CN108925365A - 一种蛹虫草培养基及基于该培养基的蛹虫草培植方法 - Google Patents

一种蛹虫草培养基及基于该培养基的蛹虫草培植方法 Download PDF

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侯立娟
李辉平
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    • A01G18/00Cultivation of mushrooms
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Abstract

本发明公开了一种蛹虫草培养基及基于该培养基的蛹虫草培植方法,属于食(药)用菌栽培技术领域,蛹虫草培养基包括固体原料和水,其中固体原料包括大米70%~90%,糖5%~15%,蜂蛹5%~15%,水的重量是所述固体原料总重量的1.2~1.3倍。本发明公开的培养基成分简单易得、安全无毒害作用,通过基于该培养基的蛹虫草培植方法,培养出的蛹虫草高产优质,其中的虫草素的含量高达950mg/100g以上,大大提高了经济效益,具有很好的市场推广前景。

Description

一种蛹虫草培养基及基于该培养基的蛹虫草培植方法
技术领域
本发明涉及食(药)用菌培养技术领域,尤其涉及一种蛹虫草培养基及基于该培养基的蛹虫草培植方法。
背景技术
冬虫夏草是我国一种名贵的中药材,它与人参,鹿茸并称为三大补药,不过由于冬虫夏草的生长环境比较特殊,寄主比较专一,因此人工培育难度比较大。蛹虫草主要是目前唯一可人工培育的虫草属真菌。越来越多的研究表明蛹虫草与天然冬虫夏草的成分比较相似,其主要药用成分为,虫草素,虫草酸,虫草多糖,等,因此蛹虫草具有与冬虫夏草相似的保健功效。因此可用作冬虫夏草的替代品来生产药品以及保健食品,有较为广阔的市场前景。
目前人工栽培蛹虫草的方法有很过存在以下问题:1.由于蛹虫草菌种不稳定容易退化培育出蛹虫草的品质不稳定;2.人工栽培蛹虫草时,添加剂的使用过多,难以保证食用、药用蛹虫草的安全性;3、当前研发的培养基大都以提高产量为主要目标,忽略了对蛹虫草的品质提高。
常规的蛹虫草培养基培育的蛹虫草中的虫草素的含量一般在400mg/100g,产量较低。ZL201110366025.X公开了《一种蛹虫草培养基》,其特征在于蛹虫草培养基按重量份由32~38份大米粉、0.5~1.5份玉米粉、1~3份异麦芽酮糖、2~5份蛋清寡肽、2~5份麦饭石、3~8份蚕蛹浆、0.5~1.5份胡萝卜汁和45~55份的水组成;所述的蛋清寡肽采用的是F值达到20~30的蛋清寡肽;所述的水为pH值为7.5~7.7的水,且水中含有0.03~0.1mg/L的锌、10~12mg/L的游离二氧化碳、60~70mg/L的钙和0.1~0.2mg/L的碘化物。该发明使虫草素含量达到8000mg/kg,即800mg/100g,使虫草素含量大大提高。但是该发明成分复杂,使用添加剂多,生产过程繁复及成本相对较高。
发明内容
本发明提供一种高产优质、成分简单易得、成本低、安全无毒害作用的蛹虫草培养基及基于该培养基的蛹虫草培植方法。本发明提供的技术方案如下:
一种蛹虫草培养基,其特征在于,包括固体原料和水,所述固体原料包括大米70%~90%,糖5%~15%,蜂蛹5%~15%,水的重量是所述固体原料总重量的1.2~1.3倍。
基于本发明提供的蛹虫草培养基的蛹虫草培植方法,包括如下步骤:
(1)固体菌种制备:
(2)液化菌种制备:
(3)蛹虫草培育:
