6、10或14個π電子，基團中至少一個環是芳族的。術語“5到14員雜芳基”指具有5到14個環原子，其中1、2、3或4個環原子為選自氮、氧或S(=O) m'(其中m'是整數0至2)的雜原子的雜芳基。較佳為具有5到10個環原子，其中1、2、3或4個環原子為雜原子的5到10員雜芳基。本發明中5到14員雜芳基可以為單環雜芳基、稠合雙環雜芳基或稠合三環雜芳基。
如本文所用，術語“5或6員單環雜芳基”指具有5或6個環原子，其中1、2或3個環原子為選自氮、氧或S(=O) m'(其中m'是整數0至2)的雜原子的單環雜芳基。單環雜芳基的具體實例包括但不限於噻吩、呋喃、噻唑、異噻唑、咪唑、噁唑、吡咯、吡唑、三唑、1,2,3-三唑、1,2,4-三唑、1,2,5-三唑、1,3,4-三唑、四唑、異噁唑、噁二唑、1,2,3-噁二唑、1,2,4-噁二唑、1,2,5-噁二唑、1,3,4-噁二唑、噻二唑、吡啶、噠嗪、嘧啶、吡嗪等。
如本文所用，術語“8至10員雙環雜芳基”指具有8到10個環原子，其中1、2、3、4或5個環原子為選自氮、氧或S(=O) m'(其中m'是整數0至2)的雜原子的稠合雙環雜芳基。所述稠合雙環雜芳基既可以是單芳基環(如苯基)與單環雜芳基環(較佳為5或6員單環雜芳基環)稠合形成的雙環基團(較佳為9或10員雙環雜芳基環)，也可以是單環雜芳基環(較佳為5或6員單環雜芳基環)與單環雜芳基環(較佳為5或6員單環雜芳基環)稠合形成的雙環基團。
上述單環雜芳基環上任意相連的2個環原子，包括C-C、N-C、N-N均可與本發明所定義的單環環烷基環、單環雜環基環、單芳基環、5或6員單環雜芳基環等環烷基、雜環基、芳基或雜芳基稠合形成稠合多環。與其他環形成稠合環的單環雜芳基環上相連的2個環原子較佳地為C-C，非限制性地包括如下形式： 和 。
上述基團中藉由“ ”標記的環原子與分子其他部分連接。
8至10員雙環雜芳基的非限制性實例包括：苯并[d]異噁唑、1H-吲哚、異吲哚、1H-苯并[d]咪唑、苯并[d]異噻唑、1H-苯并[d][1,2,3]三唑、苯并[d]噁唑、苯并[d]噻唑、吲唑、苯并呋喃、苯并[b]噻吩、喹啉、異喹啉、喹唑啉、喹喔啉、噌啉、吡啶并[3,2-d]嘧啶、吡啶并[2,3-d]嘧啶、吡啶并[3,4-d]嘧啶、吡啶并[4,3-d]嘧啶、1,8-萘啶、1,7-萘啶、1,6-萘啶、1,5-萘啶、吡唑并[1,5-a]嘧啶、咪唑并[1,2-b]噠嗪等。
雙環雜芳基具體實例包括但不限於： 。這些基團可藉由任意一個合適的環原子與分子其餘部分連接。與母體結構連接的環可以為單環雜芳基環或苯環。
在本發明的一些實施方案中，所述的稠合雙環雜芳基或稠合三環雜芳基可以是單環雜芳基環(較佳為5或6員單環雜芳基環)與一個或多個非芳香環稠合形成的多環基團，其中與母體結構連接的環為單環雜芳基環或非芳香環。所述非芳香環包括但不限於3至6員單環雜環基環(較佳為5或6員單環雜環基環，所述單環雜環基環的環碳原子可被1至2個氧代基取代，形成環內醯胺或環內酯結構)，3至6員單環環烷基環(較佳為5或6員單環環烷基環，所述單環環烷基環的環碳原子可被1或2個氧代基取代，形成環酮結構)等。上述單環雜芳基環與一個或多個非芳香環稠合形成的多環基團可藉由氮原子或碳原子與其他基團或母體結構連接，與母體結構連接的環為單環雜芳基環或非芳香環。
在本發明中，上述各類雜芳基可以是取代的或非取代的，當被取代時，取代基較佳為一個或多個本申請中所記載的取代基團。
如本文所用，術語“羥基”指-OH。
如本文所用，術語“羥甲基”指-CH 2OH，“羥乙基”指-CH 2CH 2OH或-CH(OH)CH 3。
如本文所用，術語“氰基甲基”指-CH 2CN，“氰基乙基”指-CH 2CH 2CN或-CHCNCH 3。
如本文所用，術語“氨基”指-NH 2。
如本文所用，術語“氰基”指-CN。
如本文所用，術語“硝基”指-NO 2。
如本文所用，術語“苄基”指-CH 2-苯。
如本文所用，術語“氧代基”指=O。
如本文所用，術語“羧基”指-C(O)OH。
如本文所用，術語“羧酸酯基”指-C(O)O(烷基)或-C(O)O(環烷基)。
如本文所用，術語“乙醯基”指-COCH 3。
如本文所用，術語“取代”是指特定原子上的任意一個或多個氫原子被取代基取代，可以包括重氫和氫的變體，只要特定原子的價態是正常的並且取代後的化合物是穩定的。當取代基為氧代基(即＝O)時，意味著兩個氫原子被取代。氧代基取代不會發生在芳香基上。術語“任選取代”或“任選被取代的”是指可以被取代，也可以不被取代，除非另有規定，取代基的種類和數目在化學上可以實現的基礎上可以是任意的。
當任何變數(例如R)在化合物的組成或結構中出現一次以上時，其在每一種情況下的定義都是獨立的。因此，例如，如果一個基團被0-2個R所取代，則所述基團可以任選地至多被兩個R所取代，並且每種情況下的R都有獨立的選項。此外，取代基和/或其變體的組合只有在這樣的組合會產生穩定的化合物的情況下才是被允許的。
在任何實施方案中，化合物中存在的任何或所有氫，或化合物內的特定基團或部分中的氫可以被氘或氚代替。該化合物中存在的一個至最大數目的氫可以被氘代替。通式化合物或具體化合物中的任何基團中存在的一個至最大數目的氫可以被氘代。例如，當描述某一基團為乙基時，該乙基可以是C 2H 5或其中x個(1至5個)氫被氘代替的C 2H 5，例如C 2D xH 5-x。當描述某一基團為氘代乙基，該氘代乙基可以是x個(1至5個)氫被氘代替的C 2H 5，例如C 2D xH 5-x。
本發明的化合物可以藉由本領域技術人員所熟知的多種合成方法來製備，包括下面列舉的具體實施方式、其與其他化學合成方法的結合所形成的實施方式以及本領域技術上人員所熟知的等同替換方式。較佳的實施方式包括但不限於本發明的實施例。本文中的中間體或起始化合物的合成方法部分單獨以製備例展示部分展示在某一個實施例中，其餘實施例若採用相同的中間體或起始化合物不再重複描述該化合物的製備。
下面藉由實施例對本發明進行詳細描述，但並不意味著對本發明任何不利限制。本文已經詳細地描述了本發明，其中也揭示了其具體實施例方式，對本領域的技術人員而言，在不脫離本發明精神和範圍的情況下針對本發明具體實施方式進行各種變化和改進將是顯而易見的。實施例中未注明具體條件者，按照常規條件或製造商建議的條件進行。所用試劑或儀器未注明生產廠商者，均為可以藉由市購獲得的常規產品。
化合物的結構藉由核磁共振(NMR)、質譜(MS)等方法確定。
NMR的測定採用Bruker  Avance  NEO 400或Bruker  Avance  NEO 500核磁共振儀，化學位移(δ)以百萬分之一(ppm)為單位，測定溶劑如各個實施例中所示，內標為四甲基矽烷(TMS)。
MS的測定採用Agilent 1100液相色譜儀。
高效液相色譜法(HPLC)分析採用Waters 2695高效液相色譜儀。
高效液相製備使用Waters 2767高效液相色譜儀。
手性HPLC和ee值分析採用Waters 2695高效液相色譜儀或Waters Investigator SFC系統。
手性製備使用gilson gx-281色譜儀或waters SFC-80色譜儀。
薄層層析矽膠板採用青島GF254或煙臺黃海HSGF254矽膠板。薄層色譜法(TLC)使用的矽膠板採用的規格是0.15mm-0.2mm。薄層層析分離純化產品採用的規格是0.4mm-0.5mm。
柱層析採用ISCO CombiFlash NextGen 300 柱層析系統，使用Agela Flash Column Silica-Cs系列矽膠柱。
以下實施例中所採用的製備HPLC，若無特殊說明，可採用如下條件：
製備HPLC(碳酸氫銨法)：柱型：Waters XBridge C18, 190*250mm, 5um; 流動相體系: A:0.1%碳酸氫銨水溶液; B: 製備級乙腈; 流速: 15ml/min; B%=20%-100%; 柱溫: 室溫。
製備HPLC(碳酸氫銨法-A)：柱型：Welch Xtimate，21.2*150 mm，5 um; 流動相A: 5 mmol/L 碳酸氫銨水溶液, 流動相B：乙腈; 流速：15mL/min; 色譜條件：15mL-35-85-13min; 柱溫：室溫。
製備HPLC(氨水法)：柱型：Waters XBridge C18, 190*250mm, 5um; 流動相體系: A: 0.1%氨水溶液; B: 製備級乙腈; 流速: 15ml/min; B%=20%-100%; 柱溫: 室溫。
製備HPLC(氨水法-A)：柱型：Ultimate XB-C18, 50*250mm, 10um，流動相體系：A：純化水(0.05%氨水)B : 純乙腈，流速：80ml/min，梯度：在50分鐘內，B/A=20%-90%，波長：214nm，柱溫：室溫。
製備HPLC(甲酸法)：柱型：Waters XBridge C18, 190*250mm, 5um; 流動相體系: A:20 0.1%甲酸; B: 製備級乙腈; 流速: 15ml/min; B%=20%-100%; 柱溫: 室溫。
製備HPLC(三氟乙酸法)：柱型：Waters XBridge C18, 190*250mm, 5um; 流動相體系: A: 0.1%三氟乙酸; B: 製備級乙腈; 流速: 15ml/min; B%=20%-100%; 柱溫: 室溫。
製備HPLC(鹽酸法)：柱型：Phenomenex luna C18, 80*40mm*3 um; 流動相體系: [水(鹽酸)-乙腈]; B%: 1%-30%；流速：15ml/min; 柱溫：室溫。
製備例1 中間體1a的製備
步驟一：將2-溴-4-氯苯甲醛(50g，227.8mmol)溶解在200ml甲醇中，冰水浴加入氨基乙醛縮二甲醇(24g，227.8mmol)和醋酸(3ml)，攪拌30分鐘，分批加入NaBH 3CN(28.63g，455.6mmol)，室溫反應2h，乙酸乙酯萃取，碳酸氫鈉洗滌，乾燥，濃縮得到粗品30g，直接用於下一步。ES-API:[M+H] += 308.0
步驟二：將上述粗品N-(2-溴-4-氯苄基)-2,2-二甲氧基乙胺(30g)溶解在150ml二氯甲烷中，冰水浴，依次加入三乙胺(29.3g，292.5mmol)，TsCl(27.8g，146.5mmol)，室溫反應過夜，靜置5h，過濾，濾液依次用水、飽和食鹽水洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，純化得到N-(2-溴-4-氯苄基)-N-(2,2-二甲氧基乙基)-4-甲基苯磺醯胺(35g，粗品純度76%)。ES-API: [M+H] += 430 .0
步驟三：將上述N-(2-溴-4-氯苄基)-N-(2,2-二甲氧基乙基)-4-甲基苯磺醯胺(35g，75.75mmol)溶解在乾燥二氯甲烷(300ml)中，冰水浴，加入三氯化鋁(80.6g，606mmol)，室溫過夜，反應完畢，緩慢導入冰水浴中淬滅，緩慢加入過量NaOH溶液攪拌，至澄清溶液，分離有機層，水洗，乾燥，純化(30%-40%乙酸乙酯/石油醚)得到8-溴-6-氯異喹啉(8g，三步總收率14.5%)。ES-API: [M+H] += 242.0
步驟四：氮氣保護下，將8-溴-6-氯異喹啉(1 g，4.15 mmol)、乙烯基三氟硼酸鉀(1.66 g，12.45 mmol)、[1,1'-雙(二苯基膦基)二茂鐵]二氯化鈀(151mg，0.207mmol)、三乙胺(419mg，4.15mmol)和乙醇(50ml)，80℃反應過夜，加入乙酸乙酯，依次用水、飽和食鹽水洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，純化，得到產物6-氯-8-乙烯基異喹啉(667mg，收率85%)。ES-API: [M+H] += 190.0
步驟五：將6-氯-8-乙烯基異喹啉(600mg，3.17mmol)溶解在四氫呋喃20ml中，室溫加入2.6-二甲基吡啶(339mg，3.17mmol)，再加入K 2OsO 42H 2O(424mg，0.951mmol)和NaIO 4(5.42g，25.36mmol)的水溶(10ml)，室溫反應5h，冷卻至0℃，加入硫代硫酸鈉水溶液淬滅，乙酸乙酯稀釋，過濾，濾液依次用水、飽和碳酸氫鈉水溶液和食鹽水洗滌，乾燥、濃縮，純化得到6-氯異喹啉-8-甲醛(400mg，收率66%)。ES-API: [M+H] += 192.0.
步驟六：將上述6-氯異喹啉-8-甲醛(400mg，2.09mmol)和叔丁基亞磺醯胺(760mg，6.27mmol)溶解在10ml乾燥二氯甲烷中，加入Ti(EtO) 4(1.9g，8.36mmol)，室溫，3h，反應完畢，緩慢導入20ml飽和食鹽水中，加入20ml二氯甲烷，分離有機層後過濾，乾燥，純化得到(E/Z)-N-(((6-氯異喹啉-8-基)亞甲基)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺(420mg，收率68%)。ES-API: [M+H] += 295.0.
步驟七：格氏試劑製備：將2-(2-溴乙基)-1,3-二氧雜環己烷(849mg，4.35mmol，8eq)、Mg(104mg，4.35mmol，8eq)、催化量I 2單質和20ml乾燥四氫呋喃加入到50ml三口瓶中，氮氣保護，室溫反應至無色，並有發熱，汽包產生，隨後移至75C油浴反應2h，鎂粉大部分消失，冷卻至室溫，備用。將(E/Z)-N-(((6-氯異喹啉-8-基)亞甲基)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺(420mg，1.43mmol)和20ml乾燥四氫呋喃加入到100ml三口瓶中，氮氣保護，乾冰浴-78℃，加入上述格氏試劑溶液(10ml，4eq)，緩慢加入，10分鐘後，反應完畢，加入飽和NH 4Cl水溶液(20ml)淬滅，分離有機層，水洗，乾燥，濃縮後，純化得到N-(1-(1-氯異喹啉-8-基)-3-(1,3-二噁烷-2-基)丙基)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺(469mg，收率80%)。ES-API: [M+H] += 411.1.
步驟八：將N-(1-(1-氯異喹啉-8-基)-3-(1,3-二噁烷-2-基)丙基)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺(469mg，1.14mmol)加入到三氟乙酸/水(6ml/0.3ml)中，室溫(＜25℃)反應30分鐘，加入Et 3SiH(1.32g，11.4mmol)，反應2h，濃縮後，溶解在四氫呋喃中，加入TEA(921mg，9.12mmol)和(Boc) 2O(745.5mg，3.42mmol)，反應完畢，乙酸乙酯萃取，飽和食鹽水洗滌，純化得到產物2-(6-氯異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(3a, 189mg，收率50%)。ES-API: [M+H] += 333.1.
步驟九：將上述2-(6-氯異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(189mg，0.569mmol)和碘甲烷(10eq)加入到5ml乙腈中，90℃封管反應6小時，反應完畢，濃縮得到產物8-(1-(叔丁氧基羰基)吡咯烷-2-基)-6-氯-異喹啉-2-甲基鹽(210mg，粗品)直接用於下一步。ES-API: [M+H] += 347.1.
步驟十：將上述8-(1-(叔丁氧基羰基)吡咯烷-2-基)-6-氯-異喹啉-2-甲基鹽(210mg，粗品)溶解在5ml甲醇中，冰水浴，加入NaBH 4(8eq)，冰水浴反應2h，飽和NH 4Cl淬滅，乙酸乙酯萃取，食鹽水洗滌，乾燥，純化得到產物2-(6-氯-2-甲基-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(中間體1a，160mg，兩步收率80%)。ES-API: [M+H] +=351.1.
製備例2 中間體2a的製備
步驟一：將3,5-二溴苯乙酸(7.5g，25.5mmol)和150ml四氫呋喃加入三口反應瓶中，氮氣保護，冰水浴，緩慢滴加硼烷四氫呋喃溶液(38.3mL，38.3mmol)，室溫攪拌6小時，反應完畢，緩慢加入甲醇，直至不再產生氣泡。乙酸乙酯萃取，依次用碳酸氫鈉、飽和食鹽水洗滌，乾燥，濃縮、矽膠柱色譜純化(乙酸乙酯：石油醚=1：20)，得到3，5-二溴苯乙醇(6.3g，收率88.8%)。ES-API: [M+H -18] += 260.9.
步驟二：將3,5-二溴苯乙醇(6.3g，22.5mmol)溶解在120ml二氯甲烷中，冰水浴，依次加入二異丙基乙胺(14.5g，112.5mmol)，2-甲氧基乙氧基甲基氯(8.37g，67.5mmol)，室溫反應過夜，反應完畢，依次用水、飽和食鹽水洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，矽膠柱色譜純化(乙酸乙酯：石油醚=1：20)，得到1,3-二溴-5-(2-(((2-甲氧基乙氧基)甲氧基)乙基)苯(7.2g，收率87%)。ES-API: [M + Na] +=391.0.
步驟三：將1,3-二溴-5-(2-(((2-甲氧基乙氧基)甲氧基)乙基)苯(7.2g，19.56mmol)溶解在乾燥二氯甲烷(150ml)中，冰水浴，加入四氯化鈦(29.3mL，29.3mmol)，冰水浴反應2小時，緩慢倒入飽和食鹽水中猝滅，二氯甲烷萃取，分離有機層，乾燥，純化(乙酸乙酯: 石油醚=1：15)得到6,8-二溴異色滿(5.0g，收率87.7%)。ES-API: [M+H] += 294.9.
步驟四：將6,8-二溴異色滿(3.5 g，11.98 mmol)和乾燥的四氫呋喃(100mL)加入到250ml三口瓶中，氮氣保護，丙酮-乾冰浴-78℃冷卻，緩慢加入正丁基鋰(5.27mL，2.5M)，-78℃反應0.5小時，緩慢加入乾燥的N，N-二甲基甲醯胺(5mL)，反應10分鐘後，LCMS檢測反應完畢。加入1M稀鹽酸淬滅，乙酸乙酯稀釋，依次用水、飽和食鹽水洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，矽膠柱色譜純化(乙酸乙酯：石油醚=1：10)，得到產物6-溴異色滿-8-甲醛(1.8g，收率44%)。ES-API: [M+H] +=241.0.
步驟五：將6-溴異色滿-8-甲醛(1.8g，7.5mmol)和叔丁基亞磺醯胺(1.81g，15mmol)溶解在50ml二氯甲烷中，冰水浴加入鈦酸四乙酯(3.42g，15mmol)，室溫反應3小時，反應完畢，倒入飽和食鹽水中，二氯甲烷稀釋，過濾，有機相分離，無水硫酸鈉乾燥，過濾，矽膠柱色譜純化(乙酸乙酯: 石油醚=1：2)，得到產物N-(((6-溴異色滿-8-基)亞甲基)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺(2.36g，收率92%)。ES-API: [M+H] +=344.1。
步驟六：將N-(((6-溴異色滿-8-基)亞甲基)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺(1.86g，5.42mmol)和20ml乾燥四氫呋喃加入到100ml三口瓶中，氮氣保護，乾冰浴-78℃，加入(2-(1,3-二氧六環-2-基)乙基)溴化鎂(43.4ml，0.5M四氫呋喃溶液)，10分鐘後，反應完畢，加入飽和NH 4Cl水溶液(20ml)猝滅，分離有機層，水洗，乾燥，濃縮後，矽膠純化(乙酸乙酯：石油醚=1：1)得到N-(1-(6-溴異色滿-8-基)-3-(1,3-二噁烷-2-基)丙基)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺(2.1g，收率85%)。ES-API: [M+H] +=460.2。
步驟七：將N-(1-(6-溴異色滿-8-基)-3-(1,3-二噁烷-2-基)丙基)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺(2.5g，7.29mmol)加入到三氟乙酸/水(30ml/3ml)中，室溫(＜25℃)反應30分鐘，加入Et 3SiH(8.45g，11.6mmol)，反應5h，濃縮後除去三氟乙酸，殘渣溶解在四氫呋喃中，加入三乙胺(2.21g，21.9mmol)和(Boc) 2O(3.96g，18.2mmol)，反應完畢，乙酸乙酯萃取，飽和食鹽水洗滌，矽膠純化(乙酸乙酯：石油醚=1：4)，得到產物2-(6-溴異色滿-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(1.65g，收率59%)。ES-API: [M+H] += 382.0。
步驟八：2-(6-溴異色滿-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(750mg，1.96mmol)用SFC手性拆分(柱型: ChiralpakIC 250mm*4.6mm*5um, 流動相: HEX-IPA =85:15，流速:1ml/min, 柱溫：30℃，30min)得到( S)-2-(6-溴異色滿-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(420mg，收率56%，保留時間：9.619 min，ee值：100%)。ES-API: [M+H] +=382.1。
步驟九：氮氣保護下，將( S)-2-(6-溴異色滿-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(381mg，1mmol)、聯硼酸頻哪醇酯(762mg，3mmol)、Pd(dppf)Cl 2(73mg，0.1mmol)和醋酸鉀(294mg，3mmol)溶解在1，4-二氧六環(8ml)中，微波100℃反應0.5小時，反應完畢，加入乙酸乙酯，過濾，濃縮，純化(石油醚：乙酸乙酯=50：50)得到( S)-2-(6-(4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼硼烷-2-基)異色烷-8-基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(400mg，收率93%)。ES-API: [M+H] +=430.3。
製備例3 中間體4a及其異構體的製備
步驟一：將8-溴-6-氯-異喹啉(1 g, 4.12 mmol)溶於乙醇(20 mL)中，加入三氟(乙烯基)硼酸鉀(1.66 g, 12.4 mmol)，[1,1'-雙(二苯基膦基)二茂鐵]二氯化鈀(302 mg, 0.41 mmol)和三乙胺(1.25 g, 12.4 mmol)，升溫至80℃反應3小時。反應液旋乾，柱層析純化(石油醚/乙酸乙酯=4/1)得到6-氯-8-乙烯基異喹啉(750 mg, 收率: 95.9%)。ES-API:[M+1] +=190.1。
步驟二：將6-氯-8-乙烯基異喹啉(750 mg, 3.95 mmol)溶於四氫呋喃/水(10 mL/5 mL)中，加入2,6-二甲基吡啶(424 mg, 3.95 mmol)，高碘酸鈉(6.77 g, 31.64 mmol)和二水合鋨酸鉀(437 mg, 1.19 mmol)，室溫反應2小時。用硫代硫酸鈉水溶液淬滅反應，乙酸乙酯萃取，有機相無水硫酸鈉乾燥，旋乾，柱層析純化(石油醚/乙酸乙酯=2/1)得到6-氯異喹啉-8-甲醛(390 mg, 收率: 51%)。ES-API:[M+1] +=191.9。
步驟三：將6-氯異喹啉-8-甲醛(270 mg, 1.41 mmol)溶於二氯甲烷(10 mL)，再加入2-(三丁基甲錫基甲氧基)乙胺(513 mg, 1.41 mmol)和4A 分子篩(300 mg)，室溫反應過夜。反應液過濾，旋乾，得到1-(6-氯-8-異喹啉基)-N-[2-(三丁基甲錫基甲氧基)乙基]甲胺，粗品，不經純化直接用於下一步反應。
步驟四：將(R,R)-2,2'-異亞丙基雙(4-苯基-2-噁唑啉)(94 mg, 0.28 mmol)一次性加入到三氟甲磺酸銅(510 mg, 1.41 mmol)的六氟異丙醇(2.5 mL)懸浮液中，再加入1-(6-氯-8-異喹啉基)-N-[2-(三丁基甲錫基甲氧基)乙基]甲胺(粗品)的六氟異丙醇(2.5 mL)溶液，室溫反應過夜。用1M 氫氧化鈉溶液淬滅反應，二氯甲烷萃取，有機相無水硫酸鈉乾燥，旋乾，得到3-(6-氯-8-異喹啉基)嗎啉，粗品，不經純化直接用於下一步反應。ES-API:[M+1] +=249.1。
步驟五：將3-(6-氯-8-異喹啉基)嗎啉(粗品)溶於四氫呋喃(5 mL)中，再加入三乙胺(428 mg，4.23 mmol)和二碳酸二叔丁酯(615 mg，2.82 mmol)，室溫反應2小時。反應完成後，加水淬滅反應，乙酸乙酯萃取，無水硫酸鈉乾燥，旋乾，柱層析純化(石油醚/乙酸乙酯=4/1)得到3-(6-氯-8-異喹啉基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(200 mg, 收率: 40.1%)。ES-API:[M+1] +=349.1。
步驟六：將3-(6-氯-8-異喹啉基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(100 mg, 0.29 mmol)溶於乙酸(1.5 mL)，冷卻至0℃，再加入硼氫化鈉(43 mg,1.15 mmol)，在0℃下反應1小時。反應完成後，加水淬滅反應，用碳酸鈉鹼化，二氯甲烷萃取，無水硫酸鈉乾燥，旋乾，得到3-(6-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯，粗品，不經純化直接用於下一步反應。ES-API:[M+1] +=353.1。
步驟七：將3-(6-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(粗品, 0.28 mmol)溶於二氯甲烷(1 mL)，加入三乙胺(85 mg, 0.84 mmol)，冷卻至0℃，再加乙醯氯(22 mg, 0.28 mmol)，0℃下反應0.5小時。反應完成後，加水淬滅反應，二氯甲烷萃取，無水硫酸鈉乾燥，旋乾，柱層析純化(石油醚/乙酸乙酯=3/1)得到3-(2-乙醯基-6-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(4a，80 mg, 收率: 72%)。ES-API:[M+1-100] +=295.1。
步驟八：3-(2-乙醯基-6-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(4a，1.1 g, 2.79 mmol)經過SFC拆分(柱型:IC: 5μm, 4.6*250mm, 流動相: 二氧化碳:異丙醇=70:30, 流速:3mL/min, 柱溫:40℃，柱壓：常壓)得到兩個異構體，其中一個異構體結構任意指定為：(S)-3-(2-乙醯基-6-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(4a-1，406 mg, 收率：37%, 保留時間：8.10 min, 純度100%，ee值：100%)，ES-API: [M+H] += 395.0；另一個異構體結構任意指定為(R)-3-(2-乙醯基-6-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(4a-2，471 mg, 收率：43%, 保留時間：9.83 min, 純度100%，ee值：100%)。ES-API: [M+H] += 395.1。
製備例4 中間體5a的製備
步驟二：將化合物(R)-3-(2-乙醯基-6-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(4a-2，471 mg,1.19 mmol)和氫氧化鈉(167 mg, 4.18 mmol)的乙醇(5 mL)和水(1 mL)在80℃攪拌過夜。反應結束後，反應液濃縮，並加入乙酸乙酯(30 mL)。有機相用水(15 mL)和飽和食鹽水(15 mL)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮得到( R)-3-(6-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(5a, 260 mg, 粗品)，不經純化直接用於下一步反應。ES-API: [M+H] += 353.0。
製備例5 中間體6a及其中間體的製備
步驟一：向50 mL單口圓底燒瓶中加入5-溴-7-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉(492mg, 2mmol)、三乙胺(606mg, 6mmol)、和二氯甲烷(10 mL)，0℃下緩慢加入乙酸酐(310mg, 3mmol)，0℃條件下反應1小時。反應液加入二氯甲烷(20 mL)，用飽和食鹽水(20 mLX3)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮，粗品用快速矽膠柱純化(甲醇：二氯甲烷=10:100)得到目標產物1-(5-溴-7-氯-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)乙烷-1-酮(582 mg , 收率: 100%)。ES-API: [M+H] +=288.0。
步驟二：向50mL圓底燒瓶中加入1-(5-溴-7-氯-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)乙烷-1-酮(1.5 g, 5.2 mmol)，5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)-2,3-二氫-4H-1,4-噁嗪-4-羧酸叔丁酯(1.35 g, 4.33 mmol)，1,1-二(二苯膦基)二茂鐵二氯化鈀(320 mg, 0.43 mmol)，碳酸鉀(1.8 g, 13.0 mmol)，二氧六環(20 mL)和水(3 mL)。體系用氮氣置換三次，然後用氮氣球保護。100℃條件下反應3小時，反應液加入乙酸乙酯(50 mL)，用飽和食鹽水(50 mLX3)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮，粗品用快速矽膠柱純化(乙酸乙酯：石油醚=50:100)得到目標產物5-(2-乙醯基-7-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-5-基)-2,3-二氫-4H-1,4-噁嗪-4-羧酸叔丁酯(1.88 g, 粗品)。ES-API: [M+H] +=393.2。
步驟三：向25 mL單口圓底燒瓶中加入5-(2-乙醯基-7-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-5-基)-2,3-二氫-4H-1,4-噁嗪-4-羧酸叔丁酯(1.88 g, 粗品)，三氟乙酸(20 mL)和二氯甲烷(40 mL)，硼氫化鈉(0.73 g, 19 mmol)緩慢加到混合溶液中，室溫攪拌反應3小時。反應液旋乾後加入乙酸乙酯(50 mL)，用飽和食鹽水(50 mLX3)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮，粗品用快速矽膠柱純化(乙酸乙酯：石油醚=50:100)得到目標產物1-(7-氯-5-(嗎啉-3-基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)乙烷-1-酮(1.4 g, 粗品)。ES-API: [M+H] +=294.9。
步驟四：向25mL單口圓底燒瓶中加入1-(7-氯-5-(嗎啉-3-基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)乙烷-1-酮(1.4g, 粗品)，二碳酸二叔丁酯(5.18 g, 23.7 mmol)，三乙胺(3.84 g, 38 mmol)和四氫呋喃(50 mL)，室溫攪拌反應1小時，反應液後加入乙酸乙酯(50 mL)，用飽和食鹽水(50 mLX3)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮，粗品用快速矽膠柱純化(乙酸乙酯：石油醚=50:100)得到目標產物3-(2-乙醯基-7-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-5-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(6a，1.5 g, 3步收率: 73%)。ES-API: [M+H] +=395.2。
步驟五：3-(2-乙醯基-7-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-5-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(6a，1 g, 2.5 mmol)經過手性拆分(色譜柱柱：IG柱; 流動相 A:正己烷; 流動相B: 乙醇; 流速: 1ml/min; B%=50%; 柱溫: 30 oC)純化得到兩個異構體化合物：其中一個異構體結構任意指定為(R)-3-(2-乙醯基-7-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-5-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(6a-1，保留時間8.559min, 250mg, 收率: 25%)。ES-API: [M+H] +=395.2；另一個異構體結構任意指定為(S)-3-(2-乙醯基-7-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-5-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(6a-2，保留時間7.134min, 250mg, 收率: 25%)。ES-API: [M+H] +=395.2。
實施例1 化合物Z1的合成
步驟一：氮氣保護下，將5-溴-3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(250mg，1.18mmol)、聯硼酸頻那醇酯(902mg，3.55mmol)、Pd(dppf)Cl 2(86mg，0.0118mmol)、醋酸鉀(173mg，1.77mmol)溶解在1,4-二氧六環(20ml)中，80℃反應5h，反應完畢，加入乙酸乙酯，依次用水、飽和食鹽水洗滌，無水硫酸鈉乾燥，純化得到(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)硼酸(130mg，收率62%)。ES-API: [M+H] += 177.0
步驟二：將(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)硼酸(16mg，0.09mmol)、2-(6-氯-2-甲基-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(15mg，0.045mmol)、Sphos Pd G2(3.2mg，0.0045mmol)和K 3PO 4(28.6mg，0.135mmol)加入到1,4-二氧六環(1ml)和水(0.2ml)中，氮氣置換，微波100℃反應1h，反應完畢，加入乙酸乙酯，依次用水、飽和食鹽水洗滌，無水硫酸鈉乾燥，純化得到2-(2-甲基-6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(10mg，收率50%)。ES-API: [M+H] += 447.2
步驟三：將2-(2-甲基-6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(10mg，0.022mmol)加入到4M鹽酸甲醇溶液(5ml)中，室溫反應2h，反應完畢，濃縮，經製備HPLC(甲酸法)純化得到2-(2-甲基-6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷(Z1，甲酸鹽，2.3mg，收率23%)。ES-API: [M+H] += 347.2
實施例2 化合物Z2的合成
步驟一：氮氣保護下，將5-溴-3-碘吡啶-2-胺(1.49g，5mmol)、4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼硼烷-2-基)-1H-吡唑(970mg，5mmol)、Pd(dppf)Cl 2(365mg，0.5mmol)、碳酸鉀(2.07g，15mmol)溶解在1,4-二氧六環(30ml)中，85℃反應20h，反應完畢，加入乙酸乙酯，依次用水、飽和食鹽水洗滌，無水硫酸鈉乾燥，純化得到5-溴-3-(1H-吡唑-4-基)吡啶-2-胺(350mg，收率29%)。ES-API: [M+H] += 239.0
步驟二：氮氣保護下，將5-溴-3-(1H-吡唑-4-基)吡啶-2-胺(350mg，1.47mmol)、聯硼酸頻那醇酯(1.12g，4.43mmol)Pd(dppf)Cl 2(120mg，0.147mmol)、醋酸鉀(434mg，4.43mmol)溶解在1,4-二氧六環(20ml)中，80℃反應20h，反應完畢，加入乙酸乙酯，依次用水、飽和食鹽水洗滌，無水硫酸鈉乾燥，純化得到(6-氨基-5-(1H-吡唑-4-基)吡啶-3-基)硼酸(100mg，收率33%)。ES-API: [M+H] +=205.0
步驟三：將(6-氨基-5-(1H-吡唑-4-基)吡啶-3-基)硼酸(20mg，0.098mmol)、2-(6-氯-2-甲基-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(34mg，0.098mmol)、SphosPdG2(3.2mg，0.0049mmol)和K 3PO 4(62mg，0.294mmol)加入到1,4-二氧六環(5ml)和水(1ml)中，氮氣置換，微波100℃反應1h，反應完畢，加入乙酸乙酯，依次用水、飽和食鹽水洗滌，無水硫酸鈉乾燥，純化得到2-(6-(6-氨基-5-(1H-吡唑-4-基)吡啶-3-基)-2-甲基-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(10mg，收率21%)。ES-API: [M+H] += 475.2
步驟四：將2-(6-(6-氨基-5-(1H-吡唑-4-基)吡啶-3-基)-2-甲基-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(10mg，0.021mmol)加入到4M鹽酸甲醇溶液(5ml)中，室溫反應2h，反應完畢，濃縮，經製備HPLC(碳酸氫銨法)純化得到5-(2-甲基-8-(吡咯烷-2-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-6-基)-3-(1 H-吡唑-4-基)吡啶-2-胺 (Z2，1.79mg，收率22%)。ES-API: [M+H] +=375.2。
實施例3 化合物Z3及其異構體的合成
步驟一：將(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)硼酸(66mg，0.2mmol)、2-(6-氯異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(70mg，0.4mmol)、Sphos Pd G2(14.4mg，0.02mmol)和K 3PO 4(127mg，0.6mmol)加入到1,4-二氧六環(2ml)和水(0.2ml)中，氮氣置換，微波110℃反應1h，反應完畢，加入乙酸乙酯，依次用水、飽和食鹽水洗滌，無水硫酸鈉乾燥，純化得到2-(6-(3-(甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基]異喹啉-8-基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(60mg，收率70%)。ES-API: [M+H] += 429.2
步驟二：將2-(6-(3-(甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基]異喹啉-8-基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(60mg，0.14mmol)加入到4M鹽酸甲醇溶液(5ml)中，室溫反應2h，反應完畢，濃縮，經製備HPLC純化得到6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-8-(吡咯烷-2-基)異喹啉 (Z3，甲酸鹽，19mg，收率41%)。ES-API: [M+H] +=329.2
步驟三：將上述步驟得到的化合物Z3(15 mg)用手性製備拆分(分離柱IC 250mm*4.6mm*5um, 流動相: HEX-ETOH-DEA =50:50:2, 流速:1ml/min, 柱溫：30℃)得到兩個異構體化合物。一個異構體化合物結構任意指定為 ( S)-6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-8-(吡咯烷-2-基)異喹啉(Z3-1，3.5 mg, 峰1，保留時間 15.24 min，收率23%，ee：100%)，ES-API: [M+H] += 329.2; 1H NMR (500 MHz, DMSO- d 6) δ 11.46 (s, 1H), 9.62 (s, 1H), 8.66 (d, J= 2.2 Hz, 1H), 8.53 (d, J= 5.6 Hz, 1H), 8.33 (d, J= 2.2 Hz, 1H), 8.18 (d, J= 1.8 Hz, 1H), 7.88 (d, J= 5.6 Hz, 1H), 7.34-7.30 (m, 1H), 5.02 (t, J= 7.6 Hz, 1H), 3.18 (dt, J= 9.8, 6.3 Hz, 1H), 3.07 (dt, J= 9.8, 7.4 Hz, 1H), 2.35 (d, J= 1.1 Hz, 3H), 2.05-1.91 (m, 1H), 1.90-1.85 (m, 2H), 1.69-1.32 (m, 1H). 另一個異構體化合物結構任意指定為( R)-6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-8-(吡咯烷-2-基)異喹啉 (Z3-2，4.5 mg, 峰2，保留時間 24.78min，收率30%，ee：100%)，ES-API: [M+H] += 329.2。
實施例4 化合物Z4的合成
步驟一：氮氣保護下，將5-溴-3-碘吡啶-2-胺(2g，6.69mmol)、1-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼烷-2-基)-1H-吡唑(2.08mg，10.0mmol)、Pd(dppf)Cl 2(273mg，0.05mmol)、碳酸鉀(2.3g，16.72mmol)溶解在1,4-二氧六環(30ml)和水(3ml)中，85℃反應20h，反應完畢，加入乙酸乙酯，依次用水、飽和食鹽水洗滌，無水硫酸鈉乾燥，純化得到5-溴-3-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶-2-胺(900mg，收率53.6%)。ES-API: [M+H] += 253.0
步驟二：氮氣保護下，將5-溴-3-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶-2-胺(900mg，3.55mmol)、聯硼酸頻那醇酯(1.8g，7.11mmol)Pd(dppf)Cl 2(145mg，0.177mmol)、醋酸鉀(697mg，7.11mmol)溶解在1,4-二氧六環(20ml)中，80℃反應20h，反應完畢，加入乙酸乙酯，依次用水、飽和食鹽水洗滌，無水硫酸鈉乾燥，純化得到(6-氨基-5-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶-3-基)硼酸(220mg，收率28%)。ES-API: [M+H] +=219.0
步驟三：將(6-氨基-5-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶-3-基)硼酸(218mg，1.0mmol)、2-(6-氯-2-甲基-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(160mg，0.457mmol)、Sphos Pd G2(72mg，0.1mmol)和K 2CO 3(414mg，3.0 mmol)加入到1,4-二氧六環(6ml)和水(1ml)中，氮氣置換，微波110℃反應1h，反應完畢，加入乙酸乙酯，依次用水、飽和食鹽水洗滌，無水硫酸鈉乾燥，純化得到2-(6-(6-氨基-5-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶-3-基)-2-甲基-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(150mg，收率67%)。ES-API: [M+H] += 489.2
步驟四：將2-(6-(6-氨基-5-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶-3-基)-2-甲基-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(150mg，0.307mmol)加入到4M鹽酸甲醇溶液(8ml)中，室溫反應2h，反應完畢，濃縮，經製備HPLC(碳酸氫銨法)純化得到3-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-5-(2-甲基-8-(吡咯烷-2-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-6-基)吡啶-2-胺(60mg，收率50.4%)。ES-API: [M+H] +=389.2. 1H NMR (500 MHz, DMSO- d 6) δ 8.26 (d, J= 2.4 Hz, 1H), 8.10 (s, 1H), 7.83 (d, J= 4.3 Hz, 2H), 7.68 (s, 1H), 7.40 (d, J= 1.8 Hz, 1H), 5.78 (s, 2H), 4.54-4.46 (m, 1H), 3.89 (s, 3H), 3.72 (d, J= 15.4 Hz, 1H), 3.50 (d, J= 15.2 Hz, 1H), 3.21 (t, J= 7.9 Hz, 1H), 2.92-2.89 (m, 3H), 2.66-2.54 (m, 3H), 2.41 (s, 3H), 2.30 (t, J= 10.4 Hz, 1H), 2.08-1.84 (m, 3H).
實施例5 化合物Z93及其異構體的合成
步驟一：將(6-氨基-5-(1H-吡唑-4-基)吡啶-3-基)硼酸(48mg，0.236mmol)、2-(6-溴異色滿-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(45mg，0.118mmol)、Sphos Pd G2(34mg，0.0472mmol)和K 2CO 3(98mg，0.708mmol)加入到1,4-二氧六環(2ml)和水(0.5ml)中，氮氣置換，微波100℃反應1h，反應完畢，加入乙酸乙酯，依次用水、飽和食鹽水洗滌，無水硫酸鈉乾燥，純化(石油醚：乙酸乙酯=10：90)得到2-(6-(6-(6-氨基-5-(1H-吡唑-4-基)吡啶-3-基)異色滿-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(32mg，收率60%)。ES-API: [M+H] +=462.2。
步驟二：將2-(6-(6-(6-氨基-5-(1H-吡唑-4-基)吡啶-3-基)異色滿-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(32mg，0.069mmol)加入到4M鹽酸甲醇溶液(5ml)中，室溫反應3h，反應完畢，濃縮，加入7M氨/甲醇溶液(1mL)中和後，再次濃縮，經製備HPLC(甲酸法)純化得到3-(1H-吡唑-4-基)-5-(8-(吡咯烷-2-基)異色滿-6-基)吡啶-2-胺甲酸鹽(20mg，收率80%)。ES-API: [M+H] +=362.2。
步驟三：將3-(1H-吡唑-4-基)-5-(8-(吡咯烷-2-基)異色滿-6-基)吡啶-2-胺甲酸鹽(Z93, 20mg)用手性製備拆分(分離柱IC 250mm*4.6mm*5um, 流動相: HEX-ETOH-DEA =50:50:2, 流速:1ml/min, 柱溫：30℃，35MIN)得到兩個異構體化合物。一個異構體化合物結構任意指定為(R)-3-(1H-吡唑-4-基)-5-(8-(吡咯烷-2-基)異色滿-6-基)吡啶-2-胺(Z93-1, 3.8 mg, 峰1，保留時間 9.20 min，收率19%，ee：97%)，ES-API: [M+H] += 362.2; 1H NMR (500 MHz, DMSO- d 6) δ 8.17 (d, J= 2.4 Hz, 1H), 7.99 (s, 3H), 7.73 (d, J= 2.4 Hz, 1H), 7.59 (d, J= 1.9 Hz, 1H), 7.27 (d, J= 1.9 Hz, 1H), 5.73 (s, 2H), 4.87-4.68 (m, 3H), 4.04 (t, J= 7.7 Hz, 1H), 3.89-3.82 (m, 2H), 3.14-3.04 (m, 1H), 2.93-2.88 (m, 1H), 2.87-2.83 (m, 2H), 2.17-2.10 (m, 1H), 1.84-1.79 (m, 1H), 1.76-1.70 (m, 1H), 1.46-1.40 (m, 1H)；另一個異構體化合物結構任意指定為(S)-3-(1H-吡唑-4-基)-5-(8-(吡咯烷-2-基)異色滿-6-基)吡啶-2-胺(Z93-2, 3 mg, 峰2，保留時間 15.54min，收率15%，ee：96.8%)，ES-API: [M+H] += 362.2。
實施例6 化合物Z94及其異構體的合成
步驟一：將(6-氨基-5-(1H-吡唑-4-基)吡啶-3-基)硼酸(55mg，0.271mmol)、2-(6-氯異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(45mg，0.135mmol)、Sphos Pd G2(19.5mg，0.0271mmol)和K 2CO 3(56mg，0.405mmol)加入到1,4-二氧六環(2ml)和水(0.5ml)中，氮氣置換，微波110℃反應1h，反應完畢，加入乙酸乙酯，依次用水、飽和食鹽水洗滌，無水硫酸鈉乾燥，純化(二氯甲烷：甲醇=90：10)得到2-(6-(6-(6-氨基-5-(1H-吡唑-4-基)吡啶-3-基)異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(24mg，收率39%)。ES-API: [M+H] +=457.2。
步驟二：將2-(6-(6-(6-氨基-5-(1H-吡唑-4-基)吡啶-3-基)異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(24mg，0.069mmol)加入到4M鹽酸甲醇溶液(5ml)中，室溫反應3h，反應完畢，濃縮，經製備HPLC(碳酸氫銨法)純化得到3-(1H-吡唑-4-基)-5-(8-(吡咯烷-2-基)異喹啉-6-基)吡啶-2-胺(Z94, 10mg, 收率53%)。ES-API: [M+H] +=357.2。
步驟三: 將3-(1H-吡唑-4-基)-5-(8-(吡咯烷-2-基)異喹啉-6-基)吡啶-2-胺(Z94，10mg)用手性製備拆分(分離柱IC 250mm*4.6mm*5um, 流動相: HEX-ETOH-DEA =50:50:2, 流速:1ml/min, 柱溫：30℃，35MIN)得到兩個異構體化合物。一個異構體化合物結構任意指定為(R)-3-(1H-吡唑-4-基)-5-(8-(吡咯烷-2-基)異喹啉-6-基)吡啶-2-胺(Z94-1, 3.9 mg, 峰1，保留時間 11.90 min，收率39%，ee值：97%)，ES-API: [M+H] += 357.2; 1H NMR (500 MHz, DMSO- d 6) δ 9.57 (s, 1H), 8.49 (d, J= 5.6 Hz, 1H), 8.39 (d, J= 2.4 Hz, 1H), 8.14 (d, J= 1.8 Hz, 1H), 8.08 (d, J= 1.8 Hz, 1H), 8.03 (s, 2H), 7.94 (d, J= 2.4 Hz, 1H), 7.81 (d, J= 5.6 Hz, 1H), 5.96 (s, 2H), 4.96 (t, J= 7.6 Hz, 1H), 3.15 (dt, J= 9.9, 6.3 Hz, 1H), 3.07-3.02 (m, 1H), 2.46-2.41 (m, 1H), 1.94-1.79 (m, 3H), 1.65-1.58 (m, 1H)；另一個異構體化合物結構任意指定為(S)-3-(1H-吡唑-4-基)-5-(8-(吡咯烷-2-基)異喹啉-6-基)吡啶-2-胺(Z94-2，3.5mg，峰2，保留時間 15.58min，收率35%，ee值：96.5%)，ES-API: [M+H] += 357.2。
實施例7 化合物Z95及其異構體的合成
步驟一：將5-溴-3-異丙基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(250mg，1.05mmol)、聯硼酸頻哪醇酯(800mg，3.15mmol)、Pd(dppf)Cl 2(77mg，0.105mmol)和醋酸鉀(309mg，3.15mmol)加入到乾燥的1,4-二氧六環(8mL)中，氮氣置換，微波100℃反應0.5小時，反應完畢。乙酸乙酯稀釋，過濾，濃縮，矽膠純化(石油醚：乙酸乙酯=80：20)，得到3-異丙基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼硼烷-2-基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(230mg，收率76%)。ES-API: [M+H] += 287.2。
步驟二：將3-異丙基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼硼烷-2-基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(61mg，0.3mmol)、2-(6-氯異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(50mg，0.15mmol)、Sphos Pd G2(21.6mg，0.03mmol)和K 2CO 3(62mg，0.45mmol)加入到1,4-二氧六環(2ml)和水(0.5ml)中，氮氣置換，微波110℃反應1h，反應完畢，加入乙酸乙酯，依次用水、飽和食鹽水洗滌，無水硫酸鈉乾燥，純化得到2-(6-(3-(異丙基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基]異喹啉-8-基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(45mg，收率66%)。ES-API: [M+H] += 457.2。
步驟三：將2-(6-(3-(異丙基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基]異喹啉-8-基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(45mg，0.099mmol)加入到4M鹽酸甲醇溶液(5ml)中，室溫反應2h，反應完畢，濃縮，經製備HPLC(碳酸氫銨法)純化得到6-(3-異丙基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-8-(吡咯烷-2-基)異喹啉(Z95, 18mg, 收率51%)。ES-API: [M+H] +=357.2。
步驟四：將6-(3-異丙基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-8-(吡咯烷-2-基)異喹啉(Z95，15mg)用手性拆分(柱型: Chiralpak IC 250mm*4.6mm*5um, 流動相: HEX-ETOH-DEA = 40:60:2, 流速:1ml/min, 柱溫：30℃，35MIN)得到兩個異構體化合物。一個異構體化合物結構任意指定為( R)-6-(3-異丙基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-8-(吡咯烷-2-基)異喹啉(Z95-1，3.8mg，收率：25%，保留時間：10.29 min，ee值：100%)。ES-API:[M+H] +=357.2。 1H NMR (500 MHz, DMSO- d 6) δ 11.48 (s, 1H), 9.62 (s, 1H), 8.64 (d, J= 2.2 Hz, 1H), 8.52 (d, J= 5.6 Hz, 1H), 8.36 (d, J= 2.2 Hz, 1H), 8.23 (d, J= 1.9 Hz, 1H), 8.17 (d, J= 1.8 Hz, 1H), 7.89 (d, J= 5.6 Hz, 1H), 7.29 (d, J= 2.5 Hz, 1H), 5.00 (t, J= 7.6 Hz, 1H), 3.27-3.23 (m, 1H), 3.16 (dt, J= 9.8, 6.2 Hz, 1H), 3.06 (dt, J= 9.8, 7.4 Hz, 1H), 2.46 (d, J= 7.1 Hz, 1H), 2.04-1.80 (m, 3H), 1.66-1.62 (m, 1H), 1.36 (d, J= 6.9 Hz, 6H)；另一個異構體化合物結構任意指定為( S)-6-(3-異丙基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-8-(吡咯烷-2-基)異喹啉(Z95-2，2.7mg，收率：18%，保留時間：16.30 min，ee值：100%)。ES-API:[M+H] +=357.2。
實施例8 化合物Z96的合成
步驟一：將5-溴-3-(三氟甲基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(250mg，0.947mmol)、聯硼酸頻哪醇酯(721mg，2.84mmol)、Pd(dppf)Cl 2(69mg，0.0947mmol)和醋酸鉀(278mg，2.84mmol)加入到乾燥的1,4-二氧六環(8mL)中，氮氣置換，微波110℃反應0.5小時，反應完畢。乙酸乙酯稀釋，過濾，濃縮，矽膠純化(石油醚：乙酸乙酯=75：25)，得到3-(三氟甲基)-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼硼烷-2-基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(240mg，收率82%)。ES-API: [M+H] += 313.1。
步驟二：將3-(三氟甲基)-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼硼烷-2-基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(94mg，0.3mmol)、2-(6-氯異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(50mg，0.15mmol)、Sphos Pd G2(21.6mg，0.03mmol)和K 2CO 3(62mg，0.45mmol)加入到1,4-二氧六環(2ml)和水(0.5ml)中，氮氣置換，微波110℃反應1h，反應完畢，加入乙酸乙酯，依次用水、飽和食鹽水洗滌，無水硫酸鈉乾燥，純化得到2-(6-(3-三氟甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)異喹啉-8-基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(46mg，收率61%)。ES-API: [M+H] += 483.2。
步驟三：將2-(6-(3-三氟甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)異喹啉-8-基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(46mg，0.093mmol)加入到4M鹽酸甲醇溶液(5ml)中，室溫反應2h，反應完畢，濃縮，經製備HPLC(碳酸氫銨法)純化得到6-(3-(三氟甲基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-8-(吡咯烷-2-基)異喹啉(Z96，10mg，收率28%)。ES-API: [M+H] +=383.2。 1H NMR (500 MHz, DMSO- d 6) δ 9.64 (s, 1H), 8.84 (d, J= 2.1 Hz, 1H), 8.55 (d, J= 5.6 Hz, 1H), 8.36 (d, J= 2.1 Hz, 1H), 8.27 (q, J= 1.4 Hz, 1H), 8.24-8.22 (m, 2H), 7.92 (d, J= 5.6 Hz, 1H), 5.00 (t, J= 7.6 Hz, 1H), 3.15 (ddd, J= 9.8, 6.8, 5.4 Hz, 1H), 3.06 (dt, J= 9.8, 7.4 Hz, 1H), 2.46 (s, 1H), 1.85 (dq, J= 10.1, 7.4 Hz, 3H), 1.65-1.58 (m, 1H)。
實施例9 化合物Z97及其異構體的合成
步驟一：將(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)硼酸頻哪醇酯(76mg，0.296mmol)、2-(6-溴異色滿-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(50mg，0.148mmol)、Sphos Pd G2(21mg，0.0296mmol)和K 2CO 3(61mg，0.444mmol)加入到1,4-二氧六環(2ml)和水(0.5ml)中，氮氣置換，微波110℃反應1h，反應完畢，加入乙酸乙酯，依次用水、飽和食鹽水洗滌，無水硫酸鈉乾燥，純化(石油醚：乙酸乙酯=20：80)得到2-(6-(3-(1-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基]異色滿-8-基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(45mg，收率70%)。ES-API: [M+H] +=434.1。
步驟二：將2-(6-(3-(1-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基]異色滿-8-基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(45mg，0.108mmol)溶解到二氯甲烷(2mL)中，加入1mL三氟乙酸中，室溫反應0.5h，反應完畢，濃縮，加入7M氨/甲醇溶液(1mL)中和後，再次濃縮，經製備HPLC(氨水法)純化得到3-甲基-5-(8-(吡咯烷-2-基)異色滿-6-基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(Z97，10mg，收率27.8%)。ES-API: [M+H] +=334.1。 1H NMR (500 MHz, DMSO- d 6) δ 11.32 (s, 1H), 8.45 (d, J= 2.2 Hz, 1H), 8.09 (d, J= 2.2 Hz, 1H), 7.70 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 7.34 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 7.25 (dd, J= 2.5, 1.3 Hz, 1H), 4.95-4.62 (m, 3H), 4.05 (t, J= 7.7 Hz, 1H), 3.92-3.83 (m, 2H), 3.12-3.07 (m, 1H), 2.94-2.85 (m, 3H), 2.31 (t, J= 1.9 Hz, 3H), 2.17-2.13 (m, 1H), 1.93-1.61 (m, 3H), 1.48-1.42 (m, 1H)。
步驟三：將3-甲基-5-(8-(吡咯烷-2-基)異色滿-6-基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(Z97，80mg)用手性拆分(柱型: Chiralpak IC 250mm*4.6mm*5um, 流動相: HEX-ETOH-DEA =50:50:2, 流速:1ml/min, 柱溫：30℃，35MIN)得到兩個異構體化合物。一個異構體化合物結構任意指定為( R)-3-甲基-5-(8-(吡咯烷-2-基)異色滿-6-基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(Z97-1，30mg，收率：37.5%，保留時間：6.88 min，純度：100%，ee值：100%)。ES-API:[M+H] +=334.1。 1H NMR (500 MHz, DMSO- d 6) δ 11.32 (s, 1H), 8.45 (d, J= 2.2 Hz, 1H), 8.09 (d, J= 2.2 Hz, 1H), 7.70 (d, J= 1.9 Hz, 1H), 7.34 (d, J= 1.9 Hz, 1H), 7.25 (s, 1H), 4.87 (d, J= 15.2 Hz, 1H), 4.75 (d, J= 15.2 Hz, 1H), 4.04 (t, J= 7.7 Hz, 1H), 3.90-3.86 (m, 2H), 3.50 (d, J= 10.0 Hz, 1H), 3.10-1.06 (m, 1H), 2.89 (dt, J= 10.3, 7.1 Hz, 3H), 2.31 (s, 3H), 2.15-2.10 (m, 1H), 1.80-1.76 (m, 2H), 1.45-1.40 (, 1H)；一個異構體化合物結構任意指定為( S)-3-甲基-5-(8-(吡咯烷-2-基)異色滿-6-基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(Z97-2，30mg，收率：37.5%，保留時間：11.09 min，純度：100%，ee值：100%)。ES-API:[M+H] +=334.1。 1H NMR (500 MHz, DMSO- d 6) δ 11.32 (s, 1H), 8.45 (d, J= 2.2 Hz, 1H), 8.09 (d, J= 2.2 Hz, 1H), 7.70 (d, J= 1.9 Hz, 1H), 7.34 (s, 1H), 7.25 (s, 1H), 4.91-4.71 (m, 2H), 4.05 (t, J= 7.7 Hz, 1H), 3.90-3.86 (m, 2H), 3.67-3.42 (m, 1H), 3.10-1.06 (m, 1H), 2.89 (dt, J= 11.3, 6.6 Hz, 3H), 2.31 (s, 3H), 2.20-2.11 (m, 1H), 1.88-1.71 (m, 2H), 1.48-1.39 (m, 1H)。
實施例10 化合物Z98及其異構體的合成
步驟一：將2-(6-氯異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(60mg，0.18mmol)溶解在5ml醋酸中，室溫加入NaBH 4(55mg，1.44mmol)，反應0.5小時，濃縮，加入乙酸乙酯萃取，依次用飽和碳酸氫鈉水溶液和飽和食鹽水洗滌，乾燥，濃縮得到產物2-(6-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(60mg，粗品)，直接用於下一步。ES-API: [M+H] +=337.1。
步驟二：2-(6-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(60mg，0.178)溶解在二氯甲烷中，冰水浴條件下，依次加入三乙胺(54mg，0.534mmoL)、乙醯氯(21mg，0.267mmol)，反應1小時後，反應完畢。乙酸乙酯萃取，飽和食鹽水洗滌，乾燥，濃縮，矽膠純化(石油醚：乙酸乙酯=80：20)，得到2-(2-乙醯基-6-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(60mg，兩步收率88%)。ES-API: [M+H] +=379.1。
步驟三：將2-(2-乙醯基-6-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(60mg，0.158mmol)、(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)硼酸頻哪醇酯(56mg，0.317mmol)、Sphos Pd G2(23mg，0.0317mmol)和K 2CO 3(65.4mg，0.474mmol)加入到1,4-二氧六環(2ml)和水(0.5ml)中，氮氣置換，微波110℃反應1h，反應完畢，加入乙酸乙酯，依次用水、飽和食鹽水洗滌，無水硫酸鈉乾燥，純化得到2-(2-乙醯基-6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(60mg，收率80%)。ES-API: [M+H] += 475.2。
步驟四：將2-(2-乙醯基-6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(60mg，0.126mmol)溶解在3ml二氯甲烷中，加入2ml三氟乙酸，室溫反應1h，反應完畢，濃縮，經製備HPLC(氨水法)純化得到1-(6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-8-(吡咯烷-2-基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)乙酮(Z98，35mg，收率74%)。ES-API: [M+H] += 374.2. 1H NMR (500 MHz, DMSO- d 6) δ 11.32 (s, 1H), 8.45 (d, J= 2.2 Hz, 1H), 8.09 (d, J= 2.5 Hz, 1H), 7.75 (dd, J= 10.4, 2.0 Hz, 1H), 7.39 (t, J= 3.0 Hz, 1H), 7.27-7.25 (m, 1H), 4.79 (t, J= 17.1 Hz, 1H), 4.64-4.68 (m, 1H), 4.23-4.18 (m, 1H), 3.68 (t, J= 5.9 Hz, 2H), 3.12-3.08 (m, 1H), 3.01-2.82 (m, 4H), 2.31 (t, J= 1.5 Hz, 3H), 2.14-2.10 (m, 4H), 1.82-1.78 (m, 2H), 1.53-1.38 (m, 1H)。
步驟五：1-(6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-8-(吡咯烷-2-基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基) 乙酮(Z98，35mg)用手性拆分(柱型: ChiralpakIC 250mm*4.6mm*5um, 流動相: HEX-ETOH-DEA =50:50:2, 流速:1ml/min, 柱溫：30℃，30MIN)得到兩個異構體化合物。一個異構體化合物結構任意指定為( R)-1-(6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-8-(吡咯烷-2-基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)乙酮(Z98-1，10mg，收率：28.5%，保留時間：3.65 min，純度：96%，ee值：100%)。ES-API:[M+H] += 374.2.。 1H NMR (500 MHz, DMSO- d 6) δ 11.33 (s, 1H), 8.46 (d, J= 2.2 Hz, 1H), 8.09 (d, J= 2.3 Hz, 1H), 7.75 (dd, J= 9.8, 2.0 Hz, 1H), 7.40 (dd, J= 5.7, 1.8 Hz, 1H), 7.26 (s, 1H), 4.79 (t, J= 17.1 Hz, 1H), 4.65-4.60 (m, 1H), 4.24 (dt, J= 19.8, 7.7 Hz, 1H), 3.68 (t, J= 5.9 Hz, 2H), 3.14-3.10 (m, 1H), 3.00-2.95 (m, 2H), 2.86 (t, J= 6.1 Hz, 1H), 2.31 (s, 3H), 2.25-2.17 (m, 1H), 2.16-2.10 (m, 3H), 1.91-1.75 (m, 3H), 1.56-1.42 (m, 1H)。一個異構體化合物結構任意指定為( S)-1-(6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-8-(吡咯烷-2-基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)乙酮(Z98-2，10mg，收率：37.5%，保留時間：6.82min，純度：97%，ee值：100%)。ES-API:[M+H] += 374.2。
實施例11 化合物Z99的合成
步驟一：將2-(6-溴異色滿-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(381mg，1mmol)、聯硼酸頻哪醇酯(762mg，3mmol)、Pd(dppf)Cl 2(73mg，0.1mmol)和醋酸鉀(294mg，3mmol)溶解在1,4-二氧六環(8ml)中，氮氣置換，微波100℃反應0.5小時，反應完畢，加入乙酸乙酯，過濾，濃縮，純化(石油醚：乙酸乙酯=50：50)得到2-(6-(4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼硼烷-2-基)異色烷-8-基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(400mg，收率93%)。ES-API: [M+H] +=430.3。
步驟二：將2-(6-(4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼硼烷-2-基)異色烷-8-基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(123.5 mg，0.288mmol)、5-溴-3,4-二甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(50mg，0.222mmol)、Sphos Pd G2(16mg，0.0222mmol)和K 2CO 3(92mg，0.666mmol)加入到1,4-二氧六環(2ml)和水(0.5ml)中，氮氣置換，微波110℃反應1h，反應完畢，加入乙酸乙酯，依次用水、飽和食鹽水洗滌，無水硫酸鈉乾燥，純化(石油醚：乙酸乙酯=20：80)得到2-(6-(3,4-二甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)異色滿-8-基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(50mg，收率50.5%)。ES-API: [M+H] +=448.2。
步驟三：將2-(6-(3-(1-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基]異色滿-8-基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(50mg，0.108mmol)溶解到二氯甲烷(2mL)中，加入1mL三氟乙酸中，室溫反應0.5h，反應完畢，濃縮，加入7M氨/甲醇溶液(1mL)中和後，再次濃縮，經製備HPLC(氨水法)純化得到3-甲基-5-(8-(吡咯烷-2-基)異色滿-6-基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(Z99，34mg，收率87%)。ES-API: [M+H] +=348.2。 1H NMR (500 MHz, DMSO- d 6) δ 11.24-11.17 (m, 1H), 7.94 (s, 1H), 7.35 (d, J= 1.9 Hz, 1H), 7.17 (s, 1H), 6.99 (dd, J= 14.6, 1.8 Hz, 1H), 4.90-4.75 (m, 2H), 4.08 (t, J= 7.5 Hz, 1H), 3.94-3.84 (m, 2H), 3.57-3.40 (m, 2H), 3.03-2.98 (m, 1H), 2.90-2.84 (m, 2H), 2.55 (d, J= 5.6 Hz, 3H), 2.45 (d, J= 1.1 Hz, 3H), 1.84-1.73 (m, 2H), 1.68-1.60 (m, 1H), 1.46-1.40 (m, 1H)。
實施例12 化合物Z100及其異構體的合成
步驟一：將2-(6-(4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼硼烷-2-基)異色烷-8-基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(50 mg，0.2mmol)、5-溴-3-(嘧啶-4-基)吡啶-2-胺(86mg，0.2mmol)、Sphos Pd G2(28.8mg，0.04mmol)和K 2CO 3(83mg，0.6mmol)加入到1,4-二氧六環(2ml)和水(0.5ml)中，氮氣置換，微波110℃反應1h，反應完畢，加入乙酸乙酯，依次用水、飽和食鹽水洗滌，無水硫酸鈉乾燥，純化(石油醚：乙酸乙酯=10：90)得到2-(6-(6-(6-(6-氨基-5-(噻吩-4-基))甲苯-3-基)異色烷-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(57mg，收率60%)。ES-API: [M+H] +=474.2。
步驟二：將2-(6-(6-(6-(6-氨基-5-(噻吩-4-基))甲苯-3-基)異色烷-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(57mg，0.120mmol)溶解到二氯甲烷(2mL)中，加入1mL三氟乙酸中，室溫反應0.5h，反應完畢，濃縮，加入7M氨/甲醇溶液(1mL)中和後，再次濃縮，經製備HPLC(氨水法)純化得到3-(嘧啶-4-基)-5-(8-(吡咯烷-2-基)異色滿-6-基)吡啶-2-胺(Z100，28mg，收率63%)。ES-API: [M+H] +=374.2。
步驟三：將3-(嘧啶-4-基)-5-(8-(吡咯烷-2-基)異色滿-6-基)吡啶-2-胺(Z100，25mg)用手性拆分(柱型: Chiralpak IC 250mm*4.6mm*5um, 流動相: HEX-ETOH-DEA =40:60:2, 流速:1ml/min, 柱溫：30℃，30MIN)得到兩個異構體。一個異構體結構任意指定為( R)-3-(嘧啶-4-基)-5-(8-(吡咯烷-2-基)異色滿-6-基)吡啶-2-胺(Z100-1，8mg，收率：32%，保留時間：6.64 min，純度：96%，ee值：100%)。ES-API:[M+H] += 374.2。 1H NMR (500 MHz, DMSO- d 6) δ 9.25 (d, J= 1.3 Hz, 1H), 8.86 (d, J= 5.6 Hz, 1H), 8.44 (d, J= 2.3 Hz, 1H), 8.37 (d, J= 2.4 Hz, 1H), 8.25 (dd, J= 5.7, 1.5 Hz, 1H), 7.75 (s, 2H), 7.64 (d, J= 1.9 Hz, 1H), 7.35 (d, J= 1.9 Hz, 1H), 4.88-4.72 (m, 2H), 4.01 (t, J= 7.6 Hz, 1H), 3.93-3.83 (m, 2H), 3.70-3.47 (m, 1H), 3.10-3.06 (m, 1H), 2.90-2.86 (m, 3H), 2.14-2.10 (m, 1H), 1.87-1.70 (m, 2H), 1.44-1.40 (m, 1H)；另一個異構體結構任意指定為( S)-3-(嘧啶-4-基)-5-(8-(吡咯烷-2-基)異色滿-6-基)吡啶-2-胺(Z100-2，8mg，收率：32%，保留時間：10.79min，純度：97%，ee值：99%)。ES-API:[M+H] += 374.2。 1H NMR (500 MHz, DMSO- d 6) δ 9.26 (d, J= 1.4 Hz, 1H), 8.86 (d, J= 5.6 Hz, 1H), 8.45 (d, J= 2.3 Hz, 1H), 8.38 (d, J= 2.3 Hz, 1H), 8.25 (dd, J= 5.7, 1.4 Hz, 1H), 7.81-7.71 (m, 2H), 7.65 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 7.37 (d, J= 1.9 Hz, 1H), 4.88-4.73 (m, 2H), 4.05 (t, J= 7.7 Hz, 1H), 3.91-3.83 (m, 2H), 3.71-3.46 (m, 1H), 3.10-3.06 (m, 1H), 2.95-2.84 (m, 3H), 2.14-2.10 (m, 1H), 1.87-1.70 (m, 2H), 1.52-1.44 (m, 1H)。
實施例13 化合物Z101及其異構體的合成
步驟一：將1-(5-溴-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-基)-N，N-二甲基甲胺(1g，3.95mmol)、碘甲烷(2.8g，19.7mmol)加入到二氯甲烷/甲苯(40ml/80ml)中，封管室溫反應20小時，反應完畢，濃縮，得到1-(5-溴-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-基)-N,N,N-三甲基碘化銨(1.6g，粗品)。ES-API: [M+H] +=269.2。
步驟二：將1-(5-溴-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-基)-N，N，N-三甲基甲銨(1.0g，2.52mmol)、溶解在四氫呋喃(100ml)中，依次加入TMSCN(554mg，5.59mmol)和TBAF(11.2ml，11.2mmol)，室溫反應2小時，反應完畢。濃縮，乙酸乙酯稀釋，依次用碳酸鈉水溶液，飽和食鹽水洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮，矽膠純化(石油醚：乙酸乙酯=50：50)，得到2-(5-溴-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-基)乙腈(480mg，收率80%)。ES-API: [M+H] +=236.1/238.1。
步驟三：2-(5-溴-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-基)乙腈(50 mg，0.211mmol)、2-(6-(4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼硼烷-2-基)異色烷-8-基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(90.5mg，0.211mmol)、Pd(dppf)Cl 2二氯甲烷加合物(17.2mg，0.0211mmol)和K 2CO 3(87.3mg，0.633mmol)加入到1,4-二氧六環(2ml)和水(0.5ml)中，氮氣置換，微波110℃反應1h，反應完畢，加入乙酸乙酯，依次用水、飽和食鹽水洗滌，無水硫酸鈉乾燥，純化(石油醚：乙酸乙酯=10：90)得到2-(6-(3-(氰基甲基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)異色滿-8-基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(45mg，收率47%)。ES-API: [M+H] +=459.2。
步驟四：(6-(3-(氰基甲基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)異色滿-8-基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(45mg，0.098mmol)溶解到二氯甲烷(2mL)中，加入1mL三氟乙酸中，室溫反應0.5h，反應完畢，濃縮，加入7M氨/甲醇溶液(1mL)中和後，再次濃縮，經製備HPLC(氨水法)純化得到2-(5-(8-(吡咯烷-2-基)異色滿-6-基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-基)乙腈(Z101，22mg，收率63%)。ES-API: [M+H] +=359.2。
步驟五：將2-(5-(8-(吡咯烷-2-基)異色滿-6-基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-基)乙腈(Z101，20mg)用SFC手性拆分(柱型: Chiralpak IC 250mm*4.6mm*5um, 流動相: HEX-ETOH-DEA =50:50:2，流速:1ml/min，柱溫：30℃，30MIN)得到兩個異構體化合物。一個異構體化合物結構任意指定為( R)-2-(5-(8-(吡咯烷-2-基)異色滿-6-基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-基)乙腈(Z101-1，8mg，收率：40%，保留時間：9.46 min，ee值：100%)。ES-API:[M+H] += 359.2.。 1H NMR (500 MHz, DMSO- d 6) δ 11.78 (s, 1H), 8.57 (d, J= 2.2 Hz, 1H), 8.29-8.25 (m, 2H), 7.74 (d, J= 1.9 Hz, 1H), 7.53 (d, J= 2.2 Hz, 1H), 7.39 (d, J= 1.9 Hz, 1H), 4.92-4.76 (m, 2H), 4.19 (t, J= 7.9 Hz, 1H), 4.13 (s, 2H), 3.93-3.85 (m, 2H), 3.18 (d, J= 7.2 Hz, 1H), 3.01 (q, J= 8.3 Hz, 1H), 2.90 (q, J= 6.5, 5.9 Hz, 2H), 2.36 (d, J= 1.9 Hz, 1H), 2.22-2.18 (m, 1H), 1.90-1.85 (m, 2H), 1.64-1.60 (m, 1H)；另一個異構體化合物結構任意指定為( S)-2-(5-(8-(吡咯烷-2-基)異色滿-6-基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-基)乙腈(Z101-2，8mg，收率：40%，保留時間：13.04min，ee值：99.55%)。ES-API:[M+H] += 359.2。
實施例14 化合物Z103的合成
步驟一：6-溴異色滿-8-甲醛(355 mg，1.47 mmol)溶於1，2-二氯乙烷(10 mL)中，依次加入2.0M二甲胺四氫呋喃溶液(2.2 mL，4.40 mmol)，乙酸 (265 mg，4.41 mmol)，和三乙醯氧基硼氫化鈉(623 mg，2.94 mmol)，反應在室溫下攪拌4小時。反應液加入二氯甲烷(50 mL)，依次用飽和碳酸氫鈉(20 mL×2)，飽和食鹽水(20 mL)洗滌，乾燥濃縮，粗品用快速矽膠柱純化(甲醇/二氯甲烷：0-5%)得到目標產物1-(6-溴異色滿-8-基)- N， N-二甲基甲胺(370 mg，產率93%)，無色液體。ES-API: [M+H] +=270.1/272.1。
步驟二：向5 mL微波管裡加入1-(6-溴異色滿-8-基)- N， N-二甲基甲胺(50 mg, 0.18 mmol)，3-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼烷-2-基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(62 mg，0.24 mmol), 碳酸鉀(75 mg，0.54 mmol)，2-二環己基膦-2′,6′-二甲氧基-聯苯(8 mg, 0.018 mmol)，氯(2-二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II)(13 mg, 0.018 mmol)，1,4-二氧六環(2 mL)和水(0.5 mL)。用氮氣吹1分鐘，在微波反應器中110℃下反應1小時。反應液加入水(10 mL)，用40 mL乙酸乙酯萃取。有機相依次用飽和碳酸氫鈉溶液(15 mL)，飽和食鹽水(15 mL)洗滌，乾燥後濃縮，粗品用製備HPLC(碳酸氫銨法)純化得到目標產物 N， N-二甲基-1-(6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)異色滿-8-基)甲胺(Z103, 32 mg, 收率54%)，白色固體。 1H NMR (500 MHz, DMSO- d 6) δ 11.32 (s, 1H), 8.46 (d, J= 1.5 Hz, 1H), 8.12 (d, J= 1.5 Hz, 1H), 7.43-7.38 (m, 2H), 7.25 (s, 1H), 4.84 (s, 2H), 3.88 (t, J= 5.5 Hz, 2H), 3.33 (s, 2H), 2.89 (t, J= 5.5 Hz, 2H), 2.30 (s, 3H), 2.16 (s, 6H)。ES-API: [M+H] +=322.1。
實施例15 化合物Z104及其異構體的合成
步驟一：將1-(5-溴-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-基)-N,N-二甲基甲胺(1.0g，3.95mmol)和碘甲烷(2.8g，19.75mmol)加入到40ml二氯甲烷和80ml甲苯的混合溶液中，室溫攪拌20小時，反應完畢，濃縮得到1-(5-溴-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-基)-N,N,N-三甲基碘化銨(1.5g，粗品)，直接用於下一步。ES-API: [M+H] +=268.0/270.0。
步驟二：將1-(5-溴-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-基)-N,N,N-三甲基碘化銨(1.5g，3.93mmol)、三甲基氰矽烷(503mg，5.08mmol)和四丁基氟化銨(11.8ml，11.8mmol, 1M THF 溶液)加入到50ml四氫呋喃中，室溫攪拌2小時，反應完畢，乙酸乙酯稀釋，依次水和飽和食鹽水洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮，矽膠純化(石油醚：乙酸乙酯=80：20)，得到2-(5-溴-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-基)乙腈(520mg，收率55%)。ES-API: [M+H] +=236.0/238.0。
步驟三：將2-(5-溴-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-基)乙腈(150mg，0.638mmol)溶解在二氯甲烷(10ml)中，依次加入(Boc) 2O(209mg，0.957mmol)、二異丙基乙胺(164mg，1.276mmol)和DMAP(7.6mg，0.0638mmol)，室溫反應1小時，反應完畢。濃縮，乙酸乙酯稀釋，依次水和飽和食鹽水洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮，矽膠純化(石油醚：乙酸乙酯=80：20)，得到5-溴-3-(氰基甲基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-1-羧酸叔丁酯(205mg，收率95%)。ES-API: [M+H] +=337.2/339.2。
步驟四：將5-溴-3-(氰基甲基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-1-羧酸叔丁酯(80mg，0.238mmol)溶解在乾燥的N,N-二甲基甲醯胺(5ml)中，冰水浴冷卻，依次加入60%NaH(28.5mg，0.714mmol)和碘甲烷(34mg，0.238mmol)，反應0.5小時，反應完畢。冰水猝滅，乙酸乙酯稀釋，依次水和飽和食鹽水洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮，矽膠純化(石油醚：乙酸乙酯=80：20)，得到5-溴-3-(1-氰乙基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-1-羧酸叔丁酯(35mg，收率42%)。ES-API: [M+H] +=350.0/252.0。
步驟五：5-溴-3-(1-氰乙基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-1-羧酸叔丁酯(35mg，0.10mmol)、( S)-2-(6-(4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼硼烷-2-基)異色滿-8-基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(43mg，0.10mmol)、Sphos Pd G2(7.2mg，0.01mmol)和K 2CO 3(41.4mg，0.3mmol)加入到1,4-二氧六環(2ml)和水(0.5ml)中，氮氣置換，微波110℃反應1h，反應完畢，加入乙酸乙酯，依次用水、飽和食鹽水洗滌，無水硫酸鈉乾燥，純化(石油醚：乙酸乙酯=10：90)得到(2 S)2-(6-(6-(3-(1-氰乙基))-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)異色滿-8-基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(35mg，收率74%)。ES-API: [M+H] +=473.2。
步驟六：(2 S)2-(6-(6-(3-(1-氰乙基))-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)異色滿-8-基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(35mg，0.074mmol)溶解到二氯甲烷(2mL)中，加入1mL三氟乙酸中，室溫反應0.5h，反應完畢，濃縮，加入7M氨/甲醇溶液(1mL)中和後，再次濃縮，經製備HPLC(氨水法)純化得到2-(5-(8-((S)-吡咯烷基-2-基)異色滿-6-基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-基)丙腈(Z104，11mg，收率48%)。ES-API: [M+H] +=373.2。
步驟七：將2-(5-(8-((S)-吡咯烷基-2-基)異色滿-6-基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-基)丙腈(Z104，8mg)用手性拆分(柱型: Chiral pak IC 250mm*4.6mm*5um, 流動相: ACN-IPA-DEA=80-20-02, 流速:1ml/min, 柱溫：30℃，35 min)得到兩個異構體化合物，一個異構體化合物結構任意指定為( S)-2-(5-(8-(( S)-吡咯烷基-2-基)異色滿-6-基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-基)丙腈(Z104-1, 1.5mg, 收率: 18.7%, 保留時間: 8.36 min, 純度: 75%, ee值: 95%)。ES-API:[M+H] +=373.2。另一個異構體結構任意指定為( R)-2-(5-(8-(( S)-吡咯烷基-2-基)異色滿-6-基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-基)丙腈(Z104-2, 2.9mg, 收率: 36.2%, 保留時間: 10.379 min, 純度: 86%, ee值: 96%)。ES-API:[M+H] +=373.2。
實施例16 化合物Z105的合成
步驟一：將5-溴-3-(氰基甲基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-1-羧酸叔丁酯(80mg，0.238mmol)溶解在乾燥的N,N-二甲基甲醯胺(5ml)中，冰水浴冷卻，依次加入60%NaH(28.5mg，0.714mmol)和碘甲烷(168mg，1.19 mmol)，冰水浴反應0.5小時，反應完畢。冰水猝滅，乙酸乙酯稀釋，依次水和飽和食鹽水洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮，矽膠純化(石油醚：乙酸乙酯=80：20)，得到5-溴-3-(2-氰基丙烷-2-基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-1-羧酸叔丁酯(70mg，收率81%)。ES-API: [M+H] +=364.0/366.0。
步驟二：將5-溴-3-(2-氰基丙烷-2-基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-1-羧酸叔丁酯(70mg，0.192mmol)、( S)-2-(6-(4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼硼烷-2-基)異色滿-8-基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(90.6mg，0.211mmol)、Sphos Pd G2(13.8mg，0.0192mmol)和K 2CO 3(0.576mg，79.5mmol)加入到1,4-二氧六環(2ml)和水(0.5ml)中，氮氣置換，微波110℃反應1h，反應完畢，加入乙酸乙酯，依次用水、飽和食鹽水洗滌，無水硫酸鈉乾燥，純化(石油醚：乙酸乙酯=10：90)得到(2 S)-2-(6-(6-(3-(2-氰基丙烷-2-基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)異色滿-8-基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(35mg，收率37.5%)。ES-API: [M+H] +=487.2。
步驟三：(2 S)-2-(6-(6-(3-(2-氰基丙烷-2-基)-1 H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)異色滿-8-基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(35mg，0.072mmol)溶解到二氯甲烷(2mL)中，加入1mL三氟乙酸中，室溫反應0.5h，反應完畢，濃縮，加入7M氨/甲醇溶液(1mL)中和後，再次濃縮，經製備HPLC(氨水)純化得到( S)-2-甲基-2-(5-(8-(吡咯烷-2-基)異色滿-6-基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-基)丙腈(Z105，11mg，收率31%)。ES-API: [M+H] +=387.2。
實施例17 化合物Z106的合成
步驟一：將2-溴-7-碘-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪(1g，3.1mmol)溶解在N,N-二甲基甲醯胺(20ml)中，依次加入60%NaH(620mg，15.5mmol)、2-(三甲基矽烷基)乙氧甲基氯(774mg，4.64mmol)，室溫反應1小時，反應完畢。氯化銨水溶液猝滅，乙酸乙酯稀釋，依次水和飽和食鹽水洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮，矽膠純化(石油醚：乙酸乙酯=80：20)，得到2-溴-7-碘-5-((2-(三甲基甲矽烷基)乙氧基)甲基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪(1.2g，收率85.7%)。ES-API: [M+H] +=453.9/455.9。
步驟二：將2-溴-7-碘-5-((2-(三甲基甲矽烷基)乙氧基)甲基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪(900mg，1.99 mmol)和二(三叔丁基膦)鈀(204mg，0.4mmol)溶解在乾燥的四氫呋喃(5ml)中，冰水浴條件下，緩慢加入二甲基鋅(2ml，2.0mmol，1M正己烷溶液)，冰水浴反應0.5小時，反應完畢。飽和氯化銨水溶液猝滅，乙酸乙酯稀釋，依次水和飽和食鹽水洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮，矽膠純化(石油醚：乙酸乙酯=80：20)，得到2-溴-7-甲基-5-((2-(三甲基甲矽烷基)乙氧基)甲基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪(70mg，收率10.2%)。ES-API: [M+H] +=342.0/244.0。
步驟三：2-溴-7-甲基-5-((2-(三甲基甲矽烷基)乙氧基)甲基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪(34mg，0.10mmol)、( S)-2-(6-(4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼硼烷-2-基)異色滿-8-基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(43mg，0.10mmol)、Sphos Pd G2(7.2mg，0.01mmol)和K 2CO 3(41.4mg，0.3mmol)加入到1,4-二氧六環(2ml)和水(0.5ml)中，氮氣置換，微波110℃反應1h，反應完畢，加入乙酸乙酯，依次用水、飽和食鹽水洗滌，無水硫酸鈉乾燥，純化(石油醚：乙酸乙酯=10：90)得到(S)-2-(6-(7-甲基-5-((2-(三甲基甲矽烷基)乙氧基)甲基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-2-基)異色滿8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(20mg，收率36%)。ES-API: [M+H] +=565.3。
步驟四：(S)-2-(6-(7-甲基-5-((2-(三甲基甲矽烷基)乙氧基)甲基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-2-基)異色滿8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(20mg，0.035)溶解到二氯甲烷(2mL)中，加入1mL三氟乙酸中，室溫反應0.5h，反應完畢，濃縮，加入7M氨/甲醇溶液(5mL)，室溫攪拌3小時，再次濃縮，經製備HPLC(氨水法)純化得到(S)-7-甲基-2-(8-(吡咯烷-2-基)異色滿-6-基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪(Z106，2.9mg，收率24.7%)。ES-API: [M+H] +=335.2。
實施例18 化合物Z107的合成
步驟一：5-溴-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶-3-羧酸(300 mg，1.24 mmol)，1-乙基-3(3-二甲基丙胺)碳二亞胺(476 mg，2.48 mmol)和1-羥基苯并三唑(335 mg，2.48 mmol)溶於二氯甲烷(10 mL)和二甲基亞碸(0.7 mL)中，依次加入 N, N-二異丙基乙胺(480 mg，3.72 mmol)，(1-(氨基甲基)環丁基)甲醇(157 mg，1.37 mmol)，反應在室溫下攪拌16小時。反應液加入飽和碳酸鈉(8 mL)，用乙酸乙酯萃取(60 mL×2)。有機相乾燥濃縮，粗品用快速矽膠柱純化(甲醇/二氯甲烷：2-10%)得到目標產物5-溴- N-(((1-(羥甲基)環丁基)甲基)-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶-3-羧醯胺(265 mg，產率63%)，白色固體。ES-API: [M+H] +=338.1/340.1。
步驟二：向5 mL微波管中加入1-(6-溴異色滿-8-基)-N,N-二甲基甲胺(80 mg，0.30 mmol)，雙(頻哪醇合)二硼 (91 mg，0.36 mmol)，[1,1'-雙(二苯基膦)二茂鐵]二氯化鈀(22 mg，0.03 mmol)，乙酸鉀(88 mg，0.90 mmol)，1,4-二氧六環(2 mL)，用氮氣吹1分鐘，反應在微波反應器中120℃反應30分鐘。將反應冷卻至室溫，加入二氯甲烷(5 mL)溶解，用矽藻土過濾，乙酸乙酯洗滌，濾液濃縮得到淡棕色粗品 N， N-二甲基-1-(6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼硼烷-2-基)異色滿-8-基)甲胺(165 mg)，該粗品無需進一步純化即可使用。ES-API:[M+H] +=318.3。
步驟三：向5 mL微波管中加入：5-溴-N-(((1-(羥甲基)環丁基)甲基)-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶-3-羧醯胺(60 mg，0.18 mmol)，N,N-二甲基-1-(6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼硼烷-2-基)異色滿-8-基)甲胺(165 mg，粗品)，碳酸鉀(75 mg，0.54 mmol)，2-二環己基膦-2′,6′-二甲氧基-聯苯(8 mg, 0.018 mmol)，氯(2-二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II)(13 mg, 0.018 mmol)，1,4-二氧六環(2 mL)和水(0.4 mL)，用氮氣吹1分鐘，在微波反應器中110℃下反應1小時。反應液加入水(5 mL)，用乙酸乙酯萃取(60 mL)。有機相用飽和食鹽水洗滌(15 mL)，乾燥濃縮，粗品用製備HPLC(碳酸氫銨法)純化得到目標產物5-(8-(((二甲氨基)甲基)異色滿-6-基)- N-(((1-(羥甲基)環丁基)甲基)-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶-3-甲醯胺(Z107, 15 mg, 收率18.5%)，白色固體。 1H NMR (500 MHz, DMSO- d 6) δ 12.19 (s, 1H), 8.61 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 8.55 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 8.23 (d, J= 3.0 Hz, 1H), 8.07 (t, J= 6.0 Hz, 1H), 7.39 (s, 2H), 4.84 (s, 2H), 4.72 (t, J= 5.5 Hz, 1H), 3.88 (t, J= 5.5 Hz, 2H), 3.41-3.34 (m, 6H), 2.90 (t, J= 5.5 Hz, 2H), 2.16 (s, 6H), 1.88-1.66 (m, 6H). ES-API:[M+H] +=449.2。
實施例19 化合物Z136的合成
步驟一：2-氯喹啉-4-羧酸(3.0 g, 14.49 mmol)懸浮於二氯甲烷(25 mL)，在0℃下加入草醯氯(3.68 g, 28.98 mmol)和 N, N-二甲基甲醯胺(0.1 mL)，在室溫下攪拌反應2小時。冷卻到0℃，緩慢滴加甲醇(20 mL)，在室溫下攪拌反應1小時。反應液加入水(40 mL)，用二氯甲烷萃取(80 mL×2)。合併有機相，用飽和食鹽水洗滌(30 mL)，無水硫酸鈉乾燥，濃縮得到2-氯喹啉-4-羧酸甲酯(2.95 g, 收率: 92%)，淡棕色固體。ES-API: [M+H] +=222.1。
步驟二：2-氯喹啉-4-羧酸甲酯(2.95 g, 13.35 mmol)溶於甲醇(50 mL)，在0℃下分批加入硼氫化鈉(1.52 g, 40.05 mmol)，室溫下攪拌反應18小時。反應液加入飽和氯化銨溶液(40 mL)和水(20 mL)，旋掉甲醇，用二氯甲烷萃取(100 mL×3)。有機相無水硫酸鈉乾燥，濃縮，粗品用快速矽膠柱純化(甲醇/二氯甲烷：1-5%)得到 (2-氯喹啉-4-基)甲醇(1.65 g, 收率: 64%)，灰白色固體。ES-API: [M+H] +=194.1。
步驟三：(2-氯喹啉-4-基)甲醇(1.55 g, 8.03 mmol)溶於二氯甲烷(50 mL)，冷卻到0℃，加入戴斯-馬丁氧化劑(4.08 g，9.64 mmol)，在室溫下攪拌反應2小時。反應液加入飽和硫代硫酸鈉溶液(60 mL)，用二氯甲烷萃取(60 mL×2)。有機相用飽和碳酸氫鈉溶液洗滌(60 mL)，無水硫酸鈉乾燥，濃縮，粗品用快速矽膠柱純化(乙酸乙酯/石油醚：0-30%)得到2-氯喹啉-4-甲醛(1.45 g, 收率94%)，白色固體。ES-API: [M+H] +=192.1。
步驟四：2-氯喹啉-4-甲醛(1.0 g，5.23 mmol)和( S)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺(1.26 g, 10.46 mmol)溶於二氯甲烷(25 mL)加入四乙氧基鈦(2.98 g, 13.08 mmol)，在室溫下攪拌反應18小時。反應液加入飽和食鹽水(100 mL)，用乙酸乙酯萃取(80 mL×2)。合併有機相，用飽和食鹽水洗滌(50 mL)，無水硫酸鈉乾燥，濃縮。粗品用快速矽膠柱純化(甲醇/二氯甲烷：0-5%)得到( S, E)- N-((2-氯喹啉-4-基)亞甲基)-2-甲基丙烷-2-亞碸醯胺(1.5 g, 收率: 97%)，白色固體。ES-API: [M+H] +=295.1。
步驟五：( S, E)- N-((2-氯喹啉-4-基)亞甲基)-2-甲基丙烷-2-亞碸醯胺(1.35 g, 4.59 mmol)溶於四氫呋喃(20 mL)，在氮氣保護下，-78℃下滴加(2-(1,3-二噁烷-2-基)乙基)溴化鎂四氫呋喃溶液(27.5 mL, 13.77 mmol, 0.5M)，在-78℃下攪拌反應30分鐘。飽和氯化銨溶液淬滅(20 mL)反應，加入水(20 mL)，用乙酸乙酯萃取(50 mL×2)。合併有機相，用飽和食鹽水洗滌(25 mL)，無水硫酸鈉乾燥，濃縮得到 ( S)- N-(( S)-1-(2-氯喹啉-4-基)-3-(1,3-二噁烷-2-基)丙基)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺(1.88 g, 收率: 100%)，白色固體。ES-API: [M+H] +=411.2。
步驟六：三氟乙酸(20 mL)和水(1 mL)，冷卻到0℃，分批加入( S)- N-(( S)-1-(2-氯喹啉-4-基)-3-(1,3-二噁烷-2-基)丙基)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺(1.88 g, 4.59 mmol)，反應在室溫下攪拌45分鐘，加入三乙基矽烷(5.32 g, 45.90 mmol)，在室溫下攪拌反應16小時。反應液濃縮得到 ( S)-2-氯-4-(吡咯烷-2-基)喹啉三氟乙酸鹽(4.1 g, 粗品)，無需進一步純化直接用於下一步反應。ES-API: [M+H] +=233.1(游離鹼)。
步驟七：( S)-2-氯-4-(吡咯烷-2-基)喹啉三氟乙酸鹽(4.1 g, 粗品)溶於二氯甲烷(40 mL)，在0℃下加入三乙胺 (1.62 g, 16.0 mmol)和二碳酸二叔丁酯(1.74 g, 8.0 mmol)，室溫下攪拌反應1小時。反應液加入二氯甲烷(40 mL)，依次用水(25 mL)，飽和食鹽水洗滌(25 mL)，無水硫酸鈉乾燥，濃縮。粗品用快速矽膠柱純化(乙酸乙酯/石油醚：0-30%)得到 ( S)-2-(2-氯喹啉-4-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(1.15 g, 2步收率: 75%)，黏稠狀液體。ES-API: [M+H] +=333.2。
步驟八：向5 mL微波管裡加入 ( S)-2-(2-氯喹啉-4-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(60 mg, 0.23 mmol)，3-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼烷-2-基)-1H-吡咯并[2,3- b]吡啶(76 mg, 0.23 mmol)，碳酸鉀(95 mg, 0.69 mmol)，2-二環己基膦-2′,6′-二甲氧基-聯苯(9 mg, 0.023 mmol)，氯(2-二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II)(17 mg, 0.023 mmol)，1,4-二氧六環(2 mL)和水(0.4 mL)。用氮氣吹1分鐘，在110℃下微波反應器中反應1小時。反應液加入水(5 mL)，乙酸乙酯萃取(40 mL)。有機相用飽和食鹽水洗滌(10 mL)，無水硫酸鈉乾燥，濃縮，粗品用快速矽膠柱純化(甲醇/二氯甲烷：0-3%)得到( S)-2-(2-(3-甲基-1H-吡咯[2,3- b]吡啶-5-基)喹啉-4-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(42 mg, 收率: 42%)，白色固體。ES-API: [M+H] +=429.3。
步驟九：( S)-2-(2-(3-甲基-1H-吡咯[2,3- b]吡啶-5-基)喹啉-4-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(42 mg, 0.10 mmol)溶於甲醇(1 ml)，加入4M鹽酸二氧六環溶液(3 ml)，於室溫下攪拌反應1小時。反應液濃縮，加入7.0M氨/甲醇溶液(4 mL)，溶劑旋乾。粗品用製備HPLC(碳酸氫銨法)純化得到( S)-2-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3- b]吡啶-5-基)-4-(吡咯烷-2-基)喹啉(Z136, 20 mg, 收率: 62%)，白色固體。ES-API: [M+H] +=329.1。 1H NMR (500 MHz, DMSO- d 6 ) δ 11.49 (s, 1H), 9.09 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 8.68 (d, J= 1.5 Hz, 1H), 8.34 (s, 1H), 8.19 (d, J= 8.5 Hz, 1H), 8.10 (d, J= 8.5 Hz, 1H), 7.77-7.72 (m, 1H), 7.60-7.54 (m, 1H), 7.31 (s, 1H), 4.88 (t, J= 7.5 Hz, 1H), 3.22-3.14 (m, 1H), 3.10-3.04 (m, 1H), 2.50-2.45 (m, 1H), 2.37 (s, 3H), 1.88-1.78 (m, 2H), 1.60-1.50 (m, 1H)。
實施例20 化合物Z109的合成
步驟一：將化合物四氫吡咯(147 mg, 2.07 mmol)和醋酸(13 mg, 0.21 mmol)加入到6-溴異色滿-8-甲醛(100 mg, 0.41 mmol)的1,2-二氯乙烷(2 mL)溶液中，混合物室溫攪拌1小時。然後加入氰基硼氫化鈉(52 mg, 0.83 mmol)，室溫攪拌過夜。反應結束後，用氯化銨水溶液(5 mL)淬滅反應，二氯甲烷(5 mLX3)萃取，有機相合併，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮，粗品用快速矽膠柱(0-6%甲醇(1%氨水)/二氯甲烷)純化得到1-((6-溴異色滿-8-基)甲基)吡咯烷(90 mg, 收率:74%)，無色液體。ES-API: [M+H] += 296.0, 298.0。
步驟二：氮氣保護下，3-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(55 mg, 0.21 mmol)，1-((6-溴異色滿-8-基)甲基)吡咯烷(80 mg, 0.27 mmol)，氯(2-二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II) (14 mg, 0.02 mmol)，2-雙環己基膦-2',6'-二甲氧基聯苯(8 mg, 0.02 mmol)和碳酸鉀(87 mg, 0.63 mmol)的1,4-二氧六環(2 mL)和水(0.4 mL)的混合溶液在110℃下微波攪拌0.5小時。反應液倒入乙酸乙酯(10 mL)，依次用飽和食鹽水(5 mL)和水(5 mL)洗滌。有機相用無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮，用製備HPLC(碳酸氫銨法)純化得到3-甲基-5-(8-(吡咯烷-1-基甲基)異色滿-6-基)-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶(Z109, 30 mg, 收率: 41%)，白色固體。ES-API: [M+H] += 348.3。 1H NMR (500 MHz, DMSO- d 6 ) δ 11.33 (s, 1H), 8.46 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 8.11 (d, J= 1.6 Hz, 1H), 7.43 (s, 1H), 7.40 (s, 1H), 7.26 (s, 1H), 4.85 (s, 2H), 3.88 (t, J= 5.5 Hz, 2H), 2.88 (t, J= 5.5 Hz, 2H), 2.45 (s, 4H), 2.31 (s, 3H), 1.69 (s, 4H)。
實施例21 化合物Z114的合成
步驟一：將化合物N-甲基呱嗪(207 mg, 2.07 mmol)和醋酸(13 mg, 0.21 mmol)加入到6-溴異色滿-8-甲醛(100 mg, 0.41 mmol)的1,2-二氯乙烷(2 mL)溶液中，混合物室溫攪拌1小時。然後加入氰基硼氫化鈉(52 mg, 0.83 mmol)，室溫攪拌過夜。反應結束後，用氯化銨水溶液(5 mL)淬滅反應，二氯甲烷(5 mLX3)萃取，有機相合併，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮，粗品用快速矽膠柱(0-6%甲醇(1%氨水)/二氯甲烷)純化得到1-((6-溴異色滿-8-基)甲基)-4-甲基呱嗪(100 mg, 收率: 75%)，無色液體。ES-API: [M+H] += 325.1, 327.1。
步驟二：氮氣保護下，3-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(55 mg, 0.21 mmol)，1-((6-溴異色滿-8-基)甲基)-4-甲基呱嗪(88 mg, 0.27 mmol)，氯(2-二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II) (14 mg, 0.02 mmol)，2-雙環己基膦-2',6'-二甲氧基聯苯(8 mg, 0.02 mmol)和碳酸鉀(87 mg, 0.63 mmol)的1,4-二氧六環(2 mL)和水(0.4 mL)的混合溶液在110℃下微波攪拌反應0.5小時。反應液倒入乙酸乙酯(10 mL)，依次用飽和食鹽水(5 mL)和水(5 mL)洗滌。有機相用無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮，用製備HPLC(碳酸氫銨法)純化得到3-甲基-5-(8-((4-甲基呱嗪)-1-基)甲基)異色滿-6-基)-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶(Z114, 31 mg, 收率: 39%)，白色固體。ES-API: [M+H] += 377.4。 1H NMR (500 MHz, DMSO- d 6 ) δ 11.33 (s, 1H), 8.46 (s, 1H), 8.12 (s, 1H), 7.40 (s, 2H), 7.26 (s, 1H), 4.85 (s, 2H), 3.88 (t, J= 4.5, 2H), 3.42 (s, 2H), 3.34 (s, 4H), 2.89 (t, J= 5.5, 2H), 2.37 (s, 4H), 2.31 (s, 3H), 2.14 (s, 3H)。
實施例22 化合物Z115的合成
步驟一：將嗎啉(180 mg, 2.07 mmol)和醋酸(13 mg, 0.21 mmol)加入到6-溴異色滿-8-甲醛(100 mg, 0.41 mmol)的1,2-二氯乙烷(2 mL)溶液中，混合物室溫攪拌1小時。然後加入氰基硼氫化鈉(52 mg, 0.83 mmol)，室溫攪拌過夜。反應結束後，用氯化銨水溶液(5 mL)淬滅反應，二氯甲烷(5 mLX3)萃取，有機相合併，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮，粗品用快速矽膠柱(0-6%甲醇(1%氨水)/二氯甲烷)純化得到4-((6-溴異色滿-8-基)甲基)嗎啉(90 mg, 收率: 70%)，無色液體。ES-API: [M+H] += 312.0, 314.0。
步驟二：氮氣保護下，3-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(55 mg, 0.21 mmol)，4-((6-溴異色滿-8-基)甲基)嗎啉(80 mg, 0.27 mmol)，氯(2-二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II) (14 mg, 0.02 mmol)，2-雙環己基膦-2',6'-二甲氧基聯苯(8 mg, 0.02 mmol)和碳酸鉀(87 mg, 0.63 mmol)的1,4-二氧六環(2 mL)和水(0.4 mL)的混合溶液在110℃下微波攪拌反應0.5小時。反應液倒入乙酸乙酯(10 mL)，依次用飽和食鹽水(5 mL)和水(5 mL)洗滌。有機相用無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮，用製備HPLC(碳酸氫銨法)純化得到4-((6-(3-甲基-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶-5-基)異色滿-8-基)甲基)嗎啉(Z115, 41 mg, 收率: 52%)，白色固體。ES-API: [M+H] += 364.3。 1H NMR (500 MHz, DMSO-d 6) δ 11.33 (s, 1H), 8.47 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 8.12 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 7.42 (s, 2H), 7.26 (s, 1H), 4.87 (s, 2H), 3.89 (t, J= 5.5 Hz, 2H), 3.55 (s, 4H), 3.43 (s, 2H), 2.89 (t, J= 5.5 Hz, 2H), 2.37 (s, 4H), 2.31 (s, 3H)。
實施例23 化合物Z111的合成
步驟一：將化合物異丙胺(122 mg, 2.07 mmol)和醋酸(13 mg, 0.21 mmol)加入到6-溴異色滿-8-甲醛(100 mg, 0.41 mmol)的1,2-二氯乙烷(2 mL)溶液中，混合物室溫攪拌1小時。然後加入氰基硼氫化鈉(52 mg, 0.83 mmol)，室溫攪拌過夜。反應結束後，用氯化銨水溶液(5 mL)淬滅反應，二氯甲烷(5 mLX3)萃取，有機相合併，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮，粗品用快速矽膠柱(0-6%甲醇(1%氨水)/二氯甲烷)純化得到 N-((6-溴異色滿-8-基)甲基)丙-2-胺(90 mg, 收率: 77%)，無色液體。ES-API: [M+H] += 284.1, 286.1。
步驟二：氮氣保護下，3-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(55 mg, 0.21 mmol)， N-((6-溴異色滿-8-基)甲基)丙-2-胺(77 mg, 0.27 mmol)，氯(2-二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II) (14 mg, 0.02 mmol)，2-雙環己基膦-2',6'-二甲氧基聯苯(8 mg, 0.02 mmol)和碳酸鉀(87 mg, 0.63 mmol)的1,4-二氧六環(2 mL)和水(0.4 mL)的混合溶液在110℃下微波攪拌0.5小時。反應液倒入乙酸乙酯(10 mL)，依次用飽和食鹽水(5 mL)和水(5 mL)洗滌。有機相用無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮，用製備HPLC(碳酸氫銨法)純化得到 N-((6-(3-甲基-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶-5-基)異色滿-8-基)甲基)丙-2-胺(Z111, 40 mg, 收率57%)，白色固體。ES-API: [M+H] += 336.3。 1H NMR (500 MHz, DMSO-d 6) δ 11.33 (s, 1H), 8.48 (d, J= 1.5 Hz, 1H), 8.12 (s, 1H), 7.50 (s, 1H), 7.37 (s, 1H), 7.26 (s, 1H), 4.85 (s, 2H), 3.88 (t, J= 5.5 Hz, 2H), 3.62 (s, 2H), 2.88 (t, J= 5.0 Hz, 2H), 2.77 (dt, J= 12.0, 6.0 Hz, 1H), 2.31 (s, 3H), 1.78 (br s, 1H), 1.04 (d, J = 6.2 Hz, 6H)。
實施例24 化合物Z112的合成
步驟一：將化合物環丙甲胺(147 mg, 2.07 mmol)和醋酸(13 mg, 0.21 mmol)加入到6-溴異色滿-8-甲醛(100 mg, 0.41 mmol)的1,2-二氯乙烷(2 mL)溶液中，混合物室溫攪拌1小時。然後加入氰基硼氫化鈉(52 mg, 0.83 mmol)，室溫攪拌過夜。反應結束後，用氯化銨水溶液(5 mL)淬滅反應，二氯甲烷(5 mLX3)萃取，有機相合併，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮，粗品用快速矽膠柱(0-6%甲醇(1%氨水)/二氯甲烷)純化得到1-(6-溴異色滿-8-基)- N-(環丙基甲基)甲胺(90 mg, 收率: 74%)，無色液體。ES-API: [M+H] += 296.0, 298.1。
步驟二：氮氣保護下，3-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶(55 mg, 0.21 mmol)，1-(6-溴異色滿-8-基)- N-(環丙基甲基)甲胺(80 mg, 0.27 mmol)，氯(2-二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II) (14 mg, 0.02 mmol)，2-雙環己基膦-2',6'-二甲氧基聯苯(8 mg, 0.02 mmol)和碳酸鉀(87 mg, 0.63 mmol)的1,4-二氧六環(2 mL)和水(0.4 mL)的混合溶液在110℃下微波攪拌0.5小時。反應液倒入乙酸乙酯(10 mL)，依次用飽和食鹽水(5 mL)和水(5 mL)洗滌。有機相用無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮，用製備HPLC(碳酸氫銨法)純化得到1-環丙基- N-((6-(3-甲基-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶-5-基)異色滿-8-基)甲基)甲胺(Z112, 11 mg, 收率: 15%)，白色固體。ES-API: [M+H] += 348.3。 1H NMR (500 MHz, DMSO-d 6) δ 11.33 (s, 1H), 8.48 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 8.12 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 7.51 (s, 1H), 7.38 (s, 1H), 7.26 (s, 1H), 4.83 (s, 2H), 3.88 (t, J= 5.5 Hz, 2H), 3.66 (s, 2H), 2.88 (t, J= 5.5 Hz, 2H), 2.45 (d, J= 7.0 Hz, 2H), 2.31 (s, 3H), 0.93 (m, 1H), 0.50-0.31 (m, 2H), 0.12 (m, 2H)。
實施例25 化合物Z113的合成
步驟一：將化合物3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸叔丁酯(264 mg, 1.25 mmol)和醋酸(19 mg, 0.31 mmol)加入到6-溴異色滿-8-甲醛(150 mg, 0.62 mmol)的1,2-二氯乙烷(2 mL)溶液中，混合物室溫攪拌1小時。然後加入氰基硼氫化鈉(78 mg, 1.25 mmol)，室溫攪拌過夜。反應結束後，用氯化銨水溶液(5 mL)淬滅反應，二氯甲烷(5 mLX3)萃取，有機相合併，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮，粗品用快速矽膠柱(0-6%甲醇(1%氨水)/二氯甲烷)純化得到3-((6-溴異色滿-8-基)甲基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸叔丁酯(180 mg, 收率66%)，無色液體。ES-API: [M+H] += 437.2, 439.2。
步驟二：氮氣保護下，冰浴條件下緩慢將氫化鋁鋰的四氫呋喃溶液(0.5 mL, 1.23 mmol, 2.5 M)加入到3-((6-溴異色滿-8-基)甲基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸叔丁酯(180 mg, 0.41 mmol)的四氫呋喃(2 mL)溶液中。反應液在70℃下攪拌1小時，冷卻至室溫，用十水合硫酸鈉(20 g)淬滅反應，矽藻土過濾，濾液旋乾得到3-((6-溴異色滿-8-基)甲基)-8-甲基-3,8-二氮雜二環[3.2.1]辛烷(150 mg, 粗品)。API: [M+H] += 351.1, 353.1。
步驟三：氮氣保護下，3-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶(55 mg, 0.21 mmol)，3-((6-溴異色滿-8-基)甲基)-8-甲基-3,8-二氮雜二環[3.2.1]辛烷(97 mg, 0.27 mmol)，氯(2-二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II) (14 mg, 0.02 mmol)，2-雙環己基膦-2',6'-二甲氧基聯苯(8 mg, 0.02 mmol)和碳酸鉀(87 mg, 0.63 mmol)的1,4-二氧六環(2 mL)和水(0.4 mL)的混合溶液在110℃下微波攪拌0.5小時。反應液倒入乙酸乙酯(10 mL)，依次用飽和食鹽水(5 mL)和水(5 mL)洗滌。有機相用無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮，用製備HPLC(碳酸氫銨法)純化得到3-甲基-5-(8-((8-甲基-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛-3-基)甲基)異色滿-6-基)-1 H-吡咯并[2,3- b] 吡啶(Z113, 19 mg, 收率: 22%)，白色固體。ES-API: [M+H] += 403.3。 1H NMR (500 MHz, DMSO-d 6) δ 11.32 (s, 1H), 8.45 (d, J= 1.5 Hz, 1H), 8.11 (d, J= 1.5 Hz, 1H), 7.42-7.36 (m, 2H), 7.25 (s, 1H), 4.85 (s, 2H), 3.88 (t, J= 5.5 Hz, 2H), 3.39 (s, 2H), 2.97 (s, 2H), 2.89 (t, J= 5.0 Hz, 2H), 2.43 (d, J= 8.0 Hz, 2H), 2.30 (s, 3H), 2.21 (d, J= 10 Hz, 2H), 2.13 (s, 3H), 1.86-1.78 (m, 2H), 1.63-1.55 (m, 2H)。
實施例26 化合物Z186的合成
步驟一：將8-溴-6-氯異喹啉(1g, 4.12 mmol)溶解在乙腈(30 mL)中，加入碘甲烷(2.92 g, 20.6 mmol)，封管中加熱反應5小時，反應完畢。冷卻至室溫，濃縮得到8-溴-6-氯-2-甲基異喹啉-2-鎓碘化物(1.5 g, 粗品)。ES-API: [M+H] +=256.0, 258.0。
步驟二：將8-溴-6-氯-2-甲基異喹啉-2-鎓碘化物(1.4 g, 粗品)溶解在甲醇(30 mL)中，冰水浴下，緩慢加入硼氫化鈉(1.12 g, 29.4 mmol)，室溫反應2小時，反應完畢，加入乙酸乙酯(100 mL)，依次用水(30 mL)、飽和食鹽水(30 mL)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，粗品經快速矽膠柱純化(乙酸乙酯：石油醚=50:50)得到8-溴-6-氯-2-甲基-1,2,3,4-四氫異喹啉(750 mg, 2步收率: 78%)。ES-API: [M + H] +=260, 262。
步驟三：將8-溴-6-氯-2-甲基-1,2,3,4-四氫異喹啉(520 mg, 2.0 mmol)溶解在乾燥四氯化碳(20 mL)和乙腈(5 mL)中，依次加入高碘酸鈉(1.28 g, 6.0 mmol)的水溶液(10 mL)和三氯化釕(124 mg, 0.6 mmoL)，室溫反應4小時，加入硫代硫酸鈉水溶液猝滅反應，用二氯甲烷(30 mL x 2次)萃取，分離有機層，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮，粗品經快速矽膠柱純化(乙酸乙酯：石油醚=80：20)得到8-溴-6-氯-2-甲基-3,4-二氫異喹啉-1(2H)-酮(110mg, 收率: 20%)。ES-API: [M+H] += 274, 276。
步驟四：將8-溴-6-氯-2-甲基-3,4-二氫異喹啉-1(2H)-酮(100 mg, 0.365 mmol)、乙烯基三氟硼酸鉀(146 mg, 1.09 mmol)、[1,1'-雙(二苯基膦基)二茂鐵]二氯化鈀(29.7 mg, 0.0365 mmol)、三乙胺(36.8 mg, 0.365 mmol)和乙醇(8 mL)，氮氣置換，在100℃下微波反應1小時，加入乙酸乙酯(50 mL)，依次用水(20 mL)、飽和食鹽水(20 mL)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，柱層析純化(乙酸乙酯: 石油醚=1: 2)得到6-氯-2-甲基-8-乙烯基-3,4-二氫異喹啉-1(2H)-酮(50 mg, 收率: 62%)。ES-API: [M+H] += 222.0。
步驟五：將6-氯-2-甲基-8-乙烯基-3,4-二氫異喹啉-1(2H)-酮(50 mg, 0.226 mmol)溶解在四氫呋喃(5 mL)中，室溫加入二水合鋨酸鉀(25 mg, 0.0678 mmol)和高碘酸鈉(290 mg, 1.35 mmol)的水溶液(2 mL)，室溫反應2小時後，冷卻至0℃，加入硫代硫酸鈉水溶液淬滅反應，乙酸乙酯(20 mL)稀釋，依次用水(20 mL)、飽和食鹽水(20 mL)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾、濃縮，粗品經柱層析純化(乙酸乙酯：石油醚=3：1)得到6-氯-2-甲基-1-氧代-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-甲醛(36 mg, 收率: 72%)。ES-API: [M+H] += 224.0。
步驟六：將6-氯-2-甲基-1-氧代-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-甲醛(36 mg, 0.161 mmol)溶解在四氫呋喃中(10 mL)，依次加入二甲胺的四氫呋喃溶液(0.24 mL, 0.0483 mmol, 2M)、冰醋酸(9.66 mg, 0.161 mmol)和氰基硼氫化鈉(20 mg, 0.322 mmoL)，室溫反應2小時，反應完畢，加入乙酸乙酯(20 mL)，依次用飽和碳酸氫鈉水溶液(20 mL)和飽和食鹽水(20 mL)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾、濃縮，粗品經矽膠柱純化(乙酸乙酯：石油醚=90：10)得到6-氯-8-((二甲基氨基)甲基)-2-甲基-3,4-二氫異喹啉-1(2H)-酮(25 mg, 收率: 61.7%)。ES-API: [M+H] +=253.1。
步驟七：氮氣保護下，將6-氯-8-((二甲基氨基)甲基)-2-甲基-3,4-二氫異喹啉-1(2H)-酮(25 mg, 0.1 mmol)、3-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(25.8 mg, 0.1 mmol)、Sphos G2 Pd(7.2 mg, 0.01 mmol)和碳酸鉀(41.4 mg, 0.3 mmol)溶解在1,4-二氧六環(2 mL)和水(0.5 mL)中，在100℃下微波反應0.5小時，反應完畢，過濾，濃縮，經HPLC(氨水法)純化得到8-((二甲基氨基)甲基)-2-甲基-6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-3,4-二氫異喹啉-1(2H)-酮(Z186, 3.5 mg, 收率: 10%)。ES-API: [M+H] +=349.2。
實施例27 化合物Z131的合成
步驟一：( S)-2-(6-(3-甲基-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(70 mg, 0.16 mmol)和三乙胺(48 mg, 0.48 mmol)溶於 N, N-二甲基甲醯胺(2 mL)，室溫下加入2,2,2-三氟乙基三氟甲磺酸酯(51 mg, 0.24 mmol)，反應在室溫下攪拌16小時。反應液加入水(5 mL)，用乙酸乙酯萃取(40 mL)。有機相用飽和食鹽水洗滌(15×3 mL)，無水硫酸鈉乾燥，濃縮。粗品用快速矽膠柱純化(7M氨甲醇/二氯甲烷：0-5%)得到( S)-2-(6-(3-甲基-1 H-吡咯[2,3- b]吡啶-5-基)-2-(2,2,2-三氟乙基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(70 mg, 收率: 84%)，淡黃色固體。ES-API: [M+H] +=515.3。
步驟二：( S)-2-(6-(3-甲基-1 H-吡咯[2,3- b]吡啶-5-基)-2-(2,2,2-三氟乙基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(65 mg, 0.13 mmol)加入3M鹽酸甲醇溶液(4 ml)，於室溫下攪拌反應1小時。反應液濃縮，加入7.0M氨/甲醇溶液(5 mL)，溶劑旋乾。粗品用製備HPLC(碳酸氫銨法)純化得到( S)-6-(3-甲基-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶-5-基)-8-(吡咯烷-2-基)-2-(2,2,2-三氟乙基)-1,2,3,4-四氫異喹啉(Z131, 48 mg, 收率: 92%)，淡黃色固體。ES-API: [M+H] +=415.1。 1H NMR (500 MHz, CD 3OD) δ 8.51 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 8.37 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 7.71 (d, J= 1.5 Hz, 1H), 7.57(d, J= 1.5 Hz, 1H), 7.26 (q, J= 1.0 Hz, 1H), 4.79 (dd, J= 10.0, 7.0 Hz, 1H), 4.11 (d, J= 15.0 Hz, 1H), 4.00 (d, J= 15.0 Hz, 1H), 3.65-3.56 (m, 1H), 3.52-3.44 (m, 1H), 3.40 (d, J= 10.0 Hz, 1H), 3.36 (d, J= 10.0 Hz, 1H), 3.10-2.98 (m, 4H), 2.58-2.48 (m, 1H), 2.39 (d, J= 1.0 Hz, 3H), 2.37-2.19 (m, 3H)。
實施例28 化合物Z190的合成
步驟一:將3-溴-5-氯-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(2.31g, 10.0 mmol)溶解在乾燥的N,N-二甲基甲醯胺(5 mL)中，依次加入氰化鋅(1.17 mg, 10.0 mmol)和四(三苯基膦)鈀(1.15 g, 1.0 mmol)，在100℃下反應2小時，反應完畢。加入乙酸乙酯稀釋(30 mL)，飽和食鹽水(30 mL)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮，加入二氯甲烷稀釋(30 mL)。依次加入二碳酸二叔丁酯(3.27 g, 15 mmoL)和三乙胺(2.02 g, 20.0 mmoL)，室溫攪拌1小時。反應完畢，濃縮，粗品經矽膠柱純化(石油醚：乙酸乙酯=70：30)得到5-氯-3-氰基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-1-羧酸叔丁酯(260 mg, 收率: 9.3%)。ES-API: [M+H] +=278, 222。
步驟二：將5-氯-3-氰基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-1-羧酸叔丁酯(30 mg, 0.129 mmol)、( S)-2-(6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼硼烷-2-基)異色滿-8-基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(55.7 mg, 0.129 mmol)、Sphos Pd G2(9.3 mg, 0.0129 mmol)和碳酸鉀(53.4 mg, 0.387 mmol)加入到1,4-二氧六環(2 mL)和水(0.5 mL)中，氮氣置換，在110℃下微波反應1小時。反應完畢，加入乙酸乙酯(20 mL)，依次用水(10 mL)、飽和食鹽水洗滌(10 mL)，無水硫酸鈉乾燥，經柱層析純化(石油醚：乙酸乙酯=10：90)得到(S)-5-(8-(1-(叔丁氧基羰基)吡咯烷-2-基)異苯并二氫吡喃-6-基)-3-氰基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-1-羧酸叔丁酯(15 mg, 收率: 21%)。ES-API: [M+H] +=545.2。
步驟三：(S)-5-(8-(1-(叔丁氧基羰基)吡咯烷-2-基)異苯并二氫吡喃-6-基)-3-氰基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-1-羧酸叔丁酯(15 mg, 0.027 mmol)溶解到二氯甲烷(2 mL)中，加入三氟乙酸中(1 mL)，室溫反應0.5小時，反應完畢，濃縮，加入氨/甲醇溶液(1mL)中和後，再次濃縮，經HPLC(三氟乙酸法)純化得到(S)-5-(8-(吡咯烷-2-基)異苯并二氫吡喃-6-基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-甲腈(Z190, 三氟乙酸鹽, 2mg, 收率: 21.7%)。ES-API: [M+H] +=345.2。
實施例29 化合物Z199的合成
步驟一：將5-溴-3-碘-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(2 g, 6.21 mmol)溶解在二氯甲烷中(50 mL)，依次加入二碳酸二叔丁酯(2.03 g, 9.31 mmol)、三乙胺(1.25 g, 12.4 mmol)和二甲氨基吡啶(75 mg, 0.621 mmol)，室溫反應1小時，濃縮，粗品經矽膠柱純化(石油醚：乙酸乙酯=60：40)得到5-溴-3-碘-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-1-羧酸叔丁酯(2.3 g, 收率: 87.7%)ES-API: [M+H] +=423.0, 424.0。
步驟二：氮氣保護下，將5-溴-3-碘-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-1-羧酸叔丁酯(100 mg, 0.236 mmol)溶解在乾燥的二氧六環(8 mL)中，依次加入吡啶-3-基硼酸(29 mg, 0.236 mmol)和[1,1'-雙(二苯基膦基)二茂鐵]二氯化鈀-二氯甲烷複合物(19.2 mg, 0.0236 mmol)，在80℃下反應0.5小時，反應完畢。加入乙酸乙酯稀釋(30 mL)，飽和食鹽水(30mL)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮，粗品經矽膠柱純化(石油醚：乙酸乙酯=70：30)得到5-溴-3-(吡啶-3-基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-1-羧酸叔丁酯(40 mg, 收率: 45%)。ES-API: [M+H] +=373, 375。
步驟三：將5-溴-3-(吡啶-3-基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-1-羧酸叔丁酯(40 mg, 0.11 mmol)、( S)-2-(6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼硼烷-2-基)異色滿-8-基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(45 mg, 0.11 mmol)、Sphos Pd G2(7.7 mg, 0.011 mmol)和碳酸鉀(45 mg, 0.387 mmol)加入到1,4-二氧六環(2 mL)和水(0.5 mL)中，氮氣置換，在110℃下微波反應1小時，反應完畢，加入乙酸乙酯(20 mL)，依次用水(10 mL)、飽和食鹽水洗滌(10 mL)，無水硫酸鈉乾燥，經柱層析純化(石油醚：乙酸乙酯=10：90)得到(S)-5-(8-(1-(叔丁氧基羰基)吡咯烷-2-基)異苯并二氫吡喃-6-基)-3-(吡啶-3-基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-1-羧酸叔丁酯(10 mg, 收率: 15.3%)。ES-API: [M+H] +=597.3。
步驟四：(S)-5-(8-(1-(叔丁氧基羰基)吡咯烷-2-基)異苯并二氫吡喃-6-基)-3-(吡啶-3-基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-1-羧酸叔丁酯(10 mg, 0.017 mmol)溶解到二氯甲烷(2 mL)中，加入三氟乙酸中(1 mL)，室溫反應0.5小時，反應完畢，濃縮，加入氨/甲醇溶液(1 mL)中和後，再次濃縮，經製備HPLC(氨水法)純化得到(S)-3-(吡啶-3-基)-5-(8-(吡咯烷-2-基)異苯并二氫吡喃-6-基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(Z199, 3.3 mg, 收率: 48%)。ES-API: [M+H] +=397.2。
實施例30 化合物Z116-1和化合物Z116-2的合成
步驟一：氮氣保護下，6,8-二溴異色滿(300 mg, 1.03 mmol)，D-脯氨醇(114 mg, 1.13 mmol)，碘化亞銅(19 mg, 0.1 mmol)，碳酸鉀(285 mg, 2.06 mmol)的 N, N-二甲基甲醯胺(3 mL)的混合溶液在100℃下攪拌過夜。反應結束後，倒入乙酸乙酯(15 mL)中，用飽和食鹽水(5 mLX3)洗滌，有機相用無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮，用製備薄層色譜板(石油醚：乙酸乙酯=1：1)純化得到 (R)-(1-(6-溴異色滿-8-基)吡咯烷-2-基)甲醇(30 mg, 收率9%)，無色液體。ES-API: [M+H] += 312.0, 314.0。
步驟二：氮氣保護下，3-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶(20 mg, 0.08 mmol)，(R)-(1-(6-溴異色滿-8-基)吡咯烷-2-基)甲醇(30 mg, 0.10 mmol)，氯(2-二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II) (7 mg, 0.01 mmol)，2-雙環己基膦-2',6'-二甲氧基聯苯(4 mg, 0.01 mmol)和碳酸鉀(33 mg, 0.24 mmol)的1,4-二氧六環(2 mL)和水(0.4 mL)的混合溶液在120℃下微波攪拌0.5小時。反應液倒入乙酸乙酯(10 mL)，依次用飽和食鹽水(5 mL)和水(5 mL)洗滌。有機相用無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮，用製備HPLC(碳酸氫銨法)純化得到(R)-(1-(6-(3-甲基-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶-5-基)異色滿-8-基)吡咯烷-2-基)甲醇(Z116-1, 3 mg, 收率: 10%)，白色固體。ES-API: [M+H] += 364.3。 1H NMR (500 MHz, DMSO-d 6) δ 11.34 (s, 1H), 8.08 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 7.78 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 7.26 (s, 1H), 6.39 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 6.36 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 4.74 (t, J= 5.5 Hz, 1H), 4.44 (d, J= 2.0 Hz, 2H), 3.89-3.81 (m, 2H), 3.69-3.64 (m, 1H), 3.55-3.46 (m, 1H), 3.42-3.34 (m, 1H), 3.17-3.10 (m, 1H), 3.03 (dd, J = 16.1, 9.1 Hz, 1H), 2.80 (t, J= 5.5 Hz, 2H), 2.26 (d, J = 0.7 Hz, 3H), 2.05-1.79 (m, 4H)。
步驟三：氮氣保護下，6,8-二溴異色滿(300 mg, 1.03 mmol)，L-脯氨醇(114 mg, 1.13 mmol)，碘化亞銅(19 mg, 0.1 mmol)，碳酸鉀(285 mg, 2.06 mmol)的 N, N-二甲基甲醯胺(3 mL)的混合溶液在100℃下攪拌過夜。反應結束後，倒入乙酸乙酯(15 mL)中，用飽和食鹽水(5 mLX3)洗滌，有機相用無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮，粗品用製備色譜板(石油醚：乙酸乙酯=1：1)純化得到 (S)-(1-(6-溴異色滿-8-基)吡咯烷-2-基)甲醇(30 mg, 收率9%)，無色液體。ES-API: [M+H] += 312.0, 314.0。
步驟四：氮氣保護下，3-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶(20 mg, 0.08 mmol)，(S)-(1-(6-溴異色滿-8-基)吡咯烷-2-基)甲醇(30 mg, 0.10 mmol)，氯(2-二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II) (7 mg, 0.01 mmol)，2-雙環己基膦-2',6'-二甲氧基聯苯(4 mg, 0.01 mmol)和碳酸鉀(33 mg, 0.24 mmol)的1,4-二氧六環(2 mL)和水(0.4 mL)的混合溶液在120℃下微波攪拌0.5小時。反應液倒入乙酸乙酯(10 mL)，依次用飽和食鹽水(5 mL)和水(5 mL)洗滌。有機相用無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮，用製備HPLC(碳酸氫銨法)純化得到(S)-(1-(6-(3-甲基-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶-5-基)異色滿-8-基)吡咯烷-2-基)甲醇(Z116-2, 4 mg, 收率: 14%)，白色固體。ES-API: [M+H] += 364.3。 1H NMR (500 MHz, DMSO-d 6) δ 11.34 (s, 1H), 8.07 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 7.78 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 7.26 (s, 1H), 6.39 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 6.36 (d, J= 2.5 Hz, 1H), 4.77-4.70 (m, 1H), 4.44 (s, 2H), 3.87-3.82 (m, 2H), 3.70-3.64 (m, 1H), 3.55-3.46 (m, 1H), 3.42-3.35 (m, 1H), 3.19-3.10 (m, 1H), 3.07-2.98 (m, 1H), 2.80 (t, J= 5.6 Hz, 2H), 2.26 (s, 3H), 2.02-1.82 (m, 4H)。
實施例31 化合物Z110的合成
步驟一：將化合物二乙胺鹽酸鹽(227 mg, 2.07 mmol)加入到6-溴異色滿-8-甲醛(100 mg, 0.41 mmol)的1,2-二氯乙烷(2 mL)溶液中，混合物室溫攪拌1小時。然後加入氰基硼氫化鈉(52 mg, 0.83 mmol)，室溫攪拌過夜。反應結束後，用氯化銨水溶液(5 mL)淬滅反應，二氯甲烷(5 mLX3)萃取，有機相合併，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮，粗品用快速矽膠柱(0-6%甲醇(1%氨水)/二氯甲烷)純化得到 N-((6-溴異色滿-8-基)甲基)- N-乙基乙胺(90 mg, 收率: 74%)，無色液體。ES-API: [M+H] += 298.1, 300.1。
步驟二：氮氣保護下，3-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶(55 mg, 0.21 mmol)， N-((6-溴異色滿-8-基)甲基)- N-乙基乙胺(80 mg, 0.27 mmol)，氯(2-二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II) (14 mg, 0.02 mmol)，2-雙環己基膦-2',6'-二甲氧基聯苯(8 mg, 0.02 mmol)和碳酸鉀(87 mg, 0.63 mmol)的1,4-二氧六環(2 mL)和水(0.4 mL)的混合溶液在110℃下微波攪拌0.5小時。反應液倒入乙酸乙酯(10 mL)，依次用飽和食鹽水(5 mL)和水(5 mL)洗滌。有機相用無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮，用製備HPLC(碳酸氫銨法)純化得到 N-乙基- N-((6-(3-甲基-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶-5-基)異色滿-8-基)甲基)乙胺(Z110, 14 mg, 收率: 19%)，白色固體。ES-API: [M+H] += 350.3。 1H NMR (500 MHz, DMSO- d 6 ) δ 11.33 (s, 1H), 8.46 (s, 1H), 8.11 (s, 1H), 7.45 (s, 1H), 7.39 (s, 1H), 7.26 (s, 1H), 4.86 (s, 2H), 3.87 (s, 2H), 3.49 (s, 2H), 2.89 (s, 2H), 2.46 (d, J= 6.5 Hz, 4H), 2.31 (s, 3H), 0.98 (t, J= 6.5 Hz, 6H)。
實施例32 化合物Z226的合成
步驟一：在0℃下向含有2-(5-溴-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-基)乙酸(100 mg, 0.392 mmol)的二氯甲烷(10 mL)溶液的燒瓶中滴加草醯氯(0.49 mL, 0.784 mmol)，然後加入 N,N-二甲基甲醯胺 (0.024 mL, 0.313 mmol)。混合物在室溫下攪拌1小時，濃縮後，加入二氯甲烷(10 mL)和氨水(2 mL)，室溫攪拌1小時。濃縮，粗品經柱層析純化(石油醚：乙酸乙酯=10：90)得到2-(5-溴-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-基)乙醯胺(40 mg, 收率: 40%)。ES-API: [M+H] +=254.1, 256.1。
步驟二：將2-(5-溴-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-基)乙醯胺(40 mg, 0.157 mmol)、( S)-2-(6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼硼烷-2-基)異色滿-8-基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(67 mg, 0.157 mmol)、Sphos Pd G2(11.3 mg, 0.0157 mmol)和碳酸鉀(65 mg, 0.472 mmol)加入到1,4-二氧六環(2 mL)和水(0.5 mL)中，氮氣置換，在110℃下微波反應1小時。反應完畢，加入乙酸乙酯(20 mL)，依次用水(10 mL)、飽和食鹽水洗滌(10 mL)，無水硫酸鈉乾燥，柱層析(石油醚：乙酸乙酯=10：90)純化得到(S)-2-(6-(3-(2-氨基-2-氧代乙基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)異苯并二氫吡喃-8-基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(50 mg, 粗品)。ES-API: [M+H] +=477.2。
步驟三：將(S)-2-(6-(3-(2-氨基-2-氧代乙基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)異苯并二氫吡喃-8-基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(50 mg, 粗品)溶解到二氯甲烷(2 mL)中，加入三氟乙酸中(1 mL)，室溫反應0.5小時。反應完畢，濃縮，加入氨/甲醇溶液(1mL)中和後，再次濃縮，經製備HPLC(氨水法)純化得到(S)-2-(5-(8-(吡咯烷-2-基)異苯并二氫吡喃-6-基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-基)乙醯胺 (Z226, 15 mg, 2步收率: 25.4%)。ES-API: [M+H] +=377.2。
實施例33 化合物Z233的合成
步驟一：將2M二甲胺四氫呋喃溶液(1 mL, 2 mmol)和醋酸(13 mg, 0.21 mmol)加入到6-溴異色滿-8-甲醛(100 mg, 0.41 mmol)的1,2-二氯乙烷(2 mL)溶液中，混合物室溫攪拌1小時。然後加入氰基硼氫化鈉(52 mg, 0.83 mmol)，室溫攪拌過夜。反應結束後，用氯化銨水溶液(5 mL)淬滅反應，二氯甲烷(5 mLX3)萃取，有機相合併，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮，粗品用快速矽膠柱(0-6%甲醇(1%氨水)/二氯甲烷)純化得到1-(6-溴異色滿-8-基)-N,N-二甲基甲胺(90 mg, 收率: 81%)，無色液體。ES-API: [M+H] += 270.1, 272.1。
步驟二：氮氣保護下，5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶(43 mg, 0.18 mmol)，1-(6-溴異色滿-8-基)-N,N-二甲基甲胺(40 mg, 0.15 mmol)，氯(2-二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II) (7 mg, 0.01 mmol)，2-雙環己基膦-2',6'-二甲氧基聯苯(4 mg, 0.01 mmol)和碳酸鉀(62 mg, 0.45 mmol)的1,4-二氧六環(2 mL)和水(0.4 mL)的混合溶液在110℃下微波攪拌0.5小時。反應液倒入乙酸乙酯(10 mL)，依次用飽和食鹽水(5 mL)和水(5 mL)洗滌。有機相用無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮，粗品用快速矽膠柱(0-6%甲醇(1%氨水)/二氯甲烷)純化得到1-(6-(1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶-5-基)異色滿-8-基)- N, N-二甲基甲胺(40 mg, 收率: 88%)，白色固體。ES-API: [M+H] += 308.2。
步驟三：將 N-氯代丁二醯亞胺(9 mg, 65 μmol)加入到1-(6-(1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶-5-基)異色滿-8-基)- N, N-二甲基甲胺(20 mg, 65 μmol)的乙腈(1 mL)溶液中，室溫攪拌2小時。用硫代硫酸鈉溶液(1 mL)淬滅反應，乙酸乙酯(1 mL)萃取，旋乾，用製備HPLC(碳酸氫銨法)純化得到1-(6-(3-氯-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶-5-基)異色滿-8-基)- N, N-二甲基甲胺(Z233, 8 mg, 收率: 36%)，白色固體。ES-API: [M+H] += 342.2。 1H NMR (500 MHz, DMSO- d 6 ) δ 12.05 (s, 1H), 8.59 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 8.10 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 7.73 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 7.45 (s, 1H), 7.43 (s, 1H), 4.84 (s, 2H), 3.88 (t, J= 5.5 Hz, 2H), 3.34 (s, 2H), 2.90 (t, J= 5.5 Hz, 2H), 2.16 (s, 6H)。
實施例34 化合物Z108-1的合成
步驟一：氮氣保護下，6,8二溴異色滿(2 g, 6.85 mmol)的四氫呋喃(30 mL)溶液冷卻至-60℃，緩慢滴加正丁基鋰的四氫呋喃溶液(2.74 mL, 6.85 mmol, 2.5 M)，在此溫度下攪拌2小時。然後加入 N-甲基- N-甲氧基乙醯胺(1.41 g, 13.70 mmol)，繼續攪拌10分鐘。用飽和氯化銨水溶液(10 mL)淬滅反應，乙酸乙酯(10 mLX3)萃取，有機相合併，無水硫酸鈉乾燥，過濾，旋乾，粗品用快速矽膠柱(0-20%乙酸乙酯/石油醚)純化得到1-(6-溴異色滿-8-基)乙-1-酮(200 mg, 收率: 11%)。ES-API: [M+H] += 255。
步驟二：將二甲胺的四氫呋喃溶液(1 mL, 2 mmol, 2 M)和四異丙氧基鈦(222 mg, 0.78 mmol)加入到1-(6-溴異色滿-8-基)乙-1-酮(200 mg, 0.78 mmol)的1,2-二氯乙烷(2 mL)溶液中，混合物室溫攪拌1小時。然後加入氰基硼氫化鈉(98 mg, 1.56 mmol)，室溫攪拌過夜。反應結束後，用氯化銨水溶液(5 mL)淬滅反應，二氯甲烷(5 mLX3)萃取，有機相合併，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮，粗品用快速矽膠柱(0-6%甲醇(1%氨水)/二氯甲烷)純化得到1-(6-溴異色滿-8-基)-N,N-二甲基乙-1-胺(100 mg, 收率: 45%)，無色液體。ES-API: [M+H] += 284.2, 286.2。
步驟三：氮氣保護下，3-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶(90 mg, 0.35 mmol)，1-(6-溴異色滿-8-基)-N,N-二甲基乙-1-胺(100 mg, 0.35 mmol)，氯(2-二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II) (25 mg, 0.03 mmol)，2-雙環己基膦-2',6'-二甲氧基聯苯(14 mg, 0.03 mmol)和碳酸鉀(145 mg, 1.05 mmol)的1,4-二氧六環(2 mL)和水(0.4 mL)的混合溶液在120℃下微波攪拌0.5小時。反應液倒入乙酸乙酯(10 mL)，依次用飽和食鹽水(5 mL)和水(5 mL)洗滌。有機相用無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮，用製備HPLC(碳酸氫銨法)純化得到 N, N-二甲基-1-(6-(3-甲基-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶-5-基)異色滿-8-基)乙-1-胺(Z108-1, 40 mg, 收率: 34%)，白色固體。ES-API: [M+H] += 336.3。 1H NMR (500 MHz, DMSO- d 6 ) δ 11.33 (s, 1H), 8.45 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 8.10 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 7.52 (s, 1H), 7.36 (s, 1H), 7.26 (s, 1H), 4.91 (d, J= 15.5 Hz, 1H), 4.80 (d, J= 15.5 Hz, 1H), 3.87 (t, J= 5.5 Hz, 2H), 3.32-3.28 (m, 1H), 2.90 (t, J= 5.5 Hz, 2H), 2.31 (s, 3H), 2.15 (s, 6H), 1.28 (d, J= 6.5 Hz, 3H)。
實施例35 化合物Z181的合成
步驟一：在-78℃條件下，氮氣保護下，向2,6-二氯-4-甲基煙腈(22.4 g, 120 mmol)的四氫呋喃(200 mL)溶液緩慢滴加雙三甲基矽基胺基鋰四氫呋喃溶液(360 mL, 360 mmol, 1M)，30分鐘後，緩慢滴加入碳酸二甲酯 (16.2 g, 180 mmol)。將混合物緩慢升至0℃，攪拌反應2小時。緩慢倒入冷的氯化銨水溶液(100 mL)中，攪拌10分鐘後，加入乙酸乙酯(200 mL)，分出有機相，依次用水(100 mL)、飽和食鹽水洗滌(100 mL)，無水硫酸鈉乾燥，經柱層析純化(石油醚：乙酸乙酯=80：20)得到2-(2,6-二氯-3-氰基吡啶-4-基)乙酸甲酯(6 g, 收率: 20.5%)。ES-API: [M+H] +=245.0。
步驟二：將2-(2,6-二氯-3-氰基吡啶-4-基)乙酸甲酯(4 g, 16.39 mmol)溶解在無水乙醇中(80 mL)，冰水浴冷卻，緩慢分批加入硼氫化鈉(1.86 g, 49.18 mmol)，保持0℃反應0.5小時。反應完畢，用氯化銨水溶液淬滅(20 mL)反應，加入乙酸乙酯(100 mL)，依次用水(50 mL)、飽和食鹽水(50 mL)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，經柱層析純化(石油醚：乙酸乙酯=40：60)得到2,6-二氯-4-(2-羥乙基)煙腈(800 mg, 收率: 22.5%)。ES-API: [M+H] +=217.0。
步驟三：向2,6-二氯-4-(2-羥乙基)煙腈(800 mg, 3.7 mmol)中加入濃鹽酸(20 mL)中，加熱至100℃反應1小時。反應完畢，濃縮，除去濃鹽酸，加入乙酸乙酯(50 mL)，依次用水(30 mL)、飽和碳酸氫鈉水溶液(50 mL)、飽和食鹽水(30 mL)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，經柱層析純化(石油醚：乙酸乙酯=40：60)得到6,8-二氯-3,4-二氫-1H-吡喃并[3,4-c]吡啶-1-酮(600 mg, 收率: 75%)。ES-API: [M+H] +=218.0。
步驟四：將6,8-二氯-3,4-二氫-1H-吡喃并[3,4-c]吡啶-1-酮(600 mg, 2.76 mmol)溶解在四氫呋喃(10 mL)和無水乙醇(5 mL)中，冰水浴冷卻，緩慢分批加入硼氫化鈉(525 mg, 13.8 mmol)，加熱至60℃反應0.5小時。反應完畢，加入乙酸乙酯淬滅(20 mL)反應，柱層析純化(石油醚：乙酸乙酯=10：90)得到2-(2,6-二氯-3-(羥甲基)吡啶-4-基)乙-1-醇(500 mg, 收率: 82%)。ES-API: [M+H] +=222。
步驟五：將2-(2,6-二氯-3-(羥甲基)吡啶-4-基)乙-1-醇(500mg，2.26mmol)溶解在甲苯(30mL)中，加入對甲苯磺酸(778mg，4.52mmol)，加熱至130℃反應18小時，反應完畢。濃縮，粗品經柱層析純化(石油醚：乙酸乙酯=30：70)得到6,8-二氯-3,4-二氫-1H-吡喃并[3,4-c]吡啶(360 mg, 收率: 78%)。ES-API: [M+H] +=204.0。
步驟六：氮氣保護下，將6,8-二氯-3,4-二氫-1H-吡喃并[3,4-c]吡啶(360 mg, 1.77 mmol)、乙烯基三氟硼酸鉀(237 mg, 1.77 mmol)、[1,1'-雙(二苯基膦基)二茂鐵]二氯化鈀(72 mg, 0.088 mmol)、三乙胺(536 mg, 5.31 mmol)和乙醇(9 mL)，80℃下反應1小時。加入乙酸乙酯(30 mL)，依次用水(50 mL)、飽和食鹽水(50 mL)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，經柱層析純化(石油醚：乙酸乙酯=40：60)得到6-氯-8-乙烯基-3,4-二氫-1H-吡喃并[3,4-c]吡啶和8-氯-6-乙烯基-3,4-二氫-1H-吡喃并[3,4-c]吡啶混合物(180 mg, 收率: 52%)。ES-API: [M+H] +=196.1。
步驟七：將上述混合物(180 mg, 0.92 mmol)溶解在四氫呋喃(20 mL)中，室溫加入二水合鋨酸鉀(169 mg, 0.459 mmol)和高碘酸鈉(197 g, 9.23 mmol)的水溶液(15 mL)，室溫反應2小時。乙酸乙酯(30mL)稀釋，冷卻至0℃，加入硫代硫酸鈉水溶液淬滅反應，過濾，濾液依次用水(20 mL)、飽和食鹽水(20 mL)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，經柱層析純化(石油醚：乙酸乙酯=20：80)得到8-氯-3,4-二氫-1H-吡喃并[3,4-c]吡啶-8-甲醛和6-氯-3,4-二氫-1H-吡喃并[3,4-c]吡啶-8-甲醛混合物(100 mg，收率: 55.2%)。ES-API: [M+H] += 198.0。
步驟八：將上述混合物(100 mg, 0.51 mmol)溶解在乙腈(20 mL)中，依次加入2M二甲胺四氫呋喃溶液(2.5 mL, 5.0 mmol)、冰醋酸(0.2 mL)和三乙醯氧基硼氫化鈉(268 mg, 1.265 mmol)，室溫反應18小時。乙酸乙酯(30 mL)稀釋，依次用飽和碳酸氫鈉水溶液(20 mL)、飽和食鹽水(20 mL)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，經製備薄層板(展開劑乙酸乙酯)純化得到1-(8-氯-3,4-二氫-1H-吡喃并[3,4-c]吡啶-6-基)-N,N-二甲基甲胺(35 mg, Rf=0.3, 收率: 30%)，ES-API: [M+H] += 227.0；1-(6-氯-3,4-二氫-1H-吡喃并[3,4-c]吡啶-8-基)-N,N-二甲基甲胺(40 mg, Rf=0.5, 收率: 34.7%)。ES-API: [M+H] += 227.0。
步驟九：將1-(6-氯-3,4-二氫-1H-吡喃并[3,4-c]吡啶-8-基)-N,N-二甲基甲胺(40 mg, 0.177 mg)、3-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(68 mg, 0265 mmol)、Sphos Pd G2(12.7 mg, 0.0177 mmol)和碳酸鉀(73 mg, 0.531 mmol)加入到1,4-二氧六環(2 mL)和水(0.5 mL)中，氮氣置換，在110℃下微波反應1小時，反應完畢，加入乙酸乙酯(20 mL)，依次用水(10 mL)、飽和食鹽水(10 mL)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，經HPLC(碳酸氫銨法)純化得到N,N-二甲基-1-(6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-3,4-二氫-1H-吡喃并[3,4-c]吡啶-8-基)甲胺(Z181, 6.5 mg，收率: 10.5%)。ES-API: [M+H] +=323.0。 1H NMR (500 MHz, DMSO- d 6) δ 11.38 (s, 1H), 8.91 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 8.50 (d, J= 2.1 Hz, 1H), 7.75 (s, 1H), 7.26 (dd, J= 2.5, 1.3 Hz, 1H), 4.87 (s, 2H), 3.90 (t, J= 5.7 Hz, 2H), 3.52 (s, 2H), 2.90 (t, J= 5.8 Hz, 2H), 2.32 (d, J= 1.1 Hz, 3H), 2.18 (s, 6H)。
實施例36 化合物Z229和化合物Z230的合成
步驟一：2-(3,5-二溴苯基)乙酸(5.0 g, 17.0 mmol)溶於甲醇(50 mL)，在0℃下滴加二氯亞碸(2.5 mL, 34.0 mmol)，加熱至回流攪拌反應5小時。反應液濃縮，加入乙酸乙酯(80 mL)，用飽和碳酸氫鈉溶液洗滌(30 mL×2)，飽和食鹽水洗滌(30 mL)，無水硫酸鈉乾燥，濃縮，得到2-(3,5-二溴苯基)乙酸甲酯(5.2 g, 收率: 99%)，淡棕色液體。ES-API: [M+H] +=309.0。
步驟二：2-(3,5-二溴苯基)乙酸甲酯(4.6 g, 14.94 mmol)和鈦酸異丙酯(848 mg, 2.99 mmol)溶於四氫呋喃(20 mL)，氮氣保護下，在0℃下緩慢滴加1M乙基溴化鎂乙醚溶液(41.8 mL, 41.80 mmol)，0℃下繼續攪拌反應1小時。反應液緩慢滴加1M硫酸溶液(40 mL)，乙酸乙酯萃取(100 mL×2)。合併有機相，依次用飽和碳酸氫鈉溶液(50 mL)，飽和食鹽水(50 mL)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，濃縮，粗品用快速矽膠柱純化(乙酸乙酯/石油醚：0-10%)得到1-(3,5-二溴苄基)環丙烷-1-醇(2.2 g, 收率: 48%)，白色固體。 1H NMR (500 MHz, DMSO- d 6 ) δ 7.66 (t, J= 1.5 Hz, 1H), 7.51 (d, J= 1.5 Hz, 2H), 5.24 (s, 1H), 2.74 (s, 2H), 0.62-0.55 (m, 2H), 0.55– 0.50 (m, 2H).ES-API: [M+H] +=306.9。
步驟三：1-(3,5-二溴苄基)環丙烷-1-醇(2.05 g, 6.70 mmol)和 N, N-二異丙基乙胺(3.02 g, 23.45 mmol)溶於二氯甲烷(15 mL)，在0℃下滴加1-(氯甲氧基)-2-甲氧基乙烷(2.49 g, 20.10 mmol)，在室溫下攪拌反應72小時。反應液加入水(15 mL)，用二氯甲烷萃取(50 mL×2)。合併有機相，無水硫酸鈉乾燥，濃縮，粗品用快速矽膠柱純化(四氫呋喃/石油醚：5-10%)得到1,3-二溴-5-((1-((2-甲氧基乙氧基)甲氧基)環丙基)甲基)苯(1.35 g, 收率: 51%)，無色液體。ES-API: [M+Na] +=417.0。
步驟四：1,3-二溴-5-((1-((2-甲氧基乙氧基)甲氧基)環丙基)甲基)苯(2.1 g, 5.32 mmol)溶於二氯甲烷(4 mL)，在氮氣保護下，0℃下滴加四氯化鈦的二氯甲烷溶液(8.0 mL,8.0 mmol, 1.0M)，在0℃下攪拌反應1小時。反應液滴加甲醇(1.5 mL)和1M飽和碳酸氫鈉溶液(20 mL)，二氯甲烷萃取(50 mL)。有機相用飽和食鹽水洗滌(25 mL×2)，無水硫酸鈉乾燥，濃縮，粗品用快速矽膠柱純化(乙酸乙酯/石油醚：0-5%)得到6',8'-二溴螺[環丙烷-1,3'-異色滿](1.5 g, 收率: 88%)，淡黃色液體。 1H NMR (500 MHz, CDCl 3) δ 7.55 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 7.22 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 4.61 (s, 2H), 2.84 (s, 2H), 0.96-0.89 (m, 2H), 0.57-0.50 (m, 2H).ES-API: [M+H] +=318.9。
步驟五：6',8'-二溴螺[環丙烷-1,3'-異色滿](1.0 g, 3.14 mmol)溶於四氫呋喃(10 mL)，在氮氣保護下，-78℃下緩慢滴加正丁基鋰正己烷溶液(1.25 mL, 3.14 mmol, 2.5M)，在-78℃下攪拌反應2小時，然後滴加甲酸乙酯(377 mg, 6.28 mmol)，在-78℃下攪拌反應45分鐘，移除乾冰丙酮浴，繼續攪拌15分鐘。加水(10 mL)淬滅反應，乙酸乙酯(50 mL)萃取。有機相無水硫酸鈉乾燥，濃縮，粗品用快速矽膠柱純化(乙酸乙酯/石油醚：0-5%)得到6'-溴螺[環丙烷-1,3'-異色滿]-8'-甲醛(230 mg, 收率: 27%)，無色液體。ES-API: [M+H] +=267.0。
步驟六：6'-溴螺[環丙烷-1,3'-異色滿]-8'-甲醛(275 mg, 1.03 mmol)和( S)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺(249 mg, 2.06 mmol)溶於二氯甲烷(15 mL)，加入四乙氧基鈦(587 mg, 2.58 mmol)，在室溫下攪拌反應3小時。反應液加入飽和食鹽水(30 mL)，乙酸乙酯萃取(50 mL×2)。合併有機相，飽和食鹽水洗滌(30 mL)，無水硫酸鈉乾燥，濃縮，粗品用快速矽膠柱純化(乙酸乙酯/石油醚：0-20%)得到( S, E)- N-((6'-溴螺[環丙烷-1,3'-異色滿]-8'-基)亞甲基)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺(380 mg, 收率: 100%)，黏稠狀液體。ES-API: [M+H] +=370.1, 372.0。
步驟七：( S, E)- N-((6'-溴螺[環丙烷-1,3'-異色滿]-8'-基)亞甲基)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺(350 mg, 0.95 mmol)溶於四氫呋喃(7 mL)，在氮氣保護下，-78℃下滴加(2-(1,3-二噁烷-2-基)乙基)溴化鎂四氫呋喃溶液(5.7 mL, 2.85 mmol, 0.5M)，在-78℃下攪拌反應30分鐘。用飽和氯化銨溶液淬滅(10 mL)反應，加入水(10 mL)，用乙酸乙酯萃取(50 mL)。有機相用飽和食鹽水洗滌(25 mL)，無水硫酸鈉乾燥，濃縮得到( S)- N-(( S)-1-(6'-溴螺[環丙烷-1,3'-異色滿]-8'-基)-3-(1,3-二噁烷-2-基)丙基)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺(460 mg, 收率: 100%)，黏稠狀液體。ES-API: [M+H] +=486.2, 488.1。
步驟八：三氟乙酸(20 mL)和水(1 mL)，冷卻到0℃，將上述溶液滴加到( S)- N-(( S)-1-(6'-溴螺[環丙烷-1,3'-異色滿]-8'-基)-3-(1,3-二噁烷-2-基)丙基)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺(460 mg, 0.95 mmol)中，室溫下攪拌反應45分鐘，加入三乙基矽烷(1.1 g, 9.50 mmol)，室溫下攪拌反應16小時。反應液濃縮，得到 ( S)-2-(6'-溴螺[環丙烷-1,3'-異色滿]-8'-基)吡咯三氟乙酸鹽(1.7 g, 粗品)，無需進一步純直接用於下一步化。ES-API: [M+H] +=308.0, 310.0(游離鹼)。
步驟九：( S)-2-(6'-溴螺[環丙烷-1,3'-異色滿]-8'-基)吡咯三氟乙酸鹽(1.7 g, 粗品)溶於二氯甲烷(10 mL)，在0℃下加入三乙胺 (384 mg, 3.80 mmol)和二碳酸二叔丁酯(414 mg, 1.90 mmol)，在室溫下攪拌反應1小時。反應液加入二氯甲烷(40 mL)，依次用水(15 mL)，飽和食鹽水洗滌(15 mL)，無水硫酸鈉乾燥，濃縮，粗品用快速矽膠柱純化(四氫呋喃/石油醚：0-10%)得到( S)-2-(6'-溴螺[環丙烷-1,3'-異色滿]-8'-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(300 mg, 2步收率: 73%)，黏稠狀液體。ES-API: [M+H] +=430.1, 432.0。
步驟十：向5 mL微波管裡加入 ( S)-2-(6'-溴螺[環丙烷-1,3'-異色滿]-8'-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(60 mg, 0.15 mmol)，3-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼烷-2-基)-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶(49 mg, 0.19 mmol)，碳酸鉀(62 mg, 0.45 mmol)，2-二環己基膦-2′,6′-二甲氧基-聯苯(6 mg, 0.015 mmol)，氯(2-二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II)(11 mg, 0.015 mmol)，1,4-二氧六環(2 mL)和水(0.4 mL)。用氮氣吹1分鐘，在110℃下微波反應器中反應45分鐘。反應液加入水(5 mL)，乙酸乙酯萃取(30 mL)。有機相用飽和食鹽水洗滌(10 mL)，無水硫酸鈉乾燥，濃縮，粗品用快速矽膠柱純化(甲醇/二氯甲烷：0-3%)得到( S)-2-(6'-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)螺[環丙烷-1,3'-異色滿]-8'-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(68 mg, 收率: 100%)，白色固體。ES-API: [M+H] +=460.3。
步驟十一：( S)-2-(6'-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)螺[環丙烷-1,3'-異色滿]-8'-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(68 mg, 0.15 mmol)溶於甲醇(1 mL)，加入4M鹽酸/二氧六環溶液(3 mL)，室溫下攪拌反應1小時。反應液濃縮，加入7.0M氨/甲醇溶液(4 mL)，溶劑旋乾。粗品用製備HPLC(甲酸法)，然後手性製備HPLC(分離柱：Daicel CHIRALPAK® IC 250*4.6 mm, 5µm, 流動相: 正己烷(0.2%DEA):異丙醇(0.2%DEA)=50:50, 流速:1ml/min, 柱溫：30℃)純化得到( S)-3-甲基-5-(8'-(吡咯烷-2-基)螺[環丙烷-1,3'-異色滿]-6'-基)-1H-吡咯并[2,3- b]吡啶(Z229, 5 mg, 收率: 9%)，淡粉色固體。 1H NMR (500 MHz, DMSO- d 6 ) δ 11.32 (s, 1H), 8.45 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 8.09 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 7.71 (d, J= 1.5 Hz, 1H), 7.32 (d, J= 1.5 Hz, 1H), 7.22 (q, J= 1.0 Hz, 1H), 4.88-4.64 (m, 2H), 4.09 (t, J= 7.5 Hz, 1H), 3.12-3.07 (m, 1H), 3.01-2.83 (m, 3H), 2.32 (d, J= 1.0 Hz, 3H), 2.21-2.11 (m, 1H), 1.93-1.71 (m, 2H), 1.51-1.41 (m, 1H), 0.88-0.76 (m, 2H), 0.60-0.47 (m, 2H). ES-API: [M+H] +=360.2；( S)-3-甲基-5-(4-亞甲基-9-(吡咯烷-2-基)-1,3,4,5-四氫苯并[ c]噁庚因-7-基)-1 H-吡咯并[2, 3- b]吡啶(Z230, 7 mg, 收率: 13%)，淡粉色固體。 1H NMR (500 MHz, DMSO- d 6 ) δ 11.34 (s, 1H), 8.47 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 8.11 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 7.74 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 7.47 (d, J= 1.6 Hz, 1H), 7.28-7.24 (m, 1H), 5.02-4.77 (m, 4H), 4.37-4.27 (m, 3H), 3.79-3.70 (m, 2H), 3.12-3.03 (m, 1H), 2.95-2.90 (m, 1H), 2.31 (d, J= 1.0 Hz, 3H), 2.17-2.09 (m, 1H), 1.86-1.70 (m, 2H), 1.49-1.41 (m, 1H).ES-API: [M+H] +=360.2。
實施例37 化合物Z234-1和化合物Z234-2的合成
步驟一：氮氣保護下，將6-溴異色滿-8-甲醛(300 mg, 1.24 mmol)的四氫呋喃(5 mL)溶液冷卻至0℃，緩慢加入苯基氯化鎂的四氫呋喃溶液(1.86 mL, 1.86 mmol, 1M)，緩慢升至室溫，攪拌2小時。用飽和氯化銨溶液(5 mL)淬滅反應，乙酸乙酯(5 mLX3)萃取。有機相合併，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮，粗品用快速矽膠柱(0-50%乙酸乙酯/石油醚)純化得到 (6-溴異色滿-8-基)(苯基)甲醇(310 mg, 收率: 78%)，無色液體。ES-API: [M+H +-H 2O] = 301.0, 303.0。
步驟二：冰浴條件下，將戴斯-馬丁試劑(598 mg, 1.41 mmol)緩慢加入到(6-溴異色滿-8-基)(苯基)甲醇(150 mg, 0.47 mmol)的二氯甲烷(10 mL)溶液中，室溫攪拌2小時。依次用硫代硫酸鈉溶液(10 mL)和碳酸氫鈉溶液(10 mL)淬滅反應，二氯甲烷(15 mLX3)萃取。有機相合併，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮，粗品用快速矽膠柱(0-50%乙酸乙酯/石油醚)純化得到(6-溴異色滿-8-基)(苯基)甲酮(120 mg, 收率: 80%)。ES-API: [M+H] += 317.1, 319.0。
步驟三：將甲胺鹽酸鹽(128 mg, 1.89 mmol)和四異丙氧基鈦(108 mg, 0.38 mmol)加入到(6-溴異色滿-8-基)(苯基)甲酮(120 mg, 0.38 mmol)的1,2-二氯乙烷(5 mL)溶液中，混合物室溫攪拌反應過夜。然後加入氰基硼氫化鈉(71 mg, 1.13 mmol)，室溫攪拌2小時。反應結束後，用氯化銨水溶液(5 mL)淬滅反應，二氯甲烷(5 mLX3)萃取，有機相合併，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮，粗品用快速矽膠柱(0-6%甲醇(1%氨水)/二氯甲烷)純化得到1-(6-溴異色滿-8-基)- N-甲基-1-苯基甲胺(80 mg, 收率: 64%)，無色液體。ES-API: [M+H] += 332.0, 334.1。
步驟四：氮氣保護下，3-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(68 mg, 0.26 mmol)，1-(6-溴異色滿-8-基)- N-甲基-1-苯基甲胺(80 mg, 0.24 mmol)，氯(2-二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II) (14 mg, 0.02 mmol)，2-雙環己基膦-2',6'-二甲氧基聯苯(8 mg, 0.02 mmol)和碳酸鉀(99 mg, 0.72 mmol)的1,4-二氧六環(2 mL)和水(0.4 mL)的混合溶液在110℃下微波攪拌0.5小時。反應液倒入乙酸乙酯(10 mL)，依次用飽和食鹽水(5 mL)和水(5 mL)洗滌。有機相用無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮，粗品用製備HPLC(碳酸氫銨法)純化得到 N-甲基-1-(6-(3-甲基-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶-5-基)異色滿-8-基)-1-苯基甲胺(60 mg, 收率: 65%)，白色固體。ES-API: [M+H] += 384.3.
