TW201742919A - 具有蛹蟲草的咖啡豆之製備方法及其咖啡豆 - Google Patents

Abstract

本發明提供一種具有蛹蟲草的咖啡豆之製備方法，其包含步驟:(a)純化:係將蛹蟲草藉由液態培養基純化培養；(b)滅菌:將咖啡豆以高溫高壓方式滅菌，並風乾冷卻；(c)接種:將咖啡豆添加一培養液，培養液包含30g/L的可溶澱粉及10g/L的大豆蛋白，再加入液態培養基，放置於一培養溫度之一培養箱進行無光培養；(d)加速培養:接著把培養箱設定於一加速培養溫度進行光照培養，使咖啡豆長出蛹蟲草之菌絲及子實體，加速培養溫度低於培養溫度；(e)成熟培養:將培養箱升溫至培養溫度，並且進行光照培養；以及(f)乾燥:最後進行乾燥得到具有蛹蟲草之咖啡豆。

Description

具有蛹蟲草的咖啡豆之製備方法及其咖啡豆

本發明為一種複合食品之製備方法及其複合食品，尤指一種具有蛹蟲草的咖啡豆之製備方法及其咖啡豆。

蛹蟲草，學名為( Cordyceps militaris )，蛹蟲草是一種蟲或蛹與菌的結合體，並含有多種生物活性成分，包括多醣體、蟲草素、蟲草酸及超氧歧化酶等等，其中多醣體已被指出可增強免疫、抗腫瘤活性及抑制腫瘤細胞生長。此外，蟲草素也具有抑菌及抗病毒之效果，而可做為細胞毒性試劑。

天然的蛹蟲草係由菌類與昆蟲共同發育而成。蛹蟲草的孢子透過其所分泌的幾丁酵素而分解寄生蛹體（或蟲體）之外皮以侵入蛹體，並藉由吸收蛹體之養分而於蛹體內成長並長滿菌絲，經過一段時間後係自蛹體長出子實體。

由於天然的蛹蟲草取得不易，近年來為了滿足市場需求，以人工方式培養蛹蟲草係成為蛹蟲草之主要來源。如中國大陸專利CN103283477號揭示一種蛹蟲草的生產方法，其生產方法包含:(1)將蛹蟲草菌種在培養料中培養至產生氣生菌絲；(2)將所述氣生菌絲進行機械刺激，然後培養至產生蛹蟲草子實體原基誘導階段及生長階段，其中，原基誘導階段的條件包含:每天光照時間為15至18小時，光照強度為100至150勒克司，且光照期間的培養溫度為18至24℃，無光照期間的溫度為13至18.5℃。

然而，於前述之生產方法是利用溫差方式誘發蛹蟲草子實體生長，但在生產過程蛹蟲草菌種只能吸取培養料中的成分進行繁殖生長子實體，由於培養料的澱粉含量有限，因此會受限蛹蟲草子實體生長含量，相對培養出的蛹蟲草的品質也會有所影響。

另外，市面上具有多種含有蛹蟲草的保健食品或複合食品，但並未發現蛹蟲草運用在咖啡豆中。

其中，咖啡豆中的咖啡因成分能暫時的驅走睡意並恢復精力，但是如果攝取過多時可能會造成失眠，因此許多市場針對低咖啡因的咖啡進行研究，其中，大多數係透過添加化學溶劑來降低咖啡中的咖啡因含量，但此種的咖啡攝取過多會影響人體的健康。

