TW202216206A - 細胞結合分子與喜樹鹼類似物的偶聯物 - Google Patents

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Abstract

本發明涉及一種喜樹鹼類似物與式（I）細胞結合分子的偶聯物，其中R 1, R 2, R 3, R 4, R 5, X, L, n, m, T 和 -----如定義中所述。本發明還涉及含有喜樹鹼類似物與細胞結合分子偶聯物的組合物在治療癌症、自免疫系統疾病和感染性疾病上的應用方法。

Description

細胞結合分子與喜樹鹼類似物的偶聯物
本發明涉及用於靶向治療的喜樹鹼類似物與細胞表面受體結合分子的偶聯物。本發明還涉及含有喜樹鹼類似物與細胞結合分子偶聯物的組合物在治療癌症、自免疫系統疾病和感染性疾病上的應用。
癌症靶向治療旨在藉由將藥物更好地靶向腫瘤，並避開健康組織而使副作用最小或克服副作用。其中一種策略是抗體-藥物偶聯物（ADC），它藉由有條件穩定的連接子將對腫瘤精確識別的抗體與高效細胞毒性藥物（有效載荷）結合，從而提高後者在腫瘤中的局部濃度（健康組織中的若干倍）。在過去的四十年中，製藥行業對ADC投入了巨額資金，開展深入研究。美國FDA批准了8個ADC藥物，分別命為Mylotarg （gemtuzumab ozogamicin）， Adcetris （brentuximab vedotin）， Kadcyla （ado-trastuzumab emtansine）， Besponsa （inotuzumab ozogamicin）， Polivy （polatuzumab vedotin-piiq）， Enhertu （fam-trastuzumab deruxtecan-nxki）， Padcev （enfortumab vedotin-ejfv）， Trodelvy （sacituzumab govitecan），100多種ADC新藥正處於臨床開發階段（Chau， C.H. 等， Lancet.2019， 394， 793-804）。
眾所周知， ADC複合物中的有效載荷-連接子組分對於ADC 的同質性、循環系統中的穩定性、藥代動力學特徵、耐受性和整體治療效果有很大影響（Zhao， R. Y. 等 （2011） J. Med. Chem. 54， 3606； Acchionea， M. 等 （2012） mAbs， 4， 362； Doronina， S. 等， （2006） Bioconjug Chem， 17， 114； Hamann， P. 等. （2005） Bioconjug Chem. 16， 346）。儘管人們進行了廣泛的研究來改善ADC的這些參數，但迄今為止，選擇的有效載荷仍然多來自美登素（maytansin）（DM1和DM4），澳瑞他汀（auruistatin）（MMAE和MMAF），加利車黴素（calicheamicin），吡咯并[2，1-c] [1 ，4]苯二氮呯（PBD）二聚體，喜樹鹼（camptothecin），海兔毒素（duocarmysin）和tubulysin（Leung， D.， 等，Antibodies （Basel）.2020， 9： E2. doi： 10.3390/antib9010002； Khongorzul， P.， 等， Mol Cancer Res.2020， 18： 3-19. doi： 10.1158/1541-7786.MCR-19-0582； Chau， C.H.， 等， Lancet. 2019， 394：793-804. doi： 10.1016/S0140-6736（19）31774-X）。
在這些有效載荷中，用喜樹鹼（CPT）構建的ADC已被證明具有更寬的治療指數（TI），許多臨床試驗已經證明，其中的兩個ADC化合物，Enhertu（fam-trastuzumab deruxtecan-nxki或DS-8201a）和 Sacituzumab govitecan（IMMU-132或hRS7-SN-38）在實體瘤治療時，具有顯著的臨床益處（PFS 和OS）（Pondé，N.，等，Curr Treat Options Oncol.2019 Apr 1；20（5）：37. doi： 10.1007/s11864-019-0633-6； Kaplon， H.， 等， MAbs.2020， 12（1）： 1703531， 10.1080/19420862.2019.1703531）。喜樹鹼（CPT）是一種有效的抗腫瘤劑，1958年從中國本土喜樹（Camptotheca acuminata）的提取物中被成功分離，已在傳統中藥中被廣泛使用了數百年。喜樹鹼可藉由與DNA酶拓撲異構酶I交互作用，形成可逆的酶-喜樹鹼-DNA三元複合物，引起細胞死亡（Wu Du，Tetrahedron 59（2003）8649-8687）。在過去的五十年中有許多喜樹鹼類似物結構被公開，如下所示：
Figure 02_image008
喜樹鹼、
Figure 02_image010
20-去氧喜樹鹼、
Figure 02_image012
10-甲氧基喜樹鹼、
Figure 02_image014
9-甲氧基喜樹鹼、
Figure 02_image016
10-羥基喜樹鹼、
Figure 02_image018
19-脫氫喜樹鹼、
Figure 02_image020
拓撲替康、
Figure 02_image022
伊立替康（camtosar）、
Figure 02_image024
Simmitecan、
Figure 02_image026
SN-38、
Figure 02_image028
Silatecan、
Figure 02_image030
可司替康（Karenitecin）、
Figure 02_image032
伊喜替康、
Figure 02_image034
Lurtotecan、
Figure 02_image036
GI-149893、
Figure 02_image038
9-甘氨酸醯胺喜樹鹼鹽酸鹽（MLS000756803）、
Figure 02_image040
10，11-亞甲二氧基喜樹鹼（Mdo-CPT）、
Figure 02_image042
吉馬替康、
Figure 02_image044
倍羅替康（Belotecan）、
Figure 02_image046
魯比替康（Rubitecan）或IDEC-132類似物、
Figure 02_image048
依洛替康（Elomotecan）（BN-80927）、
Figure 02_image050
9-胺基喜樹鹼（9-AC）、
Figure 02_image052
10-胺基喜樹鹼（10-AC）、
Figure 02_image054
11-氰基喜樹鹼 （NSC609951）、
Figure 02_image056
7-乙醯基-喜樹鹼（SCHEMBL6851483）、
Figure 02_image058
7-羥甲基喜樹鹼、
Figure 02_image060
10-胺基-11-羥基喜樹鹼 （BDBM50285230）、
Figure 02_image062
二氟替康（Diflomotecan）、
Figure 02_image064
喜樹鹼20-O-丙酸酯（CZ-48）、
Figure 02_image066
喜樹鹼氯乙酸酯（DL5FFZ93W4）、
Figure 02_image068
喜樹鹼賴氨酸酯（NSC610457）、
Figure 02_image070
Sacituzumab govitecan（Immu-132）（mAb是靶向Trop2單克隆抗體）、
Figure 02_image072
Trastuzumab deruxtecan（DS-8201a）（mAb是靶向Her2單克隆抗體，曲妥珠單抗）、
Figure 02_image074
（Jeffrey S.等 US2019/0343828）、
Figure 02_image076
（Li W.等， ACS Med Chem Lett. 2019， 10（10）： 1386–1392）。
因為喜樹鹼（CPT）及其大多數衍生物都極難溶於生理緩衝液，在1970年代以來開展的初步臨床試驗中，藥物不良反應率很高。喜樹鹼類ADC的偶聯物聚集可高達80％（Burke， P.等 Bioconjugate Chem.2009， 20， 6， 1242-1250），因此限制了其大規模生產，由於聚集體產生的系統性副作用，也限制了臨床試驗的開展。到目前為止，美國FDA僅批准了三種水溶性CPT衍生物，用於癌症化療，包括拓撲替康，伊立替康和倍羅替康（Palakurthi， S.， Expert Opin Drug Deliv. 2015；12（12）：1911-21； Shang， X. F. 等， Med Res Rev. 2018， 38（3）：775-828）以及一種水溶性CPT衍生物偶聯的ADC，Enhertu（fam-trastuzumab deruxtecan-nxki或DS-8201a），用於Her2實體瘤的靶向免疫治療（Modi S 等， N Engl J Med.2020， 382（7）： 610-621. doi： 10.1056/NEJMoa1914510； Keam， S. J.， Drugs. 2020 Apr；80（5）：501-508. doi： 10.1007/s40265-020-01281-4）。吾人已經在水溶性CPT衍生物ADC方面進行了一段時間的研究，應用親水性支鏈連接子與CPT類似物偶聯（請參考PCT/CN2019/092614），以擴大產生的ADC的治療視窗。本發明公開了一種水溶性CPT衍生物的ADC，其中，CPT 類似物的 C-10 位置與 O 或 NH 相連，這對水溶性的提高至關重要，而 C-11 位置與吸電子基團或較大的基團相連，可以保持與天然 CPT 相當的高細胞毒性。
本發明包括了喜樹鹼類似物與細胞結合分子的偶聯物、喜樹鹼類似物-連接子和喜樹鹼類似物，它們的製備和使用方法，以及用於製備的中間物。本發明的喜樹鹼類似物是水溶性的並且在血液迴圈中穩定，一旦偶聯物上的喜樹鹼類似物或喜樹鹼類似物-連接子的代謝物從無序生長的細胞內或者在細胞附近被釋放出來，能夠引起細胞死亡。
在一個實施例中，喜樹鹼類似物的偶聯物具有如式（I）的結構 ：
Figure 02_image078
（I） 或其藥學上可接受的鹽，水合物或水合鹽； 或這些化合物的多晶型晶體結構； 或其同位素，旋光異構體，外消旋體，非鏡像異構物或鏡像異構物； 其中 T是靶向或結合配位體； L是可釋放連接子；
Figure 02_image080
是獨立地連接L到括弧內的R 1， R 2， R 3或R 5的原子的連接鍵；n為1-30，m為1-10 ； 括號內是一種具有活性的喜樹鹼類似物，其中： R 1和R 2獨立地是 H；直鏈或支鏈C 1-C 6烷基、烷基醇、烷基胺（包括第一、第二、第三胺或季銨），胺基烷基、氧基烷基、胺基烷基胺基、氧基烷基胺基、胺基烷氧基、氧基烷氧基、烷基羧酸；C 2-C 6雜烷基， 烷基環烷基、雜環烷基、雜環、胺基環烷基、雜烷基環烷基、烷基羰基、烷基醚、烷基酯、烷基醯胺、氧基烷基醯胺、胺基烷基醯胺、肟；NH 2或OH； R 3獨立地是H、 C（O）NH、 C（O）O、SO 2R 6、 SO 3R 6、 PR 6R 6’、 POR 6R 6’、 CH 2OP（O）（OR 6） 2、 C（O）OP（O）（OR 6） 2、 PO（OR 6）（OR 6’）、 P（O）（OR 6）OP（O）（OR 6’） 2、 C（O）R 6、 C（O）NHR 6；C 1-C 6直鏈或支鏈烷基、烷基醇、烷基胺（包括第一、第二、第三胺或季銨）或烷基羧酸；C 2-C 6雜烷基、烷基環烷基、雜環烷基、雜環、環烷基、雜烷基環烷基、烷基羰基、烷基醚、烷基酯、烷基醯胺、肟； C 5~C 12糖苷、NH 2或OH； R 4是鹵素（F、 Cl、 Br、 或I）、 CN、 NO 2、 SO 3H、 OR 6、 SR 6、 S（O 2）R 6、 NHR 6、 N（R 6）（R 6’）、 C（O）XR 6、 N +（R 6）（R 6’）（R 6’’）； X 是 NH 或O； R 5是 H、 C（O）O、 C（O）NH、 R 6C（O）、直鏈或支鏈C 1-C 6烷基、烷基醇、烷基胺（包括第一、第二、第三胺或季銨）、烷基羧酸；C 2-C 6碳酸酯、脲、雜烷基、烷基環烷基、雜環烷基、雜環、環烷基、 雜烷基環烷基、烷基羰基、烷基醚、烷基酯、烷基醯胺或胺基酸； R 6、 R 6’、 和 R 6’’獨立地是 C 1-C 6烷基、烷基醇、烷基胺（包括第一、第二、第三胺或季銨）或烷基羧酸； C 2-C 6雜烷基、烷基環烷基、雜環烷基、雜環、環烷基、雜烷基環烷基、烷基羰基、烷基醚、烷基酯、烷基醯胺或胺基酸；或醫藥上可接受之鹽； 此外， R 1、 R 2、 R 3和 R 6獨立地可缺省， 和 R 2、 R 3、 X、 C-10 和 C-9 可以共同形成 5-、 6- 或 7-元雜環。
在另一個實施例中，喜樹鹼類似物物與結合分子的連接子L具有下式結構：--Ww-（Aa）r-Vv--；其中：--W--是延展體單元； w是0或1； 每個-Aa-獨立地是一個胺基酸單元； r獨立地是0至12的整數； --V--是一個間隔體單元；v為0、1或2。延展體W獨立地包含自毀滅間隔體，肽單元，腙鍵，二硫鍵或硫醚鍵。
在另一個實施例中，細胞表面結合分子T可以是任何種類，目前已知或即將被知的細胞結合配位體，例如肽和非肽。通常，結合分子T是抗體；單鏈抗體；與靶細胞結合的抗體片段；單克隆抗體；單鏈單克隆抗體；結合靶細胞的單克隆抗體片段；嵌合抗體；結合靶細胞的嵌合抗體片段；結構域抗體；結合靶細胞的結構域抗體片段；adnectin類抗體；DARPins；淋巴因數；激素； 維生素；生長因數；集落刺激因數；營養轉運分子（轉鐵蛋白）以及結合在白蛋白、聚合物、樹狀大分子、脂質體、納米顆粒、囊泡或（病毒）衣殼上的肽、蛋白質、抗體或小分子。 較佳結合分子T是單克隆抗體。
在另一態樣，式（I）中的化合物或其藥學上可接受的鹽或溶劑化物可被用於治療人或動物的癌症、自身免疫性疾病或傳染病。
定義
“烷基”是指在烷烴上除去一個或兩個氫原子而產生的脂肪烴基團或單價基團。它可以是直鏈或是支鏈的，在鏈中具有 C 1-C 8（1-8個碳原子）。“支鏈”是指直鏈烷基上連接有一個或多個低碳數的烷基，如甲基、乙基或丙基。示例性的烷基包括甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、第三丁基、正戊基、3-戊基、辛基、壬基、癸基、環戊基、環己基、2，2-二甲基丁基、2，3-二甲基丁基、2，2-二甲基戊基、2，3-二甲基戊基、3，3-二甲基戊基、2，3，4-三甲基戊基、3-甲基-己基、2，2-二甲基己基、2，4-二甲基己基、2，5-二甲基己基、3，5-二甲基己基、2，4-二甲基戊基、2-甲基庚基、3-甲基庚基、正庚基、異庚基、正辛基和異辛基。 C 1-C 8烷基可以是未被取代的或被一個或多個基團取代，包括但不限於 C 1-C 8烷基、-O-（C 1-C 8烷基）、-芳基、-C（O）R'、-OC（O）R'、-C（O）OR'、-C（O）NH 2， -C（O）NHR'、-C（O）N（R'） 2、-NHC（O）R'、-SR'、-S（O） 2R'、-S（O）R'、-OH、-鹵素、-N 3、-NH 2、-NH（R'）、-N（R'） 2和-CN；其中每個R'獨立地選自由下列組成之群組於C 1-C 8烷基和芳基。
“鹵素”指氟、氯、溴或碘原子；較佳氟和氯原子。
“雜烷基”指其中1至4個碳原子獨立地被選自由下列組成之群組O、S和N的雜原子所取代的C 2-C 8烷基。
“碳環”指含有3到8個碳原子的飽和或不飽和單環，或含有7到13個碳原子的飽和或不飽和雙環。單環碳環有3到6個環原子，典型的有5或6個環原子。雙環碳環有7到12個環原子，構成 [4，5]、[5，5]、[5，6]或[6，6]的雙環系統，或有9個或10個環原子，構成 [5、6]或[6，6]的雙環系統。具有代表性的C 3-C 8的碳環包括但不限於：-環丙基、-環丁基、-環戊基、-環戊二烯基、-環己基、-環己烯基、-1， 3-環己二烯基、-1，4-環己二烯基、-環庚基、-1，3-環庚二烯基、-1，3，5-環庚三烯基、-環辛基和-環辛二烯基。
“C 3-C 8碳環”是指3、4、5、6、7或8元飽和或不飽和非芳族碳環。C 3-C 8碳環可以是未被取代的或被一個或多個基團取代，包括但不限於C 1-C 8烷基、-O-（C 1-C 8烷基）、-芳基、-C（O）R'、 -OC（O）R'、 -C（O）OR'、-C（O）NH 2、-C（O）NHR'、-C（O）N（R'） 2、-NHC（O）R'、-SR'、-S（O）R'、-S（O） 2R'、 -OH、 -鹵素、-N 3、-NH 2、-NH（R'）、-N（R'） 2及-CN；其中每個R'獨立地選自由下列組成之群組C 1-C 8烷基和芳基。
“烯基”指含有碳-碳雙鍵的直鏈或支鏈脂肪烴基團，鏈內含有2-8個碳原子。示例性的烯基包括乙烯基、丙烯基、正丁烯基、異丁烯基、3-甲基丁-2-烯基、正戊烯基、己烯基、庚烯基、辛烯基。
“炔基”是指含有碳-碳三鍵的脂族烴基，該碳-碳三鍵可以是在鏈中具有2至8個碳原子的直鏈或支鏈。示例性的炔基包括乙炔基，丙炔基，正丁炔基，2-丁炔基，3-甲基丁炔基，5-戊炔基，正戊炔基，己炔基，庚烯基和辛炔基。
“伸烷基”是指含1-18個碳原子的飽和的支鏈或直鏈或環狀烴基，並帶有兩個藉由從母體烷烴的相同或兩個不同碳原子上除去兩個氫原子而產生的一價自由基。典型的伸烷基包括但不限於：亞甲基（-CH 2-）、1，2-乙基（-CH 2CH 2-）、1，3-丙基（-CH 2CH 2CH 2-）、1，4-丁基（-CH 2CH 2CH 2CH 2-）等。
“亞烯基”指含2-18個碳原子的不飽和的支鏈或直鏈或環狀烴基，並帶有兩個藉由從母體烯烴的相同或兩個不同碳原子上除去兩個氫原子而產生的一價自由基。典型的亞烯基包括但不限於：1，2-亞乙基（-CH = CH-）。
“亞炔基”指含2-18個碳原子的不飽和的支鏈或直鏈或環狀烴基，並帶有兩個藉由從母體炔的相同或兩個不同碳原子上除去兩個氫原子而產生的一價自由基。典型的亞炔基包括但不限於：乙炔、炔丙基和4-戊炔基。
“芳基”或“芳香基”指由一個或多個環組成的芳香或雜芳香基團，包含三至十四個碳原子，較佳六至十個碳原子。術語“雜芳香基團”是指芳香基團上的一個或幾個碳，最優是一個、兩個、三個或四個碳原子，被氧（O）、氮（N）、矽（Si）、硒（Se）、磷（P）或（S）所取代，較佳被氧、硫和氮所取代而產生的基團。術語“芳基”或“芳香基”也指其中一個或幾個氫原子獨立地被-R’、鹵素、-OR’， -SR’、-NR’R’’、-N=NR’、-N=R’、-NR’R’’、-NO 2、-S（O）R’、-S（O） 2R’、-S（O） 2OR’、-OS（O） 2OR’、-PR’R’’、-P（O）R’R’’、 -P（OR’）（OR’’）、-P（O）（OR’）（OR’’） 或-OP（O）（OR’）（OR’’）所取代而產生的芳香基團。其中R’和R’’獨立地為氫、烷基、烯基、炔基、雜烷基、芳基、芳烷基、羰基或其醫藥上可接受之鹽。
“雜環”指其中一到四個環碳原子獨立地被O、N、S、Se、B、Si或P等雜原子所取代而產生的的環結構。較佳的雜原子是O、N和S。在《化學與物理手冊》第78版的225-226頁（The Handbook of Chemistry and Physics， 78th Edition， CRC Press， Inc.， 1997 -1998， 第225至226頁）上也有雜環化合物的相關描述，在此引作參考。較佳的非芳基雜環包括環氧基、氮丙啶基、硫雜丙基、吡咯啶基、吡唑啶基、咪唑啶基、環氧乙烷基、四氫呋喃基、二氧戊環基、四氫吡喃基、二噁烷基、二氧戊環基、呱啶基、呱嗪基、嗎啉基、呱喃基、咪唑啉基、吡咯啉基、吡唑啉基、噻唑烷基、四氫噻喃基、二噻烷基、硫代嗎啉基、 二氫呱喃基、四氫呱喃基、二氫呱喃基、四氫吡啶基、二氫吡啶基、四氫嘧啶基、二氫噻喃基、氮雜環庚烷基，以及上述基團與苯基縮合得到的稠環體系。
術語“雜芳基”或“芳基雜環”是指含3到14，較佳5至10個原子的芳香性雜環、包含單環、雙環或多環。示例包括吡咯基、吡啶基、吡唑基、噻吩基、嘧啶基、吡嗪基、四唑基、吲哚基、喹啉基、嘌呤基、咪唑基、噻吩基、噻唑基、苯并噻唑基、呋喃基、苯并呋喃基、1，2，4-噻二唑基、異噻唑基、三唑基、四唑基、異喹啉基、苯并噻吩基、異苯并呋喃基、吡唑基、哢唑基、苯并咪唑基、異噁唑基、吡啶基-N-氧化物，以及上述基團與苯基縮合得到的稠環體系。
“烷基”、“環烷基”、“烯基”、“炔基”、“芳基”、“雜芳基”、“雜環”等，也包含各自對應的“伸烷基”、“亞環烷基”、“亞烯基”、“亞炔基”、“亞芳基”、“亞雜芳基”、“亞雜環”等，為論述方便，本專利申請對它們未做完全區分。
“芳烷基”指一類非環烷基，其中一個與碳原子（通常為末端或sp 3碳原子）鍵合的氫原子被芳基取代。典型的芳烷基包括苄基、2-苯基乙-1-基、2-苯基乙烯-1-基、萘基甲基、2-萘基乙-1-基、2-萘基乙- 1-基、萘并苄基、2-萘基苯基-1-基等。
“雜芳烷基”指一類非環烷基，其中一個與碳原子（通常為末端或sp3碳原子）鍵合的氫原子被雜芳基取代。雜芳烷基的實例有2-苯并咪唑基甲基、2-呋喃基乙基。
“羥基保護基”的實例包括甲氧基甲基醚、2-甲氧基乙氧基甲基醚、四氫呱喃基醚、苄基醚、對甲氧基苄基醚、三甲基甲矽醚、三乙基矽醚、三異丙基矽醚、第三丁基二甲基矽醚、三苯基甲基矽醚、乙酸酯、取代乙酸酯、特戊酸酯、苯甲酸酯、甲磺酸酯和對甲苯磺酸酯。
“離去基團”指可以被另一個官能團取代的官能團。這些離去基團是業內公知的、實例包括鹵化物（如氯化物、溴化物和碘化物）、甲磺醯基、對甲苯磺醯基和三氟甲磺醯基。較佳的離去基團選自由下列組成之群組硝基苯氧基；N-羥基琥珀醯亞胺基（NHS）；苯氧基；二硝基苯氧基；五氟苯氧基；四氟苯氧基；二氟苯氧基；一氟苯氧基；五氯苯氧基；三氟甲磺醯基；咪唑基；氯苯氧基；四氯苯氧基；1-羥基苯并三唑基；甲苯磺醯基；甲磺醯基；2-乙基-5-苯基異噁唑-3'-磺醯基，酸酐或與其它酸酐作用形成的酸酐，例如乙酸酐、甲酸酐；或與多肽縮合試劑、Mitsunobu反應試劑作用生成的中間物。
以下縮寫為本發明所採用，其定義為：Boc，第三丁氧基羰基；BroP，溴代十四烷基鏻六氟磷酸鹽；CDI，1，1'-羰基二咪唑；DCC，二環己基碳二亞胺；DCE，二氯乙烷；二氯甲烷，二氯甲烷；DEAD，偶氮二甲酸二乙酯；DIAD，偶氮二甲酸二異丙基酯； DIBAL-H，二異丁基氫化鋁；DIPEA或DEA，二異丙基乙胺；DEPC，二乙基氰基磷酸酯；DMA，N，N-二甲基乙醯胺；DMAP，4-（N，N-二甲基胺基）吡啶；DMF，N，N-二甲基甲醯胺；DMSO，二甲基亞碸；DTPA，二亞乙基三胺五乙酸；DTT，二硫蘇糖醇；EDC，1-（3-二甲基胺基丙基）-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽；ESI-MS，電噴霧質譜；乙酸乙酯，乙酸乙酯；Fmoc，N-（9-茀基甲氧基羰基）；HATU，O- （7-氮雜苯并三唑-1-基）-N，N，N'，N'-四甲基脲六氟磷酸鹽；HOBt，1-羥基苯并三唑；HPLC，高效液相色譜；NHS，N-羥基琥珀醯亞胺；MeCN，乙腈；甲醇，甲醇；MMP，4-甲基嗎啉；PAB，對胺基苯甲酸；PBS，磷酸鹽緩衝液（pH 7.0-7.5）；Ph，苯基；Phe，L-苯丙氨酸；PyBrop，溴-三-吡咯烷-鏻六氟磷酸鹽；PEG，聚乙二醇；SEC，尺寸排阻色譜；TCEP，三（2-羧乙基）膦； 三氟乙酸，三氟乙酸；THF，四氫呋喃；Val，纈氨酸；TLC，薄層色譜；UV是紫外線。
“胺基酸”可以是天然或非天然的，較佳α-胺基酸。天然胺基酸可以由遺傳密碼所編碼，它們是丙氨酸、精氨酸、天冬醯胺、天冬氨酸、半胱氨酸、麩胺酸、穀氨醯胺、甘氨酸、組氨酸、異亮氨酸、亮氨酸、賴氨酸、蛋氨酸、苯丙氨酸、脯氨酸、絲氨酸、蘇氨酸、酪氨酸、色氨酸和纈氨酸。非天然胺基酸是蛋白質胺基酸的衍生物，包括羥脯氨酸、羊毛硫氨酸、2-胺基異丁酸、脫氫丙氨酸、γ-胺基丁酸（神經遞質）、鳥氨酸、瓜氨酸、β-丙氨酸（3 -胺基丙酸）、γ-羧基麩胺酸、硒代半胱氨酸（存在於許多非真核以及大多數真核細胞中、但不是由DNA直接進行編碼）、吡咯賴氨酸（僅在一些古細菌和一種細菌中發現）、N-甲醯基甲硫氨酸（通常是細菌、線粒體和葉綠體中蛋白質中最初的胺基酸）、5-羥色氨酸、L-二羥基苯丙氨酸、三碘甲腺原氨酸、L-3，4-二羥基苯丙氨酸（DOPA）和O-磷酸絲氨酸。術語“胺基酸”還包括胺基酸類似物和模擬物。類似物是具有與天然胺基酸相同結構通式H 2N（R）CHCO 2H的化合物，其中R在天然胺基酸裡。類似物的實例包括高絲氨酸、正亮氨酸、3-胺基丙酸、4-胺基丁酸、5-胺基戊酸、6-胺基己酸、7-胺基庚酸、甲硫氨酸-亞碸和甲硫氨酸甲基鋶。更優的是胺基酸模擬物，它是具有與α-胺基酸的化學結構不同、但是作用方式類似的化合物。天然胺基酸多為“L” 立體化學構型，“非天然胺基酸”也用於代表“D”構型的胺基酸。在本專利申請中使用1至8個胺基酸時、其序列較佳為蛋白水解酶可識別的序列。許多水解酶識別序列是業內已知的，可以參見：Matayoshi 等. Science 247： 954 （1990）；Dunn 等. Meth. Enzymol. 241： 254 （1994）；Seidah 等. Meth. Enzymol. 244： 175 （1994）；Thornberry， Meth . Enzymol. 244： 615 （1994）；Weber 等. Meth. Enzymol. 244： 595 （1994）；Smith 等. Meth. Enzymol. 244： 412 （1994）；及Bouvier 等. Meth. Enzymol. 248 ： 614 （1995）；此處引作參考。特別是選自由下列組成之群組以下序列：Val-Cit、Ala-Val、Ala-Ala、Val-Val、Val-Ala-Val、Lys-Lys、Ala-Asn-Val、Val-Leu-Lys、Cit -Cit、Val-Lys、Ala-Ala-Asn、Asp-Lys、Asp-Glu、Glu-Lys、Lys、Cit、Ser及Glu。
“糖苷”是糖藉由糖苷鍵在其異頭碳上與另一基團鍵合得到的分子。糖苷可以藉由O-（產生O-糖苷）、N-（產生糖基胺）、S-（產生硫代糖苷）或C-（產生C-糖苷）糖苷鍵連接。其實驗式為C m（H 2O） n（其中m可以不同於n，m、n ＜36），本發明中的糖苷包括葡萄糖（右旋糖）、果糖（左旋糖）、阿洛糖、阿卓糖、甘露糖、古洛糖、艾杜糖、半乳糖、塔羅糖、半乳糖胺、胺基葡萄糖、唾液酸、N-乙醯胺基葡萄糖、磺基奎諾糖（6-去氧-6-磺基-D -呱喃葡萄糖）、核糖、阿拉第一糖、木糖、來蘇糖、山梨糖醇、甘露醇、蔗糖、乳糖、麥芽糖、海藻糖、麥芽糖糊精、棉子糖、葡萄糖醛酸（葡糖苷酸）和水蘇糖。它可以是D或L的構型、5原子環狀呋喃糖的形式、6原子環狀呱喃糖的形式，或是非環形式、α-異構體（異頭碳的-OH在Haworth投影碳原子平面之下）、或β-異構體（異頭碳的-OH在Haworth投影碳原子平面之上）。本發明中亦稱為單糖、二糖、多元醇或含3-6個糖單元的低聚糖。
本發明中的“抗體”指全長免疫球蛋白分子或全長免疫球蛋白分子的免疫活性部分，如含有抗原結合位點的分子，該結合位點免疫特異性地與標靶抗原或部分標靶抗原結合，標靶包括但不限於，癌細胞或產生與自身免疫疾病相關的自免疫抗體的細胞。本發明中的免疫球蛋白可以是免疫球蛋白的任何類型（例如IgG、IgE、IgM、IgD、IgA和IgY）、類別（例如IgG1、IgG2、IgG3、IgG4、IgA1和IgA2）或子類。免疫球蛋白可以來自任何物種，但較佳的免疫球蛋白來源於人、鼠或兔。本發明的抗體較佳是單克隆抗體，包括但不限於多克隆、單克隆、雙特異性、人、人源化或嵌合抗體，單鏈抗體，Fv、Fab片段、F（ab'）片段、F（ab'） 2片段、由Fab表達庫產生的片段，抗獨特型（抗Id）抗體，CDR和任何能免疫特異性地結合癌細胞抗原、病毒抗原或微生物抗原的上述結構的抗原決定基結合片段。
如本文所用，術語“單克隆抗體”是指從大體上均質的抗體群體中獲得的抗體，即，除了可能少量存在的可能的天然突變以外，構成該群體的各個抗體是相同的。單克隆抗體針對單個抗原位點具有高度特異性。修飾語“單克隆”表示從大體上同質的抗體群體獲得的抗體的特徵，而不應解釋為要求藉由任何特定方法生產抗體。
“完整抗體”是包含適於抗體類別的，抗原結合可變區以及輕鏈恒定域（C L）和重鏈恒定域C H1、C H2、C H3和C H4的抗體。恒定結構域可以是天然序列恒定結構域（例如，人天然序列恒定結構域）或其胺基酸序列變異體。
“抗體片段”為完整抗體的一部分，包含其抗原結合區或可變區。抗體片段的實例包括Fab，Fab'，F（ab'）sub2和Fv片段，雙抗體，三抗體，四抗體，線性抗體，單鏈抗體分子，scFv，scFv-Fc，由抗體片段形成的多特異性抗體片斷，由Fab表達文庫產生的片段，或上述任一項的抗原決定基結合片段，它們免疫特異性結合靶抗原（例如癌細胞抗原，病毒抗原或微生物抗原）。
“抗原”是抗體特異性結合的實體。
術語“特異性的結合”和“特異性地結合”是指抗體或抗體衍生物將以高度選擇性的方式與其靶抗原的相應抗原決定基結合，而不與多種其他抗原結合。通常，抗體或抗體衍生物以至少約1×10 -7M，較佳10 -8M至10 -9M，10 -10M，10 -11M或10 -12M的親和力與特定抗原結合，結合的親和力比與特定抗原或緊密相關抗原以外的、非特異性抗原（例如，BSA，酪蛋白）結合的親和力至少大兩倍。
“鏡像異構物”，也稱為“光學異構體”，是兩個立體異構體中的一個，它們是彼此的鏡像，不可重迭（不等同），就像人的左右手，除非沿著某一平面被翻轉，它們是不可重迭的（僅藉由改變方向不能讓雙手重迭）。化合物中的單個手性原子或類似的結構特徵使得該化合物具有兩種可能的結構，它們不可重迭，是彼此的鏡像。在某一化合物中存在的多個手性特徵增加了可能存在的構型的數目，其中可能會有一些互為鏡像。對映體純的化合物是指在檢測方法的能力範疇內，僅具有同一種手性的樣品。在對稱的環境中，兩個對映體可以使平面偏振光（+/−） 在相反的方向上等量旋轉（偏振光可以被認為是不對稱的介體），除此之外，它們具有相同的化學性質和物理性質。由於這個原因，它們有時也被稱為光學異構體。光學活性異構體及其等量的對映體的混合物被稱為外消旋體，它對平面偏振光無淨旋轉，因為每個正旋轉（+）都被負旋轉（−）完全抵消。通常兩個鏡像異構物與其他的鏡像異構物物質發生不同的化學反應。由於許多生物分子是對映體，因此有時兩種對映體對生物有機體的影響存在顯著差異。例如，在藥物中，通常只有一種對映體可以發生想要的生理作用、而另一種對映體或是活性較低、或無活性，有時甚至產生不良反應。基於這樣的發現，可以開發僅由一種對映體（“對映體純”）組成的藥物以增強藥理學效力，有時還可以消除一些副作用。
同位素是特定化學元素的質子數相同，中子數不同的不同核素。同一元素的所有同位素具有相同數量的質子。一個原子序數指定一個特定的元素，但非同位素；特定元素原子可以有不同的中子數。核子（質子和中子）的數量是原子的質量數，特定元素的每個同位素具有不同的質量數。例如、碳-12、碳-13和碳-14是碳元素的三種同位素，質量數分別為12，13和14。碳的原子序數為6，意味著每個碳原子都有6個質子，因此這些同位素的中子數分別為6、7和8。氫原子有三種同位素：氕（ 1H）、氘（ 2H）和氚（ 3H），氘的品質是氕的兩倍，氚的品質是氕的三倍。藉由動力學同位素效應，同位素替代實驗可用於確定化學反應的機理。同位素替代實驗還可用於研究外源化合物藉由吸收和分佈機制進入體內後，身體如何對它產生作用，體內物質的代謝變化（例如藉由細胞色素P450或葡萄糖醛酸轉移酶等代謝酶的作用），以及藥物代謝產物的排泄路徑，是為藥代動力學（PK）研究。同位素替代實驗可用於研究藥物的生化和生理作用，包括在動物（包括人類）、微生物或生物組合（例如感染）上所顯現出來的作用，是為藥力學（PD）研究。兩種研究共同影響藥物的劑量，益處和不利影響。同位素可以包含穩定的（非放射性）或不穩定的元素。同位素取代的藥物可能具有與原始藥物不同的治療功效。藉由同位素標記本發明公開的化合物，可用於藥物和/或個體組織分佈測定。特別較佳氚（ 3H）和碳14（ 14C）標記的化合物，因為易於製備和容易被檢測。此外，用較重的同位素如氘（ 2H）替代可以提供某些治療優勢，這是由於代謝穩定性更高，例如體內半衰期延長或劑量要求降低，因此在某些情況下可能是較佳方案。本發明公開的同位素標記的化合物，包括其藥物鹽，酯和前藥，可以藉由業內已知的任何方法來製備。也可以用 12C代替天然 12C，可以獲得同樣的益處。
“藥學上”或“藥學上可接受的”是指當分子實體和組合物適當地施用於動物或人時，不會產生不利、過敏或其他不良反應。
“藥學上可接受的溶劑化物”或“溶劑化物”是指一種或多種溶劑分子與本發明公開的化合物的結合物。用於製備溶劑合物的溶劑的實例包括，但不限於水、異丙醇、乙醇、甲醇、DMSO、乙酸乙酯、乙酸和乙醇胺。
“藥學上可接受的輔料”包括任何載劑、稀釋劑、佐劑或其它，例如防腐劑或抗氧化劑、填充劑、崩解劑、潤濕劑、乳化劑、懸浮劑、溶劑、分散介體、包衣劑、抗細菌劑和抗真菌劑、等滲劑和吸收延遲劑等。這些介體和藥劑用於藥物活性物質在業內內是熟知的。任何傳統介體或藥劑，除非與活性成分不相容，也可以考慮將其用於治療組合物中。補充活性成分也可以加入組合物中，成為合適的治療組合。
如本文所用，“醫藥上可接受之鹽”是本發明公開化合物的衍生物，藉由製備母體化合物的酸鹽或鹼鹽來獲得。藥學上可接受的鹽包括由無毒無機酸或有機酸與母體化合物形成的習知無毒鹽或季銨鹽。例如，所述習知無毒鹽包括衍生自無機酸（例如鹽酸、氫溴酸鹽、硫酸、胺基磺酸、磷酸、硝酸等）的鹽；以及由有機酸（例如乙酸、丙酸、琥珀酸、酒石酸、檸檬酸、甲磺酸、苯磺酸、葡萄糖醛酸、麩胺酸、苯甲酸、水楊酸、甲苯磺酸、草酸、富馬酸、馬來酸及乳酸等製備的鹽。另外的加成鹽包括銨鹽，如三甲胺、葡甲胺、丙三醇等的鹽、金屬鹽、如鈉、鉀、鈣、鋅或鎂鹽。
本發明的醫藥上可接受之鹽可由含有鹼性或酸性部分的母體化合物，藉由習知化學方法合成。通常而言，這些鹽可以藉由在水或有機溶劑中或兩者的混合物中，向母體化合物裡，加入等當量的適當鹼或酸來製備。一般來說，乙醚、乙酸乙酯、乙醇、異丙醇或乙腈是非水介體的首選。適用鹽的列表見於1985年由麥克出版公司出版的《雷明頓藥物科學》（Remington's Pharmaceutical Sciences），其內容納入本發明作參考。
術語“治療有效量”是指有效治療哺乳動物疾病或病症的偶聯物的量。治療癌症時，治療有效量的偶聯物可減少癌細胞的數量；減小腫瘤的大小；抑制（即，在一定程度上減緩，最佳情況下，停止）癌細胞浸潤到外周器官；抑制（即，在一定程度上減緩，最佳情況下，停止）腫瘤轉移；在一定程度上抑制腫瘤生長；和/或在一定程度上緩解與癌症相關的一種或多種症狀的程度。就藥物可以抑制生長和/或殺死現有癌細胞的程度而言，它可能是細胞抑制性和/或細胞毒性的。對於癌症治療，療效可以，例如，藉由評估疾病進展時間（TTP）和/或確定反應率（RR）。
如本文所用，術語“藥學上可接受的形式”是指公開的化合物的形式，包括但不限於藥學上可接受的鹽、酯、水合物、溶劑化物、多晶型物、異構體、前藥和同位素標記的衍生物。 在一個實施例中，“藥學上可接受的形式”包括但不限於藥學上可接受的鹽、酯、前藥和同位素標記的衍生物。在一些實施方式中，“藥學上可接受的形式”包括但不限於藥學上可接受的異構體 及其立體異構體、前藥和同位素標記的衍生物。
術語“實質”或“實質上”是指混合物或樣品的多數，即＞50%，較佳超過50%、55%、60%、65%、70%、75%、80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98% 或 99%。
本發明所設想的取代基和變數的組合僅指那些可以形成穩定化合物的組合。 本文所用的術語“穩定”是指在製造時保持穩定，在用於本文詳述的目的（例如，對個體的治療性或預防性投予）的時間段內，保持化合物完整性。
本發明的化合物是，在製備之後，較佳地被分離和純化，獲得的含量等於或大於95%（“純的”）的組合物，然後如本文所述被使用或配製。 在某些實施例中，本發明的化合物純度超過99%。
術語“細胞毒活性”是指藥物或喜樹鹼偶聯物或喜樹鹼偶聯物的細胞內代謝物的細胞殺傷作用。細胞毒活性可用IC 50值表示，即使一半細胞存活的濃度（摩爾或品質/單位體積）。
術語“細胞抑制活性”是指藥物或喜樹鹼類似物偶聯物或喜樹鹼偶聯物的細胞內代謝物的抗增生作用。
如本文所用，術語“細胞毒性劑”是指具有細胞毒活性並導致細胞破壞的物質。該術語旨在包括化學治療劑和毒素，例如小分子毒素或源於細菌、真菌、植物或動物的酶活性毒素，包括它們的合成類似物和衍生物。
“施用”或“投予”是指以任何方式向個體轉移、遞送、引入或運輸藥物或其他藥劑。這些方式包括口服、局部接觸、靜脈內、腹膜內、肌肉內、病灶內、鼻內、皮下或鞘內投予。本發明還考慮使用裝置或器械來施用藥劑。這種裝置可以使用主動或被動型傳輸，而且可以是緩釋或快速釋放遞送裝置。
就癌症而言，術語“治療”包括以下任何一項或全部：阻止腫瘤細胞或癌細胞生長、複製，減輕整體腫瘤量，以及改善與該疾病相關的一個或多個症狀。
就自身免疫性疾病而言，術語“治療”包括以下任一項或全部：阻止與自身免疫性疾病相關的細胞的複製，包括但不限於能夠產生自身免疫性抗體的細胞，減輕自身免疫性抗體量和改善自身免疫性疾病的一個或多個症狀。
就傳染病而言、術語“治療”包括以下任何一項或全部：阻止引起傳染病的病原體的生長、增生或複製，以及改善傳染病的一個或多個症狀。
術語“癌”和“癌的”是指或描述哺乳動物的生理狀況或病症，其通常以不受調節的細胞生長為特徵。“腫瘤”包括一種或多種癌細胞。
如本文所用，“自身免疫疾病”是指由個體自身組織或蛋白質引起並針對個體自身組織或蛋白質的疾病或病症。
如本文所用，“患者”是指向其施用本發明的喜樹鹼偶聯物的個體。患者包括但不限於人、大鼠、小鼠、豚鼠、非人靈長類動物、豬、山羊、 牛、馬、狗、貓、鳥和家禽。通常，患者是大鼠、小鼠、狗、人類或非人類靈長類動物，尤其是人類。
“哺乳動物”或“動物”的實例包括但不限於人、鼠、家鼠、豚鼠、猴、豬、山羊、牛、馬、狗、貓、鳥和家禽。
除非上下文另有說明，否則術語“治療”或“治療”是指治療性和預防性治療，其目的是抑制或減緩（減輕）不希望的生理變化或障礙，例如癌症的發展或擴散。 出於本發明的目的，有益的或期望的臨床結果包括但不限於症狀的緩解、疾病程度的減輕、疾病的穩定（即不惡化）狀態、疾病進展的延遲或減緩、改善或緩和疾病狀態，以及緩解（無論是部分的還是全部的），無論是可檢測的還是不可檢測的。“治療”還可以指與未接受治療的預期生存期相比，延長生存期。需要治療的人包括那些已經患有該病症或障礙的人以及易於患有這種疾病或疾病的人。
藥物-連接子-結合配位體偶聯物
如上所述，本發明提供了如式(I)的細胞表面結合分子-喜樹鹼類似物的偶聯物：
Figure 02_image082
（I） 或其藥學上可接受的鹽，水合物或水合鹽； 或這些化合物的多晶結構； 或它們的異構體，旋光異構體，外消旋體，非鏡像異構物或鏡像異構物； 其中T是靶向或結合配位體；L是可釋放的連接子；
Figure 02_image080
是L獨立地連接到括弧內的R 1， R 2， R 3或R 5的原子的連接鍵；n為1-30，m為1-10 ； 括弧內是一種具有活性的喜樹鹼類似物，其中： R 1和R 2獨立地為H；直鏈或支鏈C 1-C 6烷基、烷基醇、烷基胺（包括第一、第二、第三胺或季銨）、胺基烷基、氧基烷基、胺基烷基胺基、氧基烷基胺基、胺基烷氧基、氧基烷氧基、烷基羧酸的，或羰基；C 2-C 6雜烷基、烷基環烷基、雜環烷基、雜環、胺基環烷基、雜烷基環烷基、烷基羰基、胺基烷基羰基、氧基烷基羰基、烷基醚、烷基酯、烷基醯胺、氧基烷基醯胺、胺基烷基醯胺、肟 ；NH 2或OH； R 3獨立地是 H、 C（O）NH、 C（O）O、 SO 2R 6、 SO 3R 6、 PR 6R 6’、 POR 6R 6’、 CH 2OP（O）（OR 6） 2、 C（O）OP（O）（OR 6） 2、 PO（OR 6）（OR 6’）、 P（O）（OR 6）OP（O）（OR 6’） 2、 C（O）R 6、 C（O）NHR 6；直鏈或支鏈C 1-C 6烷基、烷基醇、烷基胺（包括第一、第二、第三胺或季銨）、胺基烷基、氧基烷基、胺基烷基胺基、氧基烷基胺基、胺基烷氧基、氧基烷氧基、烷基羧酸的、或羰基；C 2-C 6雜烷基、烷基環烷基、雜環烷基、雜環、胺基環烷基、雜烷基環烷基、烷基羰基、胺基烷基羰基、氧基烷基羰基、烷基醚、烷基酯、烷基醯胺、氧基烷基醯胺、胺基烷基醯胺、肟 ；NH 2或OH； R 4鹵素 （F、 Cl、 Br、或I）、 CN、 NO 2、 SO 3H、 OR 6、 SR 6、 S（O 2）R 6、 NHR 6、 N（R 6）（R 6’）、 C（O）XR 6、 N +（R 6）（R 6’）（R 6’’）； X 是 NH 或 O； R 5是 H、 C（O）O、 C（O）NH、 R 6C（O）、 直鏈或支鏈C 1-C 6烷基、烷基醇、烷基胺（包括第一、第二、第三胺或季銨）、烷基羧酸；碳酸酯、脲、雜烷基、烷基環烷基、雜環烷基、雜環、環烷基、雜烷基環烷基、烷基羰基、烷基醚的C 2-C 6、烷基酯、烷基醯胺或胺基酸； R 6、 R 6’、和 R 6’’ 獨立地是 H、 C 1-C 6烷基、烷基醇、烷基胺（包括第一、第二、第三胺或季銨）或烷基羧酸；雜烷基、烷基環烷基、雜環烷基、雜環、環烷基、雜烷基環烷基、烷基羰基、烷基醚、烷基酯、烷基的C 2-C 6醯胺或胺基酸；或醫藥上可接受之鹽； 此外， R 1、 R 2、 R 3和 R 6獨立地可缺省， 和 R 2、 R 3、 X、 C-10 和 C-9 可以共同形成 5-、 6- 或 7-元雜環。
在另一個實施例中，喜樹鹼類似物的偶聯物具有式（II）結構：
Figure 02_image085
（II） 或其藥學上可接受的鹽，水合物或水合鹽； 或這些化合物的多晶結構； 或它們的異構體，旋光異構體，外消旋體，非鏡像異構物或鏡像異構物； 其中T是靶向或結合配位體；L是可釋放的連接子； n 是1-30 ， m 是1-10； 括弧內是一種有效喜樹鹼類似物，其中： R 1是直鏈或支鏈C 1-C 6烷基、烷氧基、烷基胺基（包括第一、第二、第三胺基或季銨）、氧基羰基、胺基羰基、胺基烷基、氧基烷基、胺基烷基胺基、氧基烷基胺基、胺基烷氧基、氧基烷氧基或烷基羧酸的；C 2-C 6雜烷基、烷基環烷基、雜環烷基、雜環、氧基環烷基、胺基環烷基、雜烷基環烷基、烷基羰基、胺基烷基羰基、氧基烷基羰基、烷基醚、烷基酯、烷基醯胺、氧基烷基醯胺、胺基烷基醯胺、肟的；NH，或O； R 2是 H， 直鏈或支鏈C 1-C 6烷基、烷基醇、烷基胺（包括第一、第二、第三胺或季銨）、胺基烷基醇、胺基烷基胺、氧基烷基醇、氧基烷基胺、胺基烷基、氧基烷基或烷基羧酸的；C 2-C 6雜烷基、烷基環烷基、雜環烷基、雜環、環烷基、雜烷基環烷基、烷基羰基、烷基醚、烷基酯、烷基醯胺、肟；NH 2或OH； R 3獨立地是H， R 6NHC（O）， R 6OC（O），SO 2R 6， SO 3R 6， PR 6R 6’， POR 6R 6’， CH 2OP（O）（OR 6） 2， C（O）OP（O）（OR 6） 2， PO（OR 6）（OR 6’）， P（O）（OR 6）OP（O）（OR 6’） 2， R 6C（O）， C（O）N R 6R 6’； 直鏈或支鏈C 1-C 6烷基、烷基醇、烷基胺（包括第一、第二、第三胺或季銨）或烷基羧酸的；C 2-C 6雜烷基、烷基環烷基、雜環烷基、雜環、環烷基、雜烷基環烷基、烷基羰基的，烷基醚，烷基酯，烷基醯胺，肟； C 5~C 12糖苷； R 4是鹵素 （F， Cl， Br，或I）， CN， NO 2， SO 3H， OR 6， SR 6， S（O 2）R 6， NHR 6， N（R 6）（R 6’）， C（O）XR 6， N +（R 6）（R 6’）（R 6’’）； X 是 NH 或 O； R 5是H， C（O）OR 6， C（O）NHR 6， R 6C（O），直鏈或支鏈C 1-C 6烷基，烷基醇，烷基胺（包括第一、第二、第三胺或季銨），烷基羧酸； C 2-C 6碳酸酯、脲、雜烷基、烷基環烷基、雜環烷基、雜環、環烷基、雜烷基環烷基、烷基羰基、烷基醚、烷基酯、烷基醯胺或胺基酸； R 6， R 6’， 和 R 6’’ 獨立地是 H， C 1-C 6烷基，烷基醇，烷基胺（包括第一、第二、第三胺或季銨）或烷基羧酸； C 2-C 6雜烷基、烷基環烷基、雜環烷基、雜環、環烷基、雜烷基環烷基、烷基羰基、烷基醚、烷基酯、烷基醯胺或胺基酸；或醫藥上可接受之鹽； 此外， R 1可以缺省且 C-7 直接與 L連接， 且R 2， R 3， X， C-10 和 C-9 可以共同形成5-， 6- 或 7-元雜環。
式(II)括弧內的示例性化合物具有以下結構：
Figure 02_image087
II-01，
Figure 02_image089
II-02，
Figure 02_image091
II-03，
Figure 02_image093
II-04，
Figure 02_image095
II-05，
Figure 02_image097
II-06，
Figure 02_image099
II-07，
Figure 02_image101
II-08，
Figure 02_image103
II-09，
Figure 02_image105
II-10，
Figure 02_image107
II-11，
Figure 02_image109
II-12，
Figure 02_image111
II-13，
Figure 02_image113
II-14，
Figure 02_image115
II-15，
Figure 02_image117
II-16，
Figure 02_image119
II-17，
Figure 02_image121
II-18，
Figure 02_image123
II-19，
Figure 02_image125
II-20，
Figure 02_image127
II-21，
Figure 02_image129
II-22，
Figure 02_image131
II-23，
Figure 02_image133
II-24，
Figure 02_image135
II-25，
Figure 02_image137
II-26，
Figure 02_image139
II-27，
Figure 02_image141
II-28，
Figure 02_image143
II-29，
Figure 02_image145
II-30，
Figure 02_image147
II-31，
Figure 02_image149
II-32，
Figure 02_image151
II-33，
Figure 02_image153
II-34，
Figure 02_image155
II-35，
Figure 02_image157
II-36，
Figure 02_image159
II-37，
Figure 02_image161
II-38，
Figure 02_image163
II-39，
Figure 02_image165
II-40，
Figure 02_image167
II-41，
Figure 02_image169
II-42，
Figure 02_image171
II-43，
Figure 02_image173
II-44，
Figure 02_image175
II-45，
Figure 02_image177
II-46，
Figure 02_image179
II-47，
Figure 02_image181
II-48，
Figure 02_image183
II-49，
Figure 02_image185
II-50，
Figure 02_image187
II-51，
Figure 02_image189
II-52，
Figure 02_image191
II-53，
Figure 02_image193
II-54，
Figure 02_image195
II-55，
Figure 02_image197
II-56，
Figure 02_image199
II-57，
Figure 02_image201
II-58，
Figure 02_image203
II-60，
Figure 02_image205
II-61， 或其藥學上可接受的鹽，水合物或水合鹽； 或這些化合物的多晶結構； 或它們的異構體，旋光異構體，外消旋體，非鏡像異構物或鏡像異構物； 其中 R 6和 R 6’的定義與前文相同。 其中“
Figure 02_image207
”是連接到式（II）的連接子L的連接點。
在另一個具體的實施例中，細胞結合分子-喜樹鹼類似物的偶聯物具有式（III）的結構：
Figure 02_image209
（III） 或其藥學上可接受的鹽，水合物或水合鹽； 或這些化合物的多晶結構； 或它們的異構體，旋光異構體，外消旋體，非鏡像異構物或鏡像異構物； 其中T是靶向或結合配位體；L是可釋放的連接子；n是 1-30 ，m是1-10； 括號内是一種具有活性的喜樹鹼類似物，其中： R 1是直鏈或支鏈C 1-C 6烷基、烷氧基、烷基胺基（包括第一、第二、第三胺基或季銨）、氧基羰基、胺基羰基、胺基烷基、氧基烷基、胺基烷基胺基、氧基烷基胺基、胺基烷氧基、氧基烷氧基或烷基羧酸； C 2-C 6雜烷基、烷基環烷基、雜環烷基、雜環、氧基環烷基、胺基環烷基、雜烷基環烷基、烷基羰基、胺基烷基羰基、氧基烷基羰基、烷基醚、烷基酯、烷基醯胺、氧基烷基醚、胺基烷基醚、氧基烷基酯、胺基烷基酯、氧基烷基醯胺、胺基烷基醯胺、肟；NH或O； R 2是NH、 NR 6、 -N +R 6R 6’-、 O、 S、 直鏈或支鏈C 1-C 6烷基、烷基醇、烷基胺（包括第一、第二、第三胺或季銨）、胺基烷基醇、胺基烷基胺、氧基烷基醇、氧基烷基胺、胺基烷基、氧基烷基或烷基羧酸； C 2-C 6雜烷基、烷基環烷基、雜環烷基、雜環、環烷基、雜烷基環烷基、烷基羰基、烷基醚、烷基酯、烷基醯胺、肟；氧基烷基醚、胺基烷基醚、氧基烷基酯、胺基烷基酯、氧基烷基醯胺、胺基烷基醯胺； R 3是 H、 R 6NHC（O）、 R 6OC（O）、SO 2R 6、 SO 3R 6、 PR 6R 6’、 POR 6R 6’、 CH 2OP（O）（OR 6） 2、 C（O）OP（O）（OR 6） 2、 PO（OR 6）（OR 6’）、 P（O）（OR 6）OP（O）（OR 6’） 2、 R 6C（O）、 C（O）N R 6R 6’； 直鏈或支鏈 C 1-C 6烷基、烷基醇、烷基胺（包括第一、第二、第三胺或季銨）、或烷基羧酸； C 2-C 6雜烷基、烷基環烷基、雜環烷基、雜環、環烷基、雜烷基環烷基、烷基羰基、烷基醚、烷基酯、烷基醯胺、肟； C 5~C 12糖苷； R 4是鹵素（F、 Cl、 Br、或 I）、 CN、 NO 2、 SO 3H、 OR 6、 SR 6、 S（O 2）R 6、 NHR 6、 N（R 6）（R 6’）、 C（O）XR 6、 N +（R 6）（R 6’）（R 6’’）； X 是 NH或 O； R 5是 H、 C（O）OR 6、 C（O）NHR 6、 R 6C（O）、直鏈或支鏈C 1-C 6烷基、烷基醇、烷基胺（包括第一、第二、第三胺或季銨）、烷基羧酸； C 2-C 6碳酸酯、尿素、雜烷基、烷基環烷基、雜環烷基、雜環、環烷基、雜烷基環烷基、烷基羰基、烷基醚、烷基酯、烷基醯胺或胺基酸； R 6、 R 6’、 和 R 6’’獨立地是 H、 C 1-C 6烷基、烷基醇、烷基胺（包括第一、第二、第三胺或季銨）或烷基羧酸； C 2-C 6雜烷基、烷基環烷基、雜環烷基、雜環、環烷基、雜烷基環烷基、烷基羰基、烷基醚、烷基酯、烷基醯胺或胺基酸；或醫藥上可接受之鹽； 此外， R 2獨立地缺省且C-9 直接與L連接，且R 2、 R 3、 X、 C-10 和 C-9可以共同形成5-、 6- 或 7-元雜環。
式(III)括弧內的示例性化合物具有以下結構：
Figure 02_image211
III-1，
Figure 02_image213
III-2，
Figure 02_image215
III-3，
Figure 02_image217
III-4，
Figure 02_image219
III-5，
Figure 02_image221
III-6，
Figure 02_image223
III-7，
Figure 02_image225
III-8，
Figure 02_image227
III-9，
Figure 02_image229
III-10，
Figure 02_image231
III-11，
Figure 02_image233
III-12，
Figure 02_image235
III-13，
Figure 02_image237
III-14、
Figure 02_image239
III-15、
Figure 02_image241
III-16、
Figure 02_image243
III-17，
Figure 02_image245
III-18，
Figure 02_image247
III-19，
Figure 02_image249
III-20，
Figure 02_image251
III-21，
Figure 02_image253
III-22，
Figure 02_image255
III-23，
Figure 02_image257
III-24，
Figure 02_image259
III-25，
Figure 02_image261
III-26，
Figure 02_image263
III-27，
Figure 02_image265
III-28，
Figure 02_image267
III-29，
Figure 02_image269
III-30，
Figure 02_image271
III-31，
Figure 02_image273
III-32，
Figure 02_image275
III-33，
Figure 02_image277
III-34，
Figure 02_image279
III-35，
Figure 02_image281
III-36，
Figure 02_image283
III-37，
Figure 02_image285
III-38，
Figure 02_image287
III-39，
Figure 02_image289
III-40，
Figure 02_image291
III-41，
Figure 02_image293
III-41，
Figure 02_image295
III-42，
Figure 02_image297
III-43，
Figure 02_image299
III-44，
Figure 02_image301
III-45，
Figure 02_image303
III-46，
Figure 02_image305
III-47，
Figure 02_image307
III-48，
Figure 02_image309
III-49，
Figure 02_image311
III-50，
Figure 02_image313
III-51，
Figure 02_image315
III-52， 或其藥學上可接受的鹽，水合物或水合鹽； 或這些化合物的多晶結構； 或它們的異構體，旋光異構體，外消旋體，非鏡像異構物或鏡像異構物； 其中 R 6， 和 R 6’ 獨立地是 H、 C 1-C 6烷基、烷基醇、烷基胺（包括第一、第二、第三胺或季銨）或烷基羧酸； C 2-C 6雜烷基、烷基環烷基、雜環烷基、雜環、環烷基、雜烷基環烷基、烷基羰基、烷基醚、烷基酯、烷基醯胺或胺基酸；或醫藥上可接受之鹽；
在另一個實施例中，細胞結合分子-喜樹鹼類似物的偶聯物具有式（IV）：
Figure 02_image317
（IV） 或其藥學上可接受的鹽，水合物或水合鹽； 或這些化合物的多晶結構； 或它們的異構體，旋光異構體，外消旋體，非鏡像異構物或鏡像異構物； 其中T是靶向或結合配位體；L是可釋放的連接子；n為1-30且m為1-10； 括弧內是一種有效喜樹鹼類似物，其中： R 1和R 2獨立地是H、 NR 6R 6’、 -N +R 6R 6’R 6’’、 OH、 SH、C 1-C 6直鏈或支鏈 烷基、烷氧基、烷基胺基（包括第一、第二、第三胺基或季銨）、氧基羰基、胺基羰基、胺基烷基、氧基烷基、胺基烷基胺基、氧基烷基胺基、胺基烷氧基、氧基烷氧基或烷基羧酸； C 2-C 6雜烷基、烷基環烷基、雜環烷基、雜環、氧基環烷基、胺基環烷基、雜烷基環烷基、烷基羰基、胺基烷基羰基、氧基烷基羰基、烷基醚、烷基酯、烷基醯胺、氧基烷基醚、胺基烷基醚、氧基烷基酯、胺基烷基酯、氧基烷基醯胺、胺基烷基醯胺、肟；NH 2或OH； R 3獨立地是 -NHC（O）-、 -C（O）-、 SO 2-、 -SO 2NH-、 - NR 6SO 2-、 R 6NHC（O）、 R 6OC（O）、SO 2R 6、 SO 3R 6、 PR 6R 6’、 POR 6R 6’、 CH 2OP（O）（OR 6） 2、 C（O）OP（O）（OR 6） 2、 PO（OR 6）（OR 6’）、 P（O）（OR 6）OP（O）（OR 6’） 2、 R 6C（O）、 C（O）N R 6R 6’； 直鏈或支鏈C 1-C 6烷基、烷基醇、烷基胺（包括第一胺、第二胺、第三胺）或烷基羧酸； C 2-C 6雜烷基、烷基環烷基、雜環烷基、雜環、環烷基、雜烷基環烷基、烷基羰基、烷基醚、烷基酯、烷基醯胺、肟； R 4是鹵素 （F、 Cl、 Br、 或 I）、 CN、 NO 2、 SO 3H、 OR 6、 SR 6、 S（O 2）R 6、 NH（R 6）S（O 2）R 6’、 N（R 6）（R 6’）、 C（O）XR 6、 N +（R 6）（R 6’）（R 6’’）； X 是 NH 或O； R 5是H、 C（O）OR 6、 C（O）NHR 6、 R 6C（O）、直鏈或支鏈C 1-C 6烷基、烷基醇、烷基胺（包括第一、第二、第三胺或季銨）、烷基羧酸； C 2-C 6碳酸酯、尿素、雜烷基、烷基環烷基、雜環烷基、雜環、環烷基、雜烷基環烷基、烷基羰基、烷基醚、烷基酯、烷基醯胺或胺基酸； R 6、 R 6’、 和 R 6’’獨立地是 H、 C 1-C 6烷基、烷基醇、烷基胺（包括第一、第二、第三胺或季銨）或烷基羧酸； C 2-C 6雜烷基、烷基環烷基、雜環烷基、雜環、環烷基、雜烷基環烷基、烷基羰基、烷基醚、烷基酯、烷基醯胺或胺基酸；或醫藥上可接受之鹽； 在另一个實施例中， R 3獨立地缺省且C-10 的X直接與 L連接， 且R 2、 R 3、 X、 C-10 和 C-9可以共同形成5-、 6- 或7-元雜環。
式(IV)括弧內的示例性化合物具有以下結構：
Figure 02_image319
IV-1，
Figure 02_image321
IV-2，
Figure 02_image323
IV-3
Figure 02_image325
IV-4，
Figure 02_image327
IV-5，
Figure 02_image329
IV-6，
Figure 02_image331
IV-7，
Figure 02_image333
IV-8，
Figure 02_image335
IV-9，
Figure 02_image337
IV-10，
Figure 02_image339
IV-11，
Figure 02_image341
IV-12，
Figure 02_image343
IV-13，
Figure 02_image345
IV-14，
Figure 02_image347
IV-15，
Figure 02_image349
IV-16，
Figure 02_image351
IV-17，
Figure 02_image353
IV-18，
Figure 02_image355
IV-19，
Figure 02_image357
IV-20，
Figure 02_image359
IV-21，
Figure 02_image361
IV-22，
Figure 02_image363
IV-23，
Figure 02_image365
IV-24，
Figure 02_image367
IV-25，
Figure 02_image369
IV-26，
Figure 02_image371
IV-27，
Figure 02_image373
IV-28，
Figure 02_image375
IV-29，
Figure 02_image377
IV-30，
Figure 02_image379
IV-31，
Figure 02_image381
IV-32，
Figure 02_image383
IV-33，
Figure 02_image385
IV-34，
Figure 02_image387
IV-35，
Figure 02_image389
IV-36，
Figure 02_image391
IV-37，
Figure 02_image393
IV-38，
Figure 02_image395
IV-39，
Figure 02_image397
IV-40，
Figure 02_image399
IV-41，
Figure 02_image401
IV-42，
Figure 02_image403
IV-43，
Figure 02_image405
IV-44，
Figure 02_image407
IV-45，
Figure 02_image409
IV-46，
Figure 02_image411
IV-47， 或其藥學上可接受的鹽，水合物或水合鹽； 或這些化合物的多晶結構； 或它們的異構體，旋光異構體，外消旋體，非鏡像異構物或鏡像異構物；其中 “
Figure 02_image413
”， R 6和 R 6’的定義如前文所述；
在另一個實施例中，細胞結合分子-喜樹鹼類似物的偶聯物具有式（V）的結構：
Figure 02_image415
（V） 或其藥學上可接受的鹽，水合物或水合鹽； 或這些化合物的多晶結構； 或它們的異構體，旋光異構體，外消旋體，非鏡像異構物或鏡像異構物； 其中T是靶向或結合配位體；L是可釋放的連接子； n為1-30，m為1-10； 括弧內是一種具有活性的喜樹鹼類似物，其中： R 1和R 2獨立地是 H、 NR 6R 6’、 -N +R 6R 6’R 6’’、 OH、 SH、直鏈或支鏈C 1-C 6烷基、烷氧基、烷基胺基（包括第一、第二、第三胺基或季銨）、氧基羰基、胺基羰基、胺基烷基、氧基烷基、胺基烷基胺基、氧基烷基胺基、胺基烷氧基、氧基烷氧基或烷基羧酸； C 2-C 6雜烷基、烷基環烷基、雜環烷基、雜環、氧基環烷基、胺基環烷基、雜烷基環烷基、烷基羰基、胺基烷基羰基、氧基烷基羰基、烷基醚、烷基酯、烷基醯胺、氧基烷基醚、胺基烷基醚、氧基烷基酯、胺基烷基酯、氧基烷基醯胺、胺基烷基醯胺、肟；NH 2或OH； R 3獨立地是R 6NHC（O）-、 R 6C（O）-、 R 6SO 2、 -SO 2NHR 6、 R 6OC（O）、 R 6’SO 2R 6-、 SO 3R 6、 PR 6R 6’、 POR 6R 6’、 CH 2OP（O）（OR 6） 2、 C（O）OP（O）（OR 6） 2、 PO（OR 6）（OR 6’）、 P（O）（OR 6）OP（O）（OR 6’） 2、 R 6C（O）、 C（O）N R 6R 6’； 直鏈或支鏈 C 1-C 6烷基、烷基醇、烷基胺（包括第一胺、第二胺、第三胺）或烷基羧酸； C 2-C 6雜烷基、烷基環烷基、雜環烷基、雜環、環烷基、雜烷基環烷基、烷基羰基、烷基醚、烷基酯、烷基醯胺、肟； R 4是鹵素 （F、 Cl、 Br、或I）、 CN、 NO 2、 SO 3H、 OR 6、 SR 6、 S（O 2）R 6、 NH（R 6）S（O 2）R 6’、 N（R 6）（R 6’）、 C（O）XR 6、 N +（R 6）（R 6’）（R 6’’）； X是 NH 或O； R 5是 C（O）O、 C（O）NH、 R 6C（O）、直鏈或支鏈C 1-C 6烷基、烷基醇、烷基胺（包括第一、第二、第三胺或季銨）、烷基羧酸； C 2-C 6碳酸酯、尿素、雜烷基、烷基環烷基、雜環烷基、雜環、環烷基、雜烷基環烷基、烷基羰基、烷基醚、烷基酯、烷基醯胺或胺基酸； R 6、 R 6’、 和 R 6’’ 獨立地是 H、 C 1-C 6烷基、烷基醇、烷基胺（包括第一、第二、第三胺或季銨）或烷基羧酸； C 2-C 6雜烷基、烷基環烷基、雜環烷基、雜環、環烷基、雜烷基環烷基、烷基羰基、烷基醚、烷基酯、烷基醯胺或胺基酸；或醫藥上可接受之鹽； 此外、 R 5獨立地缺省且C-20的O直接與 L連接， 且 R 2、 R 3、 X、 C-10 和 C-9可以共同形成5-、 6- 或 7-元雜環。
式(V)括弧內的示例性化合物具有以下結構：
Figure 02_image417
V-01、
Figure 02_image419
V-02，
Figure 02_image421
V-03，
Figure 02_image423
V-04，
Figure 02_image425
V-05，
Figure 02_image427
V-06，
Figure 02_image429
V-07，
Figure 02_image431
V-08，
Figure 02_image433
V-09，
Figure 02_image435
V-10，
Figure 02_image437
V-11，
Figure 02_image439
V-12，
Figure 02_image441
V-13，
Figure 02_image443
V-14，
Figure 02_image445
V-15，
Figure 02_image447
V-16，
Figure 02_image449
V-17，
Figure 02_image451
V-18，
Figure 02_image453
V-19，
Figure 02_image455
V-20，
Figure 02_image457
V-21，
Figure 02_image459
V-22，
Figure 02_image461
V-23，
Figure 02_image463
V-24，
Figure 02_image465
V-25，
Figure 02_image467
V-26，
Figure 02_image469
V-27，
Figure 02_image471
V-28，
Figure 02_image473
V-29、
Figure 02_image475
V-30、
Figure 02_image477
V-31、
Figure 02_image479
V-32、
Figure 02_image481
V-33、
Figure 02_image483
V-34、
Figure 02_image485
V-35、
Figure 02_image487
V-36、
Figure 02_image489
V-37、
Figure 02_image491
V-38、
Figure 02_image493
V-39、
Figure 02_image495
V-40、
Figure 02_image497
V-41、
Figure 02_image499
V-42、
Figure 02_image501
V-43、
Figure 02_image503
V-44、
Figure 02_image505
V-45、
Figure 02_image507
V-46、
Figure 02_image509
V-47、
Figure 02_image511
V-48、
Figure 02_image513
V-49、
Figure 02_image515
V-50、
Figure 02_image517
V-51、
Figure 02_image519
V-52、
Figure 02_image521
V-53、
Figure 02_image523
V-54、
Figure 02_image525
V-55、
Figure 02_image527
V-56、
Figure 02_image529
V-57、
Figure 02_image531
V-58、
Figure 02_image533
V-59、
Figure 02_image535
V-60、
Figure 02_image537
V-61、 或其藥學上可接受的鹽，水合物或水合鹽； 或這些化合物的多晶結構； 或它們的異構體，旋光異構體，外消旋體，非鏡像異構物或鏡像異構物；其中 “
Figure 02_image413
”， R 6和 R 6’如前文所定義； 在另一個實施例中，合成製備喜樹鹼類似物及它們與本發明的細胞表面受體結合分子的偶聯物的路線，包括但不限於圖1-32所示。
在另一個實施例中，可釋放的連接子（L）是由選自由下列組成之群組C、N、O、S、Si和P等原子構成的鏈狀結構，共價連接細胞表面結合配位體（T）與有效的喜樹鹼類似物。連接子可具有多種長度，例如在約2至約100個原子的範疇內。用於形成連接子的原子可以以任何化學方式組合，例如形成伸烷基，亞烯基和亞炔基，醚，聚氧化烯，酯，胺，亞胺，多胺，肼，醯胺，脲，胺基脲，卡巴脲， 烷氧基胺，胺基甲酸酯，胺基酸，醯氧基胺，異羥肟酸等。 另外，應當注意到的是，形成可釋放的連接子（L）的原子可以是飽和的或不飽和的，或者可以是自由基，或者可以彼此成環以形成二價環狀結構，包括環烷烴，環狀醚，環胺，亞芳基，雜亞芳基等。
術語“可釋放的連接子”是指連接子上包含至少一個可在生理條件下被破壞的鍵，例如pH、酸、鹼、氧化作用、代謝、生化或酶不穩定的鍵。應當理解，導致鍵斷裂不一定是生物或代謝過程、而可能是一個化學反應、例如水解或取代反應，這種生理條件的例子有： pH值比細胞漿內pH低的內涵體，惡性細胞記憶體在的毫摩爾濃度的大量谷胱甘肽，它能夠與細胞內硫醇發生二硫鍵交換反應。
偶聯物的可釋放連接子L可以具有下式的結構：--Ww-（Aa）r-Vv--；其中：--W--是延展體單元； w是0或1； 每個-Aa-獨立地是一個胺基酸單元； r獨立地是0至12的整數； --V--是一個間隔體單元；v為0、1或2。
當延展體—Ww—存在時，它起著連接著細胞結合分子（T）和胺基酸單元—Aa—或者間隔體—V—（當—Aa—不存在時）的作用。延展體W中可以獨立地包含自毀滅間隔體，肽單元，腙鍵，二硫鍵或硫醚鍵。此時，細胞結合分子（T）含有一個能夠與延展體上相應功能團成鍵的基團。在細胞結合分子上固有或藉由化學方式產生的用於連接的功能團，包括但不限於：巰基(--SH)，胺基，羥基，羰基，糖的異頭羥基，以及羧基等。較佳的功能團為巰基，羧基和胺基。巰基可以藉由還原細胞結合分子，分子內的雙硫鍵生成。巰基也可以藉由細胞結合分子中賴氨酸的胺基與2-亞胺基硫烷（Traut試劑）或者硫內酯或者其他的巰基生成試劑反應產生，比如先用含雙硫鍵的連接子或硫酯修飾細胞結合分子T，再分別藉由還原或水解生成巰基。
連接在T上的W的例子如下所示：
Figure 02_image540
；
Figure 02_image542
；
Figure 02_image544
；
Figure 02_image546
；
Figure 02_image548
；
Figure 02_image550
；
Figure 02_image552
；
Figure 02_image554
；
Figure 02_image556
；
Figure 02_image558
；
Figure 02_image560
；
Figure 02_image562
；
Figure 02_image564
；
Figure 02_image566
；
Figure 02_image568
；
Figure 02_image570
Figure 02_image572
；
Figure 02_image574
；
Figure 02_image576
；
Figure 02_image578
；
Figure 02_image580
；
Figure 02_image582
；
Figure 02_image584
、
Figure 02_image586
、
Figure 02_image588
、
Figure 02_image590
、
Figure 02_image592
、
Figure 02_image594
、
Figure 02_image596
、
Figure 02_image598
、
Figure 02_image600
、
Figure 02_image602
、
Figure 02_image604
、
Figure 02_image606
、
Figure 02_image608
、
Figure 02_image610
、
Figure 02_image612
、
Figure 02_image614
、
Figure 02_image616
、
Figure 02_image618
、
Figure 02_image620
、
Figure 02_image622
、
Figure 02_image624
、
Figure 02_image626
其中R 20、R 21選自由下列組成之群組–C 1-C 9伸烷基-、-C 1-C 7碳環-、-O-（C 1-C 8烷基）-、-亞芳基-、-C 1-C 9伸烷基-亞芳基-、-亞芳基、-C 1-C 9伸烷基-、-C 1-C 9伸烷基-（C 1-C 8碳環）-、-（C 3-C 7碳環）-C 1-C 9伸烷基-、-C 3-C 8雜環基、-C 1-C 10伸烷基-（C 3-C 8雜環）-、-（C 3-C 8雜環）-C 1-C 9伸烷基-、-（CH 2CH 2O） k-、-（CH（CH 3）CH 2O） k-和-（CH 2CH 2O） k-CH 2-； k是1-20的整數；R’和R''獨立地為H或CH 3。
在另一個實施例中，如上所述的W與T的共價連接可以藉由各種化學反應實現。
醯胺鍵形成的示例如下：
Figure 02_image628
Figure 02_image630
其中延展體單元含有一個活性反應位元點E，E可以與細胞結合分子上的第一胺或第二胺反應生成醯胺鍵。 E的例子包括但不限於，羥基琥珀醯亞胺酯（NHS和S-NHS等）， 4-硝基苯基酯，五氟苯基酯，四氟苯基酯（包括S-四氟苯基酯），酸酐，醯氯，磺醯氯，異氰酸酯和異硫氰酸酯等。
用硫醚或雙硫鍵連接的示例：
Figure 02_image632
Figure 02_image634
Figure 02_image636
Figure 02_image638
其中延展體單元含有一個能夠與巰基反應的位點，可以和細胞結合分子T之間形成硫醚或雙硫鍵，為形成雙硫鍵，細胞結合分子T上的巰基既可以藉由還原分子內雙硫鍵生成，也可以藉由其他化學過程修飾細胞結合分子T而生成。
在本發明的另一個態樣，延展體上也可以有一個能夠與醛基-（-CHO）或酮基（-C（=O）R）反應的活性基團，以修飾細胞結合分子T上的醛基或酮基。比如，細胞結合分子T的糖，藉由用氧化劑例如高碘酸鈉氧化就可以生成醛基或酮基（-C（=O）R）。再比如，抗體（或蛋白質或多肽）N端胺基酸上的胺可以和5-磷酸吡哆醛（PLP）反應，而引入酮基（Scheck＆Francis，ACS Chem.Biol.2007 ，2，247-251）。這些醛基或酮基（-C=O）可以和延展體上的活性反應基團例如醯肼，肟，第一胺或第二胺，肼，縮胺基硫脲，肼羧酸酯或芳基肼反應，從而將二者連接在一起。
用腙，肟或亞胺連接的示例如下：
Figure 02_image640
Figure 02_image642
其中R 20和R 21的定義如前所述，R 25指一個胺基酸的取代基。
另外本發明另一態樣，延展體（可以含有一個隔離體V和/或一個胺基酸）可以先和細胞結合分子(T)連結，然後再將這個細胞結合分子-延展體片段與一個喜樹鹼類似物共軛連接，連接過程可以在緩衝水溶液裡進行。下面是一些按照這種方式分兩步偶聯的例子（連接在R 16上的藥物被省略）：
Figure 02_image644
Figure 02_image646
Figure 02_image648
Figure 02_image650
Figure 02_image652
Figure 02_image654
Figure 02_image656
其中E包括但不僅限於，羥基琥珀醯亞胺酯（NHS和S-NHS等）， 4-硝基苯基酯，五氟苯基酯，四氟苯基酯（包括S-四氟苯基酯），酸酐，醯氯，磺醯氯，異氰酸酯和異硫氰酸酯等。R’和R’’分別為H或CH 3；R 20，R 16和Ar的定義同前文；R 26為H，F或NO 2；J為F， Cl，Br，I，甲苯磺酸酯基（TsO）或甲磺酸酯基（MsO），其中
Figure 02_image658
含有至少一個喜樹鹼類似物，如
Figure 02_image660
所示。
本發明另一態樣，延展體也可以先和喜樹鹼類似物連接，然後再與細胞結合分子(T)在pH為3 -10（較佳為5.0-8.5）的緩衝水溶液（可含有上限至50%的有機溶劑）中偶聯。 這種兩步偶聯的示例為：
Figure 02_image662
Figure 02_image664
Figure 02_image666
Figure 02_image668
Figure 02_image670
Figure 02_image672
其中E包括但不僅限於，羥基琥珀醯亞胺酯（NHS和S-NHS等）、 4-硝基苯基酯、五氟苯基酯、四氟苯基酯（包括S-四氟苯基酯）、酸酐、醯氯、磺醯氯、異氰酸酯和異硫氰酸酯等。R’和R’’分別為H或CH 3；R 20、R 16和Ar的定義同前文；R 26為H、F或NO 2；J為F、 Cl、Br、I、甲苯磺酸酯基（TsO）或甲磺酸酯基（MsO），其中
Figure 02_image674
含有至少一個喜樹鹼類似物。
當胺基酸單元（--Aa--）存在時，隔離體存在時，它連接延展體和隔離體，隔離體缺失時，它連接延展體和喜樹鹼類似物，如果延展體和隔離體都缺失時，它直接連接細胞結合分子T和喜樹鹼類似物。--（Aa）r—可以是天然或非天然胺基酸，可以是二肽、三肽、四肽、五肽、六肽、七肽、八肽、九肽、十肽、十一肽或者十二肽單元，r為0-12 之間的整數。在這裡，胺基酸一般地指胺基烷基羧酸，其中烷基可以是被諸如烷基，醯基，羥烷基，巰烷基，氨烷基或羧烷基等基團取代的烷基。天然及非天然胺基酸和多肽的結構在G. C. Barrett 和D. T. Elmore 所著的《Amino Acid and Peptide》（ Cambridge University Press，2004）書裡有詳細說明。另外，胺基酸也指β胺基酸，γ胺基酸和分子內含有甲基、苄基、羥甲基、巰甲基、羧基、羧甲基或胍基丙基等的長鏈胺基酸。較佳的胺基酸為精胺酸、天冬醯胺酸、天冬氨酸、瓜氨酸、半胱氨酸、甘氨酸、麩胺酸、亮氨酸、賴氨酸、穀氨醯胺、絲氨酸、鳥氨酸、苯丙氨酸、蘇氨酸、酪氨酸和纈氨酸等。
胺基酸單元可以被一種或多種酶，包括在腫瘤相關蛋白水解酶，所酶解而釋放出喜樹鹼類似物。在一實施例中，喜樹鹼類似物被釋放後在體內被質子化。
當隔離體（-V-）存在時，胺基酸單元存在時，它連接胺基酸單元和喜樹鹼類似物，胺基酸單元缺失時，它連接延伸體和喜樹鹼類似物。當胺基酸單元和延伸體都缺失時，隔離體連接喜樹鹼類似物和細胞結合分子(T)。隔離體中可以包含一些功能團，以提高偶聯物的水溶性，生物傳送，獲得適宜的腎清除，攝入，吸收，生物分佈，以及生物利用度。隔離體有兩種基本類型：自毀滅型和非自毀滅型。非自毀滅型隔離體指喜樹鹼類似物-連接子-細胞結合分子或喜樹鹼類似物-連接子的胺基酸單元斷裂（特別是酶解之後），部分或全部的隔離體仍然連接在喜樹鹼類似物上。自毀滅型包括電子結構類似對胺基苄基胺基甲醯基（PAB）的芳香族化合物，2-胺基咪唑-5-甲醇衍生物，雜環PAB衍生物，β-葡糖醛酸，鄰或對胺基苄基縮醛，或以下結構之一：
Figure 02_image676
，
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，
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，.
