TW201738216A - 吲哚胺２，３－雙加氧酶抑制劑及其製備方法與應用 - Google Patents

吲哚胺２，３－雙加氧酶抑制劑及其製備方法與應用 Download PDF

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Abstract

本發明涉及一種具有式(I)結構的吲哚胺2,3-雙加氧酶抑制劑及其製備方法與應用。該IDO抑制劑是N'-羥基-N-苯基甲脒衍生物，對IDO具有很高的抑制活性，能夠有效抑制IDO活性，也可用於抑制患者的免疫抑制。可廣泛應用於治療或預防癌症或腫瘤、病毒感染、抑鬱症、神經變性病症、創傷、年齡相關的白內障、器官移植排斥或自身免疫疾病，有望開發成新一代免疫抑制劑。□

Description

吲哚胺2,3-雙加氧酶抑制劑及其製備方法與應用
本發明屬於藥物開發領域，具體涉及吲哚胺2,3-雙加氧酶抑制劑及其製備方法與應用。
吲哚胺2,3-雙加氧酶(indoleamine 2,3-dioxygenase，簡寫IDO)是一種與色胺酸代謝有關的蛋白酶。色胺酸是八種必需胺基酸之一，在體內色胺酸可用來合成蛋白質，色胺酸還可作為前體受質藉由甲氧基吲哚代謝途徑合成5-羥色胺和褪黑激素(N-乙醯-5-甲氧基色胺)。5-羥色胺和褪黑激素是神經遞質和神經內分泌激素，參與體內的多種神經與生理過程的調節。此外，色胺酸還可藉由犬尿胺酸代謝途徑產生犬尿胺酸等代謝產物。犬尿胺酸代謝途徑的第一步是在吲哚胺2,3-雙加氧酶或色胺酸2，3-雙加氧酶(TDO)的催化作用下，色胺酸L-色胺酸降解為N-甲醯基-犬尿胺酸，N-甲醯基-犬尿胺酸在犬尿胺酸甲醯胺酶的催化作用下形成犬尿胺酸，犬尿胺酸還可被進一步代謝形成3-羥基鄰胺基苯甲酸，喹啉酸，吡啶甲酸。喹啉酸具有神經毒性，而吡啶甲酸具有神經保護作用。犬尿胺酸和3-羥基鄰胺基 苯甲酸參與淋巴細胞活性調節從而引起免疫系統被抑制。
除胎盤組織外，正常健康狀況下吲哚胺2,3-雙加氧酶在多數組織細胞內基本不表達。在炎症發生區域，干擾素γ等炎性細胞因子可誘導吲哚胺2,3-雙加氧酶表達量升高。多方面的實驗結果證明，吲哚胺2,3-雙加氧酶在組織細胞中的高表達可導致該組織微環境的免疫系統被抑制，或稱免疫被抑制或免疫檢查點(immune checkpoint)。胎盤組織吲哚胺2,3-雙加氧酶的高表達可防止對胎兒的免疫排斥反應。炎症區域吲哚胺2,3-雙加氧酶的高表達可防止過度的免疫反應，防止細胞組織受到過度的損傷。導致免疫被抑制的機制之一是吲哚胺2,3-雙加氧酶高表達造成局部L-色胺酸耗竭，從而被周圍的淋巴細胞藉由GCN2等機制感受到，引起CD8+細胞毒性T細胞發生細胞週期停滯或凋亡。導致免疫被抑制的另一種機制是吲哚胺2,3-雙加氧酶高表達造成犬尿胺酸升高，犬尿胺酸形成後可離開細胞進入細胞外基質，然後進入附近的淋巴細胞藉由結合AHR轉錄因子對CD8+ T細胞和調節性Treg細胞進行調節，CD8+細胞毒性T細胞的活性被抑制，而調節性Treg細胞的數量增多並且被啟動，從而導致免疫被抑制。
在很多不同類型的腫瘤中吲哚胺2,3-雙加氧酶發生異常高表達，包括血液腫瘤和直結腸癌、肝癌、肺癌、胰腺癌、咽喉癌等實體瘤。吲哚胺2,3-雙加氧酶異常高表達與腫瘤不良預後呈正相關。腫瘤細胞逃脫免疫監控是癌變和癌症進一步發展的關鍵一步，腫瘤中吲哚胺2,3-雙加氧酶 的異常高表達可能是腫瘤細胞逃脫免疫監控的一種主要機制，抑制吲哚胺2,3-雙加氧酶的活性有可能啟動被抑制的免疫系統，達到抑制腫瘤生長的效果，所以吲哚胺2,3-雙加氧酶抑制劑作為一種免疫檢查點抑制劑(immune checkpoint inhibitor)引起了醫藥界很大的興趣。吲哚胺2,3-雙加氧酶(IDO)有兩種，IDO-1和IDO-2，參與上述免疫被抑制的主要是IDO-1，IDO-2在免疫被抑制中的作用還不是很清楚。色胺酸2，3-雙加氧酶(TDO)也在很多類型的腫瘤中發生異常高表達，有的腫瘤還呈現IDO和TDO雙陽性，所以有人認為也可藉由抑制TDO免疫檢查點起到腫瘤治療的目的。因為正常肝臟細胞表達TDO，尚不清楚TDO抑制劑是否會影響肝臟功能和正常的色胺酸代謝，但TDO剔除的小鼠模型未見異常，表明TDO抑制劑可能不會影響肝臟功能和正常的色胺酸代謝。IDO和TDO導致免疫被抑制的機理基本相同，所以IDO/TDO雙特異抑制劑也同樣引起了醫藥界的興趣，IDO/TDO雙特異抑制劑將適用於IDO陽性、TDO陽性、IDO/TDO雙陽性的病人。
色胺酸的犬尿胺酸代謝途徑的很多代謝產物與精神分裂症，抑鬱症，神經元退化有關，吲哚胺2,3-雙加氧酶抑制劑可能也可用於這些疾病的治療。犬尿胺酸在犬尿胺酸胺基轉移酶的催化作用下可轉化為犬尿喹啉酸，犬尿喹啉酸是一種NMDA拮抗劑，在精神分裂症病人的中樞神經中常見到較高的犬尿喹啉酸水準。喹啉酸具有神經毒性，可導致神經細胞凋亡和神經退化。吲哚胺2,3-雙加氧酶不 僅參與色胺酸代謝，還參與色胺等的代謝，5-羥色胺在吲哚胺2,3-雙加氧酶的催化作用下可轉化為5-羥吲哚乙酸，5-羥色胺下降可能是導致抑鬱症的因素之一。
