TW202203906A

TW202203906A - 包含１５－ｈｅｐｅ之組成物及治療或預防血液學病症及／或相關疾病之方法

Info

Publication number: TW202203906A
Application number: TW110112099A
Authority: TW
Inventors: 約翰克萊密克斯; 穆阿耶德哈姆札; 馬庫斯威斯巴赫; 大衛考夫蘭
Original assignee: 愛爾蘭商艾菲穆恩有限公司
Priority date: 2020-04-03
Filing date: 2021-04-01
Publication date: 2022-02-01
Also published as: US12076304B2; US20210315851A1; US20220265593A1

Abstract

本揭示案係關於藉由投與15-HEPE或其組成物來治療或預防血液學病症之方法。

Description

包含15-HEPE之組成物及治療或預防血液學病症及/或相關疾病之方法

本申請案大體上係關於包含15-HEPE之組成物，且係關於其使用方法。序列表

本揭示案包括序列表，其經由EFS-Web以ASCII格式提交，並且以全文引用之方式併入本文中。2020年4月1日創建的ASCII副本被命名為序列表124318-8014.US00_ST25.txt，大小為3千位元組。

血液學病症包括紅血球病症及血栓好發症。紅血球病症係一類影響紅血球（RBC）及其氧氣運輸分子血紅蛋白之產生、壽命及形狀的病況。此等病況抑制了氧氣自肺運輸至身體其他部位。血栓好發症係一類病症，其會增加個體產生靜脈及動脈血凝塊之風險。此等凝塊可能會自血管中掙脫並穿過血流到達器官，從而阻止血液流向該器官，從而導致缺血。此等病況導致中風及/或肺栓塞之風險增加。

本申請案係關於包含15-羥基二十碳五烯酸（15-HEPE）之組成物及係關於使用此類組成物治療各種疾病及病症之方法。

在一些態樣中，本揭示案提供治療及/或預防有需要個體之血液學病症之方法，該方法包含向個體投與15-HEPE或包含15-HEPE之組成物。

在一些態樣中，本揭示案提供治療及/或預防有需要個體之血液學病症之方法，該方法包含向個體投與至多約8 g的包含15-HEPE之組成物，其中該15-HEPE占組成物中所有脂肪酸之至少約90重量%。

在又另一個態樣中，本揭示案提供治療及/或預防有需要個體之血液學病症之方法，該方法包含向該個體投與至多約8 g的包含15-HEPE之組成物，其中該15-HEPE占組成物中所有脂肪酸之至少約90重量%，並且該個體表現出以下一或多者：（a）紅血球計數增加；（b）紅細胞分佈寬度減少；及/或（c）網狀紅血球計數減少。

在各種實施例中，血液學病症係選自由以下組成之群：遺傳性溶血性貧血、獲得性溶血性貧血、範可尼貧血（Fanconi anemia）、缺鐵性貧血、葉酸缺乏症、B12缺乏症及骨髓發育不良症候群。

在一些態樣中，本揭示案提供治療及/或預防有需要個體之血紅蛋白病症之方法，該方法包含向該個體投與15-HEPE或包含15-HEPE之組成物。

在其他態樣中，本揭示案提供治療及/或預防有需要個體之紅血球病症之方法，該方法包含向該個體投與15-HEPE或包含15-HEPE之組成物。

在另一個態樣中，本揭示案提供治療及/或預防有需要個體之血紅蛋白病症及/或紅血球病症之方法，該方法包含向該個體投與至多約8 g的包含15-HEPE之組成物，其中該15-HEPE占組成物中所有脂肪酸之至少約90重量%。

在又另一個態樣中，本揭示案提供治療及/或預防有需要個體之血紅蛋白病症及/或紅血球病症之方法，該方法包含向該個體投與至多約8 g的包含15-HEPE之組成物，其中該15-HEPE占該組成物中所有脂肪酸之至少約90重量%，並且該個體表現出以下一或多者：（a）紅血球計數增加；（b）紅細胞分佈寬度減少；及/或（c）網狀紅血球計數減少。

在各種實施例中，血液學病症，血紅蛋白病症及/或紅血球病症係選自由以下組成之群：遺傳性溶血性貧血、獲得性溶血性貧血、範可尼貧血、缺鐵性貧血、葉酸缺乏症、B12缺乏症及骨髓發育不良症候群。

在又另一個態樣中，本揭示案提供治療及/或預防有需要個體之溶血性貧血之方法，該方法包含向該個體投與至多約8 g的包含15-HEPE之組成物，其中該15-HEPE占組成物中所有脂肪酸之至少約90重量%。

在一些實施例中，溶血性貧血係遺傳性溶血性貧血或獲得性溶血性貧血。在另一個實施例中，獲得性溶血性貧血係由於繼發於感染而獲得、因藥物、惡性血液病、自體免疫疾病、脾功能亢進症而獲得，在放置機械性心臟瓣膜、輸血之後獲得或其組合。在又另一個實施例中，鐮狀細胞疾病及鐮狀細胞貧血與鐮狀細胞危機、血管閉塞性危機、脾隔離或其組合有關。

在一些實施例中，個體表現出紅血球計數增加、紅血球分佈寬度減少及網狀紅血球計數減少。在一些態樣中，本揭示案提供治療及/或預防有需要個體之血栓好發症病症之方法，該方法包含向該個體投與15-HEPE或包含15-HEPE之組成物。

在其他態樣中，本揭示案提供治療及/或預防有需要個體之血栓好發症之方法，該方法包含向該個體投與至多約8 g的包含15-HEPE之組成物，其中該15-HEPE占組成物中所有脂肪酸之至少約90重量%。

在另一個態樣中，本揭示案提供治療及/或預防有需要個體之血栓好發症之方法，該方法包含向該個體投與至多約8 g的包含15-HEPE之組成物，其中該15-HEPE占組成物中所有脂肪酸之至少約90重量%，並且該個體表現出以下一或多者：（a）凝血酶原時間增加；（b）活化部分凝血活素時間增加；及/或（c）纖維蛋白原濃度降低。

在又另一個態樣中，本揭示案提供治療及/或預防有需要個體之靜脈血栓性栓塞之方法，該方法包含該向個體投與至多約8 g的包含15-HEPE之組成物，其中該15-HEPE占組成物中所有脂肪酸之至少約90重量%。

在一個態樣中，本揭示案提供治療及/或預防有需要個體之動脈血栓形成之方法，該方法包含向該個體投與至多約8 g的包含15-HEPE之組成物，其中該15-HEPE占組成物中所有脂肪酸之至少約90重量%。

在另一個態樣中，本揭示案提供了預防有需要個體之栓塞之方法，該方法包含向該個體投與至多約8 g的包含15-HEPE之組成物，其中該15-HEPE占組成物中所有脂肪酸之至少約90重量%。

在一些實施例中，個體表現出凝血酶原時間增加、活化部分凝血活素時間增加及纖維蛋白原濃度降低。

在另一個實施例中，15-HEPE呈游離酸形式、酯化形式或鹽形式。在又另一個實施例中，酯化形式係烷基酯形式或三酸甘油酯形式。在一些實施例中，15-HEPE包含15(S)-HEPE、15(R)-HEPE或其組合。

在一些實施例中，15-HEPE呈乙酯（15-HEPE EE）之形式或15-HEPE呈光活性酯（15(S)-HEPE EE）之形式。

在一些實施例中，組成物包含約10 mg至約10,000 mg之15-HEPE。在另一個實施例中，組成物包含約1 g至約2 g之15-HEPE。在另一個實施例中，組成物包含約2 g或更多之15-HEPE。在又另一個實施例中，調配組成物以向個體提供約每公斤體重5 mg（mg/kg）、約50 mg/kg、約250 mg/kg或約500 mg/kg之15-HEPE。在各種實施例中，15-HEPE占組成物中存在的所有脂肪酸之至少約90重量%。

在一些實施例中，15-HEPE經口投與。在各種實施例中，組成物以每日1至8個膠囊投與。

儘管本發明能夠以多種形式實施，但在理解應將本揭示案視為本發明之範例的情況下對若干實施例進行描述，且並不意欲以所說明之特定實施例限制本發明。僅僅為方便起見而提供標題，且不應解釋為以任何方式限制本發明。在任何標題下說明之實施例可與在任何其他標題下說明之實施例組合。

除非另外明確指示，否則如本申請案中所指定之各種定量值中數值之使用係陳述為近似值，如同在所陳述範圍內之最小值及最大值前面均存在詞語「約」。以此方式，所陳述值之微弱變化可用於實現與所陳述值實質上相同的結果。此外，本揭示案之範圍意欲為連續的範圍，包括在所陳述最小值與最大值之間的每一值以及可藉由此類值所形成的任何範圍。亦揭示於本文中的為可藉由將所陳述數值劃分成任何其他所陳述數值所形成的任何及全部比率（及任何此類比率之範圍）。相應地，熟習此項技術者將瞭解，許多此類比率、範圍及比率之範圍可明確地來源於本文中所提出的數值，且在所有情況下，此類比率、範圍及比率之範圍代表本發明之各種實施例。

除非另外定義，否則本文所用之所有技術及科學術語具有與本揭示案所屬領域之一般技術者通常所理解相同之含義。儘管可利用類似於或等效於本文所描述之方法及材料的方法及材料來實踐本揭示案，但下文描述合適方法及材料。本文所提及之所有公開案、專利申請案、專利及其他參考案均以全文引用的方式明確併入本文中。在有衝突之情況下，將以本說明書（包括定義）為準。本文所描述之材料、方法及實例僅為說明性且並不意欲限制。定義

如本文所用，「15-HEPE」為15-羥基-二十碳-5Z,8Z,11Z,13E,17Z-五烯酸。15-HEPE，偶爾亦稱為15-OHEPA，可以根據此項技術中已知之方法由二十碳五烯酸（「EPA」，二十碳-5,8,11,14,17-五烯酸或20:5n-3），一種Ω-3脂肪酸合成。例如，可以藉由將EPA暴露於酶15-脂肪加氧酶來合成15-HEPE。如本文所用，術語「15-HEPE」係指呈其游離酸形式之15-HEPE（例如15-羥基-二十碳-5Z,8Z,11Z,13E,17Z-五烯酸）及/或其醫藥學上可接受之酯、綴合物或鹽或前述中之任一者之混合物。可替代地使用15-HEPE之衍生物，儘管此不包括缺失15-HEPE之羥基的任何衍生化合物。在一些實施例中，15-HEPE以游離酸形式使用。或者，本揭示案中使用15-HEPE之醫藥學上可接受之酯或鹽。在一些實施例中，15-HEPE呈C_1-4 烷基酯之形式，諸如甲酯、乙酯或甲酯及乙酯之組合。在又另一個實施例中，15-HEPE呈甘油酯（例如二酸甘油酯或三酸甘油酯）之形式。在另一個實施例中，15-HEPE呈乙酯之形式（在本文中亦稱為E-15-HEPE、15-HEPE EE或乙基-15-HEPE）。

15-HEPE為對掌性分子且可以(S)-或(R)-對映異構形式或作為外消旋混合物使用。本文中所用之「15-HEPE」包括所有此類形式，關於立體特異性無限制。在另一個實施例中，15-HEPE包含(S)形式：15(S)-羥基-(5Z,8Z,11Z,13E,17Z)-二十碳五烯酸或(R)形式：15(R)-羥基-(5Z,8Z,11Z,13E,17Z)-二十碳五烯酸。在又另一個實施例中，15-HEPE EE包含(S)形式：15(S)-HEPE EE。

如本文所用，「DS102」係指15-HEPE、15-HEPE EE、包含15-HEPE之組成物、包含15-HEPE EE之組成物或包含15-HEPE及15-HEPE EE之組成物。

如本文所用，「艾培利頓（Epeleuton）」係指15-HEPE、15-HEPE EE、包含15-HEPE之組成物、包含15-HEPE EE之組成物或包含15-HEPE及15-HEPE EE之組成物。

如本文所用，「治療（treating/treatment）」疾病、病症或病況包括至少部分地：（1）抑制疾病、病症或病況，亦即遏制或減少疾病、病症或病況或其臨床症狀之發展；或（2）緩解疾病、病症或病況，亦即促使疾病、病症或病況或其臨床症狀消退。與給定疾病或病症有關之術語「預防」意謂：在未出現之情況下預防疾病發展的發作、預防疾病或病症出現在可易患病症或疾病但尚未診斷為患有病症或疾病之個體中，及/或在已經存在之情況下，預防其他疾病/病症發展。

如本文所用之「有效量」係指賦予個體治療效果所需之活性組成物的量。如本文所用之「治療有效量」係指所投與之藥劑或化合物之足夠量，其將在一定程度上減輕所治療之疾病、病症或病況之一或多者症狀。在一些實施例中，結果為疾病之體徵、症狀或病因的減少及/或緩解，或生物學系統之任何其他所需的改變。例如，在一些實施例中，用於治療用途之「有效量」為所需的包括如本文中所揭示之化合物的組成物之量，其提供疾病症狀之臨床上顯著降低而無不當不良副作用。在一些實施例中，使用諸如劑量遞增研究之技術來確定在任何個別情況下的適當「有效量」。術語「治療有效量」包括例如預防有效量。在其他實施例中，本文所揭示化合物（諸如式（A）或式（I）化合物）之「有效量」為有效達成所需藥理學作用或治療改良而無不當不良副作用的量。在其他實施例中，應理解，歸因於個體之代謝、年齡、體重、一般條件、所治療之病況、所治療之病況之嚴重程度及處方醫師之判斷的差異，「有效量」或「治療有效量」因個體而異。在本文之情形下，術語「醫藥學上可接受」意謂相關物質不會對個體產生不可接受之毒性或不會與組成物之其他組分相互作用。

本揭示案之其他特徵及優勢將自以下實施方式顯而易見。組成物

在一個實施例中，本揭示案之組成物包含15-HEPE作為活性成分。在本文之情形下，術語「醫藥學上可接受」意謂相關物質不會對個體產生不可接受之毒性或不會與組成物之其他組分相互作用。

在一個實施例中，15-HEPE呈乙酯之形式（在本文中亦稱為E-15-HEPE、乙基-15-HEPE或15-HEPE EE）。在另一個實施例中，15-HEPE包含15-HEPE之C₁ -C₅ 烷基酯。在另一個實施例中，15-HEPE包含15-HEPE甲酯、15-HEPE丙酯或15-HEPE丁酯。在再另一個實施例中，15-HEPE包含光活性15(S )-羥基-(5Z ,8Z ,11Z ,13E ,17Z )-二十碳五烯酸。此異構體可以如上文所論述之形式中之任一者使用。

在另一個實施例中，15-HEPE包含鋰15-HEPE、單酸甘油酯、二酸甘油酯或三酸甘油酯15-HEPE，或15-HEPE之任何其他酯或鹽，或15-HEPE之游離酸形式。

在各種實施例中，本揭示案提供包含15-之醫藥組成物，例如經口遞送之組成物。在一個實施例中，組成物包含治療有效量之15-HEPE。在一個實施例中，醫藥組成物包含約0.1重量%至約99重量%、約1重量%至約95重量%、約5重量%至約90重量%之15-HEPE。如本文所提供，「組成物」及片語「醫藥組成物」可互換使用。

在一個實施例中，醫藥組成物包含約至少約70重量%、至少約80重量%或至少約90重量%之15-HEPE。在一個實施例中，醫藥組成物包含至少約50重量%、至少約60重量%、至少約70重量%、至少約80重量%或至少約90重量%之15-HEPE。

在另一個實施例中，15-HEPE以以下之量存在於本揭示案之組成物中：約1 mg至約10,000 mg、約25 mg至約7500 mg、約25 mg至約5000 mg、約50 mg至約5000 mg、約50 mg至約3000 mg、約75 mg至約2500 mg，或約100 mg至約1000 mg，例如約1 mg、約2 mg、約3 mg、約4 mg、約5 mg、約6 mg、約7 mg、約8 mg、約9 mg、約10 mg、約11 mg、約12 mg、約13 mg、約14 mg、約15 mg、約16 mg、約17 mg、約18 mg、約19 mg、約20 mg、約21 mg、約22 mg、約23 mg、約24 mg、約25 mg、約50 mg、約75 mg、約100 mg、約125 mg、約150 mg、約175 mg、約200 mg、約225 mg、約250 mg、約275 mg、約300 mg、約325 mg、約350 mg、約375 mg、約400 mg、約425 mg、約450 mg、約475 mg、約500 mg、約525 mg、約550 mg、約575 mg、約600 mg、約625 mg、約650 mg、約675 mg、約700 mg、約725 mg、約750 mg、約775 mg、約800 mg、約825 mg、約850 mg、約875 mg、約900 mg、約925 mg、約950 mg、約975 mg、約1000 mg、約1025 mg、約1050 mg、約1075 mg、約1100 mg、約1025 mg、約1050 mg、約1075 mg、約1200 mg、約1225 mg、約1250 mg、約1275 mg、約1300 mg、約1325 mg、約1350 mg、約1375 mg、約1400 mg、約1425 mg、約1450 mg、約1475 mg、約1500 mg、約1525 mg、約1550 mg、約1575 mg、約1600 mg、約1625 mg、約1650 mg、約1675 mg、約1700 mg、約1725 mg、約1750 mg、約1775 mg、約1800 mg、約1825 mg、約1850 mg、約1875 mg、約1900 mg、約1925 mg、約1950 mg、約1975 mg、約2000 mg、約2025 mg、約2050 mg、約2075 mg、約2100 mg、約2125 mg、約2150 mg、約2175 mg、約2200 mg、約2225 mg、約2250 mg、約2275 mg、約2300 mg、約2325 mg、約2350 mg、約2375 mg、約2400 mg、約2425 mg、約2450 mg、約2475 mg、約2500 mg、2525 mg、約2550 mg、約2575 mg、約2600 mg、約2625 mg、約2650 mg、約2675 mg、約2700 mg、約2725 mg、約2750 mg、約2775 mg、約2800 mg、約2825 mg、約2850 mg、約2875 mg、約2900 mg、約2925 mg、約2950 mg、約2975 mg、約3000 mg、約3025 mg、約3050 mg、約3075 mg、約3100 mg、約3125 mg、約3150 mg、約3175 mg、約3200 mg、約3225 mg、約3250 mg、約3275 mg、約3300 mg、約3325 mg、約3350 mg、約3375 mg、約3400 mg、約3425 mg、約3450 mg、約3475 mg、約3500 mg、約3525 mg、約3550 mg、約3575 mg、約3600 mg、約3625 mg、約3650 mg、約3675 mg、約3700 mg、約3725 mg、約3750 mg、約3775 mg、約3800 mg、約3825 mg、約3850 mg、約3875 mg、約3900 mg、約3925 mg、約3950 mg、約3975 mg、約4000 mg、約4025 mg、約4050 mg、約4075 mg、約4100 mg、約4125 mg、約4150 mg、約4175 mg、約4200 mg、約4225 mg、約4250 mg、約4275 mg、約4300 mg、約4325 mg、約4350 mg、約4375 mg、約4400 mg、約4425 mg、約4450 mg、約4475 mg、約4500 mg、約4525 mg、約4550 mg、約4575 mg、約4600 mg、約4625 mg、約4650 mg、約4675 mg、約4700 mg、約4725 mg、約4750 mg、約4775 mg、約4800 mg、約4825 mg、約4850 mg、約4875 mg、約4900 mg、約4925 mg、約4950 mg、約4975 mg、約5000 mg、約5025 mg、約5050 mg、約5075 mg、約5100 mg、約5125 mg、約5150 mg、約5175 mg、約5200 mg、約5225 mg、約5250 mg、約5275 mg、約5300 mg、約5325 mg、約5350 mg、約5375 mg、約5400 mg、約5425 mg、約5450 mg、約5475 mg、約5500 mg、約5525 mg、約5550 mg、約5575 mg、約5600 mg、約5625 mg、約5650 mg、約5675 mg、約5700 mg、約5725 mg、約5750 mg、約5775 mg、約5800 mg、約5825 mg、約5850 mg、約5875 mg、約5900 mg、約5925 mg、約5950 mg、約5975 mg、約6000 mg、約6025 mg、約6050 mg、約6075 mg、約6100 mg、約6125 mg、約6150 mg、約6175 mg、約6200 mg、約6225 mg、約6250 mg、約6275 mg、約6300 mg、約6325 mg、約6350 mg、約6375 mg、約6400 mg、約6425 mg、約6450 mg、約6475 mg、約6500 mg、約6525 mg、約6550 mg、約6575 mg、約6600 mg、約6625 mg、約6650 mg、約6675 mg、約6700 mg、約6725 mg、約6750 mg、約6775 mg、約6800 mg、約6825 mg、約6850 mg、約6875 mg、約6900 mg、約6925 mg、約6950 mg、約6975 mg、約7000 mg、約7025 mg、約7050 mg、約7075 mg、約7100 mg、約7125 mg、約7150 mg、約7175 mg、約7200 mg、約7225 mg、約7250 mg、約7275 mg、約7300 mg、約7325 mg、約7350 mg、約7375 mg、約7400 mg、約7425 mg、約7450 mg、約7475 mg、約7500 mg、約7525 mg、約7550 mg、約7575 mg、約7600 mg、約7625 mg、約7650 mg、約7675 mg、約7700 mg、約7725 mg、約7750 mg、約7775 mg、約7800 mg、約7825 mg、約7850 mg、約7875 mg、約7900 mg、約7925 mg、約7950 mg、約7975 mg、約8000 mg、約8025 mg、約8050 mg、約8075 mg、約8100 mg、約8125 mg、約8150 mg、約8175 mg、約8200 mg、約8225 mg、約8250 mg、約8275 mg、約8300 mg、約8325 mg、約8350 mg、約8375 mg、約8400 mg、約8425 mg、約8450 mg、約8475 mg、約8500 mg、約8525 mg、約8550 mg、約8575 mg、約8600 mg、約8625 mg、約8650 mg、約8675 mg、約8700 mg、約8725 mg、約8750 mg、約8775 mg、約8800 mg、約8825 mg、約8850 mg、約8875 mg、約8900 mg、約8925 mg、約8950 mg、約8975 mg、約9000 mg、約9025 mg、約9050 mg、約9075 mg、約9100 mg、約9125 mg、約9150 mg、約9175 mg、約9200 mg、約9225 mg、約9250 mg、約9275 mg、約9300 mg、約9325 mg、約9350 mg、約9375 mg、約9400 mg、約9425 mg、約9450 mg、約9475 mg、約9500 mg、約9525 mg、約9550 mg、約9575 mg、約9600 mg、約9625 mg、約9650 mg、約9675 mg、約9700 mg、約9725 mg、約9750 mg、約9775 mg、約9800 mg、約9825 mg、約9850 mg、約9875 mg、約9900 mg、約9925 mg、約9950 mg、約9975 mg或約10,000 mg。

在一個實施例中，存在於本揭示案之組成物中之15-HEPE包含至少約90重量%的15-HEPE（如本文定義及例示之術語「15-HEPE」）。15-HEPE組成物可以包含甚至更高純度之15-HEPE，例如至少約95重量%之15-HEPE或至少約97重量%之15-HEPE，其中該15-HEPE係任何形式的如本文所闡述之15-HEPE。15-HEPE之純度可以藉由本文提供之15-HEPE之描述中之任一者進一步定義（例如雜質分佈）。

上文論述醫藥組成物中15-HEPE之量及其純度。必需脂肪酸之性質及其合成使得15-HEPE組成物可包括來自必需脂肪酸代謝級聯中之其他必需脂肪酸之部分。

在一個實施例中，本揭示案之組成物含有不超過約10重量%、不超過約9重量%、不超過約8重量%、不超過約7重量%、不超過約6重量%、不超過約5重量%、不超過約4重量%、不超過約3重量%、不超過約2重量%、不超過約1重量%或不超過約0.5重量%之其他Ω-3脂肪酸（其包括α次亞麻油酸、十八碳四烯酸、二十二碳六烯酸（DHA）或其衍生物）。在其他實施例中，實質上不存在或不存在此類其他Ω-3脂肪酸。

在另一個實施例中，15-HEPE占存在於本揭示案之組成物中之所有脂肪酸之至少約60重量%、至少約70重量%、至少約80重量%、至少約90重量%、至少約95重量%、至少約97重量%、至少約98重量%、至少約99重量%或100重量%。

在一個實施例中，存在於本發明之組成物中之15-HEPE之鹽形式包含至少90重量%之15-HEPE之鹽形式。含有15-HEPE之鹽形式的組成物可以包含甚至更高純度，例如至少91重量%、至少92重量%、至少93重量%、至少94重量%、至少95重量%、至少96重量%或至少97重量%之15-HEPE之鹽形式。

可存在來自合成15-HEPE之一些殘餘二十碳五烯酸。可存在不超過約10重量%、不超過約9重量%、不超過約8重量%、不超過約7重量%、不超過約6重量%、不超過約5重量%、不超過約4重量%、不超過約3重量%、不超過約2重量%、不超過約1重量%或不超過約0.5重量%之EPA。或者，實質上不存在或不存在呈尚未改質為羥基形式之形式的EPA。

在一個實施例中，本揭示案提供醫藥組成物，其包含封裝於膠囊殼層中之15-HEPE或其衍生物。在一個實施例中，以足以每天提供至多約1 g、約2 g、約3 g、約4 g、約5 g、約6 g、約7 g、約8 g、約9 g或約10 g之15-HEPE E或其衍生物之量向個體投與組成物。在一個實施例中，以足以每天提供約4 g至約8 g、約1 g至約2 g、約2 g至約4 g、約3 g至約8 g、約4 g至約6 g之15-HEPE或其衍生物之量向個體投與組成物。在一個實施例中，約500 mg至約1 g之15-HEPE或其衍生物封裝於膠囊殼層中。

在一個實施例中，膠囊殼層包含明膠（例如具有較低分子量之明膠RXL或石灰骨明膠）。在另一個實施例中，膠囊殼層包含已藉由蛋白分解酶處理以切割明膠圖案且有效地降低其分子量之明膠RXL。在另一個實施例中，醫藥組成物包含D-山梨糖醇及1,4-脫水山梨糖醇之15-HEPE酯。在一個實施例中，膠囊殼層包含（a）明膠及（b）選自D-山梨糖醇及1,4-脫水山梨糖醇中之一或多者之塑化劑。在一個實施例中，明膠如U.S. 7,485,323中所描述，且在此以全文引用之方式併入本文中。

在一個實施例中，塑化劑包含約20%至約30%，例如約24%至約28%、24%或28%（以乾重計）之量的1,4-脫水山梨糖醇，及約30%至約50%，例如約35%至約45%（以乾重計）之D-山梨糖醇含量。

在一些實施例中，膠囊為硬明膠膠囊。在另一個實施例中，膠囊為軟明膠膠囊。

在一些實施例中，膠囊殼層包含改質澱粉、角叉菜膠（例如紅色海藻之提取物）、磷酸二鈉、甘油及/或山梨糖醇。在一些實施例中，膠囊殼層進一步包含水。在一些實施例中，膠囊殼層在高達約65℃溫度及/或約pH 12下為穩定的。

在一些實施例中，膠囊殼層為無味的且具有中性顏色（例如無色、白色或透明）。

在一些實施例中，膠囊殼層進一步包含甘油、純化水、二氧化鈦、中鏈三酸甘油酯及卵磷脂。額外活性劑

在一個實施例中，醫藥組成物進一步包含一或多種額外活性劑。在一個實施例中，醫藥組成物包含小於彼藥劑之通常公認之治療有效量之額外活性劑的量。在一個實施例中，醫藥組成物包含等於或大於彼藥劑之通常公認之治療有效量之額外活性劑的量。若使用額外活性劑，則可將15-HEPE共調配為單一劑量單元或可調配為兩個至多個劑量單元以用於協同、組合或同時投與。

EPA自身在治療脂肪肝病及/或心血管疾病方面具有有益特性且在一替代性實施例中有可能組合15-HEPE與EPA。

在一個實施例中，15-HEPE及一或多種活性劑存在於本揭示案之組成物中，或以15-HEPE:額外藥劑為約1:1000至約1000:1、約1:500至約500:1、約1:100至約100:1、約1:50至約50:1、約1:25至約25:1、約1:10至約10:1、約1:5至約5:1、約1:4至約4:1 about 1:3至約3:1、約1:2至約2:1或約1:1之重量比共投與。劑型

根據本揭示案使用之組成物可以調配為一或多個劑量單元。術語「劑量單元（dose unit及dosage unit）」在本文中係指含有一定量之適用於單次投與以提供治療效果的治療劑的組成物之一部分。此類劑量單元可每日投與一次至多次（亦即1至約10次、1至8次、1至6次、1至4次或1至2次）或根據需要投與多次以引起治療反應。

在一些實施例中，本揭示案之組成物呈經口遞送劑型或單元形式。適合劑型之非限制性實例包括錠劑（例如懸浮錠劑、叮咬懸浮錠劑（bite suspension tablet）、快速分散錠劑、咀嚼錠劑等）、膠囊型錠劑、膠囊（例如軟或硬明膠膠囊或HPMC膠囊）、口含錠、藥囊、扁囊劑、糖衣錠、丸劑、懸浮液、酏劑、糖漿或經合理調適用於經口投與之任何其他固體劑型。本文中之術語「經口遞送」及「經口投與」包括任何形式之遞送，其中藥劑或組成物置於治療之個體的口中，無論是否吞咽。因此，此包括頰內及舌下投與以及食道投與。

或者，本揭示案之組成物亦可經調配用於經直腸、局部或非經腸（例如皮下、肌肉內、靜脈內及皮內或輸注）遞送。

在論述本揭示案之組成物中15-HEPE之量時，可將其分成數種劑型。關於經口投與之尺寸存在限制。若向個體一天投與約1至約4 g之15-HEPE，則此可為至多4個膠囊，各自提供約1 g至15-HEPE。

本揭示案之組成物可呈待直接吸收之液體劑型或劑量單元形式，或其可以在攝取之前與食品或飲料混合。適合之液體劑型之非限制性實例包括溶液、懸浮液、酏劑、糖漿、液態氣溶膠調配物及其類似物。

在另一個實施例中，本揭示案之組成物包含一或多種醫藥學上可接受之賦形劑。本文中之術語「醫藥學上可接受之賦形劑」意謂用作載劑或媒劑以將治療劑遞送至個體，或添加至組成物以改良其處置或儲存特性或准許或促進形成單位劑量之組成物的任何物質，而非自身為治療劑，且不會產生不可接受之毒性或與組成物中之其他組分的相互作用。僅舉例而言，根據本揭示案之醫藥組成物可包含以下中之一或多者：抗氧化劑、界面活性劑、防腐劑、調味劑、共溶劑、黏度助劑、懸浮助劑及親脂相。

在一個實施例中，醫藥組成物包含一或多者抗氧化劑，諸如抗壞血酸、棕櫚酸、抗壞血酸棕櫚酸酯、α-生育酚、艾地苯醌、泛醌、阿魏酸、輔酶Q10、番茄紅素、綠茶、兒茶素、表沒食子兒茶素3-沒食子酸酯（EGCG）、綠茶多酚（GTP）、水飛薊素、加州咖啡（coffeeberry）、白藜蘆醇、葡萄籽、石榴提取物、染料木素（genisten）、碧蘿芷（pycnogenol）、菸鹼醯胺及其類似者。在一個實施例中，醫藥組成物包含約0.01重量%至約2重量%的抗氧化劑，例如約0.01重量%、約0.02重量%、約0.03重量%、約0.04重量%、約0.05重量%、約0.06重量%、約0.07重量%、約0.08重量%、約0.09重量%、約0.1重量%、約0.11重量%、約0.12重量%、約0.13重量%、約0.14重量%、約0.15重量%、約0.16重量%、約0.17重量%、約0.18重量%、約0.19重量%、約0.2重量%、約0.21重量%、約0.22重量%、約0.23重量%、約0.24重量%、約0.25重量%、約0.26重量%、約0.27重量%、約0.28重量%、約0.29重量%、約0.3重量%、約0.31重量%、約0.32重量%、約0.33重量%、約0.34重量%、約0.35重量%、約0.36重量%、約0.37重量%、約0.38重量%、約0.39重量%、約0.4重量%、約0.41重量%、約0.42重量%、約0.43重量%、約0.44重量%、約0.45重量%、約0.46重量%、約0.47重量%、約0.48重量%、約0.49重量%、約0.5重量%、約0.51重量%、約0.52重量%、約0.53重量%、約0.54重量%、約0.55重量%、約0.56重量%、約0.57重量%、約0.58重量%、約0.59重量%、約0.6重量%、約0.61重量%、約0.62重量%、約0.63重量%、約0.64重量%、約0.65重量%、約0.66重量%、約0.67重量%、約0.68重量%、約0.69重量%、約0.7重量%、約0.71重量%、約0.72重量%、約0.73重量%、約0.74重量%、約0.75重量%、約0.76重量%、約0.77重量%、約0.78重量%、約0.79重量%、約0.8重量%、約0.81重量%、約0.82重量%、約0.83重量%、約0.84重量%、約0.85重量%、約0.86重量%、約0.87重量%、約0.88重量%、約0.89重量%、約0.9重量%、約0.91重量%、約0.92重量%、約0.93重量%、約0.94重量%、約0.95重量%、約0.96重量%、約0.97重量%、約0.98重量%、約0.99重量%、約1重量%、約1.1重量%、約1.2重量%、約1.3重量%、約1.4重量%、約1.5重量%、約1.6重量%、約1.7重量%、約1.8重量%、約1.9重量%或約2重量%的一或多種抗氧化劑。治療方法

