WO2022085603A1 - 筋量増加、筋力増加、筋量減少抑制又は筋力低下抑制用組成物 - Google Patents

筋量増加、筋力増加、筋量減少抑制又は筋力低下抑制用組成物 Download PDF

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WO2022085603A1
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muscle
evening primrose
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increasing
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研迅 永井
亜由太 船木
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サントリーホールディングス株式会社
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    • A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
    • A23L33/10—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
    • A23L33/105—Plant extracts, their artificial duplicates or their derivatives
    • A—HUMAN NECESSITIES
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    • A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
    • A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
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    • A61P21/06—Anabolic agents
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Definitions

  • the present invention relates to a composition for increasing muscle mass, increasing muscle strength, suppressing muscle loss, or suppressing muscle weakness.
  • muscle mass muscle mass
  • a decrease in muscle mass leads to a decrease in muscle strength, a decrease in walking speed, etc., and causes an increased risk of falls, injuries such as fractures, and long-term bed rest.
  • muscle mass also decreases when there is a lack of exercise, or when long-term rest is required for medical treatment of illness after surgery.
  • Evening primrose is a plant belonging to the genus Evening Primrose in the family Evening Primrose.
  • Patent Document 1 describes a learning memory improving agent containing an evening primrose extract as an active ingredient.
  • primrose seed extract is not known to have muscle mass increasing, muscle strength increasing, muscle weakness suppressing, and muscle weakness suppressing effects.
  • An object of the present invention is to provide a composition for increasing muscle mass, increasing muscle strength, suppressing muscle mass loss, or suppressing muscle weakness. Further, an object of the present invention is the use of evening primrose seed extract for producing a composition for increasing muscle mass, increasing muscle strength, suppressing muscle mass loss or suppressing muscle weakness, and increasing muscle mass, increasing muscle strength, and reducing muscle mass. To provide the use of evening primrose seed extract for suppression or suppression of muscle weakness.
  • the evening primrose seed extract has an action of increasing muscle mass, increasing muscle strength, suppressing muscle mass loss or suppressing muscle weakness, and completed the present invention.
  • the present invention relates to the following compositions for increasing muscle mass, increasing muscle strength, suppressing muscle mass loss, or suppressing muscle weakness.
  • a composition for increasing muscle mass, increasing muscle strength, suppressing muscle mass loss, or suppressing muscle weakness which contains evening primrose seed extract as an active ingredient.
  • the composition according to the above [1] which promotes muscle hypertrophy.
  • the evening primrose seed extract is used for producing a composition for increasing muscle mass, increasing muscle strength, suppressing muscle mass loss or suppressing muscle weakness, and increasing muscle mass, increasing muscle strength, and suppressing muscle weakness.
  • the use of evening primrose seed extract for suppressing muscle weakness can be provided.
  • the evening primrose seed extract used in the present invention is a component that has been ingested as a food raw material for a long time, and is also advantageous in that it is highly safe and can be ingested continuously.
  • composition for increasing muscle mass, increasing muscle strength, suppressing muscle mass loss, or suppressing muscle weakness of the present invention contains evening primrose seed extract as an active ingredient.
  • Muscle mass usually refers to skeletal muscle mass.
  • the composition for increasing muscle mass, increasing muscle strength, suppressing muscle mass loss, or suppressing muscle weakness of the present invention is hereinafter also referred to as the composition of the present invention.
  • Evening primrose is classified into the evening primrose genus (scientific name: Evening primrose), evening primrose (scientific name: Evening primrose), evening primrose (scientific name: Evening primrose), evening primrose, etc.
  • the type of evening primrose used in the present invention is not particularly limited, and may be one type or two or more types. Of these, evening primrose is preferable.
  • the method for extracting evening primrose seeds for obtaining evening primrose seed extract is not particularly limited, and can be obtained by a usual extraction method used for extracting plant components.
  • the extraction method can be appropriately set, and the extraction conditions are not particularly limited.
  • evening primrose seeds as a raw material may be subjected to an extraction step as they are, or may be subjected to an extraction step after being crushed, cut or dried.
  • the evening primrose seed extract may be an extract obtained by extracting the evening primrose seed as it is, but may be an extract obtained by extracting the evening primrose seed from crushed, cut or dried.
  • the extraction solvent for extracting the evening primrose seed extract from the evening primrose seed is not particularly limited as long as the evening primrose seed extract can be extracted.
  • the extraction solvent used for preparing the evening primrose seed extract can be appropriately selected, and those usually used for extracting the evening primrose seed component can be used.
  • Examples of the extraction solvent include water; monohydric alcohols having 1 to 5 carbon atoms such as methanol, ethanol, propanol and butanol; ethylene glycol, propylene glycol, 1,2-butylene glycol, 1,3-butylene glycol and 1,4-.
  • Polyhydric alcohols having 2 to 5 carbon atoms such as butylene glycol, 2,3-butylene glycol and glycerin; ketones such as acetone and methyl ethyl ketone; esters such as methyl acetate and ethyl acetate; chains such as tetrahydrofuran, ethyl ether and diethyl ether.
  • the monohydric alcohol having 1 to 5 carbon atoms those having 1 to 4 carbon atoms are preferable, those having 2 to 4 carbon atoms are more preferable, and ethanol is more preferable.
  • the polyhydric alcohol having 2 to 5 carbon atoms a divalent or trivalent alcohol having 2 to 4 carbon atoms is preferable, a divalent alcohol is more preferable, and 1,3-butylene glycol is further preferable.
  • the extraction solvent water, a monohydric alcohol having 1 to 5 carbon atoms, a polyhydric alcohol having 2 to 5 carbon atoms, and a mixed solvent of two or more of these are preferable, and water and a monohydric alcohol having 2 to 4 carbon atoms are preferable.
  • an aqueous solution thereof, a dihydric alcohol having 2 to 4 carbon atoms or an aqueous solution thereof is more preferable, and water, ethanol, an aqueous ethanol solution, 1,3-butylene glycol, an aqueous solution of 1,3-butylene glycol are more preferable, and water, an aqueous ethanol solution or an aqueous solution thereof.
  • An aqueous solution of 1,3-butylene glycol is particularly preferable.
  • the ethanol or 1,3-butylene glycol aqueous solution preferably has an ethanol or 1,3-butylene glycol concentration of 10 to 98% by volume, more preferably 30 to 90% by volume, and further preferably 30 to 70% by volume. preferable.
  • the above solvent extract can be preferably used.
  • Acid or alkali may be added at the time of extraction to adjust the pH of the extraction solvent. After extraction, it is preferable to remove the evening primrose seed residue (evening primrose seed after extraction) from the extract.
  • the method for removing the evening primrose seed residue from the extract is not particularly limited, and examples thereof include known separation means such as filtration and centrifugation.
  • the following method can be used, for example. Finely crush the evening primrose seeds or dried products, add 0.1 to 30 times the amount of the extraction solvent by weight, and under normal pressure, preferably at room temperature for 10 minutes to 15 days, more preferably 30 minutes to 10 days, still more preferably 1. Extraction takes time to 7 days, or extraction is preferably performed in the vicinity of the boiling point of the extraction solvent for about 10 minutes to 1 day (more preferably 10 minutes to 2 hours), and then filtered to obtain a filtrate. At the time of extraction, it may be allowed to stand still or may be appropriately stirred. Further, the obtained filtrate (evening primrose seed extract) may be used as it is as evening primrose seed extract, and may be diluted, concentrated or dried as necessary.
  • the evening primrose seed extract obtained by extraction can be used as it is as evening primrose seed extract. Further, as long as the effect of the present invention is not impaired, it may be diluted, concentrated or dried by a known method to form a diluted solution, a concentrate or a powder, or it may be prepared in the form of a paste and used. Examples of the drying method include freeze-drying and spray-drying. Further, the evening primrose seed extract, its concentrate, dry powder and the like may be further purified by deodorization, decolorization and the like, if necessary, as long as the effects of the present invention are not impaired. Such a purification method may be carried out by arbitrarily selecting ordinary means.
