KR0179725B1 - 상황버섯 자실체의 비닐포트 재배방법 - Google Patents

Abstract

본 발명은 상황버섯의 자실체의 비닐포트를 이요하여 대량 배양하기 위한 고체배지 조성물과 비닐포트 재배법에 관한 것이다.

상황버섯의 비닐포트 재배법은 적절히 조성한 고체배지를 비닐포트에 넣어 살균한 후 액체 종균을 접종하여 자실체 성장단계별로 3단계로 재배실의 온도와 습도를 조작하고 통풍 환기하여 수행한다.

Description

상황버섯 자실체의 비닐포트 재배방법

본 발명은 상황버섯(학명 Phellinus linteus) 자실체의 비닐포트 재배법에 관한 것이다.

상황(桑黃)은 희귀 한방약재로서 옛부터 위통, 무릎관절통 등에 사용되어 의약품 개발자원으로서 그 가능성이 시사되어져 왔다(강소신 의약원편, 중약대사전 P28, 상해과학 기술출판사. 홍콩, 1977).

그러나 상황은 자연계에서 그 분포와 발생빈도가 낮아 자실체를 얻기가 어려우며 인공배양 역시 어려워서 그의 생리활성 물질에 대한 화학적 및 생화학적 연구가 극미한 실정이다.

상황은 민주름 버섯목(Aphylloporales) 구멍장이 버섯과(Polyporaceae)에 속하는 목재부후성 담자균류로서 그 자실체로부터 얻은 균사체를 공시균주로 하여 액체 배양한 결과 다당류인 폴리사카라이드계(Polysaccharide) 항암면역 활성물질을 생산하는 것으로 알려졌다.

이 항암면역 활성물질은 부작용이 적어 독성면에서 안전하며 인체내에서 T세포, B 세포, NK 세포 등과 관련하여 인체내의 면역기능을 강화하고 인터루킨이나 인터페론 등 사이토킨(Cytokine) 생산을 촉진하므로써 항암효과를 나타내어 대치 의약품으로 개발되고 있다.

종래, 상황버섯 균사체의 배양방법으로 공지된 것으로 한국특허공고 제92-1367호가 있으나 이는 상황의 균사체를 액체배양하는 방법으로서 항종양 다당류 물질을 추출하기 위한 것에 불과하며, 지금까지 인공적으로 상황의 자실체를 대량 생산하는 방법은 공지된 바 없었다.

따라서, 본 발명의 목적은 상황버섯 균사체까지는 1차적으로 액체 배양한 후 이 액체종균을 미리 준비하여 살균된 비닐포트내 고체배지에 2차 접종하여 상황버섯 자실체의 대량배양방법을 제공함을 그 목적으로 한다. 본 발명에 사용한 상황버섯 균사체는 강원대학교 미생물 실험실에서 얻은 균주번호 강원 제K-41호를 공시균주로 사용하였다.

본 발명의 다른 목적은 상황버섯의 자실체를 안전하고 확실하게 대량 배양하기 위한 비닐포트 재배용 고체배지 조성물을 제공함에 있다.

본 발명의 상기 목적은 상황버섯 재배에 적합한 고체배지를 제조하고 이것을 유리병, P.P, 필름병 및 비닐포트에 각각 투입한 후 멸균하여 액체종균 균사체 스타터를 크린벤치에서 접종한 후 온도, 습도, 통풍 등 환경조건을 변화시키면서 재배하고 그 성장상태를 비교함으로써 달성하였다.

이하, 본 발명의 구성 및 작용을 당업자가 용이하게 실시할 수 있도록 공정별로 상세히 설명한다.

제1도는 상황버섯 균사체를 유리병(1)과 P.P병(2)를 통제구로하고 비닐포트(3)를 실험구로하여 각각 고체배지로 접종후 5개월간 재배하여 상황버섯 자실체의 성장을 보인 것이다.

제2도는 상황버섯의 포트재배 결과 각각 3주, 3개월,6개월, 12개월, 16개월 성장시의 자실체 성장 및 고체배지 감량을 보인 것이다.

제3도는 상황버섯을 고체배지를 이용하여 비닐포트 재배한 후 16개월시에 채취한 자실체의 성장부분을 보인 것이다.

[제1공정(균사체의 액체 배양 공정)]

공시균주 강원 K-41호를 0.3∼0.4%의 서당, 0.2∼0.3%의 효모추출분말(Yeast Extrat), 0.02∼0.03%의 콩기름(Bean oil)로 조성하고 121℃에서 90분간 살균처리한 후 상온으로 냉각하여 조제된 액체배지에 접종, 배양하여 액체종균(균사체)으로 한다.

[제2공정(고체배지 제조공정)]

뽕나무 톱밥 또는 참나무 톱밥 70∼75%, 미강 25∼30%로 혼합하여 고체배양조성물로 하여 여기에 수분함량 50∼70%가 되도록 가수한 다음 pH 5.5∼7.5로 조절하기 위하여 탄산칼슘 2∼3%를 혼합한다. 이 고체배지 조성물을 비닐포트 용기에 담아 121℃에서 90분간 멸균처리한 후 상온으로 냉각한다.

이때 배양용기로 유리병이나 P.P. 필름병을 사용할 수 있다.

[제3공정(종균접종공정)]

상온으로 냉각시킨 비닐포트를 무균실 크린벤치로 이송하여 상기 제1공정에서 얻은 상황버섯 균사체 액체배양 종균 스타터를 접종한다.