本文所揭示之組成物及調配物可用於治療及/或預防有需要個體之血液學病症。在一些實施例中，血液學病症係血紅蛋白病症、紅血球病症、溶血性貧血、血栓好發症病症、靜脈血栓性栓塞，動脈血栓形成、栓塞或其組合。在一些實施例中，方法包含向個體投與15-羥基二十碳五烯酸（15-HEPE）或包含15-羥基二十碳五烯酸（15-HEPE）之組成物。

本文所揭示之組成物及調配物可用於治療及/或預防血液學病症、血紅蛋白病症及/或紅血球病症。血液學病症係指影響血液及血液形成器官之一類病況。儘管血紅蛋白病症及紅血球病症與血液學病症相似，但血紅蛋白病症及紅血球病症均定義為一類較窄的病症。具體而言，血紅蛋白病症係指血紅蛋白中之缺陷，血紅蛋白係指紅血球中之氧氣運輸蛋白。且紅血球病症係指紅血球本身之缺陷。血液學病症、血紅蛋白病症及紅血球病症之危險因素之非限制性實例包括減少的紅血球計數、增加的紅血球分佈寬度及增加的網狀紅血球計數。血液學病症、血紅蛋白病症及紅血球病症之非限制性實例包括貧血（營養性貧血及非營養性貧血、遺傳性溶血性貧血，諸如鐮狀細胞疾病、鐮狀細胞貧血、β-地中海型貧血及遺傳性球形紅血球症、獲得性溶血貧血，諸如繼發於感染、藥物、惡性血液病、自體免疫疾病、脾功能亢進症、機械性心臟瓣膜及輸血，範可尼貧血、缺乏性貧血、血癌（淋巴瘤、白血病及骨髓瘤）、凝血功能缺陷（血栓好發症、血友病、馮威里氏病（Von Willebrand disease）及血小板減少症）、葉酸缺乏症、B12缺乏症及骨髓發育不良症候群。在一些實施例中，鐮狀細胞疾病及鐮狀細胞貧血與鐮狀細胞危機、血管閉塞性危機及/或脾隔離有關。

在一些實施例中，個體之紅血球計數減少為比正常低至少10%、比正常低至少15%、比正常低至少20%、比正常低至少25%或比正常低至少30%。

在一些實施例中，個體之紅血球分佈寬度增加，其中紅血球的大小變化約15%至20%、約20%至25%、約25%至30%、約30%至35%或約35%至40%。

在另一個實施例中，個體之網狀紅血球計數增加為紅血球總量之至少約5%、紅血球總量之至少約10%、紅血球總量之至少約15%或紅血球總量之至少約20%。

在一些實施例中，個體之基線三酸甘油酯含量升高為約135 mg/dL至約2000 mg/dL，例如約135 mg/dL至約500 mg/dL、約150 mg/dL至約500 mg/dL、約200 mg/dL至約499 mg/dL、約200 mg/dL至＜500 mg/dL、約300 mg/dL至約1800 mg/dL、約500 mg/dL至約1500 mg/dL、約500 mg/dL至約＜2000 mg/dL或約500 mg/dL至約2000 mg/dL。在一些實施例中，個體之空腹基線三酸甘油酯含量為約50 mg/dL至約2000 mg/dL，例如約50 mg/dL至約1500 mg/dL、約80 mg/dL至約1500 mg/dL、約50 mg/dL至約190 mg/dL、約80 mg/dL至約190 mg/dL、約190 mg/dL至約250 mg/dL、約250 mg/dL至約1400 mg/dL、約500 mg/dL至約1200 mg/dL、約500 mg/dL至約1500 mg/dL、約500 mg/dL至約＜2000 mg/dL或約500 mg/dL至約2000 mg/dL。在一個實施例中，個體之空腹基線三酸甘油酯含量為約80 mg/dL至約1400 mg/dL。在一些實施例中，個體或個體組之攝食或空腹之基線三酸甘油酯含量（或在個體組之情況下中值基線三酸甘油酯含量）為約50 mg/dL、約55 mg/dL、約60 mg/dL、約65 mg/dL、約70 mg/dL、約75 mg/dL、約80 mg/dL、約85 mg/dL、約90 mg/dL、約95 mg/dL、約100 mg/dL、約105 mg/dL、約110 mg/dL、約115 mg/dL、約120 mg/dL、約125 mg/dL、約130 mg/dL、約135 mg/dL、約140 mg/dL、約145 mg/dL、約150 mg/dL、約155 mg/dL、約160 mg/dL、約165 mg/dL、約170 mg/dL、約175 mg/dL、約180 mg/dL、約185 mg/dL、約190 mg/dL、約195 mg/dL、約200 mg/dL、約205 mg/dL、約210 mg/dL、約215 mg/dL、約220 mg/dL、約225 mg/dL、約230 mg/dL、約235 mg/dL、約240 mg/dL、約245 mg/dL、約250 mg/dL、約255 mg/dL、約260 mg/dL、約265 mg/dL、約270 mg/dL、約275 mg/dL、約280 mg/dL、約285 mg/dL、約290 mg/dL、約295 mg/dL、約300 mg/dL、約305 mg/dL、約310 mg/dL、約315 mg/dL、約320 mg/dL、約325 mg/dL、約330 mg/dL、約335 mg/dL、約340 mg/dL、約345 mg/dL、約350 mg/dL、約355 mg/dL、約360 mg/dL、約365 mg/dL、約370 mg/dL、約375 mg/dL、約380 mg/dL、約385 mg/dL、約390 mg/dL、約395 mg/dL、約400 mg/dL、約405 mg/dL、約410 mg/dL、約415 mg/dL、約420 mg/dL、約425 mg/dL、約430 mg/dL、約435 mg/dL、約440 mg/dL、約445 mg/dL、約450 mg/dL、約455 mg/dL、約460 mg/dL、約465 mg/dL、約470 mg/dL、約475 mg/dL、約480 mg/dL、約485 mg/dL、約490 mg/dL、約495 mg/dL、約500 mg/dL、約1000 mg/dL、約1100 mg/dL、約1200 mg/dL、約1300 mg/dL、約1400 mg/dL、約1500 mg/dL、約2000 mg/dL、約2500 mg/dL、約3000 mg/dL、約3500 mg/dL、約4000 mg/dL、約4500 mg/dL、約5000 mg/dL或大於約5000 mg/dL。在一些實施例中，個體或個體組之攝食或空腹之基線三酸甘油酯含量（或在個體組之情況下中值基線三酸甘油酯含量）大於或等於80 mg/dL、大於或等於約100 mg/dL、大於或等於約120 mg/dL、大於或等於約150 mg/dL、大於或等於約175 mg/dL、大於或等於約250 mg/dL或大於等於約500 mg/dL，例如約190 mg/dL至約250 mg/dL、約80 mg/dL至約190 mg/dL、約250 mg/dL至約1400 mg/dL、約200 mg/dL至約500 mg/dL、約300 mg/dL至約1800 mg/dL、約500 mg/dL至約1500 mg/dL、約80 mg/dL至約1500 mg/dL、約80 mg/dL至小於約2000 mg/dL、約80 mg/dL至約2000 mg/dL、約500 mg/dL至小於約2000 mg/dL或約500 mg/dL至約2000 mg/dL。

在另一個實施例中，個體之基線血壓升高為至少約100 mmHg、至少約115 mmHg、至少約120 mmHg、至少約125 mmHg、至少約130 mmHg、至少約135 mmHg、至少約140 mmHg、至少約145 mmHg、至少約150 mmHg、至少約155 mmHg、至少約160 mmHg、至少約165 mmHg或至少約170 mmHg。

在一些實施例中，個體之基線空腹葡萄糖含量升高為至少約100 mg/dL、至少約115 mg/dL、至少約120 mg/dL、至少約125 mg/dL、至少約130 mg/dL、至少約135 mg/dL、至少約140 mg/dL、至少約145 mg/dL、至少約150 mg/dL、至少約155 mg/dL、至少約160 mg/dL、至少約165 mg/dL或至少約170 mg/dL。

在一些實施例中，個體之基線HDL-C含量降低為小於約60 mg/dL、小於約55 mg/dL、小於約50 mg/dl、小於約45 mg/dL、小於約40 mg/dL、小於約35 mg/dL、小於約30 mg/dL、小於約25 mg/dL、小於約20 mg/dL、小於約15 mg/dL、小於約10 mg/dL或小於約5 mg/dL。

在一些實施例中，本揭示案提供一種治療及/或預防個體之血液學疾病之方法，該方法包含向該個體投與15-HEPE。在另一個實施例中，該方法包含向個體投與至多約8 g之15-HEPE。在又另一個實施例中，15-HEPE占組成物中所有脂肪酸之至少約90重量%。

在一些實施例中，本揭示案提供一種治療及/或預防個體之血液學疾病之方法，該方法包含向該個體投與15-HEPE或包含15-HEPE之組成物。在另一個實施例中，該方法包含向個體投與至多約8 g之15-HEPE或包含15-HEPE之組成物。在又另一個實施例中，15-HEPE占組成物中所有脂肪酸之至少約90重量%。

在一些實施例中，本揭示案提供治療及/或預防有需要個體之血液學病症之方法，該方法包含向該個體投與15-羥基二十碳五烯酸（15-HEPE）或包含15-HEPE之組成物。在另一個實施例中，該方法包含向個體投與至多約8 g之包含15-HEPE之組成物。在另一個實施例中，15-HEPE占組成物中所有脂肪酸之至少約90重量%。

在一些實施例中，本揭示案提供一種治療及/或預防個體之血液學疾病之方法，該方法包含向該個體投與15-HEPE或包含15-HEPE之組成物。在一些實施例中，該方法進一步包含在投與15-HEPE或包含15-HEPE之組成物之前，確定個體具有至少一個血液學疾病之風險因素。在一些實施例中，該方法進一步包含在投與15-HEPE之前，確定個體之基線紅血球計數、紅血球分佈寬度及/或網狀紅血球計數。在一個實施例中，個體表現出紅血球計數增加、紅血球分佈寬度減少及/或網狀紅血球計數減少。在另一個實施例中，該方法包含向個體投與至多約8 g之15-HEPE或包含15-HEPE之組成物。在又另一個實施例中，15-HEPE占組成物中所有脂肪酸之至少約90重量%。

在一些實施例中，本揭示案提供治療及/或預防有需要個體之血液學病症之方法，該方法包含向該個體投與15-羥基二十碳五烯酸（15-HEPE）或包含15-HEPE之組成物。在一些實施例中，該方法進一步包含在投與15-HEPE或包含15-HEPE之組成物之前，確定個體具有至少一個血液學疾病之風險因素。在一些實施例中，該方法進一步包含在投與15-HEPE之前，確定個體之基線紅血球計數、紅血球分佈寬度及/或網狀紅血球計數。在一個實施例中，個體表現出紅血球計數增加、紅血球分佈寬度減少及/或網狀紅血球計數減少。在另一個實施例中，該方法包含向個體投與至多約8 g之包含15-HEPE之組成物。在另一個實施例中，15-HEPE占組成物中所有脂肪酸之至少約90重量%。

在一些實施例中，本揭示案提供治療及/或預防有需要個體之血紅蛋白病症之方法，該方法包含向該個體投與15-羥基二十碳五烯酸（15-HEPE）或包含15-HEPE之組成物。在另一個實施例中，該方法包含向個體投與至多約8 g之包含15-HEPE之組成物。在另一個實施例中，15-HEPE占組成物中所有脂肪酸之至少約90重量%。

在一些實施例中，本揭示案提供治療及/或預防有需要個體之血紅蛋白病症之方法，該方法包含向該個體投與15-羥基二十碳五烯酸（15-HEPE）或包含15-HEPE之組成物。在一些實施例中，該方法進一步包含在投與15-HEPE或包含15-HEPE之組成物之前，確定個體具有至少一個血紅蛋白病症之風險因素。在一些實施例中，該方法進一步包含在投與15-HEPE之前，確定個體之基線紅血球計數、紅血球分佈寬度及/或網狀紅血球計數。在一個實施例中，個體表現出紅血球計數增加、紅血球分佈寬度減少及/或網狀紅血球計數減少。在另一個實施例中，該方法包含向個體投與至多約8 g之包含15-HEPE之組成物。在另一個實施例中，15-HEPE占組成物中所有脂肪酸之至少約90重量%。

在一些實施例中，本揭示案提供治療及/或預防有需要個體之紅血球病症之方法，該方法包含向該個體投與15-HEPE或包含15-HEPE之組成物。在另一個實施例中，該方法包含向個體投與至多約8 g之包含15-HEPE之組成物。在另一個實施例中，15-HEPE占組成物中所有脂肪酸之至少約90重量%。

在一些實施例中，本揭示案提供治療及/或預防有需要個體之紅血球病症之方法，該方法包含向該個體投與15-HEPE或包含15-HEPE之組成物。在一些實施例中，該方法進一步包含在投與15-HEPE或包含15-HEPE之組成物之前，確定個體具有至少一個紅血球病症之風險因素。在一些實施例中，該方法進一步包含在投與15-HEPE之前，確定個體之基線紅血球計數、紅血球分佈寬度及/或網狀紅血球計數。在一個實施例中，個體表現出紅血球計數增加、紅血球分佈寬度減少及/或網狀紅血球計數減少。在另一個實施例中，該方法包含向個體投與至多約8 g之包含15-HEPE之組成物。在另一個實施例中，15-HEPE占組成物中所有脂肪酸之至少約90重量%。

在一些實施例中，本揭示案提供治療及/或預防有需要個體之血液學病症、血紅蛋白病症及/或紅血球病症之方法，該方法包含向該個體投與15-HEPE或包含15-HEPE之組成物。在另一個實施例中，該方法包含向個體投與至多約8 g之包含15-HEPE之組成物。在另一個實施例中，15-HEPE占組成物中所有脂肪酸之至少約90重量%。

在一些實施例中，本揭示案提供治療及/或預防有需要個體之血液學病症、血紅蛋白病症及/或紅血球病症之方法，該方法包含向該個體投與15-HEPE或包含15-HEPE之組成物。在一些實施例中，該方法進一步包含在投與15-HEPE或包含15-HEPE之組成物之前，確定個體具有血液學病症、血紅蛋白病症及/或紅血球病症之至少一個危險因素。在一些實施例中，至少一個風險因素係減少的紅血球計數、增加的紅血球分佈寬度及/或增加的網狀紅血球計數。在一些實施例中，個體表現出紅血球計數增加、紅血球分佈寬度減少及/或網狀紅血球計數減少中之一或多者。

在一些實施例中，本揭示案提供治療及/或預防有需要個體之血液學病症、血紅蛋白病症及/或紅血球病症之方法，該方法包含向該個體投與15-HEPE或包含15-HEPE之組成物。在另一個實施例中，該方法包含向個體投與至多約8 g之包含15-HEPE之組成物。在另一個實施例中，15-HEPE占組成物中所有脂肪酸之至少約90重量%。在另一個實施例中，血液學病症、血紅蛋白病症及/或紅血球病症係選自由以下組成之群：遺傳性溶血性貧血、獲得性溶血性貧血、範可尼貧血、缺鐵性貧血、葉酸缺乏症、B12缺乏症及骨髓發育不良症候群。在一些實施例中，該方法進一步包含在投與15-HEPE或包含15-HEPE之組成物之前，確定個體具有遺傳性溶血性貧血、獲得性溶血性貧血、範可尼貧血、缺鐵性貧血、葉酸缺乏症、B12缺乏症及/或骨髓發育不良症候群之至少一個危險因素。在一些實施例中，該方法進一步包含在投與15-HEPE之前，確定個體之基線紅血球計數、紅血球分佈寬度及/或網狀紅血球計數。在一個實施例中，個體表現出紅血球計數增加、紅血球分佈寬度減少及/或網狀紅血球計數減少。

在一些實施例中，本揭示案提供治療及/或預防有需要個體之溶血性貧血之方法，該方法包含向該個體投與15-HEPE或包含15-HEPE之組成物。在另一個實施例中，該方法包含向個體投與至多約8 g之包含15-HEPE之組成物。在另一個實施例中，15-HEPE占組成物中所有脂肪酸之至少約90重量%。

在一些實施例中，本揭示案提供治療及/或預防有需要個體之溶血性貧血之方法，該方法包含向該個體投與15-HEPE或包含15-HEPE之組成物。在一些實施例中，該方法進一步包含在投與15-HEPE或包含15-HEPE之組成物之前，確定個體具有至少一個溶血性貧血之風險因素。在一些實施例中，至少一個風險因素係減少的紅血球計數、增加的紅血球分佈寬度及/或增加的網狀紅血球計數。在一些實施例中，個體表現出紅血球計數增加、紅血球分佈寬度減少及/或網狀紅血球計數減少中之一或多者。

在一些實施例中，本揭示案提供治療及/或預防有需要個體之溶血性貧血之方法，該方法包含向該個體投與至多約8 g的包含15-HEPE之組成物。在一些實施例中，15-HEPE占組成物中所有脂肪酸之至少約90重量%。在一些實施例中，溶血性貧血係遺傳性溶血性貧血或獲得性溶血性貧血。在另一個實施例中，遺傳性溶血性貧血係選自由以下組成之群：鐮狀細胞疾病、鐮狀細胞貧血、β-地中海型貧血及遺傳性球形紅血球症。在又另一個實施例中，獲得性溶血性貧血係選自由以下組成之群：繼發於感染、藥物、惡性血液病、自體免疫疾病、脾功能亢進症、機械性心臟瓣膜及輸血。在各種實施例中，鐮狀細胞疾病及鐮狀細胞貧血與鐮狀細胞危機、血管閉塞性危機及/或脾隔離有關。在一些實施例中，個體在投與後表現出紅血球計數增加、紅血球分佈寬度減少及網狀紅血球計數減少。

在一些實施例中，本揭示案提供治療及/或預防有需要個體之溶血性貧血之方法，該方法包含向該個體投與至多約8 g的包含15-HEPE之組成物。在一些實施例中，15-HEPE占組成物中所有脂肪酸之至少約90重量%。在一些實施例中，溶血性貧血係遺傳性溶血性貧血或獲得性溶血性貧血。在另一個實施例中，遺傳性溶血性貧血係選自由以下組成之群：鐮狀細胞疾病、鐮狀細胞貧血、β-地中海型貧血及遺傳性球形紅血球症。在一些實施例中，該方法進一步包含在投與15-HEPE或包含15-HEPE之組成物之前，確定個體具有至少一個遺傳性溶血性貧血或獲得性溶血性貧血之風險因素。在又另一個實施例中，獲得性溶血性貧血係選自由以下組成之群：繼發於感染、藥物、惡性血液病、自體免疫疾病、脾功能亢進症、機械性心臟瓣膜及輸血。在各種實施例中，鐮狀細胞疾病及鐮狀細胞貧血與鐮狀細胞危機、血管閉塞性危機及/或脾隔離有關。在一些實施例中，該方法進一步包含在投與15-HEPE之前，確定個體之基線紅血球計數、紅血球分佈寬度及/或網狀紅血球計數。在一個實施例中，個體表現出紅血球計數增加、紅血球分佈寬度減少及/或網狀紅血球計數減少。

本文中所揭示之組成物及調配物進一步可用於治療及/或預防血栓好發症病症。血栓好發症病症係指以會增加血栓形成之風險的異常血液凝固為特徵的一類病況。血栓好發症病症之危險因素之非限制性實例包括凝血酶原時間減少、活化部分凝血活素時間減少及纖維蛋白原濃度增加。

在一些實施例中，個體之凝血酶原時間減少為比正常低至少10%、比正常低至少15%、比正常低至少20%、比正常低至少25%或比正常低至少30%。

在一些實施例中，個體之活化部分凝血活素時間減少為比正常低至少10%、比正常低至少15%、比正常低至少20%、比正常低至少25%或比正常低至少30%。

在一些實施例中，個體之纖維蛋白原濃度增加為比正常低至少10%、比正常低至少15%、比正常低至少20%、比正常低至少25%或比正常低至少30%。

在一些實施例中，本揭示案提供治療及/或預防有需要個體之血栓好發症病症之方法，該方法包含向該個體投與15-羥基二十碳五烯酸（15-HEPE）或包含15-HEPE之組成物。在另一個實施例中，該方法包含向個體投與至多約8 g之包含15-HEPE之組成物。在另一個實施例中，15-HEPE占組成物中所有脂肪酸之至少約90重量%。

在一些實施例中，本揭示案提供治療及/或預防有需要個體之血栓好發症病症之方法，該方法包含向該個體投與15-HEPE或包含15-HEPE之組成物。在一些實施例中，該方法進一步包含在投與15-HEPE或包含15-HEPE之組成物之前，確定個體具有至少一個血栓好發症病症之風險因素。在一些實施例中，至少一個危險因素係凝血酶原時間減少、活化部分凝血活素時間減少及/或纖維蛋白原濃度增加。在一些實施例中，在投與15-HEPE或包含15-HEPE之組成物之後，個體表現出凝血酶原時間增加、活化部分凝血活素時間增加及/或纖維蛋白原濃度減少中的一或多者。

在一些實施例中，本揭示案提供治療及/或預防有需要個體之靜脈血栓性栓塞之方法，該方法包含向該個體投與15-羥基二十碳五烯酸（15-HEPE）或包含15-HEPE之組成物。在另一個實施例中，該方法包含向個體投與至多約8 g之包含15-HEPE之組成物。在另一個實施例中，15-HEPE占組成物中所有脂肪酸之至少約90重量%。

在一些實施例中，本揭示案提供治療及/或預防有需要個體之靜脈血栓性栓塞之方法，該方法包含向該個體投與15-HEPE或包含15-HEPE之組成物。在一些實施例中，該方法進一步包含在投與15-HEPE或包含15-HEPE之組成物之前，確定個體具有至少一個靜脈血栓性栓塞之風險因素。在一些實施例中，至少一個危險因素係凝血酶原時間減少、活化部分凝血活素時間減少及/或纖維蛋白原濃度增加。在一些實施例中，個體表現出凝血酶原時間增加、活化部分凝血活素時間增加及/或纖維蛋白原濃度降低中之一或多者。

在一些實施例中，本揭示案提供治療及/或預防有需要個體之動脈血栓形成之方法，該方法包含向該個體投與15-羥基二十碳五烯酸（15-HEPE）或包含15-HEPE之組成物。在另一個實施例中，該方法包含向個體投與至多約8 g之包含15-HEPE之組成物。在另一個實施例中，15-HEPE占組成物中所有脂肪酸之至少約90重量%。

在一些實施例中，本揭示案提供治療及/或預防有需要個體之動脈血栓形成之方法，該方法包含向該個體投與15-HEPE或包含15-HEPE之組成物。在一些實施例中，該方法進一步包含在投與15-HEPE或包含15-HEPE之組成物之前，確定個體具有至少一個動脈栓塞之風險因素。在一些實施例中，至少一個危險因素係凝血酶原時間減少、活化部分凝血活素時間減少及/或纖維蛋白原濃度增加。在一些實施例中，個體表現出凝血酶原時間增加、活化部分凝血活素時間增加及/或纖維蛋白原濃度降低中之一或多者。

在一些實施例中，本揭示案提供預防有需要個體之栓塞之方法，該方法包含向該個體投與15-羥基二十碳五烯酸（15-HEPE）或包含15-HEPE之組成物。在另一個實施例中，該方法包含向個體投與至多約8 g之包含15-HEPE之組成物。在另一個實施例中，15-HEPE占組成物中所有脂肪酸之至少約90重量%。

在一些實施例中，本揭示案提供預防有需要個體之栓塞之方法，該方法包含向該個體投與15-HEPE或包含15-HEPE之組成物。在一些實施例中，該方法進一步包含在投與15-HEPE或包含15-HEPE之組成物之前，確定個體具有至少一個患上栓塞之風險因素。在一些實施例中，至少一個危險因素係凝血酶原時間減少、活化部分凝血活素時間減少及/或纖維蛋白原濃度增加。在一些實施例中，個體表現出凝血酶原時間增加、活化部分凝血活素時間增加及/或纖維蛋白原濃度降低中之一或多者。

在一些實施例中，本揭示案提供一種治療及/或預防個體之內皮細胞功能不良之方法，該方法包含向該個體投與15-HEPE。在另一個實施例中，該方法包含向個體投與至多約8 g之15-HEPE。在又另一個實施例中，15-HEPE占組成物中所有脂肪酸之至少約90重量%。

在一些實施例中，本揭示案提供一種治療及/或預防個體之內皮細胞功能不良之方法，該方法包含向該個體投與15-HEPE或包含15-HEPE之組成物。在另一個實施例中，該方法包含向個體投與至多約8 g之15-HEPE或包含15-HEPE之組成物。在又另一個實施例中，15-HEPE占組成物中所有脂肪酸之至少約90重量%。

在一些實施例中，本揭示案提供治療、預防或減少細胞應激細胞凋亡之方法，該方法包含向個體投與15-HEPE或包含15-HEPE之組成物。在一些實施例中，個體表現出與細胞凋亡相關之標記物之減少，諸如來自Bcl-2家族之蛋白、凋亡蛋白酶之活化片段及/或裂解PARP-1。

在一些實施例中，本揭示案提供一種治療、預防及/或減少發炎之方法，該方法包含向個體投與15-HEPE或包含15-HEPE之組成物。在一些實施例中，個體表現出T細胞活化、B細胞活化及/或趨化性之減少。

本文所揭示之組成物及調配物可用於治療或預防心血管疾病或病症。在一個實施例中，心血管疾病或病症係選自：血脂異常、高脂質血症、高膽固醇血症、高三酸甘油酯血症、原發性高膽固醇血症、原發性高脂質血症、常見原發性高脂質血症、常見高膽固醇血症、家族性高脂質血症、家族性原發性高脂質血症、家族性高膽固醇血症、家族性高三酸甘油酯血症、家族性混合型高脂質血症、家族性脂蛋白元b-100缺陷症、繼發性高脂質血症、混合型高脂質血症、心血管疾病、殘餘心血管風險、預防動脈粥樣硬化斑塊形成/進展、微血管疾病、大血管疾病、動脈粥樣硬化、冠狀動脈粥樣硬化、舒張功能障礙、心血管風險降低、預防主要冠狀動脈事件、預防主要不良心血管事件、預防缺血事件、二級/一級預防心血管事件、預防心血管死亡、心肌梗塞、中風、絞痛症、正常內皮功能之恢復、糖尿病、糖尿病、胰島素抗性、高胰島素血症、高血糖症、血糖代謝障礙、誘導血糖控制、葡萄糖耐量異常及空腹葡萄糖異常。微血管疾病之非限制性實例包括視網膜病變、腎病變及神經病變。大血管疾病之非限制性實例包括中風、周邊血管疾病、肢體缺血及心臟病。在一些實施例中，個體患有非酒精性肝病、膽汁鬱積性肝病、腎臟疾病或代謝症候群。心血管疾病之前述實例中之任一者亦可指心血管代謝疾病之非限制性實例。

在一個實施例中，本揭示案提供一種治療及/或預防個體之心血管疾病之方法，該方法包含向該個體投與15-HEPE。

在一個實施例中，本揭示案提供一種治療及/或預防個體之心血管疾病之方法，該方法包含向該個體投與15-HEPE或包含15-HEPE之組成物。

在另一個實施例中，本揭示案提供預防患有糖尿病（例如I型或II型）之個體之血液學病症之方法，該方法包含向該個體投與15-HEPE。在一些實施例中，該方法進一步包含在投與15-HEPE之前，確定個體患有糖尿病。在另一個實施例中，該方法包含向個體投與約10 mg/個體之重量（mg/kg）、約50 mg/kg、約250 mg/kg或約500 mg/kg之15-HEPE。在又另一個實施例中，15-HEPE占組成物中所有脂肪酸之至少約90重量%。

在另一個實施例中，本揭示案提供預防患有糖尿病（例如I型或II型）之個體之血液學病症之方法，該方法包含向該個體投與15-HEPE或包含15-HEPE之組成物。在一些實施例中，該方法進一步包含在投與15-HEPE或包含15-HEPE之組成物之前，確定個體患有糖尿病。在另一個實施例中，該方法包含向個體投與約10 mg/個體之重量（mg/kg）、約50 mg/kg、約250 mg/kg或約500 mg/kg之15-HEPE或包含15-HEPE之組成物。在又另一個實施例中，15-HEPE占組成物中所有脂肪酸之至少約90重量%。

在另一個實施例中，本揭示案提供一種治療及/或預防患有心血管疾病之個體之血液學病症的方法，該方法包含向該個體投與15-HEPE。在一些實施例中，該方法進一步包含在投與15-HEPE之前，確定個體患有心血管病。在另一個實施例中，該方法包含向個體投與約10 mg/個體之重量（mg/kg）、約50 mg/kg、約250 mg/kg或約500 mg/kg之15-HEPE。在又另一個實施例中，15-HEPE占組成物中所有脂肪酸之至少約90重量%。

在另一個實施例中，本揭示案提供一種治療及/或預防患有心血管疾病之個體之血液學病症的方法，該方法包含向該個體投與15-HEPE或包含15-HEPE之組成物。在一些實施例中，該方法進一步包含在投與15-HEPE或包含15-HEPE之組成物之前，確定個體患有心血管病。在另一個實施例中，該方法包含向個體投與約10 mg/個體之重量（mg/kg）、約50 mg/kg、約250 mg/kg或約500 mg/kg之15-HEPE或包含15-HEPE之組成物。在又另一個實施例中，15-HEPE占組成物中所有脂肪酸之至少約90重量%。

在另一個實施例中，本揭示案提供一種治療及/或預防患有高血壓之個體之血液學病症的方法，該方法包含向該個體投與15-HEPE。在一些實施例中，該方法進一步包含在投與15-HEPE之前，確定個體患有高血壓。在一些實施例中，個體之高血壓為至少約130 mmHg、至少約135 mmHg、至少約140 mmHg、至少約145 mmHg、至少約150 mmHg、至少約155 mmHg、至少約160 mmHg、至少約165 mmHg或至少約170 mmHg。在另一個實施例中，該方法包含向個體投與約10 mg/kg、約50 mg/kg、約250 mg/kg或約500 mg/kg之15-HEPE。在又另一個實施例中，15-HEPE占組成物中所有脂肪酸之至少約90重量%。

在另一個實施例中，本揭示案提供一種治療及/或預防患有高血壓之個體之血液學病症的方法，該方法包含向該個體投與15-HEPE或包含15-HEPE之組成物。在一些實施例中，該方法進一步包含在投與15-HEPE或包含15-HEPE之組成物之前，確定個體患有高血壓。在一些實施例中，個體之高血壓為至少約130 mmHg、至少約135 mmHg、至少約140 mmHg、至少約145 mmHg、至少約150 mmHg、至少約155 mmHg、至少約160 mmHg、至少約165 mmHg或至少約170 mmHg。在另一個實施例中，該方法包含向個體投與約10 mg/kg、約50 mg/kg、約250 mg/kg或約500 mg/kg之15-HEPE或包含15-HEPE之組成物。在又另一個實施例中，15-HEPE占組成物中所有脂肪酸之至少約90重量%。

本文所揭示之組成物及調配物亦可用於降低患有心血管疾病及/或血液學疾病之個體中的細胞介素及/或趨化介素。非限制性細胞介素及/或趨化介素包括α-平滑肌作用（α-SMA）、金屬肽酶抑制劑-1（TIMP-1）、轉型生長因子β-β（TGF-β）及膠原蛋白1型。