步驟五：將 N-甲基-1-(6-(3-甲基-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶-5-基)異色滿-8-基)-1-苯基甲胺(60 mg, 0.16 mmol)用手性拆分(柱型: Chiralpak IG: 5μm, 4.6*250mm, 流動相: 正己烷(0.2%三氟乙酸):乙醇(0.2%三氟乙酸)=70:30, 流速:1mL/min, 柱溫:室溫)得到兩個異構體化合物，一個異構體化合物結構任意指定為(S) -N-甲基-1-(6-(3-甲基-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶-5-基)異色滿-8-基)-1-苯基甲胺(Z234-1，三氟乙酸鹽，36 mg, 收率: 46%, 保留時間：8.290 min, ee值: 100%)。ES-API: [M+H] +=384.3。 1H NMR (500 MHz, DMSO-d 6) δ 11.47 (s, 1H), 9.70 (s, 2H), 8.61 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 8.27 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 7.97 (s, 1H), 7.62 (s, 1H), 7.58-7.53 (m, 2H), 7.51-7.46 (m, 2H), 7.45-7.40 (m, 1H), 7.33-7.31 (m, 1H), 5.53 (t, J= 6.0 Hz, 1H), 5.10 (d, J= 15.5 Hz, 1H), 4.32 (d, J= 15.5 Hz, 1H), 3.96-3.87 (m, 1H), 3.80-3.68 (m, 1H), 2.99-2.90 (m, 1H), 2.88-2.79 (m, 1H), 2.61 (t, J= 5.0 Hz, 3H), 2.34 (d, J= 1.0 Hz, 3H)；另一個異構體化合物結構任意指定為(R) -N-甲基-1-(6-(3-甲基-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶-5-基)異色滿-8-基)-1-苯基甲胺(Z234-2，三氟乙酸鹽，23 mg, 收率：30%, 保留時間：9.857 min, ee值：100%)。ES-API: [M+H] += 384.3。 1H NMR (500 MHz, DMSO-d 6) δ 11.44 (s, 1H), 9.69 (s, 2H), 8.61 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 8.25 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 7.97 (s, 1H), 7.61 (s, 1H), 7.57-7.53 (m, 2H), 7.50-7.45 (m, 2H), 7.44-7.40 (m, 1H), 7.31 (s, 1H), 5.52 (d, J= 6.5 Hz, 1H), 5.10 (d, J= 15.5 Hz, 1H), 4.32 (d, J= 15.5 Hz, 2H), 3.95-3.89 (m, 1H), 3.78-3.69 (m, 1H), 2.98-2.91 (m, 1H), 2.89-2.80 (m, 1H), 2.61 (t, J= 5.0 Hz, 4H), 2.34 (d, J= 1.0 Hz, 3H)。
實施例38 化合物Z227的合成
步驟一: 將7-氨基-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-羧酸叔丁酯(7 g, 28.2 mmol)溶解在乙腈中(150 mL)中，冰水浴冷卻至0℃，分批緩慢加入N-溴代丁二醯亞胺(5.02 g, 28.2 mmol)，冰水浴條件下反應2小時，反應完畢。加入乙酸乙酯稀釋(200 mL)，依次用飽和碳酸氫鈉水溶液(150 mL)、飽和食鹽水(150 mL)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮，粗品經柱層析純化(石油醚：乙酸乙酯=80：20)得到7-氨基-8-溴-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-羧酸叔丁酯(8.2 g, 收率: 88%)。ES-API: [M+H] +=327.0, 329.0。
步驟二：將7-氨基-8-溴-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-羧酸叔丁酯(7.4 g, 22.6 mmol)溶解在N，N-二甲基甲醯胺(150 mL)中，冰水浴冷卻至0℃，分批緩慢加入N-氯代丁二醯亞胺(3.16 g, 23.7 mmol)，加熱至50℃反應0.5小時，反應完畢。加入乙酸乙酯稀釋(200 mL)，依次用飽和碳酸氫鈉水溶液(150 mL)、飽和食鹽水(150 mL)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮，粗品經柱層析純化(石油醚：乙酸乙酯=80：20)得到7-氨基-6-氯-8-溴-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-羧酸叔丁酯(5.0 g, 收率: 61%)。ES-API: [M+H]+=305, 307。
步驟三：將7-氨基-6-氯-8-溴-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-羧酸叔丁酯(5.0 g, 13.85 mmol)溶解到四氫呋喃(50 mL)中，依次加入水(10 mL)和次磷酸(25 mL, 50%水溶液)中，冷卻至0℃，緩慢加入亞硝酸鈉(1.91 g, 27.7 mmol)，室溫反應0.5小時，反應完畢，倒入冰水中，加入乙酸乙酯(50 mL)，依次用飽和碳酸氫鈉水溶液(50 mL)、飽和食鹽水(50 mL)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮得到6-氯-8-溴-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-羧酸叔丁酯(3.34 g, 收率: 70%)，ES-API: [M+H] +=346.1, 348.1。
步驟四：將6-氯-8-溴-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-羧酸叔丁酯(3.34 g, 9.68 mmol)溶解到二氯甲烷(20 mL)中，加入三氟乙酸(10 mL)，室溫反應2小時，反應完畢，濃縮除去多餘的三氟乙酸。再加入四氫呋喃(50 mL)，冷卻至0℃，依次加入三乙胺(7 g, 29.04 mmoL)和氯甲酸苄酯(2.48 g, 14.52 mmoL)，室溫反應2小時，反應完畢。加入乙酸乙酯(50 mL)，依次用水(50 mL)、飽和食鹽水(50 mL)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮，粗品經柱層析純化(石油醚：乙酸乙酯=50：50)得到8-溴-6-氯-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-羧酸苄酯(3.65 g, 收率: 99%)，ES-API: [M+H] +=380.0, 382.0。
步驟五：將8-溴-6-氯-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-羧酸苄酯(3.4 g, 8.97 mmol)、乙烯基三氟硼酸鉀(2.38 g, 17.94 mmol)、[1,1'-雙(二苯基膦基)二茂鐵]二氯化鈀(366 mg, 0.448 mmol)、三乙胺(1.81 g, 17.94 mmol)和乙醇(60 mL)，90℃下反應3小時，加入乙酸乙酯(100 mL)，依次用水(50mL)、飽和食鹽水(50mL)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，柱層析純化(石油醚：乙酸乙酯=50：50)得到6-氯-8-乙烯基-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-羧酸苄酯(2 g, 收率: 68%)。ES-API: [M+H] +=328.1。
步驟六：將6-氯-8-乙烯基-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-羧酸苄酯(2 g, 6.11 mmol)溶解在四氫呋喃(40 mL)和乙腈(20 mL)中，加入二水合鋨酸鉀(225 mg, 0.611 mmol)和高碘酸鈉(7.85 g, 36.7 mmol)的水溶液(10 mL)，室溫反應2小時，冷卻至0℃，加入硫代硫酸鈉水溶液淬滅反應，加入乙酸乙酯(100 mL)，依次用水(50 mL)、飽和食鹽水(50 mL)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，柱層析純化(石油醚：乙酸乙酯=20：80)得到6-氯-8-甲醯基-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-羧酸苄酯(1.1 g, 收率: 55%)。ES-API: [M+H] += 330.0。
步驟七：將6-氯-8-甲醯基-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-羧酸苄酯(720 mg, 2.18 mmol)和( S)-叔丁基亞磺醯胺(529 mg, 4.37 mmol)溶解在乾燥二氯甲烷中(15 mL)，加入四乙氧基鈦(1.99 g, 8.75 mmol)，室溫反應15小時，反應完畢，緩慢倒入飽和食鹽水中(20 mL)，加入二氯甲烷(30 mL)，分離有機層，過濾，無水硫酸鈉乾燥，柱層析純化(乙酸乙酯: 石油醚=2：1)得到(S)-8-(((叔丁基亞磺醯基)亞氨基)甲基)-6-氯-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-羧酸苄酯(800 mg, 收率: 85%)。ES-API: [M+H] += 433.1。
步驟八：將(S)-8-(((叔丁基亞磺醯基)亞氨基)甲基)-6-氯-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-羧酸苄酯(800 mg, 1.85 mmol)和乾燥四氫呋喃(20 mL)加入到100ml三口瓶中，氮氣保護下，乾冰浴-78℃下，緩慢加入(2-(1,3-二氧六環-2-基)乙基)溴化鎂四氫呋喃溶液(14.5 mL, 0.5M)，攪拌反應10分鐘。反應完畢，加入1M鹽酸(8 mL)淬滅反應，加入乙酸乙酯(50 mL)，依次用水(30 mL)、飽和食鹽水(30 mL)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，柱層析純化(乙酸乙酯；石油醚=9：1)得到8-(1-(((S)-叔丁基亞磺醯基)氨基)-3-(1,3-二噁烷-2-基)丙基)-6-氯-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-羧酸苄酯(950 mg, 收率: 94%)。ES-API: [M+H] += 549.1。
步驟九：將8-(1-(((S)-叔丁基亞磺醯基)氨基)-3-(1,3-二噁烷-2-基)丙基)-6-氯-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-羧酸苄酯(950 mg, 1.73 mmol)加入到三氟乙酸/水(10 mL/0.5 mL)中，室溫(＜25℃)下反應30分鐘，加入三乙基矽烷(2 g, 17.3 mmol)，反應2小時，濃縮後，溶解在四氫呋喃中，加入三乙胺(524 g, 5.19 mmol)和二碳酸二叔丁酯(564 mg, 2.59 mmol)，反應完畢，加入乙酸乙酯(50 mL)，依次用水(30 mL)、飽和食鹽水(30 mL)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，經柱層析純化(乙酸乙酯: 石油醚=3：1)得到(S)-8-(1-(叔丁氧基羰基)吡咯烷-2-基)-6-氯-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-羧酸苄酯(220 mg, 收率: 25%)。ES-API: [M+H] += 471.2。
步驟十：將(S)-8-(1-(叔丁氧基羰基)吡咯烷-2-基)-6-氯-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-羧酸苄酯(220 mg, 0.468 mmL)、氯化鈀(9.94 mg, 0.0561 mmoL)和三乙胺(47.3 mg, 0.468 mg)溶解在二氯甲烷(15 mL)中，緩慢滴加三乙基矽烷(217 mg, 1.87 mmoL)。室溫反應1小時，反應完畢。加入二氯甲烷(50 mL)，依次用水(30 mL)、飽和食鹽水(30 mL)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，經柱層析純化(二氯甲烷；甲醇=10：1)得到(S)-2-(6-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(125 mg, 收率: 80%)。ES-API: [M+H] += 337.0。
步驟十一：將(S)-2-(6-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(125 mg, 0.372 mmol)溶解在乾燥的二氯甲烷中(5 mL)中，依次加入3,3,3-三氟-2-羥基-2-甲基丙酸(117.5 mg, 0.744 mmol)、三乙胺(112 mg, 1.11 mmol)和2-(7-偶氮苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯(283 mg, 0.744 mmol)，室溫反應1小時。反應完畢，加入二氯甲烷稀釋(30 mL)，飽和食鹽水(30 mL)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮，經柱層析純化(乙酸乙酯；石油醚=3:1)得到(2 S)-2-(6-氯-2-(3,3,3-三氟-2-羥基-2-甲基丙醯基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(80 mg, 收率: 45%)。ES-API: [M+H] +=477.0。
步驟十二：將(2S)-2-(6-氯-2-(3,3,3-三氟-2-羥基-2-甲基丙醯基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(80 mg, 0.168 mmol)、3-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(65 mg, 0.252 mmol)、Sphos Pd G2(12.0 mg, 0.0168 mmol)和碳酸鉀(69.5 mg, 0.504 mmol)加入到1,4-二氧六環(3 mL)和水(0.5 mL)中，氮氣置換，在110℃下微波反應1小時，反應完畢，加入乙酸乙酯(20 mL)，依次用水(10 mL)、飽和食鹽水(10 mL)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，經製備薄層層析(石油醚/乙酸乙酯=1/1)純化得到(2S)-2-(6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-2-(3,3,3-三氟-2-羥基-2-甲基丙醯基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(40 mg, 收率: 41%)。ES-API: [M+H]+=573.1。
步驟十三：將(2S)-2-(6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-2-(3,3,3-三氟-2-羥基-2-甲基丙醯基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(40 mg, 0.07 mmol)溶解到二氯甲烷(2 mL)中，加入三氟乙酸中(1 mL)，室溫反應0.5小時。反應完畢，濃縮，加入氨/甲醇溶液(1mL)中和後，再次濃縮，經製備HPLC(氨水法)純化得到3,3,3-三氟-2-羥基-2-甲基-1-(6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-8-((S)-吡咯烷-2-基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)丙-1-酮(Z227, 15 mg, 收率: 45%)。ES-API: [M+H] +=473.2。 1H NMR (500 MHz, DMSO- d 6) δ 11.34 (s, 1H), 8.47 (d, J= 2.2 Hz, 1H), 8.11 (d, J= 2.2 Hz, 1H), 7.77 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 7.41 (d, J= 10.1 Hz, 1H), 7.26 (s, 1H), 7.20 (s, 1H), 5.32 (t, J= 4.8 Hz, 1H), 4.85 (d, J= 17.1 Hz, 1H), 4.65 (d, J= 17.6 Hz, 1H), 4.26 (s, 1H), 3.17-2.90 (m, 2H), 2.34-2.29 (m, 3H), 2.27-2.19 (m, 1H), 1.99 (dt, J= 17.1, 6.9 Hz, 2H), 1.88-1.83 (m, 1H), 1.57 (d, J= 24.3 Hz, 3H)。
實施例39 化合物Z231的合成
步驟一：向5 mL微波管裡加入4-(6-溴異色滿-8-基)氮雜環丁烷-2-酮(30 mg, 0.11 mmol)，3-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼烷-2-基)-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶(33 mg, 0.13 mmol)，碳酸鈉(35 mg, 0.33 mmol)，2-二環己基膦-2′,6′-二甲氧基-聯苯(4 mg, 0.01 mmol)，氯(2-二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II)(7 mg, 0.01 mmol)，1,4-二氧六環(1.5 mL)和水(0.3 mL)，用氮氣吹1分鐘，在110℃下微波反應器中反應45 分鐘。反應液加入水(5 mL)，用乙酸乙酯(30 mL)萃取。有機相用飽和食鹽水(10 mL)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，濃縮，粗品用製備HPLC(碳酸氫銨法)純化得到4-(6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)異色滿-8-基) 氮雜環丁烷-2-酮(Z231, 11 mg, 收率: 31%)，白色固體，ES-API: [M+H] +=334.1。 1H NMR (500 MHz, DMSO- d 6 ) δ 11.36 (s, 1H), 8.57-8.44 (m, 2H), 8.14 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 7.54 (s, 1H), 7.46 (s, 1H), 7.27 (s, 1H), 4.82 (d, J= 15.0 Hz, 1H), 4.69 (dd, J= 4.0, 2.0 Hz, 1H), 4.55 (d, J= 15.0 Hz, 1H), 3.97-3.80 (m, 2H), 3.44-3.37 (m, 1H), 2.98-2.82 (m, 2H), 2.63 (dd, J= 14.5, 2.0 Hz, 1H), 2.31 (d, J= 1.0 Hz, 3H)。
實施例40 化合物Z138的合成
步驟一：向250 mL單口圓底燒瓶中加入2-(3,5-二溴苯基)乙酸(5.8 g, 19.7 mmol)，乙胺鹽酸鹽(3.2 g, 39.3 mmol)和四氫呋喃(100 mL)，室溫攪拌5分鐘後，分批加入2-(7-偶氮苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯(22.5 g, 59.2 mmol)，然後室溫攪拌30分鐘。反應液加入乙酸乙酯(300 mL)，飽和食鹽水洗滌(300 mLX3)，無水硫酸鈉乾燥，濃縮，粗品用快速矽膠柱純化(乙酸乙酯：石油醚=10:100)得到2-(3,5-二溴苯基)-N-乙基乙醯胺(5.1 g, 收率: 80%)。ES-API: [M+H] +=319.9。
步驟二：向100 mL單口燒瓶中加入2-(3,5-二溴苯基)-N-乙基乙醯胺(4.8 g, 14.9 mmol)，多聚甲醛(0.54 g, 18.0 mmol)和伊頓試劑(15 mL)，80 oC下攪拌4小時。反應液加入乙酸乙酯(100 mL)，用飽和食鹽水洗滌(50 mLX3)，無水硫酸鈉乾燥，濃縮，粗品用快速矽膠柱純化(乙酸乙酯：石油醚=20:100)得到6,8-二溴-2-乙基-1,4-二氫異喹啉-3(2H)-酮(2.9 g, 收率: 59%)。ES-API: [M+H] +=331.9。
步驟三：向50mL三口圓底燒瓶中加入6,8-二溴-2-乙基-1,4-二氫異喹啉-3(2H)-酮(1.5 g, 4.5 mmol)，乙烯基氟硼酸鉀(0.63 g, 4.7 mmol)，四三苯基膦鈀(0.5 g, 0.43 mmol)，碳酸鉀(1.8 g, 13.0 mmol)，二氧六環(30 mL)和水(4 mL)。氮氣置換三次，氮氣保護下，110 oC下反應4小時。反應液加入乙酸乙酯(100 mL)，用飽和食鹽水洗滌(50 mLX3)，無水硫酸鈉乾燥，濃縮，粗品用快速矽膠柱純化(乙酸乙酯：石油醚=40:100)得到6-溴-2-乙基-8-乙烯基-1,4-二氫異喹啉-3(2H)-酮(2.37 g, 粗品)。ES-API: [M+H] +=280.0。
步驟四：向50 mL單口圓底燒瓶中加入6-溴-2-乙基-8-乙烯基-1,4-二氫異喹啉-3(2H)-酮(2.37 g, 粗品)，高碘酸鈉(10 g, 46.7 mmol)，四氫呋喃(50 mL)和水(40 mL)，冰水浴條件下分批加入二水合鋨酸鉀(0.6 g, 1.63 mmol)，然後0 oC攪拌2小時。反應液加入乙酸乙酯(100 mL)，用飽和食鹽水洗滌(100 mLX3)，無水硫酸鈉乾燥，濃縮，粗品用快速矽膠柱純化(乙酸乙酯：石油醚=30:100)得到6-溴-2-乙基-3-氧代-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-甲醛(300 mg, 2步收率: 23.6%)。ES-API: [M+H] +=282.0。
步驟五：向50 mL單口圓底燒瓶中加入6-溴-2-乙基-3-氧代-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-甲醛(300 mg, 1.1 mmol)和二氯甲烷(10 mL)，冰水浴條件下加入(S)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺(260 mg, 2.1 mmol)和鈦酸四乙酯(1 mL)，室溫攪拌3小時。反應液加入乙酸乙酯(30 mL)，用飽和食鹽水洗滌(30 mLX3)，無水硫酸鈉乾燥，濃縮，粗品用快速矽膠柱純化(乙酸乙酯：石油醚=20:100)得到(S,E)-N-((6-溴-2-乙基-3-氧代-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)亞甲基)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺(350 mg, 收率: 83%)。ES-API: [M+H] +=385.1。
步驟六：向5 mL三口圓底燒瓶中加入(S,E)-N-((6-溴-2-乙基-3-氧代-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)亞甲基)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺(250 mg, 0.65 mmol)和無水四氫呋喃(3 mL)，體系用氮氣置換三次，氮氣保護下，-78 oC條件下加入0.5M (2-(1,3-二噁烷-2-基)乙基)溴化鎂的四氫呋喃溶液(4 mL)，繼續攪拌2小時。加入飽和氯化銨溶液淬滅反應(5 mL)，加入乙酸乙酯(30 mL)，飽和食鹽水洗滌(30 mLX3)，無水硫酸鈉乾燥，濃縮，粗品用快速矽膠柱(乙酸乙酯：石油醚=20:100)純化得到(S)-N-(1-(6-溴-2-乙基-3-氧代-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)-3-(1,3-二噁烷-2-基)丙基)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺(55 mg, 粗品)。ES-API: [M+H] +=501.1。
步驟七：向25 mL單口圓底燒瓶中加入(S)-N-(1-(6-溴-2-乙基-3-氧代-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)-3-(1,3-二噁烷-2-基)丙基)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺(55 mg, 粗品)，三氟乙酸(3 mL)和水(0.15 mL)，0 oC條件下加入三甲基矽烷(120 mg, 1.0 mmol)，攪拌18小時。反應液旋乾，加入乙酸乙酯(30 mL)，用飽和食鹽水洗滌(30 mLX3)，無水硫酸鈉乾燥，濃縮得到(S)-6-溴-2-乙基-8-(吡咯烷-2-基)-1,4-二氫異喹啉-3(2H)-酮(50 mg, 粗品)。ES-API: [M+H] +=323.0。
步驟八：向25 mL單口圓底燒瓶中加入(S)-6-溴-2-乙基-8-(吡咯烷-2-基)-1,4-二氫異喹啉-3(2H)-酮(50 mg，粗品)，二碳酸二叔丁酯(1mL)，三乙胺(46 mg, 0.45 mmol)和二氯甲烷(5 mL)，攪拌1小時。反應液加入二氯甲烷(20 mL)，用飽和食鹽水洗滌(20 mLX3)，無水硫酸鈉乾燥，濃縮得到 (S)-2-(6-溴-2-乙基-3-氧代-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(58 mg, 粗品)。ES-API: [M+H] +=423.0。
步驟九：向25 mL單口圓底燒瓶中加入 (S)-2-(6-溴-2-乙基-3-氧代-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(58 mg, 粗品)，3-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(28 mg, 0.11 mmol)，sphos-pd-g2(10 mg, 0.01 mmol)，碳酸鉀(40 mg, 0.29 mmol)，二氧六環(30 mL)和水(4 mL)。氮氣置換三次，氮氣保護下，110℃下微波反應50分鐘。反應液加入乙酸乙酯(10 mL)，用飽和食鹽水洗滌(5 mLX3)，無水硫酸鈉乾燥，濃縮，粗品用快速矽膠柱純化(甲醇：二氯甲烷=10:100)得到 (S)-2-(2-乙基-6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-3-氧代-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸酯(27 mg, 4步收率: 8.7%)。ES-API: [M+H] +=475.3。
步驟十：向5 mL單口圓底燒瓶中加入 (S)-2-(2-乙基-6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-3-氧代-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸酯(27 mg, 0.05 mmol)，三氟乙酸(3 mL)和二氯甲烷(6 mL)，室溫攪拌反應30分鐘。旋乾，粗品用製備HPLC(碳酸氫銨法)純化得到(S)-2-乙基-6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-8-(吡咯烷-2-基)-1,4-二氫異喹啉-3(2H)-酮(Z138, 10 mg, 收率: 53%)。ES-API: [M+H] +=375.3。
實施例41 化合物Z235的合成
步驟一：將化合物5-氯-2-甲基苯甲酸(10 g, 58.62 mmol)，鐵粉(1.64 g, 29.31 mmol)和溴素(40 mL)置於密封罐中，室溫攪拌48小時。反應液緩慢滴加到飽和碳酸氫鈉水溶液(400 mL)中淬滅反應，乙酸乙酯(100 mLX3)萃取。有機相合併，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮得到3-溴-5-氯-2-甲基苯甲酸(18 g, 粗品)，白色固體。ES-API: [M+H] += 248.9。
步驟二：將3-溴-5-氯-2-甲基苯甲酸(18 g, 72.15 mmol)，碘甲烷(20.48 g, 144.30 mmol)，和碳酸鉀(29.91 g, 216.44 mmol)的N，N-二甲基甲醯胺(100 mL)的混合液置於封管中，60℃下攪拌2小時。反應液溶於乙酸乙酯(300 mL)，用稀鹽水(100 mLX3)洗滌，水(100 mLX3)洗滌。有機相用無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮，粗品用快速矽膠柱(0-10%乙酸乙酯/石油醚)純化得到3-溴-5-氯-2-甲基苯甲酸甲酯(14 g, 2步收率: 91%)，白色固體。ES-API: [M+H] += 262.9。
步驟三：氮氣保護下，3-溴-5-氯-2-甲基苯甲酸甲酯(7 g, 26.56mmol)，N-溴代丁二醯亞胺(4.73 g, 26.56 mmol)和偶氮二異丁腈(4.36 g, 26.56 mmol)的四氯化碳(100 mL)混合溶液在90℃下攪拌5小時。TLC監測反應完全，冷卻至室溫，水(50 mLX3)洗滌，有機相用無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮，粗品用快速矽膠柱(0-10%乙酸乙酯/石油醚)純化得到3-溴-2-(溴甲基)-5-氯苯甲酸甲酯(6 g, 收率: 66%)，無色液體。ES-API: [M+H] += 340.9。
步驟四：將7 M氨/甲醇溶液(30 mL)加入到3-溴-2-(溴甲基)-5-氯苯甲酸甲酯(6 g, 17.52 mmol)中，在70℃下封管中反應2小時。白色固體析出，冷卻至室溫，過濾，烘乾得到4-溴-6-氯異吲哚啉-1-酮(2 g, 收率: 46%)。ES-API: [M+H] += 246.2, 248.2。
步驟五：將1 M硼烷四氫呋喃絡合物(40 mL)滴加到4-溴-6-氯異吲哚啉-1-酮(1 g, 4.06 mmol)的四氫呋喃(20 mL)渾濁液中，升溫至回流反應過夜。冷卻至室溫，加入1 M鹽酸(40 mL)，繼續攪拌1小時。用飽和碳酸氫鈉溶液調pH = 8，乙酸乙酯(40 mLX3)萃取。有機相合併，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮得到4-溴-6-氯異二氫吲哚(1 g, 粗品)。ES-API: [M+H] += 232.2, 234.2。
步驟六：冰浴條件下，依次將N,N-二異丙基乙胺(1.67 g, 12.90 mmol)和乙醯氯(675 mg, 8.60 mmol)加入到4-溴-6-氯異二氫吲哚(1 g, 4.30 mmol)的二氯甲烷(20 mL)溶液，攪拌30 分鐘。反應液用飽和碳酸氫鈉溶液(10 mLX3)洗滌，有機相無水硫酸鈉乾燥，濃縮得到1-(4-溴-6-氯異二氫吲哚-2-基)乙-1-酮(1 g, 粗品)。ES-API: [M+H] += 274.0, 276.0。
步驟七：氮氣保護下，化合物1-(4-溴-6-氯異二氫吲哚-2-基)乙-1-酮 (900 mg, 3.28 mmol)，乙烯基氟硼酸鉀(1 g, 6.56 mmol)，[1,1'-雙(二苯基膦)二茂鐵]二氯化鈀二氯甲烷絡合物(267 mg, 0.33 mmol)，三乙胺(996 mg, 9.84 mmol)的乙醇(10 mL)的混合溶液在80℃下攪拌2小時。反應液溶於乙酸乙酯(30 mL)，依次用飽和食鹽水(20 mL)和水(20 mL)洗滌。有機相用無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮，粗品用快速矽膠柱(0-50%乙酸乙酯/石油醚)純化得到1-(6-氯-4-乙烯基異二氫吲哚-2-基)乙-1-酮(360 mg, 收率: 50%)。[M+H] += 222.1。
步驟八：將二水合鋨酸鉀(100 mg, 0.27 mmol)和高碘酸鈉(1.73 g, 8.1 mmol)加入到1-(6-氯-4-乙烯基異二氫吲哚-2-基)乙-1-酮(300 mg, 1.35 mmol)的四氫呋喃(6 mL)和水(6 mL)中，室溫攪拌2小時。反應結束後，倒入水(10 mL)中，乙酸乙酯(10 mLX3)萃取。有機相合併，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮，粗品用快速矽膠柱(0-50%乙酸乙酯/石油醚)純化得到2-乙醯基-6-氯異二氫吲哚-4-甲醛(165 mg, 收率: 55%)。[M+H] += 224.1。
步驟九：氮氣保護下，將四乙氧基鈦(899 mg, 3.94 mmol)滴加到2-乙醯基-6-氯異二氫吲哚-4-甲醛(220 mg, 0.98 mmol)和S-叔丁基亞磺醯胺(238 mg,1.97 mmol)的二氯甲烷(5 mL)溶液中。反應液室溫攪拌1小時。反應結束後，加入二氯甲烷(5 mL)，水(1 mL)，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮，粗品用快速矽膠柱(0-60%乙酸乙酯/石油醚)純化得到 (S,E)- N-((2-乙醯基-6-氯異吲哚啉-4-基)亞甲基)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺(220 mg, 收率: 69%)，黃色固體。[M+H] += 327.0。
步驟十：氮氣保護下，-65℃條件下將(1,3-二氧六環-2-乙基)溴化鎂四氫呋喃溶液(6.24 mL, 3.12 mmol, 0.5 M)滴加到(S,E)- N-((2-乙醯基-6-氯異吲哚啉-4-基)亞甲基)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺(170 mg, 0.52 mmol)的四氫呋喃(10 mL)溶液中，在此溫度下攪拌1小時，升至室溫後繼續攪拌過夜。用飽和氯化銨溶液(20 mL)淬滅反應，乙酸乙酯(30 mLX3)萃取。有機相合併，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮得到 (S)- N-((S)-1-(2-乙醯基-6-氯異吲哚啉-4-基)-3-(1,3-二噁烷-2-基)丙基)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺(230 mg, 粗品)。[M+H] += 443.2。
步驟十一：冰浴條件下，將三氟乙酸(2 mL)和水(0.12 mL)加入到(S)- N-((S)-1-(2-乙醯基-6-氯異吲哚啉-4-基)-3-(1,3-二噁烷-2-基)丙基)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺(230 mg, 0.52 mmol)，室溫攪拌0.5小時。濃縮，得到(S)-1-(6-氯-4-(吡咯烷-2-基)異吲哚啉-2-基)乙-1-酮(140 mg, 粗品)。[M+H] += 265.2。
步驟十二：將二碳酸二叔丁酯(227 mg, 1.04 mmol)加入到(S)-1-(6-氯-4-(吡咯烷-2-基)異吲哚啉-2-基)乙-1-酮(140 mg, 0.52 mmol)和N,N-二異丙胺(202 mg, 1.56 mmol)的二氯甲烷(5 mL)溶液中，室溫反應0.5小時。反應結束後，濃縮，粗品用快速矽膠柱(0-50%乙酸乙酯/石油醚)純化得到(S)-2-(2-乙醯基-6-氯異吲哚啉-4-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(100 mg, 3步收率: 53%)。[M+H] += 365.2。
步驟十三：氮氣保護下，3-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(93 mg, 0.36 mmol)，(S)-2-(2-乙醯基-6-氯異吲哚啉-4-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(130 mg, 0.36 mmol)，氯(2-二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II) (29 mg, 0.04 mmol)，2-雙環己基膦-2',6'-二甲氧基聯苯(16 mg, 0.04 mmol)和碳酸鉀(149 mg, 1.08 mmol)的1,4-二氧六環(3 mL)和水(0.6 mL)的混合溶液在110℃下微波攪拌反應0.5小時。反應液倒入乙酸乙酯(10 mL)，依次用飽和食鹽水(5 mL)和水(5 mL)洗滌。有機相用無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮，粗品用快速矽膠柱(0-80%乙酸乙酯/石油醚)純化得到(S)-2-(2-乙醯基-6-(3-甲基-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶-5-基)異吲哚啉-4-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(100 mg, 收率60%)。[M+H] += 461.2。
步驟十四：冰浴條件下，將三氟乙酸(0.5 mL)滴加到(S)-2-(2-乙醯基-6-(3-甲基-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶-5-基)異吲哚啉-4-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(100 mg, 0.22 mmol)的二氯甲烷(1 mL)溶液中，室溫攪拌1小時。濃縮，用製備HPLC(甲酸法)純化得到(S)-1-(6-(3-甲基-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶-5-基)-4-(吡咯烷-2-基)異吲哚啉-2-基)乙-1-酮(Z235, 甲酸鹽, 17 mg, 收率: 19%)，白色固體。ES-API: [M+H] += 361.1。 1H NMR (500 MHz, DMSO-d 6) δ 11.36 (s, 1H), 8.49 (t, J= 2.0 Hz, 1H), 8.27 (s, 1H), 8.14 (t, J= 2.5 Hz, 1H), 7.74 (s, 1H), 7.59 (d, J= 9.5 Hz, 1H), 7.27 (s, 1H), 4.91 (d, J= 18.4 Hz, 2H), 4.70 (d, J= 24.1 Hz, 2H), 4.33-4.15 (m, 1H), 3.21-3.14 (m, 1H), 3.07-2.98 (m, 1H), 2.31 (d, J= 1.0 Hz, 3H), 2.28-2.19 (m, 1H), 2.10 (d, J= 7.0 Hz, 3H), 1.96-1.88 (m, 1H), 1.88-1.80 (m, 1H), 1.74-1.64 (m, 1H)。
實施例42 化合物Z236的合成
步驟一：4-溴-6-氯異吲哚啉-1-酮(700 mg, 2.84 mmol)，碘乙烷(4.43 g, 28.40 mmol)和碳酸鉀(1.18 g, 8.52 mmol)的丙酮(10 mL)混合液在50℃下封管中攪拌2天。反應液過濾，濃縮，粗品用快速矽膠柱(0-50%乙酸乙酯/石油醚)純化得到4-溴-6-氯-2-乙基異吲哚啉-1-酮(250 mg, 收率: 32%)。ES-API: [M+H] += 274.0, 276.0。
步驟二：氮氣保護下，化合物4-溴-6-氯-2-乙基異吲哚啉-1-酮(200 mg, 0.73 mmol)，乙烯基氟硼酸鉀(223 mg, 1.46 mmol)，[1,1'-雙(二苯基膦)二茂鐵]二氯化鈀二氯甲烷絡合物(57 mg, 0.07 mmol)，三乙胺(222 mg, 2.19 mmol)的乙醇(4 mL)溶液在80℃下攪拌2小時。反應液溶於乙酸乙酯(30 mL)，依次用飽和食鹽水(20 mL)和水(20 mL)洗滌。有機相用無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮，粗品用快速矽膠柱(0-50%乙酸乙酯/石油醚)純化得到6-氯-2-乙基-4-乙烯基異吲哚啉-1-酮(160 mg, 收率: 99%)。[M+H] += 222.1。
步驟三：將二水合鋨酸鉀(50 mg, 0.68 mmol)和高碘酸鈉(873 mg, 4.08 mmol)加入到6-氯-2-乙基-4-乙烯基異吲哚啉-1-酮(150 mg, 0.68 mmol)的四氫呋喃(3 mL)和水(3 mL)中，室溫攪拌2小時。反應結束後，倒入水(10 mL)中，乙酸乙酯(10 mLX3)萃取。有機相合併，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮，粗品用快速矽膠柱(0-50%乙酸乙酯/石油醚)純化得到6-氯-2-乙基-1-氧代異吲哚啉-4-甲醛(55 mg, 收率: 37%)。[M+H] += 224.0。
步驟四：氮氣保護下，將四乙氧基鈦(286 mg, 1.25 mmol)滴加到6-氯-2-乙基-1-氧代異吲哚啉-4-甲醛(70 mg, 0.31 mmol)和S-叔丁基亞磺醯胺(76 mg,0.63 mmol)的二氯甲烷(2 mL)溶液中。反應液室溫攪拌1小時，反應結束後，加入二氯甲烷(5 mL)，水(1 mL)，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮，粗品用快速矽膠柱(0-60%乙酸乙酯/石油醚)純化得到(S)- N-((6-氯-2-乙基-1-氧代異吲哚啉-4-基)亞甲基)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺(95 mg, 收率: 93%)，黃色固體。[M+H] += 327.1。
步驟五：氮氣保護下，-65℃條件下將(1,3-二氧六環-2-乙基)溴化鎂四氫呋喃溶液(3.49 mL, 1.74 mmol , 0.5 M)滴加到(S)- N-((6-氯-2-乙基-1-氧代異吲哚啉-4-基)亞甲基)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺(95 mg, 0.29 mmol)的四氫呋喃(10 mL)溶液中，在此溫度下攪拌1小時，升至室溫後繼續攪拌過夜。用飽和氯化銨溶液(20 mL)淬滅反應，乙酸乙酯(30 mLX3)萃取。有機相合併，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮得到(S)- N-((R)-1-(6-氯-2-乙基-1-氧代異吲哚啉-4-基)-3-(1,3-二噁烷-2-基)丙基)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺(120 mg, 收率: 93%)。[M+H] += 443.2。
步驟六：冰浴條件下，將三氟乙酸(2 mL)和水(0.12 mL)加入到(S)- N-((R)-1-(6-氯-2-乙基-1-氧代異吲哚啉-4-基)-3-(1,3-二噁烷-2-基)丙基)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺(120 mg, 0.27 mmol)，室溫攪拌0.5小時。濃縮，得到(S)-6-氯-2-乙基-4-(吡咯烷-2-基)異吲哚啉-1-酮(72 mg, 收率: 100%)。[M+H] += 265.2。
步驟七：將二碳酸二叔丁酯(118 mg, 0.54 mmol)加入到(S)-6-氯-2-乙基-4-(吡咯烷-2-基)異吲哚啉-1-酮(72 mg, 0.27 mmol)和N,N-二異丙胺(105 mg, 0.81 mmol)的二氯甲烷(5 mL)溶液中，室溫反應0.5小時。反應結束後，濃縮，粗品用快速矽膠柱(0-50%乙酸乙酯/石油醚)純化得到(S)-2-(6-氯-2-乙基-1-氧代異吲哚啉-4-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(72 mg, 收率: 73%)。[M+H] += 365.2。
步驟八：氮氣保護下，3-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(52 mg, 0.20 mmol)，(S)-2-(6-氯-2-乙基-1-氧代異吲哚啉-4-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(72 mg, 0.20 mmol)，氯(2-二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II) (14 mg, 0.02 mmol)，2-雙環己基膦-2',6'-二甲氧基聯苯(8 mg, 0.02 mmol)和碳酸鉀(83 mg, 0.60 mmol)的1,4-二氧六環(2 mL)和水(0.2 mL)的混合溶液在110℃下微波攪拌0.5小時。反應液倒入乙酸乙酯(10 mL)，依次用飽和食鹽水(5 mL)和水(5 mL)洗滌。有機相用無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮，粗品用快速矽膠柱(0-80%乙酸乙酯/石油醚)純化得到(S)-2-(2-乙基-6-(3-甲基-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶-5-基)-1-氧代異吲哚啉-4-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(60 mg, 收率: 65%)。[M+H] += 461.2。
步驟九：冰浴條件下，將三氟乙酸(0.5 mL)滴加到(S)-2-(2-乙基-6-(3-甲基-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶-5-基)-1-氧代異吲哚啉-4-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(60 mg, 0.13 mmol)的二氯甲烷(1 mL)溶液中，室溫攪拌1小時。濃縮，粗品用製備HPLC(碳酸氫銨法)純化得到(S)-2-乙基-6-(3-甲基-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶-5-基)-4-(吡咯烷-2-基)異吲哚啉-1-酮(Z236, 22 mg, 收率: 47%)，白色固體。ES-API: [M+H] += 361.1。 1H NMR (500 MHz, DMSO-d 6) δ 11.38 (s, 1H), 8.52 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 8.21 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 7.96 (d, J= 1.5 Hz, 1H), 7.80 (d, J= 1.5 Hz, 1H), 7.28 (s, 1H), 4.60 (d, J= 8.0 Hz, 2H), 4.29 (t, J= 8.0 Hz, 1H), 3.59 (q, J= 7.5 Hz, 2H), 3.14-3.09 (m, 1H), 2.99-2.93 (m, 1H), 2.33 (d, J= 1.0 Hz, 3H), 2.29-2.19 (m, 1H), 1.99-1.74 (m, 2H), 1.69-1.61 (m, 1H), 1.21 (t, J= 7.5 Hz, 3H)。
實施例43 化合物Z232的合成
步驟一：6-溴異色滿-8-甲醛(1.0 g, 4.15 mmol)和甲基三苯基溴化鏻(4.44 g, 12.45 mmol)溶於四氫呋喃(40 mL)，在氮氣保護下，0℃下加入60%氫化鈉(622 mg, 15.56 mmol)，在0℃下攪拌反應30分鐘，然後升到室溫繼續攪拌16小時。反應液加入水(40 mL)，用乙酸乙酯萃取(100 mL)。有機相用飽和食鹽水洗滌(50 mL)，無水硫酸鈉乾燥，濃縮。粗品用快速矽膠柱純化(乙酸乙酯/石油醚：0-15%)得到6-溴-8-乙烯基異色滿(950 mg, 收率: 96%)，無色液體。 1H NMR (500 MHz, CDCl 3) δ 7.43 (d, J= 1.5 Hz, 1H), 7.19 (s, 1H), 6.58 (dd, J= 17.5, 11.0 Hz, 1H), 5.63 (dd, J= 17.5, 1.0 Hz, 1H), 5.36 (dd, J= 11.0, 1.0 Hz, 1H), 4.75 (s, 2H), 3.91 (t, J= 5.5 Hz, 2H), 2.84 (t, J= 5.5 Hz, 2H)。
步驟二：6-溴-8-乙烯基異色滿(1.7 g, 7.11 mmol)溶於二氯甲烷(8 mL)，在氮氣保護下，室溫緩慢滴加氯化硫異氰酸酯(1.52 g, 40.05 mmol)的二氯甲烷溶液，反應在室溫下攪拌16小時。反應液冷卻到0℃，滴加亞硫酸鈉(1.34 g, 10.66 mmol)和碳酸鈉(2.26 g, 21.33 mmol)的水溶液(15 mL)，在室溫下攪拌反應1小時。反應液加入二氯甲烷(80 mL)，用矽藻土過濾，濾液分離，水層用二氯甲烷萃取(50 mL×2)。合併有機相，無水硫酸鈉乾燥，濃縮，粗品用快速矽膠柱純化(四氫呋喃/石油醚：0-50%)得到4-(6-溴異色滿-8-基)氮雜環丁烷-2-酮(350 mg, 收率: 17%)，白色固體。ES-API: [M+H] +=282.1, 284.1。
步驟三：4-(6-溴異色滿-8-基)氮雜環丁烷-2-酮(280 mg, 0.99 mmol)溶於四氫呋喃(10 mL)，冷卻到0℃，滴加1M硼烷四氫呋喃溶液(6.93 mL，6.93 mmol)，在室溫下攪拌反應30分鐘，然後加熱回流16小時。反應液冷卻到0℃，緩慢滴加6M鹽酸(10 mL)，滴加完後加熱回流30分鐘。反應液冷卻到室溫，加入6M氫氧化鈉溶液調pH=10，用乙酸乙酯萃取(50 mL×2)。合併有機相，飽和氯化鈉溶液洗滌(3 mL)，無水硫酸鈉乾燥，濃縮，得到4-(6-溴異色滿-8-基)氮雜環丁烷(950 mg, 粗品)，無需進一步純化直接用於下一步反應。
步驟四：4-(6-溴異色滿-8-基)氮雜環丁烷(950 mg, 粗品)溶於二氯甲烷(80 mL)，在0℃下加入三乙胺 (505 mg, 5.0 mmol)和二碳酸二叔丁酯(1.09 g, 5.0 mmol)，反應在0℃下攪拌1小時。反應液濃縮，加入乙酸乙酯(50 mL)，依次用水(25 mL×2)，飽和食鹽水洗滌(25 mL)，無水硫酸鈉乾燥，濃縮。粗品用快速矽膠柱純化(四氫呋喃/石油醚：0-18%)得到2-(6-溴異色滿-8-基)氮雜環丁烷-1-羧酸叔丁酯(175 mg, 2步收率: 48%)，無色液體。ES-API: [M+Na] +=390.1, 392.1
步驟五：向5 mL微波管裡加入2-(6-溴異色滿-8-基)氮雜環丁烷-1-羧酸叔丁酯(70 mg, 0.19 mmol)，3-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼烷-2-基)-1 H-吡咯[2,3- b]吡啶(59 mg，0.23 mmol)，碳酸鈉(60 mg, 0.57 mmol)，2-二環己基膦-2′,6′-二甲氧基-聯苯(4 mg, 0.01 mmol)，氯(2-二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II)(14 mg, 0.019 mmol)，1,4-二氧六環(2.0 mL)和水(0.5 mL)，用氮氣吹1分鐘，在110℃下在微波反應器中反應45 分鐘。反應液加入水(5 mL)，用乙酸乙酯(40 mL)萃取。有機相用飽和食鹽水(15 mL)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，濃縮，粗品用快速矽膠柱純化(甲醇/二氯甲烷：0-2%)得到2-(6-(3-甲基-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶-5-基)異色滿-8-基)氮雜環丁烷-1-羧酸叔丁酯(75 mg, 收率: 94%)，淡黃色固體。ES-API:[M+H] +=420.3。
步驟六：2-(6-(3-甲基-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶-5-基)異色滿-8-基)氮雜環丁烷-1-羧酸叔丁酯(65 mg, 0.15 mmol)溶於4M氯化氫/二氧六環溶液(4 mL)，室溫下攪拌反應2小時。反應液濃縮，得到3-氯-3-(6-(3-甲基-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶-5-基)異色滿-8-基)丙烷-1-胺鹽酸鹽(60 mg, 收率: 100%)，淡黃色固體。ES-API: [M+H] +=356.2(游離鹼)。
步驟七：3-氯-3-(6-(3-甲基-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶-5-基)異色滿-8-基)丙烷-1-胺鹽酸鹽(50 mg, 0.13 mmol)溶於甲醇(30 mL)，在0℃下加入4M氫氧化鈉溶液 (2 mL, 8.0 mmol)，室溫下攪拌反應16小時。反應液用二氯甲烷萃取(40 mL)，有機相用飽和食鹽水洗滌(10mL)，無水硫酸鈉乾燥，濃縮，粗品用薄層色譜製備板(二氯甲烷/7M氨甲醇=15：1)純化得到粗產物，然後製備HPLC(甲酸法)純化得到5-(8-(氮雜環丁烷-2-基)異色滿-6-基)-3-甲基-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶(Z232, 1 mg, 甲酸鹽，收率: 2.6%)，白色固體。ES-API: [M+H] +=320.2(游離鹼)。
實施例44 化合物Z228-1和化合物Z228-2的合成
步驟一：將(S)-2-(6-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(75 mg, 0.222 mmol)溶解在乾燥的二氯甲烷中(5 mL)中，依次加入(R)-3,3,3-三氟-2-羥基-2-甲基丙酸(70.3 mg, 0.444 mmol)、三乙胺(67.2 mg, 0.666 mmol)和2-(7-偶氮苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯(169 mg, 0.444 mmol)，室溫反應1小時，反應完畢。加入二氯甲烷稀釋(30 mL)，飽和食鹽水(30 mL)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮，粗品經柱層析純化(石油醚/乙酸乙酯=1/1)得到( S)-2-(6-氯-2-(( R)-3,3,3-三氟-2-羥基-2-甲基丙醯基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(105 mg，收率: 99%)。ES-API: [M+H] +=477.0。
步驟二：將(S)-2-(6-氯-2-((R)-3,3,3-三氟-2-羥基-2-甲基丙醯基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(105 mg, 0.22 mmol)、3-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(113 mg, 0.44 mmol)、Sphos Pd G2(15.8 mg, 0.022 mmol)和碳酸鉀(91 mg, 0.66 mmol)加入到1,4-二氧六環(3 mL)和水(0.5 mL)中，氮氣置換，110℃下微波反應1小時。反應完畢，加入乙酸乙酯(20 mL)，依次用水(10 mL)、飽和食鹽水(10 mL)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，經製備薄層析(石油醚/乙酸乙酯=1/1)純化得到(S)-2-(6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-2-((R)-3,3,3-三氟-2-羥基-2-甲基丙醯基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(40 mg, 收率: 32%)。ES-API: [M+H] +=573.1。
步驟三：將(S)-2-(6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-2-((R)-3,3,3-三氟-2-羥基-2-甲基丙醯基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(40 mg, 0.07 mmol)溶解到二氯甲烷(2 mL)中，加入三氟乙酸中(1 mL)，室溫反應0.5小時。反應完畢，濃縮，加入氨/甲醇溶液(1 mL)中和後，再次濃縮，經製備HPLC(氨水法)純化得到(R)-3,3,3-三氟-2-羥基-2-甲基-1-(6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-8-((S)-吡咯烷-2-基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)丙-1-酮(Z228-1, 22mg, 收率: 66.6%)。ES-API: [M+H] +=473.2。 1H NMR (500 MHz, DMSO- d 6) δ 11.33 (d, J= 2.4 Hz, 1H), 8.45 (d, J= 2.2 Hz, 1H), 8.09 (d, J= 2.2 Hz, 1H), 7.76 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 7.38 (s, 1H), 7.28-7.24 (m, 1H), 7.19 (s, 1H), 5.25-5.22 (m, 1H), 4.99-4.78 (m, 1H), 4.64 (d, J= 17.4 Hz, 1H), 4.20 (t, J= 7.7 Hz, 1H), 4.12 (s, 1H), 3.76-3.66 (m, 1H), 3.13-3.08 (m，1H), 2.98-2.93 (m, 3H), 2.31 (d, J= 1.2 Hz, 3H), 2.23-2.20 (m, 1H), 1.85-1.81 (m, 2H), 1.60 (d, J= 21.9 Hz, 3H), 1.48-1.43 (m, 1H)。
步驟四：將(S)-2-(6-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(75 mg, 0.222 mmol)溶解在乾燥的二氯甲烷中(5 mL)中，依次加入(S)-3,3,3-三氟-2-羥基-2-甲基丙酸(70.3 mg, 0.444 mmol)、三乙胺(67.2 mg, 0.666 mmol)和2-(7-偶氮苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯(169 mg, 0.444 mmol)，室溫反應1小時。反應完畢，加入二氯甲烷稀釋(30 mL)，飽和食鹽水(30 mL)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮，粗品經柱層析純化(石油醚/乙酸乙酯=1/1)得到( S)-2-(6-氯-2-(( S)-3,3,3-三氟-2-羥基-2-甲基丙醯基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(85 mg, 收率: 81%)。ES-API: [M+H] +=477.0。
步驟五：將(S)-2-(6-氯-2-((S)-3,3,3-三氟-2-羥基-2-甲基丙醯基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(85 mg, 0.178 mmol)、3-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(92 mg, 0.357 mmol)、Sphos Pd G2(13 mg, 0.0178 mmol)和碳酸鉀(74 mg, 0.534 mmol)加入到1,4-二氧六環(3 mL)和水(0.5 mL中，氮氣置換，在110℃下微波反應1小時。反應完畢，加入乙酸乙酯(20 mL)，依次用水(10mL)、飽和食鹽水(10 mL)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，經製備薄層層析(石油醚/乙酸乙酯=1/1)純化得到(S)-2-(6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-2-((S)-3,3,3-三氟-2-羥基-2-甲基丙醯基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(40 mg, 收率: 39%)。ES-API: [M+H] +=573.1。
步驟六：將(S)-2-(6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-2-((S)-3,3,3-三氟-2-羥基-2-甲基丙醯基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(40 mg, 0.07 mmol)溶解到二氯甲烷(2 mL)中，加入三氟乙酸中(1 mL)，室溫反應0.5小時。反應完畢，濃縮，加入氨水/甲醇溶液(1 mL)中和後，再次濃縮，經製備HPLC(氨水法)純化得到(S)-3,3,3-三氟-2-羥基-2-甲基-1-(6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-8-((S)-吡咯烷-2-基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)丙-1-酮(Z228-2, 25mg, 收率: 75.7%)。ES-API: [M+H] +=473.2。 1H NMR (500 MHz, DMSO- d 6) δ 11.33 (d, J= 2.4 Hz, 1H), 8.45 (d, J= 2.2 Hz, 1H), 8.09 (d, J= 2.2 Hz, 1H), 7.76 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 7.38 (s, 1H), 7.26 (s, 1H), 7.19 (d, J= 6.7 Hz, 1H), 5.23-5.18 (m, 1H), 4.96-4.78 (m, 1H), 4.64 (d, J= 17.1 Hz, 1H), 4.19 (t, J= 7.7 Hz, 1H), 4.09 (s, 1H), 3.56 (d, J= 28.4 Hz, 1H), 3.13-3.06 (m, 1H), 3.01-2.89 (m, 3H), 2.31 (s, 3H), 2.21 (s, 1H), 1.85-1.72 (m, 2H), 1.57 (d, J= 21.9 Hz, 3H), 1.46 (m, 1H)。
實施例45 化合物Z137的合成
步驟一：將5-溴-3-(氰基甲基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-1-羧酸叔丁酯(100 mg, 0.3 mmol)溶解在乾燥的N,N-二甲基甲醯胺(5 mL)中，冰水浴冷卻，依次加入1,8-二氮雜雙環[5.4.0]十一碳-7-烯(136.8 mg, 0.9 mmol)和二苯基(乙烯基)鋶三氟甲磺酸鹽(130 mg, 0.36 mmol)，反應1小時。反應完畢，加入氯化銨飽和水溶液淬滅(10 mL)反應，加入乙酸乙酯(30 mL)，依次用水(200 mLX1)、飽和食鹽水(20 mLX1)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮，粗品經矽膠柱層析純化(石油醚：乙酸乙酯=80：20)得到5-溴-3-(1-氰基環丙基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-1-羧酸叔丁酯(75 mg, 收率: 69.4%)。ES-API: [M+H] +=362.0。
步驟二：將5-溴-3-(1-氰基環丙基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-1-羧酸叔丁酯(36 mg, 0.1 mmol)、( S)-2-(6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼硼烷-2-基)異色滿-8-基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(43 mg, 0.10 mmol)、Sphos Pd G2(7.2 mg, 0.01 mmol)和碳酸鉀(41.4 mg, 0.3 mmol)加入到1,4-二氧六環(2 mL)和水(0.5 mL)中，氮氣置換，在110℃下微波反應1小時。反應完畢，加入乙酸乙酯(20 mL)，依次用水、飽和食鹽水洗滌，無水硫酸鈉乾燥，柱層析純化(石油醚：乙酸乙酯=10：90)得到(S)-5-(8-(1-(叔丁氧基羰基)吡咯烷-2-基)異苯并二氫吡喃-6-基)-3-(1-氰基環丙基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-1-甲酸叔丁酯(58 mg, 收率: 98%)。ES-API: [M+H] +=585.3。
步驟三：將(S)-5-(8-(1-(叔丁氧基羰基)吡咯烷-2-基)異苯并二氫吡喃-6-基)-3-(1-氰基環丙基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-1-甲酸叔丁酯(58 mg, 0.10 mmol)溶解到二氯甲烷(2 mL)中，加入三氟乙酸中(1 mL)，室溫反應0.5小時。反應完畢，濃縮，加入氨/甲醇溶液(1 mL)中和後，再次濃縮，經製備HPLC(氨水法)純化得到(S)-1-(5-(8-(吡咯烷-2-基)異苯并二氫吡喃-6-基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-基)環丙烷-1-甲腈(Z137, 12mg, 收率: 31%)。ES-API: [M+H] +=385.2。 1H NMR (500 MHz, DMSO- d 6) δ 11.84 (s, 1H), 8.53 (d, J= 2.1 Hz, 1H), 8.22 (d, J= 2.2 Hz, 1H), 7.71 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 7.59 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 7.34 (d, J= 1.9 Hz, 1H), 4.92-4.69 (m, 3H), 4.08 (t, J= 7.7 Hz, 1H), 3.98-3.82 (m, 3H), 3.66-3.46 (m, 1H), 3.11-3.06 (m, 1H), 2.98-2.82 (m, 4H), 2.19-2.11 (m, 1H), 1.92-1.72 (m, 3H), 1.71-1.62 (m, 3H), 1.54-1.41 (m, 4H)。
實施例46 化合物Z237的合成
步驟一：3-溴-4-甲基吡啶(500 mg, 2.89 mmol)溶於無水N,N-二甲基甲醯胺(5 mL)加入三甲基乙炔基矽(424.8 mg, 4.34 mmol)，二(三苯基磷)氯化鈀(203.3 mg, 0.29 mmol)，碘化亞銅(110.2 mL, 0.58 mmol)，三乙胺(875.7 mg, 8.67 mmol)，氮氣保護下室溫攪拌2分鐘，然後油浴加熱至115 oC攪拌16小時。LC-MS監測反應完全，反應液倒入水中(20 mL)，用乙酸乙酯(200 mL ×2)萃取，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮，柱層析(四氫呋喃：石油醚= 20%-40%)純化得到4-甲基-3-((三甲基甲矽烷基)乙炔基)吡啶(450 mg, 產率: 82.4%)。ES-API: [M+H] +=190.2。
步驟二：4-甲基-3-((三甲基甲矽烷基)乙炔基)吡啶(450 mg, 2.38 mmol)溶於甲醇(10mL)，室溫下加入碳酸鉀(492.7 mg, 3.57 mmol)，攪拌反應2小時。LC-MS監測反應完全，反應液過濾，濃縮，柱層析(四氫呋喃：石油醚= 20%-50%)純化得到3-乙炔基-4-甲基吡啶(250 mg , 收率: 89.9%)。ES-API: [M+H] +=118.1。
步驟三：3-乙炔基-4-甲基吡啶(250 mg , 2.13 mg)溶於無水三乙胺(10 mL)，加入5-溴-3-碘-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(754.4 mg, 2.34 mmol)，二(三苯基磷)氯化鈀(147.2 mg, 0.21 mmol)，碘化亞銅(110.2 mL, 0.58 mmol)，氮氣保護下室溫攪拌2 分鐘，然後油浴加熱至80 oC攪拌16小時。LC-MS監測反應完全，反應液中加入水(20 mL)，用乙酸乙酯萃取(50 mL×2)，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮，柱層析(四氫呋喃：石油醚= 50%-60%)純化得到5-溴-3-((4-甲基吡啶-3-基)乙炔基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(312 mg, 收率: 47.1%)。ES-API: [M+H] +=312.2, 314.2。
步驟四：5-溴-3-((4-甲基吡啶-3-基)乙炔基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(60 mg, 0.19 mmol)溶於二氧六環(5 mL)和水(1 mL)，室溫下加入(S)-2-(6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼烷-2-基)異色滿-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(97.8 mg, 0.23 mmol)，氯(2-二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II)(14.4 mg, 0.02 mmol)，磷酸鉀(127.2 mg, 0.60 mmol)，氮氣保護下在100 oC下攪拌反應2小時。反應液加入二氯甲烷(40 mL)，依次加水(10 mL)，飽和食鹽水(20 mL)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮，柱層析(四氫呋喃：石油醚= 40%-60%)純化得到叔丁基(S)-2-(6-(3-((4-甲基吡啶-3-基)乙炔基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)異色滿-8-基)吡咯烷-1-羧酸酯(31.2 mg, 收率: 30.9%)。ES-API: [M+H] +=535.2。
步驟五：叔丁基(S)-2-(6-(3-((4-甲基吡啶-3-基)乙炔基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)異色滿-8-基)吡咯烷-1-羧酸酯(31.2 mg, 0.0584mmol)溶於二氯甲烷(2 mL)，加入三氟乙酸(3 mL)，在室溫下反應1小時。反應液濃縮，加入7.0M氨/甲醇溶液(5 mL)，溶劑旋乾，粗品用製備HPLC(三氟乙酸法)純化得到 (S)-3-((4-甲基吡啶-3-基)乙炔基)-5-(8-(吡咯烷-2-基)異色滿-6-基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(Z237, 三氟乙酸鹽, 2.5 mg, 收率: 10%)。ES-API: [M+H] +=435.2。
實施例47 化合物Z119及其異構體的合成
步驟一：將8-溴-6-氯-異喹啉(1 g, 4.12 mmol)溶於乙醇(20 mL)中，加入三氟(乙烯基)硼酸鉀(1.66 g, 12.4 mmol)，[1,1'-雙(二苯基膦基)二茂鐵]二氯化鈀(302 mg, 0.41 mmol)和三乙胺(1.25 g, 12.4 mmol)，升溫至80℃反應3小時。反應液旋乾，柱層析純化(石油醚/乙酸乙酯=4/1)得到6-氯-8-乙烯基異喹啉(750 mg, 收率: 95.9%)。ES-API:[M+1] +=190.1。
步驟二：將6-氯-8-乙烯基異喹啉(750 mg, 3.95 mmol)溶於四氫呋喃/水(10 mL/5 mL)中，加入2,6-二甲基吡啶(424 mg, 3.95 mmol)，高碘酸鈉(6.77 g, 31.64 mmol)和二水合鋨酸鉀(437 mg, 1.19 mmol)，室溫反應2小時。用硫代硫酸鈉水溶液淬滅反應，乙酸乙酯萃取，有機相無水硫酸鈉乾燥，旋乾，柱層析純化(石油醚/乙酸乙酯=2/1)得到6-氯異喹啉-8-甲醛(390 mg, 收率: 51%)。ES-API:[M+1] +=191.9。
步驟三：將6-氯異喹啉-8-甲醛(270 mg, 1.41 mmol)溶於二氯甲烷(10 mL)，再加入2-(三丁基甲錫基甲氧基)乙胺(513 mg, 1.41 mmol)和4A 分子篩(300 mg)，室溫反應過夜。反應液過濾，旋乾，得到1-(6-氯-8-異喹啉基)-N-[2-(三丁基甲錫基甲氧基)乙基]甲胺，粗品，不經純化直接用於下一步反應。
步驟四：將(R,R)-2,2'-異亞丙基雙(4-苯基-2-噁唑啉)(94 mg, 0.28 mmol)一次性加入到三氟甲磺酸銅(510 mg, 1.41 mmol)的六氟異丙醇(2.5 mL)懸浮液中，再加入1-(6-氯-8-異喹啉基)-N-[2-(三丁基甲錫基甲氧基)乙基]甲胺(粗品)的六氟異丙醇(2.5 mL)溶液，室溫反應過夜。用1M 氫氧化鈉溶液淬滅反應，二氯甲烷萃取，有機相無水硫酸鈉乾燥，旋乾，得到3-(6-氯-8-異喹啉基)嗎啉，粗品，不經純化直接用於下一步反應。ES-API:[M+1] +=249.1。
步驟五：將3-(6-氯-8-異喹啉基)嗎啉(粗品)溶於四氫呋喃(5 mL)中，再加入三乙胺(428 mg，4.23 mmol)和二碳酸二叔丁酯(615 mg，2.82 mmol)，室溫反應2小時。反應完成後，加水淬滅反應，乙酸乙酯萃取，無水硫酸鈉乾燥，旋乾，柱層析純化(石油醚/乙酸乙酯=4/1)得到3-(6-氯-8-異喹啉基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(200 mg, 收率: 40.1%)。ES-API:[M+1] +=349.1。
步驟六：將3-(6-氯-8-異喹啉基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(100 mg, 0.29 mmol)溶於乙酸(1.5 mL)，冷卻至0℃，再加入硼氫化鈉(43 mg,1.15 mmol)，在0℃下反應1小時。反應完成後，加水淬滅反應，用碳酸鈉鹼化，二氯甲烷萃取，無水硫酸鈉乾燥，旋乾，得到3-(6-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯，粗品，不經純化直接用於下一步反應。ES-API:[M+1] +=353.1。
步驟七：將3-(6-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(粗品, 0.28 mmol)溶於二氯甲烷(1 mL)，加入三乙胺(85 mg, 0.84 mmol)，冷卻至0℃，再加乙醯氯(22 mg, 0.28 mmol)，0℃下反應0.5小時。反應完成後，加水淬滅反應，二氯甲烷萃取，無水硫酸鈉乾燥，旋乾，柱層析純化(石油醚/乙酸乙酯=3/1)得到3-(2-乙醯基-6-氯-3,4-二氫-1H-異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(80 mg, 收率: 72%)。ES-API:[M+1-100] +=295.1。
步驟八：將3-(2-乙醯基-6-氯-3,4-二氫-1H-異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(80 mg, 0.2 mmol)溶於二氧六環/水(1 mL/0.2 mL)中，加入3-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二噁硼烷-2-基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(63 mg, 0.24 mmol)，Sphos-Pd-G2(14 mg, 0.02 mmol)和碳酸鉀(56 mg, 0.4 mmol)。加熱至100℃反應1.5小時。反應完成後，旋乾，製備薄層色譜柱純化(石油醚/乙酸乙酯=2/1)得到叔丁基 3-[2-乙醯基-6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-8-基]嗎啉-4-羧酸鹽(62 mg, 收率: 62%)。ES-API:[M+1] +=491.3。
步驟九：將叔丁基 3-[2-乙醯基-6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-8-基]嗎啉-4-羧酸鹽(62 mg, 0.13 mmol)溶於二氯甲烷(1.3 mL)中，加入三氟乙酸(1.3 mL)，室溫反應1小時。反應完成後，旋乾，製備薄層色譜柱純化(二氯甲烷/甲醇=10/1)得到1-(6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-8-(嗎啉-3-基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)乙-1-酮(Z119, 25 mg, 收率: 51%)。ES-API:[M+1] +=391.2。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 8.53 (s, 1H), 8.05-7.96 (m, 1H), 7.95-7.85 (m, 1H), 7.30 (s, 1H), 7.11-7.04 (m, 1H), 5.26-4.65 (m, 1H), 4.64-4.28 (m, 1H), 4.01-3.77 (m, 4H), 3.76-3.50 (m, 3H), 3.38-3.05 (m, 2H), 3.03-2.83 (m, 2H), 2.33 (s, 3H), 2.29 (s, 1H), 2.18 (s, 2H)。
步驟十：將1-(6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-8-(嗎啉-3-基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)乙-1-酮(Z119, 21mg)手性拆分得到(流動相: HEX:ETOH=70:30); 分離柱: AB 250mm*4.6mm*5um) ；流速: 1.0 ml/min; T: 30.0℃)得到兩個異構體化合物，一個異構體化合物結構任意指定為(R)-1-(6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-8-(嗎啉-3-基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)乙-1-酮：(Z119-1, 保留時間: 12.533min, 9mg, 純度：99%，de值: 100%, 收率:42.9%)。ES-API:[M+H] += 391.1； 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6 ) δ 11.35 (s, 1H), 8.49-8.43 (m, 1H), 8.14-8.07 (m, 1H), 7.82-7.75 (m, 1H), 7.50-7.45 (m, 1H), 7.27 (s, 1H), 4.92-4.55 (m, 2H), 4.09-3.94 (m, 1H), 3.84-3.49 (m, 5H), 3.24 (t, J= 10.4 Hz, 1H), 3.05-2.90 (m, 3H), 2.87 (t, J= 6.0 Hz, 1H), 2.32 (s, 3H), 2.21-2.07 (m, 3H).  另一個異構體化合物結構任意指定為(S)-1-(6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-8-(嗎啉-3-基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)乙-1-酮(Z119-2, 保留時間: 13.819 min, 10mg, 純度: 99%, de值: 100%, 收率: 47.6%)。ES-API:[M+H] += 391.1。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6 ) δ 11.36 (s, 1H), 8.51-8.45 (m, 1H), 8.15-8.08 (m, 1H), 7.84-7.76 (m, 1H), 7.50 (s, 1H), 7.31-7.24 (m, 1H), 4.92-4.57 (m, 2H), 4.15-4.03 (m, 1H), 3.87-3.54 (m, 5H), 3.45-3.35 (m, 1H), 3.11-2.82 (m, 4H), 2.37-2.29 (m, 3H), 2.22-2.08 (m, 3H)。
實施例48 化合物Z132的合成
步驟一：8-溴-6-氯異喹啉(1.8 g, 7.469 mmol)，乙烯基三氟硼酸鉀(3 g, 22.41 mmol)，三乙胺(2.3 g, 22.41 mmol)溶解在乙醇(15 mL)中，然後加入1,1-雙(二苯基膦)二荗鐵二氯化鈀(546 mg, 0.747 mmol)，氮氣保護下加熱到80℃攪拌2小時。反應結束後，過濾，旋乾，加入乙酸乙酯/水萃取，旋乾，柱層析純化(0-20%乙酸乙酯/石油醚, 石油醚/乙酸乙酯=5/1, Rf=0.4)得到6-氯-8-乙烯基異喹啉(850 mg, 收率: 61%)ES-API:[M+H] +=190.00。
步驟二：6-氯-8-乙烯基異喹啉(850 mg, 4.45 mmol)溶解在四氫呋喃(10 mL)中，加入2,6-二甲基吡啶(476 mg, 4.45 mmol)，室溫攪拌，將高碘酸鈉(7.6 g, 35.6 mmol)、二水合鋨酸鉀(492 mg, 1.335 mmol)加入到水(5 mL)中，冰浴下，將水溶液加入到反應瓶中，常溫下攪拌1小時。反應結束後，加入硫代硫酸鈉水溶液淬滅反應，過濾，乙酸乙酯萃取，旋乾，柱層析純化(0-30%乙酸乙酯/石油醚, 石油醚/乙酸乙酯=2/1, Rf=0.5)得到6-氯異喹啉-8-甲醛(320 mg, 收率: 37%)。ES-API:[M+H] +=192.0。
步驟三：6-氯異喹啉-8-甲醛(260 mg, 1.36 mmol)加入到二氯甲烷(5 mL)中，加入二甲胺鹽酸鹽(443 mg, 5.44 mmol)，常溫下攪拌2小時，加入醋酸硼氫化鈉(865 mg, 4.08 mmol)。反應結束後，加入飽和氯化鈉溶液，二氯甲烷萃取，旋乾，柱層析(0-10%甲醇/二氯甲烷，二氯甲烷/甲醇=20/1，Rf=0.5)純化得到1-(6-氯異喹啉-8-基)-N,N-二甲基甲胺(85 mg, 收率: 28%)ES-API:[M+H] +=221.1。
步驟四：向 1-(6-氯異喹啉-8-基)-N,N-二甲基甲胺(95 mg, 0.432 mmol) 的醋酸(3 mL)溶液中加入硼氫化鈉 (33 mg, 0.864 mmol)，在0℃下攪拌0.5小時。LC-MS監測反應完全，加入碳酸氫鈉水溶液淬滅反應，二氯甲烷萃取，無水硫酸鈉乾燥，濃縮，柱層析(0-10%，甲醇在二氯甲烷中, 二氯甲烷/甲醇=10/1, Rf=0.4)純化得到1-(6-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)-N,N-二甲基甲胺(90 mg, 收率: 95%) 。ES-API:[M+H] += 225.1。
步驟五：向 1-(6-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)-N,N-二甲基甲胺(90 mg, 0.402 mmol) 的四氫呋喃(1 mL)溶液中加入三乙胺 (203 mg, 2.01 mmol)、乙醯氯(63mg, 0.804 mmol)，在0℃下攪拌15分鐘。LC-MS監測反應完全，加水淬滅反應，二氯甲烷萃取，無水硫酸鈉乾燥，濃縮，得到1-(6-氯-8-((二甲基氨基)甲基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)乙酮(80 mg, 收率: 75%) 。ES-API:[M+H] += 267.1。
步驟六：向1-(6-氯-8-((二甲基氨基)甲基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)乙酮(80 mg, 0.3 mmol) 中加入3-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二噁硼烷-2-基)-1H-吡咯[2,3-b]吡啶(116 mg, 0.45 mmol)，S-phos Pd G2(22 mg, 0.03 mmmol)，碳酸鉀(124 mg, 0.9 mmmol)，在氮氣保護下，混合物加熱至110℃攪拌反應。LC-MS監測反應完全，乙酸乙酯/水萃取，無水硫酸鈉乾燥，濃縮，製備HPLC(Ultimate XB-C18, 50*250mm, 10um，流動相體系：A：純化水(0.05%氨水)B : 純乙腈，流速：80ml/min，梯度：在50分鐘內，B/A=20%-90%，波長：214nm，柱溫：室溫)純化得到1-(8-((二甲氨基)甲基)-6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)乙酮(Z132, 24.4 mg, 收率: 23%) ，白色粉末。ES-API:[M+H] += 363.2。 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 11.33 (s, 1H), 8.46 (s, 1H), 8.12 (s, 1H), 7.47 (s, 2H), 7.23 (s, 1H), 4.73 (d, J= 21.6 Hz, 2H), 3.64 (t, J= 5.2 Hz, 2H), 3.31 (s, 2H), 2.96-2.91 (m, 1H), 2.85-2.80 (m, 1H), 2.35-2.05 (m, 12H)。
實施例49 化合物Z121的合成
步驟一：在0°C下，向 (S)-2-(6-氯異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(800 mg, 2.4 mmol) 的醋酸(30 mL)溶液中加入硼氫化鈉 (360 mg, 9.6 mmol)，攪拌2小時。LC-MS監測反應完全，加入碳酸氫鈉溶液淬滅反應，二氯甲烷萃取，無水硫酸鈉乾燥，濃縮，柱層析(0-10%甲醇/二氯甲烷，二氯甲烷/甲醇=10/1，Rf=0.6)純化得到 (S)-2-(6-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯 (900 mg, 粗品) 。ES-API:[M+H] += 337.2。
步驟二：在氮氣保護下，向(S)-2-(6-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(800 mg, 2.38 mmol) 的1,4-二氧六環(20 mL)和水(4 mL)的溶液中加入3-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二噁硼烷-2-基)-1 H-吡咯[2,3- b]吡啶(921 mg, 3.57 mmol)，氯(2-二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II) (173 mg, 0.24 mmmol)，碳酸鉀(985 mg, 7.14 mmmol)，混合物在110 ℃下攪拌2小時。乙酸乙酯/水萃取，無水硫酸鈉乾燥，濃縮，柱層析(0-10%甲醇/二氯甲烷，二氯甲烷/甲醇=10/1，Rf=0.4)純化得到 (S)-2-(6-(3-甲基-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(495 mg, 收率: 48%) ，黃色粉末。ES-API:[M+H] += 433.3。
步驟三：在0°C下，向(S)-2-(6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(50 mg, 0.12 mmol) 的四氫呋喃(1 mL)溶液中加入三乙胺(21 mg, 0.21 mol)，2-甲氧基乙醯氯(17 mg, 0.16 mmol)，攪拌15分鐘。LC-MS監測反應完全，加水淬滅反應，二氯甲烷萃取，無水硫酸鈉乾燥，濃縮得到 (S)-2-(2-2-甲氧基乙醯基-6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基) 吡咯烷-1-羧酸叔丁酯 (60 mg, 收率: 95%) 。ES-API:[M+H] += 501.3。
步驟四：向(S)-2-(2-2-甲氧基乙醯基-6-(3-甲基-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基) 吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(60 mg, 0.11 mmol) 加入鹽酸甲醇溶液(4M, 1 mL)，常溫下攪拌1小時。LC-MS監測反應完全，用碳酸氫鈉水溶液調pH至7，二氯甲烷/水萃取，無水硫酸鈉乾燥，濃縮，製備HPLC(Ultimate XB-C18，50*250mm，10um，流動相體系：A：純化水(0.05%氨水)，B : 純乙腈，流速：80ml/min，梯度：在50分鐘內，B/A=20%-90%，波長：214nm，柱溫：室溫)純化得到 (S)-1-(6-(3-甲基-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶-5-基)-8-(吡咯烷-2-基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)甲氧基乙基酮(Z121, 18.2 mg, 收率: 38%) ，白色粉末。ES-API:[M+H] += 405.2。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 9.60 (s, 1H), 8.52 (s, 1H), 7.95 (s, 1H), 7.93-7.82 (m, 1H), 7.23-7.14 (m, 1H), 7.13-7.04 (m, 1H), 4.94 (d, J= 18.2 Hz, 1H), 4.81-4.65 (m, 1H), 4.62-4.46 (m, 1H), 4.34 (s, 1H), 4.18 (s, 1H), 3.87-3.58 (m, 2H), 3.45 (s, 3H), 3.30-3.12 (m, 1H), 3.06-2.75 (m, 3H), 2.44-2.25 (m, 4H), 2.16-1.76 (m, 4H)。
實施例50 化合物Z122的合成
步驟一：冰浴條件下，向 (S)-2-(6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(50 mg, 0.12 mmol) 的二氯甲烷(1 mL)溶液中加入三乙胺(21 mg, 0.21 mmol)，環丙基甲醯氯(17 mg, 0.14 mmol)，攪拌15分鐘。LC-MS監測反應完全，加水淬滅反應，二氯甲烷萃取，無水硫酸鈉乾燥，濃縮，柱層析(0-5%甲醇/二氯甲烷，二氯甲烷/甲醇=20/1，Rf=0.6)純化得到 (S)-2-(2-環丙基甲醯基-6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯 (60 mg, 收率: 95%) 。ES-API:[M+H] += 501.3。
步驟二：向(S)-2-(2-環丙基甲醯基-6-(3-甲基-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯 (60 mg, 0.11 mmol) 加入4M鹽酸/甲醇溶液(1 mL)，常溫下攪拌1小時。LC-MS監測反應完全，碳酸氫鈉溶液調pH至7，二氯甲烷/水萃取，無水硫酸鈉乾燥，濃縮，製備HPLC(Ultimate XB-C18，50*250mm，10um，流動相體系：A：純化水(0.05%氨水)，B : 純乙腈，流速：80ml/min，梯度：在50分鐘內，B/A=20%-90%，波長：214nm，柱溫：室溫)純化得到 (S)-1-(6-(3-甲基-1 H-吡咯并[2,3- b] 吡啶-5-基)-8-(吡咯烷-2-基)-3,4-二氫異喹啉-2( 1H)-基)環丙基甲基酮(Z122, 13.1 mg, 收率: 25%) ，白色粉末。ES-API:[M+H] += 401.2。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 9.42 (s, 1H), 8.52 (s, 1H), 8.08-7.88 (m, 1H), 7.83 (s, 1H), 7.25-7.17 (m, 1H), 7.16-6.98 (m, 1H), 4.93 (d, J= 25.9 Hz, 1H), 4.80-4.37 (m, 2H), 4.02-3.83 (m, 2H), 3.81-3.66 (m, 2H), 3.23-2.78 (m, 2H), 2.32 (s, 3H), 2.15-1.72 (m, 4H), 1.29-1.18 (m, 1H), 1.11-0.98 (m, 2H), 0.91-0.78 (m, 2H)。
實施例51 化合物Z126的合成
步驟一：向 (S)-叔丁基2-(6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸鹽(50 mg, 120.12 μmol) 的二氯甲烷(1 mL)溶液中加入三乙胺(21.01 mg, 208.07 μmol)、叔丁基甲醯氯(17 mg, 144.27 μmol)，在0°C下攪拌15分鐘。LC-MS監測完全，加水淬滅反應，二氯甲烷萃取，無水硫酸鈉乾燥，濃縮，柱層析(0-5%，甲醇在二氯甲烷中，二氯甲烷/甲醇=20/1，Rf=0.6)純化得到 (S)-叔丁基 2-(2-叔丁基甲醯基-6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸鹽 (60 mg, 收率: 95%) 。ES-API:[M+H]+= 517.3
步驟二：向(S)-叔丁基 2-(2-叔丁基甲醯基-6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸鹽 (60 mg, 111.94 μmol) 中加入鹽酸的甲醇溶液，常溫下攪拌1小時。LC-S監測反應完全，碳酸氫鈉水溶液調pH至7，二氯甲烷/水萃取，無水硫酸鈉乾燥，濃縮，製備HPLC(Ultimate XB-C18, 50*250mm, 10um，流動相體系：A：純化水(0.05%氨水)，B : 純乙腈，流速：80ml/min，梯度：在50分鐘內，B/A=20%-90%，波長：214nm，柱溫：室溫)純化得到 (S)-1-(6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b] 吡啶-5-基)-8-吡咯烷-2-基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)叔丁基甲基酮(Z126, 16.4 mg, 收率: 33%) ，白色粉末。ES-API:[M+H] += 417.2。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 8.55 (s, 1H), 7.94 (s, 1H), 7.85 (s, 1H), 7.11 (s, 1H), 7.02 (s, 1H), 4.83 (s, 2H), 4.68-4.57 (m, 1H), 3.97-3.87 (m, 1H), 3.66-3.52 (m, 2H), 3.37-3.26 (m, 1H), 2.97-2.83 (m, 1H), 2.82-2.69 (m, 1H), 2.43-2.30 (m, 1H), 2.29 (s, 3H), 2.22-2.10 (m, 1H), 2.02-1.90 (m, 2H), 1.31 (s, 9H)。
實施例52 化合物Z125的合成
步驟一：向 (S)-2-(6-(3-甲基-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(50 mg, 120.12 μmol) 的二氯甲烷(1 mL)溶液中加入三乙胺(21.01 mg, 208.07 μmol)、環己基甲醯氯(21 mg, 144.27 μmol)，在0°C下攪拌15分鐘。LC-MS監測反應權，加水淬滅反應，二氯甲烷萃取，無水硫酸鈉乾燥，濃縮，柱層析(0-5%，甲醇在二氯甲烷中，二氯甲烷/甲醇=20/1，Rf=0.6)純化得到 (S)-2-(2-環己基甲醯基-6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯 (60 mg, 收率: 95%) 。ES-API:[M+H] += 543.4。
步驟二：向(S)-2-(2-環己基甲醯基-6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯 (60 mg, 111.94 μmol) 加入鹽酸甲醇溶液，常溫下攪拌1小時。LC-MS監測反應完全，碳酸氫鈉溶液調pH至7，二氯甲烷/水萃取，無水硫酸鈉乾燥，濃縮，製備HPLC(色譜柱信息：Ultimate XB-C18, 50*250mm, 10um，流動相體系：A：純化水(0.05%氨水)，B : 純乙腈，流速：80ml/min，梯度：在50分鐘內，B/A=20%-90%，波長：214nm，柱溫：室溫)純化得到 (S)-1-(6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b] 吡啶-5-基)-8-(吡咯烷-2-基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)環己基甲基酮(Z125, 15.3 mg, 收率: 31%) 白色粉末。ES-API:[M+H] += 443.3。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 9.86 (s, 1H), 8.53 (s, 1H), 8.01-7.78 (m, 2H), 7.24-6.89 (m, 2H), 5.14-4.70 (m, 2H), 4.72-4.43 (m, 1H), 3.80-3.47 (m, 3H), 3.32-3.14 (m, 1H), 2.90-2.50 (m, 3H), 2.29 (s, 3H), 2.18-2.00 (m, 2H), 1.96-1.65 (m, 6H), 1.64-1.46 (m, 2H), 1.45-1.14 (m, 4H)。
實施例53 化合物Z123的合成
步驟一：冰浴條件下，向 (S)-2-(6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(50 mg, 0.12 mmol) 的二氯甲烷(1 mL)溶液中加入三乙胺(21 mg, 0.21 mmol)，苯甲醯氯(20 mg, 0.14 mmol)，攪拌15分鐘。LC-MS監測反應完全，加水淬滅反應，二氯甲烷萃取，無水硫酸鈉乾燥，濃縮，柱層析(0-5%甲醇/二氯甲烷，二氯甲烷/甲醇=20/1，Rf=0.6)純化得到 (S)-2-(2-苯甲醯基-6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯 (60 mg, 收率: 95%) 。ES-API:[M+H] += 537.30。
步驟二：向(S)-2-(2-苯甲醯基-6-(3-甲基-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯 (60 mg, 0.11 mmol) 加入4M鹽酸/甲醇溶液(1 mL)，常溫下攪拌1小時。LC-MS監測反應完全，用碳酸氫鈉溶液調pH至7，二氯甲烷/水萃取，無水硫酸鈉乾燥，濃縮，製備HPLC(Ultimate XB-C18，50*250mm，10um，流動相體系：A：純化水(0.05%氨水)，B : 純乙腈，流速：80ml/min，梯度：在50分鐘內，B/A=20%-90%，波長：214nm，柱溫：室溫)純化得到產物(S)-1-(6-(3-甲基-1 H-吡咯并[2,3- b] 吡啶-5-基)-8-吡咯烷-2-基)-3,4-二氫異喹啉-2( 1H)-基)苯甲基酮(Z123, 11.3 mg, 收率: 22%)，白色粉末。ES-API:[M+H] += 437.3。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3)δ8.59 (s, 1H), 8.12–7.73 (m, 2H), 7.50–7.38 (m, 5H), 7.19-6.94 (m, 2H),5.10–4.64 (m, 2H), 3.80–3.14 (m, 5H), 3.05–2.65 (m, 2H), 2.28 (s, 3H),2.20–1.73 (m, 4H)。
實施例54 化合物Z124的合成
步驟一：在氮氣保護下，向(S)-2-(6-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(250 mg, 0.742 mmol) 加入3-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二噁硼烷-2-基)-1 H-吡咯[2,3- b]吡啶(230 mg, 0.891 mmol)，氯(2-二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II) ( 53 mg, 0.0742 mmmol)，碳酸鉀(307 mg, 2.23 mmmol)，混合物在110℃下攪拌3小時。用乙酸乙酯/水處理，無水硫酸鈉乾燥，濃縮，柱層析(0-10%甲醇(1%氨水)：二氯甲烷)純化得到 (S)-2-(6-(3-甲基-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(220 mg, 收率: 68%) ，黃色粉末。ES-API:[M+H] += 433.3。
步驟二：向 (S)-2-(6-(3-甲基-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(50 mg, 0.115 mmol) 的 N, N-二甲基甲醯胺(1 ml)溶液中加入吡啶甲酸(17 mg, 0.138 mmol)，三乙胺(35 mg, 0.347 mmol)，2-(7-偶氮苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯(65 mg, 0.173 mmol)，在25°C下，攪拌2小時。LCMS監測反應完全，加水淬滅反應，乙酸乙酯萃取，飽和食鹽水洗，無水硫酸鈉乾燥，濃縮，柱層析純化(0-6%甲醇/二氯甲烷)得到(S)-2-(6-(3-甲基-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶-5-基)-2-吡啶甲基-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯 (55 mg, 89 %) 。ES-API:[M+H] += 538.3。
步驟三：向(S)-2-(6-(3-甲基-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶-5-基)-2-吡啶甲基-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯 (55 mg, 0.102 mmol)中 加入4M鹽酸/甲醇溶液(1 mL)，常溫攪拌1小時。LCMS監測反應完全，用飽和碳酸氫鈉水溶液調pH至7，用二氯甲烷/水處理，無水硫酸鈉乾燥，濃縮，製備薄層層析(甲醇：二氯甲烷=10：1)純化得到(S)-(6-(3-甲基-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶-5-基)-8-(吡咯烷-2-基)-3,4-二氫異喹啉-2(1 H)-基)(吡啶-4-基)甲酮(Z124, 10.2 mg, 收率: 23%) ，白色粉末。ES-API:[M+H] += 438.2。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 8.74-8.59 (m, 2H), 8.43 (d, J= 8.8 Hz, 1H), 7.82 (d, J= 11.6 Hz, 1H), 7.78-7.53 (m, 1H), 7.34-7.20 (m, 2H), 7.20-7.05 (m, 1H), 6.96 (s, 1H), 5.09-4.53 (m, 2H), 4.52-3.86 (m, 1H), 3.51-2.38 (m, 6H), 2.21 (s, 3H), 2.15-1.48 (m, 4H)。
實施例55 化合物Z127的合成
步驟一：2-溴-4-氯苯甲醛(50 g, 0.22 mol)溶解在甲苯中，加入2,2-二甲氧基乙胺(34 g, 0.33 mmol)，醋酸(4 mL)，氮氣保護下加熱到110℃攪拌3小時。旋乾，加入甲醇(200 mL)，降溫到0℃，緩慢加入硼氫化鈉(15 g, 0.4 mol)室溫反應1小時。反應結束後，將溶液倒入冰水中，二氯甲烷萃取，無水硫酸鈉乾燥，旋乾得到N-(2-溴-4-氯苄基)-2,2-二甲氧基乙胺(61 g, 粗品)。ES-API:[M+H] += 310.0。
步驟二：將N-(2-溴-4-氯苄基)-2,2-二甲氧基乙胺(61g, 0.23 mmol)加入到二氯甲烷(150 mL)，加入三乙胺(34.8 g, 0.344 mol)，冰水浴條件下加入對甲苯磺醯氯( 65.6 g，0.344 mol)，室溫反應過夜。反應結束後，加入水，二氯甲烷萃取，旋乾，粗品用石油醚打漿得到N-(2-溴-4-氯苄基)-N-(2,2-二甲氧基乙基)-4-甲基苯磺醯胺(35 g, 收率: 38%)。ES-API:[M+Na] += 486.0。
步驟三：將N-(2-溴-4-氯苄基)-N-(2,2-二甲氧基乙基)-4-甲基苯磺醯胺(35 g, 76 mmol)加入到無水二氯甲烷(150 mL)中，冰水浴下加入三氯化鋁(80 g, 0.6 mol)，室溫下攪拌過夜。反應結束後，將反應液加入冰水中，加入氫氧化鈉溶液至澄清狀態，二氯甲烷萃取，旋乾，柱層析(0-20%乙酸乙酯/石油醚，石油醚/乙酸乙酯=5/1，Rf=0.5流動相)純化得到8-溴-6-氯異喹啉(3.5 g, 收率: 19%)。ES-API:[M+H] += 243.9。
步驟四：將8-溴-6-氯異喹啉(3.5 g, 14.4 mmol)，乙烯基三氟硼酸鉀(5.912 g, 43.2 mmol)，三乙胺(4.37 g, 43.2 mmol)溶解在乙醇(35 mL)中，然後加入1,1-雙(二苯基膦)二荗鐵二氯化鈀(1.05 g, 1.44 mmol)，氮氣保護下加熱到80℃攪拌2小時。反應結束後，過濾，旋乾，加入乙酸乙酯/水萃取，旋乾，柱層析(0-20%乙酸乙酯/石油醚，石油醚/乙酸乙酯=5/1，Rf=0.4流動相)純化得到6-氯-8-乙烯基異喹啉(1.6 g, 收率: 57%)。ES-API:[M+H] += 190.0。
步驟五：將6-氯-8-乙烯基異喹啉(1.6 g, 8.46 mmol)溶解在四氫呋喃(32 mL)中，加入2,6-二甲基吡啶(0.9 g, 8.46 mmol)，室溫攪拌下，將高碘酸鈉(14.47 g, 67.68 mmol)、二水合鋨酸鉀(0.93 g, 2.538 mmol)加入到水(16 mL)中，冰浴下，將水溶液加入到反應瓶中，常溫下攪拌1小時。反應結束後，加入硫代硫酸鈉水溶液淬滅反應，過濾，乙酸乙酯萃取，旋乾，柱層析(0-30%乙酸乙酯/石油醚，石油醚/乙酸乙酯=2/1，Rf=0.5流動相)純化得到6-氯異喹啉-8-甲醛(0.8 g, 收率: 50%)。ES-API:[M+H] += 192.1。
步驟六：將6-氯異喹啉-8-甲醛(0.8 g, 4.18 mmol)、(S)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺(1.0 g, 8.37 mmol)加入到二氯甲烷(20 mL)中，再加入鈦酸四乙酯(2.74 g, 16.72 mmol)，室溫反應過夜。反應結束後，加入飽和氯化鈉溶液，加入二氯甲烷，萃取，旋乾，得到(S,E)-N-((6-氯異喹啉-8-基)亞甲基)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺(1.15 g, 收率: 93%)。ES-API:[M+H] += 295.1。
步驟七：將(S,E)-N-((6-氯異喹啉-8-基)亞甲基)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺(1.15 g, 3.92 mmol)加入到四氫呋喃(20 mL)中，乾冰浴冷至-78℃，添加(2-(1,3-二噁烷-2-基)乙基)溴化鎂(3.4 g, 3.92 mmol)，攪拌10分鐘。撤去乾冰浴，加入飽和氯化銨溶液，乙酸乙酯萃取，旋乾，柱層析(0-30%乙酸乙酯/石油醚，石油醚/乙酸乙酯=2/1，Rf=0.5)純化得到(S)-N-((S)-1-(6-氯異喹啉-8-基)-3-(1,3-二噁烷-2-基)丙基)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺(2.0 g, 粗品)。ES-API:[M+H] += 411.1。
步驟八：將(S)-N-((S)-1-(6-氯異喹啉-8-基)-3-(1,3-二噁烷-2-基)丙基)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺(2.0 g, 4.87 mmol)加入到三氟乙酸(50 mL)和水(2.5 mL)中，室溫攪拌30分鐘，加入三乙基矽氫(5.66 g, 48.7 mmol)，常溫攪拌2小時。反應結束後，旋乾，加入四氫呋喃(40 mL)、三乙胺(4.9 g, 48.7 mmol)和二碳酸二叔丁酯(3.18 g, 14.61 mmol)，室溫攪拌30分鐘。反應結束後，乙酸乙酯萃取，旋乾，柱層析(0-30%乙酸乙酯/石油醚，石油醚/乙酸乙酯=4/1，Rf=0.3流動相)純化得到(S)-叔丁基2-(6-氯異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸酯(0.9g，收率: 56%)。ES-API:[M+H] += 333.1。
步驟九：向 (S)-叔丁基2-(6-氯異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸酯(40 mg, 0.12 mmol) 的醋酸(1.5 mL)溶液中加入硼氫化鈉 (18 mg, 0.48 mmol)，在0℃下攪拌2小時。LC-MS監測反應完全，加入碳酸氫鈉溶液淬滅反應，二氯甲烷萃取，無水硫酸鈉乾燥，濃縮，柱層析(0-10%，甲醇在二氯甲烷中，二氯甲烷/甲醇=4/1，Rf=0.6)純化得到 (S)-叔丁基2-(6-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸酯 (18 mg, 收率: 45%) 。ES-API:[M+H] += 337.2。
步驟十：向(S)-叔丁基2-(6-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸酯(18 mg, 0.054 mmol) 加入3-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二噁硼烷-2-基)-1H-吡咯[2,3-b]吡啶(21 mg, 0.081 mmol)，S-phosPdG2(4 mg, 0.0054 mmmol)，碳酸鉀(22 mg, 0.162 mmmol)，混合物在氮氣保護下加熱至110℃攪拌反應。LC-MS監測反應完全，乙酸乙酯/水處理，無水硫酸鈉乾燥，濃縮，柱層析(流動相0-10%甲醇/二氯甲烷，二氯甲烷/甲醇=10/1，Rf=0.4)純化得到 (S)-叔丁基2-(6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸鹽(8 mg, 收率: 35%) 黃色粉末。ES-API:[M+H] += 433.3。
步驟十一：向 (S)-叔丁基2-(6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸鹽(8 mg, 0.019 mmol) 的四氫呋喃(1 mL)溶液中加入三乙胺 (5.8 mg, 0.057 mmol)、四氫-2H-吡喃-4-碳醯氯(3.4 mg, 0.023 mmol)，在0℃下攪拌15分鐘。LC-MS監測反應完全，加水淬滅反應，二氯甲烷萃取，無水硫酸鈉乾燥，濃縮得到 (S)-叔丁基 2-(2-四氫-2H-吡喃-4-甲醯基-6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸鹽 (9 mg, 收率: 87%) 。ES-API:[M+H] += 545.4。
步驟十二：向(S)-叔丁基 2-(2-四氫-2H-吡喃-4-甲醯基-6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基) 吡咯烷-1-羧酸鹽(9 mg, 0.016 mmol) 加入鹽酸甲醇溶液，常溫攪拌1小時。LC-MS監測反應完全，用碳酸氫鈉溶液調pH至7，二氯甲烷/水處理，無水硫酸鈉乾燥，濃縮，製備HPLC(Ultimate XB-C18, 50*250mm, 10um，流動相體系：A：純化水(0.05%氨水)，B : 純乙腈，流速：80ml/min，梯度：在50分鐘內，B/A=20%-90%，波長：214nm，柱溫：室溫)純化得到 (S)-(6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-8-(吡咯烷-2-基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)(四氫-2H-吡喃-4-基)甲基酮(Z127, 1.5 mg, 收率: 21%) ，白色粉末。ES-API:[M+H] += 445.2。
實施例56 化合物Z128的合成
步驟一：向 (S)-叔丁基2-(6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸鹽 (40 mg, 92.47 μmol)的 N,N-二甲基乙醯胺(0.4 mL)溶液中加入2-氟吡啶(10.77 mg, 0.11 mmol)和碳酸銫(90.44 mg, 277.42μmol)，160℃下微波反應2小時。LC-MS監測反應完全，乙酸乙酯和水後處理，無水硫酸鈉乾燥，濃縮，柱層析(0-5%甲醇在二氯甲烷中，二氯甲烷/甲醇=10/1，Rf=0.7)純化得到叔丁基(S)-2-(6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-2-(吡啶-2-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡啶-1-羧酸鹽(28 mg, 收率: 59.41%)。ES-API:[M+H] += 510.3。
步驟二：向叔丁基(S)-2-(6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-2-(吡啶-2-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡啶-1-羧酸鹽(30 mg, 72.65μmol)加入鹽酸甲醇溶液，常溫攪拌1小時。LC-MS監測反應完全，碳酸氫鈉溶液調pH至7，用二氯甲烷/水處理，無水硫酸鈉乾燥，濃縮，製備HPLC(Ultimate XB-C18, 50*250mm, 10um，流動相體系：A：純化水(0.05%氨水)，B : 純乙腈，流速：80ml/min，梯度：在50分鐘內，B/A=20%-90%，波長：214nm，柱溫：室溫)純化得到(S)-6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-2-(吡啶-2-基)-8-(吡咯烷-2-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉(Z128, 3.5 mg, 收率: 12.44%)白色粉末。ES-API:[M+H] += 410.2。
實施例57 化合物Z130的合成
步驟一：向2-(6-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯 (80 mg, 237.49μmol) 二氯甲烷 (1 mL)溶液中加入苯基硼酸 (34.75 mg, 284.99μmol)，吡啶 (37.57 mg, 474.98μmol, 38.26μL)，醋酸銅 (64.70 mg, 356.24μmol)，混合物在 25℃下攪拌 16小時。LC-MS監測反應完全，二氯甲烷和水後處理，無水硫酸鈉乾燥，濃縮，柱層析(0-5%，甲醇在二氯甲烷中)純化得到(S)-2-(6-氯-2-苯基-3,4-二氫-1H-異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(30 mg, 收率: 30.59%)。ES-API:[M+H] += 413.2。
步驟二：向(S)-2-(6-氯-2-苯基-3,4-二氫-1H-異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯 (30 mg, 72.65μmol)的二噁烷 (0.5 mL)溶液中加入3-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼烷-2-基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(28.13 mg, 108.97μmol)，氯(2-二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯)[2-(2'-氨基-1,1'-聯苯)]鈀(II) (5.24 mg, 7.26μmol)，碳酸鉀( 30.12 mg, 217.94μmol)，混合物在110℃下攪拌2小時。LC-MS監測反應完全，用二氯甲烷/水處理，無水硫酸鈉乾燥、濃縮、柱層析(0-10%=甲醇/二氯甲烷)純化得到叔丁基(S)-2-(6-3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基-2-苯基-3,4-二氫-1H-異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸鹽 (20 mg, 收率: 54.02%)。ES-API:[M+H]+= 442.4。
步驟三：向叔丁基(S)-2-(6-3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基-2-苯基-3,4-二氫-1H-異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸鹽 (20 mg, 39.24μmol)中加入鹽酸甲醇溶液，常溫攪拌1小時。LC-MS監測反應完全，用碳酸氫鈉溶液調pH至7，用二氯甲烷/水處理，無水硫酸鈉乾燥，濃縮，製備HPLC(色譜柱信息：Ultimate XB-C18, 50*250mm, 10um，流動相體系：A：純化水(0.05%氨水)，B : 純乙腈，流速：80ml/min，梯度：在50分鐘內，B/A=20%-90%，波長：214nm，柱溫：室溫)純化得到 (S)-6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-2-苯基-8-(吡咯烷-2-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉(Z130, 2.4 mg, 收率: 15%)，白色粉末。ES-API:[M+H] += 442.4。
實施例58 化合物Z210的合成
步驟一：向(S)-叔丁基2-(6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸鹽(30 mg, 69.36 μmol) 的二氯甲烷(1 ml)溶液中加入三乙胺 (21.01 mg, 208.07μmol)、煙醯氯(11.78 mg, 83.23μmol)，在0℃下攪拌15分鐘。LC-MS監測反應完全，加水淬滅反應，二氯甲烷萃取，無水硫酸鈉乾燥，濃縮，得到 (S)-叔丁基 2-(2-煙醯基-6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸鹽 (35 mg, 收率: 93.86%) 。ES-API:[M+H] += 538.3。
步驟二：向(S)-叔丁基2-(2-煙醯基-6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸鹽 (35 mg, 65.10 μmol,) 加入鹽酸甲醇溶液，常溫攪拌1小時。LC-MS監測反應完全，用碳酸氫鈉溶液調pH至7，二氯甲烷/水處理，無水硫酸鈉乾燥，濃縮，製備HPLC(色譜柱信息：Ultimate XB-C18,50*250mm,10um，流動相體系：A：純化水(0.05%氨水)，B : 純乙腈，流速：80ml/min，梯度：在50分鐘內，B/A=20%-90%，波長：214nm，柱溫：室溫)純化得到(S)-1-(6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b] 吡啶-5-基)-8-(吡咯烷-2-基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)(吡啶-3-基)甲酮(Z210, 1.2 mg, 收率: 4.2%) ，白色粉末。ES-API:[M+H] +=438.2。
實施例59 化合物Z211的合成
步驟一：向(S)-叔丁基2-(6-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸酯(250 mg, 0.742 mmol)中 加入3-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二噁硼烷-2-基)-1H-吡咯[2,3-b]吡啶(230 mg，0.891 mmol)，S-phosPdG2( 53 mg, 0.0742 mmmol)，碳酸鉀(307mg, 2.23 mmmol)，在氮氣保護下，將混合物加熱至110℃攪拌反應。LC-MS監測反應完全，用乙酸乙酯/水處理，無水硫酸鈉乾燥，濃縮，柱層析(0-10%甲醇/二氯甲烷，二氯甲烷/甲醇=10/1，Rf=0.4流動相)純化得到(S)-叔丁基2-(6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸鹽(220 mg, 收率: 68%) ，黃色粉末。ES-API:[M+H] += 433.3。
步驟二：向(S)-叔丁基2-(6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸鹽(30 mg, 0.069 mmol) 的N,N-二甲基甲醯胺(1 mL)溶液中加入吡啶甲酸(10.2 mg, 0.083 mmol)，三乙胺(21 mg, 0.208 mmol)、N,N,N′,N′-四甲基-O-(7-氮雜苯并三唑-1-基)六氟磷酸脲(39.2 mg, 0.104 mmol)，在25℃下攪拌2小時。LC-MS監測反應完全，加水淬滅反應，乙酸乙酯萃取，飽和食鹽水洗，無水硫酸鈉乾燥，濃縮，柱層析(0-6%甲醇/二氯甲烷，二氯甲烷/甲醇=10/1，Rf=0.6)純化得到(S)-叔丁基2-(6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-2-吡啶甲基-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯 (24 mg, 收率: 64 %) 。ES-API:[M+H] += 538.3。
步驟三：向(S)-叔丁基2-(6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-2-吡啶甲基-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯 (24 mg, 0.045 mmol) 加入鹽酸甲醇溶液，常溫攪拌1小時。LC-MS監測反應完全，碳酸氫鈉溶液調pH至7，用二氯甲烷/水處理，無水硫酸鈉乾燥，濃縮，製備HPLC(Ultimate XB-C18, 50*250mm, 10um，流動相體系：A：純化水(0.05%氨水)，B : 純乙腈，流速：80ml/min，梯度：在50分鐘內，B/A=20%-90%，波長：214nm，柱溫：室溫)純化得到 (S)-(6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-8-(吡咯烷-2-基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)(吡啶-2-基)甲酮(Z211, 5.9 mg, 收率: 30%) ，白色粉末。ES-API:[M+H] += 438.2。
實施例60 化合物Z212的合成
步驟一：向5-溴-3-碘-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶(600 mg, 1.86 mmol)的二氧六環/水(5mL/1 mL)溶液中加入(6-甲基吡啶-3-基)硼酸(305 mg, 2.23 mmol)、1,1'-二(二苯膦基)二茂鐵二氯化鈀(II) (136 mg, 0.186mmol)，碳酸鉀(513 mg, 3.72mmol)，在80℃下攪拌過夜。LC-MS監測反應完全，加水淬滅反應，二氯甲烷萃取，無水硫酸鈉乾燥，濃縮，柱層析(0-10%，甲醇/二氯甲烷，二氯甲烷/甲醇=10/1，Rf=0.5)純化得到5-溴-3-(6-甲基吡啶-3-基)-1H-吡咯并[2,3- b]吡啶(24 mg, 收率: 4.5%)。ES-API:[M+H] += 288.0。
步驟二：向5-溴-3-(6-甲基吡啶-3-基)-1H-吡咯并[2,3- b]吡啶(35 mg, 0.087 mmol)的二氧六環/水(1 mL/0.2 mL)溶液中加入(S)-2-(6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼戊環-2-基)異色滿-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(37 mg, 0.087 mmol)，氯(2-二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II) (6 mg, 0.0087 mmol)，碳酸鉀(24 mg, 0.173mmol)，在100℃下微波反應2小時。LC-MS監測反應完全，加水淬滅反應，二氯甲烷萃取，無水硫酸鈉乾燥，濃縮，柱層析(0-10%，甲醇/二氯甲烷)純化得到(S)-2-(6-(3-(6-甲基吡啶-3-基)-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶-5-基)異色滿-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(8 mg, 收率: 18 %)。ES-API:[M+H] +=511.3。
步驟三：向(S)-2-(6-(3-(6-甲基吡啶-3-基)-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶-5-基)異色滿-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(8 mg, 0.016 mmol)中加入三氟乙酸(0.2 mL)的二氯甲烷(0.4 mL)溶液，常溫攪拌1小時。LC-MS監測反應完全，用碳酸氫鈉溶液調pH至7，用二氯甲烷/水處理，無水硫酸鈉乾燥，濃縮，製備HPLC純化(Ultimate XB-C18, 50*250mm, 10um，流動相體系：A：純化水(0.05%氨水)，B : 純乙腈，流速：80 mL/min，梯度：在50分鐘內，B/A=20%-90%，波長：214nm，柱溫：室溫)得到(S)-3-(6-甲基吡啶-3-基)-5-(8-(吡咯烷-2-基)異色滿-6-基)-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶(Z212, 0.7 mg, 收率: 11%)。ES-API:[M+H] +=411.2。
實施例61 化合物Z213的合成
步驟一：向 (S)-叔丁基2-(6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸鹽(30 mg, 0.069 mmol) 的N,N-二甲基甲醯胺(1 mL)溶液中加入2-甲基異煙酸(9.5 mg, 0.069 mmol)，三乙胺 (21 mg, 0.208 mmol)、N,N,N′,N′-四甲基-O-(7-氮雜苯并三唑-1-基)六氟磷酸脲(39.2 mg, 0.104 mmol)，在25°C下攪拌2小時。LC-MS監測反應完全，加水淬滅反應，乙酸乙酯萃取，飽和食鹽水洗，無水硫酸鈉乾燥，濃縮，柱層析(0-6%甲醇/二氯甲烷，二氯甲烷/甲醇=10/1，Rf=0.6)純化得到 (S)-叔丁基2-(6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-2-(2-甲基異煙醯基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸酯 (30 mg, 收率: 78 %) 。ES-API:[M+H] += 552.4。
步驟二：向(S)-叔丁基2-(6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-2-(2-甲基異煙醯基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸酯 (30 mg, 0.054 mmol) 加入鹽酸/甲醇溶液，常溫攪拌1小時。LC-MS監測反應完全，用碳酸氫鈉溶液調pH至7，用二氯甲烷/水處理，無水硫酸鈉乾燥，濃縮，製備HPLC(Ultimate XB-C18, 50*250mm, 10um，流動相體系：A：純化水(0.05%氨水)，B : 純乙腈，流速：80ml/min，梯度：在50分鐘內，B/A=20%-90%，波長：214nm，柱溫：室溫)純化得到(S)-(6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-8-(吡咯烷-2-基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)(2-甲基吡啶-4-基)甲酮 (Z213, 3.9 mg, 收率: 15%) ，白色粉末。ES-API:[M+H] += 452.3。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 8.63-8.50 (m, 2H), 7.99-7.79 (m, 2H), 7.20-6.96 (m, 4H), 4.97 (s, 1H), 4.82 (s, 1H), 4.63-4.29 (m, 1H), 3.85-3.66 (m, 1H), 3.58-3.44 (m, 2H), 3.40-3.25 (m, 1H), 3.06-2.70 (m, 1H), 2.61-2.57 (m, 3H), 2.50-2.33 (m, 1H), 2.28 (s, 3H), 2.24-1.90 (m, 4H)。
實施例62 化合物Z214的合成
步驟一：向(S)-叔丁基2-(6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸鹽(30 mg, 0.069 mmol) 的N,N-二甲基甲醯胺(1 mL)溶液中加入2,6-二甲基異煙酸(10.5 mg, 0.069 mmol)，三乙胺 (21 mg, 0.208 mmol)、N,N,N′,N′-四甲基-O-(7-氮雜苯并三唑-1-基)六氟磷酸脲(39.2 mg, 0.104 mmol)在25℃下攪拌2小時。LC-MS監測反應完全，加水淬滅反應，乙酸乙酯萃取，飽和食鹽水洗，無水硫酸鈉乾燥，濃縮，柱層析(0-6%甲醇/二氯甲烷，二氯甲烷/甲醇/10/1，Rf=0.6)純化得到(S)-叔丁基2-(6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-2-(2,6-二甲基異煙醯基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸酯 (31 mg, 收率: 79%) 。ES-API:[M+H] += 566.4。
步驟二：向(S)-叔丁基2-(6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-2-(2,6-二甲基異煙醯基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸酯(31 mg, 0.055 mmol) 加入鹽酸/甲醇溶液，常溫攪拌1小時。LC-MS監測反應完全，用碳酸氫鈉溶液調pH至7，用二氯甲烷/水處理，無水硫酸鈉乾燥，濃縮，製備HPLC(色譜柱信息：Ultimate XB-C18,50*250mm,10um，流動相體系：A：純化水(0.05%氨水)，B : 純乙腈，流速：80ml/min，梯度：在50分鐘內，B/A=20%-90%，波長：214nm，柱溫：室溫)純化得到(S)-(6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-8-(吡咯烷-2-基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)(2,6-二甲基吡啶-4-基)甲酮 (Z214, 5.61 mg, 收率: 22%) ，白色粉末。ES-API:[M+H] += 466.3。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 8.52 (d, J= 14.2 Hz, 1H), 7.92 (d, J= 8.4 Hz, 2H), 7.18-7.08 (m, 1H), 7.08-6.98 (m, 2H), 6.93 (s, 1H), 5.04-4.88 (m, 1H), 4.81-4.56 (m, 1H), 4.38-4.12 (m, 1H), 3.68-3.49 (m, 1H), 3.48-3.28 (m, 2H), 3.13-2.63 (m, 3H), 2.55 (s, 6H), 2.31 (s, 3H), 2.24-2.12 (m, 1H), 2.09-1.95 (m, 3H)。
實施例63 化合物Z215的合成
步驟一：向 (S)-叔丁基2-(6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸鹽(30 mg, 0.069 mmol) 的N,N-二甲基甲醯胺(1 mL)溶液中加入2-甲氧基異煙酸(10.6 mg, 0.069 mmol)，三乙胺 (21 mg, 0.208 mmol)、N,N,N′,N′-四甲基-O-(7-氮雜苯并三唑-1-基)六氟磷酸脲(39.2 mg, 0.104 mmol)，在25℃下攪拌2小時。LC-MS監測反應完全，加水淬滅反應，乙酸乙酯萃取，飽和食鹽水洗，無水硫酸鈉乾燥，濃縮，柱層析(0-6%甲醇/二氯甲烷，二氯甲烷/甲醇=10/1，Rf=0.6)純化得到(S)-叔丁基2-(6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-2-(2-甲氧基異煙醯基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸酯 (31 mg, 收率: 79%) 。ES-API:[M+H] += 568.4。
步驟二：向(S)-叔丁基2-(6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-2-(2-甲氧基異煙醯基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸酯 (31 mg, 0.055 mmol) 加入鹽酸甲醇溶液，常溫攪拌1小時。LC-MS監測反應完全，用碳酸氫鈉溶液調pH至7，用二氯甲烷/水處理，無水硫酸鈉乾燥，濃縮，製備HPLC(Ultimate XB-C18, 50*250mm, 10um，流動相體系：A：純化水(0.05%氨水)，B : 純乙腈，流速：80ml/min，梯度：在50分鐘內，B/A=20%-90%，波長：214nm，柱溫：室溫)純化得到(S)-(6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-8-(吡咯烷-2-基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)(2-甲氧基吡啶-4-基)甲酮 (Z215, 2.6 mg, 收率: 10%) 白色粉末。ES-API:[M+H] += 468.3。
實施例64 化合物Z216的合成
步驟一：向(S)-2-(6-(3-甲基-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(30 mg, 0.069 mmol)的N,N-二甲基甲醯胺(1 mL)溶液中加入2-羥基-2-甲基丙酸(7.2 mg, 0.069 mmol)，三乙胺(21 mg, 0.208 mmol)，2-(7-偶氮苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯(39.2 mg, 0.104 mmol)，室溫攪拌2小時。LC-MS監測反應完全，加水淬滅反應，乙酸乙酯萃取，飽和食鹽水洗，無水硫酸鈉乾燥，濃縮，柱層析(0-6%甲醇/二氯甲烷，二氯甲烷/甲醇=10/1，Rf=0.6)純化得到(S)-2-(2-(2-羥基-2-甲基丙醯基)-6-(3-甲基-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(30 mg, 收率: 83%)。ES-API:[M+H] += 519.4。
步驟二：向(S)-2-(2-(2-羥基-2-甲基丙醯基)-6-(3-甲基-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(30 mg, 0.058 mmol)加入4M鹽酸/甲醇溶液(1 mL)，常溫攪拌1小時。LC-MS監測反應完全，用碳酸氫鈉溶液調pH至7，用二氯甲烷/水處理，無水硫酸鈉乾燥，濃縮，製備HPLC(Ultimate XB-C18, 50*250mm, 10um，流動相體系：A：純化水(0.05%氨水)，B : 純乙腈，流速：80 mL/min，梯度：在50分鐘內，B/A=20%-90%，波長：214nm，柱溫：室溫)純化得到 (S)-2-羥基-2-甲基-1-(6-(3-甲基-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶-5-基)-8-(吡咯烷-2-基)-3,4-二氫異喹啉-2(1 H)-基)丙-1-酮(Z216, 3.1mg, 收率: 14 %)，白色粉末。ES-API:[M+H] +=419.3。
實施例65 化合物Z34-1的合成
步驟一：向(S)-2-(6-(3-甲基-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(30 mg, 0.069 mmol)的四氫呋喃(1 mL)溶液中加入氯甲酸甲酯(7.86 mg, 0.069 mmol)，三乙胺 (21 mg, 0.208 mmol)，室溫攪拌2小時。LC-MS監測反應完全，加水淬滅反應，乙酸乙酯萃取，飽和食鹽水洗，無水硫酸鈉乾燥，濃縮得到(S)-8-(1-(叔丁氧基羰基)吡咯烷-2-基)-6-(3-甲基-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶-5-基)-3,4-二氫異喹啉-2(1 H)-羧酸甲酯(30 mg, 收率: 88%)。ES-API:[M+H] += 491.3。
步驟二：向(S)-8-(1-(叔丁氧基羰基)吡咯烷-2-基)-6-(3-甲基-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶-5-基)-3,4-二氫異喹啉-2(1 H)-羧酸甲酯(30 mg, 0.058 mmol)加入4M鹽酸/甲醇溶液(1 mL)，常溫攪拌1小時。LC-MS監測反應完全，用飽和碳酸氫鈉溶液調pH至7，用二氯甲烷/水處理，無水硫酸鈉乾燥，濃縮，製備HPLC(Ultimate XB-C18, 50*250mm, 10um，流動相體系：A：純化水(0.05%氨水)，B : 純乙腈，流速：80ml/min，梯度：在50分鐘內，B/A=20%-90%，波長：214nm，柱溫：室溫)純化得到(S)-(6-(3-甲基-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶-5-基)-8-(吡咯烷-2-基)-3,4-二氫異喹啉-2(1 H)羧酸甲酯(Z34-1, 4.9 mg, 收率: 22%)，白色粉末。ES-API:[M+H] += 391.2。
實施例66 化合物Z54-1的合成
步驟一：5-溴-3-碘-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶(1 g, 3.11 mmol)溶於四氫呋喃(10 mL)中，加入氫化鈉(0.25 g, 6.22 mmol)，室溫攪拌0.5小時，分批加入對甲苯磺醯氯(0.62 g, 3.26mmol)，室溫反應2小時。用水淬滅反應，乙酸乙酯萃取，有機相食鹽水洗滌，無水硫酸鈉乾燥，旋乾，得到5-溴-3-碘-1-甲苯磺醯基-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶(1.4 g, 收率：94.6%)。ES-API:[M+H] += 476.9。
步驟二：5-溴-3-碘-1-甲苯磺醯基-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶(0.7 g, 1.47 mmol)溶於二氧六環/水(7.5/1.5 mL)，加入 N, N-二甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二噁硼烷-2-基)吡啶甲醯胺 (0.34 g, 1.77 mmol)，碳酸鉀(0.41 g, 2.94 mmol)，1,1’-二(二苯膦基)二茂鐵二氯化鈀(II) (0.107 g, 0.147 mmol)，氮氣保護下80℃下反應3小時。反應液冷卻，加水、乙酸乙酯萃取，有機相食鹽水洗滌，無水硫酸鈉乾燥，濃縮，柱層析(乙酸乙酯/石油醚=1/5，Rf=0.6)純化得到6-(5-溴-1-甲苯磺醯基-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶-3-基)- N, N-二甲基煙醯胺(0.53 g, 收率: 72%)。ES-API:[M+H] += 499.1。
步驟三：6-(5-溴-1-甲苯磺醯基-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶-3-基)- N, N-二甲基煙醯胺(0.53 g, 1.07 mmol)溶於二氧六環/水(7.5/1.5 mL)，加入(S)-(8-(1-(叔丁氧基羰基)吡咯烷-2-基)異色滿-6-基)硼酸(0.34 g, 1.07 mmol)，碳酸鉀(0.41 g, 2.94 mmol)，氯(2-二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II) (0.107 g, 0.147 mmol)，氮氣保護下，100℃下微波反應3小時。反應液冷卻，加水、乙酸乙酯萃取，有機相食鹽水洗滌，無水硫酸鈉乾燥，濃縮，柱層析(乙酸乙酯/石油醚=1/1，Rf=0.5)純化得到(S)-2-(6-(3-(5-(二甲基氨基甲醯基)吡啶-2-基)-1-甲苯磺醯基-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶-5-基)異色滿-8-基) 吡咯烷-1-羧酸叔丁酯 (366 mg, 收率: 50%)。ES-API:[M+H] += 722.40。
步驟四：(S)-2-(6-(3-(5-(二甲基氨基甲醯基)吡啶-2-基)-1-甲苯磺醯基-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶-5-基)異色滿-8-基) 吡咯烷-1-羧酸叔丁酯 (366 mg, 0.5 mmol)溶於甲醇/水(5/0.5 mL)中，加入氫氧化鈉(0.242 g, 6.1 mmol)，65℃下反應1小時。反應液濃縮，加水、二氯甲烷分液，有機相食鹽水洗滌，無水硫酸鈉乾燥，濃縮，製備HPLC(色譜柱信息：Ultimate XB-C18, 50*250mm, 10um，流動相體系：A：純化水 B : 純乙腈，流速：80ml/min，梯度：在50分鐘內，B/A=20%-90%，波長：214nm，柱溫：室溫)純化得到(S)-2-(6-(3-(6-(二甲基氨基甲醯基) 吡啶-3-基)-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶-5-基)異色滿-8-基) 吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(183.6 mg, 收率: 65%)。ES-API: ES-API:[M+H] += 568.40。
步驟五：(S)-2-(6-(3-(6-(二甲基氨基甲醯基)吡啶-3-基)-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶-5-基)異色滿-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(183.6 mg, 0.25 mmol)溶於二氯甲烷(5 mL)中，加入三氟乙酸(2 mL)，室溫反應2小時。反應液濃縮，加水、二氯甲烷萃取，有機相食鹽水洗滌，無水硫酸鈉乾燥，濃縮，製備HPLC(色譜柱信息：Ultimate XB-C18, 50*250mm, 10um，流動相體系：A：純化水(0.05%氨水)，B : 純乙腈，流速：80ml/min，梯度：在50分鐘內，B/A=20%-90%，波長：214nm，柱溫：室溫)純化得到(S)- N, N-二甲基-5-(5-(8-(吡咯烷-2-基) 異色滿-6-基)-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶-3-基)吡啶甲醯胺(Z54-1, 16 mg, 收率: 10.5%)。ES-API:[M+H] += 468.40。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 10.32 (s, 1H), 9.38 (s, 1H), 8.93 (s, 1H), 8.72 (s, 1H), 8.56 (s, 1H), 8.06 (dd, J= 8.0, 1.6 Hz, 1H), 7.84 (s, 1H), 7.78 (s, 1H), 7.67 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.53-7.28 (m, 1H), 7.16 (s, 1H), 4.92 (d, J= 15.2 Hz, 1H), 4.70 (d, J= 15.2 Hz, 1H), 4.50 (s, 1H), 3.83 (t, J= 5.6 Hz, 2H), 3.71 (d, J = 10.7 Hz, 1H), 3.16 (s, 3H), 3.12 (s, 3H),, 2.89-2.76 (m, 1H), 2.73-2.61 (m, 1H), 2.45-2.28 (m, 2H), 2.25-2.06 (m, 2H). ES-API:[M+H] += 468.40。
實施例67 化合物Z217的合成
步驟一：向(S)-2-(6-(3-甲基-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(30 mg, 0.069 mmol)的四氫呋喃(1 mL)溶液中加入異氰酸乙酯(5 mg, 0.069 mmol)，三乙胺 (21 mg, 0.208 mmol)，室溫攪拌2小時。LC-MS監測反應完全，加水淬滅反應，乙酸乙酯萃取，飽和食鹽水洗，無水硫酸鈉乾燥，濃縮得到(S)-2-(2-(乙基氨基甲醯基)-6-(3-甲基-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(30 mg, 收率: 86%)。ES-API:[M+H] += 504.3。
步驟二：向(S)-2-(2-(乙基氨基甲醯基)-6-(3-甲基-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯 (30 mg, 0.059 mmol)加入4M鹽酸/甲醇溶液(1 mL)，常溫攪拌1小時。LC-MS監測反應完全，用碳酸氫鈉溶液調pH至7，用二氯甲烷/水處理，無水硫酸鈉乾燥，濃縮，製備HPLC(Ultimate XB-C18, 50*250mm, 10um，流動相體系：A：純化水(0.05%氨水)，B : 純乙腈，流速：80ml/min，梯度：在50分鐘內，B/A=20%-90%，波長：214nm，柱溫：室溫)純化得到(S)- N-乙基-6-(3-甲基-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶-5-基)-8-(吡咯烷-2-基)-3,4-二氫異喹啉-2(1 H)-甲醯胺 (Z217, 4.9 mg, 收率: 20%)，白色粉末。ES-API:[M+H] + = 404.2。
實施例68 化合物Z37-1的合成
步驟一：冰浴條件下，向(S)-2-(6-氯異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(800 mg, 2.4 mmol)的醋酸(30 mL)溶液中加入硼氫化鈉 (360 mg, 9.6 mmol)，攪拌2小時。LC-MS監測反應完全，加碳酸氫鈉淬滅反應，二氯甲烷萃取，無水硫酸鈉乾燥，濃縮，柱層析(0-10%甲醇/二氯甲烷，二氯甲烷/甲醇=10/1，Rf=0.4)純化得到 (S)-2-(6-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯 (900 mg, 粗品)。ES-API:[M+H] += 337.2。
步驟二：冰浴條件下，向(S)-2-(6-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(100 mg, 0.297 mmol)的二氯甲烷(1 mL)溶液中加入三乙胺(90 mg, 0.89 mmol)，甲基磺醯氯(40 mg, 0.356mmol，攪拌15分鐘。LC-MS監測反應完全，加水淬滅反應，二氯甲烷萃取，無水硫酸鈉乾燥，濃縮得到(S)-2-(6-氯-2-(甲基磺醯基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(100 mg, 收率: 81%)。ES-API:[M+Na] += 437.2。
步驟三：在氮氣保護下，向(S)-2-(6-氯-2-(甲基磺醯基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(100 mg, 0.24 mmol)中加入3-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二噁硼烷-2-基)-1 H-吡咯[2,3- b]吡啶(74.65 mg, 0.289mmol)，氯(2-二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2-基)鈀 (17.34 mg, 0.024 mmmol)，碳酸鉀(99.77 mg, 0.723 mmmol)，混合物在110℃下攪拌3小時。LC-MS監測反應完全，用乙酸乙酯/水處理，無水硫酸鈉乾燥，濃縮，柱層析(0-6%甲醇/二氯甲烷，二氯甲烷/甲醇=10/1，Rf=0.6)純化得到(S)-2-(6-(3-甲基-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶-5-基)-2-(甲基磺醯基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(80 mg, 收率: 65%)，黃色粉末。ES-API:[M+H-100] += 411.3。
步驟四：向(S)-2-(6-(3-甲基-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶-5-基)-2-(甲基磺醯基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(80 mg, 0.157 mmol)中加入4M鹽酸/甲醇溶液(1 mL)，常溫攪拌1小時。LC-MS監測反應完全，用飽和碳酸氫鈉溶液調pH至7，用二氯甲烷/水處理，無水硫酸鈉乾燥，濃縮，製備HPLC(Ultimate XB-C18, 50*250mm, 10um，流動相體系：A：純化水(0.05%氨水)，B : 純乙腈，流速：80ml/min，梯度：在50分鐘內，B/A=20%-90%，波長：214nm，柱溫：室溫)純化得到(S)-6-(3-甲基-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶-5-基)-2-(甲基磺醯基)-8-(吡咯烷-2-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉(Z37-1, 23.6 mg, 收率: 37%)，白色粉末。ES-API:[M+H] += 411.2。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 8.46 (s, 1H), 7.99 (s, 1H), 7.71 (s, 1H), 7.27-7.25 (m, 1H), 7.09 (s, 1H),4.64 (d, J= 16.4 Hz, 1H), 4.51 (d, J= 15.6 Hz, 1H), 4.28 (t, J= 8.0 Hz, 1H), 3.64-3.55 (m, 1H), 3.54-3.44 (m, 1H),3.33-3.23 (m, 1H), 3.14-3.01 (m, 3H), 2.89 (s, 3H), 2.34 (s, 3H), 2.33-2.16 (m, 1H), 2.05-1.94 (m, 1H), 1.94-1.67 (m, 2H)。
實施例69 化合物Z218的合成
步驟一：向(S)-2-(6-(3-甲基-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(20 mg, 0.046 mmol)的二氯甲烷(0.6 mL)溶液中加入2-(四氫-2 H-吡喃-4-基)乙酸(8 mg, 0.055 mmol)，三乙胺 (21 mg, 0.208 mmol)，1-丙基磷酸酐(44 mg, 0.14 mmol)，室溫攪拌2小時。LC-MS監測反應完全，加水淬滅反應，乙酸乙酯萃取，飽和食鹽水洗，無水硫酸鈉乾燥，濃縮，柱層析(0-6%甲醇/二氯甲烷，二氯甲烷/甲醇=10/1，Rf=0.6)純化得到(S)-2-(6-(3-甲基-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶-5-基)-2-(2-(四氫-2 H-吡喃-4-基)乙醯基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(20mg, 收率: 77%)。ES-API:[M+H] += 559.3。
步驟二：向(S)-2-(6-(3-甲基-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶-5-基)-2-(2-(四氫-2 H-吡喃-4-基)乙醯基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯 (30 mg, 0.055 mmol)加入4M鹽酸/甲醇溶液(1 mL)，常溫攪拌1小時。LC-MS監測反應完全，用飽和碳酸氫鈉水溶液調pH至7，用二氯甲烷/水處理，無水硫酸鈉乾燥，濃縮，製備HPLC(Ultimate XB-C18, 50*250mm, 10um，流動相體系：A：純化水(0.05%氨水)，B : 純乙腈，流速：80ml/min，梯度：在50分鐘內，B/A=20%-90%，波長：214nm，柱溫：室溫)得到(S)-1-(6-(3-甲基-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶-5-基)-8-(吡咯烷-2-基)-3,4-二氫異喹啉-2(1 H)-基)-2-(四氫-2H-吡喃-4-基)乙酮(Z218, 3.5mg, 收率: 14 %)，白色粉末。ES-API:[M+H] +=459.2。
實施例70 化合物Z219的合成
步驟一：向(S)-2-(6-(3-甲基-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(30 mg, 0.069 mmol)的二氯甲烷(0.6 mL)溶液中加入四氫呋喃-3-羧酸 (8 mg, 0.069 mmol)，三乙胺 (21 mg, 0.208 mmol)，1-丙基磷酸酐(66 mg, 0.21 mmol)，室溫攪拌2小時。LC-MS監測反應完全，加水淬滅反應，乙酸乙酯萃取，飽和食鹽水洗，無水硫酸鈉乾燥，濃縮，柱層析(0-6%甲醇/二氯甲烷，二氯甲烷/甲醇=10/1，Rf=0.6)純化得到(2S)-2-(6-(3-甲基-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶-5-基)-2-(四氫呋喃-3-羰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(30 mg, 收率: 81%)。ES-API:[M+H] += 531.3。
步驟二：向(2S)-2-(6-(3-甲基-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶-5-基)-2-(四氫呋喃-3-羰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯 (30 mg, 0.056 mmol)加入4M鹽酸/甲醇溶液(1 mL)，常溫攪拌1小時。LC-MS監測反應完全，用飽和碳酸氫鈉溶液調pH至7，用二氯甲烷/水處理，無水硫酸鈉乾燥，濃縮，製備HPLC (Ultimate XB-C18, 50*250mm, 10um，流動相體系：A：純化水(0.05%氨水)，B : 純乙腈，流速：80ml/min，梯度：在50分鐘內，B/A=20%-90%，波長：214nm，柱溫：室溫)得到(6-(3-甲基-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶-5-基)-8-(S)-吡咯烷-2-基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)(四氫呋喃-3-基)甲酮 (Z219, 9.1mg, 收率: 37 %)白色粉末。ES-API:[M+H] +=431.2。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 8.60-8.50 (m, 1H), 7.99-7.88 (m, 1H), 7.87-7.74 (m, 1H), 7.12-7.03 (m, 1H),7.02-6.86 (m, 1H), 4.92-4.80 (m, 1H), 4.76-4.60 (m, 3H), 4.15-3.93 (m, 1H), 3.92-3.79 (m, 3H),3.77-3.53 (m, 3H), 3.39-3.29 (m, 1H), 2.86-2.67 (m, 2H), 2.42-2.30 (m, 1H), 2.29-2.24 (m, 3H),2.23-2.17 (m, 2H), 2.15-2.10 (m, 1H), 2.07-1.85 (m, 2H)。
實施例71 化合物Z220的合成
步驟一：向(S)-2-(6-(3-甲基-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(30 mg, 0.069 mmol)的二氯甲烷(0.6 mL)溶液中加入2-環丙氧基乙酸 (8 mg, 0.069 mmol)，三乙胺 (21 mg, 0.208 mmol)，1-丙基磷酸酐 (66 mg, 0.21 mmol)，室溫攪拌2小時。LC-MS監測反應完全，加水淬滅反應，乙酸乙酯萃取，飽和食鹽水洗，無水硫酸鈉乾燥，濃縮，柱層析(0-6%甲醇/二氯甲烷，二氯甲烷/甲醇=10/1，Rf=0.6)純化得到 (S)-2-(2-(2-環丙氧基乙醯基)-6-(3-甲基-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(15 mg, 收率: 41%)。ES-API:[M+H] += 539.3。
步驟二：向(S)-2-(2-(2-環丙氧基乙醯基)-6-(3-甲基-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(15 mg, 0.028 mmol)加入4M鹽酸/甲醇溶液(1 mL)，常溫攪拌1小時。LC-MS監測反應完全，用飽和碳酸氫鈉溶液調pH至7，用二氯甲烷/水處理，無水硫酸鈉乾燥，濃縮，製備HPLC(Ultimate XB-C18, 50*250mm, 10um，流動相體系：A：純化水(0.05%氨水)，B : 純乙腈，流速：80ml/min，梯度：在50分鐘內，B/A=20%-90%，波長：214nm，柱溫：室溫)純化得到(S)-2-環丙基-1-(6-(3-甲基-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶-5-基)-8-(吡咯烷-2-基)-3,4-二氫異喹啉-2(1 H)-基)乙酮 (Z220, 2.8 mg, 收率: 23%)，白色粉末。ES-API:[M+H] +=439.2。
實施例72 化合物Z221的合成
步驟一：向 (S)-2-(6-(3-甲基-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(30 mg, 0.069 mmol)的二氯甲烷(0.6 mL)溶液中加入嘧啶-4-羧酸 (10.33 mg, 0.083 mmol)，三乙胺 (21 mg, 0.208 mmol)，1-丙基磷酸酐(66 mg, 0.21 mmol)，室溫攪拌2小時。LC-MS監測反應完全，加水淬滅反應，乙酸乙酯萃取，飽和食鹽水洗，無水硫酸鈉乾燥，濃縮，柱層析(0-6%甲醇/二氯甲烷，二氯甲烷/甲醇=10/1，Rf=0.6)純化得到(S)-2-(6-(3-甲基-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶-5-基)-2-(嘧啶-4-羰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(30 mg, 收率: 80%)。ES-API:[M+H] += 539.4。
步驟二：向(S)-2-(6-(3-甲基-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶-5-基)-2-(嘧啶-4-羰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(30 mg, 0.056 mmol)中加入4 M的鹽酸/甲醇溶液(1 mL)，常溫攪拌1小時。LC-MS監測反應完全，用飽和碳酸氫鈉溶液調pH至7，用二氯甲烷/水處理，無水硫酸鈉乾燥，濃縮，製備HPLC(Ultimate XB-C18, 50*250mm, 10um，流動相體系：A：純化水(0.05%氨水)，B : 純乙腈，流速：80ml/min，梯度：在50分鐘內，B/A=20%-90%，波長：214nm，柱溫：室溫)純化得到(S)-(6-(3-甲基-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶-5-基)-8-(吡咯烷-2-基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)(嘧啶-4-基)甲酮(Z221, 5.2 mg, 收率: 21%)，白色粉末。ES-API:[M+H] +=439.3。
實施例73 化合物Z222的合成
步驟一：向 (S)-2-(6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(30 mg, 0.069 mmol) 的二氯甲烷(0.6 mL)溶液中加入嘧啶-5-羧酸 (10.33 mg, 0.083 mmol)，三乙胺 (21 mg, 0.208 mmol)，1-丙基磷酸酐(66 mg, 0.21 mmol)，室溫攪拌2小時。LC-MS監測反應完全，加水淬滅反應，乙酸乙酯萃取，飽和食鹽水洗，無水硫酸鈉乾燥，濃縮，柱層析(0-6%甲醇/二氯甲烷，二氯甲烷/甲醇=10/1，Rf=0.6)純化得到(S)-2-(6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-2-(嘧啶-5-羰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(30 mg, 收率: 80%) 。ES-API:[M+H] += 539.4。
步驟二：向(S)-2-(6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-2-(嘧啶-5-羰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(30 mg, 0.056 mmol) 加入4 M的鹽酸/甲醇溶液，常溫攪拌1小時。LC-MS監測反應完全，用飽和碳酸氫鈉溶液調pH至7，用二氯甲烷/水處理，無水硫酸鈉乾燥，濃縮，製備HPLC純化(Ultimate XB-C18, 50*250mm, 10um，流動相體系：A：純化水(0.05%氨水)，B : 純乙腈，流速：80ml/min，梯度：在50分鐘內，B/A=20%-90%，波長：214nm，柱溫：室溫)得到(S)-(6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-8-(吡咯烷-2-基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)(嘧啶-5-基)甲酮(Z222, 4.7 mg, 收率: 19%)，白色粉末。ES-API:[M+H] +=439.3。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 9.28 (s, 1H), 8.94-8.84 (m, 1H), 8.80 (s, 1H), 8.54 (s, 1H),8.00-7.80 (m, 2H), 7.10-6.95 (m, 2H), 4.97 (d, J= 8.4 Hz, 2H), 4.80-4.68 (m, 1H),3.80-3.66 (m, 1H), 3.63-3.34 (m, 3H), 2.91-2.75 (m, 1H), 2.70-2.55 (m, 1H),2.29 (s, 3H), 2.25-2.15 (m, 1H), 2.15-1.80 (m, 3H)。
實施例74 化合物Z223的合成
步驟一：向 (S)-2-(6-(3-甲基-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(30 mg, 0.069 mmol)的二氯甲烷(0.6 mL)溶液中加入1-甲基-1 H-吡唑-3-羧酸 (10.5 mg, 0.083 mmol)，三乙胺 (21 mg, 0.208 mmol)，1-丙基磷酸酐(66 mg, 0.21 mmol)，室溫攪拌2小時。LC-MS監測反應完全，加水淬滅反應，乙酸乙酯萃取，飽和食鹽水洗，無水硫酸鈉乾燥，濃縮，柱層析(0-6%甲醇/二氯甲烷，二氯甲烷/甲醇=10/1，Rf=0.6)純化得到(S)-2-(2-(1-甲基-1 H-吡唑-3-羰基)-6-(3-甲基-1 H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(30 mg, 收率: 80%)。ES-API:[M+H] += 541.3
步驟二：向(S)-2-(2-(1-甲基-1 H-吡唑-3-羰基)-6-(3-甲基-1 H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯 (30 mg, 0.055 mmol)加入4M鹽酸/甲醇溶液(1 mL)，常溫攪拌1小時。LC-MS監測反應完全，用飽和碳酸氫鈉溶液調pH至7，用二氯甲烷/水處理，無水硫酸鈉乾燥，濃縮，製備HPLC(Ultimate XB-C18, 50*250mm, 10um，流動相體系：A：純化水(0.05%氨水)，B : 純乙腈，流速：80ml/min，梯度：在50分鐘內，B/A=20%-90%，波長：214nm，柱溫：室溫)純化得到(S)-(1-甲基-1 H-吡唑-3-基)(6-(3-甲基-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶-5-基)-8-(吡咯烷-2-基)-3,4-二氫異喹啉-2(1 H)-基)甲酮(Z223, 5.7 mg, 收率: 23%)，白色粉末。ES-API:[M+H] +=441.2。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 8.54 (s, 1H), 7.98-7.68 (m, 2H), 7.41-7.35 (m, 1H), 7.03-6.82 (m, 2H), 6.79-6.65 (m, 1H), 5.27-4.96 (m, 1H), 4.92-4.67 (m, 2H), 4.12-3.74 (m, 5H), 3.69-3.36 (m, 2H), 2.95-2.59 (m, 2H), 2.26 (s, 3H), 2.22-1.80 (m, 4H)。
實施例75 化合物Z224的合成
步驟一：向 (S)-2-(6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(30 mg, 0.069 mmol) 的二氯甲烷(0.6 mL)溶液中加入1-甲基-1H-吡唑-4-羧酸 (10.5 mg, 0.083 mmol)，三乙胺 (21 mg, 0.208 mmol)、1-丙基磷酸酐(66 mg, 0.21 mmol)，室溫攪拌2小時。LC-MS監測反應完全，加水淬滅反應，乙酸乙酯萃取，飽和食鹽水洗，無水硫酸鈉乾燥，濃縮，柱層析(0-6%甲醇/二氯甲烷，二氯甲烷/甲醇=10/1，Rf=0.6)純化得到(S)-2-(2-(1-甲基-1H-吡唑-4-羰基)-6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(30 mg, 收率: 80%) 。ES-API:[M+H] += 541.3。
步驟二：向(S)-2-(2-(1-甲基-1H-吡唑-4-羰基)-6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯 (30 mg, 0.055 mmol,) 加入4M鹽酸/甲醇溶液(1 mL)，常溫攪拌1小時。LC-MS監測反應完全，用飽和碳酸氫鈉溶液調pH至7，用二氯甲烷/水處理，無水硫酸鈉乾燥，濃縮，製備HPLC純化(Ultimate XB-C18, 50*250mm, 10um，流動相體系：A：純化水(0.05%氨水)，B : 純乙腈，流速：80ml/min，梯度：在50分鐘內，B/A=20%-90%，波長：214nm，柱溫：室溫)純化得到(S)-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)(6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-8-(吡咯烷-2-基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)甲酮(Z224, 3.1 mg, 收率: 13%) ，白色粉末。ES-API:[M+H] +=441.2。
實施例76 化合物Z225的合成
步驟一：將1-(5-溴-1H-吡咯并[2,3- b]吡啶-3-基)- N, N-二甲基-甲胺(0.2 g, 0.79 mmol)溶於四氫呋喃(1 mL)中，冰浴冷卻，滴加碘甲烷(279 mg, 1.97 mmol)，室溫反應過夜。反應液旋乾得到(5-溴-3a,7a-二氫-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶-3-基)甲基-三甲基碘化銨(300 mg，粗品)。ES-API:[M+1] +=268.0。
步驟二：將(5-溴-3a,7a-二氫-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶-3-基)甲基-三甲基碘化銨(300 mg,0.75 mmol)溶於四氫呋喃(5 mL)中，加入四丁基氟化銨(394 mg, 1.51 mmol)和三甲基氰矽烷(187 mg，1.88 mmol)，室溫反應4小時。用水淬滅反應，乙酸乙酯萃取，有機相無水硫酸鈉乾燥，旋乾，柱層析(二氯甲烷/甲醇=10/1，Rf=0.5)純化得到2-(5-溴-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-基)乙腈(100 mg, 收率: 56%)。ES-API:[M+1] +=236.0。
步驟三：將2-(5-溴-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-基)乙腈(80 mg, 0.34 mmol)溶於二氧六環(2 mL)，再加入聯硼酸頻那醇酯(129 mg, 0.51 mmol)，[1,1'-雙(二苯基膦基)二茂鐵]二氯化鈀(25 mg, 0.034 mmol)和醋酸鉀(99 mg, 1.02 mmol)，加熱至100℃反應過夜。反應液用乙酸乙酯萃取，無水硫酸鈉乾燥，旋乾，得到[3-(氰甲基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基]硼酸，粗品，不經純化直接用於下一步反應。ES-API:[M+1] +=202.1。
步驟四：將2-(6-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(95 mg, 0.79 mmol)溶於二氯甲烷(3 mL)中，加入三乙胺(86 mg, 1.97 mmol)和2-甲氧基乙醯氯(31 mg，0.285mmol)，室溫反應2小時。用水淬滅反應，二氯甲烷萃取，無水硫酸鈉乾燥，旋乾得到2-[6-氯-2-(2-甲氧基乙醯基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-8-基]吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(100 mg，粗品)。ES-API:[M+1-100] +=309.2。
步驟五：將[3-(氰甲基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基]硼酸(粗品, 0.32 mmol)溶於二氧六環/水(1.5 mL/0.3 mL)中，再加入2-[6-氯-2-(2-甲氧基乙醯基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-8-基]吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(105 mg，0.26 mmol)，氯(2-二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II)(23 mg，0.032 mmol)和碳酸鉀(132 mg, 0.96 mmol)。加熱至100℃反應2小時。反應完成後，旋乾，製備薄層色譜柱(二氯甲烷/甲醇=10/1, Rf=0.7)純化得到2-[6-[3-(氰甲基)-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶-5-基]-2-(2-甲氧基乙醯基)-3,4-二氫-1 H-異喹啉-8-基]吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(33 mg，收率: 19%)。ES-API:[M+1-100] +=430.3。
步驟六：將2-[6-[3-(氰甲基)-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶-5-基]-2-(2-甲氧基乙醯基)-3,4-二氫-1 H-異喹啉-8-基]吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(50 mg, 0.094 mmol)溶於二氯甲烷(1 mL)中，加入三氟乙酸(1 mL)。室溫反應1小時。反應完成後，旋乾，二氯甲烷和飽和碳酸氫鈉萃取，無水硫酸鈉乾燥，旋乾，製備薄層色譜柱純化(二氯甲烷/甲醇=10/1, Rf=0.4)得到 (S)-2-(5-(2-(2-甲氧基乙醯基)-8-(吡咯烷-2-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-6-基)-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶-3-基)乙腈(Z225, 5.1 mg，收率: 12.6%)。ES-API:[M+1] +=430.2。
實施例77 化合物Z286的合成
步驟一：向 (S)-叔丁基2-(6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸鹽(30 mg, 0.069 mmol) 的二氯甲烷(1 mL)溶液中加入1-異丙基-1H-吡唑-4-羧酸(12.83 mg, 0.083 mmol)，1-丙基磷酸酐 (66.16 mg, 0.21 mmol) ，三乙胺 (21.01 mg, 0.21 mmol) 。在25°C下攪拌2小時，LCMS監測反應完全，加水淬滅反應，乙酸乙酯萃取，飽和食鹽水洗，無水硫酸鈉乾燥，濃縮得到 (S)-叔丁基2-(2-(1-異丙基-1H-吡唑-4-羰基)-6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸酯(40 mg, 粗品) 。ES-API:[M+H] += 569.4。
步驟二：向(S)-叔丁基2-(2-(1-異丙基-1H-吡唑-4-羰基)-6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸酯(40 mg, 0.07 mmol) 的二氯甲烷(1 mL)加入三氟乙酸(0.5 mL)，常溫攪拌1小時，LCMS監測反應完全，用飽和碳酸氫鈉調pH至7，用二氯甲烷/水處理，無水硫酸鈉乾燥，濃縮，粗品製備純化(色譜柱：Ultimate XB-C18,50*250mm,10um；流動相：A：純化水(0.05%氨水) B : 純乙腈；流速：80ml/min；梯度：在50分鐘內，B/A=20%-90%；波長：214nm；柱溫：室溫)得到(S)-(1-異丙基-1H-吡唑-4-基)(6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-8-(吡咯烷-2-基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)甲酮(Z286, 1.8 mg, 收率:5.46%) ，白色粉末。ES-API:[M+H] +=469.3。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 9.69 (s, 1H), 8.45 (s, 1H), 7.99 (s, 1H), 7.89 (s, 1H), 7.74 (s, 2H), 7.28 (s, 1H), 7.09 (s, 1H), 5.08-4.76 (m, 2H), 4.60-4.25 (m, 2H), 4.08-3.69 (m, 2H), 3.37-3.28 (m, 1H), 3.17-3.08 (m, 1H), 3.07-2.88 (m, 3H), 2.33 (s, 3H), 2.05-1.88 (m, 2H), 1.81-1.67 (m, 1H), 1.52 (d, J= 3.3 Hz, 3H).
實施例78 化合物Z287、化合物Z288的合成
步驟一：冰浴下，煙醛(1 g, 9.34 mmol)，乙酸(10 mL)溶於三甲基氰矽烷(326 mg, 9.34 mmol)中，升溫至室溫反應16小時。加水淬滅反應，加入乙酸乙酯萃取，有機相食鹽水洗滌，無水硫酸鈉乾燥，濃縮後得到粗產品2-羥基-2-(吡啶-3-基)乙腈(1 g, 收率：80%)。ES-API: [M+H] += 135.1。
步驟二：2-羥基-2-(吡啶-3-基)乙腈(2 g, 14.91 mmol)溶於鹽酸甲醇溶液(20 mL)，室溫反應16小時。反應完成後，反應液加入碳酸氫鈉水溶液淬滅，調pH至7，乙酸乙酯萃取，有機相食鹽水洗滌，無水硫酸鈉乾燥，濃縮後，得到粗品經薄層析柱純化(二氯甲烷/甲醇=10/1)得產物2-羥基-2-(吡啶-3-基)乙酸甲酯(219 mg, 收率：8.79%)。ES-API: [M+H] += 168.1。
步驟三：2-羥基-2-(吡啶-3-基)乙酸甲酯(219 mg, 1.31 mmol)和氫氧化鋰(31.37 mg, 1.31 mmol)溶於水(0.5 mL)和四氫呋喃(0.5 mL)溶液，室溫攪拌1小時，然後旋乾得粗產物2-羥基-2-(3-吡啶基)乙酸(200 mg, 收率：100%)。ES-API: [M+H] += 154.1。
步驟四：2-羥基-2-(3-吡啶基)乙酸(12.74 mg, 0.083mmol)，(S)-2-[6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基]吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(30 mg, 0.069 mmol)，1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽(39.89 mg, 0.208 mmol)，1-羥基苯并三唑(28.11 mg, 0.208 mmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(0.5 mL)，室溫反應1小時。反應完成後水洗，乙酸乙酯萃取，無水硫酸鈉乾燥，濃縮得粗產品叔丁基(2S)-2-(2-(2-羥基-2-(吡啶-3-基)乙醯基)-6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸酯(39 mg, 收率：100%)。ES-API: [M+H] += 568.8。
步驟五：叔丁基(2S)-2-(2-(2-羥基-2-(吡啶-3-基)乙醯基)-6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸酯(39 mg, 0.068 mmol)溶於二氯甲烷(1 mL)和三氟乙酸(0.5 mL)，室溫反應1小時，濃縮後，加氨水鹼化處理，再濃縮。粗品藉由HPLC製備(色譜柱: Ultimate XB-C18, 19mm*150mm, 10um; 流動相：A：純化水(0.05%氨水) B : 純乙腈; 流速：5mL/min; 梯度：在9分鐘內，B/A=30%-40%; 波長：214nm; 柱溫：室溫)得兩個異構體化合物：一個異構體化合物結構任意指定為(R)-2-羥基-1-(6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-8-((S)-吡咯烷-2-基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)-2-(吡啶-3-基)乙烷-1-酮(Z287, 1 mg, 收率：3.2%, 保留時間1.296min)ES-API: [M+H] += 468.8；另一個異構體化合物結構任意指定為(S)-2-羥基-1-(6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-8-((S)-吡咯烷-2-基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)-2-(吡啶-3-基)乙烷-1-酮(Z288, 3.1 mg, 收率：9.8%, 保留時間1.307min)。ES-API: [M+H] += 468.8。
實施例79 化合物Z289的合成
步驟一：向 (S)-叔丁基2-(6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸鹽(30 mg, 0.069 mmol) 的N,N-二甲基甲醯胺(1 mL)溶液中加入(R)-2-羥基-2-苯乙酸(12.66 mg, 0.083 mmol)，1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽 (39.89 mg, 0.21 mmol) ，三乙胺(21.01mg, 0.21 mmol) ，1-羥基苯并三唑(14.06 mg, 0.11mmol) ，混合液在25°C下攪拌2小時，LCMS監測反應完全，加水淬滅反應，乙酸乙酯萃取，飽和食鹽水洗，無水硫酸鈉乾燥，濃縮得到 (S)-叔丁基2-(2-((R)-2-羥基-2-苯乙醯基)-6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸酯(30mg, 粗品) 。ES-API:[M+H] += 567.4。
步驟二：向(S)-叔丁基2-(2-((R)-2-羥基-2-苯乙醯基)-6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸酯(30 mg, 0.053mmol) 的二氯甲烷(1 mL)加入三氟乙酸(0.5 mL)，常溫攪拌1小時，LCMS檢測反應完全。用飽和碳酸氫鈉調pH至7，用二氯甲烷/水處理，無水硫酸鈉乾燥，濃縮，粗品製備純化(色譜柱: Ultimate XB-C18,50*250mm,10um; 流動相：A：純化水(0.05%氨水) B : 純乙腈；流速：80ml/min；梯度：在50分鐘內，B/A=20%-90%；波長：214nm；柱溫：室溫)得到(R)-2-羥基-1-(6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-8-((S)-吡咯烷-2-基)-3-,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)-2-苯乙酮(Z289, 2.2 mg, 收率: 8.9 %) 白色粉末。ES-API:[M+H] +=467.3。
實施例80 化合物Z290的合成
步驟一：向 (S)-叔丁基2-(6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸鹽(30 mg, 0.069 mmol) 的N,N-二甲基甲醯胺(1 mL)溶液中加入(S)-2-羥基-2-苯乙酸(12.66 mg, 0.083 mmol)，1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽 (39.89 mg, 0.21 mmol) ，三乙胺(21.01, 0.21 mmol) ，1-羥基苯并三唑 (14.06 mg, 0.11mmol) ，混合液在25°C下攪拌2小時，LCMS監測反應完全，加水淬滅反應，乙酸乙酯萃取，飽和食鹽水洗，無水硫酸鈉乾燥，濃縮得到產物(S)-叔丁基2-(2-((S)-2-羥基-2-苯乙醯基)-6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸酯(30 mg, 粗品) 。ES-API:[M+H] += 567.4。
步驟二：向(S)-叔丁基2-(2-((S)-2-羥基-2-苯乙醯基)-6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸酯(30 mg, 0.053mmol) 的二氯甲烷(1 mL)加入三氟乙酸(0.5 mL，常溫攪拌1小時，LCMS監測反應完全，用飽和碳酸氫鈉調pH至7，用二氯甲烷/水處理，無水硫酸鈉乾燥，濃縮，粗品經製備純化(色譜柱：Ultimate XB-C18,50*250mm,10um；流動相：A：純化水(0.05%氨水) B : 純乙腈；流速：80ml/min；梯度：在50分鐘內，B/A=20%-90%；波長：214nm；柱溫：室溫)得到(S)-2-羥基-1-(6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-8-((S)-吡咯烷-2-基)-3-,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)-2-苯乙酮(Z290, 3.3 mg, 收率:13.4%) 白色粉末.ES-API:[M+H] +=467.3。
實施例81 化合物Z291的合成
步驟一：氮氣保護下，(S)-2-(6-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(10 mg, 30 μmol)，4-碘吡啶(12 mg, 59 μmol)，氯(2-二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II) (3 mg, 4 μmol)，2-雙環己基膦-2',6'-二甲氧基聯苯(2 mg, 5 μmol)，碳酸銫(30 mg, 92 μmol)的甲苯(1 mL)混合物在100℃下攪拌3小時。反應結束後，濃縮，粗品用柱層析純化(0-100%乙酸乙酯/石油醚)得到(S)-2-(6-氯-2-(吡啶-4-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(5 mg, 收率: 40%)。ES-API: [M+H] += 414.2。
步驟二：氮氣保護下，將(S)-2-(6-氯-2-(吡啶-4-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(25 mg, 60 μmol)，3-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-二氧硼雜環戊烷-2-基)-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶(31 mg, 120 μmol)，氯(2-二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II) (5 mg, 7 μmol)，2-雙環己基膦-2',6'-二甲氧基聯苯(3 mg, 7 μmol)和碳酸鉀(25 mg, 181 μmol)的1,4-二氧六環(2 mL)和水(0.4 mL)的混合溶液在120℃攪拌2小時。反應液倒入乙酸乙酯(10 mL)，依次用飽和食鹽水(5 mL)和水(5 mL)洗滌。有機相用無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮，粗品柱層析(甲醇/二氯甲烷=0-10%)純化得到透明油狀液體(S)-2-(6-(3-甲基-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶-5-基)-2-(吡啶-4-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(25 mg, 收率: 81.7%)。ES-API: [M+H] += 510.2。
步驟三：冰浴條件下，將三氟乙酸(0.5 mL)滴加到(S)-2-(6-(3-甲基-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶-5-基)-2-(吡啶-4-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(30 mg, 59 μmol)的二氯甲烷(1 mL)溶液中，室溫攪拌1小時。濃縮，粗品用製備色譜柱(碳酸氫銨法)純化得到白色固體(S)-6-(3-甲基-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶-5-基)-2-(吡啶-4-基)-8-(吡咯烷-2-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉(Z291, 14.25 mg, 純度:100%, 收率: 59%)。ES-API: [M+H] += 410.2。 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 11.38 (s, 1H), 8.56 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 8.23-8.19 (m, 3H), 7.82 (s, 1H), 7.60 (s, 1H), 7.28 (s, 1H), 7.01 (d, J= 6.0 Hz, 2H), 4.81-4.75 (m, 1H), 4.71 (d, J= 16.5 Hz, 1H), 4.58 (d, J= 16.0 Hz, 1H), 3.75-3.69 (m, 1H), 3.67-3.60 (m, 1H), 3.43-3.36 (m, 1H), 3.31-3.22 (m, 1H), 3.07-3.00 (m, 2H), 2.44-2.35 (m, 1H), 2.32 (s, 3H), 2.18-1.92 (m, 3H).
實施例82 化合物Z292的合成
步驟一：將2-溴-4氯苯乙酸(26 g, 104.213 mmol) 和乙胺鹽酸鹽(10.1 g, 125.055 mmol)溶解在二氯甲烷(200mL)，冰水浴條件下，依次加入乙基二異丙基胺 (51.051 mL, 312.638 mmol)和1-丙基磷酸酐(97.699 mL, 156.319 mmol, 50% 乙酸乙酯溶液)。混合物在室溫下攪拌 1小時。混合物用水(100mL x 2)洗滌，濃縮，向殘餘物中加入乙酸乙酯，過濾。乾燥濾餅得到2-(2-溴-4-氯苯基)-N-乙基乙醯胺(18g, 65.085mmol, 收率: 62.45％)。ES-API: [M+H] +=275.9, 277.9。
步驟二：將2-(2-溴-4-氯苯基)-N-乙基乙醯胺 (12 g, 43.390mmol) 溶解在伊頓試劑 (100 mL) 溶液中，加入多聚甲醛 (6.51 g, 216.951 mmol)。混合物在100℃下攪拌3小時。冷卻，倒入冰水 (100 mL) 中，用乙酸乙酯(100 mL x 3) 萃取。合併乙酸乙酯層，用飽和氯化鈉溶液 (100 mL x 1) 洗滌，用 無水硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮。粗品用柱層析(石油醚/四氫呋喃=70/30) 純化得到 5-溴-7-氯-2-乙基-1,4-二氫異喹啉-3(2H)-酮 (14 g, 粗品)。ES-API: [M+H] +=287.9, 289.9。
步驟三：向5-溴-7-氯-2-乙基-1,4-二氫異喹啉-3(2H)-酮(14 g, 粗品) 的乙醇 (420 mL) 溶液中加入乙烯三氟硼酸鉀 (13.00 g, 97.030 mmol) 、三乙胺 (13.487 mL, 97.030 mmol) 和 1,1-雙(二苯基膦)二荗鐵二氯化鈀二氯甲烷複合物 (1.98 g, 2.426 mmol)。混合物用氮氣脫氣並在100℃下攪拌4小時。倒入水 (250 mL) 中，乙酸乙酯 (250 mL x 3) 萃取。合併乙酸乙酯層，用飽和氯化鈉溶液(200mL x 1)洗滌，用無水硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮。粗品經柱層析(石油醚/乙酸乙酯=40/60)純化得到7-氯-2-乙基-5-乙烯基-1,4-二氫異喹啉-3(2H)-酮 (5 g, 19.516 mmol, 收率: 44.97%)。ES-API: [M+H] +=236.0。
步驟四：冰水浴條件下，將7-氯-2-乙基-5-乙烯基-1,4-二氫異喹啉-3(2H)-酮 (5 g, 21.213 mmol) 溶解在四氫呋喃(120 mL) 溶液中，緩慢加入到高碘酸鈉 (27.22 g, 127.275 mmol) 和 鋨酸鉀二水合物 (0.23 g, 0.636 mmol) 的水溶液 (60 mL) 中。混合物在室溫下攪拌1小時。倒入乙酸乙酯(100mL)，過濾。濾液用無水無水硫酸乾燥，過濾並濃縮。粗品用柱層析(石油醚/乙酸乙酯=20/80) 純化得到 7-氯-2-乙基-3-氧代-1,2,3,4-四氫異喹啉-5-甲醛 (2.8 g, 11.780 mmol, 收率: 55.53%)。ES-API: [M+H] +=238.0。
步驟五：將7-氯-2-乙基-3-氧代-1,2,3,4-四氫異喹啉-5-甲醛(2.8 g, 11.780 mmol)和(S)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺(2.86 g, 23.560 mmol)溶解在乾燥的二氯甲烷(30mL)中。室溫加入鈦酸四乙酯 (10.75 g, 47.120 mmol)。室溫攪拌18 小時。倒入飽和食鹽水(50 mL) 中，用二氯甲烷 (100 mL x 3) 萃取。合併有機相，過濾，飽和食鹽水溶液 (100 mL x 1) 洗滌，用無水硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮。粗品經柱層析 (石油醚/四氫呋喃=30/70) 純化得到(S)-N-((7-氯-2-乙基-3-氧代-1,2,3,4-四氫異喹啉-5-基)亞甲基)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺(3.34 g, 9.798 mmol, 收率: 83.18%)。ES-API: [M+H] +=341.1。
步驟六：將(S)-N-((7-氯-2-乙基-3-氧代-1,2,3,4-四氫異喹啉-5-基)亞甲基)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺(3.34 g, 9.798 mmol)溶解在乾燥的四氫呋喃(30mL)中。乾冰浴-78℃條件下，緩慢加入(2-(1,3-二噁烷-2-基)乙基)溴化鎂 (78.4mL, 39.2 mmol)。室溫攪拌1 小時。加入飽和氯化銨水溶液(5mL)淬滅反應，用乙酸乙酯 (100 mL x 3) 萃取。合併有機相，飽和 食鹽水溶液 (100 mL x 1) 洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮。粗品經柱層析(石油醚/四氫呋喃=30/70) 純化得到(S)-N-(1-(7-氯-2-乙基-3-氧代-1,2,3,4-四氫異喹啉-5-基)-3-(1,3-二噁烷-2-基)丙基)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺(700mg, 1.56 mmol, 收率: 15.9%)。ES-API: [M+H] +=457.1。
步驟七：將(S)-N-(1-(7-氯-2-乙基-3-氧代-1,2,3,4-四氫異喹啉-5-基)-3-(1,3-二噁烷-2-基) 丙基)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺(0.70 g, 1.56 mmol)溶解在在三氟乙酸(5 mL)，加入水 (0.25 mL)。混合物在室溫下攪拌0.5 小時。然後加入三乙基矽氫(1.78 g, 15.316 mmol)。室溫下攪拌2小時。反應液直接濃縮得到(S)-7-氯-2-乙基-5-[吡咯-2-基]-1,4-二氫異喹啉-3(2H)-酮(700 mg, 粗品)。ES-API: [M+H] +=279.1。
步驟八：將(S)-7-氯-2-乙基-5-[吡咯-2-基]-1,4-二氫異喹啉-3(2H)-酮 (700 mg, 粗品)溶解在在二氯甲烷中(20 mL)，加入三乙胺(0.178 mL, 1.281 mmol) 和二碳酸二叔丁酯(0.147 mL, 0.640 mmol)。混合物在室溫下攪拌0.5 小時。反應液濃縮，粗品經柱層析(乙酸乙酯/石油醚=40/60)純化得到( S)-2-(7-氯-2-乙基-3-氧代-1,2,3,4-四氫異喹啉-5-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(110 mg, 0.226 mmol, 2步反應收率::14.48%)。ES-API: [M+H] +=379.1。
步驟九：將( S)-2-(7-氯-2-乙基-3-氧代-1,2,3,4-四氫異喹啉-5-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(110 mg, 0.290 mmol)、3-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(112.41 mg, 0.435 mmol)、氯(2-二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II) (20.90 mg, 0.029 mmol) 和碳酸鉀 (120.37 mg, 0.871 mmol) 加入到1,4,-二氧六環(20mL)和水(2mL)中，氮氣置換，油浴加熱120℃反應1小時，反應完畢，加入乙酸乙酯(100 mL)，依次用水(100mL)、飽和食鹽水(100mL)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，濃縮，粗品經柱層析(乙酸乙酯/石油醚=80/20)純化得到 (S)-2-(2-乙基-7-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-3-氧代-1,2,3,4-四氫異喹啉-5-基) 吡咯烷-1-羧酸叔丁酯 (40 mg, 0.064 mmol, 收率：22.06%)。ES-API: [M+H] +=475.2。
步驟十：將(S)-2-(2-乙基-7-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-3-氧代-1,2,3,4-四氫異喹啉-5-基) 吡咯烷-1-羧酸叔丁酯 (40 mg, 0.064 mmol)溶解到二氯甲烷(5mL)中，加入三氟乙酸(3 mL)中，室溫反應0.5小時。反應完畢，反應液濃縮，加入氨甲醇溶液(1mL)中和後，再次濃縮，粗品經製備HPLC(氨水法)純化得到(S)-2-乙基-7-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-5-(吡咯烷-2-基)-1,4-二氫異喹啉-3(2H)-酮(Z292, 12 mg, 收率：38.00%)。ES-API: [M+H] +=475.2。 1H NMR (500 MHz, DMSO- d 6) δ 11.37 (d, J= 2.4 Hz, 1H), 8.49 (d, J= 2.2 Hz, 1H), 8.14 (d, J= 2.2 Hz, 1H), 7.81 (d, J= 1.9 Hz, 1H), 7.55 (d, J= 1.9 Hz, 1H), 7.28-7.25 (m, 1H), 4.58 (d, J= 6.8 Hz, 2H), 4.34 (t, J= 7.8 Hz, 1H), 3.64-3.57 (m, 2H), 3.48 (q, J= 7.1 Hz, 3H), 3.20-3.13 (m, 1H), 3.05-2.98 (m, 1H), 2.32-2.31 (m, 3H), 2.23-2.19 (m, 1H), 1.87-1.81 (m, 2H), 1.59-1.52 (m, 1H), 1.13-1.10 (m, 3H).
實施例83 化合物Z293的合成
步驟一：將5-溴-7-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉(11.37 g, 46.120 mmol)溶解在四氫呋喃(100mL)和水(30mL)中，加入碳酸鉀 (19.12 g, 138.360 mmol) , 冷卻至 0℃，緩慢加入氯甲酸苄酯 (16.334 mL, 115.300 mmol). 室溫反應2小時。加入乙酸乙酯(100mL)，依次用水(50mL)和飽和食鹽水(50mL)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，濃縮，得到固體粗品，粗品用二氯甲烷(50mL)打漿處理，過濾，石油醚沖洗，乾燥濾餅得到產物5-溴-7-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-2-甲酸苄酯 (15 g,收率：83.73%)。ES-API: [M+H] +=380.1, 382.1。
步驟二：將5-溴-7-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-2-甲酸苄酯 (15 g, 38.616 mmol)、乙烯基三氟硼酸鉀 (10.56 g, 78.808 mmol)溶解在無水乙醇 (300 mL)中，加入三乙胺(5.477 mL, 39.404 mmol)和[1,1'-雙(二苯基膦)二茂鐵]二氯化鈀二氯甲烷絡合物 (1.61 g, 1.970 mmol)。氮氣保護，油浴加熱到90℃反應18小時，倒入冰水(100 mL)，乙酸乙酯(100 mL x 3)萃取，飽和食鹽水(50mLx1)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，濃縮，得到粗品經柱層析純化(石油醚/乙酸乙酯=80/20)得到7-氯-5-乙烯基-1,2,3,4-四氫異喹啉-2-甲酸苄酯 (12 g, 收率：92.90%)。ES-API: [M+H] +=328.1。
步驟三：將7-氯-5-乙烯基-1,2,3,4-四氫異喹啉-2-甲酸苄酯 (12 g, 36.607 mmol)溶於四氫呋喃(400mL)和水(200mL)，依次緩慢加入高碘酸鈉(46.98 g, 219.639 mmol)和鋨酸鉀二水合物 (0.30 g, 0.805 mmol)，室溫反應2小時。倒入乙酸乙酯(200 mL)，攪拌過濾，濾液依次用水(100mL)和飽和食鹽水(200mLx1)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，濃縮，得到粗品經矽膠柱層析純化(石油醚/乙酸乙酯=80/20)得到產物7-氯-5-醛基-1,2,3,4-四氫異喹啉-2-甲酸苄酯(9 g, 收率：74.55%)。ES-API: [M+H] +=330.1。
步驟四：將7-氯-5-醛基-1,2,3,4-四氫異喹啉-2-甲酸苄酯(9 g, 27.291 mmol)和(S)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺(8.27 g, 68.227 mmol)溶解在乾燥的二氯甲烷(180mL)中。室溫下加入鈦酸四乙酯 (24.90 g, 109.164 mmol)，室溫攪拌18小時。倒入鹽水(200mL) 中，用二氯甲烷 (100 mL x 3) 萃取。合併有機相，過濾，飽和氯化鈉水溶液 (200 mL x 1) 洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮。粗品用柱層析(石油醚/四氫呋喃=30/70) 純化得到(S)-5-(((叔丁基亞磺醯基)亞氨基)甲基)-7-氯-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-羧酸苄酯(10.5 g, 收率：88.83%)。ES-API: [M+H] +=433.1。
步驟五：將(S)-5-(((叔丁基亞磺醯基)亞氨基)甲基)-7-氯-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-羧酸苄酯(10 g, 23.096 mmol)溶解在乾燥的四氫呋喃(100mL)中。乾冰浴-78℃條件下，緩慢加入(2-(1,3-二噁烷-2-基)乙基)溴化鎂 (184.770 mL, 92.385 mmol, 0.5M 四氫呋喃溶液)。室溫攪拌0.5 小時。加入氯化銨水溶液(50mL)猝滅反應，用乙酸乙酯(100 mLx2)萃取，合併有機相，用飽和氯化鈉水溶液 (200mL x 1) 洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮。粗品經柱層析 (石油醚/四氫呋喃=30/70) 純化得到5-(1-(((S)-叔丁基亞磺醯基)氨基)-3-(1,3-二噁烷-2-基)丙基)-7-氯-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-羧酸苄酯(11.67 g, 收率：92%)。ES-API: [M+H] +=549.2。
步驟六：將5-(1-(((S)-叔丁基亞磺醯基)氨基)-3-(1,3-二噁烷-2-基)丙基)-7-氯-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-羧酸苄酯(11.67 g, 21.249 mmol)溶解在三氟乙酸(100mL)，加入水 (5 mL)。混合物在室溫下攪拌0.5 小時。加入三乙基矽氫(33.851 mL, 212.518 mmol)。在室溫下攪拌2小時。反應液濃縮得到 (S)-7-氯-5-(吡咯烷-2-基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-甲酸苄酯 (15 g, 粗品)。ES-API: [M+H] +=371.1。
步驟七：將(S)-7-氯-5-(吡咯烷-2-基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-甲酸苄酯 (15 g, 粗品)溶解在四氫呋喃中(150 mL)，並加入N,N-二異丙基乙胺(26.737 mL, 161.777 mmol) 和二碳酸二叔丁酯(11.150 mL, 48.533 mmol)。混合物在室溫下攪拌1小時。加入乙酸乙酯(100mL)，依次用水(100mLx1)和飽和食鹽水(100mLx1)洗滌，濃縮，粗品經矽膠柱層析(四氫呋喃/石油醚=40/60)純化得到(S)-5-(1-(叔丁氧羰基)吡咯烷-2-基)-7-氯-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-羧酸苄酯 (10 g, 2步反應收率: 65.62%)。ES-API: [M+H] +=471.2。
步驟八：將(S)-5-(1-(叔丁氧羰基)吡咯烷-2-基)-7-氯-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-羧酸苄酯(1.00 g, 2.123 mmol)、3-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(660 mg, 2.548 mmol)、氯(2-二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II) (0.08 g, 0.106 mmol) 和碳酸鉀(0.88 g, 6.369 mmol) 加入到1,4-二氧六環(20mL)和水(2mL)中，氮氣置換，油浴加熱120℃反應1小時。反應完畢，加入乙酸乙酯(100 mL)，依次用水(100mL)、飽和食鹽水(100mL)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，濃縮得到(S)-5-(1-(叔丁氧羰基)吡咯烷-2-基)-7-(3-甲基-1H-吡咯[2,3-b]吡啶-5-基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-羧酸苄酯 (1.8g, 粗品)。ES-API: [M+H] +=567.3。
步驟九：將(S)-5-(1-(叔丁氧羰基)吡咯烷-2-基)-7-(3-甲基-1H-吡咯[2,3-b]吡啶-5-基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-羧酸苄酯 (1.8g, 粗品)溶解在二氯甲烷(30 mL)溶液中，依次加入二碳酸二叔丁酯(0.471 mL, 2.049 mmol) 和4-二甲氨基吡啶(0.03 g, 0.273 mmol)。混合物在室溫下攪拌0.5 小時。反應液濃縮，粗品用柱層析(石油醚/乙酸乙酯=1/1)純化得到 (S)-7-(1-(叔丁氧基羰基)-3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-5-(1-(叔丁氧基羰基)吡咯烷-2-基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-羧酸苄酯(600 mg, 2步收率: 59.29%)。ES-API: [M+H] +=667.2。
步驟十：將(S)-7-(1-(叔丁氧基羰基)-3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-5-(1-(叔丁氧基羰基)吡咯烷-2-基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-羧酸苄酯(600 mg, 0.810 mmol)溶解在二氯甲烷(10mL)中，室溫依次加入氯化鈀 (159.56 mg, 0.900 mmol)、三乙胺 (0.250 mL, 1.800 mmol) 和 三乙基矽烷 (418.51 mg, 3.599 mmol)，反應0.5小時。加入二氯甲烷(20mL)，依次用水(10mL)、飽和食鹽水(10mL)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，濃縮得到 (S)-5-(5-(1-(叔丁氧基羰基)吡咯烷-2-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-7-基)-3-甲基-1H-吡咯[2,3-b]吡啶-1-羧酸叔丁酯 (500 mg, 粗品)。ES-API: [M+H] +=533.3。
步驟十一：將(S)-5-(5-(1-(叔丁氧基羰基)吡咯烷-2-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-7-基)-3-甲基-1H-吡咯[2,3-b]吡啶-1-羧酸叔丁酯 (100 mg, 0.188 mmol)溶解到二氯甲烷(5mL)中，加入( R)-四氫呋喃-3-羧酸(32.70 mg, 0.282 mmol)、三乙胺 (0.078 mL, 0.563 mmol) 和 2-(7-偶氮苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯 (142.76 mg, 0.375 mmol)，室溫反應0.5小時。反應完畢，加入二氯甲烷(20mL)，依次用水(10mL)、飽和食鹽水(10mL)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，濃縮，粗品經柱層析純化(乙酸乙酯/石油醚=30%~80%)得到5-(5-(( S)-1-(叔丁氧基羰基)吡咯烷-2-基)-2-(( R)-四氫呋喃-3-羰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉)-7-基)-3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-1-羧酸叔丁酯(45 mg, 收率：36.00%)。ES-API: [M+H] +=631.3。
步驟十二：將5-(5-(( S)-1-(叔丁氧基羰基)吡咯烷-2-基)-2-(( R)-四氫呋喃-3-羰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉)-7-基)-3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-1-羧酸叔丁酯(45 mg, 0.068 mmol)溶解到二氯甲烷(2mL)中，加入三氟乙酸(1 mL)中，室溫反應0.5小時。反應完畢，濃縮，加入氨甲醇溶液(1mL)中和後，再次濃縮，經製備HPLC(氨水法)純化得到(7-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-5-((S)-吡咯烷-2-基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)((R)-四氫呋喃-3-基)甲酮(Z293, 18 mg, 收率: 57.00%)。ES-API: [M+H] +=431.2。 1H NMR (500 MHz, DMSO- d 6) δ 11.34 (d, J= 6.5 Hz, 1H), 8.47 (t, J= 2.6 Hz, 1H), 8.11 (dd, J= 7.5, 2.2 Hz, 1H), 7.76 (dd, J= 12.1, 2.0 Hz, 1H), 7.44 (dd, J= 11.1, 1.9 Hz, 1H), 7.26 (d, J= 5.6 Hz, 1H), 4.91-4.61 (m, 3H), 4.24 (t, J= 7.7 Hz, 1H), 3.94 (t, J= 8.1 Hz, 1H), 3.83 (dt, J= 11.4, 5.7 Hz, 1H), 3.77-3.67 (m, 5H), 3.66-3.59 (m, 1H), 3.48 (p, J= 7.4 Hz, 2H), 3.13-3.08 (m, 1H), 2.98-2.82 (m, 3H), 2.31 (s, 3H), 2.20-2.16 (m, 1H), 2.14-1.94 (m, 3H), 1.83-1.75 (m, 2H), 1.50-1.40 (, 1H).
實施例84 化合物Z294的合成
步驟一：將(S)-5-(5-(1-(叔丁氧基羰基)吡咯烷-2-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-7-基)-3-甲基-1H-吡咯[ 2,3-b]吡啶-1-羧酸叔丁酯 (100 mg, 0.188 mmol)溶解到二氯甲烷(5mL)中，加入( S)-四氫呋喃-3-羧酸(32.70 mg, 0.282 mmol)、三乙胺 (0.078 mL, 0.563 mmol) 和 2-(7-偶氮苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯 (142.76 mg, 0.375 mmol)，室溫反應0.5小時。反應完畢，加入二氯甲烷(20mL)，依次用水(10mL)、飽和食鹽水(10mL)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，濃縮，粗品經柱層析純化(乙酸乙酯/石油醚=30%~80%)得到5-(5-(( S)-1-(叔丁氧基羰基)吡咯烷-2-基)-2-(( S)-四氫呋喃-3-羰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉)-7-基)-3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-1-羧酸叔丁酯(80 mg, 收率: 66.67%)。ES-API: [M+H] +=631.3。
步驟二：將5-(5-(( S)-1-(叔丁氧基羰基)吡咯烷-2-基)-2-(( S)-四氫呋喃-3-羰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉)-7-基)-3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-1-羧酸叔丁酯(80 mg, 0.127 mmol) 溶解到二氯甲烷(5mL)中，加入三氟乙酸(3 mL)中，室溫反應0.5小時。反應完畢，反應液濃縮，加入氨甲醇溶液(1mL)中和後，再次濃縮，經製備HPLC(氨水法)純化得到(7-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-5-((S)-吡咯烷-2-基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)((S)-四氫呋喃-3-基)甲酮(Z294, 20 mg, 收率: 38.00%)。ES-API: [M+H] +=431.2。 1H NMR (500 MHz, DMSO- d 6) δ 11.34 (d, J= 6.8 Hz, 1H), 8.47 (t, J= 2.6 Hz, 1H), 8.11 (dd, J= 7.5, 2.2 Hz, 1H), 7.76 (dd, J= 11.3, 1.9 Hz, 1H), 7.45 (d, J= 10.6 Hz, 1H), 7.27 (d, J= 5.3 Hz, 1H), 4.82-4.89 (m, 2H), 4.70-4.65 (m, 1H), 4.26 (t, J= 7.7 Hz, 1H), 3.94 (d, J= 7.9 Hz, 1H), 3.76-3.67 (m, 5H), 3.48 (t, J= 7.9 Hz, 1H), 3.13-3.09 (m, 1H), 2.99-2.84 (m, 3H), 2.31 (t, J= 1.4 Hz, 3H), 2.22-2.16 (m, 1H), 2.13-1.98 (m, 3H), 1.82-1.78 (m, 2H).
