RU2783498C2 - Пути применения триацетил-3-гидроксифениладенозина в лечении воспалительных процессов в сосудах или улучшении функций эндотелия сосудов - Google Patents
Пути применения триацетил-3-гидроксифениладенозина в лечении воспалительных процессов в сосудах или улучшении функций эндотелия сосудов Download PDFInfo
- Publication number
- RU2783498C2 RU2783498C2 RU2018143953A RU2018143953A RU2783498C2 RU 2783498 C2 RU2783498 C2 RU 2783498C2 RU 2018143953 A RU2018143953 A RU 2018143953A RU 2018143953 A RU2018143953 A RU 2018143953A RU 2783498 C2 RU2783498 C2 RU 2783498C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- imm
- vessels
- mice
- triacetyl
- endothelial
- Prior art date
Links
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 title abstract description 22
- 210000003038 Endothelium Anatomy 0.000 title abstract description 5
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims abstract description 21
- 229940079593 drugs Drugs 0.000 claims abstract description 14
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims abstract description 13
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 claims abstract description 5
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 claims abstract description 3
- VOGJLGJXZOVCHK-DXBBTUNJSA-N C(C)(=O)[C@]1([C@]([C@]([C@@](O1)(N1C=NC=2C(N)=NC=NC1=2)C1=CC(=CC=C1)O)(O)C(C)=O)(O)C(C)=O)CO Chemical compound C(C)(=O)[C@]1([C@]([C@]([C@@](O1)(N1C=NC=2C(N)=NC=NC1=2)C1=CC(=CC=C1)O)(O)C(C)=O)(O)C(C)=O)CO VOGJLGJXZOVCHK-DXBBTUNJSA-N 0.000 claims description 13
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 6
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 4
- 239000007924 injection Substances 0.000 claims description 3
- 238000002347 injection Methods 0.000 claims description 3
- 239000002775 capsule Substances 0.000 claims description 2
- 239000006187 pill Substances 0.000 claims description 2
- 239000003826 tablet Substances 0.000 claims description 2
- 238000009472 formulation Methods 0.000 claims 2
- 230000023404 leukocyte cell-cell adhesion Effects 0.000 claims 2
- 229940023488 Pill Drugs 0.000 claims 1
- 230000002459 sustained Effects 0.000 claims 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 37
- 210000004027 cells Anatomy 0.000 abstract description 7
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 abstract description 5
- 210000002865 immune cell Anatomy 0.000 abstract 3
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract 1
- 206010048554 Endothelial dysfunction Diseases 0.000 description 31
- 210000000265 Leukocytes Anatomy 0.000 description 21
- HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N (3β)-Cholest-5-en-3-ol Chemical compound C1C=C2C[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H]([C@H](C)CCCC(C)C)[C@@]1(C)CC2 HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N 0.000 description 20
- 210000004204 Blood Vessels Anatomy 0.000 description 18
- 230000002792 vascular Effects 0.000 description 17
- 102000000852 Tumor Necrosis Factor-alpha Human genes 0.000 description 13
- 108010001801 Tumor Necrosis Factor-alpha Proteins 0.000 description 13
- 230000003511 endothelial Effects 0.000 description 13
- 230000028709 inflammatory response Effects 0.000 description 12
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 12
- MWUXSHHQAYIFBG-UHFFFAOYSA-N nitric oxide Chemical compound O=[N] MWUXSHHQAYIFBG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- 210000004369 Blood Anatomy 0.000 description 11
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 11
- 206010003210 Arteriosclerosis Diseases 0.000 description 10
- 229940107161 Cholesterol Drugs 0.000 description 10
- 201000001320 atherosclerosis Diseases 0.000 description 10
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 10
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 9
- SONNWYBIRXJNDC-VIFPVBQESA-N Phenylephrine Chemical compound CNC[C@H](O)C1=CC=CC(O)=C1 SONNWYBIRXJNDC-VIFPVBQESA-N 0.000 description 9
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 9
- 235000012000 cholesterol Nutrition 0.000 description 9
- 235000009200 high fat diet Nutrition 0.000 description 9
- 230000003845 vascular endothelial function Effects 0.000 description 9
- 210000002966 Serum Anatomy 0.000 description 8
- XZWYZXLIPXDOLR-UHFFFAOYSA-N metformin Chemical compound CN(C)C(=N)NC(N)=N XZWYZXLIPXDOLR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 150000003626 triacylglycerols Chemical class 0.000 description 8
- 229960004373 Acetylcholine Drugs 0.000 description 7
- 108010028554 LDL Cholesterol Proteins 0.000 description 7
- 229960001802 Phenylephrine Drugs 0.000 description 7
- OIPILFWXSMYKGL-UHFFFAOYSA-N acetylcholine Chemical compound CC(=O)OCC[N+](C)(C)C OIPILFWXSMYKGL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 230000001154 acute Effects 0.000 description 7
- 235000014113 dietary fatty acids Nutrition 0.000 description 7
- 239000000194 fatty acid Substances 0.000 description 7
- 150000004665 fatty acids Chemical class 0.000 description 7
- WCUXLLCKKVVCTQ-UHFFFAOYSA-M potassium chloride Chemical compound [Cl-].[K+] WCUXLLCKKVVCTQ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 7
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N D-Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 6
- 210000002889 Endothelial Cells Anatomy 0.000 description 6
- 108010023302 HDL Cholesterol Proteins 0.000 description 6
- UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M NaHCO3 Chemical compound [Na+].OC([O-])=O UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 6
- 229940083618 Sodium Nitroprusside Drugs 0.000 description 6
- 102100019577 VCAM1 Human genes 0.000 description 6
- 108010000134 Vascular Cell Adhesion Molecule-1 Proteins 0.000 description 6
- GIRZNGMZUXTPTL-UHFFFAOYSA-N disodium;iron(3+);nitroxyl;pentacyanide;dihydrate Chemical compound O.O.[Na+].[Na+].[Fe+3].N#[C-].N#[C-].N#[C-].N#[C-].N#[C-].O=N GIRZNGMZUXTPTL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 6
- 230000002757 inflammatory Effects 0.000 description 6
- 230000004044 response Effects 0.000 description 6
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 6
- 230000024883 vasodilation Effects 0.000 description 6
- 238000008620 Cholesterol Assay Methods 0.000 description 5
- 229960003105 Metformin Drugs 0.000 description 5
- 229960001412 Pentobarbital Drugs 0.000 description 5
- WEXRUCMBJFQVBZ-UHFFFAOYSA-N Pentobarbital Chemical compound CCCC(C)C1(CC)C(=O)NC(=O)NC1=O WEXRUCMBJFQVBZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 230000001464 adherent Effects 0.000 description 5
- 230000001684 chronic Effects 0.000 description 5
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 5
- 230000003247 decreasing Effects 0.000 description 5
- 229920001467 poly(styrenesulfonates) Polymers 0.000 description 5
- 201000009594 systemic scleroderma Diseases 0.000 description 5
- 208000008787 Cardiovascular Disease Diseases 0.000 description 4
- 238000008157 ELISA kit Methods 0.000 description 4
- 206010062060 Hyperlipidaemia Diseases 0.000 description 4
- 206010020772 Hypertension Diseases 0.000 description 4
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 description 4
- 206010022489 Insulin resistance Diseases 0.000 description 4
- 102000008299 Nitric Oxide Synthase Human genes 0.000 description 4
- 108010021487 Nitric Oxide Synthase Proteins 0.000 description 4
- 238000000692 Student's t-test Methods 0.000 description 4
- 208000006906 Vascular Ring Diseases 0.000 description 4
- 206010047116 Vascular inflammations Diseases 0.000 description 4
- 206010047139 Vasoconstriction Diseases 0.000 description 4
