KR20210068010A - 유비퀴틴 특이적 프로테아제 억제제로서의 카복사미드 - Google Patents

유비퀴틴 특이적 프로테아제 억제제로서의 카복사미드 Download PDF

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KR20210068010A
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데이빗 제이. 게린
푸이 이 응
중궈 왕
타티아나 셸리킨
저스틴 카라벨라
메리-마거릿 자블로키
제니퍼 알. 다우닝
홍빈 리
스테파노스 아이오안니디스
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발로 얼리 디스커버리, 인크.
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Abstract

본 개시내용은 USP28 및 USP25로부터 선택되는 적어도 하나의 경로의 조정인자, 예컨대, 억제제, 상기 억제제를 포함하는 약제학적 조성물, 및 상기 억제제를 사용하는 방법에 관한 것이다. 상기 USP28 및 USP25로부터 선택되는 적어도 하나의 경로의 조정인자, 예컨대, 억제제는 다른 병 중에서도 암 치료에 유용할 수 있다.

Description

유비퀴틴 특이적 프로테아제 억제제로서의 카복사미드
관련 출원에 대한 상호 참조
본 출원은 2018년 8월 9일에 출원된 PCT 국제출원번호 PCT/US2018/046061; 2018년 8월 9일에 출원된 미국 임시출원번호 62/716,744; 2019년 1월 4일에 출원된 미국 임시 출원 번호 62/788,204; 및 2019년 2월 13일에 출원된 미국 임시출원번호 62/805,118에 대한 우선권을 주장하며; 각각의 내용은 그 전체가 참고로 포함된다.
기술 분야
본 개시내용은 유비퀴틴 특이적 프로테아제 28(ubiquitin-specific protease 28, USP28) 및 USP25 효소로부터 선택되는 적어도 하나의 경로와 관련이 있는 질환 또는 장애의 치료에 유용한 USP28 및/또는 USP25로부터 선택되는 적어도 하나의 경로의 조정인자(modulator)에 관한 것이다. 구체적으로, 본 개시내용은 USP28 및 USP25로부터 선택되는 적어도 하나의 경로를 억제하는 화합물 엔티티(chemical entity) 및 조성물, USP28 및 USP25로부터 선택되는 적어도 하나의 경로와 관련이 있는 질환 또는 장애를 치료하는 방법, 및 이 화합물의 합성 방법에 관한 것이다.
USP28 및 USP25는 3개의 별개의 도메인인, N-말단 UBA-유사 도메인; 한 쌍의 유비퀴틴-상호작용 모티프(UIM) 및 USP 서브패밀리의 보존적 폴드(fold)를 가질 것으로 예측되는 USP 도메인을 함유하는 DUB의 USP 서브패밀리의 시스테인 이소펩티다제(isopeptidase)이다(Nijman 등, Cell 2005, 123, 773-786; Komander 등, Mol. Cell Bio. 2009, 10, 550-563). USP28 및 USP25는 과다한 세포 단백질의 안정성 조절을 통해 그 기능을 발휘한다. USP28은 종양 촉진 인자로서 특성화되었고 많은 종양 단백질을 안정시키는 것으로 밝혀졌다. USP25는 종양 촉진 인자 및 자가면역 질환, 염증 및 감염성 질환(예컨대, 바이러스 및 박테리아)과 관련된 세포 반응의 조절인자(regulator)로서 특성화되었다.
USP28의 증폭, 결실 및 돌연변이는 유방암, AML, 난소암 및 결장직장암을 포함한 여러 암 유형에서 식별되었다(cbioportal; http://www.cbioportal.org; Diefenbacher 등, J. of Clin. Investi. 2014, 124, 3407-3418; Popov 등, Nat. Cell. Biol. 2007, 9, 729-731). 더욱이, USP28 과발현은 교모세포종, 비소세포 폐 암종 및 방광암이 있는 환자에서 불량한 예후와 상관성이 있었고, 이것은 USP28이 이러한 종양 유형의 종양형성에 중요한 역할을 한다는 것을 시사한다.(Wang 등 Exp. Biol. Med. 2016, 255-264; Zhang 등 J. Cell. Mol. Med. 2015, 19, 799-805; Guo 등, Tumor Bio. 2014, 35, 4017-4022).
대규모 shRNA 선별은 또한 MYC 단백질의 안정성 제어에 있어서 USP28의 역할을 식별하였다.(Popov, Nat. Cell. Biol., 765-774). MYC는 세포 성장, 증식 및 아폽토시스에 관여하는 유전자 전사의 마스터 조절인자이며, 많은 종양 유형에서 종양 개시 및 유지에 필수적이다.(Meyer 등, Nat. Rev. Cancer 2008, 8, 976-990; Conacci-Sorrell 등, Cold Spring Harb. Perspect. Med. 2014, 4, 1-24; Huang 등, Cold Spring Harb. Perspect. Med. 2013; Roussel 등, Cold Spring Harb. Perspect. Med. 2013; Gabay 등, Cold Spring Harb. Perspect. Med. 2014; Schmitz 등, Cold Spring Harb. Perspect. Med. 2014). 또한, MYC는 유방, 폐 및 전립선을 포함한 많은 종양 유형에서 변경을 갖는, 인간 암 중 가장 빈번하게 증폭되는 종양유전자이다.(Beroukhim 등, Nature 2010, 463, 899-905). USP28 유전자의 녹다운(knockdown)은 시험관내 인간 암 세포주 패널에서 MYC 단백질의 감소 및 관련된 성장 억제를 야기하는 것으로 밝혀졌다.(Popov, Nat. Cell Biol., 765-774).
USP28은 또한 LSD1(라이신 특이적 탈메틸효소 1) 단백질에 안정성을 부여하는데 필요한 것으로 보고되었다.(Wu 등, Cell Rep. 2013, 5, 224-236). LSD1은 세포 다능성(pluripotency) 및 분화를 제어하기 위해 많은 파트너 단백질과 복합체를 형성하는 히스톤 탈메틸효소이다.(Metzger 등 Nature 2005, 437, 436-439; Toffolo et al, J. Neurochem. 2014 128, 603-616, 2014; Periz 등, PloS Biology 2015). 종양 세포에서 USP28의 녹다운은 LSD1 단백질의 불안정화, 시험관내 암 줄기 세포(CSC) 유사 특성의 억제, 및 생체내 종양 성장의 억제를 야기하는 것으로 밝혀졌다.(Wu, Cell Rep., 224-236). LSD1의 소분자 억제제는 AML 및 유잉(Ewing) 육종 모델에서 항종양 활성을 보여주었다.(Sankar 등, "Reversible LSD1 inhibition interferes with global EWS/ETS transcriptional activity and impedes Ewing sarcoma tumor growth" Clin Cancer Res. 2014 4584-4597; Schenk 등, Nat. Med. 2012, 18, 605-611). 따라서, USP28 억제는 이러한 종양 유형에서 LSD1을 표적화하기 위한 대안적 접근법에 해당한다.
USP28 억제는 또한 NICD1-수준을 감소시키고 NOTCH 경로 활성의 억제를 야기하는 것으로 밝혀졌다.(Diefenbacher 등). NOTCH 신호전달(signaling)은 다양한 세포 분화 결정을 제어하고 특정 종양 유형에서 종양형성을 유도한다. NOTCH1은 강력한 T-세포 종양 유전자이며, T-세포 급성 림프아구성 백혈병(T-ALL) 사례의 >50%가 NOTCH1 중 활성화 돌연변이를 운반한다.(Weng 등 Science 2004, 306, 269-271). 증가 된 NOTCH1 단백질 수준은 또한 결장암의 질병 진행과 관련이 있다.(Meng 등, Cancer Res. 2009, 69, 573-582). NOTCH1 재배열은 구성적 경로 활성화를 야기하고 삼중 음성(triple-negative) 유방암을 포함한 많은 암 유형에서 종양형성을 유도한다.(Stoeck 등, Cancer Discov. 2014, 4, 1154-1167).
USP28의 기타 보고된 기질은 c-Jun, Cyclin E, HIF-1α, Claspin, 53BP1 및 Mdc1을 포함하며, 이들 중 다수는 인간의 종양형성에 중요한 역할을 한다.(Diefenbacher 등; Flugel 등 Blood 2012, 119, 1292-1301; Zhang 등, "A role for the deubiquitinating enzyme USP28 in control of the DNA-damage response" Cell 2006, 126, 529-542). 흥미롭게도, 많은 USP28 기질은 SCF(FBW7) E3 유비퀴틴 리가제(ligase)의 기질 인식 서브유닛인 FBW7에 의해 인식된다.(Diefenbacher 등). FBW7은 인산화-의존적 방식으로 USP28 기질을 인식하고, 이들을 유비퀴틴화에 대해 표적화하여, 궁극적으로 이들의 프로테아좀 분해를 야기한다. 이들의 공유된 종양단백질 기질에 대한 USP28 및 FBW7의 길항작용성 역할은 단백질 안정성 제어의 복잡한 성질을 나타내며 암 치료에 대해 추가적인 치료 기회를 제공할 수 있다.
USP28의 생식계열 녹아웃을 갖는 마우스는 생존가능하고 생식력이 있는 것으로 밝혀졌고, 이것은 USP28 활성이 정상적인 발달 및 생식 기능에 필요하지 않음을 확인시켜 준다.(Knobel 등, Molecular and Cellular Biology 2014, 34, 2062-2074). 마우스 장에서 USP28의 조건적 녹아웃은 감소된 장 세포 증식 및 향상된 분화와 관련이 있는 c-Myc, 활성 NOTCH(NICD1) 및 c-JUN을 포함한 종양단백질의 감소를 야기하였다. 더 중요하게도, APC 돌연변이에 의해 유도된 장 종양형성은 급성 USP28 고갈에 의해 효과적으로 차단되었고, 이것은 USP28이 종양 부담을 감소시키고 장의 암에 대한 생존율 개선에 매력적인 표적일 수 있음을 시사한다.(Diefenbacher 등).
요약하면, USP28 및 USP25는 세포에서 종양형성을 촉진하고 면역 반응을 조정하는 데 중요한 역할을 한다. 이의 주요 역할은 인간에서 면역 반응 및 종양 개시 및 성장에 필수적인 다른 세포 인자 중 다양한 종양 단백질 및 후성적 유도인자 및 면역조정 단백질의 탈유비퀴틴화 및 안정화에 있다. 따라서, 소분자 억제제를 사용한 USP28 및/또는 USP25의 억제는 폐암 같은 암의 치료용과 같이, 의료용으로 개발될 수 있다. 이러한 이유로, USP28 및/또는 USP25의 새롭고 강력한 소분자 억제제는 여전히 상당히 요구되고 있다.
개요
본 개시내용은 화학식 (I)의 화합물, 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 형태를 제공한다:
Figure pct00001
(I)
여기서, Y는 C(R3) 및 N으로부터 선택되고;
R'는 H 및 CH3으로부터 선택되고;
R1은 R5 및/또는 R6으로부터 선택되는 하나 이상의 치환체에 의해 선택적으로 치환되는, 6원 내지 11원 헤테로아릴로부터 선택되고;
R2는 N-연결된 4원 내지 12원 헤테로사이클릴 및 C-연결된 4원 내지 12원 헤테로사이클릴로부터 선택되며, 여기서 헤테로사이클릴은 하나 이상의 R5에 의해 선택적으로 치환되고, 추가로 수소를 함유하는 임의의 R2 기는 중수소로 대체된 하나 이상의 수소를 가질 수 있고;
각 R3(존재하는 경우)은 H, 중수소, (C1-C6)알킬, (C1-C6)알콕시, (C1-C6)할로알킬, (C1-C6)할로알콕시, 할로겐, -OH, -CN으로부터 독립적으로 선택되고, 여기서, (C1-C6)알킬, (C1-C6)알콕시, (C1-C6)할로알킬, (C1-C6)할로알콕시, (C3-C8)사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬, 아릴, 및 헤테로아릴 기는 각각 하나 이상의 R7에 의해 선택적으로 치환되며;
각 R4는 H, 중수소, (C1-C6)알킬, 할로겐, -OH, -CN으로부터 선택되고, 추가로 수소를 함유하는 임의의 R4 기는 중수소로 대체된 하나 이상의 수소를 가질 수 있으며;
각 R5(존재하는 경우)는 -OH, -NH2, NHC(O)CH3, -C(O)NHCH3, (C1-C6)알킬, (C1-C6)알콕시, (C1-C6)할로알킬, (C1-C6)할로알콕시, 할로겐, 사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬 및 -C(O)-헤테로사이클로알킬 기로부터 독립적으로 선택되고, 여기서 -NH2, NHC(O)CH3, -C(O)NHCH3, (C1-C6)알킬, (C1-C6)알콕시, (C1-C6)할로알킬, (C1-C6)할로알콕시, 사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬 및 -C(O)-헤테로사이클로알킬은 각각 (C1-C6)알콕시, -NH2, 및 -OH로부터 독립적으로 선택되는 하나 이상의 치환체에 의해 선택적으로 치환되며, 수소를 함유하는 임의의 R5 기는 중수소로 대체된 하나 이상의 수소를 가질 수 있고;
각 R6(존재하는 경우)은 -NH(C1-C6)알킬-아릴, -NH(C1-C6)알킬-헤테로아릴, -NH(C1-C6)알킬-사이클릴 기, 및 -NH(C1-C6)알킬-헤테로사이클릴 기로부터 선택되고, 여기서 R6 기는 각각 -OH, -NH, 할로겐, (C1-C6)알킬, (C1-C6)알콕시, 및 (C1-C6)할로알킬 기로부터 선택되는 하나 이상의 치환체에 의해 선택적으로 치환되고, 추가로 수소를 함유하는 임의의 R6 기는 중수소로 대체된 하나 이상의 수소를 가질 수 있고;
각 R7(존재하는 경우)은 -OH, -NH2, (C1-C6)알킬, (C1-C6)알콕시, (C1-C6)할로알킬, (C1-C6)할로알콕시, 할로겐, 사이클로알킬, -C(O)-사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬, 및 -C(O)-헤테로사이클로알킬 기로부터 독립적으로 선택되고, 여기서 -NH2, (C1-C6)알킬, (C1-C6)알콕시, (C1-C6)할로알킬, (C1-C6)할로알콕시, 할로겐, 사이클로알킬, -C(O)-사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬, 및 -C(O)-헤테로사이클로알킬은 각각 (C1-C6)알킬, (C1-C6)알콕시, 및 -OH로부터 독립적으로 선택되는 하나 이상의 치환체에 의해 선택적으로 치환되며;
n은 0, 1, 2, 또는 3이고,
단, 상기 화합물은 도 1의 표 C에 존재하지 않는다.
화학식 (I)의 화합물은
Y가 C(R3) 및 N으로부터 선택되고;
R'가 H 및 CH3으로부터 선택되며;
R1이 R5 및 R6으로부터 선택되는 하나 이상의 치환체에 의해 선택적으로 치환되는 8원 내지 11원 헤테로아릴로부터 선택되고;
R2가 하나 이상의 R5에 의해 선택적으로 치환되는 N-연결된 4원 내지 12원 헤테로사이클릴로부터 선택되고;
R3은 H, 중수소, (C1-C6)알킬, (C1-C6)알콕시, (C1-C6)할로알킬, 할로겐, -OH, -CN으로부터 독립적으로 선택되고, 여기서 (C1-C6)알킬, (C1-C6)알콕시, 및 (C1-C6)할로알킬은 각각 중수소, 할로겐, (C1-C6)알콕시, -NH2 및 -OH로부터 독립적으로 선택되는 하나 이상의 치환체에 의해 선택적으로 치환되고;
R4는 H, 중수소, (C1-C4)알킬, 할로겐, -OH, -CN으로부터 선택되고, 추가로 수소를 함유하는 임의의 R4 기는 중수소로 대체된 하나 이상의 수소를 가질 수 있고;
각 R5(존재하는 경우)는 -OH, -NH2, NHC(O)CH3, (C1-C6)알킬, (C1-C6)알콕시, (C1-C6)할로알킬, (C1-C6)할로알콕시, 할로겐, 사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬, 및 -C(O)-헤테로사이클로알킬 기로부터 독립적으로 선택되고, 여기서 -NH2, NHC(O)CH3, (C1-C6)알킬, (C1-C6)알콕시, (C1-C6)할로알킬, (C1-C6)할로알콕시, 사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬, 및 -C(O)-헤테로사이클로알킬은 각각 할로겐, (C1-C6)알콕시, -NH2, 및 -OH로부터 독립적으로 선택되는 하나 이상의 치환체에 의해 선택적으로 치환되고, 수소를 함유하는 임의의 R5 기는 중수소로 대체된 하나 이상의 수소를 가질 수 있고;
각 R6(존재하는 경우)은 -N(C1-C6)알킬-아릴, -N(C1-C6)알킬-헤테로아릴, 및 -N(C1-C6)알킬-헤테로사이클릴 기로부터 선택되고, 여기서 상기 기들은 -OH, -NH, 할로겐, (C1-C6)알킬, (C1-C6)알콕시, 및 (C1-C6)할로알킬 기로부터 선택되는 하나 이상의 치환체에 의해 선택적으로 치환되고, 추가로 수소를 함유하는 임의의 R6 기는 중수소로 대체된 하나 이상의 수소를 가질 수 있고;
n은 0, 1, 2, 또는 3인,
화합물 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 형태일 수 있고,
단, 상기 화합물은 도 1의 표 C에 존재하지 않는다.
다른 측면에서, 화합물은 화학식 (VI)의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염일 수 있다:
Figure pct00002
(VI)
여기서, X는 C(R)(R") 및 O로부터 선택되고;
Y1, Y2 및 Y3은 각각 C(R3) 및 N으로부터 독립적으로 선택되고;
R'는 H, 중수소 및 -CH3으로부터 선택되고;
R 및 R"는 각각 H, 할로겐, -OH, -CN, 하나 이상의 Ri에 의해 선택적으로 치환된 C1-C6 알킬로부터 독립적으로 선택되고, R 및 R"는 이들이 부착된 탄소와 함께 하나 이상의 Ri에 의해 선택적으로 치환된 스피로사이클릭 사이클로프로필을 형성하며, 여기서 수소이거나 또는 수소를 함유하는 임의의 R, R", 또는 Ri 기는 독립적으로 중수소로 대체된 하나 이상의 수소를 독립적으로 가질 수 있으며;
각 Ri는 할로겐, -OH 및 CH3으로부터 독립적으로 선택되고;
R1은 R5 및/또는 R6으로부터 선택된 하나 이상의 치환체에 의해 선택적으로 치환된 6원 내지 12원의 융합 및 비융합 헤테로아릴로부터 선택되고, 추가로 수소를 함유하는 임의의 R1 기는 중수소로 대체된 하나 이상의 수소를 가질 수 있고;
R2는 N-연결된 4원 내지 12원 헤테로사이클릴, C-연결된 4원 내지 12원 헤테로사이클릴 및 -O-연결된 4원 내지 12원 헤테로사이클릴로부터 선택되며, 여기서 4원 내지 12원 헤테로사이클릴은 하나 이상의 R5(이것은 R1의 하나 이상의 R5와 동일하거나 상이할 수 있음)에 의해 선택적으로 치환되고, 추가로 R2 기 중 임의의 수소는 중수소로 대체된 하나 이상의 수소를 가질 수 있고;
각 R3은 H, (C1-C6)알킬, (C1-C6)알콕시, (C1-C6)할로알킬, (C1-C6)할로알콕시, 할로겐, -OH, -CN, (C3-C8)사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬, 아릴, 및 헤테로아릴 기로부터 독립적으로 선택되고, 여기서 (C1-C6)알킬, (C1-C6)알콕시, (C1-C6)할로알킬, (C1-C6)할로알콕시, 사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬, 아릴, 및 헤테로아릴 기는 각각 하나 이상의 R7에 의해 선택적으로 치환되며;
R4는 H, (C1-C6)알킬, (C1-C6)알콕시, (C1-C6)할로알킬, (C1-C6)할로알콕시, 할로겐, -OH, -CN, (C3-C8)사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬, 아릴, 및 헤테로아릴 기로부터 선택되고, 여기서 (C1-C6)알킬, (C1-C6)알콕시, (C1-C6)할로알킬, (C1-C6)할로알콕시, (C3-C8)사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬, 아릴, 및 헤테로아릴은 하나 이상의 R5에 의해 선택적으로 치환되고, 추가로 수소를 함유하는 임의의 R4 기는 중수소로 대체된 하나 이상의 수소를 가질 수 있고;
각 R5는 -OH, -NH2, 아미도-(C1-C6)알킬, (C1-C6)알킬, (C1-C6)알콕시, (C1-C6)할로알킬, (C1-C6)할로알콕시, 할로겐, 사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬, 및 -C(O)-헤테로사이클로알킬 기로부터 독립적으로 선택되고, 여기서 -NH2, 아미도-(C1-C6)알킬, (C1-C6)알킬, (C1-C6)알콕시, (C1-C6)할로알킬, (C1-C6)할로알콕시, 사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬 및 -C(O)-헤테로사이클로알킬은 각각 (C1-C6)알킬, (C1-C6)알콕시, -NH2 및 -OH로부터 독립적으로 선택된 하나 이상의 치환체에 의해 선택적으로 치환되고, 여기서 수소를 함유하는 임의의 R5 기는 중수소로 대체된 하나 이상의 수소를 가질 수 있으며;
각 R6은 -아미노 알킬-아릴, -아미노 알킬-헤테로아릴, -아미노 알킬-사이클 릴 및 -아미노 알킬-헤테로사이클릴 기로부터 독립적으로 선택되며, 여기서 각 R6 기는 -OH, -NH, 할로겐, (C1-C6)알킬, (C1-C6)알콕시 및 (C1-C6)할로알킬 기로부터 선택되는 하나 이상의 치환체에 의해 선택적으로 치환되고, 추가로 수소를 함유하는 임의의 R6 기는 중수소로 대체된 하나 이상의 수소를 가질 수 있고;
각 R7은 -OH, -NH2, (C1-C6)알킬, (C1-C6)알콕시, (C1-C6)할로알킬, (C1-C6)할로알콕시, 할로겐, 사이클로알킬, -C(O)-사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬 및 -C(O)-헤테로사이클로알킬 기로부터 독립적으로 선택되고, 여기서 -NH2, (C1-C6)알킬, (C1-C6)알콕시, (C1-C6)할로알킬, (C1-C6)할로알콕시, 할로겐, 사이클로알킬, -C(O)-사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬 및 -C(O)-헤테로사이클로알킬은 각각 (C1-C6)알킬, (C1-C6)알콕시 및 -OH로부터 독립적으로 선택되는 하나 이상의 치환체에 의해선택적으로 치환되고;
n은 0, 1, 2 또는 3이며,
단, 상기 화합물은 표 C에 존재하지 않는다.
다른 측면에서, 화합물은 화학식 (II)의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염일 수 있다:
Figure pct00003
(II)
여기서, X, R1, R2, R3, R7 및 n은 각각 화학식 (VI)에서 정의되는 바와 같고;
R4는 H, (C1-C6)알킬, 할로겐 및 -OH로부터 선택되고;
각 R5는 -OH, -NH2, -NHC(O)CH3, -C(O)NHCH3, (C1-C6)알킬, (C1-C6)알콕시, (C1-C6)할로알킬, (C1-C6)할로알콕시, 할로겐, 사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬 및 -C(O)-헤테로사이클로알킬 기로부터 독립적으로 선택되고, 여기서 -NH2, -NHC(O)CH3, -C(O)NHCH3, (C1-C6)알킬, (C1-C6)알콕시, (C1-C6)할로알킬, (C1-C6)할로알콕시, 사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬 및 -C(O)-헤테로사이클로알킬은 각각 (C1-C6)알킬, (C1-C6)알콕시, -NH2 및 -OH로부터 독립적으로 선택되는 하나 이상의 치환체에 의해 선택적으로 치환되고;
각 R6은 -NH(C1-C6)알킬-아릴, -NH(C1-C6)알킬-헤테로아릴, -NH(C1-C6)알킬-사이클릴, 및 -NH(C1-C6)알킬-헤테로사이클릴 기로부터 독립적으로 선택되고, 여기서 각 R6 기는 -OH, -NH, 할로겐, (C1-C6)알킬, (C1-C6)알콕시 및 (C1-C6)할로알킬 기로부터 독립적으로 선택되는 하나 이상의 치환체에 의해 선택적으로 치환되고,
단, 상기 화합물은 표 C에 존재하지 않는다.
다른 측면에서, 화합물은 화학식 (II)의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염일 수 있다:
Figure pct00004
(II)
여기서, X, R1, R2, R3, R7 및 n은 각각 화학식 (VI)에서 정의된 바와 같고;
R4는 H, (C1-C6)알킬, 할로겐 및 -OH로부터 선택되고;
각 R5는 -OH, -NH2, -NHC(O)CH3, -C(O)NHCH3, (C1-C6)알킬, (C1-C6)알콕시, (C1-C6)할로알킬, (C1-C6)할로알콕시, 할로겐, 사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬 및 -C(O)-헤테로사이클로알킬 기로부터 독립적으로 선택되고, 여기서 -NH2, -NHC(O)CH3, -C(O)NHCH3, (C1-C6)알킬, (C1-C6)알콕시, (C1-C6)할로알킬, (C1-C6)할로알콕시, 사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬, 및 -C(O)-헤테로사이클로알킬은 각각 (C1-C6)알킬, (C1-C6)알콕시, -NH2 및 -OH로부터 독립적으로 선택되는 하나 이상의 치환체에 의해 선택적으로 치환되고;
각 R6은 -NH(C1-C6)알킬-아릴, -NH(C1-C6)알킬-헤테로아릴, -NH(C1-C6)알킬-사이클릴, 및 -NH(C1-C6)알킬-헤테로사이클릴 기로부터 독립적으로 선택되고, 여기서 각 R6 기는 -OH, -NH, 할로겐, (C1-C6)알킬, (C1-C6)알콕시 및 (C1-C6)할로알킬 기로부터 선택되는 하나 이상의 치환체에 의해 선택적으로 치환되며,
여기서, 상기 화합물은 표 C에 존재하지 않는다.
다른 측면에서, 화합물은 화학식 (IIaa)의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염일 수 있다:
Figure pct00005
(IIaa)
여기서, R1은 R5 및 R6으로부터 선택되는 하나 이상의 치환체에 의해 치환된 8-9원 헤테로아릴로부터 선택되고, 여기서 각 R5 및 R6은 독립적으로 화학식 (II)에 정의된 바와 같고;
R2는 하나 이상의 R5에 의해 선택적으로 치환되는, N-연결된 6원 내지 12원 헤테로사이클릴 또는 C-연결된 6원 내지 12원 헤테로사이클릴로부터 선택되고, 여기서 R5는 화학식 (II)에 정의된 바와 같고;
R3은 H, (C1-C6)알킬, 할로겐, 및 -CN으로부터 독립적으로 선택되고, 여기서 (C1-C6)알킬 기는 R7에 의해 선택적으로 치환되고, 여기서 각 R7은 독립적으로 화학식 (VI)에 정의된 바와 같고,
여기서, 상기 화합물은 도 1의 표 C에 존재하지 않는다.
다른 측면에서, 화합물은 화학식 (IIb')의 청구항 1의 화합물, 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염일 수 있다:
Figure pct00006
(IIb')
여기서, R'는 H 및 CH3으로부터 선택되고;
R1은 R5 및 R6으로부터 선택되는 하나 이상의 치환체에 의해 치환된 8-9원 헤테로아릴로부터 선택되며, 여기서 각 R5 및/또는 R6(존재하는 경우)은 독립적으로 화학식 (VI)에서 정의된 바와 같고;
R2는 하나 이상의 R5에 의해 선택적으로 치환된 N-연결된 6원 내지 12원 헤테로사이클릴 또는 C-연결된 6원 내지 12원 헤테로사이클릴로부터 선택되며, 여기서 각 R5는 독립적으로 화학식 (VI)에서 정의된 바와 같고;
R3은 H, (C1-C6)알킬, 할로겐, 및 -CN으로부터 독립적으로 선택되며, 여기서 (C1-C6)알킬 기는 R7에 의해 선택적으로 치환되고, 여기서 각 R7은 독립적으로 화학식 (VI)에서 정의된 바와 같고,
여기서, 상기 화합물은 표 C에 존재하지 않는다.
다른 측면에서, 화합물은 화학식 (VI), (II), (IIaa) 및 (IIb') 중 어느 하나의 화합물일 수 있으며, 여기서 R5 및/또는 R6에 의해 선택적으로 치환된 R1은 표 A로부터 선택되고, 여기서 상기 화합물은 표 C에 존재하지 않는다.
다른 측면에서, 화합물은 화학식 (VI), (II), (IIaa) 및 (IIb') 중 어느 하나의 화합물일 수 있으며, 여기서 R5에 의해 선택적으로 치환된 R2는 표 B로부터 선택되고, 여기서 상기 화합물은 표 C에 존재하지 않는다.
다른 측면에서, 화합물은 실시예 2-38, 3-17, 3-18, 10-15, 10-16, 14-15, 14-16, 14-17, 14-18, 14-19, 14-20, 14-21, 14-22, 14-23, 14-24, 22-5, 22-6, 23-1, 23-2, 24-1, 24-2, 25, 26-1, 26-2; 27-1, 27-2, 28-1, 28-2, 29-1, 29-2, 30-1, 30-2, 31-1, 31-2, 31-3, 31-4, 32-1, 32-2, 33-3, 33-4, 34, 35, 표 21 및 표 25의 화합물일 수 있고, 단, 화합물은 표 C에 존재하지 않는다.
추가적인 목적 및 장점은 이하 상세한 설명에 부분적으로 제시될 것이지만,부분적으로는 상세한 설명으로부터 자명할 것이고, 또는 실시에 의해 알게 될 것이다. 목적 및 이점은 첨부된 청구범위에서 특히 지적된 요소 및 조합에 의해 실현되고 달성될 것이다.
전술한 일반적인 설명 및 이하의 상세한 설명은 모두 예시적이고 설명적일 뿐이며 청구범위를 제한하지 않는 것으로 이해되어야 한다.
본 개시내용이 잘 이해될 수 있도록 하기 위해, 첨부된 도면을 참조하여 예로서 제공된 다양한 형태가 이제 설명될 것이다.
도 1은 다수의 화합물의 구조를 나타낸 표 C이고;
도 2는 종양 크기에 대한 본 개시내용의 화합물의 효과를 예시하는 이종이식편 연구의 그래프 표현이다.
본원에 정의된 USP25 억제제 화합물, USP28 억제제 화합물 및 USP28/25 억제제 화합물을 포함하는, USP28 및/또는 USP25를 억제하는 데 유용한 화합물이 본원에 개시된다. USP28/25 억제제, USP28 억제제 및/또는 USP25 억제제 화합물은 화학식 (I)의 화합물, 화학식 (II)의 화합물, 화학식 (III)의 화합물, 화학식 (IV)의 화합물, 화학식 (V)의 화합물, 화학식 (VI)의 화합물, 및/또는 화학식 (VII)의 화합물을 포함하는, 본원에 개시된 화합물일 수 있다. 이러한 화합물 엔티티는 표 C에 예시 된 화합물을 포함하지 않을 수 있다.
본원에 사용된 용어 "USP28 억제제" 화합물은 본원의 실시예 A-1(a)에 기재된 USP28에 대한 유비퀴틴-로다민(Ubiquitin-Rhodamine) 110 검정 및/또는 본원의 실시예 A-1(b)에 기재된 USP28에 대한 유비퀴틴-로다민 110 검정에서 2 마이크로몰 이하의 IC50 값을 갖는 본원에 개시된 화합물[예를 들어, 화학식 (I)의 화합물, 화학식 (II)의 화합물, 화학식 (III)의 화합물, 화학식 (IV)의 화합물, 화학식 (V)의 화합물, 화학식 (VI)의 화합물, 및/또는 화학식 (VII)의 화합물]을 지칭한다. 예를 들어, USP28 억제제는 실시예 A-1(a)에 기재된 USP28에 대한 유비퀴틴-로다민 110 검정을 사용하여 2 마이크로몰 이하의 IC50 값, 예컨대 0.001 내지 2 마이크로몰, 바람직하게는 0.001 내지 0.2 마이크로몰, 더욱 바람직하게는 0.001 내지 0.05 마이크로몰 범위의 IC50 값을 갖는, 본원에 개시된 화학식의 화합물일 수 있다. USP28 억제제는 실시예 A-1(b)에 기재된 USP28에 대한 유비퀴틴-로다민 110 검정을 사용하여 2 마이크로몰 이하의 IC50 값, 예컨대 0.001 내지 2 마이크로몰, 바람직하게는 0.001 내지 0.2 마이크로몰, 더욱 바람직하게는 0.001 내지 0.05 마이크로몰 범위의 IC50 값을 갖는, 본원에 개시된 화학식의 화합물일 수 있다. USP28 억제제는 실시예 A-1(a)에 기재된 USP28에 대한 유비퀴틴-로다민 110 검정 및 실시예 A-1(b)에 기재된 USP28에 대한 유비퀴틴-로다민 110 검정을 둘 모두 사용하여 2 마이크로몰 이하의 IC50 값, 예컨대 두 검정 모두에서 0.001 내지 2 마이크로몰, 바람직하게는 0.001 내지 0.2 마이크로몰, 더욱 바람직하게는 0.001 내지 0.05 마이크로몰의 IC50 값을 갖는, 본원에 개시된 화학식의 화합물일 수 있다.
본원에 사용된 용어 "USP25 억제제"는 본원의 실시예 A-2에 기재된 USP25에 대한 유비퀴틴-로다민 110 검정에서 2 마이크로몰 이하의 IC50 값을 갖는 본원에 개시된 화합물[예를 들어, 화학식 (I)의 화합물, 화학식 (II)의 화합물, 화학식 (III)의 화합물, 화학식 (IV)의 화합물, 화학식 (V)의 화합물, 화학식 (VI)의 화합물, 및/또는 화학식 (VII)의 화합물]을 지칭한다. 예를 들어, USP25 억제제는 실시예 A-2에 기재된 USP25에 대한 유비퀴틴-로다민 110 검정을 사용하여 2 마이크로몰 이하의 IC50 값, 예컨대 0.001 내지 2 마이크로몰, 바람직하게는 0.001 내지 0.2 마이크로몰, 더욱 바람직하게는 0.001 내지 0.05 마이크로몰 범위의 IC50 값을 갖는, 본원에 개시된 화학식의 화합물일 수 있다. USP25 억제제는 실시예 A-2에 기재된 USP25에 대한 유비퀴틴-로다민 110 검정을 사용하여 2 마이크로몰 이하의 IC50 값, 예컨대 0.001 내지 2 마이크로몰, 바람직하게는 0.001 내지 0.2 마이크로몰, 더욱 바람직하게는 0.001 내지 0.05 마이크로몰 범위의 IC50 값을 갖는, 본원에 개시된 화학식의 화합물일 수 있다. USP25 억제제는 실시예 A-2에 기재된 USP25에 대한 유비퀴틴-로다민 110 검정 및 실시예 A-2에 기재된 USP25에 대한 유비퀴틴-로다민 110 검정을 둘 모두 사용하여 2 마이크로몰 이하의 IC50 값, 예컨대 두 검정 모두에서 0.001 내지 2 마이크로몰, 바람직하게는 0.001 내지 0.2 마이크로몰, 더욱 바람직하게는 0.001 내지 0.05 마이크로몰 범위의 IC50 값을 갖는, 본원에 개시된 화학식의 화합물일 수 있다.
본원에 사용된 용어 "USP28/25 억제제"는 본원에 정의된 USP28 억제제 또는 USP25 억제제, 또는 USP28 억제제 및 USP25 억제제 둘 모두인, 본원에 개시된 화합물[예컨대, 화학식 (I)의 화합물, 화학식 (II)의 화합물, 화학식 (III)의 화합물, 화학식 (IV)의 화합물, 화학식 (V)의 화합물, 화학식 (VI)의 화합물, 및/또는 화학식 (VII)의 화합물]을 지칭한다.
선택적으로, 화학식 (I)의 화합물, 화학식 (II), 화학식 (III)의 화합물, 화학식 (IV)의 화합물, 화학식 (V)의 화합물, 또는 화학식 (VI)의 화합물 및/또는 화학식 (VII)의 화합물 중 임의의 하나 이상의 수소 원자는 중수소 또는 다른 수소 동위원소로 독립적으로 대체될 수 있다.
본 개시내용의 제1 측면에서, 화합물 엔티티는 화학식 (I)의 화합물 및 이의 약제학적으로 허용가능한 염, 용매화물, 전구약물, 입체이성질체, 및 호변이성질체로부터 선택된다:
Figure pct00007
(I)
여기서 X, Y, R1, R2, R3, R4 및 n은 상기 본원에 기재된 바와 같다.
본 개시내용의 세부사항은 이하에 동반되는 상세한 설명에 제시된다. 본원에 기재된 것과 유사하거나 동등한 방법 및 물질이 본 개시내용의 실시 또는 시험에 사용될 수 있지만, 예시적인 방법 및 물질이 이제 설명된다. 본 개시내용의 다른 특징, 목적 및 이점은 상세한 설명 및 청구범위로부터 명백해질 것이다. 본 명세서 및 첨부된 청구범위에서, 단수형은 문맥 상 달리 명백히 지시되지 않는 한 복수형도 포함한다. 달리 정의되지 않는 한, 본 명세서에 사용된 모든 기술 및 과학 용어는 본 개시내용이 속하는 기술분야의 통상의 기술자에 의해 일반적으로 이해되는 것과 동일한 의미를 갖는다. 본 명세서에 인용된 모든 특허 및 간행물은 그 전체가 본원에 참고로 포함된다.
관사 "일" 및 "한"은 하나 또는 하나보다 많은(예를 들어, 적어도 하나)의 물체의 문법적 대상을 지칭하기 위해 본 개시내용에 사용된다. 예를 들어, "요소"는 하나의 요소 또는 하나 이상의 요소를 의미한다.
용어 "및/또는"은 달리 표시되지 않는 한, "및" 또는 "또는"을 의미하기 위해 본 명세서에 사용된다.
용어 "선택적으로 치환된"은 주어진 화학적 모이어티(예를 들어, 알킬 기)가 다른 치환체(예를 들어, 헤테로원자)에 결합될 수 있다(하지만, 반드시 결합될 필요는 없음)는 것을 의미하는 것으로 이해한다. 예를 들어, 선택적으로 치환된 알킬 기는 완전히 포화된 알킬 사슬(예컨대, 순수한 탄화수소)일 수 있다. 대안적으로, 동일한 선택적으로 치환된 알킬 기는 수소와 상이한 치환체를 가질 수 있다. 예를 들어, 이것은 사슬을 따라 임의의 지점에서 할로겐 원자, 하이드록실 기 또는 본원에 기재된 임의의 다른 치환체에 결합될 수 있다. 따라서, 용어 "선택적으로 치환된"은 주어진 화학적 모이어티가 다른 작용기를 함유할 가능성이 있지만, 반드시 임의의 추가 작용기를 가질 필요는 없음을 의미한다. 상기 기재된 기의 선택적 치환에 사용된 적합한 치환체는 제한없이, 할로겐, 옥소, -OH, -CN, -COOH, -CH2CN, -O-(C1-C6)알킬, (C1-C6)알킬, (C1-C6)알콕시, (C1-C6)할로알킬, (C1-C6)할로알콕시, -O-(C2-C6)알케닐, -O-(C2-C6)알키닐, (C2-C6)알케닐, (C2-C6)알키닐, -OH, -OP(O)(OH)2, -OC(O)(C1-C6)알킬, -C(O)(C1-C6)알킬, -OC(O)O(C1-C6)알킬, -NH2, -NH((C1-C6)알킬), -N((C1-C6)알킬)2, -NHC(O)(C1-C6)알킬, -C(O)NH(C1-C6)알킬, -S(O)2(C1-C6)알킬, -S(O)NH(C1-C6)알킬 및 -S(O)N((C1-C6)알킬)2를 포함한다. 상기 치환체는 그 자체가 선택적으로 치환될 수 있다. 본원에 사용된 "선택적으로 치환 된"은 또한 그 의미가 이하에 기재되는 치환된 또는 비치환된 것을 지칭한다.
본원에 사용된 용어 "치환된"은 특정 기 또는 모이어티가 하나 이상의 적합한 치환체를 보유한다는 것을 의미하며, 여기서 치환체는 하나 이상의 위치에서 특정 기 또는 모이어티에 연결될 수 있다. 예를 들어, 사이클로알킬에 의해 치환된 아릴은 사이클로알킬이 아릴의 하나의 원자에 결합에 의해 또는 아릴과 융합하여 2개 이상의 공통 원자를 공유함으로써 연결되는 것을 나타낼 수 있다.
본원에 사용된 용어 "비치환된"은 특정 기가 치환체를 보유하지 않는 것을 의미한다.
달리 구체적으로 정의되지 않는 한, 용어 "아릴"은 페닐, 바이페닐 또는 나프틸과 같은 모노사이클릭 또는 바이사이클릭 기를 포함하는, 1 내지 3개의 방향족 고리를 갖는 사이클릭 방향족 탄화수소 기를 지칭한다. 2개의 방향족 고리(바이사이클릭 등)를 함유하는 경우, 아릴 기의 방향족 고리는 단일 지점에서 연결(예컨대, 바이페닐)되거나, 융합(예컨대, 나프틸)될 수 있다. 아릴 기는 임의의 부착 지점에서 하나 이상의 치환체, 예를 들어 1 내지 5개의 치환체에 의해 선택적으로 치환될 수 있다. 예시적인 치환체는 -H, 할로겐, -O-(C1-C6)알킬, (C1-C6)알킬, -O-(C2-C6)알케닐, -O-(C2-C6)알키닐, (C2-C6)알케닐, (C2-C6)알키닐, -OH, -OP(O)(OH)2, -OC(O)(C1-C6)알킬, -C(O)(C1-C6)알킬, -OC(O)O(C1-C6)알킬, -NH2, -NH((C1-C6)알킬), -N((C1-C6)알킬)2, -S(O)2-(C1-C6)알킬, -S(O)NH(C1-C6)알킬 및 -S(O)N((C1-C6)알킬)2를 포함하지만, 이에 제한되지는 않는다. 치환체는 그 자체가 선택적으로 치환될 수 있다. 더욱이, 2개의 융합 고리를 함유할 때 본원에 정의된 아릴 기는 완전 포화된 고리와 융합된 불포화 고리 또는 부분 포화된 고리를 가질 수 있다. 이들 아릴 기의 예시적인 고리계는 페닐, 바이페닐, 나프틸, 안트라세닐, 페날레닐, 페난트레닐, 인다닐, 인데닐, 테트라하이드로나프탈레닐, 테트라하이드로벤조안눌레닐 등을 포함하지만, 이에 제한되지는 않는다.
달리 구체적으로 정의되지 않는 한, "헤테로아릴"은 N, O 및 S로부터 선택되는 하나 이상의 고리 헤테로원자를 함유하고 나머지 고리 원자는 C인, 5 내지 24개 고리 원자의 1가 모노사이클릭 방향족 라디칼 또는 폴리사이클릭 방향족 라디칼을 의미한다. 본원에 정의된 헤테로아릴은 또한 헤테로원자가 N, O 및 S로부터 선택되는 바이사이클릭 헤테로방향족 기를 의미한다. 방향족 라디칼은 독립적으로 본원에 기재된 하나 이상의 치환체에 의해 선택적으로 치환된다. 예로는 푸릴, 티에닐, 피롤릴, 피리딜, 피라졸릴, 피리미디닐, 이미다졸릴, 이속사졸릴, 옥사졸릴, 옥사디아졸릴, 피라지닐, 인돌릴, 티오펜-2-일, 퀴놀릴, 벤조피라닐, 이소티아졸릴, 티아졸릴, 티아디아졸, 인다졸, 벤즈이미다졸릴, 티에노[3,2-b]티오펜, 트리아졸릴, 트리아지닐, 이미다조[1,2-b]피라졸릴, 푸로[2,3-c]피리디닐, 이미다조[1,2-a]피리디닐, 인다졸릴, 피롤로[2,3-c]피리디닐, 피롤로[3,2-c]피리디닐, 피라졸로[3,4-c]피리디닐, 티에노[3,2-c]피리디닐, 티에노[2,3-c]피리디닐, 티에노[2,3-b]피리디닐, 벤조티아졸릴, 인돌릴, 인돌리닐, 인돌리노닐, 디하이드로벤조티오페닐, 디하이드로벤조푸라닐, 벤조푸란, 크로마닐, 티오크로마닐, 테트라하이드로퀴놀리닐, 디하이드로벤조티아진, 디하이드로벤족사닐, 퀴놀리닐, 이소퀴놀리닐, 1,6-나프티리디닐, 벤조[데]이소퀴놀리닐, 피리도[4,3-b][1,6]나프티리디닐, 티에노[2,3-b]피라지닐, 퀴나졸리닐, 테트라졸로[1,5-a]피리디닐, [1,2,4]트리아졸로[4,3-a]피리디닐, 이소인돌릴, 피롤로[2,3-b]피리디닐, 피롤로[3,4-b]피리디닐, 피롤로[3,2-b]피리디닐, 이미다조[5,4-b]피리디닐, 피롤로[1,2-a]피리미디닐, 테트라하이드로피롤로[1,2-a]피리미디닐, 디벤조[b,d]티오펜, 피리딘-2-온, 푸로[3,2-c]피리디닐, 푸로[2,3-c]피리디닐, 1H-피리도[3,4-b][1,4]티아지닐, 벤조옥사졸릴, 벤조이속사졸릴, 푸로[2,3-b]피리디닐, 벤조티오페닐, 1,5-나프티리디닐, 푸로[3,2-b]피리딘, [1,2,4]트리아졸로[1,5-a]피리디닐, 벤조[1,2,3]트리아졸릴, 이미다조[1,2-a]피리미디닐, [1,2,4]트리아졸로[4,3-b]피리다지닐, 벤조[c][1,2,5]티아디아졸릴, 벤조[c][1,2,5]옥사디아졸, 1,3-디하이드로-2H-벤조[d]이미다졸-2-온, 3,4-디하이드로-2H-피라졸로[1,5-b][1,2]옥사지닐, 4,5,6,7-테트라하이드로피라졸로[1,5-a]피리디닐, 티아졸로[5,4-d]티아졸릴, 이미다조[2,1-b][1,3,4]티아디아졸릴, 티에노[2,3-b]피롤릴, 티에노[2,3-d]티아졸, 1a,2,3,7b-테트라하이드로-1H-사이클로프로파[c][1,8]나프티리딘, 3H-인돌릴 및 이들의 유도체를 포함하지만, 이에 제한되지는 않는다. 또한, 본원에 사용된 용어 "헤테로아릴" 및 "헤테로아르-"는 또한 헤테로방향족 고리가 하나 이상의 아릴, 지환족 또는 헤테로사이클릴 고리에 융합된 기를 포함하며, 여기서 라디칼 또는 부착 지점은 헤테로 방향족 고리 상이다. 비제한적인 예는 인돌리닐, 인돌리노닐, 디하이드로벤조티오페닐, 디하이드로벤조푸란, 크로마닐, 티오크로마닐, 테트라하이드로퀴놀리닐, 디하이드로벤조티아진, 3,4-디하이드로-1H-이소퀴놀리닐, 2,3-디하이드로벤조푸란, 인돌리닐, 인돌릴, 이소인돌릴 및 디하이드로벤족사닐을 포함한다.
할로겐 또는 "할로"는 불소, 염소, 브롬 또는 요오드를 지칭한다.
알킬은 1 내지 12개의 탄소 원자를 함유한 직쇄 또는 분지쇄 포화 탄화수소를 지칭한다. (C1-C6)알킬 기의 예는 메틸, 에틸, 프로필, 부틸, 펜틸, 헥실, 이소프로필, 이소부틸, sec-부틸, tert-부틸, 이소펜틸, 네오펜틸 및 이소헥실을 포함하지만, 이에 제한되지는 않는다.
"알콕시"는 사슬에 말단 "O"를 함유한 1 내지 12개의 탄소 원자를 함유하는 직쇄 또는 분지쇄 포화 탄화수소, 예를 들어 -O(알킬)을 지칭한다. 알콕시 기의 예는 제한없이, 메톡시, 에톡시, 프로폭시, 부톡시, t-부톡시 또는 펜톡시 기를 포함한다. 용어 "알킬렌" 또는 "알킬렌일"은 2가 알킬 라디칼을 지칭한다. 위에서 언급한 임의의 1가 알킬 기는 알킬로부터 두 번째 수소 원자의 추출에 의한 알킬렌일 수 있다. 본원에 정의된 바와 같이, 알킬렌은 또한 C0-C6 알킬렌일 수 있다. 알킬렌은 추가로 C0-C4 알킬렌일 수 있다. 전형적인 알킬렌 기는 -CH2-, -CH(CH3)-, -C(CH3)2-, -CH2CH2-, -CH2CH(CH3)-, -CH2C(CH3)2-, -CH2CH2CH2-, -CH2CH2CH2CH2- 등을 포함하지만, 이에 제한되지는 않는다.
"사이클로알킬" 또는 "카보사이클릴"은 3 내지 18개의 탄소 원자를 함유하는 모노사이클릭 또는 폴리사이클릭 포화 탄소 고리를 의미한다. 사이클로알킬 기의 예는 제한없이 사이클로프로필, 사이클로부틸, 사이클로펜틸, 사이클로헥실, 사이클로헵타닐, 사이클로옥타닐, 노르보라닐, 노르보레닐, 바이사이클로[2.2.2]옥타닐, 또는 바이사이클로[2.2.2]옥테닐 및 이의 유도체를 포함한다. C3-C8 사이클로알킬은 3 내지 8개의 탄소 원자를 함유하는 사이클로알킬 기이다. 사이클로알킬기는 융합(예컨대, 데칼린) 또는 가교(예컨대, 노르보르난)될 수 있다.
"헤테로사이클릴" 또는 "헤테로사이클로알킬" 모노사이클릭 또는 폴리사이클릭 고리는 산소, 질소 또는 황으로부터 취해지는 헤테로원자 및 탄소를 함유하고 전체 고리 탄소 또는 헤테로원자 사이에 공유되는 비편재화된 π 전자(방향족성)가 없다. 헤테로사이클로알킬 고리 구조는 하나 이상의 치환체에 의해 치환될 수 있다. 치환체는 그 자체가 선택적으로 치환될 수 있다. 헤테로사이클릴 고리의 예는 옥 세타닐, 아제타디닐, 테트라하이드로푸라닐, 테트라하이드로피라닐, 피롤리디닐, 옥사졸리닐, 옥사졸리디닐, 티아졸리닐, 티아졸리디닐, 피라닐, 티오피라닐, 테트라하이드로피라닐, 디옥살리닐, 피페리디닐, 모르폴리닐, 티오모르폴리닐, 티오모르폴리닐 S-옥사이드, 티오모르폴리닐 S-디옥사이드, 피페라지닐, 아제피닐, 옥세피닐, 디아제피닐, 트로파닐, 옥사졸리디노닐, 및 호모트로파닐을 포함하지만, 이에 제한되지는 않는다. 본원에 사용된, "헤테로사이클릴" 및 "헤테로사이클로알킬"은 또한 적어도 하나의 원자가 헤테로원자인 가교 및 스피로사이클릭 고리 시스템을 포함한다. 치환체로서의 헤테로사이클릭 고리는 고리 헤테로원자를 통해(예컨대, "N-연결된") 또는 고리 탄소(예컨대, "C-연결된")를 통해 부착될 수 있다.
용어 "하이드록시알킬"은 상기 정의된 바와 같은 알킬 기를 의미하고, 여기서 알킬 기는 하나 이상의 OH 기에 의해 치환된다. 하이드록시알킬 기의 예는 HO-CH2-, HO-CH2-CH2- 및 CH3-CH(OH)-를 포함한다.
본원에 사용된 용어 "할로알킬"은 하나 이상의 할로겐에 의해 치환된 본원에 정의된 바와 같은 알킬기를 지칭한다. 할로알킬 기의 예는 트리플루오로메틸, 디플루오로메틸, 펜타플루오로에틸, 트리클로로메틸 등을 포함하지만, 이에 제한되지는 않는다.
본원에 사용된 용어 "할로알콕시"는 하나 이상의 할로겐에 의해 치환된, 본원에 정의된 바와 같은 알콕시 기를 지칭한다. 할로알킬 기의 예는 트리플루오로메톡시, 디플루오로메톡시, 펜타플루오로에톡시, 트리클로로메톡시 등을 포함하지만, 이에 제한되지는 않는다.
본원에 사용된 용어 "시아노"는 삼중 결합에 의해 질소 원자에 연결된 탄소 원자를 갖는 치환체, 예를 들어 C≡N을 의미한다.
용어 "용매화물"은 용질과 용매에 의해 형성된 가변적 화학양론의 복합체를 지칭한다. 본 개시내용의 목적을 위한 상기 용매는 용질의 생물학적 활성을 방해하는 것이 아닐 수 있다. 적합한 용매의 예는 물, MeOH, EtOH 및 AcOH를 포함하지만, 이에 제한되지 않는다. 물이 용매 분자인 용매화물은 전형적으로 수화물이라고 한다. 수화물은 화학양론적 양의 물을 함유하는 조성물, 뿐만 아니라 다양한 양의 물을 함유하는 조성물을 포함한다.
용어 "이성질체"는 동일한 조성 및 분자량을 갖지만, 물리적 및/또는 화학적 특성이 다른 화합물을 의미한다. 구조적 차이는 구성 차이(기하이성질체) 또는 편광면을 회전하는 능력 차이(입체이성질체)에 있을 수 있다. 입체이성질체와 관련하여, 화학식 (I)의 화합물은 하나 이상의 비대칭 탄소 원자를 가질 수 있고 라세미체, 라세미 혼합물로서, 그리고 개별 거울상이성질체 또는 부분입체이성질체로서 발생할 수 있다.
본 개시내용은 또한 유효량의 개시된 화합물 및 약제학적으로 허용가능한 담체를 포함하는 약제학적 조성물을 포함한다.
대상체와 관련하여 용어 "치료하는"은 대상체의 장애 중 적어도 하나의 증상을 개선시키는 것을 지칭한다. 치료는 장애를 치유, 개선 또는 적어도 부분적으로 호전시키는 것을 포함한다.
용어 "장애"는 본 명세서에서 달리 명시되지 않는 한, 용어 질환, 상태 또는 질병을 의미하는데 사용되고 상호교환적으로 사용된다.
본 개시내용에서 사용된 용어 "투여하다", "투여하는" 또는 "투여"는 개시된 화합물 또는 개시된 화합물의 약제학적으로 허용가능한 염 또는 조성물을 대상체에게 직접 투여하거나, 또는 대상체의 신체 내에서 활성 화합물의 등가량을 형성할 수 있는, 화합물 또는 화합물의 약제학적으로 허용가능한 염의 전구약물 유도체 또는 유사체 또는 조성물을 대상체에게 투여하는 것을 지칭한다.
본 개시내용에서 사용된 용어 "전구약물"은 대사 수단에 의해(예를 들어, 가수분해에 의해) 개시된 화합물로 생체내에서 전환될 수 있는 화합물을 의미한다.
용어 "암"은 하기 암을 포함하지만, 이에 제한되지는 않는다: 방광암, 유방암(예를 들어, 유관암), 자궁경부암(예컨대, 편평세포 암), 결장직장암(예컨대, 선암), 식도암(예컨대, 편평세포 암), 위암(예컨대, 선암, 수모세포종, 결장암, 융모암, 편평세포 암), 두경부암, 혈액암(예컨대, 급성 림프구성 빈혈, 급성 골수성 백혈병, 급성 림프모구성 B 세포 백혈병, 역형성 대세포 림프종, B 세포 림프종, 버킷 림프종, 만성 림프구성 백혈병, 만성 호산구성 백혈병/고호산구 증후군, 만성 골수성 백혈병, 호지킨 림프종, 맨틀 세포 림프종, 다발성 골수종, T 세포 급성 림프모구성 백혈병), 폐암(예컨대, 기관지폐포 선암, 중피종, 점막표피종 암종, 소세포 폐암, 비소세포 폐암, 선암, 편평세포 암), 간암(예컨대, 간세포 암종), 림프종, 신경암(예컨대, 교모세포종, 신경모세포종, 신경교종), 난소암(예컨대, 선암), 췌장암(예컨대, 유관암), 전립선암(예컨대, 선암), 신장 암(예컨대, 신장 세포 암종, 투명 세포 신장 암종), 육종(예컨대, 연골육종, 유잉 육종, 섬유육종, 다능성 육종, 골육종, 횡문근육종, 활막 육종), 피부암(예컨대, 흑색종, 표피성 암종, 편평 세포 암종), 갑상선암(예컨대, 수질 암종), 및 자궁암.
본 개시내용은 USP28 및 USP25로부터 선택되는 적어도 하나의 경로를 억제할 수 있는 화합물 및 이의 약제학적으로 허용가능한 염, 용매화물, 전구약물, 입체이성질체, 및 호변이성질체로부터 선택되는 화합물 엔티티에 관한 것으로서, 이는 USP28 및 USP25로부터 선택되는 적어도 하나의 경로의 조정과 관련이 있는 질환 및 장애를 치료하는데 유용하다. 본 개시내용은 또한 USP28 및 USP25로부터 선택되는 적어도 하나의 경로를 억제하는데 유용한, 화합물 및 이의 약제학적으로 허용가능한 염, 용매화물, 전구약물, 입체이성질체, 및 호변이성질체로부터 선택되는 화합물 엔티티에 관한 것이다.
본원에 개시된 임의의 구현예에서, 암은 임의의 기관의 임의의 암일 수 있으며, 예를 들어, 암은 신경교종, 갑상선 암종, 유방 암종, 소세포 폐 암종, 비소세포 암종, 위 암종, 결장 암종, 위장 간질 암종, 췌장 암종, 담관 암종, CNS 암종, 난소 암종, 자궁내막 암종, 전립선 암종, 신장 암종, 역형성 대세포 림프종, 백혈병, 다발성 골수종, 중피종, 및 흑색종, 및 이들의 조합으로 이루어진 군으로부터 선택된다.
본 개시내용은 USP28 및 USP25로부터 선택되는 적어도 하나의 경로를 억제할 수 있는 화합물 및 이의 약제학적으로 허용가능한 염, 용매화물, 전구약물, 입체이성질체, 및 호변이성질체로부터 선택되는 화합물 엔티티에 관한 것으로서, 이는 USP28 및 USP25 효소로부터 선택되는 적어도 하나의 경로의 조정과 관련이 있는 질환 및 장애를 치료하는데 유용하다. 본 개시내용은 또한 USP28 및 USP25로부터 선택되는 적어도 하나의 경로를 억제하는데 유용한, 화합물 및 이의 약제학적으로 허용가능한 염, 용매화물, 전구약물, 입체이성질체, 및 호변이성질체로부터 선택되는 화합물 엔티티에 관한 것이다.
일 구현예에서, 화합물 엔티티는 화학식 (II)의 화합물, 및 이의 약제학적으로 허용가능한 염, 용매화물, 전구약물, 입체이성질체, 및 호변이성질체로부터 선택된다:
Figure pct00008
(II)
여기서, X, Y, R1, R2, R3, R4, 및 n은 상기에 기재된 바와 같다.
다른 구현예에서, 화합물 엔티티는 화학식 (III)의 화합물, 및 이의 약제학적으로 허용가능한 염, 용매화물, 전구약물, 입체이성질체, 및 호변이성질체로부터 선택된다:
Figure pct00009
(III)
여기서, X, Y, R1, R2, R3, R4, 및 n은 상기에 기재된 바와 같다.
다른 구현예에서, 화합물 엔티티는 화학식 (IV)의 화합물, 및 이의 약제학적으로 허용가능한 염, 수화물, 용매화물, 전구약물, 입체이성질체, 및 호변이성질체로부터 선택된다:
Figure pct00010
(IV)
여기서, X, Y, R1, R2, R3, R4, 및 n은 상기에 기재된 바와 같다.
다른 구현예에서, 화합물 엔티티는 화학식 (V)의 화합물, 및 이의 약제학적으로 허용가능한 염, 수화물, 용매화물, 전구약물, 입체이성질체, 및 호변이성질체로부터 선택된다:
Figure pct00011
(V)
여기서, X, Y, R1, R2, R3, R4, 및 n은 상기에 기재된 바와 같다.
일부 구현예에서, 화합물 엔티티는 화학식 (VI)의 화합물, 및 이의 약제학적으로 허용가능한 염으로부터 선택된다:
Figure pct00012
(VI)
여기서, X는 C(R)(R") 및 O로부터 선택되고;
Y1, Y2 및 Y3은 각각 C(R3) 및 N으로부터 독립적으로 선택되고;
R'는 H, 중수소 및 CH3으로부터 선택되고;
R 및 R"는 각각 H, 할로겐, -OH, -CN, 하나 이상의 Ri에 의해 선택적으로 치환된 C1-C6 알킬로부터 독립적으로 선택되거나,
또는 R 및 R"는 이들이 부착된 탄소와 함께 하나 이상의 Ri에 의해 선택적으로 치환된 스피로사이클릭 사이클로프로필을 형성하며, 여기서 수소이거나 또는 수소를 함유하는 임의의 R, R", 또는 Ri 기는 독립적으로 중수소로 대체된 하나 이상의 수소를 가질 수 있고;
각 Ri는 할로겐, -OH 및 CH3으로부터 독립적으로 선택되고;
R1은 R5 및/또는 R6으로부터 선택된 하나 이상의 치환체에 의해 선택적으로 치환된 6원 내지 12원의 융합 및 비융합 헤테로아릴로부터 선택되고, 추가로 수소를 함유하는 임의의 R1 기는 중수소로 대체된 하나 이상의 수소를 가질 수 있고;
R2는 N-연결된 4원 내지 12원 헤테로사이클릴, C-연결된 4원 내지 12원 헤테로사이클릴 및 4원 내지 12원 헤테로사이클릴에 부착된 O 링커로부터 선택되며, 여기서 4원 내지 12원 헤테로사이클릴은 하나 이상의 R5(이것은 R1의 하나 이상의 R5와 동일하거나 상이할 수 있음)에 의해 선택적으로 치환되고, 추가로 R2 기 중 임의의 수소는 중수소로 대체된 하나 이상의 수소를 가질 수 있고;
각 R3은 H, (C1-C6)알킬, (C1-C6)알콕시, (C1-C6)할로알킬, (C1-C6)할로알콕시, 할로겐, -OH, -CN, (C3-C8)사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬, 아릴, 및 헤테로아릴 기로부터 독립적으로 선택되고, 여기서 (C1-C6)알킬, (C1-C6)알콕시, (C1-C6)할로알킬, (C1-C6)할로알콕시, 사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬, 아릴, 및 헤테로아릴 기는 하나 이상의 R7에 의해 선택적으로 치환되며;
R4는 H, (C1-C6)알킬, (C1-C6)알콕시, (C1-C6)할로알킬, (C1-C6)할로알콕시, 할로겐, -OH, -CN, (C3-C8)사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬, 아릴, 및 헤테로아릴 기로부터 선택되고, 여기서 (C1-C6)알킬, (C1-C6)알콕시, (C1-C6)할로알킬, (C1-C6)할로알콕시, (C3-C8)사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬, 아릴, 및 헤테로아릴은 각각 하나 이상의 R5에 의해 선택적으로 치환되고, 추가로 수소를 함유하는 임의의 R4 기는 중수소로 대체된 하나 이상의 수소를 가질 수 있고;
각 R5는 -OH, -NH2, 아미도-(C1-C6)알킬, (C1-C6)알킬, (C1-C6)알콕시, (C1-C6)할로알킬, (C1-C6)할로알콕시, 할로겐, 사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬, 및 -C(O)-헤테로사이클로알킬 기로부터 독립적으로 선택되고, 여기서 -NH2, 아미도-(C1-C6)알킬, (C1-C6)알킬, (C1-C6)알콕시, (C1-C6)할로알킬, (C1-C6)할로알콕시, 사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬, 및 -C(O)-헤테로사이클로알킬은 각각 (C1-C6)알킬, (C1-C6)알콕시, -NH2 및 -OH로부터 독립적으로 선택된 하나 이상의 치환체에 의해 선택적으로 치환되고, 여기서 수소를 함유하는 임의의 R5 기는 중수소로 대체된 하나 이상의 수소를 가질 수 있으며;
각 R6은 -아미노 알킬-아릴, -아미노 알킬-헤테로아릴, -아미노 알킬-사이클 릴 및 -아미노 알킬-헤테로사이클릴 기로부터 독립적으로 선택되며, 여기서 각 R6 기는 -OH, -NH, 할로겐, (C1-C6)알킬, (C1-C6)알콕시, 및 (C1-C6)할로알킬 기로부터 선택된 하나 이상의 치환체에 의해 선택적으로 치환되고, 추가로 수소를 함유하는 임의의 R6 기는 중수소로 대체된 하나 이상의 수소를 가질 수 있고;
각 R7은 -OH, -NH2, (C1-C6)알킬, (C1-C6)알콕시, (C1-C6)할로알킬, (C1-C6)할로알콕시, 할로겐, 사이클로알킬, -C(O)-사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬 및 -C(O)-헤테로사이클로알킬 기로부터 독립적으로 선택되고, 여기서 -NH2, (C1-C6)알킬, (C1-C6)알콕시, (C1-C6)할로알킬, (C1-C6)할로알콕시, 할로겐, 사이클로알킬, -C(O)-사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬 및 -C(O)-헤테로사이클로알킬은 각각 (C1-C6)알킬, (C1-C6)알콕시 및 -OH로부터 독립적으로 선택된 하나 이상의 치환체에 의해선택적으로 치환되고;
n은 0, 1, 2 또는 3이다.
화학식 (VI)의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염:
여기서,
X는 C(R)(R") 및 O로부터 선택되고;
Y1, Y2 및 Y3은 각각 C(R3) 및 N으로부터 독립적으로 선택되고;
R'는 H, 및 CH3으로부터 선택되고;
R 및 R"는 각각 H, 할로겐, -OH, -CN, 하나 이상의 Ri에 의해 선택적으로 치환된 C1-C6 알킬로부터 독립적으로 선택되고,
또는 R 및 R"는 이들이 부착된 탄소와 함께 하나 이상의 Ri에 의해 선택적으로 치환된 스피로사이클릭 사이클로알킬(예컨대, 스피로사이클릭 사이클로프로필)을 형성하며, 여기서 임의의 R, R"에서;
각 Ri는 할로겐, -OH 및 CH3으로부터 독립적으로 선택되고;
R1은 R5 및/또는 R6으로부터 선택된 하나 이상의 치환체에 의해 선택적으로 치환된 융합 및 비융합 헤테로아릴(예컨대, 6원 내지 12원의 융합 및 비융합 헤테로아릴)로부터 선택되고(예컨대, 하나 이상의 R6에 의해 선택적으로 치환된 6원 비융합 헤테로아릴);
R2는 N-연결된 헤테로사이클릴(예컨대, 4원 내지 12원 헤테로사이클릴), C-연결된 헤테로사이클릴(예컨대, 4원 내지 12원 헤테로사이클릴), 및 O-링커-헤테로사이클릴(예컨대, 4원 내지 12원 헤테로사이클릴, 예컨대,
Figure pct00013
)로부터 선택되며, 여기서 임의의 -N-연결된, -C-연결된, 또는 -O-연결된(예컨대, 4원 내지 12원) 헤테로사이클릴은 하나 이상의 R5(이것은 R1의 하나 이상의 R5와 동일하거나 상이할 수 있음)에 의해 선택적으로 치환되고;
각 R3은 H, (C1-C6)알킬, (C1-C6)알콕시, (C1-C6)할로알킬, (C1-C6)할로알콕시, 할로겐, -OH, -CN, (C3-C8)사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬, 아릴, 및 헤테로아릴 기로부터 독립적으로 선택되고, 여기서 (C1-C6)알킬, (C1-C6)알콕시, (C1-C6)할로알킬, (C1-C6)할로알콕시, 사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬, 아릴, 및 헤테로아릴 기는 각각 하나 이상의 R7에 의해 선택적으로 치환되며;
R4는 H, (C1-C6)알킬, (C1-C6)알콕시, (C1-C6)할로알킬, (C1-C6)할로알콕시, 할로겐, -OH, -CN, (C3-C8)사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬, 아릴, 및 헤테로아릴 기로부터 선택되고, 여기서 (C1-C6)알킬, (C1-C6)알콕시, (C1-C6)할로알킬, (C1-C6)할로알콕시, (C3-C8)사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬, 아릴, 및 헤테로아릴은 각각 하나 이상의 R5에 의해 선택적으로 치환되고;
각 R5는 -OH, -NH2, 아미도-(C1-C6)알킬, (C1-C6)알킬, (C1-C6)알콕시, (C1-C6)할로알킬, (C1-C6)할로알콕시, 할로겐, 사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬, 및 -C(O)-헤테로사이클로알킬 기로부터 독립적으로 선택되고, 여기서 -NH2, 아미도-(C1-C6)알킬, (C1-C6)알킬, (C1-C6)알콕시, (C1-C6)할로알킬, (C1-C6)할로알콕시, 사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬 및 -C(O)-헤테로사이클로알킬은 각각 (C1-C6)알킬, (C1-C6)알콕시, -NH2 및 -OH로부터 독립적으로 선택된 하나 이상의 치환체에 의해 선택적으로 치환되고;
각 R6은 -아미노 알킬-아릴, -아미노 알킬-헤테로아릴, -아미노 알킬-사이클 릴 및 -아미노 알킬-헤테로사이클릴 기로부터 독립적으로 선택되며, 여기서 각 R6 기는 -OH, -NH, 할로겐, (C1-C6)알킬, (C1-C6)알콕시 및 (C1-C6)할로알킬 기로부터 선택되는 하나 이상의 치환체에 의해 선택적으로 치환되고;
각 R7은 -OH, -NH2, (C1-C6)알킬, (C1-C6)알콕시, (C1-C6)할로알킬, (C1-C6)할로알콕시, 할로겐, 사이클로알킬, -C(O)-사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬 및 -C(O)-헤테로사이클로알킬 기로부터 독립적으로 선택되고, 여기서 -NH2, (C1-C6)알킬, (C1-C6)알콕시, (C1-C6)할로알킬, (C1-C6)할로알콕시, 할로겐, 사이클로알킬, -C(O)-사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬 및 -C(O)-헤테로사이클로알킬은 각각 (C1-C6)알킬, (C1-C6)알콕시 및 -OH로부터 독립적으로 선택된 하나 이상의 치환체에 의해선택적으로 치환되고;
n은 0, 1, 2 또는 3이다.
일부 구현예에서, 상기 화학식 (I), 화학식 (II), 화학식 (III), 화학식 (IV), 화학식 (V) 및/또는 화학식 (VI)의 화합물은 X(존재하는 경우)를 CH2로서 포함한다[예컨대, 화학식 (VI)에서 R 및 R"는 둘 모두 수소이다]. 다른 구현예에서, 상기 화학식 (I), 화학식 (II), 화학식 (III), 화학식 (IV), 화학식 (V) 및/또는 화학식 (VI)의 화합물은 X(존재하는 경우)를 O로서 포함한다.
다른 구현예에서, 화합물 엔티티는 화학식 (VI)의 화합물 및 이의 약제학적으로 허용가능한 염으로부터 선택되고, 여기서,
X는 C(R)(R") 및 O로부터 선택되고;
Y1, Y2 및 Y3은 각각 C(R3) 및 N으로부터 독립적으로 선택되고;
R'는 H 및 CH3으로부터 선택되고;
R 및 R"는 각각 H, 할로겐, -OH, -CN, 하나 이상의 Ri에 의해 선택적으로 치환된 C1-C6 알킬로부터 독립적으로 선택되고,
각 Ri는 할로겐, -OH 및 CH3으로부터 독립적으로 선택되고;
R1은 하나 이상의 R5에 의해 선택적으로 치환된 6원 내지 12원의 융합 및 비융합 헤테로아릴로부터 선택되고, 여기서 6원 비융합 헤테로아릴은 하나 이상의 R6에 의해 치환되며;
R2는 N-연결된 및 C-연결된 4원 내지 12원 헤테로사이클릴로부터 선택되고, 여기서 4원 내지 12원 헤테로아릴은 하나 이상의 R5(이것은 R1의 하나 이상의 R5와 동일하거나 상이할 수 있음)에 의해 선택적으로 치환되고;
각 R3은 H, (C1-C6)알킬, (C1-C6)알콕시, (C1-C6)할로알킬, (C1-C6)할로알콕시, 할로겐, -OH, 및 -CN으로부터 독립적으로 선택되고, 여기서, (C1-C6)알킬, (C1-C6)알콕시, (C1-C6)할로알킬, 및 (C1-C6)할로알콕시 기는 각각 하나 이상의 R7에 의해 선택적으로 치환되며;
R4는 H, (C1-C6)알킬, 할로겐, -OH, 및 -CN으로부터 선택되고, 여기서 (C1-C6)알킬은 (C1-C6)알콕시 및 -OH로부터 독립적으로 선택되는 하나 이상의 치환체에 의해 선택적으로 치환되고;
각 R5는 -OH, -NH2, -NHC(O)CH3, (C1-C6)알킬, (C1-C6)알콕시, (C1-C6)할로알킬, (C1-C6)할로알콕시, 할로겐, 사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬, 및 -C(O)-헤테로사이클로알킬 기로부터 독립적으로 선택되고, 여기서 알킬은 (C1-C6)알콕시, -NH2 및 -OH로부터 독립적으로 선택되는 하나 이상의 치환체에 의해 선택적으로 치환되고;
각 R6은 -NH(C1-C6)알킬-아릴, -NH(C1-C6)알킬-헤테로아릴, -NH(C1-C6)알킬-사이클릴 및 -NH(C1-C6)알킬-헤테로사이클릴 기로부터 독립적으로 선택되며, 여기서 각 R6 기는 -OH, -NH, 할로겐, (C1-C6)알킬, (C1-C6)알콕시 및 (C1-C6)할로알킬 기로부터 선택되는 하나 이상의 치환체에 의해 선택적으로 치환되고;
각 R7은 -OH, -NH2, (C1-C6)알킬, (C1-C6)알콕시, (C1-C6)할로알킬, (C1-C6)할로알콕시, 할로겐, 사이클로알킬, -C(O)-사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬 및 -C(O)-헤테로사이클로알킬 기로부터 독립적으로 선택되고, 여기서 (C1-C6)알킬, (C1-C6)알콕시, (C1-C6)할로알킬, (C1-C6)할로알콕시, 할로겐, 사이클로알킬, -C(O)-사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬 및 -C(O)-헤테로사이클로알킬 기는 (C1-C6)알콕시 및 -OH로부터 독립적으로 선택된 하나 이상의 치환체에 의해 선택적으로 치환되고;
n은 0, 1, 2 또는 3이다.
다른 구현예에서, 화학식 실체는 화학식 (VII)의 화합물, 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염으로부터 선택된다:
Figure pct00014
(VII)
여기서,
Y는 C(R3) 및 N으로부터 선택되고;
R'는 H, 중수소 및 CH3으로부터 선택되고;
R1은 R5 및/또는 R6으로부터 선택되는 하나 이상의 치환체에 의해 선택적으로 치환된 6원 내지 11원 헤테로아릴로부터 선택되고;
R2는 N-연결된 4원 내지 12원 헤테로사이클릴 및 C-연결된 4원 내지 12원 헤테로사이클릴로부터 선택되며, 여기서 헤테로사이클릴은 하나 이상의 R5에 의해 선택적으로 치환되고, 추가로 수소를 함유하는 임의의 R2 기는 중수소로 대체된 하나 이상의 수소를 가질 수 있고;
각 R3(존재하는 경우)은 H, 중수소, (C1-C6)알킬, (C1-C6)알콕시, (C1-C6)할로알킬, (C1-C6)할로알콕시, 할로겐, -OH, -CN으로부터 독립적으로 선택되고, 여기서, (C1-C6)알킬, (C1-C6)알콕시, (C1-C6)할로알킬, (C1-C6)할로알콕시, 사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬, 아릴, 및 헤테로아릴 기는 각각 하나 이상의 R7에 의해 선택적으로 치환되며;
각 R4는 H, 중수소, (C1-C6)알킬, 할로겐, -OH, -CN으로부터 선택되고, 추가로 수소를 함유하는 임의의 R4 기는 중수소로 대체된 하나 이상의 수소를 가질 수 있으며;
각 R5(존재하는 경우)는 -OH, -NH2, NHC(O)CH3, -C(O)NHCH3, (C1-C6)알킬, (C1-C6)알콕시, (C1-C6)할로알킬, (C1-C6)할로알콕시, 할로겐, 사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬 및 -C(O)-헤테로사이클로알킬 기로부터 독립적으로 선택되고, 여기서 -NH2, NHC(O)CH3, -C(O)NHCH3, (C1-C6)알킬, (C1-C6)알콕시, (C1-C6)할로알킬, (C1-C6)할로알콕시, 사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬 및 -C(O)-헤테로사이클로알킬은 각각 (C1-C6)알콕시, -NH2, 및 -OH로부터 독립적으로 선택되는 하나 이상의 치환체에 의해 선택적으로 치환되며, 수소를 함유하는 임의의 R5 기는 중수소로 대체된 하나 이상의 수소를 가질 수 있고;
각 R6(존재하는 경우)은 -NH(C1-C6)알킬-아릴, -NH(C1-C6)알킬-헤테로아릴, -NH(C1-C6)알킬-헤테로사이클릴 기, 및 -NH(C1-C6)알킬-헤테로사이클릴 기로부터 선택되고, 여기서 R6 기는 각각 -OH, -NH, 할로겐, (C1-C6)알킬, (C1-C6)알콕시, 및 (C1-C6)할로알킬 기로부터 선택되는 하나 이상의 치환체에 의해 선택적으로 치환되고, 추가로 수소를 함유하는 임의의 R6 기는 중수소로 대체된 하나 이상의 수소를 가질 수 있고;
각 R7(존재하는 경우)은 -OH, -NH2, (C1-C6)알킬, (C1-C6)알콕시, (C1-C6)할로알킬, (C1-C6)할로알콕시, 할로겐, 사이클로알킬, -C(O)-사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬, 및 -C(O)-헤테로사이클로알킬 기로부터 독립적으로 선택되고, 여기서 -NH2, (C1-C6)알킬, (C1-C6)알콕시, (C1-C6)할로알킬, (C1-C6)할로알콕시, 할로겐, 사이클로알킬, -C(O)-사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬, 및 -C(O)-헤테로사이클로알킬은 각각 (C1-C6)알킬, (C1-C6)알콕시, 및 -OH로부터 독립적으로 선택되는 하나 이상의 치환체에 의해 선택적으로 치환되며;
n은 0, 1, 2, 또는 3이다.
일부 구현예에서, 화학식 (VII)의 화합물은 화학식 (VII')의 화합물로부터 선택된다:
Figure pct00015
(VII')
여기서, Y는 C(R3) 및 N으로부터 선택되고; R3은 수소 및 할로겐으로부터 독립적으로 선택되며; R4는 H, 중수소, (C1-C6)알킬, 할로겐, -OH, -CN으로부터 선택되며, 추가로 수소를 함유하는 임의의 R4 기는 중수소로 대체된 하나 이상의 수소를 가질 수 있으며; B는 결합, N 또는 C(Rb')로부터 선택되고; Z는 N, S, C(Rz')로부터 선택되며; 여기서 Rb' 및 Rz'는 H 및 R5'에서 각각 독립적으로 선택되고; R5'는 -NH2, (C1-C6)알킬, (C1-C6)할로알킬, 및 할로겐 기로부터 각각 독립적으로 선택되고, R2는 1 내지 3개의 R5에 의해 치환된, N-연결된 5원 내지 8원 모노- 또는 바이-사이클릭 헤테로사이클릴로부터 선택되며; 각 R5는 -OH, -NH2, (C1-C6)알킬, (C1-C6)알콕시, (C1-C6)할로알킬, N(CO)CH3, (C1-C6)할로알콕시, 할로겐, 사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬, 및 -C(O)-헤테로사이클로알킬 기로부터 독립적으로 선택되고, 여기서 -NH2, (C1-C6) 알킬, (C1-C6)알콕시, (C1-C6)할로알킬, N(CO)CH3, (C1-C6)할로알콕시, 사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬 및 -C(O)-헤테로사이클로알킬 알킬은 각각 (C1-C6)알콕시 -NH2 및 -OH로부터 독립적으로 선택된 하나 이상의 치환체에 의해 선택적으로 치환되고, 여기서 수소를 함유하는 임의의 R5 기는 중수소에 의해 대체된 하나 이상의 수소를 가질 수 있으며; n은 0, 1 또는 2로부터 선택된다.
일부 구현예에서, 화학식 (VII)의 화합물은 화학식 (VII")의 화합물로부터 선택된다:
Figure pct00016
(VII")
여기서, Y는 C(R3) 및 N으로부터 선택되고; R3은 수소 및 할로겐으로부터 독립적으로 선택되며; R4는 H, 중수소, (C1-C6)알킬, 할로겐, -OH, -CN으로부터 선택되고, 추가로 수소를 함유하는 임의의 R4 기는 중수소로 대체된 하나 이상의 수소를 가질 수 있으며; M은 N 및 C(Rm)으로부터 선택되고; P는 N 및 C(Rp)로부터 선택되며; Q는 N(Rq'), S, 또는 C(Rq)로부터 선택되고; 여기서, Rm, Rp, 및 Rq', 및 Rq는 수소 및 Rs로부터 각각 독립적으로 선택되고; 존재하는 경우, 융합 고리계의 임의의 부위에 부착될 수 있는 각 Rs는 -NH2, (C1-C6)알킬, (C1-C6)할로알킬, 및 할로겐으로부터 독립적으로 선택되고; s는 0, 1, 2, 3, 4, 5, 또는 6으로부터 선택되며; R2는 1 내지 3개의 R5에 의해 치환된, N-연결된 5원 내지 8원 모노- 또는 바이-사이클릭 헤테로사이클릴로부터 선택되며; 각 R5는 -OH, -NH2, (C1-C6)알킬, (C1-C6)알콕시, (C1-C6)할로알킬, N(CO)CH3, (C1-C6)할로알콕시, 할로겐, 사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬, 및 -C(O)-헤테로사이클로알킬 기로부터 독립적으로 선택되고, 여기서 -NH2, (C1-C6) 알킬, (C1-C6)알콕시, (C1-C6)할로알킬, -N(CO)CH3, -(C1-C6)할로알콕시, 사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬, 및 -C(O)-헤테로사이클로알킬 알킬은 각각 (C1-C6)알콕시 -NH2 및 -OH로부터 독립적으로 선택된 하나 이상의 치환체에 의해 선택적으로 치환되고, 여기서 수소를 함유하는 임의의 R5 기는 중수소에 의해 대체된 하나 이상의 수소를 가질 수 있으며; n은 0, 1 또는 2로부터 선택된다.
본 개시내용은 또한 화학식 (VII"')의 화합물, 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 형태를 제공한다:
Figure pct00017
(VII"')
여기서, R1은
Figure pct00018
이고, R2는
Figure pct00019
, 및
Figure pct00020
으로부터 선택된다.
일부 구현예에서, 본 개시내용은 화학식 (VIII)의 화합물, 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 형태를 제공한다:
Figure pct00021
(VIII)
여기서, X는 C(R)(R") 및 O로부터 선택되고; Y1은 C(R3') 및 N으로부터 선택되고; Y2는 C(R3") 및 N으로부터 선택되고; 여기서 Y1은 Y2가 N일 때 C(R3')이거나, 또는 Y1이 N일 때 Y2는 C(R3")이고; R, R' 및 R"는 각각 H, 및 중수소로부터 선택되고; R1은, 하나 이상의 N 원자를 포함하고 선택적으로 할로겐(바람직하게는 F 또는 Cl), (C1-C4)알킬(바람직하게는, 메틸, 또는 에틸), (C3)사이클로알킬(사이클로프로필 또는 융합된 사이클로프로필), 또는 -NH2, -NHR10 또는 NR10R10' 군으로부터 선택되는 아민으로부터 선택되는 하나 이상의 치환체에 의해 치환되는, 8원 내지 10원의 융합된 헤테로아릴로부터 바람직하게 선택되고, 여기서, R10 및 R10'는 각각 독립적으로 (C1-C4)알킬(바람직하게는, 메틸)이고; R2는 선택적으로 가교되고, 선택적으로 하나 이상의 R5에 의해 치환되고, 선택적으로 NH2, NHR11 또는 NR11R11' 군으로부터 선택되는 하나 이상의 아민에 의해 치환되는, 5원 내지 8원의 모노사이클릭 또는 바이사이클릭 N-연결된-헤테로사이클로알킬 모이어티로부터 바람직하게 선택되고, 여기서 R11 및 R11'는 각각 독립적으로 (C1-C4)알킬(바람직하게는, 메틸)이고, 상기 R2 5원 내지 8원의 모노사이클릭 또는 바이사이클릭 N-연결된-헤테로사이클로알킬 모이어티는 바람직하게는 적어도 2개의 질소 헤테로원자 또는 1개의 질소 헤테로원자 및 적어도 하나의 아민 치환을 포함하고; R3, R3', 및 R3"는 H, (C1-C6)알킬(바람직하게는, 메틸), 할로겐(바람직하게는, -F 또는 -Cl), 및 -CN으로부터 각각 독립적으로 선택되고; R4는 H, (C1-C6)알킬(바람직하게는 메틸), 할로겐으로부터 선택되고, 추가로 수소를 함유하는 임의의 R4 기는 중수소로 대체된 하나 이상의 수소를 가질 수 있으며;
각 R5는 -OH, -NH2, 아미도-(C1-C6)알킬, (C1-C6)알킬, (C1-C6)알콕시, (C1-C6)할로알킬, (C1-C6)할로알콕시, 할로겐, 사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬, 및 -C(O)-헤테로사이클로알킬 기로부터 독립적으로 선택되고, 여기서 -NH2, 아미도-(C1-C6)알킬, (C1-C6)알킬, (C1-C6)알콕시, (C1-C6)할로알킬, (C1-C6)할로알콕시, 사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬, 및 -C(O)-헤테로사이클로알킬은 각각 (C1-C6)알킬, (C1-C6)알콕시, -NH2, 및 -OH로부터 독립적으로 선택되는 하나 이상의 치환체에 의해 선택적으로 치환되고, 여기서 수소를 함유하는 임의의 R5 기는 중수소로 대체된 하나 이상의 수소를 가질 수 있고;
각 R6은 -아미노알킬-아릴, -아미노알킬-헤테로아릴, -아미노알킬-사이클릴, 및 -아미노알킬-헤테로사이클릴 기로부터 독립적으로 선택되고, 여기서 각 R6 기는 -OH, -NH, 할로겐, (C1-C6)알킬, (C1-C6)알콕시, 및 (C1-C6)할로알킬 기로부터 선택되는 하나 이상의 치환체에 의해 선택적으로 치환되고, 추가로 수소를 함유하는 임의의 R6 기는 중수소로 대체된 하나 이상의 수소를 가질 수 있고;
단, 화학식 (VIII)의 화합물은 도 1에서 발견되는 표 C의 화합물들로부터 선택되지 않는다.
일부 구현예에서, 화학식 (VIII)의 치환체는 화학식 (VI)에서와 같이 정의된다.
일부 구현예에서, 화학식 (VIII)의 R1 및 R2 기는 각각 표 A 및 B로부터 선택된다.
화학식 (VIII)의 일부 구현예에서, 화합물은 화학식 (I')의 화합물, 및 이의 약제학적으로 허용가능한 형태로부터 선택될 수 있다:
Figure pct00022
(VIII')
여기서, X는 C(R)(R") 및 O로부터 선택되고; R 및 R"는 각각 H, 할로겐, -OH, -CN, 하나 이상의 Ri에 의해 선택적으로 치환된 C1-C6 알킬로부터 독립적으로 선택되고; 각 Ri는 할로겐, -OH, 및 -CH3으로부터 독립적으로 선택되고; Y1은 C(R3') 및 N으로부터 선택되고; Y2는 C(R3") 및 N으로부터 선택되고; R3, R3' 및 R3"는 H, (C1-C6)알킬, (C1-C6)할로알킬, 할로겐, -OH, -CN으로부터 각각 독립적으로 선택되고, 여기서 각 (C1-C6)알킬 및 (C1-C6)할로알킬 기는 하나 이상의 R7에 의해 선택적으로 치환되고; R4는 H, 중수소, (C1-C6)알킬, 할로겐, -OH, -CN으로부터 선택되고, 추가로 수소를 함유하는 임의의 R4 기는 중수소로 대체된 하나 이상의 수소를 가질 수 있고, B는 결합, N, 또는 C(Rb')로부터 선택되고; Z는 N, S, C(Rz')로부터 선택되고, 여기서 Rb' 및 Rz'는 H 및 R5'로부터 각각 독립적으로 선택되고;
R5'는 -NH2, (C1-C6)알킬, (C1-C6)할로알킬, 및 할로겐으로부터 각각 독립적으로 선택되고, R2는 1 내지 3개의 R5에 의해 치환된 N-연결된 5원 내지 8원의 모노사이클릭 또는 바이사이클릭 헤테로사이클릴로부터 선택되고;
각 R5는 -OH, -NH2, (C1-C6)알킬, (C1-C6)알콕시, (C1-C6)할로알킬, N(CO)CH3, (C1-C6)할로알콕시, 할로겐, 사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬, 및 -C(O)-헤테로사이클로알킬 기로부터 독립적으로 선택되고, 여기서 -NH2, (C1-C6)알킬, (C1-C6)알콕시, (C1-C6)할로알킬, N(CO)CH3, (C1-C6)할로알콕시, 사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬 및 -C(O)-헤테로사이클로알킬 알킬은 각각 (C1-C6)알콕시 -NH2 및 -OH로부터 독립적으로 선택된 하나 이상의 치환체에 의해 선택적으로 치환되고, 여기서 수소를 함유하는 임의의 R5 기는 중수소로 대체된 하나 이상의 수소를 가질 수 있으며;
단, 화학식 (VIII')의 화합물은 도 1에서 볼 수 있는 표 C의 화합물로부터 선택되지 않는다.
바람직하게는, 화학식 (VIII')의 R2는 제2 질소 헤테로원자를 함유하거나, 또는 -NH2, -NHR11 또는 -NR11R11' 군으로부터 선택되는 아민 모이어티에 의해 치환되는, 5원 내지 8원의 모노사이클릭 또는 바이사이클릭 N-연결된 헤테로사이클로알킬, 헤테로아릴 또는 융합된 헤테로사이클로알킬-헤테로아릴 모이어티이며, 여기서 R11 및 R11'는 각각 독립적으로 (C1-C4)알킬(바람직하게는 메틸)이다. R2 모이어티는 바람직하게는 적어도 2개의 질소 헤테로원자 또는 1개의 질소 헤테로원자 및 적어도 하나의 아민 치환을 포함한다. R2는 모노사이클릭 또는 바이사이클릭(예컨대, 가교, 융합 또는 스피로사이클릭) 사이클로헤테로알킬 구조일 수 있다. R2는 적어도 2개의 질소 원자를 함유하는 N-연결된 5원, 6원 또는 7원의 모노사이클릭 N-연결된-헤테로사이클로알킬 모이어티일 수 있다. 임의의 경우에, R2는 추가로 상기 제시된 바와 같은 추가 모이어티에 의해 선택적으로 치환될 수 있다.
화학식 (VIII)의 일부 구현예에서, 화합물은 화학식 (VIII")의 화합물 및 이의 약제학적으로 허용가능한 형태로부터 선택될 수 있다:
Figure pct00023
(VIII")
여기서, X는 C(R)(R") 및 O로부터 선택되고;
R 및 R"는 각각 H, 할로겐, -OH, -CN, 하나 이상의 Ri에 의해 선택적으로 치환된 C1-C6 알킬로부터 독립적으로 선택되고; 각 Ri는 할로겐, -OH, 및 -CH3으로부터 독립적으로 선택되고; Y1은 C(R3') 및 N으로부터 선택되고; Y2는 C(R3") 및 N으로부터 선택되고;
R3, R3' 및 R3"는 H, (C1-C6)알킬, (C1-C6)할로알킬, 할로겐, -OH, -CN으로부터 각각 독립적으로 선택되고, 여기서 각 (C1-C6)알킬 및 (C1-C6)할로알킬 기는 하나 이상의 R7에 의해 선택적으로 치환되고;
R4는 H, 중수소, (C1-C6)알킬, 할로겐, -OH, -CN으로부터 선택되고, 추가로 수소를 함유하는 임의의 R4 기는 중수소로 대체된 하나 이상의 수소를 가질 수 있고,
M은 N 및 C(Rm)으로부터 선택되고; P는 N 및 C(Rp)로부터 선택되고; Q는 N(Rq'), S 또는 C(Rq)로부터 선택되고;
여기서 Rm, Rp 및 Rq' 및 Rq는 수소 및 Rs로부터 각각 독립적으로 선택되고;
존재하는 경우, 융합 고리계의 임의의 부분에 부착될 수 있는 각 Rs는 -NH2, (C1-C6)알킬, (C1-C6)할로알킬, 및 할로겐으로부터 독립적으로 선택되고;
i는 0, 1, 2, 3, 4, 5, 또는 6으로부터 선택되고;
R2는 1 내지 3개의 R5에 의해 치환된 N-연결된 5원 내지 8원의 모노사이클릭 또는 바이사이클릭 헤테로사이클릴로부터 선택되고;
각 R5는 -OH, -NH2, (C1-C6)알킬, (C1-C6)알콕시, (C1-C6)할로알킬, N(CO)CH3, (C1-C6)할로알콕시, 할로겐, 사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬, 및 -C(O)-헤테로사이클로알킬 기로부터 독립적으로 선택되고, 여기서 -NH2, (C1-C6)알킬, (C1-C6)알콕시, (C1-C6)할로알킬, N(CO)CH3, (C1-C6)할로알콕시, 사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬 및 -C(O)-헤테로사이클로알킬 알킬은 각각 (C1-C6)알콕시 -NH2 및 -OH로부터 독립적으로 선택된 하나 이상의 치환체에 의해 선택적으로 치환되고, 여기서 수소를 함유하는 임의의 R5 기는 중수소로 대체된 하나 이상의 수소를 가질 수 있으며;
단, 화학식 (VIII")의 화합물은 도 1에서 볼 수 있는 표 C의 화합물로부터 선택되지 않는다.
바람직하게는, 화학식 (VIII")에서 R2는 제2 질소 헤테로원자를 함유하거나, 또는 -NH2, -NHR11 또는 -NR11R11' 군으로부터 선택되는 아민 모이어티에 의해 치환되는, 5원 내지 8원의 모노사이클릭 또는 바이사이클릭 N-연결된 헤테로사이클로알킬, 헤테로아릴 또는 융합된 헤테로사이클로알킬-헤테로아릴 모이어티이며, 여기서 R11 및 R11'는 각각 독립적으로 (C1-C4)알킬(바람직하게는 메틸)이다. R2 모이어티는 바람직하게는 적어도 2개의 질소 헤테로원자 또는 1개의 질소 헤테로원자 및 적어도 하나의 아민 치환을 포함한다. R2는 모노사이클릭 또는 바이사이클릭(예컨대, 가교, 융합 또는 스피로사이클릭) 사이클로헤테로알킬 구조일 수 있다. R2는 적어도 2개의 질소 원자를 함유하는 N-연결된 5원, 6원 또는 7원의 모노사이클릭 N-연결된-헤테로사이클로알킬 모이어티일 수 있다. 임의의 경우에, R2는 추가로 상기 제시된 바와 같은 추가 모이어티에 의해 선택적으로 치환될 수 있다.
일부 구현예에서, 화학식 (VIII)의 화합물은 화학식 (IX)의 화합물, 및 이의 약제학적으로 허용가능한 형태로부터 선택될 수 있다:
Figure pct00024
(IX)
여기서, Y1, Y2, R', R1, R2, R3, R3', R3", R4, R5, R6, 및 R7은 모두 화학식 (VIII)에서 정의된 바와 같고, 단 화학식 (II)의 화합물은 도 1에서 볼 수 있는 표 C의 화합물로부터 선택되지 않는다.
화학식 (IX)의 일부 구현예에서, Y1은 C(R3') 및 N으로부터 선택되고; Y2는 C(R3") 및 N으로부터 선택되며; R'는 H 및 중수소로부터 선택되고; R1은 R5 및/또는 R6으로부터 선택되는 하나 이상의 치환체에 의해 선택적으로 치환된 6원 내지 11원의 헤테로아릴로부터 선택되고; R2는 N-연결된 4원 내지 12원의 헤테로사이클릴 및 C-연결된 4원 내지 12원의 헤테로사이클릴로부터 선택되고, 여기서 상기 헤테로사이클릴은 하나 이상의 R5에 의해 선택적으로 치환되고, 추가로 수소를 함유하는 임의의 R2 기는 중수소로 대체된 하나 이상의 수소를 가질 수 있고; R3, R3' 및 R3"는 H, 중수소, (C1-C6)알킬, (C1-C6)할로알킬, 할로겐, -OH, -CN으로부터 각각 독립적으로 선택되고, 여기서 각 (C1-C6)알킬 및 (C1-C6)할로알킬 기는 하나 이상의 R7에 의해 선택적으로 치환되고; 각 R4는 H 및 중수소로부터 선택되고; 각 R5(존재하는 경우)는 -OH, -NH2, NHC(O)CH3, -C(O)NHCH3, (C1-C6)알킬, (C1-C6)알콕시, (C1-C6)할로알킬, (C1-C6)할로알콕시, 할로겐, 사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬, 및 -C(O)-헤테로사이클로알킬 기로부터 독립적으로 선택되고, 여기서 -NH2, -NHC(O)CH3, -C(O)NHCH3, (C1-C6)알킬, (C1-C6)알콕시, (C1-C6)할로알킬, (C1-C6)할로알콕시, 사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬, 및 -C(O)-헤테로사이클로알킬은 각각 (C1-C6)알콕시 -NH2, 및 -OH로부터 독립적으로 선택되는 하나 이상의 치환체에 의해 선택적으로 치환되고, 여기서 수소를 함유하는 임의의 R5 기는 중수소로 대체된 하나 이상의 수소를 가질 수 있고; 각 R6(존재하는 경우)은 -NH(C1-C6)알킬-아릴, -NH(C1-C6)알킬-헤테로아릴, -NH(C1-C6)알킬-헤테로사이클릴 기, 및 -NH(C1-C6)알킬-헤테로사이클릴 기로부터 독립적으로 선택되고, 여기서 각 R6 기는 -OH, -NH, 할로겐, (C1-C6)알킬, (C1-C6)알콕시, 및 (C1-C6)할로알킬 기로부터 선택되는 하나 이상의 치환체에 의해 선택적으로 치환되고, 추가로 수소를 함유하는 임의의 R6 기는 중수소로 대체된 하나 이상의 수소를 가질 수 있고; 각 R7(존재하는 경우)은 -OH, -NH2, (C1-C6)알킬, (C1-C6)알콕시, (C1-C6)할로알킬, (C1-C6)할로알콕시, 할로겐, 사이클로알킬, -C(O)-사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬, 및 -C(O)-헤테로사이클로알킬 기로부터 독립적으로 선택되고; 여기서 -NH2, (C1-C6)알킬, (C1-C6)알콕시, (C1-C6)할로알킬, (C1-C6)할로알콕시, 할로겐, 사이클로알킬, -C(O)-사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬, 및 -C(O)-헤테로사이클로알킬은 각각 (C1-C6)알킬, (C1-C6)알콕시, 및 -OH로부터 독립적으로 선택되는 하나 이상의 치환체에 의해 선택적으로 치환된다.
화학식 (IX)의 일부 구현예에서, Y1은 C(R3')로부터 선택되고; Y2는 C(R3")로부터 선택되고; R'는 H 및 중수소로부터 선택되고; R1은 표 A의 기들로부터 선택되고; R2는 표 B의 기들로부터 선택되고; R3은 H, 중수소, (C1-C6)알킬, (C1-C6)할로알킬, 할로겐, 및 -CN으로부터 선택되고, 여기서 상기 (C1-C6)알킬, 및 (C1-C6)할로알킬 기는 각각 하나 이상의 R7에 의해 선택적으로 치환되고; R3'는 H, 중수소, 및 할로겐으로부터 선택되고; R3"는 H, 중수소, (C1-C6)알킬, (C1-C6)할로알킬, 할로겐, 및 -CN으로부터 선택되고, 여기서 상기 (C1-C6)알킬 및 (C1-C6)할로알킬 기는 각각 하나 이상의 R7에 의해 선택적으로 치환되고; R4는 수소이다.
바람직하게는, 화학식 (IX)에서 R1은 적어도 하나의 질소 원자 및 질소, 황 및 산소로부터 선택되는 하나 이상의 추가 헤테로원자를 함유하고, (C1-C4)알킬, 할로겐(바람직하게는 Cl 또는 F) 또는 아민(예컨대, -NH2, 또는 하나 이상의 알킬 또는 할로알킬 모이어티에 의해 치환된 2차 또는 3차 아민)에 의해 선택적으로 치환되는, 8원, 9원, 또는 10원의 융합된 바이사이클릭 헤테로아릴 기이다. 바람직하게는, R1은 하기로 이루어지는 군으로부터 선택된다:
Figure pct00025
Figure pct00026
및
Figure pct00027
.
대안적으로, 화학식 (IX)에서 R1은 융합 또는 스피로사이클릭 3원 내지 6원의 헤테로사이클로알킬 또는 사이클로알킬 기로 그 자체가 치환될 수 있는 3원 내지 6원의 헤테로사이클로알킬 또는 사이클로알킬 기에 융합된 5원 내지 6원의 헤테로아릴 기(예를 들어, 바람직하게는, 스피로사이클릭 또는 융합된 사이클로부틸 모이어티에 의해 선택적으로 치환된 6원의 헤테로사이클로알킬 모이어티에 융합된 6원의 헤테로아릴 기)일 수 있다. 일부 구현예에서, R1은 하기로 이루어진 군으로부터 선택된다:
Figure pct00028
및
Figure pct00029
.
바람직하게는, 화학식 (IX)에서 R2는 제2 질소 헤테로원자를 함유하거나, 또는 NH2, NHR11 또는 NR11R11' 군으로부터 선택되는 아민 모이어티에 의해 치환되는, 5원 내지 8원의 모노사이클릭 또는 바이사이클릭 N-연결된 헤테로사이클로알킬, 헤테로아릴 또는 융합된 헤테로사이클로알킬-헤테로아릴 모이어티이며, 여기서, R11 및 R11'가 각각 독립적으로 (C1-C4)알킬(바람직하게는 메틸)이다. R2 모이어티는 바람직하게는 적어도 2개의 질소 헤테로원자 또는 1개의 질소 헤테로원자 및 적어도 하나의 아민 치환을 포함한다. R2는 모노사이클릭 또는 바이사이클릭(예컨대, 가교, 융합 또는 스피로사이클릭) 사이클로헤테로알킬 구조일 수 있다. R2는 적어도 2개의 질소 원자를 함유하는 N-연결된 5원, 6원 또는 7원의 모노사이클릭 N-연결된-헤테로사이클로알킬 모이어티일 수 있다. 임의의 경우에, R2는 추가로 상기 제시된 바와 같은 추가 모이어티에 의해 선택적으로 치환될 수 있다.
화학식 (IX)의 일부 구현예에서, 화합물은 화학식 (IX')의 화합물 및 이의 약제학적으로 허용가능한 형태로부터 선택될 수 있다:
Figure pct00030
(IX')
여기서, Y1은 C(R3') 및 N으로부터 선택되고; Y2는 C(R3") 및 N으로부터 선택되며; R3, R3' 및 R3"는 H, (C1-C6)알킬, (C1-C6)할로알킬, 할로겐, -OH, -CN으로부터 각각 독립적으로 선택되고, 여기서 각 (C1-C6)알킬 및 (C1-C6)할로알킬 기는 하나 이상의 R7에 의해 선택적으로 치환되고; B는 결합, N, 또는 C(Rb')로부터 선택되고; Z는 N, S, C(Rz')로부터 선택되고, 여기서 Rb' 및 Rz'는 H 및 R5'로부터 각각 독립적으로 선택되고; R5'는 -NH2, (C1-C6)알킬, (C1-C6)할로알킬, 및 할로겐 기로부터 각각 독립적으로 선택되고; R2는 1 내지 3개의 R5에 의해 치환된 N-연결된 5원 내지 8원의 모노사이클릭 또는 바이사이클릭 헤테로사이클릴로부터 선택되고; 각 R5는 -OH, -NH2, (C1-C6)알킬, (C1-C6)알콕시, (C1-C6)할로알킬, -N(CO)CH3, (C1-C6)할로알콕시, 할로겐, 사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬, 및 -C(O)-헤테로사이클로알킬 기로부터 독립적으로 선택되고, 여기서 -NH2, (C1-C6)알킬, (C1-C6)알콕시, (C1-C6)할로알킬, N(CO)CH3, (C1-C6)할로알콕시, 사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬 및 -C(O)-헤테로사이클로알킬 알킬은 각각 (C1-C6)알콕시 -NH2 및 -OH로부터 독립적으로 선택된 하나 이상의 치환체에 의해 선택적으로 치환되고, 여기서 수소를 함유하는 임의의 R5 기는 중수소로 대체된 하나 이상의 수소를 가질 수 있으며; 단, 화학식 (IX')의 화합물은 도 1에서 볼 수 있는 표 C의 화합물로부터 선택되지 않는다.
바람직하게는, 화학식 (IX')에서 R2는 제2 질소 헤테로원자를 함유하거나, 또는 -NH2, -NHR11 또는 -NR11R11' 군으로부터 선택되는 아민 모이어티에 의해 치환되는, 5원 내지 8원의 모노사이클릭 또는 바이사이클릭 N-연결된 헤테로사이클로알킬, 헤테로아릴 또는 융합된 헤테로사이클로알킬-헤테로아릴 모이어티이며, 여기서, R11 및 R11'는 각각 독립적으로 (C1-C4)알킬(바람직하게는 메틸)이다. R2 모이어티는 바람직하게는 적어도 2개의 질소 헤테로원자 또는 1개의 질소 헤테로원자 및 적어도 하나의 아민 치환을 포함한다. R2는 모노사이클릭 또는 바이사이클릭(예컨대, 가교, 융합 또는 스피로사이클릭) 사이클로헤테로알킬 구조일 수 있다. R2는 적어도 2개의 질소 원자를 함유하는 N-연결된 5원, 6원 또는 7원의 모노사이클릭 N-연결된-헤테로사이클로알킬 모이어티일 수 있다. 임의의 경우에, R2는 추가로 상기 제시된 바와 같은 추가 모이어티에 의해 선택적으로 치환될 수 있다.