  • the evening primrose seed extract in the present invention includes various solvent extracts obtained by the above-mentioned extraction methods, diluted solutions thereof, concentrates thereof or dry powders thereof, and purified products thereof. Further, the extract can also be used by diluting or dissolving it in a solvent different from the extraction solvent.
  • the evening primrose seed extract contained in the composition of the present invention may be extracted from the pressed cake obtained in the manufacturing process for obtaining evening primrose oil from evening primrose seeds by the above-mentioned extraction method.
  • the extraction temperature is not particularly limited, and may be extracted at room temperature, for example, or may be extracted at a temperature of 70 ° C. or higher.
  • the composition of the present invention exerts an excellent effect of increasing muscle mass, increasing muscle strength, suppressing muscle loss, or suppressing muscle weakness. Further, due to such effects, for example, prevention of muscle weakness, prevention of muscle weakness, maintenance of muscle mass, maintenance of muscle strength, recovery of decreased muscle mass or muscle strength, state of decreased muscle mass or state of decreased muscle strength. Improvements can be made.
  • the composition of the present invention is suitably used for increasing muscle mass and strength. In one embodiment, the composition of the present invention is suitably used for suppressing, preventing, maintaining or recovering a decrease in muscle mass or strength.
  • the composition of the present invention is used for suppressing or preventing a decrease in muscle mass or strength due to aging, maintaining muscle mass or strength, recovering or increasing muscle mass or strength due to aging.
  • Muscle mass is muscle mass and means the weight or volume of muscle.
  • muscle strength means the magnitude of the force that a muscle can exert per unit weight. In one aspect, it is suitable for suppressing or preventing a decrease in muscle mass or strength due to aging, maintaining muscle mass or strength, recovering muscle mass or strength decreased due to aging, or increasing muscle mass or strength in middle-aged and elderly people. used. Middle-aged and elderly people are concepts that include the elderly.
  • the weight and volume of the muscles of animals such as humans can be measured by, for example, micro PET / CT (positron emission tomography / computer tomography, INVEON, Siemens, USA).
  • the muscle strength of animals such as humans is measured by, for example, Biodex System 4 (multipurpose muscle function evaluation exercise device, Sakai Medical Co., Ltd., Japan) or Jamer type hydraulic grip strength meter (Sakai Medical Co., Ltd., Japan). be able to.
  • the composition of the present invention can be used, for example, to increase muscle mass, increase muscle strength, suppress muscle mass loss, or suppress muscle weakness by promoting muscle hypertrophy.
  • the composition of the present invention can be used, for example, as a composition for increasing muscle mass, increasing muscle strength, suppressing muscle mass loss, or suppressing muscle weakness that promotes muscle hypertrophy.
  • evening primrose seed extract has an action of promoting the expression of insulin-like growth factor 1 (igf1) gene and PPAR ⁇ coactivator 1 ⁇ (ppargc1a) gene.
  • the composition of the present invention preferably promotes the expression of the insulin-like growth factor 1 (igf1) gene and / or the PPAR ⁇ coactivator 1 ⁇ (ppargc1a) gene to promote muscle hypertrophy.
  • Insulin-like growth factor 1 is secreted primarily in the liver as a result of growth hormone (GH) stimulation, with most cells in the human body, especially muscle, bone, liver, kidney, nerves, skin and lung cells being igf1. It is known to be affected by. In addition, igf1 is also secreted from muscles when trained, and works locally to act on the muscles themselves and promote the proliferation of stem cells called muscle satellite cells (cells necessary for muscle fiber regeneration). It is known to contribute to hypertrophy. Expression of the igf1 gene can be measured using commonly used methods, for example using a real-time PCR system.
  • GH growth hormone
  • PPAR ⁇ coactivator 1 ⁇ is mainly expressed in the liver, brain, heart, brown adipocytes and skeletal muscle, and it is known that the expression of ppargc1a in skeletal muscle is enhanced by exercise. It is known that ppargc1a is involved in the promotion of mitochondrial biosynthesis and oxidative phosphorylation and plays a role in controlling the energy production of cells. Based on such energy production control action, it is known that the function of ppargc1a in skeletal muscle is involved in improvement of endurance (reference non-patent document 1), muscle hypertrophy (reference non-patent document 2), and the like. ..
  • ppargc1a gene can be measured using commonly used methods, for example using a real-time PCR system.
  • Reference Non-Patent Document 1 Nature. 2008 Jul 24; 454 (7203): 463-9.
  • Reference Non-Patent Document 2 Cell. 2012 Dec 7; 151 (6): 1319-31.
  • the composition of the present invention is preferably a composition for increasing muscle mass, increasing muscle strength, suppressing muscle mass loss or suppressing muscle weakness of skeletal muscle, and is a composition for increasing muscle mass or increasing muscle strength of skeletal muscle. Is more preferable.
  • the composition of the present invention is preferably a composition that promotes muscle hypertrophy of skeletal muscle, and promotes the expression of the insulin-like growth factor 1 (igf1) gene and / or the PPAR ⁇ coactivator 1 ⁇ (ppargc1a) gene. It is preferable that the muscle hypertrophy of the skeletal muscle is promoted.
  • insulin-like growth factor 1 (igf1) gene and / or PPAR ⁇ coactivator 1 ⁇ (ppargc1a) gene also increased muscle mass, increased muscle strength, suppressed muscle mass loss, or suppressed muscle weakness in skeletal muscle. Will be.
  • composition of the present invention can be used for the treatment of a condition or disease that can be expected to be prevented or improved by increasing muscle mass, increasing muscle strength, suppressing muscle mass loss or suppressing muscle weakness.
  • a condition or disease include a condition or disease in which muscle mass or strength is reduced such as preflail, flail, sarcopenia, locomotive syndrome and the like.
  • the composition for increasing muscle mass, increasing muscle strength, suppressing muscle mass loss or suppressing muscle weakness of the present invention may be used for prevention or improvement of preflail, flail, sarcopenia or locomotive syndrome. ..
  • composition of the present invention may be used for improving motor function or endurance, and further, preventing or improving obesity, lowering blood glucose, promoting heat production, improving energy metabolism, digestion, etc. It may be used for enhancing tube motility, preventing or ameliorating alcoholic fatty liver, preventing or ameliorating metabolic syndrome, and the like.
  • prevention includes preventing the onset, delaying the onset, reducing the incidence, reducing the risk of onset, and the like. Improvement of a condition or disease is to recover the subject from the condition or disease, alleviate the symptoms of the condition or disease, improve the symptoms of the condition or disease, delay the progression of the condition or disease, or prevent it. Etc. are included.
  • composition of the present invention can be applied to either therapeutic use (medical use) or non-therapeutic use (non-medical use).
  • Non-therapeutic is a concept that does not include medical practice, ie human surgery, treatment or diagnosis.
  • the composition of the present invention can be provided, for example, in the form of foods and drinks, cosmetics, pharmaceuticals, quasi-drugs, feeds and the like, but is not limited thereto.
  • the composition of the present invention may itself be a food or drink, a cosmetic, a pharmaceutical product, a quasi-drug, a feed or the like used for increasing muscle mass, increasing muscle strength, suppressing muscle mass loss or suppressing muscle weakness. , It may be a preparation such as a material or an additive used in combination with these.
  • the composition of the present invention can be provided, as an example, in the form of an agent, but is not limited to this form.
  • the agent can be provided as it is as a composition or as a composition containing the agent.
  • the composition of the present invention may be either an oral composition or a parenteral composition, but is preferably an oral composition.
  • the oral composition include foods and drinks, oral medicines, quasi-drugs for oral use, and feeds, and foods and drinks are preferable.
  • Examples of the parenteral composition include parenteral drugs, quasi-drugs for parenteral use, and cosmetics.
  • composition of the present invention may contain any additives and any components in addition to the above-mentioned evening primrose seed extract as long as the effects of the present invention are not impaired.
  • additives and ingredients can be selected according to the form of the composition and the like, and generally, those that can be used for foods and drinks, cosmetics, pharmaceuticals, quasi-drugs, feeds and the like can be used. Any additive or component may be used alone or in combination of two or more.
  • excipients, binders, emulsifiers, tensioning agents (isotonic agents), buffers, solubilizing agents, preservatives, stabilizers to be added in the formulation.