目前吲哚胺2,3-雙加氧酶抑制劑的研發均處於早期，包括NewLink公司的Indoximod，NLG-919(IDO/TDO雙特異性)，Incyte公司的Epacadostat(INCB 024360)，以及BMS，Flexus，Iomet,Iteos,Curadev等公司的IDO或TDO抑制劑。專利WO2016041489A1公開了一系列磺醯亞胺基化合物，該類對吲哚胺2,3-雙加氧酶(IDO)具有很好的抑制活性，但該專利公開的最好化合物6相對於INCB-24360的暴露量(AUC)提升幅度有限，且T1/2很短，不利於臨床開發；化合物13(化合物6前藥)雖然延長了T1/2，但其暴露量(AUC)還不如INCB-24360，因此，進一步開發具有適合臨床給藥的T1/2，同時具有較高暴露量(AUC)的化合物吸引了世界許多科學家為此不斷努力。
發明人在一系列研究後發現N'-羥基-N-苯基甲脒衍生物，對吲哚胺2,3-雙加氧酶(IDO)具有很高的抑制活性，而對色胺酸2，3-雙加氧酶(TDO)沒有抑制活性，並且在PK動物模型中具有非常好的暴露量(AUC)，同時具有非常適合臨床應用的T1/2。該類化合物能夠有效抑制IDO的活性，也可用於抑制患者的免疫抑制。可廣泛應用於治療或預防癌症或腫瘤、病毒感染、抑鬱症、神經變性病症、創傷、年齡相關的白內障、器官移植排斥或自身免疫疾病， 有望開發成新一代免疫抑制劑。
本發明一方面提供一種具有如下式(I)結構的(Z)-N'-羥基-N-苯基甲脒衍生物、其立體異構體或其藥學上可接受鹽，
其中：為Z型和E型；較佳為Z型；X選自C1-8烷基或C3-8環烷基，視需要進一步被一個或多個選自氘、鹵素、羥基、巰基、氰基、硝基、疊氮基、C1-8烷基、C2-8鏈烯基、C2-8鏈炔基、鹵取代C1-8烷基、C3-8環烷基、3-8員雜環基、3-8員雜環基氧基、3-8員雜環基硫基、C5-10芳基、C5-10芳基氧基、C5-10芳基硫基、5-10員雜芳基、5-10員雜芳基氧基、5-10員雜芳基硫基、-C0-8-S(O)rR8、-C0-8-O-R5、-C0-8-C(O)OR5、-C0-8-C(O)R6、-C0-8-O-C(O)R6、-C0-8-NR7R8、-C0-8-C(O)NR7R8、-N(R7)-C(O)R6或-N(R7)-C(O)OR5的取代基所取代；R1選自如下結構： Y選自-S(O)2-或-C(O)-C(O)-；Z選自鍵、O、S或-NR7-； R2選自氫、氘、C1-8烷基、C2-8鏈烯基、C2-8鏈炔基、C3-8環烷基、3-8員雜環基、C5-10芳基、5-10員雜芳基或C0-8烷基羰基，視需要進一步被一個或多個選自鹵素、羥基、巰基、氰基、硝基、疊氮基、C1-8烷基、C2-8鏈烯基、C2-8鏈炔基、鹵取代C1-8烷基、C3-8環烷基、3-8員雜環基、3-8員雜環基氧基、3-8員雜環基硫基、C5-10芳基、C5-10芳基氧基、C5-10芳基硫基、5-10員雜芳基、5-10員雜芳基氧基、5-10員雜芳基硫基、-C0-8-S(O)rR4、-C0-8-O-R5、-C0-8-C(O)OR5、-C0-8-C(O)R6、-C0-8-O-C(O)R6、-C0-8-NR7R8、-C0-8-C(O)NR7R8、-N(R7)-C(O)R6或-N(R7)-C(O)OR5的取代基所取代；R3選自氫、氘、羥基、胺基、C1-8烷基、C2-8鏈烯基、C3-8環烷基、3-8員雜環基、C5-10芳基、5-10員雜芳基、C1-8烷氧基、C3-8環烷氧基、3-8員雜環基氧基、C5-10芳基氧基、5-10員雜芳基氧基、-C0-8-S(O)rR4、-C0-8-C(O)OR5、-C0-8-O-C(O)R6、-C0-8-NR7R8、-C0-8-C(O)NR7R8、-N(R7)-C(O)R6或-N(R7)-C(O)OR5，視需要進一步被一個或多個選自鹵素、羥基、巰基、氰基、硝基、疊氮基、C1-8烷基、C2-8鏈烯基、C2-8鏈炔基、鹵取代C1-8烷基、C3-8環烷基、3-8員雜環基、3-8員雜環基氧基、3-8員雜環基硫基、C5-10芳基、C5-10芳基氧基、C5-10芳基硫基、5-10員雜芳基、5-10員雜芳基氧基、5-10員雜芳基硫基、-C0-8-S(O)rR4、-C0-8-O-R5、-C0-8-C(O)OR5、-C0-8-C(O)R6、-C0-8-O-C(O)R6、-C0-8-NR7R8、-C0-8-C(O)NR7R8、 -N(R7)-C(O)R6或-N(R7)-C(O)OR5的取代基所取代；R4選自氫、氘、C1-8烷基、C2-8鏈烯基、C3-8環烷基、鹵取代C1-8烷基、苯基、對甲基苯基、胺基、單C1-8烷基胺基、二C1-8烷基胺基或C1-8烷醯胺基；R5選自氫、氘、C1-8烷基、C3-8環烷基、鹵取代C1-8烷基或羥取代C1-8烷基；R6選自氫、氘、C1-8烷基、C1-8烷氧基、C3-8環烷基、C3-8環烷氧基、鹵取代C1-8烷基、鹵取代C1-8烷氧基、羥取代C1-8烷基或羥取代C1-8烷氧基；R7、R8、R9、R10各自獨立的選自氫、氘、羥基、C1-8烷基、C1-8羥烷基、C1-8烷氧基、C2-8鏈烯基、C2-8鏈炔基、C3-8環烷基、3-8員雜環基、C5-10芳基、5-10員雜芳基或C1-8烷醯基，或者，R7與R8、R9與R10和所連接的氮原子形成3-8員雜環烷基，視需要進一步被一個或多個選自鹵素、羥基、巰基、氰基、硝基、乙醯胺基、疊氮基、磺醯基、甲磺醯基、C1-8烷基、三氟甲基、C2-8鏈烯基、C2-8鏈炔基、C3-8環烷基、3-8員雜環基、C1-8烷氧基、C1-8烷氧羰基、C1-8烷基羰基、C1-8烷基羰基氧基、3-8員雜環基氧基、3-8員雜環基硫基、C5-10芳基、C5-10芳基氧基、C5-10芳基硫基、5-10員雜芳基、5-10員雜芳基氧基、5-10員雜芳基硫基、胺基、單C1-8烷基胺基或二C1-8烷基胺基的取代基所取代；r為0~2。