화학식 (II)의 일부 구현예에서, 상기 화합물은 하기 화학식 (IX")의 화합물 및 이의 약제학적으로 허용가능한 형태로부터 선택될 수 있다:
Figure pct00031
(IX")
여기서, Y1은 C(R3') 및 N으로부터 선택되고; Y2는 C(R3") 및 N으로부터 선택되며; R3, R3' 및 R3"는 H, (C1-C6)알킬, (C1-C6)할로알킬, 할로겐, -OH, -CN으로부터 각각 독립적으로 선택되고, 여기서 각 (C1-C6)알킬 및 (C1-C6)할로알킬 기는 하나 이상의 R7에 의해 선택적으로 치환되고; M은 N 및 C(Rm)으로부터 선택되고; P는 N 및 C(Rp)로부터 선택되고; Q는 N(Rq'), S 또는 C(Rq)로부터 선택되고; 여기서 Rm, Rp 및 Rq' 및 Rq는 수소 및 Rs로부터 각각 독립적으로 선택되고; 존재하는 경우, 융합 고리계의 임의의 부분에 부착될 수 있는 각 Rs는 -NH2, (C1-C6)알킬, (C1-C6)할로알킬, 및 할로겐으로부터 독립적으로 선택되고; i는 0, 1, 2, 3, 4, 5, 또는 6으로부터 선택되고; R2는 1 내지 3개의 R5에 의해 치환된 N-연결된 5원 내지 8원의 모노사이클릭 또는 바이사이클릭 헤테로사이클릴로부터 선택되고; 각 R5는 -OH, -NH2, (C1-C6)알킬, (C1-C6)알콕시, (C1-C6)할로알킬, -N(CO)CH3, (C1-C6)할로알콕시, 할로겐, 사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬, 및 -C(O)-헤테로사이클로알킬 기로부터 독립적으로 선택되고, 여기서 -NH2, (C1-C6)알킬, (C1-C6)알콕시, (C1-C6)할로알킬, -N(CO)CH3, (C1-C6)할로알콕시, 사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬 및 -C(O)-헤테로사이클로알킬 알킬은 각각 (C1-C6)알콕시 -NH2 및 -OH로부터 독립적으로 선택된 하나 이상의 치환체에 의해 선택적으로 치환되고, 여기서 수소를 함유하는 임의의 R5 기는 중수소로 대체된 하나 이상의 수소를 가질 수 있으며; 단, 화학식 (IX")의 화합물은 도 1에서 볼 수 있는 표 C의 화합물로부터 선택되지 않는다.
바람직하게는, 화학식 (IX")에서 R2는 제2 질소 헤테로원자를 함유하거나, 또는 -NH2, -NHR11 또는 -NR11R11' 군으로부터 선택되는 아민 모이어티에 의해 치환되는, 5원 내지 8원의 모노사이클릭 또는 바이사이클릭 N-연결된 헤테로사이클로알킬, 헤테로아릴 또는 융합된 헤테로사이클로알킬-헤테로아릴 모이어티이며, 여기서, R11 및 R11'는 각각 독립적으로 (C1-C4)알킬(바람직하게는 메틸)이다. R2 모이어티는 바람직하게는 적어도 2개의 질소 헤테로원자 또는 1개의 질소 헤테로원자 및 적어도 하나의 아민 치환을 포함한다. R2는 모노사이클릭 또는 바이사이클릭(예컨대, 가교, 융합 또는 스피로사이클릭) 사이클로헤테로알킬 구조일 수 있다. R2는 적어도 2개의 질소 원자를 함유하는 N-연결된 5원, 6원 또는 7원의 모노사이클릭 N-연결된-헤테로사이클로알킬 모이어티일 수 있다. 임의의 경우에, R2는 상기 제시된 바와 같은 추가 모이어티에 의해 선택적으로 추가 치환될 수 있다.
화학식 (IX)의 일부 구현예에서, 화합물은 화학식 (IX"')의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 형태로부터 선택될 수 있다:
Figure pct00032
(IX"')
여기서, R1은
Figure pct00033
이고, R2는
Figure pct00034
, 및
Figure pct00035
로부터 선택된다.
일부 구현예에서, 화학식 (VIII)의 화합물은 화학식 (X)의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 형태로부터 선택될 수 있다:
Figure pct00036
(X)
여기서, Y1, Y2, R', R1, R2, R3, R3', R3", R4, R5, R6, 및 R7은 모두 화학식 (VIII)에서 정의된 바와 같고, 단, 화학식 (X)의 화합물은 도 1의 표 C의 화합물이 아니다.
바람직하게는, 화학식 (X)에서 R1은 적어도 하나의 질소 원자 및 질소, 황 및 산소로부터 선택되는 하나 이상의 추가 헤테로원자를 함유하고, (C1-C4)알킬, 할로겐(바람직하게는 Cl 또는 F) 또는 아민(예컨대, -NH2, 또는 하나 이상의 알킬 또는 할로알킬 모이어티에 의해 치환된 2차 또는 3차 아민)에 의해 선택적으로 치환되는, 8원, 9원, 또는 10원의 융합된 바이사이클릭 헤테로아릴 기이다. 바람직하게는, 화학식 (III)에서 R1은 하기로 이루어지는 군으로부터 선택된다:
Figure pct00037
Figure pct00038
및
Figure pct00039
.
대안적으로, 화학식 (X)에서 R1은 융합 또는 스피로사이클릭 3원 내지 6원의 헤테로사이클로알킬 또는 사이클로알킬 기로 그 자체가 치환될 수 있는 3원 내지 6원의 사이클로알킬 또는 사이클로알킬 기에 융합된 5원 내지 6원의 헤테로아릴 기(예를 들어, 바람직하게는, 스피로사이클릭 또는 융합된 사이클로부틸 모이어티에 의해 선택적으로 치환된 6원의 헤테로사이클로알킬 모이어티에 융합된 6원의 헤테로아릴 기)일 수 있다. 일부 구현예에서, R1은 하기로 이루어진 군으로부터 선택된다:
Figure pct00040
및
Figure pct00041
.
바람직하게는, 화학식 (X)에서 R2는 제2 질소 헤테로원자를 함유하거나, 또는 -NH2, -NHR11 또는 -NR11R11' 군으로부터 선택되는 아민 모이어티에 의해 치환되는, 5원 내지 8원의 모노사이클릭 또는 바이사이클릭 N-연결된 헤테로사이클로알킬, 헤테로아릴 또는 융합된 헤테로사이클로알킬-헤테로아릴 모이어티이며, 여기서, R11 및 R11'는 각각 독립적으로 (C1-C4)알킬(바람직하게는 메틸)이다. R2 모이어티는 바람직하게는 적어도 2개의 질소 헤테로원자 또는 1개의 질소 헤테로원자 및 적어도 하나의 아민 치환을 포함한다. R2는 모노사이클릭 또는 바이사이클릭(예컨대, 가교, 융합 또는 스피로사이클릭) 사이클로헤테로알킬 구조일 수 있다. R2는 적어도 2개의 질소 원자를 함유하는 N-연결된 5원, 6원 또는 7원의 모노사이클릭 N-연결된-헤테로사이클로알킬 모이어티일 수 있다. 임의의 경우에, R2는 상기 제시된 바와 같은 추가 모이어티에 의해 선택적으로 추가 치환될 수 있다.
화학식 (X)의 일부 구현예에서, Y1은 C(R3') 및 N으로부터 선택되고; Y2는 C(R3") 및 N으로부터 선택되며; R'는 H 및 중수소로부터 선택되고; R1은 R5 및/또는 R6으로부터 선택되는 하나 이상의 치환체에 의해 선택적으로 치환된 6원 내지 11원의 헤테로아릴로부터 선택되고; R2는 N-연결된 4원 내지 12원의 헤테로사이클릴 및 C-연결된 4원 내지 12원의 헤테로사이클릴로부터 선택되고, 여기서 상기 헤테로사이클릴은 하나 이상의 R5에 의해 선택적으로 치환되고, 추가로 수소를 함유하는 임의의 R2 기는 중수소로 대체된 하나 이상의 수소를 가질 수 있고; R3, R3' 및 R3"는 H, 중수소, (C1-C6)알킬, (C1-C6)할로알킬, 할로겐, -OH, -CN으로부터 각각 독립적으로 선택되고, 여기서 각 (C1-C6)알킬 및 (C1-C6)할로알킬 기는 하나 이상의 R7에 의해 선택적으로 치환되고; R4는 H 및 중수소로부터 선택되고; 각 R5(존재하는 경우)는 -OH, -NH2, -NHC(O)CH3, -C(O)NHCH3, (C1-C6)알킬, (C1-C6)알콕시, (C1-C6)할로알킬, (C1-C6)할로알콕시, 할로겐, 사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬, 및 -C(O)-헤테로사이클로알킬 기로부터 독립적으로 선택되고, 여기서 -NH2, -NHC(O)CH3, -C(O)NHCH3, (C1-C6)알킬, (C1-C6)알콕시, (C1-C6)할로알킬, (C1-C6)할로알콕시, 사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬, 및 -C(O)-헤테로사이클로알킬은 각각 (C1-C6)알콕시 -NH2, 및 -OH로부터 독립적으로 선택되는 하나 이상의 치환체에 의해 선택적으로 치환되고, 여기서 수소를 함유하는 임의의 R5 기는 중수소로 대체된 하나 이상의 수소를 가질 수 있고; 각 R6(존재하는 경우)은 -NH(C1-C6)알킬-아릴, -NH(C1-C6)알킬-헤테로아릴, -NH(C1-C6)알킬-헤테로사이클릴 기, 및 -NH(C1-C6)알킬-헤테로사이클릴 기로부터 독립적으로 선택되고, 여기서 각 R6 기는 -OH, -NH, 할로겐, (C1-C6)알킬, (C1-C6)알콕시, 및 (C1-C6)할로알킬 기로부터 선택되는 하나 이상의 치환체에 의해 선택적으로 치환되고, 추가로 수소를 함유하는 임의의 R6 기는 중수소로 대체된 하나 이상의 수소를 가질 수 있고; 각 R7(존재하는 경우)은 -OH, -NH2, (C1-C6)알킬, (C1-C6)알콕시, (C1-C6)할로알킬, (C1-C6)할로알콕시, 할로겐, 사이클로알킬, -C(O)-사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬, 및 -C(O)-헤테로사이클로알킬 기로부터 독립적으로 선택되고; 여기서 -NH2, (C1-C6)알킬, (C1-C6)알콕시, (C1-C6)할로알킬, (C1-C6)할로알콕시, 할로겐, 사이클로알킬, -C(O)-사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬, 및 -C(O)-헤테로사이클로알킬은 각각 (C1-C6)알킬, (C1-C6)알콕시, 및 -OH로부터 독립적으로 선택되는 하나 이상의 치환체에 의해 선택적으로 치환되고; 단 화학식 (X)의 화합물은 도 1에서 볼 수 있는 표 C의 화합물로부터 선택되지 않는다.
화학식 (X)의 일부 구현예에서, Y1은 C(R3')로부터 선택되고; Y2는 C(R3")로부터 선택되고; R'는 H 및 중수소로부터 선택되고; R1은 표 A의 기들로부터 선택되고; R2는 표 B의 기들로부터 선택되고; R3은 H, 중수소, (C1-C6)알킬, (C1-C6)할로알킬, 할로겐, 및 -CN으로부터 선택되고, 여기서 상기 (C1-C6)알킬, 및 (C1-C6)할로알킬 기는 각각 하나 이상의 R7에 의해 선택적으로 치환되고; R3'는 H, 중수소, 및 할로겐으로부터 선택되고; R3"는 H, 중수소, (C1-C6)알킬, (C1-C6)할로알킬, 할로겐, 및 -CN으로부터 선택되고, 여기서 상기 (C1-C6)알킬 및 (C1-C6)할로알킬 기는 각각 하나 이상의 R7에 의해 선택적으로 치환되고; R4는 수소이며, 단 화학식 (X)의 화합물은 도 1에서 볼 수 있는 표 C의 화합물로부터 선택되지 않는다.
화학식 (X)의 일부 구현예에서, 화합물은 화학식 (X')의 화합물 및 이의 약제학적으로 허용가능한 형태로부터 선택될 수 있다:
Figure pct00042
(X')
여기서, Y1은 C(R3') 및 N으로부터 선택되고; Y2는 C(R3") 및 N으로부터 선택되며;
R3, R3' 및 R3"는 H, (C1-C6)알킬, (C1-C6)할로알킬, 할로겐, -OH, -CN으로부터 각각 독립적으로 선택되고, 여기서 각 (C1-C6)알킬 및 (C1-C6)할로알킬 기는 하나 이상의 R7에 의해 선택적으로 치환되고;
B는 결합, N, 또는 C(Rb')로부터 선택되고; Z는 N, S, C(Rz')로부터 선택되고, 여기서 Rb' 및 Rz'는 H 및 R5'로부터 각각 독립적으로 선택되고;
R5'는 -NH2, (C1-C6)알킬, (C1-C6)할로알킬, 및 할로겐 기로부터 각각 독립적으로 선택되고;
R2는 1 내지 3개의 R5에 의해 치환된 N-연결된 5원 내지 8원의 모노사이클릭 또는 바이사이클릭 헤테로사이클릴로부터 선택되고;
각 R5는 -OH, -NH2, (C1-C6)알킬, (C1-C6)알콕시, (C1-C6)할로알킬, N(CO)CH3, (C1-C6)할로알콕시, 할로겐, 사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬, 및 -C(O)-헤테로사이클로알킬 기로부터 독립적으로 선택되고, 여기서 -NH2, (C1-C6)알킬, (C1-C6)알콕시, (C1-C6)할로알킬, -N(CO)CH3, -(C1-C6)할로알콕시, 사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬 및 -C(O)-헤테로사이클로알킬 알킬은 각각 (C1-C6)알콕시 -NH2 및 -OH로부터 독립적으로 선택된 하나 이상의 치환체에 의해 선택적으로 치환되고, 여기서 수소를 함유하는 임의의 R5 기는 중수소로 대체된 하나 이상의 수소를 가질 수 있으며;
단, 화학식 (X')의 화합물은 도 1에서 볼 수 있는 표 C의 화합물로부터 선택되지 않는다.
바람직하게는, 화학식 (X')에서 R2는 제2 질소 헤테로원자를 함유하거나, 또는 -NH2, -NHR11 또는 -NR11R11' 군으로부터 선택되는 아민 모이어티에 의해 치환되는, 5원 내지 8원의 모노사이클릭 또는 바이사이클릭 N-연결된 헤테로사이클로알킬, 헤테로아릴 또는 융합된 헤테로사이클로알킬-헤테로아릴 모이어티이며, 여기서, R11 및 R11'가 각각 독립적으로 (C1-C4)알킬(바람직하게는 메틸)이다. R2 모이어티는 바람직하게는 적어도 2개의 질소 헤테로원자 또는 1개의 질소 헤테로원자 및 적어도 하나의 아민 치환을 포함한다. R2는 모노사이클릭 또는 바이사이클릭(예컨대, 가교, 융합 또는 스피로사이클릭) 사이클로헤테로알킬 구조일 수 있다. R2는 적어도 2개의 질소 원자를 함유하는 N-연결된 5원, 6원 또는 7원의 모노사이클릭 N-연결된-헤테로사이클로알킬 모이어티일 수 있다. 임의의 경우에, R2는 상기 제시된 바와 같은 추가 모이어티에 의해 선택적으로 추가 치환될 수 있다.
화학식 (X)의 일부 구현예에서, 상기 화합물은 하기 화학식 (X")의 화합물 및 이의 약제학적으로 허용가능한 형태로부터 선택될 수 있다:
Figure pct00043
(X")
여기서, Y1은 C(R3')로부터 선택되고; Y2는 C(R3")로부터 선택되며;
R3, R3' 및 R3"는 H, (C1-C6)알킬, (C1-C6)할로알킬, 할로겐, -OH, -CN으로부터 각각 독립적으로 선택되고, 여기서 각 (C1-C6)알킬 및 (C1-C6)할로알킬 기는 하나 이상의 R7에 의해 선택적으로 치환되고;
M은 N 및 C(Rm)으로부터 선택되고;
P는 N 및 C(Rp)로부터 선택되고;
Q는 N(Rq'), S 또는 C(Rq)로부터 선택되고;
여기서 Rm, Rp 및 Rq' 및 Rq는 수소 및 Rs로부터 각각 독립적으로 선택되고;
존재하는 경우, 융합 고리계의 임의의 부분에 부착될 수 있는 각 Rs는 -NH2, (C1-C6)알킬, (C1-C6)할로알킬, 및 할로겐으로부터 독립적으로 선택되고;
i는 0, 1, 2, 3, 4, 5, 또는 6으로부터 선택되고;
R2는 1 내지 3개의 R5에 의해 치환된 N-연결된 5원 내지 8원의 모노사이클릭 또는 바이사이클릭 헤테로사이클릴로부터 선택되고;
각 R5는 -OH, -NH2, (C1-C6)알킬, (C1-C6)알콕시, (C1-C6)할로알킬, -N(CO)CH3, -(C1-C6)할로알콕시, 할로겐, 사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬, 및 -C(O)-헤테로사이클로알킬 기로부터 독립적으로 선택되고, 여기서 -NH2, (C1-C6)알킬, (C1-C6)알콕시, (C1-C6)할로알킬, -N(CO)CH3, (C1-C6)할로알콕시, 사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬 및 -C(O)-헤테로사이클로알킬 알킬은 각각 (C1-C6)알콕시 -NH2 및 -OH로부터 독립적으로 선택된 하나 이상의 치환체에 의해 선택적으로 치환되고, 여기서 수소를 함유하는 임의의 R5 기는 중수소로 대체된 하나 이상의 수소를 가질 수 있으며;
단, 화학식 (X")의 화합물은 도 1에서 볼 수 있는 표 C의 화합물로부터 선택되지 않는다.
바람직하게는, 화학식 (X")에서 R2는 제2 질소 헤테로원자를 함유하거나, 또는 -NH2, -NHR11 또는 -NR11R11' 군으로부터 선택되는 아민 모이어티에 의해 치환되는, 5원 내지 8원의 모노사이클릭 또는 바이사이클릭 N-연결된 헤테로사이클로알킬, 헤테로아릴 또는 융합된 헤테로사이클로알킬-헤테로아릴 모이어티이며, 여기서, R11 및 R11'는 각각 독립적으로 (C1-C4)알킬(바람직하게는 메틸)이다. R2 모이어티는 바람직하게는 적어도 2개의 질소 헤테로원자 또는 1개의 질소 헤테로원자 및 적어도 하나의 아민 치환을 포함한다. R2는 모노사이클릭 또는 바이사이클릭(예컨대, 가교, 융합 또는 스피로사이클릭) 사이클로헤테로알킬 구조일 수 있다. R2는 적어도 2개의 질소 원자를 함유하는 N-연결된 5원, 6원 또는 7원의 모노사이클릭 N-연결된-헤테로사이클로알킬 모이어티일 수 있다. 임의의 경우에, R2는 상기 제시된 바와 같은 추가 모이어티에 의해 선택적으로 추가 치환될 수 있다.
상기 화학식의 일부 구현예에서, X는 CH2이다. 다른 구현예에서, X는 O이다.
상기 화학식의 일부 구현예에서, R1은 하나 이상의 R5에 의해 선택적으로 치환된 6원 내지 12원의 헤테로아릴로부터 선택된다. 상기 화학식의 일부 구현예에서, R1은 하나 이상의 R6에 의해 치환된 6원 헤테로아릴로부터 선택된다. 상기 화학식의 일부 구현예에서, 수소를 함유하는 임의의 R1 기 또는 선택적인 치환체는 중수소로 대체된 하나 이상의 수소를 가질 수 있다.
상기 화학식의 일부 구현예에서, R2는 하나 이상의 R5에 의해 선택적으로 치환된 N-연결된 4원 내지 10원의 헤테로사이클릴로부터 선택되고, 여기서, 상기 헤테로사이클릴의 황 구성원은 S(O) 또는 S(O)2일 수 있다. 상기 화학식의 일부 구현예에서, R2는 하나 이상의 R5에 의해 선택적으로 치환된 C-연결된 4원 내지 10원의 헤테로사이클릴로부터 선택되고, 여기서 상기 헤테로사이클릴의 황 구성원은 S(O) 또는 S(O)2일 수 있다. 상기 화학식의 일부 구현예에서, R2는 하나 이상의 R5에 의해 선택적으로 치환된 헤테로사이클릭 실체에 연결된 O로부터 선택되고, 상기 헤테로사이클릴의 황 구성원은 S(O) 또는 S(O)2일 수 있다. 상기 화학식의 일부 구현예에서, 수소를 함유하는 임의의 R2 기 또는 선택적인 치환체는 중수소로 대체된 하나 이상의 수소를 가질 수 있다.
상기 화학식의 일부 구현예에서, R3은 H, (C1-C6)알킬, (C1-C6)할로알콕시, 할로겐, 및 -CN으로부터 독립적으로 선택된다.
상기 화학식의 일부 구현예에서, R4는 H 및 (C1-C6)알킬로부터 선택된다. 상기 화학식의 일부 구현예에서, R4의 하나 이상의 수소는 중수소로 대체될 수 있다.
상기 화학식의 일부 구현예에서, n은 0, 1, 또는 2이다. 다른 구현예에서, n은 0 또는 1이다. 또 다른 구현예에서, n은 1, 2, 또는 3이다. 다른 구현예에서, n은 1 또는 2이다. 다른 구현예에서, n은 2 또는 3이다. 다른 구현예에서, n은 0이다. 다른 구현예에서, n은 1이다. 다른 구현예에서, n은 2이다. 다른 구현예에서, n은 3이다.
상기 화학식의 일부 구현예에서, R5 및/또는 R6에 의해 선택적으로 치환된 R1은 표 A 및/또는 표 A-2의 기들로부터 선택된다. 바람직하게는, 화학식 (I), 화학식 (II), 화학식 (III), 화학식 (IV), 화학식 (V), 화학식 (VI) 및/또는 화학식 (VII)의 화합물은 이하 표 A 및/또는 표 A-2의 기들로부터 선택되는 R1(단독으로 또는 하나 이상의 R5 및/또는 R6에 의해 치환된 것으로서)을 포함한다.
Figure pct00044
Figure pct00045
Figure pct00046
Figure pct00047
상기 화학식의 일부 구현예에서, R5에 의해 선택적으로 치환된 R2는 이하 표 B 및/또는 표 B-2의 기들로부터 선택된다. 바람직하게는, 화학식 (I), 화학식 (II), 화학식 (III), 화학식 (IV), 화학식 (V), 화학식 (VI) 및/또는 화학식 (VII)의 화합물은 이하 표 B 및/또는 표 B-2의 기들로부터 선택되는 R2(단독으로 또는 동일하거나 상이할 수 있는 하나 이상의 R5 및/또는 R6에 의해 치환된 것으로서)을 포함할 수 있다.
Figure pct00048
Figure pct00049
Figure pct00050
Figure pct00051
Figure pct00052
Figure pct00053
Figure pct00054
Figure pct00055
Figure pct00056
바람직하게는, 화학식 (I), 화학식 (I'), 화학식 (I"), 화학식 (I"'), 화학식 (II), 화학식 (III), 화학식 (IV), 화학식 (V), 화학식 (VI) 및/또는 화학식 (VII)의 화합물은 상기 표 A 및/또는 표 A-2의 기들로부터 선택되는 R1(단독으로 또는 동일하거나 상이할 수 있는 하나 이상의 R5 및/또는 R6에 의해 치환된 것으로서), 및 상기 표 B 및/또는 표 B-2의 기들로부터 선택되는 R2(단독으로 또는 동일하거나 상이할 수 있는 하나 이상의 R5 및/또는 R6에 의해 치환된 것으로서)를 둘 모두 포함할 수 있다.
일부 구현예에서, 화합물 엔티티는 화학식 (IIa)의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염:
Figure pct00057
(IIa)
여기서, R1, R2, R3, R4, R5, R6, R7, 및 n은 화학식 (I)에서 정의된 바와 같음,
및/또는 화학식 (IIaa)의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염으로부터 선택된다:
Figure pct00058
(IIaa)
여기서, R1, R2, R3, R5, R6, R7, 및 n은 화학식 (I)에서 정의된 바와 같다.
일부 구현예에서, 화합물 엔티티는 화학식 (IIb)의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염으로부터 선택된다:
Figure pct00059
(IIb')
여기서, R', R1, R2, R3, R4, R5, R6, R7, 및 n은 각각 독립적으로 화학식 (VI)에서 정의된 바와 같다.
일부 구현예에서, 화합물 엔티티는 화학식 (IIaa)의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염으로부터 선택된다:
Figure pct00060
(IIaa)
여기서,
R1은 R5 및 R6으로부터 선택된 하나 이상의 치환체에 의해 치환된 8원 내지 9원의 헤테로아릴로부터 선택되고;
R2는 N-연결된 6원 내지 12원의 헤테로사이클릴 또는 C-연결된 6원 내지 12원의 헤테로사이클릴로부터 선택되고, 여기서 상기 6원 내지 12원의 헤테로사이클릴은 하나 이상의 R5에 의해 선택적으로 치환되고;
R3은 H, (C1-C6)알킬, 할로겐, 및 -CN으로부터 독립적으로 선택되고;
여기서, R5, R6, R7, 및 n은 각각 독립적으로 화학식 (I)에서 정의된 바와 같다.
화학식 (IIaa)의 바람직한 구현예에서, R5 및/또는 R6에 의해 선택적으로 치환된 R1은
Figure pct00061
및
Figure pct00062
로부터 선택되고;
R5에 의해 선택적으로 치환된 R2는
Figure pct00063
Figure pct00064
및
Figure pct00065
로부터 선택된다.
일부 구현예에서, 화합물 엔티티는 화학식 (IIb') 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염으로부터 선택된다:
Figure pct00066
(IIb')
여기서, R'는 H 및 CH3으로부터 선택되고;
R1은 R5 및 R6으로부터 선택되는 하나 이상의 치환체에 의해 치환된 8원 내지 9원의 헤테로아릴로부터 선택되고;
R2는 N-연결된 6원 내지 12원의 헤테로사이클릴 또는 C-연결된 6원 내지 12원의 헤테로사이클릴로부터 선택되고, 여기서 상기 6원 내지 12원의 헤테로사이클릴은 하나 이상의 R5에 의해 선택적으로 치환되고;
R3은 H 및 할로겐으로부터 독립적으로 선택되고;
R5, R6, R7, 및 n은 각각 독립적으로 화학식 (VI)에서 정의된 바와 같다.
화학식 (IIb')의 바람직한 구현예에서, R5 및/또는 R6에 의해 선택적으로 치환된 R1은
Figure pct00067
및
Figure pct00068
로부터 선택되고;
R5에 의해 선택적으로 치환된 R2는
Figure pct00069
Figure pct00070
및
Figure pct00071
로부터 선택된다.
일부 구현예에서, 화합물 엔티티는 화학식 (IIIa) 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염:
Figure pct00072
(IIIa)
여기서, R1, R2, R3, R4, R5, R6, R7, 및 n은 각각 독립적으로 화학식 (I)에서 정의된 바와 같고; 및/또는 화학식 (IIIb)의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염으로부터 선택된다:
Figure pct00073
(IIIb)
여기서, R1, R2, R3, R4, R5, R6, R7, 및 n은 각각 독립적으로 화학식 (I)에서 정의된 바와 같다.
일부 구현예에서, 화합물 엔티티는 화학식 (IIIaa) 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염으로부터 선택된다:
Figure pct00074
(IIIaa)
여기서,
R1은 하나 이상의 R5에 의해 선택적으로 치환된 8원 내지 11원의 헤테로아릴로부터 선택되고;
R2는 하나 이상의 R5에 의해 선택적으로 치환된, N-연결된 4원 내지 12원의 헤테로사이클릴 및 C-연결된 4원 내지 12원의 헤테로사이클릴로부터 선택되고;
각 R5(존재하는 경우)는 -OH, -NH2, NHC(O)CH3, (C1-C6)알킬, (C1-C6)알콕시, (C1-C6)할로알킬, (C1-C6)할로알콕시, 할로겐, 사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬, 및 -C(O)-헤테로사이클로알킬 기로부터 독립적으로 선택되고, 여기서, 각각의 -NH2, NHC(O)CH3, (C1-C6)알킬, (C1-C6)알콕시, (C1-C6)할로알킬, (C1-C6)할로알콕시, 사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬, 및 -C(O)-헤테로사이클로알킬은 (C1-C6)알콕시, -NH2, 및 -OH로부터 독립적으로 선택된 하나 이상의 치환체에 의해 선택적으로 치환되고;
n은 0, 1, 2 또는 3이다.
화학식 (IIIaa)의 바람직한 구현예에서, R1은 하기 식으로부터 선택되고:
Figure pct00075
여기서, B는 결합 또는 C로부터 선택되고;
Z는 N, S, C(Rii)로부터 선택되고;
Rii는 H, CH3 및 R5로부터 선택되며;
R2는 1 내지 3개의 R5에 의해 치환된 N-연결된 5원 내지 8원의 헤테로사이클릴로부터 선택되고;
각 R5(존재하는 경우)는 -OH, -NH2, NHC(O)CH3, (C1-C6)알킬, (C1-C6)알콕시, (C1-C6)할로알킬, (C1-C6)할로알콕시, 할로겐, 사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬, 및 -C(O)-헤테로사이클로알킬 기로부터 독립적으로 선택되고, 여기서, 각각의 -NH2, -NHC(O)CH3, (C1-C6)알킬, (C1-C6)알콕시, (C1-C6)할로알킬, (C1-C6)할로알콕시, 사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬, 및 -C(O)-헤테로사이클로알킬은 (C1-C6)알콕시, -NH2, 및 -OH로부터 독립적으로 선택된 하나 이상의 치환체에 의해 선택적으로 치환되고; n은 0, 1, 2 또는 3이다.
화학식 (IIIaa)의 또 다른 바람직한 구현예에서, R5에 의해 선택적으로 치환된 R1은 하기로부터 선택되고;
Figure pct00076
및
Figure pct00077
;
R5에 의해 선택적으로 치환된 R2는 하기로부터 선택된다:
Figure pct00078
Figure pct00079
및
Figure pct00080
.
일부 구현예에서, 화합물 엔티티는 화학식 (IVa)의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염으로부터 선택된다:
Figure pct00081
(IVa)
여기서, R1, R2, R3, R4, R5, R6, R7, 및 n은 각각 독립적으로 화학식 (I)에서 정의된 바와 같다.
일부 구현예에서, 화합물 엔티티는 화학식 (Va) 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염으로부터 선택된다:
Figure pct00082
(Va)
여기서, R1, R2, R4, R5, R6, R7, 및 n은 각각 독립적으로 화학식 (I)에서 정의된 바와 같다.
일부 구현예에서, 화합물 엔티티는 화학식 (Vaa) 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염으로부터 선택된다:
Figure pct00083
(Vaa)
여기서,
R1은 R5 및 R6으로부터 선택된 하나 이상의 치환체에 의해 치환된 8원의 헤테로아릴로부터 선택되고; R2는 N-연결된 5원의 헤테로사이클릴로부터 선택되며; R5, R6, R7 및 n은 각각 독립적으로 화학식 (I)에서 정의된 바와 같다.
화학식 (Vaa)의 또 다른 바람직한 구현예에서, R5에 의해 치환된 R1은
Figure pct00084
로부터 선택되고, R2는
Figure pct00085
으로부터 선택된다.
일부 구현예에서, 화합물 엔티티는 화학식 (VIIa')의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염으로부터 선택된다:
Figure pct00086
(VIIa')
여기서, R', R1, R2, R3, R4, R5, R6, R7, 및 n은 각각 독립적으로 화학식 (VI)에서 정의된 바와 같다.
적어도 하나의 구현예에서, 화합물 엔티티는 화학식 (VIIaa)의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염으로부터 선택된다:
Figure pct00087
(VIIaa)
여기서,
R1은 하나 이상의 R5에 의해 선택적으로 치환된 8원 내지 9원의 헤테로아릴로부터 선택되고;
R2는 1 내지 3개의 R5에 의해 선택적으로 치환된 N-연결된 4원 내지 12원의 헤테로사이클릴로부터 선택되고;
각 R5(존재하는 경우)는 -OH, -NH2, NHC(O)CH3, (C1-C6)알킬, (C1-C6)알콕시, (C1-C6)할로알킬, (C1-C6)할로알콕시, 할로겐, 사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬, 및 -C(O)-헤테로사이클로알킬 기로부터 독립적으로 선택되고, 여기서, 각각의 -NH2, -NHC(O)CH3, (C1-C6)알킬, (C1-C6)알콕시, (C1-C6)할로알킬, (C1-C6)할로알콕시, 사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬, 및 -C(O)-헤테로사이클로알킬은 (C1-C6)알콕시, -NH2, 및 -OH로부터 독립적으로 선택된 하나 이상의 치환체에 의해 선택적으로 치환되고;
n은 0, 1, 2 또는 3이다.
화학식 (VIIaa)의 바람직한 구현예에서, R1은 하기 식으로부터 선택된다:
Figure pct00088
여기서, B는 결합 또는 C로부터 선택되고;
Z는 N, S, C(Rii)로부터 선택되고;
Rii는 H, CH3 및 R5로부터 선택되고;
R2는 1 내지 3개의 R5에 의해 치환된 N-연결된 5원 내지 8원의 헤테로사이클릴로부터 선택되고;
각 R5(존재하는 경우)는 -OH, -NH2, NHC(O)CH3, (C1-C6)알킬, (C1-C6)알콕시, (C1-C6)할로알킬, (C1-C6)할로알콕시, 할로겐, 사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬, 및 -C(O)-헤테로사이클로알킬 기로부터 독립적으로 선택되고, 여기서, 각각의 -NH2, -NHC(O)CH3, (C1-C6)알킬, (C1-C6)알콕시, (C1-C6)할로알킬, (C1-C6)할로알콕시, 사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬, 및 -C(O)-헤테로사이클로알킬은 (C1-C6)알콕시, -NH2, 및 -OH로부터 독립적으로 선택된 하나 이상의 치환체에 의해 선택적으로 치환되고;
n은 0, 1, 2 또는 3이다.
화학식 (VIIaa)의 또 다른 바람직한 구현예에서, R5에 의해 선택적으로 치환된 R1은 하기로부터 선택되고;
Figure pct00089
및
Figure pct00090
;
R5에 의해 선택적으로 치환된 R2는 하기로부터 선택된다:
Figure pct00091
Figure pct00092
및
Figure pct00093
.
바람직하게는, 화합물은 본원에 정의된 USP28 억제제, USP25 억제제 및/또는 USP28/25 억제제인, 화학식 (I), (II), (III), (IV), (V), (VI), (VII), (IIa), (IIaa), (IIb'), (IIIa), (IIIb), (IIIaa), (IVa), (Va), (Vaa), (VIIa') 또는 화학식 (VIIaa)의 화합물이다.
본 개시내용의 다른 구현예에서, 화학식 (I)의 화합물은 거울상이성질체이다. 일부 구현예에서, 상기 화합물은 (S)-거울상이성질체이다. 다른 구현예에서, 상기 화합물은 (R)-거울상이성질체이다. 또 다른 구현예에서, 화학식 (I)의 화합물은 (+) 또는 (-) 거울상이성질체일 수 있다.
혼합물을 포함한 모든 이성질체 형태는 본 개시내용에 포함되는 것으로 이해되어야 한다. 화합물이 이중 결합을 함유한다면 치환체는 E 또는 Z 배열일 수 있다. 화합물이 이치환된 사이클로알킬을 함유한다면, 사이클로알킬 치환체는 시스- 또는 트랜스 배열을 가질 수 있다. 모든 호변이성질체 형태도 포함되는 것으로 간주한다.
본 개시내용의 화합물, 및 이의 약제학적으로 허용가능한 염, 수화물, 용매화물, 입체이성질체 및 전구약물은 이들의 호변이성질체 형태(예를 들어, 아미드 또는 이미노 에테르로서)로 존재할 수 있다. 이러한 모든 호변이성질체 형태는 본 개시내용의 일부로서 본원에서 고려된다.
본 개시내용의 화합물은 비대칭 또는 키랄 중심을 함유할 수 있고, 따라서 상이한 입체이성질체 형태로 존재할 수 있다. 본 개시내용의 화합물의 모든 입체 이성질체 형태, 뿐만 아니라 라세미 혼합물을 비롯한 이들의 혼합물은 본 개시내용의 일부를 형성하는 것으로 의도된다. 또한, 본 개시내용은 모든 기하학적 및 위치 이성질체를 포함한다. 예를 들어, 본 개시내용의 화합물이 이중 결합 또는 융합 고리를 포함하는 경우, 시스- 및 트랜스-형태 둘 모두 뿐만 아니라 혼합물도 본 개시내용의 범위 내에 포함된다. 본원에 개시된 각 화합물은 화합물의 일반적인 구조에 따르는 모든 거울상이성질체를 포함한다. 화합물은 라세미 또는 거울상이성질체적으로 순수한 형태, 또는 입체화학 측면에서 임의의 다른 형태일 수 있다. 검정 결과는 라 세미 형태, 거울상이성질체적으로 순수한 형태 또는 입체화학 측면에서 임의의 다른 형태에 대해 수집된 데이터를 반영할 수 있다.
부분입체이성질체 혼합물은 이의 이화학적 차이를 기반으로 하여, 본 기술분야의 기술자에게 잘 알려진 방법에 의해, 예를 들어 크로마토그래피 및/또는 분별 결정화에 의해 개별 부분입체이성질체로 분리될 수 있다. 거울상이성질체는 적절한 광학 활성 화합물[예컨대, 키랄 알코올 또는 모셔(Mosher)의 산 염화물과 같은 키랄 보조제]과의 반응에 의해 거울상이성질체 혼합물을 부분입체이성질체 혼합물로 전환하고, 부분입체이성질체를 분리하고, 개별 부분입체이성질체를 대응하는 순수 거울상이성질체로 전환(예컨대, 가수분해)함으로써 분리될 수 있다. 또한, 본 개시내용의 화합물 중 일부는 회전장애이성질체(예를 들어, 치환된 바이아릴)일 수 있고 본 개시내용의 일부로서 간주된다. 거울상이성질체는 또한 키랄 HPLC 컬럼을 사용하여 분리할 수 있다.
본 개시내용의 화합물은 상이한 호변이성질체 형태로 존재할 수 있고, 이러한 모든 형태가 본 개시내용의 범위 내에 포함되는 것도 가능하다. 또한, 예를 들어, 화합물의 모든 케토-에놀 및 이민-엔아민 형태도 본 개시내용에 포함된다.
본 발명의 화합물(화합물의 염, 용매화물, 에스테르 및 전구약물, 뿐만 아니라 전구약물의 염, 용매화물 및 에스테르도 포함함)의 모든 입체이성질체(예를 들어, 기하학적 이성질체, 광학 이성질체 등), 예컨대 거울상이성질체 형태(비대칭 탄소의 부재 시에도 존재할 수 있음), 회전이성질체 형태, 회전장애이성질체 및 부분입체이성질체 형태를 포함하는 다양한 치환체 상의 비대칭 탄소로 인해 존재할 수 있는 것들은 위치 이성질체(예컨대, 예를 들어 4-피리딜 및 3-피리딜)인 것으로서 본 개시내용의 범위 내에서 고려된다[예를 들어, 화학식 (I)의 화합물이 이중 결합 또는 융합 고리를 포함하는 경우, 시스- 및 트랜스-형태, 뿐만 아니라 혼합물도 본 개시내용의 범위 내에 포함된다. 또한, 예를 들어 화합물의 모든 케토-엔올 및 이민-엔아민 형태도 본 개시내용에 포함된다]. 본 개시내용의 화합물의 개별 입체이성질체는, 예를 들어, 다른 이성질체가 실질적으로 없을 수 있거나, 또는 예를 들어 라세미체로서 또는 다른 모든 또는 다른 선택된 입체이성질체와 혼합될 수 있다. 본 개시내용의 키랄 중심은 IUPAC 1974 Recommendations에 의해 정의된 바와 같은 S 또는 R 배열을 가질 수 있다. 용어 "염", "용매화물", "에스테르", "전구약물" 등의 사용은 본원에 개시된 화합물의 거울상이성질체, 입체이성질체, 회전이성질체, 호변이성질체, 위치이성질체, 라세미체 또는 전구약물의 염, 용매화물, 에스테르 및 전구약물에도 동일하게 적용되는 것으로 간주한다.
본원에 개시된 화합물은 또한 본 개시내용의 범위 내에 있는 염을 형성할 수 있다.
본 개시내용은 USP28 및 USP25로부터 선택되는 적어도 하나의 경로의 조정인자인 화합물에 관한 것이다. 일 구현예에서, 본 개시내용의 화합물은 USP28 및 USP25로부터 선택되는 적어도 하나의 경로의 억제제이다.
본 개시내용은 본원에 기재된 바와 같은 화합물 및 이의 약제학적으로 허용가능한 염, 용매화물, 전구약물, 입체이성질체 및 호변이성질체로부터 선택되는 화합물 엔티티, 및 본원에 기재된 화합물로부터 선택되는 적어도 하나의 화합물 엔티티, 및 이의 약제학적으로 허용가능한 염, 수화물, 용매화물, 전구약물, 입체이성질체 및 호변이성질체를 포함하는 약제학적 조성물에 관한 것이다.
본 개시내용의 다른 측면은 USP28의 조정과 관련된 질환 또는 장애를 치료, 예방, 억제 또는 제거하는 방법에 관한 것이다. 상기 방법은 USP28의 조정과 관련된 질환 또는 장애에 대한 치료를 필요로 하는 환자에게 유효량의 화학식 (I)의 조성물 및 화합물 엔티티를 투여하는 것을 포함한다. 일 구현예에서, 상기 질환 또는 장애는 암이다.
다른 측면에서, 본 개시내용은 USP28의 억제와 관련된 질환 또는 장애를 치료, 예방, 억제 또는 제거하는 방법에 관한 것이다. 상기 방법은 USP28의 조정과 관련된 질환 또는 장애에 대한 치료를 필요로 하는 환자에게 유효량의 화학식 (I)의 조성물 및 화합물 엔티티를 투여하는 것을 포함한다. 일 구현예에서, 상기 질환 또는 장애는 암이다.
다른 측면에서, 본 개시내용은 USP28을 억제하는 방법에 관한 것이다. 상기 방법은 유효량의 화학식 (I)의 화합물 엔티티를 이를 필요로 하는 환자에게 투여하는 것을 수반한다.
본 개시내용의 다른 측면은 USP25의 조정과 관련된 질환 또는 장애를 치료, 예방, 억제 또는 제거하는 방법에 관한 것이다. 상기 방법은 USP25의 조정과 관련된 질환 또는 장애에 대한 치료를 필요로 하는 환자에게 유효량의 화학식 (I)의 조성물 및 화합물 엔티티를 투여하는 것을 포함한다. 일 구현예에서, 상기 질환 또는 장애는 암이다.
다른 측면에서, 본 개시내용은 USP25의 억제와 관련된 질환 또는 장애를 치료, 예방, 억제 또는 제거하는 방법에 관한 것이다. 상기 방법은 USP25의 조정과 관련된 질환 또는 장애에 대한 치료를 필요로 하는 환자에게 유효량의 화학식 (I)의 조성물 및 화합물 엔티티를 투여하는 것을 포함한다. 일 구현예에서, 상기 질환 또는 장애는 암이다.
다른 측면에서, 본 개시내용은 USP25를 억제하는 방법에 관한 것이다. 상기 방법은 유효량의 화학식 (I)의 화합물 엔티티를 이를 필요로 하는 환자에게 투여하는 것을 포함한다.
본 개시내용의 다른 측면은 USP28의 조정과 관련된 질환 또는 장애를 치료, 예방, 억제 또는 제거하는 방법에 관한 것이다. 상기 방법은 USP28의 조정과 관련된 질환 또는 장애에 대한 치료를 필요로 하는 환자에게 유효량의 화학식 (I)의 조성물 및 화합물 엔티티를 투여하는 것을 포함한다. 일 구현예에서, 상기 질환 또는 장애는 암이다. 다른 측면에서, 본 개시내용은 USP28의 억제와 관련된 질환 또는 장애를 치료, 예방, 억제 또는 제거하는 방법에 관한 것이다. 상기 방법은 USP28의 조정과 관련된 질환 또는 장애에 대한 치료를 필요로 하는 환자에게 유효량의 화학식 (I)의 조성물 및 화합물 엔티티를 투여하는 것을 포함한다. 일 구현예에서, 상기 질환 또는 장애는 암이다. 상기 방법은 USP28 및/또는 USP25의 조정과 관련된 질환 또는 장애에 대한 치료를 필요로 하는 환자에게 본원에 개시된 USP28 억제제, USP25 억제제 및/또는 USP28/25 억제제를 포함하는 약제학적 조성물의 유효량을 투여하는 것을 포함할 수 있다. 다른 측면에서, 본 개시내용은 USP28 및 USP25로부터 선택되는 적어도 하나의 경로를 억제하는 방법에 관한 것이다. 상기 방법은 유효량의 화학식 (I)의 화합물 엔티티를 이를 필요로 하는 환자에게 투여하는 것을 수반한다. 상기 방법은 USP28 및/또는 USP25의 조정과 관련된 질환 또는 장애에 대한 치료를 필요로 하는 환자에게 본원에 개시된 USP28 억제제, USP25 억제제 및/또는 USP28/25 억제제를 포함하는 약제학적 조성물의 유효량을 투여하는 것을 포함할 수 있다.
본 개시내용의 다른 측면은 USP28의 억제와 관련된 환자에서 질환 또는 장애를 치료, 예방, 억제 또는 제거하는 방법에 관한 것으로서, 상기 방법은 화학식 (I)의 화합물 엔티티의 유효량을 이를 필요로 하는 환자에게 투여하는 것을 포함한다. 일 구현예에서, 상기 질환 또는 장애는 암이다. 상기 방법은 USP28 및/또는 USP25의 조정과 관련된 질환 또는 장애에 대한 치료를 필요로 하는 환자에게 본원에 개시된 USP28 억제제, USP25 억제제 및/또는 USP28/25 억제제를 포함하는 약제학적 조성물의 유효량을 투여하는 것을 포함할 수 있다.
본 개시내용의 다른 측면은 USP25의 억제와 관련된 환자에서 질환 또는 장애를 치료, 예방, 억제 또는 제거하는 방법에 관한 것으로서, 상기 방법은 화학식 (I)의 화합물 엔티티의 유효량을 이를 필요로 하는 환자에게 투여하는 것을 포함한다. 일 구현예에서, 상기 질환 또는 장애는 암이다. 상기 방법은 USP28 및/또는 USP25의 조정과 관련된 질환 또는 장애에 대한 치료를 필요로 하는 환자에게 본원에 개시된 USP28 억제제, USP25 억제제 및/또는 USP28/25 억제제를 포함하는 약제 학적 조성물의 유효량을 투여하는 것을 포함할 수 있다.
본 개시내용의 다른 측면은 USP28 및 USP25로부터 선택되는 적어도 하나의 경로의 억제와 관련된 환자의 질환 또는 장애를 치료, 예방, 억제 또는 제거하는 방법에 관한 것으로서, 상기 방법은 화학식 (I)의 화합물 엔티티의 유효량을 이를 필요로 하는 환자에게 투여하는 것을 포함한다. 일 구현예에서, 상기 질환 또는 장애는 암이다. 상기 방법은 USP28 및/또는 USP25의 조정과 관련된 질환 또는 장애에 대한 치료를 필요로 하는 환자에게 본원에 개시된 USP28 억제제, USP25 억제제 및/또는 USP28/25 억제제를 포함하는 약제학적 조성물의 유효량을 투여하는 것을 포함할 수 있다.
다른 측면에서, 본 개시내용은 암을 치료, 예방, 억제, 또는 제거하는 방법에 관한 것이다. 이 방법은 암의 치료를 필요로 하는 환자에게 화학식 (I)의 화합물, 이의 약제학적으로 허용가능한 염, 용매화물, 전구약물, 입체이성질체, 및 호변이성질체로부터 선택되는 화합물 엔티티의 유효량을 투여하는 것을 포함한다. 이 방법은 USP28 및/또는 USP25의 조정과 관련된 질환 또는 장애에 대한 치료를 필요로 하는 환자에게 본원에 개시된 USP28 억제제, USP25 억제제 및/또는 USP28/25 억제제를 포함하는 약제학적 조성물의 유효량을 투여하는 것을 포함할 수 있다.
본 개시내용의 다른 측면은 USP28을 억제하는 것과 관련된 질환 또는 장애를 치료, 예방, 억제 또는 제거하는 방법에 사용하기 위한, 화학식 (I)의 화합물, 및 이의 약제학적으로 허용가능한 염, 용매화물, 전구약물, 입체이성질체, 및 호변이성질체로부터 선택되는 화합물 엔티티에 관한 것이다. 일 구현예에서, 상기 질환 또는 장애는 암이다. 상기 방법은 USP28 및/또는 USP25의 조정과 관련된 질환 또는 장애에 대한 치료를 필요로 하는 환자에게 본원에 개시된 USP28 억제제, USP25 억제제, 및/또는 USP28/25 억제제를 포함하는 약제학적 조성물의 유효량을 투여하는 것을 포함할 수 있다.
다른 측면에서, 본 개시내용은 USP25를 억제하는 것과 관련이 있는 질환 또는 장애를 치료, 예방, 억제, 또는 제거하는 방법에 사용하기 위한, 화학식 (I)의 화합물, 및 이의 약제학적으로 허용가능한 염, 용매화물, 전구약물, 입체이성질체, 및 호변이성질체로부터 선택되는 화합물 엔티티에 관한 것이다. 일 구현예에서, 상기 질환 또는 장애는 암이다.
본 개시내용의 다른 측면은 USP28 및 USP25로부터 선택되는 적어도 하나의 경로를 억제하는 것과 관련이 있는 질환 또는 장애를 치료, 예방, 억제, 또는 제거하는 방법에 사용하기 위한, 화학식 (I)의 화합물, 및 이의 약제학적으로 허용가능한 염, 용매화물, 전구약물, 입체이성질체, 및 호변이성질체로부터 선택되는 화합물 엔티티에 관한 것이다. 일 구현예에서, 상기 질환 또는 장애는 암이다.
다른 측면에서, 본 개시내용은 암을 치료, 예방, 억제, 또는 제거하는 방법에 사용하기 위한, 화학식 (I)의 화합물, 및 이의 약제학적으로 허용가능한 염, 용매화물, 전구약물, 입체이성질체, 및 호변이성질체로부터 선택되는 화합물 엔티티에 관한 것이다.
본 개시내용의 다른 측면은 USP28을 억제하는 것과 관련된 질환 또는 장애를 치료, 예방, 억제, 또는 제거하기 위한 약제의 제조에 사용되는, 화학식 (I)의 화합물, 및 이의 약제학적으로 허용가능한 염, 용매화물, 전구약물, 입체이성질체, 및 호변이성질체로부터 선택되는 화합물 엔티티의 용도에 관한 것이다. 일 구현예에서, 상기 질환 또는 장애는 암이다.
본 개시내용의 다른 측면은 USP28 및 USP25로부터 선택되는 적어도 하나의 경로를 억제하는 것과 관련된 질환 또는 장애를 치료, 예방, 억제, 또는 제거하기 위한 약제의 제조에 사용되는, 화학식 (I)의 화합물, 및 이의 약제학적으로 허용가능한 염, 용매화물, 전구약물, 입체이성질체, 및 호변이성질체로부터 선택되는 화합물 엔티티의 용도에 관한 것이다. 일 구현예에서, 상기 질환 또는 장애는 암이다.
다른 측면에서, 본 개시내용은 암을 치료, 예방, 억제, 또는 제거하기 위한 약제의 제조에 사용되는, 화학식 (I)의 화합물, 및 이의 약제학적으로 허용가능한 염, 용매화물, 전구약물, 입체이성질체, 및 호변이성질체로부터 선택되는 화합물 엔티티의 용도에 관한 것이다.
다른 구현예에서, 본 개시내용은 암과 관련된 질환 또는 장애의 치료, 예방, 억제, 또는 제거에 사용되는 약제를 제조하기 위한 USP28의 억제제의 용도에 관한 것이다.
본 개시내용은 또한 USP28에 의해 매개되는 질환 또는 상태의 치료, 예방, 억제 또는 제거에 사용되는 약제를 제조하기 위한 USP28의 억제제의 용도에 관한 것으로서, 여기서, 약제는 화학식 (I)의 화합물, 및 이의 약제학적으로 허용가능한 염, 용매화물, 전구약물, 입체이성질체, 및 호변이성질체로부터 선택되는 화합물 엔티티를 포함한다. 또한, 본 개시내용은 USP28에 의해 매개되는 질환 또는 상태의 치료, 예방, 억제, 또는 제거에 사용되는 약제를 제조하기 위한 USP28 억제제의 용도에 관한 것으로서, 여기서, 약제는 본원에 정의된 바와 같은 USP28 억제제, USP25 억제제 및/또는 USP28/25 억제제인 화학식 (II), (III), (IV), (V), (VI), (VII), (IIa), (IIaa), (IIb'), (IIIa), (IIIb), (IVa), (Va), (Vaa), (VIIa') 또는 화학식 (VIIaa)의 화합물로부터 선택되는 화합물 엔티티를 포함한다.
본 개시내용은 또한 USP25에 의해 매개되는 질환 또는 상태의 치료, 예방, 억제 또는 제거에 사용되는 약제의 제조에 대한 USP25의 억제제의 용도에 관한 것으로서, 여기서, 약제는 화학식 (I)의 화합물, 및 이의 약제학적으로 허용가능한 염, 용매화물, 전구약물, 입체이성질체, 및 호변이성질체로부터 선택되는 화합물 엔티티를 포함한다. 또한, 본 개시내용은 USP25에 의해 매개되는 질환 또는 상태의 치료, 예방, 억제, 또는 제거에 사용되는 약제의 제조에 대한 USP25 억제제의 용도에 관한 것으로서, 여기서, 약제는 본원에 정의된 USP28 억제제, USP25 억제제 및/또는 USP28/25 억제제인 화학식 (II), (III), (IV), (V), (VI), (VII), (IIa), (IIaa), (IIb'), (IIIa), (IIIb), (IIIaa), (IVa), (Va), (Vaa), (VIIa') 또는 화학식 (VIIaa)의 화합물로부터 선택되는 화합물 엔티티를 포함한다.
다른 측면에서, 본 개시내용은 USP28 및 USP25로부터 선택되는 적어도 하나의 경로에 의해 매개되는 질환 또는 상태를 치료, 예방, 억제, 또는 제거하기 위한 약제를 제조하는 방법에 관한 것으로서, 여기서, 약제는 화학식 (I)의 화합물, 및 이의 약제학적으로 허용가능한 염, 용매화물, 전구약물, 입체이성질체, 및 호변이성질체로부터 선택되는 화합물 엔티티를 포함한다. 상기 메카니즘은 폐암 및 뇌암과 같은 암을 치료하는데 유용한 것으로 밝혀졌다.
일부 구현예에서, 환자는 USP28, MYC, LSD1, NICD1의 유전자 증폭 및/또는 상승된 종양 발현, 및/또는 조직-매칭(tissue-matched) 발현에 관한 FBXW7의 감소 된 발현을 기반으로 하는 치료를 위해 선택된다.
일부 구현예에서, 환자는 USP28, USP25, MYC, LSD1, NICD1의 유전자 증폭 및/또는 상승된 종양 발현, 및/또는 조직-매칭 발현에 관한 FBXW7의 감소된 발현을 기반으로 하는 치료를 위해 선택된다.
일부 구현예에서, 화학식 (I)의 화합물 또는 본 개시내용의 화합물과 약제학적으로 허용가능한 담체를 포함하는 약제학적 조성물의 투여는 세포 주기, 세포 생존력, 세포 아폽토시스, 또는 분화의 변화를 유도한다.
예를 들어, 세포주기 또는 세포 생존력 또는 분화의 변화는 MYC, LSD1, NICD1, PIM1, CDK1, POLA2, HEY1 및/또는 CCND1의 감소된 종양 수준, 및/또는 CD86, p21, LGALS4, 및/또는 DLL1의 증가된 수준에 의해 시사될 수 있다.
본 개시내용의 다른 측면은 화학식 (I)의 화합물, 및 이의 약제학적으로 허용가능한 염, 용매화물, 전구약물, 입체이성질체 및 호변이성질체로부터 선택되는 화합물 엔티티 및 약제학적으로 허용가능한 담체를 포함하는 약제학적 조성물에 관한 것이다. 약제학적으로 허용가능한 담체는 부형제, 희석제, 또는 계면활성제를 추가로 포함할 수 있다. 본 개시내용의 다른 측면은 본원에 정의된 USP28 억제제, USP25 억제제, 및/또는 USP28/25 억제제인 화학식 (II), (III), (IV), (V), (VI), (VII), (IIa), (IIaa), (IIb'), (IIIa), (IIIb), (IIIaa), (IVa), (Va), (Vaa), (VIIa') 또는 화학식 (VIIaa)의 화합물로부터 선택되는 화합물 엔티티를 포함하는 약제학적 조성물에 관한 것이다.
일 구현예에서, 암을 포함한 USP28의 조정과 관련된 질환 또는 장애를 치료하는 방법으로서, 상기 질환 또는 장애 중 적어도 하나를 앓고 있는 환자에게 화학식 (I)의 화합물 엔티티를 투여하는 것을 포함하는 방법이 제공된다. 암을 포함하는 USP28의 조정과 관련된 질환 또는 장애를 치료하는 방법은 상기 질환 또는 장애 중 적어도 하나를 앓고 있는 환자에게 본원에 정의된 USP28 억제제, USP25 억제제, 및/또는 USP28/25 억제제인 화학식 (II), (III), (IV), (V), (VI), (VII), (IIa), (IIaa), (IIb'), (IIIa), (IIIb), (IIIaa), (IVa), (Va), (Vaa), (VIIa') 또는 화학식 (VIIaa)의 화합물 엔티티를 투여하는 것을 포함할 수 있다.
다른 구현예에서, 암을 포함한 USP25의 조정과 관련된 질환 또는 장애를 치료하는 방법으로서, 상기 질환 또는 장애 중 적어도 하나를 앓고 있는 환자에게 화학식 (I)의 화합물 엔티티를 투여하는 것을 포함하는 방법이 제공된다. 암을 포함하는 USP25의 조정과 관련된 질환 또는 장애를 치료하는 방법은 상기 질환 또는 장애 중 적어도 하나를 앓고 있는 환자에게 본원에 정의된 USP28 억제제, USP25 억제제, 및/또는 USP28/25 억제제인 화학식 (II), (III), (IV), (V), (VI), (VII), (IIa), (IIaa), (IIb'), (IIIa), (IIIb), (IIIaa), (IVa), (Va), (Vaa), (VIIa') 또는 화학식 (VIIaa)의 화합물 엔티티를 투여하는 것을 포함할 수 있다.
다른 구현예에서, 암을 포함한 USP28 및 USP25로부터 선택되는 적어도 하나의 경로의 조정과 관련된 질환 또는 장애를 치료하는 방법으로서, 상기 질환 또는 장애 중 적어도 하나를 앓고 있는 환자에게 화학식 (I)의 화합물 엔티티를 투여하는 것을 포함하는 방법이 제공된다. 암을 포함하는 USP28 및 USP25로부터 선택되는 적어도 하나의 경로의 조정과 관련된 질환 또는 장애를 치료하는 방법은 또한 상기 질환 또는 장애 중 적어도 하나를 앓고 있는 환자에게 본원에 정의된 USP28 억제제, USP25 억제제, 및/또는 USP28/25 억제제인 화학식 (II), (III), (IV), (V), (VI), (VII), (IIa), (IIaa), (IIb'), (IIIa), (IIIb), (IIIaa), (IVa), (Va), (Vaa), (VIIa') 또는 화학식 (VIIaa)의 화합물 엔티티를 투여하는 것을 포함할 수 있다.
USP28을 억제하는 본 개시내용의 화합물 또는 조성물의 하나의 치료적 용도는 암을 앓고 있는 환자 또는 대상체에 대한 치료를 제공하는 것이다.
USP25를 억제하는 본 개시내용의 화합물 또는 조성물의 다른 치료적 용도는 암을 앓고 있는 환자 또는 대상체에게 치료를 제공하기 위한 것이다.
USP28 및 USP25로부터 선택되는 적어도 하나의 경로를 억제하는 본 개시내용의 화합물 또는 조성물의 다른 치료적 용도는 암을 앓고 있는 환자 또는 대상체에 대한 치료를 제공하는 것이다.
본 개시내용의 화합물은 대상체에서 장애를 치료 또는 예방하고, 및/또는 그 장애의 발달을 예방하기에 효과적인 양으로 투여될 수 있다.
개시된 화합물의 투여는 치료제에 대한 임의의 투여 방식을 통해 달성될 수 있다.
본 개시내용의 다른 측면은 화학식 (I)의 화합물, 및 이의 약제학적으로 허용가능한 염, 용매화물, 전구약물, 입체이성질체, 및 호변이성질체로부터 선택된 화합물 엔티티 및 약제학적으로 허용가능한 담체를 포함하는 약제학적 조성물에 관한 것이다. 약제학적으로 허용가능한 담체는 부형제, 희석제 또는 계면활성제를 추가로 포함할 수 있다.
개시된 화합물을 이용하는 투여 요법은 환자의 유형, 종, 연령, 체중, 성별 및 의학적 상태; 치료할 상태의 중증도; 투여 경로; 환자의 신장 또는 간 기능; 및 사용된 특정 개시된 화합물을 포함하는 다양한 인자에 따라 선택된다. 본 기술분야에 통상의 기술을 가진 의사 또는 수의사는 상태의 진행을 예방, 대응 또는 저지하는데 필요한 약물의 유효량을 쉽게 결정하고 처방할 수 있다.
본 개시내용의 화학식 (I)-(VII)에 따른 화합물의 비제한적인 예는 이하의 표 9 내지 25의 화합물을 포함한다.
화합물의 합성 방법
본 개시내용의 화합물은 유기 합성 분야의 기술자에게 공지된 다수의 방법으로 제조될 수 있다. 본 개시내용의 화합물은 표준 화학을 포함하는 다양한 방법에 의해 제조될 수 있다. 적합한 합성 경로는 본원에 제공된 반응식에 묘사된다. 본원에 개시된 화합물은 하기 합성 반응식에 의해 부분적으로 제시된 바와 같은 유기 합성 분야에 공지된 방법에 의해 제조될 수 있다. 본원에 기술된 반응식에서, 민감성 또는 반응성 기에 대한 보호기는 필요한 경우 일반적인 원리 또는 화학에 따라 사용된다는 것은 충분히 이해된다. 보호 기는 유기 합성의 표준 방법(T. W. Greene 및 P. G. M. Wuts, "Protective Groups in Organic Synthesis", Third edition, Wiley, New York 1999)에 따라 조작된다. 이들 기는 본 기술분야의 기술자에게 너무나 자명한 방법을 사용하여 화합물 합성의 편리한 단계에서 제거된다. 선택 공정, 뿐만 아니라 반응 조건 및 실행 순서는 본원에 개시된 화합물(예를 들어, 화학식 (I)의 화합물 포함)의 제조와 일치할 것이다.
본원에 기재된 화합물은 상업적으로 입수가능한 출발 물질로부터 제조되거나, 또는 공지된 유기, 무기 및/또는 효소적 공정을 사용하여 합성될 수 있다. 본 기술분야의 기술자는 본원에 개시된 화합물에 입체중심이 존재하는지를 인식할 것이다. 따라서, 본 개시내용은 가능한 입체이성질체(합성에서 특정되지 않는 한) 둘 모두를 포함하고, 라세미 화합물 뿐만 아니라 개별 거울상이성질체 및/또는 부분입체이성질체도 포함한다. 화합물이 단일 거울상이성질체 또는 부분입체이성질체로서 원하는 경우, 입체특이적 합성 또는 최종 생성물 또는 임의의 편리한 중간체의 분할(resolution)에 의해 수득할 수 있다. 최종 생성물, 중간체 또는 출발 물질의 분할은 본 기술분야에 공지된 임의의 적합한 방법에 의해 영향을 받을 수 있다. 예를 들어, "Stereochemistry of Organic Compounds" by E. L. Eliel, S. H. Wilen, 및 L. N. Mander(Wiley-lnterscience, 1994)를 참조한다.
예를 들어, 본 개시내용의 화합물은 합성 유기 화학 기술분야에 공지된 합성 방법 또는 본 기술분야의 기술자가 인식하고 있는 그 변형과 함께, 이하에 기재된 방법을 사용하여 합성할 수 있다. 바람직한 방법은 이하에 기재된 방법을 포함하지만, 이에 제한되지는 않는다. 본 발명의 화합물을 제조하는 일반적인 절차는 일반 반응식 1에 기재된다. 적절하게 치환되고 보호된 바이사이클릭 중간체 1은 적절하게 치환된 보호된 아민 중간체 2와, 톨루엔과 같은 적합한 용매에서 적절한 팔라듐 착물, 리간드, 및 염기(예컨대, 비제한적으로 RuPhos 제3 세대 팔라듐 전촉매(precatalyst) 및 탄산세슘)를 사용하는 팔라듐-촉매된 탄소-질소 커플링 프로토콜 하에 적절한 온도(예컨대, 100℃)에서 반응시켜 중간체 3을 제공할 수 있다. 보호기 1(PG1; 전형적으로 Cbz 기)은 적절한 탈보호 조건[예컨대, 비제한적으로, 메탄올, 에탄올, 또는 에틸 아세테이트와 같은 적절한 용매 중 탄소 상의 팔라듐과 함께, 수소(기체)] 하에 제거하여 아민 중간체 4를 제공할 수 있다. 적절히 치환된 아민 중간체 4는 적절히 치환된 카복실산과 아미드 커플링 조건(예컨대, 비제한적으로, DMF 또는 DMA와 같은 용매 중 Et3N 또는 DIEA와 같은 적절한 염기와 커플링 시약 EDC 및 HOBt) 하에 반응하여 끝에서 두번 째(penultimate) 아미드 중간체 5를 제공할 수 있다. 보호기 2(PG2; 전형적으로 boc 기)는 DCM과 같은 용매 중 TFA 또는 MeOH 또는 디옥산과 같은 용매 중 HCl과 같은 적절한 조건 하에 제거되어 최종 화합물 6을 제공할 수 있다. 최종 화합물은 분취용 HPLC에 의해 전형적으로 정제되어 유리 염기로서 단리될 수 있다. 거울상이성질체 및/또는 부분입체이성질체의 혼합물이 형성되는 경우, 개별 입체이성질체는 적절한 단계에서, 대부분의 경우 키랄 HPLC에 의해 정제될 수 있다.
일반 반응식 1
Figure pct00094
선택된 중간체의 일반적인 제조 방법
본 발명의 중간체를 제조하는 일반 절차는 중간체 일반 반응식 1에 기재된다. 출발 물질 1을 함유하는 적절히 치환된 이탈 기(LG1; 전형적으로 브로마이드)는 THF와 같은 적절한 용매에서 리튬화된 키랄 보조제 2(nBuLi과 같은 강염기와 2를 반응시킴에 의해 형성됨)와 저온(전형적으로, -78℃)에서 반응하여 중간체 3을 제공할 수 있다. 아세토니트릴과 같은 용매 중 수성 HCl과 같은 조건 하에 상기 보조제를 제거하는 가수분해, 그 다음 환원(전형적으로 MeOH와 같은 용매에서 NaBH4를 사용하여)은 아미노 알코올 4를 제공할 수 있다. 아미노 알코올 4는 저온(전형적으로, -70℃)에서 DMSO와 같은 용매 중 NaH와 같은 강염기를 사용하여 고리화하여 중간체 4를 제공할 수 있다. 상응하는 중간체에 적절한 보호기(PG1; 전형적으로 CBz 기)의 첨가는 적절히 치환된 바이사이클릭 중간체 5를 초래할 수 있다.
중간체 일반 반응식 1
Figure pct00095
본 발명의 중간체를 제조하는 일반 절차는 중간체 일반 반응식 2에 기재된다. 적절히 치환된 케톤 1은 환원적 아민화 조건(전형적으로, 아민 급원으로서 암모늄 아세테이트, 환원제로서 NaBH3CN, 및 MeOH와 같은 용매) 하에 반응하여 아민 중간체 2를 제공할 수 있다. 아민 2는 그 다음 보호되어(PG1; 전형적으로 CBz 기) 적절히 치환된 중간체 3을 제공한다.
중간체 일반 반응식 2
Figure pct00096
본 발명의 중간체를 제조하는 일반 절차는 중간체 일반 반응식 3에 기재된다. 산 클로라이드 1은 루이스 산 촉진된 에틸렌 첨가(전형적으로, DCM과 같은 용매에서 AlCl3 및 에틸렌 가스를 사용함) 하에 반응하여 케톤 2를 제공할 수 있다. 케톤 2는 그 다음 옥심으로 전환된 뒤, 환원(O-메틸하이드록실아민 염산염, 피리딘 및 EtOH를 사용하여 옥심을 형성하고; 수소 가스, EtOH 용매 중 Raney Ni을 사용하여 환원)될 수 있거나, 또는 환원적 아민화 조건(전형적으로, 아민 급원으로서 암모늄 아세테이트, 환원제로서 NaBH3CN, 및 MeOH와 같은 용매에 의해) 하에 반응하여 아민 3을 제공할 수 있다. 아민 3은 그 다음 보호되어(PG1; 전형적으로 CBz 기), 적절히 치환된 중간체 4를 제공할 수 있다.
중간체 일반 반응식 3
Figure pct00097
본 발명의 중간체를 제조하는 일반 절차는 중간체 일반 반응식 4에 기재된다. 2-피리돈 2는 프로핀산 에스테르에 의한 엔아미노 케톤(전형적으로 메탄올 중 암모니아에 의한 1과 같은 단일-보호된 사이클로헥산-1,4-디온의 처리에 의해 동일계에서 생성됨)의 마이클(Michael) 첨가에 의해 수득될 수 있다. 피리돈 2는 이탈기(LG; 전형적으로, 트리에틸아민과 같은 염기의 존재 하에 트리플릭 무수물(triflic anhydride)로 처리하여 수득할 수 있는 트리플레이트 기)를 혼입하도록 전환될 수 있다. 케톤 보호기의 제거 후, 케톤 4는 그 다음 환원적 아민화 조건(전형적으로, 아민 급원으로서 암모늄 아세테이트, 환원제로서 NaBH3CN, 및 MeOH와 같은 용매에 의해) 하에 반응하여 아민 5를 제공할 수 있다. 아민 5는 그 다음 보호되어(PG1; 전형적으로 CBz 기), 적절히 치환된 중간체 6을 제공할 수 있다.
중간체 일반 반응식 4
Figure pct00098
본 발명의 중간체를 제조하는 일반 절차는 중간체 일반 반응식 5에 기재된다. 케톤 1은 용매(예컨대, 톨루엔)에서 디메틸-포름아미드 디메틸 아세탈과 축합하여 엔아미노 케톤 2를 제공할 수 있다. 케톤 2는 퀴니딘 및 염기(예컨대, 에톡시화나트륨)로 처리되어 피리미딘-2-아민 3을 제공할 수 있다. 피리미딘-2-아민 3은 이탈기(LG; 전형적으로, CuCl2 및 tert-부틸 니트라이트로의 처리에 의해 수득될 수 있는 클로라이드 기)를 혼입하도록 전환되어 적절히 치환된 중간체 4를 제공할 수 있다.
중간체 일반 반응식 5
Figure pct00099
본 발명의 중간체를 제조하는 일반 절차는 중간체 일반 반응식 6에 기재된다. 적절히 치환된 중간체 1은 팔라듐 촉매화된 탄소-탄소 결합 형성 조건(100℃와 같은 온도에서 탄산칼륨과 같은 염기 및 1,4-디옥산/물 혼합물과 같은 용매에서 Pd(dppf)Cl2 디클로로메탄 착물)과 같은 적절한 팔라듐 촉매를 사용하여) 하에 적절히 치환된 보론산 에스테르 2(또는 보론산)와 반응하여 커플링된 중간체 3을 제공할 수 있다. 중간체 3에 존재하는 올레핀 이중 결합은 그 다음, 예컨대, 비제한적으로, 올레핀 환원 및 에폭시화, 그 다음 최종 에폭사이드의 환원과 같은 표준 방법을 사용하여 작용기화함으로써 적절히 치환된 중간체 4를 제공할 수 있다.
중간체 일반 반응식 6
Figure pct00100
본 발명의 중간체를 제조하는 일반 절차는 중간체 일반 반응식 7에 기재된다. 적절히 치환된 중간체 1은 팔라듐 촉매화된 보론산 에스테르 형성 조건(80℃와 같은 온도에서 디옥산과 같은 용매에서 비스(피나콜레이토)디보론과 같은 보론산 에스테르 급원 및 Pd(dppf)Cl2-CH2Cl2 착물과 같은 팔라듐 촉매를 사용하여) 하에 반응하여 보론산 에스테르 2를 제공할 수 있다. 보론산 에스테르 2는 적절한 산화제(예컨대, MeOH와 같은 용매 중 우레아-과산화수소 착물)의 존재 하에 반응하여 페놀 중간체 3을 제공할 수 있다. 페놀 중간체는 그 다음 적절한 친전자체(예를 들어, Mitsonobu형 조건: 예컨대, PPh3과 DIAD를 사용함)에 의해 알킬화되어 적절히 치환된 중간체 4를 제공할 수 있다.
중간체 일반 반응식 7
Figure pct00101
실시예
본 개시내용은 이하 실시예 및 합성 반응식에 의해 추가 예시되며, 이는 본원에 기재된 특정 절차로 본 개시내용을 범위 또는 취지를 제한하는 것으로서 해석되지 않아야 한다. 이 실시예는 특정 구현예를 예시하기 위해 제공된 것이지, 본 개시내용의 범위를 제한하려고 의도된 것이 아님이 이해되어야 한다. 또한, 본 개시내용의 사상 및/또는 첨부된 청구항의 범위를 벗어남이 없이 본 기술분야의 기술자에게 암시적일 수 있는 다양한 다른 구현예, 변형 및 그 균등물에 의존할 수 있음도 이해되어야 한다.
분석 방법, 재료 및 계측
달리 언급되지 않는 한, 시약 및 용매는 상업적 공급업체로부터 받은 대로 사용하였다. 달리 언급하지 않는 한, 반응은 질소의 불활성 대기 하에서 수행되었다. 양성자 핵 자기 공명(NMR) 스펙트럼은 Bruker 또는 Varian 분광계에서 300 또는 400 MHz에서 수득하였다. 스펙트럼은 ppm(δ)으로 제시되며 커플링 상수 J는 헤르츠(Hertz)로 기록된다. 테트라메틸실란(테트라메틸실란, TMS)은 내부 표준으로 사용하였다. 순도 및 질량 스펙트럼 데이터는 다음과 같은 두 가지 방법 중 하나를 사용하여 측정하였다. 방법 1: Acquity Photo Diode Array 검출기, Acquity Evaporative Light Scattering 검출기(ELSD) 및 Waters ZQ Mass Spectrometer가 있는 Waters Acquity i-class 초고성능 액체 크로마토그래피(UPLC) 시스템. 데이터는 Waters MassLynx 4.1 소프트웨어 및 UV 파장 220nm를 특징으로 하는 순도, 증발적 광 산란 검출(ELSD) 및 전자분무 양이온(ESI)을 사용하여 수집하였다.(컬럼: Acquity UPLC BEH C18 1.7μm 2.1 x 50mm; 유속 0.6 mL/min; 용매 A(95/5/0.1%: 10mM 포름산암모늄/아세토니트릴/포름산), 용매 B(95/5/0.09%: 아세토니트릴/물/포름산; 구배: 0 내지 2분에서 5 내지 100% B, 2.2분까지 100% B 및 2.21분에 5% B 유지). 방법 2: UFLC 20-AD 및 LCMS 2020 MS 검출기로 구성된 SHIMADZU LCMS[컬럼: Shim-pack XR-ODS, 2.2 μm, 3.0 x 50 mm; 용매: (아세토니트릴/물; 0.05% NH4HCO3 함유)]. 별도의 언급이 없는 한, 분취용 HPLC 정제는 20 mL/min의 유속 및 UV 파장 220 nm 및 254 nm에 의한 검출로 이하에 명시된 바와 같이 수행하였다. 본원에 기재된 실시예에서 화합물의 분리된 거울상이성질체의 절대 배열은 경우에 따라 결정되었다. 다른 모든 경우에, 분리된 거울상이성질체의 절대 배열은 결정되지 않았으며, 그런 경우에 분해된 물질의 배열은 각 경우마다 R 또는 S로 임의 지정하였다.
이하 실시예 및 그 외 본원에서 사용된 약어는 다음과 같다:
Figure pct00102
Figure pct00103
중간체 제조
중간체 1, 2, 및 3. 벤질(7-브로모크로만-3-일)카바메이트, 벤질(R)-(7-브로모크로만-3-일)카바메이트, 및 벤질(S)-(7-브로모크로만-3-일)카바메이트
Figure pct00104
단계 1 . 7-브로모-3-니트로-2H-크로멘
톨루엔(800 mL) 중 4-브로모-2-하이드록시벤즈알데하이드(21.6g, 108mmol), 1,3-디하이드로-2-벤조푸란-1,3-디온(32g, 216mmol) 및 디부틸아민(7.0g, 54mmol)의 혼합물을 N2 대기 하에 환류 가열하였다. 2-니트로에탄-1-아민(50g, 550mmol)을 2시간 넘게 분할 첨가하였다. 혼합물을 Dean-Stark 장치를 사용하여 밤새 환류 교반하였다. 실온으로 냉각한 후, 고체를 여과해 내었다. 8개의 배취를 병렬로 진행시켜 8개 배취로부터의 여과액을 합하여 진공 하에 농축하였다. 잔류물은 EtOAc(2L)으로 희석하고 1N NaOH(2L)로 세척하였다. 유기 층은 무수 Na2SO4 상에서 건조하고, 여과하고, 진공 하에 농축하였다. 실리카겔 크로마토그래피에 의한 정제(1:6 EtOAc석유 에테르로 용출)는 7-브로모-3-니트로-2H-크로멘을 황색 고체로서 제공하였다. MS:(ESI, m/z): 256, 258[M+H]+.
단계 2 . 7-브로모크로만-3-아민
THF(300 mL) 중 7-브로모-3-니트로-2H-크로멘(27g, 106mmol) 용액에 BH3(THF 중 1M, 600 mL, 600 mmol) 및 NaBH4(201mg, 5.3mmol)을 첨가하였다. 이 혼합물을 65℃에서 밤새 교반하였다. 실온으로 냉각한 후, 반응은 그 다음 MeOH 600mL을 첨가하여 ??치(quench)시키고 80℃에서 8시간 동안 교반하였다. 실온으로 냉각한 후, 혼합물을 진공 하에 농축하였다. 잔류물을 역상 크로마토그래피(컬럼: C18 실리카겔; 이동상 A: 물(10mM NH4HCO3), B: ACN; 구배: 0%에서부터 50%B까지, 40분 넘게)하여 7-브로모크로만-3-아민을 백색 고체로서 제공하였다. MS: (ESI, m/z): 228, 230[M+H]+.
단계 3 . 벤질(7-브로모크로만-3-일)카바메이트(중간체 1)
물(150mL) 중 K2CO3(19.3g, 140mmol) 용액을 EtOAc(300mL) 중 7-브로모크로만-3-아민(16.0g, 70.1mmol) 용액에 첨가하였다. -10℃에서 벤질 클로로포르메이트(17.8g, 104mmol)를 첨가하였고, 반응 혼합물을 실온에서 30분 동안 교반하였다. 혼합물을 EtOAc(200mL)으로 희석하였다. 유기 층을 수집하였고, 무수 Na2SO3 상에서 건조하고, 여과하고, 진공 하에 농축하였다. 잔류물은 1:1 EtOAc/석유 에테르(200mL)로 세척하여 벤질-(7-브로모크로만-3-일)카바메이트를 백색 고체로서 제공하였다. MS:(ESI, m/z): 362, 364[M+H]+.
단계 4 . 벤질 (R)-(7-브로모크로만-3-일)카바메이트(중간체 2) 및 벤질 (S)-(7-브로모크로만-3-일)카바메이트(중간체 3)
라세미체인 벤질(7-브로모크로만-3-일)카바메이트(12.5g, 34.6mmol)를 SFC(컬럼: ChiralArt Amylose-SA, 2x25cm, 5μm: 이동상 A: CO2, 80%, B: EtOH, 20%: 유속: 40 mL/min)로 분리하여 다음과 같은 표제 화합물을 제공하였다: 백색 고체로서 벤질 (R)-(7-브로모크로만-3-일)카바메이트(1차 용출 이성질체, RT=7.98분) 및 백색 고체로서 벤질 (S)-(7-브로모크로만-3-일)카바메이트(2차 용출 이성질체, RT=9.21 분).
1차 용출 이성질체: 1H NMR(CDCl3, 400 MHz) δ(ppm): 7.35-7.32(m, 5H), 7.03-7.01(m, 2H), 6.90(d, J = 8.8 Hz, 1H), 5.22-5.10(m, 3H), 4.25(s, 1 H), 4.17-4.09(m, 2H), 3.04(dd, J = 16.8 Hz, 4.8 Hz, 1H), 2.73(d, J = 16.8 Hz, 1H). MS: (ESI, m/z): 362, 364[M+H]+.
2차 용출 이성질체: 1H NMR(CDCl3, 400 MHz) δ(ppm): 7.35-7.32(m, 5H), 7.03-7.01(m, 2H), 6.90(d, J = 8.8 Hz, 1H), 5.22-5.07(m, 3H), 4.25(s, 1 H), 4.18-4.09(m, 2H), 3.04(dd, J = 16.8 Hz, 4.8 Hz, 1H), 2.73(d, J = 16.80 Hz, 1H). MS: (ESI, m/z): 362, 364[M+H]+.
중간체 4-1. tert-부틸 4-(3-아미노-8-플루오로크로만-7-일)피페라진-1-카복실레이트
Figure pct00105
단계 1 . 3,4-디플루오로-2-하이드록시벤즈알데하이드
질소의 불활성 대기로 퍼지(purge)하여 유지된 500 mL 둥근 바닥 플라스크에 2,3-디플루오로페놀(10.0g, 75.33mmol), ACN(200mL), HCHO(23.06g, 738mmol), Et3N(21.0mL, 146mmol), 및 MgCl2(14.6g, 150.28mmol)을 첨가하였다. 결과적으로 수득되는 용액을 60℃에서 16 시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 26℃로 냉각한 다음, 200mL의 물로 희석하였다. 결과적으로 수득되는 용액을 에틸 아세테이트(3x100mL)로 추출하였다. 유기 층을 합하여, 무수 황산나트륨 상에서 건조하고, 여과하고, 진공 하에 농축하여 잔류물을 제공하였고, 이를 에틸 아세테이트/석유 에테르(1:4)를 이용한 실리카겔 크로마토그래피로 정제하여 3,4-디플루오로-2-하이드록시벤즈알데하이드를 연황색 오일로서 제공하였다.
단계 2 . tert-부틸 4-(2-플루오로-4-포르밀-3-하이드록시페닐)피페라진-1-카복실레이트
250mL 둥근 바닥 플라스크에 3,4-디플루오로-2-하이드록시벤즈알데하이드(5g, 31.63mmol), tert-부틸 피페라진-1-카복실레이트(5.9g, 31.68mmol), DMSO(100mL), 및 DIEA(6.1g, 47.20mmol)를 첨가하였다. 결과적으로 수득되는 용액을 120℃에서 6시간 동안 교반하였다. 실온으로 냉각한 후, 반응은 물 100mL를 첨가하여 ??치시켰다. 결과적으로 수득되는 용액을 에틸아세테이트(3x100mL)로 추출하였다. 유기 층을 합하여, 무수 황산나트륨 상에서 건조하고, 여과하고, 진공 하에 농축하여 잔류물을 제공하였고, 이를 에틸 아세테이트/석유 에테르(0-30%)를 이용한 실리카겔 크로마토그래피로 정제하여 tert-부틸 4-(2-플루오로-4-포르밀-3-하이드록시페닐)피페라진-1-카복실레이트를 황색 오일로서 제공하였다.
단계 3 . tert-부틸 4-(8-플루오로-3-니트로-2H-크로만-7-일)피페라진-1-카복실레이트
100-mL 둥근 바닥 플라스크에 tert-부틸 4-(2-플루오로-4-포르밀-3-하이드록시페닐)피페라진-1-카복실레이트(185mg, 0.48 mmol), 1,3-디하이드로-2-벤조푸란-1,3-디온(166mg, 1.06 mmol, 95%), 2-니트로에탄-1-올(104mg, 1.08 mmol), 디부틸아민(37mg, 0.27 mmol), 및 톨루엔(10mL)을 첨가하였다. 결과적으로 수득되는 용액을 오일 조에서 100℃에서 8시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각한 뒤, 5mL 물을 첨가하여 ??치시키고, DCM(3x10mL)으로 추출하였다. 유기 층을 합하여, 염수(3x10mL)로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조하고, 여과하고, 진공 하에 농축하여 잔류물을 제공하였고, 이를 에틸 아세테이트/석유 에테르(1:3)를 이용한 실리카겔 크로마토그래피로 정제하여 tert-부틸 4-(8-플루오로-3-니트로-2H-크로멘-7-일)피페라진-1-카복실레이트를 적색 고체로서 제공하였다.
단계 4 . tert-부틸 4-(3-아미노-8-플루오로크로만-7-일)피페라진-1-카복실레이트
질소의 불활성 대기로 퍼지되어 유지된 100mL 3구 둥근 바닥 플라스크에 tert-부틸 4-(8-플루오로-3-니트로-2H-크로멘-7-일)피페라진-1-카복실레이트(150mg, 0.39mmol), 및 THF(20mL)를 첨가하였다. 0℃에서 교반하면서 보란-THF 착물(4mL, 4mmol)을 적가하였다. 이 반응 혼합물에 NaBH4(73mg, 1.93mmol)을 첨가하였다. 결과적으로 수득되는 용액을 65℃에서 12 시간 동안 교반한 뒤, 메탄올(20mL)을 첨가하여 ??치시키고, 진공 하에 농축하여 잔류물을 제공하였고, 이를 에틸 아세테이트/석유 에테르(0-100%)를 이용한 실리카겔 크로마토그래피로 정제하여 tert-부틸 4-(3-아미노-8-플루오로-3,4-디하이드로-2H-1-벤조피란-7-일)피페라진-1-카복실레이트를 황색 오일로서 제공하였다.
이하 표 1의 중간체는 중간체 4-1의 제조에 사용된 것과 유사한 표준 화학적 조작 및 절차를 사용하여 제조하였다.
Figure pct00106
1 절차 상 주의점: 단계 1은 필요하지 않았다.
중간체 5-1. 벤질 (R)-(7-브로모-5-플루오로크로만-3-일)카바메이트
방법 1.
Figure pct00107
단계 1 . 5-브로모-2-(브로모메틸)-1,3-디플루오로벤젠
48% HBr(130mL, 1149mmol) 및 (4-브로모-2,6-디플루오로페닐)메탄올(40g, 179mmol)의 혼합물을 밤새 환류 가열하였다. 실온으로 냉각한 후, 반응 혼합물을 80mL의 물에 붓고, 헥산(2x300mL)으로 추출하였다. 합한 유기층을 중탄산나트륨 용액으로 세척하고, MgSO4 상에서 건조하고, 여과하고, 농축하여 5-브로모-2-(브로모메틸)-1,3-디플루오로벤젠을 제공하였다. 1H NMR(CDCl3, 300 MHz)δ(ppm): 6.94-7.22(m, 2H), 4.46(s, 2H).
단계 2 . (2R,5S)-2-(4-브로모-2,6-디플루오로벤질)-5-이소프로필-3,6-디메톡시-2,5-디하이드로피라진
헥산 중 nBuLi(6.78 mL, 10.86 mmol, 1.6 M) 용액을 THF 20 mL 중 (S)-2-이소프로필-3,6-디메톡시-2,5-디하이드로피라진(2.0 g, 10.86 mmol) 용액에 -78℃에서 적가하였다. -78℃에서 30분 동안 교반한 후, THF 10 mL 중 5-브로모-2-(브로모메틸)-1,3-디플루오로벤젠(3.10 g, 10.86 mmol) 용액을 첨가하였고, 반응 혼합물을 -78℃에서 3 시간 동안 교반하였다. 그 다음, 20 mL의 NH4Cl 포화 용액을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온으로 가온한 후, 물 150 mL를 첨가하였고, 혼합물을 EtOAc로 3회 추출하였다. 합한 유기 층을 MgSO4 상에서 건조하고, 여과하고, 농축하였다. 실리카겔 크로마토그래피로 정제(0 내지 15% EtOAc/헥산으로 용출)하여 (2R,5S)-2-(4-브로모-2,6-디플루오로벤질)-5-이소프로필-3,6-디메톡시-2,5-디하이드로피라진을 제공하였다. 1H NMR(CDCl3, 300 MHz)δ(ppm): 7.03(d, J = 7.04 Hz, 2H), 4.14-4.32(m, 1H), 3.71(s, 3H), 3.58(s, 3H), 3.13-3.33(m, 1H), 2.79-2.93(m, 1H), 2.13-2.33(m, 1H), 1.00(d, J = 7.04 Hz, 3H), 0.64(d, J = 7.04 Hz, 3H). MS:(ESI, m/z): 389, 391[M+H]+.
단계 3 . 메틸 (R)-2-아미노-3-(4-브로모-2,6-디플루오로페닐)프로파노에이트
아세토니트릴(60mL) 중 (2R,5S)-2-(4-브로모-2,6-디플루오로벤질)-5-이소프로필-3,6-디메톡시-2,5-디하이드로피라진(3.1g, 8.02mmol) 용액을 HCl(53.5ml, 16.04mmol, 0.3N)로 처리하였다. 반응 혼합물을 실온에서 60분 동안 교반하였다. 반응은 NaHCO3 포화 수용액으로 염기성화하고, 혼합물을 CH2Cl2로 3회 추출하였다. 합한 유기 층을 MgSO4 상에서 건조하고, 여과하고, 농축하였다. 실리카겔 크로마토그래피로 정제(0 내지 100% EtOAc/헥산으로 용출)하여 메틸 (R)-2-아미노-3-(4-브로모-2,6-디플루오로페닐)프로파노에이트를 제공하였다. 1H NMR(CDCl3, 300 MHz)δ(ppm): 7.07(d, J = 6.74 Hz, 2H), 3.54-3.80(m, 4H), 3.01-3.24(m, 1H), 2.93(s, 1H), 1.62(br s, 2H). MS:(ESI, m/z): 294, 296[M+H]+.
단계 4 . (R)-2-아미노-3-(4-브로모-2,6-디플루오로페닐)프로판-1-올
실온에서 MeOH(70 mL) 중 메틸 (R)-2-아미노-3-(4-브로모-2,6-디플루오로페닐)프로파노에이트(2.3 g, 7.85 mmol) 용액에 NaBH4(1.043 g, 27.57 mmol)를 분할 첨가하였다. 이 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 물을 첨가하였고, MeOH는 감압 하에 제거하였다. 수성 혼합물을 클로로포름으로 3회 추출하였다. 합한 유기 층을 Na2SO4 상에서 건조하고, 여과하고, 농축하여 (R)-2-아미노-3-(4-브로모-2,6-디플루오로페닐)프로판-1-올을 제공하였다. 1H NMR(CDCl3, 300 MHz)δ(ppm): 7.08(d, J = 6.74 Hz, 2H), 3.54-3.72(m, 1H), 3.36(dd, J = 10.55, 7.62 Hz, 1H), 3.09(br s, 1H), 2.51-2.86(m, 2H), 1.74(br s, 3H). MS:(ESI, m/z): 266, 268[M+H]+.
단계 5 . (R)-7-브로모-5-플루오로크로만-3-아민
실온에서 DMSO(3mL) 중 (R)-2-아미노-3-(4-브로모-2,6-디플루오로페닐)프로판-1-올(500mg, 1.88mmol) 용액에 NaH(113mg, 2.82mmol)을 첨가하였다. 이 혼합물을 실온에서 30 분 동안 교반한 뒤, 70℃에서 30분 동안 교반하고, 50℃에서 밤새 교반을 유지하였다. 실온으로 냉각한 후, 물 30mL를 첨가했고, 혼합물을 EtOAc로 3회 추출하였다. 합한 유기 층을 물로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조하고, 여과하고, 농축하여 조생성물(crude)인 (R)-7-브로모-5-플루오로크로만-3-아민을 제공하였다. 1H NMR(CDCl3, 300 MHz)δ(ppm): 6.61-6.92(m, 2H), 4.01-4.32(m, 1H), 3.67-3.88(m, 1H), 3.35(ddt, J = 7.00, 3.19, 1.80, 1.80 Hz, 1H), 2.79-3.03(m, 1H), 2.46(br d, J = 6.74 Hz, 1H), 1.40-1.89(m,2H). MS:(ESI, m/z): 246, 248[M+H]+.
단계 6. 벤질 (R)-(7-브로모-5-플루오로크로만-3-일)카바메이트
0℃에서 MeOH(20mL) 중 탄산수소나트륨 포화 용액(10mL) 및 (R)-7-브로모-5-플루오로크로만-3-아민(467mg, 1.90mmol) 용액에 벤질 클로로포르메이트(0.405mL, 2.85mmol)를 적가하였다. 이 혼합물을 밤새 교반하였고, 온도를 실온으로 가온하였다. 물 20mL를 첨가하였고, 혼합물을 EtOAc로 3회 추출하였다. 합한 유기 층을 물로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조하고, 여과하고, 농축하였다. 실리카겔 크로마토그래피로 정제(7% 내지 60% EtOAc/헥산으로 용출)하여 벤질 (R)-(7-브로모-5-플루오로크로만-3-일)카바메이트를 제공하였다. 1H NMR(CDCl3, 300 MHz)δ(ppm): 7.34(s, 5 H), 6.65-6.97(m, 2H), 5.10(s, 2H), 4.90-5.08(m, 1H), 4.26(br s, 1H), 3.97-4.21(m, 3H), 2.89(m, 1H), 2.78(m, 1H). MS:(ESI, m/z): 380, 382[M+H]+.
중간체 5-1. 벤질 (R)-(7-브로모-5-플루오로크로만-3-일)카바메이트
방법 2.
Figure pct00108
단계 1 . 디에틸 2-아세트아미도-2-(4-브로모-2,6-디플루오로벤질)말로네이트
DMF(500mL) 중 디에틸 2-아세트아미도말로네이트(59.2g, 0.273mol) 교반 용액에 t-BuOK(33.1g, 0.295mol)를 분할 첨가하였다. 이 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하였고, 5-브로모-2-(브로모메틸)-1,3-디플루오로벤젠(65.0g, 0.227mol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 3시간 동안 교반하였다. 물(2000mL)을 천천히 첨가하였고, 혼합물을 1시간 동안 교반하였다. 결과적으로 수득되는 침전물을 여과하여 수집하였고, 물로 세척하고(3x250mL), 진공 하에 건조하여 디에틸 2-아세트아미도-2-(4-브로모-2,6-디플루오로벤질)말로네이트를 회백색 고체로서 제공하였다.
단계 2. 2-아세트아미도-3-(4-브로모-2,6-디플루오로페닐)프로판산
에탄올(500mL) 중 디에틸 2-아세트아미도-2-(4-브로모-2,6-디플루오로벤질)말로네이트(80g, 0.189mol)의 교반 용액에 물(500mL) 중 NaOH(30g, 0.758mol) 용액을 첨가하였다. 반응 혼합물을 5시간 동안 환류 가열한 뒤, 실온으로 냉각하였다. 혼합물을 2N HCl 수용액으로 pH를 5 내지 6으로 조정하였고, 밤새 환류 가열하였다. 혼합물을 실온으로 냉각하였고, 10% NaOH 수용액으로 pH를 8 내지 9로 조정하였다. 결과적으로 수득되는 혼합물을 MTBE(300mL)로 세척하고, 수성 상을 2N 수성 HCl로 pH를 2 내지 3으로 조정한 뒤, EtOAc(500mLx2)로 추출하였다. 합한 추출물을 염수(300mL)로 세척하고, 무수 Na2SO4 상에서 건조하고, 여과하고, 건조 상태로 농축하였다. 잔류물을 EtOAc(100mL)과 석유 에테르(150mL)의 혼합물로 교반 하에 1시간 동안 처리하였다. 결과적으로 수득되는 침전물을 여과하여 수집하고, 석유 에테르로 세척하고 진공 건조하여 2-아세트아미도-3-(4-브로모-2,6-디플루오로페닐)프로판산을 백색 고체로서 제공하였다. 1H NMR(DMSO-d 6, 400 MHz)δ(ppm): 12.86(br s, 1H), 8.31(br s, 1H), 7.43(d, J = 6.8 Hz, 2H), 4.43(m, 1H), 3.08-2.87(m, 2H), 1.77(s, 3H). MS:(ESI, m/z): 322, 324[M+H]+.
단계 3 . (R)-2-아세트아미도-3-(4-브로모-2,6-디플루오로페닐)프로판산
증류수(1.1L) 중 2-아세트아미도-3-(4-브로모-2,6-디플루오로페닐)프로판산(55g, 0.171mol)의 현탁액에 10% 수성 NaOH를 적가하여 pH를 8.5로 조정하였다. 이 혼합물을 35 내지 38℃로 가열하였고, L-아실라제(11.0g)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 이 온도에서 48시간 동안 교반하면서, pH는 10% 수성 NaOH에 의해 8.5로 유지시켰다. 혼합물을 2N 수성 HCl로 pH를 4 내지 5로 조정하고, 활성탄(2g)을 첨가하였다. 혼합물을 60℃에서 2시간 동안 가열한 뒤, 실온으로 냉각하였다. 혼합물을 10% 수성 NaOH로 pH 9.5 내지 10으로 조정하고 여과하였다. 여과액을 2N 수성 HCl로 pH 2 내지 3으로 조정한 뒤, EtOAc(400mLx2)로 추출하였다. 합한 추출물을 0.5N 수성 HCl(200mLx2) 및 염수(200mL)로 세척하고, 무수 Na2SO4 상에서 건조하고, 여과하고, 건조 상태로 농축하였다. 잔류물을 EtOAc(60mL) 및 석유 에테르(80mL)의 혼합물로 1시간 동안 교반 하에 처리하였다. 결과적으로 수득되는 침전물을 여과하여 수집하고, 석유 에테르로 세척하고 진공 하에 건조하여 (R)-2-아세트아미도-3-(4-브로모-2,6-디플루오로페닐)프로판산을 백색 고체로서 제공하였다.
단계 4 . (R)-2-아미노-3-(4-브로모-2,6-디플루오로페닐)프로판산 염산염
6N 수성 HCl(260mL) 중 (R)-2-아세트아미도-3-(4-브로모-2,6-디플루오로페닐)프로판산(26g, 80.7mmol)의 혼합물을 5시간 동안 환류 가열하였다. 이 혼합물을 농축하였고, 잔류물을 50℃에서 진공 하에 건조하여 조생성물인 (R)-2-아미노-3-(4-브로모-2,6-디플루오로페닐)프로판산 염산염을 백색 고체로서 제공하였다.
단계 5. (R)-메틸 2-아미노-3-(4-브로모-2,6-디플루오로페닐)프로파노에이트
MeOH(125mL) 중 (R)-2-아미노-3-(4-브로모-2,6-디플루오로페닐)프로판산 염산염(25.4g, 80.7mmol) 용액에 MeOH/HCl(8M, 125 mL)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 밤새 교반하고 건조상태로 농축하였다. 잔류물을 5% 수성 Na2CO3(250mL)에 현탁한 뒤, EtOAc(250mL x 2)로 추출하였다. 합한 추출물을 염수로 세척하고, 무수 Na2SO4 상에서 건조하고, 여과하고, 농축하여 (R)-메틸 2-아미노-3-(4-브로모-2,6-디플루오로페닐)프로파노에이트를 오일로서 제공하였다. 1H NMR(CDCl3, 400 MHz)δ(ppm): 7.08(m, 2H), 3.73(s, 3H), 3.70(m, 1H), 3.09-2.87(m, 2H), 1.55(br s, 2H). MS:(ESI, m/z): 294, 296[M+H]+.
단계 6. (R)-2-아미노-3-(4-브로모-2,6-디플루오로페닐)프로판-1-올
MeOH(500mL) 중 (R)-메틸 2-아미노-3-(4-브로모-2,6-디플루오로페닐)프로파노에이트(23.5g, 79.9mmol)의 교반 용액에 NaBH4(6.08g, 159.9mmol)을 분할 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 3시간 동안 교반하였고, NaBH4(1.52 g, 39.9 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 물(500mL)을 첨가하고, MeOH을 진공 하에 증발시켜 제거하였다. 결과적으로 수득되는 혼합물을 CH2Cl2(250 mL x 3)으로 추출하고, 합한 추출물을 무수 Na2SO4 상에서 건조하고, 여과하고, 농축하여 조생성물인 (R)-2-아미노-3-(4-브로모-2,6-디플루오로페닐)프로판-1-올을 백색 고체로서 제공하였다. MS:(ESI, m/z): 266, 268[M+H]+.
단계 7 . (R)-7-브로모-5-플루오로크로만-3-아민
DMSO(100mL) 중 (R)-2-아미노-3-(4-브로모-2,6-디플루오로페닐)프로판-1-올(18.5 g, 69.5 mmol)의 교반 용액에 NaH(광유 중 60%, 4.17g)을 실온에서 첨가하였다. 반응 혼합물을 35℃에서 3시간 동안 교반하였고, 얼음-물(500mL)을 조심스럽게 첨가하여 반응을 ??치시켰다. 결과적으로 수득되는 혼합물을 EtOAc(300mL x 3)로 추출하였고, 합한 추출물을 염수(200mL)로 세척하고, 무수 Na2SO4 상에서 건조하고, 여과하고, 농축하여 조생성물인 (R)-7-브로모-5-플루오로크로만-3-아민을 제공하였다. MS:(ESI, m/z): 246, 248[M+H]+.
단계 8. 벤질 (R)-(7-브로모-5-플루오로크로만-3-일)카바메이트
MeOH(400mL) 중 조생성물인 (R)-7-브로모-5-플루오로크로만-3-아민(17g, 69.5mmol) 및 포화 수성 NaHCO3(200 mL)의 교반 혼합물에 벤질 클로로포르메이트(17.7g, 104.2 mmol)를 적가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 밤새 교반한 뒤, 물(500mL)로 희석하였다. 결과적으로 수득되는 혼합물을 EtOAc(300mL x 2)로 추출하고, 합한 추출물을 물(200mL)로 세척하고, 무수 Na2SO4 상에서 건조하고, 여과하고, 농축시켰다. 잔류물을 실리카겔 크로마토그래피로 정제하여 벤질 (R)-(7-브로모-5-플루오로크로만-3-일)카바메이트를 제공하였다. MS:(ESI, m/z): 380, 382[M+H]+.
이하 표 2의 중간체는 중간체 5-1의 방법 2와 유사한 표준 화학적 조작 및 절차를 사용하여 제조하였다.
Figure pct00109
1 절차 상 주의점: 단계 3 및 단계 8은 수행하지 않았다. 단계 1에서, 5-브로모-2-(브로모메틸-d2)-1,3-디플루오로벤젠은 메틸 4-브로모-2,6-디플루오로벤조에이트로부터 2 단계로 제조하였다: 메탄올(0.806ml, 19.92mmol)을 THF(15mL) 중 메틸 4-브로모-2,6-디플루오로벤조에이트(5g, 19.92mmol), 소듐 테트라하이드로보레이트-d4(0.834g, 19.92mmol)의 교반 용액에 조심스럽게 적가하였다. 반응물은 그 다음 70℃에서 2시간 동안 교반시켰다. 반응물은 실온으로 냉각하고 10mL 포화 수성 NH4Cl을 첨가하였다. 반응물은 실온에서 2시간 동안 교반시켰다. 유기 층은 분리하였다. 수성 층은 2x15mL DCM으로 추출하였다. 유기 층을 합하여, Na2SO4 상에서 건조하고, 여과하고, 진공 하에 농축하여 (4-브로모-2,6-디플루오로페닐)메탄-d2-올을 제공하였다.
DCM(30mL) 중 (4-브로모-2,6-디플루오로페닐)메탄-d2-올(3.00g, 13.33mmol) 및 PBr3(14.21mL, 14.21mmol)의 용액을 40℃에서 30분 동안 교반하였다. 실온으로 냉각한 후, 반응은 물(7.5mL)을 첨가하여 ??치시켰다. 결과적으로 수득되는 혼합물을 DCM(3x10mL)으로 추출하였고, 유기 층을 합하여 Na2SO4 상에서 건조하고, 여과하고 농축하여 조생성물인 담황색 오일을 제공하였다. 오일은 Biotage(KP-SIL 50g, 2% EtOAc/헥산부터 25% EtOAc/헥산까지)를 사용하여 정상 크로마토그래피로 정제하였다. 원하는 분획을 합하고 농축하여 5-브로모-2-(브로모메틸-d2)-1,3-디플루오로벤젠을 제공하였다. 1H NMR(CDCl3, 300 MHz)δ(ppm): 1.54(s, 1H) 4.46(br d, J=3.8 Hz, 1H) 7.05-7.21(m, 2H).
중간체 6. tert-부틸(R)-4-(3-아미노-8-브로모-5-플루오로크로만-7-일)피페라진-1-카복실레이트 및
중간체 7-1. tert-부틸(R)-4-(3-아미노-6-시아노-5-플루오로크로만-7-일)피페라진-1-카복실레이트
Figure pct00110
단계 1: tert-부틸 (R)-4-(3-(((벤질옥시)카보닐)아미노)-8-브로모-5-플루오로크로만-7-일)피페라진-1-카복실레이트 및 tert-부틸(R)-4-(3-(((벤질옥시)카보닐)아미노)-6-브로모-5-플루오로크로만-7-일)피페라진-1-카복실레이트
20-mL 바이엘에 tert-부틸 4-[(3R)-3-[[(벤질옥시)카보닐]아미노]-5-플루오로-3,4-디하이드로-2H-1-벤조피란-7-일]피페라진-1-카복실레이트(570mg, 1.17mmol), THF(10 mL), 및 NBS(314mg, 1.76mmol)를 첨가하였다. 결과적으로 수득되는 용액을 25℃에서 2시간 동안 교반한 뒤, 물(30mL)을 첨가하여 ??치시켰다. 결과적으로 수득되는 혼합물을 에틸 아세테이트(3x30mL)로 추출하였다. 유기 층을 합하여 무수 황산나트륨 상에서 건조하고, 여과하고, 진공 하에 농축하였다. 잔류물을 분취용 HPLC(컬럼: XSelect CSH Prep C18 OBD, 5μm, 19x150mm; 이동상 A: 물(0.05% TFA), B: ACN; 구배: 45% B에서부터 15분 내에 70% B로 증가함)로 정제하였다. 수집한 분획을 진공 농축하여 tert-부틸 4-[(3R)-3-[[(벤질옥시)카보닐]아미노]-8-브로모-5-플루오로-3,4-디하이드로-2H-1-벤조피란-7-일]피페라진-1-카복실레이트(피크 1)(중간체 6)을 회백색 고체로서, 그리고 tert-부틸 4-[(3R)-3-[[(벤질옥시)카보닐]아미노]-6-브로모-5-플루오로-3,4-디하이드로-2H-1-벤조피란-7-일]피페라진-1-카복실레이트(피크 2)를 회백색 고체로서 제공하였다. MS(ESI, m/z): 564, 566[M+H]+. 이들 두 화합물을 후속 합성 단계에 각각 운반하였다.
