KR20230034957A - 캄프토테신 유사체를 갖는 세포-결합 분자의 접합체 - Google Patents

캄프토테신 유사체를 갖는 세포-결합 분자의 접합체 Download PDF

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큉리앙 양
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위엔위엔 황
이팡 수
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시앙페이 콩
웬쥔 리
루 바이
시앙 카이
시우젠 장
진시앙 지아
지시앙 궈
샹마 황
샤오쉬 왕
준 정
용 두
옌화 리
윤시아 정
첸 린
샤오샤오 첸
웨이 정
신옌 지앙
닝니 장
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미아오미아오 첸
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Abstract

본 발명은 하기 화학식 (I)의 세포-결합 분자를 갖는 캄프토테신 유사체의 접합체에 관한 것으로서, R1, R2, R3, R4, R5, X, L, n, m, T 및
Figure pct00478
가 본 명세서에서 정의된다. 그것은 또한 세포 결합제에 대한 캄프토테신 유사체의 접합체를 제조하는 방법, 및 암, 감염 및 면역 장애의 표적 치료에 상기 접합체를 사용하는 방법을 제공한다.
Figure pct00479

Description

캄프토테신 유사체를 갖는 세포-결합 분자의 접합체
본 발명은 표적 치료를 위한 세포 표면 수용체 결합 분자를 갖는 캄프토테신 유사체의 접합체에 관한 것이다. 본 발명은 또한 암, 자가면역 질환 및 감염성 질환의 표적 치료를 위한 세포-결합 분자에 대한 캄프토테신 유사체의 접합체를 포함하는 조성물의 용도에 관한 것이다.
표적 암 전략은 종양을 더 잘 표적화하고 건강한 조직을 피함으로써 부작용을 최소화하거나 극복하는 것을 목표로 한다. 전략 중 하나는 조건부로 안정적인 링커를 통해 종양에 대한 항체의 정밀도와 해당 약물(페이로드)의 강력한 세포독성을 결합하고, 이에 의해 건강 조직보다 몇 배로 종양의 국소 농도를 증가시키는 항체-약물 접합체(ADC)이다. 지난 40년 동안 ADC에 대한 집중적인 연구 및 제약 산업의 막대한 자금 지원을 통해, 미로타르그(Mylotarg)(gemtuzumab ozogamicin), 애드세트리스(Adcetris)(brentuximab vedotin), 카드실라(Kadcyla)(ado-trastuzumab emtansine), 베스폰사(Besponsa)(inotuzumab ozogamicin), 폴리비(Polivy)(polatuzumab vedotin-piiq), 엔헤르투(Enhertu)(fam-trastuzumab deruxtecan-nxki), 파드세브(Padcev)(enfortumab vedotin-ejfv), 트로델비(Trodelvy)(sacituzumab govitecan)로 명명된 8개의 ADC에 대해 미국 FDA 승인을 얻었고, 현재 100개 이상의 ADC 약물이 현재 임상 개발 중이다(Chau, C.H. et al, Lancet. 2019, 394, 793-804).
ADC 복합체 양태(modality)에서 페이로드-링커 성분은 ADC 균질성, 순환 안정성, 약동학적 프로파일, 내약성 및 전반적인 치료 효능에 결정적으로 기여하는 것으로 알려져 있다(Zhao, R. Y. et al (2011) J. Med. Chem. 54, 3606; Acchionea, M. et al (2012) mAbs, 4, 362; Doronina, S. et al, (2006) Bioconjug Chem, 17, 114; Hamann, P. et al. (2005) Bioconjug Chem. 16, 346). 차세대 ADC에 대한 이러한 매개변수를 개선하기 위한 광범위한 연구에도 불구하고, 현재까지 사용되는 대부분의 페이로드는 여전히 메이탄신(DM1 및 DM4), 아우루이스타틴(MMAE 및 MMAF), 칼리케아미신, 피롤로[2,1-c][1,4]벤조디아제핀(PBD) 이량체, 캄프토테신, 두오카르마이신 및 튜불리신으로부터 매우 좁은 범위으로부터 선택된다(Leung, D., et al, Antibodies (Basel). 2020, 9: E2. doi: 10.3390/antib9010002; Khongorzul, P., et al, Mol Cancer Res. 2020, 18: 3-19. doi: 10.1158/1541-7786.MCR-19-0582; Chau, C.H., et al, Lancet. 2019, 394:793-804. doi: 10.1016/S0140-6736(19)31774-X).
이러한 페이로드 중에서, 캄프토테신(CPT)은 ADC 구성을 위한 다른 많은 페이로드보다 더 넓은 치료 인덱스(TI)를 갖는 유망한 선택임이 입증되어 왔는데, 이는 ADC 화합물 중 2개, 즉 엔헤르투(Enhertu)(fam-trastuzumab deruxtecan-nxki, 또는 DS-8201a) 및 사시투주맙 고비테칸(IMMU-132 또는 hRS7-SN-38)이 많은 임상 시험에서 고형 종양에 대해 상당한 임상 이점(PFS 및 OS)을 증명했기 때문이다(Ponde, N., et al, Curr Treat Options Oncol. 2019 Apr 1;20(5):37. doi: 10.1007/s11864-019-0633-6; Kaplon, H., et al, MAbs. 2020, 12(1): 1703531, 10.1080/19420862.2019.1703531). 캄프토테신(CPT)은 수백 년 동안 중국 전통 의학에서 광범위하게 사용되어 온 중국 자생 나무인 캄프토테카 아쿠미네이트(Camptotheca acuminata)의 추출물에서 1958년에 분리된 강력한 항종양 항생제이다. 캄프토테신은 DNA 효소 토포이소머라제 I과 상호 작용한 다음, 가역적 효소-캄프토테신-DNA 삼원 복합체를 축적하여, 세포 사멸을 일으킬 수 있다(Wu Du, Tetrahedron 59 (2003) 8649-8687). 많은 캄프토테신 유사체가 지난 50년 동안 공개되어 왔는데, 이는 아래에 도시되어 있다.
Figure pct00001
Figure pct00002
Figure pct00003
Figure pct00004
Figure pct00005
Figure pct00006
캄프토테신(CPT) 및 그 유사체의 대부분은 1970년대 이후의 예비 임상 시험에서 생리학적 완충액에 극도로 불용성이며 높은 약물 부작용 반응을 보인다. 캄프토테신 ADC는 ADC 접합체 응집(aggregation)을 최대 80%까지 유발하는데(Burke, P., et al Bioconjugate Chem. 2009, 20, 6, 1242-1250), 이는 응집으로 인한 전신 부작용 때문에, 대규모 제조 생산의 성공과 임상 시험의 달성을 제한할 수 있다. 지금까지, 미국 FDA는 암 화학 요법에 사용되는 3개의 수용성 CPT 유사체인 토포테칸, 이리노테칸 및 벨로테칸(Palakurthi, S., Expert Opin Drug Deliv. 2015;12(12):1911-21; Shang, X. F. et al, Med Res Rev. 2018, 38(3):775-828), 및 Her2 고형 종양에 대한 표적화된 면역 치료 요법으로서 1개의 수용성 CPT 유사체 ADC인 엔헤르투(Enhertu)(fam-trastuzumab deruxtecan-nxki, 또는 DS-8201a)(Modi S, et al, N Engl J Med. 2020, 382(7): 610-621. doi: 10.1056/NEJMoa1914510; Keam, S. J., Drugs. 2020 Apr;80(5):501-508. doi: 10.1007/s40265-020-01281-4)만을 승인했다. 본 출원인은 꽤 오랫동안 수용성 CPT 유사체 ADC에 대해 연구해 왔으며, ADC의 치료 창을 넓히기 위해 CPT 유사체 ADC에 친수성 측쇄 링커를 적용했 왔다(PCT/CN2019/092614 참조). 본 출원서는 수용성 CPT 유사체 ADC를 개시하는데, 여기서 O 또는 NH에 연결된 CPT 유사체의 C-10 위치는 수용성(water solubility)에 중요하고, 전자 구인성 기(electron withdrawing group) 또는 벌킹 기(bulking group)에 연결된 C-11 위치는 자연 CPT와 비교하여 강력한 세포 독성을 유지하는데 중요하다.
본 발명은 세포-결합 분자에 대한 캄프토테신 유사체 접합체, 캄프토테신 유사체-링커 화합물 및 캄프토테신 유사체 화합물, 이들의 제조 및 사용 방법, 및 이들의 제조에 유용한 중간체를 제공한다. 본 발명의 캄프토테신 유사체 접합체는 수용성이고 혈액 순환에서 안정할 뿐만 아니라, 캄프토테신 유사체-링커 화합물의 대사산물 또는 유리 캄프토테신 유사체 화합물이 병든 세포 근처 또는 내에서 접합체로부터 방출되면, 세포 사멸을 유발할 수 있다.
본 발명의 일 예시적인 실시예는 하기 화학식 (I)을 갖는 세포 표면 결합 분자-캄프토테신 유사체 접합체를 제공한다:
Figure pct00007
또는 그 제약상 허용되는 염, 수화물 또는 수화된 염; 또는 이들 화합물의 다형 결정 구조; 또는 그 동위원소, 광학 이성질체, 라세미체, 부분입체 이성질체 또는 거울상 이성질체;
여기서, T는 표적화 또는 결합 리간드이고; L은 방출 가능한 링커이고;
Figure pct00008
는 L이 독립적으로 브래킷 내부에서 R1, R2, R3 또는 R5의 원자에 독립적으로 연결되는 링키지 결합(linkage bond)이고; n은 1 내지 30이고 m은 1 내지 10이고;
브래킷 내부에는 강력한 암프토테신 유사체가 존재하고;
R1 및 R2는 독립적으로, H; 선형 또는 분지형 C1-C6의 알킬, 알킬 알코올, 알킬 아민(1차, 2차, 3차 아민 또는 4차 암모늄 포함), 아미노알킬, 옥실알킬, 아미노알킬아미노, 옥실알킬아미노, 아미노알킬옥실, 옥실알킬옥실, 알킬 카르복실산; C2-C6의 헤테로알킬, 알킬사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬, 헤테로사이클릭, 아미노사이클로알킬, 헤테로알킬사이클로알킬, 알킬카르보닐, 알킬 에테르, 알킬 에스테르, 알킬 아미드, 옥실알킬아미드, 아미노알킬아미드, 옥심; NH2, 또는 OH이고;
R3은 독립적으로, H, C(O)NH, C(O)O, SO2R6, SO3R6 , PR6R6', POR6R6', CH2OP(O)(OR6)2, C(O)OP(O)(OR6)2, PO(OR6)(OR6'), P(O)(OR6)OP(O)(OR6')2, C(O)R6, C(O)NHR6; 선형 또는 분지형 C1-C6의 알킬, 알킬 알코올, 알킬 아민(1차, 2차, 3차 아민 또는 4차 암모늄 포함), 또는 알킬 카르복실산; C2-C6의 헤테로알킬, 알킬사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬, 헤테로사이클릭, 사이클로알킬, 헤테로알킬사이클로알킬, 알킬카르보닐, 알킬 에테르, 알킬 에스테르, 알킬 아미드, 옥심; C5~C12 배당체, NH2, 또는 OH이고;
R4는 할로(F, Cl, Br, 또는 I), CN, NO2, SO3H, OR6, SR6, S(O2)R6, NHR6, N(R6)(R6'), C(O)XR6, N+(R6)(R6')(R6'')이고;
X는 NH 또는 O이고;
R5는 H, C(O)O, C(O)NH, R6C(O); 선형 또는 분지형 C1-C6의 알킬, 알킬 알코올, 알킬 아민(1차, 2차, 3차 아민 또는 4차 암모늄 포함), 알킬 카르복실산; C2-C6의 카보네이트, 카바마이드, 헤테로알킬, 알킬사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬, 헤테로사이클릭, 사이클로알킬, 헤테로알킬사이클로알킬, 알킬카르보닐, 알킬 에테르, 알킬 에스테르, 알킬 아미드 또는 아미노산이고;
R6, R6' 및 R6''은 독립적으로, H; C1-C6의 알킬, 알킬 알코올, 알킬 아민(1차, 2차, 3차 아민 또는 4차 암모늄 포함) 또는 알킬 카르복실산; C2-C6의 헤테로알킬, 알킬사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬, 헤테로사이클릭, 사이클로알킬, 헤테로알킬사이클로알킬, 알킬카르보닐, 알킬 에테르, 알킬 에스테르, 알킬 아미드 또는 아미노산; 또는 제약상 염이고;
또한, R1, R2, R3 및 R6은 독립적으로 부재할 수 있고, R2, R3, X, C-9 및 C-10은 함께 결합하여, 5-원, 6-원 또는 7-원 헤테로사이클릭 고리를 형성할 수 있다.
또 다른 실시예에서, 강력한 캄프토테신 유사체-결합 분자 접합체의 링커 L은 --Ww―(Aa)r--Vv―의 화학식을 갖고: 여기서: --W--는 스트레처 유닛(Stretcher unit)이고; w는 0 또는 1이고; 각각의 --Aa--는 독립적으로 아미노산 유닛이고; r은 독립적으로 0 내지 12 범위의 정수이고; --V--는 스페이서 유닛(Spacer unit)이고; v는 0, 1 또는 2이다. 스트레처 유닛 W는 독립적으로 자가-희생 스페이서, 펩티딜 유닛, 히드라존 결합, 이황화물 또는 티오에테르 결합을 함유할 수 있다.
또 다른 실시예에서, 세포-표면 결합 분자 T는 현재 공지된 임의의 종류일 수 있거나, 또는 공지된 세포-결합 리간드, 예를 들어 펩티드 및 비-펩티드일 수 있다. 일반적으로 세포-결합 분자 T는 항체이고; 단일 사슬 항체; 표적 세포에 결합하는 항체 단편; 단클론성 항체; 단일 사슬 단클론성 항체; 또는 표적 세포에 결합하는 단클론성 항체 단편; 키메라 항체; 표적 세포에 결합하는 키메라 항체 단편; 도메인 항체; 표적 세포에 결합하는 도메인 항체 단편; 항체를 모방하는 애드넥틴; DARPin; 림포카인; 호르몬; 비타민; 성장 인자; 집락 자극 인자; 또는 영양분-수송 분자(트랜스페린); 결합 펩티드, 또는 단백질, 또는 항체, 또는 알부민, 중합체, 덴드리머, 리포솜, 나노입자, 소포(vesicle) 또는 (바이러스성) 캡시드에 부착되거나 코팅되는 작은 친화성 분자이다.
또 다른 측면에서, 화학식 I의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염 또는 용매화물은 인간 또는 동물에서 암, 자가면역 질환 또는 감염성 질환을 치료하는데 사용된다.
도 1은 접합가능한 링커를 함유하는 캄프토테신 유사체의 합성을 보여준다.
도 2는 접합가능한 링커를 함유하는 캄프토테신 유사체의 합성을 보여준다.
도 3은 접합가능한 링커를 함유하는 캄프토테신 유사체의 합성을 보여준다.
도 4는 접합가능한 링커를 함유하는 캄프토테신 유사체의 합성을 보여준다.
도 5는 접합가능한 링커를 함유하는 캄프토테신 유사체의 합성을 보여준다.
도 6은 접합가능한 링커를 함유하는 캄프토테신 유사체의 합성을 보여준다.
도 7은 접합가능한 링커를 함유하는 캄프토테신 유사체의 합성을 보여준다.
도 8은 접합가능한 링커를 함유하는 캄프토테신 유사체의 합성을 보여준다.
도 9는 접합가능한 링커를 함유하는 캄프토테신 유사체의 합성을 보여준다.
도 10은 접합가능한 링커를 함유하는 캄프토테신 유사체의 합성을 보여준다.
도 11은 접합가능한 링커를 함유하는 캄프토테신 유사체의 합성을 보여준다.
도 12는 접합가능한 링커를 함유하는 캄프토테신 유사체의 합성을 보여준다.
도 13은 접합가능한 링커를 함유하는 캄프토테신 유사체의 합성을 보여준다.
도 14는 접합가능한 링커를 함유하는 캄프토테신 유사체의 합성을 보여준다.
도 15는 접합가능한 링커를 함유하는 캄프토테신 유사체의 합성을 보여준다.
도 16은 접합가능한 링커를 함유하는 캄프토테신 유사체의 합성을 보여준다.
도 17은 접합가능한 링커를 함유하는 캄프토테신 유사체의 합성을 보여준다.
도 18은 접합가능한 링커를 함유하는 캄프토테신 유사체의 합성을 보여준다.
도 19는 접합가능한 링커 및 항체에 대한 이의 접합체를 함유하는 캄프토테신 유사체의 합성을 보여준다.
도 20은 접합가능한 링커 및 항체에 대한 이의 접합체를 함유하는 캄프토테신 유사체의 합성을 보여준다.
도 21은 접합가능한 링커를 함유하는 캄프토테신 유사체의 합성을 보여준다.
도 22는 접합가능한 링커 및 항체에 대한 이의 접합체를 함유하는 캄프토테신 유사체의 합성을 보여준다.
도 23은 접합가능한 링커 및 항체에 대한 이의 접합체를 함유하는 캄프토테신 유사체의 합성을 보여준다.
도 24는 접합가능한 링커 및 항체에 대한 이의 접합체를 함유하는 캄프토테신 유사체의 합성을 보여준다.
도 25는 접합가능한 링커 및 항체에 대한 이의 접합체를 함유하는 캄프토테신 유사체의 합성을 보여준다.
도 26은 접합가능한 링커 및 항체에 대한 이의 접합체를 함유하는 캄프토테신 유사체의 합성을 보여준다.
도 27은 접합가능한 링커를 함유하는 캄프토테신 유사체의 합성을 보여준다.
도 28은 캄프토테신 유사체 접합체에 대한 접합가능한 링커의 합성을 보여준다.
도 29-1은 접합가능한 링커를 함유하는 캄프토테신 유사체의 합성을 보여준다.
도 29-2는 접합체에 사용되는 캄프토테신 유사체의 구조를 보여준다.
도 30은 접합가능한 링커를 함유하는 캄프토테신 유사체의 합성을 보여준다.
도 31은 접합가능한 링커를 함유하는 캄프토테신 유사체의 합성을 보여준다.
도 32는 접합가능한 링커를 함유하는 캄프토테신 유사체의 합성을 보여준다.
도 33은 항체-캄프토테신 유사체의 접합체 구조를 보여준다.
도 34는 6 mg/Kg 정맥내 주사 용량의 인간 위 종양 N87 세포 모델을 사용하여, Her2 항체-CPT 유사체 접합체 C1-031, C1-238, C1-397, C1-407, C1-411, C1-414, C1-424, C1-428의 생체내 항종양 효과를 T-DM1과 비교한 것을 보여준다.
도 35는 150 mg/Kg 정맥내 주사 용량에서, T-DM1과 비교한 Her2 항체-CPT 유사체 접합체 C1-031, C1-226, C1-238, C1-397, C1-407, C1-411, C1-414, C1-424, C1-428의 생체내 독성 연구를 보여준다.
도 36은 6 mg/Kg 정맥내 주사 용량의 인간 NSCLC 종양 HCC827 세포 모델을 사용하여, EGFR 항체-CPT 유사체 접합체 C1-031, C1-200, C1-214, C1-226, C1-305, C1-306, C1-311, C1-362, C1-402, C-407 및 C1-419의 생체내 항종양 효과를 보여준다.
정의
"알킬"은 지방족 탄화수소기 또는 탄소 원자로부터의 1개 또는 2개의 수소 원자의 제거에 의해서 알칸으로부터 유래된 1가 기를 지칭한다. 이것은 사슬 내에 C1-C8(1 내지 8개의 탄소 원자)을 갖는 선형 또는 분지형일 수 있다. "분지형"은 메틸, 에틸 또는 프로필과 같은 하나 이상의 저급 C 알킬기가 선형 알킬 사슬에 부착된 것을 의미한다. 예시적인 알킬기는 메틸, 에틸, n-프로필, i-프로필, n-부틸, t-부틸, n-펜틸, 3-펜틸, 옥틸, 노닐, 데실, 사이클로펜틸, 사이클로헥실, 2,2-디메틸부틸, 2,3-디메틸부틸, 2,2-디메틸펜틸, 2,3-디메틸펜틸, 3,3-디메틸펜틸, 2,3,4-트리메틸펜틸, 3-메틸-헥실, 2,2-디메틸헥실, 2,4-디메틸헥실, 2,5-디메틸헥실, 3,5-디메틸헥실, 2,4-디메틸펜틸, 2-메틸헵틸, 3-메틸헵틸, n-헵틸, 이소헵틸, n-옥틸 및 이소옥틸을 포함한다. C1-C8 알킬기는 -C1-C8 알킬, -O-(C1-C8 알킬), -아릴, -C(O)R', -OC(O)R', -C(O)OR', -C(O)NH2, -C(O)NHR', -C(O)N(R')2, -NHC(O)R', -SR', -S(O)2R', -S(O)R', -OH, -할로겐, -N3, -NH2, -NH(R'), -N(R')2 및 -CN을 포함하지만, 이들에 제한되지 않는 하나 이상의 기로 치환되거나 또는 비치환될 수 있고; 여기서 각각의 R'는 -C1-C8 알킬 및 아릴로부터 독립적으로 선택된다.
"할로겐"은 플루오린, 염소, 브로민 또는 요오드 원자; 바람직하게는 플루오린 및 염소 원자를 지칭한다.
"헤테로알킬"은 1 내지 4개의 탄소 원자가 O, S 및 N으로 이루어진 군으로부터의 헤테로원자로 독립적으로 대체된 C2-C8 알킬을 지칭한다.
"카보사이클"은 모노사이클(단환식)로서 3 내지 8개의 탄소 원자 또는 비사이클(이환식)로서 7 내지 13개의 탄소 원자를 갖는 포화 또는 불포화 고리를 지칭한다. 모노사이클릭 카보사이클은 3 내지 6개의 고리 원자, 보다 전형적으로 5 또는 6개의 고리 원자를 갖는다. 비사이클릭 카보사이클은 비사이클 [4,5], [5,5], [5,6] 또는 [6,6] 시스템으로서 배열된 7 내지 12개의 고리 원자, 또는 비사이클 [5,6] 또는 [6,6] 시스템으로서 배열된 9 또는 10개의 고리 원자를 갖는다. 대표적인 C3-C8 카보사이클은 -사이클로프로필, -사이클로부틸, -사이클로펜틸, -사이클로펜타디에닐, -사이클로헥실, -사이클로헥센일, -1,3-사이클로헥사디에닐, -1,4-사이클로헥사디에닐, -사이클로헵틸, -1,3-사이클로헵타디에닐, -1,3,5-사이클로헵타트리에닐, -사이클로옥틸 및 -사이클로옥타디에닐을 포함하지만, 이들에 제한되지 않는다.
"C3-C8 카보사이클"은 3-, 4-, 5-, 6-, 7- 또는 8-원의 포화 또는 불포화 비방향족 카보사이클릭 고리를 지칭한다. C3-C8 카보사이클기는 -C1-C8 알킬, -O-(C1-C8 알킬), -아릴, -C(O)R', -OC(O)R', -C(O)OR', -C(O)NH2, -C(O)NHR', -C(O)N(R')2, -NHC(O)R', -SR', -S(O)R',-S(O)2R', -OH, -할로겐, -N3, -NH2, -NH(R'), -N(R')2 및 -CN을 포함하지만 이들에 제한되지 않는 하나 이상의 기로 치환되거나 또는 비치환될 수 있고; 여기서 각각의 R'는 -C1-C8 알킬 및 아릴로부터 독립적으로 선택된다.
"알케닐"은 사슬 내에 2 내지 8개의 탄소 원자를 갖는 선형 또는 분지형일 수 있는 탄소-탄소 이중 결합을 함유하는 지방족 탄화수소기를 지칭한다. 예시적인 알케닐기는 에테닐, 프로페닐, n-부테닐, i-부테닐, 3-메틸부트-2-에닐, n-펜테닐, 헥실레닐, 헵테닐, 옥테닐을 포함한다.
"알키닐"은 사슬 내에 2 내지 8개의 탄소 원자를 갖는 선형 또는 분지형일 수 있는 탄소-탄소 삼중 결합을 함유하는 지방족 탄화수소기를 지칭한다. 예시적인 알키닐기는 에티닐, 프로핀일, n-부티닐, 2-부티닐, 3-메틸부티닐, 5-펜티닐, n-펜티닐, 헥시닐, 헵테닐 및 옥티닐을 포함한다.
"알킬렌"은 1 내지 18개의 탄소 원자를 갖는 포화, 분지형 또는 직쇄형 또는 사이클릭 탄화수소 라디칼을 지칭하고, 모 알칸의 동일하거나 상이한 2개의 탄소 원자로부터 2개의 수소 원자를 제거함으로써 유래된 2개의 1가 라디칼 중심을 갖는다. 전형적인 알킬렌 라디칼은 메틸렌(-CH2-), 1,2-에틸(-CH2CH2-), 1,3-프로필(-CH2CH2CH2-), 1,4-부틸(-CH2CH2CH2CH2-) 등을 포함하지만, 이들에 제한되지 않는다.
"알케닐렌"은 2 내지 18개의 탄소 원자의 불포화, 분지형 또는 직쇄형 또는 사이클릭 탄화수소 라디칼을 지칭하며, 모 알켄의 동일하거나 상이한 2개의 탄소 원자로부터 2개의 수소 원자를 제거함으로써 유래된 2개의 1가 라디칼 중심을 갖는다. 전형적인 알케닐렌 라디칼은 1,2-에틸렌(-CH=CH-)을 포함하지만, 이들에 제한되지 않는다.
"알키닐렌"은 2 내지 18개의 탄소 원자의 불포화, 분지형 또는 직쇄형 또는 사이클릭 탄화수소 라디칼을 지칭하고, 모 알킨의 동일하거나 상이한 2개의 탄소 원자로부터 2개의 수소 원자를 제거함으로써 유래된 2개의 1가 라디칼 중심을 갖는다. 전형적인 알키닐렌 라디칼은 아세틸렌, 프로파길 및 4-펜티닐을 포함하지만, 이들에 제한되지 않는다.
"아릴" 또는 "Ar"은 3 내지 14개의 탄소 원자, 바람직하게는 6 내지 10개의 탄소 원자를 포함하는, 하나 또는 수 개의 고리로 구성된 방향족 또는 헤테로 방향족기를 지칭한다. "헤테로 방향족기"의 용어는 방향족기 상의 하나 또는 수 개의 탄소를 지칭하고, 바람직하게는 1, 2, 3 또는 4개의 탄소 원자가 O, N, Si, Se, P 또는 S로, 바람직하게는 O, S 및 N으로 대체된다. 용어 아릴 또는 Ar은 또한 하나 또는 수 개의 H 원자는 -R', -할로겐, -OR', 또는 -SR', -NR'R", -N=NR', -N=R', -NR'R", -NO2, -S(O)R', -S(O)2R', -S(O)2OR', -OS(O)2OR', -PR'R", -P(O)R'R", -P(OR')(OR"), -P(O)(OR')(OR") 또는 -OP(O)(OR')(OR")에 의해서 독립적으로 대체된 방향족 기를 지칭하고, 여기서 R', R"는 독립적으로 H, 알킬, 알케닐, 알키닐, 헤테로알킬, 아릴, 아릴알킬, 카보닐, 또는 제약상 염이다.
"헤테로사이클"은 1 내지 4개의 고리 탄소 원자가 O, N, S, Se, B, Si 및 P의 군으로부터의 헤테로원자로 독리적으로 대체된 고리 시스템을 지칭한다. 바람직한 헤테로원자는 O, N 및 S이다. 헤테로사이클은 또한 The Handbook of Chemistry and Physics, 78th Edition, CRC Press, Inc., 1997-1998, p. 225 to 226]에 기술되어 있고, 이의 개시내용은 참고로 여기에 포함된다. 바람직한 비방향족 헤테로환식은 에폭시, 아지리딘일, 티란일, 피롤리딘일, 피라졸리딘일, 이미다졸리딘일, 옥시란일, 테트라하이드로퓨란일, 디옥솔란일, 테트라하이드로피란일, 디옥산일, 디옥솔란일, 피페리딘일, 피페라진일, 모폴린일, 피란일, 이미다졸린일, 피롤린일, 피라졸린일, 티아졸리딘일, 테트라하이드로티오피란일, 디티안일, 티오모폴린일, 디하이드로피란일, 테트라하이드로피란일, 디하이드로피란일, 테트라하이드로피리딜, 디하이드로피리딜, 테트라하이드로피리미딘일, 디하이드로티오피란일, 아제판일, 뿐만 아니라 페닐기와의 축합으로부터 생성된 융합 시스템을 포함한다.
용어 "헤테로아릴" 또는 방향족 헤테로사이클은 3 내지 14, 바람직하게는 5 내지 10원의 방향족 헤테로, 모노-, 비- 또는 멀티-사이클릭 고리를 지칭한다. 예는 피롤릴, 피리딜, 피라졸릴, 티에닐, 피리미딘일, 피라진일, 테트라졸릴, 인돌릴, 퀴놀린일, 퓨린일, 이미다졸릴, 티에닐, 티아졸릴, 벤조티아졸릴, 퓨란일, 벤조퓨란일, 1,2,4-티아디아졸릴, 이소티아졸릴, 트리아졸릴, 테트라졸릴, 이소퀴놀릴, 벤조티에닐, 이소벤조퓨릴, 피라졸릴, 카바졸릴, 벤즈이미다졸릴, 아이속사졸릴, 피리딜-N-옥사이드, 뿐만 아니라 페닐기와의 축합으로부터 생성된 융합 시스템을 포함한다.
"알킬", "사이클로알킬", "알케닐", "알키닐", "아릴", "헤테로아릴", "헤테로사이클릭" 등은 또한 2개의 수소 원자의 제거에 의해서 형성된 대응하는 "알킬렌", "사이클로알킬렌", "알케닐렌", "알키닐렌", "아릴렌", "헤테로아릴렌", "헤테로사이클렌"을 지칭한다.
"아릴알킬"은 탄소 원자, 전형적으로 말단 또는 sp3 탄소 원자에 결합된 수소 원자 중 하나가 아릴 라디칼로 대체된 비환식(acyclic) 알킬 라디칼을 지칭한다. 전형적인 아릴알킬기는 벤질, 2-페닐에탄-1-일, 2-페닐에텐-1-일, 나프틸메틸, 2-나프틸에탄-1-일, 2-나프틸에텐-1-일, 나프토벤질, 2-나프토페닐에탄-1-일 등을 포함한다.
"헤테로아릴알킬"은 탄소 원자, 전형적으로 말단 또는 sp3 탄소 원자에 결합된 수소 원자 중 하나가 헤테로아릴 라디칼로 대체된 비환식 알킬 라디칼을 지칭한다. 헤테로아릴알킬기의 예는 2-벤즈이미다졸릴메틸, 2-퓨릴에틸이다.
"하이드록실 보호기"의 예는 메톡시메틸 에터, 2-메톡시에톡시메틸 에터, 테트라하이드로피란일 에터, 벤질 에터, p-메톡시벤질 에터, 트리메틸실릴 에터, 트리에틸실릴 에터, 트리이소프로필실릴 에터, t-부틸디메틸실릴 에터, 트리페닐메틸실릴 에터, 아세테이트 에스터, 치환된 아세테이트 에스터, 피발로에이트, 벤조에이트, 메탄설폰에이트 및 p-톨루엔설폰에이트를 포함한다.
"이탈기"는 또 다른 작용기에 의해서 치환될 수 있는 작용기를 지칭한다. 이러한 이탈기는 관련 기술 분야에 널리 공지되어 있고, 예는 할라이드(예를 들어, 클로라이드, 브로마이드 및 아이오다이드), 메탄설폰일(메실), p-톨루엔설폰일(토실), 트리플루오로메틸설폰일(트리플레이트) 및 트리플루오로메틸설폰에이트를 포함한다. 바람직한 이탈기는 나이트로페놀; N-하이드록시석신이미드(NHS); 페놀; 디나이트로페놀; 펜타플루오로페놀; 테트라플루오로페놀; 디플루오로페놀; 모노플루오로페놀; 펜타클로로페놀; 트리플레이트; 이미다졸; 디클로로페놀; 테트라클로로페놀; 1-하이드록시벤조트리아졸; 토실레이트; 메실레이트; 2-에틸-5-페닐아이속사졸륨-3'-설폰에이트, 그 자체에 의해서 형성되거나 또는 다른 무수물과 함께 형성된 무수물, 예를 들어, 아세틸 무수물, 폼일 무수물; 또는 펩티드 커플링 반응 또는 미츠노부 반응을 위한 축합 시약을 사용하여 생성된 중간체 분자로부터 선택된다.
하기 약어가 본 명세서에서 사용될 수 있고, 제시된 정의를 갖는다: Boc, tert-부톡시 카보닐; BroP, 브로모트리스피롤리디노포스포늄 헥사플루오로포스페이트; CDI, 1,1'-카보닐디이미다졸; DCC, 디사이클로헥실카보다이이미드; DCE, 디클로로에탄; DCM, 디클로로메탄; DEAD, 디에틸아조다이카복실레이트; DIAD, 디이소프로필아조다이카복실레이트; DIBAL-H, 디이소부틸-알루미늄 하이드라이드; DIPEA 또는 DEA, 디이소프로필에틸아민; DEPC, 디에틸 포스포로사이아나이데이트; DMA, N,N-디메틸 아세트아마이드; DMAP, 4-(N,N-디메틸아미노)피리딘; DMF, N,N-디메틸폼아마이드; DMSO, 디메틸설폭사이드; DTPA, 디에틸렌트리아민펜타아세트산; DTT, 디티오트레이톨; EDC, 1-(3-디메틸아미노프로필)-3-에틸카보디이미드 염산염; ESI-MS, 전자분무 질량분석; EtOAc, 에틸 아세테이트; Fmoc, N-(9-플루오레닐메톡시카보닐); HATU, O-(7-아자벤조트리아졸-1-일)-N,N,N',N'-테트라메틸우로늄 헥사플루오로포스페이트; HOBt, 1-하이드록시벤조트리아졸; HPLC, 고압 액체 크로마토그래피; NHS, N-하이드록시석신이미드; MeCN, 아세토나이트릴; MeOH, 메탄올; MMP, 4-메틸모폴린; PAB, p-아미노벤질; PBS, 인산염-완충 염수(pH 7.0 내지 7.5); Ph, 페닐; phe, L-페닐알라닌; PyBrop, 브로모-트리스-피롤리디노-포스포늄 헥사플루오로포스페이트; PEG, 폴리에틸렌 글리콜; SEC, 크기 배제 크로마토그래피; TCEP, 트리스(2-카복시에틸)포스핀; TFA, 트리플루오로아세트산; THF, 테트라하이드로퓨란; Val, 발린; TLC, 박막 크로마토그래피; UV, 자외선.
"아미노산(들)"은 자연 및/또는 비자연 아미노산, 바람직하게는 알파-아미노산일 수 있다. 자연 아미노산은 유전자 암호에 의해서 암호화된 것이며, 이것은 알라닌, 아르기닌, 아스파라긴, 아스파트산, 시스테인, 글루탐산, 글루타민, 글리신, 히스티딘, 이소류신, 류신, 라이신, 메티오닌, 페닐알라닌, 프롤린, 세린, 트레오닌, 타이로신. 트립토판 및 발린이다. 비자연 아미노산은 단백질생성 아미노산의 형태로 유래된다. 예는 하이드록시프롤린, 란티오닌, 2-아미노이소부티르산, 데하이드로알라닌, 감마-아미노부티르산(신경 전달 물질), 오르니틴, 시트룰린, 베타 알라닌 (3-아미노프로판산), 감마-카복시글루타메이트, 셀레노시스테인(대부분의 진핵 생물뿐만 아니라 많은 비진핵 생물에 존재하지만, DNA에 의해 직접 암호화되지는 않음) 피롤리신(일부 고등어와 하나의 박테리아에서만 발견됨) N-폼일메티오닌(종종 박테리아, 미토콘드리아 및 엽록체 내의 단백질의 초기 아미노산임), 5-하이드록시트립토판, L-디하이드록시페닐알라닌, 트리아이오도타이로닌, L-3,4-디하이드록시페닐알라닌(DOPA) 및 O-포스포세린을 포함한다. 용어 아미노산은 또한 아미노산 유사체 및 모방체를 포함한다. 유사체는 R기가 자연 아미노산에서 발견되는 것이 아닌 것을 제외하고는, 자연 아미노산의 동일한 일반식 H2N(R)CHCO2H 구조식을 갖는 화합물이다. 유사체의 예는 호모세린, 노르류신, 3-아미노프로판산, 4-아미노부탄산, 5-아미노펜탄산, 6-아미노헥산산, 7-아미노헵탄산, 메티오닌-설폭사이드 및 메티오닌 메틸 설포늄을 포함한다. 바람직하게는, 아미노산 모방체는 알파-아미노산의 일반적인 화학 구조식과 상이한 구조식을 갖지만 그것과 유사한 방식으로 작용하는 화합물이다. 용어 "비자연 아미노산"은 "D" 입체화학 형태를 나타내도록 의도되며, 자연 아미노산은 "L"형이다. 1 내지 8개의 아미노산이 본 특허 출원에서 사용되는 경우, 아미노산 서열은 바람직하게는 프로테아제에 대한 절단 인식 서열이다. 다수의 절단 인식 서열이 관련 기술 분야에 공지되어 있다(예를 들어, Matayoshi et al. Science 247: 954 (1990); Dunn et al. Meth. Enzymol. 241: 254 (1994); Seidah et al. Meth. Enzymol. 244: 175(1994); Thornberry, Meth. Enzymol. 244: 615(1994); Weber et al. Meth. Enzymol. 244: 595(1994); Smith et al. Meth. Enzymol. 244: 412 (1994); 및 Bouvier et al. Meth. Enzymol. 248: 614 (1995)] 참고; 이들의 개시 내용은 본 명세서에 참고로 포함됨). 특히, 그러한 서열은 Val-Cit, Ala-Val, Ala-Ala, Val-Val, Val-Ala-Val, Lys-Lys, Ala-Asn-Val, Val-Leu-Lys, Cit-Cit, Val-Lys, Ala-Ala-Asn, Asp-Lys, Asp-Glu, Glu-Lys, Lys, Cit, Ser 및 Glu로 이루어진 군으로부터 선택된다.
"글리코사이드(또는 배당체)"는 당기가 글리코사이드 결합을 통해서 또 다른 기에 애노머 탄소를 통해서 결합된 분자이다. 글리코사이드는 O-(O-글리코사이드), N-(글리코실아민), S-(티오글리코사이드), 또는 C-(C-글리코사이드) 글리코사이드 결합에 의해서 연결될 수 있다. 이의 코어 실험식은 Cm(H2O)n(여기서, m은 n과 상이할 수 있고, m 및 n은 36 미만임)이다. 본 명세서에서 글리코사이드는 글루코스(덱스트로스), 프럭토스(레불로스) 알로스, 알트로스, 만노스, 글로스, 아이오도스, 갈락토스, 탈로스, 갈락토사민, 글루코사민, 시알산, N-아세틸글루코사민, 설포퀴노보스(6-데옥시-6-설포-D-글루코피라노스), 리보스, 아라비노스, 자일로스, 릭소스, 솔비톨, 만니톨, 수크로스, 락토스, 말토스, 트레할로스, 말토덱스트린, 라피노스, 글루코쿠론산(글루쿠로나이드) 및 스타키오스를 포함한다. 이것은 D형 또는 L형, 5 원자 환식 퓨라노즈 형태, 6 원자 환식 피라노즈 형태, 또는 비환식 형태, α-이성질체(하워쓰(Haworth) 투영의 탄소 원자의 평면 아래의 애노머 탄소의 -OH) 또는 β-이성질체(하워쓰 투영면 위의 애노머 탄소의 -OH)일 수 있다. 본 명세서에서 단당류, 이당류, 폴리올 또는 3 내지 6개의 당 유닛을 함유하는 올리고당이 사용된다.
본원에 사용된 용어 "항체"는 전장 면역글로불린 분자 또는 전장 면역글로불린 분자의 면역학적 활성 부분, 즉, 관심대상 표적의 항원에 면역특이적으로 결합하는 항원 결합 부위를 함유하는 분자 또는 이의 부분을 지칭하고, 이러한 표적은 암 세포 또는 자가면역 질환과 연관된 자가면역 항체를 생산하는 세포를 포함하지만 이들에 제한되지 않는다. 본 명세서에 개시된 면역글로불린은 면역글로불린 분자의 임의의 유형(예를 들어, IgG, IgE, IgM, IgD, IgA 및 IgY), 클래스(예를 들어, IgG1, IgG2, IgG3, IgG4, IgA1 및 IgA2) 또는 서브클래스일 수 있다. 면역글로불린은 임의의 종으로부터 유래될 수 있다. 그러나, 바람직하게는, 면역글로불린은 인간, 뮤린 또는 토끼 기원이다. 본 발명에 유용한 항체는 바람직하게는 단클론성이고, 다클론성, 단클론성, 이중특이적 인간, 인간화된 또는 키메라 항체, 단일 사슬 항체, Fv, Fab 단편, F(ab') 단편, F(ab')2 단편, Fab 발현 라이브러리에 의해서 생산된 단편, 항-이디오타입(항-Id) 항체, CDR 및 이들의 임의의 에피토프-결합 단편(이들은 암세포 항원, 바이러스 항원 또는 미생물 항원에 면역특이적으로 결합함)을 포함하지만 이들에 제한되지 않는다.
본원에 사용된 용어 "단클론성 항체"는 실질적으로 균질한 항체 군집(population)으로부터 수득된 항체를 지칭하며, 즉 군집을 구성하는 개별 항체는 소량으로 존재할 수 있는 가능한 자연 발생 돌연변이를 제외하고는 동일하다. 단클론성 항체는 단일 항원 부위에 대해 지향되는 매우 특이적이다. 수식어 "단클론성"은 실질적으로 균질한 항체 군집으로부터 수득되는 항체의 특성을 나타내며, 임의의 특정 방법에 의한 항체의 생산을 필요로 하는 것으로 해석되어서는 안 된다.
"무손상(intact, 온전한) 항체"는 항체 부류에 적합한 항원-결합 가변 영역 뿐만 아니라 경쇄 불변 도메인(CL) 및 중쇄 불변 도메인(CH1, CH2, CH3 및 CH4)을 포함하는 것이다. 불변 도메인은 자연 서열 불변 도메인(예를 들어, 인간 자연 서열 불변 도메인) 또는 그의 아미노산 서열 변이체일 수 있다.
"항체 단편"은 항원 결합 또는 그의 가변 영역을 포함하는, 무손상 항체의 일부를 포함한다. 항체 단편의 예는 Fab, Fab', F(ab').sub.2, 및 Fv 단편, 디아바디, 트리아바디, 테트라바디, 선형 항체, 단일-사슬 항체 분자, scFv, scFv-Fc, 항체 단편(들)로부터 형성된 멀티-특이적 항체 단편, Fab 발현 라이브러리에 의해 생성된 단편(들), 또는 표적 항원(예를 들어, 암 세포 항원, 바이러스성 항원 또는 미생물 항원)에 면역 특이적으로 결하는 상기 모든 에피토프-결합 단편을 포함한다.
"항원"은 항체가 특이적으로 결합하는 실체(entity)이다.
용어 "특이적 결합" 및 "특이적으로 결합한다"는 항체 또는 항체 유도체가 다수의 다른 항원이 아닌, 표적 항원의 상응하는 에피토프와 고도로 선택적인 방식으로 결합할 것임을 의미한다. 전형적으로, 항체 또는 항체 유도체는 적어도 약 1 x 10-7 M, 바람직하게는 10-8 M 내지 10-9 M, 10-10 M, 10-11 M, 또는 10-12 M의 친화도로 결합하고, 미리 결정된 항원 또는 밀접하게 관련된 항원 이외의 비-특이적 항원(예를 들어, BSA, 카제인)에 대한 결합 친화도보다 적어도 2배 더 큰 친화도로 미리 결정된 항원에 결합한다.
"광학 이성질체"로서도 공지된 "거울상이성질체"는 왼손과 오른손이 하나의 축을 따라서 반대인 것을 제외하고 동일한 것처럼(손은 방향전환에 의해서 단순히 동일하게 보이게 될 수 없음), 중첩되지 않는(동일하지 않은) 서로의 거울상인 2개의 입체이성질체 중 하나이다. 화합물 내의 단일 카이럴 원자 또는 유사한 구조 특징부는, 화합물이 서로의 거울상 각각에 중첩하지 않는 2개의 가능한 구조를 갖도록 한다. 주어진 화합물 내의 다수의 카이럴 특징부의 존재는, 일부 완벽한-거울-상 쌍이 존재할 수 있지만, 가능한 기하 형태의 수를 증가시킨다. 순수한 거울상이성질체(enantiopure) 화합물은 검출 한계 내에서 단지 하나의 카이럴성의 분자를 갖는 샘플을 지칭한다. 대칭 환경으로 존재하는 경우, 거울상이성질체는 동일한 양이지만, 반대 방향으로 평면 편광(+/-)을 회전시키는 능력을 제외하고는, 동일한 화학 특성 및 물성을 갖는다(편광은 비대칭 매질이라고 간주될 수 있음). 이것은 때로는 이러한 이유로 인해서 광학 이성질체라고 불린다. 동일한 부분의 광학 활성 이성질체 및 이의 거울상 이성질체의 혼합물은 라세믹이라고 지칭되고, 0의 순 회전(zero net rotation)의 편면 편광을 갖는데, 그 이유는 각각의 (+) 형태의 양회전이 (-) 형태의 음회전에 의해서 정확히 상쇄되기 때문이다. 거울상이성질체 구성원은 보통 다른 거울상이성질체 물질과 상이한 화학 반응을 갖는다. 다수의 생물 분자는 거울상이성질체이기 때문에, 생물 유기체에 대한 2개의 거울상이성질체의 효과가 때로는 뚜렷하게 상이하다. 약물에서, 예를 들어, 보통 약물 거울상이성질체 중 단지 하나가 목적하는 생리학적 효과에 대한 책임이 있는 반면, 다른 거울상이성질체는 덜 활성이거나, 불활성이거나 때로는 심지어는 부작용을 나타낸다. 이러한 발견으로 인해서, 약물학적 효능을 향상시키고, 때로는 일부 부작용을 제거하기 위해서 단지 하나의 거울상이성질체("순수한 거울상이성질체")로 구성된 약물을 개발할 수 있다.
동위원소는 중성자수가 상이한 특정 화학 원소의 변이체이다. 주어진 원소의 모든 동위원소는 각각의 원자 내에 동일한 양성자수를 갖는다. 각각의 원자 번호는 구체적인 원소를 식별하지만, 동위원소를 식별하지 못하며; 주어진 원소의 원자는 중성자의 수에서 다양한 범위를 가질 수 있다. 핵 내에서 핵자(nucleon)(양성자 및 중성자 둘 다)의 수는 원자의 질량수이고, 주어진 원소의 각각의 동위원소는 상이한 질량수를 갖는다. 예를 들어, 탄소-12, 탄소-13 및 탄소-14는 각각 12, 13 및 14의 질량수를 갖는 탄소 원소의 3개의 동위원소이다. 탄소의 원자수는 6인데, 이것은 모든 탄소 원자가 6개의 양성자를 갖는다는 것을 의미하여, 이들 동위원소의 중성자수는 각각 6, 7 및 8이다. 수소 원자는 경수소(1H), 중수소(2H) 및 삼중수소(3H)의 3개의 동위원소를 가지며, 여기서 중수소는 경수소의 질량의 2배이고, 삼중수소는 경수소의 질량의 3배이다. 동위원소 치환을 사용하여 화학 반응의 메커니즘 및 동적 동위원소 효과를 결정할 수 있다. 동위원소 치환을 사용하여 (예를 들어, 대사 효소, 예컨대, 사이토크롬 P450 또는 글루쿠로노실트랜스퍼라제 효소에 의한) 신체 내에서 물질의 대사 변화뿐만 아니라 흡수 및 분포의 메커니즘을 통해서 투여 후 신체가 특정 제노바이오틱/화학물질에 영향을 미치는 방법 및 약물의 대사산물의 효과 및 경로를 연구할 수 있다. 이러한 연구를 약동학(PK)이라고 부른다. 동위원소 치환을 사용하여 약물의 생화학적 효과 및 생리학적 효과를 연구할 수 있다. 이러한 효과는 동물(인간 포함), 미생물 또는 유기체의 조합(예를 들어, 감염) 내에서 메니페스트된(manifested) 것을 포함할 수 있다. 이러한 연구는 약력학(PD)이라고 부른다. 이러한 효과는 동물(인간 포함), 미생물 또는 유기체의 조합(예를 들어, 감염) 내에서 메니페스트된 것을 포함할 수 있다. 둘 다는 함께 약물의 투여, 이익 및 부작용에 영향을 미친다. 동위원소는 안정적인 원소(비-방사성) 또는 불안정적인 원소를 함유할 수 있다. 약물의 동위원소 치환은 기원 약물의 상이한 치료 효능을 가질 수 있다.
현재 개시된 화합물을 동위원소-표지함으로써, 화합물은 약물 및/또는 기질 조직 분포 분석에 유용할 수 있다. 삼중수소(3H) 및 탄소-14(14C) 표지된 화합물은 제조 및 검출 용이성으로 인해 특히 바람직하다. 또한, 중수소(2H)와 같은 더 무거운 동위원소로의 치환은 대사 안정성이 더 높아져 특정 치료 이점을 제공할 수 있다. 예를 들어, 생체 내 반감기 증가시키거나 투여 요구량을 감소시켜서, 일부 상황에서는 바람직할 수 있다. 제약상 염, 에스테르, 및 이의 전구약물을 포함하는 현재 개시된 동위원소 표지된 화합물은 당업계에 공지된 임의의 수단에 의해 제조될 수 있다. 일반적으로 풍부한 12C를 13C로 대체함으로써 이점을 얻을 수도 있다.
"제약상으로" 또는 "제약상으로 허용 가능한"은 동물, 또는 인간에게 적절하게 투여되는 경우, 유해한, 알레르기성 또는 다른 부적절한 반응을 일으키지 않는 분자 실체 및 조성물을 지칭한다.
"제약상으로 허용 가능한 용매화물" 또는 "용매화물"은 하나 이상의 용매 분자 및 개시된 화합물의 회합(association)을 지칭한다. 제약상으로 허용 가능한 용매화물을 형성하는 용매의 예는 물, 이소프로판올, 에탄올, 메탄올, DMSO, 에틸 아세테이트, 아세트산 및 에탄올아민을 포함하지만, 이들에 제한되지 않는다.
"제약상으로 허용 가능한 부형제"는 임의의 담체, 희석제, 보조제 또는 비히클, 예컨대, 보존제 또는 항산화제, 충전제, 붕해제, 습윤제, 유화제, 현탁제, 용매, 분산 매질, 코팅제, 항박테리아 및 항진균제, 등장제 및 흡수지연제 등을 포함한다. 제약상 활성 물질을 위한 그러한 매질 및 작용제의 사용은 관련 기술 분야에 널리 공지되어 있다. 임의의 통상적인 매질 또는 작용제가 활성 성분과 비혼화성인 경우를 제외하고, 치료 조성물에서의 그의 사용이 고려된다. 보충 활성 성분은 또한 적합한 치료 조합물로서 조성물에 혼입될 수 있다.
본원에서 사용된 "제약상 염"은 모 화합물이 그의 산 또는 염기염을 제조함으로써 변형된 개시된 화합물의 유도체를 지칭한다. 제약상으로 허용 가능한 염은 예를 들어, 비독성 무기산 또는 유기산으로부터 형성된 모 화합물의 통상적인 무독성 염 또는 4차 암모늄 염을 포함한다. 예를 들어, 그러한 통상적인 무독성 염은 무기산, 예컨대, 염산, 브로민산, 황산, 설팜산, 인산, 질산 등; 유기산, 예컨대, 아세트산, 프로피온산, 석신산, 타타르산, 시트르산, 메탄설폰산, 벤젠설폰산, 글루쿠론산, 글루탐산, 벤조산, 살리실산, 톨루엔설폰산, 옥살산, 퓨마르산, 말레산, 락트산 등으로부터 제조된 염을 포함한다. 추가의 부가염은 암모늄염, 예컨대, 트로메타민, 메글루민, 에포라민 등, 금속염, 나트륨, 칼륨, 칼슘, 아연 또는 마그네슘을 포함한다.
본 발명의 제약상 염은 통상적인 화학적 방법에 의해서 염기성 또는 산성 모이어티를 함유하는 모 화합물로부터 합성될 수 있다. 일반적으로, 이러한 염은 이들 화합물의 유리(free) 산성 또는 염기성 형태를 물 또는 유기 용매 또는 이들 둘의 혼합물 중에서 화학양론적 양의 적절한 염기 또는 산과 반응시킴으로써 제조될 수 있다. 일반적으로, 비수성 매질, 예컨대, 에터, 에틸 아세테이트, 에탄올, 이소프로판올 또는 아세토나이트릴이 바람직하다. 적합한 염의 목록은 Remington's Pharmaceutical Sciences, 17th ed., Mack Publishing Company, Easton, PA, 1985, p. 1418]에서 발견되며, 이의 개시내용은 참고로 포함된다.
용어 "치료학적 유효량"은 포유동물의 질병 또는 장애를 치료하는데 효과적인 접합체의 양을 지칭한다. 암의 경우, 접합체의 치료학적 유효량은 암세포의 수를 감소시킬 수 있고; 종양 크기를 줄일 수 있고; 말초 기관으로의 암세포 침윤을 억제할 수 있고(즉, 어느 정도 느리게 하고 바람직하게는 정지시킴); 종양 전이를 억제할 수 있고(즉, 어느 정도 느리게 하고 바람직하게는 정지시킴); 종양 성장을 어느 정도 억제할 수 있고; 및/또는 암과 관련된 하나 이상의 증상을 어느 정도 완화시킬 수 있다. 약물이 성장을 억제하거나 기존 암세포를 죽일 수 있는 정도까지는 세포 증식 억제 및/또는 세포 독성이 있을 수 있다. 암 치료의 경우, 효능은 예를 들어, 질병 진행까지의 시간(TTP)을 평가하고, 및/또는 반응률(RR)을 결정함으로써, 측정될 수 있다.
본원에 사용된 용어 "제약상으로 허용 가능한 형태"는 그 제약상 허용되는 염, 에스테르, 수화물, 용매화물, 다형체, 이성질체, 전구약물 및 동위원소 표지된 유도체를 포함하지만 이들에 제한되지 않는 개시된 화합물의 형태를 지칭한다. 일 실시예에서, "제약상 허용 가능한 형태"는 그 제약상 허용되는 염, 에스테르, 전구약물 및 동위원소 표지된 유도체를 포함하지만 이들에 제한되지 않는다. 일부 실시예에서, "제약상 허용 가능한 형태"는 그 제약상 허용되는 이성질체 및 입체 이성질체, 전구약물 및 동위원소 표지된 유도체를 포함하지만 이들에 제한되지는 않는다.
용어 "실질적인" 또는 "실질적으로"는 혼합물 또는 샘플의 대다수, 즉 모집단의 >50%, 바람직하게는 모집단의 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 75% 80%, 85%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99%를 초과함을 지칭한다.
본 발명에 의해 구상되는 치환기 및 변수의 조합은 안정적인 화합물의 형성을 초래하는 것들일 뿐이다. 본원에 사용된 용어 "안정적인"은 제조를 허용하기에 충분한 안정성을 갖고 본원에 설명된 목적(예를 들어, 대상체에 대한 치료적 또는 예방적 투여)에 유용한 화합물의 완전성을 충분한 기간 동안 유지하는 화합물을 지칭한다.
본 발명의 화합물은 이들의 제조 이후에, 바람직하게는 단리 및 정제되어, 중량 기준으로 95% 이상의 양("실질적으로 순수한")을 함유하는 조성물을 얻은 다음, 본 명세서에 기재된 바와 같이 사용되거나 제형화된다. 특정 실시예에서, 본 발명의 화합물은 99% 순도 이상이다.
용어 "세포독성 활성"은 약물 또는 캄프토테신 접합체 또는 캄프토테신 접합체의 세포내 대사물의 세포 사멸 효과를 지칭한다. 세포독성 활성은 IC.sub.50 값으로 표현될 수 있는데, 이는 세포의 절반이 생존하는 단위 부피당 농도(몰 또는 질량)인 나타낸다.
용어 "세포 증식 억제 활성"은 약물 또는 캄프토테신 유사체 접합체 또는 캄프토테신 접합체의 세포내 대사물의 항-증식 효과를 지칭한다.
본원에 사용된 용어 "세포독성제"는 세포독성 활성을 갖고 세포를 파괴시키는 물질을 지칭한다. 이 용어는 화학요법제, 및 이의 합성 유사체 및 유도체를 포함하여, 박테리아, 진균, 식물 또는 동물 기원의 소분자 독소 또는 효소 활성 독소와 같은 독소를 포함하도록 의도된다.
"투여하는" 또는 "투여"는 대상체에게 제약상 약물 또는 기타 작용제를 전송, 전달, 도입 또는 수송하는 임의의 모드를 지칭한다. 이러한 모드는 경구 투여, 국소 접촉, 정맥내, 복강내, 근육내, 병변내, 비강내, 피하 또는 척추강내 투여를 포함한다. 작용제의 투여 시 장치 또는 장비를 사용하는 것이 또한 본 발명에서 고려된다. 이러한 장치는 능동적 또는 수동적 수송을 이용할 수 있고, 느린-방출 또는 신속-방출 전달 장치일 수 있다.
암의 맥락에서, 용어 "치료하는"은 종양 세포 또는 암세포의 성장의 예방, 종양 세포 또는 암세포의 복제 예방, 전체 종양 부하(burden)의 경감 및 질환과 연관된 하나 이상의 증상의 개선 중 임의의 것 또는 모두를 포함한다.
자가면역 질환의 맥락에서, 용어 "치료하는"은 자가면역 항체를 생산할 수 있는 세포를 포함하지만 이들에 제한되지 않은 자가면역 질환 상태와 연관된 세포의 복제 예방, 자가면역 항체 부하의 경감 및 자가면역 질환의 하나 이상의 증상의 개선 중 임의의 것 또는 모두를 포함한다.
감염성 질환의 맥락에서, 용어 "치료하는"은 감염성 질환을 유발하는 병원체의 성장, 증식 또는 복제의 예방 및 감염성 질환의 하나 이상의 증상의 개선 중 임의의 것 또는 모두를 포함한다.
용어 "암" 및 "암성"은 조절되지 않는 세포 성장을 전형적인 특징으로 하는 포유동물에서의 생리학적 병태 또는 장애를 지칭하거나 설명한다. "종양"은 하나 이상의 암세포를 포함한다.
본원에 사용된 "자가면역 질환"은 개인의 자신의 조직 또는 단백질로부터 발생하고 이에 대항하여 지향되는 질환 또는 장애를 지칭한다.
본원에 사용된 "환자"는 본 발명의 캄프토테신 접합체가 투여되는 대상체를 지칭한다. 환자는 인간, 래트, 마우스, 기니피그, 비-인간 영장류, 돼지, 염소, 소, 말, 개, 고양이, 새 및 가금류를 포함하지만, 이들에 제한되지 않는다. 전형적으로, 환자는 래트, 마우스, 개, 인간 또는 비-인간 영장류이고, 보다 일반적으로는 인간이다.
"포유동물" 또는 "동물"의 예는 인간, 래트, 마우스, 기니피그, 원숭이, 돼지, 염소, 소, 말, 개, 고양이 새 및 가금류를 포함하지만, 이들에 제한되지 않는다.
문맥상 달리 나타내지 않는 한, 용어 "치료하다" 또는 "치료"는 바람직하지 않은 생리학적 변화 또는 장애, 예를 들어 암의 발병 또는 전이를 억제 또는 지연(경감)시키는 것을 목적으로하는 치료 및 예방을 지칭한다. 본 발명의 목적을 위해, 이롭거나 원하는 임상 결과는 검출 가능 여부에 관계없이, 증상의 완화, 질병 심각도의 감소, 질병의 안정화된(즉, 악화되지 않는) 상태, 질병 진행의 지연 또는 감속, 질병 상태의 개선 또는 완화, 및 차도(remission)(부분적이든 전체적이든)를 포함한다. "치료"는 또한 치료를 받지 않는 경우 예상되는 생존과 비교하여 생존을 연장하는 것을 의미할 수 있다. 치료가 필요한 사람들은 이미 병태나 장애가 있는 사람들 뿐만 아니라 병태나 장애를 가질 경향이 있는 사람들을 포함한다.
약물-링커-결합 리간드 접합체
상기 언급된 바와 같이, 본 발명은 하기 화학식 I:
Figure pct00009
또는 그 제약상 허용되는 염, 수화물 또는 수화된 염; 또는 이들 화합물의 다형 결정 구조; 또는 그 동위원소, 광학 이성질체, 라세미체, 부분입체 이성질체 또는 거울상 이성질체의 세포 표면 결합 분자-캄프토테신 유사체 접합체를 제공하고;
여기서, T는 표적화 또는 결합 리간드이고; L은 방출 가능한 링커이고;
Figure pct00010
는 L이 독립적으로 브래킷 내부에서 R1, R2, R3 또는 R5의 원자에 독립적으로 연결되는 링키지 결합이고; n은 1 내지 30이고 m은 1 내지 10이고;
브래킷 내부에는 강력한 암프토테신 유사체가 존재하고;
여기서,
R1 및 R2는 독립적으로, H; 선형 또는 분지형 C1-C6의 알킬, 알킬 알코올, 알킬 아민(1차, 2차, 3차 아민 또는 4차 암모늄 포함), 아미노알킬, 옥실알킬, 아미노알킬아미노, 옥실알킬아미노, 아미노알킬옥실, 옥실알킬옥실, 알킬 카르복실산 또는 카르보닐; C2-C6의 헤테로알킬, 알킬사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬, 헤테로사이클릭, 아미노사이클로알킬, 헤테로알킬사이클로알킬, 알킬카르보닐, 아미노알킬카르보닐, 옥실알킬카르보닐, 알킬 에테르, 알킬 에스테르, 알킬 아미드, 옥실알킬아미드, 아미노알킬아미드, 옥심; NH2, 또는 OH이고;
R3은 독립적으로, H, C(O)NH, C(O)O, SO2R6, SO3R6 , PR6R6', POR6R6', CH2OP(O)(OR6)2, C(O)OP(O)(OR6)2, PO(OR6)(OR6'), P(O)(OR6)OP(O)(OR6')2, C(O)R6, C(O)NHR6; 선형 또는 분지형 C1-C6의 알킬, 알킬 알코올, 알킬 아민(1차, 2차, 3차 아민 또는 4차 암모늄 포함), 또는 알킬 카르복실산; C2-C6의 헤테로알킬, 알킬사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬, 헤테로사이클릭, 사이클로알킬, 헤테로알킬사이클로알킬, 알킬카르보닐, 알킬 에테르, 알킬 에스테르, 알킬 아미드, 옥심; C5~C12 배당체, NH2, 또는 OH이고;
R4는 할로(F, Cl, Br, 또는 I), CN, NO2, SO3H, OR6, SR6, S(O2)R6, NHR6, N(R6)(R6'), C(O)XR6, N+(R6)(R6')(R6'')이고;
X는 NH 또는 O이고;
R5는 H, C(O)O, C(O)NH, R6C(O); 선형 또는 분지형 C1-C6의 알킬, 알킬 알코올, 알킬 아민(1차, 2차, 3차 아민 또는 4차 암모늄 포함), 알킬 카르복실산; C2-C6의 카보네이트, 카바마이드, 헤테로알킬, 알킬사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬, 헤테로사이클릭, 사이클로알킬, 헤테로알킬사이클로알킬, 알킬카르보닐, 알킬 에테르, 알킬 에스테르, 알킬 아미드 또는 아미노산이고;
R6, R6' 및 R6''은 독립적으로, H; C1-C6의 알킬, 알킬 알코올, 알킬 아민(1차, 2차, 3차 아민 또는 4차 암모늄 포함) 또는 알킬 카르복실산; C2-C6의 헤테로알킬, 알킬사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬, 헤테로사이클릭, 사이클로알킬, 헤테로알킬사이클로알킬, 알킬카르보닐, 알킬 에테르, 알킬 에스테르, 알킬 아미드 또는 아미노산; 또는 제약상 염이고;
또한, R1, R2, R3 및 R6은 독립적으로 부재할 수 있고, R2, R3, X, C-10 및 C-9는 함께 결합하여, 5-원, 6-원 또는 7-원 헤테로사이클릭 고리를 형성할 수 있다.
하나의 특정 실시예에서, 캄프토테신 유사체의 접합체는 하기 화학식 II:
Figure pct00011
또는 그 제약상 허용되는 염, 수화물 또는 수화된 염; 또는 이들 화합물의 다형 결정 구조; 또는 그 동위원소, 광학 이성질체, 라세미체, 부분입체 이성질체 또는 거울상 이성질체를 갖고;
여기서, T는 표적화 또는 결합 리간드이고; L은 방출 가능한 링커이고; n은 1 내지 30이고 m은 1 내지 10이고;
브래킷 내부에는 강력한 캄프토테신 유사체가 존재하고;
R1은 선형 또는 분지형 C1-C6의 알킬, 알킬옥실, 알킬 아미노(1차, 2차, 3차 아미노 또는 4차 암모늄 포함), 옥실카르보닐, 아미노카르보닐, 아미노알킬, 옥실알킬, 아미노알킬아미노, 옥실알킬아미노, 아미노알킬옥실, 옥실알킬옥실, 또는 알킬 카르복실릭; C2-C6의 헤테로알킬, 알킬사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬, 헤테로사이클릭, 옥실사이클로알킬, 아미노사이클로알킬, 헤테로알킬사이클로알킬, 알킬카르보닐, 아미노알킬카르보닐, 옥실알킬카르보닐, 알킬 에테르, 알킬 에스테르, 알킬 아미드, 옥실알킬아미드, 아미노알킬아미드, 옥심; NH, 또는 O이고;
R2는 H; 선형 또는 분지형 C1-C6의 알킬, 알킬 알코올, 알킬 아민(1차, 2차, 3차 아민 또는 4차 암모늄 포함), 아미노알킬 알코올, 아미노알킬 아민, 옥실알킬 알코올, 옥실알킬 아민, 아미노알킬, 옥실알킬 또는 알킬 카르복실산; C2-C6의 헤테로알킬, 알킬사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬, 헤테로사이클릭, 사이클로알킬, 헤테로알킬사이클로알킬, 알킬카르보닐, 알킬 에테르, 알킬 에스테르, 알킬 아미드, 옥심; NH2, 또는 OH이고;
R3는 독립적으로, H, R6NHC(O), R6OC(O),SO2R6, SO3R6 , PR6R6', POR6R6', CH2OP(O)(OR6)2, C(O)OP(O)(OR6)2, PO(OR6)(OR6'), P(O)(OR6)OP(O)(OR6')2, R6C(O), C(O)N R6R6'; 선형 또는 분지형 C1-C6의 알킬, 알킬 알코올, 알킬 아민(1차, 2차, 3차 아민 또는 4차 암모늄 포함), 또는 알킬 카르복실산; C2-C6의 헤테로알킬, 알킬사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬, 헤테로사이클릭, 사이클로알킬, 헤테로알킬사이클로알킬, 알킬카르보닐, 알킬 에테르, 알킬 에스테르, 알킬 아미드, 옥심; C5~C12 배당체이고;
R4는 할로(F, Cl, Br, 또는 I), CN, NO2, SO3H, OR6, SR6, S(O2)R6, NHR6, N(R6)(R6'), C(O)XR6, N+(R6)(R6')(R6'')이고;
X는 NH 또는 O이고;
R5는 H, C(O)OR6, C(O)NHR6, R6C(O); 선형 또는 분지형 C1-C6의 알킬, 알킬 알코올, 알킬 아민(1차, 2차, 3차 아민 또는 4차 암모늄 포함), 알킬 카르복실산; C2-C6의 카보네이트, 카바마이드, 헤테로알킬, 알킬사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬, 헤테로사이클릭, 사이클로알킬, 헤테로알킬사이클로알킬, 알킬카르보닐, 알킬 에테르, 알킬 에스테르, 알킬 아미드 또는 아미노산이고;
R6, R6' 및 R6''은 독립적으로, H; C1-C6의 알킬, 알킬 알코올, 알킬 아민(1차, 2차, 3차 아민 또는 4차 암모늄 포함) 또는 알킬 카르복실산; C2-C6의 헤테로알킬, 알킬사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬, 헤테로사이클릭, 사이클로알킬, 헤테로알킬사이클로알킬, 알킬카르보닐, 알킬 에테르, 알킬 에스테르, 알킬 아미드 또는 아미노산; 또는 제약상 염이고;
또한, R1은 부재할 수 있고, C-7은 L에 직접 연결되고, R2, R3, X, C-10 및 C-9는 함께 결합하여, 5-원, 6-원 또는 7-원 헤테로사이클릭 고리를 형성할 수 있다.
화학식 (II)의 브래킷 내부의 예시적인 화합물은 하기 구조:
Figure pct00012
Figure pct00013
Figure pct00014
Figure pct00015
Figure pct00016
Figure pct00017
또는 그의 제약상 허용되는 염, 수화물 또는 수화된 염; 또는 이들 화합물의 다형 결정 구조; 또는 그들의 동위원소, 광학 이성질체, 라세미체, 부분입체 이성질체 또는 거울상 이성질체를 갖고;
여기서, R6 및 R6''은 상기와 동일하게 정의된다.
여기서, "
Figure pct00018
"는 화학식 II의 링커 L에 연결되는 부위이다.
또 다른 특정 실시예에서, 세포-결합 분자-캄프토테신 유사체의 접합체는 하기 화학식 III:
Figure pct00019
또는 그 제약상 허용되는 염, 수화물 또는 수화된 염; 또는 이들 화합물의 다형 결정 구조; 또는 그 동위원소, 광학 이성질체, 라세미체, 부분입체 이성질체 또는 거울상 이성질체를 갖고;
여기서, T는 표적화 또는 결합 리간드이고; L은 방출 가능한 링커이고; n은 1 내지 30이고 m은 1 내지 10이고;
브래킷 내부에는 강력한 캄프토테신 유사체가 존재하고;
R1은 선형 또는 분지형 C1-C6의 알킬, 알킬옥실, 알킬 아미노(1차, 2차, 3차 아미노 또는 4차 암모늄 포함), 옥실카르보닐, 아미노카르보닐, 아미노알킬, 옥실알킬, 아미노알킬아미노, 옥실알킬아미노, 아미노알킬옥실, 옥실알킬옥실, 또는 알킬 카르복실릭; C2-C6의 헤테로알킬, 알킬사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬, 헤테로사이클릭, 옥실사이클로알킬, 아미노사이클로알킬, 헤테로알킬사이클로알킬, 알킬카르보닐, 아미노알킬카르보닐, 옥실알킬카르보닐, 알킬 에테르, 알킬 에스테르, 알킬 아미드, 옥실알킬에테르, 아미노알킬에테르, 옥실알킬에스테르, 아미노알킬에스테르, 옥실알킬아미드, 아미노알킬아미드, 옥심; NH, 또는 O이고;
R2는 NH, NR6, N+R6R6', O, S; 선형 또는 분지형 C1-C6의 알킬, 알킬 알코올, 알킬 아민(1차, 2차, 3차 아민 또는 4차 암모늄 포함), 아미노알킬 알코올, 아미노알킬 아민, 옥실알킬 알코올, 옥실알킬 아민, 아미노알킬, 옥실알킬, 또는 알킬 카르복실산; C2-C6의 헤테로알킬, 알킬사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬, 헤테로사이클릭, 사이클로알킬, 헤테로알킬사이클로알킬, 알킬카르보닐, 알킬 에테르, 알킬 에스테르, 알킬 아미드, 옥심; 옥실알킬에테르, 아미노알킬에테르, 옥실알킬에스테르, 아미노알킬에스테르, 옥실알킬아미드, 아미노알킬아미드이고;
R3는 독립적으로, H, R6NHC(O), R6OC(O),SO2R6, SO3R6 , PR6R6', POR6R6', CH2OP(O)(OR6)2, C(O)OP(O)(OR6)2, PO(OR6)(OR6'), P(O)(OR6)OP(O)(OR6')2, R6C(O), C(O)N R6R6'; 선형 또는 분지형 C1-C6의 알킬, 알킬 알코올, 알킬 아민(1차, 2차, 3차 아민 또는 4차 암모늄 포함), 또는 알킬 카르복실산; C2-C6의 헤테로알킬, 알킬사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬, 헤테로사이클릭, 사이클로알킬, 헤테로알킬사이클로알킬, 알킬카르보닐, 알킬 에테르, 알킬 에스테르, 알킬 아미드, 옥심; C5~C12 배당체이고;
R4는 할로(F, Cl, Br 또는 I), CN, NO2, SO3H, OR6, SR6, S(O2)R6, NHR6, N(R6)(R6'), C(O)XR6, N+(R6)(R6')(R6'')이고;
X는 NH 또는 O이고;
R5는 H, C(O)OR6, C(O)NHR6, R6C(O); 선형 또는 분지형 C1-C6의 알킬, 알킬 알코올, 알킬 아민(1차, 2차, 3차 아민 또는 4차 암모늄 포함), 알킬 카르복실산; C2-C6의 카보네이트, 카바마이드, 헤테로알킬, 알킬사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬, 헤테로사이클릭, 사이클로알킬, 헤테로알킬사이클로알킬, 알킬카르보닐, 알킬 에테르, 알킬 에스테르, 알킬 아미드 또는 아미노산이고;
R6, R6' 및 R6''은 독립적으로, H; C1-C6의 알킬, 알킬 알코올, 알킬 아민(1차, 2차, 3차 아민 또는 4차 암모늄 포함) 또는 알킬 카르복실산; C2-C6의 헤테로알킬, 알킬사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬, 헤테로사이클릭, 사이클로알킬, 헤테로알킬사이클로알킬, 알킬카르보닐, 알킬 에테르, 알킬 에스테르, 알킬 아미드 또는 아미노산; 또는 제약상 염이고;
또한, R2는 부재할 수 있고, C-9는 L에 직접 연결되고, R2, R3, X, C-10 및 C-9는 함께 결합하여, 5-원, 6-원 또는 7-원 헤테로사이클릭 고리를 형성할 수 있다.
화학식 (III)의 브래킷 내부의 예시적인 화합물은 하기 구조:
Figure pct00020
Figure pct00021
Figure pct00022
Figure pct00023
Figure pct00024
Figure pct00025
또는 그의 제약상 허용되는 염, 수화물 또는 수화된 염; 또는 이들 화합물의 다형 결정 구조; 또는 이들의 광학 이성질체, 라세미체, 부분입체 이성질체 또는 거울상 이성질체를 갖고,
여기서, R6 및 R6'은 독립적으로, H; C1-C6의 알킬, 알킬 알코올, 알킬 아민(1차, 2차, 3차 아민 또는 4차 암모늄 포함) 또는 알킬 카르복실산; C2-C6의 헤테로알킬, 알킬사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬, 헤테로사이클릭, 사이클로알킬, 헤테로알킬사이클로알킬, 알킬카르보닐, 알킬 에테르, 알킬 에스테르, 알킬 아미드 또는 아미노산; 또는 제약상 염이다.
또 다른 특정 실시예에서, 세포-결합 분자-캄프토테신 유사체의 접합체는 하기 화학식 (IV):
Figure pct00026
또는 그 제약상 허용되는 염, 수화물 또는 수화된 염; 또는 이들 화합물의 다형 결정 구조; 또는 그 동위원소, 광학 이성질체, 라세미체, 부분입체 이성질체 또는 거울상 이성질체를 갖고;
여기서, T는 표적화 또는 결합 리간드이고; L은 방출 가능한 링커이고; n은 1 내지 30이고 m은 1 내지 10이고;
브래킷 내부에는 강력한 캄프토테신 유사체가 존재하고;
R1 및 R2는 독립적으로, H, NR6R6', -N+R6R6'R6'', OH, SH; 선형 또는 분지형 C1-C6의 알킬, 알킬옥실, 알킬 아미노(1차, 2차, 3차 아미노 또는 4차 암모늄 포함), 옥실카르보닐, 아미노카르보닐, 아미노알킬, 옥실알킬, 아미노알킬아미노, 옥실알킬아미노, 아미노알킬옥실, 옥실알킬옥실, 또는 알킬 카르복실릭; C2-C6의 헤테로알킬, 알킬사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬, 헤테로사이클릭, 옥실사이클로알킬, 아미노사이클로알킬, 헤테로알킬사이클로알킬, 알킬카르보닐, 아미노알킬카르보닐, 옥실알킬카르보닐, 알킬 에테르, 알킬 에스테르, 알킬 아미드, 옥실알킬에테르, 아미노알킬에테르, 옥실알킬에스테르, 아미노알킬에스테르, 옥실알킬아미드, 아미노알킬아미드, 옥심; NH2, 또는 OH이고;
R3는 독립적으로, -NHC(O)-, -C(O)-, SO2-, -SO2NH-, -NR6SO2-, R6NHC(O), R6OC(O), SO2R6, SO3R6 , PR6R6', POR6R6', CH2OP(O)(OR6)2, C(O)OP(O)(OR6)2, PO(OR6)(OR6'), P(O)(OR6)OP(O)(OR6')2, R6C(O), C(O)NR6R6'; 선형 또는 분지형 C1-C6의 알킬, 알킬 알코올, 알킬 아민(1차, 2차, 3차 아민 포함) 또는 알킬 카르복실산; C2-C6의 헤테로알킬, 알킬사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬, 헤테로사이클릭, 사이클로알킬, 헤테로알킬사이클로알킬, 알킬카르보닐, 알킬 에테르, 알킬 에스테르, 알킬 아미드, 옥심이고;
R4는 할로(F, Cl, Br 또는 I), CN, NO2, SO3H, OR6, SR6, S(O2)R6, NH(R6)S(O2)R6', N(R6)(R6'), C(O)XR6, N+(R6)(R6')(R6'')이고;
X는 NH 또는 O이고;
R5는 H, C(O)OR6, C(O)NHR6, R6C(O); 선형 또는 분지형 C1-C6의 알킬, 알킬 알코올, 알킬 아민(1차, 2차, 3차 아민 또는 4차 암모늄 포함), 알킬 카르복실산; C2-C6의 카보네이트, 카바마이드, 헤테로알킬, 알킬사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬, 헤테로사이클릭, 사이클로알킬, 헤테로알킬사이클로알킬, 알킬카르보닐, 알킬 에테르, 알킬 에스테르, 알킬 아미드 또는 아미노산이고;
R6, R6' 및 R6''은 독립적으로, H; C1-C6의 알킬, 알킬 알코올, 알킬 아민(1차, 2차, 3차 아민 또는 4차 암모늄 포함) 또는 알킬 카르복실산; C2-C6의 헤테로알킬, 알킬사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬, 헤테로사이클릭, 사이클로알킬, 헤테로알킬사이클로알킬, 알킬카르보닐, 알킬 에테르, 알킬 에스테르, 알킬 아미드 또는 아미노산; 또는 제약상 염이고;
또한, R3는 부재할 수 있고, C-10의 X는 L에 직접 연결되고, R2, R3, X, C-10 및 C-9는 함께 결합하여, 5-원, 6-원 또는 7-원 헤테로사이클릭 고리를 형성할 수 있다.
화학식 (IV)의 브래킷 내부의 예시적인 화합물은 하기 구조:
Figure pct00027
Figure pct00028
Figure pct00029
Figure pct00030
Figure pct00031
Figure pct00032
Figure pct00033
또는 그의 제약상 허용되는 염, 수화물 또는 수화된 염; 또는 이들 화합물의 다형 결정 구조; 또는 그들의 동위원소, 광학 이성질체, 라세미체, 부분입체 이성질체 또는 거울상 이성질체를 갖고; 여기서 "
Figure pct00034
", R6 및 R6'은 상기와 동일하게 정의된다.
또 다른 특정 실시예에서, 세포-결합 분자-캄프토테신 유사체의 접합체는 하기 화학식 (V):
Figure pct00035
또는 그 제약상 허용되는 염, 수화물 또는 수화된 염; 또는 이들 화합물의 다형 결정 구조; 또는 그 동위원소, 광학 이성질체, 라세미체, 부분입체 이성질체 또는 거울상 이성질체를 갖고;
여기서, T는 표적화 또는 결합 리간드이고; L은 방출 가능한 링커이고; n은 1 내지 30이고 m은 1 내지 10이고;
브래킷 내부에는 강력한 캄프토테신 유사체가 존재하고;
R1 및 R2는 독립적으로, H, NR6R6', -N+R6R6'R6'', OH, SH; 선형 또는 분지형 C1-C6의 알킬, 알킬옥실, 알킬 아미노(1차, 2차, 3차 아미노 또는 4차 암모늄 포함), 옥실카르보닐, 아미노카르보닐, 아미노알킬, 옥실알킬, 아미노알킬아미노, 옥실알킬아미노, 아미노알킬옥실, 옥실알킬옥실, 또는 알킬 카르복실릭; C2-C6의 헤테로알킬, 알킬사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬, 헤테로사이클릭, 옥실사이클로알킬, 아미노사이클로알킬, 헤테로알킬사이클로알킬, 알킬카르보닐, 아미노알킬카르보닐, 옥실알킬카르보닐, 알킬 에테르, 알킬 에스테르, 알킬 아미드, 옥실알킬에테르, 아미노알킬에테르, 옥실알킬에스테르, 아미노알킬에스테르, 옥실알킬아미드, 아미노알킬아미드, 옥심; NH2, 또는 OH이고;
R3은 독립적으로, R6NHC(O)-, R6C(O)-, R6SO2, -SO2NHR6 , R6OC(O), R6'SO2R6-, SO3R6 , PR6R6', POR6R6', CH2OP(O)(OR6)2, C(O)OP(O)(OR6)2, PO(OR6)(OR6'), P(O)(OR6)OP(O)(OR6')2, R6C(O), C(O)NR6R6'; 선형 또는 분지형 C1-C6의 알킬, 알킬 알코올, 알킬 아민(1차, 2차, 3차 아민 포함) 또는 알킬 카르복실산; C2-C6의 헤테로알킬, 알킬사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬, 헤테로사이클릭, 사이클로알킬, 헤테로알킬사이클로알킬, 알킬카르보닐, 알킬 에테르, 알킬 에스테르, 알킬 아미드, 옥심이고;
R4는 할로(F, Cl, Br 또는 I), CN, NO2, SO3H, OR6, SR6, S(O2)R6, NH(R6)S(O2)R6', N(R6)(R6'), C(O)XR6, N+(R6)(R6')(R6'')이고;
X는 NH 또는 O이고;
R5는 C(O)O, C(O)NH, R6C(O); 선형 또는 분지형 C1-C6의 알킬, 알킬 알코올, 알킬 아민(1차, 2차, 3차 아민 또는 4차 암모늄 포함), 알킬 카르복실산; C2-C6의 카보네이트, 카바마이드, 헤테로알킬, 알킬사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬, 헤테로사이클릭, 사이클로알킬, 헤테로알킬사이클로알킬, 알킬카르보닐, 알킬 에테르, 알킬 에스테르, 알킬 아미드 또는 아미노산이고;
R6, R6' 및 R6''은 독립적으로, H; C1-C6의 알킬, 알킬 알코올, 알킬 아민(1차, 2차, 3차 아민 또는 4차 암모늄 포함) 또는 알킬 카르복실산; C2-C6의 헤테로알킬, 알킬사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬, 헤테로사이클릭, 사이클로알킬, 헤테로알킬사이클로알킬, 알킬카르보닐, 알킬 에테르, 알킬 에스테르, 알킬 아미드 또는 아미노산; 또는 제약상 염이고;
또한, R5는 부재할 수 있고, C-20의 O는 L에 직접 연결되고, R2, R3, X, C-10 및 C-9는 함께 결합하여, 5-원, 6-원 또는 7-원 헤테로사이클릭 고리를 형성할 수 있다.
화학식 (V)의 브래킷 내부의 예시적인 화합물은 하기 구조:
Figure pct00036
Figure pct00037
Figure pct00038
Figure pct00039
Figure pct00040
Figure pct00041
Figure pct00042
Figure pct00043
Figure pct00044
Figure pct00045
Figure pct00046
또는 그의 제약상 허용되는 염, 수화물 또는 수화된 염; 또는 이들 화합물의 다형 결정 구조; 또는 그들의 동위원소, 광학 이성질체, 라세미체, 부분입체 이성질체 또는 거울상 이성질체를 갖고; 여기서, "
Figure pct00047
", R6 및 R6'은 상기와 동일하게 정의된다.
또 다른 실시예에서, 본 발명의 캄프토테신 유사체를 생산하기 위한 합성 방법 및 세포-표면 수용체 결합 분자에 대한 접합이 도 1 내지 도 32에 도시된 바와 같이 예시되지만, 이들에 제한되지 않는다.
또 다른 실시예에서, 방출 가능한 링커(L)는 C, N, O, S, Si, 및 P로부터 선택된 원자의 사슬이고, 이는 세포-표면 결합 리간드(T)를 강력한 캄프토테신 유사체에 공유적으로 연결한다. 링커는 약 2 내지 약 100개의 원자 범위와 같이 매우 다양한 길이를 가질 수 있다. 링커를 형성하는데 사용된 원자는 예를 들어, 알킬렌, 알케닐렌 및 알키닐렌, 에테르, 폴리옥시알킬렌, 에스테르, 아민, 이민, 폴리아민, 히드라진, 히드라존, 아미드, 우레아, 세미카바자이드, 카바자이드, 알콕시아민, 알콕실아민, 우레탄, 아미노산, 아실옥실아민, 히드록삼산 및 기타 여러 가지를 형성하는 것과 같이, 모든 화학적으로 관련된 방식으로 결합될 수 있다. 또한, 방출 가능한 링커(L)를 형성하는 원자는 포화 또는 불포화일 수 있거나, 라디칼일 수 있거나, 또는 링커에서 사이클로 알칸, 사이클릭 에테르, 사이클릭 아민, 아릴렌, 헤테로아릴렌 등을 포함하여, 2가 사이클릭 구조를 형성하도록 서로에 대해 고리화(또는 사이클릭화)될 수 있다.
용어 "방출 가능한 링커"는 pH-불안정(labile), 산-불안정, 염기-불안정, 산화적으로 불안정, 대사적으로 불안정, 생화학적으로 불안정 또는 효소-불안정 결합과 같이, 생리학적 조건 하에서 끊어질 수 있는 적어도 하나의 결합을 포함하는 링커를 지칭한다. 결합 파괴를 초래하는 그러한 생리학적 조건은 반드시 생물학적 또는 대사적 과정을 포함하는 것은 아니며, 대신 가수분해 또는 치환 반응과 같은 표준 화학 반응, 예를 들어 세포질 pH보다 낮은 pH를 갖는 엔도솜, 및/또는 악성 세포 내부에 풍부한 글루타티온의 아밀리몰(amillimolar) 범위와 같은 세포내 티올과의 이황화 결합 교환 반응을 포함할 수 있음을 이해해야 한다.
접합체의 방출 가능한 링커 L은 화학식: --Ww-(Aa)r-Vv--를 가질 수 있고, 여기서: --W--는 스트레처 유닛이고; w는 0 또는 1이고; 각각의 --Aa--는 독립적으로 아미노산 유닛이고; r은 독립적으로 0 내지 12 범위의 정수이고; --V--는 스페이서 유닛이고; v는 0, 1 또는 2이다.
스트레처 유닛(--W--)은 존재하는 경우, 표적 결합 분자 유닛(T)을 아미노산 유닛(--Aa--)에 연결하거나, 도는 Aa가 존재하지 않는 경우, V에 연결한다.
스트레처 유닛(W)은 독립적으로 자가-희생 스페이서, 펩티딜 유닛, 히드라존 결합, 이황화물 또는 티오에테르 결합을 함유할 수 있다. 이와 관련하여, 결합 분자(T)는 스트레처의 작용기와 결합을 형성할 수 있는 작용기를 갖는다. 자연적으로 또는 화학적 조작을 통해 결합 분자에 존재할 수 있는 유용한 작용기는 술프히드릴(--SH), 아미노, 히드록실, 카르보닐, 탄수화물의 아노머 히드록실기 및 카르복실을 포함하지만 이들에 제한되지는 않는다. 바람직한 작용기는 술프히드릴, 카르복시 및 아미노이다. 술프히드릴기는 리간드의 분자내 이황화 결합의 환원에 의해 생성될 수 있다. 대안적으로, 술프히드릴기는 2-이미노티올란(트라우트(Traut's)의 시약) 또는 티오락톤 또는 다른 술프히드릴 생성 시약을 사용하여 결합 분자의 리신 모이어티의 아미노기 반응에 의해 생성될 수 있다. 예를 들어, 각각 환원 또는 가수분해에 의해 뒤따르는 이황화 결합 링커 또는 티올로 T를 변형시킨다.
T에 연결된 W의 예시적인 예는 하기 구조를 갖는다:
Figure pct00048
Figure pct00049
여기서, R20 및 R21은 -C1~C9 알킬렌-, -C1~C7 카르보사이클로-, -O-(C1~C8 알킬)-, -아릴렌-, -C1~C9 알킬렌-아릴렌-, -아릴렌, -C1~C9 알킬렌-, -C1~C9 알킬렌-(C1~C8 카르보사이클로)-, -(C3~C7 카르보사이클로)-C1~C9 알킬렌-, -C3~C8 헤테로사이클로-, -C1~C10 알킬렌-(C3~C8 헤테로사이클로)-, -(C3~C8 헤테로사이클로)-C1~C9 알킬렌-, -(CH2CH2O)k-, -(CH(CH3)CH2O)k-, 및 -(CH2CH2O)k-CH2-로부터 선택되고; k는 1 내지 20 범위의 정수이고; R' 및 R''는 독립적으로 H 또는 CH3이다.
또 다른 실시예에서, 상기 예시된 바와 같이 공유적으로 T에 대한 W의 접합은 전형적인 접합 방법론인 다양한 화학 반응을 통해 이루어질 수 있다:
접합체의 아미드 결합 형성의 예:
Figure pct00050
Figure pct00051
여기서, 스트레처 유닛은 리간드의 1차 또는 2차 아미노기와 아미드 결합을 형성할 수 있는 반응성 E 부위를 포함할 수 있다. 반응성 E의 예는 히드록시숙신이미딜 에스테르(NHS, 술포-NHS 등), 4-니트로페닐 에스테르, 펜타플루오로페닐 에스테르, 테트라플루오로페닐(술포-테트라플루오로페닐 포함) 에스테르, 무수물, 산 염화물, 술포닐 클로라이드, 이소시아네이트 및 이소티오시아네이트를 포함하지만 이들에 제한되지 않는다.
접합체의 티올 에테르 또는 이황화 결합 링키지의 예:
Figure pct00052
여기서, 스트레처 유닛은 위에 도시된 바와 같이, 티올 에테르 또는 티올기를 갖는 이황화 결합을 형성할 수 있는 술프히드릴(sulfhydryl) 반응성 부위를 포함하며, 이는 결합 리간드 T의 분자내 이황화 결합의 환원에 의해 생성되거나, 결합 리간드 T에 대한 화학적 변형에 의해 생성된다.
본 발명의 또 다른 측면에서, 스트레처의 반응성 기는 결합 분자 상에서 화학적으로 변형될 수 있는 케톤(-C(=O)R) 기 또는 알데히드(--CHO)에 반응성인 반응성 부위를 포함한다. 예를 들어, 결합 분자 T 상의 탄수화물은 과요오드산나트륨과 같은 시약을 사용하여 약하게 산화되어, 알데히드 또는 케톤(-C(=O)R) 기를 생성할 수 있고; 또는 항체(또는 단백질 또는 펩티드)의 N-말단에 있는 아미노산의 아민은 완충 용액에서 피리독살 5'-포스페이트(PLP)와 반응하여, 케톤기를 도입할 수 있다(Scheck & Francis, ACS Chem. Biol. 2007 , 2, 247-251). 생성된 (-C=O) 유닛은 히드라지드, 옥심, 1차 또는 2차 아민, 히드라진, 티오세미카르바존, 히드라진 카르복실레이트 및 아릴히드라지드와 같은 작용기를 함유하는 스트레처로 축합될 수 있다.
히드라존, 또는 옥심 또는 이민 링키지의 접합 예:
Figure pct00053
여기서, R20 및 R21은 전술한 바와 같고, R25는 아미노산의 유기 치환기이다.
본 발명의 또 다른 측면에서, 스트레처(스페이서 V 및/또는 아미노산을 함유할 수 있음)는 결합 분자(T)에 연결될 수 있고, 이어서 수성 완충 용액에서 강력한 캄프토테신 유사체를 결합 분자-스트레처 모이어티에 접합할 수 있다.
이러한 종류의 2단계 접합의 예(R16에 연결된 약물은 여기에서 생략됨):
Figure pct00054
Figure pct00055
여기서, E는 히드록시숙신이미딜 에스테르(NHS, 술포-NHS 등), 4-니트로페닐 에스테르, 펜타플루오로페닐 에스테르, 테트라플루오로페닐(술포-테트라플루오로페닐 포함) 에스테르, 무수물, 산 염화물, 술포닐 클로라이드, 이소시아네이트 및 이소티오시아네이트와 같은 것을 포함하지만 이들에 제한되지 않는다. R' 및 R''는 독립적으로 H 또는 CH3이고; R20, R16 및 Ar은 본 발명 전반에 걸쳐 다양일 실시예에서 정의된 것이고; R26은 독립적으로 H, F, 또는 NO2이고; J는 독립적으로 F, Cl, Br, I, 토실레이트(TsO) 또는 메실레이트(MsO)이고, 여기서
Figure pct00056
는 도시된 바와 같이 적어도 하나의 캄프토테신 유사체/약물
Figure pct00057
을 함유한다.
본 발명의 또 다른 측면에서, 스트레처는 먼저 강력한 캄프토테신 유사체에 연결될 수 있고, 이어서 최대 50%의 유기 공용매를 함유하는 pH 3 ~ 10(바람직하게는 pH 5 ~ 8.5) 수성 완충 용액에서 결합 분자(T)를 접합할 수 있다.
이러한 종류의 2단계 접합의 예:
Figure pct00058
Figure pct00059
여기서, E는 히드록시숙신이미딜 에스테르(NHS, 술포-NHS 등), 4-니트로페닐 에스테르, 펜타플루오로페닐 에스테르, 테트라플루오로페닐(술포-테트라플루오로페닐 포함) 에스테르, 무수물, 산 염화물, 술포닐 클로라이드, 이소시아네이트 및 이소티오시아네이트와 같은 것을 포함하지만, 이들에 제한되지 않는다. R' 및 R''는 독립적으로 H 또는 CH3이고; R16, R20 및 Ar은 본 발명 전반에 걸쳐 다양일 실시예에서 정의된 것이고; R26은 독립적으로 H, F, 또는 NO2이고; J는 독립적으로 F, Cl, Br, I, 토실레이트(TsO) 또는 메실레이트(MsO)이고, 여기서
Figure pct00060
는 적어도 하나의 캄프토테신 유사체/약물을 함유한다.
아미노산 유닛(-Aa-)은 존재할 경우, 스페이서 유닛이 존재할 때 스트레처 유닛을 스페이서 유닛에 연결하고, 스페이서 유닛이 부재할 때 스트레처 유닛을 캄프토테신 유사체 유닛에 연결하고, 스트레처 유닛 및 스페이서 유닛이 부재할 때 결합 분자(T)를 캄프토테신 유사체 유닛에 연결한다. -(Aa)r-은 자연 또는 비자연 아미노산, 디펩티드, 트리펩티드, 테트라펩티드, 펜타펩티드, 헥사펩티드, 헵타펩티드, 옥타펩티드, 노나펩티드, 데카펩티드, 운데카펩티드 또는 도데카펩티드 유닛의 동일하거나 상이한 아미노산 서열이고, r은 0 내지 12 범위의 정수이다. 본원에 사용된 용어 아미노산은 일반적으로 아미노알킬카르복실레이트를 지칭하며, 여기서 알킬 라디칼은 예를 들어, 알킬, 아실, 히드록시 알킬, 술프히드릴알킬, 아미노알킬, 카르복시알킬 등으로 선택적으로 치환된다. 자연 및 비자연 아미노산 및 펩티드는 책자[G. C. Barrett and D. T. Elmore, "Amino Acid and Peptide", Cambridge University Press, 2004]에 기재되어 있다. 또한, 아미노산은 메틸, 벤질, 히드록시메틸, 티오메틸, 카르복실, 카르복실메틸, 구아니디노프로필 등을 함유하는 내부 사슬(intra chain)을 갖는 베타, 감마 및 더 긴 아미노산을 지칭한다. 보다 바람직하게는, 아미노산은 아스파라긴, 아스파르트산, 시스테인, 글리신, 글루탐산, 리신, 글루타민, 아르기닌, 세린, 오르니틴, 트레오닌 등으로부터 선택된다.
본 발명의 아미노산 유닛은 종양-연관 프로테아제를 포함하는 하나 이상의 효소에 의해 효소적으로 절단되어, 캄프토테신 유사체를 유리(liberate)시킬 수 있고, 이는 일 실시예에서, 방출 시 생체내에서 양성자화되어(protonated), 캄프토테신 유사체를 제공한다.
스페이서 유닛(-V-)은 존재할 경우, 아미노산 유닛이 존재할 때 아미노산 유닛을 캄프토테신 유사체에 연결한다. 대안적으로, 스페이서 유닛은 아미노산 유닛이 부재할 때 스트레처 유닛을 캄프토테신 유사체에 연결한다. 스페이서 유닛은 또한 아미노산 유닛과 스트레처 유닛이 둘 다 부재할 때, 캄프토테신 유사체 및 결합 분자(T)에 연결한다. 스페이서 링커는 접합체의 수용해도, 생물학적 수송, 우선적인 신장 청소율, 흡수율(uptake), 흡수, 생체분포, 및/또는 생체이용률을 실질적으로 증가시키는 작용기를 함유할 수 있다. 스페이서 유닛은 두 가지의 일반적인 유형: 자가-희생 및 비 자가-희생 유형을 갖는다. 비 자가-희생 스페이서 유닛은 캄프토테신 유사체-링커-결합 분자 접합체 또는 캄프토테신 유사체-링커 화합물로부터의 아미노산 유닛의 절단, 특히 효소에 의한 절단 후에, 스페이서 유닛의 일부 또는 전부가 캄프토테신 유사체에 결합된 채로 남아 있는 것이다. 자가-희생 유닛은 파라-아미노벤질-카르바모일(PAB) 기, 2-아미노이미다졸-5-메탄올 유도체, 헤테로사이클릭 PAB 유사체, 베타-글루쿠로나이드, 오르토 또는 파라-아미노벤질아세탈과 전자적으로 유사한 방향족 화합물, 또는 다음 구조 중 하나를 포함한다:
Figure pct00061
여기서, (*) 원자는 추가 스페이서 또는 방출 가능한 링커 유닛, 아미노산(Aa)r, 캄프토테신 유사체, 및/또는 결합 분자(T)의 부착 지점이고; X, Y 및 Z3은 독립적으로 NH, O 또는 S이고; Z2는 독립적으로 H, NH, O 또는 S이고; v는 0 또는 1이고; Q는 독립적으로 H, OH, C1~C6 알킬, (OCH2CH2)n, F, Cl, Br, I, OR17, SR17, NR17R18, N=NR17, N=R17 , NR17R18 , NO2, SOR17R18, SO2R17, SO3R17, OSO3R17, PR17R18, POR17R18, PO2R17R18, OPO(OR17)(OR18), 또는 OCH2PO(OR17(OR18)이고, 여기서 R17, R18은 독립적으로, H; C1~C8의 알킬; C2~C8의 알케닐, 알키닐, 헤테로알킬; C3~C8의 아릴, 헤테로사이클릭, 카르보사이클릭, 사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬, 헤테로아르알킬, 알킬카르보닐; 또는 제약상 양이온 염이고, v는 1 내지 20 범위의 정수이고;
비 자가-희생 스페이서 링커 유닛(-V-)의 예:
Figure pct00062
Figure pct00063
Figure pct00064
Figure pct00065
또는 1 내지 20개의 동일하거나 상이한 아미노산을 함유하는 L- 또는 D-, 자연 또는 비자연 펩티드;
여기서 "*" 및 "
Figure pct00066
