TW202142266A

TW202142266A - 細胞結合分子與細胞毒性劑偶聯物

Info

Publication number: TW202142266A
Application number: TW110104413A
Authority: TW
Inventors: 永新趙; 越張; 友讓馬
Original assignee: 中國大陸商杭州多禧生物科技有限公司
Priority date: 2020-02-05
Filing date: 2021-02-05
Publication date: 2021-11-16
Also published as: EP3862023A1; CA3108168A1

Abstract

有有效細胞毒性劑與細胞表面受體結合分子偶聯形成的偶聯物具有式（I）的結構，其中 T, L, m, n,

, R¹ , R² , R³ , R⁴ , R⁵ , R⁶ , R⁷ , R⁸ , R⁹ , R¹⁰ , R¹¹ , R¹² , 和 R¹³ 如本文所定義，可用於癌症、自身免疫病和感染性疾病的靶向治療。

Description

細胞結合分子與細胞毒性劑偶聯物

本發明係關於用於靶向治療的抗有絲分裂劑與細胞表面受體結合分子偶聯形成的偶聯物製劑。本發明申請還涉及包含細胞結合分子-抗有絲分裂劑偶聯物的組合物在治療癌症、自免疫系統疾病和感染性疾病上的應用。

藉由抗體或其他細胞表面受體結合劑將高活性細胞毒性藥物靶向遞送至人體中的特定疾病位點，可顯著增加細胞毒性藥物的治療視窗，該療法已被證明是一種極有前景的靶向治療方法（Van den Mooter，T. et al Expert Opin Biol Ther. 2015，15，749-60）。尤其是自美國FDA在2011年和2013年分別批准Adcetris（brentuximab vedotin）和Kadcyla（ado-trastuzumab emtansine）上市以來，幾乎所有大型製藥和生物技術公司都已經應用了抗體-藥物偶聯物（ADC）技術，靶向治療癌症（Chari，R. et al，Angew. Chem.，Int. Ed. 2014，53，3796−3827； Sievers，E. L. et al. Annu Rev Med. 2013，64，15-29； Mehrling，T. Future Oncol，2015，11，549）。到目前為止，臨床上大多數ADC都使用強效的微觀蛋白作用劑，如美登素或澳瑞他汀類藥物。少數ADC使用其他強效效應分子，如拓撲異構酶1抑制劑SN-38或DNA相互作用劑，如卡奇黴素和吡咯並苯二氮卓類（Anderl，J. et al，Methods Mol Biol. 2013；1045：51-70； Thomas，A.，et al，Lancet Oncol. 2016 Jun；17（6）：e254-e262）。

人們從自然界分離出一些具有生物活性的短鏈肽化合物，其中包括Tubulysin類（結構如下圖）。Tubulysin 最初由Hofle 和Reichenbach 等（GBF Braunschweig）從Archangium gephyra 的myxobacterial菌株的培養基裡分離出來（F. Sasse et al. J. Antibiot. 2000， 53， 879-885； WO9813375）。Tubulysin是一種抗有絲分裂肽，它能夠在細胞分裂過程中抑制微管蛋白的聚合，並因而誘發細胞凋亡。它們的活性突出，優於vinblastine， taxol 和epothilones（Wipf， et al， Org. Lett. 2004， 6， 4057–60； Peltier， et al， J. Am. Chem. Soc. 2006， 128， 16018-9； Wipf， et al， Org. Lett.， 2007， 9， 1605–1607； Wang， et al， Chem. Biol. Drug Des. 2007， 70， 75-86； Pando， et al， Org. Lett. 2009， 11， 5567-9），因此是可用於靶向治療的極具潛力的先導化合物。從結構上來講， Tubulysin 由四個肽鍵構成，這包括N端的N-甲基六氫吡啶酸（Mep），第二個氨基酸異亮氨酸（Ile），第三個獨特的包含噻唑的tubuvaline氨基酸（Tuv），以及C端的兩種可能的氨基酸tubutyrisine （Tut）或tubuphenylalanine （Tup）。

Tubulysin	Rⁱ	Rⁱⁱ	Rⁱⁱⁱ
A	CH₂ OCOCH₂ CH（CH₃ ）₂	OCOCH₃	OH
B	CH₂ OCOCH₂ CH₂ CH₃	OCOCH₃	OH
C	CH₂ OCOCH₂ CH₃	OCOCH₃	OH
D	CH₂ OCOCH₂ CH（CH₃ ）₂	OCOCH₃	H
E	CH₂ OCOCH₂ CH₂ CH₃	OCOCH₃	H
F	CH₂ OCOCH₂ CH₃	OCOCH₃	H
G	CH₂ OCOCH=CH₂	OCOCH₃	OH
H	CH₂ OCOCH₃	OCOCH₃	H
I	CH₂ OCOCH₃	OCOCH₃	OH
U	H	OCOCH₃	H
V	H	OH	H
Z	H	OH	OH
Pretubulysin	CH₃	H	H

目前，雖然已經有一些tubulysin化合物被合成出來，但在劑量達到所需要的治療效果時，它們都產生出了明顯的毒性作用（＞20%的體重減輕）（美國專利號2010/0048490）。我們一直在致力於研製細胞表面結合分子，尤其是抗體與抗有絲分裂劑的偶聯物，以達到所需要的治療效果，又能顯著降低毒副作用。天然的tubulysin化合物具有極強的活性，對許多細胞系的IC₅₀ 在10 pM以下，是理想的ADC藥物載荷。但是我們發現，天然tubulysin的偶聯物在動物體內幾乎不能被代謝，因此產生嚴重的肝臟毒性。簡單一些的Tubulysin同系物，例如在天然tubulysin結構的最左端，用2-（二甲基氨基）-2-甲基丙酸置換1-甲基六氫吡啶-2-酸後，所得化合物偶聯抗體後，活性並未改變太多，但肝臟毒性明顯降低。本專利申請在此公開了這些具有細胞表面結合配體的tubulysin偶聯物，及使用所述偶聯物治療癌症和免疫疾病。

在一個示例中，偶聯物具有如式（I）的結構：

（I）或其藥學上可接受的鹽，水合物或水合鹽；或這些化合物的多晶型晶體結構；或其，旋光異構體，外消旋體，非對映異構體或對映異構體；其中T為靶向或結合配位體；L是可釋放的連接子；

是連接鍵，L獨立地連接到括弧內的原子； n為1-20，m為1-10；括弧內是有效的抗有絲分裂劑，其中R¹ 、R² 、R³ 、和R⁴ 獨立地為C₁ -C₈ 直鏈或支鏈烷基、烷基醇；C₂ -C₈ 雜烷基、烷基環烷基、雜環烷基、烷基醚、羧酸烷基酯、烷基胺、烷基酯、烷基醯胺；C₃ -C₈ 芳基、Ar-烷基、雜環、碳環、環烷基、雜烷基環烷基、烷基羰基；或兩個R：R¹ R² 、R³ R⁴ 、R⁵ R⁶ 、或R¹² R¹³ 獨立地形成3 ~ 7元的碳環、環烷基、雜環、雜環烷基、芳基或雜芳基環； Y為N或C；另外，R¹ 、R² 、R³ 、和R⁴ 可以獨立地不存在；其中R⁵ 、R⁶ 、R⁸ 和R¹⁰ 獨立地選自H，直鏈或支鏈的C₁ -C₄ 烷基或C₂ -C₄ 雜烷基；其中R⁷ 選自 H、R¹⁴ 或 -R¹⁴ C（=O）X¹ R¹⁵ ；或 -R¹⁴ X¹ R¹⁵ ； X¹ 選自O、S、S-S、NH、或者NR¹⁴ ；其中R⁹ 為H、-O-、-OR¹⁴ 、-OC（=O）R¹⁴ -、-OC（=O）NHR¹⁴ -、-OC（=O）NR¹⁴ R¹⁵ -、-OC（=O） R¹⁴ SSR¹⁵ -、OP（=O）（OR¹⁴ ）-或OR¹⁴ OP（=O）（OR¹⁵ ）；其中R¹¹ 為 H、R¹⁴ 、-R¹⁴ C（=O）R¹⁶ 、-R¹⁴ C（=O）X² R¹⁶ 、-R¹⁴ X² R¹⁶ 、-R¹⁴ C（=O）X² 、其中X² 為-O-、-S-、-NH-、-NHS（O₂ ）、-N（R¹⁴ ）-、-O-R¹⁴ -、-S-R¹⁴ -、-S（=O）-R¹⁴ -或 -NHR¹⁴ -；其中R¹² 為 H、R¹⁴ 、-O-、-S-、-N-、=N-、=NNH-、-OH、-SH、-NH₂ 、=NH、=NNH₂ 、-NH（R¹⁴ ）、-OR¹⁴ 、-C（O）O-、-C（O）OR¹⁶- 、-COR¹⁶ 、-COOR¹⁴ -、C（O）NH-、C（O）NH₂ 、C（O）NHR¹⁴ 、-SR¹⁴ 、-S（=O）R¹⁴ 、-P（=O）（OR¹⁶ ）₂ 、-OP（=O）（OR¹⁶ ）₂ 、-CH₂ OP（=O）（OR¹⁶ ）₂ 、-SO₂ R¹⁶ ；其中R¹³ 為C₁ -C₁₀ 直鏈或支鏈烷基、烷基酸、烷基醯胺、烷基胺；或C₂ -C₁₀ 雜烷基；或C₃ -C₁₀ 芳基； Ar是指由一個或幾個環組成的芳基或雜芳基、包含4至10個碳原子、較佳地包含4至6個碳原子。術語雜芳基是指具有一個或多個碳原子被雜原子置換、較佳地一個，兩個或三個碳原子被O、N、Si、Se、P或S置換，更佳地被O、S 、N置換的芳基。術語芳基或Ar也指其中一個或幾個H原子獨立地被R¹⁷ 、F、Cl、Br、I、OR¹⁶ 、SR¹⁶ 、NR¹⁶ R¹⁷ 、N=NR¹⁶ 、N= R¹⁶ 、NR¹⁶ R¹⁷ 、NO₂ 、SOR¹⁶ R¹⁷ 、SO₂ R¹⁶ 、SO₃ R¹⁶ 、OSO₃ R¹⁶ 、PR¹⁶ R¹⁷ 、POR¹⁶ R¹⁷ 、PO₂ R¹⁶ R¹⁷ 、OP（O）（OR¹⁷ ）₂ 、OCH₂ OP（O）（OR¹⁷ ）₂ 、OC（O）OP（O）（OR¹⁷ ）₂ 、PO（OR¹⁶ ）（OR¹⁷ ）、OP（O）（OR¹⁷ ）OP（O）（OR¹⁷ ）₂ 、OC（O）R¹⁷ 或OC（O）NHR¹⁷ 置換的芳基；其中R¹⁴ 和R¹⁵ 獨立地為H； C₁ -C₈ 直鏈或支鏈烷基； C₂ -C₈ 烯基、炔基、雜烷基、雜環、碳環；C₃ -C₈ 芳基、環烷基、烷基環烷基、雜環烷基、雜芳烷基、雜烷基環烷基、烷基羰基；其中R¹⁴ 為二價時，R¹⁴ 進一步地與1至4個氨基酸單元或（CH₂ CH₂ O）_r ，r為0至12的整數，或C₄ -C₁₂ 糖苷，或C₁ -C₈ 羧酸的官能團連接；其中R¹⁶ 為H、OH、R¹⁴ 或1-4個氨基酸單元；其中R¹⁷ 為H、C₁ -C₈ 直鏈或支鏈烷基；C₂ -C₈ 烯基、炔基、雜烷基、雜環；C₃ -C₈ 芳基、碳環、環烷基、烷基環烷基、雜環烷基、雜烷基環烷基、雜芳烷基、烷基羥基或C₄ -C₁₂ 糖苷，或藥學上可用的鹽。

在另一個實例中，抗有絲分裂劑與結合分子的連接子L具有下式結構：--Ww-（Aa）r-Vv-；其中：--W--是延展體單元； w是0或1；每個-Aa-獨立地是一個氨基酸單元； r獨立地是0至12的整數； --V--是一個間隔體單元； v為0、1或2。延展體單元W獨立地可包含自毀滅間隔體，肽單元，腙鍵，二硫鍵或硫醚鍵。

在另一個實施方案中，細胞表面結合分子T可以是任何種類目前已知或即將被知的細胞結合配位體，例如肽和非肽。通常，結合分子T是抗體；單鏈抗體；與靶細胞結合的抗體片段、單克隆抗體、單鏈單克隆抗體、結合靶細胞的單克隆抗體片段、嵌合抗體、結合靶細胞的嵌合抗體片段、結構域抗體、結合靶細胞的結構域抗體片段、adnectin類抗體、DARPins、淋巴因數、激素、維生素、生長因數、集落刺激因數、營養轉運分子（轉鐵蛋白）以及結合在白蛋白、聚合物、樹狀大分子、脂質體、納米顆粒、囊泡或（病毒）衣殼上的細胞結合肽、蛋白質或小分子。較佳地結合分子T是單克隆抗體。

在另一態樣，式（I）-（VII）中的組合物可用於治療人或動物的癌症，自身免疫性疾病或感染性疾病。

相關申請案之交互參照

本申請係申請日為2019 年 5 月 9 日、申請號為US16/407,367、發明名稱為“與細胞結合分子的共軛偶聯的橋連接子”的美國專利申請的部分延續申請，其中US16/407,367是申請日為2014 年 4 月 16 日、申請號為US14/253,881，授權專利號為US10,399,941的延續申請，其中US14/253,881是申請日為2012 年 7 月 12 日，PCT/IB2012/053554的延續申請。每個在先申請的全部內容是特此以引用方式併入。定義

“烷基”是指在烷烴上除去一個或兩個氫原子而產生的脂肪烴基團或單價基團。它可以是直鏈或是支鏈的，在鏈中具有 C₁ -C₈ （1-8個碳原子）。 “支鏈”是指直鏈烷基上連接有一個或多個低碳數的烷基，如甲基、乙基或丙基。示例性的烷基包括甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、叔丁基、正戊基、3-戊基、辛基、壬基、癸基、環戊基、環己基、2,2-二甲基丁基、2,3-二甲基丁基、2,2-二甲基戊基、2,3-二甲基戊基、3,3-二甲基戊基、2,3,4-三甲基戊基、3-甲基-己基、2,2-二甲基己基、2,4-二甲基己基、2,5-二甲基己基、3,5-二甲基己基、2,4-二甲基戊基、2-甲基庚基、3-甲基庚基、正庚基、異庚基、正辛基和異辛基。 C₁ -C₈ 烷基可以是未被置換的或被一個或多個基團置換，包括但不限於 -C₁ -C₈ 烷基、-O-（C₁ -C₈ 烷基）、-芳基、-C（O）R'、-OC（O）R'、-C（O）OR'、-C（O）NH₂ ，-C（O）NHR'、-C（O）N（R'）₂ 、-NHC（O）R'、-SR'、-S（O）₂ R'、-S（O）R'、-OH、-鹵素、-N₃ 、-NH₂ 、-NH（R'）、-N（R'）₂ 和-CN；其中每個R'獨立地選自於-C₁ -C₈ 烷基和芳基。

“鹵素”指氟、氯、溴或碘原子；較佳為氟和氯原子。

“雜烷基”指其中1至4個碳原子獨立地被選自O、S和N的雜原子所置換的C₂ -C₈ 烷基。

“碳環”指含有3到8個碳原子的飽和或不飽和單環，或含有7到13個碳原子的飽和或不飽和雙環。單環碳環有3到6個環原子，典型的有5或6個環原子。雙環碳環有7到12個環原子，構成 [4,5]、[5,5]、[5,6]或[6,6]的雙環系統，或有9個或10個環原子，構成 [5,6]或[6,6]的雙環系統。具有代表性的C₃ -C₈ 的碳環包括但不限於：-環丙基、-環丁基、-環戊基、-環戊二烯基、-環己基、-環己烯基、-1,3-環己二烯基、-1,4-環己二烯基、-環庚基、-1,3-環庚二烯基、-1,3,5-環庚三烯基、-環辛基和-環辛二烯基。

“C₃ -C₈ 碳環”指3-, 4-, 5-, 6-, 7- 或8-元飽和或不飽和非芳基碳環，C₃ -C₈ 碳環可以是未被置換的或被一個或多個基團置換，包括但不限於-C₁ -C₈ 烷基、-O-（C₁ -C₈ 烷基）、-芳基、-C（O）R'、-OC（O）R'、-C（O）OR'、-C（O）NH₂ 、-C（O）NHR'、-C（O）N（R'）₂ 、-NHC（O）R'、-SR'、-S（O）R'、-S（O）₂ R'、-OH、-鹵素、-N₃ 、-NH₂ 、-NH（R'）、-N（R'）₂ 及-CN；其中每個R'獨立地選自-C₁ -C₈ 烷基和芳基。

“烯基”指含有碳-碳雙鍵的直鏈或支鏈脂肪烴基團，鏈內含有2-8個碳原子。示例性的烯基包括乙烯基、丙烯基、正丁烯基、異丁烯基、3-甲基丁-2-烯基、正戊烯基、己烯基、庚烯基、辛烯基。

“炔基”指含有碳-碳三鍵的直鏈或支鏈脂肪烴基團，鏈內含有2-8個碳原子。示例性的炔基包括乙炔基、丙炔基、正丁炔基、2-丁炔基、3-甲基丁炔基、5-戊炔基、正戊炔基、己炔基、庚炔基和辛炔基。

“伸烷基”是指含1-18個碳原子的飽和的支煉或直鏈或環狀烴基，並帶有兩個藉由從母體烷烴的相同或兩個不同碳原子上除去兩個氫原子而產生的一價自由基。典型的伸烷基包括但不限於：亞甲基（-CH₂ -）、1,2-乙基（-CH₂ CH₂ -）、1,3-丙基（-CH₂ CH₂ CH₂ -）、1,4-丁基（-CH₂ CH₂ CH₂ CH₂ -）等。

“亞烯基”指含2-18個碳原子的不飽和的支煉或直鏈或環狀烴基，並帶有兩個藉由從母體烯的相同或兩個不同碳原子上除去兩個氫原子而產生的一價自由基。典型的亞烯基包括但不限於：1,2-亞乙烯基(-CH=CH-)。

“亞炔基”指含2-18個碳原子的不飽和的支煉或直鏈或環狀烴基，並帶有兩個藉由從母體炔的相同或兩個不同碳原子上除去兩個氫原子而產生的一價自由基。典型的亞炔基包括但不限於：乙炔、炔丙基和4-戊炔基。

“芳基”或“芳香基”指由一個或多個環組成的芳香或雜芳香基團，包含三至十四個碳原子，較佳六至十個碳原子。術語“雜芳香基團”是指芳香基團上的一個或幾個碳，最優是一個、兩個、三個或四個碳原子，被氧（O）、氮（N）、矽（Si）、硒（Se）、磷（P）或（S）所置換，較佳被氧、硫和氮所置換而產生的基團。術語“芳基”或“芳香基”也指其中一個或幾個氫原子獨立地被-R’、鹵素、-OR’， -SR’、-NR’R’’、-N=NR’、-N=R’、-NR’R’’、-NO₂ 、-S（O）R’、-S（O）₂ R’、-S（O）₂ OR’、-OS（O）₂ OR’、-PR’R’’、-P（O）R’R’’、-P（OR’）（OR’’）、-P（O）（OR’）（OR’’）或-OP（O）（OR’）（OR’’）所置換而產生的芳香基團。其中R’和R’’獨立地為氫、烷基、烯基、炔基、雜烷基、芳基、芳烷基、羰基或其藥用鹽。

“雜環”指其中一到四個環碳原子獨立地被O、N、S、Se、B、Si或P等雜原子所置換而產生的的環結構。較佳的雜原子是O、N和S。在《化學與物理手冊》第78版的225-226頁（The Handbook of Chemistry and Physics，78th Edition，CRC Press，Inc.，1997 -1998，p. 225 to 226）上也有雜環化合物的相關描述，在此引作參考。較佳的非芳基雜環包括環氧基、氮丙啶基、硫雜丙基、吡咯啶基、吡唑啶基、咪唑烷基、環氧乙烷基、四氫呋喃基、二氧戊環基、四氫吡喃基、二噁烷基、二氧戊環基、呱啶基、呱嗪基、嗎啉基、吡喃基、咪唑啉基、吡咯啉基、吡唑啉基、噻唑烷基、四氫噻喃基、二噻烷基、硫代嗎啉基、二氫吡喃基、四氫吡喃基、二氫吡喃基、四氫吡啶基、二氫吡啶基、四氫嘧啶基、二氫噻喃基、氮雜環庚烷基，以及上述基團與苯基縮合得到的稠環體系。

術語“雜芳基”或“芳基雜環” 指3到14員，較佳5至10員芳族雜單環、雙環或多環。示例包括吡咯基、吡啶基、吡唑基、噻吩基、嘧啶基、吡嗪基、四唑基、吲哚基、喹啉基、嘌呤基、咪唑基、噻吩基、噻唑基、苯並噻唑基、呋喃基、苯並呋喃基、1,2,4-噻二唑基、異噻唑基、三唑基、四唑基、異喹啉基、苯並噻吩基、異苯並呋喃基、吡唑基、哢唑基、苯並咪唑基、異噁唑基、吡啶基-N -氧化物，以及上述基團與苯基縮合得到的稠合系統。。

“烷基”、“環烷基”、“烯基”、“炔基”、“芳基”、“雜芳基”、“雜環”等也指相應的去除兩個氫原子而形成的 “伸烷基”、“環伸烷基”、“亞烯基”、“亞炔基”等。

芳烷基指非環烷基，其中一個與碳原子(通常為末端或sp³ 碳原子)鍵合的氫原子被芳基置換。典型的芳烷基包括苄基、2-苯基乙-1-基、2-苯基乙烯-1-基、萘基甲基、2-萘基乙-1-基、2-萘基乙- 1-基、萘並苄基、2-萘並苯基乙-1-基等。

“雜芳烷基”指烷基上一個與碳原子（通常為末端或sp³ 碳原子）連接的氫原子被雜芳基置換而得到的一類非環烷基。雜芳烷基的實例有2-苯並咪唑基甲基、2-呋喃基乙基。

“羥基保護基”的實例包括甲氧基甲基醚、2-甲氧基乙氧基甲基醚、四氫吡喃基醚、芐基醚、對甲氧基芐基醚、三甲基甲矽醚、三乙基矽醚、三異丙基矽醚、叔丁基二甲基矽醚、三苯基甲基矽醚、乙酸酯、置換乙酸酯、特戊酸酯、苯甲酸酯、甲磺酸酯和對甲苯磺酸酯。

“離去基團”指可以被另一個官能團置換的官能團。這些離去基團是本領域公知的，實例包括鹵化物（如氯化物、溴化物和碘化物）、甲磺醯基、對甲苯磺醯基和三氟甲磺醯基。較佳的離去基團選自硝基苯酚基、N-羥基琥珀醯亞胺（NHS）、苯酚基、二硝基苯酚基、五氟苯酚基、四氟苯酚基、二氟苯酚基、一氟苯酚基、五氯苯酚基、三氟甲磺醯基、咪唑基、氯酚基、四氯苯酚基、1-羥基苯並三唑基、甲苯磺醯基、甲磺醯基、2-乙基-5-苯基異惡唑-3'-磺醯基，酸酐或與其它酸酐作用形成的酸酐，例如乙酸酐、甲酸酐、或與多肽縮合試劑、Mitsunobu反應試劑作用生成的中間體。

以下縮寫為本發明所採用，其指定的定義為：Boc，叔丁氧基羰基、BroP，溴代十四烷基鏻六氟磷酸鹽；CDI，1,1'-羰基二咪唑；DCC，二環己基碳二亞胺；DCE，二氯乙烷；DCM，二氯甲烷；DEAD，偶氮二甲酸二乙酯；DIAD，偶氮二甲酸二異丙基酯； DIBAL-H，二異丁基氫化鋁；DIPEA或DEA，二異丙基乙胺；DEPC，二乙基氰基磷酸酯；DMA，N,N-二甲基乙醯胺；DMAP，4-（N,N-二甲基氨基）吡啶；DMF，N,N-二甲基甲醯胺；DMSO，二甲基亞碸；DTPA，二亞乙基三胺五乙酸；DTT，二硫蘇糖醇；EDC，1-（3-二甲基氨基丙基）-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽；ESI-MS，電噴霧質譜；乙酸乙酯，乙酸乙酯；Fmoc，N-（9-芴基甲氧基羰基）；HATU，O- （7-氮雜苯並三唑-1-基）-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸鹽；HOBt，1-羥基苯並三唑；HPLC，高效液相層析；NHS，N-羥基琥珀醯亞胺；MeCN，乙腈；MeOH，甲醇；MMP，4-甲基嗎啉；PAB，對氨基苯甲酸；PBS，磷酸鹽緩衝液（pH 7.0-7.5）；Ph，苯基；Phe，L-苯丙氨酸；PyBrop，溴-三-吡咯啶-鏻六氟磷酸鹽；PEG，聚乙二醇；SEC，尺寸排阻層析；TCEP，三（2-羧乙基）膦； TFA，三氟乙酸；THF，四氫呋喃；Val，纈氨酸；TLC，薄層層析；UV紫外線。

“氨基酸”可以是天然或非天然的，較佳α-氨基酸。天然氨基酸由基因所編碼，包括丙氨酸、精氨酸、天冬醯胺、天冬氨酸、半胱氨酸、谷氨酸、穀氨醯胺、甘氨酸、組氨酸、異亮氨酸、亮氨酸、賴氨酸、蛋氨酸、苯丙氨酸、脯氨酸、絲氨酸、蘇氨酸、酪氨酸、色氨酸和纈氨酸。非天然氨基酸是蛋白質氨基酸的衍生物，包括羥脯氨酸、羊毛硫氨酸、2-氨基異丁酸、脫氫丙氨酸、γ-氨基丁酸（神經遞質）、鳥氨酸、瓜氨酸、β-丙氨酸（3 -氨基丙酸）、γ-羧基谷氨酸、硒代半胱氨酸（存在於許多非真核以及大多數真核細胞中、但不是由DNA直接進行編碼）、吡咯賴氨酸（僅在一些古細菌和一種細菌中發現）、N-甲醯基甲硫氨酸（通常是細菌、線粒體和葉綠體中蛋白質中最初的氨基酸）、5-羥色氨酸、L-二羥基苯丙氨酸、三碘甲腺原氨酸、L-3,4-二羥基苯丙氨酸（DOPA）和O-磷酸絲氨酸。術語“氨基酸”還包括氨基酸衍生物和模擬物。衍生物是具有與天然氨基酸相同結構通式H₂ N（R）CHCO₂ H的化合物，其中R在天然氨基酸裡未能發現。衍生物的實例包括高絲氨酸、正亮氨酸、3-氨基丙酸、4-氨基丁酸、5-氨基戊酸、6-氨基己酸、7-氨基庚酸、甲硫氨酸-亞碸和甲硫氨酸甲基鋶。更優的是氨基酸模擬物，它是具有與α-氨基酸的化學結構不同、但是功能類似的化合物。天然氨基酸多為“L” 立體化學構型，“非天然氨基酸”為“D”構型的氨基酸。在本專利申請中使用1至8個氨基酸時、其序列較佳為蛋白水解酶可識別的序列。許多水解酶可識別序列是本領域已知的，可以參見：Matayoshi 等， Science 247： 954 （1990）；Dunn 等，Meth. Enzymol. 241： 254 （1994）；Seidah 等，Meth. Enzymol. 244： 175 （1994）；Thornberry， Meth . Enzymol. 244： 615 （1994）；Weber 等，Meth. Enzymol. 244： 595 （1994）；Smith 等， Meth. Enzymol. 244： 412 （1994）及Bouvier 等，Meth. Enzymol. 248 ： 614 （1995）；此處引作參考。特別是選自以下序列：Val-Cit、Ala-Val、Ala-Ala、Val-Val、Val-Ala-Val、Lys-Lys、Ala-Asn-Val、Val-Leu-Lys、Cit -Cit、Val-Lys、Ala-Ala-Asn、Asp-Lys、Asp-Glu、Glu-Lys、Lys、Cit、Ser及Glu。

“糖苷”是糖基藉由糖苷鍵在其異頭碳上與另一基團鍵合得到的分子。糖苷可以藉由O-、N-、S-或C-糖苷鍵連接，分別產生O-糖苷、糖基胺、硫代糖苷和C-糖苷。其結構式為C_m （H₂ O）_n （其中m可以不同於n，m、n ＜36）。本發明中的糖苷包括葡萄糖（右旋糖）、果糖（左旋糖）、阿洛糖、阿卓糖、甘露糖、古洛糖、艾杜糖、半乳糖、塔羅糖、半乳糖胺、氨基葡萄糖、唾液酸、N-乙醯氨基葡萄糖、磺基奎諾糖（6-去氧-6-磺基-D -吡喃葡萄糖）、核糖、阿拉伯糖、木糖、來蘇糖、山梨糖醇、甘露醇、蔗糖、乳糖、麥芽糖、海藻糖、麥芽糖糊精、棉子糖、葡萄糖醛酸（葡糖苷酸）和水蘇糖。它可以是D或L的構型、5原子環狀呋喃糖的形式、6原子環狀吡喃糖的形式，或是非環形式、α-異構體（異頭碳的-OH在Haworth投影碳原子平面之下）、或β-異構體（異頭碳的-OH在Haworth投影碳原子平面之上），包括單糖、二糖、多元醇或含3-6個糖單元的低聚糖。

本發明申請中的“抗體”指全長免疫球蛋白分子或全長免疫球蛋白分子的免疫活性部分，如含有抗原結合位點的分子，該結合位點免疫特異性地與靶標抗原或部分靶標抗原結合，靶標包括但不限於，癌細胞或產生與自身免疫疾病相關的自免疫抗體的細胞。本發明中的免疫球蛋白可以是免疫球蛋白的任何類型（例如IgG、IgE、IgM、IgD、IgA和IgY）、類別（例如IgG1、IgG2、IgG3、IgG4、IgA1和IgA2）或子類。免疫球蛋白可以來自任何物種，但較佳的免疫球蛋白來源於人、鼠或兔。本發明的抗體較佳是單克隆抗體，包括但不限於多克隆、單克隆、雙特異性、人、人源化或嵌合抗體，單鏈抗體，Fv、Fab片段、F（ab'）片段、F（ab'）₂ 片段、由Fab表達庫產生的片段，抗獨特型（抗Id）抗體，CDR和任何能免疫特異性地結合癌細胞抗原、病毒抗原或微生物抗原的上述結構的表位元結合片段。

“對映異構體”，也稱為“光學異構體”，是兩個立體異構體中的一個，它們是彼此的鏡像，不可重迭（不等同），就像人的左右手，除非沿著某一平面被翻轉，它們是不可重迭的（僅藉由改變方向不能讓雙手重迭）。化合物中的單個手性原子或類似的結構特徵使得該化合物具有兩種可能的結構，它們不可重迭，是彼此的鏡像。在某一化合物中存在的多個手性特徵增加了可能存在的構型的數目，其中可能會有一些互為鏡像。對映體純的化合物是指在檢測方法的能力範圍內，僅具有同一種手性的樣品。在對稱的環境中，兩個對映體可以使平面偏振光（+/−）在相反的方向上等量旋轉（偏振光可以被認為是不對稱的介質），除此之外，它們具有相同的化學性質和物理性質。由於這個原因，它們有時也被稱為光學異構體。光學異構體及其等量的對映體的混合物被稱為外消旋體，它對平面偏振光無淨旋轉，因為每個正旋轉（+）都被負旋轉（−）完全抵消。通常兩個對映異構體與其他的對映異構體物質發生不同的化學反應。由於許多生物分子是對映體，因此有時兩種對映體對生物有機體的影響存在顯著差異。例如，在藥物中，通常只有一種對映體可以發生想要的生理作用，而另一種對映體或是活性較低、或無活性，有時甚至產生不良反應。基於這樣的發現，可以開發僅由一種對映體（“對映體純”）組成的藥物以增強藥理學效力，有時還可以消除一些副作用。

同位素是特定化學元素的質子數相同，中子數不同的不同核素。同一元素的所有同位素具有相同數量的質子。一個原子序數指定一個特定的元素，但非同位素；特定元素原子可以有不同的中子數。核子（質子和中子）的數量是原子的質量數，特定元素的每個同位素具有不同的質量數。例如、碳-12、碳-13和碳-14是碳元素的三種同位素，質量數分別為12，13和14。碳的原子序數為6，意味著每個碳原子都有6個質子，因此這些同位素的中子數分別為6、7和8。氫原子有三種同位素：氕（¹ H）、氘（² H）和氚（³ H），氘的品質是氕的兩倍，氚的品質是氕的三倍。藉由動力學同位素效應，同位素替代實驗可用於確定化學反應的機理。同位素替代實驗還可用於研究外源化合物藉由吸收和分佈機制進入體內後，身體如何對它產生作用，體內物質的代謝變化（例如藉由細胞色素P450或葡萄糖醛酸轉移酶等代謝酶的作用），以及藥物代謝產物的排泄途徑，是為藥代動力學（PK）研究。同位素替代實驗可用於研究藥物的生化和生理作用，包括在動物（包括人類）、微生物或生物組合上所顯現出來的作用（例如感染），是為藥力學（PD）研究。兩者（PK和PD）一起決定藥物的劑量、益處及副作用。同位素可以採用一種穩定的（非放射性的）或非穩定的元素。藥物的同位素置換物還可能具有與原始藥物不同的治療功效。

“藥學上的”或“藥學上可接受的”是指當適當投藥給動物或人類時不會產生不良反應、過敏反應或其他不良反應的分子體或組合物。

“藥學上可接受的溶劑化物”或“溶劑化物”是指一種或多種溶劑分子與本發明公開的化合物的結合物。形成藥學上可接受的溶劑合物的溶劑的實例，包括但不限於水、異丙醇、乙醇、甲醇、DMSO、乙酸乙酯、乙酸和乙醇胺。

“藥學上可接受的輔料”包括任何載體、稀釋劑、佐劑或其它介質，例如防腐劑或抗氧化劑、填充劑、崩解劑、潤濕劑、乳化劑、懸浮劑、溶劑、分散介質、包衣劑、抗細菌劑和抗真菌劑、等滲劑和吸收延遲劑等。這些介質和藥劑與藥物活性物質一起使用在本領域內是熟知的。任何傳統介質或藥劑，除非與活性成分不相容，也可以考慮將其用於治療組合物中。補充活性成分也可以加入組合物中，成為合適的治療組合。

本發明中，“藥用鹽”是指此處公開化合物的衍生物，是母體化合物的酸鹽或堿鹽。藥學上可接受的鹽包括由無毒無機酸或有機酸與母體化合物形成的常規無毒鹽或季銨鹽。例如，所述常規無毒鹽包括衍生自無機酸（例如鹽酸、氫溴酸、硫酸、氨基磺酸、磷酸、硝酸等）的鹽；以及由有機酸，例如乙酸、丙酸、琥珀酸、酒石酸、檸檬酸、甲磺酸、苯磺酸、葡萄糖醛酸、谷氨酸、苯甲酸、水楊酸、甲苯磺酸、草酸、富馬酸、馬來酸及乳酸等製備的鹽。另外的鹽包括銨鹽，如三甲胺、葡甲胺、丙三醇等的鹽、金屬鹽、如鈉、鉀、鈣、鋅或鎂鹽。

本發明中的藥用鹽可以從包含酸性或鹼性片段的母體化合物，用常規的化學方法製成。一般地說，這些鹽可以藉由在本發明化合物的遊離酸或堿的水溶液或有機溶液或兩者的混合溶液中，加入其它適當的等eq.的堿或酸而形成。非水相的反應介質一般為乙醚，乙酸乙酯，乙醇，異丙醇或者乙腈。可以適用鹽的列表可參見《Remington’s Pharmaceutical Sciences》，第17版，Mack Publishing Company， Easton， PA， 1985，第1418頁。

“ 投與”或“ 投藥”是指以任何方式向受試者轉移、遞送、引入或運輸藥物或其他藥劑。這些方式包括口服用藥、局部接觸、靜脈內、腹膜內、肌肉內、病灶內、鼻內、皮下或鞘內投與。本發明還考慮使用裝置或器械來施用藥劑。這種裝置可以使用主動或被動型傳輸，而且可以是緩釋或快速釋放遞送裝置。

就癌症而言，術語“治療”包括以下任何一項或全部：阻止腫瘤細胞或癌細胞生長、複製，減輕整體腫瘤量，以及改善與該疾病相關的一個或多個症狀。

就自身免疫性疾病而言，術語“治療”包括以下任一項或全部：阻止與自身免疫性疾病相關的細胞的複製，包括但不限於能夠產生自身免疫性抗體的細胞，減輕自身免疫性抗體量和改善自身免疫性疾病的一個或多個症狀。

就傳染病而言、術語“治療”包括以下任何一項或全部：阻止引起傳染病的病原體的生長、增殖或複製、以及改善傳染病的一個或多個症狀。

“哺乳動物”或“動物”的實例包括但不限於人、鼠、家鼠、豚鼠、猴、豬、山羊、牛、馬、狗、貓、鳥和家禽。藥物 - 連接子 - 結合配位體偶聯物

如上所述，本發明提供了式(I)的細胞表面結合分子-抗有絲分裂(細胞毒性)劑偶聯物：

（I）或其藥學上可接受的鹽，水合物或水合鹽；或這些化合物的多晶型晶體結構；或其同位素，旋光異構體，外消旋體，非對映異構體或對映異構體；其中T為靶向或結合配位體；L是可釋放的連接子；

是連接鍵， L獨立地連接到括弧內的原子； n為1-20，m為1-10；括弧內是有效的抗有絲分裂劑，其中R¹ 、R² 、R³ 和R⁴ 獨立地為C₁ -C₈ 直鏈或支鏈烷基、烷基醇；C₂ -C₈ 雜烷基、烷基環烷基、雜環烷基、烷基醚、羧酸烷基酯、烷基胺、烷基酯、烷基醯胺；C₃ -C₈ 芳基、Ar-烷基、雜環、碳環、環烷基、雜烷基環烷基、烷基羰基；或兩個R：R¹ R² 、R³ R⁴ 、R⁵ R⁶ 、或R¹² R¹³ 獨立地形成3 ~ 7元的碳環、環烷基、雜環、雜環烷基、芳基或雜芳基環； Y為N或C；另外，R¹ 、R² 、R³ 、和R⁴ 可以獨立地不存在；其中R⁵ 、R⁶ 、R⁸ 和R¹⁰ 獨立地選自H，直鏈或支鏈的C₁ -C₄ 烷基或C₂ -C₄ 雜烷基；其中R⁷ 選自 H、R¹⁴ 或 -R¹⁴ C（=O）X¹ R¹⁵ ；或 -R¹⁴ X¹ R¹⁵ ； X¹ 選自O、S、S-S、NH、或者NR¹⁴ ；其中R⁹ 為H、-O-、-OR¹⁴ 、-OC（=O）R¹⁴ -、-OC（=O）NHR¹⁴ -、-OC（=O）NR¹⁴ R¹⁵ -、-OC（=O） R¹⁴ SSR¹⁵ -、OP（=O）（OR¹⁴ ）-或OR¹⁴ OP（=O）（OR¹⁵ ）；其中R¹¹ 為 H、R¹⁴ 、-R¹⁴ C（=O）R¹⁶ 、-R¹⁴ C（=O）X² R¹⁶ 、-R¹⁴ X² R¹⁶ 、-R¹⁴ C（=O）X² 、其中X² 為-O-、-S-、-NH-、-NHS（O₂ ）、-NHS（O）、-N（R¹⁴ ）-、-O-R¹⁴ -、-S-R¹⁴ -、-S（=O）-R¹⁴ -或 -NHR¹⁴ -；其中R¹² 為 H、R¹⁴ 、-O-、-S-、-N-、=N-、=NNH-、-OH、-SH、-NH₂ 、=NH、=NNH₂ 、-NH（R¹⁴ ）、-OR¹⁴ 、-C（O）O-、-C（O）OR¹⁶- 、-COR¹⁶ 、-COOR¹⁴ -、C（O）NH-、C（O）NH₂ 、C（O）NHR¹⁴ 、-SR¹⁴ 、-S（=O）R¹⁴ 、-P（=O）（OR¹⁶ ）₂ 、-OP（=O）（OR¹⁶ ）₂ 、-CH₂ OP（=O）（OR¹⁶ ）₂ 、-SO₂ R¹⁶ ；其中R¹³ 為C₁ -C₁₀ 直鏈或支鏈烷基、烷基酸、烷基醯胺、烷基胺；或C₂ -C₁₀ 雜烷基；或C₃ -C₁₀ 芳基； Ar是指由一個或幾個環組成的芳基或雜芳基、包含4至10個碳原子、較佳地包含4至6個碳原子。術語雜芳基是指具有一個或多個碳原子被雜原子置換、較佳地一個、兩個或三個碳原子被O、N、Si、Se、P或S置換、更佳地被O、S 、N置換的芳基。術語芳基或Ar也指其中一個或幾個H原子獨立地被R¹⁷ 、F、Cl、Br、I、OR¹⁶ 、SR¹⁶ 、NR¹⁶ R¹⁷ 、N=NR¹⁶ 、N= R¹⁶ 、NR¹⁶ R¹⁷ 、NO₂ _、 SOR¹⁶ R¹⁷ 、SO₂ R¹⁶ 、SO₃ R¹⁶ 、OSO₃ R¹⁶ 、PR¹⁶ R¹⁷ 、POR¹⁶ R¹⁷ 、PO₂ R¹⁶ R¹⁷ 、OP（O）（OR¹⁷ ）₂ 、OCH₂ OP（O）（OR¹⁷ ）₂ 、OC（O）OP（O）（OR¹⁷ ）₂ 、PO（OR¹⁶ ）（OR¹⁷ ）、OP（O）（OR¹⁷ ）OP（O）（OR¹⁷ ）₂ 、OC（O）R¹⁷ 或OC（O）NHR¹⁷ 置換的芳基；其中R¹⁴ 和R¹⁵ 獨立地為H； C₁ -C₈ 直鏈或支鏈烷基； C₂ -C₈ 烯基、炔基、雜烷基、雜環、碳環；C₃ -C₈ 芳基、環烷基、烷基環烷基、雜環烷基、雜芳烷基、雜烷基環烷基、烷基羰基；其中R¹⁴ 為二價時，R¹⁴ 進一步地與1至4個氨基酸單元或（CH₂ CH₂ O）_r ，r為0至12的整數，或C₄ -C₁₂ 糖苷，或C₁ -C₈ 羧酸的官能團連接；其中R¹⁶ 為H、OH、R¹⁴ 或1-4個氨基酸單元；其中R¹⁷ 為H、C₁ -C₈ 直鏈或支鏈烷基；C₂ -C₈ 烯基、炔基、雜烷基、雜環；C₃ -C₈ 芳基、碳環、環烷基、烷基環烷基、雜環烷基、雜烷基環烷基、雜芳烷基、烷基羥基或C₄ -C₁₂ 糖苷，或藥學上可用的鹽；

在另一個實例中，製劑中抗有絲分裂劑的偶聯物具有式（II）的結構：

（II）或其藥學上可接受的鹽，水合物或水合鹽；或這些化合物的多晶型晶體結構；或其旋光異構體，外消旋體，非對映異構體或對映異構體；其中 T、L、n、m、Y、R¹ 、R² 、R³ 、R⁴ 、R⁵ 、R⁶ 、R⁸ 、R¹⁰ 、R¹³ 、R¹⁴ 、R¹⁵ 、R¹⁶ 和R¹⁷ 的定義與式（I）相同；其中 R⁷ 選自 H、R¹⁴ 或 -R¹⁴ C（=O）X¹ R¹⁵ 或 -R¹⁴ X¹ R¹⁵ ； X¹ 選自O、S、S-S、NH、或NR¹⁴ ；其中 R⁹ 為 H、-OH、-OR¹⁴ 、-OC（=O）R¹⁴ 、-OC（=O）NHR¹⁴ 、-OC（=O）NR¹⁴ R¹⁵ 、-OC（=O） R¹⁴ SSR¹⁵ 、OP（=O）（OR¹⁴ ）₂ 或 OR¹⁴ OP（=O）（OR¹⁵ ）；其中R¹¹ 為H、R¹⁴ 、-R¹⁴ C（=O）R¹⁶ 、-R¹⁴ C（=O）X² R¹⁶ 、-R¹⁴ X² R¹⁶ 、-R¹⁴ C（=O）X² 、其中 X² 為 -O-、-S-、-NH-、-NHS（O₂ ）、-N（R¹⁴ ）-、-O-R¹⁴ -、-S-R¹⁴ -、-S（=O）-R¹⁴ -或 -NHR¹⁴ -；其中 R¹² 為 H、R¹⁴ 、-O-、-S-、-N-、=N-、=NNH-、-OH、-SH、-NH₂ 、=NH、=NNH₂ 、-NH（R¹⁴ ）、-OR¹⁴ 、-C（O）O-、-C（O）OR¹⁶- 、-COR¹⁶ 、-COOR¹⁴ -、C（O）NH-、C（O）NH₂ 、C（O）NHR¹⁴ 、-SR¹⁴ 、-S（=O）R¹⁴ 、-P（=O）（OR¹⁶ ）₂ 、-OP（=O）（OR¹⁶ ）₂ 、-CH₂ OP（=O）（OR¹⁶ ）₂ 、-SO₂ R¹⁶ 。

式（II）括弧內的示例化合物具有以下較佳結構：

II-01，

II-02，

II-03，

II-04，

II-05，

II-06，

II-07，

II-08，

II-09，

II-10，

II-11，

II-12，

II-13，

II-14，

II-15，

II-16，

II-17，

II-18，

II-19，

II-20，

II-21，

II-22，

II-23，

II-24，

II-25，

II-26，

II-27，

II-28，

II-29，

II-30，

II-31，

II-32，

II-33，

II-34，

II-35，

II-36，

II-37，

II-38，

II-39，

II-40，

II-41，

II-42，

II-43，

II-44，

II-45，

II-46，

II-47，

II-48，

II-49，

II-50，

II-51，

II-52，

II-53，

II-54，

II-55，

II-56，

II-57，

II-58，

II-59，

II-60，

II-61，

II-62，

II-63，

II-64，

II-65，

II-66，

II-67，

II-68，

II-69，或是其藥學上可接受的鹽、水合物或水合鹽；或多晶型結晶；或其光學異構體、外消旋物、非對映異構體或對映異構體；其中R²⁰ 為H；C₁ -C₈ 直鏈或支鏈烷基、雜烷基或醯基（-C（O）R¹⁷ ）；C₂ -C₈ 直鏈或支鏈烯基、炔基、烷基環烷基、雜環烷基；C₃ -C₈ 直鏈或支鏈芳基、Ar-烷基、雜環、碳環、環烷基、雜烷基環烷基、烷基羰基、雜芳基的；碳酸酯（-C（O）OR¹⁷ ），氨基甲酸酯（-C（O）NR¹⁷ R¹⁸ ）；或1-8個碳原子羧酸酯、酯、醚或醯胺；或1~8個氨基酸；或如式（OCH₂ CH₂ ）_p 或（OCH₂ CH（CH₃ ））_p 的聚乙烯氧基單元、其中p是0至約1000的整數；或R²⁰ 不存在，則相應的氧成酮，或上述組合；其中R²¹ 是H、C₁ -C₈ 直鏈或支鏈烷基；其中 Z² 和 Z³ 獨立地為 H、OH、NH₂ 、OR¹⁷ 、NHR¹⁷ 、COOH、COOR¹⁷ 、C（O）R¹⁷ 、C（O）NHR¹⁷ 、C（O）NHNHR¹⁷ 、C（O）NH₂ 、R¹⁸ 、OCH₂ OP（O）（OR¹⁸ ）₂ 、OC（O）OP（O）（OR¹⁸ ）₂ 、OPO（OR¹⁸ ）₂ 、NHPO（OR¹⁸ ）₂ 、OP（O）（OR¹⁸ ）OP（O）（OR¹⁸ ）₂ 、OC（O）R¹⁸ 、OC（O）NHR¹⁸ 、OSO₂ （OR¹⁸ ）、O-（C₄ -C_12- 糖苷）、C₁ -C₈ 直鏈或支鏈烷基或雜烷基；C₂ -C₈ 直鏈或支鏈烯基、炔基、烷基環烷基、雜環烷基； C₃ -C₈ 直鏈或支鏈的芳基、Ar-烷基、雜環、碳環、環烷基、雜烷基環烷基、烷基羰基、雜芳基；碳酸酯（-C（O）OR¹⁷ ）、氨基甲酸酯（-C（O）NR¹⁷ R¹⁸ ）； R¹⁷ 和R¹⁸ 獨立地為H、C₁ -C₈ 直鏈或支鏈烷基或雜烷基； C₂ -C₈ 直鏈或支鏈烯基、炔基、烷基環烷基、雜環烷基； C₃ -C₈ 直鏈或支鏈的芳基、Ar-烷基、雜環、碳環、環烷基、雜烷基環烷基、烷基羰基、雜芳基；碳酸酯（-C（O）OR¹⁷ ）、氨基甲酸酯（-C（O）NR¹⁷ R¹⁸ ）； R¹⁹ 是H、OH、NH₂ 、OSO₂ （OR¹⁸ ）、XCH₂ OP（O）（OR¹⁸ ）₂ 、XPO（OR¹⁸ ）₂ 、XC（O）OP（O）（OR¹⁸ ）₂ 、XC（O）R¹⁸ 、XC（O） NHR¹⁸ 、C₁ -C₈ 烷基或羧酸酯； C₂ -C₈ 烯基、炔基、烷基環烷基、雜環烷基； C₃ -C₈ 芳基或烷基羰基；或藥學上可接受的鹽； X是O、S、NH、NHNH、NHR¹⁷ 或CH₂ ； R⁷ 與前文中定義相同；其中“

” 是與式（II）中連接子L連接的位點。

在另一個實例中，細胞結合分子-抗有絲分裂劑的偶聯物具有式（III）的結構：

（III）或它們在藥學上可接受的鹽、水合物或水合鹽，或這些化合物的多晶型結構，或其光學異構體、外消旋體、非對映異構體或對映異構體；其中T、L、m、Y、R¹ 、R² 、R³ 、R⁴ 、R⁵ 、R⁶ 、R⁸ 、R⁹ 、R¹⁰ 、R¹¹ 、R¹² 、R¹³ 和n 的定義與式（I）與（II）中相同；其中R⁷ 獨立地選自 -R¹⁴ -，或 -R¹⁴ C（=O）X¹ R¹⁵ - 或 -R¹⁴ X¹ R¹⁵ -，其中 R¹⁴ 和 R¹⁵ 獨立地為C₁ -C₈ 直鏈或支鏈烷基、雜烷基；C₂ -C₈ 烯基、炔基；C₃ -C₈ 芳基、雜環、碳環、環烷基、雜環烷基、雜芳烷基；雜烷基環烷基、烷基羰基； X¹ 選自O、S、S-S、NH或NR¹⁴ 。

式（III）括弧內化合物的例子包括以下結構：

III-01，

III-02，

III-03，

III-04，

III-05，

III-06，

III-07，

III-08，

III-09，

III-10，

III-11，

III-12，

III-13，

III-14，

III-15，

III-16，

III-17，

III-18，

III-19，

III-20，

III-21，

III-22，

III-23，

III-24，

III-25，

III-26，

III-27，

III-28，

III-29，

III-30，

III-31，

III-32，

III-33，

III-34，

III-35，

III-36，

III-37，

III-38，

III-39，

III-40，

III-41，

III-42，

III-43，

III-44，

III-45，

III-46，

III-47，

III-48，

III-49，

III-50，

III-51，

III-52，

III-53，

III-54，

III-55，

III-56，

III-57，

III-58，

III-59，

III-60，

III-61，

III-62，

III-63，

III-64，

III-65，

III-66，

III-67，

III-68，或它們在藥學上可接受的鹽、水合物或水合鹽，或這些化合物的多晶型結構，或其光學異構體、外消旋體、非對映異構體或對映異構體；其中R²⁰ 為H；C₁ -C₈ 直鏈或支鏈烷基、雜烷基或醯基（-C（O）R¹⁷ ）；C₂ -C₈ 直鏈或支鏈烯基、炔基、烷基環烷基、雜環烷基；C₃ -C₈ 直鏈或支鏈芳基、Ar-烷基、雜環、碳環、環烷基、雜烷基環烷基、烷基羰基、雜芳基；碳酸酯（-C（O）OR¹⁷ ），氨基甲酸酯（-C（O）NR¹⁷ R¹⁸ ）；或1-8個碳原子羧酸酯、酯、醚或醯胺；或1~8個氨基酸；或如式（OCH₂ CH₂ ）_p 或（OCH₂ CH（CH₃ ））_p 的聚乙烯氧基單元、其中p是0至約1000的整數；或R²⁰ 不存在，則相應的氧成酮，或上述組合；其中R²¹ 和R²² 獨立地為H，C₁ -C₈ 直鏈或支鏈烷基；其中 Z³ 和 Z³ 獨立地為 H、OH、NH₂ 、OR¹⁷ 、NHR¹⁷ 、COOH、COOR¹⁷ 、C（O）R¹⁷ 、C（O）NHR¹⁷ 、C（O）NHNHR¹⁷ 、C（O）NH₂ 、R¹⁸ 、OCH₂ OP（O）（OR¹⁸ ）₂ 、OC（O）OP（O）（OR¹⁸ ）₂ 、OPO（OR¹⁸ ）₂ 、NHPO（OR¹⁸ ）₂ 、OP（O）（OR¹⁸ ）OP（O）（OR¹⁸ ）₂ 、OC（O）R¹⁸ 、OC（O）NHR¹⁸ 、OSO₂ （OR¹⁸ ）、O-（C₄ -C_12- 糖苷）、C₁ -C₈ 直鏈或支鏈烷基或雜烷基；C₂ -C₈ 直鏈或支鏈烯基、炔基、烷基環烷基、雜環烷基； C₃ -C₈ 直鏈或支鏈的芳基、Ar-烷基、雜環、碳環、環烷基、雜烷基環烷基、烷基羰基、雜芳基；碳酸酯（-C（O）OR¹⁷ ）、氨基甲酸酯（-C（O）NR¹⁷ R¹⁸ ）； R¹⁷ 和R¹⁸ 獨立地為H、C₁ -C₈ 直鏈或支鏈烷基或雜烷基； C₂ -C₈ 直鏈或支鏈烯基、炔基、烷基環烷基、雜環烷基； C₃ -C₈ 直鏈或支鏈的芳基、Ar-烷基、雜環、碳環、環烷基、雜烷基環烷基、烷基羰基、雜芳基；碳酸酯（-C（O）OR¹⁷ ）、氨基甲酸酯（-C（O）NR¹⁷ R¹⁸ ）； R¹⁹ 是H、OH、NH₂ 、OSO₂ （OR¹⁸ ）、XCH₂ OP（O）（OR¹⁸ ）₂ 、XPO（OR¹⁸ ）₂ 、XC（O）OP（O）（OR¹⁸ ）₂ 、XC（O）R¹⁸ 、XC（O） NHR¹⁸ 、C₁ -C₈ 烷基或羧酸根； C₂ -C₈ 烯基、炔基、烷基環烷基、雜環烷基； C₃ -C₈ 芳基或烷基羰基；或藥學上可接受的鹽； X 、X¹ 和X² 獨立地是O、S、NH、NHNH或CH₂ 。