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，
Figure 02_image684
；   （*）標記的原子是隔離體，可釋放的連接子單元，胺基酸(Aa) r，喜樹鹼類似物或細胞結合分子(T)的連接點； X、Y和Z 3獨立地為NH，O或S； Z 2獨立地為H、 NH、O或S；v為0或1；Q獨立地為H，OH，C 1~C 6烷基、 （OCH 2CH 2） n、 F、 Cl、 Br、 I、 OR 17、或SR 17、 NR 17R 18、 N=NR 17、 N=R 17、 NR 17R 18、 NO 2、 SOR 17R 18、 SO 2R 17、 SO 3R 17、 OSO 3R 17、 PR 17R 18、 POR 17R 18、 PO 2R 17R 18、 OPO（OR 17）（OR 18）、或OCH 2PO（OR 17）（OR 18）， 其中R 17和R 18獨立地為H，C 1-C 8烷基，C 2-C 8烯烴基、炔烴基、雜烷基，C 3-C 8芳基、雜環基、碳環基、環烷基、雜環烷基、雜芳烷基、烷羰基或醫藥上可接受之正離子鹽； v 是1-20的整數。
非自我毀滅間隔體（-V-）的例子：
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Figure 02_image812
；
Figure 02_image814
6-馬來醯亞胺己醯基（MC），
Figure 02_image816
馬來醯亞胺丙醯基（MP），
Figure 02_image818
纈氨酸-瓜氨酸（val-cit），
Figure 02_image820
丙氨酸-苯丙氨酸（ala-phe），
Figure 02_image822
賴氨酸-苯丙氨酸（lys-phe），
Figure 02_image824
對胺基苄氧基-羰基（PAB），
Figure 02_image826
4-硫代戊酸基（SPP），
Figure 02_image828
4-硫丁醯基（SPDB），
Figure 02_image830
4-（N-馬來醯亞胺甲基）環己烷-1醯基（MCC） ，
Figure 02_image832
馬來醯亞胺乙基（ME），
Figure 02_image834
4-硫-2-羥基磺醯基-丁醯基（2-Sulfo-SPDB），
Figure 02_image836
芳基硫醇（PySS），
Figure 02_image838
（4-乙醯基）胺基苯醯基（SIAB），
Figure 02_image840
，氧基苄硫基，
Figure 02_image842
胺基苄硫基，
Figure 02_image844
二氧基苄硫基，
Figure 02_image846
二胺基苄硫基，
Figure 02_image848
胺基氧基苄基硫醚基，
Figure 02_image850
烷氧基胺基（AOA），
Figure 02_image852
亞乙基氧基（EO），
Figure 02_image854
4-甲基-4-二硫代戊酸（MPDP），
Figure 02_image856
三唑，
Figure 02_image858
二硫基，
Figure 02_image860
烷基磺醯基，
Figure 02_image862
烷基磺醯胺，
Figure 02_image864
磺基雙醯胺，
Figure 02_image866
膦二醯胺，
Figure 02_image868
烷基膦醯胺，
Figure 02_image870
次膦酸，
Figure 02_image872
N-甲基膦醯胺酸，
Figure 02_image874
N,N'-二甲基膦醯胺酸，
Figure 02_image876
N,N'-二甲基膦二醯胺，
Figure 02_image878
肼，
Figure 02_image880
乙脒；
Figure 02_image882
肟，
Figure 02_image884
二乙醯肼，
Figure 02_image886
胺基乙基胺，
Figure 02_image888
胺基乙基 - 胺基乙基胺，
Figure 02_image890
，
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，
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，
Figure 02_image946
，
Figure 02_image948
，
Figure 02_image950
， 或L-或D-，或含有1-20個胺基酸的天然或非天然肽； 其中“*” 和 “
Figure 02_image413
”是間隔體或可釋放的連接子，喜樹鹼類似物和/或結合分子的連接點；m為1~ 10； n為1~ 20； X 2、X 3、X 4、X 5或X 6獨立地選自由下列組成之群組NH、 NHNH、 N（R 12）、 N（R 12）N（R 12’）、 O、 S、 C 1-C 6烷基，C 2-C 6雜烷基、烷基環烷基、雜環烷基；C 3-C 8芳基、Ar-烷基、雜環、碳環、環烷基、雜烷基環烷基、烷基羰基、雜芳基； CH 2OR 12、CH 2SR 12、CH 2NHR 12或1~ 8個胺基酸； 其中R 12和R 12’獨立地為H、C 1-C 8烷基；C 2-C 8雜烷基、烷基環烷基、雜環烷基； C 3-C 8芳基、Ar-烷基、雜環、碳環、環烷基、雜烷基環烷基、烷基羰基、雜芳基、1-8個碳原子的酯、醚或醯胺； 或如式（OCH 2CH 2） p或（OCH 2CH（CH 3）） p的聚環氧乙烷單元，其中p為0至約1000的整數，或它們的組合。
可斷裂連接子L中包含至少一個在生理條件下被破壞的鍵或pH、酸、鹼、氧化作用、代謝、生化或酶不穩定的鍵，其具有以下結構之一： ‑（CR 15R 16） m（Aa）r（CR 17R 18） n（OCH 2CH 2） t-， ‑（CR 15R 16） m（CR 17R 18） n（Aa） r（OCH 2CH 2） t-， ‑（Aa） r-（CR 15R 16） m（CR 17R 18） n（OCH 2CH 2） t-， ‑（CR 15R 16） m（CR 17R 18） n（OCH 2CH 2） r（Aa） t-， -（CR 15R 16） m-（CR 17=CR 18）（CR 19R 20） n（Aa） t（OCH 2CH 2） r-， -（CR 15R 16） m（NR 11CO）（Aa） t（CR 19R 20） n-（OCH 2CH 2） r-， -（CR 15R 16） m（Aa） t（NR 21CO）（CR 19R 20） n（OCH 2CH 2） r-， -（CR 15R 16） m（OCO）（Aa） t（CR 19R 20） n（OCH 2-CH 2） r-， -（CR 15R 16） m（OCNR 17）（Aa） t（CR 19R 20） n（OCH 2CH 2） r-， -（CR 15R 16） m-（CO）（Aa） t（CR 19R 20） n-（OCH 2CH 2） r-， -（CR 15R 16） m（NR 21CO）（Aa） t（CR 19R 20） n（OCH 2CH 2） r-， -（CR 15R 16） m（OCO）（Aa） t-（CR 19R 20） n（OCH 2CH 2） r-， -（CR 15R 16） m（OCNR 17）（Aa） t（CR 19R 20） n-（OCH 2CH 2） r-， -（CR 15R 16） m-（CO）（Aa） t（CR 19R 20） n-（OCH 2CH 2） r-， -（CR 15R 16） m-苯基‑CO（Aa） t-（CR 17R 18） n-， -（CR 15R 16） m-呋喃‑CO（Aa） t（CR 17R 18） n-， -（CR 15R 6） m-噁唑‑CO（Aa） t（CR 17R 18） n-， -（CR 15R 16） m噻唑基CO-（Aa） t（CCR 17R 18） n-， -（CR 15R 16） t-噻吩‑CO（CR 17R 18） n-， -（CR 15R 16） t-咪唑‑CO-（CR 17R 18） n-， -（CR 15R 16） t-嗎啉‑CO（Aa） t（CR 17R 18） n-， -（CR 15R 16） t-呱嗪-CO（Aa） t（CR 17R 18） n-，-（CR 15R 16） tN‑甲基呱嗪‑CO（Aa） t（CR 17R 18） n-， -（CR 15R 16） m-（Aa） t苯基-， -（CR 15R 16） m-（Aa） t呋喃‑， -（CR 15R 16） m-噁唑（Aa） t‑， -（CR 15R 16） m-噻唑基（Aa） t‑， -（CR 15R 16） m-噻吩-（Aa） t-， -（CR 15R 16） m-咪唑（Aa） t-， -（CR 15R 16） m-嗎啉‑（Aa） t-， -（CR 15R 16） m-呱嗪‑（Aa） t-，-（CR 15R 16） m-N‑甲基呱嗪‑（Aa） t- ，‑K（CR 15R 16） m（Aa）r（CR 17R 18） n（OCH 2CH 2） t-， ‑K-（CR 15R 16） m（CR 17R 18） n（Aa） r（OCH 2CH 2） t-，  ‑K（Aa） r-（CR 15R 16） m（CR 17R 18） n（OCH 2CH 2） t-， ‑K-（CR 15R 16） m（CR 17R 18） n（OCH 2CH 2） r（Aa） t-， ‑K（CR 15R 16） m（CR 17=CR 18）（CR 19R 20） n（Aa） t（OCH 2-CH 2） r， ‑K（CR 15R 16） m（NR 11CO）（Aa） t-（CR 19R 20） n（OCH 2CH 2） r-， ‑K（CR 5R 6） m（Aa） t（NR 21CO）-（CR 19R 20） n（OCH 2CH 2） r-， ‑K（CR 15R 16） m-（OCO）（Aa） t（CR 19R 20） n-（OCH 2CH 2） r-， ‑K（CR 15R 16） m（O-CNR 17）（Aa） t（CR 19R 20） n-（OCH 2CH 2） r-，  ‑K（CR 15R 16） m（CO）（Aa） t-（CR 19R 20） n（OCH 2CH 2） r-，‑K（CR 15R 16） m（NR 21CO）（Aa） t（CR 19R 20） n（OCH 2CH 2） r-， ‑K（CR 15R 16） m-（OCO）（Aa） t（CR 19R 20） n（O-CH 2CH 2） r-， ‑K（CR 15R 16） m（OCNR 17）（Aa） t（CR 19R 20） n（OCH 2CH 2） r-， ‑K-（CR 15R 16） m（CO）（Aa） t-（CR 19R 20） n（OCH 2CH 2） r-， ‑K（CR 15R 16） m-苯基‑CO（Aa） t（CR 17R 18） n-， ‑K-（CR 15R 16） m-呋喃‑CO-（Aa） t（CR 17R 18） n-， ‑K（CR 15R 16） m-噁唑-CO（Aa） t（CR 17R 18） n-， ‑K（CR 15R 16） m-噻吩‑CO（Aa） t-（CR 17R 18） n-， ‑K（CR 15R 16） t-噻吩-CO（CR 17R 18） n-， ‑K（CR 15R 16） t咪唑-CO-（CR 17R 18） n-， ‑K-（CR 5R 6） t嗎啉-CO（Aa） t-（CR 17R 18） n-，  ‑K（CR 15R 16） t-呱嗪-CO（Aa） t（CR 17R 18） n-， ‑K-（CR 15R 16） t-N‑甲基呱嗪-CO（Aa） t（CR 17R 18） n-， ‑K（CR 15R 16） m（Aa） t苯基， ‑K（CR 15R 16） m- （Aa） t呋喃-， -K（CR 15R 16） m-噁唑-（Aa） t-， ‑K（CR 15R 16） m-噻吩（Aa） t-， ‑K（CR 15R 16） m-噻吩-（Aa） t-， ‑K（CR 15R 16） m-咪唑（Aa） t-， ‑K（CR 15R 16） m-嗎啉（Aa） t-， ‑K（CR 15R 16） m呱嗪（Aa） tG， ‑K（CR 5R 6） m-N-甲基-呱嗪（Aa） t-； 其中 Aa， m， n， 在前文已有定義； t 和 r獨立地為0 – 100； R 13， R 14， R 15， R 16， R 17， R 18， R 19， R 20，R 21獨立地選自由下列組成之群組 H； 鹵素； C 1~C 8烷基或雜烷基， C 2~C 8芳基、烯基、炔基、醚、酯、胺或醯胺， C 3~C 8芳基，這些基團均可以被以下成分所取代：一個或多個鹵素， CN， NR 12R 12’， CF 3， OR 12， 芳基， 雜環， S（O）R 12， SO 2R 12， -CO 2H， -SO 3H， -OR 12， -CO 2R 12， -CONR 12， -PO 2R 12R 13， -PO 3H 或 P（O）R 12R 12’R 13； K 是 NH， NR 12， -SS-， -C（=O）-， -C（=O）NH-， -C（=O）O-， -C=NH-O-， -C=N-NH-， -C（=O）NH-NH-， O， S， Se， B， Het （具有C 3-C 12的雜環或雜芳環）；或含有相同或不同的1-20個胺基酸的肽。
在本發明的另一態樣，連接子L較佳含有胺基、磺醯胺、磷醯胺或胺基酸基團，其中式（I-q）可以作為支鏈連接至連接子L。連接子L中的胺基酸優選自由下列組成之群組天冬氨酸、麩胺酸、賴氨酸、鳥氨酸或酪氨酸，其中的官能團如胺基、羧基或苯氧基中的一個或兩個可以連接如式（I-q）的長支鏈：
Figure 02_image953
（I-q）； 其中
Figure 02_image955
是與連接子中的磺醯基、磷酸酯、胺基或羰基相連的位點，較佳連接至天冬氨酸、麩胺酸、賴氨酸、鳥氨酸或酪氨酸的羰基、胺基或苯氧基；G 1是 NH、 NHNH、 C（=O）、 NHNHC（O）、 C（=O）NH、 C（=NH）NH、 CH 2、 CH 2C（O）、 C（O）O、 NHC（O）NH或 （Aa） r、 （r =1-12）； G 2是 NH、 NHNH、 C（=O）、 NHNHC（O）、 C（=O）NH、 C（=NH）NH、 CH 2、 C（O）O、 NHC（O）NH、 O、 S、 B、 P（O）（OH）、 NHP（O）（OH）、 NHP（O）（OH）NH、 CH 2P（O）（OH）NH、 OP（O）（OH）O、 CH 2P（O）（OH）O、 NHS（O） 2、 NHS（O） 2NH、 CH 2S（O） 2NH、 OS（O） 2O、 CH 2S（O） 2O、 Ar、 ArCH 2、 ArO、 ArNH、 ArS、 ArNR 1、 （Aa） r、 （r =1-12）； X 1和 X 2獨立地是O、 CH 2、 S、 NH、 N（R 12）、 +NH（R 12）、 +N（R 12）（R 13）、 C（O）、 OC（O）、 OC（O）O、 NHSO 2NH、 NHP（O）（NH） 2、 SO 2NH、 P（O）（NH） 2、 NHS（O）NH、 NHP（O）（OH）（NH）、 OC（O）NH、 NHC（O）NH； Y 2是 O、 NH、 NR 1、 CH 2.S. Ar； G 3是 OH、 SH、 OR 1、 SR 1、 OC（O）R 1、 NHC（O）R 12、 C（O）R 12、 CH 3、 NH 2、 NR 12、 +NH（R 12）、 +N（R 12）（R 13）、 C（O）OH、 C（O）NH 2、 NHC（O）NH 2、 BH 2、 BR 12R 13、 P（O）（OH） 2、 NHP（O）（OH） 2、 NHP（O）（NH 2） 2、 S（O） 2（OH）、 （CH 2） q1C（O）OH、 （CH 2） q1P（O）（OH） 2、 C（O）（CH 2） q1C（O）OH、 OC（O）（CH 2） q1C（O）OH、 NHC（O）（CH 2） q1C（O）OH、 CO（CH 2） q1P（O）（OH） 2、 NHC（O）O（CH 2） q1-C（O）OH、 OC（O）NH-（CH 2） q1C（O）OH、 NHCO（CH 2） q1P（O）（OH） 2、 NHC（O）（NH）（CH 2） q1C（O）OH、 CONH（CH 2） q1P（O）（OH） 2、 NHS（O） 2（CH 2） q1C（O）OH、 CO（CH 2） q1S（O） 2（OH）、 NHS（O） 2NH-（CH 2） q1C（O）OH、 OS（O） 2NH（CH 2） q1C（O）OH、 NHCO（CH 2） q1S（O） 2（OH）、 NHP（O）（OH）（NH）-（CH 2） q1C（O）OH、 CONH（CH 2） q1S（O）（OH）、 OP（O）（OH） 2、 （CH 2） q1P（O）（NH） 2、 NHS（O） 2（OH）、 NHS（O） 2NH 2、 CH 2S（O） 2NH 2、 OS（O） 2OH、 OS（O） 2OR 1、 CH 2S（O） 2OR 1、 Ar、 ArR 12、 ArOH、 ArNH 2、 ArSH、 ArNHR 12、或（Aa） q1； p 1、 p 2和 p 3獨立地是0 -30 但不同時為 0； q 1和 q 2獨立地為 0 -24；較佳地 ，G 3是直鏈或支鏈的 C 2-C 50聚羧酸或C 2-C 50聚烷基胺、C 6-C 90寡糖或多糖、C 6-C 50含季銨陽離子和羧酸陰離子的兩性離子或含季銨陽離子和磺酸陰離子的兩性離子（PSB）、可生物降解的聚合物，如聚乳酸/乙醇酸（PLGA）、聚（丙烯酸酯）、脫乙醯殼多糖、N-（2-羥丙基）甲基丙烯醯胺的共聚物、聚[2-（甲基丙烯醯氧基）乙基磷酸膽鹼 ]（PMPC）、聚-L -麩胺酸、聚（丙交酯- 共- 乙交酯）（PLG）、聚（乙二醇）（PEG）、聚（丙二醇）（PPG ） 、聚（乙二醇）改性肽、聚（乙二醇）改性脂質體、聚（乙二醇）改性烷基羧酸、聚（乙二醇）改性烷基胺、透明質酸（HA）（糖胺聚糖）、肝素或硫酸乙醯肝素（HSGAG）、硫酸軟骨素或硫酸皮素（CSGAG）、聚（乙二醇）改性的烷基硫酸鹽、聚（乙二醇）改性的烷基磷酸鹽或聚（乙二醇）改性的烷基季銨鹽。
更較佳地，式（I-q）選自由下列組成之群組：
Figure 02_image957
（I-q01），
Figure 02_image959
（I-q02），
Figure 02_image961
（I-q03），
Figure 02_image963
（I-q04），
Figure 02_image965
（I-q04），
Figure 02_image967
（Iq-05），
Figure 02_image969
（I-q06），
Figure 02_image971
（I-q07），
Figure 02_image973
（I-q08）
Figure 02_image975
（Iq-09），
Figure 02_image977
（Iq-10），
Figure 02_image979
（Iq-11），
Figure 02_image981
（Iq-12），
Figure 02_image983
（Iq-13），
Figure 02_image985
（Iq-14）， 其中 G 1、 p 1、 p 2、 p 3、 Aa、 r、 X 2、 q 1、 m 1與前文定義相同。
另一態樣，本發明的結合分子（T）可以是目前已知的或即將公開的，能夠與具有治療意義或者可以被生物學方式修飾的細胞的部分相結合、複合或反應的任何種類的分子。結合分子的作用是將喜樹鹼類似物遞送至與結合分子（T）反應的特定靶細胞群。
在本發明的另一個態樣，CPT衍生物與細胞結合分子的偶聯物具有如下式（IIq-1）、（IIq-2）、（IIq-3）、（IIq-4）、（IIq- 5），（IIq-6），（IIq-7），（IIq-8）的結構：
Figure 02_image987
（IIq-1），
Figure 02_image989
（IIq-2），
Figure 02_image991
（IIq-3），
Figure 02_image993
（IIq-4），
Figure 02_image995
（IIq-5），
Figure 02_image997
（IIq-6），
Figure 02_image999
（IIq-7），
Figure 02_image1001
（IIq-8）， 其中 R' 和  R''獨立地為H、 Me、 Et、 iPr、 iBu、 Bz （CH 2C 6H 5）、 CH 2COOH、 CH 2CH 2COOH、 CH 2CONH 2、 CH 2CH 2CONH 2、 CH 2CH 2CH 2CH 2NH 2、 CH 2CH 2SCH 3、 CH 2OH、 CH 2CH 2CH 2NHC（=NH）NH 2、 CH（OH）CH 3、 CH 2C 6H 4OH、 CH 2C 3N 2H 3；  p 1和 p 2獨立地是0 ~24； q 1是 1 ~18； q 3是 0 ~6； q 4是0 ~4； m’ 和 m’’獨立地為 0 ~6； m’’’ 是0 或 1； mAb是細胞結合分子，較佳為抗體； NH-藥物是上面列出的化合物II-1~II-61、III-1~III-51、IV-1~IV-47和V-1~V-61；n是1~20；
Figure 02_image1003
是與 NH-Drug連接的位點。
如式(IIq-1) 、 （IIq-2）、 （IIq-3）、 （IIq-4）、 （IIq-5）、 （IIq-6）、 （IIq-7）、 （IIq-8）的偶聯物是藉由如下式(IIq-9)、（IIq-10）、 （IIq-11）、 （IIq-12）、 （IIq-13）、 （IIq-14）、 （IIq-15）、 （IIq-16）與含有硫基的細胞結合分子反應而製備：
Figure 02_image1005
（IIq-9），
Figure 02_image1007
（IIq-10），
Figure 02_image1009
（IIq-11），
Figure 02_image1011
（IIq-12），
Figure 02_image1013
（IIq-13），
Figure 02_image1015
（IIq-14），
Figure 02_image1017
（IIq-15），
Figure 02_image1019
（IIq-8）， 其中 R'和  R''獨立地為 H、 Me、 Et、 iPr、 iBu、 Bz （CH 2C 6H 5）、 CH 2COOH、 CH 2CH 2COOH、 CH 2CONH 2、 CH 2CH 2CONH 2、 CH 2CH 2CH 2CH 2NH 2、 CH 2CH 2SCH 3、 CH 2OH、 CH 2CH 2CH 2NHC（=NH）NH 2、 CH（OH）CH 3、 CH 2C 6H 4OH、 CH 2C 3N 2H 3；  p 1和 p 2獨立地是 0 ~24； q 1是1 ~18； q 3是0 ~6； q 4是0 ~4； m’ 和 m’’ 獨立地是 0 ~6； m’’’ 是 0或1； NH-Drug 是如上所列的化合物 II-1 ~ II-61， III-1 ~ III-51， IV-1 ~ IV-47，和 V-1 ~ V-61；
Figure 02_image1003
是與 NH-Drug連接的位點。
蛋白質，特別是抗體中的游離硫基可以藉由還原蛋白質的鏈間二硫原子而生成，還原劑選自由下列組成之群組二硫蘇糖醇（DTT），二硫赤蘚糖醇（DTE），L-谷胱甘肽（GSH），三（ 2-羧乙基）膦（TCEP），2-巰基乙胺（β-MEA），或/和β 巰基乙醇（β-ME，2-ME），反應在pH5.0 ~ 8.5緩衝液中進行。 用TCEP還原蛋白質的兩個或多個二硫鍵可以在與式（IIq-9）、 （IIq-10）、 （IIq-11）、 （IIq-12）、 （IIq-13）、 （IIq-14）、 （IIq-15）、 或 （IIq-16）發生偶聯反應之前或同時進行。硫基也可以藉由蛋白質上的胺基（賴氨酸殘基）與 Traut 試劑（2-亞胺基硫烷）或 γ-硫代丁內酯反應生成。蛋白質與同Traut試劑（2-亞胺基硫雜環戊烷）或γ-硫代丁內酯化合物反應可以與同式（IIq-9）、 （IIq-10）、 （IIq-11）、 （IIq-12）、 （IIq-13）、 （IIq-14）、 （IIq-15）、或（IIq-16）的偶聯反應在一鍋中（同時）進行。
細胞結合劑T包括，但不僅限於，大分子量蛋白質，例如完整抗體（多克隆抗體，單克隆抗體）；單鏈抗體；抗體片段如Fab， Fab'， F（ab'） 2， F v（Parham， J. Immunol. 1983，131， 2895-2902），由Fab表達庫產生的片段，抗獨特型（抗-Id）抗體；CDR；上述任何抗體的抗原決定基結合片段，能免疫特異性結合癌細胞抗原，病毒抗原，微生物抗原；干擾素（如I，II，III型）；多肽；淋巴因數如IL-2，IL-3，IL-4，IL-6， GM-CSF，干擾素-γ（IFN-γ）；激素例如胰島素，TRH（促甲狀腺激素釋放激素），MSH（促黑素細胞激素），類固醇激素如雄激素和雌激素；生長因數和集落刺激因數，如表皮生長因數（EGF），粒細胞巨噬細胞集落刺激因數（GM-CSF），轉化生長因數（TGF），如TGFα，TGFβ，胰島素和胰島素樣生長因數（IGF-I，IGF-II），G-CSF，M-CSF和GM-CSF（Burgess， Immunology Today 1984， 5， 155-158）；牛痘生長因數（VGF）；成纖維細胞生長因數（FGF）；小分子量的蛋白質；多肽；肽和肽激素，如鈴蟾肽，胃泌素，胃泌素釋放肽；血小板衍生的生長因數；白細胞介素和細胞因數，例如，白細胞介素-2（IL-2），白細胞介素-6（IL-6），白血病抑制因數，粒細胞巨噬細胞集落刺激因數（GM-CSF）；維生素，如葉酸；脫輔基蛋白和糖蛋白，如轉鐵蛋白（O'Keefe 等， J. Biol. Chem. 1985 260 932-937）；糖結合蛋白或脂蛋白，如凝集素；細胞營養傳遞分子；小分子抑制劑，如前列腺特異性膜抗原（PSMA）抑制劑和小分子酪氨酸激酶抑制劑（TKI），非肽或任何其它細胞結合分子或物質，如生物活性聚合物（Dhar， 等， Proc. Natl. Acad. Sci. 2008， 105， 17356-61），生物活性樹狀聚合物（Lee， 等， Nat. Biotechnol. 2005， 23， 1517-26； Almutairi， 等； Proc. Natl. Acad. Sci. 2009， 106， 685-90） ，納米顆粒（Liong， 等， ACS Nano， 2008， 19， 1309-12； Medarova， 等， Nat. Med. 2007， 13， 372-7； Javier， 等， Bioconjugate Chem. 2008， 19， 1309-12），脂質體（Medinai， 等， Curr. Phar. Des. 2004， 10， 2981-9）和病毒外殼（Flenniken， 等， Viruses Nanotechnol. 2009， 327， 71-93）。一般而言，如果適當的單克隆抗體是可用的，則較佳單克隆抗體作為細胞表面結合劑。
較佳地，T選自由下列組成之群組抗體，單鏈抗體、與靶細胞結合的抗體片段、單克隆抗體、單鏈單克隆抗體、或結合靶細胞的單克隆抗體片段、或嵌合抗體、與靶細胞結合的嵌合抗體片段、域抗體、與靶細胞結合的域抗體片段、模擬抗體的adnectins、 DARPins、淋巴因數、激素、維生素、生長因數、菌落刺激因數、營養轉運分子（轉鐵蛋白）、在白蛋白、聚合物、樹狀聚合物、脂質體、納米顆粒、囊泡或（病毒）衣殼上連接的細胞結合多肽、蛋白質或小分子。
更較佳地，細胞結合劑/分子T能夠抗以下細胞：腫瘤細胞、病毒感染細胞、微生物感染細胞、寄生蟲感染細胞、自身免疫細胞、活化的腫瘤細胞、骨髓細胞、活化的T細胞、B細胞、或黑色素細胞或任何表現下列抗原或受體的某種疾病的細胞： CD1、CD1a、CD1b、CD1c、CD1d、CD1e、CD2、CD3、CD3d、CD3e、CD3g、CD4、CD5、CD6、CD7、CD8、CD8a、CD8b、CD9、CD10、CD11a、CD11b、CD11c、CD11d、CD12w、CD13、CD14、CD15、CD16、CD16a、CD16b、CDw17、CD18、CD19、CD20、CD21、CD22、CD23、CD24、CD25、CD26、CD27、CD28、CD29、CD30、CD31、CD32、CD32a、CD32b、CD33、CD34、CD35、CD36、CD37、CD38、CD39、CD40、CD41、CD42、CD42a、CD42b、CD42c、CD42d、CD43、CD44、CD45、CD46、CD47、CD48、CD49b、CD49c、CD49c、CD49d、CD49f、CD50、CD51、CD52、CD53、CD54、CD55、CD56、CD57、CD58、CD59、CD60、CD60a、CD60b、CD60c、CD61、CD62E、CD62L、CD62P、CD63、CD64、CD65、CD65s、CD66、CD66a、CD66b、CD66c、CD66d、CD66e、CD66f、CD67、CD68、CD69、CD70、CD71、CD72、CD73、CD74、CD75、CD75s、CD76、CD77、CD78、CD79、CD79a、CD79b、CD80、CD81、CD82、CD83、CD84、CD85、CD85a、CD85b、CD85c、CD85d、CD85e、CD85f、CD85g、CD85g、CD85i、CD85j、CD85k、CD85m、CD86、CD87、CD88、CD89、CD90、CD91、CD92、CD93、CD94、CD95、CD96、CD97、CD98、CD99、CD100、CD101、CD102、CD103、CD104、CD105、CD106、CD107、CD107a、CD107b、CD108、CD109、CD110、CD111、CD112、CD113、CD114、CD115、CD116、CD117、CD118、CD119、CD120、CD120a、CD120b、CD121、CD121a、CD121b、CD122、CD123、CD123a、CD124、CD125、CD126、CD127、CD128、CD129、CD130、CD131、CD132、CD133、CD134、CD135、CD136、CD137、CD138、CD139、CD140、CD140a、CD140b、CD141、CD142、CD143、CD144、CD145、CDw145、CD146、CD147、CD148、CD149、CD150、CD151、CD152、CD153、CD154、CD155、CD156、CD156a、CD156b、CD156c、CD156d、CD157、CD158、CD158a、CD158b1、CD158b2、CD158c、CD158d、CD158e1、CD158e2、CD158f2、CD158g、CD158h、CD158i、CD158j、CD158k、CD159、CD159a、CD159b、CD159c、CD160、CD161、CD162、CD163、CD164、CD165、CD166、CD167、CD167a、CD167b、CD168、CD169、CD170、CD171、CD172、CD172a、CD172b、CD172g、CD173、CD174、CD175、CD175s、CD176、CD177、CD178、CD179、CD179a、CD179b、CD180、CD181、CD182、CD183、CD184、CD185、CD186、CDw186、CD187、CD188、CD189、CD190、CD191、CD192、CD193、CD194、CD195、CD196、CD197、CD198、CD199、CDw198、CDw199、CD200、CD201、CD202、CD202（a、b）、CD203、CD203c、CD204、CD205、CD206、CD207、CD208、CD209、CD210、CDw210a、CDw210b、CD211、CD212、CD213、CD213a 1、CD213a 2、CD214、CD215、CD216、CD217、CD218、CD218a、CD218、CD21b9、CD220、CD221、CD222、CD223、CD224、CD225、CD226、CD227、CD228、CD229、CD230、CD231、CD232、CD233、CD234、CD235、CD235a、CD235b、CD236、CD237、CD238、CD239、CD240、CD240ce、CD240d、CD241、CD242、CD243、CD244、CD245、CD246、CD247、CD248、CD249、CD250、CD251、CD252、CD253、CD254、CD255、CD256、CD257、CD258、CD259、CD260、CD261、CD262、CD263、CD264、CD265、CD266、CD267、CD268、CD269、CD270、CD271、CD272、CD273、CD274、CD275、CD276、CD277、CD278、CD279、CD281、CD282、CD283、CD284、CD285、CD286、CD287、CD288、CD289、CD290、CD291、CD292、 CD293、CD294、CD295、CD296、CD297、CD298、CD299、CD300、CD300a、CD300b、CD300c、CD301、CD302、CD303、CD304、CD305、CD306、CD307、CD307a、CD307b、CD307c、CD307d、CD307e、CD307f、CD308、CD309、CD310、CD311、CD312、CD313、CD314、CD315、CD316、CD317、CD318、CD319、CD320、CD321、CD322、CD323、CD324、CD325、CD326、CD327、CD328、CD329、CD330、CD331、CD332、CD333、CD334、CD335、CD336、CD337、CD338、CD339、CD340、CD341、CD342、CD343、CD344、CD345、CD346、CD347、CD348、CD349、CD350、CD351、CD352、CD353、CD354、CD355、CD356、CD357、CD358、CD359、CD360、CD361、CD362、CD363、CD364、CD365、CD366、CD367、CD368、CD369、CD370、CD371、CD372、CD373、CD374、CD375、CD376、CD377、CD378、CD379、CD381、CD382、CD383、CD384、CD385、CD386、CD387、CD388、CD389、CRIPTO、CRIPTO、CR、CR1、CRGF、CRIPTO、CXCR5、LY64、TDGF1、4-1BB、 APO2、ASLG659、BMPR1B、4-1BB、5AC、5T4 （Trophoblast糖蛋白，TPBG，5T4，WNT-活化抑制因數1或WAIF1），腺癌抗原，AGS-5，AGS-22M6，啟動素受體激酶1，AFP，AKAP-4，ALK，α 整合素，αvβ6，胺基肽酶N，澱粉樣蛋白β，雄激素受體，促血管新生蛋白因數2， 促血管新生蛋白因數3，膜聯蛋白A1，炭疽毒素保護性抗原，抗轉移蛋白受體，AOC3 （VAP-1）， B7-H3，炭疽桿菌，BAFF （B細胞啟動因數），BCMA，B淋巴瘤細胞，bcr-abl，蛙皮素，BORIS，C5，C242抗原，CA125（糖抗原125，MUC16），CA-IX（或CAIX，碳酸酐酶9）， CALLA，CanAg，犬紅斑狼瘡IL31，碳酸酐酶IX，心肌肌凝蛋白，CCL11（C-C 片段趨化介素11）， CCR4 （C-C趨化介素受體4）， CCR5， CD3E （ε）， CEA（癌胚抗原），CEACAM3，CEACAM5（癌胚抗原），CFD（因數D），Ch4D5，膽囊收縮素2 （CCK2R）， CLDN18 （Claudin-18），CLDN18.1 （Claudin-18.1），CLDN18.2 （Claudin-18.2），叢生因數A，cMet，CRIPTO ，FCSF1R（集落刺激因數1受體）， CSF2（集落刺激因數2，粒細胞-巨噬細胞集落刺激因數（GM-CSF）），CSP4， CTLA4（細胞毒性T淋巴細胞相關蛋白4），CTAA16.88腫瘤抗原，CXCR4，C-X-C趨化介素受體4，環狀ADP核糖核酸酶，細胞週期蛋白B1，CYP1B1，巨細胞病毒，巨細胞病毒糖蛋白B，Dabigatran，DLL3 （類Δ配位體 3）， DLL4 （類Δ配位體 4），DPP4（雙肽-肽酶4），DR5（死亡受體5），大腸桿菌shiga毒素類型-1，大腸桿菌shiga毒素類型-2，ED-B，EGFL7 （類EGF結構域蛋白7）， EGFR，EGFRII，EGFRvIII，內皮因數，內皮素B受體，內毒素，EpCAM（上皮細胞粘附分子），EphA2，Episialin，ERBB2（表皮生長因數受體2），ERBB3，ERG （TMPRSS2 ETS融合基因），大腸桿菌，ETV6-AML，FAP（成纖維細胞活化蛋白α），成纖維細胞表面抗原，FCGR1，甲胎蛋白，纖維蛋白II β鏈，纖連蛋白額外結構域-B，FOLR（葉酸受體），葉酸受體α，葉酸水解酶，Fos相關抗原1，呼吸道合胞病毒的F蛋白，捲曲受體，岩藻糖GM1，GD2神經節苷脂，G-28（細胞表面抗原糖脂），GD3獨特型，GloboH，Glypican 3，N-羥乙醯神經氨酸，GM3，GMCSF受體α鏈，生長分化因數，GP100，GPNMB（跨膜糖蛋白NMB），GUCY2C（鳥苷酸環化酶2C），鳥苷酸環化酶C（GC-C），腸鳥苷酸環化酶，鳥苷酸環化酶C受體，熱穩定腸毒素受體（hSTAR），熱休克蛋白，血凝素，乙肝表面抗原，乙型肝炎病毒，HER1（人類表皮生長因數受體1），HER2，HER2/neu，HER3（ERBB-3），IgG4，HGF/SF（肝細胞生長因數/分散因數），HHGFR，HIV-1，組蛋白複合物，HLA-DR（人類白細胞抗原），HLA-DR10，HLA-DRB，HMWMAA，人類絨毛膜促性腺激素，HNGF, 人類分散因數受體激酶，HPV E6/E7，Hsp90，hTERT，ICAM-1（細胞間粘附分子1），獨特型，IGF1R（IGF – 1，類胰島素生長因數1受體），IGHE，IFN-γ，流感血凝素，IgE，IgE Fc區，IGHE，白介素（包括IL-1， IL-2， IL-3， IL- 4，IL-5，IL-6，IL-6R，IL-7，IL-8，IL-9，IL-10，IL-11，IL-12，IL-13，IL-15，IL-17，IL-17A，IL-18，IL-19，IL-20，IL-21，IL-22，IL-23，IL-27，或IL-28），IL31RA，ILGF2（類胰島素生長因數2），整合蛋白（α4、α IIbβ 3、αvβ3、α 4β 7、α5β1、α6β4、α7β7、αllβ3、α5β5、αvβ5），干擾素γ誘導蛋白質，ITGA2，ITGB2，KIR2D，Kapa Ig，LCK，Le，Legumain，Lewis-Y抗原，LFA-1（淋巴細胞功能相關抗原1，CD11a）， LHRH，LINGO-1，脂磷壁酸，LIV1A，LMP2，LTA，MAD-CT-1，MAD-CT-2，MAGE-1，MAGE-2，MAGE-3，MAGE A1，MAGE A3，MAGE 4，MART1，MCP-1，MIF（巨噬細胞遷移抑制因數，或糖基抑制因數（GIF）），MS4A1（跨膜4結構域亞家族A成員1），MSLN （間皮素），MUC1（粘蛋白1，細胞表面相關（MUC1）或多態性上皮粘蛋白（PEM））， MUC1-KLH，MUC16 （CA125）， MCP1（單核細胞趨化蛋白1），MelanA/MART1，ML-IAP，MPG，MS4A1（跨膜4域亞家族A）， MYCN，髓磷脂相關糖蛋白，Myostatin，NA17，NARP-1，NCA-90（粒細胞抗原），Nectin-4 （ASG-22ME），NGF，神經細胞凋亡調控蛋白酶1，NOGO-A，Notch受體，核仁素，Neu致癌基因產物，NY-BR-1， NY-ESO-1，OX-40，OxLDL（氧化低密度脂蛋白），OY-TES1，P21，p53非突變異體，P97，Page4，PAP，抗（N-羥乙醯神經氨酸）抗體結合部位，PAX3，PAX5，PCSK9，PDCD1（PD-1、程式性細胞死亡蛋白1），PDGF-Rα （α血小板源生長因數受體），PDGFR-β，PDL-1，PLAC1，類PLAP睾丸鹼性磷酸酶，血小板衍生生長因數受體β，磷酸鈉聯合轉運體，PMEL 17，聚唾液酸，蛋白酶3 （PR1），前列腺癌，PS（磷脂醯絲氨酸），前列腺癌細胞，銅綠假單胞菌，PSMA，PSA，PSCA，狂犬病病毒糖蛋白，RHD（Rh多肽1（RhPI）），Rhesus因數，RANKL，RhoC，Ras突變，RGS5，ROBO4，呼吸道合胞病毒，RON，ROR1，肉瘤易位中斷點，SART3，Sclerostin，SLAMF7（SLAM成員7），Selectin P，SDC1（多配位體蛋白聚糖1），系統性紅斑狼瘡（a），生長調節素C，SIP（1-磷酸鞘氨醇），生長激素抑制素，精子蛋白17，SSX2，STEAP1（6-跨膜上皮前列腺抗原1），STEAP2，STn，TAG-72（腫瘤相關糖蛋白72），存活素，T細胞受體，T細胞跨膜蛋白，TEM1（腫瘤血管內皮標記1），TENB2，Tenascin C（TN-C），TGF-α，TGF-β（轉化生長因數β），TGF-β1，TGF-β2（轉化生長因數2），Tie（CD202b），Tie2，TIM-1（CDX-014），Tn，TNF，TNF-α，TNFRSF8，TNFRSF10B（腫瘤壞死因數受體超家族成員10 B），TNFRSF13B（腫瘤壞死因數受體超家族成員13B），TPBG（滋養細胞糖蛋白），TRAIL-R1（TNF相關壞死誘導配位體受體1），TRAILR2（死亡受體5 （DR5）），腫瘤相關的鈣信號傳感子2，腫瘤特異的糖基化MUC1，TWEAK受體，TYRP1（糖蛋白75），TRP-1 （Trop1），TRP-2 （Trop2），酪氨酸酶，VCAM-1， VEGF，VEGF-A，VEGF-2， VEGFR-1，VEGFR-2，vimentin，WT1，XAGE 1，表現胰島素生長因數受體的細胞，或表現表皮生長因數受體的細胞。
在另一個具體實施例中，細胞結合分子可以是選自由下列組成之群組以下的配位體或受體促效劑：葉酸衍生物（與葉酸受體結合、在卵巢癌和其他惡性腫瘤中超表現的蛋白質） （Low，PS 等 2008，Acc. Chem. Res. 41，120-9）、麩胺酸脲衍生物（與前列腺特異性膜抗原結合、前列腺癌細胞的表面標記） （Hillier，SM等，2009，Cancer Res. 69，6932-40）；生長抑制素（也稱為生長激素抑制激素（GHIH）或生長激素釋放抑制因數（SRIF）或生長激素釋放抑制激素）及其類似物，如奧曲肽（Sandostatin ）和蘭瑞肽（Somatuline）（特別是用於神經內分泌腫瘤，產生GH的垂體腺瘤、副神經節瘤、非功能性垂體腺瘤、嗜鉻細胞瘤）（Ginj，M.，等，2006 ，Proc. Natl. Acad. Sci. USA 103，16436-41），以下瘤中生長激素抑制素受體亞型（sst1、sst2、sst3、sst4和sst5）：分泌GH的垂體腺瘤（Reubi JC，L和olt，AM 1984 J. Clin. Endocrinol Metab 59： 1148–51； Re ubi JC，L和olt AM 1987 J Clin Endocrinol Metab 65： 65–73； Moyse E，等，J Clin Endocrinol Metab 61： 98–103），胃腸胰腺腫瘤（Reubi JC，等，1987 J Clin Endocrinol Metab 65 ： 1127–34； Reubi，J. C，等，1990 Cancer Res 50： 5969–77），嗜鉻細胞瘤（Epel-baum J，等 1995 J Clin Endocrinol Metab 80：1837–44； Reubi J C等，1992 J Clin Endocrinol Metab 74： 1082–9），神經母細胞瘤（Prevost G，1996 Neuroendocrinology 63：188–197； Moertel，C. L，等 1994 Am J Clin Path 102：752–756），甲狀腺髓樣癌（Reubi，J. C，等 1991 Lab Invest 64：567–573） ，小細胞肺癌（Sagman U，等，1990 Cancer 66：2129–2133），腦膜瘤、成神經管細胞瘤或膠質瘤（Reubi JC，等 1986 J Clin Endocrinol Metab 63： 433–8； Reubi JC，等 1987 Cancer Res 47： 5758–64； Fruhwald，M. C，等 1999 Pediatr Res 45： 697–708 ），乳腺癌（Reubi JC，等 1990 Int J Cancer 46： 416–20； Srkalovic G，等 1990 J Clin Endocrinol Metab 70： 661–669），淋巴瘤（Reubi JC，等 1992，Int J Cancer50： 895–900），腎細胞癌（Reubi JC，等 1992，Cancer Res 52： 6074–6078），間充質腫瘤（Reubi JC，等 1996 Cancer Res 56： 1922–31）， 前列腺癌 （Reubi J C，等 1995，J. Clin. Endocrinol Metab 80： 2806–14； 等 1989，Prostate 14：191–208； Halmos G，等 J. Clin. Endo-crinol Metab 85： 2564–71），卵巢癌（Halmos，G，等，2000 J Clin Endocrinol Metab 85： 3509–12； Reubi JC，等 1991 Am J Pathol 138：1267–72），胃癌（Reubi JC，等 1999，Int J Cancer 81： 376–86； Miller，G. V，1992 Br J Cancer 66： 391–95），肝癌（Kouroumalis E，等 1998 Gut 42： 442–7； Reubi J C，等 1999 Gut 45： 66–774） 及鼻咽癌（Loh K. S，等，2002 Virchows Arch 441： 444–8）；芳香磺醯胺（碳酸酐酶IX特異性） （缺氧和腎細胞癌的標記） （Neri，D.，等，Nat. Rev. Drug Discov. 2011，10，767-7）；垂體腺苷酸環化酶啟動肽（PACAP） （PAC1） （用於嗜鉻細胞瘤和副神經節瘤）；血管活腸肽（VIP）及其受體亞型（VPAC1，VPAC2）；α-黑素細胞刺激素（α-MSH）受體；膽囊收縮素（CCK）或胃泌素受體及其受體亞型（CCK1 （以前稱為CCK-A） 和CCK2；鈴蟾肽（Pyr-Gln-Arg-Leu-Gly-Asn-Gln-Trp-Ala-Val-Gly-His-Leu-Met-NH 2）或胃泌素釋放肽（GRP）及其受體子類（BB1，GRP受體子類（BB2）、BB3和BB4） （Ohlsson，B.，等，1999，Scand. J. Gastroenterology 34（12）： 1224–9； Weber，HC，2009，Cur. Opin. Endocri. Diab. Obesity 16（1）： 66–71，Gonzalez N，等，2008，Cur. Opin. Endocri. Diab. Obesity 15（1），58-64 ）；神經降壓素受體及其受體亞型（NTR1，NTR2，NTR3）；物質P受體及其受體亞型（例如神經膠質腫瘤的NK1受體，Hennig I M，等 1995 Int. J. Cancer 61，786–792）；神經肽Y（NPY）受體及其受體亞型（Y1–Y6）；歸巢肽包括RGD（Arg-Gly-Asp ）、NGR （Asn-Gly-Arg）、二聚和多聚環狀RGD肽（如cRGDfV） （Laakkonen P，Vuorinen K. 2010，Integr Biol （Camb）. 2（7–8）： 326–337； Chen K，Chen X. 2011，Theranostics. 1：189–200； Garanger E，等，Anti-Cancer Agents Med Chem. 7 （5）： 552–558； Kerr，JS 等，Anticancer Research，19（2A） ，959-968； Thumshirn，G，等，2003 Chem. Eur. J. 9，2717- 2725），及TAASGVRSMH或LTLRWVGLMS （硫酸軟骨素蛋白多糖NG2受體）和F3肽（與細胞表面表現的核仁素受體結合的31個胺基酸肽）（Zitzmann，S.，2002 Cancer Res.，62，18，5139–5143； Temminga，K.，2005，Drug Resistance Updates， 8，381–402； P. Laakkonen 和 K. Vuorinen，2010 Integrative Biol，2（7-8），326–337； M. A. Burg，1999 Cancer Res.，59（12），2869–2874； K. Porkka 等 2002，Proc. Nat. Acad. Sci. USA 99（11），7444-9）；細胞穿透肽（CPPs） （Nakase I，等，2012，J. Control Release. 159（2）,181–188）；肽激素，例如促黃體激素釋放激素（LHRH）的促效劑和拮抗劑，促性腺激素釋放激素（GnRH）促效劑，藉由靶向卵泡刺激素（FSH）和促黃體激素（LH）以及睾酮產生而作用，如布舍瑞林（Pyr-His-Trp-Ser-Tyr-D-Ser （OtBu）-Leu-Arg-Pro-NHEt）、戈那瑞林（Pyr-His-Trp-Ser-Tyr-Gly-Leu-Arg-Pro-Gly-NH 2）、戈舍瑞林（Pyr-His- Trp-Ser-Tyr-D-Ser（OtBu）-Leu-Arg-Pro-AzGly-NH 2）、組氨瑞林（Pyr-His-Trp-Ser-Tyr-D-His（N-Bn）-Leu -Arg-Pro-NHEt）、亮丙瑞林（Pyr-His-Trp-Ser-Tyr-D-Leu-Leu-Arg-Pro-NHEt）、 那法瑞林（Pyr-His-Trp-Ser-Tyr -2Nal-Leu-Arg-Pro-Gly-NH 2）、曲普瑞林（Pyr-His-Trp-Ser-Tyr-D-Trp-Leu-Arg-Pro-Gly-NH 2）、納法瑞林、地洛林、阿貝瑞林（Ac-D-2Nal-D-4-chloroPhe-D-3-（3-pyridyl）Ala-Ser-（N-Me）Tyr-D-Asn-Leu-isopropylLys-Pro-DAla-NH 2）、西曲瑞克（Ac-D-2Nal-D-4-chloro-Phe-D-3-（3-pyridyl）Ala-Ser-Tyr-D-Cit-Leu-Arg-Pro-D-Ala-NH 2）、地加瑞克（Ac-D-2Nal-D-4-chloroPhe-D-3-（3-pyridyl）Ala-Ser-4-aminoPhe（L-hydroorotyl）-D-4-aminoPhe（carba-moyl）-Leu-isopropylLys-Pro-D-Ala-NH 2）和甘乃利（Ac-D-2Nal-D-4-chloroPhe-D-3-（3-pyridyl）Ala-Ser-Tyr-D-（N9，N10-diethyl）-homoArg-Leu-（N9，N10-diethyl）-homoArg-Pro-D-Ala-NH 2） （Thundimadathil，J. ，J. Amino Acids，2012，967347，doi:10. 1155/2012/967347； Boccon-Gibod，L.； 等，2011，Therapeutic Advances in Urology 3（3）： 127–140； Debruyne，F.，2006，Future Oncology，2（6），677–696； Schally A. V； Nagy，A. 1999 Eur J Endocrinol 141：1–14； Koppan M，等 1999 Prostate 38：151–158）；模式識別受體（PRRs），如Toll樣受體（TLRs）、C型凝集素和結節狀的受體（NLRs） （Fukata，M. 等，2009，Semin. Immunol. 21，242–253； Maisonneuve，C.等，2014，Proc. Natl. Acad. Sci. USA 111，1–6； Botos，I.等，2011，Structure 19，447–459； Means，T K等，2000，Life Sci. 68，241–258），其分子量範疇從小分子（咪喹莫特、鳥嘌和腺苷類似物）到大型和複雜的生物大分子，如脂多糖（LPS）、核酸（CpG DNA，polyI：C）和脂肽（Pam3CSK4） （Kasturi，S P等，2011，Nature 470，543–547； Lane，T.，2001，JR Soc. Med. 94，316； Hotz，C.，和 Bourquin，C.，2012，Oncoimmunology 1，227−228； Dudek，A Z 等，2007，Clin . Cancer Res. 13，7119–25）；降鈣素受體，它是一種32-胺基酸神經肽，主要藉由其對破骨細胞和腎臟的作用參與鈣水準的調節（Zaidi M，等，1990 Crit Rev Clin Lab Sci 28，109–174； Gorn，A H，等 1995 J Clin Invest 95：2680–91）；整合素受體及其受體子類（如αVβ1，αVβ3，αVβ5，αVβ6，α6β4，α7β1 ，αLβ2，αIIbβ3等），通常在血管生成中起重要作用，在多種細胞，特別是破骨細胞、內皮細胞和腫瘤細胞的表面表現（Ruoslahti，E. 等，1994 Cell 77 ，477-8； Albelda，SM 等，1990 Cancer Res.，50，6757-64）。短肽，GRGDSPK和環狀RGD五肽，如環（RGDfV） （L1）及其衍生物（環（-N（Me）R-GDfV）、環（R-Sar-DfV）、環-（RG- N（Me）D-fV）、環（RGD-N（Me）fV）、環（RGDf-N（Me）V-）（西侖吉肽）） 具有對整合素受體高親和力（Dechantsreiter，MA 等，1999 J. Med. Chem. 42，3033-40，Goodman，SL，等，2002 J. Med. Chem. 45，1045-51）。
細胞結合分子或配位體或細胞受體促效劑可以是基於Ig和非基於Ig的蛋白質分子。基於Ig的框架結構可以選自由下列組成之群組但不限於，納米抗體（VHH的衍生物 （駱駝科動物Ig）） （Muyldermans S.，2013 Annu Rev Biochem. 82，775–97）；結構域抗體（dAb ，VH或VL結構域的衍生物）（Holt，L. J，等，2003，Trends Biotechnol. 21，484–90）；雙特異性T細胞接頭（BiTE、雙特異性雙抗體） （Baeuerle，P. A 等，2009，Curr. Opin. Mol. Ther. 11，22–30）；雙重親和力復位向劑（DART，雙特異性雙抗體）（Moore PA P 等. 2011，Blood 117（ 17），4542–51）；四價串聯抗體（TandAb，二聚雙特異性雙抗體） （Cochlovius，B 等. 2000，Cancer Res. 60（16）：4336–4341）。非Ig框架結構可以選自由下列組成之群組，但不限於，Anticalin（Lipocalins的衍生物） （Skerra A. 2008，FEBS J.，275（11）： 2677–83； Beste G 等，1999 Proc. Nat. Acad. USA. 96（5）：1898–903； Skerra，A. 2000 Biochim Biophys Acta，1482（1-2）： 337–50； Skerra，A. 2007，Curr Opin Biotechnol. 18（4）： 295–304； Skerra，A. 2008，FEBS J. 275（11）：2677–83）；Adnectin （第10個FN3 （纖連蛋白）） （Koide，A 等，1998 J. Mol. Biol.，284（4）：1141 –51； Batori V，2002，Protein Eng. 15（12）： 1015–20； Tolcher，A. W，2011，Clin. Cancer Res. 17（2）： 363–71； Hackel，B. J，2010，Protein Eng. Des. Sel. 23（4）： 211–19）；設計的錨蛋白重複蛋白（DARPins） （錨蛋白重複（AR）蛋白的衍生物） （Boersma，Y L 等，2011 Curr Opin Biotechnol. 22（6）： 849–57），例如DARPin C9、DARPin Ec4 及DARPin E69_LZ3_E01 （Winkler J 等，2009 Mol Cancer Ther. 8（9），2674–83； Patricia MK. M. 等，Clin Cancer Res. 2011； 17（1）：100–10； Boersma Y. L等，2011 J. Biol. Chem. 286（48），41273–85）；Avimer（域A/低密度脂蛋白（LDL） 受體）（Boersma Y. L，2011 J. Biol. Chem. 286（48）： 41273–41285； Silverman J 等，2005 Nat. Biotechnol.，23（12）：1556–61）。
專利申請的細胞結合分子/配位體或細胞受體促效劑的小分子結構的例子如下：LB01（葉酸）、LB02（PMSA配位體）、LB03（PMSA配位體）、LB04（PMSA配位體）、 LB05 （生長抑制素）、LB06（生長抑制素）、LB07（奧曲肽、生長抑制素類似物）、LB08（蘭瑞肽、生長抑制素類似物）、LB09（伐普肽（Sanvar）、生長抑制素類似物）、LB10（CAIX配位體）、LB11（CAIX配位體） 、LB12（胃泌素釋放肽受體（GRPr）、MBA）、LB13（促黃體激素釋放激素（LH-RH）和GnRH配位體 ）、LB14（促黃體激素釋放激素（LH-RH）和GnRH配位體）、LB15（ GnRH拮抗劑、Abarelix）、LB16（鈷胺素、維生素B12類似物）、LB17（鈷胺素、維生素B12類似物）、LB18（用於αvβ3整聯蛋白受體、環狀RGD五肽）、LB19（VEGF受體的異二價肽配位體）、LB20（神經髓質素B）、LB21（蛙皮素，作用於G蛋白偶聯受體）、LB22（TLR2，作用於類Toll受體）、LB23（作用於雄性激素受體）、LB24（西侖吉肽或環（-RGDfV-）結合物，作用於α v整合素受體）、LB23（氟可體松）、LB25（利福布汀類似物）、LB26（利福布汀類似物）、LB27（利福布汀類似物）、LB28（氟氫可的松）、LB29（地塞米松）、LB30（丙酸氟替卡松）、LB31（丙酸倍氯米松）、LB32（醋酸曲安奈德）、LB33（潑尼松）、LB34 （潑尼松龍 (Prednisolone)）、LB35（甲基強的松龍）、LB36（倍他米松）、LB37（伊立替康類似物）、LB38（克唑替尼類似物）、LB39 （硼替佐米類似物）、LB40（卡菲佐米類似物）、LB41（卡非佐米類似物）、LB42（亮丙瑞林類似物）、LB43（曲普瑞林類似物）、LB44（克林黴素）、LB45（利拉魯肽類似物）、LB46（半長春新鹼類似物）、 LB47（瑞他帕林類似物）、LB48（丁布林類似物）、LB49（長春鹼類似物）、LB50（利西森肽類似物）、LB51（奧西丁尼類似物）、LB52（核苷類似物）、LB53（厄洛替尼類似物）和LB54（拉帕替尼類似物），其結構如下所示：
Figure 02_image1021
LB01 （葉酸）,
Figure 02_image1023
LB02 （PMSA配位體）,
Figure 02_image1025
LB03 （PMSA 配位體）,
Figure 02_image1027
LB04 （PMSA 配位體）,
Figure 02_image1029
LB05 （生長激素抑制素）,
Figure 02_image1031
LB06 （生長激素抑制素）,
Figure 02_image1033
LB07 （奧曲肽、生長抑制素類似物）,
Figure 02_image1035
LB08 （蘭肽、生長抑制素類似物）,
Figure 02_image1037
LB09 （氨肽 （Sanvar）、生長抑制素類似物）,
Figure 02_image1039
LB10 （CAIX配位體）,
Figure 02_image1041
LB11 （CAIX 配位體）,
Figure 02_image1043
LB12 （胃泌素釋放肽受體（GRPr），MBA）,
Figure 02_image1045
LB13 （促黃體激素釋放激素（LH-RH）和促性腺激素釋放激素GnRH配位體）,
Figure 02_image1047
LB14 （促黃體激素釋放激素（LH-RH）和促性腺激素釋放激素GnRH配位體）,
Figure 02_image1049
LB15 （GnRH拮抗物、阿巴瑞克）,
Figure 02_image1051
R 19是5’-去氧腺苷，Me, OH, CN; LB16 （鈷胺素，維生素B12類似物）,
Figure 02_image1053
R 19是5’-去氧腺苷，Me, OH, CN; LB17 （鈷胺素，維生素B12類似物）,
Figure 02_image1055
LB18 （環RGD五肽，作用於αvβ3整聯蛋白受體）,
Figure 02_image1057
LB19 （異源二價肽配位體偶聯物，作用於血管內皮生長因數VEGF受體）,
Figure 02_image1059
LB20 （神經髓質素B）,
Figure 02_image1061
LB21 （蛙皮素偶聯物，作用於G蛋白偶聯受體），
Figure 02_image1063
LB22 （TLR2偶聯物，作用於類Toll受體），
Figure 02_image1065
LB23 （雄激素受體），
Figure 02_image1067
LB24 （西倫吉肽/環（-RGDfV-） 偶聯物，作用於αv整合素受體）
Figure 02_image1069
LB25 （ 利福布汀類似物），
Figure 02_image1071
LB26 （利福布汀類似物），
Figure 02_image1073
LB27 （利福布汀類似物），
Figure 02_image1075
LB28 （ 氟氫可的松），
Figure 02_image1077
LB29 （地塞米松），
Figure 02_image1079
LB30 （丙酸氟替卡松）,
Figure 02_image1081
LB31 （倍氯米松丙酸酯）,
Figure 02_image1083
LB32 （曲安奈德）,
Figure 02_image1085
LB33 （潑尼松）,
Figure 02_image1087
LB34 （潑尼松龍）,
Figure 02_image1089
LB35 （甲基強的松龍）,
Figure 02_image1091
LB36 （倍氟美松）,
Figure 02_image1093
LB37 （伊立替康類似物）,
Figure 02_image1095
LB38 （ 克唑替尼類似物）,
Figure 02_image1097
LB39 （硼替佐米類似物），其中Y 5是N、CH、C（Cl）、C（CH 3）或C（COOR 1）；R 1是H、C 1-C 6烷基、 C 3-C 8芳基；
Figure 02_image1099
LB40 （卡菲佐米類似物）,
Figure 02_image1101
LB41 （卡菲佐米類似物）,
Figure 02_image1103
LB42 （亮丙瑞利類似物）,
Figure 02_image1105
LB43 （曲普瑞林類似物）,
Figure 02_image1107
LB44 （克林黴素）,
Figure 02_image1109
LB45 （利拉魯肽類似物）,
Figure 02_image1111
LB46 （索馬魯肽類似物）,
Figure 02_image1113
LB47 （瑞他帕林類似物）,
Figure 02_image1115
LB48 （丁布林類似物）,
Figure 02_image1117
LB49 （長春鹼類似物）,
Figure 02_image1119
LB50 （利西森肽類似物）,
Figure 02_image1121
LB51 （奧西丁尼類似物）,
Figure 02_image1123
LB52 （核苷類似物）,
Figure 02_image1125
LB53 （埃羅替尼類似物）,
Figure 02_image1127
LB54 （拉帕替尼類似物）， 其中 “
Figure 02_image1129
” 是連接子的連接位置；X 4和 Y 1獨立地是O、 NH、 NHNH、 NR 1、 S、 C（O）O、 C（O）NH、 OC（O）NH、 OC（O）O、 NHC（O）NH、 NHC（O）S、 OC（O）N（R 1）、 N（R 1）C（O）N（R 1）、 CH 2、 C（O）NHNHC（O）和 C（O）NR 1；X 1是H、 CH 2、 OH、 O、 C（O）、 C（O）NH、 C（O）N（R 1）、 R 1、 NHR 1、 NR 1、 C（O）R 1或C（O）O；X 5是H、 CH 3、F或Cl；M 1和M 2獨立地是H、 Na、 K、 Ca、 Mg、 NH4、 N（R 1R 1’R 2R 3）；R 1、 R 1’、R 2和 R 3定義同式（I）。
偶聯物的製備
在本發明的另一態樣，較佳地，合成的喜樹鹼類似物含有連接子L和反應基團Lv，如式(VI) ， （VII）， （VIII）， （IX）和 （X）所示，可以容易地與細胞結合分子T或經修飾的細胞結合分子T 反應，分別形成如式（I）， （II）， （III）， （IV） 和（V）的偶聯物：
Figure 02_image1131
（VI）
Figure 02_image1133
（VII）
Figure 02_image1135
（VIII）
Figure 02_image1137
（IX）
Figure 02_image1139
（X） 其中 R 1， R 2， R 3， R 4， R 5， L， X 和 m與前文式 （I）中的定義相同； Lv為一反應官能團，可以與細胞結合分子上的硫醇、胺、羧酸、硒醇、苯酚或羥基發生反應。 它包括，但不限於，鹵素（如氟、氯、溴、碘）；馬來醯亞胺基；甲磺醯基；甲苯磺醯基；三氟甲磺醯基；硝基苯氧基；N-羥基琥珀醯亞胺基（NHS）；苯氧基；二硝基苯氧基；五氟苯氧基；四氟苯氧基；三氟苯氧基；二氟苯氧基；一氟苯氧基；五氯苯氧基；咪唑基；一氯苯氧基；二氯苯氧基；三氯苯氧基；四氯苯氧基；N-（苯并三唑基）氧基；2-乙基-5-苯基異噁唑基-3′-磺醯基；苯氧二唑基磺醯基；2-乙基-5-苯基異噁唑基；苯氧二唑基；噁二唑基；不飽和碳（碳-碳、碳-氮、碳-硫、碳-磷、硫-氮、磷-氮、氧-氮或碳-氧之間的雙鍵或三鍵）；或與Mitsunobu反應試劑作用生成的中間物。縮合劑的例子如下： 1-乙基-（3-二甲基胺基丙基）碳二亞胺（EDC）、二環己基碳二亞胺（DCC）、N，N'-二異丙基碳二亞胺 （DIC）、N-環己基-N' - （2-嗎啉代- 乙基）碳二亞胺甲基對甲苯磺酸鹽（CMC或CME-CDI）、1，1'-羰基二咪唑（CDI）、（O-（苯并三唑-1- 基）-N，N，N’，N’-四甲基脲四氟硼酸鹽（TBTU）、N，N，N'，N'-四甲基-氧-（1H-苯并三唑-1-基）-六氟磷酸銨（HBTU）、（ 苯并三唑-1-基氧基）三（二甲基胺基）-六氟磷酸鹽（BOP）、（苯并三唑-1-基氧基）三吡咯啶基六氟磷酸鹽（PyBOP）、氰基膦酸二乙酯（DEPC）、氯-N，N，N'，N'-四甲基甲脒六氟磷酸鹽、1- [雙（二甲基胺基）亞甲基] -1H-1，2，3-三唑并[4，5-b]吡啶3-氧六氟磷酸鹽（HATU）、1-[（二甲胺基）（嗎啉代）亞甲基]-1H-[1，2，3]三唑并[4，5-b]吡啶-1-鎓3-氧六氟磷酸鹽（HDMA）、2-氯-1，3-二甲基-咪唑六氟磷酸鹽（CIP）、六氟磷酸氯代吡咯烷酮鎓（PyCloP）、氟- N，N，N'，N'-雙（四亞甲基）甲脒六氟磷酸鹽（BTFFH）、N，N，N'，N'-四甲基-S-（1-側氧基-2-吡啶基）硫脲六氟磷酸鹽、O-（2-側氧基-1（2H）吡啶基）- N，N，N'，N'- 四甲基脲四氟硼酸鹽（TPTU）、S-（1-側氧基-2-吡啶基）N，N，N'，N'-四甲基硫脲四氟硼酸鹽、O-[（乙氧基羰基）- 氰基甲基胺基] - N，N，N'，N'-六氟磷酸四甲基脲（HOTU）、（1-氰基-2-乙氧基-2-側氧基乙基胺基氧基）二甲胺基-嗎啉代-六氟磷酸鹽（COMU） 、O-（苯并三唑-1-基）- N，N，N'，N'-雙（四亞甲基）六氟磷酸鹽（HBPyU）、N-苄基-N'-環己基-碳二亞胺（有或沒有聚合物結合）、二吡咯啶基（N-琥珀醯亞胺基氧基）碳鎓六氟磷酸鹽（HSPyU）、氯二吡咯啶基六氟磷酸鹽（PyClU） 、2-氯-1，3-二甲基咪唑四氟硼酸鹽（CIB）、（苯并三唑-1-基氧基）二呱啶碳六氟磷酸鹽（HBPipU） 、O -（6-氯苯并三唑-1-基）- N，N，N'，N'-四甲基脲四氟硼酸鹽（TCTU）、溴代（二甲基胺基）-六氟磷酸鹽（BroP）、丙基膦酸酐（PPACA、T3P）、2-嗎啉代乙基異氰化物（MEI）、N，N，N'，N'-四甲基-氧-（N-琥珀醯亞胺基）六氟磷酸鹽（ HSTU）、2-溴-1-乙基- 吡啶鎓四氟硼酸鹽（BEP ）、O-[（乙氧基羰基）氰基- 亞甲基胺基] - N，N，N'，N'-四甲基脲四氟硼酸鹽（TOTU）、4-（4，6-二甲氧基-1，3，5-三嗪-2-基）-4-甲基嗎啉氯化物（MMTM、DMTMM）、N，N，N'，N'-四甲基-氧-（N -琥珀醯亞胺基） 脲四氟硼酸（TSTU）、O-（3，4-二氫-4-側氧基-1，2，3-苯并三嗪-3-基）-N，N，N’，N’-四甲基脲四氟硼酸鹽（TDBTU）、 1，1'-（偶氮二羰基）-二呱啶（ADD）、二-（4-氯苄基）偶氮二羧酸酯（DCAD）、偶氮二羧酸二第三丁酯（DBAD）、偶氮二羧酸二異丙酯（DIAD）、偶氮二羧酸二乙酯（DEAD）。另外，Lv可以是酸酐，酸自身縮合或與其它C 1-C 8酸酐作用形成的酸酐； 較佳的Lv包含以下物質：鹵化物（如氟化物、氯化物、溴化物和碘化物）、甲磺醯基（mesyl）、甲苯磺醯基（tosyl）、三氟甲基磺醯基（triflate） 、三氟甲基磺酸酯、硝基苯氧基、N-琥珀醯亞胺基（NHS）、苯氧基；二硝基苯氧基；五氟苯氧基、四氟苯氧基、三氟苯氧基、二氟苯氧基、一氟苯氧基、五氯苯氧基、1H-咪唑-1-基、一氯苯氧基、二氯苯氧基、三氯苯氧基、四氯苯氧基、N-（苯并三唑基）氧基、2-乙基-5-苯基異噁唑-3′- 磺醯基、苯基噁二唑-磺醯基、2-乙基-5-苯基異噁唑基、苯基噁二唑基、噁二唑基、不飽和碳（碳-碳、碳-氮、碳-硫、碳-磷、硫-氮、磷-氮、氧-氮或碳-氧之間的雙鍵或三鍵），或以下結構之一：
Figure 02_image1141
二硫化物；
Figure 02_image1143
鹵代乙醯基；
Figure 02_image1145
醯鹵；
Figure 02_image1147
N-羥基琥珀醯亞胺酯；
Figure 02_image1149
馬來醯亞胺；
Figure 02_image1151
單取代馬來醯亞胺；
Figure 02_image1153
二取代馬來醯亞胺；
Figure 02_image1155
單取代的琥珀醯亞胺；
Figure 02_image1157
二取代馬來醯亞胺；
Figure 02_image1159
取代馬來酸； -CHO 醛；
Figure 02_image1161
乙烯磺醯基；
Figure 02_image1163
丙烯醯基；
Figure 02_image1165
2-（甲苯磺醯氧基）乙醯基；
Figure 02_image1167
2-（甲磺醯氧基）乙醯基；
Figure 02_image1169
2-（硝基苯氧基）乙醯基；
Figure 02_image1171
2-（二硝基苯基）乙醯基；
Figure 02_image1173
2-（氟代苯氧基）-乙醯基；
Figure 02_image1175
2-（二氟苯氧基）-乙醯基；
Figure 02_image1177
2-（（三氟甲基磺醯基）氧基）乙醯基；
Figure 02_image1179
酮或醛，
Figure 02_image1181
2-（五氟苯氧基）乙醯基；
Figure 02_image1183
甲基碸苯基噁二唑  （ODA）；
Figure 02_image1185
，
Figure 02_image1187
酸酐，
Figure 02_image1189
烷氧基氨；
Figure 02_image1191
疊氮基，
Figure 02_image1193
炔基， 或
Figure 02_image1195
醯肼；其中， X 1’ 是F、Cl、Br、I 或Lv 3；X 2’ 是O、NH、N（R1）或CH 2；R 3是H、芳基或雜芳基，其中一個或多個H原子可獨立地被-R 1、 - 鹵素、-OR 1、-SR 1、-NR 1R 2、- NO 2、-S（O）R 1、-S（O） 2R 1或-COOR 1取代；Lv3是離去基團，選自由下列組成之群組F、Cl、 Br、I；硝基苯氧基；N-羥基琥珀醯亞胺（NHS）；苯氧基；二硝基苯氧基；五氟苯氧基；四氟苯氧基；二氟苯氧基；單氟苯氧基；五氯苯氧基；三氟甲磺醯基；咪唑基；二氯苯氧基；四氯苯氧基； 1-羥基苯并三唑基；甲苯甲磺醯基；甲磺醯基；2-乙基-5-苯基異噁唑-3′-磺醯基，酸酐或與其它酸酐作用形成的酸酐，例如乙酸酐、甲酸酐；或與多肽縮合試劑、Mitsunobu反應試劑作用生成的中間物。
在偶聯的過程中，在與喜樹鹼類似物偶聯之前，藉由使用含雙功能團的連接子，細胞結合分子可以被修飾，連接更具特異性的多肽，蛋白，藥物分子或其他功能性分子。這些含雙功能團的連接子包括連接胺-非選擇性功能團的連接子（琥珀醯亞胺酯（NHS酯）-二氮環丙烯（SDA），琥珀醯亞胺酯-疊氮化物），連接胺-巰基的連接子（NHS酯-馬來醯亞胺，NHS酯-吡啶二巰基，NHS酯-鹵代乙醯基），連接巰基-糖的連接子（馬來醯亞胺-醯肼，吡啶二巰基-醯肼），連接羥基-巰基的連接子（異氰酸酯-馬來醯亞胺），連接胺-DNA的連接子（NHS酯/補骨脂素）和連接胺-羧基的連接子（碳二亞胺）等。
在使用琥珀醯亞胺（NHS）-二氮環丙烯（SDA）連接子時，連接子上的NHS酯可以首先和細胞結合分子骨架上的胺反應（在pH為6-9的緩衝溶液裡），形成一個穩定的醯胺鍵。然後，在波長為330-370nm的長波照射下，二氮環丙烯被活化並產生卡賓活性中間物，該中間物再和特異性多肽、蛋白或者其他功能性分子上的胺反應。這兩步反應的次序也可以改變為：先讓功能性分子上的胺和連接子上的NHS酯反應，然後再在光（330-370 nm）的照射下與細胞結合分子進行化學反應。琥珀醯亞胺（NHS）-二氮環丙烯（SDA）連接子也可以是可斷裂的（就像SDAD連接子一樣，內部包含雙硫鍵）。
Figure 02_image1197
在使用NHS酯/疊氮化物連接子時， NHS酯可以首先和細胞結合分子骨架上的胺在pH6-9的緩衝溶液裡反應，形成一個穩定的醯胺鍵。然後，藉由Huisgen疊氮-炔環加成反應，特定的多肽、蛋白質或其他功能性分子上的炔基和交聯劑另一端的疊氮進行反應，並形成1,2,3-三唑（點擊化學）。另外， NHS酯也可以先與功能性分子上的胺在pH 為6-9的緩衝溶液裡反應，形成穩定的醯胺鍵，然後結合分子上的炔基與連接子另一端的疊氮基團進行Huisgen疊氮-炔環加成反應，並形成1,2,3-三唑連接。
Figure 02_image1199
在胺-巰基連接時， NHS酯可以首先和細胞結合分子骨架上的胺在pH=6~9的緩衝溶液裡反應 ，形成一個穩定的醯胺鍵。然後，在pH為4.5~8.5 的條件下，更具特異性的多肽、蛋白質或其他功能性分子上的巰基和連接子另一端的馬來醯亞胺，吡啶二巰基或鹵代乙醯基反應，並形成硫醚或雙硫鍵。偶聯反應的次序也可以根據情況改變。例如，功能性分子上的胺基也可以首先和連接子反應生成醯胺鍵，然後再與細胞結合分子上的巰基進行反應。以及，在pH為4.5~7.0的條件下，功能性分子上的巰基可以先與連接子反應形成硫醚或者雙硫鍵，然後再在pH為6~9的條件下與細胞結合分子上的胺基反應形成醯胺鍵。
Figure 02_image1201
在巰基-糖連接時，在pH 為4.5~8的條件下，細胞結合分子上的巰基可以首先與馬來醯亞胺或吡啶二巰基反應形成硫醚或雙硫鍵。然後，功能性分子上的羰基（醛/酮）再與醯肼反應生成腙鍵。除此以外，在pH為4.5~8的條件下，功能分子上的巰基也可以首先和連接子反應形成硫醚或者雙硫鍵，然後再與細胞結合分子上的糖、氧化糖或者羰基（醛/酮）反應生成腙鍵。
Figure 02_image1203
在羥基-巰基連接時，在pH 為6~8的條件下，細胞結合分子上的巰基可以首先和馬來醯亞胺或者吡啶二巰基反應生成硫醚或雙硫鍵。然後，在pH為8~9的條件下，再讓功能性分子上的羥基與異氰酸酯反應生成胺基甲酸酯。另外，功能性分子上的巰基也可以先和連接子在pH 為6~8的條件下反應生成硫醚或雙硫鍵。然後，再與細胞結合分子上的羥基在pH為8~9的條件反應生成胺基甲酸酯。
Figure 02_image1205
在本發明的另一個態樣，用於本發明中的抗體的生產包括體內或體外方法或其組合。生產多克隆抗受體肽抗體的方法在業內是公知的，例如美國專利4,493,795 中所述。通常是藉由將骨髓瘤細胞，與已經用所需抗原免疫的小鼠的脾細胞融合，來製備單克隆抗體（Köhler，G.； Milstein，C. Nature1975，256： 495-497）。詳細的過程在“Antibodies--A Laboratory Manual，Harlow and Lane，eds.，Cold Spring Harbor Laboratory Press，New York （1988）”中有描述，此處引作參考。具體地，可以用目標抗原，如從靶細胞、完整的病毒、滅活的全病毒和病毒蛋白質分離的抗原，來免疫小鼠，大鼠，倉鼠或任何其它哺乳動物而製備。通常使用聚乙二醇（PEG）6000將脾細胞與骨髓瘤細胞融合。藉由對HAT（次黃嘌呤-胺基蝶呤-胸腺嘧啶）的敏感性來篩選融合細胞。藉由它們免疫反應特異性受體的能力或抑制靶細胞上的受體活性的能力，可以確定實施本發明的單克隆抗體的雜交瘤。
用於本發明中的單克隆抗體的生產在單克隆雜交瘤培養物裡進行，其中包含營養培養基和能分泌具有合適抗原特異性的抗體分子的雜交瘤。培養物在合適的條件下保持足夠長的一段時間，以使雜交瘤將抗體分子分泌到培養基。然後收集含有抗體的培養基。使用藉由公知的技術進一步分離抗體分子，如蛋白質A親和層析，陰離子、陽離子、疏水或體積排阻色譜法（特別是藉由蛋白質A親和層析和體積排阻色譜法），離心，差異溶解度或任何其他純化蛋白質的準則技術。
可用於製備這些組合物的培養基在業內中是公知的，並且可商業獲得，也包括合成培養基。一個合成的培養基的例子是Dulbecco最少必需培養基（DMEM； Dulbecco 等.，Virol. 1959,8，396 ）補充有4.5g/ml葡萄糖， 20mM穀氨醯胺， 20%胎牛血清，以及消泡劑如聚氧乙烯-聚氧丙烯嵌段共聚物。