  • composition of the present invention is a food or drink, a cosmetic, a pharmaceutical product, a quasi-drug, a feed, or the like, the production method thereof is not particularly limited and can be produced by a general method.
  • ingredients that can be used in the food or drink are added to the evening primrose seed extract. It can be blended into various foods and drinks.
  • the food and drink is not particularly limited, and examples thereof include general food and drink, health food, health drink, food with functional claims, food for specified health use, food and drink for the sick, food additives, and raw materials thereof.
  • the form of the food or drink is not particularly limited, and examples thereof include solid, semi-fluid, and fluid.
  • Foods and drinks are oral solid preparations such as tablets, coated tablets, fine granules, granules, powders, pills, capsules, dry syrups and chewables; various forms of oral liquid preparations such as oral liquids and syrups. It can also be.
  • the evening primrose seed extract may be blended in the cosmetic, and the evening primrose seed extract may be blended with a carrier, an additive or the like acceptable for the cosmetic.
  • the above-mentioned cosmetics include components such as carriers and additives that are acceptable for cosmetics, for example, water, alcohols, oils, surfactants, thickeners, metal soaps, etc., as long as the effects of the present invention are not impaired. Gelling agents, powders, chelating agents, water-soluble polymers, film-forming agents, resins, inclusion compounds, antibacterial agents, deodorants, salts, pH adjusters, UV absorbers, derived from animals, plants and microorganisms other than the above.
  • the composition of the present invention is a drug or a quasi-drug
  • a pharmacologically acceptable excipient or the like is mixed with the evening primrose seed extract to form a drug or a quasi-drug in various dosage forms.
  • the administration form of the drug or quasi-drug may be oral administration or parenteral administration.
  • the administration form is preferably oral administration.
  • the dosage form may be a dosage form suitable for the administration form.
  • an oral solid preparation such as a tablet, a coated tablet, a fine granule, a granule, a powder, a pill, a capsule, a dry syrup, or a chewable;
  • oral liquid preparations such as syrups.
  • parenteral drugs or non-oral drugs include injections, infusions, ointments, lotions, patches, suppositories, nasal agents, transpulmonary agents (inhalants) and the like.
  • the evening primrose seed extract can be mixed with a component that can be used as a feed to be used as a feed.
  • the feed include livestock feeds used for cattle, pigs, chickens, sheep, horses and the like; small animal feeds used for rabbits, guinea pigs, rats, mice and the like; pet foods used for dogs, cats, small birds and the like. ..
  • the composition of the present invention can be ingested or administered by an appropriate method according to its form.
  • the composition of the present invention is preferably taken orally (orally administered).
  • the dose (which can also be referred to as ingestion) of the composition of the present invention is not particularly limited.
  • the dose of the composition of the present invention may be any amount (effective amount) that can obtain the effects of increasing muscle mass, increasing muscle strength, suppressing muscle mass loss, or suppressing muscle weakness, and the administration form, administration method, and body weight of the subject. It may be set appropriately according to the above. Preferably, it is orally administered or ingested.
  • the dose of evening primrose seed extract (dry matter equivalent) is 60 kg per day, preferably 1 mg or more. It is more preferably 10 mg or more, further preferably 100 mg or more, preferably 1000 mg or less, still more preferably 500 mg or less, still more preferably 300 mg or less. In one embodiment, the dose of evening primrose seed extract (dry matter equivalent) is 60 kg per day for humans (adults), preferably 1 to 1000 mg, more preferably 10 to 500 mg, still more preferably 100 to 300 mg. Is. It is preferable to ingest or administer the above amount once or more a day, for example, once a day or several times (for example, 2 to 3 times).
  • the composition of the present invention can be used to ingest or administer the above amount of evening primrose seed extract per day to humans per 60 kg of body weight.
  • the above total dose is the total amount of the evening primrose seed extract when two or more kinds are used.
  • the subject to ingest or administer the composition of the present invention (which may also be the subject of administration) is not particularly limited. It is preferably a human or non-human mammal, more preferably a human.
  • the administration target includes a subject requiring or wishing to increase muscle mass, increase muscle strength, suppress muscle mass loss, or suppress muscle weakness.
  • Such subjects include, for example, middle-aged and elderly people, subjects who need or desire prevention or improvement of frailty syndrome, locomotive syndrome or sarcopenia, athletes and the like.
  • the middle-aged person may be, for example, a human being 40 years or older. Among the middle-aged and elderly people in one aspect, the elderly are preferable as the target.
  • the elderly person may be, for example, a human aged 60 years or older or 65 years or older.
  • the composition of the present invention may also be used for healthy subjects, for example, for the purpose of preventing or preventing symptoms or diseases that can be expected to be prevented or improved by increasing muscle mass, increasing muscle strength, suppressing muscle mass loss, or suppressing muscle weakness. can.
  • the present invention also includes the following methods.
  • the present invention also includes the following uses. Use of evening primrose seed extract for increasing muscle mass, increasing muscle strength, suppressing muscle loss or suppressing muscle weakness.
  • the methods and uses may be therapeutic or non-therapeutic methods or uses. By administering evening primrose seed extract, it becomes possible to increase muscle mass, increase muscle strength, suppress muscle mass loss, or suppress muscle weakness. This makes it possible to prevent or improve, for example, sarcopenia, preflail, flail and the like.
  • evening primrose seed extract and preferred embodiments thereof are the same as the above-mentioned composition of the present invention.
  • the above use is preferably in humans or non-human mammals, more preferably in humans.
  • evening primrose seed extract in an amount (which can be said to be an effective amount) that gives a desired effect may be used.
  • the preferred dose of evening primrose seed extract, the subject of administration, and the like are the same as those of the above-mentioned composition of the present invention.
  • Evening primrose seed extract may be administered as it is, or may be administered as a composition containing the same.
  • the composition of the present invention described above may be used.
  • the present invention also includes the use of evening primrose seed extract for producing the compositions of the present invention.
  • Example 1 Cell proliferation 50 ⁇ 10 4 cells in a 75 cm 2 culture flask (manufactured by Wako Pure Chemical Industries, Ltd.) coated with collagen of purchased human skeletal myoblasts derived from normal adults (manufactured by Ronza Co., Ltd., CC-2580). It was sown at / ml and cultured for 7 days.
  • the composition of the culture medium was as follows. [Culture medium composition] SkGM (registered trademark) -2 BulletKit (registered trademark) _1Kit (manufactured by Lonza Co., Ltd., CC-3245)
  • the cultured cells were fixed with a 4% fixation solution (paraformaldehyde (PFA), manufactured by Fujifilm Wako Pure Chemical Industries, Ltd.) and then washed with phosphate buffered saline (PBS) (manufactured by Nacalai Tesque, Inc.). Then, Triton X-100 (manufactured by Nacalai Tesque, Inc.) was subjected to membrane permeation treatment with 0.25% Triton X-100 / PBS prepared with PBS.
  • PFA paraformaldehyde
  • PBS phosphate buffered saline
  • Bovine Serum Albumin manufactured by Sigma-Aldrich
  • Triton X-100 / 1% BSA / PBS adjusted with PBS and Triton X-100, and MF20-s
  • the primary antibody reaction was carried out with (manufactured by DSHB).
  • a secondary antibody reaction was carried out using Alexa Fluor 488 Goat Anti-Mouse IgG (H + L) (manufactured by Thermo Fisher Scientific).
  • Example 2 Cell proliferation, differentiation induction and reagent addition were tested in the same manner as in Example 1. Twenty-four hours after the addition, the gene expression levels of 18s rRNA (18s), insulin-like growth factor 1 (igf1) and PPAR ⁇ coactivator 1 ⁇ (ppargc1a) were measured. The gene expression level was measured by isolating RNA from cells using RNeasy Micro Kit (manufactured by QIAGEN) and the following method.