- DPXJVFZANSGRMM-UHFFFAOYSA-N acetic acid;2,3,4,5,6-pentahydroxyhexanal;sodium Chemical compound [Na].CC(O)=O.OCC(O)C(O)C(O)C(O)C=O DPXJVFZANSGRMM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 238000000540 analysis of variance Methods 0.000 description 4
- 239000001768 carboxy methyl cellulose Substances 0.000 description 4
- 230000001419 dependent Effects 0.000 description 4
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 4
- 238000003384 imaging method Methods 0.000 description 4
- NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N insulin Chemical compound N1C(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(NC(=O)CN)C(C)CC)CSSCC(C(NC(CO)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CCC(N)=O)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CSSCC(NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2C=CC(O)=CC=2)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(C)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2NC=NC=2)NC(=O)C(CO)NC(=O)CNC2=O)C(=O)NCC(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CCCNC(N)=N)C(=O)NCC(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC(O)=CC=3)C(=O)NC(C(C)O)C(=O)N3C(CCC3)C(=O)NC(CCCCN)C(=O)NC(C)C(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(O)=O)=O)NC(=O)C(C(C)CC)NC(=O)C(CO)NC(=O)C(C(C)O)NC(=O)C1CSSCC2NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CC(N)=O)NC(=O)C(NC(=O)C(N)CC=1C=CC=CC=1)C(C)C)CC1=CN=CN1 NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000000463 material Substances 0.000 description 4
- CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L mgso4 Chemical compound [Mg+2].[O-][S+2]([O-])([O-])[O-] CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 4
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 4
- 235000019812 sodium carboxymethyl cellulose Nutrition 0.000 description 4
- 229920001027 sodium carboxymethylcellulose Polymers 0.000 description 4
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 4
- 235000002639 sodium chloride Nutrition 0.000 description 4
- 230000025033 vasoconstriction Effects 0.000 description 4
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N β-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 4
- 210000000709 Aorta Anatomy 0.000 description 3
- VYXSBFYARXAAKO-BXMGYBSLSA-N CHEMBL3183331 Chemical compound Cl.C1=2C=C(C)C(NCC)=CC=2OC2=C\C(=N\CC)C(C)=CC2=C1C1=CC=CC=C1C(=O)OCC VYXSBFYARXAAKO-BXMGYBSLSA-N 0.000 description 3
- 208000004981 Coronary Disease Diseases 0.000 description 3
- 108010007622 LDL Lipoproteins Proteins 0.000 description 3
- 102000007330 LDL Lipoproteins Human genes 0.000 description 3
- 229960004329 Metformin hydrochloride Drugs 0.000 description 3
- 210000004088 Microvessels Anatomy 0.000 description 3
- 102000008052 Nitric Oxide Synthase Type III Human genes 0.000 description 3
- 108010075520 Nitric Oxide Synthase Type III Proteins 0.000 description 3
- 101710035826 PRKAA2 Proteins 0.000 description 3
- 102100011474 PRKAB1 Human genes 0.000 description 3
- 101710015127 PRKAB1 Proteins 0.000 description 3
- 238000009825 accumulation Methods 0.000 description 3
- 230000003044 adaptive Effects 0.000 description 3
- 238000003149 assay kit Methods 0.000 description 3
- 201000008739 coronary artery disease Diseases 0.000 description 3
- 235000005911 diet Nutrition 0.000 description 3
- 230000037213 diet Effects 0.000 description 3
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 3
- 239000002471 hydroxymethylglutaryl coenzyme A reductase inhibitor Substances 0.000 description 3
- 230000037361 pathway Effects 0.000 description 3
- 239000001103 potassium chloride Substances 0.000 description 3
- 235000011164 potassium chloride Nutrition 0.000 description 3
- 230000002829 reduced Effects 0.000 description 3
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 3
- 230000001629 suppression Effects 0.000 description 3
- 239000005541 ACE inhibitor Substances 0.000 description 2
- 210000001015 Abdomen Anatomy 0.000 description 2
- 210000002376 Aorta, Thoracic Anatomy 0.000 description 2
- 102000013918 Apolipoproteins E Human genes 0.000 description 2
- 108010025628 Apolipoproteins E Proteins 0.000 description 2
- 102000003727 Caveolin-1 Human genes 0.000 description 2
- 108090000026 Caveolin-1 Proteins 0.000 description 2
- 206010012601 Diabetes mellitus Diseases 0.000 description 2
- 210000002969 Egg Yolk Anatomy 0.000 description 2
- 108060003412 GRP Proteins 0.000 description 2
- 102000015779 HDL Lipoproteins Human genes 0.000 description 2
- 102000004877 Insulin Human genes 0.000 description 2
- 108090001061 Insulin Proteins 0.000 description 2
- 210000001758 Mesenteric Veins Anatomy 0.000 description 2
- 102100000871 NOS3 Human genes 0.000 description 2
- 208000008589 Obesity Diseases 0.000 description 2
- 208000001072 Type 2 Diabetes Mellitus Diseases 0.000 description 2
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 2
- XUKUURHRXDUEBC-KAYWLYCHSA-N atorvastatin Chemical group C=1C=CC=CC=1C1=C(C=2C=CC(F)=CC=2)N(CC[C@@H](O)C[C@@H](O)CC(O)=O)C(C(C)C)=C1C(=O)NC1=CC=CC=C1 XUKUURHRXDUEBC-KAYWLYCHSA-N 0.000 description 2
- 229960005370 atorvastatin Drugs 0.000 description 2
- 239000003833 bile salt Substances 0.000 description 2
- 238000005047 biotechnology Methods 0.000 description 2
- 229940090129 blood glucose lowering drugs Thiazolidinediones Drugs 0.000 description 2
- 239000003405 delayed action preparation Substances 0.000 description 2
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 description 2
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N edta Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 235000013345 egg yolk Nutrition 0.000 description 2
- 238000011067 equilibration Methods 0.000 description 2
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 2
- 230000002068 genetic Effects 0.000 description 2
- 235000001727 glucose Nutrition 0.000 description 2
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 2
- 229910052943 magnesium sulfate Inorganic materials 0.000 description 2
- 235000019341 magnesium sulphate Nutrition 0.000 description 2
- 238000000034 method Methods 0.000 description 2
- 235000020824 obesity Nutrition 0.000 description 2
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 2
- 229920001296 polysiloxane Polymers 0.000 description 2
- 210000000813 small intestine Anatomy 0.000 description 2
- 229910000030 sodium bicarbonate Inorganic materials 0.000 description 2
- 235000017557 sodium bicarbonate Nutrition 0.000 description 2
- 238000011105 stabilization Methods 0.000 description 2
- 150000001467 thiazolidinediones Chemical class 0.000 description 2
- 238000001262 western blot Methods 0.000 description 2
- 210000000683 Abdominal Cavity Anatomy 0.000 description 1
- 206010067484 Adverse reaction Diseases 0.000 description 1
- 210000001367 Arteries Anatomy 0.000 description 1
- 210000002565 Arterioles Anatomy 0.000 description 1
- 230000035639 Blood Levels Effects 0.000 description 1
- OFEZSBMBBKLLBJ-BAJZRUMYSA-N CORDYCEPIN Chemical class C1=NC=2C(N)=NC=NC=2N1[C@@H]1O[C@H](CO)C[C@H]1O OFEZSBMBBKLLBJ-BAJZRUMYSA-N 0.000 description 1
- 208000008665 Gastrointestinal Disease Diseases 0.000 description 1
- 206010020919 Hypervolaemia Diseases 0.000 description 1
- -1 IMM-H007 (100 mg/kg) Chemical compound 0.000 description 1
- 208000006443 Lactic Acidosis Diseases 0.000 description 1
- 229940002661 Lipitor Drugs 0.000 description 1
- 210000003975 Mesenteric Arteries Anatomy 0.000 description 1
- 210000002464 Muscle, Smooth, Vascular Anatomy 0.000 description 1
- 208000000112 Myalgia Diseases 0.000 description 1
- 210000000329 Myocytes, Smooth Muscle Anatomy 0.000 description 1