另外，生產抗體的細胞株也可以藉由融合以外的技術來獲得，例如將成瘤DNA移植至B淋巴細胞，或成瘤病毒轉染，如愛潑斯坦-巴爾病毒（EBV，也稱為人類皰疹病毒4（HHV-4））或卡波西肉瘤相關皰疹病毒（KSHV），見於美國專利4,341,761； 4,399,121； 4,427,783； 4,444,887； 4,451,570； 4,466,917； 4,472,500； 4,491,632； 4,493,890。單克隆抗體也可以藉由含末端羧基的抗受體肽或肽製備，這些都為如業內所公知，可參考文獻 Niman 等.，Proc. Natl. Acad. Sci. USA，1983，80： 4949-4953； Geysen 等.，Proc. Natl. Acad. Sci. USA，1985，82： 178-182； Lei 等. Biochemistry 1995，34（20）： 6675-6688。通常，作為產生抗受體肽單克隆抗體的免疫原，抗受體肽或肽類似物可以單獨使用或連接至免疫原性載劑。
用作本發明中結合分子的單克隆抗體也可以藉由其他業內已知的技術獲得。特別有用的是製造完整人源抗體的方法。一種方法是噬菌體顯示技術，它使用親和增濃的方式，能選擇與抗原特異性結合的人源抗體。噬菌體展示技術在文獻中也有詳細描述，噬菌體展示庫的構建和篩選在業內也是眾所周知的，可參考文獻Dente 等，Gene. 1994,148（1）：7-13； Little 等，Biotechnol Adv. 1994,12（3）：539-55； Clackson 等.，Nature 1991,352：264-628； Huse 等.，Science 1989,246：1275-1281。
藉由與非人如小鼠細胞融合的雜交瘤產生的單克隆抗體，可以被人源化以避免產生人類抗小鼠抗體。常見的抗體人源化方法是互補決定區移植技術，這些方法也已被詳細地描述，如美國專利5,859,205 和6,797,492； Liu 等，Immunol Rev. 2008，222：9-27； Almagro 等，Front Biosci. 1; 2008,13： 1619-33； Lazar 等，Mol Immunol. 2007,44（8）：1986-98； Li 等，Proc. Natl. Acad. Sci. U S A. 2006,103（10）：3557-62，此處引為參考。完整人抗體也可以藉由用免疫原免疫攜帶大部分的人類球蛋白重輕鏈的轉基因小鼠、兔子、猴子或其他哺乳動物來製備。這些老鼠的例子有：Xenomouse （Abgenix, Inc.），HuMAb-Mouse （Medarex/BMS）和VelociMouse （Regeneron），參考美國專利 6,596,541，6,207,418，6,150,584，6,111,166，6,075,181，5,922,545，5,661,016，5,545,806，5,436,149 和 5,569,825。用於人類治療時，小鼠的可變區域和人的恒定區域也可以被融合，成為“嵌合抗體”，它在人類身上的免疫原性顯著低於小鼠單抗（Kipriyanov 等，Mol Biotechnol. 2004,26：39-60 ； Houdebine，Curr Opin Biotechnol. 2002,13：625-9）。另外，在抗體可變區域的定點突變誘發能導致抗體具有較高的親和性和特異性（Brannigan 等，Nat Rev Mol Cell Biol. 2002,3：964-70； Adams 等，J Immunol Methods. 1999，231：249-60），mAb抗體恒定區域的改變可以提高其介導結合和細胞毒性的效應功能。
惡性腫瘤細胞抗原的免疫特異性抗體也可以從商業路徑獲得或藉由任何已知方法生產，例如化學合成或重組表現技術。對惡性腫瘤細胞抗原具有免疫特異性的抗體的核苷酸序列編碼可以商業獲得，例如從GenBank資料庫或類似資料庫，文獻出版物獲得，或從習知克隆和測序得到。
除了抗體之外，與目標細胞上的抗原決定基或相應的受體交互作用（結合、阻斷、靶向或其他類型作用）的一種肽或蛋白質也可以作為結合分子。這些肽或蛋白質可能是任何隨機的肽或蛋白質，它們對抗原決定基或相應的受體有親和力，不一定非得是免疫球蛋白家族成員。這些肽可以藉由類似噬菌體顯示抗體的技術分離出來（Szardenings，J Recept Signal Transduct Res. 2003； 23（4）：307-49）。從隨機肽庫中獲得的肽與抗體和抗體片段類似，可以偶聯或連接至大分子或其他物質，包括但不限於白蛋白、聚合物、脂質體、納米顆粒、樹狀分子，這樣的連接應當能保留肽或蛋白質的抗原結合特異性。
用於治療癌症、自身免疫性疾病和/或傳染性疾病的，喜樹鹼類似物偶聯物中抗體的例子包括，但不限於3F8（抗GD2），阿巴單抗（抗CA-125），阿昔單抗（抗CD41（整聯蛋白α-IIb），阿達木單抗（抗TNF-α），Adecatumumab（抗EpCAM，CD326），阿非莫單抗（抗TNF-α）， Afutuzumab（抗CD20），Alacizumab 單抗（抗VEGFR2），ALD518（抗IL-6），Alemtuzumab（Campath，MabCampath，抗CD52），Altumomab（抗CEA），Anatumomab（抗TAG-72），Anrukinzumab （IMA-638，抗-IL-13），Apolizumab (抗-HLA-DR)，阿奇單抗（抗-CEA），阿塞珠單抗（抗-L-選擇蛋白，CD62L），Atlizumab （tocilizumab，Actemra，RoActemra，抗-IL-6 受體），Atorolimumab （抗-Rhesus 因數），Bapineuzumab（抗-β澱粉樣蛋白），Basiliximab（Simulect，抗CD25（IL-2受體的α鏈）），Bavituximab（抗磷脂醯絲氨酸），Bectumomab （LymphoScan，抗-CD22），貝利單抗（Benlysta，LymphoStat-B，抗BAFF），Benralizumab（抗CD125），Bertilimumab（抗CCL11（eotaxin-1）），Besilesomab（Scintimun，抗CEA相關抗原） ，貝伐單抗（Avastin，抗VEGF-A），Biciromab（FibriScint，抗纖維蛋白II β鏈），Bivatuzumab（抗-CD44v6），Blinatumomab（BiTE，抗CD19），Brentuximab（cAC10，抗-CD30 TNRSF8），Briakinumab（抗IL-12，IL-23），Canakinumab（Ilaris，抗IL-1），Cantuzumab （C242，抗CanAg），Capromab，Catumaxomab（Removab，抗EpCAM，抗CD3），CC49（抗TAG-72），Cedelizumab（抗CD4），Certolizumab 單抗（Cimzia，抗TNF-α），西妥昔單抗（愛必妥，IMC-C225，抗EGFR），Citatuzumab bogatox（抗EpCAM），Cixutumumab（抗IGF-1），Clenoliximab（抗CD4），Clivatuzu-mab（抗MUC1），Conatumumab（抗TRAIL-R2），CR6261（抗流感A血凝素），Dacetuzumab（抗CD40），Daclizumab（Zenapax，抗CD25（IL-2受體α鏈）），Daratumumab（抗CD38（環ADP核糖水解酶），Denosumab（Prolia，抗RANKL），Detumomab（抗B淋巴瘤細胞），Dorlimomab，Dorlixizumab，Ecromeximab（抗GD3神經節苷脂），Eculizumab（Soliris，抗-C5），Edobacomab（抗內毒素），Edrecolomab（Panorex，MAb17-1A，抗-EpCAM），Efalizumab（Raptiva，抗LFA-1（CD11a）），Efungumab（Mycograb，抗Hsp90），Elotuzumab（抗SLAMF7），Elsilimomab（抗IL-6），Enlimomab 單抗（抗ICAM-1（CD54） ），Epitumomab（抗episialin），依他珠單抗（抗-CD22），Erlizumab（抗-ITGB2（CD18）），Ertumaxomab（Rexomun，抗HER2/neu，CD3），依他拉單抗（Abegrin，抗整聯蛋白αvβ3），Exbivirumab（抗乙肝表面抗原），Fanolesomab（NeutroSpec，抗CD15），Faralimomab（抗干擾素受體），Farletuzumab（抗葉酸受體1），Felvizumab（抗呼吸道合胞病毒），Fezakinumab （抗-IL-22），Figitumumab（抗-IGF-1受體），Fontolizumab（抗-IFN-γ），Foravirumab（抗狂犬病病毒糖蛋白），Fresolimumab（抗TGF-β），Galiximab（抗CD80），Gantenerumab（抗β澱粉樣蛋白），Gavilimomab（抗CD147（basigin）），Gemtuzumab（抗CD33），Girentuximab（抗碳酸酐酶9），Glembatumumab （CR011，抗GPNMB），Golimumab（Simponi，抗-TNF-α），Gomiliximab（抗-CD23（IgE受體）），抗HLA-DR抗體，Ibalizumab（抗-CD4），Ibritumomab（抗CD20），Igovomab（Indimacis-125，抗CA-125），Imciromab（Myoscint，抗心肌肌凝蛋白），Infliximab（Remicade，抗TNF-α），Intetumumab（抗CD51），Inolimomab（抗CD25（IL-2受體α鏈），伊珠單抗（抗-CD22），Ipilimumab（抗CD152），Iratumumab（抗CD30（TNFRSF8）），Keliximab（抗-CD4），Labetuzumab（CEA-Cide，抗CEA），Lebrikizumab （抗IL-13），Lemalesomab（抗NCA-90（粒細胞抗原）），Lerdelimumab（抗TGF β2），Lexatumumab（抗TRAIL-R2），Libivirumab（抗乙肝表面抗原），Lintuzumab（抗CD33），魯米木單抗（抗CD40），魯米單抗（抗CD23（IgE受體）），Mapatumumab（抗TRAIL-R1），馬西莫單抗（抗T-細胞受體），馬妥珠單抗（抗EGFR），Mepolizumab（Bosatria，抗IL-5），Metelimumab（抗TGFβ1），Milatuzumab（抗CD74），Minretumomab（抗TAG-72），Mitumomab（BEC-2，抗GD3神經節苷脂），Morolimumab（抗恒河猴因數），Motavizumab（Numax，抗呼吸道合胞病毒），Muromonab-CD3（Orthoclone OKT3，抗CD3），Nacolomab（抗C242），Naptumomab （抗5T4），那他珠單抗（Tysabri，抗整聯蛋白α4），奈巴單抗（抗內毒素），Nec​​itumumab（抗EGFR），Nerelimomab（抗-TNF-α），Nimotuzumab（Theracim，Theraloc，抗-EGFR），Nofetumomab，Ocrelizumab （抗CD20），奧利木單抗（Afolimomab，抗LFA-1（CD11a）），Ofatumumab（Arzerra，抗CD20），Olaratumab（抗PDGF-R α），Omalizumab（Xolair，抗IgE Fc區） Oportuzumab（抗EpCAM），Oregovomab（OvaRex，抗CA-125），Otelixizumab（抗CD3），Pagibaximab（抗脂磷壁酸），Palivizumab（Synagis，Abbosynagis，抗呼吸道合胞病毒），帕尼單抗（Vectibix， ABX-EGF，抗EGFR），Panobacumab（抗銅綠假單胞菌（Pseudomonas aeruginosa） ），帕考珠單抗（抗IL-4），Pemtumomab（Theragyn，抗MUC1），Pertuzumab（Omnitarg，2C4，抗HER2/neu），Pexelizumab（抗C5），Pintumomab（抗腺癌抗原），Priliximab（抗-D4），Pritumumab（抗波形蛋白），PRO140（抗-CCR5）， Racotumomab（1E10，抗-N-羥乙醯神經氨酸（NeuGc，NGNA）-神經節苷脂GM3）），Rafivirumab（抗狂犬病病毒糖蛋白），Ramucirumab（抗VEGFR2），Ranibizumab（Lucentis，抗VEGF-A），Raxibacumab （抗炭疽毒素，保護性抗原），Regavirumab（抗巨細胞病毒糖蛋白B），Reslizumab（抗-IL-5），Rilotumumab（抗-HGF），Rituximab（MabThera，Rituxanmab，抗-CD20），Robatumumab（抗-IGF-1受體），Rontalizumab（抗IFN-α），Rovelizumab（LeukAr-rest，抗CD11，CD18），Ruplizumab（Antova，抗CD154（CD40L）），Satumomab（抗TAG-72），Sevirumab （抗巨細胞病毒），Sibrotuzumab（抗FAP），西法木單抗（抗IFN-α），Siltuximab（抗IL-6），Siplizumab（抗CD2），MI 95（抗CD33），Solanezumab（抗β澱粉狀蛋白），Sonepcizumab（1-磷酸鞘氨醇），Sontuzumab（抗-episialin），Stamulumab（抗-myostatin），Sulesomab（LeukoScan，抗NCA-90（粒細胞抗原）），Tacatuzumab（抗α甲胎蛋白），Tadocizumab（抗整聯蛋白αIIbβ3），Talizumab（抗IgE），Tanezumab （anti-NGF），Taplitumomab （抗CD19），Tefibazumab（Aurexis，（抗凝聚因數A）），Telimomab，Tenatumomab（抗腱生蛋白C），Teneliximab（抗CD40），Teplizumab（抗CD3），TGN1412（抗CD28），Ticilimumab（Tremelimumab，抗-CTLA-4），Tigatuzumab（抗TRAIL-R2），TNX-650（抗IL-13），Tocilizumab（Atlizumab，Actemra，RoActemra，抗 IL-6受體），Toralizumab（抗CD154（CD40L）），Tositumomab（抗CD20），曲妥珠單抗（赫賽汀，抗HER2/neu），Tremelimumab（抗CTLA-4），Tucotuzumab celmoleukin（抗EpCAM ），Tuvirumab（抗乙型肝炎病毒），Urtoxazumab（抗大腸桿菌），Ustekinumab （Stelara，抗-IL-12，IL-23），Vapaliximab（抗-AOC3（VAP-1）），維多珠單抗（抗整聯蛋白α4β7），維妥珠單抗（抗CD20），Vepalimomab（抗AOC3（VAP-1）），Visilizumab（Nuvion，抗CD3），Vitaxin（抗血管整合素avb3），Volociximab（抗整聯蛋白α5β1），Votumumab（HumaSPECT，抗腫瘤抗原CTAA16.88），Zalutumumab（HuMax-EGFR，抗EGFR），Zanolimumab（HuMax-CD4，抗-CD4），Ziralimumab（抗-CD147（basigin）），Zolimomab（抗-CD5），依那西普（Enbrel®），Alefacept（Amevive®），Abatacept（Orencia®），Rilonacept（Arcalyst），14F7 （抗IRP-2（鐵調節蛋白2）），14G2a（抗GD2神經節苷脂，源於Nat.Cancer Inst.，治療黑素瘤和實體瘤），J591（抗-PSMA，源於Weill Cornell醫學院，治療前列腺癌），225.28S （抗HMW-MAA（高分子量黑素瘤相關抗原）），Sorin Radiofarmaci SRL（源於義大利米蘭，治療黑色素瘤），COL-1（抗CEACAM3，CGM1，源於Nat Cancer Inst. ，治療結腸直腸癌和胃癌），CYT-356（Oncoltad®，治療前列腺癌），HNK20（OraVax Inc.，治療呼吸道合胞病毒感染），ImmuRAIT（源於Immunomedics，治療NHL），Lym-1（抗HLA-DR10，Peregrine Pharm，治療癌症），MAK-195F（抗TNF（腫瘤壞死因數，TNFA，TNF-α，TNFSF2），源於Abbott/Knoll，治療膿毒症中毒性休克），MEDI-500 （T10B9，抗CD3，TRαβ（T細胞受體α/β），源於MedImmune Inc，治療移植物抗主體疾病病），RING SCAN （抗TAG 72（腫瘤相關糖蛋白72），源於Neoprobe Corp.，治療乳腺癌，結腸癌和直腸癌），Avicidin（抗EPCAM（上皮細胞粘附分子）），抗-TACSTD1（腫瘤相關鈣信號轉導1），抗GA733-2（胃腸腫瘤相關蛋白2），抗EGP-2（上皮糖蛋白2），抗KSA，KS1/4抗原，M4S，腫瘤抗原17-1A，CD326（源於NeoRx公司，治療結腸癌，卵巢癌，前列腺癌和NHL），抗Trop2人源化抗體hRS7，LymphoCide（源於Immunomedics），Smart ID10（源於Protein Design Labs），Oncolym （源於Techniclone Inc），Allomune（源於BioTransplant），抗VEGF（源於Genentech），CEAcide（源於Immunomedics），IMC-1C11（源於ImClone Systems）和Cetuximab（源於ImClone）。
其他可作為結合配位體的抗體，包括但不限於，以下抗原的抗體：氨肽酶N（CD13），膜聯蛋白A1，B7-H3（CD276，各種癌症），CA125（卵巢癌），CA15-3（各種癌症），CA19-9（各種癌症），L6（各種癌症），路易士Y（各種癌症），路易士X（各種癌症），甲胎蛋白（各種癌症），CA242（結直腸癌），胎盤鹼性磷酸酶（各種癌症），前列腺特異抗原（前列腺癌），前列腺酸磷酸酶（前列腺癌），表皮生長因數（各種癌症），CD2（霍奇金症，NHL淋巴瘤，多發性骨髓瘤），CD3 ε （T細胞淋巴瘤，肺癌，乳腺癌，胃癌，卵巢癌，自身免疫性疾病，惡性腹水），CD19 （B細胞惡性腫瘤），CD20（非霍奇金淋巴瘤），CD22（白血病，淋巴瘤，多發性骨髓瘤，SLE），CD30（霍奇金淋巴瘤），CD33（白血病，自身免疫性疾病），CD38（多發性骨髓瘤），CD40（淋巴瘤，多發性骨髓瘤，白血病（CLL）），CD51（轉移性黑色素瘤，肉瘤），CD52（白血病），CD56（小細胞肺癌，卵巢癌，梅克細胞癌，以及液體腫瘤，多發性骨髓瘤），CD66e（各種癌症），CD70（轉移性腎細胞癌和非霍奇金淋巴瘤），CD74（多發性骨髓瘤），CD80（淋巴瘤），CD98（各種癌症），粘液素（各種癌症），CD221（實體腫瘤）、CD227（乳腺癌、卵巢癌）、CD262 （非小細胞肺癌及其他癌症）、CD309（卵巢癌）、CD326（實體腫瘤）、CEACAM3（結腸直腸癌、胃癌）、CEACAM5（癌胚抗原，CEA，CD66e）（乳腺，結直腸癌和肺癌），DLL4 (Δ-like-4)，EGFR（表皮生長因數受體，各種癌症），CTLA4（黑色素瘤），CXCR4 （CD184，血液腫瘤，實體腫瘤），Endoglin （CD105，實體瘤），EPCAM（上皮細胞粘附分子，膀胱癌，頭頸癌，結腸癌，NHL前列腺癌，卵巢癌），ERBB2（表皮生長因數受體2，肺癌，乳腺癌，前列腺癌），FCGR1（自身免疫性疾病），FOLR（葉酸受體，卵巢癌），GD2神經節苷（各種癌症），G-28（細胞表面抗原糖脂質，黑色素瘤），GD3獨特型（各自癌症），熱休克蛋白（各種癌症），HER1（肺癌，胃癌），HER2（乳腺癌，肺癌和卵巢癌），HLA-DR10 （NHL）， HLA-DRB （NHL，B細胞白血病），人絨毛膜促性腺激素（各種癌症），IGF1R（類胰島素生長因數1受體，實體瘤，血癌），IL-2受體（白介素2受體，T細胞白血病和淋巴瘤），IL-6R（白介素6受體，多發性骨髓瘤，風濕性關節炎，Castleman病，白細胞介素6依賴腫瘤），整合蛋白（αvβ3、α5β1、α6β4、αllβ3、α5β5、αvβ5，各種癌症），MAGE-1（各種癌症），MAGE-2（各種癌症），MAGE-3（各種癌症），MAGE 4（各種癌症），抗轉鐵蛋白受體（各種癌症），p97（黑色素瘤），MS4A1（跨膜4結構域亞家族A成員1，非霍奇金B細胞淋巴瘤，白血病），MUC1或MUC1-KLH（乳腺癌、卵巢癌、子宮頸癌、支氣管癌和胃腸道癌），MUC16 （CA125）（卵巢癌），CEA（結直腸癌），gp100（黑色素瘤），MART1（黑色素瘤），MPG（黑素瘤），MS4A1（跨膜4結構域亞家族A成員，小細胞肺癌，NHL），Nucleolin，Neu癌基因產物（各自癌症），P21（各種癌），抗（N-羥乙醯神經氨酸）抗體結合部位（乳腺癌，黑色素瘤），類PLAP睾丸鹼性磷酸酶（卵巢癌、睾丸癌），PSMA（前列腺瘤），PSA（前列腺癌），ROBO4，TAG 72（腫瘤相關糖蛋白72，AML，胃癌、結腸直腸癌、卵巢癌），T細胞跨膜蛋白（各種癌症），Tie （CD202b），TNFRSF10B（腫瘤壞死因數受體超家族成員10B，各種癌症），TNFRSF13B（腫瘤壞死因數受體超家族成員13B，多發性骨髓瘤，NHL，其他癌症，RA和SLE）， TPBG（滋養細胞糖蛋白，腎細胞癌），TRAIL-R1（TNF相關壞死誘導配位體受體1，淋巴瘤，NHL，結直腸癌，肺癌），VCAM-1 （CD106，黑色素瘤），VEGF，VEGF-A，VEGF-2 （CD309）（各種癌症）。其它可被抗體識別的，腫瘤相關抗原已被總結和評述 （Gerber，等，mAbs 2009，1：3，247-253； Novellino 等，Cancer Immunol Immunother. 2005，54（3），187-207； Franke，等，Cancer Biother Radiopharm.2000，15，459-76）。這些抗原的例子包括：許多其他分化簇（CD4、CD5、CD6、CD7、CD8、CD9、CD10、CD11a、CD11b、CD11c、CD12w、CD14、CD15、CD16、CDw17、CD18、CD21、CD23、CD24、CD25、CD26、CD27、CD28、CD29、CD31、CD32、CD34、CD35、CD36、CD37、CD41、CD42、CD43、CD44、CD45、CD46、CD47、CD48、CD49b、CD49c、CD53、CD54、CD55、CD58、CD59、CD61、CD62E、CD62L、CD62P、CD63、CD68、CD69、CD71、CD72、CD79、CD81、CD82、CD83、CD86、CD87、CD88、CD89、CD90、CD91、CD95、CD96、CD100、CD103、CD105、CD106、CD109、CD117、CD120、CD127、CD133、CD134、CD135、CD138、CD141、CD142、CD143、CD144、CD147、CD151、CD152、CD154、CD156、CD158、CD163、CD166、.CD168、CD184、CDw186、CD195、CD202 （a、b）、CD209、CD235a、CD271、CD303、CD304）、膜聯蛋白A1、核仁素、內皮糖蛋白（CD105）、ROBO4、胺基肽酶N、 Δ-樣4（DLL4）、VEGFR-2（CD309）、CXCR49、CD184）、Tie2、B7-H3、WT1、MUC1、LMP2、HPV E6 E7、EGFRvIII、EGFR、HER-2/neu、獨特型、MAGE A3、P53 nonmutant、NY-ESO-1、GD2、CEA、MelanA/MART1、 Ras突變、gp100、p53突變體、Proteinase3（PR1）、bcr-abl、Tyrosinase、Survivin、hTERT、Sarcoma translocation breakpoints、EphA2、PAP、ML-IAP、AFP、EpCAM、ERG （TMPRSS2 ETS融合基因）、NA17、PAX3、ALK、Androgen 受體、細胞週期素B1、聚唾液酸、MYCN、RhoC、TRP-2、GD3、Fucosyl GM1、間皮素、PSCA、MAGE A1、sLe（a）、CYP1B1、PLAC1、GM3、BORIS、Tn、GloboH、ETV6-AML、NY-BR-1、RGS5、SART3、STn、碳酸酐酶 IX、PAX5、OY-TES1、精子蛋白17、LCK、HMWMAA、AKAP-4、SSX2、XAGE 1、B7H3、豆莢蛋白、Tie 2、Page4、VEGFR2、MAD-CT-1、FAP、PDGFR-β、MAD-CT-2、Fos蛋白相關抗原1。
在另一具體的實施例中，本專利申請的喜樹鹼類似物與細胞結合分子的偶聯物被用於治療癌症的組合物和方法。這些癌症包括但不限於，腎上腺皮質癌、肛門癌、膀胱癌、大腦腫瘤（腦幹神經膠質瘤、小腦星形細胞瘤、腦星形細胞瘤、室管膜瘤、成神經管細胞瘤、幕上原始神經外胚層和松果體腫瘤、視覺通路和下丘腦膠質瘤）、乳腺癌、類癌腫瘤、胃腸道癌症、未知小細胞癌、宮頸癌、結腸癌、子宮內膜癌、食道癌、肝外膽管癌、尤因家族腫瘤（PNET）、顱內生殖細胞腫瘤、眼癌、眼內黑色素瘤、膽囊癌、胃癌（胃癌）、性腺外生殖細胞瘤、孕周滋養細胞瘤、頭頸癌、下嚥癌、胰島細胞癌、腎癌（腎細胞癌）、喉癌、白血病（急性淋巴細胞，急性髓系，慢性淋巴細胞，慢性粒細胞，毛細胞）、嘴唇和口腔癌症、肝癌、肺癌（非小細胞，小細胞）、淋巴瘤（愛滋病相關，中樞神經系統，皮膚T細胞，霍奇金病，非霍奇金病）、惡性間皮瘤、黑色素瘤、梅克爾細胞癌、轉移性鱗狀頸癌與隱匿性原發性癌、多發性骨髓瘤和其他漿細胞腫瘤、蕈樣肉芽腫、骨髓增生異常綜合症、骨髓增生異常、鼻咽癌、神經母細胞瘤、口腔癌、口咽癌、骨肉瘤、卵巢癌（上皮、生殖細胞瘤、低惡性腫瘤）、胰腺癌（外分泌，胰島細胞癌）、副鼻竇和鼻腔癌、甲狀旁腺癌、陰莖癌、嗜鉻細胞瘤、垂體腫瘤、漿細胞腫瘤、前列腺癌橫紋肌肉瘤、直腸癌、腎細胞癌（腎癌）、腎盂和輸尿管（移行細胞）、唾腺癌、賽塞裡綜合症、皮膚癌（皮膚T細胞淋巴瘤，卡波西氏肉瘤，黑色素瘤）、小腸腫瘤、軟組織肉瘤、胃癌、睾丸癌、胸腺瘤（惡性）、甲狀腺癌、尿道癌症、子宮癌、不尋常的少年癌症、陰道腫瘤、外陰腫瘤和維爾姆斯瘤。
在另一具體的實施例中，本專利申請的喜樹鹼類似物與細胞結合分子的偶聯物被用於治療或預防自身免疫疾病的組合物和方法。自身免疫性疾病包括但不限於，Achlorhydra自身免疫性活動性慢性肝炎、急性播散性腦脊髓炎、急性出血性腦白質炎、艾迪生病、無精症、斑禿、肌萎縮側索硬化症、強直性脊柱炎、抗GBM/TBM腎炎、抗磷脂綜合症、抗異常酶綜合症、關節炎、特應性過敏、特應性皮炎、自身免疫性再生障礙性貧血、自身免疫性心肌病、自身免疫性溶血性貧血、自身免疫性肝炎、自身免疫性內耳疾病、自身免疫性淋巴組織增生綜合症、自身免疫性周圍神經病、自身免疫性胰腺炎、自身免疫性多內分泌綜合症I、II和III型、自身免疫性黃體酮皮炎、自身免疫性血小板減少性紫癜、自身免疫性葡萄膜炎、Balo病/ Balo同心硬化症、Bechets綜合症、Berger氏病、Bickerstaff腦炎、Blau綜合症、大皰性類天皰瘡、Castleman病、Chagas病、慢性疲勞免疫功能障礙綜合症、慢性發炎脫髓鞘性多發性神經病、慢性復發性多灶性骨髓炎、慢性萊姆病、慢性阻塞性肺病、Churg-Strauss綜合症、瘢痕性類天皰瘡、乳糜泄、Cogan綜合症、冷凝集素病、補體成分2缺乏症、顱骨動脈炎、CREST綜合症、Crohns病（特發性炎症性腸病）、庫欣綜合症、皮膚白細胞增多性血管炎、德戈氏病、Dercum氏病、皰疹樣皮炎、皮肌炎、1型糖尿病、彌漫性皮膚系統性硬化症、Dressler綜合症、盤狀紅斑狼瘡、濕疹、子宮內膜異位症、附著點炎相關的關節炎、Eosinophilic筋膜炎、大皰性表皮鬆解症、結節性紅斑、特發性混合性冷球蛋白血症、伊文氏綜合症、纖維發育不良性骨化症、纖維肌痛、纖維化性肌炎、纖維性肺泡炎、胃炎、胃腸類天皰瘡、巨細胞動脈炎、腎小球腎炎、古德帕斯丘爾綜合症、格雷夫斯病、格林-巴厘綜合症、橋本氏腦炎、橋本氏甲狀腺炎、溶血性貧血、過敏性紫癜、妊娠性肝炎、化膿性汗腺炎、休斯綜合症（抗磷脂綜合症）、低丙球蛋白血症、特發性發炎脫髓鞘疾病、特發性肺纖維化、特發性血小板減少性紫癜（自身免疫性血小板減少性紫癜）、IgA腎病（伯傑氏病）、包涵體肌炎、發炎脫髓鞘性多神經炎、間質性膀胱炎、過敏性腸綜合症、少年特發性關節炎、青少年類風濕性關節炎、川崎氏病、朗第一-伊頓重症肌無力綜合症、白細胞碎屑性血管炎、扁平苔癬、硬化性硬化症、線狀IgA疾病（LAD）、Lou Gehrig病（也稱肌萎縮側索硬化症）、狼瘡性肝炎、紅斑狼瘡、Majeed綜合症、美尼爾氏病、顯微鏡下多動脈炎、米勒-費希爾綜合症、混合性結締組織病、硬斑病、穆罕默德-哈貝曼病、麥考利綜合症、多發性骨髓瘤、多發性硬化症、重症肌無力、肌炎、嗜睡症、視神經脊髓炎（Devic病）、神經性肌強直、眼瞼瘢痕性類天皰瘡、Opsoclonus myoclonus綜合症、Ord甲狀腺炎、回文風濕病、PANDAS（與鏈球菌相關的小兒自身免疫性神經精神病）、Paraneoplastic小腦變性、陣發性睡眠性血紅蛋白尿症、Parry Romberg綜合症、Parsonnage-Turner綜合症、睫狀體平部炎、天皰瘡、尋常型天皰瘡、貧血、周圍腦脊髓炎、POEMS綜合症、結節性多動脈炎、風濕性多肌痛、多發性肌炎、原發性膽汁性肝硬化、原發性硬化性膽管炎、進行性炎症性神經病變、牛皮癬、牛皮癬性關節炎、壞疽性皮膚炎、純紅細胞再生障礙、Rasmussen腦炎、雷諾現象、復發性多軟骨炎、賴特綜合症、不寧腿綜合症、後神經纖維化、類風濕性關節炎、類風濕熱、結節病、精神分裂症、施密特綜合症、Schnitzler綜合症、施尼茨勒綜合症、鞏膜炎、硬皮病、乾燥綜合症、脊椎關節病、粘稠血症、Still病、僵人綜合症、亞急性細菌性心內膜炎、蘇薩克綜合症、Sweet綜合症、小舞蹈病、交感神經性貧血、Takayasu動脈炎、顳動脈炎（巨細胞動脈炎）、Tolosa-Hunt綜合症、橫貫性脊髓炎、潰瘍性結腸炎（特發性發炎腸病）、未分化結締組織病、未分化脊柱關節病、血管炎、白癜風、韋格納肉芽腫病、威爾遜氏綜合症、威斯科特-奧爾德里奇綜合症。
在另一个具體的實施例中，在用於治療或預防自身免疫性疾病的偶聯物上的結合分子，包括但不限於，抗彈性蛋白抗體、Abys抗上皮細胞抗體、抗地下室膜IV型膠原蛋白抗體、抗核抗體、抗ds DNA、抗ss DNA、抗心磷脂抗體IgM、IgG、抗乳糜瀉抗體、抗磷脂抗體IgK、IgG、抗SM抗體、抗線粒體抗體、甲狀腺抗體、微粒體抗體、T細胞抗體、甲狀腺球蛋白抗體、抗SCL-70、抗Jo、抗U.sub.1RNP、抗La/ SSB、抗SSA、抗SSB、抗壁細胞抗體、抗組蛋白、抗RNP、C-ANCA、P-ANCA、抗著絲粒、抗纖維蛋白原、抗GBM抗體、抗神經節苷脂抗體、抗Desmogein 3抗體、抗p62抗體、抗sp100抗體、抗線粒體（M2）抗體、類風濕因子抗體、抗MCV抗體、抗拓扑異構酶抗體、抗中性粒細胞胞質（cANCA）抗體。
在某些較佳的實施例中，本專利中偶聯物上的結合分子，可以與自身免疫性疾病相關的啟動淋巴細胞上表現的受體或受體複合物相結合。受體或受體複合物包含，免疫球蛋白基因超家族成員（例如CD2、CD3、CD4、CD8、CD19、CD20、CD22、CD28、CD79、CD90、CD152/CTLA-4、PD-1或ICOS），TNF受體超家族成員（例如CD27、CD40、CD95/Fas、CD134/OX40、CD137/4-1BB、INF-R1、TNFR-2、RANK、TACI、BCMA、骨保護素、Apo2/TRAIL-R1、TRAIL-R2、TRAIL-R3、TRAIL-R4和APO-3），整合蛋白，細胞因子受體，趨化介素受體，主要組織兼容性蛋白，凝集素（C型、S型或I型）或補體控制蛋白。
在另一个具體實施例中，可用的對病毒或微生物抗原具有免疫特異性的結合配位體是人源化或人單克隆抗體。“病毒抗原”包括但不限於，任何能夠引發免疫應答的病毒肽，多肽蛋白（例如HIV gp120、HIV nef、RSV F糖蛋白、流感病毒神經氨酸苷酶、流感病毒血凝素、HTLV Tax、疱疹單纯疱疹病毒糖蛋白（例如gB、gC、gD和gE）和乙型肝炎表面抗原）。“微生物抗原”包括但不限於，任何能夠引發免疫應答的微生物肽，多肽，蛋白質，糖，多糖或脂質分子（例如細菌，真菌，致病原生動物或酵母多肽，包括如LPS和莢膜多糖5/8）。可用於治療病毒或微生物感染的抗體的實例，包括但不限於：帕利珠單抗，它是用於治療RSV感染的，人源化抗呼吸道合胞病毒單克隆抗體；PRO542，是一種CD4融合抗體，用於治療HIV感染；奥斯他韋，是一種用於治療乙型肝炎病毒的人抗體；PROTVIR，是一種人源化IgG1抗體，用於治療巨細胞病毒，和抗LPS抗體。
藉由本專利申請中的細胞結合分子-喜樹鹼類似物偶聯物可用於治療感染性疾病。 這些感染性疾病包括但不限於，不動桿菌屬感染、放線菌病、非洲昏睡病（非洲錐蟲病）、愛滋病（獲得性免疫缺陷綜合症）、阿米巴病、無形體病、炭疽、溶血性耶爾森菌感染、阿根廷出血熱、蛔蟲病、麯黴病、星狀病毒感染、巴貝斯蟲病、蠟狀芽孢桿菌感染、細菌性肺炎、細菌性陰道炎、類桿菌感染、小袋蟲病、蛔蟲感染、BK病毒感染、黑色發結節病、人芽囊原蟲感染、芽生菌病、玻利維亞出血熱、疏螺旋體感染、肉毒中毒（和嬰兒肉毒中毒）、巴西出血熱、布魯氏桿菌病、伯克霍爾德氏菌感染、布魯裡潰瘍、杯狀病毒感染（諾如病毒和沙波病毒）、彎曲桿菌病、念珠菌病（念珠菌病、鵝口瘡）、貓抓病、蜂窩組織炎、Chagas病（美洲錐蟲病）、子囊、水痘、衣原體、肺炎衣原體感染、霍亂、色素母細胞瘤、華支睾吸蟲、艱難梭狀芽孢桿菌感染、球孢子菌病、科羅拉多蜱熱病、普通感冒（急性病毒性鼻咽炎、急性鼻炎）、克雅氏病、克裡米亞-剛果出血熱、隱球菌病、隱孢子蟲病、皮膚幼蟲遷徙、環孢子蟲病、腸桿菌感染、腸道病毒感染、流行性斑疹傷寒、傳染性紅斑（第五種疾病）、急疹、薑片蟲病、肝片吸蟲病、致命性家族性失眠、絲蟲病、產氣莢膜梭菌食物中毒、自由活體阿米巴感染、梭桿菌感染、氣性壞疽（梭菌性肌壞死）、地絲菌病、格斯特曼-斯特拉斯勒-謝克爾病綜合症、賈第鞭毛蟲病、馬鼻疽、淋病、肉芽腫性腹瀉（第五性病）、A群鏈球菌感染、B群鏈球菌感染、流感嗜血桿菌感染、手足口病（HFMD）、漢坦病毒肺綜合症、幽門螺桿菌感染、溶血性尿毒綜合症、腎綜合症出血熱、甲型肝炎、乙型肝炎、丙型肝炎、丁型肝炎、戊型肝炎、單純性皰疹、組織胞漿菌病、鉤蟲感染、人類博卡病毒感染、人類Ewingii埃裡希體病、人類粒細胞無形體病、人類偏肺病毒感染、人類單核細胞埃裡希體病、人乳頭瘤病毒感染、人副流感病毒感染、膜殼絛蟲病、艾巴氏病毒傳染性單核細胞增多症（單）、流行性感冒、等孢子蟲病、川崎病、角膜炎、金格桿菌感染、庫魯病、拉沙熱、軍團病（退伍軍人症）、軍團病（皮蒂亞克熱）、利什曼病、萊姆病、淋巴絲蟲病（象皮病）、淋巴細胞性脈絡叢腦膜炎、瘧疾、瑪律堡出血熱、麻疹、類鼻疽病（惠氏病）、腦膜炎、腦膜炎球菌病、後殖吸蟲病、微孢子蟲病、傳染性軟疣、腮腺炎、小鼠斑疹傷寒（地方性斑疹傷寒）、支原體肺炎、足菌腫、蠅蛆病、新生兒結膜炎（新生兒眼病）、變異型克雅氏病（vCJD、nvCJD）、諾卡氏菌病、盤尾絲蟲病（河盲症）、副球孢子菌病（南美芽生菌病）、肺吸蟲病、巴斯德氏菌病、頭蝨、體虱、陰虱、盆腔炎、百日咳、鼠疫、肺炎球菌感染、肺孢子蟲肺炎、肺炎、脊髓灰質炎、普氏菌感染、原發性阿米巴腦膜腦炎、進行性多灶性白質腦病、鸚鵡熱、Q熱、狂犬病、鼠咬熱、呼吸道合胞病毒感染、鼻孢子蟲病、鼻病毒感染、立克次體感染、立克次體痘、裂谷熱、洛磯山斑疹熱、輪狀病毒感染、風疹、沙門氏菌病、SARS（嚴重急性呼吸綜合症）、疥瘡、血吸蟲病、敗血症、志賀氏菌病（Bacillary痢疾）、帶狀皰疹（帶狀皰疹）、天花（天花）、孢子絲菌、葡萄球菌食物中毒、感染金黃色葡萄球菌、糞類圓線蟲病、梅毒、絛蟲病、破傷風、須癬（Barber癢）、頭皮癬、體癬、股癬、手癬、掌黑癬、足癬（香港腳）、甲癬（灰指甲）、花斑癬、弓蛔蟲病（眼幼蟲移行症）、弓蛔蟲病（內臟幼蟲移行症）、弓形體病、旋毛蟲病、滴蟲病、鞭蟲病（鞭蟲感染）、肺結核、兔熱病、解脲脲原體感染、委內瑞拉馬腦炎、委內瑞拉出血熱、病毒性肺炎、西尼羅河熱、白毛結節病（白癬）、假結核耶爾森氏菌、耶爾森氏鼠疫桿菌腸道病、黃熱病、接合菌病。
本發明的細胞結合劑，較佳為抗體，對抗的病原菌株包括但不限於，鮑氏不動桿菌、以色列放線菌、放線菌和丙酸桿菌、布氏錐蟲、HIV（人免疫缺陷病毒病毒）、溶組織內阿米巴、無形體屬、炭疽芽孢桿菌、溶血弧菌、胡寧病毒、蛔蟲屬、麯黴屬、星狀病毒科、巴貝蟲屬、蠟狀芽孢桿菌、多種細菌、擬桿菌屬、大腸桿菌、蛔蟲屬、BK病毒、結節菌 、人芽囊原蟲、皮炎芽生菌、馬丘波病毒、疏螺旋體屬、肉毒梭菌、清風藤屬、布魯氏菌屬、通常為洋蔥伯克霍爾德菌和其他伯克霍爾德氏菌種、潰瘍分枝桿菌、杯狀病毒科、彎曲桿菌屬、通常為白色假絲酵母和其他假絲酵母屬、漢賽巴爾通體、A群鏈球菌和葡萄球菌、克氏錐蟲、杜克雷嗜血桿菌、水痘帶狀疹病毒（VZV）、沙眼衣原體、科羅拉多蜱熱病毒、鼻病毒、冠狀病毒、CJD朊病毒、克裡米亞-剛果出血熱病毒、新型隱球菌、隱孢子蟲屬、巴西鉤蟲、多種寄生蟲、環孢子蟲、帶狀絛蟲、巨細胞病毒、登革熱病毒（DEN-1、DEN-2、DEN-3和DEN-4）-黃病毒、脆弱雙歧桿菌、白喉棒狀桿菌、裂頭絛蟲、麥迪那龍線蟲、埃博拉病毒、棘球絛蟲屬、埃立克體腸球菌屬、腸道病毒屬、普氏立克次體、細小病毒B19、人皰疹病毒6和人皰疹病毒7、布氏薑片蟲、肝片吸蟲和巨大片吸蟲、FFI朊病毒、絲蟲目超家族、產氣莢膜梭菌、梭桿菌屬、其他梭狀芽孢桿菌、白地黴、GSS朊病毒、腸道賈第蟲、伯克霍爾德氏菌、刺孢小芽孢桿菌和革蘭氏假絲酵母、淋球菌、肉芽腫克雷伯氏菌、化膿性鏈球菌、無乳鏈球菌、流感嗜血桿菌、腸道病毒，主要是柯薩奇A病毒和腸道病毒71、辛諾柏病毒、幽門螺旋桿菌、大腸桿菌O157：H7、布尼亞病毒科、甲型肝炎病毒、乙型肝炎病毒、丙型肝炎病毒、丁型肝炎病毒、戊型肝炎病毒、單純皰疹病毒1、單純皰疹病毒2、莢膜組織胞漿菌、十二指腸腺瘤和壺腹癌流感嗜血桿菌、人博卡病毒、埃裡希體、嗜吞噬細胞無嗜血桿菌、人偏肺病毒、查菲埃裡希體、人乳頭瘤病毒、人副流感病毒、微小膜殼絛蟲和縮小膜殼絛蟲、艾巴氏病毒、正粘病毒科家族、貝氏等孢球蟲、金格桿菌、肺炎克雷伯菌、克雷伯氏菌、嗜肺軍團菌、嗜肺軍團菌、嗜肺軍團菌、利什曼原蟲屬、麻風分枝桿菌和結核分枝桿菌、鉤端螺旋體屬、單核細胞增多性李斯特氏菌、伯氏疏螺旋體和其他疏螺旋體屬物種、班氏旋毛蟲和馬來絲蟲、淋巴細胞脈絡叢腦膜炎病毒（LCMV）瘧原蟲屬、瑪律堡病毒、麻疹病毒、類鼻疽伯克霍爾德氏菌、腦膜炎奈瑟氏球菌、橫川後殖吸蟲、小孢子蟲目門、傳染性軟疣病毒（MCV）、腮腺炎病毒、傷寒立克次氏體、肺炎支原體、多種細菌和真菌寄生雙翅蠅幼蟲、沙眼衣原體和淋病奈瑟菌、vCJD朊病毒、諾卡氏菌和其他諾卡氏菌屬、盤尾絲蟲屬、盤鮑擬亞科、副龍屬西馬尼和其他副屬 、巴斯德氏菌屬、頭蝨、人體虱、百日咳博多特氏菌鼠疫耶爾森氏菌、肺炎鏈球菌、肺炎球菌、脊髓灰質炎病毒、普雷沃氏菌屬、奈氏格氏桿菌、JC病毒、鸚鵡熱衣原體、伯氏考克斯體、狂犬病病毒、單鏈球菌和螺旋菌、呼吸道合胞病毒、鼻孢子菌、鼻病毒、立克次體屬、由小株立克次體、裂谷熱病毒、立克次體立克次體、輪狀病毒、風疹、沙門氏菌屬、SARS 冠狀病毒、人疥蟎、血吸蟲屬、體細胞屬、志賀菌屬、水痘帶狀皰疹病毒、大天花或小天花、申克孢子絲菌、金黃色葡萄球菌屬、金黃色葡萄球菌、鏈球菌化膿、圓線蟲、梅毒螺旋體、絛蟲屬、破傷風、癬屬癬音鈾、癬屬、絮狀表皮癬菌、紅色毛癬菌、須毛癬菌、紅色毛癬菌、威尼克外瓶黴、毛癬菌屬屬、細胞死亡屬、弓箭毒或弓箭毒、剛地弓形蟲、旋毛蟲、陰道毛滴蟲、三丘裡三種、結核分枝桿菌、弗朗西拉圖拉菌、尿素和馬腦炎病毒、委內瑞拉馬腦炎病毒、霍亂弧菌、瓜納裡托病毒、西尼羅河病毒、白吉利絲孢酵母、假結核耶爾森氏菌、小腸結腸炎耶爾森氏菌、黃熱病病毒、毛黴菌目階（毛黴菌病）和蟲黴目階（蟲黴屬真菌病）、毛黴菌目綠膿桿菌、彎曲桿菌（弧菌）、氣單胞菌、艾氏菌、耶爾森氏菌、志賀痢疾桿菌、志賀氏桿菌、志賀氏菌、沙門氏菌、傷寒沙門氏菌、雅司螺旋體、奮森氏螺旋體、伯氏疏螺旋體、細螺旋體、卡氏肺孢子蟲、流產布魯氏菌、布魯桿菌、布魯氏菌、支原體屬、普氏立克次體、恙蟲病立克次氏體、衣原體屬、致病性真菌（煙麯黴、白色念珠菌、莢膜組織胞漿菌）、原生動物（溶組織內阿米巴、Tenas毛滴蟲、Hominis毛滴蟲、岡比亞錐蟲、羅得西亞錐蟲、羅氏利什曼原蟲、熱帶利什曼原蟲、巴西利什曼原蟲、肺孢子蟲肺炎、間日瘧原蟲、惡性瘧原蟲、瘧原蟲瘧疾）或Helminiths（日本血吸蟲、曼氏血吸蟲、埃及血吸蟲和鉤蟲）。
用作本專利申請中的細胞結合劑，治療病毒性疾病的其他抗體，包括但不限於，抗下列致病性病毒抗原的抗體：痘病毒、皰疹病毒、腺病毒、小黃病毒、腸病毒、小核糖核酸病毒、細小病毒、呼腸病毒、逆轉錄病毒、流感病毒、副流感病毒、腮腺炎、麻疹、呼吸道合胞病毒、風疹、蟲媒病毒、彈狀病毒、沙門氏菌、非A/非B型肝炎病毒、鼻病毒、冠狀病毒、羅托病毒；致癌病毒，如HBV（肝細胞癌）、人乳頭狀瘤病毒HPV（宮頸癌、肛門癌）、卡波濟氏肉瘤相關的皰疹病毒（卡波濟氏肉瘤肉瘤）、人類皰疹病毒第四型（鼻咽癌、伯基特淋巴瘤、原發性中樞神經系統淋巴瘤）、MCPyV瘤病毒（默克爾細胞癌）、SV40（猿猴病毒40）、HCV（肝細胞癌）、HTLV-1 （成人T細胞白血病/淋巴瘤）；免疫紊亂導致病毒，如人類免疫缺陷病毒（愛滋病）；中樞神經系統病毒，如JCV（進行性多灶性腦白質病）、丙型肝炎病毒MeV（亞急性硬化性全腦炎）、LCV（淋巴細胞性脈絡叢腦膜炎）、亞博病毒腦炎、正粘病毒 （腦發炎腦炎）、RV（狂犬病）、長鼻病毒、皰疹病毒腦膜炎、拉姆齊亨特綜合症II型、脊髓灰質炎病毒（脊髓灰質炎病毒、後脊髓灰質炎綜合症）、HTLV-1（熱帶麻痹性麻痹））；巨細胞病毒（巨細胞病毒視網膜炎、HSV（皰疹性角膜炎）；心血管病毒，如CBV（心包炎、心肌炎）；呼吸系統/急性病毒性鼻內炎/病毒性肺炎病毒，如愛潑斯坦-巴爾病毒[（EBV感染/傳染性單核病）、巨細胞病毒、非典冠狀病毒（嚴重急性呼吸綜合症）或正黏液病毒、流感病毒A/B/C（流感/禽流感）、副粘病毒、人類副流感病毒、RSV（人類呼吸道合胞病毒）、hMPV；消化系統病毒，如（MuV （Mumps）腮腺炎病毒、巨細胞病毒（巨細胞病毒食管炎）、腺病毒（腺病毒感染）、輪狀病毒、諾瓦克病毒、星狀病毒、冠狀病毒、HBV(乙型肝炎病毒)、CBV、HAV（甲型肝炎病毒）、HCV（丙型肝炎病毒）、HDV（丁型肝炎病毒）、HEV（戊型肝炎病毒）、HGV（G型肝炎病毒）；泌尿生殖病毒，如BK病毒、MuV病毒（腮腺炎）。
更進一步，本發明也包括本發明中偶聯物和可接受的載劑，以治療癌症和自身免疫性疾病。治療癌症和自身免疫性疾病的方法可以在體外，體內或離體實施。體外用途的實例包括用它處理細胞培養物，以殺死除了不表現靶抗原的變異體以外的所有細胞；或者殺死表現不需要的抗原的變異體。離體使用的例子包括在進行移植（HSCT）之前對造血幹細胞（HSC）進行處理，以殺死患病或惡性腫瘤細胞。例如，在癌症治療中的自體移植之前或在自身免疫性疾病的治療中從骨髓中去除腫瘤細胞或淋巴細胞，或在移植之前為了防止移植物抗主體疾病從同種異體骨髓或組織中除去T細胞和其他淋巴細胞。這樣的臨床離體治療可以按如下步驟進行：從患者或其他個體收穫骨髓，然後在含有血清的培養基中約37 °C下孵育約15分鐘至約48小時，在該培養基中加入本發明的偶聯物，濃度範疇從約1pM至0.1mM。具體的藥物濃度和孵育時間（=劑量）應當由專業臨床醫師決定。孵育後，用含血清的培養基洗滌骨髓細胞，並按照已知的方法藉由靜脈注射給患者。若患者在骨髓採集和再輸注治療細胞之間，還接受其它治療（例如消融化療或全身輻射療程）的情況下，應使用準則醫療設備將處理後的骨髓細胞在液氮中冷凍儲存。
穩定的偶聯物應當在藥物製劑中 “保持其生物學活性”，例如，如果偶聯物的生物活性在給定時間內， 例如12個月，按照抗原結合測定和/或體外細胞毒性測定的方法，生物活性可以保持在相差20%以內，較佳10%（在測定誤差內）。
對於臨床體內使用，本發明的偶聯物將以溶液或凍乾固體形式提供，其可以溶解在無菌注射用水中。適當的偶聯物投予方案如下：每天一次、每週一次、每兩週一次、每三週一次、每次四周一次或每月一次、共8-54周，靜脈投予。注射的劑量是在50至1000mL生理鹽水中 ，可任選地向其中加入人血清白蛋白（例如0.5至1mL人血清白蛋白濃縮溶液，100mg / mL）。每週的劑量約為50 µg至20 mg / kg體重，靜脈注射（每次注射10 µg至200 mg / kg的範疇）。治療後4-54周，患者可能會接受第二個療程。關於投予方式，輔料，稀釋劑，劑量，時間等的具體臨床方案可以由熟練的臨床醫生確定。
用體內或者離體殺死特定細胞的方法，可以治療的疾病的實例包括任何類型的惡性腫瘤、自身免疫疾病、移植排異和感染疾病（病毒、細菌或寄生蟲）。
獲得滿意的生物學效應所需的偶聯物的量將取決於許多因素，包括偶聯物的化學特性，效力和生物利用度，疾病類型，患者的種族，患者的疾病狀態，投予路徑，這些決定了所需劑量，投予方式和投予方案。
一般而言，可以藉由包含本發明的藥物為含0.1至10％w / v偶聯物的生理緩衝水溶液，用於腸胃外施用。典型劑量範疇為1 µg/kg至0.1 g/kg體重每天、每週、每兩周、每三周或每月一次，較佳的劑量範疇是人體等效劑量0.01 mg/kg至20mg/kg體重每週，每兩周，每三周或每月一次。待給藥物的較佳劑量可能取決於下列變數，如疾病的類型或病症的進展，患者的總體健康狀況，所選化合物的相對生物學功效，藥物的製劑，投予方式（靜脈內，肌肉內或其他），藥物在確定的投予路徑的藥代動力學特性，投予速度（推注或連續輸注）和投予方案（在給定時間內重複次數）。
本發明的偶聯物還能夠以單位劑量形式投予，其中術語“單位劑量”是指能夠給予患者的單次劑量，並且可以很容易地處置和包裝，同時活性偶聯物本身或如下文所述的藥學上可接受的組合物，保持物理和化學上穩定的單位劑量。典型的每天/每週/每兩周/每月總劑量範疇是從0.01至100mg/kg體重。作為一般指導原則，人類的單位劑量範疇為1mg到3000mg每天/每週/每兩周/每三周/每月。單位劑量較佳1至500mg，一月一次至四次，更較佳為1mg至100mg，每週/每兩周/每三週一次。本文提供的偶聯物可以藉由與一種或多種藥學上可接受的輔料混合而配製成醫藥組合物。這樣的單位劑量組合物可以藉由口服投予，如錠劑，簡單膠囊或軟凝膠膠囊的形式的藥物；或鼻內投予，如粉劑，滴鼻劑或氣霧劑的藥物；或皮膚投予，如使用局部用軟膏，乳膏，乳液，凝膠或噴霧劑或藉由透皮貼劑投予。所述組合物可以方便地以單位劑型投予，並且可以藉由藥學領域公知的一般方法製備，例如在 Remington ： The Science and Practice of Pharmacy，21 thed.； Lippincott Williams & Wilkins： Philadelphia，PA，2005.中所述的方法。
較佳的製劑包括醫藥組合物，首選口服或非腸道投予。對於口服投予劑型，如錠劑、粉劑、膠囊劑、錠劑（片劑）等可以包含一種或多種以下組分或有類似性質的其它化合物：粘合劑、比如微晶纖維素或黃耆膠；稀釋劑，比如澱粉或乳糖；分散劑，比如澱粉和纖維素衍生物；潤滑劑，比如硬脂酸鎂；助流劑，比如二氧化矽膠體；甜味劑，比如蔗糖或糖精；增味劑，比如薄荷或水楊酸甲酯。膠囊可以是硬膠囊或軟膠囊的形式，一般由明膠混合物，或與塑化劑混合制得，澱粉膠囊也是如此。另外，單位劑形可以包含各種其他原料，改變其物理形式，例如包覆糖衣，蟲膠或腸溶劑。其它的口服劑型如糖漿或酏劑可以含有甜味劑，防腐劑，顏料，著色劑和調味劑。另外，活性化合物可以藉由不同的處理和配方，使其成為可快速溶解的劑型，控釋劑型或緩釋劑，其中的緩釋劑是較好的劑型。錠劑首選包含乳糖、玉米澱粉、矽酸鎂、交聯羧甲基纖維素鈉、聚乙烯吡咯酮、硬脂酸鎂、滑石等組合的劑型中。
非腸道投予的液體藥劑包括無菌的水溶液或非水溶液、懸浮液和乳劑。液體藥劑也可以含有粘合劑、緩衝液、防腐劑、螯合劑、甜味劑、調味劑和著色劑等等。非水溶劑包括醇、丙二醇、聚乙二醇、植物油比如橄欖油和有機脂類，比如油酸乙酯。水性溶劑包括了水、醇、緩衝試劑和鹽的混合物，特別是，生物相容性的、可降解的丙交酯聚合物、丙交酯/乙交酯聚合物或者聚乙二醇/聚丙三醇共聚物可作為控制活性藥物釋放的輔料。靜脈注射中的輔料可以包括液體和營養補充物、電解質補充物、以及基於林格氏葡萄糖的輔料，以及類似的輔料。本發明的活性藥物其它可行的非腸道投予系統，包括乙烯-醋酸乙烯酯共聚物微粒，植入式滲透幫浦和脂質體。
其它可行的投予方式包括吸入劑，包括乾粉劑、氣霧劑和水滴劑。吸入劑可以是含有如聚乙二醇-9-月桂醚、甘膽酸鹽、去氧膽酸鹽或油質的溶液，可以藉由滴鼻劑，鼻內膠體的形式投予。口含藥劑包括如錠劑、糖果錠劑等，可含有調味劑如蔗糖、阿拉伯膠以及其它輔料如甘膽酸鹽等。栓劑適合於單位劑量的形式，以固體如可哥油為載劑，也可以加入水楊酸。皮膚局部用藥劑型、以膏藥、乳劑、洗液、貼片、凝膠、噴霧劑、氣霧劑或油劑為首選。凡士林、羊毛脂、聚乙二醇、醇類以及它們的混合物可以作為藥物載劑。皮膚投予的劑型可以是貼片、乳劑、緩衝溶液、溶解或分散在聚合物或粘合劑中。
在另一個具體實施例中，發明申請的偶聯物可以與其它的已知或即將已知的治療藥物，如化療藥物、放射療法、免疫療法藥物、自身免疫疾病藥物、抗感染藥物或其它抗體藥物偶聯物共同作用，達到協同效果。在另一個具體實施例中，協同藥物或放射治療可以在本發明的共軛藥物投予之前或之後投予或施行。可以是在本發明的偶聯藥物投予之前或之後1小時、12小時、一天、一星期、二星期、三星期、一個月、也可以是幾個月進行。
在其他實施例中，協同藥物包括但不限於： 1）化療藥物：a）烷基化劑，如氮芥：氯苯那普，氯普那嗪，環磷醯胺，達喀爾巴嗪，雌二醇氮芥，異環磷醯胺，氮芥，鹽酸二甲氧胺，氧化二氮芥，鹽酸氨氯地平，麥考酚酸，衛矛醇，呱泊溴烷，新氮芥，苯芥膽甾醇，松龍苯芥，噻替呱，曲磷胺對，尿嘧啶；CC-1065（包括其阿多來新、卡折來新、比折來新及其合成類似物）；多卡黴素（包括KW-2189和CBI-TMI、及其合成類似物）；苯并二氮卓二聚體（例如吡咯苯并二氮卓（PBD）或托美黴素，吲哚苯并二氮卓，咪唑苯并噻二氮卓或噁唑烷苯并二氮卓的二聚體）；亞硝基脲（卡莫司汀，洛莫司汀，氯化梭菌素，福莫司汀，尼莫司汀，拉莫司汀）；烷基磺酸鹽（白蘇芬、樹蘇芬、磺胺異丙磺胺和皮蘇芬）；三氮烯（達喀爾巴嗪）；含鉑化合物（卡鉑，順鉑，奧沙利鉑）；吖丙啶類，如苯并二氫呱喃酮，卡洛酮，美妥替派和烏雷多巴；乙烯亞胺和甲基三聚氰胺，包括六甲蜜胺，三亞乙基三胺，三乙基磷醯胺，三亞乙基硫代磷醯胺和三羥甲基甲基胺；b）植物生物鹼：如長春花生物鹼（長春新鹼，長春鹼，長春地辛，長春瑞濱，去甲長春鹼）；紫杉醇類（紫杉醇，多西紫杉醇及其類似物）；美登素類（DM1、DM2、DM3、DM4、美登素、安沙黴素及其類似物）；cryptophycin（特別是cryptophycin 1和cryptophycin 8）；埃博黴素，軟珊瑚醇，迪莫利德，草苔蟲內酯，海兔毒素，澳瑞他汀，cephalostatin；pancratistatin；sarcodictyin；海綿抑制素；c）DNA拓撲異構酶抑制劑，例如依託泊苷替尼（9-胺基喜樹鹼，喜樹鹼，克立那托，朵拉黴素，依託泊苷，磷酸依託泊苷，伊立替康，米托蒽醌，諾消靈，視黃酸（視黃醇），替尼泊苷，拓撲替康，9-硝基喜樹鹼（RFS 2000））；絲裂黴素（絲裂黴素C）；d）抗代謝物，例如抗葉酸劑，DHFR抑制劑（甲氨蝶呤，曲麥克特，二甲葉酸，蝶羅呤，氨喋呤（4-胺基苯甲酸）或其他葉酸類似物）； IMP脫氫酶抑制劑 （麥考酚酸，噻唑呋林，利巴韋林，EICAR）；核糖核苷酸還原酶抑制劑（羥基脲，去鐵胺）；嘧啶類似物，尿嘧啶類似物（安西他濱，阿紮胞苷，6-氮尿嘧啶，卡培他濱（希羅達），卡莫氟，阿糖胞苷，雙去氧尿苷，去氧氟尿苷，依諾他濱，5-氟尿嘧啶，氟尿苷，ratitrexed（Tomudex）； 胞嘧啶類似物（阿糖胞苷，胞嘧啶阿拉伯糖苷，氟達拉濱）；嘌呤類似物（硫唑嘌呤，氟達拉濱，巰嘌呤，硫胺素，硫鳥嘌呤）；葉酸補充劑，如弗洛林酸；e）激素療法劑，如受體拮抗劑，抗雌激素（甲地孕酮，雷洛昔芬，他莫昔芬），LHRH興奮劑（戈斯他林，醋酸亮丙瑞林）；抗雄激素藥（比卡魯胺，氟他胺，卡魯司酮，丙酸倍他雄酮，表雄甾醇，戈舍瑞林，亮丙瑞林，美替利定，尼魯米特，睾內酯，曲洛司坦及其他雄激素抑制劑）；維甲類化合物，維生素D3類似物（CB1093，EB1089，KH1060，膽鈣化醇，麥角鈣化甾醇）；光動力療法劑（維替泊芬，酞菁，光敏劑Pc4，去甲氧基-竹紅菌素A）；細胞因數 （干擾素-α，干擾素-γ，腫瘤壞死因數（TNF），含TNF的人蛋白）；f）激酶抑制劑，如BIBW 2992（抗-EGFR/Erb2），伊馬替尼，吉非替尼，呱加他尼，索拉非尼，達沙替尼，舒尼替尼，厄洛替尼，尼洛替尼，拉帕替尼，阿西替尼，帕唑帕尼，凡德他尼，E7080（抗VEGFR2），mubritinib，普納替尼（AP24534），bafetinib（INNO-406），bosutinib（SKI-606），卡博替尼，維莫德吉，iniparib，盧梭利替尼，CYT387，阿西替尼，tivozanib，索拉非尼，貝伐單抗，西妥昔單抗， 曲妥珠單抗，雷珠單抗，帕尼單抗，伊斯平斯；g）聚（ADP-核糖）聚合酶（PARP）抑制劑，如奧拉帕裡、尼拉帕裡、依尼帕裡、塔拉佐帕裡、維利帕裡、維利帕裡、CEP 9722（Cephalon）、E7016（Eisai）、BGB-290（Beigene）、3-胺基苯甲醯醯胺；h）抗生素，如烯二炔類抗生素（卡奇黴素，特別是卡奇黴素γ1，δ1，α1和β1（參考J.Med.Chem. 1996，39（11），2103-2117；Angew Chem Intl. Ed. Engl. 1994，33：183-186） ，達因黴素，包括達因黴素A和去氧米黴素，埃斯培拉黴素，卡塔爾黴素，C-1027，maduropeptin，新卡嗪奧斯丁和相關色蛋白烯二炔抗生素），aclacinomysins，放線菌素，安麯黴素，重氮絲氨酸， 博來黴素，卡諾黴素，卡拉黴素，洋紅黴素，嗜癌素，色黴素，達金黴素，柔紅黴素，去柔紅黴素，6-重氮-5-側氧基-L-去甲亮氨酸，阿黴素，嗎啉-阿黴素，氰基嗎啉-阿黴素，2-吡咯啉阿黴素和去氧柔紅黴素，表柔比星，阿柔比星，伊達比星，馬可黴素，nitomycin，黴酚酸，諾加黴素，橄欖黴素，peplomycin，potfiromycin，嘌呤黴素，奎拉黴素，羅道黴素，鏈黑黴素，鏈脲黴素，殺結核菌素，烏苯美司，淨司他丁，佐柔比星；i）其他，如聚酮化合物（番荔素），特別是bullatacin和bullatacinone；吉西他濱，環氧酶素（如卡菲偌米布），硼替佐米，沙利度胺，來那度胺，pomalidomide，tosedostat，zybrestat，PLX4032，STA-9090，Stimuvax，allovectin-7，Xegeva，Provenge，Yervoy，異戊二烯化抑制劑（如洛伐他汀），多巴胺能神經毒素（如1-甲基-4-苯基吡啶鎓離子）、細胞週期抑制劑（如星形孢菌素），放線菌素（如放線菌素D，更生黴素），博萊黴素（如博來黴素A2，博萊黴素B2，培洛黴素），蒽環類抗生素（如柔紅黴素），鵝膏毒素，阿黴素 （亞德里亞黴素），伊達比星，表柔比星，吡柔比星，佐柔比星，米托蒽醌，MDR抑制劑（如維拉帕米），Ca 2 +ATP酶抑制劑（如毒胡蘿蔔素），組蛋白去乙醯酶抑制劑（伏立諾他，羅米地辛，帕比司他，丙戊酸，Mocetinostat（MGCD0103）， Belinostat，PCI-24781，恩替諾特，SB939，Resminostat，Givinostat，AR-42，CUDC-101，蘿蔔硫素，曲古抑菌素A）；塞來昔布，格列酮類，表沒食子兒茶素沒食子酸酯，雙硫侖，Salinosporamide A；抗腎上腺藥物，如氨魯米特，米托坦，曲洛司坦，醋葡醛內酯，醛磷醯胺，胺基乙醯丙酸，安吖啶，阿拉伯糖苷，bestrabucil，比生群，edatraxate，defofamine，美可辛，地吖醌，依氟鳥氨酸（DFMO），elfomithine，依利醋銨，依託格魯，硝酸鎵，胞嘧啶，羥基脲，伊班膦酸鹽，香菇多糖，氯尼達明，米托胍腙，米托蒽醌，莫呱達醇，二胺硝吖啶，噴司他丁，蛋氨氮芥，吡柔比星，鬼臼酸，2-乙肼，甲基苄肼；PSK ®；呱嗪二酮丙烷；根黴素；西佐；螺環鍺；細格孢氮雜酸；三亞胺醌；三氯三乙胺；單端孢黴烯（特別是T-2毒素，疣孢菌素A，杆孢菌素A和anguidine），聚氨酯，siRNA，反義藥物和核酸分解酶； 2）自身免疫疾病藥物，包括但不限於，環孢菌素、環孢菌素A、胺基己酸、硫唑嘌呤、溴隱亭、苯丁酸氮芥、氯喹、環磷醯胺、皮質類固醇（例如安西奈德、倍他米松、布地奈德、氫化可的松、氟尼縮松、丙酸氟替卡松、氟可龍達那唑、地塞米松、曲安奈德、二丙酸倍氯米松）、DHEA、依那西普、羥基氯喹、英夫利昔單抗、美洛昔康、甲氨蝶呤、麥考酚酸酯、潑尼松、西羅莫司、他克莫司； 3） 抗傳染病劑包括，但不限於：a）.胺基糖苷類：丁胺卡那黴素、武夷黴素、慶大黴素（奈替米星、西索米星、異帕米星）、潮黴素、卡那黴素（丁胺卡那黴素、阿貝卡星、胺基去氧卡那黴素、地貝卡星、妥布黴素）、新黴素（新黴素 B、巴龍黴素、核糖黴素）、奈替米星、大觀黴素、鏈黴素、妥布黴素、甲基姿蘇黴素；b）. 醯胺醇類：疊氮氯黴素、氯黴素、氟甲碸黴素、甲碸黴素； c）. 安沙黴素類：格爾德黴素、除莠黴素； d）. 碳青黴烯類：比阿培南、多尼培南、厄他培南、亞胺培南/西司他丁、美羅培南、帕尼培南； e）. 頭孢類：碳頭孢烯（氯碳頭孢）、頭孢乙腈、頭孢克洛、頭孢拉定、頭孢羥氨苄、頭孢羅寧、頭孢噻啶、頭孢噻吩或頭孢菌素、頭孢氨苄、頭孢來星、頭孢孟多、頭孢匹林、頭孢三嗪、頭孢氮氟、頭孢西酮、頭孢唑啉、頭孢拉宗、頭孢卡品、頭孢達肟、頭孢吡肟、頭孢米諾、頭孢西丁、頭孢丙烯、頭孢沙定、頭孢替唑、頭孢呋辛、頭孢克肟、頭孢地尼頭孢妥侖、頭孢吡肟、頭孢他美、頭孢甲肟、頭孢地嗪、頭孢尼西、頭孢呱酮、頭孢雷特、頭孢噻肟、頭孢替安、頭孢唑蘭、頭孢氨苄、頭孢咪唑、頭孢匹胺、頭孢匹羅、頭孢泊肟、頭孢丙烯、頭孢喹肟、頭孢磺啶、頭孢他啶、頭孢特侖、頭孢布烯、頭孢噻林、頭孢唑肟、頭孢、頭孢曲松、頭孢呋辛、頭孢唑喃、頭黴素（頭孢西丁、頭孢替坦、頭孢美唑）氧頭孢烯（氟氧頭孢、拉氧頭孢）； f）. 糖肽：博來黴素、萬古黴素（奧利萬星、特拉萬星）、替考拉甯（達巴萬星） 雷莫拉寧； g）. 甘氨醯：如替加環素； h）. β-內醯胺酶抑制劑：青黴烷（舒巴坦、他唑巴坦）、克拉維烷（克拉維酸）； i）. 林可醯胺類：克林黴素、林可黴素； j）. 脂肽：達托黴素、A54145、鈣依賴性抗生素（CDA）； k）. 大環內酯類：阿奇黴素、喹紅黴素、克拉黴素、地紅黴素、紅黴素、氟紅黴素、交沙黴素、酮內酯類（泰利黴素、喹紅黴素）麥迪黴素、美奧卡黴素、竹桃黴素、利福黴素（利福平、利福平、利福布汀、利福噴丁）、羅他黴素、羅紅黴素、壯觀黴素、螺旋黴素、他克莫司（FK506）、醋竹桃黴素、泰利黴素； l）.單環β-內醯胺抗生素： 氨曲南、 替吉莫南； m）. 唑烷酮類：利奈唑胺； n）. 青黴素類：阿莫西林、氨苄西林（匹氨西林、海他西林、巴氨西林、美坦西林、酞氨西林）疊氮西林、阿洛西林、青黴素、苄星青黴素、苯氧基苄星青黴素、氯甲西林、普魯卡因青黴素、羧苄青黴素（卡茚西林）、鄰氯青黴素、雙氯青黴素、先鋒黴素、氟氯西林、美西林（氮卓脒青黴素雙酯）、美洛西林、甲氧西林、萘夫西林、苯唑西林、醋甲西林、青黴素、奈西林、青黴素、呱拉西林、苯丙西林、磺苄西林、替莫西林、替凱西林； o）. 多肽：桿菌肽、多粘菌素E、多粘菌素B； p）. 喹諾酮類藥物：阿拉沙星、巴羅沙星、環丙沙星、克林沙星、達氟沙星、二氟沙星、依諾沙星、恩諾沙星、Floxin、加雷沙星、加替沙星、吉米沙星、格帕沙星、曲伐沙星卡諾、左氧氟沙星、洛美沙星、麻保沙星、莫西沙星、那氟沙星、諾氟沙星、奧比沙星、氧氟沙星、培氟沙星、曲伐沙星、格帕沙星、西他沙星、司帕沙星、替馬沙星、妥舒沙星、曲伐沙星； q）. 菌素：普那黴素、奎奴普丁/達福普汀）； r）. 磺胺類藥物：磺胺米隆、百浪多息、磺胺醋醯、磺胺甲、磺胺、柳氮磺胺吡啶、磺胺異噁唑、甲氧苄氨嘧啶、甲氧苄啶 - 磺胺甲基異噁唑（複方新諾明）； s）. 類固醇抗菌藥物：如夫西地酸； t）. 四環素類：強力黴素、金黴素、氯羥四環素、地美環素、賴甲環素、氯甲烯土黴素、美他環素、米諾環素、土黴素、青呱四環素、羅利環素、四環素、甘氨醯（如替加環素）； u）. 其他類型的抗生素：番荔枝科、胂凡納明、細菌萜醇抑制劑（桿菌肽）、DADAL / AR抑制劑（環絲氨酸）、dictyostatin、海綿內酯、艾榴塞洛素、埃博黴素、乙胺丁醇、依託泊苷、法羅培南、夫西地酸、痢特靈、異煙肼、laulimalide、甲硝唑、莫匹羅星、mycolactones、NAM合成抑制劑（如磷黴素）、呋喃妥因、紫杉醇、平板黴素、吡嗪醯胺、奎奴普丁/達福普汀、利福平、他唑巴坦替硝唑、番荔枝內酯； 4） 抗病毒的藥物： a）. 進入/融合抑制劑：aplaviroc、馬拉韋羅、維立韋羅、gp41的（恩夫韋）、PRO140、CD4（Ibalizumab）； b）. 整合酶抑制劑：拉替拉韋、埃替拉韋、globoidnan A； c）. 成熟抑制劑：貝韋立馬、vivecon； d）. 神經氨酸酶抑制劑：奧司他韋、紮那米韋、帕拉米韋； e）. 核苷和核苷酸：阿巴卡韋、阿昔洛韋、阿德福韋、氨多索韋、apricitabine、溴夫定、西多福韋克拉夫定、右艾夫他濱、去羥肌苷（DDI）、艾夫他濱、恩曲他濱（FTC）、恩替卡韋、泛昔洛韋、氟脲嘧啶（5-FU）、3'-氟取代的2'，3'-二去氧核苷衍生物（例如，3'-氟-2'，3'-二去氧胸苷（FLT）和3'-氟-2'，3'-雙去氧（FLG）福米韋生、更昔洛韋、碘苷、拉米夫定（3TC）、L-核苷（如β-L-胸苷、β-L-2'-去氧胞苷）、噴昔洛韋、Racivir、利巴韋林、stampidine、司他夫定（d4T的）、他利韋林（偉拉咪定）、替比夫定、替諾福韋、伐昔洛韋三氟胸苷、纈更昔洛韋、紮西他濱（DDC）、齊多夫定（AZT）； f）. 非核苷類：金剛烷胺、ateviridine、卡普韋林、 二芳基嘧啶 （依曲韋林、利匹韋林）、地拉韋啶、二十二烷醇、乙米韋林、依法韋侖、膦甲酸（磷醯基甲酸）、咪喹莫特、干擾素α、洛韋胺、洛德腺苷、他巴唑、奈韋拉平、NOV-205、聚乙二醇干擾素α、鬼臼毒素、利福平、金剛乙胺、瑞喹莫德（R-848）、醋胺金剛烷； g）. 蛋白酶抑制劑：安普那韋、阿紮那韋、博賽潑維、達蘆那韋、福沙那韋、茚地那韋、洛匹那韋、奈非那韋、pleconaril、利托那韋、沙奎那韋、特拉匹韋（VX-950）替拉那韋； h）. 其他類型的抗病毒的藥物：抗體酶、阿比朵爾、calanolides A、淺藍菌素、藍藻-N、二芳基嘧啶、表沒食子兒茶素沒食子酸酯（EGCG）、膦甲酸鈉、格瑞弗森、他利韋林（偉拉咪定）、羥基脲、KP-1461、米替福新、普來可那立、合成抑制劑、利巴韋林、seliciclib； 5）放射治療使用的放射性同位素。放射性同位素（放射性核素）的實例有 3H， 11C， 14C， 18F， 32P， 35S， 64Cu， 68Ga， 86Y， 99Tc， 111In， 123I， 124I， 125I， 131I， 133Xe， 177Lu， 211At或 213Bi。 放射性同位素標記的抗體可用於受體靶向成像實驗，或者可用於如本發明的抗體-藥物偶聯物的靶向治療（Wu 等， Nature Biotechnology 2005，23（9）： 1137-1146）。細胞結合分子，例如抗體可以連結配合試劑，用文獻（Current Protocols in Immunology，Volumes 1 and 2，Coligen 等，Ed. Wiley-Interscience，New York，N.Y.，Pubs. （1991））所述的方法與放射性金屬結合、絡合或生成複合物。可以絡合金屬離子的配位體包括DOTA，DOTP，DOTMA，DTPA和TETA（Macrocyclics，Dallas，TX）等； 6）作為協同劑的其它細胞結合分子-藥物偶聯物。較佳的協同偶聯物上的細胞毒性分子為： 喜樹鹼類似物、美登素生物鹼類似物、紫杉醇（紫杉烷）類似物、CC-1065類似物、柔紅黴素和多柔比星化合物、鵝膏毒素類似物、苯并二氮雜二聚體 （如吡咯苯并二氮卓（PBD）、托馬黴素、安麯黴素、吲哚苯并噻二氮卓類、咪唑苯并噻二氮卓類或噁唑烷苯并二氮卓的二聚體）、加利西黴素和烯二炔類抗生素化合物、放線菌素、重氮絲氨酸、博萊黴素、表柔比星、他莫昔芬、伊達比星、海兔毒素、澳瑞他汀（如單甲基澳瑞他汀E、MMAE 、MMAF、澳瑞他汀PYE、澳瑞他汀TP、澳瑞他汀2-AQ、6-AQ、EB （AEB）和EFP （AEFP））、多卡米星、格爾德黴素、氨甲喋呤、噻替派、 長春鹼、 長春新鹼、 hemiasterlin、 納沙醯胺、 小金黴素、radiosumin、互花米草素、 microsclerodermin、 噻吩甲醯胺、 埃斯呱黴素、PNU-159682，以及它們的類似物及衍生物； 7）其他免疫治療藥物例如：咪喹莫特，干擾素（如α，β），粒細胞集落刺激因數，細胞因數，白介素（IL-1-IL-35），抗體（如曲妥珠單抗，帕妥珠單抗，貝伐單抗，西妥昔單抗，帕尼單抗，英夫利昔單抗，阿達木單抗，巴厘昔單抗，達利珠單抗，奧馬珠單抗，PD-1或PD-L1），蛋白-結合藥物（如Abraxane），偶聯下列藥物的抗體：卡奇黴素衍生物，美登素衍生物（DM1和DM4），CC-1065，SN-38， 伊喜替康，拓撲替康，拓撲異構酶I抑制劑，多卡黴素，PBD或IGN小溝結合劑，有效的紫杉醇衍生物，阿黴素，澳瑞他汀抗有絲分裂藥物，例如曲妥珠單抗-DM1，Trastuzumab deruxtecan（DS-8201a），Inotuzumab ozogamicin，Brentuximab vedotin，Sacituzumab govitecan，Glembatumumab vedotin，Lorvotuzumab mertansine，AN-152 LMB2，TP-38，VB4-845，Cantuzumab mertansine ， AVE9633，SAR3419，CAT-8015 （抗-CD22）， IMGN388，Mirvetuximab soravtansine （IMGN853），Enfortumab vedotin，Milatuzumab-doxorubicin，SGN-75（抗CD70），抗Her3-依喜替康，抗-Trop2- 依喜替康，抗-CD79b-MMAE，抗-Her2-MMAE，抗-Trop2-MMAE，抗-Her2-MMAF，抗-Trop2-MMAF，抗-CD22-卡奇黴素衍生物，抗-CD22-MMAE，抗-Her2-澳瑞他汀衍生物，抗Muc1-澳瑞他汀衍生物，抗-cMet-澳瑞他汀衍生物或抗Claudin18.2-澳瑞他汀衍生物； 8）上述任何藥物的藥學上可接受的鹽、酸或衍生物。
在另一種協同免疫療法中，免疫檢查點抑制劑抗體，TCR（T細胞受體）T細胞抗體，CAR（嵌合抗原受體）T細胞抗體或B細胞受體（BCR）抗體，Natural killer（NK）細胞抗體或細胞毒細胞的抗體，或抗-CD3，CD4，CD8，CD16 （FcγRIII），CD19，CD20，CD22，CD25，CD27，CD30，CD33，CD37，CD38，CD40，CD40L，CD45RA，CD45RO，CD56，CD57，CD57 bright，CD70，CD79，CD79b，CD123，CD125，CD138，TNFβ，Fas配位體，MHC I類分子（HLA-A，B，C），VEGF或NKR-P1抗原的抗體，較佳與本專利的偶聯物一起用於協同治療。
在另一個實施例中，包含治療有效劑量的結構式為（I）至（VII）的偶聯物，或本發明中描述的其它任何偶聯物的醫藥組合物，可以與其他治療劑，如化學治療劑，放射治療劑，免疫治療劑，自身免疫病症治療劑，抗感染劑或其他偶聯物協同投予，以有效治療或預防癌症或自身免疫疾病或感染性疾病。協同劑較佳選自由下列組成之群組藥物中的一種或幾種：阿巴西普、醋酸阿比特龍、對乙醯胺基酚/氫可酮、阿達木單抗、ADXS31-142、ADXS-HER2、阿法替尼馬來酸鹽、阿侖單抗、曲妥珠單抗、苯丙胺/右苯丙胺、阿那曲唑、阿紮那韋、Atezolizumab、阿托伐他汀、阿昔替尼、貝林、BCG Live、貝伐單抗、卡巴他賽、卡博替、貝沙羅汀、blinatumomab、硼替佐米、波舒替尼、brentuximab vedotin、布地奈德、布地奈德/福莫特羅、丁丙諾啡、卡培他濱、卡非佐米、塞來考昔、ceritinib、西妥昔單抗、環孢素、西那卡塞、克裡唑替尼、達比加群、達拉菲尼、阿法達貝汀、地瑞那韋、甲磺酸伊馬替尼、達沙替尼、地尼白介素、狄諾塞麥、雙丙戊酸鈉、右蘭索拉唑、右呱甲酯、Dinutuximab、多西環素、度洛西汀、恩曲他濱/利匹韋林/替諾福韋地索蒲賽富馬酸鹽、恩曲他濱/替諾福韋/依法韋侖、依諾肝素、恩雜魯胺、阿法依泊汀、厄洛替尼、埃索美拉唑、依折麥布、依折麥布/辛伐他汀、非諾貝特、非格司亭、芬戈莫德、丙酸氟替卡松、氟替卡松/沙美特羅、氟維司群、吉非替尼、格拉替雷、醋酸戈舍瑞林、伊馬替尼、替伊莫單抗、依魯替尼、胰島素門冬胰島素、地特胰島素、甘精胰島素、賴脯胰島素、干擾素β1a、干擾素β1b、拉帕替尼、Ipilimumab、異丙托溴銨/沙丁胺醇、醋酸蘭樂肽、來那度胺、聯合二甲苯磺酸鹽、來曲唑、左甲狀腺素、左旋甲狀腺素、利多卡因、利奈唑胺、利拉魯肽、 MEDI4736、美金剛、呱醋甲酯、美托洛爾、莫達非尼、莫米松、尼祿替尼、Nivolumab、奧法木單抗、奧立他珠單抗、帕唑帕尼、派姆單抗、培美曲塞、帕妥珠單抗、肺炎球菌結合疫苗、泊馬度胺、普瑞巴林、喹硫平、雷貝拉唑氯化鐳223、雷洛昔芬、拉替拉韋、雷莫瑞單抗、雷珠單抗、瑞格菲尼、利妥昔單抗、利伐沙班、羅米地辛、羅蘇伐他汀、盧梭替尼磷酸鹽、沙丁胺醇、司維拉明、西地那非、siltuximab、西他列汀、西他列汀/二甲雙胍、索非那新、索拉非尼、舒尼替尼、他達拉非、他莫昔芬、替拉普韋、替西羅莫司、替諾福韋/恩曲他濱、睾酮凝膠、沙利度胺（Talidex）、噻托溴銨、托瑞米芬、曲美替尼、曲妥珠單抗、Tretinoin、尤特克單抗、纈沙坦、凡德他尼、維羅非尼、伏立諾他、阿柏西普、Zostavax及其類似物、衍生物、藥學上可接受的鹽、載劑、稀釋劑或輔料或上述的組合。
另外，本發明還涉及偶聯物的製備方法。 本發明的偶聯物可以藉由熟習此項技術者公知的方法製備。 偶聯物中喜樹鹼類似物可以藉由採用或者應用後文所述合成方法而製備，或經熟習此項技術者調整後來合成。 適當的修飾和替代對於熟習此項技術者而言將是顯而易見的和眾所周知的，並且可以從科學文獻中容易地獲得。這些方法可以參見：R.C. Larock，Comprehensive Organic Transformations，第二版，Wiley-VCH Publishers出版，1999。
進行本申請所述的反應時，可能有必要保護部分活性官能團，例如羥基、胺基、亞胺基、巰基和羧基，以避免副反應的發生。保護官能團的常見方法可參見P. G. Wuts and T.W. Greene，Greene's Protective Groups in Organic Synthesis，Wiley-Interscience出版； 第四版 （2006）。有些反應可能需要在酸鹼存在時，或在適當的溶劑中進行。對酸、鹼和溶劑並沒有特別的限制，只要沒有不利的影響，任何習知的酸、鹼以及溶劑都可以在這裡使用。反應可以在廣泛的溫度範疇內進行。總的來說，反應溫度通常在-80°C - 150°C 之間比較容易操作（在室溫與100°C之間更好）。反應所需的時間同樣可以在很大的範疇裡變化，這取決於多種因素，尤其是反應溫度和所用溶劑的性質。一般地說，理想條件下的反應，3至20小時的反應時間就足夠了。
反應結束後的後處理操作可以按習知方法進行。例如，可以藉由把溶劑從反應體系中蒸掉的方式回收反應產物。或者，如果必要的話，在把溶劑蒸出後，可以先把剩餘物倒入水中，再用與水不互溶的有機溶劑萃取，最後，蒸出萃取溶劑。此外，如有需要，產物還可藉由各種常見的方法進一步純化，如重結晶、析出沈澱或各種色譜層析的方法，如柱層析和製備薄板層析法。 本發明中的喜樹鹼類似物及其偶聯物的合成見圖1-32。
本發明的細胞結合分子與喜樹鹼類似物的偶聯也在實施例中有進一步的描述。當然，本發明並不局限於下述實施例。
實驗
以下實施例進一步描述本發明，這些實施例無意於限制本發明的範疇。除非另有說明，以下示例中所述的細胞株根據美國典型培養物保藏中心（ATCC）或德國布勞恩斯魏克的德國Deutsche Sammlung von Mikroorganismen und Zellkulturen GmbH（DMSZ）或中國科學院上海細胞培養所指定的條件進行培養。 除非另有說明，細胞培養試劑來自Invitrogen Corp.。胺基酸和它們的衍生物以及預裝的樹脂來自默克化工國際公司或Synthetech公司，或肽國際公司或Chembridge國際公司或西格瑪奧德里奇（默克公司）。一些連接子，NHS酯/馬來醯亞胺的連接子（AMAS，BMPS，GMBS，MBS，SMCC，EMCS或Sulfo-EMCS，SMPB，SMPH，LC-SMCC，Sulfo-KMUS，SM（PEG）4，SM（PEG） 6，SM（PEG）8，SM（PEG）12，SM（PEG）24）； NHS酯/吡啶基二硫醇（SPDP，LC-SPDP或Sulfo-LC-SPDP，SMPT，Sulfo-LC-SMPT）； NHS酯/鹵代乙醯（SIA，SBAP，SIAB或Sulfo-SIAB）； NHS酯/重氮（SDA或Sulfo-SDA，LC-SDA或Sulfo-LC-SDA，SDAD或Sulfo-SDAD）；馬來醯亞胺/醯肼（BMPH，EMCH，MPBH，KMUH）；吡啶基二硫醇/醯肼（PDPH）；異氰酸酯/馬來醯亞胺（PMPI）購自Thermo Fisher Scientific Co.  SPDB和SPP連接子根據參考文獻（Cumber，A.等人，Bioconjugate Chem.，1992，3，397-401）製備。Roche的曲妥珠單抗在中國的藥店採購。 Trop-2抗體是Sacituzumab的生物衍生物，公司內部生產。 EGFR抗體指Nimotuzumab，是從中國藥店購買的。 PEG和PEG衍生物購自中國浙江省嘉興市Biomatrik Inc。拓撲替康及其衍生物或主要中間物，來自若干公司，例如中國成都天源天然產物有限公司，中國蘇州光明生物醫學有限公司。實驗動物藉由中國南京的GemPharmatech有限公司和中國上海的SLAC實驗動物有限公司，購自國家模型小鼠資源中心。 T-DM1是藉由中國香港的一家藥店從羅氏公司購買的。購買的所有其他試劑和溶劑均為可用的最高等級，無需進一步純化即可使用。EDC（EDCI），PFP，HATU，TATU，PyBrOP，DIPEA，TEA，PPTS，DMAP，BrOP，p-TSA，DTT，EDTA，TCEP，NHS，三氟乙酸，Ellman試劑，Traut試劑（2-亞胺基硫雜環戊烷），γ- 硫代丁內酯和所有其他化學試劑以及無水溶劑均來自Sigma-Aldrich International（Merck）或Aladdin Chemical（Shanghai）Ltd。所有無水溶劑均藉由商業路徑獲得，並在氮氣下保存在Sure-seal瓶中。在Varain PreStar HPLC上進行製備HPLC分離（乙腈/水，含有甲酸或三氟乙酸）。 NMR光譜在Bruker 500MHz儀器上分析測得。化學位移（δ）以百萬分數（ppm）為單位報告，以四甲基矽烷（0.00 ppm）為參考值，偶合常數（J）以Hz為單位報告。質譜資料在裝有Acquity UPLC分離模組和Acquity TUV檢測器的Waters Xevo G2 QTOF質譜上獲得的。
實施例 1.（S）-（1-（（4-乙基-4，9-二羥基-3，14-二側氧基-3，4，12，14-四氫-1H-呱喃[3'， 4'；6，7]吲哚并[[1，2-b]喹啉-10-基）甲基）六氫吡啶-4-基）胺基甲酸第三丁酯（2）的合成。
Figure 02_image1207
向10-羥基喜樹鹼（2g，5.49mmol）的乙酸（10mL）溶液中加入4-第三丁氧基羰基胺基六氫吡啶（4.4g，21.9mmol）和37％甲醛（1.8g，21.9mmol）的乙酸（15 mL）溶液。將反應混合物加熱至約60℃並攪拌2小時，然後去除乙酸。在10mL 甲醇中重結晶，得到化合物2（2.1g，68％收率），為黃色粉末狀固體。ESI-MS m/z： [M + H] +C 31H 36N 4O 7： 計算值577.26；實測值577.26。
實施例 2.（S）-10-（（4-胺基六氫吡啶-1-基）甲基）-4-乙基-4，9-二羥基-1H-呱喃并[3'，4'；6，7]吲哚并[1，2] -b]喹啉-3，14（4H，12H）-二酮（3）的合成。
Figure 02_image1209
將化合物2（150mg，0.26mmol）溶解於二氯甲烷和三氟乙酸（2mL/6mL）的混合物中，並在室溫攪拌1小時。然後將混合物濃縮並在真空幫浦上乾燥，得到化合物3（120mg，100％收率），為黃色固體。ESI-MS m/z： [M + H] +C 26H 28N 4O 5： 計算值477.21；實測值477.21。
實施例 3.化合物（S）-4-（2，5-二側氧基-2，5-二氫-1H-吡咯-1-基）-N-（1-（（4-乙基-4，9-二羥基-3，14-二側氧基-3，4，12，14-四氫-1H-呱喃并[3 '，4'：6，7]吲哚并[1，2-b]喹啉-10-基）甲基）六氫吡啶-4-基）丁醯胺（5）的合成。
Figure 02_image1211
將化合物3（62 mg，0.13 mmol）和五氟苯基4-（2，5-二側氧基-2，5-二氫-1H-吡咯-1-基）丁酸酯（化合物4，56 mg，0.16 mmol）溶於DMF（ 5mL），冷卻至約0℃，然後加入N，N-二異丙基乙胺（45μL，0.16mmol），將反應升溫至室溫，攪拌2小時，濃縮，並藉由製備型HPLC（乙腈/含有甲酸的水）純化，得到化合物5（44 mg，54％收率）。ESI-MS m/z： [M + H] +C 34H 35N 5O 8： 計算值642.25；實測值642.25。
實施例 4.（S）-五氟苯基30-（4-（2，5-二側氧基-2，5-二氫-1H-吡咯-1-基）丁醯胺基）-27，31-二側氧基-2，5，8，11，14，17，20，23-八側氧基-26，32-二氮雜三十六烷-36-甲酸酯（7）的合成。
Figure 02_image1213
將化合物6（100mg，0.13mmol）溶於二氯甲烷（5mL）的溶液中，加入五氟苯酚（48mg，0.26mmol）和1-（3-二甲基胺基丙基）-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽（50mg，0.26mmol）。將反應物在室溫攪拌2小時，並用二氯甲烷（50mL）稀釋，用水（2×10mL）洗滌，經硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮，得到化合物7（120mg，100％收率）。ESI-MS m/z： [M + H] +C 40H 57F 5N 4O 15： 計算值929.37；實測值929.37。
實施例 5.（S）-2-（4-（2，5-二側氧基-2，5-二氫-1H-吡咯-1-基）丁醯胺基）-N1-（4-（（1-（（（S）- 4-乙基-4，9-二羥基-3，14-二側氧基-3，4，12，14-四氫-1H-呱喃并[3'，4'；6，7]吲哚并[1，2-b]喹啉- 10-基）甲基）六氫吡啶-4-基）胺基）-4-側氧基丁基）-N5-（2，5，8，11，14，17，20，23-八側氧基二十五烷-25-基）戊二醯胺（8）的合成。
Figure 02_image1215