将权利要求1、4所述的蛹虫草培养基配方中各成分于广口玻璃瓶中配制蛹虫草培养基,最后用聚丙烯封口膜封口,用高压蒸汽保持121℃灭菌35分钟;
待灭好菌的蛹虫草培养基冷却至25℃以下,放入超净工作台中用紫外灭菌30分钟,将培养好的液化菌种充分摇匀,用移液枪吸取10ml液化菌液,均匀喷洒在蛹虫草培养基上,用封口膜封好。放入22℃恒温培养箱中避光发菌;
(4)发菌管理:
当菌丝长满培养基表面时,并深扎到瓶底后开始见光,在22℃,60%湿度条件下,保证每天24小时光照,进行光照刺激从而促进蛹虫草菌种由营养生长转入生殖生长;
(5)出草管理:
当蛹虫草培养基料面形成橘黄色色素后进行掻菌,待长出米粒状橘黄色菌蕾,在封口膜上戳几个孔以增加培养瓶内氧气比例,保持相对湿度85%,22℃条件继续培养10~15天。
通过采用以上技术方案所达到的有益效果为:
1、本发明蔗糖为碳源,由适宜条件下培养,生长状况良好,子实体产量高且质量稳定可靠。
2、蛹虫草培养基原材料成分简单易得,成本低,无毒害作用,培养出的蛹虫草其功能性成分(虫草素、多糖)含量高,同时作为食用、药用具有较高的安全保障。
具体实施方式
一种蛹虫草培养基,其特征在于,包括固体原料和水,所述固体原料包括大米70%~90%,糖5%~15%,蜂蛹5%~15%,水的重量是所述固体原料总重量的1.2~1.3倍。
本发明提供的蛹虫草培养基的糖是蔗糖。
本发明提供的蛹虫草培养基的蜂蛹为蜂蛹粉末,所述蜂蛹粉末含水量为15%~20%,粒径为20~30目。
本发明提供的蛹虫草培养基的pH值范围为5.5~7.0。
本发明提供的蛹虫草培养基的大米为新鲜无霉变的籼米。
基于本发明提供的蛹虫草培养基的蛹虫草培植方法,包括如下步骤:
(1)固体菌种制备:
(2)液化菌种制备:
(3)蛹虫草培育:
将权利要求1、4所述的蛹虫草培养基配方中各成分于广口玻璃瓶中配制蛹虫草培养基,最后用聚丙烯封口膜封口,用高压蒸汽灭菌30分钟;
待灭好菌的蛹虫草培养基冷却至25℃以下,放入超净工作台中用紫外灭菌30分钟,将培养好的液化菌种充分摇匀,用移液枪吸取10ml液化菌液,均匀喷洒在蛹虫草培养基上,用封口膜封好。放入22℃恒温培养箱中避光发菌;
(4)发菌管理:
当菌丝长满培养基表面时,并深扎到瓶底后开始见光,在22℃,60%湿度条件下,保证每天24小时光照,进行光照刺激从而促进蛹虫草菌种由营养生长转入生殖生长;
(5)出草管理:
当蛹虫草培养基料面形成橘黄色色素后进行掻菌,待长出米粒状橘黄色菌蕾,在封口膜上戳几个孔以增加培养瓶内氧气比例,保持相对湿度85%,22℃条件继续培养10~15天。
基于本发明提供的蛹虫草培养基的蛹虫草培植方法的固体菌种制备方法如下:
将超净工作台事先用紫外灭菌30分钟,在工作台中制作固体菌种培养基,按照无菌操作要求挑取蛹虫草母种,将其接入做好的固体菌种培养基平板中,放入22℃恒温培养箱中,培养至菌种长满整个平面。
基于本发明提供的蛹虫草培养基的蛹虫草培植方法的固体菌种培养基以PDA培养基为基础,加入糖5%~15%,蜂蛹5%~15%,pH值范围为6.0~8.0;
基于本发明提供的蛹虫草培养基的蛹虫草培植方法的液化菌种制备方法如下:
超净工作台紫外线灭菌30分钟,在工作台中往均质仪中装入150ml无菌水,并且加入30g的固体菌种后均质,形成液化菌液,按液化菌种培养基配方配置好培养基并装入锥形瓶中,每瓶装10ml左右的培养基进行高压蒸汽灭菌,用移液枪向装有培养液的锥形瓶中加入5ml的液化菌液,接种完后放入100转/分钟,22℃的恒温摇床中,培养3~4天后备用。
基于本发明提供的蛹虫草培养基的蛹虫草培植方法的液化菌种培养基包括葡糖糖18~22重量份,蛋白胨8~10重量份,硫酸镁0.5~1重量份,磷酸二氢钾0.5~1重量份,水1000重量份。