- 229960002275 Pentobarbital Sodium Drugs 0.000 description 1
- 206010047141 Vasodilatation Diseases 0.000 description 1
- 210000000264 Venules Anatomy 0.000 description 1
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 1
- 231100000494 adverse effect Toxicity 0.000 description 1
- 238000005273 aeration Methods 0.000 description 1
- 239000000556 agonist Substances 0.000 description 1
- 239000002220 antihypertensive agent Substances 0.000 description 1
- FQCKMBLVYCEXJB-MNSAWQCASA-L atorvastatin calcium Chemical compound [Ca+2].C=1C=CC=CC=1C1=C(C=2C=CC(F)=CC=2)N(CC[C@@H](O)C[C@@H](O)CC([O-])=O)C(C(C)C)=C1C(=O)NC1=CC=CC=C1.C=1C=CC=CC=1C1=C(C=2C=CC(F)=CC=2)N(CC[C@@H](O)C[C@@H](O)CC([O-])=O)C(C(C)C)=C1C(=O)NC1=CC=CC=C1 FQCKMBLVYCEXJB-MNSAWQCASA-L 0.000 description 1
- 235000014590 basal diet Nutrition 0.000 description 1
- 229940058933 biguanide antimalarials Drugs 0.000 description 1
- 229940090145 biguanide blood glucose lower drugs Drugs 0.000 description 1
- 150000004283 biguanides Chemical class 0.000 description 1
- 230000004663 cell proliferation Effects 0.000 description 1
- 238000000546 chi-square test Methods 0.000 description 1
- 238000007906 compression Methods 0.000 description 1
- 230000001809 detectable Effects 0.000 description 1
- 230000003205 diastolic Effects 0.000 description 1
- 238000001647 drug administration Methods 0.000 description 1
- 230000004064 dysfunction Effects 0.000 description 1
- 230000001278 effect on cholesterol Effects 0.000 description 1
- 230000037406 food intake Effects 0.000 description 1
- 235000012631 food intake Nutrition 0.000 description 1
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 1
- 230000013632 homeostatic process Effects 0.000 description 1
- 230000001771 impaired Effects 0.000 description 1
- 239000007928 intraperitoneal injection Substances 0.000 description 1
- 230000003908 liver function Effects 0.000 description 1
- 210000000056 organs Anatomy 0.000 description 1
- MYMOFIZGZYHOMD-UHFFFAOYSA-N oxygen Chemical compound O=O MYMOFIZGZYHOMD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 1
- 230000001575 pathological Effects 0.000 description 1
- 230000000275 pharmacokinetic Effects 0.000 description 1
- 230000001681 protective Effects 0.000 description 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 1
- 230000005180 public health Effects 0.000 description 1
- 231100000197 serious side effect Toxicity 0.000 description 1
- 231100000486 side effect Toxicity 0.000 description 1
- QGMRQYFBGABWDR-OGFXRTJISA-M sodium;5-ethyl-5-[(2R)-pentan-2-yl]pyrimidin-3-ide-2,4,6-trione Chemical compound [Na+].CCC[C@@H](C)C1(CC)C(=O)NC(=O)[N-]C1=O QGMRQYFBGABWDR-OGFXRTJISA-M 0.000 description 1
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 1
- 150000003548 thiazolidines Chemical class 0.000 description 1
- 210000001519 tissues Anatomy 0.000 description 1
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000002588 toxic Effects 0.000 description 1
- 230000003966 vascular damage Effects 0.000 description 1
- 230000000304 vasodilatating Effects 0.000 description 1
- 230000000261 vasodilator Effects 0.000 description 1
- 239000003071 vasodilator agent Substances 0.000 description 1
- 230000004584 weight gain Effects 0.000 description 1
- 235000019786 weight gain Nutrition 0.000 description 1
Images
Abstract
Группа изобретений относится к медицине, а именно к кардиологии, и может быть использована для ингибирования адгезии лейкоцитов. Применение по изобретению касается триацетил-3-гидроксифениладенозина. Фармацевтическая композиция для получения лекарственных средств для ингибирования адгезии лейкоцитов содержит триацетил-3-гидроксифениладенозин и фармацевтически приемлемый носитель. Использование изобретений позволяет воздействовать на воспалительные процессы в сосудах за счет увеличения скорости движения лейкоцитов и уменьшения числа эндотелиальных клеток, подвергшихся адгезии. 2 н. и 2 з.п. ф-лы, 9 ил., 12 табл., 3 пр.
Description
ОБЛАСТЬ ТЕХНИКИ, К КОТОРОЙ ОТНОСИТСЯ ИЗОБРЕТЕНИЕ
Настоящее изобретение относится к путям применения триацетил-3-гидроксифениладенозина и содержащей его фармацевтической композиции в получении лекарственных средств для предупреждения и/или лечения воспалительных процессов в сосудах и/или обеспечения улучшения в отношении нарушений функции эндотелия, и относится к области медицины и здравоохранения.
УРОВЕНЬ ТЕХНИКИ
Возникновение и прогрессирование сердечно-сосудистых заболеваний, таких как атеросклероз, гипертензия и диабет и т.д., а также окончательное поражение органов-мишеней в значительной степени связано с воспалительными процессами внутри сосудов и дисфункцией эндотелия (ED). Эндотелиальные клетки регулируют поддержание внутрисосудистого гомеостаза посредством обеспечения вазодилатации, подавления пролиферации гладкомышечных клеток и подавления воспалительных ответов в сосудах, а также ряда защитных эффектов в отношении сосудов. Эти эффекты в основном зависят от эндогенного вазодилататора оксида азота (NO). Нарушения выработки NO могут приводить к дисфункции эндотелия, проявляющейся в виде ослабленной эндотелийзависимой релаксации. Улучшение в отношении дисфункции эндотелия сосудов является чрезвычайно важным для предупреждения возникновения и прогрессирования атеросклероза, гипертензии и диабета и их лечения. Клинические испытания показали, что статины снижают риск возникновения ишемической болезни сердца независимо от их эффектов в отношении уровня липидов в крови путем обеспечения улучшения в отношении дисфункции эндотелия, как тиазолидиндионы, так и ингибиторы ангиотензинпревращающего фермента снижают риск возникновения сердечно-сосудистого заболевания путем независимого эффекта улучшения в отношении дисфункции эндотелия, следовательно, для снижения риска возникновения сердечно-сосудистого заболевания очень важным является уменьшение воспалительных процессов в сосудах и улучшение в отношении дисфункции эндотелия.
В настоящее время применяемые в клинической практике лекарственные средства, которые могут улучшать функцию эндотелия сосудов, представляют собой, главным образом, статины, метформин, тиазолидиндионы и гипотензивные лекарственные средства, такие как ингибиторы ангиотензинпревращающего фермента и другие традиционные лекарственные средства для лечения сердечно-сосудистых заболеваний, которые в основном действуют за счет увеличения активности синтазы оксида азота и увеличения выработки NO. Однако миалгия и другие побочные реакции, вызываемые при долгосрочном применении статинов, затрудняют переносимость у пациентов при длительном приеме, бигуаниды могут вызывать желудочно-кишечные расстройства или иногда вызывать лактоацидоз, а производные тиазолидина могут вызывать серьезные побочные эффекты, такие как гиперволемия или увеличение веса, нарушения функции печени и т.д., поэтому их следует применять с осторожностью.
Триацетил-3-гидроксифениладенозин (патент № ZL 200980101131.6) представляет собой соединение нового структурного типа со значительной регулирующей уровень липидов в крови активностью, выбранное Институтом фармакологии при Китайской академии медицинских наук из производных кордицепина, и при этом оно характеризуется низкими токсическими и побочными эффектами, хорошими фармакокинетическими параметрами и т.д. и в настоящее время находится на стадии доклинического исследования. В настоящее время отсутствуют сообщения о применении данного соединения для уменьшения воспалительных реакций в сосудах и увеличения активности эндотелиальной синтазы оксида азота для обеспечения улучшения в отношении заболеваний, связанных с дисфункцией эндотелия сосудов.
КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ
Технической задачей, решаемой настоящим изобретением, является обеспечение применения триацетил-3-гидроксифениладенозина, представленного формулой (I), в получении лекарственных средств для предупреждения, уменьшения интенсивности или лечения воспалительных процессов в сосудах или дисфункции эндотелия.
Для решения технической задачи по настоящему изобретению предусмотрено следующее техническое решение.
В первом аспекте технического решения по настоящему изобретению предусмотрено применение триацетил-3-гидроксифениладенозина, представленного формулой (I), в получении лекарственных средств для предупреждения и/или лечения воспаления сосудов,
При этом воспалительные процессы в сосудах включают острые воспалительные процессы в сосудах или хронические воспалительные процессы в сосудах; и при этом хронические воспалительные процессы в сосудах включают обусловленные гиперлипидемией воспалительные процессы в сосудах.
Во втором аспекте технического решения по настоящему изобретению предусмотрено применение триацетил-3-гидроксифениладенозина, представленного формулой (I), в получении лекарственных средств для предупреждения и/или лечения дисфункции эндотелия сосудов,
При этом дисфункция эндотелия сосудов предусматривает гиперлипидемию, атеросклероз, гипертензию, ишемическую болезнь сердца, ожирение, резистентность к инсулину или дисфункцию эндотелия сосудов, обусловленную диабетом типа 2.
Триацетил-3-гидроксифениладенозин по настоящему изобретению улучшает активность эндотелиальной синтазы оксида азота в сосудах и увеличивает выработку NO путем подавления внутрисосудистой воспалительной реакции между лейкоцитами и эндотелиальными клетками, за счет чего обеспечивается улучшение в отношении дисфункции эндотелия и связанных с ней заболеваний.
В третьем аспекте технического решения по настоящему изобретению предусмотрено применение фармацевтической композиции в получении лекарственных средств для предупреждения, уменьшения интенсивности или лечения воспалительных процессов в сосудах или дисфункции эндотелия, при этом фармацевтическая композиция содержит триацетил-3-гидроксифениладенозин формулы (I) и фармацевтически приемлемый носитель,
При этом воспалительные процессы в сосудах включают острые воспалительные процессы в сосудах или хронические воспалительные процессы в сосудах; и дисфункция эндотелия сосудов предусматривает гиперлипидемию, атеросклероз, гипертензию, ишемическую болезнь сердца, ожирение, резистентность к инсулину или дисфункцию эндотелия сосудов, обусловленную диабетом типа 2.
Кроме того, хронические воспалительные процессы в сосудах включают обусловленные гиперлипидемией воспалительные процессы в сосудах.
Фармацевтическая композиция может быть получена в соответствии со способами, известными из уровня техники. Любая лекарственная форма, подходящая для применения у человека или животного, может быть получена путем объединения соединения по настоящему изобретению с одним или несколькими фармацевтически приемлемыми твердыми или жидкими вспомогательными веществами и/или вспомогательными средствами. Содержание соединения по настоящему изобретению в его фармацевтической композиции обычно составляет от 0,1 до 95% по весу.
Лекарственная форма фармацевтической композиции по настоящему изобретению представляет собой таблетки, капсулы, пилюли, растворы для инъекций, препараты с замедленным высвобождением, препараты с контролируемым высвобождением или различные системы доставки на основе микрочастиц.
Положительный технический эффект
Триацетил-3-гидроксифениладенозин может уменьшать воспалительные процессы в сосудах и увеличивать активность эндотелиальной синтазы оксида азота, а также обеспечивать улучшение в отношении нарушений функции эндотелия сосудов или связанных с ними заболеваний, при этом данный эффект не зависит от его эффекта в отношении уменьшения уровней липидов, т.е. он не коррелирует с эффектом данного соединения в отношении уменьшения уровней липидов.
ОПИСАНИЕ ГРАФИЧЕСКИХ МАТЕРИАЛОВ
На фиг. 1 показано, что IMM-H007 подавляет TNF-α-индуцированный острый внутрисосудистый воспалительный ответ у мышей.
На фиг. 2 показано, что IMM-H007 уменьшает интенсивность сосудистого воспалительного ответа у получавших корм с высоким содержанием жиров мышей АроЕ-/-.
На фиг. 3 показан эффект IMM-H007 в отношении уровней липидов в крови у мышей АроЕ-/-.
На фиг. 4 показан эффект IMM-H007 в отношении факторов воспаления TNF-α и VCAM-1 в сыворотке крови у мышей АроЕ-/-.
На фиг. 5 показан эффект IMM-H007 в отношении функции эндотелия мезентериальных микрососудов у мышей АроЕ-/-.
На фиг. 6 показан эффект IMM-H007 в отношении функции эндотелия аортальных сосудов у мышей АроЕ-/-.
На фиг. 7 показано, что IMM-H007 улучшает функцию эндотелия посредством пути AMPK-eNOS.
На фиг. 8 показано, что IMM-H007 уменьшает артериальную бляшку у мышей АроЕ-/-.
На фиг. 9 показано, что IMM-H007 улучшает функцию микрососудистого эндотелия у мышей Ob/Ob с ожирением.
ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ
Следующие примеры используются для дополнительной иллюстрации настоящего изобретения, но это не означает каких-либо ограничений в отношении настоящего изобретения.
Пример 1. Триацетил-3-гидроксифениладенозин (IMM-H007) ингибирует ранний внутрисосудистый воспалительный ответ при дисфункции эндотелия у мышей
1. IMM-H007 ингибирует TNF-α-индуцированные острые воспалительные процессы в сосудах у мышей (модель острого воспаления)
Экспериментальные материалы и приборы
IMM-H007 (независимо разработан Институтом фармакологии при Китайской академии медицинских наук), таблетки метформина гидрохлорида (Sino-American Shanghai Squibb Pharmaceuticals Ltd.), A769662 (Shanghai Hanxiang Biological Technology Co., Ltd.), TNF-α мыши (Peprotech, INC), родамин-6G (Sigma), пентобарбитал натрия (Serva) и натрий-карбоксиметилцеллюлоза (Sinopharm Chemical Reagent Co., Ltd.); Система динамического визуального исследования микрососудов (Gene&I-SMC1)
Животные и план эксперимента
Мышей SPF дикого типа (WT) C57BL/6J (самцы, возраст 6-8 недель, 18-20 г) приобретали у Beijing Huafukang Bioscience Co., Inc.
60 мышей C57BL/6J случайным образом делили на 6 групп в соответствии с весом тела: группа нормального контроля, группа модельного контроля, группа IMM-H007, группа метформина в качестве положительного контроля AMPK-агониста, группа А769662 и группа аторвастатина соответственно, и вводили внутрижелудочно физиологический раствор, IMM-H007 (100 мг/кг), метформин (260 мг/кг) и аторвастатин (липитор, 10 мг/кг) соответственно, и в течение 7 последовательных дней инъецировали внутрибрюшинно А769662 (30 мг/кг, который плохо абсорбируется при пероральном введении). На 8-й день, за исключением группы холостого контроля, которой инъецировали внутрибрюшинно физиологический раствор, всем остальным группам инъецировали внутрибрюшинно TNF-α (0,3 мкг/доза) для индуцирования острых воспалительных процессов в кровеносных сосудах. Через четыре часа после инъекции TNF-α в сосудистое сплетение зрительного нерва вводили внутривенно 100 мкл 0,05% родамин-6G, и при этом обеспечивалось флуоресцентное мечение лейкоцитов. Мышей анестезировали с помощью пентобарбитала натрия. Правый бок каждой мыши фиксировали на столе для наблюдений. Делали небольшой надрез вдоль брюшной полости. Осторожно извлекали сеть мезентериальных сосудов. Тонкий кишечник каждой мыши фиксировали в окне для наблюдений. Включали микроскоп для поиска четкой мезентериальной вены третьего порядка при малом увеличении микроскопа, а затем достигали 20-кратного увеличения для наблюдения, после регулировки яркости и фокусного расстояния до оптимального, белый свет выключали, включали флуоресценцию, и в отношении каждого сегмента сосуда получали видеоролик движения лейкоцитов длиной 1 мин. с использованием программного обеспечения ToumView из Системы динамического визуального исследования микрососудов (Gene & I-SMC1). Скорость движения лейкоцитов и число клеток, подвергшихся лейкоцитарно-эндотелиальной адгезии, отражают воспалительные процессы внутри сосудов и являются ранними признаками дисфункции эндотелия.