在另一個實施例中，在用本發明之組成物治療後，個體或個體組表現出以下結果中之一或多者：

（a）相對於基線、安慰劑對照組及/或未經治療之患者，血清轉胺酶（ALT）及/或天門冬胺酸轉胺酶（AST）含量未增加或減少；

（b）相對於基線、安慰劑對照組及/或未經治療之患者，膽紅素（BUN）含量無增加或減少；

（c）相對於基線、安慰劑對照組及/或未經治療之患者，纖維化區域無增加或減少；

（d）相對於基線、安慰劑對照組及/或未經治療之患者，空腹葡萄糖含量無增加或減少；

（e）相對於基線、安慰劑對照組及/或未經治療之患者，胰島素含量無增加或減少；

（f）相對於基線、安慰劑對照組及/或未經治療之患者，鹼性磷酸鹽（ALP）含量無增加或減少；

（g）相對於基線、安慰劑對照組及/或未經治療之患者，血紅蛋白A1C（HbA1C）含量無增加或減少；

（h）相對於基線、安慰劑對照組及/或未經治療之患者，胰島素抗性之恆穩模型評定（HOMA-IR）含量無增加或減少；

（i）相對於基線、安慰劑對照組及/或未經治療之患者，脂肪組織胰島素抗性（adipo-IR）含量無增加或減少；

（j）相對於基線、安慰劑對照組及/或未經治療之患者，總膽固醇含量無增加或減少；

（k）相對於基線、安慰劑對照組及/或未經治療之患者，三酸甘油酯含量無增加或減少；

（l）相對於基線、安慰劑對照組及/或未經治療之患者，二酸甘油酯含量無增加或減少；

（m）相對於基線、安慰劑對照組及/或未經治療之患者，極低密度脂蛋白膽固醇（VLDL-C）含量無增加或減少；

（n）相對於基線、安慰劑對照組及/或未經治療之患者，殘粒樣膽固醇（RLP-C）含量無增加或減少；

（o）相對於基線、安慰劑對照組及/或未經治療之患者，非高密度脂蛋白膽固醇（非HDL-C）含量無增加或減少；

（p）相對於基線、安慰劑對照組及/或未經治療之患者，高密度脂蛋白膽固醇（HDL-C）含量無減少或增加；

（q）相對於基線、安慰劑對照組及/或未經治療之患者，低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C）含量無增加或減少；

(R)相對於基線、安慰劑對照組及/或未經治療之患者，腎臟羥脯胺酸含量無增加或減少；

(S)相對於基線、安慰劑對照組及/或未經治療之患者，介白素-33（IL-33）含量無增加或減少；

（t）相對於基線、安慰劑對照組及/或未經治療之患者，介白素-17（IL-17）含量無增加或減少；

（u）相對於基線、安慰劑對照組及/或未經治療之患者，芳基烴受體（AhR）含量無增加或減少；

（v）相對於基線、安慰劑對照組及/或未經治療之患者，TNF樣配體1A（TL1A）含量無增加或減少；

（w）相對於基線、安慰劑對照組及/或未經治療之患者，腫瘤壞死因子（TNF-α）含量無增加或減少；

（x）相對於基線、安慰劑對照組及/或未經治療之患者，介白素-13（IL-13）含量無增加或減少；

（y）相對於基線、安慰劑對照組及/或未經治療之患者，介白素-6（IL-6）含量無增加或減少；

（z）相對於基線、安慰劑對照組及/或未經治療之患者，介白素1β-β（IL-1β）含量無增加或減少；

（aa）相對於基線、安慰劑對照組及/或未經治療之患者，膠原蛋白1型含量無增加或減少；

（bb）相對於基線、安慰劑對照組及/或未經治療之患者，轉型生長因子-β（TGF-β）含量無增加或減少；

（cc）相對於基線、安慰劑對照組及/或未經治療之患者，α-平滑肌作用（α-SMA）含量無增加或減少；

（dd）相對於基線、安慰劑對照組及/或未經治療之患者，腫瘤壞死因子配體超家族成員11A（TNRSF11A）含量無增加或減少；

（ee）相對於基線、安慰劑對照組及/或未經治療之患者，絲胺酸蛋白酶2（PRSS2）含量無增加或減少；

（ff）相對於基線、安慰劑對照組及/或未經治療之患者，胺氧化酶，含銅3（AOC3）含量無增加或減少；

（gg）相對於基線、安慰劑對照組及/或未經治療之患者，白血球免疫球蛋白樣受體B1（LILBR1）含量無增加或減少；

（hh）相對於基線、安慰劑對照組及/或未經治療之患者，運鐵蛋白受體蛋白1（TR）含量無增加或減少；

（ii）相對於基線、安慰劑對照組及/或未經治療之患者，彈性蛋白酶抑制劑（elafin）（PI3）含量無增加或減少；

（jj）相對於基線、安慰劑對照組及/或未經治療之患者，血清澱粉樣蛋白A4（SAA4）含量無增加或減少；

（kk）相對於基線、安慰劑對照組及/或未經治療之患者，單核球趨化蛋白-1（MCP-1）含量無增加或減少；

（ll）相對於基線、安慰劑對照組及/或未經治療之患者，趨化介素（C-C基元）配體16（CCL16）含量無增加或減少；

（mm）相對於基線、安慰劑對照組及/或未經治療之患者，trem樣轉錄物2（TLT2）含量無增加或減少；

（nn）相對於基線、安慰劑對照組及/或未經治療之患者，二肽基肽酶4（DPP4）含量無增加或減少；以及

（oo）相對於基線、安慰劑對照組及/或未經治療之患者，金屬蛋白酶抑制劑-1（TIMP-1）含量無增加或減少；

（pp）相對於基線、安慰劑對照組及/或未經治療之患者，纖維蛋白溶酶原活化劑抑制劑-1（PAI-1）含量無增加或減少；

（qq）相對於基線、安慰劑對照組及/或未經治療之患者，NAFLD評分（NFS）無增加或減少；以及

（rr）相對於基線、安慰劑對照組及/或未經治療之患者，纖維化-4（FIB-4）含量無增加或減少；

（ss）相對於基線、安慰劑對照組及/或未經治療之患者，肝臟硬度含量無增加或減少；

（tt）相對於基線、安慰劑對照組及/或未經治療之患者，肝脂肪含量無增加或減少；

（uu）相對於基線、安慰劑對照組及/或未經治療之患者，甘油磷脂含量無減少或增加；

（vv）相對於基線、安慰劑對照組及/或未經治療之患者，血壓無增加或減少；

（ww）相對於基線、安慰劑對照組及/或未經治療之患者，增強肝纖維化（ELF）評分無增加或減少；

（xx）相對於基線、安慰劑對照組及/或未經治療之患者，肺及/或真皮纖維母細胞中之膠原蛋白產生無增加或減少；

（yy）相對於基線、安慰劑對照組及/或未經治療之患者，葡萄糖攝取無減少或增加；

（zz）相對於基線、安慰劑對照組及/或未經治療之患者，肺及/或真皮纖維母細胞存活率增加；

（ab）相對於基線、安慰劑對照組及/或未經治療之患者，介白素-8（IL-8）含量無變化或減少；

（ac）相對於基線、安慰劑對照組及/或未經治療之患者，介白素-23（IL-23）含量無變化或減少；

（ad）相對於基線、安慰劑對照組及/或未經治療之患者，介白素-11（IL-11）含量無變化或減少；及/或

（ae）相對於基線、安慰劑對照組及/或未經治療之患者，干擾素γ（IFNγ）含量無變化或減少；

（af）相對於基線、安慰劑對照組及/或未經治療之患者，T及/或B細胞活化無變化或減少；

（ag）相對於基線、安慰劑對照組及/或未經治療之患者，趨化性無變化或減少；

（ah）相對於基線、安慰劑對照組及/或未經治療之患者，磷酸化B細胞淋巴瘤2（Bcl-2）家族成員無變化或減少；

（ai）相對於基線、安慰劑對照組及/或未經治療之患者，凋亡蛋白酶之活化片段含量無變化或減少；

（aj）相對於基線、安慰劑對照組及/或未經治療之患者，裂解聚（ADP-核糖）聚合酶-1（PARP-1）含量無變化或減少；

（ak）相對於基線、安慰劑對照組及/或未經治療之患者，腰圍無變化或減少；

（al）相對於基線、安慰劑對照組及/或未經治療之患者，AST與血小板比率指數（APRI）無變化或減少；

（am）相對於基線、安慰劑對照組及/或未經治療之患者，肝炎及纖維化（LIF）評分無變化或減少；

（an）相對於基線、安慰劑對照組及/或未經治療之患者，Lok評分無變化或減少；

（ao）相對於基線、安慰劑對照組及/或未經治療之患者，纖維化評分無變化或減少；

（ap）相對於基線、安慰劑對照組及/或未經治療之患者，King評分無變化或減少；

（aq）相對於基線、安慰劑對照組及/或未經治療之患者，Bonacini評分無變化或減少；

（ar）相對於基線、安慰劑對照組及/或未經治療之患者，瞬時彈性成像（TE）評分無變化或減少；

（as）相對於基線、安慰劑對照組及/或未經治療之患者，血管黏附分子無增加或減少；

（at）相對於基線、安慰劑對照組及/或未經治療之患者，心血管風險蛋白無增加或減少；及/或

（au）相對於基線、安慰劑對照組及/或未經治療之患者，趨化介素無增加或減少。

（av）相對於基線、安慰劑對照組及/或未經治療之患者，腫瘤壞死因子受體超家族成員無增加或減少；

（aw）相對於基線、安慰劑對照組及/或未經治療之患者，紅血球計數無變化或增加；

（ax）相對於基線、安慰劑對照組及/或未經治療之患者，白血球計數無變化或增加；

（ay）相對於基線、安慰劑對照組及/或未經治療之患者，血小板計數無變化或增加；

（az）相對於基線、安慰劑對照組及/或未經治療之患者，凝血酶原時間無變化或增加；

（ba）相對於基線、安慰劑對照組及/或未經治療之患者，活化部分凝血活素時間無變化或增加；

（bc）相對於基線、安慰劑對照組及/或未經治療之患者，血紅蛋白產生無變化或增加；

（bd）相對於基線、安慰劑對照組及/或未經治療之患者，血紅蛋白四聚體之β血球蛋白鏈之合成無變化或增加；

（be）相對於基線、安慰劑對照組及/或未經治療之患者，紅血球溶血無變化或減少；

（bf）相對於基線、安慰劑對照組及/或未經治療之患者，呼吸短促無變化或減少；

（bg）相對於基線、安慰劑對照組及/或未經治療之患者，心跳速率無變化或減少；

（bh）相對於基線、安慰劑對照組及/或未經治療之患者，脾臟大小無變化或減少；

（bi）相對於基線、安慰劑對照組及/或未經治療之患者，肝大小無變化或減少；

（bj）相對於基線、安慰劑對照組及/或未經治療之患者，指炎無變化或減少；

（bk）相對於基線、安慰劑對照組及/或未經治療之患者，疼痛危機無變化或減少；

（bl）相對於基線、安慰劑對照組及/或未經治療之患者，異常血液凝塊發展無變化或減少；

（bm）相對於基線、安慰劑對照組及/或未經治療之患者，紅血球分佈寬度無變化或減少；

（bn）相對於基線、安慰劑對照組及/或未經治療之患者，網狀紅血球計數無變化或減少；及/或

（bo）相對於基線、安慰劑對照組及/或未經治療之患者，纖維蛋白原濃度無變化或減少；

在一個實施例中，本發明之方法包含在對個體或個體組進行給藥之前量測以上（a）-（bo）中所闡述之一或多種標記物或參數之基線水準。在另一個實施例中，方法包含在確定（a）-（bo）中所闡述之一或多種標記物或參數之基線水準之後，向個體投與如本文所揭示之組成物，且隨後對該等一或多種標記物進行額外量測。

在另一個實施例中，在用本發明之組成物進行治療後，例如經約1至約12週、約1至約8週或約1至約4週之時段，個體或個體組表現出以上直接所描述之結果（a）-（bo）中之任何5個或更多個、任何10個或更多個、任何15個或更多個、任何20個或更多個、任何25個或更多個、任何30個或更多個、任何35個或更多個、任何40個或更多個、任何45個或更多個、任何50個或更多個、任何55個或更多個、任何60個或更多個、任何65個或更多個、任何70個或更多個、任何75個或更多個、任何80個或更多個、任何85個或更多個、任何90個或更多個或全部91個結果。

（a）相對於基線、安慰劑對照組及/或未經治療之患者，血清ALT及/或AST含量無增加或減少為至少約5%、至少約10%、至少約15%、至少約20%、至少約25%、至少約30%、至少約35%、至少約40%、至少約45%、至少約50%、至少約55%、至少約60%、至少約65%、至少約70%、至少約75%、至少約80%、至少約85%、至少約90%或至少約95%；

（b）相對於基線、安慰劑對照組及/或未經治療之患者，BUN含量無增加或減少為至少約5%、至少約10%、至少約15%、至少約20%、至少約25%、至少約30%、至少約35%、至少約40%、至少約45%、至少約50%、至少約55%、至少約60%、至少約65%、至少約70%、至少約75%、至少約80%、至少約85%、至少約90%或至少約95%；

（c）相對於基線、安慰劑對照組及/或未經治療之患者，纖維化區域無增加或減少為至少約5%、至少約10%、至少約15%、至少約20%、至少約25%、至少約30%、至少約35%、至少約40%、至少約45%、至少約50%、至少約55%、至少約60%、至少約65%、至少約70%、至少約75%、至少約80%、至少約85%、至少約90%或至少約95%；

（d）相對於基線、安慰劑對照組及/或未經治療之患者，空腹葡萄糖含量無增加或減少為至少約5%、至少約10%、至少約15%、至少約20%、至少約25%、至少約30%、至少約35%、至少約40%、至少約45%、至少約50%、至少約55%、至少約60%、至少約65%、至少約70%、至少約75%、至少約80%、至少約85%、至少約90%或至少約95%；

（e）相對於基線、安慰劑對照組及/或未經治療之患者，胰島素無增加或減少為至少約5%、至少約10%、至少約15%、至少約20%、至少約25%、至少約30%、至少約35%、至少約40%、至少約45%、至少約50%、至少約55%、至少約60%、至少約65%、至少約70%、至少約75%、至少約80%、至少約85%、至少約90%或至少約95%；

（f）相對於基線、安慰劑對照組及/或未經治療之患者，ALP含量無增加或減少為至少約5%、至少約10%、至少約15%、至少約20%、至少約25%、至少約30%、至少約35%、至少約40%、至少約45%、至少約50%、至少約55%、至少約60%、至少約65%、至少約70%、至少約75%、至少約80%、至少約85%、至少約90%或至少約95%；

（g）相對於基線、安慰劑對照組及/或未經治療之患者，HB1Ac含量無增加或減少為至少約5%、至少約10%、至少約15%、至少約20%、至少約25%、至少約30%、至少約35%、至少約40%、至少約45%、至少約50%、至少約55%、至少約60%、至少約65%、至少約70%、至少約75%、至少約80%、至少約85%、至少約90%或至少約95%；

（h）相對於基線、安慰劑對照組及/或未經治療之患者，HOMA-IR含量無增加或減少為至少約5%、至少約10%、至少約15%、至少約20%、至少約25%、至少約30%、至少約35%、至少約40%、至少約45%、至少約50%、至少約55%、至少約60%、至少約65%、至少約70%、至少約75%、至少約80%、至少約85%、至少約90%或至少約95%；

（i）相對於基線、安慰劑對照組及/或未經治療之患者，adipo-IR含量無增加或減少為至少約5%、至少約10%、至少約15%、至少約20%、至少約25%、至少約30%、至少約35%、至少約40%、至少約45%、至少約50%、至少約55%、至少約60%、至少約65%、至少約70%、至少約75%、至少約80%、至少約85%、至少約90%或至少約95%；

（j）相對於基線、安慰劑對照組及/或未經治療之患者，總膽固醇含量無增加或減少為至少約5%、至少約10%、至少約15%、至少約20%、至少約25%、至少約30%、至少約35%、至少約40%、至少約45%、至少約50%、至少約55%、至少約60%、至少約65%、至少約70%、至少約75%、至少約80%、至少約85%、至少約90%或至少約95%；

（k）相對於基線、安慰劑對照組及/或未經治療之患者，三酸甘油酯含量無增加或減少為至少約5%、至少約10%、至少約15%、至少約20%、至少約25%、至少約30%、至少約35%、至少約40%、至少約45%、至少約50%、至少約55%、至少約60%、至少約65%、至少約70%、至少約75%、至少約80%、至少約85%、至少約90%或至少約95%；

（l）相對於基線、安慰劑對照組及/或未經治療之患者，二酸甘油酯含量無增加或減少為至少約5%、至少約10%、至少約15%、至少約20%、至少約25%、至少約30%、至少約35%、至少約40%、至少約45%、至少約50%、至少約55%、至少約60%、至少約65%、至少約70%、至少約75%、至少約80%、至少約85%、至少約90%或至少約95%；

（m）相對於基線、安慰劑對照組及/或未經治療之患者，VLDL-C含量無增加或減少為至少約5%、至少約10%、至少約15%、至少約20%、至少約25%、至少約30%、至少約35%、至少約40%、至少約45%、至少約50%、至少約55%、至少約60%、至少約65%、至少約70%、至少約75%、至少約80%、至少約85%、至少約90%或至少約95%；

（n）相對於基線、安慰劑對照組及/或未經治療之患者，RLP-C含量無增加或減少為至少約5%、至少約10%、至少約15%、至少約20%、至少約25%、至少約30%、至少約35%、至少約40%、至少約45%、至少約50%、至少約55%、至少約60%、至少約65%、至少約70%、至少約75%、至少約80%、至少約85%、至少約90%或至少約95%；

（o）相對於基線、安慰劑對照組及/或未經治療之患者，非HDL-C含量無增加或減少為至少約5%、至少約10%、至少約15%、至少約20%、至少約25%、至少約30%、至少約35%、至少約40%、至少約45%、至少約50%、至少約55%、至少約60%、至少約65%、至少約70%、至少約75%、至少約80%、至少約85%、至少約90%或至少約95%；

（p）相對於基線、安慰劑對照組及/或未經治療之患者，HDL-C含量無減少或增加為至少約5%、至少約10%、至少約15%、至少約20%、至少約25%、至少約30%、至少約35%、至少約40%、至少約45%、至少約50%、至少約55%、至少約60%、至少約65%、至少約70%、至少約75%、至少約80%、至少約85%、至少約90%或至少約95%；

（q）相對於基線、安慰劑對照組及/或未經治療之患者，LDL-C含量無增加或減少為至少約5%、至少約10%、至少約15%、至少約20%、至少約25%、至少約30%、至少約35%、至少約40%、至少約45%、至少約50%、至少約55%、至少約60%、至少約65%、至少約70%、至少約75%、至少約80%、至少約85%、至少約90%或至少約95%；

(r)相對於基線、安慰劑對照組及/或未經治療之患者，腎臟羥脯胺酸含量無增加或減少為至少約5%、至少約10%、至少約15%、至少約20%、至少約25%、至少約30%、至少約35%、至少約40%、至少約45%、至少約50%、至少約55%、至少約60%、至少約65%、至少約70%、至少約75%、至少約80%、至少約85%、至少約90%或至少約95%；

(s)相對於基線、安慰劑對照組及/或未經治療之患者，IL-33含量無增加或減少為至少約5%、至少約10%、至少約15%、至少約20%、至少約25%、至少約30%、至少約35%、至少約40%、至少約45%、至少約50%、至少約55%、至少約60%、至少約65%、至少約70%、至少約75%、至少約80%、至少約85%、至少約90%或至少約95%；

（t）相對於基線、安慰劑對照組及/或未經治療之患者，IL-17含量無增加或減少為至少約5%、至少約10%、至少約15%、至少約20%、至少約25%、至少約30%、至少約35%、至少約40%、至少約45%、至少約50%、至少約55%、至少約60%、至少約65%、至少約70%、至少約75%、至少約80%、至少約85%、至少約90%或至少約95%；

（u）相對於基線、安慰劑對照組及/或未經治療之患者，AhR含量無增加或減少為至少約5%、至少約10%、至少約15%、至少約20%、至少約25%、至少約30%、至少約35%、至少約40%、至少約45%、至少約50%、至少約55%、至少約60%、至少約65%、至少約70%、至少約75%、至少約80%、至少約85%、至少約90%或至少約95%；

（v）相對於基線、安慰劑對照組及/或未經治療之患者，TL1A含量無增加或減少為至少約5%、至少約10%、至少約15%、至少約20%、至少約25%、至少約30%、至少約35%、至少約40%、至少約45%、至少約50%、至少約55%、至少約60%、至少約65%、至少約70%、至少約75%、至少約80%、至少約85%、至少約90%或至少約95%；

（w）相對於基線、安慰劑對照組及/或未經治療之患者，TNF-α含量無增加或減少為至少約5%、至少約10%、至少約15%、至少約20%、至少約25%、至少約30%、至少約35%、至少約40%、至少約45%、至少約50%、至少約55%、至少約60%、至少約65%、至少約70%、至少約75%、至少約80%、至少約85%、至少約90%或至少約95%；

（x）相對於基線、安慰劑對照組及/或未經治療之患者，IL-13含量無增加或減少為至少約5%、至少約10%、至少約15%、至少約20%、至少約25%、至少約30%、至少約35%、至少約40%、至少約45%、至少約50%、至少約55%、至少約60%、至少約65%、至少約70%、至少約75%、至少約80%、至少約85%、至少約90%或至少約95%；

（y）相對於基線、安慰劑對照組及/或未經治療之患者，IL-6含量無增加或減少為至少約5%、至少約10%、至少約15%、至少約20%、至少約25%、至少約30%、至少約35%、至少約40%、至少約45%、至少約50%、至少約55%、至少約60%、至少約65%、至少約70%、至少約75%、至少約80%、至少約85%、至少約90%或至少約95%；

（z）相對於基線、安慰劑對照組及/或未經治療之患者，IL-1β含量無增加或減少為至少約5%、至少約10%、至少約15%、至少約20%、至少約25%、至少約30%、至少約35%、至少約40%、至少約45%、至少約50%、至少約55%、至少約60%、至少約65%、至少約70%、至少約75%、至少約80%、至少約85%、至少約90%或至少約95%；

（aa）相對於基線、安慰劑對照組及/或未經治療之患者，膠原蛋白1型含量無增加或減少為至少約5%、至少約10%、至少約15%、至少約20%、至少約25%、至少約30%、至少約35%、至少約40%、至少約45%、至少約50%、至少約55%、至少約60%、至少約65%、至少約70%、至少約75%、至少約80%、至少約85%、至少約90%或至少約95%；

（bb）相對於基線、安慰劑對照組及/或未經治療之患者，TGF-β含量無增加或減少為至少約5%、至少約10%、至少約15%、至少約20%、至少約25%、至少約30%、至少約35%、至少約40%、至少約45%、至少約50%、至少約55%、至少約60%、至少約65%、至少約70%、至少約75%、至少約80%、至少約85%、至少約90%或至少約95%；

（cc）相對於基線、安慰劑對照組及/或未經治療之患者，α-SMA無增加或減少為至少約5%、至少約10%、至少約15%、至少約20%、至少約25%、至少約30%、至少約35%、至少約40%、至少約45%、至少約50%、至少約55%、至少約60%、至少約65%、至少約70%、至少約75%、至少約80%、至少約85%、至少約90%或至少約95%；

（dd）相對於基線、安慰劑對照組及/或未經治療之患者，TNRSF11A無增加或減少為至少約5%、至少約10%、至少約15%、至少約20%、至少約25%、至少約30%、至少約35%、至少約40%、至少約45%、至少約50%、至少約55%、至少約60%、至少約65%、至少約70%、至少約75%、至少約80%、至少約85%、至少約90%或至少約95%；

（ee）相對於基線、安慰劑對照組及/或未經治療之患者，PRSS2含量無增加或減少為至少約5%、至少約10%、至少約15%、至少約20%、至少約25%、至少約30%、至少約35%、至少約40%、至少約45%、至少約50%、至少約55%、至少約60%、至少約65%、至少約70%、至少約75%、至少約80%、至少約85%、至少約90%或至少約95%。

（ff）相對於基線、安慰劑對照組及/或未經治療之患者，AOC3含量無增加或減少為至少約5%、至少約10%、至少約15%、至少約20%、至少約25%、至少約30%、至少約35%、至少約40%、至少約45%、至少約50%、至少約55%、至少約60%、至少約65%、至少約70%、至少約75%、至少約80%、至少約85%、至少約90%或至少約95%；

（gg）相對於基線、安慰劑對照組及/或未經治療之患者，LILBR1含量無增加或減少為至少約5%、至少約10%、至少約15%、至少約20%、至少約25%、至少約30%、至少約35%、至少約40%、至少約45%、至少約50%、至少約55%、至少約60%、至少約65%、至少約70%、至少約75%、至少約80%、至少約85%、至少約90%或至少約95%；

（hh）相對於基線、安慰劑對照組及/或未經治療之患者，TR含量無增加或減少為至少約5%、至少約10%、至少約15%、至少約20%、至少約25%、至少約30%、至少約35%、至少約40%、至少約45%、至少約50%、至少約55%、至少約60%、至少約65%、至少約70%、至少約75%、至少約80%、至少約85%、至少約90%或至少約95%；

（ii）相對於基線、安慰劑對照組及/或未經治療之患者，PI3無增加或減少為至少約5%、至少約10%、至少約15%、至少約20%、至少約25%、至少約30%、至少約35%、至少約40%、至少約45%、至少約50%、至少約55%、至少約60%、至少約65%、至少約70%、至少約75%、至少約80%、至少約85%、至少約90%或至少約95%；

（jj）相對於基線、安慰劑對照組及/或未經治療之患者，SAA4含量無增加或減少為至少約5%、至少約10%、至少約15%、至少約20%、至少約25%、至少約30%、至少約35%、至少約40%、至少約45%、至少約50%、至少約55%、至少約60%、至少約65%、至少約70%、至少約75%、至少約80%、至少約85%、至少約90%或至少約95%；

（kk）相對於基線、安慰劑對照組及/或未經治療之患者，MCP-1含量無增加或減少為至少約5%、至少約10%、至少約15%、至少約20%、至少約25%、至少約30%、至少約35%、至少約40%、至少約45%、至少約50%、至少約55%、至少約60%、至少約65%、至少約70%、至少約75%、至少約80%、至少約85%、至少約90%或至少約95%；

（ll）相對於基線、安慰劑對照組及/或未經治療之患者，CCL16含量無增加或減少為至少約5%、至少約10%、至少約15%、至少約20%、至少約25%、至少約30%、至少約35%、至少約40%、至少約45%、至少約50%、至少約55%、至少約60%、至少約65%、至少約70%、至少約75%、至少約80%、至少約85%、至少約90%或至少約95%；

（mm）相對於基線、安慰劑對照組及/或未經治療之患者，TLT2含量無增加或減少為至少約5%、至少約10%、至少約15%、至少約20%、至少約25%、至少約30%、至少約35%、至少約40%、至少約45%、至少約50%、至少約55%、至少約60%、至少約65%、至少約70%、至少約75%、至少約80%、至少約85%、至少約90%或至少約95%；

（nn）相對於基線、安慰劑對照組及/或未經治療之患者，DPP4含量無增加或減少為至少約5%、至少約10%、至少約15%、至少約20%、至少約25%、至少約30%、至少約35%、至少約40%、至少約45%、至少約50%、至少約55%、至少約60%、至少約65%、至少約70%、至少約75%、至少約80%、至少約85%、至少約90%或至少約95%；

（oo）相對於基線、安慰劑對照組及/或未經治療之患者，TIMP-1含量無增加或減少為至少約5%、至少約10%、至少約15%、至少約20%、至少約25%、至少約30%、至少約35%、至少約40%、至少約45%、至少約50%、至少約55%、至少約60%、至少約65%、至少約70%、至少約75%、至少約80%、至少約85%、至少約90%或至少約95%；

（pp）相對於基線、安慰劑對照組及/或未經治療之患者，PAI-1含量無增加或減少為至少約5%、至少約10%、至少約15%、至少約20%、至少約25%、至少約30%、至少約35%、至少約40%、至少約45%、至少約50%、至少約55%、至少約60%、至少約65%、至少約70%、至少約75%、至少約80%、至少約85%、至少約90%或至少約95%；

（qq）相對於基線、安慰劑對照組及/或未經治療之患者，NFS無增加或減少為至少約5%、至少約10%、至少約15%、至少約20%、至少約25%、至少約30%、至少約35%、至少約40%、至少約45%、至少約50%、至少約55%、至少約60%、至少約65%、至少約70%、至少約75%、至少約80%、至少約85%、至少約90%或至少約95%；

（rr）相對於基線、安慰劑對照組及/或未經治療之患者，FIB-4含量無增加或減少為至少約5%、至少約10%、至少約15%、至少約20%、至少約25%、至少約30%、至少約35%、至少約40%、至少約45%、至少約50%、至少約55%、至少約60%、至少約65%、至少約70%、至少約75%、至少約80%、至少約85%、至少約90%或至少約95%；

（ss）相對於基線、安慰劑對照組及/或未經治療之患者，肝臟硬度無增加或減少為至少約5%、至少約10%、至少約15%、至少約20%、至少約25%、至少約30%、至少約35%、至少約40%、至少約45%、至少約50%、至少約55%、至少約60%、至少約65%、至少約70%、至少約75%、至少約80%、至少約85%、至少約90%或至少約95%；

（tt）相對於基線、安慰劑對照組及/或未經治療之患者，肝脂肪含量無增加或減少為至少約5%、至少約10%、至少約15%、至少約20%、至少約25%、至少約30%、至少約35%、至少約40%、至少約45%、至少約50%、至少約55%、至少約60%、至少約65%、至少約70%、至少約75%、至少約80%、至少約85%、至少約90%或至少約95%；

（uu）相對於基線、安慰劑對照組及/或未經治療之患者，甘油磷脂含量無減少或增加為至少約5%、至少約10%、至少約15%、至少約20%、至少約25%、至少約30%、至少約35%、至少約40%、至少約45%、至少約50%、至少約55%、至少約60%、至少約65%、至少約70%、至少約75%、至少約80%、至少約85%、至少約90%或至少約95%；

（vv）相對於基線、安慰劑對照組及/或未經治療之患者，血壓無增加或減少為至少約5%、至少約10%、至少約15%、至少約20%、至少約25%、至少約30%、至少約35%、至少約40%、至少約45%、至少約50%、至少約55%、至少約60%、至少約65%、至少約70%、至少約75%、至少約80%、至少約85%、至少約90%或至少約95%；

（ww）相對於基線、安慰劑對照組及/或未經治療之患者，ELF評分無增加或減少為至少約5%、至少約10%、至少約15%、至少約20%、至少約25%、至少約30%、至少約35%、至少約40%、至少約45%、至少約50%、至少約55%、至少約60%、至少約65%、至少約70%、至少約75%、至少約80%、至少約85%、至少約90%或至少約95%；

（zz）相對於基線、安慰劑對照組及/或未經治療之患者，肺及/或真皮纖維母細胞中之膠原蛋白產生評分無增加或減少為至少約5%、至少約10%、至少約15%、至少約20%、至少約25%、至少約30%、至少約35%、至少約40%、至少約45%、至少約50%、至少約55%、至少約60%、至少約65%、至少約70%、至少約75%、至少約80%、至少約85%、至少約90%或至少約95%；

（yy）相對於基線、安慰劑對照組及/或未經治療之患者，葡萄糖攝取無減少或增加為至少約5%、至少約10%、至少約15%、至少約20%、至少約25%、至少約30%、至少約35%、至少約40%、至少約45%、至少約50%、至少約55%、至少約60%、至少約65%、至少約70%、至少約75%、至少約80%、至少約85%、至少約90%或至少約95%；

（zz）相對於基線、安慰劑對照組及/或未經治療之患者，肺及/或真皮纖維母細胞存活率增加為至少約5%、至少約10%、至少約15%、至少約20%、至少約25%、至少約30%、至少約35%、至少約40%、至少約45%、至少約50%、至少約55%、至少約60%、至少約65%、至少約70%、至少約75%、至少約80%、至少約85%、至少約90%或至少約95%；

（ab）相對於基線、安慰劑對照組及/或未經治療之患者，IL-8含量評分無變化或減少為至少約5%、至少約10%、至少約15%、至少約20%、至少約25%、至少約30%、至少約35%、至少約40%、至少約45%、至少約50%、至少約55%、至少約60%、至少約65%、至少約70%、至少約75%、至少約80%、至少約85%、至少約90%或至少約95%；

（ac）相對於基線、安慰劑對照組及/或未經治療之患者，IL-23含量無變化或減少為至少約5%、至少約10%、至少約15%、至少約20%、至少約25%、至少約30%、至少約35%、至少約40%、至少約45%、至少約50%、至少約55%、至少約60%、至少約65%、至少約70%、至少約75%、至少約80%、至少約85%、至少約90%或至少約95%含量；及/或

（ad）相對於基線、安慰劑對照組及/或未經治療之患者，IL-11含量評分無變化或減少為至少約5%、至少約10%、至少約15%、至少約20%、至少約25%、至少約30%、至少約35%、至少約40%、至少約45%、至少約50%、至少約55%、至少約60%、至少約65%、至少約70%、至少約75%、至少約80%、至少約85%、至少約90%或至少約95%；

（ae）相對於基線、安慰劑對照組及/或未經治療之患者，IFNγ含量無變化或減少為至少約5%、至少約10%、至少約15%、至少約20%、至少約25%、至少約30%、至少約35%、至少約40%、至少約45%、至少約50%、至少約55%、至少約60%、至少約65%、至少約70%、至少約75%、至少約80%、至少約85%、至少約90%或至少約95%；

（af）相對於基線、安慰劑對照組及/或未經治療之患者，T及/或B細胞活化無變化或減少為至少約5%、至少約10%、至少約15%、至少約20%、至少約25%、至少約30%、至少約35%、至少約40%、至少約45%、至少約50%、至少約55%、至少約60%、至少約65%、至少約70%、至少約75%、至少約80%、至少約85%、至少約90%或至少約95%；

