TW202222329A - 增加肌肉量、增加肌力、抑制肌肉量減少或抑制肌力下降用組成物 - Google Patents

增加肌肉量、增加肌力、抑制肌肉量減少或抑制肌力下降用組成物 Download PDF

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Abstract

本發明之目的係提供增加肌肉量、增加肌力、抑制肌肉量減少或抑制肌力下降用組成物。 本發明有關含有月見草種子萃取物作為有效成分之增加肌肉量、增加肌力、抑制肌肉量減少或抑制肌力下降用組成物。

Description

增加肌肉量、增加肌力、抑制肌肉量減少或抑制肌力下降用組成物
本發明有關增加肌肉量、增加肌力、抑制肌肉量減少或抑制肌力下降用組成物。
如日本般之人口構成中高齡者比例較高的國家，延長健康壽命成為課題。作為縮短健康壽命之要因之一係隨著年齡增長肌肉量(肌量)之下降(減少)。肌肉量之下降導致肌力下降、行走速度下降，而成為跌倒風險上升、骨折等受傷、長期臥床等之原因。又，於缺乏運動或手術後、疾病療養等中需要長期休息之情況下，肌肉量亦會減少。
月見草係屬於山藥科月見草屬之植物。專利文獻1中記載一種學習記憶改善劑，其以月見草萃取物作為有效成分。 [先前技術文獻] [專利文獻]
專利文獻1：日本特開2014-141437號公報
[發明欲解決之課題]
月見草種子萃取物具有增加肌肉量、增加肌力、抑制肌肉量減少、抑制肌力下降之作用尚未知。
本發明之目的係提供增加肌肉量、增加肌力、抑制肌肉量減少或抑制肌力下降用組成物。又本發明之目的係提供月見草種子萃取物用以製造增加肌肉量、增加肌力、抑制肌肉量減少或抑制肌力下降用組成物之用途、及月見草種子萃取物用以增加肌肉量、增加肌力、抑制肌肉量減少或抑制肌力下降之用途。 [用以解決課題之手段]
本發明人鑑於上述問題進行積極研究之結果，發現月見草種子萃取物具有增加肌肉量、增加肌力、抑制肌肉量減少或抑制肌力下降之作用，因而完成本發明。
本發明有關以下之增加肌肉量、增加肌力、抑制肌肉量減少或抑制肌力下降用組成物。 [1] 一種增加肌肉量、增加肌力、抑制肌肉量減少或抑制肌力下降用組成物，其含有月見草種子萃取物作為有效成分。 [2] 如上述[1]之組成物，其係促進肌肉肥大。 [3] 如上述[1]或[2]之組成物，其係促進類胰島素生長因子1(igf1)基因及/或PPARγ共激活劑1α(ppargc1a)基因之表現並促進肌肉肥大。 [4] 如上述[1]至[3]中任一項之組成物，其係飲食品、化妝料、醫藥品、準醫藥或飼料。 [5] 如上述[1]至[4]中任一項之組成物，其附有「抑制肌肉減少」、「維持肌肉」、「增加肌肉」、「改善肌肉」、「抑制肌力下降」、「維持肌力」、「增加肌力」、「改善肌力」、「支援產生肌肉之力」、「改善步行機能」、「維持步行機能」、「改善運動機能」、「維持運動機能」、「維持因年齡增長而衰退之肌肉」及「維持因年齡增長而衰退之肌力」之1或2者以上之標示。 [6] 一種月見草種子萃取物之用途，其係用以製造增加肌肉量、增加肌力、抑制肌肉量減少或抑制肌力下降用組成物。 [7] 一種月見草種子萃取物之用途，其係用以增加肌肉量、增加肌力、抑制肌肉量減少或抑制肌力下降。 [發明效果]
依據本發明可提供增加肌肉量、增加肌力、抑制肌肉量減少或抑制肌力下降用組成物。又依據本發明可提供月見草種子萃取物用以製造增加肌肉量、增加肌力、抑制肌肉量減少或抑制肌力下降用組成物之用途、及月見草種子萃取物用以增加肌肉量、增加肌力、抑制肌肉量減少或抑制肌力下降之用途。 本發明中使用之月見草種子萃取物係自古以來即作為食品原料而可攝取之成分，就安全性高而可連續攝取之方面亦為有利。