在另一個實施方案中，細胞結合分子-抗有絲分裂劑具有式（IV）的結構：

（IV）或它們在藥學上可接受的鹽、水合物或水合鹽，或這些化合物的多晶型結構，或其光學異構體、外消旋體、非對映異構體或對映異構體；其中T、L、m、R¹ 、R² 、R³ 、R⁴ 、R⁵ 、R⁶ 、R⁸ 、R⁹ 、R¹⁰ 、R¹¹ 、R¹² 、R¹³ 和n 的定義與式（II）中相同；其中R⁹ 獨立地為H、-O-、-OR¹⁴ -、-OC（= O）R¹⁴ -、-OC（= O）NHR¹⁴ -、-OC（= O）NR¹⁴ R¹⁵ -、-OC（= O）R¹⁴ SSR¹⁵ -、-OP（＝ O）（OR¹⁴ ）O-、其中R¹⁴ ，R¹⁵ 獨立地為H，C₁ -C₈ 烷基，雜烷基； C₃ -C₈ 芳基，雜芳基，雜環，碳環，環烷基，烷基環烷基，雜環烷基，雜烷基環烷基，雜芳烷基，烷基羰基或藥學上可用的鹽。

式（IV）括弧內化合物的例子包括以下結構：

IV-01，

IV-02，

IV-03，

IV-04，

IV-05，

IV-06，

IV-07，

IV-08，

IV-09，

IV-10，

IV-11，

IV-12，

IV-13，

IV-14，

IV-15，

IV-16，

IV-17，

IV-18，

IV-19，

IV-20，

IV-21，

IV-22，

IV-23，

IV-24，

IV-25，

IV-26，

IV-27，

IV-28，

IV-29，

IV-30，

IV-31，

IV-32，

IV-33，

IV-34，

IV-35，

IV-36，

IV-37，

IV-38，

IV-39，

IV-40，

IV-41，

IV-42，

IV-43，

IV-44，

IV-45，

IV-46，

IV-47，

IV-48，

IV-49，

IV-50，

IV-51，

IV-52，

IV-53，

IV-54，

IV-55，

IV-56，

IV-57，

IV-58，

IV-59，

IV-60，

IV-61，

IV-62，

IV-63，

IV-64，

IV-65，

IV-66，

IV-67，

IV-68，或它們在藥學上可接受的鹽、水合物或水合鹽，或這些化合物的多晶型結構，或其光學異構體、外消旋體、非對映異構體或對映異構體；其中 “

”，R⁷ 、R²⁰ 、R²¹ 、R²² 、Z² 、Z³ 和 X² 定義同前文。

在另一個實施方案中，細胞結合分子-抗有絲分裂劑偶聯物具有式（V）的結構：

（V）或它們在藥學上可接受的鹽、水合物或水合鹽，或這些化合物的多晶型結構，或其光學異構體、外消旋體、非對映異構體或對映異構體；其中T、L、m、Y、R¹ 、R² 、R³ 、R⁴ 、R⁵ 、R⁶ 、R⁸ 、R⁹ 、R¹⁰ 、R¹² 、R¹³ 和n 的定義與式（II）中相同；其中R¹¹ 為-R¹⁴ -、-R¹⁴ C（= O）R¹⁷ -、-R¹⁴ C（= O）X² R¹⁷ -、-R¹⁴ X² R¹⁷ -、-R¹⁴ C（= O）X² -，其中R¹⁷ 獨立地為H、OH、C₁ -C₈ 烷基、C₂ -C₈ 烯基、炔基、雜烷基；C₃ -C₈ 芳基、亞芳基、雜環、碳環、雜環烷基；或一個氨基酸、或兩個氨基酸單元； X₂ 是-O-、-S-、-NH-、-NHS（O₂ ）-、-NHS（O）-、-N（R¹⁴ ）-、-O-R^14- 、-S-R^14- 、-S（ = O）-R¹⁴ -或-NHR¹⁴ -； R¹⁴ 為H、C₁ -C₈ 烷基、雜烷基；C₂ -C₈ 烯基、炔基；C₃ -C₈ 芳基、雜環、碳環、環烷基、烷基環烷基、雜環烷基、雜烷基環烷基、雜芳烷基、烷基羰基。

式（V）括弧內的化合物的例子包括以下結構：

V-01，

V-02，

V-03，

V-04，

V-05，

V-06，

V-07，

V-08，

V-09，

V-10，

V-11，

V-12，

V-13，

V-14，

V-15，

V-16，

V-17，

V-18，

V-19，

V-20，

V-21，

V-22，

V-23，

V-24，

V-25，

V-26，

V-27，

V-28，

V-29，

V-30，

V-31，

V-32，

V-33，

V-34，

V-35，

V-36，

V-37，

V-38，

V-39，

V-40，

V-41，

V-42，

V-43，

V-44，

V-45，

V-46，

V-47，

V-48，

V-49，

V-50，

V-51，

V-52，

V-53，

V-54，

V-55，

V-56，

V-57，

V-58，

V-59，

V-60，

V-61，

V-62，

V-63，

V-64，

V-65，

V-66，

V-67，

V-68，或它們在藥學上可接受的鹽、水合物或水合鹽，或這些化合物的多晶型結構，或其光學異構體、外消旋體、非對映異構體或對映異構體；其中 “

”，R⁷ 、R²⁰ 、R²¹ 、R²² 、Z² 、Z³ 和 X² 與前文中定義相同。

在另一個實施方案中，細胞結合分子-抗有絲分裂劑偶聯物具有式（VI）的結構：

（VI）或它們在藥學上可接受的鹽、水合物或水合鹽，或這些化合物的多晶型結構，或其光學異構體、外消旋體、非對映異構體或對映異構體；其中T、L、m、Y、R¹ 、R² 、R³ 、R⁴ 、R⁵ 、R⁶ 、R⁷ 、R⁸ 、R⁹ 、R¹⁰ 、R¹¹ 、R¹³ 和n 的定義與式（II）中相同；其中R¹² 獨立地為R¹⁴ 、-O-、-S-、-NH-、= N-、= NNH-、-N（R¹⁴ ）-、-OR¹⁴ -、C（O）O-、C（O）NH- 、C（O）NR¹⁴ -、-SR¹⁴ -、-S（= O）R¹⁴ -、-NHR¹⁴ -、-CH₂ OP（= O）（OR¹⁵ ）-、-P（= O）（OR¹⁵ ）-、-OP（＝ O）（OR¹⁵ ）O-、-SO₂ R¹⁴ ，R¹⁴ 、R¹⁵ 獨立地為C₁ -C₈ 烷基、雜烷基；C₂ -C₈ 烯基、炔基；C₃ -C₈ 芳基、雜環、碳環、環烷基、烷基環烷基、雜環烷基、雜芳烷基、雜烷基環烷基、烷基羰基。

式（VI）括弧內化合物的例子包括以下結構：

VI-01，

VI-02，

VI-03，

VI-04，

VI-05，

VI-06，

VI-07，

VI-08，

VI-09，

VI-10，

VI-11，

VI-12，或其藥學上可接受的鹽，水合物或水合鹽；或這些化合物的多晶型晶體結構；或其同位素，旋光異構體，外消旋體，非對映異構體或對映異構體；其中 R⁷ 、R¹⁷ 、R²⁰ 、R²¹ 、Z² 、Z³ 、和X² 與前文中定義相同。

在另一個實例中，細胞表面結合分子-抗有絲分裂劑的偶聯物具有式（VII）的結構：

（VII）或其藥學上可接受的鹽，水合物或水合鹽；或這些化合物的多晶型晶體結構；或其同位素，旋光異構體，外消旋體，非對映異構體或對映異構體；其中T、L、n、m、Y、R¹ 、R² 、R³ 、R⁴ 、R⁵ 、R⁶ 、R⁸ 、R⁹ 、R¹⁰ 、R¹¹ 和 R¹² 的定義與式（II）相同；其中R¹³ 為C₁ -C₁₀ 烷基、雜烷基、烷基酸、烷基醯胺、烷基胺或Ar； Ar是指由一個或多個環組成的芳基或雜芳基，包含4至10個碳原子，較佳4至6個碳原子。術語雜芳基是指芳基上的一個或幾個碳、較佳一個、兩個或三個碳原子被O、N、Si、Se、P或S置換、較佳為O、S、N。術語芳基或芳香基也指其中一個或幾個氫原子獨立地被R¹⁸ 、F、Cl、Br、I、OR¹⁶ 、SR¹⁶ 、NR¹⁶ R¹⁸ 、N = NR¹⁶ 、N = R¹⁶ 、NR¹⁶ R¹⁸ 、NO₂ 、SOR¹⁶ R¹⁸ 、SO² R¹⁶ 、SO₃ R¹⁶ 、OSO₃ R¹⁶ 、PR¹⁶ R¹⁸ 、POR¹⁶ R¹⁸ 、PO₂ R¹⁶ R¹⁸ 、OPO₃ R¹⁶ R¹⁸ 或PO₃ R¹⁶ R¹⁸ 置換的芳基，其中R¹⁶ 、R¹⁸ 獨立地為氫，C₁ -C₈ 烷基， C₂ -C₈ 烯基、炔基、雜烷基， C₃ -C₈ 芳基、雜環、碳環、環烷基、烷基環烷基、雜環烷基、雜芳烷基、雜烷基環烷基、烷基羰基，C₄ -C₁₂ 糖苷或藥學上可用的鹽。

式（VII）括弧內化合物的示例包括以下結構：

VII-01，

VII-02，

VII-03，

VII-04，

VII-05，

VII-06，

VII-07，

VII-08，

VII-09，

VII-10，

VII-11，

VII-12，

VII-13，

VII-14，

VII-15，

VII-16，

VII-17，

VII-18，

VII-19，

VII-20，

VII-21，

VII-22，

VII-23，

VII-24，

VII-25，

VII-26，

VII-27，

VII-28，

VII-29，

VII-30，

VII-31，

VII-32，

VII-33，

VII-34，

VII-35，

VII-36，

VII-37，

VII-38，

VII-39，

II-40，

VII-41，

VII-42，

VII-43，

VII-44，

VII-45，

VII-46，

VII-47，

VII-48，

VII-49，

VII-50，

VII-51，

VII-52，

VII-53，

VII-54，

VII-55，

VII-56，

VII-57，

VII-58，

VII-59，

VII-60，

VII-61，

VII-62，

VII-63，

VII-64，

VII-65，

VII-66，

VII-67，

VII-68，

VII-69，

VII-70，

VII-71，

VII-72，

VII-73，

VII-74，

VII-75，

VII-76，

VII-77，或其藥學上可接受的鹽、水合物或水合鹽；或多晶型結晶；或其光學異構體、外消旋物、非對映異構體或對映異構體；其中“

”、R⁷ 、R²⁰ 、Z² 、Z³ 和X² 定義同前文； X、X¹ 和X³ 獨立為O、S、NH、NHNH、NHR¹⁷ 、CH₂ 或不存在； P¹ 是H、R¹⁷ 、P（O）（OH）₂ 、P（O）（X¹ R¹⁷ ）₂ 、CH₂ P（O）（OH）₂ 、S（O₂ ）（X¹ R¹⁷ ）、C₆ H₁₂ O₅ （糖苷）、（CH₂ CH₂ O）_p R¹⁷ 、其中p選自0 -100，R¹⁷ 定義同前文；另外X¹ P¹ 可能不存在（為H）。

在另一個實例中，合成製備tubulysin衍生物及與它們與本發明的細胞表面受體結合分子的偶聯物的線路，包括但不限於圖1-22所示。

在另一個實例中，可釋放的連接子（L）是由選自C、N、O、S、Si和P等原子構成的鏈狀結構，共價連接細胞表面結合配位體（T）與有效的抗有絲分裂劑。連接子可具有多種長度，例如在約2至約100個原子的範圍內。用於形成連接子的原子可以以任何化學方式組合，例如形成伸烷基，亞烯基和亞炔基，醚，聚氧化烯，酯，胺，亞胺，多胺，肼，醯胺，脲，氨基脲，卡巴脲，烷氧基胺，氨基甲酸酯，氨基酸，醯氧基胺，異羥肟酸等。另外，應當注意到的是，形成可釋放的連接子（L）的原子可以是飽和的或不飽和的，或者可以是自由基，或者可以彼此成環以形成二價環狀結構，包括環烷烴，環狀醚，環胺，亞芳基，雜亞芳基等。

術語“可釋放的連接子”是指連接子上包含至少一個可在生理條件下被破壞的鍵，例如pH、酸、堿、氧化作用、代謝、生化或酶不穩定的鍵。應當理解，導致鍵斷裂不一定是生物或代謝過程、而可能是一個化學反應、例如水解或置換反應，這種生理條件的例子有： pH值比細胞漿內pH低的內涵體，惡性細胞記憶體在的毫摩爾濃度的大量谷胱甘肽，它能夠與細胞內硫醇發生二硫鍵交換反應；偶聯物的可釋放連接子L可以具有下式的結構：--Ww-（Aa）r-Vv--；其中：--W--是延展體單元； w是0或1；每個-Aa-獨立地是一個氨基酸單元； r獨立地是0至12的整數； --V--是一個間隔體單元；v為0、1或2。

當延展體—W—存在時，它起著連接著細胞結合分子（T）和氨基酸單元—Aa—或者間隔體—V—（當—Aa—不存在時）的作用。延展體W中可以獨立地包含自毀滅間隔體，肽單元，腙鍵，二硫鍵或硫醚鍵。此時，細胞結合分子（T）含有一個能夠與延展體上相應功能團成鍵的基團。在細胞結合分子上固有或藉由化學方式產生的用於連接的功能團，包括但不限於：巰基，氨基，羥基，羰基，糖的異頭羥基，以及羧基等，較佳的功能團為巰基，羧基和氨基。巰基可以藉由還原細胞結合分子（如抗體）分子內的雙硫鍵生成。巰基也可以藉由細胞結合分子中賴氨酸的氨基與2-亞氨基硫烷（Traut試劑）或者硫內酯或者其他的巰基生成試劑反應產生，比如先用含雙硫鍵的連接子或硫酯修飾細胞結合分子，再分別藉由還原或水解生成巰基。

連接在T上的W的例子如下所示：

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，

其中R²⁰ ，R²¹ 選自–C₁ ~C₉ 亞烴基-，- C₁ ~C₇ 碳環基-，-O-（-（ C₁ ~C₈ 烷基）-，-亞芳基-，- C₁ ~C₉ 亞烴基-亞芳基-，-亞芳基，- C₁ ~C₉ 亞烴基，- C₁ ~C₉ 亞烴基-（ C₁ ~C₈ 碳環基）-，-（ C₃ ~C₇ 碳環基）- C₁ ~C₉ 亞烴基-，- C₃ ~C₈ 雜環基-，- C₁ ~C₁₀ 亞烴基-（ C₃ ~C₈ 雜環基）-，-（ C₃ ~C₈ 雜環基）- C₁ ~C₉ 亞烴基-，-（CH₂ CH₂ O）_k -，-（CH（CH₃ ）CH₂ O）_k - 以及–（CH₂ CH₂ O）_k -CH₂ -； k 為1-20之間的整數；R’和R’’分別為H或CH₃ 。

在另一個實例中，如上所述的W與T的共價連接可以藉由各種化學反應實現。

醯胺鍵形成的示例：

其中延展體單元含有一個活性反應位元點E，E可以與細胞結合分子上的伯胺或仲胺反應生成醯胺鍵。 E的例子包括但不限於，羥基琥珀醯亞胺酯（NHS和S-NHS等）， 4-硝基苯基酯，五氟苯基酯，四氟苯基酯（包括S-四氟苯基酯），酸酐，醯氯，磺醯氯，異氰酸酯和異硫氰酸酯等。

用硫醚或雙硫鍵連接的示例：

其中延展體單元含有一個能夠與巰基反應的位點，可以和細胞結合分子T之間形成硫醚或雙硫鍵。為形成雙硫鍵，細胞結合分子T上的巰基既可以藉由還原分子內雙硫鍵生成，也可以藉由其他化學過程修飾細胞結合分子T而生成；

在本發明的另一個態樣，延展體上也可以有一個能夠與醛基（-CHO）或酮基（-C（= O）R）反應的活性基團，以修飾細胞結合分子上的醛基或酮基。比如，細胞結合分子T的糖，藉由用氧化劑例如高碘酸鈉氧化就可以生成醛基或酮基。再比如，抗體（或蛋白質或多肽）N端氨基酸上的胺可以和5-磷酸吡哆醛（PLP）反應，而引入酮基（Scheck＆Francis，ACS Chem.Biol.2007 ，2，247-251）。這些醛基或酮基（-C=O）可以和延展體上的活性反應基團例如醯肼，肟，伯胺或仲胺，肼，縮氨基硫脲，肼羧酸酯或芳基肼反應，從而將二者連接在一起。

用腙，肟或亞胺連接的示例：

其中R²⁰ 和R²¹ 的定義如前所述，R²⁵ 指一個氨基酸的置換基。

另外本發明另一態樣，延展體（可以含有一個隔離體V和/或一個氨基酸）可以先和細胞結合分子T連結，然後再將這個細胞結合分子-延展體片段與一個抗有絲分裂劑共軛連接，連接過程可以在緩衝水溶液裡進行。下面是一些按照這種方式分兩步偶聯的例子（連接在R¹⁶ 上的藥物被省略）：

其中E包括但不僅限於，羥基琥珀醯亞胺酯（NHS和S-NHS等）， 4-硝基苯基酯，五氟苯基酯，四氟苯基酯（包括S-四氟苯基酯），酸酐，醯氯，磺醯氯，異氰酸酯和異硫氰酸酯等。R’和R’’分別為H或CH₃ ；R²⁰ ，R¹⁶ 和Ar的定義同前文；R²⁶ 為H，F或NO₂ ；J為F， Cl，Br，I，甲苯磺酸酯基（TsO）或甲磺酸酯基（MsO），其中

含有至少一個抗有絲分裂劑/

。

本發明另一態樣，延展體也可以先和Tubulysin衍生物連接，然後再與細胞結合分子T在pH為3 -10（較佳為5.0-8.5）的緩衝水溶液（可含有上限至50%的有機溶劑）中偶聯。

這種兩步偶聯的示例：

其中E包括但不僅限於，羥基琥珀醯亞胺酯（NHS和S-NHS等）、4-硝基苯基酯、五氟苯基酯、四氟苯基酯（包括S-四氟苯基酯）、酸酐、醯氯、磺醯氯、異氰酸酯和異硫氰酸酯等。R’和R’’分別為H或CH₃ ；R²⁰ 、R¹⁶ 和Ar的定義同前文；R²⁶ 為H、F或NO₂ ；J為F、Cl、Br、I、甲苯磺酸酯基（TsO）或甲磺酸酯基（MsO），其中

含有至少一個抗有絲分裂劑/藥物。

當氨基酸單元（--Aa--）存在時，隔離體存在時，它連接延展體和隔離體，隔離體缺失時，它連接延展體和抗有絲分裂劑/藥物，如果延展體和隔離體都缺失時，它直接連接細胞結合分子T和抗有絲分裂劑/藥物。--（Aa）r—可以是天然或非天然氨基酸，可以是二肽、三肽、四肽、五肽、六肽、七肽、八肽、九肽、十肽、十一肽或者十二肽單元，r為0-12 之間的整數。在這裡，氨基酸一般地指氨基烷基羧酸，其中烷基可以是被諸如烷基，醯基，羥烷基，巰烷基，氨烷基或羧烷基等基團置換的烷基。天然及非天然氨基酸和多肽的結構在G. C. Barrett 和D. T. Elmore 所著的《Amino Acid and Peptides》（ Cambridge University Press，2004）書裡有詳細說明。另外，氨基酸也指ß氨基酸，γ氨基酸和分子內含有甲基、苄基、羥甲基、巰甲基、羧基、羧甲基或胍基丙基等的長鏈氨基酸。較佳的氨基酸為精胺酸、天冬醯胺酸、天冬氨酸、瓜氨酸、半胱氨酸、甘氨酸、谷氨酸、亮氨酸、賴氨酸、穀氨醯胺、絲氨酸、鳥氨酸、苯丙氨酸、蘇氨酸、酪氨酸和纈氨酸等。

氨基酸單元可以被一種或多種酶，包括在腫瘤相關蛋白水解酶，所酶解而釋放出抗有絲分裂劑/藥物。在一實例中，抗有絲分裂劑/藥物被釋放後在體內被質子化。

當隔離體（-V-）存在時，氨基酸單元存在時，它連接氨基酸單元和抗有絲分裂劑，氨基酸單元缺失時，它連接延伸體和抗有絲分裂劑。當氨基酸單元和延伸體都缺失時，隔離體連接抗有絲分裂劑和細胞結合分子T。隔離體中可以包含一些功能團，以提高偶聯物的水溶性，生物傳送，獲得適宜的腎清除，攝入，吸收，生物分佈，以及生物利用度。隔離體有兩種基本類型：自毀滅型和非自毀滅型。非自毀滅型隔離體指抗有絲分裂劑-連接子-細胞結合分子或抗有絲分裂劑-連接子的氨基酸單元斷裂（特別是酶解之後），部分或全部的隔離體仍然連接在抗有絲分裂劑上。自毀滅型包括電子結構類似對氨基苄基氨基甲醯基（PAB）的芳香族化合物，2-氨基咪唑-5-甲醇衍生物，雜環PAB衍生物，β-葡糖醛酸，鄰或對氨基苄基縮醛，或以下結構之一：

，

，

，.

，

；其中用（*）標記的原子是隔離體，可釋放的連接子單元，抗有絲分裂劑或細胞結合分子T的連接點； X、Y和Z³ 獨立地為NH，O或S； Z² 獨立地為H、NH、O或S；v為0或1；Q獨立地為H，OH，C₁ ~C₆ 烷基、（OCH₂ CH₂ ）_n 、F、Cl、Br、I、OR¹⁷ 、SR¹⁷ 、NR¹⁷ R¹⁸ 、N=NR¹⁷ 、N=R¹⁷ 、NR¹⁷ R¹⁸ 、NO₂ 、SOR¹⁷ R¹⁸ 、SO₂ R¹⁷ 、SO₃ R¹⁷ 、OSO₃ R¹⁷ 、PR¹⁷ R¹⁸ 、POR¹⁷ R¹⁸ 、PO₂ R¹⁷ R¹⁸ 、OPO（OR¹⁷ ）（OR¹⁸ ）、OCH₂ PO（OR¹⁷ ）（OR¹⁸ ），其中R¹⁷ 和R¹⁸ 獨立地為H，C₁ -C₈ 烷基，C₂ -C₈ 烯烴基、炔烴基、雜烷基，C₃ -C₈ 芳基、雜環基、碳環基、環烷基、雜環烷基、雜芳烷基、烷羰基或藥用的正離子鹽。

非自我毀滅間隔體的例子：

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；

；

6-馬來醯亞胺己醯基（MC），

馬來醯亞胺丙醯基（MP），

纈氨酸-瓜氨酸（val-cit），

丙氨酸-苯丙氨酸（ala-phe），

賴氨酸-苯丙氨酸（lys-phe），

對氨基芐氧基-羰基（PAB），

4-硫代戊酸基（SPP），

4-硫丁醯基（SPDB），

4-（N-馬來醯亞胺甲基）環己烷-1醯基（MCC），

馬來醯亞胺乙基（ME），

4-硫-2-羥基磺醯基-丁醯基（2-Sulfo-SPDB），

芳基硫醇（PySS），

（4-乙醯基）氨基苯醯基（SIAB），

，氧基苄硫基，

氨基苄硫基，

二氧基苄硫基，

二氨基苄硫基，

氨基氧基苄基硫醚基，

烷氧基氨基（AOA），

亞乙基氧基（EO），

4-甲基-4-二硫代戊酸（MPDP），

三唑，

二硫基，

烷基磺醯基

烷基磺醯胺，

磺基雙醯胺，

膦二醯胺，

烷基膦醯胺，

次膦酸，

N-甲基膦醯胺酸，

N,N'-二甲基膦醯胺酸，

N,N'-二甲基膦二醯胺，

肼，

乙脒；

肟，

二乙醯肼，

氨基乙基胺，

氨基乙基 - 氨基乙基胺，

，

，

，

，

，

，

，

，

，

，

，

，

，

，

，

，

，

，

，

，

，

，

，

，

，

，

，

，

，

，

，L-或D-，或含有1-20個氨基酸的天然或非天然肽；其中“*” 和 “

”是間隔體或可釋放的連接子，抗有絲分裂劑和/或結合分子的連接點；m為1~ 10； n為1~ 20； X₂ 、X₃ 、X₄ 、X₅ 或X₆ 獨立地選自NH、NHNH、N（R₁₂ ）、N（R₁₂ ）N（R₁₂ ’）、O、S、C₁ -C₆ 烷基，C₂ -C₆ 雜烷基、烷基環烷基、雜環烷基；C₃ -C₈ 芳基、Ar-烷基、雜環、碳環、環烷基、雜烷基環烷基、烷基羰基、雜芳基； CH₂ OR₁₂ 、CH₂ SR₁₂ 、CH₂ NHR₁₂ 或1~ 8個氨基酸；其中R₁₂ 和R₁₂ ’獨立地為H、C₁ -C₈ 烷基；C₂ -C₈ 雜烷基、烷基環烷基、雜環烷基； C₃ -C₈ 芳基、Ar-烷基、雜環、碳環、環烷基、雜烷基環烷基、烷基羰基、雜芳基、1-8個碳原子的酯、醚或醯胺；或如式（OCH₂ CH₂ ）_p 或（OCH₂ CH（CH₃ ））_p 的聚環氧乙烷單元，其中p為0至約1000的整數，或它們的組合。

可斷裂連接子L中包含至少一個在生理條件下被破壞的鍵或pH、酸、堿、氧化作用、代謝、生化或酶不穩定的鍵，其具有以下結構之一： ‑（CR₁₅ R₁₆ ）_m （Aa）r（CR₁₇ R₁₈ ）_n （OCH₂ CH₂ ）_t -，‑（CR₁₅ R₁₆ ）_m （CR₁₇ R₁₈ ）_n （Aa）_r （OCH₂ CH₂ ）_t -，‑（Aa）_r -（CR₁₅ R₁₆ ）_m （CR₁₇ R₁₈ ）_n （OCH₂ CH₂ ）_t -，‑（CR₁₅ R₁₆ ）_m （CR₁₇ R₁₈ ）_n （OCH₂ CH₂ ）_r （Aa）_t -，-（CR₁₅ R₁₆ ）_m （CR₁₇ =CR₁₈ ）（CR₁₉ R₂₀ ）_n （Aa）_t （OCH₂ CH₂ ）_r -，-（CR₁₅ R₁₆ ）_m （NR₁₁ CO）（Aa）_t （CR₁₉ R₂₀ ）_n- （OCH₂ CH₂ ）_r -，-（CR₁₅ R₁₆ ）_m （Aa）_t （NR₂₁ CO）（CR₁₉ R₂₀ ）_n （OCH₂ CH₂ ）_r -，-（CR₁₅ R₁₆ ）_m （OCO）（Aa）_t -（CR₁₉ R₂₀ ）_n （OCH₂ CH₂ ）_r -，-（CR₁₅ R₁₆ ）_m （OCNR₁ ₇ ）（Aa）_t （CR₁₉ R₂₀ ）_n （OCH₂ CH₂ ）_r -，-（CR₁₅ R₁₆ ）_m -（CO）（Aa）_t- （CR₁₉ R₂₀ ）_n （OCH₂ CH₂ ）_r -，-（CR₁₅ R₁₆ ）_m （NR₂₁ CO）（Aa）_t （CR₁₉ R₂₀ ）_n （OCH₂ CH₂ ）_r -，-（CR₁₅ R₁₆ ）_m- （OCO）（Aa）_t （CR₁₉ R₂₀ ）_n- （OCH₂ CH₂ ）_r -，-（CR₁₅ R₁₆ ）_m （OCNR₁ ₇ ）（Aa）_t （CR₁₉ R₂₀ ）_n -（OCH₂ CH₂ ）_r -，-（CR₁₅ R₁₆ ）_m （CO）（Aa）_t （CR₁₉ R₂₀ ）_n- （OCH₂ CH₂ ）_r -，-（CR₁ ₅ R₁ ₆ ）_m -苯基‑CO（Aa）_t- （CR₁ ₇ R₁ ₈ ）_n -，-（CR₁ ₅ R₁ ₆ ）_m -呋喃‑CO（Aa）_t （CR₁ ₇ R₁ ₈ ）_n -，-（CR₁ ₅ R₆ ）_m -惡唑‑CO（Aa）_t （CR₁ ₇ R₁ ₈ ）_n -，-（CR₁ ₅ R₁ ₆ ）_m -噻唑基‑CO（Aa）_t （CCR₁ ₇ R₁ ₈ ）_n -，-（CR₁ ₅ R₁ ₆ ）_t -噻吩‑CO（CR₁ ₇ R₁ ₈ ）_n -，-（CR₁ ₅ R₁ ₆ ）_t -咪唑‑CO-（CR₁ ₇ R₁ ₈ ）_n -，-（CR₁ ₅ R₁ ₆ ）_t -嗎啉‑CO（Aa）_t- （CR₁ ₇ R₁ ₈ ）_n -，-（CR₁ ₅ R₁ ₆ ）_t -呱嗪-CO（Aa）_t （CR₁ ₇ R₁ ₈ ）_n -，-（CR₁ ₅ R₁ ₆ ）_t -N‑甲基呱嗪‑CO（Aa）_t （CR₁ ₇ R₁ ₈ ）_n -，-（CR₁ ₅ R₁₆ ）_m -（Aa）_t 苯基-，-（CR₁ ₅ R₁ ₆ ）_m -（Aa）_t 呋喃‑，-（CR₁ ₅ R₁ ₆ ）_m -惡唑（Aa）_t ‑，-（CR₁ ₅ R₁ ₆ ）_m -噻唑基（Aa）_t ‑，-（CR₁ ₅ R₁ ₆ ）_m -噻吩基-（Aa）_t -，-（CR₁ ₅ R₁ ₆ ）_m -咪唑（Aa）_t -，-（CR₁ ₅ R₁ ₆ ）_m -嗎啉‑（Aa）_t -，-（CR₁ ₅ R₁ ₆ ）_m -呱嗪‑（Aa）_t -，-（CR₁ ₅ R₁ ₆ ）_m -N‑甲基呱嗪‑（Aa）_t-, ‑K（CR₁₅ R₁₆ ）_m （Aa）r（CR₁₇ R₁₈ ）_n （OCH₂ CH₂ ）_t -，‑K（CR₁₅ R₁₆ ）_m （CR₁₇ R₁₈ ）_n （Aa）_r （OCH₂ CH₂ ）_t -，‑K（Aa）_r -（CR₁₅ R₁₆ ）_m （CR₁₇ R₁₈ ）_n （OCH₂ CH₂ ）_t -，‑K（CR₁₅ R₁₆ ）_m （CR₁₇ R₁₈ ）_n （OCH₂ CH₂ ）_r （Aa）_t -，‑K（CR₁₅ R₁₆ ）_m- （CR₁₇ =CR₁₈ ）（CR₁₉ R₂₀ ）_n （Aa）_t （OCH₂ CH₂ ）_r ，‑K（CR₁₅ R₁₆ ）_m （NR₁₁ CO）（Aa）_t -（CR₁₉ R₂₀ ）_n （OCH₂ CH₂ ）_r -，‑K（CR₅ R₆ ）_m （Aa）_t （NR₂₁ CO）（CR₁₉ R₂₀ ）_n （OCH₂ CH₂ ）_r -，‑K（CR₁₅ R₁₆ ）_m -（OCO）（Aa）_t （CR₁₉ R₂₀ ）_n- （OCH₂ CH₂ ）_r -，‑K（CR₁₅ R₁₆ ）_m （OCNR₁ ₇ ）（Aa）_t （CR₁₉ R₂₀ ）_n- （OCH₂ CH₂ ）_r -，‑K（CR₁₅ R₁₆ ）_m （CO）（Aa）_t- （CR₁₉ R₂₀ ）_n （OCH₂ CH₂ ）_r -，‑K（CR₁₅ R₁₆ ）_m （NR₂₁ CO）（Aa）_t- （CR₁₉ R₂₀ ）_n -（OCH₂ CH₂ ）_r -，‑K（CR₁₅ R₁₆ ）_m- （OCO）（Aa）_t （CR₁₉ R₂₀ ）_n （OCH₂ CH₂ ）_r -，‑K（CR₁₅ R₁₆ ）_m- （OCNR₁ ₇ ）（Aa）_t -（CR₁₉ R₂₀ ）_n （OCH₂ CH₂ ）_r -，‑K-（CR₁₅ R₁₆ ）_m （CO）（Aa）_t （CR₁₉ R₂₀ ）_n （OCH₂ CH₂ ）_r -，‑K（CR₁ ₅ R₁ ₆ ）_m -苯基‑CO（Aa）_t （CR₁ ₇ R₁ ₈ ）_n -，‑K-（CR₁ ₅ R₁ ₆ ）_m -呋喃‑CO（Aa）_t （CR₁ ₇ R₁ ₈ ）_n -，‑K（CR₁ ₅ R₁ ₆ ）_m -惡唑-CO（Aa）_t （CR₁ ₇ R₁ ₈ ）_n -，‑K（CR₁ ₅ R₁ ₆ ）_m -噻唑基‑CO（Aa）_t- （CR₁ ₇ R₁ ₈ ）_n -，‑K（CR₁ ₅ R₁ ₆ ）_t -噻吩-CO（CR₁ ₇ R₁ ₈ ）_n -，‑K（CR₁ ₅ R₁ ₆ ）_t 咪唑-CO-（CR₁ ₇ R₁ ₈ ）_n -，‑K（CR₅ R₆ ）_t 嗎啉-CO（Aa）_t -（CR₁ ₇ R₁ ₈ ）_n -， ‑K（CR₁ ₅ R₁ ₆ ）_t -呱嗪-CO（Aa）_t- （CR₁ ₇ R₁ ₈ ）_n -，‑K（CR₁ ₅ R₁ ₆ ）_t -N‑甲基呱嗪-CO（Aa）_t （CR₁ ₇ R₁ ₈ ）_n -，‑K（CR₁ ₅ R₁₆ ）_m -（Aa）_t 苯基，‑K-（CR₁ ₅ R₁ ₆ ）_m- （Aa）_t 呋喃-，-K（CR₁ ₅ R₁ ₆ ）_m -惡唑-（Aa）_t -，‑K（CR₁ ₅ R₁ ₆ ）_m -噻唑基（Aa）_t -，‑K（CR₁ ₅ R₁ ₆ ）_m -噻吩-（Aa）_t -，‑K（CR₁ ₅ R₁ ₆ ）_m -咪唑（Aa）_t -，‑K（CR₁ ₅ R₁ ₆ ）_m -嗎啉（Aa）_t -，‑K（CR₁ ₅ R₁ ₆ ）_m 呱嗪（Aa）_t G，‑K（CR₅ R₆ ）_m -N-甲基呱嗪（Aa）_t -；其中Aa、m、n、R₁₃ 、R₁₄ 和R₁₅ 在前文已有定義； t和r獨立地為0 – 100；R₁₆ 、R₁₇ 、R₁₈ 、R₁₉ 和R₂₀ 獨立地選自H，鹵素，C₁ -C₈ 烷基或雜烷基，C₂ -C₈ 芳基、烯基、炔基、醚、酯、胺或醯胺，C₃ -C₈ 芳基，這些基團均可以被以下成分所置換：一個或多個鹵素、CN、NR₁₂ R₁₂ 、CF₃ 、OR₁₂ 、芳基、雜環、S（O）R₁₂ 、SO₂ R₁₂ 、-CO₂ H、-SO₃ H、-OR₁₂ 、-CO₂ R₁₂ 、-CONR₁₂ 、-PO₂ R₁₂ R₁₃ 、-PO₃ H 或P（O）R₁₂ R₁₂ R₁₃ ；K 是NR₁₂ 、-SS-、-C（=O）-、-C（=O）NH-、-C（=O）O-、-C=NH-O-、-C=N-NH-、-C（=O）NH-NH-、O、S、Se、B、Het （具有C₃ -C₁₂ 的雜環或雜芳環），或含有相同或不同的1-20個氨基酸的肽。

結合分子T，可以是目前已知的或即將被公開的，具有治療意義或者可以被生物學方式修飾的，能夠與細胞的部分相結合、複合或反應的任何種類的分子。結合分子單元將抗有絲分裂劑遞送至能與結合分子（T）反應的特定靶細胞群體。

細胞結合劑T包括但不限於，大分子量蛋白質，例如全長抗體（多克隆抗體和單克隆抗體）；單鏈抗體；抗體的片段，例如Fab、Fab'、F（ab'）₂ 、F_v [Parham、J. Immunol. 131，2895-2902（1983）]，由Fab表達文庫產生的片段、抗獨特性（抗-Id）抗體、CDR's；、以及以上分子的任一表位結合片段，能免疫特異性地結合癌細胞抗原、病毒抗原或微生物抗原；干擾素（如 I、II、III型）；多肽；淋巴因數如 IL-2、IL-3、IL-4、IL-6、GM-CSF、干擾素-γ（IFN-γ）；激素、如胰島素、TRH（促甲狀腺素釋放激素）、MSH（促黑素細胞激素）、類固醇激素如雄激素和雌激素；生長因數和集落刺激因數、如表皮生長因數（EGF）、粒細胞巨噬細胞集落刺激因數（GM-CSF）、轉化生長因數（TGF）、如TGFα、TGFβ、胰島素和胰島素樣生長因數（IGF-I、IGF-II）、G-CSF、M-CSF 和 GM‑CSF [Burgess、Immunology Today、5、155-158 （1984）]；牛痘生長因數（VGF）；成纖維細胞生長因數（FGF）；小分子量蛋白質；多肽；肽和肽激素、如鈴蟾肽、胃泌素、胃泌素釋放肽；血小板衍生的生長因數；白細胞介素和細胞因數、例如、白細胞介素-2（IL-2）、白細胞介素-6（IL-6）、白血病抑制因數、粒細胞巨噬細胞集落刺激因數（GM-CSF）；維生素、如葉酸；脫輔基蛋白和糖蛋白、如轉鐵蛋白（O'Keefe 等、J. Biol. Chem. 1985 260 932-937）；糖結合蛋白或脂蛋白、如凝集素；細胞營養傳遞分子；小分子抑制劑、如前列腺特異性膜抗原（PSMA）抑制劑和小分子酪氨酸激酶抑制劑（TKI）、非肽或任何其它細胞結合分子或物質、如生物活性聚合物（Dhar 等， Proc. Natl. Acad. Sci. 2008， 105， 17356-61），枝狀大分子（Lee 等， Nat. Biotechnol. 2005， 23， 1517-26； Almutairi 等； Proc. Natl. Acad. Sci. 2009， 106， 685-90），納米粒子（Liong 等， ACS Nano， 2008， 19， 1309-12； Medarova 等， Nat. Med. 2007， 13， 372-7； Javier 等， Bioconjugate Chem. 2008， 19， 1309-12），脂質體（Medinai 等， Curr. Phar. Des. 2004， 10， 2981-9）和病毒外殼（Flenniken 等， Viruses Nanotechnol. 2009， 327， 71-93）。一般而言，如果適當的單克隆抗體是可用的，則較佳單克隆抗體作為細胞表面結合劑。

較佳地，T是細胞結合劑或分子，選自抗體、單鏈抗體、與靶細胞結合的抗體片段、單克隆抗體、單鏈單克隆抗體、結合靶細胞的單克隆抗體片段、嵌合抗體、結合靶細胞的嵌合抗體片段、結構域抗體、結合靶細胞的結構域抗體片段、adnectin類抗體、DARPin蛋白、淋巴因數、激素、維生素、生長因數、集落刺激因數、營養轉運分子（轉鐵蛋白）和連接在白蛋白、聚合物、樹狀大分子、脂質體、納米粒子、囊泡或（病毒）衣殼上的細胞結合肽、蛋白質或小分子。

更佳地，細胞結合劑/分子T能夠抗以下細胞：腫瘤細胞、病毒感染細胞、微生物感染細胞、寄生蟲感染細胞、自身免疫細胞、活化的細胞、骨髓細胞、活化的T細胞、B細胞、或黑色素細胞。更具體地、細胞結合劑可以是任何能夠抗下列抗原或受體之一的試劑/分子： CD1、CD1a、CD1b、CD1c、CD1d、CD1e、CD2、CD3、CD3d、CD3e、CD3g、CD4、CD5、CD6、CD7、CD8、CD8a、CD8b、CD9、CD10、CD11a、CD11b、CD11c、CD11d、CD12w、CD13、CD14、CD15、CD16、CD16a、CD16b、CDw17、CD18、CD19、CD20、CD21、CD22、CD23、CD24、CD25、CD26、CD27、CD28、CD29、CD30、CD31、CD32、CD32a、CD32b、CD33、CD34、CD35、CD36、CD37、CD38、CD39、CD40、CD41、CD42、CD42a、CD42b、CD42c、CD42d、CD43、CD44、CD45、CD46、CD47、CD48、CD49b、CD49c、CD49c、CD49d、CD49f、CD50、CD51、CD52、CD53、CD54、CD55、CD56、CD57、CD58、CD59、CD60、CD60a、CD60b、CD60c、CD61、CD62E、CD62L、CD62P、CD63、CD64、CD65、CD65s、CD66、CD66a、CD66b、CD66c、CD66d、CD66e、CD66f、CD67、CD68、CD69、CD70、CD71、CD72、CD73、CD74、CD75、CD75s、CD76、CD77、CD78、CD79、CD79a、CD79b、CD80、CD81、CD82、CD83、CD84、CD85、CD85a、CD85b、CD85c、CD85d、CD85e、CD85f、CD85g、CD85g、CD85i、CD85j、CD85k、CD85m、CD86、CD87、CD88、CD89、CD90、CD91、CD92、CD93、CD94、CD95、CD96、CD97、CD98、CD99、CD100、CD101、CD102、CD103、CD104、CD105、CD106、CD107、CD107a、CD107b、CD108、CD109、CD110、CD111、CD112、CD113、CD114、CD115、CD116、CD117、CD118、CD119、CD120、CD120a、CD120b、CD121、CD121a、CD121b、CD122、CD123、CD123a、CD124、CD125、CD126、CD127、CD128、CD129、CD130、CD131、CD132、CD133、CD134、CD135、CD136、CD137、CD138、CD139、CD140、CD140a、CD140b、CD141、CD142、CD143、CD144、CD145、CDw145、CD146、CD147、CD148、CD149、CD150、CD151、CD152、CD153、CD154、CD155、CD156、CD156a、CD156b、CD156c、CD156d、CD157、CD158、CD158a、CD158b1、CD158b2、CD158c、CD158d、CD158e1、CD158e2、CD158f2、CD158g、CD158h、CD158i、CD158j、CD158k、CD159、CD159a、CD159b、CD159c、CD160、CD161、CD162、CD163、CD164、CD165、CD166、CD167、CD167a、CD167b、CD168、CD169、CD170、CD171、CD172、CD172a、CD172b、CD172g、CD173、CD174、CD175、CD175s、CD176、CD177、CD178、CD179、CD179a、CD179b、CD180、CD181、CD182、CD183、CD184、CD185、CD186、CDw186、CD187、CD188、CD189、CD190、CD191、CD192、CD193、CD194、CD195、CD196、CD197、CD198、CD199、CDw198、CDw199、CD200、CD201、CD202、CD202（a、b）、CD203、CD203c、CD204、CD205、CD206、CD207、CD208、CD209、CD210、CDw210a、CDw210b、CD211、CD212、CD213、CD213a₁ 、CD213a₂ 、CD214、CD215、CD216、CD217、CD218、CD218a、CD218、CD21b9、CD220、CD221、CD222、CD223、CD224、CD225、CD226、CD227、CD228、CD229、CD230、CD231、CD232、CD233、CD234、CD235、CD235a、CD235b、CD236、CD237、CD238、CD239、CD240、CD240ce、CD240d、CD241、CD242、CD243、CD244、CD245、CD246、CD247、CD248、CD249、CD250、CD251、CD252、CD253、CD254、CD255、CD256、CD257、CD258、CD259、CD260、CD261、CD262、CD263、CD264、CD265、CD266、CD267、CD268、CD269、CD270、CD271、CD272、CD273、CD274、CD275、CD276、CD277、CD278、CD279、CD281、CD282、CD283、CD284、CD285、CD286、CD287、CD288、CD289、CD290、CD291、CD292、CD293、CD294、CD295、CD296、CD297、CD298、CD299、CD300、CD300a、CD300b、CD300c、CD301、CD302、CD303、CD304、CD305、CD306、CD307、CD307a、CD307b、CD307c、CD307d、CD307e、CD307f、CD308、CD309、CD310、CD311、CD312、CD313、CD314、CD315、CD316、CD317、CD318、CD319、CD320、CD321、CD322、CD323、CD324、CD325、CD326、CD327、CD328、CD329、CD330、CD331、CD332、CD333、CD334、CD335、CD336、CD337、CD338、CD339、CD340、CD341、CD342、CD343、CD344、CD345、CD346、CD347、CD348、CD349、CD350、CD351、CD352、CD353、CD354、CD355、CD356、CD357、CD358、CD359、CD360、CD361、CD362、CD363、CD364、CD365、CD366、CD367、CD368、CD369、CD370、CD371、CD372、CD373、CD374、CD375、CD376、CD377、CD378、CD379、CD381、CD382、CD383、CD384、CD385、CD386、CD387、CD388、CD389、CRIPTO、CRIPTO、CR、CR1、CRGF、CRIPTO、CXCR5、LY64、TDGF1、4-1BB、APO2、ASLG659、BMPR1B、4-1BB、5AC、5T4 （Trophoblast糖蛋白，TPBG，WNT-活化抑制因數1或WAIF1），腺癌抗原，AGS-5，AGS-22M6，啟動素受體激酶1，AFP，AKAP-4，ALK，α 整合素，αvβ6，氨基肽酶N，澱粉樣蛋白β，雄激素受體，促血管新生蛋白因數2，促血管新生蛋白因數3，膜聯蛋白A1，炭疽毒素保護性抗原，抗轉移蛋白受體，AOC3 （VAP-1）， B7-H3，炭疽桿菌，BAFF （B細胞啟動因數），B淋巴瘤細胞，bcr-abl，蛙皮素，BORIS，C5，C242抗原，CA125（糖抗原125，MUC16），CA-IX（或CAIX，碳酸酐酶9）， CALLA，CanAg，犬紅斑狼瘡IL31，碳酸酐酶IX，心肌肌凝蛋白，CCL11（C-C 片段趨化因數11）， CCR4 （C-C趨化因數受體4）， CCR5， CD3E （ε）， CEA（癌胚抗原），CEACAM3，CEACAM5（癌胚抗原），CFD（因數D），Ch4D5，膽囊收縮素2 （CCK2R）， CLDN18 （Claudin-18），CLDN18.1 (Claudin-18.1) ，CLDN18.2 (Claudin-18.2)，cMet，叢生因數A，CRIPTO ，FCSF1R（集落刺激因數1受體，CD115）， CSF2（集落刺激因數2，粒細胞-巨噬細胞集落刺激因數（GM-CSF）），CSP4， CTLA4（細胞毒性T淋巴細胞相關蛋白4），CTAA16.88腫瘤抗原，CXCR4，C-X-C趨化因數受體4，環狀ADP核糖核酸酶，細胞週期蛋白B1，CYP1B1，巨細胞病毒，巨細胞病毒糖蛋白B，Dabigatran，DLL3 （類Δ配位體 3）， DLL4 （類Δ配位體 4），DPP4（雙肽-肽酶4），DR5（死亡受體5），大腸桿菌shiga毒素類型-1，大腸桿菌shiga毒素類型-2，ED-B，EGFL7 （類EGF結構域蛋白7）， EGFR，EGFRII，EGFRvIII，內皮因數，內皮素B受體，內毒素，EpCAM（上皮細胞粘附分子），EphA2，Episialin，ERBB2（表皮生長因數受體2），ERBB3，ERG （TMPRSS2 ETS融合基因），大腸桿菌，ETV6-AML，FAP（成纖維細胞活化蛋白α），FCGR1，甲胎蛋白，纖維蛋白II β鏈，纖連蛋白額外結構域-B，FOLR（葉酸受體），葉酸受體α，葉酸水解酶，Fos相關抗原1，呼吸道合胞病毒的F蛋白，捲曲的受體，岩藻糖GM1，GD2神經節苷脂，G-28（細胞表面抗原糖脂），GD3獨特型，GloboH，Glypican 3，N-羥乙醯神經氨酸，GM3，GMCSF受體α鏈，生長分化因數，GP100，GPNMB（跨膜糖蛋白NMB），GUCY2C（鳥苷酸環化酶2 C），鳥苷酸環化酶C（GC-C），腸鳥苷酸環化酶，鳥苷酸環化酶C受體，熱穩定腸毒素受體（hSTAR），熱休克蛋白，血凝素，乙肝表面抗原，乙型肝炎病毒，HER1（人類表皮生長因數受體1），HER2，HER2/neu，HER3（ERBB-3），IgG4，HGF/SF（肝細胞生長因數/分散因數），HHGFR，HIV-1，組蛋白複合物，HLA-DR（人類白細胞抗原），HLA-DR10，HLA-DRB，HMWMAA，人類絨毛膜促性腺激素，HNGF,人類分散因數受體激酶，HPV E6/E7，Hsp90，hTERT，ICAM-1（細胞間粘附分子1），獨特型，IGF1R（IGF – 1，類胰島素生長因數1受體），IGHE，IFN-γ，流感血凝素，IgE，IgE Fc區，IGHE，白細胞介素（包括IL–1，IL-2，IL–3，IL–4，IL-5，IL–6，IL-6R，IL-7，IL-8，IL-9，IL–10，IL-11，IL–12，IL-13，IL-15，IL-17，IL-17A，IL-18，IL-19，IL-20，IL-21，IL-22，IL-23，IL-27或IL-28），IL31RA，ILGF2（類胰島素生長因數2），整合蛋白（α4、αIIbβ3、αvβ3、α4β7、α5β1、α6β4、α7β7、αllβ3、α5β5、αvβ5），干擾素γ誘導蛋白質，ITGA2，ITGB2，KIR2D，Kappa Ig，LCK，Le，Legumain，Lewis-Y抗原，LFA-1（淋巴細胞功能相關抗原1，CD11a）， LHRH，LINGO-1，脂磷壁酸，LIV1A，LMP2，LTA，MAD-CT-1，MAD-CT-2，MAGE-1，MAGE-2，MAGE-3，MAGE A1，MAGE A3，MAGE 4，MART1，MCP-1，MIF（巨噬細胞遷移抑制因數，或糖基抑制因數（GIF）），MS4A1（跨膜4結構域亞家族A成員1），MSLN （間皮素），MUC1（粘蛋白1，細胞表面相關（MUC1）或多態性上皮粘蛋白（PEM））， MUC1-KLH，MUC16 （CA125）， MCP1（單核細胞趨化蛋白1），MelanA/MART1，ML-IAP，MPG，MS4A1， MYCN，髓磷脂相關糖蛋白，Myostatin，NA17，NARP-1，NCA-90（粒細胞抗原），Nectin-4 （ASG-22ME），NGF，神經細胞凋亡調控蛋白酶1，NOGO-A，Notch受體，核仁素，Neu致癌基因產物，NY-BR-1， NY-ESO-1，OX-40，OxLDL（氧化低密度脂蛋白），OY-TES1，P21，p53非突變體，P97，PAP，抗（N-羥乙醯神經氨酸）抗體結合部位，PAX3，PAX5，PCSK9，PDCD1（PD-1、程式性細胞死亡蛋白1），PDGF-Rα （α血小板源生長因數受體），PDGFR-β，PDL-1，PLAC1，類PLAP睾丸鹼性磷酸酶，血小板衍生生長因數受體β，磷酸鈉聯合轉運體，PMEL 17，聚唾液酸，蛋白酶3 （PR1），前列腺癌，PS（磷脂醯絲氨酸），前列腺癌細胞，銅綠假單胞菌，PSMA，PSA，PSCA，狂犬病病毒糖蛋白，RHD（Rh多肽1（RhPI），Rhesus因數，RANKL，RhoC，Ras突變，RGS5，ROBO4，呼吸道合胞病毒，RON，ROR1，肉瘤易位中斷點，SART3，Sclerostin，SLAMF7（SLAM成員7），Selectin P，SDC1（多配位體蛋白聚糖1），系統性紅斑狼瘡（a），生長調節素C，SIP（1-磷酸鞘氨醇），生長激素抑制素，精子蛋白17，SSX2，STEAP1（6-跨膜上皮前列腺抗原1），STEAP2，STn，TAG-72（腫瘤相關糖蛋白），存活素，T細胞受體，T細胞跨膜蛋白，TEM1（腫瘤血管內皮標記1），TENB2，Tenascin C（TN-C），TGF-α，TGF-β（轉化生長因數β），TGF-β1，TGF-β2（轉化生長因數2），Tie（CD202b），Tie2，TIM-1（CDX-014），Tn，TNF，TNF-α，TNFRSF8，TNFRSF10B（腫瘤壞死因數受體超家族成員10 B），TNFRSF13B（腫瘤壞死因數受體超家族成員13B），TPBG（滋養細胞糖蛋白），TRAIL-R1（TNF相關壞死誘導配位體受體1），TRAILR2（死亡受體5 （DR5）），腫瘤相關的鈣信號傳感子2，腫瘤特異糖基化的MUC1，TWEAK受體，TYRP1（糖蛋白75），TRP-1 （Trop1），TRP-2 （Trop2），酪氨酸酶，VCAM-1， VEGF，VEGF-A，VEGF-2， VEGFR-1，VEGFR-2，vimentin，WT1，XAGE 1，表達胰島素生長因數受體的細胞，或表達表皮生長因數受體的細胞。

在與抗有絲分裂劑偶聯之前，藉由使用含雙功能團的連接子修飾，細胞結合分子可以被修飾，連接更具特異性的多肽，蛋白，藥物分子或其他功能性分子。這些含雙功能團的連接子包括胺-非選擇性功能團的連接子（琥珀醯亞胺（NHS）-二氮環丙烯（SDA），琥珀醯亞胺酯-疊氮化物），胺-巰基的連接子（NHS酯-馬來醯亞胺，NHS酯-吡啶二巰基，NHS酯-鹵代乙醯基），巰基-糖的連接子（馬來醯亞胺-醯肼，吡啶二巰基-醯肼），羥基-巰基的連接子（異氰酸酯-馬來醯亞胺），胺-DNA的連接子（NHS酯/補骨脂素）和胺-羧基的連接子（碳二亞胺）等。