（ag）相對於基線、安慰劑對照組及/或未經治療之患者，趨化性無變化或減少為至少約5%、至少約10%、至少約15%、至少約20%、至少約25%、至少約30%、至少約35%、至少約40%、至少約45%、至少約50%、至少約55%、至少約60%、至少約65%、至少約70%、至少約75%、至少約80%、至少約85%、至少約90%或至少約95%；

（ah）相對於基線、安慰劑對照組及/或未經治療之患者，Bcl-2家族成員無變化或減少為至少約5%、至少約10%、至少約15%、至少約20%、至少約25%、至少約30%、至少約35%、至少約40%、至少約45%、至少約50%、至少約55%、至少約60%、至少約65%、至少約70%、至少約75%、至少約80%、至少約85%、至少約90%或至少約95%；

（ai）相對於基線、安慰劑對照組及/或未經治療之患者，凋亡蛋白酶之活化片段含量無變化或減少為至少約5%、至少約10%、至少約15%、至少約20%、至少約25%、至少約30%、至少約35%、至少約40%、至少約45%、至少約50%、至少約55%、至少約60%、至少約65%、至少約70%、至少約75%、至少約80%、至少約85%、至少約90%或至少約95%;

（aj）相對於基線、安慰劑對照組及/或未經治療之患者，裂解PARP-1含量無變化或減少為至少約5%、至少約10%、至少約15%、至少約20%、至少約25%、至少約30%、至少約35%、至少約40%、至少約45%、至少約50%、至少約55%、至少約60%、至少約65%、至少約70%、至少約75%、至少約80%、至少約85%、至少約90%或至少約95%；

（ak）相對於基線、安慰劑對照組及/或未經治療之患者，腰圍無變化或減少為至少約5%、至少約10%、至少約15%、至少約20%、至少約25%、至少約30%、至少約35%、至少約40%、至少約45%、至少約50%、至少約55%、至少約60%、至少約65%、至少約70%、至少約75%、至少約80%、至少約85%、至少約90%或至少約95%；

（al）相對於基線、安慰劑對照組及/或未經治療之患者，ARPI無變化或減少為至少約5%、至少約10%、至少約15%、至少約20%、至少約25%、至少約30%、至少約35%、至少約40%、至少約45%、至少約50%、至少約55%、至少約60%、至少約65%、至少約70%、至少約75%、至少約80%、至少約85%、至少約90%或至少約95%；

（am）相對於基線、安慰劑對照組及/或未經治療之患者，LIF評分無變化或減少為至少約5%、至少約10%、至少約15%、至少約20%、至少約25%、至少約30%、至少約35%、至少約40%、至少約45%、至少約50%、至少約55%、至少約60%、至少約65%、至少約70%、至少約75%、至少約80%、至少約85%、至少約90%或至少約95%；

（an）相對於基線、安慰劑對照組及/或未經治療之患者，Lok評分無變化或減少為至少約5%、至少約10%、至少約15%、至少約20%、至少約25%、至少約30%、至少約35%、至少約40%、至少約45%、至少約50%、至少約55%、至少約60%、至少約65%、至少約70%、至少約75%、至少約80%、至少約85%、至少約90%或至少約95%；

（ao）相對於基線、安慰劑對照組及/或未經治療之患者，纖維化評分無變化或減少為至少約5%、至少約10%、至少約15%、至少約20%、至少約25%、至少約30%、至少約35%、至少約40%、至少約45%、至少約50%、至少約55%、至少約60%、至少約65%、至少約70%、至少約75%、至少約80%、至少約85%、至少約90%或至少約95%；

（ap）相對於基線、安慰劑對照組及/或未經治療之患者，King評分無變化或減少為至少約5%、至少約10%、至少約15%、至少約20%、至少約25%、至少約30%、至少約35%、至少約40%、至少約45%、至少約50%、至少約55%、至少約60%、至少約65%、至少約70%、至少約75%、至少約80%、至少約85%、至少約90%或至少約95%；

（aq）相對於基線、安慰劑對照組及/或未經治療之患者，Bonacini評分無變化或減少為至少約5%、至少約10%、至少約15%、至少約20%、至少約25%、至少約30%、至少約35%、至少約40%、至少約45%、至少約50%、至少約55%、至少約60%、至少約65%、至少約70%、至少約75%、至少約80%、至少約85%、至少約90%或至少約95%；及/或

（ar）相對於基線、安慰劑對照組及/或未經治療之患者，TE評分無變化或減少為至少約5%、至少約10%、至少約15%、至少約20%、至少約25%、至少約30%、至少約35%、至少約40%、至少約45%、至少約50%、至少約55%、至少約60%、至少約65%、至少約70%、至少約75%、至少約80%、至少約85%、至少約90%或至少約95%；

（as）相對於基線、安慰劑對照組及/或未經治療之患者，血管黏附分子增加為至少約5%、至少約10%、至少約15%、至少約20%、至少約25%、至少約30%、至少約35%、至少約40%、至少約45%、至少約50%、至少約55%、至少約60%、至少約65%、至少約70%、至少約75%、至少約80%、至少約85%、至少約90%或至少約95%；

（at）相對於基線、安慰劑對照組及/或未經治療之患者，心血管風險蛋白質增加為至少約5%、至少約10%、至少約15%、至少約20%、至少約25%、至少約30%、至少約35%、至少約40%、至少約45%、至少約50%、至少約55%、至少約60%、至少約65%、至少約70%、至少約75%、至少約80%、至少約85%、至少約90%或至少約95%；

（au）相對於基線、安慰劑對照組及/或未經治療之患者，趨化介素增加為至少約5%、至少約10%、至少約15%、至少約20%、至少約25%、至少約30%、至少約35%、至少約40%、至少約45%、至少約50%、至少約55%、至少約60%、至少約65%、至少約70%、至少約75%、至少約80%、至少約85%、至少約90%或至少約95%；

（av）相對於基線、安慰劑對照組及/或未經治療之患者，腫瘤壞死因子受體超家族成員增加為至少約5%、至少約10%、至少約15%、至少約20%、至少約25%、至少約30%、至少約35%、至少約40%、至少約45%、至少約50%、至少約55%、至少約60%、至少約65%、至少約70%、至少約75%、至少約80%、至少約85%、至少約90%或至少約95%；

（aw）相對於基線、安慰劑對照組及/或未經治療之患者，紅血球計數無變化或增加為至少約5%、至少約10%、至少約15%、至少約20%、至少約25%、至少約30%、至少約35%、至少約40%、至少約45%、至少約50%、至少約55%、至少約60%、至少約65%、至少約70%、至少約75%、至少約80%、至少約85%、至少約90%或至少約95%；

（ax）相對於基線、安慰劑對照組及/或未經治療之患者，白血球計數無變化或增加為至少約5%、至少約10%、至少約15%、至少約20%、至少約25%、至少約30%、至少約35%、至少約40%、至少約45%、至少約50%、至少約55%、至少約60%、至少約65%、至少約70%、至少約75%、至少約80%、至少約85%、至少約90%或至少約95%；

（ay）相對於基線、安慰劑對照組及/或未經治療之患者，血小板計數無變化或增加為至少約5%、至少約10%、至少約15%、至少約20%、至少約25%、至少約30%、至少約35%、至少約40%、至少約45%、至少約50%、至少約55%、至少約60%、至少約65%、至少約70%、至少約75%、至少約80%、至少約85%、至少約90%或至少約95%；

（az）相對於基線、安慰劑對照組及/或未經治療之患者，凝血酶原時間無變化或增加為至少約5%、至少約10%、至少約15%、至少約20%、至少約25%、至少約30%、至少約35%、至少約40%、至少約45%、至少約50%、至少約55%、至少約60%、至少約65%、至少約70%、至少約75%、至少約80%、至少約85%、至少約90%或至少約95%；

（ba）相對於基線、安慰劑對照組及/或未經治療之患者，活化部分凝血活素時間無變化或增加為至少約5%、至少約10%、至少約15%、至少約20%、至少約25%、至少約30%、至少約35%、至少約40%、至少約45%、至少約50%、至少約55%、至少約60%、至少約65%、至少約70%、至少約75%、至少約80%、至少約85%、至少約90%或至少約95%；

（bc）相對於基線、安慰劑對照組及/或未經治療之患者，血紅蛋白產生無變化或增加為至少約5%、至少約10%、至少約15%、至少約20%、至少約25%、至少約30%、至少約35%、至少約40%、至少約45%、至少約50%、至少約55%、至少約60%、至少約65%、至少約70%、至少約75%、至少約80%、至少約85%、至少約90%或至少約95%；

（bd）相對於基線、安慰劑對照組及/或未經治療之患者，血紅蛋白四聚體之β血球蛋白鏈之合成無變化或增加為至少約5%、至少約10%、至少約15%、至少約20%、至少約25%、至少約30%、至少約35%、至少約40%、至少約45%、至少約50%、至少約55%、至少約60%、至少約65%、至少約70%、至少約75%、至少約80%、至少約85%、至少約90%或至少約95%；

（be）相對於基線、安慰劑對照組及/或未經治療之患者，紅血球溶血無變化或減少為至少約5%、至少約10%、至少約15%、至少約20%、至少約25%、至少約30%、至少約35%、至少約40%、至少約45%、至少約50%、至少約55%、至少約60%、至少約65%、至少約70%、至少約75%、至少約80%、至少約85%、至少約90%或至少約95%；

（bf）相對於基線、安慰劑對照組及/或未經治療之患者，呼吸短促無變化或減少為至少約5%、至少約10%、至少約15%、至少約20%、至少約25%、至少約30%、至少約35%、至少約40%、至少約45%、至少約50%、至少約55%、至少約60%、至少約65%、至少約70%、至少約75%、至少約80%、至少約85%、至少約90%或至少約95%；

（bg）相對於基線、安慰劑對照組及/或未經治療之患者，心跳速率無變化或減少為至少約5%、至少約10%、至少約15%、至少約20%、至少約25%、至少約30%、至少約35%、至少約40%、至少約45%、至少約50%、至少約55%、至少約60%、至少約65%、至少約70%、至少約75%、至少約80%、至少約85%、至少約90%或至少約95%；

（bh）相對於基線、安慰劑對照組及/或未經治療之患者，脾臟大小無變化或減少為至少約5%、至少約10%、至少約15%、至少約20%、至少約25%、至少約30%、至少約35%、至少約40%、至少約45%、至少約50%、至少約55%、至少約60%、至少約65%、至少約70%、至少約75%、至少約80%、至少約85%、至少約90%或至少約95%；

（bi）相對於基線、安慰劑對照組及/或未經治療之患者，肝大小無變化或減少為至少約5%、至少約10%、至少約15%、至少約20%、至少約25%、至少約30%、至少約35%、至少約40%、至少約45%、至少約50%、至少約55%、至少約60%、至少約65%、至少約70%、至少約75%、至少約80%、至少約85%、至少約90%或至少約95%；

（bj）相對於基線、安慰劑對照組及/或未經治療之患者，指炎無變化或減少為至少約5%、至少約10%、至少約15%、至少約20%、至少約25%、至少約30%、至少約35%、至少約40%、至少約45%、至少約50%、至少約55%、至少約60%、至少約65%、至少約70%、至少約75%、至少約80%、至少約85%、至少約90%或至少約95%；

（bk）相對於基線、安慰劑對照組及/或未經治療之患者，疼痛危機無變化或減少為至少約5%、至少約10%、至少約15%、至少約20%、至少約25%、至少約30%、至少約35%、至少約40%、至少約45%、至少約50%、至少約55%、至少約60%、至少約65%、至少約70%、至少約75%、至少約80%、至少約85%、至少約90%或至少約95%；

（bl）相對於基線、安慰劑對照組及/或未經治療之患者，異常血液凝塊發展無變化或減少為至少約5%、至少約10%、至少約15%、至少約20%、至少約25%、至少約30%、至少約35%、至少約40%、至少約45%、至少約50%、至少約55%、至少約60%、至少約65%、至少約70%、至少約75%、至少約80%、至少約85%、至少約90%或至少約95%；

（bm）相對於基線、安慰劑對照組及/或未經治療之患者，紅血球分佈無變化或減少為至少約5%、至少約10%、至少約15%、至少約20%、至少約25%、至少約30%、至少約35%、至少約40%、至少約45%、至少約50%、至少約55%、至少約60%、至少約65%、至少約70%、至少約75%、至少約80%、至少約85%、至少約90%或至少約95%；

（bn）相對於基線、安慰劑對照組及/或未經治療之患者，網狀紅血球計數無變化或減少為至少約5%、至少約10%、至少約15%、至少約20%、至少約25%、至少約30%、至少約35%、至少約40%、至少約45%、至少約50%、至少約55%、至少約60%、至少約65%、至少約70%、至少約75%、至少約80%、至少約85%、至少約90%或至少約95%；及/或

（bo）相對於基線、安慰劑對照組及/或未經治療之患者，纖維蛋白原濃度無變化或減少為至少約5%、至少約10%、至少約15%、至少約20%、至少約25%、至少約30%、至少約35%、至少約40%、至少約45%、至少約50%、至少約55%、至少約60%、至少約65%、至少約70%、至少約75%、至少約80%、至少約85%、至少約90%或至少約95%；

無需進一步描述，咸信一般技術者可藉由使用前述描述及以下說明性實例製得及利用本揭示案之藥劑且實踐所主張之方法。提供以下工作實例以促進本揭示案之實踐，且不應理解為以任何方式限制本發明之剩餘部分。實例實例1：單側輸尿管梗阻誘導之腎間質性纖維化

此研究之目標為檢查DS109（15-HETrE）及DS102（15-HEPE）對UUO誘導之腎間質性纖維化之作用。

圖1描繪自手術及治療至研究之第14天的研究設計。 1.1材料及方法

測試物質：此研究之測試物質為DS109（15-HETrE）及DS102（15-HEPE）。為了製備各物質之給藥溶液，首先稱取DS109，且隨後溶解於0.5%羥丙基甲基纖維素（HPMC）之媒劑中且在0.5% HPMC之媒劑中稀釋DS102。

UUO手術：在研究之第0天，在戊巴比妥鈉（pentobarbital sodium）麻醉下對小鼠進行UUO手術。首先將小鼠的毛髮剃光，且隨後將腹部切開以取出小鼠的左側輸尿管。將輸尿管在兩個點處用4-0耐綸縫合線接合。隨後用縫合線使小鼠的腹膜及皮膚閉合，且將小鼠轉移至乾淨籠中直至從麻醉恢復。假手術小鼠使其左輸尿管暴露，但不接合。

藥物投與：以10毫升（mL）/公斤（kg）之體積向小鼠經口投與DS109及DS102。

治療劑量：自研究之第0天至第13天每天一次以5、50及250毫克（mg）/Kg之3種劑量水準投與DS109。自研究之第0天至第13天每天一次以50及500 mg/kg之2種劑量水準投與DS102。

動物：七週齡雌性C57BL/6小鼠（亦即動物）獲自日本SLC公司（日本）且在可控條件下圈養並饋入正常飲食（CE-2；CLEA日本，日本）。在溫度（例如23±2℃）、濕度（例如45±10%）、光照（例如12小時人工光照及黑暗循環；8:00至20:00光照）及換氣之控制條件下，動物保持在無特定病原體（SPF）設施中。在實驗室中維持高壓以防止設施之污染。動物圈養在TPX籠（CLEA日本）中，每個籠具有最多4隻小鼠。使用滅菌Paper-Clean（日本SLC）鋪墊且一週替換一次。任意提供滅菌固體正常膳食，置放於籠頂上之金屬蓋子中。亦自裝備有橡膠塞及吸管之水瓶任意提供純水。水瓶一週替換一次，清潔且在高壓釜中滅菌並再使用。藉由耳孔鑑別小鼠且用特定標識碼標記各籠。

腎臟生物化學之量測：為了定量腎臟羥脯胺酸含量，冷凍之左腎臟樣品如下藉由鹼性酸水解方法處理：將腎臟樣品在65℃下溶解於2正（N）氫氧化鈉（NaOH）中且在121℃下高壓處理20分鐘。在121℃下用400 μL 6N鹽酸（HCl）使溶解樣品（400 μL）酸水解20分鐘，且用400 μL含有10 mg/mL活性碳之4 N NaOH中和。將AC緩衝液（例如2.2M乙酸/0.48M檸檬酸，400 μL）添加至樣品，隨後離心以收集上澄液。用連續稀釋之反式-4-羥基-脯胺酸（西格瑪-奧德里奇（Sigma-Aldrich），USA）以16 μg/mL起始，構建羥脯胺酸之標準曲線。將製備之樣品及標準物（例如各400 μL）與400 μL氯胺T溶液（和光純藥工業（Wako Pure Chemical Industry），日本）混合並在室溫下培育25分鐘。隨後將樣品與埃利希氏（Ehrlich）溶液（例如400 µL）混合且在65℃下加熱20分鐘以產生顏色。樣品在冰上冷卻且離心以移除沈澱物之後，各上澄液之光密度量測為560奈米（nm）。由羥脯胺酸標準曲線計算羥脯胺酸之濃度。腎臟樣品之蛋白濃度使用二辛可寧酸（bicinchoninic）（BCA）蛋白分析套組（賽默飛世爾科技（Thermo Fisher Scientific），USA）測定，且用於歸一化所計算之羥脯胺酸值。腎臟羥脯胺酸含量表示為微克（μg）/mg蛋白。

組織病理學分析：為使膠原蛋白沈積可視化，使用天狼星紅溶液（picro-Sirius red solution）（Waldeck，德國）染色腎臟切片。為了定量間質性纖維化區域，使用數位相機（例如DFC295；徠卡微系統（Leica Microsystem），德國）在200倍放大率下獲取皮質延髓區（corticomedullary region）中之明場影像，且使用ImageJ軟體（美國國立衛生研究院（National Institute of Health），USA）量測5個場/切片中之陽性面積。

定量RT-PCR：根據製造商的說明書，使用RNAiso（寶生物工程（Takara Bio），日本）自腎臟樣品提取總核糖核酸（RNA）。使用含有4.4微莫耳（mM）氯化鎂（MgCl₂ ）（羅氏（F. Hoffmann-La Roche），瑞士）、40 U RNase抑制劑（東洋紡（Toyobo），日本）、0.5 mM dNTP（普洛麥格（Promega），USA）、6.28 µM隨機六聚體（普洛麥格）、5×第一鏈緩衝液（5 x first strand buffer）（普洛麥格）、10 mM二硫蘇糖醇（英傑（Invitrogen），USA）及200 U MMLV-RT（英傑）於20 µL的最終體積中之反應混合物來反轉錄一µg RNA。在37℃下進行反應1小時，隨後在99℃下5分鐘。使用即時PCR DICE及TB Green^TM Premix Ex Taq^TM II（寶生物工程）進行即時PCR。為了計算相對微RNA（mRNA）表現量，使各基因（例如α-SMA、TIMP-1、TGF-β及膠原蛋白1型）之表現相對於參考基因36B4（基因符號：Rplp0）之表現歸一化。關於PCR-引子集及板佈局之資訊描述於表1及2中。

表1用於定量RT-PCR量測結果之PCR引子

SEQ ID NO.	基因	設置ID		序列
1 2	36B4	MA057856	正向反向	5'-TTCCAGGCTTTGGGCATCA-3' 5'-ATGTTCAGCATGTTCAGCAGTGTG-3'
3 4	α-SMA	MA057911	正向反向	5'-AAGAGCATCCGACACTGCTGAC-3' 5'-AGCACAGCCTGAATAGCCACATAC-3'
5 6	TIMP-1	MA098519	正向反向	5'-TGAGCCCTGCTCAGCAAAGA-3' 5'-GAGGACCTGATCCGTCCACAA-3'
7 8	TGF-β	MA030397	正向反向	5'-GTGTGGAGCAACATGTGGAACTCTA-3' 5'-TTGGTTCAGCCACTGCCGTA-3'
9 10	膠原蛋白1型	MA075477	正向反向	5'-CCAACAAGCATGTCTGGTTAGGAG-3' 5'-GCAATGCTGTTCTTGCAGTGGTA-3'
	36B4：核糖體蛋白，大，P0（Rplp0） α-SMA：肌動蛋白，α2，平滑肌，主動脈（Acta2） TIMP-1：金屬蛋白酶1之組織抑制劑（Timp1） TGF-β：轉型生長因子，β1（Tgfb1）膠原蛋白1型：膠原蛋白，I型，α2（Col1a2）

表2.用於定量RT-PCR量測結果之PCR板的詳情

板小鼠ID	1 101-308	2 401-608	3 701-708
α-SMA	板1-2	板2-2	板3-2
36B4	板1-1	板2-1	板3-1
TIMP-1	板1-3	板2-3	板3-2
36B4	板1-1	板2-1	板3-1
TGF-β	板1-4	板2-4	板3-3
36B4	板1-1	板2-1	板3-1
膠原蛋白1型	板1-5	板2-5	板3-3
36B4	板1-1	板2-1	板3-1

樣品收集：對於血清樣品，經由直接心臟穿刺在無抗凝血劑之情況下將非空腹血液收集於血清獨立管中，且在4℃下以3,500×g離心4分鐘。收集上澄液且儲存在-80℃下由於運送。對於腎臟樣品，收集左側腎臟且含量地切成2片。將左側腎臟之上方部分固定於波恩氏溶液（Bouin's solution）中且隨後包埋於石蠟中。將石蠟塊儲存於室溫下用於組織學分析。將左側腎臟之下部部分冠向切成2片。將左腎臟之前部部分在液氮中快速冷凍且儲存在-80℃下用於基因表現分析。將左腎臟之後部部分在液氮中快速冷凍且儲存在-80℃下用於腎臟生物化學。

統計測試：使用Bonferroni多重比較測試在GraphPad Prism 6（GraphPad軟體公司，USA）上執行統計分析。P值＜0.05視為具有統計意義。當單尾t測試返回P值＜0.1時，假定趨勢或傾向。結果以平均值±SD表示。 1.2實驗設計及治療

研究設計包括以下研究組： ● 第1組（假對照組）：八隻假手術小鼠在持續無任何治療之情況下直至處死。 ● 第2組（媒劑）：自第0天至第13天每天一次，以10 mL/kg之體積向八隻UUO小鼠經口投與媒劑[0.5% HPMC]。 ● 第3組（DS109低）：自第0天至第13天每天一次，以5 mg/kg之劑量向八隻UUO小鼠經口投與補充有DS109之媒劑，其。 ● 第4組（DS109中）：自第0天至第13天每天一次，以50 mg/kg之劑量向八隻UUO小鼠經口投與補充有DS109之媒劑。 ● 第5組（DS109高）：自第0天至第13天每天一次，以250 mg/kg之劑量向八隻UUO小鼠經口投與補充有DS109之媒劑。 ● 第6組（DS102低）：自第0天至第13天每天一次，以50 mg/kg之劑量向八隻UUO小鼠經口投與補充有DS102之媒劑。 ● 第7組（DS102高）：自第0天至第13天每天一次，以500 mg/kg之劑量向八隻UUO小鼠經口投與補充有DS102之媒劑。

表3概述研究期間第1-7組中之每一者的治療時程。

表3.治療時程之概述

組	小鼠編號	型號	測試物質	劑量（mg/kg）	體積（mL/kg）	方案	處死（天）
1	8	假	-	-	-	第0天-第13天	14
2	8	UUO	媒劑	-	10	PO，QD，第0天-第13天	14
3	8	UUO	DS109	5	10	PO，QD，第0天-第13天	14
4	8	UUO	DS109	50	10	PO，QD，第0天-第13天	14
5	8	UUO	DS109	250	10	PO，QD，第0天-第13天	14
6	8	UUO	DS102	50	10	PO，QD，第0天-第13天	14
7	8	UUO	DS102	500	10	PO，QD，第0天-第13天	14

動物監測及處死：每天監測小鼠之存活率、臨床體症及行為。在治療時段期間，在治療之前每天量測個別體重。在各投與之後約60分鐘觀察到小鼠毒性、瀕死及死亡之顯著臨床體症。在第14天在異氟醚麻醉（輝瑞公司（Pfizer Inc.））下藉由經由直接心臟穿刺放血來處死動物。 1.3結果

體重變化及一般考慮因素：圖2顯示所有動物之體重變化。在所有動物中，體重在手術之後降低，且在處理時段期間逐漸恢復。媒劑組之平均體重自第2天至第5天及自第10天至第11天顯著低於假對照組之平均體重。媒劑組與治療組之間在治療時段期間之任一天平均體重無顯著變化。在治療時段期間，所有組中不存在死亡的動物。在本發明研究中，動物中無一者顯示一般病況之惡化。

處死當天之體重及腎臟重量：圖3及表4顯示處死當天之動物的體重。在處死當天，在假對照組與媒劑組之間，平均體重無顯著差異。在處死當天，在媒劑組與治療組之間，平均體重無顯著差異。

表4.處死當天之體重

組	體重（g）	右腎臟重量（mg）	右腎臟重量與體重比率（%）	左腎臟重量（mg）	左腎臟重量與體重比率（%）
假對照組，（n=8）	19.2 ± 0.7	122 ± 8	0.64 ± 0.05	115 ± 14	0.60 ± 0.08
媒劑，（n=8）	18.9 ± 0.5	139 ± 15	0.73 ± 0.09	488 ± 150	2.56 ± 0.77
DS109低，（n=8）	19.1 ± 0.9	137 ± 7	0.71 ± 0.04	533 ± 138	2.79 ± 0.65
DS109中，（n=8）	18.6 ± 0.6	135 ± 6	0.73 ± 0.05	523 ± 91	2.83 ± 0.50
DS109高，（n=8）	18.6 ± 0.7	130 ± 13	0.70 ± 0.05	425 ± 105	2.26 ± 0.53
DS102低，（n=8）	18.8 ± 0.6	133 ± 10	0.70 ± 0.05	469 ± 60	2.49 ± 0.30
DS102高，（n=8）	18.7 ± 0.5	136 ± 6	0.71 ± 0.04	487 ± 108	2.61 ± 0.57

圖4A-4D及表4顯示在處死當天動物之腎臟重量及腎臟重量與體重比率。媒劑組顯示平均右腎臟重量相比於假對照組之顯著增加。然而，媒劑組與治療組之間的平均右腎臟重量無顯著差異。媒劑組亦顯示平均右腎臟重量與體重比率相比於假對照組之顯著增加。媒劑組與治療組之間的平均右腎臟重量與體重比率無顯著差異。媒劑組亦顯示平均左腎臟重量相比於假對照組之顯著增加。媒劑組與治療組之間的平均左腎臟重量無顯著差異。最後，媒劑組顯示平均左腎臟重量與體重比率相比於假對照組之顯著增加，但媒劑組與治療組之間的平均左腎臟重量與體重比率無顯著差異。

腎臟化學性質：圖5及表5顯示動物之腎臟羥脯胺酸含量。媒劑組顯示腎臟羥脯胺酸含量相比於假對照組之顯著增加。DS109低、DS109高、DS102低且DS102高的組顯示腎臟羥脯胺酸含量相比於媒劑組之顯著減少。媒劑組與DS109中組之間的腎臟羥脯胺酸含量無顯著差異。

表5.腎臟羥脯胺酸含量

組	腎臟羥脯胺酸（µg/mg總蛋白）
假對照組，（n=8）	3.02 ± 1.89
媒劑，（n=8）	16.67 ± 7.83
DS109低，（n=8）	9.94 ± 2.02
DS109中，（n=8）	13.94 ± 6.44
DS109高，（n=8）	8.30 ± 1.04
DS102低，（n=8）	8.47 ± 2.08
DS102高，（n=8）	8.59 ± 1.99

組織學分析：圖6A-6G及表6顯示天狼星紅染色且圖7顯示動物之纖維化區域。圖6A顯示天狼星紅染色腎臟切片之代表性顯微照片。媒劑組顯示纖維化區域（天狼星紅陽性面積）之百分比相比於假對照組的顯著增加。Bonferroni多重比較揭示，DS109中組中之纖維化區域相比於媒劑組傾向於降低。媒劑組與其他治療組之間的纖維化區域無顯著差異。Mann-Whitney U測試由於顯著離群值之存在而進行，且揭示DS109低、DS109中、DS109高、DS102低及DS102高的組之纖維化區域相比於媒劑組傾向於降低（p＜0.1）。

表6.動物之纖維化區域

組	天狼星紅陽性面積（%）	天狼星紅陽性面積（%）_中值
假對照組，（n=8）	0.63 ± 0.22	0.51 ± 0.15
媒劑，（n=8）	5.00 ± 1.37	4.55 ± 0.94
DS109低，（n=8）	4.23 ± 1.90	3.22 ± 1.47
DS109中，（n=8）	3.58 ± 1.04	3.28 ± 1.41
DS109高，（n=8）	4.71 ± 0.96	3.76 ± 0.81
DS102低，（n=8）	5.01 ± 3.11	4.19 ± 3.33
DS102高，（n=8）	4.01 ± 1.92	3.08 ± 1.16

基因表現分析：α-SMA、TIMP-1、TGF-β、膠原蛋白1型之基因表現分析顯示於圖8A-8D及表7中。

表7.基因表現分析

組	α-SMA	TIMP-1	TGF-β	膠原蛋白1型
假對照組，（n=8）	1.00 ± 0.18	1.00 ± 0.14	1.00 ± 0.09	1.00 ± 0.13
媒劑，（n=8）	3.82 ± 0.58	133.20 ± 26.86	3.88 ± 0.30	11.52 ± 2.15
DS109低，（n=8）	3.87 ± 0.82	153.60 ± 37.12	4.29 ± 0.93	10.76 ± 1.45
DS109中，（n=8）	4.61 ± 3.15	167.70 ± 122.60	6.01 ± 4.77	15.23 ± 11.52
DS109高，（n=8）	4.85 ± 1.22	180.90 ± 23.12	5.48 ± 0.36	13.88 ± 1.91
DS102低，（n=8）	3.74 ± 0.81	138.30 ± 30.39	4.31 ± 0.69	11.80 ± 1.78
DS102高，（n=8）	5.54 ± 1.54	124.80 ± 28.60	5.37 ± 0.76	14.09 ± 2.88

α-SMA：媒劑組顯示α-SMA mRNA表現量相比於假對照組之顯著增加。媒劑組與治療組之間的α-SMA mRNA表現量無顯著差異。

TIMP-1：媒劑組顯示TIMP-1 mRNA表現量相比於假對照組之顯著增加。媒劑組與治療組之間之TIMP-1 mRNA表現量無顯著差異。

TGF-β：媒劑組顯示TGF-β mRNA表現量相比於假對照組的顯著增加。媒劑組與治療組之間的TGF-β mRNA表現量無顯著差異。

膠原蛋白1型：媒劑組顯示膠原蛋白1型mRNA表現量相比於假對照組之顯著增加。媒劑組與治療組之間的膠原蛋白1型mRNA表現量無顯著差異。 1.4概述

如由天狼星紅染色及腎臟羥脯胺酸含量所顯示，在本發明研究中在媒劑組中建立腎纖維化。

DS109：用低劑量DS109治療顯示相比於媒劑組腎臟羥脯胺酸含量之顯著降低（p＜0.05）及纖維化區域之降低趨勢（p＜0.1）。用中劑量DS109治療顯示相比於媒劑組纖維化區域之降低趨勢（p＜0.1）。最後，用高劑量DS109治療顯示相比於媒劑組腎臟羥脯胺酸含量之顯著降低（p＜0.05）及纖維化區域之降低趨勢（p＜0.1）。

DS102∶用低劑量DS102治療顯示相比於媒劑組腎臟羥脯胺酸含量之顯著降低（p＜0.05）及纖維化區域之降低趨勢（p＜0.1）。用高劑量DS102治療顯示相比於媒劑組腎臟羥脯胺酸含量之顯著降低（p＜0.05）及纖維化區域之降低趨勢（p＜0.1）。

總之，此研究之結果表明DS109及DS102對腎纖維生成具有抑制作用，且作為發展成纖維化之慢性腎臟疾病的治療劑具有潛力。實例2：膽汁鬱積性肝病及/或肝臟纖維化膽管結紮（BDL）研究

此研究之目標為檢查DS012對BDL誘發之膽汁鬱積之作用。

圖9描繪自手術及治療至研究之第14天的研究設計。 1.1材料及方法

測試物質：此研究之測試物質為DS102。為了製備各物質之給藥溶液，將DS102稀釋於0.5%羥丙基甲基纖維素（HPMC）之媒劑中。

BDL手術：在研究之第0天，BDL手術在戊巴比妥（共立製藥（Kyoritsu Seiyaku），日本）麻醉下進行。首先將小鼠的毛髮剃光，將腹腔切開，且用7-0手術絲將總膽管結紮兩次。用縫合線使小鼠的腹膜及皮膚閉合，且將小鼠轉移至乾淨籠（例如靜置籠）中直至自麻醉恢復。假手術小鼠使其總膽管暴露但不結紮。