藉此，本發明申請人藉由蛹蟲草與咖啡豆進行複合培養，透過蛹蟲草發酵來降低咖啡豆的咖啡因，且同時具有蛹蟲草的生物活性成分。

為解決上述課題，本發明提供一種具有蛹蟲草的咖啡豆之製備方法及其咖啡豆，透過蛹蟲草與咖啡豆的共同培養，降低咖啡豆的咖啡因且同時具有蛹蟲草的生物活性成分。

本發明之一項實施例提供一種具有蛹蟲草的咖啡豆之製備方法，其包含步驟:(a)純化:係將蛹蟲草( Cordyceps militaris )於固態培養基培養形成複數個菌落，再將菌落接種至一液態培養基純化培養； (b)滅菌:將咖啡豆進行高溫高壓滅菌，並於常溫風乾冷卻；(c)接種:將咖啡豆添加一培養液，培養液包含20至45g/L之一可溶澱粉及5至15g/L之一 大豆蛋白，再加入液態培養基，放置於一培養溫度之一培養箱進行無光培養；(d)加速培養:接著把培養箱設定於一加速培養溫度進行光照培養，使咖啡豆長出蛹蟲草之菌絲及子實體，加速培養溫度低於培養溫度；(e)成熟培養:於步驟(d)後，將培養箱升溫至培養溫度，並且進行光照培養，使菌絲及子實體成熟生長；以及(f)乾燥:將具有菌絲及子實體之咖啡豆進行乾燥，而得到一成品。

其中，於步驟(c)中，蛹蟲草與咖啡豆之重量比係為1:10至1:25。

其中，於步驟(c)中，可溶澱粉為30g/L，大豆蛋白為10g/L。

其中，於步驟(d)及步驟(e)中，每天的光照時間為24小時。

本發明之又一項實施例提供一種咖啡豆，其具有蛹蟲草之菌絲及子實體。

藉此，本發明功效，在沖泡具有蛹蟲草之菌絲及子實體的咖啡豆時，具有低咖啡因的效果且同時具有可強化人體免疫力的功效。

為便於說明本發明於上述發明內容一欄中所表示的中心思想，茲以具體實施例表達。實施例中各種不同物件係按適於列舉說明之比例，而非按實際元件的比例予以繪製，合先敘明。

請參閱圖1至圖3所示，本發明提供一種具有蛹蟲草的咖啡豆之製備方法，其包含步驟:

(a)純化S1:先將蛹蟲草( Cordyceps militaris )於固態培養基培養12至15天，此時固態培養基會形成蛹蟲草菌種之複數個菌落，接著將菌落接種至一液態培養基純化培養三天。

(b)滅菌S2:將100g的咖啡豆進行初步泡水，並除去灰塵、胚芽、表皮、多餘水分後再裝在透明玻璃瓶中，封口高溫高壓滅菌，其中，滅菌條件為121度之滅菌溫度、壓力1.5atm下滅菌1小時後，放置於常溫風乾冷卻。

(c)接種S3:將裝有咖啡豆之玻璃瓶的瓶口火烤殺菌，接著吸取5至10ml之一培養液，並滴在咖啡豆上且轉動玻璃瓶，讓咖啡豆整個表面附著有培養液，其中，培養液包含20至45g/L之一可溶澱粉(soluble starch)及5至15g/L之一大豆蛋白，於本發明實施例中，可溶澱粉為30g/L，大豆蛋白為10g/L，此時培養液中的可溶澱粉具有黏稠性、可在咖啡豆上形成一層薄膜，主要是防止咖啡豆氧化釋出綠原酸，由於綠原酸具有抗氧化的能力，可以防止菌物附著生長，因此藉由培養液於咖啡豆上形成薄膜方式，避免綠原酸影響蛹蟲草菌種生長，而且培養液中的大豆蛋白及可溶澱粉作為蛹蟲草菌種的養份，進而使蛹蟲草穩定生長。

接著，加入含有蛹蟲草菌種之液態培養基，液態培養基與咖啡豆之重量比係為1:20，於本發明實施例中，液態培養基為5ml，但本發明不以此為限，在其他實施例中，含有蛹蟲草菌種之液態培養基與咖啡豆之重量比可為1:10至1:25，而在重量比的範圍區間，咖啡豆之重量愈重，蛹蟲草菌種的生長速度愈快。隨後，放置於一培養溫度之一培養箱進行無光培養，且無光培養一第一培養時間，於本發明實施例中，培養溫度為20至25℃，較佳者為22℃。