實施例85 化合物Z295的合成
步驟一：往(S)-2-(7-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-5-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(200 mg, 0.59 mmol)的二氯甲烷(2 mL)溶液中加入乙基異氰酸酯(42 mg, 0.59 mmol)，室溫攪拌2小時。反應結束後，反應液濃縮並用矽膠柱層析(0-80%四氫呋喃/石油醚)純化得到(S)-2-(7-氯-2-(乙基氨基甲醯基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-5-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(55 mg, 收率:22%)。ES-API: [M+H] += 430.1。
步驟二：氮氣保護下，(S)-2-(7-氯-2-(乙基氨基甲醯基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-5-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(50 mg, 0.12 mmol)，3-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-二氧硼雜環戊烷-2-基)-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶(38 mg, 0.15 mmol)，氯(2-二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II) (9 mg, 12 μmol)，2-雙環己基膦-2',6'-二甲氧基聯苯(5 mg, 12 μmol)和碳酸鉀(50 mg, 0.36 mmol)的1,4-二氧六環(2 mL)和水(0.4 mL)的混合溶液在120℃下攪拌2小時。反應液倒入乙酸乙酯(10 mL)，依次用飽和食鹽水(5 mL)和水(5 mL)洗滌。有機相用無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮並用矽膠柱層析(甲醇/二氯甲烷=0-10%)純化得到透明油狀液體(S)-2-(2-甲醯基-7-(3-甲基-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-5-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(40 mg, 收率:65%)。ES-API: [M+H] += 504.3。
步驟三：冰浴條件下，將三氟乙酸(0.5 mL)滴加到(S)-2-(2-甲醯基-7-(3-甲基-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-5-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(40 mg, 79 μmol)的二氯甲烷(1 mL)溶液中，室溫攪拌1小時。濃縮並用製備色譜柱(碳酸氫銨法)純化得到白色固體(S)- N-乙基-7-(3-甲基-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶-5-基)-5-(吡咯烷-2-基)-3,4-二氫異喹啉-2(1 H)-甲醯胺(Z295, 10 mg, 純度100%, 收率:31%)。ES-API: [M+H] += 404.2。
實施例86 化合物Z296的合成
步驟一：將7-氨基-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-羧酸叔丁酯 (25 g, 60.41 mmol)溶於乙腈(500 mL))中，加入N-溴代丁二醯亞胺 (17.92 g, 100.68 mmol)，反應混合物在-5℃-0℃攪拌反應4小時。反應混合物加入硫代硫酸鈉水溶液淬滅，乙酸乙酯萃取，有機相無水硫酸鈉乾燥，濃縮，粗品用柱層析純化(石油醚/乙酸乙酯=10/1)得到產物7-氨基-8-溴-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-羧酸叔丁酯(30 g, 收率：76.1 %)。ES-API:[M+1] +=271。
步驟二：將7-氨基-8-溴-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-羧酸叔丁酯 (30 g, 91.68 mmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺 (130 mL)中，加入N-氯代丁二醯亞胺 (12.86 g, 96.26 mmol)，50℃反應4小時。反應液用硫代硫酸鈉水溶液淬滅，乙酸乙酯萃取，有機相無水硫酸鈉乾燥，濃縮，粗品經柱層析純化(石油醚/乙酸乙酯=10/1)得到產物7-氨基-8-溴-6-氯-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-羧酸叔丁酯(22 g, 收率: 66.4%)。ES-API:[M+1] +=305.0。
步驟三：將7-氨基-8-溴-6-氯-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-羧酸叔丁酯 (22 g, 60.84 mmol)溶於四氫呋那 (54 mL)、水 (86 mL)和次磷酸(214 mL)，加入亞硝酸鈉(6.3 g, 91.24 mmol)，室溫反應4小時。反應液用硫代硫酸鈉水溶液淬滅，乙酸乙酯萃取，碳酸氫鈉溶液洗滌，有機相無水硫酸鈉乾燥，旋乾，得到粗產物8-溴-6-氯-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-羧酸叔丁酯，直接用於下步反應。ES-API:[M+1] +=290.0。
步驟四：將8-溴-6-氯-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-羧酸叔丁酯(21 g, 60.58 mmol)溶於二氯甲烷(50 mL)和三氟乙酸(50 mL)溶液中，室溫反應4小時。反應液濃縮得到粗產物8-溴-6-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉，直接用於下步反應。ES-API:[M+1] +=245.90。
步驟五：將8-溴-6-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉(15 g, 60.84 mmol)溶於二氯甲烷(50 mL)中，加入加入苄基碳醯氯(15.57 g, 91.27 mmol)和三乙胺(18.47 g, 182.53 mmol)，室溫反應4小時。反應完成後，加水淬滅反應，乙酸乙酯萃取，無水硫酸鈉乾燥，濃縮，粗品經柱層析純化(石油醚/乙酸乙酯=10/1)得到產物8-溴-6-氯-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-羧酸苄酯(15 g, 收率：60.4%)。ES-API:[M+1] +=380.0。
步驟六：將8-溴-6-氯-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-羧酸苄酯 (15 g, 39.4 mmol)溶於乙醇(110 mL)，加入三氟乙烯基硼酸鉀(15.84 g, 118.21 mmol)，三乙胺(11.96 g, 118.21 mmol)和1,1-雙(二苯基膦)二荗鐵二氯化鈀 (2.88 g, 3.94 mmol)。在80℃下反應4小時。反應完成後，反應液濃縮, 粗品經柱層析純化(石油醚/乙酸乙酯=10/1)得到產物6-氯-8-乙烯基-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-羧酸苄酯(12 g, 收率：92.7%)。ES-API:[M+1] +=328.0。
步驟七：將6-氯-8-乙烯基-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-羧酸苄酯(12 g, 36.6 mmol)四氫呋喃/水(200 mL/100 mL)中，加入2,6-二甲基吡啶(1.96 g, 36.6 mmol)，高碘酸鈉(62.64 g, 292.86 mmol)和二水合鋨酸鉀(3.42 g, 10.98 mmol)，室溫反應2小時。反應液用硫代硫酸鈉水溶液淬滅，乙酸乙酯萃取，有機相無水硫酸鈉乾燥，濃縮，粗品經柱層析純化(石油醚/乙酸乙酯=10/1)得到產物6-氯-8-甲醯基-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-羧酸苄酯(4.5 g, 收率：37.3%)。ES-API:[M+1] +=330.1。
步驟八：向 6-氯-8-甲醯基-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-羧酸苄酯(200 mg, 0.61 mmol)的二氯甲烷(6 mL)中的溶液中加入2-((三丁基甲錫烷基)甲氧基)乙胺(220.85mg, 0.61mmol) ，4A分子篩，在30℃下攪拌16小時。反應結束後過濾，旋乾，得到粗產物6-氯-8-[(E)-2(三丁基甲錫甲氧基) 乙基亞氨基甲基]-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-羧酸苄酯(410 mg, 粗品)，直接用於下步反應。
步驟九：(R,R)-2,2'-異亞丙基雙(4-苯基-2-噁唑啉) (40.57 mg, 0.12 mmol) 加入三氟甲磺酸銅 (II) (219.39 mg, 0.6mmol) 的六氟異丙醇 (2.5 mL) 懸浮液中，然後加入6-氯-8-[(E)-2(三丁基甲錫甲氧基)乙基亞氨基甲基]-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-羧酸苄酯 (410 mg, 0.6 mmol)的六氟異丙醇 (2.5 mL)溶液中，反應混合物在30℃攪拌16小時。LCMS監測反應完全，加入1N氫氧化鈉，攪拌混合物並用二氯甲烷萃取，有機層無水硫酸鈉乾燥並濃縮得到產物苄基6-氯-8-(嗎啉-3-基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-羧酸酯(235.00 mg, 粗品)，黃色油狀物，直接用於下一步反應。ES-API:[M+H] += 387.2。
步驟十：將苄基6-氯-8-(嗎啉-3-基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-羧酸酯(235mg, 0.6 mmol)的四氫呋喃(5mL溶液中加入三乙胺(184.4 mg, 1.82 mmol)和二碳酸二叔丁酯(264.84 g, 1.21 mmol)，室溫攪拌2小時。反應結束後，乙酸乙酯萃取，濃縮，粗品經柱層析純化(乙酸乙酯/石油醚=1/5)得到3-(2-((苄氧基)羰基)-6-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(90 mg, 收率：30.42%)ES-API:[M+H-100] += 387.1。
步驟十一：向3-(2-((苄氧基)羰基)-6-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(90 mg, 0.23 mmol)的二氧六環/水(2mL/0.4 mL)的溶液中加入3-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二噁硼烷-2-基)-1H-吡咯[2,3-b]吡啶(72.06 mg, 0.28 mmol) ，氯(2-二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II) (16.74 mg, 0.023 mmol)，碳酸鉀(96.31mg, 0.69 mmol)。在氮氣保護下混合物加熱攪拌到110℃反應2小時，LCMS監測反應完全。用乙酸乙酯/水處理，無水硫酸鈉乾燥，濃縮，粗品經柱層析純化(二氯甲烷/甲醇=10/1)得到產物叔丁基 3-(2-((苄氧基)羰基)-6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸酯(40 mg, 收率：29.51%) .ES-API:[M+H] += 583.4。
步驟十二：向 3-(2-((苄氧基)羰基)-6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸酯(40 mg, 0.069 mmol) 的甲醇(1 mL)溶液中加入鈀碳(10 mg)，在氫氣氛圍下，混合液在25°C下攪拌1小時。LCMS監測反應完全，過濾，濾液無水硫酸鈉，濃縮得到產物3-[6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基]嗎啉-4-羧酸叔丁酯(25mg, 收率: 81.19%) 。ES-API:[M+H] += 449.3。
步驟十三：向 3-[6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基]嗎啉-4-羧酸叔丁酯(35 mg, 0.078 mmol) 的N,N-二甲基甲醯胺(1 mL)溶液中加入(S)-3,3,3-三氟-2-羥基-2-甲基丙酸(114.18 mg, 0.722mmol)，1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽 (44.87 mg, 0.23 mmol) ，1-羥基苯并三唑 (15.81mg, 0.12 mmol) 三乙胺(23.64mg, 0.23 mmol) ，混合液在25°C下攪拌2小時。LCMS監測反應完全，加水淬滅反應，乙酸乙酯萃取，無水硫酸鈉乾燥，濃縮，粗品經柱層析純化(二氯甲烷/甲醇=10/1)得到產物叔丁基 3-(6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-2-((S)-3,3,3-三氟-2-羥基-2-甲基丙醯基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸酯(10 mg, 收率: 21.77%)。ES-API:[M+H] += 589.4。
步驟十四：向叔丁基 3-(6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-2-((S)-3,3,3-三氟-2-羥基-2-甲基丙醯基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸酯(10 mg, 0.017 mmol) 的二氯甲烷(1mL)加入三氟乙酸(0.5 mL)，常溫攪拌1小時。LCMS監測反應完全，用飽和碳酸氫鈉調pH至7，用二氯甲烷/水處理，無水硫酸鈉乾燥，濃縮，粗品經製備純化(色譜柱:Ultimate XB-C18,50*250mm,10um；流動相：A：純化水(0.05%氨水)B : 純乙腈；流速：80ml/min；梯度：在50分鐘內，B/A=20%-90%； 波長：214nm；柱溫：室溫)得到(2S)-3,3,3-三氟-2-羥基-2-甲基-1-(6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-8-(嗎啉-3-基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)丙烷-1-酮 (Z296, 3.8 mg, 收率: 45.79%) ，白色粉末。ES-API:[M+H] +=489.3。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 9.11 (s, 1H), 7.91-7.53 (m, 3H), 7.08 (s, 1H), 4.87-4.44 (m, 2H), 4.39-4.06 (m, 2H), 4.04-3.49 (m, 4H), 3.45-2.72 (m, 4H), 2.62-2.36 (m, 1H), 2.30 (s, 3H), 1.89-1.86 (m, 3H).
實施例87 化合物Z297的合成
步驟一：向 (S)-叔丁基2-(6-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸酯(100 mg, 0.3 mmol) 的N,N-二甲基甲醯胺(3 mL)溶液中加入3,3,3-三氟-2-羥基-2-(三氟甲基)丙酸(188.85 mg, 0.9 mmol)，1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽 (170.73mg, 0.9 mmol) ，1-羥基苯并三唑 (120.34 mg, 0.9 mmol)、三乙胺(90.12mg, 0.9 mmol)，混合液在25°C下攪拌2小時。LCMS監測反應完全，加水淬滅反應，乙酸乙酯萃取，無水流速阿娜乾燥，濃縮，粗品經柱層析純化(二氯甲烷/甲醇=10/1)得到產物(S)-叔丁基2-(6-氯-2-(3,3,3-三氟-2-羥基-2-(三氟甲基)丙醯基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸鹽(18 mg, 收率:11.42%) 。ES-API:[M+H-100] += 431.1。
步驟二：向(S)-叔丁基2-(6-氯-2-(3,3,3-三氟-2-羥基-2-(三氟甲基)丙醯基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸鹽(18 mg, 0.034 mmol) 的二氧六環/水(2mL/0.4 mL)的溶液中 加入3-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二噁硼烷-2-基)-1H-吡咯[2,3-b]吡啶(10.5 mg, 0.04 mmol) ，氯(2-二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II) (2.44 mg, 0.003 mmol)，碳酸鉀(14.04mg, 0.102 mmol)，在氮氣保護下將混合物加熱110 ℃攪拌反應2小時。LCMS監測反應完全，用乙酸乙酯/水處理，無水硫酸鈉乾燥，濃縮，粗品經柱層析純化(二氯甲烷/甲醇=10/1)得到產物(S)-叔丁基2-(6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-2-(3,3,3-三氟-2-羥基-2-(三氟甲基)丙醯基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸酯(12 mg, 收率: 56.48%) .ES-API:[M+H] +=627.3。
步驟三：向(S)-叔丁基2-(6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-2-(3,3,3-三氟-2-羥基-2-(三氟甲基)丙醯基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸酯(12 mg, 0.02 mmol) 的二氯甲烷(1mL)加入三氟乙酸(0.5 mL)，常溫攪拌1小時。藉由LCMS監測反應完全，用飽和碳酸氫鈉調pH至7，用二氯甲烷/水處理，無水硫酸鈉乾燥，濃縮，粗品經製備純化(色譜柱: Ultimate XB-C18,50*250mm,10um; 流動相：A：純化水(0.05%氨水) B : 純乙腈; 流速：80ml/min；梯度：在50分鐘內，B/A=20%-90%；波長：214nm；柱溫：室溫)得到(S)-3,3,3-三氟-2-羥基-1-(6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-8-(吡咯烷-2-基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)-2-(三氟甲基)丙烷-1-酮(Z297, 1.3 mg, 收率: 12.89%)，白色粉末。ES-API:[M+H] +=527.2。
實施例88 化合物Z298的合成
步驟一：向25 mL單口圓底燒瓶中加入6-溴異色烷-8-甲醛(100mg, 0.415mmol)，甲胺鹽酸鹽 (84mg, 1.244mmol)和二氯甲烷(10 mL)，室溫攪拌6小時後，分批加入氰基硼氫化鈉(78.2mg, 1.244mmol)，然後室溫攪拌過夜。反應液加入乙酸乙酯(30 mL)，用飽和食鹽水洗滌(30 mLX3)，無水硫酸鈉乾燥，濃縮，粗品用矽膠柱層析純化(乙酸乙酯:石油醚=10:100)得到1-(6-溴異色烷-8-甲醛)-N-甲基甲胺(20mg, 收率: 19%)。ES-API: [M+H] +=256.1。
步驟二：向25 mL單口圓底燒瓶中加入1-(6-溴異色烷-8-甲醛)-N-甲基甲胺(20mg, 0.078mmol)，二碳酸二叔丁酯(51mg, 0.23mmol)，三乙胺(24mg, 0.23mmol)和二氯甲烷(10 mL)，攪拌反應1小時。加入二氯甲烷(20 mL)，用飽和食鹽水洗滌(20mLX3)，無水硫酸鈉乾燥，濃縮得到粗品((6-溴異色烷-8-基)甲基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯(18mg，收率: 64%)。ES-API: [M+H] +=356.1。
步驟三：向25 mL單口圓底燒瓶中加入((6-溴異色烷-8-基)甲基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯(18mg，0.051mmol)，3-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(26mg, 0.10mmol)，氯(2-二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II)(3.6mg, 0.005mmol)，碳酸鉀(21mg, 0.15mmol)，二氧六環(3 mL)和水(0.3 mL)。體系用氮氣置換三次，然後用氮氣球保護。110℃條件下微波反應50分鐘，反應液加入乙酸乙酯(10 mL)，用飽和食鹽水洗滌(5 mLX3)，無水硫酸鈉乾燥，濃縮得到叔丁基甲基((6-(3-甲基-1H-吡咯[2,3-b]吡啶-5-基)異色烷-8-基)甲基)氨基甲酸酯(20mg, 粗品)。ES-API: [M+H] +=408.2。
步驟四：向5 mL單口圓底燒瓶中加入叔丁基甲基((6-(3-甲基-1H-吡咯[2,3-b]吡啶-5-基)異色烷-8-基)甲基)氨基甲酸酯(20mg, 粗品)，三氟乙酸(3 mL)和二氯甲烷(6 mL)，室溫攪拌反應30分鐘。反應液旋乾，粗品用製備HPLC(色譜柱：Waters XBridge C18, 190*250mm, 5μm; 流動相：A: 0.1%碳酸氫銨水溶液; 流動相B: 乙腈; 流速: 15ml/min;柱溫: 室溫)純化得到N-甲基-1-(6-(3-甲基-1H-吡咯[2,3-b]吡啶-5-基)異色烷-8-基)甲胺(Z298, 7mg, 收率 :44.5%)。ES-API: [M+H] +=308.2。
實施例89 化合物Z299的合成
步驟一：將(S)-2-(7-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-5-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(100 mg, 0.297 mmol) 溶解在乾燥的1,4-二氧六環(3mL)中，依次加入3-碘吡啶(91.28 mg, 0.445 mmol)、氯(2-二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II) (10.69 mg, 0.015 mmol), 碳酸銫(193.45 mg, 0.594 mmol)，加熱100℃反應微波3小時，反應完畢。加入乙酸乙(30 mL)稀釋，飽和食鹽水(30mL)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮，粗品經矽膠柱層析純化(甲醇/二氯甲烷=1/20)得到( S)-2-(7-氯-2-(吡啶-3-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-5-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(22 mg, 收率:17.90%)。ES-API: [M+H] +=414.2。
步驟二：將( S)-2-(7-氯-2-(吡啶-3-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-5-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(22 mg, 0.053 mmol)、3-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(20.58 mg, 0.08 mmol)、氯(2-二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II)(3.83 mg, 0.005 mmol)和碳酸鉀(22.04 mg, 0.159 mmol)加入到1,4,-二氧六環(3mL)和水(0.5mL)中，氮氣置換，115℃反應微波1小時。反應完畢，加入乙酸乙酯(20 mL)，依次用水(10mL)、飽和食鹽水(10mL)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，粗品經製備薄層析(石油醚/乙酸乙酯=1/1)純化得到(S)-2-(7-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-2-(吡啶-3-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-5-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(15 mg, 收率：55.37 %)。ES-API: [M+H] +=510.3。
步驟三：將(S)-2-(7-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-2-(吡啶-3-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-5-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯 (15 mg, 0.029 mmol)溶解到二氯甲烷(2mL)中，加入三氟乙酸(1 mL)中，室溫反應0.5小時。反應完畢，濃縮，加入氨甲醇溶液(1mL)中和後，再次濃縮，經製備HPLC(甲酸法)純化得到(S)-7-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-2-(吡啶-3-基)-5-(吡咯烷-2-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉(Z299, 甲酸鹽, 3.5 mg, 收率: 27.59%)。ES-API: [M+H] +=410.2。
實施例90 化合物Z300的合成
步驟一：向 (S)-叔丁基2-(7-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-5-基)吡咯烷-1-羧酸酯(100 mg, 296.86μmol) 的二氯甲烷(1 mL)溶液中加入三乙胺 (90.12 mg, 890.59μmol)、新戊醯氯(42.95 mg, 356.24μmol)，0°C下攪拌15分鐘，LCMS監測反應完全。加水淬滅反應，二氯甲烷萃取，無水硫酸鈉乾燥，濃縮，粗品經柱層析純化(甲醇/二氯甲烷=0-5%)得到產物(S)-叔丁基2-(7-氯-2-新戊醯基-1,2,3,4-四氫異喹啉-5-基)吡咯烷-1-羧酸酯(100 mg, 收率: 77.9%) 。ES-API:[M+H-56] +=376.1。
步驟二：將化合物化合物(S)-叔丁基2-(7-氯-2-新戊醯基-1,2,3,4-四氫異喹啉-5-基)吡咯烷-1-羧酸酯(53 mg, 125.90μmol,) 溶於二氧六環/水(2 mL/0.4 mL)中，加入3-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二噁硼烷-2-基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(39 mg, 151.6 mmol)，氯(2-二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II)(9 mg, 12.59μmol)和碳酸鉀(52.12 mg, 377.7μmol)。加熱至100℃反應2小時。加入鹽酸甲醇溶液，常溫攪拌1小時，藉由LCMS監測反應完全，用碳酸氫鈉溶液調pH至7，用二氯甲烷/水處理，無水硫酸鈉乾燥，濃縮，粗品經製備薄層色譜柱純化(二氯甲烷/甲醇=10/1)得到產物(S)-叔丁基 2-(2-新戊醯基-7-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-5-基)吡咯烷-1-羧酸酯(40 mg, 收率: 62%). ES-API:[M+H] +=517.3。
步驟三：將(S)-叔丁基 2-(2-新戊醯基-7-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-5-基)吡咯烷-1-羧酸酯(40 mg, 77.52μmol)溶於二氯甲烷(1 mL)中，加入三氟乙酸(1 mL)。室溫反應1小時。LCMS監測反應完全後，反應液旋乾，粗品經製備薄層色譜柱純化(二氯甲烷/甲醇=10/1)得到產物(S)-2,2-二甲基-1-(7-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-5-(吡咯烷-2-基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)丙烷-1-酮(Z300, 6.63 mg, 收率：20.6%)。ES-API:[M+1] +=417.2。
實施例91 化合物Z301的合成
步驟一：向 (S)-叔丁基2-(7-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-5-基)吡咯烷-1-羧酸酯(100 mg, 286.86μmol) 和2-羥基-2-甲基丙酸(37.29 mg, 356.24μmol)的N,N-二甲基及醯胺(3 mL)溶液中加入三乙胺 (90.12 mg, 890.59 μmol)、1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽(113 mg, 593.7μmol)和1-羥基苯并三唑 (80.22 mg, 593.7μmol)，25°C下攪拌1小時。LCMS監測反應完全，加水淬滅反應，乙酸乙酯萃取，無水硫酸鈉乾燥，濃縮，粗品經柱層析純化(甲醇/二氯甲烷=0-5%)得到產物(S)-叔丁基2-(7-氯-2-(2-羥基-2-甲基丙醯基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-5-基)吡咯烷-1-羧酸酯 (100 mg, 收率: 82.4%) 。ES-API:[M+H-56] +=367.2。
步驟二：將化合物(S)-叔丁基2-(7-氯-2-(2-羥基-2-甲基丙醯基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-5-基)吡咯烷-1-羧酸酯 (100 mg, 236.44μmol) 溶於二氧六環/水(2 mL/0.4 mL)中，加入3-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二噁硼烷-2-基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(74 mg, 286 mmol)，氯(2-二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II)(18 mg, 24μmol)和碳酸鉀(98mg, 712μmol)。加熱至100℃反應2小時。加入鹽酸/甲醇溶液，常溫攪拌1小時，藉由LCMS監測反應完全，用碳酸氫鈉溶液調pH至7，用二氯甲烷/水處理，無水硫酸鈉乾燥，濃縮，粗品經柱層析純化(四氫呋喃/石油醚=30/70)得到產物(S)-叔丁基2-(2-(1-羥基環丙烷羰基)-7-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-5-基)吡咯烷-1-羧酸酯(100 mg, 收率: 81.4%).ES-API:[M+H] +=519.3。
步驟三：將(S)-叔丁基2-(2-(1-羥基環丙烷羰基)-7-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-5-基)吡咯烷-1-羧酸酯(100 mg, 192.81μmol)溶於二氯甲烷(1 mL)中，加入三氟乙酸(1 mL)。室溫反應1小時。LCMS監測反應完成後，反應液旋乾，粗品經製備薄層色譜柱純化(二氯甲烷/甲醇=10/1)得到產物(S)-2-羥基-2-甲基-1-(7-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-5-(吡咯烷-2-基)-3 ,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)丙烷-1-酮(Z301, 20 mg, 收率：25%)。ES-API:[M+1] +=419.3。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 10.61-9.97 (m, 1H), 8.34-7.98 (m, 1H), 7.89-7.51 (m, 2H), 6.97 (s, 1H), 6.88 (s, 1H), 5.20-4.05 (m, 4H), 3.75-3.59 (m, 2H), 3.48-3.36 (m, 1H), 2.85-2.38 (m, 2H), 2.24 (s, 5H), 2.14-1.97 (m, 2H), 1.53 (s, 6H).
實施例92 化合物Z302的合成
步驟一：向 (S)-叔丁基2-(7-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-5-基)吡咯烷-1-羧酸酯(100 mg, 296.86μmol) 的二氯甲烷(1 mL)溶液中加入三乙胺 (90.12 mg, 890.59μmol)、環丙基甲醯氯(37.24 mg, 356μmol)，0℃下攪拌15分鐘，LCMS監測反應完全。加水淬滅反應，二氯甲烷萃取，無水硫酸鈉乾燥，濃縮，粗品經柱層析純化(甲醇/二氯甲烷=0-5%)得到產物(S)-叔丁基2-(7-氯-2-(環丙烷羰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-5-基)吡咯烷-1-羧酸酯(100 mg, 收率: 83.6%) 。ES-API:[M+H-56] +=349.1。
步驟二：將化合物化合物(S)-叔丁基2-(7-氯-2-(環丙烷羰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-5-基)吡咯烷-1-羧酸酯(100 mg, 247.5 μmol) 溶於二氧六環/水(2 mL/0.4 mL)中，加入3-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二噁硼烷-2-基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(91.79 mg, 355.6 mmol)，氯(2-二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II)(21 mg, 29μmol)和碳酸鉀(122.7 mg, 889μmol)。加熱至100℃反應2小時。加入鹽酸甲醇溶液，常溫攪拌1小時，藉由LCMS監測反應完全，用碳酸氫鈉溶液調pH至7，用二氯甲烷/水處理，無水硫酸鈉乾燥，濃縮，粗品經製備薄層色譜柱純化(二氯甲烷/甲醇=10/1)得到產物(S)-叔丁基 2-(2-(環丙烷羰基)-7-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-5-基)吡咯烷-1-羧酸酯(100 mg, 收率: 80.8%). ES-API:[M+H] +=501.3。
步驟三：將(S)-叔丁基2-(2-(環丙烷羰基)-7-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-5-基)吡咯烷-1-羧酸酯(100 mg, 200μmol)溶於二氯甲烷(1 mL)中，加入三氟乙酸(1 mL)。室溫反應1小時。反應完成後，反應液旋乾，粗品經製備薄層色譜柱純化(二氯甲烷/甲醇=10/1)得到產物(S)-環丙基(7-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-5-(吡咯烷-2-基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)甲酮(Z302, 30 mg, 收率: 37.5%)。ES-API:[M+1] +=401.2。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 10.84-10.47 (m, 1H), 8.55-8.41 (m, 1H), 8.14-7.64 (m, 2H), 7.07-6.86 (m, 2H), 5.15-4.69 (m, 2H), 4.59-4.44 (m, 1H), 3.95-3.71 (m, 2H), 3.63-3.25 (m, 3H), 3.00-2.67 (m, 1H), 2.31-1.95 (m, 7H), 1.79 (s, 1H), 1.09-0.94 (m, 2H), 0.84-0.75 (m, 2H).
實施例93 化合物Z303的合成
步驟一：向 (S)-叔丁基2-(7-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-5-基)吡咯烷-1-羧酸酯(100 mg, 286.86μmol) 的二氯甲烷(1 mL)溶液中加入4-氰基苯甲酸(52.41mg, 356.24μmol)，1-丙基磷酸酐(283.21 mg, 890.59 μmol) ，三乙胺 (89.95 mg, 890.59 μmol)，在25°C下攪拌2小時，LCMS監測反應完全。加水淬滅反應，乙酸乙酯萃取，飽和食鹽水洗，無水硫酸鈉乾燥，濃縮，粗品經柱層析純化(0-6%甲醇/二氯甲烷)得到產物(S)-叔丁基2-(7-氯-2-(4-氰基苯甲醯基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-5-基)吡咯烷-1-羧酸酯(70 mg, 收率: 52.6%) 。ES-API:[M+H-56] +=410.2。
步驟二：將化合物(S)-叔丁基2-(7-氯-2-(4-氰基苯甲醯基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-5-基)吡咯烷-1-羧酸酯 (70 mg, 151.17 μmol)溶於二氧六環/水(1 mL/0.2 mL)中，加入3-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二噁硼烷-2-基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(73.58 mg, 285.05μmol)，氯(2-二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II)(17.09 mg, 23.75μmol)和碳酸鉀(98.34 mg, 712.64μmol)。加熱至100℃反應2小時。加入鹽酸甲醇溶液，常溫攪拌1小時,藉由LCMS監測反應完全。反應液用碳酸氫鈉溶液調pH至7，用二氯甲烷/水處理，無水硫酸鈉乾燥，濃縮，粗品經柱層析純化(甲醇/二氯甲烷=0-6%)得到產物(S)-叔丁基2-(2-(4-氰基苯甲醯基)-7-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-5-基)吡咯烷-1-羧酸酯(68 mg, 收率: 76.5%). ES-API:[M+H] +=562.3。
步驟三：將(S)-叔丁基2-(2-(4-氰基苯甲醯基)-7-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-5-基)吡咯烷-1-羧酸酯(68 mg, 115.6μmol)溶於二氯甲烷(1 mL)中，加入三氟乙酸(1 mL)，室溫反應1小時。LCMS監測反應完成後，反應液旋乾，粗品經製備薄層色譜柱純化(二氯甲烷/甲醇=10/1)得到產物(S)-4-(7-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-5-(吡咯烷-2-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-2-羰基)苄腈(Z303, 17 mg, 收率：31.8%)。ES-API:[M+1] +=462.2。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 10.82 (s, 1H), 8.63-8.2 (m, 1H), 7.87-7.61 (m, 4H), 7.33-7.25 (m, 2H), 7.20-6.70 (m, 2H), 5.55-3.75 (m, 3H), 3.72-3.19 (m, 4H), 2.86-2.66 (m, 1H), 2.47-1.91 (m, 8H).
實施例94 化合物Z304的合成
步驟一：向 (S)-叔丁基2-(7-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-5-基)吡咯烷-1-羧酸酯(100 mg, 286.86μmol) 的二氯甲烷(1 ml)溶液中加入2-(4-氟苯基)乙酸(54.91mg, 356.24μmol)，1-丙基磷酸酐 (283.21 mg, 890.59 μmol)，三乙胺 (89.95 mg, 890.59 μmol) ，在25°C下攪拌2小時，LCMS監測反應完全。加水淬滅反應，乙酸乙酯萃取，飽和食鹽水洗，無水硫酸鈉乾燥，濃縮，粗品經柱層析純化(甲醇/二氯甲烷=0-6%)得到產物(S)-叔丁基2-(7-氯-2-(2-(4-氟苯基)乙醯基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-5-基)吡咯烷-1-羧酸酯(80 mg, 收率: 60%) 。ES-API:[M+H-56] +=417.1。
步驟二：將化合物(S)-叔丁基2-(7-氯-2-(2-(4-氟苯基)乙醯基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-5-基)吡咯烷-1-羧酸酯 (80 mg, 169.14 μmol)溶於二氧六環/水(1 mL/0.2 mL)中，加入3-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二噁硼烷-2-基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(52.39 mg, 202.97μmol)，氯(2-二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II)(12.17 mg，16.93μmol)和碳酸鉀(70.02 mg, 507.42μmol)。加熱至100℃反應2小時。加入鹽酸甲醇溶液，常溫攪拌1小時,藉由LCMS監測反應完全，反應液用碳酸氫鈉溶液調pH至7，用二氯甲烷/水處理，無水硫酸按乾燥，濃縮，粗品經柱層析純化(甲醇/二氯甲烷=0-6%)得到產物(S)-叔丁基2-(2-(2-(4-氟苯基)乙醯基)-7-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-5-基)吡咯烷-1-羧酸酯(78 mg, 收率: 81%). ES-API:[M+H] +=569.4。
步驟三：將(S)-叔丁基2-(2-(2-(4-氟苯基)乙醯基)-7-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-5-基)吡咯烷-1-羧酸酯(78 mg, 137.3μmol)溶於二氯甲烷(1 mL)中，加入三氟乙酸(1 mL)。室溫反應1小時。反應完成後，反應液旋乾，粗品經製備薄層色譜柱純化(二氯甲烷/甲醇=10/1)得到產物(S)-2-(4-氟苯基)-1-(7-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-5-(吡咯烷-2-基)-3 ,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)乙烷-1-酮(Z304, 38.92 mg, 收率：60%)。ES-API:[M+1] +=469.3。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 10.78-10.09 (m, 1H), 8.55-8.31 (m, 1H), 8.12-7.64 (m, 2H), 7.32-7.25 (m, 2H), 7.18-7.00 (m, 3H), 6.96-6.84 (m, 1H), 5.06-4.81 (m, 1H), 4.81-4.30 (m, 2H), 4.01-3.54 (m, 4H), 3.51-2.96 (m, 3H), 2.76-2.61 (m, 1H), 2.37-2.06 (m, 5H), 2.04-1.76 (m, 2H).
實施例95 化合物Z305的合成
步驟一：向 (S)-苄基-(5-(1-(叔丁氧基羰基)吡咯烷-2-基)-7-氯-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-羧酸苄酯 (1.6 g, 3.4 mmol) 的二氯甲烷(20 ml)溶液中加入氯化鈀 (241 mg, 1.4 mmol)、三乙胺(1.03 g, 10.9 mmol)、三乙基矽烷 (3.95 g, 34 mmol)，室溫下攪拌30分鐘，LCMS監測反應完全。加水淬滅反應，二氯甲烷萃取，無水硫酸鈉乾燥，濃縮，粗品經柱層析純化(甲醇/二氯甲烷=0-5%)得到產物(S)-叔丁基2-(7-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-5-基)吡咯烷-1-羧酸酯(700 mg, 收率: 61.7%) 。ES-API:[M+H] +=337.1。
步驟二：向 (S)-叔丁基2-(7-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-5-基)吡咯烷-1-羧酸酯(100 mg, 296.86μmol) 的二氯甲烷(1 mL)溶液中加入三乙胺 (90.12 mg, 890.59 μmol)、甲基碳醯氯(37.24 mg, 356μmol)，在0°C下攪拌15分鐘，LCMS監測反應完全。加水淬滅反應，二氯甲烷萃取，無水硫酸鈉乾燥，濃縮，粗品經柱層析純化(甲醇/二氯甲烷=0-5%)得到產物(S)-甲基 5-(1-(叔丁氧基羰基)吡咯烷-2-基)-7-氯-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-羧酸鹽(100 mg, 收率: 83.6%) 。ES-API:[M+H-100] +=295.1。
步驟三：將化合物化合物(S)-甲基 5-(1-(叔丁氧基羰基)吡咯烷-2-基)-7-氯-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-羧酸鹽(100 mg, 247.5 μmol) 溶於二氧六環/水(2 mL/0.4 mL)中，加入3-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二噁硼烷-2-基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(91.79 mg, 355.6 mmol)，氯(2-二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II)(21 mg, 29μmol)和碳酸鉀(122.7 mg, 889μmol)。加熱至100℃反應2小時。加入鹽酸甲醇溶液，常溫攪拌1小時，藉由LCMS監測反應完全。反應液用碳酸氫鈉溶液調pH至7，用二氯甲烷/水處理，無水硫酸鈉乾燥，濃縮，粗品經製備純化(色譜柱：Waters XBridge C18, 190*250mm, 5μm; 流動相：A: 0.1%碳酸氫銨水溶液; 流動相B: 乙腈; 流速: 15ml/min;柱溫: 室溫)得到產物(S)-甲基5-(1-(叔丁氧基羰基)吡咯烷-2-基)-7-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-羧酸鹽(100 mg, 收率: 80.8%). ES-API:[M+H] +=491.2。
步驟四：將(S)-甲基5-(1-(叔丁氧基羰基)吡咯烷-2-基)-7-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-羧酸鹽(100 mg, 200μmol)溶於二氯甲烷(1 mL)中，加入三氟乙酸(1 mL)。室溫反應1小時。反應完成後，反應液旋乾，粗品經製備薄層色譜柱純化(二氯甲烷/甲醇=10/1)得到產物甲基 (S)-7-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-5-(吡咯烷-2-基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-羧酸鹽(Z305, 30 mg, 收率: 37.5%)。ES-API:[M+1] +=391.2。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 10.74-10.40 (m, 1H), 8.60-8.43 (m, 1H), 8.09-7.64 (m, 2H), 7.00-6.81 (m, 2H), 5.07-4.80 (m, 1H), 4.65-4.11 (m, 2H), 3.72 (s, 3H), 3.69-3.34 (m, 4H), 3.25-2.85 (m, 1H), 2.64 (d, J= 15.7 Hz, 1H), 2.31-1.98 (m, 7H).
實施例96 化合物Z306的合成
步驟一：向 1-(2,2-二氟乙基)吡唑-4-羧酸甲酯 (250 mg, 1.31 mmol) 的四氫呋喃 (1 mL)溶液中加入氫氧化鋰水合物 (275.84 mg, 6.57 mmol)，混合物在 25°C 攪拌反應1小時，LCMS監測反應完全。反應液用乙酸乙酯/水萃取，水層調pH至1，乙酸乙酯/水萃取，無水流速鈉乾燥，濃縮得到產物1-(2,2-二氟乙基)吡唑-4-羧酸(140.00 mg，粗品)黃色固體。ES-API:[M+H] +=177.1。
步驟二：向(S)-2-(6-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯 (100 mg, 296.86 μmol) 的二氯甲烷 (2 mL)溶液中加入1-丙基磷酸酐 ( 141.68 mg, 445.30μmol)，1-(2,2-二氟乙基)吡唑-4-羧酸 (62.74 mg, 0.36 mmol)，三乙胺 (90.12 mg, 0.89 mmol)，將混合物在 25°C 攪拌 16 小時，藉由LCMS監測反應完全。用二氯甲烷/水萃取，用飽和氯化鈉水溶液洗滌，無水硫酸鈉乾燥，濃縮，粗品經柱層析純化(甲醇/二氯甲烷=0-6%)得到產物叔丁基(S)-2-[6-氯-2-[1-(2,2-二氟乙基)吡唑-4-羰基]-3,4-二氫-1H-異喹啉-8-基]吡咯烷-1-羧酸酯(78.00 mg, 產率：53.08%)，黃色油狀物。ES-API:[M+H-100] +=395.2。
步驟三：叔丁基(S)-2-[6-氯-2-[1-(2,2-二氟乙基)吡唑-4-羰基]-3,4-二氫-1H-異喹啉-8-基]吡咯烷-1-羧酸酯(78 mg, 0.157 mmol)，3-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼烷-2-基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(61.02 mg, 0.236 mmol)，氯(2-二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II)(22.68 mg, 0.031 mmol)和碳酸鉀(65.34 mg, 0.472 mmol)溶於1,4-二氧六環溶液(1 mL)和水(0.1 mL)，升溫至100 oC反應2小時。LCMS監測反應完成後，反應液加水淬滅，乙酸乙酯萃取，有機相飽和食鹽水洗滌，無水硫酸硫酸鈉乾燥，濃縮，粗品經薄層析柱純化(二氯甲烷/甲醇=10/1)得產物叔丁基(S)-2-[2-[1-(2,2-二氟乙基)吡唑-4-羰基]-6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-8-基]吡咯烷-1-羧酸酯(90 mg, 收率：96.69%)。ES-API: [M+H] += 591.6。
步驟四：叔丁基(S)-2-[2-[1-(2,2-二氟乙基)吡唑-4-羰基]-6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-8-基]吡咯烷-1-羧酸酯(90 mg, 0.152 mmol)溶於二氯甲烷(2 mL)和三氟乙酸溶液(2 mL)，室溫攪拌1小時。反應液旋乾，粗品經製備薄層色譜柱純化(二氯甲烷/甲醇=10/1)得產物(S)-[1-(2,2-二氟乙基)吡唑-4-基]-[6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-8-[吡咯烷-2-基]-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]甲酮(Z306, 10.9 mg, 收率：14.58%)。ES-API: [M+H] += 491.5。
實施例97 化合物Z307的合成
步驟一：向10 mL微波反應器中加入(S)-2-(7-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-5-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(100mg, 0.297mmol)，5-溴-1-甲基-1H-吡唑(47.8mg, 0.297mmol)、三(二亞苄基丙酮)二鈀(54.4mg, 0.059mmol)、1,1'-聯萘-2,2'-雙二苯(81.4mg, 0.13mmol)、叔丁醇鈉(85.5mg, 0.89mmol)和叔丁醇(3 mL)，體系用氮氣置換三次，然後用氮氣球保護。110℃微波反應50分鐘，反應液加入乙酸乙酯(10 mL)，用飽和食鹽水洗滌(10 mLX3)，無水硫酸鈉乾燥，濃縮，粗品用矽膠柱層析純化(乙酸乙酯:石油醚=10:100)得到(S)-2-(7-氯-2-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-5-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(15mg,收率:12%)。ES-API: [M+H] +=417.2。
步驟二：向10 mL微波反應器中加入(S)-2-(7-氯-2-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-5-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(15mg, 0.036mmol)，3-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(19mg, 0.072mmol)，氯(2-二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II)(2.59mg, 0.004mmol)，碳酸鉀(14.9mg，0.108mmol)，二氧六環(2 mL)和水(0.3 mL)。體系用氮氣置換三次，然後用氮氣球保護。110度微波反應50分鐘，反應液加入乙酸乙酯(10 mL)，用飽和食鹽水洗滌(5 mLX3)，無水硫酸鈉乾燥，濃縮，粗品用矽膠柱層析純化(甲醇:二氯甲烷=10:100)得到目標產物(S)-2-(2-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-7-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-5-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(8mg, 收率: 43%)。ES-API: [M+H] +=513.2。
步驟三：向25 mL單口圓底燒瓶中加入(S)-2-(2-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-7-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-5-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(8mg 0.016mmol)，三氟乙酸(3 mL)和二氯甲烷(6 mL)，室溫攪拌反應30分鐘。反應液旋乾，粗品用製備HPLC(甲酸法)純化得到(S)-2-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-7-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-5-(吡咯烷-2-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉(Z307, 甲酸鹽, 1.1mg, 收率:17.0%)。ES-API: [M+H] +=413.3。
實施例98 化合物Z308的合成
步驟一：向50 mL單口圓底燒瓶中加入(S)-2-(7-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-5-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(100mg, 0.297mmol)，2,2,2-三氟乙基三氟甲磺酸酯(103mg, 0.445mmol)、三乙胺(90mg, 0.891mmol)和N,N-二甲基甲醯胺(10 ml)，室溫攪拌過夜，反應液加入乙酸乙酯(30 mL)，用飽和食鹽水洗滌(30 mLX3)，無水硫酸鈉鈉乾燥，濃縮，粗品用矽膠柱層析純化(乙酸乙酯:石油醚=10:100)得到目標產物(S)-2-(7-氯-2-(2,2,2-三氟乙基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-5-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(30mg, 收率: 24%)。ES-API: [M+H] +=419.2。
步驟二：向10 mL微波反應器中加入(S)-2-(7-氯-2-(2,2,2-三氟乙基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-5-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(30mg, 0.072mmol)，3-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(37mg, 0.143mmol)，氯(2-二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II)(5.16mg, 0.007mmol)，碳酸鉀(29.7mg，0.215mmol)，二氧六環(2 mL)和水(0.3 mL)。體系用氮氣置換三次，然後用氮氣球保護。110度微波反應50分鐘。反應液加入乙酸乙酯(10 mL)，用飽和食鹽水洗滌(5 mLX3)，無水硫酸鈉乾燥，濃縮，粗品用矽膠柱層析純化(甲醇:二氯甲烷=10:100)得到目標產物 (S)-2-(7-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-2-(2,2,2-三氟乙基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-5-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(20mg, 收率: 54%)。ES-API: [M+H] +=515.3。
步驟三：向25 mL單口圓底燒瓶中加入(S)-2-(7-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-2-(2,2,2-三氟乙基)-1,2，3,4-四氫異喹啉-5-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(20mg, 0.035mmol)，三氟乙酸(3 mL)和二氯甲烷(6 mL)，室溫攪拌反應30分鐘。反應液旋乾，粗品用HPLC製備(甲酸法)純化得到(S)-7-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-5-(吡咯烷-2-基)-2-(2,2,2-三氟乙基)-1,2,3,4-四氫異喹啉(Z308, 甲酸鹽, 7mg, 收率:48.1%)。ES-API: [M+H] +=415.3。
實施例99 化合物Z309-1和化合物Z309-2的合成
步驟一：化合物(2S)-3,3,3-三氟-2-羥基-2-甲基-1-(6-(3-甲基-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶-5-基)-8-(嗎啉-3-基)-3,4-二氫異喹啉-2(1 H)-基)丙烷-1-酮(50 mg, 0.102mmol)用手性拆分(柱型: Chiralpak AB: 5μm, 4.6*250mm, 流動相:正己烷:乙醇:二乙胺=40:60:0.2, 流速:1mL/min, 柱溫:室溫)得到兩個異構體化合物：一個異構體化合物結構任意指定為(S)-3,3,3-三氟-2-羥基-2-甲基-1-(6-(3-甲基-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶-5-基)-8-((R)-嗎啉-3-基)-3,4-二氫異喹啉-2(1 H)-基) 丙烷-1-酮(Z309-1, 19 mg, 收率：38%, 保留時間：5.656 min, 純度100%，ee值：100%)。ES-API: [M+H] += 489.3. 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 11.34 (s, 1H), 8.46 (d, J= 2.4 Hz, 1H), 8.10 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 7.79 (d, J= 1.6 Hz, 1H), 7.46 (s, 1H), 7.40-7.14 (m, 2H), 5.42-5.16 (m, 1H), 4.99-4.59 (m, 1H), 4.31-4.02 (m, 1H), 3.97 (d, J= 8.8 Hz, 1H), 3.92-3.65 (m, 3H), 3.60-3.50 (m, 1H), 3.28-3.21 (m, 1H), 3.08-2.82 (m, 4H), 2.31 (s, 3H), 1.59 (s, 3H).
另一個異構體化合物結構任意指定為(S)-3,3,3-三氟-2-羥基-2-甲基-1-(6-(3-甲基-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶-5-基)-8-((S)-嗎啉-3-基)-3,4-二氫異喹啉-2(1 H)-基) 丙烷-1-酮(Z309-2, 15 mg, 收率：30%, 保留時間：9.572 min, 純度100%，ee值：100%)。ES-API: [M+H] += 489.3. 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6 ) δ 11.35 (s, 1H), 8.46 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 8.11 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 7.79 (d, J= 1.6 Hz, 1H), 7.45 (s, 1H), 7.39-7.13 (m, 2H), 5.42-5.06 (m, 1H), 5.00-4.57 (m, 1H), 4.23-4.02 (m, 1H), 4.02-3.92 (m, 1H), 3.85-3.61 (m, 3H), 3.54 (td, J= 10.8, 3.2 Hz, 1H), 3.29-3.24 (m, 1H), 3.10-2.83 (m, 4H), 2.32 (s, 3H), 1.66-1.51 (m, 3H).
實施例100 化合物Z310的合成
步驟一：向 (S)- 2-(7-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-5-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(100 mg, 286.86μmol) 的N,N-二甲基甲醯胺(3 mL)溶液中加入1-羥基環丙烷羧酸(58.5mg, 573.7μmol)，三乙胺 (90.12 mg, 890.59μmol)、1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽 (113 mg, 593.7μmol)和1-羥基苯并三唑 (80.22 mg, 593.7μmol)，在25°C下攪拌1小時。LCMS監測反應完全，加水淬滅反應，乙酸乙酯萃取，無水硫酸鈉乾燥，濃縮，粗品經柱層析純化(甲醇/二氯甲烷=0-5%)得到產物(S)- 2-(7-氯-2-(1-羥基環丙烷羰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-5-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯 (50 mg,收率: 40.2%) 。ES-API:[M+H] +=421.0。
步驟二：氮氣保護下，將化合物(S)- 2-(7-氯-2-(1-羥基環丙烷羰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-5-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(50 mg, 119μmol) 溶於二氧六環/水(1 mL/0.2 mL)中，加入3-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二噁硼烷-2-基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(37 mg, 143 mmol)，氯(2-二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II)(9 mg, 12μmol)和碳酸鉀(49 mg, 356μmol)，加熱至100℃反應2小時。加入鹽酸甲醇溶液，常溫攪拌1小時，藉由LCMS監測反應完全，用碳酸氫鈉溶液調pH至7，用二氯甲烷/水處理，無水硫酸鈉乾燥，濃縮，粗品經柱層析純化(甲醇/二氯甲烷=0-5%)得到產物(S)- 2-(2-(1-羥基環丙烷羰基)-7-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-5-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(16.8 mg, 收率: 27.4%). ES-API:[M+H] +=517.3。
步驟三：將(S)- 2-(2-(1-羥基環丙烷羰基)-7-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-5-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(16.8 mg, 32μmol)溶於二氯甲烷(1 mL)中，加入三氟乙酸(1 mL)。室溫反應1小時。LCMS監測反應完成後，反應液旋乾，粗品用製備薄層色譜柱純化(二氯甲烷/甲醇=10/1)得到產物(S)-(1-羥基環丙基)(7-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-5-(吡咯烷-2-基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)甲酮(Z310, 4.5 mg, 收率：34%)。ES-API:[M+1] +=417.3。
實施例101 化合物Z311的合成
步驟一：在冰水浴條件下，向 (S)-2-(7-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-5-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(100 mg, 0.3 mmol)的二氯甲烷(10 mL)中，添加1-丙基磷酸酐(284 mg, 0.45 mmol)。在0℃下攪拌10分鐘，緩慢添加四氫吡喃-4-乙酸(65 mg, 0.45 mmol)。在室溫下攪拌1小時。倒入水中(10 mL)，用二氯甲烷(10 mL x 3)提取。飽和氯化鈉溶液(10 mL x 1)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮。粗品經柱層析(石油醚/乙酸乙酯=50/50)純化得到(S)-2-(7-氯-2-(2-(四氫-2H-吡喃-4-基)乙醯基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-5-基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(70 mg, 收率: 51%)。ES-API: [M+H] +=463。
步驟二：向(S)-2-(7-氯-2-(2-(四氫-2H-吡喃-4-基)乙醯基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-5-基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(70 mg, 0.156mmol) 和3-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼烷-2-基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(80 mg, 0.31mmol)的二氧六環(2ml)和水(0.5ml)中，加入氯(2-二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II)(10 mg, 0.005 mmol)和碳酸鉀(64.64 mg, 0.468 mmol)。混合物用氮氣脫氣，在110℃攪拌2小時。倒入水(3mL)，用乙酸乙酯(3mL x 3)萃取。合併有機相用氯化鈉溶液(3mL×1)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮。粗品藉由柱層析(石油醚/乙酸乙酯=50/50)純化得到(S)-2-(7-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-2-(2-(四氫-2H-吡喃-4-基)乙醯基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-5-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(60 mg, 收率: 71%)ES-API: [M+H] +=559.2。
步驟三：將(S)-2-(7-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-2-(2-(四氫-2H-吡喃-4-基)乙醯基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-5-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(60 mg, 0.055 mmol)溶於無水二氯甲烷(0.5 mL)，加入三氟乙酸(0.2 mL)，室溫反應2小時。LCMS監測反應完全，反應液減壓濃縮至乾，加入氨甲醇溶液(1mL)中和後，再次濃縮，經HPLC製備(甲酸法)純化得到1-[7-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-5-[(2S)-四氫-1H-吡咯-2-基]-1,2,3,4-四氫異喹啉-2-基]-2-(3,4,5,6-四氫-2H-吡喃-4-基)乙-1-酮(Z311, 甲酸鹽，21mg, 收率: 43%)。ES-API: [M+H]+=459.2。
實施例102 化合物Z312的合成
步驟一：在冰水浴條件下，向 (S)-2-(7-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-5-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(100 mg, 0.3 mmol)的二氯甲烷(5 mL)中，添加1-丙基磷酸酐(284 mg, 0.45 mmol)。在0℃攪拌10分鐘，緩慢添加四氫-2H-吡喃-4-羧酸(65 mg, 0.45 mmol)。在室溫下攪拌1小時。倒入水中(10 mL)，用二氯甲烷(10 mL x 3)萃取。飽和氯化鈉溶液(10 mL x 1)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮。粗品藉由柱層析(石油醚/乙酸乙酯=50/50)純化得到(S)-2-(7-氯-2-(四氫-2H-吡喃-4-甲醯基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-5-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(70 mg, 收率: 51%)。ES-API: [M+H] +=449。
步驟二：向(S)-2-(7-氯-2-(四氫-2H-吡喃-4-甲醯基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-5-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(70 mg, 0.156mmol) 和3-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼烷-2-基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(80 mg, 0.31mmol)的二氧六環(2mL)和水(0.5mL)中，加入氯(2-二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II)(10 mg, 0.005 mmol)和碳酸鉀(64.64 mg, 0.468 mmol)。混合物用氮氣脫氣，在110℃攪拌2小時。倒入水(3mL)，用乙酸乙酯(3mL x 3)崔武。合併後的有機相用氯化鈉溶液(3mL×1)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮。粗品藉由柱層析(石油醚/乙酸乙酯=50/50)純化得到(S)-2-(7-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-2-(四氫-2H-吡喃-4-甲醯基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-5-基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(60 mg, 收率: 71%)ES-API: [M+H] +=545.2。
步驟三：將(S)-2-(7-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-2-(四氫-2H-吡喃-4-甲醯基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-5-基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(60 mg, 0.055 mmol)溶於無水二氯甲烷(0.5 mL)，加入三氟乙酸(0.2 mL)，室溫反應2小時。LCMS監測反應完全，反應液減壓濃縮至乾，加入氨甲醇溶液(1mL)中和後，再次濃縮，經HPLC製備(碳酸氫銨法)純化得到(S)-1-[7-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-5-[吡咯烷-2-基]-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基] (四氫-2H-吡喃-4-基)甲酮(Z312, 8.7mg, 收率: 23%)。ES-API: [M+H] +=445。
實施例103 化合物Z313、Z38-1的合成
步驟一：將(S)-2-(7-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-5-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(100 mg, 0.297 mmol) 溶解在乾燥的1,4-二氧六環(3mL)中，依次加入5-溴-2-甲基噻唑(105.71 mg, 0.594 mmol)、三(二亞苄基丙酮)二鈀(27.18 mg, 0.030 mmol)、1,1'-聯萘-2,2'-雙二苯膦 (36.97 mg, 0.059 mmol) 和 叔丁醇鈉 (71.33 mg, 0.742 mmol)，加熱100℃反應微波3小時，反應完畢。加入乙酸乙酯(30 mL)稀釋，飽和食鹽水(30mL)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮，粗品經柱層析(甲醇/二氯甲烷=1/20)得到( S)-2-(7-氯-2-(2-甲基噻唑-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-5-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(10 mg, 收率: 7.76%)。ES-API: [M+H] +=434.2；( S)-2-(7-氯異喹啉-5-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(30mg, 收率: 30.3%)。ES-API: [M+H] +=333.1。
步驟二：將( S)-2-(7-氯-2-(2-甲基噻唑-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-5-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(10 mg, 0.023 mmol)、3-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(8.92 mg, 0.035 mmol)、氯(2-二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II)(8.30 mg, 0.012 mmol)和碳酸鉀(3.18 mg, 0.023 mmol)加入到1,4-二氧六環(3mL)和水(0.5mL)中，氮氣置換，115℃反應微波1小時。LCMS監測反應完畢，加入乙酸乙酯(20 mL)，依次用水(10mL)、飽和食鹽水(10mL)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，濃縮，粗品經經製備薄層析(石油醚/乙酸乙酯=1/1)純化得到(2S)-2-(7-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-2-(2-甲基噻唑-5-基)-1,2,3,4,4a,8a-六氫異喹啉-5-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(8 mg, 收率：65.68 %)。ES-API: [M+H] +=532.3。
步驟三：將(2S)-2-(7-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-2-(2-甲基噻唑-5-基)-1,2,3,4,4a,8a-六氫異喹啉-5-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(8 mg, 0.019 mmol)溶解到二氯甲烷(2mL)中，加入三氟乙酸(1 mL)中，室溫反應0.5小時。反應完畢，反應液濃縮，加入氨甲醇溶液(1mL)中和後，再次濃縮，經HPLC製備(甲酸法)純化得到(S)-2-甲基-5-(7-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-5-(吡咯-2-基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)噻唑(Z313, 甲酸鹽, 1.1 mg, 收率：12.1%)。ES-API: [M+H] +=432.2。
步驟四：將( S)-2-(7-氯異喹啉-5-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(30mg, 0.090mmol)、3-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(23.22 mg, 0.090 mmol)、氯(2-二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II)(6.48 mg, 0.009 mmol)和碳酸鉀(37.26 mg,0.27 mmol)加入到1,4-二氧六環(3mL)和水(0.5mL)中，氮氣置換，115℃微波反應1小時。反應完畢，加入乙酸乙酯(20 mL)，依次用水(10mL x1)、飽和食鹽水(10mLx1)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，粗品經製備薄層析(石油醚/乙酸乙酯=1/1)純化得到(S)-2-(7-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-4a,8a –二氫異喹啉-5-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(8 mg, 收率: 21.1%)。ES-API: [M+H] +=429.1。
步驟五：將(S)-2-(7-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-4a,8a –二氫異喹啉-5-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(8 mg, 0.019 mmol)溶解到二氯甲烷(2mL)中，加入三氟乙酸(1 mL)中，室溫反應0.5小時。反應完畢，反應液濃縮，加入氨甲醇溶液(1mL)中和後，再次濃縮，經HPLC製備(甲酸法)純化得到(S)-7-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-2-(2-甲基噻唑-5-基)-5-(吡咯烷-2-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉(Z38-1, 甲酸鹽, 3.5 mg, 收率: 56.1%)。ES-API: [M+H] +=329.1。 1H NMR (500 MHz, DMSO- d 6) δ 11.46 (s, 1H), 9.39 (s, 1H), 8.67 (d, J= 2.2 Hz, 1H), 8.52 (d, J= 5.9 Hz, 1H), 8.38 (q, J= 2.0 Hz, 2H), 8.34 (d, J= 2.2 Hz, 1H), 8.28 (s, 1H), 8.05 (d, J= 6.0 Hz, 1H), 7.32 (s, 1H), 4.92 (t, J= 7.7 Hz, 1H), 3.2-3.08 (m, 3H), 2.47-2.43 (m, 1H), 2.36-2.35 (m, 3H), 1.93-1.87 (m, 2H), 1.72-1.63 (m, 1H).
實施例104 化合物Z314的合成
步驟一：將5-氯異吲哚啉-1-酮(5 g, 29.83 mmol)溶於濃硫酸(60 mL)中，冰浴冷卻下滴加濃硝酸(2.3 mL)，冰浴下反應1小時。反應完成後，將反應液倒入冰水中，二氯甲烷萃取，有機相無水硫酸鈉乾燥，旋乾得到產物5-氯-6-硝基異吲哚啉-1-酮(6 g, 收率:95%)。ES-API:[M+H] +=213.0。
步驟二：將5-氯-6-硝基異吲哚啉-1-酮(4.5 g, 21.2 mmol)溶於乙醇/水(100 mL/10 mL)中，加入還原鐵粉(7.1 g, 127 mmol)和氯化銨(6.8 g, 127 mmol)，加熱至90℃反應2小時。完成後，將反應液過濾，甲醇洗滌，旋乾，得到粗品經柱層析純化(二氯甲烷/甲醇=3/1)得到產物6-氨基-5-氯異吲哚啉-1-酮(2.3 g, 收率：55%)。ES-API:[M+H] +=183.0。
步驟三：將6-氨基-5-氯異吲哚啉-1-酮(2.2 g, 12.1 mmol)溶於二氯甲烷/甲醇(50 mL/10 mL)中，加入N-溴代丁二醯亞胺(2.6 g, 14.5 mmol)，室溫反應1小時。反應液旋乾，得到粗品經柱層析純化(二氯甲烷/甲醇=10/1)得到產物6-氨基-7-溴-5-氯-異吲哚啉-1-酮(3 g,粗品)。ES-API:[M+H] +=261.0。
步驟四：將6-氨基-7-溴-5-氯-異吲哚啉-1-酮(3 g，11.5 mmol)溶於四氫呋喃/水(10 mL/10 mL)和次磷酸(20 mL)中，冰浴冷卻，加入亞硝酸鈉(1.6 g，22.9 mmol)，升至室溫反應1小時。反應完成後，加水和二氯甲烷萃取，飽和碳酸氫鈉洗滌，無水硫酸鈉乾燥，旋乾，得到粗品用石油醚/乙酸乙酯(5/1)打漿得到產物7-溴-5-氯-異吲哚啉-1-酮(900 mg, 粗品)。ES-API:[M+H] +=247.9。
步驟五：將7-溴-5-氯-異吲哚啉-1-酮(900 mg, 3.6 mmol)溶於四氫呋喃(20 mL)中，加入硼烷四氫呋喃(36.5 mL, 36.5 mmol)，加熱至70℃反應過夜。反應液用2M 鹽酸淬滅，加熱至70度攪拌30分鐘，二氯甲烷萃取，水相用碳酸氫鈉中和，二氯甲烷萃取，無水硫酸鈉乾燥，旋乾得到產物4-溴-6-氯-異二氫吲哚(500 mg, 粗品)。ES-API:[M+H] +=231.9。
步驟六：將4-溴-6-氯-異二氫吲哚(500 mg, 2.2 mmol)溶於二氯甲烷(10 mL)中，加入氯甲酸苄酯(734 mg, 4.3 mmol)和三乙胺(653 mg, 6.4 mmol)，室溫反應1小時。反應完成後，反應液用水和二氯甲烷萃取，無水硫酸鈉乾燥，旋乾，得到粗品經矽膠柱層析純化(石油醚/乙酸乙酯=10/1)得到產物4-溴-6-氯-異二氫吲哚-2-羧酸苄酯(367 mg, 收率：43%)。ES-API:[M+23] +=390.0。
步驟七：將4-溴-6-氯-異二氫吲哚-2-羧酸苄酯(367 mg, 1.0 mmol)溶於乙醇(8 mL)中，加入乙烯基三氟硼酸鉀(402 mg, 3.0 mmol)，1,1-雙(二苯基膦)二荗鐵二氯化鈀(73 mg, 0.1 mmol)和三乙胺(304 mg, 3.0 mmol)，加熱至80℃反應3小時。反應完成後，將反應液旋乾，得到粗品經柱層析純化(石油醚/乙酸乙酯=4/1)得到產物6-氯-4-乙烯基-異二氫吲哚-2-羧酸苄酯(300 mg, 收率：90%)。ES-API:[M+H] +=314.1。
步驟八：將6-氯-4-乙烯基-異二氫吲哚-2-羧酸苄酯(300 mg, 0.96 mmol)溶於四氫呋喃/水(6 mL/3 mL)中，加入高碘酸鈉(1.64 g, 7.6 mmol)和二水合鋨酸鉀(106 mg, 0.27 mmol)，室溫反應2小時。反應液用硫代硫酸鈉水溶液淬滅，乙酸乙酯萃取，有機相無水硫酸鈉乾燥，旋乾，得到粗品經製備薄層色譜柱純化(石油醚/乙酸乙酯=2/1)得到產物6-氯-4-甲醯基-異二氫吲哚-2-羧酸苄酯(120 mg, 收率：33%)。ES-API:[M+23] +=338.1。
步驟九：將6-氯-4-甲醯基-異二氫吲哚-2-羧酸苄酯(120 mg, 0.38 mmol)溶於二氯甲烷(3 mL)中，加入( S)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺(92 mg, 0.76 mmol)和鈦酸四乙酯(347 mg, 1.5 mmol)，室溫反應過夜。反應完成後，加水淬滅反應，二氯甲烷萃取，無水硫酸鈉乾燥，旋乾得到產物4-[( E)-[( S)-叔丁基亞磺醯基]亞氨基甲基]-6-氯-異二氫吲哚-2-羧酸苄酯(120 mg, 粗品)。ES-API:[M+H] +=419.2。
步驟十：將4-[( E)-[( S)-叔丁基亞磺醯基]亞氨基甲基]-6-氯-異二氫吲哚-2-羧酸苄酯(120 mg, 0.29 mmol)溶於四氫呋喃(2 mL)中，乾冰/乙醇浴下冷卻，滴加[2-(1,3-二噁烷-2-基)乙基]溴化鎂(2.3 mL, 1.2 mmol)，冷卻下反應2小時。反應液倒入水中淬滅，乙酸乙酯萃取，無水硫酸鈉乾燥，旋乾，得到粗品經柱層析純化(石油醚/乙酸乙酯=1/1)得到產物6-氯-4-(( S)-1-(( S)-1,1-二甲基乙基亞磺醯氨基)-3-(1,3-二烷-2-基)丙基)異二氫吲哚-2-羧酸苄酯(145 mg, 收率：95%)。ES-API:[M+H] +=535.2。
步驟十一：將6-氯-4-(( S)-1-(( S)-1,1-二甲基乙基亞磺醯氨基)-3-(1,3-二噁烷-2-基)丙基)異二氫吲哚-2-羧酸苄酯(145 mg, 0.27 mmol)溶於三氟乙酸(1 mL)，加入水(0.1 mL)，室溫反應1小時。反應完成後，加入三乙基矽烷(315 mg, 2.7 mmol)，室溫反應過夜。將反應液旋乾，加入四氫呋喃/水(1 mL/1 mL)，碳酸氫鈉鹼化，再加入二碳酸二叔丁酯(89 mg, 0.4 mmol)，室溫反應2小時。反應完成後，加乙酸乙酯/水萃取，無水硫酸鈉乾燥，旋乾，得到粗品經製備薄層色譜柱純化(石油醚/乙酸乙酯=3/1)得到產物(S)-4-(1-(叔丁氧基羰基)吡咯烷-2-基)-6-氯異二氫吲哚-2-羧酸苄酯(70 mg,收率:56%)。ES-API:[M+H-100] +=357.1。
步驟十二：往(S)-4-(1-(叔丁氧基羰基)吡咯烷-2-基)-6-氯異二氫吲哚-2-羧酸苄酯(70 mg, 0.15 mmol)的二氯甲烷(2 mL)溶液中依次加入氯化鈀(14 mg, 0.08 mmol)，三乙胺(0.04 mL, 0.31 mmol)和三乙基矽氫(0.1 mL, 0.61 mmol)，室溫攪拌1小時。反應液用甲醇(2 mL)淬滅，過濾，濃縮得到 (S)-2-(6-氯異吲哚啉-4-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(50 mg, 粗品)。ES-API: [M+H] += 323.4.
步驟十三：向(S)-2-(6-氯異吲哚啉-4-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(45 mg, 0.14 mmol)，(S)-3,3,3-三氟-2-羥基-2-甲基丙酸(44 mg, 0.28 mmol)的二氯甲烷(2 mL)溶液中依次加入 N, N-二異丙基乙胺(180 mg, 1.39 mmol)和 N, N, N′, N′-四甲基- O-(7-氮雜苯并三唑-1-基)六氟磷酸脲(106 mg, 0.28 mmol)，室溫攪拌1小時。反應液加入二氯甲烷(10 mL)，依次用水(5 mL)和飽和食鹽水(5 mL)洗滌，有機相用無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮，粗品用矽膠柱層析(四氫呋喃/石油醚=0-50%)純化得到(S)-2-(6-氯-2-((S)-3,3,3-三氟-2-羥基-2-甲基丙醯基)異吲哚啉-4-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(40 mg, 收率: 62%)。ES-API: [M+H] += 407.2。
步驟十四：氮氣保護下，(S)-2-(6-氯-2-((S)-3,3,3-三氟-2-羥基-2-甲基丙醯基)異吲哚啉-4-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(40 mg, 0.09 mmol)，3-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-二氧硼雜環戊烷-2-基)-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶(29 mg, 0.11 mmol)，氯(2-二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II)(6 mg, 0.01 mmol)，2-雙環己基膦-2',6'-二甲氧基聯苯(4 mg, 0.01 mmol)和碳酸鉀(24 mg, 0.17 mmol)的1,4-二氧六環(2 mL)和水(0.4 mL)的混合溶液在120℃攪拌2小時。反應液倒入乙酸乙酯(10 mL)，依次用飽和食鹽水(5 mL)和水(5 mL)洗滌。有機相用無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮，粗品用矽膠柱層析(甲醇/二氯甲烷=0-10%)純化得到(S)-2-(6-(3-甲基-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶-5-基)-2-((S)-3,3,3-三氟-2-羥基-2-甲基丙醯基)異吲哚啉-4-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(25 mg, 收率: 52%)。ES-API: [M+H] += 559.3。
步驟十五：冰浴條件下，將三氟乙酸(0.5 mL)滴加到(S)-2-(6-(3-甲基-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶-5-基)-2-((S)-3,3,3-三氟-2-羥基-2-甲基丙醯基)異吲哚啉-4-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(25 mg, 45 μmol)的二氯甲烷(1 mL)溶液中，室溫攪拌1小時。反應液濃縮並用製備HPLC(碳酸氫銨法)純化得到白色固體(S)-3,3,3-三氟-2-羥基-2-甲基-1-(6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-4-((S)-吡咯烷-2-基)異吲哚啉-2-基)丙烷-1-酮(Z314, 9.5 mg, 純度:100%, 收率:46%)。ES-API: [M+H] += 459.2。 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 11.35 (s, 1H), 8.53-8.41 (m, 1H), 8.18-8.06 (m, 1H), 7.70 (d, J= 5.2 Hz, 1H), 7.59 (d, J= 6.4 Hz, 1H), 7.35-7.06 (m, 2H), 5.31-5.11 (m, 2H), 4.85 (s, 1H), 4.80 (s, 1H), 4.27-4.07 (m, 1H), 3.19-3.07 (m, 1H), 3.03-2.91 (m, 1H), 2.31 (s, 3H), 2.26-2.13 (m, 1H), 1.97-1.74 (m, 2H), 1.69-1.53 (m, 4H).
實施例105 化合物Z315的合成
步驟一：將(S)-2-(6-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(100 mg, 0.297 mmol) 溶解在乾燥的N,N-二甲基甲醯胺(5mL)中，依次加入4-氯嘧啶(102.00 mg, 0.891 mmol)、碳酸鉀(204.83 mg, 1.484 mmol)，加熱50℃反應18小時，反應完畢。加入乙酸乙酯(30 mL)稀釋，飽和食鹽水(30mL)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮，粗品經矽膠柱層析純化(甲醇/二氯甲烷=1/20)得到( S)-2-(6-氯-2-(嘧啶-4-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(80 mg, 收率: 64.95%)。ES-API: [M+H] +=415.1。
步驟二：將( S)-2-(6-氯-2-(嘧啶-4-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(80 mg, 0.193 mmol)、3-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(74.65 mg, 0.289 mmol)、氯(2-二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II)(13.89 mg, 0.019 mmol)和碳酸鉀(79.94 mg, 0.578 mmol)加入到1,4,-二氧六環(3mL)和水(0.5mL)中，氮氣置換，115℃微波反應1小時，反應完畢，加入乙酸乙酯(20 mL)，依次用水(10mL)、飽和食鹽水(10mL)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，粗品經經製備薄層析(石油醚/乙酸乙酯=1/1)純化得到(S)-2-(6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-2-(嘧啶-4-基))-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(60 mg, 收率: 60.94%)。ES-API: [M+H] +=511.3。
步驟三：將(S)-2-(6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-2-(嘧啶-4-基))-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(60 mg, 0.117 mmol)溶解到二氯甲烷(2mL)中，加入三氟乙酸(1 mL)中，室溫反應0.5小時。反應完畢，反應液濃縮，加入氨甲醇溶液(1mL)中和後，再次濃縮，經HPLC製備(氨水法)純化得到(S)-6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-2-(嘧啶-4-基)-8-(吡咯烷-2-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉(Z315, 30mg, 收率: 62.5%)。ES-API: [M+H] +=411.2。 1H NMR (500 MHz, DMSO- d 6) δ 11.35 (d, J= 2.4 Hz, 1H), 8.56 (d, J= 1.2 Hz, 1H), 8.47 (d, J= 2.2 Hz, 1H), 8.23 (d, J= 6.1 Hz, 1H), 8.11 (d, J= 2.1 Hz, 1H), 7.78 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 7.43 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 7.27-7.26 (m, 1H), 6.92 (dd, J= 6.3, 1.3 Hz, 1H), 5.00 (d, J= 16.7 Hz, 1H), 4.75 (d, J= 16.5 Hz, 1H), 4.33 (t, J= 7.7 Hz, 1H), 3.83 (s, 2H), 3.16-3.10 (m, 1H), 3.01 (t, J= 6.1 Hz, 2H).
實施例106 化合物Z316的合成
步驟一：向(R)-3-(2-((苄氧基)羰基)-6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(40 mg, 0.069mmol)，加入三乙胺(7.64mg, 0.076mmol)和二碳酸二叔丁酯(16.64 mg, 0.076mmol)，在室溫下攪拌反應過夜。混合物用水(2mLX2)、鹽水(2mL)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，濃縮得到(R)-3-(2-((苄氧基)羰基)-6-(1-(叔丁氧羰基)-3-甲基-1H-吡咯[2,3-b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-甲酸叔丁酯(45 mg, 收率: 95%)。ES-API: [M+H] +=683.0。
步驟二：向(R)-3-(2-((苄氧基)羰基)-6-(1-(叔丁氧羰基)-3-甲基-1H-吡咯[2,3-b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-甲酸叔丁酯(45 mg, 0.06mmol)的異丙醇溶液中(3mL)中，加入鈀碳(10 mg)，氮氣置換三遍。室溫反應過夜。反應液減壓濃縮至乾得到(R)-3-(6-(1-(叔丁氧羰基)-3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(30 mg, 收率: 91%)ES-API: [M+H] +=549.2。
步驟三：將(R)-3-(6-(1-(叔丁氧羰基)-3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(30 mg, 0.05 mmol)溶於二氯甲烷(1 mL)，依次加入2-(7-偶氮苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯(50 mg, 0.1 mmol)，甲基磺醯氯(34 mg，0.1 mmol)，N,N-二異丙基乙二胺(40 mg, 0.15 mmol)，室溫反應2小時。反應結束後，加入二氯甲烷(10 mL)稀釋，有機相用水(5 mL)洗，氯化鈉溶液(5 mL)洗，無水硫酸鈉乾燥，減壓濃縮至乾，粗品經柱層析純化(乙酸乙酯：石油醚=50:50)得到(R)-3-(6-(1-(叔丁氧羰基)-3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-2-(甲磺醯基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(25mg, 收率: 81%)ES-API: [M+H] +=627.2。
步驟四：將(R)-3-(6-(1-(叔丁氧羰基)-3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-2-(甲磺醯基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(25 mg, 0.045 mmol)溶於無水二氯甲烷(0.5 mL)，加入三氟乙酸(0.2 mL)，室溫反應2小時。LC-MS監測反應完全，減壓濃縮至乾，加入氨甲醇溶液(1mL)中和後，再次濃縮，經HPLC製備(碳酸氫銨法)純化得到(R)-3-(6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-2-(甲基磺醯基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基 )嗎啉(Z316, 1.07mg, 收率: 8%)。ES-API: [M+H] +=427.0。
實施例107 化合物Z317的合成
步驟一：將(R)-3-(6-(1-(叔丁氧羰基)-3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(40 mg, 0.07 mmol)溶於二氯甲烷(1 mL)，依次加入2-(7-偶氮苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯(50 mg, 0.1 mmol)，(R)-2-三氟甲基-2-羥基丙酸(18 mg, 0.1 mmol)，N,N-二異丙基乙二胺(40 mg, 0.15 mmol)，室溫反應2小時。反應結束後，加入二氯甲烷(10 mL)稀釋，有機相用水(5 mL)洗，氯化鈉溶液(5 mL)洗，無水硫酸鈉乾燥，減壓濃縮至乾，粗品經柱層析純化(乙酸乙酯：石油醚=50:50)，得到(R)-3-(6-(1-(叔丁氧羰基)-3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-2-((R)-3,3,3-三氟-2-羥基-2-甲基丙醯基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(30mg, 收率:60%)ES-API: [M+H] +=689.2。
步驟二：將(R)-3-(6-(1-(叔丁氧羰基)-3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-2-((R)-3,3,3-三氟-2-羥基-2-甲基丙醯基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(30 mg, 0.045 mmol)溶於無水二氯甲烷(0.5 mL)，加入三氟乙酸(0.2 mL)，室溫反應2小時。LCMS監測反應完全，反應液減壓濃縮至乾，加入氨甲醇溶液(1mL)中和後，再次濃縮，經HPLC製備(碳酸氫銨法)純化得到(R)-3,3,3-三氟-2-羥基-2-甲基-1-[6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-8-[(R)-嗎啉-3-基]-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]丙-1-酮(Z317, 1.2mg, 收率: 8%)。ES-API: [M+H] +=588.0。
實施例108 化合物Z318的合成
步驟一：將(R)-3-(6-(1-(叔丁氧羰基)-3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(40 mg, 0.07 mmol)溶於二氯甲烷(1 mL)，依次加入2-(7-偶氮苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯(50 mg, 0.1 mmol)，2,6-二甲基-4-吡啶甲酸(16 mg, 0.1 mmol)，N,N-二異丙基乙二胺(40 mg, 0.15 mmol)，室溫反應2小時。反應結束後，加入二氯甲烷(10 mL)稀釋，有機相用水(5 mL)洗，氯化鈉溶液(5 mL)洗，無水硫酸鈉乾燥，減壓濃縮至乾，粗品經矽膠柱層析純化(乙酸乙酯：石油醚=50:50)得到(R)-3-(6-(1-(叔丁氧羰基)-3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-2-(2,6-二甲基異煙醯基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(30mg, 收率: 62%)ES-API: [M+H] +=682.0。
步驟二：將(R)-3-(6-(1-(叔丁氧羰基)-3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-2-(2,6-二甲基異煙醯基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(30 mg, 0.045 mmol)溶於無水二氯甲烷(0.5 mL)，加入三氟乙酸(0.2 mL)，室溫反應2小時。LCMS監測反應完全，反應液減壓濃縮至乾，加入氨甲醇溶液(1mL)中和後，再次濃縮，經HPLC製備(碳酸氫銨法)純化得到(R)-(2,6-二甲基吡啶-4-基)[6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-8-[嗎啉-3-基]-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]甲酮(Z318, 17.76mg, 收率: 77%)。ES-API: [M+H] +=482.0。
實施例109 化合物Z319
步驟一：將1 H-吡唑-4-羧酸甲酯(500 mg, 3.97 mmol)溶於1,2-二氯乙烷(25 mL)，再加入環丙基硼酸(683 mg, 7.94 mmol)，碳酸鈉(842 mg, 7.94 mmol)，2,2'-聯吡啶(619 mg, 3.97 mmol)和醋酸銅(718 mg, 3.97 mmol)，加熱至70℃，氮氣氣保護下反應過夜。加入水淬滅反應，乙酸乙酯萃取，有機相無水硫酸鈉乾燥，旋乾，粗品經柱層析純化(石油醚/乙酸乙酯=2/1)得到1-環丙基-1 H-吡唑-4-羧酸甲酯(430 mg, 收率: 65%)。ES-API:[M+H] += 167.1。
步驟二：將1-環丙基-1 H-吡唑-4-羧酸甲酯(200 mg, 1.2 mmol)溶於四氫呋喃/甲醇/水(3 mL/3 mL/1 mL)中，加入一水合氫氧化鋰(253 mg, 6.02 mmol)，加熱至50℃反應1小時。反應完成後，加水和乙酸乙酯萃取，水相用1M鹽酸調pH至2，用乙酸乙酯萃取，無水硫酸鈉乾燥，旋乾得到產物1-環丙基-1 H-吡唑-4-羧酸(160 mg, 收率: 87%)。ES-API:[M+H]+= 153.1。
步驟三：將( S)- 2-(6-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(120 mg, 0.36 mmol)溶於二氯甲烷(5 mL)，加入1-環丙基-1 H-吡唑-4-羧酸(160 mg, 1.05 mmol)，2-(7-偶氮苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯(271 mg, 0.71 mmol)和三乙胺 (108 mg, 1.07 mmol) ，在室溫下攪拌2小時。反應完成後，加水淬滅反應，二氯甲烷萃取，飽和食鹽水洗，無水硫酸鈉乾燥，旋乾，粗品經製備薄層色譜柱純化(石油醚/乙酸乙酯=1/1)得到產物 ( S)- 2-(6-氯-2-(1-環丙基-1 H-吡唑-4-羰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(200 mg, 粗品)。(Rf=0.4, 石油醚/乙酸乙酯=1/1)。ES-API:[M+H]+= 471.2
步驟四：將( S)- 2-(6-氯-2-(1-環丙基-1 H-吡唑-4-羰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(200 mg, 0.42 mmol)溶於二氧六環/水(2 mL/0.4 mL)中，加入3-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二噁硼烷-2-基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(131 mg, 0.51 mmol)，氯(2-二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II)(30 mg, 0.042 mmol)和碳酸鉀(117 mg, 0.85 mmol)。氮氣保護下，加熱至100℃反應2小時。反應完成後，反應液旋乾，粗品經製備薄層色譜柱純化(二氯甲烷/甲醇=20/1)得到產物( S)- 2-(2-(1-環丙基-1 H-吡唑-4-羰基)-6-(3-甲基-1 H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(100 mg, 收率：41%)。ES-API:[M+1] +=567.3。
步驟五：將( S)- 2-(2-(1-環丙基-1 H-吡唑-4-羰基)-6-(3-甲基-1 H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(100 mg, 0.18 mmol)溶於二氯甲烷(2 mL)中，加入三氟乙酸(1.5 mL)。室溫反應1小時。反應完成後，反應液旋乾，用二氯甲烷和飽和碳酸鈉水溶液萃取，無水硫酸鈉乾燥，旋乾，粗品經製備薄層色譜柱純化(二氯甲烷/甲醇=10/1)得到產物(S)-(1-環丙基-1H-吡唑-4-基)(6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-8-(吡咯烷-2-基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)甲酮(Z319, 26.8 mg, 收率：32%)。ES-API:[M+1] +=467.3。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 8.85 (s, 1H), 8.48 (s, 1H), 8.01 (s, 1H), 7.89 (s, 1H), 7.80-7.67 (m, 2H), 7.29 (s, 1H), 7.08 (s, 1H), 5.11-4.99 (m, 1H),4.93-4.71 (m, 1H),4.55-4.17 (m, 1H), 3.91 (s, 2H), 3.67-3.59 (m, 1H), 3.36-3.27 (m, 1H), 3.14-2.98 (m, 3H), 2.34 (s, 3H), 2.26-2.14 (m, 1H), 2.06-1.85 (m, 4H), 1.18-1.12 (m, 2H), 1.08-1.03 (m, 2H).
實施例110 化合物Z320的合成
步驟一：氮氣保護下，將(S)-2-(6-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(100 mg, 0.297 mmol) 溶解在乾燥的1,4-二氧六環(2mL)中，依次加入4-碘-2-甲基吡啶(130.04 mg, 0.594 mmol)、甲磺酸(2-二環己基膦基-2',6'-二異丙氧基-1,1'-聯苯基)(2-氨基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II) (14.91 mg, 0.018 mmol)、2-二環己基磷-2',6'-二異丙氧基-1,1'-聯苯 (27.70 mg, 0.059 mmol) 和碳酸鉀 (123.09 mg, 0.891 mmol)，加熱140℃微波反應5小時，反應完畢。加入乙酸乙酯(30 mL)稀釋，飽和食鹽水(30mL)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮，粗品經矽膠柱層析純化(甲醇/二氯甲烷=1/20)得到( S)-2-(6-氯-2-(2-甲基吡啶-4-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(80 mg, 收率: 63%)。ES-API: [M+H] +=428.1。
步驟二：將( S)-2-(6-氯-2-(2-甲基吡啶-4-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(80 mg, 0.193 mmol)、3-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(72.38 mg, 0.280 mmol)、氯(2-二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II)(13.47 mg, 0.019 mmol)和碳酸鉀(77.51 mg, 0.561 mmol)加入到1,4-二氧六環(3mL)和水(0.5mL)中，氮氣置換，115℃微波反應1小時。反應完畢，加入乙酸乙酯(20 mL)，依次用水(10mL)、飽和食鹽水(10mL)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，粗品經經製備薄層析(石油醚/乙酸乙酯=1/1)純化得到(S)-2-(6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-2-(2-甲基吡啶-4-基))-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯 (60 mg, 收率：61.29%)。ES-API: [M+H] +=524.3。
步驟三：將(S)-2-(6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-2-(2-甲基吡啶-4-基))-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(60 mg, 0.115 mmol)溶解到二氯甲烷(2mL)中，加入三氟乙酸(1 mL)中，室溫反應0.5小時。反應完畢，反應液濃縮，加入氨甲醇溶液(1mL)中和後，再次濃縮，經HPLC製備(甲酸法)純化得到(S)-6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-2-(2-甲基吡啶-4-基)-8-(吡咯烷-2-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉 (Z320, 甲酸鹽，45mg, 收率: 92%)。ES-API: [M+H] +=424.2。 1H NMR (500 MHz, DMSO- d 6) δ 11.41 (d, J= 2.3 Hz, 1H), 8.59 (d, J= 2.2 Hz, 1H), 8.29 (s, 1H), 8.23 (d, J= 2.2 Hz, 1H), 8.13 (d, J= 6.2 Hz, 1H), 7.85 (d, J= 1.9 Hz, 1H), 7.64 (d, J= 1.8 Hz, 1H), 7.29 (dd, J= 2.3, 1.3 Hz, 1H), 7.00 (d, J= 2.5 Hz, 1H), 6.97 (dd, J= 6.4, 2.6 Hz, 1H), 4.88 (t, J= 8.2 Hz, 1H), 4.78 (d, J= 16.4 Hz, 1H), 4.63 (d, J= 16.4 Hz, 1H), 3.77 (dd, J= 12.3, 6.0 Hz, 1H), 3.65 (dt, J= 12.6, 6.2 Hz, 1H), 3.45 (q, J= 7.6, 6.0 Hz, 1H), 3.33 (s, 1H), 3.04 (d, J= 6.0 Hz, 2H), 2.42 (s, 3H), 2.32 (d, J= 1.0 Hz, 3H), 2.18-2.02 (m, 4H).
實施例111 化合物Z246的合成
步驟一：(4-硝基苯基)碳醯氯(600 mg, 2.98 mmol)，在0°C下加入環丙醇(207.69 mg, 3.58 mmol)，然後加入吡啶(259.29 mg, 3.28 mmol)，混合物在0°C下攪拌 1小時。LCMS監測反應完全，用二氯甲烷(5 mL)和0.1M硫酸水溶液(10 mL)稀釋，飽和碳酸氫鈉溶液(10 mL)和飽和食鹽水(10 mL)洗滌。有機相無水硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮至約5mL的體積，加入環己烷(10 mL)。過濾，濃縮，粗品經柱層析純化(石油醚/乙酸乙酯=50/50)得到黃色固體狀產物碳酸環丙基(4-硝基苯基)酯(450 mg, 產率: 67.66%)。ES-API:[M+H-100] +=224.1
步驟二：向 (S)- 2-(6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(30 mg, 0.069 mmol) 的二氯甲烷(1 mL)溶液中加入碳酸環丙基(4-硝基苯基)酯(15.48 mg, 0.069 mmol)，N ,N-二異丙基乙二胺(26.89 mg, 0.21 mmol)，混合液在25°C下攪拌兩2小時。LCMS監測反應完全，加水淬滅反應，二氯甲烷萃取，無水硫酸鈉乾燥，濃縮，粗品經柱層析純化(石油醚/乙酸乙酯=50/50)得到產物(S)- 8-(1-(叔丁氧基羰基)吡咯烷-2-基)-6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-羧酸環丙酯(30 mg, 收率: 83.73%) 。ES-API:[M+H] += 517.3。
步驟三：向(S)- 8-(1-(叔丁氧基羰基)吡咯烷-2-基)-6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-羧酸環丙酯(30 mg, 0.058 mmol,) 的二氯甲烷(2mL)溶液加入三氟乙酸(1mL)，常溫攪拌1小時。藉由LCMS監測反應完全，用飽和碳酸氫鈉中和調pH至7，用二氯甲烷/水處理，無水硫酸鈉乾燥，濃縮，粗品經HPLC製備純化(色譜柱: Ultimate XB-C18,50*250mm,10um; 流動相：A：純化水(0.05%氨水) B : 純乙腈;流速：80ml/min;梯度：在50分鐘內，B/A=20%-90%; 波長：214nm；柱溫：室溫)得到(S)- 6-(3-甲基-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-8-(吡咯烷-2-基)-3，4-二氫異喹啉-2(1H)-羧酸環丙酯(Z246, 1.8 mg, 收率: 7.44%) ，白色粉末。ES-API:[M+H] +=417.2。
實施例112 化合物Z285-1的合成
步驟一：將(S)-5-(5-(1-(叔丁氧基羰基)吡咯烷-2-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-7-基)-3-甲基-1H-吡咯[2,3-b]吡啶-1-羧酸叔丁酯 (100 mg, 0.188 mmol)溶解到二氯甲烷(5mL)中，依次加入(S)-3,3,3-三氟-2-羥基-2-甲基丙酸(22.26 mg, 0.141 mmol)、三乙胺 (0.013 mL, 0.094 mmol) 和 2-(7-偶氮苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯 (35.69 mg, 0.094 mmol)，室溫反應1小時，反應完畢。加入二氯甲烷(30 mL)稀釋，飽和食鹽水(30mL)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮，粗品經矽膠純化(石油醚/乙酸乙酯=1/1)得到 5-(5-((S)-1-(叔丁氧基羰基)吡咯烷-2-基)-2-((S)-3,3,3-三氟-2-羥基-2-甲基丙醯基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-7-基)-3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-1-羧酸叔丁酯(30 mg, 收率: 47.51%)。ES-API: [M+H] +=673.3。
步驟二：將5-(5-((S)-1-(叔丁氧基羰基)吡咯烷-2-基)-2-((S)-3,3,3-三氟-2-羥基-2-甲基丙醯基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-7-基)-3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-1-羧酸叔丁酯(30 mg, 0.045 mmol) 溶解到二氯甲烷(3mL)中，加入三氟乙酸(2 mL)中，室溫反應0.5小時。反應完畢，反應液濃縮，加入氨甲醇溶液(1mL)中和後，再次濃縮，經HPLC製備(氨水法)純化得到(S)-3,3,3-三氟-2-羥基-2-甲基-1-(7-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-5-((S)-吡咯烷-2-基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)丙-1-酮(Z285-1, 9 mg, 收率: 42.75%)。ES-API: [M+H] +=473.2。 1H NMR (500 MHz, DMSO- d 6) δ 11.34 (s, 1H), 8.47 (d, J= 2.1 Hz, 1H), 8.12 (d, J= 2.2 Hz, 1H), 7.77 (s, 1H), 7.44 (s, 1H), 7.26 (d, J= 2.1 Hz, 1H), 5.17 (s, 1H), 4.85-4.62 (m, 2H), 4.26 (t, J= 7.7 Hz, 2H), 4.01 (s, 1H), 3.75 (s, 1H), 3.13-3.09 (m, 1H), 2.94 (q, J= 8.1 Hz, 2H), 2.31 (d, J= 1.1 Hz, 3H), 2.20 (dt, J= 12.6, 6.3 Hz, 1H), 2.05-1.97 (m, 1H), 1.85-1.75 (, 2H).
實施例113 化合物Z151-1的合成
步驟一：將1,3-二氫異苯并呋喃-5-胺(1.8 g, 13.317 mmol) 和  N-氯代丁二醯亞胺 (2.66 g, 19.975 mmol)溶解在N,N-二甲基甲醯胺(20mL)，室溫下攪拌 1小時。加入乙酸乙酯(100mL)，用水(100mL x 3)洗滌，濃縮，粗品經矽膠柱色譜純化(四氫呋喃/石油醚=10/90)，得到6-氯-1,3-二氫異苯并呋喃-5-胺(550 mg, 收率: 24.35%)。ES-API: [M+H] +=170.0。
步驟二：將6-氯-1,3-二氫異苯并呋喃-5-胺(550 mg, 3.243 mmol) 溶解在乙腈 (30 mL) 溶液中，加入N-溴代丁二醯亞胺 (634.86 mg, 3.567 mmol))。混合物在室溫下攪拌1小時。加入乙酸乙酯(100 mL)。用飽和氯化鈉溶液 (100 mL x 1) 洗滌，無數硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮。粗品藉由柱層析 (四氫呋喃/石油醚=10/90) 純化得到4-溴-6-氯-1,3-二氫異苯并呋喃-5-胺(480 mg, 收率: 59.57%)。ES-API: [M+H] +=248.0, 250.0。
步驟三：將4-溴-6-氯-1,3-二氫異苯并呋喃-5-胺(480 mg, 1.932 mmol)溶解在四氫呋喃(5mL)和水(2mL)混合溶劑中，依次加入次磷酸(5 mL)和亞硝酸鈉(213.25 mg, 3.091 mmol)，室溫反應2小時。倒入水 (10 mL) 中，用乙酸乙酯 (20 mL x 3) 萃取。合併乙酸乙酯層，依次用飽和碳酸氫鈉水溶液(30mLx1)、飽和氯化鈉溶液(30mL x 1)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮。粗品經柱層析(四氫呋喃/石油醚=10/90)純化得到4-溴-6-氯-1,3-二氫異苯并呋喃(210 mg, 收率：46.7%)。ES-API: [M+H] +=233.0, 235.0。
步驟四：將4-溴-6-氯-1,3-二氫異苯并呋喃(210 mg, 0.90mmol) 溶解在乾燥的四氫呋喃(15 mL) 中，乾冰浴冷卻至-65℃，緩慢加入正丁基鋰(0.514 mL, 1.285 mmol)，保持-65℃攪拌10分鐘。滴入飽和氯化銨水溶液(1mL)淬滅反應。加入乙酸乙酯(30mL)，依次用水(30mLx1)和飽和氯化鈉溶液(30mL x 1)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮。粗品藉由柱層析 (石油醚/乙酸乙酯=20/80) 純化得到6-氯-1,3-二氫異苯并呋喃-4-甲醛 (120mg, 收率:73.2%)。ES-API: [M+H] +=183.0。
步驟五：將6-氯-1,3-二氫異苯并呋喃-4-甲醛 (120mg, 0.659 mmol)和(S)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺(159.5mg, 1.318mmol)溶解在乾燥的二氯甲烷(10mL)中。室溫加入鈦酸四乙酯 (0.599 mL, 2.629 mmol)，攪拌1小時。倒入鹽水(30 mL) 中，用二氯甲烷 (50 mL x 3) 萃取。合併有機相，過濾，飽和氯化鈉溶液 (100 mL x 1) 洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮。粗品藉由柱層析 (石油醚/四氫呋喃=30/70) 純化得到( S)-N-((6-氯-1,3-二氫異苯并呋喃-4-基)亞甲基)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺(63 mg, 收率: 33.54%)。ES-API: [M+H] +=286.1。
步驟六：將( S)-N-((6-氯-1,3-二氫異苯并呋喃-4-基)亞甲基)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺(63 mg, 0.220 mmol)溶解在乾燥的四氫呋喃(10mL)中。乾冰浴-78℃條件下，緩慢加入(2-(1,3-二噁烷-2-基)乙基)溴化鎂 (1.76mL, 0.88 mmol)。室溫攪拌0.5小時。加入氯化銨水溶液(5mL)淬滅反應，用乙酸乙酯(10 mLx2)萃取，合併有機相，用飽和氯化鈉溶液 (100 mL x 1) 洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮。粗品藉由柱層析(石油醚/四氫呋喃=30/70) 純化得到( S)-N-(( S)-1-(6-氯-1,3-二氫異苯并呋喃-4-基)-3-(1,3-二氧六環-2-基)丙基)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺(70 mg, 收率: 79.00%)。ES-API: [M+H] +=402.1。
步驟七：將( S)-N-(( S)-1-(6-氯-1,3-二氫異苯并呋喃-4-基)-3-(1,3-二氧六環-2-基)丙基)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺(70 mg, 0.174 mmol)溶解在在三氟乙酸(3 mL)，加入水 (0.15 mL)。混合物在室溫下攪拌0.5 小時。加入三乙基矽氫(202.3mg, 1.74 mmol)。室溫下攪拌3小時。反應液濃縮得到( S)-2-(6-氯-1,3-二氫異苯并呋喃-4-基)吡咯烷 (40mg, 粗品)。ES-API: [M+H] +=224.0。
步驟八：將( S)-2-(6-氯-1,3-二氫異苯并呋喃-4-基)吡咯烷 (40mg, 粗品)溶解在二氯甲烷中(20 mL)，加入三乙胺(87.8 mg, 0.87 mmol) 和二碳酸二叔丁酯(75mg, 0.348 mmol)。混合物在室溫下攪拌0.5 小時。反應液濃縮，粗品經矽膠柱層析(乙酸乙酯/石油醚=40/60)純化得到(S)-2-(6-氯-1,3-二氫異苯并呋喃-4-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(46 mg, 2步收率: 81.6%)。ES-API: [M+H] +=324.1。
步驟九：將(S)-2-(6-氯-1,3-二氫異苯并呋喃-4-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(46 mg, 0.142 mmol)、3-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(55.00 mg, 0.213 mmol)、氯(2-二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II) (10.24 mg, 0.014 mmol) 和碳酸鉀(58.90 mg, 0.426 mmol) 加入到1,4-二氧六環(2mL)和水(0.5mL)中，氮氣置換，加熱115℃微波反應1.5小時。反應完畢，加入乙酸乙酯(10 mL)，依次用水(10mLx1)、飽和食鹽水(10mLx1)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，濃縮，粗品經矽膠柱層析(乙酸乙酯/石油醚=80/20)純化得到 ( S)-2-(6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-1,3-二氫異苯并呋喃-4-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(55 mg, 收率: 92.2%)。ES-API: [M+H] +=420.2。
步驟十：將( S)-2-(6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-1,3-二氫異苯并呋喃-4-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(55 mg, 0.131 mmol)溶解到二氯甲烷(3mL)中，加入三氟(2 mL)中，室溫反應0.5小時。反應完畢，反應液濃縮，加入氨甲醇溶液(1mL)中和後，再次濃縮，經HPLC製備(甲酸法)純化得到(S)-3-甲基-5-(7-(吡咯烷-2-基)-1,3-二氫異苯并呋喃-5-基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(Z151-1, 甲酸鹽，25 mg, 收率: 59.8%)。ES-API: [M+H] +=320.2。 1H NMR (500 MHz, DMSO- d 6) δ 11.41-11.36 (m, 1H), 8.51 (d, J= 2.1 Hz, 1H), 8.33 (s, 1H), 8.17 (d, J= 2.1 Hz, 1H), 7.72 (s, 1H), 7.58 (s, 1H), 7.28 (s, 1H), 5.14 (s, 2H), 5.07 (s, 2H), 4.25 (dd, J= 9.4, 7.0 Hz, 1H), 3.24-3.19 (m, 1H), 3.10-3.05 (m, 1H), 2.31 (s, 3H), 2.23 (dtd, J= 11.8, 7.4, 3.7 Hz, 1H), 1.97-1.92 (m, 1H), 1.90-1.82 (m, 1H), 1.78 (dt, J= 12.1, 8.8 Hz, 1H).
實施例114 化合物Z247的合成
步驟一：在冰水浴條件下，向(4-溴吡啶-2-基)甲醇(500 mg, 2.659 mmol)的、N,N-二甲基甲醯胺(10 mL)中，添加氫化鈉(319.11 mg, 7.978 mmol)。在0℃攪拌10分鐘，緩慢添加碘甲烷(0.248 mL，3.989 mmol)，在室溫下攪拌1小時。倒入水中(100 mL)，用乙酸乙酯(100 mL x 3)萃取。用飽和氯化鈉溶液(100 mL x 1)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮。粗品藉由柱層析(石油醚/乙酸乙酯=80/20)純化得到4-溴-2-(甲氧基甲基)吡啶(350 mg, 收率: 65.14%)。ES-API: [M+H] +=201.9, 203.9。
步驟二：將(S)-2-(6-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(30 mg, 0.089 mmol)溶解在乾燥的1,4-二氧六環(2mL)中，依次加入4-溴-2-(甲氧基甲基)吡啶(53.98 mg，0.267 mmol)、甲磺酸(2-二環己基膦基-2',6'-二異丙氧基-1,1'-聯苯基)(2-氨基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II) (14.91 mg, 0.018 mmol) 、 2-二環己基磷-2',6'-二異丙氧基-1,1'-聯苯 (8.31 mg, 0.018 mmol) 和碳酸鉀 (36.93 mg, 0.267 mmol)，氮氣置換，加熱140℃微波反應5小時。反應完畢。加入乙酸乙酯(30 mL)稀釋，飽和食鹽水(30mL)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮，粗品經矽膠柱層析純化(甲醇/二氯甲烷=1/20)得到( S)-2-(6-氯-2-(2-(甲氧基甲基)吡啶-4-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(25 mg,收率: 61.29%)。ES-API: [M+H] +=458.2。
步驟三：將( S)-2-(6-氯-2-(2-(甲氧基甲基)吡啶-4-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(25 mg, 0.055 mmol)、3-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(28.18 mg, 0.109 mmol)、氯(2-二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II) (7.87 mg, 0.011 mmol) 和碳酸鉀 (22.63 mg, 0.164 mmol) 加入到1,4-二氧六環(3mL)和水(0.5mL)中，氮氣置換，115℃微波反應1小時。反應完畢，加入乙酸乙酯(20 mL)，依次用水(10mL)、飽和食鹽水(10mL)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，粗品經製備薄層析(石油醚/乙酸乙酯=1/1)純化得到(S)-2-(6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-2-(2-(甲氧基甲基)吡啶-4-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯 (22 mg, 收率: 72.16%)。ES-API: [M+H] +=554.3。
步驟四：將(S)-2-(6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-2-(2-(甲氧基甲基)吡啶-4-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(22 mg, 0.036 mmol)溶解到二氯甲烷(2mL)中，加入三氟乙酸(1mL)中，室溫反應0.5小時。反應完畢，反應液濃縮，加入氨甲醇溶液(1mL)中和後，再次濃縮，經HPLC製備(碳酸氫銨法)純化得到(S)-2-(2-(甲氧基甲基)吡啶-4-基)-6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-8-(吡咯烷-2-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉(Z247, 9mg, 收率: 44.4%)。ES-API: [M+H] +=454.2。 1H NMR (500 MHz, DMSO- d 6) δ 11.35 (s, 1H), 8.48 (d, J= 2.1 Hz, 1H), 8.16-8.10 (m, 2H), 7.76 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 7.46 (d, J= 1.8 Hz, 1H), 7.27 (s, 1H), 6.92 (d, J= 2.6 Hz, 1H), 6.84 (dd, J= 6.1, 2.6 Hz, 1H), 4.73-4.53 (m, 3H), 4.43 (d, J= 8.6 Hz, 1H), 4.38 (s, 2H), 3.66 (q, J= 6.0 Hz, 2H), 3.36 (d, J= 1.6 Hz, 3H), 3.17 (s, 1H), 3.03 (d, J= 6.4 Hz, 3H), 2.31 (d, J= 1.1 Hz, 3H), 2.03-1.97 (m, 1H), 1.95-1.79 (m, 3H).
實施例115 化合物Z88-1的合成
步驟一：往(S)-2-(7-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-5-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(200 mg, 0.59 mmol)的二氯甲烷(2 mL)溶液中加入N,N-二異丙基乙胺(230 mg, 1.78 mmol)，甲磺醯氯(68 mg, 0.59 mmol)，室溫攪拌1小時。反應結束後反應液濃縮，得到粗品用矽膠柱層析(四氫呋喃/石油醚=0-80%)純化得到(S)-2-(7-氯-2-(甲基磺醯基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-5-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(55 mg, 收率: 22%)。ES-API: [M+H] += 437.1。
步驟二：氮氣保護下，(S)-2-(7-氯-2-(甲基磺醯基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-5-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(50 mg, 0.12 mmol)，3-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-二氧硼雜環戊烷-2-基)-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶(37 mg, 0.14 mmol)，氯(2-二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II) (9 mg, 12 μmol)，2-雙環己基膦-2',6'-二甲氧基聯苯(5 mg, 12 μmol)和碳酸鉀(50 mg, 0.36 mmol)的1,4-二氧六環(2 mL)和水(0.4 mL)的混合溶液在120℃攪拌2小時。反應液倒入乙酸乙酯(10 mL)，依次用飽和食鹽水(5 mL)和水(5 mL)洗滌。有機相用無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮，得到粗品用矽膠柱層析(0-10%甲醇/二氯甲烷)純化得到透明油狀液體(S)-2-(7-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-2-(甲基磺醯基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-5-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(40 mg, 收率：65%)。ES-API: [M+H] += 511.3.
步驟三：冰浴條件下，將三氟乙酸(0.5 mL)滴加到(S)-2-(7-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-2-(甲基磺醯基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-5-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(40 mg, 78 μmol)的二氯甲烷(1 mL)溶液中，室溫攪拌1小時。反應液濃縮，得到粗品用製備色譜柱(碳酸氫銨法)純化得到白色固體(S)-7-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-2-(甲基磺醯基)-5-(吡咯烷-2-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉(Z88-1, 17 mg, 純度100%, 收率: 53%)。ES-API: [M+H] += 411.1。 1H NMR (500 MHz, DMSO- d 6 ) δ 11.39 (s, 1H), 8.59 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 8.23 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 7.82 (s, 1H), 7.67 (s, 1H), 7.29 (d, J= 1.0 Hz, 1H), 4.78-4.71 (m, 1H), 4.49 (s, 2H), 3.51 (t, J= 6.0 Hz, 2H), 3.49-3.42 (m, 1H), 3.38-3.33 (m, 1H), 3.11-3.00 (m, 2H), 2.99 (s, 3H), 2.45-2.36 (m, 1H), 2.32 (s, 3H), 2.21-2.01 (m, 3H).
實施例116 化合物Z340的合成
步驟一：向 2-甲基嘧啶-4-羧酸(1.0 g, 7.2 mmol)的甲醇(20 mL)溶液中加入亞硫醯氯(0.8 mL, 10.9 mmol)，反應在 70℃下攪拌 16小時。混合物濃縮，加入飽和碳酸氫鈉水溶液，並用乙酸乙酯萃取。有機層經無水硫酸鈉乾燥，過濾並真空濃縮得到2-甲基嘧啶-4-羧酸甲酯(0.6 g, 粗品)，為黃色固體。ES-API:[M+H] +=153.10。
步驟二：向 2-甲基嘧啶-4-羧酸甲酯 (0.6 g, 3.9 mmol) 的四氯化碳 (12 mL) 溶液中加入 N-溴代丁二醯亞胺(701.9 mg, 3.9 mmol)，2,2'-偶氮雙 (2-甲基丙腈) (64.8 mg , 0.4 mmol)，並將反應在 80℃下攪拌 40 小時。混合物濃縮並藉由矽膠柱層析(石油醚:乙酸乙酯=1:1)純化得到呈黃色油狀的2-(溴甲基)嘧啶-4-羧酸甲酯(130.0 mg, 產率14.27%)。ES-API:[M+H] +=230.9/233.0。
步驟三：在氮氣保護下，向 2-(溴甲基)嘧啶-4-羧酸甲酯 (0.13 g, 0.6 mmol) 在甲醇 (8 mL) 中的溶液加入甲醇鈉 (60.8 mg, 1.2 mmol) 並在 25℃下攪拌 16小時。混合物用鹽酸(1N)淬滅，並用二氯甲烷:甲醇(10:1)萃取。合併的有機層用鹽水洗滌，經無水硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮得到產物2-(甲氧基甲基)嘧啶-4-羧酸(0.1 g, 粗品)，為黃色固體。ES-API:[M+H] +=169.1。
步驟四：向( S)-2-(6-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯 (0.08 g, 0.2 mmol) 的二氯甲烷 (8 mL)溶液加入 2-(甲氧基甲基)嘧啶-4-羧酸(69.9 mg, 0.4 mmol), 1-丙基磷酸酐(254.4 mg, 0.4 mmol, 50%的乙酸乙酯溶液)，三乙胺 (72.1 mg, 0.7 mmol)，反應在 25℃下攪拌 2 小時。將混合物加入水並用乙酸乙酯萃取。有機層經無水硫酸鈉乾燥、過濾、濃縮並藉由製備薄層色譜柱 (石油醚:乙酸乙酯=1:2) 純化，得到( S)-2-[6-氯-2-[2-(甲氧基甲基) 嘧啶-4-羰基]-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基] 吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(85.0 mg, 產率73.5%)，為黃色油狀物。ES-API:[M+H-100] +=387.30。
步驟五：向( S)-2-[6-氯-2-[2-(甲氧基甲基)嘧啶-4-羰基]-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基]吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(0.085 g, 0.2 mmol)的1,4-二氧六環(4 mL)和水(0.8 mL)的溶液添加3-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二噁硼烷-2-基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(54.1 mg, 0.2 mmol)，碳酸鉀(72.3 mg, 0.5 mmol)，氯(2-二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II)(12.6 mg, 17.4μmol)。氮氣置換，加熱至100℃反應1小時。反應完成後，反應液旋乾，藉由製備薄層色譜柱純化(乙酸乙酯)得到產物( S)-2-[2-[2-(甲氧基甲基)嘧啶-4-羰基]-6-(3-甲基-1 H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基]吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(65.0 mg, 產率63.91%)，為黃色油狀物。ES-API:[M+H-100] +=583.4。
步驟六：將( S)-2-[2-[2-(甲氧基甲基)嘧啶-4-羰基]-6-(3-甲基-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基]吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(65 mg, 0.1mmol)溶於二氯甲烷(2 mL)中，加入三氟乙酸(2 mL)。室溫反應1小時。反應完成後，混合物用飽和碳酸氫鈉水溶液淬滅，用二氯甲烷萃取。合併的有機層用飽和氯化鈉洗滌，用無水硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮旋乾，經製備薄層色譜柱純化(二氯甲烷/甲醇=10/1)得到產物( S)-[2-(甲氧基甲基)嘧啶-4-基]-[6-(3-甲基-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶-5-基)-8-[吡咯烷-2-基 ]-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]甲酮 (Z340, 30.3 mg, 產率56.29%)。ES-API:[M+1] +=483.3。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 9.15 (s, 1H), 8.94-8.92 (m, 1H), 8.51-8.46 (m, 1H), 8.03-7.96 (m, 1H), 7.80 (d, J= 1.6 Hz, 1H), 7.58-7.51 (m, 1H), 7.32-7.26 (m, 1H), 7.09 (s, 1H), 5.15-4.86 (m, 2H),4.78-4.75 (m, 2H), 4.42 (t, J= 7.6 Hz, 1H), 4.10-3.99 (m, 1H), 3.80-3.72 (m, 1H), 3.57 (s, 3H), 3.34-3.25 (m, 1H), 3.17-3.01 (m, 3H), 2.37-2.30 (m, 3H), 2.04-1.77 (m, 4H).
實施例117 化合物Z355的合成
步驟一：向 ( S)-2-(6-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(70 mg, 0.21 mmol) 的二氯甲烷(6 mL)溶液中加入2,5-二甲基吡唑-3-羧酸 (58.8 mg, 0.42 mmol)，1-丙基磷酸酐(197.2 mg, 0.31 mmol, 50%的乙酸乙酯溶液), 三乙胺 (63.08 mg, 0.62 mmol)，混合液在25℃下攪拌2小時，LCMS監測反應完全，加水淬滅反應，二氯甲烷萃取，無水硫酸鈉乾燥，濃縮，經製備薄層色譜柱純化(石油醚/乙酸乙酯=1/1)得到產物( S)-2-[6-氯-2-(2,5-二甲基吡唑-3-羰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基]吡咯烷-1-羧酸叔丁酯 (80.00 mg, 產率83.88%)，為黃色油狀物。ES-API:[M+1] +=459.2。
步驟二：將( S)-2-[6-氯-2-(2,5-二甲基吡唑-3-羰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基]吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(80 mg, 0.17 mmol)溶於二氧六環/水(4 mL/0.0.8 mL)中，加入3-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二噁硼烷-2-基)-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶(53.99 mg, 0.21 mmol)，氯(2-二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II)(12.55 mg, 17.43 μmol)和碳酸鉀(72.16 mg, 0.52 mmol)。氮氣置換，加熱至100℃反應1小時。反應完成後，反應液旋乾，經製備薄層色譜柱純化(二氯甲烷/甲醇=10/1)得到產物( S)-2-[2-(2,5-二甲基吡唑-3-羰基)-6-(3-甲基-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基]吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(80.00 mg, 產率82.75%) ES-API:[M+1] +=555.3。
步驟三：將( S)-2-[2-(2,5-二甲基吡唑-3-羰基)-6-(3-甲基-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基]吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(80 mg, 0.14 mmol)溶於二氯甲烷(2.0 mL)中，加入三氟乙酸(2.0 mL)。室溫反應1小時。反應完成後，混合物用飽和碳酸氫鈉水溶液淬滅，用二氯甲烷萃取。合併的有機層用飽和氯化鈉洗滌，經無水硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮，粗品經製備薄層色譜柱純化(二氯甲烷/甲醇=10/1)得到產物(S)-(1,3-二甲基-1H-吡唑-5-基)(6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-8-(吡咯烷-2-基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)甲酮(Z355, 27.00 mg, 產率41.18%)，為黃色固體。ES-API:[M+1] += 455.3。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 9.40 (s, 1H), 8.50 (s, 1H), 8.03 (s, 1H), 7.84-7.66 (m, 1H),7.30 (s, 1H), 7.11 (s, 1H), 6.18 (s, 1H), 5.13-4.99 (m, 0.5H), 4.91-4.83 (m, 1H), 4.45-4.35 (m, 0.5H),3.97-3.80 (m, 5H), 3.36-2.92 (m, 4H), 2.35 (s, 3H), 2.29 (s, 3H), 2.21-1.78 (m, 4H), 1.73-1.55 (m, 1H).
實施例118 化合物Z346的合成
步驟一：將( S)-2-(6-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(60 mg, 178.12μmol) 在二氯甲烷 (2 mL)的溶液中加入1-環丙基-3-甲基-吡唑-4-羧酸(35.52mg, 213.74μmol)，1-丙基磷酸酐(169.8 mg, 267.18μmol, 50%的乙酸乙酯溶液)，三乙胺(0.05mL)，混合物在20℃下攪拌2小時。反應液旋乾除去溶劑得到粗產物，藉由矽膠柱層析 (石油醚/乙酸乙酯=1/1)純化，得到( S)-2-[6-氯-2-(1-環丙基-5-甲基-1H-吡唑-4-羰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基]吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(65.00 mg, 收率：71.48%)，為黃色油狀物。ES-API: [M+H] += 485.23。
步驟二：氮氣保護下，將( S)-2-[6-氯-2-(1-環丙基-5-甲基-1H-吡唑-4-羰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基]吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(65.00 mg, 134.02μmol)，3-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二噁硼烷-2-基)-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶(44.06 mg, 0.17 mmol)，氯(2-二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II)(10.24 mg, 0.014 mmol)和碳酸鉀(39.32 mg, 0.28 mmol)溶於1,4-二氧六環溶液(2 mL)和水(0.1 mL)，升溫至100 oC反應2小時。反應完成後，反應液加水淬滅，乙酸乙酯萃取，有機相食鹽水洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮後，得到粗品經薄層析柱純化(二氯甲烷/甲醇=10/1)得到白色固體( S)-2-[2-(1-環丙基-5-甲基-1H-吡唑-4-羰基)-6-(3-甲基-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基]吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(50.00 mg, 收率：57.50%)。ES-API: [M+H] += 581.32。
步驟三：將( S)-2-[2-(1-環丙基-5-甲基-1H-吡唑-4-羰基)-6-(3-甲基-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基]吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(45mg, 77.49μmol)溶於二氯甲烷(2 mL)和三氟乙酸溶液(2 mL)，室溫攪拌1小時。反應完成後，混合物用飽和碳酸氫鈉水溶液淬滅，用二氯甲烷萃取。合併的有機層用飽和氯化鈉洗滌，經無水硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮，得到粗品經薄層析柱純化(二氯甲烷/甲醇=5/1)得到產物淡黃色固體得到( S)-(1-環丙基-5-甲基-1H-吡唑-4-基)-[6-(3-甲基-1 H-吡咯并[2,3- b] 吡啶-5-基)-8-[吡咯烷-2-基]-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]甲酮(Z346, 18.00 mg, 收率: 39.33%)。ES-API: [M+H] += 481.27。 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 11.38 (s, 1H), 8.59 (d, J= 1.9 Hz, 1H), 8.33-8.28 (m, 1H), 7.90 (s, 1H), 7.64-7.56 (m, 2H), 7.28-7.23 (m, 1H), 4.95 (d, J= 17.1 Hz, 1H), 4.80 (d, J= 17.2 Hz, 1H), 4.73-4.59 (m, 1H), 3.80-3.72 (m, 2H), 3.61-3.42 (m, 2H), 2.99-2.95 (m, 2H), 2.41 (s, 3H), 2.30 (s, 3H), 2.21-1.93 (m, 3H), 1.25-1.20 (m, 2H), 1.09-0.97 (m, 4H).
實施例119 化合物Z341的合成
步驟一：向 3-甲基-1 H-吡唑-4-羧酸乙酯(1g, 6.49 mmol)的 1,2-二氯乙烷(50 mL)溶液中加入環丙基硼酸(1.11g, 13mmol)、碳酸鈉(1.38g, 13mmol)，混合物升溫至70 oC並加入2,2'-聯吡啶(1.01 g, 6.49 mmol)和乙酸銅(II)(1.18 g, 6.49 mmol)，在該溫度下繼續反應16小時。將混合物倒入水(20 mL)中並用二氯甲烷萃取，濃縮得到呈黃色液體狀的粗產物，藉由矽膠柱層析(石油醚:乙酸乙酯=5:1)純化，得到黃色液體1-環丙基-3-甲基-吡唑-4-羧酸乙酯和1-環丙基-5-甲基-1H-吡唑-4-羧酸乙酯(610.00 mg, 粗品)ES-API: [M+H] += 195.11。
步驟二：1-環丙基-3-甲基-吡唑-4-羧酸乙酯和1-環丙基-5-甲基-1H-吡唑-4-羧酸乙酯的混合物(610 mg, 3.14 mmol)的1,4-二氧六環(5 mL)和水(5 mL)的溶液中加入氫氧化鈉(314 mg, 7.85 mmol)，然後升溫到70℃反應3小時。反應完，向溶液中加入1N的鹽酸調pH至4，然後用乙酸乙酯萃取3次，合併有機相，濃縮，得到粗品藉由製備HPLC(色譜柱：Xbridge C18 19mm*250mm；流動相：乙腈：水：三氟乙酸=30:70:0.04；流速:1ml/min, 9min；柱溫：30℃)純化得到兩個單體：1-環丙基-3-甲基-吡唑-4-羧酸 (180.00 mg, 峰1，保留時間：6.55 min, 收率34.49%)。ES-API: [M+H] += 167.08。 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.11 (s, 1H), 3.67-3.62 (m, 1H), 2.25 (s, 3H), 1.17-0.78 (m, 4H).
環丙基-5-甲基-1H-吡唑-4-羧酸 (120.00 mg, 保留時間：7.40min, 收率22.99%). ES-API: [M+H] += 167.08。 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ7.61 (s, 1H), 3.54-3.48 (m, 1H), 2.52 (s, 3H), 1.04-0.96 (m, 4H).
步驟三：將( S)-2-(6-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(60 mg, 178.12μmol) 在二氯甲烷 (2 mL)的溶液中加入1-環丙基-5-甲基-1 H-吡唑-4-羧酸乙酯(35.52mg, 213.74μmol)，1-丙基磷酸酐(169.8 mg, 267.18μmol, 50%的乙酸乙酯溶液) ，三乙胺(0.05mL)，所得混合物在20℃下攪拌2小時。反應液旋乾得到粗產物，藉由矽膠柱層析 (石油醚/乙酸乙酯=1/1)純化，得到 ( S)-2-[6-氯-2-(1-環丙基-3-甲基-1H-吡唑-4-羰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基]吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(70.00 mg, 收率：76.98%)，為黃色油狀物。ES-API: [M+H] += 485.23。
步驟四：氮氣保護下，將 ( S)-2-[6-氯-2-(1-環丙基-3-甲基-1H-吡唑-4-羰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基]吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(70 mg, 144.32μmol)，3-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二噁硼烷-2-基)-1H-吡咯并[2,3- b]吡啶(44.06 mg, 0.17 mmol)，氯(2-二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II)(10.24 mg, 0.014 mmol)和碳酸鉀(39.32 mg, 0.28 mmol)溶於1,4-二氧六環溶液(2 mL)和水(0.1 mL)，升溫至100 oC反應2小時。反應完成後，反應液加水淬滅，乙酸乙酯萃取，有機相食鹽水洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮後，得到粗品經薄層析柱純化(二氯甲烷/甲醇=10/1)得到白色固體( S)-2-[2-(1-環丙基-3-甲基-1H-吡唑-4-羰基)-6-(3-甲基-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基]吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(45.00 mg, 收率：51.75%)。ES-API: [M+H] += 581.32。
步驟五：將( S)-2-[2-(1-環丙基-3-甲基-1H-吡唑-4-羰基)-6-(3-甲基-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基]吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(45mg, 77.49μmol)溶於二氯甲烷(2 mL)和三氟乙酸溶液(2 mL)，室溫攪拌1小時。反應完成後，混合物用飽和碳酸氫鈉水溶液淬滅，用二氯甲烷萃取。合併的有機層用飽和氯化鈉洗滌，經無水硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮，得到粗品經薄層析柱純化(二氯甲烷/甲醇=5/1)得到產物淡黃色固體得到( S)-(1-環丙基-3-甲基-1H-吡唑-4-基)-[6-(3-甲基-1 H-吡咯并[2,3- b] 吡啶-5-基)-8-[吡咯烷-2-基]-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]甲酮(Z341, 18.80 mg, 收率 44.13%)。
實施例120 化合物Z314-1的合成
步驟一：往混合物(S)-2-(6-氯異吲哚啉-4-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(100 mg, 0.31 mmol)，(R)-3,3,3-三氟-2-羥基-2-甲基丙酸(98 mg, 0.62 mmol)的二氯甲烷(5 mL)溶液中依次加入 N, N-二異丙基乙胺(400 mg, 3.10 mmol)和 N, N, N′, N′-四甲基- O-(7-氮雜苯并三唑-1-基)六氟磷酸脲(175 mg, 0.46 mmol)，室溫攪拌1小時。反應液溶於二氯甲烷(10 mL)，依次用水(5 mL)和飽和食鹽水(5 mL)洗滌，有機相用無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮並用快速矽膠柱(0-50%四氫呋喃/石油醚)純化，得到(S)-2-(6-氯-2-((R)-3,3,3-三氟-2-羥基-2-甲基丙醯基)異吲哚啉-4-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(70 mg, 收率49%)。ES-API: [M+H] += 463.1。
步驟二：氮氣保護下，(S)-2-(6-氯-2-((R)-3,3,3-三氟-2-羥基-2-甲基丙醯基)異吲哚啉-4-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(70 mg, 0.15 mmol)，3-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-二氧硼雜環戊烷-2-基)-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶(58 mg, 0.23 mmol)，氯(2-二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II) (11 mg, 0.02 mmol)，和碳酸鉀(63 mg, 0.46 mmol)的1,4-二氧六環(2 mL)和水(0.4 mL)的混合溶液，在120℃下攪拌2小時。反應液倒入乙酸乙酯(10 mL)，依次用飽和食鹽水(5 mL)和水(5 mL)洗滌。有機相用無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮並用快速矽膠柱(0-10%甲醇/二氯甲烷)純化，得到(S)-2-(6-(3-甲基-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶-5-基)-2-((R)-3,3,3-三氟-2-羥基-2-甲基丙醯基)異吲哚啉-4-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(50 mg, 收率59%)。ES-API: [M+H] += 559.3。
步驟三：冰浴條件下，將三氟乙酸(0.5 mL)滴加到(S)-2-(6-(3-甲基-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶-5-基)-2-((R)-3,3,3-三氟-2-羥基-2-甲基丙醯基)異吲哚啉-4-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(50 mg, 90 μmol)的二氯甲烷(1 mL)溶液中，室溫攪拌1小時。反應液濃縮，用製備HPLC(甲酸法)純化得到白色固體(R)-3,3,3-三氟-2-羥基-2-甲基-1-(6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-4-((S)-吡咯烷-2-基)異吲哚啉-2-基)丙烷-1-酮 (Z314-1, 甲酸鹽，36 mg, 純度100%, 收率79%)。ES-API: [M+H] += 459.2。 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 11.36 (s, 1H), 8.54-8.47 (m, 1H), 8.31 (s, 1H), 8.21-8.13 (m, 1H), 7.76 (s, 1H), 7.64 (s, 1H), 7.27 (s, 1H), 5.31-5.17 (m, 2H), 4.84 (d, J= 3.6 Hz, 1H), 4.81 (d, J= 3.6 Hz, 1H), 4.38-4.21 (m, 1H), 3.29-3.17 (m, 1H), 3.15-3.01 (m, 1H), 2.33 (s, 3H), 2.29-2.17 (m, 1H), 2.08-1.83 (m, 2H), 1.84-1.72 (m, 1H), 1.66-1.57 (m, 3H).
實施例121 化合物Z347的合成
步驟一：向 4-甲基-1H-吡唑-3-羧酸乙酯(1.0 g, 6.5 mmol)的 1,2-二氯乙烷(20 mL)的溶液中加入環丙基硼酸(1.1 g, 13.0 mmol)、碳酸鈉(1.3 g, 13.0 mmol)，2,2'-聯吡啶(1.0 g, 6.5 mmol)，醋酸銅 (1.3 g, 6.5 mmol)。反應在70℃下攪拌16小時。冷卻至室溫後，將反應混合物濾出，倒入水中並用乙酸乙酯萃取。合併有機層，然後用無水硫酸鈉乾燥。反應液旋乾，經矽膠柱層析純化(石油醚/乙酸乙酯=1/1)得到1-環丙基-4-甲基-1H-吡唑-3-羧酸乙酯(0.3 g, 產率23.8%)，為黃色油狀物。ES-API:[M+H] +=195.1。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 7.23 (s, 1H), 4.35 (q, J= 7.2 Hz, 2H), 3.62-3.55 (m, 1H), 2.23 (s, 3H), 1.36 (t, J= 7.2 Hz, 3H), 1.13-1.07 (m, 2H), 1.04-0.96 (m, 2H).
步驟二：向 1-環丙基-4-甲基-1H-吡唑-3-羧酸乙酯(0.3 g, 1.54 mmol)的甲醇(5 mL)和水(15 mL)溶液中加入氫氧化鈉(123.6 mg, 3.09 mmol)，反應在 25℃下攪拌 16 小時。將混合物濃縮，加入 1M 鹽酸並用乙酸乙酯萃取。有機層用無水硫酸鈉乾燥，過濾並真空濃縮，得到 1-環丙基-4-甲基-1H-吡唑-3-羧酸 (200.00 mg, 粗品)，為白色固體。ES-API:[M+H] +=167.1。
步驟三：向(S)-2-(6-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯 (70 mg, 0.2 mmol) 的二氯甲烷 (2 mL)溶液中加入1-環丙基-4-甲基-1H-吡唑-3-羧酸 (69 mg, 0.4 mmol)，1-丙基磷酸酐(190.8 mg, 0.3 mmol, 50%的乙酸乙酯溶液)，三乙胺 (63.1 mg, 0.6 mmol)，反應在 25 ℃下攪拌 4小時。將混合物加入水並用乙酸乙酯萃取。有機層經無水氯化鈉乾燥、過濾、濃縮並藉由製備薄層色譜柱純化(石油醚:乙酸乙酯=1:1) 純化，得到叔丁基 (S)-2-[6-氯-2-(1-環丙基-4-甲基-1H-吡唑-3-羰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基]吡咯烷-1-羧酸酯 (70.0 mg, 產率69.45%)，為黃色油狀物。ES-API:[M+H] +=485.3。
步驟四：氮氣保護下，將(S)-2-[6-氯-2-(1-環丙基-4-甲基-1H-吡唑-3-羰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基]吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(0.07 g, 0.14 mmol) 溶於二氧六環/水(4 mL/0.8 mL)中，加入3-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二噁硼烷-2-基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶 (44.7 mg, 0.17 mmol)，碳酸鉀 (59.75 mg, 0.43 mmol，氯(2-二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II) (10.4 mg, 14.4 μmol)。加熱至100℃反應1小時。反應完成後，反應液旋乾，粗品經製備薄層色譜柱純化(二氯甲烷:甲醇=10:1)得到產物(S)-2-[2-(1-環丙基-4-甲基-1H-吡唑-3-羰基)-6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基 )-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基]吡咯烷-1-羧酸叔丁酯 (70.0 mg, 產率83.52%)，為黃色油狀物。ES-API:[M+H] +=581.5。
步驟五：將(S)-2-[2-(1-環丙基-4-甲基-1H-吡唑-3-羰基)-6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基 )-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基]吡咯烷-1-羧酸叔丁酯 (70.0 mg, 0.12 mmol)溶於二氯甲烷(2 mL)中，加入三氟乙酸(2 mL)。室溫反應1小時。反應完成後，反應液旋乾，粗品經製備薄層色譜柱純化(二氯甲烷:甲醇=8:1) 得到(S)-(1-環丙基-4-甲基-1H-吡唑-3-基)-[6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-8-[吡咯烷-2-基]-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]甲酮(Z347, 14.8 mg, 產率25.55%)，為黃色固體。ES-API:[M+H] +=481.3。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ9.75 (s, 1H), 8.51 (s, 1H), 8.10-7.94 (m, 1H), 7.88-7.68 (m, 1H), 7.38-7.27 (m, 2H), 7.09 (s, 1H), 5.23-5.05 (m, 1H), 4.94-4.67 (m, 1H), 4.55-4.25 (m, 1H), 4.12-3.85 (m, 2H), 3.67-3.52 (m, 1H), 3.43-3.28 (m, 1H), 3.18-2.94 (m, 3H), 2.34 (s, 3H), 2.17 (s, 3H), 2.12-1.96 (m, 2H), 1.96-1.82 (m, 1H), 1.80-1.64 (m, 1H), 1.21-1.09 (m, 2H), 1.07-0.96 (m, 2H).
實施例122 化合物Z342的合成
步驟一：向 4-甲基-1H-吡唑-3-羧酸乙酯(1.0 g, 6.5 mmol)的 1,2-二氯乙烷(20 mL)的溶液中加入環丙基硼酸(1.1 g, 13.0 mmol)、碳酸鈉(1.3 g, 13.0 mmol)，2,2'-聯吡啶(1.0 g, 6.5 mmol)，醋酸銅(1.3 g, 6.5 mmol)。反應在70℃下攪拌16小時。冷卻至室溫後，將反應混合物濾出，倒入水中並用乙酸乙酯萃取。合併有機層，然後用無水硫酸鈉乾燥。反應液旋乾，經矽膠柱層析純化(石油醚/乙酸乙酯=1/1)得到1-環丙基-4-甲基-1H-吡唑-3-羧酸乙酯(0.5 g, 產率39.7%)，為黃色油狀物。ES-API:[M+H] +=195.1。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 7.21 (s, 1H), 4.34 (q, J= 7.2 Hz, 2H), 4.16-4.09 (m, 1H), 2.22 (s, 3H), 1.38 (t, J= 7.2 Hz, 3H), 1.21-1.16 (m, 2H), 1.02-0.96 (m, 2H).
步驟二：向 1-環丙基-4-甲基-1H-吡唑-3-羧酸乙酯(0.5 g, 2058 mmol)的甲醇(5 mL)和水(15 mL)溶液中加入氫氧化鈉(185.3 mg, 4.63 mmol)，反應在 25℃下攪拌 16 小時。將混合物濃縮，加入 1M 鹽酸並用乙酸乙酯萃取。有機層用無水硫酸鈉乾燥，過濾並真空濃縮，得到 1-環丙基-4-甲基-1H-吡唑-3-羧酸 (300.00 mg, 粗品)，為白色固體。ES-API:[M+H] +=167.1。
步驟三：向(S)-2-(6-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯 (70 mg, 0.2 mmol) 的二氯甲烷 (2 mL)溶液中加入1-環丙基-4-甲基-1H-吡唑-3-羧酸 (69 mg, 0.4 mmol)，1-丙基磷酸酐(190.8 mg, 0.3 mmol, 50%的乙酸乙酯溶液)，三乙胺 (63.1 mg, 0.6 mmol)，反應在 25 ℃下攪拌 4 小時。將混合物加入水並用乙酸乙酯萃取。有機層經無水硫酸鈉乾燥、過濾、濃縮並藉由製備薄層色譜柱純化(石油醚:乙酸乙酯=1:1)得到 (S)-2-[6-氯-2-(1-環丙基-4-甲基-1H-吡唑-3-羰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基]吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(60.00 mg, 產率59.53%)，為黃色油狀物。ES-API:[M+H] +=485.3。
步驟四：氮氣保護下，將 (S)-2-[6-氯-2-(1-環丙基-4-甲基-1H-吡唑-3-羰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基]吡咯烷-1-羧酸叔丁酯 (60 mg, 0.12 mmol) 溶於二氧六環/水(4 mL/0.8 mL)中，加入3-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二噁硼烷-2-基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶 (38.3 mg, 0.15 mmol)，碳酸鉀 (51.21 mg, 0.37 mmol，氯(2-二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II) (8.91 mg, 12.37 μmol)。加熱至100℃反應1小時。反應完成後，旋乾，經製備薄層色譜柱純化(二氯甲烷:甲醇=10:1)得到產物 (S)-2-[2-(1-環丙基-4-甲基-1H-吡唑-3-羰基)-6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基 )-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基]吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(60.00 mg, 產率83.52%)，為黃色油狀物。ES-API:[M+H] +=581.4。
步驟五：將 (S)-2-[2-(1-環丙基-4-甲基-1H-吡唑-3-羰基)-6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基] 吡咯烷-1-羧酸叔丁酯 (60.0 mg, 0.1 mmol)溶於二氯甲烷(2 mL)中，加入三氟乙酸(2 mL)。室溫反應1小時。反應完成後，反應液旋乾，粗品經製備薄層色譜柱純化(二氯甲烷:甲醇=8:1)得到(S)-(1-環丙基-4-甲基-1H-吡唑-3-基)-[6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-8-[吡咯烷-2-基]-3,4-二氫-2(1H)-異喹啉-基]甲酮(Z342, 30.00 mg, 產率60.42%)，為黃色固體。ES-API:[M+H] +=481.3。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ10.19 (s, 1H), 8.57 (s, 1H), 8.01-7.79 (m, 2H), 7.21-7.19 (m, 1H), 7.12-6.96 (m, 2H), 5.21-4.85 (m, 1H), 4.81-4.66 (m, 1H), 4.62-4.27 (m, 1H), 3.73-3.23 (m, 5H), 3.06-2.60 (m, 2H), 2.46-2.36 (m, 1H), 2.25 (s, 3H), 2.20-1.89 (m, 6H), 1.35-1.17 (m, 2H), 0.96-0.75 (m, 2H).
實施例123 化合物Z327的合成
步驟一：在三頸燒瓶中的乾燥氮氣氣氛下，將 1-(4-甲基-2-吡啶基)乙酮 (1 g, 7.40 mmol) 溶解在四氫呋喃 (20 mL) 中。將燒瓶在冰浴中冷卻，並向其中滴加甲基溴化鎂(2.65g, 22.20 mmol, 20mL)。將溶液升溫至 40°C 並攪拌 3 小時，藉由 LCMS 監測反應完全，然後將反應混合物在冰浴中冷卻並藉由加入飽和氯化銨水溶液 (50 ml) 淬滅，然後用乙酸乙酯 (40 mlX5) 萃取，有機物用飽和食鹽水溶液洗滌，無水硫酸鈉乾燥並在減壓下濃縮。殘餘物藉由矽膠柱層析純化(0-35% 乙酸乙酯在石油醚中)得到呈黃色液體狀的產物2-(4-甲基-2-吡啶基)丙-2-醇(375.00 mg, 產率33.52%) .ES-API:[M+H-100] += 152.2。
步驟二：在60℃下,向2-(4-甲基-2-吡啶基)丙-2-醇(375mg, 2.48mmol)的水(15mL)溶液中加入高錳酸鉀(1.57g, 9.92mmol)。將反應加熱至100℃攪拌20小時。藉由LCMS監測反應完全，將懸浮液冷卻至25℃，然後藉由矽藻土過濾。水相用乙酸乙酯洗滌。然後除去水，冷凍乾燥得到呈白色固體狀的產物2-(1-羥基-1-甲基-乙基)吡啶-4-羧酸(450 mg, 粗品)。ES-API:[M+H] += 182.0。
步驟三：向 (S)- 2-(6-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(60 mg, 0.18 mmol) 的二氯甲烷(2 mL)溶液中加入2-(1-羥基-1-甲基-乙基)吡啶-4-羧酸(64.55 mg, 0.36 mmol)，2-(7-偶氮苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯(101.53 mg, 0.27 mmol)三乙胺(180.24 mg, 1.78 mmol)，混合液在25°C下攪拌2小時。LCMS監測反應完全，加水淬滅反應，二氯甲烷萃取，無水硫酸鈉乾燥，濃縮，經矽膠柱層析純化(流動相0-50%乙酸乙酯/石油醚，乙酸乙酯/石油醚=1/1，Rf=0.5)得到產物(S)- 2-(6-氯-2-(2-(2-羥基丙-2-基)異煙醯基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁基酯(34 mg, 收率38.17%) 。ES-API:[M+H] += 500.3。
步驟四：向化合物(S)- 2-(6-氯-2-(2-(2-羥基丙-2-基)異煙醯基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁基酯(48 mg, 0.096 mmol ) 的二氧六環/水(2ml/0.4 ml)的溶液中 加入3-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二噁硼烷-2-基)-1H-吡咯[2,3-b]吡啶(29.73mg, 0.12 mmol)，氯(2-二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II) (6.91 mg, 0.0096 mmmol)，碳酸鉀(39.74 mg, 0.29 mmmol)，在氮氣保護下，將混合物加熱至110 ℃攪拌反應。藉由LCMS監測反應完全，用乙酸乙酯/水處理，無水硫酸鈉乾燥，濃縮，經矽膠柱層析純化(流動相0-10%甲醇/二氯甲烷，二氯甲烷/甲醇=10/1，Rf=0.6)得到產物(S)- 2-(2-(2-(2-羥基丙-2-基)異煙醯基)-6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁基酯(45mg, 收率78.69%) .ES-API:[M+H] += 596.4。
步驟五：向化合物(S)- 2-(2-(2-(2-羥基丙-2-基)異煙醯基)-6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁基酯(45 mg, 0.076 mmol) 的二氯甲烷(2mL)溶液中加入三氟乙酸(1 mL)，常溫攪拌1小時。藉由LCMS監測反應完全，用飽和碳酸氫鈉水溶液調pH至7，用二氯甲烷/水處理，無水硫酸鈉乾燥，濃縮，經製備HPLC純化(色譜柱：Ultimate XB-C18,50*250mm,10um，流動相體系：A：純化水(0.05%氨水) B : 純乙腈，流速：80ml/min，梯度：在50分鐘內，B/A=20%-90%，波長：214nm，柱溫：室溫)得到(S)-(2-(2-羥基丙-2-基)吡啶-4-基)(6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-8-(吡咯烷-2-基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)甲酮(Z327, 13.6 mg, 收率36.33%) 白色粉末.ES-API:[M+H] +=496.3。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 9.55-9.34 (m, 1H), 8.67-8.60 (m, 1H), 8.49 (d, J= 15.0 Hz, 1H), 7.97 (d, J= 12.6 Hz, 1H), 7.89-7.62 (m, 1H), 7.58-7.46 (m, 1H), 7.31-7.27 (m, 1H), 7.24-7.18 (m, 1H), 7.09 (s, 1H), 5.14-4.79 (m, 2H), 4.63-4.50 (m, 1H), 4.11-3.78 (m, 1H), 3.63-3.39 (m, 2H), 3.31-3.16 (m, 1H), 3.11-2.79 (m, 3H), 2.47-2.36 (m, 1H), 2.34 (s, 3H), 2.15-1.89 (m, 2H), 1.87-1.76 (m, 1H), 1.64-1.52 (m, 6H).
實施例124 化合物Z333的合成
步驟一：將(S)-2-(6-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(200 mg, 0.595mmol) 在二氯甲烷 (2 mL)的溶液中加入 2-(2-甲基吡啶-4-基)乙酸 (179.7 mg, 1.19 mmol)，1-丙基磷酸酐(756.8 mg, 1.19 mmol，50%的乙酸乙酯溶液)，三乙胺(0.05mL)，所得混合物在在20℃下攪拌2小時。反應液旋乾除去溶劑得到粗產物，藉由矽膠柱層析(石油醚/乙酸乙酯=1/1)純化，得到(S)-2-[7-氯-2-[2-(2-甲基-4-吡啶基)乙醯]-1,2,3,4-四氫異喹啉-5-基]吡咯烷-1-羧酸叔丁酯，為黃色油狀物(160 mg, 收率：57.1%)。ES-API: [M+H] += 470.20
步驟二：向化合物(S)-2-[7-氯-2-[2-(2-甲基-4-吡啶基)乙醯]-1,2,3,4-四氫異喹啉-5-基]吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(0.16 g, 340.42 μmol) 的二氧六環/水(4 mL/0.8 mL)的溶液中加入3-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼烷-2-基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(105.45 mg, 408.51 μmol)，碳酸鉀(140.94 mg, 1.02 mmol)，氯(2-二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II)(24.51 mg, 34.04 μmol)，氮氣保護下混合物加熱到100℃攪拌反應。藉由LCMS監測反應完全，用乙酸乙酯/水處理，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮，得到粗品經製備薄層色譜柱純化(二氯甲烷/甲醇=10/1)得到產物(S)-2-(7-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-2-(2-(2-甲基吡啶-4-基)乙醯基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-5-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(100.00 mg, 產率51.93%)，為黃色油狀物。ES-API:[M+H] +=566.40。
步驟三：向化合物(S)-2-(7-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-2-(2-(2-甲基吡啶-4-基)乙醯基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-5-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(100.00 mg, 176.77 μmol) 的二氯甲烷(2 mL)溶液中加入三氟乙酸(2 ml)，常溫攪拌1小時。藉由LCMS監測反應完全，用飽和碳酸氫鈉水溶液調pH至7，用二氯甲烷/水處理，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮，得到粗品經製備薄層色譜柱純化(二氯甲烷/甲醇=8/1)得到(S)-2-(2-甲基-4-吡啶基)-1-[7-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-5-吡咯烷-2-基-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]乙酮(Z333, 20.00 mg, 產率24.30%)，為黃色固體。ES-API:[M+H] +=467.3。
實施例125 化合物Z365的合成
步驟一：向10 mL微波反應器中加入(S)-2-(6-溴異色滿-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(660 mg, 1.726 mmol)，5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(632.12 mg, 2.590 mmol), 氯(2-二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II) (124.30 mg, 0.173 mmol)，碳酸鉀(714.73mg, 5.18mmol)，二氧六環(2 mL)和水(0.3 mL)。體系用氮氣置換三次，然後用氮氣球保護。110℃微波條件下反應50分鐘，反應液加入乙酸乙酯(10 mL)，用飽和食鹽水(5 mLX3)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，濃縮，粗品用快速矽膠柱純化(甲醇：二氯甲烷=1:10)得到目標產物(S)-2-(6-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)異色滿-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(500mg, 收率: 69%)。ES-API: [M+H] +=420.3。
步驟二：向25 mL單口圓底燒瓶中加入(S)-2-(6-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)異色滿-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(500mg, 1.2mmol)，N-溴代丁二醯亞胺(254.5mg, 1.43mmol)和乙腈(20 mL)，室溫攪拌反應1小時。反應液加入乙酸乙酯(30 mL)，用飽和食鹽水(30 mL X3)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，濃縮，粗品用快速矽膠柱純化(甲醇：二氯甲烷=1:10)得到目標產物(S)-2-(6-(3-溴-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)異色滿-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(550mg, 收率: 92.6%)。ES-API: [M+H] +=498.1。
步驟三：向25 mL單口圓底燒瓶中加入(S)-2-(6-(3-溴-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)異色滿-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(100mg, 0.2mmol)，6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)異苯并呋喃-1(3H)-酮(208.7mg, 0.8mmol)，氯(2-二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II) (14.5 mg, 0.02 mmol)，碳酸氫鈉(50.6mg, 0.6mmol)，二氧六環(2 mL)和水(0.3 mL)。體系用氮氣置換三次，然後用氮氣球保護。100℃微波條件下反應20分鐘。反應液加入乙酸乙酯(10 mL)，用5 mL飽和食鹽水(5 mLX3)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，濃縮，粗品用快速矽膠柱純化(甲醇：二氯甲烷=1:10)得到目標產物(S)-2-(6-(3-(3-氧代-1,3-二氫異苯并呋喃-5-基)-1H-吡咯[2,3-b]吡啶-5-基)異色烷-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(60mg, 收率: 54%)。ES-API: [M+H] +=552.3。
步驟四：向5 mL單口圓底燒瓶中加入(S)-2-(6-(3-(3-氧代-1,3-二氫異苯并呋喃-5-基)-1H-吡咯[2,3-b]吡啶-5-基)異色烷-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(60mg, 0.11mmol)，三氟乙酸(3 mL)和二氯甲烷(6 mL)，室溫攪拌反應30分鐘。反應液旋乾，粗品用製備HPLC(甲酸法)純化得到：(S)-6-(5-(8-(吡咯烷-2-基)異色烷-6-基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-基)異苯并呋喃-1(3H)-酮(Z365, 30mg, 收率:55.4%, 甲酸鹽)。ES-API: [M+H] +=452.3。
實施例126 化合物Z364的合成
步驟一：向10 mL微波反應器中加入(S)-2-(6-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(200 mg, 0.59 mmol)，3-溴吡啶(281.4 mg, 1.78 mmol)，氯(2-二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II) (108.7 mg, 0.12 mmol)，碳酸銫(580.7 mg, 1.78mmol)，二氧六環(2 mL)和水(0.3 mL)。體系用氮氣置換三次，然後用氮氣球保護。110℃微波條件下反應3小時。反應液加入乙酸乙酯(10 mL)，用飽和食鹽水(5 mLX3)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，濃縮，粗品用快速矽膠柱純化(甲醇：二氯甲烷=10:100)得到目標產物(S)-2-(6-氯-2-(吡啶-3-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(130mg, 收率: 52.9%)。ES-API: [M+H] +=414.2。
步驟二：向25 mL單口圓底燒瓶中加入(S)-2-(6-氯-2-(吡啶-3-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(20mg, 0.05mmol)，3-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3-二氧戊環-2-基)-1H-吡咯[2,3-b]吡啶(18.7mg, 0.07mmol)，氯(2-二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II) (3.48 mg, 0.005 mmol)，碳酸鉀(20mg, 0.145mmol)，二氧六環(2 mL)和水(0.3 mL)。體系用氮氣置換三次，然後用氮氣球保護。110℃微波條件下反應1小時。反應液加入乙酸乙酯(10 mL)，用飽和食鹽水(5 mLX3)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，濃縮，粗品用快速矽膠柱純化(甲醇：二氯甲烷=10:100)得到目標產物(S)-2-(6-(3-甲基-1H-吡咯[2,3-b]吡啶-5-基)-2-(吡啶-3-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(20mg, 收率: 81%)。ES-API: [M+H] +=510.3。
步驟三：向5 mL單口圓底燒瓶中加入(S)-2-(6-(3-甲基-1H-吡咯[2,3-b]吡啶-5-基)-2-(吡啶-3-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(20mg, 0.04mmol)，三氟乙酸(1 mL)和二氯甲烷(2 mL)，室溫攪拌反應30分鐘。反應液旋乾，粗品用製備HPLC(甲酸法)純化得到：(S)-6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-2-(吡啶-3-基)-8-(吡咯烷-2-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉(Z364, 甲酸鹽，4mg, 收率:24.9%)。ES-API: [M+H] +=410.2。
實施例127 化合物Z323的合成
步驟一：氮氣保護下，(S)-2-(6-(3-溴-1 H-吡咯[2,3- b]吡啶-5-基)異色烷-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(74 mg, 0.15 mmol)，7-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二噁硼烷-2-基)咪唑并[1,2- a]吡啶(44 mg, 0.18 mmol)，1,1'-二(二苯膦基)二茂鐵二氯化鈀(II)(11 mg, 0.02 mmol)和碳酸鉀(62 mg, 0.45 mmol)的1,4-二氧六環(2 mL)和水(0.4 mL)的混合溶液85℃攪拌1小時。反應液倒入乙酸乙酯(10 mL)，依次用飽和食鹽水(5 mL)和水(5 mL)洗滌。有機相用無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮並用快速矽膠柱(0-10%甲醇/二氯甲烷)純化，得到透明油狀液體(S)-2-(6-(3-(咪唑[1,2- a]吡啶-7-基)-1 H-吡咯基[2,3 -b]吡啶-5-基)異色烷-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(40 mg, 收率50%)。ES-API: [M+H] += 536.3。
步驟二：冰浴條件下，將三氟乙酸(0.5 mL)滴加到(S)-2-(6-(3-(咪唑[1,2- a]吡啶-7-基)-1 H-吡咯基[2,3 -b]吡啶-5-基)異色烷-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(40 mg, 75 μmol)的二氯甲烷(1 mL)溶液中，室溫攪拌1小時。反應液濃縮，用7M胺甲醇(5 mL)中和，隨後濃縮並用製備HPLC(甲酸)純化，得到白色固體(S)-7-(5-(8-(吡咯烷-2-基)異色烷-6-基)-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶-3-基)咪唑[1,2- a]吡啶 (Z323, 甲酸鹽11 mg，純度100%，收率31%)。ES-API: [M+H] += 436.3。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6 ) δ 12.21 (s, 1H), 8.67-8.44 (m, 3H), 8.34 (s, 1H), 8.15 (s, 1H), 8.09-7.85 (m, 2H), 7.79 (s, 1H), 7.69-7.44 (m, 2H), 7.40 (d, J= 7.1 Hz, 1H), 5.03-4.86 (m, 1H), 4.88-4.73 (m, 1H), 4.35 (t, J= 8.8 Hz, 1H), 4.00-3.82 (m, 3H), 3.36-3.24 (m, 1H), 3.20-3.09 (m, 1H), 3.00-2.83 (m, 1H), 2.36-2.21 (m, 1H), 2.07-1.71 (m, 3H).
實施例128 化合物Z330的合成
步驟一：將(S)-2-(6-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(60 mg, 178.12μmol) 在二氯甲烷 (2 mL)的溶液中加入 2-甲基嘧啶-4-羧酸 (29.5 mg, 213.74μmol)，1-丙基磷酸酐(169.8 mg, 267.18μmol, 50%的乙酸乙酯溶液) , 三乙胺(0.05mL)，所得混合物在20℃下攪拌2小時。反應液旋乾除去溶劑得到粗產物，藉由矽膠柱層析 (石油醚/乙酸乙酯=1/1)純化，得到(S)-2-[6-氯-2-( 2-甲基嘧啶-4-羰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基]吡咯烷-1-羧酸叔丁酯為黃色油狀物(70.00 mg, 收率：86.00%)。ES-API: [M+H] += 457.20。
步驟二：氮氣保護下，將(S)-2-[6-氯-2-( 2-甲基嘧啶-4-羰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基]吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(70.00 mg, 153.18μmol)，3-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼烷-2-基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(47.45 mg, 0.18 mmol)，氯(2-二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II)(10.24 mg, 0.014 mmol)和碳酸鉀(42.34 mg, 0.31 mmol)溶於1,4-二氧六環溶液(2 mL)和水(0.1 mL)，升溫至100 oC反應2小時。反應完成後，反應液加水淬滅，乙酸乙酯萃取，有機相食鹽水洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮，得到粗品經薄層析柱純化(二氯甲烷/甲醇=10/1)得到白色固體(S)-2-[2-(2-甲基嘧啶-4-羰基)-6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基]吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(50.00 mg, 收率：60.42%)。ES-API: [M+H] += 553.29。
步驟三：將(S)-2-[2-(2-甲基嘧啶-4-羰基)-6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基]吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(50 mg, 90.47μmol)溶於二氯甲烷(2 mL)和三氟乙酸溶液(2 mL)，室溫攪拌1小時。反應完成後，混合物用飽和碳酸氫鈉水溶液淬滅，用二氯甲烷萃取。合併的有機層用飽和氯化鈉洗滌，經無水硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮，得到粗品經薄層析柱純化(二氯甲烷:甲醇=5/1)得到產物淡黃色固體得到(S)-[6-(3-甲基-1H-吡咯并[2, 3-b] 吡啶-5-基)-8-[吡咯烷-2-基]-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基] (2-甲基嘧啶-4-基)甲酮(Z330, 14.0 mg, 收率 33.51%)。ES-API: [M+H] += 453.24。
實施例129 化合物Z331的合成
步驟一：向 (S)- 2-(6-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(60 mg, 0.18 mmol) 的二氯甲烷(2 mL)溶液中加入6-甲基嘧啶-4-羧酸(49.20 mg, 0.36 mmol)，1-丙基磷酸酐(337.1 mg, 0.53 mmol，50%的乙酸乙酯溶液)，三乙胺(54.07 mg, 0.53 mmol)，混合液在25°C下攪拌2小時。LCMS監測反應完全，加水淬滅反應，二氯甲烷萃取，無水硫酸鈉乾燥，濃縮, 粗品經矽膠柱層析純化(流動相0-50%乙酸乙酯/石油醚，乙酸乙酯/石油醚=1/1，Rf=0.5)得到產物(S)- 2-(6-氯-2-(6-甲基嘧啶-4-羰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(58 mg, 收率71.26%) 。ES-API:[M+H-100] += 357.2。
步驟二：向化合物(S)- 2-(6-氯-2-(6-甲基嘧啶-4-羰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(58 mg, 0.13 mmol ) 的二氧六環/水(2 mL/0.4 mL)的溶液中 加入3-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二噁硼烷-2-基)-1H-吡咯[2,3-b]吡啶(39.31mg, 0.15 mmol)，氯(2-二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II) (9.13 mg, 0.013 mmmol)，碳酸鉀(52.55 mg, 0.38 mmmol)，在氮氣保護下將混合物加熱110℃攪拌反應，藉由LCMS監測反應完全，用乙酸乙酯/水處理，無水硫酸鈉乾燥，濃縮，粗品經矽膠柱層析純化(流動相0-10%甲醇/二氯甲烷，二氯甲烷/甲醇=10/1，Rf=0.6)得到產物(S)- 2-(6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-2-(6-甲基嘧啶-4-羰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(50 mg, 收率: 71.28%) .ES-API:[M+H] += 553.4。
步驟三：向化合物(S)- 2-(6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-2-(6-甲基嘧啶-4-羰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(50 mg, 0. 09 mmol, ) 的二氯甲烷(2 mL)溶液中加入三氟乙酸(1 mL)，常溫攪拌1小時。藉由LCMS監測反應完全，用飽和碳酸氫鈉水溶液調節pH至7，用二氯甲烷/水處理，無水硫酸鈉乾燥，濃縮，經製備HPLC純化(色譜柱：Ultimate XB-C18,50*250mm,10um，流動相體系：A：純化水(0.05%氨水) B : 純乙腈，流速：80mL/min，梯度：在50分鐘內，B/A=20%-90%，波長：214nm，柱溫：室溫)得到(S)-(6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-8-(吡咯烷-2-基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)(6-甲基嘧啶-4-基)甲酮(Z331, 14.2 mg, 收率: 34.6%)白色粉末.ES-API:[M+H] +=453.3。 1HNMR (400 MHz, CDCl 3) δ 9.53-9.27 (m, 1H), 9.14 (s, 1H), 8.54-8.48 (m, 1H), 7.95 (d, J=11.6 Hz, 1H), 7.88-7.69 (m, 1H), 7.53 (d, J= 19.3 Hz, 1H), 7.22 (d, J= 19.0 Hz, 1H), 7.07 (s,1H), 5.16-4.88 (m, 2H), 4.67-4.06 (m, 1H), 3.91-3.59 (m, 2H), 3.51-3.27 (m, 1H), 3.29-2.95 (m, 3H), 2.62 (s, 3H), 2.42-2.34 (m, 1H), 2.33 (s, 3H), 2.15-1.79 (m, 3H).
實施例130 化合物Z328的合成
步驟一：將(S)-2-(6-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(60 mg, 178.12μmol) 在二氯甲烷 (2 mL)的溶液中加入 2-甲基嘧啶-5-羧酸 (29.5 mg, 213.74μmol)，1-丙基磷酸酐(170 mg, 267.18μmol, 50%的乙酸乙酯溶液) ，三乙胺(0.05 mL)。混合物在20℃下攪拌2小時。反應液旋乾得到粗產物，藉由矽膠柱層析(石油醚/乙酸乙酯=1/1)純化得到(S)-2-[6-氯-2-(2-甲基嘧啶-5-羰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基]吡咯烷-1-羧酸叔丁酯 (70.00 mg, 收率：86.00%)，為黃色油狀物。ES-API: [M+H] += 457.20。
步驟二：氮氣保護下，將(S)-2-[6-氯-2-(2-甲基嘧啶-5-羰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基]吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(70.00 mg, 153.18 μmol)，3-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二噁硼烷-2-基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(47.45 mg, 0.18 mmol), 氯(2-二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II)(10.24 mg, 0.014 mmol)和碳酸鉀(42.34 mg, 0.31 mmol)溶於1,4-二氧六環溶液(2 mL)和水(0.1 mL)，升溫至100 oC反應2小時。LCMS監測反應完全，反應液加水淬滅，乙酸乙酯萃取，有機相食鹽水洗滌，無水硫酸鈉乾燥，濃縮後，經薄層析柱純化(二氯甲烷/甲醇=10/1)得到白色固體(S)-2-[2-(2-甲基嘧啶-5-羰基)-6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基]吡咯烷-1-羧酸叔丁基酯(60.00 mg, 收率：70.87%)。ES-API: [M+H] += 553.29。
步驟三：將(S)-2-[2-(2-甲基嘧啶-5-羰基)-6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基]吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(50 mg, 90.47μmol)溶於二氯甲烷(2 mL)和三氟乙酸溶液(2 mL)，室溫攪拌1小時。反應完成後，混合物用飽和碳酸氫鈉水溶液淬滅，用二氯甲烷萃取。合併的有機層用飽和氯化鈉洗滌，經無水硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮，得到粗品經薄層析柱純化(二氯甲烷/甲醇=5/1)得到(S)-[6-(3-甲基-1H-吡咯并[2, 3-b] 吡啶-5-基)-8-[吡咯烷-2-基]-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基] (2-甲基嘧啶-5-基)甲酮(Z328, 13.7 mg, 收率 33.13%)，淡黃色固體。ES-API: [M+H] += 453.24。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 9.49-9.11 (m, 1H), 8.87-8.73 (m, 2H), 8.46 (s, 1H), 7.99 (s, 1H), 7.89-7.62 (m, 1H), 7.25-7.19 (m, 1H), 7.08 (s, 1H), 5.07-4.79 (m, 2H), 4.61-4.02 (m, 1H), 3.69-3.38 (m, 2H), 3.30-3.17 (m, 1H), 3.14-2.85 (m, 3H), 2.81 (s, 3H), 2.46-2.38 (m, 1H), 2.34 (s, 3H), 2.04-1.85 (m, 3H).
實施例131 化合物Z336的合成
步驟一：將(S)-2-(6-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(120 mg, 0.18 mmol) 在二氯甲烷 (2 mL)的溶液中加入1-(二氟甲基)-1H-吡唑-4-羧酸 (60.0 mg, 0.42 mmol)，1-丙基磷酸酐(337.1 mg, 0.53 mmol, 50%的乙酸乙酯溶液)，三乙胺(0.1mL)，混合物在20℃下攪拌2小時。反應液旋乾除去溶劑得到粗產物，經矽膠柱層析(石油醚/乙酸乙酯=1/1)純化得到(S)-2-[6-氯-2-(1-(二氟甲基)-1H-吡唑-4-羰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基]吡咯烷-1-羧酸叔丁酯為黃色油狀物(160.00 mg, 收率：55.02%)。ES-API: [M+H] += 481.18。
步驟二：氮氣保護下，將 (S)-2-[6-氯-2-(1-(二氟甲基)-1H-吡唑-4-羰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基]吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(160 mg, 332.69 μmol)，3-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二噁硼烷-2-基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(103.06 mg, 0.40 mmol), 氯(2-二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II)(23.94 mg, 0.033 mmol)和碳酸鉀(91.96 mg, 0.67 mmol)溶於1,4-二氧六環溶液(2 mL)和水(0.1 mL)，升溫至100 oC反應2小時。反應完成後，反應液加水淬滅，乙酸乙酯萃取，有機相食鹽水洗滌，無水硫酸鈉乾燥，濃縮後，經薄層析柱純化(二氯甲烷/甲醇=10/1)得到白色固體(S)-2-[2-(1-(二氟甲基)-1H-吡唑-4-羰基)-6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基]吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(120.00 mg, 收率：62.55%)。ES-API: [M+H] += 577.27。
步驟三：將(S)-2-[2-(1-(二氟甲基)-1H-吡唑-4-羰基)-6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基]吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(120 mg, 208.10μmol)溶於二氯甲烷(2 mL)和三氟乙酸溶液(2 mL)，室溫攪拌1小時。反應完成後，混合物用飽和碳酸氫鈉水溶液淬滅，用二氯甲烷萃取。合併的有機層用飽和氯化鈉洗滌，經無水硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮，得到粗品經薄層析柱純化(二氯甲烷/甲醇=5/1)得到產物 (S)-(1-(二氟甲基)-1H-吡唑-4-基)-[6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-8-[吡咯烷-2-基]-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]甲酮(Z336, 35.0 mg，收率 31.80%)，淡黃色固體。ES-API: [M+H] += 477.22。
實施例132 化合物Z335的合成
步驟一：向(S)-2-(6-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯 (0.12 g, 0.36 mmol)的二氯甲烷(5 mL)溶液中加入1-乙基吡唑-4-羧酸 (99.85 mg, 0.71 mmol)，1-丙基磷酸酐(337 mg, 0.53mmol, 50%的乙酸乙酯溶液)，三乙胺 (108 mg, 1.07 mmol)，反應在 25℃下攪拌 4小時。將混合物加入水並用乙酸乙酯萃取。有機層經無水氯化鈉乾燥、過濾、濃縮並藉由製備薄層色譜柱純化(石油醚:乙酸乙酯=1:2)，得到(S)-2-[6-氯-2-(1-乙基-1H-吡唑-4-羰基)-1,2,3,4-四氫-異喹啉-8-基]吡咯烷-1-羧酸叔丁酯 (120.00 mg, 產率 73.39%)，為黃色油狀物。ES-API:[M+H] +=459.3。
步驟二：氮氣保護下，將(S)-2-[6-氯-2-(1-乙基-1H-吡唑-4-羰基)-1,2,3,4-四氫-異喹啉-8-基]吡咯烷-1-羧酸叔丁酯 (120 mg, 0.26 mmol)溶於二氧六環/水(4 mL/0.8 mL)中，加入3-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二噁硼烷-2-基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶 (80.98 mg, 0.31 mmol)，碳酸鉀 (108 mg, 0.78 mmol)，氯(2-二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II) (18.8 mg, 26.14 μmol)，加熱至100℃反應1小時。反應完成後，反應液旋乾，粗品經製備薄層色譜柱純化(二氯甲烷:甲醇=20:1)以得到產物(S)-2-[2-(1-乙基-1H-吡唑-4-羰基)-6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫-異喹啉-8-基]吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(100.00 mg, 產率62.06%)，為黃色油狀物。ES-API:[M+H] +=555.4。
步驟三：將(S)-2-[2-(1-乙基-1H-吡唑-4-羰基)-6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫-異喹啉-8-基]吡咯烷-1-羧酸叔丁酯 (100.0 mg, 0.18 mmol)溶於二氯甲烷(2 mL)中，加入三氟乙酸(2 mL)。室溫反應1小時。反應完成後，反應液旋乾，粗品經製備薄層色譜柱純化(二氯甲烷:甲醇=10:1)得到(S)-(1-乙基-1H-吡唑-4-基)-[6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-8-[吡咯烷-2-基]-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]甲酮(Z335, 23.90 mg, 收率29.16%)，為紅色固體。ES-API:[M+H] +=455.3。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 10.00 (s, 1H), 8.49 (s, 1H), 8.01 (s, 1H), 7.87 (s, 1H), 7.75 (s, 2H), 7.29 (s, 1H), 7.11 (s, 1H), 5.12-4.98 (m, 1H), 4.96-4.75 (m, 1H), 4.51-4.29 (m, 1H), 4.20 (q, J= 7.2 Hz, 2H), 4.04-3.81 (m, 2H), 3.36-3.24 (m, 1H), 3.16-2.96 (m, 3H), 2.34 (s, 3H), 2.30-2.14 (m, 1H), 2.05-1.85 (m, 2H), 1.73-1.61 (m, 1H), 1.51 (t, J= 7.2 Hz, 3H).
實施例133 化合物Z356的合成
步驟一：( S)-2-(6-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(60 mg, 0.18 mmol)和三乙胺(54 mg, 0.53 mmol)溶於二氯乙烷(5 mL)，在冰浴下加入4-嗎啉碳醯氯(53 mg, 0.36 mmol)，反應在室溫下攪拌2小時。用二氯甲烷(15 mL)稀釋，飽和碳酸氫鈉溶液(5 mL)，飽和食鹽水(5 mL)洗滌，無水硫酸鈉乾燥並濃縮，粗品用矽膠柱層析純化(甲醇/二氯甲烷：0-5%)得到目標產物( S)-2-(6-氯-2-(嗎啉-4-羰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(65 mg, 收率81.1%)，淡粉色固體。ES-API: [M+Na] +=473.2。
步驟二：向25 mL圓底燒瓶中加入( S)-2-(6-氯-2-(嗎啉-4-羰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(65 mg, 0.14 mmol)，3-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧苯甲醛-2-基)-1H-吡咯[2,3- b]吡啶 (56 mg, 0.22 mmol)，2-二環己基膦-2′,6′-二甲氧基-聯苯(6 mg, 0.014 mmol)，氯(2-二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II)(11 mg, 0.014 mmol)，碳酸鉀 (60 mg, 0.43 mmol)，1,4-二氧六環(5 mL)，和水(1 mL)。氮氣置換三次，反應在110℃反應2小時。將反應冷卻至室溫，加入乙酸乙酯(50 mL)，用飽和食鹽水(15 mL)洗滌，用無水硫酸鈉乾燥並濃縮。粗品用矽膠柱層析純化(甲醇/二氯甲烷：0-5%)得到目標產物( S)-2-(6-(3-甲基-1 H-吡咯[2,3- b]吡啶-5-基)-2-(嗎啉-4-羰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(65 mg, 收率82.5%)，淡黃色固體。ES-API: [M+H] +=546.4。
步驟三：( S)-2-(6-(3-甲基-1 H-吡咯[2,3- b]吡啶-5-基)-2-(嗎啉-4-羰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(65 mg, 0.12 mmol)溶於甲醇(1 mL)加入4.0M氯化氫二氧六環溶液(4 mL，16.0 mmol)，反應在室溫下反應2小時。反應液濃縮，加入7.0M氨甲醇溶液(5 mL)，溶劑旋乾，粗品用製備HPLC(甲酸法)純化得到目標產物( S)-(6-(3-甲基-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶-5-基)-8-(吡咯烷-2-基)-3,4-二氫異喹啉-2(1 H)-基)(嗎啉基)甲酮(Z356, 甲酸鹽，36 mg, 收率61.5%)，白色固體。ES-API: [M+H] +=446.3。 1H NMR (500 MHz, DMSO- d 6 ) δ 11.37 (s, 1H), 8.51 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 8.33 (s, 1H), 8.16 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 7.77 (s, 1H), 7.47 (s, 1H), 7.27 (s, 1H), 4.54 (d, J= 16.5 Hz, 1H), 4.48-4.36 (m, 2H), 3.68-3.54 (m, 4H), 3.50-3.39 (m, 2H), 3.34-3.08 (m, 6H), 3.02-2.89 (m, 2H), 2.36-2.23 (m, 4H), 2.04-1.87 (m, 2H), 1.81-1.68 (m, 1H).