本發明之增加肌肉量、增加肌力、抑制肌肉量減少或抑制肌力下降用組成物含有月見草種子萃取物作為有效成分。 肌肉量(肌量)通常是指骨骼肌肉量。 本發明之增加肌肉量、增加肌力、抑制肌肉量減少或抑制肌力下降用組成物於以下稱為本發明之組成物。
月見草被歸類為月見草屬(學名：Oenothera)，作為已知之代表種為裂葉月見草(學名：Oenothera laciniata)、月見草(學名：Oenothera striata)、柳葉月見草(學名：Oenothera biennis)、黃花月見草(學名：Oenothera erythrocephala)等。 本發明中使用之月見草種類未特別限制，可為1種，亦可為2種以上。其中，較佳為柳葉月見草。
用以獲得月見草種子萃取物之月見草種子的萃取方法未特別限制，可藉由植物成分之萃取所用之通常萃取方法獲得。萃取方法可適當設定，萃取條件亦未特別限制。例如，較佳於室溫或加溫下以溶劑萃取月見草種子(萃取溶劑)而獲得月見草種子萃取物。月見草種子萃取物之調製中，原料的月見草種子可直接用於萃取步驟，亦可粉碎、切斷或乾燥後用於萃取步驟。本發明中月見草種子萃取物可為直接萃取月見草種子之萃取物，亦可為自將月見草種子粉碎、切斷或乾燥者萃取之萃取物。較佳係自將月見草種子粉碎、切斷或乾燥者之萃取物。
且，作為用以自月見草種子萃取月見草種子萃取物之萃取溶劑，若可萃取月見草種子萃取物，則未特別限制。 用於調製月見草種子萃取物之萃取溶劑可適當選擇，可使用於萃取月見草種子成分中通常使用者。作為萃取溶劑，舉例為例如水；甲醇、乙醇、丙醇、丁醇等之碳數1~5之1元醇；乙二醇、丙二醇、1,2-丁二醇、1,3-丁二醇、1,4-丁二醇、2,3-丁二醇、甘油等之碳數2~5之多元醇；丙酮、甲基乙基酮等之酮；乙酸甲酯、乙酸乙酯等之酯；四氫呋喃、乙醚、二乙醚等之鏈狀及環狀醚；聚乙二醇等之聚醚；角鯊烷等。該等可單獨使用，亦可使用組合2種以上之混合溶劑(混合液)。作為碳數1~5之1元醇，較佳為碳數1~4者，更佳為碳數2~4者，又更佳為乙醇。作為碳數2~5之多元醇，較佳為碳數2~4之2元或3元醇，更佳為2元醇，又更佳為1,3-丁二醇。其中，作為萃取溶劑，較佳為水、碳數1~5之1元醇、碳數2~5之多元醇、該等之2種以上之混合溶劑，更佳為水、碳數2~4之1元醇或其水溶液、碳數2~4之2元醇或其水溶液，又更佳為水、乙醇、乙醇水溶液、1,3-丁二醇、1,3-丁二醇水溶液，特佳為水、乙醇水溶液或1,3-丁二醇水溶液。一態樣中，乙醇水溶液及1,3-丁二醇水溶液較佳乙醇或1,3-丁二醇濃度為10~98體積%，更佳為30~90體積%，又更佳為30~70體積%。作為本發明之月見草種子萃取物，可適當使用上述溶劑萃取物。
萃取時可添加酸或鹼，調整萃取溶劑之pH。萃取後，較佳自萃取液去除月見草種子殘渣(萃取後之月見草種子)。自萃取液去除月見草種子殘渣之方法未特別限制，舉例為過濾、離心等之習知分離手段。
作為月見草種子萃取物之萃取方法之一例可使用例如以下方法。將月見草種子或乾燥物予以細碎，按重量計添加0.1~30倍量之萃取溶劑，常壓下，於室溫較佳萃取10分鐘~15天，更佳30分鐘~10天，又更佳1小時~7天，或於萃取溶劑之沸點附近較佳萃取10分鐘~1天(更佳10分鐘~2小時)後進行過濾獲得濾液。萃取時，可靜置，亦可進行適當攪拌。且，所得濾液(月見草種子萃取物)可直接作為月見草種子萃取物，亦可根據需要予以稀釋、濃縮或乾燥等。