"는 추가 스페이서 또는 방출 가능한 링커, 캄프토테신 유사체, 및/또는 결합 분자의 부착 지점이고; m은 1 내지 10이고; n은 1 내지 20이고; X2, X3, X4, X5, 또는 X6은 NH; NHNH; N(R12); N(R12)N(R12'); O; S; C1-C6의 알킬; C2-C6의 헤테로알킬, 알킬사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬; C3-C8의 아릴, Ar-알킬, 헤테로사이클릭, 카르보사이클릭, 사이클로알킬, 헤테로알킬사이클로알킬, 알킬카르보닐, 헤테로아릴; CH2OR12, CH2SR12, CH2NHR12 또는 1 내지 8개의 아미노산으로부터 독립적으로 선택되고; 여기서, R12 및 R12'는 독립적으로, H; C1-C8의 알킬; C2-C8의 헤테로알킬, 알킬사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬; C3-C8의 아릴, Ar-알킬, 헤테로사이클릭, 카르보사이클릭, 사이클로알킬, 헤테로알킬사이클로알킬, 알킬카르보닐, 헤테로아릴; 또는 1 내지 8개의 탄소 원자의 에스테르, 에테르 또는 아미드; 또는 화학식 (OCH2CH2)p 또는 (OCH2CH(CH3))p의 폴리에틸렌옥시 유닛, 또는 이들 조합으로부터 선택되고, 여기서 p는 0 내지 약 1000 범위의 정수이고;
L의 적어도 하나의 결합이 생리학적 조건: pH-불안정, 산-불안정, 염기-불안정, 산화적으로 불안정, 대사적으로 불안정, 생화학적으로 불안정 또는 효소-불안정 결합의 생리학적 조건 하에서 끊어질 수 있는 방출 가능한 링커 L의 성분은 다음 구조 중 하나를 갖는다:
-(CR15R16)m(Aa)r(CR17R18)n(OCH2CH2)t-, -(CR15R16)m(CR17R18)n(Aa)r(OCH2CH2)t-, -(Aa)r-(CR15R16)m(CR17R18)n(OCH2CH2)t-, -(CR15R16)m(CR17R18)n(OCH2CH2)r(Aa)t-, -(CR15R16)m-(CR17=CR18)(CR19R20)n(Aa)t(OCH2CH2)r-, -(CR15R16)m(NR11CO)(Aa)t(CR19R20)n-(OCH2CH2)r-, -(CR15R16)m(Aa)t(NR21CO)(CR19R20)n(OCH2CH2)r-, -(CR15R16)m(OCO)(Aa)t(CR19R20)n(OCH2-CH2)r-, -(CR15R16)m(OCNR17)(Aa)t(CR19R20)n(OCH2CH2)r-, -(CR15R16)m-(CO)(Aa)t(CR19R20)n-(OCH2CH2)r-, -(CR15R16)m(NR21CO)(Aa)t(CR19R20)n(OCH2CH2)r-, -(CR15R16)m(OCO)(Aa)t-(CR19R20)n-(OCH2CH2)r-, -(CR15R16)m(OCNR17)(Aa)t(CR19R20)n-(OCH2CH2)r-, -(CR15R16)m-(CO)(Aa)t(CR19R20)n-(OCH2CH2)r-, -(CR15R16)m-페닐-CO(Aa)t-(CR17R18)n-, -(CR15R16)m-furyl-CO(Aa)t(CR17R18)n-, -(CR15R6)m-옥사졸릴-CO(Aa)t(CR17R18)n-, -(CR15R16)m티아졸일-CO-(Aa)t(CCR17R18)n-, -(CR15R16)t-티에닐-CO(CR17R18)n-, -(CR15R16)t-이미다졸일-CO-(CR17R18)n-, -(CR15R16)t-모르폴리노-CO(Aa)t(CR17R18)n-, -(CR15R16)t-피페라지노-CO(Aa)t-(CR17R18)n-, -(CR15R16)tN-메틸피페라진-CO(Aa)t(CR17R18)n-, -(CR15R16)m-(Aa)t페닐-, -(CR15R16)m-(Aa)t푸릴-, -(CR15R16)m-옥사졸릴(Aa)t-, -(CR15R16)m-티아졸릴(Aa)t-, -(CR15R16)m-티에닐-(Aa)t-, -(CR15R16)m-이미다졸릴(Aa)t-, -(CR15R16)m-모르폴리노-(Aa)t-, -(CR15R16)m-피페라지노-(Aa)t-, -(CR15R16)m-N-메틸피페라지노-(Aa)t-, -K(CR15R16)m(Aa)r(CR17R18)n-(OCH2CH2)t-, -K(CR15R16)m-(CR17R18)n(Aa)r(OCH2CH2)t-, -K(Aa)r(CR15R16)m(CR17R18)n-(OCH2CH2)t-, -K(CR15R16)m-(CR17R18)n(OCH2CH2)r(Aa)t-, -K(CR15R16)m(CR17=CR18)(CR19R20)n(Aa)t(OCH2CH2)r, -K(CR15R16)m(NR11CO)(Aa)t-(CR19R20)n(OCH2CH2)r-, -K(CR5R6)m(Aa)t-(NR21CO)(CR19R20)n-(OCH2CH2)r-, -K(CR15R16)m(OCO)(Aa)t(CR19R20)n-(OCH2CH2)r-, -K(CR15R16)m(OCNR17)(Aa)t-(CR19R20)n-(OCH2CH2)r-, -K(CR15R16)m(CO)(Aa)t(CR19R20)n(OCH2-CH2)r-, -K(CR15R16)m(NR21-CO)(Aa)t(CR19R20)n-(OCH2CH2)r-, -K(CR15R16)m(OCO)(Aa)t-(CR19R20)n(OCH2CH2)r-, -K(CR15R16)m-(OCNR17)(Aa)t-(CR19R20)n(OCH2CH2)r-, -K(CR15R16)m-(CO)(Aa)t(CR19R20)n-(OCH2CH2)r-, -K(CR15R16)m-페닐-CO(Aa)t(CR17R18)n-, -K-(CR15R16)m-푸릴-CO(Aa)t(CR17R18)n, -K(CR15R16)m-옥사졸릴-CO(Aa)t(CR17R18)n-, -K(CR15R16)m-티아졸릴-CO(Aa)t(CR17R18)n, -K(CR15R16)t-티에닐-CO(CR17R18)n-, -K(CR15R16)t이미다졸릴-CO-(CR17R18)n, -K(CR5R6)t모르폴리노-CO(Aa)t-(CR17R18)n-, -K(CR15R16)t-피페라지노-CO(Aa)t-(CR17R18)n-, -K(CR15R16)tN-메틸피페라진-CO(Aa)t(CR17R18)n-, -K(CR15R16)m(Aa)t-페닐, -K-(CR15R16)m(Aa)t푸릴-, -K(CR15R16)m-옥사졸일-(Aa)t-, -K(CR15R16)m티아졸릴(Aa)t, -K(CR15R16)m-티에닐-(Aa)t-, -K(CR15R16)m-이미다졸릴(Aa)t-, -K(CR15R16)m-모르폴리노(Aa)t, -K(CR15R16)m피페라지노(Aa)tG, -K(CR5R6)m-N-메틸피페라지노(Aa)t-; 여기서, Aa, m, n은 상기 기술되어 있고; 여기서 t 및 r은 독립적으로 0 내지 100이고; R13, R14, R15, R16, R17, R18, R19, R20, 및 R21은 H; 할로겐화물; C1~C8의 알킬 또는 헤테로알킬; C2~C8의 아릴, 알케닐, 알키닐, 에테르, 에스테르, 아민 또는 아미드; 하나 이상의 할로겐화물, CN, NR12R12', CF3, OR12, 아릴, 헤테로사이클, S(O)R12, SO2R12, -CO2H, -SO3H, -OR12, -CO2R12, -CONR12, -PO2R12R13, -PO3H 또는 P(O)R12R12'R13에 의해 선택적으로 치환되는 C3~C8의 아릴로부터 독립적으로 선택되고; K는 NH, NR12, -SS-, -C(=O)-, -C(=O)NH-, -C(=O)O-, -C=NH-O-, -C=N-NH-, -C(=O)NH-NH-, O, S, Se, B, Het(C3-C12를 갖는 헤테로사이클릭 또는 헤테로방향족 고리); 또는 동일하거나 상이한 1 내지 20개의 아미노산을 함유하는 펩티드이다.
본 발명의 또 다른 측면에서, 링커 L은 바람직하게는 아미노, 설폰아미드, 포스파미드 또는 아미노산 기를 함유하고, 여기서 화학식 (I-q)는 측쇄로서 링커 L에 연결될 수 있다. 링커 L의 아미노산은 바람직하게는 아스파라긴산, 글루탐산, 리신, 오르니틴 또는 티로신으로부터 선택되며, 여기서 이들의 작용성 아미노기, 카르복실기 또는 페놀기 중 1개 또는 2개가 하기 화학식(I-q)의 긴 측쇄에 연결 수 있다:
Figure pct00067
여기서,
Figure pct00068
는 링커에서 설포닐, 포스페이트, 아미노 또는 카르보닐 기, 바람직하게는 링커에서 아스파르트산, 글루탐산, 리신, 오르니틴 또는 티로신의 카르보닐, 아미노 또는 페놀기에 연결되는 부위이고; G1은 NH, NHNH, C(=O), NHNHC(O), C(=O)NH, C(=NH)NH, CH2, CH2C(O), C(O)O, NHC(O)NH, 또는 (Aa)r,(r=1-12)이고; G2는 NH, NHNH, C(=O), NHNHC(O), C(=O)NH, C(=NH)NH, CH2, C(O)O, NHC(O)NH, O, S, B, P(O)(OH), NHP(O)(OH), NHP(O)(OH)NH, CH2P(O)(OH)NH, OP(O)(OH)O, CH2P(O)(OH)O, NHS(O)2, NHS(O)2NH, CH2S(O)2NH, OS(O)2O, CH2S(O)2O, Ar, ArCH2, ArO, ArNH, ArS, ArNR1, (Aa)r,(r=1-12)이고; X1 및 X2는 독립적으로 O, CH2, S, NH, N(R12), +NH(R12), +N(R12)(R13), C(O), OC(O), OC(O)O, NHSO2NH, NHP(O)(NH)2, SO2NH, P(O)(NH)2, NHS(O)NH, NHP(O)(OH)(NH), OC(O)NH, NHC(O)NH이고; Y2는 O, NH, NR1, CH2, S, Ar이고; G3은 OH, SH, OR1, SR1, OC(O)R1, NHC(O)R12, C(O)R12, CH3, NH2, NR12, +NH(R12), +N(R12)(R13), C(O)OH, C(O)NH2, NHC(O)NH2, BH2, BR12R13, P(O)(OH)2, NHP(O)(OH)2, NHP(O)(NH2)2, S(O)2(OH), (CH2)q1C(O)OH, (CH2)q1P(O)(OH)2, C(O)(CH2)q1C(O)OH, OC(O)(CH2)q1C(O)OH, NHC(O)(CH2)q1C(O)OH, CO(CH2)q1P(O)(OH)2, NHC(O)O(CH2)q1-C(O)OH, OC(O)NH-(CH2)q1C(O)OH, NHCO(CH2)q1P(O)(OH)2, NHC(O)(NH)(CH2)q1C(O)OH, CONH(CH2)q1-P(O)(OH)2, NHS(O)2(CH2)q1C(O)OH, CO(CH2)q1S(O)2(OH), NHS(O)2NH-(CH2)q1C(O)OH, OS(O)2NH(CH2)q1C(O)OH, NHCO(CH2)q1S(O)2(OH), NHP(O)(OH)(NH)-(CH2)q1C(O)OH, CONH(CH2)q1S(O)(OH), OP(O)(OH)2, (CH2)q1P(O)(NH)2, NHS(O)2(OH), NHS(O)2NH2, CH2S(O)2NH2, OS(O)2OH, OS(O)2OR1, CH2S(O)2OR1, Ar, ArR12, ArOH, ArNH2, ArSH, ArNHR12, 또는 (Aa)q1이고; p1, p2 및 p3은 독립적으로 0 내지 30이지만 동시에 0이 아니고; q1 및 q2는 독립적으로 0 내지 24이고; 바람직하게는 G3는 선형 또는 분지형의, C2-C50 폴리카르복실산 또는 C2-C50 폴리알킬아민, C6-C50 올리고당 또는 다당류, 4차 암모늄 양이온 및 술포네이트 음이온으로 이루어진 C6-C50 쯔비터이온성 베타인 또는 쯔비터이온성 폴리(설포베타인)(PSB), 생분해성 중합체(예를 들어, 폴리(락트산/글리콜)산(PLGA), 폴리(아크릴레이트), 키토산, N-(2-히드록시프로필)-메타크릴아미드의 공중합체, 폴리[2-(메타크릴로일옥시)에틸 포스포릴콜린](PMPC), 폴리-L-글루탐산, 폴리(락타이드-코-글리콜라이드)(PLG), 폴리(락타이드-코-글리콜라이드), 폴리(에틸렌 글리콜)(PEG), 폴리(프로필렌 글리콜)(PPG), 폴리(락타이드-코-글리콜라이드), 폴리(에틸렌 글리콜)-변성 펩티드, 폴리(에틸렌 글리콜)-변성 지질, 폴리(에틸렌 글리콜)-변성 알킬카르복산(alkylcarboxic acid), 폴리(에틸렌 글리콜)-변성 알킬아민, 폴리(락타이드)-코-글리콜라이드, 폴리사르코신, 히알루론산(HA)(글리코사미노글리칸), 헤파린/헤파란 설페이트(HSGAG), 콘드로이틴 설페이트/더마탄 설페이트(CSGAG), 폴리(에틸렌 글리콜)-변성 알킬설페이트, 폴리(에틸렌 글리콜)-변성 알킬포스페이트, 또는 폴리(에틸렌 글리콜)-변성 알킬 4차 암모늄이다.
보다 바람직하게는, 화학식 (I-q)는 구체적으로 하기로부터 선택된다:
Figure pct00069
여기서, G1, p1, p2, p3, Aa, r, X2, q1, m1은 상기와 동일하게 정의된다.
본 발명의 또 다른 측면에서, 본 발명의 결합 분자(T)는 현재 알려져 있거나 알려지고 있는 임의의 종류의 분자일 수 있으며, 이는 치료적으로 목적하는 세포 모집단의 모이어티와 복합체를 형성하거나 이와 반응하도록 결합되거나, 그렇지 않으면 생물학적으로 변형된 분자이다. 결합 분자 유닛은 결합 분자(T)가 반응하는 특정 표적 세포 모집단에 캄프토테신 유사체를 전달하는 역할을 한다.
본 발명의 또 다른 특정 측면에서, 세포-결합 분자에 대한 CPT 유사체의 접합체는 하기 화학식 (IIq-1), (IIq-2), (IIq-3), (IIq-4), (IIq-5), (IIq-6), (IIq-7), (IIq-8)를 갖는다:
Figure pct00070
Figure pct00071
여기서, R' 및 R''는 독립적으로, H, Me, Et, i Pr, i Bu, Bz (CH2C6H5), CH2COOH, CH2CH2COOH, CH2CONH2, CH2CH2CONH2, CH2CH2CH2CH2NH2, CH2CH2SCH3, CH2OH, CH2CH2CH2NHC(=NH)NH2, CH(OH)CH3, CH2C6H4OH, CH2C3N2H3이고; p1 및 p2는 독립적으로 0 내지 24이고; q1은 1 내지 18이고; q3은 0 내지 6이고; q4는 0 내지 4이고; m' 및 m''는 독립적으로 0 내지 6이고; m'''은 0 또는 1이고; mAb는 세포-결합 분자, 바람직하게는 항체이고; 여기서 NH-Drug는 위에서 열거한 화합물 II-1 내지 II-61, III-1 내지 III-51, IV-1 내지 IV-47 및 V-1 내지 V-61이고; n은 1 내지 20이고;
Figure pct00072
는 NH-Drug에 연결되는 부위이다.
화학식 (IIq-1), (IIq-2), (IIq-3), (IIq-4), (IIq-5), (IIq-6), (IIq-7), (IIq-8)의 접합체의 제조는 하기 도시된 화학식 (IIq-9), (IIq-10), (IIq-11), (IIq-12), (IIq-13), (IIq-14), (IIq-15), (IIq-16)과 티올을 함유하는 세포-결합 분자와의 반응을 통한 것이다:
Figure pct00073
Figure pct00074
여기서, R' 및 R''는 독립적으로, H, Me, Et, i Pr, i Bu, Bz (CH2C6H5), CH2COOH, CH2CH2COOH, CH2CONH2, CH2CH2CONH2, CH2CH2CH2CH2NH2, CH2CH2SCH3, CH2OH, CH2CH2CH2NHC(=NH)NH2, CH(OH)CH3, CH2C6H4OH, CH2C3N2H3이고; p1 및 p2는 독립적으로 0 내지 24이고; q1은 1 내지 18이고; q3은 0 내지 6이고; q4는 0 내지 4이고; m' 및 m''는 독립적으로 0 내지 6이고; m'''은 0 또는 1이고; 여기서 NH-Drug는 위에 열거한 화합물 II-1 내지 II-61, III-1 내지 III-51, IV-1 내지 IV-47 및 V-1 내지 V-61이고,
Figure pct00075
는 NH-Drug에 연결되는 부위이다.
단백질, 특히 항체에서 유리 티올은 pH 5.0 ~ 8.5의 완충용액에서, 디티오트레이톨(DTT), 디티오에리트리톨(DTE), 디티올부틸아민(DTBA), L-글루타티온(GSH), 트리스(2-카르복시에틸)포스핀(TCEP), 2-메르캅토에틸아민(β-MEA), 또는 베타 메르캅토에탄올(β-ME, 2-ME)로부터 선택된 환원제에 의한, 단백질의 내부 사슬 이황화물 원자의 환원으로부터 생성될 수 있다. TCEP에 의한 단백질의 2개 이상의 이황화 잔기의 환원은 화학식 (IIq-9), (IIq-10), (IIq-11), (IIq-12), (IIq-13), (IIq-14), (IIq-15), 또는 (IIq-16)과의 접합과 동시에, 또는 그 이전에 수행될 수 있다. 단백질 상의 티올은 또한 아미노기(리신 잔기)와 트라우트 시약(2-이미노티올란) 또는 γ-티오부티로락톤과의 반응을 통해 생성될 수도 있다. 단백질과 화학식 (IIq-9), (IIq-10), (IIq-11), (IIq-12), (IIq-13), (IIq-14), (IIq-15), 또는 (IIq-16)의 접합은 트라우트 시약(2-이미노티올란), 또는 γ-티오부티로락톤 화합물을 갖는 하나의 포트(pot)에서 (동시에) 진행될 수 있다.
세포 결합제 T는 예를 들어, 전장 항체(다클론 및 단클론 항체)와 같은 고분자량 단백질; 단일 사슬 항체; Fab, Fab', F(ab')2, Fv [Parham, J. Immunol. 131, 2895-2902 (1983)]와 같은 항체 단편, Fab 발현 라이브러리에 의해 생성된 단편, 항-이디오타입(항-Id) 항체, CDR, 및 암 세포 항원, 바이러스성 항원 또는 미생물 항원에 면역-특이적으로 결합하는 상기 중 임의의 것의 에피토프-결합 단편; 인터페론(예를 들어, 유형 I, II, III); 펩티드; 림포카인, 예컨대 IL-2, IL-3, IL-4, IL-6, GM-CSF, 인터페론-감마(IFN-γ); 호르몬, 예컨대 인슐린, TRH(갑상선 자극 호르몬 방출 호르몬), MSH(멜라닌 세포 자극 호르몬), 안드로겐 및 에스트로겐과 같은 스테로이드 호르몬, 멜라닌 세포 자극 호르몬(MSH); 성장 인자 및 집락 자극 인자, 예컨대 표피 성장 인자(EGF), 과립구-대식세포 집락 자극 인자(GM-CSF), 변형 성장 인자(TGF), 예컨대 TGFα, TGFβ, 인슐린 및 인슐린 유사 성장 인자(IGF-I, IGF-II) G-CSF, M-CSF 및 GM CSF [Burgess, Immunology Today, 5, 155-158 (1984)]; 백시니아 성장 인자(VGF); 섬유아세포 성장 인자(FGF); 더 작은 분자량 단백질, 폴리-펩티드, 펩티드 및 펩티드 호르몬, 예를 들어 봄베신, 가스트린, 가스트린-방출 펩티드; 혈소판 유래 성장 인자; 인터루킨 및 사이토카인, 예를 들어 인터루킨-2(IL-2), 인터루킨-6(IL-6), 백혈병 억제 인자, 과립구-대식세포 집락-자극 인자(GM-CSF); 비타민, 예컨대 엽산; 아포프로테인 및 당단백질, 예컨대 트랜스페린{O'Keefe et al, 260 J. Biol. Chem. 932-937(1985)}; 당 결합 단백질 또는 지질단백질, 예컨대 렉틴; 세포 영양소 수송 분자; 및 소분자 억제제, 예컨대 전립선 특이적 멤브레인 항원(PSMA) 억제제 및 소분자 티로신 키나제 억제제(TKI), 비-펩티드 또는 임의의 다른 세포-결합 분자 또는 물질, 예컨대 생체활성 중합체(Dhar, et al, Proc. Natl.Acad.Sci.2008, 105, 17356-61); 덴드리머(Lee, et al., Nat. Biotechnol. 2005, 23, 1517-26; Almutairi, et al.; Proc. Natl. Acad. Sci. 2009, 106, 685-90); 나노입자(Liong, et al, ACS Nano, 2008, 19, 1309-12; Medarova, et al, Nat. Med. 2007, 13, 372-7; Javier, et al, Bioconjugate Chem. 2008, 19, 1309-12); 리포솜(Medinai, et al, Curr. Phar. Des. 2004, 10, 2981-9); 바이러스 캡사이드(Flenniken, et al, Viruses Nanotechnol. 2009, 327, 71-93)을 포함하지만 이들에 제한되지 않는다. 일반적으로, 단클론성 항체는 적절한 항체가 있는 경우, 세포 표면 결합제로서 바람직하다.
바람직하게는, T는 항체, 단일 사슬 항체, 표적 세포에 결합하는 항체 단편, 단클론성 항체, 단일 사슬 단클론성 항체, 표적 세포에 결합하는 단클론성 항체 단편, 키메라 항체, 표적 세포에 결합하는 키메라 항체 단편, 도메인 항체, 표적 세포에 결합하는 도메인 항체 단편, 항체를 모방하는 애드넥틴, DARPin, 림포카인, 호르몬, 비타민, 성장 인자, 집락 자극 인자, 영양분-수송 분자(트랜스페린) 및/또는 세포 결합 펩티드, 단백질, 또는 알부민, 중합체, 덴드리머, 리포솜, 나노입자, 소포(vesicle) 또는 (바이러스성) 캡시드에 부착되거나 코팅되는 작은 분자로 이루어진 군으로부터 선택되고;
추가로 바람직하게는, 세포 결합제/분자 T는 종양 세포, 바이러스 감염 세포, 미생물 감염 세포, 기생충 감염 세포, 자가면역 질환 세포, 활성화된 종양 세포, 골수 세포, 활성화된 T-세포, 이환된(affecting) B 세포, 또는 멜라닌 세포, 또는 하기 항원 또는 수용체 중 어느 하나를 발현하는 임의의 질병 세포에 대해 표적화할 수 있다:
CD1, CD1a, CD1b, CD1c, CD1d, CD1e,CD2, CD3, CD3d, CD3e, CD3g, CD4, CD5,CD6, CD7, CD8, CD8a, CD8b, CD9, CD10, CD11a, CD11b, CD11c, CD11d, CD12w, CD13, CD14, CD15, CD16, CD16a, CD16b, CDw17, CD18, CD19, CD20, CD21, CD22, CD23, CD24, CD25, CD26, CD27, CD28, CD29, CD30, CD31,CD32,CD32a, CD32b, CD33, CD34, CD35, CD36, CD37, CD38, CD39, CD40, CD41,CD42,CD42a, CD42b, CD42c, CD42d, CD43, CD44, CD45, CD46, CD47, CD48, CD49b, CD49c, CD49c, CD49d, CD49f, CD50, CD51, CD52, CD53, CD54, CD55,CD56, CD57, CD58, CD59, CD60, CD60a, CD60b, CD60c, CD61,CD62E, CD62L, CD62P, CD63, CD64, CD65, CD65s, CD66, CD66a, CD66b, CD66c, CD66d, CD66e, CD66f, CD67, CD68, CD69, CD70, CD71, CD72, CD73, CD74, CD75, CD75s, CD76, CD77, CD78, CD79, CD79a, CD79b, CD80, CD81, CD82, CD83, CD84, CD85, CD85a, CD85b, CD85c, CD85d, CD85e, CD85f, CD85g, CD85g, CD85i, CD85j, CD85k, CD85m, CD86, CD87, CD88, CD89, CD90, CD91,CD92, CD93, CD94, CD95, CD96, CD97, CD98, CD99, CD100, CD101, CD102, CD103, CD104, CD105, CD106, CD107, CD107a, CD107b, CD108, CD109, CD110, CD111, CD112, CD113, CD114, CD115, CD116, CD117, CD118, CD119, CD120, CD120a, CD120b, CD121, CD121a, CD121b, CD122, CD123, CD123a, CD124, CD125, CD126, CD127, CD128, CD129, CD130, CD131, CD132, CD133, CD134, CD135, CD136, CD137, CD138, CD139, CD140, CD140a, CD140b, CD141, CD142, CD143, CD144, CD145, CDw145, CD146, CD147, CD148, CD149, CD150, CD151, CD152, CD153, CD154, CD155, CD156, CD156a, CD156b, CD156c, CD156d, CD157, CD158, CD158a, CD158b1, CD158b2, CD158c, CD158d, CD158e1, CD158e2, CD158f2, CD158g, CD158h, CD158i, CD158j, CD158k, CD159, CD159a, CD159b, CD159c, CD160, CD161, CD162, CD163, CD164, CD165, CD166, CD167, CD167a, CD167b, CD168, CD169, CD170, CD171, CD172, CD172a, CD172b, CD172g, CD173, CD174, CD175, CD175s, CD176, CD177, CD178, CD179, CD179a, CD179b, CD180, CD181, CD182, CD183, CD184, CD185, CD186, CDw186, CD187, CD188, CD189, CD190, CD191, CD192, CD193, CD194, CD195, CD196, CD197, CD198, CD199, CDw198, CDw199, CD200, CD201, CD202, CD202(a, b), CD203, CD203c, CD204, CD205, CD206, CD207, CD208, CD209, CD210, CDw210a, CDw210b, CD211, CD212, CD213, CD213a1, CD213a2, CD214, CD215, CD216, CD217, CD218, CD218a, CD218, CD21b9, CD220, CD221, CD222, CD223, CD224, CD225, CD226, CD227, CD228, CD229, CD230, CD231, CD232, CD233, CD234, CD235, CD235a, CD235b, CD236, CD237, CD238, CD239, CD240, CD240ce, CD240d, CD241, CD242, CD243, CD244, CD245, CD246, CD247, CD248, CD249, CD250, CD251, CD252, CD253, CD254,CD255, CD256, CD257, CD258, CD259, CD260, CD261, CD262, CD263, CD264, CD265, CD266, CD267, CD268, CD269, CD270, CD271, CD272, CD273, CD274, CD275, CD276, CD277, CD278, CD279, CD281, CD282, CD283, CD284, CD285, CD286, CD287, CD288, CD289, CD290, CD291, CD292, CD293, CD294, CD295, CD296, CD297, CD298, CD299, CD300, CD300a, CD300b, CD300c, CD301, CD302, CD303, CD304, CD305, CD306, CD307, CD307a, CD307b, CD307c, CD307d, CD307e, CD307f, CD308, CD309, CD310, CD311, CD312, CD313, CD314, CD315, CD316, CD317, CD318, CD319, CD320, CD321, CD322, CD323, CD324, CD325, CD326, CD327, CD328, CD329, CD330, CD331, CD332, CD333, CD334, CD335, CD336, CD337, CD338, CD339, CD340, CD341, CD342, CD343, CD344, CD345, CD346, CD347, CD348, CD349, CD350, CD351, CD352, CD353, CD354, CD355, CD356, CD357, CD358, CD359, CD360, CD361, CD362, CD363, CD364, CD365, CD366, CD367, CD368, CD369, CD370, CD371, CD372, CD373, CD374, CD375, CD376, CD377, CD378, CD379, CD381, CD382, CD383, CD384, CD385, CD386, CD387, CD388, CD389, CRIPTO, CRIPTO, CR, CR1, CRGF, CRIPTO, CXCR5, LY64, TDGF1, 4-1BB, APO2, ASLG659, BMPR1B, 4-1BB, 5AC, 5T4(영양아층 당단백질, TPBG, 5T4, Wnt-활성화된 억제 인자 1 또는 WAIF1), 선암종 항원, AGS-5, AGS-22M6, 액티빈 수용체-유사 키나제 1, AFP, AKAP-4, ALK, 알파 인테그린, 알파 v 베타6, 아미노-펩티다제 N, 아밀로이드 베타, 안드로겐 수용체, 안지오포이에틴 2, 안지오포이에틴 3, 아넥신 A1, 탄저병 독소 예방 항원, 항-트랜스페린 수용체, AOC3(VAP-1), B7-H3, 바실루스 안트라시스 안트랙스(Bacillus anthracis anthrax), BAFF(B-세포 활성화 인자), BCMA, B-림프종 세포, 브크-라블(bcr-abl), 봄베신, BORIS, C5, C242 항원, CA125(탄수화물 항원 125, MUC16), CA-IX(또는 CAIX, 탄산 탈수효소 9), CALLA, CanAg, 카니스 루푸스 파밀리아리스(Canis lupus familiaris) IL31, 탄산 탈수효소 IX, 심장 미오신, CCL11(C-C 모티브 케모카인 11), CCR4(C-C 케모카인 수용체 타입 4), CCR5, CD3E(엡실론), CEA(암배아 항원), CEACAM3, CEACAM5(암배아 항원), CFD(인자 D), Ch4D5, 콜레시스토키닌 2(CCK2R), CLDN18(클라우딘-18), CLDN18.2(클라우딘-18.2), 클럼핑(clumping) 인자 A, cMet, CRIPTO, FCSF1R(집락 자극 인자 1 수용체), CSF2(집락 자극 인자 2, 과립구-대식세포 집락 자극 인자(GM-CSF)), CSP4, CTLA4(세포독성 T-림프구 연관 단백질 4), CTAA16.88 종양 항원, CXCR4, C-X-C 케모카인 수용체 타입 4, 사이클릭 ADP 리보스 가수분해효소, 사이클린 B1, CYP1B1, 시토메갈로바이러스, 시토메갈로바이러스 당단백질 B, 다비가트란(dabigatran), DLL3(델타 유사 리간드 3), DLL4(델타 유사 리간드 4), DPP4(디펩티딜-펩티다제 4), DR5(피쓰(feath) 수용체 5), 대장균 시가(shiga) 독소 타입-1, 대장균 시가 독소 타입-2, ED-B , EGFL7(EGF 유사 도메인 함유 단백질 7), EGFR, EGFRII, EGFRvIII, 엔도글린, 엔도텔린 B 수용체, 엔도톡신, EpCAM(상피 세포 부착 분자), EphA2, 에피시알린, ERBB2(표피 성장 인자 수용체 2), ERBB3, ERG(TMPRSS2 ETS 융합 유전자), 에쉐리키아 콜라이(Escherichia coli), ETV6-AML, FAP(섬유아세포 활성화 단백질 알파), 섬유아세포 표면 항원, FCGR1, 알파-태아단백질(alpha-Fetoprotein), 피브린 II, 베타 사슬, 피브로넥틴 엑스트라 도메인-B, FOLR(엽산 수용체), 엽산 수용체 알파, 엽산 가수분해효소, 호흡기 융합 바이러스의 포스-관련(Fos-related) 항원 1F 단백질, 프리즐드(Frizzled) 수용체, 푸코실 GM1, GD2 강글리오사이드, G-28(세포 표면 항원 당지질), GD3 이디오타입, 글로보H(GloboH), 글리피칸 3, N-글리콜릴뉴라민산, GM3, GMCSF 수용체 α-사슬, 성장 분화 인자 8, GP100, GPNMB(트랜스-멤브레인 당단백질 NMB), GUCY2C(구아닐레이트 시클라제 2C), 구아닐릴 시클라제 C(GC-C), 장내 구아닐레이트(Guanylate) 시클라제, 구아닐레이트 시클라제-C 수용체, 열-안정성 엔테로톡신 수용체(hSTAR), 열충격 단백질, 헤마글루티닌, B형 간염 표면 항원, B형 간염 바이러스, HER1(인간 표피 성장 인자 수용체 1), HER2, HER2/neu, HER3(ERBB-3), IgG4, HGF/SF(간세포 성장 인자/산란(scatter) 인자), HHGFR, HIV-1, 히스톤 복합체, HLA-DR(인간 백혈구 항원), HLA-DR10, HLA-DRB, HMWMAA, 인간 융모성 성선 자극 호르몬, HNGF, 인간 산란 인자 수용체 키나제, HPV E6/E7, Hsp90, hTERT, ICAM-1(세포간 접착 분자 1), 이디오타입, IGF1R(IGF-1, 인슐린 유사 성장 인자 1 수용체), IGHE, IFN-γ, 인플루엔자 헤마글루티닌, IgE, IgE Fc 영역, IGHE, 인터루킨(IL-1, IL-2, IL-3, IL-4, IL-5, IL-6, IL-6R, IL-7, IL-8, IL-9, IL-10, IL-11, IL-12, IL-13, IL-15, IL-17, IL-17A, IL-18, IL-19, IL-20, IL-21, IL-22, IL-23, IL-27 또는 IL-28 포함), IL31RA, ILGF2(인슐린 유사 성장 인자 2), 인테그린(α4, αIIbβ3, αvβ3, α4β7, α5β1, α6β4, α7β7, αllβ3, α5β5, αvβ5), 인터페론 감마 유도 단백질, ITGA2, ITGB2, KIR2D, 카파(Kappa) Ig, LCK, 레(Le), 레구마인(Legumain), 루이스-Y 항원, LFA-1(림프구 기능-연관 항원 1, CD11a), LHRH, LINGO-1, 리포테이코산, LIV1A, LMP2, LTA, MAD-CT-1, MAD-CT-2, MAGE-1, MAGE-2, MAGE-3, MAGE A1, MAGE A3, MAGE 4, MART1, MCP-1, MIF(대식세포 이동 억제 인자 또는 글리코실화 억제 인자(GIF)), MS4A1(멤브레인-스패닝 4-도메인 서브패밀리 A 멤버 1), MSLN(메조텔린), MUC1(뮤신 1, 세포 표면 관련(MUC1) 또는 다형성 상피 뮤신(PEM)), MUC1-KLH, MUC16(CA125), MCP1(단핵구 화학주성 단백질 1), 멜란 A(Melan A)/MART1, ML-IAP, MPG, MS4A1(멤브레인-스패닝 4-도메인 서브패밀리 A), MYCN, 미엘린-연관 당단백질, 미오스타틴, NA17, NARP-1, NCA-90(과립구 항원), 넥틴-4(ASG-22ME), NGF, 신경 세포 사멸 조절 단백질분해효소 1, NOGO-A, 노치(Notch) 수용체, 뉴클레오린, 네우(neu) 종양유전자 산물, NY-BR-1, NY-ESO-1, OX-40, OxLDL(산화된 저밀도 지질단백질), OY-TES1, P21, p53 비돌연변이체(nonmutant), P97, Page4, PAP, 항-(N-글리콜릴뉴라민산)의 파라토프, PAX3, PAX5, PCSK9, PDCD1 (PD-1, 프로그램된 세포사멸 단백질 1), PDGF-Rα(알파형 혈소판-유래 성장 인자 수용체), PDGFR-β, PDL-1, PLAC1, PLAP-유사 고환 알칼리성 인산분해효소, 혈소판-유래 성장 인자 수용체 베타, 인산염-나트륨 공동-수송체, PMEL 17, 폴리시알산, 프로테이나제3(PR1), 전립선 암종, PS(포스파티딜세린), 전립선 암종 세포, 슈도모나스 녹농균, PSMA, PSA, PSCA, 광견병 바이러스 당단백질, RHD(Rh 폴리펩티드 1(RhPI)), 레서스(rhesus) 인자, RANKL, RhoC, 라스(Ras) 돌연변이체, RGS5, ROBO4, 호흡기 세포융합 바이러스, RON, ROR1, 육종 전위 파단점(sarcoma translocation breakpoint), SART3, 스클레로스틴, SLAMF7(SLAM 패밀리 멤버 7), 셀렉틴 P, SDC1(신데칸 1), sLe(a), 소마토메딘 C, SIP(스핑고신-1-인산), 소마토스타틴, 정자 단백질 17, SSX2, STEAP1(전립선의 6-트랜스 멤브레인 상피 항원 1), STEAP2, STn, TAG-72(종양 연관 당단백질 72), 서바이빈(survivin), T-세포 수용체, T 세포 트랜스멤브레인 단백질, TEM1(종양 내피 마커 1), TENB2, 테나신 C(TN-C), TGF-α, TGF-β(형질전환 성장 인자 베타), TGF-β1, TGF-β2(형질전환 성장 인자-베타 2), 타이(Tie)(CD202b), 타이2, TIM-1(CDX-014), Tn, TNF, TNF-α, TNFRSF8, TNFRSF10B(종양 괴사 인자 수용체 슈퍼패밀리 멤버 10B), TNFRSF-13B(종양 괴사 인자 수용체 슈퍼패밀리 멤버 13B), TPBG(영양아층 당단백질), TRAIL-R1(종양 괴사 세포사멸 유도 리간드 수용체 1), TRAILR2(사멸 수용체 5(DR5)), 종양-연관 칼슘 신호 변환기 2, MUC1의 종양 특이적 글리코실화, TWEAK 수용체, TYRP1(당단백질 75), TRP-1(Trop-1), TRP-2(Trop-2), 티로시나제, VCAM-1, VEGF, VEGF-A, VEGF-2, VEGFR-1, VEGFR-2 또는 비멘틴, WT1, XAGE 1, 또는 임의의 인슐린 성장 인자 수용체 또는 임의의 표피 성장 인자 수용체를 발현하는 세포.
또 다른 특정 실시예에서, 세포-결합 분자는 하기로부터 선택되는 리간드 또는 수용체 작용제일 수 있다: 엽산 유도체(엽산 수용체에 결합함, 난소암 및 기타 악성종양에서 과발현되는 단백질)(Low, P. S. et al 2008, Acc. Chem. Res. 41, 120-9); 글루탐산 요소 유도체(전립선 특이적 멤브레인 항원에 결합함, 전립선암 세포의 표면 마커)(Hillier, S. M.et al, 2009, Cancer Res. 69, 6932-40); 소마토스타틴(성장 호르몬-억제 호르몬(GHIH) 또는 소마토트로핀 방출-억제 인자(SRIF)) 또는 소마토트로핀 방출-억제 호르몬으로도 알려짐) 및 이의 유사체, 예컨대, 옥트레오타이드(산도스타틴(Sandostatin)) 및 란레오타이드(소마툴린(Somatuline))(특히, 신경내분비 종양, GH-생산 뇌하수체 선종, 부신경절종, 비기능성 뇌하수체 선종, 크롬친화성세포종)(Ginj, M., et al, 2006, Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 103, 16436-41]); GH-분비 뇌하수체 선종에서의 소마토스타틴 수용체 하위유형(sst1, sst2, sst3, sst4 및 sst5)(Reubi J. C., Landolt, A. M. 1984 J. Clin. Endocrinol Metab 59: 1148-51; Reubi J. C., Landolt A. M. 1987 J Clin Endocrinol Metab 65: 65-73; Moyse E, et al, J Clin Endocrinol Metab 61: 98-103), 위장관췌장 종양(Reubi J. C., et al, 1987 J Clin Endocrinol Metab 65: 1127-34; Reubi, J. C, et al, 1990 Cancer Res 50: 5969-77), 크롬친화성세포종(Epel-baum J, et al 1995 J Clin Endocrinol Metab 80:1837-44; Reubi J. C., et al, 1992 J Clin Endocrinol Metab 74: 1082-9), 신경모세포종(Prevostg, 1996 Neuroendocrinology 63:188-197; Moertel, C. L, et al 1994 Am J Clin Path 102:752-756), 갑상선 수질암(Reubi, J. C, et al 1991 Lab Invest 64:567-573) 소세포 폐암(Sagman U, et al, 1990 Cancer 66:2129-2133), 수막종, 수모세포종 또는 신경교종(Reubi J. C., et al 1986 J Clin Endocrinol Metab 63: 433-8; Reubi J. C., et al 1987 Cancer Res 47: 5758-64; Fruhwald, M. C, et al 1999 Pediatr Res 45: 697-708), 유방 암종(Reubi J. C., et al 1990 Int J Cancer 46: 416-20; Srkalovicg, et al 1990 J Clin Endocrinol Metab 70: 661-669), 림프종(Reubi J. C., et al 1992, Int J Cancer 50: 895-900), 신장 세포 암(Reubi J. C., et al 1992, Cancer Res 52: 6074-6078), 간충직 종양(Reubi J. C., et al 1996 Cancer Res 56: 1922-31), 전립선(Reubi J. C., et al 1995, J. Clin. Endocrinol Metab 80: 2806-14; et al 1989, Prostate 14:191-208; Halmos G, et al J. Clin. Endo-crinol Metab 85: 2564-71), 난소(Halmos, G, et al, 2000 J Clin Endocrinol Metab 85: 3509-12; Reubi J. C., et al 1991 Am J Pathol 138:1267-72), 위(Reubi J. C., et al 1999, Int J Cancer 81: 376-86; Miller, G. V, 1992 Br J Cancer 66: 391-95), 간세포(Kouroumalis E, et al 1998 Gut 42: 442-7; Reubi J. C., et al 1999 Gut 45: 66-774) 및 비인두 암종(Loh K. S, et al, 2002 Virchows Arch 441: 444-8); 방향족 설폰아마이드(탄산 탈수효소 IX에 특이적임)(저산소증 및 신장 세포 암종의 마커)(Neri, D., et al, Nat. Rev. Drug Discov. 2011, 10, 767-7); 크롬친화성세포종 및 부신경절종에 대한 뇌하수체 아데닐산 고리화효소 활성화 펩티드(PACAP)(PAC1); 혈관활성 장내 펩티드(VIP) 및 이들의 수용체 하위유형(VPAC1, VPAC2); α-멜라닌세포-자극 호르몬(α-MSH) 수용체; 콜레시스토키닌(CCK)/가스트린 수용체 및 이들의 수용체 하위유형(CCK1(이전 CCK-A) 및 CCK2; 봄베신(Pyr-Gln-Arg-Leu-Gly-Asn-Gln-Trp-Ala-Val-Gly-His-Leu-Met-NH2)/가스트린-방출 펩티드(GRP) 및 이들의 수용체 하위유형(BB1, GRP 수용체 하위유형(BB2), BB3 및 BB4)(Ohlsson, B., et al, 1999, Scand. J. Gastroenterology 34 (12): 1224-9; Weber, H. C., 2009, Cur. Opin. Endocri. Diab. Obesity 16(1): 66-71, Gonzalez N, et al, 2008, Cur. Opin. Endocri. Diab. Obesity 15(1), 58-64); 뉴로텐신 수용체 및 이의 수용체 하위유형(NTR1, NTR2, NTR3); 기질 P 수용체 및 이들의 수용체 하위유형(예컨대, 신경교 종양에 대한 NK1 수용체(Hennig I. M., et al 1995 Int. J. Cancer 61, 786-792); 신경펩티드 Y(NPY) 수용체 및 수용체 하위유형(Y1-Y6); 호밍 펩티드는 이량체 및 다량체 RGD 펩티드(예를 들어, cRGDfV)인 RGD(Arg-Gly-Asp), NGR(Asn-Gly-Arg)를 포함함(Laakkonen P, Vuorinen K. 2010, Integr Biol (Camb). 2(7-8): 326-337; Chen K, Chen X. 2011, Theranostics. 1:189-200; Garanger E, et al, Anti-Cancer Agents Med Chem. 7(5): 552-558; Kerr, J. S. et al, AntiCancer Research, 19(2A), 959-968; Thumshirn,g, et al, 2003 Chem. Eur. J. 9, 2717-2725) 및 TAASGVRSMH 또는 LTLRWVGLMS(콘드로이틴 설페이트 프로테오글리칸 NG2 수용체) 및 F3 펩티드(세포 표면-발현된 뉴클레오린 수용체에 결합하는 31 아미노산 펩티드)(Zitzmann, S., 2002 Cancer Res., 62, 18, pp. 5139-5143, Temminga, K., 2005, Drug Resistance Updates, 8, 381-402; P. Laakkonen and K. Vuorinen, 2010 Integrative Biol, 2(7-8), 326-337; M. A. Burg, 1999 Cancer Res., 59(12), 2869-2874; K. Porkka, et al 2002, Proc. Nat. Acad. Sci. USA 99(11), 7444-9); 세포 침투성 펩티드(CPP)(Nakase I, et al, 2012, J. Control Release. 159(2),181-188); 펩티드 호르몬, 예컨대, 황체형성 호르몬-방출 호르몬(LHRH) 작용제 및 길항제 및 고나도트로핀-방출 호르몬(GnRH) 작용제는 난포 호르몬(FSH) 및 황체형성 호르몬(LH), 뿐만 아니라 테스토르테론 생산을 표적으로 함으로써 작용함, 예를 들어, 부세렐린(Pyr-His-Trp-Ser-Tyr-D-Ser(OtBu)-Leu-Arg-Pro-NHEt), 고나도렐린(Pyr-His-Trp-Ser-Tyr-Gly-Leu-Arg-Pro-Gly-NH2), 고세렐린(Pyr-His-Trp-Ser-Tyr-D-Ser(OtBu)-Leu-Arg-Pro-AzGly-NH2), 히스트렐린(Pyr-His-Trp-Ser-Tyr-D-His(N-벤질)-Leu-Arg-Pro-NHEt), 류프롤라이드(Pyr-His-Trp-Ser-Tyr-D-Leu-Leu-Arg-Pro-NHEt), 나파렐린(Pyr-His-Trp-Ser-Tyr-2Nal-Leu-Arg-Pro-Gly-NH2), 트립토렐린(Pyr-His-Trp-Ser-Tyr-D-Trp-Leu-Arg-Pro-Gly-NH2), 나파렐린, 데슬로렐린, 아바렐릭스(Ac-D-2Nal-D-4-클로로Phe-D-3-(3-피리딜)Ala-Ser-(N-Me)Tyr-D-Asn-Leu-아이소프로필Lys-Pro-DAla-NH2), 세트로렐릭스(Ac-D-2Nal-D-4-클로로-Phe-D-3-(3-피리딜)Ala-Ser-Tyr-D-Cit-Leu-Arg-Pro-D-Ala-NH2), 데가렐릭스(Ac-D-2Nal-D-4-클로로Phe-D-3-(3-피리딜)Ala-Ser-4-아미노Phe(L-하이드로오로틸)-D-4-아미노Phe(카바모일)-Leu-아이소프로필Lys-Pro-D-Ala-NH2) 및 가니렐릭스(Ac-D-2Nal-D-4-클로로Phe-D-3-(3-피리딜)Ala-Ser-Tyr-D-(N9,N10-다이에틸)-호모Arg-Leu-(N9, N10-다이에틸)-호모Arg-Pro-D-Ala-NH2)(Thundimadathil, J., J. Amino Acids, 2012, 967347, doi:10.1155/2012/967347; Boccon-Gibod, L.; et al, 2011, Therapeutic Advances in Urology 3(3): 127-140; Debruyne, F., 2006, Future Oncology, 2(6), 677-696; Schally A. V; Nagy, A. 1999 Eur J Endocrinol 141:1-14; KoppanM, et al 1999 Prostate 38:151-158); 및 소분자(이미퀴모드, 구아니신 및 아데노신 유사체)에서 큰 복합체 생물거대 분자, 예컨대, 지질다당류(LPS), 핵산(CpG DNA, 폴리I:C) 및 지질펩티드(Pam3CSK4)(Kasturi, S. P., et al, 2011, Nature 470, 543-547; Lane, T., 2001, J. R. Soc. Med. 94, 316; Hotz, C., and Bourquin, C., 2012, Oncoimmunology 1, 227-228; Dudek, A. Z., et al, 2007, Clin. Cancer Res. 13, 7119-25)까지의 크기 범위인 패턴 인식 수용체(PRR), 예컨대, 톨-유사 수용체(TLR), C-타입 렉틴 및 노드유사 수용체(NLR)(Fukata, M., et al, 2009, Semin. Immunol. 21, 242-253; Maisonneuve, C., et al, 2014, Proc. Natl. Acad. Sci. U. S. A. 111, 1-6; Botos, I., et al, 2011, Structure 19, 447-459; Means, T. K., et al, 2000, Life Sci. 68, 241-258); 파골세포 및 신장에 대한 효과를 통해서 칼슘 수준을 조절하는 데 상당히 관여되는 32-아미노산 신경펩티드인 칼시토닌 수용체(ZaidiM, et al, 1990 Crit Rev Clin Lab Sci 28, 109-174; Gorn, A. H., et al 1995 J Clin Invest 95:2680-91); 및 일반적으로 혈관신생에 중요한 역할을 하고, 다양한 세포, 특히 파골세포, 내피 세포 및 종양 세포의 표면 상에서 발현되는 인테그린 수용체 및 이들의 수용체 하위유형(예컨대, αVβ1, αVβ3, αVβ5, αVβ6, α6β4, α7β1, αLβ2, αIIbβ3 등)(Ruoslahti, E. et al, 1994 Cell 77, 477-8; Albelda, S. M. et al, 1990 Cancer Res., 50, 6757-64)에서 발견되었다. 짧은 펩티드, GRGDSPK 및 환식 RGD 펜타펩티드, 예컨대, 사이클로(RGDfV)(L1) 및 이의 유도체[사이클로(-N(Me)R-GDfV), 사이클로(R-Sar-DfV), 사이클로-(RG-N(Me)D-fV), 사이클로(RGD-N(Me)f-V), 사이클로(RGDf-N(Me)V-)(실렌지타이드)]는 인테그린 수용체의 높은 결합 친화성을 나타내었다(Dechantsreiter, M. A. et al, 1999 J. Med. Chem. 42, 3033-40, Goodman, S. L., et al, 2002 J. Med. Chem. 45, 1045-51).
세포-결합 분자/리간드 또는 세포 수용체 작용제는 Ig-기반 및 비-Ig-기반 단백질 스캐폴드 분자일 수 있다. Ig-기반 스캐폴드는 나노바디(VHH(카멜리드 Ig)의 유도체)(Muyldermans S., 2013 Annu Rev Biochem. 82, 775-97); 도메인 항체(dAb, VH 또는 VL 도메인의 유도체)(Holt, L. J, et al, 2003, Trends Biotechnol. 21, 484-90); 이중특이적 T 세포 관여자(BiTE, 이중특이적 다이아바디)(Baeuerle, P. A, et al, 2009, Curr. Opin.mol. Ther. 11, 22-30); 이중 친화성 재표적화(DART, 이중특이적 다이아바디)(Moore P. A. P, et al. 2011, Blood 117(17), 4542-51); 4가 탠덤 항체(TandAb, 이량체화된 이중특이적 다이아바디)(Cochlovius, B, et al. 2000, Cancer Res. 60(16):4336-4341)로부터 선택될 수 있지만 이들에 제한되지 않는다. 비-Ig 스캐폴드는 안티칼린(리포칼린의 유도체)(Skerra A. 2008, FEBS J., 275(11): 2677-83; Besteg, et al, 1999 Proc. Nat. Acad. USA. 96(5):1898-903; Skerra, A. 2000 Biochim Biophys Acta, 1482(1-2): 337-50; Skerra, A. 2007, Curr Opin Biotechnol. 18(4): 295-304; Skerra, A. 2008, FEBS J. 275(11):2677-83); 애드넥틴(제10 FN3(피브로넥틴))(Koide, A, et al, 1998 J.mol. Biol., 284(4):1141-51; Batori V, 2002, Protein Eng. 15(12): 1015-20; Tolcher, A. W, 2011, Clin. Cancer Res. 17(2): 363-71; Hackel, B. J, 2010, Protein Eng. Des. Sel. 23(4): 211-19); 설계된 안크린 반복 단백질(DARPin)(안크린 반복(AR) 단백질의 유도체)(Boersma, Y.L, et al, 2011 Curr Opin Biotechnol. 22(6): 849-57), 예를 들어, DARPin C9, DARPin Ec4 및 DARPin E69_LZ3_E01(Winkler J, et al, 2009 Mol Cancer Ther. 8(9), 2674-83; Patricia M-K. M., et al, Clin Cancer Res. 2011; 17(1):100-10; Boersma Y. L, et al, 2011 J. Biol. Chem. 286(48), 41273-85); 아비머(도메인 A/저밀도 지질단백질(LDL) 수용체)(Boersma Y. L, 2011 J. Biol. Chem. 286(48): 41273-41285; Silverman J, et al, 2005 Nat. Biotechnol., 23(12):1556-61)로부터 선택될 수 있지만 이들에 제한되지 않는다.
본원의 세포-결합 분자/리간드 또는 세포 수용체 작용제의 소분자 구조의 예는 다음과 같다:
하기 구조로 도시된, LB01(엽산), LB02(PMSA 리간드), LB03(PMSA 리간드), LB04(PMSA 리간드), LB05(소마토스타틴), LB06(소마토스타틴), LB07(옥트레오타이드, 소마토스타틴 유사체), LB08(란레오타이드, 소마토스타틴 유사체), LB09(바프레오타이드(Sanvar), 소마토스타틴 유사체), LB10(CAIX 리간드), LB11(CAIX 리간드), LB12(가스트린 방출 펩티드 수용체(GRPr), MBA), LB13(황체 형성 호르몬-방출 호르몬(LH-RH) 리간드 및 GnRH), LB14(황체 형성 호르몬-방출 호르몬(LH-RH) 및 GnRH 리간드), LB15(GnRH 길항제, 아바렐릭스(Abarelix)), LB16(코발라민, 비타민 B12 유사체), LB17(코발라민, 비타민 B12 유사체), LB18(αvβ3 인테그린 수용체의 경우, 사이클릭 RGD 펜타펩티드), LB19(VEGF 수용체의 경우, 헤테로-2가 펩티드 리간드), LB20(뉴로메딘 B), LB21(G-단백질 결합 수용체의 경우, 봄베신), LB22(톨 유사 수용체의 경우, TLR2), LB23(안드로겐 수용체의 경우), LB24(αv 인테그린 수용체의 경우, 실렌지타이드/사이클로(-RGDf)V-)), LB23(플루드로코르티손), LB25(리파부틴 유사체), LB26(리파부틴 유사체), LB27(리파부틴 유사체), LB28(플루드로코르티손), LB29(덱사메타손), LB30(플루티카손 프로피오네이트), LB31(베클로메타손 디프로피오네이트), LB32(트리암시놀론 아세토나이드), LB33(프레드니손), LB34(프레드니솔론), LB35(메틸프레드니솔론), LB36(베타메타손), LB37(이리노테칸 유사체), LB38(크리조티닙 유사체), LB39(보르테조밉 유사체), LB40(카르필조밉 유사체), LB41(카르필조밉 유사체), LB42(류프롤라이드 유사체), LB43(트립토렐린 유사체), LB44(클린다마이신), LB45(리라글루타이드 유사체), LB46(세마글루타이드 유사체), LB47(레타파물린 유사체), LB48(인디불린 유사체), LB49(빈블라스틴 유사체), LB50(릭시세나타이드 유사체), LB51(오시머티닙 유사체), LB52(뉴클레오사이드 유사체), LB53(에를로티닙 유사체) 또는 LB54(라파티닙 유사체):
Figure pct00076
Figure pct00077
Figure pct00078
Figure pct00079
Figure pct00080
Figure pct00081
Figure pct00082
Figure pct00083
Figure pct00084
Figure pct00085
여기서 "
Figure pct00086
"는 본 특허의 측쇄 링커를 연결하는 부위이고; X4 및 Y1은 독립적으로 O, NH, NHNH, NR1, S, C(O)O, C(O)NH, OC(O)NH, OC(O)O, NHC(O)NH, NHC(O)S, OC(O)N(R1), N(R1)C(O)N(R1), CH2, C(O)NHNHC(O) and C(O)NR1이고; X1은 H, CH2, OH, O, C(O), C(O)NH, C(O)N(R1), R1, NHR1, NR1, C(O)R1 또는 C(O)O이고; X5는 H, CH3, F, 또는 Cl이고; M1 및 M2는 독립적으로 H, Na, K, Ca, Mg, NH4, N(R1R1'R2R3)이고; R1 , R1' , R2 및 R3은 화학식 (I)에서 정의된 것이다.
접합체의 제조
본 발명의 또 다른 측면에서, 캄프토테신 유사체는 바람직하게는 화학식 (VI), (VII), (VIII), (IX) 및 (X)로 표시되는 반응기 Lv 및 링커 L을 포함하도록 합성되고, 이는 세포-결합 분자 T, 또는 변형된 세포-결합 분자 T에 쉽게 반응하여, 각각 화학식 (I), (II), (III), (IV) 및 (V)의 접합체를 각각 형성할 수 있다:
Figure pct00087
여기서, R1, R2, R3, R4, R5, L, X 및 m은 상기 화학식 (I)과 동일하게 정의되고;
Lv는 세포 결합 분자 상의 티올, 아민, 카르복실산, 셀레놀, 페놀 또는 히드록실기와 반응할 수 있는 반응기이다. 이러한 반응기는 할로겐화물(불화물, 염화물, 브롬화물 및 요오드화물), 말레이미드, 메탄술포닐(메실), 톨루엔술포닐(토실), 트리플루오로메틸-술포닐(트리플레이트), 트리플루오로-메틸술포네이트, 니트로페녹실, N-숙신이미딜옥실(NHS), 페녹실; 디니트로페녹실; 펜타플루오로페녹실, 테트라플루오로페녹실, 트리플루오로페녹실, 디플루오로-페녹실, 모노플루오로-페녹실, 펜타클로로-페녹실, 1H-이미다졸-1-일, 클로로페녹실, 디클로로-페녹실, 트리클로로페녹실, 테트라클로로페녹실, N-(벤조트리아졸-일)옥실, 2-에틸-5-페닐이속사졸륨-3'-술포닐, 페닐옥사디아졸-술포닐(-술폰-ODA), 2-에틸-5-페닐이속사졸륨-일, 페닐옥사디아졸-일(ODA), 옥사디아졸-일, 불포화 탄소(탄소-탄소, 탄소-질소, 탄소-황, 탄소-인, 황-질소, 인-질소, 산소-질소 또는 탄소-산소 사이의 이중 또는 삼중 결합) 또는 미츠노부(Mitsunobu) 반응용 축합(condensation) 시약으로 생성된 중간 분자로부터 선택된다. 축합 시약의 예는 EDC(N-(3-디메틸-아미노프로필)-N'-에틸카르보디이미드), DCC(디사이클로헥실-카르보디이미드), N,N'-디이소프로필-카르보디이미드(DIC), N-사이클로헥실-N'-(2-모르폴리노에틸)-카르보디이미드 메토-p-톨루엔술포네이트(CMC 또는 CME-CDI), 1,1'-카르보닐디이미-다졸(CDI), TBTU(O-(벤조트리아졸-1-일)-N,N,N',N'-테트라-메틸우로늄 테트라플루오로보레이트), N,N,N',N'-테트라메틸-O-(1H-벤조트리아졸-1-일)-우로늄 헥사플루오로-포스페이트(HBTU), (벤조트리아졸-1-일옥시)트리스-(디메틸아미노)-포스포늄 헥사플루오로포스페이트(BOP), (벤조트리아졸-1-일옥시)-트리피롤리-디노포스포늄 헥사플루오로포스페이트(PyBOP), 디에틸 시아노포스포네이트(DEPC), 클로로-N,N,N',N'-테트라메틸포름아미디늄헥사플루오로포스페이트, 1-[비스(디메틸아미노)-메틸렌]-1H-1,2,3-트리아졸로[4,5-b]피리디늄 3-옥사이드 헥사플루오로포스-페이트(HATU), 1-[(디메틸아미노)(모르폴리노)메틸렌]-1H-[1,2,3]트리아졸로[4,5-b]피리딘-1-이움(ium) 3-옥사이드 헥사플루오로-포스페이트(HDMA), 2-클로로-1,3-디메틸-이미다졸리디늄 헥사플루오로포스페이트(CIP), 클로로트리피롤리디노포스포늄 헥사플루오로포스페이트(PyCloP), 플루오로-N,N,N',N'-비스(테트라메틸렌)-포름아미디늄 헥사플루오로포스페이트(BTFFH), N,N,N',N'-테트라메틸-S-(1-옥시도-2-피리딜)-티우로늄 헥사플루오로포스페이트, O-(2-옥소-1(2H)피리딜)-N,N,N',N'-테트라메틸우로늄 테트라플루오로보레이트(TPTU), S-(1-옥시도-2-피리딜)-N,N,N',N'-테트라메틸-티우로늄 테트라플루오로보레이트, O-[(에톡시카르보닐)-시아노메틸렌아미노]-N,N,N',N'-테트라메틸우로늄 헥사플루오로포스페이트(HOTU), (1-시아노-2-에톡시-2-옥소에틸리덴아미노-옥시)디메틸아미노-모르폴리노-카르베늄 헥사플루오로포스페이트(COMU), O-(벤조트리아졸-1-일)-N,N,N',N'-비스(테트라메틸렌)우로늄 헥사플루오로포스페이트(HBPyU), N-벤질-N'-사이클로헥실-카르보디이미드(중합체 결합 여부에 관계없음), 디피롤리디노(N-숙신이미딜-옥시)카르베늄 헥사플루오로-포스페이트(HSPyU), 클로로디피롤리디노카르베늄 헥사플루오로-포스페이트(PyClU), 2-클로로-1,3-디메틸이미다졸리디늄 테트라플루오로보레이트(CIB), (벤조트리아졸-1-일옥시)-디피페리디노-카르베늄 헥사플루오로포스페이트(HBPipU), O-(6-클로로벤조트리아졸-1-일)-N,N,N',N'-테트라메틸우로늄 테트라플루오로보레이트(TCTU), 브로모트리스(디메틸아미노)-포스포늄 헥사플루오로-포스페이트(BroP), 프로필포스포닉 무수물(PPCA, T3P), 2-모르폴리노에틸 이소시아나이드(MEI), N,N,N',N'-테트라메틸-O-(N-숙신이미딜)-우로늄 헥사플루오로포스페이트(HSTU), 2-브로모-1-에틸-피리디늄 테트라플루오로-보레이트(BEP), O-[(에톡시카르보닐)시아노-메틸렌아미노]-N,N,N',N'-테트라-메틸우로늄 테트라플루오로보레이트(TOTU), 4-(4,6-디메톡시-1,3,5-트리아진-2-일)-4-메틸모르폴리늄 클로라이드(MMTM, DMTMM), N,N,N',N'-테트라메틸-O-(N-숙신이미딜)우로늄 테트라플루오로보레이트(TSTU), O-(3,4-디하이드로-4-옥소-1,2,3-벤조트리아진-3-일)-N,N,N',N'-테트라메틸우로늄 테트라플루오로-보레이트(TDBTU),1,1'-(아조디카르보닐)-디피페리딘(ADD), 디-(4-클로로벤질)-아조디카르복실레이트(DCAD), 디-tert-부틸 아조디카르복실레이트(DBAD), 디이소프로필 아조디카르복실레이트(DIAD), 디에틸 아조디카르복실레이트(DEAD)이다. 또한, Lv는 산 자체에 의해 형성되거나 다른 C1~C8 산 무수물과 함께 형성되는 무수물일 수 있다.
보다 바람직하게는, Lv는 할로겐화물(예를 들어, 불화물, 염화물, 브롬화물 및 요오드화물), 말레이미드, 메탄술포닐(메실), 톨루엔술포닐(토실), 트리플루오로메틸-술포닐(트리플레이트), 트리플루오로메틸술포네이트, 니트로페녹실, N-숙신이미딜옥실(NHS), 페녹실; 디니트로페녹실; 펜타플루오로페녹실, 테트라플루오로페녹실, 트리플루오로페녹실, 디플루오로페녹실, 모노플루오로페녹실, 펜타클로로페녹실, 1H-이미다졸-1-일, 클로로페녹실, 디클로로페녹실, 트리클로로페녹실, 테트라클로로페녹실, N-(벤조트리아졸-일)옥실, 2-에틸-5-페닐이속사졸륨-3'-술포닐, 페닐옥사디아졸-술포닐(-술폰-ODA), 2-에틸-5-페닐이속사졸륨-일, 페닐옥사디아졸-일(ODA), 옥사디아졸-일, 불포화 탄소(탄소-탄소, 탄소-질소, 탄소-황, 탄소-인, 황-질소, 인-질소, 산소-질소 또는 탄소-산소 사이의 이중 또는 삼중 결합), 또는 다음 구조 중 하나로부터 선택된다:
Figure pct00088
Figure pct00089
여기서, X1'은 F, Cl, Br, I 또는 Lv3이고; X2'는 O, NH, N(R1) 또는 CH2이고; R3은 H, 방향족, 헤테로방향족, 또는 방향족 기이고, 여기서 하나 이상의 H 원자는 -R1, -할로겐, OR1, -SR1, -NR1R2, -NO2, -S(O)R1,-S(O)2R1, 또는 -COOR1에 의해 독립적으로 대체되고, Lv3은 F, Cl, Br, I, 니트로페놀; N-히드록시숙신이미드(NHS); 페놀; 디니트로페놀; 펜타플루오로페놀; 테트라플루오로페놀; 디플루오로페놀; 모노플루오로페놀; 펜타클로로페놀; 트리플레이트; 이미다졸; 디클로로페놀; 테트라클로로페놀; 1-하이드록시벤조-트리아졸; 토실레이트; 메실레이트; 2-에틸-5-페닐이속사졸륨-3'-술포네이트, 자체적으로 형성되거나 다른 무수물, 예컨대 아세틸 무수물, 포르밀 무수물과 함게 형성된 무수물; 또는 펩티드 커플링 반응 또는 미츠노부 반응을 위한 축합 시약으로 생성된 중간 분자로부터 선택된 이탈기이다.
접합 과정에서, 본 발명의 캄프토테신 유사체와 접합하기 이전에, 세포-결합 분자는 보다 특이적인 펩티드, 단백질, 약물, 또는 이종이작용성(heterobifunctional) 크로스 링커, 예컨대 아민-대-비선택적(숙신이미딜(NHS)-디아지린(SDA), NHS 에스테르/아지드), 아민-대-술프히드릴(NHS 에스테르/말레이미드, NHS 에스테르/피리딜디티올, NHS 에스테르/할로아세틸), 술프히드릴-대-탄수화물(말레이미드/히드라지드, 피리딜디티올/히드라지드), 히드록실-대-술프히드릴(이소시아네이트/말레이미드), 아민-대-DNA(NHS 에스테르/소랄렌), 아민-대-카르복실(카르보디이미드)를 갖는 다른 기능적 분자의 부착을 통해 변형될 수 있다.
SDA 링키지(linkage) 변형에서, SDA 링커의 NHS 에스테르는 pH 6~9 완충액에서 결합 분자 백본의 1차 아민기와 반응하여, NHS 방출 시 안정적인 아미드 결합을 형성할 수 있다. 그 다음, 장파 UV 광(330-370nm)으로 디아지린을 광활성화하면, 보다 특이적인 펩티드 또는 단백질 또는 기타 기능성 분자의 아민 그룹과 반응할 수 있는 반응성 카르벤 중간체를 생성할 수 있다. 이러한 두 단계의 순서는 다음과 같이 상이할 수 있다: 기능성 분자의 아민 그룹이 먼저 SDA 링커와 반응한 다음, 결합 분자와 장파 UV 광(330-370nm)의 광활성 반응이 이어질 수 있다. SDA 크로스 링커는 절단가능할 수 있다(SDAD 링커와 같은 내부에 이황화 결합을 가짐).
Figure pct00090
NHS 에스테르/아지드 연결 변형에서, 링커의 NHS 에스테르는 pH 6~9 완충액에서 결합 분자 백본의 1차 아민기와 반응하여, 안정적인 아미드를 형성한다. 그 다음, 보다 특이적인 펩티드 또는 단백질 또는 기타 기능성 분자의 알키닐 기가 아지드-알킨 휴젠 사이클로어디션(Azide-Alkyne Huisgen Cycloaddition)을 통해 링커의 타측에 있는 아지도와 반응하여, 1,2,3-트리아졸 연결을 형성한다(클릭 화학). 또한, 링커의 NHS 에스테르는 pH 6~9 완충액에서 기능성 분자의 1차 아민기와 반응하여, 안정적인 아미드를 형성한다. 그 다음, 결합 분자에 연결된 알키닐 기가 아지드-알킨 휴젠 사이클로어디션을 통해 링커의 타측에 있는 아지도와 반응하여, 1,2,3-트리아졸 연결을 형성한다.
Figure pct00091
아민-대-술프히드릴 연결 변형에서, 링커의 NHS 에스테르는 pH 6~9 완충액에서 결합 분자 백본의 1차 아민기와 반응하여, 안정적인 아미드 결합을 형성한다. 그 다음, 보다 특이적인 펩티드 또는 단백질 또는 다른 기능성 분자의 술프히드릴이 pH 4.5~8.5에서 아민-대-술프히드릴 링커의 타측에 있는 말레이미드 또는 피리딜디티올 또는 할로아세틸과 반응하여, 티오에테르 또는 이황화 결합을 형성한다.
아민-대-술프히드릴 링커와의 접합은 순서가 상이할 수 있다. 예를 들어, 기능성 분자의 아민 기는 링커와 반응하여, 먼저 아미드 결합을 형성한 다음, 이어서 결합 분자의 술프히드릴과 반응할 수 있다. 또한, 기능성 분자의 술프히드릴기가 링커와 반응하여, 먼저 pH 4.5~7에서 티오에테르 또는 이황화물 결합을 형성하고, 이어서 pH 6~9에서 결합 분자의 아민기와 반응하여, 아미드 결합을 형성할 수 있다.
Figure pct00092
술프히드릴-대-탄수화물 연결 변형에서, 결합 분자의 술프히드릴기는 링커의 말레이미드 또는 피리딜디티올과 반응하여, pH 4.5~8에서 먼저 티오에테르 또는 이황화 결합을 형성하고, 그 다음 기능성 분자의 카르보닐(알데히드/케톤) 기가 히드라지드와 반응하여, 히드라존 결합을 형성한다. 또한, 기능성 분자의 술프히드릴기는 링커와 반응하여, pH 4.5 ~ 8에서 먼저 티오에테르 또는 이황화물 결합을 형성하고, 이어서 결합 분자 상의 탄수화물, 또는 산화된 탄수화물, 또는 카르보닐(알데히드/케톤)기와 반응하여, 히드라존 결합을 형성한다.
Figure pct00093
히드록실-대-술프히드릴 연결 변형에서, 결합 분자의 술프히드릴기는 링커 상의 말레이미드 또는 피리딜디티올과 반응하여, pH 6~8에서 먼저 티오에테르 또는 이황화 결합을 형성하고, 그 다음 기능성 분자의 히드록시기가 링커의 이소시아네이트와 반응하여, pH 8~9에서 카바메이트 결합을 형성한다. 또한, 기능성 분자의 술프히드릴기는 링커와 반응하여, pH 6~8에서 먼저 티오에테르 또는 이황화 결합을 형성하고, 이어서 결합 분자의 하이드록시와 반응하여, pH 8~9에서 카바메이트 결합을 형성할 수 있다.
Figure pct00094
본 발명의 또 다른 측면에서, 본 발명에 사용되는 항체의 생산은 생체내 또는 시험관내 절차 또는 이들의 조합을 포함한다. 다클론성 항-수용체 펩타이드 항체를 생산하는 방법은 관련 기술 분야에 널리 공지되어 있고, 예컨대, 미국 특허 제4,493,795호(Nestor 등)에 공지되어 있다. 단클론성 항체는 전형적으로 목적하는 항원으로 면역화된 마우스의 비장 세포와 골수종 세포를 융합시킴으로써 제조된다(Koehler, G.; Milstein, C. (1975). Nature 256: 495-7). 상세한 절차는 "항체-실험실 매뉴얼"(Harlow and Lane, eds., Cold Spring Harbor Laboratory Press, New York (1988))에 기술되어 있으며, 이것은 본 명세서에 참고로 포함된다. 특히 단클론성 항체는 무손상 표적 세포, 표적 세포로부터 단리된 항원, 전체 바이러스, 약독화된 전체 바이러스 및 바이러스성 단백질과 같은 관심대상 항원으로 마우스, 래트, 햄스터 또는 임의의 다른 포유동물을 면역화시킴으로써 생산된다. 비장세포는 전형적으로 폴리에틸렌 글리콜(PEG) 6000을 사용하여 골수종 세포와 융합된다. 융합된 혼성체는 HAT(hypoxanthine-aminopterin-thymine)에 대한 민감도에 의해 선택된다. 본 발명을 실시하는데 유용한 단클론성 항체를 생산하는 하이브리도마는 특정 수용체와 면역 반응하거나 표적 세포 상의 수용체 활성도를 저해하는 능력에 의해 식별된다.
본 발명에 사용되는 단클론성 항체는 적절한 항원 특이성의 항체 분자를 분비하는 하이브리도마를 함유하는 영양 배지를 포함하는 단클론성 하이브리도마 배양물을 개시함으로써 제조될 수 있다. 배양물은 하이브리도마가 항체 분자를 배지에 분비하기에 충분한 시간 및 조건 하에서 유지된다. 이어서, 항체-함유 배지를 수집한다. 이어서, 단백질-A 친화성 크로마토그래피; 음이온, 양이온, 소수성 또는 크기 배제 크로마토그래피(특히 단백질 A 이후의 특정 항원에 대한 친화성 및 사이징 칼럼 크로마토그래피); 원심 분리, 차동 용해도, 또는 단백질 정제를 위한 다른 표준 기술과 같은 널리 알려진 기술에 의해 항체 분자를 추가로 단리할 수 있다.
이들 조성물의 제조에 유용한 배지는 관련 기술 분야에 널리 공지되어 있고, 상업적으로 입수 가능하고, 합성 배양 배지를 포함한다. 예시적인 합성 배지는 둘베코 최소 필수 배지(DMEM; Dulbecco et al., Virol. 8, 396(1959))이며, 이 배지에는 4.5gm/l 글루코스, 20mm 글루타민, 20% 우태아 혈청, 및 소포제, 예컨대 폴리옥시에틸렌-폴리옥시프로필렌 블록 공중합체가 보충된다.
또한, 항체-생산 세포주는 발암성 DNA로 B 림프구를 직접 형질전환시키거나, 온코바이러스(oncovirus), 예컨대, 엡스타인-바르 바이러스(EBV, 인간 헤르페스 바이러스 4(HHV-4)라고도 부름) 또는 카포시 육종 연관 헤르페스 바이러스(KSHV)로의 형질주입과 같은 융합 이외의 기술로 생성될 수 있다(미국 특허 제4,341,761호; 제4,399,121호; 제4,427,783호; 제4,444,887호; 제4,451,570호; 제4,466,917호; 제4,472,500호; 제4,491,632호; 제4,493,890호 참고). 단클론성 항체는 또한 관련 기술 분야에 널리 공지되게 기술된 바와 같은 카복실 말단을 함유하는 항-수용체 펩타이드 또는 펩타이드를 통해서 생산될 수 있다(Niman et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 80: 4949-53 (1983); Geysen et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 82: 178-82 (1985); Lei et al. Biochemistry 34(20): 6675-88, (1995)). 전형적으로, 항-수용체 펩타이드 또는 펩타이드 유사체는 항-수용체 펩타이드 단클론성 항체를 생산하기 위한 면역원으로서 단독으로 또는 면역원성 담체에 접합되어 사용된다.
또한, 본 발명에서 결합 분자로서의 단클론성 항체를 제조하기 위한 다른 널리 공지된 다수의 기술이 존재한다. 완전 인간 항체를 제조하는 방법이 특히 유용하다. 하나의 방법은 친화성 강화(enrichment) 방법을 사용하여 항원에 특이적으로 결합하는 다양한 인간 항체를 선택하는데 사용될 수 있는 파지 디스플레이 기술이다. 파지 디스플레이는 문헌에 완벽하게 기술되어 있고, 파지 디스플레이 라이브러리의 작제 및 스크리닝은 관련 기술 분야에 널리 공지되어 있다(예를 들어, Dente et al, Gene. 148(1):7-13 (1994); Little et al, Biotechnol Adv. 12(3): 539-55(1994); Clackson et al., Nature 352: 264-8 (1991); Huse et al., Science 246: 1275-81 (1989) 참고).
인간 이외의 또 다른 종, 예컨대 마우스로부터의 하이브리도마 기술에 의해 유래된 단클론성 항체는 인간에게 주입될 때, 인간 항-마우스 항체를 회피하기 위해서 인간화될 수 있다. 항체의 인간화의 보다 일반적인 방법에는 상보성 결정 영역 이식 및 리서페이싱(resurfacing)이 있다. 이러한 방법은 광범위하게 기술되어 있다(예를 들어, 미국 특허 제5,859,205호 및 제6,797,492호; Liu et al, Immunol Rev. 222: 9-27 (2008); Almagro et al, Front Biosci. 13: 1619-33 (2008); Lazar et al,mol Immunol. 44(8): 1986-98 (2007); Li et al, Proc. Natl. Acad. Sci. U S A. 103(10): 3557-62 (2006) 참고, 각각은 본 명세서에 참고로 포함됨). 완전 인간 항체는 또한 면역원으로 인간 면역 글로불린 중쇄 및 경쇄의 상당 부분을 운반하는 트랜스제닉 마우스, 토끼, 원숭이 또는 다른 포유동물을 면역화시킴으로써 제조될 수 있다. 이러한 마우스의 예는 Xenomouse(아브제닉스사(Abgenix)/암젠사(Amgen)), HuMAb-mouse(마다렉스사(Medarex)/BMS), Velocimouse(레제너론사(Regeneron))이다(예를 들어, 미국 특허 제6,596,541호, 제6,207,418호, 제6,150,584호, 제6,111,166호, 제6,075,181호, 제5,922,545호, 제5,661,016호, 제5,545,806호, 제5,436,149호 및 제5,569,825호 참고). 인간 요법에서, 뮤린의 가변 영역 및 인간 불변 영역은 또한 뮤린 mAb보다 사람에서 면역원성이 훨씬 낮은 "키메라 항체"라고 불리는 작제물(construct)에 융합될 수 있다(문헌[Kipriyanov et al,mol Biotechnol. 26: 39-60 (2004); Houdebine, Curr Opin Biotechnol. 13: 625-9 (2002)], 각각은 본 명세서에 참고로 포함됨). 또한, 항체의 가변 영역에서 부위-지향된 돌연변이유발(site-directed mutagenesis)은 항원에 대한 친화도 및 특이성이 보다 높은 항체를 생성할 수 있고(Brannigan et al, Nat Revmol Cell Biol. 3: 964-70, (2002)); Adams et al, J Immunol Methods. 231: 249-60 (1999)), mAb의 불변 영역의 교환은 결합 및 세포독성도 효과기 기능을 매개하는 능력을 개선시킬 수 있다.
악성 세포 항원에 대한 면역특이적 항체는 또한 상업적으로 획득되거나 예를 들어 화학적 합성 또는 재조합 발현 기술과 같은 당업자에게 공지된 임의의 방법에 의해 제조될 수 있다. 악성 세포 항원에 대한 면역특이적인 항체를 암호화하는 뉴클레오타이드 서열은 상업적으로, 예를 들어 젠뱅크(GenBank) 데이터베이스 또는 그것과 유사한 데이터베이스, 문헌 간행물 또는 통상적인 클로닝 및 서열결정으로부터 획득될 수 있다.
항체와 별개로, 표적화된 세포 상의 에피토프 또는 상응하는 수용체와 결합/차단/표적화하거나 일부 다른 방식으로 상호작용하는 펩타이드 또는 단백질이 결합 분자로서 사용될 수 있다. 이들 펩티드 또는 단백질은 에피토프 또는 상응하는 수용체에 대해 친화성을 갖는 임의의 펩타이드 또는 단백질일 수 있으며, 반드시 면역 글로불린 패밀리일 필요는 없다. 이러한 펩타이드는 파지 디스플레이 항체와 유사한 기술로 단리될 수 있다(Szardenings, J Recept Signal transduct Res. 2003, 23(4): 307-49)). 이러한 무작위 펩타이드 라이브러리로부터의 펩타이드의 사용은 항체 및 항체 단편과 유사할 수 있다. 펩타이드 또는 단백질의 결합 분자는 그러한 부착이 펩타이드 또는 단백질이 그의 항체 결합 특이성을 유지하도록 허용하는 한, 큰 분자 또는 물질, 예컨대, 비제한적으로 알부민, 중합체, 리포솜, 나노입자, 덴드리머 상에 접합 또는 연결될 수 있다.
암, 자가면역 질환 및 감염성 질환을 치료하기 위한 이러한 예방에서 캄프토테신 유사체의 접합을 위해 사용되는 항체의 예는, 3F8(항-GD2), 아바고보맙(항-CA-125), 아브식시맙(항 CD41(인터그린 알파-IIb), 아달리무맙(항-TNF-α), 아데카투무맙(항-EpCAM, CD326), 아펠리모맙(항-TNF-α), 아푸투즈맙(항-CD20), 알라시주맙 페골(항-VEGFR2), ALT518(항-IL-6), 알렘투주맙(Campath, MabCampath, 항-CD52), 알투모맙(항-CEA), 아나투모맙(항 TAG-72), 안루킨주맙(IMA-638, 항 IL-13), 아폴리주맙(항-HLA-DR), 아르시투모맙(항-CEA), 아셀리주맙(항-L-셀렉틴(CD62L), 아틀리주맙(토실리주맙, 악템라, 로악템라, 항-IL-6 수용체), 아토롤리무맙(항-레서스 인자), 바피뉴주맙(항-베타 아밀로이드), 바실릭시맙(Simulect, 항CD25(IL-2 수용체의 α 쇄), 바비툭시맙(항-포스파티딜세린), 벡투모맙(LymphoScan, 항-CD22), 벨리무맙(Benlysta, LymphoStat-B, 항-BAFF), 벤랄리주맙(항-CD125), 베르틸리무맙(항-CCL11(에오탁신-1), 베실레소맙(Scintimun, 항-CEA 관련 항원), 베바시주맙(Avastin, 항 VEGF-A), 비시로맙(FibriScint, 항-피브린 Ⅱ 베타 쇄), 비바투주맙(항-CD44 v6), 블리나투모맙(BiTE, 항-CD19), 브렌툭시맙(cAC10, 항-CD30 TNFRSF8), 브리아키누맙(항 IL-12, IL-23), 카나키누맙(Ilaris, 항-IL-1), 칸투주맙(C242, 항-CanAg), 카프로맙, 카투막소맙(Removab, 항-EpCAM, 항-CD3), CC49(항-TAG-72), 세델리주맙(항-CD4), 세르톨리주맙 페골(Cimzia, 항-TNF-알파), 세툭시맙(Erbitux, IMC-C225, 항-EGFR), 시타투주맙 보가톡스(항-EpCAM), 식수투무맙(항-IGF-1), 클레놀릭시맙(항-CD4), 클리바투주맙(항-MUC1), 코나투무맙(항-TRAIL-R2), CR6261(항-인플루엔자 A 헤마글루티닌), 다세투주맙(항-CD40), 다클리주맙(Zenapax, 항-CD25 (IL-2 수용체의 α 쇄)), 다라투무맙(항-CD38(환식 ADP 리보스 가수분해효소), 데노수맙(Prolia, 항-RANKL), 데투모맙(항-B-림프종 세포), 도르리모맙, 도르릭시주맙, 에크로멕시맙(항-GD3 강글리오사이드), 에쿨리주맙(Soliris, 항-C5), 에도바코맙(항-엔도톡신), 에드레콜로맙(Panorex, MAb17-1A, 항-EpCAM), 에팔리주맙(Raptiva, 항-LFA-1(CD11a), 에펀구맙(Mycograb, 항-Hsp90), 엘로투주맙(항-SLAMF7), 엘실리모맙(항-IL-6), 엔리모맙 페골(항-ICAM-1(CD54)), 에피투모맙(항-에피시알린), 에프라투주맙(항-CD22), 에를리주맙(항-ITGB2(CD18)), 에르투막소맙(Rexomun, 항-HER2/neu, CD3), 에타라시주맙(Abegrin, 항-인터그린 αvβ3), 엑스비비루맙(항-B형 간염 표면 항원), 파놀레소맙(NeutroSpec, 항-CD15), 파랄리모맙(항-인터페론 수용체), 파를레투주맙(항-엽산 수용체 1), 펠비주맙(항-호흡기 융합 바이러스), 페자키누맙(항-IL-22), 피지투무맙(항-IGF-1 수용체), 폰토리주맙(항-IFN-γ), 포라비루맙(항-광견병 바이러스 당 단백질), 프레솔리무맙(항-TGB-β), 갈릭시맙(항-CD80), 간테네루맙(항-베타 아밀로이드), 가빌리모맙(항-CD147(asigin)), 젬투주맙(항-CD33), 지렌툭시맙(항-탄산 탈수효소 9), 글렘바투무맙(CR011, 항-GPNMB), 골리무맙(Simponi, 항-TNF-α), 고밀릭시맙(항-CD23(IgE 수용체)), 항-HLA-DR 항체, 이발리주납(항-CD4), 이브리투모맙(항-CD20), 이고보맙(Indimacis-125, 항-CA-125), 임시로맙(Myoscint, 항-심장 마이오신), 인플릭시맙(Remicade, 항-TNF-α), 인테투무맙(항-CD51), 인올리모맙(항-CD25(IL-2 수용체의 α 쇄), 이노투주맙(항-CD22), 이필리무맙(항-CD152), 이라투무맙(항-CD30(TNFRSF8)), 켈릭시맙(항-CD4), 라베투주맙(CEA-Cide, 항-CEA), 레브리키주맙(항-IL-13), 레말레소맙(항-NCA-90(과립구 항원)), 레르델리무맙(항-TGF 베타 2), 렉사투무맙(항-TRAIL-R2), 리비비루맙(항-B형 간염 표면 항원), 린투주맙(항-CD33), 루카투무맙(항-CD40), 루밀릭시맙(항-CD23(IgE 수용체), 마파투무맙(항-TRAIL-R1), 마슬리모맙(항-T-세포 수용체), 마투주맙(항-EGFR), 메폴리주맙(Bosatria, 항-IL-5), 메텔리무맙(항-TGF 베타 1), 밀라투주맙(항-CD74), 민레투모맙(항-TAG-72), 미투모맙(BEC-2, 항-GD3 강글리오사이드), 모롤리무맙(항-레서스 인자), 모타비주맙(Numax, 항-호흡기 융합 바이러스), 무로모납-CD3(Orthoclone OKT3, 항-CD3), 나콜로맙(항-C242), 납투모맙(항-5T4), 나탈리주맙(Tysabri, 항-인테그린 α4), 네바쿠맙(항-엔도톡신), 네시투무맙(항-EGFR), 네릴리모맙(항-TNF-α), 니모투주맙(Theracim, Theraloc, 항-EGFR), 노페투모맙, 오크렐리주맙(항-CD20), 오둘리모맙(아폴리모맙, 항-LFA-1(CD11a)), 오파투무맙(Arzerra, 항-CD20), 올라라투맙(항-PDGF-Rα), 오말리주맙(Xolair, 항-IgE Fc 영역), 오포르투주맙(항-EpCAM), 오레고보맙(OVaRex, 항-CA-125), 오텔릭시주맙(항-CD3), 파기박시맙(항-리포테이코산), 팔리비주맙(Synagis, Abbosynagis, 항-호흡기 융합 바이러스), 판니투무납(Vectibix, ABX-EGF, 항-EGFR), 파노바쿠맙(항-슈도모나스 아레루기노사), 파스콜리주맙(항-IL-4), 펨투모맙(Theragyn, 항-MUC1), 퍼투주맙(Omnitarg, 2C4, 항-HER2/neu), 페셀리주맙(항-C5), 핀투모맙(항-선암 항원), 프릴릭시맙(항-CD4), 프리투무맙(항-비멘틴), PRO 140(항-CCR5), 라코투모맙(1E10, 항-(N-글리콜릴뉴라민산(NeuGc, NGNA)-강글리오사이드 GM3)), 라피비루맙(항-광견병 바이러스 당단백질), 라무시루맙(항-VEGFR2), 라니비주맙(Lucentis, 항-VEGF-A), 락시바쿠맙(항-탄저균 독소, 보호 항원), 레가비루맙(항-사이토메갈로바이러스 당단백질 B), 레슬리주맙(항-IL-5), 리로투무맙(항-HGF), 리툭시맙(MabThera, 리툭산맙, 항-CD20), 로바투무맙(항-IGF-1 수용체), 론탈리주맙(항-IFN-α), 로벨리주맙(LeukArrest, 항-CD11, Cd18), 루플리주맙(Antova, 항-CD154(CD40L)), 사투모맙(항-TAG-72), 세비루맙(항-사이토메갈로바이러스), 시브로투주맙(항-FAP), 시팔리무맙(항-IFN-α), 실툭시맙(항-IL-6), 시플리주맙(항-CD2), (스마트)MI95(항-CD33), 솔라네주맙(항-베타 아밀로이드), 소넵시주맙(항-스핀고신-1-포스페이트), 손투주맙(항-에피시알린), 스탐울루맙(항-마이오스타틴), 술레소맙(LeukoScan, (항-NCA-90(과립구 항원), 타카투주맙(항-알파-페토프로테인), 타도시주맙(항-인터그린αIIbβ3), 탈리주맙(항-IgE), 타네주맙(항-NGF), 탑리투모맙(항-CD19), 테피바주맙(Aurexis,(항-클럼핑 인자 A), 텔리모맙, 테나투모맙(항-테나신 C), 테넬릭시맙(항-CD40), 테플리주맙(항-CD3), TGN1412(항-CD28), 티실이무맙(트레멜리무맙,(항-CRLA-4), 티가투주맙(항-TRAIL-R2), TNX-650(항-IL-13), 토실리주맙(아틀리주맙, 악템라, 로악템라, (항-IL-6-수용체), 토랄리주맙(항-CD154(CD40L)), 토시투모맙(항-CD20), 트라스투주맙(허셉틴,(항-HER2/neu), 트레멜리무맙(항-CTLA-4), 투코투주맙 셀몰루킨(항-EpCAM), 투비루맙(항-B형 간염 B 바이러스), 우르톡사주맙(항-에쉐리키아 콜라이), 우스테키누맙(Stelara, 항-IL-12, IL-23), 바팔릭시맙(항-AOC3(VAP-1)), 베돌리주맙, (항-인테그린 α4β7), 벨투주맙(항-CD20), 베팔리모맙(항-AOC3(VAP-1)), 비실리주맙(Nuvion, 항-CD3), 비탁신(항-혈관 인테그린 avb3), 볼록시시맙(항-인테그린 α5β1), 보투무맙(HumaSPECT, 항-종양 항원 CTAA16.88), 잘루투무맙(HuMax-EGFr,(항-EGFR), 자놀리무맙(HuMax_CD4, 항-CD4), 지랄리무맙(항-CD147(basigin)), 졸리모맙(항-CD5), 에타네르셉트(Enbrel®), 알레파셉트(Amevive®), 아바타셉트(Orencia®), 릴오나셉트(Arcalyst), 14F7[항-IRP-2(철 단백질 2)], 14G2a(항-GD2 강글리오사이드, 흑색종 및 고형 종양의 경우 국립 암 기관으로부터), J591(항-PSMA, 전립선 암의 경우 웨일 코넬 메디컬 스쿨(Weill Cornell Medical School)), 225.28S[항-HMW-MAA(고분자량-흑색종-연관 항원), 흑색종의 경우 소린 라디오파르마시사(Sorin Radiofarmaci S.R.L.)(이태리 밀란 소재)], COL-1(항-CEACAM3, CGM1, 결장직장 및 위암의 경우 미국 국립 암 기관), CYT-356(Oncoltad®, 전립선암의 경우), HNK20(호흡기 융합 바이러스의 경우 오라박스사(OraVax Inc.)), ImmuRAIT(NHL의 경우 이뮤노메딕스사(Immunomedics)로부터), Lym-1(항-HLA-DR10, 암의 경우 페레그린 팜사(Peregrine Pharm.)), MAK-195F[항-TNF(종양 괴사 인자; TNFA, TNF-알파: TNFSF2), 패혈증 독성 쇼크의 경우 애봇사(Abbott)/크놀사(Knoll)로부터], MEDI-500[T10B9, 항-CD3, TRαβ(T 세포 수용체 알파/베타), 복합체[이식편대 숙주병의 경우 메드이뮨사(MedImmune Inc)로부터], RING SCAN[항-TAG 72(종양 연관 당단백질 72), 유방암, 결장 및 직장암의 경우 네오프로브사(Neoprobe Corp)로부터], 아비시딘(항-EPCAM)(상피 세포 접착 분자), 항-TACSTD1(종양-연관 칼슘 신호 변환기 1), 항-GA733-2(위장내 종양-연관 단백질 2), 항-EGP-2(상피 당단백질 2); 항-KSA; KS1/4 항원; M4S; 종양 항원 17-1A; CD326[결장암, 난소암, 전립선암 및 NHL의 경우 네옥스사(NeoRx Corp.)로부터]; 항-Trop-2-인간화된 항체 hRS7, 림포사이드(이뮤노메딕스사(Immunomedics), 미국 뉴저지주 소재), 스마트 ID10(프로테인 디자인 랩(Protein Design Lab)), 온코림(테크니클론사(Techniclone Inc), 미국 캘리포니아주 소재), 알로문(바이오트랜스플랜트사(BioTransplant), 미국 캘리포니아주 소재), 항-VEGF(제넨테크사(Genentech), 미국 캘리포니아주 소재); CEAcide(이뮤노메딕스사, 미국 뉴저지주 소재), IMC-1C11(임클론사(ImClone), 미국 뉴저지주 소재) 및 세툭시맙(임클론사, 미국 뉴저지주 소재)을 포함하지만, 이들에 제한되지 않는다.