  • cDNA synthesis was performed using High-Capacity cDNA Reverse Transcriptional Kits (manufactured by Thermo Fisher Scientific). Quantitative PCR was performed on Step One Plus (registered trademark, manufactured by Biosystems) using TaqMan FastUniversal PCR Mastermix ((TaqMan is a registered trademark) Thermo Fisher Scientific), 99s1 Gene 99_99s_ Thermo Fisher Scientific (manufactured by Thermo Fisher Scientific), igf1 (Hs01547656_m1, Thermo Fisher Scientific), which is a gene that contributes to muscle synthesis and muscle endurance, and pargc1a (Hs00173304_m1, manufactured by Thermo).
  • SEM mean ⁇ standard error
  • the significance test was performed by the same method as in Example 1, and 5% or less was considered significant (*: p ⁇ 0.05, vs control (Cont.)). Evening primrose seed extract was confirmed to have a significant increase in igf1 and ppargc1a expression levels at 500 and 1000 ng / ml.
  • the evening primrose seed extract has the effect of significantly increasing the muscle minor axis length and significantly increasing the expression levels of igf1 and ppargc1a, and thus has the effect of significantly increasing muscle mass and muscle strength. It was confirmed that it has an effect of increasing, suppressing muscle mass loss or suppressing muscle weakness. It was also confirmed that evening primrose seed extract has a muscle hypertrophy promoting effect.

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Abstract

本発明は、筋量増加、筋力増加、筋量減少抑制又は筋力低下抑制用組成物を提供することを目的とする。 本発明は、月見草種子エキスを有効成分として含有する、筋量増加、筋力増加、筋量減少抑制又は筋力低下抑制用組成物に関する。

Description

筋量増加、筋力増加、筋量減少抑制又は筋力低下抑制用組成物
本発明は、筋量増加、筋力増加、筋量減少抑制又は筋力低下抑制用組成物などに関する。
日本のような人口構成における高齢者比率が高い国では、健康寿命の延長が課題となっている。健康寿命の短縮の要因の一つとして、加齢に伴う筋肉量（筋量）の低下（減少）が挙げられる。筋肉量の低下は、筋力の低下、歩行速度等の低下につながり、転倒のリスク上昇、骨折等の怪我、長期臥床等の原因となる。また、運動不足や、手術後、病気の療養等において長期間安静が必要とされる場合等にも、筋肉量が減少する。
月見草は、アカバナ科マツヨイグサ属に属する植物である。特許文献１には、月見草抽出物を有効成分とする学習記憶改善剤が記載されている。
特開２０１４－１４１４３７号公報
月見草種子エキスが、筋量増加、筋力増加、筋量減少抑制、筋力低下抑制作用を有することは知られていない。
本発明の目的は、筋量増加、筋力増加、筋量減少抑制又は筋力低下抑制用組成物を提供することである。また、本発明の目的は、筋量増加、筋力増加、筋量減少抑制又は筋力低下抑制用組成物の製造のための、月見草種子エキスの使用、及び、筋量増加、筋力増加、筋量減少抑制又は筋力低下抑制のための、月見草種子エキスの使用を提供することである。
本発明者らは上記課題を解決すべく鋭意研究した結果、月見草種子エキスが筋量増加、筋力増加、筋量減少抑制又は筋力低下抑制作用を有することを見出して本発明を完成させた。
本発明は以下の筋量増加、筋力増加、筋量減少抑制又は筋力低下抑制用組成物に関する。
〔１〕月見草種子エキスを有効成分として含有する、筋量増加、筋力増加、筋量減少抑制又は筋力低下抑制用組成物。
〔２〕筋肥大を促進する上記〔１〕に記載の組成物。
〔３〕インスリン様成長因子１（ｉｇｆ１）遺伝子及び／又はＰＰＡＲγコアクチベーター１α（ｐｐａｒｇｃ１ａ）遺伝子の発現を促進して筋肥大を促進する上記〔１〕又は上記〔２〕に記載の組成物。
〔４〕飲食品、化粧料、医薬品、医薬部外品又は飼料である上記〔１〕～〔３〕のいずれかに記載の組成物。
〔５〕「筋肉減少抑制」、「筋肉維持」、「筋肉増加」、「筋肉改善」、「筋力低下抑制」、「筋力維持」、「筋力増加」、「筋力改善」、「筋肉をつくる力をサポート」、「歩行機能の改善」、「歩行機能の維持」、「運動機能改善」、「運動機能維持」、「加齢によって衰える筋肉の維持」及び「加齢によって衰える筋力の維持」の１又は２以上の表示を付した、上記〔１〕～〔４〕のいずれかに記載の組成物。
〔６〕筋量増加、筋力増加、筋量減少抑制又は筋力低下抑制用組成物の製造のための、月見草種子エキスの使用。
〔７〕筋量増加、筋力増加、筋量減少抑制又は筋力低下抑制のための、月見草種子エキスの使用。
本発明によると、筋量増加、筋力増加、筋量減少抑制又は筋力低下抑制用組成物を提供することができる。また、本発明によると、筋量増加、筋力増加、筋量減少抑制又は筋力低下抑制用組成物の製造のための、月見草種子エキスの使用、及び、筋量増加、筋力増加、筋量減少抑制又は筋力低下抑制のための、月見草種子エキスの使用を提供することができる。
本発明で使用される月見草種子エキスは、古くから食品原料として摂取されてきた成分であり、安全性が高く継続的に摂取できる点でも有利である。
図１は、実施例１で測定した筋短径長さ（Ｎ＝６の平均±標準誤差（ＳＥＭ））を示すものである。 図２は、実施例２で測定したｉｇｆ１の相対発現量（Ｎ＝４の平均±標準誤差（ＳＥＭ））を示すものである。 図３は、実施例２で測定したｐｐａｒｇｃ１ａの相対発現量（Ｎ＝４の平均±標準誤差（ＳＥＭ））を示すものである。
本発明の筋量増加、筋力増加、筋量減少抑制又は筋力低下抑制用組成物は、有効成分として月見草種子エキスを含有する。
筋量（筋肉量）は、通常骨格筋量を指す。
本発明の筋量増加、筋力増加、筋量減少抑制又は筋力低下抑制用組成物を、以下、本発明の組成物ともいう。