단계 2: tert-부틸 4-[(3R)-3-[[(벤질옥시)카보닐]아미노]-6-시아노-5-플루오로-3,4-디하이드로-2H-1-벤조피란-7-일]피페라진-1-카복실레이트
질소의 불활성 대기로 퍼지되어 유지된 10mL 밀봉 튜브에 tert-부틸 4-[(3R)-3-[[(벤질옥시)카보닐]아미노]-6-브로모-5-플루오로-3,4-디하이드로-2H-1-벤조피란-7-일]피페라진-1-카복실레이트(80mg, 0.14mmol), Zn(CN)2(13mg, 0.11mmol), Pd(PPh3)4(8mg, 0.01mmol), PPh3(7mg, 0.03mmol), 및 NMP(5mL)를 첨가하였다. 결과적으로 수득되는 용액을 120℃에서 1시간 동안 교반하였다. 25℃로 냉각한 후, 물 10mL를 첨가하여 반응을 ??치시켰다. 결과적으로 수득되는 혼합물을 3x20mL의 에틸 아세테이트로 추출하였다. 유기층을 합하고 무수 황산나트륨 상에서 건조하고, 여과하고 진공 하에 농축하여 잔류물을 제공하였고, 이를 역상 크로마토그래피(컬럼: C18 실리카겔; 이동상 A: H2O 중 0.1% TFA, B: ACN; 유속: 50 mL/min; 구배: 0% B에서부터 30분 내에 80% B로 증가함)를 통해 정제하였다. 수집한 분획을 진공 하에 농축하여 tert-부틸 4-[(3R)-3-[[(벤질옥시)카보닐]아미노]-6-시아노-5-플루오로-3,4-디하이드로-2H-1-벤조피란-7-일]피페라진-1-카복실레이트를 회백색 고체로서 제공하였다. MS(ESI, m/z): 511[M+H]+.
단계 3: tert-부틸 4-[(3R)-3-아미노-6-시아노-5-플루오로-3,4-디하이드로-2H-1-벤조피란-7-일]피페라진-1-카복실레이트
질소로 퍼지되어 유지된 25-mL 둥근 바닥 플라스크에 tert-부틸 4-[(3R)-3-[[(벤질옥시)카보닐]아미노]-6-시아노-5-플루오로-3,4-디하이드로-2H-1-벤조피란-7-일]피페라진-1-카복실레이트(40mg, 0.08mmol), 에틸 아세테이트(4mL), 및 10% 탄소 상 팔라듐(40mg,)을 넣었다. 결과적으로 수득되는 혼합물을 수소 대기 하에 25℃에서 2시간 동안 교반하였다. 고체를 Celite를 통해 여과 제거하였고, 여과액을 진공 하에 농축하여 tert-부틸 4-[(3R)-3-아미노-6-시아노-5-플루오로-3,4-디하이드로-2H-1-벤조피란-7-일]피페라진-1-카복실레이트(중간체 7-1)를 황색 오일로서 제공하였다. MS(ESI, m/z): 377[M+H]+.
이하 표 3의 중간체는 중간체 7-1의 제조에 사용된 것과 유사한 표준 화학적 조작 및 절차를 사용하여 제조할 수 있다.
Figure pct00111
중간체 8. 벤질(6-브로모-1,2,3,4-테트라하이드로나프탈렌-2-일)카바메이트;
중간체 9. 벤질(S)-(6-브로모-1,2,3,4-테트라하이드로나프탈렌-2-일)카바메이트 및
중간체 10. 벤질(R)-(6-브로모-1,2,3,4-테트라하이드로나프탈렌-2-일)카바메이트
Figure pct00112
단계 1. 6-브로모-1,2,3,4-테트라하이드로나프탈렌-2-아민
MeOH(250mL) 중 6-브로모-3,4-디하이드로나프탈렌-2(1H)-온(5g, 22.21mmol), NH4OAc(13.8g, 179mmol), 및 NaBH3CN(1.68g, 26.67mmol) 용액을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 2N HCl 용액으로 pH 4 내지 5로 산성화하고 진공 하에 농축하였다. 잔류 용액을 CH2Cl2(200mL x 2)으로 세척하였다. 수성 층은 1N NaOH 용액으로 pH 10으로 염기성화시킨 후, CH2Cl2(200mL x 2)으로 추출하였다. 합한 유기 층은 Na2SO4 상에서 건조하고, 여과하고, 진공 하에 농축하여 6-브로모-1,2,3,4-테트라하이드로나프탈렌-2-아민을 황색 오일로서 제공하였다. MS:(ESI, m/z): 226, 228[M+H]+.
단계 2. 벤질 (6-브로모-1,2,3,4-테트라하이드로나프탈렌-2-일)카바메이트(중간체 8)
THF(20mL) 및 물(20mL) 중 6-브로모-1,2,3,4-테트라하이드로나프탈렌-2-아민(1.8g, 7.96mmol), 벤질 클로로포르메이트(1.6g, 9.55mmol), 및 Cs2CO3(3g, 21.71mmol)의 용액을 60℃에서 밤새 교반하였다. 실온으로 냉각한 후, 반응 혼합물을 EtOAc(30mL x 3)로 추출하였다. 합한 유기 층을 Na2SO4 상에서 건조하고, 여과하고, 진공 하에 농축하였다. 실리카겔 크로마토그래피로 정제(구배 1:100 내지 1:3 EtOAc/석유 에테르로 용출)하여 벤질(6-브로모-1,2,3,4-테트라하이드로나프탈렌-2-일)카바메이트(중간체 8)를 고체로서 제공하였다. MS:(ESI, m/z): 360, 362[M+H]+.
단계 3. 벤질 (S)-(6-브로모-1,2,3,4-테트라하이드로나프탈렌-2-일)카바메이트 (중간체 9) 및 벤질 (R)-(6-브로모-1,2,3,4-테트라하이드로나프탈렌-2-일)카바메이트 (중간체 10)
라세미체 벤질(6-브로모-1,2,3,4-테트라하이드로나프탈렌-2-일)카바메이트를 SFC(컬럼: Chiralpak IA-SFC-03, 5x25 cm, 5 μm; 이동상 A: CO2, B: MeOH; 유속: 170 mL/min)로 분리하여 다음과 같은 표제 화합물을 제공하였다: 백색 고체로서 벤질 (S)-(6-브로모-1,2,3,4-테트라하이드로나프탈렌-2-일)카바메이트(1차 용출 이성질체, RT = 6.54 분) 및 백색 고체로서 벤질 (R)-(6-브로모-1,2,3,4-테트라하이드로나프탈렌-2-일)카바메이트(2차 용출 이성질체, RT = 9.06 분). 1차 용출 이성질체: 1H NMR(CDCl3, 400 MHz)δ(ppm): 7.30-7.21(m, 5H), 7.17-7.13(m, 2H), 6.85-6.83(d, J = 8.00 Hz, 1H), 5.02(s, 2H), 4.70(br, 1H), 3.95(m, 1H), 3.01-2.96(dd, J = 4.00 Hz, 16.00 Hz, 2H), 2.79-2.75(m, 2H), 2.53-2.47(m, 1H), 2.00-1.97(m, 1H), 1.68-1.66(m, 1H). MS:(ESI, m/z): 360, 362[M+H]+. 2차 용출 이성질체: 1H NMR(CDCl3, 400 MHz)δ(ppm): 7.30-7.23(m, 5H), 7.17-7.13(m, 2H), 6.84-6.82(d, J = 8.00 Hz, 1H), 5.02(s, 2H), 4.70(br, 1H), 4.06-3.95(m, 1H), 3.01-2.96(dd, J = 4.00 Hz, 16.0 Hz, 2H), 2.79-2.75(m, 2H), 2.51-2.47(m, 1H), 2.00-1.96(m, 1H), 1.68-1.66(m, 1H). MS:(ESI, m/z): 360, 362[M+H]+.
중간체 11-1. 벤질 (6-브로모-8-플루오로-1,2,3,4-테트라하이드로나프탈렌-2-일)카바메이트
Figure pct00113
단계 1. 2-(4-브로모-2-플루오로페닐)아세틸 클로라이드
250-mL 둥근 바닥 플라스크에 2-(4-브로모-2-플루오로페닐)아세트산(10g, 42.05mmol), DCM(50mL), 및 티오닐 클로라이드(6.3mL, 85.11mmol)를 충전하였다. 결과적으로 수득되는 용액을 40℃에서 16시간 동안 교반하였다. 25℃로 냉각한 후, 반응 혼합물을 진공 하에 농축하여 2-(4-브로모-2-플루오로페닐)아세틸 클로라이드를 갈색 오일로서 제공하였다.
단계 2 . 6-브로모-8-플루오로-3,4-디하이드로나프탈렌-2(1H)-온
500-mL 둥근 바닥 플라스크에 2-(4-브로모-2-플루오로페닐)아세틸 클로라이드(5.0g, 18.49mmol) 및 DCM(100 mL)을 충전하였다. 그 다음, AlCl3(7.15g, 53.09mmol)을 0℃에서 분할 첨가하였다. 결과적으로 수득되는 혼합물을 0℃에서 5시간 동안 교반한 다음, 에틸렌 가스의 완만한 스트림을 0℃에서 10분 동안 반응 혼합물 내로 발포시켰다. 반응 혼합물을 얼음에 붓고, 농염산(5mL)을 첨가하였다. 결과적으로 수득되는 용액을 DCM(3x50mL)으로 추출하고, 유기층을 합하여, 무수 황산나트륨 상에서 건조하고 진공 하에 농축하여 조생성물인 잔류물을 제공하였고, 이를 에틸아세테이트/석유 에테르(1:2)로 용출시키는 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 6-브로모-8-플루오로-3,4-디하이드로나프탈렌-2(1H)-온을 갈색 고체로서 제공하였다. 1H NMR(400 MHz, DMSO-d 6) δ(ppm): 2.49(t, J=8.0Hz, 2H), 3.08(t, J=8.0Hz, 2H), 3.49(s, 2H), 7.40-7.42(m, 2H).
단계 3 . (2E)-6-브로모-8-플루오로-N-메톡시-1,2,3,4-테트라하이드로나프탈렌-2-이민
250-mL 둥근 바닥 플라스크에 6-브로모-8-플루오로-3,4-디하이드로나프탈렌-2(1H)-온(4.2g, 16.07mmol), O-메틸하이드록실아민의 HCl 염(2.16g, 25.60mmol), 에탄올(50mL) 및 피리딘(5mL, 61.50mmol)을 충전하였다. 결과적으로 수득되는 혼합물을 오일 조에서 16시간 동안 80℃에서 교반한 다음, 25℃로 냉각하였다. 냉각한 후, 결과적으로 수득되는 혼합물을 진공 하에 농축하여 잔류물을 제공하였고, 이를 에틸 아세테이트/석유 에테르(1:2)로 용출되는 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 (2E)-6-브로모-8-플루오로-N-메톡시-1,2,3,4-테트라하이드로나프탈렌-2-이민을 갈색 고체로서 제공하였다. MS:(ESI, m/z) 272, 274[M+H]+.
단계 4. 6-브로모-8-플루오로-1,2,3,4-테트라하이드로나프탈렌-2-아민
질소로 퍼지된 250-mL 둥근 바닥 플라스크에 (2E)-6-브로모-8-플루오로-N-메톡시-1,2,3,4-테트라하이드로나프탈렌-2-이민(3.5g, 11.58mmol, 90%), 에탄올(50mL) 및 Raney Ni(2.0g, 23.11mmol)을 충전하였다. 여기에 수소(g)를 도입시켰다. 결과적으로 수득되는 혼합물을 25℃에서 48시간 동안 교반하였다. 고체를 Celite 상에서 여과하여 제거하였다. 여과액은 진공 하에 농축하여 잔류물을 제공하였고, 이를 DCM/메탄올(10:1)로 용출되는 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 6-브로모-8-플루오로-1,2,3,4-테트라하이드로나프탈렌-2-아민을 갈색 고체로서 제공하였다. MS:(ESI, m/z): 244, 246[M+H]+.
단계 5. 벤질 (6-브로모-8-플루오로-1,2,3,4-테트라하이드로나프탈렌-2-일)카바메이트
100-mL 둥근 바닥 플라스크에 6-브로모-8-플루오로-1,2,3,4-테트라하이드로나프탈렌-2-아민(930mg, 3.43mmol), 에틸 아세테이트(15mL), 물(15mL), 탄산칼륨(1.58g, 11.32mmol), 및 벤질 클로로포르메이트(780mg, 4.53mmol)를 충전하였다. 결과적으로 수득되는 혼합물을 오일조에서 16시간 동안 60℃에서 교반하였다. 25℃로 냉각 후, 반응물을 물(30mL)로 희석하였다. 결과적으로 수득되는 용액을 에틸 아세테이트(3x40mL)로 추출하였고, 유기층을 합하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조하고, 진공 하에 농축하여 잔류물을 제공하였고, 이를 에틸 아세테이트/석유 에테르(1:5)로 용출되는 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 벤질(6-브로모-8-플루오로-1,2,3,4-테트라하이드로나프탈렌-2-일)카바메이트를 회백색 고체로서 제공하였다. MS:(ESI, m/z): 378, 380[M+H]+.
이하 표 4의 중간체는 중간체 11-1의 제조에 사용된 것과 유사한 표준 화학 조작 및 절차를 사용하여 제조하였다.
Figure pct00114
1 절차 상 주의점: 단계 2에서, 위치이성질체 6-브로모-7-메틸-3,4-디하이드로나프탈렌-2(1H)-온 및 6-브로모-5-메틸-3,4-디하이드로나프탈렌-2(1H)-온(각각 3:1)의 혼합물이 생성되었다. 이 혼합물을 단계 5를 통해 운반하였다. 위치이성질체 및 거울상이성질체는 키랄 컬럼 Phenomenex Lux 5μm Cellulose-3 및 이동상 50% CO2/IPA(2mM NH3-MeOH)을 사용하여 SFC로 분리하여 1차 용출 이성질체로서 중간체 11-4, 2차 용출 이성질체로서 중간체 11-2, 3차 용출 이성질체로서 중간체 11-5, 및 4차 용출 이성질체로서 중간체 11-3을 제공하였다. 분리된 거울상이성질체의 입체화학은 임의로 지정하였다.
중간체 12. tert-부틸 4-(3-아미노크로만-7-일)피페라진-1-카복실레이트
Figure pct00115
단계 1 . 7-브로모-2H-크로멘-3-카보니트릴
아크릴로니트릴(16mL) 중 4-브로모-2-하이드록시벤즈알데하이드(10g, 47.26mmol) 및 트리에틸렌디아민(1.12g, 9.49mmol)의 용액을 80℃에서 24시간 동안 교반하였다. 실온으로 냉각한 후, 반응은 1N NaOH(400mL)로 ??치시켰다. 결과적으로 수득되는 용액을 EtOAc(300mL x 3)로 추출하였다. 유기층을 합하고, 무수 Na2SO4 상에서 건조하고, 여과하고, 진공 하에 농축하였다. 잔류물은 실리카겔 크로마토그래피로 정제(20:1 내지 9:1 석유 에테르/EtOAc로 용출함)하여 7-브로모-2H-크로멘-3-카보니트릴을 황색 고체로서 제공하였다. MS:(ESI, m/z): 236, 238[M+H]+.
단계 2. tert-부틸 4-(3-시아노-2H-크로멘-7-일)피페라진-1-카복실레이트
톨루엔(20mL) 중 7-브로모-2H-크로멘-3-카보니트릴(1g, 3.81mmol), tert-부틸 피페라진-1-카복실레이트(950mg, 4.85mmol), Pd(dppf)Cl2(327mg, 0.42mmol), XPhos(191mg, 0.38mmol) 및 Cs2CO3(3.9g, 11.37mmol)의 혼합물을 100℃에서 18시간 동안 교반하였다. 실온으로 냉각한 후, 반응은 30mL의 물을 첨가하여 ??치시켰다. 결과적으로 수득되는 혼합물을 EtOAc(30mL x 3)로 추출하였다. 유기 층을 합하여, 무수 Na2SO4 상에서 건조하고, 여과하고, 진공 하에 농축하였다. 잔류물을 실리카겔 크로마토그래피로 정제(9:1 내지 4:1 석유 에테르/EtOAc로 용출)하여 0.7g의 tert-부틸 4-(3-시아노-2H-크로멘-7-일)피페라진-1-카복실레이트를 황색 고체로서 제공하였다. MS:(ESI, m/z): 342[M+H]+.
단계 3 . tert-부틸 4-(3-카바모일-2H-크로멘-7-일)피페라진-1-카복실레이트
DMSO(2mL)와 에탄올(10mL)의 혼합물 중 tert-부틸 4-(3-시아노-2H-크로멘-7-일)피페라진-1-카복실레이트(500mg, 1.32mmol), 30% 과산화수소(0.2mL, 2.58mmol), 및 탄산칼륨(304mg, 2.09mmol)의 용액을 실온에서 3시간 동안 교반하였다. 반응은 물 50mL를 첨가하여 ??치시켰다. 결과적으로 수득되는 혼합물을 EtOAc(50mL x 3)로 추출하였다. 유기 층을 합하고, 무수 Na2SO4 상에서 건조하고, 여과하고, 진공 하에 농축하였다. 잔류물을 실리카겔 크로마토그래피로 정제(10:1 내지 3:1 석유 에테르/EtOAc로 용출)하여 tert-부틸 4-(3-카바모일-2H-크로멘-7-일)피페라진-1-카복실레이트를 황색 고체로서 제공하였다. MS:(ESI, m/z): 360[M+H]+.
단계 4 . tert-부틸 4-(3-카바모일크로만-7-일)피페라진-1-카복실레이트
THF(50mL) 중 tert-부틸 4-(3-카바모일-2H-크로멘-7-일)피페라진-1-카복실레이트(700mg, 1.95mmol) 및 Pd/C(100mg, 10%)의 혼합물을 수소 대기 하에 실온에서 18시간 동안 교반하였다. 고체를 여과해내고 여과액을 진공 하에 농축하였다. 잔류물은 실리카겔 크로마토그래피로 정제(EtOAc로 용출)하여 tert-부틸 4-(3-카바모일크로만-7-일)피페라진-1-카복실레이트를 연황색 고체로서 제공하였다. MS:(ESI, m/z): 362[M+H]+.
단계 5 . tert-부틸 4-(3-아미노크로만-7-일)피페라진-1-카복실레이트
DMF(3.88mL)와 물(3.88mL)의 혼합물 중 (디아세톡시요오도)벤젠(468mg, 1.45mmol)의 교반 용액에 tert-부틸 4-(3-카바모일크로만-7-일)피페라진-1-카복실레이트(350mg, 0.97mmol)를 첨가하였다. 결과적으로 수득되는 용액을 실온에서 18시간 동안 교반하였다. 추가 (디아세톡시요오도)벤젠(936mg, 2.90mmol)을 2 부분으로 24시간 넘게 첨가하였다. 결과적으로 수득되는 용액을 물 20mL로 희석하고 EtOAc(50mL)로 추출하였다. 수성 층을 진공 하에 농축하였다. 잔류물은 분취용 HPLC(컬럼: SunFire Prep C18, 19x150 mm; 이동상 A: 물(0.05% NH4HCO3), B: ACN; 구배: 15% B에서부터 15분 후 70% B까지)로 정제하여 tert-부틸 4-(3-아미노크로만-7-일)피페라진-1-카복실레이트를 연황색 고체로서 제공하였다. MS:(ESI, m/z): 334[M+H]+.
중간체 13. tert-부틸 3-(3-아미노크로만-7-일)-3,8-디아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-8-카복실레이트
Figure pct00116
단계 1 . 7-클로로크로만-3-아민
MeOH(35mL) 중 7-클로로크로만-3-온(700mg, 3.83mmol) 및 NH4OAc(2.37g, 30.75mmol)의 용액을 실온에서 4시간 동안 교반하였다. 여기에 NaBH3CN(364mg, 5.79mmol)을 첨가하였다. 결과적으로 수득되는 혼합물을 실온에서 14시간 동안 교반한 뒤, 진공 하에 농축하였다. 잔류물을 물 50mL로 희석하였다. 혼합물의 pH 값은 1N HCl로 5로 조정하였다. 결과적으로 수득되는 혼합물을 CH2Cl2(20mL x 2)로 추출하였다. 수성 층의 pH 값은 1M NaOH 용액으로 10으로 조정하였다. 결과적으로 수득되는 용액은 CH2Cl2(30mL x 3)으로 추출하였다. 유기 층을 합하고 무수 Na2SO4 상에서 건조하고, 여과하고, 진공 하에 농축하여 7-클로로크로만-3-아민을 연황색 오일로서 제공하였다. MS:(ESI, m/z): 184[M+H]+.
단계 2 . 벤질 (7-클로로크로만-3-일)카바메이트
EtOAc(15mL)와 물(15mL)의 혼합물 중 7-클로로크로만-3-아민(350mg, 1.91mmol), 탄산칼륨(786.6mg, 5.69mmol), 및 벤질 클로로포르메이트(390mg, 2.29mmol)의 혼합물을 60℃에서 3시간 동안 교반하였다. 실온으로 냉각한 후, 반응 혼합물을 물 10mL에 붓고, EtOAc(10mL x 3)로 추출하였다. 유기 층을 합하고, 무수 Na2SO4 상에서 건조하고, 여과하고, 진공 하에 농축하였다. 잔류물을 실리카겔 크로마토그래피로 정제(7:1 석유 에테르/EtOAc로 용출)하여 벤질 (7-클로로크로만-3-일)카바메이트를 백색 고체로서 제공하였다. MS:(ESI, m/z): 318[M+H]+.
단계 3 . tert-부틸 3-(3-(((벤질옥시)카보닐)아미노)크로만-7-일)-3,8-디아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-8-카복실레이트
질소의 불활성 대기로 퍼지되어 유지된 20-mL 밀봉 튜브에 벤질(7-클로로크로만-3-일)카바메이트(95mg, 0.26mmol), tert-부틸 3,8-디아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-8-카복실레이트(70mg, 0.33mmol), Cs2CO3(294mg, 0.90mmol), 톨루엔(5mL) 및 RuPhos Pd G3(25.1mg, 0.03mmol)을 넣었다. 반응 혼합물을 마이크로파 방사선으로 120℃에서 5시간 동안 처리하였다. 실온으로 냉각한 후, 반응 혼합물을 그 다음 물 10mL에 부었다. 결과적으로 수득되는 혼합물을 CH2Cl2(10mL x 3)으로 추출하였다. 유기 층을 합하고, 무수 Na2SO4 상에서 건조하고, 여과하고, 진공 하에 농축하였다. 잔류물을 실리카겔 크로마토그래피로 정제(2:1 석유 에테르/EtOAc로 용출)하여 tert-부틸 3-(3-(((벤질옥시)카보닐)아미노)크로만-7-일)-3,8-디아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-8-카복실레이트를 연황색 오일로서 제공하였다. MS: (ESI, m/z): 494[M+H]+.
단계 4. tert-부틸 3-(3-아미노크로만-7-일)-3,8-디아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-8-카복실레이트
MeOH(25mL) 중 tert-부틸 3-(3-(((벤질옥시)카보닐)아미노)크로만-7-일)-3,8-디아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-8-카복실레이트(300mg, 0.60mmol) 및 Pd/C(60mg, 10%)의 혼합물을 수소 대기 하에 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 고체를 여과해내고 여과액을 농축하여 tert-부틸 3-(3-아미노크로만-7-일)-3,8-디아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-8-카복실레이트를 황색 오일로서 제공하였다. MS:(ESI, m/z): 360[M+H]+.
중간체 14-1. tert-부틸 3-(3-아미노크로만-7-일)-3,9-디아자바이사이클로[3.3.1]노난-9-카복실레이트
Figure pct00117
단계 1. tert-부틸 3-(3-(((벤질옥시)카보닐)아미노)크로만-7-일)-3,9-디아자바이사이클로[3.3.1]노난-9-카복실레이트
톨루엔(6mL) 중 벤질-(7-브로모크로만-3-일)카바메이트, 중간체 1, (400mg, 1.07mmol), tert-부틸 3,9-디아자바이사이클로[3.3.1]노난-9-카복실레이트(300mg, 1.31mmol), Pd(dppf)Cl2-CH2Cl2(90mg, 0.11mmol), Xphos(52mg, 0.11mmol), 및 Cs2CO3(722mg, 2.22mmol)의 혼합물을 100℃에서 14시간 동안 교반하였다. 실온으로 냉각한 후, 물을 첨가하였고, 반응 혼합물을 EtOAc(70mL x 2)로 추출하였다. 조합된 유기 층을 황산나트륨 상에서 건조하고, 여과하고, 농축하였다. 정제용 TLC에 의한 정제(1:3 EtOAc/석유 에테르에 의한 용출)는 tert-부틸 3-(3-(((벤질옥시)카보닐)아미노)크로만-7-일)-3,9-디아자바이사이클로[3.3.1]노난-9-카복실레이트를 담황색 고체로서 제공하였다. MS:(ESI, m/z): 508[M+H]+.
단계 2. tert-부틸 3-(3-(((벤질옥시)카보닐)아미노)크로만-7-일)-3,9-디아자바이사이클로[3.3.1]노난-9-카복실레이트
MeOH(5mL) 중 tert-부틸 3-(3-(((벤질옥시)카보닐)아미노)크로만-7-일)-3,9-디아자바이사이클로[3.3.1]노난-9-카복실레이트(120mg, 0.22mmol) 및 Pd/C(60mg, 10%)의 혼합물을 수소 대기 하에 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 고체를 여과해내고 여과액을 진공 하에 농축하여 tert-부틸 3-(3-(((벤질옥시)카보닐)아미노)크로만-7-일)-3,9-디아자바이사이클로[3.3.1]노난-9-카복실레이트를 무색 오일로서 제공하였다. MS:(ESI, m/z): 374[M+H]+.
이하 표 5의 중간체는 중간체 14-1의 제조에 사용된 것과 유사한 표준 화학적 조작 및 절차를 사용하여 제조하였다.
Figure pct00118
1 절차 상 주의: 단계 1에서, RuPhos Pd G3/RuPhos는 촉매/리간드 시스템으로서 사용하였다.
중간체 15-1. tert-부틸 3-(3-아미노-5-플루오로크로만-7-일)-3,8-디아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-8-카복실레이트
Figure pct00119
단계 1 . 2,4-디플루오로-6-하이드록시벤즈알데하이드
ACN(200mL) 중 3,5-디플루오로페놀(10g, 73mmol), 파라포름알데하이드(23g, 728mmol), Et3N(21mL), 및 MgCl2(14.6g, 153.34mmol)의 용액을 60℃에서 14시간 동안 교반하였다. 실온으로 냉각한 후, 반응은 물(100mL)을 첨가하여 ??치시켰다. 결과적으로 수득되는 혼합물을 DCM(2 x 200mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 무수 황산나트륨 상에서 건조하고, 여과하고 진공 하에 농축하였다. 실리카겔 크로마토그래피에 의한 정제(1:10 내지 1:1 EtOAc/석유 에테르 구배로 용출)는 2,4-디플루오로-6-하이드록시벤즈알데하이드를 담황색 고체로서 제공하였다. MS:(ESI, m/z): 159[M+H]+.
단계 2. tert-부틸 3-(3-플루오로-4-포르밀-5-하이드록시페닐)-3,8-디아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-8-카복실레이트
DMSO(10mL) 중 2,4-디플루오로-6-하이드록시벤즈알데하이드(600mg, 3.80mmol), tert-부틸 3,8-디아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-8-카복실레이트(800mg, 3.75mmol), 및 DIEA(700mg, 5.42mmol)의 용액을 100℃에서 2시간 동안 교반하였다. 실온으로 냉각한 후, 반응은 물(10mL)을 첨가하여 ??치시켰다. 결과적으로 수득되는 혼합물은 DCM(2 x 20mL)으로 추출하였다. 합한 유기 층을 무수 황산나트륨 상에서 건조하고, 여과하고, 진공 하에 농축하였다. 실리카겔 크로마토그래피에 의한 정제(1:4 EtOAc/석유 에테르로 용출)는 tert-부틸 3-(3-플루오로-4-포르밀-5-하이드록시페닐)-3,8-디아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-8-카복실레이트를 황색 고체로서 제공하였다. MS: (ESI, m/z): 351[M+H]+.
단계 3. tert-부틸 3-(3-(알릴옥시)-5-플루오로-4-포르밀페닐)-3,8-디아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-8-카복실레이트
DMF(20mL) 중 tert-부틸 3-(3-플루오로-4-포르밀-5-하이드록시페닐)-3,8-디아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-8-카복실레이트(1.4g, 3.60mmol), 탄산칼륨(3g, 21.71mmol), 및 알릴브로마이드(500mg, 4.13mmol)의 용액을 100℃에서 2시간 동안 교반하였다. 실온으로 냉각한 후, 반응은 물(20mL)을 첨가하여 ??치시켰다. 결과적으로 수득되는 혼합물을 DCM(2 x 50mL)으로 추출하였다. 합한 유기 층을 무수 황산나트륨 상에서 건조하고, 여과하고, 진공 하에 농축하였다. 실리카겔 크로마토그래피에 의한 정제(1:5 EtOAc/석유 에테르)는 tert-부틸 3-(3-(알릴옥시)-5-플루오로-4-포르밀페닐)-3,8-디아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-8-카복실레이트를 황색 고체로서 제공하였다. MS:(ESI, m/z): 392[M+H]+.
단계 4. tert-부틸 3-(3-(알릴옥시)-5-플루오로-4-비닐페닐)-3,8-디아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-8-카복실레이트
THF(25mL) 중 메틸트리페닐포스포늄 브로마이드(3.3g, 8.86mmol)의 용액에 수소화나트륨(178mg, 4.45mmol, 오일 중 60% 분산액)을 0℃에서 분할 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 4시간 동안 교반하였다. 그 다음, THF(20mL) 중 tert-부틸 3-(3-(알릴옥시)-5-플루오로-4-포르밀페닐)-3,8-디아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-8-카복실레이트(1.2g, 2.77mmol)의 용액을 적가하고 30℃에서 3시간 동안 교반을 지속하였다. 반응은 물(60mL)을 첨가하여 ??치시켰다. 결과적으로 수득되는 혼합물을 EtOAc(3 x 50mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 염수(50mL)로 세척하고, 무수 황산 나트륨 상에서 건조하고, 여과하고, 진공 하에 농축하였다. 실리카겔 크로마토그래피에 의한 정제(1:6 내지 1:1 EtOAc/석유 에테르 구배로 용출)는 tert-부틸 3-(3-(알릴옥시)-5-플루오로-4-비닐페닐)-3,8-디아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-8-카복실레이트를 무색 오일로서 제공하였다. MS:(ESI, m/z): 389[M+H]+.
단계 5. tert-부틸 3-(5-플루오로-2H-크로멘-7-일)-3,8-디아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-8-카복실레이트
DCM(10mL) 중 tert-부틸 3-(3-(알릴옥시)-5-플루오로-4-비닐페닐)-3,8-디아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-8-카복실레이트(800mg, 2.06mmol) 및 Grubbs Catalyst™ 제2세대(48mg, 0.05mmol)의 용액을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 혼합물을 진공 하에 농축하였다. 실리카겔 크로마토그래피에 의한 정제(1:3 EtOAc/석유 에테르로 용출)는 tert-부틸 3-(5-플루오로-2H-크로멘-7-일)-3,8-디아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-8-카복실레이트를 무색 오일로서 제공하였다. MS:(ESI, m/z): 361[M+H]+.
단계 6. tert-부틸 3-(5-플루오로-3-니트로-2H-크로멘-7-일)-3,8-디아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-8-카복실레이트
THF(20mL) 중 KNO2 (945mg, 11.10mmol) 및 18-크라운-6(2.2g, 8.32mmol)의 용액을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 그 다음, I2(2.3g, 9.06mmol)를 첨가하였고 1시간 동안 교반을 지속하였다. 마지막으로, THF(10mL) 중 tert-부틸 3-(5-플루오로-2H-크로멘-7-일)-3,8-디아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-8-카복실레이트(1g, 2.77mmol) 및 피리딘(110mg, 1.39mmol)의 용액을 상기 용액에 첨가하였고, 교반을 14시간 동안 지속하였다. 반응은 물(20mL)을 첨가하여 ??치시켰다. 결과적으로 수득되는 혼합물을 DCM(2 x 50mL)으로 추출하였다. 합한 유기 층을 무수 황산나트륨 상에서 건조하고, 여과하고, 진공 하에 농축하였다. 실리카겔 크로마토그래피에 의한 정제(1:6 EtOAc/석유 에테르로 용출)는 tert-부틸 3-(5-플루오로-3-니트로-2H-크로멘-7-일)-3,8-디아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-8-카복실레이트를 황색 고체로서 제공하였다. MS:(ESI, m/z): 406[M+H]+.
단계 7. tert-부틸 3-(3-아미노-5-플루오로크로만-7-일)-3,8-디아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-8-카복실레이트
THF(20mL) 중 tert-부틸 3-(5-플루오로-3-니트로-2H-크로멘-7-일)-3,8-디아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-8-카복실레이트(120mg, 0.30mmol), BH3-THF(1M, 20mL, 20.0mmol), 및 NaBH4(116mg, 3.07mmol)의 용액을 65℃에서 14시간 동안 교반하였다. 그 다음, 메탄올(20mL)을 첨가하였고, 교반을 85℃에서 4시간 동안 지속하였다. 혼합물을 진공 하에 농축하였다. 역상 크로마토그래피에 의한 정제(컬럼: C18 실리카겔; 이동상 A: 물과 10mM NH4HCO3, B: ACN; 유속: 50 mL/min; 구배: 0%에서부터 50% B까지 40분 넘게)는 tert-부틸 3-(3-아미노-5-플루오로크로만-7-일)-3,8-디아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-8-카복실레이트를 무색 오일로서 제공하였다. MS:(ESI, m/z): 378[M+H]+.
이하 표 6의 중간체는 중간체 15-1의 제조에 사용된 것과 유사한 표준 화학적 조작 및 절차를 사용하여 제조하였다.
Figure pct00120
1 절차 상 주의점: 단계 6: 질화는 클로로포름(40mL) 중 tert-부틸 4-[6-(트리플루오로메톡시)-2H-크로멘-7-일]피페라진-1-카복실레이트(800mg, 2.00mmol), ACN(2.2g, 4.00mmol), NaNO2(1.4g, 20.29mmol) 및 아세트산(1.44g, 23.98mmol)의 용액을 50℃에서 6시간 동안 초음파처리하여 수행하였다. 반응은 NaHCO3 포화 수용액(40mL)으로 ??치시키고 추출 워크업(work up)은 EtOAc로 수행하였다.
중간체 16. 3-아미노-5-플루오로-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복실산
Figure pct00121
단계 1 . 2-클로로-5-플루오로-6-메틸니코티노니트릴
DMF(40mL) 및 물(20mL) 중 2,6-디클로로-5-플루오로피리딘-3-카보니트릴(5g, 26.18mmol), 메틸보론산(1.58g, 26.36mmol), Na2CO3(8.33g, 78.54mmol), 및 Pd(dppf)Cl2-CH2Cl2 (958mg, 1.31mmol)의 혼합물을 80℃에서 3시간 동안 교반하였다. 실온으로 냉각한 후, 반응 혼합물을 물 50mL로 희석하였다. 결과적으로 수득되는 혼합물을 EtOAc(3 x 100mL)로 추출하였다. 합한 유기층을 무수 황산나트륨 상에서 건조하고, 여과하고, 진공 하에 농축하였다. 실리카겔 크로마토그래피에 의한 정제(1:5 EtOAc/석유 에테르로 용출)는 2-클로로-5-플루오로-6-메틸니코티노니트릴을 핑크색 고체로서 제공하였다. MS:(ESI, m/z): 171[M+H]+.
단계 2. 메틸 3-아미노-5-플루오로-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복실레이트
DMF(20mL) 및 물(20mL) 중 2-클로로-5-플루오로-6-메틸니코티노니트릴(1.40g, 8.21mmol), KOH(1.38g, 24.63mmol), 및 메틸 2-머캅토아세테이트(1.74g, 16.42mmol)의 용액을 실온에서 3시간 동안 교반하였다. 용액의 pH 값은 1N HCl 용액으로 5로 조정하였다. 고체를 여과 수집하여 메틸 3-아미노-5-플루오로-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복실레이트를 황색 고체로서 제공하였다. MS:(ESI, m/z): 241[M+H]+ .
단계 3. 3-아미노-5-플루오로-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복실산
MeOH(2mL) 및 물(1mL) 중 메틸 3-아미노-5-플루오로-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복실레이트(200mg, 0.83mmol) 및 NaOH(66mg, 1.66mmol)의 용액을 60℃에서 1시간 동안 교반하였다. 실온으로 냉각한 후, 결과적으로 수득되는 혼합물을 진공 하에 농축하였다. 잔류물은 물 20mL로 희석하였다. 혼합물의 pH 값은 1N HCl 용액으로 5로 조정하였다. 고체를 여과 수집하여 3-아미노-5-플루오로-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복실산을 황색 고체로서 제공하였다. MS:(ESI, m/z): 227[M+H]+.
중간체 17. 3-아미노-5-플루오로티에노[2,3-b]피리딘-2-카복실산
Figure pct00122
단계 1. 메틸 3-아미노-5-플루오로티에노[2,3-b]피리딘-2-카복실레이트
나트륨(230mg, 10.00mmol)을 0℃에서 MeOH(20mL)에 첨가하였고, 결과적으로 수득되는 혼합물을 나트륨이 소모될 때까지 0℃에서 30분 동안 교반하였다. 반응 혼합물에 2-클로로-5-플루오로니코티노니트릴(900mg, 5.75mmol) 및 메틸 2-머캅토아세테이트(1.8mL, 14.98mmol)를 첨가하였다. 결과적으로 수득되는 용액을 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 반응은 물 50mL를 첨가하여 ??치시켰고 DCM(3 x 50mL)로 추출하였다. 유기 층을 합하여 무수 황산나트륨 상에서 건조하고, 여과하고 진공 하에 농축하였다. 실리카겔 크로마토그래피에 의한 정제(1:1 EtOAc/석유 에테르로 용출)는 메틸 3-아미노-5-플루오로티에노[2,3-b]피리딘-2-카복실레이트를 황색 고체로서 제공하였다. MS:(ESI, m/z): 227[M+H]+.
단계 2 . 3-아미노-5-플루오로티에노[2,3-b]피리딘-2-카복실산
물(10mL) 및 디옥산(10mL) 중 메틸 3-아미노-5-플루오로티에노[2,3-b]피리딘-2-카복실레이트(1g, 3.76mmol) 및 LiOH(100mg, 3.97mmol)의 용액을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 반응물은 물 20mL로 희석하였고 EtOAc(3 x 30mL)로 추출하였다. 수성 층의 pH 값은 6N HCl 용액으로 6으로 조정하였다. 고체를 여과 수집하여 3-아미노-5-플루오로티에노[2,3-b]피리딘-2-카복실산을 황색 고체로서 제공하였다. MS: (ESI, m/z): 213[M+H]+.
중간체 18. 3-아미노-6-플루오로티에노[2,3-b]피리딘-2-카복실산
Figure pct00123
단계 1 . 2,6-디플루오로니코티노니트릴
DMF(30mL) 중 2,6-디클로로니코티노니트릴(6.92g, 40.00mmol) 및 KF(6.98g, 120.14mmol)의 혼합물을 90℃에서 밤새 교반하였다. 실온으로 냉각한 후, 반응은 물 100mL를 첨가하여 ??치시켰다. 결과적으로 수득되는 혼합물을 EtOAc(3 x 100mL)로 추출하였다. 합한 유기층을 무수 황산나트륨 상에서 건조하고, 여과하고, 진공 하에 농축하였다. 실리카겔 크로마토그래피에 의한 정제(1:3 EtOAc/석유 에테르로 용출)는 2,6-디플루오로니코티노니트릴을 백색 고체로서 제공하였다. MS: (ESI, m/z): 141[M+H]+.
단계 2 . 벤질 2-((3-시아노-6-플루오로피리딘-2-일)티오)아세테이트
THF(20mL) 중 2,6-디플루오로니코티노니트릴(1g, 6.42mmol) 및 NaOAc(878mg, 10.70mmol)의 혼합물에 벤질 2-머캅토아세테이트(1.17g, 6.42mmol)를 -70℃에서 첨가하였다. 결과적으로 수득되는 용액을 천천히 실온으로 가온한 뒤, 30분 동안 교반하였다. 반응은 물 20mL를 첨가하여 ??치시켰다. 결과적으로 수득되는 혼합물을 DCM(3 x 30mL)으로 추출하였다. 합한 유기층을 무수 황산나트륨 상에서 건조하고, 여과하고, 진공 하에 농축하였다. 실리카겔 크로마토그래피에 의한 정제(2:25 EtOAc/석유 에테르로 용출)는 벤질 2-((3-시아노-6-플루오로피리딘-2-일)티오)아세테이트를 백색 고체로서 제공하였다. MS: (ESI, m/z): 303[M+H]+.
단계 3 . 벤질 3-아미노-6-플루오로티에노[2,3-b]피리딘-2-카복실레이트
THF(2mL) 중 벤질 2-((3-시아노-6-플루오로피리딘-2-일)티오)아세테이트(120mg, 0.40mmol)의 용액을 -50℃에서 THF(3mL) 중 DBU(120mg, 0.79mmol) 용액에 적가하였다. 혼합물을 그 다음 실온으로 가온하고 밤새 교반하였다. 결과적으로 수득되는 용액을 진공 하에 농축하였다. 실리카겔 크로마토그래피에 의한 정제(1:1 EtOAc/석유 에테르로 용출)는 벤질 3-아미노-6-플루오로티에노[2,3-b]피리딘-2-카복실레이트를 회백색 고체로서 제공하였다. MS:(ESI, m/z): 303[M+H]+.
단계 4 . 3-아미노-6-플루오로티에노[2,3-b]피리딘-2-카복실산
EtOAc(15mL) 중 벤질 3-아미노-6-플루오로티에노[2,3-b]피리딘-2-카복실레이트(89mg, 0.29mmol) 및 Pd/C(20mg, 10%)의 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 고체는 여과해 내었다. 여과액은 진공 하에 농축하여 3-아미노-6-플루오로티에노[2,3-b]피리딘-2-카복실산을 연황색 고체로서 제공하였다. MS:(ESI, m/z): 213[M+H]+.
중간체 19. 3-아미노-6-메톡시티에노[2,3-b]피리딘-2-카복실산
Figure pct00124
단계 1. 2-클로로-6-메톡시니코티노니트릴
나트륨(1.5g, 65.22mmol)을 0℃에서 MeOH(25mL)에 첨가하고, 결과적으로 수득되는 혼합물을 나트륨이 소모될 때까지 실온에서 30분 동안 교반하였다. 반응 혼합물에 2,6-디클로로니코티노니트릴(5g, 28.90mmol)을 5분 넘게 첨가하여 반응 온도를 10℃ 이하로 유지하였다. 결과적으로 수득되는 용액을 실온에서 밤새 교반하였다. 고체를 여과해 내고, 여과액을 진공 하에 농축하였다. 실리카겔 크로마토그래피에 의한 정제(1:3 EtOAc/헥산으로 용출)는 2-클로로-6-메톡시니코티노니트릴을 백색 고체로서 제공하였다. MS:(ESI, m/z): 169[M+H]+.
단계 2. 메틸 3-아미노-6-메톡시티에노[2,3-b]피리딘-2-카복실레이트
DMF(10mL) 중 2-클로로-6-메톡시니코티노니트릴(3.9g, 23.13mmol)의 용액에 KOH(5.2g)를 0℃에서 5분 넘게 첨가한 뒤, 메틸 2-머캅토아세테이트(2.46g, 23.18mmol)를 첨가하였다. 결과적으로 수득되는 용액을 0℃에서 1시간 동안 교반하였다. 반응은 물 20mL를 첨가하여 ??치시켰다. 결과적으로 수득되는 혼합물을 EtOAc(3 x 30mL)로 추출하였다. 합한 유기층을 물(50mL) 및 염수(50mL)로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조하고, 여과하고, 진공 하에 농축하였다. 실리카겔 크로마토그래피에 의한 정제(1:10 내지 1:1 EtOAc/헥산으로 용출)는 메틸 3-아미노-6-메톡시티에노[2,3-b]피리딘-2-카복실레이트를 연황색 고체로서 제공하였다. 1H NMR(DMSO-d 6 , 300 MHz)δ(ppm): 8.40(d, J = 8.7 Hz, 1H), 7.24(br, 2H), 6.89(d, J = 9.0 Hz, 1H), 3.93(s, 3H), 3.77(s, 3H). MS: (ESI, m/z): 239[M+H]+.
단계 3. 3-아미노-6-메톡시티에노[2,3-b]피리딘-2-카복실산
THF(4mL) 및 물(1.5mL) 중 메틸 3-아미노-6-메톡시티에노[2,3-b]피리딘-2-카복실레이트(110mg, 0.46mmol) 및 LiOH(100mg, 4.18mmol)의 용액을 60℃에서 2시간 동안 교반하였다. 실온으로 냉각한 후, 결과적으로 수득되는 혼합물을 진공 하에 농축하였다. 잔류물은 물 2mL로 희석하였다. 용액의 pH 값은 1N HCl로 7로 조정하였다. 고체를 여과 수집하여 3-아미노-6-메톡시티에노[2,3-b]피리딘-2-카복실산을 황색 고체로서 제공하였다. MS:(ESI, m/z): 225[M+H]+.
중간체 20. 3-아미노-5-플루오로-6-메톡시티에노[2,3-b]피리딘-2-카복실산
Figure pct00125
단계 1 . 2-클로로-5-플루오로-6-메톡시니코티노니트릴
MeOH(30mL) 중 2,6-디클로로-5-플루오로피리딘-3-카보니트릴(3.0g, 15.71mmol) 및 MeONa(1.28g, 23.70mmol)의 혼합물을 실온에서 5시간 동안 교반하였다. 결과적으로 수득되는 혼합물을 진공 하에 농축하였다. 실리카겔 크로마토그래피에 의한 정제(1:3 EtOAc/석유 에테르로 용출)는 2-클로로-5-플루오로-6-메톡시니코티노니트릴을 황색 고체로서 제공하였다. MS:(ESI, m/z): 187, 189[M+H]+.
단계 2 . 메틸 3-아미노-5-플루오로-6-메톡시티에노[2,3-b]피리딘-2-카복실레이트
THF(30mL) 중 2-클로로-5-플루오로-6-메톡시니코티노니트릴(1.90g, 10.22mmol) 메틸 2-머캅토아세테이트(1.3g, 12.26mmol), 및 DBU(7.2g, 47.29mmol)의 용액을 실온에서 밤새 교반하였다. 반응은 물 50mL를 첨가하여 ??치시키고 EtOAc(3 x 50mL)로 추출하였다. 유기 층을 합하여 무수 황산나트륨 상에서 건조하고, 여과하고, 진공 하에 농축하였다. 실리카겔 크로마토그래피에 의한 정제(1:3 EtOAc/석유 에테르로 용출)는 메틸 3-아미노-5-플루오로-6-메톡시티에노[2,3-b]피리딘-2-카복실레이트를 황색 고체로서 제공하였다. MS: (ESI, m/z): 257[M+H]+.
단계 3 . 3-아미노-5-플루오로-6-메톡시티에노[2,3-b]피리딘-2-카복실산
THF(8mL) 및 물(8mL) 중 메틸 3-아미노-5-플루오로-6-메톡시티에노[2,3-b]피리딘-2-카복실레이트(500mg, 1.95mmol) 및 LiOH(236mg, 9.85mmol)의 혼합물을 60℃에서 밤새 교반하였다. 실온으로 냉각한 후, 용매를 진공 하에 제거하였다. 잔류물의 pH 값은 3N HCl로 7로 조정하였다. 고체를 여과 수집하여 3-아미노-5-플루오로-6-메톡시티에노[2,3-b]피리딘-2-카복실산을 황색 고체로서 제공하였다. MS:(ESI, m/z): 243[M+H]+.
중간체 21. 3-아미노-4,6-디메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복실산
Figure pct00126
단계 1 . 메틸 3-아미노-4,6-디메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복실레이트
DMF(20mL) 중 2-클로로-4,6-디메틸니코티노니트릴(2.000g, 12.00mmol) 및 DBU(5.00g, 32.84mmol)의 용액에 메틸 2-설파닐아세테이트(1.019g, 9.60mmol)를 -50℃에서 교반하면서 적가하였다. 결과적으로 수득되는 용액을 실온에서 밤새 교반하였다. 혼합물을 물(50mL)에 붓고, 고체를 여과 수집하여 메틸 3-아미노-4,6-디메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복실레이트를 연황색 고체로서 제공하였다. MS: (ESI, m/z): 237[M+H]+.
단계 2. 3-아미노-4,6-디메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복실산
MeOH(5mL) 중 메틸 3-아미노-4,6-디메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복실레이트(300mg, 1.27mmol)의 용액에 물(5mL) 중 NaOH(254mg, 6.35mmol)의 용액을 첨가하였다. 결과적으로 수득되는 용액을 70℃에서 3시간 동안 교반하였다. 실온으로 냉각한 후, 용매는 진공 하에 제거하였다. 잔류물의 pH 값은 3N HCl로 6으로 조정하였다. 고체를 여과 수집하여 3-아미노-4,6-디메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복실산을 황색 고체로서 제공하였다. MS:(ESI, m/z): 223[M+H]+.
중간체 22. 3-아미노-6-메틸-4-(트리플루오로메틸)티에노[2,3-b]피리딘-2-카복실산
Figure pct00127
단계 1 . 6-메틸-2-티옥소-4-(트리플루오로메틸)-1,2-디하이드로피리딘-3-카보니트릴
에탄올(20mL) 중 2-시아노에탄티오아미드(2g, 19.97mmo) 1,1,1-트리플루오로펜탄-2,4-디온(3g, 19.47mmol), 및 트리에틸아민(0.1mL)의 용액을 90℃에서 1시간 동안 교반하였다. 실온으로 냉각한 후, 고체를 여과 수집하고 감압 하에 오븐에서 건조하여 6-메틸-2-티옥소-4-(트리플루오로메틸)-1,2-디하이드로피리딘-3-카보니트릴을 황색 고체로서 제공하였다. MS:(ESI, m/z): 219[M+H]+.
단계 2 . 에틸 3-아미노-6-메틸-4-(트리플루오로메틸)티에노[2,3-b]피리딘-2-카복실레이트
에탄올(20mL) 중 6-메틸-2-티옥소-4-(트리플루오로메틸)-1,2-디하이드로피리딘-3-카보니트릴(800mg, 3.67mmol), 에틸 2-브로모아세테이트(609mg, 3.65mmol), 및 NaOEt(297mg, 4.37mmol)의 용액을 80℃에서 밤새 교반하였다. 용매는 진공 하에 제거하였다. 잔류물을 물 30mL로 희석하고 에틸 아세테이트(3 x 30mL)로 추출하였다. 유기 층을 합하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조하고, 여과하고, 진공 하에 농축하였다. 실리카겔 크로마토그래피에 의한 정제(1:10 내지 1:1 EtOAc/석유 에테르로 용출)는 에틸 3-아미노-6-메틸-4-(트리플루오로메틸)티에노[2,3-b]피리딘-2-카복실레이트를 황색 고체로서 제공하였다. MS:(ESI, m/z): 305[M+H]+.
단계 3 . 3-아미노-6-메틸-4-(트리플루오로메틸)티에노[2,3-b]피리딘-2-카복실산
물(2mL) 및 메탄올(10mL) 중 에틸 3-아미노-6-메틸-4-(트리플루오로메틸)티에노[2,3-b]피리딘-2-카복실레이트(1.0g, 3.29mmol) 및 수산화나트륨(470mg, 11.75mmol)의 용액을 60℃에서 2시간 동안 교반하였다. 결과적으로 수득되는 혼합물을 진공 하에 농축하였다. 잔류물은 물 10mL로 희석하였다. 용액의 pH 값은 3N HCl로 3으로 조정하였다. 고체를 여과 수집하여 3-아미노-6-메틸-4-(트리플루오로메틸)티에노[2,3-b]피리딘-2-카복실산을 황색 고체로서 제공하였다. MS:(ESI, m/z): 277[M+H]+.
중간체 23. 메틸 6-아미노-2-메틸티에노[2,3-d]티아졸-5-카복실레이트 및
중간체 24. 6-아미노-2-메틸티에노[2,3-d]티아졸-5-카복실산
Figure pct00128
단계 1. 4-클로로-2-메틸티아졸-5-카보니트릴
톨루엔(30mL) 중 2,4-디클로로티아졸-5-카보니트릴(1.00g, 5.59 mmol), 디메틸아연(Et2O 중 1M)(8.8 mL, 8.80 mmol), 및 Pd(dppf)Cl2 -CH2Cl2 (911 mg, 1.12 mmol)의 혼합물을 40℃에서 4시간 동안 교반하였다. 반응은 물 20mL를 첨가하여 ??치시켰다. 결과적으로 수득되는 혼합물을 EtOAc(3 x 20mL)로 추출하였다. 유기 층을 합하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조하고, 여과하고, 진공 하에 농축하였다. 실리카겔 크로마토그래피에 의한 정제(1:5 EtOAc/석유 에테르로 용출)는 4-클로로-2-메틸티아졸-5-카보니트릴을 연황색 고체로서 제공하였다. MS:(ESI, m/z): 159[M+H]+.
단계 2 . 메틸 6-아미노-2-메틸티에노[2,3-d]티아졸-5-카복실레이트
THF(20mL) 중 4-클로로-2-메틸티아졸-5-카보니트릴(550mg, 3.47 mmol) 및 DBU(1.06g, 6.94 mmol)의 용액에 THF(2mL) 중 메틸 2-머캅토아세테이트(443mg, 4.17mmol)의 용액을 -40℃에서 교반하면서 적가하였다. 결과적으로 수득되는 용액을 밤새 교반하면서 실온으로 가온시켰다. 반응은 물 20mL로 ??치시켰다. 결과적으로 수득되는 혼합물을 EtOAc(3 x 20mL)로 추출하였다. 합한 유기층을 무수 황산나트륨 상에서 건조하고, 여과하고, 진공 하에 농축하였다. 실리카겔 크로마토그래피에 의한 정제(1:7 EtOAc/석유 에테르로 용출)는 메틸 6-아미노-2-메틸티에노[2,3-d]티아졸-5-카복실레이트를 연황색 고체로서 제공하였다. MS:(ESI, m/z): 229[M+H]+.
단계 3. 6-아미노-2-메틸티에노[2,3-d]티아졸-5-카복실산
ACN(11mL) 중 메틸 6-아미노-2-메틸티에노[2,3-d]티아졸-5-카복실레이트(174mg, 0.76 mmol)의 용액에 물(5mL) 중 LiOH(100mg, 4.18 mmol) 용액을 첨가하였다. 결과적으로 수득되는 용액을 30℃에서 밤새 교반한 다음, 진공 하에 농축하였다. 잔류물은 물 1mL로 희석하였다. 잔류물의 pH 값은 1N HCl 용액으로 7로 조정하였다. 고체를 여과 수집하여 6-아미노-2-메틸티에노[2,3-d]티아졸-5-카복실산을 회백색 고체로서 제공하였다. MS:(ESI, m/z): 214[M+H]+.
중간체 25. 1-에틸-1H-피롤로[2,3-b]피리딘-5-카복실산
Figure pct00129
DMF(80mL) 중 메틸 1H-피롤로[2,3-b]피리딘-5-카복실레이트(3g, 17.03 mmol)의 용액에 수소화 나트륨(2.04g, 51.09 mmol, 오일 중 60% 분산액)을 0℃에서 분할 첨가하였다. 반응 혼합물을 0℃에서 1시간 동안 교반하였다. 그 다음, 요오도에탄(5.32g, 34.06 mmol)을 0℃에서 첨가하였다. 결과적으로 수득되는 용액을 실온에서 10시간 동안 교반하였다. 반응은 물 10mL로 ??치시켰다. 30분 동안 교반한 후, 용액의 pH 값은 3N HCl로 7 내지 8로 조정하였다. 결과적으로 수득되는 혼합물을 EtOAc(6 x 50mL)로 추출하였다. 합한 유기층을 염수(50 mL)로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조하고, 여과하고, 진공 하에 농축하여, 1-에틸-1H-피롤로[2,3-b]피리딘-5-카복실산을 황색 고체로서 제공하였다(조생성물, 90% 순도). MS:(ESI, m/z): 191[M+H]+.
중간체 26. 7-에틸-7H-피롤로[2,3-c]피리다진-3-카복실산
Figure pct00130
단계 1. 3-클로로-7-에틸-7H-피롤로[2,3-c]피리다진
DMF(17mL) 중 3-클로로-7H-피롤로[2,3-c]피리다진(700mg, 4.56 mmol)의 용액에 NaH(365mg, 9.12 mmol, 오일 중 60% 분산액)을 0℃에서 분할 첨가하였다. 반응 혼합물을 0℃에서 30분 동안 교반하였다. 그 다음, 요오도에탄(856mg, 5.49 mmol)을 0℃에서 첨가하고, 반응 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 반응은 물 40mL를 첨가하여 ??치시켰다. 결과적으로 수득되는 혼합물을 EtOAc(3 x 20mL)로 추출하였다. 유기 층을 합하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조하고, 여과하고 진공 하에 농축하였다. 정제용 TLC에 의한 정제(1:1 EtOAc/석유 에테르로 용출)는 3-클로로-7-에틸-7H-피롤로[2,3-c]피리다진을 황색 오일로서 제공하였다. MS:(ESI, m/z): 182, 183[M+H]+.
단계 2. 메틸 7-에틸-7H-피롤로[2,3-c]피리다진-3-카복실레이트
30-mL 압력 탱크 반응기에서, MeOH(15mL) 중 3-클로로-7-에틸-7H-피롤로[2,3-c]피리다진(300mg, 1.65 mmol), Pd(dppf)Cl2.CH2Cl2(121mg, 0.15 mmol), 및 Et3N(0.69mL, 4.96 mmol)의 용액을 50 atm의 CO(g) 하에 120℃에서 48시간 동안 교반하였다. 실온으로 냉각한 후, 결과적으로 수득되는 혼합물을 진공 하에 농축하였다. 잔류물은 물 20mL로 희석하였다. 결과적으로 수득되는 혼합물을 EtOAc(3 x 20mL)로 추출하였다. 유기층을 합하여, 무수 황산나트륨 상에서 건조하고, 여과하고 진공 하에 농축하였다. 정제용 TLC에 의한 정제(1:1 EtOAc/석유 에테르로 용출)는 메틸 7-에틸-7H-피롤로[2,3-c]피리다진-3-카복실레이트를 황색 고체로서 제공하였다. MS:(ESI, m/z): 206[M+H]+ .
단계 3. 7-에틸-7H-피롤로[2,3-c]피리다진-3-카복실산
THF(10mL) 및 물(10mL) 중 메틸 7-에틸-7H-피롤로[2,3-c]피리다진-3-카복실레이트(238mg, 1.04 mmol), 및 수산화나트륨(206mg, 5.20 mmol)의 혼합물을 실온에서 18시간 동안 교반하였다. 결과적으로 수득되는 혼합물은 진공 하에 농축하였다. 잔류물은 물 10mL로 희석하였다. 혼합물의 pH 값은 2N HCl로 5로 조정하였다. 결과적으로 수득되는 혼합물을 EtOAc(3 x 30mL)로 추출하였다. 유기 층을 합하여 무수 황산나트륨 상에서 건조하고, 여과하고 진공 하에 농축하여 7-에틸-7H-피롤로[2,3-c]피리다진-3-카복실산을 연황색 고체(조생성물)로서 제공하였다. MS:(ESI, m/z): 192[M+H]+.
중간체 27. 3-아미노-6-메틸푸로[2,3-b]피리딘-2-카복실산
Figure pct00131
단계 1. 에틸 3-아미노-6-메틸푸로[2,3-b]피리딘-2-카복실레이트
NMP(80mL) 중 2-클로로-6-메틸니코티노니트릴(5g, 32.77 mmol), 에틸 2-하이드록시아세테이트(3.36g, 32.28 mmol), 및 Cs2CO3(32.2g, 98.83 mmol)의 용액을 75℃에서 밤새 교반하였다. 실온으로 냉각한 후, 혼합물을 물 100mL에 부었다. 결과적으로 수득되는 혼합물을 에틸 아세테이트(3 x 100mL)로 추출하였다. 합한 유기층을 염수(100mL)로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조하고, 여과하고 진공 하에 농축하였다. 실리카겔 크로마토그래피에 의한 정제(1:3 에틸 아세테이트/석유 에테르로 용출)는 에틸 3-아미노-6-메틸푸로[2,3-b]피리딘-2-카복실레이트를 핑크색 고체로서 제공하였다. MS:(ESI, m/z): 221[M+H]+.
단계 2. 3-아미노-6-메틸푸로[2,3-b]피리딘-2-카복실산
메탄올(1mL) 및 THF(1mL) 중 에틸 3-아미노-6-메틸푸로[2,3-b]피리딘-2-카복실레이트(110mg, 0.53 mmol)의 용액에 물(0.5mL) 중 LiOH(24mg, 1.00 mmol)의 용액을 교반 하에 적가하였다. 결과적으로 수득되는 용액을 실온에서 밤새 교반하였다. 이 용액의 pH 값은 1N HCl로 8로 조정하였다. 결과적으로 수득되는 혼합물을 에틸 아세테이트(3 x 20mL)로 추출하였다. 합한 유기층을 무수 황산나트륨 상에서 건조하고, 여과하고, 진공 하에 농축하였다. 역상 크로마토그래피에 의한 정제(컬럼: C18 실리카겔; 이동상 A: 물(0.1% 포름산), B: ACN; 유속: 50 mL/min; 구배: 0% B에서 30분 후 100% B)는 3-아미노-6-메틸푸로[2,3-b]피리딘-2-카복실산을 연황색 고체로서 제공하였다. MS:(ESI, m/z): 193[M+H]+.
중간체 28. 8-(tert-부톡시카보닐)-5,6,7,8-테트라하이드로-1,8-나프티리딘-3-카복실산
Figure pct00132
단계 1 . 메틸 5,6,7,8-테트라하이드로-1,8-나프티리딘-3-카복실레이트
30-mL 압력 탱크 반응기에서, MeOH(5mL) 중 tert-부틸 6-브로모-3,4-디하이드로-1,8-나프티리딘-1(2H)-카복실레이트(300mg, 0.86 mmol), Pd(dppf)Cl2-CH2Cl2(90mg, 0.11 mmol), 및 Et3N(1mL)의 혼합물을 CO(g) 5atm 하에 120℃에서 48시간 동안 교반하였다. 실온으로 냉각한 후, 용매를 진공 하에 제거하였다. 잔류물은 물(10mL)로 희석하고 EtOAc(3 x 10mL)로 추출하였다. 합한 유기층을 Na2SO4 상에서 건조하고, 여과하고, 진공 하에 농축하였다. 잔류물은 실리카겔 크로마토그래피로 정제(1:5 EtOAc/석유 에테르로 용출)하여 0.15g의 메틸 5,6,7,8-테트라하이드로-1,8-나프티리딘-3-카복실레이트를 백색 고체로서 제공하였다. MS:(ESI, m/z): 193[M+H]+.
단계 2. 1-(tert-부틸) 6-메틸 3,4-디하이드로-1,8-나프티리딘-1,6(2H)-디카복실레이트
DMF(5mL) 중 메틸 5,6,7,8-테트라하이드로-1,8-나프티리딘-3-카복실레이트(110mg, 0.52 mmol), DMAP(126mg, 1.03 mmol), 및 (Boc)2O(227mg, 1.04 mmol)의 용액을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 반응은 물 5mL를 첨가하여 ??치시켰다. 결과적으로 수득되는 혼합물을 에틸 아세테이트(3 x 10mL)로 추출하였다. 합한 유기층을 Na2SO4 상에서 건조하고, 여과하고, 진공 하에 농축하였다. 잔류물은 실리카겔 크로마토그래피로 정제(1:8 EtOAc/석유 에테르로 용출)하여 1-(tert-부틸) 6-메틸 3,4-디하이드로-1,8-나프티리딘-1,6(2H)-디카복실레이트를 백색 고체로서 제공하였다. MS:(ESI, m/z): 293[M+H]+.
단계 3. 8-(tert-부톡시카보닐)-5,6,7,8-테트라하이드로-1,8-나프티리딘-3-카복실산
THF(5mL) 및 물(5mL) 중 1-(tert-부틸) 6-메틸 3,4-디하이드로-1,8-나프티리딘-1,6(2H)-디카복실레이트(280mg, 0.86 mmol) 및 LiOH(81mg, 3.38 mmol)의 용액을 실온에서 3시간 동안 교반하였다. 결과적으로 수득되는 혼합물을 진공 하에 농축하였다. 잔류물은 역상 크로마토그래피로 정제(컬럼: C18 실리카겔; 이동상 A: 물(0.05% 포름산), B: ACN; 구배: 0% B에서부터 40분 후 60% B까지)하여 8-(tert-부톡시카보닐)-5,6,7,8-테트라하이드로-1,8-나프티리딘-3-카복실산을 백색 고체로서 제공하였다. MS:(ESI, m/z): 279[M+H]+.
중간체 29. 2',3'-디하이드로-1'H-스피로[사이클로프로판-1,4'-[1,8]나프티리딘]-6'-카복실산
Figure pct00133
단계 1 . 6-브로모-1,2,3,4-테트라하이드로-1,8-나프티리딘
THF(140mL) 중 6-브로모-3,4-디하이드로-1,8-나프티리딘-2(1H)-온(5.0g, 21.80 mmol) 및 NaBH4(4.18g, 110.49 mmol)의 용액에 BF3-Et2O(20mL, 157.83 mmol)를 0℃에서 적가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 1N HCl 용액(100mL)을 첨가하였고, 반응 혼합물을 추가 16시간 동안 실온에서 교반하였다. 그 다음, 혼합물의 pH 값을 NaHCO3 포화 수용액으로 8로 조정하였다. 결과적으로 수득되는 혼합물을 에틸 아세테이트(3 x 150mL)로 추출하였고, 합한 유기층을 무수 황산나트륨 상에서 건조하고, 여과하고 진공 하에 농축하여 6-브로모-1,2,3,4-테트라하이드로-1,8-나프티리딘을 백색 고체로서 제공하였다. MS:(ESI, m/z): 213, 215[M+H]+.
단계 2 . tert-부틸 6-브로모-3,4-디하이드로-1,8-나프티리딘-1(2H)-카복실레이트
THF(100mL) 중 수소화나트륨(1.41g, 58.76 mmol, 오일 중 60% 분산액)의 혼합물에 THF(100mL) 중 6-브로모-1,2,3,4-테트라하이드로-1,8-나프티리딘(5.0g, 22.53 mmol)의 용액을 0℃에서 첨가하였다. 반응 혼합물을 0℃에서 30분 동안 교반하였다. 이 혼합물에 그 다음 THF(50mL) 중 (Boc)2O(10.15g, 46.51 mmol)의 용액을 첨가하였다. 결과적으로 수득되는 혼합물을 16시간 동안 환류 가열하였다. 실온으로 냉각한 후, 반응은 물(150mL)을 첨가하여 ??치시켰다. 결과적으로 수득되는 혼합물을 에틸 아세테이트(3 x 150mL)로 추출하고 합한 유기층을 무수 황산나트륨 상에서 건조하고, 여과하고 진공 하에 농축하였다. 실리카겔 크로마토그래피에 의한 정제(1:3 EtOAc/석유 에테르로 용출)하여 tert-부틸 6-브로모-3,4-디하이드로-1,8-나프티리딘-1(2H)-카복실레이트를 연황색 고체로서 제공하였다. MS:(ESI, m/z): 313, 315[M+H]+.
단계 3 . tert-부틸 6-브로모-4-옥소-3,4-디하이드로-1,8-나프티리딘-1(2H)-카복실레이트
tert-부탄올(20mL) 및 물(15mL) 중 tert-부틸 6-브로모-3,4-디하이드로-1,8-나프티리딘-1(2H)-카복실레이트(2.0g, 6.13 mmol) 및 NaH2PO4(1.92g, 16.00 mmol)의 용액에 물(5mL) 중 NaMnO4-H2O(6.13g, 38.31 mmol)의 용액을 50℃에서 적가하였다. 반응 혼합물을 50℃에서 3시간 동안 교반하였다. 실온으로 냉각한 후, Na2SO3을 첨가하였고 혼합물을 실온에서 30분 동안 교반하였다. 고체를 여과해 내고 여과액을 물 50mL로 희석하였다. 결과적으로 수득되는 혼합물을 에틸 아세테이트(3 x 50mL)로 추출하였고, 합한 유기층을 무수 황산나트륨 상에서 건조하고, 여과하고 진공 하에 농축하였다. 실리카겔 크로마토그래피에 의한 정제(1:3 EtOAc/석유 에테르로 용출)는 tert-부틸 6-브로모-4-옥소-3,4-디하이드로-1,8-나프티리딘-1(2H)-카복실레이트를 백색 고체로서 제공하였다. MS:(ESI, m/z): 327, 329[M+H]+.
단계 4 . tert-부틸 6-브로모-4-메틸렌-3,4-디하이드로-1,8-나프티리딘-1(2H)-카복실레이트
톨루엔(30mL) 중 메틸트리페닐포스포늄 브로마이드(3.29g, 9.21 mmol) 및 t-BuOK(THF 중 1M)(9.2mL, 9.02 mmol)의 용액을 100℃에서 1시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물에 톨루엔(5mL) 중 tert-부틸 6-브로모-4-옥소-3,4-디하이드로-1,8-나프티리딘-1(2H)-카복실레이트(1.5g, 4.40 mmol)의 용액을 첨가하였다. 결과적으로 수득되는 용액을 100℃에서 1시간 동안 있었다. 실온으로 냉각한 후, 반응은 물(50mL)을 첨가하여 ??치시켰다. 결과적으로 수득되는 혼합물을 에틸 아세테이트(3x50 mL)로 추출하고, 합한 유기층을 무수 황산나트륨 상에서 건조하고, 여과하고 진공 하에 농축하였다. 실리카겔 크로마토그래피에 의한 정제(1:100 내지 1:3 EtOAc/석유 에테르 구배로 용출)는 tert-부틸 6-브로모-4-메틸렌-3,4-디하이드로-1,8-나프티리딘-1(2H)-카복실레이트를 백색 고체로서 제공하였다. MS:(ESI, m/z): 325, 327[M+H]+.
단계 5 . tert-부틸 6'-브로모-2',3'-디하이드로-1'H-스피로[사이클로프로판-1,4'-[1,8]나프티리딘]-1'-카복실레이트
물(7.2mL) 중 수산화칼륨(4.8g, 85.55 mmol) 용액에 Et2O(30mL) 중 2-니트로소프로판아미드(3.76g, 36.83 mmol)의 용액을 첨가하였다. 결과적으로 수득되는 용액을 0℃에서 1시간 동안 교반하였다. 유기 상을 분리하여 Et2O 중 디아조메탄 용액을 수득하였다. THF(30mL) 중 tert-부틸 6-브로모-4-메틸렌-3,4-디하이드로-1,8-나프티리딘-1(2H)-카복실레이트(400 mg, 1.18 mmol)의 용액에 디아조메탄 용액을 0℃에서 첨가한 뒤, THF(3mL) 중 Pd(OAc)2(28mg, 0.12 mmol)의 혼합물을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 추가 3시간 동안 교반하였다. 고체를 여과해 내고, 여과액을 진공 하에 농축하였다. 실리카겔 크로마토그래피에 의한 정제(1:3 EtOAc/석유 에테르로 용출)는 tert-부틸 6'-브로모-2',3'-디하이드로-1'H-스피로[사이클로프로판-1,4'-[1,8]나프티리딘]-1'-카복실레이트를 연황색 고체로서 제공하였다. MS: (ESI, m/z): 339, 341[M+H]+.
단계 6 . 2',3'-디하이드로-1'H-스피로[사이클로프로판-1,4'-[1,8]나프티리딘]-6'-카복실산
자석 교반 막대가 장착된 30-mL 압력 탱크 반응기에 DMF(6mL) 및 물(2mL) 중 tert-부틸 6'-브로모-2',3'-디하이드로-1'H-스피로[사이클로프로판-1,4'-[1,8]나프티리딘]-1'-카복실레이트(140mg, 0.40 mmol), 아세트산나트륨 삼수화물(167mg, 1.23 mmol), 및 Pd(dppf)Cl2-CH2Cl2(65mg, 0.08 mmol)의 혼합물을 넣었다. 반응 혼합물을 50atm의 일산화탄소 대기 하에 120℃에서 16시간 동안 교반하였다. 실온으로 냉각한 후, 반응은 물 20mL을 첨가하여 ??치시켰다. 결과적으로 수득되는 용액을 에틸 아세테이트(3 x 20mL)로 추출하였다. 합한 유기층을 무수 황산나트륨 상에서 건조하고, 여과하고 진공 하에 농축하였다. 역상 크로마토그래피에 의한 정제(컬럼: C18 실리카겔; 이동상 A: 물, B: ACN; 구배: 0% B에서 10분 후 10% B)는 2',3'-디하이드로-1'H-스피로[사이클로프로판-1,4'-[1,8]나프티리딘]-6'-카복실산을 회백색 고체로서 제공하였다. MS:(ESI, m/z): 205[M+H]+.
중간체 30. 3-(tert-부톡시카보닐)-1a,2,3,7b-테트라하이드로-1H-사이클로프로파[c][1,8]나프티리딘-6-카복실산
Figure pct00134
단계 1. 2-(알릴아미노)-5-브로모니코틴알데하이드
2개의 병렬 30 ml 밀봉 튜브에 각각 5-브로모-2-플루오로니코틴알데하이드(1.83g, 9.0 mmol), 알릴아민(1.03g, 18.0 mmol) 및 에탄올(15mL)을 넣었다. 결과적으로 수득되는 용액을 80℃에서 3시간 동안 교반하였다. 실온으로 냉각한 후, 결과적으로 수득되는 용액을 염산(1N) 30mL에 붓고 결과적으로 수득되는 혼합물을 10분 동안 교반한 뒤, 에틸 아세테이트(3 x 30mL)로 추출하였다. 합한 유기층을 무수 황산나트륨 상에서 건조하고, 여과하고 진공 하에 농축하였다. 실리카겔 크로마토그래피에 의한 정제(1:10 EtOAc/석유 에테르로 용출)는 2-(알릴아미노)-5-브로모니코틴알데하이드를 연황색 고체로서 제공하였다. MS:(ESI, m/z): 241, 243[M+H]+.
단계 2. N-알릴-5-브로모-3-비닐피리딘-2-아민
THF(30mL) 중 메틸트리페닐포스포늄 브로마이드(6.22g, 17.42 mmol) 및 tert 부톡시화칼륨(1.96g, 17.42 mmol)의 용액을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 그 다음, THF(5mL) 중 2-(알릴아미노)-5-브로모니코틴알데하이드(2.10g, 87.1 mmol)를 실온에서 적가하였고, 반응 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 반응은 물 20mL를 첨가하여 ??치시키고, DCM(3 x 40)으로 추출하였다. 합한 유기층을 무수 황산나트륨 상에서 건조하고, 여과하고 진공 하에 농축하였다. 실리카겔 크로마토그래피에 의한 정제(1:20 EtOAc/석유 에테르로 용출)는 N-알릴-5-브로모-3-비닐피리딘-2-아민을 연황색 액체로서 제공하였다. MS:(ESI, m/z): 239, 241[M+H]+.
단계 3. tert-부틸 알릴(5-브로모-3-비닐피리딘-2-일)카바메이트
THF(15mL) 중 N-알릴-5-브로모-3-비닐피리딘-2-아민(590mg, 2.47 mmol), 디-tert-부틸 디카보네이트(1.62g, 7.40 mmol), 트리에틸아민(749mg, 7.40 mmol) 및 4-디메틸아미노피리딘(90mg, 0.74 mmol)의 용액을 70℃에서 밤새 교반하였다. 실온으로 냉각한 후, 반응은 물 50mL을 첨가하여 ??치시켰다. 결과적으로 수득되는 혼합물을 에틸 아세테이트(3 x 40mL)로 추출하였다. 합한 유기층을 무수 황산나트륨 상에서 건조하고, 여과하고 진공 하에 농축하였다. 실리카겔 크로마토그래피에 의한 정제(1:30 EtOAc/석유 에테르로 용출)는 tert-부틸 알릴(5-브로모-3-비닐피리딘-2-일)카바메이트를 회백색 고체로서 제공하였다. MS:(ESI, m/z): 339, 341[M+H]+.
단계 4. tert-부틸 6-브로모-1,8-나프티리딘-1(2H)-카복실레이트
DCM(10mL) 중 tert-부틸 알릴(5-브로모-3-비닐피리딘-2-일)카바메이트(600mg, 1.77 mmol) 및 디클로로[1,3-비스(2,4,6-트리메틸페닐)-2-이미다졸리디닐리덴](벤질리덴)(트리사이클로헥실포스핀)루테늄(II)(Grubbs Catalyst™ 제2세대)(75mg, 0.09 mmol)의 용액을 50℃에서 밤새 교반하였다. 실온으로 냉각한 후, 결과적으로 수득되는 혼합물을 진공 하에 농축하였다. 실리카겔 크로마토그래피에 의한 정제(1:20 EtOAc/석유 에테르로 용출)는 tert-부틸 6-브로모-1,8-나프티리딘-1(2H)-카복실레이트를 회백색 고체로서 제공하였다. MS:(ESI, m/z): 311, 313[M+H]+.
단계 5. tert-부틸 6-브로모-1,1a,2,7b-테트라하이드로-3H-사이클로프로파[c][1,8]나프티리딘-3-카복실레이트
물(8mL) 중 수산화칼륨(5.68g, 101.24 mmol) 용액에 Et2O(40 mL) 중 1-메틸-1-니트로소우레아(2.98g, 28.92 mmol)의 용액을 0℃에서 적가하였다. 반응 혼합물을 0℃에서 1시간 동안 교반하였다. 그 다음, 유기 상을 분리하여 Et2O 중 디아조메탄 용액을 수득하였다. THF(15mL) 중 tert-부틸 6-브로모-1,8-나프티리딘-1(2H)-카복실레이트(450mg, 1.45 mmol)의 용액에 Et2O(40mL) 중 디아조메탄 용액을 첨가한 뒤, THF(7mL) 중 Pd(OAc)2(32mg, 0.14 mmol) 용액을 첨가하였다. 결과적으로 수득되는 용액을 실온에서 밤새 교반하였다. 고체를 여과해 내고 여과액을 진공 하에 농축하였다. 실리카겔 크로마토그래피에 의한 정제(1:50 내지 1:20 EtOAc/석유 에테르 구배로 용출)는 tert-부틸 6-브로모-1,1a,2,7b-테트라하이드로-3H-사이클로프로파[c][1,8]나프티리딘-3-카복실레이트를 회백색 고체로서 제공하였다. MS:(ESI, m/z): 325, 327[M+H]+.
단계 6. 3-(tert-부톡시카보닐)-1a,2,3,7b-테트라하이드로-1H-사이클로프로파[c][1,8]나프티리딘-6-카복실산
30-mL 압력 탱크 반응기에 tert-부틸 6-브로모-1,1a,2,7b-테트라하이드로-3H-사이클로프로파[c][1,8]나프티리딘-3-카복실레이트(200mg, 0.62 mmol), Pd(dppf)Cl2(90mg, 0.12 mmol), NaOAc(151mg, 1.85 mmol), DMF(4.5mL) 및 물(1.5 mL)을 넣었다. 반응 혼합물을 50atm의 CO(g) 하에 120℃에서 18시간 동안 교반하였다. 실온으로 냉각한 후, 반응 혼합물을 물 10mL로 희석하였다. 결과적으로 수득되는 혼합물을 에틸 아세테이트(3 x 10mL)로 추출하였다. 합한 유기층을 무수 황산나트륨 상에서 건조하고, 여과하고 진공 하에 농축하였다. 역상 크로마토그래피에 의한 정제(컬럼: C18 실리카겔; 이동상 A: 물(0.1% 포름산), B: ACN; 유속: 50 mL/min; 구배: 0% B에서 30분 후 100% B)는 3-(tert-부톡시카보닐)-1a,2,3,7b-테트라하이드로-1H-사이클로프로파[c][1,8]나프티리딘-6-카복실산을 연황색 고체로서 제공하였다. MS:(ESI, m/z): 291[M+H]+.
중간체 31. 6-(벤질아미노)니코틴산
Figure pct00135
단계 1 . 메틸 6-(벤질아미노)니코티네이트
DMF(10 mL) 중 메틸 6-플루오로피리딘-3-카복실레이트(1g, 6.12 mmol), 페닐메탄아민(1.38g, 12.88 mmol), 및 탄산칼륨(2.67g, 19.32 mmol)의 혼합물을 80℃에서 2시간 동안 교반하였다. 실온으로 냉각한 후, 반응은 물 20mL를 첨가하여 ??치시켰다. 결과적으로 수득되는 혼합물을 에틸 아세테이트(3 x 20mL)로 추출하였다. 합한 유기층을 무수 황산나트륨 상에서 건조하고, 여과하고 진공 하에 농축하였다. 실리카겔 크로마토그래피에 의한 정제(3:10 EtOAc:석유 에테르로 용출)는 메틸 6-(벤질아미노)니코티네이트를 백색 고체로서 제공하였다. MS:(ESI, m/z): 243[M+H]+.
단계 2. 6-(벤질아미노)니코틴산
메틸 6-(벤질아미노)니코티네이트(500mg, 1.86 mmol), 메탄올(20mL), 물(2 mL), 및 NaOH(165mg, 4.13 mmol)의 혼합물을 80℃에서 3시간 동안 교반하였다. 실온으로 냉각한 후, 결과적으로 수득되는 혼합물을 진공 하에 농축하였다. 잔류물은 물 10mL에 용해하였다. 이 용액의 pH 값은 염산(6N)으로 6으로 조정하였다. 고체를 여과 수집하여 6-(벤질아미노)니코틴산을 백색 고체로서 제공하였다. MS:(ESI, m/z): 229[M+H]+.
중간체 32. tert-부틸 9,9-디플루오로-3,7-디아자바이사이클로[3.3.1]노난-3-카복실레이트
Figure pct00136
단계 1 : tert-부틸 7-벤질-9,9-디플루오로-3,7-디아자바이사이클로[3.3.1]노난-3-카복실레이트
CH2Cl2(80mL) 중 tert-부틸 7-벤질-9-옥소-3,7-디아자바이사이클로[3.3.1]노난-3-카복실레이트(5g, 14.94 mmol) 및 DAST(12.2g, 75.69 mmol)의 용액을 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 반응은 50mL의 NaHCO3 포화 수용액을 첨가하여 ??치시켰다. 결과적으로 수득되는 혼합물을 CH2Cl2(100mL x 3)으로 추출하였다. 합한 유기층을 무수 황산나트륨 상에서 건조하고, 여과하고, 진공 하에 농축하였다. 실리카겔 크로마토그래피에 의한 정제(5:1 석유 에테르/EtOAc로 용출)는 700mg의 tert-부틸 7-벤질-9,9-디플루오로-3,7-디아자바이사이클로[3.3.1]노난-3-카복실레이트를 황색 고체로서 제공하였다. MS:(ESI, m/z): 353[M+H]+.
단계 2 : tert-부틸 9,9-디플루오로-3,7-디아자바이사이클로[3.3.1]노난-3-카복실레이트
EtOAc(20mL) 중 tert-부틸 7-벤질-9,9-디플루오로-3,7-디아자바이사이클로[3.3.1]노난-3-카복실레이트(460mg, 1.24 mmol) 및 Pd/C(50mg, 10%)의 혼합물을 수소 대기 하에 50℃에서 2시간 동안 교반하였다. 실온으로 냉각한 후, 고체를 여과해 내고 여과액을 진공 하에 농축하였다. 잔류물은 pre-HPLC(컬럼: XBridge Prep C18 OBD, 19x250 mm; 이동상 A: 물(10mM NH4HCO3), B: ACN; 구배: 20% B에서 7분 후 45% B)로 정제하여 tert-부틸 9,9-디플루오로-3,7-디아자바이사이클로[3.3.1]노난-3-카복실레이트를 연황색 고체로서 제공하였다. MS:(ESI, m/z): 263[M+H]+.
중간체 33. 5-벤질-2-옥사-5,8-디아자스피로[3.5]노난
Figure pct00137
단계 1. 메틸 2-(3-(니트로메틸)옥세탄-3-일아미노)아세테이트
DCM(70mL) 중 옥세탄-3-온(5g, 69.38 mmol), 니트로메탄(5.93g, 97.15 mmol), 및 Et3N(2.1g, 13.28 mmol)의 용액에 DCM(70mL) 중 MsCl(10g, 87.30 mmol)의 용액을 -80℃에서 첨가하였다. 추가 90분 동안 -80℃에서 교반을 지속하였다. 별도로, DCM(300mL) 중 글리신 에틸 에스테르 염산염(19.4g, 139 mmol) 및 Et3N(21g, 139 mmol)의 용액을 실온에서 10분 동안 교반 하에 반응시켰다. 결과적으로 수득되는 용액을 첫번째 반응 혼합물에 -80℃에서 분할 첨가하였다. 첨가 후, 반응 혼합물을 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 반응은 물 100mL를 첨가하여 ??치시키고, 2 x 300mL의 DCM으로 추출하였다. 합한 유기 층을 무수 황산나트륨 상에서 건조하고, 여과하고, 진공 하에 농축하였다. 정제용-HPLC에 의한 정제[컬럼: XBridge Prep C18 OBD, 19x150 mm, 5 μm; 이동상 A: 물(10 mM NH4HCO3), B: ACN; 구배: 10% B에서 30분 후 50% B]는 메틸 2-(3-(니트로메틸)옥세탄-3-일아미노)아세테이트를 황색 오일로서 제공하였다. MS:(ESI, m/z): 205[M+H]+.
단계 2. 2-옥사-5,8-디아자스피로[3.5]노난-7-온
MeOH(50 mL) 중 메틸 2-(3-(니트로메틸)옥세탄-3-일아미노)아세테이트(8.5g, 41.63 mmol) 및 Raney Ni(2g)의 현탁액을 수소 대기 하에 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 고체를 여과해 내고 여과액을 진공 하에 농축하였다. 분취용 HPLC에 의한 정제[컬럼: XBridge Prep C18 OBD, 19x150 mm, 5 μm; 이동상 A: 물(10mM NH4HCO3), B: ACN; 구배: 10% B에서 30분 후 80% B]는 2-옥사-5,8-디아자스피로[3.5]노난-7-온을 적색 고체로서 제공하였다. MS:(ESI, m/z): 143[M+H]+.
단계 3. 5-벤질-2-옥사-5,8-디아자스피로[3.5]노난-7-온
아세토니트릴(200mL) 중 2-옥사-5,8-디아자스피로[3.5]노난-7-온(4g, 28.14 mmol), (브로모메틸)벤젠(12g, 70.16 mmol), Na2CO3(20.9g, 197.18mmol), 및 NaI(10.5g, 70.05 mmol)의 혼합물을 80℃에서 3시간 동안 교반하였다. 실온으로 냉각한 후, 용매를 진공 하에 제거하였다. 잔류물은 물(200mL)로 희석하였다. 결과적으로 수득되는 혼합물을 DCM(2 x 300mL)으로 추출하였다. 합한 유기층을 무수 황산나트륨 상에서 건조하고, 여과하고, 진공 하에 농축하였다. 실리카겔 크로마토그래피에 의한 정제(1:10 MeOH/CH2Cl2로 용출)는 5-벤질-2-옥사-5,8-디아자스피로[3.5]노난-7-온을 황색 고체로서 제공하였다. MS:(ESI, m/z): 233[M+H]+.
단계 4. 5-벤질-2-옥사-5,8-디아자스피로[3.5]노난-7-티온
THF(150mL) 중 5-벤질-2-옥사-5,8-디아자스피로 [3.5]노난-7-온(2.9g, 11.86 mmol) 및 2,4-비스(4-메톡시페닐)-2,4-디티옥소-1,3,2,4-디티아디포스페탄(Lawesson 시약)(2.44g, 6.03 mmol)의 용액을 실온에서 16시간 동안 교반한 뒤, 65℃에서 추가 3시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 그 후 물(100 mL)에 붓고 DCM(2 x 150mL)으로 추출하였다. 합한 유기층을 무수 황산나트륨 상에서 건조하고, 여과하고, 진공 하에 농축하였다. 실리카겔 크로마토그래피에 의한 정제(1:3 EtOAc/석유 에테르로 용출)는 5-벤질-2-옥사-5,8-디아자스피로[3.5]노난-7-티온을 백색 고체로서 제공하였다. MS:(ESI, m/z): 249[M+H]+.
단계 5. 5-벤질-2-옥사-5,8-디아자스피로[3.5]노난
THF(15mL) 및 MeOH(30mL) 중 5-벤질-2-옥사-5,8-디아자스피로[3.5]노난-7-티온(300mg, 1.15 mmol) 및 수소화붕소나트륨(412mg, 11.19 mmol)을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 반응은 물(15 mL)로 ??치시키고 추가 14시간 동안 실온에서 교반하였다. 결과적으로 수득되는 혼합물을 DCM(2 x 50mL)으로 추출하였다. 합한 유기층을 무수 황산나트륨 상에서 건조하고, 여과하고, 진공 하에 농축하였다. 분취용 HPLC에 의한 정제(컬럼: XBridge Prep C18 OBD, 19x150 mm, 5 μm; 이동상 A: 물(10 mM NH4HCO3), B: ACN; 구배: 10% B에서 30분 후 75% B)는 5-벤질-2-옥사-5,8-디아자스피로[3.5]노난을 백색 고체로서 제공하였다. MS:(ESI, m/z): 219[M+H]+.
중간체 34. tert-부틸 2-옥사-5,8-디아자스피로[3.5]노난-8-카복실레이트
Figure pct00138
단계 1. tert-부틸 5-벤질-2-옥사-5,8-디아자스피로[3.5]노난-8-카복실레이트
DCM(4mL) 중 5-벤질-2-옥사-5,8-디아자스피로[3.5]노난, 중간체 31, (200mg, 0.82 mmol), (Boc)2O(200mg, 0.92 mmol), Et3N(185mg, 1.83 mmol), 및 4-디메틸아미노피리딘(11mg, 0.09 mmol)의 용액을 실온에서 2.5시간 동안 교반하였다. 반응은 물(20 mL)을 첨가하여 ??치시키고 EtOAc(3 x 20mL)로 추출하였다. 합한 유기층을 무수 황산나트륨 상에서 건조하고, 여과하고, 진공 하에 농축하였다. 실리카겔 크로마토그래피에 의한 정제(1:4 EtOAc/석유 에테르로 용출)는 tert-부틸 5-벤질-2-옥사-5,8-디아자스피로[3.5]노난-8-카복실레이트를 황색 오일로서 제공하였다. MS:(ESI, m/z): 319[M+H]+.
단계 2. tert-부틸 2-옥사-5,8-디아자스피로[3.5]노난-8-카복실레이트
EtOAc(10mL) 중 tert-부틸 5-벤질-2-옥사-5,8-디아자스피로[3.5]노난-8-카복실레이트(190mg, 0.60 mmol) 및 Pd/C(20mg, 10%)의 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 고체는 여과해 내고, 여과액은 진공 하에 농축하여 tert-부틸 2-옥사-5,8-디아자스피로[3.5]노난-8-카복실레이트를 황색 오일로서 제공하였다. MS: (ESI, m/z): 229[M+H]+.
중간체 35. tert-부틸 N-(4-메톡시피롤리딘-3-일)카바메이트
Figure pct00139
단계 1. 벤질 3-아지도-4-하이드록시피롤리딘-1-카복실레이트
MeOH(60 mL) 및 물(10 mL) 중 벤질 6-옥사-3-아자바이사이클로[3.1.0]헥산-3-카복실레이트(5g, 22.81 mmol), NaN3(3g, 46.15 mmol), NH4Cl(1.23g, 22.99 mmol)의 용액을 65℃에서 16시간 동안 교반하였다. 실온으로 냉각한 후, pH 값은 0.5N NaOH로 7 내지 8로 조정하였다. 결과적으로 수득되는 혼합물을 DCM(2 x 150mL)으로 추출하였다. 합한 유기층을 무수 황산나트륨 상에서 건조하고, 여과하고, 진공 하에 농축하여 벤질 3-아지도-4-하이드록시피롤리딘-1-카복실레이트를 연황색 고체로서 제공하였다. MS:(ESI, m/z): 263[M+H]+.
단계 2. 벤질 3-아지도-4-메톡시피롤리딘-1-카복실레이트
DMF(40mL) 중 벤질 3-아지도-4-하이드록시피롤리딘-1-카복실레이트(4g, 15.25 mmol) 용액에 NaH(1.2g, 오일 중 60% 분산액)을 < 10℃에서 첨가하였다. 결과적으로 수득되는 용액을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 요오도메탄(2.8mL, 44.98 mmol)을 첨가하고 다시 1시간 동안 교반을 지속하였다. 반응은 물(50mL)을 첨가하여 ??치시켰다. 결과적으로 수득되는 혼합물을 Et2O(2 x 50mL)로 추출하였다. 유기층을 합하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조하고, 여과하고, 진공 하에 농축하였다. 실리카겔 크로마토그래피에 의한 정제(1:1 EtOAc/석유 에테르로 용출)하여 벤질 3-아지도-4-메톡시피롤리딘-1-카복실레이트를 무색 오일로서 제공하였다. MS: (ESI, m/z): 277[M+H]+.
단계 3. 벤질 3-아미노-4-메톡시피롤리딘-1-카복실레이트
THF(50mL) 및 물(5mL) 중 벤질 3-아지도-4-메톡시피롤리딘-1-카복실레이트(2 g, 7.24 mmol) 및 PPh3(2.1g, 8.01 mmol)의 용액을 실온에서 1시간 동안 교반한 뒤, 50℃에서 추가 5시간 동안 교반하였다. 실온으로 냉각한 후, 반응은 진공 하에 농축하였다. 분취용 HPLC에 의한 정제[컬럼: XBridge Prep C18 OBD, 19x50 mm, 5 μm; 이동상 A: 물(10 mM NH4HCO3), B: ACN; 구배: 10% B에서 30분 후 80% B]는 벤질 3-아미노-4-메톡시피롤리딘-1-카복실레이트를 무색 오일로서 제공하였다. MS:(ESI, m/z): 251[M+H]+.
단계 4. 벤질 3-((tert-부톡시카보닐)아미노)-4-메톡시피롤리딘-1-카복실레이트
THF(12mL) 및 물(12mL) 중 벤질 3-아미노-4-메톡시피롤리딘-1-카복실레이트(600mg, 2.40 mmol), Et3N(457mg, 4.52 mmol), 및 (Boc)2O(786mg, 3.60 mmol)의 용액을 실온에서 30분 동안 교반하였다. 결과적으로 수득되는 혼합물을 DCM(2 x 30mL)으로 추출하였다. 합한 유기층을 무수 황산나트륨 상에서 건조하고, 여과하고, 진공 하에 농축하였다. 잔류물은 실리카겔 크로마토그래피로 정제(1:1 EtOAc/석유 에테르로 용출)하여 벤질 3-((tert-부톡시카보닐)아미노)-4-메톡시피롤리딘-1-카복실레이트를 백색 고체로서 제공하였다. MS: (ESI, m/z): 351[M+H]+.
단계 5. tert-부틸 N-(4-메톡시피롤리딘-3-일)카바메이트
EtOAc(10mL) 중 벤질 3-((tert-부톡시카보닐)아미노)-4-메톡시피롤리딘-1-카복실레이트(200mg, 0.57 mmol) 및 Pd/C(200mg, 10%)의 혼합물을 수소 대기 하에 실온에서 3시간 동안 교반하였다. 고체를 여과해 내어 EtOAc(3x10mL)로 세척하였다. 여과액은 진공 하에 농축하여 tert-부틸 N-(4-메톡시피롤리딘-3-일)카바메이트를 백색 고체로서 제공하였다. MS: (ESI, m/z): 217[M+H]+.
중간체 36. tert-부틸 ((3S,4S)-4-메톡시피롤리딘-3-일)카바메이트
Figure pct00140
단계 1. 벤질 (3S,4S)-3-아지도-4-하이드록시피롤리딘-1-카복실레이트
벤질 6-옥사-3-아자바이사이클로[3.1.0]헥산-3-카복실레이트(10g, 44.70 mmol) 및 (1R,2R)-(-)-[1,2-사이클로헥산디아미노-N N'-비스(3,5-디-t-부틸살리실리덴)]크롬(III) 염화물(Jacobsen 크롬 촉매)(682mg, 1.08 mmol)의 혼합물에 아지도트리메틸실란(6.52 g, 56.59 mmol)을 30℃에서 첨가하였다. 반응 혼합물을 30℃에서 16시간 동안 교반하였다. 메탄올(30mL) 및 트리플루오로아세트산(0.5mL)을 첨가하였다. 결과적으로 수득되는 용액을 30℃에서 3시간 동안 교반한 뒤, 진공 하에 농축하였다. 잔류물은 100mL의 물로 희석하고 에틸 아세테이트(3 x 100mL)로 추출하였다. 합한 유기층을 무수 황산나트륨 상에서 건조하고, 여과하고, 진공 하에 농축하였다. 실리카겔 크로마토그래피에 의한 정제(1:2 EtOAc/석유 에테르로 용출)는 벤질 (3S,4S)-3-아지도-4-하이드록시피롤리딘-1-카복실레이트를 연황색 오일로서 제공하였다. MS: (ESI, m/z): 263[M+H]+.
단계 2. 벤질 (3S,4S)-3-아지도-4-메톡시피롤리딘-1-카복실레이트
표제 화합물은 벤질 (3S,4S)-3-아지도-4-하이드록시피롤리딘-1-카복실레이트로부터 시작하여 중간체 35, 단계 2의 절차에 따라 제조하였다. MS:(ESI, m/z): 277[M+H]+.
단계 3. 벤질 (3S,4S)-3-아미노-4-메톡시피롤리딘-1-카복실레이트
표제 화합물은 벤질 (3S,4S)-3-아지도-4-메톡시피롤리딘-1-카복실레이트로부터 시작하여 중간체 35, 단계 3의 절차에 따라 제조하였다. MS:(ESI, m/z): 251[M+H]+.
단계 4. 벤질 (3S,4S)-3-((tert-부톡시카보닐)아미노)-4-메톡시피롤리딘-1-카복실레이트
표제 화합물은 벤질 (3S,4S)-3-아미노-4-메톡시피롤리딘-1-카복실레이트로부터 시작하여 중간체 35, 단계 4의 절차에 따라 제조하였다. MS:(ESI, m/z): 351[M+H]+.
단계 5. tert-부틸 ((3S,4S)-4-메톡시피롤리딘-3-일)카바메이트
표제 화합물은 벤질 (3S,4S)-3-((tert-부톡시카보닐)아미노)-4-메톡시피롤리딘-1-카복실레이트로부터 시작하여 중간체 35, 단계 5의 절차에 따라 제조하였다. MS:(ESI, m/z): 217[M+H]+.
중간체 37. tert-부틸 3-(트리플루오로메틸)피페리딘-3-일카바메이트
Figure pct00141
단계 1 . 1-벤질 3-메틸 3-(트리플루오로메틸)피페리딘-1,3-디카복실레이트
THF(60mL) 중 1-벤질 3-메틸 피페리딘-1,3-디카복실레이트(2.0g, 7.14 mmol)의 용액에 LDA(THF 중 2.0M)(10.8mL, 21.66 mmol)를 -78℃에서 적가하였다. 용액을 -78℃에서 30분 동안 교반한 후, S-(트리플루오로메틸)디벤조티오페늄 트리플루오로메탄설포네이트(4.35g, 10.81 mmol)를 첨가하였다. 첨가 후, 결과적으로 수득되는 용액을 교반 하에 추가 2시간 동안 -40℃에서 반응시켰다. 반응은 그 다음 NH4Cl의 포화 수용액 30mL을 첨가하여 ??치시켰다. 결과적으로 수득되는 혼합물을 EtOAc(3 x 70mL)로 추출하였다. 합한 유기층을 무수 황산나트륨 상에서 건조하고, 여과하고, 진공 하에 농축하였다. 실리카겔 크로마토그래피에 의한 정제(1:4 EtOAc/석유 에테르로 용출)는 1-벤질 3-메틸 3-(트리플루오로메틸)피페리딘-1,3-디카복실레이트를 황색 오일로서 제공하였다. MS:(ESI, m/z): 346[M+H]+.
단계 2 . 1-((벤질옥시)카보닐)-3-(트리플루오로메틸)피페리딘-3-카복실산
MeOH(10mL) 및 수성 1N NaOH(2.7mL, 2.70 mmol) 중 1-벤질 3-메틸 3-(트리플루오로메틸)피페리딘-1,3-디카복실레이트(310mg, 0.83 mmol)의 용액을 50℃에서 2시간 동안 교반한 뒤, 진공 하에 농축하였다. 잔류물은 물 5mL로 희석하였다. 용액의 pH 값은 6N HCl로 3 내지 4로 조정하였다. 고체를 여과 수집하여 1-((벤질옥시)카보닐)-3-(트리플루오로메틸)피페리딘-3-카복실산을 황색 고체로서 제공하였다. MS:(ESI, m/z): 332[M+H]+.
단계 3 . 벤질 3-((tert-부톡시카보닐)아미노)-3-(트리플루오로메틸)피페리딘-1-카복실레이트
톨루엔(8mL) 중 1-((벤질옥시)카보닐)-3-(트리플루오로메틸)피페리딘-3-카복실산(250mg, 0.76 mmol), Et3N(229mg, 2.26 mmol), 및 DPPA(415mg, 1.51 mmol)의 용액을 90℃에서 2시간 동안 교반하였다. tert-부탄올(279mg, 3.76 mmol)을 첨가하고, 반응 혼합물을 90℃에서 추가 16시간 동안 교반하였다. 실온으로 냉각한 후, 반응은 물(20mL)을 첨가하여 ??치시키고, EtOAc(20mL x 3)로 추출하였다. 합한 유기층을 무수 황산나트륨 상에서 건조하고, 여과하고, 진공 하에 농축하였다. 실리카겔 크로마토그래피에 의한 정제(1:10 내지 1:3 EtOAc/석유 에테르로 용출)는 벤질 3-((tert-부톡시카보닐)아미노)-3-(트리플루오로메틸)피페리딘-1-카복실레이트를 황색 고체로서 제공하였다. MS:(ESI, m/z): 403[M+H]+.
단계 4 . tert-부틸 (3-(트리플루오로메틸)피페리딘-3-일)카바메이트
EtOAc(5mL) 중 벤질 3-((tert-부톡시카보닐)아미노)-3-(트리플루오로메틸)피페리딘-1-카복실레이트(90mg, 0.21 mmol) 및 Pd/C(10mg, 10%)의 혼합물을 수소 대기 하에 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 고체는 여과해 내고 여과액은 진공 하에 농축하여 tert-부틸 (3-(트리플루오로메틸)피페리딘-3-일)카바메이트를 황색 오일로서 제공하였다. MS:(ESI, m/z): 269[M+H]+ .
중간체 38. tert-부틸 (4-(트리플루오로메톡시)피롤리딘-3-일)카바메이트
Figure pct00142
단계 1. 벤질 3-아지도-4-하이드록시피롤리딘-1-카복실레이트
MeOH(60mL) 및 물(10mL) 중 벤질 6-옥사-3-아자바이사이클로[3.1.0]헥산-3-카복실레이트(5g, 22.81 mmol), NaN3(3g, 46.15 mmol), NH4Cl(1.23g, 22.99 mmol)의 용액을 65℃에서 16시간 동안 교반하였다. 실온으로 냉각한 후, pH 값은 수성 0.5N NaOH로 7 내지 8로 조정하였다. 결과적으로 수득되는 혼합물을 DCM(2 x 150 mL)으로 추출하였다. 합한 유기층을 무수 황산나트륨 상에서 건조하고, 여과하고, 진공 하에 농축하여 벤질 3-아지도-4-하이드록시피롤리딘-1-카복실레이트를 연황색 고체로서 제공하였다. MS:(ESI, m/z): 263[M+H]+.
단계 2. 벤질 3-((tert-부톡시카보닐)아미노)-4-하이드록시피롤리딘-1-카복실레이트
THF(228 mL) 중 벤질 3-아지도-4-하이드록시피롤리딘-1-카복실레이트(6g, 22.88 mmol), 수성 1N NaOH(46mL, 46 mmol), PMe3(THF 중 1M)(70mL, 70 mmol), 및 (Boc)2O(15.0g, 68.73 mmol)의 용액을 실온에서 3시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 물 50mL로 희석하고 CH2Cl2(3 x 200 mL)로 추출하였다. 합한 유기층을 무수 Na2SO4 상에서 건조하고, 여과하고, 진공 하에 농축하였다. 역상 크로마토그래피에 의한 정제(컬럼: C18 실리카겔; 이동상 A: 물(10 mM NH4HCO3), B: ACN; 유속: 50 mL/min; 구배: 0% B에서 40분 후 70% B)는 벤질 3-((tert-부톡시카보닐)아미노)-4-하이드록시피롤리딘-1-카복실레이트를 백색 고체로서 제공하였다. MS:(ESI, m/z): 337[M+H]+.
단계 3. 벤질 3-((tert-부톡시카보닐)아미노)-4-(트리플루오로메톡시)피롤리딘-1-카복실레이트
EtOAc(14mL) 중 벤질 3-((tert-부톡시카보닐)아미노)-4-하이드록시피롤리딘-1-카복실레이트(1g, 2.97 mmol), Selectfluor®(5.26g, 14.85 mmol), AgOTf(7.6g, 29.7 mmol), KF(1.72g, 29.61 mmol), 2-플루오로피리딘(2.88g, 29.66 mmol) 및 TMS-CF3(4.22g, 29.68 mmol)의 용액을 실온에서 밤새 교반하였다. 고체를 여과해 내고 CH2Cl2(3 x 50mL)으로 세척하였다. 합한 여과액은 진공 하에 농축하고 역상 크로마토그래피로 정제(컬럼: C18 실리카겔; 이동상 A: 물 (10 mM NH4HCO3), B: ACN; 유속: 50 mL/min; 구배: 0% B에서 40분 후 80% B)하여 벤질 3-((tert-부톡시카보닐)아미노)-4-(트리플루오로메톡시)피롤리딘-1-카복실레이트를 황색 오일로서 제공하였다. MS:(ESI, m/z): 405[M+H]+.