[제4공정(자실체 대량 배양 공정)]

상기 제3공정의 결과 접종된 비닐포트를 플라스틱 상자에 넣어 비닐하우스내의 배양실로 이송하여 배양하되 접종후 3∼4주까지는 배양실의 온도를 15∼18℃로 상대습도는 60∼70%를 유지하고, 4주 이후에는 온도 23∼25℃, 상대습도 70∼80%, 자실체 형성기인 3개월 후부터는 25∼28℃, 상대습도 80∼90%로 온·습도를 증가 유지하며 환기와 통풍을 강화한다.

이와 같이 액체배지에서 배양한 상황버섯 균사체 종균을 미리 준비하여 멸균된 고체배지에 접종하여 8∼16개월 자실체를 충분히 성장시킨 후에 수확하여 상품화 할수 있다.

이하, 본 발명 상황버섯 대량 배양을 위한 고체배지 조성물과 비닐포트 재배법을 실시예를 들어 설명한다.

[실시예 1]

물 20ℓ에 설탕 60g, 효모추출분말 40g, 콩기름 5g을 넣어 액체배지를 조성하고 121℃에서 90분간 멸균한 후 상온으로 냉각하였다. 여기에 공시균주 상황버섯균주(Phellinus linteus) 강원 K-41호를 접종하여 액체배양 종균 스타터를 얻었다.

별도로 제조한 고체배양 배지를 유리병에 넣고 멸균한 다음 냉각후 상기 종균을 무균실 크린벤치에서 접종하였다.

멸균된 상기 고체배양 배지에 접종하는 종균액은 3∼5%로 하였다.

이때 멸균된 고체배양 배지의 조성물을 활엽수 뽕나무 톱밥 또는 참나무 톱밥 70∼75%, 미강 25∼30%로 조성하고 pH를 5.5로 조절하고 배지수분함량 65%로 맞추기 위하여 가수하고 탄산칼슘 2.5%를 투입하고 혼합하였다.

상기 고체배지를 유리병에 무균실 크린벤치에서 투입하고 미리 조제한 액체종균을 15∼20㎤ 접종한 후 비닐하우스내 배양실에서 5개월간 재배하였다.

이때 초기온도는 15∼18℃. 상대습도는 60∼70%, 종균 접종후 3개월 이후 재배후기 온도는 25∼28℃, 상대습도는 70∼90% 유지하고 통풍 환기하였다.

[실시예 2]

종균 배양용 액체배지 제조와 정균접종 후 대량배양용 고체배지 제조 및 배양실에서의 재배법을 상기 실시예 1과 동일하게 하였으나, 무균실 크린벤치에서 액체종균 접종시 용기를 P.P. 필름병으로 하였다.

[실시예 3]

종균 배양용 액체배지 제조와 종균접종 후 대량배양용 고체배지 제조 및 배양실에서의 재배법을 상기 실시예 1과 동일하게 하였으나, 무균실 크린벤치에서 액체종균 접종시 용기를 비닐포트로 하였다.

실시예 1,2 및 3의 실험결과 유리병 재배와 P.P.병 재배 및 비닐포트 재배의 자실체의 성장정도를 제1도(1)(2)(3)에 각각 표시하였다.

이상에서 보는 바와 같이 통제구인 유리병 재배나 P.P. 필름재배에서는 고체배지로부터 영양을 취하면서 자실체 성장이 진행되는 동안 통기되지 않아 자실체 성장이 지연되는 것으로 확인되었다.

제2-1도 내지 제2-5도는 상황버섯을 비닐포트 재배한 결과 각각 3주후, 3개월후, 6개월후, 12개월후, 16개월후 성장시의 자실체 성장 및 고체배지 감량 모습을 보인 것이며, 제3도는 상황버섯의 고체 배지내에서 비닐포트 재배결과 제16개월 시기에 채취한 자실체 성장부분을 보인 것이다.

실시예 3에 따라 고체배지를 이용하여 비닐포트로 재배한 상황버섯의 자실체 성장량과 고체배지 중량 감소를 표 1에 나타내었다.

본 발명은 이상 설명하고 사진도로 제시한 바와 같이 대량 배양이 어려운 상황버섯 자실체를 비닐포트를 이용하여 환경을 단계별로 조절함으로써 대량 공급할 수 있는 효과가 있으므로 버섯재배 산업상 매우 유용한 발명인 것이다.

Claims (1)

1. 참나무 톱밥 또는 뽕나무 톱밥 70∼75%, 미강 25∼30%로 혼합한 후 가수하여 수분함량 50∼70%로 하고 여기에 탄산칼슘 2∼3%를 투입하여 pH 5.5∼7.5로 조절하여서 되는 공지의 고체배지를 비닐포트에 투입하여 120℃에서 90분간 멸균하고 이 고체배지에 별도의 액체배지에서 배양한 액체종균 균사체 스타터를 크린벤치에서 접종한 후 상황버섯을 대량 재배함에 있어서, 비닐하우스내 재배실의 환경을 3∼4주까지는 온도를 15∼18℃, 상대습도는 60∼70%로 하고 그 후 3개월까지는 18∼23℃, 상대습도 70∼80%, 3개월 이후 자실체 형성기에는 온도 25∼28℃, 상대습도 80∼90%로 3단계조작으로 수행하고 통풍 환기함을 특징으로 하는 상황버섯 자실체의 비닐포트재배방법.