作為進一步較佳為的方案，所述的(Z)-N'-羥基-N- 苯基甲脒衍生物、其立體異構體或其藥學上可接受鹽，選自式(Ⅱ)化合物： 其中：X選自C1-6烷基或C3-8環烷基，視需要進一步被一個或多個選自氘、鹵素、羥基、巰基、氰基、硝基、疊氮基、C1-8烷基、鹵取代C1-8烷基或C3-8環烷基的取代基所取代；R7、R9、R10各自獨立的選自氫、氘、羥基、C1-8烷基、C1-8羥烷基、C1-8烷氧基、C2-8鏈烯基、C2-8鏈炔基、C3-8環烷基、3-8員雜環基、C5-10芳基、C1-8烷基取代的C5-10芳基、5-10員雜芳基、C1-8烷醯基或-C0-8-C(O)OR5，或R9與R10和所連接的氮原子形成5-6員雜環烷基，視需要進一步被一個或多個選自鹵素、羥基、巰基、氰基、硝基、乙醯胺基、疊氮基、磺醯基、甲磺醯基、C1-8烷基、三氟甲基、C3-8環烷基、3-8員雜環基、C1-8烷氧基、C1-8烷氧羰基、C1-8烷基羰基、C1-8烷基羰基氧基、3-8員雜環基氧基、3-8員雜環基硫基、C5-10芳基、C5-10芳基氧基、C5-10芳基硫基、5-10員雜芳基、5-10員雜芳基氧基、5-10員雜芳基硫基、胺基、單C1-8烷基胺基或二C1-8烷基胺基的取代基所取代。
作為更一步較佳的方案，所述的(Z)-N'-羥基-N-苯基甲脒衍生物、其立體異構體或其藥學上可接受鹽，選自 式(IIA)或(IIB)化合物： 其中：X選自乙基、環丁基、環己基，視需要進一步被一個或多個選自氘、鹵素、羥基、巰基、氰基、硝基、三氟甲基、C1-8烷基或C3-8環烷基的取代基所取代；R7、R9、R10各自獨立的選自氫、氘、羥基、C1-8烷基、C1-8羥烷基、C1-8烷氧基、C3-8環烷基、3-8員雜環基、C5-10芳基、C1-8烷基取代的C5-10芳基、5-10員雜芳基、C1-8烷醯基或-C0-8-C(O)OR5，或R9、R10與所連接的氮原子形成5-6雜環烷基。
作為最佳的方案，該(Z)-N'-羥基-N-苯基甲脒衍生物、其立體異構體或其藥學上可接受鹽，選自如下化合物：
作為進一步較佳的方案，該(Z)-N'-羥基-N-苯基甲脒衍生物、其立體異構體或其藥學上可接受鹽，選自式(III)化合物： Z選自鍵或-NR7-；R2選自氫、氘、C1-8烷基；R3選自氘、羥基、胺基、C1-8烷基、C3-8環烷基、3-8員雜環基、C5-10芳基、5-10員雜芳基、C1-8烷氧基、C3-8環烷氧基、3-8員雜環基氧基、C5-10芳基氧基、5-10員雜芳基氧基、-C0-8-S(O)rR4、-C0-8-C(O)OR5或-C0-8-O-C(O)R6； R4選自氫、氘、C1-8烷基、C2-8鏈烯基、C3-8環烷基、鹵取代C1-8烷基、苯基、對甲基苯基、胺基、單C1-8烷基胺基、二C1-8烷基胺基或C1-8烷醯胺基；R5選自氫、氘、C1-8烷基、C3-8環烷基、鹵取代C1-8烷基或羥取代C1-8烷基；R6選自氫、氘、C1-8烷基、C1-8烷氧基、C3-8環烷基、C3-8環烷氧基、鹵取代C1-8烷基、鹵取代C1-8烷氧基、羥取代C1-8烷基或羥取代C1-8烷氧基；r為0~2。
作為更進一步較佳的方案，該(Z)-N'-羥基-N-苯基甲脒衍生物、其立體異構體或其藥學上可接受鹽，該式(III)化合物有如下兩種表述方式：
作為更進一步較佳的方案，該式(I)化合物、其立體異構體或其藥學上可接受鹽，Z選自鍵或-NR7-；R2選自甲基、乙基、丙基、異丙基、環丙基、環丁基、環戊基、環己基或苯基；R3選自羥基、胺基、C1-8烷基或-C0-8-S(O)rR4；R4選自氫、氘、C1-8烷基、C2-8鏈烯基、C3-8環烷基、鹵取代C1-8烷基、苯基、對甲基苯基、胺基、單C1-8烷基 胺基、二C1-8烷基胺基或C1-8烷醯胺基；r為0~2。
作為最佳的方案，該(Z)-N'-羥基-N-苯基甲脒衍生物、其立體異構體或其藥學上可接受鹽，選自如下化合物：
本發明還涉及一種製備通式(III)化合物、其立體異構體或其藥學上可接受鹽的中間體，其特徵在於，如通式(IV)所示的化合物、其立體異構體或其藥學上可接受鹽：
其中：Z、R2和R3如通式(III)所述。
本發明還涉及一種製備所述的式(I)化合物、其立體異構體或其藥學上可接受鹽的方法，其特徵在於，包括如下製備步驟：
通式(IV)化合物在鹼性條件下開環得到通式(III)化合物；其中：X、R2和R3如通式(III)所述。本發明另一方面提供一種前所述N’-羥基-N-苯基甲脒衍生物、其立體異構體或其藥學上可接受鹽的製備方法，包括如下製備步驟： 其中：X、R1如式(I)化合物所定義。
本發明另一方面提供一種醫藥組成物，所述醫藥組成 物包括治療有效劑量的前述式(I)化合物、其立體異構體或其藥學上可接受鹽及可藥用的載體。
本發明另一方面提供一種前述式(I)化合物、其立體異構體或其藥學上可接受鹽、或前述醫藥組成物在製備藥物中的應用，該藥物用於抑制吲哚胺2,3-雙加氧酶的活性或者用於抑制患者的免疫抑制。