藥物投與：以10毫升（mL）/公斤（Kg）之體積經口投與DS102。

治療劑量：自研究第0天至第13天每天一次，以50、250及500毫克（mg）/Kg之3種劑量投與DS102。

動物：無病原體6週齡雄性C57BL/6J小鼠獲自日本SLC公司（日本）。在溫度（例如23±2℃）、濕度（例如45±10%）、光照（例如12小時人工光照及黑暗循環；8:00至20:00光照）及換氣之控制條件下，動物保持在無特定病原體（SPF）設施中。在實驗室中維持高壓以防止設施之污染。動物圈養在TPX籠（CLEA日本）中，每個籠具有最多4隻小鼠。使用滅菌Paper-Clean（日本SLC）鋪墊且一週替換一次。任意提供滅菌固體正常膳食，置放於籠頂上之金屬蓋子中。亦自裝備有橡膠塞及吸管之水瓶任意提供純水。水瓶一週替換一次，清潔且在高壓釜中滅菌並再使用。藉由耳孔鑑別小鼠且用特定標識碼標記各籠。

量測血清生物化學：為使膠原蛋白沈積可視化，使用天狼星紅溶液（Waldeck，德國）染色波恩氏固定肝臟切片。為了定量分析纖維化區域，使用數位相機（DFC295；徠卡，德國）在100倍放大率下獲取天狼星紅染色切片之明場影像，且使用ImageJ軟體（美國國立衛生研究院，USA）量測5個場/切片中之陽性面積。

組織學分析：為使膠原蛋白沈積可視化，使用天狼星紅溶液（Waldeck，德國）染色腎臟切片。為了定量間質性纖維化區域，使用數位相機（例如DFC295；徠卡微系統，德國）在200倍放大率下獲取皮質延髓區中之明場影像，且使用ImageJ軟體（美國國立衛生研究院，USA）量測5個場/切片中之陽性面積。

定量RT-PCR：根據製造商的說明書，使用RNAiso（寶生物工程，日本）自肝臟樣品提取總核糖核酸（RNA）。使用含有4.4 mM氯化鎂（MgCl₂ ）（羅氏，瑞士）、40 U RNase抑制劑（東洋紡，日本）、0.5 mM dNTP（普洛麥格，USA）、6.28 µM隨機六聚體（普洛麥格）、5×第一鏈緩衝液（普洛麥格）、10 mM二硫蘇糖醇（英傑，USA）及200 U MMLV-RT（英傑）於20 µL的最終體積中之反應混合物來反轉錄一µg RNA。在37℃下進行反應1小時，隨後在99℃下5分鐘。使用即時PCR DICE及TB Green^TM Premix Ex Taq^TM II（寶生物工程）進行即時PCR。為了計算相對mRNA表現量，使各基因（α-SMA、TIMP-1、TGF-β及膠原蛋白1型）之表現相對於參考基因36B4（基因符號：Rplp0）之表現歸一化。關於PCR-引子集及板佈局之資訊描述於表8及9中。

表8.用於定量RT-PCR量測結果之PCR引子

表9.用於定量RT-PCR量測結果之PCR板的詳情

樣品收集：對於血清樣品，經由直接心臟穿刺在無抗凝血劑之情況下將非空腹血液收集於血清獨立管中，且在4℃下以3,500×g離心4分鐘。收集上澄液且在-80℃下儲存用於生物化學（30 μL）及運送（所有剩餘物質）。對於肝臟樣品，收集左側葉且切成6片。將兩片左側葉固定於波恩氏溶液中且隨後包埋於石蠟中。在室溫下儲存樣品用於組織學分析。左側葉之其他2片包埋於O.C.T.化合物中且在液氮中快速冷凍。樣品儲存在-80℃下。將左側葉之剩餘片迅速冷凍於液氮中且儲存於-80℃下用於基因表現分析。將右內葉、左內葉、右葉及尾狀葉迅速冷凍於液氮中且儲存在-80℃下用於運送。

研究設計包括以下研究組： ● 第1組（假對照組）：八隻假手術小鼠在持續無任何治療之情況下直至處死。 ● 第2組（媒劑）：第0天至第13天每天一次，以10 mL/kg之體積向十五隻BDL操作的小鼠經口投與媒劑[0.5% HPMC]。 ● 第3組（DS102低）：第0天至第13天每天一次，以50 mg/kg之劑量向十五隻BDL操作的小鼠經口投與補充有DS102之媒劑。 ● 第4組（DS102中）：第0天至第13天每天一次，以250 mg/kg之劑量向十五隻BDL操作的小鼠經口投與補充有DS102之媒劑。 ● 第5組（DS102高）：第0天至第13天每天一次，以500 mg/kg之劑量向十五隻BDL操作的小鼠經口投與補充有DS102之媒劑。

表10概述研究期間第1-5組中之每一者的治療時程。

表10.治療時程之概述

組	小鼠編號	小鼠	測試物質	劑量（mg/kg）	體積（mL/kg）	方案	處死
1	8	假	-	-	-	-	第14天
2	15	BDL	媒劑	-	10	PO，QD，第0-13天	第14天
3	15	BDL	DS102	50	10	PO，QD，第0-13天	第14天
4	15	BDL	DS102	250	10	PO，QD，第0-13天	第14天
5	15	BDL	DS102	500	10	PO，QD，第0-13天	第14天

動物監測及處死：每天監測小鼠之存活率、臨床體症及行為。在治療時段期間，在治療之前每天量測個別體重。在各投與之後約60分鐘觀察到小鼠毒性、瀕死及死亡之顯著臨床體症。在BDL手術後第14天，在異氟醚麻醉（輝瑞公司）下藉由經由直接心臟穿刺放血來處死動物。 1.3結果

體重變化及一般考慮因素：圖10顯示所有動物之體重變化。除假對照組之外，所有組中之平均體重在研究時段期間逐漸減少。媒劑組之平均體重自第2天至第14天顯著低於假對照組之平均體重。媒劑組與DS102治療組之間在研究時段期間之任一天平均體重無顯著變化。

在治療時段期間，在達到第14天之前發現死亡之小鼠如下：在媒劑組中發現，15隻小鼠中有三隻死亡；在DS102低、DS102中及DS102高的組中發現，15隻小鼠中有七隻死亡。在此模型中，預期死亡百分比僅歸因於疾病誘導且所觀測之死亡率與歷史資料一致。

處死當天之體重及肝臟重量：圖11及表11顯示處死當天之動物之體重。媒劑組顯示在處死當天平均體重相比於假對照組之顯著降低。在媒劑組與DS102治療組之間，在處死當天平均體重無顯著差異。

表11.處死當天之體重

組	體重（g）	肝臟重量（mg）	肝臟重量與體重比率（%）
假對照組，（n=8）	23.1 ± 0.7	1132 ± 90	4.9 ± 0.4
媒劑，（n=12）	16.8 ± 1.8	1438 ± 180	8.7 ± 1.4
DS102低，（n=8）	17.4 ± 2.9	1392 ± 328	8.3 ± 2.3
DS102中，（n=8）	17.0 ± 2.4	1513 ± 182	9.0 ± 1.2
DS102高，（n=8）	16.4 ± 1.6	1231 ± 255	7.6 ± 1.5

圖12A及12B以及表11顯示處死當天之動物之肝臟重量及肝臟重量與體重比率。媒劑組顯示平均肝臟重量相比於假對照組之顯著增加。DS102高組之平均肝臟重量相比於媒劑組傾向於降低。媒劑組與其他治療組之間平均肝臟重量無顯著差異。媒劑組顯示平均肝臟重量與體重比率相比於假對照組之顯著增加。DS102高組之平均肝臟重量與體重比率相比於媒劑組傾向於降低。媒劑組與其他治療組之間平均肝臟重量與體重比率無顯著差異。

生物化學：圖13及表12顯示動物之血清轉胺酶（ALT）。媒劑組顯示血清ALT含量相比於假對照組之顯著增加。媒劑組與DS102治療組之間血清ALT含量無顯著差異。然而，根據此模型之歷史資料，已知ALT含量在未經治療之情況下在第14天減少。因而，此可影響檢測群組之間的差異之能力。

表12生物化學

組	血清ALT（U/L）	血清總膽紅素（mg/dL）
假對照組，（n=8）	22 ± 2	0.4 ± 0.1
媒劑，（n=12）	335 ± 185	24.9 ± 9.6
DS102低，（n=8）	402 ± 112	26.8 ± 6.9
DS102中，（n=8）	351 ± 155	23.5 ± 9.8
DS102高，（n=8）	383 ± 147	26.2 ± 6.1

圖14及表12顯示動物之血清總膽紅素。媒劑組顯示血清總膽紅素含量相比於假對照組之顯著增加。媒劑組與DS102治療組之間血清總膽紅素含量無顯著差異。

組織學分析：圖15A-14E及表13顯示天狼星紅染色且圖16顯示動物之纖維化區域。圖14A呈現代表性的天狼星紅染色肝臟切片之顯微照片。相比於假對照組，來自媒劑組之肝臟切片顯示在肝小葉之門靜脈區域中之膠原蛋白沈積及PV-CV或PV-PV橋連纖維化增加。媒劑組顯示纖維化區域（天狼星紅陽性面積）相比於假對照組的顯著增加。DS102中組顯示纖維化區域相比於媒劑組之顯著減少。相比於媒劑組，DS102高組中之纖維化區域傾向於減少。媒劑組與DS102低組之間的纖維化區域無顯著差異。

表13.組織學分析

組	天狼星紅陽性面積（%）
假對照組，（n=8）	0.46 ± 0.25
媒劑，（n=12）	1.93 ± 0.67
DS102低，（n=8）	1.70 ± 0.63
DS102中，（n=8）	1.06 ± 0.48
DS102高，（n=8）	1.42 ± 0.60

基因表現分析：α-SMA、TIMP-1、TGF-β及膠原蛋白1型之基因表現分析顯示於圖17A-17D及表14中。

表14.基因表現分析

組	α-SMA	TIMP-1	TGF-β	膠原蛋白1型
假對照組，（n=8）	1.00 ± 0.24	1.00 ± 0.82	1.00 ± 0.08	1.00 ± 0.24
媒劑，（n=12）	2.98 ± 2.16	33.09 ± 13.75	1.65 ± 0.44	4.77 ± 2.53
DS102低，（n=8）	3.21 ± 1.67	43.82 ± 26.19	1.48 ± 0.48	4.94 ± 2.76
DS102中，（n=8）	2.66 ± 1.33	30.65 ± 16.80	1.50 ± 0.44	4.21 ± 1.90
DS102高，（n=8）	1.42 ± 0.75	16.09 ± 10.16	1.00 ± 0.23	2.51 ± 1.39

α-SMA：媒劑組顯示α-SMA mRNA表現量相比於假對照組之顯著增加。相比於媒劑組，DS102高組中之α-SMA mRNA表現量傾向於減少。媒劑組與DS102治療組之間的α-SMA mRNA表現量無顯著差異。

TIMP-1：媒劑組顯示TIMP-1 mRNA表現量相比於假對照組之顯著增加。相比於媒劑組，DS102高組中之TIMP-1 mRNA表現量傾向於減少。媒劑組與DS102治療組之間的TIMP-1 mRNA表現量無顯著差異。

TGF-β：媒劑組顯示TGF-β mRNA表現量相比於假對照組的顯著增加。DS102高組顯示TGF-β mRNA表現量相比於媒劑組之顯著減少。媒劑組與DS102治療組之間的TGF-β mRNA表現量無顯著差異。

膠原蛋白1型：媒劑組顯示膠原蛋白1型mRNA表現量相比於假對照組的顯著增加。相比於媒劑組，DS102高組中之膠原蛋白1型mRNA表現量傾向於減少。媒劑組與DS102治療組之間的膠原蛋白1型mRNA表現量無顯著差異。 1.4概述

在此研究中，與假對照組相比，媒劑組中之生物化學參數（例如ALT及總膽紅素）、組織學膠原蛋白沈積（例如纖維化區域）及基因表現量（例如α-SMA、TIMP-1、TGF-β、膠原蛋白1型）顯著增加。此等結果表明膽汁鬱積及肝纖維化在媒劑組中建立。

用中劑量DS102治療顯示相比於媒劑組纖維化區域之顯著減少（p＜0.05）。用高劑量DS102治療顯示相比於媒劑組，TGF-β mRNA表現量之顯著減少（p＜0.05），且顯示纖維化區域、肝臟重量、肝臟重量與體重比率、α-SMA、TIMP-1及膠原蛋白1型mRNA表現量之減少趨勢趨於顯著（p＜0.01）。此等結果表明DS102抑制肝臟中多種促纖維化細胞介素之產生，對肝纖維化具有抑制作用且作為用於膽汁鬱積性肝病的治療劑具有潛力。實例3：DS102對TGF-β受體、信號傳導及誘導性纖維化蛋白之作用

此研究之目的為檢查15-HEPE及15-HEPE EE對TGF-β受體、TGF-β誘導之胞內信號傳導及促纖維化上皮間質轉化蛋白之表現的作用。 1.1材料及方法

細胞毒性測試：在不同肝臟（肝瘤）細胞株中測試15-HEPE游離酸及乙酯之細胞毒性以理解測試系統中之濃度範圍。

轉錄活性：在投與15-HEPE之後進行啟動子（螢光素酶）分析以量測TGFβ-誘導之轉錄活化。

蔗糖梯度超速離心及共焦顯微鏡用於識別15-HEPE誘導之TGF-β受體因蔗糖發生之微結構域易位。在Mv1Lu細胞之質膜（貂肺上皮細胞）（其在37℃下用100 μM 15-HEPE及相同體積DMSO（二甲亞碸）處理持續0、1、4及24小時）中進行TGF-β受體之蔗糖密度梯度分析，且使來自此等經處理細胞之細胞溶解物經受蔗糖密度梯度超速離心。蔗糖梯度級分接著藉由西方墨點分析，使用抗TβR-I（I型TGF-β受體）、抗TβR-II（II型TGF-β受體）、抗TβR-III（III型TGF-β受體，β聚糖）、抗EGFR（表皮生長因子受體）及抗窖蛋白-1抗體進行分析。評定未經處理細胞或經15-HEPE處理之細胞之質膜中之TβR-I、TβR-II、TβR-III、EGFR及窖蛋白-1之脂膜筏/穴樣內陷（caveolae）及非脂膜筏微結構域定位，以測定15-HEPE對TGF-β受體之膜微結構域定位之作用。 1.2結果

測定15-HEPE對TGF-β誘導之信號傳導及細胞反應之作用。為測試15-HEPE對TGF-β誘導之信號傳導之作用，測試15-HEPE調節TGF-β刺激之Smad2磷酸化及核易位之活性，此兩者均為引起TGF-β誘導之細胞反應的關鍵信號傳導事件。TGF-β之一個重要生物活性為負責上皮-間質轉化（EMT）之基因之轉錄活化，其為傷口癒合、組織纖維化及癌症進展中之關鍵事件。評定15-HEPE對HepG2及LXR細胞中之TGF-β誘導之上皮間質轉化相關蛋白（諸如纖維連接蛋白、PAI-1及N-鈣黏蛋白等）表現的作用。在含有0.1% FBS之DMEM中在劑量遞增之15-HEPE階段II處理HepG2細胞（人類肝瘤細胞株）1小時，且在存在或不存在200皮莫耳（pM）TGF-β之情況下持續刺激48小時。

15-HEPE直接抑制TGF-β信號傳導，如圖18A及18B中所顯示。特定言之，圖18A顯示，15-HEPE誘導II型TGF-β受體之降解，且阻斷TGF-β誘導之上皮間質轉化（EMT）（亦即促纖維化）蛋白產生。在含有0.1% FBS之DMEM中在劑量遞增之15-HEPE階段II處理HepG2細胞（人類肝瘤細胞株）1小時，且在存在或不存在200皮莫耳（pM）TGF-β之情況下持續刺激48小時。圖18A中所顯示之兩個圖係在相同實驗條件下運作之兩個單獨實驗。來自此等獨立實驗之結果表明，15-HEPE阻斷TGF-β誘導之EMT蛋白產生，且誘導II型TGF-β受體之降解。圖18A亦顯示15-HEPE對纖維蛋白溶酶原活化劑抑制劑-1（PA-1）（一種由TGF-β誘導且與增加之心血管風險相關之蛋白）的作用。圖18B顯示15-HEPE抑制肝臟星狀細胞中之TGF-β刺激之胞內信號傳導（例如SMAD2/3磷酸化）。圖18B中進行之實驗包括用遞增濃度之0μM至100μM DS102預處理LX2細胞（人類肝臟星狀細胞）24小時，隨後TGF-β刺激30分鐘。實驗之結果表明，15-HEPE抑制TGF-β刺激。

在貂肺上皮細胞（Mv1Lu細胞）之質膜（其在37℃下用100 μM 15-HEPE及相同體積二甲亞碸（DMSO）處理持續0、1、4及24小時）中進行TGF-β受體之15-HEPE蔗糖密度梯度分析，且使來自此等經處理細胞之細胞溶解物經受蔗糖密度梯度超速離心。蔗糖梯度級分接著藉由西方墨點分析，使用抗TβR-I（I型TGF-β受體-圖18C）、抗TβR-II（II型TGF-β受體-圖18D）、抗TβR-III（III型TGF-β受體，β聚糖-圖18E）、抗EGFR（表皮生長因子受體-圖18F）以及抗窖蛋白-1抗體進行分析（圖18G）。級分4至5含有脂膜筏/穴樣內陷，而級分7-10為非脂膜筏級分。用15-HEPE處理不影響TβR-I蛋白之豐度，但在24小時處理時誘導TβR-I至脂膜筏之易位（圖18C）。星形（★）指示相比於對照組之豐度，15-HEPE提高了級分中TβR-I之豐度（24小時），且處理持續時間更短（圖18C）。15-HEPE在1至4小時內誘導TβR-II易位且進一步在24小時處理時誘導降解（圖18D）。三角形（▼）指示相比於對照細胞，級分中之TβR-II之易位及降低之豐度（圖18D）。在圖18E、18F及18G中，15-HEPE不改變TβR-III、EGFR及窖蛋白-1之定位及豐度。 1.3概述

因此，綜合而言，此等結果證實游離酸或乙酯形式之15-HEPE誘導II型TGF-β受體之易位及降解，阻斷TGF-β誘導之促纖維化蛋白產生，且抑制肝臟星狀細胞中之TGF-β誘導之胞內信號傳導（SMAD2/3）。因此，15-HEPE及15-HEPE EE可直接抑制TGF-β信號傳導，結果其支持15-HEPE及15-HEPE EE治療多種纖維化疾病（包括非酒精性脂肪變性肝炎（NASH）、其他纖維化疾病、心血管代謝疾病以及多種癌症適應症）之治療潛力。實例4：在NAFLD患者中經口投與DS102之功效

研究目標為評定經口投與之DS102膠囊相對於安慰劑在治療患有非酒精性脂肪肝病（NAFLD）的成人患者中之安全性及功效。 1.1研究終點

主要終點：此研究之主要終點包括投與DS102之功效以及安全性。基於血清丙胺酸轉胺酶（ALT）自基線至第16週之變化及藉由自基線至第16週之瞬時彈性成像量測之肝臟硬度之變化評估功效。根據各治療組中導致處理中斷之處理發生的不良事件（TEAE）之數目評估安全性。

次要終點：此研究之次要終點包括以下中之任一者之變化：自基線至第2週、第4週、第8週及第12週之血清ALT；自基線至第2週、第4週、第8週、第12週及第16週之天門冬胺酸轉胺酶（AST）；自基線至第2週、第4週、第8週、第12週及第16週之AST:ALT比率；自基線至第16週之纖維化-4（FIB-4）指數；自基線至第16週之NAFLD纖維化評分（NFS）；藉由自基線至第16週之受控減弱參數（CAP）量測之肝脂肪變化；自基線至第16週之增強肝臟纖維化（ELF）評分；及自基線至第2週、第4週、第8週、第12週及第16週之恆穩模型評定胰島素抗性（HOMA-IR）及脂肪組織胰島素抗性（脂肪-IR）。

探索性分析：探測性分析包括脂質及代謝參數之分析，該等參數包括總膽固醇、三酸甘油酯、極低密度脂蛋白膽固醇（VLDL-C）、低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C）、高密度脂蛋白膽固醇（HDL-C）、非高密度脂蛋白膽固醇（非HDL-C）、殘粒樣膽固醇（RLP-C）、空腹葡萄糖、胰島素、游離脂肪酸及血紅蛋白A1C（HbA1C）。額外探索性分析包括高通量脂質組學及蛋白質體學。 1.2研究設計

此為隨機、安慰劑對照、雙盲、平行組、多中心探索性階段IIa研究，以研究18至75歲之NAFLD患者中經口投與之DS102膠囊的安全性及功效，以及DS102及安慰劑之兩個劑量之間的劑量-反應關係。在此研究中研究三組平行的經確認患有NAFLD之患者，以在16週治療時段內比較兩個不同劑量之DS102與安慰劑。研究計劃包括96位可評估患者，每一治療組隨機分配32位患者。

該研究由28天之篩選時段、16週治療時段及4週隨訪時段組成。在篩選訪視時，使用篩選檢查評估患者。滿足納入標準且不滿足排除標準之患者入選。

圖19中提供研究之總體時間範圍之示意圖。一旦患者入選該研究，則限制其使用NAFLD之任何其他治療。視為患者必需的且在研究者看來不干擾安全性及功效評估之任何藥物（例如處方以及非處方（OTC）藥物）或治療性干預得以繼續，除非其包括於下文提供之『伴隨藥物』的清單中。

在比較性治療時段開始之前，患者返回至現場以便基線評定其疾病，且符合條件的患者以1:1:1隨機分組隨機分配至三個平行組治療方案中之一者： ● 治療組A：2×安慰劑500 mg膠囊，一天兩次（每日4個膠囊）經口投與，持續16週。 ● 治療組B：1×DS102 500 mg膠囊及1×安慰劑500 mg膠囊，一天兩次（每日4個膠囊）經口投與，持續16週。 ● 治療組C：2×DS102 500 mg膠囊，一天兩次（每日4個膠囊）經口投與，持續16週。

為維持雙盲條件，DS102膠囊及安慰劑膠囊之外觀相同。 1.3患者及篩選

為了參與此研究，患者需要滿足所有以下納入標準且必須不滿足以下排除標準中之任一者。在篩選訪視（訪視1）時且在治療/基線訪視（訪視2）開始時檢驗納入及排除標準。

此研究之納入標準如下： ● 在無任何繼發性病因存在下，藉由成像或組織學上肝脂肪變性之存在診斷患有NAFLD之患者。 ● 在篩選期間在間隔7天或更多天之兩個時刻下具有ALT≥1.5 ULN及＜5 ULN之患者。 ● 在篩選3個月內具有顯示NASH及/或≥F1纖維化或NFS≥-1.455或Fib-4≥1.3或Fibroscan≥8 kPa之歷史肝臟活檢體之患者。 ● 身體質量指數（BMI）在25.0與40.0 kg/m² 之間的患者。在研究中允許具有肥胖控制或糖尿病控制病史之患者。 ● 研究前臨床實驗室研究結果在研究者看來不干擾其參與該研究之患者。 ● 年齡在18歲與75歲之間的患者。 ● 需要女性患者及具有潛在生育能力之女性伴侶的男性患者使用適當避孕措施或在研究期間具有絕育伴侶。適當避孕措施定義為：全身性激素避孕藥；子宮內避孕器或避孕方法以及殺精子劑；或與同意性禁慾，定義為患者在與研究治療相關之整個風險時段期間，避免進行異性性交且符合其較佳及常見生活方式。在基線之前，需要激素避孕藥為穩定劑量持續至少一個月。 ● 能夠與研究者很好地溝通，理解且遵從研究之要求且理解及簽署書面知情同意書之患者。

此研究之排除標準如下： ● 入選之前3個月內具有不穩定代謝病況（諸如體重變化＞5%）之患者。 ● 具有胃繞道手術、原位肝移植（OLT）或列為OLT之醫療/手術病史之患者。 ● 2型糖尿病不受控制，亦即在篩選時HbA1c≥9%（75 mmol/mol）之患者。 ● 如藉由以下中之一或多者證明患有失代償或嚴重肝病的患者：確認肝硬化或疑似肝硬化、食道靜脈曲張、腹水、疑似門靜脈高血壓、在篩選60天內因肝病而住院、膽紅素≥2×ULN或者ALT或AST≥5×ULN。若所結合膽紅素≤1.5×ULN，則患有捷倍耳氏症候群（Gilbert's syndrome）之患者符合條件。 ● 患有具有活動性或需要醫學療法之發炎性腸病之患者。 ● 患有診斷或疑似自體免疫疾病，諸如全身性紅斑性狼瘡症（SLE）及/或類風濕性關節炎（RA）之患者。 ● 具有除治癒性治療之皮膚癌（基底細胞或鱗狀細胞癌）外之活動性非肝臟惡性病病史或患有該等活動性非肝臟惡性病的患者。 ● 患有除肝病外之顯著全身性或重大疾病，包括冠狀動脈疾病、腦血管疾病、肺病、腎機能不全、嚴重精神疾病、呼吸道或高血壓疾病以及糖尿病及關節炎之患者，在研究者看來，該等疾病阻止患者參與且完成研究。 ● 排除需要抗糖尿病治療（包括胰島素敏感劑）及/或降低脂質之治療且在篩選之前持續至少3個月不穩定給藥之患者。若患者依賴胰島素，則應在篩選之前至少3個月開始此治療，然而准許劑量變化。 ● 已知對研究治療之任何成分具有過敏反應的患者。 ● 在篩選時對人類免疫缺乏病毒（HIV）抗體、B型肝炎表面抗原或C型肝炎抗體具有陽性測試之患者。 ● 患有諸如藥物誘導、自體免疫性肝炎、原發性膽汁性膽管炎（PBC）、原發性硬化性膽管炎（PSC）、血色素沉著症、α-1抗胰蛋白酶（A1AT）缺乏症或威爾森氏病（Wilson’s disease）之其他病源學之肝病的患者。 ● 在研究者看來，具有顯著藥物/溶劑濫用史之患者。 ● 在研究者看來具有酒精濫用史，或飲酒量超過每週21個單位（男性）或每週14個單位（女性）之患者，藉此一個單位由10 ml或8 mg純酒精組成。 ● 在基線之前4週使用富含Ω-3或Ω-6脂肪酸之膳食補充品的患者。 ● 在研究治療之第一天投與之前3個月內已參與使用研究性藥物之任何其他臨床研究的患者。 ● 懷孕、計劃懷孕、哺乳及/或不願意在試驗期間使用適當避孕措施的患者。 ● 在研究者看來不適合於參與研究之患者。 1.4研究行為

在研究期間，在篩選訪視之後安排十次至診所之訪視：一次在比較性治療時段/基線開始時（第0天/訪視2）且八次在比較性治療時段內（第2週/訪視3、第4週/訪視4、第6週/訪視5、第8週/訪視6、第10週/訪視7、第12週/訪視8、第14週/訪視9、第16週/訪視10）。若患者未完成該研究，在訪視10之後四週或在進入最終訪視之後兩週進行最終安全性隨訪（訪視11）。表17描述用於研究之臨床訪視。

表17.用於研究之臨床問診之研究流程圖

	篩選 / 訪視 1	基線 / 訪視 2	訪視 3/ 第 2 週	訪視 4/ 第 4 週	訪視 5/ 第 6 週	訪視 6/ 第 8 週	訪視 7/ 第 10 週	訪視 8/ 第 12 週	訪視 9/ 第 14 週	EOT/ 訪視 10/ 第 16 週	隨訪 / 訪視 11/ 第 20 週
研究程序	第 - 28 至 -1 天	第 0 天	第 14 天	第 28 天	第 42 天	第 56 天	第 70 天	第 84 天	第 98 天	第 112 天	第 140 天
訪視窗口			+/-2天	+/-2天	+/-2天	+/-2天	+/-2天	+/-2天	+/-2天	+/-2天	+/-4天
知情同意書	X
納入排除	X	X
人口統計	X
病史	X	X
身體檢查	X	X	X	X		X		X		X	X
12-導聯ECG（12-lead ECG）	X	X								X
血漿PK樣品¹		X	X	X		X		X		X	X
生命體徵	X	X	X	X		X		X		X	X
臨床實驗室測試²	X	X		X		X		X		X	X
脂質概況³		X				X				X
尿分析		X								X
病毒學	X
妊娠測試⁴	X	X		X		X		X		X	X
ALT，AST⁵	XX	X	X	X		X		X		X	X
HOMA-IR/脂肪-IR		X	X	X		X		X		X	X
ELF		X								X
肝臟硬度及CAP		X								X
FIB-4		X								X
NFS[包括BMI]		X								X
生物標記物血液樣品		X				X				X	X
探索性血液樣品		X								X
患者隨機分組		X
IMP/安慰劑分配		X	X	X	X	X	X	X	X
研究藥物/安慰劑投與		X--------------------------------------------------------------------------------------------------------------------X
IMP比重/日記卡審查		X	X	X	X	X	X	X	X	X
AE評定		X---------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------X
伴隨藥物評定	X	X-----------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------X
[1]僅藥物動力學槽。在給藥前獲取樣品。 [2]包括生物化學、血液學及凝血測試。此空腹服用（最少8小時）。 [3]空腹服用脂質概況（最少8小時）。 [4]僅具有潛在生育能力之女性患者。 [5]將在篩選間隔7天或更多天期間的兩個時刻評定ALT。

篩選訪視（訪視1）：在篩選中訪視以下

篩選訪視（訪視1）：一旦獲得知情同意，就為患者分配專利篩選號。理想情況下，患者應禁食。進行以下篩選評定/樣品收集：檢驗納入/排除標準；人口統計資料；病史；身體檢查；12-導聯心電圖（ECG）；生命體徵（血壓、心跳速率及體溫）；臨床實驗室安全性測試（血液學、血清生物化學及凝血測試）之樣品；病毒學；妊娠測試（對於具有潛在生育能力之女性患者）；ALT、AST測試（在篩選期間的兩個時刻所量測之ALT）；以及伴隨藥物評定。當患者由於不良事件（AE），難以遵從該等研究方案要求或其疾病病況之顯著變化而需要在所安排訪視日期之間進行訪視時發生不定期訪視。遵循醫學上必需之所有程序。若合格，則在離開診所之前，指示患者在下一次訪視之前不吃任何早餐，以允許最少8小時之空腹時段。

治療時段∶篩選訪視成功完成後，患者開始比較性治療時段（16週）。在比較性治療時段開始時，在確認持續合格之後，患者隨機分配至三種治療方案中之一者。患者在整個比較性治療時段每天兩次服用DS102膠囊或安慰劑膠囊之所指定研究藥品（IMP）。各自投與之IMP記錄於患者日記卡中。指示患者在上午及晚上在進食前或在進食後服用DS102（除了臨床訪視3、4、6、8及10之早上之外，當時指示患者在訪視之前避免服用DS102且在臨床訪視之後儘快服用DS102）。在基線（訪視2）、第2週（訪視3）、第4週（訪視）4、第8週（訪視6）、第12週（訪視8）、第16週（訪視10）及第20週（訪視11）開始時，詢問患者是否在訪視之前空腹最少8個小時。若情況並非如此，則記錄空腹時段之持續時間，且重新指示患者關於空腹時段之持續時間。隨後向患者提供清淡的早餐（例如茶或橙汁及土司）。在基線（訪視2）、第8週（訪視8）及第16週（訪視10）時，在患者接受清淡的早餐之前進行血液取樣評定。當患者由於不良事件（AE），難以遵從該等研究方案要求或其疾病病況之顯著變化而需要在所安排訪視日期之間進行訪視時發生不定期訪視。遵循醫學上必需之所有程序。提前中止研究的患者在患者退出後儘快安排進行訪視10之研究程序，使得可記錄所有研究相關資訊。由研究者判斷，在進行試驗期間之任何時間進行尿液DOA及酒精呼吸測試。

基線（訪視2）：患者在訪視2時進入研究現場。血液取樣為進行之第一評定。在血液取樣之後，進行以下評定：檢驗納入/排除標準；病史；身體檢查；12-導聯ECG；藥物動力學取樣；生命體徵（血壓、心率及體溫）；臨床實驗室安全性測試（血液學、血清生物化學及凝血測試）之樣品；脂質概況；尿分析；妊娠測試（對於具有潛在生育能力之女性患者）；ALT、AST測試；HOMA-IR/脂肪-IR；ELF；肝臟硬度及CAP；FIB-4；NFS（包括BMI）；生物標記物血液樣品；探測性血液樣品；患者隨機分組；研究藥物/安慰劑投與；AE評定；以及伴隨藥物評定。若滿足所有研究條目標準，則研究者將患者隨機分組且自患者治療包之一者向患者提供所指定之IMP或安慰劑。一旦已完成所有基線評定，則在現場投與第一劑量之IMP或安慰劑。患者在第0天晚上服用其第二劑量之IMP或安慰劑。隨後每天兩次投與膠囊。患者確實在其返回現場訪視（訪視3）之早上服用IMP或安慰劑。在離開診所之前，指示患者在下一次訪視之前不吃任何早餐，以允許最少8小時之空腹時段。