결합 리간드로서의 다른 항체는 하기 항원에 대한 항체를 포함하지만 이들에 제한되지 않는다: 아미노펩티다제 N(CD13), 아넥신 A1, B7-H3(CD276, 각종 암), CA125(난소), CA15-3(암종), CA19-9(암종), L6(암종), 루이스 Y(암종), 루이스 X(암종), 알파 페토프로테인(암종), CA242(결장직장), 태반 알칼린 포스파타제(암종), 전립선 특이적 항원(전립선), 전립선산 포스파타제(전립선), 표피 성장 인자(암종), CD2(호지킨병, NHL 림프종, 다발성 골수종), CD3 엡실론(T 세포 림프종, 폐암, 유방암, 위암, 난소암, 자가면역 질환, 악성 복수), CD19(B 세포 악성종양), CD20(비-호지킨 림프종), CD22(백혈병, 림프종, 다발성 골수종, SLE), CD30(호지킨 림프종), CD33(백혈병, 자가면역 질환), CD38(다발성 골수종), CD40(림프종, 다발성 골수종, 백혈병 (CLL)), CD51(전이성 흑색종, 육종), CD52(백혈병), CD56(소세포 폐암, 난소암, 메르켈(Merkel) 세포 암종 및 액상 종양, 다발성 골수종), CD66e(암), CD70(전이성 신장 세포 암종 및 비-호지킨 림프종), CD74(다발성 골수종), CD80(림프종), CD98(암), 뮤신(암종), CD221(고형 종양), CD227(유방암, 난소암), CD262 (NSCLC 및 기타 암), CD309(난소암), CD326(고형 종양), CEACAM3(결장직장, 위암), CEACAM5(암배아 항원; CEA, CD66e)(유방암, 결장직장암 및 폐암), DLL4(Δ-유사-4), EGFR(표피 성장 인자 수용체, 각종 암), CTLA4(흑색종), CXCR4(CD184, 헴-종양학(Heme-oncology), 고형 종양), 엔도글린(CD105, 고형 종양), EPCAM(상피 세포 접착 분자, 방광암, 두부암, 경부암, 결장암, NHL 전립선암 및 난소암), ERBB2(표피 성장 인자 수용체 2; 폐암, 유방암, 전립선암), FCGR1(자가면역 질환), FOLR(엽산염 수용체, 난소암), GD2 강글리오사이드(암), G-28(세포 표면 항원 당지질, 흑색종), GD3 이디오타입(암), 열 충격 단백질(암), HER1(폐암, 위암), HER2(유방암, 폐암 및 난소암), HLA-DR10(NHL), HLA-DRB(NHL, B 세포 백혈병), 인간 융모성 성선 자극 호르몬(암종), IGF1R(인슐린-유사 성장 인자 1 수용체, 고형 종양, 혈액 암), IL-2 수용체(인터류킨 2 수용체, T-세포 백혈병 및 림프종), IL-6R(인터류킨 6 수용체, 다발성 골수종, RA, 캐슬맨병, IL6 의존성 종양), 인테그린(각종 암의 경우 αvβ3, α5β1, α6β4, αllβ3, α5β5, αvβ5), MAGE-1(암종), MAGE-2(암종), MAGE-3(암종), MAGE 4(암종), 항-트랜스페린 수용체(암종), p97(흑색종), MS4A1(막-스패닝 4-도메인 서브패밀리 및 구성원 1, 비-호지킨 B 세포 림프종, 백혈병), MUC1 또는 MUC1-KLH(유방암, 난소암, 자궁경부암, 기관지암 및 위장내 암), MUC16(CA125)(난소암), CEA(결장직장), gp100(흑색종), MART1(흑색종), MPG(흑색종), MS4A1(멤브레인-스패닝 4-도메인 서브패밀리 A, 소세포 폐암, NHL), 뉴클레오린, Neu 종양유전자 산물(암종), P21(암종), 항-(N-글리콜릴뉴라민산의 파라토프(유방암, 흑색종암), PLAP-유사 고환 알칼리 포스파타제(난소암, 고환암), PSMA(전립선 종양), PSA(전립선), ROBO4, TAG 72(종양 연관 당단백질 72, AML, 위암, 결장직장암, 난소암), T 세포 트랜스멤브레인 단백질(암), 타이(Tie)(CD202b), TNFRSF10B(종양 괴사 인자 수용체 슈퍼패밀리 구성원 10B, 암), TNFRSF13B(종양 괴사 인자 수용체 슈퍼패밀리 구성원 13B, 다발성 골수종, NHL, 기타 암, RA 및 SLE), TPBG(영양아층 당단백질, 신장 세포 암종), TRAIL-R1(종양 괴사 세포사멸 유도 리간드 수용체 1, 림프종, NHL, 결장직장암, 폐암), VCAM-1(CD106, 흑색종), VEGF, VEGF-A, VEGF-2(CD309)(각종 암).
항체에 의해서 인식되는 일부 다른 종양 연관 항원은 문헌[Gerber, et al, mAbs 1:3, 247-53 (2009); Novellino et al, Cancer Immunol Immunother. 54(3), 187-207 (2005). Franke, et al, Cancer Biother Radiopharm. 2000, 15, 459-76]에 검토되어 있다.
항체가 대항하는 이러한 항원의 예는 하기와 같다: 다른 많은 분화 클러스터(CD4, CD5, CD6, CD7, CD8, CD9, CD10, CD11a, CD11b, CD11c, CD12w, CD14, CD15, CD16, CDw17, CD18, CD21, CD23 , CD24, CD25, CD26, CD27, CD28, CD29, CD31, CD32, CD34, CD35, CD36, CD37, CD41, CD42, CD43, CD44, CD45, CD46, CD47, CD48, CD49b, CD49c, CD53, CD55 , CD58, CD59, CD61, CD62E, CD62L, CD62P, CD63, CD68, CD69, CD71, CD72, CD79, CD81, CD82, CD83, CD86, CD87, CD88, CD89, CD90, CD91, CD930, CD96, CD10 , CD105, CD106, CD109, CD117, CD120, CD127, CD133, CD134, CD135, CD138, CD141, CD142, CD143, CD144, CD147, CD151, CD152, CD151, CD152, CD154, CD152, CD154, CD156, CD156, CD156 CDw186, CD195, CD202(a, b), CD209, CD235a, CD271, CD303, CD304), 아넥신 A1, 뉴클레오린, 엔도글린(CD105), ROBO4, 아미노-펩티다제 N, Δ-유사-4(DLL4), VEGFR 2(CD309), CXCR4 (CD184), 타이2, B7-H3, WT1, MUC1, LMP2, HPV E6 E7, EGFRvIII, HER-2/neu, 이디오타입, MAGE A3, p53 비-돌연변이체, NY-ESO-1, GD2, CEA , 멜란A/MART1, Ras 돌연변이체, gp100, p53 돌연변이체, 프로테이나제3(PR1), bcr-abl, 티로시나제, 서바이빈(Survivin), hTERT, 육종 전위 파단점, EphA2, PAP, ML-IAP, AFP, EpCAM, ERG(TMPRSS2 ETS 융합 유전자), NA17, PAX3, ALK, 안드로겐 수용체, 사이클린 B1, 폴리시알산, MYCN, RhoC, TRP-2, GD3, 푸코실 GM1, 메조텔린, PSCA, MAGE A1, sLe(a), CYP1B1, PLAC1, GM3, BORIS, Tn, 글로보H(GloboH), ETV6- AML, NY-BR-1, RGS5, SART3, STn, 탄산 탈수효소 IX, PAX5, OY-TES1, 정자 단백질 17, LCK, HMWMAA, AKAP-4, SSX2, XAGE 1, B7H3, 레구마인, 타이 2, Page4, VEGFR2, MAD-CT-1, FAP, PDGFR-β, MAD-CT-2, Fos-연관 항원 1.
또 다른 특정 실시예에서, 본 발명의 캄프토테신 유사체-결합 분자 접합체는 암 치료를 위한 본 발명의 조성물 및 방법에 따라 사용된다. 암은 부신피질 암종, 항문암, 방광암, 뇌종양(성인, 뇌 줄기 세포종, 유년기, 소뇌 성상 세포종, 대뇌 성상 세포종, 뇌실막종, 수아종, 천막상 원시 신경 외배엽 및 송과체 종양, 시각 경로 및 시상하부 신경교종), 유방암, 카르시노이드 종양, 위장내, 미지의 원발성 암종, 경부암, 결장암, 자궁내막암, 식도암, 간외 담관암, 유잉(Ewing) 패밀리의 종양(PNET), 두개외 배아 세포 종양, 안구암, 안내 흑색종, 담낭암, 위암(위), 배아 세포 종양, 생식선외, 임신성 영양아층 종양, 두경부암, 하인두암, 도 세포 암종, 신장암(신장세포암), 후두암, 백혈병(급성 림프구성, 급성 골수성, 만성 림프구성, 만성 골수성, 털 세포), 입술 및 구강암, 간암, 폐암(비소세포, 소세포, 림프종(AIDS-관련, 중추 신경계, 피층 T-세포, 호지킨병, 비-호지킨병, 악성 중피종, 흑색종, 머켈 세포 암종, 잠복 원발성 다발성 골수종을 동반한 전이성 편평 두부암 및 기타 형질 세포 신생물, 균상식육종, 골수이형성 증후군, 척수 증식성 장애, 비인두암, 신경모세포종, 구강암, 구강인두암, 골육종, 난소암(상피, 배아 세포 종양, 저 악성 잠재성 종양), 췌장암(외분비, 도세포 암종), 부비동 및 비강암, 부갑상선암, 음경암, 크롬친화성세포종 암, 뇌하수체암, 형질 세포 신생물, 전립선암, 횡문근 육종, 직장암, 신장 세포 암(신장암), 신장 골반 및 폐렴(이행세포), 침샘 암, 세자리 증후군, 피부암, 피부암(피부 T-세포 림프종, 카포시 육종, 흑색종), 소장암, 연조직 육종, 위암, 고환암, 흉선종(악성), 갑상선암, 요도암, 자궁암(육종), 유년기의 특이한 암, 질암, 불바르(Vulvar)암, 빌름스(Wilms) 종양을 포함하지만 이들에 제한되지 않는다.
또 다른 특정 실시예에서, 본 발명의 캄프토테신 유사체-결합 분자 접합체는 자가면역 질환의 치료 또는 예방을 위한 본 발명의 조성물 및 방법에 따라 사용된다.
자가면역 질환은 아클로히드라(Achlorhydra) 자가면역 활성 만성 감염, 급성 파종 뇌척수염, 급성 출혈성 뇌백질염, 애디슨병, 무감마글로불린혈증, 원형 탈모증, 경화증, 강직성 척추염, 항-GBM/TBM 신염, 항인지질 증후군, 항합성효소 증후군, 관절염, 아토피성 알레르기, 아토피성 피부염, 자가면역성 재생불량성 빈혈, 자가면역성 심근증, 자가면역성 용혈성 빈혈, 자가면역성 간염, 자가면역성 내이병, 자가면역성 림프증식 증후군, 자가면역성 말초 신경병증, 자가면역성 췌장염, 자가면역성 다선 증후군 타입 I, II 및 III, 자가면역성 프로게스테론 피부염, 자가면역성 혈소판감소성 자반증, 자가면역성 포도막염, 발로병/발로 동심성 경화증, 바체트 증후군, 버거병, 비커스태프 뇌염, 블라우 증후군, 수포성 유사천포창, 캐슬맨병, 사가스병, 만성 피로 면역 이상 증후군, 만성 염증성 탈수초성 다발성신경병증, 만성 재발성 다병소성 골수염, 만성 라임병, 만성 폐쇄성 폐 질환, 척 슈트라우스 증후군, 흉터유사천포창, 실리악병, 코간 증후군, 한냉 응집 질환, 보체 성분 2 결핍, 두개 동맥염, CREST 증후군, 크론병(특발성 염증성 장질환의 유형), 쿠싱 증후군, 피부 백혈구파괴성 혈관염, 데고병, 더쿰병, 포진형 피부염, 피부근육염, 당뇨병 타입 1, 광범위 피부 전신 경화증, 드레슬러 증후군, 원판상 홍반성 낭창, 습진, 자궁내막증, 착부염-관련 관절염, 호산구성 근막염, 후천성 표피 수포증, 결절성 홍반, 필수 혼합 한랭글로불린혈증, 에반 증후군, 진행성 골화성 섬유이형성증, 섬유근육통, 섬유근염, 섬유화 아베올리티스, 위염, 위장 천포창, 거대 세포 동맥염, 사구체 신염, 굿파스처 증후군, 그레이브스병, 길랑-바레 증후군(GBS), 하시모토 뇌염, 하시모토 갑상선염, 용혈성 빈혈, 헤노흐-숀라인 자반증, 임신성 포진, 화농성 한선염, 휴게스 증후군(항 인지질 증후군 참조), 저감마글로불린혈증, 특발성 염증성 탈수초성 질환, 특발성 폐섬유증, 특발성 혈소판 감소성 자반증(자가면역 혈소판 감소성 자반증 참조), IgA 신증(또한 버거병), 인클루전 바디 근염, 염증성 탈수초성 다발성 신경병증, 간질성 방광염, 과민성 대장 증후군(IBS), 청소년 특발성 관절염, 청소년 류마티스 관절염, 가와사키병, 램버트-이튼 근무력 증후군, 백혈구파괴 혈관염, 편평 태선, 경화성 태선, 선형 IgA 질환(LAD), 루게릭병(또한 루게릭 경화증), 루포이드 간염, 홍반성 낭창, 마지드 증후군, 메니에르병, 현미경 다발성 맥관염, 밀러-피셔 증후군, 혼합 결합 조직 질환, 경화증, 무차-하버만병, 머클-웰스 증후군, 다발성 골수종, 다발성 경화증, 중증 근무력증, 근염, 기면증, 시신경척수염(또한 데빅병), 신경근육기장증, 안구 반흔 천포창, 안구간대경련-근간대경련 증후군, 오드 갑상선염, 재발성 류마티스, PANDAS(스트렙토코쿠스 연관 소아 면역 신경 정신 장애), 부신생물 소뇌 변성, 발작성 야간 혈색소뇨증, 패리 롬베르그 증후군, 파르소니지-터너 증후군, 중간부 포도막염, 천포창, 심상성 천포창, 악성 빈혈, 정맥주위 뇌척수염, POEMS 증후군, 결절성 다발 동맥염, 다발성 근육통, 다발성 근염, 원발성 담즙 간경변, 원발성 경화성 담관염, 진행성 염증성 신경병증, 건선, 건선 관절염, 괴저성 농피증, 순수 적혈구 무형성증, 라스무센 뇌염, 레이노 현상, 재발성 다발 연골염, 라이터 증후군, 하지불안 증후군, 후복막 섬유증, 류마티스 관절염, 류마티스 열, 사르코이드증, 정신분열증, 슈미트 증후군, 슈니츨러 증후군, 공막염, 경피증, 쇼그렌 증후군, 척추 관절증, 점착성 혈액 증후군, 스틸병, 강직인간 증후군, 아급성 세균성 심내막염, 수사크 증후군, 스위트 증후군, 시데남무도병, 교감 안염, 타카야수 동맥염, 측두 동맥염(거대 세포 동맥염함), 톨로사-헌트 증후군, 횡단성 척수염, 궤양성 대장염(특발성 염증성 장 질환의 유형), 미분화 결합 조직 질환, 미분화 척추 관절병증, 혈관염, 백반증, 베게너 육아종증(Wegener's granulomatosis), 윌슨 증후군(Wilson's syndrome) 및 위스코트-아드리치 증후군(Wiskott-Aldrich syndrome)을 포함하지만 이들에 제한되지 않는다.
또 다른 구체적인 실시예에서, 자가면역 질환의 치료 또는 예방을 위한 접합체에 사용되는 결합 분자는 항-엘라스틴 항체; 상피 세포 항체에 대한 Abys; 항-기저막 콜라겐 타입 IV 단백질 항체; 항-핵 항체; 항 ds DNA; 항 ss DNA, 항 카디올리핀 항체 IgM, IgG; 항-셀리악 항체; 항 인지질 항체 IgK, IgG; 항 SM 항체; 항 미토콘드리아 항체; 갑상선 항체; 마이크로솜 항체, T-세포 항체; 티로글로불린 항체, 항 SCL-70; 항-Jo; 항-U.sub.1RNP; 항-La/SSB; 항 SSA; 항 SSB; 항 페리탈(Perital) 세포 항체; 항 히스톤; 항 RNP; C-ANCA; P-ANCA; 항 동원체; 항-피브릴라린 및 항 GBM 항체, 항-강글리오사이드 항체; 항-데스모게인 3 항체; 항-p62 항체; 항-sp100 항체; 항-미토콘드리아(M2) 항체; 류마티스 인자 항체; 항-MCV 항체; 항-토포아이소머라제 항체; 항-호중구 세포질(cANCA) 항체일 수 있지만 이들에 제한되지 않는다.
특정 바람직한 실시예에서, 본 발명의 접합체에 대한 결합 분자는 자가면역 질환과 관련된 활성화 림프구 상에서 발현되는 수용체 또는 수용체 복합체 둘 모두에 결합할 수 있다. 수용체 또는 수용체 복합체는 면역글로불린 유전자 슈퍼패밀리 멤버(예를 들어, CD2, CD3, CD4, CD8, CD19, CD22, CD28, CD79, CD90, CD152/CTLA-4, PD-1, 또는 ICOS), TNF 수용체 슈퍼패밀리 구성원(예를 들어, CD27, CD40, CD95/Fas, CD134/OX40, CD137/4-1BB, INF-R1, TNFR-2, RANK, TACI, BCMA, 오스테오프로테게린, Apo2/TRAIL-R1, TRAIL-R2, TRAIL-R3, TRAIL-R4 및 APO-3), 인테그린, 사이토카인 수용체, 케모카인 수용체, 주 조직적합성 단백질, 렉틴(C-타입, S-타입, 또는 I-타입), 또는 보체 대조군 단백질을 포함할 수 있다.
또 다른 특정 실시예에서, 바이러스 또는 미생물 항원에 대해 면역특이적인 유용한 결합 리간드는 인간화 또는 인간 단클론성 항체이다. 본원에 사용된 용어 "바이러스 항원"은 면역 반응을 도출할 수 있는 임의의 바이러스성 펩타이드, 폴리펩타이드 단백질(예를 들어, HIV gp120, HIV nef, RSV F 당단백질, 인플루엔자 바이러스 뉴라미니다제, 인플루엔자 바이러스 헤마글루티닌, HTLV tax, 단순 포진 바이러스 당단백질(예를 들어, gB, gC, gD 및 gE) 및 B형 간염 표면 항원)을 포함하지만 이들로 제한되지 않는다. 본 명세서에서 사용되된 용어 "미생물 항원"은 면역 반응을 도출할 수 있는 임의의 미생물 펩타이드, 폴리펩타이드, 단백질, 당류, 다당류, 또는 지질 분자(예를 들어, 박테리아, 진균, 병원성 원생동물 또는 효모 폴리펩타이드, 예를 들어, LPS 및 협막 다당류 5/8 포함)를 포함하지만 이들로 제한되지 않는다. 바이러스 또는 미생물 감염에 사용 가능한 항체의 예는 RSV 감염의 치료를 위한 인간화된 항-호흡기 융합 바이러스 단클론성 항체인 팔리비주맙; HIV 감염의 치료를 위한 CD4 융합 항체인 PRO542; B형 간염 바이러스의 치료를 위한 인간 항체인 오스타비어; 사이토메갈로바이러스의 치료를 위한 인간화된 IgG.sub.1 항체인 PROTVIR; 및 항-LPS 항체를 포함하지만, 이들로 제한되지 않는다
본 발명의 결합 분자-캄프토테신 유사체 접합체는 감염성 질환의 치료에 사용될 수 있다. 이러한 감염성 질환은 아시네토박터(Acinetobacter) 감염, 방선균증(Actinomycosis), 아프리카 수면병(아프리카 트리파노소마증(African trypanosomiasis)), AIDS(후천성 면역결핍증), 아메바증, 아나플라즈마증(Anaplasmosis), 탄저병, 용혈성 아카노박테리아균 감염(Arcanobacterium haemolyticum infection), 아르헨티나 출혈열, 회충증, 아스페르길루스증 (Aspergillosis), 아스트로바이러스 감염(Astrovirus infection), 바베시아증, 바실루스 세레우스 감염(Bacillus cereus infection), 세균성 폐렴, 세균성 질염, 박테로이데스 감염, 발란티듐증, 바일리사스카리스 감염(Baylisascaris infection), BK 바이러스 감염, 흑색사모증, 블라스토시스티스 호미니스 감염, 분아진균증, 볼리비아 출혈열, 보렐리아 감염, 보툴리누스증(및 영아 보툴리누스증), 브라질 출혈열, 브루셀라증, 버크홀데리아 감염(Burkholderia infection), 부룰리 궤양(Buruli ulcer), 칼리시바이러스 감염(Calicivirus infection)(노로바이러스(Norovirus) 및 사포바이러스(Sapovirus)), 캠필로박테리아증(Campylobacteriosis), 칸디다증(모닐리아증; 아구창), 고양이 할큄병(Cat-scratch disease), 봉와직염, 샤가스병(아메리카 수면병), 무른 궤양, 수두, 클라미디아, 클라미마이도필라 폐렴균 감염(Chlamydophila pneumoniae infection), 콜레라, 색소모세포진균증(Chromoblastomycosis), 간흡충증(Clonorchiasis), 클로스트리디움 디피실 감염(Clostridium difficile infection), 콕시디오이데스 진균증(Coccidioidomycosis), 콜로라도 진드기열(Colorado tick fever), 통상의 감기(급성 바이러스 비인두염; 급성 비염), 크로이츠펠트-야콥병(Creutzfeldt-Jakob disease), 크리민-콩고 출혈열(Crimean-Congo hemorrhagic fever), 크립토코커스증(Cryptococcosis), 크립토스포리디움증(Cryptosporidiosis), 피부 유충이행증(Cutaneous larva migrans), 원포자증, 낭미충증, 사이토메갈로바이러스 감염, 댕기열, 이핵아메바증, 디프테리아, 열두조충증, 메디나충증, 에볼라 출혈열, 포충증(Echinococcosis), 에를리히아증(Ehrlichiosis), 요충증(Enterobiasis)(요충 감염), 엔테로코쿠스 감염(Enterococcus infection), 엔테로바이러스 감염(Enterovirus infection), 발진 티푸스(Epidemic typhus), 전염성 홍반 (Erythema infectiosum)(제5 질환(Fifth disease)), 돌발진, 비대흡충증, 간질증, 치명적 가족성 불면증, 사상충증, 클로스트리디움 퍼프린겐스에 의한 식중독(Food poisoning by Clostridium perfringens), 자유 생존 아메바 감염(Free-living amebic infection), 푸소박테리움 감염(Fusobacterium infection), 가스괴사병(크로스티리디아성 근괴사(Clostridial myonecrosis)), 게오트리쿰증, 게르스트만-슈트로이슬러-샤인커 증후군(Gerstmann-Straussler-Scheinker syndrome), 편모충증, 마비저, 악구충증, 임질, 서혜부 육아종(도노바니아증), 군 A 스트렙토코쿠스 감염(streptococcal infection), 군 B 스트렙토코쿠스 감염, 헤모필루스 인플루엔자(Haemophilus influenzae) 감염, 수족구병(hand, foot and mouse disease: HFM), 한타바이러스 폐 증후군, 헬리코박터 파일로리(Helicobacter pylori) 감염, 용혈성-요독성 증후군, 신장 증후군 동반 출혈열, A형 간염, B형 간염, C형 간염, D형 간염, E형 간염, 단순 포진, 히스토플라스마증, 구충 감염(Hookworm infection), 인간 보카바이러스 감염(Human bocavirus infection), 인간 에윈기 에를리히아증(Human ewingii ehrlichiosis), 인간 과립구성 아나플라마증(Human granulocytic anaplasmosis), 인간 메타뉴모바이러스 감염(Human metapneumovirus infection), 인간 단핵구성 에를리히아증(Human monocytic ehrlichiosis), 인간 파필로마 감염, 인간 파라인플루엔자 바이러스 감염, 왜소조충증(Hymenolepiasis), 엡스타인-바르 바이러스 전염성 단핵증(Mononucleosis(Mono)), 인플루엔자, 포자충증, 가와사키병, 각막염, 킨겔라 킨개(Kingella kingae) 감염, 구루병, 라사열, 레지오넬라증(재향군인병), 레지오넬라증(폰티악열병), 리슈만편모충증, 한센병, 렙토스피라증, 리스테리아증, 라임병(라임 보렐리아증(Lyme borreliosis)), 림프성 사상충증(상피병), 림프구성 맥락수막염, 말라리아, 마르부르크 출혈열, 홍역, 유비저(휘트모어병(Whitmore's disease)), 뇌수막염(Meningitis), 수막구균 질환, 요코가와흡충증, 미포자충증, 전염성 연속종, 유행성 이하선염, 발진열(전염성 티푸스), 마이코플라스마 폐렴(Mycoplasma pneumonia), 진균종, 구더기증, 신생아 결막염(신생아 안염), (신규) 변종 크로이츠펠트-야콥병(vCJD, nvCJD), 노카르디아증, 회선사상충층(사상충증), 파라콕시디오이데스 진균증(Paracoccidioidomycosis)(남아메리카 분아균증(South American blastomycosis)), 폐흡충증, 파스투렐라병, 머리이 기생증(머릿니), 몸니 기생증(몸니), 사면발이 기생증(사면발이(Pubic lice, Crab lice)), 골반 염증성 질병, 백일해(Pertussis, Whooping cough), 흑사병, 폐렴구균 감염, 주폐포자충 폐렴, 폐렴, 소아마비, 프레보텔라 감염, 원발성 아메바성 수막뇌염, 진행성 다병소성 백질뇌증, 앵무새병(Psittacosis), Q 열, 광견병(Rabies), 서교증, 호흡기 융합 바이러스 감염, 리노스포리듐증, 리노바이러스 감염, 리케차 감염, 리케차두창, 리프트 밸리 열, 록키산 홍반열, 로타바이러스 감염, 풍진, 살모넬라증, SARS(중증 급성 호흡기 증후군), 옴, 주혈흡충증, 패혈증, 세균성 이질(Shigellosis, Bacillary dysentery), 대상포진(Shingles, Herpes zoster), 천연두(Smallpox, Variola), 스포로트리쿰증, 스타필로코쿠스 식중독, 스타필로코쿠스 감염, 분선충증, 매독, 조충증, 파상풍(Tetanus, Lockjaw), 수염백선증(Tinea barbae, Barber's itch), 머리백선증(Tinea capitis, Ringworm of Scalp), 몸백선증(Tinea corporis, Ringworm of Body), 샅백선증(Tinea cruris, Jock itch), 수부백선(Tinea manuum, Ringworm of Hand), 흑색백선증, 무좀(Tinea pedis, Athlete's foot), 손발톱백선증(Tinea unguium, Onychomycosis), 어루르기(Tinea versicolor, Pityriasis versicolor), 톡소카라증(안구유충이행증), 톡소카라증(내장유충이행증), 톡소플라스마증, 선모충증, 트리코모나스증, 편충증(편충 감염), 폐결핵, 산토끼병, 우레아플라스마 감염, 베네수엘라 마뇌염, 베네수엘라 출혈열, 바이러스성 폐렴, 웨스트 나일 열, 백색사모증(백색 윤선), 가성 결핵균 감염, 예시니아증, 황열 및 접합균증을 포함하지만, 이들로 제한되지 않는다.
결합 분자는 하기 병원성 균주: 아시네토박터 바우마니(Acinetobacter baumannii), 악티노마이세스 이스라엘리(Actinomyces israelii), 악티노마이세스 제렌세리애(Actinomyces gerencseriae) 및 프로피온니박테리움 프로피오니쿠스(Propionibacterium propionicus), 트리파노소마 브루세이(Trypanosoma brucei), HIV(인간 면역결핍 바이러스), 이질아메바(Entamoeba histolytica), 안나플라즈마 속(Anaplasma genus), 바실루스 안트라시스(Bacillus anthracis), 용혈성 아카노박테리아균(Arcanobacterium haemolyticum), 주닌 바이러스, 아카리스 루브리코이데스(Ascaris lumbricoides), 아스페르길루스 속(Aspergillus genus), 아스트로비리대 패밀리(Astroviridae family), 바베시아 속(Babesia genus), 바실루스 세레우스(Bacillus cereus), 멀티플 박테리아(multiple bacteria), 박테로이데스 속(Bacteroides genus), 발란티디움 콜라이(Balantidium coli), 배이리사스카리스 속(Baylisascaris genus), BK 바이러스, 피에드라이아 호르태(Piedraia hortae), 블라스토시스티스 호미니스(Blastocystis hominis), 블라스토마이세스 더마티티데스(Blastomyces dermatitides), 마추포(Machupo) 바이러스, 보렐리아 속(Borrelia genus), 클로스트리디움보툴리늄(Clostridium botulinum), 사비아(Sabia), 브루셀라 속(Brucella genus), 통상 부르크홀데리아 세파시아(usually Burkholderia cepacia) 및 기타 부르크홀데리아 종, 마이코박테리움 울세란스(Mycobacterium ulcerans), 칼리시비리대 패밀리(Caliciviridae family), 캄필로박터 속(Campylobacter genus), 통상 칸디다 알비칸스(Candida albicans) 및 기타 칸디다 종, 바르토넬라 헨셀래(Bartonella henselae), 군 A 스트렙토코쿠스 및 스타필로코쿠스, 트리파노소마 크루지(Trypanosoma cruzi), 헤모필루스 듀크레이(Haemophilus ducreyi), 바리셀라 조스터(Varicella zoster) 바이러스(VZV), 클라미디아 트라코마티스(Chlamydia trachomatis), 클라미도필라 뉴모니애(Chlamydophila pneumoniae), 비브리오 콜레라(Vibrio cholerae), 포세카애 페드로소이(Fonsecaea pedrosoi), 클로노치스 시엔시스(Clonorchis sinensis), 클로스트리듐 디피실(Clostridium difficile), 콕시디오이데스 임미티스(Coccidioides immitis) 및 콕시디오이데스 포사다시(Coccidioides posadasii), 콜로라도 진드기 열 바이러스, 리노바이러스, 코로나바이러스, CJD 프리온, 크리민-콩고 출혈열 바이러스, 크립토코쿠스 네오포르만스(Cryptococcus neoformans), 크립토스포르디움 속(Cryptosporidium genus), 안사이클로토마 브라질리엔스(Ancylostoma braziliense); 멀티플 기생충, 사이클로스포라 카이에타넨시스(Cyclospora cayetanensis), 태니아 솔리움(Taenia solium), 사이토메갈로바이러스, 뎅기 바이러스(DEN-1, DEN-2, DEN-3 및 DEN-4) - 플라비바이러스(Flavivirus), 장관기생아메바(Dientamoeba fragilis), 코리네박테리움 디프테리애(Corynebacterium diphtheriae), 디필로보트륨(Diphyllobothrium), 드라쿤쿨루스 메디엔시스(Dracunculus medinensis), 에볼라바이러스, 에치노코쿠스 속(Echinococcus genus), 에를리히아속(Ehrlichia genus), 엔테로비우스 버미쿨라리스(Enterobius vermicularis), 엔테로코쿠스 속(Enterococcus genus), 엔테로바이러스 속, 리케치아 프로와제키(Rickettsia prowazekii), 파보바이러스(Parvovirus) B19, 인간 헤르페스바이러스 6 및 인간 헤르페스바이러스 7, 파실로롭시스 부스키(Fasciolopsis buski), 파시올라 헤파티카(Fasciola hepatica) 및 파시올라 지간티카(Fasciola gigantica), FFI 프리온(prion), 필라리오데 슈퍼패밀리(Filarioidea superfamily), 클로스트리디움 퍼프린젠스(Clostridium perfringens), 푸소박테륨 속(Fusobacterium genus), 클로스트리디움 퍼프리젠스(Clostridium perfringens); 기타 클로스트리듐 종, 게오트리쿰 칸디둠(Geotrichum candidum), GSS 프리온, 지아디아 인테스티날리스(Giardia intestinalis), 부르크홀데리아 말레이(Burkholderia mallei), 그나토스토마 스피니게룸(Gnathostoma spinigerum) 및 그나토마스토마 히스피둠(Gnathostoma hispidum), 니세리아 고노호애(Neisseria gonorrhoeae), 클레브시엘라 그라눌로마티스(Klebsiella granulomatis), 스트렙토코쿠스 파이오제네스(Streptococcus pyogene), 스트렙토코쿠스 아갈락티애(Streptococcus agalactiae), 해모필루스 인플루엔자(Haemophilus influenzae), 엔테로바이러스, 주로 콕사키(Coxsackie) A 바이러스 및 엔테로바이러스 71, 신 놈브레(Sin Nombre) 바이러스, 헬리코박터 파일로리, 에쉐리키아 콜리(Escherichia coli) O157:H7, 부니아비리대 패밀리(Bunyaviridae family), A형 간염 바이러스, B형 간염 바이러스, C형 간염 바이러스, D형 간염 바이러스, E형 간염 바이러스, 단순 포진 바이러스 1, 단순 포진 바이러스 2, 히스토플라스마 캡슐라툼(Histoplasma capsulatum), 십이지장충(Ancylostoma duodenale) 및 아메리카 구충(Necator americanus), 헤모필루스 인플루엔자(Hemophilus influenzae), 인간 보카바이러스(Human bocavirus), 에를리히아 유잉이(Ehrlichia ewingii), 아나플라즈마 파고시토필륨(Anaplasma phagocytophilum), 인간 메타뉴모바이러스(metapneumovirus), 에를리히아 샤펜시스(Ehrlichia chaffeensis), 인간 파필로마바이러스, 인간 파라인플루엔자 바이러스, 소형조충(Hymenolepis nana) 및 쥐조충(Hymenolepis diminuta), 엡스테인-바르 바이러스, 오르토믹소비리대 패밀리(Orthomy-xoviridae family), 이소스포라 벨리(Isospora belli), 킨젤라 킨가에(Kingella kingae), 클레브시엘라 뉴모니애(Klebsiella pneumoniae), 클레브시엘라 오자에나스(Klebsiella ozaenas), 클레브시엘라 리노스클레로모티스(Klebsiella rhinoscleromotis), 크루 프리온(Kuru prion), 라사(Lassa) 바이러스, 레지오넬라 뉴모필라(Legionella pneumophila), 레지오넬라 뉴모필라(Legionella pneumophila), 레이쉬마니아 속(Leishmania genus), 마이코박테리움 레프래(Mycobacterium leprae) 및 마이코박테리움 레프로마토시스(Mycobacterium lepromatosis), 렙토스피라 속(Leptospira genus), 리스테리아 모노시토제네스(Listeria monocytogenes), 보렐리아 부르그도르페리(Borrelia burgdorferi) 및 기타 보렐리아 종(Borrelia species), 반크로프트사상충(Wuchereria bancrofti) 및 말레이사상충(Brugia malayi), 림프구성 맥낙 뇌막염 바이러스(Lymphocytic choriomeningitis virus: LCMV), 플라스모디움 속(Plasmodium genus), 마버그(Marburg) 바이러스, 메슬레스(Measles) 바이러스, 부르콜데리아 슈도말레이(Burkholderia pseudomallei), 나이세리아 메닝지티데스(Neisseria meningitides), 메타고니무스 요카가와이(Metagonimus yokagawai), 마이코플라스마 문(Microsporidia phylum), 감염성 연속종 바이러스(Molluscum contagiosum virus: MCV), 볼거리(Mumps) 바이러스, 리케치아 티피(Rickettsia typhi), 마이코플라스마 뉴모니애, 다수중 종의 박테리아(악티노마이세토마) 및 진균(에우미세토마(Eumycetoma)), 기생충 날개 달린 파리 유충(parasitic dipterous fly larvae), 클라미디아 트라코마티스(Chlamydia trachomatis) 및 임균(Neisseria gonorrhoeae), vCJD 프리온, 노카디아 아스테로이드(Nocardia asteroides) 및 기타 노카르디아 종(Nocardia species), 회선사상충(Onchocerca volvulus), 파라콕시디오이데스 브라질리엔시스(Paracoccidioides brasiliensis), 폐흡충(Paragonimus westermani) 및 기타 폐흡충 종, 파스테우렐라 속(Pasteurella genus), 머리이(Pediculus humanus capitis), 몸니(Pediculus humanus corporis), 사면발이(Phthirus pubis), 보르데텔라 퍼투시스(Bordetella pertussis), 에르시니아 페스티스), 스트렙토콕쿠스 뉴모니애(Streptococcus pneumoniae), 뉴모사이스티스 지로베시(Pneumocystis jirovecii), 폴리오바이러스(Poliovirus), 프레보텔라 속(Prevotella genus), 내글러리아 파울레리(Naegleria fowleri), JC 바이러스, 클라미도필라 프시타시(Chlamydophila psittaci), 콕시엘라 부르네티(Coxiella burnetii), 광견병 바이러스, 스트렙토바실루스 모닐리포르미스(Streptobacillus moniliformis) 및 스피리룸 미너스(Spirillum minus), 호흡기 융합 바이러스, 리노스포리듐 시베리(Rhinosporidium seeberi), 리노바이러스, 리케치아 속(Rickettsia genus), 리케차 아카리(Rickettsia akari), 리프트 밸리 열 바이러스(Rift Valley fever virus), 리케차 리케트시(Rickettsia rickettsii), 로타 바이러스, 루벨라 바이러스, 살모넬라 속(Salmonella genus), SARS 코로나바이러스, 사르콥테스 스카비에이(Sarcoptes scabiei), 스치스토소마 속(Schistosoma genus), 시겔라 속(Shigella genus), 바리셀라 조스터(Varicella zoster) 바이러스, 바리올라 메이저(Variola major) 또는 바리올라 마이너(Variola minor), 스포로트릭스 셴키(Sporothrix schenckii), 스타필로코쿠스 속, 스타필로코쿠스 속, 스타필로코쿠스 아우레우스(Staphylococcus aureus), 스트렙토코쿠스 피오제네스(Streptococcus pyogenes), 분선충(Strongyloides stercoralis), 매독트레포네마(Treponema pallidum), 태니아 속(Taenia genus), 클로스트리듐 테타니(Clostridium tetani), 트리코피톤 속(Trichophyton genus), 트리코피톤 토수란스(Trichophyton tonsurans), 트리코피톤 속, 에피더모피톤 플록코섬(Epidermophyton floccosum), 트리코피톤 루브룸(Trichophyton rubrum) 및 트리코피톤 메타그로피테스(Trichophyton mentagrophytes), 트리코피톤 루브룸(Trichophyton rubrum), 호르태아 웨넥키(Hortaea werneckii), 트리코피톤 속(Trichophyton genus), 말라세지아 속(Malassezia genus), 톡소카라 카니스(Toxocara canis) 또는 톡소카라 카티(Toxocara cati), 톡소플라스마 곤디(Toxoplasma gondii), 트리키넬라 스피랄리스(Trichinella spiralis), 트리코모나스 바지날리스(Trichomonas vaginalis), 트리처리스 트리치우라(Trichuris trichiura), 마이코박테리움 투버쿨로시스(Mycobacterium tuberculosis), 프란시셀라 투라렌시스(Francisella tularensis), 우레아플라즈마 우레알리티쿰(Ureaplasma urealyticum), 베네수엘라마뇌염(Venezuelan equine encephalitis) 바이러스, 비브리오 콜레라, 구아나리토(Guanarito) 바이러스, 웨스트 나일(West Nile) 바이러스, 트리초스포론 베이겔리(Trichosporon beigelii), 예러시니아 슈도투벨르큘로시스(Yersinia pseudotuberculosis), 예르시니아 엔테로코리티카(Yersinia enterocolitica), 황열병 바이러스, 무코랄레스 오더(Mucorales order)(털곰팡이증(Mucormycosis)) 및 엔토프토랄레스 오더(Entomophthorales order)(엔토모프토라증(Entomophthoramycosis), 슈도모나스 녹농균, 캄필로박터(Campylobacter)(비브리오) 태아, 아에로모나스 하이드로필라(Aeromonas hydrophila), 에드워드시엘라 타르다(Edwardsiella tarda), 에르시니아 페스티스(Yersinia pestis), 시겔라 디센테리애(Shigella dysenteriae), 시겔라 플렉스네리(Shigella flexneri), 시겔라 손네이(Shigella sonnei), 살모넬라 티피무리움(Salmonella typhimurium), 트레포네마 페르테누에(Treponema pertenue), 트레포네마 카르테움(Treponema carateneum), 보렐리아 빈센티(Borrelia vincentii), 보렐리아 부르고도리페리(Borrelia burgdorferi), 렙토스피라 이시테로헤모르하지애(Lept6ospira icterohemorrhagiae), 뉴모시스티스 카리니(Pneumocystis carinii), 브루셀라 아보르투스(Brucella abortus), 브루셀라 수이스(Brucella suis), 브루셀라 멜리텐시스(Brucella melitensis), 마이코플라스마 종(Mycoplasma spp.), 리케차 프로와제키(Rickettsia prowazeki), 리케차 츠츠구무쉬(Rickettsia tsutsugumushi), 클라미디아 종(Clamydia spp.); 병원성 진균(pathogenic fungi)(아스페르질루스 푸미가투스(Aspergillus fumigatus), 칸디다 알비칸스(Candida albicans), 히스토플라스마 캅술라툼(Histoplasma capsulatum); 원생동물(이질 아메바, 트리초모나스 테나스(Trichomonas tenas), 트리초모나스 호미니스(Trichomonas hominis), 트리오아노소마 감비엔스(Tryoanosoma gambiense), 트리파노소마 로데시엔세(Trypanosoma rhodesiense), 레이시마니아 도노바니(Leishmania donovani), 레이시마니아 트로피카(Leishmania tropica), 레이시마니아 브라질리엔시스(Leishmania braziliensis), 뉴모사이스티스 뉴모니아(Pneumocystis pneumonia), 플라스모디움 비백스(Plasmodium vivax), 플라스모디움 팔시파룸(Plasmodium falciparum), 플라스모디움 말라리아(Plasmodium malaria)); 또는 헬미니스(Helminith)(쉬스토소마 자포니쿰(Schistosoma japonicum), 쉬스토소마 만소니(Schistosoma mansoni), 쉬스토소마 해바토비움(Schistosoma haematobium) 및 십이지장충(hookworm)를 포함하지만 이들에 제한되지 않는 병원성 균주에 대항하는 본원에 기재된 항체를 제시한다.
바이러스 질환의 치료를 위한 본 발명의 결합 리간드로서의 다른 항체는 하기 병원성 바이러스 항원: 예를 들어, 폭시리대(Poxyiridae), 헤르페스비리대(Herpesviridae), 아데노비리대(Adenoviridae), 파포바비리대(Papovaviridae), 엔테로비리대(Enteroviridae), 피코르나비리대(Picornaviridae), 파르보비리대(Parvoviridae), 레오비리대(Reoviridae), 레트로비리대(Retroviridae), 인플루엔자 바이러스, 파라인플루엔자 바이러스, 볼거리, 홍역, 호흡기 융합 바이러스, 풍진, 아르보비리대(Arboviridae), 라브도비리대(Rhabdoviridae), 아레나비리대(Arenaviridae), 비-A형/비-B형 간염 바이러스, 리노비리대(Rhinoviridae), 코로나비리대(Coronaviridae), 로토비리대(Rotoviridae), 온코바이러스[예컨대, HBV(간세포 암종), HPV(경부암, 항문암), 카포시 육종 연관 포진 바이러스(카포시 육종), 엡스타인-바르 바이러스(비인두 암종, 버킷 림프종, 원발성 중추 신경계 림프종), MCPyV(머켈 세포암), SV40(시미안 바이러스 40), HCV(간세포 암종), HTLV-I(성인 T-세포 백혈병/림프종)], 면역 장애 유발된 바이러스: [예컨대, 인간 면역결핍바이러스(AIDS)]; 중추 신경계 바이러스: [예컨대, JCV(진행성 다병소성 백혈구증), MeV(아급성 경화성 뇌막염), LCV(림프구성 맥락수막염), 아르보바이러스(Arbovirus) 뇌염, 오쏘믹소비리대(Orthomyxoviridae)(가능성)(기면성 뇌염), RV(광견병), 찬디푸라 바이러스, 헤르페스바이러스 수막염, 램지 헌트 증후군 유형 II; 폴리오 바이러스(소아마비, 소아마비후 증후군), HTLV-I(열대성 경성 대마비)]; 사이토메갈로바이러스(사이토메갈로 바이러스 망막염, HSV(포진성 각막염)); 심혈관계 바이러스[예컨대, CBV(심막염, 심근염)]; 호흡기/급성 바이러스성 비인두염/바이러스성 폐렴: [엡스테인-바르 바이러스(EBV 감염/감염성 단핵구증), 사이토메갈로바이러스; SARS 코로나바이러스(중증 급성 호흡기 증후군), 오쏘믹소비리대: 인플루엔자 A/B/C(인플루엔자/조류 인플루엔자), 파라믹소바이러스(Paramyxovirus): 인간 파라인플루엔자 바이러스(파라인플루엔자), RSV(인간 호흡기 신티알바이러스(syncytialvirus), hMPV]; 소화계 바이러스[MuV(볼거리), 사이토메갈로바이러스(사이토메갈로바이러스 에소파지티스(esophagitis); 아데노바이러스(아데노바이러스 감염); 로타바이러스, 노로바이러스, 아스트로바이러스, 코로나바이러스; HBV(B형 간염 바이러스), CBV, HAV(A형 간염 바이러스), HCV(C형 간염 바이러스), HDV(D형 간염 바이러스), HEV(E형 간염 바이러스), HGV(G형 간염 바이러스)]; 비뇨생식기 바이러스[예컨대, BK 바이러스, MuV(볼거리)]을 포함하지만 이들에 제한되지 않는 병원성 바이러스 항원에 대항하는 항체를 포함하지만 이들에 제한되지 않는다.
추가 목적에 따라서, 본 발명은 또한 암, 감염 또는 자가면역 장애의 치료를 위한, 제약상 허용 가능한 담체와 함께, 본 발명의 접합체를 포함하는 약제학적 조성물에 관한 것이다. 암 및 자가면역 장애의 치료 방법은 시험관내, 생체내 또는 생체외에서 수행될 수 있다. 시험관내 사용의 예는 표적 항원을 발현하지 않는 목적하는 변이체를 제외한 모든 세포를 사멸시키거나, 또는 목적하지 않은 항원을 발현하는 변이체를 사멸시키기 위한 세포 배양물의 처리를 포함한다. 생체외 사용의 예는 병에 걸린 세포 또는 악성 세포를 사멸시키기 위해 동일한 환자에게 이식(HSCT)을 수행하기 전에, 조혈 줄기세포(HSC)를 처리하는 단계를 포함한다. 예를 들어, 암 치료 또는 자가면역 질환의 치료에서 자가유래 이식 이전에, 골수로부터 종양 세포 또는 림프 세포를 제거하는 임상적 생체외 처리, 또는 이식편대숙주병을 예방하기 위해서 이식 이전에 동종이계 골수 또는 조직으로부터 T 세포 및 다른 림프구 세포를 제거하는 임상적 생체외 처리는 하기와 같이 수행될 수 있다. 골수를 환자 또는 다른 개체로부터 수거하고, 이어서 약 37℃에서 약 15분 내지 약 48시간 동안, 약 1pM 내지 0.1mM의 농도 범위의 본 발명의 접합체가 첨가된 혈청을 함유하는 배지에서 인큐베이션시킨다. 정확한 농축 조건 및 인큐베이션 시간(=용량)은 숙련된 임상의에 의해 쉽게 결정된다. 인큐베이션 후, 골수 세포를 혈청을 함유하는 배지로 세척하고, 공지된 방법에 따라 i.v. 주입에 의해서 환자에게 다시 제공한다. 환자가 골수 수거와, 처리된 세포의 재주입 시간 사이에 절제(ablative) 화학 요법 또는 전신 방사선 조사의 과정과 같은 다른 치료를 받는 상황에서, 처리된 골수 세포는 표준 의료 장비를 사용하여 액체 질소에 냉동 보관된다.
안정적인 접합체는 또한 약제학적 제형 중에서 "생물학적 활성도를 유지"해야 하고, 예를 들어, 항원 결합 분석 및/또는 시험관내 세포독성 분석에서 결정되는 경우, 접합체의 생물학적 활성도는, 주어진 시간, 예를 들어, 12개월에, 약제학적 제형이 제조된 시간에 나타낸 생물학적 활성도의 약 20%, 바람직하게는 약 10%(분석의 오차 이내) 이내의 차이를 가져야 한다.
생체내 임상 사용을 위해서, 본 발명의 접합체는 용액으로서 또는 주사용 멸균수 중에 재용해될 수 있는 동결건조된 고체로서 공급될 것이다. 접합체 투여의 적합한 프로토콜의 예는 하기와 같다. 접합체는 일 단위, 주 단위, 격주 단위, 3주 단위, 8 내지 54주 동안 4주 1회 또는 개월 단위로 i.v. 볼러스(bolus)로서 제공된다. 볼러스 용량은 인간 혈청 알부민(예를 들어, 인간 혈청 알부민의 농축된 용액 0.5 내지 1mL, 100㎎/mL)이 선택적으로 첨가될 수 있는 50 내지 1000mL의 식염수 중에 제공된다. 투여량은 약 50㎍ 내지 20㎎/체중 ㎏/주 i.v.(주사 당 10㎍ 내지 200㎎/㎏ 범위)일 것이다. 치료 후 4 내지 54주에, 환자에게 제2 과정의 치료를 제공할 수 있다. 투여 경로, 부형제, 희석제, 투여량, 시간 등에 관한 구체적인 임상 프로토콜은 숙련된 의사에 의해서 결정될 수 있다.
선택된 세포 집단을 사멸시키는 생체내 또는 생체외 방법에 따라서 치료될 수 있는 의학적 병태의 예는 암, 자가면역 질환, 이식 거부 및 감염(바이러스성, 박테리아성 또는 기생충)의 임의의 유형의 악성 상태를 포함한다.
목적하는 생물학적 효과를 달성하는 데 필요한 접합체의 양은 접합체의 화학적 특징, 효력, 생체이용률, 질환의 유형, 환자가 속한 종, 환자의 질환 상태, 투여 경로, 요구되는 투여량, 전달 및 투여될 요법을 설명하는 모든 인자를 비롯하여, 다수의 인자에 따라 달라질 것이다.
일반적으로, 본 발명의 링커를 통한 접합체는 비경구 투여의 경우 0.1 내지 10% w/v 접합체를 함유하는 수성 생리 완충액 중에 제공될 수 있다. 전형적인 투여량 범위는 일 단위; 주 단위; 격주 단위; 3주 단위 또는 개월 단위로 1㎍/체중 ㎏ 내지 0.1g/체중 kg이고; 바람직한 투여량 범위는 인간에게 동등한 용량으로, 주 단위; 격주 단위; 3주 단위 또는 개월 단위로 0.01㎎/체중 ㎏ 내지 20㎎/체중 ㎏이다. 투여될 약물의 바람직한 투여량은 질환 또는 장애의 유형 및 진행 정도, 특정 환자의 전반적인 건강 상태, 선택된 화합물의 상대적인 생물학적 효능, 화합물의 제형, 투여 경로(정맥내, 근육내 등), 선택된 전달 경로에 의한 접합체의 약동학 특성 및 투여 속도(볼러스 또는 연속적 주입) 및 투여 스케줄(주어진 시간 기간 동안의 반복 횟수)과 같은 변수에 좌우될 것이다.
본 발명의 접합체는 또한 단위 투여형으로 투여될 수 있는데, 여기서 용어 "단위 투여"는 환자에게 투여될 수 있고, 쉽게 취급 및 포장될 수 있고, 활성 접합체 자체 또는 하기에 기술된 바와 같은 약제학적으로 허용 가능한 조성물을 포함하는 물리학적으로 그리고 화학적으로 안정적인 단위 용량으로 유지되는 단일 용량을 의미한다. 이와 같이, 전형적인 전체 일 단위/주 단위/격주 단위/개월 단위 용량 범위는 0.01 내지 100㎎/체중 ㎏이다. 일반적인 가이드라인에 의해서, 인간의 경우 단위 용량은 일, 주, 2주(격주), 3주 또는 개월당 1㎎ 내지 3000㎎의 범위이다. 바람직하게는 단위 용량 범위는 1개월에 1 내지 4회 투여되는 1 내지 500㎎이고, 보다 더 바람직하게는 1주 1회 또는 격주 1회 또는 3주 1회의 1㎎ 내지 100㎎이다. 본 명세서에 제공된 접합체는 1종 이상의 약제학적으로 허용 가능한 부형제와 혼합함으로써 약제학적 조성물로 제형화될 수 있다. 이러한 단위 용량 조성물은 경구 투여, 특히 정제, 단순 캡슐 또는 연질 젤 캡슐의 형태; 또는 비강내, 특히 분말, 비강 점적액 또는 에어로졸의 형태; 또는 피부, 예를 들어, 연고, 크림, 로션, 젤 또는 스프레이 또는 경피 패치를 통한 국소 사용을 위해서 제조될 수 있다. 조성물은 단위 용량 형태로 편리하게 투여될 수 있고, 이는 예를 들어, 문헌(Remington: Science and Practice of Pharmacy, 21th ed.; Lippincott Williams & Wilkins: 필라델피아, PA, 2005)에 기재되어 있다.
바람직한 제형은 본 발명의 화합물이 경구 또는 비경구 투여용으로 제형화된 제약상 조성물을 포함한다. 경구 투여를 위해, 정제, 환제, 분말, 캡슐, 트로키 등은 하기 성분 또는 유사한 성질의 화합물: 미세결정질 셀룰로오스 또는 트라가칸틴 검과 같은결합제; 전분 또는 유당과 같은 희석제; 전분 및 셀룰로오스 유도체와 같은 붕해제; 마그네슘 스테아레이트와 같은 윤활제; 콜로이드성 이산화규소와 같은 활택제; 자당 또는 사카린과 같은 감미제; 또는 페퍼민트 또는 메틸 살리실레이트와 같은 향미제 중 하나 이상을 함유할 수 있다. 캡슐은 경질 캡슐 또는 연질 캡슐의 형태일 수 있으며, 이는 일반적으로 가소제와 선택적으로 블렌딩된 젤라틴 블렌드 및 전분 캡슐로부터 제조된다. 또한, 투여 단위 형태는 투여 단위의 물리적 형태를 변형시키는 다양한 기타 물질, 예를 들어 설탕, 셸락 또는 장용제의 코팅을 함유할 수 있다. 다른 경구 투여 형태인 시럽 또는 엘릭서는 감미제, 방부제, 염료, 착색제 및 향료를 포함할 수 있다. 또한, 활성 화합물은 속용성, 변형 방출 또는 지속 방출 제제 및 제형에 혼입될 수 있으며, 여기서 이러한 지속 방출 제형은 바람직하게는 바이-모달(bi-modal)이다. 바람직한 정제는 락토스, 옥수수 전분, 마그네슘 실리케이트, 크로스카멜로스 나트륨, 포비돈, 마그네슘 스테아레이트 또는 활석을 임의의 조합으로 함유한다.
비경구 투여를 위한 액체 제제는 멸균된 수성 또는 비-수성 용액, 현탁액 및 에멀젼을 포함한다. 액체 조성물은 또한 결합제, 완충제, 방부제, 킬레이트제, 감미제, 향미제 및 착색제 등을 포함할 수 있다. 비-수성 용매는 알코올, 프로필렌 글리콜, 폴리에틸렌 글리콜, 올리브 오일과 같은 식물성 기름 및 에틸 올레에이트와 같은 유기 에스테르를 포함한다. 수성 담체는 알코올과 물의 혼합물, 완충 매질 및 식염수를 포함한다. 특히, 생체적합성, 생분해성 락타이드 중합체, 락타이드/글리콜라이드 공중합체, 또는 폴리옥시에틸렌-폴리옥시프로필렌 공중합체는 활성 화합물의 방출을 제어하는 데 유용한 부형제일 수 있다. 정맥내 비히클은 유체 및 영양 보충제, 전해질 보충제, 예켄대 링거 데스트로스(Ringer's dextrose)를 기반으로 하는 것 등을 포함할 수 있다. 이러한 활성 화합물에 대한 다른 잠재적으로 유용한 비경구 전달 시스템은 에틸렌-비닐 아세테이트 공중합체 입자, 삼투 펌프, 이식 가능한 주입 시스템 및 리포솜을 포함한다.
대체 투여 방식은 건조 분말, 에어로졸 또는 점적제와 같은 수단을 포함하는 흡입용 제형을 포함한다. 이들은 예를 들어, 폴리옥시에틸렌-9-라우릴 에테르, 글리코콜레이트 및 데옥시콜레이트를 함유하는 수용액, 또는 점비제 형태 또는 비강내 도포되는 겔 형태로 투여하기 위한 유성 용액일 수 있다. 협측 투여를 위한 제형은 예를 들어, 로젠지 또는 캔디(pastilles)를 포함하고, 또한 자당 또는 아카시아와 같은 향미 베이스 및 글리코콜레이트와 같은 기타 부형제를 포함할 수 있다. 직장 투여에 적합한 제형은 바람직하게는 코코아 버터와 같은 고체 기반 담체와 함께 단위 용량 좌제로 제공되며, 살리실레이트를 포함할 수 있다. 피부에 국소 적용하기 위한 제형은 바람직하게는 연고, 크림, 로션, 페이스트, 겔, 스프레이, 에어로졸 또는 오일의 형태를 취한다. 사용될 수 있는 담체에는 바셀린, 라놀린, 폴리에틸렌 글리콜, 알코올 또는 이들의 조합이 포함된다. 경피 투여에 적합한 제형은 개별 패치로 제공될 수 있으며, 중합체 또는 접착제에 용해 및/또는 분산된 친유성 에멀젼 또는 완충된 수용액일 수 있다.
특정 실시예에서, 본 발명의 접합체는 화학요법제, 방사선 요법, 면역요법제, 자가면역 장애 제제, 항-감염제 또는 기타 항체-약물 접합체와 같은 공지된 또는 공지될 다른 치료제와 동시에 투여되어, 시너지 효과를 발생시킨다. 또 다른 특정 실시예에서, 상승작용 약물 또는 방사선 요법은 일 측면에서, 적어도 1시간, 12시간, 하루, 1주, 2주, 3주, 1개월의 접합체의 투여 이전 또는 이후에, 또는 추가 측면에서, 수개월의 본 발명의 접합체의 투여 이전 또는 투여 이후에, 투여된다.
다른 구체예에서, 상승작용 약물은 하기를 포함하지만 이들에 제한되지는 않는다:
1) 화학요법제: a) 알킬화제: 예컨대, 질소 머스타드: 클로람부실, 클로르나파진, 사이클로포스파마이드, 다카바진, 에스트라무스틴, 이포스파마이드, 메클로레타민, 메클로레타민 옥사이드 하이드로클로라이드, 만노머스틴, 미토브로니톨, 멜팔란, 미토락톨, 피포브로만, 노벰비친, 페네스테린, 프레드니무스틴, 티오테파, 트로포스파마이드, 우라실 머스타드; CC-1065(이의 아데젤레신, 카젤레신 및 비젤레신 합성 유사체 포함); 듀오카마이신(합성 유사체, KW-2189 및 CBI TMI 포함); 벤조디아제핀 이량체(예를 들어, 피롤로벤조디아제핀(PBD) 또는 토마이마이신 이량체, 인돌리노벤조디아제핀, 이미다조벤조티아디아제핀 또는 옥사졸리디노-벤조디아제핀의 이량체); 니트로소우레아: (카무스틴, 로무스틴, 클로로조토신, 포테무스틴, 니무스틴, 라니무스틴); 알킬설폰에이트: (부설판, 트레오설판, 임프로설판 및 피포설판); 트리아젠: (다카바진); 백금 함유 화합물(카보플라틴, 시스플라틴, 옥살리플라틴); 아지리딘, 예컨대, 벤조도파, 카보쿠온, 메투레도파 및 우레도파; 알트레타민, 트리에틸렌멜라민, 트리에틸렌포스포아마이드, 트리에틸렌티오-포스파오아마이드 및 트리메틸올로멜라민을 포함하는 에틸렌이민 및 메틸아멜라민; b) 식물 알칼로이드: 예컨대, 빈카 알칼로이드: (빈크리스틴, 빈블라스틴, 빈데신, 비노렐빈, 나벨빈); 탁소이드(Taxoid): (파클리탁셀, 도세탁솔) 및 이들의 유사체, 메이탄시노이드(DM1, DM2, DM3, DM4, 메이탄신 및 안사미토신) 및 이들의 유사체, 크립토파이신(특히 크립토파이신 1 및 크립토파이신 8); 에포틸론, 엘레우테로빈, 디스코더몰리드, 브리오스타틴, 돌로스타틴, 아우리스타틴, 아마톡신, 세팔로스타틴; 판크라티스타틴; 사르코딕틴; 스폰지스타틴; c) DNA 토포이소머라제 억제제: 예컨대 [에피포도필린스: (9-아미노캄프토테신, 캄프토테신, 크리스나톨, 다우노마이신, 에토포사이드, 에토포사이드 포스페이트, 이리노테칸, 미토산트론, 노반트론, 레티노산(레티놀), 테니포사이드, 토포테칸, 9-니트로로캄프토테신(RFS 2000)); 미토마이신(미토마이신 C]; d) 항-대사제: 예컨대, {[항-엽산염: DHFR 억제제: (메토트렉세이트, 트리메트렉세이트, 데노프테린, 프테로프테린, 아미노프테린(4-아미노프테르 산) 또는 기타 엽산 유사체); IMP 탈수소효소 억제제: (마이코페놀산, 티아조퓨린, 리바비린, EICAR); 리보뉴클레오타이드 환원효소 억제제: (하이드록시우레아, 데페록사민)]; [피리미딘 유사체: 우라실 유사체: (안시타빈, 아자시티딘, 6-아자우리딘, 카페시타빈(Xeloda), 카모퍼, 시타라빈, 디데옥시우리딘, 독시플루리딘, 에노시타빈, 5-플루오로우라실, 플록스우리딘, 래티트렉세드(Tomudex)); 시토신 유사체: (시타라빈, 시토신 아라비노사이드, 플루다라빈); 퓨린 유사체: (아자티오프린, 플루다라빈, 메르캅토퓨린, 티아민프린, 티오구아닌)]; 엽산 보충제, 예컨대, 프롤린 산}; e) 호르몬 요법: 예컨대, {수용체 길항제: [항-에스트로겐: (메제스트롤, 랄록시펜, 타목시펜); LHRH 작용제: (고스크르클린(goscrclin), 류프롤라이드 아세테이트); 항-안드로겐: (비칼루타마이드, 플루타마이드, 칼루스테론, 드로모스타놀론 프로피오네이트, 에피티오스타놀, 고세렐린, 류프롤라이드, 메피티오스탄, 닐루타마이드, 테스토락톤, 트릴로스탄 및 기타 안드로겐 억제제)]; 레티노이드/델토이드: [비타민 D3 유사체: (CB 1093, EB 1089, KH 1060, 콜레칼시페롤, 에르고칼시페롤); 광역학 요법: (베르트포르핀, 프탈로시아닌, 광민감제 Pc4, 데메톡시-하이포크렐린 A); 사이토카인: (인터페론-알파, 인터페론-감마, 종양 괴사 인자(TNF), TNF 도메인을 함유하는 인간 단백질)]}; f) 키나제 억제제: 예컨대, BIBW 2992(항-EGFR/Erb2), 이마티닙, 제피티닙, 페갑타닙, 소라페닙, 다사티닙, 수니티닙, 에를로티닙, 닐로티닙, 라파티닙, 액시티닙, 파조파닙, 반데타닙, E7080(항-VEGFR2), 무브리티닙, 포나티닙(AP24534), 바페티닙(INNO-406), 보수티닙SKI-606），카보잔티닙, 비스모데집, 이니파립, 룩솔리티닙, CYT387, 악시티닙, 티보자닙, 소라페닙, 베바시주맙, 세툭시맙, 트라스투주맙, 라니비주맙, 파니투무맙, 이스피네십; g) 폴리(ADP-리보스) 중합효소(PARP) 억제제: 예컨대, 올라파립, 니라파립, 이니파립, 탈라조파립, 벨리파립, CEP 9722(세팔론사(Cephalon)), E7016(에이자이사(Eisai)), BGB-290(베이젠사(BeiGene)) 또는 3-아미노벤즈아마이드; h) 항생제, 예컨대, 에네다이인 항 생제(예를 들어, 칼리케아미신, 특히, 칼리케아미신 γ1, δ1, α1 또는 β1(예를 들어, J. Med. Chem., 39 (11), 2103-2117 (1996), Angew Chem Intl. Ed. Engl. 33:183-186 (1994) 참조); 다이네미신 A 및 데옥시다이네미신을 포함하는 다이네미신; 에스페라미신, 케다르시딘, C-1027, 마두로펩틴뿐만 아니라 네오카르지노스타틴 발색단 및 관련 크로모프로테인 에네다이인 항생제 발색단), 아클라시노마이신, 액티노마이신, 오트라마이신(authramycin), 아자세린, 블레오마이신, 칵티노마이신, 카라비신, 카미노마이신, 카르지노필린; 크로모마이신, 닥티노마이신, 다우노루비신, 데토루비신, 6-디아조-5-옥소-L-노르류신, 독소루비신, 모르폴리노-독소루비신, 시아노모르폴리노-독소루비신, 2-피롤리노-독소루비신 및 데옥시독소루비신, 에피루비신, 에소루비신, 이다루비신, 마르셀로마이신, 니토마이신, 마이코페놀산, 노갈라마이신, 올리보마이신, 페플로마이신, 폿피로마이신, 푸로마이신, 쿠엘라마이신, 로도루비신, 스트렙토니그린, 스트렙토조신, 투베르시딘, 우베니멕스, 지노스타틴, 조루비신; i) 기타: 예컨대, 폴리케타이드(아세토게닌), 특히, 불라타신 및 불라타시논, 겜시타빈, 에폭소미신(예를 들어, 카필조밉), 보르테조밉, 탈리도마이드, 레날리도마이드, 포말리도마이드, 토세도스타트, 지브레스타트, PLX4032, STA-9090, 스티무박스, 알로벡틴-7, 엑세게바(Xegeva), 프로벤지, 에르보이(Yervoy), 단백지질화 억제제(예컨대, 로바스타틴), 도파민성 신경독(예컨대, 1-메틸-4-페닐피리디늄 이온), 세포 사이클 억제제(예컨대, 스타우로스포린), 악티노마이신(예컨대, 악티노마이신 D, 닥티노마이신), 블레오마이신(예컨대, 블레오마이신 A2, 블레오마이신 B2, 페플로마이신), 안트라사이클린(예컨대, 다우노루비신, 독소루비신(아드리아마이신), 이다루비신, 에피루비신, 피라루비신, 조루비신, 엠톡산트론(mtoxantrone), MDR 억제제(예컨대, 베라파밀), Ca2+ ATPase 억제제(예컨대, 탑시가르긴), 히스톤 데아세틸라제 억제제(보리노스타트, 로미뎁신, 파노비노스타트, 발프로산, 모세티노스타트(MGCD0103), 벨리노스타트, PCT-24781, 엔티노스타트, SB939, 레스미노스타트, 지비노스타트, AR-42, CUDC-101, 설포라판, 트리초스타틴 A); 탑시가르긴, 셀레콕시브, 글리타존, 에피갈로카테킨 갈레이트, 디설피람, 살리노스포라마이드 A; 항-아드레날, 예컨대, 아미노글루트티미드, 미토탄, 트릴로스탄; 아세글라톤; 알도포스파마이드 글리코사이드; 아미노레불린산; 암사크린; 아라비노사이드, 베스트라부실; 비산트렌; 에다트락세이트; 데포파민; 데메콜신; 디아지쿠온; 에플로니틴(DFMO), 엘포미틴; 엘립티늄 아세테이트, 에토글루시드; 갈륨 나이트레이트, 가사이토신, 하이드록시우레아; 이반드로네이트, 렌티난; 로니다민; 미토구아존; 미톡산트론; 모피다몰; 니트라크린; 펜토스타틴; 페나멧; 피라루비신; 포도필린산; 2-에틸하이드라자이드; 프로카바진; PSK®; 라족산; 리족신; 시조피란; 스피로게르마늄; 테누아존산; 트리아지쿠온; 2,2',2"-트리클로로트리에틸아민; 트리초테센(특히, T-2 톡신, 버루카린(verrucarin) A, 로리딘 A 및 안구이딘); 우레탄, siRNA, 안티센스 약물; 및 핵산분해 효소;
2) 항-자가면역 질환제는 사이클로스포린, 사이클로스포린 A, 아미노카프로 산, 아자티오프린, 브로모크립틴, 클로람부실, 클로로퀸, 사이클로포스파마이드, 코르티코스테로이드(예를 들어, 암시노나이드, 베타메타손, 부데소나이드, 하이드로코르티손, 플루니솔라이드, 플루티카손 프로피오네이트, 플루코르톨론 다나졸, 덱사메타손, 트리암시놀론 아세토나이드, 베클로메타손 디프로피오네이트), DHEA, 에나너셉트, 하이드록시클로로퀸, 인플릭시맙, 메록시캄, 메토트렉세이트, 모페틸, 마이코페닐레이트, 프레드니손, 시롤리무스, 타크롤리무스를 포함하지만 이들에 제한되지 않는다;
3) 항-감염성 질환제는 하기를 포함하지만 이들에 제한되지 않는다: a) 아미노글리코사이드: 아미카신, 아스트로미신, 젠타미신(네틸미신, 시소미신, 이세파미신), 하이그로마이신 B, 카나마이신(아미카신, 아르베카신, 베카나마이신, 디베카신, 토브라마이신), 네오마이신(프라마이세틴, 파로모마이신, 리보스타마이신), 네틸미신, 스펙티노마이신, 스트렙토마이신, 토브라마이신, 베르다미신; b) 암페니콜: 아지다페니콜, 클로람페니콜, 플로페니콜, 티암페니콜; c) 안사마이신: 젤다나마이신, 헤르비마이신; d) 카바페넴: 비아페넴, 도리페넴, 에르타페넴, 이미페넴/실라스타틴, 메로페넴, 파니페넴; e) 세펨: 카바세펨(로라카르베프), 세파세트릴, 세파클로, 세프라딘, 세파드록실, 세팔로늄, 세팔로리딘, 세팔로틴 또는 세팔로씬, 세팔렉신, 세팔로글리신, 세파만돌, 세파피린, 세파트리진, 세파자플루, 세파제돈, 세파졸린, 세프부페라존, 세프카펜, 세프달록심, 세페핌, 세프미녹스, 세폭시틴, 세프프로질, 세프록사딘, 세프테졸, 세푸록심, 세픽심, 세프디니어, 세프디토렌, 세페핌, 세페타메트, 세프메녹심, 세포디짐, 세포니시드, 세포페라존, 세포라나이드, 세포탁심, 세포티암, 세포조프란, 세팔렉신, 세프피미졸, 세프피라마이드, 세프피롬, 세프포독심, 세프프로질, 세프퀴놈, 세프술로딘, 세프타지딤, 세프테람, 세프티부텐, 세프티올렌, 세프티족심, 세프토비프롤, 세프트리악손, 세푸록심, 세푸조남, 세파마이신(세폭시틴, 세포테탄, 세프메타졸), 옥사세펨(플로목세프, 라타목세프); f) 글리코펩타이드: 블레오마이신, 반코마이신(오리타반신, 텔라반신), 테이코플라닌(달바반신), 라모플라닌; g) 글리실사이클린: 예를 들어, 티게사이클린; g) β-락타마제 억제제: 페남(설박탐, 타조박탐), 클라밤(클라불란 산); i) 린코사마이드: 클린다마이신, 린코마이신; j) 리포펩타이드: 답토마이신, A54145, 칼슘-의존 항체(CDA); k) 마크롤리드: 아지트로마이신, 세트로마이신, 클라리트로마이신, 디리트로마이신, 에리트로마이신, 플루리트로마이신, 요사마이신, 케톨리드(텔리트로마이신, 세트로마이신), 미데카마이신, 미오카마이신, 올레안도마이신, 리파마이신(리팜피신, 리팜핀, 리파부틴, 리파펩틴), 로키타마이신, 록시트로마이신, 스펙티노마이신, 스피라마이신, 타크롤리무스(FK506), 트롤레안도마이신, 텔리트로마이신; l) 모노박탐: 아즈트레오남, 티게모남; m) 옥사졸리디논: 리네졸리드; n) 페니실린: 아목시실린, 암피실린(피밤피실린, 헤타실린, 바캄피실린, 메탐피실린, 탈람피실린), 아지도실린, 아즐로실린, 벤질페니실린, 벤자틴 벤질페니실린, 벤자틴 페녹시메틸페니실린, 클로메토실린, 프로카인 벤질페니실린, 카르베니실린(카린다실린), 클록사실린, 디클록사실린, 에피실린, 플루클록사실린, 메실리남(피브메실리남), 메즐로실린, 메티실린, 나프실린, 옥사실린, 페나메실린, 페니실린, 페네티실린, 페녹시메틸페니실린, 피페라실린, 프로피실린, 설베니실린, 테모실린, 티카르실린; o) 폴리펩타이드: 바시트라신, 콜리스틴, 폴리믹신 B; p) 퀴놀론: 알라트로플록사신, 발로플록사신，시프로플록사신, 클리나플록사신, 다노플록사신, 디플록사신, 에녹사신, 엔로플록사신, 플록신, 가레녹사신, 가티플록사신, 제미플록사신, 그레파플록사신, 카노트로바플록사신, 레보플록사신, 로메플록사신, 마보플록사신, 목시플록사신, 나디플록사신, 노르플록사신, 오르비플록사신, 오플록사신, 페플록사신, 트로바플록사신, 그레파플록사신, 시타플록사신, 스파플록사신, 테마플록사신, 토수폴록사신, 트로바플록사신; q) 스트렙토그라민: 프리스티나마이신, 퀴누프리스틴/달포프리스틴; r) 설폰아마이드: 마페나이드, 프론토실, 설파세타마이드, 설파메티졸, 설파닐이미드, 설파살라진, 설피속사졸, 트리메토프림, 트리메토프림-설파메톡사졸(코-트리목사졸); s) 스테로이드 항균제: 예컨대, 푸시드산; t) 테트라사이클린: 독시사이클린, 클로르테트라사이클린, 클로모사이클린, 데메클로사이클린, 라임사이클린(lymecycline), 메클로사이클린, 메타사이클린, 미노사이클린, 옥시테트라사이클린, 페니메피사이클린, 롤리테트라사이클린, 테트라사이클린, 글리실사이클린(예를 들어, 티게사이클린 포함); u) 기타 유형의 항생제: 안노나신, 아스페나민, 박토프레놀 억제제(바시트라신), DADAL/AR 억제제(사이클로세린), 딕티오스타틴, 디스코더몰리드, 엘레우테로빈, 에포틸론, 에탐부톨, 에토포사이드, 파로페넴, 푸시드산, 푸라졸리돈, 이소니아지드, 라울리말리드, 메트로니다졸, 무피로신, 마이코락톤, NAM 합성 억제제(예를 들어, 포스포마이신), 나이트로푸란토인, 파클리탁셀, 플래텐시마이신, 피라진아마이드, 퀴누프리스틴/달포프리스틴, 리팜피신(리팜핀), 타조박탐 티니다졸, 우바리신;
4) 항-바이러스성 약물: a) 유입/융합 억제제： 아프라비록, 마라비록, 비크리비록, gp41(엔푸비르타이드), PRO 140, CD4(이발리주납); b) 인테그라제 억제제: 랄테그라비어, 엘비테그라비어, 글로보이드난 A; c) 성숙 억제제: 베비리마트, 비베콘; d) 뉴라미니다제 억제제: 오셀타미비어, 자나미비어, 페라미비어; e) 뉴클레오사이드 및 뉴클레오타이드: 아바카비어, 아시클로비어, 아데포비어, 암독소비어, 아프리시타빈, 브리부딘, 시도포비어, 클레부딘, 덱셀부시타빈, 디다노신(ddI), 엘부시타빈, 엠트리시타빈(FTC), 엔테카비어, 팜시클로비어, 플루오로우라실(5-FU), 3'-플루오로-치환된 2',3'-디데옥시뉴클레오사이드 유사체(예를 들어, 3'-플루오로-2',3'-디데옥시티미딘(FLT) 및 3'-플루오로-2',3'-디데옥시구아노신(FLG)), 포미비르센, 간시클로비어, 이독스우리딘, 라미부딘(3TC), 1-뉴클레오사이드(예컨대, β-1-티미딘 및 β-1,2'-데옥시사이티딘), 펜시클로비어, 라시비어, 리바비린, 스탐피딘, 스타부딘(d4T), 타리바비린(비라미딘), 텔비부딘, 테노포비어, 트리플루리딘, 발라시클로비어, 발간시클로비어, 잘시타빈(ddC), 지도부딘(AZT); f) 비-뉴클레오사이드: 아만타딘, 아테비리딘, 카프라비린, 디아릴피리미딘(에트라비린, 릴피비린), 델라비르딘, 도코사놀, 에미비린, 에파비렌즈, 포스카르넷(포스포노폼산), 이미퀴모드, 인터페론 알파, 로비라이드, 로데노신, 메티사존, 네비라핀, NOV-205, 페그인터페론 알파, 포도필로톡신, 리팜피신, 리만타딘, 레시퀴모드(R-848), 트로만타딘; g) 프로테아제 억제제: 암프레나비어, 아타자나비어, 보세프레비어, 다루나비어, 포삼프레나비어, 인디나비어, 로피나비어, 넬피나비어, 플레코나릴, 리토나비어, 사퀴나비어, 텔라프레비어(VX-950), 팁라나비어; h) 기타 유형의 항-바이러스 약물: 아브자임, 아르비돌, 칼라놀라이드 a, 세라게닌, 시아노비린-n, 디아릴피리미딘, 에피갈로카테킨 갈레이트(EGCG), 포스카르넷, 그리피쓰신, 타리바비린(비라미딘), 하이드록시우레아, KP-1461, 밀테포신, 플레코나릴, 포트만테우(portmanteau) 억제제, 리바비린, 셀리시클립;
5) 방사선요법을 위한 방사성동위원소. 방사성동위원소(방사성핵종)의 예는 3H, 11C, 14C, 18F, 32P, 35S, 64Cu, 68Ga, 86Y, 99Tc, 111In, 123I, 124I, 125I, 131I, 133Xe, 177Lu, 211At 또는 213Bi이다. 방사성동위원소 표지된 항체는 수용체 표적화 영상화 실험에 유용하거나 또는 예컨대, 항체-방사성동위원소 접합체를 사용한 표적화 치료에 유용할 수 있다(Wu et al (2005) Nature Biotechnology 23(9): 1137-46). 세포 결합 분자, 예를 들어, 항체는 문헌[Current Protocols in Immunology, Volumes 1 and 2, Coligen et al, Ed. Wiley-Interscience, New York, Pubs. (1991)]에 기술된 기술을 사용하여, 방사성동위원소 금속에 결합하거나, 이와 킬레이팅하거나 또는 달리 복합체를 이루는 리간드 시약으로 표지될 수 있다. 금속 이온과 복합체를 이룰 수 있는 킬레이팅 리간드는 DOTA, DOTP, DOTMA, DTPA 및 TETA(마이크로사이클릭스사(Macrocyclics), 미국 텍사스주 달라스 소재);
6) 상승작용 요법으로서의 또 다른 세포-결합 분자-약물 접합체. 바람직한 상승작용 접합체는 캄프토테신 유사체, 메이탄시노이드 유사체, 탁사노이드(탁산) 유사체, CC-1065 유사체, 다우노루비신 및 독소루비신 화합물, 아마톡신 유사체, 벤조디아제핀 이량체(예를 들어, 피롤로벤조디아제핀(PBD), 토마이마이신, 안트라마이신, 인돌리노벤조디아제핀, 이미다조벤조티디아제핀, 또는 옥사졸리디노벤조디아제핀의 이량체), 칼리케아미신 및 에네다인 항생제 화합물, 악티노마이신, 아자세린, 블레오마이신, 에피루비신, 타목시펜, 이다루비신, 돌라스타틴, 아우리스타틴(예를 들어, 모노메틸 아우리스타틴 E, MMAE, MMAF, 아우리스타틴 PYE, 아우리스타틴 TP, 아우리스타틴 2-AQ, 6-AQ, EB(AEB) 및 EFP(AEFP)), 듀오카마이신, 젤다나마이신 또는 메토트렉세이트, 티오테파, 빈데신, 빈크리스틴, 헤미아스테를린, 나줌아미드, 마이크로기닌, 라디오수민, 알테로박틴, 마이크로스클레로더민, 테오넬라미드, 에스페라미신, PNU-159682; 및 이들의 유사체 및 유도체의 세포독성제를 갖는 접합체일 수 있다.
7) 기타 면역요법 약물: 예컨대, 이미퀴모드, 인터페론(예를 들어, α, β), 과립구 집락-자극 인자, 사이토카인, 인터루킨(IL-1 ~ IL-35), 항체(예를 들어, 트라스투주맙, 페르투주맙, 베바시주맙, 세툭시맙, 파니투무맙, 인플릭시맙, 아달리무맙, 바실릭시맙, 다클리주맙, 오말리주맙, PD-1 또는 PD-L1), 단백질-결합 약물(예를 들어, 아브락산), 칼리케아미신 유도체로부터 선택된 약물과 접합된 항체, 메이탄신 유도체(DM1 및 DM4), CC-1065, SN-38, 엑사테칸, 토포테칸, 토포이소머라제 I 억제제, 듀오카르마이신, PBD 또는 IGN 마이너 그루브 결합제, 강력한 탁솔 유도체, 독소루비신, 아우리스타틴 유사분열 억제제(예를 들어, 트라스투주맙-DM1, 트라스투주맙 데룩스테칸(DS-8201a), 이노투주맙 오조가미신, 브렌툭시맙 베도틴, 사시투주맙 고비테칸, 글렘바투무맙 베도틴, 로보투주맙 메르탄신, AN-152 LMB2, TP-38, VB4-845, 칸투주맙 메르탄신, AVE9633, SAR3419, CAT-8015(항-CD22), IMGN388, 미르베툭시맙 소라브탄신(IMGN853), 엔포르투맙 베도틴, 밀라투주맙-독소루비신, SGN-75(항-CD70), 항-Her3-엑세테칸, 항-Trop2-엑세테칸, nnti-CD79b-MMAE, 항-Her2-MMAE, 항-trop2-MMAE, 항-Her2-MMAF, 항-trop2-MMAF, 항-CD22-칼리케아미신 유도체, 항-CD22-MMAE, 항-Her2-아우리스타틴 유도체, 항-Muc1-아우리스타틴 유도체, 항-cMet-아우리스타틴 유도체, 또는 항-클라우딘(Claudin)18.2-아우리스타틴 유도체);
8) 상기 임의의 약물의 제약상으로 허용되는 염, 산 또는 유도체.
다른 상승적 면역요법에서, 체크포인트 억제제, TCR(T 세포 수용체) T 세포, 또는 CAR(키메라 항원 수용체) T 세포, 또는 B 세포 수용체(BCR), 자연 살해(NK) 세포, 또는 세포독성 세포의 항체, 또는 항-CD3, CD4, CD8, CD16(FcγRIII), CD19, CD20, CD22, CD25, CD27, CD30, CD33, CD37, CD38, CD40, CD40L, CD45RA, CD45RO, CD56, CD57, CD57bright, CD70, CD79, CD79b, CD123, CD125, CD138, TNFβ, Fas 리간드, MHC 클래스 I 분자(HLA-A, B, C), VEGF, 또는 NKR-P1항원의 항체가 본 특허의 접합체와 함께 상승적 치료를 위해 사용되는 것이 바람직하다.
또 다른 실시예에서, 치료 유효량의 화학식 (I) 내지 (VII)의 접합체 또는 본 특허를 통해 기재된 임의의 접합체를 포함하는 제약 조성물은 암, 자가면역 질환, 또는 감염성 질환의 상승적으로 효과적인 치료 또는 예방을 위하여, 화학요법제, 방사선 치료, 면역요법제, 자가면역 장애 제제, 항-감염제 또는 기타 접합체와 같은 다른 치료제와 동시에 투여될 수 있다. 상승 작용제는 보다 바람직하게는 하기 약물 중 하나 또는 여러 개으로부터 선택된다:
아바타셉트, 아비라테론 아세테이트, 아브락산, 아세트아미노펜/하이드로코돈, 아칼라브루티닙, 아두카누맙, 아달리무맙, ADXS31-142, ADXS-HER2, 아파티닙 디말레에이트, 알데스류킨, 알렉티닙, 알렘투주맙, 알리트레티노인, 아도-트라스투주맙 엠탄신, 암페타민/덱스트로암페타민, 아나스트로졸, 아리피프라졸, 안트라사이클린, 아리피프라졸, 아타자나비르, 아테졸리주맙, 아토르바스타틴, 아벨루맙, 악시캅타진 실로류셀(Axicabtagene ciloleucel), 악시티닙, 벨리노스타트, BCG 라이브, 베바시주맙, 벡사로텐, 블리나투모맙, 보르테조밉, 보수티닙, 브렌툭시맙 베도틴, 브리가티닙, 부데소니드, 부데소니드/포르모테롤, 부프레노르핀, 카바지탁셀, 카보잔티닙, 캡마티닙, 카페시타빈, 카르필조밉, 키메라 항원 수용체-조작된 T(CAR-T) 세포, 셀레콕시브, 세리티닙, 세툭시맙, 치다마이드(Chidamide), 시클로스포린, 시나칼셋, 크리조티닙, 코비메티닙, 코센틱스(Cosentyx), 크리조티닙, CTL019, 다비가트란, 다브라페닙, 다카르바진, 다클리주맙, 다코모티닙, 답토마이신, 다라투무맙, 다르베포에틴 알파, 다루나비르, 다사티닙, 데니류킨 디프티톡스, 데노수맙, 데파코테, 덱스란소프라졸, 덱스메틸페니데이트, 덱사메타손, 디그니캡(DigniCap) 쿨링 시스템, 디누툭시맙, 독시사이클린, 둘록세틴, 두벨리십, 두르발루맙, 엘로투주맙, 엠트리시타빈/릴피비린/테노포비르, 디소프록실 푸마레이트, 엠트리시트빈/테노포비르/에파비렌즈, 에녹사파린, 엔사르티닙, 엔잘루타마이드, 에포에틴 알파, 에를로티닙, 에소메프라졸, 에스조피클론, 에타네르셉, 에베롤리무스, 엑세메스탄, 에베롤리무스, 엑세나타이드 ER, 에제티미브, 에제티미브/심바스타틴, 페노피브레이트, 필그라스팀, 핀골리모드, 플루티카손 프로피오네이트, 플루티카손/살메테롤, 풀베스트란트, 가지바, 제피티닙, 글라티라머, 고세렐린 아세테이트, 이코티닙, 이마티닙, 이브리투모맙 티욱세탄, 이브루티닙, 이델라리십, 이포스파미드, 인플릭시맙, 이미퀴모드, ImmuCyst, 면역 BCG, 이니파립, 인슐린 아스파트, 인슐린 디터미르(detemir), 인슐린 글라르진, 인슐린 리스프로, 인터페론 알파, 인터페론 알파-1b, 인터페론 알파-2a, 인터페론 알파-2b, 인터페론 베타, 인터페론 베타 1a, 인터페론 베타 1b, 인터페론 감마-1a, 라파티닙, 이필리무맙, 이프라트로피움 브로마이드/살부타몰, 익사조밉, 카누마, 란레오타이드 아세테이트, 레날리도마이드, 레날리오마이드, 렌바티닙 메실레이트, 레트로졸, 레보티록신, 레보티록신, 리도카인, 리네졸리드, 리라글루타이드, 리스덱삼페타민, LN-144, 로라티닙, 메만틴, 메틸페니데이트, 메토프롤롤, 메키니스트, 메리시타빈/릴피비린/테노포비르, 모다피닐, 모메타손, 마이시닥(Mycidac)-C, 네시투무맙, 네라티닙, 닐로티닙, 니라파리브, 니볼루맙, 오파투무맙, 오비누투주맙, 올라파립, 올메사르탄, 올메사르탄/히드로클로로티아자이드, 오말리주맙, 오메가-3 지방산 에틸 에스테르, 온코린, 오셀타미비르, 오시머티닙, 옥시코돈, 팔보시클립, 팔리비주맙, 파니투무맙, 파노비노스타트, 파조파닙, 펨브롤리주맙, PD-1 항체, PD-L1 항체, 페메트렉세드, 페르투주맙, 폐렴구균 접합 백신, 포말리도마이드, 프레가발린, 프로스카 백스(Prosca Vax), 프로프라놀롤, 퀘티아핀, 라베프라졸, 라듐 223 클로라이드, 랄록시펜, 랄테그라비르, 라무시루맙, 라니비주맙, 레고라페닙, 리툭시맙, 리바록사반, 로미뎁신, 로수바스타틴, 룩솔리티닙 포스페이트, 살부타몰, 사볼리티닙, 세마글루타이드, 세벨라머, 실데나필, 실툭시맙, 시풀류셀-T, 시타글립틴, 시타글립틴/메트포르민, 솔리페나신, 솔라네주맙, 소니데깁, 소라페닙, 수니티닙, 타크로리무스, 타크리무스, 타달라필, 타목시펜, 타핀라르, 탈리모진 라-헤르파렙벡, 탈라조파립, 텔라프레비르, 탈라조파립, 테모졸로마이드, 템시롤리무스, 테노포비르/엠트리시타빈, 테노포비르 디소프록실 푸마레이트, 테스토스테론 겔, 탈리도마이드, TICE BCG, 티오트로피움 브로마이드, 티사젠레클레우셀(Tisagenlecleucel), 토레미펜, 트라메티닙, 트라스투주맙, 트라벡테딘(엑테이나스시딘 743), 트라메티닙, 트레멜리무맙, 트리플루리딘/티피라실, 트레티노인, Uro-BCG, 우스테키누맙, 발사르탄, 벨리파립, 반데타닙, 베무라페닙, 베네토클락스, 보리노스타트, 지브-애플리베르셉, 조스타박스 및 이들의 유사체, 유도체, 제약상 허용가능한 염, 담체, 희석제 또는 부형제, 또는 이들의 조합.
또 다른 목적에 따르면, 본 발명은 또한 본 발명의 접합체의 제조 방법에 관한 것이다. 본 발명의 접합체 및 그 제조 방법은 당업자에게 잘 알려진 다양한 방식으로 제조될 수 있다. 접합체에 사용되는 캄프토테신 유사체는, 예를 들어, 하기 기재된 방법의 적용 또는 적응에 의해, 또는 당업자에 의해 인식되는 바와 같이 그 변형에 의해 합성될 수 있다. 적절한 변형 및 치환은 과학 문헌으로부터 당업자에게 명백하고 잘 알려져 있거나 쉽게 얻을 수 있을 것이다. 특히 이러한 방법은 문헌(R.C. Larock, Comprehensive Organic Transformations, 2판, Wiley-VCH Publishers, 1999)에서 발견할 수 있을 것이다.
하기 기재된 반응에서, 반응에 원치 않는 참여를 피하기 위해, 최종 생성물에서 요구되는, 반응성 작용기, 예를 들어 히드록시, 아미노, 이미노, 티오 또는 카르복실기를 보호하는 것이 필요할 수 있다. 통상적인 보호기는 표준 관행, 예를 들어 P. G. Wuts 및 T.W. Greene, Greene's Protective Groups in Organic Synthesis, Wiley-Interscience; 4판(2006))에 따라 사용될 수 있다. 일부 반응은 염기, 산 또는 적절한 용매의 존재 하에 수행될 수 있다. 이러한 반응에 사용되는 염기, 산 및 용매의 성질에 특별한 제한은 없으며, 이러한 유형의 반응에 통상적으로 사용되는 염기, 산 또는 용매는 분자의 다른 부분에 악영향을 미치지 않는 한, 여기에서 동등하게 사용될 수 있다. 반응은 광범위한 온도에서 일어날 수 있다. 일반적으로, -80℃ 내지 150℃(더 바람직하게는 대략 실온 내지 100℃)의 온도에서 반응을 수행하는 것이 편리하다는 것을 알게 되었다. 반응에 필요한 시간은 많은 요인, 특히 반응 온도와 시약의 특성에 따라 크게 달라질 수 있다. 그러나, 반응이 위에 요약된 바람직한 조건 하에서 효과적이라면, 일반적으로 3시간 내지 20시간의 기간으로 충분할 것이다.
반응의 검사(work-up)후처리는 통상적인 수단에 의해 수행될 수 있다. 예를 들어, 반응 생성물은 반응 혼합물로부터 용매를 증류 제거하거나, 필요한 경우 반응 혼합물로부터 용매를 증류 제거한 후, 잔류물을 물에 붓고, 이어서 수-불혼화성 유기 용매로 추출하고 그 추출물로부터 용매를 증류함으로써, 회수될 수 있다. 또한, 원하는 경우, 생성물을 재결정화, 재침전 또는 다양한 크로마토그래피 기술, 특히 칼럼 크로마토그래피 또는 분취 박층 크로마토그래피와 같은 잘 알려진 다양한 기술에 의해 추가로 정제할 수 있다. 본 발명의 캄프토테신 유사체 및 이의 접합체의 합성은 도 1 내지 32에 도시되어 있다.
강력한 캄프토테신 유사체를 갖는 결합 분자의 접합체가 추가로 예시되지만, 하기 실시예의 기재내용에 의해 제한되지는 않는다.
실험적 예
본 발명은 본 발명의 범위를 제한하는 것으로 의도되지 않는 하기 실시예에서 추가로 설명된다. 다음 실시예에 설명된 세포주는 달리 명시되지 않는 한, 아메리칸 타입 컬쳐 컬렉션(American Type Culture Collection, ATCC), 또는 독일 미생물 및 세포 배양 수집부(Deutsche Sammlung von Mikroorganismen und Zellkulturen GmbH, Braunschweig, Germany)(DMSZ), 또는 중국 과학 아카데미 상하이 세포 배양 연구소(The Shanghai Cell Culture Institute of Chinese Academy)에 의해 명시된 조건에 따라 배양된 상태로 유지되었다. 달리 명시되지 않는 한, 세포 배양 시약은 인비트로젠 사(Invitrogen Corp.)로부터 입수하였다. 미리 로딩된 수지뿐만 아니라 아미날 산 및 그 유도체는 Merck Chemicals International Co, 또는 Synthetech Co., 또는 Peptides International Inc 또는 Chembridge International Co. 또는 Sigma-Aldrich (Merck Co)로부터 입수하였다. 일부 링커, NHS 에스테르/말레이미드의 링커(AMAS, BMPS, GMBS, MBS, SMCC, EMCS 또는 Sulfo-EMCS, SMPB, SMPH, LC-SMCC, Sulfo-KMUS, SM(PEG)4, SM(PEG) 6, SM(PEG)8, SM(PEG)12, SM(PEG)24); NHS 에스테르/피리딜디티올(SPDP, LC-SPDP 또는 Sulfo-LC-SPDP, SMPT, Sulfo-LC-SMPT); NHS 에스테르/할로아세틸(SIA, SBAP, SIAB 또는 Sulfo-SIAB); NHS 에스테르/디아지린(SDA 또는 Sulfo-SDA, LC-SDA 또는 Sulfo-LC-SDA, SDAD 또는 Sulfo-SDAD); 말레이미드/히드라지드(BMPH, EMCH, MPBH, KMUH); 피리딜디티올/히드라지드(PDPH); 이소시아네이트/말레이미드(PMPI)는 Thermo Fisher Scientific Co.에서 구입했으며, SPDB, SPP 링커는 참고 문헌(Cumber, A. et al, Bioconjugate Chem., 1992, 3, 397-401)에 따라 제조했으며, 로슈사(Roche)로부터의 트라스투주맙은 중국 약국을 통해 구입하였다. Trop-2 항체는 자체 생산된 사시투주맙(Sacituzumab)의 바이오시밀러이고, 여기서 EGFR 항체는 중국 약국에서 구입한 니모투주맙(Nimotuzumab)이다. PEG 및 PEG 유도체 화합물은 바이오매트릭 인코퍼레이티드(Biomatrik Inc, Jiaxing City, Zhejiang Province, China)에서 구입하였다. 토포테칸 및 이들의 유도체 또는 주요 성분들은 Chengdu Tianyuan Natural Product Co., Ltd, Chengdu, China; Brightgene Biomedical Co., Suzhou, China 등과 같은 여러 상업적 공급원에서 구입하였다. 실험 동물은 젬파마테크사(GemPharmatech.Co. Ltd, Najing, China) 및 상하이 SLAC 래보러토리 애니멀사(Shanghai SLAC Laboratory Animal Co., Ltd., Shanghai, China)를 통해 모델 마우스의 국립 자원 센터에서 구입하였고, 로슈사(Roche)로부터의 T-DM1은 중국, 홍콩 내 약국에서 구입하였다. 다른 모든 시약 및 용매는 사용 가능한 최고 등급으로 구입하여 추가 정제 없이 사용하였니. EDC(EDCI), PFP, HATU, TATU, PyBrOP, DIPEA, TEA, PPTS, DMAP, BrOP, p-TSA, DTT, EDTA, TCEP, NHS, TFA, 엘만(Ellman) 시약, 트라우트(Traut) 시약(2-이미노티올란(iminothiolane)), γ-티오부티로락톤(thiobutyrolactone) 및 기타 모든 화학 물질과 무수 용매는 Sigma-Aldrich International (Merck) 또는 Aladdin Chemical (Shanghai) Ltd.에서 구입하였다. 모든 무수 용매는 상업적으로 입수하여 질소 하에 슈어-실(Sure-seal) 병에 보관하였다. 분취용 HPLC(아세토니트릴/포름산 또는 TFA 함유 물) 분리는 바레인 프리스타(Varain PreStar) HPLC로 수행되었다. NMR 스펙트럼은 Bruker 500MHz Instrument에서 기록되었다. 화학적 이동(델타)은 0.00에서 테트라메틸실란을 기준으로 백만분율(ppm)로 기록되며, 커플링 상수(J)는 Hz로 기록된다. 질량 스펙트럼 데이터는 Waters Acquity UPLC 분리 모듈 및 Acquity TUV 검출기가 장착된 Waters Xevo QTOF 질량 스펙트럼에서 획득되었다.
실시예 1. (S)-tert-부틸(1-((4-에틸-4,9-디히드록시-3,14-디옥소-3,4,12,14-테트라히드로-1H-피라노[3',4':6,7]인돌리지노[1,2-b]퀴놀린-10-일)메틸)피페리딘-4-일)카바메이트(2)의 합성