Выявляемые показатели
(1) скорость движения лейкоцитов (снижение скорости движения лейкоцитов отражает возникновение воспалительного ответа в кровеносном сосуде, изменения скорости движения лейкоцитов после введения лекарственных средств наблюдали для определения ингибиторного эффекта лекарственных средств в отношении воспалительного ответа). У каждой мыши наблюдали три мезентериальные венулы. Скорость движения лейкоцитов анализировали с помощью image pro 6.0. Для каждого поля наблюдения выбирали по меньшей мере три точки наблюдения, и в конечном итоге подсчитывали по меньшей мере 9 участков наблюдения у каждой мыши. Рассчитывали среднее значение для получения средней скорости движения лейкоцитов.
И (2) число клеток, подвергшихся лейкоцитарно-эндотелиальной адгезии (увеличение числа подвергшихся адгезии лейкоцитов отражает увеличение внутрисосудистого воспалительного ответа, что может вызывать дисфункцию эндотелия): число подвергшихся адгезии лейкоцитов наблюдали для каждого кровеносного сосуда при 200 мкм (адгезия к эндотелиальным клеткам без движения в течение 30 секунд, т.е. адгезия).
Статистические данные
Результаты экспериментов выражали в виде среднего значения X±SD. Определение t-критерия Стьюдента выполняли с использованием программного обеспечения Graphpad Prism. Различия между группами анализировали с помощью однофакторного параметрического анализа ANOVA или непараметрического способа LSD-t. Р<0,05 указывает на статистическое различие, а Р<0,01 указывает на значимое различие.
Результаты экспериментов
Факторы воспаления, такие как TNF-α, вызывают снижение скорости движения лейкоцитов, увеличение числа клеток, подвергшихся лейкоцитарно-эндотелиальной адгезии, является важной причиной дисфункции эндотелия, а дисфункция эндотелия может усугубить поражение сосудов. Результаты показали, что острые воспалительные процессы внутри сосудов наблюдались после внутрибрюшинной инъекции TNF-α (0,3 мкг/доза) в течение 4 часов по сравнению с группой нормального контроля, и скорость движения лейкоцитов снижалась, а число лейкоцитов, подвергшихся адгезии, увеличилось в группе модельного контроля. После введения IMM-H007 (100 мг/кг) по сравнению с группой модельного контроля скорость движения лейкоцитов значимо увеличивалась, а число эндотелиальных клеток, подвергшихся адгезии, значимо уменьшалось, что указывает на то, что IMM-H007 может уменьшать внутрисосудистый воспалительный ответ, индуцированный фактором воспаления TNF-α (результаты показаны в таблице 1 и на фиг. 1).
2. IMM-H007 ингибирует внутрисосудистый воспалительный ответ у получавших корм с высоким содержанием жиров мышей АроЕ-/- (модель хронического воспаления)
Экспериментальные материалы и приборы
IMM-H007 (независимо разработан Институтом фармакологии при Китайской академии медицинских наук), таблетки метформина гидрохлорида (Sino-American Shanghai Squibb Pharmaceuticals Ltd.), A769662 (Shanghai Hanxiang Biological Technology Co., Ltd.), родамин-6G (Sigma), пентобарбитал натрия (Serva), натрий-карбоксиметилцеллюлоза (Sinopharm Chemical Reagent Co., Ltd.); набор для ELISA в отношении TNF-α мыши (Andy gene) и набор для ELISA в отношении VCAM-1 мыши (Andy gene), Система динамического визуального исследования микрососудов (Gene&I-SMC1) и ридер Epoch BioTeK.
Животные и план эксперимента
Мышей АроЕ-/- с генетическим фоном C57BL/6 (самцы, возраст 6-8 недель, 18-20 г) и мышей C57BL/6 приобретали в Научном институте лабораторных животных при Китайской академии медицинских наук (Beijing Huafukang Bioscience Co., Inc.).
После 1 недели адаптивного питания животных случайным образом делили на 4 группы в соответствии с весом тела: группа модельного контроля, группы введения А769662 (30 мг/кг, ip), метформина (260 мг/кг), IMM-H007 (100 мг/кг), по 7 в каждой группе, и содержали на рационе с высоким содержанием жиров (78,6% основного рациона, 10% полутвердого жира, 1,00% холестерина, 10% сухого яичного желтка и 0,4% соли желчной кислоты) и одновременно внутрижелудочно вводили дозу 0,1 мл/10 г веса тела, и непрерывное введение и скармливание осуществляли в течение 8 недель. Мышей анестезировали с помощью пентобарбитала натрия (60 мг/кг веса тела). Правый бок каждой мыши фиксировали на столе для наблюдений. Делали небольшой надрез вдоль брюшной полости. Осторожно извлекали сеть мезентериальных сосудов. Тонкий кишечник каждой мыши фиксировали в окне для наблюдений, включали микроскоп для поиска четкой мезентериальной вены третьего порядка при малом увеличении микроскопа, а затем достигали 20-кратного увеличения для наблюдения, после регулировки яркости и фокусного расстояния до оптимального, белый свет выключали, включали флуоресценцию, и можно было наблюдать движение лейкоцитов в кровеносном сосуде. В отношении каждого сегмента сосуда получали видеоролик движения лейкоцитов длиной 1 мин. с использованием программного обеспечения ToumView из Системы динамического визуального исследования микрососудов (Gene & I-SMC1). Скорость движения лейкоцитов и число клеток, подвергшихся лейкоцитарно-эндотелиальной адгезии, анализировали с помощью image pro 6.0.
Выявляемые показатели
(1) скорость движения лейкоцитов и (2) число клеток, подвергшихся лейкоцитарно-эндотелиальной адгезии
Статистические данные
Результаты экспериментов выражали в виде среднего значения X±SD. Определение t-критерия Стьюдента выполняли с использованием программного обеспечения Graphpad Prism. Различия между группами анализировали с помощью однофакторного параметрического анализа ANOVA или непараметрического способа LSD-t. Р<0,05 указывает на статистическое различие, а Р<0,01 указывает на значимое различие.
Результаты экспериментов
Рацион с высоким содержанием жиров увеличивает уровень холестерина липопротеинов низкой плотности в крови и стимулирует обеспечение эндотелиальными клетками воспалительного ответа, что приводит к снижению скорости движения лейкоцитов и увеличению числа клеток, подвергшихся лейкоцитарно-эндотелиальной адгезии, и вызывает нарушения функции эндотелия, что, в свою очередь, может привести к возникновению атеросклероза. После введения IMM-H007 (100 мг/кг) по сравнению с группой модельного контроля скорость движения лейкоцитов значимо увеличивалась, а число эндотелиальных клеток, подвергшихся адгезии, значительно уменьшалось, что указывает на то, что IMM-H007 в значительной степени ингибирует лейкоцитарно-эндотелиальный воспалительный ответ у получавших корм с высоким содержанием жиров мышей АроЕ-/- и уменьшает воспалительные процессы в сосудах, индуцированные кормом с высоким содержанием жиров (результаты показаны в таблице 2 и на фиг. 2).