在使用琥珀醯亞胺（NHS）-二氮環丙烯（SDA）連接子的修飾方法中，連接子上的NHS酯可以首先和細胞結合分子骨架上的胺反應（在pH為6-9的緩衝溶液裡），形成一個穩定的醯胺鍵。然後，藉由用波長為330-370nm的長波照射，二氮環丙烯被活化並產生卡賓活性中間體，該中間體和特異性多肽、蛋白或者其他功能性分子上的胺反應後即可完成連接。這兩步反應的次序也可以改變為：先讓功能性分子上的胺和連接子上的NHS酯反應，然後再在光（330-370 nm）的照射下與細胞結合分子進行化學反應。琥珀醯亞胺（NHS）-二氮環丙烯（SDA）連接子也可以是可斷裂的（就像SDAD連接子一樣，內部包含雙硫鍵）。

在使用NHS酯/疊氮化物連接子的修飾方法中， NHS酯可以首先和細胞結合分子骨架上的胺在pH6-9的緩衝溶液裡反應，形成一個穩定的醯胺鍵。然後，藉由Huisgen疊氮-炔環加成反應，特定的多肽、蛋白質或其他功能性分子上的炔基和交聯劑另一端的疊氮進行反應，並形成1,2,3-三唑（點擊化學）。另外， NHS酯也可以先與功能性分子上的胺在pH 為6-9的緩衝溶液裡反應，形成穩定的醯胺鍵，然後再用結合體上的炔基與連接子另一端的疊氮基團進行Huisgen疊氮-炔環加成反應，並形成1,2,3-三唑連接子。

在使用胺-巰基連接子的修飾方法中， NHS酯可以首先和細胞結合分子骨架上的胺在pH=6~9的緩衝溶液裡反應，形成一個穩定的醯胺鍵。然後，在pH為4.5~8.5 的條件下，更具特異性的多肽、蛋白質或其他功能性分子上的巰基和連接子另一端的馬來醯亞胺，吡啶二巰基或鹵代乙醯基反應，並形成硫醚或雙硫鍵。偶聯反應的次序也可以根據情況改變。例如，功能性分子上的氨基也可以首先和連接子反應生成醯胺鍵，然後再與細胞結合分子上的巰基進行反應。在pH為4.5~7.0的條件下，功能性分子上的巰基可以先與連接子反應形成硫醚或者雙硫鍵，然後再在pH為6~9的條件下與細胞結合分子上的氨基反應形成醯胺鍵。

在使用巰基-糖連接子的修飾方法中，在pH 為4.5~8的條件下，細胞結合分子上的巰基可以首先與馬來醯亞胺或吡啶二巰基反應形成硫醚或雙硫鍵。然後，功能性分子上的羰基（醛/酮）再與醯肼反應生成腙鍵。除此以外，在pH為4.5~8的條件下，功能分子上的巰基也可以首先和連接子反應形成硫醚或者雙硫鍵，然後再與細胞結合分子上的糖、氧化糖或者羰基（醛/酮）反應生成腙鍵。

在使用羥基-巰基連接子的修飾方法中，在pH 為6~8的條件下，細胞結合分子上的巰基可以首先和馬來醯亞胺或者吡啶二巰基反應生成硫醚或雙硫鍵。然後，在pH為8~9的條件下，再讓功能性分子上的羥基與異氰酸酯反應生成氨基甲酸酯。另外，功能性分子上的巰基也可以先和連接子在pH 為6~8的條件下反應生成硫醚或雙硫鍵。然後，再與細胞結合分子上的羥基在pH為8~9的條件反應生成氨基甲酸酯。

在本發明的另一個態樣，用於本發明中的抗體的生產包括體內或體外方法或其組合。生產多克隆抗受體肽抗體的方法在本領域是公知的，例如美國專利4,493,795 中所述。通常是藉由將骨髓瘤細胞，與已經用所需抗原免疫的小鼠的脾細胞融合，來製備單克隆抗體（Köhler，G.； Milstein，C.Nature 1975，256： 495-497）。詳細的過程在“Antibodies--A Laboratory Manual，Harlow and Lane，eds.，Cold Spring Harbor Laboratory Press，New York （1988）”中有描述，此處引作參考。具體地，可以用目標抗原，如從靶細胞、完整的病毒、滅活的全病毒和病毒蛋白質分離的抗原，來免疫小鼠，大鼠，倉鼠或任何其它哺乳動物而製備。通常使用聚乙二醇（PEG）6000將脾細胞與骨髓瘤細胞融合。藉由對HAT（次黃嘌呤-氨基蝶呤-胸腺嘧啶）的敏感性來篩選融合細胞。藉由它們免疫反應特異性受體的能力或抑制靶細胞上的受體活性的能力，可以確定實施本發明的單克隆抗體的雜交瘤。

用於本發明中的單克隆抗體的生產在單克隆雜交瘤培養物裡進行，其中包含營養培養基和能分泌具有合適抗原特異性的抗體分子的雜交瘤。培養物在合適的條件下保持足夠長的一段時間，以使雜交瘤將抗體分子分泌到培養基。然後收集含有抗體的培養基。使用藉由公知的技術進一步分離抗體分子，如蛋白質A親和層析，陰離子、陽離子、疏水或體積排阻層析法（特別是藉由蛋白質A親和層析和體積排阻層析法），離心，差異溶解度或任何其他純化蛋白質的標準技術。

可用於製備這些組合物的培養基在本領域中是公知的，並且可商業獲得，也包括合成培養基。一個合成的培養基的例子是Dulbecco最少必需培養基（DMEM； Dulbecco et al.，Virol. 1959,8，396 ）補充有4.5gm/l葡萄糖，20mm穀氨醯胺，20%胎牛血清，幾個ppm的Cu，Mn，Fe或Zn等重金屬或/和重金屬鹽，以及消泡劑如聚氧乙烯-聚氧丙烯嵌段共聚物。

另外，生產抗體的細胞系也可以藉由融合以外的技術來獲得，例如將成瘤DNA移植至B淋巴細胞，或成瘤病毒轉染，如愛潑斯坦-巴爾病毒（EBV，也稱為人類皰疹病毒4（HHV-4））或卡波西肉瘤相關皰疹病毒（KSHV），見於美國專利4,341,761； 4,399,121； 4,427,783； 4,444,887； 4,451,570； 4,466,917； 4,472,500； 4,491,632； 4,493,890。單克隆抗體也可以藉由含末端羧基的抗受體肽或肽製備，這些都為如本領域所公知，可參考文獻 Niman et al.，Proc. Natl. Acad. Sci. USA，1983，80： 4949-4953； Geysen et al.，Proc. Natl. Acad. Sci. USA，1985，82： 178-182； Lei et al. Biochemistry 1995，34（20）： 6675-6688。通常，作為產生抗受體肽單克隆抗體免疫原，抗受體肽或肽同系物可以單獨使用或連接至免疫原性載體。

用作本發明中結合分子的單克隆抗體也可以藉由其他本領域已知的技術獲得。特別有用的是製造完整人源抗體的方法。一種方法是噬菌體顯示技術，它使用親和富集的方式，可用於選擇能與抗原特異性結合的人源抗體。噬菌體展示技術在文獻中也有詳細描述，噬菌體展示庫的構建和篩選在本領域也是眾所周知的，可參考文獻Dente et al，Gene. 1994,148（1）：7-13； Little et al，Biotechnol Adv. 1994,12（3）：539-55； Clackson et al.，Nature 1991,352：264-628； Huse et al.，Science 1989,246：1275-1281。

藉由與非人如小鼠細胞融合的雜交瘤產生的單克隆抗體，可以被人源化以避免產生人類抗小鼠抗體。常見的抗體人源化方法是互補決定區移植技術，這些方法也已被詳細地描述，如美國專利5,859,205 和6,797,492； Liu et al，Immunol Rev. 2008，222：9-27； Almagro et al，Front Biosci. 2008,13： 1619-33； Lazar et al，Mol Immunol. 2007,44（8）：1986-98； Li et al，Proc. Natl. Acad. Sci. U S A. 2006,103（10）：3557-62，此處引為參考。完整人抗體也可以藉由用免疫原免疫攜帶大部分的人類球蛋白重輕鏈的轉基因小鼠、兔子、猴子或其他哺乳動物來製備。這些老鼠的例子有：Xenomouse （Abgenix/Amgen），HuMAb-Mouse （Medarex/BMS）和VelociMouse （Regeneron），參考美國專利 6,596,541，6,207,418，6,150,584，6,111,166，6,075,181，5,922,545，5,661,016，5,545,806，5,436,149 和 5,569,825。用於人類治療時，小鼠的可變區域和人的恒定區域也可以被融合，成為“嵌合抗體”，它在人類身上的免疫原性顯著低於小鼠單抗（Kipriyanov et al，MolBiotechnol. 2004,26：39-60 ； Houdebine，CurrOpinBiotechnol. 2002,13：625-9）。另外，在抗體可變區域的定點誘變能導致抗體具有較高的親和性和特異性（Brannigan et al，Nat Rev Mol Cell Biol. 2002,3：964-70； Adams et al，J Immunol Methods. 1999，231：249-60），抗體恒定區域的改變可以提高其介導結合和細胞毒性的效應功能。

惡性腫瘤細胞抗原的免疫特異性抗體也可以從商業途徑獲得或藉由任何已知方法生產，例如化學合成或重組表達技術。對惡性腫瘤細胞抗原具有免疫特異性的抗體的核苷酸序列編碼可以商業獲得，例如從GenBank資料庫或類似資料庫，文獻出版物獲得，或從常規克隆和測序得到。

除了抗體之外，與目標細胞上的表位元或相應的受體相互作用（結合、阻斷、靶向或其他類型作用）的一種肽或蛋白質也可以作為結合分子。這些肽或蛋白質可能是任何隨機的肽或蛋白質，它們對表位或相應的受體有親和力，不一定非得是免疫球蛋白家族成員。這些肽可以藉由類似噬菌體顯示抗體的技術分離出來（Szardenings，J Recept Signal Transduct Res. 2003； 23（4）：307-49）。從隨機肽庫中獲得的肽可以同抗體和抗體片段類似地被使用。肽或蛋白質結合分子可以偶聯或連接至大分子或其他物質，包括但不限於白蛋白、聚合物、脂質體、納米粒子、樹形分子，只要這樣的連接能保留肽或蛋白質的抗原結合特異性。

在治療癌症、自身免疫性疾病和/或傳染性疾病的偶聯物上，和藥物分子藉由本發明的連接體連接的抗體的例子包括，但不限於3F8（抗GD2），阿巴單抗（抗CA-125），阿昔單抗（抗CD41（整聯蛋白α-IIb），阿達木單抗（抗TNF-α），Adecatumumab（抗EpCAM，CD326），阿非莫單抗（抗TNF-α）， Afutuzumab（抗CD20），Alacizumab 單抗（抗VEGFR2），ALD518（抗IL-6），Alemtuzumab（Campath，MabCampath，抗CD52），Altumomab（抗CEA），Anatumomab（抗TAG-72），Anrukinzumab （IMA-638，抗-IL-13），Apolizumab （抗-HLA-DR），阿奇單抗（抗-CEA），阿塞珠單抗（抗-L-選擇蛋白CD62L），Atlizumab （tocilizumab，Actemra，RoActemra，抗-IL-6 受體），Atorolimumab （抗-Rhesus 因數），Bapineuzumab（抗-β澱粉樣蛋白），Basiliximab（Simulect，抗CD25（IL-2受體的α鏈）），Bavituximab（抗磷脂醯絲氨酸），Bectumomab （LymphoScan，抗-CD22），貝利單抗（Benlysta，LymphoStat-B，抗BAFF），Benralizumab（抗CD125），Bertilimumab（抗CCL11（eotaxin-1）），Besilesomab（Scintimun，抗CEA相關抗原），貝伐單抗（Avastin，抗VEGF-A），Biciromab（FibriScint，抗纖維蛋白IIβ鏈），Bivatuzumab（抗-CD44 v6），Blinatumomab（BiTE，抗CD19），Brentuximab（cAC10，抗-CD30 TNRSF8），Briakinumab（抗IL-12，IL-23），Canakinumab（Ilaris，抗IL-1），Cantuzumab （C242，抗CanAg），Capromab，Catumaxomab（Removab，抗EpCAM，抗CD3），CC49（抗TAG-72），Cedelizumab（抗CD4），Certolizumab 單抗（Cimzia抗TNF-α），西妥昔單抗（愛必妥，IMC-C225，抗EGFR），Citatuzumab bogatox（抗EpCAM），Cixutumumab（抗IGF-1），Clenoliximab（抗CD4），Clivatuzu-mab（抗MUC1），Conatumumab（抗TRAIL-R2），CR6261（抗流感A血凝素），Dacetuzumab（抗CD40），Daclizumab（Zenapax，抗CD25（IL-2受體α鏈）），Daratumumab（抗CD38（環ADP核糖水解酶），Denosumab（Prolia，抗RANKL），Detumomab（抗B淋巴瘤細胞），Dorlimomab，Dorlixizumab，Ecromeximab（抗GD3神經節苷脂），Eculizumab（Soliris，抗-C5），Edobacomab（抗內毒素），Edrecolomab（Panorex，MAb17-1A，抗-EpCAM），Efalizumab（Raptiva，抗LFA-1（CD11a）），Efungumab（Mycograb，抗Hsp90），Elotuzumab（抗SLAMF7），Elsilimomab（抗IL-6），Enlimomab 單抗（抗ICAM-1（CD54）），Epitumomab（抗episialin），依他珠單抗（抗-CD22），Erlizumab（抗-ITGB2（CD18）），Ertumaxomab（Rexomun，抗HER2/neu，CD3），依他拉單抗（Abegrin，抗整聯蛋白αvβ3），Exbivirumab（抗乙肝表面抗原），Fanolesomab（NeutroSpec，抗CD15），Faralimomab（抗干擾素受體），Farletuzumab（抗葉酸受體1），Felvizumab（抗呼吸道合胞病毒），Fezakinumab （抗-IL-22），Figitumumab（抗-IGF-1受體），Fontolizumab（抗-IFN-γ），Foravirumab（抗狂犬病病毒糖蛋白），Fresolimumab（抗TGF-β），Galiximab（抗CD80），Gantenerumab（抗β澱粉樣蛋白），Gavilimomab（抗CD147（basigin）），Gemtuzumab（抗CD33），Girentuximab（抗碳酸酐酶9），Glembatumumab （CR011，抗GPNMB），Golimumab（Simponi，抗-TNF-α），Gomiliximab（抗-CD23（IgE受體）），抗-HLA-DR抗體，Ibalizumab（抗-CD4），Ibritumomab（抗CD20），Igovomab（Indimacis-125，抗CA-125），Imciromab（Myoscint，抗心肌肌凝蛋白），Infliximab（Remicade，抗TNF-α），Intetumumab（抗CD51），Inolimomab（抗CD25（IL-2受體α鏈）），伊珠單抗（抗-CD22），Ipilimumab（抗CD152），Iratumumab（抗CD30（TNFRSF8）），Keliximab（抗-CD4），Labetuzumab（CEA-Cide，抗CEA），Lebrikizumab （抗IL-13），Lemalesomab（抗NCA-90（粒細胞抗原）），Lerdelimumab（抗TGFβ2），Lexatumumab（抗TRAIL-R2），Libivirumab（抗乙肝表面抗原），Lintuzumab（抗CD33），魯米木單抗（抗CD40），魯米單抗（抗CD23（IgE受體），Mapatumumab（抗TRAIL-R1），馬西莫單抗（抗T-細胞受體），馬妥珠單抗（抗EGFR），Mepolizumab（Bosatria，抗IL-5），Metelimumab（抗TGFβ1），Milatuzumab（抗CD74），Minretumomab（抗TAG-72），Mitumomab（BEC-2，抗GD3神經節苷脂），Morolimumab（抗恒河猴因數），Motavizumab（Numax，抗呼吸道合胞病毒），Muromonab-CD3（Orthoclone OKT3，抗CD3），Nacolomab（抗C242），Naptumomab （抗5T4），那他珠單抗（Tysabri，抗整聯蛋白α4），奈巴單抗（抗內毒素），Necitumumab（抗EGFR），Nerelimomab（抗-TNF-α），Nimotuzumab（Theracim，Theraloc，抗-EGFR），Nofetumomab，Ocrelizumab （抗CD20），奧利木單抗（Afolimomab，抗LFA-1（CD11a）），Ofatumumab（Arzerra，抗CD20），Olaratumab（抗PDGF-Rα），Omalizumab（Xolair，抗IgE Fc區） Oportuzumab（抗EpCAM），Oregovomab（OvaRex，抗CA-125），Otelixizumab（抗CD3），Pagibaximab（抗脂磷壁酸），Palivizumab（Synagis，Abbosynagis，抗呼吸道合胞病毒），帕尼單抗（Vectibix， ABX-EGF，抗EGFR），Panobacumab（抗銅綠假單胞菌（Pseudomonas aeruginosa）），帕考珠單抗（抗IL-4），Pemtumomab（Theragyn，抗MUC1），Pertuzumab（Omnitarg，2C4，抗HER2/neu），Pexelizumab（抗C5），Pintumomab（抗腺癌抗原），Priliximab（抗-D4），Pritumumab（抗波形蛋白），PRO140（抗-CCR5） Racotumomab（1E10，抗-N-羥乙醯神經氨酸（NeuGc，NGNA）-神經節苷脂GM3）），Rafivirumab（抗狂犬病病毒糖蛋白），Ramucirumab（抗VEGFR2），Ranibizumab（Lucentis，抗VEGF-A），Raxibacumab （抗炭疽毒素，保護性抗原），Regavirumab（抗巨細胞病毒糖蛋白B），Reslizumab（抗-IL-5），Rilotumumab（抗-HGF），Rituximab（MabThera，Rituxanmab，抗-CD20），Robatumumab（抗-IGF-1受體），Rontalizumab（抗IFN-α），Rovelizumab（LeukAr-rest，抗CD11，CD18），Ruplizumab（Antova，抗CD154（CD40L）），Satumomab（抗TAG-72），Sevirumab （抗巨細胞病毒），Sibrotuzumab（抗FAP），西法木單抗（抗IFN-α），Siltuximab（抗IL-6），Siplizumab（抗CD2），Smart MI95（抗CD33），Solanezumab（抗β澱粉狀蛋白），Sonepcizumab（抗鞘氨醇-1-磷酸），Sontuzumab（抗-episialin），Stamulumab（抗-myostatin），Sulesomab（LeukoScan，抗NCA-90（粒細胞抗原）），Tacatuzumab（抗α甲胎蛋白），Tadocizumab（抗整聯蛋白αIIbβ3），Talizumab（抗IgE），Tanezumab （anti-NGF），Taplitumomab （抗CD19），Tefibazumab（Aurexis，（抗凝聚因數A）），Telimomab，Tenatumomab（抗腱生蛋白C），Teneliximab（抗CD40），Teplizumab（抗CD3），TGN1412（抗CD28），Ticilimumab（Tremelimumab，抗-CTLA-4），Tigatuzumab（抗TRAIL-R2），TNX-650（抗IL-13），Tocilizumab（Atlizumab，Actemra，RoActemra， IL-6受體），Toralizumab（抗CD154（CD40L）），Tositumomab（抗CD20），曲妥珠單抗（赫賽汀，抗HER2/neu），Tremelimumab（抗CTLA-4），Tucotuzumab celmoleukin（抗EpCAM ），Tuvirumab（抗乙型肝炎病毒），Urtoxazumab（抗大腸桿菌），Ustekinumab （Stelara，抗-IL-12，IL-23），Vapaliximab（抗-AOC3（VAP-1）），維多珠單抗（抗整聯蛋白α4β7），維妥珠單抗（抗CD20），Vepalimomab（抗AOC3（VAP-1）），Visilizumab（Nuvion，抗CD3），Vitaxin（抗血管整合素avb3），Volociximab（抗整聯蛋白α5β1），Votumumab（HumaSPECT，抗腫瘤抗原CTAA16.88），Zalutumumab（HuMax-EGFR，Zanolimumab（HuMax-CD4，抗-CD4），Ziralimumab（抗-CD147（basigin）），Zolimomab（抗-CD5），依那西普（Enbrel®），Alefacept（Amevive®），Abatacept（Orencia®），Rilonacept（Arcalyst），14F7 （抗IRP-2（鐵調節蛋白2）），14G2a（抗GD2神經節苷脂，源於Nat.Cancer Inst.，治療黑素瘤和實體瘤），J591（抗-PSMA，源於Weill Cornell醫學院，治療前列腺癌），225.28S （抗HMW-MAA（高分子量黑素瘤相關抗原），Sorin Radiofarmaci SRL（源於義大利米蘭，治療黑色素瘤），COL-1（抗CEACAM3，CGM1，源於Nat Cancer Inst. 治療結腸直腸癌和胃癌），CYT-356（Oncoltad®，治療前列腺癌），HNK20（OraVax Inc.治療呼吸道合胞病毒感染），ImmuRAIT（源於Immunomedics，治療NHL），Lym-1（抗HLA-DR10，Peregrine Pharm），MAK-195F（抗TNF（腫瘤壞死因數，TNFA，TNF-α，TNFSF2，源於Abbott/Knoll，治療膿毒症中毒性休克），MEDI-500 （T10B9，抗CD3，TRαβ（T細胞受體α/β），源於MedImmune Inc，用於移植物抗宿主疾病病），RING SCAN （抗TAG 72（腫瘤相關糖蛋白72），源於Neoprobe Corp.，用於乳腺癌，結腸癌和直腸癌），Avicidin（抗EPCAM（上皮細胞粘附分子）），抗-TACSTD1（腫瘤相關鈣信號轉導1），抗GA733-2（胃腸腫瘤相關蛋白2），抗EGP-2（上皮糖蛋白2），抗KSA，KS1/4抗原，M4S，腫瘤抗原17-1A，CD326（源於NeoRx公司，治療結腸癌，卵巢癌，前列腺癌和NHL），LymphoCide（源於Immunomedics），Smart ID10（源於Protein Design Labs），Oncolym （源於Techniclone Inc），Allomune（源於BioTransplant），抗VEGF（源於Genentech），CEAcide（源於Immunomedics），IMC-1C11（源於ImClone Systems）和Cetuximab（源於ImClone）。

其他可作為細胞結合分子/配位體的抗體，包括但不限於，以下抗原的抗體：氨肽酶N（CD13），膜聯蛋白A1，B7-H3（CD276，各種癌症），CA125（卵巢癌），CA15-3（各種癌症），CA19-9（各種癌症），L6（各種癌症），路易士Y（各種癌症），路易士X（各種癌症），甲胎蛋白（各種癌症），CA242（結直腸癌），胎盤鹼性磷酸酶（各種癌症），前列腺特異抗原（前列腺癌），前列腺酸磷酸酶（前列腺癌），表皮生長因數（各種癌症），CD2（霍奇金症，NHL淋巴瘤，多發性骨髓瘤），CD3 ε （T細胞淋巴瘤，肺癌，乳腺癌，胃癌，卵巢癌，自身免疫性疾病，惡性腹水），CD19 （B細胞惡性腫瘤），CD20（非霍奇金淋巴瘤），CD22（白血病，淋巴瘤，多發性骨髓瘤，SLE），CD30（霍奇金淋巴瘤），CD33（白血病，自身免疫性疾病），CD38（多發性骨髓瘤），CD40（淋巴瘤，多發性骨髓瘤，白血病（CLL）），CD51（轉移性黑色素瘤，肉瘤），CD52（白血病），CD56（小細胞肺癌，卵巢癌，梅克細胞癌，以及液體腫瘤，多發性骨髓瘤），CD66e（各種癌症），CD70（轉移性腎細胞癌和非霍奇金淋巴瘤），CD74（多發性骨髓瘤），CD80（淋巴瘤），CD98（各種癌症），粘液素（各種癌症），CD221（實體腫瘤）、CD227（乳腺癌、卵巢癌）、CD262 （非小細胞肺癌及其他癌症）、CD309（卵巢癌）、CD326（實體腫瘤）、CEACAM3（結腸直腸癌、胃癌）、CEACAM5（癌胚抗原，CEA，CD66e）（乳腺，結直腸癌和肺癌），DLL4（Δ-樣4），EGFR（表皮生長因數受體，各種癌症），CTLA4（黑色素瘤），CXCR4 （CD184，血液腫瘤，實體腫瘤），Endoglin （CD105，實體瘤），EPCAM（上皮細胞粘附分子，膀胱癌，頭頸癌，結腸癌，NHL前列腺癌，卵巢癌），ERBB2（表皮生長因數受體2，肺癌，乳腺癌，前列腺癌），FCGR1（自身免疫性疾病），FOLR（葉酸受體，卵巢癌），GD2神經節苷（各種癌症），G-28（細胞表面抗原糖脂質，黑色素瘤），GD3獨特型（各自癌症），熱休克蛋白（各種癌症），HER1（肺癌，胃癌），HER2（乳腺癌，肺癌和卵巢癌），HLA-DR10 （NHL）， HLA-DRB （NHL，B細胞白血病），人絨毛膜促性腺激素（各種癌症），IGF1R（類胰島素生長因數1受體，實體瘤，血癌），IL-2受體（白介素2受體，T細胞白血病和淋巴瘤），IL-6R（白介素6受體，多發性骨髓瘤，風濕性關節炎，Castleman病，白細胞介素6依賴腫瘤），整合蛋白（αvβ3、α5β1、α6β4、αllβ3、α5β5、αvβ5，各種癌症），MAGE-1（各種癌症），MAGE-2（各種癌症），MAGE-3（各種癌症），MAGE 4（各種癌症），抗轉鐵蛋白受體（各種癌症），p97（黑色素瘤），MS4A1（跨膜4結構域亞家族A成員1，非霍奇金B細胞淋巴瘤，白血病），MUC1或MUC1-KLH（乳腺癌、卵巢癌、子宮頸癌、支氣管癌和α胃腸道癌），MUC16 （CA125）（卵巢癌），CEA（結直腸癌），gp100（黑色素瘤），MART1（黑色素瘤），MPG（黑素瘤），MS4A1（跨膜4結構域亞家族A成員1，小細胞肺癌，NHL），Nucleolin，Neu癌基因產物（各自癌症），P21（各種癌），抗（N-羥乙醯神經氨酸）抗體結合部位（乳腺癌，黑色素瘤），類PLAP睾丸鹼性磷酸酶（卵巢癌、睾丸癌），PSMA（前列腺瘤），PSA（前列腺癌），ROBO4，TAG 72（腫瘤相關糖蛋白72，AML，胃癌、結腸直腸癌、卵巢癌），T細胞跨膜蛋白（各種癌症），Tie （CD202b），TNFRSF10B（腫瘤壞死因數受體超家族成員10B，各種癌症），TNFRSF13B（腫瘤壞死因數受體超家族成員13B，多發性骨髓瘤，NHL，其他癌症，RA和SLE）， TPBG（滋養細胞糖蛋白，腎細胞癌），TRAIL-R1（TNF相關壞死誘導配位體受體1，淋巴瘤，NHL，結直腸癌，肺癌），VCAM-1 （CD106，黑色素瘤），VEGF，VEGF-a，VEGF-2 （CD309）（各種癌症）。其它可被抗體識別的，腫瘤相關抗原已被總結和評述（Gerber，et al，mAbs 2009，1：3，247-253； Novellino et al，Cancer ImmunolImmunother. 2005，54（3），187-207； Franke，et al，Cancer BiotherRadiopharm.2000，15，459-76）。

這些抗原的例子包括：許多其他分化簇（CD4、CD5、CD6、CD7、CD8、CD9、CD10、CD11a、CD11b、CD11c、CD12w、CD14、CD15、CD16、CDw17、CD18、CD21、CD23、CD24、CD25、CD26、CD27、CD28、CD29、CD31、CD32、CD34、CD35、CD36、CD37、CD41、CD42、CD43、CD44、CD45、CD46、CD47、CD48、CD49b、CD49c、CD53、CD54、CD55、CD58、CD59、CD61、CD62E、CD62L、CD62P、CD63、CD68、CD69、CD71、CD72、CD79、CD81、CD82、CD83、CD86、CD87、CD88、CD89、CD90、CD91、CD95、CD96、CD100、CD103、CD105、CD106、CD109、CD117、CD120、CD127、CD133、CD134、CD135、CD138、CD141、CD142、CD143、CD144、CD147、CD151、CD152、CD154、CD156、CD158、CD163、CD166、.CD168、CD184、CDw186、CD195、CD202 （a、b）、CD209、CD235a、CD271、CD303、CD304）、膜聯蛋白A1、核仁素、內皮糖蛋白（CD105）、ROBO4、氨基肽酶N、Δ-樣4（DLL4）、VEGFR-2（CD309）、CXCR49、CD184）、Tie2、B7-H3、WT1、MUC1、LMP2、HPV E6 E7、EGFRvIII、EGFR、HER-2/neu、獨特型、MAGE A3、P53 nonmutant、NY-ESO-1、GD2、CEA、MelanA/MART1、Ras突變、gp100、p53突變體、Proteinase3（PR1）、BCR-abl、Tyrosinase、Survivin、hTERT、Sarcoma translocation breakpoints、EphA2、PAP、ML-IAP、AFP、EpCAM、ERG （TMPRSS2 ETS融合基因）、NA17、PAX3、ALK、Androgen 受體、細胞週期素B1、聚唾液酸、MYCN、RhoC、TRP-2、GD3、Fucosyl GM1、間皮素、PSCA、MAGE A1、sLe（a）、CYP1B1、PLAC1、GM3、BORIS、Tn、GloboH、ETV6-AML、NY-BR-1、RGS5、SART3、STn、碳酸酐酶 IX、PAX5、OY-TES1、精子蛋白17、LCK、HMWMAA、AKAP-4、SSX2、XAGE 1、B7H3、豆莢蛋白、Tie 2、Page4、VEGFR2、MAD-CT-1、FAP、PDGFR-β、MAD-CT-2、Fos蛋白相關抗原1。

在另一具體的實例中，本專利申請的抗細胞分裂劑與細胞結合分子偶聯物用於治療癌症的組合物和方法。目標癌症包括但不限於，腎上腺皮質癌、肛門癌、膀胱癌、大腦腫瘤（腦幹神經膠質瘤、小腦星形細胞瘤、腦星形細胞瘤、室管膜瘤、成神經管細胞瘤、幕上原始神經外胚層和松果體腫瘤、視覺通路和下丘腦膠質瘤）、乳腺癌、類癌腫瘤、胃腸道癌症、未知小細胞癌、宮頸癌、結腸癌、子宮內膜癌、食道癌、肝外膽管癌、尤因家族腫瘤（PNET）、顱內生殖細胞腫瘤、眼癌、眼內黑色素瘤、膽囊癌、胃癌（胃癌）、性腺外生殖細胞瘤、孕周滋養細胞瘤、頭頸癌、下嚥癌、胰島細胞癌、腎癌（腎細胞癌）、喉癌、白血病（急性淋巴細胞，急性髓系，慢性淋巴細胞，慢性粒細胞，毛細胞）、嘴唇和口腔癌症、肝癌、肺癌（非小細胞，小細胞）、淋巴瘤（愛滋病相關，中樞神經系統的，皮膚T細胞的，霍奇金病，非霍奇金病）、惡性間皮瘤、黑色素瘤、梅克爾細胞癌、轉移性鱗狀頸癌與隱匿性原發性癌、多發性骨髓瘤和其他漿細胞腫瘤、蕈樣肉芽腫、骨髓增生異常綜合征、骨髓增生異常、鼻咽癌、神經母細胞瘤、口腔癌、口咽癌、骨肉瘤、卵巢癌（上皮、生殖細胞瘤、低惡性腫瘤）、胰腺癌（外分泌，胰島細胞癌）、副鼻竇和鼻腔癌、甲狀旁腺癌、陰莖癌、嗜鉻細胞瘤、垂體腫瘤、漿細胞腫瘤、前列腺癌橫紋肌肉瘤、直腸癌、腎細胞癌（腎癌）、腎盂和輸尿管（移行細胞）、唾腺癌、賽塞裡綜合症、皮膚癌（皮膚T細胞淋巴瘤，卡波西氏肉瘤，黑色素瘤）、小腸腫瘤、軟組織肉瘤、胃癌、睾丸癌、胸腺瘤（惡性）、甲狀腺癌、尿道癌症、子宮癌、不尋常的少年的癌症、陰道腫瘤、外陰腫瘤和維爾姆斯瘤。

在另一個具體的實例中，本專利申請的抗細胞分裂劑- 細胞結合分子偶聯物用於治療或預防自身免疫疾病的組合物和方法。自身免疫性疾病包括但不限於，Achlorhydra自身免疫性活動性慢性肝炎、急性播散性腦脊髓炎、急性出血性腦白質炎、艾迪生病、無精症、斑禿、肌萎縮側索硬化症、強直性脊柱炎、抗GBM/TBM腎炎、抗磷脂綜合征、抗異常酶綜合征、關節炎、特應性過敏、特應性皮炎、自身免疫性再生障礙性貧血、自身免疫性心肌病、自身免疫性溶血性貧血、自身免疫性肝炎、自身免疫性內耳疾病、自身免疫性淋巴組織增生綜合征、自身免疫性周圍神經病、自身免疫性胰腺炎、自身免疫性多內分泌綜合征I、II和III型、自身免疫性黃體酮皮炎、自身免疫性血小板減少性紫癜、自身免疫性葡萄膜炎、Balo病/ Balo同心硬化症、Bechets綜合征、Berger氏病、Bickerstaff腦炎、Blau綜合征、大皰性類天皰瘡、Castleman病、Chagas病、慢性疲勞免疫功能障礙綜合征、慢性炎性脫髓鞘性多發性神經病、慢性復發性多灶性骨髓炎、慢性萊姆病、慢性阻塞性肺病、Churg-Strauss綜合征、瘢痕性類天皰瘡、乳糜泄、Cogan綜合征、冷凝集素病、補體成分2缺乏症、顱骨動脈炎、CREST綜合征、Crohns病（特發性炎症性腸病）、庫欣綜合征、皮膚白細胞增多性血管炎、德戈氏病、Dercum氏病、皰疹樣皮炎、皮肌炎、1型糖尿病、彌漫性皮膚系統性硬化症、Dressler綜合征、盤狀紅斑狼瘡、濕疹、子宮內膜異位症、附著點炎相關的關節炎、Eosinophilic筋膜炎、大皰性表皮松解症、結節性紅斑、特發性混合性冷球蛋白血症、伊文氏綜合征、纖維發育不良性骨化症、纖維肌痛、纖維化性肌炎、纖維性肺泡炎、胃炎、胃腸類天皰瘡、巨細胞動脈炎、腎小球腎炎、古德帕斯丘爾綜合征、格雷夫斯病、格林-巴厘綜合征、橋本氏腦炎、橋本氏甲狀腺炎、溶血性貧血、過敏性紫癜、妊娠性肝炎、化膿性汗腺炎、休斯綜合征（抗磷脂綜合征）、低丙球蛋白血症、特發性炎性脫髓鞘疾病、特發性肺纖維化、特發性血小板減少性紫癜（自身免疫性血小板減少性紫癜）、IgA腎病（伯傑氏病）、包涵體肌炎、炎性脫髓鞘性多神經炎、間質性膀胱炎、過敏性腸綜合征、少年特發性關節炎、青少年類風濕性關節炎、川崎氏病、朗伯-伊頓重症肌無力綜合征、白細胞碎屑性血管炎、扁平苔癬、硬化性硬化症、線狀IgA疾病（LAD）、Lou Gehrig病（也稱肌萎縮側索硬化症）、狼瘡性肝炎、紅斑狼瘡、Majeed綜合征、美尼爾氏病、顯微鏡下多動脈炎、米勒-費希爾綜合征、混合性結締組織病、硬斑病、穆罕默德-哈貝曼病、麥考利綜合征、多發性骨髓瘤、多發性硬化症、重症肌無力、肌炎、嗜睡症、視神經脊髓炎（Devic病）、神經性肌強直、眼瞼瘢痕性類天皰瘡、Opsoclonus myoclonus綜合征、Ord甲狀腺炎、回文風濕病、PANDAS（與鏈球菌相關的小兒自身免疫性神經精神病）、Paraneoplastic小腦變性、陣發性睡眠性血紅蛋白尿症、Parry Romberg綜合征、Parsonnage-Turner綜合征、睫狀體平部炎、天皰瘡、尋常型天皰瘡、貧血、周圍腦脊髓炎、POEMS綜合征、結節性多動脈炎、風濕性多肌痛、多發性肌炎、原發性膽汁性肝硬化、原發性硬化性膽管炎、進行性炎症性神經病變、牛皮癬、牛皮癬性關節炎、壞疽性皮膚炎、純紅細胞再生障礙、Rasmussen腦炎、雷諾現象、復發性多軟骨炎、賴特綜合征、不寧腿綜合症、後神經纖維化、類風濕性關節炎、類風濕熱、結節病、精神分裂症、施密特綜合征、Schnitzler綜合征、施尼茨勒綜合征、鞏膜炎、硬皮病、乾燥綜合征、脊椎關節病、粘稠血症、Still病、僵人綜合征、亞急性細菌性心內膜炎、蘇薩克綜合征、Sweet綜合征、小舞蹈病、交感神經性貧血、Takayasu動脈炎、顳動脈炎（巨細胞動脈炎）、Tolosa-Hunt綜合征、橫貫性脊髓炎、潰瘍性結腸炎（特發性炎性腸病）、未分化結締組織病、未分化脊柱關節病、血管炎、白癜風、韋格納肉芽腫病、威爾遜氏綜合征、威斯科特-奧爾德里奇綜合征。

在另一個具體的實例中，本專利申請中用於治療或預防自身免疫疾病的偶聯物上的細胞結合分子，包括但不限於，抗彈性蛋白抗體、Abys抗上皮細胞抗體、抗地下室膜IV型膠原蛋白抗體、抗核抗體、抗ds DNA、抗ss DNA、抗心磷脂抗體IgM、IgG、抗乳糜瀉抗體、抗磷脂抗體IgK、IgG、抗SM抗體、抗線粒體抗體、甲狀腺抗體、微粒體抗體、T細胞抗體、甲狀腺球蛋白抗體、抗SCL-70、抗Jo、抗U.sub.1RNP、抗La/ SSB、抗SSA、抗SSB、抗壁細胞抗體、抗組蛋白、抗RNP、C-ANCA、P-ANCA、抗著絲粒、抗纖維蛋白原、抗GBM抗體、抗神經節苷脂抗體、抗Desmogein 3抗體、抗p62抗體、抗sp100抗體、抗線粒體（M2）抗體、類風濕因數抗體、抗MCV抗體、抗拓撲異構酶抗體、抗中性粒細胞胞質（cANCA）抗體。

在某些較佳的實例中，本專利申請中偶聯物上的細胞結合分子，可以與自身免疫性疾病相關的啟動淋巴細胞上表達的受體或受體複合物相結合。受體或受體複合物包含，免疫球蛋白基因超家族成員（例如CD2、CD3、CD4、CD8、CD19、CD22、CD28、CD70、CD79、CD90、CD152/CTLA-4、PD-1或ICOS）、TNF受體超家族成員（例如CD27、CD40、CD95/Fas、CD134/OX40、CD137/4-1BB、INF-R1、TNFR-2、RANK、TACI、BCMA、骨保護素、Apo2/TRAIL-R1、TRAIL-R2、TRAIL-R3、TRAIL-R4和APO-3）、整合蛋白、細胞因數受體、趨化因數受體、主要組織相容性蛋白、凝集素（C型、S型或I型）或補體控制蛋白。

在另一個具體實例中，可用的對病毒或微生物抗原具有免疫特異性的細胞結合配位體是人源化或人單克隆抗體。 “病毒抗原”包括但不限於，任何能夠引發免疫應答的病毒肽，多肽蛋白（例如HIV gp120、HIV nef、RSV F糖蛋白、流感病毒神經氨酸苷酶、流感病毒血凝素、HTLV Tax、皰疹單純皰疹病毒糖蛋白（例如gB、gC、gD和gE）和乙型肝炎表面抗原）。“微生物抗原”包括但不限於，任何能夠引發免疫應答的微生物肽、多肽、蛋白質、糖、多糖或脂質分子（例如細菌、真菌、致病原生動物或酵母多肽、包括如LPS和莢膜多糖5/8）。可用於治療病毒或微生物感染的抗體的實例，包括但不限於：帕利珠單抗，它是用於治療RSV感染的，人源化抗呼吸道合胞病毒單克隆抗體；PRO542，是一種CD4融合抗體，用於治療HIV感染；奧斯他韋，是一種用於治療乙型肝炎病毒的人抗體；PROTVIR，是一種人源化IgG1抗體，用於治療巨細胞病毒，和抗LPS抗體。

本專利申請的抗有絲分裂劑-細胞結合分子可用於治療感染性疾病。這些感染性疾病包括但不限於，不動桿菌屬感染、放線菌病、非洲昏睡病（非洲錐蟲病）、愛滋病（獲得性免疫缺陷綜合症）、阿米巴病、無形體病、炭疽、溶血性耶爾森菌感染、阿根廷出血熱、蛔蟲病、麯黴病、星狀病毒感染、巴貝斯蟲病、蠟狀芽孢桿菌感染、細菌性肺炎、細菌性陰道炎、類桿菌感染、小袋蟲病、蛔蟲感染、BK病毒感染、黑色發結節病、人芽囊原蟲感染、芽生菌病、玻利維亞出血熱、疏螺旋體感染、肉毒中毒（和嬰兒肉毒中毒）、巴西出血熱、布魯氏桿菌病、伯克霍爾德氏菌感染、布魯裡潰瘍、杯狀病毒感染（諾如病毒和沙波病毒）、彎曲桿菌病、念珠菌病（念珠菌病、鵝口瘡）、貓抓病、蜂窩組織炎、Chagas病（美洲錐蟲病）、子囊、水痘、衣原體、肺炎衣原體感染、霍亂、色素母細胞瘤、華支睾吸蟲、艱難梭狀芽孢桿菌感染、球孢子菌病、科羅拉多蜱熱病、普通感冒（急性病毒性鼻咽炎、急性鼻炎）、克雅氏病、克裡米亞-剛果出血熱、隱球菌病、隱孢子蟲病、皮膚幼蟲遷徙、環孢子蟲病、腸桿菌感染、腸道病毒感染、流行性斑疹傷寒、傳染性紅斑（第五種疾病）、急疹、薑片蟲病、肝片吸蟲病、致命性家族性失眠、絲蟲病、產氣莢膜梭菌食物中毒、自由活體阿米巴感染、梭桿菌感染、氣性壞疽（梭菌性肌壞死）、地絲菌病、格斯特曼-斯特拉斯勒-謝克爾病綜合征、賈第鞭毛蟲病、馬鼻疽、淋病、肉芽腫性腹瀉（第五性病）、A群鏈球菌感染、B群鏈球菌感染、流感嗜血桿菌感染、手足口病（HFMD）、漢坦病毒肺綜合征、幽門螺桿菌感染、溶血性尿毒綜合征、腎綜合征出血熱、甲型肝炎、乙型肝炎、丙型肝炎、丁型肝炎、戊型肝炎、單純性皰疹、組織胞漿菌病、鉤蟲感染、人類博卡病毒感染、人類ewingii埃裡希體病、人類粒細胞無形體病、人類偏肺病毒感染、人類單核細胞埃裡希體病、人乳頭瘤病毒感染、人副流感病毒感染、膜殼絛蟲病、艾巴氏病毒傳染性單核細胞增多症（單）、流行性感冒、等孢子蟲病、川崎病、角膜炎、金格桿菌感染、庫魯病、拉沙熱、軍團病（退伍軍人症）、軍團病（皮蒂亞克熱）、利什曼病、萊姆病、淋巴絲蟲病（象皮病）、淋巴細胞性脈絡叢腦膜炎、瘧疾、瑪律堡出血熱、麻疹、類鼻疽病（惠氏病）、腦膜炎、腦膜炎球菌病、後殖吸蟲病、微孢子蟲病、傳染性軟疣、腮腺炎、小鼠斑疹傷寒（地方性斑疹傷寒）、支原體肺炎、足菌腫、蠅蛆病、新生兒結膜炎（新生兒眼病）、變異型克雅氏病（vCJD、nvCJD）、諾卡氏菌病、盤尾絲蟲病（河盲症）、副球孢子菌病（南美芽生菌病）、肺吸蟲病、巴斯德氏菌病、頭蝨、體虱、陰虱、盆腔炎、百日咳、鼠疫、肺炎球菌感染、肺孢子蟲肺炎、肺炎、脊髓灰質炎、普氏菌感染、原發性阿米巴腦膜腦炎、進行性多灶性白質腦病、鸚鵡熱、Q熱、狂犬病、鼠咬熱、呼吸道合胞病毒感染、鼻孢子蟲病、鼻病毒感染、立克次體感染、立克次體痘、裂谷熱、洛磯山斑疹熱、輪狀病毒感染、風疹、沙門氏菌病、SARS（嚴重急性呼吸綜合征）、疥瘡、血吸蟲病、敗血症、志賀氏菌病（Bacillary痢疾）、帶狀皰疹（帶狀皰疹）、天花（天花）、孢子絲菌、葡萄球菌食物中毒、感染金黃色葡萄球菌、糞類圓線蟲病、梅毒、絛蟲病、破傷風、須癬（Barber癢）、頭皮癬、體癬、股癬、手癬、掌黑癬、足癬（香港腳）、甲癬（灰指甲）、花斑癬、弓蛔蟲病（眼幼蟲移行症）、弓蛔蟲病（內臟幼蟲移行症）、弓形體病、旋毛蟲病、滴蟲病、鞭蟲病（鞭蟲感染）、肺結核、兔熱病、解脲脲原體感染、委內瑞拉馬腦炎、委內瑞拉出血熱、病毒性肺炎、西尼羅河熱、白毛結節病（白癬）、假結核耶爾森氏菌、耶爾森氏鼠疫桿菌腸道病、黃熱病、接合菌病。

本發明的細胞結合劑，較佳為抗體，對抗的病原菌株包括但不限於，鮑氏不動桿菌、以色列放線菌、放線菌和丙酸桿菌、布氏錐蟲、HIV（人免疫缺陷病毒病毒）、溶組織內阿米巴、無形體屬、炭疽芽孢桿菌、溶血弧菌、胡寧病毒、蛔蟲屬、麯黴屬、星狀病毒科、巴貝蟲屬、蠟狀芽孢桿菌、多種細菌、擬桿菌屬、大腸桿菌、蛔蟲屬、BK病毒、結節菌、人芽囊原蟲、皮炎芽生菌、馬丘波病毒、疏螺旋體屬、肉毒梭菌、清風藤屬、布魯氏菌屬、通常為洋蔥伯克霍爾德菌和其他伯克霍爾德氏菌種、潰瘍分枝桿菌、杯狀病毒科、彎曲桿菌屬、通常為白色假絲酵母和其他假絲酵母屬、漢賽巴爾通體、A群鏈球菌和葡萄球菌、克氏錐蟲、杜克雷嗜血桿菌、VZV、沙眼衣原體、科羅拉多蜱熱病毒、鼻病毒、冠狀病毒、CJD朊病毒、克裡米亞-剛果出血熱病毒、新型隱球菌、隱孢子蟲屬、巴西鉤蟲、多種寄生蟲、環孢子蟲、帶狀絛蟲、巨細胞病毒、登革熱病毒（DEN-1、DEN-2、DEN-3和DEN-4）-黃病毒、脆弱雙歧桿菌、白喉棒狀桿菌、裂頭絛蟲、麥迪那龍線蟲、埃博拉病毒、棘球絛蟲屬、埃立克體腸球菌屬、腸道病毒屬、普氏立克次體、細小病毒B19、人皰疹病毒6和人皰疹病毒7、布氏薑片蟲、肝片吸蟲和巨大片吸蟲、FFI朊病毒、絲蟲目超家族、產氣莢膜梭菌、梭桿菌屬、其他梭狀芽孢桿菌、白地黴、GSS朊病毒、腸道賈第蟲、伯克霍爾德氏菌、刺孢小芽孢桿菌和革蘭氏假絲酵母、淋球菌、肉芽腫克雷伯氏菌、化膿性鏈球菌、無乳鏈球菌、流感嗜血桿菌、腸道病毒、主要是柯薩奇A病毒和腸道病毒71、無名病毒、幽門螺旋桿菌、大腸桿菌O157：H7、布尼亞病毒科、甲型肝炎病毒、乙型肝炎病毒、丙型肝炎病毒、丁型肝炎病毒、戊型肝炎病毒、單純皰疹病毒1、單純皰疹病毒2、莢膜組織胞漿菌、十二指腸腺瘤和壺腹癌流感嗜血桿菌、人博卡病毒、埃裡希體、嗜吞噬細胞無嗜血桿菌、人偏肺病毒、查菲埃裡希體、人乳頭瘤病毒、人副流感病毒、微小膜殼絛蟲和縮小膜殼絛蟲、艾巴氏病毒、正粘病毒科家族、貝氏等孢球蟲、金格桿菌、肺炎克雷伯菌、克雷伯氏菌、嗜肺軍團菌、嗜肺軍團菌、嗜肺軍團菌、利什曼原蟲屬、麻風分枝桿菌和結核分枝桿菌、鉤端螺旋體屬、單核細胞增多性李斯特氏菌、伯氏疏螺旋體和其他疏螺旋體屬物種、班氏旋毛蟲和馬來絲蟲、淋巴細胞脈絡叢腦膜炎病毒（LCMV）瘧原蟲屬、瑪律堡病毒、麻疹病毒、類鼻疽伯克霍爾德氏菌、腦膜炎奈瑟氏球菌、橫川後殖吸蟲、小孢子蟲目門、傳染性軟疣病毒（MCV）、腮腺炎病毒、傷寒立克次氏體、肺炎支原體、多種細菌和真菌寄生雙翅蠅幼蟲、沙眼衣原體和淋病奈瑟菌、vCJD朊病毒、諾卡氏菌和其他諾卡氏菌屬、盤尾絲蟲屬、盤鮑擬亞科、副龍屬西馬尼和其他副屬、巴斯德氏菌屬、頭蝨、人體虱、百日咳博多特氏菌鼠疫耶爾森氏菌、肺炎鏈球菌、肺炎球菌、脊髓灰質炎病毒、普雷沃氏菌屬、奈氏格氏桿菌、JC病毒、鸚鵡熱衣原體、伯氏考克斯體、狂犬病病毒、單鏈球菌和螺旋菌、呼吸道合胞病毒、鼻孢子菌、鼻病毒、立克次體屬、由小株立克次體、裂谷熱病毒、立克次體立克次體、輪狀病毒、風疹、沙門氏菌屬、SARS 冠狀病毒、人疥蟎、血吸蟲屬、體細胞屬、志賀菌屬、水痘帶狀皰疹病毒、天花少校或天花小、申克孢子絲菌、金黃色葡萄球菌屬、金黃色葡萄球菌、鏈球菌化膿、圓線蟲、梅毒螺旋體、絛蟲屬、破傷風、癬屬癬音鈾、癬屬、絮狀表皮癬菌、紅色毛癬菌、須毛癬菌、紅色毛癬菌、威尼克外瓶黴、毛癬菌屬屬、細胞死亡屬、弓箭毒或弓箭毒、剛地弓形蟲、旋毛蟲、陰道毛滴蟲、三丘裡三種、結核分枝桿菌、弗朗西拉圖拉菌、尿素和馬腦炎病毒、委內瑞拉馬腦炎病毒、霍亂弧菌、瓜納裡托病毒、西尼羅河病毒、beigelii絲孢、假結核耶爾森氏菌、小腸結腸炎耶爾森氏菌、黃熱病病毒、毛黴菌目階（毛黴菌病）和蟲黴目階（蟲黴屬真菌病）、毛黴菌目綠膿桿菌、彎曲桿菌（弧菌）、氣單胞菌、艾氏菌、耶爾森氏菌、志賀痢疾桿菌、志賀氏桿菌、志賀氏菌、沙門氏菌、傷寒沙門氏菌、雅司螺旋體、奮森氏螺旋體、伯氏疏螺旋體、細螺旋體、卡氏肺孢子蟲、流產布魯氏菌、布魯桿菌、布魯氏菌、支原體屬、普氏立克次體、恙蟲病立克次氏體、衣原體屬、致病性真菌（煙麯黴、白色念珠菌、莢膜組織胞漿菌）、原生動物（溶組織內阿米巴、Tenas毛滴蟲、Hominis毛滴蟲、岡比亞錐蟲、羅得西亞錐蟲、羅氏利什曼原蟲、熱帶利什曼原蟲、巴西利什曼原蟲、肺孢子蟲肺炎、間日瘧原蟲、惡性瘧原蟲、瘧原蟲瘧疾）或Helminiths（日本血吸蟲、曼氏血吸蟲、埃及血吸蟲和鉤蟲）。

用作本專利申請中的細胞結合劑，治療病毒性疾病的其他抗體，包括但不限於，抗下列致病性病毒抗原的抗體：痘病毒、皰疹病毒、腺病毒、小黃病毒、腸病毒、小核糖核酸病毒、細小病毒、呼腸病毒、逆轉錄病毒、流感病毒、副流感病毒、腮腺炎、麻疹、呼吸道合胞病毒、風疹、蟲媒病毒、彈狀病毒、沙門氏菌、非A/非B型肝炎病毒、鼻病毒、冠狀病毒、羅托病毒、致癌病毒、如HBV（肝細胞癌）、人乳頭狀瘤病毒（宮頸癌、肛門癌）、卡波濟氏肉瘤相關的皰疹病毒（卡波濟氏肉瘤肉瘤）、人類皰疹病毒第四型（鼻咽癌、伯基特淋巴瘤、原發性中樞神經系統淋巴瘤）、瘤病毒（默克爾細胞癌）、SV40（猿猴病毒40）、HCV（肝細胞癌）、HTLV-1 （成人T細胞白血病/淋巴瘤）；免疫紊亂導致病毒，如人類免疫缺陷病毒（愛滋病）、中樞神經系統病毒，如JCV（進行性多灶性腦白質病）、丙型肝炎病毒（亞急性硬化性全腦炎）、LCV（淋巴細胞性脈絡叢腦膜炎）、亞博病毒腦炎、正粘病毒（腦炎性腦炎）、RV（狂犬病）、長鼻病毒、皰疹病毒腦膜炎、拉姆齊亨特綜合征II型、脊髓灰質炎病毒（脊髓灰質炎病毒、後脊髓灰質炎綜合征）、HTLV-1（熱帶麻痹性麻痹））、巨細胞病毒（巨細胞病毒視網膜炎、HSV（皰疹性角膜炎）、心血管病毒，如CBV（心包炎、心肌炎）、呼吸系統/急性病毒性鼻內炎/病毒性肺炎，如愛潑斯坦-巴爾病毒（EBV感染/傳染性單核病）、巨細胞病毒、非典冠狀病毒（嚴重急性呼吸綜合征）或正黏液病毒、流感病毒a/b/c（流感/禽流感）、副粘病毒、人類副流感病毒、RSV（人類呼吸道合胞病毒）、hMPV、消化系統病毒（腮腺炎病毒、巨細胞病毒（巨細胞病毒食管炎）、腺病毒（腺病毒感染）、輪狀病毒、諾瓦克病毒、星狀病毒、冠狀病毒、乙型肝炎病毒、CBV、甲型肝炎病毒、丙型肝炎病毒、丁型肝炎病毒、戊型肝炎病毒、HGV）、泌尿生殖病毒，如BK病毒、MuV（腮腺炎）。