月見草は、マツヨイグサ属（学名：Ｏｅｎｏｔｈｅｒａ）に分類され、コマツヨイグサ（学名：Ｏｅｎｏｔｈｅｒａ　ｌａｃｉｎｉａｔａ）、マツヨイグサ（学名：Ｏｅｎｏｔｈｅｒａ　ｓｔｒｉａｔａ）、メマツヨイグサ（学名：Ｏｅｎｏｔｈｅｒａ　ｂｉｅｎｎｉｓ）、オオマツヨイグサ（学名：Ｏｅｎｏｔｈｅｒａ　ｅｒｙｔｈｒｏｓｅｐａｌａ）等が代表的な種として知られている。
本発明で使用される月見草の種類は特に制限されず、１種であってもよく、２種以上であってもよい。中でも、メマツヨイグサが好ましい。
月見草種子エキスを得るための月見草種子の抽出方法は特に限定されず、植物成分の抽出に用いられる通常の抽出方法により得ることができる。抽出方法は適宜設定することができ、抽出条件も特に限定されない。例えば、月見草種子を常温又は加温下にて溶媒（抽出溶媒）で抽出することにより月見草種子エキスを得ることが好ましい。月見草種子エキスの調製において、原料である月見草種子はそのまま抽出工程に付されてもよく、粉砕、切断又は乾燥された後に抽出工程に付されてもよい。本発明において月見草種子エキスは、月見草種子をそのまま抽出した抽出物であってよいが、月見草種子を粉砕、切断又は乾燥したものから抽出した抽出物であってよい。好ましくは、月見草種子を粉砕、切断又は乾燥したものからの抽出物である。
また、月見草の種子から月見草種子エキスを抽出するための抽出溶媒としては、月見草種子エキスを抽出できれば特に限定されるものではない。
月見草種子エキスの調製に用いる抽出溶媒は適宜選択することができ、月見草種子成分の抽出に通常用いられるものを使用することができる。抽出溶媒として、例えば水；メタノール、エタノール、プロパノール、ブタノール等の炭素数１～５の１価アルコール；エチレングリコール、プロピレングリコール、１，２－ブチレングリコール、１，３－ブチレングリコール、１，４－ブチレングリコール、２，３－ブチレングリコール、グリセリン等の炭素数２～５の多価アルコール；アセトン、メチルエチルケトン等のケトン；酢酸メチル、酢酸エチル等のエステル；テトラヒドロフラン、エチルエーテル、ジエチルエーテル等の鎖状及び環状エーテル；ポリエチレングリコール等のポリエーテル；スクワラン等が挙げられる。これらは単独で用いてもよいし、２種以上を組み合わせた混合溶媒（混合液）を用いてもよい。炭素数１～５の１価アルコールとして、炭素数１～４のものが好ましく、炭素数２～４のものがより好ましく、エタノールがさらに好ましい。炭素数２～５の多価アルコールとして、炭素数２～４の２価又は３価のアルコールが好ましく、２価のアルコールがより好ましく、１，３－ブチレングリコールがさらに好ましい。中でも、抽出溶媒として、水、炭素数１～５の１価アルコール、炭素数２～５の多価アルコール、これらの２種以上の混合溶媒が好ましく、水、炭素数２～４の１価アルコール又はその水溶液、炭素数２～４の２価アルコール又はその水溶液がより好ましく、水、エタノール、エタノール水溶液、１，３－ブチレングリコール、１，３－ブチレングリコール水溶液がさらに好ましく、水、エタノール水溶液又は１，３－ブチレングリコール水溶液が特に好ましい。一態様において、エタノール水溶液及び１，３－ブチレングリコール水溶液は、エタノール又は１，３－ブチレングリコール濃度が１０～９８体積％が好ましく、３０～９０体積％がより好ましく、３０～７０体積％がさらに好ましい。本発明における月見草種子エキスとして、上記の溶媒抽出物を好適に使用することができる。
抽出に際して酸又はアルカリを添加し、抽出溶媒のｐＨを調整してもよい。抽出後には、月見草種子残渣（抽出後の月見草種子）を抽出液から除去することが好ましい。月見草種子残渣を抽出液から除去する方法は特に限定されず、ろ過、遠心分離等の公知の分離手段が挙げられる。
月見草種子エキスの抽出方法の一例として、例えば以下の方法が使用できる。月見草種子又は乾燥物を細砕し、抽出溶媒を重量で０．１～３０倍量加え、常圧下、室温で好ましくは１０分～１５日、より好ましくは３０分～１０日、さらに好ましくは１時間～７日抽出するか、又は、抽出溶媒の沸点付近で好ましくは１０分～１日（より好ましくは１０分～２時間）程抽出してからろ過してろ液を得る。抽出の際は、静置してもよく、適宜攪拌を行ってもよい。また、得られたろ液（月見草種子抽出液）をそのまま月見草種子エキスとしてもよく、必要に応じ希釈、濃縮又は乾燥等してもよい。
本発明においては、抽出により得られた月見草種子抽出液をそのまま月見草種子エキスとして用いることができる。また、本発明の効果を損なわない限り、公知の方法により希釈、濃縮又は乾燥して、希釈液、濃縮物や粉末としてもよく、ペースト状に調製して用いることもできる。乾燥方法として、例えば、凍結乾燥、噴霧乾燥等が挙げられる。さらに、上記の月見草種子エキス、その濃縮物や乾燥粉末等について、本発明の効果を損なわない範囲で、必要に応じて、さらに脱臭、脱色等の精製を行ってもよい。このような精製方法は、通常の手段を任意に選択して行えばよい。
本発明における月見草種子エキスは、上記のような抽出方法で得られた各種溶媒抽出液、その希釈液、その濃縮物又はその乾燥粉末、これらの精製物を含む。また、抽出物は、抽出溶媒とは異なる溶媒で希釈又は溶解させて用いることもできる。
本発明の組成物に含まれる月見草種子エキスは、月見草種子から月見草油を得る製造工程において得られる圧搾粕から、上述の抽出方法により抽出される場合もある。
抽出温度としては、特に制限はなく、例えば、常温で抽出されてもよく、また、７０℃以上の温度で抽出されてもよい。
月見草種子エキスは、上述の抽出方法により得られたものであってもよいし、市販品であってもよい。月見草種子エキスの市販品の例としては、月見草種子エキス－Ｐ（粉末、オリザ油化（株））、月見草エキス－ＷＳＰＳ（水溶性粉末、オリザ油化（株））の他、月見草種子エキス粉末を水及び１，３－ブチレングリコールの混合溶媒に溶解させたものとして、月見草種子エキスＬＣ（商品名、オリザ油化（株））、ルナホワイトＢ（商品名、一丸ファルコス（株））等が挙げられる。
本発明の組成物は、月見草種子エキスを有効成分として含むことにより、優れた筋量増加、筋力増加、筋量減少抑制又は筋力低下抑制効果を奏する。また、このような効果により、例えば、筋量減少の予防、筋力低下の予防、筋量維持、筋力維持、低下した筋量又は筋力の回復、筋量が低下した状態又は筋力が低下した状態の改善等が可能となる。
一態様において、本発明の組成物は、筋量増加、筋力増加のために好適に使用される。
一態様において、本発明の組成物は、筋量又は筋力の低下抑制、低下予防、維持又は回復のために好適に使用される。
一態様において、本発明の組成物は、加齢による筋量又は筋力の低下抑制若しくは低下予防、筋量又は筋力維持、加齢により低下した筋量又は筋力の回復又は筋量又は筋力増加のために好適に使用される。「筋量」とは、筋肉量であって、筋肉の重量や体積を意味するものである。また、「筋力」とは、単位重量当たりの筋肉が出せる力の大きさを意味するものである。
一態様においては、中高年者における加齢による筋量や筋力の低下抑制若しくは低下予防、筋量や筋力維持、加齢により低下した筋量や筋力の回復又は筋量や筋力増加のために好適に使用される。中高年者は、高齢者を含む概念である。
ヒト等の動物の筋肉の重量や体積は、例えば、マイクロＰＥＴ／ＣＴ（陽電子（ポジトロン）放射断層撮影／コンピュータ断層撮影、ＩＮＶＥＯＮ、シーメンス、米国）により測定することができる。
また、ヒト等の動物の筋力は、例えば、バイオデックス　システム４（多用途筋機能評価運動装置、酒井医療株式会社、日本）や、ジェイマー型油圧握力計（酒井医療株式会社、日本）により測定することができる。
月見草種子エキスは、筋肥大を促進する作用を有する。本発明の組成物は、例えば、筋肥大を促進することにより、筋量を増加、筋力を増加、筋量減少を抑制又は筋力低下を抑制するために使用することができる。