本發明中，藉由萃取所得之月見草種子萃取液可直接作為月見草種子萃取物使用。且，只要不損及本發明效果，亦可藉由習知方法予以稀釋、濃縮或乾燥，作成稀釋液、濃縮物或粉末，亦可調製為糊狀使用。作為乾燥方法舉例為例如冷凍乾燥、噴霧乾燥等。此外，關於上述月見草種子萃取物、其濃縮物及乾燥粉末等，在不損及本發明效果之範圍內，可根據需要，進一步進行除臭、脫色等之純化。此等純化方法可任意選擇通常手段而進行。 本發明中之月見草種子萃取物，包含以如上述萃取方法所得之各種溶劑萃取液、其稀釋液、其濃縮物或其乾燥粉末、該等之純化物。且，萃取物亦可藉與萃取溶劑不同之溶劑稀釋或溶解而使用。
本發明之組成物中所含之月見草種子萃取物有時亦可自從月見草種子獲得月見草油之製造步驟中所得之壓榨粕，藉由上述萃取方法萃取。 作為萃取溫度未特別限制，例如可於常溫下萃取，亦可於70℃以上之溫度萃取。
月見草種子萃取物可藉由上述萃取方法獲得，亦可為市售品。作為月見草種子萃取物之市售品之例，除了月見草種子萃取物-P(粉末，ORYZA油化(股))、月見草種子萃取物-WSPS(水溶性粉末，ORYZA油化(股))以外，作為將月見草種子萃取物粉末溶解於水及1,3-丁二醇之混合溶劑者，舉例為月見草種子萃取物LC(商品名，ORYZA油化(股))、LUNA WHITE B(商品名，ICHMARU PHARCOS(股))等。
本發明之組成物藉由含有月見草種子萃取物作為有效成分，而發揮優異之肌肉量增加、肌力增加、抑制肌肉量減少或抑制肌力下降之效果。且，藉由此等效果，例如可預防肌肉量減少、預防肌力下降、維持肌肉量、維持肌力、恢復下降之肌肉量或肌力、改善肌肉量降低之狀態或肌力下降之狀態等。 一態樣中，本發明之組成物適宜使用於增加肌肉量、增加肌力。 一態樣中，本發明之組成物適宜使用於抑制肌肉量、肌力之下降、預防下降、維持或恢復。 一態樣中，本發明之組成物可適當使用於抑制因年齡增長之肌肉量或肌力下降或預防下降、維持肌肉量或肌力、恢復因年齡增長而下降之肌肉量或肌力或增加肌肉量或肌力。所謂「肌肉量」係肌量，意指肌肉重量或體積。且，所謂「肌力」係指每單位重量的肌肉可產生之力的大小。 一形態中，適宜使用於抑制中高齡者因年齡增長所致之肌肉量及肌力之下降或預防下降、維持肌肉量及肌力、恢復因年齡增長而下降之肌肉量及肌力、或增加肌肉量及肌力。中高齡者係包含高齡者之概念。 人類等動物之肌肉重量及體積藉由例如微PET/CT(正子(positron)輻射斷層攝影/電腦斷層攝影、INVEON、西門子、美國)進行測定。 且，人類等動物之肌力可藉由例如Biodex System 4(多用途肌肉機能評價運動裝置，酒井醫療股份有限公司，日本)或Jamer型液壓握力計(酒井醫療股份有限公司，日本)測定。
月見草種子萃取物具有促進肌肉肥大之作用。本發明之組成物例如藉由促進肌肉肥大，而可使用於增加肌肉量、增加肌力、抑制肌肉量減少或抑制肌力下降。 本發明之組成物可使用作為例如促進肌肉肥大之增加肌肉量、增加肌力、抑制肌肉量減少或抑制肌力下降用組成物。
又，月見草種子萃取物具有促進類胰島素生長因子1(igf1)基因、PPARγ共激活劑1α(ppargc1a)基因之表現的作用。 本發明之組成物較佳係促進類胰島素生長因子1(igf1)基因及/或PPARγ共激活劑1α(ppargc1a)基因之表現並促進肌肉肥大。