第2週（訪視3）：患者在訪視3時返回至研究現場。患者在訪視3之早上未服用IMP或安慰劑。進行以下評定：身體檢查；藥物動力學取樣；生命體徵（例如血壓、心率及體溫）；ALT、AST測試；HOMA-IR/脂肪-IR；AE評定；及伴隨藥物評定。返回IMP或安慰劑，且向患者提供其他IMP或安慰劑。一旦已完成所有訪視評定，患者就服用其下一劑量之IMP或安慰劑。膠囊繼續每天兩次投與。在此訪視完成時，建議患者在訪視4的兩週內需要返回至研究現場。患者在其返回現場訪視（訪視4）之早上未服用IMP或安慰劑。在離開診所之前，指示患者在下一次訪視之前不吃任何早餐，以允許最少8小時之空腹時段。

第4週（訪視4）：患者在訪視4時返回至研究現場。患者在訪視4之早上未服用IMP或安慰劑。進行以下評定：身體檢查；藥物動力學取樣；生命體徵（血壓、心率及體溫）；臨床實驗室安全性測試（血液學、血清生物化學及凝血測試）之樣品；妊娠測試（對於具有潛在生育能力之女性患者）；ALT、AST測試；HOMA-IR/脂肪-IR；AE評定；及伴隨藥物評定。返回IMP或安慰劑，且向患者提供其他IMP或安慰劑。一旦已完成所有訪視評定，患者就服用其下一劑量之IMP或安慰劑。膠囊繼續每天兩次投與。在此訪視完成時，建議患者在訪視5的兩週內需要返回至研究現場。患者在其返回現場訪視（訪視5）之早上未服用IMP或安慰劑。

第6週（訪視5）：患者在訪視5時返回至研究現場。進行以下評定：AE評定及伴隨藥物評定。返回IMP或安慰劑，且向患者提供其他IMP。一旦已完成所有訪視評定，患者就服用其下一劑量之IMP或安慰劑。膠囊繼續每天兩次投與。在此訪視完成時，建議患者在訪視6的兩週內需要返回至研究現場。患者在其返回現場訪視（訪視6）之早上未服用IMP或安慰劑。在離開診所之前，指示患者在下一次訪視之前不吃任何早餐，以允許最少8小時之空腹時段。

第8週（訪視6）：患者在訪視6時返回至研究現場。患者在訪視6之早上未服用IMP或安慰劑。血液取樣為進行之第一評定。在血液取樣之後，進行以下評定：身體檢查；藥物動力學取樣；生命體徵（血壓、心率及體溫）；臨床實驗室安全性測試（血液學、血清生物化學及凝血測試）之樣品；脂質概況；妊娠測試（對於具有潛在生育能力之女性患者）；ALT、AST測試；HOMA-IR/脂肪-IR；生物標記物血液樣品；ae評定；及伴隨藥物評定。返回IMP或安慰劑，且向患者提供其他IMP。一旦已完成所有訪視評定，患者就服用其下一劑量之IMP或安慰劑。膠囊繼續每天兩次投與。在此訪視完成時，建議患者在訪視7的兩週內需要返回至研究現場。患者確實在其返回現場訪視（訪視7）之早上服用IMP或安慰劑。

第10週（訪視7）：患者在訪視7時返回至研究現場。進行以下評定：AE評定及伴隨藥物評定。返回IMP或安慰劑，且向患者提供其他IMP或安慰劑。一旦已完成所有訪視評定，患者就服用其下一劑量之IMP或安慰劑。膠囊繼續每天兩次投與。在此訪視完成時，建議患者在訪視8的兩週內需要返回至研究現場。患者在其返回現場訪視（訪視8）之早上未服用IMP或安慰劑。在離開診所之前，指示患者在下一次訪視之前不吃任何早餐，以允許最少8小時之空腹時段。

第12週（訪視8）：患者在訪視8時返回至研究現場。患者在訪視8之早上未服用IMP或安慰劑。進行以下評定：身體檢查；藥物動力學取樣；生命體徵（血壓、心率及體溫）；臨床實驗室安全性測試（血液學、血清生物化學及凝血測試）之樣品；妊娠測試（對於具有潛在生育能力之女性患者）；ALT、AST測試；HOMA-IR/脂肪-IR；AE評定；及伴隨藥物評定。返回IMP或安慰劑，且向患者提供其他IMP或安慰劑。一旦已完成所有訪視評定，患者就服用其下一劑量之IMP或安慰劑。膠囊繼續每天兩次投與。在此訪視完成時，建議患者在訪視9的兩週內需要返回至研究現場。患者在其返回現場訪視（訪視9）之早上未服用IMP或安慰劑。

第14週（訪視9）：患者在訪視9時返回至研究現場。進行以下評定：AE評定及伴隨藥物評定。返回IMP或安慰劑，且向患者提供其他IMP或安慰劑。一旦已完成所有訪視評定，患者就服用其下一劑量之IMP或安慰劑。膠囊繼續每天兩次投與。在此訪視完成時，建議患者在訪視10的兩週內需要返回至研究現場患者在其返回現場訪視（訪視10）之早上不應服用IMP或安慰劑。在離開診所之前，指示患者在下一次訪視之前不吃任何早餐，以允許最少8小時之空腹時段。

第16週（訪視10）或提前退出：患者在訪視10時返回至研究現場。患者在訪視10之早上未服用IMP或安慰劑。血液取樣為進行之第一評定。在血液取樣之後，進行以下評定：身體檢查；12-導聯ECG；藥物動力學取樣；生命體徵（血壓、心率及體溫）；臨床實驗室安全性測試（血液學、血清生物化學及凝血測試）之樣品；尿分析；脂質概況；妊娠測試（對於具有潛在生育能力之女性患者）；ALT、AST測試；HOMA-IR/脂肪-IR；ELF；肝臟硬度及CAP；FIB-4；NFS[包括BMI]；生物標記物血液樣品；探測性血液樣品；AE評定；以及伴隨藥物評定。返回IMP或安慰劑。未發佈其他IMP或安慰劑泡殼包或患者日記卡。在此訪視時完成研究評定後，存在持續的研究限制。在此訪視完成時，建議患者在訪視11的四週內需要返回至研究現場，以評定此訪視以來的任何AE，且進行安全性及功效評定。在離開診所之前，指示患者在下一次訪視之前不吃任何早餐，以允許最少8小時之空腹時段。

隨訪（第20週/訪視11）：在訪視10之後四週（或在提前退出訪視之後2週），患者返回至研究現場。進行以下評定：身體檢查；藥物動力學取樣；生命體徵（血壓、心率及體溫）；臨床實驗室安全性測試（血液學、血清生物化學及凝血測試）之樣品；妊娠測試（對於具有潛在生育能力之女性患者）；ALT、AST測試；HOMA-IR/脂肪-IR；生物標記物；AE評定；及伴隨藥物評定。 1.5評定

功效評定包括：ALT、AST、ALT:AST比率；HOMA-IR/脂肪-IR；ELF；肝臟硬度及CAP；FIB-4指數；及NFS。下文提供對每一者之詳細描述。

ALT、AST、ALT:AST比率：增加之肝臟酶（ALT及AST）為肝臟損傷之標記物，且在訪視1/篩選（在篩選間隔7天或更多天期間的兩個時刻）、訪視2/基線、訪視3/第2週、訪視4/第4週、訪視6/第8週、訪視8/第12週、訪視10/第16週及隨訪11/第20週。

HOMA-IR/脂肪-IR：HOMA-IR/脂肪-IR含量為量測胰島素抗性之方法。HOMA-IR藉由空腹血漿胰島素（FPI）乘以空腹血漿葡萄糖（FPG），隨後除以常數405來計算。脂肪-IR藉由空腹非酯化脂肪酸（NEFA）×空腹胰島素來計算。在訪視2/基線、訪視3/第2週、訪視4/第4週、訪視6/第8週、訪視8/第12週、訪視10/第16週及隨訪11/第20週獲取血液樣品以評定HOMA-IR及脂肪-IR。在血液取樣之前，所有個體均需要空腹最少8小時。若個體未空腹最少8小時，則記錄空腹時間之持續時間，且鼓勵個體為下一次臨床訪視恰當地空腹。

ELF：ELF評分為由金屬蛋白酶1之組織抑制劑（TIMP-1）、III型原膠原之胺基端前肽（PIIINP）及玻尿酸（HA）組成之胞外基質標記物集合。在基線（訪視2）及第16週（訪視10）獲取血液樣品以進行此評定。

肝臟硬度及CAP：肝臟硬度及CAP係使用瞬時彈性成像（例如FibroScan® 502 Touch模型或等效物）評定。患者空腹且在當天之同時，若可能，基線（第0週）及訪視10（第16週）掃描。對於此評定，滿足以下條件：患者躺在背側臥位，其中右臂在頭部後方最大外展，處於與用於肝臟活檢體（LB）類似之位置；在肝臟右葉上之各肋部之間，將轉換器尖端置放於皮膚上（醫師使用置放於肋間空間中之探針進行量測）；在FibroScan®檢查期間，藉由自動探針選擇工具（APS）確定M+或XL+探針之選擇（若APS工具建議在「M+與XL+探針」之間連續地使用「XL+探針」或「開關」，僅使用XL+探針）；且操作員藉由超音波時間運動影像輔助，將不含大血管結構之肝臟的一部分定位（XL+探針的量測深度為35-75 mm，且M+探針的量測深度為25-65 mm且探索的體積將為3 cm³ ）。對於各患者，操作員使用XL+或M+探針在同一點進行檢查，該檢查包括至少10次有效量測或最多20次嘗試。整個檢查持續不超過10-15分鐘。最終硬度及CAP值記錄為有效量測結果之中值。

FIB-4指數：FIB-4指數係基於年齡、血小板計數、ALT含量及AST含量，且在基線（訪視2）及第16週（訪視10次）評定。FIB-4評分如以下等式所顯示測定。

NFS：NFS係基於年齡、高血糖症、BMI、血小板計數、白蛋白含量及AST/ALT比率。NAFLD纖維化評分= −1.675 + 0.037 ×年齡（歲） + 0.094 × BMI （kg/m2） + 1.13 × IFG/糖尿病（是 = 1，否 = 0） + 0.99 × AST/ALT比率 − 0.013 ×血小板（×109/l） − 0.66 × 白蛋白（g/dl）. 在基線（訪視2）及第16週（訪視10）評定NFS。

安全性評定包括以下：病史；身體檢查；ECG；生命體徵；臨床實驗室安全性測試（例如血液學、血清生物化學、凝血、脂質概況及尿分析）；病毒學；妊娠測試；血液取樣；藥物動力學取樣；探索性血液收集；生物標記物血液收集；尿液DOA及酒精呼吸測試；不良事件評定；伴隨藥物；生物分析；樣品、儲存、處置；及運送；及限制。下文提供對每一者之詳細描述。

病史：在篩選訪視（訪視1）及基線（訪視2）時由研究者或指定人員進行患者之病史之完全審查，以確保未滿足排除標準。報導任何伴隨疾病，無論研究者認為其是否與研究相關。儘可能注意到診斷日期或病況持續時間。

身體檢查：在訪視1/篩選、訪視2/基線、訪視3/第2週、訪視4/第4週、訪視6/第8週、訪視8/第12週、訪視10/第16週及根據當地實踐的隨訪11/第20週，研究者根據表19中之研究流程圖進行身體檢查（包括身高及體重）。此檢驗在基線完全完成且其後針對症狀（亦即除非患者指示，否則不評定身體系統之標準組）。舉例而言，若患者向研究者報導『皮疹』之存在，則評估皮膚。除非臨床上許可，否則不需要評估額外身體系統。記錄任何異常結果。以AE形式記錄相比於基線檢查之身體檢查結果的變化。

ECG：在各時間點記錄12-導聯ECG 10 mm/1 mv、25 mm/s以及10秒導聯II心律圖（rhythm strip）。使用GE Mac 1200或等效模型記錄ECG。患者在服用ECG之前在完全仰臥位置中靜置5分鐘。在訪視1/篩檢、訪視2/基線及訪視10/第16週，在表19中之研究流程圖中指示之數天進行記錄。

生命體徵：在訪視1/篩選、訪視2/基線、訪視3/第2週、訪視4/第4週、訪視6/第8週、訪視8/第12週、訪視10/第16週及隨訪11/第20週，根據表19中之研究流程圖進行生命體徵量測。在獲取任何血液樣品之前進行生命體徵量測。若在患者已簽名之後產生結果，則認為臨床上顯著之所有新穎發現或先前發現之變化均記錄為AE。生命體徵量測結果包括：表現為仰臥（例如休息至少5分鐘之後）收縮及舒張血壓（以mmHg為單位）之血壓；靜止時獲得的心率，以心跳/分鐘（bpm）為單位；及根據臨床實踐獲得的溫度。

臨床實驗室安全性測試：進行血液學、血清生物化學、凝血、脂質概況及尿分析之安全性測試：根據表19中之研究流程圖獲取血液及尿液樣品以用於常規血液學、血清生物化學、凝血及尿分析測試以及脂質概況。在中央實驗室中分析所有樣品。在血液取樣之前，所有個體空腹最少8小時。若個體未空腹最少8小時，則記錄空腹時間之持續時間，且鼓勵個體為下一次臨床訪視恰當地空腹。 ● 血液學：全血球計數包括紅細胞計數、血紅蛋白、血容比、白細胞計數、差異性白細胞計數、血小板計數及網狀紅血球計數。 ● 血清生物化學：尿素（血尿素氮；BUN）、肌酐、尿酸、總膽紅素、間接及直接膽紅素、鈉、碳酸氫鉀、磷、氯化鈣、鹼性磷酸酶（ALP）、天門冬胺酸轉胺酶（AST）、丙胺酸轉胺酶（ALT）、ALT/AST比率、乳酸脫氫酶（LDH）、肌酸磷酸激酶（CPK）、白蛋白、總蛋白、膽固醇、三酸甘油酯、葡萄糖、C反應蛋白（CRP）。 ● 凝血：凝血酶原時間（PT）、國際標準化比率（INR）及活化部分凝血酶原時間（APTT）。 ● 脂質概況：LDL、HDL及VLDL-C。 ● 尿分析：pH、蛋白、葡萄糖、血液、酮、白血球、白血球酯酶、膽紅素、比重、尿膽素原及硝酸鹽。若存在血液、蛋白、白血球酯酶或硝酸鹽/亞硝酸鹽，則反射作用微小。

病毒學：獲取血液樣品以進行包括HIV、Hep C及Hep B之病毒學測試，如表19中之研究流程圖中所詳述。

妊娠測試：對於可生育之女性患者，在訪視1/篩選、訪視2/基線、訪視4/第4週、訪視6/第8週、訪視8/第12週、訪視10/第16週及訪視11/第20週，根據表19之研究流程圖進行妊娠測試。

血液取樣：獲得血液樣品，且在樣品分析及檢驗之後由各研究者審查臨床上顯著值之實驗室結果。重複安全實驗室測試可能需要額外血液。

藥物動力學（PK）取樣：在訪視2/基線、訪視3/第2週、訪視4/第4週、訪視6/第8週、訪視8/第12週、訪視10/第16週及隨訪11/第20週，根據表19中之研究流程圖經由直接靜脈穿刺收集用於PK分析之血液樣品。在各時間點獲取1 mL血液樣品。離心之後，將血漿樣品分成兩個且在中央實驗室保存備用樣品直至生物分析分析已完成。

探索性血液收集：根據表19中之研究流程圖在基線（第0週）及訪視10/第16週收集血液，且在稍後日期儲存以用於潛在基因陣列分析或額外探索性測試。

生物標記物血液收集：根據表19中之研究流程圖在基線（第0週）、訪視6/第8週、訪視10/第16週及隨訪11/第20週收集血液，且儲存以用於潛在生物標記物分析。

尿液DOA及酒精呼吸測試：如由研究者判斷為臨床上適當時，進行酒精呼吸測試，且在進行試驗期間之任何時間自患者獲取尿液樣品，且進行測試以檢測以下各者：安非他明（amphetamine）、巴比妥酸鹽、苯并二氮呯、可卡因（cocaine）、大麻素及鴉片劑。

伴隨用藥：患者在篩選之前服用穩定劑量之任何伴隨用藥至少3個月，且該劑量應在整個研究期間保持穩定。若患者依賴胰島素，則應在篩選之前至少3個月開始此治療，然而准許劑量變化。

限制：該研究包括飲食、酒精、咖啡鹼及身體活動限制。對於飲食，患者在研究期間及在基線之前4週皆避免攝取富含Ω-3或Ω-6脂肪酸之食物補充品（例如魚肝油膠囊）。對於酒精，患者避免飲酒每週超過21個單位（男性）或每週超過14個單位（女性），藉此一個單位由10 ml或8 mg純酒精組成。在研究之前或期間不存在咖啡鹼限制。對於身體活動，患者在安全性實驗室測試（例如生物化學）之前至少3至4小時避免運動及劇烈的身體活動。 1.6研究藥物

DS102膠囊為白色、不透明硬殼膠囊（尺寸0），其含有500 mg 15-HEPE乙酯（EE）及5% w/w之膠態二氧化矽作為黏度調節劑。

DS102安慰劑（石蠟油）為白色、不透明硬殼膠囊（尺寸0），其含有等效填充重量之液體石蠟及1% w/w之膠態二氧化矽作為黏度調節劑。

DS102及安慰劑膠囊在2-8℃下儲存在安全區域（例如上鎖的櫥櫃或藥物儲存室）中，防止非預期使用。標記盲化劑量且含有隨機化編號。

劑量及投與：此研究涉及DS102與安慰劑之比較，每日兩次經口投與，總共持續16週。最後一次研究藥物投與發生在第16週訪視/早期終止（ET）訪視之前的當天。需要患者在進食前或在進食後服用膠囊。照常服用本研究允許的其他病況之一或多者用藥。錢包樣泡殼包由7天之4個膠囊組成，且最後，患者服用指定用藥持續16週。 1.7不良事件及嚴重不良事件

此研究之不良事件（AE）及嚴重不良事件（SAE）定義如下。

不良事件（AE）：已服用其第一次劑量之研究藥物之患者發生的任何非所需經歷，無論是否認為與研究用IMP有關。AE記錄在病例報告表中，定義與IMP及嚴重程度之關係。

嚴重不良事件（SAE）：若患者在第一劑量之研究藥物之後經歷嚴重不良事件，則事件記錄為SAE。SAE表徵為在任何劑量下之不良醫療發生，包括以下中之任一者：導致死亡，危及生命，需要患者住院或延長現有住院時間，或導致持續性或顯著的殘疾/無行為能力。術語「危及生命」係指患者在事件發生時處於死亡風險下之事件。其不指假設可能已引起死亡之事件（若其更嚴重）。重要但非危及生命之事件的實例包括在急診室進行密集治療、過敏性支氣管痙攣、血液惡血質或抽搐（不引起住院）或出現藥物依賴或藥物濫用。

非預期不良事件（UAE）：先前未在研究者手冊或類似產品資訊表單（諸如產品特徵概述（SPC））中報導之經歷。

AE之強度為研究者基於其臨床經驗對事件之相對嚴重程度作出的評估。以下定義用於評定AE之嚴重程度： ● 輕度：不良事件為暫時的且易於耐受。 ● 中度：不良事件引起患者不適且中斷患者之日常活動。 ● 嚴重：不良事件對患者之日常活動造成相當大的干擾，且可喪失或危及生命。

亦藉由考慮患者之病史、最近身體檢查發現及伴隨用藥來確立AE與實驗治療之因果關係。使用以下定義來確定AE之因果關係： ● 不相關：AE發作相對於實驗治療之時間關係不合理，或其他原因可解釋AE之發生。 ● 相關：AE發作相對於實驗治療之時間關係合理，遵循已知的治療反應模式，且不太可能有替代性原因。

在整個研究期間直至（且包括）隨訪時段報導所有AE。 1.8藥物誘導之肝臟損傷

嚴重藥物誘導之肝臟損傷（DILI）：與所感知之因果關係無關，在嚴重DILI之情況下，中斷研究藥物直至該發作視為消退。在研究藥物視為肝臟損傷之原因之情況下，則不再給藥患者該藥物。嚴重DILI規定如總膽紅素＞2×ULN或INR＞1.5所展現之肝臟損傷的證據。

具有異常基線肝臟生物化學之患者：在確定異常基線肝臟生物化學時，相對於基線含量而非使用ULN計算增加倍數。因此，3×基線ALT或AST（或＞200 IU/L）之數字在72小時內繼之以重複測試，以確認/判定生物化學變化是否改良或惡化。在全面身體檢查的同時收集AE資訊。進行肝臟病源學篩選及/或其他適當測試。在肝功能障礙之情況下，則患者以重度DILI治療。若出現在嚴重DILI下之任何標準，則考慮暫停藥物治療。 1.9連續不良反應及非預期不良反應

不良反應：對與任何劑量相關之藥品的所有有毒及非預期反應視為不良藥物反應。片語「對藥品之反應」意謂藥品與AE之間的因果關係至少可能為合理的（亦即不能排除該關係）。對於市售藥品，不良反應為對藥物的有害且非預期反應，且其通常以用於人類（用以預防、診斷或治療疾病或用以調節生理功能）之劑量發生。

非預期不良反應：不良反應，其性質或嚴重程度不與可應用產品資訊一致。

疑似非預期嚴重不良反應（SUSAR）：可能與IMP相關且根據以上定義為出人意料的任何嚴重不良反應。 1.10統計方法及資料管理

此臨床試驗採用隨機、雙盲、安慰劑對照之平行組設計。隨機分組用於最大限度地減少分配偏差，且增加已知及未知的患者屬性（例如人口統計特徵）在治療組之間均勻平衡的可能性。盲法係用於在資料收集及安全性及功效之評估期間減少潛在偏差。安慰劑作為比較劑之用途調整為合理設計，以基於簡短研究持續時間及不存在可因安慰劑治療而引起的任何可能的長期不可逆損壞，評定患者之安全性及功效。

樣品尺寸之估計：假設活性藥物與安慰劑組之間的反應百分比為20%增量，標準差為25%且丟棄率為20%，此導致每組需要32位患者進行統計學測試，其中顯著性水準為5%，且功效為80%。基於來自非盲法之建議，在中期分析下重新估計樣品尺寸。樣品尺寸可增加至最多總共150位患者，以達成主要終點之80%之條件性功效。

盲法及密碼破譯指示（Code Breaking Instruction）：所有研究現場人員以及涉及監測或進行研究之人員對個別患者治療分配不知情。隨機分組細節嚴格保密，僅可在緊急情況下經授權人員獲取直至正式揭盲之時。僅在所有患者資料已記錄及經驗證且資料庫鎖定之後，試驗之盲化密碼才破解。

中期分析及資料監測：當至少50%患者已完成其第16週訪視時，進行中期分析安全性以評估條件性功效。中期分析係基於針對主要及共同主要功效終點以及次要終點所收集之資料，且用於評估達成主要研究目標之條件性功效，以潛在地重新估計樣品尺寸及潛在地降低較不有效之治療組。

臨床上有意義的反應：與安慰劑相比，ALT或肝臟硬度之較高平均值或中值減少至少20%，且與安慰劑相比，ALT及肝臟硬度之較高平均值或中值減少至少10%

分析集包括入選集、全分析集（FAS）、符合方案集（PPS）、安全分析集（SAS）及藥物動力學（PK）集。下文提供各分析集之詳細描述。

入選集：簽署知情同意書之患者。篩選失敗為來自入選群體之不符合合格要求的患者，且在隨機分組之前退出研究。

FAS：接受至少一次研究治療投與且具有至少一次基線後量測之隨機分組患者。根據患者隨機分配之治療對其進行分析，無關於其實際上接受何種治療。

PPS：FAS之子集，由無嚴重違反方案之FAS之彼等患者組成。在資料庫鎖定之前，逐情況評定且記錄所有方案偏差，且視為對功效結果具有嚴重影響之嚴重偏差導致相關患者自PPS排除。

SAS：進行至少一次研究治療投與之患者。根據實際上採用之治療分析患者。

PK集：SAS中具有至少一個DS102 PK濃度之患者。根據實際上接受之治療分析患者。

安全性分析：針對各患者列出人口統計、病史及身體檢查資料且以描述方式概述。使用監管活動醫學詞典（MedDRA）之當前版本，將研究期間記錄之所有AE編碼至系統器官類別及較佳條款。藉由治療、與治療之關係、嚴重性及嚴重程度將AE製成表且概述。藉由治療及天數針對各患者列出臨床實驗值（例如血液學、生物化學及尿分析）。分別列出超出實驗室正常範圍的值，以及關於其臨床意義之相關評述，其中藉由治療突出顯示且概述潛在臨床上顯著之異常。在給藥之前獲得之臨床實驗室值定義為基線值。針對各患者列出酒精呼吸測試及DOA測試結果。針對各治療及天數以描述方式列出且概述生命體徵之個別值。列出各患者之12導聯ECG評定以及所有相關評述，且藉由治療及天數概述。根據世界衛生組織藥物詞典之最新版本，藉由用藥組及子組分類之伴隨用藥（若存在）藉由治療列出及概述。一般而言，應用根據變量性質之適當描述性統計。使用計數及百分比呈現類別變量，而使用平均值、標準差、中值、最小值、最大值、變異係數及患者數目呈現連續變量。

藥物動力學分析：以描述方式將15(S)-HEPE之血漿濃度製成表並概述。以圖形方式呈現15(S)-HEPE之個別及平均血漿濃度-時間曲線。

主要變量：主要功效變量為第16週（訪視10）血清ALT相對於基線之變化。經由分析共變數（ANCOVA）模型（包括作為共變數之對應基線值），相對於安慰劑比較活性治療組。相對於安慰劑之比較係根據鄧尼特（Dunnett）多重測試程序進行。對於缺失之第16週值，結轉最後一個可用值（LOCF）。針對肝臟硬度應用類似方法。對於ALT，另外考慮縱向建模。

次要變量：次要功效變量及其自基線至第16週之變化（訪視10）用根據治療組及訪視之描述性統計進行概述。此應用於AST、AST:ALT比率、藉由CAP量測之肝脂肪、藉由瞬時彈性成像量測之肝臟硬度、FIB-4、NFS、ELF及HOMA-IR/脂肪-IR。經由ANOVA模型，包括中心效應之術語，相對於安慰劑比較活性治療組之相對於基線之變化。5%顯著性水準用於所有治療比較。

探索性分析：探測性分析包括脂質及代謝參數之分析，該等參數包括總膽固醇、三酸甘油酯、極低密度脂蛋白膽固醇(VLDL-C)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)、非高密度脂蛋白膽固醇(非HDL-C)、殘粒樣膽固醇(RLP-C)、空腹葡萄糖、胰島素、游離脂肪酸及血紅蛋白A1C(HbA1C)。額外探索性分析包括高通量脂質組學及蛋白質體學。 1.11結果

此研究表明，診斷患有NAFLD且以每天1 g或2 g之劑量投與DS102之患者展現，代謝過載之標記物之統計顯著減少以及胰島素敏感性及血糖控制之改良。

圖20顯示三個治療組在基線處很好地平衡，且具有類似脂質組學及代謝體學概況。患者之基線特徵顯示於表18中，其中10至13%患者在基線時進行斯他汀療法（statin therapy）。

表18.個體之基線特徵

	2g DS102 （ n=31 ）	1g DS102 （ n=32 ）	安慰劑（ n=30 ）
年齡，中值，歲	47.0	53.5	50.0
性別， %
女性	32.3	37.5	30.0
男性	67.7	62.5	70.0
種族， %
白種人	100.00	93.75	90.00
其他	0.00	6.25	10.00
BMI ，中值， kg/m²	30.9	33.5	33.9
斯他汀使用， %	9.7	12.5	13.3
空腹血漿葡萄糖，平均值， mg/dL	119.1	110.9	120.3
血紅蛋白 A1C （ % ），平均值	6.3	6.2	6.2
ALT ，中值， IU/L	74.0	70.5	96.5
肝臟硬度，中值， kPa	7.9	8.2	8.4
HOMA-IR ，中值	4.4	5.1	5.0
三酸甘油酯，中值， mg/dL	242.0	146.0	150.0

圖21A至21C描繪與安慰劑相比，每日投與1 g或2 g DS102之患者中胰島素、葡萄糖及游離脂肪酸含量自基線至第16週之變化。在投與DS102後胰島素、葡萄糖及游離脂肪酸含量之減少在臨床上顯著，因為包括葡萄糖、碳水化合物及游離脂肪酸之代謝底物驅動NASH之發病機制。

圖22A及22B展示與安慰劑相比，每日投與1 g或2 g DS102之患者中HOMA-IR及adipo-IR含量自基線至第16週之變化。患者在第16週展現兩個胰島素抗性指數之改良（例如HOMA-IR及adipo-IR含量之減少），其中對於投與2 g DS102之彼等患者觀測到符合方案集（PPS）之顯著改良。

圖23A及23B描繪與安慰劑相比，每日投與1 g或2 g DS012之患者中糖基化血紅蛋白（例如HbA1c）含量自基線至第16週之變化。特定言之，圖23A顯示HbA1c含量之變化，且圖23B顯示在一定比例患者（其在基線具有高HbA1c含量但在第16週具有正常含量）中HbA1c含量之變化。由於Hb1Ac為附接至人體的紅血球之葡萄糖量的量度及長期血糖控制之替代者，因此此等結果指示，以劑量依賴性方式投與DS102提供臨床上顯著改善且使血糖控制正常化。

圖24A及24B顯示安全性分析集（SAS）中之第16週患者的脂質概況之平均值變化及中值（%）變化。此等結果進一步描繪於圖25A至25C中，且說明在患者中藉由維持或減少總膽固醇、VLDL-C、非HDL-C、殘粒樣（RLP）膽固醇及三酸甘油酯含量來投與DS102顯著改良患者的脂質概況。明顯地，減少量在第16週並未達到平穩段，這表明投與DS102可在較長持續時間之研究中引起甚至更大的變化。

如圖26中所顯示，投與DS102亦逆轉NASH之肝毒性脂質特徵，且提高經診斷患有NASH之患者中改變之多個脂質類別。特定言之，投與2 g DS102顯著減少多個肝毒性二酸甘油酯含量且顯著增加多個甘油磷脂組含量。由於患有NASH之患者具有低含量的肝及血漿甘油磷脂，因此此發現至關重要。

圖27顯示基於經驗證診斷測試，諸如用於NASH之OWL肝臟護理非侵入性診斷測試，投與DS102亦使NASH消退。OWL肝臟護理為基於血漿脂質組學在活檢體確認的NASH患者中開發之測試，且提供高預測值。OWL肝臟護理之曲線下面積（AUC）為0.88，其用於區分NAFLD及正常肝臟患者；及AUC為0.79，其用於區分NAFLD（無脂肪變性肝炎）及NASH患者。與第16週之安慰劑相比，以劑量依賴性方式投與DS102顯著改良及標準化診斷為NASH之OWL肝臟護理。表19顯示各治療組之基線處之測試診斷，且表明大部分患者在基線處歸類為NASH或NAFLD，2 g DS102組中之患者的百分比較低。

表19.基線處之OWL測試診斷

組	診斷	基線	診斷之變化（第 16 週對比基線）
改良	穩定	惡化
安慰劑	NASH	16	1	15	-
脂肪變性	7	1	4	2
無NAFLD	3	-	1**	2
1g DS102	NASH	19	5	14	-
脂肪變性	5	-	2	3
無NAFLD	4	-	3	1
2g DS102	NASH	12	5	7	-
脂肪變性	14	1	9	4
無NAFLD	3*	-	2，*	1

如圖28中所顯示，投與DS102亦降低診斷患有NAFLD之患者中之由CAP評定的肝脂肪含量。進一步預期在較長持續時間之研究中及在藉由更敏感的方法評定時，預期DS102引起肝含量中之較大變化。

投與DS102亦減少如表20中所顯示之患者的三酸甘油酯含量，且因此預期DS102亦將有效降低心血管風險。

表20.在第16週投與DS102之患者的三酸甘油酯含量變化

DS102（2 g）	三酸甘油酯（經中值安慰劑校正的相對於基線之變化%）
完整分析集	-40.2
子組：三酸甘油酯＞正常上限（＞ 150 mg/dL）	-39.0
子組：高三酸甘油酯（＞ 200 mg/dL）	-20.4

圖29A至29C顯示投與DS102減少發炎性及促纖維化蛋白。對於此評定，針對一組超過350個不同蛋白生物標記物，分析在用DS102治療之前及之後的血液樣品。用2 g DS102治療顯著下調與發炎、纖維化、脂質代謝、細胞凋亡及趨化性相關之超過150個標記物的表現。在用DS102治療後觀測到代謝過載及脂毒性之消退，其防止後續細胞應激、發炎及纖維化。發炎性及促纖維化蛋白之減少表明DS102有可能提供NASH之消退且預防纖維化。