將化合物3（60 mg，0.126 mmol）和化合物7（97 mg，0.105 mmol）溶於DMF（5 mL）中，冷卻至約0℃，然後加入N，N-二異丙基乙胺（37μL，0.21 mmol）。將反應升溫至室溫，攪拌2小時，濃縮，並藉由製備型HPLC（乙腈/含有甲酸的水）純化，得到化合物8（50 mg，39%收率）。ESI-MS m/z： [M + H] +C 60H 84N 8O 19： 計算值1221.59；實測值1221.59。
實施例 6. 3-（2-（2-（2-（4-（2，5-二側氧基-2，5-二氫-1H-吡咯-1-基）丁醯胺基）乙氧基）乙氧基）丙酸第三丁酯（10）的合成。
Figure 02_image1217
將化合物9（1.32 g，5.7 mmol）溶解於DMF（10 mL）中，加入4-（2，5-二側氧基-2，5-二氫-1H-吡咯-1-基）丁酸（1.04 g，5.7mmol），隨後依次加入HATU（2.6 g，6.8 mmol）和三乙胺（0.96 mL，6.8 mmol），並在室溫下攪拌反應1小時，用二氯甲烷（100mL）稀釋，用水（2×10mL）洗滌，用無水硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮。殘餘物藉由柱色譜法（乙酸乙酯/石油醚）純化，得到化合物10（1.8g，80％收率）。ESI-MS m/z： [M + H] +C 19H 30N 2O 7： 計算值399.21；實測值399.21。
實施例 7.3-（2-（2-（4-（2-（4-（2，5-二側氧基-2，5-二氫-1H-吡咯-1-基）丁醯胺基）乙氧基）乙氧基）丙酸（11）的合成。
Figure 02_image1219
將化合物10（0.40 g，1.0 mmol）溶解於二氯甲烷和三氟乙酸（12mL/4mL）的混合溶液中，並在室溫攪拌1小時。然後將混合物濃縮，與二氯甲烷濃縮兩次，並在真空幫浦上乾燥，得到呈黃色固體的化合物11（0.34g，100％收率）。ESI-MS m/z： [M + H] +C 15H 22N 2O 7： 計算值343.14；實測值343.14。
實施例 8.五氟苯基3-（2-（2-（4-（2，5-二側氧基-2，5-二氫-1H-吡咯-1-基）丁亞胺基）乙氧基）乙氧基）丙酸酯（12）的合成。
Figure 02_image1221
將化合物11（0.34 g，1.0 mmol）溶於二氯甲烷（30mL）的溶液中，加入五氟苯酚（0.46 g，2.5mmol）和1-（3-二甲基胺基丙基）-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽（0.57 g，3.0mmol）。將反應物在室溫攪拌2小時，並用二氯甲烷（50mL）稀釋，用水（200mL）洗滌，經硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮，得到化合物12（0.51 g，100％收率）。ESI-MS m/z： [M + H] +C 21H 22F 5N 2O 7： 計算值509.13；實測值509.13。
實施例 9.N，N-二甲基六氫吡啶-4-胺的（13）合成 。
Figure 02_image1223
將N-Boc六氫吡啶酮（10 g，0.05 mol）溶於甲醇（100 mL）中，加入二甲胺水溶液（25 mL，0.22 mol），與10％ Pd/C（1 g）在室溫下催化加氫攪拌隔夜。過濾後，將濾液濃縮並與二氯甲烷共濃縮3次（3×80mL），並在真空幫浦上乾燥以除去所有二甲基胺。將鹽酸/甲醇（4M，50mL）加入到殘餘物中，並在室溫攪拌30分鐘。沈澱出大量白色固體，將混合物過濾，得到白色固體13（9g，90％收率）。ESI-MS m/z： [M + H] +C 7H 16N 2，計算值129.13；實測值129.13。
實施例 10.（9H-芴-9-基）甲基4-（二甲胺基）六氫吡啶-1-甲酸酯（14）的合成。
Figure 02_image1225
將化合物13（2.0g，9.9mmol）溶解在1，4-二噁烷和水（30mL/50mL）的混合溶液中，並加入碳酸氫鈉（2.5g，29.8mmol），將混合物冷卻至0℃，滴加9-茀基甲氧基羰基氯（3.1g，11.9mmol）的1，4-二噁烷（10mL）溶液。加完後，溫度逐漸升高到室溫，將反應物攪拌1小時。加入100mL的1M 鹽酸，並將混合物用乙酸乙酯（3×50mL）洗滌，用碳酸鈉將水相調節至pH〜10，然後用二氯甲烷（3×50mL）萃取。用水（50mL）洗滌合併的有機相，用硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮，並藉由柱色譜法（甲醇 /二氯甲烷）純化，得到化合物14（2.75g，79％收率）。ESI-MS m/z： [M + H] +C 22H 26N 2O 2， 計算值351.20；實測值351.20。
實施例 11.（S）-第三丁基（1-（（4-（羥甲基）苯基）胺基）-1-側氧基丙-2-基）胺基甲酸酯（15）的合成。
Figure 02_image1227
將對胺基苄醇（5.0 g，0.04 mol）和Boc-L-丙氨酸（8.0 g，0.042 mol）溶解在無水THF（100 mL）中，加入2-乙氧基-1-乙氧基羰基-1，2-二氫喹啉（11 g，0.044mol）並在室溫攪拌隔夜。將反應混合物倒入水（300mL）中，用乙酸乙酯（3×100mL）萃取，合併的有機相用水（100mL）洗滌，用硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮。將粗產物與乙酸乙酯/石油醚（1:3）一起濕磨，過濾，得到化合物15（9.8g，84％收率），為白色固體。ESI-MS m/z： [M + H] +C 15H 22N 2O 4： 計算值295.16；實測值295.16。
實施例 12.（S）-第三丁基（1-（（4-（溴甲基）苯基）胺基）-1-側氧基丙-2-基）胺基甲酸酯（16）的合成。
Figure 02_image1229
將化合物3（3.5g，11.9mmol）和四溴化碳（5.9g，17.8mmol）溶解在二氯甲烷（80mL）中，冷卻至約0℃，並加入三苯基膦（4.7g，17.8mmol）。反應升溫至室溫並攪拌30分鐘，然後加入20 g矽膠，混合，並在旋轉濃縮儀上乾燥，並上樣至矽膠柱（100 g矽膠）上，並用石油醚/乙酸乙酯溶離，得到化合物16（ 2.6 g，62％收率）。ESI-MS m/z： [M + H] +C 15H 21BrN 2O 3： 計算值357.07；實測值357.07。
實施例 13.（S）-1-（（（9H-芴-9-基）甲氧基）羰基）-N-（4-（2-（第三丁氧基羰基）胺基）丙醯胺基）苄基）-N，N-二甲基六氫吡啶-4-溴化胺（17）的合成。
Figure 02_image1231
將化合物16（2.3g，6.4mmol）和化合物14（2.7g，7.7mmol）溶解於無水THF（50mL）中，並在室溫下攪拌隔夜。在旋轉濃縮儀上除去大部分THF後，將乙酸乙酯（50mL）加入到殘餘物中。過濾得到的漿液，得到白色固體（4.5g，100％收率）。ESI-MS m/z： M +C 37H 47N 4O 5： 計算值627.35；實測值627.35。
實施例 14.（S）-N-（4-（2-（第三丁氧羰基）胺基）丙醯胺基）苄基）-N，N-二甲基六氫吡啶-4-溴化胺（18）的合成。
Figure 02_image1233
將化合物17（1.0g，1.41mmol）溶解的DMF（5mL）中，並加入六氫吡啶（1mL）。在室溫攪拌30分鐘後，加入30mL乙酸乙酯，並攪拌10分鐘。過濾混合物，得到白色粉末狀固體（550mg，80％收率）。ESI-MS m/z： M +C 22H 37N 4O 3： 計算值405.29；實測值405.29。
實施例 15.N-（4-（（S）-2-（（第三丁氧基羰基）胺基）丙醯胺基）苄基）-1-（（S）-4-乙基-4，9-二羥基-3，14-二側氧基-3，4，12，14-四氫-1H-呱喃并[3 '，4'：6，7]吲哚并[1，2-b]喹啉-10-基）甲基）-N，N-二甲基六氫吡啶-4-溴化胺（19）的合成。
Figure 02_image1235
向10-羥基喜樹鹼（375 mg，1.03 mmol）的乙酸（5 mL）溶液中加入化合物18（550 mg，1.13 mmol）和37％甲醛（92 mg，1.13 mmol）的乙酸溶液（5 mL）。將該混合物加熱至約65℃並攪拌1小時，然後濃縮，與無水甲醇濃縮。用二氯甲烷和少量甲醇重結晶，得到化合物19（0.5g，63％收率），為黃色粉末。ESI-MS m/z： M +C 43H 53N 6O 8： 計算值781.39；實測值781.39。
實施例 16.N-（4-（（S）-2-胺基丙胺基）苄基）-1-（（（S）-4-乙基-4，9-二羥基-3，14-二側氧基-3，4，12，14-四氫-1H-呱喃并[3 '，4'：6，7]吲哚并[1，2-b]喹啉-10-基）甲基）-N，N-二甲基六氫吡啶-4-溴化胺（20）的合成。
Figure 02_image1237
將化合物19（50 mg，0.058 mmol）溶解於二氯甲烷和三氟乙酸（2mL/6mL）的混合溶液中，並在室溫攪拌30分鐘。然後將混合物濃縮並在真空幫浦上乾燥，得到呈黃色固體的化合物20（44 mg，100％收率）。ESI-MS m/z： M +C 38H 45N 6O 6： 計算值681.34；實測值681.34。
實施例 17.N-（4-（（S）-2-（4-（2，5-二側氧基-2，5-二氫-1H-吡咯-1-基）丁醯胺基）丙醯胺基）苄基）-1-（（（S）-4-乙基-4，9-二羥基-3，14-二側氧基-3，4，12，14-四氫-1H-呱喃并[3 '，4'：6，7]吲哚并[1，2-b]喹啉-10-基）甲基）-N，N-二甲基六氫吡啶-4-甲酸銨（21）的合成。
Figure 02_image1239
將化合物20（88 mg，0.116 mmol）和化合物4（49 mg，0.140 mmol）溶於DMF（5 mL）中，冷卻至約0℃，然後加入N，N-二異丙基乙胺（40μL，0.232 mmol）溶解。反應升溫至室溫。攪拌2小時，濃縮，並藉由製備型HPLC（乙腈/含有甲酸的水）純化，得到化合物21（66 mg，68%收率）。ESI-MS m/z： M +C 46H 52N 7O 9： 計算值846.38；實測值846.38。
實施例 18.N-（4-（（9S，17S）-9-（4-（2，5-二側氧基-2，5-二氫-1H-吡咯-1-基）丁醯胺基）-17-甲基-6，10，15-三側氧基-2-氧雜-5，11，16-三氮雜十八烷醯胺基）苄基）-1-（（（S）-4-乙基-4，9-二羥基-3，14-二側氧基-3，4，12，14-四氫-1H-呱喃并[3 '，4'：6，7]吲哚并[1，2-b]喹啉-10-基）甲基）-N，N-二甲基六氫吡啶-4-甲酸銨（22）的合成。
Figure 02_image1241
將化合物20（44 mg，0.058 mmol）和化合物7（60 mg，0.065 mmol）溶於DMF（5 mL）中，冷卻至約0℃，然後加入N，N-二異丙基乙胺（20μL，0.116 mmol）溶解。反應升溫至室溫。攪拌2小時，濃縮，並藉由製備型HPLC（乙腈/含有甲酸的水）純化，得到化合物22（51 mg，58%收率）。ESI-MS m/z： M +C 72H 101N 10O 20： 計算值1425.72；實測值1425.72。
實施例 19.1-（2-胺基-4-氟-5-甲氧基苯基）-2-氯乙酮（24d）的合成。
Figure 02_image1243
將溶於二氯甲烷（20mL）的3-氟-4-甲氧基苯胺（5g，35.4mmol）溶液，滴加冰水冷卻的三氯化硼（1M的二氯甲烷，38.9mL）溶液。將反應攪拌10分鐘，然後加入氯乙腈（3.2g，42.5mmol）和三氯化鋁（5.2g，38.9mmol）。加完後，將反應升溫至室溫然後回流隔夜。然後將反應混合物冷卻至約0℃，用2M 鹽酸（80mL）驟冷並在室溫持續攪拌2個小時。分離各層，水相用二氯甲烷（3×80mL）萃取。用水（100mL）洗滌合併的有機相，用硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮，在矽膠柱上純化，用石油醚/乙酸乙酯溶離，得到化合物24d（2g，26％收率）為黃色固體。ESI-MS m/z： [M + H] +C 9H 9ClFNO 2： 計算值218.03；實測值218.03。
實施例 20.（S）-11-（氯甲基）-4-乙基-8-氟-4-羥基-9-甲氧基-1H-呱喃并[3 '，4'：6，7]吲哚并[1，2-b]喹啉-3，14（4H，12H）-二酮（26d）的合成。
Figure 02_image1245
將化合物24d（0.50g，2.29mmol）和化合物25（0.57g，2.19mmol）溶解在無水甲苯（40mL）中，並加入對甲苯磺酸（42mg，0.219mmol）。將懸浮液加熱回流2天，然後冷卻至室溫。除去約三分之二的甲苯後，將殘餘物過濾並將濾餅用二氯甲烷洗滌，風乾以得到化合物26d（0.7g，72％收率）為灰色粉末狀固體。ESI-MS m/z： [M + H] +C 22H 18ClFN 2O 5： 計算值445.09；實測值445.09。
實施例 21.N-（4-（（S）-2-（（第三丁氧羰基）胺基）丙醯胺基）苄基）-1-（（S）-4-乙基-8-氟-4-羥基-9-甲氧基-3，14-二側氧基-3，4，12，14-四氫-1H-呱喃并[3 '，4'：6，7]吲哚并[1，2-b]喹啉-11-基）甲基）-N，N-二甲基六氫吡啶-4-氯化胺（27）的合成。
Figure 02_image1247
在0℃下，將化合物26d（218 mg，0.49 mmol），化合物18（200 mg，0.49 mmol）的DMF（5 mL）混合物攪拌30分鐘，然後加入三乙胺（63μL，0.45 mmol），繼續攪拌1小時。濃縮反應物，並藉由製備型HPLC（乙腈/含有甲酸的水）純化，得到化合物10（240 mg，59％收率），為黃色固體。ESI-MS m/z： M +C 44H 54FN 6O 8： 計算值813.40；實測值813.40。
實施例 22.N-（4-（（S）-2-胺基丙胺基）苄基）-1-（（S）-4-乙基-8-氟-4-羥基-9-甲氧基-3，4，12，14-四氫-1H-呱喃并[3 '，4'：6，7]吲哚并[1，2-b]喹啉-11-基）甲基）-N，N-二甲基六氫吡啶-4-氨鎓（28）的合成。
Figure 02_image1249
將化合物27（50 mg，0.06 mmol）溶解於二氯甲烷和三氟乙酸（2mL/6mL）的混合溶液中，並在室溫攪拌30分鐘。然後將混合物濃縮並在真空幫浦上乾燥，得到化合物28（42 mg，100％收率）為黃色固體。ESI-MS m/z： M +C 39H 46FN 6O 6： 計算值713.35；實測值713.35。
實施例 23.N-（4-（（30S，38S）-30-（4-（2，5-二側氧基-2，5-二氫-1H-吡咯-1-基）丁醯胺）-38-甲基-27，31，36-三側氧基-2，5，8，11，14，17，20，23-八氧雜-26，32，37-三氮雜三十九烷醯胺基）苄基）-1-（（（S）-4-乙基-8-氟-4-羥基-9-甲氧基-3，14-二側氧基-3，4，12，14-四氫-1H-呱喃并[3 '，4'：6，7]吲哚并[1，2-b]喹啉-11-基）甲基）-N，N-二甲基六氫吡啶-4-甲酸銨（29）的合成。
Figure 02_image1251
將化合物28（47 mg，0.060 mmol）和化合物7（60 mg，0.066 mmol）溶於DMF（5 mL）中，冷卻至約0℃，然後加入N，N-二異丙基乙胺（21μL，0.12 mmol）溶解。反應升溫至室溫攪拌2小時，濃縮，並藉由製備型HPLC（乙腈/含有甲酸的水）（乙腈/含有甲酸的水）純化，得到化合物29（23 mg，25％收率）。ESI-MS m/z： M +C 73H 102FN 10O 20： 計算值1457.73；實測值1457.73。
實施例 24.（S）-11-（氨甲基）-4-乙基-8-氟-4-羥基-9-甲氧基-1H-呱喃并[3 '，4'：6，7]吲哚并[1，2-b]喹啉-3，14（4H，12H）-二酮（30）的合成。
Figure 02_image1253
將化合物26d（80mg，0.18mmol）溶解於乙醇（5mL）中，加入六亞甲基四胺（76mg，0.54mmol），並將混合物回流90分鐘，然後冷卻至室溫。加入濃鹽酸（100μL），並攪拌30分鐘。濃縮後，獲得灰白色固體，藉由製備型HPLC純化（乙腈/含有甲酸的水），得到化合物30（40mg，52％收率）。ESI-MS m/z： [M + H] +C 22H 20FN 3O 5： 計算值426.14；實測值426.14。
實施例 25.（S）-2-（4-（2，5-二側氧基-2，5-二氫-1H-吡咯-1-基）丁醯胺基）-N1-（4-（（（（S）-4-乙基-8-氟-4-羥基-9-甲氧基-3，4，12，14-四氫-1H-呱喃-[3 '，4'：6，7]吲哚并[1，2-b]喹啉-10-基）甲基）胺基）-4-側氧基丁基）-N5-（2，5，8，11，14，17，20，23-八氧雜二十五烷-25-基）戊二醯胺（31）的合成。
Figure 02_image1255
將化合物30（40 mg，0.094 mmol）和化合物7（120 mg，0.13 mmol）溶於DMF（5 mL）中，冷卻至約0℃，然後加入N，N-二異丙基乙胺（33μL，0.188 mmol）。反應升溫至室溫。攪拌2小時，濃縮，並藉由製備型HPLC（乙腈/含有甲酸的水）純化，得到化合物31（55 mg，50%收率）。ESI-MS m/z： [M + H] +C 56H 76FN 7O 19： 計算值1170.52；實測值1170.52。
實施例 26.第三丁基（1-甲基六氫吡啶-4-基）胺基甲酸酯（32）的合成。
Figure 02_image1257
將4-（第三丁氧基羰基胺基）六氫吡啶（2g，10mmol）溶解在甲醇（30mL）中，然後加入37％甲醛（1.6g，20mmol）與10％Pd/C（0.2g）催化加氫（1atm）攪拌隔夜並過濾。濃縮濾液，得到化合物32（2.1g，100％收率）。ESI-MS m/z： [M + H] +C 11H 22N 2O 2： 計算值215.17；實測值215.17。
實施例 27.（S）-4-（（第三丁氧基羰基）胺基）-1-（（4-乙基-8-氟-4-羥基-9-甲氧基-3，14-二側氧基-3，4，12，14-四氫-1H-呱喃并[3 '，4'：6，7]吲哚并[1，2-b]喹啉-11-基）甲基）-1-甲基六氫吡啶-1-氯化鎓（33）的合成。
Figure 02_image1259
將化合物26d（50mg，0.112mmol）和化合物32（26mg，0.123mmol）的DMF（3mL）溶液在室溫下持續攪拌2小時。藉由製備型HPLC（乙腈/含有甲酸的水）純化反應溶液，得到化合物6（33mg，47％收率）。ESI-MS m/z： [M ] +C 33H 40FN 4O 7： 計算值623.29；實測值623.29。
實施例 28.（S）-4-胺基-1-（（4-乙基-8-氟-4-羥基-9-甲氧基-3，14-二側氧基-3，4，12，14-四氫-1H-呱喃并[3 '，4'：6，7]吲哚并[1，2-b]喹啉-11-基）甲基）-1-甲基六氫吡啶-1-鎓（34）的合成。
Figure 02_image1261
將化合物33（30 mg，0.053 mmol）溶解於二氯甲烷和三氟乙酸（3mL/1mL）的混合溶液中，並在室溫攪拌30分鐘。然後將混合物濃縮並在真空幫浦上乾燥以得到化合物34（33mg，100％收率）。ESI-MS m/z： [M] +C 28H 32N 4O 5： 計算值477.21；實測值477.21。
實施例 29.4-（（S）-30-（4-（2，5-二側氧基-2，5-二氫-1H-吡咯-1-基）丁醯胺）-27，31-二側氧基-2，5，8，11，14，17，20，23-八氧雜-26，32-二氮雜三十六烷醯胺基）-1-（（（S）-4-乙基-8-氟-4-羥基-9-甲氧基-3，14-二側氧基-3，4，12，14-四氫-1H-呱喃并[3 '，4'：6，7]吲哚并[1，2-b]喹啉-11-基）甲基）-1-甲基六氫吡啶-1-甲酸鎓（35）的合成。
Figure 02_image1263
將化合物34（30 mg，0.053 mmol）和化合物7（60 mg，0.079 mmol）溶於DMF（5 mL）中，冷卻至約0℃，然後加入N，N-二異丙基乙胺（18L，0.106 mmol）。反應升溫至室溫攪拌2小時，濃縮，並藉由製備型HPLC（乙腈/含有甲酸的水）純化，得到化合物35（15 mg，21%收率）。ESI-MS m/z： [M] +C 62H 88FN 8O 19： 計算值1267.61；實測值1267.61。
實施例 30.（9H-芴-9-基）4-甲基呱嗪-1-羧酸甲酯（36）的合成。
Figure 02_image1265
將1-甲基呱嗪（5.0 g，50.0 mmol）溶解在1，4-二噁烷和水（60 mL/100 mL）的混合溶液中，加入碳酸氫鈉（12.6 g，150 mmol），並將混合物冷卻至0℃，隨後滴加9-茀基甲氧基羰基氯（15.5g，60.0mmol）的1，4-二噁烷（20mL）溶液。加完後，溫度逐漸升高到室溫，將反應物攪拌3小時。加入300mL的1M 鹽酸，並用乙酸乙酯（2×100mL）洗滌混合物，用碳酸鈉將水相調節至pH〜10，然後用乙酸乙酯（2×100mL）萃取。用水（250mL）洗滌合併的有機相，用硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮，並藉由柱色譜法（甲醇 /二氯甲烷）純化，得到化合物2（6.5 g，40%收率）。ESI-MS m/z： [M + H] +C 20H 22N 2O 2， 計算值323.17；實測值323.19。
實施例 31.（S）-4-（（（9H-芴-9-基）甲氧基）羰基）-1-（4-（2-（第三丁氧基羰基）胺基）丙醯胺基）苄基）-1-甲基呱嗪-1-溴化鎓（37）的合成。
Figure 02_image1267
將化合物16（2.3g，6.4mmol）和化合物36（2.1 g，6.4 mmol）溶解於無水THF（100mL）中，並在室溫下攪拌隔夜。在旋轉濃縮儀上除去大部分THF後，將乙酸乙酯（200mL）加入到殘餘物中。過濾得到的漿液，得到白色固體（3.8 g，87%收率）。ESI-MS m/z： M +C 35H 43N 4O 5： 計算值599.32；實測值599.32。
實施例 32.（S）-1-（4-（2-（第三丁氧羰基）胺基）丙醯胺基）苄基）-1-甲基呱嗪-1-溴化鎓（38）的合成。
Figure 02_image1269
將化合物37（3.12 g，4.6 mmol）溶解的DMF（25mL）中，並加入六氫吡啶（3mL）。在室溫攪拌2小時後，加入200mL乙酸乙酯，並攪拌10分鐘。過濾混合物，得到白色固體（1.54g，77％收率）。ESI-MS m/z： M +C 20H 33N 4O 3： 計算值377.26；實測值377.26。
實施例 33.1-（4-（（S）-2-（（第三丁氧羰基）胺基）丙醯胺基）苄基）-4-（（S）-4-乙基-8-氟-4-羥基-9-甲氧基-3，14-二側氧基-3，4，12，14-四氫-1H-呱喃并[3 '，4'：6，7]吲哚并[1，2-b]喹啉-11-基）甲基）-1-甲基呱嗪-1-鎓（39）的合成。
Figure 02_image1271
在0℃下，將化合物38（0.30 g，0.66 mmol），化合物26d（0.25 g，0.56 mmol）的DMF（10 mL）混合物攪拌30分鐘，然後加入N，N-二異丙基乙胺（49μL，0.28 mmol）並將反應物升溫至室溫攪拌隔夜，濃縮並藉由製備型HPLC（乙腈/含有甲酸的水）純化，得到化合物39（0.40 g，80％收率）。ESI-MS m/z： M +C 42H 50FN 6O 8： 計算值785.37；實測值785.37。
實施例 34.1-（4-（（S）-2-胺基丙醯胺基）苄基）-4-（（（S）-4-乙基-8-氟-4-羥基-9-甲氧基-3，14-二側氧基-3，4，12，14-四氫-1H-呱喃并[3'，4'；6，7]吲哚并[[1，2-b]喹啉-11-基）甲基）-1-甲基呱嗪-1-鎓（40）的合成。
Figure 02_image1273
將化合物39（0.30 g，0.35 mmol）溶解於二氯甲烷和三氟乙酸（3mL/3mL）的混合溶液中，並在室溫攪拌30分鐘。然後將混合物濃縮並在真空幫浦上乾燥，得到化合物40（0.27 g，100％收率）為黃色固體。ESI-MS m/z： M +C 37H 42FN 6O 6： 計算值477.21；實測值477.21。
實施例 35.1-（4-（（S）-2-（4-（2，5-二側氧基-2，5-二氫-1H-吡咯-1-基）丁醯胺基）丙醯胺基）苄基）-4-（（S）-4-乙基-8-氟-4-羥基-9-甲氧基-3，14-二側氧基-3，4，12，14-四氫-1H-呱喃并[3 '，4'：6，7]吲哚并[1，2-b]喹啉-11-基）甲基）-1-甲基呱嗪（41）的合成。
Figure 02_image1275
將化合物40（50mg，0.065mmol）和化合物4（30mg，0.098mmol）溶解在DMF（3mL）中，然後加入N，N-二異丙基乙胺（45μL，0.26mmol）。將反應在室溫下攪拌30分鐘，濃縮，並藉由製備型C-18 HPLC（乙腈/含有甲酸的水）純化，得到化合物41（37mg，61％收率）。ESI-MS m/z： M +C 45H 49FN 7O 9： 計算值850.36；實測值850.36。
實施例 36.1-（4-（（30S，38S）-30-（4-（2，5-二側氧基-2，5-二氫-1H-吡咯-1-基）丁醯胺）-38-甲基-27，31，36-三側氧基-2，5，8，11，14，17，20，23-八氧雜-26，32，37-三氮雜-三十九烷醯胺基）苄基）-4-（（（S）-4-乙基-8-氟-4-羥基-9-甲氧基-3，14-二側氧基-3，4，12，14-四氫-1H-呱喃并[3 '，4'：6，7]吲哚并[1，2-b]喹啉-11-基）甲基）-1-甲基呱嗪-1-甲酸鎓（42）
Figure 02_image1277
將化合物40（70mg，0.092mmol）溶解在DMF（2mL）中，加入化合物7（70mg，0.092mmol）的DMF（2mL）溶液，然後依次加入HATU（52mg，0.138mmol）和三乙胺 （52 µL，0.368mmol），隨後在室溫攪拌30分鐘。濃縮後，將殘餘物藉由製備型HPLC（乙腈/含有甲酸的水）純化，得到化合物43（50.9mg，37％收率）。ESI-MS m/z： [M+] +C 71H 98FN 10O 20： 計算值1429.69；實測值1429.69。
實施例 37.1-（4-（（S）-17-（2，5-二側氧基-2，5-二氫-1H-吡咯-1-基）-2-甲基-4，14-二側氧基-7，10-二側氧基-3，13-二氮雜癸醯胺）苄基）-4-（（（S）-4-乙基-8-氟-4-羥基-9-甲氧基-3，14-二側氧基-3，4，12，14-四氫-1H-呱喃并[3 '，4'：6，7]吲哚并[1，2-b]喹啉-11-基）甲基）-1-甲基呱嗪-1-甲酸鎓（43）的合成。
Figure 02_image1279
將化合物40（0.10 g，0.13 mmol）的DMF（1 mL）溶液和化合物12（66 mg，0.13 mmol）的DMF（2 mL）溶液混合，然後加入N，N-二異丙基乙胺（90μL，0.52 mmol） 。將反應混合物在室溫攪拌1小時，濃縮，並藉由製備型HPLC（乙腈/含有甲酸的水）純化，得到化合物43（50.9mg，39％收率）。ESI-MS m/z： M +C 52H 62N 8O 12： 計算值1009.45；實測值1009.45。
實施例 38.（S）-3-（第三丁氧基羰基）胺基）-2-（2，5-二側氧基-2，5-二氫-1H-吡咯-1-基）丙酸（44）的合成。
Figure 02_image1281
在冰水浴中向2-胺基-3-（（第三丁氧基羰基）胺基）丙酸（1 g，4.90 mmol）的碳酸氫鈉飽和溶液（20 mL）中加入2，5-二側氧基2，5-甲基的二氫-1H-吡咯-1-羧酸甲酯（1.52 g，9.80 mmol）。將反應物攪拌30分鐘，然後倒入含有100mL乙酸乙酯的分液漏斗中，並分離有機相，用50mL水和50mL鹽水洗滌，用無水硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮，得到化合物4（1.39g，72％收率）。
實施例 39.（S）-五氟苯基3-（第三丁氧基羰基）胺基）-2-（2，5-二側氧基-2，5-二氫-1H-吡咯-1-基）丙酸酯（45）的合成。
Figure 02_image1283
向化合物44（0.10 g，0.35 mmol）的二氯甲烷（30mL）溶液中，加入五氟苯酚（97 mg，0.52 mmol）和1-（3-二甲基胺基丙基）-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽（0.13 g，0.7 mmol）。將反應物在室溫攪拌2小時，並用二氯甲烷（50mL）稀釋，用水（200mL）洗滌，經硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮，得到化合物45（0.16 g，100％收率）。ESI-MS m/z： [M + H] +C 18H 15F 5N 2O 6： 計算值451.09；實測值451.09。
實施例 40.化合物46的合成。
Figure 02_image1285
將化合物40（0.05 g，0.065mmol）和化合物45（45 mg，0.10 mmol）溶解在DMF（3mL）中，然後加入N，N-二異丙基乙胺（45μL，0.26mmol）。將反應物在室溫下攪拌1小時，濃縮並藉由製備型HPLC（乙腈/含有甲酸的水）純化，得到化合物46（35mg，52％收率）。ESI-MS m/z： M +C 49H 56FN 8O 11： 計算值951.41；實測值951.41。
實施例 41.1-（4-（（S）-2-（（S）-3-胺基-2-（2，5-二側氧基-2，5-二氫-1H-吡咯-1-基）丙醯胺基）丙醯胺基）苄基）-4-（（（S）-4-乙基-8-氟-4-羥基-9-甲氧基-3，14-二側氧基-3，4，12，14-四氫-1H-呱喃并[3 '，4'：6，7]吲哚并[1，2-b]喹啉-11-基）甲基）-1-甲基呱嗪-1-鎓（47）的合成。
Figure 02_image1287
將化合物46（35mg，0.03mmol）溶解於二氯甲烷（2mL）中，並與三氟乙酸（1mL）反應。在室溫攪拌1小時後，將反應混合物濃縮，與二氯甲烷濃縮兩次，並在真空幫浦上乾燥，得到化合物47（30.4mg，96％收率）。ESI-MS m/z： M +C 44H 48FN 8O 9： 計算值851.35；實測值851.35。
實施例 42.（S）-第三丁基（1-（4-乙基-8-氟-4-羥基-9-甲氧基-3，14-二側氧基-3，4，12，14-四氫-1H-呱喃并[3 '，4'：6，7]吲哚并[1，2-b]喹啉-11-基）甲基）六氫吡啶-4-基）胺基甲酸酯（48）的合成。
Figure 02_image1289
將化合物26d（50mg，0.11mmol）溶解於DMF（3mL）中，然後加入六氫吡啶-4-基胺基甲酸第三丁基酯（25mg，0.12mmol），並在室溫攪拌5小時。將混合物濃縮並藉由製備型HPLC（乙腈/含有甲酸的水）純化，得到化合物48（30mg，45％收率）。ESI-MS m/z： [M + H] +C 32H 37FN 4O 7： 計算值609.26；實測值609.26。
實施例 43.（S）-11-（（4-胺基六氫吡啶-1-基）甲基）-4-乙基-8-氟-4-羥基-9-甲氧基-1H-呱喃[3 '，4'：6，7]吲哚并[1，2-b]喹啉-3，14（4H，12H）-二酮（49）的合成。
Figure 02_image1291
將化合物48（30 mg，0.03mmol）溶解於二氯甲烷（2mL）中，並和三氟乙酸（2mL）反應。在室溫攪拌1小時後，將混合物濃縮，與二氯甲烷濃縮兩次，並在真空幫浦上乾燥，得到化合物49（25.4 mg，100%收率）。ESI-MS m/z： [M + H] +C 27H 30FN 45： 計算值509.21；實測值509.21。
實施例 44.（S）-2-（4-（2，5-二側氧基-2，5-二氫-1H-吡咯-1-基）丁醯胺基）-N1-（4-（（1-（（（（S）-4-乙基-8-氟-4-羥基-9-甲氧基-3，14-二側氧基-3，4，12，14-四氫-1H-呱喃并[3 '，4'：6，7]吲哚并[1，2-b]喹啉-11-基）甲基）六氫吡啶-4-基）胺基）-4-側氧基丁基）-N5-（2，5，8，11，14，17，20，23-八氧雜二十五烷-25-基）戊二醯胺（50）的合成。
Figure 02_image1293
將化合物49（25.4 mg，0.05 mmol）溶解在DMF（2 mL）中，加入化合物7（38.1 mg，0.05 mmol），然後加入HATU（28.5 mg，0.08 mmol）和三乙胺（14 µL，0.1 mmol），並在室溫下攪拌反應物1小時，濃縮並藉由製備型HPLC（乙腈/含有甲酸的水）純化，得到化合物50（14.4mg，23％收率）。ESI-MS m/z： [M + H] +C 61H 85FN 8O 19： 計算值1253.59；實測值1253.59。
實施例 45.第三丁基雙（2-（2，2，2-三氟乙醯胺基）乙基）胺基甲酸酯（51）的合成。
Figure 02_image1295
在0℃下，在30分鐘內向二亞乙基三胺（6.18g，60mmol）的二氯甲烷（120mL）溶液中滴加三氟乙酸乙酯（18.75g，132mmol）的二氯甲烷（60mL）溶液，然後升溫至室溫並攪拌1小時。在室溫下逐滴加入二碳酸二第三丁酯（28.78 g，132 mmol）和三乙胺（13.33 g，132 mmol）的二氯甲烷（60 mL）溶液，並攪拌隔夜。將反應混合物用飽和碳酸鈉（2×200mL），水（2×200mL），鹽水（200mL）洗滌，用硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱（石油醚/乙酸乙酯）純化，得到白色固體（17.4g，73.3％收率）。ESI-MS m/z： [M + H] +C 13H 19F 6N 3O 4： 計算值396.30； 實測值396.28。
實施例 46.第三丁基雙（2-胺基乙基）胺基甲酸酯（52）的合成。
Figure 02_image1297
將化合物51（4.28g，10.8mmol）溶解於甲醇（50mL）中，並在室溫下與氫氧化鈉（5.42g，135mmol）的水（50mL）溶液攪拌3小時。將反應濃縮，用二氯甲烷（3×100mL）萃取，將有機相用鹽水（100mL）洗滌，用硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮，得到化合物3（1.8g，82％收率）。ESI-MS m/z： [M + H] +C 9H 21N 3O 2計算值204.28；實測值204.12。 實施例 47.4，4 '-（（（（第三丁氧基羰基）氮雜二基）雙（乙烷-2，1-二基））雙（氮雜二基））雙（4-側氧基丁酸）（53）的合成。
Figure 02_image1299
將化合物52（1.8g，8.8mmol）溶解在二氯甲烷（150mL）中，加入琥珀酸酐（2.2g，22.1mmol）。在室溫攪拌隔夜，將反應濃縮並在矽膠柱上純化，用二氯甲烷/ 甲醇溶離，得到化合物53（2.99g，84％收率）。ESI-MS m/z： [M + H] +C 17H 29N 3O 8： 計算值404.43； 實測值404.11。
實施例 48.雙（（S）-4-乙基-4-羥基-3，14-二側氧基-3，4，12，14-四氫-1H-呱喃并[3 '，4'：6，7]吲哚并[1，2-b]喹啉-9-基）4，4'-（（（（第三丁氧基羰基）氮雜二基）雙（乙烷-2，1-二基））雙（氮雜二基））雙（4-側氧基丁酸酯）（54）的合成。
Figure 02_image1301
向化合物53（853mg，2.1mmol）和化合物5（1.71g，4.7mmol）的DMF（100mL）溶液中，依次加入三乙胺（948mg，9.4mmol）和HATU（1.79g，4.7mmol）。將所得混合物攪拌隔夜，然後濃縮，藉由矽膠柱純化（甲醇/二氯甲烷），得到化合物54（2.84g，100％收率）。ESI-MS m/z： [M + H] +C 57H 57N 7O 16： 計算值1097.10； 實測值1097.65。
實施例 49.雙（（（S）-4-乙基-4-羥基-3，14-二側氧基-3，4，12，14-四氫-1H-呱喃-[3 '，4'：6，7]吲哚并[1，2-b]喹啉-9-基）4，4'-（（氮雜二基（乙烷-2，1-二基））雙（氮雜二基））雙（4-側氧基丁酸酯）（55）的合成。
Figure 02_image1303
將化合物54（2.84g，2.1mmol）溶解在二氯甲烷（40mL）中，並加入三氟乙酸（20mL）。將反應物在室溫攪拌1小時，然後濃縮，得到化合物55（3.3g，100％收率）。ESI-MS m/z： [M + H] +C 52H 49N 7O 14： 計算值996.98； 實測值996.60。
實施例 50.（S）-4-乙基-4-羥基-3，14-二側氧基-3，4，12，14-四氫-1H-呱喃并[3 '，4'：6，7]吲哚并[1，2-b]喹啉-9-基30-（4-（2，5-二側氧基-2，5-二氫-1H-吡咯-1-基）丁醯胺基）-37-（2-（4-（（（S）-4-乙基-4-羥基-3，14-二側氧基-3，4，12，14-四氫-1H-呱喃并[3 '，4'：6，7]吲哚并[1，2-b]喹啉-9-基）氧基）-4-側氧基丁醯胺基）乙基）-27，31，36，41-四側氧基-2，5，8，11，14，17，20，23-八側氧基-26，32，37，40-四氮雜四十四烷-44-酸酯（56）
Figure 02_image1305
向化合物55（614mg，0.60mmol）和化合物53（470mg，0.60mmol）的DMF（20mL）溶液中，依次加入三乙胺（249mg，2.5mmol）和HATU（234mg，0.60mmol）。將所得混合物攪拌40分鐘，然後濃縮，藉由矽膠柱（甲醇 /二氯甲烷）純化，得到化合物56（46mg，5％收率）。ESI-MS m/z： [M + H] +C 86H 105N 11O 28： 計算值17410.81； 實測值1742.01。
實施例 51.（S）-4-乙基-4-羥基-9-甲氧基-1H-呱喃并[3 '，4'：6，7]吲哚并[1，2-b]喹啉-3，14（4H，12H）-二酮（57）的合成。
Figure 02_image1307
將10-羥基喜樹鹼（2.5g，6.86mmol）溶解在DMF（150mL）中，加入碳酸鉀（1.90g，13.72mmol）和碘甲烷（1.17g，8.23mmol），並在室溫攪拌隔夜。將石油醚（150mL）和乙酸乙酯（150mL）的混合溶劑加入到反應混合物中並攪拌。沈澱出黃色固體，並藉由過濾收集，然後分散在水（20mL）中。逐滴加入1 N鹽酸直至pH為7，並再次過濾混合物，得到化合物57（1.0g，38％收率）。ESI-MS m/z： [M + H] +C 21H 18N 2O 5計算值379.38；實測值379.05。
實施例 52.雙（（（S）-4-乙基-9-甲氧基-3，14-二側氧基-3，4，12，14-四氫-1H-呱喃并[3 '，4 '：6，7]吲哚并[1，2-b]喹啉-4-基）（（（第三丁氧基羰基）氮雜二基）雙（乙烷-2，1-二基））二胺基甲酸酯（59）的合成。
Figure 02_image1309
將化合物57（350mg，0.9mmol），4-二甲基胺基吡啶（339mg，2.8mmol）和三光氣（93mg，0.34mmol）在氦氣下濕磨，均勻混合，然後滴加無水二氯甲烷（8mL）並攪拌10分鐘。將化合物52（64mg，0.34mmol）溶解在無水二氯甲烷（4mL）溶液中，然後加入三乙胺（93mg，0.9mmol）。攪拌15分鐘後，將溶液濃縮，並藉由矽膠柱（甲醇 /二氯甲烷）純化，得到化合物59（200mg，22％收率）。ESI-MS m/z： [M + H] +C 53H 53N 7O 14： 計算值1013.03； 實測值1013.26。
實施例 53.雙（（（S）-4-乙基-9-甲氧基-3，14-二側氧基-3，4，12，14-四氫-1H-呱喃并[3 '，4'：6，7]吲哚并[1，2-b]喹啉-4-基）（氮雜二（乙烷-2，1-二基））二胺基甲酸酯（60）的合成。
Figure 02_image1311
將化合物59（200mg，0.2mmol）溶解於二氯甲烷（10mL）中，並與三氟乙酸（5mL）反應4小時。濃縮反應混合物，得到化合物60（0.43g，100％收率）。ESI-MS m/z： [M + H] +C 48H 45N 7O 12： 計算值912.91； 實測值912.62。
實施例 54.雙（（（S）-4-乙基-9-甲氧基-3，14-二側氧基-3，4，12，14-四氫-1H-呱喃并[3 '，4'：6，7]吲哚并[1，2-b]喹啉-4-基）（（4-（2，5-二側氧基-2，5-二氫-1H-吡咯-1-基）丁醯基）氮雜二炔基）雙（乙烷-2，1-二基））二胺基甲酸酯（61）
Figure 02_image1313
向化合物59（249mg，0.27mmol）和化合物7（60mg，0.32mmol）的二氯甲烷（10mL）溶液中加入三乙胺（112μL，0.81mmol）和HATU（104mg，0.27mmol）。將反應攪拌40分鐘，然後用水（20mL）洗滌。濃縮有機相，並藉由製備型HPLC（乙腈/含有甲酸的水）純化，得到化合物61（50mg）。ESI-MS m/z： [M + H] +C 56H 52N 8O 15計算值1078.06；實測值1078.77。
實施例 55.（S）-N，N'-（（（（（2S，20S）-11-（第三丁氧基羰基）-2，20-二甲基-4，7，15，18-四側氧基-3，8，11，14，19-五氮雜二十一烷-1，21-二醯基）雙（氮雜二醯基））雙（4，1-亞苯基））雙（亞甲基））雙（1-（（（S）-4-乙基-8-氟-4-羥基-9-甲氧基-3，14-二側氧基-3，4，12，14-四氫-1H-呱喃-[3 '，4'：6，7]吲哚[1，2-b]喹啉-11-基）甲基）-N，N-二甲基六氫吡啶-4-氮鎓）（62）的合成。
Figure 02_image1315
將化合物40（96mg，0.132mmol）和化合物53（26mg，0.066mmol）溶解在DMF（3mL）中，並冷卻至0℃。 隨後加入HATU（50mg，0.132mmol）和N，N-N-二異丙基乙胺（46μL，0.264mmol），加入完成後，在0℃下，攪拌30分鐘。將粗反應混合物直接在製備型HPLC上純化（乙腈/含有0.1％甲酸的水），得到化合物62（80mg，67％收率）。ESI-MS m/z： [M] 2+C 91H 109F 2N 15O 18： 計算值868.90；實測值868.90。
實施例 56.（S）-N，N'-（（（（（2S，20S）-2，20-二甲基-4，7，15，18-四側氧基-3，8，11，14 ，19-五氮雜二十一烷-1，21-二醯基）雙（氮雜二基）雙（4，1-亞苯基））雙（亞甲基））雙（1-（（（（S）-4-乙基-8-氟-4-羥基-9-甲氧基-3，14-二側氧基-3，4，12，14-四氫-1H-呱喃[3'，4'；6， 7]吲哚并[[1，2-b]喹啉-11-基）甲基）-N，N-二甲基六氫吡啶-4-氮鎓）（63）的合成。
Figure 02_image1317
將化合物62（80 mg，0.043 mmol）溶解於二氯甲烷和三氟乙酸（3mL/1mL）的混合溶液中，並在室溫攪拌30分鐘。濃縮反應混合物，得到化合物63（100％收率）。ESI-MS m/z： [M] 2+C 86H 101F 2N 15O 16： 計算值818.87； 實測值818.87。
實施例 57.（S）-N，N '-（（（（2S，20S）-11-（（S）-30-（4-（2，5-二側氧基-2，5-二氫-1H-吡咯-1-基）丁醯胺基）-27，31-二側氧基-2，5，8，11，14，17，20，23-八氧雜-26，32-二氮雜三十六烷-36-醯基）-2，20-二甲基-4，7，15，18-四側氧基-3，8，11，14，19-五氮雜二十一烷-1，21-二醯基）雙（氮雜二醯基））雙（4，1-亞苯基））雙（亞甲基））雙（1-（（（S）-4-乙基-8-氟-4-羥基-9-甲氧基-3，14-二側氧基-3，4，12，14-四氫-1H-呱喃并[3 '，4'：6，7]吲哚并[1，2-b]喹啉-11-基）甲基）-N，N-二甲基六氫吡啶-4-氮鎓）（64）的合成。
Figure 02_image1319
在0℃下，向化合物63（74mg，0.043mmol）和化合物7（39mg，0.0516mmol）的DMF（3mL）溶液中加入N，N-二異丙基乙胺（15μL，0.086mmol），隨後將升溫至室溫並攪拌2小時。濃縮後，將殘餘物藉由製備型HPLC（乙腈/含有甲酸的水）純化，得到化合物64（12mg）。ESI-MS m/z： [M+] 2+C 120H 157F 2N 19O 30： 計算值1191.06；實測值1191.06。
實施例 58.（S）-4-乙基-8-氟-4，9-二羥基-11-甲基-1H-呱喃并[3 '，4'：6，7]吲哚并[1，2-b]喹啉-3，14（4H，12H）-二酮（103）的合成。
Figure 02_image1321
將1-（2-胺基-4-氟-5-羥基苯基）乙酮（0.41 g，2.5 mmol）和化合物25（0.62 g，2.5 mmol）溶於無水甲苯（40 mL），加入對甲苯磺酸（46 mg， 0.25 mmol）。將懸浮液加熱回流3天，然後冷卻至室溫。除去溶劑後，殘餘物藉由柱色譜純化，得到化合物103（0.69g，73％收率），為灰色粉末狀固體。ESI-MS m/z： [M + H] +C 21H 17FN 2O 5： 計算值397.11； 實測值397.16。
實施例 59.（S）-9-（2-溴乙氧基）-4-乙基-8-氟-4-羥基-11-甲基-1H-呱喃并[3 '，4'：6，7]吲哚并[1，2-b]喹啉-3，14（4H，12H）-二酮（104）的合成。
Figure 02_image1323
在80℃下，將化合物103（0.69 g，1.74 mmol），無水1，2-二溴乙烷（6.4 g，34.8 mmol）和無水碳酸鉀（1.2 g，8.7 mmol）的無水DMF（10 mL）混合物機械攪拌16小時。藉由矽藻土墊過濾反應混合物，並用DMF充分洗滌過濾的殘餘物。將合併的濾液和洗滌液真空濃縮至乾，得到深色殘餘物。殘餘物藉由柱色譜法純化（0-5％甲醇 /二氯甲烷），得到化合物104（0.74g，85％）。ESI-MS m/z： [M + H] +C 23H 20BrFN 2O 5： 計算值503.05；實測值503.05。
實施例 60.（S）-9-（2-溴乙氧基）-4-乙基-8-氟-4-羥基-11-甲基-10-硝基-1H-呱喃并[3 '，4'：6，7]吲哚并[1，2-b]喹啉-3，14（4H，12H）-二酮（105）的合成。
Figure 02_image1325
在0℃下，向攪拌的濃硫酸（1mL）中緩慢加入化合物104（0.74g，1.47mmol），將得到的澄清溶液冷卻至-10℃。將預冷至-10℃的濃硫酸（0.5 mL）和發煙硝酸（0.5 mL）的混合物滴加至-10℃的冷卻反應混合物中。 使反應混合物升溫至0℃，再攪拌1小時，然後緩慢傾倒於冰屑上。將黃色沈澱物過濾並用水，冷乙醇和乙醚洗滌。將含水濾液再次藉由矽藻土墊過濾，並將矽藻土濾餅用30％甲醇/二氯甲烷（50mL）萃取。濃縮有機溶劑，得到另外的黃色固體。將合併的黃色固體與乙醇打漿，得到化合物105（0.74g，92％）。ESI-MS m/z [M + H] +： C 23H 19BrFN 3O 7： 計算值548.04； 實測值548.14。
實施例 61.（S）-10-胺基-9-（2-溴乙氧基）-4-乙基-8-氟-4-羥基-11-甲基-1H-呱喃并[3 '，4'：6，7]吲哚并[1，2-b]喹啉-3，14（4H，12H）-二酮（106）的合成。
Figure 02_image1327
在0℃下，向攪拌的濃鹽酸溶液（18mL）中分批加入化合物105（0.50g，0.91mmol），並在15分鐘後將所得的澄清溶液冷卻至-10℃，隨後分批向反應混合物中加入二氧化錫（0.86g，4.55mmol），並使反應混合物升溫至室溫。 攪拌1.5小時，然後緩慢倒在冰屑上。將沈澱物過濾並用乙醇和乙醚洗滌，並將含水濾液用10％甲醇/二氯甲烷萃取。將有機溶液與濾沈澱物合併溶解在30 %甲醇/二氯甲烷中，然後藉由短矽膠墊過濾，用30%甲醇/二氯甲烷溶離。除去有機溶劑，得到化合物106 （0.44g，94%收率），無需進一步純化即可用於下一步。
實施例 62.（S）-9-乙基-5-氟-9-羥基-16-甲基-2，3，12，15-四氫-[1，4]噁嗪并[3，2-f]呱喃并[3 '，4'：6，7]吲哚并[1，2-b]喹啉-10，13（1H，9H）-二酮（107）的合成。
Figure 02_image1329
將化合物106（0.44 g，0.85 mmol）的DMSO（4 mL）溶液和碳酸氫鈉（0.10 g，1.19 mmol）在70℃攪拌4小時，並用鹽酸（0.1 M，8 ml）和水（ 40 mL）稀釋。過濾沈澱的固體，溶於少量的10％甲醇 /二氯甲烷中，並藉由柱色譜法純化，用（1：20-1：6）甲醇/ 二氯甲烷作為溶離劑，得到化合物107（0.24g，66％）。ESI-MS m/z： [M + H] +C 23H 20FN 3O 5： 計算值438.14；實測值438.14。
實施例 63.（S）-第三丁基（2-（9-乙基-5-氟-9-羥基-16-甲基-10，13-二側氧基-2，3，9，10-四氫-[1，4]噁嗪并[3 '，4'：6，7]吲哚并[1，2-b]喹啉-1（12H，13H，15H）-基）乙基）胺基甲酸酯（108）的合成。
Figure 02_image1331
向化合物107（0.20g，0.456mmol）的無水DMF（2mL）拌溶液中加入碘化鈉（0.68g，4.56mmol）和（2-氯乙基）胺基甲酸第三丁酯（0.82g，4.56mmol），將混合物在120℃加熱18小時。將反應混合物冷卻至室溫。濃縮至真空乾燥，並藉由柱色譜法純化（0-5％甲醇/二氯甲烷），得到化合物108（0.19g，75％）。ESI-MS m/z： [M + H] +C 30H 33FN 4O 7： 計算值581.23； 實測值581.40。
實施例 64.（S）-1-（2-胺基乙基）-9-乙基-5-氟-9-羥基-16-甲基-2，3，12，15-四氫-[1，4]噁嗪并[3，2-f]呱喃并[3 '，4'：6，7]吲哚并[1，2-b]喹啉-10，13（1H，9H）-二酮（109）的合成。
Figure 02_image1333
向化合物108（0.19g，0.327mmol）的二氯甲烷（5mL）溶液中加入三氟乙酸（2.5mL），並將反應混合物在室溫攪拌30分鐘，濃縮反應混合物，與二氯甲烷共濃縮三次，得到化合物109，無需進一步純化即可用於下一步。
實施例 65.化合物110的合成。
Figure 02_image1335
將上一步得到的化合物109和化合物7（0.45g，0.49mmol）溶解在DMF（5mL）中，冷卻至約0℃，然後加入N，N-二異丙基乙胺（172μL，0.98mmol）。反應升溫至室溫，攪拌2小時，濃縮，並藉由製備型HPLC（乙腈/含有甲酸的水）純化，得到化合物110（359 mg，60%收率）。ESI-MS m/z： [M + H] +C 59H 81FN 8O 19： 計算值1224.56； 實測值1224.78。
實施例 66.二第三丁基4，4'-（（（2R，3S）-2，3-雙（（（苄氧基）羰基）-胺基）琥珀醯）雙（氮雜二醯））二丁酸酯（172）的合成。
Figure 02_image1337
向化合物171（4.25g，10.21mmol）的DMA（70mL）溶液中加入4-胺基丁酸第三丁酯（3.25g，20.42mmol），DMAP（4.47g，36.65mmol）和EDC·鹽酸（7.00g，36.65 mmol）。將混合物攪拌隔夜，濃縮並在矽膠柱上純化，用乙酸乙酯/二氯甲烷（1：10）溶離，得到化合物172（6.50g，91％收率）。ESI-MS m/z： [M + H] +C 36H 50N 4O 10計算值699.35； 實測值699.55。
實施例 67.二第三丁基4，4'-（（（2R，3S）-2，3-二胺基琥珀醯）-雙（氮雜二醯））二丁酸酯（173）的合成。
Figure 02_image1339
將化合物172（2.50g，3.58mmol）的甲醇（100mL）溶液與10％Pd/C（0.30g，50％wt）在室溫催化加氫反應18小時。然後藉由矽藻土過濾除去Pd/C觸媒，並用甲醇（〜70mL）洗滌濾餅。濃縮濾液，得到化合物173，為黃色泡沫，無需進一步純化即可用於下一步（1.54g，100％收率）。ESI-MS m/z： [M + H] +C 20H 38N 2O 6： 計算值431.28； 實測值431.50。
實施例 68.二第三丁基4，4'-（（2R，3R）-2，3-雙（4-（2，5-二側氧基-2，5-二氫-1H-吡咯-1-基）丁醯胺基）琥珀醯）雙（氮雜二基））二丁酸酯（174）的合成。
Figure 02_image1341
向4-（2，5-二側氧基-2，5-二氫-1H-吡咯-1-基）丁酸（1.35 g，7.39 mmol）和化合物173（1.54 g，〜3.58 mmol）的DMF（ 60mL）溶液中加入N，N-二異丙基乙胺（2.2mL，12.56mmol）和HATU（4.77g，12.56mmol）。將混合物攪拌隔夜，濃縮並在矽膠柱上純化，用乙酸乙酯 /二氯甲烷（1：10）溶離，得到標題化合物（2.35g，86％收率）。ESI-MS m/z [M + H] +： 計算值761.36， 實測值761.36。
實施例 69.4，4'-（（（2R，3R）-2，3-雙（4-（2，5-二側氧基-2，5-二氫-1H-吡咯-1-基）丁醯胺基）琥珀醯）雙（氮雜二基））二丁酸（175）的合成。
Figure 02_image1343
向化合物174（2.30g，3.02mmol）的二氯甲烷（20mL）混合溶液中加入三氟乙酸（10mL）。將混合物攪拌30分鐘，用甲苯（20mL）稀釋，濃縮，得到標題化合物（1.69g，86％收率）。ESI-MS m/z [M + H] +： C 28H 36N 6O 12計算值649.24， 實測值649.30。
實施例 70.雙（2，5-二側氧基吡咯烷-1-基）4，4'-（（2R，3R）-2，3-雙（4-（2，5-二側氧基-2，5-二氫-1H-吡咯-1-基）丁醯胺基）琥珀醯）雙（氮雜二基））二丁酸酯（176）的合成。
Figure 02_image1345
向化合物175（1.10 g，1.69 mmol）的DMA（30 mL）溶液加入N-羥基琥珀醯亞胺（1-羥基吡咯烷-2，5-二酮）（0.58 g，5.08 mmol）和EDC·鹽酸（1.25 g， 6.54mmol）。將混合物攪拌隔夜，濃縮並在矽膠柱上純化，用乙酸乙酯 /二氯甲烷（1：10）溶離，得到標題化合物（1.30 g，91%收率）。ESI-MS m/z [M + H] +：C 36H 42N 8O 168計算值43.27，實測值843.50。
實施例 71.（S）-N，N'-（（（（2S，10S，11S，19S）-10，11-雙（4-（2，5-二側氧基-2，5-二氫-1H-吡咯-1-基）丁醯胺基）-2，19-二甲基-4，9，12，17-四側氧基-3，8，13，18-四氮二十烷-1，20-二醯基）雙（氮雜二基））雙（4，1-亞苯基））雙（亞甲基））雙（1-（（S）-4-乙基-8-氟-4-羥基-9-甲氧基-3，4，14-二側氧基-3，4，12，14-四氫-1H-呱喃[3 '，4'：6，7]吲哚并[1，2-b]喹啉-11-基）甲基）-N，N-二甲基六氫吡啶-4-氮鎓（177）的合成。
Figure 02_image1347
將化合物28（94 mg，0.12 mmol）和化合物176（55 mg，0.066 mmol）溶於DMA（5 mL）中，冷卻至約0℃，然後加入N，N-二異丙基乙胺（84μL，0.48 mmol）。反應升溫至室溫攪拌2小時，濃縮，並藉由製備型HPLC（乙腈/含有甲酸的水）純化，得到化合物177（23 mg，19%收率）。ESI-MS m/z： [M+] 2+C 106H 124F 2N 18O 22： 計算值1019.46； 實測值1019.50。
實施例 72.3-側氧基-1-苯基-2，7，10，13，16-五氧雜-4-氮雜十九烷-19-酸（179）的合成。
Figure 02_image1349
在500 mL燒瓶中，將H 2N-PEG 4-CH 2CH 2CO 2H （3.0 g， 11.3 mmol， 1.0 eq） 和碳酸鉀（4.7 g，33.93 mmol，3.0eq）溶解於50 mL水中，並在冰水浴上冷卻。向50mL THF中逐滴加入苄氧基草醯氯（2.50g，14.7mmol，1.3eq）。反應升溫至室溫攪拌隔夜。用1N 硫酸鉀將反應混合物的pH調節至4-5，並用二氯甲烷（200 mL×1，100 mL×3）萃取，用水（500 mL）和鹽水（500 mL）洗滌，用無水硫酸鈉乾燥，濃縮。將殘餘物溶於少量二氯甲烷中，然後加到矽膠柱上，用2-4％甲醇/二氯甲烷溶離，合併組分並濃縮，得到3.8g無色油狀物（84％收率）。ESI-MS m/z [M + H] +：C 19H 29NO 8計算值400.2，實測值400.2。
實施例 73.2，5-二氧雜吡咯烷-1-基3-一側氧基-1-苯基-2，7，10，13，16-五氧雜-4-氮雜十九烷-19-酸酯的合成。（180）
Figure 02_image1351
向CbzHN-PEG 4-CH 2CH 2CO 2H （3.8 g，9.5 mmol，1.0eq）的50 mL無水二氯甲烷的溶液中加入N-羥基琥珀醯亞胺（1.3 g，11.4 mmol，1.2eq）和EDC·鹽酸（9.1 g，47.5mmol，5.0eq）。將反應物在室溫攪拌隔夜，然後用水（50 mL×2），鹽水（100 mL×1）洗滌，用無水硫酸鈉乾燥並濃縮。粗產物直接用於下一步。ESI-MS m/z [M + H] +：C 23H 32N 2O 10計算值497.2，實測值497.2。
實施例 74.3，19-二側氧基-1-苯基-2，7，10，13，16，23，26，29，32-九氧雜-4，20-二氮雜三十五烷-35-酸（181）的合成。
Figure 02_image1353
在300 mL燒瓶中，將H 2N-PEG 4-CH 2CH 2CO 2H（2.6 g，9.5 mmol，1.0eq）和硫酸鉀（3.9 g，28.5 mmol，3.0eq）溶於40 mL水中，在冰水浴上冷卻，並逐滴加入上述N-羥基琥珀醯亞胺酯粗產物（3.8 g，9.5 mmol）的40 mL THF溶液，將混合物升溫至室溫攪拌隔夜。用1N 硫酸鉀將反應混合物的pH調節至4-5，並用二氯甲烷（150 mL×1，100 mL×2）萃取，用水（200 mL）和鹽水（200 mL）洗滌，用無水硫酸鈉乾燥，濃縮。將殘餘物溶於少量二氯甲烷中，並上樣至矽膠柱，用4-6％甲醇/二氯甲烷溶離，得到無色油狀物（4.91 g，80％收率）。ESI-MS m/z [M + H] +：C 30H 50N 2O 13計算值646.3，實測值646.3。
實施例 75. 第三丁基3，19，35-三側氧基-1-苯基-2，7，10，13，16，23，26，29，32，39，42，45，48-十三氧雜-4，20，36-三氮雜五十一烷-51-酯（182）的合成。
Figure 02_image1355
將H 2N-PEG 4-CH 2CH 2CO 2 t Bu（0.48 g，1.5 mmol，1.0eq）溶解在3 mL DMF中，在冰/水浴上冷卻，逐滴加入N，N-二異丙基乙胺（DIPEA）（0.78 g，6.0 mmol，4.0eq），然後加入化合物181（0.97g，1.5mmol，1.0eq）的DMF（7mL）溶液和HATU（1.72g，4.5mmol，3.0eq）。將反應物在冰浴上攪拌2小時，並用100 mL水稀釋，用二氯甲烷（100 mL×3）萃取，用1N 硫酸鉀（200 mL），飽和碳酸氫鈉（200 mL）和鹽水（ 200mL）洗，無水硫酸鈉乾燥，並濃縮。將殘餘物溶解在少量二氯甲烷中，載入到矽膠柱上，並用0-5％甲醇/二氯甲烷溶離。合併組分並濃縮，得到1.22g淺黃色油狀物（86％收率）。ESI-MS m/z [M + H] +：C 45H 79N 3O 18計算值950.5，實測值950.5。
實施例 76. 第三丁基 1-胺基-15，31-二側氧基-3，6，9，12，19，22，25，28，35，38，41，44-十二氧雜-16，32-二氮雜四十七烷-47-酯（183）的合成。
Figure 02_image1357
將化合物182（1.22 g，1.28 mmol）的二氯甲烷（5 mL）中的溶液與Pd/C（5％，500 mg）在室溫下催化加氫反應（1大氣壓氫氣）2小時。然後將反應物藉由矽藻土過濾，並將濾餅用甲醇洗滌。合併濾液和洗滌液，濃縮，得到淺黃色油狀物（1.04g，100％收率）。ESI-MS m/z [M + H] +：C 37H 73N 3O 16計算值816.5，實測值816.5。
實施例 77.（50R，51R）-二第三丁基50，51-雙（（苄氧基）羰基）胺基）-17，33，49，52，68，84-六側氧基-4，7，10，13，20，23，26，29，36，39，42，45，56，59，62，65，72，75，78，81，88，91，94，97-二十四氧雜-16，32，48，53，69，85-六氮雜一百烷-1，100-二酸酯（184）
Figure 02_image1359
向化合物171（0.26g，0.64mmol）的DMA（10mL）溶液中，加入化合物183（1.04g，1.28mmol）的二氯甲烷（5mL）溶液，然後加入DMAP（0.23g，1.92mmol）和EDC·鹽酸（0.36g，1.92mmol）。將混合物攪拌隔夜，濃縮並在矽膠柱上純化，用甲醇/二氯甲烷（1：10）溶離，得到化合物184（0.81 g，63%收率）。ESI-MS m/z： [M+2H] 2+C 94H 162N 8O 38計算值1006.55；實測值1006.70。
實施例 78.（50R，51R）-二第三丁基-50，51-二胺基-17，33，49，52，68，84-六側氧基-4，7，10，13，20，23，26，29，36，39，42，45，56，59，62，65，72，75，78，81，88，91，94，97-二十四氧雜-16，32，48，53，69，85-六氮雜一百烷-1，100-二酸酯（185）的合成。
Figure 02_image1361
向化合物184（0.81 g，0.40 mmol）的甲醇（5mL）溶液中加入10％Pd/C（100 mg，5％），在室溫下催化加氫反應18小時。然後藉由矽藻土過濾除去Pd/C觸媒，並用甲醇洗滌濾餅。合併濾液和洗滌液並濃縮，得到化合物185（0.70g，100％收率）。ESI-MS m/z： [M+2H] 2+C 78H 150N 8O 34： 計算值872.52； 實測值872.55。
實施例 79.（50R，51R）-二第三丁基50，51-雙（4-（2，5-二側氧基-2，5-二氫-1H-吡咯-1-基）丁醯胺基）-17，33，49，52，68，84-六側氧基-4，7，10，13，20，23，26，29，36，39，42，45，56，59，62，65，72，75，78，81，91，94，97-二十四氧雜-16，32，48，53，69，85-六氮雜一百烷-1，100-二酸酯（186）和（50S，51S）-50，51-雙（4-（2，5-二側氧基-2，5-二氫-1H-吡咯-1-基）丁醯胺基）-17，33，49，52，68，84-六側氧基-4，7，10，13，20，23，26，29，36，39，42，45，56，59，62，65，72，75，78，81，88，91，94，97-二十四氧雜-16，32，48，53，69，85-六氮雜一百烷-1，100-二酸（187）的合成。
Figure 02_image1363
Figure 02_image1365
向4-（2，5-二側氧基-2，5-二氫-1H-吡咯-1-基）丁酸（0.17 g，1.00 mmol）和化合物185（0.70 g，0.40 mmol）的DMF（ 5mL）溶液中加入N，N-二異丙基乙胺（0.88mL，5mmol）和HATU（1.90 g，12.56mmol）。將混合物攪拌隔夜，濃縮並在矽膠柱上純化，用1-10％甲醇/二氯甲烷溶離，得到化合物186（0.548g，66％收率），為油狀物。ESI-MS m/z [M+2H] 2+： C 94H 166N 10O 40計算值2075.1264， 實測值2075.1350。 將化合物186（0.54g，0.26mmol）溶解在二氯甲烷（5mL）中，並與三氟乙酸（2.5mL）反應。將混合物在室溫攪拌，用甲苯（20mL）稀釋30分鐘，濃縮，得到標題化合物187（0.488，96％收率），無需進一步純化即可用於下一步。ESI-MS m/z [M+H] +： C 86H 149N 10O 40計算值1961.9933， 實測值1961.9987。
實施例 80.（S）-N，N'-（（（（2S，53S，54S，105S）-53，54-雙（4-（2，5-二側氧基-2，5-二氫-1H-吡咯-1-基）丁醯胺基）-2，105-二甲基-4，20，36，52，55，71，87，103-八側氧基-7，10，13，16，23，26，29，32，39，42，45，48，59，62，65，68，75，78，81，84，91，94，97，100-二十四氧雜-3，19，35，51，56，72，88，104-八氮雜一百零六烷-1，106-二醯基）雙（氮雜二醯基））雙（4，1-亞苯基））雙（亞甲基））雙（1-（（S）-4-乙基-8-氟-4-羥基-9-甲氧基-3，14-二側氧基-3，4，12，14-四氫-1H-呱喃并[3 '，4'：6，7]吲哚并[1，2-b]喹啉-11-基）甲基）-N，N-二甲基六氫吡啶-4-氮鎓）（188）
Figure 02_image1367
將化合物28（47 mg，0.060 mmol）和化合物187（59 mg，0.030 mmol）溶於DMA（5 mL）中，冷卻至約0℃，然後加入N，N-二異丙基乙胺（21μL，0.12 mmol）溶解。反應升溫至室溫攪拌2小時，濃縮，並藉由製備型HPLC（乙腈/含有甲酸的水）純化，得到化合物188（36 mg，36%收率）。ESI-MS m/z： [M+] 2+C 164H 238F 2N 22O 50： 計算值1675.8279； 實測值1675.8392。
實施例 81. 2，5，8，11，14，17，20，23，26-九氧雜二十八烷-28 -第三丁基酯（191）
Figure 02_image1369
將氫化鈉（60％，24 g，600 mmol）加入八甘醇單甲醚（115 g，300 mmol）的THF（3.0 L）溶液中。在室溫下攪拌1小時，將2-溴乙酸第三丁酯（146g，750mmol）加入到混合物中，並在室溫攪拌1小時，然後將混合物用二氯甲烷（4L）稀釋，倒入冰水（2kg）中。分離有機相，水相用二氯甲烷（1L）萃取。合併的有機相，用水洗滌，用無水硫酸鈉乾燥。藉由柱色譜法純化（20％乙酸乙酯/石油醚，然後純二氯甲烷至5％甲醇/二氯甲烷），得到標題化合物（108g，72％收率），為黃色油狀物。
實施例 82.2，5，8，11，14，17，20，23，26-九氧雜二十八烷-28-酸（192）的合成。
Figure 02_image1371
將2，5，8，11，14，17，20，23，26-九氧雜二十八烷-28-第三丁基酯（210 g，422 mmol）溶解在二氯甲烷（400 mL）和無水甲酸（1 L）中。將所得溶液在室溫攪拌隔夜。真空除去所有揮發物，得到標題化合物（200g，＞ 100％收率），為黃色油狀物。
實施例 83.2，5，8，11，14，17，20，23，26-九氧雜二十八烷-28-醯氯（193）的合成。
Figure 02_image1373
在室溫下向2，5，8，11，14，17，20，23，26-九氧雜二十八烷-28-酸（198 g，422 mmol）的二氯甲烷（2.6 L）溶液中加入草醯氯（275 mL ）和DMF（0.5 mL）。將所得溶液在室溫持續攪拌3小時。真空除去所有揮發物，得到標題化合物（210g，＞ 100％收率），為黃色油狀物。
實施例 84.（S）-34-（（苄氧基）羰基）胺基）-28-側氧基-2，5，8，11，14，17，20，23，26-九氧雜-29-氮雜三十五烷-35-酸（194）的合成。
Figure 02_image1375
將Z-L-Lys-OH（236 g，844 mmol），碳酸鈉（89.5 g，844 mmol）和氫氧化鈉（33.8 g，844 mmol）溶於水（1.6 L）中。用冰鹽浴將混合物冷卻至0℃，加入2，5，8，11，14，17，20，23，26-九氧雜二十八烷-28-醯氯（210 g，422 mmol）的THF（160mL）溶液。將得到的混合物在室溫持續攪拌1小時，然後用乙酸乙酯（1L）稀釋。分離水層，在冰冷卻下加入濃鹽酸直至達到pH 3。用二氯甲烷萃取，有機層用鹽水洗滌，經硫酸鈉乾燥並濃縮，得到標題化合物（290g，97％收率），為黃色油狀物。
實施例 85.（S）-五氟苯基34-（（（（苄氧基）羰基）胺基）-28-側氧基-2，5，8，11，14，17，20，23，26-九側氧基-29-氮雜三十五烷-35-酯（195）的合成。
Figure 02_image1377
向化合物194（183g，260mmol）的二氯甲烷（2L）溶液中加入五氟苯酚（95.4g，520mmol）和DIC（131g，1.04mol）。將反應物在室溫持續攪拌1小時，然後濃縮，得到標題產物粗品（430g）。 實施例 86.（S）-第三丁基34-（（苄氧基）羰基）胺基）-28，35-二側氧基-2，5，8，11，14，17，20，23，26-九氧雜-29，36-二氮雜四十烷-40-酯（196）的合成。
Figure 02_image1379
在0℃下，向4-胺基丁酸第三丁酯（62.0g，390mmol）的DMF（1.5L）溶液中加入N，N-二異丙基乙胺（134g，1.04mol），然後在10-20℃下，加入化合物195（430g，粗產物），並將所得混合物在室溫攪拌1小時，真空除去DMF，殘餘物用二氯甲烷稀釋，用水洗滌。用二氯甲烷反萃取水相。合併的有機相用0.2N鹽酸和鹽水洗滌，用無水硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮。柱色譜法（25％乙酸乙酯/ PE至純乙酸乙酯，然後0至5％甲醇/二氯甲烷）純化得到標題化合物（180g，82％收率），為黃色油狀物。
實施例 87.（S）-第三丁基34-胺基-28，35-二側氧基-2，5，8，11，14，17，20，23，26-九側氧基-29，36-二氮雜四十烷-40-酯（197）的合成。
Figure 02_image1381
將化合物196（78.0g，92.3mmol，1.0eq）的甲醇（500mL）溶液和Pd/C（13g，10％Pd/C，50％wet）在室溫下催化加氫反應（1大氣壓氫氣）隔夜，然後過濾並濃縮。殘留物藉由柱色譜法純化（0至20％甲醇/二氯甲烷），得到標題化合物（70.2g，92％收率），為淡黃色油狀物。
實施例 88.（7S，10R，11R，14S）-二第三丁基10，11-雙（（（（苄氧基）羰基）胺基）-6，9，12，15-四側氧基-7，14-雙（28-側氧基2，5，8，11，14，17，20，23，26-九側氧基-29-氮雜三十三烷-33-基）-5，8，13，16-四氮雜二十烷-1，20-二酸酯（198）的合成。
Figure 02_image1383
向化合物171（0.85 g，2.00 mmol）的DMA（10 mL）溶液中加入化合物197（3.20 g，4.50 mmol）的二氯甲烷（10 mL）溶液，DMAP（1.50 g，12 mmol）和EDC·鹽酸（2.3g，12mmol）溶液。將混合物攪拌隔夜，濃縮並在矽膠柱上純化，用乙酸乙酯/二氯甲烷（1：10）溶離，得到化合物198（3.33 g，88%收率）。ESI-MS m/z： [M+2H] 2+C 86H 146N 8O 32計算值902.50；實測值902.55。
實施例 89.（7S，10R，11R，14S）-二第三丁基10，11-雙（4-（2，5-二側氧基-2，5-二氫-1H-吡咯-1-基）丁醯胺基）-6，9，12，15-四側氧基-7，14-雙（28-側氧基-2，5，8，11，14，17，20，23，26-九氧雜-29-氮雜三十三烷-33-基）-5，8，13，16-四氮雜二十烷-1，20-二酸酯（199）的合成。
Figure 02_image1385
將化合物198（3.33g，1.76mmol），Pd/C（5wt％，0.10g）和二氯甲烷（50mL） 混合物催化加氫反應隔夜（1大氣壓氫氣），然後在矽藻土上過濾。濃縮濾液，然後溶解在DMF（10mL）中，加入EDC（1.00g，5.28mmol）和化合物4（1.84g，5.28mmol）。將混合物在室溫持續攪拌16小時，濃縮並藉由矽膠柱色譜法純化（1：4甲醇/二氯甲烷），得到油狀物（2.56g，78％收率）。ESI-MS m/z： [M+2H] 2+C 86H 148N 10O 34計算值933.51；實測值933.55。
實施例 90.（S）-N，N'-（（（（（2S，10S，13R，14R，17S，25S）-13，14-雙（4-（2，5-二側氧基-2，5-二氫-1H-吡咯-1-基）丁醯胺基）-2，25-二甲基-4，9，12，15，18，23-六側氧基-10，17-雙（28-側氧基-2，5，8，11，14，17，20，23，26-九側氧基-29-氮雜三十三烷-33-基）-3，8，11，16，19，24-六氮雜二十六烷-1，26-雙（氮雜二基））雙（1-（（（S）-4-乙基-8-氟-4-羥基-9-甲氧基-3，4，12，14-四氫-1H-呱喃并[3 '，4'：6，7]吲哚[1，2-b]喹啉-11-基）甲基）-N，N-二甲基六氫吡啶-4-胺基）甲酸鹽（200）的合成。
Figure 02_image1387
將化合物199（1.00g，0.536mmol）的二氯甲烷（5mL）和甲酸（5mL）的混合物在室溫持續攪拌24小時，然後濃縮。將殘餘物溶解於DMA（5mL）中，加入化合物28（0.64g，0.89mmol），三乙胺（0.15mL，1.07mmol）和HATU（0.41g，1.07mmol）並在室溫持續攪拌16小時。在高真空下除去溶劑後，將殘餘物藉由製備型HPLC（乙腈/含有甲酸的水）純化，得到化合物200（1.06 g，63％收率）。ESI-MS m/z： M 2+C 156H 220F 2N 22O 44計算值1571.78；實測值1571.78。
實施例 91.4-（雙（2-羥乙基）胺基）-4-側氧基丁酸甲酯（202）的合成。
Figure 02_image1389
將琥珀酸二甲酯（20.0 g，136.9 mmol）和二羥乙胺（7.20 g，68.7 mmol）在無水甲苯（500 mL）和吡啶（50 mL）的混合物，在150℃下，加熱28小時，濃縮混合物，並在矽膠柱上純化，用5-25％乙酸乙酯/二氯甲烷溶離，得到標題化合物（12.5g，83％收率）。ESI-MS m/z 242.42 （[M + Na] +）。
實施例 92.4-（雙（2-（（甲磺醯基）氧基）乙基）胺基）-4-側氧基丁酸甲酯（203）的合成。
Figure 02_image1391
向4-（雙（2-羥乙基）胺基）-4-側氧基丁酸甲酯（12.0g，49.56mmol）在無水吡啶（350mL）的溶液中，加入甲磺醯氯（20.0g，175.4mmol）。攪拌隔夜後，將混合物濃縮，用乙酸乙酯（350mL）稀釋，用冷的1M 磷酸二氫鈉（2×300mL）洗滌，用硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮，得到粗產物（18.8g，＞ 100％收率）。粗產物無需進一步純化即可用於下一步。ESI-MS m/z 376.06 （[M + H] +）。
實施例 93.3，6-內側氧基-Δ-四氫鄰苯二甲醯亞胺（204）的合成。
Figure 02_image1393
向馬來醯亞胺（10.0g，103.0mmol）的甲苯（200mL）溶液中加入呋喃（10.0mL，137.4mmol）。在100℃下，將混合物在1 L 反應罐中加熱8小時，冷卻至室溫後用甲醇洗，濃縮並在乙酸乙酯/正己烷中結晶，得到16.7g（99％）的標題化合物。1H NMR （CDCl 3）： 11.12 （s， 1H）， 6.68~6.64 （m， 2H）， 5.18~5.13 （m， 2H）， 2.97 ~2.92 （m， 2H）； ESI-MS m/z 188.04 （[M + Na] +）。
實施例 94.4-（（2-（（3aR，4R，7S，7aS）-1，3-二側氧基-3a，4，7，7a-四氫-1H-4，7-環氧異吲哚-2（3H）-基）乙基）（2-（（（4R，7S，7aS）-1，3-二側氧基-3a，4，7，7a-四氫-1H-4，7-環氧異吲哚-2（3H）-基）乙基）胺基） -4-側氧基丁酸甲酯（205）的合成。
Figure 02_image1395
向4-（雙（2-（（（甲基磺醯基）氧基）乙基）胺基）-4-側氧基丁酸甲酯（203，新鮮製備，90％純度，8.5 g，20 mmol）的DMA（350 mL）溶液中，加入3，6-內側氧基-Δ-四氫鄰苯二甲醯亞胺（204，10.2g，61.8mmol），碳酸鈉（8.0g，75.5mmol）和碘化鈉（0.3g，2.0mmol）。將混合物在室溫攪拌隔夜，濃縮，用乙酸乙酯（350 mL）稀釋，用飽和的碳酸氫鈉溶液（300 mL），鹽水（300 mL）和1 M 磷酸二氫鉀（300 mL）洗滌。有機層經硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮，載入到矽膠柱上，並用10-30％乙酸乙酯/正己烷溶離，得到標題化合物（7.9g，77％收率）。ESI-MS m/z 536.4 （[M + Na] +）。
實施例 95.4-（雙（2-（2-，2，5-二側氧基-2，5-二氫-1H-吡咯-1-基）乙基）胺基）-4-側氧基丁酸的合成。（206）
Figure 02_image1397
將化合物205（3.0g，5.8mmol）和三甲基錫烷醇（4.8g，26.4mmol）的1，2-二氯乙烷（150mL）溶液在80℃下，回流8小時，然後冷卻至室溫，使殘餘物藉由短矽膠柱，並用二氯甲烷/甲醇溶離以除去過量的氫氧化三甲基錫。然後合併各組分，濃縮並用DMA和甲苯稀釋，加熱至120℃並攪拌隔夜。將反應混合物載入到矽膠柱上，並用5-10％甲醇 /二氯甲烷溶離，得到標題化合物（1.62g，76％收率）。ESI-MS m/z 386.2 （[M + Na] +）。
實施例 96.2，5-二氧雜吡咯烷-1-基4-（雙（2-（2，5-二側氧基-2，5-二氫-1H-吡咯-1-基）乙基）胺基）-4-側氧基丁酸酯（207）的合成。
Figure 02_image1399
向化合物206（1.62 g，4.46 mmol，1.0eq）的10 mL DMA溶液中，加入N-羥基琥珀醯亞胺（0.61 g，5.35mmol，1.2eq）和EDC·鹽酸（1.71 g，8.92 mmol，2.0eq）。將反應物在室溫攪拌隔夜，然後用水（50 mL×2），鹽水（100 mL）洗滌，用無水硫酸鈉乾燥，濃縮，得到油狀物（2.00 g）。粗產物直接用於下一步。ESI-MS m/z [M + H] +：C 20H 20N 4O 9計算值461.12，實測值461.24。