Пример 2. Триацетил-3-гидроксифениладенозин (IMM-H007) улучшает функцию эндотелия сосудов
Экспериментальные материалы и приборы
IMM-H007 (независимо разработан Институтом фармакологии при Китайской академии медицинских наук), А769662 (Shanghai Hanxiang Biological Technology Co., Ltd.), таблетки метформина гидрохлорида (Sino-American Shanghai Squibb Pharmaceuticals Ltd.), пентобарбитал натрия (Serva), натрий-карбоксиметилцеллюлоза (Sinopharm Chemical Reagent Co., Ltd.), хлорид натрия, хлорид калия, сульфат магния, бикарбонат натрия, глюкоза, EDTA и ацетилхолин (Sigma), нитропруссид натрия (VETEC), R-(-)фенилэфрин (J&K Scientific LTD.), набор для ELISA в отношении TNF-α мыши (Andy gene), набор для ELISA в отношении VCAM-1 мыши (Andy gene), набор для анализа триглицеридов, набор для анализа общего холестерина, набор для анализа холестерина липопротеинов высокой плотности и набор для анализа холестерина липопротеинов низкой плотности (BioSino Bio-Technology & Science Inc.), а также набор для анализа свободных жирных кислот (Sekisui Medical Technology LTD.); аналитические весы, стереомикроскоп Olympus SZ51, встряхиватель, сшиватель, система для миографии сосудов под давлением Pressure Myography System-120СР, тонкий пинцет для микрохирургических вмешательств, тонкие ножницы для микрохирургических вмешательств, смесь 95% 02 и 5% С02 и силиконовый диск для хирургических операций.
Животные и план эксперимента
Мышей АроЕ-/- с генетическим фоном C57BL/6 (самцы, возраст 6-8 недель, 18-20 г) и мышей C57BL/6 приобретали у Beijing Huafukang Bioscience Co., Inc.
После 1 недели адаптивного питания животных случайным образом делили на 7 групп в соответствии с весом тела: группа нормального контроля, группа модельного контроля, группа введения А769662 (30 мг/кг), группа введения метформина (260 мг/кг), группы введения IMM-H007 в низких, средних и высоких дозах (50, 100, 200 мг/кг), по 8 в каждой группе, и содержали на рационе с высоким содержанием жиров (78,6%) основного рациона, 10% полутвердого жира, 1,0% холестерина, 10% сухого яичного желтка и 0,4%) соли желчной кислоты) и одновременно внутрижелудочно вводили дозу 0,1 мл/10 г веса тела, и непрерывное введение и скармливание осуществляли в течение 8 недель для создания модели атеросклероза.
Выявляемые показатели
(1) Эффект IMM-H007 в отношении уровней липидов в крови у мышей АроЕ-/-: общий холестерин (ТС), триглицериды (ТГ), холестерин липопротеинов низкой плотности (LDL), холестерин липопротеинов высокой плотности (HDL) и свободные жирные кислоты (FFA);
определяли в соответствии с инструкциями к набору.
(2) Эффект IMM-H007 в отношении факторов воспаления TNF-α и VCAM-1 в сыворотке крови у мышей АроЕ-/-;
определяли в соответствии с инструкциями к набору.
(3) Эффект IMM-H007 в отношении функции эндотелия мезентериальных микрососудов у мышей АроЕ-/-
Растворы PSS и KPSS составляли в соответствии с инструкциями и использовали в тот же день. Раствор PSS извлекали перед началом эксперимента и предварительно насыщали кислородом в течение примерно 20 мин. Мышей АроЕ-/-, которым скармливали корм с высоким содержанием жиров и которых одновременно обрабатывали в течение 10 недель, анестезировали с помощью пентобарбитала натрия. Мышей помещали в положение на спину и фиксировали. Брюшную полость вскрывали по срединной линии. Извлекали сеть мезентериальных сосудов и помещали в буфер PSS, предварительно насыщенный кислородом в течение 20 минут. Под стереомикроскопом осторожно отделяли мезентериальную артерию третьего порядка длиной приблизительно 3 мм. Вначале кровеносный сосуд прикрепляли к стеклянной канюле Р1 и затягивали катушку. Примечание: проксимальный конец должен быть соединен с концом Р1, а конец Р2 сосуда должен быть закреплен, и катушка должна быть затянута. Камеру помещали на предметный столик микроскопа и проверяли данные соединения между камерой и интерфейсом. Крышку ванны закрывали и вводили кислород, чтобы вывести воздух в трубки. Под микроскопом находили кровеносный сосуд, а затем микроскоп переводили в режим съемки. (Ручку со стороны окуляра поворачивали по кривой.) Открывали программное обеспечение MyoVIEW. Открывали окно камеры Capture для отображения изображения кровеносного сосуда. Уравновешивание кровеносных сосудов медленно выполняли от 10 мм рт.ст. до 60 мм рт.ст., при этом каждый шаг составлял 300 с. После завершения процедуры уравновешивания раствор в ванне сливали. Кровеносные сосуды стимулировали (10 мл) в течение 2 мин. с применением предварительно нагретого до 37°С раствора KPSS и наблюдали изменения в вазоконстрикции, а затем кровеносные сосуды промывали с помощью раствора PSS до исходного уровня. Кровеносные сосуды уравновешивали при 60 мм рт.ст. при 37°С в течение 45 минут, за это время жидкость заменяли каждые 20 минут. Эксперимент начинали: наблюдали вазодилатационный ответ, обусловленный 10-10-10-5 М Ach после предварительного сжатия с помощью 2 мкМ фенилэфрина, для оценки эффекта лекарственных средств в отношении функции эндотелия сосудов. В конце эксперимента выполняли замену на свежий предварительно нагретый до 37°С буфер PSS для уравновешивания в течение 30 мин и вводили 10-10 М - 10-3 М нитропруссида натрия для индуцирования вазодилатационного ответа после предварительного сжатия с помощью 2 мкМ фенилэфрина для оценки эффекта лекарственных средств в отношении функции гладких мышц сосудов. LD1 представлял собой диаметр кровеносного сосуда после релаксации путем введения различных концентраций ACh или нитропруссида натрия, LD2 представлял собой диаметр кровеносных сосудов после предварительного сокращения с помощью фенилэфрина, и LD3 представлял собой максимальный диастолический диаметр кровеносного сосуда без обработки каким-либо стимулятором.
Релаксационный ответа на Ach и нитропруссид натрия после предварительного сжатия с помощью фенилэфрина выражали в виде процентного увеличения диаметра сосуда: % релаксации = (LD1-LD2)/(LD3-LD2)×100.
(4) Эффект IMM-H007 в отношении функции эндотелия грудной аорты у мышей АроЕ-/-
Мышей анестезировали. Грудную аорту быстро извлекали после бережного удаления окружающих тканей, вырезали сосудистое кольцо длиной приблизительно 3 мм. Сосудистое кольцо аккуратно подвешивали на тонопреобразователе при начальном растяжении 0,5 g и уравновешивали в течение 90 минут или дольше. В ходе процесса уравновешивания жидкость заменяли каждые 20 минут, поддерживали аэрацию и температуру 37°С. Сосудистое кольцо уравновешивали в течение приблизительно 1 часа и дважды стимулировали насыщенным KCl (60 мМ) для выявления того, активен ли кровеносный сосуд. После стабилизации вазоконстрикции KCl сразу смывали. После последней замены жидкости сосудистое кольцо уравновешивали в течение 20 минут, добавляли 1 мкМ фенилэфрина для стимуляции вазоконстрикции и после стабилизации вазоконстрикции в нарастающей концентрации вводили ацетилхолин (Ach, 1×10-10-1×10-5) и нитропруссид натрия (SNP, 10-10-10-4 М) для регистрации кривой вазодилатации.
Уровень вазодилатации = [индуцированный РЕ тонус сосудов (g) - растяжение сосудов после добавления ACh (g)] ÷ [индуцированное РЕ растяжение (g) - базальный тонус сосудов (g)] × 100%.
(5) Обсуждение механизма улучшения функции эндотелия с помощью IMM-Н007
Уровни экспрессии белков АМРК, рАМРК, peNOS, eNOS, Caveolin-1 анализировали и измеряли с помощью вестерн-блоттинга для определения общей активности синтазы оксида азота в сыворотке крови.