如圖30中所示，投與DS102亦減少多個NASH開發靶點之表現。特定言之，投與2 g DS102減少NASH藥物開發靶點，包括CCR2/5信號傳導（Cenicriviroc-Allergan）、半乳糖凝集素3（GR-MD-02-半乳糖凝集素）及AOC3（Boehringer Ingelheim）。

圖31中之火山圖（Bonferroni及Benjamini-Hochberg測試之資料）顯示投與2 g DS102減少發炎性及促纖維化蛋白，減少係基於蛋白質表現之變化。表21顯示基於Bonferroni測試之最顯著發炎性及促纖維化蛋白減少。

表21.基於Bonferroni測試之顯著蛋白

蛋白	描述
PAI-1	TGF-β誘導之蛋白，在代謝症候群、動脈粥樣硬化、纖維化中增加
TIMP-1	促纖維化
DPP4	T細胞活化，DPP4抑制增加GLP-1
TLT2	增強T細胞活化，凋亡細胞之清除
CCL16	與CCR 1、2、5、8結合之趨化介素。Cenicriviroc（Allergan）為CCR2/5拮抗劑
MCP-1（CCL2）	與CCR 2、4結合之趨化介素Cenicriviroc（Allergan）為CCR2/5拮抗劑。NASH，動脈粥樣硬化等增加。
SAA4	脂蛋白元
PI3/彈力素（Elafin）	移植物抗宿主疾病增加
TR	鐵穩態
LILRB1	I類MHC抗原受體
TNRSF11A	T細胞/樹突細胞相互作用

投與1g DS102亦顯示出TR之顯著減少。表22顯示基於使用線性模型之分析的最顯著發炎性及促纖維化蛋白減少。

表22.基於線性模型之顯著蛋白

蛋白	描述
TLT2	增強T細胞活化，凋亡細胞之清除
AOC3	損害葡萄糖穩態。NASH，動脈粥樣硬化增加。
PRSS2	在胰臟中表現，參與細胞黏附

此分析亦指示1 g DS107組中之1個蛋白及安慰劑組中之0個蛋白通過基於Benjamini-Hochberg測試之第1個臨限值。

如圖32中所示，投與DS102亦減少多個血管黏附分子之表現。血管黏附分子牽涉動脈粥樣硬化且其循環量與心血管風險相關

如圖33中所顯示，投與DS102亦減少與增加之心血管風險相關之多個蛋白之表現。

如圖34中所顯示，投與DS102亦減少多個循環趨化介素之表現。趨化介素為動脈粥樣硬化之慢性發炎之重要驅動因素。

如圖35中所示，投與DS102亦減少多個腫瘤壞死因子受體超家族成員之表現。腫瘤壞死因子受體超家族成員牽涉發炎及動脈粥樣硬化。

亦證實DS102安全且具有良好耐受性，與安慰劑相比，未觀測到安全性及耐受性差異。不存在藥物相關之嚴重不良事件（SAE），且不良事件（AE）之發生率低，這在所有治療組中為一致的。大部分AE為輕度至中度以及短暫的，且沒有患者經歷過導致治療中斷之AE。各治療組之安全概況顯示於表23中。

表23.研究組之安全概況

患者，n（%）	2g DS102（n=30）	1g DS102（n=32）	安慰劑（n=31）
≥1 AE	15 （50.0）	19 （59.4）	17 （54.8）
≥1與研究藥物有關之AE	3 （10.0）	2 （6.3）	4 （12.9）
≥1 SAE	1 （3.3）	0	1 （3.2）
導致治療中斷之AE	0	0	1 （3.2）
與藥物研究有關之SAE	0	0	0
死亡	0	0	0

亦評估DS102改良相關適應症、原發性膽汁性肝硬化（PBC）及原發性硬化性膽管炎（PSC）之潛在功效，如圖36A及36B中所示。重要的是，投與2 g DS102減少鹼性磷酸鹽（ALP）以及肝纖維化之多種標記物，這表明DS102在治療PBC及PSC方面亦將有效。

圖37為15-HEPE乙酯（EE）最低血漿相對濃度之盒狀圖，其指示如所預期在第8週及第16週的DS102治療組中存在較高的系統暴露量。 1.12概述

總體而言，此等結果指示DS102藉由顯著減少代謝負載並改良胰島素敏感性而靶向NASH病變之多個階段。藉由逆轉與NASH相關之脂質積聚水準，投與DS102亦改良患者的脂質概況。特定言之，投與DS102之彼等患者展現肝毒性脂質含量之積聚的減少，包括總膽固醇、非HDL膽固醇、RLP膽固醇、三酸甘油酯、二酸甘油酯及VLDL-C，以及甘油磷脂含量之增加。此等效應為顯著的，因為經診斷患有NASH之患者的特徵在於高的總膽固醇、三酸甘油酯、二酸甘油酯及VLDL-C含量以及低的甘油磷脂及Ω-3 PUFA含量。另外，預期多種脂質之變化會帶來心血管風險之降低及代謝症候群之多個態樣之改良。

結果亦表明與安慰劑相比，存在有利於投與2 g或更多DS102之劑量依賴性作用，其具有較大及統計學上顯著之改良。

總之，DS102非常適合作為用於治療NASH之單一療法或組合療法之一部分，且預期降低心臟血管風險，包括在診斷患有NASH或包括代謝症候群之心臟代謝疾病之患者中。實例5：藉由經口管飼在大鼠中進行的15(S)-HEPE EE的26週毒性研究，具有4週恢復期

此研究之目的為確定（1）當藉由經口管飼對大鼠給藥26週時15(S)-HEPE EE（一種用於治療肝及肺疾病之Ω-3脂肪酸）的潛在毒性且評估任何研究結果的潛在可逆性；（2）15(S)-HEPE EE的毒物動力學特徵。 1.1研究設計

藉由每週7天每日一次之經口管飼，向合適的動物投與測試及對照物品持續至少26週。每隻動物之體積按最近的體重量測結果計。使用附有管飼插管之注射器給藥。給藥之第一天指定為第1天。將給藥調配物從冰箱中移出並在給藥之前攪拌至少30分鐘。在給藥期間也持續攪拌給藥調配物。

由於臨床症狀之發作，包括弓背的姿勢、直立毛皮以及異常步態及體重減輕，因此動物3206M、3515F及3703F從第45天起給予給藥假期，而其餘第3組動物從第48天起給予給藥假期。從第64天起，動物將以較低之劑量水準（3000 mg/kg/天）開始給藥。下表說明了研究中使用之治療（表23）及動物分組（表24）。

表24.治療圖

組編號	治療	劑量水準（mg/kg/天）	劑量體積（mL/kg）	劑量濃度（mg/mL）	已調整之劑量濃度（mg/mL）	動物之數目
主要研究	恢復	毒物動力學
雄	雌	雄	雌	雄	雌
1	對照組	0	10	0	0	15	15	5	5	3	3
2	15(S)-HEPE EE	2000	10	200	206^b /204^c	15	15	5	5	9	9
3	15(S)-HEPE EE	6000^a	10	600	618^b	15	15	5	5	9	9
3	15(S)-HEPE EE	3000^a	10	300	309^b /306^c	15	15	5	5	9	9
^a 由於臨床症狀之發作，包括弓背的姿勢、直立毛皮以及異常步態及體重減輕，因此動物從第48天起給予給藥假期。從第64天起，動物將以較低之劑量水準（3000 mg/kg/天）開始給藥。^b 批次2540M-1801及2540M-1802之已調整濃度。^c 批次2540M/1901及2540M/1902之已調整濃度。

表25.動物分組

組編號	動物數目
主要研究	恢復	毒物動力學
雄性	雌性	雄性	雌性	雄性	雌性
1	1001-1015	1501-1515	1101-1105	1601-1605	1201-1203	1701-1703
2	2001-2015	2501-2515	2101-2105	2601-2605	2201-2209	2701-2709
3	3001-3015	3501-3515	3101-3105	3601-3605	3201-3209	3701-3709
多餘動物將編號為4001M、4002M及4501F、4502F。

恢復期：在給藥期結束時，將指定的恢復動物保留至少4週之恢復期。

證實途徑及劑量水準之合理性：此研究選擇經口投與途徑，因為此途徑為人類給藥之預期途徑。每日給藥一次之大鼠的先前26週之經口毒性顯示，在最高測試劑量（1 mg/kg/天）下沒有不良反應。參見沃倫, H（Warren, H） (2017)。藉由經口（管飼）在具有4週恢復期之大鼠中進行之15(S)-HEPE EE的26週研究查爾斯河研究（Charles River Study）第529123號。鑒於在該研究中未發現劑量限制性毒性，因此額外28天劑量範圍研究確定口服最大耐受劑量（MTD）為6 g/kg/天。參見Murie, E（進行中）。在大鼠中藉由經口管飼對DS102進行之試點28天研究。查爾斯河研究第506611號。進行此當前研究以評估該MTD之15(S)-HEPE EE（DS102）符合ICH M3（R2）之慢性毒性潛力。參見ICH協調三方指南（ICH Harmonised Tripartite Guideline）M3（R2）。進行人體臨床試驗及藥品銷售授權之非臨床安全性研究。 1.2生活中之程序、觀察結果及量測結果：

對所有主要研究及恢復動物進行了生活中之程序、觀察及量測。稱量毒物動力學動物，並在與主要研究動物相同的時間點記錄臨床觀察結果。

每天進行死亡/瀕死檢查。觀察動物之總體健康/死亡及瀕死。除非需要鑑定或確認可能的發現，否則觀察期間不會將動物從籠子中移出。

臨床觀測結果：

每天進行籠側觀察。除非為了鑑定或確認可能的發現，否則觀察期間不會將動物從籠子中移出。

每週進行詳細的臨床觀測。從籠子中移出動物進行檢查。

全天有規律地進行給藥後觀察。檢查所有動物對治療之反應。記錄此等症狀之發作、強度及持續時間；在給藥期間及給藥後的頭一個小時要特別注意動物。

在預處理期間進行兩次體重量測；給藥期間每日一次；及在恢復期間每週兩次。單獨稱重動物。在計劃屍檢之第一天記錄體重（僅對主要動物及恢復動物）。

從第1週到給藥及恢復期，每週對食物消耗進行定量量測。

在整個研究過程中，藉由目視檢查水瓶來有規律地得出水消耗。

在使用散瞳劑（1%托品醯胺（Tropicamide），Mydriacy）後，使用間接檢眼鏡進行眼科檢查。在預處理期間，檢查了所有主要研究動物及恢復動物。在第13週及第26週期間，檢查了主要研究動物（對照及高劑量）。在第30週期間，檢查了所有恢復動物。 1.3實驗室評估：

臨床病理學

樣品收集：除非就在屍檢之前在不可恢復之異氟烷麻醉下自眼竇收集血液，否則經由尾靜脈收集血液。除非動物屍檢之前按照安樂死之順序收集樣本，否則以升序的動物順序收集血液。若未超過允許之採樣頻率及血容量，則獲得額外血液樣本（例如，由於非血清樣本之凝結）。收集後，將樣品轉移到適當的實驗室進行處理。根據下表收集樣品。

表26.用於臨床病理學評估之樣品

組編號	時間點	血液學	凝結	臨床化學	尿液分析
主要研究及恢復動物	第26週	-	-	-	X
恢復	第183天	X	X	X	-
主要研究	就在屍檢之前	X	X	X	-
恢復動物	第30週	-	-	-	X
就在屍檢之前	X	X	X	-
計劃外安樂死（當可能時）	在安樂死之前	X	X	X	-
X-待收集之樣品；- =不適用。

血液學：使用抗凝血劑K₂ EDTA收集0.5 mL血液樣品。對血液塗片進行標記、染色及儲存。根據以下參數分析血液塗片。

表27.血液學參數

紅血球計數血紅素濃度血球比容平均微粒體積紅血球分佈寬度平均微粒血紅素濃度平均微粒血紅素網狀紅血球計數（絕對值）血小板計數

白血球計數嗜中性球計數（絕對值）淋巴細胞計數（絕對值）單核細胞計數（絕對值）嗜酸性球計數（絕對值）嗜鹼性球計數（絕對值）大型未染色細胞（絕對值）

凝血：使用抗凝血劑3.8%（w/v）檸檬酸三鈉收集0.5 mL血液樣品用於處理成血漿。為了評估凝血，量測以下凝血參數。

表28.凝血參數

活化部分凝血活素時間血纖維蛋白原

凝血酶原時間樣品質量

臨床化學：使用抗凝血劑肝素鋰收集0.7 mL血液樣品用於處理成血漿。為了評估臨床化學，量測了以下參數：

表29.臨床化學參數

丙胺酸轉胺酶天門冬胺酸轉胺酶鹼性磷酸酶 γ-麩胺醯轉化酶肌酸激酶總膽紅素^a 尿素肌酐鈣磷酸酯	總蛋白質白蛋白球蛋白白蛋白/球蛋白比率葡萄糖膽固醇三酸甘油酯鈉鉀氯化物樣品質量
^a 當總膽紅素＞8.55 μmol/L時，亦量測間接及直接膽紅素。

尿液分析：在不存在食物及水之情況下，經過6個小時（+/- 30分鐘）自動物收集尿液。收集後，將樣品轉移到適當的實驗室進行處理。為了評估尿液分析，量測了以下參數：

表30.尿液分析參數

顏色外觀/澄清度比重體積 pH

蛋白質葡萄糖膽紅素酮類血液

骨髓塗片分析：自所有動物中收集骨髓，並保存在10%中性福爾馬林緩衝液中。

生物分析及毒物動力學評估

生物分析樣品收集：使用抗凝血劑K₂ EDTA，使用無菌針頭及一次性注射器，經由頸靜脈（若無法評估頸靜脈，則經由尾靜脈）收集0.5 mL血液樣品。在完成血液收集計劃後，使毒物動力學動物安樂死，並在未檢查之情況下將屍體棄置。根據下表收集樣品。

表31.毒物動力學評估樣品收集計劃

組編號	動物編號	動物之編號	樣品收集時間點（給藥後時間）在第1天及第26週
0小時^a	1小時	2小時	4小時	8小時	24小時
1	1201-1203 1701-1703	3M/3F	-	-	-	X	-	-
2	2201-2203 2701-2703	X	-	-	X	-	-
2204-2206 2704-2706	-	X	-	-	X	-
2207-2209 2707-2709	-	-	X	-	-	X
3	3201-3203 3701-3703^b	X	-	-	X	-	-
3204-3206 3704-3706^b	-	X	-	-	X	-
3207-3209 3707-3709^b	-	-	X	-	-	X
X=待收集之樣品，- =不適用。^a 將在給藥之前收集樣品^b 動物3702F收集第1天樣品，然而在第44天出於人道原因將此動物安樂死。將在第26週自動物3707F（0小時^a 收集）及3704F(4小時收集)收集額外樣品以覆蓋動物3702F之缺失時間點。

生物分析樣品處理：將樣品輕輕混合，並放在碎冰上，直到抽血後60分鐘內離心。將樣品以1500 g在4℃下離心10分鐘。分離所得之血漿，轉移到唯一標記之透明聚丙烯管中，並儘快在乾冰上冷凍或在經設置以保持-20℃之冰箱中冷凍。

生物分析樣品分析：使用經過驗證之分析程序分析血漿樣品中未酯化及總HEPE之濃度。確定了以下內容： a) 未酯化（HEPE在血漿中以游離脂肪酸的形式存在或與血漿白蛋白結合）。 b) 每個採樣時間之總（定量未酯化之HEPE及酯化之HEPE（例如，作為三酸甘油酯、膽固醇酯））濃度。

根據生物分析實驗室之適當標準操作程序，對未酯化之HEPE進行標樣再分析（Incurred sample reanalysis，ISR）。在測試設施研究第527943號期間，已使用上述參考分析程序成功地進行了ISR以確定大鼠血漿樣品中的總HEPE，因此無需在本研究中重複進行。

在發佈草稿報告後，任何殘留/保留之生物分析樣品應至少保持6個月，然後將其丟棄。或者，若在6個月保留期結束之前發佈最終報告，則在6個月保留期之前丟棄殘留的樣品。研究負責人也可能要求且批准提早丟棄此等殘留/保留的樣品。

毒物動力學評估：毒物動力學參數係使用菲尼克斯（Phoenix）藥物動力學軟件來估算。使用與經口投與途徑一致的非室體模型方法進行參數估計。只要可行，所有參數自第1天及第26週血漿中之15(S)-HEPE EE組成物濃度之總游離酸及非結合游離酸產生。估計以下參數：

表32.待估計之參數

參數	參數描述
Tmax	給藥後觀測到最大濃度之時間。
Cmax	給藥後量測到之最大觀測濃度。
Cmax/D	Cmax除以投與之劑量。
AUC(0-t)	使用線性或線性/對數梯形方法自劑量投與開始至最後觀測到可定量濃度的濃度相對於時間曲線下面積。
AUC(0-t)/D	AUC(0-t)除以投與之劑量。

可以導出部分AUC（在任何給定的採樣時間之間）並報告以幫助解釋。使用菲尼克斯生成了適當之分組及排序變量之描述性統計（Cmax及AUC(0-t)的標準誤差）。還生成了TK表及圖。 1.4終端程序

下表總結了研究中使用的終端程序。

表33.主要研究動物之最終程序

組編號	數目	預定之安樂死天數	屍檢程序	組織學^a	組織病理學^a
雄性	雌性	屍檢	組織收集^a	器官重量^a
1	15	15	183/184	X	X	X	全部組織	全部組織
2	15	15	剖檢病變目標組織^b	剖檢病變目標組織^b
3	15	15	全部組織	全部組織
1	5	5	211	剖檢病變目標組織^b	剖檢病變目標組織^b
2	5	5	剖檢病變目標組織^b	剖檢病變目標組織^b
3	5	5	剖檢病變目標組織^b	剖檢病變目標組織^b
計劃外死亡	X	X	-	全部組織	全部組織
X=待進行之程序：- =不適用^a 關於組織清單，參見組織收集及保存表。^b 目標組織為肝臟（雄性及雌性）、甲狀腺（雄性及雌性）、腎臟（僅雌性）、骨髓（僅雄性）。

計劃外死亡：若主要研究或恢復動物在研究期間死亡，則進行屍檢並保存指定的組織。如有必要，將動物冷藏以使自分解降至最低。根據測試設施SOP出於人道原因對主要研究或恢復動物實施安樂死。記錄體重，並在可能的情況下獲得用於評估臨床病理學參數的樣品。對此等動物進行屍檢，並保留指定的組織。如有必要，將動物冷藏以使自分解降至最低。在研究過程中死亡或因人道原因而被安樂死之毒物動力學動物接受了有限的屍檢。檢查包括對胸腔、腹腔及骨盆腔內的器官及組織之評估，其中沒有保留任何組織。在有限的屍檢過程中，特別注意可能發生的管飼創傷的證據。記錄體重且收集用於毒物動力學分析評估之樣品。

預定之安樂死：藉由將動物暴露於升高含量之二氧化碳而使存活直至預定安樂死的主要研究及恢復動物安樂死；記錄最終體重且隨後對動物進行放血。當可能時，在整個劑量組中以旋轉順序使動物安樂死，使得在整個一天中對來自各組（包括對照組）之類似數目的動物進行屍體解剖。在進行預定之屍檢之前，動物沒有禁食。藉由批准的方法對存活到預定之安樂死的毒物動力學動物實施安樂死。沒有進行屍檢，也沒有收集組織。

屍檢：對主要研究及恢復動物進行完整的屍檢，其中包括評估胴體及肌骨胳系統；所有外表面及孔口；顱腔及大腦外表面；以及胸腔、腹腔及骨盆腔及其相關器官及組織。屍檢程序由合格的人員進行，其具有動物解剖學及大體病理學之適當的培訓及經驗。

器官重量：對於所有預定安樂死之動物，在屍檢時（除非另有說明）對在組織收集及保存表中確定要稱重的器官進行稱重。未記錄在較差條件下或在極端情況下發現死亡或安樂死之動物的器官重量。將配對的器官一起稱重。在嚴重異常之情況下，除了總重量外，還取一對器官中每個器官的重量作為組織註釋。末期體重及大腦重量用於器官重量分析。

組織收集及保存：根據下表收集之組織保存在10%中性福爾馬林緩衝液中。

表34.組織收集及保存表

器官	稱重	宏觀評估及收集	組織學處理	微觀評估
動物ID	-	X	-	-
動脈、主動脈	-	X	X	X
鼻體腔	-	X	-	-
胸骨骨髓	-	X	X	X
骨髓塗片	-	X^a	-	-
股骨	-	X (1)	X (1)	X (1)
胸骨	-	X	X	X
大腦	X	X	X	X
子宮頸	-	X	X	X
附睾	X (2)	X (2)^b	X (2)	X (2)
食道	-	X	X	X
眼睛	-	X (2)^b	X (2)	X (2)
腎上腺	X (2)	X (2)	X (2)	X (2)
陰蒂肥大腺	-	X (2)	-	-
淚腺	-	X (2，眶外)	-	-
瞬膜腺	-	X (2)	X (1)	X (1)
乳腺	-	X	X	X
副甲狀腺	-	X (2)	X (2)	X (2)
垂體腺	X	X	X	X
包皮腺	-	X (2)	-	-
前列腺	X	X	X	X
頜下唾液腺	-	X (2)	X (1)	X (1)
舌下唾液腺	-	X (2)	-	-
腮腺唾液腺	-	X (2)	-	-
囊泡精液腺	-	X (2)	X (2)	X (2)
甲狀腺/副甲狀腺	X (2)^d	-	-	-
甲狀腺	-	X (2)	X (2)	X (2)
任氏腺（Gland,Zymbal's）	-	X (2)	-	-
腸締合淋巴組織^c	-	X	X	X
心臟	X	X	X	X
股骨脛骨關節	-	X (1)	X (1)	X (1)
腎臟	X (2)	X (2)	X (2)	X (2)
盲腸大腸	-	X	X	X
結腸大腸	-	X	X	X
直腸大腸	-	X	X	X
喉頭	-	X	-	-
肝臟	X	X	X	X
肺	-	X	X	X
下頜淋巴結	-	X (2)	X (1)	X (1)
腸系膜淋巴結	-	X	X	X
骨骼肌肉	-	X	X	X
鼻咽	-	X	-	-
視神經	-	X (2)^b	X (2)	X (2)
坐骨神經	-	X (2)	X (1)	X (1)
卵巢	X (2)	X (2)	X (2)	X (2)
輸卵管	-	X (2)	-	-
胰臟	-	X	X	X
皮膚	-	X	X	X
十二指腸小腸	-	X	X	X
迴腸小腸	-	X	X	X
空腸小腸	-	X	X	X
脊髓	-	X	X	X
脾	X	X	X	X
胃	-	X	X	X
睪丸	X (2)	X (2)^b	X (2)	X (2)
胸腺	X	X	X	X
舌	-	X	X	X
氣管	-	X	X	X
尿管	-	X (2)	-	-
膀胱	-	X	X	X
子宮/子宮頸	X	-	-	-
子宮	-	X	X	X
陰道	-	X	X	X
X=待進行之程序，- =不適用。(1) =一側。(2) =兩側。在屍檢時對所列器官及其他器官中之宏觀異常取樣，進行處理以用於組織學且用顯微鏡檢查。^a 在預定及未預定之屍體剖檢時將自股骨收集兩個骨髓塗片（為了可能之檢查）。將自發現死亡之動物或自安樂死瀕死之動物收集塗片，且隨後在屍檢之前儲存在冰箱中。使骨髓塗片風乾且不固定於福馬林中。^b 眼睛及視神經儲存在戴維森固定劑（Davidson's fixative）中。睪丸及附睾儲存在經修飾之戴維森固定劑中。^c 來自小腸：派爾集合（Peyer's patch）或孤立性淋巴濾泡^d 在固定之後稱重。

1.5給藥調配物與分析

對照物品：本研究之對照物品係Milli-Q水中之0.5% HPMC。按要求準備對照物品，並儲存在冰箱中，以在不使用時保持4℃。將製備的對照物品從冰箱中取出，並在給藥前攪拌至少30分鐘。在給藥期間亦連續攪拌對照物品。

測試物品：本研究之測試物品係DS102或15(S)-HEPE EE。基於在測試設施處建立之方法，以合適之濃度來製備測試物品之給藥調配物，以滿足劑量濃度的要求。每週製備給藥調配物，並儲存在冰箱中，以保持4℃並每天分配。將給藥調配物從冰箱中移出並在給藥之前攪拌至少30分鐘。在給藥期間也持續攪拌給藥調配物。

樣品收集及分析

分析之樣品在已建立之穩定期內提交。在環境溫度下將所有分析之樣品轉移到測試設施之分析實驗室。在草稿報告發佈後，任何殘留/保留之分析樣品應至少保留6個月，然後將其丟棄。或者，如果在6個月保留期結束之前發佈最終報告，則在6個月保留期之前丟棄殘留的樣品。研究負責人在與申辦者協商後，也可以授權更早地丟棄此等殘留/保留的樣品。收集調配物樣品用於分析，如下表中所指示。研究負責人可以酌情收集及分析額外樣品。

表35：給藥調配物樣品收集時程

時間間隔	濃度	同質性	穩定性
第1天	所有組	第2組至第3^a 組	N/A
第2週	所有組	第2組至第3^a 組	N/A
第10週	第3組	第3組	N/A
第13週	所有組	N/A	N/A
第14週	所有組	所有組^a	N/A
第26週	所有組	N/A	N/A
N/A =不適用。^a 對於製備第2組至第3組，將對自頂部、中部及底部獲得之同質性結果求平均且用作濃度結果。

分析方法

使用經過驗證之分析程序藉由具有UV檢測之UPLC進行下文描述之分析。

濃度分析： ● 用於分析之樣品：將一式兩份之頂部、中部及底部樣品（一式兩份之中部僅用於對照）進行分析。在僅評估濃度之情況下，僅一式兩份收集中部樣本。 ● 備用樣品：一式三份之頂部、中部及底部樣品（一式三份之中部僅用於對照），保持在測試設施處。研究負責人可以酌情分析備用樣品。在僅評估濃度之情況下，僅將一式三份收集中部樣本。 ● 採樣容器：適當大小之容量燒瓶。 ● 樣品體積： ● 第1組：將0.5 mL倒入50 mL容量燒瓶中。 ● 第2組：將0.25 mL倒入50 mL容量燒瓶中。 ● 第3組：將0.25 mL倒入50 mL容量燒瓶中。 ● 記錄所有樣品之重量。 ● 儲存條件：置於冰箱中以保持4℃。 ● 驗收標準：驗收標準係理論濃度之±10%內或等於其之平均樣品濃度結果。對於同質性，驗收標準係每組濃度之相對標準偏差（RSD）≤10%。

穩定性分析：先前結合試驗設施研究第439414號進行的穩定性分析表明，在相同條件下以與本研究中所使用的濃度相同的條件製備及儲存試驗物品時，該試驗物品在媒介中係穩定的。參見Rogers, E (2018)。超高效液相色譜法測定在經口（管飼）給藥調配物中之15(S) HEPE EE之驗證。查爾斯河研究第439414號。穩定性數據保留在測試設施研究編號第439414號的研究記錄中。同上。 1.6測試系統

動物：研究使用從查爾斯河英國有限公司（Charles River UK Limited）（英國肯特郡馬蓋特）購得之雄性及雌性史泊格多利大白鼠（Sprague Dawley rat）。初次給藥之目標年齡為7至8週。初次給藥時之目標重量為175至300 g（雄性）及120至250 g（雌性）。使用皮下植入的電子圓柱形「玻璃密封」 TROVAN微芯片識別每隻動物。 1.7管理

圈養：在開始給藥前，使動物適應測試設施之嚙齒動物毒理學適應場所長達3週。將動物隨機分組。雄性及雌性分別隨機分組。健康狀況不佳之動物沒有被分組。每個籠子按性別圈養2或3隻動物，放在大小合適之懸掛式聚碳酸酯/聚丙烯籠中，該籠具有不鏽鋼網格頂部及實心底部。滅菌之白色木材屑用作鋪墊材料。

環境條件：動物房間環境之目標條件如下：溫度19至23℃；濕度40至70%；每小時至少換氣10次；光循環亮12小時暗12小時。自動控制光、溫度及濕度的控制，並對其進行持續監控及記錄。

飲食：任意提供SDS大鼠及小鼠（經改質）SQC擴增之1號飲食。從水瓶中隨意提供公共供應之水。定期分析測試設施所使用之水中的溶解物質、重金屬、農藥殘留、pH、硝酸鹽及亞硝酸鹽。還進行了微生物篩選。

動物增濃：動物以社會方式圈養以心理/環境增濃，且提供具有物品，諸如用於掩蔽之裝置及用於咀嚼之物件，除非在由研究程序/活動中斷時。

獸醫護理：在整個研究過程中都可以進行獸醫護理，並由獸醫人員根據臨床體徵或其他變化的要求對動物進行檢查。研究記錄中記錄了所有獸醫檢查及推薦的治療方法（若存在）。 1.8組織學與組織病理學

組織學：將在組織收集及保存表中鑑定之組織包埋在石蠟中，切成薄片，安裝在載玻片上，並用蘇木精及曙紅染色。

組織病理學：組織病理學評估是由經過委員會認證的獸醫病理學家或經過獸醫實驗室病理學訓練並具有經驗的獸醫病理學家進行的。顯微鏡檢查了主要研究對照及高劑量動物的組織、計劃外死亡及嚴重損傷（包括主要研究低劑量組及恢復動物的組織）。若在主要研究高劑量組中有治療效果，則在與申辦者及研究負責人達成協議修訂後，對主要研究低劑量組及恢復動物之靶組織進行顯微鏡檢查。 1.9電腦系統

電腦系統：下表之電腦系統可用於本研究：

表36.關鍵電腦系統

系統名稱	資料收集及/或分析之描述
分配	測試物品接收、責任及/或調配活動。
Provantis	適用之使用週期、臨床病理學及屍體解剖
Empower 3	層析資料收集及處理（調配物分析）
分析	層析資料收集（生物分析）
Watson	層析處理（生物分析）
Phoenix	非隔室分析及描述性統計資料（毒物動力學評估）
自產報告軟體Nevis 2012（使用SAS）	適用之使用週期、臨床病理學及屍體解剖
偏差資訊庫	偏差
Trend 963 Secure	連續溫度及濕度記錄。動物室、冰箱、冷凍機及恆溫箱之警報。
共用文件管理系統	報告
文件符號	收集部分11之適應簽名

1.10統計分析

將給藥前收集之數據製成表格、彙總並進行統計分析。除非另有說明，否則所有統計分析均在相應的研究階段進行。如下所示根據性別及場合，總結並統計分析了在計劃的場合收集的數值數據（毒物動力學動物的數據除外）。

構造變量：在每個計劃的時間間隔之間計算體重變化。在計劃的時間間隔內，相對於最終體重計算出相對於體重的器官重量。在計劃的時間間隔內，相對於腦重量計算相對於腦重量的器官重量。

描述性統計分析：將藉由數據集報告平均值、標準差（或在認為合適時為變化係數或標準誤差之%）、百分比、數字及/或發病率。

推斷統計分析：所有統計分析均在5%的顯著性水平下進行。除非另有說明，所有成對比較均使用雙面測試進行，並以1%和5%的水平報告。所關注之成對比較如下所列： ● 第2組與第1組 ● 第3組與第1組

在可能之情況下，根據下面的矩陣進行分析，但排除少於3次觀察之任何組。

表37.統計矩陣

用於推理分析之變量	統計方法
參數/Xon參數
體重	X
體重增加	X
血液學變量	X
凝固變量	X
臨床化學變量	X
尿液分析變量	X
器官重量	X
相對於體重之器官重量	X
相對於大腦重量之器官重量	X

參數/非參數：萊文尼測試（Levene's Test）用於評估組方差的同質性。如果萊文尼測試不顯著或克拉斯卡-瓦立斯測試（Kruskal-Wallis test）不顯著，則使用整體單向ANOVA F測試對各組進行比較。如果總體F測試或克拉斯卡-瓦立斯測試被認為是顯著的，則分別使用鄧尼特測試（Dunnett's test）或鄧恩測試（Dunn’s test）進行成對比較。 1.11結果

紅血球計數、紅血球分佈寬度及網狀紅血球計數之變化：圖38A至38C顯示了投與15(s)-HEPE EE或安慰劑之大鼠的紅血球計數（RBC）、紅血球分佈寬度（RDW）及網狀紅血球計數（RETIC）的變化。藉由每週7天每日一次之經口管飼，投與15(S)-HEPE EE及安慰劑持續最少26週。每隻動物之體積按最近的體重量測結果計。如表38所示，6 g/kg/天之最高劑量具有較差耐受性，且被較低之3 g/kg/天代替。