實施例 97.N-（4-（（S）-2-（4-（雙（2-（2，5-二側氧基-2，5-二氫-1H-吡咯-1-基）乙基）胺基）-4-側氧基丁醯胺基）丙醯胺基）苄基）-1-（（S）-4-乙基-8-氟-4-羥基-9-甲氧基-3，14-二側氧基-3，4，12，14-四氫-1H-呱喃并[3 '，4'：6，7]吲哚并[1，2-b]喹啉-11-基）甲基）-N，N-二甲基六氫吡啶-4-氮鎓（208）的合成。
Figure 02_image1401
在0℃下，將前一步驟的粗產物（0.20 g）溶於DMA（5 mL），加入化合物28（0.71 g，1.00 mmol）和N，N-二異丙基乙胺（0.20 mL，1.20 mmol），將反應物升溫至室溫，攪拌2小時，濃縮，並藉由製備型HPLC（乙腈/含有甲酸的水）純化，得到化合物208（0.85g，80％收率）。ESI-MS m/z： M +C 55H 61FN 9O 12： 計算值1058.44； 實測值1058.60。
實施例 98.（S）-第三丁基34-（4-（雙（2-（2，5-二側氧基-2，5-二氫-1H-吡咯-1-基）乙基）胺基）-4-側氧基丁醯胺基）-28，35-二側氧基-2，5，8，11，14，17，20，23，26-九氧雜-29，36-二氮雜四十烷-40-酯（210）的合成。
Figure 02_image1403
向化合物197（2.98g，4.20mmol）和化合物206（1.39g，3.82mmol）的DMA（20mL）溶液中，加入EDC·鹽酸（0.80g，4.20mmol）。將反應物在室溫攪拌隔夜，然後倒入水（50mL）中，並用乙酸乙酯（3×40mL）萃取。合併的有機相用鹽水（40mL）洗滌，用無水硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮。殘餘物藉由柱色譜法純化（10-50％乙酸乙酯/石油醚），得到無色油狀物（3.23g，80％收率）。ESI-MS m/z 1057.85 （[M + H] +）。
實施例 99.（S）-34-（4-（雙（2-（2，5-二側氧基-2，5-二氫-1H-吡咯-1-基）乙基）胺基）-4-側氧基丁醯胺基）-28，35-二側氧基-2，5，8，11，14，17，20，23，26-九氧雜-29，36-二氮雜四十烷-40-酸（211）的合成。
Figure 02_image1405
將化合物210（3.20g，3.03mmol）在甲酸（10mL）和二氯甲烷（5mL）中的溶液，在室溫攪拌隔夜。然後將溶液濃縮並與甲苯濃縮三次，得到無色油狀物（3.00g，粗產物），無需進一步純化即可使用。ESI-MS m/z 1001.50 （[M + H] +）。
實施例 100.（S）-2，5-二氧吡咯烷-1-基34-（4-（雙（2-（2，5-二側氧基-2，5-二氫-1H-吡咯-1-基）乙基）胺基）-4-側氧基丁醯胺基）-28，35-二側氧基-2，5，8，11，14，17，20，23，26-九氧雜-29，36-二氮雜四十烷-40-酯（212）的合成。
Figure 02_image1407
向化合物211（3.00g，粗產物，3.03mmol）的DMA（15.0mL）溶液中，加入N-羥基琥珀醯亞胺（0.38g，3.33mmol）和EDC·鹽酸（0.87g，4.55mmol）。在室溫下持續攪拌2小時，然後用水（50mL）稀釋並用乙酸乙酯（3×30mL）萃取。合併的有機相用鹽水（30mL）洗滌，用無水硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱純化（10-50％乙酸乙酯/石油醚），得到無色油狀物（2.90g，90％收率）。ESI-MS m/z 1098.50 （[M + H] +）。
實施例 101.N-（4-（（34S，42S）-34-（4-（雙（2-（2，5-二側氧基-2，5-二氫-1H-吡咯-1-基）乙基）胺基）-4-側氧基丁醯胺基）-42-甲基-28，35，40-三側氧基-2，5，8，11，14，17，20，23，26-九氧雜-29，36，41-三氮雜四十三烷醯胺基）苄基）-1-（（（S）-4-乙基-8-氟-4-羥基-9-甲氧基-3，14-二側氧基-3，4，12，14-四氫-1H-呱喃并[3 '，4'：6，7]吲哚并[1，2-b]喹啉-11-基）甲基）-N，N-二甲基六氫吡啶-4-氮鎓（213）
Figure 02_image1409
在0℃下，將化合物212（0.10g，0.091mmol）溶解於DMA（5mL）中，加入化合物28（56.8mg，0.08mmol）和N，N-二異丙基乙胺（0.020mL，0.12mmol）。反應物升溫至室溫攪拌2小時，濃縮，並藉由製備型HPLC（乙腈/含有甲酸的水）純化，得到化合物213（84 mg，62％收率）。ESI-MS m/z： M +C 84H 116FN 12O 24： 計算值1695.82；實測值1695.82。
實施例 102.2-（2-（1，3-二氧雜吲哚啉-2-基）乙醯基）肼基羧酸第三丁酯（216）的合成。
Figure 02_image1411
在0℃下，向Boc-肼（7.08.g，53.5mmol）的二氯甲烷（200mL）溶液中依次加入三乙胺（13.5mL，97.4mmol）和化合物215（10.8g，48.7mmol）。在室溫攪拌30分鐘，將混合物倒入冰水（100mL）中，並用二氯甲烷（3×100mL）萃取。用水（100mL）和鹽水（100mL）洗滌合併的有機相，用無水硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮，得到白色固體（15.5g，100％收率）。ESI-MS m/z 320.12 （[M + H] +）。
實施例 103.2-（1，3-二氧異吲哚-2-基）乙醯肼的合成。（217）
Figure 02_image1413
將化合物216（15.5g，48.7mmol）溶於1，4-二噁烷（150mL）中，在室溫下與25％鹽酸（50mL）反應1小時。濃縮反應混合物，然後與甲苯共濃縮，得到白色固體（10.6g，100％收率）。ESI-MS m/z 220.06 （[M + H] +）。
實施例 104.2-（1，3-二氧雜吲哚啉-2-基）-N'-（2-（1，3-二氧雜吲哚啉-2-基）乙醯基）乙醯醯肼（218）的合成。
Figure 02_image1415
在0℃下，向化合物217（10.6g，48.7mmol）的THF（200mL）溶液中加入三乙胺（13.5mL，97.4mmol）和化合物215（10.8g，48.7mmol）。反應升溫至室溫攪拌隔夜。過濾收集沈澱物，然後將其懸浮在水（100mL）中，並攪拌20分鐘。再次過濾得到化合物218（15.7 g，80％收率），為白色固體。ESI-MS m/z 407.09 （[M + H] +）。
實施例 105.二第三丁基2，2'-（1，2-雙（2-（1，3-二氧雜吲哚啉-2-基）乙醯基）肼-1，2-二基）二乙酸酯（219）的合成。
Figure 02_image1417
在0℃下，將氫化鈉（0.5g，12.3mmol）分批加入化合物218（2.0g，4.92mmol）的DMF（40mL）溶液中。將該混合物升溫至室溫，攪拌3小時，加入溴乙酸第三丁酯（2.0g，10.3mmol），將反應攪拌隔夜，然後倒入冰水（100mL）中，並用二氯甲烷（3×50mL）萃取。用水（50mL），鹽水（50mL）洗滌合併的有機相，用無水硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮，藉由矽膠色譜法純化，得到白色固體（1.5g，50％收率）。ESI-MS m/z 635.23 （[M + H] +）。
實施例 106.二第三丁基2，2'-（1，2-雙（2-胺基乙醯基）肼-1，2-二基）二乙酸酯（220）的合成。
Figure 02_image1419
將化合物219（1.5g，2.36mmol）和肼（442mg，7.08mmol）的乙醇（30mL）混合物回流1小時，然後冷卻至室溫並過濾。將濾液濃縮加入至乙酸乙酯（20mL）中，再次過濾。濃縮濾液，得到白色固體220 （750mg，85%收率）。ESI-MS m/z 375.22 （[M + H] +）。
實施例 107.二第三丁基2，2'-（1，2-雙（2-（2，5-二側氧基-2，5-二氫-1H-吡咯-1-基）乙醯基）肼-1，2-二基）二乙酸酯（221）的合成。
Figure 02_image1421
在0℃下，向化合物220（750mg，2mmol）的THF（20mL）和飽和碳酸氫鈉水溶液（30mL）中，加入N-甲氧基羰基馬來醯亞胺（622mg，4mmol）。將反應混合物在0℃下，攪拌1小時。過濾收集白色固體，得到化合物221（854mg，80％收率）。ESI-MS m/z 535.20 （[M + H] +）。
實施例 108.2，2'-（1，2-雙（2-（2，5-二側氧基-2，5-二氫-1H-吡咯-1-基）乙醯基）肼-1，2-二基）二乙酸（222）的合成。
Figure 02_image1423
將化合物221（854mg，1.6mmol）溶於二噁烷（3mL）中，在室溫下和25％鹽酸（3mL）反應2小時，然後濃縮反應物，得到化合物222（675mg，100％收率）。ESI-MS m/z 423.07 （[M + H] +）。
實施例 109.二第三丁基4，4'-（（2，2'-（1，2-雙（2-（2，5-二側氧基-2，5-二氫-1H-吡咯-1-基）乙醯基）肼-1，2-二基）雙（乙醯基））雙（氮雜二基））二丁酸酯（223）的合成。
Figure 02_image1425
在0℃下，向化合物222（200mg，0.47mmol）的DMF（5mL）溶液中加入4-胺基丁酸第三丁酯（158mg，0.99mmol）和EDC·鹽酸（189.7mg，0.99mmol）。將反應混合物升溫至室溫攪拌隔夜，倒入冰水中，用二氯甲烷（3×10mL）萃取。合併的有機相用0.2 N鹽酸（5mL），水（5mL），鹽水（5mL）洗滌，用無水硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮，得到白色固體（330mg，100％收率）。
實施例 110.雙（2，5-二氧吡咯烷-1-基）4，4'-（（2，2'-（1，2-雙（2-（2，5-二側氧基-2，5-二氫-1H-吡咯-1-基）乙醯基）肼-1，2-二（乙醯基））雙（氮雜二醯基））二丁酸酯（225）的合成。
Figure 02_image1427
將化合物223（330mg，0.47mmol）溶於二噁烷（3mL）中，並在室溫下和25％鹽酸（3mL）反應2小時。將反應濃縮並再溶解於DMF（5mL）中，冷卻至0℃，依次加入N-羥基琥珀醯亞胺（113mg，0.98mmol）和EDC·鹽酸（189mg，0.98mmol）。將反應物升溫至室溫攪拌隔夜，倒入冰水中，用二氯甲烷（3×20mL）萃取。用水（5mL），鹽水（5mL）洗滌合併的有機相，用無水硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮，得到白色固體225（369mg，100％收率）。ESI-MS m/z 787.21 （[M + H] +）。
實施例 111.（S）-N，N'-（（（（（（2S，21S）-11，12-雙（2-（2，5-二側氧基-2，5-二氫-1H-吡咯-1-基）乙醯基）-2，21-二甲基-4，9，14，19-四側氧基-3，8，11，12，15，20-六氮雜二十二烷-1，22-二醯基）雙（氮雜二醯基））雙（4，1-亞苯基））雙（亞甲基））雙（1-（（（S）-4-乙基-8-氟-4-羥基-9-甲氧基-3，14-二側氧基-3，4，12，14-四氫-1H-呱喃并[3 '，4'：6，7]吲哚并[1，2-b]喹啉-11-基）甲基）-N，N-二甲基六氫吡啶-4-胺基）226的合成。
Figure 02_image1429
在0℃下將化合物225（31.5 mg，0.04 mmol）溶解於DMA（5mL）中，加入化合物28（56.8mg，0.08mmol）和N，N-二異丙基乙胺（0.020mL，0.12mmol）。反應物升溫至室溫攪拌2小時，濃縮，並藉由製備型HPLC（乙腈/含有甲酸的水）純化，得到化合物226（57 mg，72%收率）。ESI-MS m/z： [M+] 2+C 102H 116F 2N 18O 2： 計算值991.42； 實測值991.86。
實施例 112.第三丁基3-（（2-胺基乙基）胺基）丙酸酯（228）的合成。
Figure 02_image1431
在45℃下將丙烯酸第三丁酯（12.81g，0.10mmol）和乙烷-1，2-二胺（24.3g，0.40mol）的THF（150mL）溶液攪拌24小時。濃縮混合物，並在氧化鋁柱上純化，用三乙胺/甲醇/二氯甲烷（5：15：80）溶離，得到標題化合物（17.50g，92％收率）。ESI-MS m/z 189.20 （[M + H] +）。
實施例 113.3-（2-胺基乙基）胺基）丙酸鹽酸鹽（229）的合成。
Figure 02_image1433
將3-（（（2-胺基乙基）胺基）丙酸第三丁酯（17.00g，90.33mmol）的1，4-二噁烷（50mL）溶液與濃鹽酸（15mL）反應。將混合物在室溫攪拌30分鐘，濃縮並用純化水（150mL）和乙酸乙酯/ 石油醚（40mL，1：5）稀釋。分離混合物，並用水（2×10mL）萃取有機層。將水層濃縮並在真空幫浦上乾燥，得到標題化合物（18.70g，100％收率， LC-MS分析純度為96％）。ESI-MS m/z 133.20 （[M + H] +）。
實施例 114.3-（（2-（2，5-二側氧基-2，5-二氫-1H-吡咯-1-基）乙基）胺基）-丙酸（230）的合成。
Figure 02_image1435
在0℃下，向3-（（2-胺基乙基）胺基）丙酸（18.70g，90.33mmol）的THF（150mL）溶液中加入馬來酸酐（8.85g，90.33mmol）。將混合物在0-4℃下攪拌4小時，濃縮，得到定量收率的（Z）-4-（（2-（（（2-羧乙基）胺基）乙基）胺基）-4-側氧基丁-2-烯酸，藉由LC-MS確認。在90℃下，向其中加入甲苯（150 mL）和DMA（50 mL），用Dean-Stark分水器回流。收集30 mL溶劑後，加入六甲基乙矽烷（9.0 mL，43.15 mmol）和氯化鋅（16 mL，1.0 M的乙醚溶液）。將混合物加熱至115-125℃，並藉由Dean-Stark分水器收集甲苯。將反應混合物在120℃下回流6小時。在此期間，加入2×40 mL無水甲苯，以保持混合物體積在50 mL左右。然後冷卻混合物，並加入1 mL 1：10 鹽酸（濃）/ 甲醇。濃縮混合物，並在矽膠柱上純化，用水/ 甲醇（1：15）溶離，並在真空幫浦上乾燥，得到14.75g的標題化合物（77.0％收率）。ESI-MS m/z 213.10 （[M + H] +）。
實施例 115.2，5，8，11，14，17，20，23-八側氧基二十五烷-25-基4-甲基苯磺酸酯（231）的合成。
Figure 02_image1437
向2，5，8，11，14，17，20，23-八側氧基二十五烷-25-醇（50.0 g，0.130 mol）的二氯甲烷（200 mL）和吡啶（100 mL）溶液中加入TsCl（30.2 g， 加入0.159mol）。將混合物攪拌隔夜，濃縮並在矽膠柱上純化，用丙酮/二氯甲烷（1：1至4：1）溶離，濃縮，並在真空幫浦上乾燥，得到標題化合物57.34g（82.0％收率）。ESI-MS m/z 539.40 （[M + H] +）。
實施例 116.S-2，5，8，11，14，17，20，23-八側氧基二十五烷-25-乙基乙硫酸酯（232）的合成。
Figure 02_image1439
向2，5，8，11，14，17，20，23-八側氧基二十五烷-25-基4-甲基苯磺酸酯（57.30 g，0.106 mol）的THF（300 mL）和N，N-二異丙基乙胺的混合溶液（ 50mL）中，加入HSAc（10.0g，0.131mol）。將混合物攪拌隔夜，濃縮並在矽膠柱上純化，用乙酸乙酯/二氯甲烷（1：2至4：1）溶離，濃縮，並在真空幫浦上乾燥，得到標題化合物40.51g（86％收率）。ESI-MS m/z 443.35 （[M + H] +）。
實施例 117.2，5，8，11，14，17，20，23-八側氧基二十五烷-25-磺酸（233）的合成。
Figure 02_image1441
在35℃下，向乙酸（200 mL）和30％過氧化氫（100 mL）的混合物中加入S-2，5，8，11，14，17，20，23-八側氧基二十五烷-25-乙基乙硫醇酯（40.40 g，0.091 mol），攪拌隔夜。濃縮混合物，用純水（200mL）和甲苯（150mL）稀釋，分離，並將有機層用水（2×25mL）萃取。合併水溶液，蒸發並在真空幫浦上乾燥，得到標題化合物40.50g（99％收率， LC-MS分析純度為95％）。ESI-MS m/z 449.30 （[M + H] +）。
實施例 118.3，3-N，N-（2 ”-馬來醯亞胺乙基）（2 ’，5 ’，8 ’，11 ’，14’，17 ’，20 ’，23’，26 ’-九氧雜二十八烷-28 ’-硫氨酸）胺基丙酸（234）的合成。
Figure 02_image1443
向2，5，8，11，14，17，20，23-八側氧基二十五烷-25-磺酸（20.0 g，44.62 mmol）的THF（100 mL）和二氯甲烷（100 mL）混合溶液中，依次加入草醯氯（25.21 g，200.19 mmol）和DMF（0.015 mL）。將混合物在室溫攪拌2小時，濃縮，與二氯甲烷/甲苯（1：1，2×50mL）濃縮，然後再溶解於THF（50mL）。向3-（（2-（2，5-二側氧基-2，5-二氫-1H-吡咯-1-基）乙基）胺基）-丙酸化合物（7.50 g，35.36 mmol）的THF（100 mL）溶液中，加入上述磺醯氯。將混合物攪拌隔夜，濃縮並在矽膠柱上純化，用甲醇/二氯甲烷（1：6至1：5）溶離，濃縮並在真空幫浦上乾燥，得到標題化合物14.76 g（65%收率）。ESI-MS m/z 643.35 （[M + H] +）。
實施例 119.N-N-琥珀醯亞胺3，3-N，N-（2 ' '-馬來醯亞胺乙基）（2 '，5 '，8 '，11 '，14 '，17 '，20 '，23 '，26 '-九氧雜二十八烷-28 '-硫氨酸）胺基丙酸酯（235）的合成。
Figure 02_image1445
將3，3-N，N-（2 ”-馬來醯亞胺乙基）（2 ’，5 ’，8 ’，11 ’，14’，17 ’，20 ’，23’，26 ’-九氧雜二十八烷-28 ’-硫氨酸）胺基丙酸（234）（7.50 g，11.67 mmol），N-羥基琥珀醯亞胺（1.50 g，13.04 mmol），EDC·鹽酸（10.10 g，52.60 mmol），THF（100 mL）混合物攪拌隔夜，真空濃縮，並在矽膠柱上純化，用乙酸乙酯/二氯甲烷（1：4至2：1）溶離，濃縮並在真空幫浦上乾燥，得到標題化合物6.30g（73％收率）。ESI-MS m/z 740.40 （[M + H] +）。
實施例 120.化合物236的合成。
Figure 02_image1447
在0℃下，向H-Gly-Gly-Gly-OH（0.50 g，2.03 mmol）和化合物235（1.65 g，2.22 mmol）的DMF（15 mL）溶液中加入N，N-N-二異丙基乙胺（3 mL）。將反應混合物在0℃在下攪拌0.5小時，隨後在室溫下攪拌4小時。然後將反應混合物濃縮，並藉由矽膠柱色譜純化（乙腈/水，0.1％的甲酸的95：5），得到標題化合物（1.04g，63％收率）。ESI-MS m/z [M + H] +：C 32H 56N 5O 17S計算值814.33；實測值 814.46。
實施例 121.化合物237的合成。
Figure 02_image1449
將化合物236（0.70 g，0.86 mmol），N-羥基琥珀醯亞胺（0.20 g，1.73 mmol）和EDC·鹽酸（1.21 g，6.36 mmol）在THF（20 mL）中的混合物攪拌隔夜，真空濃縮並在矽膠柱上純化，用乙酸乙酯 /二氯甲烷（1：4至2：1）溶離，濃縮並在真空幫浦上乾燥，得到標題化合物（0.540g，69％收率）。ESI-MS m/z [M + H] +： C 36H 59N 6O 19S，計算值911.34；實測值911.42。
實施例 122.化合物238的合成。
Figure 02_image1451
在0℃下將化合物237（36 mg，0.04 mmol）溶解於DMF（5mL）中，加入化合物28（56.8mg，0.08mmol）和N，N-二異丙基乙胺（0.020mL，0.12mmol）。反應物升溫至室溫攪拌2小時，濃縮，並藉由製備型HPLC（乙腈/含有甲酸的水）純化，得到化合物238（48 mg，80%收率）。ESI-MS m/z： M +C 71H 99FN 11O 22S計算值1508.67；實測值1508.86。
實施例 123.甲基4-（雙（2-（乙醯硫基）乙基）胺基）-4-側氧基丁酸酯（240）的合成。
Figure 02_image1453
在0℃下，向4-（雙（2-（（（甲基磺醯基）氧基）乙基）胺基）-4-側氧基丁酸甲酯（新製備，90％純度，8.5 g，約20 mmol）的DMA（350 mL）溶液中加入硫代乙酸（10mL，134mmol），隨後加入三乙胺（30mL，215mmol）。然後將混合物在室溫攪拌隔夜，濃縮，用乙酸乙酯（350 mL）稀釋，用飽和碳酸氫鈉（300 mL），鹽水（300 mL）和1 M 磷酸二氫鈉（300 mL）洗滌。有機層經硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮，並在矽膠柱上純化，用乙酸乙酯 /正己烷（10％〜25％乙酸乙酯）溶離，得到標題化合物（5.1g，76％收率）。ESI-MS m/z [M + Na] +：C 13H 21NO 5S 2計算值358.1；實測值358.2。
實施例 124.4-（雙（2-（吡啶-2-基二磺醯基）乙基）胺基）-4-側氧基丁酸（241）的合成。
Figure 02_image1455
向4-（雙（2-（乙醯硫基乙基）胺基）胺基）-4-側氧基丁酸甲酯（5.0g，14.9mmol）的THF（150mL）溶液中加入氫氧化鈉（5.0g，125mmol）的水（100mL）溶液。將混合物在室溫持續攪拌35分鐘，用磷酸中和至pH 7。然後加入PySSPy（26.0 g，118 mmol）的THF（100 mL）溶液，攪拌4小時，濃縮並在矽膠柱上純化，用甲醇/二氯甲烷/ 乙酸（1：20 / 0.2）溶離，得到標題化合物（5.8g，85.6％收率）。ESI-MS m/z [M + Na] +： C 18H 21N 3O 3S 4計算值478.0； 實測值478.2。
實施例 125.2，5-二氧雜吡咯烷-1-基4-（雙（2-（吡啶-2-基二硫烷基）乙基）胺基）-4-側氧基丁酸酯（242）的合成。
Figure 02_image1457
向4-（雙（2-（2-吡啶-2-基二硫醚基）乙基）胺基）-4-側氧基丁酸（5.2 g，11.5 mmol）的DMA（100 mL）溶液中加入N-羥基琥珀醯亞胺（1.6 g，13.9 mmol）和EDC·鹽酸（5.0 g，26.1 mmol）。將混合物攪拌隔夜，濃縮並在矽膠柱上純化，用乙酸乙酯/二氯甲烷（5％至15％乙酸乙酯）溶離，得到標題化合物（5.8g，85.6％收率）。ESI-MS m/z [M + Na] +：C 22H 24N 4O 5S 4計算值575.1；實測值575.2。
實施例 126.N-（4-（（S）-2-（4-（雙（2-（吡啶-2-基二磺醯基）乙基）胺基）-4-側氧基丁醯胺基）丙醯胺基）苄基）-1-（（S）-4-乙基-8-氟-4-羥基-9-甲氧基-3，14-二側氧基-3，4，12，14-四氫-1H-呱喃并[3 '，4'：6，7]吲哚并[1，2-b]喹啉-11-基）甲基）-N，N-二甲基六氫吡啶-4-氮鎓（243）的合成。
Figure 02_image1459
在0℃下將化合物242（23 mg，0.04 mmol）溶解於DMA（5mL）中，加入化合物28（56.8mg，0.08mmol）和N，N-二異丙基乙胺（0.020mL，0.12mmol）。反應物升溫至室溫，攪拌2小時，濃縮，並藉由製備型HPLC（乙腈/含有甲酸的水）純化，得到化合物273（39 mg，85%收率）。ESI-MS m/z： M +C 57H 65FN 9O 8S 4： 計算值1150.38； 實測值1150.45。
實施例 127.4-（2-吡啶基二硫）-4-甲基戊酸（245）的合成。
Figure 02_image1461
向4-巰基-4-甲基戊酸（Goff， D. 等， BioConjugate Chem.1990， 1， 381-386）（4.67 g，31.5 mmol）的甲醇（15 mL）溶液中加入2，2'-二硫代二吡啶（30.0 g，136.2 mmol）的甲醇（80 mL）和100 mM磷酸鈉緩衝溶液（pH 7.5，70mL）混合物。攪拌6小時後，將混合物濃縮，用乙酸乙酯/正己烷（1：1）萃取。將水溶液調節至pH 3，並用乙酸乙酯（3×100mL）萃取。合併有機層，經硫酸鈉乾燥，過濾，蒸發，並在矽膠柱上純化（甲醇 /二氯甲烷/乙酸，1：15：0.01），得到標題化合物（7.05g，87％）。ESI-MS m/z： [M + H] +C 11H 15NO 2S 2計算值258.05； 實測值258.05。
實施例 128.N-琥珀醯亞胺基4-（2-吡啶基二硫代）-4-甲基戊酸酯（246）的合成。
Figure 02_image1463
向4-（2-吡啶基二硫代）-4-甲基戊酸（2.0g，7.78mmol）的二氯甲烷（20mL）溶液中，加入N-羥基琥珀醯亞胺（1.10g，9.56mmol）和EDC·鹽酸（4.0g，20.8mmol），將混合物攪拌隔夜，濃縮並在矽膠柱上純化（乙酸乙酯/二氯甲烷，1：10），得到標題化合物（2.48g，90％）。ESI-MS m/z： [M + Na] +C 15H 18N 2O 4S 2計算值377.07；實測值377.08。
實施例 129.1-（（S）-4-乙基-8-氟-4-羥基-9-甲氧基-3，14-二側氧基-3，4，12，14-四氫-1H-呱喃并[3 '，4'：6，7]吲哚并[1，2-b]喹啉-11-基）甲基）-N，N-二甲基-N-（4-（（S）-2-（4-甲基-4-（苯基二磺醯基）戊胺基）丙醯胺基）苄基）六氫吡啶-4-氮鎓（247）的合成。
Figure 02_image1465
在0℃下將化合物246（15 mg，0.04 mmol）溶解於DMA（5mL）中，加入化合物28（56.8mg，0.08mmol）和N，N-二異丙基乙胺（0.020mL，0.12mmol）。反應物升溫至室溫，攪拌2小時，濃縮，並藉由製備型HPLC（乙腈/含有甲酸的水）純化，得到化合物247（32 mg，86%收率）。ESI-MS m/z： M +C 51H 60FN 6O 7S 2： 計算值951.39；實測值951.39。
實施例 130.（S）-4-乙基-8-氟-4，9-二羥基-11-甲基-10-硝基-1H-呱喃并[3 '，4'：6，7]吲哚并[1，2-b]喹啉-3，14（4H，12H）-二酮（124）的合成。
Figure 02_image1467
在化合物103 （451.1mg，1.139mmol）的二氯甲烷 （10ml）溶液中加入乙酸 （1ml）、無水醋酸 （0.2ml）和濃硝酸（0.3ml，4.665mmol）。將混合物攪拌3小時，用水（10ml）稀釋，分離，並用二氯甲烷（3×25ml）萃取。合併有機層，經硫酸鈉乾燥，過濾，並在短的矽膠柱上純化，用甲醇 / 二氯甲烷（1：10）溶離，得到標題化合物（361.6mg，72％收率）。ESI-MS m/z： [M + H] +C 21H 17FN 3O 7： 計算值442.3739； 實測值442.3810。
實施例 131.（S）-9-（溴甲氧基）-4-乙基-8-氟-4-羥基-11-甲基-10-硝基-1H-呱喃并[3 '，4'：6，7]吲哚并[1，2-b]喹啉-3，14（4H，12H）-二酮（301）的合成。
Figure 02_image1469
301在70℃下，將化合物124（350.3mg，0.793mmol），二溴甲烷（1ml，14.41mmol）和碳酸氫鈉（0.25g，2.97mmol）的THF溶液攪拌8小時。將混合物濃縮，並用鹽酸（0.1M，8ml）和水（40mL）稀釋。過濾收集沈澱的固體，溶於少量（1：10）乙酸乙酯/ 二氯甲烷，然後藉由柱色譜法純化，使用甲醇/二氯甲烷（1：10-1：6）溶離，得到標題化合物（0.366 g， 86％收率）。ESI-MS m/z： [M + H] +C 22H 18BrFN 3O 7： 計算值534.0313； 實測值534.0385。
實施例 132.（S）-8-乙基-4-氟-8-羥基-15-甲基-11，14-二氫-1H-唑并[4，5-f]呱喃并[3 '，4'：6，7]吲哚并[1，2-b]喹啉-9，12（2H，8H）-二酮（302）的合成。
Figure 02_image1471
302在0℃下，向攪拌的THF（10ml）和濃鹽酸（5mL）混合溶液中加入（S）-9-（溴甲氧基）-4-乙基-8-氟-4-羥基-11-甲基 -10-硝基-1H-呱喃并[3'，4'：6，7]吲哚并[1，2-b]喹啉-3，14（4H，12H）-二酮（0.360 g，0.675 mmol）， 15分鐘後將得到的澄清溶液冷卻至-10℃。 分批向反應混合物中加入氯化亞錫（0.384g，2.022mmol），並使反應混合物升溫至室溫，攪拌1.5小時，在冰上冷卻，緩慢加入碳酸氫鈉至pH 5.5 -6.0，然後在70℃回流6小時並真空濃縮。將沈澱物過濾並用乙醇和乙醚洗滌，並將含水濾液用10％甲醇/二氯甲烷萃取。將有機相與沈澱物合併溶解在30 %甲醇/二氯甲烷中，然後藉由短矽膠墊，用20 %甲醇/二氯甲烷溶離。除去有機溶劑，得到標題化合物（0.120g，兩步收率42％），無需進一步純化即可用於下一步驟。ESI-MS m/z： [M + H] +C 22H 18FN 3O 5： 計算值424.1309； 實測值424.1375。
實施例 133.（S）-第三丁基（2-（（2-（8-乙基-4-氟-8-羥基-15-甲基-9，12-二側氧基-2，8，9，11，12，14-六氫-1H-唑并[4，5-f]呱喃并[3 '，4'：6，7]吲哚并[1，2-b]喹啉-1-基）-2-氧乙基）胺基）-2-氧乙基）胺基甲酸酯（303）的合成。
Figure 02_image1473
303將（S）-8-乙基-4-氟-8-羥基-15-甲基-11，14-二氫-1H-噁唑并[4，5-f]呱喃并[3'，4'：6，7]吲哚并[ 1，2-b]喹啉-9，12（2H，8H）-二酮，鹽酸鹽（158.3 mg，0.344 mmol），2-（2-（（（第三丁氧羰基羰基）胺基）乙醯胺基）乙酸（Boc-Gly-Gly-OH）（103.9 mg，0.447 mmol）和EDC（153.5 mg，0.799 mmol）的DMA（10 ml）溶液攪拌8小時。將混合物濃縮並在矽膠柱上純化，用乙酸乙酯/二氯甲烷（1：10 – 1：3）溶離，得到標題化合物（182.6 mg，82％收率）。ESI-MS m/z： [M + H] +C 31H 33FN 5O 9： 計算值638.2263； 實測值638.2295。
實施例 134.（S）-2-胺基-N-（2-（8-乙基-4-氟-8-羥基-15-甲基-9，12-二側氧基-2，8，9，11，12，14-六氫-1H-唑并[4，5-f]呱喃并[3 '，4'：6，7]吲哚并[1，2-b]喹啉-1-基）-2-側氧基乙基）乙醯胺鹽酸鹽（304）的合成。
Figure 02_image1475
304將（S）-叔丁基（2-（（2-（8-乙基-4-氟-8-羥基-15-甲基-9，12-二側氧基-2，8，9，11，12，14-六氫 -1H-噁唑并[4，5-f]呱喃并[3'，4'：6，7]吲哚并[[1，2-b]喹啉-1-基）-2-氧乙基）胺基）-2-氧乙基）胺基甲酸酯（175.6mg，0.275mmol）的濃鹽酸（1ml）和二噁烷（4ml）混合溶液攪拌30分鐘。隨後用甲苯（5ml）稀釋，濃縮並與二氯甲烷 /甲苯（5：5ml，2次）濃縮，得到標題化合物（154.6mg，98％收率），無需進一步純化即可用於下一步驟。ESI-MS m/z： [M + H] +C 26H 25FN 5O 7： 計算值538.1739； 實測值538.1780。
實施例 135.化合物305的合成。
Figure 02_image1477
向化合物236（83.2mg，0.102mmol）和化合物274（55.1mg，0.0960mmol）的DMA（8ml）溶液中，加入EDC（95.5mg，0.497mmol）。將混合物攪拌隔夜，濃縮並在矽膠柱上純化，用甲醇/ 二氯甲烷（1：6 – 1：3）溶離，得到化合物305（103.3 mg，81％收率）。ESI-MS m/z： （M+H） +C 58H 78FN 10O 23S： 計算值1333.4947； 實測值1333.5015。
實施例 136.（R）-2-（4-（2，5-二側氧基-2，5-二氫-1H-吡咯-1-基）丁醯胺基）-N1-（4-（2-（（2-（（S）-8-乙基-4-氟-8-羥基-15-甲基-9，12-二側氧基-2，8，9，11，12，14-六氫-1H-噁唑[4，5-f]呱喃并[3 '，4'：6，7]吲哚并[1，2-b]喹啉-1-基）-2-側氧基乙基）胺基）-2-側氧基乙基）胺基）-4-側氧基丁基）-N5-（2，5，8，11，14，17，20，23-八氧雜二十五烷-25-基）五烷二醯胺（306）的合成。
Figure 02_image1479
306向化合物304 （47.3mg，0.088mmol）和（S）-30-（4-（2，5-二側氧基-2，5-二氫-1H-吡咯-1-基）丁醯胺基）-27，31-二側氧基-2，5，8，11，14，17，20，23-八側氧基-26，32-二氮雜三十六烷-36-酸（化合物6） （70.1mg，0.092mmol）的DMF（5mL）中加入EDC （55 mg， 0.286 mmol）。將反應物攪拌8小時。濃縮後，殘留物藉由在矽膠柱上純化，用甲醇 / 二氯甲烷（1：6 – 1：3）溶離，得到化合物306（89.3 mg，79％收率）。ESI-MS m/z： [M + H] +C 60H 81FN 9O 21： 計算值1282.5532； 實測值1282.5590。
實施例 137.5-胺基-4-（2-氯乙醯基）-2-甲氧基-N-甲基苯甲醯胺（307）的合成。
Figure 02_image1481
將溶解在二氯甲烷（20mL）中的5-胺基-2-甲氧基-N-甲基苯甲醯胺（5.00g，27.76mmol）滴加到冰水冷卻的三氯化硼（1M的二氯甲烷，38.9mL）溶液中。將反應攪拌10分鐘，然後加入氯乙腈（3.2g，42.5mmol）和三氯化鋁（5.2g，38.9mmol）。加入完成後，將反應升溫至室溫然後回流隔夜。將反應混合物冷卻至約0℃，用2M 鹽酸（80mL）驟冷並在室溫持續攪拌2個小時。分離各層，水相用二氯甲烷（3×80mL）萃取。用水（100mL）洗滌合併的有機相，用硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮，在C-18柱上純化，用甲醇/水（1：6至1：1）溶離，得到化合物307（3.05g，43％收率），為黃色固體。ESI-MS m/z： [M + H] +C 11H 14ClN 2O 3： 257.0693； found 257.0725。
實施例 138.（S）-11-（氯甲基）-4-乙基-4-羥基-9-甲氧基-N-甲基-3，14-二側氧基-3，4，12，14-四氫-1H-呱喃并[3 '，4'：6，7]吲哚并[1，2-b]喹啉-8-甲醯胺（308）的合成。
Figure 02_image1483
將化合物307（59 g，2.30 mmol）和化合物25（0.57g，2.19mmol）溶解在無水甲苯（40mL）中，加入對甲苯磺酸（42mg，0.219mmol）。將懸浮液加熱回流2天，然後冷卻至室溫。除去約三分之二的甲苯後，將殘餘物過濾，將濾餅用二氯甲烷洗滌，風乾以得到化合物308（74 g，70%收率），為灰色粉末狀固體。ESI-MS m/z： [M + H] +C 24H 23ClN 3O 6： 484.1276； found 484.1220。
實施例 139.N-（4-（（S）-2-（（第三丁氧基羰基）胺基）丙醯胺基）苄基）-1-（（S）-4-乙基-4-羥基-9-甲氧基-8-（甲基胺基甲醯基）-3，14-二側氧基-3，4，12，14-四氫-1H-呱喃并[3 '，4'：6，7]吲哚并[1，2-b]喹啉-11-基）甲基）-N，N-二甲基六氫吡啶-4-氮鎓甲酸鹽（309）的合成。
Figure 02_image1485
在0℃下，將化合物308（238 mg，0.49 mmol），化合物18（200 mg，0.49 mmol）在DMF（5 mL）中的混合物攪拌30分鐘，然後加入三乙胺（63μL，0.45 mmol），繼續攪拌1小時。將反應濃縮並藉由製備型HPLC純化（乙腈/含有甲酸的水，Φ＝ 5cm，v ＝ 30ml/min，在45分鐘內100％水至50％水），得到化合物309（242mg，55％收率），為黃色固體。ESI-MS m/z： M +C 46H 58N 7O 9： 計算值852.4291； 實測值852.4355。
實施例 140.N-（4-（（S）-2-胺基丙胺基）苄基）-1-（（（S）-4-乙基-4-羥基-9-甲氧基-8-（甲基胺基甲醯基）-3，14-二側氧基-3，4，12，14-四氫-1H-呱喃并[3 '，4'：6，7]-吲哚并[1，2-b]喹啉-11-基）甲基）-N，N-二甲基六氫吡啶-4-氮鎓三氟乙酸鹽（310）的合成。
Figure 02_image1487
310將化合物309（95 mg，0.111 mmol）溶解於二氯甲烷和三氟乙酸（2mL/6mL）的混合物中，並在室溫攪拌30分鐘。將混合物用甲苯（10ml）稀釋，然後濃縮，並在真空幫浦上乾燥，得到化合物310（108mg，100％收率），為黃色固體。ESI-MS m/z： M +C 41H 50N 7O 7： 計算值752.3766； 實測值752.3710。
實施例 141.N-（4-（（30S，38S）-30-（4-（2，5-二側氧基-2，5-二氫-1H-吡咯-1-基）丁醯胺）-38-甲基-27，31，36-三側氧基-2，5，8，11，14，17，20，23-八氧雜-26，32，37-三氮雜-三十九烷醯胺基）苄基）-1-（（（（S）-4-乙基-4-羥基-9-甲氧基-8-（甲基胺基甲醯基）-3，14-二側氧基-3，4，12，14-四氫-1H-呱喃并[3 '，4'：6，7]吲哚并[1，2-b]喹啉-11-基）甲基）-N，N-二甲基六氫吡啶-4-氮鎓甲酸鹽（311）的合成。
Figure 02_image1489
將化合物310（60 mg，0.061 mmol）和化合物7（60 mg，0.064 mmol）溶於DMF（5 mL）中，冷卻至約0℃，然後加入N，N-二異丙基乙胺（21μL，0.12 mmol）。反應升溫至室溫， 並攪拌2小時，濃縮，並藉由製備型HPLC（乙腈/含甲酸的水，Φ= 3 cm，v = 20 ml/min，100％的水至50％的水，45分鐘內）純化，得到化合物281（38.5 mg，41％收率）。ESI-MS m/z： M +C 75H 106N 11O 21： 計算值1496.7559； 實測值1496.7595。
實施例 142.（2R，3S）-2，3-雙（（苄氧基）羰基）胺基）琥珀酸（312）的合成。
Figure 02_image1491
312在2小時內，向（2R，3S）-2，3-二胺基琥珀酸（4.03 g，27.30 mmol）的THF（250 ml）和磷酸二氫鈉（0.1 M，250 ml，pH 8.0）的混合溶液，分四批加入碳酸氯苄酯（15.0 g，88.23mmol），將混合物再攪拌6小時，濃縮並在矽膠柱上純化，用含有1％甲酸的水/ 乙腈（1：9）溶離，得到化合物（8.63g，75％收率）。MS ESI m/zC 20H 21N 2O 8[M+H] +計算值417.12， 實測值417.50。
實施例 143.（2R，3S）-雙（2，5-二氧雜吡咯烷-1-基）2，3-雙（（（苄氧基）-羰基）胺基）琥珀酸酯的合成。
Figure 02_image1493
313向（2R，3S）-2，3-雙（（（苄氧基）羰基）胺基）琥珀酸（4.25 g，10.21 mmol）的DMA（70 ml）溶液中加入NHS（3.60 g，31.30 mmol）和EDC（7.00 g，36.65 mmol）。將混合物攪拌隔夜，濃縮並在矽膠柱上純化，用乙酸乙酯 /二氯甲烷（1：6）溶離，得到標題化合物（5.48 g，88%收率）。MS ESI m/zC 28H 27N 4O 12[M+H] +計算值611.15， 實測值611.45。
實施例 144.二第三丁基4，4'-（（（2R，3S）-2，3-雙（（（苄氧基）羰基）-胺基）琥珀醯）雙（氮雜二醯））二丁酸酯的合成。
Figure 02_image1495
314向（2R，3S）-2，3-雙（（（苄氧基）羰基）胺基）琥珀酸（4.25g，10.21mmol）的DMA（70ml）溶液中加入4-胺基丁酸第三丁酯 （3.25 g，20.42 mmol）和EDC（7.00 g，36.65 mmol）。將混合物攪拌隔夜，濃縮並在矽膠柱上純化，用乙酸乙酯 /二氯甲烷（1：10）溶離，得到標題化合物（6.50 g，91%收率）。MS ESI m/zC 36H 51N 4O 10[M+H] +計算值699.35， 實測值699.55。
實施例 145.二第三丁基4，4’-（（（2R，3S）-2，3-二胺基琥珀醯）-雙（氮雜二醯））二丁酸酯的合成。
Figure 02_image1497
315向二第三丁基4，4'-（（（2R，3S）-2，3-雙（（苄氧基）羰基）胺基）-琥珀醯基）雙（氮雜二烷基））二丁酸溶液（2.50 g，3.58mmol）的甲醇（100mL）溶液中加入10％Pd / C（0.30g，50％wet），在室溫下催化加氫反應（1大氣壓氫氣）18小時。然後藉由矽藻土過濾除去Pd / C，並用甲醇（70ml）洗滌濾床。濃縮濾液，得到黃色泡沫狀產物，其無需進一步純化即可用於下一步驟（1.54g，100％收率）。ESI： m/z：C 20H 39N 2O 6[M+H] +： 計算值431.28； 實測值431.50。
實施例 146. 4，4’-（（2R，3S）-2，3-雙（3-（2，5-二側氧基-2，5-二氫-1H-吡咯-1-基）丙醯胺基）琥珀醯）雙（氮雜二醯））二丁酸第三丁酯的合成。
Figure 02_image1499
316向3-（2，5-二側氧基-2，5-二氫-1H-吡咯-1-基）丙酸（1.25 g，7.39 mmol）的DMA（60 ml）溶液中加入二第三丁基4，4’-（（（2R，3S）-2，3-二胺基琥珀醯）-雙（氮雜二醯））二丁基酸酯（1.54g，約3.57mmol）和EDC （2.40g，12.56mmol）。將混合物攪拌隔夜，濃縮並在矽膠柱上純化，用乙酸乙酯 /二氯甲烷（1：10）溶離，得到標題化合物（2.35 g，90%收率）。MS ESI m/zC 34H 49N 6O 12[M+H] +計算值733.33， 實測值733.60。
實施例 147.4，4’-（（（2R，3S）-2，3-雙（3-（2，5-二側氧基-2，5-二氫-1H-吡咯-1-基）丙醯胺基）琥珀醯）雙（氮雜二基））二丁酸的合成。
Figure 02_image1501
317向二第三丁基4，4′-（（2R，3S）-2，3-雙（3-（2，5-二側氧基-2，5-二氫-1H-吡咯-1-基）丙醯胺基）琥珀醯）雙（氮雜二基））二丁酸酯（2.30g，3.14mmol）的1，4-二噁烷（20ml）溶液中加入鹽酸（36%，7.0ml）。將混合物攪拌30分鐘，用甲苯（20ml）稀釋，濃縮並在矽膠柱上純化，用甲醇/二氯甲烷（1：10至1：4）溶離，得到標題化合物（1.69g，86％收率）。MS ESI m/zC 26H 33N 6O 12[M+H] +計算值621.21， 實測值621.70。
實施例 148.二第三丁基4，4’-（（（2R，3S）-2，3-雙（2-（2，5-二側氧基-2，5-二氫-1H-吡咯-1-基）乙醯胺基）琥珀醯）雙（氮雜二基））二丁酸酯的合成。
Figure 02_image1503
318向2-（2，5-二側氧基-2，5-二氫-1H-吡咯-1-基）丙酸（1.12 g，7.22 mmol）的DMA（60 ml）溶液中加入二第三丁基4，4’-（（（2R，3S）-2，3-二胺基琥珀醯）-雙（氮雜二醯））二丁酸酯（1.54g，約3.58 mmol）和EDC （2.40g，12.56mmol）。將混合物攪拌隔夜，濃縮並在矽膠柱上純化，用乙酸乙酯 /二氯甲烷（1：10）溶離，得到標題化合物（2.29 g，91%收率）。MS ESI m/zC 32H 45N 6O 12[M+H] +計算值704.30， 實測值704.60。
實施例 149.4，4’-（（（2R，3S）-2，3-雙（2-（2，5-二側氧基-2，5-二氫-1H-吡咯-1-基）乙醯胺基）琥珀醯）雙（氮雜二基））二丁酸的合成。
Figure 02_image1505
319向二第三丁基4，4'-（（2R，3S）-2，2-雙（3-（2，5-二側氧基-2，5-二氫-1H-吡咯-1-基）乙醯胺）琥珀醯）雙（氮雜二基））二丁酸酯（2.20 g，3.12 mmol）的1，4-二噁烷（20ml）中加入鹽酸（36%，7.0ml）。將混合物攪拌30分鐘，用甲苯（20ml）稀釋，濃縮並在矽膠柱上純化，用甲醇/二氯甲烷（1：10至1：4）溶離，得到標題化合物（1.69g，86％收率）。MS ESI m/zC 24H 29N 6O 12[M+H] +計算值593.18， 實測值593.40。
實施例 150.雙（2，5-二氧吡咯烷-1-基）4，4’-（（（2R，3S）-2，3-雙（2-（2，5-二側氧基-2，5-二氫-1H-吡咯-1-基）乙醯胺基）琥珀醯）雙（氮雜二醯））二丁酸酯的合成。
Figure 02_image1507
320向4，4′-（（2R，3S）-2，3-雙（2-（2，5-二側氧基-2，5-二氫-1H-吡咯-1-基）乙醯胺基）琥珀醯）雙（氮雜二基））二丁酸（1.10g，1.85mmol）的二甲基甲醯胺（30ml）溶液中加入NHS（1-羥基吡咯烷-2，5-二酮）（0.55g，4.78mmol）和EDC（1.25 g， 6.54 mmol）。將混合物攪拌隔夜，濃縮並在矽膠柱上純化，用乙酸乙酯 /二氯甲烷（1：10）溶離，得到標題化合物（1.30 g，90%收率）。MS ESI m/zC 32H 35N 8O 16[M+H] +計算值787.21， 實測值787.60。
實施例 151.（2S，3S）-2，3-雙（2，5-二側氧基-2，5-二氫-1H-吡咯-1-基）琥珀酸的合成。
Figure 02_image1509
在THF / H 2O / DIPEA（125ml / 125ml / 2ml）的混合物中加入（2R，3R）-2，3-二胺基琥珀酸（5.00g，33.77mmol），馬來酸酐（6.68g，68.21mmol）。將混合物攪拌隔夜，濃縮，得到（2S，3S）-2，3-雙（（Z）-3-羧基丙烯醯胺基）琥珀酸（11.05g，99％收率），為白色固體。MS ESI m/zC 12H 13N 2O 10[M+H] +計算值345.05， 實測值345.35。 向（2S，3S）-2，3-雙（（Z）-3-羧基丙烯醯胺基）琥珀酸（11.05 g，33.43 mmol）的乙酸（70 ml），DMF（10 ml）和甲苯（50 ml）的混合溶液中加入酸酐（30ml）。將混合物攪拌2小時，用Dean-Stark分水器，在100℃下回流6小時，濃縮，與乙醇（2×40ml）和甲苯（2×40ml）濃縮，並在矽膠柱上純化，用水/ 乙腈（1：10）溶離，得到標題化合物（8.10g，78％收率）。MS ESI m/zC1 2H 9N 2O 8[M+H] +計算值309.03，實測值309.50。
實施例 152.（2S，3S）-雙（2，5-二氧吡咯-1-基）2,3-雙(2,5-二氧-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)琥珀酸酯的合成。
Figure 02_image1511
325向（2S，3S）-2，3-雙（2，5-二側氧基-2，5-二氫-1H-吡咯-1-基）琥珀酸（4.00 g，12.98 mmol）的DMF溶液中加入70ml的NHS（3.60g，31.30mmol）和EDC（7.00g，36.65mmol）。將混合物攪拌隔夜，濃縮並在矽膠柱上純化，用乙酸乙酯 /二氯甲烷（1：6）溶離，得到標題化合物（5.79 g，89%收率，HPLC純度約為96％）。MS ESI m/zC 20H 15N 4O 12[M+H] +計算值503.06， 實測值503.60。
實施例 153.4-（（（苄氧基）羰基）胺基）丁酸的合成。
Figure 02_image1513
326在-20℃下，向氫氧化鈉（23.3 g，0.58 mol，2.0eq）的水溶液（140 mL）中加入4-胺基丁酸（30.0 g，0.29 mol，1.0eq）和THF（60 mL），然後逐滴加入氯甲酸苄酯（54mL，0.38mol，1.3eq）的THF（57mL）溶液。將反應混合物在室溫攪拌4小時，然後濃縮並用乙酸乙酯（4×100mL）洗滌。將濃鹽酸加入到水相中直至達到pH 3。用乙酸乙酯（4×150mL，2×100mL）萃取，合併的有機相用鹽水洗滌，用無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮，得到標題化合物（48.3g，70.3％），為白色固體。ESI m/z：C 12H 16NO 4[M+H] +計算值238.1，實測值238.1。
實施例 154.第三丁基4-（（（（苄氧基）羰基）胺基）丁酸酯的合成。
Figure 02_image1515
327在0℃下，向4-（（（（苄氧基）羰基）胺基）丁酸（48.0 g，0.2 mol，1.0 eq）和t-BuOH（58.0 mL，0.6 mol，3.0 eq）的無水二氯甲烷（480 mL）溶液中加入DCC（50.0g，0.24mol，1.2eq）和DMAP（2.5g，0.02mol，0.1eq），然後將混合物升溫至室溫並攪拌隔夜。濾出固體並將濾液濃縮，然後用乙酸乙酯（400mL）稀釋，並用5％碳酸氫鈉溶液和鹽水洗滌，經無水硫酸鈉乾燥，過濾，然後濃縮。殘餘物藉由矽柱色譜法純化（石油醚 /乙酸乙酯＝ 5 ：1），得到標題化合物（32.8g，55.1％），為無色油狀物。ESI m/z：C 16H 24NO 4[M+H] +計算值294.2，實測值294.2。
實施例 155.第三丁基4-胺基丁酸的合成。
Figure 02_image1517
328在氫化瓶中，將第三丁基4-（（（（苄氧基）羰基）胺基）丁酸酯（29.0 g，0.099 mol，1.0 eq）的甲醇（100mL）溶液和Pd/C（2.9 g，10％Pd/C，50％wet）混合。在室溫下催化加氫（1大氣壓氫氣）振盪隔夜。將反應混合物過濾，並將濾液濃縮，得到標題化合物，為無色油狀物（13.8g，83.7％收率）。ESI m/z：C 8H 18NO 2[M+H] +計算值160.1，實測值160.1。
實施例 156.11-（苄氧基）-11-側氧基十一酸的合成。
Figure 02_image1519
329向十一碳二酸（1.73 g，8 mmol）的DMF（30 mL）溶液中加入碳酸鉀（1.1 g，8 mmol）和溴化苄（1.36 g，8 mmol）。將混合物在室溫攪拌隔夜，然後濃縮，並藉由柱色譜法（石油醚 / 乙酸乙酯）純化，得到標題化合物（1.1g，45％收率）。ESI m/z：C 18H 27O 4[M+H] +： 計算值307.18； 實測值307.15。
實施例 157.3-（2-（2-（2-（二苄基胺基）乙氧基）乙氧基）丙酸的合成。
Figure 02_image1521
330向第三丁基3-（2-（2-（2-（二（苄基胺基）乙氧基）乙氧基）丙酸酯（2.00 g，4.84 mmol）的二氯甲烷（5 mL）的溶液中加入甲酸（5 mL）。將反應在室溫下攪拌隔夜，然後濃縮至乾，並與二氯甲烷濃縮兩次，並將殘餘物置於幫浦上，得到標題化合物（1.72g，〜100％收率）。ESI m/zC 21H 27NO 4[M+H] +： 計算值358.19； 實測值358.19。
實施例 158.第三丁基 2-苄基-11-側氧基-1-苯基-5，8，15，18-四氧雜-2，12-二氮雜二十一烷-21-酯的合成。
Figure 02_image1523
331在0℃下，向3-（2-（2-（2-（二苄基胺基）乙氧基）乙氧基）丙酸（1.12 g，4.83 mmol）和第三丁基3-（2-（2-（2-胺基乙氧基）乙氧基）丙酸酯（1.72 g，4.83）的二氯甲烷（30mL）溶液中加入HATU（1.83g，4.83mmol）和TEA（0.68mL，4.83mmol）。 將反應升溫至室溫並攪拌1小時，然後用50 mL 二氯甲烷稀釋，倒入裝有50 mL水的分液漏斗中。分離有機相，並用鹽水（50mL）洗滌，經無水硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮。藉由柱色譜法（甲醇/ 二氯甲烷）純化殘餘物，得到標題化合物（2.21g，80％收率）。ESI m/z C 32H 48N 2O 7[M+H] +： 計算值573.35； 實測值573.35。
實施例 159.第三丁基 1-胺基-9-側氧基-3，6，13，16-四氧雜-10-氮雜十九烷-19-酯的合成。
Figure 02_image1525
332在氫化瓶中，將2-苄基-11-側氧基-1-苯基第三丁基-5，8，15，18-四氧雜-2，12-二氮雜二十一烷-21-酯（2.21 g，3.86 mmol）的甲醇（20 mL）溶液和Pd / C（10 wt％，0.2 g）攪拌隔夜，藉由矽藻土（助濾劑）過濾，並將濾液濃縮，得到標題化合物（1.5g，〜100％收率）。ESI m/z C 18H 36N 2O 7[M+H] +： 計算值393.25； 實測值393.25。
實施例 160.31-苄基1-第三丁基11，21-二側氧基-4，7，14，17-四氧雜-10，20-二氮雜三十一烷-1，31-二酯。
Figure 02_image1527
333在0°C下，向第三丁基1-胺基-9-側氧基-3，6，13，16-四氧雜-10-氮雜十二烷-19-酯（1.50 g，3.86 mmol）和11-（苄氧基）-11-側氧基十一酸（1.10 g，3.6 mmol）的二氯甲烷（50 mL）溶液中加入HATU（1.48 g，3.9 mmol）和TEA（0.55 mL，3.9 mmol）。將反應混合物在室溫攪拌1小時，然後加入50 mL 二氯甲烷稀釋，倒入裝有50 mL水的分液漏斗中。分離有機相，並用鹽水（50mL）洗滌，經無水硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮。藉由柱色譜法（甲醇/ 二氯甲烷）純化殘餘物，得到標題化合物（1.50 g，61%收率）。ESI m/z C 36H 61N 2O 10[M+H] +： 計算值681.42； 實測值681.42。
實施例 161.3，13，23-三側氧基-1-苯基-2，17，20，27，30-五氧雜-14，24-二氮雜三十三烷-33-酸的合成。
Figure 02_image1529
334向31-苄基-1-第三丁基-11，21-二側氧基-4，7，14，17-四氧雜-10，20-二氮雜三十一烷-1，31-二酯（1.50g，2.2mmol）的二氯甲烷 （1mL）溶液中加入三氟乙酸 （3mL）。將反應在室溫下攪拌1小時，然後濃縮至乾並與二氯甲烷濃縮兩次，並將殘餘物置於幫浦上，得到標題化合物（0.09g，2.2mmol，粗產物）。ESI m/z C 32H 53N 2O 10[M+H] +： 計算值625.36； 實測值625.35。
實施例 162.（S）-39-（（苄氧基）羰基）胺基）-3，13，23，33-四側氧基-1-苯基-2，17，20，27，30-五氧雜-14，24，34-三氮雜四十烷-40-酸的合成。
Figure 02_image1531
335在0℃下，向3，13，23-三側氧基-1-苯基-2，17，20，27，30-五氧雜-14，24-二氮雜三十三烷-33-酸（1.50 g，2.20 mmol）和Z-Lys-OH（0.62g，2.20mmol）的二氯甲烷（50mL）溶液中加入HATU（0.84g，2.20mmol）和TEA（0.31mL，2.20mmol）。將反應混合物在室溫持續攪拌1小時，然後用50 mL 二氯甲烷稀釋，倒入裝有100 mL水的分液漏斗中。分離有機相，並用鹽水（100mL）洗滌，經無水硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮。藉由柱色譜法（甲醇/ 二氯甲烷）純化殘餘物，得到標題化合物（1.00 g，53%收率）。ESI m/z C 46H 71N 4O 13[M+H] +： 計算值887.49； 實測值887.50。
實施例 163.二第三丁基3，3’-（（氧基雙（乙烷-2，1-二基））雙（氧基））二丙酯的合成。
Figure 02_image1533
336向二甘醇（20g，0.188mol）的THF（200mL）溶液中加入鈉（0.43g，0.018mol）。在室溫下攪拌1小時，加入丙烯酸第三丁酯（48g，0.376mol），並將反應混合物在室溫下攪拌2天。將反應真空濃縮並藉由柱色譜法純化，得到標題化合物（34g，50％收率）。ESI m/z C 18H 35O 7[M+H] +： 計算值363.23； 實測值363.23。
實施例 164.3，3’-（（氧基雙（乙烷-2，1-二基））雙（氧基））二丙酸的合成。
Figure 02_image1535
337在室溫下，將二第三丁基3，3'-（（雙氧（乙烷-2，1-二基））雙（氧））二酸酯（34 g，0.093 mol）溶於甲酸（100 mL）中並攪拌隔夜。反應在真空下濃縮，得到標題化合物。ESI m/z C 10H 19O 7[M+H] +： 計算值251.11； 實測值251.11。
實施例 165.2，2-二甲基-4，14，24-三氧雜-3，7，10，17，20，27，30，33-八氧雜-13，23-二氮雜三十六烷-36-酸的合成。
Figure 02_image1537
338在0°C下，向第三丁基1-胺基-9-側氧基-3，6，13，16-四氧雜-10-氮雜十九烷-19-酯（1.50 g，3.82 mmol）和3，3'-（（雙氧（乙烷）-2，1-二基）雙（氧基））二丙酸（1.90 g，7.64 mmol）的DMF（10 mL）溶液中加入HATU（1.45 g， 3.82 mmol）和DIPEA （0.66 mL， 3.82 mmol）。將反應混合物升溫至室溫並攪拌1小時，然後用二氯甲烷（80mL）稀釋，用水（10mL）洗滌，用硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮並藉由矽膠柱色譜法純化，得到標題化合物（1.75g，75％收率），為無色液體。ESI m/z C 28H 53N 2O 13[M+H] +： 計算值625.35； 實測值625.35。
實施例166 1-第三丁基33-（2，5-二側氧基吡咯烷-1-基）11，21-二側氧基-4，7，14，17，24，27，30-六氧雜-10，20-二氮雜三十三烷-1，33-二酯的合成。
Figure 02_image1539
339在0℃下，向2，2-二甲基-4，14，24-三側氧基-3，7，10，17，20，27，30，33-八氧雜-13，23-二氮雜三十六烷-36-酸（1.75 g，2.8mmol）的二氯甲烷（20mL）溶液中加入EDCI（1.07g，5.6mmol）和NHS（0.64g，5.6mmol）。將反應物升溫至室溫並攪拌隔夜，然後用二氯甲烷（80mL）稀釋，用水（10mL）洗滌，經硫酸鈉乾燥，過濾並真空濃縮，得到標題化合物（2.00g，〜100％收率）。ESI m/z C 32H 56N 3O 15[M+H] +： 計算值722.36； 實測值722.36。
實施例 167.（S）-42-（（苄氧基）羰基）胺基）-2，2-二甲基-4，14，24，36-四側氧基-3，7，10，17，20，27，30，33-八氧雜-13，23，37-三氮雜四十三烷-43-酸的合成。
Figure 02_image1541
340向N-α-Cbz-L-賴氨酸（1.17 g，4.2 mmol）的水（10 mL）溶液中加入碳酸氫鈉（0.47 g，5.6 mmol），並將反應混合物冷卻至5℃，並加入1-第三丁基33-（2，5-二氧雜吡咯烷-1-基）11，21-二氧雜-4，7，14，17，24，27，30-六氧雜-10，20-二氮雜三十三烷-1，33-二酯（2.00g，2.8mmol）溶解於1，4-二噁烷（10mL）中的溶液。將反應升溫至室溫，並攪拌1小時，然後藉由加入1N 鹽酸酸化至pH 3，用二氯甲烷（50mL×3）萃取。有機萃取物用水（20mL）洗滌，用硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮，得到標題產物（2.3g，92％收率）。ESI m/z C 42H 71N 4O 16[M+H] +： 計算值887.48； 實測值887.48。
實施例 168.（S）-43-苄基1-第三丁基7-（（苄氧基）羰基）胺基）-6，13，23，33-四側氧基-16，19，26，29-四氧雜-5，12，22，32-四氮雜四十三烷-1，43-二酸酯的合成。
Figure 02_image1543
341將（S）-39-（（（（苄氧基）羰基）胺基）-3，13，23，33-四側氧基-1-苯基-2，17，20，27，30-五氧雜-14，24，34-三氮雜四十烷-40-酸（200 mg，0.225 mmol）溶於DMF（5 mL）並冷卻至0℃，依次加入第三丁基4-胺基丁酸酯（71.8 mg，0.45 mmol）和EDC（86.2 mg，0.45 mmol）。將反應物升溫至室溫攪拌隔夜，倒入冰水中，用二氯甲烷（3×20mL）萃取。用水（5mL），鹽水（5mL）洗滌合併的有機相，用無水硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮，得到標題化合物（231mg，100％收率）。ESI m/z C 54H 86N 5O 14[M+H] +：計算值1028.61，實測值： 1028.61。
實施例 169.（7S，10R，11S，14S）-二第三丁基10，11-雙（（苄氧基）-羰基）胺基）-6，9，12，15-四側氧基-7，14-雙（31-側氧基-2，5，8，11，14，17，20，23，26，29-十側氧基-32-氮雜三十六烷-36-基）-5，8，13，16-四氮雜二十烷- 1，20-二酯（342）的合成。
Figure 02_image1545
342將（S）-第三丁基37-（（苄氧基）羰基）胺基）-31，38-二側氧基-2，5，8，11，14，17，20，23，26，29-十氧雜-32，39-二氮雜四十三烷-43-酯（5.98 g，6.73 mmol）和Pd/C （10wt%，0.6 g）在甲醇（30 mL）中的混合物在1大氣壓下氫化反應隔夜，然後藉由矽藻土（助濾劑）過濾。在0℃下，將濾液濃縮並重新溶解在THF（60 mL），加入（2R，3S）-2，3-雙（（（苄氧基）羰基）胺基）琥珀酸（1.01 g，2.42 mmol）和HOBt（817 mg， 6.05mmol），依次加入DCC（1.25g，6.05mmol）和DIPEA（2.1mL，12.10mmol）。將反應物在室溫攪拌隔夜，然後用乙酸乙酯（400 mL）稀釋，並用0.1N 鹽酸，飽和碳酸氫鈉和鹽水洗滌，用無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮並藉由矽膠柱色譜法純化（24：1 二氯甲烷 / 甲醇），得到標題化合物（5.65g，49％收率）。MS ESI m/z C 90H 154N 8O 34[M+H] +計算值1892.06，實測值1892.60。
實施例 170.（7S，10R，11S，14S）-二第三丁基-10，11-二胺基-6，9，12，15-四側氧基-7，14-雙（31-側氧基-2，5，8，11，14，17，20，23，26，29-十氧 -32-氮雜三十六烷-36-基）-5，8，13，16-四氮雜二十烷-1，20-二酯(343)的合成。
Figure 02_image1547
343將（7S，10R，11S，14S）-二第三丁基10，11-雙（（（（苄氧基）-羰基）胺基）-6，9，12，15-四側氧基-7，14-雙（ 31-側氧基-2，5，8，11，14，17，20，23，26，29-十氧三十二烷-32-氮雜三十六烷-36-基）-5，8，13，16-四氮雜二十烷-1，20-二酯（3.71 g，1.96 mmol）和Pd / C（10 wt％，0.40 g）的甲醇（50 mL）在1個大氣壓下氫化反應隔夜，然後藉由矽藻土（助濾劑）過濾。濃縮濾液，得到標題化合物（3.18g，100％收率）。MS ESI m/z C 74H 142N 8O 30[M+H] +計算值1623.98，實測值1624.50。
實施例 171.（7S，10R，11S，14S）-10，11-雙（4-（2，5-二側氧基-2，5-二氫-1H-吡咯-1-基）丁醯胺基）-6，9，12，15-四側氧基-7，14-雙（31-側氧基-2，5，8，11，14，17，20，23，26，29-十氧雜-32-氮雜三十六烷-36-基）-5，8，13，16-四氮雜二十烷-1，20-二酸的合成。（344）。
Figure 02_image1549
344向（7S，10R，11S，14S）-二第三丁基10，11-二胺基-6，9，12，15-四側氧基-7，14-雙（31-側氧基-2，5，8，11，14，17，20，23，26，29-十氧雜-32-氮雜三十六烷-36-基）-5，8，13，16-四氮雜二十烷-1，20-二酯（315 mg， 0.194mmol）的DMA （10 mL）溶液中加入EDC（150mg，0.785mmol）和4-馬來醯-丁酸（72mg，0.57mmol）。將混合物在室溫攪拌12小時，濃縮並藉由矽膠柱色譜法（1：4 甲醇 / 二氯甲烷）純化，得到油狀物（329mg，87％收率），將其溶於二氯甲烷（25mL），在室溫下與三氟乙酸（5 mL）反應1小時，然後濃縮，得到標題化合物（309mg，99％收率）。MS ESI m/z C 82H 140N 10O 36[M+H] +計算值1841.94，實測值1842.50。
實施例 172.（S）-11-（5-（第三丁氧基）-2-（（第三丁氧羰基）胺基）-5-側氧基五醯胺）十一烷酸（345）的合成。
Figure 02_image1551
345向Boc-Glu（OtBu）-OH （0.50 g， 1.65 mmol）的DMF （10 mL）溶液中加入HATU （0.69 g， 1.82 mmol）和TEA （0.26 mL， 1.82 mmol）。攪拌30分鐘後，加入11-醯胺基十一烷酸（0.33g，1.65mmol）的DMF（10mL）溶液，將該反應物在室溫持續攪拌1小時，然後倒入含有200 mL 1N 鹽酸的分液漏斗中，並用二氯甲烷（3×50mL）萃取。有機相用100mL鹽水洗滌一次，然後經無水硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮。藉由柱色譜法（甲醇/ 二氯甲烷）純化殘餘物，得到標題化合物（1.0 g，100%收率）。ESI： m/z：C 25H 47N 2O 7[M+H] +： 計算值487.33； 實測值487.34。
實施例 173.（S）-11-（2-胺基-4-羧基丁醯胺基）十一酸的合成。
Figure 02_image1553
346向（S）-11-（5-（第三丁氧基）-2-（（第三丁氧基羰基）胺基）-5-側氧基五醯胺基）十一酸（1.0 g，〜2.05 mmol）的二氯甲烷（20 mL）溶液中加入三氟乙酸（5mL）。將反應在室溫攪拌30分鐘，然後濃縮至乾並與二氯甲烷濃縮兩次。最後，置於真空幫浦上，得到標題化合物（0.68g，2.06mmol，100％收率）。ESI m/z C 16H 31N 2O 5[M+H] +： 計算值331.22； 實測值331.22。
實施例 174.化合物347的合成。
Figure 02_image1555
347在500 mL燒瓶中，將H 2N-PEG 4-CH 2CH 2CO 2H （3.0 g， 11.3 mmol， 1.0 eq） 和K 2CO 3（4.7 g，33.93 mmol，3.0eq）溶解於50 mL水中，並在冰水浴上冷卻。逐滴加入Boc 2O（3.2g，14.7mmol，1.3）的THF （50mL）溶液。反應升溫至室溫攪拌隔夜。用1N KHSO 4將反應混合物的pH調節至4-5，並用二氯甲烷（200mL×1，100mL×3）萃取，用水（500mL×1）和鹽水（500mL×1）洗滌，無水硫酸鈉乾燥並濃縮。將殘餘物溶於少量二氯甲烷中，然後上樣到矽膠柱，用2-4％甲醇/二氯甲烷溶離，合併組分並濃縮，得到3.8g化合物347，為無色油狀物（93%收率）。ESI m/z C 16H 32O 8[M+H] +： 計算值366.2；實測值：366.2。
實施例 175.化合物348的合成。
Figure 02_image1557
348在50 mL單頸燒瓶中，將BocHN-PEG 4-CH 2CH 2CO 2H（0.81 g，2.22 mmol，1.0eq），K 2CO 3（0.92 g，6.66 mmol，3.0eq）和NaI（0.033 g，0.222 mmol，0.1eq）在10mL DMF中的混合物，在冰水浴上冷卻，並逐滴加入溴化苄（0.57g，3.33mmol，1.5eq），將混合物升溫至室溫攪拌隔夜。反應混合物用100mL水稀釋，二氯甲烷（100mL×2）萃取，水（200mL×1）和鹽水（200mL×1）洗滌，無水硫酸鈉乾燥並濃縮。將殘餘物溶於少量的二氯甲烷中，上樣到矽膠柱上，用70-90％的乙酸乙酯/ 石油醚溶離，得到0.69g的無色油化合物348（69％收率）。  ESI m/z C 23H 38O 8[M+H] +： 計算值446.3；實測值：446.3。
實施例 176.化合物349的合成。
Figure 02_image1559
349在室溫下，將BocHN-PEG 4-CH 2CH 2CO 2Bn （0.69 g， 1.5 mmol， 1.0 eq）的6 mL 二氯甲烷溶液和3 mL 三氟乙酸 攪拌30分鐘，除去溶劑，並將殘餘物與二氯甲烷濃縮3次，置於高真空幫浦上。粗產物直接用於下一步反應。ESI m/z C 18H 30O 6[M+H] +： 計算值356.2；實測值：356.2。
實施例 177.化合物350的合成。
Figure 02_image1561
350向BocHN-PEG 4-CH 2CH 2CO 2H（3.8 g，10.4 mmol，1.0 eq）的50 mL無水二氯甲烷溶液中加入NHS（1.4 g，12.5 mmol，1.2 eq）和EDC（10.0g，52.0mmol，5.0eq）。將反應物在室溫攪拌隔夜，然後用水（50 mL×2），鹽水（100 mL×1）洗滌，用無水硫酸鈉乾燥並濃縮。粗產物直接用於下一步。ESI m/z C 20H 35N 2O 10[M+H] +： 計算值463.2； 實測值463.2。
實施例 178.化合物351的合成。
Figure 02_image1563
351在300 mL燒瓶中，將H 2N-PEG 4-CH 2CH 2CO 2H（2.8 g，10.4 mmol，1.0eq）和K 2CO 3（4.3 g，31.2 mmol，3.0eq）溶於40 mL水中，在冰水浴上冷卻，並逐滴加入上述NHS酯（3.8 g，10.4 mmol）的THF（40 mL）溶液，將混合物升溫至室溫攪拌隔夜。用1N KHSO 4將反應混合物的pH調節至4-5，並用二氯甲烷（150 mL×1，100 mL×2）萃取，用水（200 mL）和鹽水（200 mL）洗滌，用無水硫酸鈉乾燥，濃縮。將殘餘物溶於少量二氯甲烷中，並上樣至矽膠柱，用4-6％甲醇/二氯甲烷溶離，得到無色油狀物（5.18 g，81%收率）。ESI m/z C 27H 53N 2O 13[M+H] +： 計算值613.3；實測值：613.3。
實施例 179.化合物352的合成。
Figure 02_image1565
352將H 2N-PEG 4-CH 2CH 2CO 2Bn （來自上一步驟的粗產物）溶於3 mL DMF，在冰水浴上冷卻，逐滴加入DIPEA（0.78 g，6.0 mmol，4.0 eq），然後加入 化合物22（0.93 g，1.5 mmol，1.0eq）的DMF （7 mL）溶液和HATU（1.72 g，4.5mmol，3.0eq）。將反應物在冰浴上攪拌2小時，並用100 mL水稀釋，用二氯甲烷（100 mL×3）萃取，用1N KHSO 4（200 mL× 1），飽和碳酸氫鈉（200 mL× 1）和鹽水（ 200mL× 1）洗滌，無水硫酸鈉乾燥，並濃縮。將殘餘物溶解在少量二氯甲烷中，上樣到矽膠柱上，並用0-5％甲醇/二氯甲烷溶離。合併組分並濃縮，得到1.0 g淺黃色油狀物（71%收率）。ESI m/z C 45H 80N 3O 18[M+H] +： 計算值950.5；實測值：950.5。
實施例 180.（S）-第三丁基34-（（苄氧基）羰基）胺基）-28，35-二側氧基-2，5，8，11，14，17，20，23，26-九氧雜-29，36-二氮雜四十烷-40-酯的合成（196）。
Figure 02_image1567
196在0°C下，向第三丁基 4-胺基丁酸酯（1.03 g，6.12 mmol）和（S）-34-（（（（苄氧基）羰基）胺基）胺基-28-側氧基-2，5，8，11，14，17，20，23，26 -九氧雜-29-氧雜三十五烷-35-酸（3.91 g，5.56 mmol）的DMF（18 mL）中，依次加入HATU（2.32 g，6.12 mmol）和TEA（1.2 mL，8.34 mmol）。將反應攪拌1小時，然後用水（300mL）稀釋，並用乙酸乙酯（3×250mL）萃取。用鹽水洗滌有機溶液，用無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮，並藉由矽膠柱色譜（32：1二氯甲烷/甲醇）純化，得到標題化合物（5.10g，99％收率）。ESI MS m/z 846.50 （[M+H] +）。
實施例 181.（S）-第三丁基34-胺基-28，35-二側氧基-2，5，8，11，14，17，20，23，26-九氧雜-29，36-二氮雜四十烷-40-酯（197）的合成。
Figure 02_image1569
197將化合物210（1.0g，1.18mmol）和Pd / C（10wt％，0.10g）加入裝有甲醇（50mL）的氫化瓶中。將混合物振盪2小時，藉由矽藻土（助濾劑）過濾，並將濾液濃縮，得到化合物197（0.93g，收率＞ 100％）。ESI MS m/z 712.50 （[M+H] +）。
實施例 182.（S）-第三丁基34-（4-（2，5-二側氧基-2，5-二氫-1H-吡咯-1-基）丁醯胺基）-28，35-二側氧基-2，5，8，11，14，17，20，23，26-九氧雜-29，36-二氮雜四十烷-40-酯（353）的合成。
Figure 02_image1571
353向化合物197（0.93 g，1.18 mmol）的95％甲醇（50 mL）和NaH 2PO 4（0.1 M，pH 5.0，10 mL）溶液中，加入N-琥珀醯亞胺基4-馬來醯亞胺基丁酸酯（0.50 g，1.77 mmol，1.5eq）。將混合物攪拌隔夜，然後濃縮並用水（50mL）稀釋，並用二氯甲烷（80mL×3）萃取，用無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮並藉由矽膠柱色譜法純化（25：1的二氯甲烷/甲醇），得到標題化合物（0.82 g，80％）為淺黃色油狀物。ESI MS m/z 877.52 （[M+H] +）。
實施例 183.（S）-34-（4-（2，5-二側氧基-2，5-二氫-1H-吡咯-1-基）丁醯胺基）-28，35-二側氧基-2，5，8，11，14，17，20，23，26-九氧雜-29，36-二氮雜四十烷-40-酸（354）的合成。
Figure 02_image1573
將化合物353（0.82 g，0.94 mmol）溶解於甲酸（50 mL）中，並在室溫下攪拌1小時。濃縮反應混合物，並與甲苯濃縮兩次，將殘餘物置於真空幫浦上，得到化合物354（0.80g，粗產物）。ESI MS m/z 820.45 （[M+H] +）。
實施例 184.（S）-2，5-二氧吡咯烷-1-基34-（4-（2，5-二側氧基-2，5-二氫-1H-吡咯-1-基）丁醯胺基）-28，35-二側氧基-2，5，8，11，14，17，20，23，26-九氧雜-29，36-二氮雜四十烷-40-酯（355）的合成。
Figure 02_image1575
向化合物213（0.80 g，粗產物，0.94 mmol）的DMA（5.0mL）溶液中，加入NHS（0.12 g，1.03 mmol）和EDC·HCl（0.27 g，1.41 mmol），在室溫下持續攪拌2小時，然後用水（15mL）稀釋並用乙酸乙酯（3×10mL）萃取。合併的有機相用鹽水（10mL）洗滌，用無水硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱純化（10-50％乙酸乙酯/石油醚），得到無色油狀物（0.67 g，78%收率）。ESI MS m/z 918.55 （[M+H] +）。
實施例 185.第三丁基（2-（2，5-二側氧基-2，5-二氫-1H-吡咯-1-基）乙基）胺基甲酸酯（356）的合成。
Figure 02_image1577
將N-Boc-乙二胺（5.6 mL，35.4 mmol，1.1 eq）和飽和碳酸氫鈉（60 mL）的混合物冷卻至0℃，分批加入N-甲氧基羰基馬來醯亞胺（5.00 g，32.2 mmol，1.0eq）。在0℃下，攪拌30分鐘後，將反應升溫至室溫攪拌1小時。過濾收集沈澱物，並用冷水洗滌，然後溶解在乙酸乙酯中，並用鹽水洗滌，用無水硫酸鈉乾燥並濃縮，得到白色固體（6.69g，87％收率）。ESI MS m/z 241.12 （[M+H] +）。
實施例 186.（2-（1，3-二側氧基-3a，4，7，7a-四氫-1H-4，7-環氧異吲哚-2（3H）-基）乙基）胺基甲酸第三丁酯的合成（357）。
Figure 02_image1579
在高壓管中，將化合物356（6.00 g，25.0 mmol），呋喃（18.0 mL）的甲苯（120 mL）溶液加熱回流並攪拌16小時，反應期間無色溶液變為黃色。然後將混合物冷卻至室溫並濃縮。將所得白色固體用乙醚打漿，得到化合物357（6.5g，84％收率）。ESI MS m/z 309.13 （[M+H] +）。
實施例 187.2-（2-胺基乙基）-3a，4，7，7a-四氫-1H-4，7-環氧吲哚-1，3（2H）-二酮鹽酸鹽的合成（358）。
Figure 02_image1581
將化合物357（9.93g，32.2mmol）的二噁烷（15mL）溶液在室溫下與濃鹽酸（15mL）持續反應3小時。濃縮反應物，並藉由過濾收集固體，用乙酸乙酯洗滌濾餅。將固體在烘箱（50℃）中乾燥隔夜，得到化合物217（6.94g，88％收率）。ESI MS m/z 206.05 （[M+H] +）。
實施例 188.化合物359的合成。
Figure 02_image1583