단계 4. tert-부틸 (4-(트리플루오로메톡시)피롤리딘-3-일)카바메이트
EtOAc(10 mL) 중 벤질 3-((tert-부톡시카보닐)아미노)-4-(트리플루오로메톡시)피롤리딘-1-카복실레이트(190mg, 0.47 mmol) 및 Pd/C(20mg, 10%)의 혼합물을 수소 대기 하에 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 고체는 여과해 내고 여과액은 진공 하에 농축하여 tert-부틸 (4-(트리플루오로메톡시)피롤리딘-3-일)카바메이트를 황색 오일로서 제공하였다. MS:(ESI, m/z): 271[M+H]+.
중간체 39. 4-(tert-부틸디메틸실릴옥시)피페리딘
Figure pct00143
단계 1. 1-벤질-4-(tert-부틸디메틸실릴옥시)피페리딘
DCM(20mL) 중 1-벤질피페리딘-4-올(1g, 5.23 mmol), 이미다졸(712mg, 10.46 mmol), 및 tert-부틸디메틸실릴 클로라이드(867mg, 5.75 mmol)의 용액을 실온에서 3시간 동안 교반한 뒤, 물 20mL로 희석하였다. 결과적으로 수득되는 혼합물을 DCM(3 x 20mL)으로 추출하였다. 합한 유기층을 무수 황산나트륨 상에서 건조하고, 여과하고, 진공 하에 농축하였다. 실리카겔 크로마토그래피에 의한 정제(1:3 EtOAc/석유 에테르로 용출)는 1-벤질-4-(tert-부틸디메틸실릴옥시)피페리딘을 무색 오일로서 제공하였다. MS:(ESI, m/z): 306[M+H]+.
단계 2 . 4-(tert-부틸디메틸실릴옥시)피페리딘
EtOAc(20 mL) 중 1-벤질-4-(tert-부틸디메틸실릴옥시)피페리딘(500mg, 1.64 mmol) 및 Pd/C(50mg, 10%)의 혼합물을 수소 대기 하에 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 고체는 여과해 내고, 여과액은 진공 하에 농축하여 4-(tert-부틸디메틸실릴옥시)피페리딘을 무색 오일로서 제공하였다. MS:(ESI, m/z): 216[M+H]+.
중간체 40. 3-((tert-부틸디메틸실릴)옥시)-3-메틸피페리딘
Figure pct00144
DCM(20 mL) 중 3-메틸피페리딘-3-올(500mg, 3.91 mmol), tert-부틸디메틸실릴 클로라이드(497mg, 3.30 mmol), 및 Et3N(837mg, 8.27 mmol)의 용액을 실온에서 24시간 동안 교반하였다. 반응은 물 50mL을 첨가하여 ??치시켰다. 결과적으로 수득되는 혼합물을 DCM(3 x 40mL)으로 추출하였다. 합한 유기층을 무수 황산나트륨 상에서 건조하고, 여과하고, 진공 하에 농축하였다. 실리카겔 크로마토그래피에 의한 정제(1:20 내지 1:5 EtOAc/석유 에테르 구배로 용출)는 3-((tert-부틸디메틸실릴)옥시)-3-메틸피페리딘을 무색 오일로서 제공하였다. MS:(ESI, m/z): 230[M+H]+.
중간체 41. tert-부틸 7-하이드록시-5-옥사-2-아자스피로[3.4]옥탄-2-카복실레이트
Figure pct00145
단계 1. tert-부틸 3-(2-에톡시-2-옥소에틸리덴)아제티딘-1-카복실레이트
THF(60mL) 중 에틸 2-(디에톡시포스포릴)아세테이트(26.2g, 116.86 mmol)의 용액에 NaH(4.68g, 117.01 mmol, 오일 중 60% 분산액)을 0℃에서 분할 첨가하였다. 결과적으로 수득되는 용액을 실온에서 30분 동안 교반하였다. 반응 혼합물에 tert-부틸 3-옥소아제티딘-1-카복실레이트(10g, 58.41 mmol)를 0℃에서 교반 하에 첨가하였다. 결과적으로 수득되는 용액을 실온에서 추가 30분 동안 교반하였다. 반응은 그 다음 물/얼음 혼합물 30mL을 첨가하여 ??치시켰다. 결과적으로 수득되는 용액을 DCM(3 x 40mL)으로 추출하였다. 합한 유기층을 무수 Na2SO4 상에서 건조하고, 여과하고 진공 하에 농축하였다. 실리카겔 크로마토그래피에 의한 정제(1:5 EtOAc/석유 에테르로 용출)는 tert-부틸 3-(2-에톡시-2-옥소에틸리덴)아제티딘-1-카복실레이트를 황색 오일로서 제공하였다. MS:(ESI, m/z): 242[M+H]+.
단계 2: 2-(tert-부틸) 8-에틸 7-옥소-5-옥사-2-아자스피로[3.4]옥탄-2,8-디카복실레이트
Et2O(20mL) 중 NaH(1.2g, 30.00 mmol, 오일 중 60% 분산액) 용액에 메틸 2-하이드록시아세테이트(2.69g, 29.86 mmol)를 0℃에서 첨가하였다. 결과적으로 수득되는 용액을 실온에서 30분 동안 교반한 뒤, 진공 하에 농축하였다. 잔류물은 20mL의 DMSO로 희석하고 tert-부틸 3-(2-에톡시-2-옥소에틸리덴)아제티딘-1-카복실레이트(6g, 24.87 mmol)를 첨가하였다. 결과적으로 수득되는 용액을 실온에서 밤새 교반하였다. 이 용액의 pH 값은 염산(1N)으로 4 내지 5로 조정하였다. 결과적으로 수득되는 혼합물을 Et2O(4 x 20 mL)로 추출하였다. 합한 유기층을 무수 Na2SO4 상에서 건조하고, 여과하고 진공 하에 농축하였다. 실리카겔 크로마토그래피에 의한 정제(1:10 내지 1:5 EtOAc/석유 에테르로 용출)는 2-(tert-부틸) 8-에틸 7-옥소-5-옥사-2-아자스피로[3.4]옥탄-2,8-디카복실레이트를 연황색 고체로서 제공하였다. MS:(ESI, m/z): 300[M+H]+.
단계 3. tert-부틸 7-옥소-5-옥사-2-아자스피로[3.4]옥탄-2-카복실레이트
DMSO/물(10:1, 20 mL) 중 2-(tert-부틸) 8-에틸 7-옥소-5-옥사-2-아자스피로[3.4]옥탄-2,8-디카복실레이트(4g, 13.4 mmol) 및 NaCl(1.33g, 22.76 mmol)의 용액을 120℃에서 2시간 동안 교반하였다. 실온으로 냉각한 후, 반응은 물 20mL로 ??치시켰다. 결과적으로 수득되는 혼합물을 Et2O(4 x 20 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 무수 Na2SO4 상에서 건조하고, 여과하고 진공 하에 농축하였다. 실리카겔 크로마토그래피에 의한 정제(1:3 EtOAc/석유 에테르로 용출)는 tert-부틸 7-옥소-5-옥사-2-아자스피로[3.4]옥탄-2-카복실레이트를 백색 고체로서 제공하였다. MS:(ESI, m/z): 228[M+H]+.
단계 4. tert-부틸 7-하이드록시-5-옥사-2-아자스피로[3.4]옥탄-2-카복실레이트
THF(8mL) 중 tert-부틸 7-옥소-5-옥사-2-아자스피로[3.4]옥탄-2-카복실레이트(1.1g, 4.84 mmol)의 용액에 NaH(276mg, 7.49 mmol)을 0℃에서 분할 첨가하였다. 결과적으로 수득되는 혼합물을 실온에서 30분 동안 교반하였다. 반응은 50mL의 물/얼음 혼합물로 ??치시켰다. 결과적으로 수득되는 혼합물을 에틸 아세테이트(3 x 50 mL)로 추출하였다. 합한 유기층을 무수 Na2SO4 상에서 건조하고, 여과하고 진공 하에 농축하였다. 역상 크로마토그래피에 의해 정제[컬럼: C18 실리카겔; 이동상 A: 물(0.5% TFA), B: ACN; 구배: 0%에서부터 50% B까지, 35분 넘게]는 tert-부틸 7-하이드록시-5-옥사-2-아자스피로[3.4]옥탄-2-카복실레이트를 황색 오일로서 제공하였다. MS:(ESI, m/z): 230[M+H]+.
중간체 42. 벤질 (R)-(7-클로로-3,4-디하이드로-2H-피라노[3,2-c]피리딘-3-일)카바메이트
Figure pct00146
단계 1. (4,6-디클로로피리딘-3-일)메탄올
질소의 불활성 대기로 퍼지되어 유지된 500-mL 3구 둥근 바닥 플라스크에 4,6-디클로로니코틴알데하이드(8g, 43.18 mmol) 및 에탄올(200 mL)을 넣었다. NaBH4(5.2g, 141.21 mmol)을 0℃에서 분할 첨가하였다. 그 다음, 결과적으로 수득되는 용액을 25℃에서 2시간 동안 교반하였다. 반응은 그 다음 물(200mL)을 첨가하여 ??치시켰다. 결과적으로 수득되는 혼합물을 DCM(3 x 300mL)으로 추출하고 유기층을 합하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조하고, 여과하고, 진공 하에 농축하였다. 잔류물을 실리카겔 크로마토그래피로 정제(1:10 에틸 아세테이트/석유 에테르로 용출)하여 ((4,6-디클로로피리딘-3-일)메탄올을 무색 오일로서 제공하였다. MS: (ESI, m/z): 178,180[M+H]+.
단계 2. 5-(브로모메틸)-2,4-디클로로피리딘
질소의 불활성 대기로 퍼지되어 유지된 250-mL 3구 둥근 바닥 플라스크에 (4,6-디클로로피리딘-3-일)메탄올(5g, 26.68 mmol), DCM(100mL) 및 PBr3(7.7g, 28.45 mmol)을 넣었다. 결과적으로 수득되는 용액을 오일조에서 40℃에서 30분 동안 교반하였다. 25℃로 냉각한 후, 반응은 물(120mL)을 첨가하여 ??치시켰다. 결과적으로 수득되는 혼합물을 DCM(2 x 150 mL)으로 추출하고 유기층을 합하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조하고, 여과하고, 진공 하에 농축하였다. 잔류물을 실리카겔 크로마토그래피로 정제(1:30 에틸 아세테이트/석유 에테르로 용출)하여 5-(브로모메틸)-2,4-디클로로피리딘을 무색 오일로서 제공하였다. MS:(ESI, m/z): 240, 242, 244[M+H]+.
단계 3. (2R,5S)-2-((4,6-디클로로피리딘-3-일)메틸)-5-이소프로필-3,6-디메톡시-2,5-디하이드로피라진
질소의 불활성 대기로 퍼지되어 유지된 500-mL 3구 둥근 바닥 플라스크에 (2S)-3,6-디메톡시-2-(프로판-2-일)-2,5-디하이드로피라진(3g, 15.47 mmol) 및 THF(200 mL)를 넣었다. n-헥산 중 n-BuLi 용액(2.5M)(9.8mL, 24.5 mmol)을 액체 질소조 중에서 -80℃에서 첨가하였다. 결과적으로 수득되는 용액을 액체 질소조 중에서 -80℃에서 30분 동안 교반하였다. 그 다음, THF(10mL) 중 5-(브로모메틸)-2,4-디클로로피리딘(4.7g, 18.53 mmol)의 용액을 첨가하였다. 결과적으로 수득되는 용액을 액체 질소조 중에서 온도를 -80℃로 유지시키면서 추가 1시간 동안 교반 하에 반응시켰다. 반응은 그 다음 염화암모늄(포화 수용액) 120mL를 첨가하여 ??치시켰다. 결과적으로 수득되는 혼합물을 DCM(2 x 150mL)로 추출하였고, 유기층을 합하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조하고, 여과하고, 진공 하에 농축하였다. 잔류물을 실리카겔 크로마토그래피로 정제(1:10 에틸 아세테이트/석유 에테르로 용출)하여 (2R,5S)-2-[(4,6-디클로로피리딘-3-일)메틸]-3,6-디메톡시-5-(프로판-2-일)-2,5-디하이드로피라진을 백색 고체로서 제공하였다. MS:(ESI, m/z): 344, 346[M+H]+.
단계 4. 메틸 (2R)-2-아미노-3-(4,6-디클로로피리딘-3-일)프로파노에이트
250-mL 둥근 바닥 플라스크에 (2R,5S)-2-[(4,6-디클로로피리딘-3-일)메틸]-3,6-디메톡시-5-(프로판-2-일)-2,5-디하이드로피라진(3.5g, 9.66 mmol), 염산(0.3M)(70mL) 및 ACN(80mL)을 넣었다. 결과적으로 수득되는 용액을 25℃에서 2시간 동안 교반하였다. 반응은 그 다음 중탄산나트륨(포화 수용액) 100mL를 첨가하여 ??치시켰다. 결과적으로 수득되는 혼합물을 2 x 150mL의 DCM으로 추출하였고, 유기 층을 합하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조하고, 여과하고, 진공 하에 농축하여 메틸 (2R)-2-아미노-3-(4,6-디클로로피리딘-3-일)프로파노에이트를 무색 오일로서 제공하였다. MS:(ESI, m/z): 249, 251[M+H]+.
단계 5. (2R)-2-아미노-3-(4,6-디클로로피리딘-3-일)프로판-1-올
250-mL 둥근 바닥 플라스크에 메틸 (2R)-2-아미노-3-(4,6-디클로로피리딘-3-일)프로파노에이트(1.5g, 5.72 mmol) 및 메탄올(50mL)을 넣었다. NaBH4(690mg, 18.24 mmol)을 0℃에서 분할 첨가하였다. 결과적으로 수득되는 용액을 25℃에서 3시간 동안 교반하였다. 반응은 그 다음 물(20mL)을 첨가하여 ??치시켰다. 결과적으로 수득되는 혼합물을 DCM(2 x 50mL)으로 추출하였고, 유기층을 합하여, 무수 황산나트륨 상에서 건조하고, 여과하고, 진공 하에 농축하였다. 잔류물을 실리카겔 크로마토그래피로 정제(1:10 메탄올/DCM으로 용출)하여 (2R)-2-아미노-3-(4,6-디클로로피리딘-3-일)프로판-1-올을 백색 고체로서 제공하였다. MS:(ESI, m/z): 221, 223 [M+H]+.
단계 6. (R)-7-클로로-3,4-디하이드로-2H-피라노[3,2-c]피리딘-3-아민
질소의 불활성 대기로 퍼지되어 유지된 50-mL 둥근 바닥 플라스크에 (2R)-2-아미노-3-(4,6-디클로로피리딘-3-일)프로판-1-올(1g, 4.30 mmo), 수소화나트륨(271mg, 6.78 mmol, 60%) 및 DMSO(10mL)를 넣었다. 결과적으로 수득되는 용액을 오일조에서 50℃에서 16시간 동안 교반하였다. 25℃로 냉각한 후, 반응은 물(20mL)을 첨가하여 ??치시켰다. 결과적으로 수득되는 혼합물을 DCM(2 x 30mL)으로 추출하였고, 유기층을 합하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조하고, 여과하고, 진공 하에 농축하였다. 잔류물을 역상 크로마토그래피에 의해 정제하였다(컬럼: C18 실리카겔; 이동상 A: 물(0.1% 포름산), B: ACN; 유속: 50 mL/min; 구배: 0% B에서 30분 후 30% B). 수집된 분획을 진공 하에 농축하여 (R)-7-클로로-3,4-디하이드로-2H-피라노[3,2-c]피리딘-3-아민을 백색 고체로서 제공하였다. MS:(ESI, m/z): 185, 187[M+H]+.
단계 7. 벤질 (R)-(7-클로로-3,4-디하이드로-2H-피라노[3,2-c]피리딘-3-일)카바메이트
50-mL 둥근 바닥 플라스크에 (R)-7-클로로-3,4-디하이드로-2H-피라노[3,2-c]피리딘-3-아민(500mg, 2.57 mmol, 에틸 아세테이트(15mL, 153.23 mmol), 물(15mL), 벤질 클로로포르메이트(558mg, 3.27 mmol) 및 탄산칼륨(751mg, 5.43 mmol)을 넣었다. 결과적으로 수득되는 혼합물을 25℃에서 30분 동안 교반하였다. 결과적으로 수득되는 혼합물을 3 x 20mL의 에틸 아세테이트로 추출하였다. 유기층을 합하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조하고, 여과하고, 진공 하에 농축하였다. 잔류물을 실리카겔 크로마토그래피로 정제(1:1 에틸 아세테이트/석유 에테르로 용출)하여 벤질 (R)-(7-클로로-3,4-디하이드로-2H-피라노[3,2-c]피리딘-3-일)카바메이트를 백색 고체로서 제공하였다. MS: (ESI, m/z): 319, 321[M+H]+.
중간체 43. 벤질 (R)-(7-클로로-3,4-디하이드로-2H-피라노[2,3-b]피리딘-3-일)카바메이트
Figure pct00147
단계 1. 3-(브로모메틸)-2,6-디클로로피리딘
질소의 불활성 대기로 퍼지되어 유지된 500-mL 3구 둥근 바닥 플라스크에 (2,6-디클로로피리딘-3-일)메탄올(10g, 56.17 mmol), DCM(200mL) 및 PBr3(15.3g, 56.52 mmol)을 넣었다. 결과적으로 수득되는 용액을 오일조에서 40℃에서 30분 동안 교반하였다. 용액의 pH 값은 NH4HCO3(포화 수용액)으로 7로 조정하였다. 결과적으로 수득되는 혼합물을 3 x 200mL의 DCM으로 추출하였다. 유기 층을 합하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조하고, 여과하고, 진공 하에 농축하였다. 잔류물을 실리카겔 크로마토그래피로 정제(1:10 내지 1:5 에틸 아세테이트/석유 에테르로 용출)하여 3-(브로모메틸)-2,6-디클로로피리딘을 회백색 고체로서 제공하였다. MS: (ESI, m/z): 240, 242, 244[M+H]+.
단계 2. (2R,5S)-2-((2,6-디클로로피리딘-3-일)메틸)-5-이소프로필-3,6-디메톡시-2,5-디하이드로피라진
질소의 불활성 대기로 퍼지되어 유지된 2개의 250-mL 3구 둥근 바닥 플라스크에 (2S)-3,6-디메톡시-2-(프로판-2-일)-2,5-디하이드로피라진(2g, 10.86 mmol) 및 THF(15mL)를 넣었다. 그 다음, 부틸리튬(2.5M)(6.5mL, 16.25 mmol)을 -78℃에서 첨가하였다. 결과적으로 수득되는 용액을 30분 동안 교반하였다. 여기에 3-(브로모메틸)-2,6-디클로로피리딘(2.62g, 10.88 mmol)을 첨가하였다. 결과적으로 수득되는 용액을 -78℃에서 추가 1시간 동안 교반하였다. 반응은 그 다음 5mL의 NH4HCO3(포화됨)을 첨가하여 ??치시키고, 혼합물을 10mL의 H2O로 희석하였다. 결과적으로 수득되는 두 배취의 혼합물을 합하여 3 x 50mL의 에틸 아세테이트로 추출하였다. 유기층을 합하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조하고, 여과하고, 진공 하에 농축하였다. 잔류물을 실리카겔 크로마토그래피로 정제(1/5 에틸 아세테이트/석유 에테르로 용출)하여 (2R,5S)-2-((2,6-디클로로피리딘-3-일)메틸)-5-이소프로필-3,6-디메톡시-2,5-디하이드로피라진을 무색 오일로서 제공하였다. MS:(ESI, m/z): 344, 346[M+H]+.
단계 3. 메틸 (R)-2-아미노-3-(2,6-디클로로피리딘-3-일)프로파노에이트
500-mL 둥근 바닥 플라스크에 (2R,5S)-2-((2,6-디클로로피리딘-3-일)메틸)-5-이소프로필-3,6-디메톡시-2,5-디하이드로피라진(5.4g, 16.35 mmol), 아세토니트릴(100mL) 및 염산(0.3N)(157 mL)을 넣었다. 결과적으로 수득되는 용액을 24℃에서 1시간 동안 교반하였다. 용매는 진공 하에 제거하였고 잔류물을 3 x 100mL의 DCM으로 추출하였다. 유기층을 합하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조하고, 여과하고, 진공 하에 농축하였다. 잔류물을 실리카겔 크로마토그래피로 정제(1:5 내지 1:1 에틸 아세테이트/석유 에테르로 용출)하여 메틸 (R)-2-아미노-3-(2,6-디클로로피리딘-3-일)프로파노에이트를 회백색 고체로서 제공하였다. MS:(ESI, m/z): 249, 251[M+H]+.
단계 4. (R)-2-아미노-3-(2,6-디클로로피리딘-3-일)프로판-1-올
250-mL 둥근 바닥 플라스크에 메틸 (R)-2-아미노-3-(2,6-디클로로피리딘-3-일)프로파노에이트(3.2g, 12.85 mmol), 메탄올(15mL), THF(60mL) 및 NaBH4(1.46g, 39.65 mmol)을 넣었다. 결과적으로 수득되는 용액을 24℃에서 2시간 동안 교반하였다. 반응은 물 5mL을 첨가하여 ??치시켰다. 용매는 진공 하에 제거하였다. 잔류물을 물 50mL로 희석하였다. 결과적으로 수득되는 혼합물을 3 x 50mL의 에틸 아세테이트로 추출하였다. 유기층을 합하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조하고, 여과하고, 진공 하에 농축하였다. 잔류물을 실리카겔 크로마토그래피로 정제(1:20 메탄올/DCM으로 용출)하여 (R)-2-아미노-3-(2,6-디클로로피리딘-3-일)프로판-1-올을 회백색 고체로서 제공하였다. MS:(ESI, m/z): 221, 223[M+H]+.
단계 5. (R)-7-클로로-3,4-디하이드로-2H-피라노[2,3-b]피리딘-3-아민
수소 벌룬이 장착된 250-mL 둥근 바닥 플라스크에 (R)-2-아미노-3-(2,6-디클로로피리딘-3-일)프로판-1-올(2.6g, 11.76 mmol) 및 DMSO(30mL)를 넣었다. 그 다음, 수소화나트륨(706mg, 29.42 mmol, 60%)을 0℃에서 첨가하였다. 결과적으로 수득되는 용액을 24℃에서 30분 동안 교반한 다음, 50℃에서 밤새 교반하였다. 25℃로 냉각한 후, 반응은 물 60mL을 첨가하여 ??치시켰다. 결과적으로 수득되는 혼합물을 3 x 60mL의 에틸 아세테이트로 추출하였다. 유기 층을 합하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조하고, 여과하고, 진공 하에 농축하였다. 잔류물을 역상 크로마토그래피로 정제(컬럼: C18 실리카겔; 이동상 A: 물(10 mM NH4HCO3), B: ACN; 유속: 50 mL/min; 구배: 0% B에서 30분 후 30% B)하였다. 수집한 분획을 진공 하에 농축하여 (R)-7-클로로-3,4-디하이드로-2H-피라노[2,3-b]피리딘-3-아민을 회백색 고체로서 제공하였다. MS:(ESI, m/z): 185, 187[M+H]+.
단계 6. 벤질 (R)-(7-클로로-3,4-디하이드로-2H-피라노[2,3-b]피리딘-3-일)카바메이트
100-mL 둥근 바닥 플라스크에 (R)-7-클로로-3,4-디하이드로-2H-피라노[2,3-b]피리딘-3-아민(1.3g, 6.34 mmol), 에틸 아세테이트(15 mL), 물(10mL), 탄산칼륨(1.95g, 14.11 mmol) 및 벤질 클로로포르메이트(1.44g, 8.44 mmol)를 넣었다. 결과적으로 수득되는 용액을 25℃에서 2시간 동안 교반하였다. 반응은 그 다음 물 30mL을 첨가하여 ??치시켰다. 결과적으로 수득되는 혼합물을 3 x 30mL의 에틸 아세테이트로 추출하였고, 유기 층을 합하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조하고, 여과하고, 진공 하에 농축하였다. 잔류물을 석유 에테르로부터 재결정화하여 정제하였다. 고체를 여과 수집하여 벤질 (R)-(7-클로로-3,4-디하이드로-2H-피라노[2,3-b]피리딘-3-일)카바메이트를 백색 고체로서 제공하였다. MS:(ESI, m/z): 319, 321[M+H]+.
중간체 44. tert-부틸 4-[(3R)-3-[[(벤질옥시)카보닐]아미노]-3,4-디하이드로-2H-1-벤조피란-7-일]-4-플루오로피페리딘-1-카복실레이트
Figure pct00148
단계 1. 7-브로모-4-메틸-3-니트로-3,4-디하이드로-2H-1-벤조피란
THF(30mL) 중 7-브로모-3-니트로-2H-크로멘(2.2 g, 8.59 mmol)의 용액에 CH3MgBr(THF 중 1M)(13mL, 13.00 mmol)을 -78℃에서 첨가하였다. 결과적으로 수득되는 용액을 -78℃에서 20분 동안 교반하였다. 반응은 그 다음 20mL의 포화 NH4Cl 수용액을 첨가하여 ??치시켰다. 결과적으로 수득되는 혼합물을 3 x 50mL의 에틸 아세테이트로 추출하였다. 유기층을 합하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조하고, 여과하고, 진공 하에 농축하였다. 잔류물을 실리카겔 크로마토그래피로 정제(3:1 석유 에테르/에틸 아세테이트로 용출)하여 7-브로모-4-메틸-3-니트로-3,4-디하이드로-2H-1-벤조피란을 황색 오일로서 제공하였다. GCMS: (ESI, m/z): 271, 273[M+H]+.
단계 2 . 7-브로모-4-메틸-3,4-디하이드로-2H-1-벤조피란-3-아민
THF(40mL) 중 BH3-THF(1M)(40mL, 40.00 mmol) 및 NaBH4(1.26g, 33.30 mmol)의 용액에 7-브로모-4-메틸-3-니트로-3,4-디하이드로-2H-1-벤조피란(900mg, 3.31 mmol)을 첨가하였다. 결과적으로 수득되는 혼합물을 밀봉 튜브 중에서 75℃에서 16시간 동안 교반하였다. 그 다음, 메탄올(40mL)을 첨가하였고, 반응 혼합물을 80℃에서 6시간 동안 교반하였다. 25℃로 냉각한 후, 용매를 진공 하에 제거하였다. 잔류물은 50mL의 얼음/물로 희석하였다. 결과적으로 수득되는 혼합물을 3 x 50의 에틸 아세테이트로 추출하였다. 유기층을 합하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조하고, 여과하고, 진공 하에 농축하였다. 잔류물을 역상 크로마토그래피로 정제[컬럼: C18 실리카겔; 이동상 A: 물(0.05% TFA), B: ACN; 구배: 0% B에서부터 40%까지, 45분 넘게]하여 7-브로모-4-메틸-3,4-디하이드로-2H-1-벤조피란-3-아민을 백색 고체로서 제공하였다. MS:(ESI, m/z): 242, 244[M+H]+.
단계 3 . 벤질 N-(7-브로모-4-메틸-3,4-디하이드로-2H-1-벤조피란-3-일)카바메이트
에틸 아세테이트(8mL) 중 7-브로모-4-메틸-3,4-디하이드로-2H-1-벤조피란-3-아민(500mg, 2.07 mmol) 및 CbzCl(423mg, 2.48 mmol)의 용액 및 물(8mL) 중 탄산칼륨(567mg, 4.10 mmol)의 용액을 25℃에서 1시간 동안 교반하였다. 결과적으로 수득되는 용액을 물 20mL로 희석하였다. 결과적으로 수득되는 혼합물을 3 x 20mL의 에틸 아세테이트로 추출하였다. 유기 층을 합하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조하고, 여과하고, 진공 하에 농축하였다. 잔류물을 실리카겔 크로마토그래피로 정제(3:1 석유 에테르/에틸 아세테이트로 용출)하여 벤질 N-(7-브로모-4-메틸-3,4-디하이드로-2H-1-벤조피란-3-일)카바메이트를 백색 고체로서 제공하였다. MS:(ESI, m/z): 376, 378[M+H]+.
중간체 45. tert-부틸 6-((tert-부틸디메틸실릴)옥시)-1,4-디아제판-1-카복실레이트
Figure pct00149
단계 1 . 1,4-디벤질-1,4-디아제판-6-올
톨루엔(50mL) 중 1,3-디브로모프로판-2-올(12.37g, 56.77 mmol), 벤질(2-(벤질아미노)에틸)아민(13.56g, 56.42 mmol), 및 Et3N(17.17g, 169.68 mmol)의 용액을 120℃에서 48시간 동안 교반하였다. 25℃로 냉각한 후, 반응은 그 다음 물 100mL을 첨가하여 ??치시켰다. 결과적으로 수득되는 혼합물을 2 x 100mL의 에틸 아세테이트로 추출하였고, 유기층을 합하여, 무수 황산나트륨 상에서 건조하고, 여과하고, 진공 하에 농축하였다. 잔류물을 실리카겔 크로마토그래피로 정제(1:2 에틸 아세테이트/석유 에테르로 용출)하여 1,4-디벤질-1,4-디아제판-6-올을 황색 오일로서 제공하였다. MS:(ESI, m/z): 297[M+H]+.
단계 2. 1,4-디벤질-6-((tert-부틸디메틸실릴)옥시)-1,4-디아제판
DMF(10mL) 중 1,4-디벤질-1,4-디아제판-6-올(2.0g, 6.61 mmol), 이미다졸(900mg, 13.22 mmol) 및 TBS-Cl(1.2g, 7.96 mmol)의 용액을 25℃에서 16시간 동안 교반하였다. 반응은 그 다음 물 50mL을 첨가하여 ??치시켰다. 결과적으로 수득되는 혼합물을 2 x 50mL의 에틸 아세테이트로 추출하였고, 유기층을 합하여, 무수 황산나트륨 상에서 건조하고, 여과하고, 진공 하에 농축하였다. 잔류물을 실리카겔 크로마토그래피로 정제(1:5 에틸 아세테이트/석유 에테르로 용출)하여 1,4-디벤질-6-((tert-부틸디메틸실릴)옥시)-1,4-디아제판을 황색 오일로서 제공하였다. MS: (ESI, m/z): 411[M+H]+.
단계 3. 6-((tert-부틸디메틸실릴)옥시)-1,4-디아제판
에틸 아세테이트(10mL) 중 1,4-디벤질-6-((tert-부틸디메틸실릴)옥시)-1,4-디아제판(1.5g, 3.47 mmol) 및 탄소 상의 Pd(OH)2(20mg, 10%)의 혼합물을 수소 대기 하에서 28시간 동안 20℃에서 교반하였다. 고체를 여과해 냈다. 여과액은 진공 하에 농축하여 6-((tert-부틸디메틸실릴)옥시)-1,4-디아제판을 무색 오일로서 제공하였다. MS:(ESI, m/z): 231[M+H]+.
단계 4. tert-부틸 6-((tert-부틸디메틸실릴)옥시)-1,4-디아제판-1-카복실레이트
DCM(20mL) 중 6-((tert-부틸디메틸실릴)옥시)-1,4-디아제판(1.2g, 4.95 mmol), Boc2O(700mg, 3.21 mmol), 및 트리에틸아민(500 mg, 4.94 mmol)의 용액을 드라이 아이스/에탄올 조에서 -40℃에서 2시간 동안 교반하였고, 20℃에서 추가 1시간 동안 교반하였다. 반응은 그 다음 물 40mL을 첨가하여 ??치시켰다. 결과적으로 수득되는 혼합물을 2 x 40mL의 에틸 아세테이트로 추출하였고, 유기 층을 합하여, 무수 황산나트륨 상에서 건조하고, 여과하고, 진공 하에 농축하였다. 잔류물을 실리카겔 크로마토그래피로 정제(1:10 메탄올/DCM으로 용출)하여 tert-부틸 6-((tert-부틸디메틸실릴)옥시)-1,4-디아제판-1-카복실레이트를 무색 오일로서 제공하였다. MS:(ESI, m/z): 331[M+H]+.
중간체 46. tert-부틸 6-((tert-부틸디메틸실릴)옥시)-1,4-디아제판-1-카복실레이트
Figure pct00150
DCM(20mL) 중 tert-부틸 2-(하이드록시메틸)피페라진-1-카복실레이트(1g, 4.39 mmol) 및 트리에틸아민(1.53 mL, 10,98 mmol)의 용액에 tert-부틸(클로로)디메틸실란(693mg, 4.60 mmol)을 첨가하였다. 결과적으로 수득되는 용액을 20℃에서 밤새 교반하였다. 반응은 그 다음 20mL의 물을 첨가하여 ??치시켰다. 결과적으로 수득되는 혼합물을 3 x 20mL의 DCM으로 추출하였다. 유기층을 합하여, 무수 황산나트륨 상에서 건조하고, 여과하고, 진공 하에 농축하였다. 잔류물을 실리카겔 크로마토그래피로 정제(20:1 에틸 DCM/메탄올로 용출)하여 tert-부틸 6-((tert-부틸디메틸실릴)옥시)-1,4-디아제판-1-카복실레이트를 오프(off)-무색 오일로서 제공하였다. MS: (ESI, m/z): 331[M+H]+.
중간체 47-1. 벤질 N-[2-[(트리플루오로메탄)설포닐옥시]-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-6-일]카바메이트
중간체 47-2. 벤질 N-[(6S)-2-(트리플루오로메탄설포닐옥시)-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-6-일]카바메이트
중간체 47-3. 벤질 N-[(6R)-2-(트리플루오로메탄설포닐옥시)-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-6-일]카바메이트
방법 1. 키랄 분리
Figure pct00151
단계 1 . 7',8'-디하이드로-5'H-스피로[1,3-디옥솔란-2,6'-퀴놀린]-2'-올
1,4-디옥사스피로[4.5]데칸-8-온(50.0g, 320 mmol), 에틸 프로프-2-이노에이트(68mL, 672 mmol) 및 MeOH 중 NH3 용액(230 mL, 7M)을 이소프로판올(1.3L)에 용해한 용액을 130℃에서 14시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 20℃로 냉각하였다. 용매는 진공 하에 제거하였다. 고체를 여과 수집하였다. 케익(cake)은 2 x 30mL의 석유 에테르로 세척하였고 진공 하에 건조하여 7',8'-디하이드로-5'H-스피로[1,3-디옥솔란-2,6'-퀴놀린]-2'-올을 회백색 고체로서 제공하였다. MS(ESI, m/z): 208[M+H]+.
단계 2 . 7',8'-디하이드로-5'H-스피로[1,3-디옥솔란-2,6'-퀴놀린]-2'-일 트리플루오로메탄설포네이트
DCM(500mL) 중 7',8'-디하이드로-5'H-스피로[1,3-디옥솔란-2,6'-퀴놀린]-2'-올(24.0 g, 116 mmol) 및 트리에틸아민(64.4mL, 464 mmol)의 용액에 DCM(100mL) 중 트리플루오로메탄설폰산 무수물(58.4mL, 347 mmol)의 용액을 10℃에서 첨가하였다. 결과적으로 수득되는 용액을 20℃에서 1시간 동안 교반하였다. 혼합물을 진공 하에 농축하였다. 잔류물을 실리카겔 크로마토그래피로 정제(3:1 에틸 아세테이트/석유 에테르로 용출)하여 7',8'-디하이드로-5'H-스피로[1,3-디옥솔란-2,6'-퀴놀린]-2'-일 트리플루오로메탄설포네이트를 황색 오일로서 제공하였다. MS(ESI, m/z): 340[M+H]+.
단계 3 . 6-옥소-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-2-일 트리플루오로메탄설포네이트
아세톤(300mL) 중 7',8'-디하이드로-5'H-스피로[1,3-디옥솔란-2,6'-퀴놀린]-2'-일 트리플루오로메탄설포네이트(35.0 g, 103 mmol) 및 염산(206mL, 1N)의 용액을 75℃에서 1시간 동안 교반하였다. 혼합물을 20℃로 냉각하였다. 아세톤은 진공 하에 농축하였다. 잔류물의 pH 값은 NaHCO3(포화 수용액)으로 7 내지 8로 조정하였다. 결과적으로 수득되는 혼합물을 3 x 100 mL의 DCM으로 추출하였다. 유기 층을 합하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조하고, 여과하고, 진공 하에 농축하였다. 잔류물을 에틸 아세테이트와 석유 에테르(10:1)의 혼합 용매 100mL로 재결정화에 의해 정제하여 6-옥소-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-2-일 트리플루오로메탄설포네이트를 회백색 고체로서 제공하였다. MS(ESI, m/z): 296[M+H]+.
단계 4 . 6-아미노-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-2-일 트리플루오로메탄설포네이트
메탄올(250mL) 중 6-옥소-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-2-일 트리플루오로메탄설포네이트(16.0g, 54.2 mmol) 및 NH4OAc(50.1g, 650 mmol)의 혼합물을 20℃에서 1시간 동안 교반하였다. NaBH3CN(4.10g, 65.2 mmol)을 10℃에서 분할 첨가하였다. 결과적으로 수득되는 혼합물을 20℃에서 13시간 동안 반응시켰다. 반응은 그 다음 50mL의 물/얼음을 첨가하여 ??치시켰다. 용매는 진공 하에 농축하였다. 잔류물을 100mL의 염산(1N)으로 희석하였다. 결과적으로 수득되는 혼합물을 2 x 100mL의 DCM으로 추출하였다. 수성 상의 pH 값은 Na2CO3(포화 수용액)으로 10으로 조정하였다. 수성 상은 4 x 100mL의 DCM으로 추출하였다. 유기 층을 합하여, 무수 황산나트륨 상에서 건조하고, 여과하고, 진공 하에 농축하여 6-아미노-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-2-일 트리플루오로메탄설포네이트를 황색 오일로서 제공하였다. MS(ESI, m/z): 297[M+H]+.
단계 5 . 벤질 N-[2-[(트리플루오로메탄)설포닐옥시]-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-6-일]카바메이트
에틸 아세테이트(100mL) 중 6-아미노-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-2-일 트리플루오로메탄설포네이트(12.0g, 40.5mmol), 탄산칼륨(14.0g, 101 mmol) 및 CbzCl(7.4mL, 52.8 mmol)의 혼합물을 20℃에서 2시간 동안 교반하였다. 반응은 그 다음 100mL의 물/얼음을 첨가하여 ??치시켰다. 혼합물을 3 x 100mL의 에틸 아세테이트로 추출하였다. 유기 층을 합하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조하고, 여과하고, 진공 하에 농축하였다. 잔류물을 에틸 아세테이트와 석유 에테르(10:1)의 혼합 용매 80mL로 재결정화에 의해 정제하여 벤질 N-[2-[(트리플루오로메탄)설포닐옥시]-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-6-일]카바메이트를 회백색 고체로서 제공하였다. MS(ESI, m/z): 431[M+H]+.
단계 6 . 벤질 N-[(6S)-2-(트리플루오로메탄설포닐옥시)-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-6-일]카바메이트 및 벤질 N-[(6R)-2-(트리플루오로메탄설포닐옥시)-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-6-일]카바메이트
라세미체인 벤질 N-[2-(트리플루오로메탄설포닐옥시)-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-6-일]카바메이트(중간체 47-1)(7.00g, 16.3 mmol)를 SFC(컬럼: Chiralpak AD-H SFC, 5 x 25 cm, 5 μm; 이동상, A: CO2: 55% 및 B: MeOH: 45%; 유속: 150 mL/min)로 분리하였다. 1차 용출 이성질체(RT = 4.23 분)를 수집하였고 진공 하에 농축하여 벤질 N-[(6S)-2-(트리플루오로메탄설포닐옥시)-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-6-일]카바메이트(중간체 47-2)를 회백색 고체로서 제공하였다. 2차 용출 이성질체(RT = 5.16 분)는 수집하여 진공 하에 농축하여 벤질 N-[(6R)-2-(트리플루오로메탄설포닐옥시)-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-6-일]카바메이트(중간체 47-3)를 회백색 고체로서 제공하였다. 두 이성질체에 대한 MS(ESI, m/z): 431[M+H]+.
중간체 47-2. 벤질 N-[(6S)-2-(트리플루오로메탄설포닐옥시)-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-6-일]카바메이트
방법 2. 키랄 분할
Figure pct00152
단계 1 . (S)-6-아미노-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-2-일 트리플루오로메탄설포네이트
EtOH(1830mL) 중 6-아미노-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-2-일 트리플루오로메탄설포네이트(183g, 525.65 mmol) 및 L-(-)-만델산(39.99g, 262.83 mmol)의 용액을 70℃에서 2시간 동안 교반하였다. 이 혼합물을 25℃로 천천히 냉각시키고 밤새 교반하였다. 형성된 침전물은 여과하여 수집하고 진공 하에 건조하여 키랄 염을 백색 고체로서 제공하였다. 이 염을 H2O(350mL)에 용해시키고, 수성 상의 pH 값은 NaOH(1N, 수성)로 12 내지 14로 조정하였다. 수성 상은 EtOAc(500mL)로 추출하였다. 유기 층은 Na2SO4 상에서 건조하고, 여과하고 진공 하에 농축하여 키랄 아민 (S)-6-아미노-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-2-일 트리플루오로메탄설포네이트의 유리 염기를 황색 오일로서 제공하였다. MS(ESI, m/z): 297[M+H]+. 1H NMR(DMSO-d6, 400 mHz)δ(ppm): 7.79(d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.25(d, J = 8.4 Hz, 1H), 3.14-3.11(m, 1H), 2.97-2.81(m, 3H), 2.54-2.52(m, 1H), 2.61-2.58(m, 2H), 1.64-1.59(m, 1H).
단계 2 . 벤질 N-[(6S)-2-(트리플루오로메탄설포닐옥시)-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-6-일]카바메이트
EtOAc(480mL) 중 (S)-6-아미노-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-2-일 트리플루오로메탄설포네이트(48.0g, 162.02 mmol) 및 K2CO3(55.98g, 405.04 mmol)의 용액에 CbzCl(35.93g, 210.62 mmol, 29.94 mL)를 0℃에서 적가하였다. 혼합물을 20℃에서 30분 동안 교반하였다. 반응은 그 다음 물/얼음(150mL)으로 ??치시켰다. 혼합물을 에틸 아세테이트(350mL)로 추출하였다. 유기 층을 무수 황산나트륨 상에서 건조하고, 여과하고, 진공 하에 농축하였다. 조생성물을 석유 에테르(200 mL)로 20℃에서 분쇄하였다. 결과적으로 수득되는 침전물을 여과 수집하였고 진공 하에 건조하여 벤질 N-[(6S)-2-(트리플루오로메탄설포닐옥시)-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-6-일]카바메이트를 페일 핑크색(pale pink) 고체로서 제공하였다. MS(ESI, m/z): 431[M+H]+. 1H NMR (DMSO-d6, 400 mHz)δ(ppm): 7.82(d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.49(m, 1H), 7.37-7.28(m, 6H), 5.04(s, 2H), 3.82(m, 1H), 3.08(dd, J = 16.8 Hz, 4.8 Hz, 1H), 2.91-2.88(m, 2H), 2.76-2.72(m, 1H), 2.02-2.00(m, 1H), 1.83-1.75(m, 1H).
이하 표 7의 중간체는 중간체 47-1의 제조에 사용된 것과 유사한 표준 화학적 조작 및 절차를 사용하여 제조하였다.
Figure pct00153
1 절차 상 주의점: 단계 1에서, 사용된 케톤은 6,9-디옥사디스피로[2.1.45.33]도데칸-12-온이었고, 이는 다음과 같은 방법에 의해 제조되었다: (2-클로로에틸)디메틸설포늄 요오다이드(88.0g, 347 mmol)를 t-BuOH(1.50L) 중 1,4-디옥사스피로[4.5]데칸-8-온(60.0g, 384 mmol) 및 t-BuOK(88.0g, 784 mmol)의 용액에 4시간 넘게 천천히 첨가하였다. 결과적으로 수득되는 용액을 25℃에서 1시간 동안 교반하였다. 고체를 여과하였다. 여과액은 진공 하에 농축하였다. 잔류물을 물(400mL)로 희석하였다. 결과적으로 수득되는 혼합물을 DCM(3 x 400mL)으로 추출하였다. 유기 층을 합하여 무수 황산나트륨 상에서 건조하고, 여과하고 진공 하에 농축하였다. 잔류물은 역상 크로마토그래피를 통해 정제하여 6,9-디옥사디스피로[2.1.45.33]도데칸-12-온을 담황색 오일로서 제공하였다. MS(ESI, m/z): 183[M+H]+.
중간체 48-1. 시스-tert-부틸 N-[4-(메톡시메틸)피롤리딘-3-일]카바메이트;
중간체 48-2. tert-부틸 N-[(3R,4R)-4-(메톡시메틸)피롤리딘-3-일]카바메이트 및
중간체 48-3. 벤질 (3R,4R)-3-[[(tert-부톡시)카보닐]아미노]-4-(메톡시메틸)피롤리딘-1-카복실레이트
Figure pct00154
단계 1 . 시스-벤질 3-[[(tert-부톡시)카보닐]아미노]-4-(하이드록시메틸)피롤리딘-1-카복실레이트
THF(40mL) 및 물(20mL) 중 시스-벤질 3-아미노-4-(하이드록시메틸)피롤리딘-1-카복실레이트(2.00g, 7.99 mmol), Et3N (2.13mL, 23.7 mmol) 및 (Boc)2O(2.20g, 10.1 mmol)의 용액을 20℃에서 2시간 동안 교반하였다. 용매는 진공 하에 제거하였다. 잔류물은 물(20mL)로 희석하였다. 결과적으로 수득되는 혼합물을 에틸 아세테이트(3 x 20 mL)로 추출하였고, 무수 황산나트륨 상에서 건조하고, 여과하고, 진공 하에 농축하였다. 잔류물을 실리카겔 크로마토그래피로 정제(1:3 에틸 아세테이트/석유 에테르로 용출)하여 시스-벤질 3-[[(tert-부톡시)카보닐]아미노]-4-(하이드록시메틸)피롤리딘-1-카복실레이트를 회백색 고체로서 제공하였다. MS(ESI, m/z): 351[M+H]+.
단계 2 . 시스-벤질 3-[[(tert-부톡시)카보닐]아미노]-4-(메톡시메틸)피롤리딘-1-카복실레이트
DCM(20mL) 중 트리메틸옥소늄테트라플루오로보레이트(1.50g, 10.4 mmol)의 용액을 DCM(100mL) 중 1,8-비스(디메틸아미노)나프탈렌(2.20g, 10.3 mmol) 및 시스-벤질 3-[[(tert-부톡시)카보닐]아미노]-4-(하이드록시메틸)피롤리딘-1-카복실레이트(2.20g, 6.09 mmol)의 교반 용액에 첨가하였다. 결과적으로 수득되는 혼합물을 40℃에서 3시간 동안 교반하였다. 혼합물의 pH는 HCl(3N, 수성)을 이용하여 4 내지 6으로 조정하였다. 결과적으로 수득되는 혼합물을 에틸 아세테이트(3 x 100mL)로 추출하였고, 무수 황산나트륨 상에서 건조하고, 여과하고, 진공 하에 농축하였다. 잔류물을 실리카겔 크로마토그래피로 정제(1:1 에틸 아세테이트/석유 에테르로 용출)하여 시스-벤질 3-[[(tert-부톡시)카보닐]아미노]-4-(메톡시메틸)피롤리딘-1-카복실레이트를 백색 고체로서 제공하였다. MS(ESI, m/z): 365[M+H]+.
단계 3 . 시스-tert-부틸 N-[4-(메톡시메틸)피롤리딘-3-일]카바메이트
에틸 아세테이트(50mL) 중 시스-벤질 3-[[(tert-부톡시)카보닐]아미노]-4-(메톡시메틸)피롤리딘-1-카복실레이트(1.00g, 2.74 mmol) 및 탄소 상의 팔라듐(1.00g, 10%)의 혼합물을 수소 대기(벌룬) 하에 20℃에서 1시간 동안 교반하였다. 고체는 여과해냈다. 여과액은 진공 하에 농축하여 시스-tert-부틸 N-[4-(메톡시메틸)피롤리딘-3-일]카바메이트(중간체 48-1)를 황색 오일(조생성물)로서 제공하였다. MS(ESI, m/z): 231[M+H]+.
단계 4 . tert-부틸 N-[(3R,4R)-4-(메톡시메틸)피롤리딘-3-일]카바메이트
라세미체인 시스-벤질 3-[[(tert-부톡시)카보닐]아미노]-4-(메톡시메틸)피롤리딘-1-카복실레이트를 SFC[컬럼: Chiralpak IA-SFC, 5 x 25cm, 5μm; 이동상, A: CO2: 70% 및 B: MeOH(MeOH 중 2mM NH3 함유): 30%; 유속: 150 mL/min]에 의해 그의 거울상이성질체들로 분리하였다. 1차 용출 이성질체(RT = 3.91 분)를 수집하였고 진공 하에 농축하여 벤질 (3S,4S)-3-[[(tert-부톡시)카보닐]아미노]-4-(메톡시메틸)피롤리딘-1-카복실레이트를 황색 고체로서 제공하였다. 2차 용출 이성질체(RT = 5.04 분)를 수집하였고 진공 하에 농축하여 벤질 (3R,4R)-3-[[(tert-부톡시)카보닐]아미노]-4-(메톡시메틸)피롤리딘-1-카복실레이트(중간체 48-3)를 황색 고체로서 제공하였다. MS(ESI, m/z): 365[M+H]+.
에틸 아세테이트(30mL) 중 벤질 (3R,4R)-3-[[(tert-부톡시)카보닐]아미노]-4-(메톡시메틸)피롤리딘-1-카복실레이트(중간체 48-3)(0.800g, 2.20 mmol) 및 탄소 상의 팔라듐(0.800g, 10%)의 혼합물을 수소 대기(벌룬) 하에 25℃에서 1시간 동안 교반하였다. 고체는 여과해냈다. 여과액은 진공 하에 농축하여 tert-부틸 N-[(3R,4R)-4-(메톡시메틸)피롤리딘-3-일]카바메이트(중간체 48-2)를 황색 오일(조생성물)로서 제공하였다. MS(ESI, m/z): 231[M+H]+.
중간체 48-3. 벤질 (3R,4R)-3-[[(tert-부톡시)카보닐]아미노]-4-(메톡시메틸)피롤리딘-1-카복실레이트
방법 2.
Figure pct00155
단계 1 . 벤질 N-(2,2-디메톡시에틸)카바메이트
톨루엔(8L) 중 2,2-디메톡시에탄-1-아민(1600g, 15.22 mol)의 용액에 물(4.42L) 중 NaOH(858g, 21.45 mol)의 용액을 첨가하였다. 그 다음, 20℃ 미만에서 교반 하에 CbzCl(2598g, 15.23 mol)을 적가하였다. 결과적으로 수득되는 용액을 실온에서 4시간 동안 교반하였다. 유기 층을 분리하였고 3x5L의 염수로 세척하였다. 유기 층을 무수 황산나트륨 상에서 건조하고 진공 하에 농축하여 벤질 N-(2,2-디메톡시에틸)카바메이트를 백색 고체로서 제공하였다.
단계 2 . 벤질 N-(2,2-디메톡시에틸)-N-(프로프-2-엔-1-일)카바메이트
톨루엔(7.82L) 중 벤질 N-(2,2-디메톡시에틸)카바메이트(1700g, 7.10 mol), KOH(1755g, 31.28 mol) 및 벤질트리에틸암모늄 클로라이드(32.37g, 142.1 mmol)의 용액에 실온에서 교반 하에 3-브로모프로프-1-엔(1117.4g, 9.24 mol)을 적가하였다. 결과적으로 수득되는 용액을 실온에서 24시간 동안 교반하였다. 따라서, 2개의 배취를 병렬로 진행시켰다. 반응은 그 다음 물 10L를 첨가하여 ??치시켰다. 결과적으로 수득되는 용액을 2x7L의 톨루엔으로 추출하였고 유기 층을 합하였다. 유기 층을 2x10L의 염수로 세척하였다. 혼합물은 무수 황산나트륨 상에서 건조하고 진공 하에 농축하여 벤질 N-(2,2-디메톡시에틸)-N-(프로프-2-엔-1-일)카바메이트를 담황색 오일로서 제공하였다.
단계 3 . 벤질 N-(2-옥소에틸)-N-(프로프-2-엔-1-일)카바메이트
88% 포름산(5460mL) 중 벤질 N-(2,2-디메톡시에틸)-N-(프로프-2-엔-1-일)카바메이트(3900g, 13.96 mol)의 용액을 실온에서 밤새 교반하였다. 결과적으로 수득되는 혼합물을 진공 하에 농축하였다. 잔류물을 20L의 에틸 아세테이트로 희석하고, 4x10L의 염수로 세척하였다. 유기 상을 무수 황산나트륨 상에서 건조하고 진공 하에 농축하여 벤질 N-(2-옥소에틸)-N-(프로프-2-엔-1-일)카바메이트를 갈색 오일로서 제공하였다.
단계 4 . 벤질 N-[2-(하이드록시이미노)에틸]-N-(프로프-2-엔-1-일)카바메이트
ACN(9.52L) 중 벤질 N-(2-옥소에틸)-N-(프로프-2-엔-1-일)카바메이트(1700g, 7.29 mol) 및 NH2OH-HCl(638g, 9.18 mol)의 용액에 H2O(4.96L) 중 NaOAc(669g, 8.16 mol)의 용액을 첨가하였다. 결과적으로 수득되는 용액을 실온에서 20시간 동안 교반하였다. 2개 배취를 병렬로 진행시켰다. 결과적으로 수득되는 혼합물을 진공 하에 농축하고 3x10L의 에틸 아세테이트로 추출하고, 유기 층을 합하였다. 유기 상은 3x5L의 염수로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조하고 진공 하에 농축하였다. 조생성물을 실리카겔 크로마토그래피로 정제(1:9 EtOAc/석유 에테르로 용출)하여 벤질 N-[2-(하이드록시이미노)에틸]-N-(프로프-2-엔-1-일)카바메이트를 무색 오일로서 제공하였다.
단계 5 . 시스-벤질 3-아미노-4-(하이드록시메틸)피롤리딘-1-카복실레이트
벤질 N-[2-(하이드록시이미노)에틸]-N-(프로프-2-엔-1-일)카바메이트(1200g, 4.83 mol) 및 자일렌(6L)의 용액을 130℃에서 밤새 교반하였다. 혼합물을 실온으로 냉각하였다. 이 혼합물에 HOAc(6L)을 첨가하였다. 그 다음, 이 혼합물에 Zn(1200g, 18.35 mol)을 15℃에서 첨가하였다. 결과적으로 수득되는 용액을 수조 내에서 실온 하에 밤새 교반하였다. 2개의 배취를 병렬로 진행시켰다. 배취들을 합하여 여과하였다. 여과된 케익은 자일렌으로 세척하였다. 합한 여과액은 20L의 물로 희석하였다. 혼합물은 자일렌(4x5L)으로 추출하였다. 수성 상을 진공 하에 농축하였다. 잔류물의 pH 값은 포화 탄산나트륨으로 9 내지 10으로 조정하였다. 고체는 여과해냈다. 여과액은 진공 하에 농축하였다. 잔류물은 5L의 THF로 추출하였고 진공 하에 농축하여 시스-벤질 3-아미노-4-(하이드록시메틸)피롤리딘-1-카복실레이트를 갈색 오일로서 제공하였다.
단계 6 . 시스-벤질 3-[[(tert-부톡시)카보닐]아미노]-4-(하이드록시메틸)피롤리딘-1-카복실레이트
메탄올(9L) 중 시스-벤질 3-아미노-4-(하이드록시메틸)피롤리딘-1-카복실레이트(900g, 3.60 mol) 및 트리에틸아민(728g, 7.19 mol)의 용액에 디-tert-부틸 디카보네이트(863g, 3.95 mol)를 실온에서 교반 하에 적가하였다. 결과적으로 수득되는 용액을 실온에서 밤새 교반하였다. 결과적으로 수득되는 혼합물을 진공 하에 농축하였다. 조생성물을 실리카겔 크로마토그래피로 정제(2:3 EtOAc/석유 에테르로 용출)하여 시스-벤질 3-[[(tert-부톡시)카보닐]아미노]-4-(하이드록시메틸)피롤리딘-1-카복실레이트를 백색 고체로서 제공하였다.
단계 7 . 시스-벤질 3-[[(tert-부톡시)카보닐]아미노]-4-(메톡시메틸)피롤리딘-1-카복실레이트
DCM(12L) 중 시스-벤질 3-[[(tert-부톡시)카보닐]아미노]-4-(하이드록시메틸)피롤리딘-1-카복실레이트(600g, 1.71 mol) 및 2,6-디-tert-부틸-4-메틸피리딘(1406g, 6.85 mol)의 혼합물에 트리메틸옥소늄 테트라플루오로보레이트(506.5g, 3.42 mol)를 첨가하였다. 반응은 실온에서 밤새 교반하였다. 결과적으로 수득되는 용액을 진공 하에 농축하였다. 조생성물은 실리카겔 크로마토그래피로 정제(3:7 EtOAc/석유 에테르로 용출)하여 시스-벤질 3-[[(tert-부톡시)카보닐]아미노]-4-(메톡시메틸)피롤리딘-1-카복실레이트를 백색 고체로서 제공하였다.
단계 8 . 벤질 (3R,4R)-3-[[(tert-부톡시)카보닐]아미노]-4-(메톡시메틸)피롤리딘-1-카복실레이트
라세미체인 시스-벤질 3-[[(tert-부톡시)카보닐]아미노]-4-(메톡시메틸)피롤리딘-1-카복실레이트를 SFC(컬럼: Lux 5μm Amylose-1, 5x25 cm, 5μm; 이동상 A: CO2: 50%, 및 B: MeOH: 50%; 유속: 160 mL/min)를 이용하여 그의 거울상이성질체로 분리하였다. 1차 용출 이성질체(RT = 4.2 분)를 수집하였고 진공 하에 농축하여 벤질 (3S,4S)-3-[[(tert-부톡시)카보닐]아미노]-4-(메톡시메틸)피롤리딘-1-카복실레이트를 백색 고체로서 제공하였다. MS(ESI, m/z): 387[M+Na]+. 1H NMR(CDCl3, 300 MHz)δ(ppm): 7.31-7.44(m, 5H), 5.14-5.36(m, 3H), 4.28(s, 1H), 3.46-3.70(m, 4H), 3.32-3.46(m, 5H), 2.54(s, 1H), 1.47(s, 9H).
2차 용출 이성질체(RT = 5.7 분)를 수집하였고 진공 하에 농축하여 벤질 (3R,4R)-3-[[(tert-부톡시)카보닐]아미노]-4-(메톡시메틸)피롤리딘-1-카복실레이트 (중간체 48-3)를 백색 고체로서 제공하였다. MS(ESI, m/z): 387[M+Na]+. 1H NMR(CDCl3, 300 MHz)δ(ppm): 7.33-7.40(m, 5H), 5.09-5.40(m, 3H), 4.28(s, 1H), 3.46-3.73(m, 4H), 3.32-3.46(m, 5H), 2.53-5.55(m, 1H), 1.46(s, 9H).
중간체 49. tert-부틸 ((3S,4S)-4-(메톡시-d3)피롤리딘-3-일)카바메이트
Figure pct00156
단계 1 . 벤질 (3S,4S)-3-아지도-4-(메톡시-d3)피롤리딘-1-카복실레이트
무수 DMF(5mL) 중 벤질 (3S,4S)-3-아지도-4-하이드록시피롤리딘-1-카복실레이트(202.7mg, 0.773 mmol)의 용액에 NaH(광유 중 60% 분산액, 37.1mg, 0.927 mmol)을 첨가하였다. 반응물은 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 그 다음, 요오도메탄-d3(0.058ml, 0.927 mmol)을 첨가하였고 반응물을 22℃에서 6시간 동안 교반하였다. 반응물을 5mL의 EtOAc로 희석하고 2 x 3mL의 H2O로 세척하였다. 유기 층을 분리하였고 무수 Na2SO4 상에서 건조하고, 여과하고, 농축하여, 조생성물인 벤질 (3S,4S)-3-아지도-4-(메톡시-d3)피롤리딘-1-카복실레이트를 황색 오일로서 제공하였다. MS:(ESI, m/z): 280[M+H]+.
단계 2 . 벤질 (3S,4S)-3-아미노-4-(메톡시-d3)피롤리딘-1-카복실레이트
THF(1.405mL) 및 물(0.14mL) 중 벤질 (3S,4S)-3-아지도-4-(메톡시-d3)피롤리딘-1-카복실레이트(215.8 mg, 0.773 mmol) 및 트리페닐포스핀(223mg, 0.850 mmol)의 용액을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 반응물을 그 다음 50℃에서 5시간 동안 가열하였다. 실온으로 냉각한 후, 반응물은 진공 하에 농축하였다. 잔류물을 분취용 HPLC(컬럼: Waters XBridge Prep C18 OBD 5μm, 19x50 mm; 이동상 구배 0% 내지 35% ACN, 0.1% 포름산, 8분 넘게; 유속: 23 mL/min)로 정제하여 벤질 (3S,4S)-3-아미노-4-(메톡시-d3)피롤리딘-1-카복실레이트를 무색 오일로서 제공하였다. MS: (ESI, m/z): 254 [M+H]+.
단계 3 . 벤질 (3S,4S)-3-((tert-부톡시카보닐)아미노)-4-(메톡시-d3)피롤리딘-1-카복실레이트
THF(1.43mL) 및 물(1.43mL) 중 벤질 (3S,4S)-3-아미노-4-(메톡시-d3)피롤리딘-1-카복실레이트(217mg, 0.858 mmol), Et3N(225μl, 1.61 mmol), 및 Boc2O(0.299mL, 1.29 mmol)의 용액을 실온에서 30분 동안 교반하였다. 결과적으로 수득되는 혼합물을 2 x 30mL의 DCM으로 추출하였다. 합한 유기 층을 무수 Na2SO4 상에서 건조하고, 여과하고, 진공 하에 농축하여 벤질 (3S,4S)-3-((tert-부톡시카보닐)아미노)-4-(메톡시-d3)피롤리딘-1-카복실레이트를 무색 오일로서 제공하였다. MS:(ESI, m/z): 354[M+H]+.
단계 4 . tert-부틸 ((3S,4S)-4-(메톡시-d3)피롤리딘-3-일)카바메이트
EtOAc(10mL) 중 벤질 3-((tert-부톡시카보닐)아미노)-4-메톡시피롤리딘-1-카복실레이트(200mg, 0.57 mmol) 및 Pd/C(200mg, 10%)의 혼합물을 수소 대기 하에 실온에서 3시간 동안 교반하였다. 고체를 여과해내어 3 x 10mL의 EtOAc로 세척하였다. 여과액을 진공 하에 농축하여 tert-부틸 N-(4-메톡시피롤리딘-3-일)카바메이트를 무색 오일로서 제공하였다. MS:(ESI, m/z): 220[M+H]+. 1H NMR(CDCl3, 300 MHz)δ(ppm): 8.04-8.26(m, 1H), 4.41-4.86(m, 1H), 3.93-4.22(m, 1H), 3.09-3.92(m, 3H), 1.46(s, 9H).
중간체 50. 벤질 N-(7-클로로-6,8-디플루오로-3,4-디하이드로-2H-1-벤조피란-3-일)카바메이트
Figure pct00157
단계 1 . 4-클로로-3,5-디플루오로-2-하이드록시벤즈알데하이드
TFA(60mL) 중 3-클로로-2,4-디플루오로페놀(4.00g, 23.6 mmol) 및 HMTA(6.60g, 47.2 mmol)의 용액을 100℃에서 3시간 동안 교반하였다. 0℃로 냉각한 후, 혼합물에 농축 H2SO4(10mL) 및 H2O(50mL)을 0℃에서 첨가하였다. 혼합물을 20℃에서 2시간 동안 교반한 다음, H2O(40mL)로 희석하였다. 혼합물의 pH 값은 디부틸아민으로 7 내지 8로 조정하였다. 결과적으로 수득되는 혼합물을 에틸 아세테이트(3 x 100mL)로 추출하였다. 유기층을 합하여, 무수 황산나트륨 상에서 건조하고, 여과하고, 진공 하에 농축하였다. 잔류물을 실리카겔 크로마토그래피로 정제(1:5 에틸 아세테이트/석유 에테르로 용출)하여 4-클로로-3,5-디플루오로-2-하이드록시벤즈알데하이드를 회백색 고체로서 제공하였다. GCMS(ESI, m/z): 192,194[M+H]+.
단계 2 . 7-클로로-6,8-디플루오로-3-니트로-2H-크로멘
2-니트로에탄-1-올(3.72mL, 51.9 mmol)을 톨루엔(80mL) 중 4-클로로-3,5-디플루오로-2-하이드록시벤즈알데하이드(1.50g, 7.77 mmol), 디부틸아민(0.659mL, 3.89 mmol) 및 프탈산 무수물(2.20g, 14.8 mmol)의 교반 용액에 125℃에서 0.5 mL/h의 유속으로 주입 펌프를 통해 첨가하였다. 결과적으로 수득되는 용액을 125℃에서 16시간 동안 환류시켰다. 20℃로 냉각한 후, 결과적으로 수득되는 혼합물을 진공 하에 농축하였다. 잔류물을 실리카겔 크로마토그래피로 정제(1:10 에틸 아세테이트/석유 에테르로 용출)하여 7-클로로-6,8-디플루오로-3-니트로-2H-크로멘을 황색 고체로서 제공하였다. MS(ESI, m/z): 248, 250[M+H]+.
단계 3 . 7-클로로-8-플루오로-3,4-디하이드로-2H-1-벤조피란-3-아민
7-클로로-6,8-디플루오로-3-니트로-2H-크로멘(1.30g, 5.25 mmol), BH3(40mL, THF 중 1M), 및 NaBH4(399mg, 10.5 mmol)의 혼합물을 65℃에서 16시간 동안 교반하였다. 이 혼합물에 MeOH(80mL)를 <10℃에서 천천히 첨가하였다. 결과적으로 수득되는 용액을 80℃에서 8시간 동안 교반하였다. 20℃로 냉각한 후, 결과적으로 수득되는 혼합물을 진공 하에 농축하였다. 잔류물을 역상 크로마토그래피를 통해 정제(컬럼: C18 실리카겔; 이동상, A: 물(10mM NH4HCO3) 및 B: ACN(5%에서부터 20분 후 75%까지)하여 7-클로로-8-플루오로-3,4-디하이드로-2H-1-벤조피란-3-아민을 회백색 고체로서 제공하였다. MS(ESI, m/z): 220, 222[M+H]+.
단계 4 . 벤질 N-(7-클로로-6,8-디플루오로-3,4-디하이드로-2H-1-벤조피란-3-일)카바메이트
CbzCl(0.500mL, 3.55 mmol)를 에틸 아세테이트(20mL)와 물(20mL) 중 7-클로로-6,8-디플루오로-3,4-디하이드로-2H-1-벤조피란-3-아민(650mg, 2.96 mmol) 및 탄산칼륨(822mg, 5.92 mmol)의 혼합물에 <10℃에서 첨가하였다. 결과적으로 수득되는 용액을 그 다음 25℃에서 1시간 동안 교반하였고 물(30mL)로 희석하였다. 결과적으로 수득되는 혼합물을 에틸 아세테이트(3 x 30mL)로 추출하였다. 유기층을 합하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조하고, 여과하고, 진공 하에 농축하였다. 잔류물을 실리카겔 크로마토그래피로 정제(1:5 에틸 아세테이트/석유 에테르로 용출)하여 벤질 N-(7-클로로-6,8-디플루오로-3,4-디하이드로-2H-1-벤조피란-3-일)카바메이트를 회백색 고체로서 제공하였다. MS(ESI, m/z): 354, 356[M+H]+.
중간체 51-1. tert-부틸 N-[(3R,4S)-4-(디플루오로메틸)피롤리딘-3-일]카바메이트
중간체 51-2. tert-부틸 N-[(3S,4R)-4-(디플루오로메틸)피롤리딘-3-일]카바메이트
Figure pct00158
단계 1. 에틸 4,4-디플루오로-3-하이드록시부타노에이트
NaBH4(34.2g, 902 mmol)을 톨루엔(1L) 중 에틸 4,4-디플루오로-3-옥소부타노에이트(100g, 602 mmol)의 교반 용액에 0℃에서 첨가하였다. 결과적으로 수득되는 혼합물을 0℃에서 2시간 동안 교반하였고, 그 뒤 25℃까지 가온하고 16시간 동안 교반하였다. 반응은 물(400mL)로 ??치시켰다. 결과적으로 수득되는 혼합물을 에틸 아세테이트(2 x 1L)로 추출하였다. 유기 층을 합하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조하고, 여과하고, 진공 하에 농축하여 에틸 4,4-디플루오로-3-하이드록시부타노에이트를 연황색 오일로서 제공하였다. GCMS(ESI, m/z): 168[M+H]+.
단계 2. 에틸 (2E)-4,4-디플루오로부트-2-에노에이트
DCM(300mL) 중 에틸 4,4-디플루오로-3-하이드록시부타노에이트(40.0g, 238 mmol) 및 Et3N(99.0mL, 712 mmol)의 용액에 MsCl(28.0mL, 244 mmol)을 0℃에서 적가하였다. 결과적으로 수득되는 혼합물을 25℃로 가온하고 16시간 동안 교반하였다. 반응물을 물(500mL)로 ??치시켰다. 결과적으로 수득되는 혼합물을 DCM(2 x 500mL)으로 추출하였다. 유기 층을 합하고, 염수(500mL)로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조하고, 여과하고, 진공 하에 농축하였다. 잔류물을 실리카겔 크로마토그래피로 정제(1:10 에틸 아세테이트/석유 에테르로 용출)하여 에틸 (2E)-4,4-디플루오로부트-2-에노에이트를 황녹색 오일로서 제공하였다. GCMS(ESI, m/z): 150[M+H]+.
단계 3 . 트랜스-에틸 1-벤질-4-(디플루오로메틸)피롤리딘-3-카복실레이트
DCM(250mL) 중 에틸 (2E)-4,4-디플루오로부트-2-에노에이트(12.0g, 79.9 mmol) 및 벤질(메톡시메틸)[(트리메틸실릴)메틸]아민(30.7mL, 120 mmol)의 교반 용액에 DCM(20mL) 중 TFA(0.59mL, 5.21 mmol)의 용액을 0℃에서 2분 넘게 적가하였다. 결과적으로 수득되는 혼합물을 25℃로 가온하고 14시간 동안 교반하였다. 반응은 물(500mL)을 첨가하여 ??치시켰다. 결과적으로 수득되는 혼합물을 DCM(2 x 300mL)으로 추출하였다. 유기 층을 합하고, 중탄산나트륨 용액(포화, 300mL)으로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조하고, 여과하고, 진공 하에 농축하였다. 잔류물을 실리카겔 크로마토그래피로 정제(1:10 내지 1:5 에틸 아세테이트/석유 에테르로 용출)하였다. 수집한 분획을 진공 하에 농축하여 트랜스-에틸 1-벤질-4-(디플루오로메틸)피롤리딘-3-카복실레이트를 황색 오일로서 제공하였다. MS(ESI, m/z): 284[M+H]+.
단계 4. 트랜스-에틸 4-(디플루오로메틸)피롤리딘-3-카복실레이트
MeOH(30mL) 중 트랜스-에틸-1-벤질-4-(디플루오로메틸)피롤리딘-3-카복실레이트(5.50g, 19.4 mmol) 및 Pd(OH)2/C(2.00g, 10%)의 혼합물을 수소 대기(벌룬) 하에 25℃에서 2시간 동안 교반하였다. 고체를 여과해내고 여과 케익을 MeOH(3 x 10mL)로 세척하였다. 여과액은 감압 하에 농축하여 트랜스-에틸 4-(디플루오로메틸)피롤리딘-3-카복실레이트를 백색 고체로서 제공하였다. MS(ESI, m/z): 194[M+H]+.
단계 5. 트랜스 -벤질 3-(디플루오로메틸)-4-[에톡시(하이드록시)메틸]피롤리딘-1-카복실레이트
CbzCl(4.05g, 23.741 mmol)를 H2O(20mL) 및 에틸 아세테이트(40mL) 중 트랜스-에틸 4-(디플루오로메틸)피롤리딘-3-카복실레이트(3.90g, 19.8 mmol) 및 K2CO3(8.20g, 59.3 mmol)의 교반 용액에 0℃에서 첨가하였다. 결과적으로 수득되는 혼합물을 25℃에서 1시간 동안 교반하였다. 반응은 물(100mL)을 첨가하여 ??치시켰다. 결과적으로 수득되는 혼합물을 DCM(2 x 200mL)으로 추출하였다. 유기 층을 합하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조하고, 여과하고, 진공 하에 농축하였다. 잔류물을 역상 크로마토그래피로 정제[컬럼, C18 실리카겔; 이동상, A: 물(0.1% TFA 함유) 및 B: ACN(0%에서부터 30분 후 60%까지)]하여 트랜스-벤질 3-(디플루오로메틸)-4-[에톡시(하이드록시)메틸]피롤리딘-1-카복실레이트를 황색 오일로서 제공하였다. MS(ESI, m/z): 328[M+H]+.
단계 6. 트랜스 -1-[(벤질옥시)카보닐]-4-(디플루오로메틸)피롤리딘-3-카복실산
THF(80mL) 및 MeOH(20mL) 중 트랜스-벤질 3-(디플루오로메틸)-4-[에톡시(하이드록시)메틸]피롤리딘-1-카복실레이트(6.00g, 18.0 mmol)의 교반 용액에 물(10mL) 중 LiOH(4.30g, 180 mmol)의 용액을 첨가하였다. 결과적으로 수득되는 혼합물 25℃에서 1시간 동안 교반하였다. 용매는 진공 하에 제거하였다. 잔류물의 pH 값은 NH4Cl(포화 수용액)로 5 내지 6으로 조정하였다. 결과적으로 수득되는 혼합물을 DCM(3 x 50mL)으로 추출하였다. 유기층을 합하고, 중탄산나트륨 용액(포화, 50mL)으로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조하고, 여과하고, 진공 하에 농축하였다. 잔류물을 역상 크로마토그래피로 정제[컬럼: C18 실리카겔; 이동상, A: 물 (0.1% TFA 함유) 및 B: ACN(0%에서 30분 후 60%)]하여 트랜스-1-[(벤질옥시)카보닐]-4-(디플루오로메틸)피롤리딘-3-카복실산을 무색 오일로서 제공하였다. MS (ESI, m/z): 300[M+H]+.
단계 7. 트랜스-벤질 3-[[(tert-부톡시)카보닐]아미노]-4-(디플루오로메틸)피롤리딘-1-카복실레이트
t-BuOH(100mL) 중 트랜스-1-[(벤질옥시)카보닐]-4-(디플루오로메틸)피롤리딘-3-카복실산(4.00g, 13.1 mmol)의 교반 용액에 Et3N(2.73mL, 19.6 mmol) 및 DPPA(4.33g, 15.7 mmol)를 0℃에서 적가하였다. 첨가 후, 결과적으로 수득되는 혼합물을 80℃에서 2시간 동안 교반하였다. 혼합물을 25℃로 냉각시킨 후, 진공 하에 농축하였다. 잔류물을 역상 플래쉬 크로마토그래피로 정제[컬럼, C18 실리카겔; 이동상, A: 물(0.1% TFA 함유) 및 B: ACN(0%에서 40분 후 100%)]하여 목적 생성물을 제공하였다. 추가로 실리카겔 크로마토그래피로 정제(2:5 THF/석유 에테르로 용출)하여 트랜스-벤질 3-[[(tert-부톡시)카보닐]아미노]-4-(디플루오로메틸)피롤리딘-1-카복실레이트를 무색 오일로서 제공하였다. MS(ESI, m/z): 371[M+H]+.
단계 8. tert-부틸 N-[(3S,4R)-4-(디플루오로메틸)피롤리딘-3-일]카바메이트 및 tert-부틸 N-[(3R,4S)-4-(디플루오로메틸)피롤리딘-3-일]카바메이트
트랜스-벤질 3-[[(tert-부톡시)카보닐]아미노]-4-(디플루오로메틸)피롤리딘-1-카복실레이트(1.70g, 4.58 mmol)를 SFC[컬럼: Chiralpak AD-H SFC, 5x25 cm, 5 μm; 이동상, A: CO2: 70% 및 B: MeOH(2 mM NH3-MeOH 함유): 30%; 유속: 180 mL/min]에 의해 분리하여, tert-부틸 N-[(3R,4S)-4-(디플루오로메틸)피롤리딘-3-일]카바메이트로서 임의 지정된 입체화학을 갖는 1차 용출 이성질체(RT = 4.23 분)를 백색 고체로서 제공하였고; tert-부틸 N-[(3S,4R)-4-(디플루오로메틸)피롤리딘-3-일]카바메이트로서 임의 지정된 입체화학을 갖는 2차 용출 이성질체(RT=6.14분)를 백색 고체로서 제공하였다. MS(ESI, m/z): 371[M+H]+.
단계 9. tert-부틸 N-[(3S,4R)-4-(디플루오로메틸)피롤리딘-3-일]카바메이트 및 tert-부틸 N-[(3R,4S)-4-(디플루오로메틸)피롤리딘-3-일]카바메이트
에틸 아세테이트(14mL) 중 벤질 (3S,4R)-3-[[(tert-부톡시)카보닐]아미노]-4-(디플루오로메틸)피롤리딘-1-카복실레이트(650mg, 1.76 mmol) 및 Pd/C(450mg, 10%)의 혼합물을 수소 대기(벌룬) 하에 25℃에서 3시간 동안 교반하였다. 고체는 여과해냈다. 여과액은 진공 하에 농축하여 tert-부틸 N-[(3S,4R)-4-(디플루오로메틸)피롤리딘-3-일]카바메이트를 무색 오일로서 제공하였다. MS(ESI, m/z): 237[M+H]+.
tert-부틸 N-[(3R,4S)-4-(디플루오로메틸)피롤리딘-3-일]카바메이트는 벤질 (3R,4S)-3-[[(tert-부톡시)카보닐]아미노]-4-(디플루오로메틸)피롤리딘-1-카복실레이트로부터 유사하게 수득하였다. MS(ESI, m/z): 237[M+H]+.
중간체 52-1. tert-부틸 4-[(6S)-6-아미노-4-플루오로-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-2-일]피페라진-1-카복실레이트
Figure pct00159
단계 1. 벤질 N-벤질-N-[(6S)-2-(트리플루오로메탄설포닐옥시)-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-6-일]카바메이트
NaH(260mg, 6.50 mmol, 60%)을 DMF(5mL) 중 벤질 N-[(6S)-2-(트리플루오로메탄설포닐옥시)-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-6-일]카바메이트(중간체 47-2)(1.00g, 2.23 mmol)의 교반 용액에 0℃에서 분할 첨가하였다. 결과적으로 수득되는 혼합물을 0℃에서 30분 동안 교반하였다. 상기 혼합물에 벤질 브로마이드(795mg, 4.56 mmol)를 0℃에서 30분 넘게 적가하였다. 결과적으로 수득되는 혼합물을 26℃에서 1시간 동안 교반하였다. 반응은 물(30mL)을 첨가하여 0℃에서 ??치시켰다. 결과적으로 수득되는 혼합물을 에틸 아세테이트(3 x 30 mL)로 추출하였다. 유기 층을 합하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조하고, 여과하고, 진공 하에 농축하였다. 잔류물을 역상 크로마토그래피로 정제하였다[컬럼: C18 실리카겔; 이동상, A: 물(10 mmol/L NH4HCO3 함유) 및 B: ACN(5%에서 30분 후 80%)]. 수집된 분획을 농축하여 벤질 N-벤질-N-[(6S)-2-(트리플루오로메탄설포닐옥시)-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-6-일]카바메이트를 갈색 고체로서 제공하였다. MS(ESI, m/z): 521[M+H]+.
단계 2. 벤질 N-벤질-N-[(6S)-2-클로로-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-6-일]카바메이트
벤질 N-벤질-N-[(6S)-2-(트리플루오로메탄설포닐옥시)-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-6-일]카바메이트(925mg, 1.69 mmol) 용액 및 디옥산(3mL) 중 HCl(1mL, 디옥산 중 4M) 용액을 100℃에서 15분 동안 교반하였다. 혼합물을 25℃로 냉각시키고 진공 하에 농축하였다. 잔류물을 역상 크로마토그래피로 정제하였다[컬럼: C18 실리카겔; 이동상, A: 물(10 mmol/L NH4HCO3 함유) 및 B: ACN(5%에서 30분 후 80%)]. 수집된 분획을 농축하여 벤질 N-벤질-N-[(6S)-2-클로로-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-6-일]카바메이트를 갈색 오일로서 제공하였다. MS(ESI, m/z): 407, 409[M+H]+.
단계 3. (6S)-6-[벤질[(벤질옥시)카보닐]아미노]-2-클로로-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-1-이윰-1-올레이트
DCM(20mL) 중 벤질 N-벤질-N-[(6S)-2-클로로-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-6-일]카바메이트(632mg, 1.49 mmol) 및 m-CPBA(1.31g, 7.46 mmol)의 용액을 25℃에서 16시간 동안 교반하였다. 반응은 Na2SO3(포화 수용액, 30mL) 및 NaHCO3(포화 수용액, 30mL)을 첨가하여 ??치시켰다. 결과적으로 수득되는 혼합물을 에틸 아세테이트(3 x 50 mL)로 추출하였다. 유기층을 합하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조하고, 여과하고, 진공 하에 농축하였다. 잔류물을 실리카겔 크로마토그래피로 정제(1:3 에틸 아세테이트/석유 에테르로 용출)하여 (6S)-6-[벤질[(벤질옥시)카보닐]아미노]-2-클로로-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-1-이윰-1-올레이트를 백색 고체로서 제공하였다. MS(ESI, m/z): 423, 425[M+H]+.
단계 4. (6S)-6-[벤질[(벤질옥시)카보닐]아미노]-2-[4-[(tert-부톡시)카보닐]피페라진-1-일]-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-1-이윰-1-올레이트
t-BuOH(5mL) 중 (6S)-6-[벤질[(벤질옥시)카보닐]아미노]-2-클로로-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-1-이윰-1-올레이트(470mg, 1.06 mmol), tert-부틸 피페라진-1-카복실레이트(1.04g, 5.58 mmol) 및 DIEA(0.990mL, 5.57 mmol)의 용액을 90℃에서 10시간 동안 교반하였다. 결과적으로 수득되는 혼합물을 진공 하에 농축하였다. 잔류물을 역상 크로마토그래피로 정제하였다[C18 실리카겔; 이동상, A: 물(10 mmol/L NH4HCO3 함유) 및 B: ACN(5%에서 30분 후 80%)]. 수집된 분획을 농축하여 (6S)-6-[벤질[(벤질옥시)카보닐]아미노]-2-[4-[(tert-부톡시)카보닐]피페라진-1-일]-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-1-이윰-1-올레이트를 황색 고체로서 제공하였다. MS(ESI, m/z): 573[M+H]+.
단계 5. (6S)-6-[벤질[(벤질옥시)카보닐]아미노]-2-[4-[(tert-부톡시)카보닐]피페라진-1-일]-N,N,N-트리메틸-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-4-아미늄의 TFA 염
DCM(9mL) 중 (6S)-6-[벤질[(벤질옥시)카보닐]아미노]-2-[4-[(tert-부톡시)카보닐]피페라진-1-일]-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-1-이윰-1-올레이트(460mg, 0.760 mmol)의 용액을 트리메틸아민 용액(3.63mL, THF 중 1M)으로 0℃에서 처리한 뒤, 0℃에서 Tf2O(0.365mL, 2.13 mmol)를 적가하였다. 결과적으로 수득되는 혼합물을 25℃에서 1시간 동안 교반한 뒤, 진공 하에 농축하였다. 잔류물을 역상 크로마토그래피로 정제하였다[컬럼: C18 실리카겔; 이동상, A: 물(10 mmol/L NH4HCO3 함유) 및 B: ACN(5%에서 30분 후 80%)]. 수집된 분획을 농축하여 (6S)-6-[벤질[(벤질옥시)카보닐]아미노]-2-[4-[(tert-부톡시)카보닐]피페라진-1-일]-N,N,N-트리메틸-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-4-아미늄의 TFA 염을 연갈색 고체로서 제공하였다. MS(ESI, m/z): 615[M+H]+.
단계 6. tert-부틸 4-[(6S)-6-[벤질[(벤질옥시)카보닐]아미노]-4-플루오로-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-2-일]피페라진-1-카복실레이트
(6S)-6-[벤질[(벤질옥시)카보닐]아미노]-2-[4-[(tert-부톡시)카보닐]피페라진-1-일]-N,N,N-트리메틸-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-4-아미늄(230 mg, 0.300 mmol)의 TFA 염 및 TBAF 용액(3.30mL, THF 중 1M)을 DMF(5mL) 중에 용해한 용액을 90℃에서 2시간 동안 교반하였다. 혼합물을 역상 크로마토그래피로 정제하였다[컬럼: C18 실리카겔; 이동상, A: 물(10 mmol/L NH4HCO3 함유) 및 B: ACN(5%에서 30분 후 80%)]. 수집된 분획을 농축하여 tert-부틸 4-[(6S)-6-[벤질[(벤질옥시)카보닐]아미노]-4-플루오로-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-2-일]피페라진-1-카복실레이트를 백색 고체로서 제공하였다. MS(ESI, m/z): 575[M+H]+.
단계 7. tert-부틸 4-[(6S)-6-아미노-4-플루오로-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-2-일]피페라진-1-카복실레이트
에틸 아세테이트(5mL) 중 tert-부틸 4-[(6S)-6-[벤질[(벤질옥시)카보닐]아미노]-4-플루오로-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-2-일]피페라진-1-카복실레이트(100mg, 0.170 mmol) 및 탄소 상의 팔라듐(100mg, 10%)의 혼합물을 수소 대기 하에 25℃에서 3시간 동안 교반하였다. 고체를 여과해내고 여과 케익을 에틸 아세테이트(3 x 10mL)로 세척하였다. 여과액은 감압 하에 농축하여 tert-부틸 4-[(6S)-6-아미노-4-플루오로-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-2-일]피페라진-1-카복실레이트를 연갈색 고체로서 제공하였다. MS(ESI, m/z): 351[M+H]+.
이하 표 8의 중간체는 중간체 52-1의 제조에 사용된 것과 유사한 표준 화학적 조작 및 절차를 사용하여 제조하였다.
Figure pct00160
중간체 53. 트랜스-tert-부틸 N-[4-(메톡시메틸)피롤리딘-3-일]-N-메틸카바메이트
Figure pct00161
단계 1. 에틸 (2E)-4-메톡시부트-2-에노에이트
에틸 (2E)-4-브로모부트-2-에노에이트(33.0g, 171 mmol), Ag2O(39.6g, 171 mmol) 및 MeOH(100mL)의 혼합물을 빛 없이 25℃에서 12시간 동안 교반하였다. 고체를 여과해냈다. 여과액은 진공 하에 농축하였다. 잔류물을 역상 크로마토그래피를 통해 정제하였다[컬럼: C18 실리카겔; 이동상, A: 물(0.05% TFA 함유) 및 B: ACN (5%에서 20분 후 75%)]. 수집한 분획을 진공 하에 농축하여 에틸 (2E)-4-메톡시부트-2-에노에이트를 황색 오일로서 제공하였다. MS(ESI, m/z): 145[M+H]+.
단계 2. 트랜스-에틸 1-벤질-4-(메톡시메틸)피롤리딘-3-카복실레이트
DCM(2mL) 중 TFA(0.480mL, 4.20 mmol) 용액을 DCM(400mL) 중 에틸 (2E)-4-메톡시부트-2-에노에이트(9.30g, 64.5 mmol) 및 벤질(메톡시메틸)[(트리메틸실릴)메틸]아민(22.9g, 96.7 mmol)의 교반 용액에 <10℃에서 첨가하였다. 결과적으로 수득되는 혼합물을 25℃에서 2시간 동안 교반하였다. 반응은 NH4HCO3(포화 수용액, 150 mL)을 첨가하여 ??치시켰다. 결과적으로 수득되는 혼합물을 DCM(3 x 100 mL)으로 추출하였다. 유기 층을 합하고, 무수 Na2SO4 상에서 건조하고, 여과하고, 감압 하에 농축하였다. 잔류물을 실리카겔 크로마토그래피로 정제(1:5 에틸 아세테이트/석유 에테르로 용출)하여 트랜스-에틸 1-벤질-4-(메톡시메틸)피롤리딘-3-카복실레이트를 황색 오일로서 제공하였다. MS(ESI, m/z): 278[M+H]+.
단계 3. 트랜스-에틸 4-(메톡시메틸)피롤리딘-3-카복실레이트
트랜스-에틸 1-벤질-4-(메톡시메틸)피롤리딘-3-카복실레이트(14.0g, 50.4 mmol), Pd(OH)2/C(8.43g, 10%) 및 MeOH(200 mL)의 혼합물을 수소 대기(벌룬) 하에 25℃에서 1시간 동안 교반하였다. 고체는 여과해냈다. 여과액은 진공 하에 농축하여 트랜스-에틸 4-(메톡시메틸)피롤리딘-3-카복실레이트를 황색 오일로서 제공하였다. MS(ESI, m/z): 188[M+H]+.
단계 4. 트랜스-1-벤질 3-에틸 4-(메톡시메틸)피롤리딘-1,3-디카복실레이트
CbzCl(9.01mL, 64.0 mmol)를 에틸 아세테이트(100m) 및 H2O(100mL) 중 트랜스-에틸 4-(메톡시메틸)피롤리딘-3-카복실레이트(8.00g, 42.7 mmol) 및 K2CO3(14.7g, 106 mmol)의 혼합물에 0℃에서 첨가하였다. 혼합물을 25℃에서 1시간 동안 교반하였다. 혼합물은 에틸 아세테이트(3 x 50 mL)로 추출하였다. 유기 층을 합하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조하고, 여과하고, 진공 하에 농축하였다. 잔류물을 실리카겔 크로마토그래피로 정제(1:3 에틸 아세테이트/석유 에테르로 용출)하여 트랜스-1-벤질 3-에틸 4-(메톡시메틸)피롤리딘-1,3-디카복실레이트를 황색 오일로서 제공하였다. MS(ESI, m/z): 322[M+H]+.
단계 5. 트랜스 -1-[(벤질옥시)카보닐]-4-(메톡시메틸)피롤리딘-3-카복실산
H2O(40mL), THF(40mL) 및 MeOH(40mL) 중 트랜스-1-벤질 3-에틸 4-(메톡시메틸)피롤리딘-1,3-디카복실레이트(5.00g, 15.6 mmol) 및 NaOH(3.11g, 77.7 mmol)의 용액을 25℃에서 2시간 동안 교반하였다. 용매는 진공 하에 제거하였다. 잔류물의 pH 값은 염산(3N)으로 pH 6으로 조정하였다. 결과적으로 수득되는 혼합물을 에틸 아세테이트(3 x 25mL)로 추출하였다. 유기 층을 합하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조하고, 여과하고, 진공 하에 농축하여 트랜스-1-[(벤질옥시)카보닐]-4-(메톡시메틸)피롤리딘-3-카복실산을 황색 오일로서 제공하였다. MS(ESI, m/z): 294[M+H]+.
단계 6. 트랜스-벤질 3-[[(tert-부톡시)카보닐]아미노]-4-(메톡시메틸)피롤리딘-1-카복실레이트
t-BuOH(60mL) 중 트랜스-1-[(벤질옥시)카보닐]-4-(메톡시메틸)피롤리딘-3-카복실산(3.00g, 10.2 mmol), DPPA(3.38g, 12.3 mmol), 및 Et3N(4.25mL, 30.6 mmol)의 용액을 80℃에서 3시간 동안 교반하였다. 혼합물을 25℃로 냉각하고 진공 하에 농축하였다. 잔류물을 역상 크로마토그래피를 통해 정제하였다[컬럼: C18 실리카겔; 이동상, A: 물(0.05% TFA 함유) 및 B: ACN(5%에서부터 20분 후 75%까지)]. 수집된 분획을 진공 하에 농축하여 조생성물을 제공하였다. 조생성물을 실리카겔 크로마토그래피로 정제(1:3 THF/석유 에테르로 용출)하여 트랜스-벤질 3-[[(tert-부톡시)카보닐]아미노]-4-(메톡시메틸)피롤리딘-1-카복실레이트를 무색 오일로서 제공하였다. MS(ESI, m/z): 365[M+H]+.
단계 7. 트랜스-tert-부틸 N-[1-벤질-4-(메톡시메틸)피롤리딘-3-일]-N-메틸카바메이트
NaH(59.0mg, 1.48 mmol, 60%)을 DMF(4mL) 중 트랜스-tert-부틸 N-[1-벤질-4-(메톡시메틸)피롤리딘-3-일]카바메이트(350 mg, 0.983 mmol)의 용액에 0℃에서 첨가하였다. 결과적으로 수득되는 용액을 0℃에서 30분 동안 교반하였다. 그 다음, CH3I(0.018mL, 0.281 mmol)을 0℃에서 첨가하였다. 결과적으로 수득되는 혼합물을 25℃에서 추가 2시간 동안 교반하였다. 반응은 물(50mL)로 ??치시켰다. 결과적으로 수득되는 혼합물을 에틸 아세테이트(3 x 50mL)로 추출하였다. 유기층을 합하고, 무수 Na2SO4 상에서 건조하고, 여과하고, 감압 하에 농축하였다. 잔류물은 실리카겔 크로마토그래피로 정제(1:3 에틸 아세테이트/석유 에테르로 용출)하여 트랜스-tert-부틸 N-[1-벤질-4-(메톡시메틸)피롤리딘-3-일]-N-메틸카바메이트를 백색 고체로서 제공하였다. MS(ESI, m/z): 379[M+H]+.
단계 8. 트랜스-tert-부틸 N-[4-(메톡시메틸)피롤리딘-3-일]-N-메틸카바메이트
에틸 아세테이트(10mL) 중 트랜스-tert-부틸 N-[1-벤질-4-(메톡시메틸)피롤리딘-3-일]-N-메틸카바메이트(330mg, 0.828 mmol) 및 탄소 상의 팔라듐(300mg, 10%)의 혼합물을 수소 대기(벌룬) 하에 25℃에서 3시간 동안 교반하였다. 결과적으로 수득되는 혼합물을 여과하였다. 여과액을 감압 하에 농축하여 트랜스-tert-부틸 N-[4-(메톡시메틸)피롤리딘-3-일]-N-메틸카바메이트를 무색 오일로서 제공하였다. MS(ESI, m/z): 245[M+H]+.
중간체 54. 시스-tert-부틸 N-[4-(플루오로메틸)피롤리딘-3-일]카바메이트
Figure pct00162
단계 1 . 1-벤질-4-(하이드록시메틸)피롤리딘-2-온
NaBH4(24.0g, 634 mmol)을 에탄올(800mL) 중 메틸 1-벤질-5-옥소피롤리딘-3-카복실레이트(50.0g, 214 mmol)의 용액에 0℃에서 첨가하였다. 결과적으로 수득되는 용액을 25℃에서 4시간 동안 교반하였다. 반응은 물(50mL)을 첨가하여 ??치시켰다. 혼합물을 진공 하에 농축하였다. 잔류물을 물(200mL)로 희석하였다. 결과적으로 수득되는 혼합물을 DCM(3 x 500mL)으로 추출하였다. 유기층을 합하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조하고, 여과하고, 진공 하에 농축하였다. 잔류물을 실리카겔 크로마토그래피로 정제(10:1 디클로로메탄/메탄올로 용출)하여 1-벤질-4-(하이드록시메틸)피롤리딘-2-온을 무색 오일로서 제공하였다. MS(ESI, m/z): 206[M+H]+.
단계 2. 1-벤질-4-(플루오로메틸)피롤리딘-2-온
DAST(32.2mL, 244 mmol)를 DCM(300mL) 중 1-벤질-4-(하이드록시메틸)피롤리딘-2-온(20.0g, 97.5 mmol)의 용액에 -78℃에서 첨가하였다. 결과적으로 수득되는 용액을 25℃에서 16시간 동안 교반하였다. 반응물을 얼음-물(200mL)에 부었다. 결과적으로 수득되는 혼합물을 DCM(3 x 200mL)으로 추출하였다. 유기층을 합하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조하고, 여과하고, 진공 하에 농축하였다. 잔류물을 역상 크로마토그래피를 통해 정제[컬럼: C18 컬럼; 이동상, A: 물(10 mmol/L NH4HCO3 함유) 및 B: ACN(0%에서부터 45분 후 50%까지)]하여 1-벤질-4-(플루오로메틸)피롤리딘-2-온을 황색 오일로서 제공하였다. MS(ESI, m/z): 208[M+H]+.
단계 3. 트랜스-1-벤질-4-(플루오로메틸)-3-하이드록시피롤리딘-2-온
LDA(24.0mL, THF 중 2M) 용액을 THF(100mL) 중 1-벤질-4-(플루오로메틸)피롤리딘-2-온(5.00g, 23.6 mmol)의 용액에 -78℃에서 첨가하였다. 결과적으로 수득되는 용액을 -78℃에서 1시간 동안 교반하였다. 그 다음, O2를 도입시켰다. 결과적으로 수득되는 용액을 -78℃에서 3시간 동안 교반하였다. 반응은 물(50mL)을 첨가하여 ??치시켰다. 용매는 진공 하에 제거하였고. 잔류물을 DCM(3 x 100mL)으로 추출하였다. 유기 층을 합하고, 무수 Na2SO4 상에서 건조하고, 여과하고, 감압 하에 농축하였다. 잔류물을 역상 크로마토그래피로 정제[컬럼: C18 실리카겔; 이동상, A: 물(0.1% TFA 함유) 및 B: ACN(0%에서부터 30분 후 60%까지)]하여 트랜스-1-벤질-4-(플루오로메틸)-3-하이드록시피롤리딘-2-온을 갈색 오일로서 제공하였다. MS(ESI, m/z): 224[M+H]+.
단계 4. 트랜스-1-벤질-4-(플루오로메틸)-2-옥소피롤리딘-3-일 메탄설포네이트
MsCl(2.75mL, 35.5mmol)을 DCM(70mL) 중 트랜스-1-벤질-4-(플루오로메틸)-3-하이드록시피롤리딘-2-온(5.40g, 23.7 mmol) 및 Et3N(6.59mL, 47.4 mmol)의 교반 용액에 0℃에서 첨가하였다. 결과적으로 수득되는 혼합물을 25℃에서 2시간 동안 교반하였다. 반응은 물(50mL)을 첨가하여 0℃에서 ??치시켰다. 결과적으로 수득되는 혼합물을 DCM(3 x 50mL)으로 추출하였다. 유기층을 합하고, 무수 Na2SO4 상에서 건조하고, 여과하고 감압 하에 농축하여 트랜스-1-벤질-4-(플루오로메틸)-2-옥소피롤리딘-3-일 메탄설포네이트를 갈색 오일로서 제공하였다. MS(ESI, m/z): 302[M+H]+.
단계 5. 시스-3-아지도-1-벤질-4-(플루오로메틸)피롤리딘-2-온
DMF(150mL) 중 트랜스-1-벤질-4-(플루오로메틸)-2-옥소피롤리딘-3-일 메탄설포네이트(6.00g, 19.5 mmol) 및 NaN3(3.81g, 58.6 mmol)의 혼합물을 100℃에서 1시간 동안 교반하였다. 혼합물을 25℃로 냉각시켰다. 반응은 물(500mL)을 첨가하여 25℃에서 ??치시켰다. 결과적으로 수득되는 혼합물을 에틸 아세테이트(3 x 200mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 염수(300mL)로 세척하고, 무수 Na2SO4 상에서 건조하고, 여과하고, 감압 하에 농축하였다. 잔류물을 실리카겔 크로마토그래피로 정제(1:1 에틸 아세테이트/석유 에테르로 용출)하여 시스-3-아지도-1-벤질-4-(플루오로메틸)피롤리딘-2-온을 황색 오일로서 제공하였다. MS(ESI, m/z): 249[M+H]+.
단계 6. 시스-tert-부틸 N-[1-벤질-4-(플루오로메틸)-2-옥소피롤리딘-3-일]카바메이트
EtOH(100mL) 중 3-아지도-1-벤질-4-(플루오로메틸)피롤리딘-2-온(4.00g, 15.8 mmol), 탄소 상의 팔라듐(4.00g, 10%) 및 디-tert-부틸 디카보네이트(6.89g, 31.6 mmol)를 수소 대기(벌룬) 하에 25℃에서 3시간 동안 교반하였다. 고체를 여과해냈다. 여과액은 진공 하에 농축하였다. 잔류물을 실리카겔 크로마토그래피로 정제(1:1 에틸 아세테이트/석유 에테르로 용출)하여 시스-tert-부틸 N-[1-벤질-4-(플루오로메틸)-2-옥소피롤리딘-3-일]카바메이트를 백색 고체로서 제공하였다. MS(ESI, m/z): 323[M+H]+.
단계 7. 시스-tert-부틸 N-[1-벤질-4-(플루오로메틸)피롤리딘-3-일]카바메이트
BH3 용액(30mL, THF 중 1M)을 THF(60mL) 중 시스-tert-부틸 N-[1-벤질-4-(플루오로메틸)-2-옥소피롤리딘-3-일]카바메이트(2.40g, 7.30 mmol)의 교반 용액에 0℃에서 첨가하였다. 결과적으로 수득되는 혼합물을 25℃에서 16시간 동안 교반하였다. 결과적으로 수득되는 혼합물을 진공 하에 농축하였다. 그 다음, EtOH(60mL), H2O(15mL) 및 Et3N(15mL)을 첨가하였다. 결과적으로 수득되는 혼합물을 80℃에서 2시간 동안 교반하였다. 결과적으로 수득되는 혼합물을 25℃로 냉각하고 진공 하에 농축하였다. 잔류물을 역상 크로마토그래피로 정제[컬럼: C18 컬럼; 이동상, A: 물(10 mmol/L NH4HCO3 함유) 및 B: ACN(0%에서부터 30분 후 100%까지)]하여 시스-tert-부틸 N-[1-벤질-4-(플루오로메틸)피롤리딘-3-일]카바메이트를 백색 고체로서 제공하였다. MS(ESI, m/z): 309[M+H]+.
단계 8. 시스-tert-부틸 N-[4-(플루오로메틸)피롤리딘-3-일]카바메이트
에틸 아세테이트(10mL) 중 tert-부틸 N-[1-벤질-4-(플루오로메틸)피롤리딘-3-일]카바메이트(450mg, 1.43 mmol) 및 Pd(OH)2/C(450mg, 10%)의 혼합물을 수소 대기(벌룬) 하에 25℃에서 2시간 동안 교반하였다. 결과적으로 수득되는 혼합물을 여과하였다. 여과액은 감압 하에 농축하여 시스-tert-부틸 N-[4-(플루오로메틸)피롤리딘-3-일]카바메이트를 갈색 오일로서 제공하였다. MS(ESI, m/z): 219[M+H]+.
중간체 55. 트랜스-tert-부틸 N-[4-(2-메톡시에톡시)피롤리딘-3-일]카바메이트
Figure pct00163
단계 1. 트랜스-벤질 3-아지도-4-(2-메톡시에톡시)피롤리딘-1-카복실레이트
NaH(1.91g, 47.7 mmol, 60%)을 DMF(70mL) 중 트랜스-벤질 3-아지도-4-하이드록시피롤리딘-1-카복실레이트 (5.00 g, 19.1 mmol)의 교반 용액에 <10℃에서 첨가하였다. 결과적으로 수득되는 용액을 <10℃에서 30분 동안 교반하였다. 그 다음, 1-브로모-2-메톡시에탄(7.95g, 57.2 mmol)을 상기 혼합물에 <10℃에서 첨가하였다. 결과적으로 수득되는 혼합물을 26℃에서 3시간 동안 교반하였다. 반응은 그 다음 물/얼음(70mL)을 첨가하여 ??치시켰다. 결과적으로 수득되는 혼합물을 에틸 아세테이트(3 x 100mL)로 추출하였다. 유기층을 합하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조하고, 여과하고, 여과액을 진공 하에 농축하였다. 잔류물을 역상 크로마토그래피를 통해 정제하였다[컬럼: C18 실리카겔; 이동상, A: 물(0.05% TFA 함유) 및 B: ACN(10%에서부터 25분 후 75%까지)]. 수집된 분획을 진공 하에 농축하여 트랜스-벤질 3-아지도-4-(2-메톡시에톡시)피롤리딘-1-카복실레이트를 황색 오일로서 제공하였다. MS (ESI, m/z): 321[M+H]+.
단계 2. 트랜스-벤질 3-아미노-4-(2-메톡시에톡시)피롤리딘-1-카복실레이트
에틸 아세테이트(100mL) 중 트랜스-벤질 3-아지도-4-(2-메톡시에톡시)피롤리딘-1-카복실레이트(5.60g, 17.4 mmol) 및 PtO2(2.00g, 8.80 mmol)을 수소 대기(벌룬) 하에 26℃에서 1시간 동안 교반하였다. 고체를 여과해냈다. 여과액은 진공 하에 농축하여 트랜스-벤질 3-아미노-4-(2-메톡시에톡시)피롤리딘-1-카복실레이트를 흑색 오일로서 제공하였다. MS(ESI, m/z): 295[M+H]+.
단계 3. 트랜스-벤질 3-[[(tert-부톡시)카보닐]아미노]-4-(2-메톡시에톡시)피롤리딘-1-카복실레이트
(Boc)2O(5.45g, 25.0 mmol)를 THF(70mL) 및 H2O(70mL) 중 트랜스-벤질 3-아미노-4-(2-메톡시에톡시)피롤리딘-1-카복실레이트(5.00 g, 17.0 mmol) 및 Et3N(7.08 mL, 70.0 mmol)의 용액에 첨가하였다. 결과적으로 수득되는 용액을 26℃에서 3시간 동안 교반하였다. THF는 진공 하에 제거하였다. 잔류물을 에틸 아세테이트(3 x 100mL)로 추출하였다. 유기 층을 합하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조하고, 여과하고, 여과액은 진공 하에 농축하였다. 잔류물을 실리카겔 크로마토그래피로 정제(1:3 에틸 아세테이트/석유 에테르로 용출)하여 트랜스-벤질 3-[[(tert-부톡시)카보닐]아미노]-4-(2-메톡시에톡시)피롤리딘-1-카복실레이트를 황색 오일로서 제공하였다. MS(ESI, m/z): 395[M+H]+.
단계 4. 트랜스-tert-부틸 N-[4-(2-메톡시에톡시)피롤리딘-3-일]카바메이트
에틸 아세테이트(30mL) 중 트랜스-벤질 3-[[(tert-부톡시)카보닐]아미노]-4-(2-메톡시에톡시)피롤리딘-1-카복실레이트(1.60g, 4.06 mmol) 및 탄소 상의 팔라듐(1.60g, 10%)의 혼합물을 수소 대기(벌룬) 하에 26℃에서 2시간 동안 교반하였다. 고체를 여과해냈다. 여과액은 진공 하에 농축하여 트랜스-tert-부틸 N-[4-(2-메톡시에톡시)피롤리딘-3-일]카바메이트를 연황색 오일로서 제공하였다. MS(ESI, m/z): 261[M+H]+.