更進一步，本發明也包括本發明中偶聯物和可接受的載體，以治療癌症和自身免疫性疾病。治療癌症和自身免疫性疾病的方法可以在體外，體內或離體實施。體外用途的實例包括用它處理細胞培養物，以殺死除了不表達靶抗原的變體以外的所有細胞；或者殺死表達不需要的抗原的變體。離體使用的例子包括在進行移植（HSCT）之前對造血幹細胞（HSC）進行處理，以殺死患病或惡性腫瘤細胞。例如，在癌症治療中的自體移植之前或在自身免疫性疾病的治療中從骨髓中去除腫瘤細胞或淋巴細胞，或在移植之前為了防止移植物抗宿主疾病從同種異體骨髓或組織中除去T細胞和其他淋巴細胞。這樣的臨床離體治療可以按如下步驟進行：從患者或其他個體收穫骨髓，然後在含有血清的培養基中約37 °C下孵育約15分鐘至約48小時，在該培養基中加入本發明的偶聯物，濃度範圍從約1pM至0.1mM。具體的藥物濃度和孵育時間應當由專業臨床醫師決定。孵育後，用含血清的培養基洗滌骨髓細胞，並按照已知的方法藉由靜脈注射給患者。若患者在骨髓採集和再輸注治療細胞之間，還接受其它治療（例如消融化療或全身輻射療程）的情況下，應使用標準醫療設備將處理後的骨髓細胞在液氮中冷凍儲存。配方的應用

專利申請的結合物配製成液體，或適合凍乾，然後重新配製為液體製劑。其它可以在本專利申請的液體製劑中使用的輔料還包括：例如調味劑、抗微生物劑、甜味劑、抗氧化劑、抗靜電劑、脂質如磷脂或脂肪酸脂、類固醇如膽固醇、蛋白質輔料如血清白蛋白（人血清白蛋白）、重組人白蛋白、明膠、酪蛋白、成鹽反離子如鈉等。這些和另外的適用於本發明製劑的，已知的藥物輔料和/或添加劑為本領域公知，如在由美國醫藥協會羅威（Rowe）等人編著的第四版（2003）《藥用輔料手冊》（The Handbook of Pharmaceutical Excipients）中所列；以及由威爾金斯出版公司出版（2005），熱納羅（Gennaro）等人編著的第21版《雷明頓：藥學科學與實踐》（Remington： the Science and Practice of Pharmacy）中所列。

容納本專利申請中的偶聯物製劑的藥物容器或器具有：小瓶，瓶，預填充注射器，預填充或自動注射器。液體配方可以在硼矽酸鹽或鈉鈣玻璃小瓶中冷凍乾燥，或滾筒乾燥，成餅或粉末形式。固體粉末也可以藉由有效的噴霧乾燥製備，然後用小瓶或藥物容器包裝，用於儲存和配送。

在更進一步的實例中，本發明提供了製劑的製備方法，包括以下步驟：（a）將包含偶聯物，輔料和緩衝體系的製劑凍乾；（b）在介質中複溶步驟（a）中的凍乾混合物，以使得複溶的製劑穩定。步驟（a）中的液體可進一步包含穩定劑和選自前述填充劑、鹽、介面活性劑和防腐劑的一種或多種輔料。稀釋的有機酸，或水，例如無菌水、注射用抑菌水（BWFI）可以用作複溶介質。複溶介質可選用水，如無菌水、抑菌性注射用水（BWFI）、乙酸、丙酸、琥珀酸、氯化鈉、氯化鎂溶液、氯化鈉的酸性溶液、氯化鎂的酸性溶液或精氨酸的酸性溶液，其濃度為約10至約250mM。

本專利申請的偶聯物的液體製劑應具有各種設定的特徵。需要考慮的主要問題之一是其穩定性，因為蛋白質/抗體在製造和儲存期間，常會形成可溶及不溶的聚集體。此外，溶液中會發生各種化學反應（脫醯胺、氧化、剪切、異構化等），導致降解產物水準增加和/或生物活性喪失。液體或凍乾製劑中的偶聯物最好應在25 °C下，具有超過6個月的貨架期。更優的液體或凍乾製劑中的偶聯物應在25 °C下具有超過12個月的貨架期。最為較佳的液體製劑應該在2-8 °C下具有約24至36個月的貨架期，凍乾粉末在2-8 °C下，應該具有長達約60個月的貨架期。液體製劑和凍乾製劑應該具有在-20 °C或-70 °C下至少兩年貨架期。

在一些實例中，該製劑在冷凍（例如-20℃或-70℃）和融化之後是穩定的，例如在1、2或3個冷凍和融化迴圈之後是穩定的。可以用不同的方式定性和/或定量地評估穩定性，包括評估藥物/抗體（蛋白質）的比例和聚集體的形成（例如，使用UV、尺寸排阻層析法、藉由測量濁度和/或藉由目測）；藉由使用陽離子交換層析、圖像毛細管等電聚焦（icIEF）或毛細管區帶電泳評估電荷異質性；進行氨基末端或羧基末端序列分析、質譜分析或基質輔助鐳射解吸電離/飛行時間質譜（MALDI / TOF MS）或HPLC-MS / MS SDS-PAGE分析以比較還原抗體和完整抗體；進行肽圖分析（例如胰蛋白酶或LYS-C）；評估抗體的生物學活性或抗原結合功能。不穩定可能涉及以下一種或多種：聚集、脫醯胺作用（例如Asn脫醯胺作用）、氧化作用（例如Met氧化作用）、異構化作用（例如Asp異構化作用）、剪切/水解/斷裂作用（例如鉸鏈區斷裂）、生成琥珀醯亞胺、未成對半胱氨酸、N末端延伸、C末端加工、糖基化差異等。

穩定的偶聯物應當在藥物製劑中 “保持其生物學活性”，例如，如果偶聯物的生物活性在給定時間內，例如12個月，按照抗原結合測定和/或體外細胞毒性測定的方法，生物活性可以保持在相差20%以內，較佳10%（在測定誤差內）。

用於臨床體內使用時，具有本申請連接子的偶聯物將是溶液或凍乾固體的形式，凍乾固體可被重新溶解於無菌注射用水中。對於臨床體內使用，具有本申請連接子的偶聯物投與方案如下：每天一次、每週一次、每兩週一次、每三週一次、每次四周一次或每月一次、共8-54周，靜脈投與。注射的劑量是在50至1000mL生理鹽水中，可任選地向其中加入人血清白蛋白（例如0.5至1mL人血清白蛋白濃縮溶液，100mg / mL）。每週的劑量約為50 µg至20 mg / kg體重，靜脈注射（每次注射10 µg至200 mg / kg的範圍）。治療後4-54周，患者可能會接受第二個療程。關於投與方式，輔料，稀釋劑，劑量，時間等的具體臨床方案可以由熟練的臨床醫生確定。

用體內或者離體殺死特定細胞的方法，可以治療的疾病的實例包括任何類型的惡性腫瘤、自身免疫疾病、移植排異和感染疾病（病毒、細菌或寄生蟲）。

獲得滿意的生物學效應所需的偶聯物的量將取決於許多因素，包括偶聯物的化學特性，效力和生物利用度，疾病類型，患者的種族，患者的疾病狀態，投與途徑，這些決定了所需劑量，投與方式和投與方案。

一般而言，可以藉由包含本發明的藥物為含0.1至10％w / v偶聯物的生理緩衝水溶液，用於腸胃外施用。典型劑量範圍為1 µg/kg至0.1 g/kg體重，每天、每週、每兩周、每三周或每月一次，較佳的劑量範圍是人體等效劑量0.01 mg/kg至20mg/kg體重，每週，每兩周，每三周或每月一次。待投與物的較佳劑量可能取決於下列變數，如疾病的類型或病症的進展，患者的總體健康狀況，所選化合物的相對生物學功效，藥物的製劑，投與方式（靜脈內，肌肉內或其他），藥物在確定的投與途徑的藥代動力學特性，投與速度（推注或連續輸注）和投與方案（在給定時間內重複次數）。

本發明的偶聯物還能夠以單位劑量形式投與，其中術語“單位劑量”是指能夠給予患者的單次劑量，並且可以很容易地處置和包裝，同時活性偶聯物本身或如下文所述的藥學上可接受的組合物，保持物理和化學上穩定的單位劑量。典型的每天/每週/每兩周/每月總劑量範圍是從0.01至100mg/kg體重。作為一般指導原則，人類的單位劑量範圍為1mg到3000mg每天/每週/每兩周/每三周/每月。單位劑量較佳1至500mg，一月一次至四次，更佳為1mg至100mg，每週/每兩周/每三週一次。本文提供的偶聯物可以藉由與一種或多種藥學上可接受的輔料混合而配製成藥物組合物。這樣的單位劑量組合物可以藉由口服投藥，如片劑，簡單膠囊或軟凝膠膠囊的形式的藥物；或鼻內投藥，如粉劑，滴鼻劑或氣霧劑的藥物；或皮膚投藥，如使用局部用軟膏，乳膏，乳液，凝膠或噴霧劑或藉由透皮貼劑投藥。所述組合物可以方便地以單位劑型投藥，並且可以藉由藥學領域公知的一般方法製備，例如在Remington ： The Science and Practice of Pharmacy ，21^th ed.； Lippincott Williams & Wilkins： Philadelphia，PA，2005.中所述的方法。

包含本發明的化合物的藥物劑型，首選口服或非腸道投藥的藥物組合物。對於口服投藥劑型，如片劑、粉劑、膠囊劑、片劑（錠劑）等可以包含一種或多種以下組分或有類似性質的其它化合物：粘合劑、比如微晶纖維素或黃耆膠；稀釋劑，比如澱粉或乳糖；分散劑，比如澱粉和纖維素衍生物；潤滑劑，比如硬脂酸鎂；助流劑，比如二氧化矽膠體；甜味劑，比如蔗糖或糖精；增味劑，比如薄荷或水楊酸甲酯。膠囊可以是硬膠囊或軟膠囊的形式，一般由明膠混合物，或與塑化劑混合制得，澱粉膠囊也是如此。另外，單位劑形可以包含各種其他原料，改變其物理形式，例如包覆糖衣，蟲膠或腸溶劑。其它的口服劑型如糖漿或酏劑可以含有甜味劑，防腐劑，顏料，著色劑和調味劑。另外，活性化合物可以藉由不同的處理和配方，使其成為可快速溶解的劑型，控釋劑型或緩釋劑，其中的緩釋劑是較好的劑型。片劑首選包含乳糖、玉米澱粉、矽酸鎂、交聯羧甲基纖維素鈉、聚乙烯吡咯酮、硬脂酸鎂、滑石等組合的劑型中。

非腸道投藥的液體藥劑包括無菌的水溶液或非水溶液、懸浮液和乳劑。液體藥劑也可以含有粘合劑、緩衝液、防腐劑、螯合劑、甜味劑、調味劑和著色劑等等。非水溶劑包括醇、丙二醇、聚乙二醇、植物油比如橄欖油和有機脂類，比如油酸乙酯。水性溶劑包括了水、醇、緩衝試劑和鹽的混合物，特別是，生物相容性的、可降解的丙交酯聚合物、丙交酯/乙交酯聚合物或者聚乙二醇/聚丙三醇共聚物可作為控制活性藥物釋放的輔料。靜脈注射中的輔料可以包括液體和營養補充物、電解質補充物、以及基於林格氏葡萄糖的輔料，以及類似的輔料。本發明的活性藥物其它可行的非腸道投藥系統，包括乙烯-醋酸乙烯酯共聚物微粒，植入式滲透泵和脂質體。

其它可行的投藥方式包括吸入劑，包括乾粉劑、氣霧劑和水滴劑。吸入劑可以是含有如聚乙二醇-9-月桂醚、甘膽酸鹽、去氧膽酸鹽或油質的溶液，可以藉由滴鼻劑，鼻內膠體的形式投藥。口含藥劑包括如錠劑、糖果錠劑等，可含有調味劑如蔗糖、阿拉伯膠以及其它輔料如甘膽酸鹽等。栓劑適合於單位劑量的形式，以固體如可哥油為載體，也可以加入水楊酸。皮膚局部用藥劑型、以膏藥、乳劑、洗液、貼片、凝膠、噴霧劑、氣霧劑或油劑為首選。凡士林、羊毛脂、聚乙二醇、醇類以及它們的混合物可以作為藥物載劑。皮膚投藥的劑型可以是貼片、乳劑、緩衝溶液、溶解或分散在聚合物或粘合劑中。。

特別地，本發明申請的偶聯物可以與其它的已知或即將已知的治療藥物，如化療藥物、放射療法、免疫療法藥物、自身免疫疾病藥物、抗感染藥物或其它抗體藥物偶聯物共同作用，達到協同效果。在另一個具體實例中，協同藥物或放射治療可以在本發明的共軛藥物投藥之前或之後投藥或施行。可以是在本發明的偶聯藥物投藥之前或之後1小時、12小時、一天、一星期、二星期、三星期、一個月、也可以是幾個月進行。

在其他實例中，協同藥物包括但不限於： 1）化療藥物：a）烷基化劑，如氮芥：氯苯那普，氯普那嗪，環磷醯胺，達喀爾巴嗪，雌二醇氮芥，異環磷醯胺，氮芥，鹽酸二甲氧胺，氧化二氮芥，鹽酸氨氯地平，麥考酚酸，衛矛醇，呱泊溴烷，新氮芥，苯芥膽甾醇，松龍苯芥，噻替呱，曲磷胺對，尿嘧啶；CC-1065（包括其阿多來新、卡折來新、比折來新及其合成同系物）；多卡黴素（包括KW-2189和CBI-TMI、及其合成同系物）；苯並二氮卓二聚體（例如吡咯苯並二氮卓（PBD）或托美黴素，吲哚苯並二氮卓，咪唑苯並噻二氮卓或惡唑烷苯並二氮卓的二聚體）；亞硝基脲（卡莫司汀，洛莫司汀，氯化梭菌素，福莫司汀，尼莫司汀，拉莫司汀）；烷基磺酸鹽（白蘇芬、樹蘇芬、磺胺異丙磺胺和皮蘇芬）；三氮烯（達喀爾巴嗪）；含鉑化合物（卡鉑，順鉑，奧沙利鉑）；吖丙啶類，如苯並二氫吡喃酮，卡洛酮，美妥替派和烏雷多巴；乙烯亞胺和甲基三聚氰胺，包括六甲蜜胺，三亞乙基三胺，三乙基磷醯胺，三亞乙基硫代磷醯胺和三羥甲基甲基胺；b）植物生物鹼：如長春花生物鹼（長春新堿，長春堿，長春地辛，長春瑞濱，去甲長春堿）；紫杉醇類（紫杉醇，多西紫杉醇及其同系物）；美登素類（DM1、DM2、DM3、DM4、美登素、安沙黴素及其同系物）；cryptophycin（特別是cryptophycin 1和cryptophycin 8）；埃博黴素，軟珊瑚醇，迪莫利德，草苔蟲內酯，海兔毒素，澳瑞他汀，cephalostatin；pancratistatin；sarcodictyin；海綿抑制素；c）DNA拓撲異構酶抑制劑，例如依託泊苷替尼（9-氨基喜樹堿，喜樹堿，克立那托，朵拉黴素，依託泊苷，磷酸依託泊苷，伊立替康，米托蒽醌，諾消靈，視黃酸（視黃醇），替尼泊苷，拓撲替康，9-硝基喜樹堿（RFS 2000））；絲裂黴素（絲裂黴素C）；d）抗代謝物，例如抗葉酸劑，DHFR抑制劑（甲氨蝶呤，曲麥克特，二甲葉酸，蝶羅呤，氨喋呤（4-氨基苯甲酸）或其他葉酸同系物）； IMP脫氫酶抑制劑（麥考酚酸，噻唑呋林，利巴韋林，EICAR）；核糖核苷酸還原酶抑制劑（羥基脲，去鐵胺）；嘧啶同系物，尿嘧啶同系物（安西他濱，阿紮胞苷，6-氮尿嘧啶，卡培他濱（希羅達），卡莫氟，阿糖胞苷，雙去氧尿苷，去氧氟尿苷，依諾他濱，5-氟尿嘧啶，氟尿苷，ratitrexed（Tomudex）；胞嘧啶同系物（阿糖胞苷，胞嘧啶阿拉伯糖苷，氟達拉濱）；嘌呤同系物（硫唑嘌呤，氟達拉濱，巰嘌呤，硫胺素，硫鳥嘌呤）；葉酸補充劑，如弗洛林酸；e）激素療法劑，如受體拮抗劑，抗雌激素（甲地孕酮，雷洛昔芬，他莫昔芬），LHRH興奮劑（戈斯他林，醋酸亮丙瑞林）；抗雄激素藥（比卡魯胺，氟他胺，卡魯司酮，丙酸倍他雄酮，表雄甾醇，戈舍瑞林，亮丙瑞林，美替利定，尼魯米特，睾內酯，曲洛司坦及其他雄激素抑制劑）；維甲類化合物，維生素D3同系物（CB1093，EB1089，KH1060，膽鈣化醇，麥角鈣化甾醇）；光動力療法劑（維替泊芬，酞菁，光敏劑Pc4，去甲氧基-竹紅菌素A）；細胞因數（干擾素-α，干擾素-γ，腫瘤壞死因數（TNF），含TNF的人蛋白）；f）激酶抑制劑，如BIBW 2992（抗-EGFR/Erb2），伊馬替尼，吉非替尼，呱加他尼，索拉非尼，達沙替尼，舒尼替尼，厄洛替尼，尼洛替尼，拉帕替尼，阿西替尼，帕唑帕尼，凡德他尼，E7080（抗VEGFR2），mubritinib，普納替尼（AP24534），bafetinib（INNO-406），bosutinib（SKI-606），卡博替尼，維莫德吉，iniparib，盧梭利替尼，CYT387，阿西替尼，tivozanib，索拉非尼，貝伐單抗，西妥昔單抗，曲妥珠單抗，雷珠單抗，帕尼單抗，伊斯平斯；g）聚（ADP-核糖）聚合酶（PARP）抑制劑，如奧拉帕裡、尼拉帕裡、依尼帕裡、塔拉佐帕裡、維利帕裡、維利帕裡、CEP 9722（Cephalon）、E7016（Eisai）、BGB-290（Beigene）、3-氨基苯甲醯醯胺；h）抗生素，如烯二炔類抗生素（卡奇黴素，特別是卡奇黴素γ1，δ1，α1和β1（參考J.Med.Chem. 1996，39（11），2103-2117；Angew Chem Intl. Ed. Engl. 1994，33：183-186），達因黴素，包括達因黴素A和去氧米黴素，埃斯培拉黴素，卡塔爾黴素，C-1027，maduropeptin，新卡嗪奧斯丁和相關色蛋白烯二炔抗生素），aclacinomysins，放線菌素，安麯黴素，重氮絲氨酸，博來黴素，卡諾黴素，卡拉黴素，洋紅黴素，嗜癌素，色黴素，達金黴素，柔紅黴素，去柔紅黴素，6-重氮-5-側氧基-L-去甲亮氨酸，阿黴素，嗎啉-阿黴素，氰基嗎啉-阿黴素，2-吡咯啉阿黴素和去氧柔紅黴素，表柔比星，阿柔比星，伊達比星，馬可黴素，nitomycin，黴酚酸，諾加黴素，橄欖黴素，Peplomycin，potfiromycin，嘌呤黴素，奎拉黴素，羅道黴素，鏈黑黴素，鏈脲黴素，殺結核菌素，烏苯美司，淨司他丁，佐柔比星；i）其他，如聚酮化合物（番荔素），特別是bullatacin和bullatacinone；吉西他濱，環氧酶素（如卡菲偌米布），硼替佐米，沙利度胺，來那度胺，pomalidomide，tosedostat，zybrestat，PLX4032，STA-9090，Stimuvax，allovectin-7，Xegeva，Provenge，Yervoy，異戊二烯化抑制劑（如洛伐他汀），多巴胺能神經毒素（例如1-甲基-4-苯基吡啶鎓離子），細胞週期抑制劑（如星形孢菌素），放線菌素（如放線菌素D，更生黴素），博萊黴素（如博來黴素A2，博萊黴素B2，培洛黴素），蒽環類抗生素（如柔紅黴素），鵝膏毒素，阿黴素（亞德里亞黴素），伊達比星，表柔比星，吡柔比星，佐柔比星，米托蒽醌，MDR抑制劑（如維拉帕米），Ca^{2 +} ATP酶抑制劑（如毒胡蘿蔔素），組蛋白去乙醯酶抑制劑（伏立諾他，羅米地辛，帕比司他，丙戊酸，Mocetinostat（MGCD0103）， Belinostat，PCI-24781，恩替諾特，SB939，Resminostat，Givinostat，AR-42，CUDC-101，蘿蔔硫素，曲古抑菌素A）；塞來昔布，格列酮類，表沒食子兒茶素沒食子酸酯，雙硫侖，Salinosporamide A；抗腎上腺藥物，如氨魯米特，米托坦，曲洛司坦，醋葡醛內酯，醛磷醯胺，氨基乙醯丙酸，安吖啶，阿拉伯糖苷，bestrabucil，比生群，edatraxate，defofamine，美可辛，地吖醌，依氟鳥氨酸（DFMO），elfomithine，依利醋銨，依託格魯，硝酸鎵，胞嘧啶，羥基脲，伊班膦酸鹽，香菇多糖，氯尼達明，米托胍腙，米托蒽醌，莫呱達醇，二胺硝吖啶，噴司他丁，蛋氨氮芥，吡柔比星，鬼臼酸，2-乙肼，甲基苄肼；PSK^® ；呱嗪二酮丙烷；根黴素；西佐；螺環鍺；細格孢氮雜酸；三亞胺醌；三氯三乙胺；單端孢黴烯（特別是T-2毒素，疣孢菌素A，杆孢菌素A和anguidine），聚氨酯，siRNA，反義藥物和核酸分解酶； 2）自身免疫疾病藥物，包括但不限於，環孢菌素、環孢菌素A、氨基己酸、硫唑嘌呤、溴隱亭、苯丁酸氮芥、氯喹、環磷醯胺、皮質類固醇（例如安西奈德、倍他米松、布地奈德、氫化可的松、氟尼縮松、丙酸氟替卡松、氟可龍達那唑、地塞米松、曲安奈德、二丙酸倍氯米松）、DHEA、依那西普、羥基氯喹、英夫利昔單抗、美洛昔康、甲氨蝶呤、麥考酚酸酯、潑尼松、西羅莫司、他克莫司； 3）抗傳染病劑包括，但不限於：a）.氨基糖苷類：丁胺卡那黴素、武夷黴素慶大黴素（奈替米星、西索米星、異帕米星）、潮黴素、卡那黴素（丁胺卡那黴素、阿貝卡星、氨基去氧卡那黴素、地貝卡星、妥布黴素）、新黴素（新黴素 B、巴龍黴素、核糖黴素）、奈替米星、大觀黴素、鏈黴素、妥布黴素、甲基姿蘇黴素；b）. 醯胺醇類：疊氮氯黴素、氯黴素、氟甲碸黴素、甲碸黴素； c）. 安沙黴素類：格爾德黴素、除莠黴素； d）. 碳青黴烯類：比阿培南、多尼培南、厄他培南、亞胺培南/西司他丁、美羅培南、帕尼培南； e）. 頭孢類：碳頭孢烯（氯碳頭孢）、頭孢乙腈、頭孢克洛、頭孢拉定、頭孢羥氨苄、頭孢羅寧、頭孢噻啶、頭孢噻吩或頭孢菌素、頭孢氨苄、頭孢來星、頭孢孟多、頭孢匹林、頭孢三嗪、頭孢氮氟、頭孢西酮、頭孢唑啉、頭孢拉宗、頭孢卡品、頭孢達肟、頭孢吡肟、頭孢米諾、頭孢西丁、頭孢丙烯、頭孢沙定、頭孢替唑、頭孢呋辛、頭孢克肟、頭孢地尼頭孢妥侖、頭孢吡肟、頭孢他美、頭孢甲肟、頭孢地嗪、頭孢尼西、頭孢呱酮、頭孢雷特、頭孢噻肟、頭孢替安、頭孢唑蘭、頭孢氨苄、頭孢咪唑、頭孢匹胺、頭孢匹羅、頭孢泊肟、頭孢丙烯、頭孢喹肟、頭孢磺啶、頭孢他啶、頭孢特侖、頭孢布烯、頭孢噻林、頭孢唑肟、頭孢、頭孢曲松、頭孢呋辛、頭孢唑喃、頭黴素（頭孢西丁、頭孢替坦、頭孢美唑）氧頭孢烯（氟氧頭孢、拉氧頭孢）； f）. 糖肽：博來黴素、萬古黴素（奧利萬星、特拉萬星）、替考拉甯（達巴萬星）雷莫拉寧； g）. 甘氨醯：如替加環素； h）. β-內醯胺酶抑制劑：青黴烷（舒巴坦、他唑巴坦）、克拉維烷（克拉維酸）； i）. 林可醯胺類：克林黴素、林可黴素； j）. 脂肽：達托黴素、A54145、鈣依賴性抗生素（CDA）； k）. 大環內酯類：阿奇黴素、喹紅黴素、克拉黴素、地紅黴素、紅黴素、氟紅黴素、交沙黴素、酮內酯類（泰利黴素、喹紅黴素）麥迪黴素、美奧卡黴素、竹桃黴素、利福黴素（利福平、利福平、利福布汀、利福噴丁）、羅他黴素、羅紅黴素、壯觀黴素、螺旋黴素、他克莫司（FK506）、醋竹桃黴素、泰利黴素； l）.單環β-內醯胺抗生素：氨曲南、替吉莫南； m）. 唑烷酮類：利奈唑胺； n）. 青黴素類：阿莫西林、氨苄西林（匹氨西林、海他西林、巴氨西林、美坦西林、酞氨西林）疊氮西林、阿洛西林、青黴素、苄星青黴素、苯氧基苄星青黴素、氯甲西林、普魯卡因青黴素、羧苄青黴素（卡茚西林）、鄰氯青黴素、雙氯青黴素、先鋒黴素、氟氯西林、美西林（氮卓脒青黴素雙酯）、美洛西林、甲氧西林、萘夫西林、苯唑西林、醋甲西林、青黴素、奈西林、青黴素、呱拉西林、苯丙西林、磺苄西林、替莫西林、替凱西林； o）. 多肽：桿菌肽、多粘菌素E、多粘菌素B； p）. 喹諾酮類藥物：阿拉沙星、巴羅沙星、環丙沙星、克林沙星、達氟沙星、二氟沙星、依諾沙星、恩諾沙星、Floxin、加雷沙星、加替沙星、吉米沙星、格帕沙星、曲伐沙星卡諾、左氧氟沙星、洛美沙星、麻保沙星、莫西沙星、那氟沙星、諾氟沙星、奧比沙星、氧氟沙星、培氟沙星、曲伐沙星、格帕沙星、西他沙星、司帕沙星、替馬沙星、妥舒沙星、曲伐沙星； q）. 菌素：普那黴素、奎奴普丁/達福普汀）； r）. 磺胺類藥物：磺胺米隆、百浪多息、磺胺醋醯、磺胺甲、磺胺、柳氮磺胺吡啶、磺胺異惡唑、甲氧苄氨嘧啶、甲氧苄啶 - 磺胺甲基異惡唑（複方新諾明）； s）. 類固醇抗菌藥物：如夫西地酸； t）. 四環素類：強力黴素、金黴素、氯羥四環素、地美環素、賴甲環素、氯甲烯土黴素、美他環素、米諾環素、土黴素、青呱四環素、羅利環素、四環素、甘氨醯（如替加環素）； u）. 其他類型的抗生素：番荔枝科、胂凡納明、細菌萜醇抑制劑（桿菌肽）、DADAL / AR抑制劑（環絲氨酸）、dictyostatin、海綿內酯、艾榴塞洛素、埃博黴素、乙胺丁醇、依託泊苷、法羅培南、夫西地酸、痢特靈、異煙肼、laulimalide、甲硝唑、莫匹羅星、mycolactones、NAM合成抑制劑（如磷黴素）、呋喃妥因、紫杉醇、平板黴素、吡嗪醯胺、奎奴普丁/達福普汀、利福平（利福平）、他唑巴坦替硝唑、番荔枝內酯； 4）抗病毒的藥物： a）. /融合抑制劑：aplaviroc、馬拉韋羅、維立韋羅、gp41的（恩夫韋）、PRO140、CD4（Ibalizumab）； b）. 整合酶抑制劑：拉替拉韋、埃替拉韋、globoidnan A； c）. 成熟抑制劑：貝韋立馬、vivecon； d）. 神經氨酸酶抑制劑：奧司他韋、紮那米韋、帕拉米韋； e）. 核苷和核苷酸：阿巴卡韋、阿昔洛韋、阿德福韋、氨多索韋、apricitabine、溴夫定、西多福韋克拉夫定、右艾夫他濱、去羥肌苷（DDI）、艾夫他濱、恩曲他濱（FTC）、恩替卡韋、泛昔洛韋、氟脲嘧啶（5-FU）、3'-氟置換的2'，3'-二去氧核苷衍生物（例如，3'-氟-2'，3'-二去氧胸苷（FLT）和3'-氟-2'，3'-雙去氧（FLG）福米韋生、更昔洛韋、碘苷、拉米夫定（3TC）、L-核苷（如β-L-胸苷、β-L-2'-去氧胞苷）、噴昔洛韋、Racivir、利巴韋林、stampidine、司他夫定（d4T的）、他利韋林（偉拉咪定）、替比夫定、替諾福韋、伐昔洛韋三氟胸苷、纈更昔洛韋、紮西他濱（DDC）、齊多夫定（AZT）； f）. 非核苷類：金剛烷胺、ateviridine、卡普韋林、二芳基嘧啶（依曲韋林、利匹韋林）、地拉韋啶、二十二烷醇、乙米韋林、依法韋侖、膦甲酸（磷醯基甲酸）、咪喹莫特、干擾素α、洛韋胺、洛德腺苷、他巴唑、奈韋拉平、NOV-205、聚乙二醇干擾素α、鬼臼毒素、利福平、金剛乙胺、瑞喹莫德（R-848）、醋胺金剛烷； g）. 蛋白酶抑制劑：安普那韋、阿紮那韋、博賽潑維、達蘆那韋、福沙那韋、茚地那韋、洛匹那韋、奈非那韋、pleconaril、利托那韋、沙奎那韋、特拉匹韋（VX-950）替拉那韋； h）. 其他類型的抗病毒的藥物：抗體酶、阿比朵爾、calanolides A、淺藍菌素、藍藻-N、二芳基嘧啶、表沒食子兒茶素沒食子酸酯（EGCG）、膦甲酸鈉、格瑞弗森、他利韋林（偉拉咪定）、羥基脲、KP-1461、米替福新、普來可那立、合成抑制劑、利巴韋林、seliciclib； 5）放射治療使用的放射性同位素。放射性同位素（放射性核素）的實例有³ H，¹¹ C，¹⁴ C，¹⁸ F，³² P，³⁵ S，⁶⁴ Cu，⁶⁸ Ga，⁸⁶ Y，⁹⁹ Tc，¹¹¹ In，¹²³ I，¹²⁴ I，125I，¹³¹ I，¹³³ Xe，¹⁷⁷ Lu，²¹¹ At或²¹³ Bi。放射性同位素標記的抗體可用於受體靶向成像實驗，或者可用於如本發明的抗體-藥物偶聯物的靶向治療（Wu et al Nature Biotechnology 2005，23（9）： 1137-1146）。細胞結合分子，例如抗體可以藉由本專利的連接體連結配位元體試劑，進行標記。配位體可以用文獻（Current Protocols in Immunology，Volumes 1 and 2，Coligen et al，Ed. Wiley-Interscience，New York，N.Y.，Pubs. （1991））所述的方法與放射性金屬結合、螯合或生成複合物。可以絡合金屬離子的螯合配位體包括DOTA，DOTP，DOTMA，DTPA和TETA（Macrocyclics，Dallas，Tex. USA）等； 6）另一種細胞結合分子-藥物偶聯物作為協同劑。較佳的協同偶聯物上的細胞毒性分子為： Tubulysin同系物、美登木素生物鹼同系物、紫杉醇（紫杉烷）同系物、CC-1065同系物、柔紅黴素和多柔比星化合物、鵝膏毒素同系物、苯並二氮呯二聚體（如吡咯苯並二氮呯的二聚體（PBD、托馬黴素、安麯黴素、吲哚苯並噻二氮卓類、咪唑苯並噻二氮卓類或惡唑烷苯並二氮卓類）、加利西黴素和烯二炔類抗生素化合物、放線菌素、重氮絲氨酸、博萊黴素、表柔比星、他莫昔芬、伊達比星、海兔毒素、澳瑞他汀（如MMAE 、MMAF、澳瑞他汀PYE、澳瑞他汀TP、澳瑞他汀2-AQ、6-AQ、EB （AEB）和EFP （AEFP））、多卡米星、格爾德黴素、氨甲喋呤、噻替派、長春堿、長春新堿、hemiasterlin、納沙醯胺、小金黴素、radiosumin、互花米草素、microsclerodermin、噻吩甲醯胺、埃斯呱黴素、PNU-159682，以及它們的其同系物及以上所述物質的衍生物； 7）其他免疫治療藥物例如：咪喹莫特，干擾素（如α，ß），粒細胞集落刺激因數，細胞因數，白介素（IL-1〜IL-35），抗體（如曲妥珠單抗，帕妥珠單抗，貝伐單抗，西妥昔單抗，帕尼單抗，英夫利昔單抗，阿達木單抗，巴厘昔單抗，達達克珠單抗，奧馬珠單抗，PD-1或PD-L1），蛋白結合藥物（如Abraxane），偶聯下列藥物的抗體：卡奇黴素衍生物，美登素衍生物（DM1和DM4），CC-1065，SN-38，伊喜替康，拓撲替康，拓撲異構酶I抑制劑，多卡黴素，PBD或IGN小溝結合劑，有效的紫杉醇衍生物，阿黴素，澳瑞他汀抗有絲分裂藥物（例如曲妥珠單抗-DM1），Trastuzumab deruxtecan（DS-8201a），Inotuzumab ozogamicin，Brentuximab vedotin，Sacituzumab govitecan，Glembatumumab vedotin，Lorvotuzumab mertansine，AN-152 LMB2，TP-38，VB4-845，Cantuzumab mertansine ， AVE9633，SAR3419，CAT-8015 （抗-CD22）， IMGN388，Mirvetuximab soravtansine （IMGN853），Enfortumab vedotin，Milatuzumab-doxorubicin，SGN-75（抗CD70），抗Her3-exetecan，抗-Trop2- exetecan，抗-CD79b-MMAE，抗-Her2-MMAE，抗-Trop2-MMAE，抗-Her2-MMAF，抗-Trop2-MMAF，抗-CD22-卡奇黴素衍生物，抗-CD22-MMAE，抗-Her2-澳瑞他汀衍生物，抗Muc1-澳瑞他汀衍生物，抗-cMet-澳瑞他汀衍生物或抗Claudin18.2-澳瑞他汀衍生物。 8）上述任何藥物的藥學上可接受的鹽、酸或衍生物。

在另一種協同免疫療法中，免疫檢查點抑制劑抗體，TCR（T細胞受體）T細胞抗體，CAR（嵌合抗原受體）T細胞抗體或B細胞受體（BCR）抗體，Natural killer（NK）細胞抗體或細胞毒細胞的抗體，或抗-CD3，CD4，CD8，CD16 （FcγRIII），CD19，CD20，CD22，CD25，CD27，CD30，CD33，CD37，CD38，CD40，CD40L，CD45RA，CD45RO，CD56，CD57，CD57^bright ，CD70，CD79，CD79b，CD123，CD125，CD138，TNFβ，Fas配位體，MHC I類分子（HLA-A，B，C），VEGF或NKR-P1抗原的抗體，較佳與本專利的偶聯物一起用於協同治療。

在另一個實施方案中，包含治療有效劑量的結構式為（I）或（VII）的偶聯物，或本發明中描述的其它任何偶聯物的藥物組合物，可以與其他治療劑，如化學治療劑，放射治療劑，免疫治療劑，自身免疫病症治療劑，抗感染劑或其他偶聯物協同投藥，以有效治療或預防癌症或自身免疫疾病或感染性疾病。

另外，本發明還涉及偶聯物的製備方法。本發明的偶聯物可以藉由熟習此項技術者公知的方法製備。偶聯物中抗有絲分裂劑可以藉由採用或者應用後文合成方法而製備，或經熟習此項技術者調整後來合成。適當的修飾和替代對於熟習此項技術者而言將是顯而易見的和眾所周知的，並且可以從科學文獻中容易地獲得。這些方法可以參見：R.C. Larock，Comprehensive Organic Transformations ，第二版，Wiley-VCH Publishers出版，1999。

進行本申請所述的反應時，可能有必要保護部分活性官能團，例如羥基、氨基、亞氨基、巰基和羧基，以避免副反應的發生。保護官能團的常見使用方法可參見P. G. Wuts and T.W. Greene，Greene's Protective Groups in Organic Synthesis，Wiley-Interscience出版；第四版（2006）。有些反應可能需要在酸堿存在時，或在適當的溶劑中進行。對酸、堿和溶劑並沒有特別的限制，只要沒有不利的影響，任何常規的酸、堿以及溶劑都可以在這裡使用。反應可以在廣泛的溫度範圍內進行。總的來說，反應溫度通常在-80°C - 150°C 之間比較容易操作（在室溫與100°C之間更好）。反應所需的時間同樣可以在很大的範圍裡變化，這取決於多種因素，尤其是反應溫度和所用溶劑的性質。一般地說，理想條件下的反應，3至20小時的反應時間就足夠了。

反應結束後的操作處理可以按常規方法進行。例如，可以藉由把溶劑從反應體系中蒸掉的方式回收反應產物。或者，如果必要的話，在把溶劑蒸出後，可以先把剩餘物倒入水中，再用與水不互溶的有機溶劑萃取，最後，蒸出萃取溶劑。此外，如有需要，產物還可藉由各種常見的方法進一步純化，如重結晶、沉降或各種層析層析的方法，如柱層析和製備薄板層析法。本發明中的抗有絲分裂劑及其偶聯物的合成見圖1-21。

本發明的細胞結合分子與Tubulysin衍生物的偶聯也在實例中有進一步的描述。當然，本發明並不局限於下述實例。實驗材料：

使用Bruker Esquire 3000系統獲得質譜資料。NMR圖譜在Bruker AVANCE300儀器上分析測得。化學位移（δ）以百萬分數（ppm）為單位報告，TMS為內標。使用Hitachi U1200分光光度計記錄紫外光譜。HPLC使用Agilent 1100 HPLC，該系統配有組分收集器和可變波長檢測器。在Analtech GF矽膠薄層層析板上進行薄層層析分析。氨基酸及其衍生物以及預載樹脂購於Merck Chemicals International Co.或Synthetech Co.或Peptides International Inc. 或 Chembridge International Co. 或 Sigma –Aldrich Co.。一些連接子，NHS酯/馬來醯亞胺連接子（AMAS、BMPS、GMBS、MBS、SMCC、EMCS或sulfo-EMCS、SMPB、SMPH、LC-SMCC、sulfo-KMUS、SM（PEG）₄ 、SM（PEG）₆ 、SM（PEG）₈ 、SM（PEG）₁₂ ，SM（PEG）₂₄ ；NHS酯/吡啶基二硫醇（SPDP，LC-SPDP或sulfo-LC-SPDP，SMPT，sulfo-LC-SMPT）；NHS酯類/鹵代乙醯基（SIA、SBAP、SIAB或sulfo-SIAB）；NHS酯/ Diazirine（SDA或sulfo-SDA、LC-SDA或sulfo-LC-SDA、SDAD或sulfo-SDAD）；馬來醯亞胺/醯肼（BMPH，EMCH，MPBH，KMUH）；吡啶基二硫醇/醯肼（PDPH）；異氰酸酯/馬來醯亞胺（PMPI）購自Thermo Fisher Scientific Co .，SPDB，SPP連接子是根據參考文獻製備的（Cumber，A.等，Bioconjugate Chem. ，1992，3 ，397–401）。 T-DM1和曲妥單抗來自基因泰克。所有其他化學品或無水溶劑均來自Sigma-Aldrich International或阿拉丁化工（上海）有限公司。

實例1.二叔丁基-1,2-雙（2-（叔丁氧基）-2-氧乙基）肼-1,2-二甲酸酯的合成。

向二叔丁基肼-1,2-二羧酸二叔丁酯（8.01 g，34.4 mmol）的DMF（150 mL）溶液中加入NaH（60％，2.76 g，68.8 mmol）。在室溫攪拌30分鐘後，加入2-溴乙酸叔丁酯（14.01g，72.1mmol）。將混合物攪拌隔夜，加入甲醇（3mL）淬滅，濃縮，用乙酸乙酯（100mL）和水（100mL）稀釋，分離，並將水層用乙酸乙酯（2×50mL）萃取。合併有機層，用MgSO₄ 乾燥，過濾，濃縮，並藉由SiO₂ 柱層析法純化（乙酸乙酯 /己烷1∶5至1∶3），得到標題化合物（12.98g，82％收率），為無色油狀物。 MS ESI m/z C₂₂ H₄₁ N₂ O₈ [M+H]⁺ ：計算值461.28，實測值461.40。

實例2. 2,2'-（肼-1,2-二基）二乙酸的合成。

向 1,2-雙（2-（2-（叔丁氧基）-2-氧乙基）肼-1,2-二羧酸二叔丁基酯（6.51 g，14.14 mmol）的 1,4-二噁烷（40 mL）中加入HCL（12 M，10mL）。將混合物攪拌30分鐘，用二噁烷（20mL）和甲苯（40mL）稀釋，濃縮並與二噁烷（20mL）和甲苯（40mL）蒸發至乾，得到粗品，用於下一步，無需進一步純化（2.15 g，103％產率，〜93％純度）。 MS ESI m/z C₄ H₉ N₂ O₄ [M+H]⁺ ：計算值149.05，實測值149.40。

實例3. 2,2'-（1,2-雙（（E）-3-溴丙烯醯基）肼-1,2-二基）二乙酸的合成。

向2,2'-（1,2-肼基）二乙酸（1.10g，7.43mmol）的四氫呋喃（50ml）和磷酸二氫鈉（0.1M，80ml，pH 6.0）的混合物中加入（E）-3-溴丙烯醯溴（5.01g，23.60mmol）。將混合物攪拌6小時，濃縮並在矽膠管柱上純化，用含有3%甲酸的水/乙腈（1：9）洗脫，得到目標化合物（2.35g，77%產率，-93%的純度）。MS ESI m/z C₁₀ H₁₁ Br₂ N₂ O₆ [M+H]⁺ ：計算值412.89，實測值413.50。

實例4. 2,2'-（1,2-雙（（E）-3-溴丙烯醯基）肼-1,2-二基）二乙醯氯的合成。

向2,2'-（1,2-雙（（E）-3-溴丙烯醯基） -1,2-肼基）二乙酸（210mg，0.509mmol）的二氯乙烷（15ml）溶液中加入草醯氯（ 505mg，4.01mmol），然後加入0.040ml DMF。在室溫下攪拌2小時後，將混合物濃縮，依次與二氯乙烷（2×20ml）和甲苯（2×15ml）共濃縮至乾，得到目標產物（245mg，107%產率），無需進一步純化（不穩定）。MS ESI m/z C₁₀ H₉ Br₂ Cl₂ N₂ O₄ [M+H]⁺ ：計算值448.82，450.82，452.82，454.82，實測值448.60，450.60，452.60，445.60。

實例5. 2,8-二側氧基-1,5-噁唑烷-5-羧酸叔丁酯的合成。

在4 °C下，向3,3'-亞氨基二丙酸（10.00g，62.08mmol）的1.0 N NaOH（300ml）溶液中，加入二碳酸二叔丁酯（22.10g，101.3mmol）的200ml THF溶液。添加1小時後，將混合物在4 °C下攪拌2小時。用0.2 M H₃ PO₄ 將混合物小心酸化至pH-4，真空濃縮，用二氯甲烷萃取，用硫酸鈉乾燥，濃縮後用矽膠管柱純化，用AcOH/MeOH/CH₂ Cl₂ （0.01：1：5）洗脫，得到3,3'-（（叔丁氧基羰基）亞氨基）二丙酸（13.62g，產率84%）。ESI MS m/z C₁₁ H₁₉ NO₆ [M+H]⁺ ：計算值262.27，實測值262.40。在0 °C，向3,3'-（（叔丁氧基羰基）亞氨基）二丙酸（8.0g，30.6mmol）的二氯甲烷（500ml）溶液中加入五氧化二磷（8.70g，61.30 mmol）。將混合物在0 °C下攪拌2小時，然後在室溫下攪拌1小時，藉由短矽膠管柱過濾，並用乙酸乙酯/ 二氯甲烷（1：6）洗脫。濃縮濾液，用乙酸乙酯/正己烷打漿，得到目標化合物（5.64g，74%產率）。ESI MS m/z C₁₁ H₁₇ NO₅ [M+H]⁺ ：計算值244.11，實測值244.30。

實例6. 2,5-二氧吡咯啶-1-基丙戊酸酯的合成。

在丙炔酸（5.00 g，71.4 mmol）的二氯甲烷（150 ml）溶液中加入N,N’-二異丙基乙胺（5 ml，28.7 mmol）、NHS（9.01g，78.3 mmol）和EDC（20.0g，104.1mmol），攪拌隔夜，藉由SiO₂ 柱層析法（乙酸乙酯/正己烷1：4）純化，濃縮得到無色油狀的目標化合物（9.30g，產率79%）。¹ H NMR （500 MHz，CDCl₃ ） δ 2.68 （s，1H），2.61 （s，4H）。MS ESI m/z C₇ H₅ NaNO₄ [M+Na]⁺ ：計算值190.02，實測值190.20。

實例7. 2-丙氨醯肼基甲酸叔丁酯的合成。

向丙炔酸（5.00 g，71.4 mmol）、肼基羧酸叔丁酯（9.45g，71.5 mmol）的二氯甲烷（150 ml）溶液中加入N,N’-二異丙基乙胺（5ml，28.7mmol）和EDC（20.0g，104.1mmol ），攪拌隔夜，藉由SiO₂ 柱層析法（乙酸乙酯/正己烷1：5）純化，濃縮得到呈無色油狀的目標化合物（7.92 g，產率84% ）。¹ H NMR （500 MHz，CDCl₃ ） δ 8.76 （m，2H），2.68 （s，1H），1.39 （s，9H）。MS ESI m/z C₅ H₁₂ NaN₂ O₂ [M+Na]⁺ ：計算值155.09，實測值155.26。

實例8.丙炔醯肼鹽酸鹽的合成。

將2-丙醇醯肼羧酸叔丁酯（4.01 g，30.35 mmol）溶解於1,4-二噁烷（12mL）中的與4ml 濃鹽酸在4 °C攪拌30分鐘，用二噁烷（30 ml）和甲苯（30 ml）稀釋，並減壓濃縮。將粗品用矽膠管柱純化，使用甲醇/二氯甲烷（5%至10%，含1%的甲酸）的混合物作為洗脫劑洗脫，得到目標化合物（2.11g，產率83%），ESI MS m/ z C₃ H₅ N₂ O [M+H]⁺ ：計算值85.03，實測值85.30。

實例9.化合物2的合成

在10-L反應釜中將2,2-二乙氧基乙腈（1.00 kg，7.74 mol，1.0 eq.）溶解於甲醇（6.0 L），在室溫下加入（NH₄ ）₂ S （48% 水溶液，1.41 kg，9.29 mol，1.2 eq.）。釜內溫度升至33 °C而後又降回室溫。攪拌隔夜後，濃縮反應液。向殘留物中加入乙酸乙酯（5 L），用飽和NaHCO₃ 溶液（4 × 1.0 L）洗，水相用乙酸乙酯（5 × 1.0 L）反萃。合併有機相，用飽和食鹽水（3 L）洗，之後用無水硫酸鈉乾燥，過濾後減壓濃縮。粗品用石油醚打漿，真空抽濾，收集固體並用石油醚洗滌。濾液濃縮後再用石油醚打漿，合併收集所得固體，總共得到1.1 kg （87% 產率）目標產物，為白色或亮黃色固體。¹ H NMR （500 MHz，CDCl₃ ） δ 7.81 （d，J = 71.1 Hz，2H），5.03 （s，1H），3.73 （dq，J = 9.4，7.1 Hz，2H），3.64 （dq，J = 9.4，7.0 Hz，2H），1.25 （t，J = 7.1 Hz，6H）。

實例10.化合物3的合成

在5-L 三頸圓底瓶上裝備一個回流冷凝管和一個恒壓滴液漏斗。在其中加入分子篩（3Å，500 g）和硫醯胺2 （350 g，2.14 mol，1.0 eq.）的乙醇溶液（3 L），30分鐘內滴入3-溴丙酮酸乙酯（純度80%，404 mL，2.57 mol，1.2 eq.）。滴加過程中內溫稍有上升，隨後將反應液加熱至回流並攪拌30分鐘。將反應液冷卻至室溫後用矽藻土過濾除去不溶物，並用乙酸乙酯洗濾餅。濾液濃縮後的粗產物和矽膠（1.5 kg）混合拌勻，藉由矽膠管柱（10 kg）柱層析（10-20%乙酸乙酯/石油醚梯度洗脫）純化，得到棕色油狀物，為目標化合物（509 g，92% 產率）。

實例11.化合物4的合成

將縮醛（300 g，1.16 mol）的丙酮（3.0 L）溶液加熱至回流，在1.0小時內滴加4N HCl溶液（250 mL）。TLC 顯示起始原料反應完全。反應液減壓濃縮後分離兩相。有機相加入乙酸乙酯稀釋（1.5 L），並依次用飽和NaHCO₃ 水溶液（1.0 L）、水（1.0 L）和食鹽水（1.0 L）洗，然後用無水硫酸鈉乾燥。合併所有的水相並用乙酸乙酯反萃，並用無水硫酸鈉乾燥有機相。濾出乾燥劑後濃縮有機相，所得粗產品用石油醚/乙酸乙酯（5：1）溶液打漿，析出的固體經真空過濾收集，並用石油醚/乙酸乙酯（10：1）溶液洗。濾液濃縮用柱層析純化（0-15%乙酸乙酯/石油醚），所有固體合併，得目標產物40 g （43% 產率），為白色或亮黃色固體。¹ H NMR （500 MHz，CDCl₃ ） δ 10.08 – 10.06 （m，1H），8.53 – 8.50 （m，1H），4.49 （q，J = 7.1 Hz，2H），1.44 （t，J = 7.1 Hz，3H）。 MS ESI m/z C₇ H₈ NO₃ S [M+H]⁺ ：計算值186.01，實測值186.01.