實施例134 化合物Z256的合成
步驟一：將1-溴-5-氯-2-甲基-3-硝基苯 (4.64 g, 18.524 mmol)、N-溴代丁二醯亞胺 (3.63 g, 20.377 mmol), 過氧化苯甲醯(0.45 g, 1.852 mmol) 加入到四氯化碳 (50 mL) 中，油浴加熱至回流，反應過夜。反應液旋乾除去溶劑後，加入乙酸乙酯(30 mL)稀釋，飽和食鹽水(30mLx1)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮得到1-溴-2-(溴甲基)-5-氯-3-硝基苯(6.1g，18.520mmol，粗品)，不經純化直接用於下一步。ES-API: [M+H] +=329.8。
步驟二：將 1-溴-2-(溴甲基)-5-氯-3-硝基苯 (6.1 g, 18.520 mmol) 的四氫呋喃 (30 mL)溶液加入到 70% 乙胺的水溶液 (11.5 mL, 185.202 mmol) 中，室溫攪拌 1小時。倒入水 (50 mL) 中，乙酸乙酯(50 mLx3) 萃取。合併有機相層，用飽和食鹽水溶液 (100 mL x 1) 洗滌，用無水硫酸銨乾燥，過濾並濃縮。藉由矽膠柱層析純化 (乙酸乙酯/石油醚 = 20/80)，得到N-(2-溴-4-氯-6-硝基苯)乙胺(2.5 g, 收率45.98%。)ES-API: [M+H] +=292.9。
步驟三：將N-(2-溴-4-氯-6-硝基苯)乙胺 (2.5 g, 8.516 mmol) 溶解到乙醇(100 mL)和水 (20 mL)的溶液中，加入鐵 (2.38 g, 42.582 mmol)和氯化銨(4.56 g，85.164 mmol)。將混合物在90℃攪拌1小時。反應液經矽藻土過濾並濃縮，得到3-溴-5-氯-2-[(乙基氨基)甲基]苯胺(2.3g, 粗品)，不經純化直接用於下一步。ES-API: [M+H] +=263.1。
步驟四：將3-溴-5-氯-2-[(乙基氨基)甲基]苯胺 (2.1 g, 7.968 mmol) 溶解在四氫呋喃 (30 mL)的溶液中，冰水浴條件下，加入雙三甲基矽基胺基鋰 (39.839 mL, 39.839 mmol)。0℃攪拌10分鐘，緩慢加入 N,N'-羰基二咪唑(1.68 g, 10.358 mmol)，混合物在0℃攪拌1小時。用 1M 鹽酸 (50mL) 淬滅。倒入水 (100 mL) 中，乙酸乙酯 (100 mL x 3) 萃取。合併有機層，用飽和食鹽水溶液 (100 mL x 1) 洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮。藉由矽膠柱層析純化 (乙酸乙酯/石油醚 = 40/60)得到5-溴-7-氯-3-乙基-2-氧代-1,2,3,4-四氫喹唑啉(850 mg, 收率: 36.84%)。ES-API: [M+H] +=288.9。
步驟五：將5-溴-7-氯-3-乙基-2-氧代-1,2,3,4-四氫喹唑啉(850 mg, 2.935 mmol)和乙烯基三氟硼酸鉀(786.58 mg, 5.87 mmol)溶解在乙醇(20mL)中，加入[1,1'-雙(二苯基膦)二茂鐵]二氯化鈀二氯甲烷絡合物 (239mg, 0.293mmol)和三乙胺(592.8mg, 5.87mmol)。將混合物用氮氣脫氣並在 85°C 下攪拌 3 小時。倒入水 (30 mL) 中，用乙酸乙酯 (30 mL x 3) 萃取。合併有機層，用飽和食鹽水溶液 (30 mL x 1) 洗滌，用無水硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮。藉由矽膠柱層析純化 (乙酸乙酯/石油醚=50/50)得到 7-氯-3-乙基-2-氧代-5-乙烯基-1,2,3,4-四氫喹唑啉(556 mg, 收率80%)。ES-API:[ M+H]+=237.0。
步驟六：將7-氯-3-乙基-2-氧代-5-乙烯基-1,2,3,4-四氫喹唑啉(450 mg, 1.901 mmol)溶解在四氫呋喃 (30 mL) 和 水 (15 mL) 中，加入高碘酸鈉 (2439.81 mg, 11.407 mmol) 和 二水合鋨酸鉀 (70.05 mg, 0.190 mmol)。室溫下攪拌1小時。倒入水 (30 mL) 中，用 乙酸乙酯 (30 mL x 3) 萃取。合併有機層，用飽和 氯化鈉溶液 (30 mL x 1) 洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮。藉由矽膠柱層析純化 (PE/EA=50/50)，得到 7-氯-3-乙基-2-氧代-1,2,3,4-四氫喹唑啉-5-甲醛(250 mg, 收率55.10%)。ES-API:[ M+H] +=239.0。
步驟七：7-氯-3-乙基-2-氧代-1,2,3,4-四氫喹唑啉-5-甲醛 (250 mg, 1.047 mmol) 和 (S)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺(253.91 mg, 2.095 mmol) 溶解在二氯甲烷 (20 mL) 中，加入鈦酸四乙酯 (955.75 mg, 4.190 mmol)。混合物在室溫攪拌2小時。反應完畢，倒入飽和食鹽水(10 mL)洗滌，分離有機相，無水硫酸鈉乾燥，濃縮，經矽膠柱層析純化(乙酸乙酯/石油醚=70/30)得到(S)-N-((7-氯-3-乙基-2-氧代-1,2,3,4-四氫喹唑啉-5-基)亞甲基)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺(350mg, 收率97.8%)。ES-API: [M+H] +=342.1。
步驟八：-78℃下，向(S)-N-((7-氯-3-乙基-2-氧代-1,2,3,4-四氫喹唑啉-5-基)亞甲基)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺(350mg, 1.024mmol的四氫呋喃溶液中加入(1,3-二氧六環-2-乙基)溴化鎂(16.381mL, 8.191mmol)。混合物在-78℃攪拌10分鐘。用氯化銨(20mL) 水溶液淬滅，用乙酸乙酯(50 mL x 3) 萃取。合併有機層，用飽和氯化鈉溶液 (100 mL x 1) 洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮。粗品經矽膠柱層析純化 (石油醚/四氫呋喃=10/90)，得到(S)-N-((S)-1-(7-氯-3-乙基-2-氧代-1,2,3,4-四氫喹唑啉-5-基)-3-(1,3-二氧-2-基)丙基)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺(320 mg ,收率68.24%)。ES-API: [M+H] +=342.1。
步驟九：向(S)-N-((S)-1-(7-氯-3-乙基-2-氧代-1,2,3,4-四氫喹唑啉-5-基)-3-(1,3-二氧-2-基)丙基)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺(300 mg, 0.655 mmol)中加入三氟乙酸(8 mL) 和 水 (0.5 mL)溶液。室溫攪拌0.5 小時。然後加入 三乙基矽烷 (2.092 mL, 13.100 mmol)，混合物在室溫下攪拌18小時。反應液濃縮，得到 (S)-7-氯-3-乙基-5-(吡咯烷-2-基)-3,4-二氫喹唑啉-2(1H)-酮(400mg, 粗品)，不經純化直接用於下一步反應。ES-API: M+H] +=280.1。
步驟十：將(S)-7-氯-3-乙基-5-(吡咯烷-2-基)-3,4-二氫喹唑啉-2(1H)-酮(400mg, 粗品)溶解在二氯甲烷(10 mL)中，加入 N,N-二異丙基乙胺(923.90mg, 7.149mmol)和二碳酸二叔丁酯(624.08mg, 2.859mmol)，室溫下攪拌1小時。倒入水(10 mL)中，用二氯甲烷(10 mL)萃取。合併有機層，用飽和氯化鈉溶液 (20 mL x 1) 洗滌，用無水硫酸鈉 乾燥，過濾並濃縮，得到粗品藉由矽膠柱層析純化(乙酸乙酯/石油醚=50/50)，得到 (2S)-2-(7-氯-3-乙基-2-氧代-1,2,3,4-t四氫喹唑啉-5-基)-四氫吡喃-1-甲酸叔丁酯 (220 mg, 2步收率88.39%)。ES-API: [M+H] +=380.2。
步驟十一：將(2S)-2-(7-氯-3-乙基-2-氧代-1,2,3,4-t四氫喹唑啉-5-基)-四氫吡喃-1-甲酸叔丁酯 (50 mg, 0.132 mmol)、3-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(50.96 mg, 0.197 mmol)、氯(2-二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II)(9.48 mg, 0.013 mmol)和碳酸鉀(54.57 mg, 0.395 mmol)加入到1,4,-二氧六環(3mL)和水(0.5mL)中，氮氣置換，微波115℃反應0.5小時。反應完畢，加入乙酸乙酯(20 mL)，依次用水(10mL)、飽和食鹽水(10mL)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，濃縮，經製備薄層析(石油醚/乙酸乙酯=1/1)純化，得到 (S)-2-(3-乙基-7-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-2-氧代-1,2,3,4-四氫喹唑啉-5-基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(30 mg, 收率47.92%)。ES-API: [M+H] +=476.3。
步驟十二：將(S)-2-(3-乙基-7-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-2-氧代-1,2,3,4-四氫喹唑啉-5-基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(30 mg, 0.063 mmol)溶解到二氯甲烷(2mL)中，加入三氟乙酸(1 mL)中，室溫反應0.5小時。反應完畢，反應液濃縮，加入氨甲醇溶液(1mL)中和後，再次濃縮，得到粗品經製備HPLC (氨水)純化得到(S)-3-乙基-7-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-5-(吡咯烷-2-基)-3,4-二氫喹唑啉-2( 1H)-酮(Z256, 3mg, 收率12.7%)。ES-API: [M+H] +=376.2。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 11.41-11.28 (m, 1H), 9.20-9.13 (m, 1H), 8.39-8.30 (m, 1H), 8.03-7.91 (m, 1H), 7.39 (s, 1H), 7.31-7.22 (m, 1H), 6.95 (d, J= 7.9 Hz, 1H), 4.51 (q, J= 15.0 Hz, 2H), 4.17 (s, 1H), 3.40 (q, J= 6.9 Hz, 2H), 3.10-3.01 (m, 2H), 2.30 (t, J= 1.8 Hz, 3H), 2.18 (s, 2H), 1.80-1.71(m, 2H), 1.50 (s, 1H), 1.13 (td, J= 7.1, 3.2 Hz, 3H).
實施例135 化合物Z402的合成
步驟一：將 (S)-2-(7-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-5-基)四氫吡咯-1-羧酸叔丁酯 (210 mg, 0.623 mmol) 溶於1,2-二氯乙烷 (2 mL) ，攪拌下加入 四氫吡喃-4-甲醛 (142.31 mg, 1.247 mmol)。反應液室溫攪拌0.5 小時 後，加入三乙醯基硼氫化鈉 (525.98 mg, 2.494 mmol) ，室溫攪拌過夜。加入水(5 mL)淬滅反應，水相調pH 至9-10 ，用二氯甲烷 (10 mLX2)萃取，合併有機相，用飽和食鹽水洗滌，並用無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮，得到粗品經矽膠柱層析純化(0-100% 乙酸乙酯/石油醚，隨後 0-10% 甲醇/二氯甲烷+0.1%氨水) 得到 ( S)-2-[7-氯-2-(3,4,5,6-四氫-2 H-吡喃-4-基甲基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-5-基]四氫吡咯-1-羧酸叔丁酯 (290 mg, 粗品) ，直接用於下一步反應。LCMS：ES-API [M+H] +=435.3。
步驟二：將3-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶 (166.15 mg, 0.644 mmol) 與 ( S)-2-[7-氯-2-(3,4,5,6-四氫-2 H-吡喃-4-基甲基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-5-基]四氫吡咯-1-羧酸叔丁酯 (140 mg, 0.322 mmol) 溶於1,4-二氧六環 (3 mL) ，加入碳酸鉀 (133.44 mg, 0.966 mmol)與水(0.75 mL)，然後加入氯(2-二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II) (46.38 mg, 0.064 mmol) 。氮氣保護下，120 ℃ 加熱反應 3 小時。反應液中加入乙酸乙酯(10 mL) 與飽和食鹽水。水相用乙酸乙酯(10 mLX2)萃取，合併有機相，用飽和食鹽水洗滌，無水硫酸鈉乾燥，減壓濃縮。粗品藉由矽膠柱層析純化(0-100% 乙酸乙酯/石油醚, 隨後0~10% 甲醇/二氯甲烷+0.1% 氨水) 得到( S)-2-[7-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3- b]吡啶-5-基)-2-(3,4,5,6-四氫)-2H-吡喃-4-基甲基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-5-基]四氫吡咯-1-羧酸叔丁酯(100 mg, 收率58.55%) 。LCMS：ES-API [M+H] += 531.4.
步驟三：將( S)-2-[7-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3- b]吡啶-5-基)-2-(3,4,5,6-四氫)-2H-吡喃-4-基甲基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-5-基]四氫吡咯-1-羧酸叔丁酯 (100 mg, 0.188 mmol) 溶於二氯甲烷(4 mL) ，攪拌下加入三氟乙酸 (2 mL)。室溫反應2小時。反應液濃縮後，藉由製備HPLC純化(甲酸法) 得到7-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3- b]吡啶-5-基)-2-(3,4,5,6-四氫-2H-吡喃-4-基甲基)-5-[(2 S)-四氫-1H-吡咯-2-基]-1,2,3,4-四氫異喹啉 (Z402, 甲酸鹽，54 mg, 收率59.40%)，白色固體。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 11.37 (s, 1H), 8.56 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 8.24-8.15 (m, 2H), 7.75 (s, 1H), 7.50 (s, 1H), 7.27 (s, 1H), 4.81-4.66 (m, 1H), 3.91-3.79 (m, 2H), 3.71-3.60 (m, 2H), 3.52-3.41 (m, 1H), 3.33 (q, J= 11.2, 9.8 Hz, 3H), 3.00-2.79 (m, 2H), 2.79-2.66 (m, 2H), 2.42-2.33 (m, 3H), 2.32 (s, 3H), 2.19-2.00 (m, 3H), 1.97-1.82 (m, 1H), 1.65 (d, J= 12.0 Hz, 2H), 1.22-1.10 (m, 2H). LCMS：ES-API [M+H] += 431.3。
實施例136 化合物Z337的合成
步驟一：(S)-2-(6-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(120 mg, 0.356 mmol)，1-甲基-3-(三氟甲基)吡唑-4-羧酸(82.98 mg, 0.427 mmol)，1-丙基磷酸酐(452.8 mg, 0.712 mmol, 50%的乙酸乙酯溶液)溶於三乙胺(108.14 mg, 1.07 mmol)和二氯甲烷(5 mL)中，室溫反應2小時。加水淬滅反應、加入乙酸乙酯萃取，有機相食鹽水洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮，粗品經製備薄層色譜柱純化(乙酸乙酯/石油醚=2/1)得到產品 (S)-2-[6-氯-2-[1-甲基-3-(三氟甲基)吡唑-4-羰基]-3,4-二氫-1H-異喹啉-8-基]吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(160 mg, 收率：87.56%)。ES-API: [M+H] += 513.9。
步驟二：氮氣保護下，(S)-2-[6-氯-2-[1-甲基-3-(三氟甲基)吡唑-4-羰基]-3,4-二氫-1H-異喹啉-8-基]吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(160 mg，0.311 mmol)，3-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二噁硼烷-2-基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(85.13 mg, 0.329 mmol)，氯(2-二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II)(19.78 mg, 0.027 mmol)和碳酸鉀(75.97 mg, 0.549 mmol)溶於1,4-二氧六環溶液(1 mL)和水(0.1 mL)，升溫至100 oC反應2小時。反應完成後，反應液加水淬滅，乙酸乙酯萃取，有機相食鹽水洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮，得到粗品經薄層析柱純化(二氯甲烷/甲醇=10/1)得產物 (S)-2-[6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-2-[1-甲基-3-(三氟甲基)吡唑-4-羰基]-3,4-二氫-1H-異喹啉-8-基]吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(120 mg, 收率：63.21%)。ES-API: [M+H] += 609.7。
步驟三：(S)-2-[6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-2-[1-甲基-3-(三氟甲基)吡唑-4-羰基]-3,4-二氫-1H-異喹啉-8-基]吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(120 mg, 0.197 mmol)溶於二氯甲烷(2 mL)和三氟乙酸溶液(2 mL)，室溫攪拌1小時。反應液旋乾，得到粗品經製備HPLC(色譜柱: Ultimate XB-C18,50*250mm,10um，流動相：A：純化水(0.05%氨水)；B :純乙腈，流速：80ml/min，梯度：在50分鐘內，B/A=20%-90%，波長：214nm，柱溫：室溫)純化得產物[6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-8-[(2S)-吡咯烷-2-基]-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]-[1-甲基-3-(三氟甲基)吡唑-4-基]甲酮(Z337, 22.7 mg, 收率：22.64%)。ES-API: [M+H] += 509.3。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 8.58-8.32 (m, 1H), 7.99-7.72 (m, 2H), 7.63-7.42 (m, 1H), 7.06-6.88 (m, 2H), 5.08-4.53 (m, 3H), 4.11-3.90 (m, 4H), 3.84-3.72 (m, 1H), 3.64-3.27 (m, 3H), 2.81-2.65 (m, 1H), 2.44-2.35 (m, 1H), 2.27 (s, 3H), 2.22-2.02 (m, 3H).
實施例137 化合物Z401的合成
步驟一：( S)-2-(6-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(100 mg, 0.30 mmol)和四氫吡喃-4-酮(89 mg, 0.89 mmol)溶於1,2-二氯乙烷(3 mL)，加入三乙醯硼氫化鈉(188 mg, 0.89 mmol)，反應在室溫下攪拌4小時。用二氯甲烷(30 mL)稀釋，飽和碳酸氫鈉溶液(15 mL)，飽和食鹽水(10 mL)洗滌，在無水硫酸鈉乾燥並濃縮。粗品用快速矽膠柱純化(7M氨甲醇/二氯甲烷：0-5%)得到目標產物( S)-2-(7-氯-2-(四氫-2H-吡喃-4-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-5-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(90 mg, 收率72.0%)，無色液體。ES-API: [M+H] +=421.3。
步驟二：向25 mL圓底燒瓶中加入( S)-2-(7-氯-2-(四氫-2H-吡喃-4-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-5-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(90 mg, 0.21mmol)，3-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼烷-2-基)-1H-吡咯[2,3- b]吡啶 (83 mg, 0.32 mmol)，2-二環己基膦-2′,6′-二甲氧基-聯苯(9 mg, 0.02 mmol)，氯(2-二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II)(15 mg, 0.02 mmol)，碳酸鉀 (89 mg, 0.64 mmol)，1,4-二氧六環(5 mL)，和水(1 mL)。氮氣置換三次，反應在110℃反應2小時。將反應冷卻至室溫，加入乙酸乙酯(50 mL)，用飽和食鹽水(15 mL)洗滌，用無水硫酸鈉乾燥並濃縮。粗品用快速矽膠柱純化(7M氨甲醇/二氯甲烷：0-3%)得到目標產物( S)-2-(7-(3-甲基-1 H-吡咯[2,3- b]吡啶-5-基)-2-(四氫-2 H-吡喃-4-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-5-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(90 mg, 收率81.5%)，淡黃色固體。ES-API: [M+H] +=517.3。
步驟三：( S)-2-(7-(3-甲基-1 H-吡咯[2,3- b]吡啶-5-基)-2-(四氫-2 H-吡喃-4-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-5-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(90 mg, 0.17 mmol)溶於甲醇(1 mL)加入4.0M氯化氫二氧六環溶液(4 mL，16.0 mmol)，反應在室溫下反應18小時。反應液濃縮，加入7.0M氨甲醇溶液(5 mL)，溶劑旋乾，粗品用製備HPLC(甲酸)純化得到目標產物( S)-7-(3-甲基-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶-5-基)-5-(吡咯烷-2-基)-2-(四氫-2 H-吡喃-4-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉(Z401, 甲酸鹽，51 mg, 收率63.4%)，白色固體。ES-API: [M+H] +=417.3。 1H NMR (500 MHz, DMSO- d 6 ) δ 11.35 (s, 1H), 8.52 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 8.29 (s, 2H), 8.17 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 7.73 (s, 1H), 7.43 (s, 1H), 7.26 (s, 1H), 4.62-4.51 (m, 1H), 3.93 (d, J= 9.5 Hz, 2H), 3.85-3.72 (m, 2H), 3.41-3.28 (m, 3H), 3.23-3.16 (m, 1H), 2.98-2.74 (m, 4H), 2.66-2.56 (m, 1H), 2.35-2.26 (m, 4H), 2.09-1.73 (m, 5H), 1.58-1.44 (m, 2H).
實施例138 化合物Z239的合成
步驟一：氮氣保護下，向 (3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二噁硼烷-2-基) 吡啶-2-胺(600 mg, 2.72 mmol) 的1,4-二氧六環(20 mL)和水(2 mL)溶液中加入碳酸鈉(72.24 mg, 681.59 μmol)，2-溴-1,3,4-噻二唑(89.98 mg, 545.27μmol)，1,1-二(二苯膦基)二茂鐵二氯化(133.05 mg, 181.76μmol)。反應混合物在微波100℃下攪拌 1 小時。LCMS監測反應完全，反應液濃縮，得到粗品經矽膠柱層析純化(石油醚：乙酸乙酯=1:1)得到產物3-(1,3,4-噻二唑-2-基)吡啶-2-胺(250.00 mg, 產率51.64%)，為黃色固體。ES-API:[M+H] +=179.10。
步驟二：在氮氣保護下，0℃下向 3-(1,3,4-噻二唑-2-基)吡啶-2-胺 (0.25 g, 1.40 mmol) 的四氫呋喃 (20 mL) 溶液中加入N-溴代丁二醯亞胺(299.61 mg, 1.68 mmol)。反應混合物在 0℃攪拌 1 小時。藉由LCMS監測反應完全，加入硫代硫酸鈉溶液淬滅反應，用乙酸乙酯萃取，無水硫酸鈉乾燥，濃縮，得到粗品經矽膠柱層析純化(石油醚：乙酸乙酯=10:1)得到產物5-溴-3-(1,3,4-噻二唑-2-基)吡啶-2-胺(250.00 mg, 產率69.31%)，為黃色固體。ES-API:[M+H] +=256.90/258.90。
步驟三：氮氣保護下，向 (S)-2-(6-溴異色滿-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯 (0.2 g, 523.16 μmol) 的1,4-二氧六環(3.0 mL)溶液中加入乙酸鉀 (154.03 mg, 1.57μmol)，4,4,5,5-四甲基-2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼烷-2-基)-1,3,2-二氧硼烷 (199.28 mg, 784.74 μmol), 1,1-二(二苯膦基)二茂鐵二氯化鈀 (38.30 mg, 52.32 μmol)。反應混合物100℃攪拌 16 小時。藉由LCMS監測反應完全，用水淬滅，加入乙酸乙酯萃取，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮，得到(S)-2-[6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二噁硼烷-2-基) 異色滿-8-基] 吡咯烷-1-羧酸叔丁酯，粗產品，不經純化直接用於下一步。ES-API:[M+H] +=374.20
步驟四：在氮氣保護下向5-溴-3-(1,3,4-噻二唑-2-基)吡啶-2-胺(0.1 g, 388.94 μmol)的 1,4-二氧六環(3 mL)和水(0.3 mL)溶液中加入(S)-2-[6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二噁硼烷-2-基) 異色滿-8-基] 吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(200.39 mg, 466.73 μmol)，1,1-二(二苯膦基)二茂鐵二氯化鈀(113.88 mg, 155.58 μmol)，碳酸銫 (380.17 mg, 1.17 mmol)。反應混合物微波 100℃攪拌 1 小時。藉由LCMS監測反應完全，反應液濃縮，粗品經矽膠柱層析純化(石油醚：乙酸乙酯=1:1)得到產物(S)-2-[6-[6-氨基-5-(1,3,4-噻二唑-2-基)-3-吡啶基]異色滿-8-基] 吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(100.00 mg, 產率42.89%)，為黃色油狀。ES-API:[M+H] +=480.30。
步驟五：向(S)-2-[6-[6-氨基-5-(1,3,4-噻二唑-2-基)-3-吡啶基]異色滿-8-基]吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(0.1 g, 208.51 μmol)的二氯甲烷 (1.0 mL) 溶液中加入三氟乙酸 (1.0 mL)。30℃下攪拌 1 小時。反應物中加入飽和碳酸氫鈉水溶液，然後用乙酸乙酯 (150 mL)萃取。分離有機層，用無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮，得到粗品經製備薄層色譜柱純化(二氯甲烷:甲醇=10:1) 和打漿(乙酸乙酯)純化得到 5-[8-[(S)-吡咯烷-2-基]異色滿-6-基]-3-(1,3,4-噻二唑-2-基)吡啶-2-胺(Z239, 20.00 mg, 產率24.01%)，為黃色固體。ES-API:[M+H] +=380.1。
實施例139 化合物Z285的合成
步驟一：將(S)-5-(5-(1-(叔丁氧基羰基)吡咯烷-2-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-7-基)-3-甲基-1H-吡咯[2,3-b]吡啶-1-羧酸叔丁酯 (15 mg, 0.028 mmol)溶解到二氯甲烷(3mL)中，依次加入(R)-3,3,3-三氟-2-羥基-2-甲基丙酸(8.90 mg, 0.056 mmol)、N,N-二異丙基乙胺 (0.014 mL, 0.084 mmol) 和2-(7-偶氮苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯 (10.92 mg, 0.084 mmol )，室溫反應1小時。反應完畢。加入二氯甲烷(30 mL)稀釋，飽和食鹽水(30mL)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮，得到粗品經矽膠柱層析純化(石油醚/乙酸乙酯=1/1)得到 5-(5-((S)-1-(叔丁氧基羰基)吡咯烷-2-基)-2-((R)-3,3,3-三氟-2-羥基-2-甲基丙醯基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-7-基)-3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-1-羧酸叔丁酯(6 mg, 收率32%)。ES-API: [M+H] +=673.3。
步驟二：將5-(5-((S)-1-(叔丁氧基羰基)吡咯烷-2-基)-2-((R)-3,3,3-三氟-2-羥基-2-甲基丙醯基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-7-基)-3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-1-羧酸叔丁酯(6 mg, 0.009 mmol) 溶解到二氯甲烷(3mL)中，加入三氟乙酸(2 mL)中，室溫反應0.5小時。反應完畢，反應液濃縮，加入氨水甲醇溶液(1mL)中和後，再次濃縮，經製備HPLC鹼法(氨水)純化得到(R)-3,3,3-三氟-2-羥基-2-甲基-1-(7-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-5-( (S)-吡咯烷-2-基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)丙-1-酮(Z285, 1.8 mg, 收率44%)。ES-API: [M+H] +=473.2。
實施例140 化合物Z284的合成
步驟一：將5-溴-7-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉 (11.37 g, 46.120 mmol) 溶解在四氫呋喃(100 mL) 和 水 (30 mL) 中，加入 碳酸鉀 (19.12 g, 138.360 mmol) , 冷卻至 0℃，然後加入 氯甲酸苄酯 (16.334 mL, 115.300 mmol)。混合物在室溫下攪拌2小時。用水稀釋，乙酸乙酯(100 mL)萃取，合併乙酸乙酯層並用飽和氯化鈉溶液(100 mL x 1)洗滌，無水硫酸男乾燥，過濾並濃縮。加入二氯甲烷(50ml)攪拌打漿，過濾，石油醚(100 mL)洗滌，過濾，濾餅乾燥得到5-溴-7-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-2-甲酸苄酯(15 g, 收率85.4%)，為白色固體。ES-API: [M+H] +=380.0。
步驟二：將 5-溴-7-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-2-甲酸苄酯(15 g, 39.404 mmol) 和乙烯基三氟硼酸鉀 (10.56 g, 78.808 mmol) 的溶液加入到無水乙醇(300 mL)中，加入三乙胺(5.477mL, 39.404mmol)和[1,1'-雙(二苯基膦)二茂鐵]二氯化鈀二氯甲烷絡合物(1.61g, 1.970mmol)。混合物用氮氣脫氣，油浴加熱至100℃攪拌3小時，再90℃攪拌15小時。倒入水 (100 mL) 中，用乙酸乙酯(100 mL x 3) 萃取。合併有機層，用飽和氯化鈉溶液 (100 mL x 1) 洗滌，用無水硫酸男乾燥，過濾並濃縮，得到粗品經矽膠柱層析純化 (乙酸乙酯/石油醚=20/80)得到7-氯-5-乙烯基-1 ,2,3,4-四氫異喹啉-2-甲酸苄酯 (12 g, 收率92.90%)。ES-API: [M+H] +=328.1。
步驟三：向 7-氯-5-乙烯基-1,2,3,4-四氫異喹啉-2-甲酸苄酯 (12 g, 36.607 mmol)的四氫呋喃 (400 mL) 溶液中加入高碘酸鈉 (46.98 g, 219.639 mmol)、二水合鋨酸鉀(0.30g, 0.805mmol)和水(200 mL)，反應在室溫下攪拌2小時。用乙酸乙酯(100 mL)稀釋並過濾。分離有機層，再用水洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮，得到粗品經矽膠柱層析純化(乙酸乙酯/石油醚=20/80)，得到化合物7-氯-5-甲醯基-1,2,3,4-四氫異喹啉-2-甲酸苄酯(9g, 收率74.55%)。ES-API: [M+H] +=330.1。
步驟四：將7-氯-5-甲醯基-1,2,3,4-四氫異喹啉-2-甲酸苄酯 (9 g, 27.291 mmol)和(S)-2-甲基丙基-2-亞磺醯胺溶解在二氯甲烷(180 mL)中，緩慢加入鈦酸四乙酯(24.90g, 109.164 mmol)，反應在室溫下攪拌18小時。反應用二氯甲烷和飽和氯化鈉溶液稀釋，分離有機層，再用飽和氯化鈉溶液洗滌，濃縮，得到粗品經矽膠柱層析純化(乙酸乙酯/石油醚=80/20)，得到化合物(S)-5-(((叔丁基亞磺醯基)氨基)甲基)-7-氯-3,4-四氫異喹啉-2(1H)-甲酸苄酯 (10.5 g, 收率88.83%)。ES-API: [M+H] +=433.1。
步驟五：將(S)-5-(((叔丁基亞磺醯基)氨基)甲基)-7-氯-3,4-四氫異喹啉-2(1H)-甲酸苄酯 (10g, 23.096mmol)溶解在四氫呋喃(100mL)中，冷卻至-78℃，加入(1,3-二氧六環-2-乙基)溴化鎂(184.770mL, 92.385mmol)，混合物在-78℃攪拌1小時。加入飽和氯化銨(50mL)淬火反應，倒入水 (100 mL) 中，用乙酸乙酯(100 mL x 3) 萃取。合併有機層，用飽和氯化鈉溶液(100 mL x 1) 洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮。得到粗品藉由矽膠柱層析純化 (乙酸乙酯/石油醚=60/40)，得到5-((S)-1-(((S)-叔丁基亞磺醯基)氨基)-3-(1,3-二噁烷-2-基)丙基)-7-氯-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-甲酸苄酯(11.67 g, 收率92%)。ES-API: [M+H] +=549.2。
步驟六：向5-((S)-1-(((S)-叔丁基亞磺醯基)氨基)-3-(1,3-二噁烷-2-基)丙基)-7-氯-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-甲酸苄酯(11.67 g, 21.252 mmol) 加入三氟乙酸 (100 mL) 和 水 (5 mL)的溶液，室溫攪拌0.5 小時。然後加入三乙基矽烷 (33.851 mL, 212.518 mmol)，混合物在室溫下攪拌2小時。反應液濃縮，得到 (S)-7-氯-5-(吡咯烷-2-基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-甲酸苄酯(15g, 粗品)，不經純化直接用於下一步反應。ES-API: M+H] +=371.1。
步驟七：將(S)-7-氯-5-(吡咯烷-2-基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-甲酸苄酯(15g, 粗品)溶解在二氯甲烷(150 mL)中，加入 N,N-二異丙基乙胺(26.737 mL, 161.777 mmol)和二碳酸二叔丁酯(11.150 mL, 48.533 mmol)，室溫下攪拌1小時。倒入水(100 mL)中，分離有機層，用飽和氯化鈉溶液 (20 mL x 1) 洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮。得到粗品藉由矽膠柱層析純化(乙酸乙酯/石油醚=50/50)，得到(S)-5-(1-(叔丁氧羰基)吡咯烷-2-基)-7-氯-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-甲酸苄酯 (10 g, 2步收率100%)。ES-API: [M+H] +=471.1。
步驟八：將(S)-5-(1-(叔丁氧羰基)吡咯烷-2-基)-7-氯-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-甲酸苄酯(1.00 g, 2.123 mmol)、3-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(0.66 g, 2.548 mmol)、氯(2-二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II)(0.08 g, 0.106 mmol)和碳酸鉀(0.88 g, 6.369 mmol)加入到1,4-二氧六環(10ml)和水(2ml)中，氮氣置換，微波120℃反應1小時。反應完畢，加入乙酸乙酯(100 mL)，依次用水(50mL)、飽和食鹽水(50mL)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮，得到粗品經矽膠柱層析純化(石油醚/乙酸乙酯=5/95)，得到 (S)-5-(1-(叔丁氧羰基)吡咯烷-2-基)-7-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-羧酸苄酯(774 mg, 收率 64.50%)。ES-API: [M+H] +=567.3。
步驟九：將(S)-5-(1-(叔丁氧羰基)吡咯烷-2-基)-7-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-羧酸苄酯(774 mg, 1.366 mmol)溶解在二氯甲烷(50 mL)中，加入N,N-二異丙基乙胺(528.6 mg, 4.098 mmol)、二碳酸二叔丁酯 (0.471 mL, 2.049 mmol) 和 4-二甲氨基吡啶(16.45mg, 0.136mmol)。混合物在室溫下攪拌0.5 小時。反應液濃縮，得到粗品經矽膠柱層析(石油醚/乙酸乙酯=5/95)純化得到 (S)-7-(1-(叔丁氧基羰基)-3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-5-(1-(叔丁氧基羰基)吡咯烷-2 –基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-羧酸苄酯(540 mg, 收率 59.3% ) 。ES-API: [M+H] +=667.3。
步驟十：將(S)-7-(1-(叔丁氧基羰基)-3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-5-(1-(叔丁氧基羰基)吡咯烷-2 –基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-羧酸苄酯(540 mg, 0.810 mmol)溶解在二氯甲烷 (15 mL) ，然後加入 氯化鈀 (159.56 mg, 0.090 mmol)、三乙胺 (0.250 mL, 1.800 mmol) 和三乙基矽烷 (418.51 mg, 3.599 mmol)，混合物在室溫下攪拌0.5小時。用水 (30 mL) 稀釋，用二氯甲烷(30 mL x 3) 萃取，合併有機層並用飽和氯化鈉溶液(30 mL)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮。得到粗品藉由矽膠柱層析(甲醇/二氯甲烷=0%~10%)純化，得到(S)-5-(5-(1-(叔丁氧羰基)吡咯烷-2-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-7-基)-3-甲基-1H-吡咯烷[2,3-b]吡啶-1-甲酸叔丁酯(400 mg, 收率92.6%) . ES-API: [M+H] +=533.3。
步驟十一：將(S)-5-(5-(1-(叔丁氧羰基)吡咯烷-2-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-7-基)-3-甲基-1H-吡咯烷[ 2,3-b]吡啶-1-甲酸叔丁酯(150 mg, 0.282 mmol)溶解在乾燥的二氯甲烷中(10 mL)中，冰水浴條件下，依次加入三乙胺(67.2mg, 0.666mmol)和甲氧基乙醯氯(45.84 mg, 0.422 mmol)，攪拌反應1小時。反應完畢，加入二氯甲烷(30 mL)稀釋，飽和食鹽水(30mL)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮，得到粗品經矽膠柱層析純化(石油醚/乙酸乙酯=1/1)得到(S)-5-(5-(1-(叔丁氧基羰基)吡咯烷-2-基)-2-(2-甲氧基乙醯基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-7-基)-3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-1-羧酸叔丁酯(110 mg, 收率64.71%)。ES-API: [M+H] +=605.3。
步驟十二：將(S)-5-(5-(1-(叔丁氧基羰基)吡咯烷-2-基)-2-(2-甲氧基乙醯基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-7-基)-3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-1-羧酸叔丁酯(110 mg, 0.182 mmol)溶解到二氯甲烷(5mL)中，加入三氟乙酸(3 mL)中，室溫反應0.5小時。反應完畢，反應液濃縮，加入氨甲醇溶液(1mL)中和後，再次濃縮，經製備HPLC (氨水)純化得到(S)-2-甲氧基-1-(7-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-5-(吡咯烷-2-基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)乙烷-1-酮(Z284, 32 mg, 收率43.43%)。ES-API: [M+H] +=405.2. 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 11.34 (d, J= 14.0 Hz, 1H), 8.49-8.40 (m, 1H), 8.13-8.02 (m, 1H), 7.81-7.71 (m, 1H), 7.41 (d, J= 14.2 Hz, 1H), 7.26 (s, 1H), 4.76-4.63 (m, 2H), 4.21 (d, J= 5.5 Hz, 3H), 3.90-3.52 (m, 3H), 3.35-3.25 (m, 3H), 3.15-3.05 (m, 1H), 3.00-2.72 (m, 3H), 2.31 (d, J= 1.1 Hz, 3H), 2.25-2.10 (m, 1H), 1.88-1.70 (m, 2H), 1.48-1.38 (m, 1H).
實施例141 化合物Z283的合成
步驟一：向 (S)- 2-(6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(30 mg, 0.069 mmol) 的二氯甲烷(1 mL)溶液中加入4-甲基嘧啶-5-羧酸(11.5 mg, 0.083 mmol)，1-丙基磷酸酐(132.3 mg, 0.21 mmol, 50%的乙酸乙酯溶液) ，三乙胺 (21.01 mg, 0.21 mmol) ，在25°C下攪拌2小時。藉由LCMS監測反應完全，加水淬滅反應，乙酸乙酯萃取，飽和食鹽水洗，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮得到產物(S)-2-(6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-2-(4-甲基嘧啶-5-羰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(35 mg, 粗品) 。ES-API:[M+H] += 553.4。
步驟二：向化合物(S)- 2-(6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-2-(4-甲基嘧啶-5-羰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯 (35 mg, 0.063 mmol) 的二氯甲烷溶液(1 mL)加入三氟乙酸(0.5 mL)，常溫攪拌1小時。藉由LCMS監測反應完全，用飽和碳酸氫鈉水溶液調pH至7，用二氯甲烷/水處理，無水硫酸鈉乾燥，濃縮，得到粗品經製備HPLC純化(色譜柱：Ultimate XB-C18,50*250mm,10um，流動相：A：純化水(0.05%氨水) B : 純乙腈，流速：80ml/min，梯度：在50分鐘內，B/A=20%-90%，波長：214nm，柱溫：室溫)得到產物(S)-(6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-8-(吡咯烷-2-基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)(4-甲基嘧啶-5-基)甲酮(Z283, 7.3 mg, 收率25%) ，白色粉末。ES-API:[M+H] +=453.3。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 9.16-9.12 (m, 1H), 8.99-8.80 (m, 1H), 8.56 (s, 1H),8.50-8.45 (m, 1H), 8.03-7.98 (m, 1H), 7.85-7.57 (m, 1H), 7.32 (s, 1H), 7.08 (s, 1H),5.41-4.90 (m, 1H), 4.82-4.36 (m, 1H), 4.19-3.85 (m, 1H),3.57-3.31 (m, 2H), 3.19-2.98 (m, 2H), 2.95-2.82 (m, 2H),2.60-2.45 (m, 3H), 2.43-2.34 (m, 1H), 2.34 (s, 3H), 2.13-1.90 (m, 3H).
實施例142 化合物Z282的合成
步驟一：向 (S)- 2-(6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(30 mg, 0.069 mmol) 的二氯甲烷(1mL)溶液中加入1,3-二甲基-1H-吡唑-4-羧酸(11.7 mg, 0.083 mmol)，1-丙基磷酸酐(132.3 mg, 0.21 mmol, 50%的乙酸乙酯溶液)，三乙胺 (21.01 mg, 0.21 mmol) ，在25°C下攪拌2小時。藉由LCMS監測反應完全，加水淬滅反應，乙酸乙酯萃取，飽和食鹽水洗，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮得到產物(S)- 2-(2-(1,3-二甲基-1H-吡唑-4-羰基)-6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基 )-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(35 mg, 粗品) 。ES-API:[M+H] += 555.4。
步驟二：向化合物(S)- 2-(2-(1,3-二甲基-1H-吡唑-4-羰基)-6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基 )-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(35 mg, 0.063mmol ) 的二氯甲烷(1mL)溶液中加入三氟乙酸(0.5 mL)，常溫攪拌1小時。藉由LCMS監測反應完全，反應液用飽和碳酸氫鈉水溶液調pH至7，用二氯甲烷/水處理，無水硫酸鈉乾燥，濃縮，得到粗品藉由製備HPLC純化(色譜柱：Ultimate XB-C18,50*250mm,10um，流動相：A：純化水(0.05%氨水) B : 純乙腈，流速：80mL/min，梯度：在50分鐘內，B/A=20%-90%，波長：214nm，柱溫：室溫)得到(S)-(1,3-二甲基-1H-吡唑-4-基)(6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-8-(吡咯烷-2-基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)甲酮(Z282, 1.7 mg, 收率6 %)，白色粉末。ES-API:[M+H] +=455.3。
實施例143 化合物Z281的合成
步驟一：向 (S)- 2-(6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(30 mg, 0.069 mmol) 的N，N-二甲基甲醯胺(1 ml)溶液中加入1-(2-羥乙基)-1H-吡唑-4-羧酸(11.7 mg, 0.083 mmol)，1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽 (39.89 mg, 0.21 mmol) ，三乙胺(21.01, 0.21 mmol)，1-羥基苯并三氮唑 (14.06 mg, 0.11mmol) ，混合液在25°C下攪拌2小時。LCMS監測反應完全，加水淬滅反應，乙酸乙酯萃取，飽和食鹽水洗，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮得到產物(S)-叔丁基2-(2-(1-(2-羥乙基)-1H-吡唑-4-羰基)-6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸酯(40 mg, 粗品) 。ES-API:[M+H] += 571.4。
步驟二：向化合物(S)- 2-(2-(1-(2-羥乙基)-1H-吡唑-4-羰基)-6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(40 mg, 0.07mmol ) 的二氯甲烷(1mL)加入三氟乙酸(0.5 mL)，常溫攪拌1小時。藉由LCMS監測反應完全，用飽和碳酸氫鈉水溶液調pH至7，用二氯甲烷/水處理，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮，得到粗品藉由製備HPLC純化(色譜柱：Ultimate XB-C18,50*250mm,10um，流動相：A：純化水(0.05%氨水) B : 純乙腈，流速：80mL/min，梯度：在50分鐘內，B/A=20%-90%，波長：214nm，柱溫：室溫)得到(S)-(1-(2-羥乙基)-1H-吡唑-4-基)(6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-8-(吡咯烷-2-基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)甲酮(Z281, 4.8 mg, 收率：14.6 %) 白色粉末。ES-API:[M+H] +=471.3。
實施例144 化合物Z280的合成
步驟一：向 (S)- 2-(6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(30 mg, 0.069 mmol) 的二氯甲烷(1 mL)溶液中加入吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羧酸(13.58 mg, 0.083 mmol)，1-丙基磷酸酐(132.3 mg, 0.21 mmol, 50%的乙酸乙酯溶液) ，三乙胺 (21.01 mg, 0.21 mmol) ，反應液在25°C下攪拌2小時。藉由LCMS監測反應完全，加水淬滅反應，乙酸乙酯萃取，飽和食鹽水洗，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮得到產物(S)- 2-(6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-2-(吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羰基 )-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(30 mg, 粗品) 。ES-API:[M+H] += 578.3。
步驟二：向化合物(S)-2-(6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-2-(吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羰基 )-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(40 mg, 0.069 mmol,) 的二氯甲烷(1 mL)溶液中加入三氟乙酸(0.5 mL)，常溫攪拌1小時。藉由LCMS監測反應完全，反應液用飽和碳酸氫鈉水溶液調pH至7，用二氯甲烷/水處理，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮，得到粗品經製備HPLC純化(色譜柱：Ultimate XB-C18,50*250mm,10um，流動相：A：純化水(0.05%氨水) B : 純乙腈，流速：80ml/min，梯度：在50分鐘內，B/A=20%-90%，波長：214nm，柱溫：室溫)得到(S)-(6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-8-(吡咯烷-2-基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)(吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)甲酮(Z280, 5.4 mg, 收率16.33%)，白色粉末。ES-API:[M+H] +=478.2。
實施例145 化合物Z271-1和Z271-2的合成
步驟一：向 (S)-2-(6-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(50 mg, 0.15 mmol) 的N,N-二甲基甲醯胺(1 mL)溶液中加入(S)-3,3,3-三氟-2-羥基-2-甲基丙酸(46.93mg, 0.30 mmol)，1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽 (85.36 mg, 0.45 mmol) ，三乙胺(44.97mg, 0.45 mmol) ，1-羥基-苯并三氮唑 (60.17 mg, 0.45mmol) ，混合液在25°C下攪拌2小時。LCMS監測反應完全，加水淬滅，乙酸乙酯萃取，飽和食鹽水洗，無水硫酸鈉乾燥，濃縮得到產物(S)- -2-(6-氯-2-((S)-3,3,3-三氟-2-羥基-2-甲基丙醯基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(70 mg, 粗品) 。ES-API:[M+H-100] += 377.1。
步驟二：向化合物(S)- -2-(6-氯-2-((S)-3,3,3-三氟-2-羥基-2-甲基丙醯基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(70 mg, 0.15 mmol)的N,N-二甲基甲醯胺(1.5 mL) 溶液中加入鈉氫(14.09 mg, 0.59 mmol)，在0℃下攪拌0.5小時，然後向混合液加入碘甲烷(84.54 mg, 0.59 mmmol)，混合液在25°C下攪拌1小時。LCMS監測反應完全，加水淬滅反應，乙酸乙酯萃取，飽和食鹽水洗，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮，得到粗品經矽膠柱層析純化((流動相0-25%乙酸乙酯/石油醚，乙酸乙酯/石油醚=1/5，Rf=0.6)得到產物(S)- 2-(6-氯-2-((S)-3,3,3-三氟-2-甲氧基-2-甲基丙醯基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(50 mg, 收率69.39%) ES-API:[M+H-100] += 391.1。
步驟三：向化合物(S)- 2-(6-氯-2-((S)-3,3,3-三氟-2-甲氧基-2-甲基丙醯基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(50 mg, 0.10 mmol ) 的二氧六環/水(2 mL/0.5 mL)溶液中加入3-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二噁硼烷-2-基)-1H-吡咯[2,3-b]吡啶(31.55mg, 0.12 mmol)，氯(2-二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II) (7.33 mg,0.01 mmmol)，碳酸鉀(42.16 mg, 0.31 mmmol)，在氮氣保護下，混合物加熱到110℃攪拌反應2小時。藉由LCMS監測反應完全，用乙酸乙酯/水處理，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮，得到粗品經矽膠柱層析純化(0-10%甲醇/二氯甲烷，二氯甲烷/甲醇=10/1，Rf=0.6)得到產物(S)- 2-(6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-2-((S)-3,3,3-三氟-2-甲氧基-2-甲基丙醯基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(37 mg, 收率61.93 %) 。ES-API:[M+H] += 587.4。
步驟四：向化合物(S)- 2-(6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-2-((S)-3,3,3-三氟-2-甲氧基-2-甲基丙醯基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(37 mg, 0.06 mmol ) 的二氯甲烷(1 mL)加入三氟乙酸(0.5 mL)，常溫攪拌1小時。藉由LCMS監測反應完全，用飽和碳酸氫鈉水溶液調pH至7，用二氯甲烷/水處理，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮，得到粗品經製備HPLC純化(色譜柱：Ultimate XB-C18,50*250mm,10um，流動相：A：純化水(0.05%氨水) B : 純乙腈，流速：80 mL/min，梯度：在50分鐘內，B/A=20%-90%，波長：214nm，柱溫：室溫)得到(S)-3,3,3-三氟-2-甲氧基-2-甲基-1-(6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-8-((S)-吡咯烷-2-基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)丙-1-酮(Z271-1, 6.3 mg, 20.53%)，白色粉末。ES-API:[M+H] +=487.3。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 8.73 (s, 1H), 8.49 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 8.03 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 7.74 (d, J= 12.1 Hz, 1H), 7.28 (s, 1H), 7.08 (s, 1H), 5.41-4.69 (m, 2H),4.48-3.57 (m, 3H), 3.49-3.32 (m, 3H), 3.30-3.21 (m, 1H), 3.10-2.97 (m, 3H), 2.35 (s, 3H), 2.33-2.19 (m, 1H), 2.06-1.75 (m, 3H), 1.70 (s, 3H).
步驟一：向 (S)-2-(6-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(40 mg, 0.12 mmol) 的N,N-二甲基甲醯胺(1 mL)溶液中加入(R)-3,3,3-三氟-2-羥基-2-甲基丙酸(37.54 mg, 0.24 mmol)，1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽(68.29 mg, 0.36 mmol) ，三乙胺35.98mg, 0.36 mmol) ，1-羥基-苯并三氮唑 (48.13 mg, 0.36mmol) ，混合液在25°C下攪拌2小時。LCMS監測反應完全，加水淬滅反應，乙酸乙酯萃取，飽和食鹽水洗，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮得到產物(S)- 2-(6-氯-2-((R)-3,3,3-三氟-2-羥基-2-甲基丙醯基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(60 mg, 粗品) 。ES-API:[M+H-100] += 377.1。
步驟二：向化合物(S)- 2-(6-氯-2-((R)-3,3,3-三氟-2-羥基-2-甲基丙醯基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(60 mg, 0.13 mmol,)的N,N-二甲基甲醯胺(1.5 mL) 溶液加入鈉氫(12.08 mg, 0.50 mmol)，在0℃下攪拌0.5小時，然後向混合液加入碘甲烷(72.74 mg, 0.50 mmmol)，混合液在25°C下攪拌1小時。LCMS監測反應完全，加水淬滅反應，乙酸乙酯萃取，飽和食鹽水洗，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮得到產物(S)- 2-(6-氯-2-((R)-3,3,3-三氟-2-甲氧基-2-甲基丙醯基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(60 mg, 粗品) 。ES-API:[M+H-100] += 391.1。
步驟三：向化合物(S)- 2-(6-氯-2-((R)-3,3,3-三氟-2-甲氧基-2-甲基丙醯基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(60 mg, 0.12 mmol )的二氧六環/水(2 mL/0.5 mL)溶液中加入3-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二噁硼烷-2-基)-1H-吡咯[2,3-b]吡啶(37.86mg, 0.15 mmol)，氯(2-二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II) (8.79mg, 0.012 mmmol)，碳酸鉀(50.60 mg, 0.37 mmmol)，在氮氣保護下，將混合物加熱到110 攝氏度攪拌反應2小時。藉由LCMS監測反應完全，用乙酸乙酯/水處理，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮，得到粗品經矽膠柱層析純化(0-10%甲醇/二氯甲烷，二氯甲烷/甲醇=10/1，Rf=0.6)得到產物(S)- 2-(6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-2-((R)-3,3,3-三氟-2-甲氧基-2-甲基丙醯基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸酯(18 mg, 收率25.11%) .ES-API:[M+H-100] += 587.4。
步驟四：向化合物(S)- 2-(6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-2-((R)-3,3,3-三氟-2--甲氧基-2-甲基丙醯基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸酯(18 mg, 0.03 mmol, ) 的二氯甲烷(1 mL)溶液中加入三氟乙酸(0.5 mL)，常溫攪拌1小時。藉由LCMS監測反應完全，用飽和碳酸氫鈉水溶液調pH至7，用二氯甲烷/水處理，無數硫酸鈉乾燥，過濾濃縮，得到粗品經製備HPLC純化(色譜柱：Ultimate XB-C18,50*250mm,10um，流動相：A：純化水(0.05%氨水) B : 純乙腈，流速：80 mL/min，梯度：在50分鐘內，B/A=20%-90%，波長：214nm，柱溫：室溫)得到(R)-3,3,3-三氟-2-甲氧基-2-甲基-1-(6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-8-((S)-吡咯烷-2-基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)丙-1-酮(Z271-2, 1.1mg, 7.37%)，白色粉末。ES-API:[M+H] +=487.3。
實施例146 化合物Z279的合成
步驟一：將(S)-5-(5-(1-(叔丁氧羰基)吡咯烷-2-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-7-基)-3-甲基-1 H-吡咯烷[2,3- b]吡啶-1-羧酸叔丁酯(30 mg)溶於二氯甲烷(1 mL)，依次加入2,6-二甲基異煙酸(13 mg, 0.08 mmol)，三乙胺(0.04 mL, 0.28 mmol)和50%1-丙基磷酸酐的乙酸乙酯溶液(107 mg, 0.17 mmol)，室溫攪拌2小時。混合物用飽和碳酸氫鈉溶液(10 mL)淬滅，二氯甲烷(10 mLX3)萃取。有機相合併，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮並用快速矽膠柱(0-7%甲醇/二氯甲烷)純化，得到(S)-5-(5-(1-(叔丁氧基羰基)吡咯烷-2-基)-2-(2,6-二甲基異煙醯基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-7-基)-3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-1-羧酸叔丁酯(15 mg,收率40%)。ES-API: [M+H] += 666.3。
步驟二：冰浴條件下，將三氟乙酸(0.1 mL)滴加到(S)-5-(5-(1-(叔丁氧基羰基)吡咯烷-2-基)-2-(2,6-二甲基異煙醯基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-7-基)-3-甲基-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶-1-羧酸叔丁酯(15 mg, 23 μmol)的二氯甲烷(0.2 mL)溶液中，室溫攪拌1小時。反應液濃縮並用製備HPLC(碳酸氫銨)純化，得到 (S)-(2,6-二甲基吡啶-4-基)(7-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3- b]吡啶-5-基)-5-(吡咯烷-2-基)-3,4-二氫異喹啉-2(1 H)-基)甲酮(Z279, 2.5 mg, 純度100%, 收率24%)，白色固體。ES-API: [M+H] += 466.3。
實施例147 化合物Z240-1的合成
步驟一：將硫酸鎂(330 mg, 2.74 mmol)和化合物6-溴異色烷-8-甲醛(300 mg, 1.24 mmol)依次加入到二苯甲胺(228 mg, 1.24 mmol)的二氯甲烷(10 mL)溶液中，室溫攪拌過夜。反應液過濾濃縮得到(Z)- N-苯甲醯-1-(6-溴異色烷-8-基)甲苯胺(505 mg, 粗品)，不經純化直接用於下一步反應。
步驟二：-65℃，氮氣保護下，將1 M叔丁醇鉀的四氫呋喃溶液(0.148 mL)緩慢加入到(Z)- N-苯甲醯-1-(6-溴異色烷-8-基)甲苯胺(50 mg, 0.12 mmol)的四氫呋喃(1 mL)溶液中，攪拌0.5小時。然後將1,1-雙(碘甲基)環丙烷(119 mg, 0.37 mmol)快速加入到反應液中，攪拌1小時。隨後反應液緩慢升溫至室溫，攪拌過夜。反應液用水(10 mL)淬滅，二氯甲烷(10 mLX3)萃取，有機相用無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮。得到的殘留物溶於丙酮(1 mL)，並加入3 M鹽酸溶液(0.21 mL)，室溫攪拌2小時。用飽和碳酸氫鈉水溶液調pH 至 8，二氯甲烷(10 mLX3)萃取，濃縮，得到黃色油狀物6-(6-溴異色滿-8-基)-5-氮雜螺[2.4]庚烷(40 mg)。ES-API: [M+H] += 308.0, 310.1。
步驟三：氮氣保護下，6-(6-溴異色滿-8-基)-5-氮雜螺[2.4]庚烷(40 mg, 0.13 mmol)，3-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-二氧硼雜環戊烷-2-基)-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶(30 mg, 0.12 mmol)，氯(2-二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II)(10 mg, 14 μmol)，2-雙環己基膦-2',6'-二甲氧基聯苯(5 mg, 12 μmol)和碳酸鉀(54 mg, 0.39 mmol)的1,4-二氧六環(2 mL)和水(0.4 mL)的混合溶液在120℃攪拌2小時。反應液倒入乙酸乙酯(10 mL)，依次用飽和食鹽水(5 mL)和水(5 mL)洗滌。有機相用無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮並用製備HPLC(碳酸氫銨)純化，得到白色固體5-(8-(5-氮雜螺[2.4]庚烷-6-基)異色滿-6-基)-3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(Z240-1, 0.7 mg, 純度93%, 收率1.4%)。ES-API: [M+H] += 360.2。
實施例148 化合物Z219-2，Z219-1的合成
步驟一：向 (S)-2-(6-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯 (100 mg, 0.29 mmol) 的二氯甲烷(3 mL)溶液中加入 (S)-四氫呋喃-3-羧酸(34.47 mg, 0.3 mmol) ，1-丙基磷酸酐 (566 mg, 0.89 mmol, 50%的乙酸乙酯溶液)，三乙胺 (89.95 mg, 0.89 mmol) ，在25°C下攪拌2小時。LCMS監測反應完全，加水淬滅反應，乙酸乙酯萃取，飽和食鹽水洗，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮得到產物(S)- 2-(6-氯-2-((S)-四氫呋喃-3-羰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(125 mg, 粗品) 。ES-API:[M+H-100] += 335.1。
步驟二：向化合物(S)- 2-(6-氯-2-((S)-四氫呋喃-3-羰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(125 mg, 0.28 mmol) 的二氧六環/水(2 mL/0.5 mL)溶液中，加入3-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二噁硼烷-2-基)-1H-吡咯[2,3-b]吡啶(89.02 mg, 0.34 mmol)，氯(2-二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II) (20.68mg, 0.029 mmmol)，碳酸鉀(118.98 mg, 0.86 mmmol)，在氮氣保護下，混合物加熱到110℃攪拌反應2小時。藉由LCMS監測反應完全，用乙酸乙酯/水處理，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮，得到粗品經矽膠柱層析純化(0-10%甲醇/二氯甲烷，二氯甲烷/甲醇=10/1，Rf=0.6)得到產物(S)- 2-(6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-2-((S)-四氫呋喃-3-羰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(120 mg, 收率78.7%) ，黃色粉末。ES-API:[M+H-100] += 531.4。
步驟三：向化合物(S)- 2-(6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-2-((S)-四氫呋喃-3-羰基)-1, 2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(130 mg, 0.24 mmol, ) 的二氯甲烷(1 mL)加入三氟乙酸(0.5 mL)，常溫攪拌1小時。藉由LCMS監測反應完全，用飽和碳酸氫鈉水溶液調pH至7，用二氯甲烷/水處理，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮，得到粗品經製備HPLC純化(色譜柱：Ultimate XB-C18,50*250mm,10um，流動相：A：純化水(0.05%氨水) B : 純乙腈，流速：80ml/min，梯度：在50分鐘內，B/A=20%-90%，波長：214nm，柱溫：室溫)得到(S)-(6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-8-(吡咯烷-2-基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)((S)-四氫呋喃-3-基)甲酮(Z219-2, 30.3mg, 收率28.7%) ，白色粉末。ES-API:[M+H] +=431.3。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 9.11 (s, 1H), 8.50-8.47 (m, 1H), 8.04-8.00 (m, 1H), 7.77-7.63 (m, 1H), 7.33-7.27 (m, 1H), 7.10 (s, 1H),5.11-4.60 (m, 2H), 4.39-4.21 (m,1H), 4.15-4.04 (m, 1H), 4.00-3.80 (m, 4H), 3.80-3.74 (m, 1H), 3.47-3.20 (m, 2H),3.11-2.92 (m, 3H), 2.35 (s, 3H), 2.33-2.08 (m, 2H), 2.17-2.07 (m, 1H), 2.02-1.83 (m, 2H), 1.69-1.54 (m, 1H).
步驟一：向 (S)- 2-(6-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(100 mg, 0.3 mmol) 的二氯甲烷(3 mL)溶液中加入(R)-四氫呋喃-3-羧酸(34.47mg, 0.3 mmol)，1-丙基磷酸酐(566.4 mg, 0.9 mmol, 50%的乙酸乙酯溶液)，三乙胺(89.95 mg, 0.9 mmol)，混合液在25°C下攪拌2小時。LCMS監測反應完全，加水淬滅反應，二氯甲烷萃取，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮得到產物(S)- 2-(6-氯-2-((R)-四氫呋喃-3-羰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(130 mg, 粗品) 。ES-API:[M+H-100] += 335.1。
步驟二：向化合物(S)-2-(6-氯-2-((R)-四氫呋喃-3-羰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(130 mg, 0.3 mmol)的二氧六環/水(3 mL/0.6 mL) 溶液中加入3-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二噁硼烷-2-基)-1H-吡咯[2,3-b]吡啶(92.58 mg, 0.36 mmol) ，氯(2-二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II) (21.51 mg, 0.03 mmol),碳酸鉀(123.74 mg, 0.9 mmol)，在氮氣保護下將混合物加熱到110 ℃攪拌反應。藉由LCMS監測反應完全，用乙酸乙酯/水處理，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮，得到粗品經矽膠柱層析純化(流動相0-10%甲醇/二氯甲烷，二氯甲烷/甲醇=10/1，Rf=0.6)得到產物(S)- 2-(6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-2-((R)-四氫呋喃-3-羰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(130 mg, 收率：81.97%) .ES-API:[M+H] += 531.3。
步驟三：向化合物(S)- 2-(6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-2-((R)-四氫呋喃-3-羰基)-1, 2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(130 mg, 0.24 mmol ) 的二氯甲烷(3 mL)加入三氟乙酸(1.5 mL)，常溫攪拌1小時。藉由LCMS監測反應完全，用飽和碳酸氫鈉水溶液調pH至7，用二氯甲烷/水處理，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮，得到粗品經製備HPLC純化(色譜柱：Ultimate XB-C18,50*250mm,10um，流動相：A：純化水(0.05%氨水) B : 純乙腈，流速：80ml/min，梯度：在50分鐘內，B/A=20%-90%，波長：214nm，柱溫：室溫)得到(S)-(6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-8-(吡咯烷-2-基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)((R)-四氫呋喃-3-基)甲酮(Z219-1, 38.5 mg, 收率36.5%) ，白色粉末。ES-API:[M+H] +=431.2。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 9.48 (s, 1H), 8.50 (s, 1H), 8.04 (s, 1H), 7.81-7.64 (m, 1H),7.31 (d, J= 11.3 Hz, 1H), 7.15-7.04 (m, 1H), 5.01-4.72 (m, 2H), 4.42-4.23 (m, 1H), 4.09 (t, J= 8.3 Hz, 1H),3.99-3.72 (m, 5H), 3.49-3.21 (m, 2H), 3.12-2.94 (m, 3H),2.36 (s, 3H), 2.34-2.09 (m, 4H), 1.86-1.54 (m, 2H)。
實施例149 化合物Z243的合成
步驟一：在0℃下，向6-溴異色烷-8-甲醛(3.3g, 13.69mmol)的氨甲醇溶液(7M, 80mL)溶液中加入三甲基甲矽烷基氰化物(2.04g, 20.53mmol)，攪拌1小時後，移除冰浴並將混合物在40°C攪拌16小時。LCMS檢測反應完全，真空旋乾溶劑並藉由快速矽膠柱純化(二氯甲烷:甲醇=10:1)得到黃色固體2-氨基-2-(6-溴異色滿-8-基)乙腈(2.80g, 產率76.58%)。ES-API:[M+H] +=267.0/269.0。
步驟二：2-氨基-2-(6-溴異色滿-8-基)乙腈 (2.8 g, 10.48 mmol)的25%鹽酸水溶液 (80 mL) 在100 ℃下攪拌 16 小時。將溶液冷卻至室溫，然後在0°C下攪拌1小時。LCMS檢測反應完全，過濾，收集固體並乾燥得2-氨基-2-(6-溴異色滿-8-基)乙酸(2.50g, 粗品)，呈棕色固體。ES-API:[M+H] +=286.0/288.1。
步驟三：氮氣保護下，硼氫化鋰 (251.24 mg, 11.53 mmol) 溶在四氫呋喃 (10 mL)溶液中，加入三甲基氯矽烷 (2.85 g, 26.21 mmol) 和 2-氨基-2-(6-溴異色滿-8-基)乙酸( 1.5 g, 5.24 mmol)，將混合物在 30°C 攪拌 16 小時。LCMS檢測反應完全，冰浴下緩慢加入甲醇，將所得黃色溶液濃縮並藉由快速矽膠柱(二氯甲烷:甲醇=10:1)純化，得到2-氨基-2-(6-溴異色滿-8-基)乙醇(900.00 mg, 產率63.08%)，黃色油狀物。ES-API:[M+H] +=272.1/274.0。
步驟四：在 0°C 下，向 2-氨基-2-(6-溴異色滿-8-基)乙醇 (0.4 g, 1.47 mmol) 的四氫呋喃(15 mL)溶液中加入無水碳酸鉀 (243.77 mg, 1.76 mmol)，然後加入溴化氰(155.69 mg, 1.47 mmol)的四氫呋喃(5 mL)溶液。移除冰浴並在30°C下繼續攪拌16小時。LCMS檢測反應完全，混合物加乙酸乙酯(50 mL)稀釋並用水(100 mL)洗滌，水相用乙酸乙酯(100 mL)反萃取。合併的有機層依次用水(50 mL)和飽和食鹽水(100 mL)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾並真空濃縮。殘餘物藉由矽膠柱層析 (二氯甲烷:甲醇=10:1)純化得到黃色油狀物4-(6-溴異色滿-8-基)-4,5-二氫噁唑-2-胺(300.00 mg, 產率54.95%)。ES-API:[M+H] +=297.0/298.9。
步驟五：在 氮氣 下，向 4-(6-溴異色滿-8-基)-4,5-二氫噁唑-2-胺 (0.06 g, 201.92 μmol) 的1,4-二氧六環 (2.5 mL) 和水(0.5 mL) 中的溶液中加入 3-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二噁硼烷-2-基)-1H-吡咯[2,3-b] 吡啶(62.54 mg, 242.30 μmol)，氯(2-二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II) (14.53 mg, 20.19 μmol)，碳酸鉀 (83.72 mg, 605.76 μmol)，反應在 100°C 攪拌 2 小時。LCMS檢測反應完全，將反應濃縮，得到粗品藉由製備HPLC純化(色譜柱：Ultimate XB-C18,50*250mm,10um，流動相：A：純化水(0.05%氨水) B : 純乙腈，流速：80 mL/min，梯度：在50分鐘內，B/A=20%-90%，波長：214nm，柱溫：室溫)，得到 4-[6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b] 吡啶-5-基) 異色滿-8-基]-4,5-二氫噁唑-2-胺(Z243, 5.17mg, 產率7.28%)，為白色固體。ES-API:[M+H] +=349.2。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 9.09 (s, 1H), 8.46 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 8.00 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 7.54 (s, 1H), 7.29 (s, 1H),7.04 (s, 1H), 5.22-5.16 (m, 1H), 4.93 (d, J= 15.0 Hz, 1H), 4.72-4.62 (m, 2H), 4.08-3.95 (m, 3H), 3.00-2.93 (m, 2H), 2.29 (s, 3H).
實施例150 化合物Z250的合成
步驟一：向 (S)- 2-(6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(30 mg, 0.069mmol)的四氫呋喃(1 mL)溶液中加入異氰酸酯環丙烷(6.92mg, 0.083 mmol)，三乙胺 (21.01 mg, 0.21mmol )，在0°C下攪拌0.2小時。藉由LCMS監測反應完全能，加水淬滅反應，乙酸乙酯萃取，飽和食鹽水洗，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮得到產物(S)- 2-(2-(環丙基氨基甲醯基)-6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(30 mg, 粗品) 。ES-API:[M+H] += 516.3。
步驟二：向化合物(S)- 2-(2-(環丙基氨基甲醯基)-6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(30 mg, 0.058 mmol ) 的二氯甲烷(1 mL)溶液中加入三氟乙酸(0.5 mL)，常溫攪拌1小時。藉由LCMS監測反應完全，用飽和碳酸氫鈉水溶液調pH至7，用二氯甲烷/水處理，無水硫酸乾燥，過濾濃縮，得到粗品經製備HPLC純化(色譜柱：Ultimate XB-C18,50*250mm,10um，流動相：A：純化水(0.05%氨水) B : 純乙腈，流速：80ml/min，梯度：在50分鐘內，B/A=20%-90%，波長：214nm，柱溫：室溫)得到產物(S)-N-環丙基-6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-8-(吡咯烷-2-基)-3,4-二氫異喹啉-2( 1H)-甲醯胺(Z250, 4.4 mg, 收率18.2%)，白色粉末.ES-API:[M+H] +=416.2。
實施例151 化合物Z251的合成
步驟一：向 (S)- 2-(6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(30 mg, 0.069mmol) 的四氫呋喃(1 mL)溶液中加入環丙磺醯氯 (11.7 mg, 0.083 mmol)，三乙胺 (21.01 mg, 0.21mmol ) ，在0°C下攪拌0.2小時。藉由LCMS監測反應完全，加水淬滅反應，乙酸乙酯萃取，飽和食鹽水洗，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮得到產物(S)- 2-(2-(環丙基磺醯基)-6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(30 mg, 粗品) 。ES-API:[M+H] += 537.3。
步驟二：向化合物(S)- 2-(2-(環丙基磺醯基)-6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(30 mg, 0.056 mmol) 的二氯甲烷(1 mL)溶液中加入三氟乙酸(0.5 mL)，常溫攪拌1小時。藉由LCMS監測反應完全，用飽和碳酸氫鈉水溶液調pH至7，用二氯甲烷/水處理，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮，得到粗品經製備HPLC純化(色譜柱：Ultimate XB-C18,50*250mm,10um，流動相：A：純化水(0.05%氨水) B : 純乙腈，流速：80ml/min，梯度：在50分鐘內，B/A=20%-90%，波長：214nm，柱溫：室溫)得到產物(S)-2-(環丙基磺醯基)-6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-8-(吡咯烷-2-基)-1,2,3, 4-四氫異喹啉(Z251, 2.1 mg, 收率8.61%)，白色粉末.ES-API:[M+H] +=437.2。
實施例152 化合物Z249的合成
步驟一：向 (S)- 2-(6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(30 mg, 0.069mmol) 的二氯甲烷(1 mL)溶液中加入2,2-二甲基-5-氧代四氫呋喃-3-羧酸 (13.16 mg, 0.083 mmol)，1-丙基磷酸酐(132.3 mg, 0.21mmol, 50%的乙酸乙酯溶液) ，三乙胺 (21.01 mg, 0.21mmol )，在25°C下攪拌2小時。藉由LCMS監測反應完全，加水淬滅反應，乙酸乙酯萃取，飽和食鹽水洗，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮，得到粗品經矽膠柱層析純化(0-6%甲醇/二氯甲烷)得到產物(2S)- 2-(2-(2,2-二甲基-5-氧代四氫呋喃-3-羰基)-6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基 )-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(30 mg, 收率75.53%) 。ES-API:[M+H] += 573.4。
步驟二：向化合物(2S)- 2-(2-(2,2-二甲基-5-氧代四氫呋喃-3-羰基)-6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基 )-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(30 mg, 0.052 mmol, ) 的二氯甲烷(1 mL)溶液中加入三氟乙酸(0.5 mL)，常溫攪拌1小時。藉由LCMS監測反應完全，用飽和碳酸氫鈉水溶液調pH至7，用二氯甲烷/水處理，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮，得到粗品經製備HPLC純化(色譜柱：Ultimate XB-C18,50*250mm,10um，流動相：A：純化水(0.05%氨水) B : 純乙腈，流速：80 mL/min，梯度：在50分鐘內，B/A=20%-90%，波長：214nm，柱溫：室溫)得到產物5,5-二甲基-4-(6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-8-((S)-吡咯烷-2-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-2-羰基)二氫呋喃-2(3H)-酮(Z249, 8.3 mg, 收率33.53%) 白色粉末。ES-API:[M+H] +=473.3。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 8.83 (s, 1H), 8.49-8.46 (m, 1H), 8.04-7.99 (m, 1H), 7.79-7.58 (m, 1H),7.31 (d, J= 13.8 Hz, 1H), 7.09 (s, 1H), 5.20-4.78 (m, 2H), 4.65-4.31 (m, 1H), 4.21-3.74 (m, 2H), 3.73-3.57 (m, 1H), 3.35-3.20 (m, 2H), 3.09-2.96 (m, 3H), 2.75-2.63 (m, 1H), 2.35 (s, 3H),2.32-2.16 (m, 1H), 2.03-1.81 (m, 3H), 1.62-1.57 (m, 3H), 1.38-1.29 (m, 3H).
實施例153 化合物Z139的合成
步驟一：向250 mL三口燒瓶中加入2-(2-溴-4-氯苯基)乙酸(10g, 40.1mmol)，N,N-二甲基甲醯胺(1mL)和四氫呋喃(70mL)，氮氣保護條件下，0℃緩慢滴加草醯氯(6g, 47.24mmol)，0℃條件下反應1小時。反應液旋乾，溶解在二氯甲烷(30mL)，滴加到氨水(50mL)的二氯甲烷溶液中(50mL)，攪拌30分鐘，緩慢倒入冰水中(500mL)，大量固體析出，過濾旋乾得到目標產物2-(2-溴-4-氯苯基)乙醯胺(8.5g, 收率: 85%)。ES-API: [M+H] +=247.8。
步驟二：向250 mL單口圓底燒瓶中加入2-(2-溴-4-氯苯基)乙醯胺(9g, 36.3mmol)和四氫呋喃(80mL)，氮氣保護條件下，0℃緩慢滴加1M硼烷四氫呋喃溶液(220mL)，升至75℃反應過夜。反應液旋乾，溶解在二氯甲烷(30mL)，滴加到氨水(50mL)的二氯甲烷溶液中(50mL)，攪拌30分鐘，降至0℃，緩慢加入1M 鹽酸溶液(20 mL)，75℃下攪拌1小時。加入乙酸乙酯(200 mL)，用飽和食鹽水(200 mLx3)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮，粗品用快速矽膠柱純化(甲醇：二氯甲烷=10:100)得到目標產物2-(2-溴-4-氯苯基)乙胺-1-胺(7.7g , 收率: 90%)。ES-API: [M+H] +=239.9。
步驟三：向250 mL單口圓底燒瓶中加入2-(2-溴-4-氯苯基)乙胺-1-胺(8.1g, 34.6mmol)、三乙胺(10.4g, 103mmol)、三氟乙酸酐(7.23g, 34.4mmol)和二氯甲烷(80mL)，室溫條件下反應2小時。反應液加入二氯甲烷(200 mL)，用飽和食鹽水(200 mLX3)洗滌，無水硫酸鈉乾燥。過濾濃縮，粗品用快速矽膠柱純化(甲醇：二氯甲烷=10:100)得到目標產物N-(2-溴-4-氯苯乙基)-2,2,2-三氟乙醯胺(9.2g, 收率: 81%)。ES-API: [M+H] +=330。
步驟四：向250mL單口圓底燒瓶中加入N-(2-溴-4-氯苯乙基)-2,2,2-三氟乙醯胺(4g, 12.1mmol)和醋酸(50mL)，0℃下緩慢加入濃硫酸(40mL)，室溫攪拌48小時。反應液緩慢倒入水(200 mL)中，用二氯甲烷(200 mLX3)萃取，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮，粗品用快速矽膠柱純化(乙酸乙酯：石油醚=30:100)得到目標產物1-(5-溴-7-氯-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)-2,2,2-三氟乙烷-1-酮(1.2g, 收率: 31%)。ES-API: [M+H] +=341.9。
步驟五：向50mL單口圓底燒瓶中加入1-(5-溴-7-氯-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)-2,2,2-三氟乙烷-1-酮(1.2g, 3.5mmol)、碳酸鉀(485mg, 3.5mmol)、乙醇(15mL)和水(3mL)，80℃條件下攪拌2小時。反應液緩慢倒入水(20 mL)中，用二氯甲烷(20 mLX3)萃取，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮，粗品用快速矽膠柱純化(乙酸乙酯：石油醚=30:100)得到目標產物5-溴-7-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉(860mg, 收率: 99%)。ES-API: [M+H] +=245.9。
步驟六：向50 mL單口圓底燒瓶中加入5-溴-7-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉(492mg, 2mmol)、三乙胺(606mg, 6mmol)、和二氯甲烷(10 mL)，0℃下緩慢加入乙酸酐(310mg, 3mmol)，0℃條件下反應1小時。反應液加入二氯甲烷(20 mL)，用飽和食鹽水(20 mLX3)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮，粗品用快速矽膠柱純化(甲醇：二氯甲烷=10:100)得到目標產物1-(5-溴-7-氯-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)乙烷-1-酮(582mg ,收率: 100%)。ES-API: [M+H] +=288.0.
步驟七：向25mL三口圓底燒瓶中加入1-(5-溴-7-氯-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)乙烷-1-酮(540mg, 1.88mmol)，乙烯基氟硼酸鉀(251mg, 1.89mmol)，四三苯基膦鈀(216mg, 0.18mmol)，碳酸鉀(776mg, 5.6mmol)，二氧六環(10 mL)和水(1 mL)。體系用氮氣置換三次，然後用氮氣球保護，110℃條件下反應4小時。反應液加入乙酸乙酯(100 mL)，用飽和食鹽水(50 mLX3)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮，粗品用快速矽膠柱純化(乙酸乙酯：石油醚=40:100)得到目標產物1-(7-氯-5-乙烯基-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)乙烷-1-酮(470mg，粗品)。ES-API: [M+H] +=236.1。
步驟八：向25 mL單口圓底燒瓶中加入1-(7-氯-5-乙烯基-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)乙烷-1-酮(470mg, 2mmol)，高碘酸鈉(2.14g, 10mmol)，四氫呋喃(10 mL)和水(5 mL)，冰水浴條件下分批加入二水合鋨酸鉀(147mg, 0.4mmol)，然後0 oC攪拌1小時。反應液加入乙酸乙酯(30 mL)，用飽和食鹽水(30 mLX3)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮，粗品用快速矽膠柱純化(乙酸乙酯：石油醚=30:100)得到目標產物2-乙醯基-7-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-5-甲醛(200mg, 收率:42%)。ES-API: [M+H] +=238.0。
步驟九：向50 mL單口圓底燒瓶中加入2-乙醯基-7-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-5-甲醛(200mg, 0.84mmol)和二氯甲烷(10 mL)，冰水浴條件下加入(S)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺(203mg, 1.68mmol)和鈦酸四乙酯(1 mL)，室溫攪拌3小時。反應液加入乙酸乙酯(30 mL)，用飽和食鹽水(30 mLX3)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮，粗品用快速矽膠柱純化(乙酸乙酯：石油醚=20:100)得到目標產物(S,E)-N-((2-乙醯基-7-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-5-基)亞甲基)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺(350mg, 收率: 83%)。ES-API: [M+H] +=341.1。
步驟十：向5 mL三口圓底燒瓶中加入(S,E)-N-((2-乙醯基-7-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-5-基)亞甲基)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺(200mg, 0.56mmol)和無水四氫呋喃(3 mL)，體系用氮氣置換三次，然後用氮氣球保護，-78 oC條件下加入(2-(1,3-二噁烷-2-基)乙基)溴化鎂的四氫呋喃溶液(3.5mL, 0.5M)，繼續攪拌2小時。反應液加入飽和氯化銨(5 mL)溶液淬滅，加入乙酸乙酯(30 mL)，用飽和食鹽水(30 mLX3)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮，粗品用快速矽膠柱純化(乙酸乙酯：石油醚=20:100)得到目標產物(S)-N-(1-(2-乙醯基-7-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-5-基)-3-(1,3-二噁烷-2-基)丙基)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺(210mg, 收率: 78%)。ES-API: [M+H] +=457.2。
步驟十一：向25 mL單口圓底燒瓶中加入(S)-N-(1-(2-乙醯基-7-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-5-基)-3-(1,3-二噁烷-2-基)丙基)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺(270mg, 0.59mmol)，三氟乙酸(3 mL)和水(0.15mL)，0 oC條件下加入三甲基矽烷(687mg, 5.9mmol)，攪拌18小時。反應液旋乾後加入乙酸乙酯(30 mL)，用飽和食鹽水(30 mLX3)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮得到目標產物粗品(S)-1-(7-氯-5-(吡咯烷-2-基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)乙烷-1-酮(160mg, 收率: 97%)。ES-API: [M+H] +=279.1。
步驟十二：向25 mL單口圓底燒瓶中加入(S)-1-(7-氯-5-(吡咯烷-2-基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)乙烷-1-酮(160mg, 0.574mmol)，二碳酸二叔丁酯(1mL)，三乙胺(174mg, 1.7mmol)和二氯甲烷(5 mL )，室溫攪拌1小時。反應加入二氯甲烷(20 mL)，用飽和食鹽水(20 mLX3)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮得到目標產物(S)-2-(2-乙醯基-7-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-5-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(80mg, 收率: 37%)。ES-API: [M+H] +=379.2。
步驟十三：向25 mL單口圓底燒瓶中加入(S)-2-(2-乙醯基-7-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-5-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(80mg, 0.21mmol)，3-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(81mg, 0.32mmol)，氯(2-二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II)(15mg, 0.02mmol)，碳酸鉀(88mg, 0.63mmol)，二氧六環(30 ml)和水(4 mL)。體系用氮氣置換三次，然後用氮氣球保護，110℃條件下微波反應50分鐘。反應液加入乙酸乙酯(10 mL)，用5 mL飽和食鹽水(5 mLX3)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮，粗品用快速矽膠柱純化(甲醇：二氯甲烷=10:100)得到目標產物(S)-2-(2-乙醯基-7-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-5-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(70mg, 收率: 70%)。ES-API: [M+H] +=475.3。
步驟十四：向5 mL單口圓底燒瓶中加入(S)-2-(2-乙醯基-7-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-5-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(70mg, 0.15mmol)，三氟乙酸(3 mL)和二氯甲烷(6 mL)，室溫攪拌反應30分鐘。反應液旋乾，粗品用製備HPLC(碳酸氫銨)純化得到：(S)-1-(7-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-5-(吡咯烷-2-基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H )-基)乙烷-1-酮(Z139, 20mg, 收率：36%)。ES-API: [M+H] +=375.2。
實施例154 化合物Z252的合成
步驟一：將6-溴異色烷-8-甲醛 (1.6 g, 6.67 mmol)溶解到甲醇(20 mL)中，冰水浴條件下緩慢加入硼氫化鈉(760mg, 19.99 mmol)，攪拌反應1小時。反應完畢，加入水(20 mL)淬滅反應，乙酸乙酯(20mlx3)萃取，飽和食鹽水(30mLx1)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮，得到(6-溴異色滿-8-基)甲醇(1.61 g, 粗品)。ES-API: [M+H] +=243.0。
步驟二：將(6-溴異色滿-8-基)甲醇(1.61 g, 粗品) 溶解到四氫呋喃(30 mL)中，冰水浴下，依次加入三乙胺(2.02g, 20.0mmol)和甲磺醯氯(1.14g, 10mmol)中，室溫反應2小時。反應完畢，加入水(20 mL)淬滅，乙酸乙酯(20mlx3)萃取，飽和食鹽水(30mLx1)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮，得到(6-溴異色滿-8-基)甲磺酸甲酯(1.8g, 粗品)。ES-API: [M+H]+= 321.1。
步驟三：將(6-溴異色滿-8-基)甲磺酸甲酯(1.5g, 粗品)溶解在乙腈(30 mL)中，依次加入三甲基氰矽烷(696mg, 7.03mmol)和四丁基氟化銨(1.83g, 7.03mmol)，室溫反應2小時。加入水(20 mL)淬滅，乙酸乙酯(20mlx3)萃取，飽和食鹽水(30mLx1)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮，得到粗品經矽膠柱層析純化(乙酸乙酯/石油醚=1/5)得到2-(6-溴異色滿-8-基)乙腈(0.96g, 3步收率57.3%)。ES-API: [M+H] += 252.2。
步驟四：將2-(6-溴異色滿-8-基)乙腈(250mg, 1.0mmol)溶解在N,N-二甲基甲醯胺(8ml)中，冰水浴，加入60%氫化鈉(200mg, 5mmol)，冰水浴條件下反應0.5小時，隨後加入1,2-二溴乙烷(188mg, 1mmol)，攪拌反應2小時。加入氯化銨水溶液(20 mL)淬滅，乙酸乙酯(20mlx3)萃取，飽和食鹽水(30mLx1)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮，得到粗品經矽膠柱層析純化(乙酸乙酯/石油醚=1/5)得到1-(6-溴異色滿-8-基)環丙烷-1-甲腈(200mg, 收率72.2%)。ES-API: [M+H] += 278。
步驟五：將1-(6-溴異色滿-8-基)環丙烷-1-甲腈(200mg, 0.722mmol)溶解在乙醇(4 mL)和水(4 mL)中，加入氫氧化鈉(144.4mg, 3.61mmol)，100℃微波反應15小時。冷卻至室溫，加入稀鹽酸淬滅反應，乙酸乙酯(20mlx3)萃取，飽和食鹽水(30mLx1)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮，得到粗品經矽膠柱層析純化(乙酸乙酯/石油醚=1/1)得到1-(6-溴異色滿-8-基)環丙烷-1-甲酸(160mg, 收率74.8%)。ES-API: [M+H] += 297。
步驟六：向1-(6-溴異色滿-8-基)環丙烷-1-甲酸 (90 mg, 0.303 mmol) 的燒瓶中加入甲苯(5 mL)和苯甲醇 (982.59 mg, 9.086 mmol)，然後加入疊氮磷酸二苯酯 (125.03 mg, 0.454 mmol)和三乙胺 (0.084 mL, 0.606 mmol)，將混合物在110℃攪拌15小時。反應液用水稀釋，用乙酸乙酯(30mLx3)萃取，飽和氯化鈉溶液(30 mLx1)洗滌。無水硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮，得到粗品經矽膠柱層析純化(乙酸乙酯/石油醚=1/1)得到(1-(6-溴異色滿-8-基)環丙基)氨基甲酸苄酯(110mg, 收率90.5%)。ES-API: [M+H] += 402.0。
步驟七：在冰水浴條件下，向氫化鈉 (29.83 mg, 0.746 mmol) 在四氫呋喃 (5 mL)的懸浮液中滴加(1-(6-溴異色滿-8-基)環丙基)氨基甲酸苄酯(100 mg, 0.249 mmol)，將混合物攪拌10分鐘。然後加入 碘甲烷(176.42 mg, 1.243 mmol)，使反應混合物升至室溫並攪拌3小時。倒入飽和氯化銨冰水溶液中，乙酸乙酯(30mL x3)萃取，飽和氯化鈉溶液(30 mLx1)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮，得到粗品經矽膠柱層析純化(乙酸乙酯/石油醚=1/1)得到N-甲基-(1-(6-溴異色滿-8-基)環丙基)氨基甲酸苄酯(90mg, 收率87%).ES-API: [M+H] += 416.0。
步驟八：將N-甲基-(1-(6-溴異色滿-8-基)環丙基)氨基甲酸苄酯(90mg, 0.216mmol)、3-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(111.51 mg, 0.432 mmol)、甲烷磺酸(2-二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II)(15.57 mg, 0.022 mmol)和碳酸鉀(89.64 mg, 0.649 mmol)加入到1,4-二氧六環(3 mL)和水(0.5 mL)中，氮氣置換，120℃微波反應0.5小時。反應完畢，加入乙酸乙酯(20 mL)，依次用水(10 mL)、飽和食鹽水(10 mL)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，得到粗品經製備薄層析(石油醚/乙酸乙酯=1/1)純化，得到N-甲基-(1-(6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)異色滿-8-基)環丙基)氨基甲酸苄酯(77 mg, 收率76.3%)。ES-API: [M+H] +=468.2。
步驟九：將N-甲基-(1-(6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)異色滿-8-基)環丙基)氨基甲酸苄酯(77 mg, 0.164 mmol)溶解到二氯甲烷(5 mL)中，然後在 0 ℃加入 氯化鈀 (5.08 mg, 0.01mmol)、三乙胺 (16.5mg, 0.164 mmol) 和 三乙基矽烷 (76 mg, 0.656mmol)，將混合物在室溫攪拌2小時。反應液過濾並濃縮，得到粗品經製備HPLC鹼法(氨水)純化得到N-甲基-1-(6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)異色滿-8-基)環丙烷-1-胺(Z252, 2.8mg, 收率5.1%)。ES-API: [M+H] +=334.1。
實施例155 化合物Z238的合成
步驟一：向20 mL微波管裡加入3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧苯并呋喃-2-基)吡啶-2-胺(402 mg, 1.83 mmol)，2-溴-1,3-噻唑 (250 mg, 1.52 mmol)，[1,1'-雙(二苯基膦)二茂鐵]二氯化鈀(111 mg, 0.15 mmol)，碳酸鉀 (632 mg, 4.57 mmol)，1,4-二氧六環(6 mL)和水(1.5 mL)，用氮氣吹1分鐘，110℃下在微波反應器中反應1小時。將反應冷卻至室溫，倒入水(30 mL)，用乙酸乙酯(50 mL)萃取。有機層用飽和食鹽水(25 mL)洗滌，無水硫酸鈉乾燥並過濾濃縮。得到粗品用快速矽膠柱純化(甲醇/二氯甲烷：0-10%)得到目標產物3-(噻唑-2-基)吡啶-2-胺(210 mg, 收率77.7%)，灰白色固體。ES-API: [M+H] +=178.1。
步驟二：3-(噻唑-2-基)吡啶-2-胺(185 mg, 1.04 mmol)溶於四氫呋喃(15 mL)在冰浴下加入 N-溴代丁二醯亞胺 (204 mg, 1.15 mmol)，反應在冰浴下攪拌1小時。反應液加入乙酸乙酯(50 mL)，用飽和碳酸氫鈉(20 mL)，飽和食鹽水(20 mL)洗滌，無水硫酸鈉乾燥並過濾濃縮。得到粗品用快速矽膠柱純化(甲醇/二氯甲烷：0-5%)得到目標產物5-溴-3-(噻唑-2-基)吡啶-2-胺(230 mg, 收率86.0%)，淡黃色固體。ES-API: [M+H] +=256.0, 258.0。 1H NMR (500 MHz, DMSO- d 6 ) δ 8.15 (d, J= 2.5 Hz, 1H), 8.10 (d, J= 2.5 Hz, 1H), 7.97 (d, J= 3.5 Hz, 1H), 7.84 (d, J= 3.5 Hz, 1H), 7.78 (s, 2H).
步驟三：向5 mL微波管裡加入5-溴-3-(噻唑-2-基)吡啶-2-胺(50 mg, 0.20 mmol)，( S)-2-(6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼烷-2-基)異色烷-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯 (101 mg, 0.24 mmol)，2-二環己基膦-2′,6′-二甲氧基-聯苯(4 mg, 0.01 mmol)，氯(2-二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II)(14 mg, 0.02 mmol)，碳酸鉀 (81mg, 0.59 mmol)，1,4-二氧六環(1.5 mL)和水(0.3 mL)。用氮氣吹掃30秒，在110℃下微波反應器中反應45分鐘。將反應冷卻至室溫，倒入水中(8 mL)，用乙酸乙酯(50 mL)萃取，有機層用飽和食鹽水(15 mL)洗滌，無水硫酸鈉乾燥並過濾濃縮。得到粗品用快速矽膠柱純化(甲醇/二氯甲烷：0-4%)得到目標產物( S)-2-(6-(6-氨基-5-(噻唑-2-基)吡啶-3-基)異色烷-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(55 mg, 收率58.9%)，淡黃色固體。ES-API: [M+H] +=479.3。
步驟四：( S)-2-(6-(6-氨基-5-(噻唑-2-基)吡啶-3-基)異色烷-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(55 mg, 0.11 mmol)溶於甲醇(1 mL)中，加入4.0M氯化氫二氧六環溶液(2 mL, 8.0 mmol)，反應在室溫下反應1.5小時。反應液濃縮，加入7.0M氨甲醇溶液(5 mL)，溶劑旋乾，得到粗品用製備HPLC(甲酸)純化得到目標產物( S)-5-(8-(吡咯烷-2-基)異色烷-6-基)-3-(噻唑-2-基)吡啶-2-胺(Z238, 甲酸鹽，31 mg, 收率63.5%)，淡黃色固體。ES-API: [M+H] +=379.2。 1H NMR (500 MHz, DMSO- d 6 ) δ 8.43 (d, J= 2.5 Hz, 1H), 8.29 (s, 1H), 8.14 (d, J= 2.5 Hz, 1H), 7.97 (d, J= 3.5 Hz, 1H), 7.81 (d, J= 3.5 Hz, 1H), 7.76-7.68 (m, 2H), 7.65 (s, 1H), 7.36 (s, 1H), 4.88 (d, J= 15.5 Hz, 1H), 4.76 (d, J= 15.5 Hz, 1H), 4.20 (t, J= 8.0 Hz, 1H), 3.91-3.83 (m, 2H), 3.24-3.18 (m, 1H), 3.07-2.98 (m, 1H), 2.96-2.82 (m, 2H), 2.25-2.14 (m, 1H), 1.98-1.79 (m, 2H), 1.69-1.57 (m, 1H).
實施例156 化合物Z245的合成
步驟一：向 (S)- 2-(6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(30 mg, 0.069mmol) 的二氯甲烷(1 mL)溶液中加入1-甲氧基環丙烷羧酸(9.66 mg, 0.083 mmol)，1-丙基磷酸酐 (133.6 mg, 208.07 μmol, 50%的乙酸乙酯溶液)，三乙胺 (21.01 mg, 208.07 μmol)，在25°C下攪拌2小時。LCMS監測反應完全，加水淬滅反應，乙酸乙酯萃取，飽和食鹽水洗，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮，得到粗品經矽膠柱層析純化(0-6%甲醇/二氯甲烷)得到產物(S)- 2-(2-(1-甲氧基環丙烷羰基)-6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(30 mg, 收率80%) 。ES-API:[M+H] += 531.4。
步驟二：向化合物(S)- 2-(2-(1-甲氧基環丙烷羰基)-6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(30 mg, 0.056 mmol) 的二氯甲烷(1mL)溶液中加入三氟乙酸(0.5 mL)，常溫攪拌1小時。藉由LCMS監測反應完全，用飽和碳酸氫鈉水溶液調pH至7，用二氯甲烷/水處理，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮，得到粗品經製備HPLC純化(色譜柱：Ultimate XB-C18,50*250mm,10um，流動相：A：純化水(0.05%氨水) B : 純乙腈，流速：80mL/min，梯度：在50分鐘內，B/A=20%-90%，波長：214nm，柱溫：室溫)，得到產物(S)-(1-甲氧基環丙基)(6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-8-(吡咯烷-2-基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)甲酮(Z245, 8.2 mg, 收率34%) 白色粉末.ES-API:[M+H] +=431.3。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 8.87 (s, 1H), 8.50 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 8.04 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 7.75 (s, 1H), 7.30 (s, 1H), 7.09 (s, 1H),5.37-4.50 (m, 2H), 4.39-4.31 (m, 1H), 4.13-3.71 (m, 2H), 3.33 (s, 3H), 3.29-3.23 (m, 1H),3.10-2.94 (m, 3H), 2.35 (s, 3H), 2.33-2.25 (m, 1H), 2.05-1.81 (m, 3H), 1.19-1.10 (m, 2H), 1.04-0.94 (m, 2H).
實施例157 化合物Z75-1的合成
步驟一：向500 mL單口圓底燒瓶中加入2-(羧甲基)-4-硝基苯甲酸(9g, 40mmol)、硼氫化鈉(4.6g, 121mmol)和四氫呋喃(100 mL)，氮氣保護條件下，0℃下緩慢滴加1M三氟化硼四氫呋喃溶液(19mL), 0℃條件下反應3小時。反應液加入乙酸乙酯(200 mL)，用飽和食鹽水(200 mLX3)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮，得到粗品用快速矽膠柱純化(甲醇：二氯甲烷=10:100)得到目標產物2-(2-(羥甲基)-5-硝基苯基)乙-1-醇(6.6g, 收率: 83%)。ES-API: [M+H-18] +=180.0 。
步驟二：向25 mL單口圓底燒瓶中加入2-(2-(羥甲基)-5-硝基苯基)乙-1-醇(198g, 1mmol)、對甲苯磺酸(384mg, 2mmol)和甲苯 (10mL)，120℃條件下反應過夜。反應液加入乙酸乙酯(50 mL)，用飽和食鹽水洗滌(50 mLX3)，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮，得到粗品用快速矽膠柱純化(甲醇：二氯甲烷=10:100)得到目標產物6-硝基異色烷(170g, 收率: 94%)。ES-API: [M+H] +=180.0。
步驟三：向50 mL單口圓底燒瓶中加入6-硝基異色烷(680mg, 3.78mmol)、鈀碳(70 mg)和甲醇(10 mL)，氫氣條件下反應過夜。反應液過濾，旋乾得到目標產物6-氨基異色烷(550mg, 收率: 97%)。ES-API: [M+H] +=150.0。
步驟四：向50mL單口圓底燒瓶中加入6-氨基異色烷(550mg , 3.67mmol)、N-溴代丁二醯亞胺(594mg, 3.3mmol)和乙腈(20mL)，0℃條件下攪拌1小時。反應液倒入水(50 mL)中，用乙酸乙酯(50 mLX3)萃取，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮，得到粗品用快速矽膠柱純化(乙酸乙酯：石油醚=30:100)得到目標產物5-溴異色滿6-胺(600mg , 收率: 71%)。ES-API: [M+H] +=228.0。
步驟五：向50mL單口圓底燒瓶中加入5-溴異色滿6-胺(600mg, 2.63mmol)、N-氯代丁二醯亞胺(351mg, 2.63mmol)和N,N-二甲基甲醯胺(10mL)，80℃條件下攪拌1小時。反應液倒入水(30 mL)中，用30mL乙酸乙酯萃取3次，乾燥濃縮，粗品用快速矽膠柱純化(乙酸乙酯：石油醚=30:100)得到目標產物5-溴-7-氯異色滿6-胺(420mg, 收率:61%)。ES-API: [M+H] +=262.0。
步驟六：向50 mL單口圓底燒瓶中加入5-溴-7-氯異色滿6-胺(400mg, 1.52mmol)和次磷酸水溶液(40mL)，0℃下緩慢加入亞硝酸鈉(316mg, 4.58mmol)，0℃條件下反應2小時。反應液加入水(20 mL)中，用碳酸氫鈉溶液調pH至9-10，用乙酸乙酯(20 mLX3)萃取，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮，得到粗品用快速矽膠柱純化(甲醇：二氯甲烷=10:100)得到目標產物5-溴-7-氯異色烷(320mg, 收率: 85%)。ES-API: [M+H] +=247.0。
步驟七：向25mL三口圓底燒瓶中加入5-溴-7-氯異色烷(320mg, 1.35mmol)，乙烯基氟硼酸鉀(180mg, 1.35mmol)，四三苯基膦鈀 (156mg, 0.4mmol)，碳酸鉀(558mg，4.1mmol)，二氧六環(10 mL)和水(1 mL)。體系用氮氣置換三次，然後用氮氣球保護，110℃條件下反應4小時。反應液加入乙酸乙酯(100 mL)，用飽和食鹽水(50 mLX3)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮，得到粗品用快速矽膠柱純化(乙酸乙酯：石油醚=40:100)得到目標產物7-氯-5-乙烯基異色烷(250mg, 收率: 93%)。ES-API: [M+H] +=195.1。
步驟八：向25 mL單口圓底燒瓶中加入7-氯-5-乙烯基異色烷(270mg, 1.39mmol)，高碘酸鈉(1.78g, 8.3mmol)，四氫呋喃(10 mL)和水(5 mL)，冰水浴條件下分批加入二水合鋨酸鉀(102mg, 0.27mmol)，然後0 oC攪拌1小時。反應液加入乙酸乙酯(30 mL)，用飽和食鹽水(30mLX3)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮，得到粗品用快速矽膠柱純化(乙酸乙酯：石油醚=30:100)得到目標產物7-氯異色烷-5-甲醛(110mg, 收率:40%)。ES-API: [M+H] +=197.0。
步驟九：向50 mL單口圓底燒瓶中加入7-氯異色烷-5-甲醛(110mg, 0.56mmol)和二氯甲烷(10 mL)，冰水浴條件下加入(S)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺(135.6mg, 1.12mmol)和鈦酸四乙酯(1mL)，室溫攪拌3小時。反應液加入乙酸乙酯(30 mL)，用飽和食鹽水(30 mLX3)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮，得到粗品用快速矽膠柱純化(乙酸乙酯：石油醚=20:100)得到目標產物(S,E)-N-((7-氯異色滿-5-基)亞甲基)丙烷-2-亞磺醯胺(155mg, 收率: 92%)。ES-API: [M+H] +=286.1。
步驟十：向5 mL三口圓底燒瓶中加入(S,E)-N-((7-氯異色滿-5-基)亞甲基)丙烷-2-亞磺醯胺(155mg, 0.56mmol)和無水四氫呋喃(3 mL)，體系用氮氣置換三次，然後用氮氣球保護。-78 oC條件下加入(2-(1,3-二噁烷-2-基)乙基)溴化鎂的四氫呋喃溶液(0.5M , 3.1mL)，繼續攪拌2小時。反應液加入飽和氯化銨溶液(5mL)淬滅，混合溶液加入乙酸乙酯(30 mL)，用飽和食鹽水(30 mLX3)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮，得到粗品用快速矽膠柱純化(乙酸乙酯：石油醚=20:100)得到目標產物(S)-N-(1-(7-氯異色滿-5-基)-3-(1,3-二噁烷-2-基)丙基)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺(180mg, 收率: 84%)。ES-API: [M+H] +=416.2。
步驟十一：向25 mL單口圓底燒瓶中加入(S)-N-(1-(7-氯異色滿-5-基)-3-(1,3-二噁烷-2-基)丙基)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺(180mg, 0.43mmol)，三氟乙酸(3 mL)和水(0.15 mL)，0 oC條件下加入三甲基矽烷(503mg, 4.3mmol)，攪拌18小時。反應液旋乾後加入乙酸乙酯(30 mL)，用飽和食鹽水(30 mLX3)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮得到目標產物(S)-2-(7-氯異色滿-5-基)吡咯烷(100mg, 收率: 97%)。ES-API: [M+H] +=238.1。
步驟十二：向25 mL單口圓底燒瓶中加入(S)-2-(7-氯異色滿-5-基)吡咯烷(130mg, 0.42mmol)，二碳酸二叔丁酯(1mL)，三乙胺(174mg, 1.7mmol)和二氯甲烷(5mL)，攪拌1小時。反應加入二氯甲烷(20 mL)，用飽和食鹽水洗滌(20 mLX3)次，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮得到目標產物(S)-2-(7-氯異色滿-5-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(130mg, 收率: 91%)。ES-API: [M+H] +=338.2。
步驟十三：向25 mL單口圓底燒瓶中加入(S)-2-(7-氯異色滿-5-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(130mg, 0.38mmol)，3-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(149mg, 0.57mmol), 氯(2-二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II) (28mg, 0.04mmol)，碳酸鉀(160mg, 1.15mmol)，二氧六環(20 mL)和水(3 mL)。體系用氮氣置換三次，然後用氮氣球保護，110℃條件下微波反應50分鐘。反應液加入乙酸乙酯(10 mL)，用飽和食鹽水(5 ml X3)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮，得到粗品用快速矽膠柱純化(甲醇：二氯甲烷=10:100)得到目標產物(S)-2-(7-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)異色滿-5-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(150mg, 收率: 90%)。ES-API: [M+H] +=434.3。
步驟十四：向5 mL單口圓底燒瓶中加入(S)-2-(7-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)異色滿-5-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(150mg, 0.15mmol)，三氟乙酸(3 mL)和二氯甲烷(6 mL)，室溫攪拌反應30分鐘。反應液旋乾，得到粗品用製備HPLC(碳酸氫銨)純化得到 (S)-3-甲基-5-(5-(吡咯-2-基)異色滿-7-基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(Z75-1, 100mg, 收率：65%)。ES-API: [M+H] +=334.2。
實施例158 化合物Z244的合成
步驟一：向 (S)- 2-(6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(30 mg, 0.069mmol) 的N，N-二甲基甲醯胺(1 mL)溶液中加入    1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽 (39.89 mg, 0.21 mmol) ，4-羥基四氫吡喃-4-羧酸(12.16 mg, 0.083 mmol)，1-羥基苯并三氮唑 (14.06 mg, 0.1 mmol)，在25°C下攪拌2小時。LCMS監測反應完全，加水淬滅反應，乙酸乙酯萃取，飽和食鹽水洗，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮，得到粗品經矽膠柱層析純化(0-6%甲醇/二氯甲烷)得到產物(S)- 2-(2-(2-羥基-2-(四氫-2H-吡喃-4-基)乙醯基)-6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b] 吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(20 mg, 51%) 。ES-API:[M+H] += 561.4
步驟二：向化合物(S)- 2-(2-(2-羥基-2-(四氫-2H-吡喃-4-基)乙醯基)-6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b] 吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(20 mg, 0.036 mmol, ) 的二氯甲烷(1 mL)加入三氟乙酸(0.5 mL)，常溫攪拌1小時。藉由LCMS監測反應完全，用飽和碳酸氫鈉水溶液調pH至7，用二氯甲烷/水處理，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮，得到粗品經製備HPLC純化(色譜柱：Ultimate XB-C18,50*250mm,10um，流動相：A：純化水(0.05%氨水)B : 純乙腈，流速：80ml/min，梯度：在50分鐘內，B/A=20%-90%，波長：214nm，柱溫：室溫)得到產物(S)-(4-羥基四氫-2H-吡喃-4-基)(6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-8-(吡咯烷-2-基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)甲酮 (Z244, 3.6 mg, 收率: 22%) ，白色粉末。ES-API:[M+H] +=461.3。
實施例159 化合物Z242的合成
步驟一：向 (S)- 2-(6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(20 mg, 0.0646mmol) 的N,N-二甲基甲醯胺(1 mL)溶液中加入1-羥基環丙烷羧酸(5.66 mg, 0.055 mmol)，1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽 (26.59 mg, 0.14 mmol)，1-羥基苯并三氮唑(18.74 mg, 0.14 mmol)，在25°C下攪拌2小時。LCMS監測反應完全，加水淬滅反應，乙酸乙酯萃取，飽和食鹽水洗，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮，得到粗品經矽膠柱層析純化(0-6%甲醇/二氯甲烷)得到產物(S)- 2-(2-(1-羥基環丙烷羰基)-6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(30 mg, 粗品) 。ES-API:[M+H] += 517.3。
步驟二：向化合物(S)- 2-(2-(1-羥基環丙烷羰基)-6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯 (30 mg, 0.058 mmol,) 的二氯甲烷(1 mL)溶液中加入三氟乙酸(0.5 mL)，常溫攪拌1小時。藉由LCMS監測反應完全，用飽和碳酸氫鈉水溶液調pH至7，用二氯甲烷/水處理，無數硫酸鈉乾燥，過濾濃縮，得到粗品經製備HPLC純化(色譜柱：Ultimate XB-C18,50*250mm,10um，流動相體系：A：純化水(0.05%氨水) B : 純乙腈，流速：80mL/min，梯度：在50分鐘內，B/A=20%-90%，波長：214nm，柱溫：室溫)得到產物(S)-(1-羥基環丙基)(6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-8-(吡咯烷-2-基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)甲酮(Z242, 6.5 mg, 收率27%) ，白色粉末。ES-API:[M+H] +=417.2。
實施例160 化合物Z436的合成
步驟一：將 Ｎ-碘代丁二醯亞胺(879 mg, 3.91 mmol)緩慢加入到3-氯-7 H-吡咯并[2,3- c]噠嗪(500 mg, 3.26 mmol)的乙腈(20 mL)溶液中，室溫攪拌２小時。反應結束後，用硫代硫酸鈉(20 mL)溶液淬滅反應，乙酸乙酯(20 mLX3)萃取。有機相合併，用無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮並用快速矽膠柱(0-8%甲醇/二氯甲烷)純化，得到黃色固體3-氯-5-碘-7 H-吡咯并[2,3- c]噠嗪(750 mg, 收率82%)。ES-API: [M+H] += 280.0。
步驟二：氮氣保護下，將三甲基鋁的四氫呋喃溶液(5.37 mL, 1 M)加入到3-氯-5-碘-7 H-吡咯并[2,3- c]噠嗪(750 mg, 2.68 mmol)，1,1'-二(二苯膦基)二茂鐵二氯化鈀(II) (98 mg, 0.13 mmol)的四氫呋喃(20 mL)混合液中，80℃攪拌過夜。反應液用1 M的鹽酸(20 mL)淬滅，旋乾，殘留物用二氯甲烷(20 mL)溶解，過濾，濃縮並用快速矽膠柱(0-8%甲醇/二氯甲烷)純化，得到黃色固體3-氯-5-甲基-7 H-吡咯并[2,3- c]噠嗪(250 mg, 收率56%)。ES-API: [M+H] += 168.1。
步驟三：將N,N-二異丙基乙胺(1.29 mL, 7.42 mmol)和2-(7-偶氮苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯(847 mg, 2.23 mmol)依次加入到(S)-2-(6-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(500 mg, 1.48 mmol)，(S)-2-三氟甲基-2-羥基丙酸(469 mg, 2.97 mmol)的二氯甲烷(20 mL)溶液中，室溫攪拌1小時。反應結束後，反應液濃縮並用快速矽膠柱(1-100%四氫呋喃/石油醚)純化，得到透明油狀物(S)-2-(6-氯-2-((S)-3,3,3-三氟-2-羥基-2-甲基丙醯基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(650 mg, 收率92%)。ES-API: [M+H-Boc] += 377.2。
步驟四：氮氣保護下，(S)-2-(6-氯-2-((S)-3,3,3-三氟-2-羥基-2-甲基丙醯基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(215 mg, 0.45 mmol)，雙聯頻哪醇棚酸酯(343 mg, 1.35 mmol)，氯(2-二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II)(32 mg, 0.04 mmol)和醋酸鉀(133 mg, 1.35 mmol)的1,4-二氧六環(5 mL)混合物在120℃攪拌2小時。反應結束後，反應液過濾濃縮並用快速矽膠柱(0-100%四氫呋喃/石油醚)純化，得到透明油狀物(S)-2-(6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)-2-((S)-3,3,3-三氟-2-羥基-2-甲基丙醯基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(220 mg, 收率86%)。ES-API: [M+H-Boc] += 469.2。
步驟五：氮氣保護下，(S)-2-(6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)-2-((S)-3,3,3-三氟-2-羥基-2-甲基丙醯基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(100 mg, 0.18 mmol)，3-氯-5-甲基-7 H-吡咯并[2,3- c]噠嗪(60 mg, 0.36 mmol)，氯(2-二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II)(13 mg, 0.02 mmol)和碳酸鉀(73 mg, 0.53 mmol)的1,4-二氧六環(2 mL)和水(0.4 mL)的混合溶液在100℃攪拌2小時。反應液倒入乙酸乙酯(10 mL)，依次用飽和食鹽水(5 mL)和水(5 mL)洗滌，有機相用無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮並用快速矽膠柱(0-10%甲醇/二氯甲烷)純化，得到透明油狀液體(S)-2-(6-(5-甲基-7H-吡咯并[2,3-c]噠嗪-3-基)-2-((S)-3,3,3-三氟-2-羥基-2-甲基丙醯基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(50 mg, 收率50%)。ES-API: [M+H-Boc] += 474.2。
步驟六：冰浴條件下，將三氟乙酸(0.5 mL)滴加到(S)-2-(6-(5-甲基-7H-吡咯并[2,3-c]噠嗪-3-基)-2-((S)-3,3,3-三氟-2-羥基-2-甲基丙醯基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(50 mg, 87 μmol)的二氯甲烷(1 mL)溶液中，室溫攪拌1小時。反應液濃縮，用7M胺甲醇(5 mL)中和，濃縮並用製備HPLC(三氟乙酸)純化，得到白色固體(S)-3,3,3-三氟-2-羥基-2-甲基-1-(6-(5-甲基-7H-吡咯并[2,3-c]噠嗪-3-基)-8-( (S)-吡咯烷-2-基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)丙-1-酮 (Z436, 三氟乙酸鹽，2.5 mg, 純度100%, 收率5%)。ES-API: [M+H] += 474.2。
實施例161 化合物Z405的合成
步驟一：氮氣保護下，取(S)-2-(6-氯-2-((S)-3,3,3-三氟-2-羥基-2-甲基丙醯基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(55 mg, 0.116 mmol), 3-氯-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(96 mg, 0.34 mmol), 氯(2-二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II) (8 mg g, 0.012 mmol) , 碳酸鉀(48 mg g, 0.34 mmol)溶於1,4-二氧六環(5 ml)和水(1 mL)，110℃攪拌2小時。反應液減壓濃縮至乾，得到粗品藉由矽膠柱層析(石油醚/乙酸乙酯=50/50)純化，得到(S)-2-(6-(3-氯-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-2-((S)-3,3,3-三氟-2-羥基-2-甲基丙醯基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(35 mg, 收率: 51%)。ES-API: [M+H] +=593。
步驟二：取(S)-2-(6-(3-氯-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-2-((S)-3,3,3-三氟-2-羥基-2-甲基丙醯基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(35 mg, 0.06 mmol)溶於無水二氯甲烷(0.5 mL)，加入三氟乙酸(0.2 mL)，室溫反應2小時。LC-MS監測反應完全，反應液減壓濃縮至乾，加入氨甲醇溶液(1mL)中和後，再次濃縮，得到粗品經製備HPLC酸法(甲酸)純化得到(S)-1-(6-(3-氯-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-8-((S)-吡咯烷-2-基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)-3,3,3-三氟-2-羥基-2-甲基丙烷-1-酮 (Z405, 18.6 mg, 收率58%, 甲酸鹽)。ES-API: [M+H] +=493。 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 12.07 (s, 1H), 8.61 (d, J= 1.6 Hz, 1H), 8.30 (s, 1H), 8.12 (s, 1H), 7.79 (s, 1H), 7.73 (s, 1H), 7.48 (s, 1H), 5.25-5.15 (m, 1H), 4.87-4.75 (m, 1H), 4.32 (s, 1H), 4.17-4.07 (m, 1H), 3.87-3.83 (m, 1H), 3.63-3.60 (m, 1H), 3.20 (s, 2H), 3.01-2.93 (m, 3H), 2.27-2.17 (m, 1H), 1.89-1.88 (m, 2H), 1.59 (s, 3H).
實施例162 化合物Z367-1的合成
步驟一：取6-溴異苯并吡喃-8-甲醛(670 mg, 2.78 mmol) 溶於四氫呋喃(20 mL) 加入(S)-叔丁基亞磺醯胺(337 mg, 2.78 mmol)，冰浴下加入鈦酸四異丙酯(2.34 g, 8.34 mmol)，室溫攪拌3小時。LCMS 監測反應完全，加入飽和食鹽水(20 mL)，抽濾，分相，有機相用無水硫酸鈉乾燥，過濾，減壓濃縮，得到 (S,E)-N-((6-溴異苯并吡喃-8-基)亞甲基)-2-甲基丙烷-2-磺醯胺(850mg, 收率88%)。ES-API: [M+H] +=344。
步驟二：取(S,E)-N-((6-溴異苯并吡喃-8-基)亞甲基)-2-甲基丙烷-2-磺醯胺(500 mg, 1.4 mmol)溶於四氫呋喃(15 mL)，-78°C下加入烯丙基溴化鎂(4.3 mL, 4.3 mmol)，室溫反應2小時。加入飽和氯化銨溶液(10 mL)，加入乙酸乙酯(10 mL X3)萃取，合併有機相，飽和食鹽水洗(15 mL)，無水硫酸鈉乾燥，減壓濃縮，得到粗品藉由矽膠柱層析(石油醚/乙酸乙酯=50/50)純化，得到(S)-N-(1-(6-溴異苯并吡喃-8-基)丁-3-烯-1-基)-2-甲基丙烷-2-磺醯胺(400 mg, 收率71%)。ES-API: [M+H] +=386。
步驟三：取(S)-N-(1-(6-溴異苯并吡喃-8-基)丁-3-烯-1-基)-2-甲基丙-2-磺醯胺(400 mg, 1 mmol)溶於甲醇(10 mL)，加入鹽酸/1,4-二氧六環(0.7 ml, 3 mmol)，室溫反應16小時。反應結束後，反應液減壓濃縮至乾，加入水(10 mL)，用飽和碳酸鈉溶液調pH至9，乙酸乙酯萃取(10 mLX3)，合併有機相，用飽和食鹽水洗(15 mL)，無水硫酸鈉乾燥，減壓濃縮，得到1-(6-溴異苯并吡喃-8-基)丁-3-烯-1-胺(230 mg, 收率: 78%)。ES-API: [M+H] +=282。
步驟四：取1-(6-溴異苯并吡喃-8-基)丁-3-烯-1-胺(230 mg, 0.8 mmol)溶於二氯甲烷(10 mL)，加入三乙胺(123 mg, 1.2 mmol)，加入乙酸酐(91 mg, 0.9 mmol)，室溫反應16小時。反應液加入二氯甲烷(10 mL)稀釋，水(10 mL)洗，飽和食鹽水(10 mL)洗，無水硫酸鈉乾燥，減壓濃縮至乾得到N-(1-(6-溴異苯并吡喃-8-基)丁-3-烯-1-基)乙醯胺(230 mg, 收率：88%)。ES-API: [M+H] +=324。
步驟五：取N-(1-(6-溴異苯并吡喃-8-基)丁-3-烯-1-基)乙醯胺(170 mg, 0.5 mmol)溶於四氫呋喃/水(15 mL)，加入碘(333 mg, 1.3 mmol)，室溫反應16小時。反應液加入飽和亞硫酸鈉溶液(5 mL)，飽和碳酸氫鈉溶液(5 mL)，乙酸乙酯萃取(10 mLX33)，水(10 mL)洗，飽和食鹽水(10 mL)洗，無水硫酸鈉乾燥，減壓濃縮至乾得到5-(6-溴異苯并吡喃-8-基)吡咯烷-3-基乙酸酯(140 mg, 收率: 78%)。ES-API: [M+H] +=340。
步驟六：取5-(6-溴異苯并吡喃-8-基)吡咯烷-3-基乙酸酯(556 mg, 1.6 mmol)溶於二氯甲烷(15 mL)加入三乙胺(247 mg, 2.4 mmol)，加入碳酸二叔丁酯(356 mg, 1.6 mmol)，室溫反應16小時。反應液加入二氯甲烷(10 mL)稀釋，水(10 mL)洗，飽和食鹽水(10 mL)洗，無水硫酸鈉乾燥，減壓濃縮至乾得到4-乙醯氧基-2-(6-溴異苯并吡喃-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(633 mg, 收率88%)。ES-API: [M+H] +=440。
步驟七：取4-乙醯氧基-2-(6-溴異苯并吡喃-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(600 mg, 1.3 mmol)溶於甲醇(5 mL)加入1N氫氧化鈉溶液(1.5 ml, 1.5 mmol)，室溫反應16小時。反應液減壓濃縮，加入二氯甲烷(10 mL)稀釋，水(10 mL)洗，飽和食鹽水(10 mL)洗，無水硫酸鈉乾燥，減壓濃縮至乾得到2-(6-溴異苯并吡喃-8-基)-4-羥基吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(440 mg, 收率81%)。ES-API: [M+H] +=398。
步驟八：取2-(6-溴異苯并吡喃-8-基)-4-羥基吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(200 mg, 0.5 mmol)溶於二氯甲烷(5 mL)，-78°C加入二乙胺基三氟化硫(161 mg, 1.0 mmol)，室溫反應16小時。反應液減壓濃縮，加入二氯甲烷(10 mL)稀釋，加入飽和碳酸氫鈉溶液(5 mL)，分相，有機相水(10 mL)洗，飽和食鹽水(10 mL)洗，無水硫酸鈉乾燥，減壓濃縮至乾，得到粗品藉由矽膠柱層析(石油醚/乙酸乙酯=80/20)純化，得到2-(6-溴異苯并吡喃-8-基)-4-氟吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(160 mg, 收率80%)。ES-API: [M+H] +=400。
步驟九：取2-(6-溴異苯并吡喃-8-基)-4-氟吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(110 mg, 0.27 mmol)，3-甲基-7-氮雜吲哚-5-硼酸頻哪酯(212 mg, 0.82 mmol)，碳酸鉀(114 mg, 0.82 mmol)溶於1,4-二氧六環/水中(3 mL)，加入1,1-二(二苯膦基)二茂鐵二氯化鈀(10 mg)，氮氣保護下110℃反應2小時，反應液減壓濃縮，得到粗品藉由矽膠柱層析(石油醚/乙酸乙酯=50/50)純化，得到4-氟-2-(6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)異苯并吡喃-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(90 mg, 收率72%)。ES-API: [M+H] +=452。
步驟十：取4-氟-2-(6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)異苯并吡喃-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(20 mg, 0.044 mmol)溶於無水二氯甲烷(0.5 mL)，加入三氟乙酸(0.2 mL)，室溫反應2小時。LC-MS監測反應完全，反應液減壓濃縮至乾，加入氨甲醇溶液(1mL)中和後，再次濃縮，得到粗品經製備HPLC酸法(甲酸)純化得到5-(8-(4-氟吡咯烷-2-基)異苯并吡喃-6-基)-3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(Z367-1, 10.6 mg, 收率56%, 甲酸鹽)ES-API: [M+H] +=352。 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 11.32 (s, 1H), 8.46 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 8.24 (s, 1H), 8.09 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 7.69 (s, 1H), 7.37 (s, 1H), 7.25 (s, 1H), 5.42-5.39 (m, 1H), 5.27 (s, 1H), 4.91-4.87 (m, 1H), 4.78-4.74 (m, 1H), 4.32 (dd, J= 10.0, 6.0 Hz, 1H), 3.95-3.81 (m, 3H), 3.40-3.36 (m, 1H), 3.15-3.07 (m, 1H), 2.96-2.83 (m, 2H), 2.31 (s, 3H), 1.82-1.66 (m, 1H).
實施例163 化合物Z362的合成
步驟一：0℃，氮氣保護下，向2,2-二甲基嗎啉(200 mg, 1.74 mmol)的無水二氯甲烷(10 mL)溶液中加入三乙胺(350 mg, 3.47 mmol)和(4-硝基苯基)碳醯氯(480 mg, 2.08 mmol)，混合物升溫至20°C並攪拌3小時。LCMS監測反應完全，反應液濃縮，得到粗品經矽膠柱層析純化 (石油醚/乙酸乙酯=10:90)得到4-硝基苯基 2,2-二甲基嗎啉-4-羧酸鹽(480 mg, 產率98.62%)，為黃色固體。ES-API:[M+1] +=281.1。
步驟二：向(S)-2-(6-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯 (70 mg, 0.21 mmol) 的N,N-二甲基乙醯胺 (1 mL)溶液中加入4-硝基苯基 2,2-二甲基嗎啉-4-羧酸鹽 (87.36 mg, 0.31mmol)和碳酸鉀(57.44 mg, 0.42 mmol)，混合物升溫至130℃並攪拌3小時。LCMS監測反應完全，反應用水稀釋並用乙酸乙酯萃取。合併的有機相飽和食鹽水洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮，得到粗品經製備薄層色譜柱純化 (石油醚:乙酸乙酯=1:1) 純化，得到(S)-2-(6-氯-2-(2,2-二甲基嗎啉-4-羰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(70.00 mg, 產率70.47%)，為黃色油狀物。ES-API:[M+1] +=478.3。
步驟三：氮氣保護下，向(S)-2-(6-氯-2-(2,2-二甲基嗎啉-4-羰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(70 mg, 0.15 mmol)的二氧六環/水(2 mL/0.4 mL)溶液中加入3-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二噁硼烷-2-基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(45.36 mg, 0.18 mmol)，氯(2-二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II) (10.54 mg, 14.64 μmol)和碳酸鉀(60.62 mg, 0.44 mmol)，加熱至100℃反應2小時。反應完成後，反應液旋乾，得到粗品經製備薄層色譜柱純化(二氯甲烷/甲醇=10/1)得到產物(S)- 2-(2-(2,2-二甲基嗎啉-4-羰基)-6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯 (60.00 mg, 產率71.42%)，為黃色油狀物。ES-API:[M+1] +=574.4。
步驟四：將(S)- 2-(2-(2,2-二甲基嗎啉-4-羰基)-6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(60 mg, 0.11 mmol)溶於二氯甲烷(2.0 mL)中，加入三氟乙酸(1.0 mL)。室溫反應1小時。反應完成後，混合物用飽和碳酸氫鈉水溶液淬滅，用二氯甲烷萃取。合併的有機層用飽和氯化鈉洗滌，經無水硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮，得到粗品經製備薄層色譜柱純化(二氯甲烷/甲醇=8/1)得到產物(S)-(2,2-二甲基嗎啉)(6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-8-(吡咯烷-2-基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)甲酮(Z362, 14.5 mg, 產率29.28%)，為白色固體。ES-API:[M+1] +=474.3。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 9.36 (s, 1H), 8.50 (s, 1H), 7.98 (s, 1H), 7.76 (s, 1H), 7.29 (s, 1H), 7.08 (s, 1H),4.64 (d, J= 16.3 Hz, 1H), 4.55-4.38 (m, 2H), 3.84-3.73 (m, 2H), 3.61-3.33 (m, 3H), 3.32-3.25 (m, 2H),3.21-310 (m, 3H), 3.05-2.90 (m, 2H), 2.34 (s, 3H), 2.32-2.26 (m, 1H), 2.12-1.78 (m, 3H), 1.27 (s, 6H).
實施例164 化合物Z345的合成
步驟一：向 ( S)- 2-(6-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(100 mg, 296.86μmol) 的N-甲基吡咯烷酮(1 mL)溶液中加入二異丙基乙基胺 (115.12 mg, 890.59μmol)、4-氯-2-(三氟甲基)吡啶(161.69 mg, 890.59μmol)，在130℃下反應15小時。LCMS監測反應完全，加水淬滅反應，二氯甲烷萃取，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮，得到粗品經矽膠柱層析純化(0-5%甲醇在二氯甲烷中)得到產物( S)- 2-(6-氯-2-(2-(三氟甲基)吡啶-4-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(100 mg, 收率70%) 。ES-API:[M+H] +=483.2。
步驟二：將化合物( S)- 2-(6-氯-2-(2-(三氟甲基)吡啶-4-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(100 mg, 207.58μmol)溶於二氧六環/水(2 mL/0.4 mL)中，加入3-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二噁硼烷-2-基)-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶(69.77 mg, 270.29 mmol)，氯(2-二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II)(14.94 mg, 20.76μmol)和碳酸鉀(85.94 mg, 622.74μmol)。加熱至100℃反應2小時。反應液用二氯甲烷/水萃取，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮，得到粗品經製備薄層色譜柱純化(二氯甲烷/甲醇=10/1)得到產物( S)- 2-(6-(3-甲基-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶-5-基)-2-(2-(三氟甲基)吡啶-4-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(79 mg, 收率66.6%)。ES-API:[M+H] +=578.3。
步驟三：( S)- 2-(6-(3-甲基-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶-5-基)-2-(2-(三氟甲基)吡啶-4-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(79 mg, 136.76μmol)溶於二氯甲烷(1 mL)中，加入三氟乙酸(1 mL)，室溫反應1小時。反應完成後，反應液旋乾，二氯甲烷和飽和碳酸氫鈉水溶液萃取，無水硫酸乾燥，過濾旋乾，得到粗品經製備薄層色譜柱純化(二氯甲烷/甲醇=10/1)得到產物(S)-6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-8-(吡咯烷-2-基)-2-(2-(三氟甲基)吡啶-4-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉(Z345, 20.12 mg, 收率：31%)。ES-API:[M+1] +=478.2。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 11.32 (s, 1H), 8.46 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 8.29 (d, J= 6.0 Hz, 1H), 8.10 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 7.73 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 7.46-7.41 (m, 1H), 7.29 (d, J= 2.4 Hz, 1H), 7.25-7.22 (m, 1H), 7.13-7.10 (m, 1H), 4.78-4.59 (m, 2H), 4.47-4.33 (m, 1H), 3.82-3.59 (m, 2H), 3.17-3.10 (m, 1H), 3.04-2.94 (m, 3H), 2.28 (s, 3H), 2.26-2.20 (m, 1H), 1.90-1.77 (m, 2H), 1.60-1.50 (m, 1H).
實施例165化合物Z359-1，Z359-2的合成
步驟一：0℃，氮氣保護下，向 ( S)-2-甲基嗎啉(0.2 g, 1.98 mmol)無水二氯甲烷(5 mL)溶液中加入三乙胺 (0.4 g, 3.95 mmol) 和(4-硝基苯基)碳醯氯(0.48 g, 2.37 mmol)，混合物升溫至20℃並攪拌3小時。LCMS監測反應完全，反應液濃縮，得到粗品經矽膠柱層析純化 (石油醚/乙酸乙酯=10:90)得到(4-硝基苯基)( S)-2-甲基嗎啉-4-羧酸鹽 (0.45 g, 產率85.48%)，為黃色固體。ES-API:[M+1] +=267.1。
步驟二：向( S)-2-(6-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯 (70 mg, 0.21 mmol) N,N-二甲基乙醯胺 (1 mL)的溶液中加入(4-硝基苯基)( S)-2-甲基嗎啉-4-羧酸鹽 (82.99 mg, 0.31 mmol)和碳酸鉀(57.44 mg, 0.42 mmol)，混合物升溫至150℃並攪拌3小時。LCMS監測反應完全，反應用水稀釋並用乙酸乙酯萃取。合併的有機相飽和食鹽水洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮，得到粗品經製備薄層色譜柱純化(石油醚:乙酸乙酯=1:1) 純化，得到( S)-2-[6-氯-2-[( S)-2-甲基嗎啉-4-羰基]-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基]吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(67.00 mg, 產率69.49%)，為黃色油狀物。ES-API:[M+1] +=464.3。
步驟三：氮氣保護下，向 ( S)-2-[6-氯-2-[( S)-2-甲基嗎啉-4-羰基]-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基]吡咯烷-1-羧酸叔丁酯 (67 mg, 0.14 mmol)的二氧六環/水(4 mL/0.8 mL)溶液中，加入3-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二噁硼烷-2-基)-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶(44.73 mg, 0.17 mmol)，氯(2-二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II) (10.4 mg, 14.44 μmol)和碳酸鉀(59.78 mg, 0.43 mmol)，加熱至100℃反應1小時。反應完成後，反應液旋乾，得到粗品經製備薄層色譜柱純化(二氯甲烷/甲醇=10/1)得到產物( S)-2-[2-[( S)-2-甲基嗎啉-4-羰]-6-(3-甲基-1H-吡咯烷[2,3- b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基]吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(64.50 mg, 產率79.81%)，為黃色油狀物.ES-API:[M+1] +=560.3。
步驟四：將( S)-2-[2-[( S)-2-甲基嗎啉-4-羰]-6-(3-甲基-1 H-吡咯烷[2,3- b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫-1 H-異喹啉-8-基]吡咯烷-1-羧酸叔丁酯 (64.5 mg, 0.12 mmol)溶於二氯甲烷(2.0 mL)中，加入三氟乙酸(2.0 mL)，室溫反應1小時。反應完成後，混合物用飽和碳酸氫鈉水溶液淬滅，用二氯甲烷萃取，合併的有機層用飽和氯化鈉洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮，得到粗品經製備薄層色譜柱純化(二氯甲烷/甲醇=10/1)得到產物(6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-8-((S)-吡咯烷-2-基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)((S)-2-甲基嗎啉)甲酮 (Z359-1, 23.40 mg, 產率44.18%)，為黃色固體。ES-API:[M+1] +=460.3。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ10.28 (s, 1H), 8.47 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 7.97 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 7.73 (d, J= 1.4 Hz, 1H), 7.23 (s, 1H), 7.10 (s, 1H), 4.61 (d, J= 16.3 Hz, 1H), 4.53-4.40 (m, 2H), 3.88-3.83 (m, 1H), 3.67-3.51 (m, 5H), 3.49-3.31 (m, 2H), 3.21-2.84 (m, 4H), 2.73-2.66 (m, 1H), 2.33-2.25 (m, 4H), 2.08-2.01 (m, 1H), 1.97-1.88 (m, 1H), 1.84-1.76 (m, 1H), 1.17 (d, J= 6.0 Hz, 3H).
步驟一：將 ( R)-2-甲基嗎啉(200.00 mg, 1.98 mmol)在二氯甲烷 (10 mL)的溶液中冰浴冷卻，然後依次加入三乙胺(400.17 mg, 3.95 mmol)和(4-硝基苯基)碳醯氯(478.27 mg, 2.37 mmol)，混合物升溫至室溫並攪拌3小時。旋乾除去溶劑得到粗產物，藉由矽膠柱層析 (石油醚/乙酸乙酯=5/1)純化，得到(4-硝基苯基)( R)-2-甲基嗎啉-4-羧酸鹽(380 mg, 收率：72.74%)。ES-API: [M+H] += 267.10。
步驟二：將 (4-硝基苯基) ( R)-2-甲基嗎啉-4-羧酸酯 (50 mg, 187.79μmol) 在甲苯 (2 mL)的溶液中加入二異丙基乙基胺(97.08 mg, 751.18μmol) 和 ( S)-2-(6-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(63.26 mg, 187.79μmol)，使所得混合物升溫至100℃並攪拌48小時。旋乾除去溶劑得到粗產物，藉由矽膠柱層析 (石油醚/乙酸乙酯=1/1)純化，得到 (S)-2-[6-氯-2-[ ( R)-2-甲基嗎啉-4-羰基]-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基]吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(35 mg, 收率：36.15%)，為黃色油狀物。ES-API: [M+H] += 464.23。
步驟三：氮氣保護下，(S)-2-[6-氯-2-[ (2)-2-甲基嗎啉-4-羰基]-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基]吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(35.00 mg, 75.43μmol)，3-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二噁硼烷-2-基)-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶(44.06 mg, 170.69μmol)，氯(2-二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II)(10.24 mg, 14.22μmol)和碳酸鉀(39.32 mg, 0.28 mmol)溶於1,4-二氧六環溶液(1 mL)和水(0.1 mL)，升溫至100 oC反應2小時。反應完成後，反應液加水淬滅，乙酸乙酯萃取，有機相食鹽水洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮，得到粗品經薄層析柱純化(二氯甲烷/甲醇=10/1)得到白色固體 ( S)-2-[2-[( R)-2-甲基嗎啉-4-羰基]-6-(3-甲基-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基]吡咯烷-1-羧酸叔丁酯 (40.00 mg, 收率：46.22%)。ES-API: [M+H] += 560.32。
步驟四：( S)-2-[2-[( R)-2-甲基嗎啉-4-羰基]-6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3- b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基]吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(25mg, 44.67μmol)溶於二氯甲烷(2 mL)和三氟乙酸溶液(2 mL)，室溫攪拌1小時。反應完成後，混合物用飽和碳酸氫鈉水溶液淬滅，用二氯甲烷萃取。合併的有機層用飽和氯化鈉洗滌，經無水硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮，得到粗品經薄層析柱純化(二氯甲烷/甲醇=5/1)得到產物(6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-8-((S)-吡咯烷-2-基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)((R)-2-甲基嗎啉)甲酮(Z359-2, 5.00 mg, 收率 23.87%)白色固體。ES-API: [M+H] += 460.27。
實施例166 化合物Z437的合成
步驟一：將( S)- 2-(6-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基) 吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(50 mg, 0.15 mmol )溶於乙醇(0.5 mL)，再加入1,6-二噁螺[2.5]辛烷(34 mg, 0.30 mmol)和三乙胺(45 mg, 0.44 mmol)，加熱至75℃反應16小時。反應液旋乾，得到粗品經製備薄層色譜柱純化(石油醚/乙酸乙酯=1/1)得到產物(87 mg, 粗品)。ES-API:[M+H] += 451.3。
步驟二：氮氣保護下，將( S)- 2-(6-氯-2-((4-羥基四氫-2 H-吡喃-4-基)甲基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(87 mg, 0.19 mmol)溶於二氧六環/水(2 mL/0.4 mL)中，加入3-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二噁硼烷-2-基)-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶(60 mg, 0.23 mmol)，氯(2-二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II)(14 mg, 0.019 mmol)和碳酸鉀(53 mg, 0.38 mmol)，加熱至100℃反應2小時。反應完成後，反應液旋乾，得到粗品經製備薄層色譜柱純化(二氯甲烷/甲醇=20/1)得到產物(90 mg，收率：85%)。ES-API:[M+H] +=547.3。
步驟三：將(S)- 2-(2-((4-羥基四氫-2H-吡喃-4-基)甲基)-6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基) 吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(90 mg, 0.16 mmol)溶於二氯甲烷(2 mL)中，加入三氟乙酸(1 mL)，室溫反應1小時。反應完成後，反應液旋乾，用二氯甲烷和飽和碳酸鈉水溶液萃取，無水硫酸鈉乾燥，過濾旋乾，得到粗品經製備薄層色譜柱純化(二氯甲烷/甲醇=8/1)得到產物(S)-4-((6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-8-(吡咯-2-基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)甲基)四氫-2H-吡喃-4-醇(Z437, 25.2 mg，收率：34%)。ES-API:[M+H] +=447.3。 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 11.33-11.27 (m, 1H), 8.42 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 8.05 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 7.67 (d, J= 1.6 Hz, 1H), 7.29-7.25 (m, 1H), 7.24-7.20 (m, 1H), 4.32-4.21 (m, 1H), 4.17-4.10 (m, 1H), 3.88-3.81 (m, 1H), 3.72-3.55 (m, 6H), 3.14-3.09 (m, 1H), 2.92-2.82 (m, 4H), 2.80-2.74 (m, 1H), 2.28 (s, 3H), 2.21-2.09 (m, 1H), 1.87-1.71 (m, 2H), 1.65-1.56 (m, 2H), 1.47-1.39 (m, 3H).
實施例167 化合物Z339的合成
步驟一：氮氣保護下，向 4-氯-2,6-二甲基-嘧啶 (1 g, 7.01 mmol) 的 N,N-二甲基乙醯胺 (2 mL) 溶液中加入2-二環己基膦-2',4',6'-三異丙基聯苯 (595.63 mg, 1.40 mmol)，三(二亞苄基丙酮)二鈀 (321.11 mg, 350.67μmol) ，氰化鋅 (494.10 mg, 4.21 mmol)，鋅粉 (91.17 mg, 1.40 mmol)，混合物在25℃攪拌0.5小時，然後在90℃攪拌1小時。藉由LCMS監測反應完全，反應液用乙酸乙酯/水處理，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮，得到粗品經矽膠柱層析純化(0-20%乙酸乙酯在石油醚中)，得到黃色固體產物2,6-二甲基嘧啶-4-甲腈(450.00 mg, 產率48.19%)。ES-API:[M+1] +=134.1。
步驟二：向 2,6-二甲基嘧啶-4-甲腈 (350 mg, 2.63 mmol) 的乙醇 (4 mL) /水 (2 mL) 溶液中加入氫氧化鈉 (1.05 g, 26.29 mmol)，將混合物在 90℃下攪拌 2小時。LCMS監測反應完全，反應液用乙酸乙酯/水處理，然後除去水，冷凍乾燥，得到黃色固體產物2，6-二甲基嘧啶-4-羧酸(400.00 mg, 粗品)。ES-API:[M+1] +=153.1。
步驟三：將 2,6-二甲基嘧啶-4-甲酸 (400 mg, 2.63 mmol) 的 (4M) 鹽酸/ 甲醇 (10 mL) 溶液在 25℃下攪拌 2 小時。藉由 LCMS 監測反應完全，旋乾除去溶劑，用乙酸乙酯/水處理，有機層無水硫酸鈉乾燥，濃縮，得到粗品經矽膠柱層析純化(0-40%乙酸乙酯在石油醚中)，得到黃色固體狀的產物2,6-二甲基嘧啶-4-羧酸甲酯(280.00 mg, 產率64.09%)。ES-API:[M+1] +=167.1。
步驟四：將2,6-二甲基嘧啶-4-甲酸甲酯 (280 mg, 1.68 mmol)溶在四氫呋喃 (2 mL)/甲醇(1 mL)/水(2 mL)中，加入一水合氫氧化鋰(353.6 mg, 8.42 mmol)，在 25℃下攪拌 2 小時。藉由 LCMS 監測反應完全，旋乾除去溶劑，用乙酸乙酯/水處理，然後除去水，冷凍乾燥，得到黃色油狀產物2,6-二甲基嘧啶-4-羧酸(256.00 mg, 粗品)，粗品經製備HPLC純化(氨水)得(37 mg, 收率14.45%)，ES-API:[M+1] +=153.1。
步驟五：向 ( S)- 2-(6-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(40 mg, 0.12 mmol) 的二氯甲烷(1 mL)溶液中加入2,6-二甲基嘧啶-4-羧酸 (36.13 mg, 0.24 mmol)，1-丙基磷酸酐(229 mg, 0.36 mmol, 50%的乙酸乙酯溶液)，三乙胺(36.05 mg, 0.36 mmol)，混合液在25°C下攪拌2小時。LCMS監測反應完全，加水淬滅反應，二氯甲烷萃取，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮, 得到粗品經矽膠柱層析純化(流動相0-50%乙酸乙酯/石油醚，乙酸乙酯/石油醚=1/1，Rf=0.3)得到產物( S)-2-(6-氯-2-(2,6-二甲基嘧啶-4-羰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(34 mg, 產率60.79%) 。ES-API:[M+H-100] += 471.3。
步驟六：向化合物( S)-2-(6-氯-2-(2,6-二甲基嘧啶-4-羰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(34 mg, 0.072 mmol ) 的二氧六環/水(2 mL/0.4 mL的溶液中 加入3-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二噁硼烷-2-基)-1 H-吡咯[2,3- b]吡啶(22.36 mg, 0.087 mmol)，氯(2-二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II) (5.19 mg, 0.007 mmmol)，碳酸鉀(29.89 mg, 0.22 mmmol)，在氮氣保護下將混合物加熱110℃攪拌反應。藉由LCMS監測反應完全，用乙酸乙酯/水處理，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮，得到粗品經矽膠柱層析純化(流動相0-10%甲醇/二氯甲烷，二氯甲烷/甲醇=10/1，Rf=0.6)得到產物( S)- 2-(2-(2,6-二甲基嘧啶-4-羰基)-6-(3-甲基-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶-5-基)-1, 2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(33 mg, 產率80.67%)。ES-API:[M+H] += 567.4。
步驟七：向化合物( S)- 2-(2-(2,6-二甲基嘧啶-4-羰基)-6-(3-甲基-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶-5-基)-1, 2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(33 mg, 0.06 mmol, ) 的二氯甲烷(2ml)溶液中加入三氟乙酸(1 ml)，常溫攪拌1小時。藉由LCMS監測反應完全，用飽和碳酸氫鈉調pH至7，用二氯甲烷/水處理，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮，得到粗品經製備HPLC純化(色譜柱：Ultimate XB-C18,50*250mm,10um，流動相：A：純化水(0.05%氨水) B : 純乙腈，流速：80mL/min，梯度：在50分鐘內，B/A=20%-90%，波長：214nm，柱溫：室溫)得到( S)-(2,6-二甲基嘧啶-4-基)(6-(3-甲基-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶-5-基)-8-(吡咯烷-2-基)-3,4-二氫異喹啉-2(1 H)-基)甲酮(Z339, 15.1 mg, 55.58%)，白色粉末。ES-API:[M+H] +=467.3。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 8.55-8.50 (m, 1H), 8.01-7.74 (m, 2H), 7.25-7.24 (m, 1H), 7.16-7.11 (m, 1H), 7.05 (s, 1H), 5.11-4.83 (m, 2H), 4.74-4.01 (m, 1H), 3.86-3.08 (m, 4H), 3.07-2.80 (m, 2H), 2.76-2.72 (m, 3H), 2.59-2.54 (m, 3H), 2.31 (s, 3H), 2.25-1.93 (m, 4H).
實施例168 化合物Z368的合成
步驟一：將1-甲基-1 H-吡唑-5-羧酸(47 mg, 0.37 mmol)溶於 N, N-二甲基甲醯胺(1 mL)，之後加入 N, N-二異丙基乙胺(0.2 mL)和2-(7-偶氮苯并三氮唑)- N, N, N', N'-四甲基脲六氟磷酸酯(353 mg, 0.93 mmol)，攪拌1分鐘，加入(S)-2-(6-氯異吲哚啉-4-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(0.1 g, 0.31 mol)，室溫攪拌12小時。反應完後，加入到冰水(5 mL)中，用乙酸乙酯(5 mLX3)萃取，有機相用無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮得到(S)-2-(6-氯-2-(1-甲基-1 H-吡唑-4-羰基)異吲哚啉-4-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(0.12g)，黃色油狀物。ES-API: [M+H] += 431.1。
步驟二：將(S)-2-(6-氯-2-(1-甲基-1 H-吡唑-4-羰基)異吲哚啉-4-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(0.12 g, 0.23 mmol)溶於二氧六環(1 mL)，加入3-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-二氧硼雜環戊烷-2-基)-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶(72 mg, 0.28 mmol)，之後加入水(0.1 mL)和碳酸鉀(64 mg, 0.46 mmol)，最後加入氯(2-二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II) (17 mg, 0.02 mmol)，加熱攪拌12小時。反應完後，加入到冰水(5 mL)中，用乙酸乙酯(5 mLX3)萃取，有機相用無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮，得到(S)-2-(2-(1-甲基-1 H-吡唑-4-羰基)-6-(3-甲基-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶-5-基)異吲哚啉-4-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(0.09 g)，黃色油狀物。ES-API: [M+H] += 527.3。
步驟三：將(S)-2-(2-(1-甲基-1 H-吡唑-4-羰基)-6-(3-甲基-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶-5-基)異吲哚啉-4-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(0.1g)溶於乙酸乙酯(1 mL)，加入鹽酸乙酸乙酯(4.0 mol/L, 1.0 mL)，室溫攪拌12小時。反應完後，反應液濃縮，得到粗品用製備HPLC(鹽酸)純化得到(S)-(1-甲基-1 H-吡唑-4-基)(6-(3-甲基-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶-5-基)-4-(吡咯烷-2-基)異吲哚啉-2-基)甲酮 (Z368, 鹽酸鹽，25.76 mg, 收率31.8%)，白色固體。ES-API: [M+H] += 427.3。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.46-8.50 (m, 1H), 8.29-8.22 (m, 2H), 8.04-8.03(m, 1H), 7.72-7.71 (m, 1H),7.61-7.58 (m, 1H), 7.19 (s, 1H), 5.28-5.21 (m, 2H), 5.05-5.02 (m, 2H), 4.27-4.23 (m, 1H), 4.00-3.98 (m, 3H), 3.29-3.27 (m, 1H), 3.24-3.05 (m, 1H), 2.37 (s, 3H), 2.35-2.33 (m, 1H), 2.04-1.98 (m, 3H).
實施例169 化合物Z388的合成
步驟一：0℃，氮氣保護下，向3-氧雜-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷 (0.2 g, 1.35 mmol) 的無水二氯甲烷(10 mL)溶液中加入三乙胺 (0.55 g, 5.42 mmol)和(4-硝基苯基)碳醯氯(0.33 g, 1.63 mmol)，混合物升溫至20°C並攪拌3小時。LCMS監測反應完全，反應液濃縮，得到粗品經矽膠柱層析純化 (石油醚/乙酸乙酯=10:90)得到(4-硝基苯基) 3-氧雜-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸鹽(0.3 g, 產率75.59%)，為黃色固體。ES-API:[M+1] +=279.1。
步驟二：向( S)-2-(6-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯 (70 mg, 0.21 mmol) N,N-二甲基乙醯胺 (1 mL)的溶液中加入(4-硝基苯基) 3-氧雜-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸鹽(86.74 mg, 0.31 mmol) 和碳酸鉀(57.44 mg, 0.42 mmol)，混合物升溫至150℃並攪拌3小時。LCMS監測反應完全，反應用水稀釋並用乙酸乙酯萃取，合併的有機相飽和食鹽水洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮，得到粗品經製備薄層色譜柱純化(石油醚:乙酸乙酯=1:1) 純化，得到( S)-2-[6-氯-2-(3-氧雜-8-氮雜雙環[3.2.1] 辛烷-8-羰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基]吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(70.00 mg, 產率70.77%)，為黃色油狀物。ES-API:[M+1] +=476.3。
步驟三：氮氣保護下，向 ( S)-2-[6-氯-2-(3-氧雜-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基]吡咯烷-1-羧酸叔丁酯 (70 mg, 0.15 mmol)的二氧六環/水(4 mL/0.8 mL)溶液中，加入3-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二噁硼烷-2-基)-1 H-吡咯并[2,3-b]吡啶(45.55 mg, 0.18 mmol)，氯(2-二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II) (10.6 mg, 14.71 μmol)和碳酸鉀(60.88 mg, 0.44 mmol)，加熱至100℃反應1小時。反應完成後，反應液旋乾，得到粗品經製備薄層色譜柱純化(二氯甲烷/甲醇=10/1)得到產物( S)-2-[6-(3-甲基-1 H-吡咯烷[2,3- b] 吡啶-5-基)-2-(3-氧雜-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基]吡咯烷-1-羧酸叔丁酯 (70.00 mg, 產率83.26%)，為黃色油狀物.ES-API:[M+1] +=572.4。
步驟四：將( S)-2-[6-(3-甲基-1 H-吡咯烷[2,3- b] 吡啶-5-基)-2-(3-氧雜-8-氮雜雙環[3.2.1] 辛烷-8-羰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基]吡咯烷-1-羧酸叔丁酯 (70 mg, 0.12 mmol)溶於二氯甲烷(2.0 mL)中，加入三氟乙酸(2.0 mL)，室溫反應1小時。反應完成後，混合物用飽和碳酸氫鈉水溶液淬滅，用二氯甲烷萃取。合併的有機層用飽和氯化鈉洗滌，經無水硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮，得到粗品經製備薄層色譜柱純化(二氯甲烷/甲醇=8/1)得到產物(3-氧雜-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-基)(6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-8-((S)-吡咯烷-2-基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)甲酮(Z388, 16.30 mg, 產率28.23%)，為白色固體。ES-API:[M+1] +=472.4 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ10.28 (s, 1H), 8.48 (d, J=2.0 Hz, 1H), 8.01 (d, J=2.0 Hz, 1H), 7.72 (d, J=1.4 Hz, 1H), 7.27 (s,1H), 7.11 (s, 1H), 4.72 (d, J=16.4 Hz, 1H), 4.60 (d, J=16.4 Hz, 1H), 4.46-4.32 (m, 1H), 3.95 (s, 2H), 3.81 (d, J= 10.7 Hz, 2H), 3.71-3.54 (m, 4H), 3.38-3.27 (m, 1H), 3.14-2.94 (m, 4H), 2.34 (s, 3H), 2.31-2.25 (m,1H), 2.05-1.85 (m, 7H), 1.81-1.64 (m, 1H).
實施例170 化合物Z389的合成
步驟一：0℃，氮氣保護下，向8-氧雜-3-氮雜雙環[3.2.1]辛烷鹽酸鹽 (0.2 g, 1.35 mmol) 的無水二氯甲烷(6 mL)溶液中加入三乙胺 (0.55 g, 5.42 mmol)和(4-硝基苯基)碳醯氯(0.33 g, 1.63 mmol)，混合物升溫至20℃並攪拌3小時。LCMS監測反應完全，反應液濃縮，得到粗品經矽膠柱層析純化 (石油醚/乙酸乙酯=10:90)得到(4-硝基苯基) 8-氧雜-3-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-羧酸鹽(0.3 g, 產率79.57%)，為黃色固體。ES-API:[M+1] +=279.1。
步驟二：向( S)-2-(6-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯 (70 mg, 0.21 mmol) N,N-二甲基乙醯胺 (1 mL)的溶液中加入(4-硝基苯基) 8-氧雜-3-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-羧酸鹽(86.74 mg, 0.31 mmol) 和碳酸鉀(57.44 mg, 0.42 mmol)，混合物升溫至150℃並攪拌3小時。LCMS監測反應完全，反應用水稀釋並用乙酸乙酯萃取。合併的有機相飽和食鹽水洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮，得到粗品經製備薄層色譜柱純化(石油醚:乙酸乙酯=1:1) 純化，得到(2 S)-2-[6-氯-2-(8-氧雜-3-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-羰)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基]吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(70.00 mg, 產率70.77%)，為黃色油狀物。ES-API:[M+1] +=476.3。
步驟三：向(2 S)-2-[6-氯-2-(8-氧雜-3-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-羰)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基]吡咯烷-1-羧酸叔丁酯 (70 mg, 0.15 mmol)的二氧六環/水(4 mL/0.8 mL)溶液中，加入3-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二噁硼烷-2-基)-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶(45.55 mg, 0.18 mmol)，氯(2-二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II) (10.6 mg, 14.71 μmol)和碳酸鉀(60.88 mg, 0.44 mmol)，加熱至100℃反應1小時。反應完成後，反應液旋乾，得到的粗品經製備薄層色譜柱純化(二氯甲烷/甲醇=10/1)得到產物( S)-2-[6-(3-甲基-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶-5-基)-2-(8-氧雜-3-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-羰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基] 吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(70.00 mg, 產率83.26%)，為黃色油狀物.ES-API:[M+1] +=572.5。
步驟四：將( S)-2-[6-(3-甲基-1 H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-2-(8-氧雜-3-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-羰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基] 吡咯烷-1-羧酸叔丁酯 (70 mg, 0.12 mmol)溶於二氯甲烷(2.0 mL)中，加入三氟乙酸(2.0 mL)。室溫反應1小時。反應完成後，混合物用飽和碳酸氫鈉水溶液淬滅，用二氯甲烷萃取。合併的有機層用飽和氯化鈉洗滌，經無水硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮。得到粗品經製備薄層色譜柱純化(二氯甲烷/甲醇=8/1)得到產物(8-氧雜-3-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)(6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-8-((S)-吡咯烷-2-基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)甲酮(Z389, 27.10 mg, 產率46.93%)，為白色固體。ES-API:[M+1] +=472.4。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ10.77 (s, 1H), 8.42 (s, 1H), 7.78 (s, 2H), 7.00 (s, 2H), 4.93-4.86 (m, 1H), 4.53-4.25 (m, 4H), 3.79-3.72 (m, 1H), 3.63-3.37 (m, 4H), 3.32-3.20 (m, 2H), 3.12-3.04 (m, 1H), 2.92-2.76 (m, 1H), 2.64-2.55 (m, 1H), 2.50-2.29 (m, 3H), 2.24 (s, 3H), 2.22-2.10 (m, 1H), 1.99-1.75 (m, 4H).
實施例171 化合物Z357-1，Z357-2的合成
步驟一： 0℃，氮氣保護下，向( S)-3-甲氧基吡咯烷鹽酸鹽(0.25 g, 1.82 mmol)無水二氯甲烷(10 mL)溶液中加入三乙胺 (0.4 g, 3.64 mmol) 和(4-硝基苯基)碳醯氯(0.48 g, 2.18 mmol)，混合物升溫至20°C並攪拌3小時。LCMS監測反應完全，反應液濃縮，得到粗品經矽膠柱層析純化(石油醚/乙酸乙酯=10:90)得到(4-硝基苯基)( S)-3-甲氧基吡咯烷-1-羧酸鹽(0.4 g, 產率82.59%)，為黃色固體。ES-API:[M+1] +=267.0。
步驟二：向( S)-2-(6-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯 (70 mg, 0.21 mmol) N,N-二甲基乙醯胺 (1 mL)的溶液中加入(4-硝基苯基)( S)-3-甲氧基吡咯烷-1-羧酸鹽 (82.99 mg, 0.31 mmol)和碳酸鉀(57.44 mg, 0.42 mmol)，混合物升溫至150℃並攪拌3小時。LCMS監測反應完全，反應用水稀釋並用乙酸乙酯萃取。合併的有機相飽和食鹽水洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮。得到粗品經製備薄層色譜柱純化(石油醚:乙酸乙酯=1:1) 純化，得到( S)-2-(6-氯-2-(( S)-3-甲氧基吡咯烷-1-羰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(70.00 mg, 產率72.6%)，為黃色油狀物。ES-API:[M+1] +=464.3。
步驟三：氮氣保護下，向( S)-2-(6-氯-2-(( S)-3-甲氧基吡咯烷-1-羰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯 (70 mg, 0.15 mmol)的二氧六環/水(4 mL/0.8 mL)溶液中，加入3-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二噁硼烷-2-基)-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶(46.73 mg, 0.18 mmol)，氯(2-二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II) (10.9 mg, 15.09 μmol)和碳酸鉀(62.46 mg, 0.45 mmol)，加熱至100℃反應1小時。反應完成後，反應液旋乾，得到粗品經製備薄層色譜柱純化(二氯甲烷/甲醇=10/1)得到產物( S)-2-[2-[( S)-3-甲氧基吡咯烷-1-羰基]-6-(3-甲基-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基]吡咯烷-1-羧酸叔丁酯 (45.00 mg, 產率53.29%)，為黃色油狀物。ES-API:[M+1] +=560.5。
步驟四：將( S)-2-[2-[( S)-3-甲氧基吡咯烷-1-羰基]-6-(3-甲基-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基]吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(45 mg, 80.40 μmol) 溶於二氯甲烷(1.0 mL)中，加入三氟乙酸(1.0 mL)，室溫反應1小時。反應完成後，混合物用飽和碳酸氫鈉水溶液淬滅，用二氯甲烷萃取。合併的有機層用飽和氯化鈉洗滌，經無水硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮，得到粗品經製備薄層色譜柱純化(二氯甲烷/甲醇=8/1)得到產物((S)-3-甲氧基吡咯-1-基)(6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-8-((S)-吡咯烷-2-基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)甲酮 (Z357-1, 10.30 mg, 產率27.88%)，為白色固體。ES-API:[M+1] +=460.3
步驟一：0℃，氮氣保護下，( R)-3-甲氧基吡咯烷(0.2g, 1.98mmol)的無水二氯甲烷(10mL)溶液中加入三乙胺(0.4 g, 3.95 mmol)和(4-硝基苯基)碳醯氯(0.48 g, 2.37 mmol)。混合物升溫至20℃並攪拌3小時。LCMS監測反應完全，反應液濃縮，得到粗品經矽膠柱層析純化 (石油醚/乙酸乙酯=10:90)得到( R)-4-硝基苯基 3-甲氧基吡咯烷-1-羧酸鹽 (0.4 g, 產率75.98%)，為黃色固體。ES-API:[M+1] +=267.0。
步驟二：向( S)-2-(6-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯 (70 mg, 0.21 mmol) N,N-二甲基乙醯胺 (1 mL)的溶液中加入( R)-4-硝基苯基 3-甲氧基吡咯烷-1-羧酸鹽 (82.99 mg, 0.31mmol)和碳酸鉀(57.44 mg, 0.42 mmol)，混合物升溫至150℃並攪拌3小時。LCMS監測反應完全，反應用水稀釋並用乙酸乙酯萃取。合併的有機相飽和食鹽水洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮，得到的粗品經製備薄層色譜柱純化(石油醚:乙酸乙酯=1:1) 純化，得到( S)-2-(6-氯-2-(( R)-3-甲氧基吡咯烷-1-羰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(70.00 mg, 產率72.6%)，為黃色油狀物。ES-API:[M+1] +=464.4。
步驟三：氮氣保護下，向( S)-2-(6-氯-2-(( R)-3-甲氧基吡咯烷-1-羰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(70 mg, 0.15 mmol) 的二氧六環/水(2 mL/0.4mL)溶液中，加入3-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二噁硼烷-2-基)-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶(46.73 mg, 0.18 mmol)，氯(2-二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II) (10.86 mg, 15.09 μmol)和碳酸鉀(62.46 mg, 0.45 mmol)，加熱至100℃反應2小時。反應完成後，反應液旋乾，得到粗品經製備薄層色譜柱純化(二氯甲烷/甲醇=10/1)得到產物( S)- 2-(2-(( R)-3-甲氧基吡咯烷-1-羰基)-6-(3-甲基-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯 (55.00 mg, 產率65.14%)，為黃色油狀物.ES-API:[M+1] +=560.5。
步驟四：將( S)- 2-(2-(( R)-3-甲氧基吡咯烷-1-羰基)-6-(3-甲基-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(55 mg, 0.10 mmol)溶於二氯甲烷(2.0 mL)中，加入三氟乙酸(1.0 mL)，室溫反應1小時。反應完成後，混合物用飽和碳酸氫鈉水溶液淬滅，用二氯甲烷萃取。合併的有機層用飽和氯化鈉洗滌，經無水硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮，得到粗品經製備薄層色譜柱純化(二氯甲烷/甲醇=8/1)得到產物(( R)-3-甲氧基吡咯烷-1-基)(6-(3-甲基-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶-5-基)-8-(( S)-吡咯烷-2-基 )-3,4-二氫異喹啉-2(1 H)-基)甲酮(Z357-2, 13.20 mg, 產率30.15%) ，為白色固體。ES-API:[M+1] +=460.4。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 9.09 (s, 1H), 8.50 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 8.02 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 7.73 (s, 1H), 7.28 (s, 1H),7.09 (s, 1H), 4.63 (d, J= 16.3 Hz, 1H), 4.51-4.37 (m, 2H), 3.99-3.94 (m, 1H), 3.67-3.54 (m, 3H),3.53-3.42 (m, 3H), 3.34 (s, 3H), 3.32-3.25 (m, 1H), 3.15-2.92 (m, 3H), 2.35 (s, 3H), 2.34-2.24 (m, 1H), 2.07-1.85 (m, 5H), 1.77-1.66 (m, 1H).
實施例172 化合物Z358-2和化合物Z358-1的合成
步驟一：0℃，氮氣保護下，向( R)-3-甲基嗎啉(0.2g, 1.98mmol)的無水二氯甲烷(10mL)溶液中加入三乙胺(0.4 g, 3.95 mmol)和(4-硝基苯基)碳醯氯(0.48 g, 2.37 mmol)，混合物升溫至20°C並攪拌3小時。LCMS監測反應完全，反應液濃縮，得到粗品經矽膠柱層析純化 (石油醚/乙酸乙酯=10:90)得到(4-硝基苯基)( R)-3-甲基嗎啉-4-羧酸酯 (0.47 g, 產率89.28%)，為黃色固體。ES-API:[M+1] +=267.0。
步驟二：向( S)-2-(6-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯 (70 mg, 0.21 mmol) N,N-二甲基乙醯胺(1 mL)的溶液中加入(4-硝基苯基)( R)-3-甲基嗎啉-4-羧酸酯 (82.99 mg, 0.31mmol)和碳酸鉀(57.44 mg, 0.42 mmol)，混合物升溫至130℃並攪拌3小時。LCMS監測反應完全，反應用水稀釋並用乙酸乙酯萃取。合併的有機相飽和食鹽水洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮，得到粗品經製備薄層色譜柱(石油醚:乙酸乙酯=1:1) 純化，得到( S)-2-[6-氯-2-[( R)-3-甲基嗎啉-4-羰基]-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基]吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(70.00 mg, 產率72.6%)，為黃色油狀物。ES-API:[M+1] +=464.4。
步驟三：氮氣保護下，向( S)-2-[6-氯-2-[( R)-3-甲基嗎啉-4-羰基]-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基]吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(70 mg, 0.15 mmol)的二氧六環/水(2 mL/0.4mL)溶液中，加入3-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二噁硼烷-2-基)-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶(46.73 mg, 0.18 mmol)，氯(2-二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II) (10.86 mg, 15.09 μmol)和碳酸鉀(62.46 mg, 0.45 mmol)，加熱至100℃反應2小時。反應完成後，反應液旋乾，得到粗品經製備薄層色譜柱純化(二氯甲烷/甲醇=10/1)得到產物叔丁基 ( S)-2-[2-[( R)-3-甲基嗎啉-4-羰]-6-(3-甲基-1 H-吡咯[2,3- b] 吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基]吡咯烷-1-羧酸酯 (60.00 mg, 產率71.06%)，為黃色油狀物.ES-API:[M+1] +=560.5。
步驟四：將( S)-2-[2-[( R)-3-甲基嗎啉-4-羰]-6-(3-甲基-1 H-吡咯[2,3- b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基]吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(60 mg, 0.11 mmol)溶於二氯甲烷(2.0 mL)中，加入三氟乙酸(1.0 mL)，室溫反應1小時。反應完成後，混合物用飽和碳酸氫鈉水溶液淬滅，用二氯甲烷萃取。合併的有機層用飽和氯化鈉洗滌，經無水硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮。得到粗品經製備薄層色譜柱純化(二氯甲烷/甲醇=8/1)得到產物(6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-8-((S)-吡咯烷-2-基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)((R)-3-甲基嗎啉)甲酮 (Z358-2, 18.9 mg, 產率38.36%)，為白色固體。ES-API:[M+1] +=460.4。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 9.55 (s, 1H), 8.48 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 8.01 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 7.72 (s, 1H), 7.28 (s, 1H), 7.10 (s, 1H), 4.67-4.43 (m, 2H), 4.44-4.33 (m, 1H), 3.87-3.78 (m, 2H), 3.73-3.67 (m, 1H),3.67-3.52 (m, 3H), 3.49-3.39 (m, 1H), 3.39-3.26 (m, 3H), 3.13-2.94 (m, 3H), 2.35 (s, 3H), 2.33-2.24 (m, 1H), 2.05-1.84 (m, 2H), 1.79-1.68 (m, 1H), 1.32 (d, J= 6.8 Hz, 3H).
步驟一：0℃，氮氣保護下，向( S)-3-甲基嗎啉(0.2g, 1.98mmol)的無水二氯甲烷(10mL)溶液中加入三乙胺(0.4 g, 3.95 mmol)和(4-硝基苯基)碳醯氯(0.48 g, 2.37 mmol)，混合物升溫至20°C並攪拌3小時。LCMS監測反應完全，反應液濃縮，得到粗品經矽膠柱層析純化 (石油醚/乙酸乙酯=10:90)得到(4-硝基苯基)( S)-3-甲基嗎啉-4-羧酸酯 (0.45 g, 產率85.48%)，為黃色固體。ES-API:[M+1] +=267.0。
步驟二：向( S)-2-(6-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯 (70 mg, 0.21 mmol) N,N-二甲基乙醯胺(1 mL)的溶液中加入(4-硝基苯基)( S)-3-甲基嗎啉-4-羧酸酯 (82.99 mg, 0.31mmol)和碳酸鉀(57.44 mg, 0.42 mmol)，混合物升溫至150℃並攪拌3小時。LCMS監測反應完全，反應用水稀釋並用乙酸乙酯萃取。合併的有機相飽和食鹽水洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮，得到粗品經製備薄層色譜柱純化(石油醚:乙酸乙酯=1:1) 純化，得到( S)-2-[6-氯-2-[( S)-3-甲基嗎啉-4-羰基]-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基]吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(60.00 mg, 產率62.23%)，為黃色油狀物。ES-API:[M+1] +=464.4。
步驟三：氮氣保護下，向( S)-2-[6-氯-2-[( S)-3-甲基嗎啉-4-羰基]-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基]吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(60 mg, 0.13 mmol)的二氧六環/水(4 mL/0.8 mL)溶液中，加入3-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二噁硼烷-2-基)-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶(40.05 mg, 0.16 mmol)，氯(2-二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II) (9.31 mg, 12.93 μmol)和碳酸鉀(53.53 mg, 0.39 mmol)，加熱至100度反應1小時。反應完成後，反應液旋乾，得到粗品經製備薄層色譜柱純化(二氯甲烷/甲醇=10/1)得到產物叔丁基 ( S)-2-[2-[( S)-3-甲基嗎啉-4-羰]-6-(3-甲基-1 H-吡咯[2,3- b] 吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基]吡咯烷-1-羧酸酯 (60.00 mg, 產率82.90%)，為黃色油狀物.ES-API:[M+1] +=560.5。
步驟四：將( S)-2-[2-[( S)-3-甲基嗎啉-4-羰]-6-(3-甲基-1 H-吡咯[2,3- b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基]吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(60 mg, 0.11 mmol)溶於二氯甲烷(2.0 mL)中，加入三氟乙酸(2.0 mL)，室溫反應1小時。反應完成後，混合物用飽和碳酸氫鈉水溶液淬滅，用二氯甲烷萃取。合併的有機層用飽和氯化鈉洗滌，經無水硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮，得到粗品經製備薄層色譜柱純化(二氯甲烷/甲醇=8/1)得到產物(6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-8-((S)-吡咯-2-基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)((S)-3-甲基嗎啉)甲酮 (Z358-1, 13.50 mg, 產率27.40%) ，為白色固體。ES-API:[M+1] +=460.4。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 9.96 (s, 1H), 8.48 (d, J=2.1 Hz, 1H), 8.02 (d, J=2.1 Hz, 1H), 7.72 (d, J=1.7 Hz, 1H), 7.28 (d, J=1.4 Hz, 1H),7.12 (s, 1H), 4.61 (d, J= 16.4 Hz, 1H), 4.49 (d, J= 16.4 Hz, 1H), 4.38 (t, J=7.6 Hz, 1H), 3.86-3.78 (m, 2H), 3.73-3.69 (m, 1H), 3.66-3.48 (m, 4H), 3.41-3.26 (m, 3H), 3.13-2.98 (m, 3H), 2.35 (s, 3H), 2.32-2.25 (m, 1H), 2.04-1.86 (m, 2H), 1.78-1.67 (m,1H), 1.32 (d, J=6.8 Hz, 3H).