在-10℃下，向化合物358（1.22g，5mmol）的THF（10mL）和乙腈（10ml）溶液中加入三氯氧磷（0.47mL，5mmol）。攪拌10分鐘後，加入2，5，8，11，14，17，20，23，26-九氧雜二十八烷-28-胺（2.14g，5mmol），然後加入DIPEA（0.87mL，5mmol）。將反應加熱至0℃並攪拌3小時，然後濃縮。將殘餘物用二氯甲烷（10mL）稀釋，並藉由矽藻土過濾，將濾液真空濃縮，得到粗品（3.7g，50％純度），將其直接用於下一步。ESI MS m/z 716.29 （[M+H] +）。
實施例 189.化合物360的合成。
Figure 02_image1585
向2-（2-（2-（2-胺基乙醯胺基）乙醯胺基）乙酸（Gly-Gly-Gly，0.501 g，2.644 mmol）的乙腈（20 ml）溶液中加入DIPEA（0.87 ml，5 mmol）和化合物359（1.00g，50％純度，0.699mmol）。將混合物在40℃下攪拌6小時，濃縮並藉由製備型HPLC（乙腈/含 1% 甲酸的水，Φ= 5 cm，v = 30 ml / min，在45分鐘內用70％水至25％水溶離）純化，得到 化合物360（321.5mg，53％收率）。ESI-MS m/z： （M+H） +C 35H 62N 6O 17P： 計算值869.3910； 實測值869.3995。
實施例 190.化合物361的合成。
Figure 02_image1587
將化合物360（160.1 mg，0.184 mmol）的DMA（10 ml）和甲苯（10 ml）中的溶液回流8小時，濃縮並藉由製備型C-18 HPLC純化（乙腈/含 1% 甲酸的水，Φ ＝ 3cm，v ＝ 20ml / min，在45分鐘內70％水至25％水），凍乾後得到化合物361（125.5mg，85％收率）。ESI-MS m/z： （M+H） +C 35H 62N 6O 17P： 計算值801.3648； 實測值801.3725。
實施例 190.化合物362的合成。
Figure 02_image1589
362向化合物40（50 mg，0.064 mmol）和化合物361（51.5 mg，0.064 mmol）的DMF（5 mL）溶液中加入EDC（99.5 mg，0.517 mmol）和N，N-二異丙基乙胺（45μL，0.26 mmol）。將反應在室溫下攪拌6小時，濃縮，並藉由製備型C-18 HPLC（乙腈/含有0.5％甲酸，Φ＝ 3cm，v ＝ 20ml / min，在45分鐘內從70％水至25％水）純化，得到化合物41（66.7mg，71％收率）。ESI-MS m/z： M +C 45H 49FN 7O 9： 計算值1467.6607； 實測值1467.6675。
實施例 191.14-（苄氧基）-14-側氧基十四烷酸的合成。（363）。
Figure 02_image1591
向十四碳二酸（2.06g，8mmol）的DMF（30mL）溶液中，加入碳酸鉀（1.1g，8mmol）和溴化苄（1.36g，8mmol）。將混合物在室溫攪拌隔夜，然後濃縮，並藉由柱色譜（乙酸乙酯/石油醚）純化，得到標題化合物363（1.2g，45％收率）。ESI MS m/z 349.23 （[M+H] +）。
實施例 192. 3-（2-（2-（2-（2-羥基乙氧基）乙氧基）乙氧基）丙酸第三丁基酯（364）的合成。
Figure 02_image1593
向2，2’-（乙烷-1，2-二基雙（氧基））二乙醇（55.0 mL，410.75 mmol，3.0 eq）的無水THF（200 mL）溶液中，加入鈉（0.1 g）。攪拌混合物直至鈉消失，然後滴加丙烯酸第三丁酯（20.0mL，137.79mmol，1.0eq）。將混合物攪拌隔夜，然後在0℃下藉由HCl溶液（20.0mL，1N）驟冷。藉由旋轉蒸發除去THF，加入鹽水（300mL），並將所得混合物用乙酸乙酯（3×100mL）萃取。有機層用鹽水（3×300mL）洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮，得到標題化合物，為無色油狀物（30.20g，79.0％收率），無需進一步純化即可使用。MS ESI m/z 278.17 （[M+H] +）。
實施例 193.3-（2-（2-（2-（2-（甲苯磺醯氧基）乙氧基）乙氧基）乙氧基）丙酸第三丁酯的合成（365）。
Figure 02_image1595
在0℃下，向3-（2-（2-（2-（2-（2-羥基乙氧基）乙氧基）乙氧基）丙酸第三丁酯（30.20 g，108.5 mmol，1.0 eq）和TsCl（41.37 g，217.0 mmol，2.0 eq）的無水二氯甲烷（220 mL）溶液中，加入TEA（30.0 mL，217.0 mmol，2.0eq）。將該混合物在室溫攪拌隔夜，然後用水（3×300mL）和鹽水（300mL）洗滌，用無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮並藉由矽膠柱色譜法純化（3：1己烷/乙酸乙酯），得到無色油狀物（39.4g，84.0％收率）。MS ESI m/z 433.28 （[M+H] +）。
實施例 194.3-（2-（2-（2-（2-疊氮基乙氧基）乙氧基）乙氧基）丙酸第三丁酯（366）的合成。
Figure 02_image1597
向3-（2-（2-（2-（2-（甲苯磺醯基氧基）乙氧基）乙氧基）乙氧基）丙酸第三丁基酯（39.4 g，91.1 mmol，1.0eq）的無水DMF（100 mL）溶液中加入疊氮化鈉（20.67 g，316.6mmol，3.5eq）。將混合物在室溫下攪拌隔夜。加入水（500mL），並用乙酸乙酯（3×300mL）萃取。用水（3×900mL）和鹽水（900mL）洗滌合併的有機層，用無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮並藉由矽膠柱色譜法（5：1己烷/乙酸乙酯）純化，得到黃色油狀物（23.8 g，85.53％收率）。MS ESI m/z 326.2 （[M + Na] +）。
實施例 195.3-（2-（2-（2-（2-胺基乙氧基）乙氧基）乙氧基）丙酸第三丁酯（367）的合成。
Figure 02_image1599
將Raney-Ni（7.5 g，懸浮於水中）用水（三次）和異丙醇（三次）洗滌，並與化合物366（5.0 g，16.5 mmol）在異丙醇中混合。將混合物在氫氣球下於室溫攪拌16小時，過濾，然後在矽藻土墊上過濾，用異丙醇洗滌濾墊。濃縮濾液，並藉由柱色譜法純化（5-25％甲醇/二氯甲烷），得到淺黃色油狀物（2.60g，57％收率）。MS ESI m/z 279.19 （[M+H] +）。
實施例 196.27-苄基-1-第三丁基-14-側氧基-4，7，10-三氧雜-13-氮雜二十七烷-1，27-二酯（368）的合成。
Figure 02_image1601
向化合物363（2.60g，9.35mmol）和化合物367的二氯甲烷（50mL）中加入，EDC·HCl（2.15g，11.2mmol）和DIPEA（3.6mL，20.6mmol）。將反應混合物在室溫持續攪拌1小時，然後用50 mL二氯甲烷稀釋，倒入裝有50 mL水的分液漏斗中。分離有機相，用鹽水（50mL）洗滌，用無水硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮。殘餘物藉由柱色譜法純化（0-10％甲醇/二氯甲烷），得到標題化合物368（4.94g，87％收率）。MS ESI m/z 608.40 （[M+H] +）。
實施例 197.3，16-二側氧基-1-苯基-2，20，23，26-四氧雜-17-氮雜二十九烷-29-酸（369）的合成。
Figure 02_image1603
向化合物368（4.94g，8.14mmol）的二氯甲烷（20mL）溶液中加入三氟乙酸（20mL）。將反應在室溫攪拌1小時，然後濃縮至乾，並與二氯甲烷濃縮兩次，並將殘餘物置於幫浦上，得到化合物369（4.50g，粗產物）。ESI MS m/z 552.35 （[M+H] +）。
實施例 198.40-苄基-1-第三丁基-14，27-二側氧基-4，7，10，17，20，23-六氧雜-13，26-二氮雜四十烷-1，40-二酯（370）的合成。
Figure 02_image1605
向化合物369（4.50 g，粗產物，8.14 mmol）和化合物367（1.95 g，7.00 mmol）的二氯甲烷（50 mL）溶液中加入EDC·HCl（1.56 g，8.14 mmol）和DIPEA（2.7 mL，15.4 mmol）。將反應混合物在室溫持續攪拌1小時，然後用50 mL二氯甲烷稀釋，倒入裝有50 mL水的分液漏斗中。分離有機相，用鹽水（50mL）洗滌，用無水硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮。殘餘物藉由柱色譜法純化（0-10％甲醇/二氯甲烷），得到標題化合物370（5.22 g，92%收率）。MS ESI m/z 811.52 （[M+H] +）。
實施例 199.3，16，29-三側氧基-1-苯基-2，20，23，26，33，36，39-七氧雜-17，30-二氮雜四十二烷-42-酸（371）的合成。
Figure 02_image1607
向化合物370（5.22 g，6.44 mmol）的二氯甲烷（5mL）溶液中加入三氟乙酸（20mL）。將反應在室溫攪拌1小時，然後濃縮至乾，並與二氯甲烷濃縮兩次，並將殘餘物置於幫浦上，得到化合物370（4.90 g，粗產物）。ESI MS m/z 755.46 （[M+H] +）。
實施例 200.40-苄基1-（2，5-二氧吡咯烷-1-基）14，27-二側氧基-4，7，10，17，20，23-六氧雜-13，26-二氮雜四十烷-1，40-二酯（372）的合成。
Figure 02_image1609
向化合物371（4.90 g，粗產物，6.44 mmol）的二氯甲烷（30mL）溶液中加入NHS（0.81 g，7.08 mmol），EDC·HCl（1.85 g，9.66 mmol）和DIPEA（2.8 mL，16.1 mmol）。將反應攪拌2小時，然後用水（50mL）稀釋，並用乙酸乙酯（3×30mL）萃取。合併的有機相用鹽水（30mL）洗滌，用無水硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱純化（10-50％乙酸乙酯/石油醚），得到化合物372（4.90 g，90%收率），為無色油狀物。ESI MS m/z 852.48 （[M+H] +）。
實施例 201.1-（（2，5-二氧吡咯烷-1-基）氧基）-1，14，27-三側氧基-4，7，10，17，20，23-六側氧基-13，26-二氮雜四十烷-40-酸（373）的合成。
Figure 02_image1611
在氫化瓶中，向化合物372（4.90 g，5.75 mmol）的THF（20mL）溶液中加入Pd/C （10 wt%， 0.20 g）。將混合物在H 2（1 atm） 下攪拌隔夜，藉由矽藻土（助濾劑）過濾，並將濾液濃縮，得到化合物373（4.50g，收率＞ 100％）。ESI MS m/z 762.44 （[M+H] +）。
實施例 202.（S）-五氟苯基2-（（S）-2-（4-（雙（2-（2，5-二側氧基-2，5-二氫-1H-吡咯-1-基）乙基）胺基）-4-側氧基丁醯胺基）丙醯胺基）丙酸酯（374）的合成。
Figure 02_image1613
向（S）-2-（（S）-2-（4-（雙（2-（2，5-二側氧基-2，5-二氫-1H-吡咯-1-基）乙基）胺基）-4-氧雜煙醯胺基）丙醯胺基）丙酸（47mg，0.084mmol）的二氯甲烷（5mL）溶液中加入EDC（210mg，1.10mmol）和五氟苯酚（50.0mg，0.27mmol）。將混合物在室溫攪拌3小時，濃縮並在矽膠柱上純化（二氯甲烷/ 乙酸乙酯＝ 20：1至5：1），得到標題化合物374（44.6mg，79％收率）。MS-ESI m/z： [M+H] +C 28H 27F 5N 5O 9，計算值672.17； 實測值672.17。
實施例 203. 1，2-雙（2-（第三丁氧基）-2-氧乙基）肼-1，2-二羧酸二第三丁酯（375）的合成。
Figure 02_image1615
375向二第三丁基 肼-1，2-二羧酸酯（8.01 g，34.4 mmol）的DMF（150 ml）溶液中，加入氫化鈉（60％，2.76 g，68.8 mmol）。在室溫攪拌30分鐘後，加入二第三丁基 2-溴乙酸酯（14.01g，72.1mmol）。將混合物攪拌隔夜，加入甲醇（3ml）驟冷，濃縮，用乙酸乙酯（100ml）和水（100ml）稀釋，分離，並將水層用乙酸乙酯（2×50ml）萃取。合併有機層，用硫酸鎂乾燥，過濾，濃縮，並藉由矽膠柱色譜法純化（乙酸乙酯/正己烷1：5至1：3），得到標題化合物（12.98g，82％收率），為無色油狀物。MS ESI m/z  C 22H 41N 2O 8[M+H] +計算值461.28，實測值461.40。
實施例 204.2，2'-（肼-1，2-二基）二乙酸（376）的合成。
Figure 02_image1617
376向二第三丁基1，2-二（2-（第三丁氧基）-2-氧乙基）肼-1，2-二羧酸酯（6.51 g，14.14 mmol）的1，4-二噁烷（40 ml）溶液中，加入鹽酸（12 M，10 ml）。將混合物攪拌30分鐘，用二噁烷（20ml）和甲苯（40ml）稀釋，濃縮，再並與二噁烷（20ml）和甲苯（40ml）濃縮至乾，得到粗制的標題產物，用於下一步，無需進一步生產（2.15 g，103％收率，〜93％純度）。MS ESI m/zC 4H 9N 2O 4[M+H] +計算值149.05， 實測值149.40。
實施例 205.2，2'-（1，2-雙（（E）-3-溴丙烯醯基）肼-1，2-二基）二乙酸（377）的合成。
Figure 02_image1619
377向2，2'-（肼-1，2-二基）二乙酸（1.10 g，7.43 mmol）的THF（50 ml）和NaH 2PO 4（0.1 M，80 ml，pH 6.0）的混合溶液中，加入（E）-3-溴丙烯醯基溴（5.01g，23.60mmol）。將混合物攪拌6小時，濃縮並在矽膠柱上純化，用含有3％甲酸的水/乙腈（1：9）溶離，得到標題化合物（2.35g，77％收率，93％純度）。MS ESI m/zC 10H 11Br 2N 2O 6[M+H] +計算值412.89，實測值413.50。
實施例 206.2，2'-（1，2-雙（（E）-3-溴丙烯醯基）肼-1，2-二基）二乙醯氯（378）的合成。
Figure 02_image1621
378向2，2'-（1，2-雙（（E）-3-溴丙烯醯基）肼-1，2-二基）二乙酸（210 mg，0.509 mmol）的二氯乙烷（15 ml）溶液中加入草醯氯（505 mg，4.01 mmol），然後加入0.040 ml DMF。在室溫攪拌2小時後，將混合物濃縮並與二氯乙烷（2×20ml）和甲苯（2×15ml）濃縮至乾，得到標題粗產物（不穩定），無需進一步純化用於下一步（245mg，107％收率）。MS ESI m/z C 10H 9Br 2Cl 2N 2O 4[M+H] +計算值448.82，450.82， 452.82， 454.82，實測值448.60， 450.60， 452.60， 454.60。
實施例 207. 2，8-二側氧基-1，5-噁唑烷-5-羧酸第三丁酯（380）的合成。
Figure 02_image1623
在4℃下，在1小時內，向3，3'-氮雜二基二丙酸（10.00 g，62.08 mmol）的1.0 M NaOH（300 ml）溶液中加入碳酸氫二第三丁酯（22.10 g，101.3 mmol）的THF（200 ml）溶液，加完後，將混合物在4℃下攪拌2小時。將混合物用0.2 M H 3PO 4小心酸化至pH4，真空濃縮，用二氯甲烷萃取，經硫酸鈉乾燥，蒸發並用快速矽膠色譜法純化，用醋酸 /甲醇/ 二氯甲烷（0.01：1：5）溶離，得到3 ，3'-（（第三丁氧基羰基）氮雜二基）二丙酸 379（13.62g，84％收率）。ESI MS m/z C 11H 19NO 6[M+H] +，計算值262.27； 實測值262.40。 在0℃下，向3，3'-（（第三丁氧基羰基）氮雜二基）二丙酸（8.0g，30.6mmol）的二氯甲烷（500ml）溶液中加入五氧化二磷（8.70g，61.30mmol）。將混合物在0℃下攪拌2小時，然後在室溫下持續攪拌1小時，藉由短矽膠柱過濾，並用乙酸乙酯/二氯甲烷（1：6）沖洗該柱。濃縮濾液，並用乙酸乙酯/己烷打漿，得到標題化合物380（5.64g，74％收率）。ESI MS m/z C 11H 17NO 5[M+H] +，計算值244.11； 實測值244.30。
實施例 208.4-（2，5-二側氧基-2，5-二氫1H-吡咯-1-基）丁酸（381）的合成。
Figure 02_image1625
381向馬來酸酐（268g，2.73mol）的乙酸（1L）溶液中，加入4-胺基丁酸（285g，2.76mol）。在室溫攪拌30分鐘，將反應物回流1.5小時，冷卻至室溫，真空濃縮。得到的殘餘物溶於乙酸乙酯中，用水和鹽水洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮。將粗產物用乙酸乙酯和石油醚結晶，得到白色固體（400g，80％收率）。1H NMR （500 MHz， CDCl3） δ 6.71 （s， 2H）， 3.60 （t， J = 6.7 Hz， 2H）， 2.38 （t， J = 7.3 Hz， 2H）， 2.00 – 1.84 （m， 2H）。
實施例 209.2，5-二氧吡咯烷-1-基-4-（2，5-二側氧基-2，5-二氫-1H-吡咯-1-基）丁酸酯（382）的合成。
Figure 02_image1627
在室溫下，將4-（2，5-二側氧基-2，5-二氫-1H-吡咯-1-基）丁酸（400 g，2.18 mol，1.0eq）溶解在二氯甲烷（1.5 L）中，向其中加入N-羥基琥珀醯亞胺（276 g，2.40 mmol，1.1eq）和DIC（303 g，2.40 mol，1.1eq），攪拌隔夜。將反應濃縮並藉由柱色譜法（1：2石油醚/乙酸乙酯）純化，得到為白色固體的NHS酯（382g，63％收率）。 1H NMR （500 MHz， CDCl 3） δ 6.74 （s， 2H）， 3.67 （t， J= 6.8 Hz， 2H）， 2.85 （s， 4H）， 2.68 （t， J= 7.5 Hz， 2H）， 2.13 – 2.03 （m， 2H）。
實施例 210.（S）-2-（4-（2，5-二側氧基-2，5-二氫-1H-吡咯-1-基）丁醯胺基）丙酸（383）的合成。
Figure 02_image1629
在0℃下，向化合物382（7.10g，25.35mmol）和丙氨酸（3.01g，33.80mmol）的DMF（50mL）溶液中加入DIPEA（10mL）。將反應混合物在0℃下攪拌0.5小時，然後在室溫下攪拌1小時。然後將反應混合物濃縮並在矽膠柱上純化（二氯甲烷 /甲醇＝ 10：1，含0.1％的甲酸）得到化合物383（5.21g，81％收率）。  MS-ESI m/z： [M + H] +C 11H 14N 2O 5計算值255.09； 實測值255.15。
實施例 211.（S）-2，5-二氧雜吡咯烷-1-基-2-（4-（2，5-二氧雜2，5-二氫-1H-吡咯-1-基）丁醯胺基）丙酸酯（384）的合成。
Figure 02_image1631
384將化合物383（5.15g，20.26mmol），N-羥基琥珀醯亞胺（2.80g，24.34mmol），EDC（10.28g，54.10mmol）和DIPEA（5.50ml，31.63mmol）的二氯甲烷（70ml）溶液攪拌6小時，真空濃縮，並在矽膠柱上純化（移動相：二氯甲烷 /乙酸乙酯＝ 10：1），得到化合物384（5.83g，82％收率）。  MS-ESI m/z： [M + H] +C 15H 17N 3O 7計算值351.11； 實測值351.20。
實施例 212.（S）-1-苄基5-第三丁基2-（14-（苄氧基）-14-側氧基十四烷醯胺基）戊二酸酯的合成。（385）。
Figure 02_image1633
385在室溫下，將（S）-1-苄基5-第三丁基2-胺基戊酸酯，鹽酸鹽（8.70 g，26.39 mmol），14-（苄氧基）-14-側氧基十四烷酸（9.19 mmol），DIPEA（8.0 ml，46.0）和EDC（15.3g，80.50mmol）在二氯甲烷（200ml）中的混合物攪拌6小時。  將混合物用水（100ml）稀釋並分離。用二氯甲烷（100ml）萃取水相。合併有機相，用鹽水洗滌，經硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮並在矽膠柱上純化（二氯甲烷/乙酸乙酯＝ 20：1至5：1），得到標題化合物385（13.65g，83％收率）。MS-ESI m/z： [M+H] +C 37H 54NO 7，計算值624.38；實測值624.38。
實施例 213.（S）-5-（苄氧基）-4-（14-（苄氧基）-14-側氧基巰基胺基）-5-側氧基戊酸（386）的合成。
Figure 02_image1635
386在4℃下，將化合物385（12.50g，20.05mmol）溶解於二噁烷（30mL）中，並與濃鹽酸（10mL，36% conc）反應0.5小時。反應混合物用甲苯（20ml）和DMF（20ml）稀釋，在15℃下濃縮，得到標題化合物386（11.26g，99％收率）。MS-ESI m/z： [M+H] +C 33H 46NO 7，計算值568.32；實測值568.34。
實施例 214.（S）-35，49-二苄基1-第三丁基16，32，37-三側氧基-3，6，9，12，19，22，25，28-八氧雜-15，31，36-三氮雜四十九烷- 1，35，49-三羧酸酯（387）的合成。
Figure 02_image1637
將化合物386（10.70 g，18.86 mmol），第三丁基1-胺基-15-側氧基-3，6，9，12，19，22，25，28-八氧雜-16-氮雜三十一烷-31-酸酯鹽酸鹽（11.45g，18.93mmol），EDC（9.51g，50.01mmol）和DIPEA（4.00ml，23.00mol）在二氯甲烷（200ml）中的混合物攪拌隔夜，用鹽水（100ml）稀釋並分離。用二氯甲烷（100ml）萃取水相。合併有機相，用鹽水洗滌，經硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮並在矽膠柱上純化（二氯甲烷/乙酸乙酯＝ 10：1至4：1），得到標題化合物387（18.15 g，86%收率）。MS-ESI m/z： [M + H] +C 59H 96N 3O 17計算值1118.67； 實測值1118.80。
實施例 215.（S）-18-（（（苄氧基）羰基）-3，16，21，37-四側氧基-1-苯基-2，25，28，31，34，41，44，47，50-九氧雜-17，22，38-三氮雜五十三烷-53-酸（388）的合成。
Figure 02_image1639
在4℃下，將化合物387（10.50g，9.39mmol）溶解在二噁烷（45mL）中，並與鹽酸（15mL，36％濃）反應0.5小時。在15℃下，將反應混合物用甲苯（20ml）和DMF（20ml）稀釋，濃縮，並在矽膠柱上純化（二氯甲烷/甲醇＝ 10：1至6：1），得到標題化合物388（8.67g，87％收率）。MS-ESI m/z： [M + H] +C 55H 88N 3O 17計算值1062.60； 實測值1062.68。
實施例 216.（18S，59S）-18-（（苄氧基）羰基）-59-（（第三丁氧基羰基）胺基）-3，16，21，37，53-五側氧基-1-苯基-2，25，28，31，34，41，44，47，50-九氧雜-17，22，38，54-四氮雜六十烷-60-酸（389）的合成。
Figure 02_image1641
將化合物388（8.50g，8.01mmol），N-羥基琥珀醯亞胺（3.20g，27.82mmol），EDC（10.28g，54.10mmol）和DIPEA（6.00ml，34.51mmol）的THF（150ml）溶液攪拌6小時，真空濃縮，得到（S）-18-（（（苄氧基）羰基）-3，16，21，37-四側氧基-1-苯基-2，25，28，31，34，41，44，47，50-九氧雜-17，22，38-三氮雜五十三烷-53-酸，無需純化即可用於下一步。 向（S）-6-胺基-2-（（第三丁氧羰基羰基）胺基）己酸鹽酸鹽（2.75 g，9.73 mmol）的DMF（100 mL）和1.0 M Na 2PO 4（pH 7.5，55 mL）混合溶液中，在1小時內分四批加入N-琥珀醯亞胺酯，將反應混合物在室溫下再攪拌3小時。濃縮後，將殘餘物在矽膠柱上純化（二氯甲烷/甲醇＝ 10：1至4：1），得到標題化合物389（8.16g，79％收率）。MS-ESI m/z： [M + H] +C 66H 108N 5O 20計算值1289.75； 實測值1289.90。
實施例 217.（18S，59S）-59-胺基-18-（（苄氧基）羰基）-3，16，21，37，53-五側氧基-1-苯基-2，25，28，31，34，41，44，47，50-九氧雜-17，22，38，54-四氮雜六十烷-60-酸鹽酸鹽（390）的合成。
Figure 02_image1643
在4℃下，將化合物389（8.10 g，6.28 mmol）溶解在二噁烷（40mL）中，並與鹽酸（15mL，36％濃）反應0.5小時。反應混合物用甲苯（20ml）和DMF（20ml）稀釋，在15℃下濃縮，得到粗標題化合物390（7.71g，100％收率），無需進一步純化即可用於下一步。MS-ESI m/z： [M+H] +C 61H 88N 3O 17，計算值1190.70；實測值1190.78。
實施例 218.（S）-2-（4-（2，5-二側氧基-2，5-二氫-1H-吡咯-1-基）丁醯胺基）丙酸（391）的合成。
Figure 02_image1645
在0℃下，向化合物301（7.10g，25.35mmol）和丙氨酸（3.01g，33.80mmol）的DMF（50mL）溶液中加入DIPEA（10mL）。將反應混合物在0℃下攪拌0.5小時，在室溫下攪拌1小時。然後將反應混合物濃縮並在矽膠柱上純化（二氯甲烷 /甲醇＝ 10：1，含有0.1％的甲酸），得到化合物391（5.21g，81％收率）。  MS-ESI m/z： [M+H] +C 11H 14N 2O 5，計算值255.09；實測值255.15。
實施例 219.（S）-2，5-二氧雜吡咯烷-1-基-2-（4-（2，5-二氧雜2，5-二氫-1H-吡咯-1-基）丁醯胺基）丙酸酯（392）的合成。
Figure 02_image1631
392將化合物391（5.15g，20.26mmol），N-羥基琥珀醯亞胺（2.80g，24.34mmol），EDC（10.28g，54.10mmol）和DIPEA（5.50ml，31.63mmol）的二氯甲烷（70ml）溶液攪拌6小時，真空濃縮，並在矽膠柱上純化（二氯甲烷 /乙酸乙酯＝ 10：1），得到化合物392（5.83g，82％收率）。  MS-ESI m/z： [M+H] +C 15H 17N 3O 7，計算值351.11；實測值351.20。
實施例 220.（18S，59S）-18-（（苄氧基）羰基）-59-（（S）-2-（4-（2，5-二側氧基-2，5-二氫-1H-吡咯-1-基）丁醯胺基）丙醯胺基）-3，16，21，37，53-五側氧基-1-苯基-2，25，28，31，34，41，44，47，50-九氧雜-17，22，38，54-四氮雜六十烷-60-酸( 393)的合成。
Figure 02_image1648
在0℃下，向化合物390（7.61 g，6.39 mmol）和化合物392（2.90 g，8.280 mmol）的DMF（40mL）溶液中加入DIPEA（7mL）。將反應混合物在0℃下攪拌0.5小時，然後在室溫下攪拌1小時。然後將反應混合物濃縮並在矽膠柱上純化（移動相：二氯甲烷 /甲醇＝ 10：1，含有0.1％的甲酸），得到化合物393（7.10 g，78%收率）。MS-ESI m/z： [M+H] +C 72H 112N 7O 22，計算值1426.7782；實測值1426.7820。
實施例 221.（18S，59S）-18-（（苄氧基）羰基）-59-（（S）-2-（4-（2，5-二側氧基-2，5-二氫-1H-吡咯-1-基）丁醯胺基）丙醯胺基）-3，16，21，37，53，60，63，66，69-九側氧基-1-苯基-2，25，28，31，34，41，44，47，50-九氧雜-17，22，38，54，61，64，67，70-八氧雜七十二烷-72-酸（395）的合成。
Figure 02_image1650
將化合物393（7.05g，4.94mmol），N-羥基琥珀醯亞胺（0.92g，8.00mmol），EDC（3.01g，15.84mmol）和DIPEA（1.00ml，5.75mmol）的THF（50ml）溶液攪拌6小時並真空濃縮，得到化合物394粗品，為393的NHS酯，其無需純化即可用於下一步驟。 向2-（2-（2-（2-胺基乙醯胺基）乙醯胺基）乙酸（Gly-Gly-Gly）鹽酸鹽（1.67 g，7.40 mmol）的DMF（40 mL）和1.0 M Na 2PO 4（pH 7.5，15 mL）混合溶液中，在1小時內分四批加入上述化合物394。將反應混合物在室溫下再攪拌3小時。濃縮後，將殘餘物在矽膠柱上純化（二氯甲烷/甲醇＝ 10：1至7：1），得到標題化合物395（8.16g，79％收率）。MS-ESI m/z： [M+H] +C 78H 121N 10O 25，計算值1597.8426；實測值1597.8495。
實施例 222.N-（4-（（18S，61S，76S）-18-（（苄氧基）羰基）-61-（（S）-2-（4-（2，5-二側氧基-2，5-二氫-1H-吡咯-1-基）丁醯胺基）丙醯胺基）-76-甲基-3，16，21，38，55，62，65，68，71，74-十側氧基-1-苯基-2，25，29，32，35，42，46，49，52-九氧雜-17，22，39，56，63，66，69，72，75-九氧雜七十七醯胺基）苄基）-1-（（（（S）-4-乙基-8-氟-4-羥基-9-甲氧基-3，14-二側氧基-3，4，12，14-四氫-1H-呱喃并[3'，4'：6，7]吲哚并[1，2-b]喹啉- 11-基）甲基）-N，N-二甲基六氫吡啶-4-氮鎓甲酸鹽（396）的合成。
Figure 02_image1652
在室溫下，將化合物395（251 mg，0.157 mmol），化合物28 的三氟乙酸鹽（147.8 mg，0.157 mmol），EDC（101 mg，0.526 mmol）和DIPEA（0.10 ml，0.575 mmol）在DMA（10 ml）中的溶液攪拌6小時。真空濃縮混合物，並藉由製備C-18 HPLC純化（乙腈/ 0.5％甲酸，Φ＝ 3cm，v ＝ 20ml / min，在45min內90％水至30％水），得到化合物 396（235.8mg，62％收率）。ESI-MS m/z： M +C 121H 171FN 17O 31： 計算值2377.2305； 實測值2377.2415。
實施例 223.N-（4-（（2S，17S，60S）-60，74-二羧基-17-（（S）-2-（4-（2，5-二側氧基-2，5-二氫-1H-吡咯-1-基）丁醯胺基）丙醯胺基）-2-甲基-4，7，10，13，16，23，40，57，62-九側氧基-26，29，32，36，43，46，49，53-八氧雜-3，6，9，12，15，22，39，56，61-九氮雜七十四醯胺基）苄基）-1-（（（S）-4-乙基-8-氟-4-羥基-9-甲氧基-3，14-二側氧基-3，4，12，14-四氫-1H-呱喃并[3 '，4'：6，7]吲哚并[1，2-b]喹啉-11-基）甲基）-N，N-二甲基六氫吡啶-4-氮鎓（397）的合成。
Figure 02_image1654
將化合物396 （110mg，0.0454mmol）的二氯甲烷（2mL）溶液與三氟乙酸 （4mL）反應1小時。將反應混合物用甲苯（5 ml）和DMF（5 ml）稀釋，濃縮，並藉由製備型C-18 HPLC（乙腈/水，含0.5％甲酸，Φ= 3 cm，v = 20 ml / min，95 在45分鐘內將水溶解到30％的水中）純化，得到化合物397（70.2 mg，69％收率）。ESI-MS m/z： M +C 107H 159FN 17O 31： 計算值2197.1366； 實測值2197.1410。
實施例 224.（S）-第三丁基（2-（（2-（（2-（（1-（（4-乙基-8-氟-4-羥基-9-甲氧基-3，14-二側氧基-3，4，12，14-四氫-1H-呱喃并[3'，4'：6，7]吲哚并[1，2-b]喹啉-11-基）甲基）六氫吡啶-4-基）胺基）-2-側氧基乙基 ）胺基）-2-氧乙基）胺基）-2-氧乙基）胺基甲酸酯（398）的合成。
Figure 02_image1656
398向（S）-11-（（4-胺基六氫吡啶-1-基）甲基）-4-乙基-8-氟-4-羥基-9-甲氧基-1H-呱喃并[3'，4'：6 ，7]吲哚并[1，2-b] 喹啉-3，14（4H，12H）-二酮鹽酸鹽（49）（0.805 g，1.478 mmol）的DMF（25 ml）和0.1 M NaH 2PO 4（pH 7.5，50 ml）的混合溶液中，加入2，5-二氧雜吡咯烷-1-基2，2-二甲基-4，7，10-三側氧基-3-氧雜-5，8，11-三氮雜十三烷-13-酯（0.855 g，2.214 mmol），3小時內分4批加入。加完後，將混合物再攪拌2小時，濃縮，用乙酸乙酯/正丁醇（1：1，15ml×3）萃取。合併有機層，濃縮並在矽膠柱上純化（二氯甲烷/甲醇＝ 12：1至7：1），得到標題化合物398（0.841g，73％收率）。MS-ESI m/z： [M+H] +C 38H 47FN 7O 10，計算值780.3369；實測值780.3415。
實施例 225.（S）-2-胺基-N-（2-（（2-（（1-（4-乙基-8-氟-4-羥基-9-甲氧基-3，14-二側氧基-3，4，12，14-四氫-1H-呱喃并[3 '，4'：6，7]吲哚并[1，2-b]喹啉-11-基）甲基）六氫吡啶-4-基）胺基）-2-側氧基乙基）胺基）-2-側氧基乙基）乙醯胺鹽酸鹽的合成。
Figure 02_image1658
399在4℃下，將化合物398（0.810 g，1.039 mmol）溶解於二噁烷（25mL）中，並與濃鹽酸（10mL，36% conc）反應0.5小時。反應混合物用甲苯（15 ml）和DMF（15 ml）稀釋，在15℃下濃縮，得到標題化合物399粗品（0.744 g，100％收率），無需進一步純化即可用於下一步。MS-ESI m/z： [M+H] +C 33H 39FN 7O 8，計算值680.2845；實測值680.2895。
實施例 226.（2S，10S，11S，19S）-2，19-雙（（S）-18-（（苄氧基）羰基）-3，16，21，37，53-五側氧基-1-苯基-2，25，28，31，34，41，44，47，50-九氧雜-17，22，38，54-四氮雜五十八烷-58-基）-10，11-雙（4-（2，5-二側氧基-2，5-二氫-1H-吡咯-1-基）丁醯胺基）-4，9，12，17-四側氧基-3，8，13，18-四氮代二十烷-1，20-二酸（400）的合成。
Figure 02_image1660
400在0℃下，向化合物390（2.78 g，2.267 mmol）和化合物176（0.951 g，1.129 mmol）的DMF（40mL）溶液中加入DIPEA（7mL）。將反應混合物在0℃下攪拌0.5小時，然後在室溫下攪拌1小時。將反應混合物濃縮並在矽膠柱上純化（移動相：二氯甲烷 /甲醇＝ 10：1至3：1， 含0.1％的甲酸），得到化合物400（2.432 g，72%收率）。MS-ESI m/z： [M+H] +C 150H 231N 16O 46，計算值2992.6229；實測值2992.6295。
實施例 227.（15S，56S，64S，65S，73S，114S）-四苄基64，65-雙（4-（2，5-二側氧基-2，5-二氫-1H-吡咯-1-基）丁醯胺基）-56，73 -雙（（2-（（2-（（2-（（1-（（（S）-4-乙基-8-氟-4-羥基-9-甲氧基-3，14-二氧雜-3，4， 12，14-四氫-1H-呱喃并[3'，4'：6，7]吲哚并[1，2-b]喹啉-11-基）甲基）-六氫吡啶-4-基）胺基）-2-側氧基乙基） 胺基）-2-氧乙基）胺基）-2-氧乙基）胺基甲醯基）-13，18，34，50，58，63，66，71，79，95，111，116-十二烷側氧基-22，25，28，31，38，41，44，47，82，85，88，91，98，101，104，107-十六烷氧雜-14，19，35，51，57，62，67，72，78，94，110，115-十二氮雜一百二十八烷-1，15，114，128-四羧酸酯（401）的合成。
Figure 02_image1662
401將化合物399（0.150 g，0.209 mmol），化合物400（0.312 g，0.104 mmol），EDC（0.252 g，1.311 mmol）的DMF（8 ml）的溶液攪拌8小時，真空濃縮並在矽膠柱上純化（二氯甲烷/ 甲醇＝10：1至7：1），得到標題化合物401（0.301g，67％收率）。MS-ESI m/z： [M+H] +C 216H 303F 2N 30O 60，計算值4315.1550；實測值4315.1685。
實施例 228.（15S，56S，64S，65S，73S，114S）-64，65-雙（4-（2，5-二側氧基-2，5-二氫-1H-吡咯-1-基）丁醯胺基）-56，73 -雙（（2-（（2-（（2-（（1-（（（S）-4-乙基-8-氟-4-羥基-9-甲氧基-3，14-二氧雜-3，4， 12，14-四氫-1H-呱喃并[3'，4'：6，7]吲哚并[1，2-b]喹啉-11-基）甲基）-六氫吡啶-4-基）胺基）-2-側氧基乙基） 胺基）-2-氧乙基）胺基）-2-氧乙基）胺基甲醯基）-13，18，34，50，58，63，66，71，79，95，111，116-十二烷側氧基-22，25，28，31，38，41，44，47，82，85，88，91，98，101，104,107-十六烷氧雜-14，19，35，51，57，62，67，72，78，94，110，115-十二烷氮雜一百二十八烷-1，15，114，128-四羧酸（402）的合成。
Figure 02_image1664
402將化合物401 （105 mg，0.0243 mmol）的二氯甲烷（2mL）溶液與三氟乙酸 （4mL）反應1小時。將反應混合物用甲苯（5 ml）和DMF（5 ml）稀釋，濃縮，藉由製備型C-18 HPLC（乙腈/水，含0.5％甲酸，Φ= 3 cm，v = 20 ml / min，在45分鐘內95 %至30％的水）純化，得到化合物402（65.3 mg，68%收率）。ESI-MS m/z： [M + H] +C 188H 279F 2N 30O 60： 計算值3954.9672； 實測值3954.9785。
實施例 229.（S）-1，1'-（（（（（2S，20S）-11-（第三丁氧羰基）-2，20-二甲基-4，7，15，18-四側氧基-3，8，11，14，19-五雜氮雜二十一烷-1，21-二基）雙（氮雜二基）雙（4，1-亞苯基））雙（亞甲基））雙（4-（（（S）-4-乙基-8-氟-4-羥基-9-甲氧基-3，14-二側氧基-3，4，12，14-四氫-1H-呱喃并[3'，4'：6，7]吲哚并[1，2-b]喹啉-11-（甲基）-1-甲基呱嗪-1-氮鎓）甲酸鹽（405）
Figure 02_image1666
將化合物40（96 mg，0.132 mmol）和化合物53（26 mg，0.066 mmol）的DMF（3 mL）溶液冷卻至0℃，然後加入HATU（50 mg，0.132 mmol）和N，N-二異丙基乙胺（46 μL，0.264mmol）。將混合物在0℃下攪拌30分鐘，並藉由製備C-18 HPLC（乙腈/含有甲酸的水）純化，得到化合物405（80mg，67％）。ESI-MS m/z： [M] 2+C 91H 109F 2N 15O 18： 計算值868.90； 實測值868.92。
實施例 230.（S）-1，1'-（（（（（2S，20S）-2，20-二甲基-4，7，15，18-四側氧基-3，8，11，14，19-五氮雜二十二烷-1，21-二基）雙（氮雜二基）雙（4，1-亞苯基））雙（亞甲基））雙（4-（（（S）-4-乙基-8-氟-4-羥基-9-甲氧基-3，14-二側氧基-3，4，12，14-四氫-1H-呱喃并[3'，4'：6，7]吲哚并[1，2-b]喹啉-11-（甲基）-1-甲基呱嗪-1-氮鎓）甲酸鹽（406）
Figure 02_image1668
將化合物405（80.1mg，0.043mmol）溶解於三氟乙酸 / 二氯甲烷（1mL / 3mL）中，並在室溫攪拌30分鐘，將反應混合物濃縮至乾，得到化合物406（74.55mg，101％收率）。ESI-MS m/z： [M] 2+C 86H 101F 2N 15O 16： 計算值818.8754； 實測值818.8810。
實施例 231.（S）-1，1 '-（（（（2S，20S）-11-（（S）-30-（4-（2，5-二側氧基-2，5-二氫-1H-吡咯-1-基）丁醯胺基）-27，31-二側氧基-2，5，8，11，14，17，20，23-八氧雜-26，32-二氮雜三十六烷-36-醯基）-2，20-二甲基-4，7，15，18-四側氧基-3，8，11，14，19-五氮雜二十一烷-1，21-二醯基）雙（氮雜二基））雙（4，1-亞苯基））雙（亞甲基））雙（4-（（（S）-4-乙基-8-氟-4-羥基-9-甲氧基-3，14-二側氧基-3，4，12，14-四氫-1H-呱喃并[3 '，4'：6，7]吲哚并[1，2-b]喹啉-11-基）甲基）-1-甲基呱嗪-1-氮鎓）甲酸鹽（407）的合成。
Figure 02_image1670
將化合物406（74.0 mg，0.043 mmol）和化合物7（39 mg，0.0516 mmol）溶於DMF（3 mL）中，冷卻至約0℃，然後加入N，N-二異丙基乙胺（42L，0.24 mmol）。將反應升溫至室溫並攪拌2小時，濃縮，並藉由製備型C-18 HPLC（乙腈/含有2％甲酸的水）純化，得到化合物407（42mg，45%收率）。ESI-MS m/z： [M+] 2+C 120H 157F 2N 19O 30： 計算值1191.06； 實測值1191.07。
實施例 232.2，2'-（（第三丁氧羰基）氮雜二基）二乙酸（408）的合成。
Figure 02_image1672
將亞胺基二乙酸（5.0 g，37.6 mmol）溶於THF（50 mL）和水（50 mL）中，之後與NaHCO 3（12.6 g，150 mmol）混合。在約5℃下，緩慢加入Boc 2O（9.8g，45.1mmol），然後將反應升溫至室溫，攪拌2天。將反應混合物用水（100mL）稀釋，用乙酸乙酯（2×30mL）洗滌，然後使用濃鹽酸調節至pH 1.0。溶液用乙酸乙酯（3×50mL）萃取，合併有機相用水（50mL）洗滌，用無水硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮，用乙酸乙酯/石油醚打漿，得到白色固體（5.5g，63％收率）。ESI-MS m/z： [M + H]+C 9H 15NO 6： 計算值234.09； 實測值234.09。
實施例 233.（S）-1，1'-（（（（（2S，2'S）-2，2'-（（2，2'-（（第三丁氧羰基）氮雜二基）雙（乙醯基）））雙（氮雜二基））雙（丙醯基）雙（氮雜二烷基）雙（4，1-亞苯基））雙（亞甲基）雙（4-（（（S）-4-乙基-8-氟-4-羥基-9-甲氧基-3，14-二側氧基-3，4，12，14-四氫-1H-呱喃并[3'，4'：6，7]吲哚并[[1，2-b]喹啉-11-基）甲基）-1- 甲酸甲基呱嗪-1-氮鎓）甲酸鹽（409）的合成。
Figure 02_image1674
將化合物40（109mg，0.12mmol）和化合物408（14mg，0.06mmol）的DMF（3mL）溶液冷卻至0℃，再加入HATU（50mg，0.132mmol）和N，N-二異丙基乙胺（84μL，0.48mmol）。將反應在0℃下攪拌30分鐘，然後藉由製備型C-18 HPLC（乙腈/含有甲酸的水）純化，得到化合物409（61mg，62％收率）。ESI-MS m/z： [M] 2+C 83H 95F 2N 13O 16： 計算值783.85； 實測值783.85。
實施例 234.（S）-1，1'-（（（（2S，2'S）-2，2'-（（2，2'-氮雜二苯基（乙醯基））雙（氮雜二苯基）（雙（丙醯基））雙（氮雜二苯基）（雙（4，1-亞苯基））雙（4-（（S）-4-乙基-8-氟-4-羥基-9-甲氧基-3，14-二側氧基-3，4，12，14-四氫-1H-呱喃并[3 '，4'：6，7]吲哚并[1，2-b]喹啉-11-基）甲基）-1-甲基呱嗪-1-氮鎓）甲酸鹽（410）的合成。
Figure 02_image1676
將化合物409 （61 mg，0.036 mmol）溶於三氟乙酸/二氯甲烷 （1 mL/3 mL）中，在室溫下攪拌30分鐘。用甲苯（4 ml）稀釋反應混合物並濃縮至乾，得到化合物410 （59.3 mg，＞100%收率）。ESI-MS m/z： [M] 2+C 78H 87F 2N 13O 14： 計算值733.82； 實測值733.82。
實施例 235.1-（4-（（30S，41S）-30-（4-（2，5-二側氧基-2，5-二氫-1H-吡咯-1-基）丁醯胺基）-37-（2-（（S）-1-（（4-（（4-（（（S）-4-乙基-8-氟-4-羥基-9-甲氧基-3，14-二側氧基-3，4，12，14-四氫-1H-呱喃并[3'，4'：6，7]吲哚并[1-2，b]喹啉-11-基）甲基）-1-甲基呱嗪-1-基-1-基）甲基）苯基）胺基）-1-側氧基丙烷-2-基）胺基）-2-側氧基乙基）-41-甲基-27，31，36，39-四側氧基-2，5，8，11，14，17，20，23-八氧雜-26，32，37，40-四氮雜四十二烷醯胺基）-苄基）-4-（（（（S）-4-乙基-8-氟-4-羥基-9-甲氧基-3，14-二側氧基-3，4，12，14-四氫-1H-呱喃并[3'，4'：6，7]吲哚并[1，2-b]喹啉-11-基）甲基）-1-甲基呱嗪-1-氮鎓甲酸鹽（411）的合成
Figure 02_image1678
將化合物410（65 mg，0.036 mmol）和化合物6（27 mg，0.036 mmol）的DMF（3mL）溶液冷卻至0℃，再加入HATU（17.5 mg，0.046 mmol）和N，N-二異丙基乙胺（26μL，0.144 mmol）。將反應在0℃下攪拌30分鐘，然後藉由製備型C-18 HPLC（乙腈/水，含2％甲酸）純化，得到化合物411（39 mg，62％收率）。ESI-MS m/z： [M] 2+C 112H 143F 2N 17O 28： 計算值1106.01； 實測值1106.01。
實施例 236.（S）-N，N'-（（（（（2S，2'S）-2，2'-（（2，2'-（（第三丁氧羰基）氮雜二基）雙（乙醯基））雙（氮雜二基） ）雙（丙醯基）雙（氮雜二烷基）雙（4，1-亞苯基））雙（亞甲基）雙（1-（（（（S）-4-乙基-8-氟-4-羥基-9-甲氧基-3，14-二側氧基-3，4，12，14-四氫-1H-呱喃并[3'，4'：6，7]吲哚并[[1，2-b]喹啉-11-基）甲基）-N，N-二甲基六氫吡啶-4-氮鎓）甲酸鹽（412）的合成。
Figure 02_image1680
將化合物28（106 mg，0.113 mmol）和化合物408（13 mg，0.056 mmol）的DMF（3mL）溶液冷卻至0℃，加入HATU（43 mg，0.113 mmol）和N，N-二異丙基乙胺（39μL，0.226 mmol）。將反應攪拌4小時，然後藉由製備型C-18 HPLC（乙腈/水，含有甲酸）純化，得到化合物412（71mg，74％收率）。ESI-MS m/z： [M] 2+C 87H 103F 2N 13O 16： 計算值811.8801； 實測值811.8875。
實施例 237.（S）-1，1'-（（（（2S，2'S）-2，2'-（（2，2'-氮雜二苯基（乙醯基））雙-（氮雜二苯基））雙（丙醯基）（雙（氮雜二苯基））雙（4，1-亞苯基）雙（亞甲基）雙（1-（（S）-4-乙基-8-氟-4-羥基-9-甲氧基-3，14-二側氧基-3，4，12，14-四氫-1H-呱喃并[3 '，4'：6，7]吲哚并-[1，2-b]喹啉-11-基）甲基）-N，N-二甲基六氫吡啶-4-氮鎓）甲酸鹽（413）的合成。
Figure 02_image1682
將化合物412 （71 mg，0.041 mmol）溶於三氟乙酸/二氯甲烷 （1 mL/3 mL）中，並在室溫下攪拌30分鐘。用甲苯（5 ml）稀釋反應混合物並濃縮至乾燥，得到化合物413 （70 mg，＞100收率）。ESI-MS m/z： [M] 2+C 82H 95F 2N 13O 14： 計算值761.8539； 實測值761.8595。
實施例 238.N-（4-（（30S，41S）-30-（4-（2，5-二側氧基-2，5-二氫-1H-吡咯-1-基）丁醯胺基）-37-（2-（（S）-（（4-（（4-（（（S）-4-乙基-8-氟-4-羥基-9-甲氧基-3，14-二側氧基-3，4，12，14-四氫-1H-呱喃并[3'，4'：6，7]吲哚并[1-2，b]喹啉-11-基六氫吡啶-4-基）二甲基銨）甲基）苯基）胺基）-1-側氧基丙烷-2-基）胺基）-2-側氧基乙基）-41-甲基-27，31，36，39-四側氧基-2，5，8，11，14，17，20，23-八氧雜-26，32，37，40-四氮雜四十二烷醯胺基）-苄基）-1-（（（（S）-4-乙基-8-氟-4-羥基-9-甲氧基-3，14-二側氧基-3，4，12，14-四氫-1H-呱喃并[3'，4'：6，7]吲哚并[1，2-b]喹啉-11-基）甲基）-N，N-二甲基六氫吡啶-4-氮鎓甲酸鹽（414）的合成。
Figure 02_image1684
將化合物413（70 mg，0.041 mmol）和化合物6（32 mg，0.041 mmol）的DMF（4mL）溶液冷卻至0℃，再加入HATU（19 mg，0.049 mmol）和N，N-二異丙基乙胺（28μL，0.164 mmol）。將反應攪拌4小時，然後藉由製備型C-18 HPLC（乙腈/水，含甲酸）純化，得到化合物414（43 mg，45%收率）。ESI-MS m/z： [M] 2+C 116H 151F 2N 17O 28： 計算值1134.04； 實測值1134.04。
實施例 239.4-（（S）-2-（（第三丁氧基羰基）胺基）丙醯胺基）苄基（（（S）-4-乙基-8-氟-4-羥基-9-甲氧基-3，14-二側氧基-3，4，12，14-四氫-1H-呱喃并[3'，4'：6，7]吲哚并[[1，2-b]喹啉-11-基）甲基）胺基甲酸酯（415）的合成。
Figure 02_image1686
向化合物15（83mg，0.282mmol）的二氯甲烷（2mL）溶液中加入三光氣（30mg，0.094mmol）和三乙胺（37μL，0.282mmol）。然後將反應升溫至室溫，攪拌1小時，濃縮至乾。將化合物30（100mg，0.235mmol）溶解於DMF（2mL）中並冷卻至0℃，向其中加入三乙胺（37μL，0.282mmol）和上述氯甲酸酯。加入完成後，將所得混合物在0℃下攪拌1小時，然後藉由製備型C-18 HPLC（乙腈/水，含甲酸）純化，得到化合物415（122mg，70％收率）。ESI-MS m/z： [M + H] +C 38H 40FN 5O 10： 計算值746.2838； 實測值746.2898。
實施例 240.4-（（S）-2-胺基丙醯胺基）苄基（（（S）-4-乙基-8-氟-4-羥基-9-甲氧基-3，14-二側氧基-3，4，12，14-四氫-1H-呱喃并[3'，4'：6，7]吲哚并[1，2-b]喹啉-11-基）甲基）胺基甲酸酯（416）的合成。
Figure 02_image1688
416將化合物415 （122.5 mg，0.164 mmol）溶於三氟乙酸/二氯甲烷 （1 mL/3 mL）中，並在室溫下攪拌30分鐘。用甲苯（4ml）稀釋反應混合物並濃縮至乾，得到化合物416 （120.2 mg，100%收率）。ESI-MS m/z： [M + H] +C 33H 32FN 5O 8： 計算值646.22； 實測值646.22。
實施例 241.第三丁基雙（2-（（（S）-1-（（4-（（（（（（S）-4-乙基-8-氟-4-羥基-9-甲氧基-3，14-二側氧基-3，4，12，14-四氫-1H-呱喃并[3 '，4'：6，7]吲哚并[1，2-b]喹啉-11-基）甲基）氨甲醯基（氧基）甲基）苯基）胺基）-1-側氧基丙烷-2-基）胺基）-2-側氧基乙基）甲氨酸鹽（417）的合成。
Figure 02_image1690
將化合物416（120 mg，0.164 mmol）和化合物408（19 mg，0.082 mmol）的DMF（3mL）溶液冷卻至0℃，加入HATU（62 mg，0.164 mmol）和N，N-二異丙基乙胺（57μL，0.328 mmol）。將反應攪拌8小時，濃縮，然後藉由製備型C-18 HPLC（乙腈/水，含甲酸）純化，得到化合物417（171mg，70％收率）。ESI-MS m/z： [M + H] +C 75H 76F 2N 11O 20： 計算值1488.5237； 實測值1488.5295。
實施例 242.（（（（2S，2'S）-2，2'-（（2，2'-氮雜二基雙（乙醯基））雙（氮雜二基））-雙（丙醯基））雙（氮雜二基））雙（4，1- 亞苯基））雙（亞甲基）雙（（（（S）-4-乙基-8-氟-4-羥基-9-甲氧基-3，14-二側氧基-3，4，12，14-四氫-1H-呱喃基 [3'，4'：6，7]吲哚并[[1，2-b]喹啉-11-基）甲基）胺基甲酸酯）（418）的合成
Figure 02_image1692
將化合物417（171 mg，0.115 mmol）溶解於三氟乙酸 / 二氯甲烷（1mL / 3mL）中，並在室溫攪拌30分鐘，將反應混合物濃縮至乾，得到化合物418（172 mg，＞100%收率）。ESI-MS m/z： [M + H] +C 70H 68F 2N 11O 18： 計算值1388.46； 實測值1388.46。
實施例 243.（（（（（2S，2'S）-2，2'-（（（S）-30-（4-（2，5-二側氧基-2，5-二氫-1H-吡咯-1-基）丁醯胺基）-27，31，36-三側氧基-37-（2-側氧基乙基）-2，5，8，11，14，17，20，23-八氧雜-26，32，37-三氮雜三十九烷-39-醯基）雙（氮雜二基））雙（丙醯基）雙（氮雜二基））雙（4，1-亞苯基））雙（亞甲基）雙（（（（（S）-4-乙基-8-氟-4-羥基-9-甲氧基 -3，14-二側氧基-3，4，12，14-四氫-1H-呱喃并[3'，4'：6，7]吲哚并[[1，2-b]喹啉-11-基）甲基）胺基甲酸酯）（2017）的合成
Figure 02_image1694
將化合物418（172 mg，0.115 mmol）和化合物6（87 mg，0.115 mmol）的DMF（3mL）溶液冷卻至0℃，加入HATU（52 mg，0.138 mmol）和N，N-二異丙基乙胺（40μL，0.23 mmol）。將反應攪拌4小時，然後藉由製備型C-18 HPLC（乙腈/水，含甲酸）純化，得到化合物419（122 mg，50%收率）。ESI-MS m/z： [M + H] +C 104H 123F 2N 15O 32： 計算值2132.84； 實測值2132.84。
實施例 244.2-胺基-4-氟-5-羥基苯甲醛的合成（420）
Figure 02_image1696
在0℃下，向4-氟-3-甲氧基苯甲醛（770mg，5.0mmol）的濃硫酸（10mL）溶液中滴加發煙硝酸（95％，315mg，4.8mmol）。將混合物在室溫攪拌1小時，然後倒入冰水中，並過濾。濾餅用水洗滌，然後晾乾，將其溶於DMF（20mL）中，加入氯化鋰（1.6g，25mmol），將混合物回流4小時，然後倒入水中，逐滴加入濃鹽酸以達到pH 4。溶液用乙酸乙酯萃取，有機層用鹽水洗滌，乾燥並真空濃縮。向所得殘餘物中加入乙醇/水（25mL，4：1），鐵粉（1.21g，22mmol）和氯化銨（433mg，8.1mmol）。將混合物在80℃下攪拌2小時，然後濾出固體。將水加入濾液中，並將所得混合物用乙酸乙酯萃取。有機層用鹽水洗滌，乾燥，濃縮，藉由柱色譜法純化，得到標題化合物（125mg，16收率）。ESI-MS m/z： [M + H] +C 7H 6FNO 2計算值156.04；實測值156.04。
實施例 245.（S）-4-乙基-8-氟-4，9-二羥基-1H-呱喃并[3 '，4'：6，7]吲哚并[1，2-b]喹啉-3，14（4H，12H）-二酮（421）的合成。
Figure 02_image1698
將化合物420（0.125 g，0.805 mmol）和化合物25（0.202 g，0.76 mmol）溶解在無水甲苯（40mL）中，並加入對甲苯磺酸（13 mg，0.076 mmol）。將懸浮液加熱回流2天，然後冷卻至室溫。除去約三分之二的甲苯後，將殘餘物過濾並將濾餅用二氯甲烷洗滌，風乾以得到化合物421（0.26 g，90%收率），為灰色粉末狀固體。ESI-MS m/z： [M + H] +C 20H 16FN 2O 5： 計算值383.10； 實測值383.10。
實施例 246.（S）-（2-（9-乙基-5-氟-9-羥基-10，13-二側氧基-9，10-二氫-[1，3]噁嗪[5，6-f]呱喃并[3'，4'：6，7]吲哚并[1，2-b]喹啉-2（1H，3H，12H，13H，15H）-基）乙基）胺基甲酸第三丁酯（422）的合成
Figure 02_image1700
將N-Boc-乙二胺（50 mg，0.31 mmol）和多聚甲醛（70 mg，0.78 mmol）的1，4-二噁烷（5 mL）溶液加熱到約100℃，攪拌2小時，然後冷卻至室溫，加入化合物421（100mg，0.26mmol）。將反應再次加熱至100℃並攪拌2天，冷卻至室溫並藉由製備型C-18 HPLC（乙腈/水，含甲酸）純化，得到化合物422（117 mg，80％收率）。ESI-MS m/z： [M + H] +C 29H 31FN 4O 7： 計算值567.22； 實測值567.22。
實施例 247.（S）-2-（2-胺基乙基）-9-乙基-5-氟-9-羥基-2，3，12，15-四氫-[1，3]噁嗪并[5，6-f]呱喃并[3 '，4'：6，7]吲哚并[1，2-b]喹啉-10，13（1H，9H）-二酮（2023）的合成。
Figure 02_image1702
將化合物422（117mg，0.208mmol）溶解於三氟乙酸 / 二氯甲烷（2mL / 6mL）中，在室溫下攪拌1小時，將反應混合物濃縮至乾，得到黃色固體423（117g，＞100收率）。ESI-MS m/z： [M + H] +C 24H 23FN 4O 5： 計算值467.17； 實測值467.17。
實施例 248.（S）-2-（4-（2，5-二側氧基-2，5-二氫-1H-吡咯-1-基）丁醯胺基）-N1-（4-（（2-（（S）-9 -乙基-5-氟-9-羥基-10，13-二側氧基-9，10-二氫-[1，3]噁嗪基[5，6-f]呱喃并[3'，4'：6，7]吲哚并[ 1，2-b]喹啉-2（1H，3H，12H，13H，15H）-基）乙基）胺基）-4-側氧基丁基）-N5-（2，5，8，11，14，17，20，23-八氧雜二十五烷-25-基）戊二醯胺（424）的合成。
Figure 02_image1704
424將化合物423（120mg，0.208mmol）和化合物7（193mg，0.208mmol）的DMF（5mL）溶液冷卻至0℃，加入N，N-二異丙基乙胺（72μL，0.416mmol）。反應升溫至室溫，攪拌2小時，濃縮，並藉由製備型HPLC（乙腈/水，含甲酸）純化，得到化合物424（100 mg，40%收率）。ESI-MS m/z： [M + H] +C 58H 79FN 8O 19： 計算值1211.54； 實測值1211.54。
實施例 249.（S）-9-乙基-5-氟-9-羥基-2-（2-羥乙基）-2，3，12，15-四氫-[1，3]噁嗪并[5，6-f]呱喃并[3 '，4'：6，7]吲哚并[1，2-b]喹啉-10，13（1H，9H）-二酮（425）的合成。
Figure 02_image1706
將乙醇胺（19 mg，0.31 mmol）和多聚甲醛（70 mg，0.78 mmol）的1，4-二噁烷（5 mL）溶液加熱至約100℃，攪拌2小時，然後冷卻至室溫，加入化合物421（100mg，0.26mmol）。將反應再次加熱至100℃並攪拌2天，冷卻至室溫並藉由製備型HPLC（乙腈/含有甲酸的水）純化，得到化合物425（91 mg，75%收率）。ESI-MS m/z： [M + H] +C 24H 22FN 3O 6： 計算值468.15； 實測值468.15。
實施例 250.（S）-N1-（4-（（2-胺基乙基）胺基）-4-側氧基丁基）-2-（4-（2，5-二側氧基-2，5-二氫-1H-吡咯-1-基）丁醯胺基）-N5-（2，5，8，11，14，17，20，23-八氧雜二十五烷-25-基）戊二醯胺的合成（426）
Figure 02_image1708
426用0.1M H 3PO 4將1，2-二乙基二胺（300mg，4.99mmol）的THF（15mL）和1.0 M NaH 2PO 4（15ml）混合溶液調節至pH 7.5。將混合物冷卻至4~10℃，並在1小時內分四批加入化合物7（700mg，0.75mmol）。攪拌2小時後，將混合物濃縮並藉由製備型HPLC（乙腈/含有1％甲酸的水）純化，得到化合物426（528mg，82％收率）。ESI-MS m/z： [M + H] +C 36H 65N 6O 14： 計算值805.4560； 實測值805.4595。
實施例 251.2-（（S）-9-乙基-5-氟-9-羥基-10，13-二側氧基-9，10-二氫- [1，3]噁嗪[5，6-f] 呱喃[3'，4'：6，7]吲哚并[1，2-b] 喹啉-2（1H，3H，12H，13H，15H）-基）乙基（（S）-30-（4-（2，5-二側氧基）-2，5-二氫-1H-吡咯-1-基）丁醯胺基）-27，31，36-三側氧基-2，5，8，11，14，17，20，23-八氧雜-26，32，37-三氮雜三十九烷-39-基）胺基甲酸酯（428）的合成。
Figure 02_image1710
在0℃下，向化合物425（30mg，0.0642mmol）的無水THF（5mL）和DIPEA（15μl，0.091mmol）溶液中加入4-硝基苯基草醯氯（13mg，0.0646mmol）。將混合物在0℃下攪拌4小時，得到（S）-2-（9-乙基-5-氟-9-羥基-10，13-二側氧基-9，10-二氫-[1，3]噁嗪[5，5-f]呱喃并[3'，4'：6，7]吲哚并[1，2-b]喹啉-2（1H，3H，12H，13H，15H）-基）碳酸（4-硝基苯基）碳酸酯（427），無需分離即可直接用於下一步。然後向其中加入化合物426（55mg，0.0643mmol）和DIPEA（10μl，61.2mmol）。將混合物攪拌4小時，濃縮並藉由製備型C-18 HPLC（乙腈/水，含1％甲酸）純化，得到化合物428（39mg，47％收率）。ESI-MS m/z： [M + H] +C 61H 85FN 9O 21： 計算值1298.5845； 實測值1298.5935。
實施例 252.雙（2，5-二氧雜吡咯烷-1-基）4，4'-（（（（（第三丁氧基羰基）氮雜二基）雙（乙烷-2，1-二基））雙（氮雜二基））雙（4-側氧基丁酸酯）（431）的合成。
Figure 02_image1712
向化合物53（201mg，0.5mmol）的二氯甲烷（10mL）溶液中加入EDC·HCl（287mg，1.5mmol）和NHS（173mg，1.5mmol）。將反應物在室溫攪拌反應1小時，然後用二氯甲烷（50mL）稀釋，用水（2×10mL）洗滌，用無水硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮，得到化合物431（297mg，100％收率）。ESI-MS m/z： [M + H] +C 25H 35N 5O 12： 計算值598.22； 實測值598.22。
實施例 253.11-（第三丁氧羰基）-4，7，15，18-四側氧基-3，8，11，14，19-五氮雜二十一烷-1，21-二酸（432）的合成。
Figure 02_image1714
將H-Gly-OH（94mg，1.25mmol）溶解於水（10mL）中，並加入NaHCO 3（168mg，2.00mmol），然後加入化合物431（297mg，0.5mmol）。然後將反應物在室溫攪拌1小時並濃縮，藉由製備型HPLC（乙腈/水，含甲酸）純化，得到化合物432（155mg，60％收率）。ESI-MS m/z： [M + H] +C 21H 35N 5O 10： 計算值518.23； 實測值518.23。
實施例 254.雙（五氟苯基）11-（第三丁氧羰基）-4，7，15，18-四側氧基-3，8，11，14，19-五氮雜二十一烷-1，21-二酸酯的合成（433）
Figure 02_image1716
向化合物432（110 mg，0.12 mmol）的二氯甲烷（5mL）溶液中加入五氟苯酚（48 mg，0.26 mmol）和EDC·HCl（50 mg，0.26 mmol）。將反應物在室溫攪拌反應2小時，然後用二氯甲烷（50mL）稀釋，用水（2×10mL）洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮，得到化合物433（180 mg，100％收率）。ESI-MS m/z： [M + H] +C 33H 33F 10N 5O 10： 計算值850.20； 實測值850.20。
實施例 255.（2-（4-（（2-（（（（S）-4-乙基-8-氟-4-羥基-9-甲氧基-3，14-二側氧基-3，4，12 ，14-四氫-1H-呱喃并[3'，4'：6，7]吲哚并[1，2-b]喹啉-11-基）甲基）胺基）胺基）-2-側氧基乙基）胺基）-4-側氧基戊醯胺基）乙基）胺基甲酸第三丁酯（434）的合成。
Figure 02_image1718
在冰水浴上向化合物30（55mg，0.13mmol）的DMF（1mL）溶液中加入DIPEA（27mg，0.21mmol）和化合物433（50mg，0.06mmol）。將反應升溫至室溫，攪拌1小時，然後濃縮，藉由製備型HPLC（乙腈/含有甲酸的水）純化，得到化合物434（20mg，25％收率）。ESI-MS m/z： [M + H] +C 65H 72F 2N 11O 18： 計算值1332.49； 實測值1332.49。
實施例 256.N1，N1'-（氮雜二基雙（乙烷-2，1-二基））雙（N4-（2-（（（（（（S）-4-乙基-8-氟-4-羥基-9-羥基-9-甲氧基-3，14-二側氧基-3，4，12，14-四氫-1H-呱喃[3'，4'：6，7]吲哚并[[1，2-b]喹啉-11-基）甲基）胺基）-2-側氧基乙基）琥珀醯胺）（435）
Figure 02_image1720
將化合物434（20 mg，0.015 mmol）溶解於三氟乙酸 / 二氯甲烷（0.5mL / 1mL）中，並在室溫攪拌2小時，將反應混合物濃縮至乾，得到黃色固體（18.5 mg，100收率）。ESI-MS m/z： [M + H] +C 60H 63F 2N 11O 16： 計算值1232.44； 實測值1232.44。
實施例 257.（S）-2-（4-（2，5-二側氧基-2，5-二氫-1H-吡咯-1-基）丁醯胺基）-N1-（1-（（（S）-4-乙基-8）-氟-4-羥基-9-甲氧基-3，14-二側氧基-3，4，12，14-四氫-1H-呱喃并[3'，4'：6，7]吲哚并[1，2-b]喹啉-11-基）-13-（2-（4-（（2-（（（（（S）-4-乙基-8-氟-4-羥基-9-甲氧基-3，14-二氧雜-3，4，12，14-四氫-1H-呱喃并[3'，4'：6，7]吲哚并[[1，2-b]喹啉-11-基）甲基）胺基）-2-側氧基乙基）胺基）-4-氧雜戊醯胺基）乙基）-3，6，9，14-四側氧基-2，5，10，13-四氮雜十七烷-17-基）-N5-（2，5，8，11，14，17，20，23-八氧雜二十五烷-25-基）戊二醯胺（436）
Figure 02_image1722
冰水冷卻下，向化合物6（11 mg，0.015 mmol）的DMF（1 mL）溶液中加入HATU（11.4 mg，0.03 mmol）和N，N-二異丙基乙胺（10μL，0.06 mmol），然後加入化合物435 （18.5 mg，0.015 mmol）。將反應在0℃下攪拌1小時，然後藉由製備型HPLC（乙腈/水，含甲酸）純化，得到化合物436（10mg，34％收率）。ESI-MS m/z： [M + H] +C 94H 119F 2N 15O 30： 計算值1976.82； 實測值1976.82。
實施例 258.化合物C1-005、C1-008、C1-021、C1-022、C1-029、C1-031、C1-035、C1-041、C1-042、C1-043、C1-047、C1-050、C1-056、C1-061、C1-064、C1-110、C1-177、C1-188、C1-200、C1-208、C1-213、C1-226、C1-238、C1-243、C1-247、C1-305、C1-306、C1-311、C1-362、C1-397、C1-402、C1-407、C1-411、C1-414、C1-419、C1-424和C1-428的一般製備方法。
向振盪的含 2.0 mL 的10 mg/ml Her2 抗體 (Herceptin) 或 Trop-2 抗體 或 EGFR 抗體的 pH 6.0~8.0 PBS緩衝液中，加入 0.70 ~ 2.0 mL 的100 mM NaH 2PO 4, pH 6.5~8.5 緩衝液 和TCEP (35-70µL, 20 mM)溶液, 各自獨立地加入化合物 5, 8, 21, 22, 29, 31, 35, 41, 42, 43, 47, 50, 56, 61, 64, 110, 177, 188, 200, 213, 226, 238, 243, 247, 305, 306, 311, 362, 397, 402, 407, 411, 414, 419, 424 和 428 (35-90 µL, 20 mM 的 DMA溶液) ,之後加入4-(疊氮甲基)苯甲酸 (30-100µL, 20 mM的 pH 7.5, PBS 緩衝液)。將混合物在室溫下孵育4~18小時, 之後加入DHAA (100 ~150 µL, 50 mM) 。在室溫下孵育隔夜後，將混合物在G-25柱上純化，用100 mM  NaH 2PO 4，50 mM NaCl  pH 6.0~7.5緩衝液溶離，制得11.2~18.5 mg的偶聯物C1-005, C1-008, C1-021, C1-022, C1-029, C1-031, C1-035, C1-041, C1-042, C1-043, C1-047, C1-050, C1-056, C1-061, C1-064, C1-110, C1-177, C1-188, C1-200, C1-208, C1-213, C1-226, C1-238, C1-243, C1-247, C1-305, C1-306, C1-311, C1-362, C1-397, C1-402, C1-407, C1-411, C1-414, C1-419, C1-424 和 C1-428 (82%~95% 產率) （在8.3~15.2 ml 的 NaH 2PO 4緩衝液中）。偶聯物的藥物/抗體比 (DAR) 為4.1~8.0 ,DAR為藉由 UPLC-QTOF 質譜和UV測定(CPT化合物的消光係數: E 280 nm= 4992 M -1cm -1; E 377 nm= 16730 M -1cm -1)。 藉由SEC HPLC（Tosoh Bioscience，Tskgel G3000SW，7.8mm ID×30cm，0.5ml / min，100min）測得 單體含量為95~99%。這些偶聯物的結構如圖 32 所示。
實施例 259.化合物C2-005, C3-005, C2-008, C3-008, C2-021, C3-021, C2-022, C3-022, C2-029, C3-029, C2-031, C3-031, C2-035, C3-035, C2-041, C3-041, C2-042, C3-042, C2-043, C3-043, C2-047, C3-047, C2-050, C3-050, C2-056, C3-056, C2-061, C3-061, C2-064, C3-064, C2-110, C3-110, C2-177, C3-177, C2-188, C3-188, C2-200, C3-200, C2-208, C3-208, C2-213, C3-213, C2-226, C3-226, C2-238, C3-238, C2-243, C3-243, C2-247, C3-247, C2-305, C3-305, C2-306, C3-306, C2-311, C3-311, C2-362, C3-362, C2-397, C3-397, C2-402, C3-402, C2-407, C3-407, C2-411, C3-411, C2-414, C3-414, C2-419, C3-419, C2-424, C3-424, C2-428和 C3-428一般製備方法。
向含 2.0 mL 的10 mg/ml Her2 抗體 (Herceptin) 或 Trop-2 抗體 或 EGFR 抗體的 pH 6.0~8.0 PBS緩衝液中,加入 0.70 ~ 2.0 mL 的100 mM NaH 2PO 4, pH 6.5~8.5 緩衝液 和Traut’s 試劑（2-亞胺基硫戊環鹽酸鹽）（35-70 µL， 20 mM的水溶液）或γ-硫代丁內酯（35-70µL， 20 mM 的DMA溶液），各自獨立地加入化合物 5, 8, 21, 22, 29, 31, 35, 41, 42, 43, 47, 50, 56, 61, 64, 110, 177, 188, 200, 213, 226, 238, 243, 247, 305, 306, 311, 362, 397, 402, 407, 411, 414, 419, 424和428 (14-60 µL, 20 mM 的 DMA溶液), 將混合物在室溫下孵育4~18小時，然後在G-25柱上純化，用100 mM NaH 2PO 4，50 mM NaCl pH 6.0~7.5緩衝液溶離，得到 11.2~18.5 mg偶聯物 C2-005 ，C2-008, C2-021, C2-022, C2-029, C2-031, C2-035, C2-041, C2-042, C2-043, C2-047, C2-050, C2-056, C2-061, C2-064, C2-110, C2-177, C2-188, C2-200, C2-208, C2-213, C2-226, C2-238, C2-243, C2-247, C2-305, C2-306, C2-311, C2-362, C2-397, C2-402, C2-407, C2-411, C2-414, C2-419, C2-424, 和C2-428 (85%~98% 產率，使用 Traut’s) （在 9.6~15.1 ml 的 NaH 2PO 4,緩衝液中）, 或 C3-005, C3-008, C3-021, C3-022, C3-029, C3-031, C3-035, C3-041, C3-042, C3-043, C3-047, C3-050, C3-056, C3-061, C3-064, C3-110, C3-177, C3-188, C3-200, C3-208, C3-213, C3-226, C3-238, C3-243, C3-247, C3-305, C3-306, C3-311, C3-362, C3-397, C3-402, C3-407, C3-411, C3-414, C3-419, C3-424和C3-428 (77%~94% 產率， 使用γ-硫代丁內酯) （在9.8~14.2 ml 的 NaH 2PO 4, 緩衝液中）。偶聯物的藥物/抗體比 (DAR) 為4.5~8.9 ,DAR藉由 UPLC-QTOF 質譜和UV測定(CPT化合物的消光係數: E 280 nm= 4992 M -1cm -1; E 377 nm= 16730 M -1cm -1)。藉由SEC HPLC（Tosoh Bioscience，Tskgel G3000SW，7.8mm ID×30cm，0.5ml / min，100min）檢測 單體含量為93~99%。這些偶聯物的結構如圖 33 所示。
實施例 260.  C1-005、C1-008、C1-021、C1-022、C1-029、C1-031、C1-035、C1-041、C1-042、C1-043、C1-047、C1-050、C1-056、C1-061、C1-064、C1-110、C1-177、C1-188、C1-200、C1-208、C1-213、C1-226、C1-238、C1-243 、C1-247、C1-305、C1-306、C1-311、C1-362、C1-397、C1-402、C1-407、C1-411、C1-414、C1-419、C1-424、C1-428、C2-005、C2-008、C2-021、C2-022、C2-029、C2-031、C2-035、C2-041、C2-042、C2-043、C2-047、C2-050 、C2-056、C2-061、C2-064、C2-110、C2-177、C2-188、C2-200、C2-208、C2-213、C2-226、C2-238、C2-243、C2-247、C2-305、C2-306、C2-311、C2-362、C2-397、C2-402、C2-407、C2-411、C2-414、C2-419、C2-424、C2-428、C3-005、C3-008、C3-021、C3-022、C3-029、C3-031、C3-035、C3-041、C3-042、C3-043、C3-047、C3-050、C3-056、C3-061、C3-064、C3-110、C3-177、C3-188、C3-200、C3-208、C3-213、C3-226、C3-238、C3-243、C3-247 、C3-305、C3-306、C3-311、C3-362、C3-397、C3-402、C3-407、C3-411、C3-414、C3-419、C3-424和C3-428體外細胞毒性評估（與使用Her2抗體偶聯的T-DM1相對比）：
細胞毒性試驗中使用的細胞株是人胃癌細胞株NCI-N87和非小細胞肺癌細胞HCC827。細胞在含10％FBS的RPMI-1640中生長。測定時，將細胞（180μl，6000個細胞）加入96孔板的各孔中，並在37℃和5％CO 2下孵育24小時。接著，在適當的細胞培養基（總體積0.2mL）中，以各種濃度的試驗化合物（20μl）對細胞進行處理。對照孔含有細胞和培養基，但無測試化合物。將孔板在37℃和5％CO 2下溫育120小時。然後將MTT（5 mg / ml，20 µl）加入孔中，並將孔板在37℃下溫育1.5小時。小心除去培養基，然後加入DMSO（180 µl）。振搖15分鐘後，用620 nm的參考濾光片在490 nm和570 nm處量測吸光度。根據以下等式計算抑制率：抑制％＝ [1-（測定空白）/（對照空白）]×100。結果如表1所示。
表1.專利申請中的Her2抗體-CPT衍生物偶聯物及其對NCI-N87細胞的細胞毒性結果 IC 50：