本發明另一方面提供一種前述式(I)化合物、其立體異構體或其藥學上可接受鹽、或前述醫藥組成物在製備藥物中的應用，該藥物用於治療或預防患者的癌症或腫瘤、病毒感染、抑鬱症、神經變性病症、創傷、年齡相關的白內障、器官移植排斥或自身免疫疾病；較佳的，其中該癌症或腫瘤選自肺癌、骨癌、胃癌、胰腺癌、皮膚癌、頭頸癌、子宮癌、卵巢癌、睾丸癌、子宮癌、輸卵管癌、子宮內膜癌、子宮頸癌、陰道癌、外陰癌、直腸癌、結腸癌、肛門區癌、乳腺癌、食管癌、小腸癌、內分泌系統癌、甲狀腺癌、甲狀旁腺癌、腎上腺癌、尿道癌、陰莖癌、前列腺癌、胰腺癌、腦癌、睾丸癌、淋巴癌、移行細胞癌、膀胱癌、腎癌或輸尿管癌、腎細胞癌、腎盂癌、霍奇金病、非霍奇金淋巴瘤、軟組織肉瘤、兒童實體瘤、淋巴細胞性淋巴瘤、中樞神經系統(CNS)腫瘤、原發性中樞神經系統淋巴瘤、腫瘤血管生成、脊柱腫瘤、腦幹神經膠質瘤、垂體腺瘤、黑素瘤、卡波西肉瘤、表皮樣癌、鱗狀細胞癌、T細胞淋巴瘤、慢性或急性白血病和所述癌的組合。
作為進一步較佳的方案，所述的應用是指將治療有效 劑量的前述的式(I)化合物、其立體異構體或其藥學上可接受鹽、或前述醫藥組成物與抗CTLA-4抗體、抗PD-1抗體、抗PD-L1抗體、抗病毒劑、化療劑、免疫抑制劑、輻射、抗腫瘤疫苗、抗病毒疫苗、細胞因子療法或酪胺酸激酶抑制劑進行聯合用藥；較佳的，該細胞因子較佳為IL-2、IL-3、IL-4或IL-5，該化療劑較佳為細胞毒性劑，該抗PD-1抗體較佳為Kevtruda抗體。
本發明另一方面提供一種調節吲哚胺2,3-雙加氧酶活性的方法，該方法包括將治療有效劑量的前述式(I)化合物、其立體異構體或其藥學上可接受鹽、或前述醫藥組成物與吲哚胺2,3-雙加氧酶接觸；較佳的，該調節較佳為為抑制作用。
本發明另一方面提供一種抑制患者的免疫抑制的方法，所述方法包括將治療有效劑量的前述式(I)化合物、其立體異構體或其藥學上可接受鹽、或前述醫藥組成物給予患者。
本發明另一方面涉及一種治療癌症的方法，該方法包括向患者施用治療有效劑量的本發明的通式(I)所述的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體或其混合物形式，或其可藥用鹽。該方法顯示出突出的療效和較少的副作用，其中該癌症或腫瘤選自肺癌、骨癌、胃癌、胰腺癌、皮膚癌、頭頸癌、子宮癌、卵巢癌、睾丸癌、子宮癌、輸卵管癌、子宮內膜癌、子宮頸癌、陰道癌、外陰癌、直腸癌、結腸癌、肛門區癌、乳 腺癌、食管癌、小腸癌、內分泌系統癌、甲狀腺癌、甲狀旁腺癌、腎上腺癌、尿道癌、陰莖癌、前列腺癌、胰腺癌、腦癌、睾丸癌、淋巴癌、移行細胞癌、膀胱癌、腎癌或輸尿管癌、腎細胞癌、腎盂癌、霍奇金病、非霍奇金淋巴瘤、軟組織肉瘤、兒童實體瘤、淋巴細胞性淋巴瘤、中樞神經系統(CNS)腫瘤、原發性中樞神經系統淋巴瘤、腫瘤血管生成、脊柱腫瘤、腦幹神經膠質瘤、垂體腺瘤、黑素瘤、卡波西肉瘤、表皮樣癌、鱗狀細胞癌、T細胞淋巴瘤、慢性或急性白血病和該等癌的組合。
第1圖為實施例15化合物檢測譜圖，橫座標為保留時間(單位：min)；縱座標為回應值(單位：mV)；第2圖2為光學異構體①檢測譜圖，橫座標為保留時間(單位：min)；縱座標為回應值(單位：mV)；圖3為光學異構體②檢測譜圖，橫座標為保留時間(單位：min)；縱座標為回應值(單位：mV)。
詳細說明：除非有相反陳述，下列用在說明書和申請專利範圍中的術語具有下述含義。
“C1-8烷基”指包括1至8個碳原子的直鏈烷基和含支鏈烷基，烷基指飽和的脂族烴基團，C0-8是指不含碳原子或者C1-8烷基，較佳為包括1至6個碳原子的直鏈烷基，更佳為包括1至4個碳原子的直鏈烷基，例如甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、第三丁基、第二丁基、 正戊基、1，1-二甲基丙基、1，2-二甲基丙基、2，2-二甲基丙基、1-乙基丙基、2-甲基丁基、3-甲基丁基、正己基、1-乙基-2-甲基丙基、1，1，2-三甲基丙基、1，1-二甲基丁基、1，2-二甲基丁基、2，2-二甲基丁基、1，3-二甲基丁基、2-乙基丁基、2-甲基戊基、3-甲基戊基、4-甲基戊基、2，3-二甲基丁基、正庚基、2-甲基己基、3-甲基己基、4-甲基己基、5-甲基己基、2，3-二甲基戊基、2，4-二甲基戊基、2，2-二甲基戊基、3，3-二甲基戊基、2-乙基戊基、3-乙基戊基、正辛基、2，3-二甲基己基、2，4-二甲基己基、2，5-二甲基己基、2，2-二甲基己基、3，3-二甲基己基、4，4-二甲基己基、2-乙基己基、3-乙基己基、4-乙基己基、2-甲基-2-乙基戊基、2-甲基-3-乙基戊基或其各種支鏈異構體等。
“環烷基”指飽和或部分不飽和單環或多環環狀烴取代基，“C3-8環烷基”指包括3至8個碳原子的環烷基，“5-10員環烷基”指包括5至10個碳原子的環烷基，例如：單環環烷基的非限制性實施例包含環丙基、環丁基、環戊基、環戊烯基、環己基、環己烯基、環己二烯基、環庚基、環庚三烯基、環辛基等，較佳為環丙基、環丁基和環己基；多環環烷基包括螺環、稠環和橋環的環烷基。
“雜環基”指飽和或部分不飽和單環或多環環狀烴取代基，其中一個或多個環原子選自氮、氧或S(O)r(其中r是整數0、1、2)的雜原子，但不包括-O-O-、-O-S-或-S-S-的環部分，其餘環原子為碳。“5-10員雜環基”指包含5 至10個環原子的環基，“3-8員雜環基”指包含3至8個環原子的環基，較佳為5-6員雜環基。
單環雜環基的非限制性實施例包含吡咯烷基、哌啶基、哌嗪基、嗎啉基、硫代嗎啉基、高哌嗪基等，較佳為嗎啡基。
多環雜環基包括螺環、稠環和橋環的雜環基。
“芳基”指全碳單環或稠合多環(也就是共用毗鄰碳原子對的環)基團，具有共軛的π電子體系的多環(即其帶有相鄰對碳原子的環)基團，“C5-10芳基”指含有5-10個碳的全碳芳基，“5-10員芳基”指含有5-10個碳的全碳芳基，例如苯基和萘基。