實施例173 化合物Z361的合成
步驟一：將 (4-硝基苯基) 碳醯氯 (350.02 mg, 1.74 mmol) 在二氯甲烷 (10 mL)的溶液中冰浴冷卻，然後依次加入三乙胺 (351.43 mg, 3.47 mmol) 和 3,3-二甲基嗎啉 (200 mg, 1.74 mmol)，使所得混合物升溫至室溫並攪拌3小時。旋乾除去溶劑得到粗產物，藉由矽膠柱層析(石油醚/乙酸乙酯=5/1)純化，得到4-硝基苯基3,3-二甲基嗎啉-4-羧酸酯(280 mg, 收率：56.38%)。ES-API: [M+H] += 281.1。
步驟二：(4-硝基苯基) 3,3-二甲基嗎啉-4-羧酸酯 (52.63 mg, 187.78μmol) 在無水 N，N-二甲基甲醯胺 (2 mL) 中的溶液加入二異丙基乙基胺(97.07 mg, 751.12μmol) 和 ( S)-2-(6-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(63.25 mg, 187.78μmol)，使所得混合物升溫至130℃並攪拌5小時。旋乾除去溶劑得到粗產物，藉由矽膠柱層析(石油醚/乙酸乙酯=1/)純化，得到黃色油狀的2-[6-氯-2-(3,3-二甲基嗎啉-4-羰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基]吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(33 mg, 收率：33%)。ES-API: [M+H] += 478.2。
步驟三：氮氣保護下，2-[6-氯-2-( 3,3-二甲基嗎啉-4-羰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基]吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(36.06 mg, 75.43μmol)，3-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二噁硼烷-2-基)-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶(44.06 mg, 170.69 μmol), 氯(2-二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II)(10.24 mg, 14.22μmol)和碳酸鉀(39.32 mg, 0.28 mmol)溶於1,4-二氧六環溶液(1 mL)和水(0.1 mL)，升溫至100 oC反應2小時。反應完成後，反應液加水淬滅，乙酸乙酯萃取，有機相食鹽水洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮，得到粗品經薄層析柱純化(二氯甲烷/甲醇=10/1)得到產物 ( S)-2-[2-(3,3-二甲基嗎啉-4-羰基)-6-(3-甲基)-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基]吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(30.00 mg, 收率：34.92%)。ES-API: [M+H] += 574.3。
步驟四：( S)-2-[2-(3,3-二甲基嗎啉-4-羰基)-6-(3-甲基)-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫-1 H-異喹啉-8-基]吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(30 mg, 49.68μmol)溶於二氯甲烷(2 mL)和三氟乙酸溶液(2 mL)，室溫攪拌1小時。反應完成後，混合物用飽和碳酸氫鈉水溶液淬滅，用二氯甲烷萃取。合併的有機層用飽和氯化鈉洗滌，經無水硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮，得到粗品經薄層析柱純化(二氯甲烷/甲醇=5/1)得到產物 ( S)-(3,3-二甲基嗎啉 [6-(3-甲基-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶-5-基)-8-[吡咯烷-2-基]-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]甲酮(Z361, 8.20 mg, 16.97μmol, 收率38.94%)，白色固體。ES-API: [M+H] += 474.2。
實施例174 化合物Z343的合成
步驟一：氮氣保護下，向 ( S)- 2-(6-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(100 mg, 296.86μmol) 的二氧六環(1 mL)溶液中加入2-二環己基磷-2',6'-二異丙氧基-1,1'-聯苯(27.12 mg, 59.37μmol)、甲磺酸(2-二環己基膦基-2',6'-二異丙氧基-1,1'-聯苯基)(2-氨基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II) (49.72 mg, 59.37μmol)、碳酸鉀 (123.12 mg, 890.59μmol)、4-溴-2,6-二甲基吡啶(165.69 mg, 890.59μmol)，在130°C下,反應15小時。LCMS監測反應完全，加水淬滅反應，二氯甲烷萃取，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮，得到粗品經矽膠柱層析純化(0-5%甲醇在二氯甲烷中)得到產物( S)- 2-(6-氯-2-(2,6-二甲基吡啶-4-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(95 mg, 產率65.2%) 。ES-API:[M+H] +=442.2。
步驟二：氮氣保護下，將化合物( S)- 2-(6-氯-2-(2,6-二甲基吡啶-4-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(100 mg, 226.24 μmol)溶於二氧六環/水(2 mL/0.4 mL)中，加入3-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二噁硼烷-2-基)-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶(69.77 mg, 270.29 mmol)，氯(2-二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II)(16.28 mg, 22.62μmol)和碳酸鉀(93.67 mg, 678μmol)，加熱至100℃反應2小時。反應液用二氯甲烷/水萃取，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮，得到粗品經製備薄層色譜柱純化(二氯甲烷/甲醇=10/1)得到產物( S)- 2-(2-(2,6-二甲基吡啶-4-基)-6-(3-甲基-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯 (90 mg, 產率66.6%)。ES-API:[M+H] +=538.4。
步驟三：( S)- 2-(2-(2,6-二甲基吡啶-4-基)-6-(3-甲基-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(55 mg, 102.9μmol)溶於二氯甲烷(1 mL)中，加入三氟乙酸(1 mL)，室溫反應1小時。反應完成後，反應液旋乾，用二氯甲烷和飽和碳酸氫鈉水溶液萃取，無水硫酸鈉乾燥，過濾旋乾，得到粗品經製備薄層色譜柱純化(二氯甲烷/甲醇=10/1)得到產物(S)-2-(2,6-二甲基吡啶-4-基)-6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-8-(吡咯烷-2-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉(Z343, 12 mg, 收率：21.95%)。(Rf=0.4,二氯甲烷/甲醇=10/1)。ES-API:[M+1] +=438.2。
實施例175 化合物Z261的合成
步驟一：將甲氧基乙酸(26.79 mg, 297.37umol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(1 mL)，加入N,N-二異丙基乙胺和2-(7-偶氮苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯(306.23mg, 805.38umol)，攪拌1分鐘，之後加入(S)-2-(6-氯異吲哚啉-4-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(0.08 g, 247.81 umol)，室溫攪拌12小時。反應完後，加入到冰水(5 mL)中，用乙酸乙酯(5 mLX3)萃取，有機相用無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮，得到(S)-2-(6-氯-2-(2-甲氧基乙醯基)異吲哚啉-4-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(0.09g)，黃色的油狀物。ES-API: [M+H] += 395.2。
步驟二：將(S)-2-(6-氯-2-(2-甲氧基乙醯基)異吲哚啉-4-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(0.09g ,227.91 umol)溶於二氧六環(1mL)，加入3-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-二氧硼雜環戊烷-2-基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(64.71 mg, 250.70umol)，加入0.1水(0.1 mL)和碳酸鉀(94.50 mg, 683.73umol)，最後加入氯(2-二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II) (16.42 mg, 22.79umol)，加熱攪拌12小時。反應完後，加入到冰水(5 mL)中，之後用乙酸乙酯(5 mLX3)萃取，有機相用無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮，得到(S)-2-(2-(2-甲氧基乙醯基)-6-(3-甲基-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶-5-基)異吲哚啉-4-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(0.1 g)，黃色的油狀物。ES-API: [M+H] += 491.3。
步驟三：將(S)-2-(2-(2-甲氧基乙醯基)-6-(3-甲基-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶-5-基)異吲哚啉-4-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(0.1g)溶於乙酸乙酯(1 mL)，加入鹽酸乙酸乙酯(4.0 M, 1.0 mL)，室溫攪拌12小時。反應完後，反應液濃縮。得到粗品用製備HPLC(鹽酸)得到(S)-2-甲氧基-1-(6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-4-(吡咯烷-2-基)異吲哚啉-2-基)乙-1-酮 (Z261, 鹽酸鹽，17.8 mg, 產率22.4%)白色固體。ES-API: [M+H] += 391.2。
實施例176 化合物Z262的合成
步驟一：將5-氨基異吲哚啉-1,3-二酮(200 g, 1.23 mmol)溶於的 N, N-二甲基甲醯胺(350 mL)和二氧六環(1000 mL)，緩慢加入N-氯代的琥珀醯亞胺(164.12g, 1.23 mol)，室溫攪拌16小時。反應完後，反應液慢慢的倒入冰水中，過濾，得到5-氨基-6-氯異吲哚啉-1,3-二酮(230 g)，黃色固體。ES-API: [M+H +] = 197.1。
步驟二：將5-氨基-6-氯異吲哚啉-1,3-二酮(230 g, 1.17 mol)溶於的 N, N-二甲基甲醯胺(1200 mL)，之後緩慢加入 N-溴代丁二醯亞胺(249.88 g,1.40 mol)，室溫攪拌2小時。反應完後，將反應液慢慢的倒入到冰水中，過濾，得到5-氨基-4-溴-6-氯異吲哚啉-1,3-二酮(280 g)，黃色固體。ES-API: [M+H +] = 275.0,277.0。
步驟三：將5-氨基-4-溴-6-氯異吲哚啉-1,3-二酮(285 g, 1.03mol)加入到硫酸(57.47 mL)中，溫度控制在0-5℃，分批加入亞硝酸鈉(214.13 g, 3.1 mmol)，溫度控制在0-5℃攪拌0.5小時，慢慢滴加亞磷酸(132.38 g, 50%水溶液, 1.03mol)，0-5℃下攪拌2小時。反應結束後，將反應液慢慢的倒入冰水中，過濾，得到4-溴-6-氯異吲哚啉-1,3-二酮(170 g)，黃色固體。ES-API: [M+H +] = 259.9。
步驟四：氮氣保護下，將4-溴-6-氯異吲哚啉-1,3-二酮(66 g, 253.39mmol)加入到四氫呋喃(350 mL)中，在0-10℃下滴加1M硼烷的四氫呋喃(1.52 L)，加熱至80℃攪拌36小時。反應完後，加入的甲醇(500 mL)，濃縮，得到4-溴-6-氯-異吲哚啉(40 g)。ES-API: [M+H] += 231.8,233。
步驟五：將4-溴-6-氯-異吲哚啉(80 g, 344.08 mmol)加入到四氫呋喃(560 mL)溶液中，加入碳酸鉀(237.77g, 1.72mol)，降溫至0℃後，慢慢加入氯乙醯(36.83 mL, 516.12 mmol)，室溫攪拌12小時。反應完後，慢慢加入到冰水(800 mL)中，用乙酸乙酯(100 mLX3)萃取，有機相用無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮，得到1-(4-溴-6-氯-異吲哚啉)-2-乙酮(50 g)。ES-API: [M+H] += 276.0,274.0。
步驟六：將1-(4-溴-6-氯-異吲哚啉)-2-乙酮(50 g, 182.12 mmol)和乙烯基三氟硼酸鉀(48.79 g, 364.21 mmol)加入到乙醇(350 mL)溶液中，之後加入三乙胺(25.35mL, 182.12 mmol)，氮氣置換三次，最後加入[1,1雙(二苯基膦)二茂鐵]二氯化鈀二氯甲烷絡合物(7.44 g, 9.11 mmol)，加熱至80℃反應16個小時。反應完後，慢慢倒入冰水(800 mL)中，用乙酸乙酯(200 mLX3)萃取，有機相用無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮，得到粗品經快速矽膠柱(0-100%乙酸乙酯/石油醚)純化得到1-(6-氯-4-乙烯基-異吲哚啉)-2-乙酮(30 g, 收率74%)，黃色油狀物。ES-API: [M+H] += 222.1。
步驟七：將1-(6-氯-4-乙烯基-異吲哚啉)-2-乙酮(30 g, 135.33 mmol)加入到四氫呋喃(90 mL)和水(40 mL)中，加入高碘酸鈉(173.67g, 811.97mmol)和鋨酸鉀二水合物(997.25mg, 2.71mmol)，室溫攪拌12個小時。反應完後，過濾，將液體慢慢倒入冰水(400 mL)中，用乙酸乙酯(200 mLx3)萃取，有機相用無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮並用快速矽膠柱(0-100%乙酸乙酯/石油醚)純化得到2-乙醯-6-氯-異吲哚啉-4-甲醛(20 g, 收率66%)，黃色的固體。ES-API: [M+H] += 224.1。
步驟八：將2-乙醯-6-氯-異吲哚啉-4-甲醛(20 g, 135.33 mmol)溶於到二氯甲烷(140 mL)，之後加S-(-)-2-甲基-2-丙亞磺醯胺(13.01 g ,103.71 mmol)和鈦酸四乙酯(61.19 g, 2.68 mmol)，室溫攪拌12個小時。反應完後，過濾，慢慢加入到冰水(100 mL)中，用二氯甲烷(500 mLX3)萃取，有機相用無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮，得到(E,S)-N-[(2-乙醯基-6-氯異吲哚啉-4-基)亞甲基]-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺 (21 g)，黃色固體。ES-API: [M+H] += 327.1。
步驟九：將(E,S)-N-[(2-乙醯基-6-氯異吲哚啉-4-基)亞甲基]-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺(11 g, 33.66 mmol)溶於四氫呋喃(75 mL)，氮氣置換三次，降溫到-70℃，加入(1,3-二氧六環-2-乙基)溴化鎂(0.5 M, 134.62 mL)，攪拌2小時。反應完後，過濾，慢慢加入到氯化銨水溶液(100 mL)中，用乙酸乙酯(80 mLx3)萃取，有機相用無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮，得到(S)-N-((S)-1-(2-乙醯基-6-氯異吲哚啉-4-基)-3-(1,3-二噁烷-2-基)丙基)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺(12.5 g)，黃色固體。ES-API: [M+H] += 443.1。
步驟十：將(S)-N-((S)-1-(2-乙醯基-6-氯異吲哚啉-4-基)-3-(1,3-二噁烷-2-基)丙基)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺(12 g, 27.09 mmol)溶於三氟乙酸(60 mL)，加入水(3 mL)，室溫攪拌0.5小時後，加入三乙基矽烷(31.50 g, 270.88 mmol)，室溫攪拌12小時。反應完後，直接濃縮得到(S)-1-(6-氯-4-(吡咯烷-2-基)異吲哚-2-基)乙烷-1-酮 (7.0 g)，黃色油狀物。ES-API: [M+H] +=265.1。
步驟十一：將(S)-1-(6-氯-4-(吡咯烷-2-基)異吲哚-2-基)乙烷-1-酮(7.0 g, 27.09 mmol)溶於四氫呋喃(14 mL)，之後加入三乙胺(11 mL)和二碳酸二叔丁酯(9.11 mL)，室溫攪拌12小時。反應完後，慢慢的加入到冰水(50 mL)中，用乙酸乙酯(30 mLx3)萃取，有機相用無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮並用快速矽膠柱(0-100%乙酸乙酯/石油醚)純化得到(S)-2-(2-乙醯基-6-氯異吲哚啉-4-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(6.0 g, 收率62%)，黃色油。ES-API: [M+H] += 365.0。
步驟十二：將(S)-2-(2-乙醯基-6-氯異吲哚啉-4-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(2.0 g, 5.48 mmol)溶於乙醇(14 mL)，之後加入10%氫氧化鈉(3mL)，加熱至95℃攪拌12小時。反應完後，反應液濃縮，之加入到冰水(20 mL)中，用乙酸乙酯(15 mLx3)萃取，有機相用無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮並用快速矽膠柱(0-100%乙酸乙酯/石油醚)純化得到(S)-2-(6-氯異吲哚啉-4-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(1.5 g)，黃色的泡沫狀固體。ES-API: [M+H] += 322.9。
步驟十三：將2,6-二甲基異煙酸(93 mg, 0.60 mmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(1 mL)，加入N,N-二異丙基乙胺和2-(7-偶氮苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯(306mg, 0.8 mmol)，攪拌1分鐘，加入(S)-2-(6-氯異吲哚啉-4-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(0.13 g, 0.4 mmol)，室溫攪拌12小時。反應完後，加入到冰水(5 mL)中，用乙酸乙酯(5 mLx3)萃取，有機相用無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮，得到(S)-2-(6-氯-2-(2,6-二甲基異煙醯基)異吲哚啉-4-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(0.18 g)，黃色油狀物。ES-API: [M+H] += 456.2。
步驟十四：將(S)-2-(6-氯-2-(2,6-二甲基異煙醯基)異吲哚啉-4-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(0.18 g, 0.39 mmol)溶於二氧六環(1 mL)，加入3-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-二氧硼雜環戊烷-2-基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(112 mg, 0.4 mmol)，加入水(0.1 mL)和碳酸鉀(164 mg, 1.18 mmol)，最後加入氯(2-二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II) (28.45 mg, 0.04 mmol)，加熱攪拌12小時。反應完後，加入到冰水(5 mL)中，用乙酸乙酯(5 mLX3)萃取，有機相用無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮，得到(S)-2-(2-(2,6-二甲基異煙醯基)-6-(3-甲基-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶-5-基)異吲哚啉-4-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯 (0.2 g)，黃色的油狀物。ES-API: [M+H] += 552.3。
步驟十五：將(S)-2-(2-(2,6-二甲基異煙醯基)-6-(3-甲基-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶-5-基)異吲哚啉-4-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(0.2g)溶於乙酸乙酯(1 mL)，加入鹽酸乙酸乙酯(4.0M, 1.0 mL)，室溫攪拌12小時。反應完後，反應液濃縮，得到粗品用製備HPLC(鹽酸)純化得到(S)-(2,6-二甲基吡啶-4-基)(6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-4-(吡咯烷-2-基)異吲哚啉-2-基)甲酮 (Z262, 鹽酸鹽，59.48 mg, 收率36.3%)，白色固體。ES-API: [M+H] += 452.1。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 9.08-9.06 (m, 1H), 8.82 (s, 1H), 8.12-8.06 (m, 1H), 7.96-7.80 (m, 3H), 7.55-7.54 (m, 1H), 5.28-5.14 (m, 2H), 5.02-4.99 (m, 1H), 4.87-4.83 (m, 1H), 4.65-4.64 (m, 1H), 3.71-3.47 (m, 2H), 2.87-2.86 (6H), 2.53-2.51(m, 1H), 2.49-2.48 (m, 3H), 2.46– 2.13 (m, 3H).
實施例177 化合物Z438的合成
步驟一：將3-(三氟甲基)-1H-吡唑-4-羧酸乙酯(1.0 g, 4.80 mmol)溶解在乙腈(10 mL)中並在室溫下攪拌，向該溶液中加入2-碘丙烷(1.23 g, 7.21 mmol)，隨後加入碳酸鉀(1.0 g, 7.21mmol)，反應混合物在80℃攪拌6小時。LCMS監測反應完全，加水淬滅反應並用乙酸乙酯萃取，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮，得到粗品經薄層色譜柱純化(石油醚/乙酸乙酯=10/1)得到1-異丙基-5-(三氟甲基)吡唑-4-羧酸乙酯(0.1 g,產率8%)，為黃色油狀物。ES-API:[M+1] +=251.1。
步驟二：向 1-異丙基-5-(三氟甲基)吡唑-4-羧酸乙酯(0.1 g, 0.4 mmol)在甲醇/水(6 mL/1 mL)中的溶液中加入氫氧化鈉(79.92 mg, 2.00 mmol) ，混合物在 20℃攪拌 3 小時。反應混合物濃縮，然後用水稀釋，用1N 鹽酸調pH至3，形成沉澱物，過濾，固體乾燥，得1-異丙基-5-(三氟甲基)吡唑-4-羧酸(70.00 mg, 粗品)，白色固體。ES-API:[M+1] +=223.0。
步驟三：向 ( S)-2-(6-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(70 mg, 0.21 mmol) 的二氯甲烷(6 mL)溶液中加入1-異丙基-5-(三氟甲基)吡唑-4-羧酸(69.25 mg, 311.71 μmol) ，1-丙基磷酸酐(197 mg, 0.31 mmol, 50%的乙酸乙酯溶液，三乙胺(63.08 mg, 623.41 μmol)，混合液在25℃下攪拌2小時。LCMS監測反應完全，加水淬滅反應，二氯甲烷萃取，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮，得到粗品經製備薄層色譜柱純化(石油醚/乙酸乙酯=1/1)得到產物( S)-2-[6-氯-2-[1-異丙基-3-(三氟甲基)-1H-吡唑-4-羰基]-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基]吡咯烷-1-羧酸叔丁酯 (60.00 mg, 產率53.37%)，為黃色油狀物。ES-API:[M+1-100] +=441.2。
步驟四：氮氣保護下，將( S)-2-[6-氯-2-[1-異丙基-3-(三氟甲基)-1H-吡唑-4-羰基]-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基]吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(60 mg, 0.11 mmol) 溶於二氧六環/水(4 mL/0.8 mL)中，加入3-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二噁硼烷-2-基)-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶(34.35 mg, 133.09 μmol)，氯(2-二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II) (7.99 mg, 11.09 μmol)和碳酸鉀(45.91 mg, 332.71 μmol)，加熱至100℃反應1小時。反應完成後，反應液旋乾，得到粗品經製備薄層色譜柱純化(二氯甲烷/甲醇=10/1)得到產物( S)-2-[2-[1-異丙基-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-4-羰基]-6-(3-甲基-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基] 吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(55.00 mg, 產率77.89%)，為黃色油狀物.ES-API:[M+1] +=637.4。
步驟五：將( S)-2-[2-[1-異丙基-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-4-羰基]-6-(3-甲基-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基]吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(55 mg, 86.38 μmol)溶於二氯甲烷(2.0 mL)中，加入三氟乙酸(2.0 mL)，室溫反應1小時。反應完成後，混合物用飽和碳酸氫鈉水溶液淬滅，用二氯甲烷萃取。合併的有機層用飽和氯化鈉洗滌，經無水硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮，得到粗品經製備薄層色譜柱純化(二氯甲烷/甲醇=10/1)得到產物( S)-[1-異丙基-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-4-基]-[6-(3-甲基-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶-5-基)-8-[吡咯烷-2-基]-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]甲酮(Z438, 18.00 mg, 產率38.83%)，為黃色固體。ES-API:[M+1] +=537.3。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 9.61-9.38 (m, 1H), 8.55-8.49 (m, 1H), 8.02-7.98 (m, 1H), 7.84 (s, 1H),7.61-7.59 (m, 1H), 7.23 (s, 1H), 7.09 (s, 1H), 5.05 (d, J= 17.6 Hz, 1H), 4.89 (d, J= 17.5 Hz, 1H), 4.73-4.65 (m, 2H),4.45 (t, J= 5.0 Hz, 1H), 4.19-3.98 (m, 1H), 3.63-3.53 (m, 1H), 3.41-3.33 (m, 1H), 3.21-2.85 (m, 3H), 2.34 (s, 3H), 2.12-1.98 (m, 1H), 1.94-1.87 (m, 1H), 1.81-1.68 (m, 1H),1.55 (d, J= 5.8 Hz, 6H).
實施例178 化合物Z344的合成
步驟一：氮氣保護下，向 ( S)-2-(6-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(100 mg, 296.86μmol) 的二氧六環(1 mL)溶液中加入2-二環己基磷-2',6'-二異丙氧基-1,1'-聯苯(27.12 mg, 59.37μmol)、甲磺酸(2-二環己基膦基-2',6'-二異丙氧基-1,1'-聯苯基)(2-氨基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II) (49.72 mg, 59.37μmol)、碳酸鉀 (123.12 mg, 890.59μmol)、4-碘-2-甲氧基吡啶(209.31 mg, 890.59μmol)，在130°C下反應15小時。LCMS監測反應完全，加水淬滅反應，二氯甲烷萃取，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮，得到粗品經矽膠柱層析純化(0-5%甲醇在二氯甲烷中)得到產物( S)- 2-(6-氯-2-(2-甲氧基吡啶-4-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(90 mg, 收率61.5%) 。ES-API:[M+H] +=444.3。
步驟二：氮氣保護下，將化合物化合物( S)- 2-(6-氯-2-(2-甲氧基吡啶-4-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(100 mg, 225.24μmol) 溶於二氧六環/水(2 mL/0.4 mL)中，加入3-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二噁硼烷-2-基)-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶(69.77 mg, 270.29 mmol)，氯(2-二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II)(16.21 mg, 22.5μmol)和碳酸鉀(96.7 mg, 675μmol)，加熱至100℃反應2小時。用二氯甲烷/水萃取，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮，得到粗品經製備薄層色譜柱純化(二氯甲烷/甲醇=10/1)得到產物( S)- 2-(2-(2-甲氧基吡啶-4-基)-6-(3-甲基-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶-5-基)-1,2, 3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(90 mg, 收率68.1%)。ES-API:[M+H] +=539.5。
步驟三：( S)- 2-(2-(2-甲氧基吡啶-4-基)-6-(3-甲基-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶-5-基)-1,2, 3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(75 mg, 139μmol)溶於二氯甲烷(1 mL)中，加入三氟乙酸(1 mL)，室溫反應1小時。反應完成後，反應液旋乾，加入二氯甲烷和飽和碳酸氫鈉水溶液萃取，無水硫酸鈉乾燥，過濾旋乾，得到粗品經製備薄層色譜柱純化(二氯甲烷/甲醇=10/1)得到產物(S)-2-(2-甲氧基吡啶-4-基)-6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-8-(吡咯烷-2-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉(Z344, 20 mg, 收率：40.95%)。ES-API:[M+1] +=440.3。
實施例179 化合物Z348的合成
步驟一：將3-(三氟甲基)-1 H-吡唑-4-羧酸乙酯(1.0 g, 4.80 mmol)溶解在乙腈(10 mL)中並在室溫下攪拌，向該溶液中加入2-碘丙烷(1.23 g, 7.21 mmol)，隨後加入碳酸鉀(1.0 g, 7.21mmol)，將反應混合物在80℃攪拌6小時。LCMS監測反應完全，加水淬滅並用乙酸乙酯萃取，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮，得到粗品經矽膠柱層析純化(石油醚/乙酸乙酯=10/1)得到 1-異丙基-3-(三氟甲基)-1H-吡唑-4-羧酸乙酯(0.9 g,產率75%)，白色固體。ES-API:[M+1] +=251.1。
步驟二：向 1-異丙基-3-(三氟甲基)-1H-吡唑-4-羧酸乙酯(0.9 g，3.60 mmol)的甲醇/水(6 mL/1 mL)溶液中加入氫氧化鈉(0.72 mg, 17.98 mmol )，混合物在 20℃攪拌 3 小時。反應混合物濃縮，然後用水稀釋，用1N 鹽酸調pH至3，形成沉澱物，過濾，固體乾燥，得1-異丙基-3-(三氟甲基)-1H-吡唑-4-羧酸(0.6 g, 粗產品)，白色固體。ES-API:[M+1] +=223.1。
步驟三：向 ( S)-2-(6-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(70 mg, 0.21 mmol) 的二氯甲烷(6 mL)溶液中加入1-異丙基-3-(三氟甲基)-1H-吡唑-4-羧酸 (92.33 mg, 0.42 mmol) ，1-丙基磷酸酐(197 mg, 0.31 mmol, 50%的乙酸乙酯溶液)，三乙胺 (63.08 mg, 0.62 mmol)，混合液在25℃下攪拌2小時。LCMS監測反應完全，加水淬滅反應，用二氯甲烷萃取，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮，得到粗品經製備薄層色譜柱純化(石油醚/乙酸乙酯=1/1)得到產物( S)-2-[6-氯-2-[1-異丙基-3-(三氟甲基)-1H-吡唑-4-羰基]-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基]吡咯烷-1-羧酸叔丁酯 (90 mg, 產率80.05%)，為黃色油狀物。ES-API:[M+1-100] +=441.2。
步驟四：氮氣保護下，將( S)-2-[6-氯-2-[1-異丙基-3-(三氟甲基)-1H-吡唑-4-羰基]-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基]吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(90 mg, 0.17 mmol) 溶於二氧六環/水(4 mL/0.8 mL)中，加入3-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二噁硼烷-2-基)-1H-吡咯并[2,3- b]吡啶(51.53 mg, 0.2 mmol)，氯(2-二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II) (11.98 mg, 16.64 μmol)和碳酸鉀(68.87 mg, 0.5 mmol)，加熱至100℃反應1小時。反應完成後，反應液旋乾，得到粗品經製備薄層色譜柱純化(二氯甲烷/甲醇=10/1)得到產物( S)-2-[2-[1-異丙基-3-(三氟甲基)-1H-吡唑-4-羰基]-6-(3-甲基-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基]吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(90 mg, 產率84.97%), 為黃色油狀物.ES-API:[M+1] +=637.5。
步驟五：將( S)-2-[2-[1-異丙基-3-(三氟甲基)-1H-吡唑-4-羰基]-6-(3-甲基-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基]吡咯烷-1-羧酸叔丁酯( 90 mg, 0.14 mmol)溶於二氯甲烷(2.0 mL)中，加入三氟乙酸(2.0 mL)，室溫反應1小時。反應完成後，混合物用飽和碳酸氫鈉水溶液淬滅，用二氯甲烷萃取。合併的有機層用飽和氯化鈉洗滌，經無水硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮，得到粗品經製備薄層色譜柱純化(二氯甲烷/甲醇=10/1)得到產物( S)-[1-異丙基-3-(三氟甲基)-1H-吡唑-4-基]-[6-(3-甲基-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶-5-基)-8-[吡咯烷-2-基]-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]甲酮(Z348, 27.6 mg, 產率36.39%)，為黃色固體。ES-API:[M+1] +=537.3。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 10.32 (s, 1H), 8.48 (s, 1H), 8.02 (s, 1H), 7.84-7.59 (m, 2H), 7.27 (s, 1H), 7.12 (s, 1H), 5.21-4.61 (m, 2H), 4.61-4.51 (m, 1H), 4.46-3.46 (m, 3H), 3.36-2.45 (m, 6H), 2.34 (s, 3H), 2.04-1.60 (m, 3H), 1.53 (d, J= 5.9 Hz, 6H).
實施例180 化合物Z350的合成
步驟一：將( S)-2-(6-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(60 mg, 178.12μmol) 在二氯甲烷 (2 mL)的溶液中加入2-(三氟甲基)-嘧啶-5-羧酸(41.06 mg, 213.74μmol)，1-丙基磷酸酐(52.63 mg, 267.18μmol) ，三乙胺(0.05mL)，混合物在20℃下攪拌2小時。反應液旋乾除去溶劑得到粗產物，藉由矽膠柱層析柱 (石油醚/乙酸乙酯=1/1)純化，得到 ( S)-2-[6-氯-2-[2-(三氟甲基)嘧啶-5-羰基]-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基]吡咯烷-1-羧酸叔丁酯，為黃色油狀物(65.00 mg, 收率：67.85 %)。ES-API: [M+H] += 511.17。
步驟二：氮氣保護下，將 ( S)-2-[6-氯-2-[2-(三氟甲基)嘧啶-5-羰基]-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基]吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(55.00 mg, 0.11 mmol)，3-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二噁硼烷-2-基)-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶(44.06 mg, 0.17 mmol), 氯(2-二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II)(10.24 mg, 0.014 mmol)和碳酸鉀(39.32 mg，0.28 mmol)溶於1,4-二氧六環溶液(1 mL)和水(0.1 mL)，升溫至100 oC反應2小時。反應完成後，反應液加水淬滅，乙酸乙酯萃取，有機相食鹽水洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮，得到粗品經薄層析柱純化(二氯甲烷/甲醇=10/1)得到白色固體( S)-2-[6-(3-甲基-1H-吡咯[2,3- b]吡啶-5-基)-2-[2-(三氟甲基)嘧啶-5-羰基]-1,2,3 ,4-四氫異喹啉-8-基]吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(60.00 mg,收率：66.06%)。ES-API: [M+H] += 607.26。
步驟三：( S)-2-[6-(3-甲基-1H-吡咯[2,3- b]吡啶-5-基)-2-[2-(三氟甲基)嘧啶-5-羰基]-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基]吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(60.00 mg, 93.96μmol)溶於二氯甲烷(2 mL)和三氟乙酸溶液(2 mL)，室溫攪拌1小時。反應完成後，混合物用飽和碳酸氫鈉水溶液淬滅，用二氯甲烷萃取。合併的有機層用飽和氯化鈉洗滌，經無水硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮，得到粗品經薄層析柱純化(二氯甲烷/甲醇=5/1)得到產物淡黃色固體( S)-[6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3- b]吡啶-5-基)-8-[吡咯烷-2-基]-3,4-二氫異喹啉-2(1H)–基]-[2-(三氟甲基)嘧啶-5-基]甲酮(Z350, 18.80 mg, 收率 44.13%)。ES-API: [M+H] += 507.21。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 9.83-9.49 (m, 1H), 9.09-8.95 (m, 2H), 8.52-8.33 (m, 1H), 8.04-7.56 (m, 2H), 7.18 (s, 1H), 7.08 (s, 1H), 5.18-4.84 (m, 2H), 4.22-3.97 (m, 1H), 3.65-3.44 (m, 2H), 3.35-3.23 (m, 1H), 3.15-2.75 (m, 3H), 2.44-2.35 (m, 1H), 2.32 (s, 3H), 2.22-2.12 (m, 1H), 2.07-2.01 (m, 1H), 1.94-1.81 (m, 1H).
實施例181 化合物Z354的合成
步驟一：將( S)-2-(6-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(60 mg, 178.12μmol) 在二氯甲烷 (2 mL)的溶液中加入 1,5-二甲基-1 H-吡唑-3-羧酸(29.95 mg, 213.74μmol)，1-丙基磷酸酐(169.8 mg, 267.18 μmol, 50%的乙酸乙酯溶液)，三乙胺(0.05mL)，混合物在20℃下攪拌2小時。反應液旋乾除去溶劑得到粗產物，藉由矽膠柱層析 (石油醚/乙酸乙酯=1/1)純化，得到( S)-2-[6-氯-2-(1,5-二甲基-1H-吡唑-3-羰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基]吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(60.00 mg，收率：69.72 %)，為黃色油狀物。ES-API: [M+H] += 459.2。
步驟二：氮氣保護下，( S)-2-[6-氯-2-(1,5-二甲基-1H-吡唑-3-羰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基]吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(50.00 mg, 0.11 mmol)，3-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二噁硼烷-2-基)-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶(28.12 mg, 0.11 mmol)，氯(2-二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II)(7.84 mg, 0.011 mmol)和碳酸鉀(30.11 mg, 0.22 mmol)溶於1,4-二氧六環溶液(1 mL)和水(0.1 mL)，升溫至100 oC反應2小時。反應完成後，反應液加水淬滅，乙酸乙酯萃取，有機相食鹽水洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮，得到粗品經薄層析柱純化(二氯甲烷/甲醇=10/1)得到 (2)-2-[2-(1,5-二甲基-1H-吡唑-3-羰基)-6-(3-甲基-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基]吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(45.00 mg, 65.75μmol, 收率：70.75%)，白色固體。ES-API: [M+H] += 555.3。
步驟三：( S)-2-[2-(1,5-二甲基-1H-吡唑-3-羰基)-6-(3-甲基-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基]吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(45.00 mg, 65.75μmol)溶於二氯甲烷(2 mL)和三氟乙酸溶液(2 mL)，室溫攪拌1小時。反應完成後，混合物用飽和碳酸氫鈉水溶液淬滅，用二氯甲烷萃取。合併的有機層用飽和氯化鈉洗滌，經無水硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮，得到粗品經薄層析柱純化(二氯甲烷/甲醇=5/1)得到產物淡黃色固體( S)-(1,5-二甲基-1H-吡唑-3-基)-6-(3-甲基-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶-5-基)-8-[吡咯烷-2-基]-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]-甲酮(Z354, 22.80 mg, 收率 54.53%)。ES-API: [M+H] += 455.3。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 9.71 (s, 1H), 8.52 (s, 1H), 8.09-7.71 (m, 2H), 7.14 (s, 1H), 7.06-6.96 (m, 1H), 6.55-6.39 (m, 1H), 5.50-4.51 (m, 2H), 4.68-4.50 (m, 1H), 4.20-3.95 (m, 1H), 3.82 (s, 3H), 3.77-3.48 (m, 2H), 3.43-3.17 (m, 1H), 3.02-2.78 (m, 2H), 2.41-2.33 (m, 1H), 2.32-2.27 (m, 6H), 2.21-2.08 (m, 1H), 2.05-1.80 (m, 2H).
實施例182 化合物Z349的合成
步驟一：向 ( S)- 2-(6-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(60 mg, 0.18 mmol) 的二氯甲烷(2 mL)溶液中加入2-甲基-4-(三氟甲基)嘧啶-5-羧酸(73.43 mg, 0.36 mmol)，1-丙基磷酸酐(337 mg, 0.53 mmol, 50%的乙酸乙酯溶液)，三乙胺(54.07 mg, 0.53 mmol)，混合液在25°C下攪拌2小時。LCMS監測反應完全，加水淬滅反應，二氯甲烷萃取，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮, 得到粗品經矽膠柱層析純化(流動相0-50%乙酸乙酯/石油醚，乙酸乙酯/石油醚=1/1)得到產物( S)- 2-(6-氯-2-(2-甲基-4-(三氟甲基)嘧啶-5-羰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(40 mg, 收率42.78%) 。ES-API:[M+H-100] += 425.2。
步驟二：向化合物( S)- 2-(6-氯-2-(2-甲基-4-(三氟甲基)嘧啶-5-羰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(40 mg, 0.076 mmol )的二氧六環/水(2 mL/0.4 mL)的溶液中加入3-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二噁硼烷-2-基)-1 H-吡咯[2,3- b]吡啶(23.60 mg, 0.09 mmol)，氯(2-二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II) (5.48 mg, 0.008 mmmol)，碳酸鉀(31.55 mg, 0.23 mmmol)，在氮氣保護下，混合物加熱到110 ℃攪拌反應。藉由LCMS監測反應完全，反應液用乙酸乙酯/水處理，乾無水硫酸鈉燥，過濾濃縮，得到粗品經矽膠柱層析純化(流動相0-10%甲醇/二氯甲烷，二氯甲烷/甲醇=10/1，Rf=0.6)得到產物( S)- 2-(6-(3-甲基-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶-5-基)-2-(2-甲基-4-(三氟甲基)嘧啶-5-羰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(40 mg, 收率84.58%) .ES-API:[M+H] += 621.4。
步驟三：向化合物( S)- 2-(6-(3-甲基-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶-5-基)-2-(2-甲基-4-(三氟甲基)嘧啶-5-羰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(40 mg, 0.06 mmol) 的二氯甲烷(2 mL)溶液中加入三氟乙酸(1 mL)，常溫攪拌1小時。藉由LCMS監測反應完全，用飽和碳酸氫鈉調pH至7，用二氯甲烷/水處理，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮，得到粗品經製備HPLC純化(色譜柱：Ultimate XB-C18,50*250mm,10um，流動相：A：純化水(0.05%氨水) B : 純乙腈，流速：80 mL/min，梯度：在50分鐘內，B/A=20%-90%，波長：214nm，柱溫：室溫。色譜條件)得到( S)-(6-(3-甲基-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶-5-基)-8-(吡咯烷-2-基)-3,4-二氫異喹啉-2(1 H)-基)(2-甲基-4-(三氟甲基)嘧啶-5-基)甲酮(Z349, 17.9 mg, 收率53.36%) ，白色粉末。ES-API:[M+H] +=521.3。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 8.90 (s, 1H), 8.83-8.75 (m, 1H), 8.51-8.46 (m, 1H), 8.04-7.98 (m, 1H),7.84 (s, 1H), 7.32 (s, 1H), 7.09 (s, 1H), 5.44-4.44 (m, 2H), 4.44-4.36 (m, 1H), 4.20-3.86 (m, 1H), 3.56-3.42 (m, 1H),3.38-3.27 (m, 1H), 3.20-2.89 (m, 3H), 2.88 (s, 3H), 2.35 (s, 3H), 2.12-1.81 (m, 4H).
實施例183 化合物Z351的合成
步驟一：向 ( S)- 2-(6-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(60 mg, 0.18 mmol) 的二氯甲烷(2 ml)溶液中加入2-環丙基嘧啶-5-羧酸(58.48 mg, 0.36 mmol)，1-丙基磷酸酐(337.1 mg, 0.53 mmol, 50%的乙酸乙酯溶液)，三乙胺(54.07 mg, 0.53 mmol)，混合液在25°C下攪拌2小時。LCMS監測反應完全，加水淬滅反應，二氯甲烷萃取，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮，得到粗品經矽膠柱層析純化(流動相0-50%乙酸乙酯/石油醚，乙酸乙酯/石油醚=1/1，Rf=0.4)得到產物( S)- 2-(6-氯-2-(2-環丙基嘧啶-5-羰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(45 mg, 收率52.31%) 。ES-API:[M+H] += 483.3。
步驟二：向化合物( S)- 2-(6-氯-2-(2-環丙基嘧啶-5-羰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(45 mg, 0.093 mmol )的二氧六環/水(2 mL/0.4 mL)的溶液中加入3-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二噁硼烷-2-基)-1 H-吡咯[2,3- b]吡啶(28.86 mg, 0.11 mmol)，氯(2-二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II) (6.7 mg, 0.009 mmmol)，碳酸鉀(38.57 mg, 0.238mmmol)，在氮氣保護下混合物加熱到110 ℃攪拌反應。藉由LCMS監測反應完全，用乙酸乙酯/水處理，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮，得到粗品經矽膠柱層析純化(流動相0-10%甲醇/二氯甲烷，二氯甲烷/甲醇=10/1，Rf=0.6)得到產物( S)- 2-(2-(2-環丙基嘧啶-5-羰基)-6-(3-甲基-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(45 mg, 收率83.46%) 。ES-API:[M+H] += 579.5。
步驟三：向化合物( S)- 2-(2-(2-環丙基嘧啶-5-羰基)-6-(3-甲基-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶-5-基)-1,2, 3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯 (45 mg, 0.08 mmol)的二氯甲烷(2 mL)溶液中加入三氟乙酸(1 mL)，常溫攪拌1小時。藉由LCMS監測反應完全，用飽和碳酸氫鈉調pH至7，用二氯甲烷/水處理，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮，得到粗品經製備HPLC純化(色譜柱：Ultimate XB-C18,50*250mm,10um，流動相：A：純化水(0.05%氨水)B :純乙腈，流速：80 mL/min，梯度：在50分鐘內，B/A=20%-90%，波長：214nm，柱溫：室溫)得到( S)-(2-環丙基嘧啶-5-基)(6-(3-甲基-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶-5-基)-8-(吡咯烷-2-基)-3, 4-二氫異喹啉-2(1 H)-基)甲酮(Z351, 17.6 mg, 收率47.29%)，白色粉末。ES-API:[M+H] +=479.3。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 9.58 (s, 1H), 8.70 (s, 2H), 8.48 (s, 1H), 8.01 (s, 1H), 7.86-7.59 (m, 1H), 7.10 (s, 1H), 5.12-4.82 (m, 2H),4.53-3.94 (m, 1H), 3.94-3.59 (m, 2H), 3.41-2.92 (m, 4H), 2.34 (s, 3H), 2.11-1.59 (m, 4H), 1.35-1.07 (m, 5H).
實施例184 化合物Z376的合成
步驟一：將 製備例4獲得的(R)-3-(6-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啡啉-4-羧酸叔丁酯(5a, 90 mg, 255 umol)和異氰酸乙酯(22 mg, 306 umol, 24 uL)溶於二氯甲烷(1 mL)中，然後加入N,N-二異丙基乙胺(66 mg, 510 umol, 89 uL)，室溫攪拌2小時。反應完後，加入到水(1 mL)中，用二氯甲烷(1 mLX3)萃取，有機相用飽和食鹽水(1 mL)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮，得到 (R)-3-[6-氯-2-(乙基氨基甲醯)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基]嗎啉-4-羧酸叔丁酯(100 mg)，棕色的油狀物。ES-API: [M+H] += 424.2。
步驟二：將 (R)-3-[6-氯-2-(乙基氨基甲醯)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基]嗎啉-4-羧酸叔丁酯(100 mg, 236 umol)和3-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼烷-2-基)-1H-吡咯[2,3-b]吡啶(73 mg, 283 umol)溶於二氧六環(1 mL)和水(0.2 mL)中，然後加入碳酸鉀(65 mg, 472 umol)，氮氣條件下加入[2-(2-氨基苯基)苯基]-氯鈀；二環己基-[2-(2,6-二甲氧基苯基)苯基]磷(17.00 mg, 24 umol)，120 ℃攪拌3小時。反應完後，加入到水(1 mL)中，用乙酸乙酯(1 mLX3)萃取，有機相用飽和食鹽水(1 mL)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮，得到 (R)-3-[2-(乙基氨甲醯)-6-(3-甲基-1H-吡咯[2,3-b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基]嗎啡啉-4-羧酸叔丁酯(104 mg)，棕色的油狀物。ES-API: [M+H] += 520.2。
步驟三：將 (R)-3-[2-(乙基氨甲醯)-6-(3-甲基-1H-吡咯[2,3-b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基]嗎啡啉-4-羧酸叔丁酯(104 mg, 200 umol)溶於乙酸乙酯(2 mL)中，然後加入鹽酸乙酸乙酯(4 M, 1 mL)，室溫攪拌4小時。反應完後，反應液過濾，用製備HPLC(甲酸法)純化得到(R)-N-乙基-6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-8-(嗎啉-3-基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-甲醯胺 (Z376, 甲酸鹽，26.68 mg, 收率31.8%)灰色固體。ES-API: [M+H] +=420.1。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ = 8.45 (br s, 1H), 8.43-8.38 (m, 1H), 8.22 (d, J= 1.9 Hz, 1H), 7.73 (s, 1H), 7.55 (s, 1H), 7.20 (s, 1H), 4.82 (s, 1H), 4.60 (d, J= 16.3 Hz, 2H), 4.05 (br d, J= 12.1 Hz, 2H), 3.74 (s, 2H), 3.65 (t, J= 6.0 Hz, 2H), 3.42-3.34 (m, 1H), 3.26 (d, J= 7.1 Hz, 3H), 3.01 (br t, J= 5.9 Hz, 2H), 2.38 (s, 3H), 1.16 (t, J= 7.2 Hz, 3H).
實施例185 化合物Z375的合成
步驟一：將 (R)-3-(6-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯 (5a, 0.09 g, 255 umol) 和四氫吡喃-4-甲酸(66 mg, 0.51 mmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(2 mL)，加入N,N-二異丙基乙胺(98.9 mg, 765 umol, 133 uL)和O-(7-氮雜苯并三氮唑-1-基)-N,N,N,N-四甲基脲六氟膦鹽(194 mg, 510 umol)，常溫反應2小時。反應完後，加入到水(0.5 mL)中，用乙酸乙酯(1 mL)萃取，有機相用飽和食鹽水 (0.4 mL)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮，得到(R)-3-[6-氯-2-(四氫吡喃-4-羰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基]嗎啉-4-羧酸叔丁酯(105 mg)，棕色固體 。ES-API: [M+H] +=465.1。
步驟二：將(R)-3-[6-氯-2-(四氫吡喃-4-羰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基]嗎啉-4-羧酸叔丁酯 (105 mg, 226 umol)溶於二氧六環(1 mL)，加入3-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶 (70 mg, 271 umol)，加入水(0.2 mL)和碳酸鉀(62 mg, 452 umol)，加入氯(2-二環己基膦-2′,6′-二甲氧基-1,1′-聯苯基)[2-(2′-氨基-1,1′-聯苯基)]鈀(II) (163 mg, 226 umol)，氮氣保護下加熱120度攪拌12小時。反應完後，加入到冰水(2 mL)中，用乙酸乙酯(5 mL)萃取，有機相用飽和食鹽水(1 mL)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮，得到 (R)-3-(6-(3-甲基-1H-吡咯[2,3-b]吡啶-5–基)-2-(四氫吡喃-4-羰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8–基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(100 mg)，黃色的油狀物。ES-API: [M+H] += 561.3。
步驟三：將(R)-3-(6-(3-甲基-1H-吡咯[2,3-b]吡啶-5–基)-2-(四氫吡喃-4-羰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉8–基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(100 mg, 178 umol)溶於乙酸乙酯(1 mL)，加入鹽酸乙酸乙酯(4.0 M, 1.0 mL)，室溫攪拌2小時。反應完後，反應液過濾，用乙酸乙酯(1 mL)洗滌濾餅，濾餅旋乾，藉由製備HPLC(甲酸法)純化得到( R)-(6-(3-甲基-1H-吡咯[2, 3-b]吡啶-5–基)-8[嗎啉-3-基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-2(1H)–基)-四氫吡喃-4-基]甲酮 (Z375, 甲酸鹽, 29.2 mg, 收率35.6%)，黑色固體。ES-API: [M+H] += 461.1。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.45 (s, 1H), 8.22 (s, 1H), 7.75 (s, 1H), 7.57-7.53 (d, J= 18.0 Hz, 1H), 7.21 (s, 1H), 5.02-4.98 (d,J =16.8 Hz, 2H), 4.79-4.74 (d, J = 16.8 Hz, 1H), 4.47-4.45 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 4.05-3.98 (m, 4H), 3.90-3.89 (d, J=4.0 Hz, 2H), 3.85-3.78 (m, 1H), 3.73-3.67 (m, 1H), 3.59-3.56 (d, J = 11.6 Hz, 2H), 3.35 (s, 2H), 3.13-3.09 (m, 2H), 2.38(s, 3H), 1.86-1.80(m, 2H), 1.70-1.67(d, J=12.0 Hz, 2H).
實施例186 化合物Z372的合成
步驟一：將 ( R)-3-(6-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啡啉-4-羧酸叔丁酯(5a, 90 mg, 255 umol)和2-羥基-2-甲基丙酸(27 mg, 255 umol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(1 mL)，然後加入N,N-二異丙基乙胺(66 mg, 510 umol, 89 uL)和2-(7-偶氮苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯 (97 mg, 255 umol)，室溫攪拌2小時。反應完後，加入到水(1 mL)中，用乙酸乙酯(1 mLX3)萃取，有機相用飽和食鹽水(1 mL)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮，得到 (R)-3-[6-氯-2-(2-羥基-2-甲基丙醯)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基]嗎啡啉-4-羧酸叔丁酯(100 mg)，棕色的油狀物。ES-API: [M+H] += 439.2。
步驟二：將 (R)-3-[6-氯-2-(2-羥基-2-甲基丙醯)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基]嗎啡啉-4-羧酸叔丁酯(100 mg, 228 umol)和3-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼酸-2-基)-1 H-吡咯并[2,3-b]吡啶(71 mg, 273 umol)溶於二氧六環(1 mL)和水(0.2 mL)中，加入碳酸鉀(63 mg, 456 umol)，氮氣條件下加入氯化(2-二環己基膦-2′,6′-二甲氧基-1,1′-聯苯基)[2-(2′-氨基-1,1′-聯苯基)]鈀(II) (16 mg, 23 umol)，120 ℃攪拌3小時。反應完後，加入到水(1 mL)中，用乙酸乙酯(1 mLx3)萃取，有機相用飽和食鹽水(1 mL)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮，得到 ( R)-3-[2-(2-羥基-2-甲基丙醯)-6-(3-甲基-1 H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基]嗎啡啉-4-羧酸叔丁酯(110 mg, 粗品)，棕色的油狀物。ES-API: [M+H] += 535.3。
步驟三：將 ( R)-3-[2-(2-羥基-2-甲基丙醯)-6-(3-甲基-1 H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基]嗎啡啉-4-羧酸叔丁酯(110 mg, 206 umol)溶於乙酸乙酯(2 mL)中，然後加入鹽酸乙酸乙酯溶液(4 M, 1 mL)，室溫攪拌4小時。反應完後，反應液過濾，用製備HPLC(甲酸法)純化得到( R)-2-羥基-2-甲基-1-[6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-8-[嗎啡-3-基]-3,4-二氫異喹啉-2(1 H)-基]丙-1-酮 (Z372，甲酸鹽, 21.64 mg, 收率24.1%)，白色固體。ES-API: [M+H] += 435.1。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ = 8.45 (d, J= 1.9 Hz, 1H), 8.39 (br s, 1H), 8.22 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 7.74 (d, J= 1.5 Hz, 1H), 7.55 (s, 1H), 7.20 (d, J= 0.9 Hz, 1H), 5.05-4.93 (m, 1H), 4.80 (br d, J= 5.3 Hz, 1H), 4.51-4.41 (m, 1H), 4.36-4.16 (m, 1H), 4.05 (br dd, J= 2.8, 12.3 Hz, 2H), 3.83 (br d, J= 1.6 Hz, 2H), 3.50-3.32 (m, 2H), 3.30-3.23 (m, 1H), 3.07 (br s, 2H), 2.38 (d, J= 1.0 Hz, 3H), 1.56-1.43 (m, 6H).
實施例187 化合物Z382的合成
步驟一：將乳酸(25 mg, 0.28 mmol)和(S)-2-(6-氯異吲哚啉-4-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯溶於無水二氯甲烷(1.0 mL)，加入N,N-二異丙基乙胺和2-(7-偶氮苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯(306 mg, 0.81 mmol)，室溫攪拌12小時。反應完後，加入到冰水(5.0 mL)中，用乙酸乙酯(5.0 mLX3)萃取，有機相用無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮，得到外消旋-(2R)-2-(6-氯-2-(2-羥基丙醯基)異吲哚啉-4-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯 (70 mg)，黃色的油狀物。ES-API: [M+H] += 395.1。
步驟二：將外消旋-(2R)-2-(6-氯-2-(2-羥基丙醯基)異吲哚啉-4-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯 (70 mg, 0.18 mmol)溶於二氧六環(1.0 mL)，加入3-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(69 mg, 0.27mmol)，加入水(1.0 mL)和碳酸鉀(73.5 mg, 0.68mmol)，最後加入氯化(2-二環己基膦-2′,6′-二甲氧基-1,1′-聯苯基)[2-(2′-氨基-1,1′-聯苯基)]鈀II)(13 mg,0.018mmol)，加熱120 ℃攪拌12小時。待反應完後，加入到冰水(5.0 mL)中，之後用乙酸乙酯(5.0 mLx3)萃取，有機相用無水硫酸鈉乾燥，顧慮濃縮，得到外消旋-(2R)-2-(2-(2-羥基丙醯基)-6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)異吲哚啉-4-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯 (80 mg)，黃色的油狀物。ES-API: [M+H] += 491.2。
步驟三：將外消旋-(2R)-2-(2-(2-羥基丙醯基)-6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)異吲哚啉-4-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(80 mg)溶於乙酸乙酯(1.0 mL)，加入鹽酸乙酸乙酯(4.0 M, 1.0 mL)，室溫攪拌12小時。反應完後，反應液濃縮，用製備HPLC (甲酸法)純化得到外消旋-2-羥基-1-(6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-4-((R)-吡咯烷-2-基)異吲哚啉-2-基)丙-1-酮 (Z382, 甲酸鹽, 1.38 mg, 收率2.2%)。ES-API: [M+H] += 391.2.
實施例188 化合物Z443的合成
步驟一：向 ( S)- 2-(6-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(70 mg, 0.21 mmol) 的二氯甲烷(2 mL)溶液中加入5-甲基吡嗪-2-羧酸(57.41 mg, 0.42 mmol)，1-丙基磷酸酐(394.3 mg, 0.62 mmol, 50%的乙酸乙酯溶液)，三乙胺(63.08 mg, 0.62 mmol)，混合液在25°C下攪拌2小時。LCMS監測反應完全，加水淬滅反應，二氯甲烷萃取，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮，得到粗品經矽膠柱層析純化(0-50%乙酸乙酯/石油醚，乙酸乙酯/石油醚=1/1，Rf=0.3)得到產物( S)-2-(6-氯-2-(5-甲基吡嗪-2-羰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(50 mg, 收率52.65%) 。ES-API:[M+H-100] += 357.2。
步驟二：向化合物( S)-2-(6-氯-2-(5-甲基吡嗪-2-羰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(50 mg, 0.11 mmol) 的二氧六環/水(2 mL/0.4 mL)溶液中加入3-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二噁硼烷-2-基)-1 H-吡咯[2,3- b]吡啶(33.89 mg, 0.13 mmol)，氯(2-二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II) (7.87 mg, 0.011 mmol),碳酸鉀(45.30 mg, 0.33 mmol)，在氮氣保護下將混合物加熱到110 ℃攪拌反應2小時。藉由LCMS監測反應完全，用乙酸乙酯/水處理，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮，得到粗品經矽膠柱層析純化(0-10%甲醇/二氯甲烷，二氯甲烷/甲醇=10/1，Rf=0.6)得到產物( S)- 2-(6-(3-甲基-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶-5-基)-2-(5-甲基吡嗪-2-羰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(35 mg, 收率57.88%)。ES-API:[M+H] += 553.4。
步驟三：向化合物( S)- 2-(6-(3-甲基-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶-5-基)-2-(5-甲基吡嗪-2-羰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(35 mg, 0.063 mmol ) 的二氯甲烷(2 mL)溶液中加入三氟乙酸(1 mL)，常溫攪拌1小時。藉由LCMS監測反應完全，用飽和碳酸氫鈉水溶液調pH至7，用二氯甲烷/水處理，無水硫酸鈉乾燥並過濾濃縮，得到粗品經製備薄層色譜柱純化(二氯甲烷/甲醇=8/1)得到產物( S)-(6-(3-甲基-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶-5-基)-8-(吡咯烷-2-基)-3,4-二氫異喹啉-2(1 H)-基)(5-甲基吡嗪-2-基)甲酮(Z443, 15.5 mg, 產率53.38%) ，為白色固體。ES-API:[M+H] +=453.3。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 8.99 (s, 1H), 8.92-8.86 (m, 1H), 8.55-8.42 (m, 2H), 8.02-7.95 (m, 1H), 7.83-7.65 (m, 1H), 7.28-7.26 (m, 1H), 7.07 (s, 1H), 5.21-4.87 (m, 2H), 4.55-4.11 (m, 1H), 4.03-3.78 (m, 2H), 3.44-2.98 (m, 4H), 2.67-2.61 (m, 3H), 2.40-2.30 (m, 4H), 2.17-1.93 (m, 3H).
實施例189 化合物Z404的合成
步驟一：在氮氣保護下，向懸浮在無水二氯甲烷(100 mL)中的三氯化鋁 (6.77g, 50.77mmol)的攪拌溶液中加入5-溴-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶(2 g, 10.15 mmol)，反應溶液在25℃攪拌1小時，然後滴加乙醯氯(3.98 g, 50.75 mmol)並將反應液攪拌5小時。將反應在冰浴中冷卻至0°C並加甲醇小心淬滅直到溶液變得澄清。將反應液濃縮，加入水，滴加1N 氫氧化鈉調 pH 至 4，將產物萃取到乙酸乙酯中，有機層用無水硫酸鈉乾燥，真空濃縮，得到產物 1-(5-溴-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶-3-基)乙酮(1.80 g, 粗品)，為黃色固體ES-API:[M+H] +=239.0。
步驟二：向 1-(5-溴-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶-3-基)乙酮 (7 g, 29.28 mmol)的四氫呋喃 (60 mL) 溶液中，冰浴冷卻下加入鈉氫(1.29 g, 32.21 mmol , 60% 純度)，1 小時後，滴加對甲苯磺醯氯 (6.70 g, 35.14 mmol)的四氫呋喃 (4 mL)溶液，將混合物在25°C攪拌32小時。藉由LCMS監測反應完全，混合物用乙酸乙酯和水萃取，無數硫酸鈉乾燥並過濾濃縮，殘餘物用石油醚/乙酸乙酯(5/1)打漿，得到1-[5-溴-1-(對甲苯磺醯基)吡咯并[2,3- b]吡啶-3-基]乙酮(9.00 g, 收率78.16%)，為黃色固體。ES-API:[M+H] +=393.1, 395.1。
步驟三：向 1-[5-溴-1-(對甲苯磺醯基)吡咯并[2,3- b]吡啶-3-基]乙酮 (900 mg, 2.29 mmol) 的四氫呋喃 (30 mL) 溶液中，冰浴下滴加甲基溴化鎂 (1M, 11.44 mmol, 11.44 mL)，將所得混合物在0℃攪拌2小時。將混合物倒入冰水中並用乙酸乙酯( 10 mLX3)萃取。合併的有機層用鹽水洗滌，用硫酸鈉乾燥，過濾並真空濃縮至乾。將所得殘餘物藉由矽膠柱層析純化(0-30%乙酸乙酯在石油醚中)，得到產物 2-[5-溴-1-(對甲苯磺醯基)吡咯并[2,3- b]吡啶-3-基]丙-2-醇(560.00 mg, 產率59.78%)，為黃色固體。ES-API:[M+H] +=409.1, 411.0。
步驟四：2-[5-溴-1-(對甲苯磺醯基)吡咯并[2,3- b]吡啶-3-基]丙-2-醇(500 mg, 1.22 mmol) 溶於無水二氯甲烷 (10 mL) 中，在 0°C 下滴加三乙基矽氫 (354.27 mg, 3.05 mmol)和三氟乙酸 (696.44 mg, 6.11mmol)。將所得混合物升溫至25°C並攪拌16小時。將混合物倒入冰水中並用飽和碳酸氫鈉水溶液調pH至4-5，用二氯甲烷(3 x 10 mL)萃取。合併的有機層用鹽水洗滌，用無水硫酸鈉乾燥，過濾並真空濃縮至乾。將所得殘餘物藉由矽膠柱層析純化(0-30%乙酸乙酯在石油醚中)，得到產物 5-溴-3-異丙基-1-(對甲苯磺醯基)吡咯并[2,3- b]吡啶(380.00 mg, 產率79.09 %)，為白色固體。ES-API:[M+H] +=393.1, 395.0。
步驟五：向5-溴-3-異丙基-1-(對甲苯磺醯基)吡咯并[2,3- b]吡啶(380 mg, 0.97 mmol)的甲醇溶液中加入6N 氫氧化鈉(7.5 ml)，加熱回流攪拌2小時。反應液濃縮並將殘餘物倒入冰水中，加入檸檬酸的飽和溶液將混合物的pH值調至5，過濾，濾餅溶解在乙酸乙酯中，無水硫酸鈉乾燥，過濾並真空濃縮至乾，得到5-溴-3-異丙基-1H-吡咯并[2,3- b]吡啶(225.00 mg, 產率97.39%)，為黃色固體。ES-API:[M+H] +=239.0, 241.0。
步驟六：向5-溴-3-異丙基-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶 (120 mg, 501.86 μmol)的乙腈 (1 mL)溶液中加入雙(頻哪醇)二硼酸酯(165.67 mg, 652.42 μmol)，1,1-二(二苯膦基)二茂鐵二氯化鈀 (36.42 mg, 50.19 μmol)，醋酸鉀 (246.26 mg, 2.51 mmol)，混合物在氮氣氛下加熱至90℃並攪拌過夜。反應液過濾，濾餅用乙酸乙酯洗滌，濾液真空濃縮至乾，所得殘餘物藉由矽膠柱層析 (5%至30%乙酸乙酯的石油醚溶液)純化，得到(3-異丙基-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶-5-基)硼酸(60.00 mg, 產率41.78%)，為黃色固體。ES-API:[M+H] += 205.1。
步驟七：向 ( S)- 2-(6-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(70 mg, 0.21 mmol) 的二氯甲烷(2 mL)溶液中加入2-甲氧基乙酸(37.44 mg, 0.42 mmol)，1-丙基磷酸酐(389.3 mg, 0.62 mmol, 50%的乙酸乙酯溶液)，三乙胺(63.08 mg, 0.62 mmol)，混合液在25°C下攪拌2小時。LCMS監測反應完全，加水淬滅反應，二氯甲烷萃取，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮，得到粗品藉由矽膠柱層析純化(0-50%乙酸乙酯/石油醚，乙酸乙酯/石油醚=1/1，Rf=0.3)得到產物( S)-2-(6-氯-2-(2-甲氧基乙醯基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(60 mg, 收率 70.61%) 。ES-API:[M+H-100] += 309.2。
步驟八：向化合物( S)-2-(6-氯-2-(2-甲氧基乙醯基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(60 mg, 0.15 mmol ) 的二氧六環/水(2 mL/0.4 mL)的溶液中 加入(3-異丙基-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶-5-基)硼酸(35.92 mg，0.18 mmol)，氯(2-二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II) (10.56 mg, 0.015 mmol)，碳酸鉀(60.75 mg, 0.45 mmol)，在氮氣保護下將混合物加熱到110 ℃攪拌反應2小時。藉由LCMS監測反應完全，用乙酸乙酯/水處理，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮，得到粗品經矽膠柱層析純化(0-10%甲醇/二氯甲烷，二氯甲烷/甲醇=10/1，Rf=0.6)得到產物( S)- 2-(6-(3-異丙基-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶-5-基)-2-(2-甲氧基乙醯基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(25 mg, 收率31.99%)。ES-API:[M+H] += 533.4。
步驟九：向化合物( S)- 2-(6-(3-異丙基-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶-5-基)-2-(2-甲氧基乙醯基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(20 mg, 0.05mmol ) 的二氯甲烷(2mL)溶液中加入三氟乙酸(1 mL)，常溫攪拌1小時。藉由LCMS監測反應完全，用飽和碳酸氫鈉水溶液調pH至7，用二氯甲烷/水處理，無水硫酸鈉乾燥並過濾濃縮，得到粗品經製備薄層色譜柱純化(二氯甲烷/甲醇=8/1)得到( S)-1-(6-(3-異丙基-1H-吡咯并[2,3- b]吡啶-5-基)-8-(吡咯烷-2-基)-3,4-二氫異喹啉-2(1 H) )-基)-2-甲氧基乙-1-酮(Z404, 2.4 mg, 收率11.82%) ，白色粉末。ES-API:[M+H] +=433.3。
實施例190 化合物Z387的合成
步驟一：將3-氨基吡啶(0.15 g, 1.59 mmol)溶於無水二氯甲烷(1.0 mL)，之後加入N,N-二異丙基乙胺(830 uL)，降溫至0℃後加入三光氣 (0.39 g, 1.31 mmol)，室溫攪拌2小時。待反應完後，直接加入(S)-2-(6-氯異吲哚啉-4-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(0.15 g, 0.46 mmol)，加熱至25℃攪拌12小時。反應完後，加入到冰水(5 mL)中，用乙酸乙酯(5 mLX3)萃取，有機相用無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮，得到(S)-2-(6-氯-2-(吡啶-3-基氨基甲醯基)異吲哚啉-4-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯 (0.1g)，黃色的油狀物。ES-API: [M+H] += 443.3。
步驟二：氮氣保護下，將(S)-2-(6-氯-2-(吡啶-3-基氨基甲醯基)異吲哚啉-4-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(0.1g, 0.23 mmol)溶於二氧六環(1 mL)，加入3-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(64 mg, 0.27mmol)，之後加入水(0.1 mL)和碳酸鉀(95 mg, 0.69mmol)，最後加入氯(2-二環己基膦-2′,6′-二甲氧基-1,1′-聯苯基)[2-(2′-氨基-1,1′-聯苯基)]鈀(II)(16 mg, 0.02mmol)，加熱120℃攪拌12小時。反應完後，加入到冰水(5 mL)中，用乙酸乙酯(5 mLX3)萃取，有機相用無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮，得到(S)-2-(6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-2-(吡啶-3-基氨基甲醯基)異吲哚啉-4-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯 (0.05 g)，黃色的油狀物。ES-API: [M+H] += 539.2。
步驟三：將(S)-2-(6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-2-(吡啶-3-基氨基甲醯基)異吲哚啉-4-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯 (0.05g)溶於乙酸乙酯(1 mL)，加入鹽酸乙酸乙酯(4.0 M, 1.0 mL)，室溫攪拌12小時。反應完後，濃縮，得到粗品用製備HPLC(甲酸法)純化得到(S)-6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-N-(吡啶-3-基)-4-(吡咯烷-2-基)異二氫吲哚-2-甲醯胺 (Z387, 甲酸鹽, 1.38 mg, 收率3.4%)，白色固體。ES-API: [M+H] += 439.2。
實施例191 化合物Z385的合成
步驟一：將4-硝基吡唑(5.0 g, 44.22 mmol) 和二碳酸二叔丁酯(10.62 g, 48.64 mmol)溶於四氫呋喃(35 mL)，之後加入N,N-二異丙基乙胺(8.47mL) 和4-二甲氨基吡啶(540.21 mg, 4.42mmol)，室溫攪拌12小時。反應完後，加入到冰水(50 mL)中，用乙酸乙酯(30 mLX3)萃取，有機相用無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮。粗品用石油醚(20 mL)打漿得到4-硝基-1H-吡唑-1-羧酸叔丁酯 (9.0g)，黃色的固體。ES-API: [M+H] += 214.9。
步驟二：將4-硝基-1H-吡唑-1-羧酸叔丁酯 (9.0 g, 44.22 mmol)溶於乙醇(60 mL)，之後加入濕鈀碳(0.9 g, 10%) ，加熱至30℃攪拌12小時。反應完後，反應液過濾，濾餅用乙酸乙酯(50mL)淋洗3到5次，濃縮。再用甲基叔丁基醚(20 mL)打漿得到4-氨基-1H-吡唑-1-羧酸叔丁酯 (5.0g)，黃色的固體。ES-API: [M+H +-56] = 128.0。
步驟三：將4-氨基-1H-吡唑-1-羧酸叔丁酯 (0.2 g,1.36 mmol) 和4-硝基苯酚氯甲酸酯(302.55mg, 1.50mmol)溶於無水二氯甲烷(1.0 mL)，之後加入N,N-二異丙基乙胺(1.19 mL)，室溫攪拌2小時。反應完後，反應液直接濃縮，得到4-(((4-硝基苯氧基)羰基)氨基)-1H-吡唑-1-羧酸叔丁酯(0.3 g)，黃色固體。
步驟四：將4-(((4-硝基苯氧基)羰基)氨基)-1H-吡唑-1-羧酸叔丁酯 (309.76 ug, 371.71umol)溶於N,N-二甲基乙醯胺(1.0 mL)，之後加入N,N-二異丙基乙胺(404.65 uL)，攪拌1分鐘，之後加入(S)-2-(6-氯異吲哚啉-4-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(0.15 g, 464.64 umol)，加熱至80℃攪拌12小時。反應完後，加入到冰水(5 mL)中，之後用乙酸乙酯(5 mLx3)萃取，有機相用無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮，得到(S)-4-(4-(1-(叔丁氧羰基)吡咯烷-2-基)-6-氯異二氫吲哚-2-甲醯胺基)-1H-吡唑-1-羧酸叔丁酯 (0.1g)，黃色的油狀物。ES-API: [M+H +-200] = 331.9。
步驟五：將(S)-4-(4-(1-(叔丁氧羰基)吡咯烷-2-基)-6-氯異二氫吲哚-2-甲醯胺基)-1H-吡唑-1-羧酸叔丁酯 (0.1g, 187.96 umol)溶於二氧六環(1 mL)，加入3-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-二氧硼雜環戊烷-2-基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(48.52 mg, 187.96umol)，加入水(0.1 mL)和碳酸鉀(25.98 mg, 187.96umol)，最後加入氯(2-二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II) (13.55 mg, 18.80umol)，加熱120℃攪拌12小時。待反應完後，加入到冰水(5 mL)中，之後用乙酸乙酯(5 mLX3)萃取，有機相用無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮，得到(S)-4-(4-(1-(叔丁氧基羰基)吡咯烷-2-基)-6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)異二氫吲哚-2-甲醯胺)-1H-吡唑-1-羧酸叔丁酯 (0.1 g)，黃色的油狀物。
步驟六：將(S)-4-(4-(1-(叔丁氧基羰基)吡咯烷-2-基)-6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基) 異二氫吲哚-2-甲醯胺)-1H-吡唑-1-羧酸叔丁酯 (0.1g)溶於乙酸乙酯(1 mL)，加入鹽酸乙酸乙酯(4.0 M, 1.0 mL)，室溫攪拌12小時。反應完後，反應液濃縮。得到粗品用製備HPLC(甲酸法)得到(S)-6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-N-(1 H-吡唑-4-基)-4-(吡咯烷-2-基) )異二氫吲哚-2-甲醯胺 (Z385, 甲酸鹽, 2.28g, 收率3%)，白色固體。ES-API: [M+H] += 428.2。
實施例192 化合物Z386的合成
步驟一：將2-氨基噻唑(0.1 g,1.36 mmol)和4-硝基苯酚氯甲酸酯(201 mg, 1mmol)溶於無水二氯甲烷(1.0 mL)，加入N,N-二異丙基乙胺(870 uL)，室溫攪拌2小時。反應完後，反應液直接濃縮，得到4-硝基苯基噻唑-2-基氨基甲酸酯(0.15 g)，黃色固體。
步驟二：將4-硝基苯基噻唑-2-基氨基甲酸酯(0.2 g, 0.75 mmol)溶於 N, N-二甲基乙醯胺(1.0 mL)，加入 N, N-二異丙基乙胺(240 uL)，攪拌1分鐘，之後加入(S)-2-(6-氯異吲哚啉-4-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(221 mg, 0.69 mmol)，加熱至80℃攪拌12小時。反應完後，加入到冰水(5 mL)中，之後用乙酸乙酯(5 mLX3)萃取，有機相用無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮，得到(S)-2-(6-氯-2-(噻唑-2-基氨基甲醯基)異吲哚啉-4-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(0.1g)，黃色的油狀物。ES-API: [M-200] += 449.1。
步驟三：將(S)-2-(6-氯-2-(噻唑-2-基氨基甲醯基)異吲哚啉-4-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(107 mg, 0.24 mmol)溶於二氧六環(1 mL)，加入3-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)-1 H-吡咯并[2,3-b]吡啶(74 mg, 0.29 mmol)，之後加入水(0.1 mL)和碳酸鉀(99 mg, 0.72 mmol)，最後加入氯(2-二環己基膦-2′,6′-二甲氧基-1,1′-聯苯基)[2-(2′-氨基-1,1′-聯苯基)]鈀(II)(17 mg, 0.02mmol)，加熱120℃攪拌12小時。反應完後，加入到冰水(5 mL)中，之後用乙酸乙酯(5 mLx3)萃取，有機相用無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮，得到(S)-2-(6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-2-(噻唑-2-基氨基甲醯基)異吲哚啉-4-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(0.05 g)，黃色的油狀物。ES-API: [M+H] += 545.2。
步驟四：將(S)-2-(6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-2-(噻唑-2-基氨基甲醯基)異吲哚啉-4-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(0.1g)溶於乙酸乙酯(1 mL)，加入鹽酸乙酸乙酯(4.0 M, 1.0 mL)，室溫攪拌12小時。反應完後，反應液濃縮。得到粗品用製備HPLC(碳酸氫銨法)得到(S)-6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-4-(吡咯烷-2-基)-N-(噻唑-2-基)異吲哚啉-2-甲醯胺(Z386, 8.45 mg, 收率10.3%)，白色固體。ES-API: [M+H] += 445.1.
實施例193 化合物Z439的合成
步驟一：將( S)- 2-(6-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(70 mg, 0.21 mmol)溶於二氯甲烷(2 ml)，加入5-甲基吡啶甲酸(57 mg, 0.42 mmol)，1-丙基磷酸酐(396 mg, 0.62 mmol, 50%的乙酸乙酯溶液)和三乙胺 (63 mg, 0.62 mmol) ，在室溫下反應16小時。反應完成後，加水淬滅反應，二氯甲烷萃取，飽和食鹽水洗，無水硫酸鈉乾燥，過濾旋乾，得到粗品經製備薄層色譜柱純化(石油醚/乙酸乙酯=2/1)得到產物( S)- 2-(6-氯-2-(5-甲基吡啶甲醯基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基) 吡咯烷-1-羧酸叔丁酯 (90 mg, 收率：95%)。ES-API:[M+H] += 456.2。
步驟二：將( S)- 2-(6-氯-2-(5-甲基吡啶甲醯基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(90 mg, 0.20 mmol)溶於二氧六環/水(2 mL/0.4 mL)中，加入3-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二噁硼烷-2-基)-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶(61 mg, 0.24 mmol)，氯(2-二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II)(14 mg, 0.020 mmol)和碳酸鉀(54 mg, 0.39 mmol)，加熱至100℃反應2小時。反應完成後，反應液旋乾，得到粗品經製備薄層色譜柱純化(二氯甲烷/甲醇=20/1)得到產物( S)- 2-(6-(3-甲基-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶-5-基)-2-(5-甲基吡啶甲醯基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(100 mg, 收率：92%)。ES-API:[M+1] +=552.3。
步驟三：將( S)- 2-(6-(3-甲基-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶-5-基)-2-(5-甲基吡啶甲醯基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(100 mg, 0.18 mmol)溶於二氯甲烷(2 mL)中，加入三氟乙酸(1 mL)，室溫反應2小時。反應完成後，反應液旋乾，用二氯甲烷和飽和碳酸鈉水溶液萃取，無數硫酸鈉乾燥，過濾旋乾，得到粗品經製備薄層色譜柱純化(二氯甲烷/甲醇=8/1)得到產物(S)-(6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-8-(吡咯烷-2-基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)(5-甲基吡啶-2-基)甲酮(Z439, 31.4 mg, 收率：38%)。ES-API:[M+1] +=452.2。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 9.69 (s, 1H), 8.47 (d, J= 14.4 Hz, 2H), 7.98 (d, J= 14.7 Hz, 1H), 7.83-7.60 (m, 3H), 7.25-7.2 (m, 1H), 7.08 (s, 1H), 5.20-4.84 (m, 2H), 4.57-3.75 (m, 3H), 3.42-2.99 (m, 4H), 2.65-2.57 (m, 1H), 2.41-2.33 (m, 6H), 2.05-1.73 (m, 3H).
實施例194 化合物Z440的合成
步驟一：0℃，氮氣保護下，向4,4-二氟呱啶鹽酸鹽 (0.2 g, 1.65 mmol)的無水二氯甲烷(5 mL)溶液中加入三乙胺 (0.5 g, 4.95 mmol) 和(4-硝基苯基)碳醯氯(0.49 g, 2.48 mmol)。混合物升溫至20℃並攪拌3小時。LCMS監測反應完全，反應液濃縮，得到粗品經矽膠柱層析純化 (石油醚/乙酸乙酯=10:90)得到4-硝基苯基-4,4-二氟呱啶-1-羧酸酯(300.00 mg, 產率63.48%)，為黃色固體。ES-API:[M+1] +=287.1。
步驟二：向( S)-2-(6-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯 (70 mg, 0.21 mmol) 的N,N-二甲基乙醯胺 (1 mL)溶液中加入4-硝基苯基-4,4-二氟呱啶-1-羧酸酯(71.38 mg, 0.25 mmol)和碳酸鉀(86.16 mg, 0.62 mmol)，混合物升溫至150℃並攪拌3小時。LCMS監測反應完全，反應用水稀釋並用乙酸乙酯萃取。合併的有機相飽和食鹽水洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮，得到粗品經製備薄層色譜柱純化(乙酸乙酯:石油醚=1:1)，得到( S)-2-[6-氯-2-(4,4-二氟呱啶-1-羰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基] 吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(77.00 mg , 產率76.56%)，為黃色油狀物。ES-API:[M+1-100] +=384.2。
步驟三：氮氣保護下，向( S)-2-[6-氯-2-(4,4-二氟呱啶-1-羰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基] 吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(77.00 mg , 0.16 mmol)的二氧六環/水(4 mL/0.8 mL)溶液中，加入3-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二噁硼烷-2-基)-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶(49.28 mg, 0.19 mmol)，氯(2-二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II) (11.46 mg, 15.91 μmol)和碳酸鉀(65.87 mg, 0.48 mmol)，加熱至100℃反應1小時。反應完成後，反應液旋乾，得到粗品經製備薄層色譜柱純化(二氯甲烷/甲醇=10/1)得到產物( S)-2-[2-(4,4-二氟呱啶-1-羰基)-6-(3-甲基-1 H-吡咯并[2,3- b] 吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基]吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(70.00 mg, 產率75.90%)，為黃色油狀物。ES-API:[M+1] +=580.4。
步驟四：將( S)-2-[2-(4,4-二氟呱啶-1-羰基)-6-(3-甲基-1 H-吡咯烷[2,3- b] 吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基] 吡咯烷-1-羧酸叔丁酯 (70 mg, 0.12 mmol) 溶於二氯甲烷(2.0 mL)中，加入三氟乙酸(2.0 mL)，室溫反應1小時。反應完成後，混合物用飽和碳酸氫鈉水溶液淬滅，用二氯甲烷萃取。合併的有機層用飽和氯化鈉洗滌，經無水硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮，得到粗品經製備薄層色譜柱純化(二氯甲烷/甲醇=10/1)得到產物( S)-(4,4-二氟-1-呱啶基)-[6-(3-甲基-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶-5-基)-8-[吡咯烷-2-基]-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]甲酮(Z440, 17.90 mg, 產率30.91%)，為白色固體。ES-API:[M+1] +=480.3。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 9.63 (s, 1H), 8.48 (d, J= 2.4 Hz, 1H), 8.02 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 7.71 (d, J= 1.6 Hz, 1H), 7.28 (s, 1H), 7.11 (s, 1H), 4.64 (d, J= 16.4 Hz, 1H), 4.50 (d, J= 16.4 Hz, 1H), 4.34 (t, J= 6.0 Hz, 1H), 3.57-3.50 (m, 2H), 3.46-3.39 (m, 4H), 3.36-3.25 (m, 1H), 3.13-3.05 (m, 1H), 3.04-2.99 (m, 2H), 2.35 (s, 3H), 2.31-2.24 (m, 1H), 2.08-1.95 (m, 5H), 1.94-1.85 (m, 1H), 1.81-1.65 (m, 1H).
實施例195 化合物Z414的合成
步驟一：2-肼基-5-溴吡啶(5.61 g, 30.00 mmol)溶於乙醇(100 mL)，在室溫下加入2-丁酮(2.16 g, 30.00 mmol)，回流攪拌反應2小時。LC-MS檢測反應完全，將上述混合液旋乾加入多聚磷酸(50.00 g)，170 oC油浴反應1小時。LC-MS檢測反應完全，冷卻至30 oC，加入水(100 mL)，將混合液降溫至0 oC，用4 mol/L氫氧化鈉溶液調pH至7-8，析出固體，過濾得濾餅，再用冰水(100 mL)和混合溶液(150 mL)(甲醇:水=1：5)沖洗，風乾，用混合溶液萃取(二氯甲烷：甲醇 =10：1)(150 mL×2)，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮得到產物5-溴-2,3-二甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(4.21 g, 收率：62%)，白色固體。ES-API: [M+H] +=225.2。
步驟二：5-溴-2,3-二甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(300.0 mg, 1.33 mmol)溶於二氧六環(4 mL)，在室溫下加入聯硼酸頻那醇酯(372.5 mg, 1.47 mmol)，[1,1'-雙(二苯基膦)二茂鐵]二氯化鈀(93.7 mg, 0.13 mmol)，醋酸鉀(260.7 mg, 2.66 mmol)，置換氮氣保護，油浴100 oC攪拌反應16小時。LC-MS檢測反應完全，加入水(10 mL)，用混合溶液萃取(二氯甲烷：甲醇 =10：1)(50 mL×2)，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮並藉由矽膠柱層析純化(二氯甲烷：甲醇= 3%-6%)得到產物(2,3-二甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)硼酸(210.3 mg , 收率：83%)。ES-API: [M+H] +=191.2。
步驟三：( S)-2-(6-氯-2-(( S)-3,3,3-三氟-2-羥基-2-甲基丙醯基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(100 mg, 0.21 mmol)溶於二氧六環(2 mL)和水(0.5 mL)，在室溫下加入(2,3-二甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)硼酸(47.9 mg, 0.25 mmol)，氯(2-二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II)(14.4 mg, 0.02 mmol)，碳酸鉀(57.9 mg, 0.42 mmol)，氮氣保護下，微波110 oC攪拌反應2小時。反應液加入混合溶液(二氯甲烷：甲醇 =10：1)(10 mL)萃取，依次加水(10 mL)，飽和食鹽水(10 mL)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮並藉由矽膠柱層析純化(二氯甲烷：甲醇= 3%-7%)得到產物 ( S)-2-(6-(2,3-二甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-2-(( S)-3,3,3-三氟-2-羥基-2-甲基丙醯基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(112.1 mg, 收率：91%)。ES-API: [M+H] += 587.2。
步驟四：( S)-2-(6-(2,3-二甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-2-(( S)-3,3,3-三氟-2-羥基-2-甲基丙醯基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(112.1 mg, 0.19 mmol)溶於二氯甲烷(4.0 mL)，加入三氟乙酸(2.0 mL)，在室溫下反應2小時。反應液濃縮，加入7.0M氨甲醇溶液(5.0 mL)，溶劑旋乾，得到粗品用製備HPLC純化(鹽酸)得到目標產物( S)-1-(6-(2,3-二甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-8-(( S)-吡咯烷-2-基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)-3,3,3-三氟-2-羥基-2-甲基丙-1-酮(Z414, 45.3 mg, 收率：49%, 鹽酸鹽)，白色固體。ES-API: [M+H] +=487.2。 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ11.97 (s, 1H), 10.00–9.70 (m, 1H), 9.60 –9.20 (m, 1H), 8.68 (s, 1H), 8.57 (s, 1H), 8.03 (s, 1H), 7.68(s, 1H), 7.50–6.90(m, 1H), 5.02–4.80 (m, 1H), 4.79–4.68 (m, 2H), 4.24–4.14(m, 2H), 3.58-3.48 (m, 1H)，3.42-3.28 (m, 1H)，3.02 (s, 2H), 2.47-2.41 (m, 1H), 2.39 (s, 3H), 2.27 (s, 3H), 2.21–1.97 (m, 3H), 1.61 (s, 3H).
實施例196 化合物Z441的合成
步驟一：向 ( S)- 2-(6-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(70 mg, 0.21 mmol) 的二氯甲烷(2 mL)溶液中加入6-甲基煙酸(56.99 mg, 0.42 mmol)，1-丙基磷酸酐(394.3 mg, 0.62 mmol, 50%的乙酸乙酯溶液)，三乙胺(63.08 mg, 0.62 mmol)，混合液在25°C下攪拌2小時。LCMS監測反應完全，加水淬滅，二氯甲烷萃取，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮, 得到粗品經矽膠柱層析純化(0-50%乙酸乙酯/石油醚，乙酸乙酯/石油醚=1/1，Rf=0.3)得到產物( S)-2-(6-氯-2-(6-甲基煙醯基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(65 mg, 收率68.60%) 。ES-API:[M+H] += 456.3。
步驟二：向化合物( S)-2-(6-氯-2-(6-甲基煙醯基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(65 mg, 0.14 mmol ) 的二氧六環/水(2 mL/0.4 mL)的溶液中 加入3-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二噁硼烷-2-基)-1 H-吡咯[2,3- b]吡啶(44.15 mg, 0.17 mmol)，氯(2-二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II) (10.26 mg, 0.014 mmol)，碳酸鉀(59.02 mg, 0.43 mmol)，在氮氣保護下，混合物加熱到110℃攪拌反應2小時。藉由LCMS監測反應完全，用乙酸乙酯/水處理，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮，得到粗品經矽膠柱層析純化(0-10%甲醇/二氯甲烷，二氯甲烷/甲醇=10/1，Rf=0.6)得到產物( S)- 2-(6-(3-甲基-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶-5-基)-2-(6-甲基煙醯基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(60 mg, 收率76.29%)。ES-API:[M+H] += 552.4。
步驟三：向化合物( S)- 2-(6-(3-甲基-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶-5-基)-2-(6-甲基煙醯基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(60 mg, 0.06 mmol)的二氯甲烷(2 mL)溶液中加入三氟乙酸(1 mL)，常溫攪拌1小時。藉由LCMS監測反應完全，用飽和碳酸氫鈉水溶液調pH至7，用二氯甲烷/水處理，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮，得到粗品經製備薄層色譜柱純化(二氯甲烷/甲醇=8/1)得到產物(S)-(6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-8-(吡咯烷-2-基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)(6-甲基吡啶-3-基)甲酮 (Z441, 15.5 mg, 產率31.56%)，為白色固體。ES-API:[M+H] +=452.3。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3)δ 9.34 (s, 1H), 8.63 (d, J= 1.8 Hz, 1H), 8.49 (s, 1H), 8.02 (s, 1H), 7.88-7.61 (m, 2H),7.31-7.26 (m, 1H), 7.24-7.21 (m, 1H), 7.10 (s, 1H), 5.14-4.73 (m, 2H), 4.54-3.60 (m, 3H), 3.42-2.82 (m, 4H),2.62 (s, 3H), 2.35 (s, 3H), 2.18-1.98 (m, 4H).
實施例197 化合物Z442的合成
步驟一：向( S)- 2-(6-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(50 mg, 0.18 mmol)的二氯甲烷(2 mL)溶液中加入四氫-2 H-吡喃-4-甲醛(18.64 mg, 0.16 mmol)和三乙醯氧基硼氫化鈉(29 mg, 0.24 mmol)，混合液在25°C下攪拌2小時。LCMS監測反應完全，加水淬滅反應，二氯甲烷萃取，無水硫酸鈉乾燥，顧慮濃縮，得到粗品經矽膠柱層析純化(流動相0-50%乙酸乙酯/石油醚，乙酸乙酯/石油醚=1/1，Rf=0.4)得到產物( S)-2-(6-氯-2-((四氫-2 H-吡喃-4-基)甲基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(50 mg, 收率82%)。ES-API:[M+H] += 435.3。
步驟二：向化合物( S)-2-(6-氯-2-((四氫-2 H-吡喃-4-基)甲基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(50 mg, 0.16 mmol)的二氧六環/水(2 mL/0.4 mL)的溶液中 加入3-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二噁硼烷-2-基)-1 H-吡咯[2,3- b]吡啶(35.6 mg, 0.14 mmol)，氯(2-二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II)(8.27 mg, 0.011 mmol)，碳酸鉀(47.57 mg, 0.344 mmol)，在氮氣保護下混合物加熱到110 ℃攪拌反應2小時。藉由LCMS監測反應完全，用乙酸乙酯/水萃取，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮，得到粗品經矽膠柱層析純化純化(流動相0-10%甲醇/二氯甲烷，二氯甲烷/甲醇=10/1，Rf=0.6)得到產物( S)- 2-(6-(3-甲基-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶-5-基)-2-((四氫-2 H-吡喃-4-基)甲基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(65 mg, 收率100%).ES-API:[M+H] +=531.3。
步驟三：向化合物( S)- 2-(6-(3-甲基-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶-5-基)-2-((四氫-2 H-吡喃-4-基)甲基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(50 mg, 0.09 mmol)的二氯甲烷(2 mL)溶液中加入三氟乙酸(1 mL)，常溫攪拌1小時。藉由LCMS監測反應完全，用飽和碳酸氫鈉水溶液調pH至7，用二氯甲烷/水萃取，無水硫酸鈉乾燥並過濾濃縮，得到粗品藉由製備薄層色譜柱純化(二氯甲烷/甲醇=8/1)得到( S)-6-(3-甲基-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶-5-基)-8-(吡咯烷-2-基)-2-((四氫-2 H-吡喃-4-基)甲基)-1,2,3,4-四氫異喹啉(Z442, 10.5 mg, 收率 25.88%)，黃色粉末。ES-API:[M+H] +=431.3。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 9.47 (s, 1H), 8.42 (s, 1H), 7.98 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 7.63 (s, 1H), 7.21 (s, 1H),7.08 (s, 1H), 4.37 (t, J= 5.3 Hz, 1H), 4.02-3.95 (m, 2H), 3.79 (d, J= 15.2 Hz, 1H), 3.62 (d, J= 15.1 Hz, 1H), 3.47-3.38 (m, 2H), 3.38-3.28 (m, 1H), 3.19-3.09 (m, 1H),3.00-2.93 (m, 2H), 2.73-2.63 (m, 2H), 2.43 (d, J= 6.4 Hz, 2H), 2.34-2.31 (m, 3H), 2.28-2.21 (m, 1H), 2.05-1.88 (m, 3H), 1.78-1.69 (m, 3H), 1.47-1.11 (m, 2H).
實施例198 化合物Z433的合成
步驟一：將5-溴-3-異丙基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(94 mg, 0.4 mmol)，聯硼酸頻那醇酯(200 mg, 0.8 mmol)，乙酸鉀(120 mg, 1.2 mmol)溶於1，4-二氧六環中(3 mL)，加入[1,1'-雙(二苯基膦)二茂鐵]二氯化鈀(20 mg)，氮氣保護110℃反應2小時。減壓濃縮，得到粗品藉由矽膠柱層析(石油醚/乙酸乙酯=50%-60%)純化，得到3-異丙基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(80 mg, 收率 70%)。ES-API: [M+H] +=287.2。
步驟二：氮氣保護下，製備例3獲得的( R)-3-(2-乙醯基-6-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(70 mg, 0.17 mmol)，3-異丙基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(80 mg, 0.28 mmol)，氯(2-二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II)(13 mg, 0.02 mmol)和碳酸鉀(74 mg, 0.54 mmol)的1,4-二氧六環(2 mL)和水(0.4 mL)混合物在120℃攪拌2小時。反應結束後，向反應液加入乙酸乙酯(20 mL)，並依次用飽和食鹽水(10 mL)和水(10 mL)洗滌。有機相用無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮並用快速矽膠柱(0-10%甲醇/二氯甲烷)純化，得到無色油狀物 (R)-3-(2-乙醯基-6-(3-異丙基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(70 mg, 收率76%)。ES-API: [M+H] += 519.2.
步驟三：( R)-3-(2-乙醯基-6-(3-異丙基-1 H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)-嗎啉-4-羧酸叔丁酯(70 mg, 0.14 mmol)溶於乙醇(3.5 mL)在室溫下加入5.0 mol/L氫氧化鈉(2 mL)溶液，封管85°C攪拌反應6小時。LC-MS檢測反應完全，反應液加入二氯甲烷：甲醇混合溶液(10：1, 10 mL)萃取，依次加水(10 mL)，飽和食鹽水(10 mL)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮，得到粗品經矽膠柱層析純化(二氯甲烷：含5‰氨的甲醇= 3%-5%)得到產物 ( R)-3-(6-(3-異丙基-1 H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)-嗎啉-4-羧酸叔丁酯(55.3 mg, 收率：83%)。ES-API: [M+H] += 477.2。
步驟四：1-羥基環丙烷-1-羧酸(11.9 mg, 0.11 mmol)溶於二氯甲烷(1 mL)在室溫下加入1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽(21.1 mg, 0.11 mmol)，1-羥基苯并三唑(14.9 mg, 0.11 mmol)，常溫下攪拌3分鐘後，再加入 ( R)-3-(6-(3-異丙基-1 H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)-嗎啉-4-羧酸叔丁酯(55.3 mg, 0.11 mol)，常溫攪拌反應2小時。LC-MS檢測反應完全，加入水(5 mL)，用二氯甲烷：甲醇混合溶液萃取(10：1, 10 mL×2)，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮並矽膠柱層析純化(二氯甲烷：甲醇= 3%-6%)得到產物 ( R)-3-(2-(1-羥基環丙烷-1-羰基)-6-(3-異丙基-1 H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-1,2, 3,4-四氫異喹啉-8-基-嗎啉-4-羧酸叔丁酯(43.2 mg , 收率：70%)。ES-API: [M+H] +=561.2。
步驟五：( R)-3-(2-(1-羥基環丙烷-1-羰基)-6-(3-異丙基-1 H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-1,2, 3,4-四氫異喹啉-8-基-嗎啉-4-羧酸叔丁酯(43.2 mg , 0.08 mmol)溶於二氯甲烷(4.0 mL)，加入三氟乙酸(2.0 mL)，反應在室溫下反應2小時。反應液濃縮，加入7.0M氨甲醇溶液(5.0 mL)，溶劑旋乾，得到粗品用製備HPLC純化(氨水)得到 ( R)-(1-羥基環丙基)(6-(3-異丙基-1 H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-8-(嗎啉-3-基)-3,4-二氫異喹啉-2(1 H)-基)甲酮(Z433, 15.6 mg, 收率：44%)，白色固體。ES-API: [M+H] +=461.2。 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 11.37 (s, 1H), 8.44 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 8.13 (s, 1H), 7.77 (s, 1H), 7.44 (s, 1H), 7.24 (s, 1H), 6.43 (s, 1H), 4.93 – 4.64 (m, 2H), 3.98 (d, J= 8.4 Hz, 2H), 3.78 (d, J= 10.0 Hz, 2H), 3.57 – 3.49 (m, 1H), 3.33 – 3.29(m, 1H), 3.28 – 3.16 (m, 2H), 3.06 – 2.88 (m, 4H), 1.33 (d, J= 6.8 Hz, 6H), 1.01 – 0.91(m, 2H), 0.85 – 0.78 (m, 2H).
實施例199 化合物Z424-1的合成
步驟一：將N,N-二異丙基乙胺(476 mg, 3.68 mmol)和2-(7-偶氮苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯(210 mg, 0.55 mmol)依次加入到(R)-3-(6-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(5a, 130 mg, 0.37 mmol)和甲氧基乙酸(66 mg, 0.73 mmol)的N,N-二甲基甲醯胺(1 mL)溶液中，室溫攪拌2小時。反應結束後，用乙酸乙酯(20 mL)稀釋，並用飽和食鹽水(20 mL)洗滌。有機相用無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮並用快速矽膠柱(0-80%四氫呋喃/石油醚)純化得到油狀物(R)-3-(6-氯-2-(2-甲氧基乙醯基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(130 mg, 收率83%)。ES-API: [M+H] += 425.1。
步驟二：氮氣保護下，(R)-3-(6-氯-2-(2-甲氧基乙醯基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(80 mg, 0.19 mmol)，聯硼酸頻哪醇酯(96 mg, 0.38 mmol)，氯(2-二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II)(14 mg, 0.02 mmol)和醋酸鉀(55 mg, 0.57 mmol)的1,4-二氧六環(2 mL)混合物在110℃攪拌2小時。反應結束後，反應液過濾濃縮並用快速矽膠柱(0-100%四氫呋喃/石油醚)純化，得到無色油狀物(R)-3-(2-(2-甲氧基乙醯基)-6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(70 mg, 收率72%)。ES-API: [M+H] += 517.3.
步驟三：氮氣保護下，(R)-3-(2-(2-甲氧基乙醯基)-6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(70 mg, 0.14 mmol)，5-溴-3-異丙基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(32 mg, 0.14 mmol)，氯(2-二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II)(10 mg, 0.01 mmol)和碳酸鉀(56 mg, 0.41 mmol)的1,4-二氧六環(2 mL)和水(0.4 mL)混合物在110℃攪拌2小時。反應結束後，反應液溶於乙酸乙酯(20 mL)，並依次用飽和食鹽水(10 mL)和水(10 mL)洗滌。有機相用無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮並用快速矽膠柱(0-10%甲醇/二氯甲烷)純化，得到無色油狀物(R)-3-(6-(3-異丙基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-2-(2-甲氧基乙醯基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(55 mg, 收率74%)。ES-API: [M+H] += 549.3.
步驟四：冰浴條件下，將三氟乙酸(0.5 mL)滴加到(R)-3-(6-(3-異丙基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-2-(2-甲氧基乙醯基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(20 mg, 34 μmol)的二氯甲烷(1 mL)溶液中，室溫攪拌1小時。反應液濃縮，用7M胺甲醇(5 mL)中和，隨後濃縮並用製備HPLC(碳酸氫胺)純化，得到白色固體(R)-1-(6-(3-異丙基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-8-(嗎啉-3-基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H))-基)-2-甲氧基乙烷-1-酮(Z424-1, 27.32 mg，純度100%，收率61%)。ES-API: [M+H] += 449.3。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6 ) δ 11.42 (s, 1H), 8.62 (d, J= 1.6 Hz, 1H), 8.37 (s, 1H), 8.21-8.11 (m, 1H), 7.67 (s, 1H), 7.25 (d, J= 1.6 Hz, 1H), 5.02-4.83 (m, 1H), 4.74-4.53 (m, 2H), 4.41-4.26 (m, 1H), 4.23 (s, 1H), 4.11-3.98 (m, 3H), 3.97-3.67 (m, 2H), 3.67-3.45 (m, 3H), 3.34 (s, 3H), 3.27-3.18 (m, 1H), 3.06-2.85 (m, 2H), 1.35 (d, J= 3.2 Hz, 3H), 1.33 (d, J= 3.2 Hz, 3H).
實施例200 化合物Z418-1的合成
步驟一：取( R)-3-(6-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(5a, 35 mg, 0.1 mmol), 2-羥基-2-甲基丙酸(10 mg, 0.1 mmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(1 mL)，加入2-(7-偶氮苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯(57 mg, 0.15 mmol)，N,N-二異丙基乙胺(40 mg, 0.3 mmol)，室溫反應2小時。反應液倒入水中，乙酸乙酯萃取，合併有機相，飽和食鹽水洗，減壓濃縮至乾，得到粗品藉由矽膠柱層析(石油醚/乙酸乙酯=50/50)純化，得到(R)-3-(6-氯-2-(2-羥基-2-甲基丙醯基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(35 mg, 收率79%)。ES-API: [M+H] +=439.2。
步驟二：取( R)-3-(6-氯-2-(2-羥基-2-甲基丙醯基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(35 mg, 0.08 mmol)，3-氯-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(68 mg, 0.24 mmol)，氯(2-二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II)(8 mg, 0.012 mmol)，碳酸鉀 (48 mg, 0.34 mmol)溶於1,4-二氧六環(2 mL)和水(0.5 mL)，110℃攪拌2小時。減壓濃縮至乾，得到粗品藉由矽膠柱層析(石油醚/乙酸乙酯=50/50)純化，得到 ( R)-3-(6-(3-氯-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-2-(2-羥基-2-甲基丙醯基)-1,2, 3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(22 mg, 收率51%)。ES-API: [M+H] +=555.2。
步驟三：取 ( R)-3-(6-(3-氯-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-2-(2-羥基-2-甲基丙醯基)-1,2, 3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(22 mg, 0.04 mmol)溶於無水二氯甲烷(0.5 mL)，加入三氟乙酸(0.2 mL)，室溫反應2h。LC-MS監測反應完全，減壓濃縮至乾，加入氨甲醇溶液(1mL)中和後，再次濃縮，經製備HPLC(碳酸氫銨)純化得到( R)-1-(6-(3-氯-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-8-(嗎啉-3-基)-3,4-二氫異喹啉-2(1 H))-基)-2-甲基-2-羥基-丙-1-酮(Z418-1, 8.8 mg, 收率45 %)。ES-API: [M+H] +=455.1。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 9.33 (s, 1H), 8.45– 8.24 (m, 1H), 8.08 (s, 1H), 7.79– 7.72 (m, 1H), 7.36 (s, 1H), 5.31– 5.26 (m, 1H), 4.91– 4.72 (m, 1H), 4.25– 4.18 (m, 1H), 4.09– 4.04 (m, 1H), 3.97– 3.85 (m, 2H), 3.75– 3.71 (m, 1H), 3.53– 3.48 (m, 1H), 3.28– 3.22 (m, 1H), 3.11– 2.93(m, 2H), 1.77– 1.67(m, 2H), 1.63 (s, 6H).
實施例201 化合物Z374的合成
步驟一：( R)-3-(2-乙醯基-6-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(32.1 mg, 0.08 mmol)溶於二氧六環(2.0 mL)和水(0.5 mL)，在室溫下加入3-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3-二氧戊環-2-基)-1H-吡咯并[2,3- b]吡啶(23.4 mg, 0.09 mmol)，氯(2-二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II)(7.2 mg, 0.01 mmol)和碳酸鉀(22.1 mg, 0.16 mmol)，氮氣保護下100 oC攪拌反應3小時。LC-MS檢測反應完全，反應液加入二氯甲烷：甲醇混合溶液(=10：1, 10 mL)萃取，依次加水(10 mL)，飽和食鹽水(10 mL)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮並藉由矽膠柱層析純化(二氯甲烷：含5‰氨的甲醇= 2%-5%)得到產物( R)-3-(2-乙醯基-6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3- b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(23.1 mg, 收率：59%)。ES-API: [M+H] += 491.2。
步驟二：( R)-3-(2-乙醯基-6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3- b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(23.1 mg, 0.05 mmol)溶於乙醇(2.0 mL)，在室溫下加入5M氫氧化鈉溶液(0.5 mL)，封管90 oC攪拌反應18小時。LC-MS檢測反應完全，反應液加入二氯甲烷：甲醇混合溶液(=10：1, 10 mL)萃取，依次加水(10 mL)，飽和食鹽水(10 mL)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮並藉由矽膠柱層析純化(二氯甲烷：含5‰氨的甲醇= 3%-5%)得到產物( R)-3-(6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3- b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(19.2 mg, 收率：91%)。ES-API: [M+H] += 449.2。
步驟三：1-羥基環丙烷-1-羧酸(4.4 mg, 0.04 mmol)溶於二氯甲烷(1.0 mL)，在室溫下加入1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽(7.6 mg, 0.04 mmol)，1-羥基苯并三唑(5.4 mg, 0.04 mmol)，常溫下攪拌3分鐘後再加入 ( R)-3-(6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3- b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(19.2 mg, 0.04 mol)，常溫攪拌反應2小時。LC-MS檢測反應完全，加入水(5 mL)，用二氯甲烷：甲醇混合溶液萃取(=10：1, 10 mL×2)，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮並藉由矽膠柱層析純化(二氯甲烷：甲醇= 3%-6%)得到產物( R)-3-(2-(1-羥基環丙烷-1-羰基)-6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3- b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(21.2 mg , 收率：93%)。ES-API: [M+H] +=533.2。
步驟四：( R)-3-(2-(1-羥基環丙烷-1-羰基)-6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3- b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(21.2 mg , 0.04 mmol)溶於二氯甲烷(4.0 mL)，加入三氟乙酸(2.0 mL)，反應在室溫下反應2小時。反應液濃縮，加入7.0M氨/甲醇溶液(5.0 mL)，溶劑旋乾，粗品用製備HPLC(甲酸法)純化得到目標產物( R)-(1-羥基環丙基)(6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3- b]吡啶-5-基)-8-(嗎啉-3-基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)甲酮(Z374, 甲酸鹽，6.85 mg, 收率：40%)，白色固體。ES-API: [M+H] +=433.2。 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 11.35 (s, 1H), 8.46 (s, 1H), 8.11 (s, 1H), 7.79 (s, 1H), 7.45 (s, 1H), 7.27 (s, 1H), 4.97 – 4.68 (m, 2H), 3.99 (d, J= 8.4 Hz, 1H), 3.81 – 3.76 (m, 2H), 3.58 – 3.54 (m, 2H), 3.30 – 3.20 (m, 2H), 2.99 – 2.92 (m, 4H), 2.31 (s, 3H), 1.04 – 0.90 (m, 2H), 0.88 – 0.78 (m, 2H).
實施例202 化合物Z419的合成
步驟一：2-羥基-2-甲基丙酸(18.7 mg, 0.18 mmol)溶於二氯甲烷(1.0 mL)，在室溫下加入2-(7-偶氮苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯(68.4 mg, 0.18 mmol)，N,N-二異丙基乙胺(46.5 mg, 0.36 mmol)，常溫下攪拌3分鐘後，再加入( R)-3-(6-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(5a, 65 mg, 0.18 mol)，常溫攪拌反應2小時。LC-MS檢測反應完全，加入水(5 mL)，用二氯甲烷：甲醇混合溶液萃取(二氯甲烷：甲醇=10：1, 10 mL×2)，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮並藉由矽膠柱層析純化(二氯甲烷：甲醇= 3%-6%)得到產物( R)-3-(6-氯-2-(2-羥基-2-甲基丙醯基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(51.1 mg, 收率：64%)。ES-API: [M+H] +=439.2。
步驟二：( R)-3-(6-氯-2-(2-羥基-2-甲基丙醯基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(51.1 mg, 0.12 mmol)溶於1,4-二氧六環(2.0 mL)，常溫加入聯硼酸頻那醇酯(60.9 mg, 0.24 mmol)，氯(2-二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II)(7.2 mg, 0.01 mmol)和磷酸鉀(50.9 mg, 0.24 mmol)，氮氣保護下，100℃攪拌2小時。LC-MS檢測反應結束後，得到粗品( R)-3-(2-(2-羥基-2-甲基丙醯基)-6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯，不用後處理，直接進行下一步。ES-API: [M+H] += 531.2.
步驟三：將上述混合液加入水(0.5 mL)，5-溴-3-異丙基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(57.2 mg, 0.24 mmol)，氯(2-二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II)(7.2 mg, 0.01 mmol)和磷酸鉀(50.9 mg, 0.24 mmol)，氮氣保護下，100℃攪拌2小時。LC-MS檢測反應結束後，反應液溶於乙酸乙酯(20.0 mL)，並依次用飽和食鹽水(10.0 mL)和水(10.0 mL)洗滌。有機相用無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮並用快速矽膠柱(0-10%甲醇/二氯甲烷)純化，得到產物 ( R)-3-(2-(2-羥基-2-甲基丙醯基)-6-(3-異丙基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(56.8 mg, 收率：84%)。ES-API: [M+H] += 563.2.。
步驟四：( R)-3-(2-(2-羥基-2-甲基丙醯基)-6-(3-異丙基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(56.8 mg, 0.10 mmol)溶於二氯甲烷(4.0 mL)，加入三氟乙酸(2.0 mL)，反應在室溫下反應2小時。反應液濃縮，加入7.0M氨甲醇溶液(5.0 mL)，溶劑旋乾，粗品用製備HPLC(氨水法)純化得到目標產物( R)-2-羥基-1-(6-(3-異丙基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-8-(嗎啉-3-基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)-2-甲基丙-1-酮(Z419, 13.5 mg, 收率：29%)，白色固體。ES-API: [M+H] +=463.2。 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 11.37 (s, 1H), 8.43 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 8.12 (d, J= 1.9 Hz, 1H), 7.76 (s, 1H), 7.42 (s, 1H), 7.24 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 5.55 – 5.27 (m, 2H), 4.86 – 4.62 (m, 2H), 4.14 (s, 1H), 3.99 – 3.94 (m, 1H), 3.81 – 3.74 (m, 2H), 3.56 – 3.48 (m, 1H), 3.27 – 3.17 (m, 2H), 3.05 – 2.85 (m, 4H), 1.45 – 1.06 (m, 12H).
實施例203 化合物Z422的合成
步驟一：將(R)-3-(6-氯-2-(2-羥基-2-甲基丙醯基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯 (50 mg, 0.114 mmol)和聯硼酸頻那醇酯 (87 mg, 0.341 mmol)溶解到1,4-二氧六環(10 mL)，加入 氯(2-二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II)(7.92 mg, 0.0114 mmol)和醋酸鉀 (39 mg, 0.341 mmol)，120℃反應1小時。反應完畢得到(R)-3-(2-(2-羥基-2-甲基丙醯基)-6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼烷-2-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯的1,4-二氧六環溶液(10 mL反應液)，直接用於下一步反應。ES-API: [M+H] +=531.1。
步驟二：向(R)-3-(2-(2-羥基-2-甲基丙醯基)-6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼烷-2-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯的1,4-二氧六環溶液(10 mL反應液)中加入水(1 mL)、5-溴-2-氯-3-乙基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(30 mg, 0.114 mmol)、1,1-二(二苯膦基)二茂鐵二氯化鈀 (8.3 mg, 0.0114 mmol)和碳酸鉀(31 mg, 0.228 mmol)。氮氣保護，升溫至100℃並攪拌1小時。LCMS監測，反應用水稀釋並用乙酸乙酯(20 mLx1)萃取。有機相飽和食鹽水(20 mLx1)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮，粗品藉由矽膠柱層析純化(石油醚:乙酸乙酯=1:1)得到 (R)-3-(6-(2-氯-3-乙基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-2-(2-羥基-2-甲基丙醯基)- 1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(20 mg, 2步收率29.8%)，為黃色油狀物。ES-API:[M+1] +=583.2。
步驟三：將(R)-3-(6-(2-氯-3-乙基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-2-(2-羥基-2-甲基丙醯基)- 1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(20 mg, 0.034mmol)溶於二氯甲烷(2.0 mL)中，加入三氟乙酸(2.0 mL)。室溫反應1小時。反應完成後，反應液濃縮，加入氨水(0.5 mL)，再次濃縮，粗品經製備HPLC(氨水法)純化得到產物(R)-1-(6-(2-氯-3-乙基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-8-(嗎啉-3-基)-3,4-二氫異喹啉 -2(1H)-基)-2-羥基-2-甲基丙-1-酮(Z422, 2.8 mg, 收率16.90%) ES-API: [M+H] +=483.2。 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 12.29 (s, 1H), 8.46 (d, J = 2.1 Hz, 1H), 8.12 (d, J = 2.2 Hz, 1H), 7.77 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.47 – 7.41 (m, 1H), 5.52 (s, 1H), 5.32 (t, J = 4.8 Hz, 1H), 4.13 (s, 1H), 3.98 (d, J = 9.5 Hz, 1H), 3.78 (d, J = 11.1 Hz, 2H), 3.52 (d, J = 12.0 Hz, 1H), 3.25 (d, J = 11.1 Hz, 2H), 3.01-2.87 (m, 4H), 2.75 (q, J = 7.5 Hz, 2H), 2.00 (q, J = 7.2 Hz, 2H), 1.36 (s, 3H), 1.24 (s, 3H), 1.21 (d, J = 7.5 Hz, 3H).
實施例204 化合物Z425的合成 Z425
參照化合物的Z424-1合成步驟，不同點在於替換步驟三種的5-溴-3-異丙基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶為5-溴-2-氯-3-乙基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶，最終獲得化合物Z425。ES-API: [M+H] +=469.2.
實施例205 化合物Z428的合成 Z428
參照化合物的Z376合成步驟，不同點在於替換步驟四中的3-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼烷-2-基)-1H-吡咯[2,3-b]吡啶為2-氯-3-乙基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼酸-2-基)-1H吡咯[2,3-b]吡啶，最終獲得化合物Z428。ES-API: [M+H] +=468.2.
實施例206 化合物Z429的合成
步驟一：取(R)-3-(6-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(5a, 35 mg, 0.1 mmol)溶於無水四氫呋喃(3 ml)中，加入異氰酸乙酯(7 mg, 0.1 mmol)，室溫反應2小時，反應完成後，減壓濃縮至乾得到(R)-3-(6-氯-2-(乙基氨基甲醯基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(42 mg, 收率100%)，不經純化，直接用於下一步反應。ES-API: [M+H] +=424.1。
步驟二：取(R)-3-(6-氯-2-(乙基氨基甲醯基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(42 mg, 0.1 mmol)，3-異丙基-5- (4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼烷-2-基)-1H-吡咯[2,3-b]吡啶(57 mg, 0.2 mmol)，氯(2-二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2 -基)鈀(II)(8 mg, 0.012 mmol)，碳酸鉀 (42 mg, 0.3 mmol)溶於1,4-二氧六環(2 mL)和水(0.5 mL)，110℃攪拌2小時。反應液減壓濃縮至乾，粗品藉由矽膠柱層析(石油醚/乙酸乙酯=50/50)純化，得到(R)-3-(2-(乙基氨基甲醯基)-6-(3-異丙基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(15 mg, 收率30%)。ES-API: [M+H] +=548.2。
步驟三：取(R)-3-(2-(乙基氨基甲醯基)-6-(3-異丙基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(15 mg, 0.03 mmol)溶於無水二氯甲烷(0.5 mL)，加入三氟乙酸(0.2 mL)，室溫反應2小時。LC-MS監測反應完全，反應液減壓濃縮至乾，加入氨/甲醇溶液(1mL)中和後，再次濃縮，經製備HPLC(碳酸氫銨法)純化得到(R)-N-乙基-6-(3-異丙基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-8-(嗎啉-3-基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-甲醯胺(Z429, 2.98 mg, 收率25%)。ES-API: [M+H] +=448.2。
實施例207 化合物Z430的合成 Z430
參照化合物的Z376合成步驟，不同點在於替換步驟四中的3-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼烷-2-基)-1H-吡咯[2,3-b]吡啶為3-氯-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼酸-2-基)-1H吡咯并[2,3-b]吡啶，最終獲得化合物Z430。ES-API: [M+H] +=440.2.
實施例208 化合物Z435的合成
步驟一：氮氣保護下，(3-氯-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)硼酸(52 mg, 0.27 mmol)，(R)-3-(2-乙醯基-6-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(95 mg, 0.28 mmol)，氯(2-二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II)(17 mg, 0.02 mmol)和碳酸鉀(66 mg, 0.48 mmol)的1,4-二氧六環(2 mL)和水(0.5mL)混合物，100℃攪拌2小時。反應結束後，反應液溶於乙酸乙酯(10 mL)，並依次用飽和食鹽水(5 mL)和水(5 mL)洗滌。有機相用無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮並用快速矽膠柱(0-10%甲醇/二氯甲烷)純化，得到(R)-3-(2-乙醯基-6-(3-氯-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(65 mg, 0.13mmol, 收率52.9%)。ES-API: [M+H] += 511.1。
步驟二：(R)-3-(2-乙醯基-6-(3-氯-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(65 mg, 0.13mmol)溶於乙醇(3 mL)，在室溫下加入的5.0 mol/L氫氧化鈉(2 mL)溶液，封管90°C攪拌反應10小時。LC-MS檢測反應完全，反應液加入二氯甲烷：甲醇 =10：1混合溶液(10 mL)萃取，依次加水(5 mL)，飽和食鹽水(5 mL)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮，藉由矽膠柱層析純化(二氯甲烷：含5‰氨的甲醇= 2%-5%)得到產物(R)-3-(6-(3-氯-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉- 4-羧酸叔丁基酯(45 mg, 0.10mmol, 收率：73.9%)。ES-API: [M+H] += 469.1。
步驟三：1-羥基環丙烷-1-羧酸(11 mg, 0.11 mmol)溶於二氯甲烷(1.0 mL)，在室溫下加入1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽(18 mg, 0.10 mmol)，1-羥基苯并三唑(13 mg, 0.10mmol)，常溫下攪拌3分鐘後再加入 (R)-3-(6-(3-氯-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉- 4-羧酸叔丁基酯(45 mg, 0.10mmol)，常溫攪拌反應2小時。LC-MS檢測反應完全，加入水(5 mL)，用二氯甲烷：甲醇 =10：1混合溶液萃取(5 mL×2)，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮並藉由矽膠柱層析純化(二氯甲烷：甲醇= 3%-6%)得到產物 (R)-3-(6-(3-氯-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-2-(1-羥基環丙烷-1-羰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(45mg, 0.08mmol, 收率：81.5%)。ES-API: [M+H] +=553.2。
步驟四：(R)-3-(6-(3-氯-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-2-(1-羥基環丙烷-1-羰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(45mg, 0.08mmol)溶於二氯甲烷(5 mL)加入三氟乙酸(5 mL)，反應在室溫下反應2小時。反應液濃縮，加入7.0M氨甲醇溶液(5.0 mL)，溶劑旋乾，粗品用製備HPLC(碳酸氫銨法)純化得到目標產物(R)-(6-(3-氯-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-8-(嗎啉-3-基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)(1-羥基環丙基)甲酮(Z435, 10.4mg, 0.02mmol, 收率：28.4%)。ES-API: [M+H] +=453.1。 1HNMR: 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 12.07 (s, 1H), 8.59 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 8.09 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 7.81 (s, 1H), 7.73 (d, J= 2.4 Hz, 1H), 7.50 (s, 1H), 6.43 (s, 1H), 4.10 – 3.92 (m, 2H), 3.82 – 3.75 (m, 2H), 3.58 – 3.49 (m, 1H), 3.43 – 3.36 (m, 1H), 3.31 – 3.22 (m, 2H), 3.07 – 2.86(m, 4H), 1.03 – 0.90 (m, 2H), 0.88 – 0.76 (m, 2H).
實施例209 化合物Z410的合成 Z410
參照化合物的Z424-1合成步驟，不同點在於替換步驟一中的甲氧基乙酸為(S)-3,3,3-三氟-2-羥基-2-甲基丙酸，最終獲得化合物Z410。ES-API: [M+H] +=517.2.
實施例210 化合物Z413的合成 Z413
參照化合物的Z424-1合成步驟，不同點在於替換步驟三中的5-溴-3-異丙基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶為5-溴-2-氯-3-乙基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶，最終獲得化合物Z413。ES-API: [M+H] +=537.2.
實施例211 化合物Z406的合成 Z406
參照化合物的Z418-1合成步驟，不同點在於替換步驟一中的2-羥基-2-甲基丙酸為(S)-3,3,3-三氟-2-羥基-2-甲基丙酸，最終獲得化合物Z406。ES-API: [M+H] +=509.2.
實施例212 化合物Z373的合成
步驟一：將(R)-3-(2-乙醯基-6-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(90 mg, 228 umol)和3-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(71 mg, 273 umol)溶於二氧六環(1 mL)和水(0.2 mL)中，然後加入碳酸鉀(63 mg, 456 umol)，再在氮氣條件下加入氯(2-二環己基膦-2′,6′-二甲氧基-1,1′-聯苯基)[2-(2′-氨基-1,1′-聯苯基)]鈀(II)(16 mg, 23 umol)，120 ℃攪拌3小時。待反應完後，加入到水(1 mL)中，之後用乙酸乙酯(1 mLX3)萃取，有機相用飽和食鹽水(1 mL)洗滌，再用無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮。得到(R)-3-(2-乙醯基-6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(100 mg)，棕色的油狀物。ES-API: [M+H] += 491.3。
步驟二：將(R)-3-(2-乙醯基-6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(100 mg, 204 umol)溶於乙醇(2 mL)，然後加入10%氫氧化鈉溶液(0.5 mL)，85 ℃攪拌12小時。待反應完後，加入到水(1 mL)中，之後用乙酸乙酯(1 mLX3)萃取，有機相用飽和食鹽水(1 mL)洗滌，再用無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮。得到(R)-3-(6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(0.1 g)，棕色的油狀物。ES-API: [M+H] += 449.3。
步驟三：將(R)-3-(6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(100 mg, 223 umol)和1-甲氧基環丙烷羧酸(31 mg, 268 umol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(1 mL)，然後加入N,N-二異丙基乙胺(58 mg, 446 umol, 78 uL)和      2-(7-偶氮苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯(85 mg, 223 umol)，室溫攪拌2小時。待反應完後，加入到水(1 mL)中，之後用乙酸乙酯(1 mLX3)萃取，有機相用飽和食鹽水(1 mL)洗滌，再用無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮。得到(R)-3-(2-(1-甲氧基環丙烷-1-羰基)-6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-1,2, 3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(0.1 g)，棕色的油狀物。ES-API: [M+H] += 547.3。
步驟四：將(R)-3-(2-(1-甲氧基環丙烷-1-羰基)-6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-1,2, 3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(100 mg, 183 umol)溶於乙酸乙酯(1 mL)中，然後加入鹽酸乙酸乙酯(4 mol/L, 1 mL)，室溫攪拌4小時。待反應完後，過濾。用製備HPLC(碳酸氫銨法)純化得到(R)-(1-甲氧基環丙基)(6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-8-(嗎啉-3-基)-3,4-二氫異喹啉- 2(1H)-基)甲酮 (Z373, 10.16 mg)，白色固體。ES-API: [M+H] += 447.3。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ = 8.45 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 8.22 (d, J= 2.1 Hz, 1H), 7.78 (d, J= 1.4 Hz, 1H), 7.47 (s, 1H), 7.19 (s, 1H), 5.27-5.06 (m, 1H), 4.90 (br s, 1H), 4.82-4.68 (m, 1H), 4.19-4.04 (m, 2H), 4.01-3.82 (m, 3H), 3.78-3.61 (m, 2H), 3.55-3.42 (m, 1H), 3.35 (s, 1H), 3.20-2.91 (m, 4H), 2.37 (s, 3H), 1.16-0.93 (m, 4H).
實施例213 化合物Z444的合成
步驟一：在0℃下,向5-(羥甲基)煙酸甲酯(1.0 g, 6.53 mmol)的N,N-二甲基甲醯胺(10 mL)溶液中加入鈉氫(313.42 mg, 13.06 mmol)，攪拌1小時。之後加入碘甲烷(813 μL, 13.06 mmol)，攪拌1小時。LCMS監測反應完全，加水淬滅應，二氯甲烷萃取，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮，得到粗品經矽膠柱層析純化(石油醚:乙酸乙酯=9:1~1:1)，得到產物5-(甲氧基甲基)煙酸甲酯 (700 mg, 產率64.13%)。ES-API:[M+H] +=182.1。
步驟二：向 5-(甲氧基甲基)煙酸甲酯(0.7 g, 4.19mmol)的甲醇(12 mL)和水(8 mL)溶液中加入氫氧化鈉(334.98 mg, 8.38 mmol)。混合物在 50℃攪拌 2 小時。LCMS監測反應完全，反應液濃縮，加入1N鹽酸水溶液得到固體，過濾，得到5-(甲氧基甲基)吡啶-3-羧酸(0.5 g, 粗產物)，白色固體。ES-API:[M+H] +=168.0。
步驟三：向(S)-2-[6-(3-甲基-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基]吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(0.03 g, 69.36 μmol)的二氯甲烷 (1.5 mL)溶液加入 5-(甲氧基甲基)吡啶-3-羧酸 (17.39 mg, 104.03 μmol)，1-丙基磷酸酐(133.5 mg, 208.07 μmol, 50%的乙酸乙酯溶液)，三乙胺 (21.01 mg, 208.07 μmol)，常溫攪拌2小時。藉由LCMS監測反應完全，用飽和碳酸氫鈉水溶液調pH至7，用二氯甲烷/水萃取，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮，得到粗品經製備薄層色譜柱純化(二氯甲烷:甲醇=20:1)得到產物 (S)-2-(2-(2-(甲氧基甲基)異煙醯基)-6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(17 mg, 產率42.14%)，黃色油狀物。ES-API:[M+H] += 582.3。
步驟四：向(S)-2-(2-(2-(甲氧基甲基)異煙醯基)-6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(0.014 g, 24.07 μmol)的二氯甲烷(1 mL)溶液中加入三氟乙酸(1 mL)，反應在 30℃攪拌 2 小時。藉由LCMS監測反應完全，將反應液濃縮，得到粗品藉由製備薄層色譜柱純化(二氯甲烷:甲醇=10:1)得到( S)-[2-(甲氧基甲基)-4-吡啶基]-[6-(3-甲基-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶-5-基)-8-[吡咯烷-2-基]-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]甲酮(Z444, 5.00 mg, 產率42.41%)，為白色固體。ES-API:[M+H] += 482.2。
實施例214 化合物Z452的合成
步驟一：將(S)-2-甲基-嗎啡啉 (90 mg, 890 umol)溶於無水二氯甲烷(0.5 mL)，加入N,N-二異丙基乙胺(345 mg, 465 uL)，在0 ℃下加入三光氣 (290 mg, 981 umol)，常溫反應1小時。待反應完後，反應液減壓濃縮得到粗品(S)-2-甲基-嗎啡啉-4-醯氯(135 mg)，直接用於下一步反應。
步驟二：將 (R)-3-(6-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯 (5a, 90 mg, 255 umol)溶於無水二氯甲烷(2 mL)，加入N,N-二異丙基乙胺(98.9 mg, 133 uL)和(S)-2-甲基-嗎啡啉-4-醯氯(41.7 mg, 255 umol)，常溫反1小時。待反應完後，加入到水(0.5 mL)中，之後用二氯甲烷(2 mL)萃取，有機相用飽和食鹽水 (0.4 mL)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮。得到(R)-3-(6-氯-2-((S)-2-甲基-嗎啡啉-4-羰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯 (122 mg)，黃色油狀物。ES-API: [M+H] +=480.3。
步驟三：將(R)-3-(6-氯-2-((S)-2-甲基-嗎啡啉-4-羰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯 (122 mg, 254 umol)溶於二氧六環(1 mL)，加入3-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶 (78.7 mg, 305 umol)，之後加入水(0.2 mL)和碳酸鉀(70.3 mg, 508 umol)，最後加入氯(2-二環己基膦-2′,6′-二甲氧基-1,1′-聯苯基)[2-(2′-氨基-1,1′-聯苯基)]鈀(II)(183 mg, 254 umol)，在氮氣保護下加熱至120℃攪拌12小時。待反應完後，加入到冰水(2 mL)中，之後用乙酸乙酯(5 mL)萃取，有機相用飽和食鹽水(1 mL)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮。得到 (R)-3-(6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-2-((S)-2-甲基嗎啉-4-羰基)- 1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(146 mg)，黃色的油狀物。ES-API: [M+H] += 576.3。
步驟四：將(R)-3-(6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-2-((S)-2-甲基嗎啉-4-羰基)- 1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(146 mg, 254 umol)溶於乙酸乙酯(1 mL)，加入鹽酸/乙酸乙酯(4.0 mol/L, 1.0 mL)，室溫攪拌2小時。待反應完後，過濾，用乙酸乙酯(1 mL)洗滌濾餅，濾餅旋乾。用製備HPLC(碳酸氫銨法)純化得到 (6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-8-((R)-嗎啉-3-基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)- 基)((S)-2-甲基嗎啉)甲酮(Z452, 21.58 mg)，白色固體。ES-API: [M+H] += 476.3。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD)δ = 8.43 (d, J = 1.5 Hz, 1H), 8.20 (d, J = 1.9 Hz, 1H), 7.74 (s, 1H), 7.43 (s, 1H), 7.18 (s, 1H), 4.74-4.67 (m, 1H), 4.61-4.50 (m, 1H), 4.12 (dd, J = 2.6, 10.0 Hz, 1H), 3.94-3.85 (m, 3H), 3.76-4.48 (m, 8H), 3.19-3.08 (m, 1H), 3.07-2.97 (m, 4H), 2.71 (s, 1H), 2.37 (s, 3H), 1.17 (d, J = 6.3 Hz, 3H).
實施例215 化合物Z453的合成
步驟一：將2,2-二甲基嗎啉 (90 mg, 781 umol)溶於無水二氯甲烷(0.5 mL)，加入N,N-二異丙基乙胺(302 mg, 408 uL)，在0℃下加入三光氣 (292 mg, 985 umol)，常溫反應1小時。待反應完後，反應液直接濃縮得到粗品2,2-二甲基嗎啉-4-醯氯(140 mg)，直接用於下一步反應。
步驟二：將 (R)-3-(6-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯 (5a, 0.09 g, 255 umol)溶於無水二氯甲烷(2 mL)，加入N,N-二異丙基乙胺(98.9 mg, 133 uL)和2,2-二甲基嗎啉-4-醯氯(45.31 mg, 255 umol)，常溫反1小時。待反應完後，加入到水(0.5 mL)中，之後用二氯甲烷(2 mL)萃取，有機相用飽和食鹽水 (0.4 mL)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮。得到(R)-3-(6-氯-2-(2,2-二甲基嗎啉-4-羰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(126 mg)，黃色油狀物。ES-API: [M+H] +=494.4。
步驟三：將(R)-3-(6-氯-2-(2,2-二甲基嗎啉-4-羰基)- 1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯 (126 mg, 255 umol)溶於二氧六環(1 mL)，加入3-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶 (79 mg, 306 umol)，之後加入水(0.2 mL)和碳酸鉀(70.2 mg, 510 umol)，最後加入氯(2-二環己基膦-2′,6′-二甲氧基-1,1′-聯苯基)[2-(2′-氨基-1,1′-聯苯基)]鈀(II)(184 mg, 255 umol), 在氮氣保護下加熱至120℃攪拌12小時。待反應完後，加入到冰水(2.0 mL)中，之後用乙酸乙酯(5.0 mL)萃取，有機相用飽和食鹽水(1.0 mL)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮。得到 (R)-3-(2-(2,2-二甲基嗎啉-4-羰基)-6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5–基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(167 mg)，黃色的油狀物。ES-API: [M+H] += 590.4。
步驟四：將(R)-3-(2-(2,2-二甲基嗎啉-4-羰基)-6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5–基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(167 mg, 283 umol)溶於乙酸乙酯(1 mL)，加入鹽酸/乙酸乙酯(4.0 mol/L, 1.0 mL)，室溫攪拌2小時。待反應完後，過濾，用乙酸乙酯(1 mL)洗滌濾餅，濾餅旋乾。用製備HPLC(碳酸氫銨法)純化得到 (R)-(2,2-二甲基嗎啉)(6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5–基)-8-(嗎啉-3-基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)甲酮(Z453, 32.46 mg)，白色固體。ES-API: [M+H] += 490.4。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.44-8.43 (d, J=2.00 Hz, 1H), 8.20 (s, 1H), 7.75 (s, 1H), 7.44 (s, 1H), 7.18 (s, 1H), 4.74-4.70 (d, J=16.0 Hz, 1H), 4.57-4.53 (d, J=16.0 Hz 1H), 4.14-4.12 (m, 1H), 3.91-3.86 (m, 2H), 3.81-3.78 (m, 2H), 3.73-3.69 (m, 1H), 3.59-3.56 (t, J=6.00 Hz, 2H), 3.53-3.47 (t, J=10.8 Hz ,2H), 3.32-3.29 (m, 2H), 3.18-3.01 (m, 6H), 2.37(s, 3H), 1.28-1.27(d, J=2.40 Hz, 6H).
實施例216 化合物Z454的合成
步驟一：將 (R)-3-(6-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啡啉-4-羧酸叔丁酯(5a, 60 mg, 170umol)和四氫吡喃-4-酮(26 mg, 255 umol)溶於甲醇(1 mL)，然後加入氰基硼氫化鈉(21 mg, 340 umol)和醋酸(10 mg, 170 umol, 9.73 uL)和四異丙基鈦(72 mg, 255umol)，室溫攪拌2小時。待反應完後，將反應混合物倒入冰水(5 mL)中攪拌，然後用乙酸乙酯(3 mL)萃取3次，有機相用鹽水(2 mL)洗滌，用無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮得到(R)-3-(6-氯-2-(四氫-2H-吡喃-4-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(70 mg)，黃色的油狀物。ES-API: [M+H] += 437.3。
步驟二：將(R)-3-(6-氯-2-(四氫-2H-吡喃-4-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(70 mg, 160 umol)和3-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(50 mg, 192 umol)溶於二氧六環(1 mL)和水(0.2 mL)中，然後加入碳酸鉀(44 mg, 320 umol)，氮氣條件下加入氯(2-二環己基膦-2′,6′-二甲氧基-1,1′-聯苯基)[2-(2′-氨基-1,1′-聯苯基)]鈀(II)(12mg, 16 umol)，120 ℃攪2小時。待反應完後，加入到水(1 mL)中，用乙酸乙酯(1 mL)萃取3次，有機相用飽和食鹽水(1 mL)洗滌，再用無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮，得到 (R)-3-(6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-2-(四氫-2H-吡喃-4-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(70 mg)，棕色的油狀物。ES-API: [M+H] += 533.4。
步驟三：將(R)-3-(6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-2-(四氫-2H-吡喃-4-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(70 mg, 131 umol)溶於乙酸乙酯(2 mL)中，然後加入鹽酸乙酸乙酯(4 mol/L, 1 mL)，室溫攪拌2小時。待反應完後，過濾。用製備HPLC(碳酸氫銨法)純化得到(R)-3-(6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-2-(四氫-2H-吡喃-4-基)-1,2,3 ,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉(Z454, 7.88 mg)，白色固體。ES-API: [M+H] += 433.3。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ = 8.43 (d, J= 1.6 Hz, 1H), 8.20 (d, J= 1.9 Hz, 1H), 7.72 (s, 1H), 7.40 (s, 1H), 7.18 (s, 1H), 4.13-3.99 (m, 4H), 3.93-3.78 (m, 3H), 3.69 (br d, J= 2.1 Hz, 1H), 3.49 (br s, 3H), 3.18-3.07 (m, 1H), 3.03 (br s, 3H), 2.91 (br d, J= 5.6 Hz, 2H), 2.85-2.72 (m, 1H), 2.37 (s, 3H), 1.96 (br s, 2H), 1.72 (br d, J= 11.8 Hz, 2H)
實施例217 化合物Z455的合成
步驟一：將 (R)-3-(6-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啡啉-4-羧酸叔丁酯(5a, 100 mg, 283 umol)和2-羥基-2-甲基丙酸(36 mg, 340 umol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(1 mL)，然後加入N,N-二異丙基乙胺(220 mg, 1.70 mmol)和四甲基脲六氟磷酸酯(323 mg, 850 umol)，室溫攪拌2小時。待反應完後，加入到水(1 mL)中，之後用乙酸乙酯(1 mL)萃取3次，有機相用飽和食鹽水(1 mL)洗滌，再用無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮，得到 (R)-3-[6-氯-2-(2-羥基-2-甲基丙醯)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基]嗎啡啉-4-羧酸叔丁酯(100 mg)，棕色的油狀物。ES-API: [M+H] += 439.2。
步驟二：將(R)-3-[6-氯-2-(2-羥基-2-甲基丙醯)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基]嗎啡啉-4-羧酸叔丁酯(90 mg, 205 umol)和3-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)-1H-吡唑并[3,4-b]吡啶 (64 mg, 246 umol)溶於二氧六環(1 mL)和水(0.2 mL)中，然後加入碳酸鉀(57 mg, 410 umol)，再在氮氣條件下加入氯(2-二環己基膦-2′,6′-二甲氧基-1,1′-聯苯基)[2-(2′-氨基-1,1′-聯苯基)]鈀(II)(15 mg, 20.5 umol)，120 ℃攪拌3小時。待反應完後，加入到水(1 mL)中，之後用乙酸乙酯(1 mL)萃取3次，有機相用飽和食鹽水(1 mL)洗滌，再用無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮，得到 (R)-3-(2-(2-羥基-2-甲基丙醯基)-6-(3-甲基-1H-吡唑并[3,4-b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(110 mg)，棕色的油狀物。ES-API: [M+H] += 536.4。
步驟三：將(R)-3-(2-(2-羥基-2-甲基丙醯基)-6-(3-甲基-1H-吡唑并[3,4-b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(110 mg, 205 umol)溶於乙酸乙酯(2 mL)中，然後加入鹽酸乙酸乙酯(4 mol/L, 1 mL)，室溫攪拌4小時。待反應完後，過濾。用製備HPLC(甲酸法)純化得到(R)-2-羥基-2-甲基-1-(6-(3-甲基-1H-吡唑并[3,4-b]吡啶-5-基)-8-(嗎啉-3-基)-3 ,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)丙-1-酮 (Z455, 13.84 mg, 甲酸鹽)，白色固體。ES-API: [M+H] += 436.2。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ = 8.80 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 8.46 (d, J= 2.1 Hz, 1H), 8.36 (s, 1H), 7.77 (d, J= 1.5 Hz, 1H), 7.58 (s, 1H),4.76-4.60 (m, 2H), 4.45 (d, J= 8.8 Hz, 1H), 4.41-4.18 (m, 1H), 4.15-4.02 (m, 2H), 3.88-3.77 (m, 1H), 3.82-3.51 (m, 2H), 3.51-3.36 (m, 1H), 3.29-3.18 (m, 1H), 3.15-3.00 m, 2H), 2.63 (s, 3H), 1.54-1.44 (m, 6H).
實施例218 化合物Z456的合成
步驟一：將 (R)-3 -(6-氯- 1,2,3,4 -四氫異喹啉- 8 -基)嗎啉- 4 -羧酸叔丁酯 (5a, 0.09 g, 255 umol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(2 mL),加入N,N-二異丙基乙胺(98.9 mg, 765 umol, 133 uL)和1-環丙基-1H-吡唑-4-羧酸(38.8 mg, 255 umol)，三正丙基環磷酸酐50%乙酸乙酯溶液(8.12 mg, 25.5 umol, 7.58 uL)，常溫反應2小時。待反應完後，加入到水(0.5 mL)中，之後用乙酸乙酯(1.0 mL)萃取，有機相用飽和食鹽水 (0.4 mL)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮，得到 (R)-3-[6-氯-2-(1-環丙基-1H-吡唑-4-羰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基]嗎啉-4-羧酸叔丁酯 (124 mg)，棕色固體。ES-API: [M+H] +=487.2。
步驟二：將(R)-3-[6-氯-2-(1-環丙基-1H-吡唑-4-羰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基]嗎啉-4-羧酸叔丁酯 (124 mg, 255 umol)溶於二氧六環(1 mL)，加入3-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶 (78.9 mg, 306 umol)，之後加入水(0.2 mL)和碳酸鉀(70.4 mg, 509 umol)，最後加入氯(2-二環己基膦-2′,6′-二甲氧基-1,1′-聯苯基)[2-(2′-氨基-1,1′-聯苯基)]鈀(II)(183 mg, 255 umol)，氮氣保護下加熱120℃攪拌12小時。待反應完後，加入到冰水(2.0 mL)中，用乙酸乙酯(5 mL)萃取，有機相用飽和食鹽水(1 mL)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮，得到(R)-3-(2-(1-環丙基-1H-吡唑-4-羰基)-6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5–基)-1,2,3,4 –四氫異喹啉-8–基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(107 mg)，黃色的油狀物。ES-API: [M+H] += 583.3.
步驟三：將(R)-3-(2-(1-環丙基-1H-吡唑-4-羰基)-6-(3-甲基-1H-吡咯[2,3-b]吡啶-5–基)-1,2,3,4 –四氫異喹啉-8–基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(107 mg, 184 umol)溶於乙酸乙酯(1 mL)，加入鹽酸乙酸乙酯(4.0 mol/L, 1.0 mL)，室溫攪拌2小時。待反應完後，過濾，用乙酸乙酯(1.0 mL)洗滌濾餅，濾餅旋乾。用製備HPLC(碳酸氫銨法)純化得到(R)-(1-環丙基-1H-吡唑-4-基)(6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-8-(嗎啉-3-基))-3,4-二氫異喹啉-2(1 H)-基)甲酮(Z456, 7.37 mg)，白色固體。ES-API: [M+H] += 483.3. 1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.45 (s, 1H), 8.22 (s, 1H), 8.14 (s, 1H), 7.83-7.80 (d, J = 13.2 Hz, 2H), 7.49 (s, 1H),7.19(s, 1H), 4.59 (s, 1H), 3.95 (s, 1H), 3.90-3.88 (m, 4H), 3.76-3.72 (m, 2H), 3.48 (s, 1H), 3.35 (s, 1H), 3.13-2.97 (m, 4H), 2.37(s, 3H), 1.19-1.08(m, 4H).
實施例219 化合物Z457的合成
步驟一：將2-氧-5-氮雜雙環[2.2.2]辛烷 (90 mg, 255 umol)溶於無水二氯甲烷(0.5 mL)，加入三乙胺(241 mg, 332 uL)，在0 ℃下加入三光氣 (300 mg, 1.01 mmol)，常溫反應1小時。待反應完後，反應液直接濃縮得到粗品2-氧-5-氮雜雙環[2.2.2]辛烷-5-醯氯(140 mg)，直接用於下一步反應。
步驟二：將 (R)-3 -(6-氯- 1,2,3,4 -四氫異喹啉- 8 -基)嗎啉- 4 -羧酸叔丁酯 (5a, 0.09 g, 255 umol)溶於無水二氯甲烷(2 mL)，加入三乙胺 (98.9 mg, 106 uL)和2-氧-5-氮雜雙環[2.2.2]辛烷-5-醯氯(44.8 mg, 255 umol)，常溫反1小時。待反應完後，加入到水(0.5 mL)中，之後用二氯甲烷(2 mL)萃取，有機相用飽和食鹽水 (0.4 mL)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮，得到(3R)-3-(2-(2-氧-5-氮雜雙環[2.2.2]辛烷-5-羰基)- 6-氯- 1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯 (126 mg)，黃色油狀液體 。ES-API: [M+H] +=492.2。
步驟三：將(3R)-3-(2-(2-氧-5-氮雜雙環[2.2.2]辛烷-5-羰基)- 6-氯- 1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯 (125 mg, 254 umol)溶於二氧六環(1 mL)，加入3-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶 (78.8 mg, 206 umol)，之後加入水(0.2 mL)和碳酸鉀(70.3 mg, 508 umol)，最後加入氯(2-二環己基膦-2′,6′-二甲氧基-1,1′-聯苯基)[2-(2′-氨基-1,1′-聯苯基)]鈀(II)(183 mg, 254 umol)，在氮氣保護下加熱至120℃攪拌12小時。待反應完後，加入到冰水(2 mL)中，之後用乙酸乙酯(5.0 mL)萃取，有機相用飽和食鹽水(1.0 mL)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮，得到 (3R)-3-(2-(2-氧-5-氮雜雙環[2.2.2]辛烷-5-羰基)-6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5–基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(167 mg)，黃色的油狀物。ES-API: [M+H] += 588.3。
步驟四：將(3R)-3-(2-(2-氧-5-氮雜雙環[2.2.2]辛烷-5-羰基)-6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5–基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(167 mg, 283 umol)溶於乙酸乙酯(1 mL)，加入鹽酸/乙酸乙酯(4.0 mol/L, 1.0 mL)，室溫攪拌2小時。待反應完後，過濾，用乙酸乙酯(1 mL)洗滌濾餅，濾餅旋乾。用製備HPLC(甲酸法)純化得到 (2-氧-5-氮雜雙環[2.2.2]辛烷-5-基)(6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5–基)-8-((R)-嗎啉-3-基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)甲酮 (Z457, 21.35 mg, 甲酸鹽)，白色固體。ES-API: [M+H] += 488.3。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.51-8.37 (m, 2H), 8.22 (d, J= 1.60 Hz, 1H), 7.72 (s, 1H), 7.54 (d, J= 3.20 Hz, 1H), 7.20 (s, 1H), 4.82-4.68 (m, 1H), 4.59-4.36 (m, 2H), 4.28-4.17 (m, 1H), 4.05 –3.54 (m, 13H), 3.08-3.05 (m, 2H), 2.38(s, 3H), 2.23-2.10 (m, 2H), 1.95-1.75(m, 2H).
實施例220 化合物Z458的合成
步驟一：將2,5-二甲基嗎啉 (90 mg, 781 umol)溶於無水二氯甲烷(0.5 mL)，加入N,N-二異丙基乙胺(302 mg, 408 uL)，在0 ℃下加入三光氣 (292 mg, 985 umol)，常溫反應1小時。待反應完後，反應液減壓濃縮得到粗品2,5-二甲基嗎啉-4-醯氯(140 mg)，直接用於下一步反應。
步驟二：將 (R)-3 -(6-氯- 1,2,3,4 -四氫異喹啉- 8 -基)嗎啉- 4 -羧酸叔丁酯 (5a, 0.09 g, 255 umol)溶於無水二氯甲烷(2 mL)，加入N,N-二異丙基乙胺(98.9 mg, 133 uL)和2,5-二甲基嗎啉-4-醯氯(45.31 mg, 255 umol)，常溫反應1小時。待反應完後，加入到水(0.5 mL)中，之後用二氯甲烷(2.0 mL)萃取，有機相用飽和食鹽水 (0.4 mL)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮，得到(3R)-3-[6-氯-2-(2,5-二甲基嗎啉-4-羰基)- 1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(126 mg)，黃色油狀液體。ES-API: [M+H] +=494.3。
步驟三：將(3R)-3-[6-氯-2-(2,5-二甲基嗎啉-4-羰基)- 1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯 (126 mg, 255 umol)溶於二氧六環(1 mL)，加入3-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶 (79 mg, 306 umol)，之後加入水(0.2 mL)和碳酸鉀(70.2 mg, 510 umol)，最後加入氯(2-二環己基膦-2′,6′-二甲氧基-1,1′-聯苯基)[2-(2′-氨基-1,1′-聯苯基)]鈀(II)(184 mg, 255 umol)，氮氣保護下加熱120℃攪拌12小時。待反應完後，加入到冰水(2.0 mL)中，之後用乙酸乙酯(5.0 mL)萃取，有機相用飽和食鹽水(1.0 mL)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮，得到 (3R)-3-(2-(2,5-二甲基嗎啉-4-碳基)-6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5–基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(167 mg)，黃色的油狀物。ES-API: [M+H] += 590.3。
步驟四：將(3R)-3-(2-(2,5-二甲基嗎啉-4-碳基)-6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5–基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(167 mg, 283 umol)溶於乙酸乙酯(1 mL)，加入鹽酸/乙酸乙酯(4.0 mol/L, 1.0 mL)，室溫攪拌2小時。待反應完後，過濾，用乙酸乙酯(1 mL)洗滌濾餅，濾餅旋乾。用製備HPLC(甲酸法)純化得到 (2,5-二甲基嗎啉)(6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5–基)-8-((R)-嗎啉 -3-基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)甲酮 (Z458, 30.92 mg, 甲酸鹽)，白色固體。ES-API: [M+H] += 490.3。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.52 -8.40 (m, 2H), 8.22-8.21 (m, 1H), 7.75-7.72 (m, 1H), 7.51 (s, 1H), 7.2 (s, 1H), 4.75-4.66 (m, 1H), 4.50-4.44 (m, 1H), 4.37-4.26 (m, 1H), 4.02-3.97 (m, 2H), 3.91-3.46 (m, 6H), 3.41-3.35 (m, 3H), 3.20-3.13 (s, 2H), 3.13-3.09 (m, 1H), 3.05-2.95(m, 2H), 2.38(s, 3H), 1.35-1.33 (m, 2H), 1.25-1.18(m, 3H), 1.07-1.30(m, 1H).
實施例221 化合物Z459的合成
步驟一：將2,6-二甲基嗎啉 (90 mg, 781 umol)溶於無水二氯甲烷(0.5 mL)，加入N,N-二異丙基乙胺(302 mg, 408 uL)，在0 ℃下加入三光氣 (292 mg, 985 umol)，常溫反應1小時。待反應完後，反應液減壓濃縮得到粗品2,6-二甲基嗎啉-4-醯氯(140 mg)，直接用於下一步反應。
步驟二：將 (R)-3 -(6-氯- 1,2,3,4 -四氫異喹啉- 8 -基)嗎啉- 4 -羧酸叔丁酯 (5a, 0.09 g, 255 umol)溶於無水二氯甲烷(2 mL)，加入N,N-二異丙基乙胺(98.9 mg, 133 uL)和2,6-二甲基嗎啉-4-醯氯(45.31 mg, 255 umol)，常溫反應1小時。待反應完後，加入到水(0.5 mL)中，之後用二氯甲烷(2.0 mL)萃取，有機相用飽和食鹽水 (0.4 mL)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮，得到(3R)-3-[6-氯-2-(2,6-二甲基嗎啉-4-羰基)- 1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(126 mg)，黃色油狀液體 。ES-API: [M+H] +=494.3。
步驟三：將(3R)-3-[6-氯-2-(2,6-二甲基嗎啉-4-羰基)- 1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯 (126 mg, 255 umol)溶於二氧六環(1 mL)，加入3-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶 (79 mg, 306 umol)，之後加入水(0.2 mL)和碳酸鉀(70.2 mg, 510 umol)，最後加入氯(2-二環己基膦-2′,6′-二甲氧基-1,1′-聯苯基)[2-(2′-氨基-1,1′-聯苯基)]鈀(II)(184 mg, 255 umol)，氮氣保護下加熱120℃攪拌12小時。待反應完後，加入到冰水(2.0 mL)中，之後用乙酸乙酯(5 mL)萃取，有機相用飽和食鹽水(1.0 mL)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮，得到 (3R)-3-(2-(2,6-二甲基嗎啉-4-碳基)-6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5–基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(167 mg)，黃色的油狀物。ES-API: [M+H] += 590.3。
步驟四：將(3R)-3-(2-(2,6-二甲基嗎啉-4-碳基)-6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5–基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(167 mg, 283 umol)溶於乙酸乙酯(1 mL)，加入鹽酸/乙酸乙酯(4.0 mol/L, 1.0 mL)，室溫攪拌2小時。待反應完後，過濾，用乙酸乙酯(1 mL)洗滌濾餅，濾餅旋乾。用製備HPLC(甲酸法)純化得到(2,6-二甲基嗎啉)(6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5–基)-8-((R)-嗎啉 -3-基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)甲酮 (Z459, 23.93 mg, 甲酸鹽)，白色固體。ES-API: [M+H] += 490.3。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.57-8.38 (m, 2H), 8.21-8.20 (d, J= 1.60 Hz, 1H), 7.72 (s, 1H), 7.51 (s, 1H), 7.20 (s, 1H), 4.70-4.66 (d, J= 21.9 Hz, 1H), 4.50-4.46 (d, J= 16.4 Hz, 1H), 4.41-4.38 (m, 1H), 4.04-4.00 (m, 2H), 3.81-3.55 (m, 8H), 3.32-3.30 (m, 1H), 3.24-3.21 (d, J= 12.4 Hz, 1H), 3.05-3.02 (t, J= 6.00 Hz, 2H), 3.68-2.62(m, 2H), 2.37(s, 3H), 1.18-1.16 (d, J= 6.00 Hz, 6H).
實施例222 化合物Z460的合成
步驟一：將3,5-二甲基嗎啉 (90 mg, 781 umol)溶於無水二氯甲烷(0.5 mL)，加入N,N-二異丙基乙胺(302 mg, 2.34 mmol, 408 uL)，在0 ℃下加入三光氣 (292 mg, 985 umol)，常溫反應1小時。待反應完後，反應液減壓濃縮得到粗品3,5-二甲基嗎啉-4-醯氯(140 mg)，直接用於下一步反應。
步驟二：將(R)-3-(6-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯 (5a, 0.09 g, 255 umol)溶於無水二氯甲烷(2 mL),加入N,N-二異丙基乙胺(99 mg, 765 umol, 133 uL)和3,5-二甲基嗎啉-4-醯氯(45.31 mg, 255 umol)，常溫反應1小時。待反應完後，加入到水(0.5 mL)中，之後用二氯甲烷(2 mL)萃取，有機相用飽和食鹽水 (0.4 mL)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，濃縮。得到(3R)-3-[6-氯-2-(3,5-二甲基嗎啉-4-羰基)- 1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯 (126 mg)黃色油狀物。ES-API: [M+H] +=494.3。
步驟三：將(3R)-3-[6-氯-2-(3,5-二甲基嗎啉-4-羰基)- 1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯 (126 mg, 255 umol)溶於二氧六環(1 mL), 加入3-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶 (79 mg, 306 umol), 之後加入0.2 mL水和碳酸鉀(70.2 mg, 510 umol)，最後加入氯(2-二環己基膦-2′,6′-二甲氧基-1,1′-聯苯基)[2-(2′-氨基-1,1′-聯苯基)]鈀(II)(184 mg, 255 umol), 在氮氣保護下加熱120度攪拌12小時。待反應完後，加入到冰水(2.0 mL)中，之後用乙酸乙酯(5 mL)萃取，有機相用飽和食鹽水(1.0 mL)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，濃縮。得到 (3R)-3-(2-(3,5-二甲基嗎啉-4-羰基)-6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5–基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(167 mg)黃色的油狀物。ES-API: [M+H] += 590.3.
步驟四：將(3R)-3-(2-(3,5-二甲基嗎啉-4-羰基)-6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5–基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(167 mg, 283 umol)溶於乙酸乙酯(1 mL),加入鹽酸乙酸乙酯(4.0 mol/L,1.0 mL)，室溫攪拌2小時。待反應完後，過濾，用乙酸乙酯(1.00 mL)洗滌濾餅，濾餅旋乾。用製備HPLC(甲酸法)純化得到 (3,5-二甲基嗎啉)(6-(-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5–基)-8-((R)-嗎啉 -3-基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)甲酮 (Z460, 16.14 mg, 甲酸鹽)，白色固體。ES-API: [M+H] += 490.3. 1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.49-8.37 (s, 2H), 8.22 (s, 1H), 7.75-7.33 (m, 1H), 7.52 (s, 1H), 7.20 (s, 1H), 4.83 (s, 1H), 4.77-4.66 (m, 1H), 4.40-4.32 (m, 1H), 4.03-4.00 (m, 2H), 3.85-3.67 (m, 4H), 3.68-3.54 (m, 2H), 3.53-3.52 (m, 2H), 3.48-3.43 (m, 2H), 3.32-3.31 (m, 1H), 3.23-3.20 (m, 1H), 3.09-3.06(m, 1H), 3.00-2.94(m, 1H), 2.38(s, 3H), 1.11-1.08(t, J= 6.00 Hz, 6H).
實施例223 化合物Z445的合成
步驟一：取(R)-3-(6-氯-2-(2-羥基-2-甲基丙醯基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(44 mg, 0.1 mmol)，聯硼酸頻那醇酯(0.055g, 0.22 mmol)，醋酸鉀(21 mg g, 0.22 mmol), 氯(2-二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II)(8 mg, 0.012 mmol)溶於1,4-二氧六環(5 mL)，110℃攪拌2小時，加入5-溴-3-氟-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(47 mg g, 0.22 mmol)，1,1-二(二苯膦基)二茂鐵二氯化鈀 (10 mg, 0.014 mmol )，110℃攪拌2小時。反應液減壓濃縮至乾，粗品藉由矽膠柱層析(石油醚/乙酸乙酯=50/50)純化，得到(R)-3-(6-(3-氟-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-2-(2-羥基-2-甲基丙醯基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(20 mg, 收率38%)。ES-API: [M+H] +=539.2。
步驟二：取(R)-3-(6-(3-氟-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-2-(2-羥基-2-甲基丙醯基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(20 mg, 0.038 mmol)溶於無水二氯甲烷(0.5 mL)，加入三氟乙酸(0.2 mL)，室溫反應2小時。LC-MS監測反應完全，反應液減壓濃縮至乾，加入氨/甲醇溶液(1mL)中和後，再次濃縮，粗品藉由矽膠柱層析(二氯甲烷/甲醇=10/1)純化得到(R)-1-(6-(3-氟-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-8-(嗎啉-3-基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)-2-羥基-2-甲基丙-1-酮 (Z445, 10.5 mg, 收率63%)。ES-API: [M+H] +=439.2。 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 11.56 (s, 1H), 8.56 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 8.19  (d, J= 2.0 Hz, 1H), 7.79 (s, 1H), 7.51 (s, 1H), 7.46 (s, 1H), 5.53 – 5.30 (m, 2H), 4.94 – 4.55 (m, 1H), 4.03 – 3.96 (m, 2H), 3.79 – 3.77 (m, 2H), 3.55 – 3.51 (m, 1H), 3.30 – 3.16 (m, 3H), 2.96 – 2.94 (m, 4H), 1.36 (s, 6H).
實施例224 化合物Z446的合成
步驟一：取(S)-四氫呋喃-3-羧酸(23 mg, 0.2 mmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(1 mL)，加入2-(7-偶氮苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯(98 mg, 0.26 mmol)，加入(R)-3-(7-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-5-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(70 mg, 0.2 mmol)，N,N-二異丙基乙二胺(52 mg, 0.4 mmol)，室溫反應2小時。加入水(10 mL)稀釋，乙酸乙酯萃取(15 mLX3)，有機相飽和氯化鈉(10 mL)洗滌，減壓濃縮，粗品藉由矽膠柱層析(石油醚/四氫呋喃=50/50)純化，得到(R)-3-(7-氯-2-((S)-四氫呋喃-3-甲醯基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-5-基)嗎啉-4-甲酸叔丁酯(74 mg, 收率80%)。ES-API: [M+H] +=451.2。
步驟二：取(R)-3-(7-氯-2-((S)-四氫呋喃-3-甲醯基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-5-基)嗎啉-4-甲酸叔丁酯(45mg, 0.1 mmol)，3-甲基-5- (4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼烷-2-基)-1H-吡咯[2,3-b]吡啶(52 mg, 0.2 mmol)，氯(2-二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II)(8 mg, 0.012 mmol)，碳酸鉀(42 mg, 0.3 mmol)溶於1,4-二氧六環(2 mL)和水(0.5 mL)，110℃攪拌2小時。反應液減壓濃縮至乾，粗品藉由矽膠柱層析(石油醚/乙酸乙酯=50/50)純化，得到 (R)-3-(7-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-2-((S)-四氫呋喃-3-甲醯基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-5-基)嗎啉-4-甲酸叔丁酯(38mg, 收率70%)。ES-API: [M+H] +=547.3。
步驟三：取 (R)-3-(7-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-2-((S)-四氫呋喃-3-甲醯基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-5-基)嗎啉-4-甲酸叔丁酯(38mg, 0.07 mmol)溶於無水二氯甲烷(0.5 mL)，加入三氟乙酸(0.2 mL)，室溫反應2小時。LC-MS監測反應完全，反應液減壓濃縮至乾，加入氨/甲醇溶液(1mL)中和後，再次濃縮，粗品經矽膠柱層析(二氯甲烷/甲醇=10/1)純化得到(7-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-5-((R)-嗎啉-3-基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)((S)-四氫呋喃-3-基)甲酮 (Z446, 25.0 mg, 收率80%)。ES-API: [M+H] +=447.1。 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6)δ 11.47-11.34 (m, 1H), 8.59 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 8.27-8.19 (m, 1H), 7.98-7.87 (m, 1H), 7.73 (s, 1H), 7.29 (s, 1H), 4.92-4.81 (m, 1H), 4.81-4.74 (m, 1H), 4.72-4.60 (m, 1H), 4.12-4.01 (m, 2H), 4.00-3.78 (m, 4H), 3.78-3.66 (m, 4H), 3.60-3.33 (m, 3H), 3.14-2.99 (m, 1H), 2.98-2.76 (m, 1H), 2.32 (s, 3H), 2.14-1.88 (m, 2H).
實施例225 化合物Z447的合成
步驟一：取4-硝基苯8-氧雜-3-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-羧酸酯(111 mg, 0.4 mmol)，(R)-3-(6-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(5a, 70 mg, 0.2 mmol)，碳酸鉀(55 mg, 0.4 mmol)溶於DMA(2 ml)，130℃反應過夜，加入水(10 mL)稀釋，乙酸乙酯萃取(15 mL X 3)，有機相飽和氯化鈉(10 mL)洗滌，過濾濃縮，粗品藉由矽膠柱層析(石油醚/四氫呋喃=50/50)純化，得到 (3R)-3-(2-(8-氧-3-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-羰基)-6-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(68 mg, 收率70%)。ES-API: [M+H] +=492.2。
步驟二：取 (3R)-3-(2-(8-氧-3-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-羰基)-6-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(68 mg, 0.14 mmol)，3-氯-5- (4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼烷-2-基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(78 mg, 0.28 mmol)，氯(2-二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II)(8 mg, 0.012 mmol)，碳酸鉀(58 mg, 0.42 mmol)溶於1,4-二氧六環(2 mL)和水(0.5 mL)，110℃攪拌2小時。減壓濃縮至乾，粗品藉由矽膠柱層析(石油醚/乙酸乙酯=50/50)純化，得到 (3R)-3-(2-(8-氧-3-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-羰基)-6-(3-氯-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-甲酸叔丁酯(33mg, 收率40%)。ES-API: [M+H] +=608.2。
步驟三：取 (R)-3-(7-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-2-(四氫-2H-吡喃-4-甲醯基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-甲酸叔丁酯(33 mg, 0.055 mmol)溶於無水二氯甲烷(0.5 mL)，加入三氟乙酸(0.2 mL)，室溫反應2小時。LC-MS監測反應完全，反應液減壓濃縮至乾，加入氨/甲醇溶液(1mL)中和後，再次濃縮，粗品經矽膠柱層析(二氯甲烷/甲醇=10/1)純化得到(8-氧雜-3-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)(6-(3-氯-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-8-((R)-嗎啉-3-基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)甲酮(Z447, 10.0 mg, 收率37%)。ES-API: [M+H] +=508.0。 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6)δ 12.07 (s, 1H), 8.58 (d, 1H), 8.08 (d, J= 1.6 Hz, 1H), 7.78 (s, 1H), 7.73 (d, J= 2.4 Hz, 1H), 7.47 (s, 1H), 4.60-4.50 (m, 1H), 4.44-4.35 (m, 1H), 4.28 (s, 2H), 4.04-3.95 (m, 1H), 3.78 (t, J= 10.0 Hz, 2H), 3.60-3.49 (m, 1H), 3.49-3.27 (m, 4H), 3.16-3.04 (m, 3H), 3.01-2.87 (m, 4H), 1.87-1.75 (m, 4H).
實施例226 化合物Z448的合成
步驟一：(R)-3-(6-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(5a, 70 mg, 0.198 mmol)和N,N-二異丙基乙胺 (0.098 mL, 0.595 mmol)溶解到二氯甲烷 (5 mL)，冰水浴冷卻，加入1,4-噁嗪烷-4-碳醯氯 (59.34 mg, 0.397 mmol)，室溫反應1小時。反應完畢加入水(10 mL)，二氯甲烷(10mLX3)萃取，合併有機相，飽和食鹽水(30mLX1)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮，粗品藉由矽膠柱層析純化(石油醚/乙酸乙酯=2/1)得到(R)-3-(6-氯-2-(嗎啉-4-羰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(78.57 mg, 收率85%)。ES-API: [M+H] +=466.3。
步驟二：將(R)-3-(6-氯-2-(嗎啉-4-羰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯 (78.57 mg, 0.169 mmol)和4,4,5,5-四甲基-2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼烷-2-基)-1,3,2-二氧硼烷(127.52 mg, 0.502 mmol)溶解到二氧六環 (10 mL)，依次加入氯(2 -二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II)(13.15 mg, 0.017 mmol)和醋酸鉀(49.28 mg, 0.502 mmol)，120℃反應1小時。降溫至100℃，依次加入水(3 mL)，碳酸鉀(69.2 mg, 0.502 mmol)和5-溴-3-乙基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(76mg, 0.338mmol)。反應2小時，反應用水(10 mL)稀釋，用乙酸乙酯(30 mLX1)萃取。有機相飽和食鹽水(20 mLX1)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮，粗品藉由矽膠柱層析純化(石油醚:乙酸乙酯=1:1)，得到 (R)-3-(6-(3-乙基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-2-(嗎啉-4-羰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(57.55 mg, 收率60%)。ES-API: [M+H] +=576.2。
步驟三：將(R)-3-(6-(3-乙基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-2-(嗎啉-4-羰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(57.55 mg, 0.100 mmol)溶於二氯甲烷(2.0 mL)中，加入三氟乙酸(2.0 mL)。室溫反應1小時。反應完成後，反應液濃縮，加入氨水(0.5ml)，再次濃縮，粗品經製備HPLC(氨水法)純化得到產物(R)-(6-(3-乙基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-8-(嗎啉-3-基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)(嗎啉)甲酮(Z448, 8 mg, 收率16.65%)。ES-API: [M+H] +=476.2。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 11.37 (s, 1H), 8.45 (d, J= 2.2 Hz, 1H), 8.11 (d, J= 2.2 Hz, 1H), 7.74 (d, J= 2.1 Hz, 1H), 7.43 (s, 1H), 7.27 (d, J= 2.3 Hz, 1H), 4.59 (d, J= 16.4 Hz, 1H), 4.45 (d, J= 16.4 Hz, 1H), 3.99 (s, 1H), 3.79 (t, J= 9.7 Hz, 2H), 3.62 (t, J= 4.7 Hz, 4H), 3.45 (q, J= 6.0 Hz, 2H), 3.32 (s, 4H), 3.20 (q, J= 4.1 Hz, 3H), 2.96 (d, J= 7.3 Hz, 4H), 2.76 (q, J= 7.5 Hz, 2H), 1.29 (t, J= 7.5 Hz, 3H).
實施例227 化合物Z377的合成
步驟一：取 (R)-3-(2-乙醯基-7-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-5-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(78 mg, 0.2 mmol)溶於乙醇(5 mL)和水(1 mL)中，加入氫氧化鈉(32 mg, 0.8 mmol)，80℃反應過夜，減壓濃縮，加入水(10 mL)稀釋，二氯甲烷萃取(15 mLX3)，有機相飽和氯化鈉(10 mL)洗，減壓濃縮，藉由矽膠柱層析(石油醚/四氫呋喃=50/50)純化，得到(R)-3-(7-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-5-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(56 mg, 收率80%)。ES-API: [M+H] +=353.2。
步驟二：取四氫吡喃-4-羧酸(26 mg, 0.2 mmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(1 mL)，加入2-(7-偶氮苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯(98 mg, 0.26 mmol)，加入(R)-3-(7-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-5-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(70 mg, 0.2 mmol)，N,N-二異丙基乙胺(52 mg, 0.4 mmol)，室溫反應2小時，加入水(10 mL)稀釋，乙酸乙酯萃取(15 mLX3)，有機相飽和氯化鈉(10 mL)洗，減壓濃縮，藉由矽膠柱層析(石油醚/四氫呋喃=50/50)純化，得到(R)-3-(7-氯-2-(四氫-2H-吡喃-4-甲醯基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-5-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(74 mg, 收率80%)。ES-API: [M+H] +=465.2。
步驟三：取(R)-3-(7-氯-2-(四氫-2H-吡喃-4-甲醯基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-5-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(46mg, 0.1 mmol)，3-甲基-5- (4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼烷-2-基)-1H-吡咯[2,3-b]吡啶(52 mg, 0.2 mmol)，氯(2-二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II)(8 mg, 0.012 mmol)，碳酸鉀 (42 mg, 0.3 mmol)溶於1,4-二氧六環(2 mL)和水(0.5 mL)，110℃攪拌2小時。減壓濃縮至乾，藉由矽膠柱層析(石油醚/乙酸乙酯=50/50)純化，得到 (R)-3-(7-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-2-(四氫-2H-吡喃-4-甲醯基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-5-基)嗎啉-4-甲酸叔丁酯(31mg, 收率55%)。ES-API: [M+H] +=561.2。
步驟四：取 (R)-3-(7-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-2-(四氫-2H-吡喃-4-甲醯基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-5-基)嗎啉-4-甲酸叔丁酯(31 mg, 0.055 mmol)溶於無水二氯甲烷(0.5 mL)，加入三氟乙酸(0.2 mL)，室溫反應2小時。LC-MS監測反應完全，減壓濃縮至乾，加入氨/甲醇溶液(1mL)中和後，再次濃縮，經矽膠柱層析(二氯甲烷/甲醇=10/1)純化得到(R)-(7-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-5-(嗎啉-3-基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)(四氫-2H-吡喃-4基)甲酮(Z377, 22.0 mg, 收率88%)。ES-API: [M+H] +=461.2。 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 11.35 (s, 1H), 8.48 (s, 1H), 8.13 (s, 1H), 7.79(s, 1H), 7.53 (s, 1H), 7.27 (s, 1H), 4.83 (s, 1H), 4.71 (d, J= 6.0 Hz, 1H), 4.08 – 4.06 (m, 1H), 3.78 – 3.66 (m, 6H), 3.56 – 3.42 (m, 3H), 3.25 – 3.22 (m, 1H)3.08 – 2.69 (m, 6H), 2.32 (s, 3H), 1.60 (s, 4H).
實施例228 化合物Z449的合成
步驟一：取 (S)-3-(2-乙醯基-7-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-5-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(78 mg, 0.2 mmol)溶於乙醇(5 mL)和水(1 mL)中，加入氫氧化鈉(32 mg, 0.8 mmol)，80℃反應過夜，減壓濃縮，加入水(10 mL)稀釋，二氯甲烷萃取(15 mLX3)，有機相飽和氯化鈉(10 ml)洗，減壓濃縮，藉由矽膠柱層析(石油醚/四氫呋喃=50/50)純化，得到(S)-3-(7-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-5-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(56 mg, 收率80%)。ES-API: [M+H] +=353.2。
步驟二：取四氫吡喃-4-羧酸(26 mg, 0.2 mmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(1 mL)，加入2-(7-偶氮苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯(98 mg, 0.26 mmol)，加入(S)-3-(7-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-5-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(70 mg, 0.2 mmol)，N,N-二異丙基乙胺(52 mg, 0.4 mmol)，室溫反應2小時，加入水(10 mL)稀釋，乙酸乙酯萃取(15 mLX3)，有機相飽和氯化鈉(10 mL)洗，減壓濃縮，藉由矽膠柱層析(石油醚/四氫呋喃=50/50)純化，得到(S)-3-(7-氯-2-(四氫-2H-吡喃-4-甲醯基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-5-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(74 mg, 收率80%)。ES-API: [M+H] +=465.2。
步驟三：取(S)-3-(7-氯-2-(四氫-2H-吡喃-4-甲醯基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-5-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(46mg, 0.1 mmol)，3-甲基-5- (4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼烷-2-基)-1H-吡咯[2,3-b]吡啶(52 mg, 0.2 mmol)，氯(2-二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II)(8 mg, 0.012 mmol)，碳酸鉀 (42 mg, 0.3 mmol)溶於1,4-二氧六環(2 mL)和水(0.5 mL)，110℃攪拌2小時。減壓濃縮至乾，藉由矽膠柱層析(石油醚/乙酸乙酯=50/50)純化，得到 (S)-3-(7-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-2-(四氫-2H-吡喃-4-甲醯基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-5-基)嗎啉-4-甲酸叔丁酯(28 mg, 收率50%)。ES-API: [M+H] +=561.3。
步驟四：取 (S)-3-(7-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-2-(四氫-2H-吡喃-4-甲醯基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-5-基)嗎啉-4-甲酸叔丁酯(28 mg, 0.05 mmol)溶於無水二氯甲烷(0.5 mL)，加入三氟乙酸(0.2 mL)，室溫反應2小時。LC-MS監測反應完全，反應液減壓濃縮至乾，加入氨/甲醇溶液(1mL)中和後，再次濃縮，經矽膠柱層析(二氯甲烷/甲醇=10/1)純化得到(S)-(7-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-5-(嗎啉-3-基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)(四氫-2H-吡喃-4基)甲酮 (Z449, 18.5 mg, 收率78%)。ES-API: [M+H] +=461.2。 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 11.34 (s, 1H), 8.47 (s, 1H), 8.12 (s, 1H), 7.77 (s, 1H), 7.51 (s, 1H), 7.27 (s, 1H), 4.82 (s, 1H), 4.70 (d, J= 6.0 Hz, 1H), 4.02 (d, J= 10.0 Hz, 1H), 3.88 – 3.76 (m, 6H), 3.54 – 3.42 (m, 3H), 3.25 – 3.22 (m, 1H), 3.09 – 2.71 (m, 6H), 2.32 (s, 3H), 1.65 – 1.58 (m, 4H).