胰島素樣生長因數1(igf1)已知主要於肝臟中由生長激素(GH)之刺激結果而分泌，人體的大部分細胞，特別是肌肉、骨骼、肝臟、腎臟、神經、皮膚及肺細胞受到igf1之影響。又已知肌肉若進行訓練亦會分泌igf1，對肌肉本身作用，促進稱為肌肉衛星細胞(用以使肌肉纖維再生所需之細胞)之幹細胞增生，而局部作用並助於肌肉肥大。igf1基因的表現可使用常用方法測定，例如可使用即時PCR系統進行測定。
PPARγ共激活劑1α(ppargc1a)已知主要於肝臟、腦、心臟、褐色脂肪細胞及骨骼肌中表現，特別在骨骼肌中之pargc1a藉由運動而增強表現。已知ppargc1a在控制參與促進線粒體生物合成及氧化之磷酸化等之細胞的能量產生扮演一定角色。基於此等能量產生之控制作用，作為骨骼肌中ppargc1a之機能，已知參與了持久力提高(參考非專利文獻1)、肌肉肥大(參考非專利文獻2)等。ppargc1a基因之表現可使用一般方法測定，例如使用即時PCR系統進行測定。 (參考非專利文獻1)Nature. 2008 Jul 24；454(7203)：463-9。 (參考非專利文獻2)Cell. 2012 Dec 7；151(6)：1319-31。
且本發明之組成物較佳為增加骨骼肌之肌肉量、增加肌力、抑制肌肉量減少或抑制肌力下降用組成物，更佳為增加骨骼肌之肌肉量或增加肌力用組成物。且，本發明之組成物較佳為促進骨骼肌肉肥大之組成物，較佳為促進類胰島素生長因子1(igf1)基因及/或PPARγ共激活劑1α(ppargc1a)基因之表現並促進肌肉肥大者。
骨骼肌係由稱作肌纖維之多核之肌管細胞構成，複數肌管細胞相互融合形成肌纖維。 本發明中，增加骨骼肌之肌肉量、增加肌力、抑制肌肉量減少或抑制肌力下降包含確認到下述效果之至少任一者：肌管細胞短徑長度增加效果、肌肉纖維短徑長度增加效果、肌肉橫截面面積增加效果、肌管細胞短徑長度下降抑制效果、肌肉纖維短徑長度下降抑制效果、抑制肌肉橫截面面積下降之效果。又，藉由增加類胰島素生長因子1(igf1)基因及/或PPARγ共激活劑1α(ppargc1a)基因之表現，亦確認有增加骨骼肌之肌肉量、增加肌力、抑制肌肉量減少或抑制肌力下降之作用。
且，本發明之組成物可使用於處置藉由增加肌肉量、增加肌力、抑制肌肉量減少或抑制肌力下降而可期待預防或改善之狀態或疾病。作為此等狀態或疾病舉例為例如初衰弱、衰弱、肌少症、運動障礙症候群等之肌肉量或肌力下降之狀態或疾病。 一態樣中，本發明之增加肌肉量、增加肌力、抑制肌肉量減少或抑制肌力下降用組成物亦可使用於初衰弱、衰弱、肌少症、運動障礙症候群之預防或改善。 又本發明之組成物可用以提高運動機能或提高持久力等，進而可用以預防或改善肥胖、降血糖、促進熱產生、改善能量代謝、胃腸道運動亢進、預防或改善酒精性脂肪肝、預防或改善代謝症候群等。 本說明書中，預防包括預防發病、延遲發病、降低發病率、降低發病風險等。改善狀態或疾病，包含使對象自狀態或疾病恢復、減輕狀態或疾病之症狀、使狀態或疾病症狀好轉、延遲狀態或疾病之進展，亦包含預防等。
本發明之組成物可應用於任何治療用途(醫療用途)或非治療用途(非醫療用途)。所謂非治療係不包含醫療行為即人工手術、治療或診斷之概念。 本發明之組成物可以例如飲食品、化妝料、醫藥品、準醫藥、飼料等形態提供，但不限於此。本發明之組成物其本身可為用於增加肌肉量、增加肌力、抑制肌肉量減少或抑制肌力下降之飲食品、化妝料、醫藥品、準醫藥、飼料等，亦可為調配該等而使用之原料或添加劑等之製劑。 本發明之組成物作為一例可以劑之形態提供，但不限於本形態。該劑可直接作為組成物，或亦可作成含有該劑之組成物而提供。 本發明之組成物可為經口用組成物、非經口用組成物之任一者，較佳為經口用組成物。作為經口用組成物，舉例為飲食品、經口用醫藥品、經口用準醫藥、飼料，較佳為飲食品。作為非經口用組成物，舉例為非經口用醫藥品、非經口用準醫藥、化妝料等。