중간체 56. tert-부틸 N-[(3S,4S)-4-(프로판-2-일옥시)피롤리딘-3-일]카바메이트
Figure pct00164
단계 1. 벤질 (3S,4S)-3-아지도-4-(프로판-2-일옥시)피롤리딘-1-카복실레이트
수소화나트륨(688mg, 17.2 mmol, 60%)을 DMF(100mL) 중 벤질 (3S,4S)-3-아지도-4-하이드록시피롤리딘-1-카복실레이트(3.00g, 11.44 mmol), 2-브로모프로판(10.7mL, 113 mmol) 및 KI(3.80g, 2.89 mmol)의 교반 용액에 0℃에서 첨가하였다. 결과적으로 수득되는 용액을 50℃에서 3시간 동안 교반하였다. 25℃로 냉각한 후, 반응은 H2O/얼음(100mL)을 첨가하여 ??치시켰다. 결과적으로 수득되는 혼합물을 에틸 아세테이트(3 x 200mL)로 추출하였다. 유기층을 합하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조하고, 여과한 뒤, 진공 하에 농축하였다. 잔류물을 역상 크로마토그래피로 정제하였다[컬럼, C18 실리카겔; 이동상, A: 물(0.05% 포름산 함유) 및 B: ACN (0%에서부터 40분 내에 80%까지)]. 수집된 분획을 진공 하에 농축하여 벤질 (3S,4S)-3-아지도-4-(프로판-2-일옥시)피롤리딘-1-카복실레이트를 무색 오일로서 제공하였다. MS(ESI, m/z): 305[M+H]+.
단계 2. 벤질 (3S,4S)-3-아미노-4-(프로판-2-일옥시)피롤리딘-1-카복실레이트
에틸 아세테이트(10mL) 중 벤질 (3S,4S)-3-아지도-4-(프로판-2-일옥시)피롤리딘-1-카복실레이트(220mg, 0.72 mmol) 및 PtO2(33.0mg, 0.150 mmol)의 혼합물을 수소 대기(벌룬) 하에 25℃에서 2시간 동안 교반하였다. 고체는 여과해냈다. 여과액은 진공 하에 농축하여 벤질 (3S,4S)-3-아미노-4-(프로판-2-일옥시)피롤리딘-1-카복실레이트를 갈색 오일로서 제공하였다. MS(ESI, m/z): 279[M+H]+.
단계 3. 벤질 (3S,4S)-3-[[(tert-부톡시)카보닐]아미노]-4-(프로판-2-일옥시)피롤리딘-1-카복실레이트
THF(5mL) 및 물(5mL) 중 벤질 (3S,4S)-3-아미노-4-(프로판-2-일옥시)피롤리딘-1-카복실레이트(200mg, 0.720 mmol), Et3N(0.190mL, 1.35 mmol) 및 (Boc)2O(236mg, 1.08 mmol)의 용액을 25℃에서 30분 동안 교반하였다. 용매는 진공 하에 제거하였다. 잔류물을 물(10mL)로 희석하였다. 결과적으로 수득되는 혼합물을 에틸 아세테이트(3 x 20mL)로 추출하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조하고, 여과하고, 진공 하에 농축하였다. 잔류물을 실리카겔 크로마토그래피로 정제(1:5 에틸 아세테이트/석유 에테르로 용출)하여 벤질 (3S, 4S)-3-[[(tert-부톡시)카보닐]아미노]-4-(프로판-2-일옥시)피롤리딘-1-카복실레이트를 무색 오일로서 제공하였다. MS(ESI, m/z): 379[M+H]+.
단계 4. tert-부틸 N-[(3S,4S)-4-(프로판-2-일옥시)피롤리딘-3-일]카바메이트
에틸 아세테이트(5mL) 중 벤질 (3S,4S)-3-[[(tert-부톡시)카보닐]아미노]-4-(프로판-2-일옥시)피롤리딘-1-카복실레이트(250mg, 0.660 mmol) 및 탄소 상의 팔라듐(250mg, 10%)의 혼합물을 수소 대기(벌룬) 하에 25℃에서 2시간 동안 교반하였다. 고체는 여과해냈다. 여과액은 진공 하에 농축하여 tert-부틸 N-[(3S,4S)-4-(프로판-2-일옥시)피롤리딘-3-일]카바메이트를 갈색 고체로서 제공하였다. MS(ESI, m/z): 245[M+H]+.
중간체 57. 벤질 N-(2-클로로-5,6,7,8-테트라하이드로퀴나졸린-6-일)카바메이트
Figure pct00165
단계 1. 벤질 N-[(3Z)-3-[(디메틸아미노)메틸리덴]-4-옥소사이클로헥실]카바메이트
톨루엔(20mL) 중 벤질 N-(4-옥소사이클로헥실)카바메이트(10.0g, 40.4 mmol) 및 (디메톡시메틸)디메틸아민(4.80g, 40.4 mmol)의 용액을 100℃에서 16시간 동안 교반하였다. 결과적으로 수득되는 혼합물을 진공 하에 농축하여 벤질 N-[(3Z)-3-[(디메틸아미노)메틸리덴]-4-옥소사이클로헥실]카바메이트를 황색 오일로서 제공하였다. MS(ESI, m/z): 303[M+H]+.
단계 2. 벤질 N-(2-아미노-5,6,7,8-테트라하이드로퀴나졸린-6-일)카바메이트
에탄올(150mL) 중 구아니딘 염산염(3.45g, 36.1 mmol) 및 에톡시화 나트륨(2.47g, 36.3 mmol)의 용액을 23℃에서 30분 동안 교반하였다. 그 다음, 벤질 N-[(3Z)-3-[(디메틸아미노)메틸리덴]-4-옥소사이클로헥실]카바메이트(11g, 21.8 mmol, 순도: 60%)를 첨가하였다. 결과적으로 수득되는 용액을 80℃에서 밤새 교반하였다. 결과적으로 수득되는 혼합물을 진공 하에 농축하였다. 잔류물을 실리카겔 크로마토그래피로 정제(1:10 MeOH/DCM로 용출)하여 벤질 N-(2-아미노-5,6,7,8-테트라하이드로퀴나졸린-6-일)카바메이트를 백색 고체로서 제공하였다. S(ESI, m/z): 299[M+H]+.
단계 3. 벤질 N-(2-클로로-5,6,7,8-테트라하이드로퀴나졸린-6-일)카바메이트
ACN(40mL) 중 벤질 N-(2-아미노-5,6,7,8-테트라하이드로퀴나졸린-6-일)카바메이트(1.85g, 6.20 mmol), t-BuNO2(3.72 mL, 31.0 mmol) 및 CuCl2(4.14g, 30.8 mmol)의 혼합물을 60℃에서 20분 동안 교반하였다. 반응 혼합물은 25℃로 냉각하였고 디에틸 에테르(20mL)를 첨가하였다. 고체를 여과해냈다. 여과액은 진공 하에 농축하였다. 잔류물을 역상 크로마토그래피로 정제[컬럼: C18 실리카겔; 이동상, A: 물(0.05% NH4HCO3 함유) 및 B: ACN(5%에서부터 30분 후 80%까지)]하여 벤질 N-(2-클로로-5,6,7,8-테트라하이드로퀴나졸린-6-일)카바메이트를 백색 고체로서 제공하였다. MS(ESI, m/z): 318, 320[M+H]+.
중간체 58. tert-부틸 4-(7-아미노-5,6,7,8-테트라하이드로이소퀴놀린-3-일)피페라진-1-카복실레이트
Figure pct00166
단계 1. RuCl-(S,S)-Ts-DPEN(헥사메틸벤젠)
DCM(40mL) 중 N-[(1S,2S)-2-아미노-1,2-디페닐에틸]-4-메틸벤젠-1-설폰아미드(S,S-Ts-DPEN)(1.09g, 3.00 mmol), Et3N(0.90mL, 6.47 mmol), 및 [RuCl2(헥사메틸벤젠)]2(1.00g, 1.50 mmol)의 용액을 25℃에서 5시간 동안 교반하였다. 결과적으로 수득되는 혼합물을 진공 하에 농축하였다. 잔류물을 실리카겔 크로마토그래피로 정제(1:10 MeOH/DCM으로 용출)하여 RuCl-(S,S)-Ts-DPEN(헥사메틸벤젠)을 적색 고체로서 제공하였다.
단계 2. RuCl-(S,S)-Ts-DPEN-OTf(헥사메틸벤젠)
DCM(50mL) 중 RuCl-(S,S)-Ts-DPEN(헥사메틸벤젠)(1.95g, 2.99 mmol) 및 실버 트리플루오로메탄설포네이트(0.800g, 3.17 mmol)의 용액을 25℃에서 6시간 동안 교반하였다. 고체는 여과해냈다. 여과액은 진공 하에 농축하여 RuCl-(S,S)-Ts-DPEN-OTf(헥사메틸벤젠)을 갈색 고체로서 제공하였다.
단계 3. 에틸 6-클로로-4-메틸피리딘-3-카복실레이트
황산(15.6mL, 306 mmol)을 EtOH(250mL) 중 6-클로로-4-메틸피리딘-3-카복실산(10.0g, 58.3 mmol)의 용액에 첨가하였다. 결과적으로 수득되는 용액을 25℃에서 48시간 동안 교반하였다. 물(500mL) 중 NaHCO3의 포화 용액을 반응물에 첨가하였다. 그 다음, EtOH를 증발시켰다. 잔류물은 DCM(2 x 500mL)으로 추출하였다. 유기 층을 합하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조하고, 여과하고, 진공 하에 농축하였다. 잔류물을 실리카겔 크로마토그래피로 정제(1:15 에틸 아세테이트/석유 에테르로 용출)하여 에틸 6-클로로-4-메틸피리딘-3-카복실레이트를 백색 고체로서 제공하였다. MS(ESI, m/z): 200, 202[M+H]+.
단계 4. 메틸 3-클로로-8-하이드록시-5,6-디하이드로이소퀴놀린-7-카복실레이트
LDA 용액(12.5mL, THF 중 2M)을 THF(100mL) 중 에틸 6-클로로-4-메틸피리딘-3-카복실레이트(2.00g, 10.0 mmol) 용액에 -78℃에서 첨가하였다. 결과적으로 수득되는 용액을 -78℃에서 1시간 동안 교반하였다. 그 다음, 메틸 프로프-2-에노에이트(2.25mL, 24.9 mmol)를 첨가하고, 반응물을 -78℃에서 1시간 동안 교반하였다. 반응은 그 다음 물(50mL)로 ??치시켰다. THF는 진공 제거하였다. 수성 층은 DCM(3 x 50mL)으로 추출하였다. 유기 층을 합하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조하고, 여과하고, 진공 하에 농축하였다. 잔류물을 실리카겔 크로마토그래피로 정제(1:10 에틸 아세테이트/석유 에테르로 용출)하여 메틸 3-클로로-8-하이드록시-5,6-디하이드로이소퀴놀린-7-카복실레이트를 백색 고체로서 제공하였다. MS(ESI, m/z): 240, 242[M+H]+.
단계 5 . 메틸 3-클로로-8-하이드록시-5,6,7,8-테트라하이드로이소퀴놀린-7-카복실레이트
Et3N(7.62mL, 54.8 mmol)을 MeOH(90mL) 중의 포름산 용액(1.89mL, 50.1 mmol)에 0℃에서 첨가하였다. 그 다음, 메틸 3-클로로-8-하이드록시-5,6-디하이드로이소퀴놀린-7-카복실레이트(3.00g, 12.5 mmol) 및 RuCl-(S,S)-Ts-DPEN-OTf(헥사메틸벤젠)(82mg, 0.099 mmol)을 첨가하였다. 결과적으로 수득되는 용액을 25℃에서 16시간 동안 교반하였다. 반응물은 그 다음 물(200mL)에 부었다. 용매는 진공 하에 제거하였다. 수성 층은 DCM(3 x 150mL)으로 추출하였다. 유기 층을 합하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조하고, 여과하고, 진공 하에 농축하였다. 잔류물을 실리카겔 크로마토그래피로 정제(1:5 에틸 아세테이트/석유 에테르로 용출)하여 메틸 3-클로로-8-하이드록시-5,6,7,8-테트라하이드로이소퀴놀린-7-카복실레이트를 백색 고체로서 제공하였다. MS(ESI, m/z): 242, 244[M+H]+.
단계 6 . 메틸 3-[4-[(tert-부톡시)카보닐]피페라진-1-일]-5,6-디하이드로이소퀴놀린-7-카복실레이트
톨루엔(10mL) 중 메틸 3-클로로-8-하이드록시-5,6,7,8-테트라하이드로이소퀴놀린-7-카복실레이트(0.500g, 2.07 mmol), tert-부틸 피페라진-1-카복실레이트(0.750g, 4.03 mmol), RuPhos Pd G3(100mg, 0.120 mmol), RuPhos(62.0mg, 0.140 mmol) 및 Cs2CO3(2.00g, 6.16 mmol)의 혼합물을 95℃에서 16시간 동안 교반하였다. 이 반응물을 4개의 배취로 병렬로 설치하였다. 실온으로 냉각한 후, 4개 배취의 반응 혼합물을 물(100mL)에 부었다. 결과적으로 수득되는 혼합물을 아실 아세테이트(3 x 100mL)로 추출하였다. 유기 층을 합하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조하고, 여과하고, 진공 하에 농축하였다. 잔류물을 실리카겔 크로마토그래피로 정제(1:4 에틸 아세테이트/석유 에테르로 용출)하여 메틸 3-[4-[(tert-부톡시)카보닐]피페라진-1-일]-5,6-디하이드로이소퀴놀린-7-카복실레이트를 백색 고체로서 제공하였다. MS(ESI, m/z): 374[M+H]+.
단계 7 . 메틸 3-[4-[(tert-부톡시)카보닐]피페라진-1-일]-5,6-디하이드로이소퀴놀린-7-카복실레이트
에틸 아세테이트(20mL) 중 메틸 3-[4-[(tert-부톡시)카보닐]피페라진-1-일]-5,6-디하이드로이소퀴놀린-7-카복실레이트(550mg, 1.47 mmol) 및 탄소 상의 팔라듐(500mg, 10%)의 혼합물을 수소 대기(벌룬) 하에 25℃에서 3시간 동안 교반하였다. 고체를 여과해냈다. 여과액은 진공 하에 농축하여 메틸 3-[4-[(tert-부톡시)카보닐]피페라진-1-일]-5,6,7,8-테트라하이드로이소퀴놀린-7-카복실레이트를 백색 고체로서 제공하였다. MS(ESI, m/z): 376[M+H]+.
단계 8 . 3-[4-[(tert-부톡시)카보닐]피페라진-1-일]-5,6,7,8-테트라하이드로이소퀴놀린-7-카복실산
물(20mL) 중 LiOH(200mg, 8.35 mmol)의 용액을 THF(20mL) 중 메틸 3-[4-[(tert-부톡시)카보닐]피페라진-1-일]-5,6,7,8-테트라하이드로이소퀴놀린-7-카복실레이트(500mg, 1.33 mmol)의 용액에 첨가하였다. 결과적으로 수득되는 용액을 25℃에서 2시간 동안 교반하였다. 결과적으로 수득되는 용액을 진공 하에 농축하였다. 잔류물을 역상 크로마토그래피를 통해 정제하였다[컬럼: X Bridge C18, 19 x 150 mm, 5 um; 이동상, A: 물(0.05% TFA 함유) 및 B: ACN(0%에서부터 25분 후 30%까지)]. 수집된 분획을 진공 하에 농축하여 3-[4-[(tert-부톡시)카보닐]피페라진-1-일]-5,6,7,8-테트라하이드로이소퀴놀린-7-카복실산을 백색 고체로서 제공하였다. MS(ESI, m/z): 362[M+H]+.
단계 9 . tert-부틸 4-(7-[[(벤질옥시)카보닐]아미노]-5,6,7,8-테트라하이드로이소퀴놀린-3-일)피페라진-1-카복실레이트
톨루엔(6mL) 중 3-[4-[(tert-부톡시)카보닐]피페라진-1-일]-5,6,7,8-테트라하이드로이소퀴놀린-7-카복실산(400mg, 1.11 mmol), DPPA(476mL, 2.20 mmol) 및 Et3N(0.460mL, 3.72 mmol)의 용액을 25℃에서 2시간 동안 교반한 다음, 70℃에서 2시간 동안 교반하였다. 그 다음, 벤질 알코올(1.14mL, 11.0 mmol)을 첨가하였다. 결과적으로 수득되는 용액을 70℃에서 2시간 동안 교반하였다. 실온으로 냉각한 후, 반응물은 그 다음 물(30mL)에 부었다. 결과적으로 수득되는 혼합물을 아실 아세테이트(3 x 20mL)로 추출하였다. 유기층을 합하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조하고, 여과하고, 진공 하에 농축하였다. 잔류물을 실리카겔 크로마토그래피로 정제(1:1 에틸 아세테이트/석유 에테르로 용출)하여 tert-부틸 4-(7-[[(벤질옥시)카보닐]아미노]-5,6,7,8-테트라하이드로이소퀴놀린-3-일)피페라진-1-카복실레이트를 무색 오일로서 제공하였다. MS(ESI, m/z): 467[M+H]+.
단계 10 . tert-부틸 4-(7-아미노-5,6,7,8-테트라하이드로이소퀴놀린-3-일)피페라진-1-카복실레이트
DMA(5mL) 중 tert-부틸 4-(7-[[(벤질옥시)카보닐]아미노]-5,6,7,8-테트라하이드로이소퀴놀린-3-일)피페라진-1-카복실레이트(200mg, 0.430 mmol) 및 K3PO4(228mg, 1.07 mmol)의 혼합물을 90℃에서 1시간 동안 교반하였다. 실온으로 냉각한 후, 잔류물을 역상 크로마토그래피를 통해 정제하였다[컬럼: X Bridge C18, 19 x 150 mm, 5 um; 이동상, A: 물(10 mmol/L NH4HCO3 함유) 및 B: ACN(10%에서부터 30분 후 50%까지)]. 수집된 분획을 진공 하에 농축하여 tert-부틸 4-(7-아미노-5,6,7,8-테트라하이드로이소퀴놀린-3-일)피페라진-1-카복실레이트를 백색 고체로서 제공하였다. MS(ESI, m/z): 333[M+H]+.
중간체 59. tert-부틸 N-[1,4-디옥사-7-아자스피로[4.4]노난-9-일]카바메이트
Figure pct00167
단계 1. 7-벤질 9-(2-하이드록시에틸) 1,4-디옥사-7-아자스피로[4.4]노난-7,9-디카복실레이트
톨루엔(100mL) 중 1-벤질 3-에틸 4-옥소피롤리딘-1,3-디카복실레이트(5.00g, 17.2 mmol), 에탄-1,2-디올(3.20g, 51.5 mmol), 및 PTSA(296mg, 1.72 mmol)의 혼합물을 Dean-Stark 튜브를 이용하여 110℃에서 3시간 동안 교반하였다. 혼합물을 27℃로 냉각하고 진공 하에 농축하였다. 잔류물을 역상 크로마토그래피로 정제[컬럼: C18 실리카겔; 이동상, A: 물(0.05% TFA 함유) 및 B: ACN(5%에서부터 20분 후 55%까지)]하여 7-벤질 9-(2-하이드록시에틸) 1,4-디옥사-7-아자스피로[4.4]노난-7,9-디카복실레이트를 황색 오일로서 제공하였다. MS(ESI, m/z): 352[M+H]+.
단계 2. 7-[(벤질옥시)카보닐]-1,4-디옥사-7-아자스피로[4.4]노난-9-카복실산
MeOH(40mL), THF(40mL) 및 H2O(40mL) 중 7-벤질 9-(2-하이드록시에틸) 1,4-디옥사-7-아자스피로[4.4]노난-7,9-디카복실레이트(2.80g, 7.96 mmol) 및 수산화나트륨(199mg, 4.98 mmol)의 혼합물을 28℃에서 2시간 동안 교반하였다. THF 및 MeOH는 진공 하에 제거하였다. 결과적으로 수득되는 혼합물을 HCl(1M)으로 pH를 7 내지 8로 산성화한 뒤, 진공 하에 농축하였다. 잔류물을 역상 크로마토그래피로 정제[컬럼: C18 실리카겔; 이동상, A: 물(0.05% TFA 함유) 및 B: ACN(5%에서부터 20분 후 30%까지)하여 7-[(벤질옥시)카보닐]-1,4-디옥사-7-아자스피로[4.4]노난-9-카복실산을 황색 오일로서 제공하였다. MS(ESI, m/z): 308[M+H]+.
단계 3. 벤질 9-[[(tert-부톡시)카보닐]아미노]-1,4-디옥사-7-아자스피로[4.4]노난-7-카복실레이트
DPPA(632mg, 2.30 mmol)를 t-BuOH(10mL) 중 7-[(벤질옥시)카보닐]-1,4-디옥사-7-아자스피로[4.4]노난-9-카복실산(600mg, 1.91 mmol) 및 Et3N(0.398mL, 2.87 mmol)의 교반 용액에 0℃에서 첨가하였다. 결과적으로 수득되는 혼합물을 90℃에서 2시간 동안 교반하였다. 혼합물을 냉각시켰다. 결과적으로 수득되는 혼합물을 진공 하에 농축하였다. 혼합물을 역상 크로마토그래피로 정제(컬럼: C18 실리카겔; 이동상, A: H2O(10 mmol/L NH4HCO3 함유) 및 B: ACN(0%에서부터 60%까지, 30분 넘게)]하여 벤질 9-[[(tert-부톡시)카보닐]아미노]-1,4-디옥사-7-아자스피로[4.4]노난-7-카복실레이트를 황색 오일로서 제공하였다. MS(ESI, m/z): 379[M+H]+.
단계 4. tert-부틸 N-[1,4-디옥사-7-아자스피로[4.4]노난-9-일]카바메이트
EtOAc(5mL) 중 벤질 9-[[(tert-부톡시)카보닐]아미노]-1,4-디옥사-7-아자스피로[4.4]노난-7-카복실레이트(200mg, 0.518 mmol) 및 Pd/C(200mg, 10%)의 혼합물을 수소 대기 하에 25℃에서 2시간 동안 교반하였다. 결과적으로 수득되는 혼합물을 여과하고, 여과 케익은 에틸 아세테이트(3 x 5mL)로 세척하였다. 여과액은 감압 하에 농축하여 tert-부틸 N-[1,4-디옥사-7-아자스피로[4.4]노난-9-일]카바메이트를 갈색으로서 제공하였다. MS(ESI, m/z): 245[M+H]+.
화학식 (I)의 화합물의 합성 실시예:
실시예 1-1. (R)-3-아미노-6-메틸-N-(7-(피페라진-1-일)크로만-3-일)티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드 및
실시예 1-2. (S)-3-아미노-6-메틸-N-(7-(피페라진-1-일)크로만-3-일)티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드
Figure pct00168
단계 1. tert-부틸 4-(3-(3-아미노-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미도)크로만-7-일)피페라진-1-카복실레이트
DMF(5mL) 중 tert-부틸 4-(3-아미노크로만-7-일)피페라진-1-카복실레이트, 중간체 12,(130mg, 0.27 mmol), EDCI(81mg, 0.42 mmol), HOBt(57mg, 0.42 mmol), DIEA(108mg, 0.84 mmol), 3-아미노-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복실산(58mg, 0.28 mmol)의 용액을 실온에서 18시간 동안 교반하였다. 반응은 물 20mL로 ??치시키고 EtOAc(50mL x 3)로 추출하였다. 합한 유기 층을 염수(30 mL x 2)로 세척하고, 무수 Na2SO4 상에서 건조하고, 여과하고, 진공 하에 농축하였다. 분취용 HPLC에 의한 정제[컬럼: XBridge Prep C18 OBD, 19x50 mm, 5 μm; 이동상 A: 물(10 mM NH4HCO3), B: ACN; 구배: 40% B에서부터 13분 후 60% B까지]는 tert-부틸 4-(3-(3-아미노-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미도)크로만-7-일)피페라진-1-카복실레이트를 제공하였다.
단계 2. tert-부틸 (R)-4-(3-(3-아미노-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미도)크로만-7-일)피페라진-1-카복실레이트 및 tert-부틸 (S)-4-(3-(3-아미노-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미도)크로만-7-일)피페라진-1-카복실레이트
tert-부틸 4-(3-(3-아미노-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미도)크로만-7-일)피페라진-1-카복실레이트의 라세미 혼합물을 키랄 HPLC에 의해 분리(컬럼: Lux 셀룰로스-4, 0.46x5 cm, 3μm; 이동상: 헥산(0.1% Et2NH):EtOH = 60:40, 6분 동안)하여 다음과 같은 표제 화합물을 제공하였다: tert-부틸 (R)-4-(3-(3-아미노-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미도)크로만-7-일)피페라진-1-카복실레이트, 황색 고체(1차 용출 이성질체, RT=3.87 min, 추정된 입체화학) 및 tert-부틸 (S)-4-(3-(3-아미노-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미도)크로만-7-일)피페라진-1-카복실레이트, 황색 고체(2차 용출 이성질체, RT=4.74 min, 추정된 입체화학).
단계 3. (R)-3-아미노-6-메틸-N-(7-(피페라진-1-일)크로만-3-일)티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드
CH2Cl2(2mL) 중 (R)-4-(3-(3-아미노-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미도)크로만-7-일)피페라진-1-카복실레이트(6mg, 0.01 mmol) 및 TFA(0.5mL)의 용액을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 결과적으로 수득되는 혼합물을 진공 하에 농축하였다. 잔류물을 분취용 HPLC[컬럼: XBridge Prep C18 OBD, 19x50 mm, 5 μm; 이동상 A: 물(10 mM NH4HCO3), B: ACN; 구배: 5% B에서부터 13분 후 30% B까지]로 정제하여 (R)-3-아미노-6-메틸-N-(7-(피페라진-1-일)크로만-3-일)티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드를 황색 고체로서 제공하였다. 1H NMR(CD3OD, 400 MHz)δ(ppm): 8.18(d, J = 8.0Hz, 1H), 7.28(d, J = 8.4Hz, 1H), 6.95(d, J = 8.4Hz, 1H), 6.54-6.56(m, 1H), 6.41(d, J = 2.4Hz, 1H), 4.40-4.47(m, 1H), 4.21-4.24(m, 1H), 3.88-3.93(m, 1H), 3.07-3.12(m, 4H), 2.95-3.02(m, 5H), 2.82-2.88(m, 1H), 2.62(s, 3H). MS:(ESI, m/z): 424[M+H]+.
단계 4. (S)-3-아미노-6-메틸-N-(7-(피페라진-1-일)크로만-3-일)티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드
단계 3과 유사한 절차를 (S)-4-(3-(3-아미노-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미도)크로만-7-일)피페라진-1-카복실레이트(8mg, 0.02 mmol)에 적용하여 (S)-3-아미노-6-메틸-N-(7-(피페라진-1-일)크로만-3-일)티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드를 백색 고체로서 제공하였다. 1H NMR(CD3OD, 300 MHz)δ(ppm): 8.18(d, J = 8.4Hz, 1H), 7.28(d, J = 8.7Hz, 1H), 6.96(d, J = 8.7Hz, 1H), 6.54-6.58(m, 1H), 6.41(d, J = 2.1Hz, 1H), 4.39-4.86(m, 1H), 4.22-4.25(m, 1H), 3.88-3.96(m, 1H), 3.04-3.10(m, 5H), 2.89-3.02(m, 4H), 2.81-2.87(m, 1H), 2.63(s, 3H). MS:(ESI, m/z): 424[M+H]+.
이하 표 9의 실시예는 실시예 1-1 및 1-2의 제조에 사용된 것과 유사한 표준 화학적 조작 및 절차를 사용하여 제조하였다.
Figure pct00169
Figure pct00170
15 절차 상의 주의점: 단계 1에서 아민 중간체 15-3 및 카복실산 중간체 24를 사용하였다. 거울상이성질체는 키랄 컬럼 Chiral Art Cellulose-SB 및 이동상 10% IPA/MTBE를 사용하여 키랄 HPLC에 의해 분리하여, 실시예 1-37에 대한 전구체를 1차 용출 이성질체로서 제공하고, 실시예 1-38에 대한 전구체를 2차 용출 이성질체로서 제공하였다.
16 절차 상의 주의점: 단계 1에서, 카복실산 중간체 24를 사용하였다. 거울상이성질체는 키랄 컬럼 Chiralpak ID-2 및 이동상 40% EtOH/헥산을 사용한 키랄 HPLC에 의해 분리하여, 실시예 1-39에 대한 전구체를 1차 용출 이성질체로서 제공하고, 실시예 1-40에 대한 전구체를 2차 용출 이성질체로서 제공하였다.
17 절차 상의 주의점: 단계 1에서, 아민 중간체 15-3을 사용하였다. 거울상이성질체는 키랄 컬럼 Chiralpak IG 및 이동상 50% EtOH/헥산을 사용하여 키랄 HPLC에 의해 분리하여, 실시예 1-41에 대한 전구체를 1차 용출 이성질체로서 제공하고, 실시예 1-42에 대한 전구체를 2차 용출 이성질체로서 제공하였다.
실시예 2-1. 3-아미노-N-((3R)-7-(9,9-디플루오로-3,7-디아자바이사이클로[3.3.1]노난-3-일)크로만-3-일)-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드
Figure pct00171
단계 1. tert-부틸 7-((R)-3-(((벤질옥시)카보닐)아미노)크로만-7-일)-9,9-디플루오로-3,7-디아자바이사이클로[3.3.1]노난-3-카복실레이트
톨루엔(40mL) 중 벤질 (R)-(7-브로모크로만-3-일)카바메이트, 중간체 2, (400mg, 1.08 mmol), tert-부틸 9,9-디플루오로-3,7-디아자바이사이클로[3.3.1]노난-3-카복실레이트, 중간체 32, (288mg, 1.06 mmol), Pd(dppf)Cl2-CH2Cl2(90mg, 0.11 mmol), Xphos(105mg, 0.22 mmol), 및 Cs2CO3(1.076g, 3.30 mmol)의 혼합물을 100℃에서 16시간 동안 교반하였다. 실온으로 냉각한 후, 반응은 물(40mL)로 ??치시키고 EtOAc(40mL x 3)로 추출하였다. 합한 유기 층을 무수 황산나트륨 상에서 건조하고, 여과하고, 진공 하에 농축하였다. 잔류물을 실리카겔 크로마토그래피로 정제(1:4 EtOAc/석유 에테르로 용출)하여 tert-부틸 7-((R)-3-(((벤질옥시)카보닐)아미노)크로만-7-일)-9,9-디플루오로-3,7-디아자바이사이클로[3.3.1]노난-3-카복실레이트를 황색 오일로서 제공하였다. MS:(ESI, m/z): 544[M+H]+.
단계 2. tert-부틸 7-((R)-3-아미노크로만-7-일)-9,9-디플루오로-3,7-디아자바이사이클로[3.3.1]노난-3-카복실레이트
EtOAc(10 mL) 중 tert-부틸 7-((R)-3-(((벤질옥시)카보닐)아미노)크로만-7-일)-9,9-디플루오로-3,7-디아자바이사이클로[3.3.1]노난-3-카복실레이트(110mg, 0.19 mmol) 및 Pd/C(20mg, 10%)의 혼합물을 수소 대기 하에 30℃에서 2시간 동안 교반하였다. 고체는 여과해내고 여과액은 진공 하에 농축하여 tert-부틸 7-((R)-3-아미노크로만-7-일)-9,9-디플루오로-3,7-디아자바이사이클로[3.3.1]노난-3-카복실레이트를 황색 고체로서 제공하였다. MS:(ESI, m/z): 410[M+H]+.
단계 3. tert-부틸 7-((R)-3-(3-아미노-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미도)크로만-7-일)-9,9-디플루오로-3,7-디아자바이사이클로[3.3.1]노난-3-카복실레이트
DMF(15 mL) 중 tert-부틸 7-((R)-3-아미노크로만-7-일)-9,9-디플루오로-3,7-디아자바이사이클로[3.3.1]노난-3-카복실레이트(70mg, 0.16 mmol), 3-아미노-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복실산(43mg, 0.20 mmol), HOBt(45mg, 0.33 mmol), EDCI(65mg, 0.34 mmol), 및 DIEA(66mg, 0.51 mmol)의 용액을 실온에서 16h 동안 교반하였다. 반응은 물 25mL을 첨가하여 ??치시켰다. 결과적으로 수득되는 혼합물을 EtOAc(30mL x 3)로 추출하였다. 유기층을 합하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조하고, 여과하고, 진공 하에 농축하였다. 실리카겔 크로마토그래피(1:1 EtOAc/석유 에테르로 용출)에 의한 정제는 tert-부틸 7-((R)-3-(3-아미노-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미도)크로만-7-일)-9,9-디플루오로-3,7-디아자바이사이클로[3.3.1]노난-3-카복실레이트를 황색 고체로서 제공하였다. MS:(ESI, m/z): 600[M+H]+.
단계 4. 3-아미노-N-((3R)-7-(9,9-디플루오로-3,7-디아자바이사이클로[3.3.1]노난-3-일)크로만-3-일)-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드
CH2Cl2(3mL) 중 tert-부틸 7-((R)-3-(3-아미노-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미도)크로만-7-일)-9,9-디플루오로-3,7-디아자바이사이클로[3.3.1]노난-3-카복실레이트(50 mg, 0.08 mmol) 및 TFA(1mL)의 용액을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 결과적으로 수득되는 혼합물을 진공 하에 농축하였다. 잔류물을 NH3(MeOH 중7M)(5mL)에 용해하고 1시간 동안 교반하였다. 혼합물을 농축하고, 조생성물을 분취용 HPLC로 정제[컬럼: XBridge Prep C18 OBD, 19x250 mm, 5 μm; 이동상 A: 물(10 mM NH4HCO3), B: ACN; 구배: 30% B에서부터 7분 후 50% B까지]하여 3-아미노-N-((3R)-7-(9,9-디플루오로-3,7-디아자바이사이클로[3.3.1]노난-3-일)크로만-3-일)-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드를 황색 고체로서 제공하였다. 1H NMR(CD3OD, 300 MHz)δ(ppm): 8.19(d, J = 8.1Hz, 1H), 7.29(d, J = 8.4Hz, 1H), 6.99(d, J = 8.4 Hz, 1H), 6.64(dd, J = 2.4, 8.4 Hz, 1H), 6.48(s, 1H), 4.41-4.48(m, 1H), 4.21-4.25(m, 1H), 3.82-3.96(m, 3H), 3.35-3.37(m, 2H), 3.13-3.19(m, 4H), 2.80-2.98(m, 2H), 2.63(s, 3H), 2.15-2.18(m, 2H). MS:(ESI, m/z): 500[M+H]+.
이하 표 10의 실시예는 실시예 2-1의 제조에 사용된 것과 유사한 표준 화학적 조작 및 절차를 사용하여 제조하였다.
Figure pct00172
Figure pct00173
27 절차 상의 주의점: 단계 1에서, 브로마이드 중간체 11-2 내지 11-5가 사용되었다. Pd2(dba)3/Xphos가 촉매/리간드 시스템으로서 사용되었다.
28 절차 상의 주의점: 단계 1에서, 아민 중간체 49가 사용되었다. 커플링 반응에서, Xphos Pd G3이 촉매 시스템으로서 사용되었고, Cs2CO3가 염기, 1,4-디옥산이 용매로서 사용되었다. 단계 3에서, 아미드 커플링은 DMA 중 HATU 및 Et3N에 의해 50℃에서 달성되었다. 단계 4에서, boc-탈보호는 디옥산/EtOAc 중 HCl에 의해 달성되었다.
실시예 3-1. 3-아미노-N-((R)-7-((3S,4S)-3-아미노-4-메톡시피롤리딘-1-일)크로만-3-일)-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드 및
실시예 3-2. 3-아미노-N-((R)-7-((3R,4R)-3-아미노-4-메톡시피롤리딘-1-일)크로만-3-일)-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드
방법 1.
Figure pct00174
단계 1. 벤질 ((3R)-7-(3-((tert-부톡시카보닐)아미노)-4-메톡시피롤리딘-1-일)크로만-3-일)카바메이트
톨루엔(10 mL) 중 벤질 (R)-(7-브로모크로만-3-일)카바메이트, 중간체 2, (170mg, 0.47 mmol), tert-부틸 N-(4-메톡시피롤리딘-3-일)카바메이트, 중간체 35, (100mg, 0.46 mmol), RuPhos Pd G3(38mg, 0.05 mmol), RuPhos(23mg, 0.05 mmol), 및 Cs2CO3(300mg, 0.92 mmol)의 혼합물을 95℃에서 2시간 동안 교반하였다. 실온으로 냉각한 후. 반응물을 물(20mL)에 부었다. 결과적으로 수득되는 혼합물을 DCM(2 x 50mL)으로 추출하였다. 합한 유기층을 무수 황산나트륨 상에서 건조하고, 여과하고, 진공 하에 농축하였다. 실리카겔 컬럼에 의한 정제(1:1 EtOAc/석유 에테르로 용출)는 벤질 ((3R)-7-(3-((tert-부톡시카보닐)아미노)-4-메톡시피롤리딘-1-일)크로만-3-일)카바메이트를 백색 고체로서 제공하였다. MS:(ESI, m/z): 498[M+H]+.
단계 2. tert-부틸 (1-((R)-3-아미노크로만-7-일)-4-메톡시피롤리딘-3-일)카바메이트
EtOAc(5mL) 중 벤질 ((3R)-7-(3-((tert-부톡시카보닐)아미노)-4-메톡시피롤리딘-1-일)크로만-3-일)카바메이트(80mg, 0.16 mmol) 및 Pd/C(80mg, 10%)의 혼합물을 수소 대기 하에 실온에서 3시간 동안 교반하였다. 고체는 여과해내어 EtOAc(10mL x 3)로 세척하였다. 여과액은 진공 하에 농축하여 tert-부틸 (1-((R)-3-아미노크로만-7-일)-4-메톡시피롤리딘-3-일)카바메이트를 무색 오일로서 제공하였다. MS:(ESI, m/z): 364[M+H]+.
단계 3. tert-부틸 (1-((R)-3-(3-아미노-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미도)크로만-7-일)-4-메톡시피롤리딘-3-일)카바메이트
DMA(2mL) 중 tert-부틸 (1-((R)-3-아미노크로만-7-일)-4-메톡시피롤리딘-3-일)카바메이트(40mg, 0.11 mmol), 3-아미노-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복실산 (23mg, 0.11 mmol), Et3N(39mg, 0.39 mmol), 및 HBTU(50mg, 0.13 mmol)의 용액을 실온에서 30분 동안 교반하였다. 역상 크로마토그래피에 의한 정제[컬럼: C18 실리카겔; 이동상 A: 물(10mM NH4HCO3), B: ACN; 구배: 10%에서부터 80% B까지, 10분 넘게]는 tert-부틸 (1-((R)-3-(3-아미노-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미도)크로만-7-일)-4-메톡시피롤리딘-3-일)카바메이트를 백색 고체로서 제공하였다. MS:(ESI, m/z): 554[M+H]+.
단계 4. 3-아미노-N-((3R)-7-(3-아미노-4-메톡시피롤리딘-1-일)크로만-3-일)-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드
CH2Cl2(3mL) 중 tert-부틸 (1-((R)-3-(3-아미노-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미도)크로만-7-일)-4-메톡시피롤리딘-3-일)카바메이트(45mg, 0.08 mmol) 및 TFA(1mL)의 용액을 실온에서 30분 동안 교반하였다. 결과적으로 수득되는 혼합물을 진공 하에 농축하였다. 조생성물을 역상 크로마토그래피로 정제[컬럼: C18 실리카겔; 이동상 A: 물(10 mM NH4HCO3), B: ACN; 구배: 10%에서부터 80% B까지, 10분 넘게]하여 3-아미노-N-((3R)-7-(3-아미노-4-메톡시피롤리딘-1-일)크로만-3-일)-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드를 무색 오일로서 제공하였다. MS:(ESI, m/z): 454[M+H]+.
단계 5. 아미노-N-((R)-7-((3S,4S)-3-아미노-4-메톡시피롤리딘-1-일)크로만-3-일)-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드 및 3-아미노-N-((R)-7-((3R,4R)-3-아미노-4-메톡시피롤리딘-1-일)크로만-3-일)-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드
3-아미노-N-((3R)-7-(3-아미노-4-메톡시피롤리딘-1-일)크로만-3-일)-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드의 라세미 혼합물(35mg, 0.077 mmol)은 키랄 HPLC로 분리[컬럼: Chiralpak IE, 2x25 cm, 5 μm; 이동상: 50% EtOH/MTBE (0.1% Et2NH), 28분 동안; 유속: 16 mL/min]하여 다음과 같은 표제 화합물을 제공하였다:
아미노-N-((R)-7-((3S,4S)-3-아미노-4-메톡시피롤리딘-1-일)크로만-3-일)-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드, 황색 고체(1차 용출 이성질체, RT=13.5 분). 1H NMR(DMSO-d 6 , 300 MHz)δ(ppm): 8.32(d, J = 8.4 Hz, 1H). 7.49(br s, 1H), 7.31(d, J = 8.1 Hz, 1H), 7.21(br s, 2H), 6.87(d, J = 8.4 Hz, 1H), 6.12-6.08(br s, 1H), 5.91(s, 1H), 4.31-4.21(m, 1H), 4.16-4.11(m, 1H), 3.79(t, J = 9.9Hz, 1H), 3.63-3.62(m, 1H), 3.51-3.46(m,1H), 3.42-3.32(m, 2H), 2.93(s, 3H), 3.13-3.09(m, 1H), 2.91-2.82(m, 3H), 2.58(s, 3H), 2.12-1.96(m, 2H). MS:(ESI, m/z): 454[M+H]+; 및
아미노-N-((R)-7-((3R,4R)-3-아미노-4-메톡시피롤리딘-1-일)크로만-3-일)-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드, 황색 고체(2차 용출 이성질체, RT=20.2 분). 1H NMR(DMSO-d 6 , 300 MHz)δ(ppm): 8.32(d, J = 8.1 Hz, 1H). 7.49(br s, 1H), 7.31(d, J = 8.1 Hz, 1H), 7.21(br s, 2H), 6.86(d, J = 8.4 Hz, 1H), 6.11-6.08(br s, 1H), 5.91(s, 1H), 4.31-4.21(m, 1H), 4.16-4.11(m, 1H), 3.79(t, J = 9.9Hz, 1H), 3.63-3.62(m, 1H), 3.51-3.46(m,1H), 3.42-3.32(m, 2H), 2.93(s, 3H), 3.13-3.09(m, 1H), 2.91-2.81(m, 3H), 2.58(s, 3H), 2.12-1.96(m, 2H). MS:(ESI, m/z): 454[M+H]+.
실시예 3-1. 3-아미노-N-((R)-7-((3S,4S)-3-아미노-4-메톡시피롤리딘-1-일)크로만-3-일)-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드
방법 2.
아미노-N-((R)-7-((3S,4S)-3-아미노-4-메톡시피롤리딘-1-일)크로만-3-일)-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드는 또한 단계 5의 키랄 분리에 대한 필요 없이 방법 1과 유사한 절차를 사용하여 tert-부틸 ((3S,4S)-4-메톡시피롤리딘-3-일)카바메이트, 중간체 36으로부터 제조할 수도 있다.
이하 표 11의 실시예는 실시예 3-1 및 3-2의 제조를 위한 방법 1과 유사한 표준 화학적 조작 및 절차를 사용하여 제조하였다.
Figure pct00175
8 절차 상의 주의점: 단계 1에서 브로마이드 중간체 50이 사용되었다. 커플링 반응은 DMSO 중 전구촉매 tBuXphos Pd G3 및 포스파젠 염기 P2-Et를 25℃에서 사용하여 달성하였다. 단계 5에서, 키랄 분리는 키랄 컬럼 Chiralpak IC 및 이동상 50% EtOH/헥산(0.1% Et2NH)을 사용하여 수행하였다.
실시예 6-1. (R)-1-(3-(3-아미노-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미도)크로만-7-일)피페리딘-4-카복실산
Figure pct00176
단계 1. 에틸 (R)-1-(3-(((벤질옥시)카보닐)아미노)크로만-7-일)피페리딘-4-카복실레이트
톨루엔(30mL) 중 벤질 (R)-(7-브로모크로만-3-일)카바메이트, 중간체 2, (200mg, 0.52 mmol), 에틸 피페리딘-4-카복실레이트(130mg, 0.79 mmol), RuPhos Pd G3(44mg, 0.05 mmol), RuPhos(24mg, 0.05 mmol), 및 Cs2CO3(513mg, 1.57 mmol)의혼합물을 90℃에서 2시간 동안 교반하였다. 실온으로 냉각한 후, 고체는 여과해내고 여과액은 진공 하에 농축하였다. 실리카겔 컬럼에 의한 정제(1:1 EtOAc/석유 에테르로 용출)는 에틸 (R)-1-(3-(((벤질옥시)카보닐)아미노)크로만-7-일)피페리딘-4-카복실레이트를 황색 고체로서 제공하였다. MS:(ESI, m/z): 439[M+H]+.
단계 2. 에틸 (R)-1-(3-아미노크로만-7-일)피페리딘-4-카복실레이트
EtOAc(5mL) 중 에틸 (R)-1-(3-(((벤질옥시)카보닐)아미노)크로만-7-일)피페리딘-4-카복실레이트(180mg, 0.32 mmol) 및 Pd/C(50mg, 10%)의 혼합물을 수소 대기 하에 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 고체는 여과해내고 여과액은 진공 하에 농축하여 에틸 (R)-1-(3-아미노크로만-7-일)피페리딘-4-카복실레이트를 황색 오일로서 제공하였다. MS:(ESI, m/z): 305[M+H]+.
단계 3. 에틸 (R)-1-(3-(3-아미노-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미도)크로만-7-일)피페리딘-4-카복실레이트
DMA(5mL) 중 에틸 (R)-1-(3-아미노크로만-7-일)피페리딘-4-카복실레이트(110mg, 0.33 mmol), 3-아미노-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복실산(107mg, 0.49 mmol), Et3N(99mg, 0.98 mmol), 및 HBTU(185mg, 0.49 mmol)의 용액을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 반응은 그 다음 물 5mL을 첨가하여 ??치시켰다. 결과적으로 수득되는 혼합물을 EtOAc(3 x 10mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 염수(2 x 30mL)로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조하고, 여과하고, 진공 하에 농축하였다. 실리카겔 컬럼에 의한 정제(1:1 EtOAc/석유 에테르로 용출)는 에틸 (R)-1-(3-(3-아미노-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미도)크로만-7-일)피페리딘-4-카복실레이트를 황색 고체로서 제공하였다. MS:(ESI, m/z): 495[M+H]+.
단계 4. (R)-1-(3-(3-아미노-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미도)크로만-7-일)피페리딘-4-카복실산
THF(2mL) 및 물(0.5mL) 중 에틸 (R)-1-(3-(3-아미노-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미도)크로만-7-일)피페리딘-4-카복실레이트(40mg, 0.07 mmol) 및 LiOH(1.6mg, 0.07 mmol)의 혼합물을 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 결과적으로 수득되는 혼합물을 진공 하에 농축하였다. 잔류물을 물(5mL)로 희석하고, pH를 3N HCl 수용액으로 4로 조정하였다. 결과적으로 수득되는 혼합물을 DCM(3 x 10mL)으로 세척하였다. 분취용 HPLC에 의한 정제[컬럼: XBridge Shield RP18 OBD, 19x150mm, 5μm; 이동상 A: 물(10mM NH4HCO3), B: ACN; 구배: 5% B에서부터 7분 후 65% B까지]는 (R)-1-(3-(3-아미노-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미도)크로만-7-일)피페리딘-4-카복실산을 황색 고체로서 제공하였다. 1H NMR (DMSO-d 6, 300 MHz)δ(ppm): 8.33(d, J = 8.4Hz, 1H). 7.53(br s, 1H), 7.31(d, J = 8.4Hz, 1H), 7.22(br s, 2H), 6.91(d, J = 8.7Hz, 1H), 6.52(dd, J = 2.4, 8.4Hz, 1H), 6.32(s, 1H), 4.32-4.24(m, 1H), 4.16-4.12(m, 1H), 3.80(t, J = 9.9Hz, 1H), 3.57-3.52(m, 2H), 2.86-2.82(m,2H), 2.73-2.65(m, 2H), 2.58(s, 3H), 2.50-2.28(m, 1H), 1.91-1.84(m, 2H), 1.69-1.57(m, 2H). MS:(ESI, m/z): 467[M+H]+.
이하 표 13의 실시예는 실시예 6-1의 제조에 사용된 것과 유사한 표준 화학적 조작 및 절차를 사용하여 제조하였다.
Figure pct00177
2 절차 상의 주의점: 단계 1에서, 브로마이드인 중간체 9가 사용되었다.
실시예 7-1. (R)-3-아미노-N-(7-(4-하이드록시피페리딘-1-일)크로만-3-일)-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드
Figure pct00178
단계 1. 벤질 (R)-(7-(4-(tert-부틸디메틸실릴옥시)피페리딘-1-일)크로만-3-일)카바메이트
톨루엔(10mL) 중 벤질 (R)-(7-브로모크로만-3-일)카바메이트, 중간체 2, (200mg, 0.55 mmol), 4-(tert-부틸디메틸실릴옥시)피페리딘, 중간체 39, (142 mg, 0.66 mmol), RuPhos Pd G3(46mg, 0.05 mmol), RuPhos(26mg, 0.06 mmol), 및 Cs2CO3(539mg, 1.65 mmol)의 혼합물을 100℃에서 3시간 동안 교반하였다. 실온으로 냉각한 후, 고체는 여과해내고 여과액은 진공 하에 농축하였다. 실리카겔 컬럼에 의한 정제(1:3 EtOAc/석유 에테르로 용출)는 벤질 (R)-(7-(4-(tert-부틸디메틸실릴옥시)피페리딘-1-일)크로만-3-일)카바메이트를 황색 고체로서 제공하였다. MS:(ESI, m/z): 497[M+H]+.
단계 2. (R)-7-(4-(tert-부틸디메틸실릴옥시)피페리딘-1-일)크로만-3-아민
EtOAc(6mL) 중 벤질 (R)-(7-(4-(tert-부틸디메틸실릴옥시)피페리딘-1-일)크로만-3-일)카바메이트(170mg, 0.34 mmol) 및 Pd/C(170mg, 10%)의 혼합물을 수소 대기 하에 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 고체는 여과해내고 여과액은 진공 하에 농축하여 (R)-7-(4-(tert-부틸디메틸실릴옥시)피페리딘-1-일)크로만-3-아민을 황색 고체로서 제공하였다. MS:(ESI, m/z): 363[M+H]+.
단계 3. (R)-3-아미노-N-(7-(4-(tert-부틸디메틸실릴옥시)피페리딘-1-일)크로만-3-일)-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드
DMA(5mL) 중 (R)-7-(4-(tert-부틸디메틸실릴옥시)피페리딘-1-일)크로만-3-아민(100mg, 0.28 mmol), 3-아미노-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복실산(63mg, 0.30 mmol), Et3N(84mg, 0.83 mmol), 및 HBTU(157mg, 0.41 mmol)의 용액을 실온에서 30분 동안 교반하였다. 반응은 그 다음 물 10mL을 첨가하여 ??치시켰다. 결과적으로 수득되는 혼합물을 CH2Cl2(3 x 15mL)으로 추출하였다. 합한 유기 층을 염수(3 x 15mL)로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조하고, 여과하고, 진공 하에 농축하였다. 실리카겔 컬럼에 의한 정제(1:1 EtOAc/석유 에테르로 용출)는 (R)-3-아미노-N-(7-(4-(tert-부틸디메틸실릴옥시)피페리딘-1-일)크로만-3-일)-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드를 황색 고체로서 제공하였다. MS:(ESI, m/z): 553[M+H]+.
단계 4. (R)-3-아미노-N-(7-(4-하이드록시피페리딘-1-일)크로만-3-일)-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드
CH2Cl2(3 mL) 중 (R)-3-아미노-N-(7-(4-(tert-부틸디메틸실릴옥시)피페리딘-1-일)크로만-3-일)-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드(30mg, 0.05 mmol) 및 HCl(디옥산 중 4N)(1mL)의 용액을 실온에서 10분 동안 교반하였다. pH는 NaHCO3 포화 수용액으로 8로 조정하였다. 분취용 HPLC에 의한 정제[컬럼: XBridge Prep C18 OBD, 30x150 mm, 5μm; 이동상 A: 물(10 mM NH4HCO3), B: ACN; 유속: 60 mL/min; 구배: 15% B에서부터 7분 후 50% B까지]는 (R)-3-아미노-N-(7-(4-하이드록시피페리딘-1-일)크로만-3-일)-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드를 백색 고체로서 제공하였다. 1H NMR(DMSO-d 6, 300 MHz)δ(ppm): 8.32(d, J = 8.1Hz, 1H), 7.52(br s, 1H), 7.32(d, J = 8.1Hz, 1H), 7.22(br s, 2H), 6.91(d, J = 8.4Hz, 1H), 6.51(dd, J = 2.4, 8.4Hz, 1H), 6.31(s, 1H), 4.65(br s, 1H), 4.29-4.26(m, 1H), 4.17-4.13(m, 1H), 3.80(t, J = 9.9Hz, 1H), 3.64-3.58(m, 1H), 3.48-3.44(m, 2H), 2.87-2.73(m, 4H), 2.59(s, 3H), 1.80-1.76(m, 2H), 1.48-1.43(m, 2H). MS:(ESI, m/z): 439[M+H]+.
이하 표 14의 실시예는 실시예 7-1의 제조에 사용된 것과 유사한 표준 화학적 조작 및 절차를 사용하여 제조하였다.
Figure pct00179
Figure pct00180
2 절차 상의 주의점: 단계 1에서, 라세미 브로마이드인 중간체 8, 아민 중간체 45, 및 촉매/리간드 시스템으로서 Pd(dppf)Cl2-CH2Cl2/Xphos를 사용하였다. 아미드화는 DMF 중 EDCI, HOBt, 및 DIEA를 사용하여 수행하였다. 단계 4 이후, 라세미체는 키랄 컬럼 Chiralpak IA 및 이동상 90% MeOH/DCM(0.1% Et2NH)을 사용하는 키랄 HPLC에 의해 분리하여, 두 이성질체의 혼합물 1차 용출 샘플; 즉 2차 용출 샘플(추정된 입체화학)로서 실시예 7-5, 및 3차 용출 샘플(추정된 입체화학)로서 실시예 7-7을 제공하였다. 두 이성질체의 혼합물은 키랄 컬럼인 Chiralpak IC 및 이동상 30% EtOH/MTBE(0.1% Et2NH)를 사용하는 키랄 HPLC에 의해 추가로 분리하여 1차 용출 이성질체로서 실시예 7-4 및 2차 용출 이성질체로서 실시예 7-6(추정된 입체화학)을 제공하였다.
3 절차 상의 주의점: 단계 1에서, 라세미 브로마이드인 중간체 8, 아민 중간체 46, 및 촉매/리간드 시스템으로서 Pd(dppf)Cl2-CH2Cl2/Xphos를 사용하였다. 아미드화는 DMF 중 EDCI, HOBt, 및 DIEA를 이용하여 수행하였다. 단계 4 이후, 라세미체는 키랄 컬럼 EnantioCel-C1 및 이동상 25% EtOH/헥산(0.1% Et2NH)을 사용하여 키랄 HPLC에 의해 분리하여 두 이성질체의 혼합물인 1차 용출 샘플 및 두 이성질체의 혼합물인 2차 용출 샘플 2를 제공하였다. 두 샘플은 각각 키랄 컬럼 EnantioPak A1-5 및 이동상 50% CO2/MeOH(0.1% iPrNH2)을 사용하여 SFC에 의해 추가로 분리하여, 샘플 1로부터 1차 용출 이성질체로서 실시예 7-8 및 2차 용출 이성질체로서 실시예 7-9; 및 샘플 2로부터 1차 용출 이성질체로서 실시예 7-10, 및 2차 용출 이성질체(추정된 입체화학)로서 실시예 7-11을 제공하였다.
실시예 10-1. (R)-3-아미노-N-(5-플루오로-7-(피페라진-1-일)크로만-3-일)-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드
Figure pct00181
단계 1. tert-부틸 (R)-4-(3-(((벤질옥시)카보닐)아미노)-5-플루오로크로만-7-일)피페라진-1-카복실레이트
톨루엔(15mL) 중 벤질 (R)-(7-브로모-5-플루오로크로만-3-일)카바메이트, 중간체 5-1, (500mg, 1.32 mmol), tert-부틸 피페라진-1-카복실레이트(294mg, 1.58 mmol), Pd(dppf)Cl2-CH2Cl2(106mg, 0.13 mmol), Xphos(63mg, 0.13 mmol), 및 Cs2CO3(1.3g, 3.99 mmol)의 혼합물을 밀봉된 튜브에서 95℃에서 밤새 교반하였다. 실온으로 냉각한 후, 고체는 여과해내고 여과액은 진공 하에 농축하였다. 잔류물은 실리카겔 크로마토그래피로 정제(1:3 EtOAc/석유 에테르로 용출)하여 tert-부틸 (R)-4-(3-(((벤질옥시)카보닐)아미노)-5-플루오로크로만-7-일)피페라진-1-카복실레이트를 회백색 고체로서 제공하였다. MS:(ESI, m/z): 486[M+H]+.
단계 2. tert-부틸 (R)-4-(3-아미노-5-플루오로크로만-7-일)피페라진-1-카복실레이트
EtOAc(100mL) 중 tert-부틸 (R)-4-(3-(((벤질옥시)카보닐)아미노)-5-플루오로크로만-7-일)피페라진-1-카복실레이트(4.9g, 10.10 mmol) 및 Pd/C(0.5g, 10%)의 혼합물을 수소 대기 하에 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 고체는 여과해내고 여과액은 진공 하에 농축하여 tert-부틸 (R)-4-(3-아미노-5-플루오로크로만-7-일)피페라진-1-카복실레이트를 황색 오일로서 제공하였다. MS:(ESI, m/z): 352[M+H]+.
단계 3. tert-부틸 (R)-4-(3-(3-아미노-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미도)-5-플루오로크로만-7-일)피페라진-1-카복실레이트
DMA(30mL) 중 tert-부틸 (R)-4-(3-아미노-5-플루오로크로만-7-일)피페라진-1-카복실레이트(3.5g, 9.96 mmol), 3-아미노-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복실산(2.5g, 12.01 mmol), Et3N(3.0g, 29.65 mmol), 및 HBTU(4.5g, 11.87 mmol)의 용액을 실온에서 30분 동안 교반하였다. 반응은 물 60mL을 첨가하여 ??치시켰다. 결과적으로 수득되는 혼합물을 CH2Cl2(50mL x 3)으로 추출하였다. 유기 층을 합하여, 무수 황산나트륨 상에서 건조하고, 여과하고, 진공 하에 농축하였다. 역상 크로마토그래피에 의한 정제(컬럼: C18 실리카겔; 이동상 A: 물 (10 mM NH4HCO3), B: ACN; 구배: 0%에서부터 100% B까지, 30분 넘게; 유속: 90 mL/min)는 tert-부틸 (R)-4-(3-(3-아미노-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미도)-5-플루오로크로만-7-일)피페라진-1-카복실레이트를 회백색 고체로서 제공하였다. MS:(ESI, m/z): 542[M+H]+.
단계 4. (R)-3-아미노-N-(5-플루오로-7-(피페라진-1-일)크로만-3-일)-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드
CH2Cl2(2mL) 중 tert-부틸 (R)-4-(3-(3-아미노-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미도)-5-플루오로크로만-7-일)피페라진-1-카복실레이트(30mg, 0.05 mmol) 및 TFA(1mL)의 용액을 실온에서 30분 동안 교반하였다. 결과적으로 수득되는 혼합물을 진공 하에 농축하였다. 조생성물을 분취용 HPLC로 정제[컬럼: XBridge Prep C18 OBD, 19x50 mm, 5 μm; 이동상 A: 물(10 mM NH4HCO3), B: ACN; 구배: 25% B에서부터 7분 후 75% B까지)하여 (R)-3-아미노-N-(5-플루오로-7-(피페라진-1-일)크로만-3-일)-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드를 황색 고체로서 제공하였다. 1H NMR(DMSO-d 6, 400 MHz)δ(ppm): 8.33(d, J = 9 MHz, 1H), 7.58(d, J = 9 MHz, 1H), 7.31(d, J = 6 MHz, 1H), 7.22(s, 2H), 6.43-6.40(m, 1H), 6.17(s, 1H), 4.40-4.20(m, 1H), 4.19-4.12(m, 1H), 3.89-3.82(m, 1H), 3.32(s, 1H), 3.01-2.97(m, 4H), 2.80-2.74(m, 6H), 2.58(s, 3H). MS:(ESI, m/z): 442[M+H]+.
이하 표 15의 실시예는 실시예 10-1의 제조에 사용된 것과 유사한 표준 화학적 조작 및 절차를 이용하여 제조하였다.
Figure pct00182
Figure pct00183
Figure pct00184
Figure pct00185
2 절차 상의 주의점: 단계 1에서, 촉매/리간드 시스템으로서 RuPhos Pd G3/RuPhos를 사용하였다.
3 절차 상의 주의점: 단계 1에서, 벤질 (S)-(7-브로모-5-플루오로크로만-3-일)카바메이트를 사용하였다.
4 절차 상의 주의점: 단계 3에서, 카복실산 중간체 21이 사용되었다.
5 절차 상의 주의점: 단계 4에서, 분취용 HPLC로 정제하기 전에 조생성물을 MeOH 중 NH3로 처리하여 유리 염기를 제공하였다.
6 절차 상의 주의점: 단계 3에서, 카복실산 중간체 19가 사용되었다.
7 절차 상의 주의점: 단계 3에서, 카복실산 중간체 22가 사용되었다.
8 절차 상의 주의점: Cbz-탈보호(단계 2) 전에, 카바메이트를 DMF 중 NaH(2 당량) 및 MeI(1.5 당량)로 25℃에서 처리하여 메틸화하였다. 반응은 물로 ??치시키고 EtOAc에 의한 추출 워크업을 수행한 다음, 실리카겔 크로마토그래피로 정제하여 상응하는 tert-부틸 4-(3-[[(벤질옥시)카보닐](메틸)아미노]-5-플루오로-3,4-디하이드로-2H-1-벤조피란-7-일)피페라진-1-카복실레이트를 제공하였다. MS(ESI, m/z): 500[M+H]+.
실시예 11-1. N-((2S)-6-(3,8-디아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-3-일)-1,2,3,4-테트라하이드로나프탈렌-2-일)-3-아미노-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드 및
실시예 11-2. N-((2R)-6-(3,8-디아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-3-일)-1,2,3,4-테트라하이드로나프탈렌-2-일)-3-아미노-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드
방법 1.
Figure pct00186
단계 1. tert-부틸 3-(6-(((벤질옥시)카보닐)아미노)-5,6,7,8-테트라하이드로나프탈렌-2-일)-3,8-디아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-8-카복실레이트
톨루엔(40mL) 중 벤질 (6-브로모-1,2,3,4-테트라하이드로나프탈렌-2-일)카바메이트, 중간체 8, (2g, 5.55 mmol), tert-부틸 3,8-디아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-8-카복실레이트(1.171g, 5.52 mmol), Pd(dppf)Cl2(404.96mg, 0.55 mmol), Xphos(527mg, 1.11 mmol), Cs2CO3(5.3g, 16.28 mmol)의 혼합물을 100℃에서 밤새 교반하였다. 실온으로 냉각한 후, 반응 혼합물을 진공 하에 농축하였다. 실리카겔 크로마토그래피에 의한 정제(1:100 내지 2:5 EtOAc/석유 에테르 구배로의 용출)는 tert-부틸 3-(6-(((벤질옥시)카보닐)아미노)-5,6,7,8-테트라하이드로나프탈렌-2-일)-3,8-디아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-8-카복실레이트를 황색 고체로서 제공하였다. MS:(ESI, m/z): 492[M+H]+.
단계 2. tert-부틸 3-(6-아미노-5,6,7,8-테트라하이드로나프탈렌-2-일)-3,8-디아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-8-카복실레이트
에탄올(30mL) 중 tert-부틸 3-(6-(((벤질옥시)카보닐)아미노)-5,6,7,8-테트라하이드로나프탈렌-2-일)-3,8-디아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-8-카복실레이트(1.4g, 2.85 mmol) 및 Pd/C(1.4g, 13.16 mmol)의 혼합물을 수소 대기 하에 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 고체는 여과해내고, 여과액은 진공 하에 농축하였다. 실리카겔 크로마토그래피에 의한 정제(1:10 MeOH/CH2Cl2로 용출)는 tert-부틸 3-(6-아미노-5,6,7,8-테트라하이드로나프탈렌-2-일)-3,8-디아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-8-카복실레이트를 황색 고체로서 제공하였다. MS:(ESI, m/z): 358[M+H]+.
단계 3. tert-부틸 3-(6-(3-아미노-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미도)-5,6,7,8-테트라하이드로나프탈렌-2-일)-3,8-디아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-8-카복실레이트
DMF(20mL) 중 3-아미노-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복실산(175mg, 0.84 mmol), tert-부틸 3-(6-아미노-5,6,7,8-테트라하이드로나프탈렌-2-일)-3,8-디아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-8-카복실레이트(300mg, 0.84 mmol), EDCI(193mg, 1.01 mmol), HOBt(136mg, 1.01 mmol), DIEA(325mg, 2.52 mmol)의 혼합물을 20℃에서 18시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 물(50mL)로 희석하고 에틸 아세테이트(3 x 50mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 무수 황산나트륨 상에서 건조하고, 여과하고, 진공 하에 농축하였다. 실리카겔 크로마토그래피에 의한 정제(1:3 EtOAc/석유 에테르로 용출)는 tert-부틸 3-(6-(3-아미노-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미도)-5,6,7,8-테트라하이드로나프탈렌-2-일)-3,8-디아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-8-카복실레이트를 제공하였다. MS:(ESI, m/z): 548[M+H]+.
단계 4. tert-부틸 3-((S)-6-(3-아미노-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미도)-5,6,7,8-테트라하이드로나프탈렌-2-일)-3,8-디아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-8-카복실레이트 및 tert-부틸 3-((R)-6-(3-아미노-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미도)-5,6,7,8-테트라하이드로나프탈렌-2-일)-3,8-디아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-8-카복실레이트
tert-부틸 3-(6-(3-아미노-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미도)-5,6,7,8-테트라하이드로나프탈렌-2-일)-3,8-디아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-8-카복실레이트의 라세미 혼합물은 키랄 HPLC[컬럼: (R,R)-WHELK-O1-Kromasil, 0.5x25 cm, 5 μm; 이동상: MeOH; 검출기: UV 190 내지 500 nm]에 의해 분리하여 다음과 같은 표제 화합물을 제공하였다: tert-부틸 3-((S)-6-(3-아미노-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미도)-5,6,7,8-테트라하이드로나프탈렌-2-일)-3,8-디아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-8-카복실레이트 백색 고체(1차 용출 이성질체, RT = 15.5 분) 및 tert-부틸 3-((R)-6-(3-아미노-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미도)-5,6,7,8-테트라하이드로나프탈렌-2-일)-3,8-디아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-8-카복실레이트 백색 고체(2차 용출 이성질체, RT = 20.4 분).
단계 5. N-((2S)-6-(3,8-디아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-3-일)-1,2,3,4-테트라하이드로나프탈렌-2-일)-3-아미노-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드
DCM(28mL) 중 tert-부틸 3-((S)-6-(3-아미노-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미도)-5,6,7,8-테트라하이드로나프탈렌-2-일)-3,8-디아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-8-카복실레이트(70mg, 0.13 mmol) 및 TFA(7mL)의 용액을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 진공 하에 농축하였다. 결과적으로 수득되는 용액을 5mL의 DCM으로 희석하였다. 용액의 pH 값은 NH3(MeOH 중의 용액)로 8로 조정하였다. 결과적으로 수득되는 혼합물을 진공 하에 농축하였다. 분취용 HPLC에 의해 정제[컬럼: XBridge BEH C18 OBD, 130Å, 19x150mm, 5 μm; 이동상 A: 물(10 mM NH4HCO3), B: ACN; 구배: 5% B에서부터 52% B까지, 8분 넘게)하여 N-((2S)-6-(3,8-디아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-3-일)-1,2,3,4-테트라하이드로나프탈렌-2-일)-3-아미노-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드를 회백색 고체로서 제공하였다. 1H NMR(CD3OD, 400 MHz)δ(ppm): 8.19(d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.30(d, J = 8.0 Hz, 1H), 6.93(d, J = 8.4 Hz, 1H), 6.65(d, J = 8.4 Hz, 1H), 6.58(s, 1H), 4.24-4.23(m, 1H), 3.63-3.60(m, 2H), 3.45-3.41(m, 2H), 3.02-2.68(m, 6H), 2.64(s, 3H), 2.14-2.08(m, 1H), 1.92-1.75(m, 5H). MS:(ESI, m/z): 449[M+H]+.
단계 6. N-((2R)-6-(3,8-디아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-3-일)-1,2,3,4-테트라하이드로나프탈렌-2-일)-3-아미노-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드
DCM(28mL) 중 tert-부틸 3-((R)-6-(3-아미노-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미도)-5,6,7,8-테트라하이드로나프탈렌-2-일)-3,8-디아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-8-카복실레이트(70mg, 0.13 mmol) 및 TFA(7mL)의 용액을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 진공 하에 농축하였다. 결과적으로 수득되는 용액을 5 mL DCM으로 희석하였다. 용액의 pH 값은 NH3(MeOH 중 7M)로 8로 조정하였다. 결과적으로 수득되는 혼합물을 진공 하에 농축하였다. 분취용 HPLC에 의한 정제[컬럼: XBridge BEH C18 OBD, 130Å, 19x150 mm, 5 μm; 이동상 A: 물(10 mM NH4HCO3), B: ACN; 구배: 5% B에서부터 52% B까지 8분 넘게]는 N-((2R)-6-(3,8-디아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-3-일)-1,2,3,4-테트라하이드로나프탈렌-2-일)-3-아미노-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드를 회백색 고체로서 제공하였다. 1H NMR(CD3OD, 400 MHz)δ(ppm): 8.20(d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.30(d, J = 8.4 Hz, 1H), 6.93(d, J = 8.4 Hz, 1H), 6.66(d, J = 8.4 Hz, 1H), 6.59(s, 1H), 4.26-4.17(m, 1H), 3.65-3.61(m, 2H), 3.45-3.39(m, 3H), 3.00-2.71(m, 6H), 2.64(s, 3H), 2.12-2.09(m, 1H), 1.91-1.75(m, 5H). MS:(ESI, m/z): 449[M+H]+.
실시예 11-1. N-((2S)-6-(3,8-디아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-3-일)-1,2,3,4-테트라하이드로나프탈렌-2-일)-3-아미노-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드
방법 2.
N-((2S)-6-(3,8-디아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-3-일)-1,2,3,4-테트라하이드로나프탈렌-2-일)-3-아미노-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드는 또한 벤질 (S)-(6-브로모-1,2,3,4-테트라하이드로나프탈렌-2-일)카바메이트, 중간체 9로부터 시작하고 단계 4의 키랄 분리는 생략하여, 방법 1에 따라 제조할 수 있다.
실시예 11-2. N-((2R)-6-(3,8-디아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-3-일)-1,2,3,4-테트라하이드로나프탈렌-2-일)-3-아미노-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드
방법 2.
N-((2R)-6-(3,8-디아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-3-일)-1,2,3,4-테트라하이드로나프탈렌-2-일)-3-아미노-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드는 또한 벤질 (R)-(6-브로모-1,2,3,4-테트라하이드로나프탈렌-2-일)카바메이트, 중간체 10으로부터 시작하고 단계 4의 키랄 분리는 생략하여, 방법 1에 따라 제조할 수 있다.
이하 표 16의 실시예는 실시예 11-1 및 11-2의 제조를 위한 방법 1(또는 표시된 경우 방법 2)과 유사한 표준 화학적 조작 및 절차를 사용하여 제조하였다.
Figure pct00187
Figure pct00188
Figure pct00189
Figure pct00190
Figure pct00191
Figure pct00192
Figure pct00193
7 절차 상의 주의점: 단계 1에서, 브로마이드인 중간체 44 및 촉매로서 Ruphos Pd G3을 사용하였다. 단계 4에서, 4개의 거울상이성질체를 키랄 컬럼 Cellulose SB 및 0% 내지 5% EtOH/MTBE(0.1% Et2NH)의 용출제 구배를 사용하여 키랄 HPLC에 의해 분리하였다. 분리된 거울상이성질체의 입체화학은 임의 지정되었다.
8 절차 상의 주의점: 단계 4에서, 거울상이성질체를 키랄 컬럼 Chiralpak ID 및 이동상 MeOH을 사용하여 키랄 HPLC에 의해 분리하였다. 분리된 거울상이성질체의 입체화학은 임의 지정하였다.
9 절차 상의 주의점: 단계 4에서보다 Boc 탈보호화 후 거울상이성질체를 키랄 컬럼 Phenomenex Lux 5μm Cellulose-4 및 이동상 50% EtOH/헥산을 사용한 키랄 HPLC에 의해 분리하였다. 분리된 거울상이성질체의 입체화학은 임의 지정하였다.
10 절차 상의 주의점: 단계 3에서, 카복실산 중간체 26을 사용하였다. 단계 4에서, 거울상이성질체는 키랄 컬럼 Phenomenex Lux 5μm Cellulose-4 및 이동상 50% EtOH/헥산을 이용하여 키랄 HPLC에 의해 분리하였다. 분리된 거울상이성질체의 입체화학은 임의 지정되었다.
11 절차 상의 주의점: 단계 1에서, tert-부틸 N-메틸-N-[(3S)-피롤리딘-3-일]카바메이트를 사용하였다. 단계 4에서, 거울상이성질체는 키랄 컬럼 Chiralpak IA 및 이동상 35% EtOH/헥산을 사용하여 키랄 HPLC에 의해 분리하였다. 테트라하이드로나프탈렌 아미드에서의 입체화학은 임의 지정되었다.
12 절차 상의 주의점: 단계 1에서, tert-부틸 N-메틸-N-[(3R)-피롤리딘-3-일]카바메이트를 사용하였다. 단계 4에서, 거울상이성질체는 키랄 컬럼 (R,R)-Whelk-O1-Kromasil 및 이동상 30% DCM/EtOH을 사용하여 키랄 HPLC에 의해 분리하였다. 테트라하이드로나프탈렌 아미드에서의 입체화학은 임의 지정되었다.
13 절차 상의 주의점: 단계 1에서, tert-부틸 (1S,4S)-2,5-디아자바이사이클로[2.2.1]헵탄-2-카복실레이트 및 Ruphos Pd G3을 촉매로서 사용하였다. 단계 4에서, 거울상이성질체는 키랄 컬럼 Chiralpak ID 및 60% 내지 65% MeOH/DCM의 용출 구배를 사용하여 키랄 HPLC에 의해 분리하였다. 테트라하이드로나프탈렌 아미드에서의 입체화학은 임의 지정되었다.
14 절차 상의 주의점: 단계 1에서, tert-부틸 (1R,4R)-2,5-디아자바이사이클로[2.2.1]헵탄-2-카복실레이트 및 Ruphos Pd G3을 촉매로서 사용하였다. 단계 4에서, 거울상이성질체는 키랄 컬럼 Chiralpak AD-H-SL001 및 이동상 40% IPA/헥산(0.1% Et2NH)을 사용하여 키랄 HPLC에 의해 분리하였다. 테트라하이드로나프탈렌 아미드에서의 입체화학은 임의 지정되었다.
15 절차 상의 주의점: 단계 3에서, 카복실산 중간체 24를 사용하였다. 단계 4에서, 거울상이성질체는 키랄 컬럼 Phenomenex Lux 5μm Cellulose-4 및 이동상 60% EtOH/헥산을 사용하여 SFC에 의해 분리하였다. 분리된 거울상이성질체의 입체화학은 임의 지정되었다.
16 절차 상의 주의점: 실시예 11 방법 2를 사용하였다. 단계 1에서, Ruphos Pd G3을 촉매로서 사용하였다.
17 절차 상의 주의점: 단계 1에서, 브롬화물 중간체 11-1을 사용하였다. 단계 4에서, 거울상이성질체는 키랄 컬럼 Phenomenex Lux 5μm Cellulose-4 및 이동상 50% CO2/EtOH:ACN(1:1)을 사용하여 SFC에 의해 분리하였다. 분리된 거울상이성질체의 입체화학은 임의 지정되었다.
18 절차 상의 주의점: 단계 1에서, 브롬화물 중간체 11-1 및 Ruphos Pd G3을 촉매로서 사용하였다. 단계 4에서, 거울상이성질체는 키랄 컬럼 Phenomenex Lux 5μm Cellulose-4 및 이동상 50% EtOH/헥산을 사용하여 키랄 HPLC에 의해 분리하였다. 분리된 거울상이성질체의 입체화학은 임의 지정되었다.
실시예 14-1. N-((2R)-6-(3,8-디아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-3-일)-5-시아노-1,2,3,4-테트라하이드로나프탈렌-2-일)-3-아미노-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드;
실시예 14-2. N-((2S)-6-(3,8-디아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-3-일)-5-시아노-1,2,3,4-테트라하이드로나프탈렌-2-일)-3-아미노-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드;
실시예 14-3. N-((2R)-6-(3,8-디아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-3-일)-7-시아노-1,2,3,4-테트라하이드로나프탈렌-2-일)-3-아미노-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드 및
실시예 14-4. N-((2S)-6-(3,8-디아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-3-일)-7-시아노-1,2,3,4-테트라하이드로나프탈렌-2-일)-3-아미노-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드
Figure pct00194
단계 1. 라세미 tert-부틸 3-(6-(((벤질옥시)카보닐)아미노)-1-브로모-5,6,7,8-테트라하이드로나프탈렌-2-일)-3,8-디아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-8-카복실레이트 및 라세미 tert-부틸 3-(6-(((벤질옥시)카보닐)아미노)-3-브로모-5,6,7,8-테트라하이드로나프탈렌-2-일)-3,8-디아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-8-카복실레이트의 혼합물
250-mL 둥근 바닥 플라스크에 tert-부틸 3-(6-[[(벤질옥시)카보닐]아미노]-5,6,7,8-테트라하이드로나프탈렌-2-일)-3,8-디아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-8-카복실레이트(1.2g, 2.44 mmol) 및 DCM(96mL)을 첨가하였다. 그 다음 DCM(24mL) 중 NBS(478mg, 2.69 mmol)의 용액을 0℃에서 교반 하에 적가하였다. 결과적으로 수득되는 용액을 20℃에서 2시간 동안 교반한 다음, 물(20mL)을 첨가하여 ??치시켰다. 결과적으로 수득되는 용액을 DCM(3 x 30mL)으로 추출하였다. 유기 층을 합하여, 무수 황산나트륨 상에서 건조하고, 여과하고, 진공 하에 농축하여 잔류물을 제공하였고, 이를 에틸 아세테이트/석유 에테르(PE/EA = 100:1 내지 5:1)로 용출되는 실리카겔 크로마토그래피로 정제하여 tert-부틸 3-(6-[[(벤질옥시)카보닐]아미노]-3-브로모-5,6,7,8-테트라하이드로나프탈렌-2-일)-3,8-디아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-8-카복실레이트 및 tert-부틸 3-(6-[[(벤질옥시)카보닐]아미노]-1-브로모-5,6,7,8-테트라하이드로나프탈렌-2-일)-3,8-디아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-8-카복실레이트의 혼합물을 황색 고체로서 제공하였다. MS:(ESI, m/z): 572[M+H]+.
단계 2. 라세미 tert-부틸 3-(6-[[(벤질옥시)카보닐]아미노]-3-시아노-5,6,7,8-테트라하이드로나프탈렌-2-일)-3,8-디아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-8-카복실레이트 및 tert-부틸 3-(6-[[(벤질옥시)카보닐]아미노]-1-시아노-5,6,7,8-테트라하이드로나프탈렌-2-일)-3,8-디아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-8-카복실레이트의 혼합물
질소의 불활성 대기로 퍼지되어 유지된 20-mL 밀봉 튜브에 tert-부틸 3-(6-[[(벤질옥시)카보닐]아미노]-3-브로모-5,6,7,8-테트라하이드로나프탈렌-2-일)-3,8-디아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-8-카복실레이트 및 tert-부틸 3-(6-[[(벤질옥시)카보닐]아미노]-1-브로모-5,6,7,8-테트라하이드로나프탈렌-2-일)-3,8-디아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-8-카복실레이트(460mg, 0.81 mmol), Zn(CN)2(93mg, 0.80 mmol,), Pd(PPh3)4(93mg, 0.08 mmol), 및 N,N-디메틸포름아미드(9mL)의 혼합물을 첨가하였다. 결과적으로 수득되는 혼합물을 120℃에서 1시간 동안 마이크로파로 방사선조사하였다. 반응물은 실온으로 냉각시키고 추가 20mL의 물을 첨가하여 ??치시켰다. 결과적으로 수득되는 용액을 에틸아세테이트(3 x 15mL)로 추출하였다. 유기 층을 합하여, 무수 황산나트륨 상에서 건조하고, 여과하고, 진공 하에 농축하여 잔류물을 제공하였고, 이를 실리카겔 크로마토그래피로 정제하고 100:1 내지 2:1 에틸 아세테이트/석유 에테르로 용출시켜 tert-부틸 3-(6-[[(벤질옥시)카보닐]아미노]-3-시아노-5,6,7,8-테트라하이드로나프탈렌-2-일)-3,8-디아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-8-카복실레이트 및 tert-부틸 3-(6-[[(벤질옥시)카보닐]아미노]-1-시아노-5,6,7,8-테트라하이드로나프탈렌-2-일)-3,8-디아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-8-카복실레이트의 혼합물을 황색 오일로서 제공하였다. MS:(ESI, m/z): 517[M+H]+.
단계 3. 라세미 tert-부틸 3-(6-아미노-3-시아노-5,6,7,8-테트라하이드로나프탈렌-2-일)-3,8-디아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-8-카복실레이트 및 라세미 tert-부틸 3-(6-아미노-1-시아노-5,6,7,8-테트라하이드로나프탈렌-2-일)-3,8-디아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-8-카복실레이트의 혼합물
질소로 퍼지되어 유지된 50-mL 둥근 바닥 플라스크에 tert-부틸 3-(6-[[(벤질옥시)카보닐]아미노]-3-시아노-5,6,7,8-테트라하이드로나프탈렌-2-일)-3,8-디아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-8-카복실레이트 및 tert-부틸 3-(6-[[(벤질옥시)카보닐]아미노]-1-시아노-5,6,7,8-테트라하이드로나프탈렌-2-일)-3,8-디아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-8-카복실레이트(300mg, 0.58 mmol), 에탄올(20mL), 및 팔라듐 탄소(300mg)의 혼합물을 첨가하였다. 결과적으로 수득되는 현탁액을 수소 대기 하에 20℃에서 1시간 동안 교반하였다. 고체는 셀라이트 상에서 여과하여 제거하였고, 여과액은 진공 하에 농축하여 조생성물인 잔류물을 제공하였고, 이를 실리카겔 크로마토그래피로 정제하고 DCM/메탄올(DCM/MeOH=10:1)로 용출시켜 tert-부틸 3-(6-아미노-3-시아노-5,6,7,8-테트라하이드로나프탈렌-2-일)-3,8-디아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-8-카복실레이트 및 tert-부틸 3-(6-아미노-1-시아노-5,6,7,8-테트라하이드로나프탈렌-2-일)-3,8-디아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-8-카복실레이트의 혼합물을 황색 오일로서 제공하였다. MS:(ESI, m/z): 383[M+H]+.
단계 4. tert-부틸 3-((R)-6-(3-아미노-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미도)-1-시아노-5,6,7,8-테트라하이드로나프탈렌-2-일)-3,8-디아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-8-카복실레이트(피크 A, 거울상이성질체 1);
tert-부틸 3-((S)-6-(3-아미노-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미도)-1-시아노-5,6,7,8-테트라하이드로나프탈렌-2-일)-3,8-디아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-8-카복실레이트(피크 A, 거울상이성질체 2);
tert-부틸 3-((R)-6-(3-아미노-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미도)-3-시아노-5,6,7,8-테트라하이드로나프탈렌-2-일)-3,8-디아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-8-카복실레이트(피크 B, 거울상이성질체 1);
tert-부틸 3-((S)-6-(3-아미노-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미도)-3-시아노-5,6,7,8-테트라하이드로나프탈렌-2-일)-3,8-디아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-8-카복실레이트(피크 B, 거울상이성질체 2).
100-mL 둥근 바닥 플라스크에 tert-부틸 3-(6-아미노-1-시아노-5,6,7,8-테트라하이드로나프탈렌-2-일)-3,8-디아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-8-카복실레이트 및 tert-부틸 3-(6-아미노-3-시아노-5,6,7,8-테트라하이드로나프탈렌-2-일)-3,8-디아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-8-카복실레이트(150mg, 0.39 mmol), EDCI(90mg, 0.47 mmol), HOBt(63mg, 0.47 mmol), DIEA(152mg, 1.18 mmol), N,N-디메틸포름아미드(10mL), 및 3-아미노-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복실산(98mg, 0.47 mmol)의 혼합물을 넣었다. 결과적으로 수득되는 용액을 20℃에서 2시간 동안 교반한 뒤, 20mL의 물을 첨가하여 ??치시켰다. 고체를 여과 수거하고, 고체를 분취용 HPLC[컬럼: XBridge BEH C18 OBD, 5 μm, 19 x 150mm; 이동상: 물(10 mM NH4HCO3), ACN (55% ACN에서부터 70%까지, 7분 넘게)]에 의해 정제하였다.
이 혼합물을 그 다음 키랄 HPLC(컬럼: Chiralpak OD-H, 5 μm, 20 x 250mm; 이동상 A: 헥산, B: EtOH, 50% B)에 의해 추가 정제하였다. 이로써, 단일 위치이성질체 피크 A: (RT=8.45 분) 및 단일 위치이성질체 피크 B: (RT=12.91 분)가 초래되었다.
피크 A는 키랄 HPLC(컬럼: Chiralpak IC, 5 μm, 20 x 250mm; 이동상 A: 헥산, B: EtOH, 50% B)에 의해 추가 정제하였다. 이로써 피크 A, 거울상이성질체 1: (RT=15.55 분)이 황색 고체로서, 그리고 피크 A, 거울상이성질체 2: (RT=21.10 분)가 황색 고체로서 초래되었다. 분리된 피크 A 거울상이성질체의 입체화학은 임의 지정되었다. MS(두 거울상이성질체 모두에 대해): (ESI, m/z): 573[M+H]+.
피크 B는 키랄 HPLC(컬럼: Chiralpak IB, 5μm, 20 x 250mm; 이동상 A: 헥산, B: EtOH, 50% B)에 의해 추가로 정제하였다. 그 결과, 피크 B, 거울상이성질체 1: (RT=7.65 분)이 황색 고체로서, 그리고 피크 B, 거울상이성질체 2: (RT=9.22 분)가 황색 고체로서 초래되었다. 분리된 피크 B 거울상이성질체의 입체화학은 임의 지정되었다. MS(두 거울상이성질체에 대해):(ESI, m/z): 573[M+H]+.
단계 5. N-((2R)-6-(3,8-디아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-3-일)-5-시아노-1,2,3,4-테트라하이드로나프탈렌-2-일)-3-아미노-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드;
N-((2S)-6-(3,8-디아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-3-일)-5-시아노-1,2,3,4-테트라하이드로나프탈렌-2-일)-3-아미노-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드;
N-((2R)-6-(3,8-디아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-3-일)-7-시아노-1,2,3,4-테트라하이드로나프탈렌-2-일)-3-아미노-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드
N-((2S)-6-(3,8-디아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-3-일)-7-시아노-1,2,3,4-테트라하이드로나프탈렌-2-일)-3-아미노-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드
1차 이성질체에 대한 대표 절차 및 스펙트럼:
50-mL 둥근 바닥 플라스크에 tert-부틸 3-[(6R)-6-[3-아미노-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-아미도]-1-시아노-5,6,7,8-테트라하이드로나프탈렌-2-일]-3,8-디아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-8-카복실레이트(30mg, 0.05 mmol), DCM(5mL), 및 TFA(1mL)를 첨가하였다. 결과적으로 수득되는 용액을 20℃에서 1시간 동안 교반하였고, 그 다음 진공 하에 농축하여 조생성물인 잔류물을 제공하였고, 이를 5mL의 DCM으로 희석하였다. 용액의 pH는 MeOH 중 NH3(7M)으로 8로 조정하였고, 그 다음 결과적으로 생성되는 혼합물을 진공 하에 농축하여 잔류물을 제공하였고, 이를 분취용 HPLC[컬럼: XBridge BEH C18 OBD Prep 컬럼, 130Å, 5μm, 19 x 150mm; 이동상: 물(10 mmol NH4HCO3), ACN(35% ACN에서부터 56%까지, 7분 넘게)]로 정제하여 N-((2R)-6-(3,8-디아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-3-일)-5-시아노-1,2,3,4-테트라하이드로나프탈렌-2-일)-3-아미노-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드를 연황색 고체로서 제공하였다. 1H NMR(400 MHz, MeOH-d4)δ(ppm): 8.20(d, J = 8.3 Hz, 1H), 7.29-7.30(m, 2H), 6.94(d, J = 8.5 Hz, 1H), 4.21-4.24(m, 1H), 3.55(s, 2H), 3.20-3.27(m, 2H), 2.91-3.19(m, 5H), 2.79-2.80(m, 1H), 2.64(s, 3H), 2.18-2.20(m, 3H), 1.79-1.94(m, 3H). MS:(ESI, m/z): 473[M+H]+.
이하 표 18의 실시예는 실시예 14-1의 제조에 사용된 것과 유사한 표준 화학적 조작 및 절차를 사용하여 제조하였다
Figure pct00195
Figure pct00196
Figure pct00197
Figure pct00198
Figure pct00199
1 절차 상의 주의점: 단계 1에서, 단 하나의 브롬화 위치이성질체, tert-부틸 4-(6-(((벤질옥시)카보닐)아미노)-1-브로모-4-플루오로-5,6,7,8-테트라하이드로나프탈렌-2-일)피페라진-1-카복실레이트가 관찰되었다.
2 절차 상의 주의점: 거울상이성질체의 키랄 분리를 키랄 컬럼 Chiralpak IA 및 이동상 50% EtOH/헥산(0.1% Et2NH)을 사용하여, 단계 4에서보다 단계 5 이후에 수행하였다. 분리된 거울상이성질체의 입체화학은 임의 지정하였다.
3 절차 상의 주의점: 단계 4에서, 아미드 커플링 반응은 DMA 중 HBTU 및 Et3N을 사용하여 수행하였다. 거울상이성질체의 키랄 분리는 키랄 컬럼 Chiralpak IE 및 이동상 20% IPA/MTBE(0.1% Et2NH)을 사용하여 단계 4에서보다 단계 5 후에 수행하였다. 분리된 거울상이성질체의 입체화학은 임의 지정하였다.
4 절차 상의 주의점: 단계 4에서, 카복실산 중간체 24를 사용하였다. 아미드 커플링 반응은 DMA 중 HBTU 및 Et3N을 사용하여 수행하였다. 거울상이성질체의 키랄 분리는 키랄 컬럼 Chiralpak IA 및 이동상 40% EtOH/헥산-DCM(5:1)(0.1% Et2NH)을 사용하여 단계 4에서보다 단계 5 후에 수행하였다. 분리된 거울상이성질체의 입체화학은 임의 지정하였다.
5 절차 상의 주의점: 단계 4에서, 아미드 커플링 반응은 DMA 중 HBTU 및 Et3N을 사용하여 수행하였다. 거울상이성질체의 키랄 분리는 키랄 컬럼 Chiralpak IG 및 이동상 30% EtOH/MTBE(MeOH 중 8 mM NH3)를 사용하여 단계 4에서보다 단계 5 후에 수행하였다. 분리된 거울상이성질체의 입체화학은 임의 지정하였다.
6 절차 상의 주의점: 단계 4에서, 아미드 커플링 반응은 DMA 중 HBTU 및 Et3N을 사용하여 수행하였다. 거울상이성질체는 키랄 컬럼 Chiralpak IC 및 이동상 15% EtOH/MTBE를 사용하여 키랄 HPLC에 의해 분리하였다. 분리된 거울상이성질체의 입체화학은 임의 지정하였다.
7 절차 상의 주의점: 단계 4에서, 아미드 커플링 반응은 DMA 중 HBTU 및 Et3N을 사용하여 수행하였다. 거울상이성질체는 키랄 컬럼 Chiralpak IG 및 이동상 30% EtOH/MTBE를 사용하여 키랄 HPLC에 의해 분리하였다. 분리된 거울상이성질체의 입체화학은 임의 지정하였다.
8 절차 상의 주의점: 단계 4에서, 카복실산 중간체 24를 사용하였다. 아미드 커플링 반응은 DMA 중 HBTU 및 Et3N을 사용하여 수행하였다. 거울상이성질체는 키랄 컬럼 Chiralpak IG 및 이동상 30% EtOH/MTBE를 사용하여 키랄 HPLC에 의해 분리하였다. 분리된 거울상이성질체의 입체화학은 임의 지정하였다.
9 절차 상의 주의점: 단계 2에서, 시안화는 DMA 중 Zn(2당량), Zn(CN)2(10당량), Pd(P(t-Bu)3)2(0.5당량), 및 4,4'-디-tert-부틸-2,2'-바이피리딘(1당량)의 존재 하에 97℃에서 2시간 동안 가열하여 달성하였다.
10 절차 상의 주의점: 단계 4에서, 아미드 커플링 반응은 DMA 중 HBTU 및 Et3N을 사용하여 수행하였다. 거울상이성질체는 키랄 컬럼 Chiralpak ID-2 및 이동상 15% EtOH/MTBE(0.1% Et2NH)를 사용하여 키랄 HPLC에 의해 분리하였다. 분리된 거울상이성질체의 입체화학은 임의 지정하였다.
실시예 21-1. N-((2R)-6-(3,8-디아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-3-일)-5-플루오로-1,2,3,4-테트라하이드로나프탈렌-2-일)-3-아미노-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드
Figure pct00200
단계 1. tert-부틸 3-(6-(((벤질옥시)카보닐)아미노)-3-플루오로-5,6,7,8-테트라하이드로나프탈렌-2-일)-3,8-디아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-8-카복실레이트 및 tert-부틸 3-(6-(((벤질옥시)카보닐)아미노)-1-플루오로-5,6,7,8-테트라하이드로나프탈렌-2-일)-3,8-디아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-8-카복실레이트의 혼합물
ACN(16mL) 중 tert-부틸 3-(6-(((벤질옥시)카보닐)아미노)-5,6,7,8-테트라하이드로나프탈렌-2-일)-3,8-디아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-8-카복실레이트(800mg, 1.63mmol) 및 Selectfluor(634mg, 1.79 mmol)의 용액을 20℃에서 18시간 동안 교반하였다. 반응은 물 30mL을 첨가하여 ??치시켰다. 결과적으로 수득되는 혼합물을 3x10 mL의 에틸 아세테이트로 추출하였다. 유기 층을 합하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조하고, 여과하고, 진공 하에 농축하였다. 잔류물을 실리카겔 크로마토그래피(1%-50% EtOAC/석유 에테르로 용출)로 정제하여 위치이성질체 tert-부틸 3-(6-(((벤질옥시)카보닐)아미노)-3-플루오로-5,6,7,8-테트라하이드로나프탈렌-2-일)-3,8-디아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-8-카복실레이트 및 tert-부틸 3-(6-(((벤질옥시)카보닐)아미노)-1-플루오로-5,6,7,8-테트라하이드로나프탈렌-2-일)-3,8-디아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-8-카복실레이트의 혼합물을 황색 오일로서 제공하였다. MS:(ESI, m/z): 510[M+H]+.
단계 2. tert-부틸 3-(6-아미노-3-플루오로-5,6,7,8-테트라하이드로나프탈렌-2-일)-3,8-디아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-8-카복실레이트 및 tert-부틸 3-(6-아미노-1-플루오로-5,6,7,8-테트라하이드로나프탈렌-2-일)-3,8- 디아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-8-카복실레이트의 혼합물
에틸아세테이트(100mL) 중 tert-부틸 3-(6-[[(벤질옥시)카보닐]아미노]-3-플루오로-5,6,7,8-테트라하이드로나프탈렌-2-일)-3,8-디아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-8-카복실레이트 및 tert-부틸 3-(6-[[(벤질옥시)카보닐]아미노]-1-플루오로-5,6,7,8-테트라하이드로나프탈렌-2-일)-3,8-디아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-8-카복실레이트 혼합물(508mg, 1.00 mmol), 및 탄소 상의 팔라듐(100mg, 10%)의 혼합물 슬러리를 수소 대기 하에 20℃에서 1시간 동안 교반하였다. 고체는 여과해냈다. 결과적으로 수득되는 혼합물을 진공 하에 농축하였다. 잔류물은 실리카겔 크로마토그래피에 의해 정제(1%-50% MeOH/DCM으로 용출)하여 위치이성질체 tert-부틸 3-(6-아미노-3-플루오로-5,6,7,8-테트라하이드로나프탈렌-2-일)-3,8-디아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-8-카복실레이트 및 tert-부틸 3-(6-아미노-1-플루오로-5,6,7,8-테트라하이드로나프탈렌-2-일)-3,8-디아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-8-카복실레이트의 혼합물을 백색 고체로서 제공하였다. MS:(ESI, m/z): 376[M+H]+.
단계 3. tert-부틸 3-(6-(3-아미노-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미도)-1-플루오로-5,6,7,8-테트라하이드로나프탈렌-2-일)-3,8-디아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-8-카복실레이트 및 tert-부틸 3-(6-(3-아미노-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미도)-3-플루오로-5,6,7,8-테트라하이드로나프탈렌-2-일)-3,8-디아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-8-카복실레이트의 혼합물
DMF(5mL) 중 tert-부틸 3-(6-아미노-1-플루오로-5,6,7,8-테트라하이드로나프탈렌-2-일)-3,8-디아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-8-카복실레이트 및 tert-부틸 3-(6-아미노-3-플루오로-5,6,7,8-테트라하이드로나프탈렌-2-일)-3,8-디아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-8-카복실레이트(150mg, 0.40 mmol)의 혼합물, 3-아미노-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복실산(99mg, 479.45 mmol), EDCI(92mg, 0.48 mmol), HOBt(65mg, 0.48 mmol), 및 DIEA(155mg, 1.20 mmol)의 용액을 20℃에서 2시간 동안 교반하였다. 반응은 물 20mL을 첨가하여 ??치시켰다. 고체는 여과 수집하고, 조생성물은 분취용 HPLC에 의해 정제[컬럼: XBridge BEH C18 OBD, 130Å, 5μm, 19 x 150mm; 이동상 A: 물(10 mM NH4HCO3), B: ACN(60% ACN에서부터 80%까지, 7분 넘게)]하여 표제 화합물의 혼합물을 제공하였다.
키랄 분리. 위치이성질체 및 거울상이성질체의 혼합물을 키랄 HPLC(컬럼: Chiralpak IA, 250 x 20 mm, 5μm; 유속: 15 mL/min; 이동상 10% MeOH/MTBE; 파장: 190nm 내지 500nm)에 의해 부분적으로 분리하여 tert-부틸 3-((R)-6-(3-아미노-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미도)-1-플루오로-5,6,7,8-테트라하이드로나프탈렌-2-일)-3,8-디아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-8-카복실레이트 및 tert-부틸 3-((R)-6-(3-아미노-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미도)-3-플루오로-5,6,7,8-테트라하이드로나프탈렌-2-일)-3,8-디아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-8-카복실레이트 (피크 1: RT = 7.37 min; 임의 지정된 입체화학)의 혼합물; 백색 고체로서 tert-부틸 3-((S)-6-(3-아미노-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미도)-1-플루오로-5,6,7,8-테트라하이드로나프탈렌-2-일)-3,8-디아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-8-카복실레이트(피크 2: RT = 7.69 min; 임의 지정된 입체화학); 및 백색 고체로서 tert-부틸 3-((S)-6-(3-아미노-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미도)-3-플루오로-5,6,7,8-테트라하이드로나프탈렌-2-일)-3,8-디아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-8-카복실레이트(피크 3: RT = 13.70 min; 임의 지정된 입체화학)를 제공하였다.
피크 1은 키랄 HPLC(컬럼: Phenomenex Lux 5u Cellulose-4, AXIA Packed, 250 x 21.5 mm, 5 um; 유속: 18 mL/min, 이동상: MeOH; 파장: 190nm 내지 500nm)에 의해 추가로 정제하여 백색 고체로서 tert-부틸 3-((R)-6-(3-아미노-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미도)-1-플루오로-5,6,7,8-테트라하이드로나프탈렌-2-일)-3,8-디아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-8-카복실레이트(RT=13.56min; 임의 지정된 입체화학), 및 백색 고체로서 tert-부틸 3-((R)-6-(3-아미노-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미도)-3-플루오로-5,6,7,8-테트라하이드로나프탈렌-2-일)-3,8-디아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-8-카복실레이트(RT=17.31min; 임의 지정된 입체화학)를 제공하였다. 모두 4개의 이성질체에 대한 MS:(ESI, m/z): 566[M+H]+.
단계 4. N-((2R)-6-(3,8-디아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-3-일)-5-플루오로-1,2,3,4-테트라하이드로나프탈렌-2-일)-3-아미노-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드
DCM(5mL) 중 tert-부틸 3-((R)-6-(3-아미노-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미도)-3-플루오로-5,6,7,8-테트라하이드로나프탈렌-2-일)-3,8-디아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-8-카복실레이트(25 mg, 0.04 mmol) 및 TFA(1mL)의 용액을 20℃에서 1시간 동안 교반하였다. 결과적으로 수득되는 혼합물을 진공 하에 농축하였다. 잔류물은 5mL의 DCM으로 희석하였다. 용액의 pH는 MeOH 중 NH3(7M)에 의해 8로 조정하였다. 결과적으로 수득되는 혼합물을 진공 하에 농축하였다. 잔류물은 분취용 HPLC[컬럼: XBridge Prep C18 OBD, 130Å, 5μm, 19 x 150mm; 이동상: 물(10mM NH4HCO3), ACN(25% ACN에서부터 55%까지, 7분 넘게)]로 정제하여 N-((2R)-6-(3,8-디아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-3-일)-5-플루오로-1,2,3,4-테트라하이드로나프탈렌-2-일)-3-아미노-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드를 회백색 고체로서 제공하였다. 1H NMR(메탄올-d4, 400 MHz)δ(ppm): 8.20(d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.30(d, J = 8.0 Hz, 1H), 6.80-6.76(m, 2H), 4.25-4.17(m, 1H), 3.53-3.51(m, 2H), 3.16-3.14(m, 2H), 3.10-2.99(m, 2H), 2.92-2.90(m, 2H), 2.82-2.74(m, 2H), 2.64(s, 3H), 2.18-2.12(m, 1H), 2.04-2.02(m, 2H), 1.87-1.82(m, 3H). MS:(ESI, m/z): 466[M+H]+.
표 19의 처음 3개의 실시예는 단계 3에서 분리된 나머지 3개의 이성질체로부터 실시예 21-1의 제조에 사용된 것과 유사한 표준 화학적 조작 및 절차를 사용하여 제조하였다. 표 19의 나머지 실시예는 실시예 21-1 내지 21-4의 제조에 사용된 것과 유사한 표준 화학적 조작 및 절차를 사용하여 제조하였다.
Figure pct00201
Figure pct00202
Figure pct00203
1 절차 상의 주의점: 위치이성질체 및 거울상이성질체의 혼합물은 키랄 컬럼 Chiralpak-AD-H-SL002 및 이동상 50% EtOH/헥산을 사용한 키랄 HPLC에 의해 부분적으로 분리하여 실시예 21-7에 대한 전구체를 1차 용출 샘플로서, 실시예 21-8에 대한 전구체를 2차 용출 샘플로서, 그리고 두 피크의 혼합물을 3차 용출 샘플로서 제공하였다. 혼합물은 키랄 컬럼 Chiralpak-IC 및 이동상 30% IPA/MTBE를 사용한 키랄 HPLC에 의해 추가로 분리하여 실시예 21-5에 대한 전구체를 1차 용출 샘플로서, 실시예 21-6에 대한 전구체를 2차 용출 샘플로서 제공하였다. 분리된 거울상이성질체의 입체화학은 임의로 지정하였다.
2 절차 상의 주의점: 위치이성질체 및 거울상이성질체의 혼합물은 키랄 컬럼 Chiralpak-IA 및 이동상 EtOH을 사용한 키랄 HPLC에 의해 부분적으로 분리하여 실시예 21-9에 대한 전구체를 1차 용출 샘플로서, 두 피크의 혼합물을 2차 용출 샘플로서, 그리고 실시예 21-12에 대한 전구체를 3차 용출 샘플로서 제공하였다. 혼합물은 키랄 컬럼 (R,R)-Whelk-Ol-Kromasil 및 이동상 10% EtOH/MTBE를 사용한 키랄 HPLC에 의해 추가로 분리하여 실시예 21-10에 대한 전구체를 1차 용출 샘플로서, 실시예 21-11에 대한 전구체를 2차 용출 샘플로서 제공하였다. 분리된 거울상이성질체의 입체화학은 임의로 지정하였다.
실시예 22-1. (S)-3-아미노-N-(5,8-디플루오로-6-(피페라진-1-일)-1,2,3,4-테트라하이드로나프탈렌-2-일)-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드 및
실시예 22-2. (R)-3-아미노-N-(5,8-디플루오로-6-(피페라진-1-일)-1,2,3,4-테트라하이드로나프탈렌-2-일)-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드
Figure pct00204
단계 1. tert-부틸 4-(6-(벤질옥시카보닐아미노)-1,4-디플루오로-5,6,7,8-테트라하이드로나프탈렌-2-일)피페라진-1-카복실레이트
1:1 DCM/MeOH(100mL) 중 tert-부틸 4-(6-(벤질옥시카보닐아미노)-4-플루오로-5,6,7,8-테트라하이드로나프탈렌-2-일)피페라진-1-카복실레이트(3.00g, 6.20 mmol)의 용액에 Selectfluor(2.20g, 6.20 mmol)를 0℃에서 첨가하였다. 결과적으로 수득되는 용액을 20℃에서 밤새 교반하였다. Selectfluor의 추가 2 부분(1.1g, 3.1mmol)을 0℃에서 첨가하였고, 20℃에서 4시간 동안 교반하였다. 이 반응 혼합물을 그 다음 물 80mL에 부었다. 결과적으로 수득되는 혼합물을 3 x 100mL의 DCM으로 추출하였다. 유기 층을 합하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조하고, 여과하고, 진공 하에 농축하였다. 잔류물은 실리카겔 크로마토그래피로 정제(3:1 석유 에테르/에틸 아세테이트로 용출)하여 tert-부틸 4-(6-(벤질옥시카보닐아미노)-1,4-디플루오로-5,6,7,8-테트라하이드로나프탈렌-2-일)피페라진-1-카복실레이트를 연황색 고체로서 제공하였다. MS:(ESI, m/z): 502[M+H]+.