表38.投與15(S)-HEPE EE的大鼠中RBC、RDW及RETIC之變化

研究	26週大鼠研究（CRL509554）
15(S)-HEPE EE劑量（mg/kg/天）	0 （媒劑）	2000	6000/3000
紅血球計數（RBC）（10^12/L）平均值（SD）
8.38	8.67	8.81**
0.42	0.41	0.42
紅血球分佈寬度（RDW）（%）平均值（SD）
14.98	13.91**	13.60**
1.23	0.96	0.57
網狀紅血球計數（RETIC）（10^9/L）平均值（SD）
219.51	154.60*	141.46**
40.41	32.31	30.57
Anova及鄧尼特：* = p ≤ 0.05；** = p ≤ 0.01 所有呈現值均在雄性中觀測到 6 g/kg/天之最高劑量具有較差耐受性，且被較低之3 g/kg/天劑量代替

RBC之變化：圖38A及表38顯示，與對照組相比，投與3 g/kg/天之劑量導致RBC顯著增加。

RDW之變化：圖38B及表38顯示，與對照組相比，投與2 g/kg/天與3 g/kg/天之劑量均導致RDW顯著降低。

RETIC之變化：圖38C及表38顯示，與對照組相比，投與2 g/kg/天與3 g/kg/天之劑量均導致RETIC顯著降低。

此等結果表明，15-HEPE對影響血紅蛋白及紅血球的多種病況具有治療潛力。

凝血酶原時間、活化部分凝血活素時間及纖維蛋白原濃度之變化：圖39A至39C顯示了投與15(s)-HEPE EE或安慰劑之大鼠的凝血酶原時間（PT）、活化部分凝血活素時間（APTT）及纖維蛋白原（FIB）濃度之變化。藉由每週7天每日一次之經口管飼，投與15(S)-HEPE EE及安慰劑持續至少26週。每隻動物之體積按最近的體重量測結果計。如表39所示，6 g/kg/天之最高劑量具有較差耐受性，且被較低之3 g/kg/天代替。

表39.投與15(S)-HEPE EE之大鼠中PT、APTT及FIB濃度之變化

研究	26週大鼠研究（CRL509554）
15(S)-HEPE EE劑量（mg/kg/天）	0 （媒劑）	2000	6000/3000
凝血酶原時間（PT）（秒）平均值	10.25	10.69**	10.81 **
（SD）	0.34	0.41	0.47
活化部分凝血活素時間（APTT）（秒）平均值	12.92	15.03 *	15.73**
（SD）	2.12	2.64	2.00
血纖維蛋白原（FIB）（g/L）平均值	2.61	2.35**	2.26**
（SD）	0.26	0.29	0.24
Anova及鄧尼特：* = p ≤ 0.05；** = p ≤ 0.01 所有呈現值均在雄性中觀測到 6 g/kg/天之最高劑量具有較差耐受性，且被較低之3 g/kg/天劑量代替

PT之變化：圖39A及表39顯示，與對照組相比，投與2 g/kg/天與3 g/kg/天之劑量均導致PT顯著提高。

APTT之變化：圖39B及表39顯示，與對照組相比，投與2 g/kg/天與3 g/kg/天之劑量均導致APTT顯著提高。

FIB濃度之變化：圖39C及表39顯示，與對照組相比，投與2 g/kg/天與3 g/kg/天之劑量均導致FIB濃度顯著降低。

此等結果表明15-HEPE具有抗凝和抗血栓形成作用。

在下文中闡述了本揭示案之各種實施例：

段落A.一種治療及/或預防有需要個體之代謝症候群之方法，該方法包含向該個體投與15-HEPE、15-HETrE或包含15-HEPE及/或HETrE之組成物。

段落B.一種治療及/或預防有需要個體之心血管代謝疾病之方法，該方法包含向該個體投與15-HEPE、15-HETrE或包含15-HEPE及/或HETrE之組成物。

段落C.一種治療及/或預防有需要個體之代謝症候群及/或心血管代謝疾病之方法，該方法包含向該個體投與至多約8 g的包含15-HEPE及/或15-HETrE之組成物，其中該15-HEPE及/或15-HETrE占該組成物中所有脂肪酸之至少約90重量%。

段落D.一種治療及/或預防有需要個體之代謝症候群及/或心血管代謝疾病之方法，該等方法包含向該個體投與至多約8 g的包含15-HEPE之組成物，其中該15-HEPE占該組成物中所有脂肪酸之至少約90重量%，並且其中該個體展現以下中之一或多者：二酸甘油酯、甘油磷脂、肝脂肪、血壓、腰圍及/或游離脂肪酸含量之減少；及/或甘油磷脂含量之增加。

段落E.一種預防個體之非酒精性脂肪變性肝炎（NASH）之第一階段發展為NASH之第二階段的方法，該方法包含向該個體投與至多約8 g的包含15-HEPE之組成物。

段落F.如段落E之方法，其中所述第一階段為代謝過載、肝脂肪含量及脂毒性增加、細胞應激細胞凋亡、發炎及/或纖維發生重塑。

段落G.如在段落E或或段落F中之方法，其中所述第二階段為肝脂肪含量及脂毒性增加、細胞應激細胞凋亡、發炎及/或纖維發生重塑。

段落H.一種治療及/或預防有需要個體中之患有非酒精性脂肪肝病（NAFLD）、代謝症候群及/或心血管代謝疾病之個體之心血管疾病的方法，該方法包含向該個體投與15-HEPE、15-HETrE或包含15-HEPE及/或HETrE之組成物。

段落I.一種治療及/或預防有需要個體中之患有非酒精性脂肪肝病（NAFLD）、代謝症候群或心血管代謝疾病之個體之心血管疾病的方法，該方法包含向該個體投與至多約8 g的包含15-HEPE之組成物，其中該15-HEPE占該組成物中所有脂肪酸之至少約90重量%。

段落J.如在段落A至I中任一項中之方法，其中該個體展現以下中之一或多者之減少：α-平滑肌作用（α-SMA）、金屬肽酶抑制劑-1（TIMP-1）、轉型生長因子β-β（TGF-β）及/或膠原蛋白1型含量。

段落K.如在段落A至C或E至J中任一項中之方法，該個體展現二酸甘油酯、肝脂肪、血壓、腰圍及/或游離脂肪酸含量之減少及/或甘油磷脂含量之增加。

段落L.如在段落A至K中任一項中之方法，其中該個體展現鹼性磷酸鹽（ALP）含量之降低。

段落M.如在段落A至L中任一項中之方法，其中該個體展現血清丙胺酸轉胺酶（ALT）、天門冬胺酸轉胺酶（AST）及/或膽紅素（BUN）含量之減少。

段落N.如在段落A至M中任一項中之方法，其中該個體展現纖維化區域之減少。

段落O.如在段落A至N中任一項中之方法，該個體展現血紅蛋白A1C（HbA1C）、胰島素抗性之恆穩模型評定（HOMA-IR）及/或脂肪組織胰島素抗性（adipo-IR）含量之減少。

段落P.如在段落H至O中任一項中之方法，其中該NAFLD為非酒精性脂肪性肝炎（NASH）。

段落Q.如在段落B至D或F至P中任一項中之方法，其中該心血管代謝疾病或心血管疾病為以下中之一或多者：血脂異常、高脂質血症、高膽固醇血症、高三酸甘油酯血症、原發性高膽固醇血症、原發性高脂質血症、常見原發性高脂質血症、常見高膽固醇血症、家族性高脂質血症、家族性原發性高脂質血症、家族性高膽固醇血症、家族性高三酸甘油酯血症、家族性混合型高脂質血症、家族性脂蛋白元b-100缺陷症、繼發性高脂質血症、混合型高脂質血症、心血管疾病、殘餘心血管風險（residual cardiovascular risk）、預防動脈粥樣硬化斑塊形成/進展、微血管疾病、大血管疾病、動脈粥樣硬化、冠狀動脈粥樣硬化、舒張功能障礙、心血管風險降低、預防主要冠狀動脈事件、預防主要不良心血管事件、預防缺血事件、二級/一級預防心血管事件、預防心血管死亡、心肌梗塞、中風、絞痛症、正常內皮功能之恢復、糖尿病、糖尿病（diabetes mellitus）、胰島素抗性、高胰島素血症、高血糖症、血糖代謝障礙（dysglycemia）、誘導血糖控制、葡萄糖耐量異常及空腹葡萄糖異常。

段落R.如段落Q中之方法，其中所述微血管疾病為視網膜病變、腎病變、神經病變或其組合。

段落S.如段落Q之方法，其中所述大血管疾病為中風、周邊血管疾病、肢體缺血、心臟病或其組合。

段落T.如在段落A至S中任一項中之方法，其中該個體展現極低密度脂蛋白膽固醇（VLDL-C）、非高密度脂蛋白膽固醇（非HDL-C）及/或殘粒樣膽固醇（RLP-C）之降低及/或高密度脂蛋白膽固醇（HDL-C）含量。

段落U.如在段落A至T中任一項中之方法，其中該個體展現肝臟硬度、纖維化-4（FIB-4）、增強肝纖維化（ELF）評分及/或NAFLD評分（NFS）之降低。

段落V.如在段落A至U中任一項中之方法，其中該個體展現選自由以下組成之群的發炎性及促纖維化蛋白之減少：纖維蛋白溶酶原活化劑抑制劑-1（PAI-1）、金屬肽酶抑制劑-1（TIMP-1）、二肽基肽酶4（DPP4）、trem樣轉錄物2（TLT2）、趨化介素（C-C基元）配體16（CCL16）、單核球趨化蛋白-1（MCP-1）、血清澱粉樣蛋白A4（SAA4）、磷酸肌醇3（PI3）、硫氧還蛋白還原酶（TR）、白血球免疫球蛋白樣受體B1（LILBR1）、胺氧化酶，含銅3（AOC3）、絲胺酸蛋白酶2（PRSS2），及腫瘤壞死因子配體超家族成員11A（TNRSF11A）。

段落W.一種治療及/或預防個體之膽汁鬱積性肝病之方法，該方法包含向該個體投與15-HEPE、15-HETrE或包含15-HEPE及/或15-HETrE之組成物。

段落X.如段落W中之方法，其中該膽汁鬱積性肝病為原發性膽汁性膽管炎（PBC）、原發性硬化性膽管炎（PSC）、進行性家族性肝內膽汁鬱積或其組合。

段落Y.如段落W或段落X中之方法，其中該膽汁鬱積性肝病係由藥物誘發之肝臟損傷、全營養注射劑（TPN）、病毒及酒精性肝炎、繼發於全身性疾病之膽汁鬱積、移植功能障礙、肝移植後膽汁鬱積、胰臟炎、輸膽管結石、米氏症候群（Mirizzi syndrome）、遺傳疾病、惡性病或其組合引起。

段落Z.如段落Y之方法，其中該惡性病為肝細胞癌、膽管腫瘤、胰臟癌或其組合。

段落AA.如在段落W至Z中任一項中之方法，其中該個體展現選自由以下組成之群的細胞介素及/或趨化介素之減少：α-平滑肌作用（α-SMA）、金屬肽酶抑制劑-1（TIMP-1）、轉型生長因子β-β（TGF-β）及膠原蛋白1型含量。

段落BB.一種治療及/或預防個體之腎臟疾病之方法，該方法包含向該個體投與15-HEPE及/或15-HETrE或包含15-HEPE及/或15-HETrE之組成物，其中該個體具有至少一個腎臟疾病之風險因素。

段落CC.如段落BB之方法，其中該腎臟疾病係選自由以下組成之群：腎臟纖維化、小管間質性纖維化、慢性腎臟疾病、嚴重間質性纖維化、腎間質性纖維化及末期腎臟疾病。

段落DD.如段落CC之方法，其中該腎臟疾病導致纖維化。

段落EE.如在段落BB至DD中任一項中之方法，其中該至少一個腎臟疾病之風險因素係選自由以下組成之群：糖尿病、高血壓、心血管疾病、絲球體腎炎及多囊性腎臟疾病。

段落FF.如在段落BB至EE中任一項中之方法，其中該個體展現腎臟羥脯胺酸含量之減少。

段落GG.如在段落BB至FF中任一項中之方法，其中該個體展示未增加α-SMA、TIMP-1、TGF-β及/或膠原蛋白1型含量。

段落HH.如在段落BB至GG中任一項中之方法，其中該個體展現α-SMA、TIMP-1、TGF-β及/或膠原蛋白1型含量之減少。

段落II.如在段落AA至HH中任一項中之方法，其中該個體展現肝臟中之促纖維化細胞介素之減少。

段落JJ.如段落II之方法，其中該促纖維化細胞介素為以下中之一或多者：α-SMA、TIMP-1、TGF-β、膠原蛋白1型、介白素1β（IL-1β）、介白素-6（IL-6）、介白素-6（IL-8）、介白素-13（IL-13）、腫瘤壞死因子（TNF-α）、TNF樣配體1A（TL1A）、芳基烴受體（AhR）、介白素-17（IL-17）、介白素-23（IL-23）、介白素-11（IL-11）及/或介白素-33（IL-33）。

段落KK.如在段落A至JJ中任一項中之方法，其中該個體展現血管黏附分子及/或趨化介素及/或腫瘤壞死因子受體超家族成員之減少。

段落LL.如在段落A至KK中任一項中之方法，其中該15-HEPE、15-HETrE或該包含15-HEPE及/或15-HETrE之組成物經口投與。

段落MM.如在段落A至LL中任一項中之方法，其中該15-HEPE及/或15-HETrE呈游離酸形式、酯化形式或鹽形式。

段落NN.如段落MM之方法，其中該酯化形式係烷基酯形式或三酸甘油酯形式。

段落OO.如在段落A至NN中任一項中之方法，其中該15-HEPE包含15(S)-HEPE、15(R)-HEPE或其組合及/或該15-HETrE包含15(S)-HETrE、15(R)-HETrE或其組合。

段落PP.如在段落A至OO中任一項中之方法，其中該組成物包含約1 g至約2 g的15-HEPE及/或15-HETrE。

段落QQ.如在段落A至PP中任一項中之方法，其中該組成物包含約2 g至更多的15-HEPE及/或15-HETrE。

段落RR.如在段落A至QQ中任一項中之方法，其中該組成物包含約1 g或約2 g的15-HEPE及/或15-HETrE。

段落SS.如在段落A至RR中任一項中之方法，其中該組成物包含約10 mg至約10,000 mg的15-HEPE及/或15-HETrE。

段落TT.如在段落A至SS中任一項中之方法，其中該組成物包含約5 mg/kg、約50 mg/kg、約250 mg/kg或約500 mg/kg的15-HEPE及/或15-HETrE。

段落UU.如在段落A至TT中任一項中之方法，其中該15-HEPE及/或15-HETrE占該組成物中所有脂肪酸之至少約90重量%。

段落VV.如在段落A至UU中任一項中之方法，其中該組成物以每日1至8個膠囊投與。

段落WW.如在段落A至C或H至VV中任一項中之方法，其中該方法包含向該個體投與15-HEPE或包含15-HEPE之組成物。

段落XX.如在段落A至C或H至VV中任一項中之方法，其中該方法包含向該個體投與15-HETrE或包含15-HETrE之組成物。

段落YY.一種治療及/或預防有需要個體之血液學病症之方法，該方法包含向該個體投與15-羥基二十碳五烯酸（15-HEPE）或包含15-羥基二十碳五烯酸（15-HEPE）之組成物。

段落ZZ.如段落YY之方法，其中該血液學病症係選自由以下組成之群：貧血、血癌和凝血缺陷。

段落AB.如段落ZZ之方法，其中該貧血係選自由以下組成之群：營養性貧血及非營養性貧血。

段落AC.如段落ZZ之方法，其中該血癌係選自由以下組成之群：淋巴瘤、白血病及骨髓瘤。

段落AD.如段落ZZ之方法，其中該凝血缺陷係選自由以下組成之群：血栓好發症、血友病、馮威里氏病及血小板減少症。

段落AE.一種治療及/或預防有需要個體之血紅蛋白病症之方法，該方法包含向該個體投與15-HEPE或包含15-羥基二十碳五烯酸（15-HEPE）之組成物。

段落AF.一種治療及/或預防有需要個體之紅血球病症之方法，該方法包含向該個體投與15-HEPE或包含15-羥基二十碳五烯酸（15-HEPE）之組成物。

段落AG.一種治療及/或預防有需要個體之血紅蛋白病症及/或紅血球病症之方法，該方法包含向該個體投與至多約8 g的包含15-HEPE的組成物，其中該15-HEPE占該組成物中所有脂肪酸之至少約90重量%。

段落AH.一種治療及/或預防有需要個體之血紅蛋白病症及/或紅血球病症之方法，該方法包含向該個體投與至多約8 g的包含15-HEPE之組成物，其中該15-HEPE占該組成物中所有脂肪酸之至少約90重量%，且其中該個體展現以下中之一或多者：（a）紅血球計數增加；（b）紅血球分佈寬度減少；及/或（c）網狀紅血球計數減少。

段落AI.如段落AH之方法，其中與未接受該組成物之對照個體相比，該個體之紅血球計數增加至少10%、至少15%、至少20%、至少25%或至少30%。

段落AJ.如段落AI之方法，其中該對照個體具有約4×10¹² 個紅血球/L之紅血球計數。

段落AK.如段落AH之方法，其中與未接受該組成物之對照個體相比，該個體之紅血球分佈寬度減少約15至20%、約20至25%、約25至30%、約30至35%或約35至40%。

段落AL.如段落AK之方法，其中該對照個體具有大於15%之紅血球分佈寬度。

段落AM.如段落AH之方法，其中與未接受該組成物之對照個體相比，該個體之網狀紅血球計數減少至少約5%、至少約10%、至少約15%或至少約20%。

段落AN.如段落AM之方法，其中該對照個體具有大於紅血球總數5%之網狀紅血球計數。

段落AO.一種治療及/或預防有需要個體之溶血性貧血之方法，該方法包含向該個體投與至多約8 g的包含15-HEPE之組成物，其中該15-HEPE占該組成物中所有脂肪酸之至少約90重量%。

段落AP.如段落AO之方法，其中該溶血性貧血係遺傳性溶血性貧血或獲得性溶血性貧血。

段落AQ.如段落AP之方法，其中該遺傳性溶血性貧血係選自由以下組成之群：鐮狀細胞疾病、鐮狀細胞貧血、β-地中海型貧血及遺傳性球形紅血球症。

段落AR.如段落AP之方法，其中該獲得性溶血性貧血係選自由以下組成之群：繼發於感染、藥物、惡性血液病、自體免疫疾病、脾功能亢進症、機械性心臟瓣膜及輸血。

段落AS.如段落AQ之方法，其中該鐮狀細胞疾病及鐮狀細胞貧血與鐮狀細胞危機、血管閉塞性危機及/或脾隔離有關。

段落AT.如前述段落YY至AS中任一項之方法，其中該15-HEPE呈乙酯（15-HEPE EE）之形式或該15-HEPE呈光活性酯（15(S)-HEPE EE）之形式。

段落AU.一種如段落AE至AN中任一項之方法，其中該血紅蛋白病症及/或紅血球病症係選自由以下組成之群：遺傳性溶血性貧血、獲得性溶血性貧血、範可尼貧血、缺鐵性貧血、葉酸缺乏、B12缺乏症及骨髓發育不良症候群。

段落AV.如段落YY至AG或AO至AT中任一項之方法，其中該個體展現紅血球計數增加、網狀紅血球計數減少及紅血球分佈寬度減少。

段落AW.一種治療及/或預防有需要個體之血液學病症及/或血液病症之方法，該方法包含向該個體投與至多約8 g的包含15-HEPE的組成物，其中該15-HEPE占該組成物中所有脂肪酸之至少約90重量%。

段落AX.如段落AW之方法，其中該15-HEPE呈乙酯（15-HEPE EE）之形式或該15-HEPE呈光活性酯（15(S)-HEPE EE）之形式。

段落AY.如段落AW之方法，其中該血液學病症及/或血液病症係選自由以下組成之群：遺傳性溶血性貧血、獲得性溶血性貧血、範可尼貧血、缺鐵性貧血、葉酸缺乏、B12缺乏症及骨髓發育不良症候群。

段落AZ.如段落AY之方法，其中該溶血性貧血係遺傳性溶血性貧血或獲得性溶血性貧血。

段落BA.如段落AZ之方法，其中該遺傳性溶血性貧血係選自由以下組成之群：鐮狀細胞疾病、鐮狀細胞貧血、β-地中海型貧血及遺傳性球形紅血球症。

段落BC.如段落AZ之方法，其中該獲得性溶血性貧血係選自由以下組成之群：繼發於感染、藥物、惡性血液病、自體免疫疾病、脾功能亢進症、機械性心臟瓣膜及輸血。

段落BD.如段落BA之方法，其中該鐮狀細胞疾病及鐮狀細胞貧血與鐮狀細胞危機、血管閉塞性危機及/或脾隔離有關。

段落BE.如段落AW至BD中任一項之方法，其中該個體展現紅血球計數增加、網狀紅血球計數減少及紅血球分佈寬度減少。

段落BF.一種治療及/或預防有需要個體之血栓好發症病症之方法，該方法包含向該個體投與15-HEPE或包含15-羥基二十碳五烯酸（15-HEPE）之組成物。

段落BG.一種治療及/或預防有需要個體之血栓好發症之方法，該方法包含向該個體投與至多約8 g的包含15-HEPE之組成物，其中該15-HEPE占該組成物中之所有脂肪酸的至少約90重量%。

段落BH.一種治療及/或預防有需要個體之血栓好發症之方法，該方法包含向該個體投與至多約8 g的包含15-HEPE之組成物，其中該15-HEPE占該組成物中所有脂肪酸的至少約90重量%，並且其中該個體展現以下中之一或多者：（a）凝血酶原時間增加；（b）活化部分凝血活素時間增加；及/或（c）纖維蛋白原濃度減少。

段落BI.一種治療及/或預防有需要個體之靜脈血栓性栓塞之方法，該方法包含向該個體投與至多約8 g的包含15-HEPE之組成物，其中該15-HEPE占該組成物中所有脂肪酸的至少約90重量%。

段落BJ.一種治療及/或預防有需要個體之動脈血栓形成之方法，該方法包含向該個體投與至多約8 g的包含15-HEPE之組成物，其中該15-HEPE占該組成物中所有脂肪酸的至少約90重量%。

段落BK.一種預防有需要個體中之栓塞之方法，該方法包含向該個體投與至多約8 g的包含15-羥基二十碳五烯酸（15-HEPE）之組成物，其中該15-HEPE占該組成物中所有脂肪酸的至少約90重量%。

段落BL.如段落BI至BK之方法，其中該第一階段係血栓之形成。

段落BM.如段落BF至BG或BI至BL中任一項之方法，其中該個體展現凝血酶原時間增加、活化部分凝血活素時間增加及纖維蛋白原濃度降低。

段落BN.如段落YY至BM中任一項之方法，其中該15-HEPE係經口投與。

段落BO.如段落YY至BN中任一項之方法，其中該組成物以每日1至8個膠囊投與。

段落BP.如段落YY至BO中任一項之方法，其中該15-HEPE呈游離酸形式、酯化形式或鹽形式。

段落BQ.如段落YY至BP中任一項之方法，其中該組成物包含約1 g至約2 g的15-HEPE。

段落BR.如段落YY至BQ中任一項之方法，其中該組成物包含約2 g或更多的15-HEPE。

段落BS.如段落YY至BR中任一項之方法，其中該組成物包含約5 mg/kg、約50 mg/kg、約250 mg/kg或約500 mg/kg的或15-HEPE。

無

[圖1]為實例1中所描述之研究及其持續時間之示意圖。

[圖2]顯示根據實例1中所描述之研究之動物的體重變化。

[圖3]顯示根據實例1中所描述之研究在處死動物當天之體重。

[圖4A至4D]顯示根據實例1中所描述之研究，在處死當天動物之腎臟重量及腎臟重量與體重比率。

[圖5]顯示根據實例1中所描述之研究之動物的腎臟羥脯胺酸含量。

[圖6A至6G]顯示根據實例1中所描述之研究之動物的天狼星紅染色。

[圖7]顯示描繪根據實例1中所描述之研究之動物之天狼星紅陽性面積（%）之圖。

[圖8A至8D]分別顯示根據實例1中所描述之研究之動物的α-SMA、TIMP-1、TGF-β及膠原蛋白1型的基因表現分析。

[圖9]為實例2中所描述之研究及其持續時間之示意圖。

[圖10]顯示根據實例2中所描述之研究之動物的體重變化。

[圖11]顯示根據實例2中所描述之研究在處死動物當天之體重。

[圖12A及12B]分別顯示根據實例2中所描述之研究，在處死當天動物之肝臟重量及肝臟重量與體重比率。

[圖13]顯示根據實例2中所描述之研究之動物之血清ALT含量的變化。

[圖14]顯示根據實例2中所描述之研究之動物之血清總膽紅素含量的變化。

[圖15A至15E]顯示根據實例2中所描述之研究之動物的天狼星紅染色及纖維化區域。

[圖16]顯示描繪根據實例2中所描述之研究之動物的天狼星紅陽性面積（%）之圖。

[圖17A至17D]分別顯示根據實例2中所描述之研究之動物的α-SMA、TIMP-1、TGF-β及膠原蛋白1型的基因表現分析。

[圖18A及18B]顯示根據實例3中所描述之研究之DS102（15-HEPE）誘導TGF-β之抑制。

[圖18C至18G]顯示根據實例3中所描述之研究之DS102分別對I型TGF-β受體、II型TGF-β受體、III型TGF-β受體、EGFR及小窩蛋白-1之膜易位及降解的作用。

[圖19]為實例4中所描述之研究及其持續時間之示意圖。

[圖20]顯示根據實例4中所描述之研究之患者的基線脂質組學概況。

[圖21A至21C]為描繪分別投與艾培利頓（Epeleuton）（15-HEPE）及安慰劑之患者中之胰島素、葡萄糖及游離脂肪酸含量之變化的圖。

[圖22A及22B]為描繪分別投與艾培利頓及安慰劑之患者中之HOMA-IR及apido-IR含量之變化的圖。

[圖23A及23B]為描繪在分別投與艾培利頓及安慰劑後第16週患者之平均HbA1C含量的變化和HbA1C含量≥6.5%之患者比例的圖。

[圖24A及24B]為描繪分別投與艾培利頓及安慰劑之患者之脂質概況的平均值變化及中值（%）變化的圖。

[圖25A至25C]為描繪分別投與艾培利頓及安慰劑之患者中之膽固醇、三酸甘油酯及VLDL-C含量的變化的圖。

[圖26]為描繪投與DS102之患者之肝毒性脂質概況的變化的圖表。

[圖27]為驗證使用OWL肝臟護理測試投與DS102使NASH消退之圖。

[圖28]為描繪投與DS102及安慰劑之患者中由CAP引起之肝脂肪含量的變化的圖。

[圖29A至29C]為描繪投與DS102及安慰劑之患者中之發炎性及促纖維化蛋白含量的變化的圖表。

[圖30]為描繪投與DS102及安慰劑之患者中包括NASH發展目標之蛋白表現之變化的圖。

[圖31]為描繪投與DS102及安慰劑之患者中之發炎性及促纖維化蛋白之減少的火山圖。

[圖32]為描繪投與DS102及安慰劑之患者中之血管黏附分子之變化的圖。

[圖33]為描繪投與DS102及安慰劑之患者中之心血管風險蛋白之變化的圖。

[圖34]為描繪投與DS102及安慰劑之患者中之趨化介素之變化的圖。

[圖35]為描繪投與DS102及安慰劑之患者中之腫瘤壞死因子受體超家族成員之變化的圖。

[圖36A及36B]為描繪投與DS102及安慰劑之患者中之ALP含量減少的圖。

[圖37]為15-HEPE乙酯最低血漿相對濃度之盒狀圖。

[圖38A至38C]為描繪分別投與15(S)-HEPE EE及安慰劑的大鼠中紅血球計數、紅血球分佈寬度及網狀紅血球計數的平均值變化和標準差的柱狀圖。

[圖39A至39C]為描繪分別投與15(S)-HEPE EE及安慰劑的大鼠中凝血酶原時間、活化部分凝血活素時間及纖維蛋白原濃度的平均值變化和標準差的柱狀圖。

Claims

一種治療及/或預防有需要個體之血液學病症之方法，該方法包含向該個體投與15-羥基二十碳五烯酸（15-HEPE）或包含15-HEPE之組成物。
一種治療及/或預防有需要個體之血紅蛋白病症之方法，該方法包含向該個體投與15-HEPE或包含15-HEPE之組成物。
一種治療及/或預防有需要個體之紅血球病症之方法，該方法包含向該個體投與15-HEPE或包含15-HEPE之組成物。
一種治療及/或預防有需要個體之溶血性貧血之方法，該方法包含向該個體投與至多約8 g的包含15-HEPE之組成物。
如請求項1之方法，其中該血液學病症係選自由以下組成之群：貧血、血癌和凝血缺陷。
如請求項5之方法，其中該貧血係營養性貧血、非營養性貧血或其組合。
如請求項5之方法，其中該血癌係選自由以下組成之群：淋巴瘤、白血病及骨髓瘤。
如請求項5之方法，其中該凝血缺陷係選自由以下組成之群：血栓好發症、血友病、馮威里氏病（Von Willebrand disease）及血小板減少症。
如前述請求項中任一項之方法，其中與未接受該15-HEPE或該組成物之對照個體相比，該個體具有紅血球計數增加、紅血球分佈寬度減少及/或網狀紅血球計數減少。
如前述請求項中任一項之方法，其中與未接受該15-HEPE或該組成物之對照個體相比，該個體的紅血球計數增加至少10%、至少15%、至少20%、至少25%或至少30%。
如前述請求項中任一項之方法，其中與未接受該15-HEPE或該組成物之對照個體相比，該個體的紅血球分佈寬度減少約15%至約20%、約20%至約25%、約25%至約30%、約30%至約35%或約35%至約40%。
如請求項9至11中任一項之方法，其中該對照個體之紅血球分佈寬度大於15%。
如前述請求項中任一項之方法，其中與未接受該15-HEPE或該組成物之對照個體相比，該個體的網狀紅血球計數減少至少約5%、至少約10%、至少約15%或至少約20%。
如請求項9至13中任一項之方法，其中該對照個體之網狀紅血球計數大於紅血球總數的5%。
如請求項2至14中任一項之方法，其中該血紅蛋白病症及/或紅血球病症係選自由以下組成之群：遺傳性溶血性貧血、獲得性溶血性貧血、範可尼貧血（Fanconi anemia）、缺鐵性貧血、葉酸缺乏症、B12缺乏症及骨髓發育不良症候群。
如請求項15之方法，其中該遺傳性溶血性貧血係選自由以下組成之群：鐮狀細胞疾病、鐮狀細胞貧血、β-地中海型貧血及遺傳性球形紅血球症。
如請求項15之方法，其中該獲得性溶血性貧血係因選自由以下組成之群的病症或病況而獲得：繼發於原發感染的病況、藥物、惡性血液病、自體免疫疾病、脾功能亢進症、安置機械性心臟瓣膜及輸血。
如請求項16之方法，其中該鐮狀細胞疾病及鐮狀細胞貧血與鐮狀細胞危機、血管閉塞性危機及/或脾隔離有關。
一種治療及/或預防有需要個體之血栓好發症病症之方法，該方法包含向該個體投與15-HEPE或包含15-HEPE之組成物。
一種治療及/或預防有需要個體之血栓好發症之方法，該方法包含向該個體投與15-HEPE或至多約8 g的包含15-HEPE之組成物。
一種治療及/或預防有需要個體之靜脈血栓性栓塞之方法，該方法包含向該個體投與15-HEPE或至多約8 g的包含15-HEPE之組成物。
一種治療及/或預防有需要個體之動脈血栓形成之方法，該方法包含向該個體投與15-HEPE或至多約8 g的包含15-HEPE之組成物。
一種預防有需要個體之栓塞之方法，該方法包含向該個體投與15-HEPE或至多約8 g的包含15-HEPE之組成物。
如請求項19至23中任一項之方法，其中與未接受該組成物之對照個體相比，該個體的凝血酶原時間增加、活化部分凝血活素時間增加及/或纖維蛋白原濃度降低。
如在前述請求項中任一項中之方法，其中該15-HEPE呈游離酸形式、酯化形式、綴合物形式或鹽形式。
如前述請求項中任一項之方法，其中該15-HEPE占該組成物中所有脂肪酸之至少約90重量%。
如前述請求項中任一項之方法，其中該組成物包含至多約2 g之15-HEPE。
如前述請求項中任一項之方法，其中該組成物以每日1至8個膠囊投與。
如前述請求項中任一項之方法，其中該組成物包含至少2 g之15-HEPE。
如前述請求項中任一項之方法，其中調配該組成物以向個體提供每公斤體重約5 mg（mg/kg）、約50 mg/kg、約250 mg/kg或約500 mg/kg之15-HEPE。
如前述請求項中任一項之方法，其中該15-HEPE或該包含15-HEPE之組成物經口投與。
如前述請求項中任一項之方法，其中該15-HEPE呈游離酸形式、酯化形式、綴合物形式或鹽形式。
如前述請求項中任一項之方法，其中15-HEPE之酯化形式係甲酯、乙酯或其組合。