本發明之組成物，只要不損及本發明效果，除上述月見草種子萃取物以外，可含有任何添加劑、任意成分。該等添加劑及成分可根據組成物形態加以選擇，可使用一般飲食品、化妝料、醫藥品、準醫藥、飼料等中可使用者。任意添加劑或成分可使用1種，亦可組合2種以上使用。 作為任意添加劑或成分之一例，舉例為製劑化中所調配之賦形劑、黏合劑、乳化劑、張力劑(等張劑)、緩衝劑、溶解輔助劑、防腐劑、安定化劑、抗氧化劑、著色劑、凝固劑、包衣劑、香料等。 本發明之組成物作成飲食品、化妝料、醫藥品、準醫藥、飼料等時，其製造方法未特別限制，可藉由一般方法製造。
例如本發明之組成物作成飲食品時，可於月見草種子萃取物中，調配飲食品可使用之成分(例如上述任意成分等之飲食品原料、根據需要使用之添加劑等)，而作成各種飲食品。飲食品未特別限制，可舉例為例如一般飲食品、保健食品、保健飲料、機能性顯示食品、特定保健食品、病人用飲食品、食品添加劑、該等之原料等。飲食品之形態亦未特別限制，可舉例為固體狀、半流體狀、流體狀等。飲食品亦可作成錠劑、包衣錠劑、細粒劑、顆粒劑、散劑、藥丸、膠囊劑、乾糖漿劑、口嚼劑等之經口用固形製劑；口服液劑、糖漿劑等之經口用液體製劑之各種製劑形態。
本發明之組成物作成化妝料時，將月見草種子萃取物調配於化妝料中即可，可於月見草種子萃取物中調配化妝料可容許之載體、添加劑等。 上述化妝料中，在不損及本發明效果之範圍，可適當含有化妝料容許之載體、添加劑等成分，例如水、醇類、油劑、界面活性劑、增黏劑、金屬皂、凝膠劑、粉體、螯合劑、水溶性高分子、皮膜形成劑、樹脂、包接化合物、抗菌劑、除臭劑、鹽類、pH調整劑、紫外線吸收劑、上述以外之源自動植物·微生物之萃取物、角質溶解劑、酶、激素類、其他維生素類、保濕劑、殺菌劑、抗炎劑、香料之等之1種或2種以上。化妝料可藉一般製造方法製造。例如將上述月見草種子萃取物與上述化妝料可使用之成分1或2種以上混合後，加工成期望形態而獲得。 又，化妝料之製品形態未特別限制。
本發明之組成物作成醫藥品或準醫藥時，例如可於月見草種子萃取物中調配藥理學上容許之賦形劑等，作成各種劑型之醫藥品或準醫藥。基於更充分獲得本發明效果之觀點，醫藥品或準醫藥之投予形態可為經口投予，亦可非經口投予。基於更充分獲得本發明效果之觀點，投予形態較佳為經口投予。劑型只要為適於投予形態之劑型即可。作為經口醫藥品或經口用準醫藥之劑型，舉例為例如錠劑、包衣錠劑、細粒劑、顆粒劑、散劑、藥丸、膠囊劑、乾糖漿劑、口嚼劑等之經口用固形製劑；口服液劑、糖漿劑等之經口用液體製劑。作為非經口醫藥品或非經口準醫藥之劑型，舉例為注射劑、滴注劑、軟膏劑、乳液劑、貼片劑、栓劑、經鼻劑、經肺劑(吸入劑)等。
本發明之組成物作成飼料時，可於月見草種子萃取物中調配飼料可使用之成分作成飼料。作為飼料，舉例為例如牛、豬、雞、綿羊、馬等中所用之家畜用飼料；兔子、豚鼠、大鼠、小鼠等使用之小動物用飼料；狗、貓、小鳥等使用之寵物食品。
本發明之組成物所含之月見草種子萃取物之含量未特別限制，可根據該組成物之形態等適當設定。 本發明之組成物中之月見草種子萃取物(乾燥物換算)之含量，例如於該組成物中較佳為0.001重量%以上，更佳為0.01重量%以上，又更佳為0.05重量%以上，且較佳為10重量%以下，更佳為5重量%以下。一態樣中，月見草種子萃取物(乾燥物換算)之含量於組成物中較佳為0.001~10重量%，更佳為0.01~5重量%，又更佳為0.05~5重量%。上述含量於含有2種以上不同種類之月見草種子萃取物時，係該等之合計含量。