實施例229 化合物Z450的合成
步驟一：4-羥基四氫-2H-吡喃-4-羧酸(26.3 mg, 0.18 mmol)溶於二氯甲烷(1.0 mL)，在室溫下加入2-(7-偶氮苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯(68.4 mg, 0.18 mmol)，N,N-二異丙基乙胺(46.5 mg, 0.36 mmol)，常溫下攪拌3分鐘後，加入( R)-3-(6-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(5a, 65 mg, 0.18 mol)，常溫攪拌反應2小時。LC-MS檢測反應完全，加入水(5 mL)，用二氯甲烷：甲醇混合溶液萃取(10：1, 10 mL×2)，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮並藉由矽膠柱層析純化(二氯甲烷：甲醇= 3%-6%)得到產物( R)-3-(6-氯-2-(4-羥基四氫-2H-吡喃-4-羰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(54 mg, 收率：93%)。ES-API: [M+H] +=481.2。
步驟二：( R)-3-(6-氯-2-(4-羥基四氫-2H-吡喃-4-羰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(54 mg, 0.11 mmol)溶於1,4-二氧六環(2.0 mL)和水(0.5 mL)，常溫加入(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)硼酸(23.1 mg, 0.13 mmol)，氯(2-二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II)(7.2 mg, 0.01 mmol)和碳酸鉀(30.4 mg, 0.22 mmol)，氮氣保護下，100℃攪拌2小時。反應結束後，反應液溶於乙酸乙酯(20.0 mL)，並依次用飽和食鹽水(10.0 mL)和水(10.0 mL)洗滌。有機相用無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮並用快速矽膠柱(0-10%甲醇/二氯甲烷)純化，得到產物( R)-3-(2-(4-羥基四氫-2H-吡喃-4-羰基)-6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(57.2 mg, 收率：88%)。ES-API: [M+H] += 577.2。
步驟三：( R)-3-(2-(4-羥基四氫-2H-吡喃-4-羰基)-6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(57.2 mg , 0.10 mmol)溶於二氯甲烷(4.0 mL)，加入三氟乙酸(2.0 mL)，反應在室溫下反應2小時。反應液濃縮，加入7.0M氨甲醇溶液(5.0 mL)，溶劑旋乾，粗品用製備HPLC(氨水法)純化得到目標產物( R)-(4-羥基四氫-2H-吡喃-4-基)(6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-8-(嗎啉-3-基))-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)甲酮(Z450, 27.3 mg, 收率：57%)，白色固體。ES-API: [M+H] +=477.2。
實施例230 化合物Z451的合成
步驟一：( R)-3-(6-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(5a, 50 mg, 0.14 mmol)和三乙胺(29 mg, 0.28 mmol)溶於二氯乙烷(5 mL)，在冰浴下加入對硝基苯基氯甲酸酯(37 mg, 0.18 mmol)，反應在室溫下攪拌30分鐘。反應液濃縮，粗品用快速矽膠柱純化(四氫呋喃/石油醚：0-25%)得到目標產物( R)-3-(6-氯-2-((4-硝基苯氧基)羰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(70 mg, 收率95.4%)，無色液體。ES-API: [M+Na] +=518.2。
步驟二：( R)-3-(6-氯-2-((4-硝基苯氧基)羰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(40 mg, 0.077 mmol)溶於 N, N-二甲基乙醯胺(2 mL)，在室溫下加入碳酸鉀(43 mg, 0.31 mmol)和8-氧代-3-雜氮二環[3,2,1]辛烷鹽酸鹽(23 mg, 0.15 mmol)，反應在135℃攪拌6小時。反應液冷卻到室溫，加入水(6 mL)，析出的固體過濾，濾餅真空下乾燥，然後用快速矽膠柱純化(甲醇/二氯甲烷：0-3%)得到目標產物(3 R)-3-(2-(8-氧-3-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-羰基)-6-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(25 mg, 收率65.8%)，淡黃色固體。ES-API: [M+H] +=492.3。
步驟三：向25 mL圓底燒瓶中加入(3 R)-3-(2-(8-氧-3-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-羰基)-6-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(25 mg, 0.05 mmol)，3-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼烷-2-基)-1H-吡咯[2,3- b]吡啶 (26 mg, 0.10 mmol)，2-二環己基膦-2′,6′-二甲氧基-聯苯(4 mg, 0.005mmol)，氯(2 -二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II)(2 mg, 0.005 mmol)，碳酸鉀 (21 mg, 0.15 mmol)，1,4-二氧六環(2 mL)，和水(0.4 mL)。氮氣置換3次，反應在120℃反應2小時。將反應冷卻至室溫，加入乙酸乙酯(50 mL)，用飽和食鹽水(15 mL)洗滌，用無水硫酸鈉乾燥並過濾濃縮。粗品用快速矽膠柱純化(甲醇/二氯甲烷：0-3%)得到目標產物(3 R)-3-(2-(8-氧-3-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-羰基)-6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3- b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(18 mg, 收率60.3%)，淡黃色固體。ES-API: [M+H] +=588.2。
步驟四：(3 R)-3-(2-(8-氧-3-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-羰基)-6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3- b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(18 mg, 0.03 mmol)溶於甲醇(1 mL)，加入4.0M氯化氫二氧六環溶液(4 mL, 16.0 mmol)，反應在室溫下反應2小時。反應液濃縮，加入7.0M氨甲醇溶液(5 mL)，溶劑旋乾，粗品用製備HPLC(甲酸法)純化得到目標產物(8-氧雜-3-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)(6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-8-(( R)-嗎啉-3-基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)甲酮(Z451, 甲酸鹽, 8 mg, 收率53.6%)，白色固體。ES-API: [M+H] +=488.2。
實施例231 化合物Z461的合成
步驟一：向25mL圓底燒瓶中加入(3R)-3-(6-氯-2-(4-羥基-2,2-二甲基吡咯烷-1-羰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(22 mg, 0.445 mmol)和四氫呋喃(10 mL)。0℃條件下分批加入氫化鈉(53 mg, 2.2 mmol)，保溫攪拌20分鐘後加入碘甲烷(316 mg, 2.2 mmol)。反應液加入乙酸乙酯(10 mL)，用飽和食鹽水(10 mLX3)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮，粗品用快速矽膠柱純化(甲醇：二氯甲烷=10:100)得到目標產物(3R)-3-(6-氯-2-(4-甲氧基-2,2-二甲基吡咯烷-1-羰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(80 mg, 收率: 35%)。ES-API: [M+H] +=508.3。
步驟二：向5 mL微波反應器中加入(3R)-3-(6-氯-2-(4-甲氧基-2,2-二甲基吡咯烷-1-羰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯 (90 mg, 0.17 mmol)，3-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(137.2 mg, 0.53 mmol)，碳酸鉀(73.5 mg, 0.53 mmol)，甲烷磺酸(2-二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II)(12.7 mg, 0.01 mmol)，二氧六環(2 mL)和水(0.3 mL)。體系用氮氣置換三次，然後用氮氣球保護。120℃條件下反應2小時，反應液加入乙酸乙酯(10 mL)，用飽和食鹽水(5 mLX3)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮，粗品用快速矽膠柱純化(甲醇：二氯甲烷=10:100)得到 (3R)-3-(2-(4-甲氧基-2,2-二甲基吡咯烷-1-羰基)-6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(50mg, 收率: 46%)。ES-API: [M+H] +=604.3。
步驟三：向5 mL單口圓底燒瓶中加入(3R)-3-(2-(4-甲氧基-2,2-二甲基吡咯烷-1-羰基)-6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(50 mg, 0.08 mmol)，三氟乙酸(3 mL)和二氯甲烷(6 mL)，室溫攪拌反應30分鐘，旋乾粗品用製備HPLC(碳酸氫銨法)純化得到 (4-甲氧基-2,2-二甲基吡咯烷-1-基)(6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-8-((R)-嗎啉-3-基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)甲酮(Z461, 10 mg, 收率:24%)。ES-API: [M+H] +=504.3。 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 11.34 (s, 1H), 8.45 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 8.09 (d, J= 1.9 Hz, 1H), 7.75 (s, 1H), 7.42 (s, 1H), 7.26 (s, 1H), 4.43 (dd, J= 16.4, 5.4 Hz, 1H), 4.30 – 4.19 (m, 1H), 3.90-4.05 (m, 2H), 3.85 – 3.66 (m, 3H), 3.59 – 3.34 (m, 3H), 3.31-3.28 (m, 2H), 3.27 – 3.20 (m, 4H), 3.0-2.88 (m, 4H), 2.31 (s, 3H), 2.03 – 1.77 (m, 2H), 1.44 (d, J= 5.4 Hz, 3H), 1.37 (s, 3H).
實施例232 化合物Z462的合成
步驟一：向5 mL微波反應器中加入(3R)-3-(6-氯-2-(8-甲基-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-羰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯 (30 mg, 0.06 mmol)，5-溴-3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(66 mg, 0.24 mmol)，碳酸鉀(25 mg, 0.18 mmol)，甲烷磺酸(2-二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II)(5.80 mg, 0.01 mmol)，二氧六環(2 mL)和水(0.3 mL)。體系用氮氣置換三次，然後用氮氣球保護。110℃微波條件下反應2小時，反應液加入乙酸乙酯(10 mL)，用飽和食鹽水(5 mLX3)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮，粗品用快速矽膠柱純化(甲醇：二氯甲烷=10:100)得到目標產物(3R)-3-(6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-2-(8-甲基-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-羰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(30mg, 收率: 84%)。ES-API: [M+H] +=601.3。
步驟二：向5 mL單口圓底燒瓶中加入(3R)-3-(6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-2-(8-甲基-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-羰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(30 mg, 0.03 mmol)，三氟乙酸(3 mL)和二氯甲烷(6 mL)，室溫攪拌反應30分鐘，旋乾粗品用製備HPLC(碳酸氫銨法)純化得到6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-8-((R)-嗎啉-3-基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)(8-甲基-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)甲酮(Z462, 0.5mg, 收率:2%)。ES-API: [M+H] +=501.3。 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 11.36 (s, 1H), 8.47 (d, J= 1.7 Hz, 1H), 8.11 (d, J= 1.7 Hz, 1H), 7.78 (s, 1H), 7.45 (s, 1H), 7.27 (s, 1H), 4.53 (d, J= 16.3 Hz, 1H), 4.38 (d, J= 16.4 Hz, 1H), 4.05 (d, J= 7.7 Hz, 1H), 3.84 (s, 1H), 3.56 – 2.89 (m, 16H), 2.32 (d, J= 5.6 Hz, 6H), 1.95 (s, 2H), 1.77-1.66 (m, 2H).
實施例233化合物Z463的合成
步驟一：取(1S,4S)-2-氧雜-5-氮雜雙環[2.2.1]庚烷鹽酸鹽(272 mg, 2.018 mmol)溶於二氯甲烷(10 mL)，冰浴下加入三乙胺(0.701 mL, 5.044 mmol)，對硝基苯基氯甲酸酯(447.32 mg, 2.219 mmol)，室溫反應1小時，反應液減壓濃縮，藉由矽膠柱層析(石油醚/石油醚=80/20)純化得到(1S,4S)-2-氧雜-5-氮雜雙環[2.2.1]庚烷-5-羧酸 4-硝基苯基酯(380 mg, 1.438 mmol, 收率71.28%)。ES-API: [M+H] +=265.0。
步驟二：取(1S,4S)-2-氧雜-5-氮雜雙環[2.2.1]庚烷-5-羧酸 4-硝基苯基酯(89.86 mg, 0.340 mmol)溶於N,N-二甲基乙醯胺(1mL)加入(R)-3-(6-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(5a, 60 mg, 0.170 mmol)，碳酸鉀 (47.00 mg, 0.340 mmol)，130℃反應3小時，反應結束後，加水(10 mL)稀釋，乙酸乙酯(10 mLX3)萃取，有機相飽和食鹽水(10 mL)洗，無水硫酸鈉乾燥，減壓濃縮至乾，得到粗品藉由矽膠柱層析(石油醚/乙酸乙酯=70/30)純化得到(R)-3-(2-((1S,4S)-2-氧-5-氮雜雙環[2.2.1]庚烷-5-羰基)-6-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(56 mg, 0.117 mmol, 收率68.90%)。ES-API: [M+H] +=478.1。
步驟三：取(R)-3-(2-((1S,4S)-2-氧-5-氮雜雙環[2.2.1]庚烷-5-羰基)-6-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(55 mg, 0.115 mmol)，3-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(59.40 mg, 0.230 mmol)，甲烷磺酸(2-二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II)(8.28 mg, 0.012 mmol)，碳酸鉀 (47.71 mg, 0.345 mmol)溶於1,4-二氧六環(5 mL)和水(1 mL)，氮氣保護下110℃攪拌2小時，反應液減壓濃縮至乾，得到粗品藉由矽膠柱層析(石油醚/乙酸乙酯=30/70)純化得到(R)-3-(2-((1S,4S)-2-氧雜-5-氮雜雙環[2.2.1]庚烷-5-羰基)-6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(30 mg, 0.052 mmol, 收率45.45%)。ES-API: [M+H] +=574.3。
步驟四：取(R)-3-(2-((1S,4S)-2-氧雜-5-氮雜雙環[2.2.1]庚烷-5-羰基)-6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(22 mg, 0.038 mmol)溶於甲醇 (1 mL)，加入鹽酸/二氧六環 (2 mL)，室溫反應2小時，LC-MS監測反應完全，反應液減壓濃縮至乾，加入氨/甲醇溶液(1mL)中和後，再次濃縮，經矽膠柱層析(二氯甲烷/甲醇=10/1)純化得到((1S,4S)-2-氧雜-5-氮雜雙環[2.2.1]庚烷-5-基)-6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-8-((R)-嗎啉-3-基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)甲酮 (Z463, 9.8 mg, 0.021 mmol, 收率51.58%)。ES-API: [M+H] +=474.2。 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 11.34 (s, 1H), 8.46 (s, 1H), 8.10 (s, 1H), 7.76 (s, 1H), 7.44 (s, 1H), 7.27 (s, 1H), 4.67 – 4.42 (m, 3H), 4.34 (s, 1H), 3.97 – 3.91 (m, 2H), 3.79 – 3.71 (m, 3H), 3.58 – 3.51 (m, 4H), 3.28 – 3.18 (m, 3H), 3.02 – 2.85 (m, 4H), 2.32 (s, 3H), 1.78 – 1.73 (m, 2H).
實施例234化合物Z464的合成
步驟一：將(R)-3-(2-(2-羥基-2-甲基丙醯基)-6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(100 mg, 0.189 mmol)、5-溴-3-乙基-2-氟-1-甲苯磺醯基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(150 mg, 0.378 mmol)、氯(2-二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II)(13.59 mg, 0.019 mmol)和碳酸鉀 (78.27 mg, 0.566 mmol)溶解到1,4-二氧六環(5 mL)和水(1mL)，氮氣保護，在100℃攪拌反應1小時。反應完畢加入水(30 mL)，乙酸乙酯(30 mLx3)萃取，合併有機相，飽和食鹽水(30 mLx1)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮，得到粗品經矽膠柱色譜純化(石油醚/乙酸乙酯=1/5)得到(R)-3-(6-(3-乙基-2-氟-1-對甲苯磺醯基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-2-(2-羥基-2-甲基丙醯基)-1,2, 3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(95 mg, 0.132 mmol, 收率69.80%)。ES-API: [M+H] +=721.2。
步驟二：將(R)-3-(6-(3-乙基-2-氟-1-對甲苯磺醯基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-2-(2-羥基-2-甲基丙醯基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(95 mg, 0.132 mmol)溶解在四氫呋喃 (5 mL)中，加入四丁基氟化銨 (0.416 mL，1M的四氫呋喃溶液)。在室溫下6小時後，將反應混合物用飽和碳酸氫鈉溶液處理，乙酸乙酯(30 mLx3)萃取，合併有機相，飽和食鹽水(30 mLx1)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮，得到粗品經矽膠柱色譜純化(石油醚/乙酸乙酯=1/5)得到(R)-3-(6-(3-乙基-2-氟-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-2-(2-羥基-2-甲基丙醯基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯 (35 mg, 0.062 mmol, 收率44.52%)。ES-API: [M+H] +=567.2。
步驟三：將(R)-3-(6-(3-乙基-2-氟-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-2-(2-羥基-2-甲基丙醯基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯 (35 mg, 0.062 mmol)溶解到二氯甲烷(2 mL)中，加入三氟乙酸(1 mL)中，室溫反應0.5小時，反應完畢，反應液濃縮，加入氨/甲醇溶液(1 mL)中和後，再次濃縮，經製備HPLC(氨水法)純化得到(R)-3-(6-(3-乙基-2-氟-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-2-(2-羥基-2-甲基丙醯基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉(Z464, 4.81 mg, 0.010 mmol, 收率16.69%)。ES-API: [M+H] +=467.2。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 11.72 (s, 1H), 8.74 (s, 1H), 8.18 (s, 1H), 7.82 (s, 1H), 7.67 (s, 1H), 5.54 (s, 1H), 5.32 (t, J= 4.9 Hz, 1H), 4.14 (d, J= 8.4 Hz, 1H), 3.99 (d, J= 10.0 Hz, 1H), 3.79 (d, J= 10.5 Hz, 2H), 3.55 (s, 1H), 3.36 – 3.34 (m, 2H), 2.99 – 2.89 (m, 4H), 2.36 – 2.34 (s, 2H), 2.00 (q, J= 7.1 Hz, 2H), 1.24 (s, 6H), 1.16 (t, J= 7.2 Hz, 3H).
實施例235化合物Z465的合成
步驟一：將(R)-3-(2-(2-羥基-2-甲基丙醯基)-6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(80 mg, 0.151 mmol)、2-溴-7-氯-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪(105.18 mg, 0.452 mmol)、氯(2-二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II)(21.72 mg, 0.030 mmol)和碳酸鉀 (62.44 mg, 0.452 mmol)溶解到1,4-二氧六環(5 mL)和水(1 mL)，氮氣保護，在115℃攪拌反應6小時。反應完畢加入水(30 mL)，乙酸乙酯(30 mLx3)萃取，合併有機相，飽和食鹽水(30 mLx1)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮，得到粗品經矽膠柱色譜純化(石油醚/乙酸乙酯=1/5)得到(R)-3-(6-(7-氯-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-2-基)-2-(2-羥基-2-甲基丙醯基)-1,2, 3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(55 mg, 0.099 mmol, 收率65.59%)。ES-API: [M+H] +=556.2。
步驟二：將(R)-3-(6-(7-氯-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-2-基)-2-(2-羥基-2-甲基丙醯基)-1,2, 3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(55 mg, 0.099 mmol)溶解到二氯甲烷(2 mL)中，加入三氟乙酸(1mL)中，室溫反應0.5小時，反應完畢，反應液濃縮，加入氨/甲醇溶液(1 mL)中和後，再次濃縮，經製備HPLC(氨水法)純化得到(R)-3-(6-(7-氯-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-2-基)-2-(2-羥基-2-甲基丙醯基)-1,2, 3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉(Z465, 5.28 mg, 0.012 mmol, 收率11.71%)。ES-API: [M+H] +=456.1。
實施例236化合物Z466的合成
步驟一：向 ( R)-3-(6-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(5a, 50 mg, 0.14 mmol)的二氯甲烷(2 mL)溶液中加入2-甲氧基乙醯氯(23.07 mg, 0.21 mmol)，三乙胺(43.02 mg, 0.43 mmol)，混合液在0°C下攪拌半小時，LCMS監測反應完全，加水淬滅反應，二氯甲烷萃取，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮，得到粗品經矽膠柱層析純化(流動相0-60%乙酸乙酯/石油醚，石油醚/乙酸乙酯=1/1，Rf=0.4)得到產物( R)-3-(6-氯-2-(2-甲氧基乙醯基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(40 mg, 收率66.43%)。ES-API:[M+H] += 425.2。
步驟二：向化合物( R)-3-(6-氯-2-(2-甲氧基乙醯基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(40 mg, 0.09 mmol )的二氧六環/水(2 mL/0.4 mL)的溶液中 加入3-氯-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶(31.46 mg, 0.11 mmol)，氯(2-二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II)(9.25 mg, 0.013 mmmol)，碳酸鉀(38.97 mg, 0.28 mmol)，在氮氣保護下將混合物加熱到100 °C攪拌2小時，藉由LCMS監測反應完全，用乙酸乙酯/水處理，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮，得到粗品經矽膠柱層析純化(流動相0-10%甲醇/二氯甲烷，二氯甲烷/甲醇=10/1，Rf=0.6)得到產物( R)-3-(6-(3-氯-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶-5-基)-2-(2-甲氧基乙醯基)-1,2,3,4- 四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(18 mg, 收率35.34%)。ES-API:[M+H]+= 541.2。
步驟三：向化合物( R)-3-(6-(3-氯-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶-5-基)-2-(2-甲氧基乙醯基)-1,2,3,4- 四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(18 mg, 0.03 mmol)的二氯甲烷(2 mL)溶液中加入三氟乙酸(1 mL)，常溫攪拌1小時，藉由LCMS監測，用飽和碳酸氫鈉中和調節pH至7，用二氯甲烷/水處理，無水硫酸鈉乾燥並過濾濃縮，經製備HPLC純化(氨水法-A)得到( R)- 1-[6-(3-氯-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶-5-基)-8-嗎啉-3-基-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]- 2-甲氧基乙-1-酮(Z466, 2.54 mg, 收率17.32%)，白色粉末。ES-API:[M+H] +=441.1。
實施例237化合物Z467的合成
步驟一：向 ( R)-3-(6-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯 (5a, 50 mg, 0.14 mmol)的二氯甲烷 (2 mL)溶液中加入三乙胺 (43.02 mg, 0.43 mmol)和環丙烷磺醯氯(23.91 mg, 0.17 mmol)，反應在0℃下攪拌2小時。將混合物加入水，二氯甲烷萃取，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮，得到粗品經矽膠柱層析純化(石油醚/乙酸乙酯=5/1)得到( R)-3-(6-氯-2-環丙基磺醯基-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(60.00 mg, 產率92.66%)，為無色油狀物。ES-API:[M+1-100] +=357.1。
步驟二：向( R)-3-(6-氯-2-環丙基磺醯基-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(60 mg, 0.13 mmol)的二氧六環/水(4 mL/1.0 mL)溶液中加入3-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶 (40.68 mg, 0.16 mmol)、碳酸鉀(54.36 mg, 0.39 mmol)和 氯(2-二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II)(9.45 mg, 13.13 μmol)，加熱至100℃反應2小時。反應完成後，反應液旋乾，得到粗品經矽膠柱層析純化(石油醚/乙酸乙酯=10/1)得到產物 ( R)-3-[2-環丙基磺醯基-6-(3-甲基-1 H-吡咯并[2,3- b] 吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基] 嗎啉-4-羧酸叔丁酯(57.00 mg, 產率78.55%)，為黃色油狀物。ES-API:[M+1] +=553.2。
步驟三：將( R)-3-[2-環丙基磺醯基-6-(3-甲基-1 H-吡咯并[2,3- b] 吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基] 嗎啉-4-羧酸叔丁酯(57.00 mg, 0.1 mmol)溶於二氯甲烷(1.0 mL)中，加入三氟乙酸(1.0 mL)。室溫反應1小時。反應完成後，反應液旋乾，得到粗品經矽膠柱層析純化(二氯甲烷/甲醇=10/1)得到產物( R)-3-[2-環丙基磺醯基-6-(3-甲基-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基]嗎啉 (Z467, 15.3 mg, 產率32.14%)，為黃色固體。ES-API:[M+1] +=453.0。 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6)δ 11.35 (s, 1H), 8.58-8.53 (m, 1H), 8.29-8.25 (m, 1H), 8.08-8.02 (m, 1H), 7.58 (s, 1H), 7.25-7.21 (m, 1H), 4.73 (d, J = 15.8 Hz, 1H), 4.48 (d, J = 15.8 Hz, 1H), 4.35-4.23 (m, 1H), 3.95-3.79 (m, 3H), 3.68-3.36 (m, 6H), 3.04-2.96 (m, 2H), 2.81-2.73 (m, 1H), 2.29 (s, 3H), 1.06-0.94 (m, 4H).
實施例238化合物Z468的合成
步驟一：向 ( R)-3-(6-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯 (5a, 50 mg, 0.14 mmol)的二氯甲烷 (2 mL)溶液中加入2-甲基嘧啶-5-羧酸 (29.36 mg, 0.21 mmol)，三乙胺 (43.02 mg, 0.43 mmol)，1-丙基磷酸酐(133.6 mg, 0.21 mmol, 50%的乙酸乙酯溶液)，反應在25℃下攪拌2小時。將混合物加入水並用乙酸乙酯(10mlx1)萃取，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮，得到粗品經矽膠柱層析純化(石油醚/乙酸乙酯=1/1)純化得到( R)-3-[6-氯-2-(2-甲基嘧啶-5-羰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基]嗎啉-4-羧酸叔丁酯 (60.00 mg, 產率89.53%)，為黃色油狀物。ES-API:[M+1] +=473.2。
步驟二：向( R)-3-[6-氯-2-(2-甲基嘧啶-5-羰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基]嗎啉-4-羧酸叔丁酯 (60 mg, 0.13 mmol)的二氧六環/水(4 mL/1.0 mL)溶液中加入3-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶 (39.29 mg, 0.15 mmol)、碳酸鉀(52.52 mg, 0.38 mmol)和 氯(2-二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II)(9.26 mg, 12.69 μmol)，加熱至100℃反應2小時。反應完成後，反應液旋乾，得到粗品經矽膠柱層析純化(二氯甲烷/甲醇=10/1)得到產物叔丁基 ( R)-3-[2-(2-甲基嘧啶-5-羰基)-6-(3-甲基-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基] 嗎啉-4-羧酸叔丁酯(60.00 mg, 產率83.17%)，為黃色油狀物。ES-API:[M+1] +=569.3。
步驟三：將( R)-3-[2-(2-甲基嘧啶-5-羰基)-6-(3-甲基-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基] 嗎啉-4-羧酸叔丁酯(60 mg, 0.11 mmol)溶於二氯甲烷(1.0 mL)中，加入三氟乙酸(1.0 mL)。室溫反應1小時。反應完成後，反應液旋乾，得到粗品經矽膠柱層析純化(二氯甲烷/甲醇=10/1)得到產物( R)- (2-甲基嘧啶-5-基)-[6-(3-甲基-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶-5-基)-8-[嗎啉-3-基]-3 ,4-二氫異喹啉-2(1H)-基] 甲酮(Z468, 20.00 mg, 產率40.46%)，為黃色固體。ES-API:[M+1] +=469.1。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6)δ 11.36 (s, 1H), 8.83 (s, 2H), 8.64 (d, J= 1.6 Hz, 1H), 8.45 (d, J= 1.2 Hz, 1H), 8.41-8.23 (m, 1H)，7.66 (s, 1H), 7.23-7.19 (m, 1H), 5.05 (d, J= 17.0 Hz, 1H), 4.90-4.52 (m, 1H), 4.27-4.07 (m, 1H), 4.04-3.90 (m, 2H), 3.91-3.51 (m, 3H), 3.34-3.12 (m, 3H), 3.02-2.94 (m, 2H), 2.66 (s, 3H), 2.31-2.24 (m, 4H).
實施例239化合物Z469的合成
步驟一：向 ( R)-3-(6-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯 (5a, 50 mg, 0.14 mmol)的二氯甲烷 (2 mL)溶液中加入( S)-四氫呋喃-3-羧酸 (24.68 mg, 0.21 mmol)，三乙胺 (43.02 mg, 0.43 mmol)，1-丙基磷酸酐(133.6 mg, 0.21 mmol, 50%的乙酸乙酯溶液)，反應在20度下攪拌3 小時。將混合物加入水並用乙酸乙酯(10mlx2)萃取，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮，得到粗品經矽膠柱層析純化(石油醚/乙酸乙酯=1/1)得到 ( R)-3-[6-氯-2-[( S)-四氫呋喃-3-羰基]-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基]嗎啉-4-羧酸叔丁酯 (60.00 mg, 產率93.9%)，為黃色油狀物。ES-API:[M+1] +=451.2。
步驟二：向 ( R)-3-[6-氯-2-[( S)-四氫呋喃-3-羰基]-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基]嗎啉-4-羧酸叔丁酯 (60 mg, 0.13 mmol)的二氧六環/水(4 mL/1.0 mL)溶液中加入3-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二噁硼烷-2-基)-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶 (41.21 mg, 0.16 mmol)、碳酸鉀(55.08 mg, 0.40 mmol)和 氯(2-二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II)(9.58 mg，13.31 μmol)，加熱至100℃反應2小時。反應完成後，反應液旋乾，得到粗品經矽膠柱層析純化(二氯甲烷/甲醇=10/1)得到產物 ( R)-3-[6-(3-甲基-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶-5-基)-2-[( S)-四氫呋喃-3-羰基]-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基]嗎啉-4-羧酸叔丁酯 (58.00 mg, 產率79.74%)，為黃色油狀物。ES-API:[M+1] +=547.3。
步驟三：將( R)-3-[6-(3-甲基-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶-5-基)-2-[( S)-四氫呋喃-3-羰基]-1,2,3, 4-四氫異喹啉-8-基]嗎啉-4-羧酸叔丁酯(58 mg, 0.11 mmol)溶於二氯甲烷(1.0 mL)中，加入三氟乙酸(1.0 mL)。室溫反應1小時。反應完成後，反應液濃縮，並加入氨水(0.5mL)中和為鹼性，旋乾，得到粗品經矽膠柱層析純化(二氯甲烷/甲醇=10/1)得到產物[6-(3-甲基-1 H-吡咯烷[2,3- b] 吡啶-5-基)-8-[( R)-嗎啉-3-基]-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]-[( S)-四氫呋喃-3-基]甲酮(Z469, 13.00 mg, 產率27.44%)，為白色固體。ES-API:[M+1] +=447.1。 1H NMR (400 MHz, CD 3Cl)δ 8.55 (s, 1H), 8.05-7.87 (m, 2H), 7.37-7.32 (m, 1H), 7.14-7.09 (m, 1H), 5.32-5.22 (m, 1H), 4.91-4.80 (m, 2H)，4.68-4.57 (m, 2H), 4.42-4.27 (m, 1H), 4.11 (t, J= 8.2 Hz, 1H), 4.01 -3.53 (m, 9H), 3.41-2.93 (m, 4H), 2.37 (s, 3H), 2.31-2.11 (m, 2H).
實施例240化合物Z470的合成
步驟一：向50 mL圓底燒瓶中加入8-甲基-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷 (315 mg, 2.5 mmol)，三乙胺(757 mg, 7.5 mmol)和二氯甲烷(10 mL)。0℃條件下緩慢加入對硝基苯基氯甲酸酯(605 mg, 3 mmol)，室溫攪拌1小時。反應液加入二氯甲烷(20 mL)，用飽和食鹽水(20 mLX3)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮，粗品用快速矽膠柱純化(甲醇：二氯甲烷=10:100)得到目標產物4-硝基苯基8-甲基-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-羧酸鹽(400mg, 收率: 55%)。ES-API: [M+H] +=292.2。
步驟二：向5mL微波反應器中加入4-硝基苯基8-甲基-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-羧酸鹽 (82.5 mg, 0.283 mmol)，(R)-3-(6-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(5a, 50 mg, 0.14 mmol)，碳酸鉀(117 mg, 0.43 mmol)和二甲基乙醯胺(2 mL)。130℃條件下攪拌過夜。反應液加入乙酸乙酯(10 mL)，用飽和食鹽水(10 mLX3)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮，粗品用快速矽膠柱純化(甲醇：二氯甲烷=10:100)得到(3R)-3-(6-氯-2-(8-甲基-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-羰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(60mg, 收率: 70%)。ES-API: [M+H] +=405.3。
步驟三：向5 mL微波反應器中加入(3R)-3-(6-氯-2-(8-甲基-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-羰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯 (30 mg, 0.06 mmol)，5-溴-3-氯-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(66 mg, 0.24 mmol)，碳酸鉀(25 mg, 0.18 mmol)，甲烷磺酸(2-二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II)(5.80 mg, 0.01 mmol)，二氧六環(2 mL)和水(0.3 mL)。體系用氮氣置換三次，然後用氮氣球保護。110℃微波條件下反應2小時，反應液加入乙酸乙酯(10 mL)，用飽和食鹽水(5 mLX3)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮，粗品用快速矽膠柱純化(甲醇：二氯甲烷=10:100)得到(3R)-3-(6-(3-氯-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-2-(8-甲基-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-羰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(20mg, 收率: 54%)。ES-API: [M+H] +=621.3。
步驟四：向5 mL單口圓底燒瓶中加入(3R)-3-(6-(3-氯-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-2-(8-甲基-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-羰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(20 mg, 0.03 mmol)，三氟乙酸(3 mL)和二氯甲烷(6 mL)，室溫攪拌反應30分鐘，旋乾粗品用製備HPLC(碳酸氫銨法)純化得到6-(3-氯-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-8-((R)-嗎啉-3-基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)(8-甲基-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)甲酮(Z470, 5mg, 收率:20%)。ES-API: [M+H] +=521.3。 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 12.07 (s, 1H), 8.58 (d, J= 1.7 Hz, 1H), 8.07 (d, J= 1.8 Hz, 1H), 7.75 (d, J= 15.3 Hz, 2H), 7.45 (s, 1H), 4.51 (d, J= 16.5 Hz, 1H), 4.35 (d, J= 16.4 Hz, 1H), 3.96 (d, J= 9.6 Hz, 1H), 3.77 (t, J= 10.8 Hz, 2H), 3.60 – 3.39 (m, 5H), 3.25 (d, J= 10.5 Hz, 2H), 3.16 – 2.80 (m, 8H), 2.18 (s, 3H), 1.88 (s, 2H), 1.70 – 1.50 (m, 2H).
實施例241化合物Z471的合成
步驟一：向5 mL微波反應器中加入(3R)-3-(6-氯-2-(3-甲基-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯 (30 mg, 0.06 mmol)，5-溴-3-氯-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(66 mg, 0.24 mmol)，碳酸鉀(25 mg, 0.18 mmol)，甲烷磺酸(2-二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II)(5.80 mg, 0.01 mmol)，二氧六環(2 mL)和水(0.3 mL)。體系用氮氣置換三次，然後用氮氣球保護。110℃微波條件下反應2小時，反應液加入乙酸乙酯(10 mL)，用飽和食鹽水(5 mLX3)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮，粗品用快速矽膠柱純化(甲醇：二氯甲烷=10:100)得到(3R)-3-(6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-2-(3-甲基-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(20mg, 收率: 54%)。ES-API: [M+H] +=601.3。
步驟二：向5 mL單口圓底燒瓶中加入(3R)-3-(6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-2-(3-甲基-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(30 mg, 0.03 mmol)，三氟乙酸(3 mL)和二氯甲烷(6 mL)，室溫攪拌反應30分鐘，旋乾，粗品用製備HPLC(碳酸氫銨法)純化得到(6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-8-((R)-嗎啉-3-基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)(3-甲基-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-基)甲酮(Z471, 5mg, 收率:20%)。ES-API: [M+H] +=501.3。
實施例242化合物Z472的合成
步驟一：向50 mL圓底燒瓶中加入3-甲基-3,8-二氮雜環[3.2.1]辛烷 (315 mg, 2.5 mmol)，三乙胺(757 mg, 7.5 mmol)和二氯甲烷(10 mL)。0℃條件下緩慢加入對硝基苯基氯甲酸酯(605 mg, 3 mmol)，室溫攪拌1小時。反應液加入二氯甲烷(20 mL)，用飽和食鹽水(20 mLX3)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮，粗品用快速矽膠柱純化(甲醇：二氯甲烷=10:100)得到目標產物4-硝基苯基3-甲基-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸鹽(400mg, 收率: 55%)。ES-API: [M+H] +=292.2。
步驟二：向5 mL微波反應器中加入4-硝基苯基3-甲基-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸鹽 (82.5 mg, 0.283 mmol)，(R)-3-(6-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(5a, 50 mg, 0.14 mmol)，碳酸鉀(117 mg, 0.43 mmol)和二甲基乙醯胺(2 mL)。130℃條件下攪拌過夜。反應液加入乙酸乙酯(10 mL)，用飽和食鹽水(10 mLX3)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮，粗品用快速矽膠柱純化(甲醇：二氯甲烷=10:100)得到(3R)-3-(6-氯-2-(3-甲基-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(60mg, 收率: 70%)。ES-API: [M+H] +=405.3。
步驟三：向5 mL微波反應器中加入(3R)-3-(6-氯-2-(3-甲基-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯 (30 mg, 0.06 mmol)，5-溴-3-氯-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(66 mg, 0.24 mmol)，碳酸鉀(25 mg, 0.18 mmol)，甲烷磺酸(2-二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II)(5.80 mg, 0.01 mmol)，二氧六環(2 mL)和水(0.3 mL)。體系用氮氣置換三次，然後用氮氣球保護。110℃微波條件下反應2小時，反應液加入乙酸乙酯(10 mL)，用飽和食鹽水(5 mLX3)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮，粗品用快速矽膠柱純化(甲醇：二氯甲烷=10:100)得到目標產物(3R)-3-(6-(3-氯-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-2-(3-甲基-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(20mg, 收率: 54%)。ES-API: [M+H] +=621.3。
步驟四：向5 mL單口圓底燒瓶中加入(3R)-3-(6-(3-氯-1H-吡咯[2,3-b]吡啶-5-基)-2-(3-甲基-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(20mg, 0.03mmol)，三氟乙酸(3 mL)和二氯甲烷(6 mL)，室溫攪拌反應30分鐘，旋乾粗品用製備HPLC(碳酸氫銨法)純化得到6-(3-氯-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-8-((R)-嗎啉-3-基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)(3-甲基-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-基)甲酮(Z472, 5mg, 收率30%)。ES-API: [M+H] +=521.3。
實施例243化合物Z473的合成
步驟一：將(R)-3-(6-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(5a, 70 mg, 198 umol)和2-羥基-2-甲基丙酸(25 mg, 238 umol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(1 mL)，然後加入N,N-二異丙基乙胺(154 mg, 1.19 mmol)和2-(7-偶氮苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯(220 mg, 596 umol)，室溫攪拌2小時。待反應完後，加入到水(1 mL)中，之後用乙酸乙酯(1 mLX3)萃取，有機相用飽和食鹽水(1 mL)洗滌，再用無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮。得到(R)-3-(6-氯-2-(2-羥基-2-甲基丙醯基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(100 mg)，棕色的油狀物。ES-API: [M+H] += 439.3。
步驟二：將(R)-3-(6-氯-2-(2-羥基-2-甲基丙醯基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(100mg, 189 umol)和5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)-3-(三氟甲基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(118 mg, 377 umol)溶於二氧六環(1 mL)和水(0.2 mL)中，然後加入碳酸鉀(78 mg, 566 umol)，再在氮氣條件下加入氯(2-二環己基膦-2′,6′-二甲氧基-1,1′-聯苯基)[2-(2′-氨基-1,1′-聯苯基)]鈀(II)(13 mg, 19 umol)，100 ℃攪拌1小時。待反應完後，加入到水(1 mL)中，之後用乙酸乙酯(1 mLX3)萃取，有機相用飽和食鹽水(1 mL)洗滌，再用無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮，得到(R)-3-(2-(2-羥基-2-甲基丙醯基)-6-(3-(三氟甲基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(100mg)，棕色的油狀物。ES-API: [M+H] += 589.3。
步驟三：將(R)-3-(2-(2-羥基-2-甲基丙醯基)-6-(3-(三氟甲基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(100mg, 170 umol)溶於乙酸乙酯(2 mL)中，然後加入鹽酸乙酸乙酯(4 mol/L, 1 mL)，室溫攪拌4小時。待反應完後，反應液過濾。用製備HPLC(碳酸氫銨法)純化得到(R)-2-羥基-2-甲基-1-(8-(嗎啉-3-基)-6-(3-(三氟甲基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)丙-1-酮(Z473, 10.6 mg)，白色固體。ES-API: [M+H] += 489.3。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD)δ = 8.63 (d, J= 1.6 Hz, 1H), 8.29 (s, 1H), 7.91 (s, 1H), 7.76 (s, 1H), 7.47 (s, 1H), 4.58 (s, 1H), 4.23 (d, J= 8.4 Hz, 1H), 4.01-3.84 (m, 3H), 3.80-3.66 (m, 2H), 3.52 (t, J= 10.8 Hz, 2H), 3.18 (d, J= 12 Hz, 1H), 3.14-2.95 (m, 3H), 1.49 (s, 6H).
實施例244化合物Z475的合成
步驟一：取(3R)-3-(2-(8-氧-3-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-羰基)-6-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯 (80 mg, 0.163 mmol)，聯硼酸頻那醇酯(53.68 mg, 0.211 mmol)，醋酸鉀 (47.80 mg, 0.488 mmol)，氯(2-二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II)(10 mg, 0.014 mmol)溶於1, 4-二氧六環(2.5 mL)，110℃攪拌2小時，加入5-溴-3-氟-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(36.85 mg, 0.171 mmol)，1,1-二(二苯膦基)二茂鐵二氯化鈀 (6.27 mg, 0.009 mmol)，碳酸鉀 (35.53 mg, 0.257 mmol)，水(0.5 mL)，110℃攪拌2小時，減壓濃縮至乾，得到粗品藉由矽膠柱層析(石油醚/乙酸乙酯=30/70)純化得到叔丁基(3R)-3-(2-(8-氧-3-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-羰基)-6-(3-氟-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶)-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸酯(30 mg, 0.051 mmol, 收率59.17%)。ES-API: [M+H] +=592.0。
步驟二：取叔丁基(3R)-3-(2-(8-氧-3-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-羰基)-6-(3-氟-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶)-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸酯(25 mg, 0.042 mmol)溶於無水二氯甲烷(0.5 mL)，加入三氟乙酸(0.2 mL)，室溫反應2小時，LC-MS監測反應完全，反應液減壓濃縮至乾，加入氨水/甲醇溶液(1mL)中和後，再次濃縮，經矽膠柱層析(二氯甲烷/甲醇=10/1)純化得到(8-氧-3-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)- 6-(3-氟-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶)-5-基)-8-((R)-嗎啉-3-基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)甲酮(Z475, 14.5 mg, 0.029 mmol, 收率69.81%)。ES-API: [M+H] +=492.1。
實施例245化合物Z476的合成
步驟一：在氮氣保護下向懸浮在無水二氯甲烷(100 mL)中的無水氯化鋁(6.77g, 50.77mmol)的溶液中加入5-溴-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶(2 g, 10.15 mmol)。將反應溶液在25℃攪拌1小時，然後滴加乙醯氯(3.98 g, 50.75 mmol)，混合物在25℃攪拌5小時。將反應在冰浴中冷卻至0°C並藉由加入甲醇小心地淬滅直到溶液變得澄清。將反應在真空下濃縮。加入水，滴加 1N 的氫氧化鈉溶液至 pH = 5。將產物萃取到乙酸乙酯中，有機層用無水硫酸鈉乾燥，真空濃縮，得到化合物 1-(5-溴-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶-3-基)乙-1-酮(2.20 g, 粗品)，為黃色固體。ES-API:[M+H] += 238.9。
步驟二：向化合物1-(5-溴-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶-3-基)乙-1-酮(2.2 g, 9.2 mmol )的單口瓶中加入三氟乙酸 (15.74 g, 138.04 mmol, 10.49 mL)，三乙基矽氫(16.05 g, 138.04 mmol, 21.99 mL)，混合液在15°C下攪拌16小時，LCMS監測反應完全，濃縮，碳酸氫鈉中和，二氯甲烷萃取，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮，得到粗品經矽膠柱層析純化(流動相0-30%乙酸乙酯/石油醚，石油醚/乙酸乙酯=1/1，Rf=0.4)得到產物5-溴-3-乙基-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶(390 mg, 收率18.83%).白色粉末ES-API:[M+H] += 224.9。
步驟三：向化合物5-溴-3-乙基-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶(190 mg, 0.84 mmol )的二氧六環 (4 mL)的溶液中加入聯頻那醇硼酸酯(235.79 mg, 0.93 mmol)，1,1'-雙(二-苯基膦基)二茂鐵氯化鈀 (61.25mg, 0.084 mmol)，醋酸鉀(1.27 g , 2.53 mmol)，在氮氣保護下將混合物加熱到100 ℃攪拌反應，藉由LCMS監測，用乙酸乙酯/水處理，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮，得到粗品經矽膠柱層析純化(流動相0-30%乙酸乙酯/石油醚，石油醚/乙酸乙酯=1/1，Rf=0.4)得到產物3-乙基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶(165 mg, 收率71.82%)。ES-API:[M+H]+= 191.1。
步驟四：向 ( R)-3-(6-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(5a, 300 mg, 0.85 mmol)的N,N-二甲基甲醯胺(8 ml)溶液中加入2-羥基-2-甲基丙酸(177.02 mg, 1.7 mmol)，1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺 (325.97 mg, 1.70 mmol)，1-羥基苯并三唑(229.76 mg, 1.70 mmol)，三乙胺(258.10 mg, 2.55 mmol)，混合液在25°C下攪拌反應半小時，LCMS監測反應完全，加水淬滅反應，乙酸乙酯萃取，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮，得到粗品經矽膠柱層析純化(流動相0-50%乙酸乙酯/石油醚，石油醚/乙酸乙酯=1/1，Rf=0.4)得到產物( R)-3-(6-氯-2-(2-羥基-2-甲基丙醯基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(290mg, 收率77.71%)。ES-API:[M+H-100] += 339.1。
步驟五：向化合物( R)-3-(6-氯-2-(2-羥基-2-甲基丙醯基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(60 mg, 0.14 mmol)的二氧六環/水(2 mL/0.4 mL)的溶液中 加入3-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二噁硼烷-2-基)-1 H-吡咯[2,3- b]吡啶(44.64mg, 0.16 mmol)，氯(2-二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II)(9.84 mg,0.014 mmmol)，碳酸鉀(56.59 mg, 0.41 mmmol)，將混合物加熱攪拌到100 攝氏度在氮氣保護下, 藉由LCMS監測反應完全，用乙酸乙酯/水處理，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮，得到粗品經矽膠柱層析純化(流動相0-10%甲醇/二氯甲烷，二氯甲烷/甲醇=10/1，Rf=0.6)得到產物( R)-3-(6-(3-乙基-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶-5-基)-2-(2-羥基-2-甲基丙醯基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(50 mg, 收率66.67%)。ES-API:[M+H] += 549.3。
步驟六：向化合物( R)- 3-(6-(3-乙基-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶-5-基)-2-(2-羥基-2-甲基丙醯基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(50 mg, 0.09 mmol)的二氯甲烷(2 mL)溶液中加入三氟乙酸(1 mL)，常溫攪拌一小時，藉由LCMS監測反應完全，用飽和碳酸氫鈉中和調節pH至7，用二氯甲烷/水處理，無水硫酸鈉乾燥並過濾濃縮，得到粗品經色譜柱純化(二氯甲烷/甲醇=8/1，Rf=0.4)得到( R)-1-(6-(3-乙基-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶-5-基)-8-(嗎啉-3-基)-3,4-二氫異喹啉-2(1 H)-基)-2-羥基-2-甲基丙-1-酮(Z476, 14.5mg, 收率35.47%)，白色粉末。ES-API:[M+H] +=449.0。 1H NMR (400 MHz, CD 3Cl)δ 8.81 (s, 1H), 8.37 (s, 1H), 7.99 (s, 1H), 7.74 (s, 1H), 7.11-7.08 (m, 1H), 5.33-5.15 (m, 1H), 4.95-4.62 (m, 1H), 4.24-3.99 (m, 2H), 3.96-3.77 (m, 4H), 3.76-3.61 (m, 1H), 3.56-3.44 (m, 1H), 3.28-3.14 (m, 1H), 3.11-2.86 (m, 3H), 2.85-2.71 (m, 3H), 1.59 (s, 6H), 1.37-1.30 (m, 3H).
實施例246化合物Z477的合成
步驟一：向 ( R)-叔丁基 3-(6-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸酯(5a, 50 mg, 0.14 mmol)的二氯甲烷(2 ml)溶液中加入1-異丙基-1 H-吡唑-4-羧酸(32.77 mg, 0.21 mmol)，1-丙基磷酸酐(273.5 mg, 0.43 mmol, 50%的乙酸乙酯溶液)，三乙胺(43.02 mg, 0.43 mmol)，混合液在0°C下攪拌半小時，LCMS監測反應完全，加水淬滅反應，二氯甲烷萃取，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮，得到粗品經矽膠柱層析純化(流動相0-60%乙酸乙酯/石油醚，石油醚/乙酸乙酯=1/1，Rf=0.4)得到產物( R)-3-(6-氯-2-(1-異丙基-1H-吡唑-4-羰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(40 mg, 收率57.73%)。ES-API:[M+H] += 489.2。
步驟二：向化合物( R)-3-(6-氯-2-(1-異丙基-1 H-吡唑-4-羰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(40 mg, 0.08 mmol )的二氧六環/水(2 mL/0.4 mL)的溶液中 加入3-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二噁硼烷-2-基)-1 H-吡咯[2,3-b]吡啶(25.34 mg, 0.1 mmol)，氯(2-二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II)(5.89 mg, 0.008 mmol)，碳酸鉀(33.86 mg, 0.25 mmol)，將混合物加熱攪拌到110 攝氏度在氮氣保護下，藉由LCMS監測反應完全，用乙酸乙酯/水處理，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮，得到粗品經矽膠柱層析純化(流動相0-10%甲醇/二氯甲烷，二氯甲烷/甲醇=10/1，Rf=0.6)得到產物( R)- 3-(2-(1-異丙基-1 H-吡唑-4-羰基)-6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3- b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(30 mg, 62.72%).ES-API:[M+H] += 585.3。
步驟三：向化合物( R)- 3-(2-(1-異丙基-1 H-吡唑-4-羰基)-6-(3-甲基-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶-5-基)- 1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(30 mg, 0.05 mmol)的二氯甲烷(2 mL)溶液中加入三氟乙酸(1 mL)，常溫攪拌1小時，藉由LCMS監測反應完全，用飽和碳酸氫鈉中和調節pH至7，用二氯甲烷/水處理，無水硫酸鈉乾燥並過濾濃縮，得到粗品經色譜柱純化(二氯甲烷/甲醇=8/1，Rf=0.4)得到( R)-(1-異丙基-1 H-吡唑-4-基)(6-(3-甲基-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶-5-基)-8-(嗎啉-3-基))-3,4-二氫異喹啉-2(1 H)-基)甲酮(Z477, 13.9 mg, 收率55.91%)，白色粉末。ES-API:[M+H] +=485.2。 1H NMR (400 MHz, CD 3Cl)δ 8.71 (s, 1H), 8.35 (s, 1H), 7.88 (s, 1H), 7.73 (d, J = 44.2 Hz, 1H), 7.16 (s, 1H), 7.03 (s, 2H), 5.44 (s, 1H), 5.08 (s, 1H), 4.52-4.29 (m, 6H), 4.12 (d, J = 10.6 Hz, 4H), 3.78-3.51 (m, 2H), 2.93-2.72 (m, 2H), 2.26 (s, 3H), 1.55 (d, J = 7.1 Hz, 6H).
實施例247化合物Z478的合成
步驟一：向50 mL圓底燒瓶中加入(R)-3-甲氧基吡咯烷 (303 mg, 3 mmol)，三乙胺(607 mg, 6 mmol)和二氯甲烷(10 mL)。0℃條件下緩慢加入對硝基苯基氯甲酸酯(786 mg, 3.9 mmol)，室溫攪拌1小時。反應液加入二氯甲烷(20 mL)，用飽和食鹽水(20 mLX3)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮，粗品用快速矽膠柱純化(甲醇：二氯甲烷=10:100)得到4-硝基苯基 (R)-3-甲氧基吡咯烷-1-羧酸酯(480mg, 收率: 60%)。ES-API: [M+H] +=267.1。
步驟二：向5mL微波反應器中加入4-硝基苯基 (R)-3-甲氧基吡咯烷-1-羧酸酯 (50 mg, 0.142 mmol)，(R)-3-(6-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(5a, 50 mg, 0.14 mmol)，碳酸鉀(59 mg, 0.43 mmol)和二甲基乙醯胺(2 mL)。130℃條件下攪拌過夜。反應液加入乙酸乙酯(10 mL)，用飽和食鹽水(10 mLX3)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮，粗品用快速矽膠柱純化(甲醇：二氯甲烷=10:100)得到目標產物(R)-3-(6-氯-2-((R)-3-甲氧基吡咯烷-1-羰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(40mg, 收率: 58%)。ES-API: [M+H] +=480.2。
步驟三：向5 mL微波反應器中加入(R)-3-(6-氯-2-((R)-3-甲氧基吡咯烷-1-羰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯 (40 mg, 0.08 mmol)，3-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(62 mg, 0.24 mmol)，碳酸鉀(33 mg, 0.24 mmol)，甲烷磺酸(2-二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II)(5.80 mg, 0.01 mmol)，二氧六環(2 mL)和水(0.3 mL)。體系用氮氣置換三次，然後用氮氣球保護。110℃微波條件下反應2小時，反應液加入乙酸乙酯(10 mL)，用飽和食鹽水(5 mLX3)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮，粗品用快速矽膠柱純化(甲醇：二氯甲烷=10:100)得到目標產物(R)-3-(2-((R)-3-甲氧基吡咯烷-1-羰基)-6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(30mg, 收率: 63%)。ES-API: [M+H] +=576.3。
步驟四：向5 mL單口圓底燒瓶中加入(R)-3-(2-((R)-3-甲氧基吡咯烷-1-羰基)-6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(30 mg, 0.05 mmol)，三氟乙酸(3 mL)和二氯甲烷(6 mL)，室溫攪拌反應30分鐘，旋乾粗品用製備HPLC(碳酸氫銨法)純化得到：((R)-3-甲氧基吡咯烷-1-基)(6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-8-((R)-嗎啉-3-基 )-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)甲酮(Z478, 15mg, 收率:61%)。ES-API: [M+H] +=476.3。 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 11.34 (s, 1H), 8.45 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 8.09 (d, J= 1.8 Hz, 1H), 7.75 (s, 1H), 7.43 (s, 1H), 7.26 (s, 1H), 4.56 (d, J= 16.3 Hz, 1H), 4.38 (d, J= 16.5 Hz, 1H), 3.96 (d, J= 10.4 Hz, 2H), 3.80-3.70 (m, 2H), 3.60 – 3.34 (m, 7H), 3.30 – 3.19 (m, 5H), 3.01 – 2.88 (m, 4H), 2.31 (s, 3H), 1.95-1.80 (m, 2H).
實施例248化合物Z479的合成
步驟一：向50 mL圓底燒瓶中加入3,3-二甲基嗎啉 (345 mg, 3 mmol)，三乙胺(607 mg, 6mmol)和二氯甲烷(10 mL)。0℃條件下緩慢加入對硝基苯基氯甲酸酯(786 mg, 3.9 mmol)，室溫攪拌1小時。反應液加入二氯甲烷(20 mL)，用飽和食鹽水(20 mLX3)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮，粗品用快速矽膠柱純化(甲醇：二氯甲烷=10:100)得到4-硝基苯基 3,3-二甲基嗎啉-4-羧酸酯(600mg, 收率: 72%)。ES-API: [M+H] +=281.1。
步驟二：向5 mL微波反應器中加入4-硝基苯基 3,3-二甲基嗎啉-4-羧酸酯 (50 mg, 0.142 mmol)，(R)-3-(6-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(5a, 50 mg, 0.14 mmol)，碳酸鉀(59 mg, 0.43mmol)和二甲基乙醯胺(2 mL)。130℃條件下攪拌過夜。反應液加入乙酸乙酯(10 mL)，用飽和食鹽水(10 mLX3)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮，粗品用快速矽膠柱純化(甲醇：二氯甲烷=10:100)得到目標產物(R)-3-(6-氯-2-(3,3-二甲基嗎啉-4-羰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(40mg, 收率: 57%)。ES-API: [M+H] +=494.2。
步驟三：向5 mL微波反應器中加入(R)-3-(6-氯-2-(3,3-二甲基嗎啉-4-羰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯 (40 mg, 0.08 mmol)，3-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(62 mg, 0.24 mmol)，碳酸鉀(33 mg, 0.24 mmol)，甲烷磺酸(2-二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II)(5.80 mg, 0.01 mmol)，二氧六環(2 mL)和水(0.3 mL)。體系用氮氣置換三次，然後用氮氣球保護。110℃微波條件下反應2小時，反應液加入乙酸乙酯(10 mL)，用飽和食鹽水(5 mLX3)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮，粗品用快速矽膠柱純化(甲醇：二氯甲烷=10:100)得到目標產物(R)-3-(2-(3,3-二甲基嗎啉-4-羰基)-6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(30mg, 收率: 63%)。ES-API: [M+H] +=590.3。
步驟四：向5 mL單口圓底燒瓶中加入(R)-3-(2-(3,3-二甲基嗎啉-4-羰基)-6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(30 mg, 0.05 mmol)，三氟乙酸(3 mL)和二氯甲烷(6 mL)，室溫攪拌反應30分鐘，旋乾粗品用製備HPLC(碳酸氫銨法)純化得到 (R)-(3,3-二甲基嗎啉)(6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-8-(嗎啉-3-基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)甲酮(Z479, 10mg, 收率:40%)。ES-API: [M+H] +=490.3。 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 11.34 (s, 1H), 8.45 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 8.09 (d, J= 1.9 Hz, 1H), 7.75 (s, 1H), 7.43 (s, 1H), 7.26 (s, 1H), 4.60 (dd, J= 50.9, 15.7 Hz, 2H), 3.95 (d, J= 8.2 Hz, 1H), 3.85-3.65 (m, 4H), 3.61 – 3.42 (m, 3H), 3.31 – 3.21 (m, 4H), 3.15-3.05 (m, 2H), 2.90-3.00 (m, 4H), 2.31 (s, 3H), 1.23 (d, J= 6.1 Hz, 6H).
實施例249化合物Z480的合成
步驟一：將(3R)-3-甲基-1,4-噁嗪烷 (300 mg, 2.966 mmol)和N,N-二異丙基乙胺 (1.472 mL, 8.898 mmol)溶解到 二氯甲烷 (10 mL)，冰水浴冷卻，加入4-硝基苯氯甲酸酯 (896.71 mg, 4.449 mmol)。室溫反應1小時。反應完畢加入水(30 mL)，二氯甲烷(30 mLx3)萃取，合併有機相，飽和食鹽水(30mLx1)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮，得到粗品經矽膠柱色譜純化(石油醚/乙酸乙酯=1/1)得到4-硝基苯 (3R)-3-甲基-1,4-噁嗪烷-4-甲酸酯 (550 mg, 2.066 mmol, 收率69.65%)。ES-API: [M+H] +=267.0。
步驟二：將(3R)-3-(6-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)-1,4-嗎啡啉-4-甲酸叔丁酯 (5a, 50 mg, 0.142 mmol)和4-硝基苯 (3R)-3-甲基-1,4-噁嗪烷-4-甲酸酯 (75.61 mg, 0.284 mmol)溶解到 DMA (2 mL)，加入 碳酸鉀 (58.87 mg, 0.426 mmol)，130度反應18小時。反應完畢加入水(30 mL)，乙酸乙酯(30 mLx3)萃取，合併有機相，飽和食鹽水(30 mLx1)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮，得到粗品經矽膠柱色譜純化(石油醚/乙酸乙酯=1/1)得到 (3R)-3-(6-氯-2-{[(3R)-3-甲基-1,4-嗎啡啉-4-基]甲醯基}-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)-1,4-嗎啡啉-4-甲酸叔丁酯 (60 mg, 0.125 mmol, 收率88%)。ES-API: [M+H] +=480.2。
步驟三：將(3R)-3-(6-氯-2-{[(3R)-3-甲基-1,4-嗎啡啉-4-基]甲醯基}-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)-1,4-嗎啡啉-4-甲酸叔丁酯 (60 mg, 0.125 mmol)、3-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(96.80 mg, 0.375 mmol)、氯(2-二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II)(9.00 mg, 0.013 mmol)和碳酸鉀 (51.82 mg, 0.375 mmol)溶解到1,4-二氧六環(5 mL)和水(1mL)，氮氣保護，在120℃攪拌反應2小時。反應完畢加入水(30 mL)，乙酸乙酯(30 mLx3)萃取，合併有機相，飽和食鹽水(30 mLx1)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮，經矽膠柱色譜純化(石油醚/乙酸乙酯=1/5)得到 (R)-3-(6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-2-((R)-3-甲基嗎啉-4-羰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(25 mg, 0.043 mmol, 收率34.74%)，ES-API: [M+H] +=576.3。
步驟四：將(R)-3-(6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-2-((R)-3-甲基嗎啉-4-羰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(25 mg, 0.043 mmol)溶解到二氯甲烷(2 mL)中，加入三氟乙酸(1 mL)中，室溫反應0.5小時，反應完畢，反應液濃縮，加入氨/甲醇溶液(1 mL)中和後，再次濃縮，經製備HPLC(氨水法)純化得到(6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-8-((R)-嗎啡啉-3-基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)((R)-3-甲基嗎啉代)甲酮(Z480, 10 mg, 收率48.9%)。ES-API: [M+H] +=476.3。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 11.34 (s, 1H), 8.45 (d, J= 2.1 Hz, 1H), 8.09 (d, J= 2.1 Hz, 1H), 7.74 (d, J= 1.9 Hz, 1H), 7.42 (s, 1H), 7.26 (s, 1H), 4.57 (d, J= 16.4 Hz, 1H), 4.46 (d, J= 16.4 Hz, 1H), 3.95 (d, J= 9.8 Hz, 1H), 3.82 – 3.67 (m, 4H), 3.59 – 3.41 (m, 6H), 3.28 (d, J= 11.3 Hz, 2H), 3.23 – 3.17 (m, 2H), 2.95 (d, J= 8.1 Hz, 4H), 2.31 (s, 3H), 1.22 (d, J= 6.7 Hz, 3H).
實施例250化合物Z481的合成
步驟一：將5-溴-3-甲基-1-甲苯磺醯基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(500 mg, 1.369 mmol)溶於乾燥的四氫呋喃(20 mL)中，並降溫至零下七十八攝氏度。在此溫度下，向上述溶液中緩慢滴加入二異丙基氨基鋰的四氫呋喃溶液(2 M, 0.821 mL, 1.643 mmol)，加入完畢後反應在七十八攝氏條件下繼續攪拌2小時。而後將苯磺醯氯(0.262 mL, 2.053 mmol)溶與四氫呋喃(5 mL)並緩慢滴加入反應液中。滴加完畢後，反應升至室溫再繼續攪拌1小時。反應用飽和碳酸氫鈉溶液(10 mL)猝滅後用乙酸乙酯(15 mL X3)萃取。有機相用飽和食鹽水(30 mL)洗滌後，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮得到粗品。粗品用快速矽膠柱(二氯甲烷/石油醚：0%-20%)純化得到5-溴-2-氯-3-甲基-1-甲苯磺醯基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(400 mg, 1.001 mmol, 收率73.11%)，淺黃色固體。ES-API: [M +H] +=399.1, 401.1。
步驟二：將5-溴-2-氯-3-甲基-1-甲苯磺醯基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(400 mg, 1.001 mmol)溶於四氫呋喃(3 mL)中，向上述溶液中加入四丁基溴化銨的四氫呋喃溶液(1M, 2.0 mL, 2.0 mmol)。加入完畢後，反應在室溫條件下攪拌3小時。反應完畢後，向上述溶液中加入水(10 mL)，並用乙酸乙酯(10 mL X3)萃取。有機相用飽和食鹽水(10 mLX5)洗滌後，無水硫酸按乾燥，過濾濃縮得到粗品。粗品用快速矽膠柱(四氫呋喃/石油醚：0%-30%)得到5-溴-2-氯-3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(250 mg, 0.652 mmol, 收率 65.12%)，黃色油狀液體，ES-API: [M+H] +=245.1, 247.1。
步驟三：將叔丁基 (R)-3-(2-(2-羥基-2-甲基丙醯基)-6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸酯(60 mg, 0.113 mmol)溶於二氧六環(5 mL)和水(1 mL)中。室溫條件下，向上述溶液中加入5-溴-2-氯-3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(55.54 mg, 0.226 mmol)，1,1'-雙(二苯膦基)二茂鐵二氯化鈀(II)(8.28 mg, 0.011 mmol)以及碳酸鉀(31.27 mg, 0.226 mmol)。加入完畢後，反應在氮氣氛圍，100℃條件下攪拌2個小時。反應完畢後，向上述溶液中加入水(10 mL)，並用乙酸乙酯(10 mL X3)萃取。有機相用飽和食鹽水(30 mL)洗滌後，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮得到粗品。粗品用快速矽膠柱(四氫呋喃/石油醚：5%-40%)純化得到叔丁基 (R)-3-(6-(2-氯-3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-2-(2-羥基-2-甲基丙醯基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸酯(8 mg, 0.014 mmol, 收率12.43%)，黃色固體。ES-API: [M +H] +=569.1。
步驟四：將叔丁基 (R)-3-(6-(2-氯-3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-2-(2-羥基-2-甲基丙醯基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸酯(8 mg, 0.014 mmol)溶於無水二氯甲烷(1 mL)中。向上述溶液中加入三氟乙酸(0.5 mL)，反應在室溫條件下攪拌反應2小時。反應完畢後，將反應液濃縮並用氨的甲醇溶液(7 M)調節至中性。再次濃縮後，粗品用製備HPLC(碳酸氫銨法)純化得到(R)-1-(6-(2-氯-3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-8-(嗎啉-3-基)-3,4-四氫異喹啉-2(1H)-基)-2-羥基-2-甲基丙-1-酮(Z481, 2.2 mg, 0.005 mmol, 收率33.37%)，白色固體。ES-API: [M+H] +=469.1。
實施例251化合物Z482的合成
步驟一：將1-甲基呱嗪(200 mg, 1.997 mmol)溶於二氯甲烷(8 mL)中，冰浴下向上述溶液中加入三乙胺(0.833 mL, 5.990 mmol)，對硝基苯基氯甲酸酯(442.68 mg, 2.196 mmol)，室溫反應1小時。反應減壓濃縮，粗品用快速矽膠柱(甲醇/二氯甲烷：1-12%)純化得到4-硝基苯基 4-硝基苯基 4-甲基呱嗪-1-羧酸酯(450 mg, 1.696 mmol, 收率84.96%)，白色固體。ES-API: [M+H] +=266.0。
步驟二：將4-硝基苯基 4-硝基苯基 4-甲基呱嗪-1-羧酸酯(90.21 mg, 0.340 mmol)溶於N,N-二甲基乙醯胺(3 mL)。而後向上述溶液中加入(R)-3-(6-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(5a, 60 mg, 0.170 mmol)，碳酸鉀 (70.50 mg, 0.510 mmol)。反應在130℃反應17小時。反應結束後，向上述溶液中加入水(30 mL)，並用乙酸乙酯(30 mLX3)萃取。有機相用飽和食鹽水(100 mL)洗滌後，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮得到粗品。粗品用快速矽膠柱(甲醇/二氯甲烷：0%-15%)純化得得到(R)-3-(6-氯-2-(4-甲基呱嗪-1-羰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(60 mg, 0.125 mmol, 收率73.66%)，淺黃色固體。ES-API: [M+H] +=479.1。
步驟三：將(R)-3-(6-氯-2-(4-甲基呱嗪-1-羰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(50 mg, 0.104 mmol)溶於二氧六環(5 mL)和水(1 mL)中。室溫條件下，向上述溶液中加入3-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(67.36 mg, 0.261 mmol)，氯(2 -二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II)(7.51 mg, 0.010 mmol)以及碳酸鉀(52.04 mg, 0.377 mmol)。加入完畢後，反應在氮氣氛圍，110℃條件下攪拌2個小時。反應完畢後，向上述溶液中加入水(10 mL)，並用乙酸乙酯(10 mL X3)萃取。有機相用飽和食鹽水(30 mL)洗滌後，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮得到粗品。粗品用製備薄層色譜(甲醇/二氯甲烷：1/10)純化得到叔丁基(R)-3-(6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-2-(4-甲基呱嗪-1-羰基)-1,2, 3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸酯(45 mg, 0.078 mmol, 收率75.01%)，黃色固體。ES-API: [M +H] +=575.2。
步驟四：將叔丁基(R)-3-(6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-2-(4-甲基呱嗪-1-羰基)-1,2, 3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸酯(50 mg, 0.087 mmol)溶於無水二氯甲烷(1 mL)中。向上述溶液中加入三氟乙酸(0.5 mL)，反應在室溫條件下攪拌反應2小時。反應完畢後，將反應液濃縮並用氨的甲醇溶液(7 M)調節至中性。再次濃縮後，用快速矽膠柱(甲醇/二氯甲烷：0%-6%)純化得到(R)-(6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-8-(嗎啉-3-基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)- 基)(4-甲基呱嗪-1-基)甲酮(Z482, 20 mg, 0.042 mmol, 收率48.44%)，淺黃色固體。ES-API: [M+H] +=475.2。
實施例252化合物Z483的合成
步驟一：氮氣保護下，(R)-3-(6-氯-2-(嗎啉-4-羰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯 (45 mg, 0.1 mmol)，3-氯-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶 (54 mg, 0.19 mmol)，氯(2-二環己基膦-2′,6′-二甲氧基-1,1′-聯苯基)[2-(2′-氨基-1,1′-聯苯基)]鈀(II)(7 mg, 0.01 mmol)和碳酸鉀(40 mg, 0.29 mmol)的1,4-二氧六環(2 mL)和水(0.4 mL)的混合物，100℃攪拌2小時。待反應完後，加入乙酸乙酯(10 mL)，並依次用水(5 mL)和飽和食鹽水(5 mL)洗滌。有機相用無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮並用快速矽膠柱(0-10%甲醇/二氯甲烷)純化，得到無色油狀物(R)-3-(6-(3-氯-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶-5-基)-2-(嗎啉-4-羰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(45 mg, 收率80%)。ES-API: [M+H] += 582.3。
步驟二：冰浴條件下，往化合物(R)-3-(6-(3-氯-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶-5-基)-2-(嗎啉-4-羰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(45 mg, 0.08 mmol)的二氯甲烷(1 mL)溶液中加入三氟乙酸(0.5 mL)，室溫攪拌2小時。反應液減壓濃縮，隨後用7M胺/甲醇溶液(2mL)中和。混合物濃縮並用製備HPLC(碳酸氫銨法)純化，得到(R)-(6-(3-氯-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶-5-基)-8-(嗎啉-3-基)-3,4-二氫異喹啉-2(1 H)-基)(嗎啉)甲酮(Z483，11 mg, 純度100%, 收率30%)。ES-API: [M+H] += 482.2。
實施例253化合物Z484的合成
步驟一：將(R)-3-(6-氯-2-((4-硝基苯氧基)羰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(50 mg, 0.097 mmol)和(2R)-2-甲基-1,4-噁嗪烷 (29.29 mmol, 0.290 mmol)溶解到 N,N-二甲基乙醯胺 (2 mL)，加入碳酸鉀 (53.36 mg, 0.386 mmol)。將混合物在135℃攪拌6小時。反應完畢加入水(30mL)，乙酸乙酯(30mLX3)萃取，合併有機相，飽和食鹽水(30mLX1)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮，經矽膠柱色譜純化(石油醚/乙酸乙酯=1/1)得到(R)-3-(6-氯-2-((R)-2-甲基嗎啉-4-羰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(40 mg, 0.083 mmol, 收率86.32%)。ES-API: [M+H] +=480.2。
步驟二：將(R)-3-(6-氯-2-((R)-2-甲基嗎啉-4-羰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(40 mg, 0.083 mmol)、3-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(32.27 mg, 0.125 mmol)、氯(2-二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II)(12.00 mg, 0.017 mmol)和碳酸鉀 (34.50 mg, 0.250 mmol)溶解到1,4-二氧六環(5 mL)和水(1mL)，氮氣保護，在120℃攪拌反應2小時。反應完畢加入水(30 mL)，乙酸乙酯(30 mLx3)萃取，合併有機相，飽和食鹽水(30 mLx1)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮，經矽膠柱色譜純化(石油醚/乙酸乙酯=1/5)得到，得到(R)-3-(6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-2-((R)-2-甲基嗎啉-4-羰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(20 mg, 0.035 mmol, 收率41.68%)，ES-API: [M+H] +=576.3。
步驟三：將(R)-3-(6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-2-((R)-2-甲基嗎啉-4-羰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(20 mg, 0.035 mmol)溶解到二氯甲烷(2 mL)中，加入三氟乙酸(1 mL)中，室溫反應0.5小時，反應完畢，反應液濃縮，加入氨/甲醇溶液(1mL)中和後，再次濃縮，經製備HPLC(氨水法)純化得到(6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-8-((R)-嗎啡啉-3-基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)((R)-2-甲基嗎啉代)甲酮(Z484, 2.6mg, 收率15.7%)。ES-API: [M+H] +=476.3。
實施例254化合物Z485的合成
步驟一：取4-羥基四氫吡喃-4-甲酸(17.70 mg, 0.170 mmol)，2-(7-偶氮苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯 (56.90 mg, 0.150 mmol)溶於N,N-二甲基乙醯胺(1 mL)，冰浴下加入(R)-3-(6-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(5a, 44 mg, 0.125 mmol)，N,N-二異丙基乙胺(64.47 mg, 0.499 mmol)，室溫反應1小時，反應結束後，加水(10 mL)稀釋，乙酸乙酯(10 mLX3)萃取，有機相飽和食鹽水(10 mL)洗，無水硫酸鈉乾燥，過濾減壓濃縮至乾，藉由矽膠柱層析(石油醚/乙酸乙酯=70/30)純化得到(R)-3-(6-氯-2-(4-羥基四氫-2H-吡喃-4-羰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁基酯(60 mg, 0.137 mmol, 收率80.39%)。ES-API: [M+H] +=481.1。
步驟二：取(R)-3-(6-氯-2-(4-羥基四氫-2H-吡喃-4-甲醯基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁基酯 (44 mg, 0.091 mmol)，3-氯-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(50.96 mg, 0.183 mmol)，氯(2-二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II)(6.59 mg, 0.009 mmol)，碳酸鉀 (31.50 mg, 0.228 mmol)溶於1,4-二氧六環(2.5 mL)和水(0.5 mL)，110℃攪拌2小時，反應液減壓濃縮至乾，得到粗品藉由矽膠柱層析(二氯甲烷/甲醇=97/3)純化得到(R)-3-(6-(3-氯-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-2-(4-羥基四氫-2H-吡喃-4-羰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(25 mg, 0.042 mmol, 收率46.01%)。ES-API: [M+H] +=597.2。
步驟三：取(R)-3-(6-(3-氯-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-2-(4-羥基四氫-2H-吡喃-4-羰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯 (25 mg, 0.042 mmol)溶於無水二氯甲烷(0.5 mL)，加入三氟乙酸(0.2 mL)，室溫反應2小時，LC-MS監測反應完全，反應液減壓濃縮至乾，加入氨水/甲醇溶液(1mL)中和後，再次濃縮，經柱色譜法(二氯甲烷/甲醇=10/1)純化得到(R)-(6-(3-氯-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-8-(嗎啉-3-基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)(4-羥基四氫-2H-吡喃-4-基)甲酮 (Z485, 10 mg, 0.020 mmol, 收率48.06%)。ES-API: [M+H] +=497.0。 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 12.06 (s, 1H), 8.59 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 8.09 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 7.80 (s, 1H), 7.73 (s, 1H), 7.48 (s, 1H), 5.76 – 5.65 (m, 1H), 5.38 – 5.22 (m, 1H), 4.88 – 4.62 (m, 1H), 4.18 – 3.95 (m, 2H), 3.86 – 3.51 (m, 7H), 3.30 – 3.27 (m, 3H) 2.95 – 2.88 (m, 4H), 2.14 – 1.87 (m, 2H), 2.14 – 1.58 (m, 2H).
實施例255化合物Z486的合成
步驟一：取3-(R)-氟吡咯烷鹽酸鹽 (250 mg, 2.000 mmol)溶於二氯甲烷(10 mL)，冰浴下加入三乙胺(0.975 mL, 7.014 mmol)，對硝基苯基氯甲酸酯(735.13 mg, 3.647 mmol)，室溫反應1小時。反應液減壓濃縮，得到粗品藉由矽膠柱層析(石油醚/乙酸乙酯=80/20)純化，得到(R)-3-氟吡咯烷-1-基 4-硝基苯甲酸酯(480 mg, 1.888 mmol, 收率67.30%)。ES-API: [M+H] +=254.9。
步驟二：取(R)-3-氟吡咯烷-1-基 4-硝基苯甲酸酯(36.10 mg, 0.142 mmol)溶於DMA(1mL)加入(R)-3-(6-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(5a, 50 mg, 0.142 mmol)，碳酸鉀 (58.75 mg, 0.425 mmol)，130℃反應3小時，反應結束後，加水(10 mL)稀釋，乙酸乙酯(10 mLX3)萃取，有機相飽和食鹽水(10 mL)洗，無水硫酸鈉乾燥，過濾減壓濃縮至乾，藉由矽膠柱層析(石油醚/乙酸乙酯=70/30)純化，得到(R)-3-(6-氯-2-((R)-3-氟吡咯烷-1-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-甲酸叔丁酯(50 mg, 0.107 mmol, 收率75.24%)。ES-API: [M+H] +=468.1。
步驟三：取(R)-3-(6-氯-2-((R)-3-氟吡咯烷-1-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-甲酸叔丁酯(50 mg, 0.107 mmol)，3-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(55.16 mg, 0.214 mmol)，碳酸鉀 (44.30 mg, 0.321 mmol)，氯(2-二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II)(6.03 mg, 0.008 mmol)溶於1, 4-二氧六環(5 mL)和水(1 mL)，110℃攪拌2小時，反應液減壓濃縮至乾，得到粗品藉由矽膠柱層析(石油醚/乙酸乙酯=30/70)純化，得到(R)-3-(2-((R)-3-氟吡咯烷-1-羰基)-6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(30 mg, 0.053 mmol, 收率49.81%)。ES-API: [M+H] +=564.1。
步驟四：取(R)-3-(2-((R)-3-氟吡咯烷-1-羰基)-6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(20 mg, 0.035 mmol)溶於無水二氯甲烷(0.5 mL)，加入三氟乙酸(0.2 mL)，室溫反應2小時，LC-MS監測反應完全，反應液減壓濃縮至乾，加入氨水/甲醇溶液(1mL)中和後，再次濃縮，經矽膠柱層析(二氯甲烷/甲醇=10/1)純化得到((R)-3-氟吡咯烷-1-基)(6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-8-((R)-嗎啉-3-基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)甲酮(Z486, 11 mg, 0.024 mmol, 收率66.88%)。ES-API: [M+H] +=464.3。 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 11.34 (s, 1H), 8.46 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 8.10 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 7.76 (d, J= 1.6 Hz, 1H), 7.45 (s, 1H), 7.27 (s, 1H), 5.36 – 5.25 (m, 1H), 4.59 (d, J= 16.4 Hz, 1H), 4.42 (d, J= 16.4 Hz, 1H), 4.01 – 3.96 (m, 1H), 3.82 – 3.68 (m, 2H), 3.66 – 3.43 (m, 7H), 3.30 – 3.27 (m, 2H), 3.02 – 2.85 (m, 4H), 2.32 (s, 3H), 2.15 – 1.92 (m, 2H).
實施例256化合物Z487的合成
步驟一：取四氫-2H-吡喃-4-羧酸(22.13 mg, 0.170 mmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(0.5 mL)，加入2-(7-偶氮苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯(77.59 mg, 0.204 mmol)，(R)-3-(7-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-5-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(60 mg, 0.170 mmol)，N,N-二異丙基乙胺 (65.81 mg, 0.510 mmol)，室溫反應2小時，加水(10 mL)稀釋，乙酸乙酯(10 mLX3)萃取，有機相飽和食鹽水(10 mL)洗，無水硫酸鈉乾燥，過濾，減壓濃縮至乾，得到粗品藉由矽膠柱層析(石油醚/乙酸乙酯=70/30)純化得到(R)-3-(7-氯-2-(四氫-2H-吡喃-4-羰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-5-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(55 mg, 0.118 mmol, 收率69.56%)。ES-API: [M+H] +=465.1。
步驟二：取(R)-3-(7-氯-2-(四氫-2H-吡喃-4-羰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-5-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(50 mg, 0.108 mmol)，3-氯-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(59.90 mg, 0.215 mmol)，碳酸鉀 (44.58 mg, 0.323 mmol)，氯(2-二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II)(7.74 mg, 0.011 mmol)溶於1, 4-二氧六環(5 mL)和水(1 mL)，110℃攪拌2小時，反應液減壓濃縮至乾，得到粗品藉由矽膠柱層析(石油醚/乙酸乙酯=30/70)純化得到叔丁基(R)-3-(7-(3-氯-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-2-(四氫-2H-吡喃-4-羰基)-1, 2,3,4-四氫異喹啉-5-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(20 mg, 0.034 mmol, 收率32.01%)。ES-API: [M+H] +=581.0。
步驟三：取叔丁基(R)-3-(7-(3-氯-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-2-(四氫-2H-吡喃-4-羰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-5-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(20 mg, 0.034 mmol)溶於無水二氯甲烷(0.5 mL)，加入三氟乙酸(0.2 mL)，室溫反應2小時，LC-MS監測反應完全，反應液減壓濃縮至乾，加入氨/甲醇溶液(1mL)中和後，再次濃縮，經矽膠柱層析(二氯甲烷/甲醇=10/1)純化得到(R)-(7-(3-氯-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-5-(嗎啉-3-基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)(四氫-2H-吡喃-4基)甲酮(Z487, 9 mg, 0.019 mmol, 收率54.38%)。ES-API: [M+H] +=481.1。 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 12.06 (s, 1H), 8.61 (s, 1H), 8.11 (d, J= 1.6 Hz, 1H), 7.80 (d, J= 11.2 Hz, 1H), 7.73 (s, 1H), 7.55 (d, J= 16.4 Hz, 1H), 4.96 – 4.61 (m, 2H), 4.03 (d, J= 9.6 Hz, 1H), 3.95 – 3.66 (m, 6H), 3.57 – 3.46 (m, 4H), 3.29 – 3.16 (m, 1H), 3.12 – 2.84 (m, 5H), 1.79 – 1.45 (m, 4H).
實施例257化合物Z488的合成
步驟一：取3-(S)-氟吡咯烷鹽酸鹽 (250 mg, 2.000 mmol)溶於二氯甲烷(10 mL)，冰浴下加入三乙胺(0.695 mL, 5.000 mmol)，對硝基苯基氯甲酸酯(524.06 mg, 2.600 mmol)，室溫反應1小時，反應液減壓濃縮，藉由矽膠柱層析(石油醚/乙酸乙酯=80/20)純化，得到(S)-3-氟吡咯烷-1-基 4-硝基苯甲酸酯 (370 mg, 1.455 mmol, 收率72.77%)。ES-API: [M+H] +=255.0。
步驟二：取(S)-3-氟吡咯烷-1-基 4-硝基苯甲酸酯(54.03 mg, 0.213 mmol)溶於DMA(1 mL)加入(R)-3-(6-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(5a, 50 mg, 0.142 mmol)，碳酸鉀 (58.75 mg, 0.425 mmol)，130℃反應3小時，反應結束後，加水(10 mL)稀釋，乙酸乙酯(10 mLX3)萃取，有機相飽和食鹽水(10 mL)洗，無水硫酸鈉乾燥，過濾，減壓濃縮至乾，藉由矽膠柱層析(石油醚/乙酸乙酯=70/30)純化得到(R)-3-(6-氯-2-((S)-3-氟吡咯烷-1-羰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-甲酸叔丁酯(50 mg, 0.107 mmol, 收率75.40%)。ES-API: [M+H] +=468.1。
步驟三：取(R)-3-(6-氯-2-((S)-3-氟吡咯烷-1-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-甲酸叔丁酯(45 mg, 0.096 mmol)，3-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(49.64 mg, 0.192 mmol), 碳酸鉀 (34.70 mg, 0.251 mmol)，氯(2-二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II)(6.03 mg, 0.008 mmol)溶於1,4-二氧六環(5 mL)和水(1 mL)，110℃攪拌2小時，反應液減壓濃縮至乾，得到粗品藉由矽膠柱層析(石油醚/乙酸乙酯=30/70)純化，得到(R)-3-(2-((S)-3-氟吡咯烷-1-羰基)-6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(20 mg, 0.035 mmol, 收率36.90%)。ES-API: [M+H] +=564.3。
步驟四：取(R)-3-(2-((S)-3-氟吡咯烷-1-羰基)-6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(20 mg, 0.035 mmol)溶於無水二氯甲烷(0.5 mL)，加入三氟乙酸(0.2 mL)，室溫反應2小時，LC-MS監測反應完全，反應液減壓濃縮至乾，加入氨/甲醇溶液(1mL)中和後，再次濃縮，經矽膠柱層析(二氯甲烷/甲醇=10/1)純化得到((S)-3-氟吡咯烷-1-基)(6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-8-((R)-嗎啉-3-基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)甲酮 (Z488, 9.8 mg, 0.021 mmol, 收率59.58%)。ES-API: [M+H] +=464.3。 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 11.34 (s, 1H), 8.46 (d, J= 1.6 Hz, 1H), 8.10 (d, J= 1.6 Hz, 1H), 7.77 (s, 1H), 7.45 (s, 1H), 7.27 (s, 1H), 5.36 – 5.27 (m, 1H), 4.58 – 4.41 (m, 1H), 3.82 – 3.73 (m, 2H), 3.71 – 3.44 (m, 6H), 3.23 – 3.16 (m, 2H), 3.10 – 2.82 (m, 6H), 2.55 (s, 1H), 2.32 (s, 3H), 2.18 – 1.84 (m, 2H).
實施例258化合物Z489的合成
步驟一：向5 mL微波反應器中加入(3R)-3-(2-(3-氧-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羰基)-6-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯 (30 mg, 0.06 mmol)，3-氯-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(68 mg, 0.24 mmol),碳酸鉀(25 mg, 0.18mmol)，甲烷磺酸(2-二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II)(4.40 mg, 0.006 mmol)，二氧六環(2 mL)和水(0.3 mL)。體系用氮氣置換三次，然後用氮氣球保護。110℃微波條件下反應2小時，反應液加入乙酸乙酯(10 mL)，用飽和食鹽水(5 mLX3)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮，粗品用快速矽膠柱純化(甲醇：二氯甲烷=10:100)得到目標產物(3R)-3-(2-(3-氧-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羰基)-6-(3-氯-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(20mg, 收率: 37%)。ES-API: [M+H] +=608.3。
步驟二：向5 mL單口圓底燒瓶中加入(3R)-3-(2-(3-氧-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羰基)-6-(3-氯-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(20mg, 0.11mmol)，三氟乙酸(3 mL)和二氯甲烷(6 mL)，室溫攪拌反應30分鐘，旋乾粗品用製備HPLC(碳酸氫銨法)純化得到：(3-氧雜-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-基)(6-(3-氯-1H-吡咯[2,3-b]吡啶-5-基)-8-((R)-嗎啉-3-基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)甲酮(Z489, 7mg, 收率42%)。ES-API: [M+H] +=508.3。 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 12.00 (s, 1H), 8.52 (s, 1H), 8.02 (s, 1H), 7.68 (d, J= 15.5 Hz, 2H), 7.41 (s, 1H), 4.58 (dd, J= 57.2, 16.3 Hz, 2H), 3.93 – 3.44 (m, 12H), 3.23 – 3.16 (m, 2H), 2.88 (s, 4H), 1.80 – 1.63 (m, 4H).
實施例259化合物Z491, Z490的合成
步驟一 ：將(6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-8-((S)-吡咯烷-2-基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)- 基)(2-(三氟甲基)嗎啉代)甲酮(20mg)用SFC手性拆分(色譜柱: ChiralpakIC 250mm*4.6mm*5um, 流動相: ACN-IPA-DEA=80-20-02, 流速:1ml/min, 柱溫：30℃, 30MIN)得到兩個異構體化合物。其中一個異構體化合物任意指定為(6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-8-((S)-吡咯烷-2-基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)((R)-2-(三氟甲基)嗎啉代)甲酮(Z491, 4.5mg, 收率：22.5%, 保留時間：9.411 分鐘, ee值：96.3%)。ES-API:[M+H] += 514.2。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 11.38 (s, 1H), 8.60 (d, J= 2.1 Hz, 1H), 8.28 (d, J= 2.2 Hz, 1H), 7.86 (d, J= 1.7 Hz, 1H), 7.62 (d, J= 1.7 Hz, 1H), 7.28 (s, 1H), 4.70 (s, 1H), 4.62 (d, J= 16.5 Hz, 1H), 4.50 (d, J = 16.5 Hz, 1H), 4.30 (s, 1H), 3.97 (d, J = 11.4 Hz, 1H), 3.68 (t, J = 13.1 Hz, 2H), 3.54 – 3.45 (m, 4H), 3.18 – 3.12 (m, 1H), 2.98 (d, J = 8.9 Hz, 2H), 2.92 (d, J = 13.0 Hz, 3H), 2.42 (s, 1H), 2.32 (d, J = 1.1 Hz, 3H), 2.18 – 2.07 (m, 3H).
另一個異構體化合物任意指定為(6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-8-((S)-吡咯烷-2-基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)- 基)((S)-2-(三氟甲基)嗎啉代)甲酮(Z490, 7.5mg, 收率：37.5%, 保留時間：10.206分鐘, ee值：96.84%)。ES-API:[M+H] +=514.2。
實施例260化合物Z492的合成
步驟一：向50 mL圓底燒瓶中加入3-氧雜-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷 (340 mg, 3 mmol)，三乙胺(607 mg, 6mmol)和二氯甲烷(10mL)。0℃條件下緩慢加入對硝基苯基氯甲酸酯(786 mg, 3.9 mmol)，室溫攪拌1小時。反應液加入二氯甲烷(20 mL)，用飽和食鹽水(20 mLX3)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮，粗品用快速矽膠柱純化(甲醇：二氯甲烷=10:100)得到4-硝基苯基3-氧雜-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸酯(600mg, 收率: 72%)。ES-API: [M+H] +=279.1。
步驟二：向5 mL微波反應器中加入4-硝基苯基3-氧雜-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸酯 (100 mg, 0.283 mmol)，(R)-3-(6-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(5a, 100 mg, 0.28 mmol)，碳酸鉀(117 mg, 0.86 mmol)和二甲基乙醯胺(2 mL)。130℃條件下攪拌過夜。反應液加入乙酸乙酯(10 mL)，用飽和食鹽水(10 mLX3)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮，粗品用快速矽膠柱純化(甲醇：二氯甲烷=10:100)得到目標產物(3R)-3-(2-(3-氧-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羰基)-6-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(100mg, 收率: 72%)。ES-API: [M+H] +=492.2。
步驟三：向5 mL微波反應器中加入(3R)-3-(2-(3-氧-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羰基)-6-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯 (50 mg, 0.1 mmol)，3-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(68 mg, 0.24 mmol)，碳酸鉀(42 mg, 0.3 mmol)，甲烷磺酸(2-二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II)(7.30 mg, 0.01 mmol)，二氧六環(2 mL)和水(0.3 mL)。體系用氮氣置換三次，然後用氮氣球保護。110℃微波條件下反應2小時，反應液加入乙酸乙酯(10 mL)，用飽和食鹽水(5 mLX3)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮，粗品用快速矽膠柱純化(甲醇：二氯甲烷=10:100)得到目標產物(3R)-3-(2-(3-氧-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羰基)-6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(30mg, 收率: 50%)。ES-API: [M+H] +=588.3。
步驟四：向5 mL單口圓底燒瓶中加入(3R)-3-(2-(3-氧-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羰基)-6-(3-甲基-1H-吡咯[2,3-b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(30 mg, 0.05 mmol)，三氟乙酸(3 mL)和二氯甲烷(6 mL)，室溫攪拌反應30分鐘，旋乾粗品用製備HPLC(碳酸氫銨法)純化得到(3-氧雜-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-基)(6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-8-((R)-嗎啉-3-基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)甲酮(Z492, 15mg, 收率:60%)。ES-API: [M+H] +=488.3。 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 11.35 (s, 1H), 8.46 (d, J= 1.9 Hz, 1H), 8.10 (d, J= 1.8 Hz, 1H), 7.76 (s, 1H), 7.45 (s, 1H), 7.27 (s, 1H), 4.72 (d, J= 16.4 Hz, 1H), 4.57 (d, J= 16.3 Hz, 1H), 4.08-3.50 (m, 12H), 3.31 – 3.25 (m, 2H), 3.05-2.85 (m, 4H), 2.31 (s, 3H), 1.87-1.70 (m, 4H).
實施例261化合物Z493的合成
步驟一：向 3-環丙基-1-甲基-1H-吡唑-5-甲酸乙酯 (0.25 g, 1.29 mmol)的甲醇 (6 mL)和 水 (1 mL)溶液中加入氫氧化鈉(154.45 mg, 3.86 mmol)，混合物 在 20度下攪拌 16 小時。將反應混合物濃縮除去甲醇，然後用水稀釋，用1N 稀鹽酸酸化至pH=3，用乙酸乙酯(10 mLX3)萃取，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮得到3-環丙基-1-甲基-1H-吡唑-5-羧酸(0.18 g, 粗品)，為白色固體，不經純化直接用於下一步反應。ES-API:[M+1] +=167.1。
步驟二：向 ( S)-2-(6-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯 (0.07 g, 0.21 mmol)的二氯甲烷 (4 mL)溶液加入5-環丙基-2-甲基-吡唑-3-羧酸 (49.33 mg, 0.3 mmol)，三乙胺 (63.1 mg, 0.63 mmol)，1-丙基磷酸酐(197.2 mg, 0.31 mmol, 50%的乙酸乙酯溶液)，反應在20度下攪拌3 小時。將混合物加入水並用乙酸乙酯萃取，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮，得到粗品經矽膠柱層析純化(石油醚/乙酸乙酯=1/1)得到( S)-2-[ 6-氯-2-(3-環丙基-1-甲基-1H-吡唑-5-羰基)-1,2,3,4四氫異喹啉-8-基]吡咯烷-1-羧酸叔丁酯 (70.00 mg, 產率68.9%)，為黃色油狀物。ES-API:[M+1] +=485.2。
步驟三：向( S)-2-[ 6-氯-2-(3-環丙基-1-甲基-1H-吡唑-5-羰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基]吡咯烷-1-羧酸叔丁酯 (70 mg, 0.14 mmol)的二氧六環/水(4 mL/0.8 mL)溶液中加入3-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶 (44.7 mg, 0.17 mmol)、碳酸鉀(59.75 mg, 0.43 mmol)和氯(2-二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II)(10.39 mg，14.43 μmol)，加熱至100度反應2小時。反應完成後，旋乾，得到粗品經矽膠柱層析純化(二氯甲烷/甲醇=10/1)得到產物 ( S)-2-[2-(3-環丙基-1-甲基-1H-吡唑-5-羰基)-6-(3-甲基-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶-5-基 )-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基] 吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(60.00 mg, 產率71.59%)，為黃色油狀物。ES-API:[M+1] +=581.3。
步驟四：將( S)-2-[2-(3-環丙基-1-甲基-1H-吡唑-5-羰基)-6-(3-甲基-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶-5-基 )-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基] 吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(60 mg, 0.10 mmol)溶於二氯甲烷(1.0 mL)中，加入三氟乙酸(1.0 mL)。室溫反應1小時。反應完成後，旋乾，得到粗品經色譜柱純化(二氯甲烷/甲醇=10/1)得到產物( S)-(3-環丙基-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-[6-(3-甲基-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶-5-基)-8-[吡咯烷-5-基]-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]甲酮(Z493, 13.60 mg, 產率27.39%)。ES-API:[M+1] +=481.1。 1H NMR (400 MHz, CD 3Cl) δ 10.09 (s, 1H), 8.51 (s, 1H), 8.01 (s, 1H), 7.90-7.68 (m, 1H), 7.27 (s, 1H) 7.12 (s, 1H), 6.07 (s, 1H), 5.11-4.84 (m, 2H), 4.53-4.04 (m, 1H), 3.97-3.68 (m, 5H), 3.49-2.90 (m, 5H), 2.35 (s, 3H), 2.11-1.84 (m, 5H), 0.99-0.88 (m, 2H), 0.79-0.69 (m, 2H).
實施例262化合物Z494的合成
步驟一：向 ( S)- 2-(6-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(70 mg, 0.21 mmol)的二氯甲烷(2 mL)溶液中加入1-環丙基-1 H-吡唑-3-羧酸(63.23 mg, 0.42 mmol)，1-丙基磷酸酐(394.3 mg, 0.62 mmol，50%的乙酸乙酯溶液)，三乙胺(63.08 mg, 0.62 mmol)，混合液在25°C下攪拌兩小時，LCMS監測，加水淬滅，二氯甲烷萃取，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮，得到粗品經矽膠柱層析純化(流動相0-50%乙酸乙酯/石油醚，乙酸乙酯/石油醚=1/1，Rf=0.3得到產物( S)-2-(6-氯-2-(1-環丙基-1 H-吡唑-3-羰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(64 mg, 收率65.39%)。ES-API:[M+H-100] += 371.1。
步驟二：向化合物( S)-2-(6-氯-2-(1-環丙基-1 H-吡唑-3-羰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(64 mg, 0.14 mmol )的二氧六環/水(2 mL/0.4 mL)的溶液中 加入3-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二噁硼烷-2-基)-1 H-吡咯[2,3-b]吡啶(42.09 mg，0.16 mmol)，(2-二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II)(9.78 mg,0.014 mmmol),碳酸鉀(56.26 mg, 0.41 mmmol)，在氮氣保護下將混合物加熱到110 攝氏度攪拌，藉由LCMS監測反應完全，用乙酸乙酯/水處理，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮，得到粗品經矽膠柱層析純化(流動相0-10%甲醇/二氯甲烷，二氯甲烷/甲醇=10/1，Rf=0.6)得到產物( S)- 2-(2-(1-環丙基-1 H-吡唑-3-羰基)-6-(3-甲基-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶-5-基)- 1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(42 mg, 收率54.54%)。ES-API:[M+H] += 567.3。
步驟三：向化合物( S)- 2-(2-(1-環丙基-1 H-吡唑-3-羰基)-6-(3-甲基-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶-5-基)- 1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(54 mg, 0.074 mmol )的二氯甲烷(2 mL)加入三氟乙酸(1 mL)，常溫攪拌1小時，藉由LCMS監測反應完全，用飽和碳酸氫鈉中和調節pH至7，用二氯甲烷/水處理，無水硫酸鈉乾燥並過濾濃縮，得到粗品經色譜柱純化(二氯甲烷/甲醇=8/1)得到產物( S)-(1-環丙基-1 H-吡唑-3-基)(6-(3-甲基-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶-5-基)-8-(吡咯烷-2-基)-3,4-二氫異喹啉-2(1 H)-基)甲酮(Z494, 9.2 mg, 產率26.60%)，為白色固體。ES-API:[M+H] += 467.1。 1H NMR (400 MHz, CD 3Cl) δ 8.82-8.36 (m, 1H), 7.54 (s, 1H), 6.99 -6.79 (m, 2H), 6.57-6.41 (m, 1H), 6.20-5.96 (m, 2H), 5.85-5.63 (m, 1H), 4.55-3.56 (m, 5H), 3.22-3.07 (m, 1H), 2.76-2.53 (m, 2H), 2.31-1.87 (m, 3H), 1.30 (s, 3H), 1.21-0.93 (m, 4H), 0.23-0.03 (m, 4H).
實施例263化合物Z495的合成
步驟一：冰浴條件下，將N,N-二異丙基乙胺(187 mg, 1.45 mmol)和4-嗎啉碳醯氯(86 mg, 0.58 mmol)依次加入到(R)-3-(6-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(5a, 170 mg, 0.48 mmol)的二氯甲烷(2 mL)溶液中，攪拌15分鐘。反應結束後，加入二氯甲烷(10 mL)，並用水(5 mL)洗滌3遍。有機相用無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮，並用快速矽膠柱(0-70%四氫呋喃/石油醚)純化得到(R)-3-(6-氯-2-(嗎啉-4-羰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(200 mg, 收率89%)。ES-API[M+H +] = 466.1。
步驟二：氮氣保護下，(R)-3-(6-氯-2-(嗎啉-4-羰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯 (60 mg, 0.13 mmol)，3-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶 (43 mg, 0.17 mmol)，氯(2-二環己基膦-2′,6′-二甲氧基-1,1′-聯苯基)[2-(2′-氨基-1,1′-聯苯基)]鈀(II)(9 mg, 0.01 mmol)和碳酸鉀(53 mg, 0.39 mmol)的1,4-二氧六環(2 mL)和水(0.4 mL)的混合物，120℃攪拌2小時。待反應完後，加入乙酸乙酯(10 mL)，並依次用水(5 mL)和飽和食鹽水(5 mL)洗滌。有機相用無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮並用快速矽膠柱(0-10%甲醇/二氯甲烷)純化，得到無色油狀物(R)-3-(6-(3-甲基-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶-5-基)-2-(嗎啉-4-羰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(60 mg, 收率83%)。ES-API: [M+H] += 562.3。
步驟三：冰浴條件下，往化合物(R)-3-(6-(3-甲基-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶-5-基)-2-(嗎啉-4-羰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(60 mg, 0.11 mmol)的二氯甲烷(1 mL)溶液中加入三氟乙酸(0.5 mL)，室溫攪拌2小時。反應液減壓濃縮，隨後用7M胺/甲醇溶液中和。混合物濃縮並用快速矽膠柱(7M胺/甲醇/二氯甲烷0-10%)純化，得到(R)-(6-(3-甲基-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶-5-基)-8-(嗎啉-3-基)-3,4-二氫異喹啉-2(1 H)-基)(嗎啉)甲酮(Z495, 20.34 mg, 純度100%, 收率41%)。ES-API: [M+H] += 462.2。 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 11.35 (s, 1H), 8.46 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 8.10 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 7.76 (s, 1H), 7.44 (s, 1H), 7.27 (s, 1H), 4.62 – 4.55 (m, 1H), 4.49 – 4.42 (m, 1H), 4.03 – 3.93 (m, 1H), 3.79 (t, J= 8.8 Hz, 2H), 3.68 – 3.57 (m, 4H), 3.58 – 3.51 (m, 1H), 3.50 – 3.40 (m, 2H), 3.31 – 3.29 (m, 1H), 3.29 – 3.16 (m, 4H), 3.04 – 2.88 (m, 4H), 2.31 (s, 3H).
實施例264化合物Z411的合成
步驟一：將1-(5-溴-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶-3-基)乙酮(7 g, 29.28 mmol)溶於三氟乙酸(50 g, 439.2 mmol)，加入三乙基矽烷(51 g, 439.2 mmol)，室溫反應16小時。反應完成後，旋乾，飽和碳酸氫鈉水溶液中和，二氯甲烷(100mlx3)萃取，經矽膠柱層析純化(石油醚/乙酸乙酯=3/1)得到產物5-溴-3-乙基-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶 (6.6 g, 粗品)。ES-API:[M+H] += 225.0, 227.0。
步驟二：將5-溴-3-乙基-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶(6.6 g, 29.32 mmol)溶於乙腈(80 mL)中，加入N-氯代丁二醯亞胺(4.7 g, 35.19 mmol)。加熱至40度反應24小時。反應完成後，加入乙酸乙酯和水萃取，無水硫酸鈉乾燥，過濾旋乾，得到粗品經矽膠柱層析純化(石油醚/乙酸乙酯=2/1)得到產物5-溴-3-乙基-1,3-二氫吡咯并[2,3-b]吡啶-2-酮(1.1 g, 收率：15%)。ES-API:[M+1] +=241.0, 243.0。
步驟三：將5-溴-3-乙基-1,3-二氫吡咯并[2,3-b]吡啶-2-酮(1.1 g, 4.56 mmol)溶於三氯氧磷(20 mL)中，加熱至100度反應16小時。反應完成後，旋乾，加入冰水淬滅反應，飽和碳酸鈉水溶液中和，加入二氯甲烷(30 mLX3)萃取，無水硫酸鈉乾燥，過濾旋乾，得到粗品經矽膠柱層析純化(石油醚/乙酸乙酯=5/1)得到產物5-溴-2-氯-3-乙基-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶(710 mg, 收率：60%)。ES-API:[M+1] +=258.9, 260.9。
步驟四：將( S)-2-[6-氯-2-(2-甲氧基乙醯基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基]吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(70 mg, 0.17 mmol)溶於二氧六環(1 mL)中，加入聯頻那醇硼酸酯(87 mg, 0.34 mmol)，乙酸鉀(50 mg, 0.51 mmol)，氯(2-二環己基膦基-2',4',6'-三異丙基-1,1'-聯苯基)[2-(2'-氨基-1,1'-聯苯)]鈀(II)(13 mg, 0.017 mmol)，加熱至100度反應2小時。反應完成後，加入二氯甲烷(10 mL)和水(10 mL)萃取，無水硫酸鈉乾燥，過濾旋乾，得到粗品經色譜柱純化(石油醚/乙酸乙酯=1/1)得到產物( S)-2-[2-(2-甲氧基乙醯基)-6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基]吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(70 mg, 收率：82%)。ES-API:[M+1-100] +=401.1。
步驟五：將( S)-2-[2-(2-甲氧基乙醯基)-6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基]吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(35 mg, 0.07 mmol)溶於二氧六環(1 mL)中，加入5-溴-2-氯-3-乙基-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶(18 mg, 0.07 mmol)，碳酸鉀(29 mg, 0.21 mmol)，1,1'-雙(二-苯基膦基)二茂鐵氯化鈀(5 mg, 0.007 mmol)和水(0.2 mL)加熱至100度反應3小時。反應完成後，旋乾，得到粗品經色譜柱純化(二氯甲烷/甲醇=10/1)得到產物( S)-2-[6-(2-氯-3-乙基-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶-5-基)-2-(2-甲氧基乙醯基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基]吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(20 mg, 收率：52%)。ES-API:[M+1] +=553.1。
步驟六：將 ( S)-2-[6-(2-氯-3-乙基-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶-5-基)-2-(2-甲氧基乙醯基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基]吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(40 mg, 0.072 mmol)溶於二氯甲烷(1 mL)中，加入三氟乙酸(1 mL)。室溫反應2小時。反應完成後，旋乾，用二氯甲烷和飽和碳酸鈉水溶液萃取，無水硫酸鈉乾燥，過濾旋乾，得到粗品經色譜柱純化(二氯甲烷/甲醇=8/1)得到產物( S)-1-[6-(2-氯-3-乙基-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶-5-基)-8-(吡咯烷-2-基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-2-甲氧乙-1-酮(Z411, 7.5 mg, 收率：23%)。ES-API:[M+1] +=453.0。 1H NMR (400 MHz, CD 3Cl) δ 8.55 (s, 1H), 7.89 (s, 1H), 7.79 (d, 1H), 7.12 (d, 1H), 5.10-4.94 (m, 1H), 4.72-4.65 (dd,2H), 4.37 (t, J = 12.5 Hz, 1H), 4.18 (s, 2H), 3.61 (d,2H), 3.44 (s, 3H), 3.25 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 2.88 (d,2H), 2.72 (t, J = 8.5 Hz, 2H), 2.39-2.29 (m, 1H), 2.04 (d,3H), 1.27 (s, 3H), 1.24 (s, 1H), 0.90-0.78 (m, 1H).
實施例265化合物Z496的合成
步驟一：向 ( S)-2-(6-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(300 mg, 0.9 mmol)的N, N-二甲基甲醯胺(3 ml)溶液中加入2-羥基-2-甲基丙酸 (139.07 mg, 1.34 mmol),1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺 (341.45 mg, 1.78 mmol)，1-羥基苯并三唑(240.67 mg,1.78 mmol)，三乙胺 (270.36 mg, 2.67 mmol)，混合液在25°C下攪拌兩小時，LCMS監測反應完全，加水淬滅反應，二氯甲烷萃取，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮，得到粗品經矽膠柱層析純化(流動相0-50%乙酸乙酯/石油醚，乙酸乙酯/石油醚=1/1，Rf=0.3)得到產物( S)-2-(6-氯-2-(2-羥基-2-甲基丙醯基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯 (180 mg, 收率47.49%)。ES-API:[M+H-100] += 323.1。
步驟二：向化合物( S)-2-(6-氯-2-(2-羥基-2-甲基丙醯基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(120 mg, 0.28 mmol )的二氧六環(0.5 mL)的溶液中 加入4,4,5,5-四甲基-2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)-1,3,2-二氧硼雜環戊烷(144.10 mg, 0.57 mmol)，氯(2-二環己基膦基-2',4',6'-三異丙基-1,1'-聯苯基)[2-(2'-氨基-1,1'-聯苯)]鈀(II)(22.30 mg, 28.37 μmol)，醋酸鉀(83.42mg,0.85 mmol)，將混合物加熱攪拌到100 攝氏度，在氮氣保護下反應2小時, 藉由LCMS監測反應完全，用乙酸乙酯/水處理，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮，得到粗品經矽膠柱層析純化(乙酸乙酯/石油醚=1/1，Rf=0.3)得到產物( S)-2-(2-(2-羥基-2-甲基丙醯基)-6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)-1, 2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(93 mg, 收率63.71%)。ES-API:[M+H-100] += 415.3。
步驟三：向化合物( S)-2-(2-(2-羥基-2-甲基丙醯基)-6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(50 mg, 0.097 mmol )的二氧六環/水(2 mL/0.4 mL)的溶液中 加入5-溴-3-氯-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶(27.00 mg，0.12 mmol)，1,1'-雙(二-苯基膦基)二茂鐵氯化鈀(7.05 mg, 0.0097 mmmol)，碳酸鉀(40.24 mg,0.30 mmmol)，將混合物加熱攪拌到100 攝氏度，在氮氣保護下反應2小時，藉由LCMS監測反應完全，用乙酸乙酯和水處理，有機相無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮，得到粗品經矽膠柱層析純化(流動相0-5%甲醇/二氯甲烷，二氯甲烷/甲醇=10/1，Rf=0.4)得到產物( S)-2-(6-(3-氯-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶-5-基)-2-(2-羥基-2-甲基丙醯基)-1,2, 3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(43 mg, 收率82.07%)。ES-API:[M+H] += 539.2。
步驟四：向化合物( S)- 2-(6-(3-氯-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶-5-基)-2-(2-羥基-2-甲基丙醯基)-1,2, 3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(60 mg, 0.11 mmol )的二氯甲烷(2ml)溶液中加入三氟乙酸(1 mL)，常溫攪拌1小時，藉由LCMS監測反應完全，用飽和碳酸氫鈉中和調節pH至7，用二氯甲烷/水處理，無水硫酸鈉乾燥並過濾濃縮，得到粗品經色譜柱純化(二氯甲烷/甲醇=8/1)得到產物( S)-1-(6-(3-氯-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶-5-基)-8-(吡咯烷-2-基)-3,4-二氫異喹啉-2(1 H)-基)-2-羥基-2-甲基丙-1-酮(Z496, 14.1mg, 產率28.86%)，為白色固體。ES-API:[M+H] +=439.0。 1H NMR (400 MHz, CD 3Cl) δ 8.56-8.38 (m, 1H), 8.04 (s, 1H), 7.78-7.67 (m, 1H), 7.31 (s, 1H), 7.26-7.24 (m, 1H), 5.17-4.67 (m, 2H), 4.45-4.30 (m, 1H), 4.06-3.72 (m, 2H), 3.39-2.79 (m, 4H), 2.35-2.25 (m, 3H), 2.08-1.92 (m, 3H), 1.60-1.55 (m, 6H).
實施例266化合物Z416的合成
步驟一：向 ( S)- 2-(6-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(300 mg, 0.9 mmol)的N, N-二甲基甲醯胺(3 mL)溶液中加入2-羥基-2-甲基丙酸(139.07 mg, 1.34 mmol)，1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺(341.45 mg, 1.78 mmol)，1-羥基苯并三唑(240.67 mg,1.78 mmol)，三乙胺(270.36 mg, 2.67 mmol)，混合液在25°C下攪拌兩小時，LCMS監測反應完全，加水淬滅反應，二氯甲烷萃取，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮，得到粗品經矽膠柱層析純化(流動相0-50%乙酸乙酯/石油醚，乙酸乙酯/石油醚=1/1，Rf=0.3)得到產物( S)-2-(6-氯-2-(2-羥基-2-甲基丙醯基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(180 mg, 收率47.49%)。ES-API:[M+H-100] += 323.1。
步驟二：向化合物( S)-2-(6-氯-2-(2-羥基-2-甲基丙醯基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(120 mg, 0.28 mmol )的二氧六環(0.5 mL)的溶液中 加入4,4,5,5-四甲基-2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)-1,3,2-二氧硼雜環戊烷(144.10 mg, 0.57 mmol)，氯(2-二環己基膦基-2',4',6'-三異丙基-1,1'-聯苯基)[2-(2'-氨基-1,1'-聯苯)]鈀(II)(22.30 mg, 28.37 μmol),醋酸鉀(83.42 mg, 0.85 mmol)，將混合物加熱攪拌到100 攝氏度在氮氣保護下，藉由LCMS監測反應完全，用乙酸乙酯/水處理，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮，得到粗品經矽膠柱層析純化(流動相0-50%乙酸乙酯/石油醚，乙酸乙酯/石油醚=1/1，Rf=0.3)得到產物( S)- 2-(2-(2-羥基-2-甲基丙醯基)-6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)-1, 2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(93 mg, 收率63.71%).ES-API:[M+H-100] += 415.3。
步驟三：向化合物( S)- 2-(2-(2-羥基-2-甲基丙醯基)-6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)-1, 2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(50 mg, 0.097 mmol )的二氧六環/水(2ml/0.4 ml)的溶液中 加入5-溴-3-異丙基-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶(27.89 mg，0.12 mmol)，氯(2-二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II)(6.99 mg,0.01 mmmol), 碳酸鉀(40.24 mg,0.30 mmmol),將混合物加熱攪拌到100 攝氏度，在氮氣保護下反應2小時, 藉由LCMS監測反應完全，用乙酸乙酯/水處理，無水硫酸鈉乾燥，濃縮，得到粗品經矽膠柱層析純化(流動相0-5%甲醇/二氯甲烷，二氯甲烷/甲醇=10/1，Rf=0.4)得到產物( S)-2-(2-(2-羥基-2-甲基丙醯基)-6-(3-異丙基-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶-5-基)-1,2, 3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(40 mg, 收率75.28%).ES-API:[M+H] += 547.2。
步驟四：向化合物( S)-2-(2-(2-羥基-2-甲基丙醯基)-6-(3-異丙基-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶-5-基)-1,2, 3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(55 mg, 0.1 mmol, )的二氯甲烷(2 mL)溶液中加入三氟乙酸(1 mL)，常溫攪拌一小時，藉由LCMS監測反應完全，用飽和碳酸氫鈉中和調節pH至7，用二氯甲烷/水處理，無水硫酸鈉乾燥並過濾濃縮，得到粗品經色譜柱純化(二氯甲烷/甲醇=8/1，Rf=0.4)得到產物( S)-2-羥基-1-(6-(3-異丙基-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶-5-基)-8-(吡咯烷-2-基)-3,4-二氫異喹啉 -2(1 H)-基)-2-甲基丙-1-酮(Z416, 15.5 mg, 收率34.50%)，為白色固體。ES-API:[M+H] +=447.1。 1H NMR (400 MHz, CD 3Cl) δ 8.48-8.26 (m, 1H), 7.97 (s, 1H), 7.70 (s, 1H), 7.23-7.17 (m, 1H), 7.07-7.05 (m, 1H), 4.81 (d, J = 16.6 Hz, 1H), 4.56-4.37 (m, 1H), 4.11-3.83 (m, 1H), 3.46-3.29 (m, 1H), 3.24-3.11 (m, 2H), 3.06-2.71 (m, 2H), 2.37-2.28 (m, 1H), 2.21-1.92 (m, 5H), 1.62-1.56 (m, 6H), 1.37-1.32 (m, 6H).
實施例267化合物Z497的合成
步驟一 ：在0℃下，向2-(三氟甲基)嗎啉鹽酸鹽(0.1 g, 0.65 mmol)的無水二氯甲烷(5 mL)溶液中加入三乙胺 (198.22 mg, 1.96 mmol)和(4-硝基苯基)碳醯氯(197.42 mg, 0.98 mmol)，氮氣保護，混合物升溫至20度攪拌3小時。LCMS監測反應完全，反應液濃縮，得到粗品經矽膠柱層析純化(石油醚/乙酸乙酯=10:90)得到4-硝基苯基-2-(三氟甲基)嗎啉-4-羧酸(0.18 g, 產率86.62%)，為黃色油狀物。ES-API:[M+1] +=321.0。
步驟二：向(2 S)-2-(6-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯 (70 mg, 0.21 mmol)的N, N-二甲基乙醯胺(1 mL)溶液中加入4-硝基苯基 2-(三氟甲基)嗎啉-4-羧酸 (99.81 mg, 0.31 mmol)和碳酸鉀(86.16 mg, 0.62 mmol)。混合物升溫至150度攪拌3小時。LCMS監測反應完全，反應用水稀釋並用乙酸乙酯(30mlx1)萃取，有機相用飽和食鹽水洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮，得到粗品經矽膠柱層析 (石油醚:乙酸乙酯=1:1)純化，得到(2 S)-2-[6-氯-2-[2-(三氟甲基)嗎啉-4-羰基]-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基]吡咯烷-1-羧酸叔丁酯 (70.00 mg, 產率65.03%)，為黃色油狀物。ES-API:[M+1-100] +=418.1。
步驟三：向(2 S)-2-[6-氯-2-[2-(三氟甲基)嗎啉-4-羰基]-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基]吡咯烷-1-羧酸叔丁酯 (70.00 mg , 0.14 mmol)的二氧六環/水(4 mL/0.8 mL)溶液中，加入3-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二噁硼烷-2-基)-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶(41.86 mg, 0.16 mmol)，氯(2-二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II)(9.73 mg, 13.51 μmol)和碳酸鉀(55.95 mg, 0.41 mmol)。加熱至100度反應2小時。反應完成後，旋乾，得到粗品經矽膠柱層析純化(二氯甲烷/甲醇=10/1)得到產物 (2 S)-2-[6-(3-甲基-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶-5-基)-2-[2-(三氟甲基)嗎啉-4-羰基]-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基] 吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(70.00 mg, 產率84.41%)，為黃色油狀物.ES-API:[M+1] +=614.3。
步驟四：將(2 S)-2-[6-(3-甲基-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶-5-基)-2-[2-(三氟甲基)嗎啉-4-羰基]-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基]吡咯烷-1-羧酸叔丁酯 (70 mg, 0.11 mmol)溶於二氯甲烷(1.0 mL)中，加入三氟乙酸(1.0 mL)。室溫反應1小時。反應完成後，混合物用碳酸氫鈉淬滅，並用二氯甲烷(20ml)萃取。有機層用飽和氯化鈉洗滌，經無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮，得到粗品經矽膠柱層析純化(二氯甲烷/甲醇=10/1)得到產物[6-(3-甲基-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶-5-基)-8-[( S)-吡咯烷-2-基]-3,4-二氫-異喹啉-2(1H)–基]-[2-(三氟甲基)嗎啉-4-基]甲酮(Z497, 22.10 mg, 產率37.73%)，為白色固體。ES-API:[M+1] +=514.1。 1H NMR (400 MHz, CD 3Cl) δ 9.73 (s, 1H), 8.48 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 8.00 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.72 (d, J = 1.2 Hz, 1H), 7.26 (s, 1H), 7.10 (s, 1H), 4.69 (d, J = 16.4 Hz, 1H), 4.57-4.50 (m, 1H), 4.42-4.32 (m, 1H), 4.04-3.97 (m, 2H), 3.84-3.65 (m, 2H), 3.58-3.49 (m, 3H), 3.36-3.28 (m, 1H), 3.23-2.96 (m, 6H), 2.34 (s, 3H), 2.32-2.22 (m, 1H), 2.06-1.88 (m, 2H), 1.81-1.66 (m, 1H).
實施例268化合物Z498的合成
步驟一：將(R)-3-(6-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(5a, 60 mg, 170 umol)溶於無水甲醇(2 mL)，加入1-甲基-4-呱啶酮(100 mg, 884 umol, 103 uL)，氰基硼氫化鈉(21.4 mg, 340 umol)，醋酸(10.2 mg, 170 umol, 9.73 uL)和鈦酸四異丙酯(72.5 mg, 255 umol, 75.3 uL)，常溫反應2小時。待反應完後，先旋蒸去除甲醇，用乙酸乙酯(1.00 mL)溶解過濾，濾液中加入水(0.5 mL)，之後用乙酸乙酯(2.00 mL)萃取，有機相用飽和食鹽水(0.4 mL)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮得到粗品(R)-3-(6-氯-2-(1-甲基呱啶-4-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯 (76 mg)，黃色油狀物 。ES-API: [M+H] +=450.3。
步驟二：將(R)-3-(6-氯-2-(1-甲基呱啶-4-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(76 mg, 169 umol)溶於二氧六環(1 mL)，加入3-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶(52.3 mg, 203 umol)，之後加入水(0.2 mL)和碳酸鉀(46.7 mg, 33 umol)，最後加入氯(2-二環己基膦-2′,6′-二甲氧基-1,1′-聯苯基)[2-(2′-氨基-1,1′-聯苯基)]鈀(II)(12 mg, 17 umol)，氮氣保護下加熱120℃攪拌12小時。待反應完後，加入到冰水(2 mL)中，之後用乙酸乙酯(5 mL)萃取，有機相用飽和食鹽水(1 mL)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮。得到(R)-3-(6-(3-甲基-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶-5-基)-2-(1-甲基呱啶-4-基)-1,2, 3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸鹽叔丁酯(92.0 mg)，黃色的油狀物。ES-API: [M+H] += 546.4。
步驟三：將(R)-3-(6-(3-甲基-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶-5-基)-2-(1-甲基呱啶-4-基)-1,2, 3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸鹽叔丁酯(92 mg, 169 umol)溶於乙酸乙酯(1 mL)，加入鹽酸乙酸乙酯(4.0 mol/L, 1.0 mL)，室溫攪拌2小時。待反應完後，過濾，用乙酸乙酯(1 mL)洗滌濾餅，濾餅旋乾。用製備HPLC(碳酸氫胺)純化得到(R)-3-(6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-2-(1-甲基呱啶-4-基)-1,2,3,4 -四氫異喹啉-8-基)嗎啉(Z498, 6.55 mg)，白色固體。ES-API: [M+H] += 446.3。 1H NMR (400 MHz,CD 3OD) δ = 8.43 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 8.20 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 7.71 (d, J= 1.6 Hz, 1H), 7.40 (d, J= 1.2 Hz, 1H), 7.18 (d, J= 0.8 Hz, 1H), 4.11-4.01 (m, 2H), 3.93-3.79 (m, 3H), 3.74-3.59 (m, 2H), 3.51-3.40 (m, 3H), 3.19-3.08 (m, 1H), 3.07-2.95 (m, 5H), 2.94-2.85 (m, 2H), 2.37 (d, J= 0.8 Hz, 3H), 2.33 (s, 3H), 2.23-2.11 (m, 2H), 1.83-1.69 (m, 2H).
實施例269化合物Z499的合成
步驟一：將(R)-3-(6-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(5a, 55 mg, 155.87 umol)溶於無水四氫呋喃(2 mL)，加入 N, N-二異丙基乙胺(40.3 mg, 312 umol, 54.3 uL)和環丙基磺醯氯(35.1 mg, 249 umol)，常溫反應12小時。待反應完後，加入到水(0.5 mL)中，之後用乙酸乙酯(1 mL)萃取，有機相用飽和食鹽水 (0.4 mL)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮，得到粗品(R)-3-(6-氯-2-(環丙基磺醯基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(71 mg)，棕色固體。ES-API: [M+H] +=457.2。
步驟二：將(R)-3-(6-氯-2-(環丙基磺醯基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(71 mg, 155 umol)溶於二氧六環(1.00 mL)，加入3-氯-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶 (43.3 mg, 155 umol)，之後加入水(0.2 mL)和碳酸鉀(43.0 mg, 311 uL)，最後加入氯(2-二環己基膦-2′,6′-二甲氧基-1,1′-聯苯基)[2-(2′-氨基-1,1′-聯苯基)]鈀(II)(11 mg, 16 umol)，在氮氣保護下加熱100℃攪拌3小時。待反應完後，加入到冰水(2 mL)中，之後用乙酸乙酯(5 mL)萃取，有機相用飽和食鹽水(1 mL)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮。得到粗品(R)-3-(6-(3-氯-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶-5-基)-2-(環丙基磺醯基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯 (30 mg)，黃色的油狀物。ES-API: [M+H] += 573.2。
步驟三：將(R)-3-(6-(3-氯-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶-5-基)-2-(環丙基磺醯基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(30 mg, 52.4 umol)溶於乙酸乙酯(1.00 mL)，加入鹽酸乙酸乙酯(4.0 mol/L, 1.0 mL)，室溫攪拌2小時。待反應完後，過濾，用乙酸乙酯(1 mL)洗滌濾餅，濾餅旋乾。用製備HPLC(碳酸氫胺)純化得到(R)-3-(6-(3-氯-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶-5-基)-2-(環丙基磺醯基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基 )嗎啉(Z499, 5.85 mg, 收率24%)，白色固體。ES-API: [M+H] += 473.0。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.59 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 8.24 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 7.82 (d, J= 1.6 Hz, 1H), 7.50 (d, J= 1.2 Hz, 1H), 7.49 (s, 1H), 4.82-4.74 (m, 1H), 4.65-4.55 (m, 1H), 4.09 (dd, J= 10.0, 2.8 Hz, 1H), 3.95-3.84 (m, 2H), 3.76-3.68 (m, 1H), 3.68-3.61 (m, 2H), 3.55-3.45 (m, 1H), 3.19-3.09 (m, 3H), 3.08-3.00 (m, 1H), 2.70-2.58 (m, 1H), 1.21-1.12 (m, 2H), 1.12-1.02 (m, 2H).
實施例270化合物Z500的合成
步驟一：將(R)-3-甲基嗎啡啉 (100 mg, 989 umol)溶於無水二氯甲烷(0.5 mL)，加入N,N-二異丙基乙胺(383 mg, 2.97 mmol, 517 uL)，在0 ℃下加入三光氣 (0.290 g, 977 umol)，常溫反應1小時。待反應完後，濃縮得到粗品(R)-3-甲基嗎啉-4-碳醯氯(160 mg)，直接用於下一步反應。
步驟二：將(R)-3-(6-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(5a, 60 mg, 170 umol)溶於無水二氯甲烷(2 mL)，加入N,N-二異丙基乙胺(89 uL, 510 umol)和(R)-3-甲基嗎啉-4-碳醯氯(28 mg, 170 umol)，常溫反1小時。待反應完後，加入到水(0.5 mL)中，之後用二氯甲烷(2 mL)萃取，有機相用飽和食鹽水(0.4 mL)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮得到粗品(R)-3-(6-氯-2-((R)-3-甲基嗎啉-4-羰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯 (81 mg)，黃色油狀物。ES-API: [M+H] +=480.3。
步驟三：將(R)-3-(6-氯-2-((R)-3-甲基嗎啉-4-羰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(81 mg, 169 umol)溶於二氧六環(1 mL)，加入3-氯-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶 (56 mg, 202 umol)，之後加入水(0.2 mL)和碳酸鉀(47 mg, 337 umol)，最後加入氯(2-二環己基膦-2′,6′-二甲氧基-1,1′-聯苯基)[2-(2′-氨基-1,1′-聯苯基)]鈀(II)(12 mg, 17 umol)，在氮氣保護下加熱100℃攪拌3小時。待反應完後，加入到冰水(2 mL)中，之後用乙酸乙酯(5 mL)萃取，有機相用飽和食鹽水(1 mL)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮。得到粗品(R)-3-(6-(3-氯-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-2-((R)-3-甲基嗎啉-4-羰基)- 1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁基(100 mg)，黃色的油狀物。ES-API: [M+H] += 596.3。
步驟四：將(R)-3-(6-(3-氯-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-2-((R)-3-甲基嗎啉-4-羰基)- 1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁基(100 mg, 168 umol)溶於乙酸乙酯(1 mL)，加入鹽酸乙酸乙酯(4.0 mol/L, 1.0 mL)，室溫攪拌2小時。待反應完後，過濾，用乙酸乙酯(1 mL)洗滌濾餅，濾餅用7M胺/甲醇溶液(2 mL)中和，旋乾並用製備HPLC(甲酸)純化得到(6-(3-氯-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-8-((R)-嗎啉-3-基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)((R)-3-甲基嗎啉)甲酮 (Z500, 2.37 mg, 收率2.6%, 甲酸鹽)，白色固體。ES-API: [M+H] += 496.3。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.58 (d, J= 1.6 Hz, 1H), 8.45 (s, 1H), 8.24 (d, J= 1.6 Hz, 1H), 7.76 (s, 1H), 7.55 (s, 1H), 7.50 (s, 1H), 4.77-4.70 (m, 1H), 4.55-4.47 (m, 1H), 4.45-4.37 (m, 1H), 4.08-3.99 (m, 2H), 3.93-3.79 (m, 3H), 3.79-3.49 (m, 7H), 3.48-3.35 (m, 2H), 3.26-3.20 (m, 1H), 3.12-3.01 (m, 2H), 1.34 (d, J= 6.4 Hz, 3H).
實施例271化合物Z501的合成
步驟一：將(R)-3-(6-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(5a, 60 mg, 170 umol)溶於二氯甲烷(1 mL)，然後加入三乙胺( (52 mg, 510 umol)，然後在0℃加入甲磺醯氯(29 mg, 255 umol)，室溫攪拌2小時。待反應完後，加入到水(1.00 mL)中，之後用乙酸乙酯(1.00 mL)萃取3次，有機相用飽和食鹽水(1 mL)洗滌，再用無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮。得到粗品(R)-3-(6-氯-2-(甲基磺醯基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(60 mg)，白色的固體。ES-API: [M+H-Boc] += 331.2。
步驟二：將(R)-3-(6-氯-2-(甲基磺醯基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(50mg, 116 umol)和3-氯-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶(39 mg, 139 umol)溶於二氧六環(1 mL)和水(0.2 mL)中，然後加入碳酸鉀((48 mg, 348 umol)，再在氮氣條件下加入氯(2-二環己基膦-2′,6′-二甲氧基-1,1′-聯苯基)[2-(2′-氨基-1,1′-聯苯基)]鈀(II)(8 mg, 12 umol)，100 ℃攪拌2小時。待反應完後，加入到水(1 mL)中，之後用乙酸乙酯(1 mL)萃取3次，有機相用飽和食鹽水(1 mL)洗滌，再用無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮。得到粗品(R)-3-(6-(3-氯-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-2-(甲基磺醯基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(50mg)，棕色的油狀物。ES-API: [M+H] += 547.2。
步驟三：將(R)-3-(6-(3-氯-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-2-(甲基磺醯基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(50mg, 91 umol)溶於乙酸乙酯(2 mL)中，然後加入鹽酸乙酸乙酯(4 mol/L, 1 mL)，室溫攪拌3小時。待反應完後，過濾。濾餅用7M胺/甲醇溶液(2mL)中和，旋乾，並用製備HPLC(碳酸氫銨)純化得到(R)-3-(6-(3-氯-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-2-(甲基磺醯基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉 (Z501, 14.06 mg, 收率34.42%)，白色固體。ES-API: [M+H] += 447.2。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.48 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 8.14 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.69 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 7.44 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 7.38 (s, 1H), 4.66-4.59 (m, 1H), 4.50-4.38 (m, 1H), 4.18-4.10 (m, 1H), 3.92-3.81 (m, 2H), 3.70-3.61 (m, 1H), 3.56-3.47 (m, 2H), 3.48-3.36 (m, 2H), 3.07-3.00 (m, 3H), 2.89 (s, 3H).
實施例272化合物Z502的合成
步驟一：將(R)-2-甲基嗎啉(100 mg, 989 umol)溶於無水二氯甲烷，加入N,N-二異丙基乙胺(128 mg, 989 umol)，在0℃下加入三光氣(323 mg, 1.09 mmol)，室溫攪拌1小時，待反應完後，旋乾濃縮得到粗品(R)-2-甲基嗎啉-4-碳醯氯(160 mg)，直接用於下一步反應。
步驟二：將(R)-3-(6-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(5a, 60 mg, 170 umol)溶於無水二氯甲烷中，然後加入N,N-二異丙基乙胺(66 mg, 510 umol)，加入(R)-2-甲基嗎啉-4-碳醯氯(33 mg, 204 umol)，室溫攪拌2小時。待反應完後，加入到水(1 mL)中，之後用二氯甲烷(1 mL)萃取3次，有機相用飽和食鹽水(1 mL)洗滌，再用無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮得到粗品(R)-3-(6-氯-2-((R)-2-甲基嗎啉-4-羰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(60 mg)，棕色的油狀物。ES-API: [M+H] += 480.3。
步驟三：將(R)-3-(6-氯-2-((R)-2-甲基嗎啉-4-羰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(60 mg, 125.00 umol)和3-氯-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶(48 mg, 174 umol)溶於二氧六環(1 mL)和水(0.2 mL)中，然後加入碳酸鉀((60 mg, 434 umol)，再在氮氣條件下加入氯(2-二環己基膦-2′,6′-二甲氧基-1,1′-聯苯基)[2-(2′-氨基-1,1′-聯苯基)]鈀(II)(10 mg, 14 umol)，100 ℃攪拌2小時。待反應完後，加入到水(1 mL)中，之後用乙酸乙酯(1.00 mL)萃取3次，有機相用飽和食鹽水(1.00 mL)洗滌，再用無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮得到粗品(R)-3-(6-(3-氯-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-2-((R)-2-甲基嗎啉-4-羰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(50mg)，棕色的油狀物。ES-API: [M+H] += 596.3。
步驟四：將(R)-3-(6-(3-氯-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶-5-基)-2-((R)-2-甲基嗎啉-4-羰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(50mg, 84 umol)溶於乙酸乙酯(2 mL)中，然後加入鹽酸乙酸乙酯(4 mol/L, 1 mL)，室溫攪拌2小時。待反應完後，過濾，濾餅用7M胺/甲醇溶液(2 mL)中和，濃縮並用製備HPLC(碳酸氫銨)純化得到(6-(3-氯-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶-5-基)-8-((R)-嗎啉-3-基)-3,4-二氫異喹啉-2(1 H)-基)((R)-2-甲基嗎啉代)甲酮 (Z502, 12.46 mg, 收率30%)，白色固體。ES-API: [M+H] += 496.3。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.57 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 8.23 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 7.78 (d, J= 1.6 Hz, 1H), 7.48 (s, 1H), 7.46 (s, 1H), 4.76-4.68 (m, 1H), 4.61-4.53 (m, 1H), 4.13 (dd, J= 10.0, 2.8 Hz, 1H), 3.96-3.86 (m, 3H), 3.78-3.55 (m, 7H), 3.56-3.44 (m, 1H), 3.21-3.09 (m, 2H), 3.08-2.99 (m, 3H), 2.72 (dd, J= 12.8, 10.4 Hz, 1H), 1.19 (d, J= 6.0 Hz, 3H).
實施例273化合物Z503的合成
步驟一：將3,3-二甲基嗎啉(0.1 g, 868 umol)溶於無水二氯甲烷(0.5 mL)，加入 N, N-二異丙基乙胺(112 mg, 868 umol, 151 uL)，在0℃下加入三光氣 (283 mg, 955 umol)，常溫反應1小時。待反應完後，濃縮得到粗品3,3-二甲基嗎啉-4-碳醯氯(154 mg)，直接用於下一步反應。
步驟二：將(R)-3-(6-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(5a, 60 mg, 170 umol)溶於無水二氯甲烷(2 mL)，加入 N, N-二異丙基乙胺(66 mg, 510 umol, 89 uL)和3,3-二甲基嗎啉-4-碳醯氯(30 mg, 170 umol)，常溫反應1小時。待反應完後，加入到水(0.5 mL)中，之後用二氯甲烷(2 mL)萃取，有機相用飽和食鹽水(0.4 mL)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮得到粗品(R)-3-(6-氯-2-(3,3-二甲基嗎啉-4-羰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(84 mg)，黃色油狀物。ES-API: [M+H] +=494.2。
步驟三：將(R)-3-(6-氯-2-(3,3-二甲基嗎啉-4-羰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(84 mg, 170 umol)溶於二氧六環(1 mL)，加入3-氯-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶 (52 mg, 187 umol)，之後加入水(0.2 mL)和碳酸鉀(47 mg, 340 umol)，最後加入氯(2-二環己基膦-2′,6′-二甲氧基-1,1′-聯苯基)[2-(2′-氨基-1,1′-聯苯基)]鈀(II)(12 mg, 17 umol)，在氮氣保護下加熱100℃攪拌2小時。待反應完後，加入到冰水(2 mL)中，之後用乙酸乙酯(5 mL)萃取，有機相用飽和食鹽水(1 mL)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮得到粗品 (R)-3-(6-(3-氯-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-2-(3,3-二甲基嗎啉-4-羰基)-1, 2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(32 mg)，黃色的油狀物。ES-API: [M+H] += 610.2。
步驟四：將(R)-3-(6-(3-氯-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-2-(3,3-二甲基嗎啉-4-羰基)-1, 2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(32 mg, 52 umol)溶於乙酸乙酯(1 mL)，加入鹽酸乙酸乙酯(4.0 mol/L,1.0 mL)，室溫攪拌2小時。待反應完後，過濾，用乙酸乙酯(1 mL)洗滌濾餅，濾餅用7M胺/甲醇(2 mL)中和，旋乾。用製備HPLC(甲酸)純化得到(R)-(6-(3-氯-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶-5-基)-8-(嗎啉-3-基)-3,4-二氫異喹啉-2(1 H)-基)(3,3-二甲基嗎啉代)甲酮 (Z503, 5.92 mg, 收率20%, 甲酸鹽)，白色固體。ES-API: [M+H] += 510.2。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.58 (d, J= 1.2 Hz, 1H), 8.45 (s, 1H), 8.24 (d, J= 1.6 Hz, 1H), 7.77 (s, 1H), 7.54 (s, 1H), 7.49 (s, 1H), 4.82-4.71 (m, 1H), 4.66-4.55 (m, 1H), 4.35 (dd, J= 10.2, 2.8 Hz, 1H), 4.04 (d, J= 2.8 Hz, 1H), 4.01 (d, J= 2.5 Hz, 1H), 3.91-3.76 (m, 3H), 3.74-3.59 (m, 3H), 3.44-3.27 (m, 5H), 3.25-3.18 (m, 1H), 3.05 (t, J = 6.0 Hz, 2H), 1.36 (s, 3H), 1.32 (s, 3H).
實施例274化合物Z504的合成
步驟一：將(R)-3-(6-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(5a, 60 mg, 170 umol)溶於 N, N-二甲基甲醯胺(2 mL)，加入 N, N-二異丙基乙胺(66 mg, 510 umol, 89 uL)和8-氧雜雙環[3.2.1]辛烷-3-羧酸(29 mg, 187 umol)，2-(7-偶氮苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯(7 mg, 17 umol)，常溫反應2小時。待反應完後，加入到水(0.5 mL)中，之後用乙酸乙酯(1 mL)萃取，有機相用飽和食鹽水(0.4 mL)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮得到粗品(3R)-3-[2-(8-氧雜雙環[3.2.1]辛烷-3-羰基)-6-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基]嗎啉-4-羧酸叔丁酯(50 mg)，棕色固體 。ES-API: [M+H] +=491.3。
步驟二：將(3R)-3-[2-(8-氧雜雙環[3.2.1]辛烷-3-羰基)-6-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基]嗎啉-4-羧酸叔丁酯 (50 mg, 102 umol)溶於二氧六環(1 mL)，加入3-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶 (32 mg, 122 umol)，之後加入水(0.2 mL)和碳酸鉀(28.2 mg, 204 umol)，最後加入氯(2-二環己基膦-2′,6′-二甲氧基-1,1′-聯苯基)[2-(2′-氨基-1,1′-聯苯基)]鈀(II)(7 mg, 10 umol), 在氮氣保護下加熱120℃攪拌3小時。待反應完後，加入到冰水(2 mL)中，之後用乙酸乙酯(5 mL)萃取，有機相用飽和食鹽水(1 mL)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮得到粗品(3R)-3-(2-(8-氧雜雙環[3.2.1]辛烷-3-羰基)-6-(3-甲基-1H-吡咯[2,3-b]吡啶-5–基)-1,2,3,4–四氫異喹啉-8–基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯 (59 mg)，黃色的油狀物。ES-API: [M+H] += 587.4。
步驟三：將(3R)-3-(2-(8-氧雜雙環[3.2.1]辛烷-3-羰基)-6-(3-甲基-1H-吡咯[2,3-b]吡啶-5–基)-1,2,3,4–四氫異喹啉-8–基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(59 mg, 101 umol)溶於乙酸乙酯(1 mL)，加入鹽酸乙酸乙酯(4.0 mol/L, 1.0 mL)，室溫攪拌2小時。待反應完後，過濾，用乙酸乙酯(1 mL)洗滌濾餅，濾餅用7M胺/甲醇(2 mL)中和，旋乾並用製備HPLC(甲酸)純化得到(8-氧雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)(6-(3-甲基-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶-5–基)-8[(R)-嗎啉-3-基)-3,4-二氫異喹啉-2(1 H)–基)-甲酮(Z504, 7.37 mg, 甲酸鹽)，白色固體。ES-API: [M+H] += 487.2。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.47 (s, 1H), 8.42 (s, 1H), 8.24 (s, 1H), 7.77 (s, 1H), 7.58 (s, 1H), 7.22 (s, 1H), 5.05-4.96 (m, 1H), 4.81-4.72 (m, 1H), 4.46 (s, 3H), 4.09-3.94 (m, 2H), 3.93-3.76 (m, 3H), 3.75-3.64 (m, 1H), 3.46-3.20 (m, 2H), 3.11 (t, J= 5.6 Hz, 2H), 3.02-2.93 (m, 1H), 2.39 (s, 3H), 2.10-1.90 (m, 6H), 1.66-1.54 (m, 2H).
實施例275化合物Z505的合成
步驟一：將 (R)-3-(6-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯 (5a, 50 mg, 142 umol)溶於 N, N-二甲基甲醯胺(2 mL)，加入 N, N-二異丙基乙胺(55 mg, 425 umol, 74 uL)和3-甲基-3-羧基-1-氧雜環丁烷(33 mg, 283 umol)，2-(7-偶氮苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯(108 mg, 283 umol)，常溫反應2小時。待反應完後，加入到水(0.5 mL)中，之後用乙酸乙酯(1 mL)萃取，有機相用飽和食鹽水 (0.4 mL)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮。得到粗品(R)-3-(6-氯-2-(3-甲基氧雜環丁烷-3-羰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯 (63 mg)，棕色固體 。ES-API: [M+H] +=451.3。
步驟二：將(R)-3-(6-氯-2-(3-甲基氧雜環丁烷-3-羰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(63.0 mg, 140 umol)溶於二氧六環(1 mL)，加入3-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶 (39.7 mg, 154 umol)，之後加入水(0.2 mL)和碳酸鉀(38.6 mg, 279 umol)，最後加入氯(2-二環己基膦-2′,6′-二甲氧基-1,1′-聯苯基)[2-(2′-氨基-1,1′-聯苯基)]鈀(II)(101 mg, 140 umol)，在氮氣保護下加熱120度攪拌3小時。待反應完後，加入到冰水(2 mL)中，之後用乙酸乙酯(5 mL)萃取，有機相用飽和食鹽水(1 mL)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮。得到粗品(R)-3-(6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-2-(3-甲基氧雜環丁烷-3-羰基)-1,2, 3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(76 mg)，黃色的油狀物。ES-API: [M+H] += 547.3。
步驟三：將(R)-3-(6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-2-(3-甲基氧雜環丁烷-3-羰基)-1,2, 3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(76 mg, 139 umol)溶於乙酸乙酯(1 mL)，加入鹽酸乙酸乙酯(4.0 mol/L, 1.0 mL)，室溫攪拌2小時。待反應完後，過濾，用乙酸乙酯(1 mL)洗滌濾餅，濾餅旋乾。用製備HPLC(碳酸氫銨法)純化得到(R)-(6-(3-甲基-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶-5-基)-8-(嗎啉-3-基)-3,4-二氫異喹啉-2(1 H)-基)(3-甲基氧雜環丁烷-3-基)甲酮(Z505, 5.53 mg)，白色固體。ES-API: [M+H] += 447.1。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ = 8.44 (s, 1H), 8.24-8.20 (m, 1H), 7.81-7.72 (m, 1H), 7.46 (s, 1H), 7.19 (s, 1H), 5.04 (d, J= 6.0 Hz, 2H), 5.00-4.93 (m, 1H), 4.83-4.73 (m, 1 H), 4.63-4.50 (m, 1H), 4.49-4.42 (m, 2H), 4.22-3.96 (m, 1H), 3.94-3.81 (m, 2H), 3.76-3.64 (m, 1H), 3.60-3.45 (m, 1H), 3.41-3.33 (m, 1H), 3.20-3.08 (m, 1H), 3.07-2.95 (m, 3H), 2.37 (s, 3H), 1.77-1.67 (m, 3H).
實施例276化合物Z506的合成
步驟一：將5-溴-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶-3-甲醯胺(2 g, 8.33 mmol)和三乙胺((8.41 g, 83.3 mmol)溶於乙腈(14 mL)，然後加入三氟乙酸酐(5.25 g, 25 mmol)，室溫攪拌0.5小時。待反應完後，加入二碳酸二叔丁酯(2.73 g, 12.50 mmol)和4-二甲氨基吡啶(102 mg, 0.83 mmol)，室溫攪拌12小時。待反應完後，加入到水(10 mL)中，之後用二氯甲烷(10 mLX3)萃取，有機相用飽和食鹽水(10 mL)洗滌，再用無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮並用快速矽膠柱(0-40%乙酸乙酯/石油醚)純化得到5-溴-3-氰基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-1-羧酸叔丁酯(0.5 g, 收率18.63%)，白色的固體。ES-API: [M+H-56] += 265.8, 267.8。
步驟二：將N,N-二異丙基乙胺(154 mg, 1.19 mmol)和2-(7-偶氮苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯(220 mg, 596 umol)依次加入到(R)-3-(6-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(5a, 70 mg, 198 umol)和2-羥基-2-甲基丙酸(25 mg, 238 umol)的N,N-二甲基甲醯胺(1 mL)溶液中，室溫攪拌2小時。反應結束後，用乙酸乙酯(20 mL)稀釋，並用飽和食鹽水(20 mL)洗滌。有機相用無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮得到粗品 (R)-3-(6-氯-2-(2-羥基-2-甲基丙醯基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(100 mg)，油狀物。ES-API: [M+H] += 439.3。
步驟三：氮氣保護下，(R)-3-(6-氯-2-(2-羥基-2-甲基丙醯基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(100 mg, 228 umol)，聯硼酸頻哪醇酯(174 mg, 683 umol)，氯(2-二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II)(16 mg, 23 umol)和醋酸鉀(67 mg, 683 umol)的1,4-二氧六環(1 mL)混合物在110℃攪拌2小時。反應結束後，濃縮得到產物(R)-3-(2-(2-羥基-2-甲基丙醯基)-6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)-1, 2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(120 mg)，不經處理直接用於下一步反應。ES-API: [M+H] += 531.4。
步驟四：氮氣保護下，(R)-3-(2-(2-羥基-2-甲基丙醯基)-6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)-1, 2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(100mg, 189 umol)，5-溴-3-氰基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-1-羧酸叔丁酯(122 mg, 377 umol)，1,1'-雙二苯基膦二茂鐵二氯化鈀(28 mg, 38 umol)和碳酸鉀(78 mg, 566 umol)的1,4-二氧六環(1 mL)和水(0.2 mL)混合物在100℃攪拌1小時。反應結束後，反應液溶於乙酸乙酯(20 mL)，並依次用飽和食鹽水(10 mL)和水(10 mL)洗滌。有機相用無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮得到粗品 (R)-3-(6-(1-(叔丁氧羰基)-3-氰基-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶-5-基)-2-(2-羥基-2-甲基丙醯基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(50 mg)，棕色油狀物。ES-API: [M+H] += 646.3.
步驟五：將(R)-3-(6-(1-(叔丁氧羰基)-3-氰基-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶-5-基)-2-(2-羥基-2-甲基丙醯基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(50 mg, 77 umol)溶於乙酸乙酯(2 mL)中，然後加入鹽酸乙酸乙酯(4 mol/L, 1 mL)，室溫攪拌4小時。待反應完後，過濾，濾餅用7M胺/甲醇(3 mL)中和，濃縮後用製備HPLC(甲酸法)純化得到白色固體(R)-5-(2-(2-羥基-2-甲基丙醯基)-8-(嗎啉-3-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-6-基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-腈 (Z506, 5.16 mg, 收率14%, 甲酸鹽)。ES-API: [M+H] += 446.3。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.71 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 8.51 (s, 1H), 8.40 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 8.20 (s, 1H), 7.81 (s, 1H), 7.55 (s, 1H), 4.61 (s, 1H), 4.36-4.23 (m, 2H), 4.05-3.87 (m, 3H), 3.80-3.47 (m, 3H), 3.28-3.17 (m, 1H), 3.16-2.99 (m, 3H), 1.51 (s, 6H).
實施例277化合物Z507的合成 g
步驟一：向5 mL微波反應器中加入( R)-3-(2-(2-羥基-2-甲基丙醯基)-6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯 (80 mg, 0.15 mmol)，2-溴-7-甲基-5-((2-(三甲基甲矽烷基)乙氧基)甲基)-5 H-吡咯并[2,3-b]吡嗪(44 mg, 0.13mmol)，碳酸鉀(55mg, 0.4mmol)，氯(2-二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II)(9.6 mg, 0.013 mmol)，二氧六環(2 mL)和水(0.3 mL)。體系用氮氣置換三次，然後用氮氣球保護。110℃條件下反應2小時，反應液加入乙酸乙酯(10 mL)，用飽和食鹽水(5 mLX3)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮，粗品用快速矽膠柱純化(甲醇：二氯甲烷=10:100)得到目標產物(R)-3-(2-(2-羥基-2-甲基丙醯基)-6-(7-甲基-5-((2-(三甲基甲矽烷基)乙氧基)甲基)-5 H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-2-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(30mg, 收率: 33%)。ES-API: [M+H] +=666.3。
步驟二：向5 mL單口圓底燒瓶中加入( R)-3-(2-(2-羥基-2-甲基丙醯基)-6-(7-甲基-5-((2-(三甲基甲矽烷基)乙氧基)甲基)-5 H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-2-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(30mg, 0.045 mmol)，三氟乙酸(3 mL)和二氯甲烷(6mL)，室溫攪拌反應30分鐘，反應液旋乾溶解於二氯甲烷(2mL)中，加入氨甲醇(7M)(2 mL)攪拌1小時後，旋乾粗品用製備HPLC(碳酸氫銨法)純化得到 ( R)-1-(6-(7-甲基-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-2-基)-8-(嗎啉-3-基)-3,4-二氫異喹啉-2 (1 H)-基)-2-羥基-2-甲基丙-1-酮(Z507, 3mg, 收率:15%)。ES-API: [M+H] +=436.2。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 11.78 – 11.64 (m, 1H), 8.73 (s, 1H), 8.18 (d, J= 1.9 Hz, 1H), 7.81 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 7.66 (s, 1H), 5.66 – 5.26 (m, 2H), 4.98 – 4.61 (m, 1H), 4.15 (s, 1H), 3.98 (dd, J= 10.0, 2.9 Hz, 1H), 3.79 (d, J= 10.7 Hz, 2H), 3.54 (td, J= 10.4, 4.4 Hz, 1H), 3.25 (t, J= 10.4 Hz, 1H), 3.06 – 2.76 (m, 6H), 2.35 (s, 3H), 1.36 (s, 6H).
實施例278化合物Z508的合成
步驟一：向25 mL圓底燒瓶中加入(5-溴-3-碘-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶 (500mg, 1.55 mmol)，乙烯基氟硼酸鉀(230mg, 1.7mmol)，1,1-二(二苯膦基)二茂鐵二氯化鈀(113mg, 0.15mmol)，二氧六環(10 mL)和水(1 mL)。體系用氮氣置換三次，然後用氮氣球保護。60℃條件下反應3小時，反應液加入乙酸乙酯(10 mL)，用飽和食鹽水(5 mLX3)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮，得到粗品用快速矽膠柱純化(甲醇：二氯甲烷=10:100)得到5-溴-3-乙烯基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(200mg,  收率: 57%)。ES-API: [M+H] +=223.0。
步驟二：向5 mL微波反應器中加入(R)-3-(2-(2-羥基-2-甲基丙基)-6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯 (100 mg, 0.19 mmol)，5-溴-3-乙烯基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(63mg, 0.28mmol)，碳酸鉀(78mg, 0.57mmol)，1,1-二(二苯膦基)二茂鐵二氯化鈀 (27 mg, 0.04 mmol)，二氧六環(2 mL)和水(0.3 mL)。體系用氮氣置換三次，然後用氮氣球保護。100℃條件下反應2小時，反應液加入乙酸乙酯(10 mL)，用飽和食鹽水(5 mLX3)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮，粗品用快速矽膠柱純化(甲醇：二氯甲烷=10:100)得到目標產物(R)-3-(2-(2-羥基-2-甲基丙基)-6-(3-乙烯基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(30mg, 收率: 29%)。ES-API: [M+H] +=547.3。
步驟三：向5 mL單口圓底燒瓶中加入(R)-3-(2-(2-羥基-2-甲基丙基)-6-(3-乙烯基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(30mg, 0.06mmol)，三氟乙酸(3 mL)和二氯甲烷(6 mL)， 室溫攪拌反應30分鐘，反應液旋乾，溶解於二氯甲烷(2 mL)中，加入氨甲醇(7M, 2 mL)攪拌1小時後旋乾，得到粗品用製備HPLC(碳酸氫銨法-A)純化得到(R) -2-羥基-2-甲基-1-(8-(嗎啉-3-基)-6-(3-乙烯基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)丙-1-酮(Z508, 0.49mg, 收率: 2%)。ES-API: [M+H] +=447.2。
實施例279化合物Z509的合成 Z509
參照化合物Z455合成步驟，不同點在於替換步驟二中的3-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)-1H-吡唑并[3,4-b]吡啶為3-乙炔基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶，最終獲得化合物Z509。ES-API: [M+H] +=445.2。
實施例280化合物Z510的合成
步驟一：將5-溴-3-甲基-1-甲苯磺醯基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(600 mg, 1.643 mmol)溶於乾燥的四氫呋喃(20 mL)中，並降溫至-78℃。在此溫度下，向上述溶液中緩慢滴加入二異丙基氨基鋰的四氫呋喃溶液(2 M, 0.986 mL, 1.971 mmol)，加入完畢後反應在-78℃條件下繼續攪拌2小時。而後將N-氟代雙苯磺醯胺(776.99 mg, 2.464 mmol)溶與四氫呋喃(5 mL)並緩慢滴加入反應液中。滴加完畢後，反應升至室溫再繼續攪拌1小時。反應用飽和碳酸氫鈉溶液(10 mL)猝滅後用乙酸乙酯(15 mL X3)萃取。有機相用飽和食鹽水(30 mL)洗滌後，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮，得到粗品用快速矽膠柱(二氯甲烷/石油醚：20%-100%)純化得到5-溴-2-氟-3-甲基-1-甲苯磺醯基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(400 mg, 1.044 mmol, 收率63.54%)，淺黃色固體。ES-API: [M +H] +=383.1, 385.1。
步驟二：將叔丁基 (R)-3-(2-(2-羥基-2-甲基丙醯基)-6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸酯(181 mg, 0.341 mmol)溶於二氧六環(10 mL)和水(1 mL)中。室溫條件下，向上述溶液中加入5-溴-2-氟-3-甲基-1-甲苯磺醯基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(130.76 mg, 0.341 mmol)，氯(2 -二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II)(12.48 mg, 0.017 mmol)以及碳酸鉀(94.32 mg, 0.682 mmol)。加入完畢後，反應在氮氣氛圍，110℃條件下攪拌3個小時。反應完畢後，向上述溶液中加入水(10 mL)，並用乙酸乙酯(10 mLX3)萃取。有機相用飽和食鹽水(30 mL)洗滌後，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮得到粗品。粗品用快速矽膠柱(甲醇/二氯甲烷：0%-2%)純化得到叔丁基 (R)-3-(6-(2-氟-3-甲基-1-甲苯磺醯基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-2-(2-羥基-2-甲基丙醯基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸酯(40 mg, 0.057 mmol, 收率16.59%)，黃色固體。ES-API: [M +H] +=707.1。
步驟三：將叔丁基 (R)-3-(6-(2-氟-3-甲基-1-甲苯磺醯基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-2-(2-羥基-2-甲基丙醯基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸酯(40 mg, 0.057 mmol)溶於四氫呋喃(1 mL)中，向上述溶液中加入四丁基溴化銨的四氫呋喃溶液(1M, 0.113 mL, 0.113 mmol)。加入完畢後，反應在室溫條件下攪拌3小時。反應完畢後，向上述溶液中加入水(10 mL)，並用乙酸乙酯(10 mL X3)萃取。有機相用飽和食鹽水(10 mLX5)洗滌後，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮，得到粗品用快速矽膠柱(甲醇/二氯甲烷：0%-5%)得到叔丁基 (R)-3-(6-(2-氟-3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-2-(2-羥基-2-甲基丙醯基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸酯(15 mg, 0.027 mmol, 收率47.96%)，黃色固體，ES-API: [M +H] +=553.1。
步驟四：將叔丁基 (R)-3-(6-(2-氟-3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-2-(2-羥基-2-甲基丙醯基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸酯(15 mg, 0.027 mmol)溶於無水二氯甲烷(1 mL)中。向上述溶液中加入三氟乙酸(0.5 mL)，反應在室溫條件下攪拌反應2小時。反應完畢後，將反應液濃縮並用氨/甲醇溶液(7 M)調節至中性。再次濃縮後，用快速矽膠柱(甲醇/二氯甲烷：0%-7%)純化得到(R)-1-(6-(2-氟-3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-8-(嗎啉-3-基)-3,4-四氫異喹啉-2(1H)-基)-2-羥基-2-甲基丙-1-酮(Z510, 2 mg, 0.004 mmol, 收率16.28%)，白色固體。ES-API: [M+H] +=453.1。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 12.32 (s, 1H), 8.43 (s, 1H), 8.07 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 7.79 (s, 1H), 7.45 (s, 1H), 5.53 (s, 1H), 4.84 (s, 1H), 4.65 (s, 1H), 4.14 – 3.99 (m, 2H), 3.88 – 3.75 (m, 4H), 3.59 (s, 1H), 3.02 – 2.88 (s, 4H), 2.33 – 2.28 (m, 1H), 2.19 (s, 3H), 1.37 (s, 6H).
實施例281 化合物Z511的合成 Z511
參照化合物Z377合成步驟，不同點在於替換步驟三中的3-甲基-5- (4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼烷-2-基)-1H-吡咯[2,3-b]吡啶為3-氯-5- (4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼烷-2-基)-1H-吡咯[2,3-b]吡啶，最終獲得化合物Z511。ES-API: [M+H] +=482.2。
實施例282 化合物Z512的合成
步驟一：將(2S,6S)-2,6-二甲基嗎啉 (0.05 g, 434 umol)溶於無水二氯甲烷(0.5 mL),加入N,N-二異丙基乙胺(168 mg, 1.30 mmol, 227 uL)，在0 ℃下加入三光氣 (142 mg, 478 umol)，常溫反應1小時。待反應完後，濃縮得到粗品(2S,6S)-2,6-二甲基嗎啉-4-碳醯氯(77 mg)，不經純化直接用於下一步反應。
步驟二：將 (R)-3-(6-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯 (5a, 0.06 g, 170 umol)溶於無水二氯甲烷(2 mL),加入N,N-二異丙基乙胺(66 mg, 510 umol, 89 uL)和(2S,6S)-2,6-二甲基嗎啉-4-醯氯(30 mg, 170 umol)，常溫反1小時。待反應完後，加入到水(0.5 mL)中，之後用二氯甲烷(2 mL)萃取，有機相用飽和食鹽水 (0.4 mL)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮。得到(R)-3-(6-氯-2-((2S,6S)-2,6-二甲基嗎啉-4-羰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(84 mg)，黃色油狀液體 。ES-API: [M+H] += 494.3。
步驟三：將(R)-3-(6-氯-2-((2S,6S)-2,6-二甲基嗎啉-4-羰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(84 mg, 170 umol)溶於二氧六環(1 mL)，加入3-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶 (52.7 mg, 204 umol)，之後加入水(0.2 mL)和碳酸鉀(47.0 mg, 340 umol)，最後加入氯(2-二環己基膦-2′,6′-二甲氧基-1,1′-聯苯基)[2-(2′-氨基-1,1′-聯苯基)]鈀(II)(122 mg, 170 umol)，在氮氣保護下加熱120 ℃攪拌2小時。待反應完後，加入到冰水(2 mL)中，之後用乙酸乙酯(5 mL)萃取，有機相用飽和食鹽水(1 mL)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮。得到(R)-3-(2-((2S,6S)-2,6-二甲基嗎啉-4-羰基)-6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5 -基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(100 mg)，黃色的油狀物。ES-API: [M+H] += 590.3。
步驟四：將(R)-3-(2-((2S,6S)-2,6-二甲基嗎啉-4-羰基)-6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5 -基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(100 mg, 169 umol)溶於乙酸乙酯(1 mL)，加入鹽酸乙酸乙酯(4.0 mol/L,1.0 mL)，室溫攪拌2小時。待反應完後，過濾，用乙酸乙酯(1 mL)洗滌濾餅，濾餅旋乾。用製備HPLC(碳酸氫銨法)純化得到((2S, 6S)-2,6-二甲基嗎啉)(6-(3-甲基-1H-吡咯[2,3-b]吡啶-5–基)-8-((R)-嗎啉-3-基)-3,4-二氫異喹啉-2-1H-基)甲酮(Z512, 28.28 mg)，白色固體。ES-API: [M+H] += 490.1。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ = 8.44 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 8.21 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 7.75 (d, J= 1.6 Hz, 1H), 7.43 (s, 1H), 7.19 (s, 1H), 4.80-4.73 (m, 1H), 4.59-4.51 (m, 1H), 4.15-4.03 (m, 3H), 3.92-3.83 (m, 2H), 3.78-3.67 (m, 1H), 3.63-3.57 (m, 2H), 3.55-3.48 (m, 1H), 3.47-3.41 (m, 2H), 3.17-2.99 (m, 6H), 2.37 (d, J= 0.8 Hz, 3H), 1.26 (d, J= 6.4 Hz, 6H).
實施例283 化合物Z513的合成 Z513
參照化合物Z503合成步驟，不同點在於替換步驟一中的3,3-二甲基嗎啉為8-甲基-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷，最終獲得化合物Z513。ES-API: [M+H] +=521.2。
實施例284化合物Z514的合成
步驟一：向5 mL微波反應器中加入(3R)-3-(2-(8-氧雜-3-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-羰基)-6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼環戊烷-2-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸鹽叔丁酯 (118.6 mg, 0.2 mmol)，5-溴-2-氯-3-乙基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(105mg, 0.4mmol)，碳酸鉀(84mg, 0.61mmol)，1,1-二(二苯膦基)二茂鐵二氯化鈀 (29.7 mg, 0.04 mmol)，二氧六環(2 mL)和水(0.3 mL)。體系用氮氣置換三次，然後用氮氣球保護。110℃條件下反應2小時，反應液加入乙酸乙酯(10 mL)，用飽和食鹽水(5 mLX3)洗滌，無水硫酸鈉乾燥並過濾濃縮，粗品用快速矽膠柱純化(甲醇：二氯甲烷=10:100)得到(3R)-3-(2-(8-氧代-3-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-羰基)-6-(2-氯-3-乙基-1H-吡咯[2,3-b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(70mg, 收率: 54%)。ES-API: [M+H] +=636.3。
步驟二：向5 mL單口圓底燒瓶中加入(3R)-3-(2-(8-氧代-3-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-羰基)-6-(2-氯-3-乙基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(70mg, 0.02mmol)，三氟乙酸(3 mL)和二氯甲烷(6 mL)，室溫攪拌反應30分鐘，反應液旋乾，溶解於二氯甲烷(2 mL)中，加入氨甲醇(7M, 2 mL)攪拌1小時後旋乾，粗品用製備HPLC(碳酸氫銨法-A)純化得到(8-氧代-3-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)(6-(2-氯-3-乙基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-8-((R)-嗎啉-3-基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)甲酮(Z514, 5mg, 收率: 8%)。ES-API: [M+H] +=536.2。 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 12.29 (s, 1H), 8.45 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 8.11 (d, J= 1.9 Hz, 1H), 7.73 (s, 1H), 7.42 (s, 1H), 4.55 (d, J= 16.2 Hz, 1H), 4.40 (d, J= 16.3 Hz, 1H), 4.28 (s, 2H), 3.97 (d, J= 8.8 Hz, 1H), 3.77 (t, J= 10.8 Hz, 2H), 3.61 – 3.38 (m, 5H), 3.16 – 2.71 (m, 9H), 2.05 – 1.72 (m, 5H), 1.22 (d, J= 7.5 Hz, 3H).
實施例285化合物Z515的合成
步驟一：向25 mL圓底燒瓶中加入(5-溴-3-碘-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶 (1.33g, 4.12 mmol)，氰化鋅(480mg, 4.12mmol)，四三苯基膦鈀(480mg, 0.41mmol)和二氧六環(10 mL)。體系用氮氣置換三次，然後用氮氣球保護。室溫條件下反應過夜，反應液加入乙酸乙酯(10 mL)，用飽和食鹽水(5 mLX3 )洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮，粗品用快速矽膠柱純化(甲醇：二氯甲烷=10:100)得到5-溴-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-腈(300mg, 收率: 33%)。ES-API: [M+H] +=222.0。
步驟二：向5 mL微波反應器中加入(3R)-3-(2-(8-氧雜-3-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-羰基)-6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯 (100 mg, 0.17 mmol)，5-溴-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-腈(76mg, 0.34mmol)，碳酸鉀(71mg, 0.51mmol)，1,1-二(二苯膦基)二茂鐵二氯化鈀 (25 mg, 0.03 mmol)，二氧六環(2 mL)和水(0.3 mL)。體系用氮氣置換三次，然後用氮氣球保護。110℃條件下反應2小時，反應液加入乙酸乙酯(10 mL)，用飽和食鹽水(5 mLX3)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮，粗品用快速矽膠柱純化(甲醇：二氯甲烷=10:100)得到(3R)-3-(2-(8-氧雜-3-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-羰基)-6-(3-氰基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(40mg, 收率: 39%)。ES-API: [M+H] +=599.3。
步驟三：向5 mL單口圓底燒瓶中加入(3R)-3-(2-(8-氧雜-3-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-羰基)-6-(3-氰基-1H-吡咯[2,3-b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(40mg, 0.06mmol)，三氟乙酸(3 mL)和二氯甲烷(6 mL)， 室溫攪拌反應30分鐘，反應液旋乾，溶解於二氯甲烷(2 mL)中，加入氨甲醇(7M, 2 mL)攪拌1小時後，旋乾，得到粗品用製備HPLC (碳酸氫銨法-A)純化得到5-(2-(8-氧雜-3-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-羰基)-8-((R)-嗎啉-3-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-6-基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-甲腈(Z515, 13.7mg, 收率:41%)。ES-API: [M+H] +=499.2。
實施例286化合物Z516的合成
步驟一：取6-氧雜-3-氮雜雙環[3.1.1]庚烷鹽酸鹽(100 mg, 0.738 mmol)溶於二氯甲烷(10 mL，冰浴下加入三乙胺(0.526 mL, 3.783 mmol)，對硝基苯基氯甲酸酯(163.52 mg, 0.811 mmol)，室溫反應1小時、反應液減壓濃縮，得到粗品藉由矽膠柱層析(石油醚/乙酸乙酯=80/20)純化，得到6-氧雜-3-氮雜雙環[3.1.1]庚烷-3-甲酸 4-硝基苯酯(170 mg, 0.643 mmol, 收率87.18%) 。ES-API: [M+H] +=265.1。
步驟二：取6-氧雜-3-氮雜雙環[3.1.1]庚烷-3-甲酸 4-硝基苯酯(89.86 mg, 0.340 mmol) 溶於DMA(1 mL)加入(R)-3-(6-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(5a, 60 mg, 0.170 mmol)，碳酸鉀(39.17 mg, 0.283 mmol)，130℃反應3小時，反應結束後，加水(10 mL)稀釋，乙酸乙酯(10 mLX3)萃取，有機相飽和食鹽水(10 mL)洗，無水硫酸鈉乾燥，過濾，減壓濃縮至乾，得到粗品藉由矽膠柱層析(石油醚/乙酸乙酯=70/30)純化，得到(3R)-3-(2-(6-氧-3-氮雜雙環[3.1.1]庚烷-3-羰基)-6-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(60 mg, 0.126 mmol, 收率73.84%)。ES-API: [M+H] +=478.1。
步驟三：(3R)-3-(2-(6-氧-3-氮雜雙環[3.1.1]庚烷-3-羰基)-6-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯 (60 mg, 0.126 mmol)，3-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(81.00 mg, 0.314 mmol)，碳酸鉀 (52.04  mg, 0.377 mmol) ，氯(2 - 二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2 - 基)鈀(II) (9.03 mg, 0.013 mmol)溶於1,4-二氧六環(5 mL)和水(1 mL)，110℃攪拌2小時，反應液減壓濃縮至乾，得到粗品藉由矽膠柱層析(石油醚/乙酸乙酯=30/70)純化，得到(3R)-3-(2-(6-氧-3-氮雜雙環[3.1.1]庚烷-3-羰基)-6-(3-甲基-1H-吡咯[2,3-b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯 (30 mg, 0.047 mmol, 收率37.49%) 。ES-API: [M+H] +=574.3。
步驟四：取(3R)-3-(2-(6-氧-3-氮雜雙環[3.1.1]庚烷-3-羰基)-6-(3-甲基-1H-吡咯[2,3-b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(25 mg, 0.044 mmol)溶於無水二氯甲烷(0.5 mL)，加入三氟乙酸(0.2 mL)，室溫反應2小時，LC-MS監測反應完全，減壓濃縮至乾，加入氨/甲醇溶液(1 mL)中和後，再次濃縮，經製備HPLC(碳酸氫銨法-A)純化得到 (6-氧-3-氮雜雙環[3.1.1]庚烷-3-基)-(6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-8((R)-嗎啉-3-基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)甲酮(Z516, 1.07 mg, 收率4.7 %)。ES-API: [M+H] +=474.2。
實施例287化合物Z517的合成 Z517
參照化合物Z457合成步驟，不同點在於替換步驟一中的2-氧-5-氮雜雙環[2.2.2]辛烷為3-氧-6-氮雜雙環[3.1.1]庚烷，最終獲得化合物Z517。ES-API: [M+H] +=474.2。
實施例288化合物Z518的合成
步驟一：取(1R,4R)-2-氧雜-5- 氮雜雙環[2.2.1]庚烷鹽酸鹽(150 mg, 1.513 mmol)溶於二氯甲烷(10 mL)，冰浴下加入三乙胺(0.526 mL, 3.783 mmol)，對硝基苯基氯甲酸酯(396.49 mg, 1.967 mmol)，室溫反應1小時，減壓濃縮，得到粗品藉由矽膠柱層析(石油醚/乙酸乙酯=80/20)純化，得到(1R,4R)-2-氧-5-氮雜雙環[2.2.1]庚烷-5-甲酸 4-硝基苯酯(280 mg, 1.060 mmol, 收率70.03%)。ES-API: [M+H] +=265.0。
步驟二：取(1R,4R)-2-氧-5-氮雜雙環[2.2.1]庚烷-5-甲酸 4-硝基苯酯(74.89 mg, 0.283 mmol)溶於DMA(1mL)加入(R)-3-(6-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(5a, 50 mg, 0.142 mmol)，碳酸鉀 (39.17 mg, 0.283 mmol)，130℃反應3小時，反應結束後，加水(10 mL)稀釋，乙酸乙酯(10 mLX3)萃取，有機相飽和食鹽水(10 mL)洗，無水硫酸鈉乾燥，過濾減壓濃縮至乾，藉由矽膠柱層析(石油醚/乙酸乙酯=70/30)純化，得到(R)-3-(2-((1R,4R)-2-氧-5-氮雜雙環[2.2.1]庚烷-5-甲醯基)-6-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(40 mg, 0.084 mmol, 收率59.70%)。ES-API: [M+H] +=478.1。
步驟三：取(R)-3-(2-((1R,4R)-2-氧-5-氮雜雙環[2.2.1]庚烷-5-甲醯基)-6-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(40 mg, 0.084 mmol)，3-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(43.20 mg, 0.167 mmol)，碳酸鉀 (34.70 mg, 0.251 mmol), 氯(2-二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II)(6.03 mg, 0.008 mmol)溶於1,4-二氧六環(5 mL)和水(1 mL)，110℃攪拌2小時，反應液減壓濃縮至乾，得到粗品藉由矽膠柱層析(石油醚/乙酸乙酯=30/70)純化，得到(R)-3-(2-((1R,4R)-2-氧-5-氮雜雙環[2.2.1]庚烷-5-羰基)-6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(25 mg, 0.044 mmol, 收率52.07%)。ES-API: [M+H] +=574.3。
步驟四：取(R)-3-(2-((1R,4R)-2-氧-5-氮雜雙環[2.2.1]庚烷-5-羰基)-6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(25 mg, 0.044 mmol)溶於無水二氯甲烷(0.5 mL)，加入三氟乙酸(0.2 mL)，室溫反應2小時，LC-MS監測反應完全，減壓濃縮至乾，加入氨/甲醇溶液(1mL)中和後，再次濃縮，經矽膠柱層析(二氯甲烷/甲醇=10/1)純化得到((1R,4R)-2-氧-5-氮雜雙環[2.2.1]庚烷-5-基)-6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-8-((R)-嗎啉-3-基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)甲酮 (Z518, 10 mg, 0.021 mmol, 收率47.73%))ES-API: [M+H] +=474。
實施例289化合物Z519的合成
步驟一：將順式2,6-二甲基嗎啉 (50 mg, 434 umol)溶於無水二氯甲烷(0.5 mL)，加入N,N-二異丙基乙胺(168 mg, 1.30 mmol, 227 uL)，在0℃下加入三光氣 (142 mg, 478 umol)，常溫反應1小時。待反應完後，濃縮得到粗品(2S,6R)-2,6-二甲基嗎啉-4-碳醯氯(77 mg)，不經純化直接用於下一步反應。
步驟二：將 (R)-3-(6-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯 (5a, 0.06 g, 170 umol)溶於無水二氯甲烷(2 mL)，加入N,N-二異丙基乙胺(66 mg, 510 umol, 89 uL)和(2S,6R)-2,6-二甲基嗎啉-4-醯氯(30 mg, 170 umol)，常溫反1小時。待反應完後，加入到水(0.5 mL)中，之後用二氯甲烷(2 mL)萃取，有機相用飽和食鹽水 (0.4 mL)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮。得到(R)-3-(6-氯-2-((2R,6S)-2,6-二甲基嗎啉-4-羰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(84 mg)黃色油狀液體 。ES-API: [M+H] +=494.2。
步驟三：將(R)-3-(6-氯-2-((2R,6S)-2,6-二甲基嗎啉-4-羰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(84 mg, 170 umol)溶於二氧六環(1 mL)，加入3-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶 (52.7 mg, 204 umol)，之後加入水(0.2 mL)和碳酸鉀(47.0 mg, 340 umol)，最後加入氯(2-二環己基膦-2′,6′-二甲氧基-1,1′-聯苯基)[2-(2′-氨基-1,1′-聯苯基)]鈀(II)(122 mg, 170 umol)，在氮氣保護下加熱120℃攪拌2小時。待反應完後，加入到冰水(2 mL)中，之後用乙酸乙酯(5 mL)萃取，有機相用飽和食鹽水(1 mL)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮。得到(R)-3-(2-((2R,6S)-2,6-二甲基嗎啉-4-羰基)-6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5 -基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(100 mg)，黃色的油狀物。ES-API: [M+H] += 590.3。
步驟四：將(R)-3-(2-((2R,6S)-2,6-二甲基嗎啉-4-羰基)-6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5 -基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(100 mg, 169 umol)溶於乙酸乙酯(1 mL)，加入鹽酸乙酸乙酯(4.0 mol/L, 1.0 mL)，室溫攪拌2小時。待反應完後，過濾，用乙酸乙酯(1 mL)洗滌濾餅，濾餅旋乾。用製備HPLC(甲酸法)純化得到((2R, 6S)-2,6-二甲基嗎啉)(6-(3-甲基-1H-吡咯[2,3-b]吡啶-5–基)-8-((R)-嗎啉-3-基)-3,4-二氫異喹啉-2-1H-基)甲酮 (Z519, 13.22 mg, 甲酸鹽)，白色固體。ES-API: [M+H] += 490.1。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ = 8.44 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 8.21 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 7.74 (d, J= 1.6 Hz, 1H), 7.43 (d, J= 1.6 Hz, 1H), 7.18 (d, J= 0.8 Hz, 1H), 4.72-4.65 (m, 1H), 4.58-4.51 (m, 1H), 4.11 (dd, J= 2.8, 10.0 Hz, 1H), 3.93-3.84 (m, 2H), 3.74-3.45 (m, 8H), 3.18-3.08 (m, 1H), 3.06-2.99 (m, 3H), 2.71-2.60 (m, 2H), 2.37 (d, J= 1.2 Hz, 3H), 1.18 (d, J= 6.0 Hz, 6H).