偶聯物 DAR（藥物/ 單抗比） 聚體％ IC 50（nM） （ NCI-N87細胞）
C1-005 7.3 5.5 42.8
C1-008 7.5 3.1 33.6
C1-021 7.6 1.2 31.2
C1-022 7.4 0.2 23.6
C1-029 6.9 0.4 0.81
C1-031 7.3 0.8 0.14
C1-035 7.4 0.5 1.91
C1-041 7.4 0.9 2.83
C1-042 7.5 0.4 1.74
C1-043 7.6 0.6 3.46
C1-047 7.7 0.7 4.82
C1-050 7.6 1.0 1.23
C1-056 8.5 4.2 22.2
C1-061 7.2 6.1 93.9
C1-064 8.3 0.4 1.18
C1-110 7.8 1.6 0.86
C1-177 7.2 2.1 1.11
C1-188 7.3 1.3 1.18
C1-200 7.4 0.4 0.82
C1-208 7.2 0.8 0.96
C1-213 7.2 0.5 1.01
C1-226 7.9 0.7 0.69
C1-238 8.0 0.1 0.16
C1-243 7.2 0.6 0.86
C1-247 8.0 0.7 0.51
C1-305 7.9 0.7 0.58
C1-306 7.9 0.8 0.42
C1-311 8.0 0.2 0.57
C1-362 8.0 0.1 0.44
C1-397 7.9 0.1 0.57
C1-402 8.2 0.2 0.31
C1-407 10.6 0.2 0.14
C1-411 10.7 0.2 0.53
C1-414 10.8 0.2 0.15
C1-419 10.2 1.6 0.55
C1-424 7.9 0.9 0.69
C1-428 7.9 0.7 0.61
C2-005 7.8 5.7 39.1
C2-008 8.0 3.1 35.3
C2-021 8.0 1.3 32.7
C2-022 7.9 0.2 21.1
C2-029 7.8 0.3 0.70
C2-031 7.9 0.7 0.21
C2-035 8.0 0.6 0.73
C2-041 7.9 1.0 1.13
C2-042 8.0 0.4 0.91
C2-043 7.9 0.6 1.28
C2-047 7.9 0.7 1.77
C2-050 7.8 1.1 1.09
C2-056 8.8 4.1 32.3
C2-061 7.9 5.9 87.1
C2-064 8.0 0.3 0.42
C2-110 7.9 1.7 0.93
C2-177 8.4 2.2 1.27
C2-188 8.1 1.4 0.83
C2-200 8.5 0.5 0.61
C2-208 7.5 0.7 0.47
C2-213 4.2 0.5 1.18
C2-226 7.3 0.6 0.93
C2-238 7.6 0.2 0.15
C2-243 3.8 0.6 0.71
C2-247 6.8 0.6 0.48
C2-305 7.2 0.6 0.43
C2-306 7.6 0.7 0.37
C2-311 7.5 0.1 0.63
C2-362 7.8 0.1 0.51
C2-397 7.6 0.1 0.59
C2-402 7.2 0.2 0.38
C2-407 10.4 0.3 0.15
C2-411 10.6 0.2 0.55
C2-414 10.8 0.2 0.14
C2-419 10.5 0.7 0.48
C2-424 7.2 0.8 0.62
C2-428 7.2 0.6 0.58
C3-005 7.9 6.0 42.9
C3-008 8.0 3.3 37.3
C3-021 8.0 1.2 33.9
C3-022 8.0 0.3 23.7
C3-029 7.9 0.4 0.91
C3-031 8.0 0.7 0.20
C3-035 8.0 0.5 0.69
C3-041 7.9 0.8 1.35
C3-042 8.0 0.5 0.97
C3-043 7.9 0.6 1.11
C3-047 8.0 0.7 1.61
C3-050 7.8 1.1 0.92
C3-056 8.2 4.3 30.1
C3-061 8.0 6.2 73.7
C3-064 8.8 0.4 0.31
C3-110 8.0 1.7 0.81
C3-177 8.2 2.3 1.05
C3-188 8.0 1.4 0.91
C3-200 8.2 0.4 0.82
C3-208 7.2 0.8 0.51
C3-213 4.8 0.5 1.33
C3-226 7.8 0.8 0.89
C3-238 8.0 0.1 0.14
C3-243 4.0 0.7 1.27
C3-247 7.2 0.6 0.73
C3-305 7.9 0.7 0.55
C3-306 7.8 0.9 0.41
C3-311 7.8 0.2 0.71
C3-362 8.0 0.1 0.48
C3-397 7.9 0.1 0.50
C3-402 8.2 0.2 0.33
C3-407 10.5 0.2 0.18
C2-411 10.3 0.2 0.48
C2-414 10.0 0.2 0.29
C2-419 10.2 1.6 0.60
C2-424 7.8 1.0 0.63
C2-428 7.9 0.6 0.53
T-DM1 3.5 0.4 0.61
表2. 專利申請中的EGFR抗體-CPT類似偶聯物及其對HCC827細胞的細胞毒性結果 IC 50：
偶聯物 DAR（藥物/ 抗體比） 聚體％ IC 50（nM）（ HCC827細胞）
C1-029 7.2 0.3 0.72
C1-031 7.6 0.6 0.15
C1-035 7.6 0.4 1.74
C1-041 7.8 0.8 1.95
C1-042 7.6 0.3 1.62
C1-043 7.6 0.7 3.12
C1-047 7.8 0.7 3.71
C1-050 7.6 1.1 1.05
C1-064 8.1 0.3 1.02
C1-110 7.9 1.7 0.70
C1-177 7.8 2.0 1.01
C1-188 7.6 1.2 0.88
C1-200 7.6 0.4 0.68
C1-208 7.6 0.7 0.78
C1-213 7.6 0.6 0.86
C1-226 7.8 0.8 0.60
C1-238 8.0 0.2 0.14
C1-243 7.6 0.5 0.75
C1-247 7.8 0.7 0.42
C1-305 7.8 0.7 0.50
C1-306 7.8 0.9 0.35
C1-311 7.9 0.3 0.48
C1-362 7.9 0.1 0.40
C1-397 8.0 0.2 0.53
C1-402 8.1 0.2 0.26
C1-407 10.2 0.2 0.13
C1-411 10.4 0.2 0.50
C1-414 10.5 0.2 0.16
C1-419 10.2 1.3 0.46
C1-424 8.0 0.8 0.68
C1-428 8.0 0.6 0.60
實施例 261.Her2抗體-CPT衍生物偶聯物的體內抗腫瘤活性（帶有N-87異種移植腫瘤的BALB / c裸鼠）。
在胃癌N-87細胞株腫瘤異種移植模型上評估了Her2抗體偶聯物C1-031，C1-238，C1-397，C1-407，C1-411，C1-414，C1-424，C1-428和T-DM1的體內功效。在五周大的雌性BALB / c裸鼠（60隻動物）的右肩下方區域皮下接種了在0.1 mL無血清培養基中的N-87癌細胞（5×10 6細胞/小鼠）。腫瘤生長8天，平均大小為130mm 3。然後將動物隨機分為11組（每組6隻動物）。第一組小鼠作為對照組，注射磷酸鹽緩衝鹽水（PBS）。9組分別以6 mg/kg的劑量分別用偶聯物C1-031，C1-238，C1-397，C1-407，C1-411，C1-414，C1-424，C1-428和T-DM1，靜脈注射。每3或4天（一周兩次）量測腫瘤體積的三個維度，並使用公式：體積= 1/2（長×寬×高）來計算腫瘤體積。還同時量測了動物的體重。滿足以下任一條件時殺死小鼠：（1）體重比治療前減輕了20％以上；（2）腫瘤體積大於1500 mm 3；（3）因病重至無法進食和飲水；（4）皮膚壞死。如果沒有可觸知的腫瘤，則認為小鼠無腫瘤。
抗腫瘤活性結果顯示如圖34中。在劑量為6.0 mg / Kg時，所有10種偶聯物均未引起動物體重減輕。與PBS緩衝液相比，所有偶聯物均顯示出抗腫瘤活性。
表3. 6 mg / Kg劑量對腫瘤生長的抑制作用：
偶聯物 腫瘤生長延遲
C1-424 10 天
C1-428 25 天
C1-397 26 天
T-DM1 32 天
C1-414 43 天
C1-407 43 天
C1-031 43 天
C1-238 ＞43 天
C1-414 ＞43 天
體內抗腫瘤能力的順序為C1-424 ＜C1-428 ＜C1-397 ＜T-DM1 ＜C1-411 ＜C1-407 ＜C1-031 ＜C1-238 ＜C1-414。
實施例 262.與T-DM1相比，Her2抗體-CPT衍生物偶聯物的毒性研究。
體重（BW）的變化（通常是體重減輕）是動物對藥物毒性的一般反應。將6-7周大的66隻ICR雌性小鼠分為11組。每組包括6隻小鼠，每隻小鼠給予偶聯物C1-031，C1-226，C1-238，C1-397，C1-407，C1-411，C1-414，C1-424，C1-428和T- DM1，劑量分別為每隻小鼠150 mg / Kg，靜脈推注。 設對照組（n = 8），注射磷酸鹽緩衝液（PBS）。毒性結果繪製在圖35中。在12天的實驗中，劑量為150 mg / Kg時，對照組和偶聯物C1-031，C1-397，C1-407，C1-411，C1-424和C1-428組的體重均未降低。其餘偶聯物C1-226，C1-238，C1-414和T-DM1組的體重降低，第5天時，C1-226 ，C1-238和C1-414組的體重降低，最高達2％。在所有測試的CPT偶聯物組中，體重的降低遠小於T-DM1組。相反，T-DM1組的體重持續降低，與投予前相比最大降低了25％，並且在研究結束時未見恢復趨勢。體重變化實驗證明了小鼠對CPT偶聯物比T-DM1具有更高的耐受性。
實施例 263.EGFR抗體-CPT衍生物偶聯物的體內抗腫瘤活性（BALB / c裸鼠，帶有HCC827細胞異種移植腫瘤）。
在非小細胞肺癌HCC827細胞株腫瘤異種移植模型中評估了EGFR抗體偶聯物C1-031，C1-200，C1-214，C1-226，C1-305，C1-306，C1-311，C1-362，C1-402，C-407和C1-419的體內效果。在五周大的雌性BALB / c裸鼠（72隻動物）的右肩下方區域皮下接種在0.1 mL無血清培養基中的N-87癌細胞（5×10 6細胞/小鼠）。腫瘤生長8天，至平均大小為130mm 3。然後將動物隨機分為12組（每組6隻動物）。第一組小鼠作為對照組，並注射磷酸鹽緩衝鹽水（PBS）。11組分別用偶聯物C1-031、C1-200、C1-226、C1-214、C1-305、C1-311、C1-362、C1-397、C1-402、C1-407和C1-419（濃度為3.2 ~ 8.0 mg/ml），劑量為6 mg/Kg，靜脈注射。每3或4天（一周兩次）量測腫瘤體積的三個維度，並使用公式：體積= 1/2（長×寬×高）來計算腫瘤體積。還同時量測了動物的體重。滿足以下任一條件時殺死小鼠：（1）體重比治療前減輕了20％以上；（2）腫瘤體積大於1500 mm 3；（3）病重得無法進食和飲水，或（4）皮膚壞死。如果沒有可觸知的腫瘤，則認為小鼠無腫瘤。
抗腫瘤活性結果顯示如圖36。在6.0 mg / Kg的劑量下，所有11種偶聯物均未引起動物體重減輕。與PBS緩衝液相比，所有偶聯物均顯示出抗腫瘤活性。
表4. 6 mg / Kg劑量對腫瘤生長的抑制作用為：
偶聯物 腫瘤生長延遲天數
C1-200 20 天
C1-226 22 天
C1-362 23 天
C1-305 24 天
C1-419 25 天
C1-407 27 天
C1-214 28 天
C1-311 30 天
C1-031 ＞36 天
C1-402 ＞36 天
C1-397 ＞36 天
體內抗腫瘤能力的順序為C1-200 ＜C1-226 ＜C1-362 ＜C1-305 ＜C1-419 ＜C1-407 ＜C1-214 ＜C1-311 ＜C1-031 ＜C1-402 ＜C1- 397。
圖 1 顯示了含有可偶聯連接子的喜樹鹼類似物的合成。 圖 2 顯示了含有可偶聯連接子的喜樹鹼類似物的合成。 圖 3 顯示了含有可偶聯連接子的喜樹鹼類似物的合成。 圖 4 顯示了含有可偶聯連接子的喜樹鹼類似物的合成。 圖 5 顯示了含有可偶聯連接子的喜樹鹼類似物的合成。 圖 6 顯示了含有可偶聯連接子的喜樹鹼類似物的合成。 圖 7 顯示了含有可偶聯連接子的喜樹鹼類似物的合成。 圖 8 顯示了含有可偶聯連接子的喜樹鹼類似物的合成。 圖 9 顯示了含有可偶聯連接子的喜樹鹼類似物的合成。 圖 10 顯示了含有可偶聯連接子的喜樹鹼類似物的合成。 圖 11 顯示了含有可偶聯連接子的喜樹鹼類似物的合成。 圖 12 顯示了含有可偶聯連接子的喜樹鹼類似物的合成。 圖 13 顯示了含有可偶聯連接子的喜樹鹼類似物的合成。 圖 14 顯示了含有可偶聯連接子的喜樹鹼類似物的合成。 圖 15 顯示了含有可偶聯連接子的喜樹鹼類似物的合成。 圖 16 顯示了含有可偶聯連接子的喜樹鹼類似物的合成。 圖 17 顯示了含有可偶聯連接子的喜樹鹼類似物的合成。 圖 18 顯示了含有可偶聯連接子的喜樹鹼類似物的合成。 圖 19 顯示了含有可偶聯連接子的喜樹鹼類似物的合成及其與抗體偶聯。 圖 20 顯示了含有可偶聯連接子的喜樹鹼類似物的合成及其與抗體偶聯。 圖 21 顯示了含有可偶聯連接子的喜樹鹼類似物的合成。 圖 22 顯示了含有可偶聯連接子的喜樹鹼類似物的合成及其與抗體偶聯。 圖 23 顯示了含有可偶聯連接子的喜樹鹼類似物的合成及其與抗體偶聯。 圖 24 顯示了含有可偶聯連接子的喜樹鹼類似物的合成及其與抗體偶聯。 圖 25 顯示了含有可偶聯連接子的喜樹鹼類似物的合成及其與抗體偶聯。 圖 26 顯示了含有可偶聯連接子的喜樹鹼類似物的合成及其與抗體偶聯。 圖 27 顯示了含有可偶聯連接子的喜樹鹼類似物的合成。 圖 28 顯示了用以製備喜樹鹼類似物偶聯物的可偶聯連接子的合成。 圖 29-1 顯示了含有可偶聯連接子的喜樹鹼類似物的合成。 圖 29-2 顯示了用於偶聯物的喜樹鹼類似物的結構。 圖 30 顯示了含有可偶聯連接子的喜樹鹼類似物的合成。 圖 31 顯示了含有可偶聯連接子的喜樹鹼類似物的合成。 圖 32 顯示了含有可偶聯連接子的喜樹鹼類似物的合成。 圖 33 顯示了抗體-喜樹鹼類似物偶聯物的結構。 圖34顯示了靶向Her2的抗體-CPT衍生物偶聯物C1-031， C1-238， C1-397， C1-407， C1-411， C1-414， C1-424和C1-428與T-DM1在人胃腫瘤N87細胞模型上體內抗腫瘤作用的比較，靜脈注射，劑量為6 mg/kg。 圖35顯示了靶向Her2的抗體-CPT衍生物偶聯物C1-031, C1-226, C1-238, C1-397, C1-407, C1-411, C1-414, C1-424, C1-428與T-DM1在的比較，靜脈注射，劑量為150 mg/kg。 圖36顯示了靶向EGFR的抗體-CPT衍生物偶聯物C1-031， C1-200， C1-214， C1-226， C1-305， C1-306， C1-311， C1-362， C1-402， C-407 和 C1-419在人NSCLC腫瘤HCC827細胞模型上抗腫瘤效果，靜脈注射，劑量為6 mg/kg。
Figure 110122328-A0101-11-0002-3

Claims (21)

  1. 一種細胞表面結合分子-喜樹鹼類似物偶聯物，具有如下式（I）所示的結構：
    Figure 03_image006
    （I） 或其藥學上可接受的鹽，水合物或水合鹽； 或此等化合物的多晶型晶體結構； 或其同位素，旋光異構體，外消旋體，非鏡像異構物或鏡像異構物； 其中 T是靶向或結合配位體； L是可釋放連接子；
    Figure 03_image080
    是獨立地連接L到括弧內的R 1， R 2， R 3或R 5的原子的連接鍵；n為1-30，m為1-10 ； 括弧內是一種具有活性的喜樹鹼類似物，其中： R 1和R 2獨立地是 H；直鏈或支鏈C 1-C 6烷基、烷基醇、烷基胺（包括第一、第二、第三胺或季銨），胺基烷基、氧基烷基、胺基烷基胺基、氧基烷基胺基、胺基烷氧基、氧基烷氧基、烷基羧酸；C 2-C 6雜烷基， 烷基環烷基、雜環烷基、雜環、胺基環烷基、雜烷基環烷基、烷基羰基、烷基醚、烷基酯、烷基醯胺、氧基烷基醯胺、胺基烷基醯胺、肟；NH 2或OH； R 3獨立地是H、 C（O）NH、 C（O）O、SO 2R 6、 SO 3R 6、 PR 6R 6’、 POR 6R 6’、 CH 2OP（O）（OR 6） 2、 C（O）OP（O）（OR 6） 2、 PO（OR 6）（OR 6’）、 P（O）（OR 6）OP（O）（OR 6’） 2、 C（O）R 6、 C（O）NHR 6；C 1-C 6直鏈或支鏈烷基、烷基醇、烷基胺（包括第一、第二、第三胺或季銨）或烷基羧酸；C 2-C 6雜烷基、烷基環烷基、雜環烷基、雜環、環烷基、雜烷基環烷基、烷基羰基、烷基醚、烷基酯、烷基醯胺、肟； C 5~C 12糖苷、NH 2或OH； R 4是鹵素（F、 Cl、 Br、 或I）、 CN、 NO 2、 SO 3H、 OR 6、 SR 6、 S（O 2）R 6、 NHR 6、 N（R 6）（R 6’）、 C（O）XR 6、 N +（R 6）（R 6’）（R 6’’）； X 是 NH 或O； R 5是 H、 C（O）O、 C（O）NH、 R 6C（O）、直鏈或支鏈C 1-C 6烷基、烷基醇、烷基胺（包括第一、第二、第三胺或季銨）、烷基羧酸；C 2-C 6碳酸酯、脲、雜烷基、烷基環烷基、雜環烷基、雜環、環烷基、 雜烷基環烷基、烷基羰基、烷基醚、烷基酯、烷基醯胺或胺基酸； R 6、 R 6’、 和 R 6’’獨立地是H、C 1-C 6烷基、烷基醇、烷基胺（包括第一、第二、第三胺或季銨）或烷基羧酸； C 2-C 6雜烷基、烷基環烷基、雜環烷基、雜環、環烷基、雜烷基環烷基、烷基羰基、烷基醚、烷基酯、烷基醯胺或胺基酸；或醫藥上可接受之鹽； 此外， R 1、 R 2、 R 3和 R 6獨立地可缺省， 和 R 2、 R 3、 X、 C-10 和 C-9 可以共同形成 5-、 6- 或 7-元雜環； 細胞表面結合劑/分子T選自由下列組成之群組由下列組成之群組抗體；單鏈抗體；與靶細胞結合的抗體片段；單克隆抗體；單鏈單克隆抗體；結合靶細胞的單克隆抗體片段；嵌合抗體；結合靶細胞的嵌合抗體片段；結構域抗體；結合靶細胞的結構域抗體片段；adnectin類抗體；DARPins；淋巴因數；激素； 維生素；生長因數；集落刺激因數；營養轉運分子（轉鐵蛋白），和/或結合在白蛋白、聚合物、樹狀大分子、脂質體、納米顆粒、囊泡或（病毒）衣殼上的肽、蛋白質、抗體或小分子； L具有下式結構：
    Figure 03_image1726
    ， 其中： -W-是延展體單元； w是 0 或 1； 每個 -Aa-獨立地是一個胺基酸單元； r獨立地是0至12的整數； -V-是一個間隔體單元；v為0、1或2； 當延展體（-W-）存在時，它起著連接著細胞結合分子（T）和胺基酸單元（-Aa-）或者間隔體V 當Aa不存在時；連接在T上的W的例子如下所示：
    Figure 03_image540
    ；
    Figure 03_image542
    ；
    Figure 03_image544
    ；
    Figure 03_image1731
    ；
    Figure 03_image548
    ；
    Figure 03_image550
    ；
    Figure 03_image552
    ；
    Figure 03_image554
    ；
    Figure 03_image556
    ；
    Figure 03_image558
    ；
    Figure 03_image560
    ；
    Figure 03_image562
    ；
    Figure 03_image564
    ；
    Figure 03_image566
    ；
    Figure 03_image1743
    ；
    Figure 03_image570
    Figure 03_image572
    ；
    Figure 03_image574
    ；
    Figure 03_image576
    ；
    Figure 03_image578
    ；
    Figure 03_image580
    ；
    Figure 03_image1750
    ；
    Figure 03_image1751
    ，
    Figure 03_image586
    ，
    Figure 03_image588
    ，
    Figure 03_image590
    ，
    Figure 03_image592
    ，
    Figure 03_image594
    ，
    Figure 03_image596
    ，
    Figure 03_image598
    ，
    Figure 03_image600
    ，
    Figure 03_image602
    ，
    Figure 03_image604
    ，
    Figure 03_image606
    ，
    Figure 03_image608
    ，
    Figure 03_image610
    ，
    Figure 03_image612
    ，
    Figure 03_image614
    ，
    Figure 03_image616
    ，
    Figure 03_image618
    ，
    Figure 03_image620
    ，
    Figure 03_image622
    ，
    Figure 03_image624
    ，
    Figure 03_image1773
    ，其中R 20和R 21選自由下列組成之群組由下列組成之群組–C 1-C 9烷基-、-C 1-C 7碳環-、-O-（C 1-C 8烷基）-、-亞芳基-、-C 1-C 8伸烷基-亞芳基-、-亞芳基、-C 1-C 8伸烷基-、-C 1–C 8伸烷基-（C 1-C 8碳環）-、-（C 3-C 7碳環）-C 1-C 9伸烷基-、-C 3-C 8雜環基、-C 1-C 8伸烷基-（C 3-C 8雜環）-、-（C 3-C 8雜環）-C 1-C 9伸烷基-、-（CH 2CH 2O） k-、-（CH（CH 3）CH 2O） k-和-（CH 2CH 2O） k-CH 2-； k是1-20的整數；R’和R''獨立地為H或CH 3； -（Aa）r可以是天然或非天然胺基酸，可以是具有相同或不同的胺基酸序列的二肽、三肽、四肽、五肽、六肽、七肽、八肽、九肽、十肽、十一肽或者十二肽單元，r為0-12 之間的整數； 隔離體（-V-）是自毀滅型或非自毀滅型；自毀滅型包括對胺基苄基胺基甲醯基（PAB）的芳香族化合物，2-胺基咪唑-5-甲醇衍生物，雜環PAB衍生物，β-葡糖醛酸，鄰或對胺基苄基縮醛，或以下結構之一：
    Figure 03_image1775
    ，
    Figure 03_image678
    ，
    Figure 03_image680
    ，.
    Figure 03_image682
    ，
    Figure 03_image684
    ；   （*）標記的原子是隔離體或可釋放的連接子單元，胺基酸（Aa） r，喜樹鹼類似物，和/或細胞結合分子T的連接點； X、Y和Z 3獨立地為NH，O或S； Z 2獨立地為H、 NH、O或S；v為0或1；Q獨立地為H，OH，C 1~C 6烷基、 （OCH 2CH 2） n、 F、 Cl、 Br、 I、 OR 17、或SR 17、 NR 17R 18、 N=NR 17、 N=R 17、 NR 17R 18、 NO 2、 SOR 17R 18、 SO 2R 17、 SO 3R 17、 OSO 3R 17、 PR 17R 18、 POR 17R 18、 PO 2R 17R 18、 OPO（OR 17）（OR 18）或 OCH 2PO（OR 17）（OR 18）、 其中R 17和R 18獨立地為H、C 1-C 8烷基、C 2-C 8烯烴基、炔烴基、雜烷基、C 3-C 8芳基、雜環基、碳環基、環烷基、雜環烷基、雜芳烷基、烷羰基或醫藥上可接受之正離子鹽； v 是1-20的整數； 非自我毀滅間隔體（-V-）的例子：
    Figure 03_image686
    ；
    Figure 03_image688
    ；
    Figure 03_image690
    ；
    Figure 03_image692
    ；
    Figure 03_image694
    ；
    Figure 03_image696
    ；
    Figure 03_image1787
    ；
    Figure 03_image700
    ；
    Figure 03_image702
    ；
    Figure 03_image704
    ；
    Figure 03_image706
    ；
    Figure 03_image708
    ；
    Figure 03_image710
    ；
    Figure 03_image712
    ；
    Figure 03_image714
    ；
    Figure 03_image716
    ；
    Figure 03_image718
    ；
    Figure 03_image720
    ；
    Figure 03_image722
    ；
    Figure 03_image724
    ；
    Figure 03_image726
    ；
    Figure 03_image728
    ；
    Figure 03_image730
    ；
    Figure 03_image732
    ；
    Figure 03_image734
    ；
    Figure 03_image736
    ；
    Figure 03_image738
    ；
    Figure 03_image740
    ；
    Figure 03_image742
    ；
    Figure 03_image744
    ；
    Figure 03_image746
    ；
    Figure 03_image1813
    ；
    Figure 03_image750
    ；
    Figure 03_image752
    ；
    Figure 03_image754
    ；
    Figure 03_image756
    ；
    Figure 03_image758
    ；
    Figure 03_image760
    ；
    Figure 03_image762
    ；
    Figure 03_image764
    ；
    Figure 03_image1823
    ；
    Figure 03_image1825
    ；
    Figure 03_image770
    ；
    Figure 03_image772
    ；
    Figure 03_image774
    ；
    Figure 03_image1830
    ；
    Figure 03_image778
    ；
    Figure 03_image780
    ；
    Figure 03_image1834
    ；
    Figure 03_image784
    ；
    Figure 03_image786
    ；
    Figure 03_image788
    ；
    Figure 03_image790
    ；
    Figure 03_image1840
    ；
    Figure 03_image794
    ；
    Figure 03_image796
    ；
    Figure 03_image798
    ；
    Figure 03_image800
    ；
    Figure 03_image1845
    ；
    Figure 03_image1847
    ；
    Figure 03_image806
    ；
    Figure 03_image808
    ；
    Figure 03_image810
    ；
    Figure 03_image812
    ；
    Figure 03_image814
    6-馬來醯亞胺己醯基（MC），
    Figure 03_image816
    馬來醯亞胺丙醯基（MP），
    Figure 03_image818
    纈氨酸-瓜氨酸（val-cit），
    Figure 03_image820
    丙氨酸-苯丙氨酸（ala-phe），
    Figure 03_image822
    賴氨酸-苯丙氨酸（lys-phe），
    Figure 03_image824
    對胺基苄氧基-羰基（PAB），
    Figure 03_image826
    4-硫代戊酸基（SPP），
    Figure 03_image828
    4-硫丁醯基（SPDB），
    Figure 03_image830
    4-（N-馬來醯亞胺甲基）環己烷-1醯基（MCC） ，
    Figure 03_image832
    馬來醯亞胺乙基（ME），
    Figure 03_image834
    4-硫-2-羥基磺醯基-丁醯基（2-Sulfo-SPDB），
    Figure 03_image836
    芳基硫醇（PySS），
    Figure 03_image1865
    （4-乙醯基）胺基苯醯基（SIAB），
    Figure 03_image840
    氧基苄硫基，
    Figure 03_image842
    胺基苄硫基，
    Figure 03_image844
    二氧基苄硫基，
    Figure 03_image846
    二胺基苄硫基，
    Figure 03_image848
    胺基氧基苄基硫醚基，
    Figure 03_image850
    烷氧基胺基（AOA），
    Figure 03_image852
    亞乙基氧基（EO），
    Figure 03_image854
    4-甲基-4-二硫代戊酸（MPDP），
    Figure 03_image856
    三唑，
    Figure 03_image858
    二硫基，
    Figure 03_image860
    烷基磺醯基
    Figure 03_image862
    烷基磺醯胺，
    Figure 03_image864
    磺基雙醯胺，
    Figure 03_image866
    膦二醯胺，
    Figure 03_image868
    烷基膦醯胺，
    Figure 03_image870
    次膦酸，
    Figure 03_image872
    N-甲基膦醯胺酸，
    Figure 03_image874
    N，N'-二甲基膦醯胺酸，
    Figure 03_image876
    N，N'-二甲基膦二醯胺，
    Figure 03_image878
    肼，
    Figure 03_image880
    乙脒；
    Figure 03_image882
    肟，
    Figure 03_image884
    二乙醯肼，
    Figure 03_image886
    胺基乙基胺，
    Figure 03_image888
    胺基乙基 - 胺基乙基胺，
    Figure 03_image890
    ，
    Figure 03_image892
    ，
    Figure 03_image894
    ，
    Figure 03_image896
    ，
    Figure 03_image898
    ，
    Figure 03_image900
    ，
    Figure 03_image902
    ，
    Figure 03_image904
    ，
    Figure 03_image906
    ，
    Figure 03_image908
    ，
    Figure 03_image910
    ，
    Figure 03_image912
    ，
    Figure 03_image914
    ，
    Figure 03_image916
    ，
    Figure 03_image918
    ，
    Figure 03_image920
    ，
    Figure 03_image922
    ，
    Figure 03_image924
    ，
    Figure 03_image926
    ，
    Figure 03_image928
    ，
    Figure 03_image930
    ，
    Figure 03_image932
    ，
    Figure 03_image934
    ，
    Figure 03_image936
    ，
    Figure 03_image938
    ，
    Figure 03_image940
    ，
    Figure 03_image942
    ，
    Figure 03_image944
    ，
    Figure 03_image946
    ，
    Figure 03_image948
    ，
    Figure 03_image950
    ，或L-或D-，或含有1-20個胺基酸的天然或非天然肽；其中“*” 和 “
    Figure 03_image413
    ”是間隔體或可釋放的連接子，喜樹鹼類似物，和/或結合分子的連接點；m為1~ 10； n為1~ 20； X 2、X 3、X 4、X 5或X 6獨立地選自由下列組成之群組NH、 NHNH、 N（R 12）、 N（R 12）N（R 12’）、 O、 S、 C 1-C 6烷基，C 2-C 6雜烷基、烷基環烷基、雜環烷基；C 3-C 8芳基、Ar-烷基、雜環、碳環、環烷基、雜烷基環烷基、烷基羰基、雜芳基； CH 2OR 12、CH 2SR 12、CH 2NHR 12或1~ 8個胺基酸； 其中R 12和R 12’獨立地為H、C 1-C 8烷基；C 2-C 8雜烷基、烷基環烷基、雜環烷基； C 3-C 8芳基、Ar-烷基、雜環、碳環、環烷基、雜烷基環烷基、烷基羰基、雜芳基、1-8個碳原子的酯、醚或醯胺； 或如式（OCH 2CH 2） p或（OCH 2CH（CH 3）） p的聚環氧乙烷單元，其中 p為0至約1000的整數； L具有以下結構之一： ‑（CR 15R 16） m（Aa）r（CR 17R 18） n（OCH 2CH 2） t-、 ‑（CR 15R 16） m（CR 17R 18） n（Aa） r（OCH 2CH 2） t-、 ‑（Aa） r-（CR 15R 16） m（CR 17R 18） n（OCH 2CH 2） t-、 ‑（CR 15R 16） m（CR 17R 18） n（OCH 2CH 2） r（Aa） t-、 -（CR 15R 16） m-（CR 17=CR 18）（CR 19R 20） n（Aa） t（OCH 2CH 2） r-、 -（CR 15R 16） m（NR 11CO）（Aa） t（CR 19R 20） n-（OCH 2CH 2） r-、 -（CR 15R 16） m（Aa） t（NR 21CO）（CR 19R 20） n（OCH 2CH 2） r-、 -（CR 15R 16） m（OCO）（Aa） t（CR 19R 20） n（OCH 2-CH 2） r-、 -（CR 15R 16） m（OCNR 1 7）（Aa） t（CR 19R 20） n（OCH 2CH 2） r-、 -（CR 15R 16） m-（CO）（Aa） t（CR 19R 20） n-（OCH 2CH 2） r-、 -（CR 15R 16） m（NR 21CO）（Aa） t（CR 19R 20） n（OCH 2CH 2） r-、 -（CR 15R 16） m（OCO）（Aa） t-（CR 19R 20） n-（OCH 2CH 2） r-、 -（CR 15R 16） m（OCNR 1 7）（Aa） t（CR 19R 20） n-（OCH 2CH 2） r-、 -（CR 15R 16） m-（CO）（Aa） t（CR 19R 20） n-（OCH 2CH 2） r-、 -（CR 1 5R 1 6） m-苯基‑CO（Aa） t-（CR 1 7R 1 8） n-、 -（CR 1 5R 1 6） m-呋喃‑CO（Aa） t（CR 1 7R 1 8） n-、 -（CR 1 5R 6） m-噁唑‑CO（Aa） t（CR 1 7R 1 8） n-、 -（CR 1 5R 1 6） m噻唑‑CO-（Aa） t（CCR 17R 18） n-、 -（CR 15R 16） t-噻吩‑CO（CR 17R 18） n-、 -（CR 15R 16） t-咪唑‑CO-（CR 17R 18） n-、 -（CR 15R 16） t-嗎啉‑CO（Aa） t（CR 17R 18） n-、 -（CR 15R 16） t-呱嗪-CO（Aa） t-（CR 17R 18） n-、 -（CR 15R 16） tN‑甲基呱嗪‑CO（Aa） t（CR 17R 18） n-、 -（CR 15R 16） m-（Aa） t苯基-、 -（CR 15R 16） m-（Aa） t呋喃‑、 -（CR 15R 16） m-噁唑（Aa） t‑、 -（CR 15R 16） m-噻唑（Aa） t‑、 -（CR 15R 16） m-噻吩-（Aa） t-、 -（CR 15R 16） m-咪唑（Aa） t-、 -（CR 15R 16） m-嗎啉‑（Aa） t-、 -（CR 15R 16） m-呱嗪‑（Aa） t-、 -（CR 15R 16） m-N‑甲基呱嗪‑（Aa） t- 、‑K（CR 15R 16） m（Aa） r（CR 17R 18） n-（OCH 2CH 2） t-、 ‑K（CR 15R 16） m-（CR 17R 18） n（Aa） r（OCH 2CH 2） t-、  ‑K（Aa） r（CR 15R 16） m（CR 17R 18） n-（OCH 2CH 2） t-、 ‑K（CR 15R 16） m-（CR 17R 18） n（OCH 2CH 2） r（Aa） t-、 ‑K（CR 15R 16） m（CR 17=CR 18）（CR 19R 20） n（Aa） t（OCH 2CH 2） r、‑K（CR 15R 16） m（NR 11CO）（Aa） t-（CR 19R 20） n（OCH 2CH 2） r-、 ‑K（CR 5R 6） m（Aa） t-（NR 21CO）（CR 19R 20） n-（OCH 2CH 2） r-、 ‑K（CR 15R 16） m（OCO）（Aa） t（CR 19R 20） n-（OCH 2CH 2） r-、 ‑K（CR 15R 16） m（OCNR 17）（Aa） t-（CR 19R 20） n-（OCH 2CH 2） r-、  ‑K（CR 15R 16） m（CO）（Aa） t（CR 19R 20） n（OCH 2-CH 2） r-、 ‑K（CR 15R 16） m（NR 21-CO）（Aa） t（CR 19R 20） n-（OCH 2CH 2） r-、 ‑K（CR 15R 16） m（OCO）（Aa） t-（CR 19R 20） n（OCH 2CH 2） r-、 -K-（CR 15R 16） m-（OCNR 17）（Aa） t-（CR 19R 20） n（OCH 2CH 2） r-、 ‑K（CR 15R 16） m-（CO）（Aa） t（CR 19R 20） n-（OCH 2CH 2） r-、 ‑K（CR 15R 16） m-苯基‑CO（Aa） t（CR 17R 18） n-、 ‑K-（CR 15R 16） m-呋喃‑CO（Aa） t（CR 17R 18） n、 ‑K（CR 15R 16） m-噁唑-CO（Aa） t（CR 17R 18） n-、 ‑K（CR 15R 16） m-噻唑 ‑CO（Aa） t（CR 17R 18） n、 ‑K（CR 15R 16） t-噻吩-CO（CR 17R 18） n-、 ‑K（CR 15R 16） t咪唑-CO-（CR 17R 18） n、 ‑K（CR 5R 6） t嗎啉-CO（Aa） t-（CR 17R 18） n-、  ‑K（CR 15R 16） t-呱嗪-CO（Aa） t-（CR 17R 18） n-、 ‑K（CR 15R 16） tN‑ 甲基-呱嗪-CO（Aa） t（CR 17R 18） n-、 ‑K（CR 15R 16） m（Aa） t-苯基、  ‑K-（CR 15R 16） m（Aa） t呋喃-、 -K（CR 15R 16） m-噁唑-（Aa） t-、 ‑K（CR 15R 16） m噻唑（Aa） t、  ‑K（CR 15R 16） m-噻吩-（Aa） t-、 ‑K（CR 15R 16） m-咪唑（Aa） t-、 ‑K（CR 15R 16） m-嗎啉（Aa） t、  ‑K（CR 15R 16） m呱嗪（Aa） tG、 ‑K（CR 5R 6） m-N-甲基-呱嗪（Aa） t-；其中 Aa、 m、 n、 在前文已有定義； t 和 r獨立地為0 – 100； R 13、 R 14、 R 15、 R 16、 R 17、 R 18、 R 19、 R 20、 和R 21獨立地選自由下列組成之群組 H； 鹵素； C 1~C 8烷基或雜烷基、 C 2~C 8芳基、烯基、炔基、醚、酯、胺或醯胺、 C 3~C 8芳基、此等基團均可以被以下成分所取代：一個或多個鹵素、 CN、 NR 12R 12’、 CF 3、 OR 12、 芳基、 雜環、 S（O）R 12、 SO 2R 12、 -CO 2H、 -SO 3H、 -OR 12、 -CO 2R 12、 -CONR 12、 -PO 2R 12R 13、 -PO 3H 或 P（O）R 12R 12’R 13； K 是 NH、 NR 12、 -SS-、 -C（=O）-、 -C（=O）NH-、 -C（=O）O-、 -C=NH-O-、 -C=N-NH-、 -C（=O）NH-NH-、 O、 S、 Se、 B、 Het （具有C 3-C 12的雜環或雜芳環）；或含有相同或不同的1-20個胺基酸的肽。
  2. 如請求項1之喜樹鹼類似物偶聯物，具有如式（II）所示的結構：
    Figure 03_image1924
    （II） 或其藥學上可接受的鹽，水合物或水合鹽； 或此等化合物的多晶結構； 或它們的異構體，旋光異構體，外消旋體，非鏡像異構物或鏡像異構物； 其中T是靶向或結合配位體；L是可釋放的連接子； n 是1-30 ， m 是1-10； 括弧內是一種有效喜樹鹼類似物，其中： R 1是直鏈或支鏈C 1-C 6烷基、烷氧基、烷基胺基（包括第一、第二、第三胺基或季銨）、氧基羰基、胺基羰基、胺基烷基、氧基烷基、胺基烷基胺基、氧基烷基胺基、胺基烷氧基、氧基烷氧基或烷基羧酸的；C 2-C 6雜烷基、烷基環烷基、雜環烷基、雜環、氧基環烷基、胺基環烷基、雜烷基環烷基、烷基羰基、胺基烷基羰基、氧基烷基羰基、烷基醚、烷基酯、烷基醯胺、氧基烷基醯胺、胺基烷基醯胺、肟；NH，或O； R 2是 H， 直鏈或支鏈C 1-C 6烷基、烷基醇、烷基胺（包括第一、第二、第三胺或季銨）、胺基烷基醇、胺基烷基胺、氧基烷基醇、氧基烷基胺、胺基烷基、氧基烷基或烷基羧酸的；C 2-C 6雜烷基、烷基環烷基、雜環烷基、雜環、環烷基、雜烷基環烷基、烷基羰基、烷基醚、烷基酯、烷基醯胺、肟；NH 2或OH； R 3獨立地是H， R 6NHC（O）， R 6OC（O）、SO 2R 6、 SO 3R 6、 PR 6R 6’、 POR 6R 6’、 CH 2OP（O）（OR 6） 2、 C（O）OP（O）（OR 6） 2、 PO（OR 6）（OR 6’）、 P（O）（OR 6）OP（O）（OR 6’） 2、 R 6C（O）、 C（O）N R 6R 6’； 直鏈或支鏈C 1-C 6烷基、烷基醇、烷基胺（包括第一、第二、第三胺或季銨）或烷基羧酸的；C 2-C 6雜烷基、烷基環烷基、雜環烷基、雜環、環烷基、雜烷基環烷基、烷基羰基的、烷基醚、烷基酯、烷基醯胺、肟； C 5~C 12糖苷； R 4是鹵素 （F、 Cl、 Br、或I）、 CN、 NO 2、 SO 3H、 OR 6、 SR 6、 S（O 2）R 6、 NHR 6、 N（R 6）（R 6’）、 C（O）XR 6、 N +（R 6）（R 6’）（R 6’’）； X 是 NH 或 O； R 5是H、 C（O）OR 6、 C（O）NHR 6、 R 6C（O）、直鏈或支鏈C 1-C 6烷基、烷基醇、烷基胺（包括第一、第二、第三胺或季銨）、烷基羧酸； C 2-C 6碳酸酯、脲、雜烷基、烷基環烷基、雜環烷基、雜環、環烷基、雜烷基環烷基、烷基羰基、烷基醚、烷基酯、烷基醯胺或胺基酸； R 6、 R 6’、 和 R 6’’ 獨立地是 H、 C 1-C 6烷基、烷基醇、烷基胺（包括第一、第二、第三胺或季銨）或烷基羧酸； C 2-C 6雜烷基、烷基環烷基、雜環烷基、雜環、環烷基、雜烷基環烷基、烷基羰基、烷基醚、烷基酯、烷基醯胺或胺基酸；或藥用鹽； 此外， R 1可以缺省且 C-7 直接與 L連接、 且R 2、 R 3、 X、 C-10 和 C-9 可以共同形成5-、 6- 或 7-元雜環。
  3. 如請求項1之喜樹鹼類似物偶聯物，具有如式（III）所示的結構：
    Figure 03_image1926
    （III） 或其藥學上可接受的鹽，水合物或水合鹽； 或此等化合物的多晶結構； 或它們的異構體，旋光異構體，外消旋體，非鏡像異構物或鏡像異構物； 其中T是靶向或結合配位體；L是可釋放的連接子；n是 1-30 ，m是1-10； 括弧內是一種具有活性的喜樹鹼類似物，其中： R 1是直鏈或支鏈C 1-C 6烷基、烷氧基、烷基胺基（包括第一、第二、第三胺基或季銨）、氧基羰基、胺基羰基、胺基烷基、氧基烷基、胺基烷基胺基、氧基烷基胺基、胺基烷氧基、氧基烷氧基或烷基羧酸； C 2-C 6雜烷基、烷基環烷基、雜環烷基、雜環、氧基環烷基、胺基環烷基、雜烷基環烷基、烷基羰基、胺基烷基羰基、氧基烷基羰基、烷基醚、烷基酯、烷基醯胺、氧基烷基醚、胺基烷基醚、氧基烷基酯、胺基烷基酯、氧基烷基醯胺、胺基烷基醯胺、肟；NH或O； R 2是NH、 NR 6、 N +R 6R 6’、 O、 S、 直鏈或支鏈C 1-C 6烷基、烷基醇、烷基胺（包括第一、第二、第三胺或季銨）、胺基烷基醇、胺基烷基胺、氧基烷基醇、氧基烷基胺、胺基烷基、氧基烷基或烷基羧酸； C 2-C 6雜烷基、烷基環烷基、雜環烷基、雜環、環烷基、雜烷基環烷基、烷基羰基、烷基醚、烷基酯、烷基醯胺、肟；氧基烷基醚、胺基烷基醚、氧基烷基酯、胺基烷基酯、氧基烷基醯胺、胺基烷基醯胺； R 3是 H、 R 6NHC（O）、 R 6OC（O）、SO 2R 6、 SO 3R 6、 PR 6R 6’、 POR 6R 6’、 CH 2OP（O）（OR 6） 2、 C（O）OP（O）（OR 6） 2、 PO（OR 6）（OR 6’）、 P（O）（OR 6）OP（O）（OR 6’） 2、 R 6C（O）、 C（O）N R 6R 6’； 直鏈或支鏈 C 1-C 6烷基、烷基醇、烷基胺（包括第一、第二、第三胺或季銨）、或烷基羧酸； C 2-C 6雜烷基、烷基環烷基、雜環烷基、雜環、環烷基、雜烷基環烷基、烷基羰基、烷基醚、烷基酯、烷基醯胺、肟； C 5~C 12糖苷； R 4是鹵素（F、 Cl、 Br、或 I）、 CN、 NO 2、 SO 3H、 OR 6、 SR 6、 S（O 2）R 6、 NHR 6、 N（R 6）（R 6’）、 C（O）XR 6、 N +（R 6）（R 6’）（R 6’’）； X 是 NH或 O； R 5是 H、 C（O）OR 6、 C（O）NHR 6、 R 6C（O）、直鏈或支鏈C 1-C 6烷基、烷基醇、烷基胺（包括第一、第二、第三胺或季銨）、烷基羧酸； C 2-C 6碳酸酯、尿素、雜烷基、烷基環烷基、雜環烷基、雜環、環烷基、雜烷基環烷基、烷基羰基、烷基醚、烷基酯、烷基醯胺或胺基酸； R 6、 R 6’、 和 R 6’’獨立地是 H、 C 1-C 6烷基、烷基醇、烷基胺（包括第一、第二、第三胺或季銨）或烷基羧酸； C 2-C 6雜烷基、烷基環烷基、雜環烷基、雜環、環烷基、雜烷基環烷基、烷基羰基、烷基醚、烷基酯、烷基醯胺或胺基酸；或藥用鹽； 此外， R 2獨立地缺省且C-9 直接與L連接，且R 2、 R 3、 X、 C-10 和 C-9可以共同形成5-、 6- 或 7-元雜環。
  4. 如請求項1之喜樹鹼類似物偶聯物，具有如式（IV）所示的結構：
    Figure 03_image1928
    （IV） 或其藥學上可接受的鹽，水合物或水合鹽； 或此等化合物的多晶結構； 或它們的異構體，旋光異構體，外消旋體，非鏡像異構物或鏡像異構物； 其中T是靶向或結合配位體；L是可釋放的連接子；n為1-30且m為1-10； 括弧內是一種有效喜樹鹼類似物，其中： R 1和R 2獨立地是H、 NR 6R 6’、 -N +R 6R 6’R 6’’、 OH、 SH、C 1-C 6直鏈或支鏈 烷基、烷氧基、烷基胺基（包括第一、第二、第三胺基或季銨）、氧基羰基、胺基羰基、胺基烷基、氧基烷基、胺基烷基胺基、氧基烷基胺基、胺基烷氧基、氧基烷氧基或烷基羧酸； C 2-C 6雜烷基、烷基環烷基、雜環烷基、雜環、氧基環烷基、胺基環烷基、雜烷基環烷基、烷基羰基、胺基烷基羰基、氧基烷基羰基、烷基醚、烷基酯、烷基醯胺、氧基烷基醚、胺基烷基醚、氧基烷基酯、胺基烷基酯、氧基烷基醯胺、胺基烷基醯胺、肟；NH 2或OH； R 3獨立地是 -NHC（O）-、 -C（O）-、 SO 2-、 -SO 2NH-、 - NR 6SO 2-、 R 6NHC（O）、 R 6OC（O）、SO 2R 6、 SO 3R 6、 PR 6R 6’、 POR 6R 6’、 CH 2OP（O）（OR 6） 2、 C（O）OP（O）（OR 6） 2、 PO（OR 6）（OR 6’）、 P（O）（OR 6）OP（O）（OR 6’） 2、 R 6C（O）、 C（O）N R 6R 6’； 直鏈或支鏈C 1-C 6烷基、烷基醇、烷基胺（包括第一胺、第二胺、第三胺）或烷基羧酸； C 2-C 6雜烷基、烷基環烷基、雜環烷基、雜環、環烷基、雜烷基環烷基、烷基羰基、烷基醚、烷基酯、烷基醯胺、肟； R 4是鹵素 （F、 Cl、 Br、 或 I）、 CN、 NO 2、 SO 3H、 OR 6、 SR 6、 S（O 2）R 6、 NH（R 6）S（O 2）R 6’、 N（R 6）（R 6’）、 C（O）XR 6、 N +（R 6）（R 6’）（R 6’’）； X 是 NH 或O； R 5是H、 C（O）OR 6、 C（O）NHR 6、 R 6C（O）、直鏈或支鏈C 1-C 6烷基、烷基醇、烷基胺（包括第一、第二、第三胺或季銨）、烷基羧酸； C 2-C 6碳酸酯、尿素、雜烷基、烷基環烷基、雜環烷基、雜環、環烷基、雜烷基環烷基、烷基羰基、烷基醚、烷基酯、烷基醯胺或胺基酸； R 6、 R 6’、 和 R 6’’獨立地是 H、 C 1-C 6烷基、烷基醇、烷基胺（包括第一、第二、第三胺或季銨）或烷基羧酸； C 2-C 6雜烷基、烷基環烷基、雜環烷基、雜環、環烷基、雜烷基環烷基、烷基羰基、烷基醚、烷基酯、烷基醯胺或胺基酸；或藥用鹽； 另外 ， R 3獨立地缺省且C-10 的X直接與 L連接， 且R 2、 R 3、 X、 C-10 和 C-9可以共同形成5-、 6- 或7-元雜環。
  5. 如請求項1之喜樹鹼類似物偶聯物，具有如式（V）所示的結構：
    Figure 03_image1930
    （V） 或其藥學上可接受的鹽，水合物或水合鹽； 或此等化合物的多晶結構； 或它們的異構體，旋光異構體，外消旋體，非鏡像異構物或鏡像異構物； 其中T是靶向或結合配位體；L是可釋放的連接子； n為1-30，m為1-10； 括弧內是一種具有活性的喜樹鹼類似物，其中： R 1和R 2獨立地是 H、 NR 6R 6’、 -N +R 6R 6’R 6’’、 OH、 SH、直鏈或支鏈C 1-C 6烷基、烷氧基、烷基胺基（包括第一、第二、第三胺基或季銨）、氧基羰基、胺基羰基、胺基烷基、氧基烷基、胺基烷基胺基、氧基烷基胺基、胺基烷氧基、氧基烷氧基或烷基羧酸； C 2-C 6雜烷基、烷基環烷基、雜環烷基、雜環、氧基環烷基、胺基環烷基、雜烷基環烷基、烷基羰基、胺基烷基羰基、氧基烷基羰基、烷基醚、烷基酯、烷基醯胺、氧基烷基醚、胺基烷基醚、氧基烷基酯、胺基烷基酯、氧基烷基醯胺、胺基烷基醯胺、肟；NH 2或OH； R 3獨立地是R 6NHC（O）-、 R 6C（O）-、 R 6SO 2、 -SO 2NHR 6、 R 6OC（O）、 R 6’SO 2R 6-、 SO 3R 6、 PR 6R 6’、 POR 6R 6’、 CH 2OP（O）（OR 6） 2、 C（O）OP（O）（OR 6） 2、 PO（OR 6）（OR 6’）、 P（O）（OR 6）OP（O）（OR 6’） 2、 R 6C（O）、 C（O）N R 6R 6’； 直鏈或支鏈 C 1-C 6烷基、烷基醇、烷基胺（包括第一胺、第二胺、第三胺）或烷基羧酸； C 2-C 6雜烷基、烷基環烷基、雜環烷基、雜環、環烷基、雜烷基環烷基、烷基羰基、烷基醚、烷基酯、烷基醯胺、肟； R 4是鹵素 （F、 Cl、 Br、或I）、 CN、 NO 2、 SO 3H、 OR 6、 SR 6、 S（O 2）R 6、 NH（R 6）S（O 2）R 6’、 N（R 6）（R 6’）、 C（O）XR 6、 N +（R 6）（R 6’）（R 6’’）； X是 NH 或O； R 5是 C（O）O、 C（O）NH、 R 6C（O）、直鏈或支鏈C 1-C 6烷基、烷基醇、烷基胺（包括第一、第二、第三胺或季銨）、烷基羧酸； C 2-C 6碳酸酯、尿素、雜烷基、烷基環烷基、雜環烷基、雜環、環烷基、雜烷基環烷基、烷基羰基、烷基醚、烷基酯、烷基醯胺或胺基酸； R 6、 R 6’、 和 R 6’’ 獨立地是 H、 C 1-C 6烷基、烷基醇、烷基胺（包括第一、第二、第三胺或季銨）或烷基羧酸； C 2-C 6雜烷基、烷基環烷基、雜環烷基、雜環、環烷基、雜烷基環烷基、烷基羰基、烷基醚、烷基酯、烷基醯胺或胺基酸；或藥用鹽； 此外、 R 5獨立地缺省且C-20的O直接與 L連接， 且 R 2、 R 3、 X、 C-10 和 C-9可以共同形成5-、 6- 或 7-元雜環。
  6. 如請求項2、3、4或5之喜樹鹼類似物偶聯物，其中喜樹鹼類似物與連接子L連接，具有如II-1 ~ II-61、 III-1 ~ III-52、 IV-1 ~ IV-47和 V-1 ~ V-61所示的結構：
    Figure 03_image087
    II-01，
    Figure 03_image089
    II-02，
    Figure 03_image091
    II-03，
    Figure 03_image093
    II-04，
    Figure 03_image095
    II-05，
    Figure 03_image097
    II-06，
    Figure 03_image1938
    II-07，
    Figure 03_image1940
    II-08，
    Figure 03_image1942
    II-09，
    Figure 03_image1944
    II-10，
    Figure 03_image1946
    II-11，
    Figure 03_image1948
    II-12，
    Figure 03_image1950
    II-13，
    Figure 03_image1952
    II-14，
    Figure 03_image1954
    II-15，
    Figure 03_image1956
    II-16，
    Figure 03_image1958
    II-17，
    Figure 03_image1960
    II-18，
    Figure 03_image1962
    II-19，
    Figure 03_image125
    II-20，
    Figure 03_image1965
    II-21，
    Figure 03_image129
    II-22，
    Figure 03_image131
    II-23，
    Figure 03_image133
    II-24，
    Figure 03_image135
    II-25，
    Figure 03_image137
    II-26，
    Figure 03_image139
    II-27，
    Figure 03_image141
    II-28，
    Figure 03_image143
    II-29，
    Figure 03_image1975
    II-30，
    Figure 03_image1977
    II-31，
    Figure 03_image149
    II-32，
    Figure 03_image151
    II-33，
    Figure 03_image153
    II-34，
    Figure 03_image155
    II-35，
    Figure 03_image1983
    II-36，
    Figure 03_image159
    II-37，
    Figure 03_image161
    II-38，
    Figure 03_image163
    II-39，
    Figure 03_image165
    II-40，
    Figure 03_image167
    II-41，
    Figure 03_image169
    II-42，
    Figure 03_image171
    II-43，
    Figure 03_image173
    II-44，
    Figure 03_image175
    II-45，
    Figure 03_image177
    II-46，
    Figure 03_image179
    II-47，
    Figure 03_image181
    II-48，
    Figure 03_image183
    II-49，
    Figure 03_image185
    II-50，
    Figure 03_image187
    II-51，
    Figure 03_image189
    II-52，
    Figure 03_image191
    II-53，
    Figure 03_image193
    II-54，
    Figure 03_image195
    II-55，
    Figure 03_image197
    II-56，
    Figure 03_image199
    II-57，
    Figure 03_image201
    II-58，
    Figure 03_image203
    II-60，
    Figure 03_image205
    II-61，
    Figure 03_image211
    III-1，
    Figure 03_image213
    III-2，
    Figure 03_image215
    III-3，
    Figure 03_image217
    III-4，
    Figure 03_image219
    III-5，
    Figure 03_image221
    III-6，
    Figure 03_image223
    III-7，
    Figure 03_image225
    III-8，
    Figure 03_image227
    III-9，
    Figure 03_image229
    III-10，
    Figure 03_image231
    III-11，
    Figure 03_image233
    III-12，
    Figure 03_image235
    III-13，
    Figure 03_image237
    III-14，
    Figure 03_image239
    III-15，
    Figure 03_image241
    III-16，
    Figure 03_image2025
    III-17，
    Figure 03_image245
    III-18，
    Figure 03_image247
    III-19，
    Figure 03_image249
    III-20，
    Figure 03_image2030
    III-21，
    Figure 03_image253
    III-22，
    Figure 03_image255
    III-23，
    Figure 03_image257
    III-24，
    Figure 03_image259
    III-25，
    Figure 03_image261
    III-26，
    Figure 03_image263
    III-27，
    Figure 03_image265
    III-28，
    Figure 03_image2039
    III-29，
    Figure 03_image269
    III-30，
    Figure 03_image271
    III-31，
    Figure 03_image273
    III-32，
    Figure 03_image275
    III-33，
    Figure 03_image277
    III-34，
    Figure 03_image279
    III-35，
    Figure 03_image281
    III-36，
    Figure 03_image283
    III-37，
    Figure 03_image285
    III-38，
    Figure 03_image287
    III-39，
    Figure 03_image2051
    III-40，
    Figure 03_image291
    III-41，
    Figure 03_image293
    III-41，
    Figure 03_image295
    III-42，
    Figure 03_image297
    III-43，
    Figure 03_image299
    III-44，
    Figure 03_image301
    III-45，
    Figure 03_image303
    III-46，
    Figure 03_image305
    III-47，
    Figure 03_image307
    III-48，
    Figure 03_image309
    III-49，
    Figure 03_image311
    III-50，
    Figure 03_image313
    III-51，
    Figure 03_image315
    III-52，
    Figure 03_image319
    IV-1，
    Figure 03_image321
    IV-2，
    Figure 03_image323
    IV-3
    Figure 03_image325
    IV-4，
    Figure 03_image327
    IV-5，
    Figure 03_image329
    IV-6，
    Figure 03_image2072
    IV-7，
    Figure 03_image2074
    IV-8，
    Figure 03_image2076
    IV-9，
    Figure 03_image337
    IV-10，
    Figure 03_image339
    IV-11，
    Figure 03_image341
    IV-12，
    Figure 03_image343
    IV-13，
    Figure 03_image345
    IV-14，
    Figure 03_image347
    IV-15，
    Figure 03_image349
    IV-16，
    Figure 03_image351
    IV-17，
    Figure 03_image353
    IV-18，
    Figure 03_image355
    IV-19，
    Figure 03_image357
    IV-20，
    Figure 03_image359
    IV-21，
    Figure 03_image361
    IV-22，
    Figure 03_image363
    IV-23，
    Figure 03_image365
    IV-24，
    Figure 03_image367
    IV-25，
    Figure 03_image369
    IV-26，
    Figure 03_image371
    IV-27，
    Figure 03_image373
    IV-28，
    Figure 03_image375
    IV-29，
    Figure 03_image377
    IV-30，
    Figure 03_image379
    IV-31，
    Figure 03_image381
    IV-32，
    Figure 03_image383
    IV-33，
    Figure 03_image385
    IV-34，
    Figure 03_image387
    IV-35，
    Figure 03_image389
    IV-36，
    Figure 03_image391
    IV-37，
    Figure 03_image393
    IV-38，
    Figure 03_image395
    IV-39，
    Figure 03_image397
    IV-40，
    Figure 03_image399
    IV-41，
    Figure 03_image401
    IV-42，
    Figure 03_image403
    IV-43，
    Figure 03_image405
    IV-44，
    Figure 03_image407
    IV-45，
    Figure 03_image409
    IV-46，
    Figure 03_image411
    IV-47，
    Figure 03_image417
    V-01，
    Figure 03_image419
    V-02，
    Figure 03_image421
    V-03，
    Figure 03_image423
    V-04，
    Figure 03_image425
    V-05，
    Figure 03_image427
    V-06，
    Figure 03_image429
    V-07，
    Figure 03_image431
    V-08，
    Figure 03_image433
    V-09，
    Figure 03_image435
    V-10，
    Figure 03_image437
    V-11，
    Figure 03_image439
    V-12，
    Figure 03_image441
    V-13，
    Figure 03_image443
    V-14，
    Figure 03_image445
    V-15，
    Figure 03_image447
    V-16，
    Figure 03_image449
    V-17，
    Figure 03_image451
    V-18，
    Figure 03_image453
    V-19，
    Figure 03_image455
    V-20，
    Figure 03_image457
    V-21，
    Figure 03_image459
    V-22，
    Figure 03_image461
    V-23，
    Figure 03_image463
    V-24，
    Figure 03_image465
    V-25，
    Figure 03_image467
    V-26，
    Figure 03_image469
    V-27，
    Figure 03_image471
    V-28，
    Figure 03_image473
    V-29，
    Figure 03_image475
    V-30，
    Figure 03_image477
    V-31，
    Figure 03_image479
    V-32，
    Figure 03_image481
    V-33，
    Figure 03_image483
    V-34，
    Figure 03_image485
    V-35，
    Figure 03_image487
    V-36，
    Figure 03_image489
    V-37，
    Figure 03_image491
    V-38，
    Figure 03_image493
    V-39，
    Figure 03_image495
    V-40，
    Figure 03_image497
    V-41，
    Figure 03_image499
    V-42，
    Figure 03_image501
    V-43，
    Figure 03_image503
    V-44，
    Figure 03_image505
    V-45，
    Figure 03_image507
    V-46，
    Figure 03_image509
    V-47，
    Figure 03_image511
    V-48，
    Figure 03_image513
    V-49，
    Figure 03_image515
    V-50，
    Figure 03_image517
    V-51，
    Figure 03_image519
    V-52，
    Figure 03_image521
    V-53，
    Figure 03_image523
    V-54，
    Figure 03_image525
    V-55，
    Figure 03_image527
    V-56，
    Figure 03_image529
    V-57，
    Figure 03_image531
    V-58，
    Figure 03_image533
    V-59，
    Figure 03_image535
    V-60，
    Figure 03_image537
    V-61， 或其藥學上可接受的鹽，水合物或水合鹽； 或此等化合物的多晶結構； 或它們的異構體，旋光異構體，外消旋體，非鏡像異構物或鏡像異構物； 其中 “
    Figure 03_image207
    ” 是與連接子L連接的位點； 其中 R 6、 和R 6’獨立地是 H、 C 1-C 6烷基、烷基醇、烷基胺（包括第一、第二、第三胺或季銨）或烷基羧酸； C 2-C 6雜烷基、烷基環烷基、雜環烷基、雜環、環烷基、雜烷基環烷基、烷基羰基、烷基醚、烷基酯、烷基醯胺或胺基酸；或藥用鹽。
  7. 如請求項1、2、3、4或5之喜樹鹼類似物的偶聯物，其中連接子L較佳含有胺基、磺醯胺、磷醯胺或胺基酸基團，其中式（I-q）可以作為支鏈連接至連接子L；連接子L中的胺基酸較佳自天冬氨酸、谷氨酸、賴氨酸、鳥氨酸或酪氨酸，其中的官能團如胺基、羧基或苯氧基中的一個或兩個可以連接如式（I-q）的長支鏈：
    Figure 03_image953
    （I-q）； 其中
    Figure 03_image955
    是與連接子中的磺醯基、磷酸酯、胺基或羰基相連的位點； G 1是 NH、 NHNH、 C（=O）、 NHNHC（O）、 C（=O）NH、 C（=NH）NH、 CH 2、 CH 2C（O）、 C（O）O、 NHC（O）NH、 或  （Aa） r、 （r =1-12）； G 2是NH、 NHNH、 C（=O）、 NHNHC（O）、 C（=O）NH、 C（=NH）NH、 CH 2、 C（O）O、 NHC（O）NH、 O、 S、 B、 P（O）（OH）、 NHP（O）（OH）、 NHP（O）（OH）NH、 CH 2P（O）（OH）NH、 OP（O）（OH）O、 CH 2P（O）（OH）O、 NHS（O） 2、 NHS（O） 2NH、 CH 2S（O） 2NH、 OS（O） 2O、 CH 2S（O） 2O、 Ar、 ArCH 2、 ArO、 ArNH、 ArS、 ArNR 1、 （Aa） r、 （r =1-12）； X 1和 X 2獨立地為 O、 CH 2、 S、 NH、 N（R 12）、 +NH（R 12）、 +N（R 12）（R 13）、 C（O）、 OC（O）、 OC（O）O、 NHSO 2NH、 NHP（O）（NH） 2、 SO 2NH、 P（O）（NH） 2、 NHS（O）NH、 NHP（O）（OH）（NH）、 OC（O）NH、 NHC（O）NH； Y 2是 O、NH、 NR 1、 CH 2、S、Ar； G 3是OH、 SH、 OR 1、 SR 1、 OC（O）R 1、 NHC（O）R 12、 C（O）R 12、 CH 3、 NH 2、 NR 12、 +NH（R 12）、 +N（R 12）（R 13）、 C（O）OH、 C（O）NH 2、 NHC（O）NH 2、 BH 2、 BR 12R 13、 P（O）（OH） 2、 NHP（O）（OH） 2、 NHP（O）（NH 2） 2、 S（O） 2（OH）、 （CH 2） q1C（O）OH、 （CH 2） q1P（O）（OH） 2、 C（O）（CH 2） q1C（O）OH、 OC（O）（CH 2） q1C（O）OH、 NHC（O）（CH 2） q1C（O）OH、 CO（CH 2） q1P（O）（OH） 2、 NHC（O）O（CH 2） q1-C（O）OH、 OC（O）NH-（CH 2） q1C（O）OH、 NHCO（CH 2） q1P（O）（OH） 2、 NHC（O）（NH）（CH 2） q1C（O）OH、 CONH（CH 2） q1-P（O）（OH） 2、 NHS（O） 2（CH 2） q1C（O）OH、 CO（CH 2） q1S（O） 2（OH）、 NHS（O） 2NH-（CH 2） q1C（O）OH、 OS（O） 2NH（CH 2） q1C（O）OH、 NHCO（CH 2） q1S（O） 2（OH）、 NHP（O）（OH）（NH）-（CH 2） q1C（O）OH、 CONH（CH 2） q1S（O）（OH）、 OP（O）（OH） 2、 （CH 2） q1P（O）（NH） 2、 NHS（O） 2（OH）、 NHS（O） 2NH 2、 CH 2S（O） 2NH 2、 OS（O） 2OH、 OS（O） 2OR 1、 CH 2S（O） 2OR 1、 Ar、 ArR 12、 ArOH、 ArNH 2、 ArSH、 ArNHR 12、 或 （Aa） q1； p 1、 p 2和 p 3獨立地為 0 -30 但不同時為 0； q 1和 q 2獨立地為0 -24； 較佳地G 3是直鏈或支鏈的 C 2-C 50聚羧酸或C 2-C 50聚烷基胺、 C 6-C 50寡糖或多糖、 C 6-C 50含季銨陽離子和磺酸根陰離子的甜菜鹼兩性離子或聚（磺基甜菜鹼）兩性離子（PSB）s、 可生物降解的聚合物（如聚乳酸/乙醇酸（PLGA）、聚（丙烯酸酯）、脫乙醯殼多糖、N-（2-羥丙基）甲基丙烯醯胺的共聚物、聚[2-（甲基丙烯醯氧基）乙基磷酸膽鹼 ]（PMPC）、聚-L -谷氨酸、聚（丙交酯- 共- 乙交酯）（PLG）、聚（乙二醇）（PEG）、聚（丙二醇）（PPG ） 、聚（乙二醇）改性肽、聚（乙二醇）改性脂質體、聚（乙二醇）改性烷基羧酸、聚（乙二醇）改性烷基胺、透明質酸（HA）（糖胺聚糖）、肝素/硫酸乙醯肝素（HSGAG）、硫酸軟骨素/硫酸皮素（CSGAG）、聚（乙二醇）改性的烷基硫酸鹽、聚（乙二醇）改性的烷基磷酸鹽或聚（乙二醇）改性的烷基季銨鹽。
  8. 如請求項7之喜樹鹼類似物的偶聯物，其中該式（I-q）的支鏈連接子選自由下列組成之群組：
    Figure 03_image957
    （I-q01），
    Figure 03_image959
    （I-q02），
    Figure 03_image961
    （I-q03），
    Figure 03_image963
    （I-q04），
    Figure 03_image965
    （I-q04），
    Figure 03_image967
    （Iq-05），
    Figure 03_image969
    （I-q06），
    Figure 03_image971
    （I-q07），
    Figure 03_image973
    （I-q08）
    Figure 03_image975
    （Iq-09），
    Figure 03_image977
    （Iq-10），
    Figure 03_image979
    （Iq-11），
    Figure 03_image981
    （Iq-12），
    Figure 03_image983
    （Iq-13），
    Figure 03_image985
    （Iq-14）， 其中 G 1、 p 1、 p 2、 p 3、 Aa、 r、 X 2、 q 1、 m 1與請求項7中的定義相同。
  9. 如請求項1、2、3、4或5之喜樹鹼類似物的偶聯物，其中該式（I）、（II）、（III）、（IV）和（V）的喜樹鹼類似物偶聯物可以容易地由細胞結合分子 T 與如式 （VI）、（VII）、（VIII）、（IX） 和 （X） 所示的化合物偶聯： 1.