“雜芳基”指包含1至4個雜原子的雜芳族體系，該雜原子包括氮、氧和S(O)r(其中r是整數0、1、2)的雜原子，5-7員雜芳基指含有5-7個環原子的雜芳族體系，5-10員雜芳基指含有5-10個環原子的雜芳族體系，例如呋喃基、噻吩基、吡啶基、吡咯基、N-烷基吡咯基、嘧啶基、吡嗪基、咪唑基、四唑基等。
“烯基”指由至少兩個碳原子和至少一個碳-碳雙鍵組成的如上述定義的烷基，C2-8鏈烯基指含有2-8個碳的直鏈或含支鏈烯基。例如乙烯基、1-丙烯基、2-丙烯基、1-，2-或3-丁烯基等。
“炔基”指至少兩個碳原子和至少一個碳-碳三鍵組成的如上所定義的烷基，C2-8鏈炔基指含有2-8個碳的直鏈或含支鏈炔基。例如乙炔基、1-丙炔基、2-丙炔基、1-， 2-或3-丁炔基等。
“烷氧基”指-O-(烷基)，其中烷基的定義如上所述。C1-8烷氧基指含1-8個碳的烷基氧基，非限制性實施例包含甲氧基、乙氧基、丙氧基和丁氧基等。
“鹵取代的C1-8烷基”指烷基上的氫視需要的被氟、氯、溴、碘原子取代的1-8個碳烷基基團，例如二氟甲基、二氯甲基、二溴甲基、三氟甲基、三氯甲基、三溴甲基等。
“鹵取代的C1-8烷氧基”烷基上的氫視需要的被氟、氯、溴、碘原子取代的1-8個碳烷氧基基團。例如二氟甲氧基、二氯甲氧基、二溴甲氧基、三氟甲氧基、三氯甲氧基、三溴甲氧基等。
“鹵素”指氟、氯、溴或碘。
“視需要”或“視需要地”意味著隨後所描述地事件或環境可以但不必發生，該說明包括該事件或環境發生或不發生地場合。例如，“視需要被烷基取代的雜環基團”意味著烷基可以但不必須存在，該說明包括雜環基團被烷基取代的情形和雜環基團不被烷基取代的情形。
“取代的”指基團中的一個或多個氫原子，較佳為最多5個，更佳為1~3個氫原子彼此獨立地被相應數目的取代基取代。不言而喻，取代基僅處在它們的可能的化學位置，本領域技術人員能夠在不付出過多努力的情況下確定(藉由實驗或理論)可能或不可能的取代。例如，具有游離氫的胺基或羥基與具有不飽和鍵(如烯屬)的碳原子結合時可能是不穩定的。
“醫藥組成物”表示含有一種或多種本文所述化合物或其生理學上/可藥用的鹽或前體藥物與其他化學組分的混合物，以及其他組分例如生理學/可藥用的載體和賦形劑。醫藥組成物的目的是促進對生物體的給藥，利於活性成分的吸收進而發揮生物活性。
“立體異構”包含幾何異構(順反異構)、旋光異構、構象異構三類。
下面結合實施例對本發明做進一步詳細、完整地說明，但決非限制本發明，本發明也並非僅局限於實施例的內容。
本發明的化合物結構是藉由核磁共振(NMR)或/和液質聯用色譜(LC-MS)來確定的。NMR化學位移(δ)以百萬分之一(ppm)的單位給出。NMR的測定是用Bruker AVANCE-400核磁儀，測定溶劑為氘代甲醇(CD3OD)和氘代氯仿(CDCl3)內標為四甲基矽烷(TMS)。
液質聯用色譜LC-MS的測定用Agilent 1200 Infinity Series質譜儀。HPLC的測定使用安捷倫1200DAD高壓液相色譜儀(Sunfire C18 150×4.6mm色譜管柱)和Waters 2695-2996高壓液相色譜儀(Gimini C18 150×4.6mm色譜管柱)。
薄層層析矽膠板使用煙臺黃海HSGF254或青島GF254矽膠板，TLC採用的規格是0.15mm~0.20mm，薄層層析分離純化產品採用的規格是0.4mm~0.5mm。管柱層析一般使用煙臺黃海矽膠200~300目矽膠為載體。
本發明實施例中的起始原料是已知的並且可以在市場上買到，或者可以採用或按照本領域已知的方法來合成。
在無特殊說明的情況下，本發明的所有反應均在連續的磁攪拌下，在乾燥氮氣或氬氣氛下進行，溶劑為乾燥溶劑。
氬氣氛或氮氣氛是指反應瓶連接一個約1L容積的氬氣或氮氣氣球。氫氣氛是指反應瓶連接一個約1L容積的氫氣氣球。
在無特殊說明的情況下，實施例中的溶液是指水溶液。反應的溫度為室溫。室溫為最適宜的反應溫度，為20℃~30℃。
實施例中的反應進程的監測採用薄層色譜法(TLC)或液質聯用色譜(LC-MS)反應所使用的展開劑體系有：二氯甲烷和甲醇體系，正己烷和乙酸乙酯體系，石油醚和乙酸乙酯體系，丙酮，溶劑的體積比可根據化合物的極性不同而進行調節。柱層析的洗脫劑的體系包括：A：二氯甲烷和甲醇體系，B：正己烷和乙酸乙酯體系，C：二氯甲烷和乙酸乙酯體系，D：乙酸乙酯和甲醇，溶劑的體積比根據化合物的極性不同而進行調節，也可以加入少量的胺水和醋酸等進行調節。
中間體的合成
步驟一：4-胺基-N'-羥基-1,2,5-噁二唑-3-碳雜氧雜脒1b
將丙二氰(20g,303mmol)溶於350ml水中，45℃下加熱5分鐘，冰浴下加入亞硝酸鈉(23g,333.3mmol)，當溫度升到10℃時加入6N HCl(3.4ml)，溫度升到16℃，保持溫度在16-18℃下攪拌1.5小時，冷卻到13℃，一次性加入50%羥胺水溶液(61.7g,909mmol)，溫度急劇升高到27℃，在此溫度下攪拌一個小時，然後再回流2小時，冷卻至室溫攪拌過夜，在冰浴下滴加6N HCl(49ml)，調節pH至7，繼續冰浴下攪拌，析出固體，過濾，濾餅用水洗，乾燥得到化合物4-胺基-N'-羥基-1,2,5-噁二唑-3-碳雜氧雜脒1b(40g，92%)。
MS m/z(ESI)：143.9.
13C NMR(400MHz,CD3OD,ppm)：δ 154.5,144.4, 139.7.