本発明の組成物は、例えば、筋肥大を促進する筋量増加、筋力増加、筋量減少抑制又は筋力低下抑制用組成物として使用することができる。
また、月見草種子エキスは、インスリン様成長因子１（ｉｇｆ１）遺伝子、ＰＰＡＲγコアクチベーター１α（ｐｐａｒｇｃ１ａ）遺伝子の発現を促進する作用を有する。
本発明の組成物は、インスリン様成長因子１（ｉｇｆ１）遺伝子及び／又はＰＰＡＲγコアクチベーター１α（ｐｐａｒｇｃ１ａ）遺伝子の発現を促進して筋肥大を促進するものであることが好ましい。
インスリン様成長因子１（ｉｇｆ１）は、主に肝臓で成長ホルモン（ＧＨ）による刺激の結果分泌され、人体の殆どの細胞、特に筋肉、骨、肝臓、腎臓、神経、皮膚及び肺の細胞はｉｇｆ１の影響を受けることが知られている。また、ｉｇｆ１は、トレーニングをすると筋肉からも分泌され、筋肉自身に働きかけたり、筋サテライト細胞（筋線維の再生のために必要な細胞）という幹細胞の増殖を促したりと、局所的に働いて筋肥大に貢献することがわかっている。ｉｇｆ１遺伝子の発現は、一般に使用される方法を用いて測定することができ、例えば、リアルタイムＰＣＲシステムを用いて測定することができる。
ＰＰＡＲγコアクチベーター１α（ｐｐａｒｇｃ１ａ）は、主に肝臓、脳、心臓、褐色脂肪細胞や骨格筋において発現しており、特に骨格筋におけるｐｐａｒｇｃ１ａは運動によって発現が増強することが知られている。ｐｐａｒｇｃ１ａはミトコンドリアの生合成や酸化的リン酸化の促進等に関与して細胞のエネルギー産生を制御する役割を担っていることが知られている。このようなエネルギー産生の制御作用に基づき、骨格筋におけるｐｐａｒｇｃ１ａの機能としては、持久力の向上（参考非特許文献１）、筋肥大（参考非特許文献２）等に関与することがわかっている。ｐｐａｒｇｃ１ａ遺伝子の発現は、一般に使用される方法を用いて測定することができ、例えば、リアルタイムＰＣＲシステムを用いて測定することができる。
（参考非特許文献１）Ｎａｔｕｒｅ．　２００８　Ｊｕｌ　２４；４５４（７２０３）：４６３－９．
（参考非特許文献２）Ｃｅｌｌ．　２０１２　Ｄｅｃ　７；１５１（６）：１３１９－３１．
また、本発明の組成物は、骨格筋の筋量増加、筋力増加、筋量減少抑制又は筋力低下抑制用組成物であることが好ましく、骨格筋の筋量増加又は筋力増加用組成物であることがより好ましい。また、本発明の組成物は、骨格筋の筋肥大を促進する組成物であることが好ましく、インスリン様成長因子１（ｉｇｆ１）遺伝子及び／又はＰＰＡＲγコアクチベーター１α（ｐｐａｒｇｃ１ａ）遺伝子の発現を促進して骨格筋の筋肥大を促進するものであることが好ましい。
骨格筋は筋線維という多核の筋管細胞から構成され、複数の筋管細胞が互いに融合することで筋線維が形成される。
本発明において、骨格筋の筋量増加、筋力増加、筋量減少抑制又は筋力低下抑制には、筋管細胞の短径長さの増加効果、筋繊維の短径長さの増加効果、筋断面積の増加効果、筋管細胞の短径長さの低下抑制効果、筋繊維の短径長さの低下抑制効果、筋断面積の低下抑制効果の少なくとも何れかの効果が認められることが含まれる。また、インスリン様成長因子１（ｉｇｆ１）遺伝子及び／又はＰＰＡＲγコアクチベーター１α（ｐｐａｒｇｃ１ａ）遺伝子の発現増加によっても、骨格筋の筋量増加、筋力増加、筋量減少抑制又は筋力低下抑制作用が認められる。
また、本発明の組成物は、筋量増加、筋力増加、筋量減少抑制又は筋力低下抑制により予防又は改善が期待できる状態又は疾患の処置のために用いることができる。このような状態又は疾患として、例えば、プレフレイル、フレイル、サルコペニア、ロコモティブシンドローム等の筋量又は筋力が低下した状態又は疾患が挙げられる。
一態様において、本発明の筋量増加、筋力増加、筋量減少抑制又は筋力低下抑制用組成物は、プレフレイル、フレイル、サルコペニア又はロコモティブシンドロームの予防又は改善のために使用されるものであってよい。
また、本発明の組成物は、運動機能向上又は持久力向上等のために使用されるものであってもよく、さらに、肥満の予防又は改善、血糖降下、熱産生促進、エネルギー代謝改善、消化管運動の亢進、アルコール性脂肪肝の予防又は改善、メタボリックシンドロームの予防又は改善等のために使用されるものであってもよい。
本明細書で予防は、発症を防止すること、発症を遅延させること、発症率を低下させること、発症のリスクを軽減すること等を包含する。状態又は疾患の改善は、対象を状態又は疾患から回復させること、状態又は疾患の症状を軽減すること、状態又は疾患の症状を好転させること、状態又は疾患の進行を遅延させること、防止すること等を包含する。
本発明の組成物は、治療的用途（医療用途）又は非治療的用途（非医療用途）のいずれにも適用することができる。非治療的とは、医療行為、すなわち人間の手術、治療又は診断を含まない概念である。
本発明の組成物は、例えば、飲食品、化粧料、医薬品、医薬部外品又は飼料等の形態で提供することができるが、これらに限定されるものではない。本発明の組成物は、それ自体が筋量増加、筋力増加、筋量減少抑制又は筋力低下抑制のために用いられる飲食品、化粧料、医薬品、医薬部外品、飼料等であってもよく、これらに配合して使用される素材又は添加剤等の製剤等であってもよい。
本発明の組成物は、一例として、剤の形態で提供することができるが、本形態に限定されるものではない。当該剤をそのまま組成物として、又は、当該剤を含む組成物として提供することもできる。
本発明の組成物は、経口用組成物、非経口用組成物のいずれであってもよいが、好ましくは経口用組成物である。経口用組成物としては、飲食品、経口用医薬品、経口用医薬部外品、飼料が挙げられ、好ましくは飲食品である。非経口用組成物として、非経口用医薬品、非経口用医薬部外品、化粧料が挙げられる。
本発明の組成物は、本発明の効果を損なわない限り、上述した月見草種子エキス以外に、任意の添加剤、任意の成分を含有することができる。これらの添加剤及び成分は、組成物の形態等に応じて選択することができ、一般的に飲食品、化粧料、医薬品、医薬部外品、飼料等に使用可能なものが使用できる。任意の添加剤又は成分は、１種用いてもよく、２種以上を組み合わせて用いてもよい。
また、任意の添加剤又は成分の一例として、製剤化において配合される賦形剤、結合剤、乳化剤、緊張化剤（等張化剤）、緩衝剤、溶解補助剤、防腐剤、安定化剤、抗酸化剤、着色剤、凝固剤、コーティング剤、香料等が挙げられる。
本発明の組成物を、飲食品、化粧料、医薬品、医薬部外品、飼料等とする場合、その製造方法は特に限定されず、一般的な方法により製造することができる。
例えば本発明の組成物を飲食品とする場合、月見草種子エキスに、飲食品に使用可能な成分（例えば、上記の任意成分等の飲食品素材、必要に応じて使用される添加剤等）を配合して、種々の飲食品とすることができる。飲食品は特に限定されず、例えば、一般的な飲食品、健康食品、健康飲料、機能性表示食品、特定保健用食品、病者用飲食品、食品添加剤、これらの原料等が挙げられる。飲食品の形態も特に限定されず、固形状、半流動状、流動状などを挙げることができる。飲食品は、錠剤、被覆錠剤、細粒剤、顆粒剤、散剤、丸薬、カプセル剤、ドライシロップ剤、チュアブル剤等の経口用固形製剤；内服液剤、シロップ剤等の経口用液体製剤の各種製剤形態とすることもできる。
本発明の組成物を化粧料とする場合、月見草種子エキスを化粧料に配合すればよく、月見草種子エキスに化粧料に許容される担体、添加剤等を配合することができる。