(6) Эффект IMM-H007 в отношении площади бляшки у мышей АроЕ-/-
Корень аорты окрашивали масляным красным О и аорту по всей длине окрашивали масляным красным О. Изображения с патологиями анализировали с помощью программ Photoshop, Image J и Image-Pro Plus. Данные оценки патологии статистически анализировали с использованием критерия Хи-квадрат. После сравнения Р<0,05, Р<0,01 показывали статистическое различие.
Статистические данные
Результаты экспериментов выражали в виде среднего значения X±SD. Определение t-критерия Стьюдента выполняли с использованием программного обеспечения Graphpad Prism. Различия между группами анализировали с помощью однофакторного параметрического анализа ANOVA или непараметрического способа LSD-t. Р<0,05 указывает на статистическое различие, а Р<0,01 указывает на значимое различие.
Результаты экспериментов
(1) Эффект IMM-H007 в отношении уровней липидов в крови у мышей АроЕ-/-
Результаты показали, что после 8 недель содержания на рационе с высоким содержанием жиров уровни общего холестерина, триглицеридов, холестерина липопротеинов низкой плотности и свободных жирных кислот увеличивались, а уровень холестерина липопротеинов высокой плотности уменьшался в группе модельного контроля по сравнению с группой нормального контроля. Введение IMM-H007 в дозе 50 мг/кг не влияло на уровни общего холестерина, триглицеридов, холестерина липопротеинов низкой плотности, свободных жирных кислот и холестерина липопротеинов высокой плотности; введение IMM-H007 в дозе 100 мг/кг не влияло на уровни холестерина, триглицеридов, холестерина липопротеинов низкой плотности и холестерина липопротеинов высокой плотности и в некоторой степени уменьшало уровень свободных жирных кислот; и в группе введения IMM-H007 в дозе 200 мг/кг уровни общего холестерина, холестерина липопротеинов низкой плотности и свободных жирных кислот уменьшались по сравнению с группой модельного контроля (результаты показаны в таблице 3 и на фиг. 3).
(2) Эффект IMM-H007 в отношении факторов воспаления TNF-α и VCAM-1 в сыворотке крови у мышей АроЕ-/-
Результаты показали, что по сравнению с группой модельного контроля IMM-Н007 в дозе 50, 100 или 200 мг/кг может снижать уровень VCAM-1 в сыворотке крови у мышей АроЕ-/-, и IMM-H007 в дозе 50 мг/кг уменьшал экспрессию TNF-α в сыворотке крови у мышей АроЕ-/-, что указывает на то, что введение IMM-Н007 может снижать уровни родственных факторов воспаления в сыворотке крови (результаты показаны в таблице 4 и на фиг. 4).
(3) Эффект IMM-H007 в отношении функции эндотелия мезентериальных микрососудов у мышей АроЕ-/-
Результаты показали, что после предварительного введения 2 мкМ фенилэфрина для предварительного сокращения кровеносных сосудов, вазодилатационный ответ, обусловленный различными концентрациями (10-10-10-5 М) ацетилхолина, может помочь оценить эффект лекарственных средств в отношении функции эндотелия сосудов. По сравнению с группой модельного контроля введение IMM-H007 в дозе 50 мг/кг может обеспечить значительное улучшение в отношении дисфункции микрососудистого эндотелия, обусловленной рационом с высоким содержанием жиров, не влияя на уровни липидов в крови; введение IMM-H007 в дозе 100 мг/кг может обеспечить значительное улучшение в отношении индуцированного ацетилхолином эндотелийзависимого релаксационного ответа и улучшение в отношении дисфункции эндотелия, не влияя на уровни холестерина, триглицеридов, холестерина липопротеинов низкой плотности или холестерина липопротеинов высокой плотности. Результаты показали, что IMM-H007 может обеспечить улучшение в отношении дисфункции микро сосуд истого эндотелия независимо от его эффекта в отношении уменьшения уровней липидов (результаты показаны в таблицах 5 и 6 и на фиг. 5).
(4) Эффект IMM-H007 в отношении функции эндотелия грудной аорты у мышей АроЕ-/-
Результаты показали, что после предварительного введения 1 мкМ фенилэфрина для предварительного сокращения кровеносных сосудов, вазодилатационный ответ, обусловленный различными концентрациями (10-10-10-5 М) ацетилхолина, может помочь оценить эффект лекарственных средств в отношении функции эндотелия сосудов. По сравнению с группой модельного контроля введение IMM-H007 в дозе 50 мг/кг может обеспечить значительное улучшение в отношении индуцированной ацетилхолином эндотелийзависимой релаксации аорты, обусловленной рационом с высоким содержанием жиров, и улучшение в отношении дисфункции эндотелия, не влияя на уровни липидов в крови, что указывает на то, что IMM-H007 может обеспечивать улучшение в отношении дисфункции эндотелия сосудов независимо от его эффекта в отношении уменьшения уровней липидов (результаты показаны в таблицах 7 и 8 и на фиг. 6).
(5) IMM-H007 улучшает функцию эндотелия посредством пути AMPK-eNOS
Уровни экспрессии белков AMPK, pAMPK, peNOS, eNOS, Caveolin-1 анализировали и измеряли с помощью вестерн-блоттинга для определения общей активности синтазы оксида азота в сыворотке крови. Анализировали потенциальный механизм улучшения функции эндотелия с помощью IMM-Н007, не зависящего от гиполипидемического эффекта. Экспериментальные выводы: ГММ-Н007, в основном за счет активации пути AMPK-eNOS, улучшает активность синтазы оксида азота, увеличивает выработку NO и улучшает функцию кровеносных сосудов (результаты показаны на фиг. 7).
(6) IMM-H007 уменьшает площадь бляшки у мышей АроЕ-/-
Повышенный уровень белка AMPK-eNOS и улучшение в отношении дисфункции эндотелия сосудов являются благоприятными для уменьшения частоты возникновения и развития атеросклероза. В данном исследовании мышей АроЕ-/- модели атеросклероза содержали на рационе с высоким содержанием жиров в течение 10 недель для наблюдения накопления бляшек по всей длине аорты и в корне артерии, а затем для наблюдения эффекта IMM-H007 в отношении атеросклероза. Результаты эксперимента показали, что IMM-H007 может в значительной степени уменьшать накопление бляшек в дуге аорты и по всей длине аорты, и путем окрашивания среза корня аорты выявили уменьшение накопления липидов на месте бляшки, что свидетельствует о том, что IMM-H007 обеспечивает улучшение в отношении дисфункции эндотелия, что уменьшает интенсивность прогрессирования атеросклероза (результаты показаны в таблице 9 и на фиг. 8).
Пример 3. Триацетил-3-гидроксифениладенозин (IMM-H007) улучшает функцию эндотелия сосудов у мышей Ob/Ob с ожирением
Экспериментальные материалы и приборы
IMM-H007 (независимо разработан Институтом фармакологии при Китайской академии медицинских наук), натрий-карбоксиметилиеллюлоза (Sinopharm Chemical Reagent Co., Ltd.), хлорид натрия, хлорид калия, сульфат магния, бикарбонат натрия, глюкоза, EDTA и ацетилхолин (Sigma), нитропруссид натрия (VETEC), R-(-)фенилэфрин (J&K Scientific LTD.), набор для анализа триглицеридов, набор для анализа общего холестерина, набор для анализа холестерина липопротеинов высокой плотности и набор для анализа холестерина липопротеинов низкой плотности (BioSino Bio-Technology & Science Inc.), а также набор для анализа свободных жирных кислот (Sekisui Medical Technology LTD.); инсулин, глюкоза, тестовые полоски для определения глюкозы в крови Roche, аналитические весы, стереомикроскоп Olympus SZ51, встряхиватель, сшиватель, система для миографии сосудов под давлением Pressure Myography System- 120СР, тонкий пинцет для микрохирургических вмешательств, тонкие ножницы для микрохирургический вмешательств, смесь 95% O2 и 5% CO2 и силиконовый диск для хирургических операций.