实施例1
固体菌种培养基:以500g PDA培养基为基础,加入糖5%~15%,蜂蛹5%~15%,pH值范围为6.0~8.0;
液化菌种培养基:包括葡糖糖18~22g,蛋白胨8~10g,硫酸镁0.5~1g,磷酸二氢钾0.5~1g,水1000ml;
蛹虫草培养基:大米35g,蔗糖7.5g,蜂蛹粉末7.5g,加入上述原料总重量1.2倍的水,混合均匀,用0.1mol/LHCl调pH至5.5。
具体操作方法:
固体菌种制备:
将超净工作台事先用紫外灭菌30分钟,在工作台中制作固体菌种培养基,按照无菌操作要求挑取蛹虫草母种,将其接入做好的固体菌种培养基平板中,放入22℃恒温培养箱中,培养至菌种长满整个平面。
液化菌种制备:
超净工作台紫外线灭菌30分钟,在工作台中往均质仪中装入150ml无菌水,并且加入30g的固体菌种后均质,形成液化菌液。按液化菌种培养基配方配置好培养基并装入锥形瓶中,每瓶装10ml左右的培养基进行高压蒸汽灭菌。用移液枪向装有培养液的锥形瓶中加入5ml的液化菌液,接种完后放入100转/分钟,22℃的恒温摇床中,培养3~4天后备用。
蛹虫草培育:
按照蛹虫草培养基配方于广口玻璃瓶中配制栽培培养基,最后用聚丙烯封口膜封口,用高压蒸汽灭菌30分钟。
待灭好菌的蛹虫草培养基冷却至25℃以下,放入超净工作台中用紫外灭菌30分钟,将培养好的液化菌种充分摇匀,用移液枪吸取10ml液化菌液,均匀喷洒在蛹虫草培养基上,用封口膜封好。放入22℃恒温培养箱中避光发菌。
发菌管理:当菌丝长满培养基表面时,并深扎到瓶底后开始见光,在22℃,60%湿度条件下,保证每天24小时光照,进行光照刺激从而促进蛹虫草菌种由营养生长转入生殖生长。
出草管理:当蛹虫草培养基料面形成橘黄色色素后进行掻菌,用毛刷将培养基表面老化的菌丝刷掉,给以机械刺激,进一步促进菌丝进入生殖生长,待长出米粒状橘黄色菌蕾,在封口膜上戳几个孔以增加培养瓶内氧气比例。保持相对湿度85%,22℃条件继续培养。
子实体的采收:继续培养10~15天后,当子实体表面出现龟背纹即可采收。采收后的子实体放入烘箱烘干到水分18%以下。装入食品级塑料袋于阴凉通风处或者冷冻柜保存。
实施例2
蛹虫草培养基:大米40g,蔗糖5g,蜂蛹粉末5g,加入上述原料总重量1.3倍的水,混合均匀,用0.1mol/LHCl调pH至6.5。
固体菌种培养基、液化菌种培养基、具体操作方法与实施例1相同。
实施例3
蛹虫草培养基:大米45g,蔗糖2.5g,蜂蛹粉末2.5g,加入上述原料总重量1.2倍的水,混合均匀,用0.1mol/LHCl调pH至7.0。
固体菌种培养基、液化菌种培养基、具体操作方法与实施例1相同。
为了使实验效果清晰明白,特设立2个对比培养基,
对比培养基1:纯蜂蛹粉末30g,加入其重量1.3倍的水,混合均匀,用0.1mol/LHCl调pH至6.5。
对比培养基2:大米40g,蔗糖5g,蚕蛹粉末5g,加入上述原料总重量1.3倍的水,混合均匀,用0.1mol/LHCl调pH至6.5。
实验结果如下表:
由上表可以看出,通过采用本发明提供的培养基,栽培出的蛹虫草子实体产量相对于纯蜂蛹栽培其功能成分含量和产量均较高,其中虫草素含量高达950mg/100g以上,高于ZL201110366025.X公开的《一种蛹虫草培养基》中虫草素含量800mg/100g,且本发明成分简单无毒,成本低。虽然相对目前的常规栽培培养基(对比培养基2),其产量略低,但其功能分含量均较高,品质较佳,推广应用前景广阔。
实施例中所用仪器型号、来源如下表。