步驟二：4-胺基-N-羥基-1,2,5-噁二唑-3-碳雜亞胺醯基氯1c
將化合物4-胺基-N'-羥基-1,2,5-噁二唑-3-碳雜氧雜脒(8.4g,59mmol)溶於100ml水和冰醋酸(60ml)中，加入6N HCl(29ml)，加熱至完全溶解，然後加入NaCl(10.36g,59.5mmol)，再在冰浴下加入亞硝酸鈉(3.99g,5.78mmol)的水溶液(14ml)，保持溫度在0℃攪拌1.5小時，然後攪拌至室溫，析出固體，過濾，濾餅用水洗，乾燥得到化合物4-胺基-N-羥基-1,2,5-噁二唑-3-碳雜亞胺醯基氯1c(4g,42%).
MS m/z(ESI)：162.9.
13CNMR(400MHz,CD3OD,ppm)：δ 154.3,141.9,127.0.
步驟三：4-胺基-N'-羥基-N-(2-甲氧基乙基)-1,2,5-噁二唑-3-碳雜氧雜脒1d
將化合物4-胺基-N-羥基-1,2,5-噁二唑-3-碳雜亞胺醯基氯(4.0g,24.7mmol)溶於乙酸乙酯(40ml)中，冰浴下加入2-甲氧基乙烷-1-胺(2.29ml,25.9mmol)攪拌5分鐘，再加入三乙胺(5.16ml,37.05mmol)攪拌二小時至反應完全，水洗，飽和食鹽水洗，無水硫酸鈉乾燥有機相，減壓真空濃縮得到化合物4-胺基-N'-羥基-N-(2-甲氧基乙基)-1,2,5-噁二唑-3-碳雜氧雜脒1d(4.5g,92%)。
MS m/z(ESI)：202.1.
1H NMR(400MHz,DMSO,ppm)：δ 10.67(s,1H),6.28(s,2H),6.14(s,1H),3.56(m,2H),3.44(m,2H),3.28(s,3H).
步驟四：N'-羥基-4-((2-甲氧基乙基)胺基)-1,2,5-噁二唑-3-碳雜氧雜脒1e
將化合物4-胺基-N'-羥基-N-(2-甲氧基乙基)-1,2,5-噁二唑-3-碳雜氧雜脒(4.5g,22.3mmol)溶於水(40ml)中，加入氫氧化鉀(4.15g,74.1mmol)回流48小時至反應完全，用乙酸乙酯萃取，水洗有機相，飽和食鹽水洗，無水硫酸鈉乾燥有機相，減壓真空濃縮得到化合物N'-羥基-4-((2-甲氧基乙基)胺基)-1,2,5-噁二唑-3-碳雜氧雜脒1e(2.8g，62%).
MS m/z(ESI)：202.1.
1H NMR(400MHz,DMSO-d6,ppm)：δ 10.53(s,1H),6.22(s,2H),6.15(s,1H),3.56(m,2H),3.50(m,2H),3.37(s,3H).
步驟五：N-羥基-4-((2-甲氧基乙基)胺基)-1,2,5-噁二唑-3-碳雜亞胺醯基氯1f
將化合物N'-羥基-4-((2-甲氧基乙基)胺基)-1,2,5-噁二唑-3-碳雜氧雜脒(2.8g,13.93mmol)溶於6N HCl(14ml)待溶液澄清後加入氯化鈉水(2.2g,41.79mmol)，然後再加水(14ml)和乙酸乙酯(14ml)，冰浴下滴加亞硝酸鈉(1.0g,13.3mmol)冰浴下攪拌2小時，然後室溫攪拌過夜至反應完全，用乙酸乙酯萃取，水洗有機相，飽和食鹽水洗，無水硫酸鈉乾燥有機相，減壓真空濃縮得固體用乙酸乙酯：石油醚(3/20)洗得到化合物N-羥基-4-((2-甲氧基乙基)胺基)-1,2,5-噁二唑-3-碳雜亞胺醯基氯1f(2.2g，72%).
MS m/z(ESI)：221.1.
1HNMR(400MHz,DMSO-d6,ppm)：δ 13.47(s,1H),6.22(s,2H),5.99(s,1H),3.43(m,2H),3.53(m,2H),3.28(s,3H).
步驟六：N-(3-溴-4-氟苯基)-N'-羥基-4-((2-甲氧基乙基)胺基)-1,2,5-噁二唑-3-碳雜氧雜脒1g
將化合物N-羥基-4-((2-甲氧基乙基)胺基)-1,2,5-噁二唑-3-碳雜亞胺醯基氯(2.2g,10mmol)加入水(14ml)加熱至60℃，加入3-溴-4-氟苯胺(2.06g,11mmol)，攪拌10分鐘，然後再加碳酸氫鈉(1.26g,15mmol)60℃下攪拌30分鐘，至反應完全，用乙酸乙酯萃取，水洗有機相，飽和食鹽水洗，無水硫酸鈉乾燥有機相，減壓真空濃縮得化合物1g(3.9g,105%).
MS m/z(ESI)：374.0.
1H NMR(400MHz,DMSO-d6,ppm)：δ 11.54(s,1H),8.86(s,2H),7.10(m,1H),6.81(m,1H),6.15(m,1H)3.53(m,2H),3.39(m,2H),3.29(m,3H).
步驟七：4-(3-溴-4-氟苯基)-3-(4-((2-甲氧基乙基)胺基)-1,2,5-噁二唑-3-基)-1,2,4-噁二唑-5(4H)-酮1h
將化合物N-(3-溴-4-氟苯基)-N'-羥基-4-((2-甲氧基乙基)胺基)-1,2,5-噁二唑-3-碳雜氧雜脒(3.9g,10.4mmol)加入乙酸乙酯(50ml)，加熱至60℃，加入1,1'-羰基二咪唑(2.53g,15.6mmol)，攪拌30分鐘，1N HCl洗有機相，飽和食鹽水洗，無水硫酸鈉乾燥有機相，減壓真空濃縮得化 合物1h(4.0g,96%).
步驟八：4-(3-溴-4-氟苯基)-3-(4-((2-羥基乙基)胺基)-1,2,5-噁二唑-3-基)-1,2,4-噁二唑-5(4H)-酮1i
將化合物8(4g,10mmol)加入二氯甲烷(25ml)在-78℃滴加三溴化硼的二氯甲烷溶液(25ml,25mmol)，攪拌至室溫，LC-MS監測原料，原料轉化完全，停止反應，冰浴下用飽和碳酸氫鈉溶液調pH至中性，有機相用水洗，飽和食鹽水洗，無水硫酸鈉乾燥有機相，減壓真空濃縮得化合物1i(2.0g,96%)。
MS m/z(ESI)：385.9.