단계 2 . tert-부틸 4-(6-아미노-1,4-디플루오로-5,6,7,8-테트라하이드로나프탈렌-2-일)피페라진-1-카복실레이트
에틸 아세테이트(10mL) 중 tert-부틸 4-(6-(벤질옥시카보닐아미노)-1,4-디플루오로-5,6,7,8-테트라하이드로나프탈렌-2-일)피페라진-1-카복실레이트(530mg, 1.06 mmol) 및 탄소 상의 팔라듐(100mg, 10%)의 용액을 수소 대기 하에 20℃에서 2시간 동안 교반하였다. 고체는 여과해냈다. 여과액은 진공 하에 농축하여 tert-부틸 4-(6-아미노-1,4-디플루오로-5,6,7,8-테트라하이드로나프탈렌-2-일)피페라진-1-카복실레이트를 황색 고체로서 제공하였다. MS:(ESI, m/z): 368[M+H]+.
단계 3 . tert-부틸 4-(6-(3-아미노-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미도)-1,4-디플루오로-5,6,7,8-테트라하이드로나프탈렌-2-일)피페라진-1-카복실레이트
DMA(5mL) 중 tert-부틸 4-(6-아미노-1,4-디플루오로-5,6,7,8-테트라하이드로나프탈렌-2-일)피페라진-1-카복실레이트(360mg, 0.74 mmol, 75% 순도), 3-아미노-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복실산(188mg, 0.90 mmol), HBTU(343mg, 0.90 mmol), 및 Et3N(0.31mL, 2.26 mmol)의 용액을 20℃에서 30분 동안 교반하였다. 조생성물을 역상 크로마토그래피[컬럼: C18 실리카겔; 이동상 A: 물(0.05% 포름산), B: ACN(0% ACN에서부터 30분 후 80%까지)]로 정제하였다. 수집한 분획을 진공 하에 농축하여 tert-부틸 4-(6-(3-아미노-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미도)-1,4-디플루오로-5,6,7,8-테트라하이드로나프탈렌-2-일)피페라진-1-카복실레이트를 황색 고체로서 제공하였다. MS:(ESI, m/z): 558[M+H]+.
단계 4 . 키랄 분리
라세미체인 tert-부틸 4-(6-(3-아미노-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미도)-1,4-디플루오로-5,6,7,8-테트라하이드로나프탈렌-2-일)피페라진-1-카복실레이트(250mg)를 키랄 HPLC(컬럼: ChiralArt Cellulose-SB, 2x25 cm, 5 μm; 이동상: 30% EtOH/헥산, 13분 동안)로 분리하였다. 1차 용출 이성질체(RT=9.05 분)는 진공 하에 농축하여 (S)-tert-부틸 4-(6-(3-아미노-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미도)-1,4-디플루오로-5,6,7,8-테트라하이드로나프탈렌-2-일)피페라진-1-카복실레이트를 황색 고체로서 제공하였다(임의 지정된 입체화학). 2차 용출 이성질체(RT=10.15 분)는 진공 하에 농축하여 (R)-tert-부틸 4-(6-(3-아미노-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미도)-1,4-디플루오로-5,6,7,8-테트라하이드로나프탈렌-2-일)피페라진-1-카복실레이트를 황색 고체로서 제공하였다(임의 지정된 입체화학). 두 이성질체에 대한 MS:(ESI, m/z): 558[M+H]+.
단계 5. (S)-3-아미노-N-(5,8-디플루오로-6-(피페라진-1-일)-1,2,3,4-테트라하이드로나프탈렌-2-일)-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드
DCM(3mL) 중 (S)-tert-부틸 4-(6-(3-아미노-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미도)-1,4-디플루오로-5,6,7,8-테트라하이드로나프탈렌-2-일)피페라진-1-카복실레이트(60mg, 0.11 mmol) 및 트리플루오로아세트산(1mL)의 용액을 20℃에서 1시간 동안 교반하였다. 결과적으로 수득되는 혼합물을 진공 하에 농축하였다. 잔류물을 분취용 HPLC(컬럼: XBridge Prep OBD C18, 30 x 150mm, 5μm, 이동상 A: 물(0.05% NH4OH), B: ACN(15% ACN에서부터 7분 후 50%까지)]로 정제하였다. 수집한 분획을 동결건조시켜 (S)-3-아미노-N-(5,8-디플루오로-6-(피페라진-1-일)-1,2,3,4-테트라하이드로나프탈렌-2-일)-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드를 회백색 고체로서 제공하였다. 1H NMR(CD3OD, 300 MHz)δ(ppm): 8.17(d, J = 8.1 Hz, 1H), 7.30(d, J = 8.4 Hz, 1H), 6.67-6.65(m, 1H), 4.25-4.17(m, 1H), 3.14-2.97(m, 10H), 2.82-2.70(m, 1H), 2.64-2.54(m, 4H), 1.89-1.74(m, 1H). MS:(ESI, m/z): 458[M+H]+.
단계 6. (R)-3-아미노-N-(5,8-디플루오로-6-(피페라진-1-일)-1,2,3,4-테트라하이드로나프탈렌-2-일)-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드
DCM(4mL) 중 (R)-tert-부틸 4-(6-(3-아미노-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미도)-1,4-디플루오로-5,6,7,8-테트라하이드로나프탈렌-2-일)피페라진-1-카복실레이트(90mg, 0.16 mmol) 및 트리플루오로아세트산(1.5mL)의 용액을 20℃에서 1시간 동안 교반하였다. 결과적으로 수득되는 혼합물을 진공 하에 농축하였다. 잔류물을 분취용 HPLC[컬럼, XBridge Prep OBD C18, 30x150 mm, 5μm; 이동상 A: 물(0.05% NH4OH), B: ACN(15% ACN에서부터 7분 후 50%까지)]로 정제하였다. 수집한 분획을 동결건조하여 (R)-3-아미노-N-(5,8-디플루오로-6-(피페라진-1-일)-1,2,3,4-테트라하이드로나프탈렌-2-일)-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드를 회백색 고체로서 제공하였다. 1H NMR(DMSO-d 6 , 300 MHz)δ(ppm): 8.31(d, J = 8.4Hz, 1H), 7.64(d, J = 7.5Hz, 1H), 7.31(d, J = 8.1Hz, 1H), 7.17(s, 2H), 6.70-6.68(m, 1H), 4.13-4.04(m, 1H), 2.92-2.81(m, 10H), 2.73-2.55(m, 5H), 2.06-1.97(m, 1H), 1.78-1.68(m, 1H). MS:(ESI, m/z): 458[M+H]+.
이하 표 20의 실시예는 실시예 22-1 및 22-2의 제조에 사용된 것과 유사한 표준 화학적 조작 및 절차를 사용하여 제조하였다.
Figure pct00205
Figure pct00206
1 절차 상의 주의점: 단계 4에서, 입체이성질체는 키랄 컬럼 Chiralpak IG 및 이동상 15% EtOH/MTBE을 사용하는 키랄 HPLC에 의해 분리하였다. 분리된 거울상이성질체의 입체화학은 임의로 지정하였다.
2 절차 상의 주의점: 단계 4에서, 입체이성질체는 키랄 컬럼 Chiral Art Cellulose-SB 및 이동상 10% EtOH/MTBE를 사용하는 키랄 HPLC에 의해 분리하였다. 분리된 거울상이성질체의 입체화학은 임의로 지정되었다.
실시예 23-1. 7-아미노-N-[(6S)-2-[(3S,4S)-3-아미노-4-메톡시피롤리딘-1-일]-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-6-일]-3-메틸티에노[2,3-b]피라진-6-카복사미드
방법 1.
Figure pct00207
단계 1. 벤질 N-[(6S)-2-[(3S,4S)-3-[[(tert-부톡시)카보닐]아미노]-4-메톡시피롤리딘-1-일]-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-6-일]카바메이트
톨루엔(10mL) 중 벤질 N-[(6S)-2-(트리플루오로메탄설포닐옥시)-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-6-일]카바메이트(중간체 47-2)(500mg, 1.16 mmol), tert-부틸 N-[(3S,4S)-4-메톡시피롤리딘-3-일]카바메이트(300mg, 1.39 mmol), RuPhos Pd G3(195mg, 0.230 mmol), RuPhos(108mg, 0.230 mmol), 및 Cs2CO3(1.14g, 3.49 mmol)의 혼합물을 95℃에서 3시간 동안 교반하였다. 20℃로 냉각한 후, 고체는 여과해내고 여과액은 진공 하에 농축하였다. 잔류물은 실리카겔 크로마토그래피로 정제(5:2 석유 에테르/에틸 아세테이트로 용출)하여 벤질 N-[(6S)-2-[(3S,4S)-3-[[(tert-부톡시)카보닐]아미노]-4-메톡시피롤리딘-1-일]-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-6-일]카바메이트를 갈색 고체로서 제공하였다. MS(ESI, m/z): 497[M+H]+.
단계 2. tert-부틸 N-[(3S,4S)-1-[(6S)-6-아미노-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-2-일]-4-메톡시피롤리딘-3-일]카바메이트
에틸 아세테이트(10mL) 중 벤질 N-[(6S)-2-[(3S,4S)-3-[[(tert-부톡시)카보닐]아미노]-4-메톡시피롤리딘-1-일]-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-6-일]카바메이트(450mg, 0.910 mmol) 및 탄소 상의 팔라듐(450mg, 10%)의 혼합물을 수소 대기(벌룬) 하에 20℃에서 3시간 동안 교반하였다. 고체는 여과해냈다. 여과액은 진공 하에 농축하여 tert-부틸 N-[(3S,4S)-1-[(6S)-6-아미노-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-2-일]-4-메톡시피롤리딘-3-일]카바메이트를 백색 고체로서 제공하였다. MS(ESI, m/z): 362[M+H]+.
단계 3. tert-부틸 N-[(3S,4S)-1-(6-[7-아미노-3-메틸티에노[2,3-b]피라진-6-아미도]-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-2-일)-4-메톡시피롤리딘-3-일]카바메이트
트리에틸아민(0.400mL, 2.92 mmol) 및 HBTU(377mg, 0.990 mmol)를 DMA(5mL) 중 tert-부틸 N-[(3S,4S)-1-(6-아미노-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-2-일)-4-메톡시피롤리딘-3-일]카바메이트(300mg, 0.830 mmol) 및 7-아미노-3-메틸티에노[2,3-b]피라진-6-카복실산(174mg, 0.830 mmol)의 교반 용액에 첨가하였다. 결과적으로 수득되는 용액을 20℃에서 2시간 동안 교반하였다. 혼합물은 역상 크로마토그래피(컬럼: C18 실리카겔; 이동상, A: 물(10 mM NH4HCO3) 및 B: ACN(0%에서부터 70% B까지, 30분 넘게)]로 정제하였다. 수집한 분획을 진공 하에 농축하여 tert-부틸 N-[(3S,4S)-1-(6-[7-아미노-3-메틸티에노[2,3-b]피라진-6-아미도]-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-2-일)-4-메톡시피롤리딘-3-일]카바메이트를 녹색 고체로서 제공하였다. MS(ESI, m/z): 554[M+H]+.
단계 4. 7-아미노-N-[(6S)-2-[(3S,4S)-3-아미노-4-메톡시피롤리딘-1-일]-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-6-일]-3-메틸티에노[2,3-b]피라진-6-카복사미드
DCM(10mL) 중 tert-부틸 N-[(3S,4S)-1-[(6S)-6-[7-아미노-3-메틸티에노[2,3-b]피라진-6-아미도]-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-2-일]-4-메톡시피롤리딘-3-일]카바메이트(300mg, 0.470 mmol) 및 TFA(3mL)의 용액을 20℃에서 30분 동안 교반한 뒤, 진공 하에 농축하였다. 잔류물은 MeOH 중 NH3 용액(15mL, 7M)으로 20℃에서 1시간 동안 처리하였다. 결과적으로 수득되는 용액을 진공 하에 농축하였다. 잔류물은 분취용 HPLC[컬럼: XBridge Prep C18 OBD, 19 x 150 mm 5 μm; 이동상, A: 물(10 mM NH4HCO3 함유) 및 B: ACN(20%에서부터 42% B까지, 7분 넘게)]로 정제하여 7-아미노-N-[(6S)-2-[(3S,4S)-3-아미노-4-메톡시피롤리딘-1-일]-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-6-일]-3-메틸티에노[2,3-b]피라진-6-카복사미드를 황색 고체로서 제공하였다. MS(ESI, m/z): 454[M+H]+. 1H NMR(DMSO-d 6 , 400 MHz)δ(ppm): 8.65(s, 1H), 7.81(d, J = 7.6 Hz, 1H), 7.20(d, J = 8.8 Hz, 1H), 6.92(br s, 2H), 6.23(d, J = 8.4 Hz, 1H), 4.28-4.12(m, 1H), 3.62-3.59(m, 2H), 3.48-3.41(m, 2 H), 3.36-3.33(m, 4H), 3.14-3.12(m, 1H), 2.84-2.73(m, 4 H), 2.66(s, 3 H), 2.05-2.00(m, 1 H), 1.90-1.83(m, 1H), 1.79(br s, 2H).
실시예 23-1. 7-아미노-N-[(6S)-2-[(3S,4S)-3-아미노-4-메톡시피롤리딘-1-일]-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-6-일]-3-메틸티에노[2,3-b]피라진-6-카복사미드 및
실시예 23-2. 7-아미노-N-[(6R)-2-[(3S,4S)-3-아미노-4-메톡시피롤리딘-1-일]-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-6-일]-3-메틸티에노[2,3-b]피라진-6-카복사미드
방법 2.
Figure pct00208
7-아미노-N-[(6S)-2-[(3S,4S)-3-아미노-4-메톡시피롤리딘-1-일]-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-6-일]-3-메틸티에노[2,3-b]피라진-6-카복사미드는 또한 라세미체인 벤질 N-[2-(트리플루오로메탄설포닐옥시)-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-6-일]카바메이트(중간체 47-1)로부터 시작해서 방법 1과 유사한 절차에 따라 수득하였다. 라세미체인 7-아미노-N-[2-[(3S,4S)-3-아미노-4-메톡시피롤리딘-1-일]-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-6-일]-3-메틸티에노[2,3-b]피라진-6-카복사미드의 거울상이성질체는 키랄 컬럼 Chiralpak IE 및 용출제 시스템 50% EtOH/MTBE(MeOH 중 2 mM NH3 함유)를 사용한 키랄 HPLC에 의해 분리되어 7-아미노-N-[(6S)-2-[(3S,4S)-3-아미노-4-메톡시피롤리딘-1-일]-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-6-일]-3-메틸티에노[2,3-b]피라진-6-카복사미드를 황색 고체의 1차 용출 이성질체로서, 그리고 7-아미노-N-[(6R)-2-[(3S,4S)-3-아미노-4-메톡시피롤리딘-1-일]-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-6-일]-3-메틸티에노[2,3-b]피라진-6-카복사미드를 황색 고체의 2차 용출 이성질체로서 제공하였다. 1H NMR(DMSO-d 6 , 400 MHz)δ(ppm): 8.65(s, 1H), 7.83(d, J = 7.6 Hz, 1H), 7.20(d, J = 8.4Hz, 1H), 6.93(br, 2H), 6.24(d, J = 8.8Hz, 1H), 4.20-4.11(m, 1H), 3.63-3.56(m, 2H), 3.47-3.44(m, 2H), 3.33(s, 3H), 3.15-3.13(m, 1H), 2.84-2.73(m, 4H), 2.65(s, 3H), 2.05-1.98(m, 1H), 1.91-1.83(m, 2H). MS(ESI, m/z): 454[M+H]+.
이하 표 21의 실시예는 실시예 23-1의 제조에 대한 방법 1(또는 표시된 경우 방법 2)과 유사한 표준 화학적 조작 및 절차를 사용하여 제조하였다.
Figure pct00209
Figure pct00210
Figure pct00211
Figure pct00212
Figure pct00213
1 절차 상의 주의점: 단계 3에서, 카복실산 중간체 21을 사용하였다.
2 절차 상의 주의점: 방법 2 이후, 입체이성질체는 키랄 컬럼 Chiralpak IE 및 용출제 구배 30% 내지 35% EtOH/MTBE(MeOH 중 2 mM NH3 함유)를 사용한 키랄 HPLC에 의해 분리하였다.
3 절차 상의 주의점: 방법 2 이후, 입체이성질체는 키랄 컬럼 Chiralpak ID-3 및 이동상 30% EtOH/(헥산:DCM=3:1, 0.1% DIEA 함유)를 사용한 키랄 HPLC에 의해 분리하였다.
4 절차 상의 주의점: 단계 3에서, 카복실산 중간체 24를 사용하였다.
5 절차 상의 주의점: 단계 1에서, tert-부틸 (2S)-2-메틸피페라진-1-카복실레이트를 사용하였다.
6 절차 상의 주의점: 단계 1에서, tert-부틸 (2R)-2-메틸피페라진-1-카복실레이트를사용하였다.
7 절차 상의 주의점: 단계 1 및 단계 2는 생략하고, 아민 중간체 52-1를 단계 3에 사용하였다.
8 절차 상의 주의점: 단계 1 및 단계 2를 생략하고, 아민 중간체 52-2를 단계 3에 사용하였다.
실시예 24-1. 3-아미노-N-[(6S)-2-[(3R,4R)-3-아미노-4-(메톡시메틸)피롤리딘-1-일]-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-6-일]-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드
방법 1.
Figure pct00214
단계 1 . 벤질 N-[(6S)-2-[(3R,4R)-3-[[(tert-부톡시)카보닐]아미노]-4-(메톡시메틸)피롤리딘-1-일]-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-6-일]카바메이트
톨루엔(10mL) 중 벤질 N-[(6S)-2-(트리플루오로메탄설포닐옥시)-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-6-일]카바메이트(중간체 47-2)(800mg, 1.85 mmol), tert-부틸 N-[(3R,4R)-4-(메톡시메틸)피롤리딘-3-일]카바메이트(중간체 48-2)(513mg, 2.23 mmol), RuPhos Pd G3(155mg, 0.186 mmol), RuPhos(86.7mg, 0.186 mmol) 및 Cs2CO3(1.21g, 3.71 mmol)의 혼합물을 90℃에서 3시간 동안 교반하였다. 25℃로 냉각한 후, 고체는 여과해냈다. 여과액은 진공 하에 농축하였다. 잔류물은 실리카겔 크로마토그래피로 정제(1:2 에틸아세테이트/석유 에테르로 용출)하여 벤질 N-[(6S)-2-[(3R,4R)-3-[[(tert-부톡시)카보닐]아미노]-4-(메톡시메틸)피롤리딘-1-일]-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-6-일]카바메이트를 백색 고체로서 제공하였다. MS(ESI, m/z): 511[M+H]+.
단계 2 . tert-부틸 N-[1-[(6S)-6-아미노-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-2-일]-4-(메톡시메틸)피롤리딘-3-일]카바메이트
에틸 아세테이트(5mL) 중 벤질 N-[(6S)-2-[(3R,4R)-3-[[(tert-부톡시)카보닐]아미노]-4-(메톡시메틸)피롤리딘-1-일]-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-6-일]카바메이트(550mg, 1.07 mmol) 및 탄소 상의 팔라듐(80mg, 10%)의 혼합물을 수소 대기(벌룬) 하에 25℃에서 1시간 동안 교반하였다. 고체는 여과해냈다. 여과액은 진공 하에 농축하여 tert-부틸 N-[1-[(6S)-6-아미노-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-2-일]-4-(메톡시메틸)피롤리딘-3-일]카바메이트를 백색 고체(조생성물)로서 제공하였다. MS(ESI, m/z): 377 [M+H]+.
단계 3 . tert-부틸 N-[(3R,4R)-1-[(6S)-6-[3-아미노-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-아미도]-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-2-일]-4-(메톡시메틸)피롤리딘-3-일]카바메이트
Et3N(0.50mL, 3.58 mmol) 및 HBTU(453mg, 1.19 mmol)를 DMA(4mL) 중 tert-부틸 N-[(3R,4R)-1-[(6S)-6-아미노-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-2-일]-4-(메톡시메틸)피롤리딘-3-일]카바메이트(450mg, 1.19 mmol) 및 3-아미노-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복실산(248mg, 1.19 mmol)의 교반 용액에 첨가하였다. 결과적으로 수득되는 용액을 25℃에서 2시간 동안 교반하였다. 혼합물은 역상 크로마토그래피[컬럼: C18 실리카겔; 이동상, A: 물(0.05% TFA 함유) 및 B: ACN(15%에서부터 90%까지, 25분 넘게)]로 정제하였다. 수집한 분획을 진공 하에 농축하여 tert-부틸 N-[(3R,4R)-1-[(6S)-6-[3-아미노-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-아미도]-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-2-일]-4-(메톡시메틸)피롤리딘-3-일]카바메이트를 황색 고체로서 제공하였다. MS(ESI, m/z): 567[M+H]+.
단계 4 . 3-아미노-N-[(6S)-2-[(3R,4R)-3-아미노-4-(메톡시메틸)피롤리딘-1-일]-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-6-일]-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드
DCM(12mL) 중 tert-부틸 N-[(3R,4R)-1-[(6S)-6-[3-아미노-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-아미도]-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-2-일]-4-(메톡시메틸)피롤리딘-3-일]카바메이트(450mg, 0.794 mmol) 및 TFA(3mL)의 용액을 25℃에서 1시간 동안 교반하였다. 이 혼합물을 진공 하에 농축하였다. 잔류물은 MeOH 중 NH3 용액(2mL, 7M)으로 처리하였다. 결과적으로 수득되는 혼합물을 10분 동안 교반하고, 진공 하에 농축하였다. 잔류물은 분취용 HPLC[컬럼: XBridge Shield RP18 OBD, 30 x150 mm, 5 μm; 이동상 A: 물(10 mM NH4HCO3) 및 B: ACN(27%에서부터 37%까지, 7분 넘게); 유속: 60 mL/min]에 의해 정제하였다. 수집한 분획을 동결건조하여 3-아미노-N-[(6S)-2-[(3R,4R)-3-아미노-4-(메톡시메틸)피롤리딘-1-일]-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-6-일]-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드를 백색 고체로서 제공하였다. MS(ESI, m/z): 467[M+H]+. 1H NMR(DMSO-d6, 400 MHz)δ(ppm): 8.31(d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.59(d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.31(d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.19-7.17(m, 3H), 6.20(d, J = 8.4 Hz, 1H), 4.15-4.08(m, 1H), 3.61-3.51(m, 2H), 3.52-3.35(m, 3H), 3.29(s, 3H), 3.25-3.15(m, 2H), 2.81-2.64(m, 4H), 2.60(s, 3H), 2.49-2.38(m, 1H), 2.09-1.98(m, 1H), 1.91-1.80(m, 1H), 1.61(br s, 2H).
실시예 24-1. 3-아미노-N-[(6S)-2-[(3R,4R)-3-아미노-4-(메톡시메틸)피롤리딘-1-일]-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-6-일]-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드 및
실시예 24-2. 3-아미노-N-[(6S)-2-[(3S,4S)-3-아미노-4-(메톡시메틸)피롤리딘-1-일]-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-6-일]-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드
방법 2.
Figure pct00215
3-아미노-N-[(6S)-2-[(3R,4R)-3-아미노-4-(메톡시메틸)피롤리딘-1-일]-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-6-일]-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드는 또한 시스 라세미체인 tert-부틸 N-[4-(메톡시메틸)피롤리딘-3-일]카바메이트(중간체 48-1)로부터 시작하여 방법 1과 유사한 절차에 따라 수득하였다. 시스 라세미체인 tert-부틸 N-[1-[(6S)-6-[3-아미노-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-아미도]-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-2-일]-4-(메톡시메틸)피롤리딘-3-일]카바메이트의 거울상이성질체(단계 3 생성물)는 키랄 컬럼 Chiralpak IA 및 이동상, 50% A: 헥산:DCM=3:1 및 50% B: EtOH(0.1% Et2NH 함유)을 사용한 키랄 HPLC에 의해 분리하여 tert-부틸 N-[(3R,4R)-1-[(6S)-6-[3-아미노-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-아미도]-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-2-일]-4-(메톡시메틸)피롤리딘-3-일]카바메이트를 백색 고체의 1차 용출 이성질체(RT=9.3분)로서, 그리고 tert-부틸 N-[(3S,4S)-1-[(6S)-6-[3-아미노-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-아미도]-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-2-일]-4-(메톡시메틸)피롤리딘-3-일]카바메이트를 백색 고체 2차 용출 이성질체(RT=11.3 분)로서 제공하였다.
3-아미노-N-[(6S)-2-[(3S,4S)-3-아미노-4-(메톡시메틸)피롤리딘-1-일]-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-6-일]-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드는 방법 1의 단계 4와 유사한 절차에 따라 tert-부틸 N-[(3S,4S)-1-[(6S)-6-[3-아미노-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-아미도]-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-2-일]-4-(메톡시메틸)피롤리딘-3-일]카바메이트의 전환으로부터 수득되었다. 1H NMR(DMSO-d6, 400 MHz)δ(ppm): 8.30(d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.56(br s, 1H), 7.31(d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.18-7.16(m, 3H), 6.20(d, J = 8.4 Hz, 1H), 4.18-4.09(m, 1H), 3.61-3.51(m, 2H), 3.50-3.39(m, 3H), 3.28(s, 3H), 3.21-3.17(m, 2H), 2.81-2.64(m, 4H), 2.67(s, 3H), 2.46-2.40(m, 1H), 2.09-1.91(m, 1H), 1.91-1.80(m, 1H), 1.55(br s, 2H). MS(ESI, m/z): 467[M+H]+.
실시예 25. 3-아미노-N-[(6S)-2-[(3S,4R)-3-아미노-4-(디플루오로메틸)피롤리딘-1-일]-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-6-일]-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드
Figure pct00216
단계 1. 벤질 N-[(6S)-2-[(3S,4R)-3-[[(tert-부톡시)카보닐]아미노]-4-(디플루오로메틸)피롤리딘-1-일]-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-6-일]카바메이트
톨루엔(10mL) 중 벤질 N-[(6S)-2-(트리플루오로메탄설포닐옥시)-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-6-일]카바메이트(중간체 47-2)(480mg, 1.09 mmol), tert-부틸 N-[(3S,4R)-4-(디플루오로메틸)피롤리딘-3-일]카바메이트(중간체 51-2)(284mg, 1.20 mmol), RuPhos(51.0mg, 0.109 mmol), RuPhos Pd G3(91.0mg, 0.109 mmol) 및 Cs2CO3(890mg, 2.73 mmol)의 혼합물을 95℃에서 4시간 동안 교반하였다. 25℃로 냉각한 후, 고체는 여과해냈다. 여과액은 감압 하에 농축하였다. 잔류물은 실리카겔 크로마토그래피로 정제(1:1 에틸 아세테이트/석유 에테르로 용출)하여 벤질 N-[(6S)-2-[(3S,4R)-3-[[(tert-부톡시)카보닐]아미노]-4-(디플루오로메틸)피롤리딘-1-일]-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-6-일]카바메이트를 백색 고체로서 제공하였다. MS(ESI, m/z): 517[M+H]+.
단계 2. tert-부틸 N-[(3S,4R)-1-[(6S)-6-아미노-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-2-일]-4-(디플루오로메틸)피롤리딘-3-일]카바메이트
에틸 아세테이트(10mL) 중 벤질 N-[(6S)-2-[(3S,4R)-3-[[(tert-부톡시)카보닐]아미노]-4-(디플루오로메틸)피롤리딘-1-일]-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-6-일]카바메이트(350mg, 0.664 mmol) 및 Pd/C(350mg, 10%)의 혼합물을 수소 대기 하에 25℃에서 2시간 동안 교반하였다. 고체를 여과해내고, 여과 케익을 에틸 아세테이트(3 x 10mL)로 세척하였다. 여과액은 감압 하에 농축하여 tert-부틸 N-[(3S,4R)-1-[(6S)-6-아미노-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-2-일]-4-(디플루오로메틸)피롤리딘-3-일]카바메이트를 갈색 고체로서 제공하였다. MS(ESI, m/z): 383[M+H]+.
단계 3. tert-부틸 N-[(3S,4R)-1-[(6S)-6-[3-아미노-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-아미도]-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-2-일]-4-(디플루오로메틸)피롤리딘-3-일]카바메이트
DMA(5mL) 중 tert-부틸 N-[(3S,4R)-1-[(6S)-6-아미노-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-2-일]-4-(디플루오로메틸)피롤리딘-3-일]카바메이트(240mg, 0.615 mmol), 3-아미노-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복실산(141mg, 0.677 mmol), Et3N(0.260mL, 1.85 mmol) 및 HBTU(280mg, 0.738 mmol)의 용액을 25℃에서 6시간 동안 교반하였다. 혼합물을 역상 크로마토그래피에 의해 정제[컬럼: C18 실리카겔; 이동상, A: 물(0.1% TFA 함유) 및 B: ACN(0%에서부터 30분 후 60%까지)]하여 tert-부틸 N-[(3S,4R)-1-[(6S)-6-[3-아미노-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-아미도]-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-2-일]-4-(디플루오로메틸)피롤리딘-3-일]카바메이트를 황색 고체로서 제공하였다. MS(ESI, m/z): 573[M+H]+.
단계 4. 3-아미노-N-[(6S)-2-[(3S,4R)-3-아미노-4-(디플루오로메틸)피롤리딘-1-일]-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-6-일]-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드
DCM(15mL) 중 tert-부틸 N-[(3S,4R)-1-[(6S)-6-[3-아미노-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-아미도]-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-2-일]-4-(디플루오로메틸)피롤리딘-3-일]카바메이트(300mg, 0.513 mmol)의 교반 용액에 TFA(5mL)를 0℃에서 적가하였다. 결과적으로 수득되는 혼합물을 25℃에서 40분 동안 교반하였다. 결과적으로 수득되는 혼합물을 진공 하에 농축하였다. 결과적으로 수득되는 혼합물을 진공 하에 농축하였다. 잔류물은 NH3(15 mL, MeOH 중 7M)으로 처리하였다. 이 용액을 25℃에서 30분 동안 교반하였고, 진공 하에 농축하였다. 잔류물은 분취용 HPLC[컬럼: XBridge Prep Phenyl OBD, 19 x 150 mm, 5 μm; 이동상, A: 물(10 mM NH4HCO3) 및 B: ACN(20%에서부터 8분 후 37%까지); 유속: 60 mL/min]로 정제하였다. 생성물 분획을 동결건조하여 3-아미노-N-[(6S)-2-[(3S,4R)-3-아미노-4-(디플루오로메틸)피롤리딘-1-일]-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-6-일]-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드를 백색 고체로서 제공하였다. MS(ESI, m/z): 473[M+H]+. 1H NMR(DMSO-d 6 , 400 MHz) δ(ppm): 8.31(d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.59(d, J = 7.6 Hz, 1H), 7.31(d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.21(d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.17(br s, 2H), 6.34-6.05(m, 2H), 3.68-3.57(m, 2H), 3.51-3.48(m, 1H), 3.39-3.77(m, 1H), 3.04-3.00(m, 1H), 2.81-2.75(m, 4H), 2.72(s, 3H), 2.48-2.42(m, 1H), 2.08-1.91(m, 1H), 1.90-1.78(m, 3H).
실시예 26-1. 3-아미노-N-[(6S)-2-[(3S,4R)-3-(메톡시메틸)-4-(메틸아미노)피롤리딘-1-일]-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-6-일]-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드 및
실시예 26-2. 3-아미노-N-[(6S)-2-[(3R,4S)-3-(메톡시메틸)-4-(메틸아미노)피롤리딘-1-일]-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-6-일]-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드
Figure pct00217
단계 1. 트랜스-벤질 N-[(6S)-2-(3-[[(tert-부톡시)카보닐](메틸)아미노]-4-(메톡시메틸)피롤리딘-1-일)-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-6-일]카바메이트
톨루엔(4mL) 중 벤질 N-[(6S)-2-(트리플루오로메탄설포닐옥시)-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-6-일]카바메이트(중간체 47-2)(200mg, 0.446 mmol), 트랜스-tert-부틸 N-[4-(메톡시메틸)피롤리딘-3-일]-N-메틸카바메이트(중간체 53)(121mg, 0.446 mmol), RuPhos(42.0mg, 0.090 mmol), RuPhos Pd G3(38.0mg, 0.045 mmol) 및 Cs2CO3(291mg, 0.893 mmol)의 혼합물을 90℃에서 3시간 동안 교반하였다. 고체는 여과해냈다. 여과액은 감압 하에 농축하였다. 잔류물은 실리카겔 크로마토그래피에 의해 정제(1:1 에틸 아세테이트/석유 에테르로 용출)하여 트랜스-벤질 N-[(6S)-2-(3-[[(tert-부톡시)카보닐](메틸)아미노]-4-(메톡시메틸)피롤리딘-1-일)-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-6-일]카바메이트를 황색 고체로서 제공하였다. MS(ESI, m/z): 525[M+H]+.
단계 2. 트랜스-tert-부틸 N-[1-[(6S)-6-아미노-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-2-일]-4-(메톡시메틸)피롤리딘-3-일]-N-메틸카바메이트
에틸 아세테이트 (10 mL) 중 트랜스-벤질 N-[(6S)-2-(3-[[(tert-부톡시)카보닐](메틸)아미노]-4-(메톡시메틸)피롤리딘-1-일)-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-6-일]카바메이트(180mg, 0.326 mmol) 및 탄소 상의 팔라듐(180mg, 10%)의 혼합물을 수소 대기(벌룬) 하에 25℃에서 3시간 동안 교반하였다. 고체는 여과해냈다. 여과액은 감압 하에 농축하여 트랜스-tert-부틸 N-[1-[(6S)-6-아미노-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-2-일]-4-(메톡시메틸)피롤리딘-3-일]-N-메틸카바메이트를 백색 고체로서 제공하였다. MS(ESI, m/z): 391[M+H]+.
단계 3. 트랜스-tert-부틸 N-[1-[(6S)-6-[3-아미노-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-아미도]-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-2-일]-4-(메톡시메틸)피롤리딘-3-일]-N-메틸카바메이트
HBTU(122mg, 0.322 mmol)는 DMA(2mL) 중 트랜스-tert-부틸 N-[1-[(6S)-6-아미노-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-2-일]-4-(메톡시메틸)피롤리딘-3-일]-N-메틸카바메이트(70.0 mg, 0.179 mmol), 3-아미노-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복실산(39.0 mg, 0.189 mmol) 및 Et3N(0.075 mL, 0.537 mmol)의 교반 용액에 첨가하였다. 결과적으로 수득되는 용액을 25℃에서 1시간 동안 교반하였다. 결과적으로 수득되는 혼합물을 역상 크로마토그래피[컬럼: C18 실리카겔; 이동상, A: 물(10 mmol/L NH4HCO3 함유) 및 B: ACN(5%에서부터 30분 후 80%까지)]로 정제하였다. 수집한 분획을 진공 하에 농축하여 트랜스-tert-부틸 N-[1-[(6S)-6-[3-아미노-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-아미도]-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-2-일]-4-(메톡시메틸)피롤리딘-3-일]-N-메틸카바메이트를 황색 고체로서 제공하였다. MS(ESI, m/z): 581[M+H]+.
단계 4. tert-부틸 N-[(3R,4S)-1-[(6S)-6-[3-아미노-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-아미도]-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-2-일]-4-(메톡시메틸)피롤리딘-3-일]-N-메틸카바메이트 및 tert-부틸 N-[(3S,4R)-1-[(6S)-6-[3-아미노-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-아미도]-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-2-일]-4-(메톡시메틸)피롤리딘-3-일]-N-메틸카바메이트
트랜스-tert-부틸 N-[1-[(6S)-6-[3-아미노-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-아미도]-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-2-일]-4-(메톡시메틸)피롤리딘-3-일]-N-메틸카바메이트(40.0mg, 0.0690 mmol)를 키랄 HPLC(컬럼: Chiralpak IA, 2 x 25 cm, 5 μm; 이동상, A: 헥산:DCM=3:1(0.1% Et2NH 함유) 및 B: EtOH(30분 후까지 30% 유지); 유속: 12 mL/min)에 의해 분리하였다. 1차 용출 이성질체(RT=11.8 분)를 수집하였고 진공 하에 농축하여 황색 고체를 제공하였고, 상기 피롤리딘에 대한 입체화학은 tert-부틸 N-[(3S,4R)-1-[(6S)-6-[3-아미노-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-아미도]-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-2-일]-4-(메톡시메틸)피롤리딘-3-일]-N-메틸카바메이트로서 임의 지정되었다. 2차 용출 이성질체(RT=21.4 분)를 수집하여 진공 하에 농축하여 황색 고체를 제공하였고, 상기 피롤리딘에 대한 입체화학은 tert-부틸 N-[(3R,4S)-1-[(6S)-6-[3-아미노-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-아미도]-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-2-일]-4-(메톡시메틸)피롤리딘-3-일]-N-메틸카바메이트로서 임의 지정되었다. MS(ESI, m/z): 581[M+H]+.
단계 5. 3-아미노-N-[(6S)-2-[(3S,4R)-3-(메톡시메틸)-4-(메틸아미노)피롤리딘-1-일]-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-6-일]-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드
DCM(1.50mL) 중 tert-부틸 N-[(3S,4R)-1-[(6S)-6-[3-아미노-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-아미도]-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-2-일]-4-(메톡시메틸)피롤리딘-3-일]-N-메틸카바메이트(11.0mg, 0.0190 mmol) 및 TFA(0.500 mL)의 용액을 25℃에서 30분 동안 교반하였다. 결과적으로 수득되는 혼합물을 진공 하에 농축하였다. 잔류물은 NH3 용액(2.00 mL, MeOH 중 7M)으로 처리하였다. 결과적으로 수득되는 용액을 25℃에서 30분 동안 교반하고, 진공 하에 농축하였다. 잔류물은 분취용 HPLC[컬럼: XBridge Shield RP18 OBD, 5 μm, 19 x 150 mm; 이동상 A: 물(10 mM NH4HCO3) 및 B: ACN(0%에서부터 7분 후 55%까지); 유속: 25 mL/min]로 정제하였다. 수집한 분획을 동결건조하여 3-아미노-N-[(6S)-2-[(3S,4R)-3-(메톡시메틸)-4-(메틸아미노)피롤리딘-1-일]-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-6-일]-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드를 백색 고체로서 제공하였다. MS(ESI, m/z): 481[M+H]+. 1H-NMR(DMSO-d 6 , 400 MHz)δ(ppm): 8.31(d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.59(br s, 1H), 7.31(d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.20-7.17(m, 3H), 6.24(d, J = 8.0 Hz, 1H), 4.14-4.10(m, 1H), 3.64-3.59(m, 1H), 3.54-3.50(m, 1H), 3.46-3.27(m, 8H), 3.17-3.10(m, 5H), 2.55(s, 3H), 2.35-2.30(m, 4H), 2.02-1.97(m, 1H), 1.88-1.82(m, 1H).
단계 6. 3-아미노-N-[(6S)-2-[(3R,4S)-3-(메톡시메틸)-4-(메틸아미노)피롤리딘-1-일]-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-6-일]-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드
DCM(1.50mL) 중 tert-부틸 N-[(3R,4S)-1-[(6S)-6-[3-아미노-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-아미도]-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-2-일]-4-(메톡시메틸)피롤리딘-3-일]-N-메틸카바메이트(13.0mg, 0.022 mmol) 및 TFA(0.500mL)의 용액을 25℃에서 30분 동안 교반하였다. 결과적으로 수득되는 혼합물을 진공 하에 농축하였다. 잔류물은 NH3 용액(2.00mL, MeOH 중 7M)으로 처리하였다. 결과적으로 수득되는 용액을 25℃에서 30분 동안 교반하고 진공 하에 농축하였다. 잔류물은 정제용 HPLC[컬럼: XBridge Shield RP18 OBD, 5 μm, 19 x 150 mm; 이동상, A: 물(10mM NH4HCO3) 및 B: ACN(20%에서부터 7분 후 45%까지); 유속: 25 mL/min]로 정제하였다. 수집한 분획을 동결건조하여 3-아미노-N-[(6S)-2-[(3R,4S)-3-(메톡시메틸)-4-(메틸아미노)피롤리딘-1-일]-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-6-일]-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드를 백색 고체로서 제공하였다. MS(ESI, m/z): 481[M+H]+. 1H-NMR(DMSO-d 6 , 400 MHz)δ(ppm): 8.31(d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.59(br s, 1H), 7.31(d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.20-7.17(m, 3H), 6.24(d, J = 8.4 Hz, 1H), 4.14-4.10(m, 1H), 3.65-3.60(m, 1H), 3.55-3.51(m, 1H), 3.46-3.27(m, 5H), 3.16-3.10(m, 2H), 3.02-3.00(m, 1H), 2.76-2.72(m, 4H), 2.59(s, 3H), 2.34-2.32(m, 4H), 2.02-1.97(m, 1H), 1.88-1.82(m, 1H).
실시예 27-1. 3-아미노-N-[(6S)-2-[(3R,4R)-3-아미노-4-(플루오로메틸)피롤리딘-1-일]-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-6-일]-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드 및
실시예 27-2. 3-아미노-N-[(6S)-2-[(3S,4S)-3-아미노-4-(플루오로메틸)피롤리딘-1-일]-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-6-일]-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드
Figure pct00218
단계 1. 시스-벤질 N-[(6S)-2-(3-[[(tert-부톡시)카보닐]아미노]-4-(플루오로메틸)피롤리딘-1-일)-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-6-일]카바메이트
톨루엔(5mL) 중 시스-tert-부틸 N-[4-(플루오로메틸)피롤리딘-3-일]카바메이트(중간체 54)(150mg, 0.687 mmol), 벤질 N-[(6S)-2-(트리플루오로메탄설포닐옥시)-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-6-일]카바메이트(중간체 47-2)(150mg, 0.342 mmol), RuPhos(16.0mg, 0.034 mmol), RuPhos Pd G3(29.0mg, 0.035 mmol) 및 Cs2CO3(278mg, 0.853 mmol)의 혼합물을 95℃에서 2시간 동안 교반하였다. 25℃로 냉각한 후, 고체는 여과해냈다. 여과액은 진공 하에 농축하였다. 잔류물은 실리카겔 크로마토그래피로 정제(1:1 에틸 아세테이트/석유 에테르로 용출)하여 시스-벤질 N-[(6S)-2-(3-[[(tert-부톡시)카보닐]아미노]-4-(플루오로메틸)피롤리딘-1-일)-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-6-일]카바메이트를 백색 고체로서 제공하였다. MS(ESI, m/z): 499[M+H]+.
단계 2 . 시스-tert-부틸 N-[1-[(6S)-6-아미노-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-2-일]-4-(플루오로메틸)피롤리딘-3-일]카바메이트
에틸 아세테이트(5 mL) 중 시스-벤질 N-[(6S)-2-(3-[[(tert-부톡시)카보닐]아미노]-4-(플루오로메틸)피롤리딘-1-일]-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-6-일]카바메이트(130mg, 0.256 mmol) 및 탄소 상의 팔라듐(130mg, 10%)의 혼합물을 수소 대기(벌룬) 하에 25℃에서 2시간 동안 교반하였다. 결과적으로 수득되는 혼합물을 여과해냈다. 여과액은 감압 하에 농축하여 시스-tert-부틸 N-[1-[(6S)-6-아미노-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-2-일]-4-(플루오로메틸)피롤리딘-3-일]카바메이트를 갈색 고체로서 제공하였다. MS(ESI, m/z): 365[M+H]+.
단계 3. 시스-tert-부틸 N-[1-[(6S)-6-[3-아미노-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-아미도]-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-2-일]-4-(플루오로메틸)피롤리딘-3-일]카바메이트
HBTU(92.0mg, 0.243 mmol)는 DMA(3mL) 중 cis-tert-부틸 N-[(3R,4R)-1-[(6S)-6-아미노-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-2-일]-4-(플루오로메틸)피롤리딘-3-일]카바메이트(75.0mg, 0.202 mmol), 3-아미노-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복실산(45.0mg, 0.216 mmol) 및 Et3N(0.084mL, 0.603 mmol)의 용액에 첨가하였다. 결과적으로 수득되는 용액을 25℃에서 1시간 동안 교반하였다. 혼합물을 역상 크로마토그래피[컬럼: C18 실리카겔; 이동상, A: 물(10 mmol/L NH4HCO3 함유) 및 B: ACN(0%에서부터 30분 후 100%까지)]로 정제하여 시스-tert-부틸 N-[1-[(6S)-6-[3-아미노-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-아미도]-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-2-일]-4-(플루오로메틸)피롤리딘-3-일]카바메이트를 황색 고체로서 제공하였다. MS(ESI, m/z): 555[M+H]+.
단계 4. tert-부틸 N-[(3R,4R)-1-[(6S)-6-[3-아미노-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-아미도]-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-2-일]-4-(플루오로메틸)피롤리딘-3-일]카바메이트 및 tert-부틸 N-[(3S,4S)-1-[(6S)-6-[3-아미노-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-아미도]-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-2-일]-4-(플루오로메틸)피롤리딘-3-일]카바메이트
시스-tert-부틸 N-[1-[(6S)-6-[3-아미노-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-아미도]-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-2-일]-4-(플루오로메틸)피롤리딘-3-일]카바메이트(70.0mg, 0.124 mmol)를 키랄 HPLC[컬럼: Chiralpak IG, 20 x 250 mm, 5 μm; 이동상, A: 헥산:DCM=3:1(0.1% Et2NH 함유) 및 B: IPA(16분 후까지 30% 유지)]에 의해 분리하였다. 1차 용출 이성질체(RT=10.09 분)를 수집하고 진공 하에 농축하여 백색 고체를 제공하였고, 상기 피롤리딘에 대한 입체화학은 tert-부틸 N-[(3R,4R)-1-[(6S)-6-[3-아미노-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-아미도]-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-2-일]-4-(플루오로메틸)피롤리딘-3-일]카바메이트로서 임의 지정되었다. 2차 용출 이성질체(RT=13.22 분)를 수집하고 진공 하에 농축하여 백색 고체를 제공하였고, 상기 피롤리딘에 대한 입체화학은 tert-부틸 N-[(3S,4S)-1-[(6S)-6-[3-아미노-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-아미도]-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-2-일]-4-(플루오로메틸)피롤리딘-3-일]카바메이트로서 임의 지정되었다. MS(ESI, m/z): 555[M+H]+.
단계 5. 3-아미노-N-[(6S)-2-[(3R,4R)-3-아미노-4-(플루오로메틸)피롤리딘-1-일]-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-6-일]-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드
DCM(1.5mL) 중 tert-부틸 N-[(3R,4R)-1-[(6S)-6-[3-아미노-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-아미도]-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-2-일]-4-(플루오로메틸)피롤리딘-3-일]카바메이트(15.0mg, 0.027 mmol) 및 TFA(0.5mL)의 용액을 25℃에서 25분 동안 교반하였다. 결과적으로 수득되는 혼합물을 진공 하에 농축하였다. 잔류물은 NH3 용액(1.0 mL, MeOH 중 7M)으로 처리하였다. 결과적으로 수득되는 용액을 30분 동안 교반한 다음, 진공 하에 농축하였다. 잔류물은 분취용 HPLC(컬럼: XBridge Prep OBD C18 컬럼, 30 x 150 mm 5 um; 이동상, A: 물(10 mmol/L NH4HCO3 함유) 및 B: ACN(20%에서부터 7분 후 45%까지)]로 정제하였다. 수집한 분획을 동결건조하여 3-아미노-N-[(6S)-2-[(3R,4R)-3-아미노-4-(플루오로메틸)피롤리딘-1-일]-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-6-일]-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드를 백색 고체로서 제공하였다. MS(ESI, m/z): 455[M+H]+. 1H NMR(DMSO-d 6 , 400 MHz) δ(ppm): 8.31(d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.58(d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.31(d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.20(d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.16(br s, 2H), 6.23(d, J = 8.4 Hz, 1H), 4.81-4.47(m, 2H), 4.11-4.09(m, 1H), 3.61-3.60(m, 1H), 3.54-3.46(m, 2H), 3.33-3.28(m, 1H), 3.20-3.18(m, 1H), 2.81-2.68(m, 4H), 2.59(s, 3H), 2.02-1.96(m, 1H), 1.90-1.66(m, 2H).
단계 6. 3-아미노-N-[(6S)-2-[(3S,4S)-3-아미노-4-(플루오로메틸)피롤리딘-1-일]-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-6-일]-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드
DCM(1.5mL) 중 tert-부틸 N-[(3S,4S)-1-[(6S)-6-[3-아미노-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-아미도]-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-2-일]-4-(플루오로메틸)피롤리딘-3-일]카바메이트(15.0mg, 0.027 mmol) 및 TFA(0.5mL)의 용액을 25℃에서 25분 동안 교반하였다. 결과적으로 수득되는 혼합물을 진공 하에 농축하였다. 잔류물에 NH3(1.0mL, MeOH 중 7M)를 첨가하였다. 결과적으로 수득되는 용액을 30분 동안 교반하고 진공 하에 농축하였다. 잔류물은 분취용 HPLC[컬럼: XBridge Prep OBD C18 컬럼, 30x150mm 5um; 이동상, A: 물(10 mmol/L NH4HCO3 함유) 및 B: ACN(20%에서부터 7분 후 45%까지)]로 정제하였다. 수집한 분획을 동결건조하여 3-아미노-N-[(6S)-2-[(3S,4S)-3-아미노-4-(플루오로메틸)피롤리딘-1-일]-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-6-일]-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드를 백색 고체로서 제공하였다. MS(ESI, m/z): 455[M+H]+. 1H NMR(DMSO-d 6 , 400 MHz)δ(ppm): 8.31(d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.58(d, J = 7.6 Hz, 1H), 7.31(d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.20(d, J = 8.8 Hz, 1H), 7.16(br s, 2H), 6.23(d, J = 8.4 Hz, 1H), 4.81-4.47(m, 2H), 4.12-4.09(m, 1H), 3.61-3.60(m, 1H), 3.53-3.47(m, 2H), 3.33-3.27(m, 1H), 3.21-3.18(m, 1H), 2.81-2.68(m, 4H), 2.59(s, 3H), 2.02-1.96(m, 1H), 1.90-1.66(m, 2H).
실시예 28-1. 3-아미노-N-[(6S)-2-[(3S,4S)-3-아미노-4-(2-메톡시에톡시)피롤리딘-1-일]-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-6-일]-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드 및
실시예 28-2. 3-아미노-N-[(6S)-2-[(3R,4R)-3-아미노-4-(2-메톡시에톡시)피롤리딘-1-일]-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-6-일]-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드
Figure pct00219
단계 1. 트랜스-벤질 N-[(6S)-2-(3-[[(tert-부톡시)카보닐]아미노]-4-(2-메톡시에톡시)피롤리딘-1-일)-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-6-일]카바메이트
톨루엔(4mL) 중 벤질 N-[(6S)-2-(트리플루오로메탄설포닐옥시)-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-6-일]카바메이트(중간체 47-2)(200mg, 0.465 mmol), 트랜스-tert-부틸 N-[4-(2-메톡시에톡시)피롤리딘-3-일]카바메이트(중간체 55)(157mg, 0.603 mmol), RuPhos Pd G3(38.9mg, 0.046 mmol), RuPhos(22.0mg, 0.047 mmol) 및 Cs2CO3(454mg, 1.39 mmol)의 혼합물을 100℃에서 3시간 동안 교반하였다. 26℃로 냉각한 후, 고체는 여과해냈다. 여과액은 진공 하에 농축하였다. 잔류물은 실리카겔 크로마토그래피로 정제(1:1 에틸 아세테이트/석유 에테르로 용출)하여 트랜스-벤질 N-[(6S)-2-(3-[[(tert-부톡시)카보닐]아미노]-4-(2-메톡시에톡시)피롤리딘-1-일)-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-6-일]카바메이트를 황색 고체로서 제공하였다. MS(ESI, m/z): 541[M+H]+.
단계 2. 트랜스-tert-부틸 N-[1-[(6S)-6-아미노-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-2-일]-4-(2-메톡시에톡시)피롤리딘-3-일]카바메이트
에틸 아세테이트(10mL) 중 트랜스-벤질 N-[(6S)-2-(3-[[(tert-부톡시)카보닐]아미노]-4-(2-메톡시에톡시)피롤리딘-1-일)-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-6-일]카바메이트(140mg, 0.259 mmol) 및 탄소 상의 팔라듐(70.0mg, 10%)의 혼합물을 수소 대기(벌룬) 하에 26℃에서 3시간 동안 교반하였다. 고체는 여과해냈다. 여과액은 진공 하에 농축하여 트랜스-tert-부틸 N-[1-[(6S)-6-아미노-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-2-일]-4-(2-메톡시에톡시)피롤리딘-3-일]카바메이트를 흑색 고체로서 제공하였다. MS(ESI, m/z): 407[M+H]+.
단계 3. 트랜스-tert-부틸 N-[1-[(6S)-6-[3-아미노-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-아미도]-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-2-일]-4-(2-메톡시에톡시)피롤리딘-3-일]카바메이트
HBTU(112mg, 0.295 mmol)를 DMA(2mL) 중 트랜스-tert-부틸 N-[1-[(6S)-6-아미노-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-2-일]-4-(2-메톡시에톡시)피롤리딘-3-일]카바메이트(100 mg, 0.246 mmol), Et3N(0.103mL, 0.741 mmol) 및 3-아미노-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복실산(61.0mg, 0.293 mmol)의 용액에 첨가하였다. 결과적으로 수득되는 용액을 26℃에서 1시간 동안 교반하였다. 혼합물을 역상 크로마토그래피[컬럼: C18 실리카겔; 이동상, A: 물(0.05% TFA 함유) 및 B: ACN(20%에서부터 25분 후 85%까지)]로 정제하였다. 수집한 분획을 진공 하에 농축하여 트랜스-tert-부틸 N-[1-[(6S)-6-[3-아미노-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-아미도]-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-2-일]-4-(2-메톡시에톡시)피롤리딘-3-일]카바메이트를 황색 고체로서 제공하였다. MS(ESI, m/z): 597[M+H]+.
단계 4. 3-아미노-N-[(6S)-2-[(3S,S-3-아미노-4-(2-메톡시에톡시)피롤리딘-1-일]-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-6-일]-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드 및 3-아미노-N-[(6S)-2-[(3R,4R)-3-아미노-4-(2-메톡시에톡시)피롤리딘-1-일]-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-6-일]-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드
트랜스-tert-부틸 N-[1-[(6S)-6-[3-아미노-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-아미도]-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-2-일]-4-(2-메톡시에톡시)피롤리딘-3-일]카바메이트(120mg, 0.201 mmol)를 키랄 HPLC[컬럼: Chiralpak IG, 2 x 25 cm, 5 μm; 이동상, A: 헥산 : DCM=3:1(0.1% Et2NH) 및 B: EtOH(20분 후까지 40% 유지)]로 분리하였다. 1차 용출 이성질체(RT=12.26 분)를 수집하고 진공 하에 농축하여 황색 고체를 제공하였고, 상기 피롤리딘의 입체화학은 3-아미노-N-[(6S)-2-[(3S,4S)-3-아미노-4-(2-메톡시에톡시)피롤리딘-1-일]-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-6-일]-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드로서 임의 지정되었다. 2차 용출 이성질체(RT=17.55 분)를 수집하고 진공 하에 농축하여 황색 고체를 제공하였고, 상기 피롤리딘의 입체화학은 3-아미노-N-[(6S)-2-[(3R,4R)-3-아미노-4-(2-메톡시에톡시)피롤리딘-1-일]-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-6-일]-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드로서 임의 지정되었다. MS(ESI, m/z): 597[M+H]+.
단계 5. 3-아미노-N-[(6S)-2-[(3S,4S)-3-아미노-4-(2-메톡시에톡시)피롤리딘-1-일]-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-6-일]-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드
DCM(3mL) 중 tert-부틸 N-[(3S,4S)-1-[(6S)-6-[3-아미노-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-아미도]-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-2-일]-4-(2-메톡시에톡시)피롤리딘-3-일]카바메이트(27.0mg, 0.047 mmol) 및 TFA(1.00 mL)의 용액을 26℃에서 30분 동안 교반하였다. 결과적으로 수득되는 혼합물을 진공 하에 농축하였다. 잔류물을 NH3 용액(2.00mL, MeOH 중 7M)으로 처리하였다. 결과적으로 수득되는 용액을 30분 동안 교반한 뒤, 진공 하에 농축하였다. 잔류물은 분취용 HPLC[컬럼: XBridge Prep OBD C18, 19 x 150 mm, 5 μm, 13 nm; 이동상, A: 물 (10 mM NH4HCO3) 및 B: ACN(18%에서부터 8분 후 40%까지), 유속: 60 mL/min]로 정제하였다. 수집한 분획을 동결건조하여 3-아미노-N-[(6S)-2-[(3S,4S)-3-아미노-4-(2-메톡시에톡시)피롤리딘-1-일]-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-6-일]-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드를 백색 고체로서 제공하였다. MS(ESI, m/z): 497[M+H]+. 1H NMR(DMSO-d 6 , 400 MHz) δ(ppm): 8.31(d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.59(d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.31(d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.19(d, J = 8.8 Hz, 1H), 7.17(br s, 2H), 6.22(d, J = 8.4 Hz, 1H), 4.14-4.10(m, 1H), 3.75-3.74(m 1H), 3.64-3.55(m, 3H), 3.49-3.31(m, 5H), 3.24(s, 3H), 3.14-3.12(m, 1H), 2.82-2.72(m, 4H), 2.59(s, 3H), 2.03-1.82(m, 4H).
단계 6 . 3-아미노-N-[(6S)-2-[(3R,4R)-3-아미노-4-(2-메톡시에톡시)피롤리딘-1-일]-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-6-일]-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드
DCM(3mL) 중 tert-부틸 N-[(3R,4R)-1-[(6S)-6-[3-아미노-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-아미도]-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-2-일]-4-(2-메톡시에톡시)피롤리딘-3-일]카바메이트(26.0mg, 0.045 mmol) 및 TFA(1.00 mL)의 용액을 25℃에서 30분 동안 교반하였다. 결과적으로 수득되는 혼합물을 진공 하에 농축하였다. NH3(2.00mL, MeOH 중 7M)을 잔류물에 첨가하였다. 결과적으로 수득되는 용액을 30분 동안 교반한 뒤, 진공 하에 농축하였다. 잔류물은 분취용 HPLC(컬럼: X Bridge Prep OBD C18, 30 x 150 mm, 5 μm; 이동상, A: 물(10 mM NH4HCO3) 및 B: ACN(18%에서부터 8분 후 40%까지), 유속: 60 mL/min)로 정제하였다. 수집한 분획을 동결건조하여 3-아미노-N-[(6S)-2-[(3R,4R)-3-아미노-4-(2-메톡시에톡시)피롤리딘-1-일]-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-6-일]-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드를 백색 고체로서 제공하였다. MS(ESI, m/z): 497[M+H]+. 1H NMR(DMSO-d 6 , 400 MHz)δ(ppm): 8.31(d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.59(d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.31(d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.19(d, J = 8.8 Hz, 1H), 7.17(br s, 2H), 6.22(d, J = 8.4 Hz, 1H), 4.15-4.11(m, 1H), 3.75-3.74(m 1H), 3.63-3.59(m, 3H), 3.48-3.33(m, 5H), 3.24(s, 3H), 3.14-3.11(m, 1H), 2.80-2.72(m, 4H), 2.59(s, 3H), 2.01-1.82(m, 4H).
실시예 29-1. 3-아미노-N-[(6S)-2-[(9S)-9-아미노-1,4-디옥사-7-아자스피로[4.4]노난-7-일]-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-6-일]-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드 및
실시예 29-2. 3-아미노-N-[(6S)-2-[(9R)-9-아미노-1,4-디옥사-7-아자스피로[4.4]노난-7-일]-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-6-일]-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드
Figure pct00220
단계 1. 벤질 N-[(6S)-2-(9-[[(tert-부톡시)카보닐]아미노]-1,4-디옥사-7-아자스피로[4.4]노난-7-일)-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-6-일]카바메이트
톨루엔(10mL) 중 벤질 N-[(6S)-2-(트리플루오로메탄설포닐옥시)-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-6-일]카바메이트(중간체 47-2)(180 mg, 0.410 mmol), tert-부틸 N-[1,4-디옥사-7-아자스피로[4.4]노난-9-일]카바메이트(중간체 59)(150mg, 0.614 mmol), RuPhos(19.0mg, 0.041 mmol), RuPhos Pd G3(34.0mg, 0.041 mmol) 및 Cs2CO3(334 mg, 1.025 mmol)의 혼합물을 95℃에서 3시간 동안 교반하였다. 혼합물을 25℃로 냉각시키고, 여과하여, 여과액을 진공 하에 농축하였다. 잔류물은 실리카겔 크로마토그래피(1:1 에틸 아세테이트/석유 에테르로 용출)로 정제하여 벤질 N-[(6S)-2-(9-[[(tert-부톡시)카보닐]아미노]-1,4-디옥사-7-아자스피로[4.4]노난-7-일)-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-6-일]카바메이트를 백색 고체로서 제공하였다. MS(ESI, m/z): 525[M+H]+.
단계 2. tert-부틸 N-[7-[(6S)-6-아미노-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-2-일]-1,4-디옥사-7-아자스피로[4.4]노난-9-일]카바메이트
에틸 아세테이트(5mL) 중 벤질 N-[(6S)-2-(9-[[(tert-부톡시)카보닐]아미노]-1,4-디옥사-7-아자스피로[4.4]노난-7-일)-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-6-일]카바메이트(180mg, 0.336 mmol) 및 Pd/C(180mg, 10%)의 혼합물을 25℃에서 2시간 동안 교반하였다. 결과적으로 수득되는 혼합물을 여과하였고, 여과 케익은 에틸 아세테이트(3 x 5mL)로 세척하였다. 여과액은 감압 하에 농축하여 tert-부틸 N-[7-[(6S)-6-아미노-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-2-일]-1,4-디옥사-7-아자스피로[4.4]노난-9-일]카바메이트를 갈색 고체로서 제공하였다. MS(ESI, m/z): 391[M+H]+.
단계 3. tert-부틸 N-[7-[(6S)-6-[3-아미노-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-아미도]-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-2-일]-1,4-디옥사-7-아자스피로[4.4]노난-9-일]카바메이트
HBTU(114mg, 0.301 mmol)를 DMA(3mL) 중 tert-부틸 N-[7-[(6S)-6-아미노-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-2-일]-1,4-디옥사-7-아자스피로[4.4]노난-9-일]카바메이트(100mg, 0.251 mmol), 3-아미노-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복실산(57.0mg, 0.274 mmol) 및 Et3N(0.104mL, 0.751 mmol)의 용액에 첨가하였다. 반응물은 25℃에서 3시간 동안 교반하였다. 잔류물은 역상 크로마토그래피[컬럼: C18 실리카겔; 이동상, A: 물(0.1% TFA 함유) 및 B: ACN(0%에서부터 30분 후 60%까지)]로 정제하여 tert-부틸 N-[7-[(6S)-6-[3-아미노-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-아미도]-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-2-일]-1,4-디옥사-7-아자스피로[4.4]노난-9-일]카바메이트를 황색 고체로서 제공하였다. MS(ESI, m/z): 581[M+H]+.
단계 4. tert-부틸 N-[(9S)-7-[(6S)-6-[3-아미노-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-아미도]-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-2-일]-1,4-디옥사-7-아자스피로[4.4]노난-9-일]카바메이트 및 tert-부틸 N-[(9R)-7-[(6S)-6-[3-아미노-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-아미도]-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-2-일]-1,4-디옥사-7-아자스피로[4.4]노난-9-일]카바메이트
tert-부틸 N-[7-[(6S)-6-[3-아미노-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-아미도]-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-2-일]-1,4-디옥사-7-아자스피로[4.4]노난-9-일]카바메이트(100mg, 0.169 mmol)를 키랄 HPLC(컬럼: Chiralpak IF, 2 x 25 cm, 5μm; 이동상, A: MTBE(0.1% Et2NH) 및 B: EtOH(24분 후까지 30% 유지); 유속: 12 mL/min]로 분리하였다. 1차 용출 이성질체(RT=15.97 분)를 수집하고 진공 하에 농축하여 황색 고체를 제공하였고, 상기 피롤리딘의 입체화학은 tert-부틸 N-[(9S)-7-[(6S)-6-[3-아미노-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-아미도]-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-2-일]-1,4-디옥사-7-아자스피로[4.4]노난-9-일]카바메이트로서 임의 지정되었다. MS(ESI, m/z): 581[M+H]+.
2차 용출 이성질체(RT=20.62 분)를 수집하고 진공 하에 농축하여 황색 고체를 제공하였고, 상기 피롤리딘의 입체화학은 tert-부틸 N-[(9R)-7-[(6S)-6-[3-아미노-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-아미도]-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-2-일]-1,4-디옥사-7-아자스피로[4.4]노난-9-일]카바메이트로서 임의 지정되었다. MS(ESI, m/z): 581[M+H]+.
단계 5. 3-아미노-N-[(6S)-2-[(9S)-9-아미노-1,4-디옥사-7-아자스피로[4.4]노난-7-일]-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-6-일]-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드
DCM(1.5mL) 중 tert-부틸 N-[(9S)-7-[(6S)-6-[3-아미노-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-아미도]-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-2-일]-1,4-디옥사-7-아자스피로[4.4]노난-9-일]카바메이트(40mg, 0.068 mmol) 및 TFA(0.50mL)의 용액을 25℃에서 30분 동안 교반하였다. 결과적으로 수득되는 용액을 진공 하에 농축하였다. NH3(2.0 mL, MeOH 중 7M)를 잔류물에 첨가하였다. 결과적으로 수득되는 용액을 25℃에서 30분 동안 교반한 뒤, 진공 하에 농축하였다. 잔류물은 분취용 HPLC[컬럼: X Bridge Prep C18 OBD, 19 x 150 mm, 5 μm; 이동상, A: 물(0.05% NH4HCO3) 및 B: ACN(20%에서부터 7분 후 35%까지)]로 정제하였다. 수집한 분획을 동결건조하여 3-아미노-N-[(6S)-2-[(9S)-9-아미노-1,4-디옥사-7-아자스피로[4.4]노난-7-일]-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-6-일]-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드를 백색 고체로서 제공하였다. MS(ESI, m/z): 481[M+H]+. 1H-NMR(CDCl3, 400 MHz)δ(ppm): 7.82(d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.22-7.20(m, 1H), 6.20(d, J = 8.0 Hz, 1H), 6.06-6.02(m, 2H), 5.52(d, J = 7.2 Hz, 1H), 4.48-4.42(m, 1H), 4.14-4.09(m, 4H), 3.82-3.69(m, 2H), 3.53-3.50(m, 2H), 3.24-3.20(m, 1H), 3.09-3.08(m, 1H), 2.94-2.86(m, 2H), 2.70-2.64(m, 4H), 2.26-2.23(m, 1H), 1.98-1.91(m, 1H).
단계 6. 3-아미노-N-[(6S)-2-[(9R)-9-아미노-1,4-디옥사-7-아자스피로[4.4]노난-7-일]-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-6-일]-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드
DCM(1.5mL) 중 tert-부틸 N-[(9R)-7-[(6S)-6-[3-아미노-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-아미도]-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-2-일]-1,4-디옥사-7-아자스피로[4.4]노난-9-일]카바메이트(40.0mg, 0.068 mmol) 및 TFA(0.50mL)의 용액을 25℃에서 30분 동안 교반하였다. 결과적으로 수득되는 용액을 진공 하에 농축하였다. 잔류물에 NH3(2.0mL, MeOH 중 7M)를 첨가하였다. 결과적으로 수득되는 용액을 25℃에서 30분 동안 교반한 뒤, 진공 하에 농축하였다. 잔류물은 분취용 HPLC[컬럼: XBridge Prep C18 OBD, 19 x 150 mm, 5 μm; 이동상, A: 물(0.05% NH4HCO3) 및 B: ACN(20%에서부터 7분 후 35%까지)]로 정제하였다. 수집한 분획을 동결건조하여 3-아미노-N-[(6S)-2-[(9R)-9-아미노-1,4-디옥사-7-아자스피로[4.4]노난-7-일]-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-6-일]-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드를 백색 고체로서 제공하였다. MS(ESI, m/z): 481 [M+H]+. 1H-NMR(CDCl3, 400 MHz)δ(ppm): 7.82(d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.22-7.20(m, 1H), 6.20(d, J = 8.4 Hz, 1H), 6.06-6.00(m, 2H), 5.53(d, J = 6.8 Hz, 1H), 4.48-4.42(m, 1H), 4.14-4.09(m, 4H), 3.82-3.67(m, 2H), 3.53-3.501(m, 2H), 3.27-3.22(m, 1H), 3.10-3.08(m, 1H), 2.95-2.90(m, 2H), 2.70-2.65(m, 4H), 2.24-2.20(m, 1H), 1.93-1.87(m, 1H).
실시예 30-1. 3-아미노-N-[(6S)-3-플루오로-2-(피페라진-1-일)-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-6-일]-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드 및
실시예 30-2. 3-아미노-N-[(6R)-3-플루오로-2-(피페라진-1-일)-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-6-일]-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드
Figure pct00221
단계 1 . tert-부틸 4-(6-[[(벤질옥시)카보닐]아미노]-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-2-일)피페라진-1-카복실레이트
톨루엔(15mL) 중 벤질 N-[2-[(트리플루오로메탄)설포닐옥시]-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-6-일]카바메이트(중간체 47-1)(400 mg, 0.930 mmol), tert-부틸 피페라진-1-카복실레이트(208mg, 1.12 mol), RuPhos (87.0 mg, 0.190 mmol), RuPhos Pd G3(76.0mg, 0.090 mmol), 및 Cs2CO3(758mg, 2.33 mmol)의 혼합물을 95℃에서 3시간 동안 교반하였다. 25℃로 냉각한 후, 고체를 여과해냈다. 여과액은 진공 하에 농축하였다. 잔류물은 실리카겔 크로마토그래피(1:3 에틸 아세테이트/석유 에테르로 용출)로 정제하여 tert-부틸 4-(6-[[(벤질옥시)카보닐]아미노]-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-2-일)피페라진-1-카복실레이트를 백색 고체로서 제공하였다. MS(ESI, m/z): 467[M+H]+.
단계 2 . tert-부틸 4-(6-[[(벤질옥시)카보닐]아미노]-3-플루오로-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-2-일)피페라진-1-카복실레이트
ACN(10mL) 중 SelectFluor(683mg, 1.93 mmol)의 용액을 DCM(30mL) 및 MeOH(30mL) 중 tert-부틸 4-(6-[[(벤질옥시)카보닐]아미노]-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-2-일)피페라진-1-카복실레이트(600mg, 1.29 mmol)의 교반 용액에 첨가하였다. 결과적으로 수득되는 용액을 -20℃에서 1시간 동안 교반하였다. 결과적으로 수득되는 혼합물을 진공 하에 농축하였다. 잔류물은 분취용 HPLC[컬럼: XBridge Prep C18 OBD, 5 μm, 19 x 150 mm; 이동상, A: 물(0.05% TFA) 및 B: ACN(55%에서부터 7분 후 85%까지)]로 정제하였다. 수집한 분획을 진공 하에 농축하여 tert-부틸 4-(6-[[(벤질옥시)카보닐]아미노]-3-플루오로-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-2-일)피페라진-1-카복실레이트를 회백색 고체로서 제공하였다. MS(ESI, m/z):485[M+H]+.
단계 3 . tert-부틸 4-(6-아미노-3-플루오로-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-2-일)피페라진-1-카복실레이트
에틸 아세테이트(5mL) 중 tert-부틸 4-(6-[[(벤질옥시)카보닐]아미노]-3-플루오로-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-2-일)피페라진-1-카복실레이트(70.0 mg, 0.140 mmol) 및 탄소 상의 팔라듐(70.0mg, 10%)의 혼합물을 수소 대기(벌룬) 하에 25℃에서 1시간 동안 교반하였다. 고체는 여과해냈다. 여과액은 진공 하에 농축하여 tert-부틸 4-(6-아미노-3-플루오로-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-2-일)피페라진-1-카복실레이트를 회백색 고체로서 제공하였다. MS(ESI, m/z): 351[M+H]+.
단계 4 . tert-부틸 4-(6-[3-아미노-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-아미도]-3-플루오로-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-2-일)피페라진-1-카복실레이트
HBTU(58.0mg, 0.150 mmol)를 DMA(2mL) 중 4-(6-아미노-3-플루오로-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-2-일)피페라진-1-카복실레이트(45.0mg, 0.130 mmol), 3-아미노-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복실산(32.0mg, 0.150 mmol) 및 Et3N(54.0μL, 0.390 mmol)의 용액에 첨가하였다. 결과적으로 수득되는 용액을 25℃에서 30분 동안 교반하였다. 혼합물을 역상 크로마토그래피[컬럼: C18 실리카겔; 이동상, A: 물(10 mmoL/L NH4HCO3 함유) 및 B: ACN(0%에서부터 25분 이내 85%까지)]를 통해 정제하였다. 수집한 분획을 진공 하에 농축하여 tert-부틸 4-(6-[3-아미노-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-아미도]-3-플루오로-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-2-일)피페라진-1-카복실레이트를 회백색 고체로서 제공하였다. MS(ESI, m/z): 541[M+H]+.
단계 5 . 3-아미노-N-[(6S)-3-플루오로-2-(피페라진-1-일)-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-6-일]-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드 및 3-아미노-N-[(6R)-3-플루오로-2-(피페라진-1-일)-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-6-일]-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드
DCM(3mL) 중 tert-부틸 4-[3-아미노-6-(3-아미노-6-메틸-1-벤조티오펜-2-아미도)-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-2-일]피페라진-1-카복실레이트(40.0mg, 0.070 mmol) 및 TFA(1.00mL)의 용액을 25℃에서 1시간 동안 교반하였다. 결과적으로 수득되는 혼합물을 진공 하에 농축하여 3-아미노-N-[3-플루오로-2-(피페라진-1-일)-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-6-일]-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드의 TFA 염을 황색 고체로서 제공하였다. 거울상이성질체는 키랄 HPLC(컬럼: Chiralpak IC, 2 x 25 cm, 5 μm; 이동상, A: Hex(0.2% Et2NH) 및 B: EtOH(20분 후까지 50% 유지); 유속: 15 mL/min]로 분리하였다. 1차 용출 이성질체(RT=11.3 분)를 진공 하에 농축한 뒤, 동결건조하여 회백색 고체를 제공하였고, 입체화학은 3-아미노-N-[(6S)-3-플루오로-2-(피페라진-1-일)-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-6-일]-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드로서 임의 지정되었다. MS(ESI, m/z): 441[M+H]+. 1H-NMR (DMSO-d 6 , 300 MHz)δ(ppm): 8.30(d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.60(d, J = 7.5 Hz, 1H), 7.32-7.22(m, 2H), 7.16(br s, 2H), 4.14(br s, 1H), 3.25-3.21(m, 4H), 2.83-2.72(m, 8H), 2.58(s, 3H), 1.98-1.86(m, 2H).
2차 용출 이성질체(RT=16.9 분)를 진공 하에 농축한 뒤, ACN 및 물을 이용하여 동결건조하여, 입체화학이 3-아미노-N-[(6R)-3-플루오로-2-(피페라진-1-일)-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-6-일]-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드로서 임의 지정된 회백색 고체를 제공하였다. MS(ESI, m/z): 441[M+H]+. 1H-NMR(DMSO-d 6 , 300 MHz)δ(ppm): 8.30(d, J = 8.1 Hz, 1H), 7.60(d, J = 7.8 Hz, 1H), 7.32-7.21(m, 2H), 7.16(br s, 2H), 4.15(br s, 1H), 3.22-3.20(m, 4H), 2.83-2.72(m, 8H), 2.58(s, 3H), 2.07-1.83(m, 2H).
실시예 31-1. 3-아미노-N-[(6S)-2-[(3S,4S)-3-아미노-4-(프로판-2-일옥시)피롤리딘-1-일]-5,6,7,8-테트라하이드로퀴나졸린-6-일]-4,6-디메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드 및
실시예 31-2. 3-아미노-N-[(6R)-2-[(3S,4S)-3-아미노-4-(프로판-2-일옥시)피롤리딘-1-일]-5,6,7,8-테트라하이드로퀴나졸린-6-일]-4,6-디메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드
Figure pct00222
단계 1. 벤질 N-[2-[(3S,4S)-3-[[(tert-부톡시)카보닐]아미노]-4-(프로판-2-일옥시)피롤리딘-1-일]-5,6,7,8-테트라하이드로퀴나졸린-6-일]카바메이트
DMA(10mL) 중 벤질 N-(2-클로로-5,6,7,8-테트라하이드로퀴나졸린-6-일)카바메이트(중간체 57)(300mg, 0.944 mmol), tert-부틸 N-[(3S,4S)-4-(프로판-2-일옥시)피롤리딘-3-일]카바메이트(중간체 56)(276mg, 1.133 mmol) 및 DIEA(0.312mL, 1.89 mmol)의 용액을 150℃에서 1시간 동안 마이크로파로 처리하였다. 25℃로 냉각한 후, 잔류물을 역상 크로마토그래피[컬럼: C18 실리카겔; 이동상, A: 물(10 mmol/L NH4HCO3 함유) 및 B: ACN(0%에서부터 20분 후 70%까지)]로 정제하였다. 수집한 분획을 진공 하에 농축하여 벤질 N-[2-[(3S,4S)-3-[[(tert-부톡시)카보닐]아미노]-4-(프로판-2-일옥시)피롤리딘-1-일]-5,6,7,8-테트라하이드로퀴나졸린-6-일]카바메이트를 갈색 고체로서 제공하였다. MS(ESI, m/z): 526[M+H]+.
단계 2. tert-부틸 N-[(3S,4S)-1-(6-아미노-5,6,7,8-테트라하이드로퀴나졸린-2-일)-4-(프로판-2-일옥시)피롤리딘-3-일]카바메이트
에틸 아세테이트(20 mL) 중 벤질 N-[2-[(3S,4S)-3-[[(tert-부톡시)카보닐]아미노]-4-(프로판-2-일옥시)피롤리딘-1-일]-5,6,7,8-테트라하이드로퀴나졸린-6-일]카바메이트(300mg, 0.542 mmol) 및 탄소 상의 팔라듐(300mg, 10%)의 혼합물을 수소 대기(벌룬) 하에 20℃에서 2시간 동안 교반하였다. 결과적으로 수득되는 혼합물을 여과해내었고, 여과 케익을 에틸 아세테이트(3 x 10mL)로 세척하였다. 여과액은 진공 하에 농축하여 tert-부틸 N-[(3S,4S)-1-(6-아미노-5,6,7,8-테트라하이드로퀴나졸린-2-일)-4-(프로판-2-일옥시)피롤리딘-3-일]카바메이트를 갈색 고체로서 제공하였다. MS(ESI, m/z): 392[M+H]+.
단계 3. tert-부틸 N-[(3S,4S)-1-[6-[3-아미노-4,6-디메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-아미도]-5,6,7,8-테트라하이드로퀴나졸린-2-일]-4-(프로판-2-일옥시)피롤리딘-3-일]카바메이트
HBTU(140mg, 0.370 mmol)를 DMA(3mL) 중 tert-부틸 N-[(3S,4S)-1-(6-아미노-5,6,7,8-테트라하이드로퀴나졸린-2-일)-4-(프로판-2-일옥시)피롤리딘-3-일]카바메이트(100mg, 0.230 mmol), Et3N(0.096mL, 0.690 mmol) 및 3-아미노-4,6-디메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복실산(중간체 21)(70.0mg, 0.300 mmol)의 용액에 첨가하였다. 결과적으로 수득되는 용액을 25℃에서 3시간 동안 교반하였다. 잔류물은 역상 크로마토그래피[컬럼: C18 실리카겔; 이동상, A: 물(10 mmol/L NH4HCO3 함유) 및 B: ACN(10%에서부터 30분 후 60%까지)]로 정제하였다. 수집한 분획을 농축하여 tert-부틸 N-[(3S,4S)-1-[6-[3-아미노-4,6-디메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-아미도]-5,6,7,8-테트라하이드로퀴나졸린-2-일]-4-(프로판-2-일옥시)피롤리딘-3-일]카바메이트를 백색 고체로서 제공하였다. MS(ESI, m/z): 596[M+H]+.
단계 4. tert-부틸 N-[(3S,4S)-1-[(6S)-6-[3-아미노-4,6-디메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-아미도]-5,6,7,8-테트라하이드로퀴나졸린-2-일]-4-(프로판-2-일옥시)피롤리딘-3-일]카바메이트 및 tert-부틸 N-[(3S,4S)-1-[(6R)-6-[3-아미노-4,6-디메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-아미도]-5,6,7,8-테트라하이드로퀴나졸린-2-일]-4-(프로판-2-일옥시)피롤리딘-3-일]카바메이트
tert-부틸 N-[(3S,4S)-1-[6-[3-아미노-4,6-디메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-아미도]-5,6,7,8-테트라하이드로퀴나졸린-2-일]-4-(프로판-2-일옥시)피롤리딘-3-일]카바메이트(65.0mg, 0.109 mmol)를 키랄 HPLC[컬럼: Chiralpak IA, 2 x 25 cm, 5 μm; 이동상, A: 헥산:DCM=3:1 및 B: EtOH(19분 후까지 50% 유지); 유속: 16 mL/min]로 분리하였다. 1차 용출 이성질체(RT=11.42 분)를 수집하고 농축하여 백색 고체를 제공하였고, 상기 아미드의 입체화학은 tert-부틸 N-[(3S,4S)-1-[(6S)-6-[3-아미노-4,6-디메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-아미도]-5,6,7,8-테트라하이드로퀴나졸린-2-일]-4-(프로판-2-일옥시)피롤리딘-3-일]카바메이트로서 임의 지정되었다. 2차 용출 이성질체(RT=15.96 분)를 수집하고 진공 농축하여 백색 고체를 제공하였고, 상기 아미드의 입체화학은 tert-부틸 N-[(3S,4S)-1-[(6R)-6-[3-아미노-4,6-디메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-아미도]-5,6,7,8-테트라하이드로퀴나졸린-2-일]-4-(프로판-2-일옥시)피롤리딘-3-일]카바메이트로서 임의 지정되었다. MS(ESI, m/z): 596[M+H]+.
단계 5. 3-아미노-N-[(6S)-2-[(3S,4S)-3-아미노-4-(프로판-2-일옥시)피롤리딘-1-일]-5,6,7,8-테트라하이드로퀴나졸린-6-일]-4,6-디메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드
DCM(1.5mL) 중 tert-부틸 N-[(3S,4S)-1-[(6S)-6-[3-아미노-4,6-디메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-아미도]-5,6,7,8-테트라하이드로퀴나졸린-2-일]-4-(프로판-2-일옥시)피롤리딘-3-일]카바메이트(28.0mg, 0.05 mmol) 및 TFA(0.5mL)의 용액을 25℃에서 30분 동안 교반하였다. 결과적으로 수득되는 혼합물을 진공 하에 농축하였다. 잔류물은 NH3 용액(1.0 mL, MeOH 중 7M)으로 처리하였다. 결과적으로 수득되는 용액을 30분 동안 교반하고 진공 하에 농축하였다. 잔류물은 분취용 HPLC[컬럼: XBridge Shield RP18 OBD, 30 x150 mm, 5 μm; 이동상, A: 물 (10 mM NH4HCO3) 및 B: ACN(25%에서부터 7분 후 45%까지); 유속: 60 mL/min]로 정제하였다. 수집한 분획을 동결건조하여 3-아미노-N-[(6S)-2-[(3S,4S)-3-아미노-4-(프로판-2-일옥시)피롤리딘-1-일]-5,6,7,8-테트라하이드로퀴나졸린-6-일]-4,6-디메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드를 백색 고체로서 제공하였다. MS(ESI, m/z): 496[M+H]+. 1H NMR(DMSO-d 6 , 400 MHz) δ(ppm): 8.06(s, 1H), 7.64(br s, 1H), 7.04(s, 1H), 6.82(br s, 2H), 4.14-4.11(m, 1H), 3.78-3.73(m, 1H), 3.71-3.70(m, 2 H), 3.57-3.53(m, 1H), 3.37-3.32(m, 5H), 3.25-3.22(m, 1H), 2.82-2.62(m, 7H), 2.01-1.98(m, 1 H), 1.91-1.83(m, 1H), 1.74(br s, 2H), 1.12-1.08(m, 6H).
단계 6. 3-아미노-N-[(6R)-2-[(3S,4S)-3-아미노-4-(프로판-2-일옥시)피롤리딘-1-일]-5,6,7,8-테트라하이드로퀴나졸린-6-일]-4,6-디메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드
DCM(1.5mL) 중 tert-부틸 N-[(3S,4S)-1-[(6R)-6-[3-아미노-4,6-디메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-아미도]-5,6,7,8-테트라하이드로퀴나졸린-2-일]-4-(프로판-2-일옥시)피롤리딘-3-일]카바메이트(27.0mg, 0.05 mmol) 및 TFA(0.5mL)의 용액을 25℃에서 30분 동안 교반하였다. 결과적으로 수득되는 혼합물을 진공 하에 농축하였다. NH3(1.0mL, MeOH 중 7M)를 잔류물에 첨가하였다. 결과적으로 수득되는 용액을 30분 동안 교반하고 진공 하에 농축하였다. 잔류물을 분취용 HPLC[컬럼: XBridge Shield RP18 OBD, 30 x150 mm, 5 μm; 이동상, A: 물(10 mM NH4HCO3) 및 B: ACN(25%에서부터 7분 후 50%까지); 유속: 60 mL/min]로 정제하였다. 수집한 분획을 동결건조하여 3-아미노-N-[(6R)-2-[(3S,4S)-3-아미노-4-(프로판-2-일옥시)피롤리딘-1-일]-5,6,7,8-테트라하이드로퀴나졸린-6-일]-4,6-디메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드를 백색 고체로서 제공하였다. MS(ESI, m/z): 496[M+H]+. 1H NMR(DMSO-d 6 , 400 MHz)δ(ppm): 8.07(s, 1H), 7.65(br s, 1H), 7.05(s, 1H), 6.83(br s, 2H), 4.16-4.13(m, 1H), 3.79-3.74(m, 1H), 3.72-3.71(m, 2 H), 3.57-3.53(m, 1H), 3.38-3.33(m, 5H), 3.26-3.23(m, 1H), 2.83-2.62(m, 7H), 2.01-1.99(m, 1 H), 1.92-1.83(m, 1H), 1.74(br s, 2H), 1.12-1.08(m, 6H).
이하 표 22의 실시예는 실시예 31-1 및 31-2의 제조에 사용된 것과 유사한 표준 화학적 조작 및 절차를 사용하여 제조하였다.
Figure pct00223
1 절차 상의 주의점: 단계 1에서, 트리플레이트 중간체 47-4를 사용하였다. 단계 4에서, 거울상이성질체는 키랄 Chiralpak IC 및 이동상 10% EtOH/MTBE(MeOH 중 10 mmol/L NH3 함유)를 사용한 키랄 HPLC에 의해 분리하여 실시예 31-3에 대한 전구체를 1차 용출 이성질체(임의 지정된 입체화학)로서 제공하고; 실시예 31-4에 대한 전구체를 2차 용출 이성질체(임의 지정된 입체화학)로서 제공하였다.
실시예 32-1. 3-아미노-6-메틸-N-[(7S)-3-(피페라진-1-일)-5,6,7,8-테트라하이드로이소퀴놀린-7-일]티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드 및
실시예 32-2. 3-아미노-6-메틸-N-[(7R)-3-(피페라진-1-일)-5,6,7,8-테트라하이드로이소퀴놀린-7-일]티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드
Figure pct00224
단계 1 . tert-부틸 4-(7-[3-아미노-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-아미도]-5,6,7,8-테트라하이드로이소퀴놀린-3-일)피페라진-1-카복실레이트
HBTU(70.0mg, 0.180 mmol)를 DMA(2mL) 중 tert-부틸 4-(7-아미노-5,6,7,8-테트라하이드로이소퀴놀린-3-일)피페라진-1-카복실레이트(중간체 58)(30mg, 0.090 mmol), 3-아미노-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복실산(20.0mg, 0.100mmol) 및 Et3N(0.038mL, 0.270 mmol)의 용액에 첨가하였다. 결과적으로 수득되는 용액을 25℃에서 30분 동안 교반하였다. 혼합물은 역상 크로마토그래피[컬럼: X Bridge C18, 19 x 150 mm, 5 um; 이동상, A: 물(10 mmol/L NH4HCO3 함유) 및 B: ACN(10%에서부터 30분 후 80%까지)]를 통해 정제하였다. 수집한 분획을 진공 하에 농축하여 tert-부틸 4-(7-[3-아미노-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-아미도]-5,6,7,8-테트라하이드로이소퀴놀린-3-일)피페라진-1-카복실레이트를 백색 고체로서 제공하였다. MS(ESI, m/z): 523[M+H]+.
단계 2 . 3-아미노-6-메틸-N-[3-(피페라진-1-일)-5,6,7,8-테트라하이드로이소퀴놀린-7-일]티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드
DCM(1.50mL) 중 tert-부틸 4-(7-[3-아미노-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-아미도]-5,6,7,8-테트라하이드로이소퀴놀린-3-일)피페라진-1-카복실레이트(35.0mg, 0.070 mmol) 및 TFA(0.50 mL)의 용액을 25℃에서 30분 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 진공 하에 농축하였다. 그 다음, NH3 용액(2mL, 메탄올 중 7M)을 첨가하였다. 결과적으로 수득되는 용액을 25℃에서 30분 동안 교반하였다. 결과적으로 수득되는 용액을 진공 하에 농축하여 3-아미노-6-메틸-N-[3-(피페라진-1-일)-5,6,7,8-테트라하이드로이소퀴놀린-7-일]티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드를 백색 고체로서 제공하였다. MS(ESI, m/z): 423[M+H]+.
단계 3 . 3-아미노-6-메틸-N-[(7S)-3-(피페라진-1-일)-5,6,7,8-테트라하이드로이소퀴놀린-7-일]티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드 및 3-아미노-6-메틸-N-[(7R)-3-(피페라진-1-일)-5,6,7,8-테트라하이드로이소퀴놀린-7-일]티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드
라세미체인 3-아미노-6-메틸-N-[3-(피페라진-1-일)-5,6,7,8-테트라하이드로이소퀴놀린-7-일]티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드(25.0mg, 0.059 mmol)를 키랄 HPLC[컬럼: Chiralpak IG, 2 x 25 cm, 5 um; 이동상, A: MTBE(0.1% Et2NH 함유) 및 B: 에탄올(20분까지 50% 유지)]에 의해 그의 거울상이성질체로 분리하였다. 1차 용출 이성질체(RT=12.37 분)를 진공 하에 농축한 뒤, 동결건조하여 백색 고체를 제공하였고, 입체화학은 3-아미노-6-메틸-N-[(7S)-3-(피페라진-1-일)-5,6,7,8-테트라하이드로이소퀴놀린-7-일]티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드로서 임의 지정하였다. MS(ESI, m/z): 423[M+H]+. 1H NMR(CD3OD, 400 MHz)δ(ppm): 8.22(d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.89(s, 1H), 7.33(d, J = 8.0 Hz, 1H), 6.63(s, 1H), 4.25-4.23(m, 1 H), 3.49-3.43(m, 4 H), 3.06-2.98(m, 1 H), 2.97-2.92(m, 6 H), 2.82-2.69(m, 1 H), 2.66(s, 3 H), 2.15-2.13(m, 1 H), 1.89-1.81(m, 1H). 2차 용출 이성질체(RT=17.03 분)를 진공 하에 농축한 뒤, 동결건조하여 백색 고체를 제공하였고, 입체화학은 3-아미노-6-메틸-N-[(7R)-3-(피페라진-1-일)-5,6,7,8-테트라하이드로이소퀴놀린-7-일]티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드로서 임의 지정하였다. MS(ESI, m/z): 423[M+H]+. 1H NMR(CD3OD, 400 MHz)δ(ppm): 8.22(d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.89(s, 1H), 7.33(d, J = 8.0 Hz, 1H), 6.63(s, 1H), 4.25-4.23(m, 1 H), 3.49-3.43(m, 4 H), 3.15-2.98(m, 1 H), 2.97-2.93(m, 6 H), 2.82-2.72(m, 1 H), 2.76(s, 3 H), 2.15-2.13(m, 1 H), 1.89-1.81(m, 1H).
실시예 33-1. (R)-3-아미노-N-(5-플루오로-7-(피페라진-1-일)크로만-3-일-4,4-d2)-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드
실시예 33-2. (S)-3-아미노-N-(5-플루오로-7-(피페라진-1-일)크로만-3-일-4,4-d2)-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드
Figure pct00225
단계 1 . 3-아미노-N-(7-브로모-5-플루오로크로만-3-일-4,4-d2)-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드
DMA(5mL) 중 7-브로모-5-플루오로크로만-4,4-d2-3-아민(중간체 5-2)(340mg, 1.370 mmol), 3-아미노-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복실산(342 mg, 1.645 mmol), Et3N(0.287ml, 2.056 mmol), 및 HBTU(624mg, 1.645 mmol)의 용액을 실온에서 4시간 동안 교반하였다. 반응물을 감압 하에 부피를 절반으로 감량시켰다. EtOAc(5 mL) 및 H2O(3mL)을 첨가하였다. 유기 층을 분리하고, Na2SO4 상에서 건조하고, 여과하고, 농축시켰다. 잔류물을 실리카겔 크로마토그래피(2% 내지 100% EtOAc/헥산으로 용출)로 정제하였다. 원하는 분획을 합하여 농축시켜 3-아미노-N-(7-브로모-5-플루오로크로만-3-일-4,4-d2)-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드를 황색 고체로서 제공하였다. MS:(ESI, m/z): 438[M+H]+. 1H NMR(CDCl3, 300 MHz)δ(ppm): 7.61-7.83(m, 1H), 7.03-7.13(m, 1H), 6.69-6.90(m, 2H), 6.00(br s, 2H), 5.59(br d, J = 6.7 Hz, 1H), 4.47-4.82(m, 1H), 3.95-4.29(m, 3H), 2.85-2.86(m, 1H), 2.67-2.79(m, 3H), 2.59(d, J = 3.2 Hz, 3H).
단계 2 . tert-부틸 4-(3-(3-아미노-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미도)-5-플루오로크로만-7-일-4,4-d2)피페라진-1-카복실레이트
3-아미노-N-(7-브로모-5-플루오로크로만-3-일-4,4-d2)-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드(150mg, 0.342 mmol)를 무수 DMA(3.42mL)에서 tert-부틸 피페라진-1-카복실레이트(127mg, 0.684 mmol)와 배합하였다. THF 용액 중 1M의 LiHMDS(3.42mL, 3.42 mmol)를 첨가하였고, 반응물을 N2로 20분 동안 플러시하였다. Pd-PEPPSI-IPent(34.2mg, 0.034 mmol)를 첨가하였고, 반응물을 60℃에서 16시간 동안 교반하였다. 반응물을 10mL의 EtOAc로 희석하고 3mL의 H2O로 세척하였다. 유기 층을 분리하고 무수 Na2SO4 상에서 건조하고, 여과하고, 농축하였다. 잔류물을 실리카겔 크로마토그래피(5% 내지 80% EtOAc/헥산으로 용출)로 정제하였다. 원하는 분획을 합하고 농축하여 tert-부틸 4-(3-(3-아미노-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미도)-5-플루오로크로만-7-일-4,4-d2)피페라진-1-카복실레이트를 회백색 고체로서 제공하였다. MS:(ESI, m/z): 544[M+H]+.
단계 3 . 3-아미노-N-(5-플루오로-7-(피페라진-1-일)크로만-3-일-4,4-d2)-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드
HCl(1,4-디옥산 중 4M, 0.276mL, 1.104 mmol)을 EtOAc(1mL) 중 tert-부틸 4-(3-(3-아미노-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미도)-5-플루오로크로만-7-일-4,4-d2)피페라진-1-카복실레이트의 현탁액에 첨가하였다. 반응물은 22℃에서 16시간 동안 교반하였다. 반응물은 진공 하에 농축 건조하였다. 잔류물을 키랄 컬럼 Chiralpak IA[이동상 A: 헥산(0.1% Et2NH), 및 B: EtOH(0.1% Et2NH); 50% B]를 사용하여 키랄 HPLC로 정제하여 입체화학이 (R)-3-아미노-N-(5-플루오로-7-(피페라진-1-일)크로만-3-일-4,4-d2)-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드로서 임의 지정된 피크 1 및 입체화학이 (S)-3-아미노-N-(5-플루오로-7-(피페라진-1-일)크로만-3-일-4,4-d2)-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드로서 임의 지정된 피크 2를 제공하였다. MS:(ESI, m/z): 444[M+H]+.
이하 표 23의 실시예는 실시예 33-1 및 33-2의 제조에 사용된 것과 유사한 표준 화학적 조작 및 절차를 사용하여 제조하였다.
Figure pct00226
1 절차 상의 주의점: 단계 1에서, 7-브로모크로만-3-아민을 아민 커플링 파트너로서 사용하여 라세미체인 3-아미노-N-(7-브로모크로만-3-일)-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드를 제공하였다. 거울상이성질체는 키랄 컬럼 ChiralArt Amylose-SA 및 이동상, A: CO2, 65% 및 B: EtOH:DCM=1:1을 사용하여 SFC로 분리하여 (R)-3-아미노-N-(7-브로모크로만-3-일)-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드를 1차 용출 이성질체로서, 그리고 (S)-3-아미노-N-(7-브로모크로만-3-일)-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드를 2차 용출 이성질체로서 제공하였다. 단계 2에서, 시스-tert-부틸 3,8-디아자바이사이클로[4.2.0]옥탄-3-카복실레이트를 아민 커플링 파트너로서 사용하여 시스-tert-부틸 8-[(3R)-3-[3-아미노-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-아미도]-3,4-디하이드로-2H-1-벤조피란-7-일]-3,8-디아자바이사이클로[4.2.0]옥탄-3-카복실레이트를 제공하였다. 상기 시스 이성질체는 키랄 컬럼 Chiralpak IE 및 이동상 10% EtOH/MTBE(0.1% Et2NH)를 사용한 키랄 HPLC에 의해 분리하여 실시예 33-3에 대한 전구체를 1차 용출 이성질체(임의 지정된 입체화학)로서, 그리고 실시예 33-4에 대한 전구체를 2차 용출 이성질체(임의 지정된 입체화학)로서 제공하였다. 단계 3에서, boc-탈보호는 DCM 중 TFA를 이용한 처리에 의해 달성하였다.
실시예 34. 3-아미노-N-[(3R)-7-(4-시아노-1,1-디옥소-1λ6-티안-4-일)-3,4-디하이드로-2H-1-벤조피란-3-일]-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드
Figure pct00227
단계 1. 벤질 N-[(3R)-7-(4-하이드록시티안-4-일)-3,4-디하이드로-2H-1-벤조피란-3-일]카바메이트
n-BuLi(4.40 mL, n-헥산 중 2.5M)을 THF(20mL) 중 벤질 (R)-(7-브로모크로만-3-일)카바메이트(중간체 2)(800mg, 2.16 mmol)의 용액에 -78℃에서 첨가하였다. 결과적으로 수득되는 용액을 -78℃에서 30분 동안 교반하였다. 그 다음, THF(3mL) 중 티안-4-온(1.28g, 11.0 mmol)의 용액을 -78℃에서 첨가하였다. 결과적으로 수득되는 용액을 -78℃에서 1시간 동안 교반하였다. 반응은 물(30mL)로 ??치시켰다. 결과적으로 수득되는 혼합물을 에틸 아세테이트(3 x 30mL)로 추출하였다. 유기 층을 합하여 무수 황산나트륨 상에서 건조하였고, 여과하고 진공 하에 농축하였다. 잔류물은 실리카겔 크로마토그래피(1:2 에틸 아세테이트/석유 에테르로 용출)로 정제하여 벤질 N-[(3R)-7-(4-하이드록시티안-4-일)-3,4-디하이드로-2H-1-벤조피란-3-일]카바메이트를 연황색 고체로서 제공하였다. MS:(ESI, m/z): 400[M+H]+.
단계 2. 벤질 N-[(3R)-7-(4-시아노티안-4-일)-3,4-디하이드로-2H-1-벤조피란-3-일]카바메이트
DCM(1mL) 중 TMSCN(120mg, 1.21 mmol)의 용액을 InBr3(11.0mg, 0.030 mmol) 및 DCM(1mL)의 혼합물에 첨가하였다. 그 다음, DCM(1mL) 중 벤질 N-[(3R)-7-(4-하이드록시티안-4-일)-3,4-디하이드로-2H-1-벤조피란-3-일]카바메이트(120mg, 0.300 mmol)의 용액을 30분 넘게 첨가하였다. 결과적으로 수득되는 혼합물을 29℃에서 30분 동안 교반하였다. 3개의 배취를 병렬로 진행시키고 합하여 물(10mL)로 퀀칭시켰다. 결과적으로 수득되는 혼합물을 DCM(3 x 15mL)으로 추출하였다. 유기 층을 합하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조하고, 여과하고, 진공 하에 농축하였다. 잔류물은 실리카겔 크로마토그래피(1:3 에틸 아세테이트/석유 에테르로 용출)로 정제하여 벤질 N-[(3R)-7-(4-시아노티안-4-일)-3,4-디하이드로-2H-1-벤조피란-3-일]카바메이트를 회백색 고체로서 제공하였다. MS:(ESI, m/z): 409[M+H]+.
단계 3. 벤질 N-[(3R)-7-(4-시아노-1,1-디옥소-1λ6-티안-4-일)-3,4-디하이드로-2H-1-벤조피란-3-일]카바메이트
2-부타논(10mL) 중 벤질 N-[(3R)-7-(4-시아노티안-4-일)-3,4-디하이드로-2H-1-벤조피란-3-일]카바메이트(160mg, 0.390 mmol) 및 옥손(650mg, 3.87 mmol)의 혼합물을 40℃에서 12시간 동안 교반하였다. 고체는 여과해냈다. 여과액은 진공 하에 농축하였다. 잔류물은 실리카겔 크로마토그래피(1:1 에틸 아세테이트/석유 에테르로 용출)로 정제하여 벤질 N-[(3R)-7-(4-시아노-1,1-디옥소-1λ6-티안-4-일)-3,4-디하이드로-2H-1-벤조피란-3-일]카바메이트를 백색 고체로서 제공하였다. MS:(ESI, m/z): 441[M+H]+.
단계 4. 4-[(3R)-3-아미노-3,4-디하이드로-2H-1-벤조피란-7-일]-1,1-디옥소-1λ6-티안-4-카보니트릴
에틸 아세테이트(10mL) 중 벤질 N-[(3R)-7-(4-시아노-1,1-디옥소-1λ6-티안-4-일)-3,4-디하이드로-2H-1-벤조피란-3-일]카바메이트(80.0mg, 0.180 mmol) 및 탄소 상의 팔라듐(80.0mg, 10%)의 혼합물을 수소 대기(벌룬) 하에 29℃에서 1시간 동안 교반하였다. 고체는 여과해냈다. 여과액은 진공 하에 농축하여 4-[(3R)-3-아미노-3,4-디하이드로-2H-1-벤조피란-7-일]-1,1-디옥소-1λ6-티안-4-카보니트릴을 회백색 고체로서 제공하였다. MS:(ESI, m/z): 307[M+H]+.
단계 5. 3-아미노-N-[(3R)-7-(4-시아노-1,1-디옥소-1λ6-티안-4-일)-3,4-디하이드로-2H-1-벤조피란-3-일]-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드
HBTU(68.0mg, 0.180 mmol)를 DMA(2mL) 중 4-[(3R)-3-아미노-3,4-디하이드로-2H-1-벤조피란-7-일]-1,1-디옥소-1λ6-티안-4-카보니트릴(50.0mg, 0.160 mmol), Et3N(0.067mL, 0.480 mmol) 및 3-아미노-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복실산(34.0mg, 0.160 mmol)의 용액에 첨가하였다. 결과적으로 수득되는 용액을 29℃에서 30분 동안 교반하였다. 혼합물을 분취용 HPLC[컬럼: XBridge Prep C18 OBD, 19 x 150 mm 5 μm; 이동상, A: 물(10mM NH4HCO3) 및 B: ACN(30%에서부터 7분 후 60%까지)]로 정제하였다. 수집한 분획을 동결건조하여 3-아미노-N-[(3R)-7-(4-시아노-1,1-디옥소-1λ6-티안-4-일)-3,4-디하이드로-2H-1-벤조피란-3-일]-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드를 연황색 고체로서 제공하였다. MS(ESI, m/z): 497 [M+H]+. 1H NMR(DMSO-d 6, 400 MHz)δ(ppm): 8.33(d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.63(d, J = 7.6 Hz,1H), 7.32(d, J = 8.4 Hz, 2H), 7.24-7.22(m, 3H), 7.10-7.08(m, 1H), 6.99(d, J = 2.0 Hz, 1H), 4.37-4.32(m, 1H), 4.26-4.22(m, 1H), 3.93-3.88(m, 1H), 3.42-3.27(m, 4H), 3.01-2.99(m, 2H), 2.59-2.50(m, 7H).
실시예 35. 3-아미노-6-메틸-N-[(3R)-5,6,8-트리플루오로-7-(피페라진-1-일)-3,4-디하이드로-2H-1-벤조피란-3-일]티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드
Figure pct00228
단계 1. 벤질 4-(2,3,5,6-테트라플루오로-4-포르밀페닐)피페라진-1-카복실레이트
DMF(50mL) 중 2,3,4,5,6-펜타플루오로벤즈알데하이드(10.0g, 51.0 mmol), 벤질 피페라진-1-카복실레이트(11.2g, 50.8 mmol) 및 DIEA(15.9mL, 95.9 mmol)의 용액을 60℃에서 12시간 동안 교반하였다. 반응은 물(50mL)을 첨가하여 ??치시키고, 에틸 아세테이트(3 x 50mL)로 추출하였다. 유기 층을 합하고, 물(6 x 100mL)로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조하고, 여과하고 진공 하에 농축하였다. 잔류물을 실리카겔 크로마토그래피(1:5 에틸 아세테이트/석유 에테르로 용출)로 정제하여 벤질 4-(2,3,5,6-테트라플루오로-4-포르밀페닐)피페라진-1-카복실레이트를 백색 고체로서 제공하였다. MS(ESI, m/z): 397[M+H]+.