本發明之組成物可根據其形態以適當方式攝取或投予。本發明之組成物較佳經口攝取(經口投予)。本發明之組成物的投予量(也可稱為攝取量)未特別限制。本發明之組成物之投予量只要為獲得增加肌肉量、增加肌力、抑制肌肉量減少或抑制肌力下降效果之量(有效量)即可，只要根據投予形態、投予方法、對象之體重等適當設定即可。較佳為經口投予或經口攝取。
一態樣中，本發明之組成物以人類(成人)為對象經口攝取或投予時，月見草種子萃取物(乾燥物換算)之投予量係每天以體重60kg計，較佳為1mg以上，更佳為10mg以上，又更佳為100mg以上，且較佳為1000mg以下，更佳為500mg以下，又更佳為300mg以下。一態樣中，月見草種子萃取物(乾燥產物)之投予量，若為人類(成人)，則每天以體重60kg計，較佳為1~1000mg，更佳為10~500mg，又更佳為100~300mg。上述量較佳為一天一次以上，例如一天一次或分數次(例如2~3次)予以攝取或投予。一態樣中，上述量之月見草種子萃取物較佳對人類經口攝取或投予。一態樣中，本發明之組成物可對於人類，以每60公斤體重，每1天攝取或投與上述量之月見草種子萃取物而使用。上述總投予量，於使用2種以上月見草種子萃取物時，係該等之合計量。
本發明之組成物較佳係持續攝取或投予者。月見草種子萃取物藉由持續攝取或投予，而期待提高上述效果。一態樣中，本發明之組成物較佳持續1週以上，更佳4週以上，又更佳8週以上，特佳12週以上攝取或投予。
投予或攝取本發明之組成物之對象(以下簡稱投予對象)未特別限制。較佳為人類或非人類哺乳動物，更佳為人類。 一態樣中，作為投予對象，較佳為需要或希望增加肌肉量、增加肌力、抑制肌肉量減少或抑制肌力下降之對象。作為此等對象，舉例為例如中高齡者、需要或希望預防或改善衰弱、運動障礙症候群或肌少症之對象、運動員等。中高齡者例如為40歲以上的人。一態樣中，中高齡者中，作為對象較佳為老年人。老年人例如為60歲或65歲以上的人。本發明之組成物可基於藉由例如增加肌肉量、增加肌力、抑制肌肉量減少或抑制肌力下降而可期待預防或改善之症狀或疾病之預防等之目的，亦可用於健康人。
本發明之組成物亦可於包裝、容器或說明書等標示用途、有效成分種類、上述效果、使用方法(例如攝取方法、投予方法)等之1或2者以上。亦可對本發明之組成物標示藉由增加肌肉量、增加肌力、抑制肌肉量減少或抑制肌力下降而發揮之機能標示。一態樣中，本發明之組成物中，作為該等標示，可附加例如選自由「抑制肌肉減少」、「維持肌肉」、「增加肌肉」、「改善肌肉」、「抑制肌力下降」、「維持肌力」、「增加肌力」、「改善肌力」、「支援產生肌肉之力」、「改善步行機能」、「維持步行機能」、「改善運動機能」、「維持運動機能」、「維持因年齡增長而衰退之肌肉」及「維持因年齡增長而衰退之肌力」所成之群之1或2者以上之機能標示。
本發明亦包含以下方法。 一種增加肌肉量、增加肌力、抑制肌肉量減少或抑制肌力下降之方法，係投予月見草種子萃取物。 本發明亦包含以下用途。 一種月見草種子萃取物之用途，其係用以增加肌肉量、增加肌力、抑制肌肉量減少或抑制肌力下降。 上述方法及用途可為治療方法或用途，亦可為非治療方法或用途。 藉由投予月見草種子萃取物，可增加肌肉量、增加肌力、抑制肌肉量減少或抑制肌力下降。藉此，例如可預防或改善肌少症、初衰弱、衰弱等。