(d)加速培養S4: 接著把培養箱設定於一加速培養溫度進行光照培養，且加速培養溫度低於培養溫度，其中，光照培養一第二培養時間，第一培養時間長於第二培養時間，於本發明實施例中，加速培養溫度為14至18℃，較佳者為15℃，第一培養時間為14天，第二培養時間為7天，俾使利用低溫方式誘發蛹蟲草的生長，進而加速使咖啡豆長出蛹蟲草之菌絲及子實體。

(e)成熟培養S5:於步驟(d)後，將培養箱升溫至培養溫度且進行光照培養，光照培養一第三培養時間，其中，第三培養時間為25至30天，較佳者為28天，於本發明實施例中，咖啡豆於第二培養時間與第三培養時間的每天光照時間為24小時，使菌絲及子實體成熟生長。

(f)乾燥S6:最後透過低溫將具有菌絲及子實體之咖啡豆進行乾燥，而得到一成品。

另外，本發明又一實施例提供一種利用上述的製備方法製備出咖啡豆，咖啡豆上具有蛹蟲草的菌絲及子實體。

以下實施例將提供所屬技術領域之通常知識者一完整揭露與描述物品、裝置及/或於此申請專利範圍之方法製作與評估，而其係純粹例示本發明並不用來限制本發明之範疇。 實驗:於步驟(c)接種S3中，將咖啡豆分別進行實驗組及控制組實驗

於實驗組中，將裝有100g的咖啡豆的玻璃瓶中滴入5ml的培養液，其中，培養液包含30g/L的可溶澱粉，10g/L的大豆蛋白，並轉動玻璃瓶使咖啡豆佈滿有培養液，接著吸取過多的培養液，隨後利用微量吸管吸取5ml之含有蛹蟲草菌種的液態培養液加入玻璃瓶中與咖啡豆共同培養，使蛹蟲草菌種與咖啡豆之重量比係為1:20，並放置於培養溫度為22℃的培養箱無光培養14天。

控制組與實驗組不同在於，將裝有100g的咖啡豆的玻璃瓶中無事先加入含有30g/L的可溶澱粉，10g/L的大豆蛋白之培養液，並直接加入5ml之含有蛹蟲草菌種的液態培養液，使咖啡豆與蛹蟲草菌種進行共同培養。

隨後，將實驗組及控制組分別進行加速培養S4、成熟培養S5及乾燥S6等步驟，最後使咖啡豆生長出蛹蟲草之菌絲及子實體。

實驗結果:針對實驗組及控制組進行如下分析: 1.蟲草素含量分析:

將實驗組與控制組於步驟(c)接種S3至步驟(f)乾燥S6中，每週針對蛹蟲草分析蟲草素含量，其中，第一、二週為接種S3步驟，第三週為加速培養S4步驟，第四到七週為成熟培養S5步驟。如圖2A所示，於控制組中，蛹蟲草之蟲草素的含量係呈緩慢增加，且在最後四週的成熟培養S5中，蟲草素的含量呈現停止上升的情況。

如圖2B所示，於實驗組中，蛹蟲草之蟲草素的含量相對於控制組每週呈現上升趨勢，且在最後四週的成熟培養S5中，蟲草素的含量已經遠高於控制組的蟲草素含量。 2.腺苷含量分析:

將實驗組與控制組於步驟(c)接種S3至步驟(f)乾燥S6中，每週針對蛹蟲草分析腺苷含量。如圖3A所示，於控制組中，蛹蟲草之腺苷含量呈緩慢增加，且腺苷的最大含量為第六週，且在第七週時腺苷含量呈負成長趨勢。

如圖3B所示，於實驗組中，蛹蟲草之腺苷含量遠高於控制組，在第三週時，腺苷含量已明顯高於控制組的腺苷含量，而且腺苷含量還在持續緩慢上升。

藉此，由上述分析証明本發明實施例中，在步驟(c)接種S3中事先將含有可溶澱粉為30g/L，大豆蛋白為10g/L之培養液滴在咖啡豆上，由於培養液中的可溶澱粉具有黏稠性、可在咖啡豆上形成一層薄膜，可作為蛹蟲草菌種的養份，因此蛹蟲草運用咖啡豆中的澱粉及培養液中的可溶澱粉，使蛹蟲草在咖啡豆上持續穩定生長菌絲及子實體，蛹蟲草的蟲草素及腺苷含量明顯上升，而且蛹蟲草的發酵可降低咖啡豆的咖啡因，俾使在沖泡咖啡豆時，具有低咖啡因的功效且同時具有可強化免疫力的成分。