    Figure 03_image2194
    （VI）
    Figure 03_image2196
    （VII）
    Figure 03_image2198
    （VIII）
    Figure 03_image2200
    （IX）
    Figure 03_image2202
    （X） 其中 R 1， R 2， R 3， R 4， R 5， L， X和m 與式 （I） 中的定義相同； Lv為一反應官能團，可以與細胞結合分子上的硫醇、胺、羧酸、硒醇、苯酚或羥基發生反應，它選自由下列組成之群組鹵素（氟、氯、溴、碘）；馬來醯亞胺基；甲磺醯基；甲苯磺醯基；三氟甲磺醯基；硝基苯氧基；N-羥基琥珀醯亞胺基（NHS）；苯氧基；二硝基苯氧基；五氟苯氧基；四氟苯氧基；三氟苯氧基；二氟苯氧基；一氟苯氧基；五氯苯氧基；咪唑基；一氯苯氧基；二氯苯氧基；三氯苯氧基；四氯苯氧基；N-（苯并三唑基）氧基；2-乙基-5-苯基異噁唑基-3′-磺醯基；苯氧二唑基磺醯基；2-乙基-5-苯基異噁唑基；苯氧二唑基；噁二唑基；不飽和碳（碳-碳、碳-氮、碳-硫、碳-磷、硫-氮、磷-氮、氧-氮或碳-氧之間的雙鍵或三鍵）；或與Mitsunobu反應試劑作用生成的中間物；縮合劑的例子如下： 1-乙基-（3-二甲基胺基丙基）碳二亞胺（EDC）、二環己基碳二亞胺（DCC）、N，N'-二異丙基碳二亞胺 （DIC）、N-環己基-N' - （2-嗎啉代- 乙基）碳二亞胺甲基對甲苯磺酸鹽（CMC或CME-CDI）、1，1'-羰基二咪唑（CDI）、（O-（苯并三唑-1- 基）-N，N，N’，N’-四甲基脲四氟硼酸鹽（TBTU）、N，N，N'，N'-四甲基-氧-（1H-苯并三唑-1-基）-六氟磷酸銨（HBTU）、（ 苯并三唑-1-基氧基）三（二甲基胺基）-六氟磷酸鹽（BOP）、（苯并三唑-1-基氧基）三吡咯啶基六氟磷酸鹽（PyBOP）、氰基膦酸二乙酯（DEPC）、氯-N，N，N'，N'-四甲基甲脒六氟磷酸鹽、1- [雙（二甲基胺基）亞甲基] -1H-1，2，3-三唑并[4，5-b]吡啶3-氧六氟磷酸鹽（HATU）、1-[（二甲胺基）（嗎啉代）亞甲基]-1H-[1，2，3]三唑并[4，5-b]吡啶-1-鎓3-氧六氟磷酸鹽（HDMA）、2-氯-1，3-二甲基-咪唑六氟磷酸鹽（CIP）、六氟磷酸氯代吡咯啶酮鎓（PyCloP）、氟- N，N，N'，N'-雙（四亞甲基）甲脒六氟磷酸鹽（BTFFH）、N，N，N'，N'-四甲基-S-（1-側氧基-2-吡啶基）硫脲六氟磷酸鹽、O-（2-側氧基-1（2H）吡啶基）- N，N，N'，N'- 四甲基脲四氟硼酸鹽（TPTU）、S-（1-側氧基-2-吡啶基）N，N，N'，N'-四甲基硫脲四氟硼酸鹽、O-[（乙氧基羰基）- 氰基甲基胺基] - N，N，N'，N'-六氟磷酸四甲基脲（HOTU）、（1-氰基-2-乙氧基-2-側氧基乙基胺基氧基）二甲胺基-嗎啉代-六氟磷酸鹽（COMU） 、O-（苯并三唑-1-基）- N，N，N'，N'-雙（四亞甲基）六氟磷酸鹽（HBPyU）、N-苄基-N'-環己基-碳二亞胺（有或沒有聚合物結合）、二吡咯啶基（N-琥珀醯亞胺基氧基）碳鎓六氟磷酸鹽（HSPyU）、氯二吡咯啶基六氟磷酸鹽（PyClU） 、2-氯-1，3-二甲基咪唑四氟硼酸鹽（CIB）、（苯并三唑-1-基氧基）二呱啶碳六氟磷酸鹽（HBPipU） 、O -（6-氯苯并三唑-1-基）- N，N，N'，N'-四甲基脲四氟硼酸鹽（TCTU）、溴代（二甲基胺基）-六氟磷酸鹽（BroP）、丙基膦酸酐（PPACA、T3P）、2-嗎啉代乙基異氰化物（MEI）、N，N，N'，N'-四甲基-氧-（N-琥珀醯亞胺基）六氟磷酸鹽（ HSTU）、2-溴-1-乙基- 吡啶鎓四氟硼酸鹽（BEP ）、O-[（乙氧基羰基）氰基- 亞甲基胺基] - N，N，N'，N'-四甲基脲四氟硼酸鹽（TOTU）、4-（4，6-二甲氧基-1，3，5-三嗪-2-基）-4-甲基嗎啉氯化物（MMTM、DMTMM）、N，N，N'，N'-四甲基-氧-（N -琥珀醯亞胺基） 脲四氟硼酸（TSTU）、O-（3，4-二氫-4-側氧基-1，2，3-苯并三嗪-3-基）-N，N，N’，N’-四甲基脲四氟硼酸鹽（TDBTU）、 1，1'-（偶氮二羰基）-二呱啶（ADD）、二-（4-氯苄基）偶氮二羧酸酯（DCAD）、偶氮二羧酸二第三丁酯（DBAD）、偶氮二羧酸二異丙酯（DIAD）、偶氮二羧酸二乙酯（DEAD）；另外，Lv 1和Lv 2可以是酸酐，酸自身縮合或與其它C 1-C 8酸酐作用形成的酸酐； 較佳的Lv包含以下物質：鹵化物（如氟化物、氯化物、溴化物和碘化物）、甲磺醯基（mesyl）、甲苯磺醯基（tosyl）、三氟甲基磺醯基（triflate） 、三氟甲基磺酸酯、硝基苯氧基、N-琥珀醯亞胺基（NHS）、苯氧基；二硝基苯氧基；五氟苯氧基、四氟苯氧基、三氟苯氧基、二氟苯氧基、一氟苯氧基、五氯苯氧基、1H-咪唑-1-基、一氯苯氧基、二氯苯氧基、三氯苯氧基、四氯苯氧基、N-（苯并三唑基）氧基、2-乙基-5-苯基異噁唑-3′- 磺醯基、苯基噁二唑-磺醯基、2-乙基-5-苯基異噁唑基、苯基噁二唑基、噁二唑基、不飽和碳（碳-碳、碳-氮、碳-硫、碳-磷、硫-氮、磷-氮、氧-氮或碳-氧之間的雙鍵或三鍵），或以下結構之一：
    Figure 03_image1141
    二硫化物；
    Figure 03_image1143
    鹵代乙醯基；
    Figure 03_image1145
    醯鹵；
    Figure 03_image1147
    N-羥基琥珀醯亞胺酯；
    Figure 03_image1149
    馬來醯亞胺；
    Figure 03_image1151
    單取代馬來醯亞胺；
    Figure 03_image1153
    二取代馬來醯亞胺；
    Figure 03_image1155
    單取代的琥珀醯亞胺；
    Figure 03_image1157
    二取代馬來醯亞胺；
    Figure 03_image1159
    取代馬來酸； -CHO 醛；
    Figure 03_image1161
    乙烯磺醯基；
    Figure 03_image1163
    丙烯醯基；
    Figure 03_image1165
    2-（甲苯磺醯氧基）乙醯基；
    Figure 03_image1167
    2-（甲磺醯氧基）乙醯基；
    Figure 03_image1169
    2-（硝基苯氧基）乙醯基；
    Figure 03_image1171
    2-（二硝基苯基）乙醯基；
    Figure 03_image1173
    2-（氟代苯氧基）-乙醯基；
    Figure 03_image1175
    2-（二氟苯氧基）-乙醯基；
    Figure 03_image1177
    2-（（三氟甲基磺醯基）氧基）乙醯基；
    Figure 03_image1179
    酮或醛，
    Figure 03_image1181
    2-（五氟苯氧基）乙醯基；
    Figure 03_image1183
    甲基碸苯基噁二唑  （ODA）；
    Figure 03_image1185
    ，
    Figure 03_image1187
    酸酐，
    Figure 03_image1189
    烷氧基氨；
    Figure 03_image1191
    疊氮基，
    Figure 03_image1193
    炔基， 或
    Figure 03_image1195
    醯肼； 其中， X 1’ 是F、Cl、Br、I 或Lv 3；X 2’ 是O、NH、N（R 1）或CH 2；R 3是H、芳基或雜芳基，其中一個或多個H原子可獨立地被-R 1、 - 鹵素、-OR 1、-SR 1、-NR 1R 2、- NO 2、-S（O）R 1、-S（O） 2R 1或-COOR 1取代，其中R 1及R 2定義於上；Lv 3是離去基團，選自由下列組成之群組F、Cl、 Br、I；硝基苯氧基；N-羥基琥珀醯亞胺（NHS）；苯氧基；二硝基苯氧基；五氟苯氧基；四氟苯氧基；二氟苯氧基；單氟苯氧基；五氯苯氧基；三氟甲磺醯基；咪唑基；二氯苯氧基；四氯苯氧基； 1-羥基苯并三唑基；甲苯甲磺醯基；甲磺醯基；2-乙基-5-苯基異噁唑-3′-磺醯基，酸酐或與其它酸酐作用形成的酸酐。
  10. 如請求項1、2、3、4或5之喜樹鹼類似物偶聯物，具有如式（IIq-1）、（IIq-2）、（IIq-3）、（IIq-4）、（IIq-5）， （IIq-6）， （IIq-7）， （IIq-8）所示的結構：
    Figure 03_image987
    （IIq-1），
    Figure 03_image989
    （IIq-2），
    Figure 03_image991
    （IIq-3），
    Figure 03_image993
    （IIq-4），
    Figure 03_image995
    （IIq-5），
    Figure 03_image997
    （IIq-6），
    Figure 03_image999
    （IIq-7），
    Figure 03_image1001
    （IIq-8）， 其中 R' 和  R''獨立地為H、 Me、 Et、 i Pr、 i Bu、 Bz （CH 2C 6H 5）、 CH 2COOH、 CH 2CH 2COOH、 CH 2CONH 2、 CH 2CH 2CONH 2、 CH 2CH 2CH 2CH 2NH 2、 CH 2CH 2SCH 3、 CH 2OH、 CH 2CH 2CH 2NHC（=NH）NH 2、 CH（OH）CH 3、 CH 2C 6H 4OH、 CH 2C 3N 2H 3；  p 1和 p 2獨立地是0 ~24； q 1是 1 ~18； q 3是 0 ~6； q 4是0 ~4； m’ 和 m’’獨立地為 0 ~6； m’’’ 是0 或 1； mAb是細胞結合分子，較佳為抗體； NH-Drug是上面列出的化合物II-1~II-61、III-1~III-52、IV-1~IV-47和V-1~V-61；
    Figure 03_image1003
    是與 NH-Drug連接的位點。
  11. 如請求項9之喜樹鹼類似物的偶聯物，其中該可偶聯的化合物具有如式（（IIq-9）、 （IIq-10）、 （IIq-11）、 （IIq-12）、 （IIq-13）、 （IIq-14）、 （IIq-15）、 （IIq-16）所示的結構：
    Figure 03_image1005
    （IIq-9），
    Figure 03_image1007
    （IIq-10），
    Figure 03_image1009
    （IIq-11），
    Figure 03_image1011
    （IIq-12），
    Figure 03_image1013
    （IIq-13），
    Figure 03_image1015
    （IIq-14），
    Figure 03_image1017
    （IIq-15），
    Figure 03_image1019
    （IIq-8）， 其中 R' 和  R''獨立地為H、 Me、 Et、 i Pr、 i Bu、 Bz （CH 2C 6H 5）、 CH 2COOH、 CH 2CH 2COOH、 CH 2CONH 2、 CH 2CH 2CONH 2、 CH 2CH 2CH 2CH 2NH 2、 CH 2CH 2SCH 3、 CH 2OH、 CH 2CH 2CH 2NHC（=NH）NH 2、 CH（OH）CH 3、 CH 2C 6H 4OH、 CH 2C 3N 2H 3；  p 1和 p 2獨立地是0 ~24； q 1是 1 ~18； q 3是 0 ~6； q 4是0 ~4； m’ 和 m’’獨立地為 0 ~6； m’’’ 是0 或 1； NH-Drug是上面列出的化合物II-1~II-61、III-1~III-51、IV-1~IV-47和V-1~V-61；
    Figure 03_image1003
    是與 NH-Drug連接的位點。
  12. 如請求項1、2、3、4或5之喜樹鹼類似物偶聯物，具有如C1-005、 C1-008、 C1-021、 C1-022、 C1-029、 C1-031、 C1-035、 C1-041、 C1-042、 C1-043、 C1-047、 C1-050、 C1-056、 C1-061、 C1-064、 C1-070、 C1-075、 C1-081、 C1-086、 C1-088、 C1-090、 C1-094、 C1-099、 C1-102、 C1-110、 C1-102、 C1-110、 C1-113、 C1-114、 C1-119a、 C1-119b、 C1-123、 C1-127、 C1-131、 C1-137a、 C1-137b、 C1-140、 C1-147a、 C1-147b、 C1-151、 C1-152、 C1-156、 C1-157、 C1-158、 C1-159a、 C1-159b、 C1-165、 C1-166、 C1-168、 C1-170a、 C1-170b、 C1-177、 C1-188、 C1-200、 C1-208、 C1-213、 C1-226、 C1-238、 C1-243、 C1-247、 C1-262a、 C1-262b、 C1-262c、 C1-262d、 C1-266、 C1-285a ~ C1-285z、 C1-285a 1~ C1-285i 1、 C1-291a ~ C1-291z、 C1-291a 1~ C1-291i 1、 C1-297a ~ C1-297z、 C1-297a 1~ C1-297i 1、 C1-305、 C1-306、 C1-311、 C1-362、 C1-397、 C1-402、 C1-407、 C1-411、 C1-414、 C1-419、 C1-424、 C1-428、 C1-436、 C2-005、 C3-005、 C2-008、 C3-008、 C2-021、 C3-021、 C2-022、 C3-022、 C2-029、 C3-029、 C2-031、 C3-031、 C2-035、 C3-035、 C2-041、 C3-041、 C2-042、 C3-042、 C2-043、 C3-043、 C2-047、 C3-047、 C2-050、 C3-050、 C2-056、 C3-056、 C2-061、 C3-061、 C2-064、 C3-064、 C2-070、 C3-070、 C2-075、 C3-075、 C2-081、 C3-081、 C2-086、 C3-086、 C2-088、 C3-088、 C2-090、 C3-090、 C2-094、 C3-094、 C2-099、 C3-099、 C2-102、 C3-102、 C2-110、 C3-110、 C2-113、 C3-113、 C2-114、 C3-114、 C2-119a、 C3-119a、 C2-119b、 C3-119b、 C2-123、 C3-123、 C2-127、 C3-127、 C2-131、 C3-131、 C2-137a、 C3-137a、 C2-137b、 C3-137b、 C2-140、 C3-140、 C2-147a、 C3-147a、 C2-147b、 C3-147b、 C2-151、 C3-151、 C2-152、 C3-152、 C2-156、 C3-156、 C2-157、 C3-157、 C2-158、 C3-158、 C2-159a、 C3-159a、 C2-159b、 C3-159b、 C2-165、 C3-165、 C2-166、 C3-166、 C2-168、 C3-168、 C2-170a、 C3-170a、 C2-170b、 C3-170b、 C2-177、 C3-177、 C2-188、 C3-188、 C2-200、 C3-200、 C2-208、 C3-208、 C2-213、 C3-213、 C2-226、 C3-226、 C2-238、 C3-238、 C2-243、 C3-243、 C2-247、 C3-247、 C2-262a、 C3-262a、 C2-262b、 C3-262b、 C2-262c、 C3-262c、 C2-262d、 C3-262d、 C2-266、 C3-266、 C2-285a ~ C2-285z、 C3-285a ~ C3-285z、 C2-285a 1~ C2-285i 1、 C3-285a 1~ C3-285i 1、 C2-291a ~ C2-291z、 C2-291a 1~ C2-291i 1、 C3-291a ~ C3-291z、 C3-291a 1~ C3-291i 1、 C2-297a ~ C2-297z、 C2-297a 1~ C2-297i 1、 C3-297a ~ C3-297z、 C3-297a 1~ C3-297i 1、 C2-305、 C3-305、 C2-306、 C3-306、 C2-311、 C3-311、 C2-362、 C3-362、 C2-397、 C3-397、 C2-402、 C3-402、 C2-407、 C3-407、 C2-411、 C3-411、 C2-414、 C3-414、 C2-419、 C3-419、 C2-424、 C3-424、 C2-428、 C3-428所示的結構：
    Figure 03_image2250
    C1-005，
    Figure 03_image2252
    C1-008，
    Figure 03_image2254
    C1-021，
    Figure 03_image2256
    C1-022，
    Figure 03_image2258
    C1-029，
    Figure 03_image2260
    C1-031，
    Figure 03_image2262
    C1-035，
    Figure 03_image2264
    C1-041，
    Figure 03_image2266
    C1-042，
    Figure 03_image2268
    C1-043，
    Figure 03_image2270
    C1-047，
    Figure 03_image2272
    C1-050，
    Figure 03_image2274
    C1-056，
    Figure 03_image2276
    C1-061，
    Figure 03_image2278
    C1-064，
    Figure 03_image2280
    C1-070，
    Figure 03_image2282
    C1-075，
    Figure 03_image2284
    C1-081，
    Figure 03_image2286
    C1-086，
    Figure 03_image2288
    C1-088，
    Figure 03_image2290
    C1-090，
    Figure 03_image2292
    C1-094，
    Figure 03_image2294
    C1-099，
    Figure 03_image2296
    C1-102，
    Figure 03_image2298
    C1-110，
    Figure 03_image2300
    C1-113，
    Figure 03_image2302
    C1-114，
    Figure 03_image2304
    C1-119a，
    Figure 03_image2306
    C1-119b
    Figure 03_image2308
    C1-123，
    Figure 03_image2310
    C1-127，
    Figure 03_image2312
    C1-131，
    Figure 03_image2314
    C1-137a，
    Figure 03_image2316
    C1-137b，
    Figure 03_image2318
    C1-140，
    Figure 03_image2320
    C1-147a
    Figure 03_image2322
    C1-147b，
    Figure 03_image2324
    C1-151
    Figure 03_image2326
    C1-152，
    Figure 03_image2328
    C1-156，
    Figure 03_image2330
    C1-157，
    Figure 03_image2332
    C1-158，
    Figure 03_image2334
    C1-159a，
    Figure 03_image2336
    C1-159b，
    Figure 03_image2338
    C1-165，
    Figure 03_image2340
    C1-166，
    Figure 03_image2342
    C1-168，
    Figure 03_image2344
    C1-170a，
    Figure 03_image2346
    C1-170b，
    Figure 03_image2348
    C1-177，
    Figure 03_image2350
    C1-188，
    Figure 03_image2352
    C1-200，
    Figure 03_image2354
    C1-208，
    Figure 03_image2356
    C1-213，
    Figure 03_image2358
    C1-226，
    Figure 03_image2360
    C1-238，
    Figure 03_image2362
    C1-243，
    Figure 03_image2364
    C1-247，
    Figure 03_image2366
    C1-262a （R 1=H）； C1-262b （R 1=OH）； C1-262c （R1 = OCH 3）； C1-262d （R 1= CH 3）；
    Figure 03_image2368
    C1-266；
    Figure 03_image2370
    C1-285a ~ C1285z， C1-285a 1-C1285i 1， 其中
    Figure 03_image2372
    是 285a ~285z， 285a 1~ 285i 1如下圖所示：
    Figure 03_image2374
    Figure 03_image2376
    Figure 03_image2378
    Figure 03_image2380
    Figure 03_image2382
    Figure 03_image2384
    Figure 03_image2386
    Figure 03_image2388
    Figure 03_image2390
    Figure 03_image2392
    Figure 03_image2394
    Figure 03_image2396
    C1-291a ~C1-291z， C1-291a 1~C1-291i 1；
    Figure 03_image2398
    p 1 ， p 2= 0 ~24 ； q 1= 1 ~18 C1-297a ~C1-297z， C1-297a 1~C1-297i 1；
    Figure 03_image2400
    C1-305，
    Figure 03_image2402
    C1-306，
    Figure 03_image2404
    C1-311，
    Figure 03_image2406
    C1-362，
    Figure 03_image2408
    C1-397，
    Figure 03_image2410
    C1-402，
    Figure 03_image2412
    C1-407，
    Figure 03_image2414
    C1-411，
    Figure 03_image2416
    C1-414，
    Figure 03_image2418
    C1-419，
    Figure 03_image2420
    C1-424，
    Figure 03_image2422
    C1-428，
    Figure 03_image2424
    C1-436，
    Figure 03_image2426
    C2-005 （X=NH）， C3-005 （X=O）；
    Figure 03_image2428
    C2-008 （X=NH）， C3-008 （X=O）；
    Figure 03_image2430
    C2-021 （X=NH）， C3-021 （X=O）；
    Figure 03_image2432
    C2-022 （X=NH）， C3-022 （X=O）；
    Figure 03_image2434
    C2-029 （X=NH）， C3-029 （X=O）；
    Figure 03_image2436
    C2-031 （X=NH）， C3-031 （X=O）；
    Figure 03_image2438
    C2-035 （X=NH）， C3-035 （X=O）；
    Figure 03_image2440
    C2-041 （X=NH）， C3-041 （X=O）；
    Figure 03_image2442
    C2-042 （X=NH）， C3-042 （X=O）；
    Figure 03_image2444
    C2-043 （X=NH）， C3-043 （X=O）；
    Figure 03_image2446
    C2-047 （X=NH）， C3-047 （X=O）；
    Figure 03_image2448
    C2-050 （X=NH）， C3-050 （X=O）；
    Figure 03_image2450
    C2-056 （X=NH）， C3-056 （X=O）；
    Figure 03_image2452
    C2-061 （X=NH）， C3-061 （X=O）；
    Figure 03_image2454
    C2-064 （X=NH）， C3-064 （X=O）；
    Figure 03_image2456
    C2-070 （X=NH）， C3-070 （X=O）；
    Figure 03_image2458
    C2-075 （X=NH）， C3-075 （X=O）；
    Figure 03_image2460
    C2-081 （X=NH）， C3-081 （X=O）；
    Figure 03_image2462
    C2-086 （X=NH）， C3-086 （X=O）；
    Figure 03_image2464
    C2-088 （X=NH）， C3-088 （X=O）；
    Figure 03_image2466
    C2-090 （X=NH）， C3-090 （X=O）；
    Figure 03_image2468
    C2-094 （X=NH）， C3-094 （X=O）；
    Figure 03_image2470
    C2-099 （X=NH）， C3-099 （X=O）；
    Figure 03_image2472
    C2-102 （X=NH）， C3-102 （X=O）；
    Figure 03_image2474
    C2-110 （X=NH）， C3-110 （X=O）；
    Figure 03_image2476
    C2-113 （X=NH）， C3-113 （X=O）；
    Figure 03_image2478
    C2-114 （X=NH）， C3-114 （X=O）；
    Figure 03_image2480
    C2-119 （X=NH）， C3-119 （X=O）；
    Figure 03_image2482
    C2-119b （X=NH）， C3-119b （X=O）；
    Figure 03_image2484
    C2-123 （X=NH）， C3-123 （X=O）；
    Figure 03_image2486
    C2-127 （X=NH）， C3-127 （X=O）；
    Figure 03_image2488
    C2-131 （X=NH）， C3-131 （X=O）；
    Figure 03_image2490
    C2-137a （X=NH）， C3-137a （X=O）；
    Figure 03_image2492
    C2-137b （X=NH）， C3-137b （X=O）；
    Figure 03_image2494
    C2-140 （X=NH）， C3-140 （X=O）；
    Figure 03_image2496
    C2-147a （X=NH）， C3-147a （X=O）；
    Figure 03_image2498
    C2-147b （X=NH）， C3-147b （X=O）；
    Figure 03_image2500
    C2-151 （X=NH）， C3-151 （X=O）；
    Figure 03_image2502
    C2-152 （X=NH）， C3-152 （X=O）；
    Figure 03_image2504
    C2-156 （X=NH）， C3-156 （X=O）；
    Figure 03_image2506
    C2-157 （X=NH）， C3-157 （X=O）；
    Figure 03_image2508
    C2-158 （X=NH）， C3-158 （X=O）；
    Figure 03_image2510
    C2-159a （X=NH）， C3-159a （X=O）；
    Figure 03_image2512
    C2-159b （X=NH）， C3-159b （X=O）；
    Figure 03_image2514
    C2-165 （X=NH）， C3-165 （X=O）；
    Figure 03_image2516
    C2-166 （X=NH）， C3-166 （X=O）；
    Figure 03_image2518
    C2-168 （X=NH）， C3-168 （X=O）；
    Figure 03_image2520
    C2-170a （X=NH）， C3-170a （X=O）；
    Figure 03_image2522
    C2-170b （X=NH）， C3-170b （X=O）；
    Figure 03_image2524
    C2-177 （X=NH）， C3-177 （X=O）；
    Figure 03_image2526
    C2-188 （X=NH）， C3-188 （X=O）；
    Figure 03_image2528
    C2-200 （X=NH）， C3-200 （X=O）；
    Figure 03_image2530
    C2-208 （X=NH）， C3-208 （X=O）；
    Figure 03_image2532
    C2-213 （X=NH）， C3-213 （X=O）；
    Figure 03_image2534
    C2-226 （X=NH）， C3-226 （X=O）；
    Figure 03_image2536
    C2-238 （X=NH）， C3-238 （X=O）；
    Figure 03_image2538
    C2-243 （X=NH）， C3-243 （X=O）；
    Figure 03_image2540
    C2-247 （X=NH）， C3-247 （X=O）；
    Figure 03_image2542
    C2-253 （X=NH）， C3-253 （X=O）；
    Figure 03_image2544
    C2-262a （R 1=H， X=NH）； C2-262b （R 1=OH， X=NH）； C2-262c （R1 = OCH 3 ，X=NH）； C2-262d （R 1= CH 3 ，X=NH）， C3-262a （R 1=H， X=O）； C3-262b （R 1=OH， X=O）； C3-262c （R1 = OCH 3 ，X=O）； C3-262d （R 1= CH 3 ，X=O）；
    Figure 03_image2546
    C2-266 （X=NH）， C3-266 （X=O）；
    Figure 03_image2548
    C2-285a ~ C2-285z， X=NH； C2-285a 1-C2-285i 1， X=NH； C3-285a ~ C3-285z， X=O； C3-285a 1-C3-285i 1， X=O；
    Figure 03_image2550
    285a ~285z， 285a 1-285i 1如下圖所示 ：
    Figure 03_image2552
    C2-291a ~ C2-291z， X=NH； C2-291a 1-C2-291i 1， X=NH； C3-291a ~ C3-291z， X=O； C3-291a 1-C3-291i 1， X=O；
    Figure 03_image2554
    C2-297a ~ C2-297z， X=NH； C2-297a 1-C2-297i 1， X=NH； C3-297a ~ C3-297z， X=O； C3-297a 1-C3-297i 1， X=O； p 1， 或 p 2= 0 ~24； q 1= 1 ~18；
    Figure 03_image2556
    C2-305 （X=NH）， C3-305 （X=O）；
    Figure 03_image2558
    C2-306 （X=NH）， C3-306 （X=O）；
    Figure 03_image2560
    C2-311 （X=NH）， C3-311 （X=O）；
    Figure 03_image2562
    C2-362 （X=NH）， C3-362 （X=O）；
    Figure 03_image2564
    C2-397（X=NH）， C3-397 （X=O）；
    Figure 03_image2566
    C2-402 （X=NH）， C3-402 （X=O）；
    Figure 03_image2568
    C2-407 （X=NH）， C3-407 （X=O）；
    Figure 03_image2570
    C2-411 （X=NH）， C3-411 （X=O）；
    Figure 03_image2572
    C2-414 （X=NH）， C3-414 （X=O）；
    Figure 03_image2574
    C2-419 （X=NH）， C3-419 （X=O），
    Figure 03_image2576
    C2-424 （X=NH）， C3-424 （X=O）；
    Figure 03_image2578
    C2-428 （X=NH）， C3-428 （X=O）； 其中 mAb是抗體。
  13. 如請求項9之喜樹鹼類似物的偶聯物，其中該可用於製備CPT偶聯物之式（VI）、 （VII）、 （VIII）、 （IX） 和 （X）化合物具有如下所示的化合物結構：29、 31、 35、 41、 42、 43、 47、 50、 56、 61、 64、 70、 75、 81、 86、 88、 90、 94、 99、 102、 110、 113、 114、 119a、 119b、 123、 127、 131、 137a、 137b、 140、 147a、 147b、 151、 152、 157、 158、 159a、 159b、 165、 166、 168、 170a、 170b、 177、 188、 200、 208、 213、 226、 238、 243、 247、 262a、 262b、 262c、 262d、 266、 285 （285a ~ 285z、 285a 1~ 285i 1）、 291、 297、 305、 306、 311、 362、 397、 402和 436：
    Figure 03_image2580
    Figure 03_image2582
    ，
    Figure 03_image2584
    ，
    Figure 03_image2586
    ，
    Figure 03_image2588
    ，
    Figure 03_image2590
    ，
    Figure 03_image2592
    ，
    Figure 03_image2594
    Figure 03_image2596
    Figure 03_image2598
    Figure 03_image2600
    Figure 03_image2602
    Figure 03_image2604
    Figure 03_image2606
    Figure 03_image2608
    ，
    Figure 03_image2610
    ，
    Figure 03_image2612
    ，
    Figure 03_image2614
    ，
    Figure 03_image2616
    ，
    Figure 03_image2618
    ，
    Figure 03_image2620
    ，
    Figure 03_image2622
    ，
    Figure 03_image2624
    ，
    Figure 03_image2626
    ，
    Figure 03_image2628
    ，
    Figure 03_image2630
    ，
    Figure 03_image2632
    ，
    Figure 03_image2634
    ，
    Figure 03_image2636
    ，
    Figure 03_image2638
    ，
    Figure 03_image2640
    ，
    Figure 03_image2642
    ，
    Figure 03_image2644
    ，
    Figure 03_image2646
    ，
    Figure 03_image2648
    ，
    Figure 03_image2650
    ，
    Figure 03_image2652
    ，
    Figure 03_image2654
    ，
    Figure 03_image2656
    ，
    Figure 03_image2658
    ，
    Figure 03_image2660
    ，
    Figure 03_image2662
    ，
    Figure 03_image2664
    ，
    Figure 03_image2666
    ，
    Figure 03_image2668
    ，
    Figure 03_image2670
    ，
    Figure 03_image2672
    ，
    Figure 03_image2674
    ，
    Figure 03_image1387
    ，
    Figure 03_image2677
    ，
    Figure 03_image2679
    ，
    Figure 03_image2681
    ，
    Figure 03_image2683
    ，
    Figure 03_image2685
    ，
    Figure 03_image2687
    ，
    Figure 03_image2689
    Figure 03_image2691
    266；
    Figure 03_image2693
    Figure 03_image2374
    Figure 03_image2376
    Figure 03_image2378
    Figure 03_image2380
    Figure 03_image2382
    Figure 03_image2384
    Figure 03_image2386
    Figure 03_image2388
    Figure 03_image2390
    Figure 03_image2392
    Figure 03_image2705
    Figure 03_image2707
    Figure 03_image2709
    Figure 03_image1477
    ，
    Figure 03_image1479
    306
    Figure 03_image1489
    Figure 03_image1589
    362
    Figure 03_image2715
    Figure 03_image1664
    402
    Figure 03_image1670
    Figure 03_image1678
    ，
    Figure 03_image1684
    ，
    Figure 03_image1694
    ，
    Figure 03_image1704
    424，
    Figure 03_image2723
    Figure 03_image2725
    。
  14. 如請求項1、 2、 3、 4或 5之喜樹鹼類似物的偶聯物，其中細胞連接分子（T 或 mAb）選自由下列組成之群組： （ A ）：抗體、蛋白質、前抗體、納米抗體、維生素（包括葉酸）、肽、高分子膠束、脂質體、基於脂蛋白的藥物 、納米顆粒藥物 、 樹枝狀聚合物、以及包覆在或連接至細胞結合配位體上的上述分子或顆粒，或上述的組合； （ B ）：類抗體蛋白、全長抗體（多克隆抗體、單克隆抗體、抗體二聚體、抗體多聚體）、多特異性抗體（雙特異性抗體、三特異性抗體或四特異性抗體）、單鏈抗體、與靶細胞結合的抗體片段、單克隆抗體、單鏈單克隆抗體、與靶細胞結合的單克隆抗體片段、嵌合抗體、與靶結合的嵌合抗體片段、結構域抗體、與靶細胞結合的結構域抗體片段、表面重組抗體、表面重組單鏈抗體、與靶細胞結合的表面重組抗體片段、人源化抗體或表面重組抗體、人源化單鏈抗體、與靶細胞結合的人源化抗體片段、抗獨特型（anti-Id）抗體、CDR、雙抗體、三抗體、四抗體、小型抗體、前抗體、前抗體片段、小免疫蛋白（SIP）、淋巴因數、激素、維生素、生長因數、集落刺激因數、營養轉運分子、大分子量蛋白、融合蛋白、激酶抑制劑、基因靶向劑、用抗體或大分子量蛋白修飾的納米顆粒或聚合物； （ C ）：細胞結合配位體或受體促效劑選自由下列組成之群組：葉酸衍生物； 谷氨酸脲衍生物； 生長抑制素及其類似物（選自由下列組成之群組奧曲肽（Sandostatin ）和蘭瑞肽（Somatuline））； 芳香族磺醯胺； 垂體腺苷酸環化酶啟動肽（PACAP） （PAC1）； 血管活腸肽（VIP/PACAP） （VPAC1， VPAC2）；  黑素細胞刺激素（α-MSH）； 膽囊收縮素（CCK） /胃泌素受體及其受體亞型； 鈴蟾肽（選自由下列組成之群組 Pyr-Gln-Arg-Leu-Gly-Asn-Gln-Trp-Ala-Val-Gly-His-Leu-Met-NH 2）/ 胃泌素釋放肽 （GRP）； 神經降壓素受體及其受體亞型（NTR1， NTR2， NTR3）； 物質 P （NK1 受體）配位體； 神經肽Y （Y1–Y6）；  歸巢肽包括RGD （Arg-Gly-Asp）， NGR （Asn-Gly-Arg）， 二聚和多聚環狀RGD肽（選自由下列組成之群組cRGDfV）， TAASGVRSMH 和 LTLRWVGLMS （硫酸軟骨素蛋白多糖NG2受體） 和 F3肽； 細胞穿透肽（CPPs）； 肽激素， 選自由下列組成之群組促黃體生成素釋放激素（LHRH） 的促效劑 和拮抗劑，促性腺激素釋放激素（GnRH）促效劑，藉由靶向卵泡刺激素（FSH）和促黃體激素（LH）以及睾酮產生而作用， 選自由下列組成之群組布舍瑞林（Pyr-His-Trp-Ser-Tyr-D-Ser（OtBu）-Leu-Arg-Pro-NHEt）， 戈那瑞林（Pyr-His-Trp-Ser-Tyr-Gly-Leu-Arg-Pro-Gly-NH 2）， 戈舍瑞林（Pyr-His-Trp-Ser-Tyr-D-Ser（OtBu）-Leu-Arg-Pro-AzGly-NH 2），  組氨瑞林（Pyr-His-Trp-Ser-Tyr-D-His（N-benzyl）-Leu-Arg-Pro-NHEt）， 亮丙瑞林（Pyr-His-Trp-Ser-Tyr-D-Leu-Leu-Arg-Pro-NHEt）， 那法瑞林（Pyr-His-Trp-Ser-Tyr-2Nal-Leu-Arg-Pro-Gly-NH 2）， 曲普瑞林（Pyr-His-Trp-Ser-Tyr-D-Trp-Leu-Arg-Pro-Gly-NH 2）， 納法瑞林， 阿貝瑞林（Ac-D-2Nal-D-4-chloroPhe-D-3-（3-pyridyl）Ala-Ser-（N-Me）Tyr-D-Asn-Leu-isopropylLys-Pro-DAla-NH 2）， （Ac-D-2Nal-D-4-chloroPhe-D-3-（3-pyridyl）Ala-Ser-Tyr-D-Cit-Leu-Arg-Pro-D-Ala-NH 2）， 亮丙瑞林（Ac-D-2Nal-D-4-chloroPhe-D-3-（3-pyridyl）Ala-Ser-4-aminoPhe（L-hydroorotyl）-D-4-aminoPhe（carba-moyl）-Leu-isopropylLys-Pro-D-Ala-NH 2），和地加瑞克（Ac-D-2Nal-D-4-chloroPhe-D-3-（3-pyridyl）Ala-Ser-Tyr-D-（N9， N10-diethyl）-homoArg-Leu-（N9， N10-diethyl）-homoArg-Pro-D-Ala-NH 2）； 模式識別受體（PRRs）， 選自由下列組成之群組Toll樣受體（TLRs）， C型凝集素和結節狀的受體（NLRs）； 降鈣素受體促效劑；整合素受體及其受體子類（選自由下列組成之群組α Vβ 1 ，α Vβ 3， α Vβ 5 ，α Vβ 6 ，α 6β 4 ，α 7β 1 ，α Lβ 2 ，α IIbβ 3） 促效劑 （選自由下列組成之群組 GRGDSPK， cyclo（RGDfV） （L1） 及其衍生物 [cyclo（-N（Me）R-GDfV）， cyclo（R-Sar-DfV）， cyclo（RG-N（Me）D-fV）， cyclo（RGD-N（Me）f-V）， cyclo（RGDf-N（Me）V-）（Cilengitide）]；  納米抗體（  VHH的衍生物 （駱駝科動物 Ig））； 結構域抗體（dAb， VH 或VL域的衍生物）； 雙特異性T細胞接頭（BiTE， 雙特異性雙抗體）； 雙重親和重定向劑（DART， 雙特異性雙抗體）； 四價串聯抗體（TandAb， 二聚雙特異性雙抗體）； anticalin （Lipocalins的衍生物）； adnectins （第10位 FN3 （纖連蛋白））； 設計的錨蛋白重複蛋白（DARPins）； avimers； EGF 受體， 或 VEGF 受體促效劑； （ D ）：細胞結合分子/配位體或細胞受體促效劑的小分子選自由下列組成之群組： LB01（葉酸）、LB02（PMSA配位體）、LB​​03（PMSA配位體）、LB​​04（PMSA配位體）、 LB05 （生長抑制素）、LB06（生長抑制素）、LB07（奧曲肽、生長抑制素類似物）、LB08（蘭瑞肽、生長抑制素類似物）、LB09（伐普肽（Sanvar）、生長抑制素類似物）、LB10（CAIX配位體）、LB​​11（CAIX配位體） 、LB12（胃泌素釋放肽受體（GRPr）、MBA）、LB13（促黃體激素釋放激素（LH-RH）和GnRH配位體 ）、LB14（促黃體激素釋放激素（LH-RH）和GnRH配位體）、LB​​15（ GnRH拮抗劑、Abarelix）、LB16（鈷胺素、維生素B12類似物）、LB17（鈷胺素、維生素B12類似物）、LB18（用於αvβ3整聯蛋白受體、環狀RGD五肽）、LB19（VEGF受體的異二價肽配位體）、LB​​20（神經髓質素B）、LB21（蛙皮素，作用於G蛋白偶聯受體）、LB22（TLR2，作用於類Toll受體）、LB23（作用於雄性激素受體）、LB​​24（西侖吉肽或環（-RGDfV-）結合物，作用於αv整合素受體）、LB23（氟可體松）、LB25（利福布汀類似物）、LB26（利福布汀類似物）、LB27（利福布汀類似物）、LB28（氟氫可的松）、LB29（地塞米松）、LB30（丙酸氟替卡松）、LB31（丙酸倍氯米松）、LB32（醋酸曲安奈德）、LB33（潑尼松）、LB34 （潑尼松龍 (Prednisolone)）、LB35（甲基強的松龍）、LB36（倍他米松）、LB37（伊立替康類似物）、LB38（克唑替尼類似物）、LB39 （硼替佐米類似物）、LB40（卡菲佐米類似物）、LB41（卡非佐米類似物）、LB42（亮丙瑞林類似物）、LB43（曲普瑞林類似物）、LB44（克林黴素）、LB45（利拉魯肽類似物）、LB46（半長春新鹼類似物）、 LB47（瑞他帕林類似物）、LB48（丁布林類似物）、LB49（長春鹼類似物）、LB50（利西森肽類似物）、LB51（奧西丁尼類似物）、LB52（核苷類似物）、LB53（厄洛替尼類似物）和LB54（拉帕替尼類似物），其結構如下所示：
    Figure 03_image1021
    LB01 （葉酸），
    Figure 03_image1023
    LB02 （PMSA配位體），
    Figure 03_image1025
    LB03 （PMSA配位體），
    Figure 03_image1027
    LB04 （PMSA配位體），
    Figure 03_image1029
    LB05 （生長激素抑制素），
    Figure 03_image1031
    LB06 （生長激素抑制素），
    Figure 03_image1033
    LB07 （奧曲肽、生長抑制素類似物），
    Figure 03_image1035
    LB08 （蘭肽、生長抑制素類似物），
    Figure 03_image1037
    LB09 （氨肽 （Sanvar）、生長抑制素類似物），
    Figure 03_image1039
    LB10 （CAIX配位體），
    Figure 03_image1041
    LB11 （CAIX 配位體），
    Figure 03_image1043
    LB12 （胃泌素釋放肽受體（GRPr），MBA），
    Figure 03_image1045
    LB13 （促黃體激素釋放激素（LH-RH）和促性腺激素釋放激素GnRH配位體），
    Figure 03_image1047
    LB14 （促黃體激素釋放激素（LH-RH）和促性腺激素釋放激素GnRH配位體），
    Figure 03_image1049
    LB15 （GnRH拮抗物、阿巴瑞克），
    Figure 03_image2742
    R 19是5’-去氧腺苷，Me， OH， CN； LB16 （鈷胺素，維生素B12類似物），
    Figure 03_image1053
    R 19是5’-去氧腺苷，Me， OH， CN； LB17 （鈷胺素，維生素B12類似物），
    Figure 03_image1055
    LB18 （環RGD五肽，作用於αvβ3整聯蛋白受體），
    Figure 03_image1057
    LB19 （異源二價肽配位體偶聯物，作用於血管內皮生長因數VEGF受體），
    Figure 03_image1059
    LB20 （神經髓質素B），
    Figure 03_image1061
    LB21蛙皮素偶聯物，作用於G蛋白偶聯受體），
    Figure 03_image1063
    LB22 （TLR2偶聯物，作用於類Toll受體），
    Figure 03_image1065
    LB23 （雄激素受體），
    Figure 03_image1067
    LB24 （西倫吉肽/環（-RGDfV-）偶聯物，作用於αv整合素受體）
    Figure 03_image1069
    LB25 （利福布汀類似物），
    Figure 03_image1071
    LB26 （利福布汀類似物），
    Figure 03_image1073
    LB27 （利福布汀類似物），
    Figure 03_image1075
    LB28 （氟氫可的松），
    Figure 03_image1077
    LB29 （地塞米松），
    Figure 03_image1079
    LB30 （丙酸氟替卡松），
    Figure 03_image1081
    LB31 （倍氯米松丙酸酯），
    Figure 03_image1083
    LB32 （曲安奈德），
    Figure 03_image1085
    LB33 （潑尼松），
    Figure 03_image1087
    LB34 （潑尼松龍），
    Figure 03_image1089
    LB35 （甲基強的松龍），
    Figure 03_image1091
    LB36 （倍氟美松），
    Figure 03_image1093
    LB37 （伊立替康類似物），
    Figure 03_image1095
    LB38 （克唑替尼類似物 ），
    Figure 03_image2766
    LB39 （硼替佐米類似物）， 其中Y 5是N、CH、C（Cl）、C（CH 3）或C（COOR 1）；R 1是H、C 1-C 6烷基、 C 3-C 8芳基；
    Figure 03_image1099
    LB40 （卡菲佐米類似物），
    Figure 03_image1101
    LB41 （卡菲佐米類似物），
    Figure 03_image1103
    LB42 （亮丙瑞利類似物），
    Figure 03_image1105
    LB43 （曲普瑞林類似物），
    Figure 03_image1107
    LB44 （克林黴素），
    Figure 03_image1109
    LB45 （利拉魯肽類似物），
    Figure 03_image1111
    LB46 （索馬魯肽類似物），
    Figure 03_image1113
    LB47 （瑞他帕林類似物），
    Figure 03_image1115
    LB48 （丁布林類似物），
    Figure 03_image1117
    LB49 （長春鹼類似物），
    Figure 03_image1119
    LB50 （利西森肽類似物），
    Figure 03_image1121
    LB51 （奧西丁尼類似物），
    Figure 03_image1123
    LB52 （核苷類似物），
    Figure 03_image1125
    LB53 （埃羅替尼類似物），
    Figure 03_image1127
    LB54 （拉帕替尼類似物）。
  15. 如請求項1、 2、 3、 4或 5之喜樹鹼類似物的偶聯物， 其中細胞結合劑/分子T能夠抗以下細胞：腫瘤細胞、病毒感染細胞、微生物感染細胞、寄生蟲感染細胞、自身免疫細胞、活化的腫瘤細胞、骨髓細胞、活化的T細胞、B細胞、或黑色素細胞或任何表達下列抗原或受體的某種疾病的細胞：CD1、 CD1a、 CD1b、 CD1c、 CD1d、 CD1e、CD2、 CD3、 CD3d、 CD3e、 CD3g、 CD4、 CD5、CD6、 CD7、 CD8、 CD8a、 CD8b、 CD9、 CD10、 CD11a、 CD11b、 CD11c、 CD11d、 CD12w、 CD13、 CD14、 CD15、 CD16、 CD16a、 CD16b、 CDw17、 CD18、 CD19、 CD20、 CD21、 CD22、 CD23、 CD24、 CD25、 CD26、 CD27、 CD28、 CD29、 CD30、 CD31、CD32、CD32a、 CD32b、 CD33、 CD34、 CD35、 CD36、 CD37、 CD38、 CD39、 CD40、 CD41、CD42、CD42a、 CD42b、 CD42c、 CD42d、 CD43、 CD44、 CD45、 CD46、 CD47、 CD48、 CD49b、 CD49c、 CD49c、 CD49d、 CD49f、 CD50、 CD51、 CD52、 CD53、 CD54、 CD55、CD56、 CD57、 CD58、 CD59、 CD60、 CD60a、 CD60b、 CD60c、 CD61、CD62E、 CD62L、 CD62P、 CD63、 CD64、 CD65、 CD65s、 CD66、 CD66a、 CD66b、 CD66c、 CD66d、 CD66e、 CD66f、 CD67、 CD68、 CD69、 CD70、 CD71、 CD72、 CD73、 CD74、 CD75、 CD75s、 CD76、 CD77、 CD78、 CD79、 CD79a、 CD79b、 CD80、 CD81、 CD82、 CD83、 CD84、 CD85、 CD85a、 CD85b、 CD85c、 CD85d、 CD85e、 CD85f、 CD85g、 CD85g、 CD85i、 CD85j、 CD85k、 CD85m、 CD86、 CD87、 CD88、 CD89、 CD90、 CD91、CD92、 CD93、 CD94、 CD95、 CD96、 CD97、 CD98、 CD99、 CD100、 CD101、 CD102、 CD103、 CD104、 CD105、 CD106、 CD107、 CD107a、 CD107b、 CD108、 CD109、 CD110、 CD111、 CD112、 CD113、 CD114、 CD115、 CD116、 CD117、 CD118、 CD119、 CD120、 CD120a、 CD120b、 CD121、 CD121a、 CD121b、 CD122、 CD123、 CD123a、 CD124、 CD125、 CD126、 CD127、 CD128、 CD129、 CD130、 CD131、 CD132、 CD133、 CD134、 CD135、 CD136、 CD137、 CD138、 CD139、 CD140、 CD140a、 CD140b、 CD141、 CD142、 CD143、 CD144、 CD145、 CDw145、 CD146、 CD147、 CD148、 CD149、 CD150、 CD151、 CD152、 CD153、 CD154、 CD155、 CD156、 CD156a、 CD156b、 CD156c、 CD156d、 CD157、 CD158、 CD158a、 CD158b1、 CD158b2、 CD158c、 CD158d、 CD158e1、 CD158e2、 CD158f2、 CD158g、 CD158h、 CD158i、 CD158j、 CD158k、 CD159、 CD159a、 CD159b、 CD159c、 CD160、 CD161、 CD162、 CD163、 CD164、 CD165、 CD166、 CD167、 CD167a、 CD167b、 CD168、 CD169、 CD170、 CD171、 CD172、 CD172a、 CD172b、 CD172g、 CD173、 CD174、 CD175、 CD175s、 CD176、 CD177、 CD178、 CD179、 CD179a、 CD179b、 CD180、 CD181、 CD182、 CD183、 CD184、 CD185、 CD186、 CDw186、 CD187、 CD188、 CD189、 CD190、 CD191、 CD192、 CD193、 CD194、 CD195、 CD196、 CD197、 CD198、 CD199、 CDw198、 CDw199、 CD200、 CD201、 CD202、 CD202（a、b）、 CD203、 CD203c、 CD204、 CD205、 CD206、 CD207、 CD208、 CD209、 CD210、 CDw210a、 CDw210b、 CD211、 CD212、 CD213、 CD213a 1、 CD213a 2、 CD214、 CD215、 CD216、 CD217、 CD218、 CD218a、 CD218、 CD21b9、 CD220、 CD221、 CD222、 CD223、 CD224、 CD225、 CD226、 CD227、 CD228、 CD229、 CD230、 CD231、 CD232、 CD233、 CD234、 CD235、 CD235a、 CD235b、 CD236、 CD237、 CD238、 CD239、 CD240、 CD240ce、 CD240d、 CD241、 CD242、 CD243、 CD244、 CD245、 CD246、 CD247、 CD248、 CD249、 CD250、 CD251、 CD252、 CD253、 CD254、CD255、 CD256、 CD257、 CD258、 CD259、 CD260、 CD261、 CD262、 CD263、 CD264、 CD265、 CD266、 CD267、 CD268、 CD269、 CD270、 CD271、 CD272、 CD273、 CD274、 CD275、 CD276、 CD277、 CD278、 CD279、 CD281、 CD282、 CD283、 CD284、 CD285、 CD286、 CD287、 CD288、 CD289、 CD290、 CD291、 CD292、  CD293、 CD294、 CD295、 CD296、 CD297、 CD298、 CD299、 CD300、 CD300a、 CD300b、 CD300c、 CD301、 CD302、 CD303、 CD304、 CD305、 CD306、 CD307、 CD307a、 CD307b、 CD307c、 CD307d、 CD307e、 CD307f、 CD308、 CD309、 CD310、 CD311、 CD312、 CD313、 CD314、 CD315、 CD316、 CD317、 CD318、 CD319、 CD320、 CD321、 CD322、 CD323、 CD324、 CD325、 CD326、 CD327、 CD328、 CD329、 CD330、 CD331、 CD332、 CD333、 CD334、 CD335、 CD336、 CD337、 CD338、 CD339、 CD340、 CD341、 CD342、 CD343、 CD344、 CD345、 CD346、 CD347、 CD348、 CD349、 CD350、 CD351、 CD352、 CD353、 CD354、 CD355、 CD356、 CD357、 CD358、 CD359、 CD360、 CD361、 CD362、 CD363、 CD364、 CD365、 CD366、 CD367、 CD368、 CD369、 CD370、 CD371、 CD372、 CD373、 CD374、 CD375、 CD376、 CD377、 CD378、 CD379、 CD381、 CD382、 CD383、 CD384、 CD385、 CD386、 CD387、 CD388、 CD389、 CRIPTO、 CRIPTO、 CR、 CR1、 CRGF、 CRIPTO、 CXCR5、 LY64、 TDGF1、 4-1BB、 APO2、 ASLG659、BMPR1B、 4-1BB、 5AC、 5T4 （Trophoblast糖蛋白、TPBG、5T4、WNT-活化抑制因數1或WAIF1）、腺癌抗原、AGS-5、AGS-22M6、啟動素受體激酶1、AFP、AKAP-4、ALK、α 整合素、αvβ6、胺基肽酶N、澱粉樣蛋白β、雄激素受體、促血管新生蛋白因數2、 促血管新生蛋白因數3、膜聯蛋白A1、炭疽毒素保護性抗原、抗轉移蛋白受體、AOC3 （VAP-1）、 B7-H3、炭疽桿菌、BAFF （B細胞啟動因數）、BCMA、B淋巴瘤細胞、bcr-abl、蛙皮素、BORIS、C5、C242抗原、CA125（糖抗原125、MUC16）、CA-IX（或CAIX、碳酸酐酶9）、 CALLA、CanAg、犬紅斑狼瘡IL31、碳酸酐酶IX、心肌肌凝蛋白、CCL11（C-C 片段趨化因數11）、 CCR4 （C-C趨化因數受體4）、 CCR5、 CD3E （ε）、 CEA（癌胚抗原）、CEACAM3、CEACAM5（癌胚抗原）、CFD（因數D）、Ch4D5、膽囊收縮素2 （CCK2R）、 CLDN18 （Claudin-18）、CLDN18.2 （Claudin-18.2）、叢生因數A、cMet、CRIPTO 、FCSF1R（集落刺激因數1受體）、 CSF2（集落刺激因數2、粒細胞-巨噬細胞集落刺激因數（GM-CSF））、CSP4、CTLA4（細胞毒性T淋巴細胞相關蛋白4）、CTAA16.88腫瘤抗原、CXCR4、C-X-C趨化因數受體4、環狀ADP核糖核酸酶、細胞週期蛋白B1、CYP1B1、巨細胞病毒、巨細胞病毒糖蛋白B、Dabigatran、DLL3 （類Δ配位體 3）、 DLL4 （類Δ配位體 4）、DPP4（雙肽-肽酶4）、DR5（死亡受體5）、大腸桿菌shiga毒素類型-1、大腸桿菌shiga毒素類型-2、ED-B、EGFL7 （類EGF結構域蛋白7）、 EGFR、EGFRII、EGFRvIII、內皮因數、內皮素B受體、內毒素、EpCAM（上皮細胞粘附分子）、EphA2、Episialin、ERBB2（表皮生長因數受體2）、ERBB3、ERG （TMPRSS2 ETS融合基因）、大腸桿菌、ETV6-AML、FAP（成纖維細胞活化蛋白α）、FCGR1、甲胎蛋白、纖維蛋白II β鏈、纖連蛋白額外結構域-B、FOLR（葉酸受體）、葉酸受體α、葉酸水解酶、Fos相關抗原1、呼吸道合胞病毒的F蛋白、捲曲受體、岩藻糖GM1、GD2神經節苷脂、G-28（細胞表面抗原糖脂）、GD3獨特型、GloboH、Glypican 3、N-羥乙醯神經氨酸、GM3、GMCSF受體α鏈、生長分化因數8、GP100、GPNMB（跨膜糖蛋白NMB）、GUCY2C（鳥苷酸環化酶2 C）、鳥苷酸環化酶C（GC-C）、腸鳥苷酸環化酶、鳥苷酸環化酶C受體、熱穩定腸毒素受體（hSTAR）、熱休克蛋白、血凝素、乙肝表面抗原、乙型肝炎病毒、HER1（人類表皮生長因數受體1）、HER2、HER2/neu、HER3（ERBB-3）、IgG4、HGF/SF（肝細胞生長因數/分散因數）、HHGFR、HIV-1、組蛋白複合物、HLA-DR（人類白細胞抗原）、HLA-DR10、HLA-DRB、HMWMAA、人類絨毛膜促性腺激素、HNGF、 人類分散因數受體激酶、HPV E6/E7、Hsp90、hTERT、ICAM-1（細胞間粘附分子1）、獨特型、IGF1R（IGF – 1、類胰島素生長因數1受體）、IGHE、IFN-γ、流感血凝素、IgE、IgE Fc區、IGHE、白介素（包括IL-1、 IL-2、 IL-3、 IL- 4、IL-5、IL-6、IL-6R、IL-7、IL-8、IL-9、IL-10、IL-11、IL-12、IL-13、IL-15、IL-17、IL-17A、IL-18、IL-19、IL-20、IL-21、IL-22、IL-23、IL-27、IL-28）、IL31RA、ILGF2（類胰島素生長因數2）、整合蛋白（α4、αIIbβ3、αvβ3、α4β7、α5β1、α6β4、α7β7、αllβ3、α5β5、αvβ5）、干擾素γ誘導蛋白質、ITGA2、ITGB2、KIR2D、Kapa Ig、LCK、Le、Legumain、Lewis-Y抗原、LFA-1（淋巴細胞功能相關抗原1、CD11a）、 LHRH、LINGO-1、脂磷壁酸、LIV1A、LMP2、LTA、MAD-CT-1、MAD-CT-2、MAGE-1、MAGE-2、MAGE-3、MAGE A1、MAGE A3、MAGE 4、MART1、MCP-1、MIF（巨噬細胞遷移抑制因數、或糖基抑制因數（GIF））、MS4A1（跨膜4結構域亞家族A成員1）、MSLN （間皮素）、MUC1（粘蛋白1、細胞表面相關（MUC1）或多態性上皮粘蛋白（PEM））、 MUC1-KLH、MUC16 （CA125）、 MCP1（單核細胞趨化蛋白1）、MelanA/MART1、ML-IAP、MPG、MS4A1（跨膜4域亞家族A）、 MYCN、髓磷脂相關糖蛋白、Myostatin、NA17、NARP-1、NCA-90（粒細胞抗原）、Nectin-4 （ASG-22ME）、NGF、神經細胞凋亡調控蛋白酶1、NOGO-A、Notch受體、核仁素、Neu致癌基因產物、NY-BR-1、 NY-ESO-1、OX-40、OxLDL（氧化低密度脂蛋白）、OY-TES1、P21、p53非突變體、P97、Page4、PAP、抗（N-羥乙醯神經氨酸）抗體結合部位、PAX3、PAX5、PCSK9、PDCD1（PD-1、程式性細胞死亡蛋白1）、PDGF-Rα （α血小板源生長因數受體）、PDGFR-β、PDL-1、PLAC1、類PLAP睾丸鹼性磷酸酶、血小板衍生生長因數受體β、磷酸鈉聯合轉運體、PMEL 17、聚唾液酸、蛋白酶3 （PR1）、前列腺癌、PS（磷脂醯絲氨酸）、前列腺癌細胞、銅綠假單胞菌、PSMA、PSA、PSCA、狂犬病病毒糖蛋白、RHD（Rh多肽1（RhPI））、Rhesus因數、RANKL、RhoC、Ras突變、RGS5、ROBO4、呼吸道合胞病毒、RON、ROR1、肉瘤易位中斷點、SART3、Sclerostin、SLAMF7（SLAM成員7）、Selectin P、SDC1（多配位體蛋白聚糖1）、系統性紅斑狼瘡（a）、生長調節素C、SIP（1-磷酸鞘氨醇）、生長激素抑制素、精子蛋白17、SSX2、STEAP1（6-跨膜上皮前列腺抗原1）、STEAP2、STn、TAG-72（腫瘤相關糖蛋白72）、存活素、T細胞受體、T細胞跨膜蛋白、TEM1（腫瘤血管內皮標記1）、TENB2、Tenascin C（TN-C）、TGF-α、TGF-β（轉化生長因數β）、TGF-β1、TGF-β2（轉化生長因數2）、Tie（CD202b）、Tie2、TIM-1（CDX-014）、Tn、TNF、TNF-α、TNFRSF8、TNFRSF10B（腫瘤壞死因數受體超家族成員10 B）、TNFRSF13B（腫瘤壞死因數受體超家族成員13B）、TPBG（滋養細胞糖蛋白）、TRAIL-R1（TNF相關壞死誘導配位體受體1）、TRAILR2（死亡受體5 （DR5））、腫瘤相關的鈣信號傳感子2、腫瘤特異的糖基化MUC1、TWEAK受體、TYRP1（糖蛋白75）、TRP-1 （Trop1）、TRP-2 （Trop2）、酪氨酸酶、VCAM-1、 VEGF、VEGF-A、VEGF-2、 VEGFR-1、VEGFR-2、vimentin、WT1、XAGE 1、表達胰島素生長因數受體的細胞，或表達表皮生長因數受體的細胞。
  16. 如請求項15之喜樹鹼類似物的偶聯物，其中該腫瘤細胞選自由下列組成之群組細胞：淋巴瘤細胞、骨髓瘤細胞、腎細胞、乳腺癌細胞、前列腺癌細胞、卵巢癌細胞、結直腸癌細胞、胃癌細胞、鱗狀癌細胞、小細胞肺癌細胞、非小細胞肺癌細胞、睾丸癌細胞、惡性細胞或任何不受控制地加速生長和分裂而引起癌症的細胞。
  17. 一種醫藥組合物，其包含治療有效量的請求項 1、 2、 3、 4、 5、 10或 12中任一項的喜樹鹼類似物的偶聯物，以及藥學上可接受的鹽、載劑、稀釋劑或輔料，或其偶聯物的組合，用於治療或預防癌症，自身免疫性疾病或傳染性疾病。
  18. 如請求項 1、 2、 3、 4或 5之喜樹鹼類似物的偶聯物，其具有體外、體內或離體細胞殺傷活性。
  19. 如請求項 17之醫藥組合物，其特徵在於其與化學治療劑、放射療法、免疫治療劑、自身免疫失調劑、抗感染劑或其他偶聯物同時投予，以協同治療或預防癌症、自身免疫性疾病或傳染性疾病。
  20. 如請求項 19之醫藥組合物，其中該化學治療劑選自由下列組成之群組任何一種或多種： 1）a）烷基化劑：選自由下列組成之群組氮芥：氯苯那普、氯普那嗪、環磷醯胺、達喀爾巴嗪、雌二醇氮芥、異環磷醯胺、氮芥、鹽酸二甲氧胺、氧化二氮芥、鹽酸氨氯地平、麥考酚酸、衛矛醇、呱泊溴烷、新氮芥、苯芥膽甾醇、松龍苯芥、噻替呱、曲磷胺對、尿嘧啶；CC-1065和阿多來新、卡折來新、比折來新及其合成類似物）；多卡黴素及其合成類似物、KW-2189、CBI-TMI或CBI二聚體 ；苯并二氮卓二聚體或吡咯苯并二氮卓二聚體（PBD）、托美黴素二聚體、吲哚苯并二氮卓二聚體、咪唑苯并噻二氮卓二聚體或噁唑烷苯并二氮卓的二聚體；亞硝基脲：包括卡莫司汀、洛莫司汀、氯化梭菌素、福莫司汀、尼莫司汀、拉莫司汀；烷基磺酸鹽：包括白蘇芬、樹蘇芬、磺胺異丙磺胺和皮蘇芬；三氮烯或達喀爾巴嗪；含鉑化合物包括卡鉑、順鉑、奧沙利鉑 ；吖丙啶類、如苯并二氫吡喃酮、卡洛酮、美妥替派和烏雷多巴；乙烯亞胺和甲基三聚氰胺、包括六甲蜜胺、三亞乙基三胺、三乙基磷醯胺、三亞乙基硫代磷醯胺和三羥甲基甲基胺； b）植物生物鹼選自由下列組成之群組長春花生物鹼： 包括長春新鹼、長春鹼、長春地辛、長春瑞濱、去甲長春鹼；紫杉醇類：紫杉醇、多西紫杉醇及其類似物；美登素類包括DM1、DM2、DM3、DM4、DM5、 DM6、 DM7、美登素、安沙黴素及其類似物；cryptophycin（包括cryptophycin 1和cryptophycin 8）；埃博黴素、軟珊瑚醇、迪莫利德、草苔蟲內酯、海兔毒素、澳瑞他汀、cephalostatin；pancratistatin；sarcodictyin；海綿抑制素； c）DNA拓撲異構酶抑制劑：選自由下列組成之群組依託泊苷替尼：包括9-胺基喜樹鹼、喜樹鹼、克立那托、朵拉黴素、依託泊苷、磷酸依託泊苷、伊立替康、米托蒽醌、諾消靈、視黃酸（視黃醇）、替尼泊苷、拓撲替康、9-硝基喜樹鹼或RFS 2000；絲裂黴素及其衍生物； d）抗代謝物、選自由下列組成之群組[抗葉酸劑：（DHFR抑制劑（甲氨蝶呤、曲麥克特、二甲葉酸、蝶羅呤、氨喋呤（4-胺基苯甲酸）或其他葉酸類似物）； IMP脫氫酶抑制劑 ：（包括麥考酚酸、噻唑呋林、利巴韋林、EICAR）；核糖核苷酸還原酶抑制劑（包括羥基脲、去鐵胺）]；[嘧啶類似物：尿嘧啶類似物（包括安西他濱、阿紮胞苷、6-氮尿嘧啶、卡培他濱（希羅達）、卡莫氟、阿糖胞苷、雙去氧尿苷、去氧氟尿苷、依諾他濱、5-氟尿嘧啶、氟尿苷、ratitrexed； 胞嘧啶類似物（包括阿糖胞苷、胞嘧啶阿拉第一糖苷、氟達拉濱）；嘌呤類似物（包括硫唑嘌呤、氟達拉濱、巰嘌呤、硫胺素、硫鳥嘌呤）]；葉酸補充劑、弗洛林酸； e）激素療法劑：選自由下列組成之群組受體拮抗劑[抗雌激素（甲地孕酮、雷洛昔芬、他莫昔芬）；LHRH興奮劑（包括戈斯他林、醋酸亮丙瑞林）；抗雄激素藥（包括比卡魯胺、氟他胺、卡魯司酮、丙酸倍他雄酮、表雄甾醇、戈舍瑞林、亮丙瑞林、美替利定、尼魯米特、睾內酯、曲洛司坦及其他雄激素抑制劑）]；維甲類化合物[維生素D3類似物（包括CB1093、EB1089、KH1060、膽鈣化醇、麥角鈣化甾醇）；光動力療法劑（包括維替泊芬、酞菁、光敏劑Pc4、去甲氧基-竹紅菌素A）；細胞因數 （包括干擾素-α、干擾素-γ、腫瘤壞死因數（TNF）、含TNF的人蛋白）]； f）激酶抑制劑包括BIBW 2992（抗-EGFR/Erb2）、伊馬替尼、吉非替尼、呱加他尼、索拉非尼、達沙替尼、舒尼替尼、厄洛替尼、尼洛替尼、拉帕替尼、阿西替尼、帕唑帕尼、凡德他尼、E7080（抗VEGFR2）、mubritinib、普納替尼  、bafetini 、bosutinib、卡博替尼、維莫德吉、iniparib、盧梭利替尼、CYT387、阿西替尼、tivozanib、索拉非尼、貝伐單抗、西妥昔單抗、 曲妥珠單抗、雷珠單抗、帕尼單抗、伊斯平斯； g）聚（ADP-核糖）聚合酶（PARP）抑制劑、如奧拉帕裡、尼拉帕裡、依尼帕裡、塔拉佐帕裡、維利帕裡、維利帕裡、CEP 9722（Cephalon）、E7016（Eisai）、BGB-290（Beigene）、或3-胺基苯甲醯醯胺； h）抗生素、選自由下列組成之群組烯二炔類抗生素（選自由下列組成之群組卡奇黴素、特別是卡奇黴素γ1、δ1、α1或β1、達因黴素、包括達因黴素A和去氧米黴素、埃斯培拉黴素、卡塔爾黴素、C-1027、maduropeptin、或新卡嗪奧斯丁和相關色蛋白烯二炔抗生素）、aclacinomysins、放線菌素、安麯黴素、重氮絲氨酸、 博來黴素、卡諾黴素、卡拉黴素、洋紅黴素、嗜癌素、色黴素、達金黴素、柔紅黴素、去柔紅黴素、6-重氮-5-側氧基-L-去甲亮氨酸、阿黴素、嗎啉-阿黴素、氰基嗎啉-阿黴素、2-吡咯啉阿黴素和去氧柔紅黴素、表柔比星、阿柔比星、伊達比星、馬可黴素、nitomycin、黴酚酸、諾加黴素、橄欖黴素、peplomycin、potfiromycin、嘌呤黴素、奎拉黴素、羅道黴素、鏈黑黴素、鏈脲黴素、殺結核菌素、烏苯美司、淨司他丁、佐柔比星； i）聚酮化合物（番荔素）、bullatacin和bullatacinone；吉西他濱、環氧酶素、卡菲偌米布、硼替佐米、沙利度胺、來那度胺、pomalidomide、tosedostat、zybrestat、PLX4032、STA-9090、Stimuvax、allovectin-7、Xegeva、Provenge、Yervoy、異戊二烯化抑制劑和洛伐他汀、多巴胺能神經毒素和1-甲基-4-苯基吡啶鎓離子、細胞週期抑制劑（包括星形孢菌素）、放線菌素（包括放線菌素D、更生黴素）、鵝膏毒素、博萊黴素（包括博來黴素A2、博萊黴素B2、培洛黴素）、蒽環類抗生素（包括柔紅黴素 、多柔比星（阿黴素）、伊達比星、表柔比星、吡柔比星、佐柔比星、米托蒽醌、MDR抑制劑（如維拉帕米）、Ca 2 +ATP酶抑制劑或毒胡蘿蔔素、組蛋白去乙醯酶抑制劑（包括伏立諾他、羅米地辛、帕比司他、丙戊酸、Mocetinostat（MGCD0103）、 Belinostat、PCI-24781、恩替諾特、SB939、Resminostat、Givinostat、AR-42、CUDC-101、蘿蔔硫素、曲古抑菌素A）；塞來昔布、格列酮類、表沒食子兒茶素沒食子酸酯、雙硫侖、Salinosporamide A；抗腎上腺藥物、如氨魯米特、米托坦、曲洛司坦、醋葡醛內酯、醛磷醯胺、胺基乙醯丙酸、安吖啶、阿拉第一糖苷、bestrabucil、比生群、edatraxate、defofamine、美可辛、地吖醌、依氟鳥氨酸（DFMO）、elfomithine、依利醋銨、依託格魯、硝酸鎵、胞嘧啶、羥基脲、伊班膦酸鹽、香菇多糖、氯尼達明、米托胍腙、米托蒽醌、莫呱達醇、二胺硝吖啶、噴司他丁、蛋氨氮芥、吡柔比星、鬼臼酸、2-乙肼、甲基苄肼；PSK ®；呱嗪二酮丙烷；根黴素；西佐；螺環鍺；細格孢氮雜酸；三亞胺醌；三氯三乙胺；單端孢黴烯（包括T-2毒素、疣孢菌素A、杆孢菌素A和anguidine）、聚氨酯、siRNA、反義藥物； 2）自身免疫疾病藥物：環孢菌素、環孢菌素A、胺基己酸、硫唑嘌呤、溴隱亭、苯丁酸氮芥、氯喹、環磷醯胺、皮質類固醇（包括安西奈德、倍他米松、布地奈德、氫化可的松、氟尼縮松、丙酸氟替卡松、氟可龍達那唑、地塞米松、曲安奈德、二丙酸倍氯米松）、DHEA、依那西普、羥基氯喹、英夫利昔單抗、美洛昔康、甲氨蝶呤、麥考酚酸酯、潑尼松、西羅莫司、他克莫司； 3） 抗傳染病劑包括： a）胺基糖苷類：丁胺卡那黴素、武夷黴素、慶大黴素（奈替米星、西索米星、異帕米星）、潮黴素、卡那黴素（丁胺卡那黴素、阿貝卡星、胺基去氧卡那黴素、地貝卡星、妥布黴素）、新黴素（新黴素 B、巴龍黴素、核糖黴素）、奈替米星、大觀黴素、鏈黴素、妥布黴素、甲基姿蘇黴素； b）醯胺醇類：疊氮氯黴素、氯黴素、氟甲碸黴素、甲碸黴素； c）安沙黴素類：格爾德黴素、除莠黴素； d）碳青黴烯類：比阿培南、多尼培南、厄他培南、亞胺培南/西司他丁、美羅培南、帕尼培南； e）頭孢類：碳頭孢烯（氯碳頭孢）、頭孢乙腈、頭孢克洛、頭孢拉定、頭孢羥氨苄、頭孢羅寧、頭孢噻啶、頭孢噻吩或頭孢菌素、頭孢氨苄、頭孢來星、頭孢孟多、頭孢匹林、頭孢三嗪、頭孢氮氟、頭孢西酮、頭孢唑啉、頭孢拉宗、頭孢卡品、頭孢達肟、頭孢吡肟、頭孢米諾、頭孢西丁、頭孢丙烯、頭孢沙定、頭孢替唑、頭孢呋辛、頭孢克肟、頭孢地尼頭孢妥侖、頭孢吡肟、頭孢他美、頭孢甲肟、頭孢地嗪、頭孢尼西、頭孢呱酮、頭孢雷特、頭孢噻肟、頭孢替安、頭孢唑蘭、頭孢氨苄、頭孢咪唑、頭孢匹胺、頭孢匹羅、頭孢泊肟、頭孢丙烯、頭孢喹肟、頭孢磺啶、頭孢他啶、頭孢特侖、頭孢布烯、頭孢噻林、頭孢唑肟、頭孢、頭孢曲松、頭孢呋辛、頭孢唑喃、頭黴素（包括頭孢西丁、頭孢替坦、頭孢美唑）氧頭孢烯（氟氧頭孢、拉氧頭孢）； f）糖肽：博來黴素、萬古黴素（包括奧利萬星、特拉萬星）、替考拉甯（達巴萬星）、雷莫拉寧； g）甘氨醯：替加環素； h）β-內醯胺酶抑制劑：青黴烷（舒巴坦、他唑巴坦）、克拉維烷（克拉維酸）； i）林可醯胺類：克林黴素、林可黴素； j）脂肽：達托黴素、A54145、鈣依賴性抗生素（CDA）； k）大環內酯類：阿奇黴素、喹紅黴素、克拉黴素、地紅黴素、紅黴素、氟紅黴素、交沙黴素、酮內酯類（泰利黴素、喹紅黴素）麥迪黴素、美奧卡黴素、竹桃黴素、利福黴素（利福平、利福平、利福布汀、利福噴丁）、羅他黴素、羅紅黴素、壯觀黴素、螺旋黴素、他克莫司（FK506）、醋竹桃黴素、泰利黴素； l）單環β-內醯胺抗生素： 氨曲南、 替吉莫南； m）唑烷酮類：利奈唑胺； n）青黴素類：阿莫西林、氨苄西林（匹氨西林、海他西林、巴氨西林、美坦西林、酞氨西林）疊氮西林、阿洛西林、青黴素、苄星青黴素、苯氧基苄星青黴素、氯甲西林、普魯卡因青黴素、羧苄青黴素（卡茚西林）、鄰氯青黴素、雙氯青黴素、先鋒黴素、氟氯西林、美西林（氮卓脒青黴素雙酯）、美洛西林、甲氧西林、萘夫西林、苯唑西林、醋甲西林、青黴素、奈西林、青黴素、呱拉西林、苯丙西林、磺苄西林、替莫西林、替凱西林； o）多肽：桿菌肽、多粘菌素E、多粘菌素B； p）喹諾酮類藥物：阿拉沙星、巴羅沙星、環丙沙星、克林沙星、達氟沙星、二氟沙星、依諾沙星、恩諾沙星、Floxin、加雷沙星、加替沙星、吉米沙星、格帕沙星、曲伐沙星卡諾、左氧氟沙星、洛美沙星、麻保沙星、莫西沙星、那氟沙星、諾氟沙星、奧比沙星、氧氟沙星、培氟沙星、曲伐沙星、格帕沙星、西他沙星、司帕沙星、替馬沙星、妥舒沙星、曲伐沙星； q）菌素：普那黴素、奎奴普丁/達福普汀； r）磺胺類藥物：磺胺米隆、百浪多息、磺胺醋醯、磺胺甲、磺胺、柳氮磺胺吡啶、磺胺異噁唑、甲氧苄氨嘧啶、甲氧苄啶 - 磺胺甲基異噁唑（複方新諾明）； s）類固醇抗菌藥物：選自由下列組成之群組夫西地酸； t）四環素類：強力黴素、金黴素、氯羥四環素、地美環素、賴甲環素、氯甲烯土黴素、美他環素、米諾環素、土黴素、青呱四環素、羅利環素、四環素、甘氨醯（包括替加環素）； u）其他類型的抗生素選自由下列組成之群組番荔枝科、胂凡納明、細菌萜醇抑制劑（桿菌肽）、DADAL / AR抑制劑（環絲氨酸）、dictyostatin、海綿內酯、艾榴塞洛素、埃博黴素、乙胺丁醇、依託泊苷、法羅培南、夫西地酸、痢特靈、異煙肼、laulimalide、甲硝唑、莫匹羅星、mycolactones、NAM合成抑制劑（如磷黴素）、呋喃妥因、紫杉醇、平板黴素、吡嗪醯胺、奎奴普丁/達福普汀、利福平、他唑巴坦替硝唑、番荔枝內酯； 4） 抗病毒的藥物： a）進入/融合抑制劑：aplaviroc、馬拉韋羅、維立韋羅、gp41的（恩夫韋）、PRO140、CD4（Ibalizumab）； b）整合酶抑制劑：拉替拉韋、埃替拉韋、globoidnan A； c）成熟抑制劑：貝韋立馬、vivecon； d）神經氨酸酶抑制劑：奧司他韋、紮那米韋、帕拉米韋； e） 核苷和核苷酸：阿巴卡韋、阿昔洛韋、阿德福韋、氨多索韋、apricitabine、溴夫定、西多福韋克拉夫定、右艾夫他濱、去羥肌苷（DDI）、艾夫他濱、恩曲他濱（FTC）、恩替卡韋、泛昔洛韋、氟脲嘧啶（5-FU）、3'-氟取代的2'，3'-二去氧核苷衍生物（例如，3'-氟-2'，3'-二去氧胸苷（FLT）和3'-氟-2'，3'-雙去氧（FLG）福米韋生、更昔洛韋、碘苷、拉米夫定（3TC）、L-核苷（包括β-L-胸苷、β-L-2'-去氧胞苷）、噴昔洛韋、Racivir、利巴韋林、stampidine、司他夫定（d4T的）、他利韋林（偉拉咪定）、替比夫定、替諾福韋、伐昔洛韋三氟胸苷、纈更昔洛韋、紮西他濱（DDC）、齊多夫定（AZT）； f）非核苷類：金剛烷胺、ateviridine、卡普韋林、 二芳基嘧啶 （依曲韋林、利匹韋林）、地拉韋啶、二十二烷醇、乙米韋林、依法韋侖、膦甲酸（磷醯基甲酸）、咪喹莫特、干擾素α、洛韋胺、洛德腺苷、他巴唑、奈韋拉平、NOV-205、聚乙二醇干擾素α、鬼臼毒素、利福平、金剛乙胺、瑞喹莫德（R-848）、醋胺金剛烷； g）蛋白酶抑制劑：安普那韋、阿紮那韋、博賽潑維、達蘆那韋、福沙那韋、茚地那韋、洛匹那韋、奈非那韋、pleconaril、利托那韋、沙奎那韋、特拉匹韋（VX-950）替拉那韋； h）其他類型的抗病毒的藥物：抗體酶、阿比朵爾、calanolides A、淺藍菌素、藍藻-N、二芳基嘧啶、表沒食子兒茶素沒食子酸酯（EGCG）、膦甲酸鈉、格瑞弗森、他利韋林（偉拉咪定）、羥基脲、KP-1461、米替福新、普來可那立、合成抑制劑、利巴韋林、seliciclib； （5）或其藥學上可接受的鹽，水合物或水合鹽； 或此等化合物的多晶結構； 或它們的異構體，旋光異構體，外消旋體，非鏡像異構物或鏡像異構物。
  21. 如請求項19之醫藥組合物，其中該協同劑選自由下列組成之群組下列藥物中的一種或幾種：阿巴西普、醋酸阿比特龍、對乙醯胺基酚/氫可酮、阿達木單抗、ADXS31-142、ADXS-HER2、阿法替尼馬來酸鹽、阿侖單抗、曲妥珠單抗、苯丙胺/右苯丙胺、阿那曲唑、阿紮那韋、Atezolizumab、阿托伐他汀、阿昔替尼、貝林、BCG Live、貝伐單抗、卡巴他賽、卡博替、貝沙羅汀、blinatumomab、硼替佐米、波舒替尼、brentuximab vedotin、布地奈德、布地奈德/福莫特羅、丁丙諾啡、卡培他濱、卡非佐米、塞來考昔、ceritinib、西妥昔單抗、環孢素、西那卡塞、克裡唑替尼、達比加群、達拉菲尼、阿法達貝汀、地瑞那韋、甲磺酸伊馬替尼、達沙替尼、地尼白介素、狄諾塞麥、雙丙戊酸鈉、右蘭索拉唑、右呱甲酯、Dinutuximab、多西環素、度洛西汀、恩曲他濱/利匹韋林/替諾福韋地索蒲賽富馬酸鹽、恩曲他濱/替諾福韋/依法韋侖、依諾肝素、恩雜魯胺、阿法依泊汀、厄洛替尼、埃索美拉唑、依折麥布、依折麥布/辛伐他汀、非諾貝特、非格司亭、芬戈莫德、丙酸氟替卡松、氟替卡松/沙美特羅、氟維司群、吉非替尼、格拉替雷、醋酸戈舍瑞林、伊馬替尼、替伊莫單抗、依魯替尼、胰島素門冬胰島素、地特胰島素、甘精胰島素、賴脯胰島素、干擾素β1a、干擾素β1b、拉帕替尼、Ipilimumab、異丙托溴銨/沙丁胺醇、醋酸蘭樂肽、來那度胺、聯合二甲苯磺酸鹽、來曲唑、左甲狀腺素、左旋甲狀腺素、利多卡因、利奈唑胺、利拉魯肽、 MEDI4736、美金剛、呱醋甲酯、美托洛爾、莫達非尼、莫米松、尼祿替尼、Nivolumab、奧法木單抗、奧立他珠單抗、帕唑帕尼、派姆單抗、培美曲塞、帕妥珠單抗、肺炎球菌結合疫苗、泊馬度胺、普瑞巴林、喹硫平、雷貝拉唑氯化鐳223、雷洛昔芬、拉替拉韋、雷莫瑞單抗、雷珠單抗、瑞格菲尼、利妥昔單抗、利伐沙班、羅米地辛、羅蘇伐他汀、盧梭替尼磷酸鹽、沙丁胺醇、司維拉明、西地那非、siltuximab、西他列汀、西他列汀/二甲雙胍、索非那新、索拉非尼、舒尼替尼、他達拉非、他莫昔芬、替拉普韋、替西羅莫司、替諾福韋/恩曲他濱、睾酮凝膠、沙利度胺（Talidex）、噻托溴銨、托瑞米芬、曲美替尼、曲妥珠單抗、Tretinoin、尤特克單抗、纈沙坦、凡德他尼、維羅非尼、伏立諾他、阿柏西普、Zostavax及其類似物、衍生物、藥學上可接受的鹽、載劑、稀釋劑或輔料或上述的組合。
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