단계 2. 벤질 4-[2,3,5,6-테트라플루오로-4-(하이드록시메틸)페닐]피페라진-1-카복실레이트
메탄올(40mL) 중 벤질 4-(2,3,5,6-테트라플루오로-4-포르밀페닐)피페라진-1-카복실레이트(4.00g, 10.1 mmol)의 용액에 NaBH4(950mg, 25.1 mmol)을 <10℃에서 첨가하였다. 결과적으로 수득되는 용액을 25℃에서 2시간 동안 교반하였다. 용매는 진공 하에 제거하였다. 잔류물은 물(100mL)로 희석하였다. 결과적으로 수득되는 혼합물을 에틸 아세테이트(3 x 50mL)로 추출하였다. 유기 층을 합하고 무수 황산나트륨 상에서 건조하고, 여과하고, 진공 하에 농축하여 벤질 4-[2,3,5,6-테트라플루오로-4-(하이드록시메틸)페닐]피페라진-1-카복실레이트를 백색 고체로서 제공하였다. MS:(ESI, m/z): 399[M+H]+.
단계 3. 벤질 4-[4-(브로모메틸)-2,3,5,6-테트라플루오로페닐]피페라진-1-카복실레이트
DCM(40mL) 중 벤질 4-[2,3,5,6-테트라플루오로-4-(하이드록시메틸)페닐]피페라진-1-카복실레이트(5.70g, 14.3 mmol) 및 PBr3(3.85g, 14.2 mmol)의 용액을 25℃에서 2시간 동안 교반하였다. 반응은 그 다음 물(40mL)을 첨가하여 ??치시켰다. 결과적으로 수득되는 혼합물은 DCM(3 x 30mL)으로 추출하였다. 유기 층을 합하여 염수(30mL)로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조하고, 여과하고, 진공 하에 농축하여 벤질 4-[4-(브로모메틸)-2,3,5,6-테트라플루오로페닐]피페라진-1-카복실레이트를 백색 고체로서 제공하였다. MS(ESI, m/z): 461, 463[M+H]+.
단계 4. 벤질 4-(4-[[(2R,5S)-3,6-디메톡시-5-(프로판-2-일)-2,5-디하이드로피라진-2-일]메틸]-2,3,5,6-테트라플루오로페닐)피페라진-1-카복실레이트
THF(50mL) 중 (2S)-3,6-디메톡시-2-(프로판-2-일)-2,5-디하이드로피라진(1.84g, 9.99 mmol)의 용액에 n-BuLi(6.0 mL, n-헥산 중 2.5M)을 -78℃에서 첨가하였다. 결과적으로 수득되는 용액을 -78℃에서 30분 동안 교반하였다. 여기에 벤질 4-[4-(브로모메틸)-2,3,5,6-테트라플루오로페닐]피페라진-1-카복실레이트(4.60 g, 9.97 mmol)를 -78℃에서 첨가하였다. 결과적으로 수득되는 용액을 -78℃에서 2시간 동안 교반하였다. 반응은 그 다음 NH4Cl(포화 수용액)(40mL)을 첨가하여 ??치시켰다. 결과적으로 수득되는 혼합물을 에틸 아세테이트(3 x 30mL)로 추출하였다. 유기 층을 합하여 염수(3 x 30mL)로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조하고, 여과하고 진공 하에 농축하였다. 잔류물은 역상 크로마토그래피[컬럼: C18 실리카겔; 이동상, A: 물(0.05% TFA 함유) 및 B: ACN(5%에서부터 30분 후 75%까지]로 정제하여 벤질 4-(4-[[(2R,5S)-3,6-디메톡시-5-(프로판-2-일)-2,5-디하이드로피라진-2-일]메틸]-2,3,5,6-테트라플루오로페닐)피페라진-1-카복실레이트를 황색 오일로서 제공하였다. MS(ESI, m/z): 565[M+H]+.
단계 5. 벤질 4-[4-[(2R)-2-아미노-3-메톡시-3-옥소프로필]-2,3,5,6-테트라플루오로페닐]피페라진-1-카복실레이트
염산(100mL, 0.3N)을 ACN(100mL) 중 벤질 4-(4-[[(2R,5S)-3,6-디메톡시-5-(프로판-2-일)-2,5-디하이드로피라진-2-일]메틸]-2,3,5,6-테트라플루오로페닐)피페라진-1-카복실레이트(5.86 g, 10.3 mmol)의 교반 용액에 <10℃에서 첨가하였다. 결과적으로 수득되는 용액을 25℃에서 1시간 동안 교반하였다. 용매는 진공 하에 제거하였다. 잔류물의 pH 값은 NaHCO3(포화 수용액)으로 9 내지 10으로 조정하였다. 결과적으로 수득되는 혼합물을 에틸 아세테이트(3 x 30mL)로 추출하였다. 유기 층을 합하여 염수(50mL)로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조하고, 여과하고, 진공 하에 농축하여 벤질 4-[4-[(2R)-2-아미노-3-메톡시-3-옥소프로필]-2,3,5,6-테트라플루오로페닐]피페라진-1-카복실레이트를 황색 고체로서 제공하였다. MS(ESI, m/z): 470[M+H]+.
단계 6. 벤질 4-[4-[(2R)-2-아미노-3-하이드록시프로필]-2,3,5,6-테트라플루오로페닐]피페라진-1-카복실레이트
메탄올(10mL) 및 THF(40mL) 중 벤질 4-[4-[(2R)-2-아미노-3-메톡시-3-옥소프로필]-2,3,5,6-테트라플루오로페닐]피페라진-1-카복실레이트(3.83g, 8.16 mmol)의 용액에 NaBH4(900mg, 23.7 mmol)을 <10℃에서 첨가하였다. 결과적으로 수득되는 용액을 25℃에서 3시간 동안 교반하였다. 용매는 진공 하에 농축하였다. 잔류물을 물(50mL)로 희석하였다. 결과적으로 수득되는 혼합물을 에틸 아세테이트(3 x 50mL)로 추출하였다. 유기 층을 합하여 염수(3 x 30mL)로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조하고, 여과하고, 진공 하에 농축하였다. 잔류물은 역상 크로마토그래피[컬럼: C18 실리카겔; 이동상, A: 물(0.05% TFA 함유) 및 B: ACN(5%에서부터 30분 후 80%까지)]로 정제하여 벤질 4-[4-[(2R)-2-아미노-3-하이드록시프로필]-2,3,5,6-테트라플루오로페닐]피페라진-1-카복실레이트를 황색 오일로서 제공하였다. MS(ESI, m/z): 442[M+H]+.
단계 7. 벤질 4-[(3R)-3-아미노-5,6,8-트리플루오로-3,4-디하이드로-2H-1-벤조피란-7-일]피페라진-1-카복실레이트
수소화나트륨(34.0mg, 1.42 mmol, 60%)을 DMSO(10mL) 중 벤질 4-[4-[(2R)-2-아미노-3-하이드록시프로필]-2,3,5,6-테트라플루오로페닐]피페라진-1-카복실레이트(400mg, 0.910 mmol)의 교반 용액에 첨가하였다. 결과적으로 수득되는 용액을 25℃에서 30분, 그 다음 70℃에서 2시간 동안 교반하였다. 25℃로 냉각한 후, 반응은 물(40mL)을 첨가하여 ??치시켰다. 결과적으로 수득되는 혼합물을 에틸 아세테이트(3 x 20mL)로 추출하였다. 유기 층을 합하여 염수(20mL)로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조하고, 여과하고, 진공 하에 농축하였다. 잔류물은 역상 크로마토그래피[컬럼: C18 실리카겔; 이동상, A: 물(0.05% TFA 함유) 및 B: ACN(20%에서부터 30분 후 70%까지)]로 정제하여 벤질 4-[(3R)-3-아미노-5,6,8-트리플루오로-3,4-디하이드로-2H-1-벤조피란-7-일]피페라진-1-카복실레이트를 황색 오일로서 제공하였다. MS(ESI, m/z): 422[M+H]+.
단계 8. 벤질 4-[(3R)-3-[3-아미노-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-아미도]-5,6,8-트리플루오로-3,4-디하이드로-2H-1-벤조피란-7-일]피페라진-1-카복실레이트
DMA(2mL) 중 벤질 4-[(3R)-3-아미노-5,6,8-트리플루오로-3,4-디하이드로-2H-1-벤조피란-7-일]피페라진-1-카복실레이트(70.0mg, 0.170 mmol) 및 3-아미노-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복실산(41.5mg, 0.200 mmol)의 용액에 Et3N(0.068mL, 0.49 mmol) 및 HBTU(75.0mg, 0.200 mmol)를 첨가하였다. 결과적으로 수득되는 용액을 25℃에서 1시간 동안 교반하였다. 혼합물을 역상 크로마토그래피[컬럼: C18 실리카겔; 이동상, A: 물(0.05% TFA 함유) 및 B: ACN(5%에서부터 30분 후 80%까지)]로 정제하여 벤질 4-[(3R)-3-[3-아미노-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-아미도]-5,6,8-트리플루오로-3,4-디하이드로-2H-1-벤조피란-7-일]피페라진-1-카복실레이트를 황색 오일로서 제공하였다. MS(ESI, m/z): 612[M+H]+.
단계 9. 3-아미노-6-메틸-N-[(3R)-5,6,8-트리플루오로-7-(피페라진-1-일)-3,4-디하이드로-2H-1-벤조피란-3-일]티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드
CH3COOH(1.5mL) 중 벤질 4-[(3R)-3-[3-아미노-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-아미도]-5,6,8-트리플루오로-3,4-디하이드로-2H-1-벤조피란-7-일]피페라진-1-카복실레이트(50.0mg, 0.080 mmol)의 용액에 브롬화수소산(1.5mL, 48%)을 첨가하였다. 결과적으로 수득되는 용액을 50℃에서 1시간 동안 교반하였다. 결과적으로 수득되는 혼합물을 진공 하에 농축하였다. 잔류물은 분취용 HPLC[컬럼: XBridge Shield RP18 OBD 컬럼; 이동상, A: 물(10 mmol/L NH4HCO3 함유) 및 B: ACN(25%에서부터 8분 후 65% B까지)]로 정제하였다. 수집한 분획을 동결건조하여 3-아미노-6-메틸-N-[(3R)-5,6,8-트리플루오로-7-(피페라진-1-일)-3,4-디하이드로-2H-1-벤조피란-3-일]티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드를 백색 고체로서 제공하였다. MS(ESI, m/z): 478[M+H]+. 1H NMR(DMSO-d 6, 400 MHz)δ(ppm): 8.33(d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.70(d, J = 6.8 Hz, 1H), 7.31(d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.25(br s, 2H), 4.36-4.30(m, 1H), 4.26-4.23(m, 1H), 3.99-3.95(m, 1H), 3.04-2.94(m, 5H), 2.90-2.84(m, 1H), 2.79-2.77(m, 4H), 2.58(s, 3H).
실시예 288. 3-아미노-N-[(3R)-7-[(3R)-3-아미노피롤리딘-1-일]-3,4-디하이드로-2H-1-벤조피란-3-일]-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드
Figure pct00229
단계 1. 벤질 N-[(3R)-7-[(3R)-3-[[(tert-부톡시)카보닐]아미노]피롤리딘-1-일]-3,4-디하이드로-2H-1-벤조피란-3-일]카바메이트
톨루엔(4mL) 중 벤질 N-[(3R)-7-브로모-3,4-디하이드로-2H-1-벤조피란-3-일]카바메이트(150mg, 0.400 mmol), tert-부틸 N-[(3R)-피롤리딘-3-일]카바메이트(94.0mg, 0.500 mmol), Cs2CO3(274mg, 0.840 mmol), RuPhos(40.0mg, 0.090 mmol) 및 3세대 RuPhos 전구촉매(35.0mg, 0.040 mmol)의 혼합물을 90℃에서 3시간 동안 교반하였다. 25℃로 냉각한 후, 고체는 여과해냈다. 여과액은 감압 하에 농축하였다. 잔류물은 실리카겔 크로마토그래피(1:3 에틸 아세테이트/석유 에테르로 용출)로 정제하여 벤질 N-[(3R)-7-[(3R)-3-[[(tert-부톡시)카보닐]아미노]피롤리딘-1-일]-3,4-디하이드로-2H-1-벤조피란-3-일]카바메이트를 황색 고체로서 제공하였다(145mg, 75%). LCMS(ES, m/z): 468[M+H]+.
단계 2. tert-부틸 N-[(3R)-1-[(3R)-3-아미노-3,4-디하이드로-2H-1-벤조피란-7-일]피롤리딘-3-일]카바메이트
EA(6mL) 중 벤질 N-[(3R)-7-[(3R)-3-[[(tert-부톡시)카보닐]아미노]피롤리딘-1-일]-3,4-디하이드로-2H-1-벤조피란-3-일]카바메이트(145mg, 0.300 mmol) 및 Pd/C(100mg, 10%)의 혼합물을 수소 대기(벌룬) 하에 25℃에서 3시간 동안 교반하였다. 고체는 여과해냈다. 여과액은 감압 하에 농축하여 tert-부틸 N-[(3R)-1-[(3R)-3-아미노-3,4-디하이드로-2H-1-벤조피란-7-일]피롤리딘-3-일]카바메이트를 연갈색 고체로서 제공하였다(95.0mg, 조생성물). LCMS (ES, m/z): 334[M+H]+.
단계 3. tert-부틸 N-[(3R)-1-[(3R)-3-[3-아미노-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-아미도]-3,4-디하이드로-2H-1-벤조피란-7-일]피롤리딘-3-일]카바메이트 HBTU(154mg, 0.400 mmol)를 DMA(3 mL) 중 tert-부틸 N-[(3R)-1-[(3R)-3-아미노-3,4-디하이드로-2H-1-벤조피란-7-일]피롤리딘-3-일]카바메이트(90.0mg, 0.260 mmol), 3-아미노-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복실산(84.0mg, 0.400 mmol) 및 TEA(0.150 mL, 1.07 mmol)의 용액에 첨가하였다. 결과적으로 수득되는 용액을 25℃에서 3시간 동안 교반하였다. 혼합물은 역상 크로마토그래피[컬럼: C18 실리카겔; 이동상, A: 물(10 mmol/L NH4HCO3 함유) 및 B: ACN(5%에서부터 30분 후 80%까지); 검출기: UV 254/220 nm]에 의해 정제하였다. 수집한 분획을 농축하여 tert-부틸 N-[(3R)-1-[(3R)-3-[3-아미노-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-아미도]-3,4-디하이드로-2H-1-벤조피란-7-일]피롤리딘-3-일]카바메이트를 황색 고체로서 제공하였다(85.0 mg, 61%). LCMS (ES, m/z): 524[M+H]+.
단계 4. 3-아미노-N-[(3R)-7-[(3R)-3-아미노피롤리딘-1-일]-3,4-디하이드로-2H-1-벤조피란-3-일]-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드
DCM(1.50mL) 중 tert-부틸 N-[(3R)-1-[(3R)-3-[3-아미노-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-아미도]-3,4-디하이드로-2H-1-벤조피란-7-일]피롤리딘-3-일]카바메이트(42.0mg, 0.080 mmol) 및 TFA(0.500 mL)의 용액을 25℃에서 25분 동안 교반하였다. 결과적으로 수득되는 혼합물을 진공 하에 농축하였다. NH3 용액(1.00 mL, MeOH 중 7M)을 잔류물에 첨가하였다. 결과적으로 수득되는 용액을 0.5시간 동안 교반하고 진공 하에 농축하였다. 잔류물은 분취용 HPLC[컬럼: XBridge Shield RP18 OBD, 30 x 150 mm, 5 um; 이동상, A: 물(10 mmol/L NH4HCO3 함유) 및 B: ACN(25%에서부터 7분 후 55%까지); 검출기: UV 254 nm]로 정제하였다. 수집한 분획을 동결건조하여 3-아미노-N-[(3R)-7-[(3R)-3-아미노피롤리딘-1-일]-3,4-디하이드로-2H-1-벤조피란-3-일]-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드를 황색 고체로서 제공하였다(20.0 mg, 60%). 1H-NMR(DMSO-d 6 , 400 MHz)δ(ppm): 8.33(d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.48(br s, 1H), 7.32(d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.21(br s, 2H), 6.86(d, J = 8.4 Hz, 1H), 6.10(d, J = 8.0 Hz, 1H), 5.90(s, 1H), 4.30-4.26(m, 1H), 4.16-4.12(m, 1H), 3.82-3.77(m, 1H), 3.55-3.53(m, 1H), 3.30-3.25(m, 2H), 3.19-3.13(m, 1H), 2.89-2.80(m, 3H), 2.59(s, 3H), 2.10-1.90(m, 2H), 1.72-1.64(m, 2H). LCMS(ES, m/z): 424[M+H]+.
실시예 400. N-[(6S)-2-[(3R,4R)-3-아미노-4-(메톡시메틸)피롤리딘-1-일]-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-6-일]-1-에틸-1H-피롤로[2,3-b]피리딘-5-카복사미드 및
실시예 401. N-[(6S)-2-[(3S,4S)-3-아미노-4-(메톡시메틸)피롤리딘-1-일]-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-6-일]-1-에틸-1H-피롤로[2,3-b]피리딘-5-카복사미드
Figure pct00230
단계 1 . 시스-벤질 N-[(6S)-2-(3-[[(tert-부톡시)카보닐]아미노]-4-(메톡시메틸)피롤리딘-1-일)-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-6-일]카바메이트
톨루엔(10mL) 중 벤질 N-[(6S)-2-(트리플루오로메탄설포닐옥시)-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-6-일]카바메이트(중간체 47-2)(300mg, 0.690 mmol), 시스-tert-부틸 N-[4-(메톡시메틸)피롤리딘-3-일]카바메이트(192mg, 0.825 mmol) (중간체 48-1), Cs2CO3(454mg, 1.38mmol), RuPhos(65.0mg, 0.138mmol) 및 RuPhos Pd G3(58.0mg, 0.069mmol)의 용액을 90℃에서 3시간 동안 교반하였다. 상온(약 23℃)으로 냉각한 후, 고체를 여과해내고, 여과액은 진공 하에 농축하였다. 잔류물은 역상 크로마토그래피[컬럼:XBridge Prep C18 OBD, 19 x 150 mm 5 μm; 이동상, A: 물(10 mM NH4HCO3 함유) 및 B: ACN(50%에서부터 70% B까지, 30분 넘게)]로 정제하여 시스-벤질 N-[(6S)-2-(3-[[(tert-부톡시)카보닐]아미노]-4-(메톡시메틸)피롤리딘-1-일)-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-6-일]카바메이트를 무색 오일로서 제공하였다. MS(ESI, m/z): 511[M+H]+.
단계 2. 시스-tert-부틸 N-[1-[(6S)-6-아미노-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-2-일]-4-(메톡시메틸)피롤리딘-3-일]카바메이트
에틸 아세테이트(15mL) 중 시스-벤질 N-[(6S)-2-(3-[[(tert-부톡시)카보닐]아미노]-4-(메톡시메틸)피롤리딘-1-일)-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-6-일]카바메이트(240mg, 0.465 mmol) 및 탄소 상의 팔라듐(240mg, 10%)을 수소 대기(벌룬) 하에 25℃에서 16시간 동안 교반하였다. 고체는 여과해내고, 여과 케익은 MeOH(3 x 10mL)로 세척하였다. 여과액은 진공 하에 농축하여 시스-tert-부틸 N-[1-[(6S)-6-아미노-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-2-일]-4-(메톡시메틸)피롤리딘-3-일]카바메이트를 적색 고체로서 제공하였다. MS(ESI, m/z): 377 [M+H]+.
단계 3. 시스-tert-부틸 N-[1-[(6S)-6-[1-에틸-1H-피롤로[2,3-b]피리딘-5-아미도]-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-2-일]-4-(메톡시메틸)피롤리딘-3-일]카바메이트
HBTU(176mg, 0.459 mmol)를 DMA(4mL) 중 시스-tert-부틸 N-[1-[(6S)-6-아미노-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-2-일]-4-(메톡시메틸)피롤리딘-3-일]카바메이트(160mg, 0.421 mmol), 1-에틸-1H-피롤로[2,3-b]피리딘-5-카복실산(중간체 25)(80.0mg, 0.417 mmol), 및 Et3N(0.180mL, 1.76 mmol)의 교반 용액에 첨가하였다. 결과적으로 수득되는 용액을 25℃에서 0.5시간 동안 교반하였다. 결과적으로 수득되는 혼합물을 역상 크로마토그래피[컬럼: XBridge Prep C18 OBD, 19 x 150 mm 5 μm; 이동상, A: 물(10 mM NH4HCO3 함유) 및 B: ACN(50%에서부터 20분에 걸쳐 70%까지)]로 정제하였다. 수집한 분획을 진공 하에 농축하여 시스-tert-부틸 N-[1-[(6S)-6-[1-에틸-1H-피롤로[2,3-b]피리딘-5-아미도]-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-2-일]-4-(메톡시메틸)피롤리딘-3-일]카바메이트를 제공하였다.
단계 4. tert-부틸 N-[(3R,4R)-1-[(6S)-6-[1-에틸-1H-피롤로[2,3-b]피리딘-5-아미도]-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-2-일]-4-(메톡시메틸)피롤리딘-3-일]카바메이트 및 tert-부틸 N-[(3S,4S)-1-[(6S)-6-[1-에틸-1H-피롤로[2,3-b]피리딘-5-아미도]-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-2-일]-4-(메톡시메틸)피롤리딘-3-일]카바메이트
라세미체인 시스-tert-부틸 N-[1-[(6S)-6-[1-에틸-1H-피롤로[2,3-b]피리딘-5-아미도]-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-2-일]-4-(메톡시메틸)피롤리딘-3-일]카바메이트를 키랄 HPLC[컬럼: Chiralpak IF, 2 x 25 cm, 5 μm; 이동상, A: 헥산:DCM=3:1(0.1% Et2NH 함유) 및 B: EtOH(13분까지 30% 유지); 유속: 30 mL/min]에 의해 분리하였다. 1차 용출 이성질체(RT=8.4 분)를 수집하여 진공 하에 농축하여 백색 고체를 제공하였고, 상기 피롤리딘에 대한 입체화학은 tert-부틸 N-[(3R,4R)-1-[(6S)-6-[1-에틸-1H-피롤로[2,3-b]피리딘-5-아미도]-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-2-일]-4-(메톡시메틸)피롤리딘-3-일]카바메이트로서 임의 지정되었다. 2차 용출 이성질체(RT=10.2 분)를 수집하고 진공 하에 농축하여 백색 고체를 제공하였고, 상기 피롤리딘에 대한 입체화학은 tert-부틸 N-[(3S,4S)-1-[(6S)-6-[1-에틸-1H-피롤로[2,3-b]피리딘-5-아미도]-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-2-일]-4-(메톡시메틸)피롤리딘-3-일]카바메이트로서 임의 지정되었다. MS (ESI, m/z): 549[M+H]+.
단계 5. N-[(6S)-2-[(3R,4R)-3-아미노-4-(메톡시메틸)피롤리딘-1-일]-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-6-일]-1-에틸-1H-피롤로[2,3-b]피리딘-5-카복사미드
DCM(3mL) 중 tert-부틸 N-[(3R,4R)-1-[(6S)-6-[1-에틸-1H-피롤로[2,3-b]피리딘-5-아미도]-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-2-일]-4-(메톡시메틸)피롤리딘-3-일]카바메이트(60.0mg, 0.108 mmol) 및 TFA(1.00 mL)의 용액을 25℃에서 30분 동안 교반하였다. 결과적으로 수득되는 혼합물을 진공 하에 농축하였다. 잔류물은 NH3 용액(3.00mL, MeOH 중 7M)으로 25℃에서 적가 처리하였다. 결과적으로 수득되는 혼합물을 25℃에서 추가 10분 동안 교반하고, 진공 하에 농축하였다. 잔류물은 분취용 HPLC[컬럼: XBridge Prep C18 OBD, 5 μm, 19 x 150 mm; 이동상 A: 물(10mM NH4HCO3) 및 B: ACN(30%에서부터 10분 후 50%까지)]로 정제하였다. 수집한 분획을 동결건조하여 N-[(6S)-2-[(3R,4R)-3-아미노-4-(메톡시메틸)피롤리딘-1-일]-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-6-일]-1-에틸-1H-피롤로[2,3-b]피리딘-5-카복사미드를 백색 고체로서 제공하였다. MS(ESI, m/z): 449[M+H]+. 1H-NMR(DMSO-d 6 , 400 MHz) δ(ppm): 8.77(s, 1H), 8.47-8.45(m, 2H), 7.69(d, J = 3.6 Hz, 1H), 7.20(d, J = 8.4 Hz, 1H), 6.59(d, J = 3.6 Hz, 1H), 6.21(d, J = 8.4 Hz, 1H), 4.36-4.30(m, 2H), 4.22-4.17(m, 1H), 3.60-3.33(m, 5H), 3.28(s, 3H), 3.23-3.18(m, 2H), 2.88-2.81(m, 1H), 2.80-2.77(m, 2H), 2.71-2.67(m, 1H), 2.41-2.38(m, 1H), 2.10-2.05(m, 1H), 1.88-1.82(m, 1H), 1.59(br s, 2H), 1.41-1.38(m, 4H).
단계 6. N-[(6S)-2-[(3S,4S)-3-아미노-4-(메톡시메틸)피롤리딘-1-일]-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-6-일]-1-에틸-1H-피롤로[2,3-b]피리딘-5-카복사미드
DCM(10 mL) 중 tert-부틸 N-[(3S,4S)-1-[(6S)-6-[1-에틸-1H-피롤로[2,3-b]피리딘-5-아미도]-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-2-일]-4-(메톡시메틸)피롤리딘-3-일]카바메이트(60.0mg, 0.108 mmol) 및 TFA(1.00 mL)의 용액을 25℃에서 30분 동안 교반하였다. 결과적으로 수득되는 혼합물을 진공 하에 농축하였다. 잔류물을 NH3 용액(3.00mL, MeOH 중 7M)으로 25℃에서 적가 처리하였다. 결과적으로 수득되는 혼합물을 25℃에서 추가 10분 동안 교반하고 진공 하에 농축하였다. 잔류물은 분취용 HPLC[컬럼: XBridge Prep C18 OBD, 5 μm, 19 x 150 mm; 이동상 A: 물(10 mM NH4HCO3) 및 B: ACN(30%에서부터 10분 후 50%까지)]로 정제하였다. 수집한 분획을 동결건조하여 N-[(6S)-2-[(3S,4S)-3-아미노-4-(메톡시메틸)피롤리딘-1-일]-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-6-일]-1-에틸-1H-피롤로[2,3-b]피리딘-5-카복사미드를 백색 고체로서 제공하였다. MS (ESI, m/z): 449[M+H]+. 1H-NMR(DMSO-d 6 , 400 MHz)δ(ppm): 8.77(d, J = 2.0 Hz, 1H), 8.47-8.45(m, 2H), 7.68(d, J = 3.6 Hz, 1H), 7.19(d, J = 8.4 Hz, 1H), 6.59(d, J = 3.2 Hz, 1H), 6.21(d, J = 8.4 Hz, 1H), 4.36-4.30(m, 2H), 4.18-4.13(m, 1H), 3.60-3.35(m, 5H), 3.28(s, 3H), 3.22-3.17(m, 2H), 2.88-2.86(m, 1H), 2.78-2.77(m, 2H), 2.71-2.67(m, 1H), 2.41-2.37(m, 1H), 2.11-2.04(m, 1H), 1.90-1.80(m, 1H), 1.55(br s, 2H), 1.41-1.38(m, 3H).
실시예 424. 3-아미노-N-[(3R)-7-[(3S,4S)-3-아미노-4-(플루오로메틸)피롤리딘-1-일]-3,4-디하이드로-2H-1-벤조피란-3-일]-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드
Figure pct00231
단계 1 . 1-벤질-4-(하이드록시메틸)피롤리딘-2-온
NaBH4(24.0g, 634 mmol)를 에탄올(800mL) 중 메틸 1-벤질-5-옥소피롤리딘-3-카복실레이트(50.0 g, 214 mmol)의 용액에 0℃에서 첨가하였다. 결과적으로 수득되는 용액을 25℃에서 4시간 동안 교반하였다. 반응은 물(50mL)로 ??치시켰다. 혼합물은 진공 하에 농축하였다. 잔류물은 물(200mL)로 희석하였다. 결과적으로 수득되는 혼합물을 디클로로메탄(3 x 500mL)으로 추출하였다. 유기 층을 합하여, 무수 황산나트륨 상에서 건조하고, 여과하고, 진공 하에 농축하였다. 잔류물을 실리카겔 크로마토그래피(10/1 디클로로메탄/메탄올)로 정제하여 1-벤질-4-(하이드록시메틸)피롤리딘-2-온을 백색 오일로서 제공하였다(35.0g, 76%). LCMS(ES, m/z): 206[M+H]+.
단계 2. 1-벤질-4-(플루오로메틸)피롤리딘-2-온
DAST(32.2mL, 244 mmol)를 DCM(30mL) 중 1-벤질-4-(하이드록시메틸)피롤리딘-2-온(20.0g, 97.5 mmol)의 용액에 -78℃에서 첨가하였다. 결과적으로 수득되는 용액을 25℃에서 16시간 동안 교반하였다. 반응물은 얼음-물(200 mL)에 부었다. 결과적으로 수득되는 혼합물을 DCM(3 x 200mL)으로 추출하였다. 유기 층을 합하여 무수 황산나트륨 상에서 건조하고, 여과하고, 진공 하에 농축하였다. 잔류물을 역상 크로마토그래피[컬럼: C18 컬럼; 이동상, A: 물(10 mmol/L NH4HCO3 함유) 및 B: CH3CN(0%에서부터 45분 후 50%까지); 검출기: 254/220 nm]로 정제하여 1-벤질-4-(플루오로메틸)피롤리딘-2-온을 황색 오일로서 제공하였다(12.0g, 53%). LCMS (ES, m/z): 208[M+H]+.
단계 3. 트랜스-1-벤질-4-(플루오로메틸)-3-하이드록시피롤리딘-2-온
LDA 용액(24.0 mL, THF 중 2M)을 테트라하이드로푸란(100mL) 중 1-벤질-4-(플루오로메틸)피롤리딘-2-온(5.00g, 23.6 mmol)의 용액에 -78℃에서 첨가하였다. 결과적으로 수득되는 용액을 -78℃에서 1시간 동안 교반하였다. 그 다음, O2를 도입시켰다. 결과적으로 수득되는 용액을 -78℃에서 3시간 동안 교반하였다. 반응은 물(50mL)을 첨가하여 ??치시켰다. 용매는 진공 하에 제거하였다. 잔류물은 CH2Cl2(3 x 100mL)으로 추출하였다. 유기 층을 합하여, 무수 Na2SO4 상에서 건조하고, 여과하고, 감압 하에 농축하였다. 잔류물은 역상 크로마토그래피[컬럼: C18 실리카겔; 이동상, A: 물(0.1% TFA 함유) 및 B: ACN(0%에서부터 30분 후 60%까지); 검출기: UV 220nm 및 254nm]로 정제하여 트랜스-1-벤질-4-(플루오로메틸)-3-하이드록시피롤리딘-2-온을 갈색 오일로서 제공하였다(3.00g, 56%). LCMS (ES, m/z): 224[M+H]+.
단계 4. 트랜스-1-벤질-4-(플루오로메틸)-2-옥소피롤리딘-3-일 메탄설포네이트
MsCl(2.75mL, 35.5 mmol)을 DCM(70mL) 중 트랜스-1-벤질-4-(플루오로메틸)-3-하이드록시피롤리딘-2-온(5.40g, 23.7 mmol) 및 TEA(6.59mL, 47.4 mmol)의 교반 용액에 0℃에서 첨가하였다. 결과적으로 수득되는 혼합물을 25℃에서 2시간 동안 교반하였다. 반응은 물(50mL)을 0℃에서 첨가하여 ??치시켰다. 결과적으로 수득되는 혼합물을 CH2Cl2(3 x 50mL)로 추출하였다. 유기 층을 합하여 무수 Na2SO4 상에서 건조하고, 여과하고, 감압 하에 농축하여 트랜스-1-벤질-4-(플루오로메틸)-2-옥소피롤리딘-3-일 메탄설포네이트를 갈색 오일로서 제공하였다(6.00g, 조생성물). LCMS(ES, m/z): 302[M+H]+.
단계 5. 시스-3-아지도-1-벤질-4-(플루오로메틸)피롤리딘-2-온
DMF(150mL) 중 트랜스-1-벤질-4-(플루오로메틸)-2-옥소피롤리딘-3-일 메탄설포네이트(6.00g, 19.5 mmol) 및 NaN3(3.81g, 58.6 mmol)의 혼합물을 100℃에서 1시간 동안 교반하였다. 혼합물을 25℃로 냉각시켰다. 반응은 물(500mL)을 첨가하여 25℃에서 ??치시켰다. 결과적으로 수득되는 혼합물을 에틸 아세테이트(3 x 200mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 염수(300 mL)로 세척하고, 무수 Na2SO4 상에서 건조하고, 여과하고, 감압 하에 농축하였다. 잔류물은 실리카겔 크로마토그래피(1:1 에틸 아세테이트/석유 에테르로 용출)로 정제하여 시스-3-아지도-1-벤질-4-(플루오로메틸)피롤리딘-2-온을 황색 오일로서 제공하였다(4.20g, 85%). LCMS(ES, m/z): 249[M+H]+.
단계 6. 시스-tert-부틸 N-[1-벤질-4-(플루오로메틸)-2-옥소피롤리딘-3-일]카바메이트
EtOH(100mL) 중 3-아지도-1-벤질-4-(플루오로메틸)피롤리딘-2-온(4.00g, 15.8 mmol), 탄소 상의 팔라듐(4.00g, 10%) 및 디-tert-부틸 디카보네이트(6.89g, 31.6 mmol)의 혼합물을 수소 대기(벌룬) 하에 25℃에서 3시간 동안 교반하였다. 고체는 여과해냈다. 여과액은 진공 하에 농축하였다. 잔류물은 실리카겔 크로마토그래피(1:1 에틸 아세테이트/석유 에테르로 용출)로 정제하여 시스-tert-부틸 N-[1-벤질-4-(플루오로메틸)-2-옥소피롤리딘-3-일]카바메이트를 백색 고체로서 제공하였다(2.40g, 46%). LCMS (ES, m/z): 323[M+H]+.
단계 7. 시스-tert-부틸 N-[1-벤질-4-(플루오로메틸)피롤리딘-3-일]카바메이트
BH3(30mL, THF 중 1M)를 THF(60mL) 중 시스-tert-부틸 N-[1-벤질-4-(플루오로메틸)-2-옥소피롤리딘-3-일]카바메이트(2.40 g, 7.30 mmol)의 교반 용액에 0℃에서 첨가하였다. 결과적으로 수득되는 혼합물을 25℃에서 16시간 동안 교반하였다. 결과적으로 수득되는 혼합물을 진공 하에 농축하였다. 그 다음, EtOH(60mL), H2O(15mL) 및 TEA(15mL)를 첨가하였다. 결과적으로 수득되는 혼합물을 80℃에서 2시간 동안 교반하였다. 결과적으로 수득되는 혼합물을 25℃로 냉각하고, 진공 하에 농축하였다. 잔류물은 역상 크로마토그래피[컬럼: C18 컬럼; 이동상, A: 물(10mmol/L NH4HCO3 함유) 및 B: ACN(0%에서부터 30분 후 100%까지); 검출기: UV220nm 및 200nm]로 정제하여 시스-tert-부틸 N-[1-벤질-4-(플루오로메틸)피롤리딘-3-일]카바메이트를 백색 고체로서 제공하였다(1.00g, 44%). LCMS(ES, m/z): 309[M+H]+.
단계 8. 시스-tert-부틸 N-[4-(플루오로메틸)피롤리딘-3-일]카바메이트
에틸 아세테이트(10mL) 중 tert-부틸 N-[1-벤질-4-(플루오로메틸)피롤리딘-3-일]카바메이트(450mg, 1.43 mmol) 및 탄소 상의 Pd(OH)2(450mg, 20%)의 혼합물을 25℃에서 수소 대기(벌룬) 하에 2시간 동안 교반하였다. 고체는 여과해냈다. 여과액은 감압 하에 농축하여 시스-tert-부틸 N-[4-(플루오로메틸)피롤리딘-3-일]카바메이트를 갈색 오일로서 제공하였다(300mg, 조생성물). LCMS(ES, m/z): 219[M+H]+.
단계 9 . 시스-벤질　N-[(3R)-7-(3-[[(tert-부톡시)카보닐]아미노]-4-(플루오로메틸)피롤리딘-1-일)-3,4-디하이드로-2H-1-벤조피란-3-일]카바메이트
톨루엔(3 mL) 중 tert-부틸 N-[4-(플루오로메틸)피롤리딘-3-일]카바메이트(133mg, 0.349mmol), 시스-벤질 N-[(3R)-7-브로모-3,4-디하이드로-2H-1-벤조피란-3-일]카바메이트(76.1mg, 0.331mmol), Cs2CO3(227mg, 0.698 mmol), RuPhos(32.6mg, 0.070 mmol) 및 3 세대 RuPhos 전구촉매(29.2mg, 0.035 mmol)의 혼합물을 100℃에서 6시간 동안 교반하였다. 25℃로 냉각한 후, 고체를 여과해내었고 여과액은 감압 하에 농축하였다. 잔류물은 실리카겔 크로마토그래피(1:2 에틸 아세테이트/석유 에테르로 용출)로 정제하여 시스-벤질 N-[(3R)-7-(3-[[(tert-부톡시)카보닐]아미노]-4-(플루오로메틸)피롤리딘-1-일)-3,4-디하이드로-2H-1-벤조피란-3-일]카바메이트를 회백색 고체로서 제공하였다(120mg, 65%). LCMS(ES, m/z): 500[M+H]+.
단계 10 . 시스-tert-부틸　N-[1-[(3R)-3-아미노-3,4-디하이드로-2H-1-벤조피란-7-일]-4-(플루오로메틸)피롤리딘-3-일]카바메이트
에틸 아세테이트(15mL) 중 시스-벤질　N-[(3R)-7-(3-[[(tert-부톡시)카보닐]아미노]-4-(플루오로메틸)피롤리딘-1-일)-3,4-디하이드로-2H-1-벤조피란-3-일]카바메이트(155mg,　0.295　mmol) 및 탄소 상의 팔라듐(160mg, 10%)의 혼합물을 수소 대기(벌룬) 하에 25℃에서 2시간 동안 교반하였다. 고체는 여과해냈다. 여과액은 진공 하에 농축하여 시스-tert-부틸 N-[1-[(3R)-3-아미노-3,4-디하이드로-2H-1-벤조피란-7-일]-4-(플루오로메틸)피롤리딘-3-일]카바메이트를 회백색 고체로서 제공하였다(100mg, 조생성물).　 LCMS(ES, m/z): 366[M+H]+.
단계 11 . 시스-tert-부틸　N-[1-[(3R)-3-[3-아미노-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-아미도]-3,4-디하이드로-2H-1-벤조피란-7-일]-4-(플루오로메틸)피롤리딘-3-일]카바메이트
HBTU(156mg, 0.410 mmol)를 DMA(3mL) 중 시스-tert-부틸 N-[1-[(3R)-3-아미노-3,4-디하이드로-2H-1-벤조피란-7-일]-4-(플루오로메틸)피롤리딘-3-일]카바메이트(100mg, 0.274 mmol), 3-아미노-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복실산(51.3mg, 0.246 mmol) 및 TEA(0.114ml, 0.821 mmol)의 용액에 첨가하였다. 결과적으로 수득되는 용액을 25℃에서 1시간 동안 교반하였다. 혼합물은 역상 크로마토그래피[컬럼: C18 실리카겔; 이동상, A: 물(10 mmol/L NH4HCO3 함유) 및 B: ACN(0%에서부터 30분 후 60%까지); 검출기: UV 220nm]로 정제하였다. 수집한 분획을 진공 하에 농축하여 시스-tert-부틸 N-[1-[(3R)-3-[3-아미노-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-아미도]-3,4-디하이드로-2H-1-벤조피란-7-일]-4-(플루오로메틸)피롤리딘-3-일]카바메이트를 황색 고체로서 제공하였다(95.0 mg, 59%). LCMS(ES, m/z): 556[M+H]+.
단계 12. tert-부틸　N-[(3S,4S)-1-[(3R)-3-[3-아미노-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-아미도]-3,4-디하이드로-2H-1-벤조피란-7-일]-4-(플루오로메틸)피롤리딘-3-일]카바메이트
시스-tert-부틸　N-[1-[(3R)-3-[3-아미노-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-아미도]-3,4-디하이드로-2H-1-벤조피란-7-일]-4-(플루오로메틸)피롤리딘-3-일]카바메이트(95.0mg, 0.171 mmol)를 키랄 분취용 HPLC[컬럼: CHIRALPAK IG, 2 x 250 mm, 5 um; 이동상, A: MTBE(0.1% IPA 함유) 및 B: IPA(16분 후까지 30% 유지); 유속:　20 mL/min; 검출기: UV 220/254 nm]로 분리하였다.　1차 용출 이성질체(RT1=11.150 분)를 수집하고 진공 하에 농축하여 황색 고체를 제공하였고, 이의 입체화학은 tert-부틸　N-[(3R,4R)-1-[(3R)-3-[3-아미노-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-아미도]-3,4-디하이드로-2H-1-벤조피란-7-일]-4-(플루오로메틸)피롤리딘-3-일]카바메이트로서 임의 지정되었다. 2차 용출 이성질체(RT2=14.269 분)를 수집하여 진공 하에 농축하여 황색 고체를 제공하였고, 이의 입체화학은 tert-부틸　N-[(3S,4S)-1-[(3R)-3-[3-아미노-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-아미도]-3,4-디하이드로-2H-1-벤조피란-7-일]-4-(플루오로메틸)피롤리딘-3-일]카바메이트로서 임의 지정되었다. LCMS(ES, m/z): 556[M+H]+.
단계 13. 3-아미노-N-[(3R)-7-[(3S,4S)-3-아미노-4-(플루오로메틸)피롤리딘-1-일]-3,4-디하이드로-2H-1-벤조피란-3-일]-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드　　
DCM(3.00mL) 중 tert-부틸　N-[(3S,4S)-1-[(3R)-3-[3-아미노-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-아미도]-3,4-디하이드로-2H-1-벤조피란-7-일]-4-(플루오로메틸)피롤리딘-3-일]카바메이트(30.0mg,　0.051　mmol)　및 TFA(1.00mL)의 용액을 25℃에서 30분 동안 교반하였다. 결과적으로 수득되는 혼합물을 진공 하에 농축하였다. NH3 용액(2.00mL, MeOH 중 7M)을 잔류물에 첨가하였다. 결과적으로 수득되는 용액을 25℃에서 0.5시간 동안 교반하였고, 진공 하에 농축하였다. 잔류물은 분취용 HPLC[컬럼: XBridge Shield RP18 OBD 컬럼 19 x 150 mm, 5 um; 이동상 A: 물(10 mmol/L NH4HCO3 함유) 및 B: ACN(30%에서부터 7분 후 50%까지); 유속: 60 mL/min; 검출기: 254 nm]로 정제하였다. 수집한 분획을 동결건조하여 3-아미노-N-[(3R)-7-[(3S,4S)-3-아미노-4-(플루오로메틸)피롤리딘-1-일]-3,4-디하이드로-2H-1-벤조피란-3-일]-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드를 회백색 고체로서 제공하였다(12.5mg,　51%). 1H-NMR(DMSO-d 6 , 400 MHz)δ(ppm): 8.32(d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.50(br s, 1H), 7.31(d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.22(br s, 2H), 6.87(d, J = 8.4 Hz, 1H), 6.09(d, J = 6.8 Hz, 1H), 5.90(s, 1H), 4.81-4.46(m, 2H), 4.29-4.23(m, 1H), 4.15-4.12(m, 1H), 3.81-3.76(m,1H), 3.61-3.60(m, 1H), 3.42-3.34(m, 1H), 3.28-3.26(m, 1H), 3.16-3.12(m, 1H), 2.97-2.95(m, 1H), 2.89-2.83(m, 2H), 2.59-2.57(m, 4H), 1.86(br s, 2H). LCMS(ES, m/z): 456[M+H]+.
실시예 439. 3-아미노-N-[(3R)-7-[(5R,9R)-9-아미노-2-옥사-7-아자스피로[4.4]노난-7-일]-3,4-디하이드로-2H-1-벤조피란-3-일]-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드
Figure pct00232
단계 1. 에틸　2-[(3Z)-옥솔란-3-일리덴]아세테이트　
THF(300mL) 중 에틸 2-(디에톡시포스포릴)아세테이트(26.0g, 110 mmol)의 교반 용액에 NaH(2.60g, 60%)를 0℃에서 분할 첨가하였다. 반응은 0℃에서 1.5시간 동안 교반하였다. 그 다음, THF 중 옥솔란-3-온(5.00g, 55.2 mmol)의 용액을 첨가하였다. 반응물을 25℃에서 12시간 동안 교반하였다. 반응은 물(300mL)로 ??치시켰다. 결과적으로 수득되는 혼합물을 EtOAc(3 x 300mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 염수(1 x 200mL)로 세척하고, 무수 Na2SO4 상에서 건조하였다. 여과 후, 여과액은 감압 하에 농축하였다. 잔류물은 실리카겔 크로마토그래피(1:3 에틸 아세테이트/석유 에테르로 용출)로 정제하여 에틸 2-[(3Z)-옥솔란-3-일리덴]아세테이트를 회백색 오일로서 제공하였다(6.00g, 66%).　LCMS(ES, m/z): 157[M+H]+.
단계 2. 에틸　7-벤질-2-옥사-7-아자스피로[4.4]노난-9-카복실레이트
TFA(104mg, 0.912 mmol)를 톨루엔(10mL) 중 에틸 2-[(3Z)-옥솔란-3-일리덴]아세테이트(5.00g, 30.4 mmol) 및 벤질(메톡시메틸)[(트리메틸실릴)메틸]아민 (11.1g, 45.6 mmol)의 용액에 첨가하였다. 반응물을 60℃에서 1.5시간 동안 교반하였다. 결과적으로 수득되는 혼합물을 25℃로 냉각한 뒤, NaHCO3(1 x 20mL)에 부었다. 결과적으로 수득되는 혼합물을 EtOAc(3 x 50mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 염수(1 x 50mL)로 세척하고, 무수 Na2SO4 상에서 건조하였다. 여과 후, 여과액은 감압 하에 농축하였다. 잔류물은 실리카겔 크로마토그래피 컬럼(1:3 THF/석유 에테르로 용출)에 의해 정제하여 에틸 7-벤질-2-옥사-7-아자스피로[4.4]노난-9-카복실레이트를 회백색 오일로서 제공하였다(3.00g, 30%). LCMS(ES, m/z): 290[M+H]+.
단계 3. 에틸　2-옥사-7-아자스피로[4.4]노난-9-카복실레이트
MeOH(30mL) 중 에틸 7-벤질-2-옥사-7-아자스피로[4.4]노난-9-카복실레이트(3.00g, 9.85 mmol) 및 Pd(OH)2/C(2.38g, 20%)의 혼합물을 수소 대기(벌룬) 하에 25℃에서 3.5시간 동안 교반하였다. 결과적으로 수득되는 혼합물을 여과하고, 여과 케익을 MeOH(1 x 30 mL)로 세척하였다. 여과액은 감압 하에 농축하여 에틸 2-옥사-7-아자스피로[4.4]노난-9-카복실레이트를 황색 오일로서 제공하였다(1.90g, 92%).　LCMS(ES, m/z): 200[M+H]+.
단계 4 . 7-벤질　9-에틸　2-옥사-7-아자스피로[4.4]노난-7,9-디카복실레이트
CbzCl(4.00ml, 28.0 mmol)을 EA(20.0 mL) 및 H2O(15.0 mL) 중의 에틸 2-옥사-7-아자스피로[4.4]노난-9-카복실레이트(3.91g, 18.6 mmol) 및 K2CO3(5.21g, 37.3 mmol)의 교반 용액에 0℃에서 첨가하였다. 반응물을 25℃에서 3시간 동안 교반하였다. 결과적으로 수득되는 혼합물을 EtOAc(3 x 40mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 염수(1 x 40mL)로 세척하고, 무수 Na2SO4 상에서 건조하였다. 여과 후, 여과액은 감압 하에 농축하였다 잔류물은 역상 크로마토그래피[컬럼: C18 실리카겔; 이동상, A: 물(10mmol/L NH4HCO3 함유) 및 B: ACN(0%에서부터 30분 후 60%까지); 검출기: UV 220 nm 및 254 nm]로 정제하였다. 수집한 분획을 농축하여 7-벤질 9-에틸 2-옥사-7-아자스피로[4.4]노난-7,9-디카복실레이트를 황갈색 오일로서 제공하였다(3.60g, 55%). LCMS(ES, m/z):334[M+H]+.
단계 5. 7-[(벤질옥시)카보닐]-2-옥사-7-아자스피로[4.4]노난-9-카복실산
LiOH(1.28g, 0.053 mmol)을 THF(10mL) 및 H2O(10mL) 중 7-벤질 9-에틸 2-옥사-7-아자스피로[4.4]노난-7,9-디카복실레이트(3.70g, 10.5 mmol)의 용액에 첨가하였다. 반응물은 25℃에서 2시간 동안 교반하였다. THF는 진공 하에 증발시켰다. 결과적으로 수득되는 혼합물을 HCl(1 mol/L)으로 pH 4로 산성화하였다. 결과적으로 수득되는 혼합물을 DCM(3 x 50mL)으로 추출하였다. 합한 유기 층을 염수(1 x 40mL)로 세척하고, 무수 Na2SO4 상에서 건조하였다. 여과 후, 여과액은 감압 하에 농축하여 7-[(벤질옥시)카보닐]-2-옥사-7-아자스피로[4.4]노난-9-카복실산을 황색 오일로서 제공하였다(2.80g, 83%).　LCMS(ES, m/z): 306[M+H]+.
단계 6 . 벤질　9-[[(tert-부톡시)카보닐]아미노]-2-옥사-7-아자스피로[4.4]노난-7-카복실레이트
t-BuOH(10mL) 중 7-[(벤질옥시)카보닐]-2-옥사-7-아자스피로[4.4]노난-9-카복실산(3.00g, 9.33 mmol)의 교반 용액에 TEA(2.60ml, 18.7 mmol) 및 DPPA(3.08g, 11.2 mmol)를 첨가하였다. 반응물을 90℃에서 2시간 동안 교반하였다. 혼합물을 냉각하고, 진공 하에 농축하였다. 잔류물은 역상 크로마토그래피[컬럼: C18 실리카겔; 이동상, A: 물(10 mmol/L NH4HCO3 함유) 및 B: ACN(0%에서부터 30분 후 60%까지); 검출기: UV 220 nm]로 정제하였다. 수집한 분획을 농축하여 벤질 9-[[(tert-부톡시)카보닐]아미노]-2-옥사-7-아자스피로[4.4]노난-7-카복실레이트를 회백색 고체로서 제공하였다(1.40g, 38%). LCMS(ES, m/z): 377[M+H]+.
단계 7. tert-부틸　N-[2-옥사-7-아자스피로[4.4]노난-9-일]카바메이트
에틸 아세테이트(50mL) 중 벤질 9-[[(tert-부톡시)카보닐]아미노]-2-옥사-7-아자스피로[4.4]노난-7-카복실레이트(1.40g, 3.53 mmol) 및 탄소 상의 팔라듐(1.40g, 10%)의 혼합물을 수소 대기(벌룬) 하에 25℃에서 2시간 동안 교반하였다. 고체는 여과해냈다. 여과액은 진공 하에 농축하여 tert-부틸 N-[2-옥사-7-아자스피로[4.4]노난-9-일]카바메이트를 회백색 오일로서 제공하였다(755 mg, 조생성물). LCMS(ES, m/z): 243[M+H]+.
단계 8. 벤질 N-[(3R)-7-(9-[[(tert-부톡시)카보닐]아미노]-2-옥사-7-아자스피로[4.4]노난-7-일)-3,4-디하이드로-2H-1-벤조피란-3-일]카바메이트
톨루엔(8mL) 중 벤질 N-[(3R)-7-브로모-3,4-디하이드로-2H-1-벤조피란-3-일]카바메이트(400mg, 1.10 mmol), tert-부틸 N-[2-옥사-7-아자스피로[4.4]노난-9-일]카바메이트(300mg, 1.24 mmol), 3세대 RuPhos 전구촉매(92.4mg, 0.110 mmol), RuPhos(51.5mg, 0.110 mmol) 및 Cs2CO3(1.08g, 3.31 mmol)의 혼합물을 95℃에서 3시간 동안 교반하였다. 혼합물을 냉각하였다. 고체는 여과해내고, 여과액은 진공 하에 농축하였다. 잔류물은 실리카겔 크로마토그래피(1:3 에틸 아세테이트/석유 에테르로 용출)로 정제하여 벤질 N-[(3R)-7-(9-[[(tert-부톡시)카보닐]아미노]-2-옥사-7-아자스피로[4.4]노난-7-일)-3,4-디하이드로-2H-1-벤조피란-3-일]카바메이트를 회백색 고체로서 제공하였다(350mg, 61%). LCMS(ES, m/z): 524[M+H]+.
단계 9. tert-부틸 N-[1-[(6S)-6-아미노-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-2-일]-4-(플루오로메틸)-4-메틸피롤리딘-3-일]카바메이트
EA(8mL) 중 벤질 N-[(6S)-2-(4-[[(tert-부톡시)카보닐]아미노]-3-(플루오로메틸)-3-메틸피롤리딘-1-일)-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-6-일]카바메이트(350mg, 0.683 mmol) 및 탄소 상의 팔라듐(190mg, 10%)의 혼합물을 수소 대기(벌룬) 하에 28℃에서 16시간 동안 교반하였다. 고체는 여과해냈다. 여과액은 진공 하에 농축하여 tert-부틸 N-[1-[(6S)-6-아미노-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-2-일]-4-(플루오로메틸)-4-메틸피롤리딘-3-일]카바메이트를 황색 오일로서 제공하였다(250mg, 93%). LCMS(ES, m/z): 390[M+H]+.
단계 10. tert-부틸 N-[1-[(6S)-6-[3-아미노-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-아미도]-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-2-일]-4-(플루오로메틸)-4-메틸피롤리딘-3-일]카바메이트
HBTU(300mg, 0.791 mmol)를 DMA(5mL) 중 tert-부틸 N-[1-[(6S)-6-아미노-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-2-일]-4-(플루오로메틸)-4-메틸피롤리딘-3-일]카바메이트(250mg, 0.661 mmol), 3-아미노-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복실산(151mg, 0.725 mmol) 및 TEA(0.280 mL, 2.72 mmol)의 용액에 첨가하였다. 결과적으로 수득되는 용액을 28℃에서 1시간 동안 교반하였다. 혼합물을 역상 크로마토그래피[컬럼: C18 실리카겔; 이동상, A: 물(0.05% TFA 함유) 및 B: ACN(10%에서부터 25분 후 70%까지); 검출기: UV 220/254 nm]로 정제하여 tert-부틸 N-[1-[(6S)-6-[3-아미노-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-아미도]-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-2-일]-4-(플루오로메틸)-4-메틸피롤리딘-3-일]카바메이트를 황색 고체로서 제공하였다(260mg, 69%). LCMS(ES, m/z): 580 [M+H]+.
단계 11. tert-부틸 N-[(5R,9R)-7-[(3R)-3-[3-아미노-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-아미도]-3,4-디하이드로-2H-1-벤조피란-7-일]-2-옥사-7-아자스피로[4.4]노난-9-일]카바메이트
tert-부틸 N-[7-[(3R)-3-[3-아미노-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-아미도]-3,4-디하이드로-2H-1-벤조피란-7-일]-2-옥사-7-아자스피로[4.4]노난-9-일]카바메이트(260mg, 0.431 mmol)를 키랄 분취용 HPLC[컬럼: CHIRALPAK IF, 2 x 25 cm, 5 um; 이동상, A: Hex:DCM(3:1)(10 mM NH3-MEOH 함유)--HPLC 및 B: EtOH--HPLC(20분 후 50% 유지); 유속: 15 mL/min; 검출기: UV 254/220 nm]로 분리하였다. 3차 용출 이성질체(RT3=11.68 분)를 수집하고 진공 하에 농축하여, 입체화학이 tert-부틸 N-[(5S,9S)-7-[(3R)-3-[3-아미노-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-아미도]-3,4-디하이드로-2H-1-벤조피란-7-일]-2-옥사-7-아자스피로[4.4]노난-9-일]카바메이트로서 임의 지정되는 황색 고체를 제공하였다. 4차 용출 이성질체(RT4=13.805 분)를 수집하여 진공 하에 농축하여, 입체화학이 tert-부틸 N-[(5R,9S)-7-[(3R)-3-[3-아미노-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-아미도]-3,4-디하이드로-2H-1-벤조피란-7-일]-2-옥사-7-아자스피로[4.4]노난-9-일]카바메이트로서 임의 지정되는 황색 고체를 제공하였다. 그리고 혼합물 A(1차 용출 이성질체 및 2차 용출 이성질체의 혼합물)는 키랄 분취용 HPLC[컬럼: CHIRALPAK IC, 2 x 25cm, 5 um; 이동상, A: Hex:DCM(3:1)(0.2% IPA 함유)--HPLC 및 B: MeOH:DCM(1:1)--HPLC(20분 후까지 60% 유지); 유속: 20 mL/min; 검출기: UV 254/220nm]로 분리하였다. 1차 용출 이성질체(RT1=8.3분)를 수집하여 진공 하에 농축하여, 입체화학이 tert-부틸 N-[(5R,9R)-7-[(3R)-3-[3-아미노-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-아미도]-3,4-디하이드로-2H-1-벤조피란-7-일]-2-옥사-7-아자스피로[4.4]노난-9-일]카바메이트로서 임의 지정되는 황색 고체를 제공하였다. 2차 용출 이성질체(RT2=15 분)를 수집하고 진공 하에 농축하여, 입체화학이 tert-부틸 N-[(5S,9R)-7-[(3R)-3-[3-아미노-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-아미도]-3,4-디하이드로-2H-1-벤조피란-7-일]-2-옥사-7-아자스피로[4.4]노난-9-일]카바메이트로서 임의 지정되는 황색 고체를 제공하였다. LCMS(ES, m/z): 580[M+H]+.
단계 12. 3-아미노-N-[(3R)-7-[(5R,9R)-9-아미노-2-옥사-7-아자스피로[4.4]노난-7-일]-3,4-디하이드로-2H-1-벤조피란-3-일]-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드
DCM(3mL) 중 tert-부틸 N-[(5R,9R)-7-[(3R)-3-[3-아미노-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-아미도]-3,4-디하이드로-2H-1-벤조피란-7-일]-2-옥사-7-아자스피로[4.4]노난-9-일]카바메이트(34.0mg, 0.059 mmol) 및 TFA(1mL)의 용액을 25℃에서 0.5시간 동안 교반하였다. 결과적으로 수득되는 혼합물을 진공 하에 농축하였다. 잔류물에 NH3(MeOH 중 7M, 2mL)를 첨가하였다. 결과적으로 수득되는 용액을 0.5시간동안 교반한 다음 진공 하에 농축하였다. 잔류물은 분취용 HPLC[컬럼: X Select CSH Prep C18 OBD Column 19 x 150 mm 5um; 이동상 A: 물(10mmol/L NH4HCO3) 함유) 및 B: ACN(20%에서부터 8분 후 45%까지), 유속: 25 mL/min; 검출기 UV 254nm]로 정제하였다. 수집한 분획을 동결건조하여 3-아미노-N-[(3R)-7-[(5R,9R)-9-아미노-2-옥사-7-아자스피로[4.4]노난-7-일]-3,4-디하이드로-2H-1-벤조피란-3-일]-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드를 백색 고체로서 제공하였다(14.0mg, 50%). 1H-NMR(DMSO-d 6 , 400 MHz)δ(ppm): 8.32(d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.48(br s, 1H), 7.31(d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.21(br s, 2H), 6.86(d, J = 8.4 Hz, 1H), 6.08(d, J = 6.8 Hz, 1H), 5.88(s, 1H), 4.27-4.24(m, 1H), 4.15-4.12(m, 1H), 3.81-3.77(m,3H), 3.55 (d, J = 8.4Hz, 1H), 3.48(d, J = 8.4Hz, 1H), 3.39-3.36(m, 1H), 3.32-3.23(m, 2H), 3.14-3.11(m, 1H), 2.92-2.90(m, 1H), 2.89-2.81(m, 2H), 2.58(s, 3H), 2.10-2.06(m, 1H), 1.72(br s, 2H), 1.61-1.57(m, 1H). LCMS(ES, m/z): 480[M+H]+.
실시예 525. (R)-3-아미노-6-메틸-N-(7-(피페라진-1-일)-3,4-디하이드로-2H-피라노[2,3-b]피리딘-3-일)티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드
Figure pct00233
단계 1. tert-부틸 (R)-4-(3-(((벤질옥시)카보닐)아미노)-3,4-디하이드로-2H-피라노[2,3-b]피리딘-7-일)피페라진-1-카복실레이트
톨루엔(5mL) 중 벤질 (R)-(7-클로로-3,4-디하이드로-2H-피라노[2,3-b]피리딘-3-일)카바메이트(중간체 43)(200mg, 0.56 mmol), tert-부틸 피페라진-1-카복실레이트(140mg, 0.75 mmol), RuPhos Pd G3(52mg, 0.06 mmol), RuPhos(59mg, 0.13 mmol) 및 Cs2CO3(618mg, 1.90 mmol)의 용액을 100℃에서 3시간 동안 교반하였다. 25℃로 냉각한 후, 반응은 그 다음 물 10mL을 첨가하여 ??치시켰다. 결과적으로 수득되는 혼합물을 3x10mL의 에틸아세테이트로 추출하고, 유기 층을 합하여 무수 황산나트륨 상에서 건조하고, 여과하고, 진공 하에 농축하였다. 잔류물을 실리카겔 크로마토그래피(1:3 에틸 아세테이트/석유 에테르로 용출)로 정제하여 tert-부틸 (R)-4-(3-(((벤질옥시)카보닐)아미노)-3,4-디하이드로-2H-피라노[2,3-b]피리딘-7-일)피페라진-1-카복실레이트를 회백색 고체로서 제공하였다. MS:(ESI, m/z): 469[M+H]+.
단계 2. tert-부틸 (R)-4-(3-아미노-3,4-디하이드로-2H-피라노[2,3-b]피리딘-7-일)피페라진-1-카복실레이트
에틸 아세테이트(20mL) 중 tert-부틸 (R)-4-(3-(((벤질옥시)카보닐)아미노)-3,4-디하이드로-2H-피라노[2,3-b]피리딘-7-일)피페라진-1-카복실레이트(270mg, 0.52 mmol) 및 탄소 상의 팔라듐(30mg, 10%)의 현탁액을 25℃에서 4시간 동안 교반하였다. 고체는 여과해냈다. 여과액은 진공 하에 농축하여 tert-부틸 (R)-4-(3-아미노-3,4-디하이드로-2H-피라노[2,3-b]피리딘-7-일)피페라진-1-카복실레이트를 갈색 오일로서 제공하였다. MS:(ESI, m/z): 335[M+H]+.
단계 3. tert-부틸 (R)-4-(3-(3-아미노-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미도)-3,4-디하이드로-2H-피라노[2,3-b]피리딘-7-일)피페라진-1-카복실레이트
DMA(3mL) 중 tert-부틸 (R)-4-(3-아미노-3,4-디하이드로-2H-피라노[2,3-b]피리딘-7-일)피페라진-1-카복실레이트(50mg, 0.13 mmol), 3-아미노-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복실산(34mg, 0.16 mmol), HBTU(62 mg, 0.16 mmol) 및 Et3N(45 mg, 0.44 mmol)의 용액을 25℃에서 30분 동안 교반하였다. 반응은 그 다음 물 10mL을 첨가하여 ??치시켰다. 결과적으로 수득되는 혼합물을 3 x 10mL의 에틸 아세테이트로 추출하였다. 유기 층을 합하여, 무수 황산나트륨 상에서 건조하고, 여과하고, 진공 하에 농축하였다. 잔류물은 역상 크로마토그래피[컬럼: C18 실리카겔; 이동상 A: 물(0.1% 포름산), B: ACN; 유속: 50 mL/min; 구배: 0%에서부터 40분 내에 100% B까지 증가]로 정제하였다. 수집한 분획을 진공 하에 농축하였다. 수집한 분획을 진공 하에 농축하여 tert-부틸 (R)-4-(3-(3-아미노-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미도)-3,4-디하이드로-2H-피라노[2,3-b]피리딘-7-일)피페라진-1-카복실레이트를 황색 고체로서 제공하였다. MS:(ESI, m/z): 525[M+H]+.
단계 4. (R)-3-아미노-6-메틸-N-(7-(피페라진-1-일)-3,4-디하이드로-2H-피라노[2,3-b]피리딘-3-일)티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드
DCM(3mL) 중 tert-부틸 (R)-4-(3-(3-아미노-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미도)-3,4-디하이드로-2H-피라노[2,3-b]피리딘-7-일)피페라진-1-카복실레이트(30mg, 0.05 mmol) 및 TFA(1mL)의 용액을 25℃에서 30분 동안 교반하였다. 결과적으로 수득되는 혼합물을 진공 하에 농축하였다. 잔류물은 분취용 HPLC[컬럼: XBridge Shield RP18 OBD, 19 x 250 mm, 10 μm; 이동상 A: 물(10 mM NH4HCO3), B: ACN; 구배: 20% B에서부터 8분 후 38% B까지]로 정제하였다. 수집한 분획을 동결건조하여 (R)-3-아미노-6-메틸-N-(7-(피페라진-1-일)-3,4-디하이드로-2H-피라노[2,3-b]피리딘-3-일)티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드를 회백색 고체로서 제공하였다. 1H NMR (DMSO-d 6 , 400 MHz)δ(ppm): 8.33(d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.55(br s, 1H), 7.32-7.27(m, 2H), 7.22(br s, 2H), 6.37(d, J = 8.4 Hz, 1H), 4.33-4.20(m, 2H), 3.99-3.94(m, 1H), 3.49-3.31(m, 5H), 2.89-2.74(m, 6H), 2.59(s, 3H). MS:(ESI, m/z): 425[M+H]+.
실시예 526. (R)-3-아미노-N-(6-플루오로-7-(피페라진-1-일)-3,4-디하이드로-2H-피라노[2,3-b]피리딘-3-일)-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드
Figure pct00234
단계 1. tert-부틸 (R)-4-(3-(((벤질옥시)카보닐)아미노)-6-플루오로-3,4-디하이드로-2H-피라노[2,3-b]피리딘-7-일)피페라진-1-카복실레이트
DCM(25mL) 및 MeOH(25mL) 중 tert-부틸 (R)-4-(3-(((벤질옥시)카보닐)아미노)-3,4-디하이드로-2H-피라노[2,3-b]피리딘-7-일)피페라진-1-카복실레이트(580 mg, 1.24 mmol)의 용액에 Selectfluor(441mg, 1.24 mmol)를 -20℃에서 첨가하였다. 결과적으로 수득되는 혼합물을 25℃에서 2시간 동안 교반하였다. 용매를 진공 하에 제거하였다. 잔류물은 물(30mL)로 희석하였다. 결과적으로 수득되는 혼합물을 DCM(3 x 30mL)으로 추출하였다. 합한 유기 층을 무수 Na2SO4 상에서 건조하고, 여과하고, 진공 하에 농축하였다. 잔류물은 실리카겔 크로마토그래피(1:10-1:3 에틸 아세테이트/석유 에테르로 용출)로 정제하여 tert-부틸 (R)-4-(3-(((벤질옥시)카보닐)아미노)-6-플루오로-3,4-디하이드로-2H-피라노[2,3-b]피리딘-7-일)피페라진-1-카복실레이트를 회백색 고체로서 제공하였다. MS:(ESI, m/z): 487[M+H]+.
단계 2. tert-부틸 (R)-4-(3-아미노-6-플루오로-3,4-디하이드로-2H-피라노[2,3-b]피리딘-7-일)피페라진-1-카복실레이트
에틸 아세테이트(5mL) 중 tert-부틸 (R)-4-(3-(((벤질옥시)카보닐)아미노)-6-플루오로-3,4-디하이드로-2H-피라노[2,3-b]피리딘-7-일)피페라진-1-카복실레이트 (150mg, 0.31 mmol) 및 탄소 상의 팔라듐(20mg, 10%)의 현탁액을 수소 대기 하에 25℃에서 2시간 동안 교반하였다. 고체는 여과해냈다. 여과액은 진공 하에 농축하여 tert-부틸 (R)-4-(3-아미노-6-플루오로-3,4-디하이드로-2H-피라노[2,3-b]피리딘-7-일)피페라진-1-카복실레이트를 황색 오일로서 제공하였다. MS:(ESI, m/z): 353[M+H]+.
단계 3. tert-부틸 (R)-4-(3-(3-아미노-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미도)-6-플루오로-3,4-디하이드로-2H-피라노[2,3-b]피리딘-7-일)피페라진-1-카복실레이트
DMA(4mL) 중 tert-부틸 (R)-4-(3-아미노-6-플루오로-3,4-디하이드로-2H-피라노[2,3-b]피리딘-7-일)피페라진-1-카복실레이트(90mg, 190 mmol), 3-아미노-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복실산(56.0mg, 270 mmol), HBTU(107mg, 0.28 mmol) 및 Et3N(77mg, 0.76 mmol)의 용액을 25℃에서 1시간 동안 교반하였다. 반응은 물(10mL)로 ??치시켰다. 결과적으로 수득되는 혼합물을 에틸 아세테이트(3 x 10mL)로 추출하였다. 유기 층을 합하여, 무수 황산나트륨 상에서 건조하고, 여과하고, 진공 하에 농축하였다. 잔류물은 역상 크로마토그래피[컬럼: C18 실리카겔; 이동상 A: 물 (0.1% TFA), B: ACN; 유속: 50 mL/min; 구배: 0% B에서부터 40분 내에 70% B까지]로 정제하였다. 수집한 분획을 진공 하에 농축하여 tert-부틸 (R)-4-(3-(3-아미노-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미도)-6-플루오로-3,4-디하이드로-2H-피라노[2,3-b]피리딘-7-일)피페라진-1-카복실레이트를 황색 고체로서 제공하였다. MS: (ESI, m/z): 543 [M+H]+.
단계 4. (R)-3-아미노-N-(6-플루오로-7-(피페라진-1-일)-3,4-디하이드로-2H-피라노[2,3-b]피리딘-3-일)-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드
DCM(3mL) 중 tert-부틸 (R)-4-(3-(3-아미노-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미도)-6-플루오로-3,4-디하이드로-2H-피라노[2,3-b]피리딘-7-일)피페라진-1-카복실레이트(100mg, 0.18 mmol) 및 TFA(1mL)의 용액을 25℃에서 30분 동안 교반하였다. 결과적으로 수득되는 혼합물을 진공 하에 농축하였다. 메탄올 중 NH3 용액(7M)(5mL)을 첨가하였다. 결과적으로 수득되는 혼합물을 25℃에서 30분 동안 교반하였다. 결과적으로 수득되는 혼합물을 진공 하에 농축하였다. 잔류물은 분취용 HPLC[컬럼: XBridge Prep OBD C18, 30 x 150 mm 5 μm; 이동상 A: 물(10mM NH4HCO3), B: ACN; 유속: 60 mL/min; 구배: 20% B에서부터 7분 후 45% B까지]로 정제하여 (R)-3-아미노-N-(6-플루오로-7-(피페라진-1-일)-3,4-디하이드로-2H-피라노[2,3-b]피리딘-3-일)-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드를 회백색 고체로서 제공하였다. 1H NMR(DMSO-d 6 , 300 MHz)δ(ppm): 8.32(d, J = 8.1 Hz, 1H), 7.59(br s, 1H), 7.36-7.30(m, 2H), 7.21(br s, 2H), 4.33-4.19(m, 2H), 4.01-3.95(m, 1H), 3.23-3.20(m, 4H), 2.89-2.73(m, 6H), 2.58(s, 3H). MS:(ESI, m/z): 443[M+H]+.
실시예 601. 6-아미노-N-[(3R)-7-[3,8-디아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-3-일]-5,8-디플루오로-3,4-디하이드로-2H-1-벤조피란-3-일]-2-메틸티에노[2,3-d][1,3]티아졸-5-카복사미드
Figure pct00235
단계 1: tert-부틸 3-[(3R)-3-[[(벤질옥시)카보닐]아미노]-5-플루오로-3,4-디하이드로-2H-1-벤조피란-7-일]-3,8-디아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-8-카복실레이트
톨루엔(10mL) 중 벤질 N-[(3R)-7-브로모-5-플루오로-3,4-디하이드로-2H-1-벤조피란-3-일]카바메이트(500mg, 1.32 mmol), tert-부틸 3,8-디아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-8-카복실레이트(364mg, 1.71 mmol), Cs2CO3(1.30g, 3.99 mmol), RuPhos(123mg, 0.260 mmol), 3세대 RuPhos 전구촉매(110mg, 0.130 mmol)의 혼합물을 100℃에서 3시간 동안 교반하였다(반응은 병렬로 3개의 배취로 준비하였다). 반응 혼합물을 냉각하였다. 모든 혼합물을 합하였다. 고체는 여과해냈다. 여과액은 진공 하에 농축하였다. 잔류물은 실리카겔 크로마토그래피(1:3 에틸 아세테이트/석유 에테르로 용출)를 통해 정제하여 tert-부틸 3-[(3R)-3-[[(벤질옥시)카보닐]아미노]-5-플루오로-3,4-디하이드로-2H-1-벤조피란-7-일]-3,8-디아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-8-카복실레이트를 연황색 고체로서 제공하였다(1.20g, 60%). LCMS(ES, m/z): 512[M+H]+.
단계 2. tert-부틸 3-[(3R)-3-[[(벤질옥시)카보닐]아미노]-5,6-디플루오로-3,4-디하이드로-2H-1-벤조피란-7-일]-3,8-디아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-8-카복실레이트 및 tert-부틸 3-[(3R)-3-[[(벤질옥시)카보닐]아미노]-5,8-디플루오로-3,4-디하이드로-2H-1-벤조피란-7-일]-3,8-디아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-8-카복실레이트의 혼합물
Selectfluor(727mg, 2.05 mmol)를 ACN(35mL), 메탄올(35mL) 및 디클로로메탄(35mL)의 혼합 용액 중 tert-부틸 3-[(3R)-3-[[(벤질옥시)카보닐]아미노]-5-플루오로-3,4-디하이드로-2H-1-벤조피란-7-일]-3,8-디아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-8-카복실레이트(700mg, 1.37 mmol)의 용액에 -20℃에서 첨가하였다. 결과적으로 수득되는 용액을 -20℃에서 1시간 동안 교반한 뒤, 천천히 28℃로 가온하고 28℃에서 10시간 동안 교반하였다. 반응은 그 다음 물(20mL)로 ??치시켰다. 유기 층은 증발시켰다. 수성 층을 디클로로메탄(3 x 30mL)으로 추출하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조하고, 여과하고, 진공 하에 농축하였다. 잔류물은 실리카겔 크로마토그래피(1:3 에틸 아세테이트/석유 에테르로 용출)로 정제하여 tert-부틸 3-[(3R)-3-[[(벤질옥시)카보닐]아미노]-5,6-디플루오로-3,4-디하이드로-2H-1-벤조피란-7-일]-3,8-디아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-8-카복실레이트와 tert-부틸 3-[(3R)-3-[[(벤질옥시)카보닐]아미노]-5,8-디플루오로-3,4-디하이드로-2H-1-벤조피란-7-일]-3,8-디아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-8-카복실레이트의 혼합물을 연황색 고체로서 제공하였다(270mg, 37%). LCMS(ES, m/z): 530[M+H]+.
단계 3. tert-부틸 3-[(3R)-3-아미노-5,6-디플루오로-3,4-디하이드로-2H-1-벤조피란-7-일]-3,8-디아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-8-카복실레이트 및 tert-부틸 3-[(3R)-3-아미노-5,8-디플루오로-3,4-디하이드로-2H-1-벤조피란-7-일]-3,8-디아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-8-카복실레이트의 혼합물
에틸 아세테이트(20mL) 중 탄소 상의 팔라듐(220mg, 10%), tert-부틸 3-[(3R)-3-[[(벤질옥시)카보닐]아미노]-5,6-디플루오로-3,4-디하이드로-2H-1-벤조피란-7-일]-3,8-디아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-8-카복실레이트 및 tert-부틸 3-[(3R)-3-[[(벤질옥시)카보닐]아미노]-5,8-디플루오로-3,4-디하이드로-2H-1-벤조피란-7-일]-3,8-디아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-8-카복실레이트(260mg, 0.490 mmol)의 혼합물을 28℃에서 1.5시간 동안 교반하였다. 고체는 여과해냈다. 여과액은 진공 하에 농축하여 tert-부틸 3-[(3R)-3-아미노-5,6-디플루오로-3,4-디하이드로-2H-1-벤조피란-7-일]-3,8-디아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-8-카복실레이트 및 tert-부틸 3-[(3R)-3-아미노-5,8-디플루오로-3,4-디하이드로-2H-1-벤조피란-7-일]-3,8-디아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-8-카복실레이트의 혼합물을 황색 고체로서 제공하였다(160mg, 82%). LCMS(ES, m/z): 396[M+H]+.
단계 4. tert-부틸 3-[(3R)-3-[6-아미노-2-메틸티에노[2,3-d][1,3]티아졸-5-아미도]-5,8-디플루오로-3,4-디하이드로-2H-1-벤조피란-7-일]-3,8-디아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-8-카복실레이트 및 tert-부틸 3-[(3R)-3-[6-아미노-2-메틸티에노[2,3-d][1,3]티아졸-5-아미도]-5,6-디플루오로-3,4-디하이드로-2H-1-벤조피란-7-일]-3,8-디아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-8-카복실레이트의 혼합물
HBTU(84mg, 0.222 mmol)를 DMA(2.50mL) 중 6-아미노-2-메틸티에노[2,3-d][1,3]티아졸-5-카복실산(43.0mg, 0.202 mmol), TEA(0.084mL, 0.606 mmol) 및 tert-부틸 3-[(3R)-3-아미노-5,8-디플루오로-3,4-디하이드로-2H-1-벤조피란-7-일]-3,8-디아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-8-카복실레이트 및 tert-부틸 3-[(3R)-3-아미노-5,6-디플루오로-3,4-디하이드로-2H-1-벤조피란-7-일]-3,8-디아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-8-카복실레이트의 혼합물(80.0mg, 0.202 mmol)의 용액에 첨가하였다. 결과적으로 수득되는 혼합물을 29℃에서 1시간 동안 교반하였다. 잔류물은 역상 크로마토그래피[컬럼, C18 실리카겔; 이동상, A: 물(0.5% TFA 함유) 및 B: ACN(40분 내에 0%에서부터 100%까지); 검출기, UV 220nm]로 정제하였다. 수집 분획을 진공 하에 농축하여 tert-부틸 3-[(3R)-3-[6-아미노-2-메틸티에노[2,3-d][1,3]티아졸-5-아미도]-5,8-디플루오로-3,4-디하이드로-2H-1-벤조피란-7-일]-3,8-디아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-8-카복실레이트 및 tert-부틸 3-[(3R)-3-[6-아미노-2-메틸티에노[2,3-d][1,3]티아졸-5-아미도]-5,6-디플루오로-3,4-디하이드로-2H-1-벤조피란-7-일]-3,8-디아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-8-카복실레이트의 혼합물을 황색 고체로서 제공하였다(70.0mg, 55%). LCMS(ES, m/z): 592[M+H]+.
단계 5. 6-아미노-N-[(3R)-7-[3,8-디아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-3-일]-5,8-디플루오로-3,4-디하이드로-2H-1-벤조피란-3-일]-2-메틸티에노[2,3-d][1,3]티아졸-5-카복사미드
DCM(3mL) 중 TFA(1.00mL) 및 tert-부틸 3-[(3R)-3-[6-아미노-2-메틸티에노[2,3-d][1,3]티아졸-5-아미도]-5,8-디플루오로-3,4-디하이드로-2H-1-벤조피란-7-일]-3,8-디아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-8-카복실레이트와 tert-부틸 3-[(3R)-3-[6-아미노-2-메틸티에노[2,3-d][1,3]티아졸-5-아미도]-5,6-디플루오로-3,4-디하이드로-2H-1-벤조피란-7-일]-3,8-디아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-8-카복실레이트의 혼합물(60.0mg, 0.101 mmol)의 용액을 27℃에서 0.5시간 동안 교반하였다. 결과적으로 수득되는 혼합물을 진공 하에 농축하였다. 잔류물은 분취용 HPLC[컬럼: XBridge Shield RP18 OBD 컬럼, 5um, 19 x 150mm; 이동상, A: 물(0.05% NH4HCO3 함유) 및 B: ACN(20%에서부터 12분 후 55%까지); 유속: 20 mL/min; 검출기: 220 nm; 검출기, UV 220nm]로 정제하였다. 1차 용출 이성질체(Rt1=9.92분)를 수집하여 동결건조시켜 6-아미노-N[(3R)-7-[3,8-디아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-3-일]-5,8-디플루오로-3,4-디하이드로-2H-1-벤조피란-3-일]-2-메틸티에노[2,3-d][1,3]티아졸-5-카복사미드를 백색 고체로서 제공하였다(6.20mg, 13%). 1H-NMR(DMSO-d 6 , 300 MHz)δ (ppm): 7.57(d, J = 6.9 Hz, 1H), 7.17(br s, 2H), 6.36-6.30(m, 1H), 4.29-4.22(m, 2H), 3.95-3.88(m, 1H), 3.38-3.34(m, 2H), 3.07-3.04(m, 2H), 2.95--2.87(m, 1H), 2.80-2.72(m, 6H), 1.79-1.64(m, 4H). LCMS(ES, m/z): 492[M+H]+.
실시예 602. N-((2S)-6-(3,8-디아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-3-일)-5-시아노-8-플루오로-1,2,3,4-테트라하이드로나프탈렌-2-일)-3-아미노-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드
Figure pct00236
단계 1 . tert-부틸 3-(6-[[(벤질옥시)카보닐]아미노]-4-플루오로-5,6,7,8-테트라하이드로나프탈렌-2-일)-3,8-디아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-8-카복실레이트
톨루엔(10mL) 중 벤질 N-(6-브로모-8-플루오로-1,2,3,4-테트라하이드로나프탈렌-2-일)카바메이트(500mg, 1.32 mmol), tert-부틸 3,8-디아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-8-카복실레이트(337mg, 1.59 mmol), RuPhos(124mg, 0.270 mmol), 3세대 RuPhos 전구촉매(110mg, 0.130 mmol) 및 Cs2CO3(1.30g, 3.99 mmol)의 혼합물을 100℃에서 3시간 동안 교반하였다(3개의 배취를 병렬로). 실온(20℃)으로 냉각한 후, 3개 배취의 혼합 용액을 합하였다. 고체는 여과해냈다. 여과액은 진공 하에 농축하였다. 잔류물은 실리카겔 컬럼 크로마토그래피(1:3 에틸 아세테이트/석유 에테르로 용출)로 정제하여 tert-부틸 3-(6-[[(벤질옥시)카보닐]아미노]-4-플루오로-5,6,7,8-테트라하이드로나프탈렌-2-일)-3,8-디아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-8-카복실레이트를 연황색 고체로서 제공하였다(1.35g, 67%). LCMS (ES, m/z): 510[M+H]+.
단계 2 . tert-부틸 3-(6-[[(벤질옥시)카보닐]아미노]-1-브로모-4-플루오로-5,6,7,8-테트라하이드로나프탈렌-2-일)-3,8-디아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-8-카복실레이트
테트라하이드로푸란(50mL) 중 tert-부틸 3-(6-[[(벤질옥시)카보닐]아미노]-4-플루오로-5,6,7,8-테트라하이드로나프탈렌-2-일)-3,8-디아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-8-카복실레이트(1.10g, 2.16 mmol)의 용액에 NBS(460mg, 2.58 mmol)를 -10℃에서 첨가하였다. 결과적으로 수득되는 용액을 -10℃에서 무광 조건 하에 2시간 동안 교반하였다. 반응물을 그 다음 물(50mL)에 부었다. 용매는 진공 하에 제거하였다. 수성 층을 디클로로메탄(3 x 50mL)으로 추출하였다. 유기 층을 합하여 무수 황산나트륨 상에서 건조하고, 여과하고, 진공 하에 농축하였다. 잔류물은 실리카겔 컬럼 크로마토그래피(1/2 에틸 아세테이트/석유 에테르로 용출)로 정제하여 tert-부틸 3-(6-[[(벤질옥시)카보닐]아미노]-1-브로모-4-플루오로-5,6,7,8-테트라하이드로나프탈렌-2-일)-3,8-디아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-8-카복실레이트를 백색 고체로서 제공하였다(1.10g, 82%). LCMS(ES, m/z): 588, 590[M+H]+.
단계 3 . tert-부틸 3-(6-[[(벤질옥시)카보닐]아미노]-1-시아노-4-플루오로-5,6,7,8-테트라하이드로나프탈렌-2-일)-3,8-디아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-8-카복실레이트
NMP(20mL) 중 tert-부틸 3-(6-[[(벤질옥시)카보닐]아미노]-1-브로모-4-플루오로-5,6,7,8-테트라하이드로나프탈렌-2-일)-3,8-디아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-8-카복실레이트(1.00g, 1.70 mmol), Zn(CN)2(1.00g, 8.51 mmol) 및 Pd(PPh3)4(393mg, 0.340 mmol)의 혼합물을 120℃에서 2.5시간 동안 마이크로파를 조사하였다. 실온(20℃)으로 냉각한 후, 반응물은 그 다음 물(60mL)에 부었다. 결과적으로 수득되는 혼합물을 디클로로메탄(3 x 50mL)으로 추출하였다. 유기 층을 합하고, 물(50mL)로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조하고, 여과하고, 진공 하에 농축하였다. 잔류물은 실리카겔 컬럼 크로마토그래피(1/4 에틸 아세테이트/석유 에테르로 용출)로 정제하여 tert-부틸 3-(6-[[(벤질옥시)카보닐]아미노]-1-시아노-4-플루오로-5,6,7,8-테트라하이드로나프탈렌-2-일)-3,8-디아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-8-카복실레이트를 백색 고체로서 제공하였다(600mg, 63%). LCMS(ES, m/z): 535[M+H]+.
단계 4 . tert-부틸 3-(6-아미노-1-시아노-4-플루오로-5,6,7,8-테트라하이드로나프탈렌-2-일)-3,8-디아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-8-카복실레이트
에틸아세테이트(20mL) 중 tert-부틸 3-(6-[[(벤질옥시)카보닐]아미노]-1-시아노-4-플루오로-5,6,7,8-테트라하이드로나프탈렌-2-일)-3,8-디아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-8-카복실레이트(400mg, 0.750 mmol) 및 탄소 상의 팔라듐(400 mg, 10%)의 혼합물을 수소 대기(벌룬) 하에 20℃에서 1시간 동안 교반하였다. 고체는 여과해냈다. 여과액은 진공 하에 농축하여 tert-부틸 3-(6-아미노-1-시아노-4-플루오로-5,6,7,8-테트라하이드로나프탈렌-2-일)-3,8-디아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-8-카복실레이트를 연황색 오일로서 제공하였다(200mg, 조생성물). LCMS(ES, m/z): 401[M+H]+.
단계 5 . tert-부틸 3-(6-[3-아미노-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-아미도]-1-시아노-4-플루오로-5,6,7,8-테트라하이드로나프탈렌-2-일)-3,8-디아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-8-카복실레이트
DMA(2.5mL) 중 tert-부틸 3-(6-아미노-1-시아노-4-플루오로-5,6,7,8-테트라하이드로나프탈렌-2-일)-3,8-디아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-8-카복실레이트(75.0mg, 0.190 mmol) 및 3-아미노-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복실산(47.0mg, 0.220 mmol)의 용액에 TEA(0.092mL, 0.660 mmol) 및 HBTU(107mg, 0.280 mmol)를 첨가하였다. 결과적으로 수득되는 용액을 20℃에서 3시간 동안 교반하였다. 잔류물은 역상 크로마토그래피[컬럼: C18 실리카겔; 이동상, A: 물(10 mmol/L NH4HCO3 함유) 및 B: ACN(0%에서부터 30분 후 70%까지); 유속: 60 mL/min; 검출기: UV 254/220 nm]로 정제하여 tert-부틸 3-(6-[3-아미노-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-아미도]-1-시아노-4-플루오로-5,6,7,8-테트라하이드로나프탈렌-2-일)-3,8-디아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-8-카복실레이트를 황색 고체로서 제공하였다(80.0mg, 72%). LCMS(ES, m/z): 591[M+H]+.
단계 6 . tert-부틸 3-((S)-6-(3-아미노-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미도)-1-시아노-4-플루오로-5,6,7,8-테트라하이드로나프탈렌-2-일)-3,8-디아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-8-카복실레이트
tert-부틸 3-(6-[3-아미노-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-아미도]-1-시아노-4-플루오로-5,6,7,8-테트라하이드로나프탈렌-2-일)-3,8-디아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-8-카복실레이트(80.0mg, 0.135 mmol)를 키랄 HPLC(컬럼: CHIRALPAK IC, 2 x 25 cm, 5 um; 이동상, A: MTBE 및 B: EtOH(13분까지 15% 유지); 유속: 20 mL/min; 검출기: 220 nm)로 분리하였다. 1차 용출 이성질체(RT1 = 6.944 분)를 수집하고 진공 하에 농축하여, tert-부틸 3-((S)-6-(3-아미노-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미도)-1-시아노-4-플루오로-5,6,7,8-테트라하이드로나프탈렌-2-일)-3,8-디아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-8-카복실레이트로서 임의 지정된 입체화학을 갖는 백색 고체를 제공하였다. 2차 용출 이성질체(RT2 = 8.717 분)를 수집하고 진공 하에 농축하여, tert-부틸 3-((R)-6-(3-아미노-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미도)-1-시아노-4-플루오로-5,6,7,8-테트라하이드로나프탈렌-2-일)-3,8-디아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-8-카복실레이트로서 임의 지정된 입체화학을 갖는 백색 고체를 제공하였다. LCMS (ES, m/z): 591[M+H]+.
단계 7 . 3-아미노-N-[(2S)-5-시아노-6-[3,8-디아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-3-일]-8-플루오로-1,2,3,4-테트라하이드로나프탈렌-2-일]-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드
디클로로메탄(3mL) 중 tert-부틸 3-[(6S)-6-[3-아미노-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-아미도]-1-시아노-4-플루오로-5,6,7,8-테트라하이드로나프탈렌-2-일]-3,8-디아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-8-카복실레이트(35.0mg, 0.060 mmol) 및 TFA(1 mL)의 용액을 20℃에서 20분 동안 교반하였다. 결과적으로 수득되는 용액을 진공 하에 농축하였다. 잔류물을 MeOH 중 NH3(7M) 용액 2mL로 처리하였다. 결과적으로 수득되는 용액을 26℃에서 30분 동안 교반한 뒤, 진공 하에 농축하였다. 잔류물을 분취용 HPLC[컬럼: XBridge Shield RP18 OBD 컬럼, 5 um, 19 x 150 mm; 이동상, A: 물(10mmol/L NH4HCO3) 및 B: ACN(30%에서부터 7분 후 60%까지); 유속: 20 mL/min; 검출기: 220nm]를 통해 정제하였다. 수집한 분획을 동결건조하여 3-아미노-N-[(2S)-5-시아노-6-[3,8-디아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-3-일]-8-플루오로-1,2,3,4-테트라하이드로나프탈렌-2-일]-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드를 백색 고체로서 제공하였다(10.0 mg, 34%). 1H-NMR(DMSO-d 6 , 300 MHz)δ(ppm): 8.30(d, J = 8.1 Hz, 1H), 7.66(d, J = 7.5 Hz, 1H), 7.31(d, J = 8.1 Hz, 1H), 7.18(br s, 2H), 6.78(d, J = 12.0Hz, 1H), 4.15-4.14(m, 1H), 3.44-3.42(m, 2H), 3.33-3.25(m, 2H), 3.05-2.82(m, 5H), 2.61-2.55(m, 4H), 2.07-2.03(m, 1H), 1.94-1.75(m, 3H), 1.66-1.63(m, 2H). LCMS(ES, m/z): 491[M+H]+.
실시예 603. 3-아미노-N-[(2S)-6-[3,8-디아자바이사이클로[3.2.1] 옥탄-3-일]-5,8-디플루오로-1,2,3,4- 테트라하이드로나프탈렌-2-일]-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드
Figure pct00237
단계 5 . tert-부틸 3-(6-(((벤질옥시)카보닐)아미노)-4-플루오로-5,6,7,8-테트라하이드로나프탈렌-2-일)-3,8-디아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-8-카복실레이트
벤질 N-(6-브로모-8-플루오로-1,2,3,4-테트라하이드로나프탈렌-2-일)카바메이트(1.50g, 3.97 mmol), tert-부틸 3,8-디아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-8-카복실레이트(1.01g, 4.78 mmol), 톨루엔(30mL), Cs2CO3(3.90g, 12.0 mmol), RuPhos(342mg, 0.81 mmol), 3세대 RuPhos 전구촉매(330mg, 0.39 mmol)의 혼합물을 오일 조에서 100℃에서 3시간 동안 교반하였다. 25℃로 냉각한 후, 그 다음 물(50 mL)을 첨가하여 반응을 ??치시켰다. 결과적으로 수득되는 혼합물을 디클로로메탄(2 x 50mL)으로 추출하고, 유기 층을 합하여, 무수 황산나트륨 상에서 건조하고, 여과하고, 진공 하에 농축하였다. 잔류물은 실리카겔 크로마토그래피(1:3 에틸 아세테이트/석유 에테르로 용출)로 정제하여 tert-부틸 3-(6-[[(벤질옥시)카보닐]아미노]-4-플루오로-5,6,7,8-테트라하이드로나프탈렌-2-일)-3,8-디아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-8-카복실레이트를 연황색 고체로서 제공하였다(1.35g, 67%). LCMS: (ES, m/z): 510[M+H]+ .
단계 6. tert-부틸 3-(6-[[(벤질옥시)카보닐]아미노]-1,4-디플루오로-5,6,7,8-테트라하이드로나프탈렌-2-일)-3,8-디아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-8-카복실레이트
Selectfluor(521 mg, 1.47 mmol)를 메탄올(25mL)과 디클로로메탄(25mL)의 혼합물 중 tert-부틸 3-(6-[[(벤질옥시)카보닐]아미노]-4-플루오로-5,6,7,8-테트라하이드로나프탈렌-2-일)-3,8-디아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-8-카복실레이트(500mg, 0.980 mmol)의 교반 용액에 -20℃에서 적가하였다. 결과적으로 수득되는 용액을 25℃에서 10시간 동안 교반하였다. 결과적으로 수득되는 혼합물을 진공 하에 농축하였다. 잔류물은 실리카겔 크로마토그래피(3:17 에틸 아세테이트/석유 에테르로 용출)로 정제하여 tert-부틸 3-(6-[[(벤질옥시)카보닐]아미노]-1,4-디플루오로-5,6,7,8-테트라하이드로나프탈렌-2-일)-3,8-디아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-8-카복실레이트를 백색 고체로서 제공하였다(180mg, 35%). LCMS (ES, m/z): 528[M+H]+.
단계 7. tert-부틸 3-(6-아미노-1,4-디플루오로-5,6,7,8-테트라하이드로나프탈렌-2-일)- 3,8-디아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-8-카복실레이트
tert-부틸 3-(6-[[(벤질옥시)카보닐]아미노]-1,4-디플루오로-5,6,7,8-테트라하이드로나프탈렌-2-일)-3,8-디아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-8-카복실레이트(150mg, 0.28 mmol), 탄소 상의 팔라듐(110 mg, 10%) 및 에틸 아세테이트(8mL)의 혼합물을 수소 대기 하에 25℃에서 1시간 동안 교반하였다. 고체는 여과해냈다. 여과액은 진공 하에 농축하여 tert-부틸 3-(6-아미노-1,4-디플루오로-5,6,7,8-테트라하이드로나프탈렌-2-일)-3,8-디아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-8-카복실레이트를 황색 오일로서 제공하였다(100mg, 89%). LCMS(ES, m/z): 394[M+H]+.
단계 8. tert-부틸 3-(6-[3-아미노-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-아미도]-1,4-디플루오로-5,6,7,8-테트라하이드로나프탈렌-2-일)-3,8-디아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-8-카복실레이트
DMA(3mL) 중 tert-부틸 3-(6-아미노-1,4-디플루오로-5,6,7,8-테트라하이드로나프탈렌-2-일)-3,8-디아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-8-카복실레이트(100mg, 0.250 mmol), 3-아미노-6-메틸티에노[2,3-b] 피리딘-2-카복실산(56.0mg, 0.270 mmol), TEA(0.1mL, 0.76 mmol), HBTU(106mg, 0.28 mmol)의 용액을 25℃에서 2시간 동안 교반하였다. 혼합물을 역상 크로마토그래피[컬럼, C18 실리카겔; 이동상, A: H2O(0.5% TFA 함유) 및 B: ACN(40분 내에 0%에서부터 100%까지); 검출기, UV 220 nm]로 정제하였다. 수집한 분획을 진공 하에 농축하여 tert-부틸 3-(6-[3-아미노-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-아미도]-1,4-디플루오로-5,6,7,8-테트라하이드로나프탈렌-2-일)-3,8-디아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-8-카복실레이트를 황색 고체로서 제공하였다(100mg, 67%). LCMS(ES, m/z): 584[M+H]+.
단계 9. tert-부틸 3-[(6S)-6-[3-아미노-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-아미도]-1,4-디플루오로-5,6,7,8-테트라하이드로나프탈렌-2-일]-3,8-디아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-8-카복실레이트 및 tert-부틸 3-[(6R)-6-[3-아미노-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-아미도]-1,4-디플루오로-5,6,7,8-테트라하이드로나프탈렌-2-일]-3,8-디아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-8-카복실레이트
tert-부틸 3-(6-[3-아미노-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-아미도]-1,4-디플루오로-5,6,7,8-테트라하이드로나프탈렌-2-일)-3,8-디아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-8-카복실레이트(80.0mg, 0.137 mmol)를 키랄 분취용 HPLC[컬럼: CHIRAL ART Cellulose-SB, 2 x 25 cm, 5um; 이동상 A: MTBE, 이동상 B: EtOH(10분 후까지 10% B 유지); 유속: 20 mL/min; 검출기: 254/220 nm; RT1: 7.015 min; RT2: 8.508 min]로 분리하였다. 1차 용출 이성질체(RT1 = 7.015 분)는 진공 하에 농축하여, tert-부틸 3-[(6S)-6-[3-아미노-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-아미도]-1,4-디플루오로-5,6,7,8-테트라하이드로나프탈렌-2-일]-3,8-디아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-8-카복실레이트로서 임의 지정된 입체화학을 갖는 황색 오일을 제공하였다. 2차 용출 이성질체(RT2 = 8.508 분)는 진공 하에 농축하여, tert-부틸 3-[(6R)-6-[3-아미노-6-메틸티에노[2,3-b] 피리딘-2-아미도]-1,4-디플루오로-5,6,7,8-테트라하이드로나프탈렌-2-일]-3,8-디아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-8-카복실레이트로서 임의 지정된 입체화학을 갖는 황색 오일을 제공하였다. LCMS(ES, m/z): 584[M+H]+.
단계 10. 3-아미노-N-[(2S)-6-[3,8-디아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-3-일]-5,8-디플루오로-1,2,3,4-테트라하이드로나프탈렌-2-일]-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드
디클로로메탄(3mL) 중 tert-부틸 3-[(6S)-6-[3-아미노-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-아미도]-1,4-디플루오로-5,6,7,8-테트라하이드로나프탈렌-2-일]-3,8-디아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-8-카복실레이트(35.0mg, 0.060 mmol), 트리플루오로아세트산(1mL)의 용액. 결과적으로 수득되는 용액을 25℃에서 1시간 동안 교반하였다. 결과적으로 수득되는 혼합물을 진공 하에 농축하였다. 잔류물은 분취용 HPLC[컬럼, XBridge Prep C18 OBD 컬럼, 19 x 150 mm 5um; 이동상, A: 물(0.05% NH4HCO3 함유) 및 B: ACN (25%에서부터 12분 후 50%까지); 검출기, UV 220nm]로 정제하였다. 생성물 분획을 농축하고 동결건조하여 3-아미노-N-[(2S)-6-[3,8-디아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-3-일]-5,8-디플루오로-1,2,3,4-테트라하이드로나프탈렌-2-일]-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드를 회백색 고체로서 제공하였다(19.1 mg, 66%). LCMS(ES, m/z): 484 [M+H]+. 1H-NMR(DMSO-d 6 , 400 MHz)δ(ppm): 8.30(d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.63(d, J = 7.6 Hz, 1H), 7.31(d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.17(br s, 2H), 6.61-6.57(m, 1H), 4.09-4.07(m, 1H), 3.40-3.98(m, 2H), 3.08-3.03(m, 2H), 2.95-2.62(m, 5H), 2.59-2.57(m, 4H), 2.37-2.30(m, 1H), 2.02-1.99(m, 1H), 1.80-1.61(m, 5H).
단계 1. 시스-tert-부틸 1-[(3R)-3-[[(벤질옥시)카보닐]아미노]-5-플루오로-3,4-디하이드로-2H-1-벤조피란-7-일]-옥타하이드로피롤로[2,3-c]피롤-5-카복실레이트
DMSO(30mL) 중 벤질 N-[(3R)-7-브로모-5-플루오로-3,4-디하이드로-2H-1-벤조피란-3-일]카바메이트(1.00g,　2.53　mmol), tert-부틸　옥타하이드로피롤로[2,3-c]피롤-5-카복실레이트(614mg,　2.78　mmol), BTMG(1.73g,　10.100　mmol), 3세대 t-BuXPhos 전구촉매(602mg, 0.757mmol), 및 시스-tert-부틸헥사하이드로피롤로[3,4-b]피롤-5(1H)-카복실레이트(644mg, 3.04 mmol)의 용액을 25℃에서 1시간 동안 교반하였다. 그 다음, 물(30mL)을 첨가하여 반응을 ??치시켰다. 결과적으로 수득되는 혼합물을 에틸 아세테이트(3 x 30mL)로 추출하였다. 유기 층을 합하여, 염수(2 x 100mL)로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조하고, 여과하고, 진공 하에 농축하였다. 잔류물은 실리카겔 크로마토그래피(1:2 에틸 아세테이트/석유 에테르로 용출)로 정제하여 시스-tert-부틸 1-[(3R)-3-[[(벤질옥시)카보닐]아미노]-5-플루오로-3,4-디하이드로-2H-1-벤조피란-7-일]-옥타하이드로피롤로[2,3-c]피롤-5-카복실레이트를 황색 고체로서 제공하였다(1.00g,　74%). LCMS(ES, m/z): 512[M+H]+.
단계 2. 시스-tert-부틸 1-[(3R)-3-아미노-5-플루오로-3,4-디하이드로-2H-1-벤조피란-7-일]-옥타하이드로피롤로[2,3-c]피롤-5-카복실레이트
에틸 아세테이트(30mL) 중 시스-tert-부틸 1-[(3R)-3-[[(벤질옥시)카보닐]아미노]-5-플루오로-3,4-디하이드로-2H-1-벤조피란-7-일]-옥타하이드로피롤로[2,3-c]피롤-5-카복실레이트(1.00g,　1.88　mmol) 및 탄소 상의 팔라듐(1.10g,　10%)의 혼합물을 수소 대기 하에 25℃에서 2시간 동안 교반하였다. 고체는 여과해내고 여과액은 진공 하에 농축하여 시스-tert-부틸 1-[(3R)-3-아미노-5-플루오로-3,4-디하이드로-2H-1-벤조피란-7-일]-옥타하이드로피롤로[2,3-c]피롤-5-카복실레이트를 연황색 고체로서 제공하였다(750mg, 조생성물). LCMS(ES, m/z): 378[M+H]+.
단계 3. 시스-tert-부틸 1-[(3R)-3-[3-아미노-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-아미도]-5-플루오로-3,4-디하이드로-2H-1-벤조피란-7-일]-옥타하이드로피롤로[2,3-c]피롤-5-카복실레이트
DMA(5mL) 중 시스-tert-부틸 1-[(3R)-3-아미노-5-플루오로-3,4-디하이드로-2H-1-벤조피란-7-일]-옥타하이드로피롤로[2,3-c]피롤-5-카복실레이트(720mg,　1.72　mmol), 3-아미노-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복실산(357mg,　1.72　mmol), HBTU(1.02g,　2.58　mmol) 및 TEA(0.953mL,　6.87　mmol)의 용액을 25℃에서 1시간 동안 교반하였다. 혼합물은 역상 크로마토그래피[컬럼: C18 실리카겔; 이동상, A: 물(10 mmol/L NH4HCO3 함유) 및 B: ACN(5%에서부터 30분 후 80%까지); 검출기: UV 254/220 nm]로 정제하였다. 수집한 분획을 농축하여 시스-tert-부틸 1-[(3R)-3-[3-아미노-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-아미도]-5-플루오로-3,4-디하이드로-2H-1-벤조피란-7-일]-옥타하이드로피롤로[2,3-c]피롤-5-카복실레이트를 연황색 고체로서 제공하였다(700mg,　69%). LCMS(ES, m/z): 568[M+H]+.
단계 4. tert-부틸 (3aR,6aR)-1-[(3R)-3-[3-아미노-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-아미도]-5-플루오로-3,4-디하이드로-2H-1-벤조피란-7-일]-옥타하이드로피롤로[2,3-c]피롤-5-카복실레이트 및 tert-부틸 (3aS,6aS)-1-[(3R)-3-[3-아미노-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-아미도]-5-플루오로-3,4-디하이드로-2H-1-벤조피란-7-일]-옥타하이드로피롤로[2,3-c]피롤-5-카복실레이트
시스-tert-부틸 1-[(3R)-3-[3-아미노-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-아미도]-5-플루오로-3,4-디하이드로-2H-1-벤조피란-7-일]-옥타하이드로피롤로[2,3-c]피롤-5-카복실레이트(700mg, 1.18 mmol)를 키랄 분취용 HPLC[컬럼: Chiralpak IC, 2 x 25 cm, 5 um; 이동상, A: MTBE(10mM NH3-MeOH 함유) 및 B: EtOH(12분 후까지 30% 유지); 유속: 20 mL/min; 검출기: 254/220 nm; RT1: 6.456 min; RT2: 9.216 min]를 통해 분리하였다. 1차 용출 이성질체(RT1: 6.456 분)를 수집하고 농축하여, tert-부틸 (3aS,6aS)-1-[(3R)-3-[3-아미노-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-아미도]-5-플루오로-3,4-디하이드로-2H-1-벤조피란-7-일]-옥타하이드로피롤로[2,3-c]피롤-5-카복실레이트로서 임의 지정된 입체화학을 갖는 연황색 고체를 제공하였고, 2차 용출 이성질체(RT2: 9.216 분)를 수집하고 농축하여, tert-부틸(3aR,6aR)-1-[(3R)-3-[3-아미노-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-아미도]-5-플루오로-3,4-디하이드로-2H-1-벤조피란-7-일]-옥타하이드로피롤로[2,3-c]피롤-5-카복실레이트로서 임의 지정된 입체화학을 갖는 연황색 고체를 제공하였다. LCMS(ES, m/z): 568[M+H]+.