上記化粧料には、本発明の効果を損なわない範囲で、化粧料に許容される担体、添加剤等の成分、例えば、水、アルコール類、油剤、界面活性剤、増粘剤、金属セッケン、ゲル化剤、粉体、キレート剤、水溶性高分子、皮膜形成剤、樹脂、包接化合物、抗菌剤、消臭剤、塩類、ｐＨ調整剤、紫外線吸収剤、上記以外の動植物・微生物由来の抽出物、角質溶解剤、酵素、ホルモン類、他のビタミン類、保湿剤、殺菌剤、抗炎症剤、香料等の１又は２以上を適宜含有させることができる。化粧料は、一般的な製造法により製造することができる。例えば、上記月見草種子エキスと、上記の化粧料に使用し得る成分１又は２以上とを混合した後、所望の形態に加工することによって得ることができる。
また、化粧料の製品形態は特に限定されない。
本発明の組成物を医薬品又は医薬部外品とする場合、例えば、月見草種子エキスに、薬理学的に許容される賦形剤等を配合して、各種剤形の医薬品又は医薬部外品とすることができる。本発明の効果をより充分に得る観点から、医薬品又は医薬部外品の投与形態は、経口投与でもよく、非経口投与でもよい。本発明の効果をより充分に得る観点から、投与形態は、経口投与が好ましい。剤形は、投与形態に適した剤形とすればよい。経口医薬品又は経口用医薬部外品の剤形として、例えば、錠剤、被覆錠剤、細粒剤、顆粒剤、散剤、丸薬、カプセル剤、ドライシロップ剤、チュアブル剤等の経口用固形製剤；内服液剤、シロップ剤等の経口用液体製剤が挙げられる。非経口医薬品又は非経口用医薬部外品の剤形として、注射剤、点滴剤、軟膏剤、ローション剤、貼付剤、坐剤、経鼻剤、経肺剤（吸入剤）等が挙げられる。
本発明の組成物を飼料とする場合、月見草種子エキスに、飼料に使用可能な成分を配合して飼料とすることができる。飼料としては、例えば、ウシ、ブタ、ニワトリ、ヒツジ、ウマ等に用いる家畜用飼料；ウサギ、モルモット、ラット、マウス等に用いる小動物用飼料；イヌ、ネコ、小鳥等に用いるペットフードなどが挙げられる。
本発明の組成物に含まれる月見草種子エキスの含有量は特に限定されず、該組成物の形態等に応じて適宜設定することができる。
本発明の組成物中の月見草種子エキス（乾燥物換算）の含有量は、例えば、該組成物中に０．００１重量％以上が好ましく、０．０１重量％以上がより好ましく、０．０５重量％以上がさらに好ましく、また、１０重量％以下が好ましく、５重量％以下がより好ましい。一態様において、月見草種子エキス（乾燥物換算）の含有量は、組成物中に０．００１～１０重量％が好ましく、０．０１～５重量％がより好ましく、０．０５～５重量％がさらに好ましい。上記含有量は、異なる種類の月見草種子エキスを２種以上含有する場合は、これらの合計含有量である。
本発明の組成物は、その形態に応じた適当な方法で摂取又は投与することができる。本発明の組成物は、経口で摂取（経口投与）されることが好ましい。本発明の組成物の投与量（摂取量ということもできる）は特に限定されない。本発明の組成物の投与量は、筋量増加、筋力増加、筋量減少抑制又は筋力低下抑制効果が得られるような量（有効量）であればよく、投与形態、投与方法、対象の体重等に応じて適宜設定すればよい。好ましくは、経口投与又は経口摂取される。
一態様において、本発明の組成物をヒト（成人）を対象に経口で摂取させる又は投与する場合、月見草種子エキス（乾燥物換算）の投与量は、１日当たり体重６０ｋｇで、好ましくは１ｍｇ以上、より好ましくは１０ｍｇ以上、さらに好ましくは１００ｍｇ以上、また、好ましくは１０００ｍｇ以下、より好ましくは５００ｍｇ以下、さらに好ましくは３００ｍｇ以下である。一態様において、月見草種子エキス（乾燥物換算）の投与量は、ヒト（成人）であれば、１日当たり体重６０ｋｇで、好ましくは１～１０００ｍｇ、より好ましくは１０～５００ｍｇ、さらに好ましくは１００～３００ｍｇである。上記量を、１日１回以上、例えば、１日１回又は数回（例えば２～３回）に分けて、摂取させる又は投与することが好ましい。一態様においては、上記量の月見草種子エキスを、ヒトに経口で摂取させる又は投与することが好ましい。一態様において、本発明の組成物は、ヒトに、体重６０ｋｇあたり、１日あたり上記量の月見草種子エキスを摂取させる又は投与するために使用することができる。上記総投与量は、月見草種子エキスを２種以上使用する場合は、これらの合計量である。
本発明の組成物は、継続して摂取又は投与されるものであることが好ましい。月見草種子エキスは、継続的に摂取又は投与されることによって、上記の効果が高まることが期待される。一態様において、本発明の組成物は、好ましくは１週間以上、より好ましくは４週間以上、さらに好ましくは８週間以上継続して、特に好ましくは１２週間以上継続して摂取又は投与されることが好ましい。
本発明の組成物を摂取させる又は投与する対象（投与対象ということもできる）は、特に限定されない。好ましくはヒト又は非ヒト哺乳動物であり、より好ましくはヒトである。
一態様において、投与対象として、筋量増加、筋力増加、筋量減少抑制又は筋力低下抑制を必要とする又は希望する対象等が挙げられる。このような対象として、例えば、中高年者、フレイル、ロコモティブシンドローム又はサルコペニアの予防又は改善を必要とする又は希望する対象、アスリート等が挙げられる。中高年者は、例えば、４０歳以上のヒトであってよい。一態様において中高年者の中でも、対象として高齢者が好ましい。高齢者は、例えば、６０歳以上又は６５歳以上のヒトであってよい。本発明の組成物は、例えば、筋量増加、筋力増加、筋量減少抑制又は筋力低下抑制により予防又は改善が期待できる症状又は疾患の予防等を目的として、健常者に対して使用することもできる。
本発明の組成物には、包装、容器又は説明書等に用途、有効成分の種類、上述した効果、使用方法（例えば、摂取方法、投与方法）等の１又は２以上を表示してもよい。本発明の組成物には、筋量増加、筋力増加、筋量減少抑制又は筋力低下抑制により発揮される機能の表示が付されていてもよい。一態様において、本発明の組成物には、このような表示として、例えば、「筋肉減少抑制」、「筋肉維持」、「筋肉増加」、「筋肉改善」、「筋力低下抑制」、「筋力維持」、「筋力増加」、「筋力改善」、「筋肉をつくる力をサポート」、「歩行機能の改善」、「歩行機能の維持」、「運動機能改善」、「運動機能維持」、「加齢によって衰える筋肉の維持」及び「加齢によって衰える筋力の維持」からなる群より選択される１又は２以上の機能の表示が付されていてもよい。
本発明は、以下の方法も包含する。
月見草種子エキスを投与する、筋量増加、筋力増加、筋量減少抑制又は筋力低下抑制方法。
本発明は、以下の使用も包含する。
筋量増加、筋力増加、筋量減少抑制又は筋力低下抑制のための、月見草種子エキスの使用。
上記方法及び使用は、治療的な方法又は使用であってもよく、非治療的な方法又は使用であってもよい。
月見草種子エキスを投与することにより、筋量増加、筋力増加、筋量減少抑制又は筋力低下抑制が可能となる。これにより、例えば、サルコペニア、プレフレイル、フレイルなどの予防又は改善が可能となる。
上記の方法及び使用において、月見草種子エキス及びその好ましい態様は、上述した本発明の組成物と同じである。上記方法及び使用においては、１日に１回以上、例えば、１日１回～数回（例えば２～３回）、月見草種子エキスを対象に投与する（摂取させる）ことが好ましい。上記方法及び使用においては、月見草種子エキスを、経口投与（摂取）することが好ましい。上記の使用は、好ましくはヒト又は非ヒト哺乳動物、より好ましくはヒトにおける使用である。
上記方法及び使用においては、所望の作用が得られる量（有効量ということもできる）の月見草種子エキスを使用すればよい。月見草種子エキスの好ましい投与量や投与対象等は上述した本発明の組成物と同じである。月見草種子エキスは、そのまま投与してもよく、これを含む組成物として投与してもよい。例えば、上述した本発明の組成物を使用してもよい。