實例12.化合物6的合成

將NaN₃ （740 g，11.4 mol）溶於水（2.0 L）後加入二氯甲烷（2.0 L）並冷卻至 0 °C，向該溶液中加入Tf₂ O（700 mL，4.10 mol，1.8 eq.），歷時1.5 小時。加完後在0 °C 下繼續攪拌3 小時。分離出有機相，水相用二氯甲烷萃取（2 × 500 mL）。合併有機相，用飽和NaHCO₃ （3 × 1.0 L）洗。室溫下將此二氯甲烷溶液加入到（L）-異亮氨酸（300 g，2.28 mol，1.0 eq.），碳酸鉀（472 g，3.42 mol，1.5 eq.），五水硫酸銅（5.7 g，22.8 mmol，0.01 eq.）的混合甲醇/水（1：1 v/v， 6.0 L）溶液中。加料過程中反應體系內溫度會稍微升高。混合液在室溫下攪拌16小時，減壓蒸去溶劑，水相用濃鹽酸（大約280 mL）酸化至pH 6-6.5 （約280 mL），然後用磷酸鹽緩衝液稀釋（0.25 M，pH 6.2，6.0 L），用乙酸乙酯（6 × 2.0 L）洗去磺酸胺副產物。水相用濃鹽酸（大約400 mL）酸化至pH 3後用乙酸乙酯（4 × 2.0 L）萃取。合併有機相，飽和食鹽水洗（2.0 L），無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮得產物6 （320 g，89% 產率），為亮黃色油狀物。¹ H NMR （500 MHz，CDCl₃ ） δ 12.01 （s，1H），3.82 （d，J = 5.9 Hz，1H），2.00 （ddd，J = 10.6，8.6，5.5 Hz，1H），1.54 （dqd，J = 14.8，7.5，4.4 Hz，1H），1.36 – 1.24 （m，1H），1.08 – 0.99 （m，3H），0.97 – 0.87 （m，3H）。

實例13.化合物10的合成

在N₂ 保護下室溫下向（S）- 叔丁基亞磺酸胺（100 g，0.825 mol，1.0 eq.）的四氫呋喃（1 L）溶液中加入Ti（OEt）₄ （345 mL，1.82 mol，2.2 eq.）和 3-甲基-2-丁酮（81 mL，0.825 mol，1.0 eq.）。加熱反應液，回流16小時後冷卻至室溫，然後倒入冰水（1L）。過濾並且用乙酸乙酯洗濾餅。分離濾液中的有機相，無水硫酸鈉乾燥後減壓濃縮，其殘留物減壓蒸餾（15-20 torr，95 °C）得目標產物10 （141 g，90% 產率），為黃色油狀物。¹ H NMR （500 MHz，CDCl3） δ 2.54 – 2.44 （m，1H），2.25 （s，3H），1.17 （s，9H），1.06 （dd，J = 6.9，5.1 Hz，6H）。 MS ESI m/z C₉ H₁₉ NaNOS [M+Na]⁺ ：計算值212.12，實測值212.11。

實例14.化合物11的合成

在N₂ 保護下，於-78 °C下向二異丙胺（264 mL，1.87 mol，1.65 eq.）的四氫呋喃溶液中加入正丁基鋰溶液（2.5 M，681 mL，1.70 mol，1.5 eq.）。反應在30分鐘內升溫至0 °C 然後重新冷卻至-78 °C，向其中加入化合物10 （258 g，1.36mol，1.2 eq.）並用四氫呋喃（50 mL）沖洗。攪拌1小時後滴加ClTi（Oⁱ Pr）₃ （834 g，3.17 mol，2.8 eq.）的四氫呋喃（1.0 L）溶液。滴加完成1小時後再緩慢滴入化合物4 （210 g，1.13 mol，1.0 eq.）的四氫呋喃（500 mL）溶液，耗時1小時。所得溶液在-78 °C繼續攪拌3小時。TLC監測反應進行完全後，用乙酸和四氫呋喃（體積比1：1，300 mL）的混合液淬滅反應，而後將反應液倒入鹽水（2 L），用乙酸乙酯萃取（8 × 1L）。有機相用水和食鹽水洗，無水硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮。殘留物經柱層析（二氯甲烷/乙酸乙酯/石油醚 2：1：2）純化，得化合物11 （298 g，74% 產率），為無色油狀物。¹ H-NMR （500 MHz，CDCl₃ ） δ 8.13 （s，1H），6.63 （d，J = 8.2 Hz，1H），5.20 – 5.11 （m，1H），4.43 （q，J = 7.0 Hz，2H），3.42 – 3.28 （m，2H），2.89 （dt，J = 13.1，6.5 Hz，1H），1.42 （t，J = 7.1 Hz，3H），1.33 （s，9H），1.25 – 1.22 （m，6H）。 MS ESI m/z C₁₆ H₂₆ NaN₂ O₄ S₂ [M+Na]⁺ ：計算值397.13，實測值397.11。

實例15.化合物12的合成

將化合物11 （509 g，1.35 mol，1.0 eq.）溶於四氫呋喃（200 mL），冷卻至-78 °C，向其中緩慢加入Ti（OEt）₄ （570 mL，2.72 mol，2.0 eq.），加完後攪拌1小時。然後在90分鐘內分批加入NaBH₄ （51.3 g，1.36 mol，1.0 eq.），反應在-78 °C 攪拌 3 小時。TLC 監測發現起始原料仍有剩餘。緩慢加入EtOH （50 mL），繼續攪拌1.5小時後將反應液倒入飽和食鹽水（2 L，含250 mL HOAc），升至室溫。經過矽藻土過濾，分離有機相。水洗、飽和食鹽水洗、無水硫酸鈉乾燥有機相、過濾並濃縮。殘留物經柱層析法（乙酸乙酯/石油醚 1：1）純化得化合物12 （364 g，71% 產率），為白色固體。¹ H NMR （500 MHz，CDCl₃ ） δ 8.10 （s，1H），5.51 （d，J = 5.8 Hz，1H），5.23 – 5.15 （m，1H），4.41 （q，J = 7.0 Hz，2H），3.48 – 3.40 （m，1H），3.37 （d，J = 8.3 Hz，1H），2.29 （t，J = 13.0 Hz，1H），1.95 – 1.87 （m，1H），1.73 – 1.67 （m，1H），1.40 （t，J = 7.1 Hz，3H），1.29 （s，9H），0.93 （d，J = 7.3 Hz，3H），0.90 （d，J = 7.2 Hz，3H）. MS ESI m/z 計算值 C₁₆ H₂₈ NaN₂ O₄ S₂ [M+Na]⁺ ：399.15，實測值 399.14。

實例16.化合物13的合成

在0 °C下，於化合物12 （600 g，1.60 mol，1.0 eq.）的乙醇（590 mL）溶液中加入4 N HCl的1,4-二氧六環（590 mL）溶液。反應逐漸升至室溫後攪拌2.5 小時。過濾收集析出的白色固體並用乙酸乙酯洗。濾液濃縮後用乙酸乙酯打漿。合併兩次獲得的白色固體，共446 g （90% 產率）。

實例17.化合物14的合成

將疊氮-Ile-OH （6 ，153 g，0.97 mol，2.0 eq.）溶於四氫呋喃（1.5 L）並冷卻至0 °C，依次加入 NMM （214 mL，1.94 mol，4.0 eq.）和氯甲酸異丁酯（95 mL，0.73 mol，2.0 eq.）。在0 °C 攪拌1小時後分批加入化合物13 （150 g，0.49 mmol，1.0 eq.）。在0 °C 攪拌30 分鐘後，逐漸升至室溫並繼續攪拌2小時。反應在0 °C下加冰水淬滅並用乙酸乙酯萃取三遍。合併有機相用1N HCl洗，飽和NaHCO₃ 洗和食鹽水洗，無水硫酸鈉乾燥。過濾濃縮，殘留物經柱層析（0-30% 乙酸乙酯/石油醚）純化得到白色固體（140 g，70% 產率）。¹ H NMR （500 MHz，CDCl3） δ 8.14 （s，1H），6.57 （d，J = 8.9 Hz，1H），4.91 （d，J = 11.1 Hz，1H），4.44 （dd，J = 13.2，6.3 Hz ，2H），4.08 – 3.95 （m，2H），2.21 （dd，J = 24.4，11.5 Hz，2H），1.90 – 1.79 （m，3H），1.42 （t，J = 6.6 Hz，3H），1.37 – 1.27 （m，2H），1.11 （d，J = 6.4 Hz，3H），1.01 – 0.94 （m，9H）。MS ESI m/z 計算值C₁₈ H₃₀ N₅ O₄ S [M+H]⁺ ：412.19，實測值 412.19。

實例18.化合物15的合成

在 0 °C下依次向化合物14 （436 g，1.05 mol，1.0 eq.）的二氯甲烷（50 mL）溶液中加入咪唑（94 g，1.37 mmol，1.3 eq.）和三乙基氯矽烷（222 mL，1.32 mol）。反應液歷時1小時升至室溫後，繼續攪拌1小時。加入飽和食鹽水淬滅，分出有機相，水相用乙酸乙酯萃取。合併後的有機相經乾燥、過濾、濃縮後用柱層析（15-35% 乙酸乙酯 / 石油醚）純化得產物15 （ 557.4 g ，95% 產率），為無色油狀物。¹ H NMR （500 MHz，CDCl₃ ） δ 8.12 （s，1H），6.75 （d，J = 8.0 Hz，1H），5.20 – 5.12 （m，1H），4.44 （q，J = 7.0 Hz，2H），4.06 – 3.97 （m，1H），3.87 （d，J = 3.8 Hz，1H），2.14 （d，J = 3.8 Hz，1H），2.01 – 1.91 （m，3H），1.42 （t，J = 7.1 Hz，3H），1.34 – 1.25 （m，2H），1.06 （d，J = 6.8 Hz，3H），1.00 – 0.93 （m，18H），0.88 （dd，J = 19.1，6.8 Hz，6H）. MS ESI m/z C₂₄ H₄₄ N₅ O₄ SSi [M+H]⁺ ：計算值526.28，實測值 526.28。

Example19 . 化合物16 的合成

在0^o C下，向化合物15 （408 g，0.77 mol，1.0 eq.）和碘甲烷（145 mL，2.32 mol，3.0 eq.）的四氫呋喃（4 L）溶液中加入鈉氫（60%，62.2 g，1.55 mol，2.0 eq.）。將所得的反應液在0^o C攪拌隔夜，而後倒入激烈攪拌的冰水飽和氯化銨（5 L）溶液中。用乙酸乙酯（3 × 500 mL）萃取。合併後的有機相經乾燥、過濾、濃縮後用柱層析（15-35% 乙酸乙酯 / 石油醚）純化得產物16 （388 g，93% 產率），為亮黃色油狀物。¹ H NMR （500 MHz，CDCl₃ ） δ 8.09 （s，1H），4.95 （d，J = 6.6 Hz，1H），4.41 （q，J = 7.1 Hz，2H），3.56 （d，J = 9.5 Hz，1H），2.98 （s，3H），2.27 – 2.06 （m，4H），1.83 – 1.70 （m，2H），1.41 （t，J = 7.2 Hz，3H），1.29 （ddd，J = 8.9，6.8，1.6 Hz，3H），1.01 （d，J = 6.6 Hz，3H），0.96 （dt，J = 8.0，2.9 Hz，15H），0.92 （d，J = 6.6 Hz，3H），0.90 （d，J = 6.7 Hz，3H）. MS ESI m/z C₂₅ H₄₆ N₅ O₄ SSi [M+H]⁺ ：計算值540.30，實測值 540.30。

實例20.化合物17的合成

向化合物16 （1.01 g，1.87 mmol）的甲醇（15 mL）溶液中滴入0.1N HCl直到pH為中性。加入Pd/C （10 wt%，583 mg）後將該混合溶液在H₂ （1 atm）環境於室溫攪拌16小時。濾去Pd/C，甲醇洗。濾液旋乾，殘留物複溶於乙酸乙酯（50 mL）中，用無水硫酸鈉乾燥，過濾後濃縮得化合物17 （900 mg，94% 產率），為淺黃色油狀物。

實例21.化合物22的合成

向D-呱啶酸（10.0 g，77.4 mmol，1.0 eq.）的甲醇（100 mL）溶液中加入甲醛（37% 水溶液，30.8 mL，154.8 mmol，2.0 eq.）和Pd/C （10 wt%，1.0 g）。將該反應液在H₂ （1 atm）環境中攪拌隔夜，而後用矽藻土過濾，甲醇洗。濾液濃縮得化合物22 （10.0 g，90%產率），為白色固體。

實例22.化合物23的合成

向D-N -甲基呱啶酸（2.65 g，18.5 mmol）的乙酸乙酯（50 mL）溶液中加入五氟苯酚（3.75 g，20.4 mmol）和DCC （4.21 g，20.4 mmol）。反應在室溫下攪拌16 小時，矽藻土過濾，用10 mL 乙酸乙酯洗。濾液不用進一步純化，直接使用。

實例23.化合物28的合成

將2-甲基丙氨酸（500 g，4.85 mol，1.0 eq.），甲醛（37%水溶液，1.0 L，12.1 mol，2.5 eq.）和甲酸（1.0 L）的混合液加熱至回流（80 °C）。攪拌3.0小時後冷卻至室溫，加入 6 N HCl （850 mL），而後濃縮反應液。過濾收集所得的固體並用乙酸乙酯洗三遍（1.0 L）。將固體溶於水（1.5 L）並用4N NaOH （約1.0 L）中和至pH 7。濃縮並用乙醇（2.0 L）共沸以除水。殘留物用甲醇（2.0 L）溶解，過濾除去 NaCl固體，乙酸乙酯洗。濾液濃縮後得白色固體639.2 g，包含有少量NaCl，可直接使用不用進一步純化。

實例24.化合物29的合成

向化合物2-（二甲基氨基）-2-甲基丙酸（97 g，0.74 mol）的乙酸乙酯（1 L）溶液中加入五氟苯酚（163 g，0.88 mol）和DIC （126 mL，0.81 mol）。反應室溫攪拌24小時後用矽藻土過濾，用10mL乙酸乙酯洗。濾液不經進一步純化直接使用。

實例25.化合物30的合成

向五氟苯基酯23 的乙酸乙酯溶液中加入幹Pd/C（10 wt%，300 mg）和疊氮化合物16 （3.33 g，6.61 mmol）。反應液在氫氣（1 atm）環境中攪拌27小時，而後用矽藻土過濾，乙酸乙酯洗。濾液旋乾經柱層析（ 0-5% 甲醇 / 乙酸乙酯）純化得化合30 （3.90 g，86% 產率）。 MS ESI m/z C₃₂ H₅₉ N₄ O₅ SSi [M+H]⁺ 計算值 639.39，實測值 639.39。

實例26.化合物31的合成

將化合物30 （3.90 g，6.1 mmol）溶於乙酸/水/四氫呋喃（v/v/v 3：1：1，100 mL）混合溶液中，室溫攪拌48小時。然後濃縮，殘留物經柱層析（2：98至15：85 甲醇/乙酸乙酯）純化得化合物31 （2.50 g，兩步產率72%）. MS ESI m/z C₂₆ H₄₅ N₄ O₅ S [M+H]⁺ ：計算值 525.30，實測值 525.33。

實例27.化合物32的合成

在0 °C下將LiOH （0.4 N，47.7 mL，19.1 mmol，4.0 eq.）水溶液加入化合物31 （2.50 g，4.76 mmol，1.0 eq.）的二噁烷（47.7 mL）溶液中。室溫攪拌2小時後濃縮。殘留物經柱層析（100% 二氯甲烷至二氯甲烷/甲醇/氨水 80：20：1）純化得化合物32 （2.36 g，99% 產率），為無定形白色固體。MS ESI m/z C₂₄ H₄₁ N₄ O₅ S [M+H]⁺ ：計算值 497.27，實測值 497.28。

實例28.化合物33的合成

在0 °C下向化合物32 （2.36 g，4.75 mmol）的吡啶（50 mL）溶液中滴入乙酸酐（2.25 mL，24 mmol）。反應經2小時逐漸升至室溫，並繼續攪拌24小時。濃縮後加入二噁烷/水（v/v 1：1，10 mL）混合液攪拌1小時，以破壞可能生成的酸酐。濃縮後的殘留物經柱層析（100% 二氯甲烷至二氯甲烷/甲醇/氨水 50：50：1）純化，得化合物33 （2.25 g，88% 產率）為無定形白色固體。MS ESI m/z C₂₆ H₄₃ N₄ O₆ S [M+H]⁺ ：計算值 539.28，實測值 539.28。

實例29.化合物38的合成

向上述五氟苯基酯29 的乙酸乙酯溶液中加入化合物16 （200 g，0.37 mol）和幹的Pd/C （10 wt%，10 g）。反應液在氫氣（1 atm）環境中攪拌27小時。矽藻土過濾，乙酸乙酯洗。合併的有機相濃縮後經柱層析（0-5% 甲醇/乙酸乙酯）純化得化合物38 （184 g，79% 產率）. MS ESI m/z C₃₁ H₅₈ N₄ O₅ SSi [M+H]⁺ ：計算值 627.39，實測值 627.39。

實例30.化合物39的合成

將化合物38 （200 g，0.32 mmol）溶於乙酸/水/四氫呋喃（v/v/v 3：1：1，638 mL）混合溶液中，室溫攪拌4天。反應液濃縮後加甲苯共沸濃縮，此步驟重複兩遍後得化合物39 ，直接用於下一步反應。MS ESI m/z C₂₅ H₄₅ N₄ O₅ S [M+H]⁺ ：計算值 513.30，實測值 513.30。

實例31.化合物40的合成

在 0 °C下將氫氧化鋰（0.4 N，600 mL，2.55 mol，8.0 eq.）的水溶液加入化合物39 （160 g，0.319 mol，1.0 eq.）的甲醇（1.2 L）溶液中。反應在室溫攪拌2小時後濃縮。經柱層析（100%二氯甲烷至80：20：1 二氯甲烷/甲醇/氨水）得化合物40 （140 g，兩步產率91%）為無定形白色固體。MS ESI m/z C₂₃ H₄₀ N₄ O₅ S [M+H]⁺ ：計算值 485.27，實測值 485.27。

實例32.化合物41的合成

將化合物27 （143 g，0.30 mol，1.0eq.）和DMAP （0.36 g，2.95 mmol，0.01eq.）溶於無水四氫呋喃（1.4 L）與無水DMF （75 mL）的混合溶液中。冷卻至0 °C，加入三乙胺（82.2 mL，0.59 mmol，2.0eq.）和乙酸酐（56 mL，0.59 mmol，2.0eq.）。反應逐漸升至室溫並攪拌24小時。濃縮後經柱層析（5-50% 甲醇/二氯甲烷）純化得化合物41 （147 g，95%產率），為無定形白色固體。MS ESI m/z C₂₅ H₄₄ N₄ O₆ S [M+H]⁺ ：計算值 527.28，實測值 527.28。

實例33.化合物41a的合成

在室溫下的氮氣環境中，向化合物41（5.0g，9.5mmol，1.0eq.）的無水二氯甲烷（100mL）溶液中加入EDC（4.6g，23.8mmol，2.5 eq.）和五氟苯酚（4.4g，23.8mmol，2.5eq.）。將混合物在室溫下攪拌2小時，然後在二氯甲烷（100mL）中稀釋，用水（2×200mL）和鹽水（200mL）洗滌，經無水硫酸鈉乾燥，過濾、濃縮，並藉由矽膠管柱層析（50% EtOAc/PE）純化，得到白色固體狀的化合物41a（5.2g，產率79%）。MS ESI m/z C₃₁ H₄₂ F₅ N₄ O₆ S [M+H]⁺ ：計算值693.27，實測值693.27。.

實例34.化合物95的合成

向配備有機械攪拌棒的500 mL 圓底瓶中加入三苯基膦（100 g，381 mmol，1.0eq.）和2-溴丙酸乙酯（100 mL，762 mmol，2.0eq.）。反應液在N₂ 保護下加熱至50 °C，攪拌隔夜。當白色固體（PPh₃ ）全部溶解後，大量的白色產物開始析出。經石油醚/乙酸乙酯打漿後抽濾收集白色固體，得化合物95 （135 g，80% 產率）。MS ESI m/z C₂₃ H₂₄ O₂ P [M-Br]⁺ ：計算值363.15，實測值 363.13.。

實例35.化合物96合成

在劇烈的攪拌下將化合物95 （135.42 g，305.7 mmol）的二氯甲烷（500 mL）溶液加入到10% NaOH （450 mL）水溶液中。有機相立即變黃，攪拌30分鐘後，TLC顯示反應完全。分離出有機相，水相用二氯甲烷（2 × 200 mL）萃取。合併後的有機相經飽和食鹽水洗，無水硫酸鈉乾燥後濃縮得黃色固體96 （104 g，94% 產率）。 MS ESI m/z C₂₃ H₂₄ O₂ P [M+H]⁺ ：計算值362.14，實測值 363.13。粗產物直接用於下一步。

實例36.化合物98的合成

向Boc-L-酪氨酸甲酯（670 g，2.27mol，1.1eq.），碳酸鉀（358 g，2.5mol，1.1eq.）和碘化鉀（38 g，0.227mol，0.1eq.）的丙酮（3L）溶液中緩慢加入苄基溴（283 mL，2.38mol，1.05eq.）。回流隔夜，冷卻後加入水（6L），用乙酸乙酯（5×100 L）萃取。合併後的有機相用飽和食鹽水（2L）洗，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮後經矽膠管柱層析（4：1 石油醚/乙酸乙酯）得白色固體98 （795 g，91%產率）.¹ H NMR （500 MHz，CDCl₃ ） δ 7.43 （d，J = 7.0 Hz，2H），7.38 （t，J = 7.4 Hz，2H），7.32 （t，J = 7.2 Hz，1H），7.04 （d，J = 8.5 Hz，2H），6.91 （d，J = 8.6 Hz，2H），5.04 （s，2H），4.55 （d，J = 6.9 Hz，1H），3.71 （s，3H），3.03 （qd，J = 14.0，5.8 Hz，2H），1.43 （s，9H）。 MS ESI m/z C₂₂ H₂₈ NO₅ [M+H]⁺ ：計算值 386.19，實測值 386.19。

實例37.化合物99的合成

在-78°C下向化合物98 （380 g，987 mmol，1.0eq.）的無水二氯甲烷（1L）溶液中緩慢滴加DIBAL （1.0 M 正己烷溶液，2.9 L，2.9eq.），歷時3小時。加完後用3 L乙醇淬滅反應。滴加1N HCl 至pH 4。所得混合液逐漸升至0 °C，分出有機相，水相用乙酸乙酯（3 × 3 L）萃取。合併後的有機相用飽和食鹽水洗，無水硫酸鈉乾燥，並濃縮。經石油醚/乙酸乙酯打漿得白色固體99 （263 g，75% 產率）. 1H NMR （500 MHz，CDCl3） δ 9.65 （s，1H），7.45 （d，J = 7.1 Hz，2H），7.41 （t，J = 7.4 Hz，2H），7.35 （t，J = 7.1 Hz，1H），7.11 （d，J = 8.6 Hz，2H），6.95 （d，J = 8.6 Hz，2H），5.07 （s，2H），4.42 （dd，J = 12.4，6.1 Hz，1H），3.09 （d，J = 6.2 Hz，2H），1.46 （s，9H）. MS ESI m/z C₂₁ H₂₆ NO₄ [M+H]⁺ ：計算值 356.18，實測值 356.19。

實例38.化合物100的合成

室溫下，向化合物99 （81.4 g，229 mmol，1.0eq.）的無水二氯甲烷（800 mL）溶液中加入葉立德96 （2.0 eq.）的無水二氯甲烷（800 mL）溶液，歷時30分鐘。反應在室溫攪拌隔夜後濃縮，經矽膠管柱層析（6：1 石油醚/ 乙酸乙酯）純化後得白色固體100 （63.4 g，63% 產率）.¹ H NMR （500 MHz，CDCl₃ ） δ 7.45 – 7.41 （m，2H），7.40 – 7.35 （m，2H），7.33 （d，J = 7.2 Hz，1H），7.10 – 7.06 （m，2H），6.92 – 6.88 （m，2H），6.50 （dd，J = 8.8，1.3 Hz，1H），5.04 （s，2H），4.57 （s，2H），4.18 （q，J = 7.1 Hz，2H），2.86 （d，J = 8.5 Hz，1H），2.72 （dd，J = 13.6，6.8 Hz，1H），1.71 （d，J = 1.4 Hz，3H），1.41 （d，J = 2.2 Hz，9H），1.28 （td，J = 7.5，5.1 Hz，4H）. MS ESI m/z C₂₆ H₃₃ NaNO₅ [M+Na]⁺ ：計算值 462.24，實測值 462.22。

實例39.化合物101的合成

在氫化反應瓶中將Pd/C （1.83 g，10 wt%，50% 水）加入到化合物100 （30.2 g，68.9 mmol）的四氫呋喃（100 mL）與甲醇（300 mL）混合溶液中。混合物在1 atm H₂ 環境下振搖隔夜。矽藻土過濾，濾液濃縮得化合物101 （25.0 g，接近理論產率），為無色油狀物。¹ H NMR （500 MHz，CDCl₃ ） δ 6.99 （d，J = 7.0 Hz，2H），6.72 （d，J = 7.6 Hz，2H），4.39 （s，1H），4.18 – 4.04 （m，2H），3.82 （s，1H），2.60 （dd，J = 37.2，20.9 Hz，4H），1.95 – 1.81 （m，1H），1.39 （s，11H），1.24 （dd，J = 9.5，4.3 Hz，3H），1.13 （t，J = 8.9 Hz，3H）. MS ESI m/z C₁₉ H₃₁ NO₅ [M+H]⁺ ：計算值 352.20，實測值 352.19。

實例40.化合物102的合成

在室溫下向化合物101 （5.96 g，35.9 mmol，1.0eq.）的無水二氯甲烷（200 mL）溶液中加入乙酸酐（3.2 mL，33.9 mmol，2.0eq.）和硝酸（65%-68%水溶液，3.5 mL，50.79 mmol，3.0eq.）。室溫攪拌30分鐘後，TLC顯示反應完全。反應液用水（3 × 200 mL）洗，水相用二氯甲烷（3 × 100 mL）反萃。合併的二氯甲烷相用飽和食鹽水洗，無水硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮。經矽膠管柱層析（5：1 石油醚/ 乙酸乙酯）純化得化合物102 （4.18 g，72% 產率），為一黃色固體。¹ H NMR （500 MHz，CDCl₃ ） δ 10.49 （s，1H），7.89 （s，1H），7.44 （d，J = 8.4 Hz，1H），7.09 （d，J = 8.6 Hz，1H），4.32 （d，J = 8.3 Hz，1H），4.12 （dd，J = 14.0，7.0 Hz，2H），3.80 （s，1H），2.76 （dd，J = 13.0，6.8 Hz，2H），2.59 （s，1H），1.88 （s，1H），1.37 （t，J = 8.7 Hz，9H），1.25 （dd，J = 13.5，6.9 Hz，4H），1.16 （t，J = 8.0 Hz，3H）. MS ESI m/z C₁₉ H₂₈ NaN₂ O₇ [M+Na]⁺ ：計算值 419.19，實測值 419.17。

實例41.化合物103的合成

在室溫下，向化合物102 （15.3 g，38.6 mmol，1.0eq.）的四氫呋喃（100 mL）與甲醇（100 mL）混合溶液中加入LiOH· H₂ O （16.3 g，389 mmol，10.0eq.）的水溶液（190 mL）。反應室溫攪拌40分鐘後，加水（400 mL）稀釋並用1N KHSO₄ 調至pH 3-4。用乙酸乙酯（3 × 300 mL）萃取後，有機相用飽和食鹽水洗，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮得103 （14.4 g，約100%產率），為一黃色固體。¹ H NMR （500 MHz，CDCl₃ ） δ 10.48 （s，1H），7.98 – 7.88 （m，1H），7.42 （dd，J = 18.4，8.2 Hz，1H），7.14 – 7.03 （m，1H），4.48 （d，J = 8.6 Hz，1H），3.90 （s，1H），2.82 – 2.53 （m，3H），1.97 – 1.82 （m，2H），1.42 – 1.27 （m，10H），1.21 （d，J = 6.7 Hz，4H）. MS ESI m/z C₁₇ H₂₃ N₂ O₇ [M-H]^- ：計算值 367.16，實測值 367.14。

實例42.化合物104的合成

在氫化反應瓶中將Pd/C （2.60 g，10 wt%，50%水）加入到化合物103 （26.0 g，70.6 mmol，1.0eq.）的甲醇（260 mL）溶液中。混合物在1 atm H₂ 環境下攪拌反應隔夜。矽藻土過濾，濾液濃縮得化合物104 （24.0 g，約100%產率），為綠色油狀物。

實例43.化合物106的合成

將2-溴丙酸叔丁酯（255 g，1.22 mol，1.0eq.）和三苯基膦（320 g，1.22 mol，1.0eq.）的乾燥乙腈（1L）溶液在室溫攪拌18小時。減壓旋去乙腈後加入甲苯使白色固體析出。傾倒出甲苯後將白色固體溶於二氯甲烷（1L）並轉移至分液漏斗。加入10% NaOH水溶液（1L），搖晃後有機相很快變黃。分出有機相，水相用二氯甲烷（1L）反萃一次。合併二氯甲烷相，飽和食鹽水（400 mL）洗，無水硫酸鈉乾燥，過濾後濃縮得葉立德106 （280g，58%），為一黃色固體。

實例44.化合物107的合成

向化合物99 （450 g，1.27 mol，1.0eq.）的乾燥二氯甲烷（3L）溶液中加入葉立德106 （546 g，1.40 mmol，1.1eq.）。室溫攪拌隔夜。TLC監測反應完全後，經柱層析（10-50% 乙酸乙酯/石油醚）純化得化合物107 （444 g，75% 產率），為一白色固體。ESI m/z C₂₈ H₃₈ NO₅ [M+H]⁺ ：計算值 468.27，實測值 468.22。

實例45.化合物108的合成

將化合物107 （63 g，0.13mol）溶於甲醇（315 mL），加入Pd/C （10 wt%，6.3 g），在氫氣（1 atm）環境下室溫攪拌隔夜。過濾除去觸媒後濃縮濾液得化合物108 （45.8 g，93% 產率）。

實例46.化合物109的合成

在室溫下向化合物108 （390 g，1.03 mol，1.0eq.）的四氫呋喃（4 L）溶液中加入亞硝酸叔丁酯（1.06 kg，10.3 mol. ，1.0eq.）。攪拌隔夜後旋去四氫呋喃，殘留物經柱層析（10-50% 乙酸乙酯/石油醚）純化得化合物109 （314 g，72% 產率），為一亮黃色固體。

實例47.化合物110的合成

在氮氣保護下向化合物109 （166 g，0.392 mol，1.0eq.）的乙酸乙酯（500 mL）溶液中加入Pd/C （10 wt%，16 g）。通入氫氣，真空置換三次。反應液在氫氣（1 atm）環境中於室溫攪拌16小時。矽藻土過濾，濃縮得化合物110 （146 g，97% 產率），為一黃色泡沫狀固體。¹ H NMR （400 MHz，CDCl₃ ） δ 6.62 （d，J = 7.9 Hz，1H），6.55 （s，1H），6.43 （d，J = 7.3 Hz，1H），4.39 （dd，J = 53.0，44.2 Hz，1H），3.77 （s，4H），2.72 – 2.29 （m，3H），1.83 – 1.58 （m，1H），1.40 （d，J = 7.6 Hz，18H），1.24 （s，1H），1.06 （t，J = 5.7 Hz，3H）. MS ESI m/z C₂₁ H₃₅ N₂ O₅ [M+H]⁺ ：計算值 394.25，實測值 395.25。

實例48.化合物114的合成

在在氮氣保護下，將（S）-4-異丙基惡唑烷-2-酮（5.00 g，38.7 mmol，1.0eq.）溶於無水四氫呋喃（200 mL）中，降溫至-78 °C，30分鐘內將正丁基鋰（2.5 M 正己烷溶液，17.0 mL，1.2eq.）滴加進反應瓶中，在-78 °C下反應1小時。然後滴加丙醯氯（4.0 mL，42.58 mmol，1.1eq.），滴加完畢後，在-78 °C下反應1小時，薄層層析監測反應完畢，將反應液倒入飽和食鹽水溶液（250 mL）中，乙酸乙酯萃取（3 × 100 mL），合併有機相，用1N NaOH溶液（200 mL）洗滌一次，飽和食鹽水溶液（300 mL）洗滌一次，無水硫酸鈉乾燥，過濾，旋乾，用矽膠管柱純化（7：1 石油醚/ 乙酸乙酯）得到無色油狀物6.36 g，產率89%。MS ESI m/z C₉ H₁₆ NO₃ [M+H]⁺ 計算值186.10，實測值 186.10。¹ H NMR （400 MHz，CDCl₃ ） δ 4.48 – 4.39 （m，1H），4.27 （t，J = 8.7 Hz，1H），4.21 （dd，J = 9.1，3.1 Hz，1H），3.06 – 2.82 （m，2H），2.38 （dtd，J = 14.0，7.0，4.0 Hz，1H），1.17 （t，J = 7.4 Hz，3H），0.90 （dd，J = 17.0，7.0 Hz，6H）。

實例49.化合物115的合成

在氮氣保護下，將化合物（S）-4-異丙基-3-丙醯基惡唑烷-2-酮（2.00 g，11.9 mmol，1.1 eq.）溶於無水二氯甲烷（200 mL）中，降溫至0 °C，將二異丙基乙基胺（2.3 mL，12.9 mmol，1.2 eq.）和n -Bu₂ BOTf （1.0 M 二氯甲烷溶液，12.0 mL，1.1 eq.）滴加進反應瓶中，0 °C下反應45分鐘，再降溫至-78 °C，將化合物99 （4.24 mL，10.8 mmol，1.0eq.）的二氯甲烷溶液滴加進反應瓶中，-78 °C下反應1小時，然後慢慢升溫至室溫並反應隔夜。次日，將磷酸鹽緩衝液（0.1M，pH 7.0，100 mL）加進反應瓶中，分液，水相用二氯甲烷萃取（3 × 50 mL），合併有機相，用飽和食鹽水溶液（200 mL）洗滌一次，無水硫酸鈉乾燥，旋乾得粗品。將粗品溶於甲醇（100 mL）中，降溫至0°C，將H₂ O₂ （30% 水溶液，26 mL）滴入，0 °C下反應3小時，旋蒸除去甲醇，加水（100 mL），用乙酸乙酯萃取（3 × 100 mL），合併有機相，飽和食鹽水溶液（300 mL）洗滌一次，無水硫酸鈉乾燥，過濾，旋乾，經矽膠管柱純化（3：1 石油醚/ 乙酸乙酯）得到白色泡沫狀固體2.7 g，產率49%。¹ H NMR （400 MHz，CDCl₃ ） δ 7.36 （ddd，J = 24.2，14.2，7.1 Hz，5H），7.12 （d，J = 8.4 Hz，2H），6.90 （d，J = 8.5 Hz，2H），5.02 （s，2H），4.69 （d，J = 9.0 Hz，1H），4.45 （d，J = 4.1 Hz，1H），4.33 （t，J = 8.4 Hz，1H），4.15 （d，J = 8.6 Hz，1H），3.90 （dd，J = 16.6，8.0 Hz，1H），3.85 – 3.77 （m，2H），2.81 （d，J = 7.6 Hz，2H），2.27 （dd，J = 11.4，6.7 Hz，1H），1.35 （s，9H），0.89 （dd，J = 14.3，6.9 Hz，6H）。MS ESI m/z C₃₀ H₄₁ N₂ O₇ [M+H]⁺ 計算值541.28，實測值 541.30。

實例50.化合物116的合成

在氮氣保護下，將化合物115 （2.50 g，4.63 mmol，1.0 eq.）溶於無水四氫呋喃（46 mL）中，加入二硫羰基咪唑（2.48 g，13.89 mmol，3.0 eq.），回流反應隔夜。次日，加水（100 mL），乙酸乙酯萃取（3 × 50 mL），合併有機相，用飽和食鹽水溶液（300 mL）洗滌一次，無水硫酸鈉乾燥，過濾，旋乾，經矽膠管柱純化（3：1 石油醚/ 乙酸乙酯）得到黃色泡沫狀固體2.33 g，產率77%。¹ H NMR （400 MHz，CDCl₃ ） δ 8.41 （s，1H），7.67 （s，1H），7.36 （dt，J = 16.0，6.9 Hz，6H），7.09 （s，1H），7.05 （d，J = 8.4 Hz，2H），6.86 （d，J = 8.4 Hz，2H），6.32 （d，J = 9.5 Hz，1H），5.01 （s，2H），4.56 – 4.43 （m，2H），4.32 （ddd，J = 16.2，15.6，7.8 Hz，3H），4.19 （d，J = 8.7 Hz，1H），2.96 （dd，J = 14.6，4.4 Hz，1H），2.49 （dd，J = 14.5，10.5 Hz，1H），2.29 （td，J = 13.4，6.7 Hz，1H），1.73 （s，1H），1.29 （s，9H），0.91 （dd，J = 13.9，6.9 Hz，6H）。 MS ESI m/z C₃₄ H₄₃ N₄ O₇ S[M+H]⁺ 計算值651.27，實測值 651.39。

實例51.化合物117的合成

在氮氣保護下，將化合物116 （1.90 g，2.92 mmol，1.0 eq.）溶於無水甲苯（30 mL）中，加入偶氮二異丁腈（0.05 g，0.584 mmol，2.0 eq.）和三丁基錫烷（1.6 mL，5.84 mmol），回流反應2.5小時，旋乾，經矽膠管柱純化（5：1 石油醚/ 乙酸乙酯）得到白色泡沫狀固體1.21 g，產率79%。¹ H NMR （400 MHz，CDCl₃ ） δ 7.36 （ddd，J = 24.5，14.5，7.1 Hz，5H），7.08 （d，J = 8.5 Hz，2H），6.90 （d，J = 8.5 Hz，2H），5.04 （d，J = 5.1 Hz，2H），4.48 （d，J = 4.2 Hz，1H），4.33 （t，J = 8.4 Hz，1H），4.22 （d，J = 9.7 Hz，1H），4.15 （d，J = 8.8 Hz，1H），3.81 （s，2H），2.73 （dd，J = 14.1，5.9 Hz，1H），2.61 （dd，J = 14.0，7.2 Hz，1H），2.29 （dq，J = 13.5，6.8 Hz，1H），2.11 – 2.00 （m，1H），1.60 （dd，J = 15.2，6.2 Hz，2H），1.35 （s，9H），1.20 （d，J = 6.9 Hz，3H），0.89 （dd，J = 14.0，6.9 Hz，6H）。 MS ESI m/z C₃₀ H₄₁ N₂ O₆ [M+H]⁺ ：計算值525.28，實測值 525.37。

實例52.化合物118的合成

將化合物117 （1.20 g，2.29 mmol，1.0 eq.）溶於四氫呋喃（30 mL）和水（6 mL）中，冰浴下加入LiOH （0.192 g，4.58 mmol， 2.0 eq.）和H₂ O₂ （30% 水溶液，1.4 mL），冰浴反應3小時，加入亞硫酸鈉（1.5 M，30 mL），冰浴下攪拌30分鐘後用1 N KHSO₄ 調節pH至4，乙酸乙酯萃取（3 × 50 mL），合併有機相，飽和食鹽水溶液（200 mL）洗滌一次，無水硫酸鈉乾燥，過濾，旋乾，矽膠管柱純化（3：1 石油醚/ 乙酸乙酯）得到白色固體0.78 g，產率82%。¹ H NMR （400 MHz，CDCl₃ ） δ 7.46 – 7.28 （m，5H），7.07 （d，J = 7.7 Hz，2H），6.91 （d，J = 7.8 Hz，2H），5.04 （s，2H），4.52 （d，J = 8.5 Hz，1H），3.87 （d，J = 41.8 Hz，1H），2.82 – 2.43 （m，3H），1.85 （t，J = 12.2 Hz，1H），1.41 （s，9H），1.17 （d，J = 6.9 Hz，3H）。 MS ESI m/z C₂₄ H₃₂ NO₅ [M+H]⁺ 計算值414.22，實測值 414.21。

實例53.化合物119的合成

將化合物118 （0.77 g，1.86 mmol，1.0 eq.）溶於甲醇（15 mL）中，加入Pd/C （10wt%，0.25 g），催化加氫（1 atm H₂ ）反應16小時，用矽藻土（助濾劑）過濾，旋乾得到化合物119 為白色固體0.58 g，產率96%。¹ H NMR （400 MHz，CDCl₃ ） δ 7.00 （d，J = 7.5 Hz，2H），6.80 （s，2H），4.51 （d，J = 9.0 Hz，1H），3.88 （s，1H），2.66 （dd，J = 65.6，22.6 Hz，4H），1.88 （t，J = 12.2 Hz，1H），1.42 （s，9H），1.14 （d，J = 6.6 Hz，3H）。 MS ESI m/z C₁₇ H₂₆ NO₅ [M+H]⁺ ：計算值324.17，實測值 324.16。

實例54.化合物120的合成

將化合物119 （0.57 g，1.76 mmol，1.0 eq.）溶於無水四氫呋喃（10 mL）中，冰浴下滴加亞硝酸叔丁酯（0.63 mL，5.28 mmol，3.0 eq.），完畢升溫至室溫反應2h，加水（50 mL），用乙酸乙酯萃取（3 × 30 mL），合併有機相，用飽和食鹽水溶液（100 mL）洗滌一次，無水硫酸鈉乾燥，過濾，旋乾，經矽膠管柱純化（2：1 石油醚/ 乙酸乙酯，含0.1%乙酸）得到黃色固體0.50 g，產率77%。¹ H NMR （400 MHz，DMSO） δ 12.00 （s，1H），10.68 （s，1H），7.67 （s，1H），7.34 （d，J = 8.4 Hz，1H），7.03 （d，J = 8.4 Hz，1H），6.69 （d，J = 8.9 Hz，1H），3.56 （d，J = 3.8 Hz，1H），2.67 （dd，J = 13.5，5.1 Hz，1H），2.41 （dd，J = 13.8，6.6 Hz，1H），1.78 – 1.65 （m，1H），1.27 （s，9H），1.18 （s，1H），1.05 （d，J = 7.1 Hz，3H）。 MS ESI m/z C₁₇ H₂₅ N₂ O₇ [M+H]⁺ ：計算值369.15，實測值 369.14。

實例55.化合物121的合成

將化合物120 （0.50 g，1.36 mmol，1.0 eq.）溶於甲醇（10 mL）中，加入Pd/C （10wt%，0.02g），催化加氫（1 atm H₂ ）反應1小時，用矽藻土（助濾劑）過濾，旋乾得到化合物121 白色固體0.43 g，產率93%。MS ESI m/z C₁₇ H₂₇ N₂ O₅ [M+H]⁺ 計算值339.18，實測值 339.17。¹ H NMR （400 MHz，MeOD） δ 6.60 （d，J = 7.9 Hz，2H），6.44 （d，J = 7.3 Hz，1H），3.71 （d，J = 6.3 Hz，1H），2.62 – 2.37 （m，3H），1.83 （ddd，J = 13.7，9.9，3.7 Hz，1H），1.39 （s，9H），1.13 （d，J = 7.1 Hz，3H）。

實例56.化合物124的合成

將馬來酸酐（285 g，2.76mol）溶於乙酸（1 L）中，加入4-氨基丁酸（285 g，2.76mol），室溫反應30分鐘，升溫至回流後反應1.5小時，冷卻至室溫，旋蒸除去溶劑，用乙酸乙酯溶解，水洗，飽和食鹽水洗，無水硫酸鈉乾燥，過濾，旋乾，粗品用石油醚和乙酸乙酯重結晶得到白色固體（400g，產率80%）。¹ H NMR （500 MHz，CDCl3） δ 6.71 （s，2H），3.60 （t，J = 6.7 Hz，2H），2.38 （t，J = 7.3 Hz，2H），2.00 – 1.84 （m，2H）。

實例57.化合物125的合成

將化合物124 （400 g，2.18mol，1.0 eq.）溶於無水二氯甲烷（1.5 L）中，加入N-羥基馬來醯亞胺（276 g，2.40 mmol，1.1 eq.）和DIC （303 g，2.40 mol，1.1 eq.），室溫反應隔夜，旋乾，矽膠管柱純化（1：2石油醚/ 乙酸乙酯）得到NHS酯125 為白色固體382 g，產率63%。¹ H NMR （500 MHz，CDCl₃ ） δ 6.74 （s，2H），3.67 （t，J = 6.8 Hz，2H），2.85 （s，4H），2.68 （t，J = 7.5 Hz，2H），2.13 – 2.03 （m，2H）。

實例58.化合物126的合成

將化合物124 （60 g，328mmol，1.3 eq.）溶於THF （600 mL）中，冰浴，滴加N-甲基嗎啉（85.3 mL，984mmol，3.0 eq.）和氯甲酸異丁酯（44.6mL，426mmol，1.3 eq.）， 0 °C下反應2小時後，滴加化合物104 （102g ，259 mmol，1.0 eq.）的THF（400 mL）溶液，完畢，0 °C反應30分鐘，加水（300mL），用乙酸乙酯萃取（3 × 300 mL），合併有機相，飽和食鹽水溶液（100 mL）洗滌一次，無水硫酸鈉乾燥，過濾，旋乾，矽膠管柱純化（9-35% 乙酸乙酯/石油醚）得到化合物126 為淺黃色固體（104 g，產率73%）。¹ H NMR （400 MHz，CDCl₃ ） δ 8.86 （s，1H），8.40 （d，J = 17.3 Hz，1H），6.87 （s，3H），6.70 （s，2H），4.53 – 4.16 （m，0H），3.79 （s，0H），3.62 （t，J = 6.1 Hz，1H），2.63 （s，1H），2.40 （t，J = 6.9 Hz，1H），2.12 – 1.88 （m，4H），1.84 – 1.64 （m，0H），1.38 （t，J = 9.6 Hz，6H），1.06 （t，J = 6.0 Hz，3H）。

實例59.化合物127的合成

將溶解在二氯甲烷（20 mL）中的化合物126（12.7g，22.7mmol），在0°C用三氟乙酸（40mL）處理，溫熱反應物至室溫，並攪拌3小時。濃縮混合物並與甲苯一起濃縮三次。將殘留物用乙醚濕磨，收集淺黃色固體127（11.4g，理論產率）。

實例60.化合物128的合成

將化合物33 （40 mg，0.074 mmol，1.0 eq.）溶於乙酸乙酯中，加入五氟苯酚（27 mg，0.148mmol，2.0 eq.）和 DCC （23 mg，0.111mmol，1.5 eq.），室溫反應16小時，矽膠墊過濾，用乙酸乙酯洗脫，將濾液濃縮，再溶於DMA （6 mL）中，加入化合物127 （56.6 mg，0.13 mmol）和N，N’-二異丙基乙胺（47.4 μL，0.18mmol），室溫反應24小時，濃縮，製備HPLC （C₁₈ 柱，10-100% 乙腈/水）純化得到白色固體128 （43 mg，產率63%）。MS ESI m/z C₄₆ H₆₆ N₇ O₁₁ S [M+H]⁺ ：計算值924.45，實測值 924.45。

實例61.化合物132的合成

將化合物41a （11 g，15.9 mmol，1.0 eq.）和化合物127 （12.3 g，23.8 mmol，1.5 eq.）溶於DMF （100 mL）中，冰浴下加入N，N’-二異丙基乙胺（6.9 mL，39.7 mmol），升溫至室溫反應1小時，濃縮，矽膠管柱純化（0-10%甲醇/二氯甲烷）得到無定型固體10 g，產率69%。MS ESI m/z C₄₅ H₆₅ N₇ O₁₁ S [M+H]⁺ ：計算值912.45，實測值 912.45。

實例62.化合物204的合成

將（R）-4-異丙基-2-惡唑烷酮（25.0g，0.194mol，1.0 eq.）溶於1150mL無水THF中，在N₂ 保護下，降溫至-70 °C，滴加n-BuLi（85.0 mL，0.213mol，1.1 eq.）（溫度控制在-70 至-65 °C之間），滴加過程中有大量白色固體析出，滴加完畢，-70 °C下反應1h，再滴加丙醯氯（20.0 mL，0.232mol，1.2 eq.），滴加完畢，-70 °C下反應1h，薄層層析跟蹤，反應完畢。將反應液倒入到1.2 L飽和氯化銨溶液中，乙酸乙酯萃取（700mL×1，350mL×2），合併乙酸乙酯相，用1 L 1mol/LNaOH溶液洗滌一次，1 L水洗滌一次，1 L飽和氯化鈉溶液洗滌一次，無水硫酸鈉乾燥，旋乾，得無色液體。乙酸乙酯/石油醚（6-10%）過柱，得產物32.6g，產率90.8%。ESI： m/z： C₉ H₁₇ NO₃ [M+H]⁺ ：計算值 186.1，實測值186.1。¹ H NMR （400 MHz，CDCl₃ ） δ 4.48 – 4.37 （m，1H），4.27 （t，J = 8.7 Hz，1H），4.21 （dd，J = 9.1，3.1 Hz，1H），3.04 – 2.82 （m，2H），2.45 – 2.30 （m，1H），1.17 （t，J = 7.4 Hz，3H），0.90 （dd，J = 17.1，7.0 Hz，6H）。

實例63.化合物205的合成。

在0°C下，在N₂ 中，向（R）-4-異丙基-3-丙醯基氧唑烷-2-酮（18.4 g，99.5 mmol，1.1 eq.）的無水DCM（200 mL）溶液中加入Bu₂ BOTf（1 M二氯甲烷溶液，100 mL，100 mmol ，1.1eq.）和DIPEA（19 mL，108.6mmol，1.2eq.），將混合物在相同溫度下攪拌45分鐘。在-78℃下加入醛99（32.2 g，90.5 mmol，1.0eq.）的二氯甲烷（320 mL）溶液，並在相同溫度下攪拌1 h，然後將該溶液在15小時內緩慢升溫至室溫。將混合物倒入700mL磷酸鉀緩衝液（pH 7.0）中，並用乙酸乙酯萃取。有機萃取液用鹽水洗滌，用無水硫酸鈉乾燥，過濾，然後真空濃縮。將殘餘物溶於甲醇（730mL）中並冷卻至0℃，然後緩慢加入30％H₂ O₂ 水溶液（225mL），並將混合物在相同溫度下攪拌3小時。加入水（750mL），然後將混合物真空濃縮以除去甲醇。所得水溶液用乙酸乙酯（500mL，150mL×2）萃取，有機萃取液用5％碳酸氫鈉溶液和鹽水洗滌，用無水硫酸鈉乾燥，過濾，真空濃縮，然後藉由矽膠管柱層析純化（二氯甲烷 / 乙酸乙酯＝ 3∶1）得到標題化合物，為白色泡沫狀物（31.7g，64.8％）。ESI m/z： C₃₀ H₄₁ N₂ O₇ [M+H]⁺ ： 541.3，實測值 541.3。¹ H NMR （400 MHz，CDCl₃ ） δ 7.49 – 7.29 （m，5H），7.17 （t，J = 10.7 Hz，2H），6.93 （d，J = 7.0 Hz，2H），5.06 （s，2H），4.28 （dd，J = 44.4，36.4 Hz，3H），4.04 – 3.52 （m，3H），3.11 – 2.73 （m，2H），2.35 （s，1H），1.41 （t，J = 16.3 Hz，9H），0.91（dd，J =15.6，6.4Hz，5H）。

實例64.化合物206的合成。

向化合物205（28.3g，52.3mmol，1.0eq.）的無水THF（350mL）溶液中加入1,1-硫代羰基二咪唑（TCDI）（35.1g，157.0mmol，3.0eq.），並將混合物加熱回流隔夜。藉由TLC監測原料消耗後，將混合物真空濃縮並藉由矽膠管柱層析純化（二氯甲烷：乙酸乙酯＝ 3∶1），得到標題化合物，為淺黃色泡沫狀物（26.1g，76.8％）。ESI m/z： C₃₄ H₄₃ N₄ O₇ S [M+H]⁺ ：計算值651.3，實測值 651.3。¹ H NMR （400 MHz，CDCl₃ ） δ 8.21 （s，1H），7.43 （d，J = 11.8 Hz，1H），7.42 – 7.28 （m，5H），7.06 （d，J = 8.3 Hz，2H），7.01 （s，1H），6.80 （d，J = 8.3 Hz，2H），6.17 （dd，J = 8.5，2.9 Hz，1H），4.96 （s，2H），4.42 – 4.04 （m，5H），2.83 （dd，J = 14.2，6.2 Hz，1H），2.69 （dd，J = 14.2，7.1 Hz，1H），2.32 （dd，J = 6.8，4.2 Hz，1H），1.37 （s，9H），1.30 （d，J = 6.9 Hz，3H），0.87 （dd，J = 9.9，7.0 Hz，6H）。

實例65.化合物207的合成。

在N₂ 中，向化合物206（26.0 g，40.0 mmol，1.0eq.）的無水甲苯（350 mL）溶液中加入n -Bu₃ SnH（21.5 mL，80.0 mmol，2.0eq.）和2，2'-氮雜雙（2-甲基丙腈）（AIBN）（0.066g，0.01eq.），並將混合物加熱回流1小時。藉由TLC監測原料消耗後，將混合物真空濃縮並藉由矽膠管柱層析純化（二氯甲烷：乙酸乙酯＝ 5∶1），得到標題化合物，為白色泡沫狀物（6.0g，37.3％）。 ESI m/z： C₃₀ H₄₁ N₂ O₆ [M+H]⁺ ：計算值525.3，實測值 525.3。¹ H NMR （400 MHz，CDCl₃ ） δ 7.37 （ddd，J = 25.1，15.1，7.1 Hz，5H），7.08 （d，J = 7.9 Hz，2H），6.89 （d，J = 8.4 Hz，2H），5.03 （s，2H），4.61 （d，J = 8.4 Hz，1H），4.40 （s，1H），4.32 – 4.08 （m，2H），3.91 – 3.66 （m，2H），2.83 （d，J = 8.4 Hz，1H），2.60 （t，J = 10.1 Hz，1H），2.33 （s，1H），1.71 （s，1H），1.41 （s，9H），1.15 （d，J = 6.5 Hz，3H），0.87 （dd，J = 17.0，7.0 Hz，6H）。

實例66.化合物208的合成。

向化合物207（7.84 g，15.0 mmol，1.0eq.）的THF（90 mL）和水（30 mL）溶液中加入LiOH∙H₂ O（1.57 g，37.5mmol，2.5eq.）的30％H₂ O₂ 水溶液（11.4mL，112.5mmol，7.5eq.），並將混合物在相同溫度下攪拌3小時。在0℃下加入1.5M Na₂ SO₃ 溶液（160 mL）後，將混合物在相同溫度下攪拌30分鐘。然後緩慢加入1N KHSO₄ 直至pH為4。用乙酸乙酯（200 mL，75 mL×2）萃取水溶液，有機萃取液用鹽水洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，真空濃縮並藉由矽膠管柱層析純化（二氯甲烷：乙酸乙酯＝ 2∶1）得到標題化合物，為白色固體（6.18g，100％）。ESI m/z： C₂₄ H₃₂ N₁ O₅ [M+H]⁺ ：計算值414.2，實測值 414.2。¹ H NMR （400 MHz，CDCl₃ ） δ 7.39 （ddd，J = 24.5，15.0，7.2 Hz，5H），7.11 （d，J = 7.8 Hz，2H），6.93 （d，J = 8.3 Hz，2H），5.06 （s，2H），4.44 （t，J = 8.3 Hz，1H），3.83 （d，J = 69.4 Hz，1H），2.85 – 2.61 （m，2H），2.61 – 2.40 （m，1H），1.99 – 1.70 （m，1H），1.39 （d，J = 26.1 Hz，9H），1.19 （s，3H）。

實例67.化合物209的合成

在氫化瓶中，將Pd / C（0.6 g， 10% Pd/C）加入到化合物208的甲醇（50mL）溶液中加入。將混合物在1 atm氫氣環境中振盪隔夜，然後過濾。濃縮濾液，得到標題化合物，為無色油狀物（4.8g，99％收率）。ESI m/z： C₁₇ H₂₆ N₁ O₅ [M+H]⁺ ： 324.2，實測值 324.2。¹ H NMR （400 MHz，CDCl₃ ） δ 6.97 （d，J = 6.5 Hz，2H），6.74 （d，J = 8.2 Hz，2H），3.93 – 3.66 （m，1H），2.58 （tdd，J = 19.5，12.9，7.4 Hz，3H），1.75 （ddd，J = 20.1，16.3，7.7 Hz，1H），1.37 （d，J = 21.5 Hz，9H），1.11 （d，J = 7.0 Hz，3H）。

實例68.化合物210的合成。

在N₂ 中，0℃下向化合物209（4.8 g，15.0 mmol，1.0 eq.）的無水THF（75 mL）溶液中緩慢加入t-BuONO（18.0 mL，150 mmol，10.0 eq.）。在相同溫度下攪拌3小時。藉由TLC監測原料消耗後，向混合物中緩慢加入1N KHSO₄ 直至pH為4。將所得水溶液用乙酸乙酯（150 mL，75 mL×2）萃取，有機萃取液用鹽水洗滌，用無水硫酸鈉乾燥，過濾，真空濃縮，殘餘物藉由矽膠管柱層析純化（二氯甲烷：乙酸乙酯＝ 3∶1），得到標題化合物，為黃色固體（3.6g，65.4％）。ESI m/z： C₁₇ H₂₅ N₂ O₇ [M+H]⁺ ，計算值369.2，實測值 369.2。¹ H NMR （400 MHz，MeOD） δ 7.93 （d，J = 2.0 Hz，1H），7.48 （dd，J = 8.6，2.1 Hz，1H），7.06 （d，J = 8.5 Hz，1H），3.83 – 3.71 （m，1H），2.82 （dd，J = 13.6，5.0 Hz，1H），2.66 – 2.41 （m，2H），1.84 （ddd，J = 14.0，10.6，5.6 Hz，1H），1.65 – 1.51 （m，1H），1.28 （d，J = 24.9 Hz，9H），1.15 （d，J = 7.0 Hz，3H）。

實例69.化合物211的合成。

在氫化瓶中，將Pd / C（0.2g，10％Pd / C）加入到化合物210（3.2g，7.74mmol，1.0eq.）的甲醇（20mL）溶液中。將混合物在1 atm 氫氣環境中振盪3小時。藉由TLC監測原料消耗後，將混合物過濾並將濾液濃縮，得到標題化合物，為白色泡沫狀物（2.3g，92.0％收率）。 ESI m/z： C₁₇ H₂₇ N₂ O₅ [M+H]⁺ 計算值339.2，實測值 339.2。¹ H NMR （400 MHz，MeOD） δ 6.61 （d，J = 8.0 Hz，2H），6.45 （d，J = 6.3 Hz，1H），3.72 （d，J = 7.3 Hz，1H），2.68 – 2.34 （m，3H），1.81 – 1.66 （m，1H），1.56 – 1.45 （m，1H），1.36 （d，J = 29.0 Hz，9H），1.08 （d，J = 6.9 Hz，3H）。

實例70.化合物390的合成

在-25℃下，向化合物102（1.00g，2.52mmol）的乙腈（10mL）溶液中加入CCl₄ （2.2mL，22.7mmol，9.0eq.）。攪拌10分鐘後，加入二異丙基乙胺（0.88mL，5.04mmol，2.0eq.）和DMAP（0.03g，0.252mmol，0.1eq.），然後加入亞磷酸二苄酯（0.84mL，3.78mmol，1.5eq.）。在1.5小時內將反應物溫熱至室溫。然後用KH₂ PO₄ 溶液（0.5M，50mL）淬滅。反應混合物用乙酸乙酯（3×50mL）萃取。將合併的有機萃取物用無水Na₂ SO₄ 乾燥並在減壓下濃縮。殘餘物藉由快速柱層析法純化（10-50％乙酸乙酯/石油醚），得到化合物390（1.60g，96％收率），為無色油狀物。MS ESI m/z C₃₃ H₄₁ N₂ O₁₀ P [M+H]⁺ 657，實測值 657。

實例71.化合物391的合成

向化合物390（1.60g，2.43mmol）的甲醇（20mL）溶液中加入Pd / C（10wt％，160mg）。在室溫下將反應混合物在氫氣環境（1 atm）中攪拌3小時，然後藉由矽藻土過濾並減壓濃縮，得到白色固體的化合物391（1.00g，91％收率）。 MS ESI m/z C₁₉ H₃₁ N₂ O₈ P [M-H]^- 計算值447，實測值 447。

Example72 . 化合物392 的合成

在室溫下，將化合物391（730mg，1.63mmol）的乙醇（10mL）溶液與1N NaOH（16mL，16.3mmol，10eq.）反應隔夜，然後減壓濃縮。將殘餘物溶於水（20mL）中，並用1N HCl酸化至pH 6。將水溶液減壓濃縮，並將殘餘物經甲醇/乙酸乙酯（80：20，5mL）打漿後抽濾收集作為白色固體化合物392（0.68g，99％收率）。MS ESI m/z C₁₇ H₂₇ N₂ O₈ P [M-H]^- 計算值417，實測值 417。

實例73.化合物399的合成。

向2-（2-氨基乙氧基）乙醇（21.00 g，200 mmol，1.0eq.）和K₂ CO₃ （83.00 g，600 mmol，3.0eq.）的乙腈（350 mL）中加入BnBr（57.0 mL，480 mmol，2.4eq.）。將混合物回流隔夜，加入水（1L），並用乙酸乙酯（3×300mL）萃取。合併的有機層用鹽水（1000mL）洗滌，經無水Na₂ SO₄ 乾燥，過濾，濃縮並藉由矽膠管柱層析純化（4∶1己烷/ 乙酸乙酯），得到無色油狀物（50.97g，89.2％收率）。MS ESI m/z C₁₈ H₂₃ NO₂ Na [M + Na]⁺ 計算值309.17，實測值 309.19。

實例74.化合物400的合成

向2-（2-（二（苄基氨基）乙氧基）乙醇（47.17 g，165.3 mmol，1.0 eq.），丙烯酸叔丁酯（72.0 mL，495.9 mmol，3.0 eq.）和n -Bu₄ NI（6.10 g， 16.53mmol，0.1eq.）加入DCM（560mL）的氫氧化鈉溶液（300mL，50％）。將混合物攪拌隔夜。分離有機層，水層用乙酸乙酯（3×100mL）萃取。將有機層用水（3×300mL）和鹽水（300mL）洗滌，用無水Na₂ SO₄ 乾燥，過濾，濃縮並藉由矽膠管柱層析純化（7：1己烷/ 乙酸乙酯），得到無色油狀物（61.08g ，收率為89.4％）。MS ESI m/z C₂₅ H₃₆ NO₄ [M + H]⁺ 計算值414.2566，實測值 414.2384。

實例75.化合物401的合成

在氫化瓶中，向3-（2-（2-（二（苄基氨基）乙氧基）乙氧基）丙酸叔丁酯（20.00 g，48.36 mmol，1.0eq.）的THF（30 mL）和甲醇（60 mL）溶液中加入Pd /C（2.00 g，10 wt％，50％水）。將混合物振盪隔夜，藉由矽藻土（助濾劑）過濾，並將濾液濃縮，得到無色油狀物（10.58g，93.8％收率）。 MS ESI m/z C₁₁ H₂₄ NO₄ [M + H]⁺ 計算值234.1627，實測值 234.1810。

實例76.化合物402的合成

在0℃下，向（E）-3-溴丙烯酸（0.15 g，1 mmol），DMAP（0.15 g，1.2 mmol）和DCC（0.21 g，1 mmol）的DCM（10 ml）中的溶液中加入化合物401（0.23g，加入1mmol）。將反應混合物溫熱至室溫並攪拌隔夜。將粗產物濃縮並藉由矽膠管柱層析純化用EA / DCM梯度洗脫，得到標題產物402（0.31g，85％收率）。ESI MS m/z： C₁₄ H₂₅ BrNO₅ [M+H]⁺ ：電腦366.08，實測值 366.08。

實例77.化合物403的合成

在0℃下，將化合物402（0.31g，0.84mmol）溶解在甲酸（4mL）中，然後加入H₂ O（2mL）。將反應混合物溫特至室溫並攪拌隔夜。將粗產物濃縮，無需進一步純化即可用於下一步。 ESI MS m/z： C₁₀ H₁₇ BrNO₅ [M+H]⁺ 計算值310.02，實測值 310.03。

實例78.化合物404的合成

將化合物303（0.12g，0.39mmol），NHS（0.067g，0.58mmol）和EDCI（0.11g，0.58mmol）溶解於DCM（10mL）中，並將混合物在室溫下攪拌隔夜，濃縮並藉由矽膠管柱層析純化，得到標題產物404（0.13g，82％收率）。 ESI MS m/z： C₁₄ H₂₀ BrN₂ O₇ [M+H]⁺ 計算值407.04，實測值 407.04.