단계 5. 3-아미노-N-((R)-5-플루오로-7-((3aS,6aS)-헥사하이드로피롤로[3,4-b]피롤-1(2H)-일)크로만-3-일)-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드
디클로로메탄(6mL) 중 tert-부틸 (3aS,6aS)-1-[(3R)-3-[3-아미노-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-아미도]-5-플루오로-3,4-디하이드로-2H-1-벤조피란-7-일]-옥타하이드로피롤로[2,3-c]피롤-5-카복실레이트(250mg, 0.418 mmol) 및 트리플루오로아세트산(5mL)의 용액을 25℃에서 30분 동안 교반하였다. 결과적으로 수득되는 용액을 진공 하에 농축하였다. 잔류물은 NH3 용액(10mL, 메탄올 중 7M)에 용해시켰다. 결과적으로 수득되는 용액을 25℃에서 30분 동안 교반하고 진공 하에 농축하였다. 잔류물은 분취용 HPLC(컬럼, XBridge Prep C18 OBD 컬럼, 19 x 150 mm 5 μm; 이동상, A: 물(10 mmol/L NH4HCO3 함유) 및 B: ACN(20%에서부터 7분 후 50%까지); 검출기, UV 254/220 nm]로 정제하였다. 수집한 분획을 동결건조하여 N-[(3R)-7-[(3aS,6aS)-옥타하이드로피롤로[2,3-c]피롤-1-일]-5-플루오로-3,4-디하이드로-2H-1-벤조피란-3-일]-3-아미노-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드를 연황색 고체로서 제공하였다(95.0mg, 48%). 1H-NMR(DMSO-d 6 , 400 MHz)δ(ppm): 8.33 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.57(br s, 1H), 7.32(d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.23(br s, 2H), 5.99(d, J = 11.2 Hz, 1H), 5.81(s, 1H), 4.31-4.24(m, 1H), 4.18-4.15(m, 1H), 3.89-3.81(m, 2H), 3.43-3.41(m, 1H), 3.11-3.05(m, 1H), 2.88-2.63(m, 7H), 2.59(s, 3H), 2.05-2.01(m, 1H), 1.76-1.71(m, 1H). LCMS(ES, m/z): 468[M+H]+.
실시예 606. 5-클로로-N-[(3R)-8-시아노-7-[3,8-디아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-3-일]-5- 플루오로 -3,4-디하이드로-2H-1-벤조피란-3-일]-7-에틸-7H-피롤로[2,3-c]피리다진-3-카복사미드
Figure pct00238
단계 1. 5-클로로-7-에틸-7H-피롤로[2,3-c]피리다진-3-카복실레이트
DCM(30mL) 중 메틸 7-에틸-7H-피롤로[2,3-c]피리다진-3-카복실레이트(1.20g, 5.84 mmol) 및 NCS(3.12g, 23.3 mmol)의 용액을 25℃에서 18시간 동안 교반하였다. 결과적으로 수득되는 용액을 물(50ml)로 희석하고, DCM(3 x 30mL)으로 추출하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조하고, 여과하고, 진공 하에 농축하였다. 잔류물은 실리카겔 크로마토그래피(1:10 MeOH/DCM으로 용출)로 정제하여 메틸 5-클로로-7-에틸-7H-피롤로[2,3-c]피리다진-3-카복실레이트를 황색 고체로서로서 제공하였다(1.30g, 88%). LCMS(ES, m/z): 240, 242[M+H]+.
단계 2. 5-클로로-7-에틸-7H-피롤로[2,3-c]피리다진-3-카복실산
NaOH(1.08g, 27.1 mmol)을 THF(20mL) 및 H2O(20mL) 중 메틸 5-클로로-7-에틸-7H-피롤로[2,3-c]피리다진-3-카복실레이트(1.30g, 5.42 mmol)의 용액에 <10℃에서 첨가하였다. 결과적으로 수득되는 용액을 25℃에서 16시간 동안 교반하였다. THF는 진공 하에 농축하였다. 잔류물을 물(20mL)로 희석하였다. 용액의 pH 값은 HCl(1M)으로 6으로 조정하고 혼합물은 진공 하에 농축하였다. 잔류물은 역상 크로마토그래피[컬럼: C18 실리카겔; 이동상, A: 물(0.05% TFA 함유) 및 B: ACN(5% B에서부터 30분 후 80% B까지); 검출기: UV 254/220 nm]로 정제하여 5-클로로-7-에틸-7H-피롤로[2,3-c]피리다진-3-카복실산을 황색 고체로서 제공하였다(440mg, 34%). LCMS(ES, m/z): 256, 258[M+H]+.
단계 3. tert-부틸 3-[(3R)-3-[[(벤질옥시)카보닐]아미노]-5-플루오로-3,4-디하이드로-2H-1-벤조피란-7-일]-3,8-디아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-8-카복실레이트
DMSO(2mL) 중 BTMG(362mg, 2.10 mmol)의 용액을 DMSO(8mL) 중 벤질 N-[(3R)-7-브로모-5-플루오로-3,4-디하이드로-2H-1-벤조피란-3-일]카바메이트(500mg, 1.05 mmol), tert-부틸 3,8-디아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-8-카복실레이트(336mg, 1.57 mmol) 및 3세대 t-BuXPhos 전구촉매(84.0mg, 0.105 mmol)의 용액에 첨가하였다. 결과적으로 수득되는 용액을 20℃에서 2시간 동안 교반하였다. 반응은 물(20mL)로 ??치시켰다. 결과적으로 수득되는 혼합물을 에틸 아세테이트(3 x 30mL)로 추출하였다. 유기 층을 합하고, 물(3 x 45 mL)로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조하고, 여과하고, 진공 하에 농축하였다. 잔류물은 실리카겔 크로마토그래피(1:3 에틸 아세테이트/석유 에테르로 용출)로 정제하여 tert-부틸 3-[(3R)-3-[[(벤질옥시)카보닐]아미노]-5-플루오로-3,4-디하이드로-2H-1-벤조피란-7-일]-3,8-디아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-8-카복실레이트를 황색 고체로서 제공하였다(460mg, 81%). LCMS (ES, m/z): 512 [M+H]+.
단계 4. tert-부틸 3-[(3R)-3-[[(벤질옥시)카보닐]아미노]-8-브로모-5-플루오로-3,4-디하이드로-2H-1-벤조피란-7-일]-3,8-디아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-8-카복실레이트
NBS(160mg, 0.899 mmol)를 THF(20mL) 중 tert-부틸 3-[(3R)-3-[[(벤질옥시)카보닐]아미노]-5-플루오로-3,4-디하이드로-2H-1-벤조피란-7-일]-3,8-디아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-8-카복실레이트(460mg, 0.899 mmol)의 용액에 0℃에서 무광 하에 첨가하였다. 결과적으로 수득되는 용액을 0℃에서 2시간 동안 교반하였다. 그 다음, 물(20mL)을 첨가하여 ??치시켰다. 결과적으로 수득되는 혼합물을 EA(3 x 30 mL)로 추출하였다. 유기 층을 합하여 무수 황산나트륨 상에서 건조하고, 여과하고, 진공 하에 농축하였다. 잔류물을 실리카겔 크로마토그래피(1:3 에틸 아세테이트/석유 에테르)로 정제하여 tert-부틸 3-[(3R)-3-[[(벤질옥시)카보닐]아미노]-8-브로모-5-플루오로-3,4-디하이드로-2H-1-벤조피란-7-일]-3,8-디아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-8-카복실레이트를 회백색 고체로서 제공하였다(230 mg, 41%). LCMS(ES, m/z): 590, 592[M+H]+.
단계 5. tert-부틸 3-[(3R)-3-[[(벤질옥시)카보닐]아미노]-8-시아노-5-플루오로-3,4-디하이드로-2H-1-벤조피란-7-일]-3,8-디아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-8-카복실레이트
DMA(6mL) 중 tert-부틸　3-[(3R)-3-[[(벤질옥시)카보닐]아미노]-8-브로모-5-플루오로-3,4-디하이드로-2H-1-벤조피란-7-일](230mg,　0.390　mmol), 4-tert-부틸-2-(4-tert-부틸피리딘-2-일)피리딘(104mg,　0.390　mmol),　Pd(t-Bu3P)2(99.5mg, 0.195　mmol), Zn(50.9mg,　0.779　mmol)　및 Zn(CN)2(457mg,　3.89　mmol)의 혼합물을 100℃에서 1시간 동안 교반하였다. 혼합물은 25℃로 냉각시켰다. 고체는 여과해내고, 여과액은 진공 하에 농축하였다. 잔류물은 역상 크로마토그래피[컬럼: C18 실리카겔; 이동상, A: 물(0.05% TFA 함유) 및 B: ACN(5%에서부터 30분 후 80%까지); 검출기: UV 254/220 nm]로 정제하여 tert-부틸 3-[(3R)-3-[[(벤질옥시)카보닐]아미노]-8-시아노-5-플루오로-3,4-디하이드로-2H-1-벤조피란-7-일]-3,8-디아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-8-카복실레이트를 백색 고체로서 제공하였다(155mg, 70%). LCMS(ES, m/z): 537[M+H]+.
단계 6. tert-부틸　3-[(3R)-3-아미노-8-시아노-5-플루오로-3,4-디하이드로-2H-1-벤조피란-7-일]-3,8-디아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-8-카복실레이트
EA(15mL) 중 tert-부틸　3-[(3R)-3-[[(벤질옥시)카보닐]아미노]-8-시아노-5-플루오로-3,4-디하이드로-2H-1-벤조피란-7-일]-3,8-디아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-8-카복실레이트(155mg,　0.289　mmol)　및　Pd/C(150mg,　10%)의 혼합물을 수소 대기(벌룬) 하에 24℃에서 16시간 동안 교반하였다. 고체는 여과해냈다. 여과액은 진공 하에 농축하여 tert-부틸　3-[(3R)-3-아미노-8-시아노-5-플루오로-3,4-디하이드로-2H-1-벤조피란-7-일]-3,8-디아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-8-카복실레이트를 무색 고체로서 제공하였다(110mg,　조생성물).　 LCMS(ES, m/z): 403[M+H]+.
단계 7. tert-부틸　3-[(3R)-3-[5-클로로-7-에틸-7H-피롤로[2,3-c]피리다진-3-아미도]-8-시아노-5-플루오로-3,4-디하이드로-2H-1-벤조피란-7-일]-3,8-디아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-8-카복실레이트
HBTU(118mg,　0.313　mmol)를 DMA(4mL) 중 tert-부틸　3-[(3R)-3-아미노-8-시아노-5-플루오로-3,4-디하이드로-2H-1-벤조피란-7-일]-3,8-디아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-8-카복실레이트(105mg,　0.261　mmol),　5-클로로-7-에틸-7H-피롤로[2,3-c]피리다진-3-카르복실산(70.6mg,　0.313　mmol)　및 TEA(0.110mL,　0.780 mmol)의 용액에 첨가하였다. 결과적으로 수득되는 용액을　25℃에서 1시간 동안 교반하였다. 혼합물은 역상 크로마토그래피[컬럼: C18 실리카겔; 이동상, A: 물(0.05% TFA 함유) 및 B: ACN(5%에서부터 30분 후 80%까지); 검출기: UV 254/220 nm]로 정제하여 tert-부틸　3-[(3R)-3-[5-클로로-7-에틸-7H-피롤로[2,3-c]피리다진-3-아미도]-8-시아노-5-플루오로-3,4-디하이드로-2H-1-벤조피란-7-일]-3,8-디아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-8-카복실레이트를 황색 고체로서 제공하였다(120mg,　72%). LCMS(ES, m/z): 610,612[M+H]+.
단계 8. 5-클로로-N-[(3R)-8-시아노-7-[3,8-디아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-3-일]-5-플루오로-3,4-디하이드로-2H-1-벤조피란-3-일]-7-에틸-7H-피롤로[2,3-c]피리다진-3-카복사미드　
DCM(3mL) 중 tert-부틸　3-[(3R)-3-[5-클로로-7-에틸-7H-피롤로[2,3-c]피리다진-3-아미도]-8-시아노-5-플루오로-3,4-디하이드로-2H-1-벤조피란-7-일]-3,8-디아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-8-카복실레이트(60.0mg,　0.098　mmol) 및 TFA(1.00mL)의 용액을 25℃에서 30분 동안 교반하였다. 결과적으로 수득되는 혼합물을 진공 하에 농축하였다. NH3 용액(2.00mL, MeOH 중 7M)을 잔류물에 첨가하였다. 결과적으로 수득되는 용액을 0.5시간 동안 교반한 뒤, 진공 하에 농축하였다. 잔류물은 정제용HPLC[컬럼: XBridge Prep C18 OBD 컬럼, 19 x 150 mm 5 μm; 이동상, A: 물(10 mmol/L NH4HCO3 함유) 및 B: ACN(23%에서부터 8분 후 38%까지): 검출기, UV 220/254nm]로 정제하였다. 수집한 분획을 동결건조하여 5-클로로-N-[(3R)-8-시아노-7-[3,8-디아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-3-일]-5-플루오로-3,4-디하이드로-2H-1-벤조피란-3-일]-7-에틸-7H-피롤로[2,3-c]피리다진-3-카복사미드를 백색 고체로서 제공하였다(19.8mg,　39%). 1H-NMR(DMSO-d 6 , 400 MHz)δ(ppm): 9.19(br s, 1H), 8.40(s, 1H), 8.36(s, 1H), 6.50(d, J = 9.6 Hz, 1H), 4.55-4.50(m, 3H), 4.41-4.38(m, 1H), 4.31-4.27(m, 1H), 3.46-3.44(m, 2H), 3.32-3.28(m, 2H), 2.98-2.89(m, 4H), 1.90-1.89(m, 2H), 1.65-1.63(m, 2H), 1.51-1.47(m, 3H). LCMS (ES, m/z): 510,512 [M+H]+.
실시예 611-1. 3-아미노-N-[(3R)-7-[(4S,5R)-4-아미노-6-옥사-2-아자스피로[4.5]데칸-2-일]-3,4-디하이드로-2H-1-벤조피란-3-일]-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드
실시예 611-2. 3-아미노-N-[(3R)-7-[(4R,5S)-4-아미노-6-옥사-2-아자스피로[4.5]데칸-2-일]-3,4-디하이드로-2H-1-벤조피란-3-일]-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드
Figure pct00239
단계 1. 트랜스-벤질 3-아지도-4-하이드록시피롤리딘-1-카복실레이트
물(58mL) 중 NaN3(17.4g, 267 mmol)의 용액을 메탄올(348mL) 중 벤질 6-옥사-3-아자바이사이클로[3.1.0]헥산-3-카복실레이트(29.0g, 133 mmol) 및 NH4Cl(7.15g, 134 mmol)의 용액에 첨가하였다. 결과적으로 수득되는 용액을 60℃에서 16시간 동안 교반하였다. 25℃로 냉각한 후, pH 값은 NaOH(1M)로 7 내지 8로 조정하였다. 결과적으로 수득되는 용액을 그 다음 물(100mL)을 첨가하여 ??치시켰다. 용매는 진공 하에 제거하고, 잔류물은 디클로로메탄(2 x 150mL)으로 추출하였다. 유기 층을 합하여 무수 황산나트륨 상에서 건조하고, 여과하고, 진공 하에 농축하여 트랜스-벤질 3-아지도-4-하이드록시피롤리딘-1-카복실레이트를 연황색 오일로서 제공하였다(35.0g, 조생성물). LCMS(ES, m/z): 263[M+H]+.
단계 2. 트랜스-벤질 3-[[(tert-부톡시)카보닐]아미노]-4-하이드록시피롤리딘-1-카복실레이트
에틸 아세테이트(2.00L) 중 트랜스-벤질 3-아지도-4-하이드록시피롤리딘-1-카복실레이트(35.0g, 133 mmol) 및 PtO2(10.0g, 44.1 mmol)의 혼합물을 수소 대기(벌룬) 하에 25℃에서 16시간 동안 교반하였다. 고체를 여과해내고, 여과액은 진공 하에 농축하여 트랜스-벤질 3-아미노-4-하이드록시피롤리딘-1-카복실레이트를 연황색 오일로서 제공하였다(30.0g, 조생성물). 트랜스-벤질 3-아미노-4-하이드록시피롤리딘-1-카복실레이트(30.0g, 127 mmol)는 THF(500mL) 및 H2O(500mL)에 용해시켰다. 그 다음, TEA(53.0mL, 381 mmol) 및 (Boc)2O(33.3g, 152 mmol)를 5℃ 하에 첨가하였다. 결과적으로 수득되는 용액을 25℃에서 16시간 동안 교반하였다. 용매는 진공 하에 제거하였다. 잔류물은 에틸 아세테이트(3 x 300mL)로 추출하였다. 유기 층을 합하여 무수 황산나트륨 상에서 건조하고, 여과하고, 진공 하에 농축하였다. 잔류물은 에틸 아세테이트/석유 에테르(1:10)로 세척하여 트랜스-벤질 3-[[(tert-부톡시)카보닐]아미노]-4-하이드록시피롤리딘-1-카복실레이트를 백색 고체로서 제공하였다(35.0g, 82%). LCMS(ES, m/z): 337[M+H]+.
단계 3. 벤질 3-[[(tert-부톡시)카보닐]아미노]-4-옥소피롤리딘-1-카복실레이트
DMSO(15.0mL, 339 mmol)를 무수 THF(120mL) 중 옥살산 이염화물(7.55mL, 89.2 mmol)의 용액에 -78℃에서 첨가하였다. -78℃에서 15분 동안 교반한 후, 무수 THF(600mL) 중 트랜스-벤질 3-[[(tert-부톡시)카보닐]아미노]-4-하이드록시피롤리딘-1-카복실레이트(30.0g, 89.2 mmol)의 용액을 -78℃에서 첨가하고, 그 다음 TEA(37.2mL, 268 mmol)를 -78℃에서 첨가하였다. 반응물은 -60℃ 하에서 30분 동안 교반하였다. 반응 혼합물은 H2O(50mL)로 ??치하였다. 유기 층을 수집하고, 수성 상을 에틸 아세테이트(2 x 30mL)로 추출하였다. 유기층을 합하여 무수 황산나트륨 상에서 건조하고, 여과하고, 농축하였다. 잔류물은 실리카겔 크로마토그래피(1/10 에틸 아세테이트/석유 에테르로 용출)로 정제하여 벤질 3-[[(tert-부톡시)카보닐]아미노]-4-옥소피롤리딘-1-카복실레이트를 연황색 고체로서 제공하였다(21.0g, 67%). LCMS(ES, m/z): 335[M+H]+.
단계 4 . 벤질 4-[[(tert-부톡시)카보닐]아미노]-3-하이드록시-3-(프로프-2-엔-1-일)피롤리딘-1-카복실레이트
브로모(프로프-2-엔-1-일)마그네슘(59.8mL, THF 중 1M)을 THF(100mL) 중 벤질 3-[[(tert-부톡시)카보닐]아미노]-4-옥소피롤리딘-1-카복실레이트(10.0g, 29.9 mmol)의 용액에 -78℃에서 첨가하였다. 결과적으로 수득되는 용액을 -78℃ 내지 10℃에서 2시간 동안 교반하였다. 결과적으로 수득되는 용액을 물(100mL)로 ??치시키고, EA(3 x 100mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 염수(2 x 200mL)로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조하고, 여과하고, 진공 하에 농축하여 벤질 4-[[(tert-부톡시)카보닐]아미노]-3-하이드록시-3-(프로프-2-엔-1-일)피롤리딘-1-카복실레이트를 연황색 오일로서 제공하였다(11.0g, 87%). LCMS(ES, m/z): 377[M+H]+.
단계 5. 벤질 3-[(2E)-4-브로모부트-2-엔-1-일]-4-[[(tert-부톡시)카보닐]아미노]-3-하이드록시피롤리딘-1-카복실레이트
Grubbs 제2세대(1.24g, 1.46 mmol)를 DCM(200mL) 중 벤질 4-[[(tert-부톡시)카보닐]아미노]-3-하이드록시-3-(프로프-2-엔-1-일)피롤리딘-1-카복실레이트(11.0g, 29.2 mmol) 및 3-브로모프로프-1-엔(14.1g, 116 mmol)의 용액에 첨가하였다. 결과적으로 수득되는 용액을 25℃에서 1시간 동안 교반한 뒤, 진공 하에 농축하였다. 잔류물을 역상 크로마토그래피[컬럼: C18 실리카겔; 이동상, A: 물(0.05% TFA 함유) 및 B: CH3CN(0%에서부터 30분 후 70%까지); 검출기: 220/254 nm]로 정제하여 벤질 3-[(2E)-4-브로모부트-2-엔-1-일]-4-[[(tert-부톡시)카보닐]아미노]-3-하이드록시피롤리딘-1-카복실레이트를 회백색 고체로서 제공하였다(6.80g, 47%). LCMS(ES, m/z): 469,471[M+H]+.
단계 6. 시스-벤질 4-[[(tert-부톡시)카보닐]아미노]-6-옥사-2-아자스피로[4.5]데크-8-엔-2-카복실레이트
t-BuOK(20.8mL, THF 중 1M)를 DMSO(40.0mL) 중 벤질 3-[(2Z)-4-브로모부트-2-엔-1-일]-4-[[(tert-부톡시)카보닐]아미노]-3-하이드록시피롤리딘-1-카복실레이트(4.90g, 10.4 mmol)의 용액에 25℃에서 첨가하였다. 결과적으로 수득되는 용액을 25℃에서 1시간 동안 교반하였다. 반응은 얼음/물(10 mL)을 첨가하여 ??치시켰다. 결과적으로 수득되는 용액을 EA(3 x 50mL)로 추출하였다. 유기 층을 농축한 뒤, 역상 크로마토그래피[컬럼: C18 실리카겔; 이동상, A: 물(0.5% TFA 함유) 및 B: CH3CN(0%에서부터 45분 후 70%까지); 검출기: 200/210 nm]를 통해 정제하여 시스-벤질 4-[[(tert-부톡시)카보닐]아미노]-6-옥사-2-아자스피로[4.5]데크-8-엔-2-카복실레이트를 황색 오일(550mg, 12%)로서 제공하였다.(배열은 시스인 것으로 추정되었다). LCMS(ES, m/z): 389[M+H]+.
단계 7. 시스-tert-부틸　N-[6-옥사-2-아자스피로[4.5]데칸-4-일]카바메이트　
MeOH(20mL) 중 시스-벤질　4-[[(tert-부톡시)카보닐]아미노]-6-옥사-2-아자스피로[4.5]데크-8-엔-2-카복실레이트(550mg,　1.41　mmol)　및　Pd(OH)2/C(300mg,　20%)의 혼합물을 무수 대기(벌룬) 하에 35℃에서 2시간 동안 교반하였다. 고체는 여과해내고, 여과액은 진공 하에 농축하여 시스-tert-부틸　N-[6-옥사-2-아자스피로[4.5]데칸-4-일]카바메이트를 회백색 오일로서 제공하였다(350mg,　88%). LCMS(ES, m/z): 389[M+H]+.
단계 8. 시스-벤질 N-[(3R)-7-[4-[(tert-부톡시카보닐)아미노]-6-옥사-2-아자스피로[4.5]데칸-2-일]-3,4-디하이드로-2H-1-벤조피란-3-일]카바메이트
톨루엔(10.0mL) 중 벤질 N-[(3R)-7-브로모-3,4-디하이드로-2H-1-벤조피란-3-일]카바메이트(200mg, 0.552 mmol), 시스-tert-부틸 N-[6-옥사-2-아자스피로[4.5]데칸-4-일]카바메이트(155mg, 0.607 mmol), 3세대 RuPhos 전구촉매(46.2mg, 0.055 mmol), RuPhos(51.5mg, 0.110 mmol) 및 Cs2CO3(539mg, 1.65 mmol)의 혼합물을 95℃에서 3시간 동안 교반하였다. 혼합물은 냉각하였다. 고체는 여과해냈다. 여과액은 진공 하에 농축하였다. 잔류물은 실리카겔 크로마토그래피(1:2 에틸 아세테이트/석유 에테르로 용출)로 정제하여 시스-벤질 N-[(3R)-7-[4-[(tert-부톡시카보닐)아미노]-6-옥사-2-아자스피로[4.5]데칸-2-일]-3,4-디하이드로-2H-1-벤조피란-3-일]카바메이트를 황색 고체로서 제공하였다(110mg, 35%). LCMS(ES, m/z): 538[M+H]+.
단계 9 . 시스-tert-부틸 N-[2-[(3R)-3-아미노-3,4-디하이드로-2H-1-벤조피란-7-일]-6-옥사-2-아자스피로[4.5]데칸-4-일]카바메이트
EA(10.0mL) 중 시스-벤질 N-[(3R)-7-[4-[(tert-부톡시카보닐)아미노]-6-옥사-2-아자스피로[4.5]데칸-2-일]-3,4-디하이드로-2H-1-벤조피란-3-일]카바메이트(110mg, 0.205 mmol) 및 Pd/C(100mg, 10%)의 혼합물을 수소 대기(벌룬) 하에 25℃에서 16시간 동안 교반하였다. 고체는 여과해냈다. 여과액은 진공 하에 농축하여 시스-tert-부틸 N-[2-[(3R)-3-아미노-3,4-디하이드로-2H-1-벤조피란-7-일]-6-옥사-2-아자스피로[4.5]데칸-4-일]카바메이트를 백색 고체로서 제공하였다(70.0mg, 80%). LCMS (ES, m/z): 404[M+H]+.
단계 10. 시스-tert-부틸 N-[2-[(3R)-3-[3-아미노-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-아미도]-3,4-디하이드로-2H-1-벤조피란-7-일]-6-옥사-2-아자스피로[4.5]데칸-4-일]카바메이트
HBTU(78.9mg, 0.208 mmol)를 DMA(3mL) 중 시스-tert-부틸 N-[2-[(3R)-3-아미노-3,4-디하이드로-2H-1-벤조피란-7-일]-6-옥사-2-아자스피로[4.5]데칸-4-일]카바메이트(70.0mg, 0.173 mmol), 3-아미노-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복실산 (43.3mg, 0.208 mmol) 및 TEA(0.070mL, 0.504 mmol)의 용액에 첨가하였다. 결과적으로 수득되는 용액을 25℃에서 2시간 동안 교반하였다. 혼합물은 역상 크로마토그래피[컬럼: C18 실리카겔; 이동상, A: 물(0.05% TFA 함유) 및 B: ACN(5%에서부터 30분 후 80%까지); 검출기: UV 254/220 nm]로 정제하여 시스-tert-부틸 N-[2-[(3R)-3-[3-아미노-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-아미도]-3,4-디하이드로-2H-1-벤조피란-7-일]-6-옥사-2-아자스피로[4.5]데칸-4-일]카바메이트를 황색 고체로서 제공하였다(70.0mg, 64%). LCMS(ES, m/z): 594[M+H]+.
Step 11 . tert-부틸 N-[(4S,5R)-2-[(3R)-3-[3-아미노-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-아미도]-3,4-디하이드로-2H-1-벤조피란-7-일]-6-옥사-2-아자스피로[4.5]데칸-4-일]카바메이트 및 tert-부틸 N-[(4R,5S)-2-[(3R)-3-[3-아미노-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-아미도]-3,4-디하이드로-2H-1-벤조피란-7-일]-6-옥사-2-아자스피로[4.5]데칸-4-일]카바메이트
tert-부틸 N-[2-[(3R)-3-[3-아미노-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-아미도]-3,4-디하이드로-2H-1-벤조피란-7-일]-6-옥사-2-아자스피로[4.5]데칸-4-일]카바메이트(70.0mg, 0.118 mmol)를 키랄 분취용 HPLC를 통해 다음과 같은 조건 하에 분리하였다[컬럼: CHIRALPAK IA, 2 x 25cm, 5um; 이동상, A: HEX:DCM=3:1(0.2% IPA 함유) 및 B: EtOH(16분 후까지 50% 유지); 유속: 16 mL/min; 검출기, UV 254/220nm]. 1차 용출 이성질체(RT1=8.989 nm)를 수집하고 진공 하에 농축하여 tert-부틸 N-[(4S,5R)-2-[(3R)-3-[3-아미노-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-아미도]-3,4-디하이드로-2H-1-벤조피란-7-일]-6-옥사-2-아자스피로[4.5]데칸-4-일]카바메이트를 황색 고체로서 제공하였다(25.0mg, 33%); 2차 용출 이성질체(RT2=14.735 분)를 수집하고 진공 하에 농축하여 tert-부틸 N-[(4R,5S)-2-[(3R)-3-[3-아미노-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-아미도]-3,4-디하이드로-2H-1-벤조피란-7-일]-6-옥사-2-아자스피로[4.5]데칸-4-일]카바메이트를 황색 고체로서 제공하였다(20.0mg, 27%). LCMS(ES, m/z): 594[M+H]+.
단계 12. 3-아미노-N-[(3R)-7-[(4S,5R)-4-아미노-6-옥사-2-아자스피로[4.5]데칸-2-일]-3,4-디하이드로-2H-1-벤조피란-3-일]-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드
DCM(1.50mL) 중 tert-부틸 N-[(4S,5R)-2-[(3R)-3-[3-아미노-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-아미도]-3,4-디하이드로-2H-1-벤조피란-7-일]-6-옥사-2-아자스피로[4.5]데칸-4-일]카바메이트(25.0mg, 0.042 mmol) 및 TFA(0.500 mL)의 용액을 25℃에서 30분 동안 교반하였다. 결과적으로 수득되는 용액을 진공 하에 농축하였다. NH3(2.00 mL, MeOH 중 7M)를 잔류물에 첨가하였다. 결과적으로 수득되는 용액을 25℃에서 0.5시간 동안 교반한 뒤, 진공 하에 농축하였다. 잔류물은 분취용 HPLC[컬럼, XBridge Shield RP18 OBD 컬럼, 30 x 150mm 5um; 이동상, A: 물(0.05% NH4HCO3 함유) 및 B: ACN(30%에서부터 7분 후 55%까지); 검출기, UV 220/254 nm]를 통해 정제하였다. 수집한 분획을 동결건조하여 3-아미노-N-[(3R)-7-[(4S,5R)-4-아미노-6-옥사-2-아자스피로[4.5]데칸-2-일]-3,4-디하이드로-2H-1-벤조피란-3-일]-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드를 백색 고체로서 제공하였다(9.3mg, 43%). 1H-NMR(DMSO-d 6 , 400 MHz)δ(ppm): LCMS(ES, m/z): 494[M+H]+
단계 13. 3-아미노-N-[(3R)-7-[(4R,5S)-4-아미노-6-옥사-2-아자스피로[4.5]데칸-2-일]-3,4-디하이드로-2H-1-벤조피란-3-일]-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드
DCM(1.50mL) 중 tert-부틸 N-[(4R,5S)-2-[(3R)-3-[3-아미노-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-아미도]-3,4-디하이드로-2H-1-벤조피란-7-일]-6-옥사-2-아자스피로[4.5]데칸-4-일]카바메이트(20.0mg, 0.034 mmol) 및 TFA(0.500mL)의 용액을 25℃에서 30분 동안 교반하였다. 결과적으로 수득되는 용액을 진공 하에 농축하였다. NH3(2.00mL, MeOH 중 7M)를 잔류물에 첨가하였다. 결과적으로 수득되는 용액을 25℃에서 0.5시간 동안 교반한 뒤, 진공 하에 농축하였다. 잔류물을 분취용 HPLC[컬럼, XBridge Shield RP18 OBD 컬럼, 30 x 150mm 5um; 이동상, A: 물(0.05% NH4HCO3 함유) 및 B: ACN(30%에서부터 7분 후 55%까지); 검출기, UV 220/254 nm]를 통해 정제하였다. 수집한 분획을 동결건조하여 3-아미노-N-[(3R)-7-[(4R,5S)-4-아미노-6-옥사-2-아자스피로[4.5]데칸-2-일]-3,4-디하이드로-2H-1-벤조피란-3-일]-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드를 백색 고체로서 제공하였다(10.2mg, 60%). 1H-NMR(DMSO-d 6 , 400 MHz)δ(ppm): 8.31(d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.47(d, J = 7.6 Hz, 1H), 7.32(d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.21(s, 2H), 6.87(d, J = 8.4 Hz, 1H), 6.11(d, J = 8.4 Hz, 1H), 5.91(s, 1H), 4.29-4.26(m, 1H), 4.16-4.12(m, 1H), 3.82-3.80(m, 1H), 3.77-3.64(m, 2H), 3.60-3.58(m, 1H), 3.37-3.35(m, 1H), 3.11-3.03(m, 2H), 2.85-2.81(m, 3H), 2.59(s, 3H), 1.76-1.70(m, 2H), 1.58-1.43(m, 6H). LCMS(ES, m/z): 494[M+H]+.
실시예 612-1. 3-아미노-N-[(3R)-7-[(4S,5R,9S)-9-아미노-4-메틸-1-옥사-7-아자스피로[4.4]노난-7-일]-3,4-디하이드로-2H-1-벤조피란-3-일]-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드
실시예 612-2. 3-아미노-N-[(3R)-7-[(4R,5R,9S)-9-아미노-4-메틸-1-옥사-7-아자스피로[4.4]노난-7-일]-3,4-디하이드로-2H-1-벤조피란-3-일]-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드
실시예 612-3. 3-아미노-N-[(3R)-7-[(4S,5S,9R)-9-아미노-4-메틸-1-옥사-7-아자스피로[4.4]노난-7-일]-3,4-디하이드로-2H-1-벤조피란-3-일]-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드
실시예 612-4. 3-아미노-N-[(3R)-7-[(4R,5S,9R)-9-아미노-4-메틸-1-옥사-7-아자스피로[4.4]노난-7-일]-3,4-디하이드로-2H-1-벤조피란-3-일]-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드
Figure pct00240
단계 1. 트랜스-벤질 3-아지도-4-하이드록시피롤리딘-1-카복실레이트
물(58mL) 중 NaN3(17.4g, 267 mmol) 용액을 메탄올(348mL) 중 벤질 6-옥사-3-아자바이사이클로[3.1.0]헥산-3-카복실레이트(29.0g, 133mmol) 및 NH4Cl(7.15g, 134 mmol)의 용액에 첨가하였다. 결과적으로 수득되는 용액을 60℃에서 16시간 동안 교반하였다. 25℃로 냉각한 후, pH 값은 NaOH(1M)로 7-8로 조정하였다. 결과적으로 수득되는 용액을 그 다음 물(100mL)로 희석하였다. 용매는 진공 하에 제거하고 잔류물은 디클로로메탄(2 x 150mL)로 추출하였다. 유기 층을 합하여, 무수 황산나트륨 상에서 건조하고, 여과하고, 진공 하에 농축하여 트랜스-벤질 3-아지도-4-하이드록시피롤리딘-1-카복실레이트를 연황색 오일로서 제공하였다(35.0g, 조생성물). LCMS(ES, m/z): 263[M+H]+.
단계 2. 트랜스-벤질 3-[[(tert-부톡시)카보닐]아미노]-4-하이드록시피롤리딘-1-카복실레이트
에틸 아세테이트(2.00L) 중 트랜스-벤질 3-아지도-4-하이드록시피롤리딘-1-카복실레이트(35.0g, 133 mmol) 및 PtO2(10.0g, 44.1 mmol)의 혼합물을 수소 대기(벌룬) 하에 25℃에서 16시간 동안 교반하였다. 고체는 여과해내고, 여과액은 진공 하에 농축하여 트랜스-벤질 3-아미노-4-하이드록시피롤리딘-1-카복실레이트를 연황색 오일로서 제공하였다(30.0g, 조생성물). 트랜스-벤질 3-아미노-4-하이드록시피롤리딘-1-카복실레이트(30.0g, 127 mmol)를 THF(500mL) 및 H2O(500mL)에 용해하였다. 그 다음, TEA(53.0mL, 381 mmol) 및 (Boc)2O(33.3g, 152 mmol)를 5℃ 하에서 첨가하였다. 결과적으로 수득되는 용액을 25℃에서 16시간 동안 교반하였다. 용매는 진공 하에 제거하였다. 잔류물은 에틸 아세테이트(3 x 300mL)로 추출하였다. 유기 층을 합하여 무수 황산나트륨 상에서 건조하고, 여과하고, 진공 하에 농축하였다. 잔류물은 에틸 아세테이트/석유 에테르(1:10)로 세척하여 트랜스-벤질 3-[[(tert-부톡시)카보닐]아미노]-4-하이드록시피롤리딘-1-카복실레이트를 백색 고체로서 제공하였다(35.0g, 82%). LCMS(ES, m/z): 337[M+H]+.
단계 3. 벤질 3-[[(tert-부톡시)카보닐]아미노]-4-옥소피롤리딘-1-카복실레이트
DMSO(15.0mL, 339 mmol)를 무수 THF(120mL) 중 옥살산 이염화물(7.55mL, 89.2 mmol)의 용액에 -78℃에서 첨가하였다. -78℃에서 15분 동안 교반한 후, 무수 THF(600mL) 중 트랜스-벤질 3-[[(tert-부톡시)카보닐]아미노]-4-하이드록시피롤리딘-1-카복실레이트(30.0g, 89.2 mmol)의 용액을 -78℃에서 첨가하였고, 그 다음 TEA(37.2mL, 268 mmol)를 -78℃에서 첨가하였다. 반응물은 -60℃ 하에서 30분 동안 교반하였다. 반응은 H2O(50mL)로 ??치시켰다. 유기 층은 수집하고, 수성 상은 에틸 아세테이트(2 x 30mL)로 추출하였다. 유기층을 합하여 무수 황산나트륨 상에서 건조하고, 여과 및 농축하였다. 잔류물은 실리카겔 크로마토그래피(1/10 에틸 아세테이트/석유 에테르로 용출)로 정제하여 벤질 3-[[(tert-부톡시)카보닐]아미노]-4-옥소피롤리딘-1-카복실레이트를 연황색 고체로서 제공하였다(21.0g, 67%). LCMS(ES, m/z): 335[M+H]+.
단계 4. 벤질 3-(부트-3-엔-2-일)-4-[[(tert-부톡시)카보닐]아미노]-3-하이드록시피롤리딘-1-카복실레이트
(부트-3-엔-2-일)(클로로)마그네슘(46.6mL, THF 중 0.25M)의 용액을 THF(40mL) 중 벤질 3-[[(tert-부톡시)카보닐]아미노]-4-옥소피롤리딘-1-카복실레이트(1.50g, 4.48 mmol)의 교반 용액에 -78℃에서 첨가하였다. 온도는 자연적으로 -10℃로 증가시켰다. 반응은 그 다음 NH4Cl(40mL, 포화)으로 ??치시켰다. 결과적으로 수득되는 혼합물을 에틸 아세테이트(3 x 20mL)로 추출하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조하고, 여과하고, 여과액은 진공 하에 농축하였다. 잔류물을 역상 크로마토그래피[컬럼: C18 실리카겔; 이동상, A: 물(0.05% TFA 함유) 및 B: ACN(5%에서부터 30분 후 30%까지); 검출기: UV 254/220 nm]을 통해 정제하여 벤질 3-(부트-3-엔-2-일)-4-[[(tert-부톡시)카보닐]아미노]-3-하이드록시피롤리딘-1-카복실레이트(1.10g, 60%). LCMS(ES, m/z): 391[M+H]+.
단계 5. 벤질 4-[(tert-부톡시카보닐)아미노]-3-하이드록시-3-(4-하이드록시부탄-2-일)피롤리딘-1-카복실레이트
9-보라바이사이클로[3.3.1]노난(30.7mL, THF 중 0.5M)의 용액을 THF(40mL) 중 벤질 3-(부트-3-엔-2-일)-4-[(tert-부톡시카보닐)아미노]-3-하이드록시피롤리딘-1-카복실레이트(600mg, 1.53 mmol)의 용액에 0℃에서 첨가하였다. 혼합물을 21℃에서 15시간 동안 교반한 후, H2O2(20mL, 30%) 및 NaOAc(20mL, 포화)을 0℃에서 용액에 첨가하였다. 결과적으로 수득되는 혼합물을 20℃에서 1시간 동안 교반하였다. 반응은 MeOH로 0℃에서 ??치시키고 용액을 21℃에서 2시간 동안 교반하였다. 결과적으로 수득되는 혼합물을 감압 하에 농축하였다. 잔류물은 에틸 아세테이트(10 mL)에 용해하고, 물(2 x 5 mL)로 세척하였다. 유기 층을 합하여 무수 황산나트륨 상에서 건조하고, 여과하고, 진공 하에 농축하였다. 잔류물은 역상 크로마토그래피[컬럼: C18 실리카겔; 이동상, A: 물(0.05% TFA 함유) 및 B: ACN(20%에서부터 20분 후 85%까지); 검출기: 220/254 nm]로 정제하여 벤질 4-[(tert-부톡시카보닐)아미노]-3-하이드록시-3-(4-하이드록시부탄-2-일)피롤리딘-1-카복실레이트를 황색 오일로서 제공하였다(500mg, 76%). LCMS(ES, m/z): 409[M+H]+.
단계 6. 벤질 9-[(tert-부톡시카보닐)아미노]-4-메틸-1-옥사-7-아자스피로[4.4]노난-7-카복실레이트
DCM(4mL) 중 벤질 4-[(tert-부톡시카보닐)아미노]-3-하이드록시-3-(4-하이드록시부탄-2-일)피롤리딘-1-카복실레이트(440 mg, 1.08 mmol), Et3N(0.450mL, 3.23 mmol) 및 MsCl(172mg, 1.51 mmol)의 용액을 20℃에서 1시간 동안 교반하고 60℃에서 1시간 동안 교반하였다. 혼합물을 진공 하에 농축하였다. 잔류물은 역상 크로마토그래피[컬럼: C18 실리카겔; 이동상, A: 물(0.05% NH4HCO3 함유) 및 B: ACN(15%에서부터 20분 후 80% ACN까지); 검출기: UV 254/220 nm]로 정제하였다. 수집한 분획을 진공 하에 농축하여 벤질 9-[(tert-부톡시카보닐)아미노]-4-메틸-1-옥사-7-아자스피로[4.4]노난-7-카복실레이트를 황색 고체로서 제공하였다(400mg, 54%). LCMS (ES, m/z): 391[M+H]+.
단계 7. tert-부틸 N-[4-메틸-1-옥사-7-아자스피로[4.4]노난-9-일]카바메이트
벤질 9-[[(tert-부톡시)카보닐]아미노]-4-메틸-1-옥사-7-아자스피로[4.4]노난-7-카복실레이트(550mg, 1.41 mmol), Pd/C(400mg, 10%) 및 EA(15mL)의 혼합물을 수소 대기(벌룬) 하에 28℃에서 3시간 동안 교반하였다. 고체는 여과해냈다. 여과액은 진공 하에 농축하여 tert-부틸 N-[4-메틸-1-옥사-7-아자스피로[4.4]노난-9-일]카바메이트를 황색 고체로서 제공하였다(200mg, 조생성물). LCMS(ES, m/z): 257[M+H]+.
단계 8. 벤질 N-[(3R)-7-(9-[[(tert-부톡시)카보닐]아미노]-4-메틸-1-옥사-7-아자스피로[4.4]노난-7-일)-3,4-디하이드로-2H-1-벤조피란-3-일]카바메이트
벤질 N-[(3R)-7-브로모-3,4-디하이드로-2H-1-벤조피란-3-일]카바메이트(200 mg, 0.621 mmol), tert-부틸 N-[4-메틸-1-옥사-7-아자스피로[4.4]노난-9-일]카바메이트(142mg, 0.621 mmol), 3세대 RuPhos 전구촉매(46.2mg, 0.062 mmol), RuPhos(51.2 mg, 0.110 mmol), Cs2CO3(539 mg, 1.66 mmol) 및 톨루엔(7mL)의 혼합물을 95℃에서 3시간 동안 교반하였다. 28℃로 냉각한 후, 고체는 여과해냈다. 여과액은 진공 하에 농축하였다. 잔류물은 실리카겔 크로마토그래피(1:3 에틸 아세테이트/석유 에테르로 용출)로 정제하여 벤질 N-[(3R)-7-(9-[[(tert-부톡시)카보닐]아미노]-4-메틸-1-옥사-7-아자스피로[4.4]노난-7-일)-3,4-디하이드로-2H-1-벤조피란-3-일]카바메이트를 황색 고체로서 제공하였다(110mg, 33%). LCMS(ES, m/z): 538[M+H]+.
단계 9. tert-부틸 N-[7-[(3R)-3-아미노-3,4-디하이드로-2H-1-벤조피란-7-일]-4-메틸-1-옥사-7-아자스피로[4.4]노난-9-일]카바메이트
EA(5mL) 중 벤질 N-[(3R)-7-(9-[[(tert-부톡시)카보닐]아미노]-4-메틸-1-옥사-7-아자스피로[4.4]노난-7-일)-3,4-디하이드로-2H-1-벤조피란-3-일]카바메이트(110mg, 0.205 mmol) 및 Pd/C(110mg, 10%)의 혼합물을 수소 대기(벌룬) 하에 28℃에서 1시간동안 교반하였다. 고체는 여과해냈다. 여과액은 진공 하에 농축하여 tert-부틸 N-[7-[(3R)-3-아미노-3,4-디하이드로-2H-1-벤조피란-7-일]-4-메틸-1-옥사-7-아자스피로[4.4]노난-9-일]카바메이트를 황색 오일로서 제공하였다(100mg, 조생성물). LCMS(ES, m/z): 404[M+H]+.
단계 10 . tert-부틸 N-[7-[(3R)-3-[3-아미노-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-아미도]-3,4-디하이드로-2H-1-벤조피란-7-일]-4-메틸-1-옥사-7-아자스피로[4.4]노난-9-일]카바메이트
HBTU(112mg, 0.297 mmol)를 DMA(2mL) 중 tert-부틸 N-[7-[(3R)-3-아미노-3,4-디하이드로-2H-1-벤조피란-7-일]-4-메틸-1-옥사-7-아자스피로[4.4]노난-9-일]카바메이트(100mg, 0.248 mmol), 3-아미노-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복실산 (51.6mg, 0.248 mmol) 및 TEA(0.100mL, 0.987 mmol)의 용액에 첨가하였다. 결과적으로 수득되는 용액을 25℃에서 2시간 동안 교반하였다. 결과적으로 수득되는 혼합물을 역상 크로마토그래피[컬럼: C18 실리카겔; 이동상, A: 물(10 mmol/L NH4HCO3 함유) 및 B: ACN(5%에서부터 30분 후 80%까지); 검출기: UV 254/220 nm]로 정제하였다. 수집한 분획을 농축하여 tert-부틸 N-[7-[(3R)-3-[3-아미노-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-아미도]-3,4-디하이드로-2H-1-벤조피란-7-일]-4-메틸-1-옥사-7-아자스피로[4.4]노난-9-일]카바메이트를 황색 고체로서 제공하였다(100mg, 65%). LCMS(ES, m/z): 594[M+H]+.
단계 11. tert-부틸 N-[(4S,5R,9S)-7-[(3R)-3-[3-아미노-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-아미도]-3,4-디하이드로-2H-1-벤조피란-7-일]-4-메틸-1-옥사-7-아자스피로[4.4]노난-9-일]카바메이트, tert-부틸 N-[(4S,5S,9R)-7-[(3R)-3-[3-아미노-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-아미도]-3,4-디하이드로-2H-1-벤조피란-7-일]-4-메틸-1-옥사-7-아자스피로[4.4]노난-9-일]카바메이트, tert-부틸 N-[(4R,5R,9S)-7-[(3R)-3-[3-아미노-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-아미도]-3,4-디하이드로-2H-1-벤조피란-7-일]-4-메틸-1-옥사-7-아자스피로[4.4]노난-9-일]카바메이트 및 tert-부틸 N-[(4R,5S,9R)-7-[(3R)-3-[3-아미노-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-아미도]-3,4-디하이드로-2H-1-벤조피란-7-일]-4-메틸-1-옥사-7-아자스피로[4.4]노난-9-일]카바메이트
tert-부틸 N-[7-[(3R)-3-[3-아미노-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-아미도]-3,4-디하이드로-2H-1-벤조피란-7-일]-4-메틸-1-옥사-7-아자스피로[4.4]노난-9-일]카바메이트(100mg, 0.168 mmol)를 키랄 분취용 HPLC[컬럼: Chiralpak IA, 2 x 25 cm, 5 um; 이동상, A: HEX:DCM=3:1(0.2% IPA 함유) 및 B: IPA:DCM=1:1(16분 후까지 60% 유지); 유속: 20 mL/min; 220/254 nm]로 분리하였다. 1차 용출 이성질체 (RT1:5.379 분)를 수집하고 진공 하에 농축하여 tert-부틸 N-[(4S,5R,9S)-7-[(3R)-3-[3-아미노-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-아미도]-3,4-디하이드로-2H-1-벤조피란-7-일]-4-메틸-1-옥사-7-아자스피로[4.4]노난-9-일]카바메이트를 황색 고체로서 제공하였다(15.0mg, 14%). 2차 용출 이성질체(RT2:7.043 분)는 수집하여 진공 하에 농축하여 tert-부틸 N-[(4S,5S,9R)-7-[(3R)-3-[3-아미노-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-아미도]-3,4-디하이드로-2H-1-벤조피란-7-일]-4-메틸-1-옥사-7-아자스피로[4.4]노난-9-일]카바메이트를 황색 고체로서 제공하였다(15.0mg, 14%). 3차 용출 이성질체(RT3:9.337 분)는 수집하여 진공 하에 농축하여 tert-부틸 N-[(4R,5R,9S)-7-[(3R)-3-[3-아미노-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-아미도]-3,4-디하이드로-2H-1-벤조피란-7-일]-4-메틸-1-옥사-7-아자스피로[4.4]노난-9-일]카바메이트를 황색 고체로서 제공하였다(15.0mg, 14%). 4차 용출 이성질체(RT4: 14.107 분)는 수집하여 진공 하에 농축하여 tert-부틸 N-[(4R,5S,9R)-7-[(3R)-3-[3-아미노-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-아미도]-3,4-디하이드로-2H-1-벤조피란-7-일]-4-메틸-1-옥사-7-아자스피로[4.4]노난-9-일]카바메이트를 황색 고체로서 제공하였다(15.0mg, 14%). LCMS(ES, m/z): 594[M+H]+.
단계 12. 3-아미노-N-[(3R)-7-[(4S,5R,9S)-9-아미노-4-메틸-1-옥사-7-아자스피로[4.4]노난-7-일]-3,4-디하이드로-2H-1-벤조피란-3-일]-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드
DCM(2mL) 중 tert-부틸 N-[(4S,5R,9S)-7-[(3R)-3-[3-아미노-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-아미도]-3,4-디하이드로-2H-1-벤조피란-7-일]-4-메틸-1-옥사-7-아자스피로[4.4]노난-9-일]카바메이트(11.0mg, 0.019 mmol) 및 TFA(1mL)의 용액을 25℃에서 30분 동안 교반하였다. 결과적으로 수득되는 혼합물을 진공 하에 농축하였다. 잔류물에 NH3(2.00 mL, MeOH 중 7M) 용액을 첨가하였다. 결과적으로 수득되는 용액을 25℃에서 0.5시간 동안 교반한 뒤, 진공 하에 농축하였다. 잔류물은 분취용 HPLC[컬럼: XBridge Shield RP18 OBD 컬럼, 5um, 19 x 150 mm; 이동상, A: 물 (10mmol/L NH4HCO3 함유) 및 B: ACN(30%에서부터 8분 후 50%까지); 유속: 25 mL/min; 검출기: 220 nm]로 정제하였다. 수집한 분획을 동결건조하여 3-아미노-N-[(3R)-7-[(4S,5R,9S)-9-아미노-4-메틸-1-옥사-7-아자스피로[4.4]노난-7-일]-3,4-디하이드로-2H-1-벤조피란-3-일]-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드를 백색 고체로서 제공하였다(7.20mg, 76%). 1H-NMR(DMSO-d 6 , 400 MHz)δ(ppm): 8.33(d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.47(br s, 1H), 7.32(d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.21(br s, 2H), 6.87(d, J = 8.0 Hz, 1H), 6.08(d, J = 6.8 Hz, 1H), 5.89(s, 1H), 4.30-4.20(m, 1H), 4.16-4.13(m, 1H), 3.86-3.72(m, 3H), 3.41-3.32(m, 1H), 3.26-3.21(m, 2H), 3.07-3.04(m, 1H), 2.86-2.82(m, 3H), 2.59(s, 3H), 2.30-2.24(m, 1H), 2.17-2.13(m, 1H), 1.93(br s, 2H), 1.64-1.59(m, 1H), 1.03(d, J = 6.8 Hz, 3H). LCMS(ES, m/z): 494[M+H]+.
단계 13. 3-아미노-N-[(3R)-7-[(4R,5R,9S)-9-아미노-4-메틸-1-옥사-7-아자스피로[4.4]노난-7-일]-3,4-디하이드로-2H-1-벤조피란-3-일]-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드
DCM(3mL) 중 tert-부틸 N-[(4R,5R,9S)-7-[(3R)-3-[3-아미노-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-아미도]-3,4-디하이드로-2H-1-벤조피란-7-일]-4-메틸-1-옥사-7-아자스피로[4.4]노난-9-일]카바메이트(12.0mg, 0.020 mmol) 및 TFA(1.00mL)의 용액을 25℃에서 30분 동안 교반하였다. 결과적으로 수득되는 혼합물을 진공 하에 농축하였다. 잔류물에 NH3(2mL, MeOH 중 7M)의 용액을 첨가하였다. 결과적으로 수득되는 용액을 25℃에서 0.5시간 동안 교반한 뒤, 진공 하에 농축하였다. 잔류물은 분취용 HPLC[컬럼: XBridge Prep C18 OBD 컬럼, 19 x 150 mm 5 um; 이동상, A: 물(10 mmol/L NH4HCO3 함유) 및 B: ACN(30%에서부터 8분 후 50%까지); 유속: 25 mL/min; 검출기: 220 nm]로 정제하였다. 수집한 분획을 동결건조하여 3-아미노-N-[(3R)-7-[(4R,5R,9S)-9-아미노-4-메틸-1-옥사-7-아자스피로[4.4]노난-7-일]-3,4-디하이드로-2H-1-벤조피란-3-일]-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드를 백색 고체로서 제공하였다(8.10 mg, 78%). 1H-NMR(DMSO-d 6 , 400 MHz)δ(ppm): 8.33(d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.47(br s, 1H), 7.32(d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.21(br s, 2H), 6.87(d, J = 8.4 Hz, 1H), 6.05-6.03(m, 1H), 5.84(s, 1H), 4.31-4.21(m, 1H), 4.15-4.12(m, 1H), 3.98-3.95(m, 1H), 3.81-3.76(m, 1H), 3.70-3.67(m, 1H), 3.39-3.32(m, 1H), 3.29-3.25(m, 2H), 3.10-3.07(m, 1H), 2.85-2.80(m, 3H), 2.59(s, 3H), 2.20-2.12(m, 1H), 2.07-1.99(m, 1H), 1.88-1.79(m, 1H), 1.50(br s, 2H), 1.14(d, J = 6.8 Hz, 3H). LCMS(ES, m/z): 494[M+H]+.
단계 14. 3-아미노-N-[(3R)-7-[(4S,5S,9R)-9-아미노-4-메틸-1-옥사-7-아자스피로[4.4]노난-7-일]-3,4-디하이드로-2H-1-벤조피란-3-일]-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드
DCM(2mL) 중 tert-부틸 N-[(4S,5S,9R)-7-[(3R)-3-[3-아미노-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-아미도]-3,4-디하이드로-2H-1-벤조피란-7-일]-4-메틸-1-옥사-7-아자스피로[4.4]노난-9-일]카바메이트(10.0mg, 0.017 mmol) 및 TFA(1mL)의 용액을 25℃에서 30분 동안 교반하였다. 결과적으로 수득되는 혼합물을 진공 하에 농축하였다. 잔류물에 NH3(1.00 mL, MeOH 중 7M) 용액을 첨가하였다. 결과적으로 수득되는 용액을 25℃에서 0.5시간 동안 교반한 뒤, 진공 하에 농축하였다. 잔류물은 분취용 HPLC[컬럼: XBridge Prep C18 OBD 컬럼, 19 x 150 mm, 5 um; 이동상, A: 물(10 mmol/L NH4HCO3 함유) 및 B: ACN(30%에서부터 8분 후 50%까지); 유속: 60 mL/min; 검출기: 220 nm)로 정제하였다. 수집한 분획을 동결건조하여 3-아미노-N-[(3R)-7-[(4S,5S,9R)-9-아미노-4-메틸-1-옥사-7-아자스피로[4.4]노난-7-일]-3,4-디하이드로-2H-1-벤조피란-3-일]-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드를 백색 고체로서 제공하였다(7.30mg, 84%). 1H-NMR(DMSO-d 6 , 400 MHz)δ(ppm): 8.33(d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.47(br s, 1H), 7.32(d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.21(br s, 2H), 6.86(d, J = 8.4 Hz, 1H), 6.08-6.06(m, 1H), 5.88(s, 1H), 4.31-4.20(m, 1H), 4.15-4.12(m, 1H), 3.83-3.72(m, 3H), 3.40-3.32(m, 1H), 3.25-3.18(m, 2H), 3.06-3.04(m, 1H), 2.85-2.82(m, 3H), 2.59(s, 3H), 2.28-2.22(m, 1H), 2.20-2.11(m, 1H), 1.63-1.58(m, 3H), 1.03(d, J = 6.8 Hz, 3H). LCMS(ES, m/z): 494[M+H]+.
단계 15. 3-아미노-N-[(3R)-7-[(4R,5S,9R)-9-아미노-4-메틸-1-옥사-7-아자스피로[4.4]노난-7-일]-3,4-디하이드로-2H-1-벤조피란-3-일]-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드
DCM(2mL) 중 tert-부틸 N-[(4R,5S,9R)-7-[(3R)-3-[3-아미노-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-아미도]-3,4-디하이드로-2H-1-벤조피란-7-일]-4-메틸-1-옥사-7-아자스피로[4.4]노난-9-일]카바메이트(12.0mg, 0.020 mmol) 및 TFA(1.00 mL)의 용액을 25℃에서 30분 동안 교반하였다. 결과적으로 수득되는 혼합물을 진공 하에 농축하였다. 잔류물에 NH3(1.00 mL, MeOH 중 7M)의 용액을 첨가하였다. 결과적으로 수득되는 용액을 25℃에서 0.5시간 동안 교반한 뒤, 진공 하에 농축하였다. 잔류물은 분취용 HPLC[컬럼: XBridge Prep C18 OBD 컬럼, 19 x 150 mm 5 um; 이동상, A: 물 (10 mmol/L NH4HCO3 함유) 및 B: ACN(30%에서부터 8분 후 50%까지); 유속: 25 mL/min; 검출기: 220 nm]로 정제하였다. 수집한 분획을 동결건조하여 3-아미노-N-[(3R)-7-[(4R,5S,9R)-9-아미노-4-메틸-1-옥사-7-아자스피로[4.4]노난-7-일]-3,4-디하이드로-2H-1-벤조피란-3-일]-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드를 백색 고체로서 제공하였다(7.60mg, 73%). 1H-NMR(DMSO-d 6 , 400 MHz)δ(ppm): 8.33(d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.47(br s 7.6 Hz, 1H), 7.32(d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.21(br s, 2H), 6.87(d, J = 8.4 Hz, 1H), 6.05-6.03 (m, 1H), 5.84 (s, 1H), 4.31-4.21(m, 1H), 4.15-4.12(m, 1H), 3.98-3.95(m, 1H), 3.82-3.77(m, 1H), 3.70-3.67(m, 1H), 3.40-3.32(m, 1H), 3.29-3.25(m, 2H), 3.10-3.08(m, 1H), 2.85-2.80(m, 3H), 2.59(s, 3H), 2.19-2.12(m, 1H), 2.07-1.99(m, 1H), 1.88-1.79(m, 1H), 1.51(br s, 2H), 1.14(d, J = 6.8 Hz, 3H). LCMS(ES, m/z): 494[M+H]+.
실시예 A-1(a): 생화학 검정: USP28 활성에 대한 유비퀴틴-로다민 110 검정
본 검정은 20mM Tris-HCl[pH 8.0, (1M Tris-HCl, pH 8.0 용액; Corning 46-031-CM)], 3mM BME(2-머캅토에탄올); Sigma 63689-25ML-F), 0.03% BGG(0.22μM 여과됨, Sigma, G7516-25G) 및 0.01 % Triton X-100(Sigma, T9284-10L)을 함유하는 검정 완충액에서 최종 부피 9μL 중에서 수행하였다. DMSO에 10 포인트, 3배 연속 희석의 나노리터 양을 최고 용량부터 최저 용량까지 25μM 내지 1.3nM의 최종 시험 농도로서 1536 분석 평판(Corning, # 3724BC)에 각각 미리 분주하였다. 효소 USP28, His 태그가 붙은 USP28-FL-포유류 작제물(단백질 발현 및 정제 절차는 이하에 설명됨). 농도 및 배양 시간은 고정된 기질 농도에서 초기 속도 조건을 유지하면서 최대 신호 대 배경에 대해 최적화시켰다. 이 검정에서 효소의 최종 농도는 75pM이었다. 최종 기질(Ub-Rh110; 유비퀴틴-로다민 110, UbiQ-126) 농도는 [Ub-Rh110]<<Km에서 25 nM이었다. 3μL의 2x 효소를 USP25에 의해 30 분 동안 사전항온처리된 검정 평판(화합물에 의해 사전 스탬프처리됨)에 첨가한 다음, 3μL의 2x Ub-Rh110을 검정 평판에 첨가하였다. 3μL의 정지 용액[10mM 시트르산의 최종 농도(Sigma, 251275-500G)]을 첨가하기 전에 평판을 실온에서 45분 동안 항온처리하였다. 형광은 Envision(485nm에서 여기 및 535nm에서 방출, Perkin Elmer) 또는 PheraSTAR(485nm에서 여기 및 535nm에서 방출, BMG Labtech)에서 판독하였다.
His-태그화된 USP28-FL-포유류 작제물에 대한 단백질 발현 및 정제 절차
USP28(1-1077)-TEV-6*His(pTT5 벡터)의 발현은 Expi293f 세포(유니프로트 ID: Q96RU2-1로부터 유래된 서열)에서 수행하였다. 세포를 용해 완충액 B 50mM Bicine, pH 8.0, 20mM NaCl, 5% 글리세롤, 0.1% CHAPS, 5mM β-ME, 1mM PMSF, 1ug/ml Leupeptin, 1ug/ml Pepstatin)에 재현탁시키고 초음파처리로 용해시켰다. 불용성 물질을 원심분리로 제거하고 상청액을 Ni 완충액 A(50mM Bicine, pH 8.0, 20mM NaCl, 5% 글리세롤, 0.1% CHAPS, 5mM β-ME)로 평형화된 Ni-NTA 컬럼(GE Healthcare) 위에 로드하고, A280이 기준선에 도달할 때까지 Ni 완충액 A + 20mM 이미다졸로 세척하였다. 단백질은 Ni 완충액 B(50mM Bicine, pH 8.0, 20mM NaCl, 5% 글리세롤, 0.1% CHAPS, 5mM β-ME, 300mM 이미다졸)로 용출시켰다. 단백질은 50mM Bicine, pH 8.0, 20mM NaCl, 5% 글리세롤, 0.1% CHAPS, 5mM β-ME로 평형화된 Superdex™ 200 10/300 GL 컬럼(GE Healthcare)을 사용하여 추가로 정제하였다. 단백질은 2.5 mgml-1로 농축하고 액체 N2에서 급속냉동하고 -80℃에 보관하였다.
실시예 A-1(b): 생화학 검정: USP28 활성에 대한 유비퀴틴-로다민 110 검정.
각 검정은 20mM Tris-HCl[pH 8.0, (1M Tris-HCl, pH 8.0 용액; Corning 46-031-CM)], 2mM CaCl2(1M 염화칼슘 용액; Sigma # 21114) 2mM BME (2-머캅토에탄올; Sigma 63689-25ML-F), 0.01% Prionex(0.22μM 여과됨, Sigma #G-0411), 및 0.01% Triton X-100를 포함하는 검정 완충액에서 20μL의 최종 부피 중에서 수행하였다. 스톡 화합물 용액은 DMSO 중에 10mM로서 -20℃에 보관하였다. 검정 전 최대 1달 전에 2mM 시험 화합물을 검정 평판(Black, 저 용량; Corning # 3820)에 미리 분주하고, -20℃에 동결시켰다. 사전스탬프된(Prestamped) 검정 평판을 검정 당일에 실온에 놓아 두었다. 선별을 위해, 최종 선별 농도 10μM(DMSO(fc) = 0.5%)을 위해 2mM을 100nL 미리 분주하였다. 효소[USP28, 작제물 USP28(USP28-5(1-1077)-TEV-6*His; LifeSensors)] 농도 및 항온처리 시간은 고정된 기질 농도에서 초기 속도 조건을 유지하면서 최대 신호 대 배경에 대해 최적화하였다. 본 검정에서 효소의 최종 농도는 400pM이었다. 최종 기질(Ub-Rh110; 유비퀴틴-로다민 110, R&D Systems #U-555) 농도는 [Ub-Rh110]<<Km인 25 nM이었다. 10 μL의 2x 효소는 2x Ub-Rh110과 동시에 검정 평판(화합물에 의해 사전스탬프됨)에 첨가하거나, 또는 화합물 평판에 10μL의 2 x Ub-Rh110을 첨가하기 40분 전에 USP28과 사전항온처리하였다. 평판은 Envision(485nm에서 여기 및 535nm에서 방출; Perkin Elmer) 또는 PheraSTAR(485nm에서 여기 및 535nm에서 방출; BMG Labtech)에서 형광을 판독하기 전에 실온에서 90분 동안 적층시켜 항온처리하였다.
후속 연구를 위해, 각 검정은 20mM Tris-HCl[pH 8.0, (1M Tris-HCl, pH 8.0 용액; Corning 46-031-CM)], 3mM BME(2-머캅토에탄올; Sigma 63689-25ML-F), 0.03% BGG(0.22 μM 여과됨, Sigma, G7516-25G) 및 0.01% Triton X-100(Sigma, T9284-10L)을 함유하는 검정 완충액에서 15μL의 최종 부피에서 수행하였다. 8 포인트 또는 10 포인트 중 어느 하나의 3배 연속 DMSO 중 희석물의 나노리터 양을 검정 평판(Perkin Elmer, ProxiPlate-384 F Plus, #)에 최종 시험 농도가 각각 25μM 내지 11nM 또는 25μM 내지 1.3nM가 되도록 사전 분주하였다. 효소 USP28, 작제물 USP28(USP28-5(1-1077)-TEV-6*His; LifeSensors) 농도 및 항온처리 시간은 고정된 기질 농도에서 초기 속도 조건을 유지하면서 최대 신호 대 배경비에 대해 최적화하였다. 상기 검정에서 효소의 최종 농도는 75pM이었다. 최종 기질(Ub-Rh110; 유비퀴틴-로다민 110, R&D Systems #U-555) 농도는 [Ub-Rh110]<<Km인 25 nM이었다. 5μL의 2x 효소는 30분 동안 USP28와 사전항온처리된 검정 평판(화합물에 의해 사전 스탬프됨)에 첨가하였고, 그 다음 5μL의 2x Ub-Rh110을 검정 평판에 첨가하였다. 평판은 적층 상태로 실온에서 20분 동안 항온처리한 후, 5μL의 종결 용액을 첨가하였다[최종 농도 10mM 시트르산(Sigma, 251275-500G)]. 형광은 Envision(485nm에서 여기 및 535nm에서 방출; Perkin Elmer) 또는 PheraSTAR(485nm에서 여기 및 535nm에서 방출; BMG Labtech)에서 판독하였다.
실시예 A-2: 생체내 이종이식편 연구
마우스에게 인간 호산구 EOL-1(DSMZ no. ACC 386) 세포(NCI)를 옆구리측에 피하 주사하였다. 세포 주사(원, 도 2A) 및 비히클 단독 주사(삼각형, 도 2B)를 모니터하였고, 종양이 임계 크기(예를 들어, 약 1000 mm3)에 도달했을 때, 마우스를 비히클 대조 그룹 및 참조 표준 그룹을 포함한 처리 그룹으로 무작위로 분류하였다. 도 2B에 도시된 그룹들은 다음과 같다: 그룹 1, 격일로 경구 투여된 비히클; 그룹 2, 격일로 경구 투여된 제1 시험 화합물[(S)-아미노-N-(5-플루오로-7-(피페라진-1-일)크로만-3-일)-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드] 120 mg/kg; 그룹 3, 격일로 경구 투여된 제1 시험 화합물 80 mg/kg; 그룹 4, 1일 2회, 이후 격일로 피하 투여된 제1 시험 화합물 80 mg/kg; 그룹 5, 연속 4일 동안 1일 2회 피하 투여된 제1 시험 화합물, 60 mg/kg, 그리고 3일 동안 비투여. 도 2C에서 그룹 6은 격일로 비히클의 경구 투여를 나타내고; 그룹 7은 연속 5일 동안 1일 2회 피하 투여된 제1 시험 화합물 50mg/kg, 그 다음 2일 동안 비투여; 그룹 8, 1일 2회 경구 투여된 제2 시험 화합물 (7-아미노-N-[(6S)-2-[(3S, 4S)-3-아미노-4-메톡시피롤리딘-1-일]-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-6-일]-3-메틸티에노[2,3-b]피라진-6-카복사미드) 40 mg/kg; 및 그룹 9, 1일 2회 경구 투여된 제2 시험 화합물 60 mg/kg. 마우스의 무게를 측정하고 지정된 날짜에 버니어 캘리퍼스를 사용하여 종양을 측정하였다. 종양 부피는 식 (길이/폭2)/2에 따라 계산하였다. 시험 화합물의 투여는 시간이 지남에 따라 종양 성장의 저하를 나타내었다.
실시예 A-3: 생화학 검정: USP25 활성에 대한 유비퀴틴-로다민 110 검정.
본 검정은 20mM Tris-HCl[pH 8.0, (1M Tris-HCl, pH 8.0 용액; Corning 46-031-CM)], 3mM BME(2-머캅토에탄올; Sigma 63689-25ML-F), 0.03% BGG(0.22μM 여과됨, Sigma, G7516-25G), 및 0.01% Triton X-100(Sigma, T9284-10L)을 함유하는 검정 완충액에서 9μL의 최종 부피로 수행하였다. 10 포인트의 3배 연속 DMSO 중 희석물의 나노리터 양을 1536 검정 평판(Corning, #3724BC)에 최종 시험 농도가 각각 최고 용량부터 최저 용량까지 25μM 내지 1.3nM이도록 사전 분주하였다. 효소 USP25, 작제물 USP25-His6,(Boston Biochem E-546). 농도 및 항온처리 시간은 고정된 기질 농도에서 초기 속도 조건을 유지하면서 최대 신호 대 배경비가 되도록 최적화하였다. 상기 검정에서 효소의 최종 농도는 75pM이었다. 최종 기질(Ub-Rh110; 유비퀴틴-로다민 110, R&D Systems #U-555) 농도는 [Ub-Rh110]<<Km인 25 nM이었다. 3μL의 2x 효소는 30분 동안 USP25와 사전항온처리된 검정 평판(화합물에 의해 사전 스탬프됨)에 첨가하였고, 그 다음 3μL의 2x Ub-Rh110을 검정 평판에 첨가하였다. 평판은 실온에서 45분 동안 항온처리한 후, 3μL의 종결 용액[최종 농도 10mM 시트르산(Sigma, 251275-500G)]을 첨가하였다. 형광은 Envision(485nm에서 여기 및 535nm에서 방출; Perkin Elmer) 또는 PheraSTAR(485nm에서 여기 및 535nm에서 방출; BMG Labtech)에서 판독하였다.
검정 방식 실시예 A-1(a), A-1(b) 및 A-2에 대해, 데이터는 다음 방정식에 기초하여 대조군 웰과 비교한 억제율(%)로서 기록하였다: 억제율% = 1-((FLU-AveLow)/(AveHigh-AveLow)), 여기서 FLU = 측정된 형광, AveLow = 효소 무함유 대조군의 평균 형광(n = 16), AveHigh = DMSO 대조군의 평균 형광(n = 16). IC50 값은 Activity Base 소프트웨어 패키지: IDBS XE Designer Model205에 포함된 표준 4 파라미터 로지스틱 피팅 알고리즘의 곡선 피팅에 의해 결정되었다. 데이터는 Levenburg Marquardt 알고리즘을 사용하여 피팅한다.
본 개시내용에 따른 생화학적 IC50 검정(IC50 범위)에서 화합물의 활성은 다음에 따라 이하 표 24에 기록된다:
"+": >2μM; "++": 0.2-2μM; "+++": 0.05-0.2μM; "++++": 0.001-0.05μM.
Figure pct00241
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Figure pct00539
본 기술분야의 기술자는 통상적인 실험만으로 표 24, 표 25, 표 26, 표 27, 및 표 28의 화합물들이 본원에 개시된 합성 반응식, 또는 이의 조합을 사용하여 제조될 수 있는 것임을 인식하거나, 확인할 수 있을 것이다.
등가물
본 기술분야의 기술자는 통상적인 실험만을 사용하여 본원에 구체적으로 기재된 특정 구체예들에 대한 다수의 등가물을 인식하거나 확인할 수 있을 것이다. 이러한 등가물은 이하 청구범위의 영역에 포함되는 것으로 간주한다.

Claims (17)

  1. 하기 화학식 (I)의 화합물, 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 형태:
    Figure pct00540
    (I)
    여기서, Y는 C(R3) 및 N으로부터 선택되고;
    R'는 H 및 CH3으로부터 선택되고;
    R1은 R5 및/또는 R6으로부터 선택되는 하나 이상의 치환체에 의해 선택적으로 치환된 6원 내지 11원 헤테로아릴로부터 선택되고;
    R2는 N-연결된 4원 내지 12원 헤테로사이클릴 및 C-연결된 4원 내지 12원 헤테로사이클릴로부터 선택되며, 여기서 상기 헤테로사이클릴은 하나 이상의 R5에 의해 선택적으로 치환되고, 추가로 수소를 함유하는 임의의 R2 기는 중수소로 대체된 하나 이상의 수소를 가질 수 있고;
    각 R3은 H, 중수소, (C1-C6)알킬, (C1-C6)알콕시, (C1-C6)할로알킬, (C1-C6)할로알콕시, 할로겐, -OH, -CN으로부터 독립적으로 선택되고, 여기서, 각각의 (C1-C6)알킬, (C1-C6)알콕시, (C1-C6)할로알킬, (C1-C6)할로알콕시, 사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬, 아릴, 및 헤테로아릴 기는 하나 이상의 R7에 의해 선택적으로 치환되며;
    R4는 H, 중수소, (C1-C6)알킬, 할로겐, -OH, -CN으로부터 선택되고, 추가로 수소를 함유하는 임의의 R4 기는 중수소로 대체된 하나 이상의 수소를 가질 수 있으며;
    각 R5(존재하는 경우)는 -OH, -NH2, NHC(O)CH3, -C(O)NHCH3, (C1-C6)알킬, (C1-C6)알콕시, (C1-C6)할로알킬, (C1-C6)할로알콕시, 할로겐, 사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬 및 -C(O)-헤테로사이클로알킬 기로부터 독립적으로 선택되고, 여기서 -NH2, -NHC(O)CH3, -C(O)NHCH3, (C1-C6)알킬, (C1-C6)알콕시, (C1-C6)할로알킬, (C1-C6)할로알콕시, 사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬 및 -C(O)-헤테로사이클로알킬은 각각 (C1-C6)알콕시 -NH2, 및 -OH로부터 독립적으로 선택되는 하나 이상의 치환체에 의해 선택적으로 치환되며, 여기서 수소를 함유하는 임의의 R5 기는 중수소로 대체된 하나 이상의 수소를 가질 수 있고;
    각 R6(존재하는 경우)은 -NH(C1-C6)알킬-아릴, -NH(C1-C6)알킬-헤테로아릴, -NH(C1-C6)알킬-헤테로사이클릴 기, 및 -NH(C1-C6)알킬-헤테로사이클릴 기로부터 선택되고, 여기서 R6 기는 각각 -OH, -NH, 할로겐, (C1-C6)알킬, (C1-C6)알콕시, 및 (C1-C6)할로알킬 기로부터 선택되는 하나 이상의 치환체에 의해 선택적으로 치환되고, 추가로 수소를 함유하는 임의의 R6 기는 중수소로 대체된 하나 이상의 수소를 가질 수 있고;
    각 R7은 -OH, -NH2, (C1-C6)알킬, (C1-C6)알콕시, (C1-C6)할로알킬, (C1-C6)할로알콕시, 할로겐, 사이클로알킬, -C(O)-사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬, 및 -C(O)-헤테로사이클로알킬 기로부터 독립적으로 선택되고, 여기서 -NH2, (C1-C6)알킬, (C1-C6)알콕시, (C1-C6)할로알킬, (C1-C6)할로알콕시, 할로겐, 사이클로알킬, -C(O)-사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬, 및 -C(O)-헤테로사이클로알킬은 각각 (C1-C6)알킬, (C1-C6)알콕시, 및 -OH로부터 독립적으로 선택되는 하나 이상의 치환체에 의해 선택적으로 치환되며;
    n은 0, 1, 2, 또는 3이고;
    단, 상기 화합물은 표 C에 존재하지 않음.
  2. 제1항에 있어서, 화학식 (II) 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 형태인, 화합물:
    Figure pct00541
    (II)
    여기서, R1, R2, R3, R4, R5, R6, R7, 및 n은 모두 화학식 (I)에서 정의된 바와 같음.
  3. 제1항 또는 제2항에 있어서, 화학식 (III) 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 형태인, 화합물:
    Figure pct00542
    (III)
    여기서,
    R1은 하나 이상의 R5에 의해 선택적으로 치환된 8원 내지 11원의 헤테로아릴로부터 선택되고;
    R2는 하나 이상의 R5에 의해 선택적으로 치환된, N-연결된 4원 내지 12원의 헤테로사이클릴 및 C-연결된 4원 내지 12원의 헤테로사이클릴로부터 선택되고;
    각 R5(존재하는 경우)는 -OH, -NH2, NHC(O)CH3, (C1-C6)알킬, (C1-C6)알콕시, (C1-C6)할로알킬, (C1-C6)할로알콕시, 할로겐, 사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬, 및 -C(O)-헤테로사이클로알킬 기로부터 독립적으로 선택되고, 여기서, 각각의 -NH2, NHC(O)CH3, (C1-C6)알킬, (C1-C6)알콕시, (C1-C6)할로알킬, (C1-C6)할로알콕시, 사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬, 및 -C(O)-헤테로사이클로알킬은 (C1-C6)알콕시 -NH2, 및 -OH로부터 독립적으로 선택되는 하나 이상의 치환체에 의해 선택적으로 치환되고;
    n은 0, 1, 2 또는 3임.
  4. 제1항에 있어서, 화학식 (IV) 및 이의 약제학적으로 허용가능한 형태인, 화합물:
    Figure pct00543
    (IV)
    여기서, R', R1, R2, R3, R4, R5, R6, R7, 및 n은 모두 화학식 (I)에서 정의된 바와 같음.
  5. 제1항 또는 제4항에 있어서, 화학식 (V) 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 형태인 화합물:
    Figure pct00544
    (V)
    여기서,
    R1은 하나 이상의 R5에 의해 선택적으로 치환된 8원 내지 9원의 헤테로아릴로부터 선택되고;
    R2는 하나 이상의 R5에 의해 선택적으로 치환된, N-연결된 4원 내지 12원의 헤테로사이클릴로부터 선택되고;
    각 R5(존재하는 경우)는 -OH, -NH2, NHC(O)CH3, (C1-C6)알킬, (C1-C6)알콕시, (C1-C6)할로알킬, (C1-C6)할로알콕시, 할로겐, 사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬, 및 -C(O)-헤테로사이클로알킬 기로부터 독립적으로 선택되고, 여기서, 각각의 -NH2, NHC(O)CH3, (C1-C6)알킬, (C1-C6)알콕시, (C1-C6)할로알킬, (C1-C6)할로알콕시, 사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬, 및 -C(O)-헤테로사이클로알킬은 (C1-C6)알콕시 -NH2, 및 -OH로부터 독립적으로 선택되는 하나 이상의 치환체에 의해 선택적으로 치환되고;
    n은 0, 1, 2 또는 3임.
  6. 제1항 내지 제5항 중 어느 한 항에 있어서, R5 및/또는 R6에 의해 선택적으로 치환된 R1은 표 A로부터 선택되는, 화합물.
  7. 제1항 내지 제5항 중 어느 한 항에 있어서, R5에 의해 선택적으로 치환된 R2는 표 B로부터 선택되는, 화합물.
  8. 제1항 내지 제5항 중 어느 한 항에 있어서, R5 및/또는 R6에 의해 선택적으로 치환된 R1은 표 A로부터 선택되고, R5에 의해 선택적으로 치환된 R2는 표 B로부터 선택되는, 화합물.
  9. 제1항 내지 제5항 중 어느 한 항에 있어서, R1은 하기로부터 선택되는, 화합물:
    Figure pct00545

    여기서, B는 결합 또는 C로부터 선택되고;
    Z는 N, S, C(Rii)로부터 선택되며;
    Rii는 H, CH3 및 R5로부터 선택되고;
    R2는 1 내지 3개의 R5에 의해 치환된 N-연결된 5원 내지 8원의 헤테로사이클릴로부터 선택되고;
    각 R5(존재하는 경우)는 -OH, -NH2, NHC(O)CH3, (C1-C6)알킬, (C1-C6)알콕시, (C1-C6)할로알킬, (C1-C6)할로알콕시, 할로겐, 사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬, 및 -C(O)-헤테로사이클로알킬 기로부터 독립적으로 선택되고, 여기서, 각각의 -NH2, -NHC(O)CH3, (C1-C6)알킬, (C1-C6)알콕시, (C1-C6)할로알킬, (C1-C6)할로알콕시, 사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬, 및 -C(O)-헤테로사이클로알킬은 (C1-C6)알콕시, -NH2, 및 -OH로부터 독립적으로 선택되는 하나 이상의 치환체에 의해 선택적으로 치환되고;
    n은 0, 1, 2 또는 3임.
  10. 제1항 내지 제9항 중 어느 한 항에 있어서, R5에 의해 선택적으로 치환된 R1은
    Figure pct00546
    및
    Figure pct00547
    로부터 선택되고;
    R5에 의해 선택적으로 치환된 R2는 하기로부터 선택되는 화합물:
    Figure pct00548

    Figure pct00549
    및
    Figure pct00550
  11. 제1항 내지 제10항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 화합물이
    a. 본원의 실시예 A-1(a)에 기재된 USP28에 대한 유비퀴틴-로다민 110 검정에서 0.001 내지 2 마이크로몰의 IC50 값을 갖는 USP28 억제제 화합물; 및/또는
    b. 본원의 실시예 A-3에 기재된 USP25에 대한 유비퀴틴-로다민 110 검정에서 0.001 내지 2 마이크로몰의 IC50 값을 갖는 USP25 억제제 화합물인, 화합물.
  12. 제1항에 있어서, 표 21 및 25 중 어느 하나의 화합물, 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 형태로부터 선택되고, 단 상기 화합물은 표 C에 존재하는 것은 아닌, 화합물.
  13. 제1항에 있어서, 하기 화합물로부터 선택되는 화합물:
    23-1: 7-아미노-N-[(6S)-2-[(3S,4S)-3-아미노-4-메톡시피롤리딘-1-일]-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-6-일]-3-메틸티에노[2,3-b]피라진-6-카복사미드
    23-2: 7-아미노-N-[(6R)-2-[(3S,4S)-3-아미노-4-메톡시피롤리딘-1-일]-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-6-일]-3-메틸티에노[2,3-b]피라진-6-카복사미드
    23-3: 3-아미노-N-[(6S)-2-[(3S,4S)-3-아미노-4-메톡시피롤리딘-1-일]-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-6-일]-4,6-디메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드
    23-4: 3-아미노-N-[(6S)-2-[(3S,4S)-3-아미노-4-메톡시피롤리딘-1-일]-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-6-일]-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드
    23-5: 3-아미노-N-[(6R)-2-[(3S,4S)-3-아미노-4-메톡시피롤리딘-1-일]-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-6-일]-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드
    23-6: 7-아미노-3-메틸-N-[(6S)-2-(피페라진-1-일)-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-6-일]티에노[2,3-b]피라진-6-카복사미드
    23-7: 3-아미노-6-메틸-N-[(6S)-2-(피페라진-1-일)-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-6-일]티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드
    23-8: 3-아미노-6-메틸-N-[(6R)-2-(피페라진-1-일)-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-6-일]티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드
    23-9: 6-아미노-2-메틸-N-[(6S)-2-(피페라진-1-일)-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-6-일]티에노[2,3-d][1,3]티아졸-5-카복사미드
    23-12: 3-아미노-N-[(6S)-2-{3,8-디아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-3-일}-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-6-일]-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드
    23-13: 7-아미노-N-[(6S)-2-{3,8-디아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-3-일}-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-6-일]-3-메틸티에노[2,3-b]피라진-6-카복사미드
    23-14: 3-아미노-4,6-디메틸-N-[(6S)-2-(피페라진-1-일)-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-6-일]티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드
    23-17: 3-아미노-N-[(6S)-4-플루오로-2-(피페라진-1-일)-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-6-일]-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드
    23-18: 3-아미노-N-[(6S)-2-{3,8-디아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-3-일}-4-플루오로-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-6-일]-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드
    24-1: 3-아미노-N-[(6S)-2-[(3R,4R)-3-아미노-4-(메톡시메틸)피롤리딘-1-일]-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-6-일]-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드
    24-2: 3-아미노-N-[(6S)-2-[(3S,4S)-3-아미노-4-(메톡시메틸)피롤리딘-1-일]-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-6-일]-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드
    25: 3-아미노-N-[(6S)-2-[(3S,4R)-3-아미노-4-(디플루오로메틸)피롤리딘-1-일]-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-6-일]-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드
    26-1: 3-아미노-N-[(6S)-2-[(3S,4R)-3-(메톡시메틸)-4-(메틸아미노)피롤리딘-1-일]-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-6-일]-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드
    26-2: 3-아미노-N-[(6S)-2-[(3R,4S)-3-(메톡시메틸)-4-(메틸아미노)피롤리딘-1-일]-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-6-일]-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드
    27-1: 3-아미노-N-[(6S)-2-[(3R,4R)-3-아미노-4-(플루오로메틸)피롤리딘-1-일]-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-6-일]-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드
    27-2: 3-아미노-N-[(6S)-2-[(3S,4S)-3-아미노-4-(플루오로메틸)피롤리딘-1-일]-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-6-일]-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드
    28-1: 3-아미노-N-[(6S)-2-[(3S,4S)-3-아미노-4-(2-메톡시에톡시)피롤리딘-1-일]-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-6-일]-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드
    28-2: 3-아미노-N-[(6S)-2-[(3R,4R)-3-아미노-4-(2-메톡시에톡시)피롤리딘-1-일]-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-6-일]-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드
    29-1: 3-아미노-N-[(6S)-2-[(9S)-9-아미노-1,4-디옥사-7-아자스피로[4.4]노난-7-일]-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-6-일]-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드
    29-2: 3-아미노-N-[(6S)-2-[(9R)-9-아미노-1,4-디옥사-7-아자스피로[4.4]노난-7-일]-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-6-일]-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드
    30-1: 3-아미노-N-[(6S)-3-플루오로-2-(피페라진-1-일)-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-6-일]-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드
    30-2: 3-아미노-N-[(6R)-3-플루오로-2-(피페라진-1-일)-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-6-일]-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드
    31-3: 3-아미노-6-메틸-N-[(6'S)-2'-(피페라진-1-일)-6',7'-디하이드로-5'H-스피로[사이클로프로판-1,8'-퀴놀린]-6'-일]티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드
    31-4: 3-아미노-6-메틸-N-[(6'R)-2'-(피페라진-1-일)-6',7'-디하이드로-5'H-스피로[사이클로프로판-1,8'-퀴놀린]-6'-일]티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드
    142: 3-아미노-N-[(6S)-2-[(3S,4S)-3-아미노-4-에톡시피롤리딘-1-일]-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-6-일]-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드
    203: 3-아미노-N-[(6S)-2-[(3S,4S)-3-아미노-4-메톡시피롤리딘-1-일]-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-6-일]-5-플루오로-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드
    204: 3-아미노-5-플루오로-6-메틸-N-[(6S)-2-(피페라진-1-일)-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-6-일]티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드
    205: 3-아미노-6-메틸-N-[(6S,8S)-8-메틸-2-(피페라진-1-일)-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-6-일]티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드
    206: 3-아미노-6-메틸-N-[(6R,8S)-8-메틸-2-(피페라진-1-일)-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-6-일]티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드
    207: 3-아미노-6-메틸-N-[(6S,8R)-8-메틸-2-(피페라진-1-일)-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-6-일]티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드
    208: 3-아미노-6-메틸-N-[(6R,8R)-8-메틸-2-(피페라진-1-일)-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-6-일]티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드
    210: 3-아미노-N-[(6S)-2-[(3S,4S)-4-아미노-3-메톡시-3-메틸피롤리딘-1-일]-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-6-일]-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드
    211: 3-아미노-N-[(6S)-2-[(3R,4R)-4-아미노-3-메톡시-3-메틸피롤리딘-1-일]-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-6-일]-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드
    239: 3-아미노-N-[(6S)-2-[(3S,4S)-3-아미노-4-메톡시-3-메틸피롤리딘-1-일]-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-6-일]-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드
    240: 3-아미노-N-[(6S)-2-[(3R,4R)-3-아미노-4-메톡시-3-메틸피롤리딘-1-일]-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-6-일]-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드
    254: 3-아미노-N-[(6S)-2-[(3S,4R)-3-아미노-4-에톡시피롤리딘-1-일]-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-6-일]-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드
    255: 3-아미노-N-[(6S)-2-[(3R,4S)-3-아미노-4-에톡시피롤리딘-1-일]-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-6-일]-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드
    269: 3-아미노-N-[(6S)-2-[(3S,4R)-3-아미노-4-메톡시피롤리딘-1-일]-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-6-일]-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드
    270: 3-아미노-N-[(6S)-2-[(3R,4S)-3-아미노-4-메톡시피롤리딘-1-일]-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-6-일]-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드
    279: 7-아미노-N-[(6S)-2-[(3S,4S)-4-아미노-3-메톡시-3-메틸피롤리딘-1-일]-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-6-일]-3-메틸티에노[2,3-b]피라진-6-카복사미드
    280: 7-아미노-N-[(6S)-2-[(3R,4R)-4-아미노-3-메톡시-3-메틸피롤리딘-1-일]-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-6-일]-3-메틸티에노[2,3-b]피라진-6-카복사미드
    285: 3-아미노-N-[(6S)-2-[(3S,4S)-3-아미노-4-사이클로부톡시피롤리딘-1-일]-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-6-일]-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드
    296: 3-아미노-N-[(6S)-2-[(3R,4R)-3-아미노-4-(메톡시메틸)피롤리딘-1-일]-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-6-일]-4,6-디메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드
    297: 3-아미노-N-[(6S)-2-[(3S,4S)-3-아미노-4-(메톡시메틸)피롤리딘-1-일]-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-6-일]-4,6-디메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드
    298: 7-아미노-N-[(6S)-2-[(3R,4R)-3-아미노-4-(메톡시메틸)피롤리딘-1-일]-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-6-일]-3-메틸티에노[2,3-b]피라진-6-카복사미드
    299: 7-아미노-N-[(6S)-2-[(3S,4S)-3-아미노-4-(메톡시메틸)피롤리딘-1-일]-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-6-일]-3-메틸티에노[2,3-b]피라진-6-카복사미드
    300: 3-아미노-N-[(6S)-2-[(3R,4R)-3-아미노-4-(메톡시메틸)피롤리딘-1-일]-3-플루오로-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-6-일]-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드
    301: 3-아미노-N-[(6S)-2-[(3S,4S)-3-아미노-4-(메톡시메틸)피롤리딘-1-일]-3-플루오로-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-6-일]-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드
    302: 3-아미노-N-[(6R)-2-[(3R,4R)-3-아미노-4-(메톡시메틸)피롤리딘-1-일]-3-플루오로-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-6-일]-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드
    303: 3-아미노-N-[(6R)-2-[(3S,4S)-3-아미노-4-(메톡시메틸)피롤리딘-1-일]-3-플루오로-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-6-일]-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드
    311: 3-아미노-N-[(6S)-2-[(3S,4S)-3-메톡시-4-(메틸아미노)피롤리딘-1-일]-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-6-일]-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드
    312: 3-아미노-N-[(6S)-2-[(3S,4S)-3-메톡시-4-(메틸아미노)피롤리딘-1-일]-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-6-일]-4,6-디메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드
    320: 3-아미노-N-[(6S)-2-[(3S,4S)-3-아미노-4-(프로판-2-일옥시)피롤리딘-1-일]-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-6-일]-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드
    321: 3-아미노-N-[(6S)-2-[(3S,4R)-3-아미노-4-(프로판-2-일옥시)피롤리딘-1-일]-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-6-일]-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드
    322: 3-아미노-N-[(6S)-2-[(3R,4S)-3-아미노-4-(프로판-2-일옥시)피롤리딘-1-일]-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-6-일]-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드
    327: 3-아미노-N-[(6S)-2-[(3R,4S)-3-아미노-4-(메톡시메틸)피롤리딘-1-일]-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-6-일]-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드
    328: 3-아미노-N-[(6S)-2-[(3S,4R)-3-아미노-4-(메톡시메틸)피롤리딘-1-일]-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-6-일]-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드
    331: 3-아미노-N-[(6S)-2-[(3R,4S)-3-하이드록시-3-메틸-4-(메틸아미노)피롤리딘-1-일]-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-6-일]-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드
    332: 3-아미노-N-[(6S)-2-[(3S,4R)-3-하이드록시-3-메틸-4-(메틸아미노)피롤리딘-1-일]-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-6-일]-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드
    341: 3-아미노-N-[(6S)-2-[(3S,4R)-4-아미노-3-(메톡시메틸)-3-메틸피롤리딘-1-일]-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-6-일]-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드
    342: 3-아미노-N-[(6S)-2-[(3R,4R)-4-아미노-3-(메톡시메틸)-3-메틸피롤리딘-1-일]-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-6-일]-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드
    343: 3-아미노-N-[(6S)-2-[(3S,4S)-4-아미노-3-(메톡시메틸)-3-메틸피롤리딘-1-일]-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-6-일]-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드
    344: 3-아미노-N-[(6S)-2-[(3R,4S)-4-아미노-3-(메톡시메틸)-3-메틸피롤리딘-1-일]-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-6-일]-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드
    345: 3-아미노-N-[(6S)-2-[(3R,4R)-3-아미노-4-(디플루오로메틸)피롤리딘-1-일]-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-6-일]-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드
    346: 3-아미노-N-[(6S)-2-[(3S,4S)-3-아미노-4-(디플루오로메틸)피롤리딘-1-일]-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-6-일]-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드
    347: 3-아미노-N-[(6S)-2-[(3R,4S)-3-아미노-4-(디플루오로메틸)피롤리딘-1-일]-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-6-일]-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드
    354: 3-아미노-N-[(6S)-2-{3,8-디아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-3-일}-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-6-일]-4,6-디메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드
    363: 3-아미노-N-[(6S)-2-[(3R,4S)-3-아미노-4-(트리플루오로메틸)피롤리딘-1-일]-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-6-일]-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드
    364: 3-아미노-N-[(6S)-2-[(3S,4R)-3-아미노-4-(트리플루오로메틸)피롤리딘-1-일]-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-6-일]-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드
    376: 3-아미노-N-[(6S)-2-[(3S,4R)-3-(디플루오로메틸)-4-(메틸아미노)피롤리딘-1-일]-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-6-일]-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드
    377: 3-아미노-N-[(6S)-2-[(3R,4S)-3-(디플루오로메틸)-4-(메틸아미노)피롤리딘-1-일]-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-6-일]-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드
    384: 3-아미노-N-[(6S)-2-[(3R,4S)-3-아미노-4-(플루오로메틸)피롤리딘-1-일]-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-6-일]-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드
    385: 3-아미노-N-[(6S)-2-[(3S,4R)-3-아미노-4-(플루오로메틸)피롤리딘-1-일]-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-6-일]-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드
    427: 3-아미노-N-[(6S)-2-[(3R,4S)-4-아미노-3-메톡시-3-메틸피롤리딘-1-일]-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-6-일]-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드
    428: 3-아미노-N-[(6S)-2-[(3S,4R)-4-아미노-3-메톡시-3-메틸피롤리딘-1-일]-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-6-일]-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드
    430: 3-아미노-N-[(6S)-2-[(5S,9R)-9-아미노-2-옥사-7-아자스피로[4.4]노난-7-일]-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-6-일]-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드
    431: 3-아미노-N-[(6S)-2-[(5R,9S)-9-아미노-2-옥사-7-아자스피로[4.4]노난-7-일]-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-6-일]-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드
    437: 3-아미노-N-[(6S)-2-[(5R,9R)-9-아미노-2-옥사-7-아자스피로[4.4]노난-7-일]-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-6-일]-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드
    441: 3-아미노-N-[(6S)-2-[(3R,4R)-3-(플루오로메틸)-4-(메틸아미노)피롤리딘-1-일]-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-6-일]-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드
    442: 3-아미노-N-[(6S)-2-[(3S,4S)-3-(플루오로메틸)-4-(메틸아미노)피롤리딘-1-일]-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-6-일]-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드.
  14. 제1항 내지 제13항 중 어느 한 항의 적어도 하나의 화합물 및 생물학적으로 허용가능한 담체를 포함하는 조성물.
  15. 제1항 내지 제5항 중 어느 한 항에 있어서, R5 및/또는 R6에 의해 선택적으로 치환된 R1이 표 A로부터 선택되며, 화합물이 표 C에는 존재하지 않는, 화합물.
  16. 제1항 내지 제5항 중 어느 한 항에 있어서, R5에 의해 선택적으로 치환된 R2가 표 B로부터 선택되며, 화합물이 표 C에는 존재하지 않는, 화합물.
  17. 하기로 이루어진 군으로부터 선택되며, 화합물이 표 C에는 존재하지 않는, 제1항 내지 제5항 중 어느 한 항의 화합물, 또는 이의 약제학적 염:
    2-38: 3-아미노-N-((R)-7-((3S,4S)-3-아미노-4-(메톡시-d3)피롤리딘-1-일)크로만-3-일)-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드;
    3-17: 3-아미노-N-[(3R)-6,8-디플루오로-7-(피페라진-1-일)-3,4-디하이드로-2H-1-벤조피란-3-일]-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드;
    3-18: 3-아미노-N-[(3S)-6,8-디플루오로-7-(피페라진-1-일)-3,4-디하이드로-2H-1-벤조피란-3-일]-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드;
    10-15: 3-아미노-N-[(3R)-5-플루오로-7-(피페라진-1-일)-3,4-디하이드로-2H-1-벤조피란-3-일]-N,6-디메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드;
    10-16: 3-아미노-N-[(3S)-5-플루오로-7-(피페라진-1-일)-3,4-디하이드로-2H-1-벤조피란-3-일]-N,6-디메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드;
    14-15: 3-아미노-N-[(2S)-5-시아노-8-플루오로-6-{9-옥사-3,7-디아자바이사이클로[3.3.1]노난-3-일}-1,2,3,4-테트라하이드로나프탈렌-2-일]-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드;
    14-16: 3-아미노-N-[(2R)-5-시아노-8-플루오로-6-{9-옥사-3,7-디아자바이사이클로[3.3.1]노난-3-일}-1,2,3,4-테트라하이드로나프탈렌-2-일]-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드;
    14-17: 3-아미노-N-[(2S)-5-시아노-6-{3,8-디아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-3-일}-8-플루오로-1,2,3,4-테트라하이드로나프탈렌-2-일]-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드;
    14-18: 3-아미노-N-[(2R)-5-시아노-6-{3,8-디아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-3-일}-8-플루오로-1,2,3,4-테트라하이드로나프탈렌-2-일]-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드;
    14-19: 7-아미노-N-[(2S)-5-시아노-6-{3,8-디아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-3-일}-8-플루오로-1,2,3,4-테트라하이드로나프탈렌-2-일]-3-메틸티에노[2,3-b]피라진-6-카복사미드;
    14-20: 7-아미노-N-[(2R)-5-시아노-6-{3,8-디아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-3-일}-8-플루오로-1,2,3,4-테트라하이드로나프탈렌-2-일]-3-메틸티에노[2,3-b]피라진-6-카복사미드;
    14-21: 6-아미노-N-[(2S)-5-시아노-6-{3,8-디아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-3-일}-8-플루오로-1,2,3,4-테트라하이드로나프탈렌-2-일]-2-메틸티에노[2,3-d][1,3]티아졸-5-카복사미드;
    14-22: 6-아미노-N-[(2R)-5-시아노-6-{3,8-디아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-3-일}-8-플루오로-1,2,3,4-테트라하이드로나프탈렌-2-일]-2-메틸티에노[2,3-d][1,3]티아졸-5-카복사미드;
    14-23: 3-아미노-N-[(2S)-6-[(3S,4S)-3-아미노-4-메톡시피롤리딘-1-일]-5-시아노-8-플루오로-1,2,3,4-테트라하이드로나프탈렌-2-일]-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드;
    14-24: 3-아미노-N-[(2R)-6-[(3S,4S)-3-아미노-4-메톡시피롤리딘-1-일]-5-시아노-8-플루오로-1,2,3,4-테트라하이드로나프탈렌-2-일]-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드;
    22-5: 3-아미노-N-[(2S)-6-{3,8-디아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-3-일}-5,8-디플루오로-1,2,3,4-테트라하이드로나프탈렌-2-일]-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드;
    22-6: 3-아미노-N-[(2R)-6-{3,8-디아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-3-일}-5,8-디플루오로-1,2,3,4-테트라하이드로나프탈렌-2-일]-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드;
    23-1: 7-아미노-N-[(6S)-2-[(3S,4S)-3-아미노-4-메톡시피롤리딘-1-일]-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-6-일]-3-메틸티에노[2,3-b]피라진-6-카복사미드;
    23-2: 7-아미노-N-[(6R)-2-[(3S,4S)-3-아미노-4-메톡시피롤리딘-1-일]-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-6-일]-3-메틸티에노[2,3-b]피라진-6-카복사미드;
    24-1: 3-아미노-N-[(6S)-2-[(3R,4R)-3-아미노-4-(메톡시메틸)피롤리딘-1-일]-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-6-일]-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드;
    24-2: 3-아미노-N-[(6S)-2-[(3S,4S)-3-아미노-4-(메톡시메틸)피롤리딘-1-일]-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-6-일]-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드;
    25: 3-아미노-N-[(6S)-2-[(3S,4R)-3-아미노-4-(디플루오로메틸)피롤리딘-1-일]-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-6-일]-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드;
    26-1: 3-아미노-N-[(6S)-2-[(3S,4R)-3-(메톡시메틸)-4-(메틸아미노)피롤리딘-1-일]-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-6-일]-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드;
    26-2: 3-아미노-N-[(6S)-2-[(3R,4S)-3-(메톡시메틸)-4-(메틸아미노)피롤리딘-1-일]-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-6-일]-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드;
    27-1: 3-아미노-N-[(6S)-2-[(3R,4R)-3-아미노-4-(플루오로메틸)피롤리딘-1-일]-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-6-일]-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드;
    27-2: 3-아미노-N-[(6S)-2-[(3S,4S)-3-아미노-4-(플루오로메틸)피롤리딘-1-일]-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-6-일]-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드;
    28-1: 3-아미노-N-[(6S)-2-[(3S,4S)-3-아미노-4-(2-메톡시에톡시)피롤리딘-1-일]-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-6-일]-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드
    28-2: 3-아미노-N-[(6S)-2-[(3R,4R)-3-아미노-4-(2-메톡시에톡시)피롤리딘-1-일]-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-6-일]-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드
    29-1: 3-아미노-N-[(6S)-2-[(9S)-9-아미노-1,4-디옥사-7-아자스피로[4.4]노난-7-일]-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-6-일]-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드
    29-2: 3-아미노-N-[(6S)-2-[(9R)-9-아미노-1,4-디옥사-7-아자스피로[4.4]노난-7-일]-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-6-일]-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드
    30-1: 3-아미노-N-[(6S)-3-플루오로-2-(피페라진-1-일)-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-6-일]-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드
    30-2: 3-아미노-N-[(6R)-3-플루오로-2-(피페라진-1-일)-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-6-일]-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드;
    31-1: 3-아미노-N-[(6S)-2-[(3S,4S)-3-아미노-4-(프로판-2-일옥시)피롤리딘-1-일]-5,6,7,8-테트라하이드로퀴나졸린-6-일]-4,6-디메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드;
    31-2: 3-아미노-N-[(6R)-2-[(3S,4S)-3-아미노-4-(프로판-2-일옥시)피롤리딘-1-일]-5,6,7,8-테트라하이드로퀴나졸린-6-일]-4,6-디메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드;
    31-3: 3-아미노-6-메틸-N-[(6'S)-2'-(피페라진-1-일)-6',7'-디하이드로-5'H-스피로[사이클로프로판-1,8'-퀴놀린]-6'-일]티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드;
    31-4: 3-아미노-6-메틸-N-[(6'R)-2'-(피페라진-1-일)-6',7'-디하이드로-5'H-스피로[사이클로프로판-1,8'-퀴놀린]-6'-일]티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드;
    32-1: 3-아미노-6-메틸-N-[(7S)-3-(피페라진-1-일)-5,6,7,8-테트라하이드로이소퀴놀린-7-일]티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드;
    32-2: 3-아미노-6-메틸-N-[(7R)-3-(피페라진-1-일)-5,6,7,8-테트라하이드로이소퀴놀린-7-일]티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드;
    33-3: 3-아미노-N-[(3R)-7-[(1R,6S)-3,8-디아자바이사이클로[4.2.0]옥탄-8-일]-3,4-디하이드로-2H-1-벤조피란-3-일]-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드;
    33-4: 3-아미노-N-[(3R)-7-[(1S,6R)-3,8-디아자바이사이클로[4.2.0]옥탄-8-일]-3,4-디하이드로-2H-1-벤조피란-3-일]-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드;
    34: 3-아미노-N-[(3R)-7-(4-시아노-1,1-디옥소-1λ6-티안-4-일)-3,4-디하이드로-2H-1-벤조피란-3-일]-6-메틸티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드;
    35: 3-아미노-6-메틸-N-[(3R)-5,6,8-트리플루오로-7-(피페라진-1-일)-3,4-디하이드로-2H-1-벤조피란-3-일]티에노[2,3-b]피리딘-2-카복사미드;
    표 21의 화합물; 및
    표 25의 화합물.
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