實施例290化合物Z566的合成
步驟一：將4-氟呱啶鹽酸鹽(46 mg, 0.33 mmol)的二氯甲烷(5 mL)混合物冷卻至0℃，依次加入三乙胺(0.07 mL, 0.49 mmol)和三光氣(98 mg, 0.33 mmol)，攪拌0.5小時。反應液濃縮，隨後溶於二氯甲烷(5 mL)中，加入三乙胺(0.07 mL, 0.49 mmol)和(R)-3-(6-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(5a, 58 mg, 0.16 mol)，室溫攪拌1小時。反應結束後，用飽和碳酸氫鈉(10 mL)溶液淬滅，二氯甲烷(10 mLX3)萃取。有機相用無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮並用快速矽膠柱(0-40%四氫呋喃/石油醚)純化，得到(R)-3-(6-氯-2-(4-氟呱啶-1-羰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(75 mg, 收率95%)。ES-API: [M+H-56] += 482.1。
步驟二：氮氣保護下，(R)-3-(6-氯-2-(4-氟呱啶-1-羰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(75 mg, 0.16 mmol)，聯硼酸頻那醇酯(76 mg, 0.31 mmol)，氯(2-二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II)(11 mg, 0.02 mmol)和醋酸鉀(46 mg, 0.47 mmol)的1,4-二氧六環(2 mL)混合物110℃攪拌2小時。反應結束後，反應液過濾濃縮得到粗品(R)-3-(2-(4-氟呱啶-1-羰基)-6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(90 mg)。ES-API: [M+H] += 574.3。
步驟三：氮氣保護下，(R)-3-(2-(4-氟呱啶-1-羰基)-6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(90 mg, 0.16 mmol)，2-溴-7-甲基-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪(67 mg, 0.31 mmol)，氯(2-二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II)(11 mg, 0.02 mmol)和碳酸鉀(65 mg, 0.47 mmol)的1,4-二氧六環(2 mL)和水(0.4 mL)混合物110℃攪拌2小時。反應結束後，反應液溶於乙酸乙酯(20 mL)，並依次用飽和食鹽水(10 mL)和水(10 mL)洗滌。有機相用無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮並用快速矽膠柱(0-10%甲醇/二氯甲烷)純化，得到無色油狀物(R)-3-(2-(4-氟呱啶-1-羰基)-6-(7-甲基-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-2-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(30 mg, 收率33%)。ES-API: [M+H] += 579.3。
步驟四：冰浴條件下，將三氟乙酸(0.5 mL)滴加到(R)-3-(2-(4-氟呱啶-1-羰基)-6-(7-甲基-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-2-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(30 mg, 0.05 mmol)的二氯甲烷(1 mL)溶液中，室溫攪拌1小時。濃縮，用7M胺/甲醇(5 mL)中和，隨後濃縮並用製備HPLC(碳酸氫胺法)純化得到白色固體(R)-(4-氟呱啶-1-基)(6-(7-甲基-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-2-基)-8-(嗎啉-3-基)-3, 4-二氫異喹啉-2(1H)-基)甲酮(Z566, 14 mg, 純度100%, 收率56%)。ES-API: [M+H] += 479.2。 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 11.42 (s, 1H), 8.62 (d, J= 1.6 Hz, 1H), 8.37 (s, 1H), 8.21-8.11 (m, 1H), 7.67 (s, 1H), 7.25 (d, J= 1.6 Hz, 1H), 5.02-4.83 (m, 1H), 4.74-4.53 (m, 2H), 4.41-4.26 (m, 1H), 4.23 (s, 1H), 4.11-3.98 (m, 3H), 3.97-3.67 (m, 2H), 3.67-3.45 (m, 3H), 3.34 (s, 3H), 3.27-3.18 (m, 1H), 3.06-2.85 (m, 2H), 1.35 (d, J= 3.2 Hz, 3H), 1.33 (d, J= 3.2 Hz, 3H).
實施例291化合物Z522的合成
步驟一：取2-溴-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪(500 mg, 2.525 mmol)溶於乙腈 (12 mL)，加入乙酸(4 mL)，1-氯甲基-4-氟-1,4-二氮雜雙環[2.2.2]辛烷二(四氟硼酸)鹽 (893.85 mg, 2.525 mmol)，氮氣保護，80℃ 反應 15小時，反應結束後，加水(10 mL)稀釋，乙酸乙酯(10 mLX3)萃取，有機相飽和食鹽水(10 mL)洗，無水硫酸鈉乾燥，過濾減壓濃縮至乾，藉由矽膠柱層析(石油醚/乙酸乙酯=85/15)純化得到 2-溴-7-氟-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪 (200 mg, 0.926 mmol, 收率36.67%)。ES-API: [M+H] +=216.1。
步驟二：取(3R)-3-(2-(8-氧-3-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-羰基)-6-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(80 mg, 0.163 mmol)，聯硼酸頻那醇酯(79.36 mg, 0.313 mmol)，醋酸鉀(61.25 mg, 0.625 mmol)，氯(2-二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II)(20.76 mg, 0.030 mmol)溶於1,4-二氧六環(2.5 mL)，110℃攪拌2小時，加入2-溴-7-氟-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪 (29.61 mg, 0.137 mmol)，氯(2-二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II)(9.87 mg, 0.014 mmol)，碳酸鉀 (56.84 mg, 0.411 mmol)和 水 (0.5 mL)，110℃攪拌2小時 ，減壓濃縮至乾，得到粗品藉由矽膠柱層析(二氯甲烷/甲醇=97/3)純化，得到(3R)-3-(2-(8-氧-3-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-羰基)-6-(7-氟-5H-吡咯[2,3-b]吡嗪-2-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-甲酸叔丁酯(30 mg, 0.051 mmol, 收率36.92%)ES-API: [M+H] +=593.1。
步驟三：取(3R)-3-(2-(8-氧-3-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-羰基)-6-(7-氟-5H-吡咯[2,3-b]吡嗪-2-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-甲酸叔丁酯(24 mg, 0.040 mmol)溶於無水二氯甲烷(0.5 mL)，加入三氟乙酸(0.2 mL)，室溫反應2小時，LC-MS監測反應完全，減壓濃縮至乾，加入氨/甲醇溶液(1 mL)中和後，再次濃縮，經矽膠柱層析(二氯甲烷/甲醇=10/1)純化得到(8-氧-3-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)(6- (7-氟-5H-吡咯[2,3-b]吡嗪-2-基)- 8-((R)-嗎啉-3-基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)甲酮(Z522, 10 mg, 0.020 mmol, 收率50.14%)ES-API: [M+H] +=493.1。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 8.93 (s, 1H), 8.67 (s, 1H), 8.11 (s, 1H), 7.72 (s, 1H), 7.32 (s, 1H), 4.68 – 4.61 (m, 1H), 4.35 – 4.15 (m, 5H), 3.96 – 3.66 (m, 3H), 3.56 – 3.36 (m, 6H), 3.26 – 3.06 (m, 5H), 1.87 (s, 4H).
實施例292化合物Z567的合成
步驟一：取2-甲基嘧啶-5-羧酸(27.40 mg, 0.198 mmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(2 mL)，加入(R)-3-(6-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(5a, 70 mg, 0.198 mmol)，2-(7-偶氮苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯 (98.06 mg, 0.258 mmol)，N,N-二異丙基乙胺 (128.20 mg, 0.992 mmol)，室溫反應2小時，反應結束後，加水(10 mL)稀釋，乙酸乙酯(10 mLX3)萃取，有機相飽和食鹽水(10 mL)洗，無水硫酸鈉乾燥，過濾減壓濃縮至乾，藉由柱色譜法矽膠柱層析(石油醚/乙酸乙酯=70/30)純化得到(R)-3-(6-氯-2-(2-甲基嘧啶-5-甲醯基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-甲酸叔丁酯(75 mg, 0.159 mmol, 收率79.93%)。ES-API: [M+H] +=473.0。
步驟二：取(R)-3-(6-氯-2-(2-甲基嘧啶-5-甲醯基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-甲酸叔丁酯(70 mg, 0.148 mmol)，聯硼酸頻那醇酯(75.17 mg, 0.296 mmol)，醋酸鉀(29.01 mg, 0.296 mmol)，氯(2-二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II)(20.76 mg, 0.030 mmol)溶於1,4-二氧六環(2.5 mL)，110℃攪拌2小時，加入5-溴-3-乙基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(31.90 mg, 0.142 mmol)，氯(2-二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II)(10 mg, 0.028 mmol)，碳酸鉀 (72.54 mg, 0.525 mmol)，水(0.5 mL)，110℃攪拌2小時 ，減壓濃縮至乾，得到粗品藉由矽膠柱層析(二氯甲烷/甲醇=97/3)純化，得到叔丁基(R)-3-(6-(3-乙基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-2-(2-甲基嘧啶-5-羰基)-1,2, 3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯 (30 mg, 0.051 mmol, 收率36.33%)。ES-API: [M+H] +=583.2。
步驟三：取(R)-3-(2-(2-羥基-2-甲基丙醯基)-6-(7-異丙基-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-2-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯 (20 mg, 0.034 mmol)溶於無水二氯甲烷(0.5 mL)，加入三氟乙酸(0.2 mL)，室溫反應2h，LC-MS監測反應完全，減壓濃縮至乾，加入氨/甲醇溶液(1 mL)中和後，再次濃縮，經矽膠柱層析(二氯甲烷/甲醇=10/1)純化得到(R)-(6-(3-乙基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-8-(嗎啉-3-基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)(2-甲基嘧啶-5-基)甲酮(Z567, 8 mg, 0.017 mmol, 收率48.31%)。ES-API: [M+H] +=483.2。 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 11.38 (s, 1H), 8.91 (s, 2H), 8.47 (s, 1H), 8.14 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 7.88 – 7.75 (m, 1H), 7.55 – 7.44 (m, 1H), 7.27 (s, 1H), 5.14 – 4.61 (m, 2H), 4.23 – 3.47 (m, 6H), 3.31 – 3.21 (m, 2H), 3.05 – 2.98 (m, 4H), 2.79 – 2.74 (m, 2H), 2.70 (s, 3H), 1.28 (t, J= 7.2 Hz, 3H).
實施例293化合物Z552的合成
步驟一：取(2R,6R)-二甲基嗎啉(117.48 mg, 1.02 mmol)，吡啶(0.4 mL, 4.971 mmol)溶於二氯甲烷(10 mL)，冰浴下加入三光氣(67.36 mg, 0.227 mmol)，室溫反應1小時，加入N,N-二異丙基乙胺(5 mL)和(R)-3-(6-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(5a, 80 mg, 0.227 mmol)，室溫反應1小時，反應結束後，加水(10 mL)稀釋，二氯甲烷(10 mLX3)萃取，有機相飽和食鹽水(10 mL)洗，無水硫酸鈉乾燥，過濾減壓濃縮至乾，藉由矽膠柱層析(石油醚/乙酸乙酯=70/30)純化，得到(R)-3-(6-氯-2-((2R,6R)-2,6-二甲基嗎啉-4-甲醯基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-甲酸叔丁酯(90 mg, 0.182 mmol, 收率80.36%)。ES-API: [M+H] +=494.3。
步驟二：取(R)-3-(6-氯-2-((2R,6R)-2,6-二甲基嗎啉-4-甲醯基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-甲酸叔丁酯(50 mg, 0.101 mmol)，3-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(52.25 mg, 0.202 mmol)，氯(2-二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II)(7.29 mg, 0.010 mmol)，碳酸鉀 (41.96 mg, 0.304 mmol)溶於1,4-二氧六環(2.5 mL)和水(0.5 mL)，110℃攪拌2小時，減壓濃縮至乾，藉由矽膠柱層析(二氯甲烷/甲醇=97/3)純化，得到(R)-3-(2-((2R,6R)-2,6-二甲基嗎啉-4-羰基)-6-(3-甲基-1H-吡咯[2,3-b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-甲酸叔丁酯(40 mg, 0.068 mmol, 收率67.02%)。ES-API: [M+H] +=590.3。
步驟三：取(R)-3-(2-((2R,6R)-2,6-二甲基嗎啉-4-羰基)-6-(3-甲基-1H-吡咯[2,3-b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-甲酸叔丁酯 (21 mg, 0.036 mmol)溶於無水二氯甲烷(0.5 mL)，加入三氟乙酸(0.2 mL)，室溫反應2小時，LC-MS監測反應完全，減壓濃縮至乾，加入氨/甲醇溶液(1mL)中和後，再次濃縮，經矽膠柱層析(二氯甲烷/甲醇=10/1)純化得到((2R,6R)-2,6-二甲基嗎啉)(6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-8-((R)-嗎啉-3-基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)甲酮 (Z552, 11 mg, 0.022 mmol, 收率63.11% )。ES-API: [M+H] +=490.1。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 10.16 (s, 1H), 8.42 (d, J= 1.6 Hz, 1H), 7.96 (d, J= 1.6 Hz, 1H), 7.71 (s, 1H), 7.26 (s, 1H), 7.06 (s, 1H), 4.63 – 4.58 (m, 2H), 4.43 – 4.48 (m, 1H), 4.12 – 3.94 (m, 3H), 3.88 – 3.76 (m, 2H), 3.65 – 3.58 (m, 1H), 3.53 – 3.26 (m, 5H), 3.13 – 3.06 (m, 1H), 3.03 – 2.86 (m, 5H), 2.29 (s, 3H), 1.18 (s, 6H).
實施例294化合物Z568的合成
步驟一：將( R)-3-(6-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(5a, 150 mg, 0.425 mmol)和(2 S)-3,3,3-三氟-2-羥基-2-甲基丙酸(134.40 mg, 0.850 mmol)溶解到 N,N-二甲基甲醯胺 (5 mL)，依次加入三乙胺 (0.177 mL, 1.275 mmol)和2-(7-偶氮苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯 (323.28 mg, 0.850 mmol). 室溫反應1小時。反應完畢加入水(30mL)，乙酸乙酯(30mLx3)萃取，合併有機相，飽和食鹽水(30mLx1)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮，經矽膠柱層析純化(石油醚/乙酸乙酯=1/1)得到( R)-3-(6-氯-2-(( S)- 3,3,3-三氟-2-羥基-2-甲基丙醯基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(200 mg, 0.406 mmol, 收率95%)。ES-API: [M+H] +=493.2。
步驟二：將( R)-3-(6-氯-2-((S)- 3,3,3-三氟-2-羥基-2-甲基丙醯基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(200mg，0.406 mmol)、聯硼酸頻那醇酯(206.07 mg，0.811 mmol)、氯(2-二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II)(17.53 mg，0.024 mmol)和乙酸鉀(119.53 mg, 1.218 mmol)溶解到乾燥的1,4-二氧六環(10 mL)，氮氣保護，在110℃攪拌反應2小時。反應完畢，不用處理，得到( R)-3-(6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)-2-((S)-3,3,3-三氟 -2-羥基-2-甲基丙醯基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯溶液，直接用於下一步反應，ES-API: [M+H] +=585.3。
步驟三：向上述(R)-3-(6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)-2-((S)-3,3,3-三氟 -2-羥基-2-甲基丙醯基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯的反應液直接加入水 (3 mL)、2-溴-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪 (240.90 mg, 1.217 mmol)、氯(2-二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II)(29.20 mg, 0.041 mmol)和 碳酸鉀 ( 168.13 mg, 1.217 mmol)，氮氣保護，在110℃攪拌3小時。將反應用乙酸乙酯 (20 mL)和水 (20 mL)稀釋。分離有機層，再用飽和氯化鈉溶液(20mL×3)洗滌，真空濃縮並藉由矽膠柱層析純化 (乙酸乙酯/石油醚 = 40/60)，得到(3 R)-3-[6-(5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-2-基)-2-[(2S)-3,3,3-三氟-2-羥基 -2-甲基丙醯基]-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基]嗎啉-4-羧酸叔丁酯(100 mg, 0.174 mmol, 收率42.84%)。ES-API: [M+H] +=576.2。
步驟四：將(3 R)-3-[6-(5 H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-2-基)-2-[(2 S)-3,3,3-三氟-2-羥基 -2-甲基丙醯基]-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基]嗎啉-4-羧酸叔丁酯(100 mg, 0.174 mmol)溶解在N,N-二甲基甲醯胺(3 mL)中，冰水浴條件下，加入N-碘代丁二醯亞胺 (39.09 mg, 0.174 mmol)。室溫攪拌10分鐘。緩慢加入 硫代硫酸鈉水溶液(2 mL)猝滅。用乙酸乙酯 (100 mL x 3)萃取。合併有機層，用飽和氯化鈉溶液(100 mL x 1)洗滌，用無水硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮。藉由矽膠柱層析純化 (乙酸乙酯/石油醚 = 40/60)，得到( R)-3-(6-(7-碘-5 H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-2-基)-2-((S)-3,3,3-三氟-2 -羥基-2-甲基丙醯基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(110 mg, 0.157 mmol, 收率90.2%)。ES-API: M+H] +=702.0。
步驟五：向( R)-3-(6-(7-碘-5 H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-2-基)-2-(( S)-3,3,3-三氟-2 -羥基-2-甲基丙醯基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(100 mg, 0.143 mmol)的四氫呋喃( 5 mL)溶液加入二(三叔丁基膦)鈀(7.31mg, 0.014mmol)。用氮氣保護並冷卻至0℃，然後將二甲基鋅 (0.042mL, 0.042mmol, 1M甲苯溶液)滴加到上述溶液中 . 然後在室溫下攪拌 1小時。用氯化銨水溶液(1 mL)淬滅。用乙酸乙酯 (10 mL x 3)萃取，合併有機層，用飽和氯化鈉水溶液(20 mL x 1)洗滌，用無水硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮。藉由矽膠柱層析純化 (乙酸乙酯/石油醚 = 40/60)，得到(3 R)-3-[6-(7-甲基-5 H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-2-基)-2-[(2 S)-3,3,3-三氟-2-羥基-2-甲基丙醯基]-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基]-嗎啉-4-羧酸叔丁酯(30 mg, 0.051 mmol, 收率35.6%)。ES-API: [M+H] +=590.2。
步驟六：將(3 R)-3-[6-(7-甲基-5 H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-2-基)-2-[(2 S)-3,3,3-三氟-2-羥基-2-甲基丙醯基]-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基]-嗎啉-4-羧酸叔丁酯(30 mg, 0.051 mmol)溶解到二氯甲烷(2 mL)中，加入三氟乙酸(1 mL)中，室溫反應0.5小時，反應完畢，濃縮，加入氨/甲醇溶液(1mL)中和後，再次濃縮，經製備HPLC(氨水法)純化得到( S)-3,3,3-三氟-2-羥基-2-甲基-1-(6-(7-甲基-5 H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-2-基)-8-(( R)-嗎啉-3-基)-3,4-二氫異喹啉-2(1 H)-基)丙-1-酮(Z568, 7.7mg, 0.0157mmol, 收率30.8%)。ES-API: [M+H] +=490.2。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 11.72 (d, J= 2.6 Hz, 1H), 8.74 (s, 1H), 8.18 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 7.83 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 7.67 (dd, J= 2.7, 1.3 Hz, 1H), 7.46 – 7.05 (m, 1H), 5.44 – 5.19 (m, 1H), 5.04 – 4.52 (m, 1H), 4.28 – 4.03 (m, 1H), 3.97 (dd, J= 9.9, 3.0 Hz, 1H), 3.92 – 3.50 (m, 4H), 3.27 (t, J= 10.7 Hz, 1H), 3.08 – 2.89 (m, 4H), 2.81 (s, 1H), 2.35 (d, J= 1.1 Hz, 3H), 1.59 (s, 3H).
實施例295化合物Z569的合成
步驟一：向25mL微波反應器中加入(3R)-3-(6-氯-2-(4-羥基-2,2-二甲基吡咯烷-1-羰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯 (200 mg, 0.4 mmol)，頻那醇聯硼酸酯(102mg, 0.4 mmol)，醋酸鉀(119 mg, 1.25mmol)，氯(2-二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II)(29 mg, 0.04mmol)和二氧六環(1mL)。90℃條件下攪拌過夜。反應液加入乙酸乙酯(10 mL)，用飽和食鹽水(10 mLX3)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮，粗品用快速矽膠柱純化(甲醇：二氯甲烷=10:100)得到目標產物(3R)-3-(2-(4-羥基-2,2-二甲基吡咯烷-1-羰基)-6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(160mg, 收率: 67%)。ES-API: [M+H] +=586.3。
步驟二：向5 mL微波反應器中加入(3R)-3-(2-(4-羥基-2,2-二甲基吡咯烷-1-羰基)-6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯 (60 mg, 0.1 mmol)，2-溴-7-氯-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪(119mg, 0.51mmol)，碳酸鉀(42mg, 0.3mmol)，1,1'-雙(二-苯基膦基)二茂鐵氯化鈀 (15 mg, 0.02 mmol)，二氧六環(2 mL)和水(0.3 mL)。體系用氮氣置換三次，然後用氮氣球保護。120℃條件下反應2小時，反應液加入乙酸乙酯(10 mL)，用飽和食鹽水(5 mLX3)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮，粗品用快速矽膠柱純化(甲醇：二氯甲烷=10:100)得到目標產物 (3R)-3-(6-(7-氯-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-2-基)-2-(4-羥基-2,2-二甲基吡咯烷-1-羰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(50mg, 收率:40%)。ES-API: [M+H] +=610.3。
步驟三：向5 mL單口圓底燒瓶中加入(3R)-3-(6-(7-氯-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-2-基)-2-(4-羥基-2,2-二甲基吡咯烷-1-羰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(50mg 0.04mmol)，三氟乙酸(3 mL)和二氯甲烷(6 mL)，室溫攪拌反應30分鐘，旋乾粗品用製備HPLC(碳酸氫銨法)純化得到：(6-(7-氯-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-2-基)-8-((R)-嗎啉-3-基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)- 基)(4-羥基-2,2-二甲基吡咯烷-1-基)甲酮(Z569, 7mg, 收率:32%)。ES-API: [M+H] +=510.3。
實施例296化合物Z570的合成
步驟一：取2-溴-7-甲基-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪(1.5 g, 7.074 mmol)溶於乙腈(10 mL)，加入二碳酸二叔丁酯 (2.31 g, 10.611 mmol)，三乙胺(2.86 g, 28.295 mmol)，4-二甲氨基吡啶 (0.86 g, 7.074 mmol),室溫反應過夜，反應結束後，加水(10 mL)稀釋，二氯甲烷(10 mLX3)萃取，有機相飽和食鹽水(10 mL)洗，無水硫酸鈉乾燥，過濾減壓濃縮至乾，藉由矽膠柱層析(石油醚/乙酸乙酯=70/30)純化，得到2-溴-7-甲基-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-5-羧酸叔丁酯 (366 mg, 1.172 mmol, 收率16.57%)。ES-API: [M-56] +=256.0。
步驟二：取(3R)-3-(2-(3-氧雜-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-甲醯基)-6-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-甲酸叔丁酯(80 mg, 0.163 mmol)，聯硼酸頻那醇酯(79.36 mg, 0.313 mmol)，醋酸鉀 (61.25 mg, 0.625 mmol)，氯(2-二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II)(20.76 mg, 0.030 mmol)溶於1,4-二氧六環(2.5 mL)，110℃攪拌2小時，加入2-溴-7-甲基-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-5-羧酸叔丁酯(48.15 mg, 0.154 mmol)，氯(2-二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II)(11.10 mg, 0.015 mmol)，碳酸鉀 (63.95 mg, 0.463 mmol)水 (0.5 mL)，110℃攪拌2小時 ，減壓濃縮至乾，得到粗品藉由矽膠柱層析(二氯甲烷/甲醇=97/3)純化，得到(3R)-3-(2-(3-氧雜-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-基)-6-(7-甲基-5H-吡咯[2,3-b]吡嗪-2-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-甲酸叔丁酯 (30 mg, 0.051 mmol, 收率61.3%)。ES-API: [M+H] +=589.3。
步驟三：取(3R)-3-(2-(3-氧雜-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-基)-6-(7-甲基-5H-吡咯[2,3-b]吡嗪-2-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-甲酸叔丁酯 (30 mg, 0.051 mmol)溶於無水二氯甲烷(0.5 mL)，加入三氟乙酸(0.2 mL)，室溫反應2小時，LC-MS監測反應完全，減壓濃縮至乾，加入氨/甲醇溶液(1 mL)中和後，再次濃縮，經矽膠柱層析(二氯甲烷/甲醇=10/1)純化得到(3-氧雜-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-基)(6- (7-甲基-5H-吡咯[2,3-b]吡嗪-2-基)- 8-((R)-嗎啉-3-基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)甲酮 (Z570, 10 mg, 0.02 mmol, 收率40.8% )。ES-API: [M+H] +=489.1。 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 11.72 (s, 1H), 8.74 (s, 1H), 8.15 (s, 1H), 7.82 (s, 1H), 7.67 (s, 1H), 4.76 – 4.56 (m, 2H), 4.06 – 3.89 (m, 3H), 3.81 – 3.77 (m, 2H), 3.73 – 3.49 (m, 8H), 3.29 – 3.22 (m, 1H), 2.96 – 2.95 (m, 4H), 2.35 (s, 3H), 10.84 – 1.79 (m, 4H).
實施例297化合物Z571的合成
步驟一：取3-氧雜-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷鹽酸鹽(119.95 mg, 1.06 mmol)，吡啶(0.4 mL, 4.971 mmol)溶於二氯甲烷(10 mL)，冰浴下加入三光氣(63.07 mg, 0.213 mmol)，室溫反應1小時，加入N,N-二異丙乙胺(5 mL)和(R)-3-(6-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(5a, 75 mg, 0.213 mmol)，室溫反應1小時，反應結束後，加水(10 mL)稀釋，二氯甲烷(10 mLX3)萃取，有機相飽和食鹽水(10 mL)洗，無水硫酸鈉乾燥，過濾減壓濃縮至乾，藉由矽膠柱層析(石油醚/乙酸乙酯=70/30)純化得到(3R)-3-(2-(3-氧雜-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-甲醯基)-6-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-甲酸叔丁酯(80 mg, 0.163 mmol, 收率76.50%)。ES-API: [M+H] +=492.3。
步驟二：取(3R)-3-(2-(3-氧雜-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-甲醯基)-6-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-甲酸叔丁酯(80 mg, 0.163 mmol)，聯硼酸頻那醇酯(79.36 mg, 0.313 mmol)，醋酸鉀 (61.25 mg, 0.625 mmol)，氯(2-二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II)(20.76 mg, 0.030 mmol)溶於1,4-二氧六環(2.5 mL)，110℃攪拌2小時，加入2-溴-7-氯-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪(48.15 mg, 0.154 mmol)，氯(2-二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II)(11.10 mg, 0.015 mmol)，碳酸鉀(63.95 mg, 0.463 mmol)，水 (0.5 mL)，110℃攪拌2小時 ，減壓濃縮至乾，得到粗品藉由矽膠柱層析(二氯甲烷/甲醇=97/3)純化，得到 (3R)-3-(2-(3-氧雜-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-甲醯基)-6-(7-氯-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-2-基)--1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(30 mg, 0.049 mmol, 收率30.2%)。ES-API: [M+H] +=609.3。
步驟三：取(3R)-3-(2-(3-氧雜-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-甲醯基)-6-(7-氯-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-2-基)--1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(30 mg, 0.049 mmol)溶於無水二氯甲烷(0.5 mL)，加入三氟乙酸(0.2 mL)，室溫反應2小時，LC-MS監測反應完全，減壓濃縮至乾，加入氨/甲醇溶液(1mL)中和後，再次濃縮，經矽膠柱層析(二氯甲烷/甲醇=10/1)純化得到 (3-氧雜-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-基)(6- (7-氯-5H-吡咯[2,3-b]吡嗪-2-基)- 8-((R)-嗎啉-3-基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)甲酮(Z571, 13 mg, 0.025 mmol, 收率51.02% )。ES-API: [M+H] +=509.0。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ9.83 (s, 1H), 8.64 (s, 1H), 8.06 (s, 1H), 7.77 (s, 1H), 7.51 (s, 1H), 4.48 – 4.41 (m, 1H), 4.35 – 4.15 (m, 1H), 3.89 – 3.76 (m, 4H), 3.74 – 3.67 (m, 4H) , 3.64 – 3.58 (m, 6H), 3.16 – 2.86 (m, 4H), 1.91 (s, 4H).
實施例298化合物Z572的合成
步驟一：取8-氧-3-氮雜二環[3.2.1]辛烷鹽酸鹽(119.95 mg, 1.06 mmol)，吡啶(0.4 mL, 4.971 mmol)溶於二氯甲烷(10 ml)，冰浴下加入三光氣(63.07 mg, 0.213 mmol)，室溫反應1小時，加入N,N-二異丙基乙胺(5 mL)和(R)-3-(6-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(5a, 75 mg, 0.213 mmol)，室溫反應1小時，反應結束後，加水(10 mL)稀釋，二氯甲烷(10 mLX3)萃取，有機相飽和食鹽水(10 mL)洗，無水硫酸鈉乾燥，過濾減壓濃縮至乾，藉由矽膠柱層析(石油醚/乙酸乙酯=70/30)純化，得到(3R)-3-(2-(8-氧-3-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-羰基)-6-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(80 mg, 0.163 mmol, 收率76.50%)。ES-API: [M+H] +=492.3。
步驟二：取(3R)-3-(2-(8-氧-3-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-羰基)-6-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(80 mg, 0.163 mmol)，聯硼酸頻那醇酯(79.36 mg, 0.313 mmol)，醋酸鉀 (61.25 mg, 0.625 mmol)，氯(2-二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II)(20.76 mg, 0.030 mmol)溶於1,4-二氧六環(2.5 mL)，110℃攪拌2小時，加入2-溴-7-甲基-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-5-羧酸叔丁酯(48.15 mg, 0.154 mmol)，氯(2-二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II)(11.10 mg, 0.015 mmol)，碳酸鉀(63.95 mg, 0.463 mmol)，水 (0.5 mL)，110℃攪拌2小時 ，減壓濃縮至乾，得到粗品藉由矽膠柱層析(二氯甲烷/甲醇=97/3)純化，得到(3R)-3-(2-(8-氧-3-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-羰基)-6-(5-(叔丁氧羰基)-7-甲基-5H-吡咯[2,3-b]吡嗪-2-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-甲酸叔丁酯(30 mg, 0.044 mmol, 收率26.9%)。ES-API: [M+H] +=689.2。
步驟三：取(3R)-3-(2-(8-氧-3-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-羰基)-6-(5-(叔丁氧羰基)-7-甲基-5H-吡咯[2,3-b]吡嗪-2-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-甲酸叔丁酯(30 mg, 0.044 mmol)溶於無水二氯甲烷(0.5 mL)，加入三氟乙酸(0.2 mL)，室溫反應2小時，LC-MS監測反應完全，減壓濃縮至乾，加入氨/甲醇溶液(1mL)中和後，再次濃縮，經矽膠柱層析(二氯甲烷/甲醇=10/1)純化得到(8-氧-3-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)(6-(7-甲基-5H-吡咯[2,3-b]吡嗪-2-基)-8-((R)-嗎啉-3-基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)甲酮 (Z572, 13 mg, 0.027 mmol, 收率61.3% )。ES-API: [M+H] +=489.1。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 9.37 (s, 1H), 8.57 (s, 1H), 8.05 (s, 1H), 7.70 (s, 1H), 7.32 (s, 1H), 4.62 – 4.56 (m, 1H), 4.46 – 4.23 (m, 3H), 4.12 – 4.11 (m, 1H), 3.77 – 3.58 (m, 3H), 3.55 – 2.90 (m, 11H), 2.37 (s, 3H), 1.87 (s, 4H).
實施例299化合物Z573的合成
步驟一：取(R)-3-(6-氯-2-((S)-3-甲基嗎啉-4-甲醯基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-甲酸叔丁酯(100 mg, 0.208 mmol)，聯硼酸頻那醇酯(79.36 mg, 0.313 mmol)，醋酸鉀 (61.25 mg, 0.625 mmol)，氯(2-二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II)(20.76 mg, 0.030 mmol)溶於1,4-二氧六環(2.5 mL)，110℃攪拌2小時，加入2-溴-7-氯-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪(40.68 mg, 0.175 mmol)，氯(2-二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II)(10 mg, 0.028 mmol)，碳酸鉀 (72.54 mg, 0.525 mmol)，水(0.5 mL)，110℃攪拌2小時 ，減壓濃縮至乾，得到粗品藉由矽膠柱層析純化(二氯甲烷/甲醇=97/3)純化，得到(R)-3-(6-(7-氯-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-2-基)-2-((S)-3-甲基嗎啉-4-甲醯基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-甲酸叔丁酯 (30 mg, 0.052 mmol, 收率16.6%)。ES-API: [M+H] +=597.2。
步驟二：取(R)-3-(2-(2-羥基-2-甲基丙醯基)-6-(7-異丙基-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-2-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯 (30 mg, 0.052 mmol)溶於無水二氯甲烷(0.5 mL)，加入三氟乙酸(0.2 mL)，室溫反應2小時，LC-MS監測反應完全，減壓濃縮至乾，加入氨/甲醇溶液(1mL)中和後，再次濃縮，經矽膠柱層析(二氯甲烷/甲醇=10/1)純化得到(6-(7-氯-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-2-基)-8-((R)-嗎啉-3-基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)(S)-3-甲基嗎啉)甲酮(Z573, 10 mg, 0.020 mmol, 收率38.4%)。ES-API: [M+H] +=497.1。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 9.33 (s, 1H), 8.70 (s, 1H), 8.13 (s, 1H), 7.82 (s, 1H), 7.59 (s, 1H), 4.76 – 4.72 (m, 2H), 4.43 – 4.22 (m, 2H), 3.97 – 3.77 (m, 5H), 3.70 – 3.65 (m, 5H), 3.35 – 3.24 (m, 3H), 3.15 – 3.14 (m, 2H), 3.05 – 2.97 (m, 2H), 1.34 (s, 3H).
實施例300化合物Z574的合成
步驟一：取3,5-二溴吡嗪-2-胺(10 g, 39.541 mmol)溶於四氫呋喃(100 mL)，加入叔丁醇鉀(59.312 mL, 59.312 mmol)，三溴丙烯(5.74 g, 47.450 mmol)，室溫反應16小時，減壓濃縮，加水(100 mL)稀釋，二氯甲烷(100 mLX3)萃取，有機相飽和食鹽水(100 mL)洗，無水硫酸鈉乾燥，過濾減壓濃縮至乾，藉由矽膠柱層析(石油醚/乙酸乙酯=50/50)純化，得到 N-烯丙基-3,5-二溴吡嗪-2-胺(3000 mg, 10.240 mmol, 收率25.90%)。ES-API: [M+H] +=291.8。
步驟二：取N-烯丙基-3,5-二溴吡嗪-2-胺(1.8 g, 6.3 mmol)溶於乙腈(10 mL)，加入醋酸鈀(0.14 g, 0.631 mmol)，三(2-甲基苯基)膦(0.46 g, 1.516 mmol)，三乙胺(5.266 mL, 37.889 mmol)，100℃攪拌5小時，減壓濃縮至乾，得到粗品藉由矽膠柱層析(石油醚 / 乙酸乙酯 =15/1)純化，得到2-溴-7-甲基-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪(400 mg, 1.886 mmol, 收率30%)。ES-API: [M+H] +=211.9。
步驟三：取(R)-3-(6-氯-2-((S)-3-甲基嗎啉-4-羰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(100 mg, 0.208 mmol)，聯硼酸頻那醇酯(79.36 mg, 0.313 mmol)，醋酸鉀 (61.15 mg, 0.624 mmol)，氯(2-二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II)(14.98 mg, 0.021 mmol)溶於1,4-二氧六環(2 mL)，110℃攪拌2小時，加入 2-溴-7-甲基-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪(55.65 mg, 0.262 mmol)，氯(2-二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II)(10 mg, 0.028 mmol)，碳酸鉀 (117.24 mg, 0.848 mmol)，水(0.5 mL)，110℃攪拌2小時 ，減壓濃縮至乾，得到粗品藉由矽膠柱層析(二氯甲烷/甲醇=97/3)純化，得到(R)-3-(6-(7-甲基-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-2-基)-2-((S)-3-甲基嗎啉-4-甲醯基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(30 mg, 0.052 mmol, 收率25%)。ES-API: [M+H] +=577.3。
步驟四：取(R)-3-(6-(7-甲基-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-2-基)-2-((S)-3-甲基嗎啉-4-甲醯基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(30 mg, 0.052 mmol)，溶於無水二氯甲烷(0.5 mL)，加入三氟乙酸(0.2 mL)，室溫反應2小時，LC-MS監測反應完全，減壓濃縮至乾，加入氨/甲醇溶液(1mL)中和後，再次濃縮，經矽膠柱層析(二氯甲烷/甲醇=10/1)純化得到(6-(7-甲基-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-2-基)-8-((R)-嗎啉-3-基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)((S)-3-甲基嗎啉)甲酮(Z574, 11 mg, 0.023 mmol, 收率44.37%)。ES-API: [M+H] +=477.2。 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 11.71 (s, 1H), 8.74 (s, 1H), 8.14 (s, 1H), 7.81 (s, 1H), 7.67 (s, 1H), 4.61 (d, J= 16.4 Hz, 1H), 4.46 (d, J= 16.4 Hz, 1H), 3.97 – 3.95 (m, 1H), 3.78 – 3.71 (m, 4H), 3.66 – 3.40 (m, 6H), 3.26 – 3.18 (m, 3H), 2.95 (s, 5H), 2.35 (s, 3H), 1.20 (s, 3H).
實施例301化合物Z562的合成
步驟一：向50 mL圓底燒瓶中加入2-氧雜-5-氮雜雙環[4.1.0]庚烷鹽酸鹽 (250 mg, 1.84 mmol)，N,N-二異丙基乙胺(713 mg, 5.5 mmol)和二氯甲烷(10 mL)。0℃條件下緩慢加入三光氣(656 mg, 2.2 mmol)，室溫攪拌1小時後加入(R)-3-(6-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(5a, 181mg, 1.5 mmol)，室溫攪拌1小時，反應液加入二氯甲烷(20 mL)，用飽和食鹽水(20 mLX3)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮，粗品用快速矽膠柱純化(甲醇：二氯甲烷=10:100)得到目標產物(3R)-3-(2-(2-氧雜-5-氮雜雙環[4.1.0]庚烷-5-羰基)-6-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(350mg, 收率: 49%)。ES-API: [M+H] +=478.2。
步驟二：向5 mL微波反應器中加入(3R)-3-(2-(2-氧雜-5-氮雜雙環[4.1.0]庚烷-5-羰基)-6-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(50 mg, 0.1 mmol)，3-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(108mg, 0.42mmol)，碳酸鉀(43mg, 0.31mmol)，氯(2-二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II)(7.50 mg, 0.01 mmol)，二氧六環(2 mL)和水(0.3 mL)。體系用氮氣置換三次，然後用氮氣球保護。110℃微波條件下反應2小時，反應液加入乙酸乙酯(10 mL)，用飽和食鹽水(5 mLX3)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮，粗品用快速矽膠柱純化(甲醇：二氯甲烷=10:100)得到目標產物(3R)-3-(2-(2-氧雜-5-氮雜雙環[4.1.0]庚烷-5-羰基)-6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶)-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(40mg, 收率: 68%)。ES-API: [M+H] +=574.3。
步驟三：向5 mL單口圓底燒瓶中加入(3R)-3-(2-(2-氧雜-5-氮雜雙環[4.1.0]庚烷-5-羰基)-6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶)-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(40mg, 0.07mmol)，三氟乙酸(3 mL)和二氯甲烷(6 mL)，室溫攪拌反應30分鐘，旋乾粗品用製備HPLC(碳酸氫銨法)純化得到(2-氧-5-氮雜雙環[4.1.0]庚烷-5-基)(6-(3-甲基-1H-吡咯[2,3-b]吡啶-5-基)-8-((R)-嗎啉-3-基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)甲酮(Z562, 6 mg, 收率:18%)。ES-API: [M+H] +=474.3。 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 11.39 (s, 1H), 8.50 (d, J= 20.8 Hz, 1H), 8.13 (d, J= 29.9 Hz, 1H), 7.81 (d, J= 29.4 Hz, 1H), 7.50 (d, J= 54.8 Hz, 1H), 7.29 (s, 1H), 4.82 – 4.45 (m, 2H), 4.34 (s, 1H), 4.06 – 3.41 (m, 11H), 3.12 – 2.64 (m, 5H), 2.32 (s, 3H), 2.20-1.85 (m, 1H), 0.95 – 0.79 (m, 2H).
實施例302化合物Z540的合成
步驟一 ：向 2-溴-5 H-吡咯并[2,3- b]吡嗪 (10 g, 50.50 mmol)的N，N-二甲基甲醯胺(60 mL)溶液中加入 1-碘吡咯烷-2,5-二酮 (12.50 g, 55.55 mmol), 20℃攪拌 16 小時。反應混合物中加水稀釋，並用乙酸乙酯萃取。合併的有機層用鹽水洗滌，並用無水硫酸鈉乾燥，過濾，旋乾得到呈黃色固體的2-溴-7-碘-5 H-吡咯并[2,3- b]吡嗪(16.00 g, 粗品)。ES-API:[M+1] +=323.9。
步驟二：0℃，向2-溴-7-碘-5 H-吡咯并[2,3- b]吡嗪 (16 g, 49.40 mmol)的N,N-二甲基甲醯胺(80 mL)溶液中加入 鈉氫 (2.37 g, 59.27 mmol)，並在0度下攪拌30分鐘。加入4-甲基苯磺醯氯(10.36 g, 54.34 mmol)，反應在20度攪拌3小時。加入冰水淬滅，乙酸乙酯萃取，用鹽水洗滌，並用無水硫酸鈉乾燥，過濾，旋乾，得到粗品經矽膠柱層析純化(石油醚/乙酸乙酯=2/1)得到2-溴-7-碘-5-(對甲苯磺醯基)-5H-吡咯并[2,3- b]吡嗪(17.80 g, 產率75.37%)，為黃色固體。ES-API:[M+1] +=477.9。
步驟三：向 2-溴-7-碘-5-(對甲苯磺醯基)-5H-吡咯并[2,3- b]吡嗪 (5.0 g, 10.46 mmol)的二氧六環 (50 mL)和 水 (10 mL)溶液中加乙烯氟硼酸鉀鹽(1.68 g, 12.55 mmol)，1,1'-雙(二-苯基膦基)二茂鐵氯化鈀 (765.53 mg, 1.05 mmol)和碳酸鉀 (4.33 g, 31.37 mmol)，反應在40度下攪拌16小時。反應液旋乾，得到粗品經矽膠柱層析純化(石油醚/乙酸乙酯=2/1)得到產物2-溴-5-(對甲苯磺醯基)-7-乙烯基-5H-吡咯并[2,3- b]吡嗪(2.50 g, 產率63.20%)，為黃色固體。ES-API:[M+1] +=378.0。
步驟四：將2-溴-5-(對甲苯磺醯基)-7-乙烯基-5H-吡咯并[2,3- b]吡嗪(1.0 g, 2.64 mmol)溶於乙酸乙酯/乙醇(20 mL/10 mL)溶液中，加入二氧化鉑 (780.19 mg, 3.44 mmol)，氫氣球下20度攪拌3小時。過濾，旋乾，得到粗品經矽膠柱層析純化(石油醚/乙酸乙酯=20/1)得到產物2-溴-7-乙基-5-(對甲苯磺醯基)-5H-吡咯并[2,3- b]吡嗪(480.00 mg, 產率47.75%)，為白色固體。ES-API:[M+1] +=379.9。
步驟五：向 2-溴-7-乙基-5-(對甲苯磺醯基)-5H-吡咯并[2,3- b]吡嗪 (200 mg, 0.52mol)的 水 /甲醇(0.4 mL/1 mL)溶液中加入氫氧化鈉 (208 mg, 5.2 mmol)，將反應物在20度攪拌16小時。加入水(20 mL)稀釋，並用乙酸乙酯(30 mL)萃取，有機相經過無水硫酸鈉乾燥、過濾濃縮，得到粗品經矽膠柱層析純化(石油醚/乙酸乙酯=2/1)得到粗品2-溴-7-乙基-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪(90mg, 產率77%)ES-API:[M+1] +=225.9。
步驟六：向5 mL微波反應器中加入(R)-3-(2-(2-羥基-2-甲基丙烷基)-6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯 (82 mg, 0.15 mmol)，2-溴-7-乙基-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪(12mg, 0.15mmol)，碳酸鉀(64mg, 0.46mmol)，1,1'-雙(二-苯基膦基)二茂鐵氯化鈀 (9.6 mg, 0.01 mmol)，二氧六環(2 mL)和水(0.3mL)。體系用氮氣置換三次，然後用氮氣球保護。110度條件下反應2小時，反應液加入乙酸乙酯(10 mL)，用飽和食鹽水(5 mLx3)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮，粗品用快速矽膠柱純化(甲醇：二氯甲烷=10:100)得到目標產物(R)-3-(6-(7-乙基-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-2-基)-2-(2-羥基-2-甲基丙醯基)-1,2, 3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(12mg, 收率: 14%)。ES-API: [M+H] +=550.3。
步驟七：向5 mL單口圓底燒瓶中加入(R)-3-(6-(7-乙基-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-2-基)-2-(2-羥基-2-甲基丙醯基)-1,2, 3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(12mg, 0.02mmol)，三氟乙酸(3 mL)和二氯甲烷(6 mL)，室溫攪拌反應30分鐘，反應液旋乾溶解於二氯甲烷(2 mL)中，加入氨/甲醇(7M)(2 mL)攪拌1小時後，旋乾粗品用製備HPLC(碳酸氫銨法)純化得到 (R)-1-(6-(7-乙基-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-2-基)-8-(嗎啉-3-基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)-2-羥基-2-甲基丙-1-酮(Z540, 2mg, 收率:20%)。ES-API: [M+H] +=450.2。
實施例303化合物Z533的合成
步驟一：向5 mL微波反應器中加入(R)-3-(2-(2-(2-甲基嘧啶-5-羰基)-6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)- 1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(174mg, 0.31mmol)，2-溴-7-乙基-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪(35mg, 0.153mmol)，碳酸鉀(64mg, 0.46mmol)，1,1'-雙(二-苯基膦基)二茂鐵氯化鈀 (13 mg, 0.017 mmol)，二氧六環(2 mL)和水(0.3 mL)。體系用氮氣置換三次，然後用氮氣球保護。100℃條件下反應3小時，反應液加入乙酸乙酯(10 mL)，用飽和食鹽水(5 mLX3)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮，粗品用快速矽膠柱純化(甲醇：二氯甲烷=10:100)得到 (R)-3-(6-(7-乙基-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-2-基)-2-(2-甲基嘧啶-5-羰基)-1,2, 3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(60mg, 收率：66%)。ES-API: [M+H] +=584.2。
步驟二：向5 mL單口圓底燒瓶中加入(R)-3-(6-(7-乙基-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-2-基)-2-(2-甲基嘧啶-5-羰基)-1,2, 3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(60mg, 0.13mmol)，三氟乙酸(3mL)和二氯甲烷(6 mL)，室溫攪拌反應30分鐘，旋乾粗品用製備HPLC(碳酸氫銨法)純化得到 (R)-(6-(7-乙基-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-2-基)-8-(嗎啉-3-基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)- 基)(2-甲基嘧啶-5-基)甲酮(Z533, 20mg, 收率:40%)。ES-API: [M+H] +=484.2。
實施例304化合物Z528的合成
步驟一：將叔丁基 (R)-3-(2-(嗎啉-4-羰基)-6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸鹽(100 mg, 0.179 mmol)溶於二氧六環(5 mL)和水(1 mL)中。室溫條件下，向上述溶液中加入2-溴-7-乙基-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪(50 mg, 0.221 mmol)，氯(2 -二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II)(12.93 mg, 0.018 mmol)以及碳酸鉀(24.79 mg, 0.179 mmol)。加入完畢後，反應在氮氣氛圍，110℃條件下攪拌5個小時。反應完畢後，向上述溶液中加入水(10 mL)，並用乙酸乙酯(10 mLX3)萃取。有機相用飽和食鹽水(30 mL)洗滌後，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮，得到粗品用快速矽膠柱(甲醇/二氯甲烷：0%-4%)純化得到叔丁基(R)-3-(6-(7-乙基-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-2-基)-2-(嗎啉-4-羰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸酯(50 mg, 0.087 mmol, 收率48.34%)，黃色固體。ES-API: [M +H] +=577.3。
步驟二：將叔丁基(R)-3-(6-(7-乙基-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-2-基)-2-(嗎啉-4-羰基)-1,2,3, 4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸酯(50 mg, 0.087 mmol)溶於無水二氯甲烷(1 mL)中。向上述溶液中加入三氟乙酸(0.5 mL)，反應在室溫條件下攪拌反應2小時。反應完畢後，將反應液濃縮並用氨/甲醇溶液(7 M)調節至中性。再次濃縮後，用快速矽膠柱(甲醇/二氯甲烷：0%-7%)純化得到(R)-(6-(7-乙基-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-2-基)-8-(嗎啉-3-基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)- 基)(嗎啉代)甲酮(Z528, 20 mg, 純度90%, 0.038 mmol, 收率43.56%)，淺黃色固體。ES-API: [M+H] +=477.2。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 9.08 (s, 1H), 8.59 (s, 1H), 8.06 (s, 1H), 7.72 (s, 1H), 7.31 (s, 1H), 4.70 – 4.62 (m, 1H), 4.45 – 4.37 (m, 1H), 4.17 – 4.09 (m, 1H), 3.91 – 3.79 (m, 2H), 3.71 – 3.62 (m, 5H), 3.55 – 3.43 (m, 3H), 3.32 – 3.24 (m, 4H), 3.19 – 3.10 (m, 1H), 3.06 – 3.00 (m, 1H), 2.99 – 2.93 (m, 2H), 2.90 – 2.82 (m, 2H), 1.33 (t, J= 7.6 Hz, 3H).
實施例305化合物Z541的合成
步驟一：向 2-溴-7-碘-5-(對甲苯磺醯基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪 (3.0 g, 6.27 mmol)的二氧六環 (50 mL)和 水 (10 mL)溶液中加異丙烯基三氟硼酸鉀 (1.11 g, 7.53 mmol)，Pd(dppf)Cl2 (459.32 mg, 0.63 mmol)和碳酸鉀 (2.6 g, 18.82 mmol)，反應在40度下攪拌16小時。反應液旋乾，得到粗品藉由矽膠柱層析純化(石油醚/乙酸乙酯=20/1)得到產物2-溴-7-異丙烯基-5-(對甲苯磺醯基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪(620.00 mg, 25.19%收率)，為黃色固體。ES-API:[M+1] +=391.8。
步驟二：取(R)-3-(6-氯-2-(2-羥基-2-甲基丙醯基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(130 mg, 0.296 mmol)，聯硼酸頻那醇酯(127.85 mg, 0.503 mmol)，醋酸鉀 (72.56 mg, 0.740 mmol)，氯(2-二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II)(20.76 mg, 0.030 mmol)溶於1,4-二氧六環(5 mL)，110℃攪拌2小時，加入2-溴-7-異丙烯基-5-(對甲苯磺醯基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪(110.92 mg, 0.283 mmol)，氯(2-二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II)(10 mg, 0.028 mmol)，碳酸鉀 (117.24 mg, 0.848 mmol)，水 (1 mL)，110℃攪拌2小時 ，減壓濃縮至乾，得到粗品藉由矽膠柱層析(二氯甲烷/甲醇=97/3)純化，得到(R)-3-(2-(2-羥基-2-甲基丙醯基)-6-(7-(丙-1-烯-2-基)-5-甲苯磺醯基-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-2-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(80 mg, 0.112 mmol, 收率37.8%)。ES-API: [M+H] +=716.1。
步驟三：取(R)-3-(2-(2-羥基-2-甲基丙醯基)-6-(7-(丙-1-烯-2-基)-5-甲苯磺醯基-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-2-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸的叔丁酯(50 mg, 0.07 mmol)溶於二氯甲烷(3 mL)，加入三乙基矽烷(162.43 mg, 1.397 mmol)，醋酸鈀(31.36 mg, 0.140 mmol)，室溫反應2小時，反應結束後，加水(10 mL)稀釋，二氯甲烷(10 mLX3)萃取，有機相飽和食鹽水(10 mL)洗，無水硫酸鈉乾燥，過濾減壓濃縮至乾，藉由矽膠柱層析(石油醚/乙酸乙酯=50/50)純化，得到(R)-3-(2-(2-羥基-2-甲基丙醯基)-6-(7-異丙基-5-甲苯磺醯基-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-2-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(40 mg, 0.055 mmol, 收率79.78%)。ES-API: [M+H] +=718.1。
步驟四：取(R)-3-(2-(2-羥基-2-甲基丙醯基)-6-(7-異丙基-5-甲苯磺醯基-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-2-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(40 mg, 0.055 mmol)溶於甲醇，加入氫氧化鈉 (1 mL, 6.000 mmol)，60℃攪拌2小時，減壓濃縮至乾，得到粗品藉由矽膠柱層析(石油醚/乙酸乙酯=30/70)純化得到(R)-3-(2-(2-羥基-2-甲基丙醯基)-6-(7-異丙基-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-2-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯 (30 mg, 0.053 mmol, 收率92.9%)。ES-API: [M+H] +=564.3。
步驟五：取(R)-3-(2-(2-羥基-2-甲基丙醯基)-6-(7-異丙基-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-2-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯 (30 mg, 0.053 mmol)溶於無水二氯甲烷(0.5 mL)，加入三氟乙酸(0.2 mL)，室溫反應2小時，LC-MS監測反應完全，減壓濃縮至乾，加入氨/甲醇溶液(1 mL)中和後，再次濃縮，經矽膠柱層析(二氯甲烷/甲醇=10/1)純化得到(R)-2-羥基-1-(6-(7-異丙基-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-2-基)-8-(嗎啉-3-基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)-2-甲基丙-1-酮 (Z541, 12 mg, 0.026 mmol, 收率58.42%)。ES-API: [M+H] +=464.2。 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 11.72 (s, 1H), 8.72 (s, 1H), 8.14 (s, 1H), 7.80 (s, 1H), 7.62 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 5.62 – 5.26 (m, 2H), 4.78 (d, J= 73.1 Hz, 1H), 4.15 (s, 1H), 4.02 – 3.98 (m, 1H), 3.80 – 3.76 (m, 3H), 3.59 – 3.56 (m, 1H), 3.30 – 3.26 (m, 3H), 3.01 – 2.96 (m, 4H), 1.47 – 1.32 (m, 12H).
實施例306化合物Z563的合成
步驟一：取7-氧雜-2-氮雜螺[3.5]壬烷鹽酸鹽(100.93 mg, 0.794 mmol)，吡啶(0.4 mL, 4.971 mmol)溶於二氯甲烷(10 mL)，冰浴下加入三光氣(58.86 mg, 0.198 mmol)，室溫反應1小時，加入N,N-二異丙基乙胺(5 mL)和(R)-3-(6-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(5a, 70 mg, 0.198 mmol)，室溫反應1小時。反應結束後，加水(10 mL)稀釋，二氯甲烷(10 mLX3)萃取，有機相飽和食鹽水(10 mL)洗，無水硫酸鈉乾燥，過濾減壓濃縮至乾，得到粗品藉由矽膠柱層析(石油醚/乙酸乙酯=70/30)純化，得到(R)-3-(6-氯-2-(7-氧-2-氮雜螺[3.5]壬烷-2-甲醯基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-甲酸叔丁酯(80 mg, 0.158 mmol, 收率79.69%)。ES-API: [M+H] +=506.2。
步驟二：取(R)-3-(6-氯-2-(7-氧-2-氮雜螺[3.5]壬烷-2-甲醯基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-甲酸叔丁酯(80 mg, 0.158 mmol)，3-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(43.20 mg, 0.167 mmol)，碳酸鉀 (34.70 mg, 0.251 mmol)，氯(2-二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II)(6.03 mg, 0.008 mmol)溶於1,4-二氧六環(5 mL)和水(1 mL)，110℃攪拌2小時，減壓濃縮至乾，得到粗品藉由矽膠柱層析(石油醚/乙酸乙酯=30/70)純化，得到 (R)-3-(6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-2-(7-氧-2-氮雜螺[3.5]壬烷-2-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-甲酸叔丁酯(35 mg, 0.058 mmol, 收率36.79%)。ES-API: [M+H] +=602.2。
步驟三：取(R)-3-(6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-2-(7-氧-2-氮雜螺[3.5]壬烷-2-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-甲酸叔丁酯(30 mg, 0.058 mmol)溶於無水二氯甲烷(0.5 mL)，加入三氟乙酸(0.2 mL)，室溫反應2小時，LC-MS監測反應完全，減壓濃縮至乾，加入氨/甲醇溶液(1mL)中和後，再次濃縮，經矽膠柱層析(二氯甲烷/甲醇=10/1)純化得到(R)-(6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-8-(嗎啉-3-基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)(7-氧-2-氮雜螺[3.5]壬烷-2-基)甲酮 (Z563, 12 mg, 0.030 mmol, 收率49.87%)。ES-API: [M+H] +=502.1。 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 11.34 (s, 1H), 8.45 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 8.09 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 7.75 (s, 1H), 7.44 (s, 1H), 7.26 (s, 1H), 4.66 (d, J= 16.4 Hz, 1H), 4.48 (d, J= 16.4 Hz, 1H), 3.96 (dd, J= 10.0, 2.8 Hz, 1H), 3.89 – 3.69 (m, 6H), 3.57 – 3.43 (m, 7H), 3.29 – 3.26 (m, 2H), 2.99 – 2.87 (m, 4H), 2.31 (s, 3H), 1.73 – 1.64 (m, 4H).
實施例307化合物Z565的合成
步驟一：取8-氧雜-2-氮雜螺[4.5]癸烷鹽酸鹽(176 mg, 0.991 mmol)，吡啶(0.4 mL, 4.971 mmol)溶於二氯甲烷(10 mL)，冰浴下加入三光氣(63.07 mg, 0.213 mmol)，室溫反應1小時，加入N,N-二異丙基乙胺(5 mL)和(R)-3-(6-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(5a, 70 mg, 0.198 mmol)，室溫反應1小時，反應結束後，加水(10 mL)稀釋，二氯甲烷(10 mLX3)萃取，有機相飽和食鹽水(10 mL)洗，無水硫酸鈉乾燥，過濾減壓濃縮至乾，得到粗品藉由矽膠柱層析(石油醚/乙酸乙酯=70/30)純化，得到(R)-3-(6-氯-2-(8-氧雜-2-氮雜螺[4.5]癸烷-2-甲醯基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-甲酸叔丁酯(50 mg, 0.096 mmol, 收率48.46%)。ES-API: [M+H] +=520.1。
步驟二：取(R)-3-(6-氯-2-(8-氧雜-2-氮雜螺[4.5]癸烷-2-甲醯基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-甲酸叔丁酯(45 mg, 0.087 mmol)，3-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(44.67 mg, 0.173 mmol)，氯(2-二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II)(6.23 mg, 0.009 mmol)，碳酸鉀 (35.87 mg, 0.260 mmol)溶於1,4-二氧六環(2.5 mL)和水(0.5 mL)，110℃攪拌2小時，加入2-溴-7-氯-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪(48.15 mg, 0.154 mmol)，氯(2-二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II)(11.10 mg, 0.015 mmol)，碳酸鉀 (63.95 mg, 0.463 mmol)，水 (0.5 mL)，110℃攪拌2小時 ，減壓濃縮至乾，得到粗品藉由矽膠柱層析(二氯甲烷/甲醇=97/3)純化，得到(R)-3-(6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-2-(8-氧-2-氮雜螺[4.5]癸烷-2-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-甲酸叔丁酯(30 mg, 0.049 mmol, 收率56.31%)。ES-API: [M+H] +=616.2。
步驟三：取(R)-3-(6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-2-(8-氧-2-氮雜螺[4.5]癸烷-2-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-甲酸叔丁酯(30 mg, 0.049 mmol)溶於無水二氯甲烷(0.5 mL)，加入三氟乙酸(0.2 mL)，室溫反應2小時，LC-MS監測反應完全，減壓濃縮至乾，加入氨/甲醇溶液(1mL)中和後，再次濃縮，經矽膠柱層析(二氯甲烷/甲醇=10/1)純化得到(R)-(6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-8-(嗎啉-3-基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)(8-氧-2-氮雜螺[4.5]癸烷-2-基)甲酮 (Z565, 11 mg, 0.021 mmol, 收率43.79%)。ES-API: [M+H] +=516.3。 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 11.35 (s, 1H), 8.46 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 8.10 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 7.76 (d, J= 1.2 Hz, 1H), 7.43 (d, J= 1.2 Hz, 1H), 7.27 (s, 1H), 4.57 (d, J= 16.4 Hz, 1H), 4.40 (d, J= 16.4 Hz, 1H), 3.97 (dd, J= 10.0, 2.8 Hz, 1H), 3.83 – 3.69 (m, 2H), 3.65 – 3.43 (m, 9H), 3.32 – 3.13 (m, 4H), 3.07 – 2.76 (m, 4H), 2.32 (s, 3H), 1.86 – 1.67 (m, 2H), 1.46 – 1.43 (m, 2H).
實施例308化合物Z544的合成
步驟一：將8-氧雜-3-氮雜雙環[3.2.1]辛烷 (0.1 g, 884 umol, 121 uL)溶於無水二氯甲烷(0.5 mL)，加入 N, N-二異丙基乙胺(114 mg, 884 umol, 154 uL)，在0℃下加入三光氣 (288 mg, 972 umol)，常溫反應1小時。待反應完後，濃縮得到粗品8-氧雜-3-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-碳醯氯(155 mg)，不經純化直接用於下一步反應。
步驟二：將(R)-3-(6-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯 (5a, 60 mg, 170 umol)溶於無水二氯甲烷(2 mL)，加入 N, N-二異丙基乙胺(66 mg, 510 umol, 89 uL)和8-氧雜-3-氮雜二環[3.2.1]辛烷-3-碳醯氯(30 mg, 170 umol)，常溫反應1小時。待反應完後，加入到水(0.5 mL)中，之後用二氯甲烷(2 mL)萃取，有機相用飽和食鹽水 (0.4 mL)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮。得到粗品(3R)-3-(2-(8-氧雜-3-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-羰基)-6-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯 (83 mg)，黃色油狀物。ES-API: [M+H] +=492.3。
步驟三：將(3R)-3-(2-(8-氧雜-3-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-羰基)-6-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(83 mg, 169 umol)溶於無水二氧六環(1 mL)，加入雙聯頻那醇硼酸酯 (128 mg, 506 umol),乙酸鉀(49.7 mg, 506 umol)和氯(2-二環己基膦-2′,6′-二甲氧基-1,1′-聯苯基)[2-(2′-氨基-1,1′-聯苯基)]鈀(II)(12 mg, 17umol)，在氮氣保護下加熱110℃攪拌2小時。待反應完後，得到的含(3R)-3-(2-(8-氧雜-3-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-羰基)-6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(98 mg)反應液不做處理，直接用於一步反應。ES-API: [M+H] += 584.4。
步驟四：在上一步得到的含(3R)-3-(2-(8-氧雜-3-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-羰基)-6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(98 mg)反應液中加入水(0.2 mL)，再加入碳酸鉀(70 mg, 504 umol)，3-三氟甲基-5-溴-7-氮雜吲哚(89 mg, 336 umol)和[1,1'-雙(二苯基膦)二茂鐵]二氯化鈀(25 mg, 34 umol)，氮氣保護下100 ℃攪拌1小時。待反應完成後，降溫冷卻，加入到水(1 mL)中，用乙酸乙酯(5 mL)萃取，有機相用飽和食鹽水(0.5 mL)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮，得到粗品(3R)-3-(2-(8-氧雜-3-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-羰基)-6-(3-三氟甲基-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶-5–基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(107 mg)，棕褐色油狀物。ES-API: [M+H] += 642.3。
步驟五：將(3R)-3-(2-(8-氧雜-3-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-羰基)-6-(3-三氟甲基-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶-5–基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(107 mg, 167 umol)溶於乙酸乙酯(1 mL)，加入鹽酸乙酸乙酯(4.0 mol/L, 1.0 mL)，室溫攪拌2小時。待反應完後，過濾，用乙酸乙酯(1 mL)洗滌濾餅。濾餅用7M胺/甲醇(2 mL)溶液中和，旋乾並用製備HPLC(甲酸法)純化得到(8-氧雜-3-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)(8-((R)-嗎啉-3-基)-6-(3-(三氟甲基)-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶-5–基)-3,4-二氫異喹啉-2(1 H)-基)甲酮 (Z544, 2.33 mg, 收率2.4%, 甲酸鹽)，白色固體。ES-API: [M+H] += 542.2。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD)δ = 8.63 (s, 1H), 8.55-8.44 (m, 1H), 8.29 (s, 1H), 7.91 (s, 1H), 7.74 (s, 1H), 7.48 (s, 1H), 4.71-4.64 (m, 1H), 4.55-4.49 (m, 1H), 4.33 (br s, 2H), 4.31-4.24 (m, 1H), 4.04-3.95 (m, 2H), 3.80-3.71 (m, 1H), 3.65-3.55 (m, 3H), 3.52 (br t, J= 6.0 Hz, 2H), 3.28-3.19 (m, 2H), 3.18-3.09 (m, 1H), 3.07-3.00 (m, 2H), 1.93 (s, 4H).
實施例309化合物Z575的合成
步驟一：將8-甲基-3,8-二氮雜-二環[3.2.1]辛烷二鹽酸鹽 (50 mg, 396 umol)溶於無水二氯甲烷(0.5 mL)，加入N,N-二異丙基乙胺(154 mg, 1.19 mmol, 207 uL)，在0 ℃下加入三光氣 (0.13 g, 438 umol)，常溫反應1小時 。待反應完後，濃縮得到粗品8-甲基-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-碳醯氯(75 mg)，不經純化，直接用於下一步反應。
步驟二：將(R)-3-(6-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯 (5a, 0.05 g, 142 umol)溶於無水二氯甲烷(2 mL)，加入N,N-二異丙基乙胺(54.9 mg, 425 umol, 74.0 uL)和8-甲基-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-醯氯 (26.7 mg, 142 umol)，常溫反應1小時。待反應完後，加入到水(0.5 mL)中，之後用二氯甲烷(2 mL)萃取，有機相用飽和食鹽水 (0.4 mL)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮，得到(3R)-3-(6-氯-2-(8-甲基-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-羰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8- 基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯 (71.0 mg)，黃色油狀物 。ES-API: [M+H] +=505.3。
步驟三：將(3R)-3-(6-氯-2-(8-甲基-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-羰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯 (71.0 mg, 141 umol)溶於無水二氧六環(1 mL), 加入雙聯嚬哪醇硼酸酯 (107 mg, 422 umol)，之後加入乙酸鉀(41.3 mg, 421 umol)，最後在氮氣環境下加入氯(2-二環己基膦-2′,6′-二甲氧基-1,1′-聯苯基)[2-(2′-氨基-1,1′-聯苯基)]鈀(II)(10.1 mg, 14.1 umol)，在氮氣保護下加熱110℃攪拌2小時。待反應完後，濃縮得到的(3R)-3-(2-(8-甲基-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-羰基)-6-(4,4,5,5-四甲基-1,3 ,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(84 mg)，不經處理直接用於下一步反應。ES-API: [M+H] += 597.4。
步驟四：在上一步得到的(3R)-3-(2-(8-甲基-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-羰基)-6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(84 mg, 141 umol)反應液中加入水(0.2 mL)，再加入碳酸鉀(57.7 mg, 417 umol)，2-溴-7-氯-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪(64.7 mg, 278 umol)，在氮氣環境下加入四三苯基膦鈀(20.4 mg, 27.8 umol)後加熱至100 ℃攪拌1小時。待反應完成後，降溫冷卻，加入到水(1 mL)中，用乙酸乙酯(5 mL)萃取，有機相用飽和食鹽水(0.5 mL)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮，得到(3R)-3-(6-(7-氯-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-2-基)-2-(8-甲基-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-羰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(86.0 mg)，棕褐色油狀物。ES-API: [M+H] += 622.4。
步驟五：將(3R)-3-(6-(7-氯-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-2-基)-2-(8-甲基-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-羰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(86.0 mg, 138 umol)溶於乙酸乙酯(1 mL)，加入鹽酸乙酸乙酯(4.0 mol/L, 1.0 mL)，室溫攪拌2小時。待反應完後，過濾，用乙酸乙酯(1 mL)洗滌濾餅，濾餅旋乾。用製備HPLC(甲酸法)純化得到(6-(7-氯-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-2-基)-8-((R)-嗎啉-3-基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)(8-甲基-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)甲酮(Z575, 1.24 mg, 二甲酸鹽)，淡黃色固體。ES-API: [M+H] += 522.3。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD)δ = 8.84 (s, 1H), 8.43 (br s, 2H), 8.15 (s, 1H), 7.94 (s, 1H), 7.83 (s, 1H), 4.75-4.68 (m, 1H), 4.67-4.50 (m, 2H), 4.44-4.36 (m, 1H), 4.07-3.98 (m, 2H), 3.89-3.68 (m, 6H), 3.62-3.55 (m, 2H), 3.50-3.38 (m, 2H), 3.24-3.19 (m, 1H), 3.14-3.06 (m, 2H), 2.69 (br s, 3H), 2.28-2.18 (m, 2H), 2.08-1.98 (m, 2H).
實施例310化合物Z551的合成
步驟一：將8-羥基-3-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-羧酸叔丁酯(150 mg, 660 umol)溶於乙酸乙酯(1 mL)，加入鹽酸乙酸乙酯(4.0 mol/L,1.0 mL)，室溫攪拌2小時。待反應完後，過濾，用乙酸乙酯(1 mL)洗滌濾餅，濾餅旋乾，得到粗品3-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-醇鹽酸鹽(100 mg)，白色固體。ES-API: [M+H] +=128.4。
步驟二：將3-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-醇鹽酸鹽(100 mg, 611 umol)和叔丁基二甲基氯矽烷(178 mg, 1.18 mmol, 144 uL)溶於二氯甲烷(1 mL)，加入咪唑(161 mg, 2.36 mmol)，室溫攪拌4小時。待反應完成後，過濾，用二氯甲烷(1 mL)洗滌濾餅，濾餅旋乾，得到粗品8-((叔丁基二甲基矽烷)氧)-3-氮雜雙環[3.2.1]辛烷(300 mg)，淡黃色固體。ES-API: [M+H] +=242.3。
步驟三：將(R)-3-(6-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯 (5a, 0.100 g, 283 umol)溶於無水二氯甲烷(2 mL)，加入N,N-二異丙基乙胺(110 mg, 850 umol, 148 uL)，在0 ℃下加入三光氣 (0.120 g, 404 umol)，常溫反應1小時。待反應完後，濃縮得到粗品(R)-3-(6-氯-2-(氯羰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(118 mg)，不經純化直接用於下一步反應。
步驟四：將(R)-3-(6-氯-2-(氯羰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯 (118 mg, 282 umol)溶於無水二氯甲烷(2 mL)，加入N,N-二異丙基乙胺(109 mg, 845 umol, 147 uL)和8-((叔丁基二甲基矽烷)氧)-3-氮雜雙環[3.2.1]辛烷(68.0 mg, 282 umol)，常溫反應1小時。待反應完後，加入到水(0.5 mL)中，之後用二氯甲烷(2 mL)萃取，有機相用飽和食鹽水 (0.4 mL)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮。得到粗品(3R)-3-(2-(8-((叔丁基二甲基甲矽烷基)氧基)-3-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-羰基)-6-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(100 mg)，黃色油狀液體。ES-API: [M+H] +=620.3。
步驟五：將(3R)-3-(2-(8-((叔丁基二甲基甲矽烷基)氧基)-3-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-羰基)-6-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯 (100 mg, 161 umol)溶於二氧六環(1 mL)，加入3-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶 (41.6 mg, 161 umol)，之後加入0.2 mL水和碳酸鉀(66.8 mg, 484 umol)，最後加入氯(2-二環己基膦-2′,6′-二甲氧基-1,1′-聯苯基)[2-(2′-氨基-1,1′-聯苯基)]鈀(II)(116 mg, 161 umol)，在氮氣保護下加熱120℃攪拌3小時。待反應完後，加入到冰水(2 mL)中，之後用乙酸乙酯(5 mL)萃取，有機相用飽和食鹽水(1 mL)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮。得到 (3R)-3-(2-(8-((叔丁基二甲基矽烷)氧)-3-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-碳基)-6-(3-甲基-1H-吡咯[2,3-b]吡啶-5–基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(100 mg)，黃色的油狀物。ES-API: [M+H] += 716.5。
步驟六：將(3R)-3-(2-(8-((叔丁基二甲基矽烷)氧)-3-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-碳基)-6-(3-甲基-1H-吡咯[2,3-b]吡啶-5–基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(100 mg, 140 umol)溶於乙酸乙酯(1 mL)，加入鹽酸乙酸乙酯(4.0 mol/L,1.0 mL)，室溫攪拌2小時。待反應完後，過濾，用乙酸乙酯(1 mL)洗滌濾餅。濾餅用7M胺/甲醇(2 mL)溶液中和，旋乾並用製備HPLC(甲酸法)純化得到(8-羥基-3-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)(6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-8-((R)-嗎啉-3-基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)甲酮(Z551, 0.44 mg, 收率0.58%, 甲酸鹽)，白色固體。ES-API: [M+H] += 502.2。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD)δ = 8.51-8.36 (m, 2H), 8.21 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 7.71 (s, 1H), 7.54 (s, 1H), 7.20 (d, J= 0.8 Hz, 1H), 4.70-4.55 (m, 1H), 4.51-4.46 (m, 1H), 4.45-4.36 (m, 1H), 4.09-4.02 (m, 2H), 3.93 (s, 1H), 3.88-3.72 (m, 4H), 3.61-3.46 (m, 2H), 3.45-3.35 (m, 1H), 3.29-3.19 (m, 1H), 3.15-3.00 (m, 4H), 2.38 (d, J= 0.8 Hz, 3H), 2.15 (s, 2H), 1.94-1.84 (m, 2H), 1.60 (d, J= 10.8 Hz, 2H).
實施例311化合物Z545的合成
步驟一：將5-氯-3-碘-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(1.4 g, 5.03 mmol)，碳酸銫(3.28 g, 10 mmol)和對甲苯磺醯氯(1.44 g, 7.54 mmol)的N,N-二甲基甲醯胺(5 mL)溶液，室溫攪拌4小時。待反應完後，加入到水(20 mL)中，過濾得到5-氯-3-碘-1-甲苯磺醯基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(2.1 g, 收率96%)，白色的固體。ES-API: [M+H] += 432.9。
步驟二：氮氣保護下，將5-氯-3-碘-1-甲苯磺醯基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(500 mg, 1.16 mmol)，雙聯頻那醇硼酸酯(352 mg, 1.39 mmol)，[1,1-雙(二苯基膦)二茂鐵]二氯化鈀二氯甲烷絡合物(94.3 mg, 115 umol)，醋酸鉀(340 mg, 3.47 mmol)溶於二甲亞碸(5 mL)中，80 ℃攪拌2小時。待反應完後，加入到水(10 mL)中，過濾，得到粗品5-氯-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)-1-對甲苯磺醯基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(300 mg)，棕色固體。ES-API: [M+H] += 433.1。
步驟三：氮氣保護下，將5-氯-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)-1-對甲苯磺醯基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(300 mg, 693 umol)，4-溴-2,5-二甲基-吡啶(154 mg, 831 umol)，[1,1-雙(二苯基膦)二茂鐵]二氯化鈀二氯甲烷絡合物(56.6 mg, 69.3 umol)，碳酸銫(677 mg, 2.08 mmol)溶於 N, N-二甲基甲醯胺(1 mL)和水(0.1 mL)中，90 ℃攪拌3小時。待反應完後，加入到水(10 mL)中，乙酸乙酯 (10 mL x 3)萃取，有機相無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮，得到粗品經快速矽膠柱(0-100%乙酸乙酯/石油醚)純化得到5-氯-3-(2,5-二甲基吡啶-4-基)-1-甲苯磺醯基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(100 mg, 收率35%)，黃色固體。ES-API: [M+H] += 412.0。
步驟四：將5-氯-3-(2,5-二甲基吡啶-4-基)-1-甲苯磺醯基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(60 mg, 145 umol)和氫氧化鈉(5 mol/L, 145 uL)的四氫呋喃(1 mL)溶液60℃攪拌6小時。待反應完後，乙酸乙酯 (2 mL x 3)萃取，有機相無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮得到粗品5-氯-3-(2,5-二甲基吡啶-4-基)-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶(37 mg)，黃色固體。ES-API: [M+H] += 258.0。
步驟五：氮氣保護下，將5-氯-3-(2,5-二甲基吡啶-4-基)-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶(30 mg, 116 umol)，雙聯頻那醇硼酸酯(35.4 mg, 139 umol)，甲烷磺酸(2-二環己基膦基-2',4',6'-三異丙基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II)(19.7 mg, 23.2 umol)，醋酸鉀(22.8 mg, 232 umol)溶於1,4-二氧六環(1 mL)中，115℃攪拌1小時。反應完成後，濃縮得到3-(2,5-二甲基吡啶-4-基)-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(40 mg)，不經處理直接用於下一步反應。ES-API: [M+H] += 350.1。
步驟六：氮氣保護下，將(R)-3-(6-氯-2-(2-羥基-2-甲基丙醯基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(75.4 mg, 171 umol)，碳酸鉀(71.2 mg, 515 umol)，氯化(2-二環己基膦-2′,6′-二甲氧基-1,1′-聯苯基)[2-(2′-氨基-1,1′-聯苯基)]鈀(II)(12.3 mg, 17.1 umol)和水(0.2 mL)加入到上述3-(2,5-二甲基吡啶-4-基)-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(40 mg)反應液中，120℃攪拌2小時。反應完成後，加入到水(20 mL)中，乙酸乙酯 (2 mL x 3)萃取，有機相無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮，得到(R)-3-(6-(3-(2,5-二甲基吡啶-4-基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-2-(2-羥基)-2-甲基丙醯基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯 (30 mg, 收率42%)，棕色固體。ES-API: [M+H] += 626.3。
步驟七：將(R)-3-(6-(3-(2,5-二甲基吡啶-4-基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-2-(2-羥基)-2-甲基丙醯基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯 (30 mg, 47.9 umol)溶於鹽酸乙酸乙酯(4 mol/L, 1 mL)，室溫攪拌1小時。待反應完後，過濾。濾餅用7M胺/甲醇(3 mL)中和，濃縮後用製備HPLC(甲酸法)純化得到(R)-1-(6-(3-(2,5-二甲基吡啶-4-基)-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶-5-基)-8-(嗎啉-3-基)-3,4-二氫異喹啉-2(1 H)-基)-2-羥基-2-甲基丙-1-酮(Z545, 21.64 mg, 收率79%, 甲酸鹽)，白色固體。ES-API: [M+H] += 526.2。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD)δ 8.60 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 8.41-8.33 (m, 2H), 8.18 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 7.73-7.68 (m, 2H), 7.55 (s, 1H), 7.43 (s, 1H), 4.76-4.57 (m, 1H), 4.52-4.41 (m, 1H), 4.39-4.15 (m, 1H), 4.10-3.96 (m, 2H), 3.86-3.74 (m, 1H), 3.73-3.59 (m, 1H), 3.48-3.34 (m, 3H), 3.29-3.21 (m, 1H), 3.14-2.98 (m, 2H), 2.58 (s, 3H), 2.38 (s, 3H), 1.51 (s, 3H), 1.50 (s, 3H).
實施例312化合物Z546的合成
步驟一：氮氣保護下，將5-氯-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)-1-對甲苯磺醯基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(280 mg, 647 umol)，5-溴-1,4-二甲基-咪唑(135 mg, 776 umol)，[1,1-雙(二苯基膦)二茂鐵]二氯化鈀二氯甲烷絡合物(52.8 mg, 64.7 umol)，碳酸銫(632 mg, 1.94 mmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(1 mL)和水(0.1 mL)中，90 ℃攪拌3小時。待反應完後，加入到水(3 mL)中，乙酸乙酯(3 mL x 3)萃取，有機相無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮，粗品經快速矽膠柱(0-100%乙酸乙酯/石油醚)純化得到5-氯-3-(1,4-二甲基-1 H-咪唑-5-基)-1-甲苯磺醯基-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶 (100 mg, 收率39%)，黃色固體。ES-API: [M+H] += 401.1。
步驟二：5-氯-3-(1,4-二甲基-1 H-咪唑-5-基)-1-甲苯磺醯基-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶(100 mg, 0.25 mmol)和氫氧化鈉(498 mg, 2.49 mmol)的四氫呋喃(2 mL)溶液60℃攪拌6小時。待反應完後，乙酸乙酯 (2 mL x 3)萃取，有機相無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮得到5-氯-3-(1,4-二甲基-1H咪唑-5-基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(50 mg, 收率81%)，黃色固體。ES-API: [M+H] += 247.0。
步驟三：氮氣保護下,將5-氯-3-(1,4-二甲基-1H-咪唑-5-基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(50 mg, 0.2 mmol)，雙聯頻那醇硼酸酯(62 mg, 0.24 mmol)，甲烷磺酸(2-二環己基膦基-2',4',6'-三異丙基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II)(17 mg, 0.02 mmol)，醋酸鉀(40 mg, 0.41 mmol)溶於1,4-二氧六環(1 mL)中，115℃攪拌1小時。反應完成後，濃縮得到產物3-(1,4-二甲基-1H-咪唑-5-基)-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)-1H-吡咯并[2, 3-b]吡啶(69 mg)，不經處理直接用於下一步反應。ES-API: [M+H] += 339.1。
步驟四：氮氣保護下，將(R)-3-(6-氯-2-(2-羥基-2-甲基丙醯基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(89 mg, 0.2 mmol)，碳酸鉀(71 mg, 0.52 mmol)，氯化(2-二環己基膦-2′,6′-二甲氧基-1,1′-聯苯基)[2-(2′-氨基-1,1′-聯苯基)]鈀(II)(12 mg, 0.02 mmol)和水(0.2 mL)加入到上述3-(1,4-二甲基-1H-咪唑-5-基)-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)-1H-吡咯并[2, 3-b]吡啶(69 mg)反應液中，120℃攪拌2小時。反應完成後，加入到水(20 mL)中，乙酸乙酯 (2 mL x 3)萃取，有機相無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮得到(R)-3-(6-(3-(1,4-二甲基-1 H-咪唑-5-基)-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶-5-基)-2- (2-羥基-2-甲基丙醯基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(50 mg, 兩步收率40%)，棕色固體。ES-API: [M+H] += 615.3。
步驟五：將(R)-3-(6-(3-(1,4-二甲基-1 H-咪唑-5-基)-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶-5-基)-2- (2-羥基-2-甲基丙醯基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯 (50 mg, 0.08 mmol)溶於鹽酸乙酸乙酯(4 mol/L, 1 mL)，室溫攪拌0.5小時。待反應完後，過濾。濾餅用7M胺/甲醇(3 mL)中和，濃縮後用製備HPLC(甲酸法)純化得到(R)-1-[6-[3-(1,4-二甲基-1H-咪唑-5-基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基]-8-[嗎啉-3-基]-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]-2-羥基-2-甲基丙-1-酮(Z546, 24.6 mg, 收率54%, 甲酸鹽)，綠色固體。ES-API: [M+H] += 515.3。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD)δ 8.55 (d, J= 1.6 Hz, 1H), 8.45 (d, J= 1.6 Hz, 1H), 8.41 (s, 1H), 7.91 (s, 1H), 7.75 (s, 1H), 7.58 (s, 1H), 7.56 (s, 1H), 4.84-4.64 (m, 1H), 4.53-4.42 (m, 1H), 4.38-4.15 (m, 1H), 4.14-4.02 (m, 2H), 3.90-3.79 (m, 1H), 3.79-3.66 (m, 4H), 3.47-3.34 (m, 3H), 3.31-3.23 (m, 1H), 3.12-2.93 (m, 2H), 2.38 (s, 3H), 1.52 (s, 3H), 1.51 (s, 3H).
實施例313化合物Z555的合成
步驟一：將5-溴-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶(30g, 152 mmol)溶於1,1,1,3,3,3-六氟丙烷-2-醇(26 g, 152 mmol)，然後加入 N-氯代丁二醯亞胺(20 g, 344 mmol)，室溫攪拌2小時。待反應完後，過濾，用30%乙酸乙酯環己烷(50.0 mL)打漿，得到5-溴-3-氯-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶(25 g, 收率71%)，白色的固體。ES-API: [M+H] += 231, 233.0。
步驟二：氮氣保護下，將5-溴-3-氯-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶(10 g, 43.20 mmol)和雙聯頻那醇硼酸酯(22 g, 86.40 mmol)溶於1, 4-二氧六環(77 mL)中，然後加入無水醋酸鉀((13 g, 133 mmol)和1,1'-雙二苯基膦二茂鐵二氯化鈀(3.13 g, 4.32 mmol)，100 ℃攪拌12小時。待反應完後，過濾，濃縮並用快速矽膠柱(0-100%乙酸乙酯/石油醚)純化得到3-氯-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(8 g, 收率66%)，白色固體。ES-API: [M+H] += 279.1。 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6)δ = 12.12 (br s, 1H), 8.52 (s, 1H), 8.14 (s, 1H), 7.71 (s, 1H), 1.32 (s, 12H).
步驟三：將呱啶醇(200 mg, 1.98 mmol)溶於四氫呋喃(1mL)中，然後加入三乙胺(600 mg, 5.93 mmol)和叔丁基氯二苯矽烷(815 mg, 2.97 mmol)，室溫攪拌12小時。待反應完後，過濾，濃縮。得到4-((叔丁基二苯基甲矽烷基)氧基)呱啶(300 mg)，白色的固體。ES-API: [M+H] += 340.3。
步驟四：將(R)-3-(6-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(5a, 60 mg, 170 umol)溶於無水二氯甲烷，加入N,N-二異丙基乙胺(22 mg, 170 umol)，在0℃下加入三光氣 (106 mg, 357 umol)，室溫攪拌1小時，待反應完後，濃縮得到粗品(R)-3-(6-氯-2-(氯羰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(71 mg)，不經純化直接用於下一步反應。
步驟五：將(R)-3-(6-氯-2-(氯羰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯 (70 mg, 169 umol)和4-((叔丁基二苯基甲矽烷基)氧基)呱啶(69 mg, 202 umol)溶於無水二氯甲烷中，然後加入N,N-二異丙基乙胺(65 mg, 506 umol)，室溫攪拌2小時。待反應完後，加入到水(1 mL)中，之後用二氯甲烷(1 mLX3)萃取，有機相用飽和食鹽水(1 mL)洗滌，再用無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮得到(R)-3-(2-(4-((叔丁基二苯基甲矽烷基)氧基)呱啶-1-羰基)-6-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(70 mg)，棕色的油狀物。ES-API: [M+H] += 718.3。
步驟六：在氮氣保護下，將3-氯-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(28 mg, 100 umol)和(R)-3-(2-(4-((叔丁基二苯基甲矽烷基)氧基)呱啶-1-羰基)-6-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(60 mg, 84 umol)溶於二氧六環(1 mL)和水(0.2 mL)中，然後加入碳酸鉀(35 mg, 251 umol)和氯(2-二環己基膦-2′,6′-二甲氧基-1,1′-聯苯基)[2-(2′-氨基-1,1′-聯苯基)]鈀(II)(6 mg, 8.35 umol)，100 ℃攪拌2小時。待反應完後，加入到水(1 mL)中，之後用乙酸乙酯(1 mLX3)萃取，有機相用飽和食鹽水(1 mL)洗滌，再用無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮得到(R)-3-(2-(4-((叔丁基二苯基甲矽烷基)氧基)呱啶-1-羰基)-6-(3-氯-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(70 mg)，棕色的油狀物。ES-API: [M+H] += 834.4。
步驟七：將(R)-3-(2-(4-((叔丁基二苯基甲矽烷基)氧基)呱啶-1-羰基)-6-(3-氯-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(70 mg, 84 umol)溶於四氫呋喃(1 mL)中，然後加入三乙胺三氫氟酸鹽(541 mg, 3.36 mmol)，70 ℃攪拌12小時。待反應完後，加入到水(1 mL)中，之後用乙酸乙酯(1 mLX3)萃取，有機相用飽和食鹽水(1 mL)洗滌，再用無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮得到(R)-3-(6-(3-氯-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-2-(4-羥基呱啶-1-羰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(50 mg)，棕色的油狀物。ES-API: [M+H] += 596.3。
步驟八：將(R)-3-(6-(3-氯-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-2-(4-羥基呱啶-1-羰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(50 mg, 83.88 umol, 1 eq)溶於乙酸乙酯(1 mL)中，然後加入鹽酸乙酸乙酯(4 mol/L, 1 mL)，室溫攪拌4小時。待反應完後，過濾。用製備HPLC(碳酸氫銨法)純化得到(R)-(6-(3-氯-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-8-(嗎啉-3-基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)(4-羥基呱啶-1-基)甲酮(Z555, 15.12 mg)，白色固體。ES-API: [M+H] += 496.0。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD)δ = 8.56 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 8.21 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 7.76 (d, J= 1.6 Hz, 1H), 7.49-7.40 (m, 2H), 4.72-4.65 (m, 1H), 4.59-4.48 (m, 1H), 4.12 (dd, J= 2.8, 10.0 Hz, 1H), 3.92-3.77 (m, 3H), 3.76-3.62 (m, 3H), 3.59-3.45 (m, 3H), 3.17-2.99 (m, 6H), 1.97-1.84 (m, 2H), 1.62-1.48 (m, 2H).
實施例314化合物Z556的合成
步驟一：在氮氣保護下，將3-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(26 mg, 100 umol)和(R)-3-(2-(4-((叔丁基二苯基甲矽烷基)氧基)呱啶-1-羰基)-6-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(60 mg, 84 umol)溶於二氧六環(1 mL)和水(0.2 mL)中，然後加入碳酸鉀(35 mg, 251 umol)和氯(2-二環己基膦-2′,6′-二甲氧基-1,1′-聯苯基)[2-(2′-氨基-1,1′-聯苯基)]鈀(II)(6 mg, 8.35 umol)，100 ℃攪拌2小時。待反應完後，加入到水(1 mL)中，之後用乙酸乙酯(1 mLX3)萃取，有機相用飽和食鹽水(1 mL)洗滌，再用無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮得到(R)-3-(2-(4-((叔丁基二苯基甲矽烷基)氧基)呱啶-1-羰基)-6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(70 mg)，棕色的油狀物。ES-API: [M+H] += 814.4。
步驟二：將(R)-3-(2-(4-((叔丁基二苯基甲矽烷基)氧基)呱啶-1-羰基)-6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(70 mg, 86 umol)溶於四氫呋喃(1 mL)中，然後加入三乙胺三氫氟酸鹽(554 mg, 3.44 mmol)，70 ℃攪拌12小時。待反應完後，加入到水(1 mL)中，之後用乙酸乙酯(1 mLX3)萃取，有機相用飽和食鹽水(1 mL)洗滌，再用無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮得到(R)-3-(6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-2-(4-羥基呱啶-1-羰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(55 mg)，棕色的油狀物。ES-API: [M+H] += 576.4。
步驟三：將(R)-3-(6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-2-(4-羥基呱啶-1-羰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(55 mg, 96 umol)溶於乙酸乙酯(1 mL)中，然後加入鹽酸乙酸乙酯(4 mol/L, 1 mL)，室溫攪拌4小時。待反應完後，過濾。用製備HPLC(碳酸氫銨法)純化得到 (R)-(4-羥基呱啶-1-基)(6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-8-(嗎啉-3-基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)甲酮(Z556, 15.91 mg)，白色固體。ES-API: [M+H] += 476.1。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD)δ = 8.43 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 8.20 (d, J= 2.1 Hz, 1H), 7.74 (d, J= 1.6 Hz, 1H), 7.42 (d, J= 1.4 Hz, 1H), 7.18 (d, J= 0.9 Hz, 1H), 4.71-4.62 (m, 1H), 4.55-4.48 (m, 1H), 4.11 (dd, J= 2.8, 10.1 Hz, 1H), 3.93-3.76 (m, 3H), 3.74-3.60 (m, 3H), 3.57-3.44 (m, 3H), 3.18-2.97 (m, 6H), 2.37 (d, J= 0.9 Hz, 3H), 1.96-1.85 (m, 2H), 1.61-1.46 (m, 2H).
實施例315化合物Z558的合成
步驟一：將吡咯烷-3-醇(100 mg, 1.15 mmol)溶於四氫呋喃(1mL)中，然後加入三乙胺(348 mg, 3.44 mmol)和叔丁基氯二苯矽烷(473 mg, 1.72 mmol)，室溫攪拌12小時。待反應完後，過濾，濃縮，得到3-((叔丁基二苯基甲矽烷基)氧基)吡咯烷(120 mg)，白色的固體。ES-API: [M+H] += 326.1。
步驟二：將(R)-3-(6-氯-2-(氯羰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯 (70 mg, 169 umol)和3-((叔丁基二苯基甲矽烷基)氧基)吡咯烷(69 mg, 202 umol)溶於無水二氯甲烷中，然後加入N,N-二異丙基乙胺(65 mg, 506 umol)，室溫攪拌2小時。待反應完後，加入到水(1 mL)中，之後用二氯甲烷(1 mLX3)萃取，有機相用飽和食鹽水(1 mL)洗滌，再用無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮，得到(3R)-3-(2-(3-((叔丁基二苯基甲矽烷基)氧基)吡咯烷-1-羰基)-6-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(70 mg)，棕色的油狀物。ES-API: [M+H] += 704.4。
步驟三：將3-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(26 mg, 102 umol)和(3R)-3-(2-(3-((叔丁基二苯基甲矽烷基)氧基)吡咯烷-1-羰基)-6-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(60 mg, 85 umol)溶於二氧六環(1 mL)和水(0.2 mL)中，然後加入碳酸鉀(35 mg, 256 umol)，再在氮氣條件下加入氯(2-二環己基膦-2′,6′-二甲氧基-1,1′-聯苯基)[2-(2′-氨基-1,1′-聯苯基)]鈀(II)(6 mg, 8.52 umol)，120 ℃攪拌2小時。待反應完後，加入到水(1 mL)中，之後用乙酸乙酯(1 mLX3)萃取，有機相用飽和食鹽水(1 mL)洗滌，再用無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮，得到(3R)-3-(2-(3-((叔丁基二苯基甲矽烷基)氧基)吡咯烷-1-羰基)-6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(70 mg)，棕色的油狀物。ES-API: [M+H] += 800.4。
步驟四：將(3R)-3-(2-(3-((叔丁基二苯基甲矽烷基)氧基)吡咯烷-1-羰基)-6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(70 mg, 87 umol)溶於四氫呋喃(1 mL)中，然後加入三乙胺三氫氟酸鹽(282 mg, 1.75 mmol)，70 ℃攪拌12小時。待反應完後，加入到水(1 mL)中，之後用乙酸乙酯(1 mLX3)萃取，有機相用飽和食鹽水(1 mL)洗滌，再用無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮，得到 (3R)-3-(2-(3-羥基吡咯烷-1-羰基)-6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(50 mg)，棕色的油狀物。ES-API: [M+H] += 562.4。
步驟五：將(3R)-3-(2-(3-羥基吡咯烷-1-羰基)-6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(50 mg, 89 umol)溶於乙酸乙酯(1 mL)中，然後加入鹽酸乙酸乙酯(4 mol/L, 1 mL)，室溫攪拌4小時。待反應完後，過濾。用製備HPLC(碳酸氫銨法)純化得到(3-羥基吡咯烷-1-基)(6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-8-((R)-嗎啉-3-基)-3, 4-二氫異喹啉-2(1H)-基)甲酮(Z558, 24.61 mg)，白色固體。ES-API: [M+H] += 462.1。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD)δ = 8.44 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 8.21 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 7.75 (s, 1H), 7.44 (s, 1H), 7.18 (s, 1H), 4.78-4.70 (m, 1H), 4.64-4.49 (m, 2H), 4.46-4.41 (m, 1H), 4.21-4.12 (m, 1H), 3.95-3.83 (m, 2H), 3.77-3.64 (m, 4H), 3.56-3.41 (m, 3H), 3.22-2.91 (m, 4H), 2.37 (s, 3H), 2.07-1.87 (m, 2H).
實施例316化合物Z549的合成
步驟一：將8-氧雜-3-氮雜雙環[3.2.1]辛烷鹽酸鹽 (0.05 g, 442 umol)溶於無水二氯甲烷(0.5 mL)，加入N,N-二異丙基乙胺(171 mg, 1.33 mmol, 231 uL)，在0 ℃下加入三光氣 (144 mg, 486 umol)，常溫反應1小時。待反應完後，反應液濃縮得到粗品8-氧雜-3-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-醯氯(59 mg)，不經純化直接用於下一步反應。
步驟二：將 (R)-3-(6-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯 (5a, 50.0 mg, 142 umol)溶於無水二氯甲烷(2 mL)，加入N,N-二異丙基乙胺(54.9 mg, 425 umol, 74.0 uL)和8-氧雜-3-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-醯氯(24.9 mg, 142 umol)，常溫反1小時。待反應完後，加入到水(0.5 mL)中，之後用二氯甲烷(2 mL)萃取，有機相用飽和食鹽水 (0.4 mL)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮。得到(3R)-3-[2-(8-氧雜-3-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-羰基)-6-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯 (69.0 mg)，黃色油狀物 。ES-API: [M+H] +=492.4。
步驟三：將(3R)-3-[2-(8-氧雜-3-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-羰基)-6-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯 (69 mg, 140 umol)溶於無水二氧六環(1 mL)，加入雙聯頻那醇硼酸酯 (107 mg, 421 umol)，之後加入乙酸鉀(41.3 mg, 421 umol)，最後在氮氣環境下加入氯(2-二環己基膦-2′,6′-二甲氧基-1,1′-聯苯基)[2-(2′-氨基-1,1′-聯苯基)]鈀(II)(10.1 mg, 14.0 umol)，在氮氣保護下加熱110℃攪拌2小時。待反應完後，濃縮得到(3R)-3-(2-(8-氧雜-3-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-羰基)-6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(81 mg)，不經處理直接用於下一步反應。ES-API: [M+H] += 584.4。
步驟四：在上一步得到的(3R)-3-(2-(8-氧雜-3-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-羰基)-6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(81 mg)反應液中加入水(0.2 mL)，再加入碳酸鉀(59.0 mg, 427 umol)，2-溴-7-氯-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪(66.1 mg, 284 umol)，在氮氣環境下加入1,1-雙(二苯基磷)二茂鐵氯化鈀(20.8 mg, 28.4 umol)後加熱至100 ℃攪拌1小時。待反應完成後，降溫冷卻，加入到水(1 mL)中，用乙酸乙酯(5 mL)萃取，有機相擁飽和食鹽水(0.5 mL)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮，得到(3R)-3-(2-(8-氧雜-3-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-羰基)-6-(7-氯-5H-吡咯[2,3-b]吡嗪-2–基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(84.7 mg)，棕褐色油狀物。ES-API: [M+H] += 609.3。
步驟五：將(3R)-3-(2-(8-氧雜-3-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-羰基)-6-(7-氯-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-2–基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(84.7 mg, 139 umol)溶於乙酸乙酯(1 mL)，加入鹽酸乙酸乙酯(4.0 mol/L, 1.0 mL)，室溫攪拌2小時。待反應完後，過濾，用乙酸乙酯(1 mL)洗滌濾餅，濾餅旋乾。用製備HPLC(碳酸氫銨法)純化得到(8-氧雜-3-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)(6-(7-氯-5H-吡咯[2,3-b]吡嗪-2–基)-8-((R)-嗎啉-3-基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)甲酮(Z549, 4.39 mg)，白色固體。ES-API: [M+H] += 509.0。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD)δ = 8.82 (s, 1H), 8.13 (d, J= 1.4 Hz, 1H), 7.86 (s, 1H), 7.81 (s, 1H), 4.72-4.66 (m, 1H), 4.63-4.56 (m, 1H), 4.56-4.49 (m, 1H), 4.34 (br s, 2H), 4.14 (dd, J= 2.7, 9.6 Hz, 1H), 3.93-3.86 (m, 2H), 3.76-3.68 (m, 1H), 3.62-3.47 (m, 6H), 3.15-3.10 (m, 1H), 3.08-3.00 (m, 3H), 1.98-1.90 (m, 4H).
實施例317化合物Z550的合成
步驟一：將2-氧-5-氮雜雙環[2.2.2]辛烷半草酸鹽 (50.0 mg, 442 umol)溶於無水二氯甲烷(0.5 mL)，加入N,N-二異丙基乙胺(171 mg, 1.33 mmol, 231 uL)，在0 ℃下加入三光氣 (0.370 g, 1.25 mmol)，常溫反應1小時 。待反應完後，濃縮得到2-氧-5-氮雜雙環[2.2.2]辛烷-3-醯氯(55 mg)，不經純化直接用於下一步反應。
步驟二：將 (R)-3-(6-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯 (5a, 0.05 g, 142 umol)溶於無水二氯甲烷(2 mL)，加入N,N-二異丙基乙胺(54.9 mg, 425 umol, 74.0 uL)和2-氧-5-氮雜雙環[2.2.2]辛烷-3-醯氯(27.4 mg, 156 umol)，常溫反應1小時。待反應完後，加入到水(0.5 mL)中，之後用二氯甲烷(2 mL)萃取，有機相用飽和食鹽水 (0.4 mL)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮。得到(3R)-3-[-2-(2-氧-5-氮雜雙環[2.2.2]辛烷-5-羰基)-6-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯 (69.0 mg)，黃色油狀物 。ES-API: [M+H] +=492.3。
步驟三：將(3R)-3-[-2-(2-氧-5-氮雜雙環[2.2.2]辛烷-5-羰基)-6-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯 (69.0 mg, 140 umol)溶於無水二氧六環(1 mL)，加入雙聯頻那醇硼酸酯 (107 mg, 422 umol)，之後加入乙酸鉀(41.3 mg, 421 umol)，最後在氮氣環境下加入氯(2-二環己基膦-2′,6′-二甲氧基-1,1′-聯苯基)[2-(2′-氨基-1,1′-聯苯基)]鈀(II)(10.1 mg, 14.1 umol)，在氮氣保護下加熱110℃攪拌2小時。待反應完後，濃縮得到的(3R)-3-[-2-(2-氧-5-氮雜雙環[2.2.2]辛烷-5-羰基)-6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼烷-2-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(82 mg)，不經處理直接用於下一步反應。ES-API: [M+H] += 584.3。
步驟四：在上一步得到的(3R)-3-[-2-(2-氧-5-氮雜雙環[2.2.2]辛烷-5-羰基)-6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼烷-2-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(82 mg，140 umol)反應液中加入水(0.2 mL)，再加入碳酸鉀(59.0 mg, 427 umol)，2-溴-7-氯-5H-吡咯[2,3-b]吡嗪(66.1 mg, 284 umol)，在氮氣環境下加入1,1-雙(二苯基磷)二茂鐵氯化鈀(20.8 mg, 28.4 umol)後加熱至100 ℃攪拌1小時。待反應完成後，降溫冷卻，加入到水(1 mL)中，用乙酸乙酯(5 mL)萃取，有機相擁飽和食鹽水(0.5 mL)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮，得到(3R)-3-(2-(2-氧-5-氮雜雙環[2.2.2]辛烷-5-羰基)-6-(7-氯-5H-吡咯[2,3-b]吡嗪-2–基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(86.0 mg)，棕褐色油狀物。ES-API: [M+H] += 609.1。
步驟五：將(3R)-3-(2-(2-氧-5-氮雜雙環[2.2.2]辛烷-5-羰基)-6-(7-氯-5H-吡咯[2,3-b]吡嗪-2–基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(86.0 mg, 141 umol)溶於乙酸乙酯(1 mL)，加入鹽酸乙酸乙酯(4.0 mol/L, 1.0 mL)，室溫攪拌2小時。待反應完後，過濾，用乙酸乙酯(1 mL)洗滌濾餅，濾餅旋乾。用製備HPLC(碳酸氫銨法)純化得到 (2-氧-5-氮雜雙環[2.2.2]辛烷-5-基)(6-(7-氯-5H-吡咯[2,3-b]吡嗪-2–基)-8-((R)-嗎啉-3-基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)甲酮(Z550, 5.30 mg)，白色固體。ES-API: [M+H] += 509.0。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD)δ 8.83 (s, 1H), 8.13 (s, 1H), 7.88 (s, 1H), 7.81 (s, 1H), 4.79-4.70 (m, 1H), 4.60-4.52 (m, 1H), 4.24-4.14 (m, 2H), 4.02-3.87 (m, 5H), 3.87-3.81 (m, 1H), 3.77-3.47 (m, 5H), 3.21-3.02 (m, 4H), 2.29-2.07 (m, 2H), 1.98-1.74 (m, 2H).
實施例318化合物Z576的合成
步驟一：將5-溴-N,N,N-三乙基-2-羥基-1-甲苯磺醯基-2,3-二氫-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-溴化胺(2000 mg, 3.641 mmol)溶於甲醇(20 mL)中。向上述溶液中加入甲醇鈉的甲醇溶液(5M, 2.185 mL, 10.923 mmol)，加入完畢後後反應在60℃條件下攪拌17小時。反應完畢後，反應液濃縮，向殘留物中加入水(30 mL)並用乙酸乙酯(30 mLX3)萃取。有機相合併後用飽和食鹽水(30 mLX2)洗滌後，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮，得到粗品用快速矽膠柱(乙酸乙酯/石油醚：0-30%)純化得到5-溴-3-甲氧基-1-甲苯磺醯基-2,3-二氫-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-2-醇(1100 mg, 2.755 mmol, 收率75.67%)，綠色固體。ES-API: [M +H] +=399.1, 401.1。
步驟二：封管反應器中加入5-溴-3-甲氧基-1-甲苯磺醯基-2,3-二氫-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-2-醇(800 mg, 2.004 mmol)和氯化氫的甲醇溶液(4 M, 10 mL)。封閉後，反應在80℃條件下攪拌17小時。反應液濃縮後用氨的甲醇溶液(7 M)中和，所得溶液濃縮，得到粗品用快速矽膠柱(乙酸乙酯/石油醚：0-10%)純化得到5-溴-3-甲氧基-1-甲苯磺醯基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(200 mg, 0.525 mmol, 收率26.18%)，白色固體。ES-API: [M +H] +=381.1, 383.1。
步驟三：封管反應器中加入5-溴-3-甲氧基-1-甲苯磺醯基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(200 mg, 0.525 mmol)，氫氧化鈉(104.92 mg, 2.623 mmol)，乙醇(2 mL)和水(2 mL)。反應封閉後在70℃條件下攪拌17小時。反應液用稀鹽酸(1 M)調節至弱酸性後用乙酸乙酯(10 mLX3)萃取。有機相合併後用飽和食鹽水(10 mLX2)洗滌後，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮得到粗品。粗品用快速矽膠柱(四氫呋喃/石油醚：0-35%)純化得到5-溴-3-甲氧基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(100 mg, 0.440 mmol, 收率83.95%)，白色固體。ES-API: [M +H] +=227.1, 229.1。
步驟四：將叔丁基 (R)-3-(2-(2-羥基-2-甲基丙醯基)-6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)-1, 2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸酯(120 mg, 0.226 mmol)溶於二氧六環(5 mL)和水(1 mL)中。室溫條件下，向上述溶液中加入5-溴-3-甲氧基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(51.36 mg, 0.226 mmol)，氯(2 -二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II)(16.28 mg, 0.023 mmol)以及碳酸鉀(93.79 mg, 0.679 mmol)。加入完畢後，反應在氮氣氛圍，110℃條件下攪拌5個小時。反應完畢後，向上述溶液中加入水(10 mL)，並用乙酸乙酯(10 mLX3)萃取。有機相用飽和食鹽水(30 mL)洗滌後，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮，得到粗品用快速矽膠柱(甲醇/二氯甲烷：0%-2%)純化得到叔丁基 (R)-3-(2-(2-羥基-2-甲基丙醯基)-6-(3-甲氧基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-1,2, 3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸酯(50 mg, 0.091 mmol, 收率40.14%)，黃色固體。ES-API: [M +H] +=551.0。
步驟五：將叔丁基 (R)-3-(2-(2-羥基-2-甲基丙醯基)-6-(3-甲氧基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-1,2, 3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸酯(50 mg, 0.091 mmol)溶於無水二氯甲烷(1 mL)中。向上述溶液中加入三氟乙酸(0.5 mL)，反應在室溫條件下攪拌反應2小時。反應完畢後，將反應液濃縮並用氨/甲醇溶液(7 M)調節至中性。再次濃縮後，用快速矽膠柱(甲醇/二氯甲烷：0%-7%)純化得到(R)-2-羥基-1-(6-(3-甲氧基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-8-(嗎啉-3-基)-3,4-二氫異喹啉 -2(1H)-基)-2-甲基丙-1-酮(Z576, 30 mg, 0.067 mmol, 收率73.33%)，淺黃色固體。ES-API: [M+H] +=451.1。
實施例319化合物Z527的合成
步驟一：將叔丁基 (R)-3-(2-(嗎啉-4-羰基)-6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)-1,2, 3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸酯(137 mg, 0.246 mmol)溶於二氧六環(8 mL)和水(1 mL)中。室溫條件下，向上述溶液中加入7-氯-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪(171.38 mg, 0.737 mmol)，氯(2 -二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II)(17.68 mg, 0.025 mmol)以及碳酸鉀(101.88 mg, 0.737 mmol)。加入完畢後，反應在氮氣氛圍，110攝氏度條件下攪拌5個小時。反應完畢後，向上述溶液中加入水(20 mL)，並用乙酸乙酯(20 mLX3)萃取。有機相用飽和食鹽水(50 mL)洗滌後，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮，得到粗品用快速矽膠柱(甲醇/二氯甲烷：0%-2%)純化得到叔丁基(R)-3-(6-(7-氯-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-2-基)-2-(嗎啉-4-羰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸酯(70 mg, 0.120 mmol, 收率48.85%)，黃色固體。ES-API: [M +H] +=583.0。
步驟二：將叔丁基(R)-3-(6-(7-氯-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-2-基)-2-(嗎啉-4-羰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸酯(70 mg, 0.120 mmol)溶於無水二氯甲烷(1 mL)中。向上述溶液中加入三氟乙酸(0.5 mL)，反應在室溫條件下攪拌反應2小時。反應完畢後，將反應液濃縮並用氨/甲醇溶液(7 M)調節至中性。再次濃縮後，用快速矽膠柱(甲醇/二氯甲烷：0%-7%)純化得到(R)-(6-(7-氯-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-2-基)-8-(嗎啉-3-基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)- 基)(嗎啉代)甲酮(Z527, 30 mg, 0.062 mmol, 收率51.74%)，淺黃色固體。ES-API: [M+H] +=483.1。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 9.97 (s, 1H), 8.64 (s, 1H), 8.05 (s, 1H), 7.73 (s, 1H), 7.52 (s, 1H), 4.70 – 4.62 (m, 1H), 4.45 – 4.37 (m, 1H), 4.14 – 4.06 (m, 1H), 3.89 – 3.77 (m, 2H), 3.70 – 3.62 (m, 5H), 3.52 – 3.42 (m, 3H), 3.32 – 3.25 (m, 4H), 3.18 – 3.08 (m, 1H), 3.04 – 2.91 (m, 3H).
實施例320化合物Z532的合成
步驟一：向50 mL圓底燒瓶中加入2-甲基嘧啶-5-羧酸 (117 mg, 0.85 mmol)，N,N-二異丙乙胺(274 mg, 2.1mmol)，2-(7-偶氮苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯(485 mg, 1.27 mmol)和二甲基甲醯胺(10 mL)。室溫條件下緩慢加入對(R)-3-(6-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(500 mg, 0.14 mmol)，室溫攪拌1小時。反應液加入乙酸乙酯(20 mL)，用飽和食鹽水(20 mLX3)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮，粗品用快速矽膠柱純化(甲醇：二氯甲烷=10:100)得到目標產物(R)-3-(6-氯-2-(2-甲基嘧啶-5-羰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(200mg, 收率: 99.5%)。ES-API: [M+H] +=473.2。
步驟二：向5 mL微波反應器中加入(R)-3-(6-氯-2-(6-氯-2-(2-甲基嘧啶-5-羰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(200 mg, 0.42 mmol)，聯硼酸頻那醇酯(129 mg, 0. 5 mmol)，氯(2-二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II)(29.8 mg, 0.04 mmol)，醋酸鉀(124 mg, 1.27mmol)和二氧六環(10 mL)。100℃條件下攪拌2小時。反應液冷卻至室溫直接用於下一步反應。ES-API: [M+H] +=565.3。
步驟三：向5 mL微波反應器中加入上一步反應得到的叔丁基 (R)-3-(2-(2-甲基嘧啶-5-羰基)-6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸酯反應液，5-溴-3-氯-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(123mg, 0.53mmol)，碳酸鉀(74mg, 0.53mmol)，1,1'-雙(二-苯基膦基)二茂鐵氯化鈀 (26 mg, 0.035 mmol)，二氧六環(2 mL)和水(0.3 mL)。體系用氮氣置換三次，然後用氮氣球保護。100℃條件下反應3小時，反應液加入乙酸乙酯(10 mL)，用飽和食鹽水(5 mLX3)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮，粗品用快速矽膠柱純化(甲醇：二氯甲烷=10:100)得到目標產物 (R)-3-(6-(3-氯-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-2- (2-甲基嘧啶-5-羰基)-1, 2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(60mg, 兩步收率：66%)。ES-API: [M+H] +=589.2。
步驟四：向5 mL單口圓底燒瓶中加入(R)-3-(6-(3-氯-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-2- (2-甲基嘧啶-5-羰基)-1, 2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(60mg 0.13mmol)，三氟乙酸(3mL)和二氯甲烷(6mL)，室溫攪拌反應30分鐘，旋乾，粗品用製備HPLC(碳酸氫銨法)純化得到(R)-(6-(3-氯-1H-吡咯[2,3-b]吡啶-5-基)-8-(嗎啉-3-基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)(2-甲基嘧啶-5-基)甲酮(Z532, 25mg, 收率:50%)。ES-API: [M+H] +=489.2。
實施例321化合物Z531的合成
步驟一：向50 mL圓底燒瓶中加入2,6-二甲基嘧啶-4-羧酸 (215 mg, 1.4 mmol)，N,N-二異丙基乙胺 (915 mg, 7.0mmol)，2-(7-偶氮苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯(1616 mg, 4.2 mmol)和二甲基甲醯胺(10 mL)。室溫條件下緩慢加入對(R)-3-(6-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(500 mg, 0.14 mmol)，室溫攪拌1小時。反應液加入乙酸乙酯(20 mL)，用飽和食鹽水(20 mLX3)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮，粗品用快速矽膠柱純化(甲醇：二氯甲烷=10:100)得到目標產物(R)-3-(6-氯-2-(2,6-二甲基嘧啶-4-羰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(550mg, 收率: 79.7%)。ES-API: [M+H] +=487.1。
步驟二：向5 mL微波反應器中加入(R)-3-(6-氯-2-(2,6-二甲基嘧啶-4-羰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(100 mg, 0.2 mmol)，聯硼酸頻那醇酯(62 mg, 0.25 mmol)，氯(2-二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II)2(14.8 mg, 0.02 mmol)，醋酸鉀(60 mg, 0.61mmol)和二氧六環(2 mL)。100℃條件下攪拌3小時。反應液冷卻至室溫直接用於下一步反應。ES-API: [M+H] +=579.3。
步驟三：向5 mL微波反應器中加入上一步反應得到的(R)-3-(2-(2,6-二甲基嘧啶-4-羰基)-6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯反應液，5-溴-3-氯-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(141mg, 0.61mmol)，碳酸鉀(84mg, 0.61mmol)，1,1'-雙(二-苯基膦基)二茂鐵氯化鈀 (29 mg, 0.04 mmol)，二氧六環(2 mL)和水(0.3 mL)。體系用氮氣置換三次，然後用氮氣球保護。100℃條件下反應3小時，反應液加入乙酸乙酯(10 mL)，用飽和食鹽水(5 mLX3)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮，粗品用快速矽膠柱純化(甲醇：二氯甲烷=10:100)得到目標產物 (R)-3-(6-(3-氯-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-2-(2,6-二甲基嘧啶-4-羰基)-1, 2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(80mg, 兩步收率：66%)。ES-API: [M+H] +=603.2。
步驟四：向5 mL單口圓底燒瓶中加入(R)-3-(6-(3-氯-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-2-(2,6-二甲基嘧啶-4-羰基)-1, 2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(80mg 0.13mmol)，三氟乙酸(3mL)和二氯甲烷(6mL)，室溫攪拌反應30分鐘，旋乾粗品用製備HPLC(碳酸氫銨法)純化得到：(R)-(6-(3-氯-1H-吡咯[2,3-b]吡啶-5-基)-8-(嗎啉-3-基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)(2,6-二甲基嘧啶-4-基)甲酮(Z531, 25mg, 收率:37%)。ES-API: [M+H] +=503.2。
實施例322化合物Z538的合成
步驟一：將( R)-3-(6-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(5a, 100 mg, 0.28 mmol)溶於乙醇(1 mL)，加入1,6-二噁螺[2.5]辛烷(68 mg, 0.56 mmol)，和三乙胺 (86.03 mg, 0.85 mmol)，加熱至75℃反應16小時。反應完成後，反應液旋乾，得到粗品經色譜柱純化(石油醚/乙酸乙酯=1/1)得到產物( R)-3-(6-氯-2-((4-羥基四氫-2 H-吡喃-4-基)甲基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4 -羧酸叔丁酯(104 mg, 收率78.58%)。ES-API:[M+H] += 467.1。
步驟二：將( R)- 3-(6-氯-2-((4-羥基四氫-2 H-吡喃-4-基)甲基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4 -羧酸叔丁酯(40 mg, 0.09 mmol)溶於二氧六環/水(2 mL/0.4 mL)中，加入3-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶(26.53 mg, 0.10 mmol)，氯(2-二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II)(6.16 mg, 0.009 mmol)和碳酸鉀(35.46 mg, 0.26 mmol)。加熱至100℃反應2小時。反應完成後，反應液旋乾，得到粗品經色譜柱純化(二氯甲烷/甲醇=20/1)得到產物( R)-3-(2-((4-羥基四氫-2 H-吡喃-4-基)甲基)-6-(3-甲基-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶-5- 基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(40 mg, 收率：82.99%)。ES-API:[M+1] +=563.3。
步驟三：將( R)-3-(2-((4-羥基四氫-2 H-吡喃-4-基)甲基)-6-(3-甲基-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶-5- 基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(40 mg, 0.07 mmol)溶於二氯甲烷(2 mL)中，加入三氟乙酸(1 mL)。室溫反應1小時。反應完成後，反應液旋乾，用二氯甲烷和飽和碳酸鈉水溶液萃取，無水硫酸鈉乾燥，過濾旋乾，得到粗品經色譜柱純化(二氯甲烷/甲醇=8/1)得到產物( R)-4-((6-(3-甲基-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶-5-基)-8-(嗎啉-3-基)-3,4-二氫異喹啉-2( 1 H)-基)甲基)四氫-2 H-吡喃-4-醇(Z538, 4.2 mg, 收率12.77%)。ES-API:[M+1] +=463.2。
實施例323化合物Z543的合成
步驟一：向 ( R)-3-(6-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(5a, 50 mg, 0.14 mmol)的二氯甲烷(2 mL)溶液中加入四氫吡喃-4-甲醯氯(31.58 mg, 0.21 mmol)，三乙胺(43.02 mg, 0.43 mmol)，混合液在0°C下攪拌半小時，LCMS監測反應完全，加水淬滅反應，二氯甲烷萃取，無水硫酸乾燥，過濾濃縮，得到粗品經矽膠柱層析純化(流動相0-60%乙酸乙酯/石油醚，石油醚/乙酸乙酯=1/1，Rf=0.4)得到產物( R)-3-(6-氯-2-(四氫-2 H-吡喃-4-羰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(50 mg, 收率75.89%)。ES-API:[M+H] += 465.1。
步驟二：向化合物( R)-3-(6-氯-2-(四氫-2H-吡喃-4-羰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(50 mg, 0.11 mmol )的二氧六環/水(2 mL/0.4mL)的溶液中 加入3-氯-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶(35.94 mg, 0.13 mmol)，氯(2-二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II)(7.74 mg, 0.01 mmmol)，碳酸鉀(44.52 mg, 0.32 mmol)，在氮氣保護下將混合物加熱到100 ℃攪拌2小時，藉由LCMS監測反應完全，用乙酸乙酯/水處理，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮，得到粗品經矽膠柱層析純化(流動相0-10%甲醇/二氯甲烷，二氯甲烷/甲醇=10/1，Rf=0.6)得到產物( R)- 3-(6-(3-氯-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶-5-基)-2-(四氫-2 H-吡喃-4-羰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(30 mg, 收率48.01%)。ES-API:[M+H] += 581.2。
步驟三：向化合物( R)-3-(6-(3-氯-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶-5-基)-2-(四氫-2 H-吡喃-4-羰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(30 mg, 0.05 mmol)的二氯甲烷(2 mL)溶液中加入三氟乙酸(1 mL)，常溫攪拌1小時。藉由LCMS監測反應完全，用飽和碳酸氫鈉中和調節pH至7，用二氯甲烷/水處理，無水硫酸鈉乾燥並過濾濃縮，經製備HPLC(氨水法-A)純化得到( R)- [6-(3-氯-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶-5-基)-8-(嗎啉-3-基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基](四氫-2H-吡喃-4-基)甲酮(Z543, 4.2 mg, 16.91%)，白色粉末。ES-API:[M+H] +=481.1。
實施例324化合物Z523的合成
步驟一：取2-氨基-3-碘-5-溴吡啶(300 mg, 1.004 mmol)，環丙基(三甲基矽基)乙炔(249.81 mg, 1.807 mmol)，雙三苯基磷二氯化鈀 (72.26 mg, 0.100 mmol)，碳酸鈉 (265.94 mg, 2.509 mmol)，氯化鋰 (42.54 mg, 1.004 mmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺 (5 mL)，氮氣保護下85℃反應16小時，反應結束後，加水(10 mL)稀釋，乙酸乙酯(10 mLX3)萃取，有機相飽和食鹽水(10 mL)洗，無水硫酸鈉乾燥，過濾減壓濃縮至乾，藉由矽膠柱層析(石油醚/乙酸乙酯=50/50)純化得到5-溴-3-環丙基-2-(三甲基矽基)-1H-吡咯[2,3-b]吡啶(100 mg, 0.323 mmol, 收率32.22%)。ES-API: [M+H] +=309.0。
步驟二：取5-溴-3-環丙基-2-(三甲基矽基)-1H-吡咯[2,3-b]吡啶(100 mg, 0.323 mmol)溶於四氫呋喃(2 mL)，加入四丁基氟化銨 (0.647 mL, 0.647 mmol)，70℃反應1小時，減壓濃縮，得到粗品藉由矽膠柱層析(石油醚/乙酸乙酯=50/50)純化得到5-溴-3-環丙基-1H-吡咯[2,3-b]吡啶(60 mg, 0.253 mmol, 收率78.27%)。ES-API: [M+H] +=237.1。
步驟三：取(R)-3-(6-氯-2-(2-羥基-2-甲基丙醯基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(44 mg, 0.1 mmol)，聯硼酸頻那醇酯(0.055g, 0.22 mmol)，醋酸鉀 (21 mg g, 0.22 mmol)，氯(2-二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II)(8 mg, 0.012 mmol)溶於1,4-二氧六環(5 mL)，110℃攪拌2小時，加入5-溴-3-環丙基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(60 mg, 0.253 mmol)，氯(2-二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II)(8 mg, 0.012 mmol)，碳酸鉀(41 m, 0.3mmol )，110℃攪拌2小時，減壓濃縮至乾，得到粗品藉由矽膠柱層析(二氯甲烷/甲醇=97/3)純化得到(R)-3-(6-(3-環丙基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-2-(2-羥基-2-甲基丙醯基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(25 mg, 0.045 mmol, 收率45%)。ES-API: [M+H] +=561.2。
步驟四：取(R)-3-(6-(3-環丙基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-2-(2-羥基-2-甲基丙醯基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(25 mg, 0.045 mmol)溶於無水二氯甲烷(0.5 mL)，加入三氟乙酸(0.2 mL)，室溫反應2小時，LC-MS監測反應完全，反應液減壓濃縮至乾，加入氨/甲醇溶液(1 mL)中和後，再次濃縮，經矽膠柱層析(二氯甲烷/甲醇=10/1)純化得到(R)-1-(6-(3-環丙基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-8-(嗎啉-3-基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)-2-羥基-2-甲基丙-1酮 (Z523, 12 mg, 0.026 mmol, 收率58.42%)。ES-API: [M+H] +=461.2。 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 11.36 (s, 1H), 8.45 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 8.15 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 7.78 (s, 1H), 7.43 (s, 1H), 7.19 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 5.52 – 5.32 (m, 2H), 4.84 – 4.67 (m, 1H), 4.15 (s, 1H), 4.02 – 3.93 (m, 1H), 3.78 (d, J= 10.4 Hz, 2H), 3.56 – 3.50 (m, 1H), 3.25 – 3.22 (m, 2H), 2.92 – 2.81 (m, 5H), 2.05 – 1.97 (m, 1H), 1.37 (s, 6H), 0.94 – 0.78 (m, 2H), 0.67 – 0.64 (m, 2H).
實施例325化合物Z577的合成
步驟一：向5mL微波反應器中加入4-硝基苯基 4-羥基-2,2-二甲基吡咯烷-1-羧酸鹽 (111 mg, 0.397 mmol)，(R)-3-(6-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(5a, 70 mg, 0.198 mmol)，碳酸鉀(82 mg, 0.595mmol)和二甲基乙醯胺(1 mL)。130℃條件下攪拌過夜。反應液加入乙酸乙酯(10 mL)，用飽和食鹽水(10 mLX3)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮，粗品用快速矽膠柱純化(甲醇：二氯甲烷=10:100)得到目標產物(3R)-3-(6-氯-2-(4-羥基-2,2-二甲基吡咯烷-1-羰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(80mg, 收率: 81%)。ES-API: [M+H] +=494.2。
步驟二：向5 mL微波反應器中加入(3R)-3-(6-氯-2-(4-羥基-2,2-二甲基吡咯烷-1-羰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯 (80 mg, 0.16 mmol)，3-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧苯甲醛-2-基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(84 mg, 0.32 mmol)，碳酸鉀(67 mg, 0.48 mmol)，氯(2-二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II)(11.6 mg, 0.01 mmol)，二氧六環(2 mL)和水(0.3 mL)。體系用氮氣置換三次，然後用氮氣球保護。120度條件下反應2小時，反應液加入乙酸乙酯(10 mL)，用飽和食鹽水(5 mLX3)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮，粗品用快速矽膠柱純化(甲醇：二氯甲烷=10:100)得到目標產物(3R)-3-(2-(4-羥基-2,2-二甲基吡咯烷-1-羰基)-6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(60mg, 收率: 63%)。ES-API: [M+H] +=590.3。
步驟三：向5 mL單口圓底燒瓶中加入(3R)-3-(2-(4-羥基-2,2-二甲基吡咯烷-1-羰基)-6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(30 mg 0.05 mmol)，三氟乙酸(3 mL)和二氯甲烷(6 mL)，室溫攪拌反應30分鐘，旋乾粗品用製備HPLC(碳酸氫銨法)純化得到(4-羥基-2,2-二甲基吡咯烷-1-基)(6-(3-甲基-1H-吡咯[2,3-b]吡啶-5-基)-8-(R)-嗎啉-3-基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)甲酮(Z577, 7 mg, 收率14%)。ES-API: [M+H] +=490.3。 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 11.34 (s, 1H), 8.45 (d, J= 1.9 Hz, 1H), 8.09 (s, 1H), 7.75 (s, 1H), 7.42 (s, 1H), 7.26 (s, 1H), 5.08 – 4.95 (m, 1H), 4.47 – 4.38 (m, 1H), 4.24 (d, J= 12.1 Hz, 2H), 3.95 (d, J= 10.1 Hz, 1H), 3.80 – 3.43 (m, 5H), 3.35 (s, 1H), 3.25 (s, 2H), 2.92 (s, 4H), 2.31 (s, 4H), 1.91 (s, 1H), 1.74 (s, 1H), 1.45 (d, J= 9.5 Hz, 3H), 1.37 (d, J= 2.3 Hz, 3H).
實施例326化合物Z578的合成
步驟一：取5-溴-3-碘-7-氮雜吲哚 (0.8 g, 2.477 mmol)和2-乙炔-3-甲基吡啶(0.38 g, 3.220 mmol)溶於三乙胺(10 mL)，加入碘化亞銅(0.05 g, 0.248 mmol)，雙三苯基磷二氯化鈀 (0.19 g, 0.248 mmol)，室溫反應18小時，反應結束後，加水(50 mL)稀釋，二氯甲烷(30 mLX3)萃取，有機相飽和食鹽水(30 mL)洗，無水硫酸鈉乾燥，過濾減壓濃縮至乾，藉由矽膠柱層析(石油醚/乙酸乙酯=50/50)純化，得到5-溴-3-[(3-甲基吡啶-2-基)乙炔基]-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(430 mg, 1.377 mmol, 收率55.60%)。ES-API: [M+H] +=312.0。
步驟二：(R)-3-(6-氯-2-(2-羥基-2-甲基丙醯基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(44 mg, 0.1 mmol)，聯硼酸頻那醇酯(0.055g, 0.22 mmol)，醋酸鉀 (21 mg g, 0.22 mmol)，氯(2-二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II)(8 mg, 0.012 mmol)溶於1,4-二氧六環(5 mL)，110℃攪拌2小時，加入5-溴-3-[(3-甲基吡啶-2-基)乙炔基]-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(68 mg g, 0.22 mmol)，1,1'-雙(二-苯基膦基)二茂鐵氯化鈀(10 mg，0.014 mmol )，碳酸鉀(41 mg，0.3mmol )，110℃攪拌2小時，反應液減壓濃縮至乾，得到粗品藉由矽膠柱層析(石油醚/乙酸乙酯=30/70)純化得到(R)-3-(2-(2-羥基-2-甲基丙醯基)-6-(3-((3-甲基吡啶-2-基)乙炔基)-1H-吡咯[2,3-b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(20 mg, 0.031 mmol, 收率31.71%)。ES-API: [M+H] +=636.2。
步驟三：取(R)-3-(2-(2-羥基-2-甲基丙醯基)-6-(3-((3-甲基吡啶-2-基)乙炔基)-1H-吡咯[2,3-b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(15 mg, 0.024 mmol)溶於無水二氯甲烷(0.5 mL)，加入三氟乙酸(0.2 mL)，室溫反應2小時，LC-MS監測反應完全，反應液減壓濃縮至乾，加入氨/甲醇溶液(1 mL)中和後，再次濃縮，經矽膠柱層析(二氯甲烷/甲醇=10/1)純化得到(R)-2-羥基-2-甲基-1-(6-(3-((3-甲基吡啶-2-基)乙炔基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)- 8-(嗎啉-3-基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)丙-1-酮 (Z578, 7.5 mg, 0.014 mmol, 收率59.34%)。ES-API: [M+H] +=536.3。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6 ) δ 12.36 (s, 1H), 8.62 (d, J= 1.6 Hz, 1H), 8.42 (d, J= 4.0 Hz, 1H), 8.19 (d, J= 2.0 Hz, 1H)., 8.09 (s, 1H), 7.84 (s, 1H), 7.76 (d, J= 7.6 Hz, 1H), 7.49 (s, 1H), 7.27 – 7.17 (m, 1H), 5.53 – 5.32(m, 2H), 4.83 – 4.66(m, 1H) , 4.01 – 3.81(m, 2H), 3.79 (d, J= 10.0 Hz, 2H), 3.62 – 3.50 (m, 2H), 3.25– 3.22 (m, 2H), 3.04 – 2.88 (m, 4H), 2.54 (s, 3H), 1.37 (s, 6H).
實施例327化合物Z579的合成
步驟一：將2-氧雜-6-氮雜螺環[3.3]庚烷(200 mg, 2.018 mmol)溶於二氯甲烷(8 mL)中，冰浴下向上述溶液中加入三乙胺(0.841 mL, 6.053 mmol)，對硝基苯基氯甲酸酯(447.32 mg, 2.219 mmol)，室溫反應1小時。反應減壓濃縮，粗品用快速矽膠柱(甲醇/二氯甲烷：1-8%)純化得到4-硝基苯基 2-氧雜-6-氮雜螺環[3.3]庚烷-6-羧酸酯(400 mg, 1.514 mmol, 收率75.03%)，白色固體。ES-API: [M+H] +=265.0。
步驟二：將4-硝基苯基 2-氧雜-6-氮雜螺環[3.3]庚烷-6-羧酸酯(44.92 mg, 0.170 mmol)溶於N,N-二甲基乙醯胺(3 mL)。而後向上述溶液中加入(R)-3-(6-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(5a, 60 mg, 0.170 mmol)，碳酸鉀 (70.50 mg, 0.510 mmol)。反應在130℃反應17小時。反應結束後，向上述溶液中加入水(30 mL)，並用乙酸乙酯(30 mLX3)萃取。有機相用飽和食鹽水(100 mL)洗滌後，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮得到粗品。粗品用快速矽膠柱(四氫呋喃/石油醚：0%-40%)純化得得到叔丁基 (R)-3-(6-氯-2-(2-氧雜-6-氮雜螺環[3.3]庚烷-6-羰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸酯(48.76 mg, 0.102 mmol, 收率60%)，淺黃色固體。ES-API: [M+H] +=478.1。
步驟三：將叔丁基 (R)-3-(6-氯-2-(2-氧雜-6-氮雜螺環[3.3]庚烷-6-羰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸酯(60 mg, 0.126 mmol)溶於二氧六環(5 mL)和水(1 mL)中。室溫條件下，向上述溶液中加入3-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(81.00 mg, 0.314 mmol)，氯(2 -二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II)(9.03 mg, 0.013 mmol)以及碳酸鉀(52.04 mg, 0.377 mmol)。加入完畢後，反應在氮氣氛圍，110℃條件下攪拌2個小時。反應完畢後，向上述溶液中加入水(10 mL)，並用乙酸乙酯(10 mL X3)萃取。有機相用飽和食鹽水(30 mL)洗滌後，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮，得到粗品用快速矽膠柱(甲醇/二氯甲烷：0%-2%)純化得到叔丁基(R)-3-(6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-2-(2-氧雜-6-氮雜螺環[3.3]庚烷-6-羰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸酯(35 mg, 0.061 mmol, 收率48.4%)，白色固體。ES-API: [M +H] +=574.3。
步驟四：將叔丁基(R)-3-(6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-2-(2-氧雜-6-氮雜螺環[3.3]庚烷-6-羰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸酯(35 mg, 0.061 mmol)溶於無水二氯甲烷(1 mL)中。向上述溶液中加入三氟乙酸(0.5 mL)，在室溫條件下攪拌反應2小時。反應完畢後，將反應液濃縮並用氨/甲醇溶液(7 M)調節至中性。再次濃縮後，用快速矽膠柱(甲醇/二氯甲烷：0%-4%)純化得到(R)-(6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-8-(嗎啉-3-基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)(2-氧雜-6-氧雜螺環[3.3]庚烷-6-基)甲酮(Z579, 15 mg, 0.032 mmol, 收率51.92%)，淺黃色固體。ES-API: [M+H] +=474.2。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 9.40 (s, 1H), 8.42 (d, J= 1.6 Hz, 1H), 7.95 (d, J= 1.6 Hz, 1H), 7.73 (s, 1H), 7.25 (s, 1H), 7.04 (s, 1H), 4.79 – 4.69 (m, 6H), 4.45 – 4.36 (m, 1H), 4.18 – 4.11 (m, 4H), 3.90 – 3.76 (m, 2H), 3.73 – 3.64 (m, 1H), 3.52 – 3.41 (m, 3H), 3.22 – 3.11 (m, 1H), 3.06 – 2.97 (m, 1H), 2.90 – 2.82 (m, 2H), 2.29 (s, 3H).
實施例328化合物Z580的合成
步驟一：將1-(氧雜環丁烷-3-基)呱嗪(200 mg, 1.406 mmol)溶於二氯甲烷(8 mL)中，冰浴下向上述溶液中加入三乙胺(0.586 mL, 4.219 mmol)，對硝基苯基氯甲酸酯(340.19 mg, 1.688 mmol)，室溫反應1小時。反應液減壓濃縮，粗品用快速矽膠柱(甲醇/二氯甲烷：1-8%)純化得到4-硝基苯基 4-(氧雜環丁烷-3-基)呱嗪-1-羧酸酯(400 mg, 1.302 mmol, 收率92.55%)，白色固體。ES-API: [M+H] +=308.0。
步驟二：將4-硝基苯基 4-(氧雜環丁烷-3-基)呱嗪-1-羧酸酯(149.77 mg, 0.567 mmol)溶於N,N-二甲基乙醯胺(3 mL)。而後向上述溶液中加入((R)-3-(6-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(5a, 100 mg, 0.283 mmol)，碳酸鉀 (117.50 mg, 0.850 mmol)。反應在130℃反應17小時。反應結束後，向上述溶液中加入水(30 mL)，並用乙酸乙酯(30 mL X3)萃取。有機相用飽和食鹽水(100 mL)洗滌後，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮，得到粗品用快速矽膠柱(甲醇/二氯甲烷：0%-3%)純化得得到叔丁基 (R)-3-(6-氯-2-(4-(氧雜環丁烷-3-基)呱嗪-1-羰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸酯(100 mg, 0.192 mmol, 收率67.84%)，淺黃色固體。ES-API: [M+H] +=521.1。
步驟三：將叔丁基 (R)-3-(6-氯-2-(4-(氧雜環丁烷-3-基)呱嗪-1-羰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸酯(100 mg, 0.192 mmol)溶於二氧六環(5 mL)和水(1 mL)中。室溫條件下，向上述溶液中加入3-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(123.85 mg, 0.480 mmol)，氯(2 -二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II)(13.81 mg, 0.019 mmol)以及碳酸鉀(79.57 mg, 0.576 mmol)。加入完畢後，反應在氮氣氛圍，110℃條件下攪拌2個小時。反應完畢後，向上述溶液中加入水(20 mL)，並用乙酸乙酯(20 mLX3)萃取。有機相用飽和食鹽水(50 mL)洗滌後，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮得到粗品。粗品用快速矽膠柱(甲醇/二氯甲烷：0%-4%)純化得到叔丁基 (R)-3-(6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-2-(4-(氧雜環丁烷-3-基)呱嗪-1-羰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸酯(40 mg, 0.065 mmol, 收率33.79%)，白色固體。ES-API: [M +H] +=617.3。
步驟四：將叔丁基 (R)-3-(6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-2-(4-(氧雜環丁烷-3-基)呱嗪-1-羰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸酯(40 mg, 0.065 mmol)溶於無水二氯甲烷(1 mL)中。向上述溶液中加入三氟乙酸(0.5 mL)，反應在室溫條件下攪拌反應2小時。反應完畢後，將反應液濃縮並用氨/甲醇溶液(7 M)調節至中性。再次濃縮後，用快速矽膠柱(甲醇/二氯甲烷：0%-6%)純化得到(R)-(6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-8-(嗎啉-3-基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)(4-(氧雜環丁烷-3-基)呱嗪-1-基)甲酮(Z580, 20 mg, 0.038 mmol, 收率58.49%)，淺黃色固體。ES-API: [M+H] +=517.3。
實施例329化合物Z581的合成
步驟一：將(S)-3-甲基嗎啉 (220 mg, 2.18 mmol)溶於四氫呋喃(5 mL)，依次加入三乙胺 (660 mg, 6.53 mmol)和4-硝基苯甲醯氯 (525 mg, 2.61 mmol)，並將反應在室溫下攪拌2小時。LC-MS檢測反應完成後，加入水(10mL)，並用乙酸乙酯 (20 mL×2)萃取，有機層用飽和氯化鈉溶液(20 mL×2)洗滌，濃縮並使用矽膠柱色譜純化(乙酸乙酯/石油醚= 10%-30%)得到4-硝基苯基 (S)-3-甲基嗎啉-4-羧酸鹽(550 mg, 2.07 mmol, 收率94.85%)。ES-API: [M+H] +=267.1。
步驟二：封管中將 4-硝基苯基 (S)-3-甲基嗎啉-4-羧酸鹽 (455 mg, 1.71 mmol)溶於 N,N-二甲基乙醯胺(2 mL)，加入 (R)-3-(6-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯 (5a, 550 mg, 1.56 mmol)和 碳酸鉀 (1075 mg, 7.79 mmol)，並將反應在130℃攪拌過夜。LC-MS檢測反應完成後，加入水(5mL)，並用乙酸乙酯 (20 mL×2)萃取，有機層用飽和氯化鈉溶液(10mL×2)洗滌，濃縮並使用矽膠柱色譜純化(甲醇/二氯甲烷= 2%-5%)得到 (R)-3-(6-氯-2-((S)-3-甲基嗎啉-4-羰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(101 mg, 0.21 mmol, 收率12.33%)。ES-API: [M+H] +=480.2。
步驟三：取(R)-3-(6-氯-2-((S)-3-甲基嗎啉-4-羰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(101 mg, 0.21 mmol)，3-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(65 mg, 0.25 mmol)，碳酸鉀(58 mg, 0.42 mmol)，氯(2-二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II)(15 mg, 0.02 mmol)溶於1,4-二氧六環(5 mL)和水(1 mL)，100℃攪拌2小時。LC-MS檢測反應完成後，加入水(5 mL)，並用乙酸乙酯 (10 mL×2)萃取，有機層用飽和氯化鈉溶液(5 mL×2)洗滌，濃縮並使用矽膠柱色譜純化(乙酸乙酯/石油醚= 30%-70%)得到 (R)-3-(6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-2-((S)-3-甲基嗎啉-4-羰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(93 mg, 0.16 mmol, 收率77.02%)。ES-API: [M+H] +=576.3。
步驟四：取(R)-3-(6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-2-((S)-3-甲基嗎啉-4-羰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(93 mg, 0.16 mmol)溶於無水二氯甲烷(5 mL)，加入三氟乙酸(3 mL)，室溫反應2小時，LC-MS監測反應完全，減壓濃縮至乾，加入氨/甲醇溶液(1 mL)中和後，再次濃縮，殘留物用製備HPLC (碳酸氫銨法-A)純化得到(6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-8-((R)-嗎啉-3-基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)((S)-3-甲基嗎啉代)甲酮(Z581, 13 mg, 0.03 mmol, 收率18.75%)。ES-API: [M+H] +=476.3。 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 11.34 (s, 1H), 8.46 (d, J= 1.6 Hz, 1H), 8.11 (d, J= 1.6 Hz, 1H), 7.76 (s, 1H), 7.44 (s, 1H), 7.27 (s, 1H), 4.67 – 4.35 (m, 4H), 3.99 – 3.97 (m, 1H), 3.87 (d, J= 7.2 Hz, 1H), 3.83 – 3.66 (m, 3H), 3.61 – 3.45 (m, 4H), 3.30 – 3.22 (m, 3H), 3.01 – 2.87 (m, 4H), 2.32 (s, 3H), 1.74 (s, 2H).
實施例330 化合物Z606的合成
步驟一：氮氣保護下，(3R)-3-(2-(8-氧雜-3-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-羰基)-6-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(90 mg, 0.18 mmol)，聯硼酸頻哪醇酯(60 mg, 0.24 mmol)，氯(2-二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II)(13 mg, 0.02 mmol)和醋酸鉀(54 mg, 0.55 mmol)的1,4-二氧六環(2 mL)混合物，110℃攪拌2小時。反應結束後，反應液過濾濃縮得到 (3R)-3-(2-(8-氧雜-3-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-羰基)-6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(106 mg, 粗品)。ES-API: [M+H] += 584.2。
步驟二：氮氣保護下，(3R)-3-(2-(8-氧雜-3-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-羰基)-6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(106 mg, 0.18 mmol)，2-溴-7-(三氟甲基)-5-((2-(三甲基甲矽烷基)乙氧基)甲基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪(216 mg, 0.55 mmmol)，[1,1'-雙(二苯基膦)二茂鐵]二氯化鈀(13 mg, 0.02 mmol)和碳酸鉀(75 mg, 0.55 mmol)的1,4-二氧六環(2 mL)和水(0.4 mL)混合物，100℃攪拌2小時。反應結束後，反應液溶於乙酸乙酯(20 mL)，並依次用飽和食鹽水(10 mL)和水(10 mL)洗滌。有機相用無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮並用快速矽膠柱(0-100%四氫呋喃/石油醚)純化，得到無色油狀物(R)-3-(2-(8-氧雜-3-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-羰基)-6-(7-(三氟甲基)-5-((2-(三甲基甲矽烷基)乙氧基)甲基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-2-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(60 mg, 收率42.7%)。ES-API: [M+H] += 773.2。
步驟三：冰浴條件下，將三氟乙酸(1 mL)滴加到(R)-3-(2-(8-氧雜-3-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-羰基)-6-(7-(三氟甲基)-5-((2-(三甲基甲矽烷基)乙氧基)甲基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-2-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(60 mg, 0.08 mmol)的二氯甲烷(2 mL)溶液中，室溫攪拌1小時。反應液濃縮，加入7M胺甲醇(5 mL)中和，隨後濃縮並用製備HPLC(碳酸氫銨)純化，得到(8-氧雜-3-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)(8-((R)-嗎啉-3-基)6-(7-(三氟甲基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-2-基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)甲酮(Z606, 11.63 mg, 純度100%, 收率27.61%)，白色固體。ES-API: [M+H] += 543.2。 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 8.95 (s, 1H), 8.52 (s, 1H), 8.15 (s, 1H), 7.81 (s, 1H), 4.63 – 4.53 (m, 1H), 4.48 – 4.40 (m, 1H), 4.28 (s, 2H), 4.07 – 3.96 (m, 1H), 3.85 – 3.75 (m, 2H), 3.56 (t, J= 9.2 Hz, 1H), 3.49 – 3.35 (m, 4H), 3.20 – 3.04 (m, 3H), 3.02 – 2.90 (m, 4H), 1.85 – 1.75 (m, 4H).
實施例331 化合物Z608的合成
步驟一：氮氣保護下，(R)-3-(2-((1R,4R)-2-氧雜-5-氮雜雙環[2.2.1]庚烷-5-羰基)-6-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(130 mg, 0.27 mmol)，3-氯-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(152 mg, 0.54 mmol)，氯(2-二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II)(20 mg, 0.03 mmol)和碳酸鉀(113 mg, 0.82 mmol)的1,4-二氧六環(2 mL)和水(0.4 mL)混合物，100℃攪拌1小時。反應結束後，反應液溶於乙酸乙酯(20 mL)，並依次用飽和食鹽水(10 mL)和水(10 mL)洗滌。有機相用無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮並用快速矽膠柱(0-100%四氫呋喃/石油醚)純化，得到無色油狀物(R)-3-(2-(1R,4R)-2-氧雜-5-氮雜雙環[2.2.1]庚烷-5-羰基)-6-(3-氯-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(120 mg, 收率74%)。ES-API: [M+H] += 594.1。
步驟二：冰浴條件下，將三氟乙酸(1 mL)滴加到(R)-3-(2-(1R,4R)-2-氧雜-5-氮雜雙環[2.2.1]庚烷-5-羰基)-6-(3-氯-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(120 mg, 0.20 mmol)的二氯甲烷(2 mL)溶液中，室溫攪拌1小時。濃縮，加入7M胺甲醇(5 mL)中和，隨後濃縮並用製備HPLC(碳酸氫銨)純化，得到((1R,4R)-2-氧雜-5-氮雜雙環[2.2.1]庚烷-5-基) (6-(3-氯-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-8-((R)-嗎啉-3-基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)- 基)甲酮(Z608, 33.4 mg, 純度100%, 收率33.5%)，白色固體。ES-API: [M+H] += 494.1。 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 12.07 (s, 1H), 8.59 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 8.08 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 7.77 (d, J= 1.6 Hz, 1H), 7.73 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 7.48 (s, 1H), 4.68 – 4.60 (m, 1H), 4.56 (s, 1H), 4.48 – 4.40 (m, 1H), 4.36 (s, 1H), 4.02 – 3.94 (m, 1H), 3.90 – 3.84 (m, 1H), 3.82 – 3.72 (m, 2H), 3.72 – 3.67 (m, 1H), 3.60 – 3.45 (m, 3H), 3.44 – 3.36 (m, 1H), 3.30 – 3.20 (m, 2H), 3.01 – 2.87 (m, 4H), 1.74 (s, 2H).
實施例332 化合物Z624的合成
步驟一：將4,4-二氟呱啶鹽酸鹽(89 mg, 0.57 mmol)的二氯甲烷(5 mL)混合物冷卻至0℃，依次加入三乙胺(0.12 mL, 0.85 mmol)和三光氣(168 mg, 0.57 mmol)，攪拌0.5小時。反應液濃縮，隨後溶於二氯甲烷(5 mL)中，加入三乙胺(0.12 mL, 0.85 mmol)和(R)-3-(6-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(5a, 100 mg, 0.28 mol)，室溫攪拌1小時。反應結束後，用飽和碳酸氫鈉溶液(10 mL)淬滅，二氯甲烷(10 mLX3)萃取。有機相用無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮並用快速矽膠柱(0-40%四氫呋喃/石油醚)純化，得到(R)-3-(6-氯-2-(4,4-二氟呱啶-1-羰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(130 mg, 收率92%)。ES-API: [M+H] += 500.1。
步驟二：氮氣保護下，(R)-3-(6-氯-2-(4,4-二氟呱啶-1-羰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(90 mg, 0.18 mmol)，聯硼酸頻哪醇酯(59 mg, 0.23 mmol)，氯(2-二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II)(13 mg, 0.02 mmol)和醋酸鉀(53 mg, 0.54 mmol)的1,4-二氧六環(2 mL)混合物，110℃攪拌2小時。反應結束後，反應液過濾濃縮得到 (R)-3-(2-(4,4-二氟呱啶-1-羰基)-6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(106 mg, 粗品)。ES-API: [M+H] += 592.3。
步驟三：氮氣保護下，(R)-3-(2-(4,4-二氟呱啶-1-羰基)-6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(106 mg, 0.18 mmol)，2-溴-7-甲基-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-5-羧酸叔丁酯(112 mg, 0.36 mmmol)，[1,1'-雙(二苯基膦)二茂鐵]二氯化鈀(13 mg, 0.02 mmol)和碳酸鉀(74 mg, 0.54 mmol)的1,4-二氧六環(2 mL)和水(0.4 mL)混合物，100℃攪拌2小時。反應結束後，反應液溶於乙酸乙酯(20 mL)，並依次用飽和食鹽水(10 mL)和水(10 mL)洗滌。有機相用無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮並用快速矽膠柱(0-100%四氫呋喃/石油醚)純化，得到無色油狀物(R)-3-(6-(5-(叔丁氧基羰基)-7-甲基-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-2-基)-2-(4,4-二氟呱啶)-1-羰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(110 mg, 收率88%)。ES-API: [M+H] += 697.3。
步驟四：冰浴條件下，將三氟乙酸(1 mL)滴加到(R)-3-(6-(5-(叔丁氧基羰基)-7-甲基-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-2-基)-2-(4,4-二氟呱啶)-1-羰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(110 mg, 0.16 mmol)的二氯甲烷(2 mL)溶液中，室溫攪拌1小時。反應液濃縮，加入7M胺甲醇(5 mL)中和，隨後濃縮並用製備HPLC(碳酸氫銨)純化，得到(R)-(4,4-二氟呱啶-1-基)(6-(7-甲基-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-2-基)-8-(嗎啉-3-基)- 3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)甲酮(Z624, 49.3 mg, 純度100%, 收率62.9%)，白色固體。ES-API: [M+H] += 497.2。 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 11.72 (s, 1H), 8.74 (s, 1H), 8.15 (s, 1H), 7.81 (s, 1H), 7.67 (s, 1H), 4.69 – 4.58 (m, 1H), 4.56 – 4.45 (m, 1H), 4.02 – 3.93 (m, 1H), 3.84 – 3.72 (m, 2H), 3.59 – 3.41 (m, 3H), 3.37 – 3.33 (m, 2H), 3.32 – 3.25 (m, 3H), 3.03 – 2.92 (m, 4H), 2.35 (s, 3H), 2.09 – 1.97 (m, 4H).
實施例333 化合物Z607的合成
步驟一：將(1R, 4R)-2-氧雜-5-氮雜雙環[2.2.1]庚烷鹽酸鹽(192 mg, 1.42 mmol)的二氯甲烷(5 mL)混合物冷卻至0℃，依次加入三乙胺(0.29 mL, 2.12 mmol)和三光氣(420 mg, 1.42 mmol)，攪拌0.5小時。反應液濃縮，隨後溶於二氯甲烷(5 mL)中，加入三乙胺(0.29 mL, 2.12 mmol)和(R)-3-(6-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(5a, 250 mg, 0.71 mol)，室溫攪拌1小時。反應結束後，用飽和碳酸氫鈉溶液(10 mL)淬滅，二氯甲烷萃取(10 mLX3)。有機相用無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮並用快速矽膠柱(0-40%四氫呋喃/石油醚)純化，得到(R)-3-(2-((1R,4R)-2-氧雜-5-氮雜雙環[2.2.1]庚烷-5-羰基)-6-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(270 mg, 收率80%)。ES-API: [M+H] += 478.1。
步驟二：氮氣保護下，(R)-3-(2-((1R,4R)-2-氧雜-5-氮雜雙環[2.2.1]庚烷-5-羰基)-6-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(90 mg, 0.19 mmol)，聯硼酸頻那醇酯(62 mg, 0.25 mmol)，氯(2-二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II)(14 mg, 0.02 mmol)和醋酸鉀(55 mg, 0.57 mmol)的1,4-二氧六環(2 mL)混合物，110℃攪拌2小時。反應結束後，反應液過濾濃縮得到 (R)-3-(2-((1R,4R)-2-氧雜-5-氮雜雙環[2.2.1]庚烷-5-羰基)-6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(106 mg, 粗品)。ES-API: [M+H] += 570.2。
步驟三：氮氣保護下，(R)-3-(2-((1R,4R)-2-氧雜-5-氮雜雙環[2.2.1]庚烷-5-羰基)-6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(106 mg, 0.19 mmol)，2-溴-7-甲基-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-5-羧酸叔丁酯(116 mg, 0.37 mmmol)，[1,1'-雙(二苯基膦)二茂鐵]二氯化鈀(14 mg, 0.02 mmol)和碳酸鉀(77 mg, 0.56 mmol)的1,4-二氧六環(2 mL)和水(0.4 mL)混合物，100℃攪拌2小時。反應結束後，反應液溶於乙酸乙酯(20 mL)，並依次用飽和食鹽水(10 mL)和水(10 mL)洗滌。有機相用無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮並用快速矽膠柱(0-100%四氫呋喃/石油醚)純化，得到無色油狀物(R)-3-(2-(1R,4R)-2-氧雜-5-氮雜雙環[2.2.1]庚烷-5-羰基)-6-(5-(叔丁氧羰基)-7-甲基-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-2-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(100 mg, 收率80%)。ES-API: [M+H] += 675.3。
步驟四：冰浴條件下，將三氟乙酸(1 mL)滴加到(R)-3-(2-(1R,4R)-2-氧雜-5-氮雜雙環[2.2.1]庚烷-5-羰基)-6-(5-(叔丁氧羰基)-7-甲基-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-2-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(100 mg, 0.10 mmol)的二氯甲烷(2 mL)溶液中，室溫攪拌1小時。反應液濃縮，加入7M胺甲醇(5 mL)中和，隨後濃縮並用製備HPLC(碳酸氫銨)純化，得到((1R,4R)-2-氧雜-5-氮雜雙環[2.2.1]庚烷-5-基)(6-(7-甲基-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-2-基)-8-((R)-嗎啉-3-基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)甲酮(Z607, 45.22 mg, 純度100%, 收率64.3%)，白色固體。ES-API: [M+H] += 475.1. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 11.72 (s, 1H), 8.74 (s, 1H), 8.14 (s, 1H), 7.82 (s, 1H), 7.67 (s, 1H), 4.70 – 4.61 (m, 1H), 4.56 (s, 1H), 4.54 – 4.43 (m, 1H), 4.36 (s, 1H), 4.02 – 3.94 (m, 1H), 3.87 (d, J= 7.2 Hz, 1H), 3.82 – 3.74 (m, 2H), 3.72 – 3.66 (m, 1H), 3.64 – 3.44 (m, 3H), 3.40 (s, 1H), 3.30 – 3.20 (m, 2H), 3.03 – 2.87 (m, 4H), 2.35 (s, 3H), 1.74 (s, 2H).
實施例334 化合物Z611的合成
步驟一：氮氣保護下，(3R)-3-(2-(3-氧雜-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羰基)-6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2)-二氧硼雜環戊烷-2-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(90 mg, 0.19 mmol)，5-溴-3-(三氟甲基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(99 mg, 0.37 mmmol)，[1,1'-雙(二苯基膦)二茂鐵]二氯化鈀(14 mg, 0.02 mmol)和碳酸鉀(77 mg, 0.56 mmol)的1,4-二氧六環(2 mL)和水(0.4 mL)混合物，100℃攪拌2小時。反應結束後，反應液溶於乙酸乙酯(20 mL)，並依次用飽和食鹽水(10 mL)和水(10 mL)洗滌。有機相用無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮並用快速矽膠柱(0-100%四氫呋喃/石油醚)純化，得到無色油狀物 (3R)-3-(2-(3-氧雜-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羰基)-6-(3-三氟甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶)-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(20 mg, 收率17%)。ES-API: [M+H] += 642.1。
步驟二：冰浴條件下，將(3R)-3-(2-(3-氧雜-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羰基)-6-(3-三氟甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶)-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(20 mg, 0.03 mmol)的二氯甲烷(1 mL)溶液中，室溫攪拌1小時。反應液濃縮，加入7M胺甲醇(5 mL)中和，隨後濃縮並用製備HPLC(碳酸氫銨)純化，得到(3-氧雜-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-基)(6-(3-三氟甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶)-5-基)-8-((R)-嗎啉-3-基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)甲酮(Z611, 0.51 mg, 純度100%, 收率3%)，白色固體。ES-API: [M+H] += 542.2。
實施例335 化合物Z595的合成
步驟一：向50 mL圓底燒瓶中加入(R)-3-(6-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯  (5a, 120 mg, 0.34 mmol)，N,N-二異丙基乙二胺(131 mg, 1.0 mmol)和二氯甲烷(10 mL)。向反應液中緩慢加入1,4-噁嗪烷-4-羰基氯(153 mg, 1.0 mmol)，室溫攪拌1小時，反應液加入乙酸乙酯(20 mL)，用飽和食鹽水(20 mLX3)洗滌，無水硫酸鈉乾燥並過濾濃縮，粗品用快速矽膠柱純化(甲醇：二氯甲烷=10:100)得到(R)-3-(6-氯-2-(嗎啉-4-羰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-2-羧酸叔丁酯(150 mg, 收率: 95%)。ES-API: [M+H] +=466.2。
步驟二：向25 mL微波反應器中加入(R)-3-(6-氯-2-(嗎啉-4-羰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-2-羧酸叔丁酯(170 mg, 0.37 mmol)，聯硼酸頻那醇酯(139 mg, 0.55 mmol)，醋酸鉀(107 mg, 1.1 mmol)，氯(2 - 二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2 - 基)鈀(II) (52 mg, 0.07 mmol)，二氧六環(10 mL)。體系用氮氣置換三次，然後用氮氣球保護。105℃條件下反應3小時，反應液冷卻至室溫直接用於下一步反應。
步驟三：向25 mL微波反應器中加入上一步反應得到的(R)-3-(2-(嗎啉-4-羰基)-6-(4,4,5-四甲基-1,3,2-二氧苯并呋喃-2-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-2-羧酸叔丁酯反應液， 2-溴-7-甲基吡咯[2,3-b]吡嗪-5-羧酸叔丁酯(83 mg, 0.15 mmol)，碳酸鉀(62 mg, 0.45 mmol)，氯(2 - 二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2 - 基)鈀(II) (21 mg, 0.03 mmol)，二氧六環(10 mL)和水(1 mL)。體系用氮氣置換三次，然後用氮氣球保護。110℃微波條件下反應2小時，反應液加入乙酸乙酯(10 mL)，用飽和食鹽水(5 mLX3)洗滌，無水硫酸鈉乾燥並過濾濃縮，粗品用快速矽膠柱純化(甲醇：二氯甲烷=10:100)得到(R)-3-(6-(5-(叔丁氧羰基)-7-甲基-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-2-基)-2-(嗎啉-4-羰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-2-羧酸叔丁酯(60 mg, 兩步收率：24%)。ES-API: [M+H] +=663.3。
步驟四：向25 mL單口圓底燒瓶中加入(R)-3-(6-(5-(叔丁氧羰基)-7-甲基-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-2-基)-2-(嗎啉-4-羰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-2-羧酸叔丁酯(60 mg, 0.09 mmol)，三氟乙酸(3 mL)和二氯甲烷(6 mL)， 室溫攪拌反應30分鐘，反應液旋乾，粗品用製備HPLC(碳酸氫銨法-A)純化得到(R) -(6-(7-甲基-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-2-基)-8-(嗎啉-3-基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)(嗎啉基)甲酮(Z595, 20mg, 收率48%)。ES-API: [M+H] +=463.3。 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 11.72 (s, 1H), 8.74 (s, 1H), 8.15 (s, 1H), 7.81 (s, 1H), 7.67 (s, 1H), 4.61 (d, J= 16.6 Hz, 1H), 4.48 (d, J= 16.7 Hz, 1H), 3.96 (d, J= 8.4 Hz, 1H), 3.78 (t, J= 9.1 Hz, 2H), 3.68 – 3.40 (m, 8H), 3.27 – 3.17 (m, 5H), 2.96 (d, J= 8.8 Hz, 4H), 2.35 (s, 3H).
實施例336 化合物Z603的合成
步驟一：向25 mL微波反應器中加入(R)-3-(2-((S)-3-氟吡咯烷-1-羰基)-6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼環勱-2-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(112 mg, 0.2 mmol)，2-溴-7-甲基-5H-吡咯[2,3-b]吡嗪-5-羧酸叔丁酯(156 mg, 0.5 mmol)，碳酸鉀(83 mg, 0.6 mmol)，氯(2 - 二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2 - 基)鈀(II) (30 mg, 0.04 mmol)，二氧六環(10 mL)和水(1 mL)。體系用氮氣置換三次，然後用氮氣球保護。100度條件下反應2小時，反應液加入乙酸乙酯(10 mL)，用飽和食鹽水(5 mLX3)洗滌，無水硫酸鈉乾燥並過濾濃縮，粗品用快速矽膠柱純化(甲醇：二氯甲烷=10:100)得到(R)-3-(6-(5-(叔丁氧羰基)-7-甲基-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-2-基)-2-(S)-3-氟吡咯烷-1-羰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(100 mg,  兩步收率: 75%)。ES-API: [M+H] +=665.3。
步驟二：向25mL單口圓底燒瓶中加入(R)-3-(6-(5-(叔丁氧羰基)-7-甲基-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-2-基)-2-(S)-3-氟吡咯烷-1-羰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(100 mg, 0.15 mmol)，三氟乙酸(3 mL)和二氯甲烷(6 mL)， 室溫攪拌反應30分鐘，反應液旋乾，粗品用製備HPLC(碳酸氫銨法-A)純化得到((S)-3-氟吡咯烷-1-基)(6-(7-甲基-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-2-基)-8-((R)-嗎啉-3-基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)甲酮(Z603, 30 mg, 收率: 43%)。ES-API: [M+H] +=465.2。 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 11.72 (s, 1H), 8.74 (s, 1H), 8.16 (s, 1H), 7.82 (s, 1H), 7.67 (s, 1H), 5.32 (d, J= 53.4 Hz, 1H), 4.62 (d, J= 16.5 Hz, 1H), 4.44 (d, J= 16.5 Hz, 1H), 3.98 (d, J= 7.9 Hz, 1H), 3.85 – 3.39 (m, 8H), 3.31 – 2.85 (m, 7H), 2.35 (s, 3H), 2.20 – 1.86 (m, 2H),
實施例337 化合物Z604的合成
步驟一：向25 mL圓底燒瓶中加入(3S)-3-氟四氫吡咯(151mg, 1.7 mmol)，三乙胺(343 mg, 3.4 mmol)和二氯甲烷(10 mL)。0度條件下緩慢加入三光氣(336 mg, 1.13 mmol)，室溫攪拌1小時後加入(R)-3-(6-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(5a, 200 mg, 0.57 mmol)，室溫攪拌1小時，反應液加入二氯甲烷(20 mL)，用飽和食鹽水(20 mLX3)洗滌，無水硫酸鈉乾燥並過濾濃縮，粗品用快速矽膠柱純化(甲醇：二氯甲烷=10:100)得到(R)-3-(6-氯-2-((S)-3-氟吡咯烷-1-羰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(200mg, 收率: 75%)。ES-API: [M+H] +=468.2。
步驟二：向25 mL微波反應器中加入(R)-3-(6-氯-2-((S)-3-氟吡咯烷-1-羰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(200 mg, 0.43 mmol)，聯硼酸頻那醇酯(162 mg, 0.64 mmol)，醋酸鉀(125 mg, 1.3 mmol)，氯(2 - 二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2 - 基)鈀(II) (61 mg, 0.09 mmol)，二氧六環(10 mL)。體系用氮氣置換三次，然後用氮氣球保護。100度條件下反應3小時，反應液冷卻至室溫直接用於下一步反應。ES-API: [M+H] +=560.3。
步驟三：向25 mL微波反應器中加入(R)-3-(2-((S)-3-氟吡咯烷-1-羰基)-6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼環戊烷-2-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯反應液，5-溴-3-氯-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(139 mg, 0.6 mmol)，碳酸鉀(83 mg, 0.6 mmol)，氯(2 - 二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2 - 基)鈀(II) (30 mg, 0.04 mmol)，二氧六環(10 mL)和水(1 mL)。體系用氮氣置換三次，然後用氮氣球保護。100度條件下反應2小時，反應液加入乙酸乙酯(10 mL)，用飽和食鹽水(5 mLX3)洗滌，無水硫酸鈉乾燥並過濾濃縮，粗品用快速矽膠柱純化(甲醇：二氯甲烷=10:100)得到(R)-3-(6-(3-氯-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-2-((S)-3-氟吡咯烷-1-羰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(110 mg, 兩步收率: 43%)。ES-API: [M+H] +=584.3。
步驟四：向25mL單口圓底燒瓶中加入(R)-3-(6-(3-氯-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-2-((S)-3-氟吡咯烷-1-羰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(110 mg, 0.19mmol)，三氟乙酸(3 mL)和二氯甲烷(6 mL)， 室溫攪拌反應30分鐘，反應液旋乾，粗品用製備HPLC(碳酸氫銨法-A)純化得到(6-(3-氯-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-8-((R)-嗎啉-3-基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)((S)-3-氟吡咯烷-1-基)甲酮(Z604, 30 mg, 收率:33%)。ES-API: [M+H] +=484.2。 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 12.07 (s, 1H), 8.59 (d, J= 1.9 Hz, 1H), 8.08 (d, J= 1.8 Hz, 1H), 7.81 – 7.70 (m, 2H), 7.48 (s, 1H), 5.32 (d, J= 53.5 Hz, 1H), 4.6-4.31 (m, 2H), 3.98 (d, J= 8.4 Hz, 1H), 3.81 – 3.41 (m, 8H), 3.30-3.22 (m, 15H), 3.05-2.85 (m, 4H), 2.16 – 1.91 (m, 2H).