本発明は、本発明の組成物を製造するための、月見草種子エキスの使用も包含する。
以下、本発明を実施例に基づいてより具体的に説明する。なお、本発明はこれらの実施例に限定されるものではない。
＜実施例１＞
（細胞増殖）
購入した正常成人由来のヒト骨格筋筋芽細胞（ロンザ（株）製、ＣＣ－２５８０）をコラーゲンコートされた７５ｃｍ２の培養フラスコ（富士フイルム和光純薬（株）製）に５０×１０４ｃｅｌｌｓ／ｍｌで播種し７日間培養した。培養培地組成は次の通りであった。
［培養培地組成］
ＳｋＧＭ（登録商標）－２　ＢｕｌｌｅｔＫｉｔ（登録商標）＿１Ｋｉｔ（ロンザ（株）製、ＣＣ－３２４５）
（分化誘導、試薬添加）
増殖させたヒト骨格筋筋芽細胞をトリプシン（ナカライテスク（株）製）で剥離し、１０×１０４ｃｅｌｌｓ／ｍｌで４日間増殖後、分化培地を使用して５日間の分化誘導を行った。分化誘導後３日目にポジティブコントロールであるクレンブテロール（東京化成工業（株）製）または月見草種子エキス（月見草エキス－Ｐ（オリザ油化（株）製））を分化培地に添加した。クレンブテロールはＤＭＳＯ（ナカライテスク（株）製、最終濃度０．１％）により最終濃度が１０μＭになるように溶解させた。同様に、月見草種子エキス（粉末）はＤＭＳＯ（ナカライテスク（株）製、最終濃度０．１％）により最終濃度が１００、５００、１０００ｎｇ／ｍｌになるように溶解させた。添加から４８時間後にミオシンヘビーチェイン筋管細胞（ＭｙＨＣ）の免疫染色を行った後、蛍光顕微鏡で撮像を行い、ＩｍａｇｅＪを用いて筋短径の測定を行った。分化培地組成は次の通りであった。
［分化培地組成］
Ｄ－ＭＥＭ／Ｈａｍ’ｓ　Ｆ－１２（富士フイルム和光純薬（株）製）
２％　Ｈｏｒｓｅ　Ｓｅｒｕｍ（Ｓｉｇｍａ－Ａｌｄｒｉｃｈ社製）
１％　Ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃ－Ａｎｔｉｍｙｃｏｔｉｃ　Ｍｉｘｅｄ　Ｓｔｏｃｋ　Ｓｏｌｕｔｉｏｎ（１００ｘ）（ナカライテスク（株）製）
（免疫染色）
培養した細胞を４％　固定液（パラホルムアルデヒド（ＰＦＡ）、富士フイルム和光純薬（株）製）で固定した後、リン酸緩衝食塩水（ＰＢＳ）（ナカライテスク（株）製）で洗浄した。その後、Ｔｒｉｔｏｎ　Ｘ－１００（ナカライテスク（株）製）をＰＢＳで調整した０．２５％Ｔｒｉｔｏｎ　Ｘ－１００／ＰＢＳで膜透過処理を行った。再度ＰＢＳで洗浄した後、Ｂｏｖｉｎｅ　Ｓｅｒｕｍ　Ａｌｂｕｍｉｎ（Ｓｉｇｍａ－Ａｌｄｒｉｃｈ社製）をＰＢＳおよびＴｒｉｔｏｎ　Ｘ－１００で調整した０．１％　ＴｒｉｔｏｎＸ－１００／１％ＢＳＡ／ＰＢＳでブロッキング処理を行い、ＭＦ２０－ｓ（ＤＳＨＢ社製）で一次抗体反応を行った。次に、ＰＢＳで洗浄後、Ａｌｅｘａ　Ｆｌｕｏｒ　４８８　Ｇｏａｔ　Ａｎｔｉ－Ｍｏｕｓｅ　ＩｇＧ　（Ｈ＋Ｌ）　（Ｔｈｅｒｍｏ　Ｆｉｓｈｅｒ　Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ社製）を用いて二次抗体反応を行った。
筋短径の測定結果に関して、筋短径の長さ（μｍ）（Ｎ＝６の平均±標準誤差（ＳＥＭ））を図１に示す。Ｄｕｎｎｅｔｔ’ｓ　ｔｅｓｔ検定を用いて検定し、５％以下を有意とした（＊：ｐ＜０．０５、ｖｓ　コントロール（Ｃｏｎｔ．））。月見草種子エキスは５００及び１０００ｎｇ／ｍｌで筋短径の有意な肥大が確認された。
＜実施例２＞
細胞増殖、分化誘導及び試薬添加は実施例１と同じ方法で試験を行った。添加から２４時間後に１８ｓ　ｒＲＮＡ（１８ｓ）、インスリン様成長因子１（ｉｇｆ１）およびＰＰＡＲγコアクチベーター１α（ｐｐａｒｇｃ１ａ）の遺伝子発現量を測定した。遺伝子発現量の測定は、ＲＮｅａｚｙ　Ｍｉｃｒｏ　Ｋｉｔ（ＱＩＡＧＥＮ社製）を用いて細胞からＲＮＡを単離し、以下の方法で行った。
（遺伝子発現量の測定）
単離したＲＮＡから、Ｈｉｇｈ－Ｃａｐａｃｉｔｙ　ｃＤＮＡ　Ｒｅｖｅｒｓｅ　Ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎａｌ　Ｋｉｔｓ（Ｔｈｅｒｍｏ　Ｆｉｓｈｅｒ　Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ社製）を用いてｃＤＮＡ合成を行った。Ｓｔｅｐ　Ｏｎｅ　Ｐｌｕｓ（登録商標、Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ社製）にて、ＴａｑＭａｎ　ＦａｓｔＵｎｉｖｅｒｓａｌ　ＰＣＲ　Ｍａｓｔｅｒｍｉｘ（（ＴａｑＭａｎは登録商標）Ｔｈｅｒｍｏ　Ｆｉｓｈｅｒ　Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ社製）を使用して定量的ＰＣＲを行い、ハウスキーピング遺伝子である１８ｓ（Ｈｓ９９９９９９０１＿ｓ１、Ｔｈｅｒｍｏ　Ｆｉｓｈｅｒ　Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ社製）、筋合成や筋持久力に寄与する遺伝子であるｉｇｆ１（Ｈｓ０１５４７６５６＿ｍ１、Ｔｈｅｒｍｏ　Ｆｉｓｈｅｒ　Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ社製）およびｐｐａｒｇｃ１ａ（Ｈｓ００１７３３０４＿ｍ１、Ｔｈｅｒｍｏ　Ｆｉｓｈｅｒ　Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ社製）の遺伝子発現量を測定した。
１８ｓの発現量で補正したコントロールの発現量を１とし、被験試料を添加した場合のｉｇｆ１の相対発現量（Ｎ＝４の平均±標準誤差（ＳＥＭ））を図２に、ｐｐａｒｇｃ１ａの相対発現量（Ｎ＝４の平均±標準誤差（ＳＥＭ））を図３に示す。有意差検定は実施例１と同じ方法で行い、５％以下を有意とした（＊：ｐ＜０．０５、ｖｓ　コントロール（Ｃｏｎｔ．））。月見草種子エキスは５００及び１０００ｎｇ／ｍｌでｉｇｆ１及びｐｐａｒｇｃ１ａ発現量の有意な増加が確認された。
以上の実施例１及び実施例２から、月見草種子エキスは、筋短径長さを有意に増加させ、また、ｉｇｆ１及びｐｐａｒｇｃ１ａ発現量を有意に増加させる効果を有することから、筋量増加、筋力増加、筋量減少抑制又は筋力低下抑制効果を有することを確認した。また、月見草種子エキスは、筋肥大促進作用を有することを確認した。

 

Claims (7)

  1. 月見草種子エキスを有効成分として含有する、筋量増加、筋力増加、筋量減少抑制又は筋力低下抑制用組成物。
  2. 筋肥大を促進する請求項１に記載の組成物。
  3. インスリン様成長因子１（ｉｇｆ１）遺伝子及び／又はＰＰＡＲγコアクチベーター１α（ｐｐａｒｇｃ１ａ）遺伝子の発現を促進して筋肥大を促進する請求項１又は２に記載の組成物。
  4. 飲食品、化粧料、医薬品、医薬部外品又は飼料である請求項１～３のいずれか一項に記載の組成物。
  5. 「筋肉減少抑制」、「筋肉維持」、「筋肉増加」、「筋肉改善」、「筋力低下抑制」、「筋力維持」、「筋力増加」、「筋力改善」、「筋肉をつくる力をサポート」、「歩行機能の改善」、「歩行機能の維持」、「運動機能改善」、「運動機能維持」、「加齢によって衰える筋肉の維持」及び「加齢によって衰える筋力の維持」の１又は２以上の表示を付した、請求項１～４のいずれか一項に記載の組成物。
  6. 筋量増加、筋力増加、筋量減少抑制又は筋力低下抑制用組成物の製造のための、月見草種子エキスの使用。
  7. 筋量増加、筋力増加、筋量減少抑制又は筋力低下抑制のための、月見草種子エキスの使用。

     
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