實例79.化合物426的合成

將4-氨基丁酸（7.5 g，75 mmol）和NaOH（6 g，150 mmol）的H₂ O（40 mL）溶液冷卻至0°C，並滴加CbzCl（16.1 g，95 mmol）的THF（32ml）與其反應。 1小時後，使反應溫熱至室溫並攪拌3小時。在真空下除去THF，加入6N HCl將水溶液的pH調節至1.5。將溶液用乙酸乙酯萃取，有機層用鹽水洗滌，乾燥並濃縮，得到化合物426（16.4g，92％收率）。 MS ESI m/z C₁₂ H₁₆ NO₅ [M+H]⁺ 計算值238.10，實測值 238.08.

實例80.化合物427的合成

將DMAP（0.8 g，6.56 mmol）和DCC（17.1 g，83 mmol）加入到4-（（（苄氧基）羰基）氨基）丁酸（16.4 g，69.2 mmol）和t-BuOH（15.4 g ，208mmol）的DCM（100mL）溶液中。在室溫下攪拌隔夜，將反應物過濾並將濾液濃縮。將殘餘物溶解在乙酸乙酯中，並用1N HCl，鹽水洗滌，並經Na₂ SO₄ 乾燥。濃縮並藉由柱層析純化（10至50％乙酸乙酯 /正己烷），得到化合物427 （7.5 g， 37%收率）。 MS ESI m/z C₁₆ H₂₃ NO₄ Na [M+Na]⁺ 316.16，實測值 316.13。

實例81.化合物428的合成

將4-（（（（苄氧基）羰基）氨基）丁酸叔丁酯（560 mg，1.91 mmol）溶於甲醇（50 mL）中，並與Pd / C（10 wt％，100 mg）混合，催化加氫（1 atm）在室溫下反應3小時。濾出觸媒，並在真空下除去所有揮發物，得到化合物428（272mg，90％收率）。 MS ESI m/z C₈ H₁₈ NO₂ [M+H]⁺ 計算值160.13，實測值 160.13。

實例 82. 化合物430 的合成

將4-氨基丁酸叔丁酯（477 mg，3 mmol）和2,3-二溴丁二酸（414 mg，1.5 mmol）溶於DCM（35 mL）中，加入DIPEA（1.16 g，9 mmol）和EDC（0.86g，4.5mmol）。將所得溶液在室溫攪拌隔夜，然後用鹽水洗滌，經Na₂ SO乾燥。藉由柱層析（純DCM至10％甲醇/二氯甲烷）進行過濾，濃縮和純化，得到化合物430（160mg，22％收率）。 MS ESI m/z C₂₀ H₃₄ BrN₂ O₆ [M+H]⁺ 計算值 477.15，實測值 477.16。

實例83.化合物431的合成

將化合物430（80mg，0.168mmol）溶解於DCM（5mL）中，並在38℃下與甲酸（8mL）反應隔夜。真空除去所有揮發物，得到化合物431（61mg，99％收率）。MS ESI m/z C₁₂ H₁₈ BrN₂ O₆ [M+H]⁺ 計算值365.03，實測值 365.05。

實例84.化合物432的合成

向NHS（60 mg，0.504 mmol）和EDCI（97 mg，0.504 mmol）加入化合物431（61 mg，0.168 mmol）的二氯甲烷（10 mL）溶液。在室溫攪拌隔夜，將反應混合物濃縮並藉由柱層析純化（0至10％甲醇/二氯甲烷），得到化合物432（72mg，77％收率）。MS ESI m/z C₂₀ H₂₄ BrN₄ O₁₀ [M+H]⁺ 計算值559.06，實測值 559.78.

實例85.化合物433的合成

將NaH₂ PO₄ （0.1M的水溶液，1 mL）加入化合物432（36 mg，0.065 mmol）和化合物110（25 mg，0.063 mmol）的EtOH（5 mL）溶液中。在室溫下攪拌隔夜，真空除去所有揮發物，並將殘餘物藉由柱層析純化（0至10％甲醇/二氯甲烷），得到化合物433（19.7mg，41％收率）。 MS ESI m/z 計算值741.35 （[M+H]⁺ ）。

實例86.化合物435的合成

將化合物433（18mg，0.024mmol）溶解於二氯甲烷（2mL）中，並在室溫與用TFA（2mL）反應2小時。真空除去所有揮發物，得到化合物435（14mg，98％收率），直接用於下一步。 MS ESI m/z 585.22 （[M+H]⁺ ）。

實例87.化合物437的合成

將化合物435（14mg，0.0239mmol）和五氟苯基酯33a（18mg，0.0255mmol）溶解在DMA（5mL）中。向混合物中加入DIPEA（10mg，0.077mmol）。將得到的混合物在室溫下攪拌隔夜，濃縮並藉由製備型HPLC（C18柱，10-90％乙腈/水）純化，得到化合物437（12.8 mg，48％收率）。MS ESI m/z 1105.50 （[M+H]⁺ ）。

實例88.化合物441的合成

向2,2’-（乙烷-1,2-二基雙（氧基））二乙醇（55.0 mL，410.75 mmol，3.0 eq.）的無水四氫呋喃（200 mL）溶液中加入鈉（0.1 g）。攪拌混合物直至Na消失，然後滴加丙烯酸叔丁酯（20.0mL，137.79mmol，1.0eq.）。將混合物攪拌隔夜，然後在0℃下藉由鹽酸溶液（20.0mL，1N）淬滅。藉由旋轉蒸發除去四氫呋喃，加入鹽水（300mL），並將所得混合物用乙酸乙酯（3×100mL）萃取。有機層用鹽水（3×300mL）洗滌，經無水硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮，得到無色油狀物（30.20g，79.0％收率），其無需進一步純化即可使用。MS ESI m/z ：計算值 C₁₃ H₂₇ O₆ [M + H]⁺ 278.1729，實測值 278.1730。

實例89.化合物442的合成

在0℃下，向3-（2-（2-（2-羥基乙氧基）乙氧基）乙氧基）丙酸叔丁酯（30.20 g，108.5 mmol，1.0 eq.）和TsCl（41.37 g，217.0 mmol，2.0 eq.）的無水二氯甲烷（220mL）溶液中加入三乙胺（30.0mL，217.0mmol，2.0 eq.）。將混合物在室溫下攪拌隔夜，然後用水（3×300 mL）和鹽水（300 mL）洗滌，用無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮並藉由矽膠管柱層析法純化（3：1正己烷/乙酸乙酯）得到無色油狀物（39.4g，84.0％產率）。 MS ESI m/z C₂₀ H₃₃ O₈ S [M + H]⁺ ：計算值433.1818，實測值 433.2838。

實例90.化合物443的合成

向3-（2-（2-（2-（甲苯磺醯基氧基）乙氧基）乙氧基）乙氧基）叔丁基丙酸酯（39.4 g，91.1 mmol，1.0eq.）的無水DMF（100 mL）溶液中加入疊氮化鈉（ 20.67g，316.6mmol，3.5eq.）。將混合物在室溫攪拌隔夜。加入水（500mL），並用乙酸乙酯（3×300mL）萃取。用水（3×900 mL）和鹽水（900 mL）洗滌合併的有機層，用無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮並藉由矽膠管柱層析法純化（5：1正己烷/乙酸乙酯），得到淺黃色油狀物（ 23.8 g，85.53％的產率）。 MS ESI m/z C₁₃ H₂₅ O₃ N₅ Na [M + Na]⁺ ：計算值326.2，實測值 326.2。

實例91.化合物444的合成

將Raney-鎳（7.5 g，懸浮於水中）用水（三次）和異丙醇（三次）洗滌，並與化合物433（5.0 g，16.5 mmol）的異丙醇溶液混合。將混合物在H₂ 氣球下於室溫攪拌。保持16小時，然後在矽藻土墊上過濾，用異丙醇洗滌。濃縮濾液，並藉由柱層析法純化（5-25％甲醇 / 二氯甲烷），得到淺黃色油狀物（2.60g，57％產率）。 MS ESI m/z C₁₃ H₂₈ NO₅ [M+H]⁺ ：計算值279.19；實測值 279.19。

實例92.化合物445的合成

將乙炔二羧酸（0.35 g，3.09 mmol，1.0 eq.）溶於NMP（10 mL）中並冷卻至0°C，加入化合物444（2.06 g，7.43 mmol，2.4 eq.），然後分批加入DMTMM（2.39 g，8.65 mmol，2.8eq. ）將反應在0℃下攪拌6小時，然後用乙酸乙酯稀釋，並用水和鹽水洗滌。將有機溶液用乙酸乙酯和石油醚的混合溶劑濃縮，打漿。濾出固體並將濾液濃縮，並藉由柱層析法純化（80-90％乙酸乙酯/ 石油醚），得到淺黃色油狀物（2.26g，＞ 100％收率），其無需進一步純化即可使用。 MS ESI m/z C₃₀ H₅₃ N₂ O₁₂ [M+H]⁺ 計算值633.35；實測值 633.30。

實例93.化合物446的合成

將化合物445（2.26g）溶於二氯甲烷（15mL）中並冷卻至0℃，然後與TFA（15mL）反應。將反應溫熱至室溫並攪拌45分鐘，然後在旋轉蒸發儀上除去溶劑和殘留的TFA。藉由柱層析純化（0-15％甲醇/二氯甲烷）粗產物，得到淺黃色油狀物（1.39 g，兩步收率86％）。 MS ESI m/z C₂₂ H₃₇ N₂ O₁₂ [M+H]⁺ 計算值521.23；實測值 521.24。

實例94.化合物480的合成

將化合物110（68mg，0.17mmol），化合物124（94.5mg，0.52mmol）和HATU（162mg，0.425mmol）溶解於二氯甲烷（50mL）中。然後加入TEA（73μL，0.52mmol）。將反應混合物在室溫攪拌隔夜。然後減壓除去溶劑，並將殘餘物藉由矽膠管柱層析純化，得到標題產物480（98mg，80％收率）。 ESI m/z C₃₇ H₄₉ N₄ O₁₁ [M+H]⁺ ：計算值725.33，實測值 725.34。

實例95.化合物481的合成

在室溫下，將化合物480（98mg，0.135mmol）溶於二氯甲烷（1.0mL）與TFA（1.0mL）反應2小時，然後濃縮並重新溶解於DMA（1mL）中，加入五氟苯基酯41a（44mg，0.06mmol）和DIPEA（45.8μL，0.27mmol）。將反應攪拌隔夜，然後濃縮。殘餘物藉由製備型HPLC用MeCN / H₂ O梯度純化，得到標題產物481（37mg，55％收率）。 ESI m/z ：C₅₃ H₇₃ N₈ O₁₄ S [M+H]⁺ 計算值1077.49，實測值 1077. 50。

實例96.化合物484的合成

在0℃下，向（S）-2-氨基-3-（4-硝基苯基）丙酸（13.2g，62.8mmol）的甲醇（120mL）溶液中加入亞硫醯氯（9mL，125.6mmol）。將反應混合物加熱回流並攪拌1小時，然後在真空下濃縮並懸浮在乙酸乙酯（50mL）中。然後將混合物過濾，得到標題化合物，為白色固體（14.5g，91％收率）。ESI m/z C₁₀ H₁₃ N₂ O₄ [M+H]⁺ ：計算值225.08，實測值 225.08。

實例97.化合物485的合成

向化合物484（9.5g，36.4mmol）的THF（200mL）溶液中加入三乙胺（12.6mL，91.1mmol）。將混合物攪拌30分鐘後，加入二碳酸二叔丁酯（12.5mL，54.7mmol），並將反應混合物攪拌1小時，然後用乙酸乙酯（200mL）稀釋，用1N HCl，水（30mL）洗滌，用硫酸鈉乾燥，真空下過濾並濃縮，得到標題化合物，為白色固體（11.4g，97％收率）。 ESI m/z ： C₁₅ H₂₁ N₂ O₆ [M+H]⁺ 計算值325.13，實測值 325.13。

實例98.化合物486的合成

在-78℃下，向化合物485（14g，43.2mmol）的無水二氯甲烷（150mL）溶液中加入DIBAL-H（108mL，108mmol）。將反應混合物在-78℃下攪拌30分鐘，然後倒入冰水（200mL）中，用乙酸乙酯（3×80mL）萃取。合併的有機相用1N HCl（2×50mL），水（50mL）洗滌，用硫酸鈉乾燥，真空下過濾，濃縮，並藉由矽膠管柱層析純化，得到標題化合物（8.6g，68％收率）。 ESI m/z ： C₁₄ H₁₉ N₂ O₅ [M+H]⁺ 計算值295.12，實測值 295.12。

實例99.化合物487的合成

在0℃下，向化合物106（8.1g，20.8mmol）的二氯甲烷（100mL）溶液中加入化合物486（5.2g，17.8mmol）。將反應混合物加熱至室溫。攪拌30分鐘。然後真空濃縮並藉由矽膠管柱層析純化，得到標題化合物，為黃色固體（5.9g，82％收率）。ESI m/z ：C₂₁ H₃₁ N₂ O₆ [M+H]⁺ 計算值406.21，實測值 406.21。

實例100.化合物488的合成

在氫化瓶中，向化合物487（4g，9.85mmol）的MeOH（40mL）溶液中加入Pd / C（0.4g，10wt％）。將混合物在1 atm H₂ 下攪拌隔夜，藉由矽藻土（助濾劑）過濾，並將濾液濃縮，得到化合物488（3.6g，收率〜100％）。 ESI m/z： C₂₁ H₃₅ N₂ O₄ [M+H]⁺ ：計算值379.25，實測值 379.25。

實例101.化合物489的合成

在0℃下，向化合物488（3.6g，9.52mmol）和三乙胺（1.3mL，9.52mmol）的二氯甲烷（50mL）溶液中加入4-硝基苯磺醯氯（2.1g，9.52mmol）。將反應混合物加熱至室溫。並攪拌1小時，然後用二氯甲烷（50mL）稀釋，用1N HCl（20mL），水（20mL）洗滌，經硫酸鈉乾燥，過濾並真空濃縮，然後藉由矽膠管柱層析純化，得到標題化合物為黃色固體（4 g，75％收率）。 ESI m/z C₂₇ H₃₈ N₃ O₈ S [M+H]⁺ ：計算值564.23，實測值 564.23。

實例102.化合物490的合成

向化合物489（3.6g，6.39mmol）的乙腈（40mL）溶液中加入亞硝酸叔丁酯（2.29mL，19.1mmol）。將反應混合物加熱至45℃並攪拌6小時。然後將反應真空濃縮，並藉由矽膠管柱層析純化，得到標題化合物（3g，79％收率）。ESI m/z C₂₇ H₃₇ N₄ O₁₀ S [M+H]⁺ ：計算值609.22，實測值 609.22。

實例103.化合物491的合成

向化合物490（3.0g，4.92mmol）的乙腈/ DMSO（30mL / 1mL）溶液中加入4-甲氧基苯硫酚（2.76g，19.7mmol）和碳酸鉀（2.7g，19.7mmol）。將反應混合物在室溫攪拌隔夜，然後用乙酸乙酯（100mL）稀釋，用水（20mL），鹽水（20mL）洗滌，用硫酸鈉乾燥，過濾並在真空下濃縮，並藉由矽膠管柱層析純化，得到標題化合物（1.7g，85％收率）。ESI m/z C₂₁ H₃₄ N₃ O₆ [M+H]⁺ ： 424.24，實測值 424.24。

實例104.化合物492的合成

在氫化瓶中，向化合物491（100mg，0.236mmol）的MeOH（4mL）溶液中加入 Pd / C（10mg，10wt％）。將混合物在1 atm H₂ 下攪拌隔夜，藉由矽藻土（助濾劑）過濾，並將濾液濃縮，得到標題化合物（92.9mg，〜100％收率）。ESI m/z ：C₂₁ H₃₆ N₃ O₄ [M+H]⁺ 計算值394.26，實測值 394.26。

實例105.化合物493的合成

將化合物492（66mg，0.17mmol），化合物124（94.5mg，0.52mmol）和HATU（162mg，0.425mmol）溶解在二氯甲烷（50mL）中，然後加入TEA（73μL，0.52mmol）。將反應混合物在室溫攪拌隔夜，減壓除去溶劑，殘餘物藉由矽膠管柱層析純化，得到標題產物493（98mg，80％收率）。 ESI m/z C₃₇ H₅₀ N₅ O₁₀ [M+H]⁺ ：計算值724.35，實測值 724.35。

實例106.化合物494的合成

在室溫下，將化合物493（98mg，0.135mmol）的二氯甲烷（1.0mL）與TFA（1.0mL）反應2小時，然後濃縮，得到化合物494，其無需進一步純化即可用於下一步。

實例107.化合物495的合成

向化合物494（76.9mg，0.135mmol）的DMA（1mL）溶液中加入五氟苯基酯41a（44mg，0.06mmol）和DIPEA（45.8μL，0.27mmol）。將反應攪拌隔夜，然後濃縮，並將殘餘物藉由製備型HPLC用乙腈 / 水梯度純化，得到標題產物495（37mg，55％收率）。ESI m/z C₅₃ H₇₄ N₉ O₁₃ S [M+H]⁺ ：計算值1076.50，實測值 1076.50。

實例108.化合物509的合成

在0°C下，向馬來醯亞胺（6.35 g，65.4 mmol，1.0eq.）的乙酸乙酯（120 mL）溶液中加入N-甲基嗎啉（8.6 mL，78.5 mmol，1.2eq.）和氯甲酸甲酯（6.0 mL，78.5 mmol，1.2 eq.）。將反應在0℃下攪拌30分鐘，然後在室溫下攪拌1小時，濾出固體，並將濾液濃縮。將殘餘物溶於二氯甲烷中，並藉由矽膠塞過濾，並用二氯甲烷洗脫以除去顏色。將該組分濃縮，所得的固體用10% 乙酸乙酯/石油醚打漿，得到白色固體（9.00 g，89%收率）。

實例109.化合物510的合成

將化合物401（8.16g，35.0mmol，1.0eq.）和飽和NaHCO₃ （40mL）的混合物冷卻至0℃，然後然後分批加入化合物509（5.43g，35.0mmol，1.0eq.）。在0℃下攪拌1小時，將反應溫熱至室溫並攪拌1小時，將反應物用二氯甲烷（3×100mL）萃取，將有機萃取液進行純化，用Na₂ SO₄ 乾燥，濃縮並在藉由矽膠管柱層析純化，得到白色固體（6.76g，62％收率）。MS ESI m/z C₁₅ H₂₃ NO₆ [M+H]⁺ 計算值314.15，實測值 314.15。

實例110.化合物511的合成

將化合物510（1.85 g，5.9 mmol）溶解於二氯甲烷（20 mL），加入TFA（7 mL），在室溫下反應16 h，然後濃縮，並藉由矽膠管柱層析純化（11：1 二氯甲烷/甲醇）得到白色泡沫（1.47g，97％收率）。MS ESI m/z C₁₁ H₁₅ NO₆ [M+H]⁺ 計算值258.09，實測值 258.09。

實例111.化合物519的合成

將N-Boc-乙二胺（5.6 mL，35.4 mmol，1.1 eq.）和飽和NaHCO₃ （60 mL）的混合物冷卻至0°C，分批加入化合物509（5.00 g，32.2 mmol，1.0eq.）。在0°C攪拌30分鐘，將反應溫熱至室溫，攪拌1小時，過濾收集固體，用冷水洗滌，然後將其溶於乙酸乙酯中，用純淨水洗滌，之後用硫酸鈉乾燥，濃縮得到白色固體（6.69g，87％收率）。

實例112.化合物520的合成

在高壓管中將化合物519（6.00 g，25.0 mmol），呋喃（18.0 mL）的甲苯溶液（120 mL）加熱回流並攪拌16 小時。無色溶液在反應過程中變為黃色。然後將混合物冷卻至室溫並濃縮，將所得白色固體用乙醚打漿，得到化合物520（6.5g，84％收率）。

實例113.化合物521的合成

將化合物520（9.93g，32.2mmol）的溶解於二噁烷（15mL）中，並在室溫下與濃HCl（15mL）反應3小時，將反應濃縮，並過濾收集得到的固體，用乙酸乙酯洗滌濾餅。將固體在烘箱（50℃）中乾燥隔夜，得到化合物521（6.94g，88％收率）。

實例114.化合物522的合成

在-10℃下，向化合物521（0.85g，3.47mmol）的THF（10mL）溶液中加入POCl₃ （162μL，1.73mmol），之後加入TEA（966μL，6.95mmol）。將反應在-10℃下攪拌三小時，然後將溶液用二氯甲烷（20mL）稀釋，並在矽藻土上過濾，將過濾物濃縮，得到化合物522，將其直接用於下一步。 ESI m/z C₂₀ H₂₃ ClN₄ O₇ P [M+H]⁺ ：計算值497.09，實測值 497. 09.

實例115.化合物523的合成

在0℃下，將化合物522（0.50g，1.0mmol）和DIPEA（0.4mL，2.4mmol）溶解於二氯甲烷（5.0mL）中，然後加入化合物401（0.23g，1.0mmol）。在0℃下攪拌2.5小時，然後濃縮並藉由矽膠管柱層析純化，得到標題產物523（0.30g，43％）。 ESI m/z C₃₁ H₄₅ N₅ O₁₁ P [M+H]⁺ ：計算值694.28，實測值 694.28。

實例116.化合物524的合成

將化合物523（0.30g，0.5mmol）溶解在二氯甲烷（3mL）中，與TFA（3mL）在室溫下反應2小時，然後濃縮以得到化合物524，其無需進一步純化即可用於下一步。

實例117.化合物525的合成

將化合物524（40mg，0.063mmol），化合物110（40mg，0.10mmol），HATU（24mg，0.063mmol）溶解在二氯甲烷（5mL）中，然後加入TEA（27.8μL，0.2mmol）。將反應混合物在室溫攪拌隔夜，然後減壓除去溶劑，並將殘餘物藉由矽膠管柱層析純化，得到標題產物525（53.4mg，84％收率）。 ESI m/z C₄₈ H₆₉ N₇ O₁₅ P [M+H]⁺ ：計算值1014.45，實測值 1014.45。

實例118.化合物526的合成

將化合物525（53.4mg，0.053mmol）溶解於二氯甲烷（2mL）中，並在室溫下與TFA（2mL）反應1小時，然後濃縮得到化合物526，無需進一步純化即可用於下一步。

實例119.化合物527的合成

向化合物526 （45.0 mg，0.053mmol）的DMA （1mL）溶液中加入五氟苯基酯41a （37.0 mg，0.053 mmol）和DIPEA （17 L，0.1 mmol）。將反應攪拌隔夜並濃縮。殘留物藉由製備型HPLC純化，用MeCN/H₂ O梯度洗脫，得到標題產物527 （26.2 mg，36%收率）。ESI m/z C₆₄ H₉₃ N₁₁ O₁₈ PS [M+H]⁺ ：計算值1366.61，實測值 1366. 61。

實例120.化合物528的合成

將化合物527（8.0 mg，0.0058 mmol）溶解於甲苯（5.0 mL）中，加熱回流隔夜，然後濃縮並藉由製備型HPLC純化，用乙腈/水梯度洗脫，得到標題產物528（6.4 mg，90％收率）。ESI m/z C₅₆ H₈₅ N₁₁ O₁₆ PS [M+H]⁺ ：計算值1230.56，實測值 1230. 56。

實例121.化合物529的合成

向3-（2-（2-（二苄氨基氨基）乙氧基）乙氧基）丙酸叔丁酯（5.00 g，12.1 mmol）的10 mL 二氯甲烷溶液中加入5 mL TFA。將反應混合物在室溫下攪拌一小時之後濃縮。將粗產物溶於二氯甲烷（50mL）中，之後加入NHS（4.25g，37mmol）和EDCI（7.10g，37mmol）。將反應混合物在室溫下攪拌隔夜，然後濃縮並藉由矽膠管柱層析純化，用二氯甲烷/甲醇梯度純化，得到標題化合物529（5.00g，91％）。 ESI m/z C₂₅ H₃₁ N₂ O₆ [M+H]⁺ ：計算值455.21，實測值 455.21。

實例122.化合物530的合成

在室溫下，向化合物110（1.00 g，2.5 mmol，1.0 eq.）的EtOH（10 mL）溶液中加入化合物529（1.80 g，3.9 mmol，1.5 eq.）和0.1M NaH₂ PO₄ （2 mL）。將反應混合物在室溫下攪拌隔夜之後濃縮。用水（100mL）將殘餘物稀釋，然後用乙酸乙酯（3×50mL）萃取，將合併的有機層用Na₂ SO₄ 乾燥，過濾並濃縮，藉由矽膠管柱層析純化，用硫酸鈉乾燥。用二氯甲烷/甲醇梯度洗脫，得到標題化合物530（0.93g，50％）。ESI m/z C₄₂ H₆₀ N₃ O₈ [M+H]⁺ ：計算值734.43，實測值 734.43。

實例123.化合物531的合成

在氫化瓶中，向化合物530（0.93g，1.27mmol）的乙酸乙酯（20mL）溶液中加入Pd / C（0.093g，10wt％）。將混合物在1 atm H₂ 環境下振搖隔夜，然後藉由矽藻土（助濾劑）過濾，濃縮濾液，得到化合物531（0.57g，81％），其無需進一步純化即可用於下一步。ESI m/z C₂₈ H₄₈ N₃ O₈ [M+H]⁺ ：計算值554.34，實測值554.34。

實例124.化合物537的合成

將HATU（39.9g，105mmol）加入至4-（（（苄氧基）羰基）氨基）丁酸（26.1g，110mmol）的DMF（300mL）溶液中。在室溫下攪拌30分鐘，將混合物加入到化合物110（39.4g，100mmol）和TEA（20.2g，200mmol）的DMF（300mL）溶液中。將混合物在室溫下攪拌 2小時。之後加入水，用乙酸乙酯萃取，之後有機層用鹽水洗滌，用Na₂ SO₄ 乾燥。藉由柱層析純化（20％至70％EA / PE），得到標題產物，為白色固體（45g，73％收率）。ESI m/z C₃₃ H₄₈ N₃ O₈ [M+H]⁺ ：計算值614.34，實測值 614.15。

實例125.化合物538的合成

將化合物537（100g，163mmol）溶於甲醇（500mL）中，並在室溫下用Pd / C催化加氫（10wt％，10g）隔夜。濾出觸媒，並將濾液減壓濃縮，得到化合物538（75.8g，97％收率），為棕色泡沫狀固體。¹ H NMR （400 MHz，CDCl₃ ） δ 7.11 （s，1H），6.83 （d，J = 10.3 Hz，2H），5.04 – 4.52 （m，6H），3.90 – 3.56 （m，1H），2.81 （d，J = 5.3 Hz，2H），2.63 （dd，J = 12.5，6.1 Hz，2H），2.54-2.26 （dd，J = 14.0，7.6 Hz，4H），1.94-1.64 （m，3H），1.44 – 1.36 （m，18H），1.08 （d，J = 6.9 Hz，3H）. ESI m/z C₂₅ H₄₂ N₃ O₆ [M+H]⁺ ：計算值480.30，實測值 480.59。

實例126 . 化合物539的合成

向化合物537（1.00g，1.63mmol）的1mL 二氯甲烷中加入2mL TFA，將反應混合物在室溫下攪拌1小時，然後濃縮。所得粗產物539無需進一步純化即可用於下一步。ESI m/z C₂₄ H₃₂ N₃ O₆ [M+H]⁺ ：計算值458.22，實測值 458.22。

實例127.化合物540的合成

向化合物539（0.42g，0.92mmol）的DMF（3mL）溶液中加入五氟苯基酯41a（0.63g，0.91mmol）和DIPEA（0.46mL，2.73mmol）。將反應物在室溫攪拌隔夜，然後濃縮，並過矽膠管柱層析純化，用二氯甲烷/甲醇梯度純化，得到標題化合物540（0.67g，75％收率），為黃色油狀物。 ESI m/z C₄₉ H₇₂ N₇ O₁₁ S [M+H]⁺ ：計算值966.49，實測值 966.49.

實例128.化合物541的合成

在氫化瓶中，化合物540（0.40 g，0.41 mmol）的MeOH（15 mL）溶液中加入Pd / C（0.02 g，10 wt％）。然後加入一滴1N HCl將pH調節至約4。將混合物在1 atm H₂ 下振搖隔夜，然後藉由矽藻土（助濾劑）過濾，濃縮濾液，得到化合物541，將其不經進一步純化用於下一步。進一步純化。ESI m/z C₄₁ H₆₆ N₇ O₉ S [M+H]⁺ ：計算值832.46，實測值 832.46.

實例129.化合物587的合成

將化合物110（0.30 g，0.76 mmol），化合物Z-L-Ala-OH（0.17 g，0.76 mmol）和HATU（0.29 g，0.76 mmol）溶於二氯甲烷（20 mL）中，然後加入TEA（110μL，0.8 mmol））。將反應混合物在室溫攪拌隔夜。然後減壓除去溶劑，殘餘物藉由矽膠管柱層析純化，得到標題產物587（0.43g，95％收率）。 ESI m/z C₃₂ H₄₆ N₃ O₈ [M+H]⁺ ：計算值600.32，實測值 600.32。

實例130.化合物627的合成

在室溫下，向H-Lys（Boc）-OH（1.00 g，3.8 mmol，1.0eq.）的EtOH（16 mL）溶液中加入化合物125（1.00 g，5.6 mmol，1.5eq.）。之後加入0.1M NaH₂ PO₄ （3mL），將反應混合物在室溫攪拌隔夜。將反應在真空下濃縮，並將殘餘物藉由矽膠管柱層析純化，用二氯甲烷/甲醇的梯度洗脫，得到標題化合物627（1.62g，理論收率）。ESI m/z C₁₉ H₃₀ N₃ O₇ [M+H]⁺ ：計算值412.20，實測值 412.20。

實例131.化合物628的合成

向羧酸627（0.24g，0.58mmol）的乙酸乙酯（10mL）溶液中加入五氟苯酚（0.21g，1.17mmol）和DCC（0.24g，1.17mmol）。將反應混合物在室溫攪拌隔夜，然後過濾，用乙酸乙酯洗滌濾餅，並將濾液濃縮。將所得的五氟苯基酯（32mg，0.056mmol）溶解在1mL DMF中，向其中加入化合物531（50mg，0.056mmol）和i-Pr₂ EtN（29μL，0.168mmol）。將反應混合物在室溫攪拌2小時並濃縮。將殘餘物藉由HPLC用MeCN / H₂ O梯度洗脫，得到標題化合物628（3mg，4％收率）。 ESI m/z C₆₃ H₉₉ N₁₀ O₁₇ S [M+H]⁺ ：計算值1299.68，實測值 1299.68。

實例132.化合物629的合成

向化合物628（3mg，0.002mmol）的0.5mL 二氯甲烷溶液中加入1mL TFA，將反應混合物在室溫攪拌1小時，然後濃縮。粗產物藉由HPLC用MeCN / H₂ O梯度洗脫，得到標題化合物629（1.43mg，52％收率）。 ESI m/z C₅₈ H₉₁ N₁₀ O₁₅ S [M+H]⁺ ：計算值1199.63，實測值 1199.62。

實例133.化合物632的合成

將化合物627的五氟苯基酯（0.11g，0.19mmol）溶解於1mL DMF中，加入化合物541（0.21g，0.25mmol）和i-Pr₂ EtN（86μL，0.5mmol）。將反應混合物在室溫下攪拌2小時並濃縮。殘餘物藉由製備型HPLC用MeCN / H₂ O梯度洗脫，得到標題產物632（20mg，9％）。 ESI m/z C₆₀ H₉₃ N₁₀ O₁₅ S [M+H]⁺ ：計算值1225.65，實測值 1225.66。

實例134.化合物633的合成

向化合物632（20mg，0.016mmol）的1mL 二氯甲烷溶液中加入2mL TFA。將反應混合物在室溫下攪拌1小時，然後濃縮，並將粗產物藉由製備型HPLC用MeCN / H₂ O梯度純化，得到標題化合物633（8.9mg，18％收率）。 ESI m/z C₅₅ H₈₅ N₁₀ O₁₃ S [M+H]⁺ ：計算值1125.59，實測值 1125.59。

實例135.化合物636的合成

在室溫下，向H-Dap（Boc）-OH（1.00 g，4.9 mmol，1.0eq.）的EtOH（30 mL）中的溶液中加入化合物125（2.00 g，7.3 mmol，1.5eq.）。之後加入0.1M NaH₂ PO₄ （6mL），並將反應混合物在室溫攪拌隔夜。真空除去溶劑，並將殘餘物藉由矽膠管柱層析用二氯甲烷/甲醇梯度純化，得到標題化合物636（1.41g，78％）。 ESI m/z C₁₆ H₂₄ N₃ O₇ [M+H]⁺ ：計算值370.15，實測值 370.15。

實例136.化合物637的合成

向化合物636（1.41g，3.8mmol）的2mL 二氯甲烷中的溶液中加入5mL TFA。將反應混合物在室溫攪拌1小時，然後濃縮。粗產物637無需進一步純化即可用於下一步。ESI m/z C₁₁ H₁₆ N₃ O₅ [M+H]⁺ ：計算值270.10，實測值 270.10。

實例137.化合物638的合成

在室溫下，向以上得到的化合物637的EtOH（20mL）溶液中加入化合物125（1.90g，6.9mmol，1.5eq.）。然後加入0.1M NaH₂ PO₄ （4mL），並將反應混合物在室溫攪拌隔夜。真空除去溶劑後，然後將殘餘物藉由HPLC用H₂ O / MeCN梯度純化，得到標題化合物638（0.45g，22％收率）。ESI m/z C₁₉ H₂₃ N₄ O₈ [M+H]⁺ ：計算值435.14，實測值 435.14。

實例138.化合物639的合成

向化合物638（0.15g，0.34mmol），化合物538（0.17g，0.34mmol）和HATU（0.16g，0.41mmol）的DMF（2mL）溶液中加入TEA（95μL，0.68mmol）。在室溫攪拌後在1小時內，將反應物減壓濃縮並將殘餘物藉由製備型HPLC純化，用MeCN / H₂ O梯度洗脫，得到標題化合物639（34mg，收率11％）。 ESI m/z C₄₄ H₆₂ N₇ O₁₃ [M+H]⁺ ：計算值896.43，實測值 896.42。

實例139.化合物640的合成

向化合物639（34mg，0.04mmol）的0.5mL 二氯甲烷溶液中加入1mL TFA。將反應混合物在室溫攪拌2小時，然後濃縮，得到標題化合物640，其無需進一步純化即可用於下一步。 ESI m/z C₃₅ H₄₆ N₇ O₁₁ [M+H]⁺ ：計算值740.30，實測值 740.32。

實例140.化合物641的合成

向化合物640的DMA（2mL）溶液中加入五氟苯基酯41a（28mg，0.04mmol），然後加入DIPEA（21μL，0.12mmol）。將反應攪拌隔夜，然後濃縮，並藉由製備型HPLC純化，用MeCN / H₂ O梯度洗脫，得到標題化合物641（14.4mg，29％）。 ESI m/z C₆₀ H₈₆ N₁₁ O₁₆ S [M+H]⁺ ：計算值1248.59，實測值 1248.60。

實例141.化合物644的合成

在0℃下，向化合物132（0.300g，0.329mmol，1.0eq.）和（2-氨基乙基）氨基甲酸叔丁酯鹽酸鹽（0.063g，0.395mmol，1.2eq.）的無水DCM中加入EDCI（0.189g，0.988mmol，3.0eq.）。攪拌10分鐘後，將反應溫熱至室溫並攪拌隔夜。將反應物用二氯甲烷稀釋並用水和鹽水洗滌，用無水Na₂ SO₄ 乾燥，濃縮並藉由矽膠管柱層析純化（二氯甲烷/甲醇），得到為黃色泡沫狀固體化合物644（0.132g，54％收率）。 ESI m/z C₅₂ H₈₀ N₉ O₁₂ S[M+H]⁺ ：計算值1054.6，實測值：1054.6。

實例142.化合物645的合成

在室溫下，向化合物644（0.132g，0.125mmol，1.0eq.）的二氯甲烷（4.5mL）溶液中加入TFA（1.5mL），並攪拌1小時。將反應物用無水甲苯稀釋並濃縮，重複該操作三次，得到黃色油狀物，將其藉由製備型HPLC純化（C₁₈ 柱，流動相A：水，流動相B：乙腈，由10％的B 至80％B，60min）。合併組分並凍乾，得到化合物645（111mg，93％收率）。 ESI m/z C₄₇ H₇₂ N₉ O₁₀ S [M+H]⁺ ：計算值954.5，實測值： 954.5。

實例143.化合物648的合成

在0℃下，向化合物645（0.050g，0.0549mmol，1.0eq.）和叔丁基（2-（2-（2-（2-氨基乙氧基）乙氧基）乙氧基）乙基）氨基甲酸酯（0.024g，0.0824mmol，1.5）的無水二氯甲烷（10 mL）溶液中加入EDCI（0.032 g，0.1647mmol，3.0 eq.）。攪拌10分鐘後，將反應溫熱至室溫並攪拌隔夜。然後將混合物用二氯甲烷稀釋並用水和鹽水洗滌，用無水Na₂ SO₄ 乾燥，濃縮並藉由矽膠管柱層析純化（二氯甲烷/甲醇），得到標題化合物，為黃色泡沫狀固體（0.030g，46％收率）。ESI m/z C₅₈ H₉₂ N₉ O₁₅ S [M+H]⁺ ：計算值1186.6，實測值：1186.6。

實例144.化合物649的合成

在室溫下，向化合物648（0.030g，0.0253mmol，1.0eq.）的二氯甲烷（3.0mL）溶液中加入TFA（1.0mL）。將反應攪拌1小時，然後用無水甲苯稀釋並濃縮，重複此操作3次，得到黃色油狀物，在製備型HPLC上純化（C₁₈ 柱，流動相A：水，流動相B：乙腈， 10％的B到80％的B，60min）。合併組分並凍乾，得到化合物649（11.7mg，43％收率）。 ESI m/z C₅₃ H₈₄ N₉ O₁₃ S [M+H]⁺ ：計算值1086.6，實測值：1086.6。

實例145.化合物652的合成

在0℃下，在3小時內向N-（2-氨基乙基）乙烷-1,2-二胺（28.7 g，275 mmol，10.0eq.）和DMAP（0.034 g，0.000275mmol，0.01eq.）的無水二氯甲烷（350 mL）中加入Boc₂ O（6.0g，0.0275mmol，1.0eq.）的無水二氯甲烷（100mL）。然後將反應加熱至室溫並攪拌隔夜，濃縮並藉由矽膠管柱層析純化（二氯甲烷/甲醇），得到標題化合物，為黃色油狀物（4.5g，80％收率）。 ESI m/z C₉ H₂₂ N₃ O₂ [M+H]⁺ ：計算值204.2，實測值：204.2。

實例146.化合物653的合成

在0℃下，向化合物645（0.060 g，0.0658 mmol，1.0eq.）和叔丁基（2-（（2-氨基乙基）氨基）乙基）氨基甲酸酯（0.016 g，0.0790 mmol，1.2eq.）的無水二氯甲烷（6mL）中加入EDCI（0.038g，0.1974mmol，3.0eq.）。攪拌10分鐘後，將反應溫熱至室溫，攪拌隔夜，將混合物濃縮並在製備型HPLC上純化（C₁₈ 柱，流動相A：水，流動相B：乙腈，從10％的B至80％的B，60min）。合併組分並凍乾，得到標題化合物653（48mg，66％收率）。ESI m/z C₅₄ H₈₅ N₁₀ O₁₂ S [M+H]⁺ ：計算值1097.6，實測值：1097.6。

實例147.化合物654的合成

在室溫下，向化合物653（0.048g，0.0437mmol，1.0eq.）的二氯甲烷（3.0mL）溶液中加入TFA（1.0mL）攪拌1小時。將反應混合物用無水甲苯稀釋並濃縮，重複此操作3次，得到黃色油狀物，藉由製備型HPLC純化（C₁₈ 層析柱，流動相A：水，流動相B：乙腈， 10％的B到80％的B，60min）。合併組分並凍乾，得到標題化合物654（111mg，93％收率）。 ESI m/z C₄₉ H₇₇ N₁₀ O₁₀ S[M+H]⁺ ：計算值997.5，實測值： 997.5。

實例148.化合物658的合成

在0 ℃，向化合物645（0.400 g，0.439 mmol，1.0eq.）和H-Lys（Boc）-O ^t Bu· HCl（0.135 g，0.528 mmol，1.2eq.）的無水DCM（40ml）中加入EDCI（0.189g，1.317mmol，3.0eq.）。攪拌10分鐘後，將反應溫熱至室溫攪拌隔夜，將混合物用二氯甲烷稀釋並用水和鹽水洗滌，用無水Na₂ SO₄ 乾燥，濃縮並藉由矽膠管柱層析純化（二氯甲烷/甲醇），得到為黃色油的化合物658（0.43g，82％收率）。 ESI m/z C₆₀ H₉₄ N₉ O₁₄ S [M+H]⁺ ：計算值1196.7，實測值：1196.7。

實例149.化合物559的合成

在室溫下向化合物658（0.230g，0.192mmol，1.0eq.）的二氯甲烷（6.0mL）溶液中。加入TFA（2.0 mL），將反應攪拌3 h，然後用甲苯稀釋並濃縮，重複此操作3次，得到黃色油狀物，將其藉由製備型HPLC純化（C₁₈ 層析柱，流動相A：水，流動相B：乙腈，在60分鐘內從10％的B到80％的B）。合併級分並凍乾，得到標題化合物（153mg，76％收率）。 ESI m/z C₅₁ H₇₈ N₉ O₁₂ S [M+H]⁺ ： 1040.5，實測值：1040.5。

實例150.化合物662的合成

向0°C，向化合物658（0.200 g，0.167 mmol，1.0eq.）和Boc-L-Lys（Boc）-OH（0.070 g，0.200 mmol，1.2eq.）的無水二氯甲烷（10 mL）溶液加入HATU（0.095g，0.250mmol，1.5eq.）和TEA（46μL，0.334mmol，2.0eq.）。將反應在0℃下攪拌10分鐘，然後溫熱至室溫並攪拌隔夜，將混合物用二氯甲烷稀釋並用水和鹽水洗滌，用無水Na₂ SO₄ 乾燥，濃縮並藉由矽膠管柱層析純化（二氯甲烷/甲醇），得到化合物662，為無色油狀物（0.270g，理論收率）。ESI m/z C₇₆ H₁₂₂ N₁₁ O₁₉ S [M+H]⁺ ：計算值1524.9，實測值：1524.9。

實例151.化合物663的合成

在室溫下，向化合物662（0.270g，0.177mmol，1.0eq.）的二氯甲烷（6.0mL）溶液中加入TFA（2.0mL）並攪拌4小時。混合物用無水甲苯稀釋並濃縮，重複此操作三次，得到黃色油狀物，將其在製備型HPLC（C₁₈ 柱，流動相A：水，流動相B：乙腈，從10％的B 80％，60min）上純化。合併組分並凍乾，得到標題化合物（172mg，83％收率）。 ESI m/z C₅₇ H₉₀ N₁₁ O₁₃ S [M+H]⁺ ：計算值1168.6，實測值：1168.6。

實例152.化合物666的合成

在0℃下，在7小時內向乙烷-1,2-二胺（30.0 g，0.5 mol，10.0eq.）的無水二氯甲烷（500 mL）中加入CbzCl（8.53 g，0.050 mol，1.0eq.）的無水二氯甲烷（ 250毫升），然後將反應加熱至室溫攪拌隔夜，將混合物用水和鹽水洗滌，經無水Na₂ SO₄ 乾燥，濃縮，得到白色固體狀的（2-氨基乙基）-氨基甲酸苄酯（7.0g，94％收率）。 ESI m / z C₁₀ H₁₄ N₂ O₂ [M + H]⁺ ：計算值195.1，實測值：195.2。

實例153.化合物667的合成

在0℃下，向化合物666（7.0 g，35.8 mmol，1.0eq.）和37％HCHO（aq）（14mL，0.1772mmol，5.0eq.）的MeOH（120 mL）溶液中加入NaBH₃ CN（3.9 g， 0.0620 mol，1.6 eq.），然後加入HOAc（3 mL），將pH調節至7.0。將該混合物加熱至室溫攪拌隔夜，然後濃縮。將殘餘物溶於二氯甲烷（200 mL），並用水和鹽水洗滌，用無水Na₂ SO₄ 乾燥，濃縮並藉由矽膠管柱層析純化（二氯甲烷/甲醇），得到標題化合物，為淺黃色油狀物（6.4 g，收率80％）。ESI m/： C₁₂ H₁₈ N₂ O₂ [M+H]⁺ ：計算值224.1，實測值：224.1。

實例154.化合物668的合成

在氫化瓶中，將化合物667（3.0 g，13.4 mmol，1.0eq.）和Pd / C（0.3 g，10％Pd / C，50％wet）、HCl（3 mL）和MeOH（100 mL）混合，在100 psi H₂ 環境中振搖5小時。然後將混合物經矽藻土過濾，並將濾液濃縮，得到標題化合物，其為黃色固體（2.1g，98％收率）。¹ H NMR （400 MHz，D₂ O） δ 3.33 （d，J = 4.6 Hz，2H），3.27 （s，2H），2.79 （s，6H）。

實例155.化合物669的合成

在0℃下，向化合物103（0.58 g，1.58 mmol，1.0 eq.）和化合物668（0.051 g，3.15 mmol，2.0eq.）的無水DMF（10 mL）溶液中加入HATU（0.090 g，2.37 mmol ，1.5eq.）和TEA（0.656mL，4.74mmol，3.0eq.），攪拌10分鐘，將反應溫熱至室溫攪拌90分鐘，將混合物用水稀釋並用乙酸乙酯（3×100 mL）萃取。用水和鹽水洗滌合併的有機層，用無水Na₂ SO₄ 乾燥，濃縮，得到標題化合物，為黃色泡沫狀固體（0.67g，97％收率）。 ESI m/z C₂₁ H₃₅ N₄ O₆ [M+H]⁺ ：計算值439.2，實測值：439.2。

實例156.化合物670的合成

將Pd / C（0.2 g，10％Pd / C，50％wet）與化合物669（0.60 g，13.7 mmol，1.0eq.）的乙酸乙酯（10 mL）溶液混合。將混合物在100 psi H₂ 環境下振搖4小時。然後將混合物經矽藻土過濾並將濾液濃縮，得到標題化合物，為綠色油狀物（5.50g，98％收率）。ESI m/z C₂₁ H₃₇ N₄ O₆₄ [M+H]⁺ ：計算值409.3，實測值：409.3。

實例157.化合物671的合成

向化合物670（0.50 g，1.22 mmol，1.0eq.）的95％乙醇（10 mL）和0.1M NaH₂ PO₄ （2 mL）溶液中加入化合物125（0.683 g，2.44 mmol，2.0eq.）並將反應攪拌隔夜，然後濃縮並藉由矽膠管柱層析純化（二氯甲烷/甲醇），得到標題化合物，為淺黃色油狀物（0.624g，89％收率）。ESI m/z C₂₉ H₄₄ N₅ O₇ [M+H]⁺ ：計算值574.3，實測值：574.3。

實例158.化合物672的合成

在室溫下，向化合物671（0.20g，0.349mmol，1.0eq.）的二氯甲烷（6.0mL）溶液中加入TFA（2.0mL），並將反應攪拌2小時，然後用無水甲苯稀釋並濃縮，重複此操作3次，得到標題化合物，為黃色油狀物（165mg，理論收率）。ESI m/z C₂₄ H₃₆ N₅ O₅ [M+H]⁺ ：計算值474.3，實測值：474.3。

實例159.化合物673的合成

在0 ℃下，向化合物672（0.165 g，0.349 mmol，1.0eq.）的無水DMF（2 mL）溶液中加入化合物41a（0.290 g，1.047 mmol，1.2eq.）的無水DMF（3 mL）溶液。將反應攪拌10分鐘，然後溫熱至室溫。攪拌1小時。將反應混合物濃縮並在製備型HPLC上純化（C₁₈ 柱，流動相A：水，流動相B：乙腈，10％的B到80％的B，60min）。合併組分並凍乾，得到標題化合物（58mg，17％收率），為淺黃色泡沫狀固體。 ESI m/z C₄₉ H₇₆ N₉ O₁₀ S [M+H]⁺ ：計算值982.5，實測值： 982.5。

實例160.化合物704的合成

將（S）-2-（（叔丁氧基羰基）（甲基）氨基）-3-甲基丁酸（33 mg，0.14 mmol），DCC（32 mg，0.154 mmol）和五氟苯酚（39 mg，0.21 mmol）溶解在乙酸乙酯（20mL）中，將反應在室溫攪拌隔夜。然後將反應濃縮至乾，得到化合物（S）-五氟苯基2-（（叔丁氧基羰基）（甲基）氨基）-3-甲基丁酸酯，將其溶解在2mL DMA中，並加入2-（（1R,3R）-3-（（2S,3S）-2-氨基-N,3-二甲基戊醯胺）-1-羥基-4-甲基戊基）噻唑-4-羧酸（52 mg，0.14 mmol）的DMA（3 mL）溶液和DIPEA（48.5μL，0.28mmol）。將反應在室溫攪拌隔夜，然後濃縮。將殘留物用1 mL乙腈稀釋，並藉由反相HPLC用乙腈/水梯度純化，得到化合物704（40.2 mg，收率49％）。ESI m/z： C₂₈ H₄₉ N₄ O₇ S [M+H]⁺ ：計算值585.32，實測值 585.32。

實例161.化合物705的合成

在0℃下，向化合物704（40mg，0.069mmol）的吡啶（8mL）溶液中加入乙酸酐（20.4mg，0.2mmol），並將反應物升溫至室溫並攪拌隔夜，然後濃縮。殘餘物藉由柱層析（甲醇/二氯甲烷）純化，得到標題化合物705（48.1mg，〜100％收率）。 ESI： m/z： C₃₀ H₅₁ N₄ O₈ S [M+H]⁺ ：計算值627.33，實測值 627.33。