實施例338 化合物Z630的合成
步驟一：向50 mL圓底燒瓶中加入(R)-3-(6-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯  (5a, 200 mg, 0.57 mmol)，(3S)-四氫呋喃-3-羧酸(497 mg, 1.7 mmol)，N,N-二異丙基乙二胺(438 mg, 3.4 mmol)和二甲基甲醯胺(10 mL)。向反應液中緩慢加入2-(7-偶氮苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯(646 mg, 1.7 mmol)，室溫攪拌1小時，反應液加入乙酸乙酯(20 mL)，用飽和食鹽水(20 mLX3)洗滌，無水硫酸鈉乾燥並過濾濃縮，粗品用快速矽膠柱純化(甲醇：二氯甲烷=10:100)得到(R)-3-(6-氯-2-((S)-四氫呋喃-3-羰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(240 mg, 收率: 94%)。ES-API: [M+H] +=451.2。
步驟二：向25 mL微波反應器中加入(R)-3-(6-氯-2-((S)-四氫呋喃-3-羰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(220 mg, 0.49 mmol)，聯硼酸頻那醇酯(185 mg, 0.73 mmol)，醋酸鉀(143 mg, 1.45 mmol)，氯(2 - 二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2 - 基)鈀(II) (70 mg, 0.1 mmol)，二氧六環(10 mL)。體系用氮氣置換三次，然後用氮氣球保護。100度條件下反應3小時，反應液冷卻至室溫直接用於下一步反應。
步驟三：向25 mL微波反應器中加入上一步反應得到的(R)-3-(2-((S)-四氫呋喃-3-羰基)-6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯反應液，2-溴-7-甲基吡咯[2,3-b]吡嗪-5-羧酸叔丁酯(195 mg, 0.62 mmol)，碳酸鉀(103 mg, 0.75 mmol)，氯(2 - 二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2 - 基)鈀(II) (36 mg, 0.05 mmol)，二氧六環(10 mL)和水(1 mL)。體系用氮氣置換三次，然後用氮氣球保護。110度微波條件下反應2小時，反應液加入乙酸乙酯(10 mL)，用飽和食鹽水(5 mLX3)洗滌，無水硫酸鈉乾燥並過濾濃縮，粗品用快速矽膠柱純化(甲醇：二氯甲烷=10:100)得到目標產物(R)-3-(6-(5-(叔丁氧羰基)-7-甲基-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-2-基)-2-((S)-四氫呋喃-3-羰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(100 mg,  兩步收率：31%)。ES-API: [M+H] +=648.3。
步驟四：向25 mL單口圓底燒瓶中加入(R)-3-(6-(5-(叔丁氧羰基)-7-甲基-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-2-基)-2-((S)-四氫呋喃-3-羰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(100 mg, 0.17 mmol)，三氟乙酸(3 mL)和二氯甲烷(6 mL)， 室溫攪拌反應30分鐘，反應液旋乾，粗品用製備HPLC(碳酸氫銨法-A)純化得到(6-(7-甲基-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-2-基)-8-((R)-嗎啉-3-基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)((S)-四氫呋喃-3-基)甲酮(Z630, 50 mg, 收率72%)。ES-API: [M+H] +=448.3。 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 11.73 (s, 1H), 8.75 (d, J= 5.5 Hz, 1H), 8.17 (d, J= 17.6 Hz, 1H), 7.84 (s, 1H), 7.67 (s, 1H), 4.79 (dd, J= 117.5, 16.3 Hz, 2H), 4.10 – 3.36 (m, 12H), 3.24 (t, J= 10.4 Hz, 1H), 3.02-2.86 (m, 4H), 2.35 (s, 3H), 2.15 – 1.95 (m, 2H).
實施例339 化合物Z631的合成
步驟一：向25 mL微波反應器中加(R)-3-(2-((S)-四氫呋喃-3-羰基)-6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(135 mg, 0.25 mmol)，5-溴-3-氯-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(173 mg, 0.75 mmol)，碳酸鉀(103 mg, 0.75 mmol)，氯(2 - 二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2 - 基)鈀(II) (36 mg, 0.05 mmol)，二氧六環(10 mL)和水(1 mL)。體系用氮氣置換三次，然後用氮氣球保護。110度微波條件下反應2小時，反應液加入乙酸乙酯(10 mL)，用飽和食鹽水(5 mLX3)洗滌，無水硫酸鈉乾燥並過濾濃縮，粗品用快速矽膠柱純化(甲醇：二氯甲烷=10:100)得到(R)-3-(6-(3-氯-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-2-((S)-四氫呋喃-3-羰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(100mg,  收率: 70%)。ES-API: [M+H] +=567.3。
步驟二：向25 mL單口圓底燒瓶中加入(R)-3-(6-(3-氯-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-2-((S)-四氫呋喃-3-羰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(100 mg, 0.17mmol)，三氟乙酸(3 mL)和二氯甲烷(6 mL)，室溫攪拌反應30分鐘，反應液旋乾，粗品用製備HPLC(碳酸氫銨法-A)純化得到(6-(3-氯-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-8-((R)-嗎啉-3-基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)((S)-四氫呋喃-3-基)甲酮(Z631, 20 mg, 收率：24%)。ES-API: [M+H] +=467.2。 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 12.07 (s, 1H), 8.60 (s, 1H), 8.09 (s, 1H), 7.86 – 7.70 (m, 2H), 7.51 (s, 1H), 4.77 (dd, J= 117.8, 16.9 Hz, 2H), 4.10-3.91(m, 2H), 3.85 – 3.40 (m, 10H), 3.27 – 3.18 (m, 1H), 3.04 – 2.86 (m, 4H), 2.13 – 1.96 (m, 2H).
實施例340 化合物Z613的合成
步驟一：向25 mL圓底燒瓶中加入(S)-3-甲基嗎啉(195 mg, 1.92 mmol)，三乙胺(292 mg, 2.89 mmol)和二氯甲烷(10mL)。零度條件下緩慢加入三光氣(286mg, 0.96mmol)，室溫攪拌1h後加入(R)-3-(6-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(5a, 170 mg, 0.48 mmol)，室溫攪拌1小時，反應液加入二氯甲烷(20 mL)，用飽和食鹽水(20 mLX3)洗滌，無水硫酸鈉乾燥並過濾濃縮，粗品用快速矽膠柱純化(甲醇：二氯甲烷=10:100)得到(R)-3-(6-氯-2-((S)-3-甲基嗎啉-4-羰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-3-羧酸叔丁酯(190 mg, 收率: 82%)。ES-API: [M+H] +=480.2。
步驟二：向25 mL微波反應器中加入(R)-3-(6-氯-2-((S)-3-甲基嗎啉-4-羰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-3-羧酸叔丁酯(190 mg, 0.40 mmol)，聯硼酸頻那醇酯(201 mg, 0.79 mmol)，醋酸鉀(116 mg, 1.19 mmol)，氯(2-二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2 - 基)鈀(II) (57 mg, 0.08 mmol)，二氧六環(10 mL)。體系用氮氣置換三次，然後用氮氣球保護。100度條件下反應3小時，反應液冷卻至室溫加入乙酸乙酯(20 mL)，用飽和食鹽水(20 mLX3)洗滌，無水硫酸鈉乾燥並過濾濃縮，粗品用快速矽膠柱純化(甲醇：二氯甲烷=10:100)得到(R)-3-(2-((S)-3-甲基嗎啉-4-羰基)-6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧苯并呋喃-2-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-2-羧酸叔丁酯(114mg, 收率: 50%)。ES-API: [M+H] +=572.3。
步驟三：向25 mL微波反應器中加入(R)-3-(2-((S)-3-甲基嗎啉-4-羰基)-6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧苯甲酸-2-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-2-羧酸叔丁酯(114 mg, 0.2 mmol)，5-溴-3-氯-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(139 mg, 0.6 mmol)，碳酸鉀(83 mg, 0.6 mmol)，氯(2 - 二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2 - 基)鈀(II) (29 mg, 0.04 mmol)，二氧六環(10 mL)和水(1 mL)。體系用氮氣置換三次，然後用氮氣球保護。100度條件下反應2小時，反應液加入乙酸乙酯(10 mL)，用飽和食鹽水(5 mLX3)洗滌，無水硫酸鈉乾燥並過濾濃縮，粗品用快速矽膠柱純化(甲醇：二氯甲烷=10:100)得到(R)-3-(6-(3-氯-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-2-((S)-3-甲基嗎啉-4-羰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-5-羧酸叔丁酯(70 mg,兩步收率：58%)。ES-API: [M+H] +=596.3。
步驟四：向25 mL單口圓底燒瓶中加入(R)-3-(6-(3-氯-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-2-((S)-3-甲基嗎啉-4-羰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-5-羧酸叔丁酯(70 mg, 0.11mmol)，三氟乙酸(3 mL)和二氯甲烷(6 mL)， 室溫攪拌反應30分鐘，反應液旋乾，粗品用製備HPLC(碳酸氫銨法-A)純化得到(6-(3-氯-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-8-((R)-嗎啉-3-基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)((2R, 6R)-2,6-二甲基嗎啉基)甲酮(Z613,10mg, 收率:17%)。ES-API: [M+H] +=496.2。 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 12.07 (s, 1H), 8.58 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 8.08 (d, J= 1.8 Hz, 1H), 7.77 (s, 1H), 7.73 (d, J= 2.2 Hz, 1H), 7.47 (s, 1H), 4.59 (d, J= 16.8 Hz, 1H), 4.43 (d, J= 16.5 Hz, 1H), 3.95 (d, J= 8.9 Hz, 1H), 3.83-3.68 (m, 4H), 3.65 – 3.33 (m, 7H), 3.29 – 3.13 (m, 3H), 3.03-2.91 (m, 7H), 1.20 (d, J= 6.6 Hz, 3H).
實施例341 化合物Z600的合成
步驟一：向25 mL微波反應器中加入(R)-3-(2-((2R,6R)-2,6-二甲基嗎啉-4-羰基)-6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷) -2-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(176 mg, 0.3 mmol)，2-溴-7-甲基吡咯[2,3-b]吡嗪-5-羧酸叔丁酯(187 mg, 0.6 mmol)，碳酸鉀(124 mg, 0.9 mmol)，氯(2 - 二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2 - 基)鈀(II) (43 mg, 0.06 mmol)，二氧六環(10 mL)和水(1 mL)。體系用氮氣置換三次，然後用氮氣球保護。100度條件下反應3小時，反應液加入乙酸乙酯(10 mL)，用飽和食鹽水(5 mLX3)洗滌，無水硫酸鈉乾燥並過濾濃縮，粗品用快速矽膠柱純化(甲醇：二氯甲烷=10:100)得到 (R)-3-(6-(5-(叔丁氧羰基)-7-甲基-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-2-基)-2-((2R,6R) -2,6-二甲基嗎啉-4-羰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(110 mg, 收率：62%)。ES-API: [M+H] +=691.4。
步驟二：向25 mL單口圓底燒瓶中加入(R)-3-(6-(5-(叔丁氧羰基)-7-甲基-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-2-基)-2-((2R,6R) -2,6-二甲基嗎啉-4-羰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(110 mg, 0.11 mmol)，三氟乙酸(3 mL)和二氯甲烷(6 mL)， 室溫攪拌反應30分鐘，反應液旋乾，粗品用製備HPLC(碳酸氫銨法-A)純化得到：((2R, 6R)-2,6-二甲基嗎啉基)(6-(7-甲基-5H-吡咯并[2,3-b]吡啶-2-基)-8-((R)-嗎啉-3-基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)甲酮(Z600, 10 mg, 收率: 11%)。ES-API: [M+H] +=491.4。 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 11.72 (s, 1H), 8.74 (s, 1H), 8.15 (s, 1H), 7.81 (s, 1H), 7.67 (s, 1H), 4.63 (t, J= 16.2 Hz, 1H), 4.55 – 4.41 (m, 1H), 3.99-3.85 (m, 3H), 3.81-3.71(m, 2H), 3.59 – 3.34 (m,3H), 3.31 – 3.20 (m, 4H), 2.98-2.88 (m, 6H), 2.35 (s, 3H), 1.23 – 1.10 (m, J= 6.9 Hz, 6H).
實施例342 化合物Z599的合成
步驟一：向25 mL微波反應器中加入(R)-3-(6-氯-2-((2R,6R)-2,6-二甲基嗎啉-4-羰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉- 4-羧酸叔丁酯(310 mg, 0.62 mmol)，聯硼酸頻那醇酯(318 mg, 1.25 mmol)，氯(2 - 二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2 - 基)鈀(II) (90 mg, 0.12 mmol)，醋酸鉀(184 mg, 1.88mmol)和二氧六環(10 mL)。100度條件下攪拌3小時。反應液冷卻至室溫直接用於下一步反應。ES-API: [M+H] +=586.3。
步驟二：向25 mL微波反應器中加入上一步反應得到的(R)-3-(2-((2R,6R)-2,6-二甲基嗎啉-4-羰基)-6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷) -2-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯反應液，5-溴-3-氯-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(208mg, 0.9mmol)，碳酸鉀(124mg, 0.9mmol)，氯(2 - 二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2 - 基)鈀(II) (44 mg, 0.06 mmol)，二氧六環(10 mL)和水(1 mL)。體系用氮氣置換三次，然後用氮氣球保護。100度條件下反應3小時，反應液加入乙酸乙酯(10 mL)，用飽和食鹽水(5 mLX3)洗滌，無水硫酸鈉乾燥並過濾濃縮，粗品用快速矽膠柱純化(甲醇：二氯甲烷=10:100)得到(R)-3-(6-(3-氯-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-2-((2R, 6R)-2,6-二甲基嗎啉-4-羰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-5-羧酸叔丁酯(110mg, 兩步收率：29%)。ES-API: [M+H] +=610.2。
步驟三：向25 mL單口圓底燒瓶中加入(R)-3-(6-(3-氯-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-2-((2R, 6R)-2,6-二甲基嗎啉-4-羰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-5-羧酸叔丁酯(70 mg 0.11 mmol)，三氟乙酸(3 mL)和二氯甲烷(6 mL)， 室溫攪拌反應30分鐘，反應液旋乾，得到粗品用製備HPLC(碳酸氫銨法-A)純化得到(6-(3-氯-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-8-((R)-嗎啉-3-基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)((2R，6R)-2,6-二甲基嗎啉基)甲酮(Z599, 25mg, 收率: 27%)。ES-API: [M+H] +=510.2。 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 11.72 (s, 1H), 8.74 (s, 1H), 8.15 (s, 1H), 7.81 (s, 1H), 7.67 (s, 1H), 4.63 (t, J= 16.2 Hz, 1H), 4.53 – 4.44 (m, 1H), 3.96 (d, J= 8.0 Hz, 3H), 3.81-3.35 (m, 5H), 3.27-3.21 (m, 2H), 2.98-2.86 (m, 6H), 2.35 (s, 3H), 1.17 (t, J= 6.9 Hz, 6H).
實施例343 化合物Z643和Z644的合成
步驟一：向25 mL微波反應器中加入(3R)-3-(2-(2-氧代-5-氮雜雙環[2.2.2]辛烷-5-羰基)-6-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(40 mg, 0.08 mmol)，3-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(42mg, 0.16mmol)，碳酸鉀(34mg, 0.24mmol)，氯(2-二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II) (6mg, 0.008 mmol)，二氧六環(2 mL)和水(0.3 mL)。體系用氮氣置換三次，然後用氮氣球保護。120℃條件下反應3小時，反應液加入乙酸乙酯(10 mL)，用飽和食鹽水(5 mLX3)洗滌，無水硫酸鈉乾燥並過濾濃縮，粗品用快速矽膠柱純化(甲醇：二氯甲烷=10:100)得到(3R)-3-(2-(2-氧代-5-氮雜雙環[2.2.2]辛烷-5-羰基)-6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(40mg,  收率：80%)。ES-API: [M+H] +=588.3。
步驟二：向25 mL單口圓底燒瓶中加入(3R)-3-(2-(2-氧代-5-氮雜雙環[2.2.2]辛烷-5-羰基)-6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(40mg, 0.06mmol)，三氟乙酸(3 mL)和二氯甲烷(6 mL)， 室溫攪拌反應30分鐘，反應液旋乾粗品用製備HPLC(碳酸氫銨法-A)純化和手性柱(色譜柱: IB柱, 250mm*4.6mm*5um, 流動性: ACN:IPA:DEA=90:10:2, 流速:1ml/min, 柱溫=30℃)拆分得到兩個異構體化合物。其中一個化合物任意指定為((1S, 4S)-2-氧雜-5-氮雜雙環[2.2.2]辛烷-5-基)(6-(3-甲基-1H-吡咯[2,3-b]吡啶-5-甲基)-8-((R)-嗎啉-3-基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)甲酮(Z644, 7mg, 保留時間：9.171min, 收率: 21%)。ES-API: [M+H] +=488.2。 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 11.36 (s, 1H), 8.49 (s, 1H), 8.14 (d, J= 4.8 Hz, 1H), 7.80 (s, 1H), 7.50 (s, 1H), 7.27 (s, 1H), 4.58 (d, J= 16.4 Hz, 1H), 4.41 (d, J= 16.4 Hz, 1H), 4.23 – 3.41 (m, 14H), 3.17 – 2.83 (m, 4H), 2.32 (s, 3H), 2.11-1.65 (m, 4H).
另一個化合物任意指定為((1R, 4R)-2-氧雜-5-氮雜雙環[2.2.2]辛烷-5-基)(6-(3-甲基-1H-吡咯[2,3-b]吡啶-5-甲基)-8-((R)-嗎啉-3-基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)甲酮(Z643, 7mg, 保留時間：10.639min, 收率: 21%)。ES-API: [M+H] +=488.2。 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 11.37 (s, 1H), 8.51 (s, 1H), 8.14 (d, J= 4.6 Hz, 1H), 7.81 (s, 1H), 7.53 (s, 1H), 7.28 (s, 1H), 4.59 (d, J= 16.4 Hz, 1H), 4.40 (d, J= 16.3 Hz, 1H), 4.28 – 3.44 (m, 14H), 2.96 (s, 4H), 2.32 (s, 3H), 2.05 – 1.66 (m, 4H).
實施例344 化合物Z582的合成
步驟一：氮氣保護下，(3R)-3-(2-(3-氧雜-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羰基)-6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2)-二氧硼雜環戊烷-2-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(80 mg, 0.16 mmol)，5-溴-3-甲氧基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(37 mg, 0.16 mmmol)，[1,1'-雙(二苯基膦)二茂鐵]二氯化鈀(12 mg, 0.02 mmol)和碳酸鉀(69 mg, 0.50 mmol)的1,4-二氧六環(2 mL)和水(0.4 mL)混合物，100℃攪拌2小時。反應結束後，反應液溶於乙酸乙酯(20 mL)，並依次用飽和食鹽水(10 mL)和水(10 mL)洗滌。有機相用無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮並用快速矽膠柱(0-100%四氫呋喃/石油醚)純化，得到無色油狀物 (3R)-3-(2-(3-氧雜-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羰基)-6-(3-甲氧基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶)-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(70 mg, 收率70%)。ES-API: [M+H] += 604.3。
步驟二：冰浴條件下，將(3R)-3-(2-(3-氧雜-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羰基)-6-(3-甲氧基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶)-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(70 mg, 0.10 mmol)的二氯甲烷(1 mL)溶液中，室溫攪拌1小時。反應液濃縮，加入7M胺甲醇(5 mL)中和，隨後濃縮並用製備HPLC(甲酸)純化，得到(3-氧雜-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-基)(6-(3-甲氧基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶)-5-基)-8-((R)-嗎啉-3-基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)甲酮(Z582, 12 mg, 純度100%，收率19%, 甲酸鹽)，白色固體。ES-API: [M+H] += 504.2。 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 11.10 (s, 1H), 8.48 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 8.23 (s, 1H), 8.07 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 7.74 (s, 1H), 7.43 (s, 1H), 7.07 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 4.75 – 4.67 (m, 1H), 4.60 – 4.52 (m, 1H), 3.98 – 3.93 (m, 1H), 3.92 – 3.88 (m, 2H), 3.84 (s, 3H), 3.81 – 3.74 (m, 2H), 3.67 (t, J= 10.4 Hz, 2H), 3.61 – 3.52 (m, 5H), 3.34 – 3.23 (m, 1H), 2.99 – 2.89 (m, 4H), 1.87 – 1.72 (m, 4H).
實施例345 化合物Z584和Z583的合成
步驟一：將3-氧雜-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷鹽酸鹽(170 mg, 1.14 mmol)的二氯甲烷(5 mL)混合物冷卻至0℃，依次加入三乙胺(0.4 mL, 2.88 mmol)和三光氣(340 mg, 1.15 mmol)，攪拌0.5小時。反應液濃縮，隨後溶於二氯甲烷(5 mL)中，加入三乙胺(0.4 mL, 2.88 mmol)和(R)-3-(6-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(5a, 300 mg, 0.85 mol)，室溫攪拌1小時。反應結束後，用飽和碳酸氫鈉溶液(10 mL)淬滅，二氯甲烷(10 mLX3)萃取。有機相用無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮並用快速矽膠柱(0-40%四氫呋喃/石油醚)純化，得到(3R)-3-(2-(3-氧雜-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羰基)-6-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(380 mg, 收率91%)。ES-API: [M+H] += 492.2。
步驟二：氮氣保護下，(3R)-3-(2-(3-氧雜-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羰基)-6-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(220 mg, 0.45 mmol)，聯硼酸頻那醇酯(148 mg, 0.58 mmol)，氯(2-二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II)(32 mg, 0.04 mmol)和醋酸鉀(132 mg, 1.34 mmol)的1,4-二氧六環(2 mL)混合物，110℃攪拌2小時。反應結束後，反應液過濾濃縮得到 (3R)-3-(2-(3-氧雜-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羰基)-6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(260 mg, 粗品)。ES-API: [M+H] += 584.2。
步驟三：氮氣保護下，(3R)-3-(2-(3-氧雜-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羰基)-6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(80 mg, 0.16 mmol)，2-氯-7-(三氟甲基)-5-((2-(三甲基甲矽烷基)乙氧基)甲基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪(100 mg, 0.28 mmmol)，[1,1'-雙(二苯基膦)二茂鐵]二氯化鈀(12 mg, 0.02 mmol)和碳酸鉀(69 mg, 0.50 mmol)的1,4-二氧六環(2 mL)和水(0.4 mL)混合物，100℃攪拌2小時。反應結束後，反應液溶於乙酸乙酯(20 mL)，並依次用飽和食鹽水(10 mL)和水(10 mL)洗滌。有機相用無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮並用快速矽膠柱(0-100%四氫呋喃/石油醚)純化，得到無色油狀物 (3R)-3-(2-(3-氧雜-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羰基)-6-(7-(三氟甲基)-5-((2-(三甲基甲矽烷基)乙氧基)甲基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-2-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(80 mg, 收率62%)。ES-API: [M+H] += 773.2。
步驟四：冰浴條件下，將三氟乙酸(0.5 mL)滴加到(3R)-3-(2-(3-氧雜-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羰基)-6-(7-(三氟甲基)-5-((2-(三甲基甲矽烷基)乙氧基)甲基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-2-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(80 mg, 0.10 mmol)的二氯甲烷(1 mL)溶液中，室溫攪拌1小時。反應液濃縮，加入7M胺甲醇(5 mL)，60℃攪拌1小時，隨後濃縮並用製備HPLC(碳酸氫銨)純化，得到兩個化合物。其中一個化合物為(3-氧雜-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-基)(8-((R)-嗎啉-3-基)-6-(7-(三氟甲基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-2-基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)甲酮(Z584, 3.2 mg, 純度100%, 收率5.7%, 保留時間7.35min)，白色固體。ES-API: [M+H] += 543.2。 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 8.96 (s, 1H), 8.53 (s, 1H), 8.15 (s, 1H), 7.82 (s, 1H), 4.82 – 4.70 (m, 1H), 4.68 – 4.56 (m, 1H), 4.03 – 3.95 (m, 1H), 3.95 – 3.88 (m, 2H), 3.83 – 3.75 (m, 2H), 3.73 – 3.63 (m, 2H), 3.60 – 3.50 (m, 5H), 3.30 – 3.27 (m, 1H), 3.03 – 2.91 (m, 4H), 1.89 – 1.72 (m, 4H).
另一個化合物為2-(2-(3-氧雜-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羰基)-8-((R)-嗎啉-3-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-6-基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲腈(Z583, 12 mg, 純度100%, 收率23%, 保留時間7.00 min)，白色固體。ES-API: [M+H] += 500.1。 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 9.01 (s, 1H), 8.79 (s, 1H), 8.23 (s, 1H), 7.88 (s, 1H), 4.82 – 4.70 (m, 1H), 4.64 – 4.55 (m, 1H), 4.03 – 3.96 (m, 1H), 3.95 – 3.89 (m, 2H), 3.85 – 3.76 (m, 2H), 3.68 (t, J= 10.4 Hz, 2H), 3.61 – 3.52 (m, 5H), 3.28 – 3.22 (m, 1H), 3.03 – 2.92 (m, 4H), 1.91 – 1.72 (m, 4H).
實施例346 化合物Z585的合成
步驟一：氮氣保護下，(R)-3-(6-氯-2-(4-氟呱啶-1-羰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(140 mg, 0.29 mmol)，3-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-二氧硼雜環戊烷-2-基)-1 H-吡咯并[2,3- b]吡啶(150 mg, 0.58 mmol)，氯(2-二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II)(21 mg, 0.03 mmol)和碳酸鉀(120 mg, 0.87 mmol)的1,4-二氧六環(2 mL)和水(0.4 mL)混合物，110℃攪拌2小時。反應結束後，反應液溶於乙酸乙酯(20 mL)，並依次用飽和食鹽水(10 mL)和水(10 mL)洗滌。有機相用無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮並用快速矽膠柱(0-100%四氫呋喃/石油醚)純化，得到無色油狀物(R)-3-(2-(4-氟呱啶-1-羰基)-6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(150 mg, 收率89%)。ES-API: [M+H] += 578.2。
步驟二：冰浴條件下，將三氟乙酸(1 mL)滴加到(R)-3-(2-(4-氟呱啶-1-羰基)-6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(150 mg, 0.26 mmol)的二氯甲烷(2 mL)溶液中，室溫攪拌1小時。反應液濃縮，用7M胺甲醇(5 mL)中和，隨後濃縮並用製備HPLC(碳酸氫銨)純化，得到白色固體(R)-(4-氟呱啶-1-基)(6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-8-(嗎啉-3-基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)甲酮(Z585, 45 mg, 純度100%, 收率36%)。ES-API: [M+H] += 478.1。 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 11.34 (s, 1H), 8.45 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 8.09 (d, J= 1.6 Hz, 1H), 7.75 (d, J= 1.2 Hz, 1H), 7.42 (s, 1H), 7.26 (s, 1H), 4.97 – 4.75 (m, 1H), 4.57 (d, J= 16.4 Hz, 1H), 4.44 (d, J= 16.4 Hz, 1H), 4.00 – 3.92 (m, 1H), 3.84 – 3.71 (m, 2H), 3.59 – 3.49 (m, 1H), 3.48 – 3.40 (m, 2H), 3.41 – 3.34 (m, 2H), 3.30 – 3.24 (m, 1H), 3.21 – 3.07 (m, 2H), 3.02 – 2.85 (m, 4H), 2.31 (s, 3H), 2.01 – 1.82 (m, 2H), 1.81 – 1.64 (m, 2H).
實施例347 化合物Z586的合成
步驟一：向5 mL微波反應器中加入(3R)-3-(2-(2-氧代-5-氮雜雙環[2.2.2]辛烷-5-羰基)-6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼環戊烷-2-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(99 mg, 0.17 mmol)，2-溴-7-甲基-5H-吡咯[2,3-b]吡嗪-5-羧酸叔丁酯(212 mg, 0.68 mmol)，碳酸鉀(70 mg, 0.51 mmol)，氯(2 - 二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2 - 基)鈀(II) (49 mg, 0.07 mmol)，二氧六環(2 mL)和水(0.3 mL)。體系用氮氣置換三次，然後用氮氣球保護。115℃條件下反應3小時，反應液加入乙酸乙酯(10 mL)，用飽和食鹽水(5 mLX3)洗滌，無水硫酸鈉乾燥並過濾濃縮，粗品用快速矽膠柱純化(甲醇：二氯甲烷=10:100)得到(3R)-3-(2-(2-氧代-5-氮雜雙環[2.2.2]辛烷-5-羰基)-6-(5-(叔丁氧基羰基)-7-甲基-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-2-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(60 mg, 收率：51%)。ES-API: [M+H] +=689.3。
步驟二：向25 mL單口圓底燒瓶中加入(3R)-3-(2-(2-氧代-5-氮雜雙環[2.2.2]辛烷-5-羰基)-6-(5-(叔丁氧基羰基)-7-甲基-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-2-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(60 mg 0.08 mmol)，三氟乙酸(3 mL)和二氯甲烷(6 mL)，室溫攪拌反應30分鐘，旋乾粗品用製備HPLC(碳酸氫銨法-A)純化得到(2-氧代-5-氮雜雙環[2.2.2]辛烷-5-基)(6-(7-甲基-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-2-基)-8-((R)-嗎啉-3-基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)甲酮(Z586, 30 mg, 收率: 70%)。ES-API: [M+H] +=489.2。 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 11.74 (s, 1H), 8.77 (s, 1H), 8.18 (s, 1H), 7.86 (s, 1H), 7.68 (s, 1H), 4.60 (d, J= 16.5 Hz, 1H), 4.44 (d, J= 16.5 Hz, 1H), 4.20 – 3.38 (m, 14H), 3.13-2.81 (m, 4H), 2.35 (s, 3H), 2.10 – 1.62 (m, 4H).
實施例348 化合物Z589的合成
步驟一：向25 mL圓底燒瓶中加入4-甲氧基六氫吡啶  (200mg, 1.74 mmol)，三乙胺(1403mg, 13.9mmol)和二氯甲烷(10 mL)。0℃條件下緩慢加入三光氣(515mg, 1.74mmol)，室溫攪拌1小時後加入(R)-3-(6-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(5a, 200 mg, 0.57 mmol)，室溫攪拌1小時。反應液加入二氯甲烷(20 mL)，用飽和食鹽水(20 mLX3)洗滌，無水硫酸鈉乾燥並過濾濃縮，粗品用快速矽膠柱純化(甲醇：二氯甲烷=10:100)得到(R)-3-(6-氯-2-(4-甲氧基呱啶-1-羰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(230mg, 收率: 81%)。ES-API: [M+H] +=494.2。
步驟二：向25 mL微波反應器中加入(R)-3-(6-氯-2-(4-甲氧基呱啶-1-羰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(230 mg, 0.46 mmol)，聯硼酸頻那醇酯(236 mg, 0.93 mmol)，醋酸鉀(137 mg, 1.4 mmol)，氯(2-二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II) (67 mg, 0.09 mmol)，二氧六環(10 mL)。體系用氮氣置換三次，然後用氮氣球保護。105℃微波條件下反應3小時，反應液冷卻至室溫直接用於下一步反應。ES-API: [M+H] +=586.3。
步驟三：向25 mL微波反應器中加入(R)-3-(2-(4-甲氧基呱啶-1-羰基)-6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯反應液，5-溴-3-氯-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(108 mg, 0.42 mmol)，碳酸鉀(312 mg, 1.35 mmol)，氯(2 - 二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II) (66 mg, 0.09 mmol)，二氧六環(10 mL)和水(1 mL)。體系用氮氣置換三次，然後用氮氣球保護。100℃條件下反應2小時，反應液加入乙酸乙酯(10 mL)，用飽和食鹽水(5 mLX3)洗滌，無水硫酸鈉乾燥並過濾濃縮，粗品用快速矽膠柱純化(甲醇：二氯甲烷=10:100)得到 (R)-3-(6-(3-氯-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-2-(4-甲氧基呱啶-1-羰基)-1,2, 3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(190 mg, 兩步收率: 68%)。ES-API: [M+H] +=610.3。
步驟四：向25mL單口圓底燒瓶中加入(R)-3-(6-(3-氯-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-2-(4-甲氧基呱啶-1-羰基)-1,2, 3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(190mg 0.31mmol)，3mL三氟乙酸和6mL二氯甲烷， 室溫攪拌反應30min，旋乾粗品用製備HPLC(碳酸氫銨法-A)純化得到：(R) -(6-(3-氯-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-8-(嗎啉-3-基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)(4-甲氧基呱啶-1-基)甲酮(Z589, 70mg, 收率: 44%)。ES-API: [M+H] +=510.3。 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 12.07 (s, 1H), 8.58 (d, J= 1.9 Hz, 1H), 8.08 (d, J= 1.9 Hz, 1H), 7.77 (s, 1H), 7.73 (s, 1H), 7.46 (s, 1H), 4.56 (d, J= 16.5 Hz, 1H), 4.42 (d, J= 16.4 Hz, 1H), 3.94 (d, J= 9.7 Hz, 1H), 3.77 (t, J= 9.5 Hz, 2H), 3.61 – 3.34 (m, 6H), 3.30 – 3.23 (m, 4H), 3.0-2.81 (m, 7H), 2.0-1.81 (m, 2H), 1.70 – 1.14 (m, 2H).
實施例349 化合物Z590和Z591的合成
步驟一：向5 mL微波反應器中加入(3R)-3-(2-(2-氧代-5-氮雜雙環[2.2.2]辛烷-5-羰基)-6-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(120 mg, 0.24 mmol)，聯硼酸頻那醇酯(124 mg, 0. 49 mmol)，氯(2 - 二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II) (17.5 mg, 0.02 mmol)，醋酸鉀(71 mg, 0.73 mmol)和二氧六環(10 mL)。100℃條件下攪拌2小時。反應液冷卻至室溫直接用於下一步反應。ES-API: [M+H] +=584.3。
步驟二：向25 mL微波反應器中加入上一步反應得到的(3R)-3-(2-(2-氧代-5-氮雜雙環[2.2.2]辛烷-5-羰基)-6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼環戊烷-2-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯反應液，2-溴-7-氯-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪(80 mg, 0.13 mmol)，碳酸鉀(56 mg, 0.41 mmol)，氯(2 - 二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2 - 基)鈀(II) (40 mg, 0.05 mmol)，二氧六環(10 mL)和水(1 mL)。體系用氮氣置換三次，然後用氮氣球保護。100℃條件下反應3小時，反應液加入乙酸乙酯(10 mL)，用飽和食鹽水(5 mLX3)洗滌，無水硫酸鈉乾燥並過濾濃縮，粗品用快速矽膠柱純化(甲醇：二氯甲烷=10:100)得到(3R)-3-(2-(2-氧代-5-氮雜雙環[2.2.2]辛烷-5-羰基)-6-(7-氯-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-2-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(60 mg, 兩步收率：41%)。ES-API: [M+H] +=609.2。
步驟三：向25 mL單口圓底燒瓶中加入(3R)-3-(2-(2-氧代-5-氮雜雙環[2.2.2]辛烷-5-羰基)-6-(7-氯-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-2-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(70 mg, 0.11 mmol)，三氟乙酸(3 mL)和二氯甲烷(6 mL)，室溫攪拌反應30分鐘，反應液旋乾，粗品用製備HPLC(碳酸氫銨法-A)純化和手性柱(色譜柱: Daicel CHIRALPAK, 250mm*4.6mm*5um, 流動相: n-hexane:MeOH:DEA=60:40:2, 流速:1ml/min, 柱溫=30℃)拆分得到兩個異構體化合物。其中一個異構體化合物任意指定為((1S, 4S)-2-氧雜-5-氮雜雙環[2.2.2]辛烷-5-基)(6-(7-氯-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-2-基)-8-((R)-嗎啉-3-基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)甲酮(Z590, 10 mg, 保留時間：21.084min,  收率:17%)。ES-API: [M+H] +=509.2。 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 12.47 (s, 1H), 8.92 (s, 1H), 8.22 (s, 1H), 8.12 (s, 1H), 7.87 (s, 1H), 4.61 (d, J= 16.6 Hz, 1H), 4.44 (d, J= 16.5 Hz, 1H), 4.14 – 3.42 (m, 13H), 3.15 – 2.81 (m, 5H), 2.05 (dd, J= 41.0, 10.6 Hz, 2H), 1.86 – 1.60 (m, 2H).
另一個異構體化合物任意指定為((1R, 4R)-2-氧雜-5-氮雜雙環[2.2.2]辛烷-5-基)(6-(7-氯-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-2-基)-8-((R)-嗎啉-3-基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)甲酮(Z591, 10 mg, 保留時間：24.207min, 收率:17%)。ES-API: [M+H] +=509.2。 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 12.48 (s, 1H), 8.96 (s, 1H), 8.27 (s, 1H), 8.13 (s, 1H), 7.91 (s, 1H), 4.62 (d, J= 16.6 Hz, 1H), 4.44 (d, J= 16.6 Hz, 1H), 4.12 – 3.46 (m, 13H), 3.15 – 2.89 (m, 5H), 2.10 – 1.65 (m, 4H).
實施例350 化合物Z592的合成
步驟一：取(3R)-3-(2-(8-氧-3-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-羰基)-6-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯 (75 mg, 0.152 mmol)，聯硼酸頻那醇酯(77.42 mg, 0.305 mmol)，醋酸鉀 (44.8 mg, 0.0.457 mmol)，氯(2-二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II)(10.98 mg, 0.015 mmol)溶於1, 4-二氧六環(2.5 mL)，110℃攪拌2小時，加入5-溴-3-甲氧基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(69.3 mg, 0.305 mmol)，1,1-二(二苯膦基)二茂鐵二氯化鈀 (6.27 mg, 0.009 mmol)，碳酸鉀 (63.43 mg, 0.459 mmol)，水(0.5 mL)，110℃攪拌2小時，減壓濃縮至乾，得到粗品藉由矽膠柱層析(石油醚/乙酸乙酯=30/70)純化得到(3R)-3-(2-(8-氧-3-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-羰基)-6-(3-甲氧基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(30 mg, 0.05 mmol, 收率32.6%)。ES-API: [M+H] +=604.2。
步驟二：取(3R)-3-(2-(8-氧-3-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-羰基)-6-(3-甲氧基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(30 mg, 0.05 mmol)溶於無水二氯甲烷(2 mL)，加入三氟乙酸(1 mL)，室溫反應2小時，LC-MS監測反應完全，反應液減壓濃縮至乾，加入氨水/甲醇溶液(1 mL)中和後，再次濃縮，經HPLC酸法(三氟乙酸法)純化得到(8-氧-3-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-6-(3-甲氧基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-8-((R)-嗎啉-3-基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)甲酮 (Z592, 8.9 mg, 0.018 mmol, 收率35.5%, 三氟乙酸鹽)。ES-API: [M+H] +=504.2。
實施例351 化合物Z587和Z588的合成
步驟一：向25 mL微波反應器中加入(3R)-3-(2-(2-氧代-5-氮雜雙環[2.2.2]辛烷-5-羰基)-6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜環-2-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(99 mg, 0.17 mmol)，2-溴-7-甲基-5H-吡咯[2,3-b]吡嗪-5-羧酸叔丁酯(212 mg, 0.68 mmol)，碳酸鉀(70 mg, 0.5 mmol)，氯(2 - 二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2 - 基)鈀(II) (49 mg, 0.068 mmol)，二氧六環(10 mL)和水(1 mL)。體系用氮氣置換三次，然後用氮氣球保護。115度條件下反應3小時，反應液加入乙酸乙酯(10 mL)，用飽和食鹽水(5 mLX3)洗滌，無水硫酸鈉乾燥並過濾濃縮，粗品用快速矽膠柱純化(甲醇：二氯甲烷=10:100)得到目標產物(3R)-3-(2-(2-氧代-5-氮雜雙環[2.2.2]辛烷-5-羰基)-6-(5-(叔丁氧基羰基)-7-甲基-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-2-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(60mg,  收率: 51%)。ES-API: [M+H] +=689.3。
步驟二：向25mL單口圓底燒瓶中加入(3R)-3-(2-(2-氧代-5-氮雜雙環[2.2.2]辛烷-5-羰基)-6-(5-(叔丁氧基羰基)-7-甲基-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-2-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(60 mg , 0.09 mmol)，三氟乙酸(3 mL)和二氯甲烷(6 mL)， 室溫攪拌反應30分鐘，反應液旋乾，粗品用製備HPLC(碳酸氫銨法-A)純化和手性柱(色譜柱: IB柱, 250mm*4.6mm*5um, 流動相: ACN:IPA:DEA=70:30:2, 流速:1ml/min, 柱溫=30℃)拆分得到兩個異構體化合物。其中一個異構體化合物任意指定為((1S, 4S)-2-氧雜-5-氮雜雙環[2.2.2]辛烷-5-基)(6-(7-甲基-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-2-基)-8-((R)-嗎啉-3-基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)甲酮(Z587, 12 mg, 保留時間：15.654min, 收率: 28%)。ES-API: [M+H] +=489.2。
另一個異構體化合物任意指定為((1R, 4R)-2-氧雜-5-氮雜雙環[2.2.2]辛烷-5-基)(6-(7-甲基-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-2-基)-8-((R)-嗎啉-3-基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)甲酮(Z588, 12 mg, 保留時間：17.233min, 收率:28%)。ES-API: [M+H] +=489.2。 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 11.75 (s, 1H), 8.79 (s, 1H), 8.16 (d, J= 19.0 Hz, 1H), 7.88 (s, 1H), 7.68 (s, 1H), 4.61 (d, J= 16.4 Hz, 1H), 4.43 (d, J= 16.4 Hz, 1H), 4.25-3.98 (m, 2H), 3.93 – 3.38 (m, 12H), 3.21-2.95 (m, 4H), 2.35 (s, 3H), 2.07 – 1.68 (m, 4H).
實施例352 化合物Z594和Z593的合成
步驟一：向25 mL圓底燒瓶中加入(5-溴-3-碘-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶 (500 mg, 1.55 mmol)，三甲基矽基乙炔(182 mg, 1.8 mmol)，二(三苯基膦)二氯化鈀(II) (60 mg, 0.08 mmol)，碘化亞銅(14.7 mg, 0.08 mmol)和三乙胺(10 mL)。體系用氮氣置換三次，然後用氮氣球保護。室溫條件下反應過夜，反應液加入乙酸乙酯(10 mL)，用飽和食鹽水(5 mLX3)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮，粗品用快速矽膠柱純化(甲醇：二氯甲烷=10:100)得到5-溴-3-((三甲基矽烷基)乙炔基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(350 mg, 收率: 77%)。ES-API: [M+H] +=293.0。
步驟二：向5 mL微波反應器中加入(R)-3-(2-(2-羥基-2-甲基丙基)-6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯 (100 mg, 0.19 mmol)，5-溴-3-((三甲基矽烷基)乙炔基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(110 mg, 0.38 mmol)，碳酸鉀(78 mg, 0.57 mmol)，1,1-二(二苯膦基)二茂鐵二氯化鈀 (27 mg, 0.04 mmol)，二氧六環(3 mL)和水(0.3 mL)。體系用氮氣置換三次，然後用氮氣球保護。100℃條件下反應1小時，反應液加入乙酸乙酯(10 mL)，用飽和食鹽水(5 mLX3)洗滌，無水硫酸鈉乾燥並過濾濃縮，粗品用快速矽膠柱純化(甲醇：二氯甲烷=10:100)得到(R)-3-(2-(2-羥基-2-甲基丙基)-6-(3-(三甲基甲矽烷基)乙炔基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(30 mg, 收率: 26%)。ES-API: [M+H] +=617.3。
步驟三：向25 mL圓底燒瓶中加入(R)-3-(2-(2-羥基-2-甲基丙基)-6-(3-(三甲基甲矽烷基)乙炔基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(30 mg, 0.05 mmol)，氟化鉀 (10 mg, 0.017 mmol)和二甲基甲醯胺(10 mL)。體系用氮氣置換三次，然後用氮氣球保護。室溫條件下反應1小時，反應液加入乙酸乙酯(10 mL)，用飽和食鹽水(5 mLX3)洗滌，無水硫酸鈉乾燥並過濾濃縮，得到(R)-3-(6-(3-乙炔基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-2-(2-羥基-2-甲基丙基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(20mg,  收率: 76%)。ES-API: [M+H] +=545.3。
步驟四：向5 mL單口圓底燒瓶中加入(R)-3-(6-(3-乙炔基-1H-吡咯[2,3-b]吡啶-5-基)-2-(2-羥基-2-甲基丙基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(20mg, 0.03mmol)，三氟乙酸(3 mL)和二氯甲烷(6 mL)， 室溫攪拌反應30分鐘，反應液旋乾，溶解於二氯甲烷(2 mL)中，加入氨/甲醇(7M, 2 mL)攪拌1小時後旋乾，粗品用製備HPLC(碳酸氫銨法-A)純化得到兩個化合物。其中一個化合物為(R) -1-(6-(3-乙炔基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-8-(嗎啉-3-基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)-2-羥基-2-甲基丙烷-1-酮(Z594, 1mg, 收率: 6%, 保留時間：7.147min)。ES-API: [M+H] +=445.2。
另一個化合物為(R) -1-(6-(3-乙醯基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-8-(嗎啉-3-基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)-2-羥基-2-甲基丙烷-1-酮(Z593, 3.5mg, 收率: 20%, 保留時間：7.006min)。ES-API: [M+H] +=463.2。
實施例353化合物Z619和Z620的合成
步驟一：向25 mL微波反應器中加入(3R)-3-(2-(2-氧代-5-氮雜雙環[2.2.2]辛烷-5-羰基)-6-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(99 mg, 0.2 mmol)，3-氯-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼環戊烷-2-基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(168 mg, 0.6 mmol)，碳酸鉀(83 mg, 0.6 mmol)，氯(2 - 二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2 - 基)鈀(II) (14 mg, 0.02 mmol)，二氧六環(10 mL)和水(1 mL)。體系用氮氣置換三次，然後用氮氣球保護。120度條件下反應3小時，反應液加入乙酸乙酯(10 mL)，用飽和食鹽水(5 mLX3)洗滌，無水硫酸鈉乾燥並過濾濃縮，粗品用快速矽膠柱純化(甲醇：二氯甲烷=10:100)得到(3R)-3-(2-(2-氧代-5-氮雜雙環[2.2.2]辛烷-5-羰基)-6-(3-氯-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(30 mg,  收率：24%)。ES-API: [M+H] +=608.3。
步驟二：向25 mL單口圓底燒瓶中加入(3R)-3-(2-(2-氧代-5-氮雜雙環[2.2.2]辛烷-5-羰基)-6-(3-氯-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(30 mg, 0.03 mmol)，三氟乙酸(3 mL)和二氯甲烷(6 mL)，室溫攪拌反應30分鐘，反應液旋乾，粗品用製備HPLC(碳酸氫銨法-A)純化和手性柱(色譜柱: Daicel CHIRALPAK, 250mm*4.6mm*5um, 流動相: n-hexane:MeOH:DEA=50:50:2, 流速:1ml/min, 柱溫=30℃)拆分得到兩個異構體化合物。其中一個異構體化合物任意指定為((1R, 4R)-2-氧雜-5-氮雜雙環[2.2.2]辛烷-5-基)(6-(3-氯-1H-吡咯[2,3-b]吡啶-5-甲基)-8-((R)-嗎啉-3-基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)甲酮(Z619, 3 mg, 保留時間: 24.496min, 收率:18%)。ES-API: [M+H] +=508.2。 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 12.07 (s, 1H), 8.58 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 8.08 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 7.75 (d, J= 15.9 Hz, 2H), 7.47 (s, 1H), 4.58 (d, J= 16.3 Hz, 1H), 4.41 (d, J= 16.3 Hz, 1H), 4.10 – 3.69 (m, 9H), 3.61-3.41 (m, 4H), 3.26 (d, J= 10.6 Hz, 1H), 3.04 – 2.86 (m, 4H), 2.13 – 1.65 (m, 4H).
另一個異構體化合物任意指定為((1S, 4S)-2-氧雜-5-氮雜雙環[2.2.2]辛烷-5-基)(6-(3-氯-1H-吡咯[2,3-b]吡啶-5-甲基)-8-((R)-嗎啉-3-基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)甲酮(Z620, 3 mg, 保留時間: 23.482min, 收率:18%)。ES-API: [M+H] +=508.2。 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 12.07 (s, 1H), 8.58 (d, J= 1.9 Hz, 1H), 8.08 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 7.75 (d, J= 16.1 Hz, 2H), 7.47 (s, 1H), 4.58 (d, J= 16.5 Hz, 1H), 4.42 (d, J= 16.3 Hz, 1H), 4.10 – 3.40 (m, 13H), 3.26 (d, J= 10.5 Hz, 1H), 2.99-2.84 (m, 4H), 2.07 – 1.64 (m, 4H).
實施例354 化合物Z615的合成
步驟一：向50 mL圓底燒瓶中加入4-甲基四氫吡喃-4-羧酸  (144 mg, 1.0 mmol)，N,N-二甲基甲醯胺兩滴和二氯甲烷(10 mL)。0度條件下緩慢加入草醯氯(317 mg, 2.5 mmol)，室溫攪拌1小時h後旋乾，溶解在二氯甲烷(10 mL)，向混合物中加入三乙胺(120 mg, 1.2 mmol)和(R)-3-(6-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯 (5a, 70 mg, 0.2 mmol)，室溫攪拌1小時，反應液加入二氯甲烷(20 mL)，用飽和食鹽水(20 mLX3)洗滌，無水硫酸鈉乾燥並過濾濃縮，粗品用快速矽膠柱純化(甲醇：二氯甲烷=10:100)得到(R)-3-(6-氯-2-(4-甲基四氫-2H-吡喃-4-羰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(90 mg, 收率: 95%)。ES-API: [M+H] +=479.2。
步驟二：向25 mL微波反應器中加入(R)-3-(6-氯-2-(4-甲基四氫-2H-吡喃-4-羰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(150 mg, 0.31 mmol)，3-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(161 mg, 0.63 mmol)，碳酸鉀(129 mg, 0.94 mmol)，氯(2 - 二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2 - 基)鈀(II) (22 mg, 0.03 mmol)，二氧六環(10 mL)和水(1 mL)。體系用氮氣置換三次，然後用氮氣球保護。100度條件下反應4小時，反應液加入乙酸乙酯(30 mL)，用飽和食鹽水(30 mLX3)洗滌，無水硫酸鈉乾燥並過濾濃縮，粗品用快速矽膠柱純化(甲醇：二氯甲烷=10:100)得到(R)-3-(6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-2-(4-甲基四氫-2H-吡喃-4-羰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(110 mg, 收率: 61%)。ES-API: [M+H] +=575.3。
步驟三：向25 mL單口圓底燒瓶中加入(R)-3-(6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-2-(4-甲基四氫-2H-吡喃-4-羰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(110 mg, 0.19 mmol)，三氟乙酸(3 mL)和二氯甲烷(6 mL)，室溫攪拌反應30分鐘，反應液旋乾，粗品用製備HPLC(碳酸氫銨法-A)純化得到(R) -(6-(3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-8-(嗎啉-3-基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)(4-甲基四氫-2H-吡喃-4-基)甲酮(Z615, 50 mg, 收率: 55%)。ES-API: [M+H] +=475.3。 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 11.35 (s, 1H), 8.46 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 8.10 (d, J= 1.9 Hz, 1H), 7.76 (s, 1H), 7.44 (s, 1H), 7.27 (s, 1H), 4.98 (d, J= 16.9 Hz, 1H), 4.73 (d, J= 16.9 Hz, 1H), 3.98 – 3.46 (m, 10H), 3.28 (s, 1H), 3.02 – 2.64 (m, 5H), 2.31 (s, 3H), 2.07 (d, J= 12.5 Hz, 2H), 1.53 (dd, J= 22.4, 9.6 Hz, 2H), 1.32 (s, 3H).
實施例355 化合物Z617的合成
步驟一：向5 mL微波反應器中加入(3R)-3-(2-(4-羥基-2,2-二甲基吡咯烷-1-羰基)-6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2 -基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯 (50 mg, 0.09 mmol)，5-溴-3-氯-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(40 mg, 0.17 mmol)，碳酸鉀(35 mg,0.26 mmol)，氯(2 - 二環己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯苯基)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2 - 基)鈀(II) (12 mg, 0.02 mmol)，二氧六環(2 mL)和水(0.3 mL)。體系用氮氣置換三次，然後用氮氣球保護。115度條件下反應3小時，反應液加入乙酸乙酯(10 mL)，用飽和食鹽水(5 mLX3)洗滌，無水硫酸鈉乾燥並過濾濃縮，粗品用快速矽膠柱純化(甲醇：二氯甲烷=10:100)得到(3R)-3-(6-(3-氯-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-2-(4-羥基-2,2-二甲基吡咯烷-1-羰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(20 mg, 收率: 38%)。ES-API: [M+H] +=610.3。
步驟二：向5 mL單口圓底燒瓶中加入(3R)-3-(6-(3-氯-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-2-(4-羥基-2,2-二甲基吡咯烷-1-羰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯(20 mg, 0.03 mmol)，三氟乙酸(3 mL)和二氯甲烷(6 mL)，室溫攪拌反應30分鐘，反應液旋乾，粗品用製備HPLC(碳酸氫銨法-A)純化得到(6-(3-氯-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-8-((R)-嗎啉-3-基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)(4-羥基-2,2-二甲基吡咯烷-1-基)甲酮(Z617, 1.3 mg, 收率: 7%)。ES-API: [M+H] +=510.2。
實施例356：中間體5a衍生化，藉由單晶培養確定絕對構型
步驟一：將( R)-3-(6-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯（1000 mg, 2.83 mmol）溶於乙腈（6 mL）,攪拌下，加入K2CO3（1174 mg， 8.50 mmol）的水溶液（4 mL）。上述混合物0 oC攪拌下，加入溴化苄（0.269 mL， 2.267 mmol），0 oC 到室溫反應過夜。反應液用乙酸乙酯萃取（30 mLX2），有機相合併用飽和食鹽水(15 mL)洗滌兩遍，無水硫酸鈉乾燥並過濾濃縮，粗品用快速矽膠柱純化(乙酸乙酯：石油醚=1:4)得到 ( R)-3-(2-苄基-6-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯（860 mg，收率：69%）。ES-API: [M+H] +=443.0。
步驟二：將( R)-3-(2-苄基-6-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉-4-羧酸叔丁酯（440 mg, 0.99 mmol）溶於二氯甲烷（5 mL）， 室溫攪拌下加入三氟乙酸（3 mL）， 反應過夜，並減壓濃縮得到( R)-3-(2-苄基-6-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉（390 mg，粗品，棕色液體），不經純化直接進行下一步反應。ES-API: [M+H] +=343.0。
步驟三：將上述得到的( R)-3-(2-苄基-6-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉（195 mg，粗品），2,4-二硝基苯甲酸（212 mg， 1.00 mmol）溶於N,N-二甲基甲醯胺（2.5 mL）。0 oC攪拌下，依次加入二異丙基乙基胺（0.44 mL， 2.50 mmol），與2-(7-偶氮苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯（380 mg， 1.0 mmol），0 oC 到室溫攪拌過夜，攪拌下向體系中加入水（75 mL），大量棕黃色固體析出，過濾得到棕黃色固體。將過濾得到的固體溶於二氯甲烷/異丙醇（20 mL， 4:1），經飽和NaHCO3溶液洗滌後，用無水硫酸鈉乾燥並過濾濃縮，粗品用快速矽膠柱純化(乙酸乙酯：石油醚=0~50%) 得到( R)-(3-(2-苄基-6-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉)(2,4-二硝基苯基)甲酮（170 mg， 兩步收率：63%）。ES-API: [M+H] +=537.0。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 8.87 (d, J= 2.2 Hz, 1H), 8.61 (s, 1H), 7.75 (s, 1H), 7.45 – 7.02 (m, 7H), 5.50 (s, 1H), 4.35 – 4.05 (m, 1H), 3.99 – 3.50 (m, 7H), 3.39 (d, J= 11.7 Hz, 1H), 3.20 (d, J= 13.8 Hz, 1H), 2.85 (d, J= 6.1 Hz, 2H), 2.76 – 2.54 (m, 2H).
對製備的（( R)-(3-(2-苄基-6-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-基)嗎啉)(2,4-二硝基苯基)甲酮）進行了單晶培養。具體方法如下：稱取化合物20 mg，溶於MeOH與二氯甲烷（1:1）3 mL，藉由揮發法得到單晶， 藉由Bruker D8 Venture儀器進行X-射線單晶衍射測試。結果見下表1與圖1。圖1為分子立體結構橢球圖。
儀器參數： 光源：Mo靶                         X射線：Mo-Ka(= 0.71073 Å) 探測器：CMOS面探測器              解析度：0.80Å 電流電壓：50 kV，1.4mA               曝光時間：5 s 面探測器至樣品距離：40 mm          測試溫度：170(2)K
結構解析與精修過程：
採用SAINT程式對衍射資料進行積分還原後，採用SADABS程式對資料進行經驗吸收校正；採用SHELXT2014藉由直接法解析單晶結構，並採用最小二乘法對結構進行精修，氫原子精修過程採取各向同性計算處理獲得， C-H上氫原子藉由計算加氫獲得，並採取騎式模型對其精修處理。Flack常數為-0.04(8) ，圖1中C17為R構型。
晶體資料：
表1
 C 27H 25ClN 4O 6 F(000) = 560
M r = 536.96 D x= 1.420 Mg m -3
Monoclinic, P2 1 Mo Ka radiation,　 l = 0.71073 Å
a= 5.2791 (16) Å Cell parameters from 2023 reflections
b= 9.626 (3) Å q = 2.5–23.7°
c= 24.718 (8) Å m = 0.20 mm -1
b = 90° T= 100 K
V= 1256.2 (7)  Å 3 Block, colourless
Z= 2 0.12 × 0.08 × 0.05 mm
參照前述式(ID)化合物記載的反應路線，以及上述實施例的製備方法，藉由更改部分原料來製備表(C)所示化合物：
表(C)
結構和編號 MS [M+H] + 結構和編號 MS [M+H] + 結構和編號 MS [M+H] +
Z596 517.2 Z597 516.2 Z598 478.2
Z601 544.3 Z602 518.2 Z605 505.3
Z609 529.2 Z610 528.2 Z612 505.3
Z614 530.2 Z616 491.3 Z618 508.2
Z621 504.3 Z622 542.2 Z623 543.2
Z625 496.2 Z626 516.2 Z627 512.2
Z628 550.2 Z629 491.3 Z632 517.3
Z633 510.1 Z634 543.2 Z635 544.2
Z636 495.2 Z637 519.2 Z638 545.2
Z639 531.2 Z640 517.2 Z641 545.2
Z642 544.3            
參照上述實施例的製備方法藉由更改部分原料來製備表(A)所示化合物：
表(A)
結構和編號 MS [M+H] + 結構和編號 MS [M+H] + 結構和編號 MS [M+H] +
Z5 357.2 Z6 362.2 Z7 379.3
Z8 387.2 Z9 365.3 Z10 381.3
Z11 357.2 Z12 361.2 Z13 466.2
Z14 473.2 Z15 351.2 Z16 385.2
Z17 383.2 Z18 397.2 Z19 373.2
Z20 385.2 Z21 424.2 Z22 400.2
Z23 357.2 Z24 416.2 Z91 417.2
Z92 443.2 Z200 390.2 Z201 378.2
Z202 391.2 Z203 391.2 Z204 398.2
Z205 379.2 Z206 391.2 Z207 363.2
Z208 357.2 Z209 413.2      
參照上述實施例的製備方法藉由更改部分原料來製備表(B)所示化合物：
表(B)
結構和編號 MS [M+H] + 結構和編號 MS [M+H] + 結構和編號 MS [M+H] +
Z25 324.2 Z26 365.1 Z27 329.2
Z28 335.2 Z29 334.2 Z30 335.2
Z31 336.2 Z32 335.2 Z33 361.2
Z34 391.2    Z35 389.2 Z36 382.2
Z37 411.2    Z38 329.2    Z39 335.2
Z40 329.2 Z41 329.2 Z42 343.2
Z43 335.2 Z44 337.2 Z45 369.2
Z46 383.2 Z47 355.2 Z48 345.2
Z49 381.2 Z50 395.2 Z51 362.2
Z52 404.2 Z53 507.3 Z54 468.2
Z55 474.3 Z56 461.2 Z57 395.2
Z58 415.2 Z59 379.2 Z60 424.2
Z61 410.2 Z62 453.2 Z63 347.2
Z64 408.2 Z65 422.2 Z66 346.2
Z67 345.2 Z68 412.2 Z69 402.2
Z70 408.2 Z71 398.2 Z72 335.2
Z73 334.2 Z74 336.2 Z75 334.2   
Z76 338.2 Z77 383.1 Z78 349.1
Z79 393.1 Z80 339.2 Z81 424.2
Z82 425.2 Z83 477.2 Z84 453.1
Z85 453.2 Z86 391.2    Z87 375.2   
Z88 411.2    Z89 455.2 Z90 416.2
Z102 397.2 Z108 336.2    Z116 364.2   
Z117 363.2 Z118 343.2 Z120 350.2
Z129 413.2 Z133 388.2 Z134 449.3
Z135 335.2    Z140 403.2 Z141 418.2
Z143 417.2 Z144 432.2 Z145 348.2
Z146 414.2 Z147 362.2 Z148 348.2
Z149 378.2 Z150 348.2 Z151 320.2
Z152 324.2 Z153 405.2 Z154 373.2
Z155 349.2 Z156 377.2 Z157 446.2
Z158 470.2 Z159 482.2 Z160 375.2
Z161 375.2 Z162 437.2 Z163 440.2
Z164 481.3 Z165 451.3 Z166 435.2
Z167 361.2 Z168 429.2 Z169 417.2
Z170 352.2 Z171 449.3 Z172 435.2
Z173 366.2 Z174 349.2    Z175 375.2
Z176 323.2 Z177 374.2 Z178 402.2
Z179 324.2 Z180 329.2    Z182 375.2
Z183 508.2 Z184 340.2    Z185 349.2   
Z187 509.3 Z188 437.2 Z189 365.2
Z191 375.2 Z192 351.2 Z193 365.2
Z194 366.2 Z195 379.2 Z196 354.2
Z197 357.3 Z198 434.3 Z240 360.2
Z241 468.2 Z248 436.2 Z253 400.2
Z254 413.2 Z255 387.2 Z263 425.2
Z257 466.2 Z258 387.2 Z259 438.2
Z260 424.2 Z264 459.2 Z265 424.2
Z266 396.2 Z267 473.2 Z268 511.2
Z269 443.2 Z270 457.2 Z271 487.2
Z272 506.2 Z273 452.2 Z274 452.2
Z275 437.2 Z276 453.2 Z277 473.2
Z278 429.2 Z326 513.3 Z329 499.3
Z321 413.2 Z322 413.2 Z338 363.2
Z324 468.2 Z325 391.2 Z332 452.2
 Z352 481.2 Z334 431.2 Z353 495.2
Z360 514.2 Z363 436.2 Z367 352.2
Z366-1 491.2 Z366-2 491.2 Z369 457.2
Z370 452.2  Z371 413.2 Z378 421.2
Z379 447.2 Z380 413.2 Z381 455.2
Z383 445.2 Z384 454.2 Z403 419.2
Z407 445.3 Z390 472.3 Z391 458.3
Z392 458.3 Z393 458.3 Z394 458.3
 Z395 486.3 Z396 456.3 Z397 488.3
Z398 411.2 Z399 416.2 Z400 413.2
Z407 445.3 Z408 425.2 Z409 501.2
Z434 461.3 Z412 521.2 Z432 447.2
Z431 434.3 Z415 503.2 Z417 489.3
Z418 455.2 Z427 441.2 Z420 445.3
Z421 432.3 Z426 435.2 Z423 449.3
Z424 449.3 Z520 515.3 Z521 437.2
Z524 485.2 Z525 451.2 Z526 431.2
Z529 469.2 Z530 464.3 Z534 436.2
Z535 482.3 Z536 477.2 Z537 529.2
Z539 483.2 Z542 484.2 Z547 440.2
Z548 493.2 Z553 460.2 Z554 461.2
Z557 501.3 Z559 517.3 Z560 475.3
Z561 495.2 Z564 488.3      
測試例1  SLP76磷酸化測定
RPMI-1640：購自Gibco；貨號：11875-093；FBS：購自Gibco；貨號：10099-141C；PS：購自Gibco；貨號：15140-122；PBS：購自Hyclone；貨號：SH30256.01；EDTA, 0.5M, pH 8.0購自：absin；貨號：abs9133；Dynabeads anti-human CD3：購自Thermo Fisher；貨號：11151D；96 well F-bottom TC plate：購自Corning；貨號：3599；96 well V-storage plate：購自Corning；貨號：3894；Halt Protease Inhibitor Cocktail, EDTA-Free (100X)：購自Thermo Fisher；貨號：78439；PathScan Phospho-SLP-76 (Ser376) Sandwich ELISA Kit購自：CST；貨號：78222CA；
藉由對S376處的SLP76磷酸化的檢測來測試細胞內的HPK1抑制活性，本試驗使用的細胞是Jurkat, Clone E6-1，該細胞表達HPK1和SLP76。
細胞培養：Jurkat, Clone E6-1細胞(購於ATCC；貨號：TIB-512；完全培養基：RPMI-1640 + 10% FBS + 1% PS)，採用含10%胎牛血清和1%雙抗(青鏈黴素混合液)的RPMI-1640完全培養基，置於37℃，5% CO 2的培養箱中進行培養，每週傳代2-3次，維持培養密度為1×10 5/mL~1×10 6/mL。
1000×儲存藥板配製：配製1000×化合物儲存板，將10 mM或者5 mM的化合物儲存液用DMSO進行稀釋，起始濃度10 mM(5 mM)，9個濃度梯度，3.162倍稀釋。化合物儲存板用封板膜密封，放入-20℃冰箱儲存備用。
Beads wash buffer配製：100 mL PBS中加入0.1 mL FBS和0.4 mL 0.5 M EDTA (終濃度為2 mM)，放入4℃冰箱儲存備用。
5×蛋白裂解液配製：取10× Cell lysis buffer，用去離子水稀釋至5× ，並加入1/20總體積的100× Protease Inhibitor Cocktail，置於濕冰上保存備用，現用現配。
細胞接種和加藥：取出1000×儲存藥板，室溫避光融化。然後用新鮮RPMI-1640完全培養基配製10×中間藥板，充分混勻。選取處於對數生長期的Jurkat細胞，收集細胞，離心後沉澱用新鮮完全培養基重懸，計數，調整細胞密度至2.22×10 6/mL，接種到96孔板中(每孔體積為90 μL)，設置空白對照孔(不接種細胞，加入110 μL培養基)。從10×中間藥板中，轉移10 μL含藥培養基(10×)到96孔細胞板中(DMSO終濃度為0.1%)，同時設置DMSO對照組(加入0.1% DMSO處理細胞)、刺激對照組(加入10 μL培養基處理細胞)和未刺激組(加入10 μL培養基處理細胞)，雙複孔，輕拍混勻，然後放入37℃，5% CO 2培養箱中，培養1 小時。
Anti-CD3磁珠刺激：取出Dynabeads anti-human CD3，震盪混勻60秒後吸取所需體積的磁珠，加入等體積或者不低於1 mL的洗滌液洗滌一次，之後加入新鮮完全培養基重懸並調整磁珠密度為4×10 7/mL ，置於冰上待用。藥物預孵育結束後，取出細胞培養孔板，每孔加入10 μL Dynabeads anti-human CD3處理細胞，未刺激組加入10 μL培養基，2500 rpm震盪10秒以充分混勻，然後放入37℃，5% CO 2培養箱中，繼續培養20分鐘。
p-SLP76蛋白水平檢測：使用PathScan Phospho-SLP-76 (Ser376) Sandwich ELISA Kit 檢測p-SLP76蛋白水平。Anti-CD3磁珠刺激結束後，取出細胞培養孔板，每孔加入27 μL預冷的5×蛋白裂解液，置於冰上裂解30 分鐘。裂解結束後，4℃, 400×g 離心5分鐘，每孔加入25 μL樣品和75 μL樣本稀釋液，置於37℃，5% CO 2培養箱中孵育2小時，參照試劑盒說明書進行後續檢測步驟，用酶標儀讀取450nm處各孔的吸光度(OD值)。
資料分析處理：按下列公式計算p-SLP76蛋白水平抑制率：抑制率(Inhibition rate%)=[1-(OD Compound-OD Blank control) / (OD DMSO control– OD Blank control)] ×100%。其中OD Compound為細胞化合物處理孔的讀值，OD Blank control為空白對照孔的讀值，OD DMSO control為細胞DMSO對照孔的讀值。使用XLfit 5.5.x軟體採用“Dose response one site/f(x) 205[fit=(A+((B-A)/(1+((C/x)^D))))] ”模型擬合藥效抑制率曲線並計算藥物的IC 50值。
從實驗結果可知，本發明化合物對SLP76磷酸化具有較高的抑制活性，IC 50值小於5000 nM(例如1 nM至5000 nM)；部分化合物的IC 50值甚至小於3000 nM(例如1 nM 至3000 nM)或小於1000 nM(例如1 nM至1000 nM)。其中部分化合物的實驗結果如表2所示。
表2
編號 p-SLP76 IC 50(nM) 編號 p-SLP76 IC 50(nM) 編號 p-SLP76 IC 50(nM) 編號 p-SLP76 IC 50(nM)
Z2 2897.1 Z3 853.1 Z3-1 ＞10000 Z3-2 603.8
Z4 3574.9 Z93 438.6 Z93-2 235.0 Z94 2846.4
Z94-2 1388.0 Z95 1077.0 Z95-2 623.3 Z96 1001.1
Z97 377.0 Z97-2 164.3 Z98 237.3 Z98-2 151.5
Z100 211.6 Z100-2 327.9 Z101 162.6 Z101-2 110.9
Z103 545.4 Z104 77.0 Z105 198.5 Z106 132.8
Z107 525.3 Z223 301.0 Z225 1337.0 Z104-2 196.9
Z137 159.41 Z199 116.6 Z181 1705.0 Z228-1 84.4
Z136 7909.7 Z229 275.7 Z231 ＞10000 Z109 1061.0
Z112 304.9 Z110 2838.1 Z108-1 570.7 Z236 3810.4
Z237 100.2 Z138 132.1 Z244 96.58 Z238 354.42
Z139 158.7 Z251 131.41 Z250 193.07 Z243 2508.09
Z219-2 122.06 Z279 161.97 Z271-2 379.75 Z281 2029.08
Z283 285.8 Z285 322.74 Z132 352.2 Z121 185.2
Z122 179.1 Z126 252.0 Z125 301.0 Z123 343.0
Z124 260.1 Z127 204.29 Z130 1805.4 Z210 226.9
Z211 463.1 Z212 909.4 Z119 358.0 Z213 318.2
Z214 180.5 Z215 443.6 Z216 107.5 Z34-1 265.4
Z119-1 390.2 Z54-1 400.6 Z217 133.0 Z37-1 143.3
Z218 367.4 Z219 257.4 Z220 469.0 Z221 215.0
Z222 201.0 Z224 333.0 Z104-1 126.2 Z186 3760.6
Z190 494.43 Z226 10697.0 Z227 118.6 Z228-2 49.3
Z131 663.79 Z230 437.7 Z232 1658.59 Z111 814.7
Z113 10005.8 Z233 520.0 Z235 735.4 Z242 175.45
Z245 118.68 Z252 1772.47 Z249 208.06 Z444 334.63
Z75-1 475.43 Z219-1 173.74 Z240-1 769.82 Z271-1 330.83
Z280 315.7 Z282 471.4 Z284 366.02 Z239 239.29
Z286 244.37 Z287 338.14 Z246 278.73 Z288 320.8
Z289 378.33 Z290 272.12 Z291 161.98 Z292 272.3
Z293 112.87 Z294 95.33 Z285-1 239.14 Z88-1 91.27
Z295 213.75 Z296 223.27 Z297 1011.49 Z298 668.33
Z299 376.23 Z300 274.42 Z301 253.61 Z302 125.33
Z303 236.39 Z304 388.62 Z305 297.3 Z306 169.79
Z307 276.56 Z151-1 739.21 Z308 440.76 Z38-1 719.14
Z309-1 82.59 Z309-2 - Z310 567.19 Z311 146
Z312 88.37 Z313 - Z314 452.46 Z315 224.81
Z316 313.53 Z317 199.9 Z318 528.15 Z319 110.54
Z320 121.45 Z247 150.6 Z327 149.93 Z333 205.23
Z365 315.06 Z364 327.49 Z323 203.64 Z330 204.66
Z331 174.4 Z328 90.73 Z336 174.49 Z335 169.98
Z356 62.06 Z256 279.28 Z402 453.52 Z337 359.42
Z401 462.05 Z405 89.76 Z367-1 999.27 Z362 92.92
Z345 764.77 Z359-1 135.45 Z437 119.11 Z339 148.52
Z368 417.36 Z388 43.09 Z389 47.14 Z357-1 99.3
Z357-2 80.74 Z358-2 53.25 Z361 101.55 Z359-2 98.08
Z358-1 67.4 Z343 176.69 Z261 842.27 Z262 627.45
Z438 338.8 Z344 386.05 Z348 182.88 Z350 177.6
Z354 268.63 Z349 240.47 Z351 125.59 Z376 211.09
Z375 257.72 Z372 105.73 Z382 474.26 Z443 210.82
Z404 112.51 Z387 2402.03 Z385 - Z386 632.29
Z439 209.96 Z440 141.99 Z414 2608.75 Z441 197.04
Z442 411.91 Z433 111.45 Z424-1 128.88 Z418-1 61.3
Z340 240.65 Z355 195.52 Z346 225.84 Z341 492.46
Z314-1 969.45 Z347 318.58 Z342 270.8 Z374 265.75
Z429 159 Z385 3.3 Z452 237.83 Z453 147.97
Z456 315.3 Z457 60.94 Z454 655.29 Z455 4428.47
Z460 176.81 Z445 253.18 Z458 127.05 Z459 170.82
Z448 120.42 Z422 348.97 Z446 195.63 Z447 44.8
Z419 74.21 Z450 157.77 Z377 189.83 Z449 -
Z497 185.95 Z451 44.17 Z545 559.74 Z531 385.19
Z461 195.33 Z463 292.92 Z464 193.14 Z465 143.55
Z466 305.94 Z467 385.04 Z468 340.07 Z469 125.43
Z470 127.32 Z471 179.94 Z472 215.75 Z473 143.46
Z496 62.7 Z475 116.86 Z476 66.97 Z477 422.44
Z435 257.58 Z416 63.12 Z373 158.74 Z478 328.98
Z479 146.74 Z480 118.02 Z481 442.8 Z482 311.43
Z483 111.95 Z484 364.27 Z485 125.7 Z486 153.27
Z487 153.49 Z488 149.98 Z489 82.14 Z490 429.81
Z491 307.95 Z492 95.73 Z493 295.07 Z494 452.93
Z495 129.49 Z411 428.07 Z569 154.44 Z570 31.89
Z571 108.22 Z572 28.05 Z573 121.94 Z574 83.91
Z562 146.64 Z540 524.03 Z533 228.92 Z528 42.4
Z541 33.67 Z563 174.25 Z565 245.19 Z500 143.3
Z499 218.96 Z498 195.47 Z501 284.62 Z504 232.15
Z503 168.45 Z502 169.35 Z519 196.81 Z512 147.59
Z505 263.4 Z544 50.12 Z575 420.26 Z551 497.69
Z555 481.28 Z556 961.58 Z543 235.67 Z523 51.77
Z558 936.41 Z549 66.29 Z550 117.11 Z506 685.05
Z576 188.1 Z527 163.75 Z507 118.94 Z532 393.54
Z518 129.51 Z577 78.11 Z578 163.46 Z579 276.14
Z585 83.17 Z581 86.69 Z462 255.4 Z568 66.24
Z552 104.76 Z567 125.37 Z522 110.22 Z510 283.43
Z566 81.76 Z515 172.61 Z508 303.8 Z594 824.88
Z593 317.26 Z514 134.34 Z516 161.26 Z592 215
Z590 61.75 Z591 275.3 Z589 246.14 Z586 44.97
Z606 62.9 Z608 67.09 Z624 76.03 Z607 76.15
Z611 98.87 Z595 109.31 Z603 67.41 Z604 108.04
Z630 247.18 Z631 240.09 Z613 135.71 Z600 103.07
Z599 183.58 Z643 294.21 Z644 61.59 Z582 160
Z583 2668.11 Z584 127.28 Z620 161.36 Z619 60.61
Z617 86.22 Z615 207.16 Z588 214.69 Z587 44.81
Z538 1051                  
測試例2 HPK1激酶活性測定
ADP-GloTM Kinase Assay購自Promega；貨號：V9102；HPK1購自Carna；貨號：07-410；ATP購自Promega；BSA購自Sigma；貨號：B2064-100G；MgCl2購自Shyuanye；貨號：R21455；MBP購自Millipore；貨號：13-110；Briji-35購自Sigma；貨號：B4184-100ML；Tris-HCl購自Sigma；DTT購自Thermo Fisher；貨號：R0861；V-storage plate購自corning；貨號：3894；ProxiPlate-384-Plates購自PerkinElmer；貨號：6008289。
緩衝液配製：使用無菌水配製1×反應緩衝液：40 mM Tris-HCl, 20 mM MgCl 2, 0.01%Brij35, 50μM DTT, 0.1mg/ml BSA，實驗當天配製使用。
1000×儲存藥板配製：配製1000×化合物儲存板，將10 mM的化合物儲存液用DMSO進行稀釋，起始濃度1 mM，10個濃度梯度，3.162倍稀釋。化合物儲存板用封板膜密封，放入-20℃冰箱儲存備用。
化合物配製和加藥：取出1000×儲存藥板，室溫避光融化。然後用反應緩衝液配製5×中間藥板，充分混勻。從5×中間藥板中轉移2 μL到384孔板中，設置陰性對照孔和陽性對照孔(加入2 μL含0.5%DMSO的反應緩衝液)，每個點重複兩次。
反應液配製和孵育：HPK1蛋白使用反應緩衝液稀釋成2.5×工作液，加4 μL 2.5×HPK1蛋白分別到含有待測化合物的各孔和陽性對照孔中，陰性對照孔加入4 μL不含HPK1蛋白的反應緩衝液。1000 rpm離心1 分鐘，然後於20℃培養箱中孵育15 分鐘。使用反應緩衝液配製2.5× MBP蛋白和ATP混合工作液，濃度分別為0.5 μg/μL和50 μM，加4 μL MBP和ATP混合工作液到各孔中，1000 rpm離心1 分鐘，然後於20℃培養箱中孵育90分鐘。
ADP-Glo檢測和讀板：加入10 μL ADP-Glo到實驗板各孔中，1000 rpm離心1 分鐘，於20℃培養箱中孵育60分鐘。然後從實驗板中轉移10 μL孵育結束後的溶液到一塊新的384孔板中，每孔加入10 μL激酶檢測試劑，400 g離心1分鐘，於20℃培養箱中孵育60分鐘，用酶標儀讀取化學發光訊號。
資料分析處理：抑制率%=(1-(實驗孔-陰性對照孔)/(陽性對照孔-陰性對照孔))*100%；陰性對照孔：10 μM ATP + 0.1 μg/μL MBP + DMSO；陽性對照孔：1 nM HPK1 + 10 μM ATP + 0.1 μg/μL MBP + DMSO；實驗孔：1 nM HPK1 + 10 μM ATP + 0.1 μg/μL MBP + 化合物；使用Graphpad Prism 8.0.1分析資料，使用四參數法擬合藥效抑制率曲線並計算藥物的IC 50值。
從實驗結果可知，本發明化合物對HPK1激酶具有較高的抑制活性，IC 50值小於500 nM(例如0.1 nM至500 nM)；部分化合物的IC 50值甚至小於100 nM(例如0.1 nM 至100 nM)或小於50nM(例如 0.1 nM至 50 nM)，更甚至小於10 nM(例如0.1 nM 至10 nM)。其中部分化合物的實驗結果如表3 所示。
表3
編號 HPK1激酶活性 IC 50(nM) 編號 HPK1激酶活性 IC 50(nM) 編號 HPK1激酶活性 IC 50(nM) 編號 HPK1激酶活性 IC 50(nM)
Z2 2.72 Z3 4.34 Z3-1 230.6 Z3-2 3.37
Z4 48.68 Z93 1.62 Z93-1 162.9 Z93-2 0.71
Z94 4.34 Z94-1 92.7 Z94-2 1.53 Z95 3.11
Z95-1 18.38 Z95-2 1.45 Z96 4.13 Z97 1.54
Z97-1 120.08 Z97-2 0.67 Z98 0.90 Z98-1 49.41
Z98-2 0.50 Z100 4.26 Z100-1 61.88 Z100-2 1.52
Z101 0.49 Z101-1 42.70 Z101-2 0.99 Z103 2.65
Z104 0.29 Z105 0.47 Z106 0.53 Z107 5.79
Z104-1 0.62 Z186 34.24 Z190 1.89 Z226 3.25
Z227 0.52 Z228-2 0.41 Z131 7.54 Z230 1.04
Z232 20.53 Z114 138.43 Z111 5.81 Z113 62.20
Z110 26.95 Z233 4.01 Z234-1 154.34 Z235 1.32
Z138 0.81 Z242 0.52 Z245 0.45 Z252 5.1
Z249 0.38 Z444 0.65 Z75-1 1.7 Z219-1 0.42
Z240 2.28 Z271-1 1.03 Z280 0.54 Z282 0.38
Z284 0.83 Z239 - Z132 3.64 Z121 0.50
Z122 0.71 Z126 0.78 Z125 1.43 Z123 1.35
Z124 0.33 Z127 0.58 Z128 167.95 Z130 3.06
Z210 0.62 Z211 1.70 Z212 3.76 Z119 1.54
Z213 0.64 Z214 1.04 Z215 0.51 Z216 0.41
Z34-1 0.55 Z119-1 1.06 Z119-2 90.03 Z54-1 0.60
Z217 0.44 Z37-1 0.82 Z218 0.81 Z219 0.66
Z220 2.26 Z221 1.27 Z222 0.80 Z223 1.60
Z224 1.11 Z225 0.72 Z104-2 0.74 Z137 0.37
Z199 0.32 Z181 14.60 Z228-1 0.48 Z136 31.23
Z229 0.46 Z231 35.26 Z109 9.78 Z115 257.03
Z112 3.55 Z116-1 843.42 Z116-2 ＞1000 Z108-1 4.12
Z234-2 ＞1000 Z236 29.59 Z237 0.71 Z244 0.35
Z238 1.48 Z139 0.39 Z251 0.49 Z250 0.42
Z243 16.49 Z219-2 0.35 Z279 0.44 Z271-2 1.06
Z281 - Z283 0.3 Z285 0.91 Z286 0.46
Z287 0.4 Z246 0.48 Z288 0.69 Z289 1.35
Z290 0.77 Z291 0.6 Z292 0.97 Z293 0.47
Z294 0.52 Z285-1 0.87 Z88-1 0.38 Z295 1.22
Z296 0.86 Z297 2.37 Z298 3.3 Z299 1.06
Z300 0.64 Z301 0.61 Z302 0.93 Z303 0.83
Z304 1.18 Z305 0.84 Z306 0.64 Z307 0.53
Z151-1 2.52 Z308 2.06 Z38-1 2.97 Z309-1 0.58
Z309-2 22.67 Z310 1.79 Z311 0.56 Z312 0.47
Z313 - Z314 2.42 Z315 0.29 Z316 0.74
Z317 0.88 Z318 1.06 Z319 0.28 Z320 0.73
Z247 0.61 Z347 0.61 Z342 0.64 Z327 0.33
Z333 0.49 Z365 0.97 Z364 1.01 Z323 0.49
Z330 0.73 Z331 0.7 Z328 0.33 Z336 0.36
Z335 0.25 Z356 0.28 Z256 0.8 Z402 1.2
Z337 1.57 Z401 3.19 Z405 0.23 Z367-1 1.44
Z362 0.22 Z345 1.11 Z359-1 0.27 Z437 0.58
Z339 0.58 Z368 1.41 Z436 39.1 Z389 0.21
Z357-1 0.31 Z357-2 0.26 Z358-2 0.23 Z361 0.36
Z359-2 0.36 Z358-1 0.23 Z343 0.4 Z261 2.63
Z262 1.72 Z438 1.13 Z344 1.52 Z348 0.75
Z350 0.67 Z354 1.02 Z349 0.47 Z351 0.87
Z386 2.74 Z439 0.78 Z440 0.37 Z414 20.63
Z441 0.52 Z442 1.5 Z376 0.33 Z375 0.59
Z372 0.18 Z382 1.35 Z418-1 0.19 Z424-1 0.31
Z433 0.22 Z404 0.32 Z443 0.65 Z340 0.57
Z355 0.45 Z346 0.43 Z341 1.09 Z314-1 2.62
Z374 0.38 Z429 0.41 Z387 3.8 Z497 0.4
Z445 0.85 Z446 0.83 Z447 0.18 Z448 0.29
Z422 0.72 Z377 0.28 Z449 12.44 Z419 0.11
Z450 0.22 Z451 0.11 Z473 0.24 Z469 0.06
Z489 0.21 Z490 1.66 Z491 1.29 Z492 0.18
Z493 0.41 Z494 0.81 Z495 0.38 Z411 1.12
Z496 0.22 Z416 0.29 Z570 0.13 Z572 0.16
Z574 0.41 Z512 0.35 Z518 0.22 Z488 0.21
Z600 0.08 Z604 0.36 Z603 0.21 Z595 0.21
Z611 0.37 Z607 0.27 Z624 0.36 Z608 0.27
Z606 0.25 Z587 0.27 Z588 0.67 Z615 0.76
Z617 0.36 Z619 0.28 Z620 0.77 Z644 0.25
Z585 0.25 Z586 0.19 Z590 0.24 Z566 0.24
Z552 0.22 Z568 0.33 Z571 0.49 Z528 0.16
Z541 0.16 Z544 0.12 Z549 0.11 Z507 0.43
Z523 0.17 Z577 0.25 Z581 0.24 Z476 0.21
Z457 0.14                  
儘管本發明的具體實施方式已經得到詳細的描述，根據已經揭示的所有教導，本領域技術人員可以對本發明技術方案的細節進行各種修改和替換，這些改變均在本發明的保護範圍之內。本發明的全部範圍由所附申請專利範圍及其任何等同物給出。
無
圖1為實施例356中的分子立體結構橢球圖。

Claims (18)

  1. 一種式(IA)化合物或其藥學上可接受的鹽、立體異構體、溶劑化物或前藥， (IA) 式中， Y為CH或N； R 1為H、C 1-6烷基、-C 1-4烷基-羥基、-C 1-4烷基-氰基、-C 1-4烷基-羧基、-C 1-4烷基-C 1-6烷基、-C 1-4烷基-C 1-6烷氧基、C 3-20環烷基、3到20員雜環基、C 6-14芳基、5或6員單環雜芳基、8至10員雙環雜芳基、-C 1-4烷基-C 3-20環烷基、-C 1-4烷基-O-C 3-20環烷基、-C 1-4烷基-3到20員雜環基、-C 1-4烷基-O-3到20員雜環基、-C 1-4烷基-C 6-14芳基、-C 1-4烷基-O-C 6-14芳基、-C 1-4烷基-5或6員單環雜芳基、-C 1-4烷基-O-5或6員單環雜芳基、-C 1-4烷基-8至10員雙環雜芳基、-C 1-4烷基-O-8至10員雙環雜芳基、-C 1-4烷基-NR aR b、-C 1-4烷基-NR d-C(=O)-R c、-C 1-4烷基-NR d-C(=O)-NR aR b、-C 1-4烷基-NR d-S(=O) 2-R c、-C 1-4烷基-NR d-S(=O) 2-NR aR b、-C 1-4烷基-C(=O)-NR aR b、-C 1-4烷基-S(=O) 2-R c、-C 1-4烷基-S(=O) 2-NR aR b、-C(=O)-C 1-6烷基、-C(=O)-C 3-20環烷基、-C(=O)-3到20員雜環基、-C(=O)-C 6-14芳基、-C(=O)-5或6員單環雜芳基 、-C(=O)-8至10員雙環雜芳基、-C(=O)-NR aR b、-S(=O) 2-R c或-S(=O) 2-NR aR b；其中，所述C 1-6烷基、所述C 1-6烷氧基各自獨立地任選地被鹵素、氘、氰基或羥基取代；所述C 3-20環烷基、所述3到20員雜環基、所述C 6-14芳基、所述5或6員單環雜芳基、所述8至10員雙環雜芳基各自獨立地任選地被1、2、3或4個選自S1組的基團所取代；所述3到20員雜環基、所述5或6員單環雜芳基、所述8至10員雙環雜芳基各自獨立地含有1、2、3或4個獨立地選自N、O、S的雜原子作為環原子； Z、L 1、R 4選自下組組合中的一種： (a) Z為N；-L 1-R 4不存在； (b) Z為C； L 1為一個鍵、-C 1-4烷基-、-C 3-6單環環烷基-、-O-、-S-、-NH-、-C(=O)-、-S(=O)-或-S(=O) 2-； R 4選自下組：H、鹵素、氰基、羥基、羧基、硝基、C 1-6烷基、C 1-6烷氧基、C 3-20環烷基、3到20員雜環基、C 6-14芳基、5或6員單環雜芳基、8至10員雙環雜芳基、-C 1-4烷基-羥基、-C 1-4烷基-氰基、-C 1-4烷基-羧基、-C 1-4烷基-C 1-6烷基、-C 1-4烷基-C 1-6烷氧基、-C 1-4烷基-C 3-20環烷基、-C 1-4烷基-O-C 3-20環烷基、-C 1-4烷基-3到20員雜環基、-C 1-4烷基-O-3到20員雜環基、-C 1-4烷基-C 6-14芳基、-C 1-4烷基-O-C 6-14芳基、-C 1-4烷基-5或6員單環雜芳基、-C 1-4烷基-O-5或6員單環雜芳基、-C 1-4烷基-8至10員雙環雜芳基、-C 1-4烷基-O-8至10員雙環雜芳基、-C 1-4烷基-NR aR b、-C 1-4烷基-C(=O)-NR aR b、-C 1-4烷基-NR d-C(=O)-R c、-C 1-4烷基-NR d-C(=O)-NR aR b、-C 1-4烷基-S(=O) 2-R c、-C 1-4烷基-NR d-S(=O) 2-R c、-C 1-4烷基-S(=O) 2-NR aR b、-C 1-4烷基-NR d-S(=O) 2-NR aR b、-C(=O)-C 1-6烷基、-C(=O)-C 3-20環烷基、-C(=O)-3到20員雜環基、-C(=O)-C 6-14芳基、-C(=O)-5或6員單環雜芳基、-C(=O)-8至10員雙環雜芳基、-C(=O)-NR aR b、-NR d-C(=O)-R c、-NR d-C(=O)-NR aR b、-S(=O) 2-R c、-NR d-S(=O) 2-R c、-S(=O) 2-NR aR b、-NR d-S(=O) 2-NR aR b、-NR aR b、-OR c；所述C 1-6烷基、所述C 1-6烷氧基各自獨立地任選地被鹵素、氘、氰基或羥基取代；所述C 3-20環烷基、所述3到20員雜環基、所述C 6-14芳基、所述5或6員單環雜芳基、所述8至10員雙環雜芳基各自獨立地任選地被1、2、3或4個選自S1組的基團所取代；所述3到20員雜環基、所述5或6員單環雜芳基、所述8至10員雙環雜芳基各自獨立地含有1、2、3或4個獨立地選自N、O、S的雜原子作為環原子； 為苯基或5或6員單環雜芳基；所述5或6員單環雜芳基含有1、2或3個獨立地選自N、O、S的雜原子作為環原子； 所述苯基或5或6員單環雜芳基各自獨立地任選地被m1個R 2取代；m1為1、2、3或4； 所述R 2為 ；其中， R 2a為H、氘、C 1-6烷基、苯基或氘代C 1-6烷基和R 2b為H、氘、C 1-6烷基或氘代C 1-6烷基；或者R 2a和R 2b與和它們連接的碳原子共同構成C 3-6單環環烷基；且R 2a與碳原子之間的鍵為單鍵；R 2c為H、氘、C 1-6烷基、氘代C 1-6烷基、-C 1-4烷基-C 3-6單環環烷基或C 3-6單環環烷基；R 2d為H、氘、C 1-6烷基、氘代C 1-6烷基、C 3-20環烷基或3到20員雜環基； 或當R 2a和R 2d與和它們相連的氮原子共同構成3到20員雜環基、5或6員單環雜芳基或8至10員雙環雜芳基時，R 2c為H、氘、C 1-6烷基或氘代C 1-6烷基；R 2b為H、氘、C 1-6烷基或氘代C 1-6烷基且R 2a與碳原子之間的鍵為單鍵或R 2b為無且R 2a與碳原子之間的鍵為雙鍵；所述3到20員雜環基、所述5或6員單環雜芳基或所述8至10員雙環雜芳基各自獨立地含有一個氮原子和任選地1或2個獨立地選自N、O、S的雜原子作為環原子；且所述3到20員雜環基、所述5或6員單環雜芳基、所述8至10員雙環雜芳基各自獨立地任選地被1、2、3或4個選自S1組的基團所取代； 或當R 2c和R 2d與和它們相連的氮原子共同構成3到20員雜環基、5或6員單環雜芳基或8至10員雙環雜芳基時，R 2a為H、氘、C 1-6烷基或氘代C 1-6烷基，R 2b為H、氘、C 1-6烷基或氘代C 1-6烷基，且R 2a與碳原子之間的鍵為單鍵；所述3到20員雜環基、所述5或6員單環雜芳基或所述8至10員雙環雜芳基各自獨立地含有一個氮原子和任選地1或2個獨立地選自N、O、S的雜原子作為環原子；且所述3到20員雜環基、所述5或6員單環雜芳基、所述8至10員雙環雜芳基各自獨立地任選地被1、2、3或4個選自S1組的基團所取代； 或所述R 2為 ； 為含有一個氮原子且藉由所述氮原子與分子其餘部分連接的3到20員雜環基、5或6員單環雜芳基或8至10員雙環雜芳基； 還任選地含有1或2個獨立地選自N、O、S的雜原子作為環原子；所述3到20員雜環基、所述5或6員單環雜芳基、所述8至10員雙環雜芳基各自獨立地任選地被1、2、3或4個選自S1組的基團所取代； 為苯基或5或6員單環雜芳基；所述5或6員單環雜芳基、含有1、2或3個獨立地選自N、O、S的雜原子作為環原子；所述苯基、所述5或6員單環雜芳基各自獨立地任選地被m2個R 3取代； m2為1、2、3或4；各個R 3各自獨立地選自下組：H、氧代(=O)、鹵素、氰基、羥基、羧基、硝基、C 1-6烷基、C 1-6烷氧基、C 3-20環烷基、3到20員雜環基、C 6-14芳基、5或6員單環雜芳基、8至10員雙環雜芳基、-O-C 3-20環烷基、-O-3到20員雜環基、-O-C 6-14芳基、-O-5或6員單環雜芳基、-O-8至10員雙環雜芳基、-C 1-4烷基-羥基、-C 1-4烷基-氰基、-C 1-4烷基-C 1-6烷基、-C 1-4烷基-C 1-6烷氧基、-C 1-4烷基-C 3-20環烷基、-C 1-4烷基-O-C 3-20環烷基、-C 1-4烷基-3到20員雜環基、-C 1-4烷基-O-3到20員雜環基、-C 1-4烷基-C 6-14芳基、-C 1-4烷基-O-C 6-14芳基、-C 1-4烷基-5或6員單環雜芳基、-C 1-4烷基-O-5或6員單環雜芳基、-C 1-4烷基-8至10員雙環雜芳基、-C 1-4烷基-O-8至10員雙環雜芳基、-C 1-4烷基-NR aR b、-C 1-4烷基-C(=O)-NR aR b、-C 1-4烷基-NR d-C(=O)-R c、-C 1-4烷基-NR d-C(=O)-NR aR b、-C 1-4烷基-S(=O) 2-R c、-C 1-4烷基-NR d-S(=O) 2-R c、-C 1-4烷基-S(=O) 2-NR aR b、-C 1-4烷基-NR d-S(=O) 2-NR aR b、-C 1-4烷基-羧基、-C(=O)-C 1-6烷基、-C(=O)O-C 1-6烷基、-C(=O)-C 1-4烷基-羥基、-C(=O)-C 1-4烷基-C 1-6烷氧基、-C(=O)-C 1-4烷基-O-C 3-20環烷基、-C(=O)-C 3-20環烷基、-C(=O)O-C 3-20環烷基、-C(=O)-C 1-4烷基-C 3-20環烷基、-C(=O)-3到20員雜環基、-C(=O)-C 1-4烷基-3到20員雜環基、-C(=O)-C 6-14芳基、-C(=O)-5或6員單環雜芳基、-C(=O)-8至10員雙環雜芳基、-C(=O)-NR aR b、-NR d-C(=O)-R c、-NR d-C(=O)-NR aR b、-S(=O) 2-R c、-NR d-S(=O) 2-R c、-S(=O) 2-NR aR b、-NR d-S(=O) 2-NR aR b、-NR aR b、-OR c、-C 1-4烷基-P(=O)(C 1-6烷基) 2、-P(=O)(C 1-6烷基) 2；其中，所述C 1-6烷基、所述C 1-6烷氧基各自獨立地任選地被1、2、3或4個選自鹵素、氘、氰基、5到6員雜環基和羥基取代；所述C 3-20環烷基、所述3到20員雜環基、所述C 6-14芳基、所述5或6員單環雜芳基、所述8至10員雙環雜芳基各自獨立地任選地被1、2、3或4個選自S2組的基團所取代；所述3到20員雜環基、所述5或6員單環雜芳基、所述8至10員雙環雜芳基各自獨立地含有1、2、3或4個獨立地選自N、O、S的雜原子作為環原子； 或者 為C 5-7單環環烷基或5、6或7員單環雜環基；所述5、6或7員雜環基各自獨立地含有1、2或3個獨立地選自N、O、S的雜原子作為環原子；所述C 5-7單環環烷基、所述5、6或7員單環雜環基各自獨立地任選地被m2個R 3取代； m2為1、2、3或4；各個R 3各自獨立地選自下組：H、氧代(=O)、鹵素、氰基、羥基、羧基、硝基、C 1-6烷基、C 1-6烷氧基、C 3-20環烷基、3到20員雜環基、C 6-14芳基、5或6員單環雜芳基、8至10員雙環雜芳基、-O-C 3-20環烷基、-O-3到20員雜環基、-O-C 6-14芳基、-O-5或6員單環雜芳基、-O-8至10員雙環雜芳基、-C 1-4烷基-羥基、-C 1-4烷基-氰基、-C 1-4烷基-C 1-6烷基、-C 1-4烷基-C 1-6烷氧基、-C 1-4烷基-C 3-20環烷基、-C 1-4烷基-O-C 3-20環烷基、-C 1-4烷基-3到20員雜環基、-C 1-4烷基-O-3到20員雜環基、-C 1-4烷基-C 6-14芳基、-C 1-4烷基-O-C 6-14芳基、-C 1-4烷基-5或6員單環雜芳基、-C 1-4烷基-O-5或6員單環雜芳基、-C 1-4烷基-8至10員雙環雜芳基、-C 1-4烷基-O-8至10員雙環雜芳基、-C 1-4烷基-NR aR b、-C 1-4烷基-C(=O)-NR aR b、-C 1-4烷基-NR d-C(=O)-R c、-C 1-4烷基-NR d-C(=O)-NR aR b、-C 1-4烷基-S(=O) 2-R c、-C 1-4烷基-NR d-S(=O) 2-R c、-C 1-4烷基-S(=O) 2-NR aR b、-C 1-4烷基-NR d-S(=O) 2-NR aR b、-C 1-4烷基-羧基、-C(=O)-C 1-6烷基、-C(=O)O-C 1-6烷基、-C(=O)-C 1-4烷基-羥基、-C(=O)-C 1-4烷基-C 1-6烷氧基、-C(=O)-C 1-4烷基-O-C 3-20環烷基、-C(=O)-C 3-20環烷基、-C(=O)O-C 3-20環烷基、-C(=O)-C 1-4烷基-C 3-20環烷基、-C(=O)-3到20員雜環基、-C(=O)-C 1-4烷基-3到20員雜環基、-C(=O)-C 6-14芳基、-C(=O)-5或6員單環雜芳基、-C(=O)-8至10員雙環雜芳基、-C(=O)-NR aR b、-NR d-C(=O)-R c、-NR d-C(=O)-NR aR b、-S(=O) 2-R c、-NR d-S(=O) 2-R c、-S(=O) 2-NR aR b、-NR d-S(=O) 2-NR aR b、-NR aR b、-OR c、-C 1-4烷基-P(=O)(C 1-6烷基) 2、-P(=O)(C 1-6烷基) 2、=CR 3aR 3b；其中，2個R 3可以同時取代一個碳上的2個氫原子使得2個R 3和與它們相連的碳原子共同形成C 3-6單環環烷基或3到6員單環雜環基；或者2個R 3分別取代不同碳上的2個氫原子且2個R 3相連形成-CH 2-、-CH 2CH 2-或-CH 2CH 2CH 2-；其中，所述C 1-6烷基、所述C 1-6烷氧基各自獨立地任選地被1、2、3或4個選自鹵素、氘、氰基、5到6員雜環基和羥基取代；所述C 3-20環烷基、所述3到20員雜環基、所述C 6-14芳基、所述5或6員單環雜芳基、所述8至10員雙環雜芳基各自獨立地任選地被1、2、3或4個選自S2組的基團所取代；所述3到20員雜環基、所述5或6員單環雜芳基、所述8至10員雙環雜芳基各自獨立地含有1、2、3或4個獨立地選自N、O、S的雜原子作為環原子；其中，R 3a、R 3b各自獨立地為氫、鹵素、氰基、C 1-6烷基、鹵代C 1-6烷基、C 6-14芳基或5或6員單環雜芳基；所述C 6-14芳基或5或6員單環雜芳基任選地被1、2、3個選自鹵素、氰基、C 1-4烷基、C 1-4烷氧基、鹵代C 1-4烷基、鹵代C 1-4烷氧基的基團取代；或者R 3a、R 3b與相連的碳原子共同構成C 3-6單環環烷基或3到6員單環雜環基；所述C 3-6單環環烷基或3到6員單環雜環基任選地被1、2、3個選自鹵素、氰基、C 1-4烷基、C 1-4烷氧基、鹵代C 1-4烷基、鹵代C 1-4烷氧基、C 6-14芳基、5或6員單環雜芳基的基團取代； 上述各基團中，各個S1組的基團各自獨立地選自下組：氧代(=O)、鹵素、氰基、羥基、羧基、硝基、C 1-6烷基、C 2-6烯基、C 2-6炔基、C 1-6烷氧基、C 3-20環烷基、3到20員雜環基、C 6-14芳基、5或6員單環雜芳基、8至10員雙環雜芳基、-O-C 3-20環烷基、-O-3到20員雜環基、-O-C 6-14芳基、-O-5或6員單環雜芳基、-O-8至10員雙環雜芳基、-C≡C-C 3-20環烷基、-C≡C-3到20員雜環基、-C≡C-C 6-14芳基、-C≡C-5或6員單環雜芳基、-C≡C-8至10員雙環雜芳基、-C 1-4烷基-羥基、-C 1-4烷基-氰基、-C 1-4烷基-C 1-6烷基、-C 1-4烷基-C 1-6烷氧基、-C 1-4烷基-C 3-20環烷基、-C 1-4烷基-O-C 3-20環烷基、-C 1-4烷基-3至20員雜環基、-C 1-4烷基-O-3至20員雜環基、-C 1-4烷基-C 6-14芳基、-C 1-4烷基-O-C 6-14芳基、-C 1-4烷基-5或6員單環雜芳基、-C 1-4烷基-O-5或6員單環雜芳基、-C 1-4烷基-8至10員雙環雜芳基、-C 1-4烷基-O-8至10員雙環雜芳基、-S(=O) 2-C 1-6烷基、-S(=O) 2-C 3-20環烷基、-S(=O) 2-3至20員雜環基、-S(=O) 2-5或6員單環雜芳基、-S(=O) 2-8至10員雙環雜芳基、-C(=O)O-C 1-6烷基、-C(=O)O-C 3-20環烷基、-C(=O)O-3至20員雜環基、-C(=O)O-5或6員單環雜芳基、-C(=O)O-8至10員雙環雜芳基、-C(=O)-C 1-6烷基、-C(=O)-C 3-20環烷基、-C(=O)-C 6-14芳基、-NR a1R b1、-C(=O)-NR a1R b1、-OR c1、-C 1-4烷基-S(=O) 2-C 1-6烷基、-C 1-4烷基-S(=O) 2-C 3-20環烷基、-C 1-4烷基-S(=O) 2-3至20員雜環基、-C 1-4烷基-C(=O)O-C 1-6烷基、-C 1-4烷基-C(=O)O-C 3-20環烷基、-C 1-4烷基-C(=O)-C 1-6烷基、-C 1-4烷基-C(=O)-C 3-20環烷基、-C 1-4烷基-C(=O)-C 6-14芳基、-C(=O)-5或6員單環雜芳基、-C(=O)-8至10員雙環雜芳基、-C 1-4烷基-NR a1R b1、-C 1-4烷基-C(=O)-NR a1R b1、-C≡C-C(=O)-NR a1R b1、-C≡C-C 1-4烷基-C(=O)-NR a1R b1、-C 1-4烷基-OR c1、-C 1-4烷基-P(=O)-(C 1-6烷基) 2、-P(=O)-(C 1-6烷基) 2、-C 1-4烷基-NR d1-C(=O)-R c1、-C 1-4烷基-NR d1-C(=O)-NR a1R b1、-C 1-4烷基-NR d1-S(=O) 2-R c1、-C 1-4烷基-S(=O) 2-NR a1R b1、-C 1-4烷基-NR d1-S(=O) 2-NR a1R b1、-NR d1-C(=O)-R c1、-NR d1-C(=O)-NR a1R b1、-NR d1-S(=O) 2-R c1、-S(=O) 2-NR a1R b1、-NR d1-S(=O) 2-NR a1R b1；其中，所述C 1-6烷基、所述C 1-6烷氧基、所述C 2-6烯基、所述C 2-6炔基各自獨立地任選地被1個、2個或3個選自鹵素、氘、氰基或羥基的基團所取代；所述C 3-20環烷基、所述3到20員雜環基、所述C 6-14芳基、所述5或6員單環雜芳基、所述8至10員雙環雜芳基各自獨立地任選地被1、2、3或4個選自S3組的基團所取代；所述3到20員雜環基、所述5或6員單環雜芳基、所述8至10員雙環雜芳基各自獨立地含有1、2、3或4個獨立地選自N、O、S的雜原子作為環原子； 上述各基團中，各個S2組的基團各自獨立地選自下組：氧代(=O)、鹵素、氰基、羥基、羧基、硝基、C 1-6烷基、C 2-6炔基、C 1-6烷氧基、C 3-20環烷基、3到20員雜環基、C 6-14芳基、5或6員單環雜芳基、8至10員雙環雜芳基、-O-3到20員雜環基、-O-5或6員單環雜芳基、-O-8至10員雙環雜芳基、-C 1-4烷基-羥基、-C 1-4烷基-氰基、-C 1-4烷基-C 1-6烷基、-C 1-4烷基-C 1-6烷氧基、-C 1-4烷基-C 3-20環烷基、-C 1-4烷基-O-C 3-20環烷基、-C 1-4烷基-3至20員雜環基、-C 1-4烷基-O-3至20員雜環基、-C 1-4烷基-5或6員單環雜芳基、-C 1-4烷基-O-5或6員單環雜芳基、-C 1-4烷基-8至10員雙環雜芳基、-C 1-4烷基-O-8至10員雙環雜芳基、-S(=O) 2-C 1-6烷基、-S(=O) 2-C 3-20環烷基、-S(=O) 2-3至20員雜環基、-S(=O) 2-5或6員單環雜芳基、-S(=O) 2-8至10員雙環雜芳基、-C(=O)O-C 1-6烷基、-C(=O)O-C 3-20環烷基、-C(=O)O-3至20員雜環基、-C(=O)O-5或6員單環雜芳基、-C(=O)O-8至10員雙環雜芳基、-NR a1R b1、-C(=O)-NR a1R b1、-OR c1、-C 1-4烷基-C(=O)O-C 1-6烷基、-C 1-4烷基-C(=O)O-C 3-20環烷基、-C 1-4烷基-NR a1R b1、-C 1-4烷基-C(=O)-NR a1R b1、-C≡C-C(=O)-NR a1R b1、-C≡C-C 1-4烷基-C(=O)-NR a1R b1、-C 1-4烷基-OR c1、-C 1-4烷基-P(=O)-(C 1-6烷基) 2、-P(=O)-(C 1-6烷基) 2、-C 1-4烷基-NR d1-C(=O)-R c1、-C 1-4烷基-NR d1-C(=O)-NR a1R b1、-C 1-4烷基-NR d1-S(=O) 2-R c1、-C 1-4烷基-S(=O) 2-NR a1R b1、-C 1-4烷基-NR d1-S(=O) 2-NR a1R b1、-NR d1-C(=O)-R c1、-NR d1-C(=O)-NR a1R b1、-NR d1-S(=O) 2-R c1、-S(=O) 2-NR a1R b1、-NR d1-S(=O) 2-NR a1R b1；其中，所述C 1-6烷基、所述C 1-6烷氧基、所述C 2-6炔基各自獨立地任選地被1個、2個或3個選自鹵素、氘、氰基或羥基的基團所取代；所述C 3-20環烷基、所述3到20員雜環基、所述C 6-14芳基、所述5或6員單環雜芳基、所述8至10員雙環雜芳基各自獨立地任選地被1、2、3或4個選自S3組的基團所取代；所述3到20員雜環基、所述5或6員單環雜芳基、所述8至10員雙環雜芳基各自獨立地含有1、2、3或4個獨立地選自N、O、S的雜原子作為環原子； 上述各基團中，各個R a、各個R b、各個R a1、各個R b1各自獨立地為H、C 1-6烷基、鹵代C 1-6烷基、氘代C 1-6烷基、-C 1-4烷基-羥基、-C 1-4烷基-氰基、-C 1-4烷基-鹵代C 1-6烷基、-C 1-4烷基-氘代C 1-6烷基、-C 1-4烷基-C 1-6烷氧基、-C 1-4烷基-鹵代C 1-6烷氧基、-C 1-4烷基-氘代C 1-6烷氧基、C 3-6單環環烷基、-C 1-4烷基-C 3-6單環環烷基、-C 1-4烷基-O-C 3-6單環環烷基、3至6員單環雜環基、-C 1-4烷基-3至6員單環雜環基、-C 1-4烷基-O-3至6員單環雜環基、苯基、-C 1-4烷基-苯基、5或6員單環雜芳基、-C 1-4烷基-5或6員單環雜芳基、8至10員雙環雜芳基、-C 1-4烷基-8至10員雙環雜芳基、-S(=O) 2-C 1-6烷基、-S(=O) 2-C 3-6單環環烷基、-S(=O) 2-3至6員單環雜環基、-C(=O)-C 1-6烷基、-C(=O)-C 3-6單環環烷基、-C(=O)-3至6員單環雜環基；其中，所述C 3-6單環環烷基、所述3至6員單環雜環基、所述苯基、所述5或6員單環雜芳基、所述8至10員雙環雜芳基任選地被1或2個選自下組的基團所取代：鹵素、羥基、羧基、硝基、C 1-6烷基、鹵代C 1-6烷基、氘代C 1-6烷基、C 1-6烷氧基、鹵代C 1-6烷氧基、氘代C 1-6烷氧基、-NH 2、-NHC 1-6烷基、-N(C 1-6烷基) 2、-C 1-4烷基-P(=O)-(C 1-6烷基) 2、-P(=O)-(C 1-6烷基) 2；或 各個R a和R b與和它們相連的氮原子共同形成3到20員雜環基；各個R a1和R b1與和它們相連的氮原子共同形成3到20員雜環基；其中，所述3到20員雜環基各自獨立地任選地被1或2個選自下組的基團所取代：鹵素、羥基、羧基、硝基、C 1-6烷基、鹵代C 1-6烷基、氘代C 1-6烷基、C 1-6烷氧基、鹵代C 1-6烷氧基、氘代C 1-6烷氧基、-NH 2、-NHC 1-6烷基、-N(C 1-6烷基) 2、-C 1-4烷基-P(=O)-(C 1-6烷基) 2、-P(=O)-(C 1-6烷基) 2； 上述各基團中，各個R d、各個R d1各自獨立地為H、C 1-6烷基或氘代C 1-6烷基； 上述各基團中，各個R c、各個R c1各自獨立地為H、C 1-6烷基、鹵代C 1-6烷基、氘代C 1-6烷基、C 1-6烷氧基、鹵代C 1-6烷氧基、氘代C 1-6烷氧基、-C 1-4烷基-鹵代C 1-6烷基、-C 1-4烷基-氘代C 1-6烷基、-C 1-4烷基-C 1-6烷氧基、-C 1-4烷基-鹵代C 1-6烷氧基、-C 1-4烷基-氘代C 1-6烷氧基、C 3-6單環環烷基、-C 1-4烷基-C 3-6單環環烷基、-C 1-4烷基-O-C 3-6單環環烷基、3至6員單環雜環基、-C 1-4烷基-3至6員單環雜環基、-C 1-4烷基-O-3至6員單環雜環基、苯基、-C 1-4烷基-苯基、5或6員單環雜芳基、-C 1-4烷基-5或6員單環雜芳基、8至10員雙環雜芳基或-C 1-4烷基-8至10員雙環雜芳基；所述C 3-6單環環烷基、所述3至6員單環雜環基、所述苯基、所述5或6員單環雜芳基、所述8至10員雙環雜芳基任選地被1或2個選自下組的基團所取代：鹵素、羥基、羧基、硝基、C 1-6烷基、鹵代C 1-6烷基、氘代C 1-6烷基、C 1-6烷氧基、鹵代C 1-6烷氧基、氘代C 1-6烷氧基、-NH 2、-NHC 1-6烷基、-N(C 1-6烷基) 2、-C 1-4烷基-P(=O)-(C 1-6烷基) 2、-P(=O)-(C 1-6烷基) 2； 上述各基團中，各個S3組的基團各自獨立地選自下組：氧代(C=O)、氰基、鹵素、羥基、羧基、硝基、C 1-6烷基、鹵代C 1-6烷基、氘代C 1-6烷基、C 1-6烷氧基、鹵代C 1-6烷氧基、氘代C 1-6烷氧基、-NH 2、-NHC 1-6烷基、-N(C 1-6烷基) 2、-C 1-4烷基-P(=O)-(C 1-6烷基) 2、-P(=O)-(C 1-6烷基) 2、3至6員單環雜環基； 上述各基團中，所述-C 1-4烷基-或-C 3-6單環環烷基-為未取代的；或者-C 1-4烷基-上的氫原子各自獨立地被選自鹵素、氰基、羥基、C 1-6烷基、鹵代C 1-6烷基、氘代C 1-6烷基、-CH 2-羥基、-CH 2-氰基、苯基的基團所取代或者C 1-4烷基上同一個碳原子的兩個氫原子同時被-(CH 2) j-取代進而形成環烷基，其中j為2、3、4、5或6；-C 3-6單環環烷基-上的氫原子各自獨立地被選自鹵素、氰基、羥基、C 1-6烷基、鹵代C 1-6烷基、氘代C 1-6烷基的基團所取代。
  2. 如請求項1所述之化合物或其藥學上可接受的鹽、立體異構體、溶劑化物或前藥，其中，所述化合物為式(IA-1)化合物； 式中，R 1、Y、 、R 2、m1、 、R 3、m2如請求項1所定義； L 1為一個鍵、-C 1-4烷基-、-C 3-6單環環烷基-、-O-、-S-、-NH-、-C(=O)-、-S(=O)-或-S(=O) 2-； R 4選自下組：H、鹵素、氰基、羥基、羧基、硝基、C 1-6烷基、C 1-6烷氧基、C 3-20環烷基、3到20員雜環基、C 6-14芳基、5或6員單環雜芳基、8至10員雙環雜芳基、-C 1-4烷基-羥基、-C 1-4烷基-氰基、-C 1-4烷基-羧基、-C 1-4烷基-C 1-6烷基、-C 1-4烷基-C 1-6烷氧基、-C 1-4烷基-C 3-20環烷基、-C 1-4烷基-O-C 3-20環烷基、-C 1-4烷基-3到20員雜環基、-C 1-4烷基-O-3到20員雜環基、-C 1-4烷基-C 6-14芳基、-C 1-4烷基-O-C 6-14芳基、-C 1-4烷基-5或6員單環雜芳基、-C 1-4烷基-O-5或6員單環雜芳基、-C 1-4烷基-8至10員雙環雜芳基、-C 1-4烷基-O-8至10員雙環雜芳基、-C 1-4烷基-NR aR b、-C 1-4烷基-C(=O)-NR aR b、-C 1-4烷基-NR d-C(=O)-R c、-C 1-4烷基-NR d-C(=O)-NR aR b、-C 1-4烷基-S(=O) 2-R c、-C 1-4烷基-NR d-S(=O) 2-R c、-C 1-4烷基-S(=O) 2-NR aR b、-C 1-4烷基-NR d-S(=O) 2-NR aR b、-C(=O)-C 1-6烷基、-C(=O)-C 3-20環烷基、-C(=O)-3到20員雜環基、-C(=O)-C 6-14芳基、-C(=O)-5或6員單環雜芳基、-C(=O)-8至10員雙環雜芳基、-C(=O)-NR aR b、-NR d-C(=O)-R c、-NR d-C(=O)-NR aR b、-S(=O) 2-R c、-NR d-S(=O) 2-R c、-S(=O) 2-NR aR b、-NR d-S(=O) 2-NR aR b、-NR aR b、-OR c；所述C 1-6烷基、所述C 1-6烷氧基各自獨立地任選地被鹵素、氘、氰基或羥基取代；所述C 3-20環烷基、所述3到20員雜環基、所述C 6-14芳基、所述5或6員單環雜芳基、所述8至10員雙環雜芳基各自獨立地任選地被1、2、3或4個選自S1組的基團所取代；所述3到20員雜環基、所述5或6員單環雜芳基、所述8至10員雙環雜芳基各自獨立地含有1、2、3或4個獨立地選自N、O、S的雜原子作為環原子；其中，R a、R b、R c、R d、S1組各自如請求項1所定義。
  3. 如請求項1所述之化合物或其藥學上可接受的鹽、立體異構體、溶劑化物或前藥，其中，所述化合物為式(IA1)化合物、式(IA2)化合物、式(IA3)化合物、式(IA4)化合物、式(IA5)化合物或式(IA6)化合物； 各式中，Y、L 1、R 1、R 2、 、R 3、R 4、m2各自獨立地如請求項2所定義。
  4. 如請求項1所述之化合物或其藥學上可接受的鹽、立體異構體、溶劑化物或前藥，其中，所述化合物為式(IB)化合物； 式中，R 1、 、R 2、m1、 、R 3、m2如請求項1所定義。
  5. 如請求項4所述之化合物或其藥學上可接受的鹽、立體異構體、溶劑化物或前藥，其中，所述化合物為式(IB1)化合物、式(IB2)化合物、式(IB3)化合物、式(IB4)化合物、式(IB5)化合物或式(IB6)化合物； 各式中，R 1、R 2、 、R 3、m2各自獨立地如請求項4所定義。
  6. 如請求項1至5中任一項所述之化合物或其藥學上可接受的鹽、立體異構體、溶劑化物或前藥，其中， R 1為 ；其中，R 1a為C 1-6烷基、鹵代C 1-6烷基、氘代C 1-6烷基、C 1-6烷氧基、鹵代C 1-6烷氧基、氘代C 1-6烷氧基、-C 1-4烷基-羥基、-C 1-4烷基-氰基、-C 1-4烷基-C 1-6烷氧基、-C 1-4烷基-鹵代C 1-6烷氧基、或-C 1-4烷基-氘代C 1-6烷氧基；R 1b為H、鹵素、C 1-3烷基、鹵代C 1-3烷基、氘代C 1-3烷基、C 1-3烷氧基、鹵代C 1-3烷氧基、或氘代C 1-3烷氧基； 或者 R 1為 ；其中，R 1a為C 3-6單環環烷基、3到6員單環雜環基、苯基、5或6員單環雜芳基、或8至10員雙環雜芳基；R 1b為H、鹵素、C 1-3烷基、鹵代C 1-3烷基、氘代C 1-3烷基、C 1-3烷氧基、鹵代C 1-3烷氧基、或氘代C 1-3烷氧基；其中，所述C 3-6單環環烷基、所述3到6員單環雜環基、所述苯基、所述5或6員單環雜芳基、所述8至10員雙環雜芳基各自獨立地任選地被1、2、3或4個選自S1組的基團所取代。
  7. 一種式(IC)化合物或其藥學上可接受的鹽、立體異構體、溶劑化物或前藥， 式中， X為CR 5或N；Y為CH或N；且X和Y不能同時為N；R 5為H、C 1-6烷基或C 3-6單環環烷基； 為苯基或5或6員單環雜芳基；所述5或6員單環雜芳基含有1、2或3個獨立地選自N、O、S的雜原子作為環原子；所述苯基或5或6員單環雜芳基各自獨立地任選地被m1個R 2取代；m1為1、2、3或4； 所述R 2為 ；其中， R 2a為H、氘、C 1-6烷基、苯基或氘代C 1-6烷基和R 2b為H、氘、C 1-6烷基或氘代C 1-6烷基或者R 2a和R 2b與和它們連接的碳原子共同構成C 3-6單環環烷基，且R 2a與碳原子之間的鍵為單鍵；R 2c為H、氘、C 1-6烷基、氘代C 1-6烷基、-C 1-4烷基-C 3-6單環環烷基或C 3-6單環環烷基；R 2d為H、氘、C 1-6烷基、氘代C 1-6烷基、C 3-20環烷基或3到20員雜環基； 或當R 2a和R 2d與和它們相連的氮原子共同構成3到20員雜環基、5或6員單環雜芳基或8至10員雙環雜芳基時，R 2c為H、氘、C 1-6烷基或氘代C 1-6烷基；R 2b為H、氘、C 1-6烷基或氘代C 1-6烷基且R 2a與碳原子之間的鍵為單鍵或R 2b為無且R 2a與碳原子之間的鍵為雙鍵；所述3到20員雜環基、所述5或6員單環雜芳基或所述8至10員雙環雜芳基各自獨立地含有一個氮原子和任選地1或2個獨立地選自N、O、S的雜原子作為環原子；且所述3到20員雜環基、所述5或6員單環雜芳基、所述8至10員雙環雜芳基各自獨立地任選地被1、2、3或4個選自S1組的基團所取代； 或當R 2c和R 2d與和它們相連的氮原子共同構成3到20員雜環基、5或6員單環雜芳基或8至10員雙環雜芳基時，R 2a為H、氘、C 1-6烷基或氘代C 1-6烷基；R 2b為H、氘、C 1-6烷基或氘代C 1-6烷基；且R 2a與碳原子之間的鍵為單鍵；所述3到20員雜環基、所述5或6員單環雜芳基或所述8至10員雙環雜芳基各自獨立地含有一個氮原子和任選地1或2個獨立地選自N、O、S的雜原子作為環原子；且所述3到20員雜環基、所述5或6員單環雜芳基、所述8至10員雙環雜芳基各自獨立地任選地被1、2、3或4個選自S1組的基團所取代； 或所述R 2為 ； 為含有一個氮原子且藉由所述氮原子與分子其餘部分連接的3到20員雜環基、5或6員單環雜芳基或8至10員雙環雜芳基； 還任選地含有1或2個獨立地選自N、O、S的雜原子作為環原子；所述3到20員雜環基、所述5或6員單環雜芳基、所述8至10員雙環雜芳基各自獨立地任選地被1、2、3或4個選自S1組的基團所取代； 為苯基或5或6員單環雜芳基；所述5或6員單環雜芳基含有1、2或3個獨立地選自N、O、S的雜原子作為環原子；所述苯基、所述5或6員單環雜芳基各自獨立地任選地被m2個R 3取代； m2為1、2、3或4；各個R 3各自獨立地選自下組：H、氧代(=O)、鹵素、氰基、羥基、羧基、硝基、C 1-6烷基、C 1-6烷氧基、C 3-20環烷基、3到20員雜環基、C 6-14芳基、5或6員單環雜芳基、8至10員雙環雜芳基、-O-C 3-20環烷基、-O-3到20員雜環基、-O-C 6-14芳基、-O-5或6員單環雜芳基、-O-8至10員雙環雜芳基、-C 1-4烷基-羥基、-C 1-4烷基-氰基、-C 1-4烷基-C 1-6烷基、-C 1-4烷基-C 1-6烷氧基、-C 1-4烷基-C 3-20環烷基、-C 1-4烷基-O-C 3-20環烷基、-C 1-4烷基-3到20員雜環基、-C 1-4烷基-O-3到20員雜環基、-C 1-4烷基-C 6-14芳基、-C 1-4烷基-O-C 6-14芳基、-C 1-4烷基-5或6員單環雜芳基、-C 1-4烷基-O-5或6員單環雜芳基、-C 1-4烷基-8至10員雙環雜芳基、-C 1-4烷基-O-8至10員雙環雜芳基、-C 1-4烷基-NR aR b、-C 1-4烷基-C(=O)-NR aR b、-C 1-4烷基-NR d-C(=O)-R c、-C 1-4烷基-NR d-C(=O)-NR aR b、-C 1-4烷基-S(=O) 2-R c、-C 1-4烷基-NR d-S(=O) 2-R c、-C 1-4烷基-S(=O) 2-NR aR b、-C 1-4烷基-NR d-S(=O) 2-NR aR b、-C 1-4烷基-羧基、-C(=O)-C 1-6烷基、-C(=O)O-C 1-6烷基、-C(=O)-C 1-4烷基-羥基、-C(=O)-C 1-4烷基-C 1-6烷氧基、-C(=O)-C 1-4烷基-O-C 3-20環烷基、-C(=O)-C 3-20環烷基、-C(=O)O-C 3-20環烷基、-C(=O)O-C 3-20環烷基、-C(=O)-C 1-4烷基-C 3-20環烷基、-C(=O)-3到20員雜環基、-C(=O)-C 1-4烷基-3到20員雜環基、-C(=O)-C 6-14芳基、-C(=O)-5或6員單環雜芳基、-C(=O)-8至10員雙環雜芳基、-C(=O)-NR aR b、-NR d-C(=O)-R c、-NR d-C(=O)-NR aR b、-S(=O) 2-R c、-NR d-S(=O) 2-R c、-S(=O) 2-NR aR b、-NR d-S(=O) 2-NR aR b、-NR aR b、-OR c、-C 1-4烷基-P(=O)(C 1-6烷基) 2、-P(=O)(C 1-6烷基) 2；其中，所述C 1-6烷基、所述C 1-6烷氧基各自獨立地任選地被1、2、3或4個選自鹵素、氘、氰基、5到6員雜環基和羥基取代；所述C 3-20環烷基、所述3到20員雜環基、所述C 6-14芳基、所述5或6員單環雜芳基、所述8至10員雙環雜芳基各自獨立地任選地被1、2、3或4個選自S2組的基團所取代；所述3到20員雜環基、所述5或6員單環雜芳基、所述8至10員雙環雜芳基各自獨立地含有1、2、3或4個獨立地選自N、O、S的雜原子作為環原子； 或者 為C 5-7單環環烷基或5、6或7員單環雜環基；所述5、6或7員雜環基各自獨立地含有1、2或3個獨立地選自N、O、S的雜原子作為環原子；所述C 5-7單環環烷基、所述5、6或7員單環雜環基各自獨立地任選地被m2個R 3取代； m2為1、2、3或4；各個R 3各自獨立地選自下組：H、氧代(=O)、鹵素、氰基、羥基、羧基、硝基、C 1-6烷基、C 1-6烷氧基、C 3-20環烷基、3到20員雜環基、C 6-14芳基、5或6員單環雜芳基、8至10員雙環雜芳基、-O-C 3-20環烷基、-O-3到20員雜環基、-O-C 6-14芳基、-O-5或6員單環雜芳基、-O-8至10員雙環雜芳基、-C 1-4烷基-羥基、-C 1-4烷基-氰基、-C 1-4烷基-C 1-6烷基、-C 1-4烷基-C 1-6烷氧基、-C 1-4烷基-C 3-20環烷基、-C 1-4烷基-O-C 3-20環烷基、-C 1-4烷基-3到20員雜環基、-C 1-4烷基-O-3到20員雜環基、-C 1-4烷基-C 6-14芳基、-C 1-4烷基-O-C 6-14芳基、-C 1-4烷基-5或6員單環雜芳基、-C 1-4烷基-O-5或6員單環雜芳基、-C 1-4烷基-8至10員雙環雜芳基、-C 1-4烷基-O-8至10員雙環雜芳基、-C 1-4烷基-NR aR b、-C 1-4烷基-C(=O)-NR aR b、-C 1-4烷基-NR d-C(=O)-R c、-C 1-4烷基-NR d-C(=O)-NR aR b、-C 1-4烷基-S(=O) 2-R c、-C 1-4烷基-NR d-S(=O) 2-R c、-C 1-4烷基-S(=O) 2-NR aR b、-C 1-4烷基-NR d-S(=O) 2-NR aR b、-C 1-4烷基-羧基、-C(=O)-C 1-6烷基、-C(=O)O-C 1-6烷基、-C(=O)-C 1-4烷基-羥基、-C(=O)-C 1-4烷基-C 1-6烷氧基、-C(=O)-C 1-4烷基-O-C 3-20環烷基、-C(=O)-C 3-20環烷基、-C(=O)O-C 3-20環烷基、-C(=O)-C 1-4烷基-C 3-20環烷基、-C(=O)-3到20員雜環基、-C(=O)-C 1-4烷基-3到20員雜環基、-C(=O)-C 6-14芳基、-C(=O)-5或6員單環雜芳基、-C(=O)-8至10員雙環雜芳基、-C(=O)-NR aR b、-NR d-C(=O)-R c、-NR d-C(=O)-NR aR b、-S(=O) 2-R c、-NR d-S(=O) 2-R c、-S(=O) 2-NR aR b、-NR d-S(=O) 2-NR aR b、-NR aR b、-OR c、-C 1-4烷基-P(=O)(C 1-6烷基) 2、-P(=O)(C 1-6烷基) 2、=CR 3aR 3b；其中，2個R 3可以同時取代一個碳上的2個氫原子使得2個R 3和與它們相連的碳原子共同形成C 3-6單環環烷基或3到6員單環雜環基；或者2個R 3分別取代不同碳上的2個氫原子且2個R 3相連形成-CH 2-、-CH 2CH 2-或-CH 2CH 2CH 2-；其中，所述C 1-6烷基、所述C 1-6烷氧基各自獨立地任選地被1、2、3或4個選自鹵素、氘、氰基、5到6員雜環基和羥基取代；所述C 3-20環烷基、所述3到20員雜環基、所述C 6-14芳基、所述5或6員單環雜芳基、所述8至10員雙環雜芳基各自獨立地任選地被1、2、3或4個選自S2組的基團所取代；所述3到20員雜環基、所述5或6員單環雜芳基、所述8至10員雙環雜芳基各自獨立地含有1、2、3或4個獨立地選自N、O、S的雜原子作為環原子；其中，R 3a、R 3b各自獨立地為氫、鹵素、氰基、C 1-6烷基、鹵代C 1-6烷基、C 6-14芳基或5或6員單環雜芳基；所述C 6-14芳基或5或6員單環雜芳基任選地被1、2、3個選自鹵素、氰基、C 1-4烷基、C 1-4烷氧基、鹵代C 1-4烷基、鹵代C 1-4烷氧基的基團取代；或者R 3a、R 3b與相連的碳原子共同構成C 3-6單環環烷基或3到6員單環雜環基；所述C 3-6單環環烷基或3到6員單環雜環基任選地被1、2、3個選自鹵素、氰基、C 1-4烷基、C 1-4烷氧基、鹵代C 1-4烷基、鹵代C 1-4烷氧基、C 6-14芳基、5或6員單環雜芳基的基團取代； 為5至7員雜芳環；其中， 上m3個氫原子任選地被m3個R 4’取代；m3為1、2、3或4；R 4’選自下組：H、氧代(C=O)、鹵素、氰基、羥基、羧基、硝基、C 1-6烷基、C 2-6烯基、C 2-6炔基、C 1-6烷氧基、C 3-20環烷基、3到20員雜環基、5或6員單環雜芳基、8至10員雙環雜芳基、-C≡C-C 3-20環烷基、-C≡C-3到20員雜環基、-C≡C-C 6-14芳基、-C≡C-5或6員單環雜芳基、-C≡C-8至10員雙環雜芳基、-C≡C-C(=O)-NR aR b、-C≡C-C 1-4烷基-C(=O)-NR aR b、-C 1-4烷基-羥基、-C 1-4烷基-氰基、-C 1-4烷基-羧基、-C 1-4烷基-C 1-6烷基、-C 1-4烷基-C 1-6烷氧基、-C 1-4烷基-C 3-20環烷基、-C 1-4烷基-O-C 3-20環烷基、-C 1-4烷基-3到20員雜環基、-C 1-4烷基-O-3到20員雜環基、-C 1-4烷基-C 6-14芳基、-C 1-4烷基-O-C 6-14芳基、-C 1-4烷基-5或6員單環雜芳基、-C 1-4烷基-O-5或6員單環雜芳基、-C 1-4烷基-8至10員雙環雜芳基、-C 1-4烷基-O-8至10員雙環雜芳基、-C 1-4烷基-NR aR b、-C 1-4烷基-C(=O)-NR aR b、-C 1-4烷基-NR d-C(=O)-R c、-C 1-4烷基-NR d-C(=O)-NR aR b、-C 1-4烷基-S(=O) 2-R c、-C 1-4烷基-NR d-S(=O) 2-R c、-C 1-4烷基-S(=O) 2-NR aR b、-C 1-4烷基-NR d-S(=O) 2-NR aR b、-C(=O)-C 1-6烷基、-C(=O)-C 3-20環烷基、-C(=O)-3到20員雜環基、-C(=O)-C 6-14芳基、-C(=O)-5或6員單環雜芳基、-C(=O)-8至10員雙環雜芳基、-C(=O)-NR aR b、-NR d-C(=O)-R c、-NR d-C(=O)-NR aR b、-S(=O) 2-R c、-NR d-S(=O) 2-R c、-S(=O) 2-NR aR b、-NR d-S(=O) 2-NR aR b、-NR aR b、-OR c、-C 1-4烷基-P(=O)-(C 1-6烷基) 2、-P(=O)-(C 1-6烷基) 2；其中，所述C 1-6烷基、所述C 1-6烷氧基、所述C 2-6烯基、所述C 2-6炔基各自獨立地任選地被1個、2個或3個選自鹵素、氘、氰基或羥基的基團所取代；所述C 3-20環烷基、所述3到20員雜環基、所述C 6-14芳基、所述5或6員單環雜芳基、所述8至10員雙環雜芳基各自獨立地任選地被1、2、3或4個選自S1組的基團所取代；所述3到20員雜環基、所述5或6員單環雜芳基、所述8至10員雙環雜芳基各自獨立地含有1、2、3或4個獨立地選自N、O、S的雜原子作為環原子； 或者 為5至7員雜環；其中， 上m3個氫原子任選地被m3個R 4’取代；m3為1、2、3或4；R 4’選自下組：H、氧代(C=O)、鹵素、氰基、羥基、羧基、硝基、C 1-6烷基、C 2-6烯基、C 2-6炔基、C 1-6烷氧基、C 3-20環烷基、3到20員雜環基、C 6-14芳基、5或6員單環雜芳基、8至10員雙環雜芳基、-C≡C-C 3-20環烷基、-C≡C-3到20員雜環基、-C≡C-C 6-14芳基、-C≡C-5或6員單環雜芳基、-C≡C-8至10員雙環雜芳基、-C≡C-C(=O)-NR aR b、-C≡C-C 1-4烷基-C(=O)-NR aR b、-C 1-4烷基-羥基、-C 1-4烷基-氰基、-C 1-4烷基-羧基、-C 1-4烷基-C 1-6烷基、-C 1-4烷基-C 1-6烷氧基、-C 1-4烷基-C 3-20環烷基、-C 1-4烷基-O-C 3-20環烷基、-C 1-4烷基-3到20員雜環基、-C 1-4烷基-O-3到20員雜環基、-C 1-4烷基-C 6-14芳基、-C 1-4烷基-O-C 6-14芳基、-C 1-4烷基-5或6員單環雜芳基、-C 1-4烷基-O-5或6員單環雜芳基、-C 1-4烷基-8至10員雙環雜芳基、-C 1-4烷基-O-8至10員雙環雜芳基、-C 1-4烷基-NR aR b、-C 1-4烷基-C(=O)-NR aR b、-C 1-4烷基-NR d-C(=O)-R c、-C 1-4烷基-NR d-C(=O)-NR aR b、-C 1-4烷基-S(=O) 2-R c、-C 1-4烷基-NR d-S(=O) 2-R c、-C 1-4烷基-S(=O) 2-NR aR b、-C 1-4烷基-NR d-S(=O) 2-NR aR b、-C(=O)-C 1-6烷基、-C(=O)-C 3-20環烷基、-C(=O)-3到20員雜環基、-C(=O)-C 6-14芳基、-C(=O)-5或6員單環雜芳基、-C(=O)-8至10員雙環雜芳基、-C(=O)-NR aR b、-NR d-C(=O)-R c、-NR d-C(=O)-NR aR b、-S(=O) 2-R c、-NR d-S(=O) 2-R c、-S(=O) 2-NR aR b、-NR d-S(=O) 2-NR aR b、-NR aR b、-OR c、-C 1-4烷基-P(=O)-(C 1-6烷基) 2、-P(=O)-(C 1-6烷基) 2；所述C 1-6烷基、所述C 1-6烷氧基、所述C 2-6烯基、所述C 2-6炔基各自獨立地任選地被1個、2個或3個選自鹵素、氘、氰基或羥基的基團所取代；所述C 3-20環烷基、所述3到20員雜環基、所述C 6-14芳基、所述5或6員單環雜芳基、所述8至10員雙環雜芳基各自獨立地任選地被1、2、3或4個選自S1組的基團所取代；所述3到20員雜環基、所述5或6員單環雜芳基、所述8至10員雙環雜芳基各自獨立地含有1、2、3或4個獨立地選自N、O、S的雜原子作為環原子； 上述各基團中，各個S1組的基團各自獨立地選自下組：氧代(=O)、鹵素、氰基、羥基、羧基、硝基、C 1-6烷基、C 2-6烯基、C 2-6炔基、C 1-6烷氧基、C 3-20環烷基、3到20員雜環基、C 6-14芳基、5或6員單環雜芳基、8至10員雙環雜芳基、-O-C 3-20環烷基、-O-3到20員雜環基、-O-C 6-14芳基、-O-5或6員單環雜芳基、-O-8至10員雙環雜芳基、-C≡C-C 3-20環烷基、-C≡C-3到20員雜環基、-C≡C-C 6-14芳基、-C≡C-5或6員單環雜芳基、-C≡C-8至10員雙環雜芳基、-C 1-4烷基-羥基、-C 1-4烷基-氰基、-C 1-4烷基-C 1-6烷基、-C 1-4烷基-C 1-6烷氧基、-C 1-4烷基-C 3-20環烷基、-C 1-4烷基-O-C 3-20環烷基、-C 1-4烷基-3至20員雜環基、-C 1-4烷基-O-3至20員雜環基、-C 1-4烷基-C 6-14芳基、-C 1-4烷基-O-C 6-14芳基、-C 1-4烷基-5或6員單環雜芳基、-C 1-4烷基-O-5或6員單環雜芳基、-C 1-4烷基-8至10員雙環雜芳基、-C 1-4烷基-O-8至10員雙環雜芳基、-S(=O) 2-C 1-6烷基、-S(=O) 2-C 3-20環烷基、-S(=O) 2-3至20員雜環基、-C(=O)O-C 1-6烷基、-C(=O)O-C 3-20環烷基、-C(=O)-C 1-6烷基、-C(=O)-C 3-20環烷基、-C(=O)-C 6-14芳基、-NR a1R b1、-C(=O)-NR a1R b1、-OR c1、-C 1-4烷基-S(=O) 2-C 1-6烷基、-C 1-4烷基-S(=O) 2-C 3-20環烷基、-C 1-4烷基-S(=O) 2-3至20員雜環基、-C 1-4烷基-C(=O)O-C 1-6烷基、-C 1-4烷基-C(=O)O-C 3-20環烷基、-C 1-4烷基-C(=O)-C 1-6烷基、-C 1-4烷基-C(=O)-C 3-20環烷基、-C 1-4烷基-C(=O)-C 6-14芳基、-C(=O)-5或6員單環雜芳基、-C(=O)-8至10員雙環雜芳基、-C 1-4烷基-NR a1R b1、-C 1-4烷基-C(=O)-NR a1R b1、-C≡C-C(=O)-NR a1R b1、-C≡C-C 1-4烷基-C(=O)-NR a1R b1、-C 1-4烷基-OR c1、-C 1-4烷基-P(=O)-(C 1-6烷基) 2、-P(=O)-(C 1-6烷基) 2、-C 1-4烷基-NR d1-C(=O)-R c1、-C 1-4烷基-NR d1-C(=O)-NR a1R b1、-C 1-4烷基-NR d1-S(=O) 2-R c1、-C 1-4烷基-S(=O) 2-NR a1R b1、-C 1-4烷基-NR d1-S(=O) 2-NR a1R b1、-NR d1-C(=O)-R c1、-NR d1-C(=O)-NR a1R b1、-NR d1-S(=O) 2-R c1、-S(=O) 2-NR a1R b1、-NR d1-S(=O) 2-NR a1R b1；其中，所述C 1-6烷基、所述C 1-6烷氧基、所述C 2-6烯基、所述C 2-6炔基各自獨立地任選地被1個、2個或3個選自鹵素、氘、氰基或羥基的基團所取代；所述C 3-20環烷基、所述3到20員雜環基、所述C 6-14芳基、所述5或6員單環雜芳基、所述8至10員雙環雜芳基各自獨立地任選地被1、2、3或4個選自S3組的基團所取代；所述3到20員雜環基、所述5或6員單環雜芳基、所述8至10員雙環雜芳基各自獨立地含有1、2、3或4個獨立地選自N、O、S的雜原子作為環原子； 上述各基團中，各個S2組的基團各自獨立地選自下組：氧代(=O)、鹵素、氰基、羥基、羧基、硝基、C 1-6烷基、C 2-6炔基、C 1-6烷氧基、C 3-20環烷基、3到20員雜環基、C 6-14芳基、5或6員單環雜芳基、8至10員雙環雜芳基、-O-3到20員雜環基、-O-5或6員單環雜芳基、-O-8至10員雙環雜芳基、-C 1-4烷基-羥基、-C 1-4烷基-氰基、-C 1-4烷基-C 1-6烷基、-C 1-4烷基-C 1-6烷氧基、-C 1-4烷基-C 3-20環烷基、-C 1-4烷基-O-C 3-20環烷基、-C 1-4烷基-3至20員雜環基、-C 1-4烷基-O-3至20員雜環基、-C 1-4烷基-5或6員單環雜芳基、-C 1-4烷基-O-5或6員單環雜芳基、-C 1-4烷基-8至10員雙環雜芳基、-C 1-4烷基-O-8至10員雙環雜芳基、-S(=O) 2-C 1-6烷基、-S(=O) 2-C 3-20環烷基、-S(=O) 2-3至20員雜環基、-S(=O) 2-5或6員單環雜芳基、-S(=O) 2-8至10員雙環雜芳基、-C(=O)O-C 1-6烷基、-C(=O)O-C 3-20環烷基、-C(=O)O-3至20員雜環基、-C(=O)O-5或6員單環雜芳基、-C(=O)O-8至10員雙環雜芳基、-NR a1R b1、-C(=O)-NR a1R b1、-OR c1、-C 1-4烷基-C(=O)O-C 1-6烷基、-C 1-4烷基-C(=O)O-C 3-20環烷基、-C 1-4烷基-NR a1R b1、-C 1-4烷基-C(=O)-NR a1R b1、-C≡C-C(=O)-NR a1R b1、-C≡C-C 1-4烷基-C(=O)-NR a1R b1、-C 1-4烷基-OR c1、-C 1-4烷基-P(=O)-(C 1-6烷基) 2、-P(=O)-(C 1-6烷基) 2、-C 1-4烷基-NR d1-C(=O)-R c1、-C 1-4烷基-NR d1-C(=O)-NR a1R b1、-C 1-4烷基-NR d1-S(=O) 2-R c1、-C 1-4烷基-S(=O) 2-NR a1R b1、-C 1-4烷基-NR d1-S(=O) 2-NR a1R b1、-NR d1-C(=O)-R c1、-NR d1-C(=O)-NR a1R b1、-NR d1-S(=O) 2-R c1、-S(=O) 2-NR a1R b1、-NR d1-S(=O) 2-NR a1R b1；其中，所述C 1-6烷基、所述C 1-6烷氧基、所述C 2-6炔基各自獨立地任選地被1個、2個或3個選自鹵素、氘、氰基或羥基的基團所取代；所述C 3-20環烷基、所述3到20員雜環基、所述C 6-14芳基、所述5或6員單環雜芳基、所述8至10員雙環雜芳基各自獨立地任選地被1、2、3或4個選自S3組的基團所取代；所述3到20員雜環基、所述5或6員單環雜芳基、所述8至10員雙環雜芳基各自獨立地含有1、2、3或4個獨立地選自N、O、S的雜原子作為環原子； 上述各基團中，各個R a、各個R b、各個R a1、各個R b1各自獨立地為H、C 1-6烷基、鹵代C 1-6烷基、氘代C 1-6烷基、-C 1-4烷基-羥基、-C 1-4烷基-氰基、-C 1-4烷基-鹵代C 1-6烷基、-C 1-4烷基-氘代C 1-6烷基、-C 1-4烷基-C 1-6烷氧基、-C 1-4烷基-鹵代C 1-6烷氧基、-C 1-4烷基-氘代C 1-6烷氧基、C 3-6單環環烷基、-C 1-4烷基-C 3-6單環環烷基、-C 1-4烷基-O-C 3-6單環環烷基、3至6員單環雜環基、-C 1-4烷基-3至6員單環雜環基、-C 1-4烷基-O-3至6員單環雜環基、苯基、-C 1-4烷基-苯基、5或6員單環雜芳基、-C 1-4烷基-5或6員單環雜芳基、8至10員雙環雜芳基、-C 1-4烷基-8至10員雙環雜芳基、-S(=O) 2-C 1-6烷基、-S(=O) 2-C 3-6單環環烷基、-S(=O) 2-3至6員單環雜環基、-C(=O)-C 1-6烷基、-C(=O)-C 3-6單環環烷基、-C(=O)-3至6員單環雜環基；其中，所述C 3-6單環環烷基、所述3至6員單環雜環基、所述苯基、所述5或6員單環雜芳基、所述8至10員雙環雜芳基任選地被1或2個選自下組的基團所取代：鹵素、羥基、羧基、硝基、C 1-6烷基、鹵代C 1-6烷基、氘代C 1-6烷基、C 1-6烷氧基、鹵代C 1-6烷氧基、氘代C 1-6烷氧基、-NH 2、-NHC 1-6烷基、-N(C 1-6烷基) 2、-C 1-4烷基-P(=O)-(C 1-6烷基) 2、-P(=O)-(C 1-6烷基) 2；或 各個R a和R b與和它們相連的氮原子共同形成3到20員雜環基；各個R a1和R b1與和它們相連的氮原子共同形成3到20員雜環基；其中，所述3到20員雜環基各自獨立地任選地被1或2個選自下組的基團所取代：鹵素、羥基、羧基、硝基、C 1-6烷基、鹵代C 1-6烷基、氘代C 1-6烷基、C 1-6烷氧基、鹵代C 1-6烷氧基、氘代C 1-6烷氧基、-NH 2、-NHC 1-6烷基、-N(C 1-6烷基) 2、-C 1-4烷基-P(=O)-(C 1-6烷基) 2、-P(=O)-(C 1-6烷基) 2； 上述各基團中，各個R d、各個R d1各自獨立地為H、C 1-6烷基或氘代C 1-6烷基； 上述各基團中，各個R c、各個R c1各自獨立地為H、C 1-6烷基、鹵代C 1-6烷基、氘代C 1-6烷基、C 1-6烷氧基、鹵代C 1-6烷氧基、氘代C 1-6烷氧基、-C 1-4烷基-鹵代C 1-6烷基、-C 1-4烷基-氘代C 1-6烷基、-C 1-4烷基-C 1-6烷氧基、-C 1-4烷基-鹵代C 1-6烷氧基、-C 1-4烷基-氘代C 1-6烷氧基、C 3-6單環環烷基、-C 1-4烷基-C 3-6單環環烷基、-C 1-4烷基-O-C 3-6單環環烷基、3至6員單環雜環基、-C 1-4烷基-3至6員單環雜環基、-C 1-4烷基-O-3至6員單環雜環基、苯基、-C 1-4烷基-苯基、5或6員單環雜芳基、-C 1-4烷基-5或6員單環雜芳基、8至10員雙環雜芳基或-C 1-4烷基-8至10員雙環雜芳基；所述C 3-6單環環烷基、所述3至6員單環雜環基、所述苯基、所述5或6員單環雜芳基、所述8至10員雙環雜芳基任選地被1或2個選自下組的基團所取代：鹵素、羥基、羧基、硝基、C 1-6烷基、鹵代C 1-6烷基、氘代C 1-6烷基、C 1-6烷氧基、鹵代C 1-6烷氧基、氘代C 1-6烷氧基、-NH 2、-NHC 1-6烷基、-N(C 1-6烷基) 2、-C 1-4烷基-P(=O)-(C 1-6烷基) 2、-P(=O)-(C 1-6烷基) 2； 上述各基團中，各個S3組的基團各自獨立地選自下組：氧代(C=O)、鹵素、氰基、羥基、羧基、硝基、C 1-6烷基、鹵代C 1-6烷基、氘代C 1-6烷基、C 1-6烷氧基、鹵代C 1-6烷氧基、氘代C 1-6烷氧基、-NH 2、-NHC 1-6烷基、-N(C 1-6烷基) 2、-C 1-4烷基-P(=O)-(C 1-6烷基) 2、-P(=O)-(C 1-6烷基) 2、3至6員單環雜環基； 上述各基團中，所述-C 1-4烷基-或-C 3-6單環環烷基-為未取代的，或者-C 1-4烷基-上的氫原子各自獨立地被選自鹵素、氰基、羥基、C 1-6烷基、鹵代C 1-6烷基、氘代C 1-6烷基、-CH 2-羥基、-CH 2-氰基、苯基的基團所取代或者C 1-4烷基上同一個碳原子的兩個氫原子同時被-(CH 2) j-取代進而形成環烷基，其中j為2、3、4、5或6；-C 3-6單環環烷基-上的氫原子各自獨立地被選自鹵素、氰基、羥基、C 1-6烷基、鹵代C 1-6烷基、氘代C 1-6烷基的基團所取代。
  8. 如請求項7所述之化合物或其藥學上可接受的鹽、立體異構體、溶劑化物或前藥，其中，所述化合物為式(IC1)化合物； 式中， X、Y、 、R 2、m1、 、R 3、m2如請求項7所定義； B 1為CH或N； R 4’選自下組：H、氧代(C=O)、鹵素、氰基、羥基、羧基、硝基、C 1-6烷基、C 2-6烯基、C 2-6炔基、C 1-6烷氧基、C 3-20環烷基、3到20員雜環基、5或6員單環雜芳基、8至10員雙環雜芳基、-C≡C-C 3-20環烷基、-C≡C-3到20員雜環基、-C≡C-C 6-14芳基、-C≡C-5或6員單環雜芳基、-C≡C-8至10員雙環雜芳基、-C≡C-C(=O)-NR aR b、-C≡C-C 1-4烷基-C(=O)-NR aR b、-C 1-4烷基-羥基、-C 1-4烷基-氰基、-C 1-4烷基-羧基、-C 1-4烷基-C 1-6烷基、-C 1-4烷基-C 1-6烷氧基、-C 1-4烷基-C 3-20環烷基、-C 1-4烷基-O-C 3-20環烷基、-C 1-4烷基-3到20員雜環基、-C 1-4烷基-O-3到20員雜環基、-C 1-4烷基-C 6-14芳基、-C 1-4烷基-O-C 6-14芳基、-C 1-4烷基-5或6員單環雜芳基、-C 1-4烷基-O-5或6員單環雜芳基、-C 1-4烷基-8至10員雙環雜芳基、-C 1-4烷基-O-8至10員雙環雜芳基、-C 1-4烷基-NR aR b、-C 1-4烷基-C(=O)-NR aR b、-C 1-4烷基-NR d-C(=O)-R c、-C 1-4烷基-NR d-C(=O)-NR aR b、-C 1-4烷基-S(=O) 2-R c、-C 1-4烷基-NR d-S(=O) 2-R c、-C 1-4烷基-S(=O) 2-NR aR b、-C 1-4烷基-NR d-S(=O) 2-NR aR b、-C(=O)-C 1-6烷基、-C(=O)-C 3-20環烷基、-C(=O)-3到20員雜環基、-C(=O)-C 6-14芳基、-C(=O)-5或6員單環雜芳基、-C(=O)-8至10員雙環雜芳基、-C(=O)-NR aR b、-NR d-C(=O)-R c、-NR d-C(=O)-NR aR b、-S(=O) 2-R c、-NR d-S(=O) 2-R c、-S(=O) 2-NR aR b、-NR d-S(=O) 2-NR aR b、-NR aR b、-OR c、-C 1-4烷基-P(=O)-(C 1-6烷基) 2、-P(=O)-(C 1-6烷基) 2；其中，所述C 1-6烷基、所述C 1-6烷氧基、所述C 2-6烯基、所述C 2-6炔基各自獨立地任選地被1個、2個或3個選自鹵素、氘、氰基或羥基的基團所取代；所述C 3-20環烷基、所述3到20員雜環基、所述C 6-14芳基、所述5或6員單環雜芳基、所述8至10員雙環雜芳基各自獨立地任選地被1、2、3或4個選自S1組的基團所取代；所述3到20員雜環基、所述5或6員單環雜芳基、所述8至10員雙環雜芳基各自獨立地含有1、2、3或4個獨立地選自N、O、S的雜原子作為環原子；其中，R a、R b、R c、R d、S1組各自如請求項7所定義。
  9. 如請求項8所述之化合物或其藥學上可接受的鹽、立體異構體、溶劑化物或前藥，其中，所述化合物為式(IC1a)化合物、式(IC1b)化合物、式(IC1c)化合物、式(IC1d)化合物、式(IC1e)化合物或式(IC1f)化合物； 各式中，X、Y、R 2、 、R 3、m2、B 1和R 4’各自獨立地如請求項8所定義。
  10. 如請求項7所述之化合物或其藥學上可接受的鹽、立體異構體、溶劑化物或前藥，其中，所述化合物為式(IC3)化合物； 式中，X、Y、 、R 2、m1、 、R 3、m2如請求項7所定義；B 2為N或CH； R 4’選自下組：H、氧代(C=O)、鹵素、氰基、羥基、羧基、硝基、C 1-6烷基、C 2-6烯基、C 2-6炔基、C 1-6烷氧基、C 3-20環烷基、3到20員雜環基、C 6-14芳基、5或6員單環雜芳基、8至10員雙環雜芳基、-C≡C-C 3-20環烷基、-C≡C-3到20員雜環基、-C≡C-C 6-14芳基、-C≡C-5或6員單環雜芳基、-C≡C-8至10員雙環雜芳基、-C≡C-C(=O)-NR aR b、-C≡C-C 1-4烷基-C(=O)-NR aR b、-C 1-4烷基-羥基、-C 1-4烷基-氰基、-C 1-4烷基-羧基、-C 1-4烷基-C 1-6烷基、-C 1-4烷基-C 1-6烷氧基、-C 1-4烷基-C 3-20環烷基、-C 1-4烷基-O-C 3-20環烷基、-C 1-4烷基-3到20員雜環基、-C 1-4烷基-O-3到20員雜環基、-C 1-4烷基-C 6-14芳基、-C 1-4烷基-O-C 6-14芳基、-C 1-4烷基-5或6員單環雜芳基、-C 1-4烷基-O-5或6員單環雜芳基、-C 1-4烷基-8至10員雙環雜芳基、-C 1-4烷基-O-8至10員雙環雜芳基、-C 1-4烷基-NR aR b、-C 1-4烷基-C(=O)-NR aR b、-C 1-4烷基-NR d-C(=O)-R c、-C 1-4烷基-NR d-C(=O)-NR aR b、-C 1-4烷基-S(=O) 2-R c、-C 1-4烷基-NR d-S(=O) 2-R c、-C 1-4烷基-S(=O) 2-NR aR b、-C 1-4烷基-NR d-S(=O) 2-NR aR b、-C(=O)-C 1-6烷基、-C(=O)-C 3-20環烷基、-C(=O)-3到20員雜環基、-C(=O)-C 6-14芳基、-C(=O)-5或6員單環雜芳基、-C(=O)-8至10員雙環雜芳基、-C(=O)-NR aR b、-NR d-C(=O)-R c、-NR d-C(=O)-NR aR b、-S(=O) 2-R c、-NR d-S(=O) 2-R c、-S(=O) 2-NR aR b、-NR d-S(=O) 2-NR aR b、-NR aR b、-OR c、-C 1-4烷基-P(=O)-(C 1-6烷基) 2、-P(=O)-(C 1-6烷基) 2；所述C 1-6烷基、所述C 1-6烷氧基、所述C 2-6烯基、所述C 2-6炔基各自獨立地任選地被1個、2個或3個選自鹵素、氘、氰基或羥基的基團所取代；所述C 3-20環烷基、所述3到20員雜環基、所述C 6-14芳基、所述5或6員單環雜芳基、所述8至10員雙環雜芳基各自獨立地任選地被1、2、3或4個選自S1組的基團所取代；所述3到20員雜環基、所述5或6員單環雜芳基、所述8至10員雙環雜芳基各自獨立地含有1、2、3或4個獨立地選自N、O、S的雜原子作為環原子；其中，R a、R b、R c、R d、S1組各自如請求項7所定義。
  11. 如請求項10所述之化合物或其藥學上可接受的鹽、立體異構體、溶劑化物或前藥，其中，所述化合物為式(IC3a)化合物、式(IC3b)化合物、式(IC3c)化合物、式(IC3d)化合物、式(IC3e)化合物或式(IC3f)化合物； 各式中，X、Y、R 2、 、R 3、m2、B 2、R 4’各自獨立地如請求項10所定義。
  12. 如請求項7所述之化合物或其藥學上可接受的鹽、立體異構體、溶劑化物或前藥，其中，所述化合物為式(IC4)化合物； 式中，X、Y、 、R 2、m1、 、R 3、m2如請求項7所定義；B 3為CHR 4’’’、NR 4’’’或O； R 4’、R 4’’、R 4’’’各自獨立地選自下組：H、氧代(C=O)、鹵素、氰基、羥基、羧基、硝基、C 1-6烷基、C 2-6烯基、C 2-6炔基、C 1-6烷氧基、C 3-20環烷基、3到20員雜環基、C 6-14芳基、5或6員單環雜芳基、8至10員雙環雜芳基、-C≡C-C 3-20環烷基、-C≡C-3到20員雜環基、-C≡C-C 6-14芳基、-C≡C-5或6員單環雜芳基、-C≡C-8至10員雙環雜芳基、-C≡C-C(=O)-NR aR b、-C≡C-C 1-4烷基-C(=O)-NR aR b、-C 1-4烷基-羥基、-C 1-4烷基-氰基、-C 1-4烷基-羧基、-C 1-4烷基-C 1-6烷基、-C 1-4烷基-C 1-6烷氧基、-C 1-4烷基-C 3-20環烷基、-C 1-4烷基-O-C 3-20環烷基、-C 1-4烷基-3到20員雜環基、-C 1-4烷基-O-3到20員雜環基、-C 1-4烷基-C 6-14芳基、-C 1-4烷基-O-C 6-14芳基、-C 1-4烷基-5或6員單環雜芳基、-C 1-4烷基-O-5或6員單環雜芳基、-C 1-4烷基-8至10員雙環雜芳基、-C 1-4烷基-O-8至10員雙環雜芳基、-C 1-4烷基-NR aR b、-C 1-4烷基-C(=O)-NR aR b、-C 1-4烷基-NR d-C(=O)-R c、-C 1-4烷基-NR d-C(=O)-NR aR b、-C 1-4烷基-S(=O) 2-R c、-C 1-4烷基-NR d-S(=O) 2-R c、-C 1-4烷基-S(=O) 2-NR aR b、-C 1-4烷基-NR d-S(=O) 2-NR aR b、-C(=O)-C 1-6烷基、-C(=O)-C 3-20環烷基、-C(=O)-3到20員雜環基、-C(=O)-C 6-14芳基、-C(=O)-5或6員單環雜芳基、-C(=O)-8至10員雙環雜芳基、-C(=O)-NR aR b、-NR d-C(=O)-R c、-NR d-C(=O)-NR aR b、-S(=O) 2-R c、-NR d-S(=O) 2-R c、-S(=O) 2-NR aR b、-NR d-S(=O) 2-NR aR b、-NR aR b、-OR c、-C 1-4烷基-P(=O)-(C 1-6烷基) 2、-P(=O)-(C 1-6烷基) 2；所述C 1-6烷基、所述C 1-6烷氧基、所述C 2-6烯基、所述C 2-6炔基各自獨立地任選地被1個、2個或3個選自鹵素、氘、氰基或羥基的基團所取代；所述C 3-20環烷基、所述3到20員雜環基、所述C 6-14芳基、所述5或6員單環雜芳基、所述8至10員雙環雜芳基各自獨立地任選地被1、2、3或4個選自S1組的基團所取代；所述3到20員雜環基、所述5或6員單環雜芳基、所述8至10員雙環雜芳基各自獨立地含有1、2、3或4個獨立地選自N、O、S的雜原子作為環原子；或者 R 4’、R 4’’與和它們相連的碳原子共同形成羰基(C=O)； 其中，R a、R b、R c、R d、S1組各自如請求項7所定義。
  13. 如請求項12所述之化合物或其藥學上可接受的鹽、立體異構體、溶劑化物或前藥，其中，所述化合物為式(IC4a)化合物、式(IC4b)化合物、式(IC4c)化合物、式(IC4d)化合物、式(IC4e)化合物或式(IC4f)化合物； 各式中，X、Y、R 2、 、R 3、m2、B 3、R 4’、R 4’’各自獨立地如請求項12所定義。
  14. 如請求項7所述之化合物或其藥學上可接受的鹽、立體異構體、溶劑化物或前藥，其中，所述化合物為選自下組：
    。
  15. 如請求項7所述之化合物或其藥學上可接受的鹽、立體異構體、溶劑化物或前藥，其中，所述化合物為選自表（C）。
  16. 一種藥物組合物，所述藥物組合物包括如請求項1至15中任一項所述之化合物或其藥學上可接受的鹽、立體異構體、溶劑化物或前藥；以及藥學可接受的載體。
  17. 一種如請求項1至15中任一項所述之化合物或其藥學上可接受的鹽、立體異構體、溶劑化物或前藥或如請求項16所述之藥物組合物在製備預防和/或治療與HPK1活性相關的疾病或病症的藥物中的用途。
  18. 如請求項17所述之用途，其中，所述與HPK1活性相關的疾病或病症為癌症。
TW112100190A 2022-01-04 2023-01-04 稠環取代的六員雜環化合物及其製法和用途 TW202330525A (zh)

Applications Claiming Priority (12)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN2022100049440 2022-01-04
CN202210004944 2022-01-04
WOPCT/CN2022/079153 2022-03-03
PCT/CN2022/079153 WO2022184152A1 (zh) 2021-03-03 2022-03-03 稠环取代的六元杂环化合物及其制法和用途
CN202210501757 2022-04-28
CN2022105017573 2022-04-28
CN202210888363 2022-07-25
CN2022108883638 2022-07-25
CN202211075969 2022-09-02
CN2022110759696 2022-09-02
CN202211660724X 2022-12-23
CN202211660724 2022-12-23

Publications (1)

Publication Number Publication Date
TW202330525A true TW202330525A (zh) 2023-08-01

Family

ID=87073191

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
TW112100190A TW202330525A (zh) 2022-01-04 2023-01-04 稠環取代的六員雜環化合物及其製法和用途

Country Status (2)

Country Link
TW (1) TW202330525A (zh)
WO (1) WO2023131122A1 (zh)

Family Cites Families (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US9499495B2 (en) * 2013-04-12 2016-11-22 Asana Biosciences, Llc Quinazolines and azaquinazolines as dual inhibitors of RAS/RAF/MEK/ERK and PI3K/AKT/PTEN/mTOR pathways
WO2018152220A1 (en) * 2017-02-15 2018-08-23 Incyte Corporation Pyrazolopyridine compounds and uses thereof
WO2019206049A1 (en) * 2018-04-25 2019-10-31 Zhuhai Yufan Biotechnologies Co., Ltd Hpk1 inhibitors, preparation method and application thereof
TW202016109A (zh) * 2018-06-13 2020-05-01 英屬開曼群島商百濟神州有限公司 作為hpk1抑制劑的吡咯並[2,3-b]吡啶或吡咯並[2,3-b]吡嗪及其用途
JP7386841B2 (ja) * 2018-07-24 2023-11-27 エフ・ホフマン－ラ・ロシュ・アクチェンゲゼルシャフト イソキノリン化合物及びその使用
WO2022184152A1 (zh) * 2021-03-03 2022-09-09 劲方医药科技(上海)有限公司 稠环取代的六元杂环化合物及其制法和用途

Also Published As

Publication number Publication date
WO2023131122A1 (zh) 2023-07-13

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US10988478B1 (en) Pyrazolo[1,5a]pyrimidine derivatives as IRAK4 modulators
CN112166110B (zh) Shp2磷酸酶抑制剂及其使用方法
CN115551867B (zh) 稠合三环类化合物、其药物组合物及用途
US20220402915A1 (en) Bcl-2 inhibitors
CN113767106B (zh) 氧杂氮杂喹唑啉-7(8h)-酮类化合物,其制法与医药上的用途
US20230084095A1 (en) Substituted heterocyclic fused cyclic compound, preparation method therefor and pharmaceutical use thereof
JP2022517222A (ja) Ｋｒａｓ ｇ１２ｃ阻害剤
CN107011348B (zh) 作为btk活性的抑制剂的杂芳基吡啶酮和氮杂-吡啶酮化合物
CN117222650A (zh) 吡啶或嘧啶并环类化合物，其制法与医药上的用途
JP2023553492A (ja) アザキナゾリン汎ＫＲａｓ阻害剤
TW201722948A (zh) Ｎ－磺醯化吡唑并﹝３，４－ｂ﹞吡啶－６－甲醯胺及其使用方法
WO2022184152A1 (zh) 稠环取代的六元杂环化合物及其制法和用途
KR20210068010A (ko) 유비퀴틴 특이적 프로테아제 억제제로서의 카복사미드
TW202104230A (zh) 用於治療自體免疫疾病之六氫-1H-吡并[1,2-a]吡化合物
CN116745295A (zh) Brm靶向化合物及相关使用方法
TW202340211A (zh) 嘧啶雜環化合物、其製法與醫藥上的用途
WO2023131122A1 (zh) 稠环取代的六元杂环化合物及其制法和用途
KR20220141321A (ko) 다이하이드로나프티리딘온 화합물, 이의 제조 방법 및 이의 의학적 용도
CN116829151A (zh) 氮杂喹唑啉泛KRas抑制剂
RU2809869C1 (ru) Соединение на основе дигидронафтиридинона, и способ его получения, и его применение в медицине
US20240140954A1 (en) Tricyclic heterocyclic derivatives, compositions and uses thereof
TW202346295A (zh) 作為iap拮抗劑的三環雜環化合物
KR20240016977A (ko) 2,8-디아자스피로[4.5]데칸 화합물
KR20190111079A (ko) 알로스테릭 shp2 억제제로서의 이환 화합물