Животные и план эксперимента
Мышей Ob/Ob с ожирением (самцы, возраст 4 недели) приобретали в Исследовательском центре модельных животных Нанкинского университета.
После 1 недели адаптивного питания животных случайным образом делили на две группы в соответствии с весом тела: группа модельного контроля и группа IMM-H007 (400 мг/кг), по 10 в каждой группе, и содержали на нормальном корме и одновременно вводили внутрижелудочно дозу 0,1 мл/10 г веса тела, и непрерывное введение и скармливание осуществляли в течение 9 недель. Регистрировали изменения в отношении потребления пищи и веса тела и измеряли стандартные биохимические показатели, такие как уровни липидов в крови и уровень глюкозы в крови и т.д. Через 9 недель из каждой группы выбирали 3 животных, и мезентериальные артериолы извлекали для измерения функции эндотелия сосудов таким же образом, как в примере 2.
Выявляемые показатели: (1) стандартные биохимические показатели и (2) функция эндотелия сосудов
Статистические данные
Результаты экспериментов выражали в виде среднего значения X±SD. Определение t-критерия Стьюдента выполняли с использованием программного обеспечения Graphpad Prism. Различия между группами анализировали с помощью однофакторного параметрического анализа ANOVA или непараметрического способа LSD-t. Р<0,05 указывает на статистическое различие, а Р<0,01 указывает на значимое различие.
Результаты экспериментов
Результаты показали, что после содержания мышей Ob/Ob с ожирением на нормальном корме в течение 9 недель определение уровней глюкозы и инсулина в крови показало, что сформировалась модель резистентности к инсулину, а резистентность к инсулину является важной причиной нарушений функции эндотелия, следовательно, авторы настоящего изобретения определяли функцию микрососудистого эндотелия у 9-недельных мышей Ob/Ob. В ходе исследования обнаружили, что в группе введения дозы IMM-H007 (400 мг/кг) улучшается функция микрососудистого эндотелия (результаты эксперимента показаны в таблицах 10, 11 и 12 и на фиг. 9).
Claims (6)
1. Применение триацетил-3-гидроксифениладенозина, представленного формулой (I), в получении лекарственных средств для ингибирования адгезии лейкоцитов,
2. Фармацевтическая композиция для получения лекарственных средств для ингибирования адгезии лейкоцитов, где фармацевтическая композиция содержит триацетил-3-гидроксифениладенозин, представленный формулой (I), и фармацевтически приемлемый носитель,
3. Фармацевтическая композиция по п. 2, где фармацевтическая композиция представлена в виде таблетки, капсулы, пилюли или раствора для инъекций.
4. Фармацевтическая композиция по п. 2, где фармацевтическая композиция представляет собой препарат с замедленным высвобождением, препарат с контролируемым высвобождением или различные системы доставки на основе микрочастиц.
Applications Claiming Priority (3)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201610346541.9A CN107412248A (zh) | 2016-05-24 | 2016-05-24 | 三乙酰基-3-羟基苯基腺苷在治疗血管炎症或改善血管内皮功能中的应用 |
| CN201610346541.9 | 2016-05-24 | ||
| PCT/CN2017/085519 WO2017202297A1 (zh) | 2016-05-24 | 2017-05-23 | 三乙酰基-3-羟基苯基腺苷在治疗血管炎症或改善血管内皮功能中的应用 |
Publications (3)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2018143953A3 RU2018143953A3 (ru) | 2020-06-25 |
| RU2018143953A RU2018143953A (ru) | 2020-06-25 |
| RU2783498C2 true RU2783498C2 (ru) | 2022-11-14 |
Family
ID=
Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2179021C2 (ru) * | 1995-02-09 | 2002-02-10 | Эли Лилли Энд Компани | Способ ингибирования межклеточной адгезии и способ ингибирования воспалительного процесса |
| CN102125580A (zh) * | 2011-01-17 | 2011-07-20 | 泰山医学院 | 三乙酰基-3-羟基苯基腺苷thpa在制药中的应用 |
| CN101874036B (zh) * | 2008-10-06 | 2012-01-25 | 中国医学科学院药物研究所 | 三乙酰基-3-羟基苯基腺苷及其调血脂的用途 |
Patent Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2179021C2 (ru) * | 1995-02-09 | 2002-02-10 | Эли Лилли Энд Компани | Способ ингибирования межклеточной адгезии и способ ингибирования воспалительного процесса |
| CN101874036B (zh) * | 2008-10-06 | 2012-01-25 | 中国医学科学院药物研究所 | 三乙酰基-3-羟基苯基腺苷及其调血脂的用途 |
| CN102125580A (zh) * | 2011-01-17 | 2011-07-20 | 泰山医学院 | 三乙酰基-3-羟基苯基腺苷thpa在制药中的应用 |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| КИРЕЕВА В. В. и др. Дисфункция эндотелия как краеугольный камень сердечно-сосудистых событий: молекулярно- и фармакогенетические аспекты//Российский кардиологический журнал 2014, 10 (114): 64-68. * |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| JP6250588B2 (ja) | Ｌ−オルニチンフェニル酢酸塩を用いる門脈圧亢進の治療及び肝機能の修復 | |
| Fruchart et al. | The Residual Risk Reduction Initiative: a call to action to reduce residual vascular risk in patients with dyslipidemia | |
| RU2281764C2 (ru) | Лекарственные средства для лечения осложнений, связанных с диабетом, и невропатии и их применения | |
| CN108348491A (zh) | 治疗混合性血脂异常 | |
| CN110191724A (zh) | 纤维化的治疗 | |
| US20100184783A1 (en) | Combination for use in the treatment of inflammatory atherosclerosis comprising a mast cell inhibitor and a ppar gamma agonist | |
| RU2615767C2 (ru) | Способ лечения сердечной недостаточности и поражения нервных клеток | |
| JP2010513430A (ja) | 炎症障害の治療において使用するための新たな併用 | |
| CN108096567A (zh) | 组蛋白甲基转移酶ezh2在制备预防或治疗主动脉疾病的药物制剂中的应用 | |
| RU2783498C2 (ru) | Пути применения триацетил-3-гидроксифениладенозина в лечении воспалительных процессов в сосудах или улучшении функций эндотелия сосудов | |
| CN105193795B (zh) | 两种卤酚化合物在促血管生成作用方面的应用 | |
| AU2017270864B2 (en) | Applications of triacetyl-3-hydroxyl phenyl adenosine in treating vascular inflammations or improving vascular endothelium functions | |
| EP4376832A1 (en) | Treatment of his hyporesponders | |
| CN113712960A (zh) | R-酮咯酸在防治主动脉夹层和主动脉瘤中的应用 | |
| JP2022533603A (ja) | １５－ＨＥＰＥおよび／または１５－ＨＥＴｒＥを含む組成物、ならびに心血管代謝性疾患、メタボリックシンドローム、および／または関連疾患を治療または予防する方法 | |
| JP2010539079A (ja) | スコパロンの新規な用途 | |
| CN110193020A (zh) | 京尼平苷在制备防治心肌肥厚的药物中的应用 | |
| CN109806250A (zh) | 一种含羟基脲的药物组合物的应用 | |
| CN113143922B (zh) | Dhc在制备动脉粥样硬化治疗制剂中的应用 | |
| WO2024060359A1 (zh) | 甘油磷脂类化合物在预防和治疗高血脂、动脉粥样硬化、非酒精性脂肪肝和肥胖中的用途 | |
| Liu et al. | Effects of combined MCA and G-CSF treatment on myocardial fibrosis and apoptosis gene expression in rats with diastolic heart failure | |
| WO2020130003A1 (ja) | 炎症性疾患およびアレルギー性疾患の治療、予防または改善剤 | |
| WO2022094203A1 (en) | Lipid prophylactic brain injury treatment | |
| CN113768943A (zh) | Tlr4通路抑制剂在制备药物中的用途 | |
| JP2005232150A (ja) | アディポネクチン産生増強剤 |