實例162.化合物708的合成

將化合物705（48.1 mg，0.077 mmol），DCC（17.4 mg，0.085 mmol）和五氟苯酚（21.2 mg，0.115 mmol）溶於乙酸乙酯（10 mL）中，並將反應混合物在室溫下攪拌隔夜，然後濃縮至乾得到化合物五氟苯基2-（（6S,9S,12R,14R）-9-（（S）-仲丁基）-6,12-二異丙基-2,2,5,11-四甲基-4,7,10,16- 四氧雜-3,15-二氧雜-5,8,11-三氮雜十四烷基-14-基）噻唑-4-羧酸酯，將其溶於4 mL DMA和加入化合物（4R）-4-氨基-2-甲基-5-苯基戊酸的三氟乙酸鹽（20.7 mg，0.1 mmol）的DMA（3 mL）溶液和DIPEA（26.8μL，0.154mmol）。將反應在室溫攪拌隔夜，然後濃縮。將殘餘物用1mL乙腈稀釋，並藉由反相HPLC純化，用MeCN / H₂ O梯度洗脫，得到化合物708（33mg，收率84％）。ESI： m/z： C₄₂ H₆₆ N₅ O₉ S [M+H]⁺ ：計算值816.45，實測值 816.45。

實例163.化合物709的合成

將上一步的化合物708溶解在二氯甲烷（1mL）中，並在室溫下與TFA（1mL）反應2小時。濃縮反應物，並將殘餘物溶於EtOH（20mL）。加入化合物125（30.8mg，0.11mmol）和0.1M NaH₂ PO₄ （4mL），並在室溫攪拌隔夜，然後濃縮，殘餘物藉由柱層析（甲醇/二氯甲烷）純化，得到標題化合物709（28.5mg，42％收率）。ESI m/z： C₄₅ H₆₅ N₆ O₁₀ S [M+H]⁺ ：計算值881.44，實測值 881.44。

實例164.化合物712的合成

在室溫下，化合物708（63 mg，0.077 mmol）的二氯甲烷（1 mL）溶液與TFA（1ml）反應2小時，然後濃縮，並將殘餘物溶於DMA（4 mL）。加入化合物711（65.8mg，0.11mmol）和DIPEA（27μL，0.154mmol），並將反應在室溫下攪拌隔夜，然後濃縮，並將殘餘物藉由反相HPLC用MeCN / H₂ O梯度純化，得到化合物712（14mg，16％收率）。 ESI： m/z： C₅₅ H₈₄ N₇ O₁₆ S [M+H]⁺ ：計算值1130.56，實測值 1130.57。

實例165. 17-（2,5-二氧雜-2-,5-二氫-1H-吡咯-1-基）-14-氧雜-4,7,10-三氧雜-13-氮雜十七烷-1- 叔丁酯（化合物157a）的合成

將化合物444（27.92g，0.1mol）和化合物124（18.3g，0.1mol）溶解在二氯甲烷（300mL）中，向其中加入DIPEA（12.9g，0.1mol）和EDC（38.6g，0.2mol）。將所得溶液在室溫攪拌隔夜，然後用鹽水洗滌，經Na₂ SO₄ 乾燥。過濾，濃縮後藉由柱層析（5％乙酸乙酯 / 二氯甲烷至20％乙酸乙酯 / 二氯甲烷）純化，得到化合物157a（38.03g，收率86％）。 MS ESI m/z C₂₁ H₃₅ N₂ O₈ [M+H]⁺ 計算值443.2394，實測值 443.2412。

實例166. 17-（2,5-二氧雜-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基）-14-氧雜-4,7,10-三氧雜-13-氮雜十七烷-1-酸的合成（化合物158a）

向化合物157a（38.0g，85.9mmol）的150mL 二氯甲烷中加入50mL TFA。將反應混合物在室溫攪拌1小時，然後用甲苯（50ml）稀釋，真空濃縮，並藉由柱層析純化（10％甲醇/二氯甲烷至20％甲醇/二氯甲烷），得到化合物158a（27.53g，收率83％）。MS ESI m/z C₁₇ H₂₇ N₂ O₈ [M+H]⁺ 計算值：387.1768，實測值 387.1792。

實例167. 2,5-二側氧基吡咯啶-1-基17-（2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基）-14-側氧基-4,7,10-三氧雜-13-氮雜十七烷-1-酯（化合物159a）的合成

向NHS（3.20 g，27.82 mmol）和EDCI（9.70 g，50.4 mmol）中加入化合物158a（10.10 g，26.15 mmol）的二氯甲烷（80 mL）溶液中。在室溫下攪拌隔夜，將反應混合物濃縮並藉由柱層析純化（5至20％乙酸乙酯/二氯甲烷），得到化合物159a（10.73g，85％收率）。 MS ESI m/z C₂₁ H₃₀ N₃ O₁₀ [M+H]+ 計算值484.1942，實測值 484.1978。

實例168.（2S,5S）-23-（2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基）-2,5-二甲基-4,7,20-三側氧基-10,13,16-三氮雜-3,6,19-三氮雜二十三烷-1-酸（化合物162a）的合成

在兩小時內分四份，向化合物161（（S）-Ala-（S）-Ala，5.01 g，31.2 mmol）的乙醇（100 ml）和pH 7.5緩衝液（0.1 M NaH₂ PO₄ / Na₂ HPO₄ ，100 ml）的混合物中加入化合物159a（15.08 g，31.20 mmol）。將混合物繼續攪拌4小時，真空濃縮，並藉由柱層析純化（10至20％甲醇/二氯甲烷），得到化合物162a（13.18g，80％收率）。 MS ESI m/z C₂₃ H₃₇ N₄ O₁₀ [M+H]⁺ 計算值529.2511，實測值 529.2545。

實例169. （2S,5S）-2,5-二氧吡咯啶-1-基23-（2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基）-2,5-二甲基-4,7,20-三側氧基-10,13,16-三氧雜-3,6,19-三氮雜二十三烷-1-酯（163a）的合成

向NHS（1.60 g，13.91 mmol）和EDCI（5.90 g，30.7 mmol）中加入化合物162a（6.50 g，12.30 mmol）的二氯甲烷（70 mL）溶液。在室溫下攪拌隔夜，將反應混合物濃縮並藉由柱層析純化（5至20％乙酸乙酯/二氯甲烷），得到化合物163a（6.61g，86％收率）。 MS ESI m/z C₂₇ H₄₀ N₅ O₁₂ [M+H]⁺ 計算值626.2672，實測值 626.2698。

實例170. （2S,4R）-4-（（叔丁氧羰基）氨基）-5-（3-（（2S,5S）-23-（2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H-吡咯- 1-基）-2,5-二甲基-4,7,20-三氧雜-10,13,16-三氧雜-3,6,19-三氮雜二十三烷醯胺）-4-羥基苯基）-2-甲基戊酸（164a ）的合成

在2小時內分四份，向化合物121（3.57 g，10.55 mmol）的乙醇（70 ml）和pH 7.5緩衝液（0.1 M NaH₂ PO₄ / Na₂ HPO₄ ，60 ml）中加入化合物163a（6.60g，10.55mmol）。加入之後，將混合物繼續攪拌4小時，真空濃縮，並藉由柱層析純化（15至25％甲醇/二氯甲烷），得到化合物164a（7.25g，81％收率）。 MS ESI m/z C₄₀ H₆₁ N₆ O₁₄ [M+H]⁺ 計算值849.4267，實測值 849.4295。

實例171.（2R,4S）-4-羧基-1-（3-（（2S,5S）-23-（2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基） -2,5-二甲基-4,7,20-三側氧基-10,13,16-三氧雜-3,6,19-三氮雜二十三烷醯胺）-4-羥基苯基）戊-2-銨三氟乙酸鹽（165a）的合成

在室溫下，向化合物164a（0.20g，0.349mmol，1.0eq.）的二氯甲烷（6.0mL）溶液中加入TFA（2.0mL），將反應攪拌2小時，然後用無水甲苯稀釋並濃縮，重複此操作3次，得到標題化合物，為黃色油狀物（165mg，理論收率），無需進一步純化直接用於下一步。ESI m/z C₃₅ H₅₄ N₆ O₁₂ [M+H]⁺ ：計算值750.3795，實測值： 750.3825。

實例172. （2S,4R）-4-（2-（（6S,9R,11R）-6-（（S）-仲丁基）-9-異丙基-2,3,3,8-四甲基-4,7,13-三側氧基-12-氧雜-2,5,8-三氮雜十一烷-11-基）噻唑-4-甲醯胺）-5-（3-（（2S,5S）-23-（2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基）- 2,5-二甲基-4,7,20-三氧雜-10,13,16-三氧雜-3,6,19-三氮雜二十三烷醯胺）-4-羥基苯基）-2-甲基戊酸（166a ）的合成

將化合物165a（45mg，0.0600mmol）和五氟苯基酯41a（45mg，0.0650mmol）溶解在DMA（5mL）中。向混合物中加入DIPEA（20mg，0.154mmol）。將得到的混合物在室溫攪拌隔夜，濃縮並藉由製備型HPLC（C18柱，10-90％乙腈/水）純化，得到化合物166a（49.1 mg，收率65％）。 ESI m/z C₆₀ H₉₃ N₁₀ O₁₇ S [M+H]⁺ ：計算值1256.6442，實測值： 1256.6510。

實例173.五氟苯基2-甲基-2-（吡咯啶-1-基）丙酸酯713的合成

713 將2-甲基-2-（吡咯啶-1-基）丙酸25（401 mg，2.50 mmol），EDC（654 mg，3.40 mmol）和五氟苯酚（480 mg，2.60 mmol）溶解在二氯甲烷（45 mL）中並在室溫攪拌隔夜，然後濃縮至乾，得到化合物五氟苯基2-甲基-2-（吡咯啶-1-基）丙酸酯713（662mg，82％收率）。 MS ESI m/z C₁₄ H₁₅ F₅ NO₂ [M+H]⁺ 計算值324.1024，實測值 324.1045。

實例174. 2-（（5R,7R,10S）-10-（（S）-仲丁基）-3,3-二乙基-7-異丙基-8,13-二甲基-9,12-二側氧基-13-（吡咯啶-1-基）-4-氧雜-8,11-二氮雜-3-矽十四基-5-基）噻唑-4-羧酸乙酯714的合成

714 向五氟苯基酯713（650mg，2.01mmol）的EtOAc溶液（40ml）中加入化合物16（1.085g，2.01mmol）和乾的Pd / C（10wt％，100mg）。將反應混合物在氫氣環境（1 atm）下攪拌24小時，然後藉由矽藻土過濾，用乙酸乙酯洗滌濾墊。濃縮合併的有機部分，並藉由柱層析純化，用0-5％甲醇的CH₂ Cl₂ 溶液梯度洗脫，得到化合物714（1.10g，84％收率）。 MS ESI m/z C₃₃ H₆₁ N₄ O₅ SSi [M+H]⁺ 計算值653.4133，實測值 653.4148。

實例175.乙基2-（（1R,3R）-3-（（2S,3S）-N,3-二甲基-2-（2-甲基-2-（吡咯啶基-1-基）丙醯胺）戊醯胺）-1-羥基-4-甲基戊基）噻唑-4-羧酸酯,715的合成

715 將化合物714（1.10g，1.68mmol）溶解於AcOH /水/ THF（v / v / v 3∶1∶1，25mL）中，並在室溫攪拌2天。反應濃縮後，加入甲苯並再次濃縮。重複該步驟兩次，得到化合物715，將其直接用於下一步。 MS ESI m/z C₂₇ H₄₇ N₄ O₅ S [M+H]⁺ 計算值539.3268，實測值 539.3295.

實例176. 2-（（1R,3R）-3-（（2S,3S）-N,3-二甲基-2-（2-甲基-2-（吡咯啶基-1-基）丙醯胺）戊醯胺）1-羥基-4-甲基戊基）噻唑-4-羧酸716的合成

716 在0℃下，將LiOH（0.4N，5mL）的水溶液加入到化合物715（0.85g，1.65mmol）的MeOH（20mL）溶液中。將反應混合物在室溫攪拌2小時，然後濃縮。藉由柱層析（純CH₂ Cl₂ 至80∶20∶1 CH₂ Cl₂ / MeOH / NH₄ OH）得到化合物716（773mg，兩步收率90％），為無定形固體。 MS ESI m/z C₂₅ H₄₃ N₄ O₅ S [M+H]⁺ 計算值511.2955，實測值 511.2980。

實例177. 2-（（1R,3R）-1-乙醯氧基-3-（（2S,3S）-N,3-二甲基-2-（2-甲基-2-（吡咯啶基-1-基）丙醯胺））戊二胺）-4-甲基戊基）噻唑-4-羧酸717的合成

717 將化合物716（765 mg，1.50 mmol）和DMAP（180 mg，1.48 mmol）的無水THF（30 mL）和無水DMF（15 mL）溶液冷卻至0°C，向其中加入DIPEA（3.0 mL， 17.2mmol）和乙酸酐（1.0g，9.79mmol），使反應混合物升溫至室溫，攪拌4小時，然後濃縮。藉由柱層析（5-50％甲醇/二氯甲烷）純化，得化合物717（785mg，95％產率），為無定形固體。MS ESI m/z C₂₇ H₄₅ N₄ O₆ S [M+H]⁺ 計算值553.3061，實測值 553.3095。.

實例178.五氟苯基 2-（（（1R,3R）-1-乙醯氧基-3-（（2S,3S）-N,3-二甲基-2-（2-甲基-2-（吡咯啶-1-基））丙醯胺）戊醯胺）-4-甲基戊基）噻唑-4-羧酸酯718的合成

718 在室溫和N₂ 下，向化合物717（775 mg，1.40 mmol）的無水二氯甲烷（10 mL）的溶液中加入EDC（805 mg，4.19 mmol）和五氟苯酚（276 mg，1.50 mmol）。將該混合物在室溫下攪拌4小時，然後用二氯甲烷（100mL）稀釋，用水（2×200mL）和鹽水（200mL）洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮並藉由矽膠管柱層析（50％乙酸乙酯/石油醚）純化，得到白色固體化合物718（815 mg，81％產率） MS ESI m/z C₃₃ H₄₄ F₅ N₄ O₆ S [M+H]⁺ ：計算值719.2901，實測值： 719.2945。

實例179.（2S,4R）-4-（2-（（（1R,3R）-1-乙醯氧基-3-（（2S,3S）-N,3-二甲基-2-（2-甲基-2 -（吡咯啶-1-基丙醯胺）戊醯胺）-4-甲基戊基）噻唑-4-羧醯胺）-5-（3-（（2S,5S）-23-（2,5-二側氧基-2,5-二氫） -1H-吡咯-1-基）-2,5-二甲基-4,7,20-三側氧基-10,13,16-三氧雜-3,6,19-三氮雜二十三烷醯胺）-4-羥基苯基）-2-甲基戊酸的合成

在化合物718（153mg，0.213mmol）和化合物165a（160mg，0.213mmol）的7mL DMA的溶液中，加入DIPEA（100μL，0.575mmol）。將反應在室溫攪拌隔夜，然後濃縮。將殘餘物用1 mL乙腈稀釋，並藉由反相HPLC純化，並用乙腈/水梯度洗脫（10％MeCN至40％MeCN， 45min，d2 cm x L25 cm，C-18柱，8 ml / min），得到化合物719（166.1mg，61％產率）。 ESI： m/z： C₆₂ H₉₅ N₁₀ O₁₇ S [M+H]⁺ ：計算值1282.6598，實測值 1282.6630.

實例180 . （2S,4R）-4-（2-（（1R,3R）-1-乙醯氧基-3-（（2S,3S）-N,3-二甲基-2-（（R）-1-甲基六氫吡啶-2-羧醯胺）戊醯胺）-4-甲基戊基噻唑-4-羧醯胺）-5-（3-（（2S,5S）-23-（2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基））-2,5-二甲基-4,7,20-三氧雜-10,13,16-三氧雜-3,6,19-三氮二十三烷醯胺）-4-羥苯基）-2-甲基戊酸720的合成

將化合物33（30.2 mg，0.056 mmol），EDC（25.0 mg，0.130 mmol）和五氟苯酚（11 mg，0.060 mmol）溶於二氯甲烷（4 mL）中，在室溫下將反應攪拌隔夜，然後濃縮至乾，得到化合物五氟苯基2-（（1R,3R）-1-乙醯氧基-3-（（2S,3S）-N,3-二甲基-2-（（R）-1-甲基六氫吡啶-2-甲醯胺）戊二胺）-4 -甲基戊基）噻唑-4-羧酸酯33a，之後加入化合物165a（160 mg，0.213 mmol）的DMA（3mL）溶液和DIPEA（26.8μL，0.154 mmol）。將反應在室溫攪拌隔夜，然後濃縮。殘留物用1 mL乙腈稀釋，並藉由反相HPLC純化，梯度為MeCN / H₂ O（在45分鐘內10％MeCN至40％MeCN， D 2 cm × L 25 cm，C-18柱，8 ml / min）得到化合物720（133.1 mg，48％產率）。ESI： m/z： C₆₁ H₉₃ N₁₀ O₁₇ S [M+H]⁺ ： 1269.6442，實測值 1282.6630。

實例181.（2S,4R）-叔丁基4-（（叔丁氧羰基）氨基）-5-（4-（（2S,5S）-23-（2,5-二側氧基-2,5- 二氫-1H-吡咯-1-基）-2,5-二甲基-4,7,20-三側氧基-10,13,16-三氧雜-3,6,19-三氮二十三烷醯胺基）苯基）-2-甲基戊酸酯721的合成

在2小時內分四份，向化合物488（310 mg，0.82 mmol）的乙醇（70 ml）和pH 7.5緩衝液（0.1 M NaH₂ PO₄ / Na₂ HPO₄ ，60 ml）的混合物中加入化合物163a （660 mg， 1.055 mmol），加入之後將混合物繼續攪拌4小時，真空濃縮，並藉由柱層析純化（15至25％乙酸乙酯/二氯甲烷），得到化合物714（604.5mg，83％收率）。MS ESI m/z C₄₄ H₆₉ N₆ O₁₃ [M+H]⁺ 計算值 889.4923，實測值 889.4965。

實例182.（2S,4R）-4-氨基-5-（4-（（2S,5S）-23-（2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基）-2,5-二甲基-4,7,20-三氧雜-10,13,16-三氧雜-3,6,19-三氮雜二十三醯胺）苯基）-2-甲基戊酸三氟乙酸鹽的合成。

在室溫下，向化合物721（0.20g，0.225mmol，1.0eq）的二氯甲烷（6.0mL）溶液中加入TFA（2.0mL），將反應攪拌2h，然後用無水甲苯稀釋並濃縮，重複此操作3次，得到標題化合物，為黃色油狀物（165mg，理論產率），無需進一步純化用於下一步。ESI m/z C₃₅ H₅₃ N₆ O₁₁ [M+H]⁺ ：計算值732.3773，實測值： 732.3795。

實例183.（2S,4R）-4-（2-（（（1R,3R）-1-乙醯氧基-3-（（2S,3S）-N,3-二甲基-2-（（R）-1） -甲基六氫吡啶-2-羧醯胺）戊醯胺）-4-甲基戊基）噻唑-4-羧醯胺）-5-（4-（（2S,5S）-23-（2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H - 吡咯-1-基）-2,5-二甲基-4,7,20-三氧雜-10,13,16-三氧雜-3,6,19-三氮雜二十三烷醯胺）苯基）-2-甲基戊酸（723,作為控制對照品）的合成

將化合物33（30.2 mg，0.056 mmol），EDC（25.0 mg，0.130 mmol）和五氟苯酚（11 mg，0.060 mmol）溶解在二氯甲烷（4 mL）中，並將反應在室溫下攪拌隔夜，然後濃縮至乾，得到化合物五氟苯基 2-（（1R,3R）-1-乙醯氧基-3-（（2S,3S）-N,3-二甲基-2-（（R）-1-甲基六氫吡啶-2-羧醯胺）戊醯胺）-4）-甲基戊基）噻唑-4-羧酸酯，將其溶解在4 mL DMA中，之後加入化合物722（160 mg，0.213 mmol）的DMA（3 mL）溶液和DIPEA（26.8μL，0.154 mmol）。將反應在室溫攪拌隔夜，然後濃縮。將殘餘物用1 mL乙腈稀釋，並藉由反相HPLC純化，並用乙腈/水梯度洗脫（10％MeCN至40％MeCN， 45min，D 2 cm × L 25 cm，C-18柱，8 ml / min ）得到化合物723（47.7mg，68％產率）。 ESI m/z： C₆₁ H₉₃ N₁₀ O₁₆ S [M+H]⁺ ：計算值1253.6492，實測值 1253.6540。

實例184. 化合物128、132、437、481、495、528、629、633、641、645、649、654、659、663、673、709、712、166a、719、720和723 的一般製備方法向2.0 mL的pH 6.0~8.0， 10 mg / ml Herceptin中加入0.70~2.0 mL 的100 mM NaH₂ PO₄ 的PBS緩衝液，pH 6.5~8.5的緩衝液，TCEP（14-35µL，20 mM水溶液）以及化合物128、132、437、481、495、528、629、633、641、645、649、654、659、663、673、709、712、166a、719、720和723（14~28 µL， 20 mM 的DMA溶液），之後加入4-（疊氮甲基）苯甲酸（14~50µL，20 mM，pH 7.5的PBS緩衝液）。將混合物在室溫下孵育4~18 h，然後加入DHAA（135 µL，50 mM）。在室溫下連續孵育隔夜後，將混合物在G-25柱上純化，用100 mM NaH₂ PO₄ 、50 mM NaCl pH 6.0~7.5緩衝液洗脫，得到12.2~18.6 mg的偶聯物C-128 ，C-132，C-437，C-481，C-495，C-528，C-629，C-633，C-641，C-644，C-645，C-649，C-654，C -659，C-663，C-673，C-709，C-712，C-166a，C-719，C-720和C-723（80％~93％產率）（在13.4~15.8ml的NaH₂ PO₄ 緩衝液中）。偶聯物的藥物/抗體比（DAR）藉由UPLC-QTOF質譜確定為3.4~3.9。 SEC HPLC（Tosoh Bioscience，Tskgel G3000SW，7.8mm ID×30cm，0.5ml / min，100min）分析表明單體含量為94~99％，SDS-PAGE顯示為單條帶。

實例185. 與T-DM1相比，偶聯物C-128，C-132，C-437，C-481，C-495，C-528，C-629，C-633，C-641，C-644，C- 645，C-649，C-654，C-659，C-663，C-673，C-709，C-712，C-166a，C-719，C-720和C-723的體外細胞毒性評價：用於細胞毒性測定的細胞系是人胃癌細胞系NCI-N87，細胞在含有10％FBS的RPMI-1640中生長。測定時，將細胞（180μL，6000個細胞）加入到96孔板中的每個孔中，並在37°C，5％CO₂ 下溫育24小時。然後，在適當的細胞培養基裡，用不同濃度的測試化合物（20μL）處理細胞（總體積，0.2 mL）。對照孔含有細胞和培養基但無測試化合物。將孔板在37°C和5％CO₂ 下溫育120小時，然後向孔中加入MTT（5 mg/mL）（20μL），並將孔板在37°C下孵育1.5小時。小心去除培養基，然後加入DMSO（180μL），振盪15分鐘，在490nm和570nm處測量吸光度，620nm為參考。如以下公式計算抑制率：抑制率% = [1-（分析值-空白對照值）/（控制值-空白對照值）]×100。結果列於表1。表1 .本專利申請的Her2-tubullysin衍生物偶聯物及其對NCI-N87細胞的細胞毒性結果（IC₅₀ ）：

化合物＃	NCI-N87細胞結構及IC₅₀
129 （C-128）	IC₅₀ =0.14 nM，（n= 3.5）
133 （C-132）	IC₅₀ =0.17 nM，（n= 3.6）
C-437	IC₅₀ =3.67 nM，（n= 3.8）
C-481	IC₅₀ = 0.73 nM，（n= 3.8）
C-495	IC₅₀ = 13.06 nM，（n= 3.9）
C-528	IC₅₀ = 1.35 nM，（n= 3.8）
C-629	IC₅₀ =0.18 nM，（n= 3.7）
C-633	IC₅₀ = 0.11 nM，（n= 3.6）
C-641	IC₅₀ = 0.15 nM，（n= 3.6）
C-645	IC₅₀ = 3.56 nM，（n= 3.8）
C-649	IC₅₀ =9.01 nM，（n= 3.8）
C-654	IC₅₀ =3.51nM，（n= 3.6）
C-659	IC₅₀ =2.3 nM，（n= 3.8）
C-663	IC₅₀ =4.21nM，（n= 3.8）
C-673	IC₅₀ = 1.35 nM，（n= 3.7）
C-709	IC₅₀ =9.6 nM，（n= 3.6）
C-712	IC₅₀ =11.2 nM，（n= 3.6）
C-166a	IC₅₀ =0.12 nM，（n= 3.6）
C-719	IC₅₀ =0.10 nM，（n= 3.6）
C-720	IC₅₀ =0.08 nM，（n= 3.6）
C-723	IC₅₀ =0.07 nM，（n= 3.6）

實例186. BALB/c裸鼠人胃癌NCI-N87異種移植瘤模型上的體內抗腫瘤活性在人胃癌N-87異種移植瘤模型上評估了偶聯物C-166a，C-719，C-720，C-723和T-DM1的體內療效。五周齡的雌性BALB / c小鼠（40隻動物）在右肩下區域用0.1 mL無血清培養基裡的N-87癌細胞（5×10⁶ 個細胞/小鼠）進行皮下接種。腫瘤生長7天后長至平均大小125 mm³ 。然後將動物隨機分成6組（每組6隻動物）。第一組小鼠用作對照組，注射磷酸鹽緩衝液（PBS）。另5組分別靜脈注射6 mg/kg劑量的偶聯物C-166a，C-719，C-720，C-723和T-DM1。每3天或4天（每週兩次）測量腫瘤的三個維度，並使用公式腫瘤體積=1/2（長×寬×高）計算腫瘤體積。同時測量動物的體重。當滿足以下任何一個條件時，需要處死小鼠：（1）體重減少超過注射前體重的20％，（2）腫瘤體積大於1500 mm³ ，（3）病態嚴重至無法進食和進水或（4）皮膚壞死。如果腫瘤是未可感知的，則認為小鼠是無腫瘤的。結果如圖22。

實例187.偶聯物C-166a，C-719，C-720，C-723和T-DM1的毒性比較研究將6-7周大的66只ICR雌性小鼠分為11組。每組包括6只小鼠，用於肝毒性研究。第一組小鼠用作對照組，注射磷酸鹽緩衝液（PBS）。其他 10組分別注射偶聯物C-166a，C-719，C-720，C-723和T-DM1，靜脈注射，劑量75mg / Kg和150mg / Kg。在12天內每天測量每隻動物的體重變化。血液採集遵循NCI的齧齒動物采血指南。通常而言，投藥後第5天，藉由小鼠的眶後竇采血，離心以獲得血清。使用PUS-2018半自動生化分析儀（分別使用天冬氨酸和丙氨酸作為底物），分析天冬氨酸氨基轉移酶（AST）、丙氨酸氨基轉移酶（ALT）和鹼性磷酸酶（ALP）的水準。根據製造商的建議，藉由跟隨反應動力學建立參考值。采血後，處死小鼠，並將小鼠肝臟切片以進行病理研究。AST和ALT的結果如表2所示，動物的體重變化和病理圖片如圖23A和23B和圖24A-24F所示。

肝毒性結果和動物體重變化的結果表明，在相對更高的75 mg / Kg和150 mg / Kg劑量下，偶聯物C-166a和C-719的毒性低於T-DM1，偶聯物C- 720具有與T-DM1相似的毒性，偶聯物C-723的毒性比T-DM1高得多。在測試劑量下的毒性順序為：C-723＞ T-DM1≥C-720＞ C-719＞ C-166a＞ PBS。如圖23A和23B所示，由於偶聯物C-166a，C-719，C-720和C-723具有相似的體內活性，並且它們均比T-DM1具有更好的體內活性，因此，偶聯物C-166a和C-719的治療窗口將比T-DM1更大。總體而言，用2-N-烷基-2,2-二烷基-乙酸基團置換tubulysin左側的N-烷基-六氫吡啶-2-羧基可以顯著地降低藥物的毒副作用，同時能保持其體內活性。表2.受試動物的AST和ALT的平均測試結果

	AST （IU/L）	ALT （IU/L）
Day 5	Day 12	Day 5	Day 12
PBS	91.3±11.4	95.9±11.0	36.3±18.5	27.9±8.0
T-DM1 75 mg/Kg	1349.7±321.5	303.2±157.8	154.4±96.5	164.6±61.4
T-DM1 150 mg/Kg	3276.6±724.4	1509.6±399.3	305.9±142.9	407.3±53.8
C-166a，75 mg/Kg	173.6±13.1	100.5±16.1	56.8±13.3	48.3±9.5
C-166a，150 mg/Kg	480.3±50.5	131.5±29.3	126.5±38.1	71.7±15.3
C-719，75 mg/Kg	185.6±14.8	111.5±19.2	62.8±14.8	52.7±11.9
C-719，150 mg/Kg	543.5±67.5	159.5±38.5	137.5±43.7	83.4±19.2
C-720 75 mg/Kg	904.5±231.8	264.4±49.6	145.6±60.7	139.8±28.9
C-720 150 mg/Kg	3083.1±803.0	1576.6±34.9	401.8±59.0	335.9±41.5
C-723，75 mg/Kg	1673.4±335.5	1093.1±351.6	206.8±84.1	196.0±41.6
C-723，150 mg/Kg	4083.4±353.9	1861.8±787.1	587.6±111.2	483.9±220.9

圖1顯示了Tubulysin衍生物的Tuv片段的一般合成。圖2顯示了Tubulysin的片段的合成。圖3顯示了Tubulysin的片段的合成。圖4顯示了Tubulysin衍生物的片段的合成。圖5顯示了Tubulysin衍生物的片段的合成。圖6顯示了Tubulysin衍生物的片段的合成。圖7顯示了Tubulysin衍生物的片段的合成。圖8顯示了含有偶聯物連接子的Tubulysin衍生物的片段的合成。圖9顯示了Tubulysin衍生物的片段的合成及其與抗體的偶聯。圖10顯示了連接子的片段的合成。圖11顯示了含有連接子的Tubulysin衍生物的合成及其與抗體的偶聯。圖12顯示了含有連接子的Tubulysin衍生物的合成及其與抗體的偶聯。圖13顯示了含有連接子的Tubulysin衍生物的合成及其與抗體的偶聯。圖14顯示了含有連接子的Tubulysin衍生物的合成及其與抗體的偶聯。圖15顯示了連接子的片段的合成及其與含有連接子的Tubulysin衍生物的連接以及其與抗體的偶聯。圖16顯示了Tup和Tuv衍生物的片段的合成。圖17顯示了Tuv衍生物的片段的合成。圖18顯示了含有連接子的Tubulysin衍生物的合成及其與抗體的偶聯。圖19顯示了含有連接子的Tubulysin衍生物的合成及其與抗體的偶聯。圖20顯示了Tubulysin衍生物的片段的合成。圖21顯示了Tubulysin衍生物的片段的合成。圖22顯示了在人胃腫瘤N87細胞模型上偶聯物C-166a，C-719，C-720和C-723與T-DM1的抗腫瘤作用的比較，i.v.一次注射，劑量為6 mg / kg。四種偶聯物顯示出比T-DM1更好的抗腫瘤活性。化合物C-166a，C-719，C-720和C-723組中的所有動物（6/6）在第22天至第36天完全沒有可測量的腫瘤，並且它們都可以抑制腫瘤生長超過48天。相比之下，劑量為6 mg / Kg的T-DM1不能消除腫瘤，只能抑制腫瘤生長31天。圖23（A）和（B）顯示了ADC偶聯物T-DM1，C-166a，C-719，C-720和C-723的急性毒性研究，觀察投予劑量分別為75 mg / Kg（圖23A）和150 mg / Kg（圖23B）的小鼠在12天內的體重（BW）變化。體重變化顯示了偶聯物C-723的毒性在兩種劑量下都比T-DM1高；偶聯物C-720在劑量為75 mg / Kg時，與T-DM1的毒性相似，而在劑量為150 mg / Kg時，毒性小於T-DM1；偶聯物C-166a和偶聯物C-719在兩種測試劑量下，毒性都比T-DM1低得多。圖24A和24B顯示了注射75mg / Kg的偶聯物T-DM1，C-166a，C-719，C-720和C-723以及PBS緩衝液後，在第5天小鼠的肝病理圖片（圖片放大40倍）。圖片表明：（1）T-DM1組（圖24A），75mg / kg T-DM1組病理表明肝細胞腫脹和多灶性壞死。小葉結構不清楚。中央小靜脈包含腫脹的肝細胞，紅血球和其他的紅色物質。肝細胞核的大小和染色程度不同。肝細胞顯示邊界模糊，體積增加和血漿嗜酸性染色。肝細胞核部分消失。呈現增殖特徵。（2）在C-723組（圖24B），分散的單細胞壞死和水樣變性是主要的病理學表現。在腫脹區域，肝小葉結構消失，中央小靜脈中充斥著大量紅細胞。肝細胞呈腫脹，邊界不清和嗜酸性染色。細胞核的大小和顏色多變。觀察到輕度增殖。（3）C-720組的病理（圖24C）顯示小葉中央靜脈中的滲出液，肝板排列紊亂和肝細胞增生。偶爾會觀察到Kupffer細胞肥大。（4）在C-719（圖24D）和C-166a（圖24E）組中，肝小葉結構均出現輕微紊亂，可見肝竇。膽管壁可見炎性細胞浸潤。少量Kupffer細胞肥大，肝細胞輕度腫脹，其顯微結構與對照組PBS組相似（圖24F）。

Claims

一種細胞結合分子與細胞毒劑的偶聯物具有式 (I) 的結構：
（I）或醫藥上可接受之鹽、水合物或水合鹽；或此等化合物的多晶形晶體結構；或光學異構體、消旋體、非對映異構體或對映異構體；其中T為靶向分子或細胞結合分子；L是可釋放的連接子；
是連接鍵，藉由它L獨立地連接到括弧內的原子； n為1-20，m為1-10；其中 T是抗體；單鏈抗體；與靶細胞結合的抗體片段、單株抗體、單鏈單株抗體、結合靶細胞的單株抗體片段、嵌合抗體、結合靶細胞的嵌合抗體片段、結構域抗體、結合靶細胞的結構域抗體片段、adnectin類抗體、DARPins、淋巴因數、激素、維生素、生長因數、集落刺激因數、營養轉運分子（轉鐵蛋白）以及結合在白蛋白、聚合物、樹狀大分子、脂質體、納米顆粒、囊泡或（病毒）衣殼上的細胞結合肽、蛋白質或小分子。其中連接子 L具有下式結構: --Ww—（Aa）r--Vv—；其中: --W--是延展體單元； w是0或1；每個-Aa-獨立地是一個胺基酸單元； r獨立地是0至12的整數； --V--是一個間隔體單元；v為0、1或2。延當延展體單元（--W--）存在時，它連接著細胞結合分子（T）和胺基酸單元（-Aa-），若Aa不存在時，連接V。延展體單元W可以獨立地包含自毀滅間隔體，肽單元，腙鍵，二硫鍵或硫醚鍵。連接至T的W具有如下結構：

其中R²⁰ ，R²¹ 選自–C₁ ~C₉ 伸烷基-，- C₁ ~C₇ 碳環基-，-O-（ C₁ ~C₈ 烷基）-，-亞芳基-，- C₁ ~C₉ 伸烷基-亞芳基-，-亞芳基，- C₁ ~C₉ 伸烷基，- C₁ ~C₉ 伸烷基-（ C₁ ~C₈ 碳環基）-，-（ C₃ ~C₈ 碳環基）- C₁ ~C₉ 伸烷基-，- C₃ ~C₈ 雜環基-，- C₁ ~C₁₀ 伸烷基-（ C₃ ~C₈ 雜環基）-，-（ C₃ ~C₈ 雜環基）- C₁ ~C₉ 伸烷基-，-（CH₂ CH₂ O）_k -，-（CH（CH₃ ）CH₂ O）_k - 以及–（CH₂ CH₂ O）_k -CH₂ -； k 為1-20之間的整數；R’和R’’獨立地為H或CH₃ ; 當隔離體（-V-）存在時，胺基酸單元存在時，它連接胺基酸單元和有絲分裂劑。或者，當胺基酸單元缺失時，隔離體單元連接延伸體單元和有絲分裂劑。當胺基酸單元和延伸體單元均缺失時，隔離體單元連接有絲分裂劑和結合分子（T）。隔離體單元中可以包含一些官能團，以提高本發明中偶聯物的水溶性，生物傳送，獲得適宜的腎清除，攝入，吸收，生物分佈，和/或生物利用度。隔離體有兩種基本類型：自毀滅型和非自毀滅型。有絲分裂劑-連接子-細胞結合分子或有絲分裂劑-連接子的胺基酸單元斷裂，部分或全部的非自毀滅型隔離體仍然連接在有絲分裂劑上。自毀滅型包括電子結構類似於對胺基苄基胺基甲醯基（PAB）的芳香基團，2-胺基咪唑-5-甲醇衍生物，雜環PAB衍生物，β-葡糖醛酸，鄰或對胺基苄基縮醛，或以下結構之一：
，
，
，
，
；其中用（*）標記的原子是其它隔離體，可釋放的連接子單元，有絲分裂劑，和/或結合分子T的連接點； X、Y和Z³ 獨立地為NH，O或S； Z² 獨立地為H、NH、O或S；v為0或1；Q獨立地為H，OH，C₁ ~C₆ 烷基、（OCH₂ CH₂ ）_n 、F、Cl、Br、I、OR¹⁷ 、SR¹⁷ 、NR¹⁷ R¹⁸ 、N=NR¹⁷ 、N=R¹⁷ 、NR¹⁷ R¹⁸ 、NO₂ 、SOR¹⁷ R¹⁸ 、SO₂ R¹⁷ 、SO₃ R¹⁷ 、OSO₃ R¹⁷ 、PR¹⁷ R¹⁸ 、POR¹⁷ R¹⁸ 、PO₂ R¹⁷ R¹⁸ 、OPO（OR¹⁷ ）（OR¹⁸ ）、OCH₂ PO（OR¹⁷ ）（OR¹⁸ ），其中R¹⁷ 和R¹⁸ 獨立地為H，C₁ -C₈ 烷基，C₂ -C₈ 烯烴基、炔烴基、雜烷基，C₃ -C₈ 芳基、雜環基、碳環基、環烷基、雜環烷基、雜芳烷基、烷羰基或藥用的正離子鹽。非自我毀滅間隔體有如下結構：
；
；
；
；
；
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；
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；
；
；
；
；
；
；
；