Figure pct00095
아세트산(10mL) 중 10-하이드록시캄프토테신(2g, 5.49mmol)의 용액에, 아세트산(15mL) 중 4-tert-부톡시카르보닐아미노피페리딘(4.4g, 21.9mmol) 및 37% 포름알데히드(1.8g, 21.9mmol)의 용액을 첨가하였다. 반응 혼합물을 약 60℃로 가열하고 2시간 동안 교반한 후, 아세트산을 제거하였다. 10mL의 MeOH에서 재결정화하여, 화합물 2(2.1g, 68% 수율)를 황색 분말 고체로서 수득하였다. ESI-MS m/z: [M+H]+ C31H36N4O7에 대한 계산치 577.26; 실측치(found) 577.26.
실시예 2. (S)-10-((4-아미노피페리딘-1-일)메틸)-4-에틸-4,9-디히드록시-1H-피라노[3',4':6,7]인돌리지노[1,2-b]퀴놀린-3,14(4H,12H)-디온(3)의 합성
Figure pct00096
화합물 2(150mg, 0.26mmol)를 디클로로메탄 및 트리플루오로아세트산의 혼합물(2mL/6mL)에 용해시키고, 실온에서 1 시간 동안 교반하였다. 그 다음, 혼합물을 농축하고 진공 펌프에서 건조시켜, 화합물 3(120 mg, 100% 수율)을 황색 고체로서 수득하였다. ESI-MS m/z: [M+H]+ C26H28N4O5에 대한 계산치 477.21; 실측치 477.21.
실시예 3. 화합물 (S)-4-(2,5-디옥소-2,5-디히드로-1H-피롤-1-일)-N-(1-((4-에틸-4,9-디히드록시)-3,14-디옥소-3,4,12,14-테트라히드로-1H-피라노[3',4':6,7]인돌리지노[1,2-b]퀴놀린-10-일)메틸)피페리딘-4-일)부탄아미드(5)의 합성
Figure pct00097
화합물 3(62 mg, 0.13 mmol) 및 퍼플루오로페닐 4-(2,5-디옥소-2,5-디하이드로-1H-피롤-1-일)부타노에이트(화합물 4, 56 mg, 0.16 mmol)를 DMF(5 mL)에 용해시키고, 약 0℃로 냉각한 다음, N,N-디이소프로필에틸아민(45 μL, 0.16 mmol)을 첨가하였다. 반응을 실온으로 가온하고 2시간 동안 교반하고, 농축하고, 정제용 HPLC(아세토니트릴/포름산 함유 물)로 정제하여, 화합물 5(44 mg, 54% 수율)를 수득하였다. ESI-MS m/z: [M+H]+ C34H35N5O8에 대한 계산치 642.25; 실측치 642.25.
실시예 4. (S)-퍼플루오로페닐 30-(4-(2,5-디옥소-2,5-디히드로-1H-피롤-1-일)부탄아미도)-27,31-디옥소-2,5,8,11,14,17,20,23-옥타옥사-26,32-디아자헥사트리아콘탄-36-오에이트(7)의 합성
Figure pct00098
디클로로메탄(5mL)에 용해된 화합물 6(100mg, 0.13mmol)의 용액에, 펜타플루오로페놀(48mg, 0.26mmol) 및 1-(3-디메틸아미노프로필)-3-에틸카르보디이미드 염산염(50mg, 0.26mmol)을 첨가하였다. 반응을 실온에서 2시간 동안 교반하고, 디클로로메탄(50mL)으로 희석하고, 물(2 x 10mL)로 세척하고, 황산나트륨으로 건조하고, 여과하고, 농축하여, 화합물 7(120mg, 100% 수율)을 수득하였다. ESI-MS m/z: [M+H]+ C40H57F5N4O15에 대한 계산치 929.37; 실측치 929.37.
실시예 5. (S)-2-(4-(2,5-디옥소-2,5-디히드로-1H-피롤-1-일)부탄아미도)-N1-(4-((1-(((S)-4-에틸-4,9-디히드록시-3,14-디옥소-3,4,12,14-테트라히드로-1H-피라노[3',4':6,7]인돌리지노[1,2-b]퀴놀린-10-일)메틸)피페리딘-4-일)아미노)-4-옥소부틸)-N5-(2,5,8,11,14,17,20,23-옥타옥사펜타코산-25-일)펜탄디아미드(8)의 합성
Figure pct00099
화합물 3(60mg, 0.126mmol) 및 화합물 7(97mg, 0.105mmol)을 DMF(5mL)에 용해시키고 약 0℃로 냉각시킨 다음, N,N-디이소프로필에틸아민(37μL, 0.21mmol)을 첨가하였다. 반응을 실온으로 가온하고 2시간 동안 교반하고, 농축하고, 분취용 HPLC(아세토니트릴/포름산 함유 물)로 정제하여, 화합물 8(50 mg, 39% 수율)을 수득하였다. ESI-MS m/z: [M+H]+ C60H84N8O19에 대한 계산치 1221.59; 실측치 1221.59.
실시예 6. tert-부틸 3-(2-(2-(4-(2,5-디옥소-2,5-디히드로-1H-피롤-1-일)부탄아미도)에톡시)에톡시)프로파노에이트(10)의 합성
Figure pct00100
화합물 9(1.32g, 5.7mmol)를 DMF(10mL)에 용해시키고, 여기에 4-(2,5-디옥소-2,5-디히드로-1H-피롤-1-일)부탄산(1.04g, 5.7 mmol)을 첨가한 다음, HATU(2.6g, 6.8mmol) 및 트리에틸아민(0.96mL, 6.8mmol)을 순서대로 첨가하고, 반응을 실온에서 1시간 동안 교반하고 디클로로메탄(100mL)으로 희석하고 물(2 x 10mL)로 세척하고 무수 황산나트륨으로 건조하고 여과하고 농축하였다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피(에틸 아세테이트/석유 에테르)로 정제하여, 화합물 10(1.8g, 80% 수율)을 수득하였다. ESI-MS m/z: [M+H]+ C19H30N2O7에 대한 계산치 399.21; 실측치 399.21.
실시예 7. 3-(2-(2-(4-(2,5-디옥소-2,5-디히드로-1H-피롤-1-일)부탄아미도)에톡시)에톡시)프로판산(11)의 합성
Figure pct00101
화합물 10(0.40g, 1.0mmol)을 디클로로메탄 및 트리플루오로아세트산의 혼합물(12mL/4mL)에 용해시키고 실온에서 1 시간 동안 교반하였다. 그 다음, 혼합물을 농축하고, 디클로로메탄과 함께 2회 공-증발시키고(co-evaporated), 진공 펌프에서 건조시켜, 화합물 11(0.34g, 100% 수율)을 황색 고체로서 수득하였다. ESI-MS m/z: [M+H]+ C15H22N2O7에 대한 계산치 343.14; 실측치 343.14.
실시예 8. 퍼플루오로페닐 3-(2-(2-(4-(2,5-디옥소-2,5-디히드로-1H-피롤-1-일)부탄아미도)에톡시)에톡시)프로파노에이트(12)의 합성
Figure pct00102
디클로로메탄(30mL)에 용해된 화합물 11(0.34g, 1.0mmol)의 용액에, 펜타플루오로페놀(0.46g, 2.5mmol) 및 1-(3-디메틸아미노프로필)-3-에틸카르보디이미드 염산염(0.57g, 3.0mmol)을 첨가하였다. 반응을 실온에서 2시간 동안 교반하고, 디클로로메탄(50mL)으로 희석하고, 물(200mL)로 세척하고, 황산나트륨으로 건조하고, 여과하고, 농축시켜, 화합물 12(0.51g, 100% 수율)를 수득하였다. ESI-MS m/z: [M+H]+ C21H22F5N2O7에 대한 계산치 509.13; 실측치 509.13.
실시예 9. N,N-디메틸피페리딘-4-아민(13)의 합성
Figure pct00103
N-Boc 피페리돈(10g, 0.05mol)을 MeOH(100mL)에 용해시키고, 여기에 디메틸아민 수용액(25mL, 0.22mol) 및 10% 탄소상 팔라듐(1g)을 첨가하고, 반응 플라스크를 비우고 수소로 재충전한 다음, 실온에서 밤새 교반하였다. 여과 후, 여과액을 농축하고 디클로로메탄과 함께 3회(3 x 80mL) 공-증발시키고, 진공 펌프에서 건조시켜 모든 디메틸아민을 제거하였다. HCl/MeOH(4 M, 50 mL)를 잔류물에 첨가하고, 실온에서 30분 동안 교반하였다. 다량의 백색 고체가 침전되었고, 혼합물을 여과하여 백색 고체 13(9g, 90% 수율)을 수득하였다. ESI-MS m/z: [M+H]+ C7H16N2에 대한 계산치 129.13; 실측치 129.13.
실시예 10. (9H-플루오렌-9-일)메틸 4-(디메틸아미노)피페리딘-1-카르복실레이트(14)의 합성
Figure pct00104
화합물 13(2.0g, 9.9mmol)을 1,4-디옥산과 물(30mL/50mL)의 혼합 용액에 용해시키고, 중탄산나트륨(2.5g, 29.8mmol)을 첨가한 후, 혼합물을 0℃로 냉각하였다. 1,4-디옥산(10mL) 중 9-플루오레닐메톡시카르보닐 클로라이드(3.1g, 11.9mmol)의 용액을 적가하였다. 첨가 후, 온도를 점진적으로 실온까지 상승시키고, 반응물을 1시간 동안 교반하였다. 1M HCl 100mL를 첨가하고, 혼합물을 에틸 아세테이트(3 x 50mL)로 세척하고, 수성상(aqueous phase)을 탄산나트륨으로 pH ~ 10으로 조정한 다음, 디클로로메탄(3 x 50mL)으로 추출하였다. 합해진(combined) 유기상(organic phase)을 물(50mL)로 세척하고, 황산나트륨으로 건조하고, 여과하고, 농축하고, 칼럼 크로마토그래피(MeOH/디클로로메탄)로 정제하여, 화합물 14(2.75g, 79% 수율)를 수득하였다. ESI-MS m/z: [M+H]+ C22H26N2O2에 대한 계산치 351.20; 실측치 351.20.
실시예 11. (S)-tert-부틸 (1-((4-(히드록시메틸)페닐)아미노)-1-옥소프로판-2-일)카르바메이트 (15)의 합성
Figure pct00105
p-아미노벤질 알코올(5.0g, 0.04mol) 및 Boc-L-알라닌(8.0g, 0.042mol)을 무수 THF(100mL)에 용해시키고, 2-에톡시-1-에톡시카르보닐-1,2-디하이드로퀴놀린(11g, 0.044mol)을 첨가하고 실온에서 밤새 교반하였다. 반응 혼합물을 물(300mL)에 붓고, 에틸 아세테이트(3 x 100mL)로 추출하고, 합해진 유기상을 물(100mL)로 세척하고, 황산나트륨으로 건조하고, 여과하고, 농축시켰다. 조 생성물을 에틸 아세테이트/석유 에테르(1:3)로 연화처리하고(triturated) 여과하여, 화합물 15(9.8g, 84% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다. ESI-MS m/z: [M + H] + C15H22N2O4에 대한 계산치 295.16; 실측치 295.16.
실시예 12. (S)-tert-부틸(1-((4-(브로모메틸)페닐)아미노)-1-옥소프로판-2-일)카바메이트(16)의 합성
Figure pct00106
화합물 3(3.5g, 11.9mmol) 및 사브롬화탄소(5.9g, 17.8mmol)를 디클로로메탄(80mL)에 용해시키고 약 0℃로 냉각하고, 트리페닐포스핀(4.7g, 17.8mmol)을 첨가하였다. 반응을 실온으로 가온하고 30분 동안 교반한 후, 실리카겔 20g을 첨가하고 혼합하고 회전증발기(rotavap)에서 건조시키고, 실리카겔 칼럼(실리카겔 100g)에 로딩하고 석유에테르/에틸아세테이트로 용리하여, 화합물 16( 2.6g, 62% 수율)을 수득하였다. ESI-MS m/z: [M+H]+ C15H21BrN2O3에 대한 계산치 357.07; 실측치 357.07.
실시예 13. (S)-1-(((9H-플루오렌-9-일)메톡시)카르보닐)-N-(4-(2-((tert-부톡시카르보닐)아미노)프로판아미도)벤질)-N,N-디메틸피페리딘-4-아미늄 브로마이드 (17)의 합성
Figure pct00107
화합물 16(2.3g, 6.4mmol) 및 화합물 14(2.7g, 7.7mmol)를 무수 THF(50mL)에 용해시키고 실온에서 밤새 교반하였다. 회전증발기에서 대부분의 THF를 제거한 후, 에틸 아세테이트(50mL)를 잔류물에 첨가하였다. 생성된 슬러리를 여과하여, 백색 고체를 수득하였다(4.5g, 100% 수율). ESI-MS m/z: M + C37H47N4O5에 대한 계산치 627.35; 실측치 627.35.
실시예 14. (S)-N-(4-(2-((tert-부톡시카르보닐)아미노)프로판아미도)벤질)-N,N-디메틸피페리딘-4-아미늄 브로마이드(18)의 합성
Figure pct00108
화합물 17(1.0g, 1.41mmol)을 DMF(5mL)에 용해시키고, 피페리딘(1mL)을 첨가하였다. 실온에서 30분 동안 교반한 후 에틸 아세테이트 30mL를 첨가하고 10분 동안 교반하였다. 혼합물을 여과하여, 백색 분말 고체를 수득하였다(550 mg, 80% 수율). ESI-MS m/z: M + C22H37N4O3에 대한 계산치 405.29; 실측치 405.29.
실시예 15. N-(4-((S)-2-((tert-부톡시카르보닐)아미노)프로판아미도)벤질)-1-(((S)-4-에틸-4,9-디히드록시-3,14-디옥소-3,4,12,14-테트라히드로-1H-피라노[3',4':6,7]인돌리지노[1,2-b]퀴놀린-10-일)메틸)-N,N-디메틸피페리딘-4-아미늄 브로마이드(19)의 합성
Figure pct00109
아세트산(5 mL) 중 10-하이드록시캄프토테신(375 mg, 1.03 mmol)의 용액에, 아세트산(5mL) 중 화합물 18(550mg, 1.13mmol) 및 37% 포름알데히드(92mg, 1.13mmol)의 용액을 첨가하였다. 혼합물을 약 65℃로 가열하고, 1시간 동안 교반한 다음, 농축하고, 드라이 MeOH와 공-증발시켰다. 디클로로메탄 및 소량의 MeOH에서 재결정화하여, 화합물 19(0.5g, 63% 수율)를 황색 분말로서 수득하였다. ESI-MS m/z: M+ C43H53N6O8에 대한 계산치 781.39; 실측치 781.39.
실시예 16. N-(4-((S)-2-아미노프로판아미도)벤질)-1-(((S)-4-에틸-4,9-디히드록시-3,14-디옥소-3,4,12,14-테트라하이드로-1H-피라노[3',4':6,7]인돌리지노[1,2-b]퀴놀린-10-일)메틸)-N,N-디메틸피페리딘-4-아미늄 브로마이드(20)의 합성
Figure pct00110
화합물 19(50mg, 0.058mmol)를 디클로로메탄 및 트리플루오로아세트산의 혼합물(2mL/6mL)에 용해시키고, 실온에서 30분 동안 교반하였다. 그 다음, 혼합물을 농축하고 진공 펌프에서 건조시켜, 화합물 20(44 mg, 100% 수율)을 황색 고체로서 수득하였다. ESI-MS m/z: M+ C38H45N6O6에 대한 계산치 681.34; 실측치 681.34.
실시예 17. N-(4-((S)-2-(4-(2,5-디옥소-2,5-디히드로-1H-피롤-1-일)부탄아미도)프로판아미도)벤질)-1-(((S)-4-에틸-4,9-디히드록시-3,14-디옥소-3,4,12,14-테트라히드로-1H-피라노[3',4':6,7]인돌리지노[1,2-b]퀴놀린-10-일)메틸)-N,N-디메틸피페리딘-4-아미늄 포르메이트(21)의 합성
Figure pct00111
화합물 20(88mg, 0.116mmol) 및 화합물 4(49mg, 0.140mmol)를 DMF(5mL)에 용해시키고, 약 0℃로 냉각시킨 후, N,N-디이소프로필에틸아민(40μL, 0.232mmol)을 첨가하였다. 반응을 실온으로 가온하고, 2시간 동안 교반하고, 농축하고, 정제용 HPLC(아세토니트릴/포름산 함유 물)로 정제하여, 화합물 21(66 mg, 68% 수율)을 수득하였다. ESI-MS m/z: M+ C46H52N7O9에 대한 계산치 846.38; 실측치 846.38.
실시예 18. N-(4-((9S,17S)-9-(4-(2,5-디옥소-2,5-디히드로-1H-피롤-1-일)부탄아미도)-17-메틸-6,10,15-트리옥소-2-옥사-5,11,16-트리아자옥타데칸아미도)벤질)-1-(((S)-4-에틸-4,9-디히드록시-3,14-디옥소-3,4,12,14-테트라히드로-1H-피라노[3',4':6,7]인돌리지노[1,2-b]퀴놀린-10-일)메틸)-N,N-디메틸피페리딘-4-아미늄 포메이트(22)의 합성
Figure pct00112
화합물 20(44mg, 0.058mmol) 및 화합물 7(60mg, 0.065mmol)을 DMF(5mL)에 용해시키고, 약 0℃로 냉각시킨 후, N,N-디이소프로필에틸아민(20μL, 0.116mmol)을 첨가하였다. 반응을 실온으로 가온하고, 2시간 동안 교반하고, 농축하고, 정제용 HPLC(아세토니트릴/포름산 함유 물)로 정제하여, 화합물 22(51 mg, 58% 수율)를 수득하였다. ESI-MS m/z: M+ C72H101N10O20에 대한 계산치 1425.72; 실측치 1425.72.
실시예 19. 1-(2-아미노-4-플루오로-5-메톡시페닐)-2-클로로에타논(24d)의 합성
Figure pct00113
디클로로메탄(20mL)에 용해된 3-플루오로-4-메톡시아닐린(5g, 35.4mmol)의 용액을 빙수 냉각된 삼염화붕소(디클로로메탄 중 1M, 38.9mL) 용액에 적가하였다. 반응물을 10분 동안 교반한 다음, 클로로아세토니트릴(3.2g, 42.5mmol) 및 삼염화알루미늄(5.2g, 38.9mmol)을 첨가하였다. 첨가가 완료된 후, 반응을 실온으로 가온한 다음, 밤새 환류시켰다. 그 다음, 반응 혼합물을 약 0℃로 냉각시키고, 2M HCl(80mL)로 켄칭하고, 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 층을 분리하고 수성상을 디클로로메탄(3 x 80mL)으로 추출하였다. 합해진 유기상을 물(100mL)로 세척하고, 황산나트륨으로 건조하고, 여과하고, 농축하고, 석유 에테르/에틸 아세테이트로 용리되는 실리카겔 칼럼 상에서 정제하여, 화합물 24d(2g, 26% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다. ESI-MS m/z: [M+H]+ C9H9ClFNO2에 대한 계산치 218.03; 실측치 218.03.
실시예 20. (S)-11-(클로로메틸)-4-에틸-8-플루오로-4-히드록시-9-메톡시-1H-피라노[3',4':6,7]인돌리지노[1,2]-b]퀴놀린-3,14(4H,12H)-디온(26d)의 합성
Figure pct00114
화합물 24d(0.50g, 2.29mmol) 및 화합물 25(0.57g, 2.19mmol)를 무수 톨루엔(40mL)에 용해시키고, p-톨루엔설폰산(42mg, 0.219mmol)을 첨가하였다. 현탁액을 2일 동안 환류 가열하고 실온으로 냉각되도록 하였다. 톨루엔의 약 2/3를 제거한 후, 잔류물을 여과하고, 필터 케이크를 디클로로메탄으로 세척하고, 공기 건조하여, 화합물 26d(0.7g, 72% 수율)를 회색 분말 고체로서 수득하였다. ESI-MS m/z: [M+H]+ C22H18ClFN2O5에 대한 계산치 445.09; 실측치 445.09.
실시예 21. N-(4-((S)-2-((tert-부톡시카르보닐)아미노)프로판아미도)벤질)-1-(((S)-4-에틸-8-플루오로-4-히드록시-9-메톡시-3,14-디옥소-3,4,12,14-테트라히드로-1H-피라노[3',4':6,7]인돌리지노[1,2-b]퀴놀린-11-일)메틸)-N,N-디메틸피페리딘-4-아미늄 클로라이드(27)의 합성
Figure pct00115
DMF(5 mL) 중 화합물 26d(218 mg, 0.49 mmol), 화합물 18(200 mg, 0.49 mmol)의 혼합물을 0℃에서 30분 동안 교반한 다음, 트리에틸아민(63 μL, 0.45 mmol)을 첨가하고, 1시간 동안 계속 교반하였다. 반응물을 농축하고, 분취용 HPLC(아세토니트릴/포름산 함유 물)로 정제하여, 화합물 10(240 mg, 59% 수율)을 황색 고체로서 수득하였다. ESI-MS m/z: M+ C44H54FN6O8에 대한 계산치 813.40; 실측치 813.40.
실시예 22. N-(4-((S)-2-아미노프로판아미도)벤질)-1-(((S)-4-에틸-8-플루오로-4-히드록시-9-메톡시-3,14-디옥소-3,4,12,14-테트라히드로-1H-피라노[3',4':6,7]인돌리지노[1,2-b]퀴놀린-11-일)메틸)-N,N-디메틸피페리딘-4-아미늄(28)의 합성
Figure pct00116
화합물 27(50mg, 0.06mmol)을 디클로로메탄 및 트리플루오로아세트산의 혼합물(2mL/6mL)에 용해시키고, 실온에서 30분 동안 교반하였다. 그 다음, 혼합물을 농축하고 진공 펌프에서 건조시켜, 화합물 28(42 mg, 100% 수율)을 황색 고체로서 수득하였다. ESI-MS m/z: M+ C39H46FN6O6에 대한 계산치 713.35; 실측치 713.35.
실시예 23. N-(4-((30S,38S)-30-(4-(2,5-디옥소-2,5-디히드로-1H-피롤-1-일)부탄아미도)-38-메틸-27,31,36-트리옥소-2,5,8,11,14,17,20,23-옥타옥사-26,32,37-트리아자노나트리아콘탄아미도)벤질)-1-(((S)-4-에틸-8-플루오로-4-히드록시-9-메톡시-3,14-디옥소-3,4,12,14-테트라히드로-1H-피라노[3',4':6,7]인돌리지노[1,2-b]퀴놀린-11-일)메틸)-N,N-디메틸피페리딘-4-아미늄 포르메이트(29)의 합성
Figure pct00117
화합물 28(47mg, 0.060mmol) 및 화합물 7(60mg, 0.066mmol)을 DMF(5mL)에 용해시키고, 약 0℃로 냉각한 후, N,N-디이소프로필에틸아민(21μL, 0.12mmol)을 첨가하였다. 반응을 실온으로 가온하고, 2시간 동안 교반하고, 농축하고, 분취용 HPLC(아세토니트릴/포름산 함유 물)(아세토니트릴/포름산 함유 물)로 정제하여, 화합물 29(23 mg, 25% 수율)를 수득하였다. ESI-MS m/z: M+ C73H102FN10O20에 대한 계산치 1457.73; 실측치 1457.73.
실시예 24. (S)-11-(아미노메틸)-4-에틸-8-플루오로-4-히드록시-9-메톡시-1H-피라노[3',4':6,7]인돌리지노[1,2-b]퀴놀린-3,14(4H,12H)-디온(30)의 합성
Figure pct00118
화합물 26d(80mg, 0.18mmol)를 에탄올(5mL)에 용해시키고, 헥사메틸렌테트라민(76mg, 0.54mmol)을 첨가하고, 혼합물을 90분 동안 환류시킨 다음, 실온으로 냉각시켰다. 농축된 염산(100μL)을 첨가하고 30분간 교반하였다. 농축 후, 황백색(off-white) 고체를 얻었고, 이를 분취용 HPLC(아세토니트릴/포름산 함유 물)로 정제하여, 화합물 30(40 mg, 52% 수율)을 수득하였다. ESI-MS m/z: [M+H]+ C22H20FN3O5에 대한 계산치 426.14; 실측치 426.14.
실시예 25. (S)-2-(4-(2,5-디옥소-2,5-디히드로-1H-피롤-1-일)부탄아미도)-N1-(4-((((S)-4-에틸-8-플루오로-4-히드록시-9-메톡시-3,14-디옥소-3,4,12,14-테트라히드로-1H-피라노[3',4':6,7]인돌리지노[1,2-b]퀴놀린-10-일)메틸)아미노)-4-옥소부틸)-N5-(2,5,8,11,14,17,20,23-옥타옥사펜타코산-25-일)펜탄디아미드(31)의 합성
Figure pct00119
화합물 30(40mg, 0.094mmol) 및 화합물 7(120mg, 0.13mmol)을 DMF(5mL)에 용해시키고 약 0℃로 냉각한 다음, N,N-디이소프로필에틸아민(33μL, 0.188mmol)을 첨가하였다. 반응을 실온으로 가온하고, 2시간 동안 교반하고, 농축하고, 분취용 HPLC(아세토니트릴/포름산 함유 물)로 정제하여, 화합물 31(55 mg, 50% 수율)을 수득하였다. ESI-MS m/z: [M+H]+ C56H76FN7O19에 대한 계산치 1170.52; 실측치 1170.52.
실시예 26. tert-부틸(1-메틸피페리딘-4-일)카바메이트(32)의 합성
Figure pct00120
4-(tert-부톡시카르보닐아미노)피페리딘(2g, 10mmol)을 MeOH(30mL)에 용해시킨 다음, 37% 포름알데히드(1.6g, 20mmol) 및 10% 탄소상 팔라듐(0.2g)을 첨가하였다. 반응물을 1 atm 수소 하에 밤새 교반하고 여과하였다. 여과액을 농축하여, 화합물 32(2.1g, 100% 수율)를 수득하였다. ESI-MS m/z: [M+H]+ C11H22N2O2에 대한 계산치 215.17; 실측치 215.17.
실시예 27. (S)-4-((tert-부톡시카르보닐)아미노)-1-((4-에틸-8-플루오로-4-히드록시-9-메톡시-3,14-디옥소-3,4,12,14-테트라하이드로-1H-피라노[3',4':6,7]인돌리지노[1,2-b]퀴놀린-11-일)메틸)-1-메틸피페리딘-1-이움 클로라이드(33)의 합성
Figure pct00121
DMF(3 mL) 중 화합물 26d(50 mg, 0.112 mmol) 및 화합물 32(26 mg, 0.123 mmol)를 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 반응 용액을 분취용 HPLC(아세토니트릴/포름산 함유 물)로 정제하여, 화합물 6(33 mg, 47% 수율)을 수득하였다. ESI-MS m/z: [M ]+ C33H40FN4O7에 대한 계산치 623.29; 실측치 623.29.
실시예 28. (S)-4-아미노-1-((4-에틸-8-플루오로-4-히드록시-9-메톡시-3,14-디옥소-3,4,12,14-테트라히드로-1H-피라노[3',4':6,7]인돌리지노[1,2-b]퀴놀린-11-일)메틸)-1-메틸피페리딘-1-이움(34)의 합성
Figure pct00122
화합물 33(30mg, 0.053mmol)을 디클로로메탄 및 트리플루오로아세트산의 혼합물(3mL/1mL)에 용해시키고 실온에서 30분 동안 교반하였다. 그 다음, 혼합물을 농축하고 진공 펌프에서 건조시켜, 화합물 34(33 mg, 100% 수율)를 수득하였다. ESI-MS m/z: [M]+ C28H32N4O5에 대한 계산치 477.21; 실측치 477.21.
실시예 29. 4-((S)-30-(4-(2,5-디옥소-2,5-디히드로-1H-피롤-1-일)부탄아미도)-27,31-디옥소-2,5,8,11,14,17,20,23-옥타옥사-26,32-디아자헥사트리아콘탄아미도)-1-(((S)-4-에틸-8-플루오로-4-히드록시-9-메톡시-3,14-디옥소-3,4,12,14-테트라히드로-1H-피라노[3',4':6,7]인돌리지노[1,2-b]퀴놀린-11-일)메틸)-1-메틸피페리딘-1-윰 포르메이트(35)의 합성
Figure pct00123
화합물 34(30mg, 0.053mmol) 및 화합물 7(60mg, 0.079mmol)을 DMF(5mL)에 용해시키고, 약 0℃로 냉각시킨 다음, N,N-디이소프로필에틸아민(18μL, 0.106mmol)을 첨가하였다. 반응을 실온으로 가온하고, 2시간 동안 교반하고, 농축하고, 정제용 HPLC(아세토니트릴/포름산 함유 물)로 정제하여, 화합물 35(15 mg, 21% 수율)를 수득하였다. ESI-MS m/z: [M]+ C62H88FN8O19에 대한 계산치 1267.61; 실측치 1267.61.
실시예 30. (9H-플루오렌-9-일)메틸 4-메틸피페라진-1-카르복실레이트(36)의 합성
Figure pct00124
1-메틸피페라진(5.0g, 50.0mmol)을 1,4-디옥산과 물(60mL/100mL)의 혼합용액에 용해시키고, 탄산수소나트륨(12.6g, 150mmol)을 첨가하고, 혼합물을 0℃로 냉각하였다. 1,4-디옥산(20mL) 중 9-플루오레닐메톡시카르보닐 클로라이드(15.5g, 60.0mmol)의 용액을 적가하였다. 첨가 후, 온도를 점진적으로 실온까지 상승시키고, 반응물을 3시간 동안 교반하였다. 300mL의 1M HCl을 첨가하고, 혼합물을 에틸 아세테이트(2 x 100mL)로 세척하고, 수성상을 탄산나트륨으로 pH ~ 10으로 조정한 다음, 에틸 아세테이트(2 x 100mL)로 추출하였다. 합해진 유기상을 물(250mL)로 세척하고, 황산나트륨으로 건조하고, 여과하고, 농축하고, 칼럼 크로마토그래피(MeOH/디클로로메탄)로 정제하여, 화합물 2(6.5g, 40% 수율)를 수득하였다. ESI-MS m/z: [M + H] + C20H22N2O2에 대한 계산치 323.17; 실측치 323.19.
실시예 31. (S)-4-(((9H-플루오렌-9-일)메톡시)카르보닐)-1-(4-(2-((tert-부톡시카르보닐)아미노)프로판아미도)벤질)-1-메틸피페라진-1-이움 브로마이드(37)의 합성
Figure pct00125
화합물 16(2.3g, 6.4mmol) 및 화합물 36(2.1g, 6.4mmol)을 무수 THF(100mL)에 용해시키고, 실온에서 밤새 교반하였다. 회전증발기에서 대부분의 THF를 제거한 후, 에틸 아세테이트(200mL)를 잔류물에 첨가하였다. 생성된 슬러리를 여과하여, 백색 고체를 수득하였다(3.8g, 87% 수율). ESI-MS m/z: M+ C35H43N4O5에 대한 계산치 599.32; 실측치 599.32.
실시예 32. (S)-1-(4-(2-((tert-부톡시카르보닐)아미노)프로판아미도)벤질)-1-메틸피페라진-1-윰 브로마이드(38)의 합성
Figure pct00126
화합물 37(3.12g, 4.6mmol)을 DMF(25mL)에 용해시키고, 피페리딘(3mL)을 첨가하였다. 실온에서 2시간 동안 교반한 후, 에틸 아세테이트 200mL를 첨가하고, 10분 동안 교반하였다. 혼합물을 여과하여, 백색 고체를 수득하였다(1.54g, 77% 수율). ESI-MS m/z: M+ C20H33N4O3에 대한 계산치 377.26; 실측치 377.26.
실시예 33. 1-(4-((S)-2-((tert-부톡시카르보닐)아미노)프로판아미도)벤질)-4-(((S)-4-에틸-8-플루오로-4-히드록시-9-메톡시-3,14-디옥소-3,4,12,14-테트라히드로-1H-피라노[3',4':6,7]인돌리지노[1,2-b]퀴놀린-11-일)메틸)-1-메틸피페라진-1-이움(39)의 합성
Figure pct00127
DMF(10mL) 중 화합물 38(0.30g, 0.66mmol), 화합물 26d(0.25g, 0.56mmol)의 혼합물을 0℃에서 30분 동안 교반한 다음, N,N-디이소프로필에틸아민(49μL, 0.28mmol)을 첨가하고, 반응을 실온으로 가온하고, 밤새 교반하고, 농축하고, 정제용 HPLC(아세토니트릴/포름산 함유 물)로 정제하여, 화합물 39(0.40g, 80% 수율)를 수득하였다. ESI-MS m/z: M+ C42H50FN6O8에 대한 계산치 785.37; 실측치 785.37.
실시예 34. 1-(4-((S)-2-아미노프로판아미도)벤질)-4-(((S)-4-에틸-8-플루오로-4-히드록시-9-메톡시-3,14-디옥소-3,4,12,14-테트라히드로-1H-피라노[3',4':6,7]인돌리지노[1,2-b]퀴놀린-11-일)메틸)-1-메틸피페라진-1-이움(40)의 합성
Figure pct00128
화합물 39(0.30g, 0.35mmol)를 디클로로메탄 및 트리플루오로아세트산의 혼합물(3mL/3mL)에 용해시키고, 실온에서 30분 동안 교반하였다. 그 다음, 혼합물을 농축하고 진공 펌프에서 건조시켜, 화합물 40(0.27g, 100% 수율)을 황색 고체로서 수득하였다. ESI-MS m/z: M+ C37H42FN6O6에 대한 계산치 477.21; 실측치 477.21.
실시예 35. 1-(4-((S)-2-(4-(2,5-디옥소-2,5-디히드로-1H-피롤-1-일)부탄아미도)프로판아미도)벤질)-4-(((S)-4-에틸-8-플루오로-4-히드록시-9-메톡시-3,14-디옥소-3,4,12,14-테트라히드로-1H-피라노[3',4':6,7]인돌리지노[1,2-b]퀴놀린-11-일)메틸)-1-메틸피페라진-1-이움 포르메이트(41)의 합성
Figure pct00129
화합물 40(50mg, 0.065mmol) 및 화합물 4(30mg, 0.098mmol)를 DMF(3mL)에 용해시키고, N,N-디이소프로필에틸아민(45μL, 0.26mmol)을 첨가하였다. 반응물을 실온에서 30분 동안 교반하고, 농축하고, 분취용 C-18 HPLC(아세토니트릴/포름산 함유 물)로 정제하여, 화합물 41(37 mg, 61% 수율)을 수득하였다. ESI-MS m/z: M+ C45H49FN7O9에 대한 계산치 850.36; 실측치 850.36.
실시예 36. 1-(4-((30S,38S)-30-(4-(2,5-디옥소-2,5-디히드로-1H-피롤-1-일)부탄아미도)-38-메틸-27,31,36-트리옥소-2,5,8,11,14,17,20,23-옥타옥사-26,32,37-트리아자노나트리아콘탄아미도)벤질)-4-(((S)-4-에틸-8-플루오로-4-히드록시-9-메톡시-3,14-디옥소-3,4,12,14-테트라히드로-1H-피라노[3',4':6,7]인돌리지노[1,2-b]퀴놀린-11-일)메틸)-1-메틸피페라진-1-이움 포르메이트(42)의 합성
Figure pct00130
화합물 40(70mg, 0.092mmol)을 DMF(2mL)에 용해시키고, 여기에 DMF(2mL) 중 화합물 7(70mg, 0.092mmol)을 첨가하고, 이어서 HATU(52mg, 0.138mmol) 및 트리에틸아민(52 μL, 0.368mmol)을 순서대로 첨가하고, 반응물을 실온에서 30분 동안 교반하였다. 농축 후, 잔류물을 분취용 HPLC(아세토니트릴/포름산 함유 물)로 정제하여, 화합물 43(50.9 mg, 37% 수율)을 수득하였다. ESI-MS m/z: [M+]+ C71H98FN10O20에 대한 계산치 1429.69; 실측치 1429.69.
실시예 37. 1-(4-((S)-17-(2,5-디옥소-2,5-디히드로-1H-피롤-1-일)-2-메틸-4,14-디옥소-7,10-디옥사-3,13-디아자헵타데칸아미도)벤질)-4-(((S)-4-에틸-8-플루오로-4-히드록시-9-메톡시-3,14-디옥소-3,4,12,14-테트라히드로-1H-피라노[3',4':6,7]인돌리지노[1,2-b]퀴놀린-11-일)메틸)-1-메틸피페라진-1-이움 포르메이트(43)의 합성
Figure pct00131
DMF(1mL) 중 화합물 40(0.10g, 0.13mmol) 및 DMF(2mL) 중의 화합물 12(66mg, 0.13mmol)를 혼합한 후, N,N-디이소프로필에틸아민(90μL, 0.52mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하고, 농축하고, 분취용 HPLC(아세토니트릴/포름산 함유 물)로 정제하여, 화합물 43(50.9 mg, 39% 수율)을 수득하였다. ESI-MS m/z: M+ C52H62N8O12에 대한 계산치 1009.45; 실측치 1009.45.
실시예 38. (S)-3-((tert-부톡시카르보닐)아미노)-2-(2,5-디옥소-2,5-디히드로-1H-피롤-1-일)프로판산(44)의 합성
Figure pct00132
NaHCO3(20mL)의 포화 용액 중 2-아미노-3-((tert-부톡시카르보닐)아미노)프로판산(1g, 4.90mmol)의 용액에, 메틸 2,5-디옥소-2,5-디히드로-1H-피롤-1-카르복실레이트(1.52g, 9.80mmol)를 빙수조에서 첨가하였다. 반응물을 30분 동안 교반한 다음, 100mL의 에틸 아세테이트를 함유하는 분별 깔때기에 붓고, 유기상을 분리하고, 50mL의 물 및 50mL의 염수로 세척하고, 무수 Na2SO4로 건조하고, 여과하고, 농축하여, 화합물 4(1.39g, 수율 72%)를 수득하였다.
실시예 39. (S)-퍼플루오로페닐 3-((tert-부톡시카르보닐)아미노)-2-(2,5-디옥소-2,5-디히드로-1H-피롤-1-일)프로파노에이트(45)의 합성
Figure pct00133
디클로로메탄(30mL)에 용해된 화합물 44(0.10g, 0.35mmol)의 용액에, 펜타플루오로페놀(97mg, 0.52mmol) 및 1-(3-디메틸아미노프로필)-3-에틸카르보디이미드 염산염(0.13g, 0.7mmol)을 첨가하였다. 반응물을 실온에서 2시간 동안 교반하고, 디클로로메탄(50mL)으로 희석하고, 물(200mL)로 세척하고, 황산나트륨으로 건조하고, 여과하고, 농축시켜, 화합물 45(0.16g, 100% 수율)를 수득하였다. ESI-MS m/z: [M+H]+ C18H15F5N2O6에 대한 계산치 451.09; 실측치 451.09.
실시예 40. 화합물 46의 합성
Figure pct00134
화합물 40(0.05g, 0.065mmol) 및 화합물 45(45mg, 0.10mmol)를 DMF(3mL)에 용해시키고, N,N-디이소프로필에틸아민(45μL, 0.26mmol)을 첨가하였다. 반응물을 실온에서 1시간 동안 교반하고, 농축하고, 분취용 HPLC(아세토니트릴/포름산 함유 물)로 정제하여, 화합물 46(35 mg, 52% 수율)을 수득하였다. ESI-MS m/z: M+ C49H56FN8O11에 대한 계산치 951.41; 실측치 951.41.
실시예 41. 1-(4-((S)-2-((S)-3-아미노-2-(2,5-디옥소-2,5-디히드로-1H-피롤-1-일)프로판아미도)프로판아미도)벤질)-4-(((S)-4-에틸-8-플루오로-4-히드록시-9-메톡시-3,14-디옥소-3,4,12,14-테트라히드로-1H-피라노[3',4':6,7]인돌리지노[1,2-b]퀴놀린-11-일)메틸)-1-메틸피페라진-1-이움(47)의 합성
Figure pct00135
화합물 46(35 mg, 0.03 mmol)을 디클로로메탄(2 mL)에 용해시키고, 트리플루오로아세트산(1 mL)으로 처리하였다. 실온에서 1시간 동안 교반한 후, 반응 혼합물을 농축하고, 디클로로메탄으로 2회 공-증발시키고, 진공 펌프에서 건조시켜, 화합물 47(30.4 mg, 96% 수율)을 수득하였다. ESI-MS m/z: M+ C44H48FN8O9에 대한 계산치 851.35; 실측치 851.35.
실시예 42. (S)-tert-부틸 (1-((4-에틸-8-플루오로-4-히드록시-9-메톡시-3,14-디옥소-3,4,12,14-테트라히드로-1H-피라노[3',4':6,7]인돌리지노[1,2-b]퀴놀린-11-일)메틸)피페리딘-4-일)카바메이트(48)의 합성
Figure pct00136
화합물 26d(50mg, 0.11mmol)를 DMF(3mL)에 용해시킨 다음, tert-부틸 피페리딘-4-일카바메이트(25mg, 0.12mmol)를 첨가하고, 실온에서 5시간 동안 교반하였다. 혼합물을 농축하고, 분취용 HPLC(아세토니트릴/포름산 함유 물)로 정제하여, 화합물 48(30 mg, 45% 수율)을 수득하였다. ESI-MS m/z: [M+H]+ C32H37FN4O7에 대한 계산치 609.26; 실측치 609.26.
실시예 43. (S)-11-((4-아미노피페리딘-1-일)메틸)-4-에틸-8-플루오로-4-히드록시-9-메톡시-1H-피라노[3',4':6,7]인돌리지노[1,2-b]퀴놀린-3,14(4H,12H)-디온(49)의 합성
Figure pct00137
화합물 48(30 mg, 0.03 mmol)을 디클로로메탄(2 mL)에 용해시키고, 트리플루오로아세트산(2 mL)으로 처리하였다. 실온에서 1시간 동안 교반한 후, 혼합물을 농축하고, 디클로로메탄으로 2회 공-증발시키고, 진공 펌프에서 건조시켜, 화합물 49(25.4 mg, 100% 수율)를 수득하였다. ESI-MS m/z: [M+H]+ C27H30FN45에 대한 계산치 509.21; 실측치 509.21.
실시예 44. (S)-2-(4-(2,5-디옥소-2,5-디히드로-1H-피롤-1-일)부탄아미도)-N1-(4-((1-(((S)-4-에틸-8-플루오로-4-히드록시-9-메톡시-3,14-디옥소-3,4,12,14-테트라히드로-1H-피라노[3',4':6,7]인돌리지노[1,2-b]퀴놀린-11-일)메틸)피페리딘-4-일)아미노)-4-옥소부틸)-N5-(2,5,8,11,14,17,20,23-옥타옥사펜타코산-25-일)펜탄디아미드(50)의 합성
Figure pct00138
화합물 49(25.4mg, 0.05mmol)를 DMF(2mL)에 용해시키고, 여기에 화합물 7(38.1mg, 0.05mmol)을 첨가하고, 이어서 HATU(28.5mg, 0.08mmol) 및 트리에틸아민(14μL, 0.1mmol)을 순서대로 첨가하고, 반응물을 실온에서 1시간 동안 교반하고, 농축하고, 분취용 HPLC(아세토니트릴/포름산 함유 물)로 정제하여, 화합물 50(14.4 mg, 23% 수율)을 수득하였다. ESI-MS m/z: [M+H]+ C61H85FN8O19에 대한 계산치 1253.59; 실측치 1253.59.
실시예 45. tert-부틸 비스(2-(2,2,2-트리플루오로아세트아미도)에틸)카바메이트(51)의 합성
Figure pct00139
디클로로메탄(120 mL) 중 디에틸렌트리아민(6.18 g, 60 mmol)의 용액에, 디클로로메탄(60 mL) 중 에틸 트리플루오로아세테이트(18.75 g, 132 mmol)의 용액을 0℃에서 적가하였다. 용액을 30분 동안 교반한 다음, 실온으로 가온하고, 1시간 동안 교반하였다. 디클로로메탄(60mL) 중 디-tert-부틸 디카보네이트(28.78g, 132mmol) 및 트리에틸아민(13.33g, 132mmol)의 용액을 실온에서 적가하고, 밤새 교반하였다. 반응 혼합물을 포화 탄산나트륨(2×200mL), 물(2×200mL), 염수(200mL)로 세척하고, 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 잔류물을 실리카겔 칼럼(석유 에테르/에틸 아세테이트)으로 정제하여, 백색 고체를 수득하였다(17.4g, 73.3% 수율). ESI-MS m/z: [M+H]+ C13H19F6N3O4에 대한 계산치 396.30; 실측치 396.28.
실시예 46. tert-부틸 비스(2-아미노에틸)카바메이트(52)의 합성
Figure pct00140
화합물 51(4.28g, 10.8mmol)을 MeOH(50mL)에 용해시키고, 물(50mL) 중 수산화나트륨(5.42g, 135mmol)의 용액과 함께 실온에서 3시간 동안 교반하였다. 반응물을 농축하고, 디클로로메탄(3 x 100mL)으로 추출하고, 유기상을 염수(100mL)로 세척하고, 황산나트륨으로 건조하고, 여과하고, 농축하여, 화합물 3(1.8g, 82% 수율)을 수득하였다. ESI-MS m/z: [M+H]+ C9H21N3O2에 대한 계산치 204.28; 실측치 204.12.
실시예 47. 4,4'-((((tert-부톡시카르보닐)아잔디일)비스(에탄-2,1-디일))비스(아잔디일))비스(4-옥소부탄산)(53)의 합성
Figure pct00141
화합물 52(1.8g, 8.8mmol)를 디클로로메탄(150mL)에 용해시키고, 여기에 숙신산 무수물(2.2g, 22.1mmol)을 첨가하였다. 실온에서 밤새 교반한 후, 반응물을 농축시키고, 디클로로메탄/MeOH로 용리시키면서 실리카 겔 칼럼 상에서 정제하여, 화합물 53(2.99g, 84% 수율)을 수득하였다. ESI-MS m/z: [M + H] + C17H29N3O8에 대한 계산치 404.43; 실측치 404.11.
실시예 48. 비스((S)-4-에틸-4-히드록시-3,14-디옥소-3,4,12,14-테트라히드로-1H-피라노[3',4':6,7]인돌리지노[1,2-b]퀴놀린-9-일) 4,4'-((((tert-부톡시카르보닐)아잔디일)비스(에탄-2,1-디일))비스(아잔디일))비스(4-옥소부타노에이트) (54)의 합성
Figure pct00142
DMF(100mL) 중의 화합물 53(853mg, 2.1mmol) 및 화합물 5(1.71g, 4.7mmol)의 용액에, 트리에틸아민(948mg, 9.4mmol) 및 HATU(1.79g, 4.7mmol)를 순서대로 첨가하였다. 생성된 혼합물을 밤새 교반한 다음, 농축하고, 실리카겔 칼럼(디클로로메탄/MeOH)으로 정제하여, 화합물 54(2.84g, 100% 수율)를 수득하였다. ESI-MS m/z: [M+H]+ C57H57N7O16에 대한 계산치 1097.10; 실측치 1097.65.
실시예 49. 비스((S)-4-에틸-4-히드록시-3,14-디옥소-3,4,12,14-테트라히드로-1H-피라노[3',4':6,7]인돌리지노[1,2-b]퀴놀린-9-일)4,4'-((아잔디일비스(에탄-2,1-디일))비스(아잔디일))비스(4-옥소부타노에이트)(55)의 합성
Figure pct00143
화합물 54(2.84g, 2.1mmol)를 디클로로메탄(40mL)에 용해시키고, 트리플루오로아세트산(20mL)을 첨가하였다. 반응물을 실온에서 1시간 동안 교반하고 농축하여, 화합물 55(3.3g, 100% 수율)를 수득하였다. ESI-MS m/z: [M+H]+ C52H49N7O14에 대한 계산치 996.98; 실측치 996.60.
실시예 50. (S)-(S)-4-에틸-4-히드록시-3,14-디옥소-3,4,12,14-테트라히드로-1H-피라노[3',4':6,7]인돌리지노[1,2-b]퀴놀린-9-일 30-(4-(2,5-디옥소-2,5-디히드로-1H-피롤-1-일)부탄아미도)-37-(2-(4)-(((S)-4-에틸-4-히드록시-3,14-디옥소-3,4,12,14-테트라히드로-1H-피라노[3',4':6,7]인돌리지노[1,2-b]퀴놀린-9-일)옥시)-4-옥소부탄아미도)에틸)-27,31,36,41-테트라옥소-2,5,8,11,14,17,20,23-옥타옥사-26,32 ,37,40-테트라아자테트라테트라콘탄-44-오에이트(56)의 합성
Figure pct00144
DMF(20mL) 중의 화합물 55(614mg, 0.60mmol) 및 화합물 53(470mg, 0.60mmol)의 용액에, 트리에틸아민(249mg, 2.5mmol) 및 HATU(234mg, 0.60mmol)를 순서대로 첨가하였다. 생성된 혼합물을 40분 동안 교반한 다음, 농축하고, 실리카겔 칼럼(MeOH/디클로로메탄)으로 정제하여, 화합물 56(46 mg, 5% 수율)을 수득하였다. ESI-MS m/z: [M+H]+ C86H105N11O28에 대한 계산치 17410.81; 실측치 1742.01.
실시예 51. (S)-4-에틸-4-히드록시-9-메톡시-1H-피라노[3',4':6,7]인돌리지노[1,2-b]퀴놀린-3,14(4H,12H)-디온(57)의 합성
Figure pct00145
10-하이드록시캄프토테신(2.5g, 6.86mmol)을 DMF(150mL)에 용해시키고, 여기에 탄산칼륨(1.90g, 13.72mmol) 및 요오드화메틸(1.17g, 8.23mmol)을 첨가하고, 반응물을 실온에서 밤새 교반하였다. 반응 혼합물에 석유 에테르(150mL) 및 에틸 아세테이트(150mL)의 혼합 용매를 첨가하고 교반하였다. 황색 고체가 침전되었고 여과에 의해 수집된 다음, 물(20 mL)에 분산되었다. 1N 염산을 pH 7이 될 때까지 적가하고, 혼합물을 다시 여과하여, 화합물 57(1.0g, 38% 수율)을 수득하였다. ESI-MS m/z: [M+H]+ C21H18N2O5에 대한 계산치 379.38; 실측치 379.05.
실시예 52. 비스((S)-4-에틸-9-메톡시-3,14-디옥소-3,4,12,14-테트라히드로-1H-피라노[3',4':6,7]인돌리지노[1,2-b]퀴놀린-4-일)(((tert-부톡시카르보닐)아잔디일)비스(에탄-2,1-디일))디카르바메이트(59)의 합성
Figure pct00146
화합물 57(350mg, 0.9mmol), 4-디메틸아미노피리딘(339mg, 2.8mmol) 및 트리포스겐(93mg, 0.34mmol)을 N2하에서 부수고 균일하게 혼합한 후, 무수 디클로로메탄(8mL)을 적가하고, 10분 동안 교반하였다. 무수 디클로로메탄(4mL)에 용해된 화합물 52(64mg, 0.34mmol)의 용액을 혼합물에 첨가한 다음, 트리에틸아민(93mg, 0.9mmol)을 첨가하였다. 15분 동안 교반한 후, 용액을 농축하고, 실리카겔 칼럼(MeOH/디클로로메탄)으로 정제하여, 화합물 59(200 mg, 22% 수율)를 수득하였다. [M+H]+ C53H53N7O14에 대한 계산치 1013.03; 실측치 1013.26.
실시예 53. 비스((S)-4-에틸-9-메톡시-3,14-디옥소-3,4,12,14-테트라히드로-1H-피라노[3',4':6,7]인돌리지노[1,2-b]퀴놀린-4-일)(아잔디일비스(에탄-2,1-디일))디카르바메이트(60)의 합성
Figure pct00147
화합물 59(200mg, 0.2mmol)를 디클로로메탄(10mL)에 용해시키고, 트리플루오로아세트산(5mL)으로 4시간 동안 처리하였다. 반응 혼합물을 농축하여, 화합물 60(0.43g, 100% 수율)을 수득하였다. ESI-MS m/z: [M+H]+ C48H45N7O12에 대한 계산치 912.91; 실측치 912.62.
실시예 54. 비스((S)-4-에틸-9-메톡시-3,14-디옥소-3,4,12,14-테트라히드로-1H-피라노[3',4':6,7]인돌리지노[1,2-b]퀴놀린-4-일)(((4-(2,5-디옥소-2,5-디히드로-1H-피롤-1-일)부타노일)아잔디일)비스(에탄-2,1-디일))디카르바메이트(61)의 합성
Figure pct00148
디클로로메탄(10mL) 중의 화합물 59(249mg, 0.27mmol) 및 화합물 7(60mg, 0.32mmol)의 용액에, 트리에틸아민(112μL, 0.81mmol) 및 HATU(104mg, 0.27mmol)를 첨가하였다. 반응물을 40분 동안 교반한 다음, 물(20mL)로 세척하였다. 유기상을 농축하고 분취용 HPLC(아세토니트릴/포름산 함유 물)로 정제하여, 화합물 61(50 mg)을 얻었다. ESI-MS m/z: [M+H]+ C56H52N8O15에 대한 계산치 1078.06; 실측치 1078.77.
실시예 55. (S)-N,N'-(((((2S,20S)-11-(tert-부톡시카르보닐)-2,20-디메틸-4,7,15,18-테트라옥소-3,8,11,14,19-펜타아자헤니코산-1,21-디오일)비스(아잔디일))비스(4,1-페닐렌))비스(메틸렌))비스(1-(((S)-4-에틸-8-플루오로-4-히드록시-9-메톡시-3,14-디옥소-3,4,12,14-테트라히드로-1H-피라노[3',4':6,7]인돌리지노[1,2-b]퀴놀린-11-일)메틸)-N,N-디메틸피페리딘-4-아미늄)(62)의 합성
Figure pct00149
화합물 40(96mg, 0.132mmol) 및 화합물 53(26mg, 0.066mmol)을 DMF(3mL)에 용해시키고, 0℃로 냉각시켰다. HATU(50 mg, 0.132 mmol)) 및 N,N-디이소프로필에틸아민(46 μL, 0.264 mmol)을 첨가하고, 첨가 완료 후 반응물을 0℃에서 30분 동안 교반하였다. 조 반응 혼합물을 분취용 HPLC(아세토니트릴/포름산 함유 물)(아세토니트릴/0.1% 포름산 함유 물)에서 직접 정제하여, 화합물 62(80 mg, 67% 수율)를 수득하였다. ESI-MS m /z: [M]2+ C91H109F2N15O18에 대한 계산치 868.90; 실측치 868.90.
실시예 56. (S)-N,N'-(((((2S,20S)-2,20-디메틸-4,7,15,18-테트라옥소-3,8,11,14,19-펜타아자헤니코산-1,21-디오일)비스(아잔디일))비스(4,1-페닐렌))비스(메틸렌))비스(1-(((S)-4-에틸-8-플루오로-4-히드록시-9-메톡시-3,14-디옥소-3,4,12,14-테트라히드로-1H-피라노[3',4':6,7]인돌리지노[1,2-b]퀴놀린-11-일)메틸)-N,N-디메틸피페리딘-4-아미늄)(63)의 합성
Figure pct00150
화합물 62(80 mg, 0.043 mmol)를 디클로로메탄 및 트리플루오로아세트산의 혼합물(3 mL/1 mL)에 용해시키고, 실온에서 30분 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 농축하여, 화합물 63(100% 수율)을 수득하였다. ESI-MS m/z: [M]2+ C86H101F2N15O16에 대한 계산치 818.87; 실측치818.87.
실시예 57. (S)-N,N'-(((((2S,20S)-11-((S)-30-(4-(2,5-디옥소-2,5-디히드로-1H-피롤-1-일)부탄아미도)-27,31-디옥소-2,5,8,11,14,17,20,23-옥타옥사-26,32-디아자헥사트리아콘탄-36-오일)-2,20-디메틸-4,7,15,18-테트라옥소-3,8,11,14,19-펜타아자헤니코산-1,21-디오일)비스(아잔디일))비스(4,1-페닐렌))비스(메틸렌))비스( 1-(((S)-4-에틸-8-플루오로-4-히드록시-9-메톡시-3,14-디옥소-3,4,12,14-테트라히드로-1H-피라노[3',4':6,7]인돌리지노[1,2-b]퀴놀린-11-일)메틸)-N,N-디메틸피페리딘-4-아미늄)(64)의 합성
Figure pct00151
DMF(3 mL) 중의 화합물 63(74 mg, 0.043 mmol) 및 화합물 7(39 mg, 0.0516 mmol)의 용액에, N,N-디이소프로필에틸아민(15 μL, 0.086 mmol)을 0℃에서 첨가하였다. 반응을 실온으로 가온하고, 2시간 동안 교반하였다. 농축 후, 잔류물을 정제용 HPLC(아세토니트릴/포름산 함유 물)로 정제하여, 화합물 64(12 mg)를 수득하였다. ESI-MS m/z: [M+]2+ C120H157F2N19O30에 대한 계산치 1191.06; 실측치 1191.06.
실시예 58. (S)-4-에틸-8-플루오로-4,9-디히드록시-11-메틸-1H-피라노[3',4':6,7]인돌리지노[1,2-b]퀴놀린-3,14(4H,12H)-디온(103)의 합성
Figure pct00152
1-(2-아미노-4-플루오로-5-하이드록시페닐)에타논(0.41g, 2.5mmol) 및 화합물 25(0.62g, 2.5mmol)를 무수 톨루엔(40mL)에 용해시키고, p-톨루엔설폰산(46) mg, 0.25mmol)을 첨가하였다. 현탁액을 3일 동안 환류 가열하고 실온으로 냉각되도록 하였다. 용매를 제거한 후, 잔류물을 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 103(0.69g, 73% 수율)을 회색 분말 고체로 얻었다. ESI-MS m/z: [M+H]+ C21H17FN2O5에 대한 계산치 397.11; 실측치 397.16.
실시예 59. (S)-9-(2-브로모에톡시)-4-에틸-8-플루오로-4-히드록시-11-메틸-1H-피라노[3',4':6,7]인돌리지노[1,2-b]퀴놀린-3,14(4H,12H)-디온(104)의 합성
Figure pct00153
무수 DMF(10mL) 중의 화합물 103(0.69g, 1.74mmol), 무수 1,2-디브로모에탄(6.4g, 34.8mmol), 및 무수 K2CO3(1.2g, 8.7mmol)의 혼합물을 80℃에서 16시간 동안 기계적으로 교반하였다. 반응 혼합물을 셀라이트 패드를 통해 여과하고, 여과된 잔류물을 DMF로 잘 세척하였다. 합해진 여과액 및 세척액을 진공에서 증발 건조시켜, 어두운 잔류물을 얻었다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피(0-5% MeOH/디클로로메탄)로 정제하여, 화합물 104(0.74g, 85%)를 얻었다. ESI-MS m/z: [M+H]+ C23H20BrFN2O5에 대한 계산치 503.05; 실측치 503.05.
실시예 60. (S)-9-(2-브로모에톡시)-4-에틸-8-플루오로-4-히드록시-11-메틸-10-니트로-1H-피라노[3',4':6,7]인돌리지노[1,2-b]퀴놀린-3,14(4H,12H)-디온(105)의 합성
Figure pct00154
0℃의 교반된 농축 H2SO4(1mL)에, 화합물 104(0.74g, 1.47mmol)를 천천히 첨가하고, 생성된 투명한 용액을 -10℃로 냉각시켰다. -10℃로 미리 냉각된 진한 H2SO4(0.5mL) 및 발연(fuming) HNO3(0.5mL)의 혼합물을, 상기 냉각된 반응 혼합물에 -10℃에서 적가하였다. 반응 혼합물을 0℃로 가온하고, 추가로 1시간 동안 교반한 다음, 얼음 조각에 천천히 부었다. 황색 침전물을 여과하고, H2O, 차가운 EtOH 및 Et2O로 세척하였다. 수성 여과액을 셀라이트 패드를 통해 다시 여과하고, 셀라이트 필터 케이크를 30% MeOH/CH2Cl2(50mL)로 추출하였다. 유기 용매를 증발시켜, 추가의 황색 고체를 얻었다. 합해진 황색 고체를 EtOH로 분쇄하여(trituration), 화합물 105(0.74g, 92%)를 수득하였다. ESI-MS m/z [M+H]+: C23H19BrFN3O7에 대한 계산치 548.04; 실측치 548.14.
실시예 61. (S)-10-아미노-9-(2-브로모에톡시)-4-에틸-8-플루오로-4-히드록시-11-메틸-1H-피라노[3',4':6,7]인돌리지노[1,2-b]퀴놀린-3,14(4H,12H)-디온(106)의 합성
Figure pct00155
0℃의 교반된 진한 HCl 용액(18mL)에, 화합물 105(0.50g, 0.91mmol)를 소량씩 첨가하고, 생성된 투명한 용액을 15분 후에 -10℃로 냉각시켰다. 반응 혼합물에 SnCl2(0.86g, 4.55mmol)를 소량씩 첨가하고, 반응 혼합물을 실온으로 가온되도록 하고, 1.5시간 동안 교반한 다음, 얼음 조각에 천천히 부었다. 침전물을 여과하고 EtOH 및 Et2O로 세척하고, 수성 여과액을 10% MeOH/CH2Cl2로 추출하였다. 유기 용액을 30% MeOH/CH2Cl2에 용해된 여과된 침전물과 합한 다음, 짧은 SiO2 패드를 통과시키고, 30% MeOH/CH2Cl2로 용리시켰다. 유기 용매를 제거하여, 화합물 106(0.44g, 94%)을 얻었고, 이를 추가 정제 없이 다음 단계에서 사용하였다.
실시예 62. (S)-9-에틸-5-플루오로-9-히드록시-16-메틸-2,3,12,15-테트라히드로-[1,4]옥사지노[3,2-f]피라노[3',4':6,7]인돌리지노[1,2-b]퀴놀린-10,13(1H,9H)-디온(107)의 합성
Figure pct00156
DMSO(4mL) 및 NaHCO3(0.10g, 1.19mmol) 중 화합물 106(0.44g, 0.85mmol)의 용액을 70℃에서 4시간 동안 교반하고, HCl(0.1M, 8ml) 및 H2O(40mL)로 희석하였다. 침전된 고체를 여과하고 소량의 10% MeOH/CH2Cl2에 용해시키고, (1:20 - 1:6) MeOH/CH2Cl2를 용리액으로 사용하는 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 107(0.24g, 66%)을 수득하였다. ESI-MS m/z: [M+H]+ C23H20FN3O5에 대한 계산치 438.14; 실측치 438.14.
실시예 63. (S)-tert-부틸 (2-(9-에틸-5-플루오로-9-히드록시-16-메틸-10,13-디옥소-2,3,9,10-테트라히드로-[1,4]옥사지노[3,2-f]피라노[3',4':6,7]인돌리지노[1,2-b]퀴놀린-1(12H,13H,15H)-일)에틸)카바메이트(108)의 합성
Figure pct00157
무수 DMF(2mL) 중 화합물 107(0.20g, 0.456mmol)의 교반된 용액에, NaI(0.68g, 4.56mmol) 및 tert-부틸(2-클로로에틸)카바메이트(0.82g, 4.56mmol)를 첨가하고, 혼합물을 120℃에서 18시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고 진공에서 증발 건조시키고, 칼럼 크로마토그래피(0-5% MeOH/CH2Cl2)로 정제하여, 화합물 108(0.19g, 75%)을 수득하였다. ESI-MS m/z: [M+H]+ C30H33FN4O7에 대한 계산치 581.23; 실측치 581.40.
실시예 64. (S)-1-(2-아미노에틸)-9-에틸-5-플루오로-9-히드록시-16-메틸-2,3,12,15-테트라히드로-[1,4]옥사지노[3,2-f]피라노[3',4':6,7]인돌리지노[1,2-b]퀴놀린-10,13(1H,9H)-디온(109)의 합성
Figure pct00158
디클로로메탄(5 mL) 중 화합물 108(0.19 g, 0.327 mmol)의 용액에, TFA(2.5 mL)를 첨가하고, 반응물을 실온에서 30분 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 농축하고, 디클로로메탄과 함께 3회 공-증발시켜, 화합물 109를 얻었으며, 이를 추가 정제 없이 다음 단계에서 사용하였다.
실시예 65. 화합물 110의 합성
Figure pct00159
이전 단계의 화합물 109 및 화합물 7(0.45g, 0.49mmol)을 DMF(5mL)에 용해시키고, 약 0℃로 냉각시킨 다음, N,N-디이소프로필에틸아민(172μL, 0.98mmol)을 첨가하였다. 반응을 실온으로 가온하고, 2시간 동안 교반하고, 농축하고, 정제용 HPLC(아세토니트릴/포름산 함유 물)로 정제하여, 화합물 110(359 mg, 60% 수율)을 수득하였다. ESI-MS m/z: [M+H]+ C59H81FN8O19에 대한 계산치 1224.56; 실측치 1224.78.
실시예 66. 디-tert-부틸 4,4'-(((2R,3S)-2,3-비스(((벤질옥시)카르보닐)-아미노)숙시닐)비스(아잔디일))디부타노에이트(172)의 합성
Figure pct00160
DMA(70mL) 중 화합물 171(4.25g, 10.21mmol)의 용액에, tert-부틸 4-아미노부타노에이트(3.25g, 20.42mmol), DMAP(4.47g, 36.65mmol) 및 EDC·HCl(7.00g, 36.65mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 밤새 교반하고, 농축하고, EtOAc/CH2Cl2(1:10)로 용리되는 SiO2 칼럼에서 정제하여, 화합물 172(6.50g, 91% 수율)를 수득하였다. EESI-MS m/z: [M+H]+ C36H50N4O10에 대한 계산치 699.35; 실측치 699.55.
실시예 67. 디-tert-부틸 4,4'-(((2R,3S)-2,3-디아미노숙시닐)-비스(아잔디일))디부타노에이트(173)의 합성
Figure pct00161
MeOH(100mL) 중 화합물 172(2.50g, 3.58mmol)의 용액에, 10% Pd/C(0.30g, 50% 습윤)를 첨가하고, 혼합물을 수소 대기 하에 실온에서 18시간 동안 교반하였다. 그 다음, Pd/C 촉매를 셀라이트 상에서 여과하여 제거하고, 필터 케이크를 MeOH(~70 mL)로 세척하였다. 여과액을 농축하여, 화합물 173을 황색 발포체로서 수득하고, 이를 추가 정제 없이 다음 단계에서 사용하였다(1.54g, 100% 수율). ESI-MS m/z: [M+H]+ C20H38N2O6에 대한 계산치 431.28; 실측치 431.50.
실시예 68. 디-tert-부틸 4,4'-(((2R,3R)-2,3-비스(4-(2,5-디옥소-2,5-디히드로-1H-피롤-1-일)부탄아미도)숙시닐)비스(아잔디일)디부타노에이트(174)의 합성
Figure pct00162
DMF(60mL) 중 4-(2,5-디옥소-2,5-디하이드로-1H-피롤-1-일)부탄산(1.35g, 7.39mmol) 및 화합물 173(1.54g, ~3.58mmol)의 용액에, N,N-디이소프로필에틸아민(2.2mL, 12.56mmol) 및 HATU(4.77g, 12.56mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 밤새 교반하고, 농축하고, EtOAc/CH2Cl2(1:10)로 용리되는 SiO2 칼럼 상에서 정제하여, 표제 화합물을 수득하였다(2.35g, 86% 수율). ESI-MS m/z [M+H]+: C34H52N6O12에 대한 계산치 761.36, 실측치 761.36.
실시예 69. 4,4'-(((2R,3R)-2,3-비스(4-(2,5-디옥소-2,5-디히드로-1H-피롤-1-일)부탄아미도)숙시닐)비스(아잔디일))디부탄산(175)의 합성
Figure pct00163
디클로로메탄(20mL) 중 화합물 174(2.30g, 3.02mmol)의 교반된 용액에, TFA(10mL)를 첨가하였다. 혼합물을 30분 동안 교반하고, 톨루엔(20mL)으로 희석하고, 농축하여, 표제 화합물(1.69g, 86% 수율)을 수득하였다. ESI-MS m/z [M+H]+: C28H36N6O12에 대한 계산치 649.24, 실측치 649.30.
실시예 70. 비스(2,5-디옥소피롤리딘-1-일)4,4'-(((2R,3R)-2,3-비스(4-(2,5-디옥소-2,5-디히드로-1H-피롤-1-일)부탄아미도)숙시닐)비스(아잔디일))디부타노에이트(176)의 합성
Figure pct00164
DMA(30mL) 중 화합물 175(1.10g, 1.69mmol)의 용액에, N-히드록시숙신이미드(1-히드록시피롤리딘-2,5-디온)(0.58g, 5.08mmol) 및 EDC·HCl(1.25g, 6.54mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 밤새 교반하고, 농축하고, EtOAc/CH2Cl2(1:10)로 용리되는 SiO2 칼럼 상에서 정제하여, 표제 화합물을 수득하였다(1.30g, 91% 수율). ESI-MS m/z [M+H]+ : C36H42N8O16에 대한 계산치 843.27, 실측치 843.50.
실시예 71. (S)-N,N'-(((((2S,10S,11S,19S)-10,11-비스(4-(2,5-디옥소-2,5-디히드로-1H-피롤-1-일)부탄아미도)-2,19-디메틸-4,9,12,17-테트라옥소-3,8,13,18-테트라아자이코산-1,20-디오일)비스(아잔디일))비스(4,1-페닐렌))비스(메틸렌))비스(1-(((S)-4-에틸-8-플루오로-4-히드록시-9-메톡시-3,14-디옥소-3,4,12,14-테트라하이드로-1H-피라노[3',4':6,7]인돌리지노[1,2-b]퀴놀린-11-일)메틸)-N,N-디메틸피페리딘-4-아미늄)(177)의 합성
Figure pct00165
화합물 28(94mg, 0.12mmol) 및 화합물 176(55mg, 0.066mmol)을 DMA(5mL)에 용해시키고, 약 0℃로 냉각시킨 다음, N,N-디이소프로필에틸아민(84μL, 0.48mmol)을 첨가하였다. 반응을 실온으로 가온하고, 2시간 동안 교반하고, 농축하고, 정제용 HPLC(아세토니트릴/포름산 함유 물)로 정제하여, 화합물 177(23 mg, 19% 수율)을 수득하였다. ESI-MS m/z: M2+ C106H124F2N18O22에 대한 계산치 1019.46; 실측치 1019.50.
실시예 72. 3-옥소-1-페닐-2,7,10,13,16-펜타옥사-4-아자노나데칸-19-오익산(oic acid)(179)의 합성
Figure pct00166
500mL 플라스크에서, H2N-PEG4-CH2CH2CO2H(3.0g, 11.3mmol, 1.0eq.)와 K2CO3(4.7g, 33.93mmol, 3.0eq.)를 물 50mL에 용해시키고, 빙수조에서 냉각시켰다. THF 50mL 중 CbzCl(2.50g, 14.7mmol, 1.3 eq.)을 적가하였다. 반응을 실온으로 가온하고, 밤새 교반하였다. 반응 혼합물을 1N KHSO4로 pH 4-5로 조정하고, 디클로로메탄(200mL × 1, 100mL × 3)으로 추출하고, 물(500mL) 및 염수(500mL)로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 농축시켰다. 잔류물을 소량의 디클로로메탄에 용해시키고, 2-4% MeOH/디클로로메탄으로 용리되는 실리카겔 칼럼에 로딩하고, 분획(fractions)을 합하고 농축하여, 무색 오일 3.8g(수율 84%)을 수득하였다. ESI-MS m/z [M+H]+: C19H29NO8에 대한 계산치 400.2, 실측치: 400.2.
실시예 73. 2,5-디옥소피롤리딘-1-일 3-옥소-1-페닐-2,7,10,13,16-펜타옥사-4-아자노나데칸-19-오에이트(180)의 합성
Figure pct00167
50mL의 드라이 디클로로메탄 중 CbzHN-PEG4-CH2CH2CO2H(3.8g, 9.5mmol, 1.0 eq.)의 용액에, N-히드록시숙신이미드(1.3g, 11.4mmol, 1.2 eq.) 및 EDC·HCl(9.1g, 47.5mmol, 5.0 eq.)을 첨가하였다. 반응물을 실온에서 밤새 교반한 다음, 물(50mL × 2), 염수(100mL × 1)로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조하고, 농축하였다. 조 생성물을 다음 단계에서 직접 사용하였다. ESI-MS m/z [M+H]+: C23H32N2O10에 대한 계산치 497.2, 실측치: 497.2.
실시예 74. 3,19-디옥소-1-페닐-2,7,10,13,16,23,26,29,32-노나옥사-4,20-디아자펜타트리아콘탄-35-오익산(181)의 합성
Figure pct00168
300mL 플라스크에서, H2N-PEG4-CH2CH2CO2H(2.6g, 9.5mmol, 1.0 eq.) 및 K2CO3(3.9g, 28.5mmol, 3.0 eq.)를 40mL의 물에 용해시키고, 빙수조에서 냉각시키고, 40mL의 THF 중 상기 조 N-히드록시숙신이미드 에스테르 용액(3.8g, 9.5mmol)을 적가하고, 혼합물을 실온으로 가온하고, 밤새 교반하였다. 반응 혼합물을 1N KHSO4를 사용하여 pH 4-5로 조정하고, 디클로로메탄(150mL × 1, 100mL × 2)으로 추출하고, 물(200mL) 및 염수(200mL)로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 농축시켰다. 잔류물을 소량의 디클로로메탄에 용해시키고, 4-6% MeOH/디클로로메탄으로 용리되는 실리카겔 칼럼에 로딩하여, 무색 오일(4.91g, 80% 수율)을 수득하였다. ESI-MS m/z [M+H]+: C30H50N2O13에 대한 계산치 646.3, 실측치: 646.3.
실시예 75. tert-부틸 3,19,35-트리옥소-1-페닐-2,7,10,13,16,23,26,29,32,39,42,45,48-트리데카옥사-4,20,36-트리아자헨펜타콘탄-51-오에이트(182)의 합성
Figure pct00169
H2N-PEG4-CH2CH2CO2 t Bu(0.48g, 1.5mmol, 1.0 eq.)를 3mL의 DMF에 용해시키고, 빙수조/물수조에서 냉각시키고, N,N-디이소프로필에틸아민(DIPEA)(0.78g, 6.0mmol, 4.0 eq.)을 적가하고, 이어서 7mL의 DMF 중 화합물 181(0.97g, 1.5mmol, 1.0 eq.) 및 HATU(1.72g, 4.5mmol, 3.0 eq.)의 용액을 적가하였다. 반응물을 빙수조에서 2시간 동안 교반하고, 100mL의 물로 희석하고, 디클로로메탄(100mL × 3)으로 추출하고, 1N KHSO4(200mL), 포화 중탄산나트륨(200mL) 및 염수(200 mL)로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조하고, 농축하였다. 잔류물을 소량의 디클로로메탄에 용해시키고, 실리카겔 칼럼에 로딩하여 0-5% MeOH/디클로로메탄으로 용리시켰다. 분획을 합하고 농축하여, 1.22g의 밝은 황색 오일을 수득하였다(86% 수율). ESI-MS m/z [M+H]+: C45H79N3O18에 대한 계산치 950.5, 실측치: 950.5.
실시예 76. tert-부틸 1-아미노-15,31-디옥소-3,6,9,12,19,22,25,28,35,38,41,44-도데카옥사-16,32-디아자헵타테트라콘탄-47-오트 (183)의 합성
Figure pct00170
디클로로메탄(5 mL) 중 화합물 182(1.22 g, 1.28 mmol)의 용액을 1 atm H2하에서 Pd/C(5% 습윤, 500 mg)와 함께 2시간 동안 교반하였다. 그 다음, 반응물을 셀라이트 상에서 여과하고, 필터 케이크를 MeOH로 세척하였다. 여과액과 세척액을 합하고 농축하여, 밝은 황색 오일을 수득하였다(1.04g, 100% 수율). ESI-MS m/z [M+H]+: C37H73N3O16에 대한 계산치 816.5, 실측치: 816.5.
실시예 77. (50R,51R)-디-tert-부틸 50,51-비스(((벤질옥시)카르보닐)아미노)-17,33,49,52,68,84-헥사옥소-4,7,10,13,20,23,26,29,36,39,42,45,56,59,62,65,72,75,78,81,88,91,94,97-테트라코사옥사-16,32,48 ,53,69,85-헥사아자헥탄-1,100-디오에이트(184)의 합성
Figure pct00171
DMA(10mL) 중 화합물 171(0.26g, 0.64mmol)의 용액에, 디클로로메탄(5mL) 중 화합물 183(1.04g, 1.28mmol)의 용액을 첨가하고, 이어서 DMAP(0.23g, 1.92mmol) 및 EDC·HCl(0.36g, 1.92mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 밤새 교반하고, 농축하고, MeOH/CH2Cl2(1:10)로 용리되는 SiO2 칼럼 상에서 정제하여, 화합물 184(0.81g, 63% 수율)를 수득하였다. ESI-MS m/z: [M+2H]2+ C94H162N8O38에 대한 계산치 1006.55; 실측치 1006.70.
실시예 78. (50R,51R)-디-tert-부틸 50,51-디아미노-17,33,49,52,68,84-헥사옥소-4,7,10,13,20,23,26,29,36,39,42,45,56,59,62,65,72,75,78,81,88,91,94,97-테트라코사옥사-16,32,48,53,69,85-헥사아자헥탄-1,100-디오에이트(185)의 합성
Figure pct00172
MeOH(5 mL) 중 화합물 184(0.81 g, 0.40 mmol)의 용액에, 10% Pd/C(100 mg, 5wt%)를 첨가하고, 혼합물을 수소 대기 하에 실온에서 18시간 동안 교반하였다. 그 다음, 셀라이트 상에서 여과하여 Pd/C 촉매를 제거하고, 필터 케이크를 MeOH로 세척하였다. 여과액 및 세척액을 합하고 농축하여, 화합물 185(0.70g, 100% 수율)를 수득하였다. ESI-MS m/z: [M+2H]2+ C78H150N8O34에 대한 계산치 872.52; 실측치 872.55.
실시예 79. (50R,51R)-디-tert-부틸 50,51-비스(4-(2,5-디옥소-2,5-디히드로-1H-피롤-1-일)부탄아미도)-17,33,49,52,68,84-헥사옥소-4,7,10,13,20,23,26,29,36,39,42,45,56,59,62,65,72,75,78,81,88,91,94,97-테트라코사옥사-16,32,48,53,69,85-헥사아자헥탄-1,100-디오에이트(186), 및 (50S,51S)-50,51-비스(4-(2,5-디옥소-2,5-디히드로-1H-피롤-1-일)부탄아미도)-17,33,49,52,68,84-헥사옥소-4,7,10,13,20,23,26,29,36,39,42,45,56,59,62,65,72,75,78,81,88,91,94,97-테트라코사옥사-16,32,48,53,69,85-헥사아자헥탄-1,100-디오익산(187)의 합성
Figure pct00173
DMF(5mL) 중 4-(2,5-디옥소-2,5-디하이드로-1H-피롤-1-일)부탄산(0.17g, 1.00mmol) 및 화합물 185(0.70g, 0.40mmol)의 용액에, N,N-디이소프로필에틸아민(0.88mL, 5mmol) 및 HATU(1.90g, 12.56mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 밤새 교반하고, 농축하고, 1-10% MeOH/CH2Cl2로 용리되는 SiO2 칼럼 상에서 정제하여, 화합물 186을 오일로서 수득하였다(0.548g, 66% 수율). ESI-MS m/z [M+2H]2+: C94H166N10O40에 대한 계산치 2075.1264; 실측치 2075.1350.
화합물 186(0.54g, 0.26mmol)을 디클로로메탄(5mL)에 용해시키고, TFA(2.5mL)로 처리하였다. 혼합물을 실온에서 30분 동안 교반하고, 톨루엔(20mL)으로 희석하고, 농축하여, 표제 화합물 187(0.488, 96% 수율)을 수득하고, 이를 추가 정제 없이 다음 단계에 사용하였다. ESI-MS m/z [M+H]+: C86H149N10O40에 대한 계산치 1961.9933; 실측치 1961.9987.
실시예 80. (S)-N,N'-(((((2S,53S,54S,105S)-53,54-비스(4-(2,5-디옥소-2,5-디히드로-1H-피롤-1-일)부탄아미도)-2,105-디메틸-4,20,36,52,55,71,87,103-옥타옥소-7,10,13,16,23,26,29,32,39,42,45,48,59,62,65,68,75,78,81,84,91,94,97,100-테트라코사옥사-3,19,35,51,56,72,88,104-옥타아자헥사헥탄-1,106-디올)비스(아잔디일))비스(4,1-페닐렌))비스(메틸렌))비스(1-(((S)-4-에틸-8-플루오로-4-히드록시-9-메톡시-3,14-디옥소-3,4,12,14-테트라하이드로-1H-피라노[3',4':6,7]인돌리지노[1,2-b]퀴놀린-11-일)메틸)-N,N-디메틸피페리딘-4-아미늄)(188)의 합성
Figure pct00174
화합물 28(47mg, 0.060mmol) 및 화합물 187(59mg, 0.030mmol)을 DMA(5mL)에 용해시키고, 약 0℃로 냉각시킨 다음, N,N-디이소프로필에틸아민(21μL, 0.12mmol)을 첨가하였다. 반응을 실온으로 가온하고, 2시간 동안 교반하고, 농축하고, 정제용 HPLC(아세토니트릴/포름산 함유 물)로 정제하여, 화합물 188(36 mg, 36% 수율)을 수득하였다. ESI-MS m/z: M2+ C164H238F2N22O50에 대한 계산치 1675.8279; 실측치 1675.8392.
실시예 81. tert-부틸 2,5,8,11,14,17,20,23,26-노나옥사옥타코산-28-오에이트(191)의 합성
Figure pct00175
NaH(60%, 24g, 600mmol)를 THF(3.0L) 중 옥타에틸렌 글리콜 모노메틸 에테르(115g, 300mmol)의 용액에 첨가하였다. 실온에서 1시간 동안 교반한 후, tert-부틸 2-브로모아세테이트(146g, 750mmol)를 혼합물에 첨가하고, 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 그 다음, 혼합물을 디클로로메탄(4 L)으로 희석하고, 얼음물(2 kg)에 부었다. 유기상을 분리하고, 수성상을 디클로로메탄(1 L)으로 추출하였다. 합해진 유기상을 물로 세척하고, 무수 Na2SO4로 건조시켰다. 칼럼 크로마토그래피(20% EtOAc/PE, 이어서 순수한 디클로로메탄 내지 5% MeOH/디클로로메탄)로 정제하여, 표제 화합물을 황색 오일로서 수득하였다(108 g, 72% 수율).
실시예 82. 2,5,8,11,14,17,20,23,26-노나옥사옥타코산-28-오익산(192)의 합성
Figure pct00176
tert-부틸 2,5,8,11,14,17,20,23,26-노나옥사옥타코산-28-오에이트(210g, 422mmol)를 디클로로메탄(400mL) 및 무수 포름산(1L)에 용해시켰다. 생성된 용액을 실온에서 밤새 교반하였다. 모든 휘발성 물질을 진공 하에 제거하여, 표제 화합물을 황색 오일로서 수득하였다(200g, >100% 수율).
실시예 83. 2,5,8,11,14,17,20,23,26-노나옥사옥타코산-28-오일 클로라이드(193)의 합성
Figure pct00177
디클로로메탄(2.6L)에 용해된 2,5,8,11,14,17,20,23,26-노나옥사옥타코산-28-오익산(198g, 422mmol)의 용액에, (COCl)2(275mL) 및 DMF(0.5mL)를 실온에서 첨가하였다. 생성된 용액을 실온에서 3시간 동안 교반하였다. 모든 휘발성 물질을 진공 하에 제거하여, 표제 화합물을 황색 오일로서 수득하였다(210g, >100% 수율).
실시예 84. (S)-34-(((벤질옥시)카르보닐)아미노)-28-옥소-2,5,8,11,14,17,20,23,26-노나옥사-29-아자펜타트리아콘탄-35-오익산(194)의 합성
Figure pct00178
Z-L-Lys-OH(236g, 844mmol), Na2CO3(89.5g, 844mmol) 및 NaOH(33.8g, 844mmol)를 물(1.6L)에 용해시켰다. 혼합물을 빙염조(ice salt bath)를 사용하여 0℃ 이하로 냉각시키고, 여기에 THF(160 mL) 중 2,5,8,11,14,17,20,23,26-노나옥사옥타코산-28-오일 클로라이드(210g, 422mmol)의 용액를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하고, 그 다음 EtOAc(1 L)로 희석하였다. 수성 층을 분리하고, 여기에 pH 3에 도달할 때까지 빙냉하에 진한 HCl을 첨가하였다. 디클로로메탄으로 추출한 후, 유기 층을 염수로 세척하고, Na2SO4로 건조시키고, 농축시켜, 표제 화합물을 황색 오일로서 수득하였다(290g, 97% 수율).
실시예 85. (S)-퍼플루오로페닐 34-(((벤질옥시)카르보닐)아미노)-28-옥소-2,5,8,11,14,17,20,23,26-노나옥사-29-아자펜타트리아콘탄-35-오트(195)의 합성
Figure pct00179
디클로로메탄(2L) 중 화합물 194(183g, 260mmol)의 용액에, 펜타플루오로페놀(95.4g, 520mmol) 및 DIC(131g, 1.04mol)를 첨가하였다. 반응물을 실온에서 1시간 동안 교반한 다음 농축하여, 조 표제 생성물(430g)을 수득하였다.
실시예 86. (S)-tert-부틸 34-(((벤질옥시)카르보닐)아미노)-28,35-디옥소-2,5,8,11,14,17,20,23,26-노나옥사-29,36-디아자테트라콘탄-40-오에이트(196)의 합성
Figure pct00180
DMF(1.5L) 중 tert-부틸 4-아미노부타노에이트(62.0g, 390mmol)의 용액에, N,N-디이소프로필에틸아민(134g, 1.04mol)을 0℃에서 첨가하였다. 그 다음, 화합물 195(430g, 미정제(조))를 10-20℃에서 첨가하고, 생성된 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. DMF를 진공 하에 제거하고, 잔류물을 디클로로메탄으로 희석하고, 물로 세척하였다. 수성상을 디클로로메탄으로 역-추출하였다(back-extracted). 합해진 유기상을 0.2N HCl 및 염수로 세척하고, 무수 Na2SO4로 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 칼럼 크로마토그래피(25% EtOAc/PE 내지 순수 EtOAc, 이어서 0 내지 5% MeOH/디클로로메탄)로 표제 화합물을 황색 오일로서 수득하였다(180 g, 82% 수율).
실시예 87. (S)-tert-부틸 34-아미노-28,35-디옥소-2,5,8,11,14,17,20,23,26-노나옥사-29,36-디아자테트라콘탄-40-오에이트(197)의 합성
Figure pct00181
MeOH(500mL) 중 화합물 196(78.0g, 92.3mmol, 1.0 eq.)의 용액에, Pd/C(13g, 10% Pd/C, 50% 습윤)를 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 1atm H2하에 밤새 수소화시킨 다음, 여과하고 농축하였다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피(0 내지 20% MeOH/디클로로메탄)로 정제하여, 표제 화합물을 녹색 황색 오일로서 수득하였다(70.2 g, 92% 수율).
실시예 88. (7S,10R,11R,14S)-디-tert-부틸 10,11-비스(((벤질옥시)카르보닐)아미노)-6,9,12,15-테트라옥소-7,14-비스(28-옥소-2,5,8,11,14,17,20,23,26-노나옥사-29-아자트리아콘탄-33-일)-5,8,13,16-테트라아자이코산-1,20-디오에이트( 198)의 합성
Figure pct00182
DMA(10mL) 중 화합물 171(0.85g, 2.00mmol)의 용액에, 디클로로메탄(10mL) 중 화합물 197(3.20g, 4.50mmol), DMAP(1.50g, 12mmol) 및 EDC·HCl(2.3g, 12mmol)의 용액을 첨가하였다. 혼합물을 밤새 교반하고, 농축하고, EtOAc/CH2Cl2(1:10)로 용리되는 SiO2 칼럼 상에서 정제하여, 화합물 198(3.33g, 88% 수율)을 수득하였다. ESI-MS m/z: [M+2H]2+ C86H146N8O32에 대한 계산치 902.50; 실측치 902.55.
실시예 89. (7S,10R,11R,14S)-디-tert-부틸 10,11-비스(4-(2,5-디옥소-2,5-디히드로-1H-피롤-1-일)부탄아미도)-6,9,12,15-테트라옥소-7,14-비스(28-옥소-2,5,8,11,14,17,20,23,26-노나옥사-29-아자트리아콘탄-33-일)-5,8,13,16-테트라아자이코산-1,20-디오에이트(199)의 합성
Figure pct00183
디클로로메탄(50mL) 중 화합물 198(3.33g, 1.76mmol) 및 Pd/C(5wt%, 0.10g)의 혼합물을 1 atm H2 압력 하에 밤새 수소화한 다음, 셀라이트(여과 보조제) 상에서 여과하였다. 여과액을 농축한 후, DMF(10mL)에 용해시키고, 여기에 EDC·HCl(1.00g, 5.28mmol) 및 화합물 4(1.84g, 5.28mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 16시간 동안 교반하고, 농축하고, SiO2 칼럼 크로마토그래피(1:4 MeOH/디클로로메탄)로 정제하여, 오일(2.56g, 78% 수율)을 수득하였다. ESI-MS m/z: [M+2H]2+ C86H148N10O34에 대한 계산치 933.51; 실측치 933.55.
실시예 90. (S)-N,N'-(((((2S,10S,13R,14R,17S,25S)-13,14-비스(4-(2,5-디옥소-2,5)-디히드로-1H-피롤-1-일)부탄아미도)-2,25-디메틸-4,9,12,15,18,23-헥사옥소-10,17-비스(28-옥소-2,5,8,11,14,17,20,23,26-노나옥사-29-아자트리아콘탄-33-일)-3,8,11,16,19,24-헥사아자헥사-코산-1,26-디오일)비스(아잔디일))비스(4,1-페닐렌))비스(메틸렌))비스(1-(((S)-4-에틸-8-플루오로-4-히드록시-9-메톡시-3,14-디옥소-3,4,12,14-테트라하이드로-1H-피라노[3',4':6,7]인돌리지노[1,2-b]퀴놀린-11-일)메틸)-N,N-디메틸피페리딘-4-아미늄) 포름산염 (200)의 합성
Figure pct00184
디클로로메탄(5 mL) 중 화합물 199(1.00 g, 0.536 mmol) 및 포름산(5 mL)의 혼합물을 실온에서 24시간 동안 교반하고, 농축하였다. 그 다음, 잔류물을 DMA(5mL)에 용해시키고, 여기에 화합물 28(0.64g, 0.89mmol), 트리에틸아민(0.15mL, 1.07mmol) 및 HATU(0.41g, 1.07mmol)를 첨가하고, 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 용매를 고 진공하에 제거한 후, 잔류물을 정제용 HPLC(아세토니트릴/포름산 함유 물)(아세토니트릴/물)로 정제하여, 화합물 200(1.06g, 63% 수율)을 수득하였다. ESI-MS m/z: M2+ C156H220F2N22O44에 대한 계산치 1571.78; 실측치 1571.78.
실시예 91. 메틸 4-(비스(2-히드록시에틸)아미노)-4-옥소부타노에이트(202)의 합성
Figure pct00185
무수 톨루엔(500mL) 및 피리딘(50mL)의 혼합물 중 디메틸 숙시네이트(20.0g, 136.9mmol) 및 디하이드록시에틸아민(7.20g, 68.7mmol)을 150℃에서 28시간 동안 가열하였다. 혼합물을 농축하고, 5-25% 에틸 아세테이트/디클로로메탄으로 용리되는 실리카 겔 칼럼 상에서 정제하여, 표제 화합물을 수득하였다 (12.5 g, 83% 수율). ESI-MS m/z 242.42 ([M + Na]+).
실시예 92. 메틸 4-(비스(2-((메틸술포닐)옥시)에틸)아미노)-4-옥소부타노에이트(203)의 합성
Figure pct00186
무수 피리딘(350mL) 중 메틸 4-(비스(2-하이드록시에틸)아미노)-4-옥소부타노에이트(12.0g, 49.56mmol)의 용액에, 메탄술포닐 클로라이드(20.0g, 175.4mmol)를 첨가하였다. 밤새 교반한 후, 혼합물을 농축하고, 에틸 아세테이트(350mL)로 희석하고, 차가운 1M NaH2PO4(2 x 300mL)로 세척하고, Na2SO4로 건조하고, 여과하고, 증발시켜, 조 생성물(~18.8g, >100% 수율)을 수득하였다. 조 생성물을 추가 정제 없이 다음 단계에 사용하였다. ESI-MS m/z 376.06 ([M+H]+).
실시예 93. 3,6-엔독소-Δ-테트라히드로프탈이미드(204)의 합성
Figure pct00187
톨루엔(200mL) 중 말레이미드(10.0g, 103.0mmol)의 용액에, 푸란(10.0mL, 137.4mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 100℃에서 8시간 동안 1L 오토 클레이브 밤(Clave bomb)에서 가열하였다. 밤을 실온으로 냉각시키고, 고체를 MeOH로 헹구고, 농축하고, 에틸 아세테이트/헥산에서 결정화하여, 16.7 g(99%)의 표제 화합물을 수득하였다. 1H NMR(CDCl3): 11.12(s, 1H), 6.68~6.64(m, 2H), 5.18~5.13(m, 2H), 2.97~2.92(m, 2H); ESI-MS m/z 188.04 ([M + Na]+).
실시예 94. 메틸 4-((2-((3aR,4R,7S,7aS)-1,3-디옥소-3a,4,7,7a-테트라히드로-1H-4,7-에폭시이소인돌-2(3H))-일)에틸)(2-((4R,7S,7aS)-1,3-디옥소-3a,4,7,7a-테트라히드로-1H-4,7-에폭시이소인돌-2(3H)-일)에틸)아미노)-4-옥소부타노에이트(205)의 합성
Figure pct00188
DMA(350mL) 중 메틸 4-(비스(2-((메틸술포닐)옥시)에틸)아미노)-4-옥소부타노에이트(203, 신선 제조, 90% 순도, 8.5g, ~20mmol)의 용액에, 3,6-엔독소-Δ-테트라하이드로프탈이미드(204, 10.2g, 61.8mmol), 탄산나트륨(8.0g, 75.5mmol) 및 요오드화나트륨(0.3g, 2.0mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 밤새 교반하고, 농축하고, 에틸 아세테이트(350mL)로 희석하고, 포화 NaHCO3용액(300mL), 염수(300mL) 및 1M NaH2PO4(300mL)로 세척하였다. 유기 층을 황산나트륨으로 건조하고, 여과하고, 증발시키고, 실리카 겔 칼럼 상에 로딩하고, 10-30% 에틸 아세테이트/헥산으로 용리하여, 표제 화합물을 수득하였다 (7.9 g, 77% 수율). ESI-MS m/z 536.4 ([M + Na]+).
실시예 95. 4-(비스(2-(2,5-디옥소-2,5-디히드로-1H-피롤-1-일)에틸)아미노)-4-옥소부탄산(206)의 합성
Figure pct00189