對於所屬技術領域之人許多改良及變化在不脫離本發明之範疇和精神內是明顯地。本發明之其他實施例對於所屬技術領域之人從說明書思考及於此所揭露本發明之作法係明顯地。說明書及實施例僅為例示性，本發明之真實範疇及精神將於以下申請專利範圍指出。

S1‧‧‧純化
S4‧‧‧加速培養
S2‧‧‧滅菌
S5‧‧‧成熟培養
S3‧‧‧接種
S6‧‧‧乾燥

圖1係為本發明之流程圖。 圖2A係為本發明咖啡豆之控制組的蟲草素含量分析圖。 圖2B係為本發明咖啡豆之實驗組的蟲草素含量分析圖。 圖3A係為本發明咖啡豆之控制組的腺苷含量分析圖。 圖3B係為本發明咖啡豆之實驗組的腺苷含量分析圖。

S1‧‧‧純化

S2‧‧‧滅菌

S3‧‧‧接種

S4‧‧‧加速培養

S5‧‧‧成熟培養

S6‧‧‧乾燥

Claims (10)

1. 一種具有蛹蟲草的咖啡豆之製備方法，其包含步驟: 　　(a)純化:係將蛹蟲草( Cordyceps militaris )於固態培養基培養形成複數個菌落 ，再將該等菌落接種至一液態培養基純化培養； 　　(b)滅菌:將咖啡豆進行高溫高壓滅菌，並於常溫風乾冷卻； 　　(c)接種:將咖啡豆添加一培養液，該培養液包含20至45g/L的可溶澱粉及5至15g/L的大豆蛋白，再加入該液態培養基，放置於一培養溫度之一培養箱進行無光培養； 　　(d)加速培養:接著把該培養箱設定於一加速培養溫度進行光照培養，使咖啡豆長出蛹蟲草之菌絲及子實體，該加速培養溫度低於該培養溫度； 　　(e)成熟培養:將該培養箱升溫至該培養溫度，並且進行光照培養，使菌絲及子實體成熟生長；以及 　　(f)乾燥:將具有蛹蟲草之菌絲及子實體的咖啡豆進行乾燥，而得到一成品。
2. 如請求項1所述之具有蛹蟲草的咖啡豆之製備方法，其中，於該步驟(c)中，該液態培養基與咖啡豆之重量比係為1:10至1:25。
3. 如請求項2所述之具有蛹蟲草的咖啡豆之製備方法，其中，該液態培養基為5ml，咖啡豆為100g。
4. 如請求項1所述之具有蛹蟲草的咖啡豆之製備方法，其中，於該步驟(c)中，該可溶澱粉為30g/L，該大豆蛋白為10g/L。
5. 如請求項1所述之具有蛹蟲草的咖啡豆之製備方法，其中，該培養溫度為20至25℃，該加速培養溫度為14至18℃。
6. 如請求項1所述之具有蛹蟲草的咖啡豆之製備方法，其中，於該步驟(c)中，咖啡豆無光培養一第一培養時間，於該步驟(d)中，咖啡豆光照培養一第二培養時間，該第一培養時間長於該第二培養時間。
7. 如請求項6所述之具有蛹蟲草的咖啡豆之製備方法，其中，該第一培養時間為14天，該第二培養時間為7天。
8. 如請求項7所述之具有蛹蟲草的咖啡豆之製備方法，其中，於該步驟(e)中，咖啡豆光照培養一第三培養時間，該第三培養時間為25至30天。
9. 如請求項8所述之具有蛹蟲草的咖啡豆之製備方法，其中，該第二培養時間與該第三培養時間之每天光照時間為24小時。
10. 一種利用如請求項1之製備方法所製備的咖啡豆，咖啡豆具有蛹蟲草之菌絲及子實體。