上述方法及用途中，月見草種子萃取物及其較佳態樣與上述本發明之組成物相同。上述方法及用途中，較佳對於對象以一天一次以上例如1天1次~數次(例如2~3次)投予月見草種子萃取物。上述方法及用途中，月見草種子萃取物較佳經口投予(攝取)。上述用途較佳為人類或非人類哺乳動物，更佳為人類之用途。
上述方法及用途中，只要使用獲得期望作用之量(亦可稱為有效量)之月見草種子萃取物即可。月見草種子萃取物之投予量及投予對象等與上述之本發明之組成物相同。月見草種子萃取物可直接投予，亦可作為包含其之組成物投予。例如亦可使用上述之本發明之組成物。
本發明亦包含用以製造本發明組成物之月見草種子萃取物之用途。 [實施例]
以下基於實施例更具體說明本發明。又本發明並非限定於該等實施例。
＜實施例1＞ (細胞增殖) 將購入之源自正常成人之人類骨骼肌母細胞(Ronza(股)製，CC-2580)以50×10 4細胞/ml播種於經膠原蛋白塗佈之75cm 2培養瓶(富士軟片和光純藥(股)製)培養7天。培養基組成如下。 [培養基組成] SkGM(註冊商標)-2 BulletKit(註冊商標)_1Kit(Ronza (股)製，CC-3245)
(誘發分化、試藥添加) 經增殖之人類骨骼肌母細胞以胰蛋白酶(Nacalai Tesque(股)製)剝離，以10×10 4細胞/ml增殖4天後，使用分化培養基進行5天之誘發分化。於誘發分化後第3天，將作為陽性對照之克倫特羅(clenbuterol)(東京化成工業(股)製)或月見草種子萃取物(月見草萃取物-P(ORYZA油化(股)製))添加於分化培養基中。克倫特羅以DMSO(Nacalai Tesque(股)製，最終濃度0.1%)溶解為最終濃度10μM。同樣，月見草種子萃取物(粉末)以DMSO(Nacalai Tesque(股)製，最終濃度0.1%)溶解為最終濃度為100、500、1000ng/ ml。自添加後48小時後，進行肌凝蛋白重鏈肌管細胞(MyHC)之免疫染色後，以螢光顯微鏡進行拍攝，使用ImageJ進行肌肉短徑之測定。分化培養基組成如下。 [分化培養基組成] D-MEM/Ham’s F-12(富士軟片和光純藥(股)製) 2%馬血清(Sigma-Aldrich公司製) 1%抗生素-抗真菌素混合試樣溶液(100x)(Nacalai Tesque股)製)
(免疫染色) 培養之細胞以4%固定液(甲醛(PFA)，富士軟片和光純藥(股)製)固定後，以磷酸鹽緩衝食鹽水(PBS)(Nacalai Tesque股)製)洗淨。隨後，以經PBS調整Triton X-100(Nacalai Tesque股)製)後之0.25%Triton X-100/PBS進行膜透過處理。再次以PBS洗淨後，以PBS及Triton X-100調整胎牛血清白蛋白(Sigma-Aldrich公司製)後之0.1% TritonX-100/1%BSA/PBS進行阻斷處理，以MF20-s(DSHB公司製)進行一次抗體反應。然後，以PBS洗淨後，使用Alexa Fluor 488羊抗小鼠IgG(H+L)(Thermo Fisher Scientific公司製)進行二次抗體反應。
關於肌肉短徑之測定結果，肌肉短徑長度(μm)(N=6之平均±標準誤差(SEM))示於圖1。使用Dunnett’s測試檢定進行檢定，將5%以下設為有意義(*：p＜0.05，vs對照(Cont.))。月見草種子萃取物於500及1000ng/ml時，確認肌肉短徑有意義肥大。