1,2-디클로로에탄(150mL) 중 화합물 205(3.0g, 5.8mmol) 및 트리메틸스탄놀(4.8g, 26.4mmol)을 80℃에서 8시간 동안 환류시킨 다음, 실온으로 냉각시키고, 잔류물을 짧은 실리카겔 칼럼에 통과시키고, 디클로로메탄/MeOH로 용리하여, 과량의 트리메틸주석 수산화물을 제거하였다. 그 다음, 풀링된(pooled) 분획을 합하고 농축하고, DMA 및 톨루엔으로 희석하고, 120°C로 가열하고, 밤새 교반하였다. 반응 혼합물을 실리카 겔 칼럼에 로딩하고, 5-10% MeOH/디클로로메탄으로 용리하여, 표제 화합물을 수득하였다(1.62 g, 76% 수율). ESI-MS m/z 386.2 ([M + Na]+).
실시예 96. 2,5-디옥소피롤리딘-1-일 4-(비스(2-(2,5-디옥소-2,5-디히드로-1H-피롤-1-일)에틸)아미노)-4-옥소부타노에이트(207)의 합성
Figure pct00190
10mL의 DMA 중 화합물 206(1.62g, 4.46mmol, 1.0 eq.)의 용액에, N-하이드록시숙신이미드(0.61g, 5.35mmol, 1.2 eq.) 및 EDC·HCl(1.71g, 8.92mmol, 2.0 eq.)을 첨가하였다. 반응물을 실온에서 밤새 교반한 다음, 물(50mL × 2), 염수(100mL)로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조하고, 농축하여, 오일(2.00g)을 수득하였다. 조 생성물을 다음 단계에서 직접 사용하였다. ESI-MS m/z [M+H]+: C20H20N4O9에 대한 계산치 461.12, 실측치: 461.24.
실시예 97. N-(4-((S)-2-(4-(비스(2-(2,5-디옥소-2,5-디히드로-1H-피롤-1-일)에틸)아미노)-4-옥소부탄아미도)프로판아미도)벤질)-1-(((S)-4-에틸-8-플루오로-4-히드록시-9-메톡시-3,14-디옥소-3,4,12,14-테트라히드로-1H-피라노[3',4':6,7]인돌리지노[1,2-b]퀴놀린-11-일)메틸)-N,N-디메틸피페리딘-4-아미늄(208)의 합성
Figure pct00191
이전 단계의 조 생성물(0.20g)을 DMA(5mL)에 용해시키고, 여기에 화합물 28(0.71g, 1.00mmol) 및 N,N-디이소프로필에틸아민(0.20mL, 1.20mmol)을 0℃에서 첨가하였다. 반응을 실온으로 가온하고, 2시간 동안 교반하고, 농축하고, 정제용 HPLC(아세토니트릴/포름산 함유 물)로 정제하여, 화합물 208(0.85g, 80% 수율)을 수득하였다. ESI-MS m/z: M+ C55H61FN9O12에 대한 계산치 1058.44; 실측치 1058.60.
실시예 98. (S)-tert-부틸 34-(4-(비스(2-(2,5-디옥소-2,5-디히드로-1H-피롤-1-일)에틸)아미노)-4-옥소부탄아미도)-28,35-디옥소-2,5,8,11,14,17,20,23,26-노나옥사-29,36-디아자테트라콘탄-40-오에이트(210)의 합성
Figure pct00192
DMA(20mL) 중 화합물 197(2.98g, 4.20mmol) 및 화합물 206(1.39g, 3.82mmol)의 용액에, EDC·HCl(0.80g, 4.20mmol)을 첨가하였다. 반응물을 실온에서 밤새 교반한 다음, 물(50mL)에 붓고, 에틸 아세테이트(3 x 40mL)로 추출하였다. 합해진 유기상을 염수(40mL)로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조하고, 여과하고, 농축시켰다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피(10-50% 에틸 아세테이트/석유 에테르)로 정제하여, 무색 오일(3.23g, 80% 수율)을 수득하였다. ESI-MS m/z 1057.85 ([M+H]+).
실시예 99. (S)-34-(4-(비스(2-(2,5-디옥소-2,5-디히드로-1H-피롤-1-일)에틸)아미노)-4-옥소부탄아미도)-28,35-디옥소-2,5,8,11,14,17,20,23,26-노나옥사-29,36-디아자테트라콘탄-40-오익산(211)의 합성
Figure pct00193
포름산(10mL) 및 디클로로메탄(5mL) 중 화합물 210(3.20g, 3.03mmol)의 용액을 실온에서 밤새 교반하였다. 그 다음, 용액을 농축하고, 톨루엔과 함께 3회 공-증발시켜, 무색 오일(3.00g, 조 물질)을 얻었고, 이를 추가 정제 없이 사용하였다. ESI-MS m/z 1001.50 ([M+H]+).
실시예 100. (S)-2,5-디옥소피롤리딘-1-일 34-(4-(비스(2-(2,5-디옥소-2,5-디히드로-1H-피롤-1-일)에틸))아미노)-4-옥소부탄아미도)-28,35-디옥소-2,5,8,11,14,17,20,23,26-노나옥사-29,36-디아자테트라콘탄-40-오에이트(212)의 합성
Figure pct00194
DMA(15.0mL) 중 화합물 211(3.00g, 조 물질, 3.03mmol)의 용액에, N-히드록시숙신이미드(0.38g, 3.33mmol) 및 EDC·HCl(0.87g, 4.55mmol)을 첨가하고, 반응물을 실온에서 2시간 동안 교반하고, 물(50mL)로 희석하고, 에틸 아세테이트(3 x 30mL)로 추출하였다. 합해진 유기상을 염수(30mL)로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조하고, 여과하고, 농축시켰다. 잔류물을 실리카겔 칼럼(10-50% 에틸 아세테이트/석유 에테르)으로 정제하여, 무색 오일(2.90g, 90% 수율)을 수득하였다. ESI-MS m/z 1098.50 ([M+H]+).
실시예 101. N-(4-((34S,42S)-34-(4-(비스(2-(2,5-디옥소-2,5-디히드로-1H-피롤-1-일)에틸아미노)-4-옥소부탄아미도)-42-메틸-28,35,40-트리옥소-2,5,8,11,14,17,20,23,26-노나옥사-29,36,41-트리아자트리테트라콘타나미도)벤질) -1-(((S)-4-에틸-8-플루오로-4-히드록시-9-메톡시-3,14-디옥소-3,4,12,14-테트라히드로-1H-피라노[3',4':6,7]인돌리지노[1,2-b]퀴놀린-11-일)메틸)-N,N-디메틸피페리딘-4-아미늄(213)의 합성
Figure pct00195
화합물 212(0.10g, 0.091mmol)를 DMA(5mL)에 용해시키고, 여기에 화합물 28(56.8mg, 0.08mmol) 및 N,N-디이소프로필에틸아민(0.020mL, 0.12mmol)을 0℃에서 첨가하였다. 반응을 실온으로 가온하고, 2시간 동안 교반하고, 농축하고, 정제용 HPLC(아세토니트릴/포름산 함유 물)로 정제하여, 화합물 213(84 mg, 62% 수율)을 수득하였다. ESI-MS m/z: M+ C84H116FN12O24에 대한 계산치 1695.82; 실측치 1695.82.
실시예 102. tert-부틸 2-(2-(1,3-디옥소이소인돌린-2-일)아세틸)히드라진카르복실레이트(216)의 합성
Figure pct00196
0℃에서 디클로로메탄(200mL) 중 Boc-히드라진(7.08.g, 53.5mmol)의 용액에, 트리에틸아민(13.5mL, 97.4mmol) 및 화합물 215(10.8g, 48.7mmol)를 순서대로 첨가하였다. 실온에서 30분 동안 교반한 후, 혼합물을 얼음물(100mL)에 붓고, 디클로로메탄(3 x 100mL)으로 추출하였다. 합해진 유기상을 물(100mL) 및 염수(100mL)로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조하고, 여과하고, 농축하여, 백색 고체를 수득하였다(15.5g, 100% 수율). ESI-MS m/z 320.12 ([M+H]+).
실시예 103. 2-(1,3-디옥소이소인돌린-2-일)아세토히드라지드(217)의 합성
Figure pct00197
화합물 216(15.5g, 48.7mmol)을 1,4-디옥산(150mL)에 용해시키고, 실온에서 1시간 동안 25% HCl(50mL)로 처리하였다. 반응 혼합물을 농축한 다음, 톨루엔과 함께 공-증발시켜, 백색 고체를 수득하였다(10.6g, 100% 수율). ESI-MS m/z 220.06 ([M+H]+).
실시예 104. 2-(1,3-디옥소이소인돌린-2-일)-N'-(2-(1,3-디옥소이소인돌린-2-일)아세틸)아세토히드라지드(218)의 합성
Figure pct00198
0℃에서 THF(200mL) 중 화합물 217(10.6g, 48.7mmol)의 용액에, 트리에틸아민(13.5mL, 97.4mmol) 및 화합물 215(10.8g, 48.7mmol)를 첨가하였다. 반응을 실온으로 가온하고, 밤새 교반하였다. 침전물을 여과에 의해 수집하고, 물(100mL)에 현탁시키고, 20분 동안 교반하였다. 혼합물을 다시 여과하여, 화합물 218을 백색 고체(15.7g, 80% 수율)로서 수득하였다. ESI-MS m/z 407.09 ([M+H]+).
실시예 105. 디-tert-부틸 2,2'-(1,2-비스(2-(1,3-디옥소이소인돌린-2-일)아세틸)히드라진-1,2-디일)디아세테이트(219)의 합성
Figure pct00199
NaH(0.5g, 12.3mmol)를 DMF(40mL) 중 화합물 218(2.0g, 4.92mmol)의 용액에 0℃에서 나누어서 첨가하였다. 혼합물을 실온으로 가온하고, 3시간 동안 교반하였다. 그 후, tert-부틸 브로모아세테이트(2.0g, 10.3mmol)를 첨가하고, 반응물을 밤새 교반한 후, 얼음물(100mL)에 붓고, 디클로로메탄(3 x 50mL)으로 추출하였다. 합해진 유기상을 물(50mL), 염수(50mL)로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조하고, 여과하고, 농축하고, 실리카 겔 크로마토그래피로 정제하여, 백색 고체를 수득하였다(1.5g, 50% 수율). ESI-MS m/z 635.23 ([M+H]+).
실시예 106. 디-tert-부틸 2,2'-(1,2-비스(2-아미노아세틸)히드라진-1,2-디일)디아세테이트(220)의 합성
Figure pct00200
에탄올(30mL) 중 화합물 219(1.5g, 2.36mmol) 및 히드라진(442mg, 7.08mmol)의 혼합물을 1시간 동안 환류시킨 다음, 실온으로 냉각시키고, 여과하였다. 여과액을 농축하고, 에틸 아세테이트(20mL)에 용해시키고, 다시 여과하였다. 여과액을 농축하여, 백색 고체 220(750 mg, 85% 수율)을 수득하였다. ESI-MS m/z 375.22 ([M+H]+).
실시예 107. 디-tert-부틸 2,2'-(1,2-비스(2-(2,5-디옥소-2,5-디히드로-1H-피롤-1-일)아세틸)히드라진-1,2-디일)디아세테이트(221)의 합성
Figure pct00201
0℃의 포화 NaHCO3수용액(30mL) 및 THF(20mL) 중 화합물 220(750mg, 2mmol)의 용액에, N-메톡시카르보닐 말레이미드(622mg, 4mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 0℃에서 1시간 동안 교반하였다. 여과에 의해 화합물 221을 백색 고체로서 수득하였다(854 mg, 80% 수율). ESI-MS m/z 535.20 ([M+H]+).
실시예 108. 2,2'-(1,2-비스(2-(2,5-디옥소-2,5-디히드로-1H-피롤-1-일)아세틸)히드라진-1,2-디일)디아세트산(222)의 합성
Figure pct00202
화합물 221(854 mg, 1.6 mmol)을 디옥산(3 mL)에 용해시키고, 실온에서 2시간 동안 25% HCl(3 mL)로 처리하였다. 그 다음, 반응물을 증발시켜 화합물 222(675 mg, 100% 수율)를 수득하였다. ESI-MS m/z 423.07 ([M+H]+).
실시예 109. 디-tert-부틸 4,4'-((2,2'-(1,2-비스(2-(2,5-디옥소-2,5-디히드로-1H-피롤-1-일)아세틸)히드라진-1,2-디일)비스(아세틸)비스(아잔디일)디부타노에이트(223)의 합성
Figure pct00203
0℃에서 DMF(5mL) 중 화합물 222(200mg, 0.47mmol)의 용액에, tert-부틸 4-아미노부타노에이트(158mg, 0.99mmol) 및 EDC·HCl(189.7mg, 0.99mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온으로 가온하고, 밤새 교반하고, 얼음물에 붓고, 디클로로메탄(3 x 10mL)으로 추출하였다. 합해진 유기상을 0.2N HCl(5mL), 물(5mL), 염수(5mL)로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조하고, 여과하고, 농축하여, 백색 고체(330mg, 100% 수율)를 수득하였다.
실시예 110. 비스(2,5-디옥소피롤리딘-1-일) 4,4'-((2,2'-(1,2-비스(2-(2,5-디옥소-2,5-디히드로-1H-피롤-1-일)아세틸)히드라진-1,2-디일)비스(아세틸))비스(아잔디일))디부타노에이트(225)의 합성
Figure pct00204
화합물 223(330 mg, 0.47 mmol)을 디옥산(3 mL)에 용해시키고, 실온에서 2시간 동안 25% HCl(3 mL)로 처리하였다. 반응물을 농축하고, DMF(5mL)에 재-용해하고, 0℃로 냉각하고, N-히드록시숙신이미드(113mg, 0.98mmol) 및 EDC·HCl(189mg, 0.98mmol)을 순서대로 첨가하였다. 반응을 실온으로 가온하고, 밤새 교반하고, 얼음물에 붓고, 디클로로메탄(3 x 20mL)으로 추출하였다. 합해진 유기상을 물(5mL), 염수(5mL)로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조하고, 여과하고, 농축하여, 백색 고체 225(369mg, 100% 수율)를 수득하였다. ESI-MS m/z 787.21 ([M+H]+).
실시예 111. (S)-N,N'-(((((2S,21S)-11,12-비스(2-(2,5-디옥소-2,5-디히드로-1H-피롤-1-일)아세틸)-2,21-디메틸-4,9,14,19-테트라옥소-3,8,11,12,15,20-헥사아자도코산-1,22-디올)비스(아잔디일))비스(4,1-페닐렌))비스(메틸렌))비스(1-(((S)-4-에틸-8-플루오로-4-히드록시-9-메톡시-3,14-디옥소-3,4,12,14-테트라하이드로-1H-피라노[3',4':6,7]인돌리지노[1,2-b]퀴놀린-11-일)메틸)-N,N-디메틸피페리딘-4-아미늄)(226)의 합성
Figure pct00205
화합물 225(31.5mg, 0.04mmol)를 DMA(5mL)에 용해시키고, 여기에 화합물 28(56.8mg, 0.08mmol) 및 N,N-디이소프로필에틸아민(0.020mL, 0.12mmol)을 0℃에서 첨가하였다. 반응을 실온으로 가온하고, 2시간 동안 교반하고, 농축하고, 정제용 HPLC(아세토니트릴/포름산 함유 물)로 정제하여, 화합물 226(57 mg, 72% 수율)을 수득하였다. ESI-MS m/z: M2+ C102H116F2N18O2에 대한 계산치 991.42; 실측치 991.86.
실시예 112. tert-부틸 3-((2-아미노에틸)아미노)프로파노에이트(228)의 합성
Figure pct00206
THF(150mL) 중 tert-부틸 아크릴레이트(12.81g, 0.10mmol) 및 에탄-1,2-디아민(24.3g, 0.40mol)을 45℃에서 24시간 동안 교반하였다. 혼합물을 농축하고, 트리에틸아민/MeOH/CH2Cl2(5%:15%:80%)로 용리되는 Al2O3 겔 칼럼 상에서 정제하여, 표제 화합물을 수득하였다(17.50 g, 92% 수율).ESI-MS m/z 189.20 ([M+H]+).
실시예 113. 3-((2-아미노에틸)아미노)프로판산, HCl 염(229)의 합성
Figure pct00207
1,4-디옥산(50mL) 중 tert-부틸 3-((2-아미노에틸)아미노)프로파노에이트(17.00g, 90.33mmol)를 진한 HCl(15mL)으로 처리하였다. 혼합물을 실온에서 30분 동안 교반하고, 농축하고, 순수한 물(150 mL) 및 EtOAc/PE(40 mL, 1:5)로 희석하였다. 혼합물을 분리하고, 유기층을 물(2 x 10mL)로 추출하였다. 수성 층을 농축하고, 진공 펌프에서 건조시켜, 표제 화합물을 수득하였다(18.70g, 100% 수율, 및 LC-MS에 의한 96% 순도). ESI-MS m/z 133.20 ([M+H]+).
실시예 114. 3-((2-(2,5-디옥소-2,5-디히드로-1H-피롤-1-일)에틸)아미노)-프로판산(230)의 합성
Figure pct00208
0℃에서 THF(150mL) 중 3-((2-아미노에틸)아미노)프로판산(18.70g, 90.33mmol)의 용액에, 말레산 무수물(8.85g, 90.33mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 0-4℃에서 4시간 동안 교반하고 농축하여, (Z)-4-((2-((2-카르복시에틸)아미노)에틸)아미노)-4-옥소부트-2-에노익산을 정량적으로 수득하였고, 이는 LC-MS에 의해 확인되었다. 그 다음, 톨루엔(150mL) 및 DMA(50mL)를 혼합물에 첨가하고, 딘-스타크(Dean-Stark) 트랩으로 90℃에서 환류시켰다. 트랩에 30mL 용매를 수집한 후, 헥사메틸디실란(9.0mL, 43.15mmol) 및 ZnCl2(16mL, 디에틸 에테르 중 1.0M)를 첨가하였다. 혼합물을 115-125℃로 가열하고, 톨루엔을 딘-스타k 트랩을 통해 수집하였다. 반응 혼합물을 120℃에서 6시간 동안 유동시켰다(fluxed). 이 기간 동안, 2 x 40mL의 드라이 톨루엔을 첨가하여, 혼합물 부피를 약 50mL로 유지하였다. 그 다음, 혼합물을 냉각하고, 1mL의 1:10 HCl(진한)/CH3OH를 첨가하였다. 혼합물을 증발시키고, 물/CH3CN(1:15)으로 용리되는 SiO2 칼럼 상에서 정제하고, 진공 펌프에서 건조시켜, 표제 화합물 14.75g을 수득하였다(77.0% 수율). ESI-MS m/z 213.10 ([M+H]+).
실시예 115. 2,5,8,11,14,17,20,23-옥타옥사펜타코산-25-일 4-메틸벤젠술포네이트(231)의 합성
Figure pct00209
디클로로메탄(200mL) 및 피리딘(100mL) 중 2,5,8,11,14,17,20,23-옥타옥사펜타코산-25-올(50.0g, 0.130mol)의 용액에, TsCl(30.2g, 0.159mol)을 첨가하였다. 혼합물을 밤새 교반하고, 증발시키고, 아세톤/디클로로메탄(1:1 내지 4:1)으로 용리되는 SiO2 칼럼 상에서 정제하고, 진공 펌프에서 건조시켜, 표제 화합물 57.34g(82.0% 수율)을 수득하였다. ESI-MS m/z 539.40 ([M+H]+).
실시예 116. S-2,5,8,11,14,17,20,23-옥타옥사펜타코산-25-일 에탄티오에이트(232)의 합성
Figure pct00210
THF(300mL) 및 N,N-디이소프로필에틸아민(50 mL)의 혼합물 중 2,5,8,11,14,17,20,23-옥타옥사펜타코산-25-일 4-메틸벤젠술포네이트(57.30g, 0.106mol)의 용액에, HSAc(10.0 g, 0.131 mol)를 첨가하였다. 혼합물을 밤새 교반하고, 증발시키고, EtOAc/디클로로메탄(1:2 내지 4:1)으로 용리되는 SiO2 칼럼 상에서 정제하고, 진공 펌프에서 건조시켜, 표제 화합물 40.51g(86% 수율)을 수득하였다. ESI-MS m/z 443.35 ([M+H]+).
실시예 117. 2,5,8,11,14,17,20,23-옥타옥사펜타코산-25-설폰산(233)의 합성
Figure pct00211
아세트산(200mL)과 30% H2O2(100mL)의 혼합물 중 S-2,5,8,11,14,17,20,23-옥타옥사펜타코산-25-일 에탄티오에이트(40.40g, 0.091mol)을 35℃에서 밤새 교반하였다. 혼합물을 농축하고, 순수 물(200mL) 및 톨루엔(150mL)으로 희석하고, 분리하고, 유기층을 물(2 x 25mL)로 추출하였다. 수용액을 합하고, 증발시키고, 진공 펌프 상에서 건조시켜, 표제 화합물 40.50g(99% 수율, LC-MS에 의해 95% 순도)을 수득하였다. ESI-MS m/z 449.30 ([M+H]+).
실시예 118. 3,3-N,N-(2''-말레이미도에틸)(2',5',8',11',14',17',20',23',26'-노나옥사옥타코산-28'-설핀)아미노프로판산 (234)의 합성
Figure pct00212
THF(100mL) 및 디클로로메탄(100mL)의 혼합물 중 2,5,8,11,14,17,20,23-옥타옥사펜타코산-25-설폰산(20.0g, 44.62mmol)의 용액에, (COCl)2(25.21g, 200.19mmol) 및 DMF(0.015mL)을 순서대로 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하고, 농축하고, 디클로로메탄/톨루엔(1:1, 2 x 50mL)과 함께 공-증발시킨 다음, THF(50mL)에 재-용해시켰다. THF (100 mL) 중 3-((2-(2,5-디옥소-2,5-디히드로-1H-피롤-1-일)에틸)아미노)-프로판산(7.50 g, 35.36 mmol)의 화합물에, 술포닐 클로라이드 용액을 첨가하였다. 혼합물을 밤새 교반하고, 진공에서 증발시키고, MeOH/디클로로메탄(1:6 내지 1:5)으로 용리되는 SiO2 칼럼 상에서 정제하고, 진공 펌프에서 건조시켜, 표제 화합물 14.76g(65% 수율)을 수득하였다. ESI-MS m/z 643.35 ([M+H]+).
실시예 119. N-N-숙신이미도 3,3-N,N-(2''-말레이미도에틸)(2',5',8',11',14',17',20',23',26'-노나옥사옥타코산-28'-설핀)아미노프로파노에이트(235)의 합성
Figure pct00213
THF(100mL) 중 3,3-N,N-(2''-말레이미도에틸)(2',5',8',11',14',17',20',23',26'-노나옥사옥타코산-28'-설핀)아미노프로판산(234)(7.50g, 11.67mmol), N-하이드록시숙신이미드(1.50g, 13.04mmol) 및 EDC·HCl(10.10g, 52.60mmol)의 혼합물을 밤새 교반하고, 진공 하에 증발시키고, EtOAc/디클로로메탄(1:4 내지 2:1)으로 용리되는 SiO2 칼럼 상에서 정제하고, 진공 펌프에서 건조시켜, 표제 화합물 6.30g(73% 수율)을 수득하였다. ESI-MS m/z 740.40 ([M+H]+).
실시예 120. 화합물 236의 합성
Figure pct00214
0℃에서 DMF(15mL) 중 H-Gly-Gly-Gly-OH(0.50g, 2.03mmol) 및 화합물 235(1.65g, 2.22mmol)의 용액에, N,N-디이소프로필에틸아민(3mL)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 0℃에서 0.5 시간동안, 실온에서 4시간 동안 교반하였다. 그 다음, 반응 혼합물을 농축하고, SiO2 크로마토그래피(아세토니트릴/물 95:5, 0.1% 포름산 포함)로 정제하여, 표제 화합물(1.04g, 63% 수율)을 수득하였다. ESI-MS m/z [M+H]+ : C32H56N5O17S에 대한 계산치 814.33; 실측치 814.46.
실시예 121. 화합물 237의 합성
Figure pct00215
THF(20mL) 중 화합물 236(0.70g, 0.86mmol), N-히드록시숙신이미드(0.20g, 1.73mmol) 및 EDC·HCl(1.21g, 6.36mmol)의 혼합물을 밤새 교반하고, 진공에서 증발시키고, EtOAc/디클로로메탄(1:4 내지 2:1)으로 용리하는 SiO2 칼럼 상에서 정제하고, 진공 펌프에서 건조시켜, 표제 화합물(0.540g, 69% 수율)을 수득하였다. ESI-MS m/z [M+H]+ : C36H59N6O19S에 대한 계산치 911.34; 실측치 911.42.
실시예 122. 화합물 238의 합성
Figure pct00216
화합물 237(36mg, 0.04mmol)을 DMF(5mL)에 용해시키고, 여기에 화합물 28(56.8mg, 0.08mmol) 및 N,N-디이소프로필에틸아민(0.020mL, 0.12mmol)을 0℃에서 첨가하였다. 반응을 실온으로 가온하고, 2시간 동안 교반하고, 농축하고, 정제용 HPLC(아세토니트릴/포름산 함유 물)로 정제하여, 화합물 238(48 mg, 80% 수율)을 수득하였다. ESI-MS m/z: M+ C71H99FN11O22S에 대한 계산치 1508.67; 실측치 1508.86.
실시예 123. 메틸 4-(비스(2-(아세틸티오)에틸)아미노)-4-옥소부타노에이트(240)의 합성
Figure pct00217
0℃에서 DMA(350mL) 중 메틸 4-(비스(2-((메틸술포닐)옥시)에틸)아미노)-4-옥소부타노에이트(신선 제조, 90% 순도, 8.5g, ~20mmol)에, 티오아세트산(10mL, 134mmol)을 첨가하고, 이어서 트리에틸아민(30mL, 215mmol)을 첨가하였다. 그 다음, 혼합물을 실온에서 밤새 교반하고, 농축하고, EtOAc(350mL)로 희석하고, 포화 NaHCO3(300mL), 염수(300mL) 및 1M NaH2PO4(300mL)로 세척하였다. 유기 층을 Na2SO4로 건조시키고, 여과하고, 증발시키고, EtOAc/헥산(10% ~ 25% EtOAc)으로 용리되는 SiO2 칼럼 상에서 정제하여, 표제 화합물(5.1 g, 76% 수율)을 수득하였다. ESI-MS m/z [M + Na]+ : C13H21NO5S2에 대한 계산치 358.1; 실측치 358.2.
실시예 124. 4-(비스(2-(피리딘-2-일디설파닐)에틸)아미노)-4-옥소부탄산(241)의 합성
Figure pct00218
THF(150mL) 중 메틸 4-(비스(2-(아세틸티오)에틸)아미노)-4-옥소부타노에이트(5.0g, 14.9mmol)에, 물(100mL) 중 NaOH(5.0g, 125mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 35분 동안 교반하고, H3PO4로 중화하여 pH 7로 만들었다. 그 다음, THF(100mL) 중 PySSPy(26.0g, 118mmol)를 첨가하고, 혼합물을 4시간 동안 교반하고, 농축하고, MeOH/디클로로메탄/HOAc(1:20/0.2)로 용리되는 SiO2 칼럼 상에서 정제하여, 표제 생성물(5.8g, 85.6% 수율)을 수득하였다. ESI-MS m/z [M + Na]+ : C18H21N3O3S4에 대한 계산치 478.0; 실측치 478.2.
실시예 125. 2,5-디옥소피롤리딘-1-일 4-(비스(2-(피리딘-2-일디설파닐)에틸)아미노)-4-옥소부타노에이트(242)의 합성
Figure pct00219
DMA(100mL) 중 4-(비스(2-(피리딘-2-일디설파닐)에틸)아미노)-4-옥소부탄산(5.2g, 11.5mmol)의 용액에, N-하이드록시숙신이미드(1.6g, 13.9mmol) 및 EDC·HCl(5.0g, 26.1mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 밤새 교반하고, 증발시키고, EtOAc/디클로로메탄(5% 내지 15% EtOAc)으로 용리되는 SiO2 칼럼 상에서 정제하여, 표제 생성물을 수득하였다(5.8g, 85.6% 수율). ESI-MS m/z [M + Na]+ : C22H24N4O5S4에 대한 계산치 575.1; 실측치 575.2.
실시예 126. N-(4-((S)-2-(4-(비스(2-(피리딘-2-일디설파닐)에틸)아미노)-4-옥소부탄아미도)프로판아미도)벤질)-1-(((S)-4-에틸-8-플루오로-4-히드록시-9-메톡시-3,14-디옥소-3,4,12,14-테트라히드로-1H-피라노[3',4':6,7]인돌리지노[1,2-b]퀴놀린-11-일)메틸)-N,N-디메틸피페리딘-4-아미늄(243)의 합성
Figure pct00220
화합물 242(23mg, 0.04mmol)를 DMA(5mL)에 용해시키고, 여기에 화합물 28(56.8mg, 0.08mmol) 및 N,N-디이소프로필에틸아민(0.020mL, 0.12mmol)을 0℃에서 첨가하였다. 반응을 실온으로 가온하고, 2시간 동안 교반하고, 농축하고, 정제용 HPLC(아세토니트릴/포름산 함유 물)로 정제하여, 화합물 273(39 mg, 85% 수율)을 수득하였다. ESI-MS m/z: M+ C57H65FN9O8S4에 대한 계산치 1150.38; 실측치 1150.45.
실시예 127. 4-(2-피리딜디티오)-4-메틸펜탄산(245)의 합성
Figure pct00221
MeOH(15 mL) 중 4-메르캅토-4-메틸펜탄산(Goff, D. et al, BioConjugate Chem. 1990, 1, 381-386)(4.67 g, 31.5 mmol)에, MeOH(80mL) 및 100mM 인산나트륨 완충액(pH 7.5, 70mL)의 혼합물 중 2,2'-디티오디피리딘(30.0g, 136.2mmol)을 첨가하였다. 6시간 동안 교반한 후, 혼합물을 농축시키고, EtOAc/헥산(1:1)으로 추출하였다. 수용액을 pH 3으로 조정하고, EtOAc(3 x 100 mL)로 추출하였다. 유기층을 합하고, Na2SO4로 건조시키고, 여과하고, 증발시키고, SiO2 칼럼(MeOH/디클로로메탄/HOAc, 1:15:0.01) 상에서 정제하여, 표제 화합물(7.05g, 87%)을 수득하였다. ESI-MS m/z: [M+H]+ C11H15NO2S2에 대한 계산치 258.05; 실측치 258.05.
실시예 128. N-숙신이미딜 4-(2-피리딜디티오)-4-메틸펜타노에이트(246)의 합성
Figure pct00222
디클로로메탄(20mL) 중 4-(2-피리딜디티오)-4-메틸펜탄산(2.0g, 7.78mmol)에, N-히드록시숙신이미드(1.10g, 9.56mmol) 및 EDC·HCl(4.0g, 20.8mmol)을 첨가하고, 혼합물을 밤새 교반하고, 증발시키고, SiO2 칼럼(EtOAc/디클로로메탄, 1:10)에서 정제하여, 표제 화합물(2.48g, 90%)을 수득하였다. ESI-MS m/z: [M + Na]+ C15H18N2O4S2에 대한 계산치 377.07; 실측치 377.08.
실시예 129. 1-(((S)-4-에틸-8-플루오로-4-히드록시-9-메톡시-3,14-디옥소-3,4,12,14-테트라히드로-1H-피라노[3',4':6,7]인돌리지노[1,2-b]퀴놀린-11-일)메틸)-N,N-디메틸-N-(4-((S)-2-(4-메틸-4-(페닐디설파닐)펜타아미도)프로판아미도)벤질)피페리딘-4-아미늄(247)의 합성
Figure pct00223
화합물 246(15mg, 0.04mmol)을 DMA(2mL)에 용해시키고, 여기에 화합물 28(56.8mg, 0.08mmol) 및 N,N-디이소프로필에틸아민(0.020mL, 0.12mmol)을 0℃에서 첨가하였다. 반응을 실온으로 가온하고, 2시간 동안 교반하고, 농축하고, 정제용 HPLC(아세토니트릴/포름산 함유 물)로 정제하여, 화합물 247(32 mg, 86% 수율)을 수득하였다. ESI-MS m/z: M+ C51H60FN6O7S2에 대한 계산치 951.39; 실측치 951.39.
실시예 130. (S)-4-에틸-8-플루오로-4,9-디히드록시-11-메틸-10-니트로-1H-피라노[3',4':6,7]인돌리지노[1,2-b]퀴놀린-3,14(4H,12H)-디온(124)의 합성
Figure pct00224
DCM(10ml) 중의 화합물 103(451.1mg, 1.139mmol)에, HOAc(1ml), Ac2O(0.2ml) 및 HNO3(진한, 0.3ml, 4.665mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 3시간 동안 교반하고, 물(10ml)로 희석하고, 분리하고, 수용액을 DCM(3 x 25ml)으로 추출하였다. 유기층을 합하고, Na2SO4로 건조하고, 여과하고, MeOH/DCM(1:10)으로 용리되는 짧은 SiO2 칼럼 상에서 정제하여, 표제 화합물(361.6 mg, 72% 수율)을 수득하였다. ESI-MS m/z: (M+H)+ C21H17FN3O7에 대한 계산치 442.3739; 실측치 442.3810.
실시예 131. (S)-9-(브로모메톡시)-4-에틸-8-플루오로-4-히드록시-11-메틸-10-니트로-1H-피라노[3',4':6,7]인돌리지노[1,2-b]퀴놀린-3,14(4H,12H)-디온(301)의 합성
Figure pct00225
THF 중 화합물 124(350.3mg, 0.793mmol), CH2Br2(1ml, 14.41mmol) 및 NaHCO3(0.25g, 2.97mmol)를 70℃에서 8시간 동안 교반하였다. 혼합물을 농축하고, HCl(0.1M, 8ml) 및 H2O(40ml)로 희석하였다. 침전된 고체를 여과하고, 소량의 (1:10) EtOAc/CH2Cl2에 용해시키고, MeOH/CH2Cl2(1:10 - 1:6)를 용리액으로 사용하는 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 표제 화합물(0.366 g, 86% 수율)을 수득하였다. ESI-MS m/z: [M+H]+ C22H18BrFN3O7에 대한 계산치 534.0313; 실측치 534.0385.
실시예 132. (S)-8-에틸-4-플루오로-8-히드록시-15-메틸-11,14-디히드로-1H-옥사졸로[4,5-f]피라노[3',4':6,7]인돌리지노[1,2-b]퀴놀린-9,12(2H,8H)-디온(302)의 합성
Figure pct00226
0℃에서 THF(10 ml) 및 진한 HCl 용액(5 mL)의 교반된 혼합물에, (S)-9-(브로모메톡시)-4-에틸-8-플루오로-4-히드록시-11-메틸-10-니트로-1H-피라노[3',4':6,7]인돌리지노[1,2-b]퀴놀린-3,14(4H,12H)-디온(0.360g, 0.675mmol)을 소량으로 첨가하고, 생성된 투명한 용액을 15분 후에 -10℃로 냉각시켰다. 반응 혼합물에 SnCl2(0.384g, 2.022mmol)를 조금씩 첨가하고, 반응 혼합물을 실온으로 가온되도록 하고, 1.5시간 동안 교반한 다음, 얼음으로 냉각시켰다. 혼합물을 얼음물 상에서 NaHCO3를 천천히 첨가하여 pH 5.5 내지 6.0로 중화시키고, 이어서 70℃에서 6시간 동안 환류시키고, 진공에서 농축시켰다. 침전물을 여과하고, EtOH 및 Et2O로 세척하고, 수성 여과액을 10% MeOH/CH2Cl2로 추출하였다. 유기 용액을 30% MeOH/CH2Cl2에 용해된 여과된 침전물과 합한 다음, 20% MeOH/CH2Cl2로 용리되는 짧은 SiO2 패드를 통과시켰다. 유기 용매를 제거하여, 표제 화합물(0.120g, 2단계에서 42% 수율)을 얻었고, 이를 추가 정제 없이 다음 단계에서 사용하였다. ESI-MS m/z: [M+H]+ C22H18FN3O5에 대한 계산치 424.1309; 실측치 424.1375.
실시예 133. (S)-tert-부틸(2-((2-(8-에틸-4-플루오로-8-히드록시-15-메틸-9,12-디옥소-2,8,9,11,12,14-헥사하이드로-1H-옥사졸로[4,5-f]피라노[3',4':6,7]인돌리지노[1,2-b]퀴놀린-1-일)-2-옥소에틸)아미노)-2-옥소에틸)카바메이트(303)의 합성
Figure pct00227
(S)-8-에틸-4-플루오로-8-히드록시-15-메틸-11,14-디히드로-1H-옥사졸로[4,5-f]피라노[3',4':6,7]인돌리지노[1,2-b]퀴놀린-9,12(2H,8H)-디온, HCl 염(158.3 mg, 0.344 mmol), 2-(2-((tert-부톡시카르보닐)아미노)아세트아미도)아세트산(gly-gly-NHBoc)(103.9mg, 0.447mmol) 및 EDC(153.5mg, 0.799mmol)를 DMA(10ml)에서 8시간 동안 교반하였다. 혼합물을 농축하고, EtOAc/DCM(1:10 - 1:3)으로 용리되는 SiO2칼럼 상에서 정제하여, 표제 화합물(182.6 mg, 82% 수율)을 수득하였다. ESI-MS m/z: (M+H)+ C31H33FN5O9에 대한 계산치 638.2263; 실측치 638.2295.
실시예 134. (S)-2-아미노-N-(2-(8-에틸-4-플루오로-8-히드록시-15-메틸-9,12-디옥소-2,8,9,11,12,14-헥사히드로-1H-옥사졸로[4,5-f]피라노[3',4':6,7]인돌리지노[1,2-b]퀴놀린-1-일)-2-옥소에틸)아세트아미드, HCl 염(304)의 합성
Figure pct00228
HCl 농축 용액(1 ml) 및 디옥산(4 ml)의 혼합물 중에서 (S)-tert-부틸 (2-((2-(8-에틸-4-플루오로-8-히드록시-15-메틸-9,12-디옥소-2,8,9,11,12,14-헥사히드로-1H-옥사졸로[4,5-f]피라노[3',4':6,7]인돌리지노[1,2-b]퀴놀린-1-일)-2-옥소에틸)아미노)-2-옥소에틸)카바메이트(175.6 mg, 0.275 mmol)를 30분 동안 교반하였다. 혼합물을 톨루엔(5 ml)으로 희석하고, 농축하고, DCM/톨루엔(5:5 ml, 2회)과 함께 공-증발시켜, 추가 정제 없이 다음 단계를 위한 표제 화합물을 수득하였다(154.6 mg, 98% 수율). ESI-MS m/z: (M+H)+ C26H25FN5O7에 대한 계산치 538.1739; 실측치 538.1780.
실시예 135. 화합물 305의 합성
Figure pct00229
DMA(8ml) 중 화합물 236(83.2mg, 0.102mmol) 및 화합물 274(55.1mg, 0.0960mmol)의 용액에, EDC(95.5mg, 0.497mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 밤새 교반하고, 농축하고, MeOH/DCM(1:6 - 1:3)으로 용리되는 SiO2 칼럼 상에서 정제하여, 화합물 305(103.3 mg, 81% 수율)를 수득하였다. ESI-MS m/z: (M+H)+ C58H78FN10O23S에 대한 계산치 1333.4947; 실측치 1333.5015.
실시예 136. (R)-2-(4-(2,5-디옥소-2,5-디히드로-1H-피롤-1-일)부탄아미도)-N1-(4-((2-((2-((S)-8-에틸-4-플루오로-8-히드록시-15-메틸-9,12-디옥소-2,8,9,11,12,14-헥사히드로-1H-옥사졸로[4,5-f]피라노[3',4':6,7]인돌리지노[1,2-b]퀴놀린-1-일)-2-옥소에틸)아미노)-2-옥소에틸)아미노)-4-옥소부틸)-N5- (2,5,8,11,14,17,20,23-옥타옥사펜타코산-25-일)펜탄디아미드(306)의 합성
Figure pct00230
DMF(5 mL) 중 화합물 304 (47.3 mg, 0.088 mmol) 및 (S)-30-(4-(2,5-디옥소-2,5-디히드로-1H-피롤-1-일)부탄아미도)-27,31-디옥소-2,5,8,11,14,17,20,23-옥타옥사-26,32-디아자헥사트리아콘탄-36-오익산(화합물 6)(70.1 mg, 0.092 mmol)의 용액에, EDC(55 mg, 0.286 mmol)을 첨가하였다. 반응물을 8시간 동안 교반하였다. 농축 후, 잔류물을 MeOH/DCM(1:6 - 1:3)으로 용리되는 SiO2 칼럼 상에서 정제하여, 화합물 306(89.3 mg, 79% 수율)을 수득하였다. ESI-MS m/z: (M+H)+ C60H81FN9O21에 대한 계산치 1282.5532; 실측치 1282.5590.
실시예 137. 5-아미노-4-(2-클로로아세틸)-2-메톡시-N-메틸벤즈아미드(307)의 합성
Figure pct00231
디클로로메탄(20mL)에 용해된 5-아미노-2-메톡시-N-메틸벤즈아미드(5.00g, 27.76mmol)의 용액을 빙수 냉각된 삼염화붕소(디클로로메탄 중 1M, 38.9mL) 용액에 적가하였다. 반응물을 10분 동안 교반한 다음, 클로로아세토니트릴(3.2g, 42.5mmol) 및 삼염화알루미늄(5.2g, 38.9mmol)을 첨가하였다. 첨가가 완료된 후, 반응물을 실온으로 가온한 다음, 밤새 환류시켰다. 그 다음, 반응 혼합물을 약 0℃로 냉각시키고, 2M HCl(80mL)로 켄칭하고, 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 층을 분리하고, 수성상을 디클로로메탄(3 x 80mL)으로 추출하였다. 합해진 유기상을 물(100mL)로 세척하고, 황산나트륨으로 건조하고, 여과하고, 농축하고, EtOH/H2O(1:6 내지 1:1)로 용리되는 C-18 칼럼 상에서 정제하여, 화합물 307(3.05g, 43% 수율)을 황색 고체로서 수득하였다. ESI-MS m/z: [M+H]+ C11H14ClN2O3에 대한 계산치 257.0693; 실측치 257.0725.
실시예 138. (S)-11-(클로로메틸)-4-에틸-4-히드록시-9-메톡시-N-메틸-3,14-디옥소-3,4,12,14-테트라히드로-1H-피라노[3',4':6,7]인돌리지노[1,2-b]퀴놀린-8-카르복사미드(308)의 합성
Figure pct00232
화합물 307(0.59g, 2.30mmol) 및 화합물 25(0.57g, 2.19mmol)를 무수 톨루엔(40mL)에 용해시키고, p-톨루엔술폰산(42mg, 0.219mmol)을 첨가하였다. 현탁액을 2일 동안 환류 가열하고, 실온으로 냉각되도록 하였다. 약 2/3의 톨루엔을 제거한 후, 잔류물을 여과하고, 필터 케이크를 디클로로메탄으로 세척하고, 공기 건조하여, 화합물 308(0.74g, 70% 수율)을 회색 분말 고체로서 수득하였다. ESI-MS m/z: [M+H]+ C24H23ClN3O6에 대한 계산치 484.1276; 실측치 484.1220.
실시예 139. N-(4-((S)-2-((tert-부톡시카르보닐)아미노)프로판아미도)벤질)-1-(((S)-4-에틸-4-히드록시-9-메톡시-8-(메틸카르바모일)-3,14-디옥소-3,4,12,14-테트라히드로-1H-피라노[3',4':6,7]인돌리지노[1,2-b]퀴놀린-11-일)메틸)-N,N-디메틸피페리딘-4-아미늄, 포름산염(309)의 합성
Figure pct00233
DMF(5 mL) 중 화합물 308(238 mg, 0.49 mmol), 화합물 18(200 mg, 0.49 mmol)의 혼합물을 0℃에서 30분 동안 교반한 다음, 트리에틸아민(63 μL, 0.45 mmol)을 첨가하고, 1시간 동안 계속 교반하였다. 반응물을 농축하고, 분취용 HPLC(아세토니트릴/포름산 함유 물, Φ = 5 cm, v = 30 ml/min, 45분 내에 100% 물에서 50% 물)로 정제하여, 화합물 309(242 mg, 55% 수율)을 황색 고체로서 수득하였다. ESI-MS m/z: M+ C46H58N7O9에 대한 계산치 852.4291; 실측치 852.4355.
실시예 140. N-(4-((S)-2-아미노프로판아미도)벤질)-1-(((S)-4-에틸-4-히드록시-9-메톡시-8-(메틸카르바모일)-3,14-디옥소-3,4,12,14-테트라히드로-1H-피라노[3',4':6,7]-인돌리지노[1,2-b]퀴놀린-11-일)메틸)-N,N-디메틸피페리딘-4-아미노, 트리플루오로아세트산 염(310)의 합성
Figure pct00234
화합물 309(95 mg, 0.111 mmol)를 디클로로메탄 및 트리플루오로아세트산의 혼합물(2 mL/6 mL)에 용해시키고, 실온에서 30분 동안 교반하였다. 혼합물을 톨루엔(10ml)으로 희석한 다음, 농축하고 진공 펌프에서 건조시켜, 화합물 310(108mg, 100% 수율)을 황색 고체로서 수득하였다. ESI-MS m/z: M+ C41H50N7O7에 대한 계산치 752.3766; 실측치 752.3710.
실시예 141. N-(4-((30S,38S)-30-(4-(2,5-디옥소-2,5-디히드로-1H-피롤-1-일)부탄아미도)-38-메틸-27,31,36-트리옥소-2,5,8,11,14,17,20,23-옥타옥사-26,32,37-트리아자노나트리아콘탄아미도)벤질)-1-(((S)-4-에틸-4-히드록시-9-메톡시-8-(메틸카르바모일)-3,14-디옥소-3,4,12,14-테트라히드로-1H-피라노[3',4':6,7]인돌리지노[1,2-b]퀴놀린-11-일)메틸)-N,N-디메틸피페리딘-4-아미늄 포메이트(311)의 합성
Figure pct00235
화합물 310(60mg, 0.061mmol) 및 화합물 7(60mg, 0.064mmol)을 DMF(5mL)에 용해시키고, 약 0℃로 냉각시킨 다음, N,N-디이소프로필에틸아민(21μL, 0.12mmol)을 첨가하였다. 반응을 실온으로 가온하고, 2시간 동안 교반하고, 농축하고, 정제용 HPLC(아세토니트릴/포름산 함유 물, Φ = 3 cm, v = 20 ml/min, 45분 내에 100% 물에서 50% 물)로 정제하여, 화합물 281(38.5 mg, 41% 수율)을 수득하였다. ESI-MS m/z: M+ C75H106N11O21에 대한 계산치 1496.7559; 실측치 1496.7595.
실시예 142. (2R,3S)-2,3-비스(((벤질옥시)카르보닐)아미노)숙신산(312)의 합성
Figure pct00236
THF(250ml) 및 NaH2PO4(0.1M, 250ml, pH 8.0)의 혼합물 중 (2R,3S)-2,3-디아미노숙신산(4.03g, 27.30mmol)의 용액에, 벤질 카르보노클로라이드(15.0g, 88.23mmol)를 2시간에 4 분할로 첨가하였다. 혼합물을 추가로 6시간 동안 교반하고, 농축하고, 1% 포름산을 함유하는 H2O/CH3CN(1:9)으로 용리되는 SiO2 칼럼 상에서 정제하여, 표제 화합물을 수득하였다(8.63g, 75% 수율). MS ESI m/z C20H21N2O8에 대한 계산치 [M+H]+ 417.12, 실측치 417.50.
실시예 143. (2R,3S)-비스(2,5-디옥소피롤리딘-1-일) 2,3-비스(((벤질옥시)-카르보닐)아미노)숙시네이트의 합성
Figure pct00237
DMA(70ml)의 혼합물 중 (2R,3S)-2,3-비스(((벤질옥시)카르보닐)아미노)숙신산(4.25g, 10.21mmol)의 용액에, NHS(3.60g, 31.30mmol) 및 EDC(7.00g, 36.65mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 밤새 교반하고, 농축하고, EtOAc/CH2Cl2(1:6)로 용리되는 SiO2 칼럼 상에서 정제하여, 표제 화합물을 수득하였다(5.48g, 88% 수율). MS ESI m/z C28H27N4O12에 대한 계산치 [M+H]+ 611.15, 실측치 611.45.
실시예 144. 디-tert-부틸 4,4'-(((2R,3S)-2,3-비스(((벤질옥시)카르보닐)-아미노)숙시닐)비스(아잔디일))디부타노에이트의 합성
Figure pct00238
DMA(70ml)의 혼합물 중 (2R,3S)-2,3-비스(((벤질옥시)카르보닐)아미노)숙신산(4.25g, 10.21mmol)의 용액에, tert-부틸 4-아미노부타노에이트(3.25g, 20.42mmol) 및 EDC(7.00g, 36.65mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 밤새 교반하고, 농축하고, EtOAc/CH2Cl2(1:10)로 용리되는 SiO2 칼럼에서 정제하여, 표제 화합물(6.50g, 91% 수율)을 수득하였다. MS ESI m/z C36H51N4O10에 대한 계산치 [M+H]+ 699.35, 실측치 699.55.
실시예 145. 디-tert-부틸 4,4'-(((2R,3S)-2,3-디아미노숙시닐)-비스(아잔디일))디부타노에이트의 합성
Figure pct00239
MeOH(100mL) 중 디-tert-부틸 4,4'-(((2R,3S)-2,3-비스(((벤질옥시)카르보닐)아미노)-숙시닐)비스(아잔디일))디부타노에이트(2.50 g, 3.58 mmol)의 용액에, 10% Pd/C(0.30g, 50% 습윤)를 첨가하고, 혼합물을 수소 분위기 하에 실온에서 18시간 동안 교반하였다. 그 다음, 셀라이트를 통한 여과에 의해 Pd/C를 제거하고, 필터 베드를 MeOH(~70 ml)로 세척하였다. 여과액을 농축하여, 생성물을 황색 발포체로 수득하였고, 이를 추가 정제 없이 다음 단계에서 사용하였다(1.54g, 100% 수율). ESI: m/z: C20H39N2O6에 대한 계산치 [M+H]+: 431.28, 실측치 431.50.
실시예 146. 디-tert-부틸 4,4'-(((2R,3S)-2,3-비스(3-(2,5-디옥소-2,5-디히드로-1H-피롤-1-일)프로판아미도)숙시닐)비스(아잔디일))디부타노에이트의 합성
Figure pct00240
DMA(60 ml)의 혼합물 중 3-(2,5-디옥소-2,5-디히드로-1H-피롤-1-일)프로판산(1.25 g, 7.39 mmol)의 용액에 디-tert-부틸 4,4'-(((2R,3S)-2,3-디아미노숙시닐)-비스(아잔디일))디부타노에이트(1.54g, ~3.57mmol) 및 EDC(2.40g, 12.56mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 밤새 교반하고, 농축하고, EtOAc/CH2Cl2(1:10)로 용리되는 SiO2 칼럼 상에서 정제하여, 표제 화합물(2.35g, 90% 수율)을 수득하였다. MS ESI m/z C34H49N6O12에 대한 계산치 [M+H]+: 733.33, 실측치 733.60.
실시예 147. 4,4'-(((2R,3S)-2,3-비스(3-(2,5-디옥소-2,5-디히드로-1H-피롤-1-일)프로판아미도)숙시닐)비스(아잔디일))디부탄산의 합성
Figure pct00241
1,4-디옥산(20ml) 중 디-tert-부틸 4,4'-(((2R,3S)-2,3-비스(3-(2,5-디옥소-2,5-디히드로-1H-피롤-1-일)프로판아미도)숙시닐)비스(아잔디일))디부타노에이트(2.30g, 3.14mmol)의 교반된 용액에, HCl(36%, 7.0ml)을 첨가하였다. 혼합물을 30분 동안 교반하고, 톨루엔(20ml)으로 희석하고, 농축하고, MeOH/CH2Cl2(1:10 내지 1:4)로 용리되는 SiO2 칼럼 상에서 정제하여, 표제 화합물을 수득하였다(1.69g, 86% 수율). MS ESI m/z C26H33N6O12에 대한 계산치 [M+H]+: 621.21, 실측치 621.70.
실시예 148. 디-tert-부틸 4,4'-(((2R,3S)-2,3-비스(2-(2,5-디옥소-2,5-디히드로-1H-피롤-1-일)아세트아미도)숙시닐)비스(아잔디일))디부타노에이트의 합성
Figure pct00242
DMA(60 ml)의 혼합물 중 2-(2,5-디옥소-2,5-디히드로-1H-피롤-1-일)아세트산(1.12 g, 7.22 mmol)의 용액에, 디-tert-부틸 4,4'-(((2R,3S)-2,3-디아미노숙시닐)-비스(아잔디일))디부타노에이트(1.54g, ~3.58mmol) 및 EDC(2.40g, 12.56mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 밤새 교반하고, 농축하고, EtOAc/CH2Cl2(1:10)로 용리되는 SiO2 칼럼 상에서 정제하여, 표제 화합물(2.29g, 91% 수율)을 수득하였다. MS ESI m/z C32H45N6O12에 대한 계산치 [M+H]+: 704.30, 실측치 704.60.
실시예 149. 4,4'-(((2R,3S)-2,3-비스(2-(2,5-디옥소-2,5-디히드로-1H-피롤-1-일)아세트아미도)숙시닐)비스(아잔디일))디부탄산의 합성
Figure pct00243
1,4-디옥산(20ml) 중 디-tert-부틸 4,4'-(((2R,3S)-2,3-비스(2-(2,5-디옥소-2,5-디히드로-1H-피롤-1-일)아세트아미도)숙시닐)비스(아잔디일))디부타노에이트(2.20g, 3.12mmol)의 용액에, HCl(36%, 7.0ml)을 첨가하였다. 혼합물을 30분 동안 교반하고, 톨루엔(20ml)으로 희석하고, 농축하고, MeOH/CH2Cl2(1:10 내지 1:4)로 용리되는 SiO2 칼럼 상에서 정제하여, 표제 화합물을 수득하였다(1.69g, 86% 수율). MS ESI m/z C24H29N6O12에 대한 계산치 [M+H]+: 593.18, 실측치 593.40.
실시예 150. 비스(2,5-디옥소피롤리딘-1-일) 4,4'-(((2R,3S)-2,3-비스(2-(2,5-디옥소-2,5-디히드로-1H-피롤-1-일)아세트아미도)숙시닐)비스(아잔디일))디부타노에이트의 합성
Figure pct00244
DMA(30ml)의 혼합물 중 4,4'-(((2R,3S)-2,3-비스(2-(2,5-디옥소-2,5-디히드로-1H-피롤-1-일)아세트아미도)숙시닐)비스(아잔디일))디부탄산(1.10g, 1.85mmol)의 용액에, NHS(1-히드록시피롤리딘-2,5-디온)(0.55g, 4.78mmol) 및 EDC(1.25g, 6.54mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 밤새 교반하고, 농축하고, EtOAc/CH2Cl2(1:10)로 용리되는 SiO2 칼럼 상에서 정제하여, 표제 화합물(1.30g, 90% 수율)을 수득하였다. MS ESI m/z C32H35N8O16 에 대한 계산치 [M+H]+:787.21, 실측치 787.60.
실시예 151. (2S,3S)-2,3-비스(2,5-디옥소-2,5-디히드로-1H-피롤-1-일)숙신산의 합성.
Figure pct00245
THF/H2O/DIPEA(125ml/125ml/2ml)의 혼합물 중 (2R,3R)-2,3-디아미노숙신산(5.00g, 33.77mmol)에, 말레산 무수물(6.68g, 68.21mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 밤새 교반하고, 증발시켜, (2S,3S)-2,3-비스((Z)-3-카르복시아크릴아미도)숙신산(11.05g, 99% 수율)을 백색 고체로서 수득하였다. MS ESI m/z C12H13N2O10에 대한 계산치 [M+H]+: 345.05, 실측치 345.35.
HOAc(70ml), DMF(10ml) 및 톨루엔(50ml)의 혼합 용액 중 (2S,3S)-2,3-비스((Z)-3-카르복시아크릴아미도)숙신산(11.05g, 33.43mmol)에, 아세트산 무수물(30 ml)을 첨가하였다. 혼합물을 2시간 동안 교반하고, 100℃에서 6시간 동안 딘-스타크 트랩으로 환류시키고, 농축시키고, EtOH(2 x 40 ml) 및 톨루엔(2 x 40 ml)과 함께 공-증발시키고, H2O/CH3CN(1:10)으로 용리되는 SiO2 칼럼 상에서 정제하여, 표제 화합물(8.10g, 78% 수율)을 수득하였다. MS ESI m/z C12H13N2O10에 대한 계산치 [M+H]+: 345.05, 실측치 345.35.
실시예 152. (2S,3S)-비스(2,5-디옥소피롤리딘-1-일) 2,3-비스(2,5-디옥소-2,5-디히드로-1H-피롤-1-일)숙시네이트의 합성
Figure pct00246
DMF(70 ml)의 혼합물 중 (2S,3S)-2,3-비스(2,5-디옥소-2,5-디히드로-1H-피롤-1-일)숙신산(4.00g, 12.98mmol)의 용액에, NHS(3.60 g, 31.30 mmol) 및 EDC(7.00 g, 36.65 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 밤새 교반하고, 농축하고, EtOAc/CH2Cl2(1:6)로 용리되는 SiO2 칼럼 상에서 정제하여, 표제 화합물을 수득하였다(5.79g, 89% 수율, HPLC에 의해 ~96% 순도). MS ESI m/z C20H15N4O12에 대한 계산치 [M+H]+: 503.06, 실측치 503.60.
실시예 153. 4-(((벤질옥시)카르보닐)아미노)부탄산의 합성
Figure pct00247
물(140mL) 중 NaOH(23.3g, 0.58mol, 2.0 eq.)의 용액에, 4-아미노부탄산(30.0g, 0.29mol, 1.0eq) 및 THF(60mL)를 -20℃에서 첨가한 다음, THF(57 mL) 중 CbzCl(54 mL, 0.38 mol, 1.3eq)을 적가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 4시간 동안 교반한 다음, 농축하고, EtOAc(4 x 100mL)로 세척하였다. pH 3에 도달할 때까지 진한 염산을 수용액에 첨가하였다. 용액을 EA(4 × 150 mL, 2 × 100 mL)로 추출하고, 합해진 유기상을 염수로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조하고, 여과하고, 농축하여, 표제 화합물을 백색 고체로서 수득하였다(48.3g, 70.3%). ESI m/z: C12H16NO4에 대한 계산치 [M+H]+: 238.1, 실측치 238.1.
실시예 154. tert-부틸 4-(((벤질옥시)카르보닐)아미노)부타노에이트의 합성
Figure pct00248
무수 디클로로메탄(480mL) 중 4-(((벤질옥시)카르보닐)아미노)부탄산(48.0g, 0.2mol, 1.0 eq.) 및 t-BuOH(58.0mL, 0.6mol, 3.0 eq.)의 용액에, DCC(50.0g, 0.24mol, 1.2eq.) 및 DMAP(2.5g, 0.02mol, 0.1eq.)를 0℃에서 첨가한 다음, 혼합물을 실온으로 가온하고, 밤새 교반하였다. 고체를 여과하고, 여과액을 농축한 다음, EtOAc(400mL)로 희석하고, 5% NaHCO3 용액 및 염수로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조하고, 여과한 다음, 농축하였다. 잔류물을 SiO2 칼럼 크로마토그래피(PE/EtOAc = 5:1)로 정제하여, 표제 화합물을 무색 오일(32.8g, 55.1%)로 수득하였다. ESI m/z: C16H24NO4에 대한 계산치 [M+H]+: 294.2, 실측치 294.2.
실시예 155. tert-부틸 4-아미노부타노에이트의 합성
Figure pct00249
MeOH(100mL) 중 tert-부틸 4-(((벤질옥시)카르보닐)아미노)부타노에이트(29.0g, 0.099mol, 1.0 eq.)의 용액에, Pd/C(2.9g, 10% Pd/C, 50% 습윤)를 수소화 병에서 첨가하였다. 혼합물을 1 atm H2하에 밤새 진탕시켰다. 반응 혼합물을 여과하고, 여과액을 농축하여 표제 화합물을 무색 오일로 수득하였다(13.8g, 83.7% 수율). ESI m/z: C8H18NO2에 대한 계산치[M+H]+: 160.1, 실측치 160.1.
실시예 156. 11-(벤질옥시)-11-옥소운데칸산의 합성
Figure pct00250
DMF(30mL) 중 운데칸산(1.73g, 8mmol)의 용액에, K2CO3(1.1g, 8mmol) 및 BnBr(1.36g, 8mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 밤새 교반한 다음, 농축하고, 칼럼 크로마토그래피(PE/EtOAc)로 정제하여, 표제 화합물(1.1g, 45% 수율)을 수득하였다. ESI m/z: C18H27O4에 대한 계산치 [M+H]+: 307.18, 실측치 307.15.
실시예 157. 3-(2-(2-(디벤질아미노)에톡시)에톡시)프로판산의 합성
Figure pct00251
DCM(5 mL) 중 tert-부틸 3-(2-(2-(디벤질아미노)에톡시)에톡시)프로파노에이트(2.00 g, 4.84 mmol)의 용액에, HCO2H(5 mL)를 첨가하였다. 반응물을 실온에서 밤새 교반한 다음, 건조될 때까지 농축하고, DCM으로 2회 공-증발시키고, 잔류물을 펌프에 배치하여, 표제 화합물을 수득하였다(1.72g, ~100% 수율). ESI m/z C21H27NO4에 대한 계산치 [M+H]+: 358.19, 실측치 358.19.
실시예 158. tert-부틸 2-벤질-11-옥소-1-페닐-5,8,15,18-테트라옥사-2,12-디아자헤니코산-21-오에이트의 합성
Figure pct00252
DCM(30mL) 중 3-(2-(2-(디벤질아미노)에톡시)에톡시)프로판산(1.12g, 4.83mmol) 및 tert-부틸 3-(2-(2-아미노에톡시)에톡시)프로파노에이트(1.72g, 4.83)의 용액에, HATU(1.83g, 4.83mmol) 및 TEA(0.68mL, 4.83mmol)를 0℃에서 첨가하였다. 반응을 실온으로 가온하고, 1시간 동안 교반한 다음, 50mL DCM으로 희석하고, 50mL의 물을 함유하는 분별 깔때기에 부었다. 유기상을 분리하고, 염수(50mL)로 세척하고, 무수 Na2SO4로 건조하고, 여과하고, 농축하였다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피(MeOH/DCM)로 정제하여, 표제 화합물(2.21g, 80% 수율)을 수득하였다. ESI m/z C32H48N2O7에 대한 계산치 [M+H]+: 573.35, 실측치 573.35.
실시예 159. tert-부틸 1-아미노-9-옥소-3,6,13,16-테트라옥사-10-아자노나데칸-19-오에이트의 합성
Figure pct00253
MeOH(20mL) 중 tert-부틸 2-벤질-11-옥소-1-페닐-5,8,15,18-테트라옥사-2,12-디아자헤니코산-21-오에이트(2.21g, 3.86mmol)의 용액에, Pd/C(10wt%, 0.2g)를 수소화 병에서 첨가하였다. 혼합물을 1 atm H2하에 밤새 교반하고, 셀라이트(여과 보조제)를 통해 여과하고, 여과액을 농축하여, 표제 화합물(1.5 g, ~100% 수율)을 수득하였다. ESI m/z C18H36N2O7에 대한 계산치 [M+H]+: 393.25, 실측치 393.25.
실시예 160. 31-벤질 1-tert-부틸 11,21-디옥소-4,7,14,17-테트라옥사-10,20-디아자헨트리아콘탄-1,31-디오에이트의 합성
Figure pct00254
DCM(50mL) 중 tert-부틸 1-아미노-9-옥소-3,6,13,16-테트라옥사-10-아자노나데칸-19-오에이트(1.50g, 3.86mmol) 및 11-(벤질옥시)-11-옥소운데칸산(1.10g, 3.6mmol)의 용액에, HATU(1.48g, 3.9mmol) 및 TEA(0.55mL, 3.9mmol)를 0℃에서 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반한 다음, 50 mL DCM으로 희석하고, 50 mL 물을 함유하는 분별 깔때기에 부었다. 유기상을 분리하고, 염수(50 mL)로 세척하고, 무수 Na2SO4로 건조시키고, 여과하고, 농축하였다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피(MeOH/DCM)로 정제하여, 표제 화합물(1.50g, 61% 수율)을 수득하였다. ESI m/z C36H61N2O10에 대한 계산치 [M+H]+: 681.42, 실측치 681.42.
실시예 161. 3,13,23-트리옥소-1-페닐-2,17,20,27,30-펜타옥사-14,24-디아자트리아콘탄-33-오익산의 합성
Figure pct00255
DCM(1 mL) 중 31-벤질 1-tert-부틸 11,21-디옥소-4,7,14,17-테트라옥사-10,20-디아자헨트리아콘탄-1,31-디오에이트(1.50 g, 2.2 mmol)의 용액에, TFA(3 mL)를 첨가하였다. 반응물을 실온에서 1시간 동안 교반한 다음, 농축 건조하고, DCM으로 2회 공-증발시키고, 잔류물을 펌프에 놓아, 표제 화합물(0.09g, 2.2mmol, 조 생성물)을 수득하였다. ESI m/z: C32H53N2O10에 대한 계산치 [M+H]+: 625.36, 실측치 625.35.
실시예 162. (S)-39-(((벤질옥시)카르보닐)아미노)-3,13,23,33-테트라옥소-1-페닐-2,17,20,27,30-펜타옥사-14,24,34-트리아자테트라콘탄-40-오익산의 합성
Figure pct00256
DCM(50mL) 중 3,13,23-트리옥소-1-페닐-2,17,20,27,30-펜타옥사-14,24-디아자트리아콘탄-33-오익산(1.50g, 2.20mmol) 및 Z-Lys-OH(0.62g, 2.20mmol)의 용액에, HATU(0.84g, 2.20mmol) 및 TEA(0.31mL, 2.20mmol)를 0℃에서 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하고, 50mL DCM으로 희석하고, 100mL의 물을 함유하는 분별 깔때기에 부었다. 유기상을 분리하고, 염수(100mL)로 세척하고, 무수 Na2SO4로 건조하고, 여과하고, 농축하였다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피(MeOH/DCM)로 정제하여, 표제 화합물(1.00g, 53% 수율)을 수득하였다. ESI m/z C46H71N4O13에 대한 계산치 [M+H]+: 887.49, 실측치 887.50.
실시예 163. 디-tert-부틸 3,3'-((옥시비스(에탄-2,1-디일))비스(옥시)) 디프로파노에이트의 합성
Figure pct00257
THF(200mL) 중 디에틸렌 글리콜(20g, 0.188mol)의 용액에, Na(0.43g, 0.018mol)를 첨가하였다. 실온에서 1시간 동안 교반한 후, tert-부틸 아크릴레이트(48g, 0.376mol)를 첨가하고, 반응 혼합물을 실온에서 2일 동안 교반하였다. 반응물을 진공하에 농축하고, 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 표제 화합물을 수득하였다(34g, 50% 수율). ESI m/z C18H35O7에 대한 계산치 [M+H]+: 363.23, 실측치 363.23.
실시예 164. 3,3'-((옥시비스(에탄-2,1-디일))비스(옥시))디프로판산의 합성
Figure pct00258
디-tert-부틸 3,3'-((옥시비스(에탄-2,1-디일))비스(옥시))디프로파노에이트(34g, 0.093mol)를 실온에서 포름산(100mL)에 용해시키고, 밤새 교반하였다. 반응물을 진공 하에 농축시켜, 표제 화합물을 수득하였다. ESI m/z C10H19O7에 대한 계산치 [M+H]+: 251.11, 실측치 251.11.
실시예 165. 2,2-디메틸-4,14,24-트리옥소-3,7,10,17,20,27,30,33-옥타옥사-13,23-디아자헥사트리아콘탄-36-오익산의 합성
Figure pct00259
DMF(10mL) 중 tert-부틸 1-아미노-9-옥소-3,6,13,16-테트라옥사-10-아자노나데칸-19-오에이트(1.50g, 3.82mmol) 및 3,3'-((옥시비스(에탄-2,1-디일))비스(옥시))디프로판산(1.90g, 7.64mmol)의 용액에, HATU(1.45g, 3.82mmol) 및 DIPEA(0.66mL, 3.82mmol)에 0°에서 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온으로 가온하고, 1시간 동안 교반한 다음, DCM(80mL)으로 희석하고, 물(10mL)로 세척하고, 황산나트륨으로 건조하고, 여과하고, 농축하고, 실리카겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 표제 화합물을 무색 액체(1.75g, 75% 수율)로서 수득하였다. ESI m/z C28H53N2O13에 대한 계산치 [M+H]+: 625.35, 실측치 625.35.
실시예 166. 1-tert-부틸 33-(2,5-디옥소피롤리딘-1-일) 11,21-디옥소-4,7,14,17,24,27,30-헵타옥사-10,20-디아자트리아콘탄-1,33-디오에이트의 합성
Figure pct00260
DCM(20mL) 중 2,2-디메틸-4,14,24-트리옥소-3,7,10,17,20,27,30,33-옥타옥사-13,23-디아자헥사트리아콘탄-36-오익산(1.75g, 2.8mmol)의 용액에, EDCI(1.07g, 5.6mmol) 및 NHS(0.64g, 5.6mmol)를 0℃에서 첨가하였다. 반응물을 실온으로 가온하고, 밤새 교반한 다음, DCM(80mL)으로 희석하고, 물(10mL)로 세척하고, 황산나트륨으로 건조하고, 여과하고, 진공하에 농축하여, 표제 화합물(2.00g, ~100% 수율)을 수득하였다. ESI m/z C32H56N3O15에 대한 계산치 [M+H]+: 722.36, 실측치 722.36.
실시예 167. (S)-42-(((벤질옥시)카르보닐)아미노)-2,2-디메틸-4,14,24,36-테트라옥소-3,7,10,17,20,27,30,33-옥타옥사-13,23,37-트리아자트리테트라콘탄-43-오익산의 합성
Figure pct00261
물(10mL) 중 N-α-Cbz-L-리신(1.17g, 4.2mmol)의 용액에, 중탄산나트륨(0.47g, 5.6mmol)을 첨가하고, 반응 혼합물을 5℃로 냉각시키고, 1,4-디옥산(10mL)에 용해된 1-tert-부틸 33-(2,5-디옥소피롤리딘-1-일) 11,21-디옥소-4,7,14,17,24,27,30-헵타옥사-10,20-디아자트리아콘탄-1,33-디오에이트(2.00g, 2.8mmol)를 첨가하였다. 반응을 실온으로 가온하고, 1시간 동안 교반한 다음, 1N HCl을 첨가하여 pH 3으로 산성화하고, DCM(50mL x 3)으로 추출하였다. 유기 추출물을 물(20 mL)로 세척하고, 황산나트륨으로 건조하고, 여과하고, 농축시켜, 표제 생성물을 수득하였다(2.3 g, 92% 수율). ESI m/z C42H71N4O16에 대한 계산치 [M+H]+: 887.48, 실측치 887.48.
실시예 168. (S)-43-벤질 1-tert-부틸 7-(((벤질옥시)카르보닐)아미노)-6,13,23,33-테트라옥소-16,19,26,29-테트라옥사-5,12,22,32-테트라아자트리테트라콘탄-1,43-디오에이트의 합성
Figure pct00262
(S)-39-(((벤질옥시)카르보닐)아미노)-3,13,23,33-테트라옥소-1-페닐-2,17,20,27,30-펜타옥사-14,24,34-트리아자테트라콘탄-40-오익산(200mg, 0.225mmol)을 DMF(5mL)에 용해시키고, 0℃로 냉각시키고, tert-부틸 4-아미노부타노에이트(71.8mg, 0.45mmol) 및 EDC(86.2mg, 0.45mmol)를 순서대로 첨가하였다. 반응을 실온으로 가온하고, 밤새 교반하고, 얼음물에 붓고, DCM(3 x 10mL)으로 추출하였다. 합해진 유기상을 물(5mL), 염수(5mL)로 세척하고, 무수 Na2SO4로 건조하고, 여과하고, 농축하여, 표제 화합물(231mg, 100% 수율)을 수득하였다. ESI m/z C54H86N5O14에 대한 계산치 [M+H]+: 1028.61, 실측치: 1028.61.
실시예 169. (7S,10R,11S,14S)-디-tert-부틸 10,11-비스(((벤질옥시)-카르보닐)아미노)-6,9,12,15-테트라옥소-7,14-비스(31-옥소-2,5,8,11,14,17,20,23,26,29-데카옥사-32-아자헥사트리아콘탄-36-일)-5,8,13,16-테트라아자이코산-1,20-디오에이트(342)의 합성
Figure pct00263
메탄올(30mL) 중 (S)-tert-부틸 37-(((벤질옥시)카르보닐)아미노)-31,38-디옥소-2,5,8,11,14,17,20,23,26,29-데카옥사-32,39-디아자트리테트라콘탄-43-오에이트(5.98g, 6.73mmol) 및 Pd/C(10wt%, 0.6g)의 혼합물을 1atm H2 압력 하에 밤새 수소화한 다음, 셀라이트(여과 보조제)를 통해 여과하였다. 여과액을 농축하고, THF(60mL)에 재-용해시키고, (2R,3S)-2,3-비스(((벤질옥시)카르보닐)아미노)숙신산(1.01g, 2.42mmol) 및 HOBt(817mg, 6.05mmol)을 0℃에서 첨가하였다. DCC(1.25g, 6.05mmol) 및 DIPEA(2.1mL, 12.10mmol)를 순서대로 첨가하였다. 반응물을 실온에서 밤새 교반한 다음, EtOAc(400mL)로 희석하고, 0.1N HCl, 포화 중탄산나트륨 및 염수로 세척하고, 무수 Na2SO4로 건조하고, 여과하고, 농축하고, SiO2 칼럼 크로마토그래피(24:1 DCM/MeOH)로 정제하여, 표제 화합물(5.65g, 49% 수율)을 수득하였다. MS ESI m/z C90H154N8O34에 대한 계산치 [M+H]+ 1892.06, 실측치1892.60.
실시예 170. (7S,10R,11S,14S)-디-tert-부틸 10,11-디아미노-6,9,12,15-테트라옥소-7,14-비스(31-옥소-2,5,8,11,14,17,20,23,26,29-데카옥사-32-아자헥사트리아콘탄-36-일)-5,8,13,16-테트라아자이코산-1,20-디오에이트(343)의 합성
Figure pct00264
메탄올(50 mL) 중 (7S,10R,11S,14S)-디-tert-부틸 10,11-비스(((벤질옥시)-카르보닐)아미노)-6,9,12,15-테트라옥소-7,14-비스(31-옥소-2,5,8,11,14,17,20,23,26,29-데카옥사-32-아자헥사트리아콘탄-36-일)-5,8,13,16-테트라아자이코산-1,20-디오에이트(3.71 g, 1.96 mmol) 및 Pd/C(10 wt%, 0.40 g)의 혼합물을 1 atm H2 압력 하에 밤새 수소화한 다음, 셀라이트(여과 보조제)를 통해 여과하였다. 여과액을 농축하여 표제 화합물을 수득하였다(3.18g, 100% 수율). MS ESI m/z C74H142N8O30에 대한 계산치 [M+H]+ 1623.98, 실측치 1624.50.
실시예 171. (7S,10R,11S,14S)-10,11-비스(4-(2,5-디옥소-2,5-디히드로-1H-피롤-1-일)부탄아미도)-6,9,12,15-테트라옥소-7,14-비스(31-옥소-2,5,8,11,14,17,20,23,26,29-데카옥사-32-아자헥사트리아콘탄-36-일)-5,8,13,16-테트라아자이코산-1,20-디오익산(344)의 합성
Figure pct00265
DMA (10 mL) 중 (7S,10R,11S,14S)-디-tert-부틸 10,11-디아미노-6,9,12,15-테트라옥소-7,14-비스(31-옥소-2,5,8,11,14,17,20,23,26,29-데카옥사-32-아자헥사트리아콘탄-36-일)-5,8,13,16-테트라아자이코산-1,20-디오에이트(315 mg, 0.194mmol)의 용액에, EDC(150 mg, 0.785 mmol) 및 4-말레이도-부탄산(72 mg, 0.57 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 12시간 동안 교반하고, 농축하고, SiO2 칼럼 크로마토그래피(1:4 MeOH/DCM)로 정제하여, 오일(329 mg, 87% 수율)을 얻었고, 이를 디클로로메탄(25 mL)에 용해시키고, 실온에서 1시간 동안 TFA(5mL)로 처리한 다음, 농축하여, 표제 화합물을 수득하였다(309 mg, 99% 수율). MS ESI m/z C82H140N10O36에 대한 계산치 [M+H]+ 1841.94, 실측치 1842.50.
실시예 172. (S)-11-(5-(tert-부톡시)-2-((tert-부톡시카르보닐)아미노)-5-옥소펜타나미도)운데칸산(345)의 합성
Figure pct00266
DMF(10mL) 중 Boc-Glu(OtBu)-OH(0.50g, 1.65mmol)의 용액에, HATU(0.69g, 1.82mmol) 및 TEA(0.26mL, 1.82mmol)를 첨가하였다. 30분 동안 교반한 후, DMF(10mL) 중 11-아미노운데칸산(0.33g, 1.65mmol)의 용액을 첨가하고, 반응물을 실온에서 1시간 동안 교반하고, 1N HCl 200mL를 함유하는 분별 깔때기에 붓고, DCM(3 x 50mL)으로 추출하였다. 유기상을 100mL의 염수로 1회 세척한 다음, 무수 Na2SO4로 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피(MeOH/DCM)로 정제하여, 표제 화합물(1.0g, >100% 수율)을 수득하였다. ESI: m/z: C25H47N2O7에 대한 계산치 [M+H]+: 487.33, 실측치 487.34.
실시예 173. (S)-11-(2-아미노-4-카르복시부탄아미도)운데칸산의 합성
Figure pct00267
DCM(20mL) 중 (S)-11-(5-(tert-부톡시)-2-((tert-부톡시카르보닐)아미노)-5-옥소펜타나미도)운데칸산(1.0g, ~2.05mmol)의 용액에, TFA(5mL)를 첨가하였다. 반응물을 실온에서 30분 동안 교반한 다음, 농축 건조하고, DCM으로 2회 건조시켰다. 마지막으로, 진공 펌프에 배치하여, 표제 화합물(0.68g, ~2.06mmol, ~100% 수율)을 수득하였다. ESI: m/z: C16H31N2O5에 대한 계산치 [M+H]+: 331.22, 실측치 331.22.
실시예 174. 화합물 347의 합성
Figure pct00268
500mL 플라스크에서, H2N-PEG4-CH2CH2CO2H(3.0g, 11.3mmol, 1.0eq) 및 K2CO3(4.7g, 33.93mmol, 3.0eq)를 물 50mL에 용해시키고, 빙수조에서 냉각시켰다. THF 50mL 중 Boc2O(3.2g, 14.7mmol, 1.3)를 적가하였다. 반응을 실온으로 가온되도록 하고, 밤새 교반하였다. 반응 혼합물을 1N KHSO4로 pH 4-5로 조정하고, DCM(200mL × 1, 100mL × 3)으로 추출하고, 물(500mL × 1) 및 염수(500mL × 1)로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 농축하였다. 잔류물을 소량의 DCM에 용해시키고, 2-4% MeOH/DCM으로 용리되는 실리카겔 칼럼에 로딩하고, 분획을 합하여 농축하여, 무색 오일화합물 347 3.8g(수율 93%)을 수득하였다. ESI m/z C16H32NO8에 대한 계산치 [M+H]+: 366.2, 실측치: 366.2.
실시예 175. 화합물 348의 합성
Figure pct00269
50mL 1구 플라스크에서, BocHN-PEG4-CH2CH2CO2H(0.81g, 2.22mmol, 1.0eq), K2CO3(0.92g, 6.66mmol, 3.0eq) 및 NaI(0.033g, 0.222mmol)를 10 mL의 DMF에서 혼합하고, 빙수조으로 냉각하고, BnBr(0.57 g, 3.33 mmol, 1.5 eq)을 적가하고, 혼합물을 실온으로 가온하고, 밤새 교반하였다. 반응 혼합물을 물 100mL로 희석하고, DCM(100mL × 2)으로 추출하고, 물(200mL × 1) 및 염수(200mL × 1)로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 농축시켰다. 잔류물을 소량의 DCM에 용해시키고, 70-90% EA/PE로 용리되는 실리카겔 칼럼에 로딩하여, 0.69g의 무색 오일 화합물 348을 수득하였다(69% 수율). ESI m/z C23H38NO8에 대한 계산치 [M+H]+: 446.3, 실측치: 446.3.
실시예 176. 화합물 349의 합성
Figure pct00270
6mL의 DCM 및 3mL의 TFA 중 BocHN-PEG4-CH2CH2CO2Bn(0.69g, 1.5mmol, 1.0 eq.)의 용액을 실온에서 30분 동안 교반하였다. 용매를 제거하고, 잔류물을 DCM과 함께 3회 공-증발시키고, 고진공 펌프에 놓았다. 조 생성물을 다음 반응에 직접 사용하였다. ESI m/z C18H30NO6에 대한 계산치 [M+H]+: 356.2, 실측치: 356.2.
실시예 177. 화합물 350의 합성
Figure pct00271
50mL의 드라이 DCM 중 BocHN-PEG4-CH2CH2CO2H(3.8g, 10.4mmol, 1.0 eq.)의 용액에, NHS(1.4g, 12.5mmol, 1.2 eq.) 및 EDC(10.0g, 52.0mmol, 5.0eq)를 첨가하였다. 반응물을 실온에서 밤새 교반한 다음, 물(50mL × 2), 염수(100mL × 1)로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조하고, 농축하였다. 조 생성물을 다음 단계에서 직접 사용하였다. ESI m/z C20H35N2O10에 대한 계산치 [M+H]+: 463.2, 실측치:463.2.
실시예 178. 화합물 351의 합성
Figure pct00272
300mL 플라스크에서, H2N-PEG4-CH2CH2CO2H(2.8g, 10.4mmol, 1.0 eq.) 및 K2CO3(4.3g, 31.2mmol, 3.0 eq.)를 40mL의 물에 용해시키고, 빙수조으로 냉각시키고, 40mL의 THF 중 상기 조 NHS 에스테르 용액(3.8g, 10.4mmol, 1.0 eq.)을 적가하고, 혼합물을 실온으로 가온하고, 밤새 교반하였다. 반응 혼합물을 1N KHSO4를 사용하여 pH 4-5로 조정하고, DCM(150mL × 1, 100mL × 2)으로 추출하고, 물(200mL × 1) 및 염수(200mL × 1)로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 농축시켰다. 잔류물을 소량의 DCM에 용해시키고, 4-6% MeOH/DCM으로 용리되는 실리카겔 칼럼에 로딩하여, 무색 오일을 수득하였다(5.18g, 81% 수율). ESI m/z C27H53N2O13에 대한 계산치 [M+H]+: 613.3, 실측치: 613.3.
실시예 179. 화합물 352의 합성
Figure pct00273
H2N-PEG4-CH2CH2CO2Bn(이전 단계의 조 생성물)을 3mL의 DMF에 용해시키고, 빙/수욕으로 냉각시키고, DIPEA(0.78g, 6.0mmol, 4.0 eq.)를 적가하고, 이어서 7mL의 DMF 중 화합물 22(0.93g, 1.5mmol, 1.0eq) 및 HATU(1.72g, 4.5mmol, 3.0eq)의 용액을 첨가하였다. 반응물을 빙조에서 2시간 동안 교반하고, 100mL의 물로 희석하고, DCM(100mL x 3)으로 추출하고, 1N KHSO4(200mL x 1), 포화 중탄산나트륨(200mL x 1), 및 염수(200 mL × 1)로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조하고, 농축하였다. 잔류물을 소량의 DCM에 용해시키고, 0-5% MeOH/DCM으로 용리하는 실리카겔 칼럼에 로딩하였다. 분획을 합하고 농축하여, 1.0g의 담황색 오일을 수득하였다(71% 수율). ESI m/z C45H80N3O18에 대한 계산치 [M+H]+: 950.5, 실측치: 950.5.
실시예 180. (S)-tert-부틸 34-(((벤질옥시)카르보닐)아미노)-28,35-디옥소-2,5,8,11,14,17,20,23,26-노나옥사-29,36-디아자테트라콘탄-40-오에이트(196)의 합성
Figure pct00274
DMF(18mL) 중 tert-부틸 4-아미노부타노에이트(1.03g, 6.12mmol) 및 (S)-34-(((벤질-옥시)카르보닐)아미노)-28-옥소-2,5,8,11,14,17,20,23,26-노나옥사-29-아자펜타트리아콘탄-35-오익산(3.91g, 5.56mmol)의 혼합물에, HATU(2.32g, 6.12mmol) 및 TEA(1.2mL, 8.34)를 0℃에서 순서대로 첨가하였다. 반응물을 1시간 동안 교반한 다음, 물(300mL)로 희석하고, 에틸 아세테이트(3 x 250mL)로 추출하였다. 유기 용액을 염수로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조하고, 여과하고, 농축시키고, 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(32:1 디클로로메탄/메탄올)로 정제하여, 표제 화합물을 수득하였다(5.10 g, 99% 수율). ESI MS m/z 846.50 ([M+H]+).
실시예 181. (S)-tert-부틸 34-아미노-28,35-디옥소-2,5,8,11,14,17,20,23,26-노나옥사-29,36-디아자테트라콘탄-40-오에이트(197)의 합성
Figure pct00275
화합물 210(1.0g, 1.18mmol) 및 Pd/C(10wt%, 0.10g)를 메탄올(50mL)이 담긴 수소화 병에 첨가하였다. 혼합물을 2시간 동안 진탕하고, 셀라이트(여과 보조제)를 통해 여과하고, 여과액을 농축하여, 화합물 197(0.93g, 수율 >100%)을 수득하였다. ESI MS m/z 712.50 ([M+H]+).
실시예 182. (S)-tert-부틸 34-(4-(2,5-디옥소-2,5-디히드로-1H-피롤-1-일)부탄아미도)-28,35-디옥소-2,5,8,11,14,17,20,23,26-노나옥사-29,36-디아자테트라콘탄-40-오에이트(353)의 합성
Figure pct00276
95% EtOH(50mL) 및 NaH2PO4 용액(0.1M, pH 5.0, 10mL) 중 화합물 197(0.93g, 1.18mmol)의 용액에, N-숙신이미딜 4-말레이미도-부티레이트(0.50g, 1.77mmol, 1.5 eq.)을 첨가하였다. 혼합물을 밤새 교반한 다음, 농축하고, 물(50mL)로 희석하고, 디클로로메탄(80mL x 3)으로 추출하고, 무수 황산나트륨으로 건조하고, 여과하고, 농축하고, 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(25:1 디클로로메탄/메탄올)로 정제하여, 표제 화합물을 밝은 황색 오일로서 수득하였다(0.82 g, 80%). ESI MS m/z 877.52 ([M+H]+).
실시예 183. (S)-34-(4-(2,5-디옥소-2,5-디히드로-1H-피롤-1-일)부탄아미도)-28,35-디옥소-2,5,8,11,14,17,20,23,26-노나옥사-29,36-디아자테트라콘탄-40-오익산(354)의 합성
Figure pct00277
화합물 353(0.82g, 0.94mmol)을 HCOOH(50mL)에 용해시키고, 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 농축하고, 톨루엔과 함께 2회 공-증발시키고, 잔류물을 진공 펌프에 놓아, 화합물 354(0.80g, 조 생성물)를 수득하였다. ESI MS m/z 820.45 ([M+H]+).
실시예 184. (S)-2,5-디옥소피롤리딘-1-일 34-(4-(2,5-디옥소-2,5-디히드로-1H-피롤-1-일)부탄아미도)-28,35-디옥소-2,5,8,11,14,17,20,23,26-노나옥사-29,36-디아자테트라콘탄-40-오에이트(355)의 합성
Figure pct00278
DMA(5.0mL) 중 화합물 213(0.80g, 조 물질, 0.94mmol)의 용액에, NHS(0.12g, 1.03mmol) 및 EDC·HCl(0.27g, 1.41mmol)을 첨가하고, 반응물을 실온에서 2시간 동안 교반한 다음, 물(15mL)로 희석하고, 에틸 아세테이트(3 x 10mL)로 추출하였다. 합해진 유기상을 염수(10mL)로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조하고, 여과하고, 농축시켰다. 잔류물을 실리카겔 칼럼(10-50% 에틸 아세테이트/석유 에테르)으로 정제하여, 무색 오일 화합물(0.67g, 78% 수율)을 수득하였다. ESI MS m/z 918.55 ([M+H]+).
실시예 185. tert-부틸 (2-(2,5-디옥소-2,5-디히드로-1H-피롤-1-일)에틸)카르바메이트(356)의 합성
Figure pct00279
N-Boc-에틸렌디아민(5.6mL, 35.4mmol, 1.1 eq.) 및 포화 NaHCO3(60mL)의 혼합물을 0℃로 냉각하고, 여기에 N-메톡시카르보닐 말레이미드(5.00g, 32.2mmol, 1.0 eq.)를 부분적으로 첨가하였다. 0℃에서 30분 동안 교반한 후, 반응물을 실온으로 가온하고, 1시간 동안 교반하였다. 침전물을 여과하여 수집하고, 냉수로 세척한 다음, 에틸 아세테이트에 용해시키고, 염수로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조하고, 농축하여, 백색 고체를 수득하였다(6.69g, 87% 수율). EESI MS m/z 241.12 ([M+H]+).
실시예 186. tert-부틸 (2-(1,3-디옥소-3a,4,7,7a-테트라히드로-1H-4,7-에폭시이소인돌-2(3H)-일)에틸)카르바메이트(357)의 합성
Figure pct00280
고압 튜브에서, 톨루엔(120mL) 중 화합물 356(6.00g, 25.0mmol), 푸란(18.0mL)의 용액을 환류 가열하고, 16시간 동안 교반하였다. 무색 용액은 반응 중에 황색으로 변하였다. 그 다음, 혼합물을 실온으로 냉각시키고 농축시켰다. 생성된 백색 고체를 에틸 에테르로 연화처리하여, 화합물 357(6.5g, 84% 수율)을 수득하였다. ESI MS m/z 309.13 ([M+H]+).
실시예 187. 2-(2-아미노에틸)-3a,4,7,7a-테트라히드로-1H-4,7-에폭시이소인돌-1,3(2H)-디온 히드로클로라이드(358)의 합성
Figure pct00281
디옥산(15mL) 중 화합물 357(9.93g, 32.2mmol)의 용액을 진한 HCl(15mL)로 실온에서 3시간 동안 처리하였다. 반응물을 농축하고, 생성된 고체를 여과에 의해 수집하고, 필터 케이크를 에틸 아세테이트로 세척하였다. 고체를 오븐(50℃)에서 밤새 건조시켜, 화합물 217(6.94g, 88% 수율)을 수득하였다. ESI MS m/z 206.05 ([M+H]+).
실시예 188. 화합물 359의 합성
Figure pct00282
-10℃에서 THF(10mL) 및 CH3CN(10ml) 중 화합물 358(1.22g, 5mmol)의 용액에, POCl3(0.47mL, 5mmol)를 첨가하였다. 10분 동안 교반한 후, 2,5,8,11,14,17,20,23,26-노나옥사옥타코산-28-아민(2.14g, 5mmol)을 첨가하고, 이어서 DIPEA(0.87mL, 5mmol)를 첨가하였다. 반응물을 0℃로 가온하고 3시간 동안 교반한 다음, 농축시켰다. 잔류물을 디클로로메탄(10mL)으로 희석하고, 셀라이트 상에서 여과하고, 여과액을 진공에서 농축하여, 조 화합물(~3.7g, ~50% 순도)을 수득하였고, 이를 다음 단계에서 직접 사용하였다. ESI MS m/z 716.29 ([M+H]+).
실시예 189. 화합물 360의 합성
Figure pct00283
CH3CN(20ml) 및 DIPEA(0.87ml, 5mmol) 중의 2-(2-(2-아미노아세트아미도)아세트아미도)아세트산(gly-gly-gly, 0.501g, 2.644mmol)의 용액에, 화합물 359( 1.00g, 50% 순도, ~0.699mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 40℃에서 6시간 동안 교반하고, 농축하고, 분취용 HPLC(아세토니트릴/포름산 함유 물, Φ = 5cm, v = 30ml/min, 45분 내에 70% 물에서 25% 물)로 정제하여, 화합물 360(321.5 mg, ~53% 수율)을 수득하였다. ESI-MS m/z: (M+H)+ C35H62N6O17P에 대한 계산치: 869.3910; 실측치 869.3995.
실시예 190. 화합물 361의 합성
Figure pct00284
DMA(10ml) 및 톨루엔(10ml) 중 화합물 360(160.1mg, 0.184mmol)의 용액을 8시간 동안 환류시키고, 농축하고, 분취용 C-18 HPLC(아세토니트릴/1% 포름산 함유 물, Φ = 3 cm, v = 20 ml/분, 45분 내에 70% 물에서 25% 물)로 정제하고, 동결건조 후, 화합물 361(125.5 mg, 85% 수율)을 수득하였다. ESI-MS m/z: (M+H)+ C35H62N6O17P에 대한 계산치: 801.3648; 실측치 801.3725.