步驟九：甲磺酸2-((4-(4-(3-溴-4-氟苯基)-5-羰基-4,5-二氫-1,2,4-噁二唑-3-基)-1,2,5-噁二唑-3-基)胺基)乙基酯1j
將化合物4-(3-溴-4-氟苯基)-3-(4-((2-羥基乙基)胺基)-1,2,5-噁二唑-3-基)-1,2,4-噁二唑-5(4H)-酮(2g,5.2mmol)加入乙酸乙酯(15ml)室溫下加入甲磺醯氯(593mg,5.2mmol)，再加三乙胺(526mg,5.2mmol)，LC-MS監測原料，原料轉化完全，停止反應，有機相用水洗，飽和食鹽水洗，無水硫酸鈉乾燥有機相，減壓真空濃縮得化合物1j(2.0g,82%)。
MS m/z(ESI)：463.9.
步驟十：3-(4-((2-疊氮乙基)胺基)-1,2,5-噁二唑-3-基)-4-(3-溴-4-氟苯基)-1,2,4-噁二唑-5(4H)-酮1k
將化合物甲磺酸2-((4-(4-(3-溴-4-氟苯基)-5-羰基-4,5-二氫-1,2,4-噁二唑-3-基)-1,2,5-噁二唑-3-基)胺基)乙基酯 (9.8g,21.1mmol)加入DMF(45ml)室溫下加入疊氮化鈉(1.7g,26.4mmol)，50℃攪拌4小時，LC-MS監測原料，原料轉化完全，停止反應，加入水和乙酸乙酯，有機相用水洗，飽和食鹽水洗，無水硫酸鈉乾燥有機相，減壓真空濃縮得化合物1k(9.0g,100%)。
MS m/z(ESI)：411.0.
步驟十一：3-(4-((2-胺基乙基)胺基)-1,2,5-噁二唑-3-基)-4-(3-溴-4-氟苯基)-1,2,4-噁二唑-5(4H)-酮氫碘化11
將化合物3-(4-((2-疊氮乙基)胺基)-1,2,5-噁二唑-3-基)-4-(3-溴-4-氟苯基)-1,2,4-噁二唑-5(4H)-酮(9.0g,21.9mmol)加入甲醇(160ml)室溫下加入碘化鈉(14.3g,131.74mmol)，攪拌5分鐘，再滴加三甲基氯矽烷(15.6ml,131.7mmol)的甲醇溶液(32ml)，室溫下攪拌4小時，LC-MS監測原料，原料轉化完全，停止反應，冰浴下將反應液傾入硫代硫酸鈉(23g)的水溶液(900ml)，析出固體，過濾，乾燥得化合物11(10.5g,91%)。
MS m/z(ESI)：387.0.
實施例化合物的合成 實施例一 (Z)-N 1 -(2-((4-(N-(3-溴-4-氟苯基)-N'-羥基胺基甲亞胺醯基)-1,2,5-噁二唑-3-基)胺基)乙基)氧醛醯胺(1)
步驟一：N 1 -(2-((4-(4-(3-溴-4-氟苯基)-5-羰基-4,5-二氫-1,2,4-噁二唑-3-基)-1,2,5-噁二唑-3-基)胺基)乙基)氧醛醯胺1m.
在100mL單口瓶中將3-(4-((2-胺基乙基)胺基)-1,2,5-噁二唑-3-基)-4-(3-溴-4-氟苯基)-1,2,4-噁二唑-5(4H)-酮11(300mg，0.78mmol)，草醯胺(138mg，1.56mmol)溶於N，N-二甲基甲醯胺(8mL)，加入O-苯並三氮唑-N,N,N',N'-四甲基脲四氟硼酸(375.6mg,1.17mmol)，隨後加入N，N-二異丙基乙胺(0.5mL,2.34mmol)，室溫反應2小時，加入水(50mL)，固體析出，過濾，固體烘乾，得N1-(2-((4-(4-(3-溴-4-氟苯基)-5-羰基-4,5-二氫-1,2,4-噁二唑-3-基)-1,2,5-噁二唑-3-基)胺基)乙基)氧醛醯胺1m(105mg)，收率32.0%。
MS m/z(ESI)：456.0,458.0(M,M+2).
步驟二：(Z)-N 1 -(2-((4-(N-(3-溴-4-氟苯基)-N'-羥基胺基甲亞胺醯基)-1,2,5-噁二唑-3-基)胺基)乙基)氧醛醯胺1.
在100mL單口瓶中將N1-(2-((4-(4-(3-溴-4-氟苯基)-5-羰基-4,5-二氫-1,2,4-噁二唑-3-基)-1,2,5-噁二唑-3-基)胺基)乙基)氧醛醯胺(105mg,0.23mmol)溶於四氫呋喃/甲醇(5mL/5mL)，將氫氧化鈉(46mg,1.15mmol)溶於水(2mL)加入上述溶液中，室溫下反應2小時。LC-MS監測原料轉化完全，停止反應，加入飽和氯化銨溶液(30mL)，用乙酸乙酯(30mL x 2)萃取，合併有機相用飽和氯化鈉(30mL)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液濃縮，藉由 製備矽膠板分離純化(展開劑：二氯甲烷/甲醇=10/1；洗脫劑：乙酸乙酯/甲醇=10/1)得(Z)-N1-(2-((4-(N-(3-溴-4-氟苯基)-N'-羥基胺基甲亞胺醯基)-1,2,5-噁二唑-3-基)胺基)乙基)氧醛醯胺1(36.6mg)，收率40.0%。
MS m/z(ESI)：430.0,432.0(M,M+2).
1H NMR(400MHz,DMSO-d6,ppm)δ 11.43(s,1 H),8.88(s,1H),8.83(s,1H),8.05(s,1H),7.79(s,1H),7.18(t,J=8.8Hz,1H),7.12(dd,J1=6.0Hz,J2=2.8Hz,1H),6.75(m,1H),6.30(t,J=6.0Hz,1H),3.36(m,4 H).
實施例二 (Z)-N 1 -(2-((4-(N-(3-溴-4-氟苯基)-N'-羥基胺基甲亞胺醯基)-1,2,5-噁二唑-3-基)胺基)乙基)-N 2 -甲基氧醛醯胺(2)
步驟一：2-((2-((4-(4-(3-溴-4-氟苯基)-5-羰基-4,5-二氫-1,2,4-噁二唑-3-基)-1,2,5-噁二唑-3-基)胺基)乙基)胺基)-2-羰基乙酸甲基酯2b.