Claims (10)

1.一种蛹虫草培养基,其特征在于,包括固体原料和水,所述固体原料包括大米70%~90%,糖5%~15%,蜂蛹5%~15%,水的重量是所述固体原料总重量的1.2~1.3倍。
2.根据权利要求1所述的蛹虫草培养基,其特征在于,所述糖是蔗糖。
3.根据权利要求1所述的蛹虫草培养基,其特征在于,所述蜂蛹为蜂蛹粉末,所述蜂蛹粉末含水量为15%~20%,粒径为20~30目。
4.根据权利要求1所述的蛹虫草培养基,其特征在于,所述蛹虫草培养基的pH值范围为5.5~7.0。
5.根据权利要求1所述的蛹虫草培养基,其特征在于,所述大米为新鲜无霉变的籼米。
6.基于权利要求1所述的蛹虫草培养基的蛹虫草培植方法,包括如下步骤:
(1)固体菌种制备:
(2)液化菌种制备:
(3)蛹虫草培育:
将权利要求1、4所述的蛹虫草培养基配方中各成分于广口玻璃瓶中配制蛹虫草培养基,最后用聚丙烯封口膜封口,用高压蒸汽保持121℃灭菌30~40分钟;
待灭好菌的蛹虫草培养基冷却至25℃以下,放入超净工作台中用紫外线灭菌30分钟,将培养好的液化菌种充分摇匀,用移液枪吸取10ml液化菌液,均匀喷洒在蛹虫草培养基上,用封口膜封好,放入22℃恒温培养箱中避光发菌;
(4)发菌管理:
当菌丝长满培养基表面时,并深扎到瓶底后开始见光,在22℃,60%湿度条件下,保证每天24小时光照,进行光照刺激从而促进蛹虫草菌种由营养生长转入生殖生长;
(5)出草管理:
当蛹虫草培养基料面形成橘黄色后进行掻菌,待长出米粒状橘黄色菌蕾,在封口膜上戳若干个小孔以增加培养瓶内氧气比例,保持相对湿度85%,22℃条件继续培养10~15天。
7.根据权利要求6所述的蛹虫草培植方法,其特征在于,所述固体菌种制备方法如下:
将超净工作台事先用紫外线灭菌30分钟,在工作台中制作固体菌种培养基,按照无菌操作要求挑取蛹虫草母种,将其接入预先做好的固体菌种培养基平板中,放入22℃恒温培养箱中,培养至菌种长满整个平面。
8.根据权利要求7所述的蛹虫草培植方法,其特征在于,所述固体菌种培养基以PDA培养基为基础,加入糖5%~15%,蜂蛹5%~15%,pH值范围为6.0~8.0。
9.根据权利要求6所述的蛹虫草培植方法,其特征在于,所述液化菌种制备方法如下:
超净工作台紫外线灭菌30分钟,在工作台中往均质仪中装入150ml无菌水,并且加入30g的固体菌种后均质,形成液化菌液,按液化菌种培养基配方配置好培养基并装入锥形瓶中,每瓶装10ml左右的培养基进行高压蒸汽灭菌,用移液枪向装有培养液的锥形瓶中加入5ml的液化菌液,接种完后放入100转/分钟,22℃的恒温摇床中,培养3~4天后备用。
10.根据权利要求9所述的蛹虫草培植方法,其特征在于,所述液化菌种培养基包括葡糖糖18~22重量份,蛋白胨8~10重量份,硫酸镁0.5~1重量份,磷酸二氢钾0.5~1重量份,水1000重量份。
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