실시예 190. 화합물 362의 합성
Figure pct00285
DMF(5mL) 중 화합물 40(50mg, 0.064mmol) 및 화합물 361(51.5mg, 0.064mmol)의 용액에, EDC(99.5mg, 0.517mmol) 및 N,N-디이소프로필에틸아민(45μL, 0.26mmol)을 첨가하였다. 반응물을 실온에서 6시간 동안 교반하고, 농축하고, 분취용 C-18 HPLC(아세토니트릴/0.5% 포름산 함유 물, Φ = 3cm, v = 20ml/min, 70% 물에서 25% 물 45분)로 정제하여, 화합물 41(66.7 mg, 71% 수율)을 수득하였다. ESI-MS m/z: M+ C45H49FN7O9에 대한 계산치: 1467.6607; 실측치 1467.6675.
실시예 191. 14-(벤질옥시)-14-옥소테트라데칸산(363)의 합성
Figure pct00286
DMF(30mL) 중 테트라데칸이산(2.06g, 8mmol)의 용액에, K2CO3(1.1g, 8mmol) 및 BnBr(1.36g, 8mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 밤새 교반한 다음, 농축하고, 칼럼 크로마토그래피(에틸 아세테이트/석유 에테르)로 정제하여, 표제 화합물 363(1.2g, 45% 수율)을 수득하였다. ESI MS m/z 349.23 ([M+H]+).
실시예 192. tert-부틸 3-(2-(2-(2-히드록시에톡시)에톡시)에톡시)프로파노에이트(364)의 합성
Figure pct00287
무수 THF(200mL) 중 2,2'-(에탄-1,2-디일비스(옥시))디에탄올(55.0mL, 410.75mmol, 3.0 eq.)의 용액에, 나트륨(0.1g)을 첨가하였다. 혼합물을 Na이 사라질 때까지 교반한 다음, tert-부틸 아크릴레이트(20.0 mL, 137.79 mmol, 1.0 eq.)를 적가하였다. 혼합물을 밤새 교반한 다음, 0℃에서 HCl 용액(20.0mL, 1N)으로 켄칭하였다. THF를 회전 증발에 의해 제거하고, 염수(300mL)를 첨가하고, 생성된 혼합물을 에틸 아세테이트(3 x 100mL)로 추출하였다. 유기층을 염수(3 x 300mL)로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조하고, 여과하고, 농축하여, 표제 화합물의 무색 오일(30.20g, 79.0% 수율)을 얻었고, 이를 추가 정제 없이 사용하였다. MS ESI m/z 278.17 ([M+H]+).
실시예 193. tert-부틸 3-(2-(2-(2-(토실옥시)에톡시)에톡시)에톡시)프로파노에이트(365)의 합성
Figure pct00288
0℃에서 무수 DCM(220mL) 중 tert-부틸 3-(2-(2-(2-히드록시에톡시)에톡시)에톡시)프로파노에이트(30.20g, 108.5mmol, 1.0 eq.) 및 TsCl(41.37g, 217.0mmol, 2.0 eq.)의 용액에, TEA(30.0mL, 217.0mmol, 2.0 eq.)를 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 밤새 교반한 다음, 물(3 x 300mL) 및 염수(300mL)로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하고, 농축하고, 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(3:1 헥산/에틸 아세테이트)로 정제하여, 무색 오일을 수득하였다(39.4g, 84.0% 수율). MS ESI m/z 433.28 ([M+H]+).
실시예 194. tert-부틸 3-(2-(2-(2-아지도에톡시)에톡시)에톡시)프로파노에이트(366)의 합성
Figure pct00289
무수 DMF(100 mL) 중 tert-부틸 3-(2-(2-(2-(토실옥시)에톡시)에톡시)에톡시) 프로파노에이트(39.4 g, 91.1 mmol, 1.0 eq.)의 용액에, NaN3(20.67 g, 316.6mmol, 3.5 eq.)을 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 물(500mL)을 첨가하고, 에틸 아세테이트(3 x 300mL)로 추출하였다. 합한 유기층을 물(3 x 900mL) 및 염수(900mL)로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조하고, 여과하고, 농축하고, 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(5:1 헥산/에틸 아세테이트)로 정제하여, 담황색 오일(23.8g, 85.53% 수율)을 수득하였다. MS ESI m/z 326.2 (M + Na]+).
실시예 195. tert-부틸 3-(2-(2-(2-아미노에톡시)에톡시)에톡시)프로파노에이트(367)의 합성
Figure pct00290
라니(Raney)-Ni(7.5g, 물에 현탁됨)를 물(3회) 및 이소프로필 알코올(3회)로 세척하고, 이소프로필 알코올 중 화합물 366(5.0g, 16.5mmol)과 혼합하였다. 혼합물을 H2 벌룬 하에 실온에서 16시간 동안 교반하고, 셀라이트 패드로 여과하고, 이소프로필 알코올 패드로 세척하였다. 여과액을 농축하고, 칼럼 크로마토그래피(5-25% 메탄올/디클로로메탄)로 정제하여, 담황색 오일(2.60g, 57% 수율)을 수득하였다. MS ESI m/z 279.19 ([M+H]+).
실시예 196. 27-벤질 1-tert-부틸 14-옥소-4,7,10-트리옥사-13-아자헵타코산-1,27-디오에이트(368)의 합성
Figure pct00291
디클로로메탄(50mL) 중 화합물 363(2.60g, 9.35mmol) 및 화합물 367(3.91g, 11.2mmol)의 용액에, EDC·HCl(2.15g, 11.2mmol) 및 DIPEA(3.6mL, 20.6mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하고, 디클로로메탄 50mL로 희석하고, 물 50mL를 함유하는 분액 깔때기에 부었다. 유기상을 분리하고, 염수(50mL)로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조하고, 여과하고, 농축시켰다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피(0-10% 메탄올/디클로로메탄)로 정제하여, 표제 화합물 368(4.94g, 87% 수율)을 수득하였다. ESI m/z 608.40 ([M+H]+).
실시예 197. 3,16-디옥소-1-페닐-2,20,23,26-테트라옥사-17-아자노나코산-29-오익산(369)의 합성
Figure pct00292
디클로로메탄(20mL) 중 화합물 368(4.94g, 8.14mmol)의 용액에, TFA(20mL)를 첨가하였다. 반응물을 실온에서 1시간 동안 교반한 다음, 농축 건조하고, 디클로로메탄으로 2회 공-증발시키고, 잔류물을 펌프에 놓아, 화합물 369(4.50g, 조 생성물)를 수득하였다. ESI MS m/z 552.35 ([M+H]+).
실시예 198. 40-벤질 1-tert-부틸 14,27-디옥소-4,7,10,17,20,23-헥사옥사-13,26-디아자테트라콘탄-1,40-디오에이트(370)의 합성
Figure pct00293
디클로로메탄(50mL) 중 화합물 369(4.50g, 조(crude), 8.14mmol) 및 화합물 367(1.95g, 7.00mmol)의 용액에, EDC·HCl(1.56g, 8.14mmol) 및 DIPEA(2.7mL, 15.4mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하고, 디클로로메탄 50mL로 희석하고, 물 50mL를 함유하는 분액 깔때기에 부었다. 유기상을 분리하고, 염수(50mL)로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조하고, 여과하고, 농축시켰다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피(0-10% 메탄올/디클로로메탄)로 정제하여, 표제 화합물 370(5.22 g, 92% 수율)을 수득하였다. ESI m/z 811.52 ([M+H]+).
실시예 199. 3,16,29-트리옥소-1-페닐-2,20,23,26,33,36,39-헵타옥사-17,30-디아자도테트라콘탄-42-오익산(371)의 합성
Figure pct00294
디클로로메탄(20mL) 중 화합물 370(5.22g, 6.44mmol)의 용액에, TFA(5mL)를 첨가하였다. 반응물을 실온에서 1시간 동안 교반한 다음, 농축 건조하고, 디클로로메탄으로 2회 공-증발시키고, 잔류물을 펌프에 놓아, 화합물 370(4.90g, 조 생성물)을 수득하였다. ESI MS m/z 755.46 ([M+H]+).
실시예 200. 40-벤질 1-(2,5-디옥소피롤리딘-1-일) 14,27-디옥소-4,7,10,17,20,23-헥사옥사-13,26-디아자테트라콘탄-1,40-디오에이트(372)의 합성
Figure pct00295
디클로로메탄(30mL) 중 화합물 371(4.90g, 조 물질, 6.44mmol)의 용액에, NHS(0.81g, 7.08mmol), EDC·HCl(1.85g, 9.66mmol) 및 DIPEA(2.8mL, 16.1mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 교반한 다음, 2시간 동안 물(50mL)로 희석하고, 에틸 아세테이트(3 x 30mL)로 추출하였다. 합해진 유기상을 염수(30mL)로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조하고, 여과하고, 농축시켰다. 잔류물을 실리카겔 칼럼(10-50% 에틸 아세테이트/석유 에테르)으로 정제하여, 무색 오일 372(4.90g, 90% 수율)를 수득하였다. ESI MS m/z 852.48 ([M+H]+).
실시예 201. 1-((2,5-디옥소피롤리딘-1-일)옥시)-1,14,27-트리옥소-4,7,10,17,20,23-헥사옥사-13,26-디아자테트라콘탄-40-오익산(373)의 합성
Figure pct00296
수소화 병 내의 THF(20mL) 중 화합물 372(4.90g, 5.75mmol)의 용액에, Pd/C(10wt%, 0.20g)를 첨가하였다. 혼합물을 1 atm H2하에 밤새 교반하고, 셀라이트(여과 보조제)를 통해 여과하고, 여과된 용액을 농축하여, 화합물 373(4.50 g, >100% 수율)을 수득하였다. ESI MS m/z 762.44 ([M+H]+).
실시예 202. (S)-퍼플루오로페닐 2-((S)-2-(4-(비스(2-(2,5-디옥소-2,5-디히드로-1H-피롤-1-일)에틸)아미노)-4-옥소부탄아미도)프로판아미도)프로파노에이트(374)의 합성
Figure pct00297
디클로로메탄(5 mL) 중 (S)-2-((S)-2-(4-(비스(2-(2,5-디옥소-2,5-디히드로-1H-피롤-1-일)에틸)아미노)-4-옥소부탄아미도)프로판아미도)프로판산(47 mg, 0.084 mmol)의 용액에, EDC(210 mg, 1.10 mmol) 및 펜타플루오로페놀(50.0 mg, 0.27 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 3시간 동안 교반하고, 농축하고, 실리카겔 칼럼(디클로로메탄/EtOAc = 20:1 내지 5:1)에서 정제하여, 표제 화합물 374(44.6 mg, 79% 수율)를 수득하였다. MS-ESI m/z: [M+H]+ C28H27F5N5O9에 대한 계산치 672.17; 실측치 672.17.
실시예 203. 디-tert-부틸 1,2-비스(2-(tert-부톡시)-2-옥소에틸)히드라진-1,2-디카르복실레이트(375)의 합성
Figure pct00298
DMF(150ml) 중 디-tert-부틸 히드라진-1,2-디카르복실레이트(8.01g, 34,4mmol)의 용액에, NaH(오일 중 60%, 2.76g, 68.8mmol)를 첨가하였다. 실온에서 30분 동안 교반한 후, tert-부틸 2-브로모아세테이트(14.01g, 72.1mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 밤새 교반하고, 메탄올(3 ml)을 첨가하여 켄칭하고, 농축하고, EtOAc(100 ml) 및 물(100 ml)로 희석하고, 분리하고, 수성 층을 EtOAc(2 x 50 ml)로 추출하였다. 유기층을 합하고, MgSO4로 건조하고, 여과하고, 증발시키고, SiO2 칼럼 크로마토그래피(EtOAc/헥산1:5에서 1:3)로 정제하여, 표제 화합물(12.98g, 82% 수율)을 무색 오일로서 수득하였다. MS ESI m/z C22H41N2O8에 대한 계산치 [M+H]+ 461.28, 실측치 461.40.
실시예 204. 2,2'-(히드라진-1,2-디일)디아세트산(376)의 합성
Figure pct00299
1,4-디옥산(40 ml) 중 디-tert-부틸 1,2-비스(2-(tert-부톡시)-2-옥소에틸)히드라진-1,2-디카르복실레이트(6.51 g, 14.14 mmol)의 용액에, HCl(12 M, 10 ml)을 첨가하였다. 혼합물을 30분 동안 교반하고, 디옥산(20 ml) 및 톨루엔(40 ml)으로 희석하고, 증발시키고, 디옥산(20 ml) 및 톨루엔(40 ml)과 함께 건조되게 공-증발시켜, 추가 제조 없이 다음 단계를 위한 조 표제 생성물을 수득하였다. (2.15g, 103% 수율, ~93% 순도). MS ESI m/z C4H9N2O4에 대한 계산치 [M+H]+ 149.05, 실측치 149.40.
실시예 205. 2,2'-(1,2-비스((E)-3-브로모아크릴로일)히드라진-1,2-디일)디아세트산(377)의 합성
Figure pct00300
THF(50ml) 및 NaH2PO4(0.1M, 80ml, pH 6.0)의 혼합물 중 2,2'-(히드라진-1,2-디일)디아세트산(1.10g, 7.43mmol)의 용액에, (E)-3 -브로모아크릴로일 브로마이드(5.01g, 23.60mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 6시간 동안 교반하고, 농축하고, 3% 포름산을 함유하는 H2O/CH3CN(1:9)으로 용리되는 SiO2 칼럼 상에서 정제하여, 표제 화합물을 수득하였다(2.35g, 77% 수율, ~93% 순도). MS ESI m/z C10H11Br2N2O6에 대한 계산치 [M+H]+ 412.89, 실측치 413.50.
실시예 206. 2,2'-(1,2-비스((E)-3-브로모아크릴로일)히드라진-1,2-디일)디아세틸 클로라이드(378)의 합성
Figure pct00301
디클로로에탄(15 ml) 중 2,2'-(1,2-비스((E)-3-브로모아크릴로일)히드라진-1,2-디일)디아세트산(210 mg, 0.509 mmol)의 용액에, (COCl )2(505 mg, 4.01 mmol)를 첨가하고, 이어서 DMF 0.040 ml를 첨가하였다. 실온에서 2시간 동안 교반한 후, 혼합물을 농축하고, 디클로로에탄(2 x 20 ml) 및 톨루엔(2 x 15 ml)과 함께 건조되게 공-증발 건조시켜, 추가 정제 없이 다음 단계를 위한 표제 조 생성물(안정적이지 않음)을 수득하였다(245 mg, 107% 수율). MS ESI m/z C10H9Br2Cl2N2O4에 대한 계산치 [M+H]+ 448.82, 450.82, 452.82, 454.82; 실측치 448.60, 450.60, 452.60, 454.60.
실시예 207. tert-부틸 2,8-디옥소-1,5-옥사조칸-5-카르복실레이트(380)의 합성
Figure pct00302
4℃에서 1.0M NaOH(300ml) 중 3,3'-아잔디일디프로판산(10.00g, 62.08mmol)의 용액에, 200ml THF 중 디-tert-부틸 디카보네이트(22.10g, 101.3mmol)를 1시간 안내 첨가하였다. 첨가 후, 혼합물을 4℃에서 2시간 동안 계속 교반하였다. 혼합물을 0.2 M H3PO4로 pH ~4로 조심스럽게 산성화하고, 진공에서 농축하고, CH2Cl2로 추출하고, Na2SO4로 건조시키고, 증발시키고, AcOH/MeOH/CH2Cl2(0.01:1:5)로 용리되는 플래시 SiO2 크로마토그래피로 정제하여, 3,3'-((tert-부톡시카르보닐)아잔디일)디프로판산 379(13.62g, 84% 수율)을 수득하였다. ESI MS m/z C11H19NO6에 대한 계산치[M+H]+ 262.27, 실측치 262.40.
0℃에서 CH2Cl2(500ml) 중 3,3'-((tert-부톡시카르보닐)아잔디일)디프로판산(8.0g, 30.6mmol)의 용액에, 오산화인(8.70g, 61.30mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 0℃에서 2시간 동안 교반한 다음, 실온에서 1시간 동안 교반하고, 짧은 SiO2 칼럼을 통해 여과하고, 칼럼을 EtOAc/CH2Cl2(1:6)로 헹구었다. 여과액을 농축하고, EtOAc/헥산으로 연화처리하여, 표제 화합물 380(5.64g, 74% 수율)을 수득하였다. ESI MS m/z C11H17NO5에 대한 계산치 [M+H]+ 244.11, 실측치 244.30.
실시예 208. 4-(2,5-디옥소-2,5-디히드로-1H-피롤-1-일)부탄산(381)의 합성
Figure pct00303
아세트산(1L) 중 말레산 무수물(268g, 2.73mol)의 용액에, 4-아미노부탄산(285g, 2.76mol)을 첨가하였다. 실온에서 30분 동안 교반한 후, 반응물을 1.5시간 동안 환류시키고, 실온으로 냉각시키고, 진공 하에 증발시켜 잔류물을 얻었고, 이것을 EA에 용해시키고, 물과 염수로 세척하고, 무수 Na2SO4로 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 조 생성물을 EtOAc 및 PE로부터 결정화하여, 백색 고체를 수득하였다(400g, 80% 수율). 1H NMR(500MHz, CDCl3) δ 6.71(s, 2H), 3.60(t, J = 6.7Hz, 2H), 2.38(t, J = 7.3Hz, 2H), 2.00 - 1.84(m, 2H).
실시예 209. 2,5-디옥소피롤리딘-1-일 4-(2,5-디옥소-2,5-디히드로-1H-피롤-1-일)부타노에이트(382)의 합성
Figure pct00304
4-(2,5-디옥소-2,5-디히드로-1H-피롤-1-일)부탄산(400g, 2.18mol, 1.0 eq.)을 CH2Cl2(1.5L)에 용해시키고, 여기에 N-히드록시숙신이미드 (276 g, 2.40 mmol, 1.1 eq.) 및 DIC(303 g, 2.40 mol, 1.1 eq.)를 실온에서 첨가하고, 밤새 교반하였다. 반응물을 농축하고, 칼럼 크로마토그래피(1:2 석유 에테르/EtOAc)로 정제하여, NHS 에스테르를 백색 고체로서 수득하였다(382g, 63% 수율). 1H NMR(500MHz, CDCl3) δ 6.74(s, 2H), 3.67(t, J = 6.8Hz, 2H), 2.85(s, 4H), 2.68(t, J = 7.5Hz, 2H), 2.13 - 2. 03 (m, 2H).
실시예 210. (S)-2-(4-(2,5-디옥소-2,5-디히드로-1H-피롤-1-일)부탄아미도)프로판산(383)의 합성
Figure pct00305
0℃에서 DMF(50mL) 중 화합물 382(7.10g, 25.35mmol) 및 알라닌(3.01g, 33.80mmol)의 용액에, DIPEA(10mL)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 0℃에서 0.5시간 동안 교반하고, 이어서 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 그 다음, 반응 혼합물을 농축하고, SiO2 칼럼(이동 상: DCM/MeOH = 10:1, 0.1% 포름산 포함)에서 정제하여, 화합물 383(5.21g, 81% 수율)을 수득하였다. MS-ESI m/z: [M+H]+ C11H14N2O5에 대한 계산치 255.09; 실측치 255.15.
실시예 211. (S)-2,5-디옥소피롤리딘-1-일 2-(4-(2,5-디옥소-2,5-디히드로-1H-피롤-1-일)부탄아미도)프로파노에이트(384)의 합성
Figure pct00306
DCM(70ml) 중의 화합물 383(5.15g, 20.26mmol), N-하이드록시숙신이미드(2.80g, 24.34mmol), EDC(10.28g, 54.10mmol) 및 DIPEA(5.50ml, 31.63mmol)의 용액을 6시간 동안 교반하고, 진공에서 증발시키고, SiO2 칼럼(이동 상: DCM/EtOAc = 10:1)에서 정제하여, 화합물 384(5.83g, 82% 수율)를 수득하였다. MS-ESI m/z: [M+H]+ C15H17N3O7에 대한 계산치 351.11; 실측치 351.20.
실시예 212. (S)-1-벤질 5-tert-부틸 2-(14-(벤질옥시)-14-옥소테트라데칸아미도)펜탄디오에이트(385)의 합성
Figure pct00307
CH2Cl2(200ml) 중의 (S)-1-벤질 5-tert-부틸 2-아미노펜탄디오에이트, HCl 염(8.70g, 26.39mmol), 14-(벤질옥시)-14-옥소테트라데칸산(9.19mmol), DIPEA(8.0ml, 46.0mmol) 및 EDC(15.3g, 80.50mmol)의 용액을 실온에서 6시간 동안 교반하였다. 혼합물을 물(100ml)로 희석하고, 분리하였다. 수성상을 CH2Cl2(100ml)로 추출하였다. 유기상을 합하고, 염수로 세척하고, Na2SO4로 건조하고, 여과하고, 농축하고, 실리카겔 칼럼(디클로로메탄/EtOAc = 20:1 내지 5:1)에서 정제하여, 표제 화합물 385(13.65g, 83% 수율)를 수득하였다. MS-ESI m/z: [M+H]+ C37H54NO7에 대한 계산치 624.38; 실측치 624.38.
실시예 213. (S)-5-(벤질옥시)-4-(14-(벤질옥시)-14-옥소테트라데칸아미도)-5-옥소펜타노산(386)의 합성
Figure pct00308
화합물 385(12.50g, 20.05mmol)를 4℃에서 디옥산(30mL)에 용해시키고, 염산(10mL, 36% 농도)으로 0.5시간 동안 처리하였다. 반응 혼합물을 톨루엔(20ml) 및 DMF(20ml)로 희석하고, 15℃에서 증발시켜, 표제 화합물 386(11.26g, 99% 수율)을 수득하였다. MS-ESI m/z: [M+H]+ C33H46NO7에 대한 계산치 568.32; 실측치 568.34.
실시예 214. (S)-35,49-디벤질 1-tert-부틸 16,32,37-트리옥소-3,6,9,12,19,22,25,28-옥타옥사-15,31,36-트리아자노나테트라콘탄-1,35,49-트리카르복실레이트(387)의 합성
Figure pct00309
CH2Cl2(200ml) 중의 화합물 386(10.70g, 18.86mmol), tert-부틸 1-아미노-15-옥소-3,6,9,12,19,22,25,28-옥타옥사-16-아자헨트리아콘탄-31-오에이트 HCl 염(11.45g, 18.93mmol), EDC(9.51g, 50.01mmol) 및 DIPEA(4.00ml, 23.00mol)의 혼합물을 밤새 교반하고, 염수(100ml)로 희석하고, 분리하였다. 수성상을 CH2Cl2(100ml)로 추출하였다. 유기상을 합하고, 염수로 세척하고, Na2SO4로 건조시키고, 여과하고, 농축하고, 실리카겔 칼럼(디클로로메탄/EtOAc = 10:1 내지 4:1)에서 정제하여, 표제 화합물 387(18.15g, 86% 수율)을 수득하였다. MS-ESI m/z: [M+H]+ C59H96N3O17에 대한 계산치 1118.67; 실측치 1118.80.
실시예 215. (S)-18-((벤질옥시)카르보닐)-3,16,21,37-테트라옥소-1-페닐-2,25,28,31,34,41,44,47,50-노나옥사-17,22,38-트리아자트리펜타콘탄-53-오익산(388)의 합성
Figure pct00310
화합물 387(10.50g, 9.39mmol)을 4℃에서 디옥산(45mL)에 용해시키고, 염산(15mL, 36% 농도)으로 0.5시간 동안 처리하였다. 반응 혼합물을 톨루엔(20ml) 및 DMF(20ml)로 희석하고, 15℃에서 증발시키고, 실리카겔 칼럼(디클로로메탄/MeOH=10:1 내지 6:1)에서 정제하여, 표제 화합물 388(8.67g, 87% 수율))을 수득하였다. MS-ESI m/z: [M+H]+ C55H88N3O17에 대한 계산치 1062.60; 실측치 1062.68.
실시예 216. (18S,59S)-18-((벤질옥시)카르보닐)-59-((tert-부톡시카르보닐)아미노)-3,16,21,37,53-펜타옥소-1-페닐-2,25,28,31,34,41,44,47,50-노나옥사-17,22,38,54-테트라아자헥사콘탄-60-오익산(389)의 합성
Figure pct00311
THF(150ml) 중의 화합물 388(8.50g, 8.01mmol), N-하이드록시숙신이미드(3.20g, 27.82mmol), EDC(10.28g, 54.10mmol) 및 DIPEA(6.00ml, 34.51mmol)의 용액을 6시간 동안 교반하고, 진공에서 증발시켜, 정제 없이 다음 단계에 사용하기 위한 (S)-18-((벤질옥시)카르보닐)-3,16,21,37-테트라옥소-1-페닐-2,25,28,31,34,41,44,47,50-노나옥사-17,22,38-트리아자트리펜타콘탄-53-오익산의 조 N-숙신이미딜 에스테르를 수득하였다.
DMF(100mL) 및 1.0M Na2PO4(pH 7.5, 55mL) 중 (S)-6-아미노-2-((tert-부톡시카르보닐)아미노)헥산산, HCl 염(2.75g, 9.73mmol)의 용액에, 상기 제조된 N-숙신이미딜 에스테르를 1시간 내에 4분할로 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 추가로 3시간 동안 교반하였다. 농축 후, 잔류물을 실리카겔 칼럼(디클로로메탄/MeOH = 10:1 내지 4:1)에서 정제하여, 표제 화합물 389(8.16g, 79% 수율)를 수득하였다. MS-ESI m/z: [M+H]+ C66H108N5O20에 대한 계산치 1289.75; 실측치 1289.90.
실시예 217. (18S,59S)-59-아미노-18-((벤질옥시)카르보닐)-3,16,21,37,53-펜타옥소-1-페닐-2,25,28,31,34,41,44,47,50-노나옥사-17,22,38,54-테트라아자헥사콘탄-60-오익산, HCl 염(390)의 합성
Figure pct00312
화합물 389(8.10g, 6.28mmol)를 4℃에서 디옥산(40mL)에 용해시키고, 염산(15mL, 36% 농도)으로 0.5시간 동안 처리하였다. 반응 혼합물을 톨루엔(20ml) 및 DMF(20ml)로 희석하고, 15℃에서 증발시켜, 추가 정제 없이 다음 단계를 위한 조 표제 화합물 390(7.71g, 100% 수율)을 수득하였다. MS-ESI m/z: [M+H]+ C61H88N3O17에 대한 계산치 1190.70; 실측치 1190.78.
실시예 218. (S)-2-(4-(2,5-디옥소-2,5-디히드로-1H-피롤-1-일)부탄아미도)-프로판산(391)의 합성
Figure pct00313
0℃에서 DMF(50mL) 중 화합물 301(7.10g, 25.35mmol) 및 알라닌(3.01g, 33.80mmol)의 용액에, DIPEA(10mL)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 0℃에서 0.5시간 동안 교반하고, 이어서 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 그 다음, 반응 혼합물을농축하고, SiO2 칼럼(이동 상: DCM/MeOH = 10:1, 0.1% 포름산 포함)에서 정제하여, 화합물 391(5.21g, 81% 수율)을 수득하였다. MS-ESI m/z: [M+H]+ C11H14N2O5에 대한 계산치 255.09; 실측치 255.15.
실시예 219. (S)-2,5-디옥소피롤리딘-1-일 2-(4-(2,5-디옥소-2,5-디히드로-1H-피롤-1-일)부탄아미도)프로파노에이트(392)의 합성
Figure pct00314
DCM(70ml) 중의 화합물 391(5.15g, 20.26mmol), N-하이드록시숙신이미드(2.80g, 24.34mmol), EDC(10.28g, 54.10mmol) 및 DIPEA(5.50ml, 31.63mmol)의 용액을 6시간 동안 교반하고, 진공에서 증발시키고 SiO2 칼럼(이동 상: DCM/EtOAc = 10:1)에서 정제하여, 화합물 392(5.83g, 82% 수율)를 수득하였다. MS-ESI m/z: [M+H]+ C15H17N3O7에 대한 계산치 351.11; 실측치 351.20.
실시예 220. (18S,59S)-18-((벤질옥시)카르보닐)-59-((S)-2-(4-(2,5-디옥소-2,5-디히드로-1H-피롤-1-일)부탄아미도)프로판아미도)-3,16,21,37,53-펜타옥소-1-페닐-2,25,28,31,34,41,44,47,50-노나옥사-17,22,38,54-테트라아자헥사콘탄-60-오익산(393)의 합성
Figure pct00315
0℃에서 DMF(40mL) 중의 화합물 390(7.61g, 6.39mmol) 및 화합물 392(2.90g, 8.280mmol)의 용액에, DIPEA(7mL)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 0℃에서 0.5시간 동안 교반하고, 이어서 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 그 다음, 반응 혼합물을 농축하고, SiO2 칼럼(이동 상: DCM/MeOH = 10:1, 0.1% 포름산 포함)에서 정제하여, 화합물 393(7.10g, 78% 수율)을 수득하였다. MS-ESI m/z: [M+H]+ C72H112N7O22에 대한 계산치 1426.7782; 실측치 1426.7820.
실시예 221. (18S,59S)-18-((벤질옥시)카르보닐)-59-((S)-2-(4-(2,5-디옥소-2,5-디히드로-1H-피롤-1-일)부탄아미도)프로판아미도)-3,16,21,37,53,60,63,66,69-노나옥소-1-페닐-2,25,28,31,34,41,44,47,50-노나옥사-17,22,38,54,61,64,67,70-옥타아자도헵타콘탄-72-오익산(395)의 합성
Figure pct00316
THF(50ml) 중의 화합물 393(7.05g, 4.94mmol), N-하이드록시숙신이미드(0.92g, 8.00mmol), EDC(3.01g, 15.84mmol) 및 DIPEA(1.00ml, 5.75mmol)의 용액을 6시간 동안 교반하고, 진공에서 증발시켜, 정제 없이 다음 단계에서 사용하기 위한 화합물 393의 조 화합물 394(N-숙신이미딜 에스테르)를 수득하였다
DMF(40mL) 및 1.0M Na2PO4(pH 7.5, 15mL) 중 2-(2-(2-아미노아세트아미도)아세트아미도)아세트산(gly-gly-gly) HCl 염(1.67g, 7.40mmol)의 용액에, 상기 화합물 394를 1시간 내에 4분할로 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 추가로 3시간 동안 교반하였다. 농축 후, 잔류물을 실리카겔 칼럼(디클로로메탄/MeOH = 10:1 내지 7:1)에서 정제하여, 표제 화합물 395(8.16g, 79% 수율)를 수득하였다. MS-ESI m/z: [M+H]+ C78H121N10O25에 대한 계산치 1597.8426; 실측치 1597.8495.
실시예 222. N-(4-((18S,61S,76S)-18-((벤질옥시)카르보닐)-61-((S)-2-(4-(2,5-디옥소-2,5-디하이드로-1H-피롤-1-일)부탄아미도)프로판아미도)-76-메틸-3,16,21,38,55,62,65,68,71,74-데카옥소-1-페닐-2,25,29,32,35,42,46,49,52-노나옥사-17,22,39,56,63,66,69,72,75-노나아자헵타헵타콘타아미도)벤질)-1-(((S)-4-에틸 -8-플루오로-4-히드록시-9-메톡시-3,14-디옥소-3,4,12,14-테트라히드로-1H-피라노[3',4':6,7]인돌리지노[1,2-b]퀴놀린-11-일)메틸)-N,N-디메틸피페리딘-4-아미늄 포르메이트(396)의 합성
Figure pct00317
DMA(10ml) 중의 화합물 395(251mg, 0.157mmol), 화합물 28 TFA 염(147.8mg, 0.157mmol), EDC(101mg, 0.526mmol) 및 DIPEA(0.10ml, 0.575mmol)의 용액을 실온에서 6시간 동안 교반하였다. 혼합물을 진공에서 증발시키고, 분취용 C-18 HPLC(0.5% 포름산을 함유하는 아세토니트릴/물, Φ = 3cm, v = 20ml/min, 45분 내에 90% 물 대 30% 물)에 의해 정제하여, 화합물 396(235.8 mg, 62% 수율)을 수득하였다. ESI-MS m/z: M+ C121H171FN17O31에 대한 계산치 2377.2305; 실측치 2377.2415.
실시예 223. N-(4-((2S,17S,60S)-60,74-디카르복시-17-((S)-2-(4-(2,5-디옥소-2,5-디히드로-1H-피롤-1-일)부탄아미도)프로판아미도)-2-메틸-4,7,10,13,16,23,40,57,62-노나옥소-26,29,32,36,43,46,49,53-옥타옥사-3,6,9,12,15,22,39,56,61-노나아자테트라헵타콘탄-아미도)벤질)-1-(((S)-4-에틸-8-플루오로-4-하이드록시-9-메톡시-3,14-디옥소-3,4,12,14-테트라히드로-1H-피라노[3',4':6,7]인돌리지노[1,2-b]퀴놀린-11-일)메틸)-N,N-디메틸피페리딘-4-아미늄(397)의 합성
Figure pct00318
DCM(2 mL) 중 화합물 396(110 mg, 0.0454 mmol)을 TFA(4 mL)로 1시간 동안 처리하였다. 반응 혼합물을 톨루엔(5 ml) 및 DMF(5 ml)로 희석하고, 증발시키고, 분취용 C-18 HPLC(0.5% 포름산을 함유하는 아세토니트릴/물, Φ = 3 cm, v = 20 ml/min, 95 45분 내에 % 물에서 30% 물로)로 정제하여, 화합물 397(70.2 mg, 69% 수율)을 수득하였다. ESI-MS m/z: M+ C107H159FN17O31에 대한 계산치 2197.1366; 실측치 2197.1410.
실시예 224. (S)-tert-부틸 (2-((2-((2-((1-((4-에틸-8-플루오로-4-히드록시-9-메톡시-3,14-디옥소-3,4,12,14-테트라하이드로-1H-피라노[3',4':6,7]인돌리지노[1,2-b]퀴놀린-11-일)메틸)피페리딘-4-일)아미노)-2-옥소에틸)아미노)-2-옥소에틸)아미노)-2-옥소에틸)카바메이트(398)의 합성
Figure pct00319
DMF(25ml) 및 0.1M NaH2PO4 pH 7.5(50ml) 중 (S)-11-((4-아미노피페리딘-1-일)메틸)-4-에틸-8-플루오로-4-히드록시-9-메톡시-1H-피라노[3',4':6,7]인돌리지노[1,2-b]퀴놀린-3,14(4H,12H)-디온, HCl 염(49)(0.805g, 1.478mmol)의 용액에, 2,5-디옥소피롤리딘-1-일 2,2-디메틸-4,7,10-트리옥소-3-옥사-5,8,11-트리아자트리데칸-13-오에이트(0.855g, 2.214mmol)를 3시간 내에 4분할로 첨가하였다. 첨가 후, 혼합물을 추가로 2시간 동안 교반하고, 농축하고, EtOAc/n-부탄올(1:1, 15 ml x3)로 추출하였다. 유기층을 합하고, 농축하고, 실리카겔 칼럼(디클로로메탄/MeOH = 12:1 내지 7:1)에서 정제하여, 표제 화합물 398(0.841g, 73% 수율)을 수득하였다. MS-ESI m/z: [M+H]+ C38H47FN7O10에 대한 계산치 780.3369; 실측치 780.3415.
실시예 225. (S)-2-아미노-N-(2-((2-((1-((4-에틸-8-플루오로-4-히드록시-9-메톡시-3,14-디옥소-3,4,12,14-테트라하이드로-1H-피라노[3',4':6,7]인돌리지노[1,2-b]퀴놀린-11-일)메틸)피페리딘-4-일)아미노)-2-옥소에틸)아미노)-2-옥소에틸)아세트아미드, HCl 염의 합성
Figure pct00320
화합물 398(0.810g, 1.039mmol)을 4℃에서 디옥산(25mL)에 용해시키고, 염산(10mL, 36% 농도)으로 0.5시간 동안 처리하였다. 반응 혼합물을 톨루엔(15ml) 및 DMF(15ml)로 희석하고, 15℃에서 증발시켜, 추가 정제 없이 다음 단계를 위한 조 표제 화합물 399(0.744g, 100% 수율)를 수득하였다. MS-ESI m/z: [M+H]+ C33H39FN7O8에 대한 계산치 680.2845; 실측치 680.2895.
실시예 226. (2S,10S,11S,19S)-2,19-비스((S)-18-((벤질옥시)카르보닐)-3,16,21,37,53-펜타옥소-1-페닐-2,25,28,31,34,41,44,47,50-노나옥사-17,22,38,54-테트라아자옥타펜타콘탄-58-일)-10,11-비스(4-(2,5-디옥소-2,5-디히드로-1H-피롤-1-일)부탄아미도)-4,9,12,17-테트라옥소-3,8,13,18-테트라아자이코산-1,20-디산(400)의 합성
Figure pct00321
0℃에서 DMF(40mL) 중 화합물 390(2.78g, 2.267mmol) 및 화합물 176(0.951g, 1.129mmol)의 용액에, DIPEA(6mL)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 0℃에서 0.5시간 동안 교반하고, 이어서 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 그 다음, 반응 혼합물을 농축하고, SiO2 칼럼(이동 상: DCM/MeOH = 10:1 내지 3:1, 0.1% 포름산 사용)에서 정제하여, 화합물 400(2.432g, 72% 수율)을 수득하였다. MS-ESI m/z: [M+H]+ C150H231N16O46에 대한 계산치 2992.6229; 실측치 2992.6295.
실시예 227. (15S,56S,64S,65S,73S,114S)-테트라벤질 64,65-비스(4-(2,5-디옥소-2,5-디히드로-1H-피롤-1-일)부탄아미도)-56,73-비스((2-((2-((2-((1-((((S)-4-에틸-8-플루오로-4-히드록시-9-메톡시-3,14-디옥소-3,4,12,14-테트라하이드로-1H-피라노[3',4':6,7]인돌리지노[1,2-b]퀴놀린-11-일)메틸)-피페리딘-4-일)아미노)-2-옥소에틸)아미노)-2-옥소에틸)아미노)-2-옥소에틸)카르바모일)-13,18,34,50,58,63, 66,71,79,95,111,116-도데카옥소-22,25,28,31,38,41,44,47,82,85,88,91,98,101,104,107-헥사데카옥사-14,19,35,51,57,62,67,72,78,94,110,115-도데카아자옥타코사헥탄-1,15,114,128-테트라카르복실레이트(401)의 합성
Figure pct00322
DMF(8ml) 중의 화합물 399(0.150g, 0.209mmol), 화합물 400(0.312g, 0.104mmol), EDC(0.252g, 1.311mmol)의 용액을 8시간 동안 교반하고, 진공에서 증발시키고, 실리카겔 칼럼(디클로로메탄/MeOH = 10:1 내지 7:1)으로 정제하여, 표제 화합물 401(0.301g, 67% 수율)을 수득하였다. MS-ESI m/z: [M+H]+ C216H303F2N30O60에 대한 계산치 4315.1550; 실측치 4315.1685.
실시예 228. (15S,56S,64S,65S,73S,114S)-64,65-비스(4-(2,5-디옥소-2,5-디히드로-1H-피롤-1-일)부탄아미도)-56,73-비스((2-((2-((2-((1-((((S)-4-에틸-8-플루오로-4-히드록시-9-메톡시-3,14-디옥소-3,4,12,14-테트라하이드로-1H-피라노[3',4':6,7]인돌리지노[1,2-b]퀴놀린-11-일)메틸)피페리딘-4-일)아미노)-2-옥소에틸)아미노)-2-옥소에틸)아미노)-2-옥소에틸)카바모일)-13,18,34,50,58,63,66,71,79,95,111,116-도데카옥소-22,25,28,31,38,41,44,47,82,85,88,91,98,101,104,107-헥사데카옥사-14,19,35,51,57,62,67,72,78,94,110,115-도데카아자옥타코사헥탄-1,15,114,128-테트라카르복실산(402)의 합성
Figure pct00323
DCM(2 mL) 중 화합물 401(105 mg, 0.0243 mmol)을 TFA(4 mL)로 1시간 동안 처리하였다. 반응 혼합물을 톨루엔(5ml) 및 DMF(5ml)로 희석하고, 증발시키고, 분취용 C-18 HPLC(0.5% 포름산을 함유하는 아세토니트릴/물, Φ = 3cm, v = 20ml/min, 45분 내에 95% 물에서 30% 물로)로 정제하여, 화합물 402(65.3 mg, 68% 수율)를 수득하였다. ESI-MS m/z: [M+H]+ C188H279F2N30O60에 대한 계산치 3954.9672; 실측치 3954.9785.
실시예 229. (S)-1,1'-(((((2S,20S)-11-(tert-부톡시카르보닐)-2,20-디메틸-4,7,15,18-테트라옥소-3,8,11,14,19-펜타아자헤니코산-1,21-디오일)비스(아잔디일))비스(4,1-페닐렌))비스(메틸렌))비스(4-(((S)-4-에틸-8-플루오로-4-히드록시-9-메톡시-3,14-디옥소-3,4,12,14-테트라히드로-1H-피라노[3',4':6,7]인돌리지노[1,2-b]퀴놀린-11-일)메틸)-1-메틸피페라진-1-이움)포르메이트(405)의 합성
Figure pct00324
DMF(3mL) 중의 화합물 40(96mg, 0.132mmol) 및 화합물 53(26mg, 0.066mmol)의 용액을 0℃로 냉각시키고, HATU(50mg, 0.132mmol) 및 N,N- 디이소프로필에틸아민(46μL, 0.264mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 0℃에서 30분 동안 교반하고, 분취용 C-18 HPLC(아세토니트릴/포름산 함유 물)로 정제하여, 화합물 405(80 mg, 67%)를 수득하였다. ESI-MS m/z: [M]2+ C91H109F2N15O18에 대한 계산치 868.90; 실측치 868.92.
실시예 230. (S)-1,1'-(((((2S,20S)-2,20-디메틸-4,7,15,18-테트라옥소-3,8,11,14,19-펜타아자헤니코산-1,21-디오일)비스(아잔디일))비스(4,1-페닐렌))비스(메틸렌))-비스(4-(((S)-4-에틸-8-플루오로-4-히드록시-9-메톡시-3,14-디옥소-3,4,12,14-테트라히드로-1H-피라노[3',4':6,7]인돌리지노[1,2-b]퀴놀린-11-일)메틸)-1-메틸피페라진-1-이움)포르메이트(406)의 합성
Figure pct00325
화합물 405(80.1 mg, 0.043 mmol)를 TFA/DCM(1 mL/3 mL)에 용해시키고, 실온에서 30분 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 농축 건조시켜, 화합물 406(74.55 mg, 101% 수율)을 수득하였다. ESI-MS m/z: [M]2+ C86H101F2N15O16에 대한 계산치 818.8754; 실측치 818.8810.
실시예 231. (S)-1,1'-(((((2S,20S)-11-((S)-30-(4-(2,5-디옥소-2,5-디히드로-1H-피롤-1-일)부탄아미도)-27,31-디옥소-2,5,8,11,14,17,20,23-옥타옥사-26,32-디아자헥사트리아콘탄-36-오일)-2,20-디메틸-4,7,15,18-테트라옥소-3,8,11,14,19-펜타아자헤니코산-1,21-디오일)비스(아잔-디일))비스(4,1-페닐렌))비스(메틸렌))비스(4-(((S)-4-에틸-8-플루오로-4-히드록시-9-메톡시-3,14-디옥소-3,4,12,14-테트라히드로-1H-피라노[3',4':6,7]인돌리지노[1,2-b]퀴놀린-11-일)메틸)-1-메틸피페라진-1-이움)포르메이트(407)의 합성
Figure pct00326
화합물 406(74.0mg, 0.043mmol) 및 화합물 7(39mg, 0.0516mmol)을 DMF(3mL)에 용해시키고, 약 0℃로 냉각시킨 다음, N,N-디이소프로필에틸아민(42μL, 0.24mmol)을 첨가하였다. 반응물을 실온으로 가온하고, 2시간 동안 교반하고, 농축하고, 분취용 C-18 HPLC(아세토니트릴/2% 포름산 함유 물)로 정제하여, 화합물 407(42 mg, 45% 수율)을 수득하였다. ESI-MS m/z: M2+ C120H157F2N19O30에 대한 계산치 1191.06; 실측치 1191.07.
실시예 232. 2,2'-((tert-부톡시카르보닐)아잔디일)디아세트산(408)의 합성
Figure pct00327
이미노디아세트산(5.0g, 37.6mmol)을 THF(50mL) 및 물(50mL)에 용해시키고, NaHCO3(12.6g, 150mmol)와 혼합하였다. Boc2O(9.8g, 45.1mmol)를 약 5℃에서 천천히 첨가한 다음, 반응물을 실온으로 가온하고, 2일 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 물(100 mL)로 희석하고, 에틸 아세테이트(2 x 30 mL)로 세척한 다음, 진한 HCl을 사용하여 pH 1.0으로 조정하였다. 용액을 에틸 아세테이트(3 x 50mL)로 추출하고, 합해진 유기상을 물(50mL)로 세척하고, 무수 Na2SO4로 건조하고, 여과하고, 농축하고, 에틸 아세테이트/석유 에테르로 연화처리하여, 백색 고체(5.5 g, 63% 수율)를 수득하였다. ESI-MS m/z: [M+H]+ C9H15NO6에 대한 계산치 234.09; 실측치 234.09.
실시예 233. (S)-1,1'-(((((2S,2'S)-2,2'-((2,2'-((tert-부톡시카르보닐)아잔디일)비스(아세틸))비스(아잔디일))비스(프로파노일))비스(아잔디일))비스(4,1-페닐렌))비스(메틸렌))비스(4-(((S)-4-에틸-8-플루오로-4-히드록시-9-메톡시-3,14-디옥소-3,4,12,14-테트라히드로-1H-피라노[3',4':6,7]인돌리지노[1,2-b]퀴놀린-11-일)메틸)-1-메틸피페라진-1-이움)포르메이트(409)의 합성
Figure pct00328
0℃로 냉각된 DMF(3mL) 중 화합물 40(109mg, 0.12mmol) 및 화합물 408(14mg, 0.06mmol)의 용액에, HATU(50mg, 0.132mmol) 및 N,N-디이소프로필에틸아민(84μL, 0.48mmol)을 첨가하였다. 반응물을 0℃에서 30분 동안 교반한 다음, 분취용 C-18 HPLC(아세토니트릴/포름산 함유 물)로 정제하여, 화합물 409(61 mg, 62% 수율)를 수득하였다. ESI-MS m/z: [M]2+ C83H95F2N13O16에 대한 계산치 783.85; 실측치 783.85.
실시예 234. (S)-1,1'-(((((2S,2'S)-2,2'-((2,2'-아잔디일비스(아세틸))비스(아잔디일))비스(프로파노일))비스(아잔디일))비스(4,1-페닐렌))비스(메틸렌))비스(4-(((S)-4-에틸-8-플루오로-4-히드록시-9-메톡시-3,14-디옥소-3,4,12,14-테트라히드로-1H-피라노[3',4':6,7]인돌리지노[1,2-b]퀴놀린-11-일)메틸)-1-메틸피페라진-1-윰) 포르메이트(410)의 합성
Figure pct00329
화합물 409(61 mg, 0.036 mmol)를 TFA/DCM(1 mL/3 mL)에 용해시키고, 실온에서 30분 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 톨루엔(4 ml)으로 희석하고, 농축 건조하여, 화합물 410(59.3 mg, >100% 수율)을 수득하였다. ESI-MS m/z: [M]2+ C78H87F2N13O14에 대한 계산치 733.82; 실측치 733.82.
실시예 235. 1-(4-((30S,41S)-30-(4-(2,5-디옥소-2,5-디히드로-1H-피롤-1-일)부탄아미도)-37-(2-(((S)-1-((4-((4-(((S)-4-에틸-8-플루오로-4-히드록시-9-메톡시-3,14-디옥소-3,4,12,14-테트라히드로-1H-피라노[3',4':6,7]인돌리지노[1,2-b]퀴놀린-11-일)메틸)-1-메틸-피페라진-1-윰-1-일)메틸)페닐)아미노)-1-옥소프로판-2-일)아미노)-2-옥소에틸)-41-메틸-27,31,36,39-테트라옥소-2,5,8,11,14,17,20,23-옥타옥사-26,32,37,40-테트라아자도테트라콘탄아미도)-벤질)-4-(((S)-4-에틸-8-플루오로-4-히드록시-9-메톡시-3,14-디옥소-3,4,12,14-테트라하이드로-1H-피라노[3',4':6,7]인돌리지노[1,2-b]퀴놀린-11-일)메틸)-1-메틸피페라진-1-이움 포메이트(411)의 합성
Figure pct00330
0℃로 냉각된 DMF(3mL) 중 화합물 410(65mg, 0.036mmol) 및 화합물 6(27mg, 0.036mmol)의 용액에, HATU(17.5mg, 0.046mmol) 및 N,N-디이소프로필에틸아민(26μL, 0.144mmol)을 첨가하였다. 반응물을 0℃에서 30분 동안 교반한 다음, 분취용 C-18 HPLC(아세토니트릴/2% 포름산 함유 물)로 정제하여, 화합물 411(39 mg, 62% 수율)을 수득하였다. ESI-MS m/z: [M]2+ C112H143F2N17O28에 대한 계산치 1106.01; 실측치 1106.01.
실시예 236. (S)-N,N'-(((((2S,2'S)-2,2'-((2,2'-((tert-부톡시카르보닐)아잔디일)비스(아세틸))비스(아잔디일))비스(프로파노일))비스(아잔디일))비스(4,1-페닐렌))비스(메틸렌))비스(1-(((S)-4-에틸-8-플루오로-4-히드록시-9-메톡시-3,14-디옥소-3,4,12,14-테트라히드로-1H-피라노[3',4':6,7]인돌리지노[1,2-b]퀴놀린-11-일)메틸)-N,N-디메틸피페리딘-4-아미늄)포르메이트(412)의 합성
Figure pct00331
0℃로 냉각된 DMF(3mL) 중 화합물 28(106mg, 0.113mmol) 및 화합물 408(13mg, 0.056mmol)의 용액에, HATU(43mg, 0.113mmol) 및 N,N-디이소프로필에틸아민(39μL, 0.226mmol)을 첨가하였다. 반응물을 4시간 동안 교반한 다음, 분취용 C-18 HPLC(아세토니트릴/포름산 함유 물)로 정제하여, 화합물 412(71 mg, 74% 수율)를 수득하였다. ESI-MS m/z: [M]2+ C87H103F2N13O16에 대한 계산치 811.8801; 실측치 811.8875.
실시예 237. (S)-N,N'-(((((2S,2'S)-2,2'-((2,2'-아잔디일비스(아세틸))비스-(아잔디일))비스(프로파노일))비스(아잔디일))비스(4,1-페닐렌))비스(메틸렌))비스(1-(((S)-4-에틸-8-플루오로-4-히드록시-9-메톡시-3,14-디옥소-3,4,12,14-테트라히드로-1H-피라노[3',4':6,7]인돌리지노-[1,2-b]퀴놀린-11-일)메틸)-N,N-디메틸피페리딘-4-아미늄)포르메이트(413)의 합성
Figure pct00332
화합물 412(71 mg, 0.041 mmol)를 TFA/DCM(1 mL/3 mL)에 용해시키고, 실온에서 30분 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 톨루엔(5 ml)으로 희석하고, 농축 건조시켜, 화합물 413(70 mg, >100 수율)을 수득하였다. ESI-MS m/z: [M]2+ C82H95F2N13O14에 대한 계산치 761.8539; 실측치 761.8595.
실시예 238. N-(4-((30S,41S)-30-(4-(2,5-디옥소-2,5-디하이드로-1H-피롤-1-일)부탄아미도)-37-(2-(((S)-1-((4-(((1-(((S)-4-에틸-8-플루오로-4-히드록시-9-메톡시-3,14-디옥소-3,4,12,14-테트라히드로-1H-피라노[3',4':6,7]인돌리지노[1,2-b]퀴놀린-11-일)메틸)피페리딘-4-일)디메틸암모니오)메틸)페닐)아미노)-1-옥소프로판-2-일)아미노)-2-옥소에틸)-41-메틸-27,31,36,39-테트라옥소-2,5,8,11,14,17,20,23-옥타옥사-26,32,37,40-테트라아자도테트라콘타나미도)-벤질)-1-(((S)-4-에틸-8-플루오로-4-히드록시-9-메톡시-3,14-디옥소-3,4,12,14-테트라하이드로-1H-피라노[3',4':6,7]인돌리지노[1,2-b]퀴놀린-11-일)메틸)-N,N-디메틸피페리딘-4-아미늄 포메이트(414)의 합성
Figure pct00333
0℃로 냉각된 DMF(4mL) 중 화합물 413(70mg, ~0.041mmol) 및 화합물 6(32mg, 0.041mmol)의 용액에, HATU(19mg, 0.049mmol) 및 N,N-디이소프로필에틸아민(28μL, 0.164mmol)을 첨가하였다. 반응물을 4시간 동안 교반한 다음, 분취용 C-18 HPLC(아세토니트릴/포름산 함유 물)로 정제하여, 화합물 414(43 mg, 45% 수율)를 수득하였다. ESI-MS m/z: [M]2+ C116H151F2N17O28에 대한 계산치 1134.04; 실측치 1134.04.
실시예 239. 4-((S)-2-((tert-부톡시카르보닐)아미노)프로판아미도)벤질(((S)-4-에틸-8-플루오로-4-히드록시-9-메톡시-3,14-디옥소-3,4,12,14-테트라하이드로-1H-피라노[3',4':6,7]인돌리지노[1,2-b]퀴놀린-11-일)메틸)카바메이트(415)의 합성
Figure pct00334
DCM(2 mL) 중 화합물 15(83 mg, 0.282 mmol)의 용액에, 트리포스겐(30 mg, 0.094 mmol) 및 트리에틸아민(37 μL, 0.282 mmol)을 첨가하였다. 그 다음, 반응물을 실온으로 가온하고, 1시간 동안 교반하고, 농축 건조시켰다. 화합물 30(100mg, 0.235mmol)을 DMF(2mL)에 용해시키고, 0℃로 냉각한 후, 여기에 트리에틸아민(37μL, 0.282mmol) 및 상기 클로로포르메이트를 첨가하였다. 첨가가 완료된 후, 생성된 혼합물을 0℃에서 1시간 동안 교반한 다음, 분취용 C-18 HPLC(아세토니트릴/포름산 함유 물)로 정제하여, 화합물 415(122 mg, 70% 수율)를 수득하였다. ESI-MS m/z: [M+H]+ C38H40FN5O10에 대한 계산치 746.2838; 실측치 746.2898.
실시예 240. 4-((S)-2-아미노프로판아미도)벤질(((S)-4-에틸-8-플루오로-4-히드록시-9-메톡시-3,14-디옥소-3,4,12,14-테트라하이드로-1H-피라노[3',4':6,7]인돌리지노[1,2-b]퀴놀린-11-일)메틸)카바메이트(416)의 합성
Figure pct00335
화합물 415(122.5 mg, 0.164 mmol)를 TFA/DCM(1 mL/3 mL)에 용해시키고, 실온에서 30분 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 톨루엔(4ml)으로 희석하고, 농축 건조하여, 화합물 416(120.2mg, 0.100% 수율)을 수득하였다. ESI-MS m/z: [M+H]+ C33H32FN5O8에 대한 계산치 646.22; 실측치 646.22.
실시예 241. tert-부틸 비스(2-(((S)-1-((4-((((((S)-4-에틸-8-플루오로-4-히드록시-9-메톡시-3,14-디옥소-3,4,12,14-테트라히드로-1H-피라노[3',4':6,7]인돌리지노[1,2-b]퀴놀린-11-일)메틸)카르바모일)옥시)메틸)페닐)아미노)-1-옥소프로판-2-일)아미노)-2-옥소에틸)카바메이트(417)의 합성
Figure pct00336
0℃로 냉각된 DMF(3mL) 중 화합물 416(120mg, 0.164mmol) 및 화합물 408(19mg, 0.082mmol)의 용액에, HATU(62mg, 0.164mmol) 및 N,N-디이소프로필에틸아민(57μL, 0.328mmol)을 첨가하였다. 반응물을 8시간 동안 교반하고, 농축시킨 다음, 분취용 C-18 HPLC(아세토니트릴/포름산 함유 물)로 정제하여, 화합물 417(171 mg, 70% 수율)을 수득하였다. ESI-MS m/z: [M+H]+ C75H76F2N11O20에 대한 계산치 1488.5237; 실측치 1488.5295.
실시예 242. ((((2S,2'S)-2,2'-((2,2'-아잔디일비스(아세틸))비스(아잔디일))-비스(프로파노일))비스(아잔디일))비스(4,1-페닐렌))비스(메틸렌)비스((((S)-4-에틸-8-플루오로-4-히드록시-9-메톡시-3,14-디옥소-3,4,12,14-테트라히드로-1H-피라노[3',4':6,7]인돌리지노[1,2-b]퀴놀린-11-일)메틸)카바메이트)(418)의 합성
Figure pct00337
화합물 417(171 mg, 0.115 mmol)을 TFA/DCM(1 mL/3 mL)에 용해시키고, 실온에서 30분 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 농축 건조하여, 화합물 418(172 mg, >100% 수율)을 수득하였다. ESI-MS m/z: [M+H]+ C70H68F2N11O18에 대한 계산치 1388.46; 실측치 1388.46.
실시예 243. ((((2S,2'S)-2,2'-(((S)-30-(4-(2,5-디옥소-2,5-디히드로-1H-피롤-1-일)부탄아미도)-27,31,36-트리옥소-37-(2-옥소에틸)-2,5,8,11,14,17,20,23-옥타옥사-26,32,37-트리아자노나트리아콘탄-39-오일)비스(아잔디일))비스(프로파노일))비스(아잔디일))비스(4,1-페닐렌))비스(메틸렌)비스((((S)-4-에틸-8-플루오로-4-히드록시-9-메톡시-3,14-디옥소-3,4,12,14-테트라히드로-1H-피라노[3',4':6,7]인돌리지노[1,2-b]퀴놀린-11-일)메틸)카르바메이트)(2017)의 합성
Figure pct00338
0℃로 냉각된 DMF(3mL) 중 화합물 418(172mg, 0.115mmol) 및 화합물 6(87mg, 0.115mmol)의 용액에, HATU(52mg, 0.138mmol) 및 N,N-디이소프로필에틸아민(40μL, 0.23mmol)을 첨가하였다. 반응물을 4시간 동안 교반한 다음, 분취용 C-18 HPLC(아세토니트릴/포름산 함유 물)로 정제하여, 화합물 419(122 mg, 50% 수율)를 수득하였다. ESI-MS m/z: [M+H]+ C104H123F2N15O32에 대한 계산치 2132.84; 실측치 2132.84.
실시예 244. 2-아미노-4-플루오로-5-히드록시벤즈알데히드(420)의 합성
Figure pct00339
0℃에서 진한 황산(10mL) 중 4-플루오로-3-메톡시벤즈알데히드(770mg, 5.0mmol)의 용액에, 발연 질산(95%, 315mg, 4.8mmol)을 적가하였다. 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반한 다음, 얼음물에 붓고, 여과하였다. 필터 케이크를 물로 세척한 다음, 건조시켰다. 생성된 잔류물을 DMF(20mL)에 용해시키고, 염화리튬(1.6g, 25mmol)을 첨가하고, 혼합물을 4시간 동안 환류시킨 다음, 물에 붓고, 진한 염산을 적가하여 pH 4에 도달시켰다. 용액은 에틸 아세테이트로 추출하고, 유기층을 염수로 세척하고, 건조하고, 진공에서 농축하였다. 생성된 잔류물에 에탄올/물(25mL, 4:1), 철 분말(1.21g, 22mmol) 및 염화암모늄(433mg, 8.1mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 80℃에서 2시간 동안 교반한 다음, 고체를 여과 제거하였다. 여과액에 물을 첨가하고, 생성된 혼합물을 에틸 아세테이트로 추출하였다. 유기층을 염수로 세척하고, 건조하고, 농축하고, 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 표제 화합물(125 mg, 16 수율)을 수득하였다. ESI-MS m/z: [M+H]+ C7H6FNO2에 대한 계산치 156.04; 실측치 156.04.
실시예 245. (S)-4-에틸-8-플루오로-4,9-디히드록시-1H-피라노[3',4':6,7]인돌리지노[1,2-b]퀴놀린-3,14(4H,12H)-디온(421)의 합성
Figure pct00340
화합물 420(0.125g, 0.805mmol) 및 화합물 25(0.202g, 0.76mmol)를 무수 톨루엔(40mL)에 용해시키고, p-톨루엔술폰산(13mg, 0.076mmol)을 첨가하였다. 현탁액을 2일 동안 환류 가열하고, 실온으로 냉각되도록 하였다. 톨루엔의 약 2/3를 제거한 후, 잔류물을 여과하고, 필터 케이크를 디클로로메탄으로 세척하고, 공기 건조하여, 화합물 421(0.26g, 90% 수율)을 회색 분말 고체로서 수득하였다. ESI-MS m/z: [M+H]+ C20H16FN2O5에 대한 계산치 383.10; 실측치 383.10.
실시예 246. (S)-tert-부틸 (2-(9-에틸-5-플루오로-9-히드록시-10,13-디옥소-9,10-디히드로-[1,3]옥사지노[5,6-f]피라노[3',4':6,7]인돌리지노[1,2-b]퀴놀린-2(1H,3H,12H,13H,15H)-일)에틸)카바메이트(422)의 합성
Figure pct00341
1,4-디옥산(5mL) 중 N-Boc-에틸렌디아민(50mg, 0.31mmol) 및 파라포름알데히드(70mg, 0.78mmol)의 용액을 약 100℃에서 2시간 동안 가열한 다음, 실온으로 냉각시키고, 화합물 421(100 mg, 0.26 mmol)을 첨가하였다. 반응물을 다시 100℃로 가열하고, 2일 동안 교반하고, 실온으로 냉각하고, 분취용 C-18 HPLC(아세토니트릴/포름산 함유 물)로 정제하여, 화합물 422(117 mg, 80% 수율)를 수득하였다. ESI-MS m/z: [M+H]+ C29H31FN4O7에 대한 계산치 567.22; 실측치 567.22.
실시예 247. (S)-2-(2-아미노에틸)-9-에틸-5-플루오로-9-히드록시-2,3,12,15-테트라히드로-[1,3]옥사지노[5,6-f]피라노[3',4':6,7]인돌리지노[1,2-b]퀴놀린-10,13(1H,9H)-디온(423)의 합성
Figure pct00342
화합물 422(117 mg, 0.208 mmol)를 TFA/DCM(2 mL/6 mL)에 용해시키고, 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 농축 건조시켜, 황색 고체 423(117 g, >100 수율)을 수득하였다. ESI-MS m/z: [M+H]+ C24H23FN4O5에 대한 계산치 467.17; 실측치 467.17.
실시예 248. (S)-2-(4-(2,5-디옥소-2,5-디히드로-1H-피롤-1-일)부탄아미도)-N1-(4-((2-((S)-9-에틸-5-플루오로-9-히드록시-10,13-디옥소-9,10-디히드로-[1,3]옥사지노[5,6-f]피라노[3',4':6,7]인돌리지노[1,2-b]퀴놀린-2(1H,3H,12H,13H,15H)-일)에틸)아미노)-4-옥소부틸)-N5-(2,5,8,11,14,17,20,23-옥타옥사펜타코산-25-일)펜탄디아미드(424)의 합성
Figure pct00343
0℃로 냉각된 DMF(5mL) 중 화합물 423(120mg, 0.208mmol) 및 화합물 7(193mg, 0.208mmol)의 용액에, N,N-디이소프로필에틸아민(72μL, 0.416mmol)을 첨가하였다. 반응을 실온으로 가온하고, 2시간 동안 교반하고, 농축하고, 분취용 HPLC(아세토니트릴/포름산 함유 물)로 정제하여, 화합물 424(100mg, 40% 수율)를 수득하였다. ESI-MS m/z: [M+H]+ C58H79FN8O19에 대한 계산치 1211.54; 실측치 1211.54.
실시예 249. (S)-9-에틸-5-플루오로-9-하이드록시-2-(2-하이드록시에틸)-2,3,12,15-테트라하이드로-[1,3]옥사지노[5,6-f]피라노[3',4':6,7]인돌리지노[1,2-b]퀴놀린-10,13(1H,9H)-디온(425)의 합성
Figure pct00344
1,4-디옥산(5mL) 중 에탄올아민(19mg, 0.31mmol) 및 파라포름알데히드(70mg, 0.78mmol)의 용액을 약 100℃에서 2시간 동안 가열한 다음, 실온으로 냉각시키고, 화합물 421(100 mg, 0.26 mmol)을 첨가하였다. 반응물을 다시 100℃로 가열하고, 2일 동안 교반하고, 실온으로 냉각하고, 분취용 HPLC(아세토니트릴/포름산 함유 물)로 정제하여, 화합물 425(91 mg, 75% 수율)를 수득하였다. ESI-MS m/z: [M+H]+ C24H22FN3O6에 대한 계산치 468.15; 실측치 468.15.
실시예 250. (S)-N1-(4-((2-아미노에틸)아미노)-4-옥소부틸)-2-(4-(2,5-디옥소-2,5-디히드로-1H-피롤-1-일)부탄아미도)-N5-(2,5,8,11,14,17,20,23-옥타옥사펜타코산-25-일)펜탄디아미드(426)의 합성
Figure pct00345
THF(15mL) 및 1.0M NaH2PO4(15ml) 중 1,2-디에틸-디아민(300mg, 4.99mmol)의 용액을 0.1M H3PO4를 사용하여 pH 7.5로 조정하였다. 혼합물을 4~10℃로 냉각시키고, 화합물 7(700mg, 0.75mmol)을 1시간 내에 4분할로 첨가하였다. 추가로 2시간 동안 교반한 후, 혼합물을 농축하고, 분취용 HPLC(아세토니트릴/1% 포름산 함유 물)로 정제하여, 화합물 426(528 mg, 82% 수율)을 수득하였다. ESI-MS m/z: [M+H]+ C36H65N6O14에 대한 계산치 805.4560; 실측치 805.4595.
실시예 251. 2-((S)-9-에틸-5-플루오로-9-히드록시-10,13-디옥소-9,10-디히드로-[1,3]옥사지노[5,6-f]피라노[3',4':6,7]인돌리지노[1,2-b]퀴놀린-2(1H,3H,12H,13H,15H)-일)에틸((S)-30-(4-(2,5-디옥소-2,5-디히드로-1H-피롤-1-일)부탄아미도)-27,31,36-트리옥소-2,5,8,11,14,17,20,23-옥타옥사-26,32,37-트리아자노나트리아콘탄-39-일)카바메이트(428)의 합성
Figure pct00346
0℃에서 드라이 THF(5mL) 중 화합물 425(30mg, 0.0642mmol) 및 DIPEA(15μl, 0.091mmol)의 용액에, 4-니트로페닐 카르보노클로리데이트(13mg, 0.0646mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 0℃에서 4시간 동안 교반하여, (S)-2-(9-에틸-5-플루오로-9-히드록시-10,13-디옥소-9,10-디히드로-[1,3]옥사지노[5,6-f]피라노[3',4':6,7]인돌리지노[1,2-b]퀴놀린-2(1H,3H,12H,13H,15H)-일)에틸(4-니트로페닐)카보네이트(427)를 생성하고, 이는 분리 없이 다음 단계에 직접 사용되었다. 그 다음, 혼합물에 화합물 426(55mg, 0.0643mmol) 및 DIPEA(10l, 61.2mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 4시간 동안 교반하고, 농축하고, 분취용 C-18 HPLC(아세토니트릴/1% 포름산 함유 물)로 정제하여, 화합물 428(39 mg, 47% 수율)을 수득하였다. ESI-MS m/z: [M+H]+ C61H85FN9O21에 대한 계산치 1298.5845; 실측치 1298.5935.
실시예 252. 비스(2,5-디옥소피롤리딘-1-일) 4,4'-((((tert-부톡시카르보닐)아잔디일)비스(에탄-2,1-디일))비스(아잔디일))비스(4-옥소부타노에이트)(431)의 합성
Figure pct00347
DCM(10mL) 중 화합물 53(201mg, 0.5mmol)의 용액에, EDC·HCl(287mg, 1.5mmol) 및 NHS(173mg, 1.5mmol)를 첨가하였다. 반응물을 실온에서 1시간 동안 교반한 다음, DCM(50mL)으로 희석하고, 물(2 x 10mL)로 세척하고, 무수 Na2SO4로 건조하고, 여과하고, 농축하여, 화합물 431(297mg, 100% 수율)을 수득하였다. ESI-MS m/z: [M+H]+ C25H35N5O12에 대한 계산치 598.22; 실측치 598.22.
실시예 253. 11-(tert-부톡시카르보닐)-4,7,15,18-테트라옥소-3,8,11,14,19-펜타아자헤니코산-1,21-디오익산(432)의 합성
Figure pct00348
H-Gly-OH(94mg, 1.25mmol)를 물(10mL)에 용해시키고, NaHCO3(168mg, 2.00mmol)을 첨가하고, 이어서 화합물 431(297mg, 0.5mmol)을 첨가하였다. 그 다음, 반응물을 실온에서 1시간 동안 교반하고, 농축하고, 분취용 HPLC(아세토니트릴/포름산 함유 물)로 정제하여, 화합물 432(155 mg, 60% 수율)를 수득하였다. ESI-MS m/z: [M+H]+ C21H35N5O10에 대한 계산치 518.23; 실측치 518.23.
실시예 254. 비스(퍼플루오로페닐) 11-(tert-부톡시카르보닐)-4,7,15,18-테트라옥소-3,8,11,14,19-펜타아자헤니코산-1,21-디오에이트(433)의 합성
Figure pct00349
DCM(5 mL) 중 화합물 432(110 mg, 0.12 mmol)의 용액에, 펜타플루오로페놀(48 mg, 0.26 mmol) 및 EDC·HCl(50 mg, 0.26 mmol)을 첨가하였다. 반응물을 실온에서 2시간 도안 교반한 다음, DCM(50mL)으로 희석하고, 물(2 x 10mL)로 세척하고, 무수 Na2SO4로 건조하고, 여과하고, 농축하여, 화합물 433(180mg, 100% 수율)을 수득하였다. ESI-MS m/z: [M+H]+ C33H33F10N5O10에 대한 계산치 850.20; 실측치 850.20.
실시예 255. tert-부틸 비스(2-(4-((2-((((S))-4-에틸-8-플루오로-4-히드록시-9-메톡시-3,14-디옥소-3,4,12,14-테트라하이드로-1H-피라노[3',4':6,7]인돌리지노[1,2-b]퀴놀린-11-일)메틸)아미노)-2-옥소에틸)아미노)-4-옥소부탄아미도)에틸)카바메이트(434)의 합성
Figure pct00350
DMF(1mL) 중 화합물 30(55mg, 0.13mmol)의 용액에, DIPEA(27mg, 0.21mmol) 및 화합물 433(50mg, 0.06mmol)을 빙수조 위로 첨가하였다. 반응물을 실온으로 가온하고, 1시간 동안 교반한 다음, 농축하고, 분취용 HPLC(아세토니트릴/포름산 함유 물)로 정제하여, 화합물 434(20 mg, 25% 수율)를 수득하였다. ESI-MS m/z: [M+H]+ C65H72F2N11O18에 대한 계산치 1332.49; 실측치 1332.49.
실시예 256. N1,N1'-(아잔디일비스(에탄-2,1-디일))비스(N4-(2-((((S)-4-에틸-8-플루오로-4-히드록시-9-메톡시-3,14-디옥소-3,4,12,14-테트라히드로-1H-피라노[3',4':6,7]인돌리지노[1,2-b]퀴놀린-11-일)메틸)아미노)-2-옥소에틸)숙신아미드)(435)의 합성
Figure pct00351
화합물 434(20 mg, 0.015 mmol)를 TFA/DCM(0.5 mL/1 mL)에 용해시키고, 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 농축 건조시켜, 황색 고체를 수득하였다(18.5 mg, 100% 수율). ESI-MS m/z: [M+H]+ C60H63F2N11O16에 대한 계산치 1232.44; 실측치 1232.44.
실시예 257. (S)-2-(4-(2,5-디옥소-2,5-디히드로-1H-피롤-1-일)부탄아미도)-N1-(1-((S)-4-에틸-8-플루오로-4-히드록시-9-메톡시-3,14-디옥소-3,4,12,14-테트라히드로-1H-피라노[3',4':6,7]인돌리지노[1,2-b]퀴놀린-11-일)-13-(2-(4-((2-((((S))-4-에틸-8-플루오로-4-히드록시-9-메톡시-3,14-디옥소-3,4,12,14-테트라하이드로-1H-피라노[3',4':6,7]인돌리지노[1,2-b]퀴놀린-11-일)메틸)아미노)-2-옥소에틸)아미노)-4-옥소부탄아미도)에틸)-3,6,9,14-테트라옥소-2,5,10,13-테트라아자헵타데칸-17-일)-N5-(2,5,8,11,14,17,20,23-옥타옥사펜타코산-25-일)펜탄디아미드(436)의 합성
Figure pct00352
DMF(1mL) 중 화합물 6(11mg, 0.015mmol)의 빙냉 용액에, HATU(11.4mg, 0.03mmol) 및 N,N-디이소프로필에틸아민(10μL, 0.06mmol)을 첨가하고, 이어서 화합물 435(18.5 mg, 0.015 mmol)를 첨가하였다. 반응물을 0℃에서 1시간 동안 교반한 다음, 분취용 HPLC(아세토니트릴/포름산 함유 물)로 정제하여, 화합물 436(10 mg, 34% 수율)을 수득하였다. ESI-MS m/z: [M+H]+ C94H119F2N15O30에 대한 계산치 1976.82; 실측치 1976.82.
실시예 258. 접합체 C1-005, C1-008, C1-021, C1-022, C1-029, C1-031, C1-035, C1-041, C1-042, C1-043, C1-047, C1-050, C1-056, C1-061, C1-064, C1-110, C1-177, C1-188, C1-200, C1-208, C1-213, C1-226, C1-238, C1-243, C1-247, C1-305, C1-306, C1-311, C1-362, C1-397, C1-402, C1-407, C1-411, C1-414, C1-419, C1-424, 및 C1-428의 일반적인 제조 방법.
pH 6.0 ~ 8.0 PBS 완충액, 0.70 내지 2.0mL의 100mM NaH2PO4, pH 6.5 ~ 8.5 완충제 및 TCEP(35-45μL, 물 중의 20 mM)에 2.0mL의 10㎎/mL Her2 항체(허셉틴) 또는 Trop-2 항체 또는 EGFR 항체를 함유하는 진탕(shaken) 용액에, 화합물 5, 8, 21, 22, 29, 31, 35, 41, 42, 43, 47, 50, 56, 61, 64, 110, 177, 188, 200, 213, 226, 238, 243, 247, 305, 306, 311, 362, 397, 402, 407, 411, 414, 419, 424, 및 428 (35-90μL, DMA 중의 20 mM)를 독립적으로 첨가하고, 그 다음 4-(아지도메틸)벤조산(30-100μ, pH 7.5 중의 20mM, PBS 완충제)을 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 4 내지 18시간 동안 배양하고, 이어서 DHAA(100~150μL, 50 mM)를 첨가하였다.
실온에서 밤새 계속 배양한 후, 혼합물을 100mM NaH2PO4, 50mM NaCl pH 6.0~7.5 완충액으로 용리되는 G-25 칼럼 상에서 정제하여, 11.2~18.5 mg의 접합체 화합물 C1-005, C1-008, C1-021, C1-022, C1-029, C1-031, C1-035, C1-041, C1-042, C1-043, C1-047, C1-050, C1-056, C1-061, C1-064, C1-110, C1-177, C1-188, C1-200, C1-208, C1-213, C1-226, C1-238, C1-243, C1-247, C1-305, C1-306, C1-311, C1-362, C1-397, C1-402, C1-407, C1-411, C1-414, C1-419, C1-424, 및 C1-428(수율 82%~95% NaH2PO4 완충액 중 8.3~15.2 ml)을 수득하였다. 약물/항체 비율(DAR)은 4.1~8.0이었고, 여기서 DAR은 UPLC-QTOF 질량 스펙트럼 및 UV에 의해 결정되었다(여기서, CPT 화합물은 흡광 계수를 사용하였다: E280 nm = 4992 M-1cm-1; E377 nm = 16730 M-1cm-1). 그것은 SEC HPLC(토쉬 바이오사이언스사(Tosoh Bioscience), Tskgel G3000SW, 7.8㎜ ID×30㎝, 0.5mL/분, 100분)에 의해서 95 내지 99% 단량체라고 분석되었다. 이들 접합체의 구조는 도 32에 도시되어 있다.
실시예 259. 접합체 C2-005, C3-005, C2-008, C3-008, C2-021, C3-021, C2-022, C3-022, C2-029, C3-029, C2-031, C3-031, C2-035, C3-035, C2-041, C3-041, C2-042, C3-042, C2-043, C3-043, C2-047, C3-047, C2-050, C3-050, C2-056, C3-056, C2-061, C3-061, C2-064, C3-064, C2-110, C3-110, C2-177, C3-177, C2-188, C3-188, C2-200, C3-200, C2-208, C3-208, C2-213, C3-213, C2-226, C3-226, C2-238, C3-238, C2-243, C3-243, C2-247, C3-247, C2-305, C3-305, C2-306, C3-306, C2-311, C3-311, C2-362, C3-362, C2-397, C3-397, C2-402, C3-402, C2-407, C3-407, C2-411, C3-411, C2-414, C3-414, C2-419, C3-419, C2-424, C3-424, C2-428, 및 C3-428의 일반적인 제조 방법.
pH 6.0 ~ 8.0 PBS 완충액, 0.70 내지 2.0mL의 100mM NaH2PO4, pH 6.5 ~ 8.5 완충제 및 트라우트(Traut) 시약(2-이미노티올란 HCl)(35-70μL, 물 중 20mM) 또는 감마-티오부티로락톤(35-70μL, DMA 중 20mM)에 2.0mL의 10㎎/mL Her2 항체(허셉틴) 또는 Trop-2 항체 또는 EGFR 항체를 함유하는 용액에, 화합물 5, 8, 21, 22, 29, 31, 35, 41, 42, 43, 47, 50, 56, 61, 64, 110, 177, 188, 200, 213, 226, 238, 243, 247, 305, 306, 311, 362, 397, 402, 407, 411, 414, 419, 424, 및 428 (14-60μL, DMA 중의 20 mM)를 독립적으로 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 4~18시간 동안 배양한 다음, 100mM NaH2PO4, 50mM NaCl pH 6.0~7.5 완충액으로 용리되는 G-25 칼럼 상에서 정제하여, 11.2~18.5 mg의 접합체 화합물 C2-005, C2-008, C2-021, C2-022, C2-029, C2-031, C2-035, C2-041, C2-042, C2-043, C2-047, C2-050, C2-056, C2-061, C2-064, C2-110, C2-177, C2-188, C2-200, C2-208, C2-213, C2-226, C2-238, C2-243, C2-247, C2-305, C2-306, C2-311, C2-362, C2-397, C2-402, C2-407, C2-411, C2-414, C2-419, C2-424, 및 C2-428(트라우트 시약으로 85%~98% 수율, NaH2PO4 완충액 중 9.6~15.1 ml), 또는 C3-005, C3-008, C3-021, C3-022, C3-029, C3-031, C3-035, C3-041, C3-042, C3-043, C3-047, C3-050, C3-056, C3-061, C3-064, C3-110, C3-177, C3-188, C3-200, C3-208, C3-213, C3-226, C3-238, C3-243, C3-247, C3-305, C3-306, C3-311, C3-362, C3-397, C3-402, C3-407, C3-411, C3-414, C3-419, C3-424, 및 C3-428(감마-티오부티로락톤으로 77%~94% 수율, NaH2PO4 완충액 중 9.8~14.2 ml)을 수득하였다. 약물/항체 비율(DAR)은 4.5~8.9였으며, 여기서 DAR은 UPLC-QTOF 질량 스펙트럼 및 UV에 의해 결정되었다(여기서, CPT 화합물은 흡광 계수를 사용하였다: E280 nm = 4992 M-1cm-1; E377 nm = 16730 M-1cm-1). 그것은 SEC HPLC(토쉬 바이오사이언스사(Tosoh Bioscience), Tskgel G3000SW, 7.8㎜ ID×30㎝, 0.5mL/분, 100분)에 의해서 93 내지 99% 단량체라고 분석되었다. 이들 접합체의 구조는 도 33에 도시되어 있다.
실시예 260. (접합을 위해 Her2 항체가 사용될 때, T-DM1과 비교한) C1-005, C1-008, C1-021, C1-022, C1-029, C1-031, C1-035, C1-041, C1-042, C1-043, C1-047, C1-050, C1-056, C1-061, C1-064, C1-110, C1-177, C1-188, C1-200, C1-208, C1-213, C1-226, C1-238, C1-243, C1-247, C1-305, C1-306, C1-311, C1-362, C1-397, C1-402, C1-407, C1-411, C1-414, C1-419, C1-424, C1-428, C2-005, C2-008, C2-021, C2-022, C2-029, C2-031, C2-035, C2-041, C2-042, C2-043, C2-047, C2-050, C2-056, C2-061, C2-064, C2-110, C2-177, C2-188, C2-200, C2-208, C2-213, C2-226, C2-238, C2-243, C2-247, C2-305, C2-306, C2-311, C2-362, C2-397, C2-402, C2-407, C2-411, C2-414, C2-419, C2-424, C2-428, C3-005, C3-008, C3-021, C3-022, C3-029, C3-031, C3-035, C3-041, C3-042, C3-043, C3-047, C3-050, C3-056, C3-061, C3-064, C3-110, C3-177, C3-188, C3-200, C3-208, C3-213, C3-226, C3-238, C3-243, C3-247, C3-305, C3-306, C3-311, C3-362, C3-397, C3-402, C3-407, C3-411, C3-414, C3-419, C3-424, 및 C3-428의 시험관내 세포독성 평가
세포 독성도 검증에 사용된 세포주는 인간 위 암종 세포주인 NCI-N87 및 비-소세포 폐암 세포주인 HCC827이었고: 세포를 10% FBS가 함유된 RPMI-1640에서 성장시켰다. 검정을 실행하기 위해, 세포(180㎕, 6000개 세포)를 96웰 플레이트의 각 웰에 첨가하고, 5% CO2와 함께 37℃에서 24시간 동안 인큐베이션시켰다. 그 다음, 적절한 세포 배양 배지(총 부피, 0.2㎖)에서 다양한 농도의 시험 화합물(20㎕)로 세포를 처리하였다. 대조군 웰은 세포와 배지를 함유하지만, 시험 화합물이 결핍되었다. 플레이트를 5% CO2와 함께 37℃에서 120시간 동안 인큐베이션시켰다. 이어서, MTT(5mg/㎖)를 웰(20㎕)에 첨가하고, 플레이트를 1.5시간 동안 37℃에서 인큐베이션시켰다. 배지를 조심스럽게 제거하고, DMSO(180㎕)를 이후에 첨가하였다. 15분 동안 진탕한 후, 620㎚의 표준 필터를 사용하여 490㎚ 및 570㎚에서의 흡광도를 측정하였다. 저해%는 하기 식에 따라 계산되었다: 저해% = [1-(검정-블랭크)/(대조군-블랭크)]×100. 결과를 표 1에 열거한다.
표 1. NCI-N87 세포에 대한 세포독성 IC50 결과와 함께, 본 특허 출원의 Her2 항체-CPT 유사체 접합체:
Figure pct00353
Figure pct00354
Figure pct00355
Figure pct00356
표 2. HCC827 세포에 대한 세포독성 IC50 결과와 함께 본 특허 출원의 EGFR 항체-CPT 유사체 접합체:
Figure pct00357
실시예 261. Her2 항체-CPT 유사체 접합체의 생체내 항종양 활성도(N-87 세포 이종이식 종양을 보유하는 BALB/c 누드 마우스).
C1-031, C1-238, C1-397, C1-407, C1-411, C1-414, C1-424, C1-428 및 T-DM1의 Her2 항체 접합체의 생체내 효능을 위 암종 N-87 세포주 종양 이종이식 모델로 평가하였다. 5주령 암컷 BALB/c 누드 마우스(66마리 동물)에게 무 혈청 배지 0.1㎖의 N-87 암종 세포(5×106개 세포/마우스)를 우측 어깨 아래 면적에 피하 주사하였다. 종양은 8일 동안 130㎣의 평균 크기로 자랐다. 이어서, 동물을 무작위로 11개 군으로 나누었다(군당 6마리의 동물). 제1 군의 마우스를 대조군으로 제공하고, 인산염 완충 염수(PBS) 비히클로 처리하였다. 9개의 군을 정맥 내 투여된 6㎎/㎏의 용량으로, 각각 접합체 C1-031, C1-238, C1-397, C1-407, C1-411, C1-414, C1-424, C1-428, 및 T-DM1로 처리하였다. 종양의 3차원 치수를 3 또는 4일마다(주 2회) 측정하고, 종양 부피를 수학식 종양 부피 = 1/2(길이×폭×높이)를 사용하여 계산하였다. 동물의 중량을 또한 동시에 측정하였다. 다음의 기준 중 임의의 하나가 충족될 때 마우스를 희생시켰다: (1) 전처리 중량에서 20% 초과의 체중 감소, (2) 종양 체적 1500mm3 초과, (3) 병에 걸려 음식물 및 물에 도달하지 못함, 또는 (4) 피부 괴사. 종양이 발견되지 않으면 마우스는 종양이 없는 것으로 간주되었다.
항종양 활성 결과를 도 34에 나타내었다. 10개의 접합체 모두는 6.0㎎/㎏의 용량에서 동물 체중 손실을 초래하지 않았다. 모든 접합체는 PBS 완충액과 비교하여 항종양 활성을 입증하였다.
표 3. 6 mg/Kg의 용량에서 종양 성장 억제는 다음과 같다:
Figure pct00358
생체 내 항종양 능력의 순서는 C1-424 < C1-428 < C1-397 < T-DM1 < C1-411 < C1-407 < C1-031 < C1-238 < C1-414이다.
실시예 262. T-DM1과 비교한, Her2 항체-CPT 유사체 접합체의 독성 연구.
체중(BW)의 변화(전형적으로 감소)는 약물 독성에 대한 동물의 일반적인 반응이다. 6 내지 7주령의 암컷 ICR 마우스 66마리를 11개 그룹으로 분리하였다. 각각의 그룹은 6마리의 마우스를 포함하였고, 각각의 마우스에게, i.v. 볼러스로 마우스당 150㎎/㎏의 용량으로, 접합체 C1-031, C1-226, C1-238, C1-397, C1-407, C1-411, C1-414, C1-424, C1-428 및 T-DM1을 각각 제공하였다. 대조군(n=8)은 인산염 완충 식염수(PBS)인 비히클 용액을 I.V. 투여하도록 설정되었다. 독성 결과를 도 35에 나타내었다. 150 mg/Kg의 용량에서 대조군 및 접합체 C1-031, C1-397, C1-407, C1-411, C1-424 및 C1-428 그룹의 체중(BW)은 12일 실험 동안 감소하지 않았다. 150 mg/Kg의 용량에서 나머지 접합체 C1-226, C1-238, C1-414 및 T-DM1의 BW는 12일 실험 동안 감소되었으며, C1-226, C1-238, 및 C1-414에 대해 5일째에 가장 높은 수준의 약 2% BW 감소가 보였다. 시험된 모든 CPT 접합체에서의 BW 감소는 T-DM1보다 훨씬 적었다. 대조적으로, T-DM1 그룹의 BW는 투여 전 값으로부터 최대 25% 감소로 계속 감소했으며, 연구 종료시 회복 경향은 보이지 않았다. BW 변화 실험은 이들 마우스에서 T-DM1보다 이들 CPT 접합체에 대한 더 큰 내약성을 입증하였다.
실시예 263. EGFR 항체-CPT 유사체 접합체의 생체내 항종양 활성(HCC827 세포 이종이식 종양을 보유하는 BALB/c 누드 마우스).
C1-031, C1-200, C1-214, C1-226, C1-305, C1-306, C1-311, C1-362, C1-402, C-407 및 C1-419의 EGFR 항체 접합체의 생체내 효능을 비-소세포 폐암종 HCC827 세포주 종양 이종이식 모델로 평가하였다. 5주령 암컷 BALB/c 누드 마우스(72마리 동물)에게 무 혈청 배지 0.1㎖의 N-87 암종 세포(5×106개 세포/마우스)를 우측 어깨 아래 면적에 피하 주사하였다. 종양은 8일 동안 130㎣의 평균 크기로 자랐다. 이어서, 동물을 무작위로 12개 군으로 나누었다(그룹당 6마리의 동물). 제1 군의 마우스를 대조군으로 제공하고, 인산염 완충 식염수(PBS)로 처리하였다. 11개의 군은 정맥 내로 투여되는 농도 3.2 ~ 8.0 mg/ml에서 6 mg/Kg의 용량으로 각각, PBS 중 C1-031, C1-200, C1-226, C1-214, C1-305, C1-311, C1-362, C1-397, C1-402, C1-407, 및 C1-419로 처리되었다. 종양의 3차원 치수를 3 또는 4일마다(주 2회) 측정하고, 종양 부피를 수학식 종양 부피 = 1/2(길이×폭×높이)를 사용하여 계산하였다. 동물의 중량을 또한 동시에 측정하였다. 다음의 기준 중 임의의 하나가 충족될 때 마우스를 희생시켰다: (1) 전처리 중량에서 20% 초과의 체중 감소, (2) 종양 체적 1500㎣ 초과, (3) 병에 걸려 음식물 및 물에 도달하지 못함, 또는 (4) 피부 괴사. 종양이 발견되지 않으면 마우스는 종양이 없는 것으로 간주되었다.
항종양 활성 결과를 도 36에 나타내었다. 11개의 접합체 모두는 6.0㎎/㎏의 용량에서 동물 체중 손실을 초래하지 않았다. 모든 접합체는 PBS 완충액과 비교하여 항종양 활성을 입증하였다.
표 4. 6 mg/Kg의 투여량에서 종양 성장 억제는 다음과 같다:
Figure pct00359
생체 내 항종양 능력의 순서는 C1-200 < C1-226 < C1-362 < C1 내지 305< C1-419 < C1-407 < C1-214 < C1-311 < C1-031 < C1-402 < C1- 397이다.