6-馬來醯亞胺己醯基（MC），
馬來醯亞胺丙醯基（MP），
纈氨酸-瓜氨酸（val-cit），
丙氨酸-苯丙氨酸（ala-phe），
賴氨酸-苯丙氨酸（lys-phe），
對胺基芐氧基-羰基（PAB），
4-硫代戊酸基（SPP），
4-硫丁醯基（SPDB），
4-（N-馬來醯亞胺甲基）環己烷-1醯基（MCC），
馬來醯亞胺乙基（ME），
4-硫-2-羥基磺醯基-丁醯基（2-Sulfo-SPDB），
芳基硫基（PySS），
（4-乙醯基）胺基苯醯基（SIAB），
，氧基苄硫基，
胺基苄硫基，
二氧基苄硫基，
二胺基苄硫基，
胺基氧基苄基硫基，
烷氧基胺基（AOA），
亞乙基氧基（EO），
4-甲基-4-二硫代戊醯基（MPDP），
三唑，
二硫基，
烷基磺醯基
烷基磺醯胺，
磺基雙醯胺，
膦二醯胺，
烷基膦醯胺，
次膦酸，
N-甲基膦醯胺酸，
N，N'-二甲基膦醯胺酸，
N，N'-二甲基膦二醯胺，
肼，
乙脒；
肟，
二乙醯肼，
胺基乙基胺，
胺基乙基 - 胺基乙基胺，
，
，
，
，
，
，
，
，
，
，
，
，
，
，
，
，
，
，
，
，
，
，
，
，
，
，
，
，
，
，
， L-或D-，或含有1-20個相同或不同種類胺基酸的天然或非天然肽；其中“*” 和 “
”是其它間隔體或可釋放的連接子，有絲分裂劑和/或結合分子的連接點；m為1~ 10； n為1~ 20； X₂ 、X₃ 、X₄ 、X₅ 或X₆ 獨立地選自NH、NHNH、N（R₁₂ ）、N（R₁₂ ）N（R₁₂ ’）、O、S、C₁ -C₆ 烷基，C₂ -C₆ 雜烷基、烷基環烷基、雜環烷基；C₃ -C₈ 芳基、芳烷基、雜環、碳環、環烷基、雜烷基環烷基、烷基羰基、雜芳基； CH₂ OR₁₂ 、CH₂ SR₁₂ 、CH₂ NHR₁₂ 或1~ 8個胺基酸；其中R₁₂ 和R₁₂ ’獨立地為H、C₁ -C₈ 烷基；C₂ -C₈ 雜烷基、烷基環烷基、雜環烷基； C₃ -C₈ 芳基、芳烷基、雜環、碳環、環烷基、雜烷基環烷基、烷基羰基、雜芳基、1-8個碳原子的酯、醚或醯胺；或式（OCH₂ CH₂ ）p或（OCH₂ CH（CH₃ ））p的聚乙烯氧基單元，其中p為0至約1000的整數，或它們的組合。可斷裂連接子L中包含至少一個在生理條件下被破壞的鍵或pH、酸、堿、氧化作用、代謝、生化或酶不穩定的鍵，其具有以下結構之一： ‑（CR₁₅ R₁₆ ）_m （Aa）r（CR₁₇ R₁₈ ）_n （OCH₂ CH₂ ）_t -、‑（CR₁₅ R₁₆ ）_m （CR₁₇ R₁₈ ）_n （Aa）_r （OCH₂ CH₂ ）_t -、‑（Aa）_r -（CR₁₅ R₁₆ ）_m （CR₁₇ R₁₈ ）_n （OCH₂ CH₂ ）_t -、‑（CR₁₅ R₁₆ ）_m （CR₁₇ R₁₈ ）_n （OCH₂ CH₂ ）_r （Aa）_t -、-（CR₁₅ R₁₆ ）_m （CR₁₇ =CR₁₈ ）（CR₁₉ R₂₀ ）_n （Aa）_t （OCH₂ CH₂ ）_r -、-（CR₁₅ R₁₆ ）_m （NR₁₁ CO）（Aa）_t （CR₁₉ R₂₀ ）_n- （OCH₂ CH₂ ）_r -、-（CR₁₅ R₁₆ ）_m （Aa）_t （NR₂₁ CO）（CR₁₉ R₂₀ ）_n （OCH₂ CH₂ ）_r -、-（CR₁₅ R₁₆ ）_m （OCO）（Aa）_t -（CR₁₉ R₂₀ ）_n （OCH₂ CH₂ ）_r -、-（CR₁₅ R₁₆ ）_m （OCNR₁ ₇ ）（Aa）_t （CR₁₉ R₂₀ ）_n （OCH₂ CH₂ ）_r -、-（CR₁₅ R₁₆ ）_m -（CO）（Aa）_t- （CR₁₉ R₂₀ ）_n （OCH₂ CH₂ ）_r -、-（CR₁₅ R₁₆ ）_m （NR₂₁ CO）（Aa）_t （CR₁₉ R₂₀ ）_n （OCH₂ CH₂ ）_r -、-（CR₁₅ R₁₆ ）_m- （OCO）（Aa）_t （CR₁₉ R₂₀ ）_n- （OCH₂ CH₂ ）_r -、-（CR₁₅ R₁₆ ）_m （OCNR₁ ₇ ）（Aa）_t （CR₁₉ R₂₀ ）_n -（OCH₂ CH₂ ）_r -、-（CR₁₅ R₁₆ ）_m （CO）（Aa）_t （CR₁₉ R₂₀ ）_n- （OCH₂ CH₂ ）_r -、-（CR₁ ₅ R₁ ₆ ）_m -苯基‑CO（Aa）_t- （CR₁ ₇ R₁ ₈ ）_n -、-（CR₁ ₅ R₁ ₆ ）_m -呋喃‑CO（Aa）_t （CR₁ ₇ R₁ ₈ ）_n -、-（CR₁ ₅ R₆ ）_m -惡唑‑CO（Aa）_t （CR₁ ₇ R₁ ₈ ）_n -、-（CR₁ ₅ R₁ ₆ ）_m -噻唑基‑CO（Aa）_t （CCR₁ ₇ R₁ ₈ ）_n -、-（CR₁ ₅ R₁ ₆ ）_t -噻吩‑CO（CR₁ ₇ R₁ ₈ ）_n -、-（CR₁ ₅ R₁ ₆ ）_t -咪唑‑CO-（CR₁ ₇ R₁ ₈ ）_n -、-（CR₁ ₅ R₁ ₆ ）_t -嗎啉‑CO（Aa）_t- （CR₁ ₇ R₁ ₈ ）_n -、-（CR₁ ₅ R₁ ₆ ）_t -呱嗪-CO（Aa）_t （CR₁ ₇ R₁ ₈ ）_n -、-（CR₁ ₅ R₁ ₆ ）_t -N‑甲基呱嗪‑CO（Aa）_t （CR₁ ₇ R₁ ₈ ）_n -、-（CR₁ ₅ R₁₆ ）_m -（Aa）_t 苯基-、-（CR₁ ₅ R₁ ₆ ）_m -（Aa）_t 呋喃‑、-（CR₁ ₅ R₁ ₆ ）_m -惡唑（Aa）_t ‑、-（CR₁ ₅ R₁ ₆ ）_m -噻唑基（Aa）_t ‑、-（CR₁ ₅ R₁ ₆ ）_m -噻吩基-（Aa）_t -、-（CR₁ ₅ R₁ ₆ ）_m -咪唑（Aa）_t -、-（CR₁ ₅ R₁ ₆ ）_m -嗎啉‑（Aa）_t -、-（CR₁ ₅ R₁ ₆ ）_m -呱嗪‑（Aa）_t -、-（CR₁ ₅ R₁ ₆ ）_m -N‑甲基呱嗪‑（Aa）_t- _、 ‑K（CR₁₅ R₁₆ ）_m （Aa）r（CR₁₇ R₁₈ ）_n （OCH₂ CH₂ ）_t -、‑K（CR₁₅ R₁₆ ）_m （CR₁₇ R₁₈ ）_n （Aa）_r （OCH₂ CH₂ ）_t -、‑K（Aa）_r -（CR₁₅ R₁₆ ）_m （CR₁₇ R₁₈ ）_n （OCH₂ CH₂ ）_t -、‑K（CR₁₅ R₁₆ ）_m （CR₁₇ R₁₈ ）_n （OCH₂ CH₂ ）_r （Aa）_t -、‑K（CR₁₅ R₁₆ ）_m- （CR₁₇ =CR₁₈ ）（CR₁₉ R₂₀ ）_n （Aa）_t （OCH₂ CH₂ ）_r 、‑K（CR₁₅ R₁₆ ）_m （NR₁₁ CO）（Aa）_t -（CR₁₉ R₂₀ ）_n （OCH₂ CH₂ ）_r -、‑K（CR₅ R₆ ）_m （Aa）_t （NR₂₁ CO）（CR₁₉ R₂₀ ）_n （OCH₂ CH₂ ）_r -、‑K（CR₁₅ R₁₆ ）_m -（OCO）（Aa）_t （CR₁₉ R₂₀ ）_n- （OCH₂ CH₂ ）_r -、‑K（CR₁₅ R₁₆ ）_m （OCNR₁ ₇ ）（Aa）_t （CR₁₉ R₂₀ ）_n- （OCH₂ CH₂ ）_r -、‑K（CR₁₅ R₁₆ ）_m （CO）（Aa）_t- （CR₁₉ R₂₀ ）_n （OCH₂ CH₂ ）_r -、‑K（CR₁₅ R₁₆ ）_m （NR₂₁ CO）（Aa）_t- （CR₁₉ R₂₀ ）_n -（OCH₂ CH₂ ）_r -、‑K（CR₁₅ R₁₆ ）_m- （OCO）（Aa）_t （CR₁₉ R₂₀ ）_n （OCH₂ CH₂ ）_r -、‑K（CR₁₅ R₁₆ ）_m- （OCNR₁ ₇ ）（Aa）_t -（CR₁₉ R₂₀ ）_n （OCH₂ CH₂ ）_r -、‑K-（CR₁₅ R₁₆ ）_m （CO）（Aa）_t （CR₁₉ R₂₀ ）_n （OCH₂ CH₂ ）_r -、‑K（CR₁ ₅ R₁ ₆ ）_m -苯基‑CO（Aa）_t （CR₁ ₇ R₁ ₈ ）_n -、‑K-（CR₁ ₅ R₁ ₆ ）_m -呋喃‑CO（Aa）_t （CR₁ ₇ R₁ ₈ ）_n -、‑K（CR₁ ₅ R₁ ₆ ）_m -惡唑-CO（Aa）_t （CR₁ ₇ R₁ ₈ ）_n -、‑K（CR₁ ₅ R₁ ₆ ）_m -噻唑基‑CO（Aa）_t- （CR₁ ₇ R₁ ₈ ）_n -、‑K（CR₁ ₅ R₁ ₆ ）_t -噻吩-CO（CR₁ ₇ R₁ ₈ ）_n -、‑K（CR₁ ₅ R₁ ₆ ）_t 咪唑-CO-（CR₁ ₇ R₁ ₈ ）_n -、‑K（CR₅ R₆ ）_t 嗎啉-CO（Aa）_t -（CR₁ ₇ R₁ ₈ ）_n -、‑K（CR₁ ₅ R₁ ₆ ）_t -呱嗪-CO（Aa）_t- （CR₁ ₇ R₁ ₈ ）_n -、‑K（CR₁ ₅ R₁ ₆ ）_t -N‑甲基呱嗪-CO（Aa）_t （CR₁ ₇ R₁ ₈ ）_n -、‑K（CR₁ ₅ R₁₆ ）_m -（Aa）_t 苯基、‑K-（CR₁ ₅ R₁ ₆ ）_m- （Aa）_t 呋喃-、-K（CR₁ ₅ R₁ ₆ ）_m -惡唑-（Aa）_t -、‑K（CR₁ ₅ R₁ ₆ ）_m -噻唑基（Aa）_t -、‑K（CR₁ ₅ R₁ ₆ ）_m -噻吩-（Aa）_t -、‑K（CR₁ ₅ R₁ ₆ ）_m -咪唑（Aa）_t -、‑K（CR₁ ₅ R₁ ₆ ）_m -嗎啉（Aa）_t -、‑K（CR₁ ₅ R₁ ₆ ）_m 呱嗪（Aa）_t G、‑K（CR₅ R₆ ）_m -N-甲基呱嗪（Aa）_t -；其中Aa、m、n、R₁₃ 、R₁₄ 和R₁₅ 在前文已有定義； t和r獨立地為0 – 100；R₁₆ 、R₁₇ 、R₁₈ 、R₁₉ 和R₂₀ 獨立地選自H、鹵素、C₁ -C₈ 烷基或雜烷基、C₂ -C₈ 芳基、烯基、炔基、醚、酯、胺或醯胺、C₃ -C₈ 芳基、這些基團均可以被以下基團所取代：一個或多個鹵素、CN、NR₁ R₂ 、CF₃ 、OR₁ 、芳基、雜環、S（O）R₁ 、SO₂ R₁ 、-CO₂ H、-SO₃ H、-OR₁ 、-CO₂ R₁ 、-CONR₁ 、-PO₂ R₁ R₂ 、-PO₃ H 或P（O）R₁ R₂ R₃ ；K 是NR₁₂ 、-SS-、-C（=O）-、-C（=O）NH-、-C（=O）O-、-C=NH-O-、-C=N-NH-、-C（=O）NH-NH-、O、S、Se、B、Het （具有C₃ -C₁₂ 的雜環或雜芳環），或含有1-20個相同或不同胺基酸的肽。括弧內的式（I）是有效的有絲分裂劑，其中R¹ 、R² 、R³ 、和R⁴ 獨立地為C₁ -C₈ 直鏈或支鏈烷基、烷基醇；C₂ -C₈ 雜烷基、烷基環烷基、雜環烷基、烷基醚、羧酸烷基酯、烷基胺、烷基酯、烷基醯胺；C₃ -C₈ 芳基、芳烷基、雜環、碳環、環烷基、雜烷基環烷基、烷基羰基；或兩個R：R¹ R² 、R³ R⁴ 、R⁵ R⁶ 、或R¹² R¹³ 獨立地形成3 ~ 7元的碳環、環烷基、雜環、雜環烷基、芳基或雜芳基環； Y為N或C；另外，R¹ 、R² 、R³ 、和R⁴ 可以獨立地缺省；其中R⁵ 、R⁶ 、R⁸ 和R¹⁰ 獨立地選自H，直鏈或支鏈的C₁ -C₄ 烷基或C₂ -C₄ 雜烷基；其中R⁷ 選自 H、R¹⁴ 或 -R¹⁴ C（=O）X¹ R¹⁵ ；或 -R¹⁴ X¹ R¹⁵ ； X¹ 選自O、S、S-S、NH、或者NR¹⁴ ；其中 R⁹ 是 H、-O-、-OR¹⁴ 、-OC（=O）R¹⁴ -、-OC（=O）NHR¹⁴ -、-OC（=O）NR¹⁴ R¹⁵ -、-OC（=O） R¹⁴ SSR¹⁵ -、OP（=O）（OR¹⁴ ）-、or OR¹⁴ OP（=O）（OR¹⁵ ）；其中 R¹¹ 為 H、R¹⁴ 、-R¹⁴ C（=O）R¹⁶ 、-R¹⁴ C（=O）X² R¹⁶ 、-R¹⁴ X² R¹⁶ 、-R¹⁴ C（=O）X² 、其中 X² 是 -O-、-S-、-NH-、-NHS（O₂ ）、-NHS（O）、-N（R¹⁴ ）-、-O-R¹⁴ -、-S-R¹⁴ -、-S（=O）-R¹⁴ -、或 -NHR¹⁴ -；其中 R¹² 為 H、R¹⁴ 、-O-、-S-、-N-、=N-、=NNH-、-OH、-SH、-NH₂ 、=NH、=NNH₂ 、-NH（R¹⁴ ）、-OR¹⁴ 、-C（O）O-、-C（O）OR¹⁶- 、-COR¹⁶ 、-COOR¹⁴ -、C（O）NH-、C（O）NH₂ 、C（O）NHR¹⁴ 、-SR¹⁴ 、-S（=O）R¹⁴ 、-P（=O）（OR¹⁶ ）₂ 、-OP（=O）（OR¹⁶ ）₂ 、-CH₂ OP（=O）（OR¹⁶ ）₂ 、-SO₂ R¹⁶ ；其中R¹³ 為直鏈或支鏈C₁ -C₁₀ 烷基、烷基酸、烷基醯胺、烷基胺；或C₂ -C₁₀ 雜烷基；或C₃ -C₁₀ 芳基；芳基是指由一個或幾個環組成的芳香基團或雜芳香基團、包含一個或幾個環，4至10個碳原子。術語雜芳香基團是指具有一個或多個碳原子被雜原子取代、術語芳基或Ar也指其中一個或幾個H原子獨立地被R¹⁷ 、F、Cl、Br、I、OR¹⁶ 、SR¹⁶ 、NR¹⁶ R¹⁷ 、N=NR¹⁶ 、N= R¹⁶ 、NR¹⁶ R¹⁷ 、NO₂ 、SOR¹⁶ R¹⁷ 、SO₂ R¹⁶ 、SO₃ R¹⁶ 、OSO₃ R¹⁶ 、PR¹⁶ R¹⁷ 、POR¹⁶ R¹⁷ 、PO₂ R¹⁶ R¹⁷ 、OP（O）（OR¹⁷ ）₂ 、OCH₂ OP（O）（OR¹⁷ ）₂ 、OC（O）OP（O）（OR¹⁷ ）₂ 、PO（OR¹⁶ ）（OR¹⁷ ）、OP（O）（OR¹⁷ ）OP（O）（OR¹⁷ ）₂ 、OC（O）R¹⁷ 或OC（O）NHR¹⁷ 取代的芳香基團；其中R¹⁴ 和R¹⁵ 獨立地為H；直鏈或支鏈C₁ -C₈ 烷基； C₂ -C₈ 烯基、炔基、雜烷基、雜環、碳環；C₃ -C₈ 芳基、環烷基、烷基環烷基、雜環烷基、雜芳烷基、雜烷基環烷基、烷基羰基；其中R¹⁴ 為二價時，R¹⁴ 進一步地與其它1至4個胺基酸單元或（CH₂ CH₂ O）_r ，r為0至12的整數，或C₄ -C₁₂ 糖苷，或C₁ -C₈ 羧酸連接；其中R¹⁶ 為H、OH、R¹⁴ 或1-4個胺基酸單元；其中R¹⁷ 為H、直鏈或支鏈C₁ -C₈ 烷基；C₂ -C₈ 烯基、炔基、雜烷基、雜環；C₃ -C₈ 芳基、碳環、環烷基、烷基環烷基、雜環烷基、雜烷基環烷基、雜芳烷基、烷基羥基或C₄ -C₁₂ 糖苷，或醫藥上可接受之鹽。
如請求項1之偶聯物具有式（II）的結構：
（II）或醫藥上可接受之鹽、水合物或水合鹽；或此等化合物的多晶形晶體結構；或光學異構體、消旋體、非對映異構體或對映異構體；其中 T、L、n、m、Y、R¹ 、R² 、R³ 、R⁴ 、R⁵ 、R⁶ 、R⁸ 、R¹⁰ 、R¹³ 、R¹⁴ 、R¹⁵ 、R¹⁶ 和R¹⁷ 的定義與式（I）相同；其中 R⁷ 選自 H、R¹⁴ 或 -R¹⁴ C（=O）X¹ R¹⁵ 或 -R¹⁴ X¹ R¹⁵ ； X¹ 選自O、S、S-S、NH、或NR¹⁴ ；其中 R⁹ 為 H、-OH、-OR¹⁴ 、-OC（=O）R¹⁴ 、-OC（=O）NHR¹⁴ 、-OC（=O）NR¹⁴ R¹⁵ 、-OC（=O） R¹⁴ SSR¹⁵ 、OP（=O）（OR¹⁴ ）₂ 或 OR¹⁴ OP（=O）（OR¹⁵ ）；其中R¹¹ 為H、R¹⁴ 、-R¹⁴ C（=O）R¹⁶ 、-R¹⁴ C（=O）X² R¹⁶ 、-R¹⁴ X² R¹⁶ 、-R¹⁴ C（=O）X² 、其中 X² 為 -O-、-S-、-NH-、-NHS（O₂ ）、-N（R¹⁴ ）-、-O-R¹⁴ -、-S-R¹⁴ -、-S（=O）-R¹⁴ -或 -NHR¹⁴ -；其中 R¹² 為 H、R¹⁴ 、-O-、-S-、-N-、=N-、=NNH-、-OH、-SH、-NH₂ 、=NH、=NNH₂ 、-NH（R¹⁴ ）、-OR¹⁴ 、-C（O）O-、-C（O）OR¹⁶- 、-COR¹⁶ 、-COOR¹⁴ -、C（O）NH-、C（O）NH₂ 、C（O）NHR¹⁴ 、-SR¹⁴ 、-S（=O）R¹⁴ 、-P（=O）（OR¹⁶ ）₂ 、-OP（=O）（OR¹⁶ ）₂ 、-CH₂ OP（=O）（OR¹⁶ ）₂ 、-SO₂ R¹⁶ 。
如請求項1之偶聯物具有式（III）的結構：
（III）或醫藥上可接受之鹽、水合物或水合鹽；或此等化合物的多晶形晶體結構；或光學異構體、消旋體、非對映異構體或對映異構體；其中T、L、m、Y、R¹ 、R² 、R³ 、R⁴ 、R⁵ 、R⁶ 、R⁸ 、R⁹ 、R¹⁰ 、R¹¹ 、R¹² 、R¹³ 和n 的定義與式（I）中相同；其中R⁷ 獨立地選自 -R¹⁴ -，或 -R¹⁴ C（=O）X¹ R¹⁵ - 或 -R¹⁴ X¹ R¹⁵ -，其中 R¹⁴ 和 R¹⁵ 獨立地為直鏈或支鏈C₁ -C₈ 烷基、雜烷基；C₂ -C₈ 烯基、炔基；C₃ -C₈ 芳基、雜環、碳環、環烷基、雜環烷基、雜芳烷基；雜烷基環烷基、烷基羰基； X¹ 選自O、S、S-S、NH或NR¹⁴ 。
如請求項1之偶聯物具有式（IV）的結構：
（IV）或醫藥上可接受之鹽、水合物或水合鹽；或此等化合物的多晶形晶體結構；或光學異構體、消旋體、非對映異構體或對映異構體；其中T、L、m、R¹ 、R² 、R³ 、R⁴ 、R⁵ 、R⁶ 、R⁷ 、R⁸ 、R⁹ 、R¹⁰ 、R¹¹ 、R¹² 、R¹³ 和n 的定義與式（I）中相同；其中R⁹ 獨立地為H、-O-、-OR¹⁴ -、-OC（= O）R¹⁴ -、-OC（= O）NHR¹⁴ -、-OC（= O）NR¹⁴ R¹⁵ -、-OC（= O）R¹⁴ SSR¹⁵ -、-OP（＝ O）（OR¹⁴ ）O-、其中R¹⁴ ，R¹⁵ 獨立地為H，C₁ -C₈ 烷基，雜烷基； C₃ -C₈ 芳基，雜芳基，雜環，碳環，環烷基，烷基環烷基，雜環烷基，雜烷基環烷基，雜芳烷基，烷基羰基或醫藥上可用的鹽。
如請求項1之偶聯物具有式（V）的結構：
（V）或醫藥上可接受之鹽、水合物或水合鹽；或此等化合物的多晶形晶體結構；或光學異構體、消旋體、非對映異構體或對映異構體；其中T、L、m、Y、R¹ 、R² 、R³ 、R⁴ 、R⁵ 、R⁶ 、R⁷ 、R⁸ 、R⁹ 、R¹⁰ 、R¹² 、R¹³ 和n 的定義與式（I）中相同；其中R¹¹ 為-R¹⁴ -、-R¹⁴ C（= O）R¹⁷ -、-R¹⁴ C（= O）X² R¹⁷ -、-R¹⁴ X² R¹⁷ -、-R¹⁴ C（= O）X² -，其中R¹⁷ 獨立地為H、OH、C₁ -C₈ 烷基、C₂ -C₈ 烯基、炔基、雜烷基；C₃ -C₈ 芳基、亞芳基、雜環、碳環、雜環烷基；或一個胺基酸、或兩個胺基酸單元； X² 是-O-、-S-、-NH-、-NHS（O₂ ）-、-NHS（O）-、-N（R¹⁴ ）-、-O-R^14- 、-S-R^14- 、-S（ = O）-R¹⁴ -或-NHR¹⁴ -； R¹⁴ 為H、C₁ -C₈ 烷基、雜烷基；C₂ -C₈ 烯基、炔基；C₃ -C₈ 芳基、雜環、碳環、環烷基、烷基環烷基、雜環烷基、雜烷基環烷基、雜芳烷基、烷基羰基。
如請求項1之偶聯物具有式（VI）的結構：
（VI）或醫藥上可接受之鹽、水合物或水合鹽；或此等化合物的多晶形晶體結構；或光學異構體、消旋體、非對映異構體或對映異構體；其中T、L、m、Y、R¹ 、R² 、R³ 、R⁴ 、R⁵ 、R⁶ 、R⁷ 、R⁸ 、R⁹ 、R¹⁰ 、R¹¹ 、R¹³ 和n 的定義與式（I）中相同；其中R¹² 獨立地為R¹⁴ 、-O-、-S-、-NH-、= N-、= NNH-、-N（R¹⁴ ）-、-OR¹⁴ -、C（O）O-、C（O）NH- 、C（O）NR¹⁴ -、-SR¹⁴ -、-S（= O）R¹⁴ -、-NHR¹⁴ -、-CH₂ OP（= O）（OR¹⁵ ）-、-P（= O）（OR¹⁵ ）-、-OP（＝ O）（OR¹⁵ ）O-、-SO₂ R¹⁴ ，R¹⁴ 、R¹⁵ 獨立地為C₁ -C₈ 烷基、雜烷基；C₂ -C₈ 烯基、炔基；C₃ -C₈ 芳基、雜環、碳環、環烷基、烷基環烷基、雜環烷基、雜芳烷基、雜烷基環烷基、烷基羰基。
如請求項1之偶聯物具有式（VII）的結構：
（VII）或醫藥上可接受之鹽、水合物或水合鹽；或此等化合物的多晶形晶體結構；或光學異構體、消旋體、非對映異構體或對映異構體；其中T、L、n、m、Y、R¹ 、R² 、R³ 、R⁴ 、R⁵ 、R⁶ 、R⁸ 、R⁹ 、R¹⁰ 、R¹¹ 和 R¹² 的定義與式（I）相同；其中R¹³ 為C₁ -C₁₀ 烷基、雜烷基、烷基酸、烷基醯胺、烷基胺或Ar； Ar是指由一個或多個環組成的芳基或雜芳基，包含4至10個碳原子。術語雜芳基是指芳基上的一個或多個碳原子被O、N、Si、Se、P或S取代。術語芳基或芳香基也指其中一個或幾個氫原子獨立地被R¹⁸ 、F、Cl、Br、I、OR¹⁶ 、SR¹⁶ 、NR¹⁶ R¹⁸ 、N = NR¹⁶ 、N = R¹⁶ 、NR¹⁶ R¹⁸ 、NO₂ 、SOR¹⁶ R¹⁸ 、SO₂ R¹⁶ 、SO₃ R¹⁶ 、OSO₃ R¹⁶ 、PR¹⁶ R¹⁸ 、POR¹⁶ R¹⁸ 、PO₂ R¹⁶ R¹⁸ 、OPO₃ R¹⁶ R¹⁸ 或PO₃ R¹⁶ R¹⁸ 取代的芳基，其中R¹⁶ 、R¹⁸ 獨立地為氫，C₁ -C₈ 烷基， C₂ -C₈ 烯基、炔基、雜烷基， C₃ -C₈ 芳基、雜環、碳環、環烷基、烷基環烷基、雜環烷基、雜芳烷基、雜烷基環烷基、烷基羰基，C₄ -C₁₂ 糖苷或醫藥上可用的鹽。
如請求項1之偶聯物，其中式（I）括弧內的細胞毒性劑化合物具有式II-01 ~II-69， III-01 ~III-68， IV-01 ~IV-68， V-01 ~V-68， VI-01 ~VI-12和VII-01 ~VII-77的結構：
II-01，
II-02，
II-03，
II-04，
II-05，
II-06，
II-07，
II-08，
II-09，
II-10，
II-11，
II-12，
II-13，
II-14，
II-15，
II-16，
II-17，
II-18，
II-19，
II-20，
II-21，
II-22，
II-23，
II-24，
II-25，
II-26，
II-27，
II-28，
II-29，
II-30，
II-31，
II-32，
II-33，
II-34，
II-35，
II-36，
II-37，
II-38，
II-39，
II-40，
II-41，
II-42，
II-43，
II-44，
II-45，
II-46，
II-47，
II-48，
II-49，
II-50，
II-51，
II-52，
II-53，
II-54，
II-55，
II-56，
II-57，
II-58，
II-59，
II-60，
II-61，
II-62，
II-63，
II-64，
II-65，
II-66，
II-67，
II-68，
II-69， I
III-01，
III-02，
III-03，
III-04，
III-05，
III-06，
III-07，
III-08，
III-09，
III-10，
III-11，
III-12，
III-13，
III-14，
III-15，
III-16，
III-17，
III-18，
III-19，
III-20，
III-21，
III-22，
III-23，
III-24，
III-25，
III-26，
III-27，
III-28，
III-29，
III-30，
III-31，
III-32，
III-33，
III-34，
III-35，
III-36，
III-37，
III-38，
III-39，
III-40，
III-41，
III-42，
III-43，
III-44，
III-45，
III-46，
III-47，
III-48，
III-49，
III-50，
III-51，
III-52，
III-53，
III-54，
III-55，
III-56，
III-57，
III-58，
III-59，
III-60，
III-61，
III-62，
III-63，
III-64，
III-65，
III-66，
III-67，
III-68，
IV-01，
IV-02，
IV-03，
IV-04，
IV-05，
IV-06，
IV-07，
IV-08，
IV-09，
IV-10，
IV-11，
IV-12，
IV-13，
IV-14，
IV-15，
IV-16，
IV-17，
IV-18，
IV-19，
IV-20，
IV-21，
IV-22，
IV-23，
IV-24，
IV-25，
IV-26，
IV-27，
IV-28，
IV-29，
IV-30，
IV-31，
IV-32，
IV-33，
IV-34，
IV-35，
IV-36，
IV-37，
IV-38，
IV-39，
IV-40，
IV-41，
IV-42，
IV-43，
IV-44，
IV-45，
IV-46，
IV-47，
IV-48，
IV-49，
IV-50，
IV-51，
IV-52，
IV-53，
IV-54，
IV-55，
IV-56，
IV-57，
IV-58，
IV-59，
IV-60，
IV-61，
IV-62，
IV-63，
IV-64，
IV-65，
IV-66，
IV-67，
IV-68，
V-01，
V-02，
V-03，
V-04，
V-05，
V-06，
V-07，
V-08，
V-09，
V-10，
V-11，
V-12，
V-13，
V-14，
V-15，
V-16，
V-17，
V-18，
V-19，
V-20，
V-21，
V-22，
V-23，
V-24，
V-25，
V-26，
V-27，
V-28，
V-29，
V-30，
V-31，
V-32，
V-33，
V-34，
V-35，
V-36，
V-37，
V-38，
V-39，
V-40，
V-41，
V-42，
V-43，
V-44，
V-45，
V-46，
V-47，
V-48，
V-49，
V-50，
V-51，
V-52，
V-53，
V-54，
V-55，
V-56，
V-57，
V-58，
V-59，
V-60，
V-61，
V-62，
V-63，
V-64，
V-65，
V-66，
V-67，
V-68，
VI-01，
VI-02，
VI-03，
VI-04，
VI-05，
VI-06，
VI-07，
VI-08，
VI-09，
VI-10，
VI-11，
VI-12，
VII-01，
VII-02，
VII-03，
VII-04，
VII-05，
VII-06，
VII-07，
VII-08，
VII-09，
VII-10，
VII-11，
VII-12，
VII-13，
VII-14，
VII-15，
VII-16，
VII-17，
VII-18，
VII-19，
VII-20，
VII-21，
VII-22，
VII-23，
VII-24，
VII-25，
VII-26，
VII-27，
VII-28，
VII-29，
VII-30，
VII-31，
VII-32，
VII-33，
VII-34，
VII-35，
VII-36，
VII-37，
VII-38，
VII-39，
II-40，
VII-41，
VII-42，
VII-43，
VII-44，
VII-45，
VII-46，
VII-47，
VII-48，
VII-49，
VII-50，
VII-51，
VII-52，
VII-53，
VII-54，
VII-55，
VII-56，
VII-57，
VII-58，
VII-59，
VII-60，
VII-61，
VII-62，
VII-63，
VII-64，
VII-65，
VII-66，
VII-67，
VII-68，
VII-69，
VII-70，
VII-71，
VII-72，
VII-73，
VII-74，
VII-75，
VII-76，
VII-77，或醫藥上可接受之鹽、水合物或水合鹽；或此等化合物的多晶形晶體結構；或光學異構體、消旋體、非對映異構體或對映異構體；其中 R²⁰ 是H； C₁ -C₈ 直鏈或支鏈烷基、雜烷基、或醯基（-C（O）R¹⁷ ）； C₂ -C₈ 直鏈或支鏈烯基、炔基、烷基環烷基、雜環烷基； C₃ -C₈ 直鏈或支鏈的芳基、芳烷基、雜環、碳環、環烷基、雜烷基環烷基、烷基羰基、雜芳基；碳酸酯（-C（O）OR¹⁷ ）、胺基甲酸酯（-C（O）NR¹⁷ R¹⁸ ）；或 C₁ -C₈ 碳原子的羧酸酯、酯、醚或醯胺；或 1~8個胺基酸；或如式（OCH₂ CH₂ ）_p 或（OCH₂ CH（CH₃ ））_p 的聚乙烯氧基單元、其中p是0至約1000的整數；或R²⁰ 缺省，相應的氧則成酮，或上述組合；其中 R²¹ 是 H、C₁ -C₈ 直鏈或支鏈烷基； X、X¹ 、X² 和 X³ 獨立地為 O、S、NH、NHNH、NHR¹⁷ 、CH₂ 或缺省； P¹ 是 H、R¹⁷ 、P（O）（OH）₂ 、P（O）（X¹ R¹⁷ ）₂ 、CH₂ P（O）（OH）₂ 、S（O² ）（X¹ R¹⁷ ）、C₆ H₁₂ O₅ （糖苷）、（CH₂ CH₂ O）_p R¹⁷ ，其中 p是選自 0 -100， R¹⁷ 的定義同前文；另外， X¹ P¹ 可缺省（一起為 H）；其中 Z² 和 Z³ 獨立地為 H、OH、NH₂ 、OR¹⁷ 、NHR¹⁷ 、COOH、COOR¹⁷ 、C（O）R¹⁷ 、C（O）NHR¹⁷ 、C（O）NHNHR¹⁷ 、C（O）NH₂ 、R¹⁸ 、OCH₂ OP（O）（OR¹⁸ ）₂ 、OC（O）OP（O）（OR¹⁸ ）₂ 、OPO（OR¹⁸ ）₂ 、NHPO（OR¹⁸ ）₂ 、OP（O）（OR¹⁸ ）OP（O）（OR¹⁸ ）₂ 、OC（O）R¹⁸ 、OC（O）NHR¹⁸ 、OSO₂ （OR¹⁸ ）、O-（C₄ -C_12- 糖苷）、C₁ -C₈ 直鏈或支鏈烷基或雜烷基；C₂ -C₈ 直鏈或支鏈烯基、炔基、烷基環烷基、雜環烷基； C₃ -C₈ 直鏈或支鏈的芳基、芳烷基、雜環、碳環、環烷基、雜烷基環烷基、烷基羰基、雜芳基；碳酸酯（-C（O）OR¹⁷ ）、胺基甲酸酯（-C（O）NR¹⁷ R¹⁸ ）； R¹⁷ 和R¹⁸ 獨立地為H、C₁ -C₈ 直鏈或支鏈烷基或雜烷基； C₂ -C₈ 直鏈或支鏈烯基、炔基、烷基環烷基、雜環烷基； C₃ -C₈ 直鏈或支鏈的芳基、芳烷基、雜環、碳環、環烷基、雜烷基環烷基、烷基羰基、雜芳基；碳酸酯（-C（O）OR¹⁷ ）、胺基甲酸酯（-C（O）NR¹⁷ R¹⁸ ）； R¹⁹ 是H、OH、NH₂ 、OSO₂ （OR¹⁸ ）、XCH₂ OP（O）（OR¹⁸ ）₂ 、XPO（OR₁₈ ）₂ 、XC（O）OP（O）（OR₁₈ ）₂ 、XC（O）R¹⁸ 、XC（O） NHR¹⁸ 、C₁ -C₈ 烷基或羧酸酯； C₂ -C₈ 烯基、炔基、烷基環烷基、雜環烷基； C₃ -C₈ 芳基或烷基羰基；或醫藥上可接受的鹽； X是O、S、NH、NHNH、NHR¹⁷ 或CH₂ ； R⁷ 與前文中定義相同；其中“
” 是與連接子L連接的位點。
如請求項1之偶聯物具有以下結構：

C-481，
C-495，
C-528，
C-629，
C-633，
C-641，
C-645，
C-649，
C-654，
C-659，
C-663，
C-673，
C-709，
C-712，
C-166a，
C-719，其中 mAb是抗體； n 是 1 ~20； p 是 0~100。
一種製備請求項9之偶聯物的方法，其中抗體和具有下式結構的化合物反應：
如請求項1之偶聯物，其中細胞結合劑能夠抗腫瘤細胞、病毒感染細胞、微生物感染細胞、寄生蟲感染細胞、自身免疫細胞、活化的細胞、骨髓細胞、活化的T細胞、B細胞、或黑色素細胞，或任何表達下列抗原或受體之一的細胞：CD2、CD2R、CD3、CD3gd、CD3e、CD4、CD5、CD6、CD7、CD8、CD8a、CD8b、CD9、CD10、CD11a、CD11b、CD11c、CD12、CD12w、CD13、CD14、CD15、CD15s、CD15u、CD16、CD16a、CD16b、CD17、CDw17、CD18、CD19、CD20、CD21、CD22、CD23、CD24、CD25、CD26、CD27、CD28、CD29、CD30、CD31、CD32、CD33、CD34、CD35、CD36、CD37、CD38、CD39、CD40、CD41、CD42、CD42a、CD42b、CD42c、CD42d、CD43、CD44、CD44R、CD45、CD45RA、CD45RB、CD45RO、CD46、CD47、CD47R、CD48、CD49a、CD49b、CD49c、CD49e、CD49f、CD50、CD51、CD52、CD53、CD54、CD55、CD56、CD57、CD58、CD59、CD60、CD60a、CD60b、CD60c、CD61、CD62E、CD62L、CD62P、CD63、CD64、CD65、CD65s、CD66、CD66a、CD66b、CD66c、CD66d、CD66e、CD66f、CD67、CD68、CD69、CD70、CD71、CD72、CD73、CD74、CD74、CD75、CD75s、CD76、CD77、CD78、CD79、CD79a、CD79b、CD80、CD81、CD82、CD83、CD84、CDw84、CD85、CD86、CD87、CD88、CD89、CD90、CD91、CD92、CDw92、CD93、CD94、CD95、CD96、CD97、CD98、CD99、CD99R、CD100、CD101、CD102、CD103、CD104、CD105、CD106、CD107、CD107a、CD107b、CD108、CD109、CD110、CD111、CD112、CD113、CDw113、CD114、CD115、CD116、CD117、CD118、CD119、CDw119、CD120a、CD120b、CD121a、CD121b、CDw121b、CD122、CD123、CDw123、CD124、CD125、CDw125、CD126、CD127、CD128、CDw128、CD129、CD130、CD131、CDw131、CD132、CD133、CD134、CD135、CD136、CDw136、CD137、CDw137、CD138、CD139、CD140a、CD140b、CD141、CD142、CD143、CD144、CD145、CDw145、CD146、CD147、CD148、CD149、CD150、CD151、CD152、CD153、CD154、CD155、CD156a、CD156b、CDw156c、CD157、 CD158a、CD158b、CD159a、CD159b、CD159c、CD160、CD161、CD162、CD162R、CD163、CD164、CD165、CD166、CD167、CD167a、CD168、CD169、CD170、CD171、CD172a、CD172b、CD172g、CD173、CD174、CD175、CD175s、CD176、CD177、CD178、CD179、CD180、CD181、CD182、CD183、CD184、CD185、CD186、CDw186、CD187、CD188、CD189、CD190、Cd191、CD192、CD193、CD194、CD195、CD196、CD197、CD198、CDw198、CD199、CDw199、CD200、CD200a、CD200b、CD201、CD202、CD202b、CD203、CD203c、CD204、CD205、CD206、CD207、CD208、CD209、CD210、CDw210、CD212、CD213a1、CD213a2、CDw217、CDw218a、CDw218b、CD220、CD221、CD222、CD223、CD224、CD225、CD226、CD227、CD228、CD229、CD230、CD231、CD232、CD233、CD234、CD235a、CD235ab、CD235b、CD236、CD236R、CD238、CD239、CD240、CD240CE、CD240D、CD241、CD242、CD243、CD244、CD245、CD246、CD247、CD248、CD249、CD252、CD253、CD254、CD256、CD257、CD258、CD261、CD262、CD263、CD265、CD266、CD267、CD268、CD269、CD271、CD273、CD274、CD275、CD276 （B7-H3）、CD277、CD278、CD279、CD280、CD281、CD282、CD283、CD284、CD289、CD292、CDw293、CD294、CD295、CD296、CD297、CD298、CD299、CD300a、CD300c、CD300e、CD301、CD302、CD303、CD304、CD305、CD306、CD309、CD312、CD314、CD315、CD316、CD317、CD318、CD319、CD320、CD321、CD322、CD324、CDw325、CD326、CDw327、CDw328、CDw329、CD331、CD332、CD333、CD334、CD335、CD336、CD337、CDw338、CD339、CD340、CD341、CD342、CD343、CD344、CD345、CD346、CD347、CD348、CD349、CD350、CD351、CD352、CD353、CD354、CD355、CD356、CD357、CD358、CD359、CD360、CD361、CD362、CD363、CD364、CD365、CD366、CD367、CD368、CD369、CD370、CD371、CD372、CD373、CD374、CD375、CD376、CD377、CD378、CD379、CD381、CD382、CD383、CD384、CD385、CD386、CD387、CD388、CD389、CRIPTO、CRIPTO、CR、CR1、CRGF、CRIPTO、CXCR5、LY64、TDGF1、4-1BB、APO2、ASLG659、BMPR1B、4-1BB、5AC、5T4 （Trophoblast糖蛋白、TPBG、5T4、WNT-活化抑制因數1或WAIF1）、腺癌抗原、AGS-5、AGS-22M6、啟動素受體激酶1、AFP、AKAP-4、ALK、α 整合素、αvβ6、胺基肽酶N、澱粉樣蛋白β、雄激素受體、促血管新生蛋白因數2、促血管新生蛋白因數3、膜聯蛋白A1、炭疽毒素保護性抗原、抗轉移蛋白受體、AOC3 （VAP-1）、B7-H3、炭疽桿菌、BAFF （B細胞啟動因數）、B淋巴瘤細胞、bcr-abl、蛙皮素、BORIS、C5、C242抗原、CA125（糖抗原125、MUC16）、CA-IX（或CAIX、碳酸酐酶9）、CALLA、CanAg、犬紅斑狼瘡IL31、碳酸酐酶IX、心肌肌凝蛋白、CCL11（C-C 片段趨化因數11）、CCR4 （C-C趨化因數受體4）、CCR5、CD3E （ε）、CEA（癌胚抗原）、CEACAM3、CEACAM5（癌胚抗原）、CFD（因數D）、Ch4D5、膽囊收縮素2 （CCK2R）、CLDN18 （Claudin-18）、CLDN18.1 （Claudin-18.1），CLDN18.2 （Claudin-18.2），叢生因數A、cMet、CRIPTO 、FCSF1R（集落刺激因數1受體）、CSF2（集落刺激因數2、粒細胞-巨噬細胞集落刺激因數（GM-CSF））、CSP4、CTLA4（細胞毒性T淋巴細胞相關蛋白4）、CTAA16.88腫瘤抗原、CXCR4、C-X-C趨化因數受體4、環狀ADP核糖核酸酶、細胞週期蛋白B1、CYP1B1、巨細胞病毒、巨細胞病毒糖蛋白B、Dabigatran、DLL3 （類Δ配位體 3）、DLL4 （類Δ配位體 4）、DPP4（雙肽-肽酶4）、DR5（死亡受體5）、大腸桿菌shiga毒素類型-1、大腸桿菌shiga毒素類型-2、ED-B、EGFL7 （類EGF結構域蛋白7）、EGFR、EGFRII、EGFRvIII、內皮因數、內皮素B受體、內毒素、EpCAM（上皮細胞粘附分子）、EphA2、Episialin、ERBB2（表皮生長因數受體2）、ERBB3、ERG （TMPRSS2 ETS融合基因）、大腸桿菌、ETV6-AML、FAP（成纖維細胞活化蛋白α）、FCGR1、α-胎蛋白、纖維蛋白II、β鏈、纖連蛋白額外結構域-B、FOLR（葉酸受體）、葉酸受體α、葉酸水解酶、Fos相關抗原1、呼吸道合胞病毒的F蛋白、捲曲的受體、岩藻糖GM1、GD2神經節苷脂、G-28（細胞表面抗原糖脂）、GD3獨特型、GloboH、Glypican 3、N-羥乙醯神經氨酸、GM3、GMCSF受體α鏈、生長分化因數、GP100、GPNMB（跨膜糖蛋白NMB）、GUCY2C（鳥苷酸環化酶2 C）、鳥苷酸環化酶C（GC-C）、腸鳥苷酸環化酶、鳥苷酸環化酶C受體、熱穩定腸毒素受體（hSTAR）、熱休克蛋白、血凝素、乙肝表面抗原、乙型肝炎病毒、HER1（人類表皮生長因數受體1）、HER2、HER2/neu、HER3（ERBB-3）、IgG4、HGF/SF（肝細胞生長因數/分散因數）、HHGFR、HIV-1、組蛋白複合物、HLA-DR（人類白細胞抗原）、HLA-DR10、HLA-DRB、HMWMAA、人類絨毛膜促性腺激素、HNGF、人類分散因數受體激酶、HPV E6/E7、Hsp90、hTERT、ICAM-1（細胞間粘附分子1）、獨特型、IGF1R（IGF – 1、類胰島素生長因數1受體）、IGHE、IFN-γ、流感血凝素、IgE、IgE Fc區、IGHE、白細胞介素（包括IL–1、IL-2、 IL-3、IL–4、IL-5、IL–6、IL-6R、IL-7、IL-8、IL-9、IL–10、IL-11、IL–12、IL-13、IL-15、IL-17、IL-17A、IL-18、IL-19、IL-20、IL-21、IL-22、IL-23、IL-27或IL-28）、IL31RA、ILGF2（類胰島素生長因數2）、整合蛋白（α4、αIIbβ3、αvβ3、α4β7、α5β1、α6β4、α7β7、αllβ3、α5β5、αvβ5）、干擾素γ誘導蛋白質、ITGA2、ITGB2、KIR2D、Kappa Ig、LCK、Le、Legumain、Lewis-Y抗原、LFA-1（淋巴細胞功能相關抗原1、CD11a）、LHRH、LINGO-1、脂磷壁酸、LIV1A、LMP2、LTA、MAD-CT-1、MAD-CT-2、MAGE-1、MAGE-2、MAGE-3、MAGE A1、MAGE A3、MAGE 4、MART1、MCP-1、MIF（巨噬細胞遷移抑制因數、或糖基抑制因數（GIF））、MS4A1（跨膜4結構域亞家族A成員1）、MSLN （間皮素）、MUC1（粘蛋白1、細胞表面相關（MUC1）或多態性上皮粘蛋白（PEM））、MUC1-KLH、MUC16 （CA125）、MCP1（單核細胞趨化蛋白1）、MelanA/MART1、ML-IAP、MPG、MS4A1、MYCN、髓磷脂相關糖蛋白、Myostatin、NA17、NARP-1、NCA-90（粒細胞抗原）、Nectin-4 （ASG-22ME）、NGF、神經細胞凋亡調控蛋白酶1、NOGO-A、Notch受體、核仁素、Neu致癌基因產物、NY-BR-1、NY-ESO-1、OX-40、OxLDL（氧化低密度脂蛋白）、OY-TES1、P21、p53非突變體、P97、PAP、抗（N-羥乙醯神經氨酸）抗體結合部位、PAX3、PAX5、PCSK9、PDCD1（PD-1、程式性細胞死亡蛋白1）、PDGF-Rα （α血小板源生長因數受體）、PDGFR-β、PDL-1、PLAC1、類PLAP睾丸鹼性磷酸酶、血小板衍生生長因數受體β、磷酸鈉聯合轉運體、PMEL 17、聚唾液酸、蛋白酶3 （PR1）、前列腺癌、PS（磷脂醯絲氨酸）、前列腺癌細胞、銅綠假單胞菌、PSMA、PSA、PSCA、狂犬病病毒糖蛋白、RHD（Rh多肽1（RhPI）、CD240）、Rhesus因數、RANKL、RhoC、Ras突變、RGS5、ROBO4、呼吸道合胞病毒、RON、ROR1、肉瘤易位中斷點、SART3、Sclerostin、SLAMF7（SLAM成員7）、Selectin P、SDC1（多配位體蛋白聚糖1）、系統性紅斑狼瘡（a）、生長調節素C、SIP（1-磷酸鞘氨醇）、生長激素抑制素、精子蛋白17、SSX2、STEAP1（6-跨膜上皮前列腺抗原1）、STEAP2、STn、TAG-72（腫瘤相關糖蛋白）、存活素、T細胞受體、T細胞跨膜蛋白、TEM1（腫瘤血管內皮標記1）、TENB2、Tenascin C（TN-C）、TGF-α、TGF-β（轉化生長因數β）、TGF-β1、TGF-β2（轉化生長因數2）、Tie（CD202b）、Tie2、TIM-1（CDX-014）、Tn、TNF、TNF-α、TNFRSF8、TNFRSF10B（腫瘤壞死因數受體超家族成員10 B）、TNFRSF13B（腫瘤壞死因數受體超家族成員13B）、TPBG（滋養細胞糖蛋白）、TRAIL-R1（TNF相關壞死誘導配位體受體1）、TRAILR2（死亡受體5 （DR5））、腫瘤相關的鈣信號傳感子2、腫瘤特異糖基化的MUC1、TWEAK受體、TYRP1（糖蛋白75）、TRP-1 （Trop1）、TRP-2 （Trop2）、酪氨酸酶、VCAM-1、VEGF、VEGF-A、VEGF-2、VEGFR-1、VEGFR-2、vimentin、WT1、XAGE 1、表達胰島素生長因數受體的細胞、或表達表皮生長因數受體的細胞。
如請求項11之偶聯物，其中腫瘤細胞選自淋巴瘤細胞、骨髓瘤細胞、腎細胞、乳腺癌細胞、前列腺癌細胞、卵巢癌細胞、結直腸癌細胞、胃癌細胞、鱗狀癌細胞、小細胞肺癌細胞、非小細胞肺癌細胞、睾丸癌細胞、惡性細胞或任何因以不受調節的加速生長和分裂而導致癌症的細胞。
一種藥物組合物，包含請求項 1之一個或多個治療有效量的偶聯物，以及醫藥上可接受的鹽、載劑、稀釋劑或輔料。
如請求項13之藥物組合物，具有體外、體內或離體細胞殺傷活性。
一種協同治療癌症、自身免疫性疾病或傳染病的方法，包括同時投藥如請求項13的藥物組合物與選自化療藥物、放射療法、免疫療法藥物、自身免疫疾病藥物、抗感染藥物的協同劑。
如請求項15之方法，其中協同劑選自以下一種或者兩種藥劑：（1）. 化療藥劑選自以下一種或幾種藥物： a）烷基化劑選自氮芥：氯苯那普，氯普那嗪，環磷醯胺，達喀爾巴嗪，雌二醇氮芥，異環磷醯胺，氮芥，鹽酸二甲氧胺，氧化二氮芥，鹽酸氨氯地平，麥考酚酸，衛矛醇，呱泊溴烷，新氮芥，苯芥膽甾醇，松龍苯芥，噻替呱，曲磷胺對，尿嘧啶；CC-1065和阿多來新、卡折來新、比折來新及其合成同系物；多卡黴素和KW-2189和CBI-TMI、及其合成同系物；苯並二氮呯二聚體或吡咯苯並二氮呯（PBD）或托美黴素，吲哚苯並二氮呯，咪唑苯並噻二氮呯或惡唑烷苯並二氮呯的二聚體；亞硝基脲包括卡莫司汀，洛莫司汀，氯化梭菌素，福莫司汀，尼莫司汀，拉莫司汀；烷基磺酸鹽包括白蘇芬、樹蘇芬、磺胺異丙磺胺和皮蘇芬；三氮烯或達喀爾巴嗪；鉑化合物包括卡鉑，順鉑，奧沙利鉑；吖丙啶類，苯並二氫吡喃酮，卡洛酮，美妥替派或烏雷多巴；乙烯亞胺和甲基三聚氰胺，包括六甲蜜胺，三亞乙基三胺，三乙基磷醯胺，三亞乙基硫代磷醯胺和三羥甲基甲基胺； b）植物生物鹼選自長春花生物鹼包括長春新堿，長春堿，長春地辛，長春瑞濱，去甲長春堿；紫杉醇類包括紫杉醇，多西紫杉醇及其同系物；美登素類包括DM1、DM2、DM3、DM4、DM5， DM6， DM7，美登素、安沙黴素及其同系物；cryptophycin包括cryptophycin 1和cryptophycin 8；埃博黴素，軟珊瑚醇，迪莫利德，草苔蟲內酯，海兔毒素，澳瑞他汀，tubulysins ，cephalostatin；pancratistatin；sarcodictyin；海綿抑制素； c）DNA拓撲異構酶抑制劑選自表鬼臼毒素，9-胺基喜樹堿，喜樹堿，克立那托，朵拉黴素，依託泊苷，磷酸依託泊苷，伊立替康，米托蒽醌，諾消靈，視黃酸（或視黃醇），替尼泊苷，拓撲替康，9-硝基喜樹堿或RFS 2000，和絲裂黴素及其類似物； d）抗代謝物選自[抗葉酸劑，如DHFR抑制劑，包括甲氨蝶呤，曲麥克特，二甲葉酸，蝶羅呤，氨喋呤（4-胺基苯甲酸）或葉酸同系物）； IMP脫氫酶抑制劑（包括麥考酚酸，噻唑呋林，利巴韋林，EICAR）；核糖核苷酸還原酶抑制劑（包括羥基脲，去鐵胺）]； [嘧啶同系物，尿嘧啶同系物（包括安西他濱，阿紮胞苷，6-氮尿嘧啶，卡培他濱（希羅達），卡莫氟，阿糖胞苷，雙去氧尿苷，去氧氟尿苷，依諾他濱，5-氟尿嘧啶，氟尿苷，ratitrexed（Tomudex）；胞嘧啶同系物（包括阿糖胞苷，胞嘧啶阿拉伯糖苷，氟達拉濱）；嘌呤同系物（包括硫唑嘌呤，氟達拉濱，巰嘌呤，硫胺素，硫鳥嘌呤）]；葉酸補充劑，弗洛林酸； e）激素療法劑，選自受體拮抗劑[抗雌激素：（包括甲地孕酮，雷洛昔芬，他莫昔芬），LHRH興奮劑（包括戈斯他林，醋酸亮丙瑞林）；抗雄激素藥（包括比卡魯胺，氟他胺，卡魯司酮，丙酸倍他雄酮，表雄甾醇，戈舍瑞林，亮丙瑞林，美替利定，尼魯米特，睾內酯，曲洛司坦及其他雄激素抑制劑）]；維甲類化合物：[維生素D3同系物：（包括CB1093，EB1089，KH1060，膽鈣化醇，麥角鈣化甾醇）；光動力療法劑（維替泊芬，酞菁，光敏劑Pc4，去甲氧基-竹紅菌素A）；細胞因數（包括干擾素-α，干擾素-γ，腫瘤壞死因數（TNF），含TNF的人蛋白）]； f）激酶抑制劑選自BIBW 2992（抗-EGFR/Erb2），伊馬替尼，吉非替尼，呱加他尼，索拉非尼，達沙替尼，舒尼替尼，厄洛替尼，尼洛替尼，拉帕替尼，阿西替尼，帕唑帕尼，凡德他尼，E7080（抗VEGFR2），mubritinib，普納替尼（AP24534），bafetinib（INNO-406），bosutinib（SKI-606），卡博替尼，維莫德吉，iniparib，盧梭利替尼，CYT387，阿西替尼，tivozanib，索拉非尼，貝伐單抗，西妥昔單抗，曲妥珠單抗，雷珠單抗，帕尼單抗，伊斯平斯； g）聚（ADP-核糖）聚合酶（PARP）抑制劑，如奧拉帕裡、尼拉帕裡、依尼帕裡、塔拉佐帕裡、維利帕裡、維利帕裡、CEP 9722（Cephalon）、E7016（Eisai）、BGB-290（Beigene）、或3-胺基苯甲醯醯胺； h）抗生素，選自烯二炔類抗生素（選自卡奇黴素，特別是卡奇黴素γ1，δ1，α1和β1，達因黴素，包括達因黴素A和去氧米黴素，埃斯培拉黴素，卡塔爾黴素，C-1027，maduropeptin，新卡嗪奧斯丁和相關色蛋白烯二炔抗生素），aclacinomysins，放線菌素，安麯黴素，重氮絲氨酸，博來黴素，卡諾黴素，卡拉黴素，洋紅黴素，嗜癌素，色黴素，達金黴素，柔紅黴素，去柔紅黴素，6-重氮-5-氧代-L-去甲亮氨酸，阿黴素，嗎啉-阿黴素，氰基嗎啉-阿黴素，2-吡咯啉阿黴素和去氧柔紅黴素，表柔比星，阿柔比星，伊達比星，馬可黴素，nitomycin，黴酚酸，諾加黴素，橄欖黴素，peplomycin，potfiromycin，嘌呤黴素，奎拉黴素，羅道黴素，鏈黑黴素，鏈脲黴素，殺結核菌素，烏苯美司，淨司他丁，佐柔比星； i）聚酮化合物（番荔素），bullatacin和bullatacinone；吉西他濱，環氧酶素，硼替佐米，沙利度胺，來那度胺，pomalidomide，tosedostat，zybrestat，PLX4032，STA-9090，Stimuvax，allovectin-7，Xegeva，Provenge，Yervoy，異戊二烯化抑制劑（和洛伐他汀），多巴胺能神經毒素和1-甲基-4-苯基吡啶鎓離子，細胞週期抑制劑（選自星形孢菌素），放線菌素（選自放線菌素D，更生黴素），博萊黴素（選自博來黴素A2，博萊黴素B2，培洛黴素），蒽環類抗生素（選自柔紅黴素），鵝膏毒素，阿黴素（亞德里亞黴素），伊達比星，表柔比星，吡柔比星，佐柔比星，米托蒽醌，MDR抑制劑或維拉帕米，Ca^{2 +} ATP酶抑制劑或毒胡蘿蔔素，組蛋白去乙醯酶抑制劑（伏立諾他，羅米地辛，帕比司他，丙戊酸，Mocetinostat（MGCD0103）， Belinostat，PCI-24781，恩替諾特，SB939，Resminostat，Givinostat，AR-42，CUDC-101，蘿蔔硫素，曲古抑菌素A）；塞來昔布，格列酮類，表沒食子兒茶素沒食子酸酯，雙硫侖，Salinosporamide A；抗腎上腺藥物，如氨魯米特，米托坦，曲洛司坦，醋葡醛內酯，醛磷醯胺，胺基乙醯丙酸，安吖啶，阿拉伯糖苷，bestrabucil，比生群，edatraxate，defofamine，美可辛，地吖醌，依氟鳥氨酸（DFMO），elfomithine，依利醋銨，依託格魯，硝酸鎵，胞嘧啶，羥基脲，伊班膦酸鹽，香菇多糖，氯尼達明，米托胍腙，米托蒽醌，莫呱達醇，二胺硝吖啶，噴司他丁，蛋氨氮芥，吡柔比星，鬼臼酸，2-乙肼，甲基苄肼；PSK^® ；呱嗪二酮丙烷；根黴素；西佐；螺環鍺；細格孢氮雜酸；三亞胺醌；三氯三乙胺；單端孢黴烯（包括T-2毒素，疣孢菌素A，杆孢菌素A和anguidine），聚氨酯，siRNA，反義藥物；（2）自身免疫疾病藥物包括環孢菌素、環孢菌素A、胺基己酸、硫唑嘌呤、溴隱亭、苯丁酸氮芥、氯喹、環磷醯胺、皮質類固醇（包括安西奈德、倍他米松、布地奈德、氫化可的松、氟尼縮松、丙酸氟替卡松、氟可龍達那唑、地塞米松、曲安奈德、二丙酸倍氯米松）、DHEA、依那西普、羥基氯喹、英夫利昔單抗、美洛昔康、甲氨蝶呤、麥考酚酸酯、潑尼松、西羅莫司、他克莫司；（3）. 抗傳染病劑包括： a）.胺基糖苷類：丁胺卡那黴素、武夷黴素、慶大黴素（奈替米星、西索米星、異帕米星）、潮黴素、卡那黴素（丁胺卡那黴素、阿貝卡星、胺基去氧卡那黴素、地貝卡星、妥布黴素）、新黴素（新黴素 B、巴龍黴素、核糖黴素）、奈替米星、大觀黴素、鏈黴素、妥布黴素、甲基姿蘇黴素； b）. 醯胺醇類：疊氮氯黴素、氯黴素、氟甲碸黴素、甲碸黴素； c）. 安沙黴素類：格爾德黴素、除莠黴素； d）. 碳青黴烯類：比阿培南、多尼培南、厄他培南、亞胺培南/西司他丁、美羅培南、帕尼培南； e）. 頭孢類：碳頭孢烯（氯碳頭孢）、頭孢乙腈、頭孢克洛、頭孢拉定、頭孢羥氨苄、頭孢羅寧、頭孢噻啶、頭孢噻吩或頭孢菌素、頭孢氨苄、頭孢來星、頭孢孟多、頭孢匹林、頭孢三嗪、頭孢氮氟、頭孢西酮、頭孢唑啉、頭孢拉宗、頭孢卡品、頭孢達肟、頭孢吡肟、頭孢米諾、頭孢西丁、頭孢丙烯、頭孢沙定、頭孢替唑、頭孢呋辛、頭孢克肟、頭孢地尼頭孢妥侖、頭孢吡肟、頭孢他美、頭孢甲肟、頭孢地嗪、頭孢尼西、頭孢呱酮、頭孢雷特、頭孢噻肟、頭孢替安、頭孢唑蘭、頭孢氨苄、頭孢咪唑、頭孢匹胺、頭孢匹羅、頭孢泊肟、頭孢丙烯、頭孢喹肟、頭孢磺啶、頭孢他啶、頭孢特侖、頭孢布烯、頭孢噻林、頭孢唑肟、頭孢、頭孢曲松、頭孢呋辛、頭孢唑喃、頭黴素（頭孢西丁、頭孢替坦、頭孢美唑）氧頭孢烯（氟氧頭孢、拉氧頭孢）； f）. 糖肽：博來黴素、萬古黴素（奧利萬星、特拉萬星）、替考拉甯（達巴萬星）雷莫拉寧； g）. 甘氨醯：替加環素； h）. β-內醯胺酶抑制劑：青黴烷（舒巴坦、他唑巴坦）、克拉維烷（克拉維酸）； i）. 林可醯胺類：克林黴素、林可黴素； j）. 脂肽：達托黴素、A54145、鈣依賴性抗生素（CDA）； k）. 大環內酯類：阿奇黴素、喹紅黴素、克拉黴素、地紅黴素、紅黴素、氟紅黴素、交沙黴素、酮內酯類（泰利黴素、喹紅黴素）麥迪黴素、美奧卡黴素、竹桃黴素、利福黴素（利福平、利福平、利福布汀、利福噴丁）、羅他黴素、羅紅黴素、壯觀黴素、螺旋黴素、他克莫司（FK506）、醋竹桃黴素、泰利黴素； l）.單環β-內醯胺抗生素：氨曲南、替吉莫南； m）. 唑烷酮類：利奈唑胺； n）. 青黴素類：阿莫西林、氨苄西林（匹氨西林、海他西林、巴氨西林、美坦西林、酞氨西林）疊氮西林、阿洛西林、青黴素、苄星青黴素、苯氧基苄星青黴素、氯甲西林、普魯卡因青黴素、羧苄青黴素（卡茚西林）、鄰氯青黴素、雙氯青黴素、先鋒黴素、氟氯西林、美西林（氮呯脒青黴素雙酯）、美洛西林、甲氧西林、萘夫西林、苯唑西林、醋甲西林、青黴素、奈西林、青黴素、呱拉西林、苯丙西林、磺苄西林、替莫西林、替凱西林； o）. 多肽：桿菌肽、多粘菌素E、多粘菌素B； p）. 喹諾酮類藥物：阿拉沙星、巴羅沙星、環丙沙星、克林沙星、達氟沙星、二氟沙星、依諾沙星、恩諾沙星、Floxin、加雷沙星、加替沙星、吉米沙星、格帕沙星、曲伐沙星卡諾、左氧氟沙星、洛美沙星、麻保沙星、莫西沙星、那氟沙星、諾氟沙星、奧比沙星、氧氟沙星、培氟沙星、曲伐沙星、格帕沙星、西他沙星、司帕沙星、替馬沙星、妥舒沙星、曲伐沙星； q）. 菌素：普那黴素、奎奴普丁/達福普汀； r）. 磺胺類藥物：磺胺米隆、百浪多息、磺胺醋醯、磺胺甲、磺胺、柳氮磺胺吡啶、磺胺異惡唑、甲氧苄氨嘧啶、甲氧苄啶 - 磺胺甲基異惡唑（複方新諾明）； s）. 類固醇抗菌藥物：如夫西地酸； t）. 四環素類藥物：強力黴素、金黴素、氯羥四環素、地美環素、賴甲環素、氯甲烯土黴素、美他環素、米諾環素、土黴素、青呱四環素、羅利環素、四環素、甘氨醯（如替加環素）； u）. 其他類型的抗生素：番荔枝科、胂凡納明、細菌萜醇抑制劑（桿菌肽）、DADAL / AR抑制劑（環絲氨酸）、dictyostatin、海綿內酯、艾榴塞洛素、埃博黴素、乙胺丁醇、依託泊苷、法羅培南、夫西地酸、痢特靈、異煙肼、laulimalide、甲硝唑、莫匹羅星、mycolactones、NAM合成抑制劑（如磷黴素）、呋喃妥因、紫杉醇、平板黴素、吡嗪醯胺、奎奴普丁/達福普汀、利福平（利福平）、他唑巴坦替硝唑、番荔枝內酯；（4）抗病毒的藥物包括： a）. /融合抑制劑：aplaviroc、馬拉韋羅、維立韋羅、gp41（恩夫韋）、PRO140、CD4（Ibalizumab）； b）. 整合酶抑制劑：拉替拉韋、埃替拉韋、globoidnan A； c）. 成熟抑制劑：貝韋立馬、vivecon； d）. 神經氨酸酶抑制劑：奧司他韋、紮那米韋、帕拉米韋； e）. 核苷和核苷酸：阿巴卡韋、阿昔洛韋、阿德福韋、氨多索韋、apricitabine、溴夫定、西多福韋克拉夫定、右艾夫他濱、去羥肌苷（DDI）、艾夫他濱、恩曲他濱（FTC）、恩替卡韋、泛昔洛韋、氟脲嘧啶（5-FU）、3'-氟取代的2',3'-二去氧核苷衍生物（包括3'-氟-2',3'-二去氧胸苷（FLT）和3'-氟-2',3'-雙去氧（FLG）福米韋生、更昔洛韋、碘苷、拉米夫定（3TC）、L-核苷（包括β-L-胸苷、β-L-2'-去氧胞苷）、噴昔洛韋、Racivir、利巴韋林、stampidine、司他夫定（d4T）、他利韋林（偉拉咪定）、替比夫定、替諾福韋、伐昔洛韋三氟胸苷、纈更昔洛韋、紮西他濱（DDC）、齊多夫定（AZT）； f）. 非核苷類：金剛烷胺、ateviridine、卡普韋林、二芳基嘧啶（依曲韋林、利匹韋林）、地拉韋啶、二十二烷醇、乙米韋林、依法韋侖、膦甲酸（磷醯基甲酸）、咪喹莫特、干擾素α、洛韋胺、洛德腺苷、他巴唑、奈韋拉平、NOV-205、聚乙二醇干擾素α、鬼臼毒素、利福平、金剛乙胺、瑞喹莫德（R-848）、醋胺金剛烷； g）. 蛋白酶抑制劑：安普那韋、阿紮那韋、博賽潑維、達蘆那韋、福沙那韋、茚地那韋、洛匹那韋、奈非那韋、pleconaril、利托那韋、沙奎那韋、特拉匹韋（VX-950）、替拉那韋； h）. 其他類型的抗病毒的藥物：抗體酶、阿比朵爾、calanolides A、淺藍菌素、藍藻-N、二芳基嘧啶、表沒食子兒茶素沒食子酸酯（EGCG）、膦甲酸鈉、格瑞弗森、他利韋林（偉拉咪定）、羥基脲、KP-1461、米替福新、普來可那立、合成抑制劑、利巴韋林、seliciclib；（5）. 用於放射治療的放射性同位素，可選自（放射性核素）³ H、¹¹ C、¹⁴ C、¹⁸ F、³² P、³⁵ S、⁶⁴ Cu、⁶⁸ Ga、⁸⁶ Y、⁹⁹ Tc、¹¹¹ In、¹²³ I、¹²⁴ I、¹²⁵ I、¹³¹ I、¹³³ Xe、¹⁷⁷ Lu、²¹¹ At、或²¹³ Bi；（6）. 另一種細胞結合分子-藥物偶聯物上的細胞毒性分子為： tubulysin同系物、美登木素生物鹼同系物、紫杉醇（紫杉烷）同系物、CC-1065同系物、柔紅黴素和多柔比星化合物、鵝膏毒素同系物、苯並二氮呯二聚體（吡咯苯並二氮呯（PBD）、托馬黴素、安麯黴素、吲哚苯並噻二氮呯、咪唑苯並噻二氮呯類或惡唑烷苯並二氮呯類的二聚體）、加利西黴素和烯二炔類抗生素化合物、放線菌素、重氮絲氨酸、博萊黴素、表柔比星、他莫昔芬、伊達比星、海兔毒素、澳瑞他汀（MMAE 、MMAF、澳瑞他汀PYE、澳瑞他汀TP、澳瑞他汀2-AQ、6-AQ、EB （AEB）和EFP （AEFP））、多卡米星、格爾德黴素、氨甲喋呤、噻替派、長春堿、長春新堿、hemiasterlin、納沙醯胺、小金黴素、radiosumin、互花米草素、microsclerodermin、噻吩甲醯胺、埃斯呱黴素、PNU-159682，以及它們的同系物及衍生物；（7）. 上述任何藥物的醫藥上可接受的鹽、酸或衍生物。