＜實施例2＞ 細胞增殖、誘發分化及試藥添加以與實施例1相同之方法進行試驗。添加後24小時後測定18s rRNA18s)、類胰島素生長因子1(igf1)及PPARγ共激活劑1α(ppargc1a)基因表現量。基因表現量之測定係使用RNeazy微套組(QIAGEN公司製)從細胞分離RNA，藉以下方法進行。
(基因表現量之測定) 自分離之RNA，使用高容量cDNA逆轉錄套組(Thermo Fisher Scientific公司製)進行cDNA合成。以Step One Plus (註冊商標，Biosystems公司製)使用TaqMan FastUniversal PCR Mastermix(TaqMan為註冊商標)Thermo Fisher Scientific公司製)進行定量PCR，測定持家基因的18s(H99999901_1，Thermo Fisher Scientific公司製)、有助於肌肉合成及肌肉持久力之基因的igf1(Hs01547656_m1，Thermo Fisher Scientific公司製)及ppargc1a(Hs00173304_ m1，Thermo Fisher Scientific公司製)之基因表現量。
以18s之表現量校正之對照的表現量設為1，添加受驗試樣時之igf1的相對表現量(N=4之平均±標準誤差(SEM))示於圖2，ppargc1a之相對表現量(N=4之平均±標準誤差(SEM))示於圖3。有意義檢定係以與實施例1相同之方法進行，5%以下設為有意義(*：p＜0.05 vs對照(Cont.))。月見草種子萃取物於500及1000ng/ml確認igf1及ppargc1a表現量之有意義增加。
由上述實施例1及實施例2，由於月見草種子萃取物具有使肌肉短徑常顯著增加，且使igf1及pargc1a表現量有意義增佳之效果，故確認具有增加肌肉量、增加肌力、抑制肌肉量減少或抑制肌力下降之效果。且，月見草種子萃取物確認有肌肉肥大促進作用。
[圖1]顯示實施例1測定之肌肉短徑長(N=6之平均±標準誤差SEM))。 [圖2]顯示實施例2測定之igf1的相對表現量(N=4之平均值±標準誤差(SEM))。 [圖3]顯示實施例2測定之pargc1a之相對表現量(N=4之平均±標準誤差(SEM))。

Claims (7)

  1. 一種增加肌肉量、增加肌力、抑制肌肉量減少或抑制肌力下降用組成物，其含有月見草種子萃取物作為有效成分。
  2. 如請求項1之組成物，其係促進肌肉肥大。
  3. 如請求項1或2之組成物，其係促進類胰島素生長因子1(igf1)基因及/或PPARγ共激活劑1α(ppargc1a)基因之表現並促進肌肉肥大。
  4. 如請求項1至3中任一項之組成物，其係飲食品、化妝料、醫藥品、準醫藥或飼料。
  5. 如請求項1至4中任一項之組成物，其附有「抑制肌肉減少」、「維持肌肉」、「增加肌肉」、「改善肌肉」、「抑制肌力下降」、「維持肌力」、「增加肌力」、「改善肌力」、「支援產生肌肉之力」、「改善步行機能」、「維持步行機能」、「改善運動機能」、「維持運動機能」、「維持因年齡增長而衰退之肌肉」及「維持因年齡增長而衰退之肌力」之1或2者以上之標示。
  6. 一種月見草種子萃取物之用途，其係用以製造增加肌肉量、增加肌力、抑制肌肉量減少或抑制肌力下降用組成物。
  7. 一種月見草種子萃取物之用途，其係用以增加肌肉量、增加肌力、抑制肌肉量減少或抑制肌力下降。
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