Claims (21)

  1. 하기 화학식 (I):
    Figure pct00360

    또는 그 제약상 허용되는 염, 수화물 또는 수화된 염; 또는 이들 화합물의 다형 결정 구조; 또는 그 동위원소, 광학 이성질체, 라세미체, 부분입체 이성질체 또는 거울상 이성질체fmf 갖는 세포 표면 결합 분자-캄프토테신 유사체 접합체:
    여기서, T는 세포 결합제/분자이고; L은 방출 가능한 링커이고;
    Figure pct00361
    는 L이 독립적으로 브래킷 내부에서 R1, R2, R3 또는 R5의 원자에 독립적으로 연결되는 링키지 결합(linkage bond)이고; n은 1 내지 30이고 m은 1 내지 10이고;
    브래킷 내부에는 강력한 암프토테신 유사체가 존재하고;
    여기서,
    R1 및 R2는 독립적으로, H; 선형 또는 분지형 C1-C6의 알킬, 알킬 알코올, 알킬 아민(1차, 2차, 3차 아민 또는 4차 암모늄 포함), 아미노알킬, 옥실알킬, 아미노알킬아미노, 옥실알킬아미노, 아미노알킬옥실, 옥실알킬옥실, 알킬 카르복실산 또는 카르보닐; C2-C6의 헤테로알킬, 알킬사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬, 헤테로사이클릭, 아미노사이클로알킬, 헤테로알킬사이클로알킬, 알킬카르보닐, 아미노알킬카르보닐, 옥실알킬카르보닐, 알킬 에테르, 알킬 에스테르, 알킬 아미드, 옥실알킬아미드, 아미노알킬아미드, 옥심; NH2, 또는 OH이고;
    R3은 독립적으로, H, C(O)NH, C(O)O, SO2R6, SO3R6 , PR6R6', POR6R6', CH2OP(O)(OR6)2, C(O)OP(O)(OR6)2, PO(OR6)(OR6'), P(O)(OR6)OP(O)(OR6')2, C(O)R6, C(O)NHR6; 선형 또는 분지형 C1-C6의 알킬, 알킬 알코올, 알킬 아민(1차, 2차, 3차 아민 또는 4차 암모늄 포함), 또는 알킬 카르복실산; C2-C6의 헤테로알킬, 알킬사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬, 헤테로사이클릭, 사이클로알킬, 헤테로알킬사이클로알킬, 알킬카르보닐, 알킬 에테르, 알킬 에스테르, 알킬 아미드, 옥심; C5~C12 배당체, NH2, 또는 OH이고;
    R4는 할로(F, Cl, Br, 또는 I), CN, NO2, SO3H, OR6, SR6, S(O2)R6, NHR6, N(R6)(R6'), C(O)XR6, N+(R6)(R6')(R6'')이고;
    X는 NH 또는 O이고;
    R5는 H, C(O)O, C(O)NH, R6C(O); 선형 또는 분지형 C1-C6의 알킬, 알킬 알코올, 알킬 아민(1차, 2차, 3차 아민 또는 4차 암모늄 포함), 알킬 카르복실산; C2-C6의 카보네이트, 카바마이드, 헤테로알킬, 알킬사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬, 헤테로사이클릭, 사이클로알킬, 헤테로알킬사이클로알킬, 알킬카르보닐, 알킬 에테르, 알킬 에스테르, 알킬 아미드 또는 아미노산이고;
    R6, R6' 및 R6''은 독립적으로, H; C1-C6의 알킬, 알킬 알코올, 알킬 아민(1차, 2차, 3차 아민 또는 4차 암모늄 포함) 또는 알킬 카르복실산; C2-C6의 헤테로알킬, 알킬사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬, 헤테로사이클릭, 사이클로알킬, 헤테로알킬사이클로알킬, 알킬카르보닐, 알킬 에테르, 알킬 에스테르, 알킬 아미드 또는 아미노산; 또는 제약상 염이고;
    또한, R1, R2, R3 및 R6은 독립적으로 부재할 수 있고, R2, R3, X, C-10 및 C-9는 함께 결합하여, 5-원, 6-원 또는 7-원 헤테로사이클릭 고리를 형성할 수 있고;
    세포 결합제/분자 T는 항체, 단일 사슬 항체, 표적 세포에 결합하는 항체 단편, 단클론성 항체, 단일 사슬 단클론성 항체, 표적 세포에 결합하는 단클론성 항체 단편, 키메라 항체, 표적 세포에 결합하는 키메라 항체 단편, 도메인 항체, 표적 세포에 결합하는 도메인 항체 단편, 항체를 모방하는 애드넥틴(adnectin), DARPin, 림포카인, 호르몬, 비타민, 성장 인자, 집락 자극 인자, 영양분-수송 분자(트랜스페린) 및/또는 세포 결합 펩티드, 단백질, 또는 알부민, 중합체, 덴드리머, 리포솜, 나노입자, 소포(vesicle) 또는 (바이러스성) 캡시드에 부착되거나 코팅되는 작은 친화성 분자로 이루어진 군으로부터 선택되고;
    L은
    Figure pct00362
    의 화학식을 갖고: 여기서: -W-는 스트레처 유닛(Stretcher unit)이고; w는 0 또는 1이고; 각각의 -Aa-는 독립적으로 아미노산 유닛이고; r은 독립적으로 0 내지 12 범위의 정수이고; -V-는 스페이서 유닛(Spacer unit)이고; v는 0, 1 또는 2이고;
    상기 스트레처 유닛(-W-)은 존재하는 경우, 표적 결합 분자 유닛(T)을 아미노산 유닛(-Aa-)에 연결하거나, 또는 Aa가 존재하지 않는 경우, V에 연결하고; T에 연결된 W는 하기 구조 중 하나를 갖고:
    Figure pct00363

    Figure pct00364

    여기서,
    R20 및 R21은 C1~C8 알킬, -C1~C7 카르보사이클로, -O-(C1~C8 알킬)-, -아릴렌, -C1~C8 알킬렌-아릴렌, -아릴렌, -C1~C8 알킬렌, -C1~C8 알킬렌-(C1~C8 카르보사이클로)-, -(C3~C7 카르보사이클로)-C1~C9 알킬렌-, -C3~C8 헤테로사이클로-, -C1~C8 알킬렌-(C3~C8 헤테로사이클로)-, -(C3~C8 헤테로사이클로)-C1~C9 알킬렌-, -(CH2CH2O)k-, -(CH(CH3)CH2O)k-, 및 -(CH2CH2O)k-CH2-로부터 선택되고; k는 1 내지 20 범위의 정수이고; R' 및 R''는 독립적으로 H 또는 CH3이고;
    -(Aa)r-은 자연 또는 비자연 아미노산, 동일하거나 상이한 서열의 디펩티드, 트리펩티드, 테트라펩티드, 펜타펩티드, 헥사펩티드, 헵타펩티드, 옥타펩티드, 노나펩티드, 데카펩티드, 운데카펩티드 또는 도데카펩티드 유닛이고, r은 0 내지 12 범위의 정수이고;
    스페이서 유닛(-V-)은 자가-희생(self-immolative) 또는 비 자가-희생 유닛이고, 상기 자가-희생 유닛은 파라-아미노벤질-카르바모일(PAB) 기, 2-아미노이미다졸-5-메탄올 유도체, 헤테로사이클릭 PAB 유사체, 베타-글루쿠로나이드, 및 오르토(ortho) 또는 파라-아미노벤질아세탈; 또는 다음 구조 중 하나를 포함하고:
    Figure pct00365

    여기서,
    (*) 원자는 추가 스페이서 또는 방출 가능한 링커 유닛, 아미노산(Aa)r, 캄프토테신 유사체, 및/또는 결합 분자(T)의 부착 지점이고; X, Y 및 Z3은 독립적으로 NH, O 또는 S이고; Z2는 독립적으로 H, NH, O 또는 S이고; v는 0 또는 1이고; Q는 독립적으로 H, OH, C1~C6 알킬, (OCH2CH2)n, F, Cl, Br, I, OR17, SR17, NR17R18, N=NR17, N=R17 , NR17R18 , NO2, SOR17R18, SO2R17, SO3R17, OSO3R17, PR17R18, POR17R18, PO2R17R18, OPO(OR17)(OR18), 또는 OCH2PO(OR17(OR18)이고, 여기서 R17, R18은 독립적으로, H; C1~C8의 알킬; C2~C8의 알케닐, 알키닐, 헤테로알킬; C3~C8의 아릴, 헤테로사이클릭, 카르보사이클릭, 사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬, 헤테로아르알킬, 알킬카르보닐; 또는 제약상 양이온 염이고, v는 1 내지 20 범위의 정수이고;
    상기 비 자가-희생 스페이서 링커 유닛(-V-)은:
    Figure pct00366


    Figure pct00367

    Figure pct00368

    Figure pct00369

    또는 1 내지 20개의 동일하거나 상이한 아미노산을 함유하는 L- 또는 D-, 자연 또는 비자연 펩티드를 포함하고; 여기서 "*" 및 "
    Figure pct00370
    "는 추가 스페이서 또는 방출 가능한 링커, 캄프토테신 유사체, 및/또는 결합 분자의 부착 지점이고; m은 1 내지 10이고; n은 1 내지 20이고; X2, X3, X4, X5, 또는 X6은 NH; NHNH; N(R12); N(R12)N(R12'); O; S; C1-C6의 알킬; C2-C6의 헤테로알킬, 알킬사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬; C3-C8의 아릴, Ar-알킬, 헤테로사이클릭, 카르보사이클릭, 사이클로알킬, 헤테로알킬사이클로알킬, 알킬카르보닐, 헤테로아릴; CH2OR12, CH2SR12, CH2NHR12 또는 1 내지 8개의 아미노산으로부터 독립적으로 선택되고; 여기서, R12 및 R12'는 독립적으로, H; C1-C8의 알킬; C2-C8의 헤테로알킬, 알킬사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬; C3-C8의 아릴, Ar-알킬, 헤테로사이클릭, 카르보사이클릭, 사이클로알킬, 헤테로알킬사이클로알킬, 알킬카르보닐, 헤테로아릴; 또는 1 내지 8개의 탄소 원자의 에스테르, 에테르 또는 아미드; 또는 화학식 (OCH2CH2)p 또는 (OCH2CH(CH3))p의 폴리에틸렌옥시 유닛이고, 여기서 p는 0 내지 약 1000 범위의 정수이고;
    L은 다음 구조 중 하나를 가질 수 있고:
    -(CR15R16)m(Aa)r(CR17R18)n(OCH2CH2)t-, -(CR15R16)m(CR17R18)n(Aa)r(OCH2CH2)t-, -(Aa)r-(CR15R16)m(CR17R18)n(OCH2CH2)t-, -(CR15R16)m(CR17R18)n(OCH2CH2)r(Aa)t-, -(CR15R16)m-(CR17=CR18)(CR19R20)n(Aa)t(OCH2CH2)r-, -(CR15R16)m(NR11CO)(Aa)t(CR19R20)n-(OCH2CH2)r-, -(CR15R16)m(Aa)t(NR21CO)(CR19R20)n(OCH2CH2)r-, -(CR15R16)m(OCO)(Aa)t(CR19R20)n(OCH2-CH2)r-, -(CR15R16)m(OCNR17)(Aa)t(CR19R20)n(OCH2CH2)r-, -(CR15R16)m-(CO)(Aa)t(CR19R20)n-(OCH2CH2)r-, -(CR15R16)m(NR21CO)(Aa)t(CR19R20)n(OCH2CH2)r-, -(CR15R16)m(OCO)(Aa)t-(CR19R20)n-(OCH2CH2)r-, -(CR15R16)m(OCNR17)(Aa)t(CR19R20)n-(OCH2CH2)r-, -(CR15R16)m-(CO)(Aa)t(CR19R20)n-(OCH2CH2)r-, -(CR15R16)m-페닐-CO(Aa)t-(CR17R18)n-, -(CR15R16)m-furyl-CO(Aa)t(CR17R18)n-, -(CR15R6)m-옥사졸릴-CO(Aa)t(CR17R18)n-, -(CR15R16)m티아졸일-CO-(Aa)t(CCR17R18)n-, -(CR15R16)t-티에닐-CO(CR17R18)n-, -(CR15R16)t-이미다졸일-CO-(CR17R18)n-, -(CR15R16)t-모르폴리노-CO(Aa)t(CR17R18)n-, -(CR15R16)t-피페라지노-CO(Aa)t-(CR17R18)n-, -(CR15R16)tN-메틸피페라진-CO(Aa)t(CR17R18)n-, -(CR15R16)m-(Aa)t페닐-, -(CR15R16)m-(Aa)t푸릴-, -(CR15R16)m-옥사졸릴(Aa)t-, -(CR15R16)m-티아졸릴(Aa)t-, -(CR15R16)m-티에닐-(Aa)t-, -(CR15R16)m-이미다졸릴(Aa)t-, -(CR15R16)m-모르폴리노-(Aa)t-, -(CR15R16)m-피페라지노-(Aa)t-, -(CR15R16)m-N-메틸피페라지노-(Aa)t-, -K(CR15R16)m(Aa)r(CR17R18)n-(OCH2CH2)t-, -K(CR15R16)m-(CR17R18)n(Aa)r(OCH2CH2)t-, -K(Aa)r(CR15R16)m(CR17R18)n-(OCH2CH2)t-, -K(CR15R16)m-(CR17R18)n(OCH2CH2)r(Aa)t-, -K(CR15R16)m(CR17=CR18)(CR19R20)n(Aa)t(OCH2CH2)r, -K(CR15R16)m(NR11CO)(Aa)t-(CR19R20)n(OCH2CH2)r-, -K(CR5R6)m(Aa)t-(NR21CO)(CR19R20)n-(OCH2CH2)r-, -K(CR15R16)m(OCO)(Aa)t(CR19R20)n-(OCH2CH2)r-, -K(CR15R16)m(OCNR17)(Aa)t-(CR19R20)n-(OCH2CH2)r-, -K(CR15R16)m(CO)(Aa)t(CR19R20)n(OCH2-CH2)r-, -K(CR15R16)m(NR21-CO)(Aa)t(CR19R20)n-(OCH2CH2)r-, -K(CR15R16)m(OCO)(Aa)t-(CR19R20)n(OCH2CH2)r-, -K(CR15R16)m-(OCNR17)(Aa)t-(CR19R20)n(OCH2CH2)r-, -K(CR15R16)m-(CO)(Aa)t(CR19R20)n-(OCH2CH2)r-, -K(CR15R16)m-페닐-CO(Aa)t(CR17R18)n-, -K-(CR15R16)m-푸릴-CO(Aa)t(CR17R18)n, -K(CR15R16)m-옥사졸릴-CO(Aa)t(CR17R18)n-, -K(CR15R16)m-티아졸릴-CO(Aa)t(CR17R18)n, -K(CR15R16)t-티에닐-CO(CR17R18)n-, -K(CR15R16)t이미다졸릴-CO-(CR17R18)n, -K(CR5R6)t모르폴리노-CO(Aa)t-(CR17R18)n-, -K(CR15R16)t-피페라지노-CO(Aa)t-(CR17R18)n-, -K(CR15R16)tN-메틸피페라진-CO(Aa)t(CR17R18)n-, -K(CR15R16)m(Aa)t-페닐, -K-(CR15R16)m(Aa)t푸릴-, -K(CR15R16)m-옥사졸일-(Aa)t-, -K(CR15R16)m티아졸릴(Aa)t, -K(CR15R16)m-티에닐-(Aa)t-, -K(CR15R16)m-이미다졸릴(Aa)t-, -K(CR15R16)m-모르폴리노(Aa)t, -K(CR15R16)m피페라지노(Aa)tG, -K(CR5R6)m-N-메틸피페라지노(Aa)t-;
    여기서, Aa, m, n은 상기 기술되어 있고; 여기서 t 및 r은 독립적으로 0 내지 100이고; R13, R14, R15, R16, R17, R18, R19, R20, 및 R21은 H; 할로겐화물; C1~C8의 알킬 또는 헤테로알킬; C2~C8의 아릴, 알케닐, 알키닐, 에테르, 에스테르, 아민 또는 아미드; CN, NR12R12', CF3, OR12, 아릴, 헤테로사이클, S(O)R12, SO2R12, -CO2H, -SO3H, -OR12, -CO2R12, -CONR12, -PO2R12R13, -PO3H 또는 P(O)R12R12'R13, 또는 하나 이상의 할로겐화물에 의해 선택적으로 치환되는 C3~C8의 아릴로부터 독립적으로 선택되고; K는 NH, NR12, -SS-, -C(=O)-, -C(=O)NH-, -C(=O)O-, -C=NH-O-, -C=N-NH-, -C(=O)NH-NH-, O, S, Se, B, Het(C3-C12를 갖는 헤테로사이클릭 또는 헤테로방향족 고리); 또는 동일하거나 상이한 1 내지 20개의 아미노산을 함유하는 펩티드이다.
  2. 제1항에 있어서, 하기 화학식 (II):
    Figure pct00371

    또는 그 제약상 허용되는 염, 수화물 또는 수화된 염; 또는 이들 화합물의 다형 결정 구조; 또는 그 동위원소, 광학 이성질체, 라세미체, 부분입체 이성질체 또는 거울상 이성질체를 갖는 캄프토테신 유사체 접합체:
    여기서, T는 표적화 또는 결합 리간드이고; L은 방출 가능한 링커이고; n은 1 내지 30이고 m은 1 내지 10이고;
    브래킷 내부에는 강력한 캄프토테신 유사체가 존재하고;
    R1은 선형 또는 분지형 C1-C6의 알킬, 알킬옥실, 알킬 아미노(1차, 2차, 3차 아미노 또는 4차 암모늄 포함), 옥실카르보닐, 아미노카르보닐, 아미노알킬, 옥실알킬, 아미노알킬아미노, 옥실알킬아미노, 아미노알킬옥실, 옥실알킬옥실, 또는 알킬 카르복실릭; C2-C6의 헤테로알킬, 알킬사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬, 헤테로사이클릭, 옥실사이클로알킬, 아미노사이클로알킬, 헤테로알킬사이클로알킬, 알킬카르보닐, 아미노알킬카르보닐, 옥실알킬카르보닐, 알킬 에테르, 알킬 에스테르, 알킬 아미드, 옥실알킬아미드, 아미노알킬아미드, 옥심; NH, 또는 O이고;
    R2는 H; 선형 또는 분지형 C1-C6의 알킬, 알킬 알코올, 알킬 아민(1차, 2차, 3차 아민 또는 4차 암모늄 포함), 아미노알킬 알코올, 아미노알킬 아민, 옥실알킬 알코올, 옥실알킬 아민, 아미노알킬, 옥실알킬 또는 알킬 카르복실산; C2-C6의 헤테로알킬, 알킬사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬, 헤테로사이클릭, 사이클로알킬, 헤테로알킬사이클로알킬, 알킬카르보닐, 알킬 에테르, 알킬 에스테르, 알킬 아미드, 옥심; NH2, 또는 OH이고;
    R3는 독립적으로, H, R6NHC(O), R6OC(O),SO2R6, SO3R6 , PR6R6', POR6R6', CH2OP(O)(OR6)2, C(O)OP(O)(OR6)2, PO(OR6)(OR6'), P(O)(OR6)OP(O)(OR6')2, R6C(O), C(O)N R6R6'; 선형 또는 분지형 C1-C6의 알킬, 알킬 알코올, 알킬 아민(1차, 2차, 3차 아민 또는 4차 암모늄 포함), 또는 알킬 카르복실산; C2-C6의 헤테로알킬, 알킬사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬, 헤테로사이클릭, 사이클로알킬, 헤테로알킬사이클로알킬, 알킬카르보닐, 알킬 에테르, 알킬 에스테르, 알킬 아미드, 옥심; C5~C12 배당체이고;
    R4는 할로(F, Cl, Br, 또는 I), CN, NO2, SO3H, OR6, SR6, S(O2)R6, NHR6, N(R6)(R6'), C(O)XR6, N+(R6)(R6')(R6'')이고;
    X는 NH 또는 O이고;
    R5는 H, C(O)OR6, C(O)NHR6, R6C(O); 선형 또는 분지형 C1-C6의 알킬, 알킬 알코올, 알킬 아민(1차, 2차, 3차 아민 또는 4차 암모늄 포함), 알킬 카르복실산; C2-C6의 카보네이트, 카바마이드, 헤테로알킬, 알킬사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬, 헤테로사이클릭, 사이클로알킬, 헤테로알킬사이클로알킬, 알킬카르보닐, 알킬 에테르, 알킬 에스테르, 알킬 아미드 또는 아미노산이고;
    R6, R6' 및 R6''은 독립적으로, H; C1-C6의 알킬, 알킬 알코올, 알킬 아민(1차, 2차, 3차 아민 또는 4차 암모늄 포함) 또는 알킬 카르복실산; C2-C6의 헤테로알킬, 알킬사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬, 헤테로사이클릭, 사이클로알킬, 헤테로알킬사이클로알킬, 알킬카르보닐, 알킬 에테르, 알킬 에스테르, 알킬 아미드 또는 아미노산; 또는 제약상 염이고;
    또한, R1은 부재할 수 있고, C-7은 L에 직접 연결되고, R2, R3, X, C-10 및 C-9는 함께 결합하여, 5-원, 6-원 또는 7-원 헤테로사이클릭 고리를 형성할 수 있다.
  3. 제1항에 있어서, 하기 화학식 (III):
    Figure pct00372

    또는 그 제약상 허용되는 염, 수화물 또는 수화된 염; 또는 이들 화합물의 다형 결정 구조; 또는 그 동위원소, 광학 이성질체, 라세미체, 부분입체 이성질체 또는 거울상 이성질체를 갖는 캄프토테신 유사체 접합체:
    여기서, T는 표적화 또는 결합 리간드이고; L은 방출 가능한 링커이고; n은 1 내지 30이고 m은 1 내지 10이고;
    브래킷 내부에는 강력한 캄프토테신 유사체가 존재하고;
    R1은 선형 또는 분지형 C1-C6의 알킬, 알킬옥실, 알킬 아미노(1차, 2차, 3차 아미노 또는 4차 암모늄 포함), 옥실카르보닐, 아미노카르보닐, 아미노알킬, 옥실알킬, 아미노알킬아미노, 옥실알킬아미노, 아미노알킬옥실, 옥실알킬옥실, 또는 알킬 카르복실릭; C2-C6의 헤테로알킬, 알킬사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬, 헤테로사이클릭, 옥실사이클로알킬, 아미노사이클로알킬, 헤테로알킬사이클로알킬, 알킬카르보닐, 아미노알킬카르보닐, 옥실알킬카르보닐, 알킬 에테르, 알킬 에스테르, 알킬 아미드, 옥실알킬에테르, 아미노알킬에테르, 옥실알킬에스테르, 아미노알킬에스테르, 옥실알킬아미드, 아미노알킬아미드, 옥심; NH, 또는 O이고;
    R2는 NH, NR6, N+R6R6', O, S; 선형 또는 분지형 C1-C6의 알킬, 알킬 알코올, 알킬 아민(1차, 2차, 3차 아민 또는 4차 암모늄 포함), 아미노알킬 알코올, 아미노알킬 아민, 옥실알킬 알코올, 옥실알킬 아민, 아미노알킬, 옥실알킬, 또는 알킬 카르복실산; C2-C6의 헤테로알킬, 알킬사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬, 헤테로사이클릭, 사이클로알킬, 헤테로알킬사이클로알킬, 알킬카르보닐, 알킬 에테르, 알킬 에스테르, 알킬 아미드, 옥심; 옥실알킬에테르, 아미노알킬에테르, 옥실알킬에스테르, 아미노알킬에스테르, 옥실알킬아미드, 아미노알킬아미드이고;
    R3는 독립적으로, H, R6NHC(O), R6OC(O),SO2R6, SO3R6 , PR6R6', POR6R6', CH2OP(O)(OR6)2, C(O)OP(O)(OR6)2, PO(OR6)(OR6'), P(O)(OR6)OP(O)(OR6')2, R6C(O), C(O)N R6R6'; 선형 또는 분지형 C1-C6의 알킬, 알킬 알코올, 알킬 아민(1차, 2차, 3차 아민 또는 4차 암모늄 포함), 또는 알킬 카르복실산; C2-C6의 헤테로알킬, 알킬사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬, 헤테로사이클릭, 사이클로알킬, 헤테로알킬사이클로알킬, 알킬카르보닐, 알킬 에테르, 알킬 에스테르, 알킬 아미드, 옥심; C5~C12 배당체이고;
    R4는 할로(F, Cl, Br 또는 I), CN, NO2, SO3H, OR6, SR6, S(O2)R6, NHR6, N(R6)(R6'), C(O)XR6, N+(R6)(R6')(R6'')이고;
    X는 NH 또는 O이고;
    R5는 H, C(O)OR6, C(O)NHR6, R6C(O); 선형 또는 분지형 C1-C6의 알킬, 알킬 알코올, 알킬 아민(1차, 2차, 3차 아민 또는 4차 암모늄 포함), 알킬 카르복실산; C2-C6의 카보네이트, 카바마이드, 헤테로알킬, 알킬사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬, 헤테로사이클릭, 사이클로알킬, 헤테로알킬사이클로알킬, 알킬카르보닐, 알킬 에테르, 알킬 에스테르, 알킬 아미드 또는 아미노산이고;
    R6, R6' 및 R6''은 독립적으로, H; C1-C6의 알킬, 알킬 알코올, 알킬 아민(1차, 2차, 3차 아민 또는 4차 암모늄 포함) 또는 알킬 카르복실산; C2-C6의 헤테로알킬, 알킬사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬, 헤테로사이클릭, 사이클로알킬, 헤테로알킬사이클로알킬, 알킬카르보닐, 알킬 에테르, 알킬 에스테르, 알킬 아미드 또는 아미노산; 또는 제약상 염이고;
    또한, R2는 부재할 수 있고, C-9는 L에 직접 연결되고, R2, R3, X, C-10 및 C-9는 함께 결합하여, 5-원, 6-원 또는 7-원 헤테로사이클릭 고리를 형성할 수 있다.
  4. 제1항에 있어서, 하기 화학식 (IV):
    Figure pct00373

    또는 그 제약상 허용되는 염, 수화물 또는 수화된 염; 또는 이들 화합물의 다형 결정 구조; 또는 그 동위원소, 광학 이성질체, 라세미체, 부분입체 이성질체 또는 거울상 이성질체를 갖는 캄프토테신 유사체 접합체:
    여기서, T는 표적화 또는 결합 리간드이고; L은 방출 가능한 링커이고; n은 1 내지 30이고 m은 1 내지 10이고;
    브래킷 내부에는 강력한 캄프토테신 유사체가 존재하고;
    R1 및 R2는 독립적으로, H, NR6R6', -N+R6R6'R6'', OH, SH; 선형 또는 분지형 C1-C6의 알킬, 알킬옥실, 알킬 아미노(1차, 2차, 3차 아미노 또는 4차 암모늄 포함), 옥실카르보닐, 아미노카르보닐, 아미노알킬, 옥실알킬, 아미노알킬아미노, 옥실알킬아미노, 아미노알킬옥실, 옥실알킬옥실, 또는 알킬 카르복실릭; C2-C6의 헤테로알킬, 알킬사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬, 헤테로사이클릭, 옥실사이클로알킬, 아미노사이클로알킬, 헤테로알킬사이클로알킬, 알킬카르보닐, 아미노알킬카르보닐, 옥실알킬카르보닐, 알킬 에테르, 알킬 에스테르, 알킬 아미드, 옥실알킬에테르, 아미노알킬에테르, 옥실알킬에스테르, 아미노알킬에스테르, 옥실알킬아미드, 아미노알킬아미드, 옥심; NH2, 또는 OH이고;
    R3는 독립적으로, -NHC(O)-, -C(O)-, SO2-, -SO2NH-, -NR6SO2-, R6NHC(O), R6OC(O), SO2R6, SO3R6 , PR6R6', POR6R6', CH2OP(O)(OR6)2, C(O)OP(O)(OR6)2, PO(OR6)(OR6'), P(O)(OR6)OP(O)(OR6')2, R6C(O), C(O)NR6R6'; 선형 또는 분지형 C1-C6의 알킬, 알킬 알코올, 알킬 아민(1차, 2차, 3차 아민 포함) 또는 알킬 카르복실산; C2-C6의 헤테로알킬, 알킬사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬, 헤테로사이클릭, 사이클로알킬, 헤테로알킬사이클로알킬, 알킬카르보닐, 알킬 에테르, 알킬 에스테르, 알킬 아미드, 옥심이고;
    R4는 할로(F, Cl, Br 또는 I), CN, NO2, SO3H, OR6, SR6, S(O2)R6, NH(R6)S(O2)R6', N(R6)(R6'), C(O)XR6, N+(R6)(R6')(R6'')이고;
    X는 NH 또는 O이고;
    R5는 H, C(O)OR6, C(O)NHR6, R6C(O); 선형 또는 분지형 C1-C6의 알킬, 알킬 알코올, 알킬 아민(1차, 2차, 3차 아민 또는 4차 암모늄 포함), 알킬 카르복실산; C2-C6의 카보네이트, 카바마이드, 헤테로알킬, 알킬사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬, 헤테로사이클릭, 사이클로알킬, 헤테로알킬사이클로알킬, 알킬카르보닐, 알킬 에테르, 알킬 에스테르, 알킬 아미드 또는 아미노산이고;
    R6, R6' 및 R6''은 독립적으로, H; C1-C6의 알킬, 알킬 알코올, 알킬 아민(1차, 2차, 3차 아민 또는 4차 암모늄 포함) 또는 알킬 카르복실산; C2-C6의 헤테로알킬, 알킬사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬, 헤테로사이클릭, 사이클로알킬, 헤테로알킬사이클로알킬, 알킬카르보닐, 알킬 에테르, 알킬 에스테르, 알킬 아미드 또는 아미노산; 또는 제약상 염이고;
    또한, R3는 부재할 수 있고, C-10의 X는 L에 직접 연결되고, R2, R3, X, C-10 및 C-9는 함께 결합하여, 5-원, 6-원 또는 7-원 헤테로사이클릭 고리를 형성할 수 있다.
  5. 제1항에 있어서, 하기 화학식 (V):
    Figure pct00374

    또는 그 제약상 허용되는 염, 수화물 또는 수화된 염; 또는 이들 화합물의 다형 결정 구조; 또는 그 동위원소, 광학 이성질체, 라세미체, 부분입체 이성질체 또는 거울상 이성질체를 갖는 캄프토테신 유사체 접합체:
    여기서, T는 표적화 또는 결합 리간드이고; L은 방출 가능한 링커이고; n은 1 내지 30이고 m은 1 내지 10이고;
    브래킷 내부에는 강력한 캄프토테신 유사체가 존재하고;
    R1 및 R2는 독립적으로, H, NR6R6', -N+R6R6'R6'', OH, SH; 선형 또는 분지형 C1-C6의 알킬, 알킬옥실, 알킬 아미노(1차, 2차, 3차 아미노 또는 4차 암모늄 포함), 옥실카르보닐, 아미노카르보닐, 아미노알킬, 옥실알킬, 아미노알킬아미노, 옥실알킬아미노, 아미노알킬옥실, 옥실알킬옥실, 또는 알킬 카르복실릭; C2-C6의 헤테로알킬, 알킬사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬, 헤테로사이클릭, 옥실사이클로알킬, 아미노사이클로알킬, 헤테로알킬사이클로알킬, 알킬카르보닐, 아미노알킬카르보닐, 옥실알킬카르보닐, 알킬 에테르, 알킬 에스테르, 알킬 아미드, 옥실알킬에테르, 아미노알킬에테르, 옥실알킬에스테르, 아미노알킬에스테르, 옥실알킬아미드, 아미노알킬아미드, 옥심; NH2, 또는 OH이고;
    R3은 독립적으로, R6NHC(O)-, R6C(O)-, R6SO2, -SO2NHR6 , R6OC(O), R6'SO2R6-, SO3R6 , PR6R6', POR6R6', CH2OP(O)(OR6)2, C(O)OP(O)(OR6)2, PO(OR6)(OR6'), P(O)(OR6)OP(O)(OR6')2, R6C(O), C(O)NR6R6'; 선형 또는 분지형 C1-C6의 알킬, 알킬 알코올, 알킬 아민(1차, 2차, 3차 아민 포함) 또는 알킬 카르복실산; C2-C6의 헤테로알킬, 알킬사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬, 헤테로사이클릭, 사이클로알킬, 헤테로알킬사이클로알킬, 알킬카르보닐, 알킬 에테르, 알킬 에스테르, 알킬 아미드, 옥심이고;
    R4는 할로(F, Cl, Br 또는 I), CN, NO2, SO3H, OR6, SR6, S(O2)R6, NH(R6)S(O2)R6', N(R6)(R6'), C(O)XR6, N+(R6)(R6')(R6'')이고;
    X는 NH 또는 O이고;
    R5는 C(O)O, C(O)NH, R6C(O); 선형 또는 분지형 C1-C6의 알킬, 알킬 알코올, 알킬 아민(1차, 2차, 3차 아민 또는 4차 암모늄 포함), 알킬 카르복실산; C2-C6의 카보네이트, 카바마이드, 헤테로알킬, 알킬사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬, 헤테로사이클릭, 사이클로알킬, 헤테로알킬사이클로알킬, 알킬카르보닐, 알킬 에테르, 알킬 에스테르, 알킬 아미드 또는 아미노산이고;
    R6, R6' 및 R6''은 독립적으로, H; C1-C6의 알킬, 알킬 알코올, 알킬 아민(1차, 2차, 3차 아민 또는 4차 암모늄 포함) 또는 알킬 카르복실산; C2-C6의 헤테로알킬, 알킬사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬, 헤테로사이클릭, 사이클로알킬, 헤테로알킬사이클로알킬, 알킬카르보닐, 알킬 에테르, 알킬 에스테르, 알킬 아미드 또는 아미노산; 또는 제약상 염이고;
    또한, R5는 부재할 수 있고, C-20의 O는 L에 직접 연결되고, R2, R3, X, C-10 및 C-9는 함께 결합하여, 5-원, 6-원 또는 7-원 헤테로사이클릭 고리를 형성할 수 있다.
  6. 제2항, 제3항, 제4항 및 제5항 중 어느 한 항에 있어서, 캄프토테신 유사체가 하기 도시된 II-1 내지 II-61, III-1 내지 III-52, IV-1 내지 IV-47 및 V-1 내지 V-61의 구조:
    Figure pct00375

    Figure pct00376

    Figure pct00377

    Figure pct00378

    Figure pct00379

    Figure pct00380

    Figure pct00381

    Figure pct00382

    Figure pct00383

    Figure pct00384

    Figure pct00385

    Figure pct00386

    Figure pct00387

    Figure pct00388

    Figure pct00389

    Figure pct00390

    Figure pct00391

    Figure pct00392

    Figure pct00393

    Figure pct00394

    Figure pct00395

    Figure pct00396

    Figure pct00397

    Figure pct00398

    Figure pct00399

    Figure pct00400

    Figure pct00401

    Figure pct00402

    또는 그 제약상 허용되는 염, 수화물 또는 수화된 염; 또는 이들 화합물의 다형 결정 구조; 또는 그 동위원소, 광학 이성질체, 라세미체, 부분입체 이성질체 또는 거울상 이성질체를 갖는 링커 L에 연결된, 캄프토테신 유사체 접합체:
    여기서, "
    Figure pct00403
    "는 링커 L에 연결되는 부위이고;
    여기서, R6 및 R6'은 독립적으로, H; C1-C6의 알킬, 알킬 알코올, 알킬 아민(1차, 2차, 3차 아민 또는 4차 암모늄 포함) 또는 알킬 카르복실산; C2-C6의 헤테로알킬, 알킬사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬, 헤테로사이클릭, 사이클로알킬, 헤테로알킬사이클로알킬, 알킬카르보닐, 알킬 에테르, 알킬 에스테르, 알킬 아미드 또는 아미노산; 또는 제약상 염이다.
  7. 제1항, 제2항, 제3항, 제4항 또는 제5항 중 어느 한 항에 있어서, 링커 L은 바람직하게는 아미노, 설폰아미드, 포스파미드 또는 아미노산 기를 갖고, 여기서 하기 화학식 (I-q)의 측쇄가 상기 기를 통해 연결될 수 있는 캄프토테신 유사체 접합체:
    여기서, 상기 링커 L의 아미노산은 바람직하게는 아스파라긴산, 글루탐산, 리신, 오르니틴 또는 티로신으로부터 선택되고, 여기서 이들 작용성 아미노기, 카르복실기 또는 페놀기 중 1개 또는 2개가 하기 화학식 (I-q)의 긴 측쇄에 연결되고:
    Figure pct00404

    여기서,
    Figure pct00405
    는 링커의 설포닐, 포스페이트, 아미노 또는 카르보닐 기에 연결되는 부위이고; G1은 NH, NHNH, C(=O), NHNHC(O), C(=O)NH, C(=NH)NH, CH2, CH2C(O), C(O)O, NHC(O)NH, 또는 (Aa)r,(r=1-12)이고; G2는 NH, NHNH, C(=O), NHNHC(O), C(=O)NH, C(=NH)NH, CH2, C(O)O, NHC(O)NH, O, S, B, P(O)(OH), NHP(O)(OH), NHP(O)(OH)NH, CH2P(O)(OH)NH, OP(O)(OH)O, CH2P(O)(OH)O, NHS(O)2, NHS(O)2NH, CH2S(O)2NH, OS(O)2O, CH2S(O)2O, Ar, ArCH2, ArO, ArNH, ArS, ArNR1, (Aa)r,(r=1-12)이고; X1 및 X2는 독립적으로 O, CH2, S, NH, N(R12), +NH(R12), +N(R12)(R13), C(O), OC(O), OC(O)O, NHSO2NH, NHP(O)(NH)2, SO2NH, P(O)(NH)2, NHS(O)NH, NHP(O)(OH)(NH), OC(O)NH, NHC(O)NH이고; Y2는 O, NH, NR1, CH2, S, Ar이고; G3은 OH, SH, OR1, SR1, OC(O)R1, NHC(O)R12, C(O)R12, CH3, NH2, NR12, +NH(R12), +N(R12)(R13), C(O)OH, C(O)NH2, NHC(O)NH2, BH2, BR12R13, P(O)(OH)2, NHP(O)(OH)2, NHP(O)(NH2)2, S(O)2(OH), (CH2)q1C(O)OH, (CH2)q1P(O)(OH)2, C(O)(CH2)q1C(O)OH, OC(O)(CH2)q1C(O)OH, NHC(O)(CH2)q1C(O)OH, CO(CH2)q1P(O)(OH)2, NHC(O)O(CH2)q1-C(O)OH, OC(O)NH-(CH2)q1C(O)OH, NHCO(CH2)q1P(O)(OH)2, NHC(O)(NH)(CH2)q1C(O)OH, CONH(CH2)q1-P(O)(OH)2, NHS(O)2(CH2)q1C(O)OH, CO(CH2)q1S(O)2(OH), NHS(O)2NH-(CH2)q1C(O)OH, OS(O)2NH(CH2)q1C(O)OH, NHCO(CH2)q1S(O)2(OH), NHP(O)(OH)(NH)-(CH2)q1C(O)OH, CONH(CH2)q1S(O)(OH), OP(O)(OH)2, (CH2)q1P(O)(NH)2, NHS(O)2(OH), NHS(O)2NH2, CH2S(O)2NH2, OS(O)2OH, OS(O)2OR1, CH2S(O)2OR1, Ar, ArR12, ArOH, ArNH2, ArSH, ArNHR12, 또는 (Aa)q1이고; p1, p2 및 p3은 독립적으로 0 내지 30이지만 동시에 0이 아니고; q1 및 q2는 독립적으로 0 내지 24이고; 바람직하게는 G3는 선형 또는 분지형의, C2-C50 폴리카르복실산 또는 C2-C50 폴리알킬아민, C6-C50 올리고당 또는 다당류, 4차 암모늄 양이온 및 술포네이트 음이온으로 이루어진 C6-C50 쯔비터이온성 베타인 또는 쯔비터이온성 폴리(설포베타인)(PSB), 생분해성 중합체(예를 들어, 폴리(락트/글리콜)산(PLGA), 폴리(아크릴레이트), 키토산, N-(2-히드록시프로필)-메타크릴아미드의 공중합체, 폴리[2-(메타크릴로일옥시)에틸 포스포릴콜린] (PMPC), 폴리-L-글루탐산, 폴리(락타이드-코-글리콜라이드)(PLG), 폴리(락타이드-코-글리콜라이드), 폴리(에틸렌 글리콜)(PEG), 폴리(프로필렌 글리콜)(PPG), 폴리(락타이드-코-글리콜라이드), 폴리(에틸렌 글리콜)-변성 펩티드, 폴리(에틸렌 글리콜)-변성 지질, 폴리(에틸렌 글리콜)-변성 알킬카르복산(alkylcarboxic acid), 폴리(에틸렌 글리콜)-변성 알킬아민, 폴리(락타이드)-코-글리콜라이드, 폴리사르코신, 히알루론산(HA)(글리코사미노글리칸), 헤파린/헤파란 설페이트(HSGAG), 콘드로이틴 설페이트/더마탄 설페이트(CSGAG), 폴리(에틸렌 글리콜)-변성 알킬설페이트, 폴리(에틸렌 글리콜)-변성 알킬포스페이트, 또는 폴리(에틸렌 글리콜)-변성 알킬 4차 암모늄이다.
  8. 제7항에 있어서, 상기 화학식 (I-q)의 측쇄 링커는 하기로부터 선택되는 캄프토테신 유사체 접합체:
    Figure pct00406

    여기서, G1, p1, p2, p3, Aa, r, X2, q1, m1은 상기 제7항에서와 동일하게 정의된다.
  9. 제1항, 제2항, 제3항, 제4항 또는 제5항에 있어서, 상기 화학식 (I), (II), (III), (IV) 및 (V)의 캄프토테신 유사체의 접합체는 각각 세포 결합 분자 T와 하기 화학식 (VI), (VII), (VIII), (IX) 및 (X)의 접합가능한(conjugatable) 화합물의 용이한 커플링 반응으로부터 제조되는, 캄프토테신 유사체의 접합체:
    Figure pct00407

    여기서, R1, R2, R3, R4, R5, L, X 및 m은 상기 화학식 I에서와 동일하게 정의되고;
    Lv는 세포 결합 분자 상의 티올, 아민, 카르복실산, 셀레놀, 페놀 또는 히드록실기와 반응할 수 있는 반응기이고, 이러한 반응기는 할로겐화물(불화물, 염화물, 브롬화물 및 요오드화물), 말레이미드, 메탄술포닐(메실), 톨루엔술포닐(토실), 트리플루오로메틸-술포닐(트리플레이트), 트리플루오로-메틸술포네이트, 니트로페녹실, N-숙신이미딜옥실(NHS), 페녹실; 디니트로페녹실; 펜타플루오로페녹실, 테트라플루오로페녹실, 트리플루오로페녹실, 디플루오로-페녹실, 모노플루오로-페녹실, 펜타클로로-페녹실, 1H-이미다졸-1-일, 클로로페녹실, 디클로로-페녹실, 트리클로로페녹실, 테트라클로로페녹실, N-(벤조트리아졸-일)옥실, 2-에틸-5-페닐이속사졸륨-3'-술포닐, 페닐옥사디아졸-술포닐(-술폰-ODA), 2-에틸-5-페닐이속사졸륨-일, 페닐옥사디아졸-일(ODA), 옥사디아졸-일, 불포화 탄소(탄소-탄소, 탄소-질소, 탄소-황, 탄소-인, 황-질소, 인-질소, 산소-질소 또는 탄소-산소 사이의 이중 또는 삼중 결합) 또는 미츠노부(Mitsunobu) 반응용 축합(condensation) 시약으로 생성된 중간 분자로부터 선택되고; 축합 시약의 예는 EDC(N-(3-디메틸-아미노프로필)-N'-에틸카르보디이미드), DCC(디사이클로헥실-카르보디이미드), N,N'-디이소프로필-카르보디이미드(DIC), N-사이클로헥실-N'-(2-모르폴리노에틸)-카르보디이미드 메토-p-톨루엔술포네이트(CMC 또는 CME-CDI), 1,1'-카르보닐디이미-다졸(CDI), TBTU(O-(벤조트리아졸-1-일)-N,N,N',N'-테트라-메틸우로늄 테트라플루오로보레이트), N,N,N',N'-테트라메틸-O-(1H-벤조트리아졸-1-일)-우로늄 헥사플루오로-포스페이트(HBTU), (벤조트리아졸-1-일옥시)트리스-(디메틸아미노)-포스포늄 헥사플루오로포스페이트(BOP), (벤조트리아졸-1-일옥시)-트리피롤리-디노포스포늄 헥사플루오로포스페이트(PyBOP), 디에틸 시아노포스포네이트(DEPC), 클로로-N,N,N',N'-테트라메틸포름아미디늄헥사플루오로포스페이트, 1-[비스(디메틸아미노)-메틸렌]-1H-1,2,3-트리아졸로[4,5-b]피리디늄 3-옥사이드 헥사플루오로포스-페이트(HATU), 1-[(디메틸아미노)(모르폴리노)메틸렌]-1H-[1,2,3]트리아졸로[4,5-b]피리딘-1-이움(ium) 3-옥사이드 헥사플루오로-포스페이트(HDMA), 2-클로로-1,3-디메틸-이미다졸리디늄 헥사플루오로포스페이트(CIP), 클로로트리피롤리디노포스포늄 헥사플루오로포스페이트(PyCloP), 플루오로-N,N,N',N'-비스(테트라메틸렌)-포름아미디늄 헥사플루오로포스페이트(BTFFH), N,N,N',N'-테트라메틸-S-(1-옥시도-2-피리딜)-티우로늄 헥사플루오로포스페이트, O-(2-옥소-1(2H)피리딜)-N,N,N',N'-테트라메틸우로늄 테트라플루오로보레이트(TPTU), S-(1-옥시도-2-피리딜)-N,N,N',N'-테트라메틸-티우로늄 테트라플루오로보레이트, O-[(에톡시카르보닐)-시아노메틸렌아미노]-N,N,N',N'-테트라메틸우로늄 헥사플루오로포스페이트(HOTU), (1-시아노-2-에톡시-2-옥소에틸리덴아미노-옥시)디메틸아미노-모르폴리노-카르베늄 헥사플루오로포스페이트(COMU), O-(벤조트리아졸-1-일)-N,N,N',N'-비스(테트라메틸렌)우로늄 헥사플루오로포스페이트(HBPyU), N-벤질-N'-사이클로헥실-카르보디이미드(중합체 결합 여부에 관계없음), 디피롤리디노(N-숙신이미딜-옥시)카르베늄 헥사플루오로-포스페이트(HSPyU), 클로로디피롤리디노카르베늄 헥사플루오로-포스페이트(PyClU), 2-클로로-1,3-디메틸이미다졸리디늄 테트라플루오로보레이트(CIB), (벤조트리아졸-1-일옥시)-디피페리디노-카르베늄 헥사플루오로포스페이트(HBPipU), O-(6-클로로벤조트리아졸-1-일)-N,N,N',N'-테트라메틸우로늄 테트라플루오로보레이트(TCTU), 브로모트리스(디메틸아미노)-포스포늄 헥사플루오로-포스페이트(BroP), 프로필포스포닉 무수물(PPCA, T3P), 2-모르폴리노에틸 이소시아나이드(MEI), N,N,N',N'-테트라메틸-O-(N-숙신이미딜)-우로늄 헥사플루오로포스페이트(HSTU), 2-브로모-1-에틸-피리디늄 테트라플루오로-보레이트(BEP), O-[(에톡시카르보닐)시아노-메틸렌아미노]-N,N,N',N'-테트라-메틸우로늄 테트라플루오로보레이트(TOTU), 4-(4,6-디메톡시-1,3,5-트리아진-2-일)-4-메틸모르폴리늄 클로라이드(MMTM, DMTMM), N,N,N',N'-테트라메틸-O-(N-숙신이미딜)우로늄 테트라플루오로보레이트(TSTU), O-(3,4-디하이드로-4-옥소-1,2,3-벤조트리아진-3-일)-N,N,N',N'-테트라메틸우로늄 테트라플루오로-보레이트(TDBTU),1,1'-(아조디카르보닐)-디피페리딘(ADD), 디-(4-클로로벤질)-아조디카르복실레이트(DCAD), 디-tert-부틸 아조디카르복실레이트(DBAD), 디이소프로필 아조디카르복실레이트(DIAD), 디에틸 아조디카르복실레이트(DEAD)이고;
    또한, Lv1 및 Lv2는 산 자체에 의해 형성되거나 다른 C1~C8 산 무수물과 함께 형성되는 무수물일 수 있고;
    보다 바람직하게는, Lv는 할로겐화물(예를 들어, 불화물, 염화물, 브롬화물 및 요오드화물), 말레이미드, 메탄술포닐(메실), 톨루엔술포닐(토실), 트리플루오로메틸-술포닐(트리플레이트), 트리플루오로메틸술포네이트, 니트로페녹실, N-숙신이미딜옥실(NHS), 페녹실; 디니트로페녹실; 펜타플루오로페녹실, 테트라플루오로페녹실, 트리플루오로페녹실, 디플루오로페녹실, 모노플루오로페녹실, 펜타클로로페녹실, 1H-이미다졸-1-일, 클로로페녹실, 디클로로페녹실, 트리클로로페녹실, 테트라클로로페녹실, N-(벤조트리아졸-일)옥실, 2-에틸-5-페닐이속사졸륨-3'-술포닐, 페닐옥사디아졸-술포닐(-술폰-ODA), 2-에틸-5-페닐이속사졸륨-일, 페닐옥사디아졸-일(ODA), 옥사디아졸-일, 불포화 탄소(탄소-탄소, 탄소-질소, 탄소-황, 탄소-인, 황-질소, 인-질소, 산소-질소 또는 탄소-산소 사이의 이중 또는 삼중 결합), 또는 다음 구조 중 하나로부터 선택되고:
    Figure pct00408

    Figure pct00409

    여기서, X1'은 F, Cl, Br, I 또는 Lv3이고; X2'는 O, NH, N(R1) 또는 CH2이고; R3은 H, 방향족, 헤테로방향족, 또는 방향족 기이고, 여기서 하나 이상의 H 원자는 -R1, -할로겐, OR1, -SR1, -NR1R2, - NO2, -S(O)R1,-S(O)2R1, 또는 -COOR1에 의해 독립적으로 대체되고, 여기서 R1 및 R2는 위에서 정의되고; Lv3은 F, Cl, Br, I, 니트로페놀; N-히드록시숙신이미드(NHS); 페놀; 디니트로페놀; 펜타플루오로페놀; 테트라플루오로페놀; 디플루오로페놀; 모노플루오로페놀; 펜타클로로페놀; 트리플레이트; 이미다졸; 디클로로페놀; 테트라클로로페놀; 1-하이드록시벤조-트리아졸; 토실레이트; 메실레이트; 2-에틸-5-페닐이속사졸륨-3'-술포네이트, 자체적으로 형성되거나 아세틸 무수물, 포르밀 무수물과 함게 형성된 무수물로부터 선택된 이탈기이다.
  10. 제1항, 제2항, 제3항, 제4항 또는 제5항에 있어서, 하기 화학식 (IIq-1), (IIq-2), (IIq-3), (IIq-4), (IIq-5), (IIq-6), (IIq-7), (IIq-8)를 갖는 캄프토테신 유사체의 접합체:
    Figure pct00410

    Figure pct00411

    여기서, R' 및 R''는 독립적으로, H, Me, Et, i Pr, i Bu, Bz (CH2C6H5), CH2COOH, CH2CH2COOH, CH2CONH2, CH2CH2CONH2, CH2CH2CH2CH2NH2, CH2CH2SCH3, CH2OH, CH2CH2CH2NHC(=NH)NH2, CH(OH)CH3, CH2C6H4OH, CH2C3N2H3이고; p1 및 p2는 독립적으로 0 내지 24이고; q1은 1 내지 18이고; q3은 0 내지 6이고; q4는 0 내지 4이고; m' 및 m''는 독립적으로 0 내지 6이고; m'''은 0 또는 1이고; mAb는 세포 결합 분자, 바람직하게는 항체이고; 여기서 NH-Drug는 위에서 열거한 화합물 II-1 내지 II-61, III-1 내지 III-52, IV-1 내지 IV-47 및 V-1 내지 V-61이고;
    Figure pct00412
    는 NH-Drug에 연결되는 부위이다.
  11. 제9항에 있어서, 하기 화학식 (IIq-9), (IIq-10), (IIq-11), (IIq-12), (IIq-13), (IIq-14), (IIq-15), (IIq-16)을 갖는 접합가능한 화합물.
    Figure pct00413

    Figure pct00414

    여기서, R' 및 R''는 독립적으로, H, Me, Et, i Pr, i Bu, Bz (CH2C6H5), CH2COOH, CH2CH2COOH, CH2CONH2, CH2CH2CONH2, CH2CH2CH2CH2NH2, CH2CH2SCH3, CH2OH, CH2CH2CH2NHC(=NH)NH2, CH(OH)CH3, CH2C6H4OH, CH2C3N2H3이고; p1 및 p2는 독립적으로 0 내지 24이고; q1은 1 내지 18이고; q3은 0 내지 6이고; q4는 0 내지 4이고; m' 및 m''는 독립적으로 0 내지 6이고; m'''은 0 또는 1이고; 여기서 NH-Drug는 위에 열거한 화합물 II-1 내지 II-61, III-1 내지 III-51, IV-1 내지 IV-47 및 V-1 내지 V-61이고,
    Figure pct00415
    는 NH-Drug에 연결되는 부위이다.
  12. 제1항, 제2항, 제3항, 제4항 또는 제5항에 있어서, 하기 도시된 하기 구조를 갖는 캄프토테신 유사체 접합체:
    C1-005, C1-008, C1-021, C1-022, C1-029, C1-031, C1-035, C1-041, C1-042, C1-043, C1-047, C1-050, C1-056, C1-061, C1-064, C1-070, C1-075, C1-081, C1-086, C1-088, C1-090, C1-094, C1-099, C1-102, C1-110, C1-102, C1-110, C1-113, C1-114, C1-119a, C1-119b, C1-123, C1-127, C1-131, C1-137a, C1-137b, C1-140, C1-147a, C1-147b, C1-151, C1-152, C1-156, C1-157, C1-158, C1-159a, C1-159b, C1-165, C1-166, C1-168, C1-170a, C1-170b, C1-177, C1-188, C1-200, C1-208, C1-213, C1-226, C1-238, C1-243, C1-247, C1-262a, C1-262b, C1-262c, C1-262d, C1-266, C1-285a ~ C1-285z, C1-285a1 ~ C1-285i1, C1-291a ~ C1-291z, C1-291a1 ~ C1-291i1, C1-297a ~ C1-297z, C1-297a1 ~ C1-297i1, C1-305, C1-306, C1-311, C1-362, C1-397, C1-402, C1-407, C1-411, C1-414, C1-419, C1-424, C1-428, C1-436, C2-005, C3-005, C2-008, C3-008, C2-021, C3-021, C2-022, C3-022, C2-029, C3-029, C2-031, C3-031, C2-035, C3-035, C2-041, C3-041, C2-042, C3-042, C2-043, C3-043, C2-047, C3-047, C2-050, C3-050, C2-056, C3-056, C2-061, C3-061, C2-064, C3-064, C2-070, C3-070, C2-075, C3-075, C2-081, C3-081, C2-086, C3-086, C2-088, C3-088, C2-090, C3-090, C2-094, C3-094, C2-099, C3-099, C2-102, C3-102, C2-110, C3-110, C2-113, C3-113, C2-114, C3-114, C2-119a, C3-119a, C2-119b, C3-119b, C2-123, C3-123, C2-127, C3-127, C2-131, C3-131, C2-137a, C3-137a, C2-137b, C3-137b, C2-140, C3-140, C2-147a, C3-147a, C2-147b, C3-147b, C2-151, C3-151, C2-152, C3-152, C2-156, C3-156, C2-157, C3-157, C2-158, C3-158, C2-159a, C3-159a, C2-159b, C3-159b, C2-165, C3-165, C2-166, C3-166, C2-168, C3-168, C2-170a, C3-170a, C2-170b, C3-170b, C2-177, C3-177, C2-188, C3-188, C2-200, C3-200, C2-208, C3-208, C2-213, C3-213, C2-226, C3-226, C2-238, C3-238, C2-243, C3-243, C2-247, C3-247, C2-262a, C3-262a, C2-262b, C3-262b, C2-262c, C3-262c, C2-262d, C3-262d, C2-266, C3-266, C2-285a ~ C2-285z, C3-285a ~ C3-285z, C2-285a1 ~ C2-285i1, C3-285a1 ~ C3-285i1, C2-291a ~ C2-291z, C2-291a1 ~ C2-291i1, C3-291a ~ C3-291z, C3-291a1 ~ C3-291i1, C2-297a ~ C2-297z, C2-297a1 ~ C2-297i1, C3-297a ~ C3-297z, C3-297a1 ~ C3-297i1, C2-305, C3-305, C2-306, C3-306, C2-311, C3-311, C2-362, C3-362, C2-397, C3-397, C2-402, C3-402, C2-407, C3-407, C2-411, C3-411, C2-414, C3-414, C2-419, C3-419, C2-424, C3-424, C2-428, C3-428
    Figure pct00416

    Figure pct00417

    Figure pct00418

    Figure pct00419

    Figure pct00420

    Figure pct00421

    Figure pct00422

    Figure pct00423

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    Figure pct00429

    Figure pct00430

    Figure pct00431

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    Figure pct00433

    Figure pct00434

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    Figure pct00436

    Figure pct00437

    Figure pct00438

    Figure pct00439

    Figure pct00440

    Figure pct00441

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    Figure pct00444

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    Figure pct00447

    Figure pct00448

    Figure pct00449

    Figure pct00450
  13. 하기 도시된 화합물 29, 31, 35, 41, 42, 43, 47, 50, 56, 61, 64, 70, 75, 81, 86, 88, 90, 94, 99, 102, 110, 113, 114, 119a, 119b, 123, 127, 131, 137a, 137b, 140, 147a, 147b, 151, 152, 157, 158, 159a, 159b, 165, 166, 168, 170a, 170b, 177, 188, 200, 208, 213, 226, 238, 243, 247, 262a, 262b, 262c, 262d, 266, 285 (285a ~ 285z, 285a1 ~ 285i1), 291, 297, 305, 306, 311, 362, 397, 402, 436의 구조를 갖는, CPT 접합체를 제조하기 위한 제9항의 화학식 (VI), (VII), (VIII), (IX) 및 (X)의 화합물:
    Figure pct00451

    Figure pct00452

    Figure pct00453

    Figure pct00454

    Figure pct00455

    Figure pct00456

    Figure pct00457

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    Figure pct00465

    Figure pct00466

    Figure pct00467
  14. 제1항, 제2항, 제3항, 제4항, 제5항, 제10항 또는 제12항에 있어서, 세포 결합 분자(T 또는 mAb)는 하기로부터 선택되는 캄프토테신 유사체 접합체:
    (A): 항체, 단백질, 프로바디, 나노바디, 비타민(엽산 포함), 펩티드, 중합체 미셀, 리포솜, 지질단백질계 약물 담체, 나노입자 약물 담체, 덴드리머, 및 세포-결합 리간드로 코팅 또는 연결된 분자 또는 입자, 또는 이들의 조합으로 이루어진 군;
    (B): 항체-유사 단백질, 전장 항체(다클론성 항체, 단클론성 항체, 항체 이량체, 항체 다량체), 다중특이적 항체(이중특이적 항체, 삼중특이적 항체 또는 사중특이적 항체 중로부터 선택됨); 단일 사슬 항체, 표적 세포에 결합하는 항체 단편, 단클론성 항체, 단일 사슬 단클론성 항체, 표적 세포에 결합하는 단클론성 항체 단편, 키메라 항체, 표적 세포에 결합하는 키메라 항체 단편, 도메인 항체, 표적 세포에 결합하는 도메인 항체 단편, 리서페이스트(resurfaced) 항체, 리서페이스트 단일 사슬 항체 또는 표적 세포에 결합하는 리서페이스트 항체 단편, 인간화된 항체 또는 리서페이스트 항체, 인간화된 단일 사슬 항체, 또는 표적 세포에 결합하는 인간화된 항체 단편, 항-이디오타입(항-Id) 항체, CDR, 디아바디, 트리아바디, 테트라바디, 미니항체, 프로바디, 프로바디 단편, 작은 면역 단백질(small immune proteins: SIP), 림포카인, 호르몬, 비타민, 성장 인자, 집락 자극 인자, 영양분-수송 분자, 고분자량 단백질, 융합 단백질, 키나제 억제제, 유전자-표적화제, 항체 또는 고분자량 단백질로 변형된 중합체 또는 나노입자;
    (C): 하기로부터 선택된 세포-결합 리간드 또는 수용체 작용제: 엽산 유도체; 글루탐산 요소 유도체; 소마토스타틴 및 이의 유사체(옥트레오티드(산도스타틴) 및 란레오티드(소마툴린)로 이루어진 군으로부터 선택됨); 방향족 술폰아미드; 뇌하수체 아데닐레이트 사이클라제 활성화 펩티드(PACAP)(PAC1); 혈관활성 장 펩티드(VIP/PACAP)(VPAC1, VPAC2); 멜라닌세포-자극 호르몬(α-MSH); 콜레시스토키닌(CCK)/가스트린 수용체 작용제; 봄베신(Pyr-Gln-Arg-Leu-Gly-Asn-Gln-Trp-Ala-Val-Gly-His-Leu-Met-NH2로 이루어진 군으로부터 선택됨)/가스트린-방출 펩티드(GRP); 뉴로텐신 수용체 리간드(NTR1, NTR2, NTR3); 물질 P(NK1 수용체) 리간드; 뉴로펩티드 Y(Y1-Y6); RGD(Arg-Gly-Asp), NGR(Asn-Gly-Arg), 이량체 및 다량체 사이클릭 RGD 펩티드(cRGDfV로부터 선택됨), TAASGVRSMH 및 LTLRWVGLMS(콘드로이틴 설페이트 프로테오글리칸 NG2 수용체 리간드) 및 F3 펩티드를 포함하는 호밍(homing) 펩티드; 세포 침투성 펩티드(CPP); 부세렐린(Pyr-His-Trp-Ser-Tyr-D-Ser(OtBu)-Leu-Arg-Pro-NHEt), 고나도렐린(Pyr-His-Trp-Ser-Tyr-Gly-Leu-Arg-Pro-Gly-NH2), 고세렐린(Pyr-His-Trp-Ser-Tyr-D-Ser(OtBu)-Leu-Arg-Pro-AzGly-NH2), 히스트렐린(Pyr-His-Trp-Ser-Tyr-D-His(N-벤질)-Leu-Arg-Pro-NHEt), 류프롤라이드(Pyr-His-Trp-Ser-Tyr-D-Leu-Leu-Arg-Pro-NHEt), 나파렐린(Pyr-His-Trp-Ser-Tyr-2Nal-Leu-Arg-Pro-Gly-NH2), 트립토렐린(Pyr-His-Trp-Ser-Tyr-D-Trp-Leu-Arg-Pro-Gly-NH2), 데슬로렐린(Deslorelin), 아바렐릭스(Abarelix)(Ac-D-2Nal-D-4-클로로Phe(chloroPhe)-D-3-(3-피리딜)Ala-Ser-(N-Me)Tyr-D-Asn-Leu-이소프로필Lys-Pro-DAla-NH2), (Ac-D-2Nal-D-4-클로로Phe-D-3-(3-피리딜)Ala-Ser-Tyr-D-Cit-Leu-Arg-Pro-D-Ala-NH2), 데가렐릭스(Degarelix)(Ac-D-2Nal-D-4-클로로Phe-D-3-(3-피리딜)Ala-Ser-4-아미노Phe(L-하이드로오로틸)-D-4-아미노Phe(카르바-모일)-Leu-이소프로필Lys-Pro-D-Ala-NH2), 및 가니렐릭스(Ganirelix)(Ac-D-2Nal-D-4-클로로Phe-D-3-(3-피리딜)Ala-Ser-Tyr-D-(N9,N10-디에틸)-호모Arg-Leu-(N9,N10-디에틸)-호모Arg-Pro-D-Ala-NH2)으로 이루어진 군으로부터 선택된, 테스토스테론 생성뿐만 아니라, 난포 자극 호르몬(FSH) 및 황체 형성 호르몬(LH)을 표적으로 하여 작용하는, 황체형성 호르몬-방출 호르몬(LHRH) 작용제 및 길항제, 및 성선 자극 호르몬 방출 호르몬(GnRH)으로 이루어진 군으로부터 선택된 펩티드 호르몬; 톨-유사 수용체(TLR) 리간드, C-형 렉틴 및 노드라이크(nodlike) 수용체(NLR) 리간드로 이루어진 군으로부터 선택되는 패턴 인식 수용체(PRR); 칼시토닌 수용체 작용제; 인테그린 수용체 및 이들의 수용체 아형(αVβ1, αVβ3, αVβ5, αVβ6, α6β4, α7β1, αLβ2, αIIbβ3으로 구성된 군으로부터 선택됨) 작용제(GRGDSPK, 사이클로(RGDfV)(L1) 및 이의 유도체[사이클로(-N(Me)R-GDfV), 사이클로(R-Sar-DfV), 사이클로(RG-N(Me)D-fV), 사이클로(RGD-N(Me)f-V), 사이클로(RGDf-N(Me)V-)(실렌지타이드)]로 이루어진 군으로부터 선택됨); 나노바디(VHH(카멜리드 Ig)의 유도체); 도메인 항체(dAb, VH 또는 VL 도메인의 유도체); 이중특이적 T 세포 관여자(Bispecific T cell Engager: BiTE, 이중특이적 디아바디); 이중 친화성 재표적화(Dual Affinity ReTargeting: DART, 이중특이적 디아바디); 4가 탠덤 항체(TandAb, 이량체화된 이중특이적 디아바디); 안티칼린(리포칼린의 유도체); 어드넥틴(제10 FN3(피브리노넥틴)); 설계된 안키린 반복 단백질(Designed Ankyrin Repeat Protein: DARPin); 아비머; EGF 수용체 또는 VEGF 수용체 작용제;
    (D): 하기로부터 선택된 세포-결합 분자/리간드 또는 세포 수용체 작용제의 소분자:
    하기 구조로 도시된, LB01(엽산), LB02(PMSA 리간드), LB03(PMSA 리간드), LB04(PMSA 리간드), LB05(소마토스타틴), LB06(소마토스타틴), LB07(옥트레오타이드, 소마토스타틴 유사체), LB08(란레오타이드, 소마토스타틴 유사체), LB09(바프레오타이드(Sanvar), 소마토스타틴 유사체), LB10(CAIX 리간드), LB11(CAIX 리간드), LB12(가스트린 방출 펩티드 수용체(GRPr), MBA), LB13(황체 형성 호르몬-방출 호르몬(LH-RH) 리간드 및 GnRH), LB14(황체 형성 호르몬-방출 호르몬(LH-RH) 및 GnRH 리간드), LB15(GnRH 길항제, 아바렐릭스(Abarelix)), LB16(코발라민, 비타민 B12 유사체), LB17(코발라민, 비타민 B12 유사체), LB18(αvβ3 인테그린 수용체의 경우, 사이클릭 RGD 펜타펩티드), LB19(VEGF 수용체의 경우, 헤테로-2가 펩티드 리간드), LB20(뉴로메딘 B), LB21(G-단백질 결합 수용체의 경우, 봄베신), LB22(톨 유사 수용체의 경우, TLR2), LB23(안드로겐 수용체의 경우), LB24(αv 인테그린 수용체의 경우, 실렌지타이드/사이클로(-RGDf)V-)), LB23(플루드로코르티손), LB25(리파부틴 유사체), LB26(리파부틴 유사체), LB27(리파부틴 유사체), LB28(플루드로코르티손), LB29(덱사메타손), LB30(플루티카손 프로피오네이트), LB31(베클로메타손 디프로피오네이트), LB32(트리암시놀론 아세토나이드), LB33(프레드니손), LB34(프레드니솔론), LB35(메틸프레드니솔론), LB36(베타메타손), LB37(이리노테칸 유사체), LB38(크리조티닙 유사체), LB39(보르테조밉 유사체), LB40(카르필조밉 유사체), LB41(카르필조밉 유사체), LB42(류프롤라이드 유사체), LB43(트립토렐린 유사체), LB44(클린다마이신), LB45(리라글루타이드 유사체), LB46(세마글루타이드 유사체), LB47(레타파물린 유사체), LB48(인디불린 유사체), LB49(빈블라스틴 유사체), LB50(릭시세나타이드 유사체), LB51(오시머티닙 유사체), LB52(뉴클레오사이드 유사체), LB53(에를로티닙 유사체) 또는 LB54(라파티닙 유사체):
    Figure pct00468

    Figure pct00469

    Figure pct00470

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    Figure pct00473

    Figure pct00474

    Figure pct00475

    Figure pct00476

    Figure pct00477
  15. 제1항, 제2항, 제3항, 제4항, 제5항, 제10항 또는 제12항에 있어서, 세포 결합 분자는 종양 세포, 바이러스 감염 세포, 미생물 감염 세포, 기생충 감염 세포, 자가면역 질환 세포, 활성화된 종양 세포, 골수 세포, 활성화된 T-세포, 이환된(affecting) B 세포, 또는 멜라닌 세포, 또는 하기 항원 또는 수용체 중 어느 하나를 발현하는 임의의 세포에 대해 표적화할 수 있는, 캄프토테신 유사체 접합체:
    CD1, CD1a, CD1b, CD1c, CD1d, CD1e,CD2, CD3, CD3d, CD3e, CD3g, CD4, CD5,CD6, CD7, CD8, CD8a, CD8b, CD9, CD10, CD11a, CD11b, CD11c, CD11d, CD12w, CD13, CD14, CD15, CD16, CD16a, CD16b, CDw17, CD18, CD19, CD20, CD21, CD22, CD23, CD24, CD25, CD26, CD27, CD28, CD29, CD30, CD31,CD32,CD32a, CD32b, CD33, CD34, CD35, CD36, CD37, CD38, CD39, CD40, CD41,CD42,CD42a, CD42b, CD42c, CD42d, CD43, CD44, CD45, CD46, CD47, CD48, CD49b, CD49c, CD49c, CD49d, CD49f, CD50, CD51, CD52, CD53, CD54, CD55,CD56, CD57, CD58, CD59, CD60, CD60a, CD60b, CD60c, CD61,CD62E, CD62L, CD62P, CD63, CD64, CD65, CD65s, CD66, CD66a, CD66b, CD66c, CD66d, CD66e, CD66f, CD67, CD68, CD69, CD70, CD71, CD72, CD73, CD74, CD75, CD75s, CD76, CD77, CD78, CD79, CD79a, CD79b, CD80, CD81, CD82, CD83, CD84, CD85, CD85a, CD85b, CD85c, CD85d, CD85e, CD85f, CD85g, CD85g, CD85i, CD85j, CD85k, CD85m, CD86, CD87, CD88, CD89, CD90, CD91,CD92, CD93, CD94, CD95, CD96, CD97, CD98, CD99, CD100, CD101, CD102, CD103, CD104, CD105, CD106, CD107, CD107a, CD107b, CD108, CD109, CD110, CD111, CD112, CD113, CD114, CD115, CD116, CD117, CD118, CD119, CD120, CD120a, CD120b, CD121, CD121a, CD121b, CD122, CD123, CD123a, CD124, CD125, CD126, CD127, CD128, CD129, CD130, CD131, CD132, CD133, CD134, CD135, CD136, CD137, CD138, CD139, CD140, CD140a, CD140b, CD141, CD142, CD143, CD144, CD145, CDw145, CD146, CD147, CD148, CD149, CD150, CD151, CD152, CD153, CD154, CD155, CD156, CD156a, CD156b, CD156c, CD156d, CD157, CD158, CD158a, CD158b1, CD158b2, CD158c, CD158d, CD158e1, CD158e2, CD158f2, CD158g, CD158h, CD158i, CD158j, CD158k, CD159, CD159a, CD159b, CD159c, CD160, CD161, CD162, CD163, CD164, CD165, CD166, CD167, CD167a, CD167b, CD168, CD169, CD170, CD171, CD172, CD172a, CD172b, CD172g, CD173, CD174, CD175, CD175s, CD176, CD177, CD178, CD179, CD179a, CD179b, CD180, CD181, CD182, CD183, CD184, CD185, CD186, CDw186, CD187, CD188, CD189, CD190, CD191, CD192, CD193, CD194, CD195, CD196, CD197, CD198, CD199, CDw198, CDw199, CD200, CD201, CD202, CD202(a,b), CD203, CD203c, CD204, CD205, CD206, CD207, CD208, CD209, CD210, CDw210a, CDw210b, CD211, CD212, CD213, CD213a1, CD213a2, CD214, CD215, CD216, CD217, CD218, CD218a, CD218, CD21b9, CD220, CD221, CD222, CD223, CD224, CD225, CD226, CD227, CD228, CD229, CD230, CD231, CD232, CD233, CD234, CD235, CD235a, CD235b, CD236, CD237, CD238, CD239, CD240, CD240ce, CD240d, CD241, CD242, CD243, CD244, CD245, CD246, CD247, CD248, CD249, CD250, CD251, CD252, CD253, CD254,CD255, CD256, CD257, CD258, CD259, CD260, CD261, CD262, CD263, CD264, CD265, CD266, CD267, CD268, CD269, CD270, CD271, CD272, CD273, CD274, CD275, CD276, CD277, CD278, CD279, CD281, CD282, CD283, CD284, CD285, CD286, CD287, CD288, CD289, CD290, CD291, CD292, CD293, CD294, CD295, CD296, CD297, CD298, CD299, CD300, CD300a, CD300b, CD300c, CD301, CD302, CD303, CD304, CD305, CD306, CD307, CD307a, CD307b, CD307c, CD307d, CD307e, CD307f, CD308, CD309, CD310, CD311, CD312, CD313, CD314, CD315, CD316, CD317, CD318, CD319, CD320, CD321, CD322, CD323, CD324, CD325, CD326, CD327, CD328, CD329, CD330, CD331, CD332, CD333, CD334, CD335, CD336, CD337, CD338, CD339, CD340, CD341, CD342, CD343, CD344, CD345, CD346, CD347, CD348, CD349, CD350, CD351, CD352, CD353, CD354, CD355, CD356, CD357, CD358, CD359, CD360, CD361, CD362, CD363, CD364, CD365, CD366, CD367, CD368, CD369, CD370, CD371, CD372, CD373, CD374, CD375, CD376, CD377, CD378, CD379, CD381, CD382, CD383, CD384, CD385, CD386, CD387, CD388, CD389, CRIPTO, CRIPTO, CR, CR1, CRGF, CRIPTO, CXCR5, LY64, TDGF1, 4-1BB, APO2, ASLG659，BMPR1B, 4-1BB, 5AC, 5T4(영양아층 당단백질, TPBG, 5T4, Wnt-활성화된 억제 인자 1 또는 WAIF1), 선암종 항원, AGS-5, AGS-22M6, 액티빈 수용체-유사 키나제 1, AFP, AKAP-4, ALK, 알파 인테그린, 알파 v 베타6, 아미노-펩티다제 N, 아밀로이드 베타, 안드로겐 수용체, 안지오포이에틴 2, 안지오포이에틴 3, 아넥신 A1, 탄저병 독소 예방 항원, 항-트랜스페린 수용체, AOC3(VAP-1), B7-H3, 바실루스 안트라시스 안트랙스(Bacillus anthracis anthrax), BAFF(B-세포 활성화 인자), BCMA, B-림프종 세포, 브크-라블(bcr-abl), 봄베신, BORIS, C5, C242 항원, CA125(탄수화물 항원 125, MUC16), CA-IX(또는 CAIX, 탄산 탈수효소 9), CALLA, CanAg, 카니스 루푸스 파밀리아리스(Canis lupus familiaris) IL31, 탄산 탈수효소 IX, 심장 미오신, CCL11(C-C 모티브 케모카인 11), CCR4(C-C 케모카인 수용체 타입 4), CCR5, CD3E(엡실론), CEA(암배아 항원), CEACAM3, CEACAM5(암배아 항원), CFD(인자 D), Ch4D5, 콜레시스토키닌 2(CCK2R), CLDN18(클라우딘-18), CLDN18.2(클라우딘-18.2), 클럼핑(clumping) 인자 A, cMet, CRIPTO, FCSF1R(집락 자극 인자 1 수용체), CSF2(집락 자극 인자 2, 과립구-대식세포 집락 자극 인자(GM-CSF)), CSP4, CTLA4(세포독성 T-림프구 연관 단백질 4), CTAA16.88 종양 항원, CXCR4, C-X-C 케모카인 수용체 타입 4, 사이클릭 ADP 리보스 가수분해효소, 사이클린 B1, CYP1B1, 시토메갈로바이러스, 시토메갈로바이러스 당단백질 B, 다비가트란(dabigatran), DLL3(델타 유사 리간드 3), DLL4(델타 유사 리간드 4), DPP4(디펩티딜-펩티다제 4), DR5(피쓰(feath) 수용체 5), 대장균 시가(shiga) 독소 타입-1, 대장균 시가 독소 타입-2, ED-B , EGFL7(EGF 유사 도메인 함유 단백질 7), EGFR, EGFRII, EGFRvIII, 엔도글린, 엔도텔린 B 수용체, 엔도톡신, EpCAM(상피 세포 부착 분자), EphA2, 에피시알린, ERBB2(표피 성장 인자 수용체 2), ERBB3, ERG(TMPRSS2 ETS 융합 유전자), 에쉐리키아 콜라이(Escherichia coli), ETV6-AML, FAP(섬유아세포 활성화 단백질 알파), FCGR1, 알파-태아단백질(alpha-Fetoprotein), 피브린 II, 베타 사슬, 피브로넥틴 엑스트라 도메인-B, FOLR(엽산 수용체), 엽산 수용체 알파, 엽산 가수분해효소, 호흡기 융합 바이러스의 포스-관련(Fos-related) 항원 1F 단백질, 프리즐드(Frizzled) 수용체, 푸코실 GM1, GD2 강글리오사이드, G-28(세포 표면 항원 당지질), GD3 이디오타입, 글로보H(GloboH), 글리피칸 3, N-글리콜릴뉴라민산, GM3, GMCSF 수용체 α-사슬, 성장 분화 인자 8, GP100, GPNMB(트랜스-멤브레인 당단백질 NMB), GUCY2C(구아닐레이트 시클라제 2C, 구아닐릴 시클라제 C(GC-C), 장내 푸아닐레이트(fuanylate) 시클라제, 푸아닐레이트 시클라제-C 수용체, 열-안정성 엔테로톡신 수용체(hSTAR), 열충격 단백질, 헤마글루티닌, B형 간염 표면 항원, B형 간염 바이러스, HER1(인간 표피 성장 인자 수용체 1), HER2, HER2/neu, HER3(ERBB-3), IgG4, HGF/SF(간세포 성장 인자/산란(scatter) 인자), HHGFR, HIV-1, 히스톤 복합체, HLA-DR(인간 백혈구 항원), HLA-DR10, HLA-DRB, HMWMAA, 인간 융모성 성선 자극 호르몬, HNGF, 인간 산란 인자 수용체 키나제, HPV E6/E7, Hsp90, hTERT, ICAM-1(세포간 접착 분자 1), 이디오타입, IGF1R(IGF-1, 인슐린 유사 성장 인자 1 수용체), IGHE, IFN-γ, 인플루엔자 헤마글루티닌, IgE, IgE Fc 영역, IGHE, 인터루킨(IL-1, IL-2, IL-3, IL-4, IL-5, IL-6, IL-6R, IL-7, IL-8, IL-9, IL-10, IL-11, IL-12, IL-13, IL-15, IL-17, IL-17A, IL-18, IL-19, IL-20, IL-21, IL-22, IL-23, IL-27 또는 IL-28 포함), IL31RA, ILGF2(인슐린 유사 성장 인자 2), 인테그린(α4, αIIbβ3, αvβ3, α4β7, α5β1, α6β4, α7β7, αllβ3, α5β5, αvβ5), 인터페론 감마 유도 단백질, ITGA2, ITGB2, KIR2D, 카파(Kappa) Ig, LCK, 레(Le), 레구마인(Legumain), 루이스-Y 항원, LFA-1(림프구 기능-연관 항원 1, CD11a), LHRH, LINGO-1, 리포테이코산, LIV1A, LMP2, LTA, MAD-CT-1, MAD-CT-2, MAGE-1, MAGE-2, MAGE-3, MAGE A1, MAGE A3, MAGE 4, MART1, MCP-1, MIF(대식세포 이동 억제 인자 또는 글리코실화 억제 인자(GIF)), MS4A1(멤브레인-스패닝 4-도메인 서브패밀리 A 멤버 1), MSLN(메조텔린), MUC1(뮤신 1, 세포 표면 관련(MUC1) 또는 다형성 상피 뮤신(PEM)), MUC1-KLH, MUC16(CA125), MCP1(단핵구 화학주성 단백질 1), 멜란A(MelanA)/MART1, ML-IAP, MPG, MS4A1(멤브레인-스패닝 4-도메인 서브패밀리 A), MYCN, 미엘린-연관 당단백질, 미오스타틴, NA17, NARP-1, NCA-90(과립구 항원), 넥틴-4(ASG-22ME), NGF, 신경 세포 사멸 조절 단백질분해효소 1, NOGO-A, 노치(Notch) 수용체, 뉴클레오린, 네우(neu) 종양유전자 산물, NY-BR-1, NY-ESO-1, OX-40, OxLDL(산화된 저밀도 지질단백질), OY-TES1, P21, p53 비돌연변이체(nonmutant), P97, Page4, PAP, 항-(N-글리콜릴뉴라민산)의 파라토프, PAX3, PAX5, PCSK9, PDCD1 (PD-1, 프로그램된 세포사멸 단백질 1), PDGF-Rα(알파형 혈소판-유래 성장 인자 수용체), PDGFR-β, PDL-1, PLAC1, PLAP-유사 고환 알칼리성 인산분해효소, 혈소판-유래 성장 인자 수용체 베타, 인산염-나트륨 공동-수송체, PMEL 17, 폴리시알산, 프로테이나제3(PR1), 전립선 암종, PS(포스파티딜세린), 전립선 암종 세포, 슈도모나스 녹농균, PSMA, PSA, PSCA, 광견병 바이러스 당단백질, RHD(Rh 폴리펩티드 1(RhPI)), 레서스(rhesus) 인자, RANKL, RhoC, 라스(Ras) 돌연변이체, RGS5, ROBO4, 호흡기 세포융합 바이러스, RON, ROR1, 육종 전위 파단점(sarcoma translocation breakpoint), SART3, 스클레로스틴, SLAMF7(SLAM 패밀리 멤버 7), 셀렉틴 P, SDC1(신데칸 1), sLe(a), 소마토메딘 C, SIP(스핑고신-1-인산), 소마토스타틴, 정자 단백질 17, SSX2, STEAP1(전립선의 6-트랜스 멤브레인 상피 항원 1), STEAP2, STn, TAG-72(종양 연관 당단백질 72), 서바이빈(survivin), T-세포 수용체, T 세포 트랜스멤브레인 단백질, TEM1(종양 내피 마커 1), TENB2, 테나신 C(TN-C), TGF-α, TGF-β(형질전환 성장 인자 베타), TGF-β1, TGF-β2(형질전환 성장 인자-베타 2), 타이(Tie)(CD202b), 타이2, TIM-1(CDX-014), Tn, TNF, TNF-α, TNFRSF8, TNFRSF10B(종양 괴사 인자 수용체 슈퍼패밀리 멤버 10B), TNFRSF-13B(종양 괴사 인자 수용체 슈퍼패밀리 멤버 13B), TPBG(영양아층 당단백질), TRAIL-R1(종양 괴사 세포사멸 유도 리간드 수용체 1), TRAILR2(사멸 수용체 5(DR5)), 종양-연관 칼슘 신호 변환기 2, MUC1의 종양 특이적 글리코실화, TWEAK 수용체, TYRP1(당단백질 75), TRP-1(Trop-1), TRP-2(Trop-2), 티로시나제, VCAM-1, VEGF, VEGF-A, VEGF-2, VEGFR-1, VEGFR-2 또는 비멘틴, WT1, XAGE 1, 또는 임의의 인슐린 성장 인자 수용체 또는 임의의 표피 성장 인자 수용체를 발현하는 세포.
  16. 제15항에 있어서, 종양 세포는 림프종 세포, 골수종 세포, 신장 세포, 유방암 세포, 전립선암 세포, 난소암 세포, 결장직장암 세포, 위암 세포, 편평상피암 세포, 소세포 폐암 세포, 비-소세포 폐암 세포, 고환암 세포, 악성 세포, 또는 조절되지 않고 빠른 속도로 성장 및 분화하여 암을 유발하는 임의의 세포로 이루어진 군으로부터 선택되는 화합물.
  17. 암, 자가면역 질환, 또는 감염성 질환의 치료 또는 예방을 위한, 제1항, 제2항, 제3항, 제4항, 제5항, 제10항 또는 제12항 중 어느 한 항의 치료적 유효량의 접합체 화합물 및 제약상 허용되는 염, 담체, 희석제 또는 부형제, 또는 이들 접합체들의 조합을 포함하는 제약 조성물.
  18. 제1항, 제2항, 제3항, 제4항, 제5항, 제10항 또는 제12항에 있어서, 시험관내, 생체내 또는 생체외 세포 사멸 활성을 갖는, 캄프토테신 유사체 접합체.
  19. 제17항에 있어서, 암, 또는 자가면역 질환, 또는 감염성 질환의 상승작용적 치료 또는 예방을 위하여, 화학요법제, 방사선 요법, 면역요법제, 자가면역 장애 치료제, 항-감염제 또는 다른 접합체와 동시에 투여되는, 제약 조성물.
  20. 제19항에 있어서, 상기 화학요법제는 하기 중 하나 이상으로부터 선택되는, 제약 조성물:
    (1) a) 알킬화제: 질소 머스타드: 클로람부실, 클로르나파진, 사이클로포스파마이드, 다카바진, 에스트라무스틴, 이포스파마이드, 메클로레타민, 메클로레타민 옥사이드 하이드로클로라이드, 만노무스틴, 미토브로니톨, 멜팔란, 미톨락톨, 피포브로만, 노벰비친, 페네스테린, 프레드니무스틴, 티오테파, 트로포스파마이드, 우라실 머스타드; CC-1065 및 아도젤레신, 카르젤레신, 비젤레신 또는 이들의 합성 유사체; 듀오카르마이신 및 이의 합성 유사체, KW-2189, CBI-TMI 또는 CBI 이량체; 벤조디아제핀 이량체 또는 피롤로벤조디아제핀(PBD) 이량체, 토메이마이신(tomaymycin) 이량체, 인돌리노벤조디아제핀 이량체, 이미다조벤조티아디아제핀 이량체, 또는 옥사졸리디노벤조디아제핀 이량체; 니트로소우레아: 카르무스틴, 로무스틴, 클로로조토신, 포테무스틴, 니무스틴, 라니무스틴을 포함함; 알킬술포네이트: 부설판, 트레오설판, 임프로설판 및 피포설판을 포함함; 트리아젠 또는 다카르바진; 백금 함유 화합물: 카보플라틴, 시스플라틴 및 옥살리플라틴을 포함함; 아지리딘, 벤조도파, 카르보쿠온, 메투레도파 또는 우레도파; 알트레타민, 트리에틸렌멜라민, 트리에틸렌포스포르아미드, 트리에틸렌티오포스포르아미드 및 트리메틸올로멜라민을 포함하는 에틸렌이민 및 메틸아멜라민으로부터 선택됨;
    b) 식물 알칼로이드: 빈카 알칼로이드: 빈크리스틴, 빈블라스틴, 빈데신, 비노렐빈, 및 나벨빈을 포함함; 탁소이드(taxoid): 파클리탁셀, 도세탁솔 및 이들의 유사체, DM1, DM2, DM3, DM4, DM5, DM6, DM7, 메이탄신, 안사미토신 및 이들의 유사체를 포함하는 메이탄시노이드, 크립토피신(크립토피신 1 및 크립토피신 8의 군 포함)을 포함함; 에포틸론, 엘류테로빈, 디스코더몰리드, 브리오스타틴, 돌로스타틴, 아우리스타틴, 튜불리신, 세팔로스타틴; 판크라티스타틴; 사르코딕틴; 스폰지스타틴으로 이루어진 군으로부터 선택됨;
    c) DNA 토포이소머라제 억제제: 에피포도필린스(epipodophyllins): 9-아미노캄프토테신, 캄프토테신, 크리스나톨, 다우노마이신, 에토포사이드, 에토포사이드 포스페이트, 이리노테칸, 미톡산트론, 노반트론, 레티노산(또는 레티놀), 테니포사이드, 토포테칸, 9-니트로캄프토테신 또는 RFS 2000을 포함함; 및 미토마이신 및 이들의 유사체로 이루어진 군으로부터 선택됨;
    d) 항대사물질: [항-엽산: (DHFR 억제제: 메토트렉세이트, 트리메트렉세이트, 데노프테린, 프테로프테린, 아미노프테린(4-아미노프테르 산) 또는 엽산 유사체를 포함함); IMP 탈수소효소 억제제: (미코페놀산, 티아조푸린, 리바비린, EICAR를 포함함); 리보뉴클레오티드 환원효소 억제제(하이드록시우레아, 데페록사민을 포함함)]; [피리미딘 유사체: 우라실 유사체(안시타빈, 아자시티딘, 6-아자우리딘, 카페시타빈, 카모퍼, 시타라빈, 디데옥시우리딘, 독시플루리딘, 에노시타빈, 5-플루오로우라실, 플폭스우리딘, 라티트렉세드를 포함함); 시토신 유사체(시타라빈, 시토신 아라비노사이드, 플루다라빈을 포함함); 퓨린 유사체(아자티오프린, 플루다라빈, 메르캅토퓨린, 티아미프린, 티오구아닌을 포함함)]; 엽산 보충제, 프롤린산으로 이루어진 군으로부터 선택됨;
    e) 호르몬 요법: 수용체 길항제[항-에스트로겐(메게스트롤, 랄록시펜, 타목시펜 포함); LHRH 작용제(고스크르클린(goscrclin), 류프롤라이드 아세테이트 포함); 항-안드로겐(비칼루타미드, 플루타미드, 칼루스테론, 드로모스타놀론 프로피오네이트, 에피티오스타놀, 고세렐린, 류프롤리드, 메피티오스탄, 닐루타미드, 테스토락톤, 트리로스탄 및 기타 안드로겐 억제제 포함)]; 레티노이드/델토이드[비타민 D3 유사체(CB 1093, EB 1089, KH 1060, 콜레칼시페롤, 에르고칼시페롤 포함); 광역학 요법(베르테포르핀, 프탈로시아닌, 광민감제 Pc4, 데메톡시하이포크렐린 A 포함); 사이토카인(인터페론-알파, 인터페론-감마, 종양 괴사 인자(TNF), TNF 도메인을 함유하는 인간 단백질 포함)]으로부터 선택됨;
    f) 키나제 억제제: BIBW 2992(항-EGFR/Erb2), 이마티닙, 게피티닙, 페갑타닙, 소라페닙, 다사티닙, 수니티닙, 에를로티닙, 닐로티닙, 라파티닙, 악시티닙, 파조파닙, 반데타닙, E7080(항-VEGFR2), 뮤브리티닙, 포나티닙, 바페티닙, 보수티닙, 카보잔티닙, 비스모데깁, 이니파립, 룩솔리티닙, CYT387, 악시티닙, 티보자닙, 소라페닙, 베바시주맙, 세툭시맙, 트라스투주맙, 라니비주맙, 파니투무맙, 이스피네십으로 이루어진 군으로부터 선택됨;
    g) 폴리(ADP-리보스) 중합효소(PARP) 억제제: 올라파립, 니라파립, 이니파립, 탈라조파립, 벨리파립, CEP 9722(세팔론사(Cephalon)), E7016(에이자이사(Eisai), BGB-290(베이젠사(BeiGene)) 또는 3-아미노벤자미드로 이루어진 군으로부터 선택됨.
    h) 항생제: 에네다인 항생제(칼리케아미신, 칼리케아미신 γ1, δ1, α1 또는 β1; 다이네미신(dynemicin) A 및 데옥시다이네미신을 포함하는 다이네미신; 에스페라미신, 케다르시딘, C-1027, 마두로펩틴, 또는 네오카르지노스타틴 크로모포어 및 관련 크로모프로테인 에네다인 항생제 크로모포어의 군으로부터 선택됨), 아클라시노마이신, 악티노마이신, 아우트라마이신(authramycin), 아자세린, 블레오마이신, 칵티노마이신, 카라비신, 카미노마이신, 카르지노필린; 크로모마이신, 닥티노마이신, 다우노루비신, 데토루비신, 6-디아조-5-옥소-L-노르류신, 독소루비신, 모르폴리노-독소루비신, 시아노모르폴리노-독소루비신, 2-피롤리노-독소루비신 및 데옥시독소루비신, 에피루비신, 에리불린, 에소루비신, 이다루비신, 마르셀로마이신, 니토마이신, 마이코페놀산, 노갈라마이신, 올리보마이신, 페플로마이신, 폿피로마이신, 퓨로마이신, 쿠엘라마이신, 로도루비신, 스트렙토니그린, 스트렙토조신, 투베르시딘(tubercidin), 우베니멕스(ubenimex), 지노스타틴, 조루비신으로 이루어진 군으로부터 선택됨;
    i) 폴리케타이드(아세토게닌), 불라타신 및 불라타시논; 젬시타빈, 에폭소마이신(epoxomicin) 및 카르필조밉, 보르테조밉, 탈리도마이드, 레날리도마이드, 포말리도마이드, 토세도스타트, 자이브레스타트, PLX4032, STA-9090, 스티무박스(Stimuvax), 알로벡틴-7, 제게바(Xegeva), 프로벤지(Provenge), 예르보이(Yervoy), 이소프레닐화 억제제 및 로바스타틴, 도파민성 신경독소 및 1-메틸-4-페닐피리디늄 이온, 세포 사이클 억제제(스타우로스포린 포함), 악티노마이신(악티노마이신 D, 닥티노마이신 포함), 아마니틴, 블레오마이신(블레오마이신 A2, 블레오마이신 B2, 페플로마이신 포함), 안트라사이클린(다우노루비신, 독소루비신(아드리아마이신), 이다루비신, 에피루비신, 피라루비신, 조루비신, 엠톡산트론, MDR 억제제 또는 베라파밀, Ca2+ ATPase 억제제 또는 탑시가르긴, 히스톤 데아세틸라제 억제제(보리노스타트, 로미뎁신, 파노비노스타트, 발프로산, 모세티노스타트(MGCD0103), 벨리노스타트, PCI-24781, 엔티노스타트, SB939, 레스미노스타트, 지비노스타트, AR-42, CUDC-101, 설포라판, 트리코스타틴 A 포함); 탑시가르긴, 셀레콕시브, 글리타존, 에피갈로카테킨 갈레이트, 디설피람, 살리노스포라마이드 A; 아미노글루테티미드, 미토탄, 트릴로스탄으로 이루어진 군으로부터 선택되는 항-아드레날; 아세글라톤; 알도포스파미드 배당체; 아미노레불린산; 암사크린; 아라비노사이드, 베스트라부실; 비산트렌; 에다트락세이트; 데포파민; 데메콜신; 디아지쿠온; 에플로르니틴(DFMO), 엘포미틴; 엘립티늄 아세테이트, 에토글루시드; 갈륨 나이트레이트; 가시토신, 하이드록시우레아; 이반드로네이트, 렌티난; 로니다민; 미토구아존; 미톡산트론; 모피다몰; 니트라크린; 펜토스타틴; 페나멧; 피라루비신; 포도필린산; 2-에틸히드라지드; 프로카바진; PSK®; 라족산; 리족신; 시조피란; 스피로게르마늄; 테누아존산; 트리아지쿠온; 2,2',2''-트리클로로트리에틸아민; 트리코테센(T-2 독소, 베루카린 A, 로리딘 A 및 안구아딘의 군 포함); 우레탄, siRNA, 안티센스 약물;
    (2) 항-자가면역 질환제: 사이클로스포린, 사이클로스포린 A, 아미노카프로산, 아자티오프린, 브로모크립틴, 클로람부실, 클로로퀸, 사이클로포스파미드, 코르티코스테로이드(암시노나이드, 베타메타손, 부데소나이드, 히드로코르티손, 플루니솔리드, 플루티카손 프로피오네이트, 플루오코르톨론 다나졸, 덱사메타손, 트리암시놀론 아세토니드, 베클로메타손 디프로피오네이트로 이루어진 군 포함), DHEA, 에나네르셉(enanercept), 히드록시클로로퀸, 인플릭시맙, 멜록시캄, 메토트렉세이트, 모페틸, 마이코페닐레이트, 프레드니손, 시롤리무스, 타크로리무스;
    (3) 하기 a) 내지 u)를 포함하는 항-감염성 질환제:
    a) 아미노글리코사이드: 아미카신, 아스트로마이신, 겐타마이신(네틸마이신, 시소마이신, 이세파마이신), 하이그로마이신 B, 카나마이신(아미카신, 아르베카신, 베카나마이신, 디베카신, 토브라마이신), 네오마이신(프라마이세틴, 파로모마이신, 리보스타마이신), 네틸마이신, 스펙티노마이신, 스트렙토마이신, 토브라마이신, 베르다마이신;
    b) 암페니콜: 아지담페니콜, 클로람페니콜, 플로르페니콜, 티암페니콜;
    c) 안사마이신: 겔다나마이신, 헤르비마이신;
    d) 카르바페넴: 비아페넴, 도리페넴, 에르타페넴, 이미페넴, 실라스타틴, 메로페넴, 파니페넴;
    e)세펨: 카르바세펨(로라카르베트(loracarbef)), 세파세트릴, 세파클로르, 세프라딘, 세파드록실, 세팔로늄, 세팔로리딘, 세팔로틴(cefalotin) 또는 세팔로씬(cefalothin), 세팔렉신, 세팔로글리신, 세파만돌, 세파피린, 세파트리진, 세파자플루르, 세파제돈, 세파졸린, 세프부페라존, 세프카펜, 세프달록심, 세페핌, 세프미녹스, 세폭시틴, 세프프로질, 세프록사딘, 세프테졸, 세푸록심, 세픽심, 세프디니르, 세프디토렌, 세페핌, 세페타메트, 세프메녹심, 세포디짐, 세포니시드, 세포페라존, 세포라니드, 세포탁심, 세포티암, 세포조프란, 세팔렉신, 세프피미졸, 세프피라미드, 세프피롬, 세프포독심, 세프프로질, 세프퀴놈, 세프술로딘, 세프타지딤, 세프테람, 세프티부텐, 세프티올렌, 세프티족심, 세프토비프롤, 세프트리악손, 세푸록심, 세푸조남, 세파마이신(세폭시틴, 세포테탄, 세프메타졸 포함), 옥사세펨(플로목세프, 라타목세프);
    f) 글리코펩티드: 블레오마이신, 반코마이신(오리타반신, 텔라반신 포함), 테이코플라닌(달바반신), 라모플라닌;
    g) 글리실사이클린: 티게사이클린;
    h) β-락타마제 억제제: 페남(설박탐, 타조박탐), 클라밤(클라불란산);
    i) 린코사미드: 클린다마이신, 린코마이신;
    j) 리포펩티드: 답토마이신, A54145, 칼슘-의존성 항생제(CDA);
    k) 마크로리드: 아지트로마이신, 세트로마이신, 클라리트로마이신, 디리트로마이신, 에리트로마이신, 플루리트로마이신, 조사마이신, 케톨리드(텔리트로마이신, 세트로마이신), 미데카마이신, 미오카마이신, 올레안도마이신, 리파마이신(리팜피신, 리팜핀, 리파부틴, 리파펜틴), 로키타마이신, 록시트로마이신, 스펙티노마이신, 스피라마이신, 타크로리무스(FK506), 트롤리안도마이신, 텔리트로마이신;
    l) 모노박탐: 아즈트레오남, 티게모남;
    m) 옥사졸리디논: 리네졸리드;
    n) 페니실린: 아목시실린, 암피실린, 피밤피실린, 헤타실린, 바캄피실린, 메타암피실린, 탈람피실린, 아지도실린, 아즐로실린, 벤질페니실린, 벤자틴 벤질페니실린, 벤자틴 페녹시메틸페니실린, 클로메토실린, 프로카인 벤질페니실린, 카르베니실린(카린다실린), 클록사실린, 디클록사실린, 에피실린, 플루클록사실린, 메실리남(피브메실리남), 메즐로실린, 메티실린, 나프실린, 옥사실린, 페나메실린, 페니실린, 페네티실린, 페녹시메틸페니실린, 피페라실린, 프로피실린, 설베니실린, 테모실린, 티카르실린;
    o) 폴리펩티드: 바시트라신, 콜리스틴, 폴리믹신 B;
    p) 퀴놀론: 알라트로플록사신, 발로플록사신, 시프로플록사신, 클리나플록사신, 다노플록사신, 디플록사신, 에녹사신, 엔로플록사신, 플록신, 가레녹사신, 가티플록사신, 제미플록사신, 그레파플록사신, 카노 트로바플록사신, 레보플록사신, 로메플록사신, 마르보플록사신, 목시플록사신, 나디플록사신, 노르플록사신, 오르비플록사신, 오플록사신, 페플록사신, 트로바플록사신, 그레파플록사신, 시타플록사신, 스파플록사신, 테마플록사신, 토수플록사신, 트로바플록사신;
    q) 스트렙토그라민: 프리스티나마이신, 퀴누프리스틴/달포프리스틴;
    r) 설폰아미드: 마페니드, 프론토실, 설파세타미드, 설파메티졸, 설파닐이미드, 설파살라진, 설피속사졸, 트리메토프림, 트리메토프림-설파메톡사졸(코-트리목사졸);
    s) 스테로이드 항균제: 푸시딘산으로부터 선택됨;
    t) 테트라사이클린: 독시사이클린, 클로르테트라사이클린, 클로모사이클린, 데메클로사이클린, 리메사이클린, 메클로사이클린, 메타사이클린, 미노사이클린, 옥시테트라사이클린, 페니메피사이클린, 롤리테트라사이클린, 테트라사이클린, 글리실사이클린(티게사이클린 포함);
    u) 기타 항생제: 아노나신, 아르스페나민, 박토프레놀 억제제(바시트라신), DADAL/AR 억제제(사이클로세린), 딕티오스타틴, 디스코더몰리드, 엘류테로빈, 에포틸론, 에탐부톨, 에토포사이드, 파로페넴, 푸시딘산, 푸라졸리돈, 이소니아지드, 라우리말리드, 메트로니다졸, 뮤피로신, 미코락톤, NAM 합성 억제제(포스포마이신), 니트로푸란토인, 파클리탁셀, 플라텐시마이신, 피라진아미드, 퀴누프리스틴/달포프리스틴, 리팜피신(리팜핀), 타조박탐 티니다졸, 우바리신으로 이루어진 군으로부터 선택됨;
    (4) 하기 a) 내지 h)를 포함하는 항-바이러스 약물:
    a) 엔트리/융합 억제제: 아플라비록, 마라비록, 비크리비록, gp41(엔푸비르티드), PRO 140, CD4(이발리주맙);
    b) 인테그라제 억제제: 랄테그라비르, 엘비테그라비르, 글로보이드난 A;
    c) 성숙 억제제: 베비리맛(bevirimat), 비베콘(vivecon);
    d) 뉴라미니다제 억제제: 오셀타미비르, 자나미비르, 페라미비르;
    e) 뉴클레오사이드 및 뉴클레오타이드: 아바카비르, 아시클로비르, 아데포비르, 암독소비르, 아프리시타빈, 브리부딘, 시도포비르, 클레부딘, 덱셀부시타빈, 디다노신(ddI), 엘부시타빈, 엠트리시타빈(FTC), 엔테카비르, 팜시클로비르, 플루오로우라실(5-FU), 3'-플루오로-치환된 2',3'-디데옥시뉴클레오시드 유사체(3'-플루오로-2',3'-디데옥시티미딘(FLT) 및 3'-플루오로-2',3'-디데옥시구아노신(FLG) 포함), 포미비르센, 간시클로비르, 이독수리딘, 라미부딘(3TC), l-뉴클레오시드(β-1-티미딘 및 β-1-2'-데옥시시티딘으로 이루어진 군 포함), 펜시클로비르, 라시비르, 리바비린, 스탐피딘, 스타부딘(d4T), 타리바비린(비라미딘), 텔비부딘, 테노포비르, 트리플루리딘 발라시클로비르, 발간시클로비르, 잘시타빈(ddC), 지도부딘(AZT);
    f) 비-뉴클레오시드: 아만타딘, 아테비리딘, 카프라비린, 디아릴피리미딘(에트라비린, 릴피비린), 델라비르딘, 도코사놀, 에미비린, 에파비렌즈, 포스카르넷(포스포노포름산), 이미퀴모드, 인터페론 알파, 로비리드, 로데노신, 메티사존, 네비라핀, NOV-205, 페그인터페론 알파, 포도필로톡신, 리팜피신, 리만타딘, 레시퀴모드(R-848), 트로만타딘;
    g) 프로테아제 억제제: 암프레나비르, 아타자나비르, 보세프레비르, 다루나비르, 포삼프레나비르, 인디나비르, 로피나비르, 넬피나비르, 플레코나릴, 리토나비르, 사퀴나비르, 텔라프레비르(VX-950), 티프라나비르;
    h) 기타 유형의 항-바이러스 약물: 압자임, 아르비돌, 칼라놀리드 a, 세라게닌, 시아노비린-n, 디아릴피리미딘, 에피갈로카테킨 갈레이트(EGCG), 포스카르넷, 그리피쓰신(griffithsin), 타리바비린(비라미딘), 하이드록시우레아, KP-1461, 밀테포신, 플레코나릴, 포트만테오(portmanteau) 억제제, 리바비린, 셀리시클립;
    (5) 제약상 허용가능한 염, 산, 유도체, 수화물 또는 수화된 염; 또는 결정 구조; 또는 상기 약물의 광학 이성질체, 라세미체, 부분입체 이성질체 또는 거울상 이성질체.
  21. 제19항에 있어서, 상승 작용제는 하기 약물 중 하나 이상으로부터 선택된, 제약 조성물:
    아바타셉트, 아베마시클립, 아비라테론 아세테이트, 아브락산, 아세트아미노펜/하이드로코돈, 아칼라브루티닙, 아두카누맙, 아달리무맙, ADXS31-142, ADXS-HER2, 아파티닙 디말레에이트, 알데스류킨, 알렉티닙, 알렘투주맙, 알리트레티노인, 아도-트라스투주맙 엠탄신, 암페타민/덱스트로암페타민, 아나스트로졸, 아리피프라졸, 안트라사이클린, 아리피프라졸, 아타자나비르, 아테졸리주맙, 아토르바스타틴, 아벨루맙, 악시캅타진 실로류셀(Axicabtagene ciloleucel), 악시티닙, 벨리노스타트, BCG 라이브, 베바시주맙, 벡사로텐, 블리나투모맙, 보르테조밉, 보수티닙, 브렌툭시맙 베도틴, 브리가티닙, 부데소니드, 부데소니드/포르모테롤, 부프레노르핀, 카바지탁셀, 카보잔티닙, 캡마티닙, 카페시타빈, 카르필조밉, 키메라 항원 수용체-조작된 T(CAR-T) 세포, 셀레콕시브, 세리티닙, 세툭시맙, 치다마이드(Chidamide), 시클로스포린, 시나칼셋, 크리조티닙, 코비메티닙, 코센틱스(Cosentyx), CTL019, 다비가트란, 다브라페닙, 다카르바진, 다클리주맙, 다코모티닙, 답토마이신, 다라투무맙, 다르베포에틴 알파, 다루나비르, 다사티닙, 데닐류킨 디프티톡스, 데노수맙, 데파코트, 덱스란소프라졸, 덱스메틸페니데이트, 덱사메타손, 디누툭시맙, 독시사이클린, 둘록세틴, 두벨리십, 두르발루맙, 엘로투주맙, 엠트리시빈/릴피비린/테노포비르, 디소프록실 푸마레이트, 엠트리시트빈/테노포비르/에파비렌즈, 에녹사파린, 엔사르티닙, 엔잘루타마이드, 에포에틴 알파, 에를로티닙, 에소메프라졸, 에스조피클론, 에타네르셉, 에베롤리무스, 엑세메스탄, 에베롤리무스, 엑세나타이드 ER, 에제티미브, 에제티미브/심바스타틴, 페노피브레이트, 필그라스팀, 핀골리모드, 플루티카손 프로피오네이트, 플루티카손/살메테롤, 풀베스트란트, 가지바, 제피티닙, 글라티라머, 고세렐린 아세테이트, 이코티닙, 이마티닙, 이브리투모맙 티욱세탄, 이브루티닙, 이델라리십, 이포스파미드, 인플릭시맙, 이미퀴모드, ImmuCyst, 면역 BCG, 이니파립, 인슐린 아스파트, 인슐린 디터미르(detemir), 인슐린 글라르진, 인슐린 리스프로, 인터페론 알파, 인터페론 알파-1b, 인터페론 알파-2a, 인터페론 알파-2b, 인터페론 베타, 인터페론 베타 1a, 인터페론 베타 1b, 인터페론 감마-1a, 라파티닙, 이필리무맙, 이프라트로피움 브로마이드/살부타몰, 익사조밉, 카누마, 란레오타이드 아세테이트, 레날리도미드, 레날리오마이드, 렌바티닙 메실레이트, 레트로졸, 레보티록신, 레보티록신, 리도카인, 리네졸리드, 리라글루타이드, 리스덱삼페타민, LN-144, 로라티닙, 메만틴, 메틸페니데이트, 메토프롤롤, 메키니스트, 메리시타빈/릴피비린/테노포비르, 모다피닐, 모메타손, 마이시닥(Mycidac)-C, 네시투무맙, 네라티닙, 닐로티닙, 니라파리브, 니볼루맙, 오파투무맙, 오비누투주맙, 올라파립, 올메사르탄, 올메사르탄/히드로클로로티아지드, 오말리주맙, 오메가-3 지방산 에틸 에스테르, 온코린, 오셀타미비르, 오시머티닙, 옥시코돈, 팔보시클립, 팔리비주맙, 파니투무맙, 파노비노스타트, 파조파닙, 펨브롤리주맙, PD-1 항체, PD-L1 항체, 페메트렉세드, 퍼투주맙, 폐렴구균 접합 백신, 포말리도마이드, 프레가발린, 프로스카 백스(Prosca Vax), 프로프라놀롤, 퀘티아핀, 라베프라졸, 라듐 223 클로라이드, 랄록시펜, 랄테그라비르, 라무시루맙, 라니비주맙, 레고라페닙, 리보시클립, 리툭시맙, 리바록사반, 로미뎁신, 로수바스타틴, 룩솔리티닙 포스페이트, 살부타몰, 사볼리티닙, 세마글루타이드, 세벨라머, 실데나필, 실툭시맙, 시풀류셀-T, 시타글립틴, 시타글립틴/메트포르민, 솔리페나신, 솔라네주맙, 소니데깁, 소라페닙, 수니티닙, 타크로리무스, 타크리무스, 타달라필, 타목시펜, 타핀라르, 탈리모진 라-헤르파렙벡, 탈라조파립, 텔라프레비르, 탈라조파립, 테모졸로마이드, 템시롤리무스, 테노포비르/엠트리시타빈, 테노포비르 디소프록실 푸마레이트, 테스토스테론 겔, 탈리도마이드, TICE BCG, 티오트로피움 브로마이드, 티사젠레클레우셀(Tisagenlecleucel), 토레미펜, 트라메티닙, 트라스투주맙, 트라벡테딘(엑테이나시딘 743), 트라메티닙, 트레멜리무맙, 트리플루리딘/티피라실, 트레티노인, Uro-BCG, 우스테키누맙, 발사르탄, 벨리파립, 반데타닙, 베무라페닙, 베네토클락스, 보리노스타트, 지브-애플리베르셉, 조스타박스 및 이들의 유사체, 유도체, 제약상 허용가능한 염, 담체, 희석제 또는 부형제, 또는 이들의 조합.

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