在100mL單口瓶中將3-(4-((2-胺基乙基)胺基)-1,2,5-噁二唑-3-基)-4-(3-溴-4-氟苯基)-1,2,4-噁二唑-5(4H)-酮11(385mg,1.0mmol)，草酸二甲酯(141.6mg,1.2mmol)溶於甲醇(15mL)，加入甲醇鈉(130mg,2.4mmol)，室溫反應過夜，LC-MS監測原料轉化完全，停止反應。加入飽和 氯化銨溶液(30mL)，用乙酸乙酯(50mL x 2)萃取，合併有機相用飽和氯化鈉(50mL)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液濃縮，得2-((2-((4-(4-(3-溴-4-氟苯基)-5-羰基-4,5-二氫-1,2,4-噁二唑-3-基)-1,2,5-噁二唑-3-基)胺基)乙基)胺基)-2-羰基乙酸甲基酯2b(200mg)，收率50.0%。
MS m/z(ESI)：471.0,473.0(M,M+2).
步驟二：(Z)-N 1 -(2-((4-(N-(3-溴-4-氟苯基)-N'-羥基胺基甲亞胺醯基)-1,2,5-噁二唑-3-基)胺基)乙基)-N 2 -甲基氧醛醯胺2.
在100mL單口瓶中將2-((2-((4-(4-(3-溴-4-氟苯基)-5-羰基-4,5-二氫-1,2,4-噁二唑-3-基)-1,2,5-噁二唑-3-基)胺基)乙基)胺基)-2-羰基乙酸甲基酯(200mg，0.42mmol)溶於甲醇(5mL)，將40%甲胺溶液(2mL)加入上述溶液中，室溫下反應3小時，LC-MS監測原料轉化完全，停止反應。加入水(30mL)，用乙酸乙酯(30mL x 2)萃取，合併有機相用飽和氯化鈉(30mL)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液濃縮，藉由製備矽膠板分離純化(展開劑：二氯甲烷/甲醇=10/1；洗脫劑：乙酸乙酯/甲醇=10/1)得(Z)-N1-(2-((4-(N-(3-溴-4-氟苯基)-N'-羥基胺基甲亞胺醯基)-1,2,5-噁二唑-3-基)胺基)乙基)-N2-甲基氧醛醯胺2(57.5mg)，收率29.6%。
MS m/z(ESI)：444.0,446.0(M,M+2).
1H NMR(400MHz,DMSO-d6,ppm)δ 11.42(s,1 H),8.88(s,1H),8.86(m,1H),8.68(m,1H),7.18(t,J=8.8Hz,1H),7.10(dd,J1=6.0Hz,J2=2.8Hz,1H),6.74(m,1H),6.30 (t,J=6.0Hz,1H),3.38(m,4H),2.66(d,J=4.0Hz,3H).
實施例三 (Z)-N 1 -(2-((4-(N-(3-溴-4-氟苯基)-N'-羥基胺基甲亞胺醯基)-1,2,5-噁二唑-3-基)胺基)乙基)-N 2 -乙基氧醛醯胺(3)
步驟一：N 1 -(2-((4-(4-(3-溴-4-氟苯基)-5-羰基-4,5-二氫-1,2,4-噁二唑-3-基)-1,2,5-噁二唑-3-基)胺基)乙基)-N 2 -乙基氧醛醯胺3b.
在100mL單口瓶中將2-((2-((4-(4-(3-溴-4-氟苯基)-5-羰基-4,5-二氫-1,2,4-噁二唑-3-基)-1,2,5-噁二唑-3-基)胺基)乙基)胺基)-2-羰基乙酸甲基酯(240mg，0.51mmol)溶於甲醇(15mL)，將1M的乙胺溶液(2mL)加入上述溶液中，室溫下反應3小時。LC-MS監測原料轉化完全，停止反應，加入水(30mL)，用乙酸乙酯(30mL x 2)萃取，合併有機相用飽和氯化鈉(30mL)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液濃縮，得N1-(2-((4-(4-(3-溴-4-氟苯基)-5-羰基-4,5-二氫-1,2,4-噁二唑-3-基)-1,2,5-噁二唑-3-基)胺基)乙基)-N2-乙基氧醛醯胺3b(190mg)，收率78.5%。
MS m/z(ESI)：471.0,473.0(M,M+2).
步驟二：(Z)-N 1 -(2-((4-(N-(3-溴-4-氟苯基)-N'-羥基胺基甲亞胺醯基)-1,2,5-噁二唑-3-基)胺基)乙基)-N 2 -乙基氧醛醯胺3.
在100mL單口瓶中將N1-(2-((4-(4-(3-溴-4-氟苯基)-5- 羰基-4,5-二氫-1,2,4-噁二唑-3-基)-1,2,5-噁二唑-3-基)胺基)乙基)-N2-乙基氧醛醯胺(190mg,0.39mmol)溶於四氫呋喃/甲醇(8mL/8mL)，將氫氧化鈉(62.7mg,1.57mmol)溶於水(4mL)加入上述溶液中，室溫下反應2小時。LC-MS監測原料轉化完全，停止反應。加入飽和氯化銨溶液(30mL)，用乙酸乙酯(30mL x 2)萃取，合併有機相用飽和氯化鈉(30mL)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液濃縮，藉由製備矽膠板分離純化(展開劑：二氯甲烷/甲醇=10/1；洗脫劑：乙酸乙酯/甲醇=10/1)得(Z)-N1-(2-((4-(N-(3-溴-4-氟苯基)-N'-羥基胺基甲亞胺醯基)-1,2,5-噁二唑-3-基)胺基)乙基)-N2-乙基氧醛醯胺3(80.0mg)，收率43.1%。
MS m/z(ESI)：458.0,460.0(M,M+2).
1H NMR(400MHz,DMSO-d6,ppm)δ 11.42(s,1 H),8.88(s,1H),8.86(m,1H),8.75(t,J=6.0Hz,1H),7.18(t,J=8.8Hz,1H),7.10(dd,J1=6.0Hz,J2=2.4Hz,1H),6.74(m,1H),6.31(t,J=6.0Hz,1H),3.38(m,4H),3.15(m,2H),1.04(m,3H).
實施例四 (Z)-N 1 -苯甲基-N 2 -(2-((4-(N-(3-溴-4-氟苯基)-N'-羥基胺基甲亞胺醯基)-1,2,5-噁二唑-3-基)胺基)乙基)氧醛醯胺(4)
步驟一：N 1 -苯甲基-N 2 -(2-((4-(4-(3-溴-4-氟苯基)-5-羰基 -4,5-二氫-1,2,4-噁二唑-3-基)-1,2,5-噁二唑-3-基)胺基)乙基)氧醛醯胺4b.
在100mL單口瓶中將2-((2-((4-(4-(3-溴-4-氟苯基)-5-羰基-4,5-二氫-1,2,4-噁二唑-3-基)-1,2,5-噁二唑-3-基)胺基)乙基)胺基)-2-羰基乙酸甲基酯(200mg，0.42mmol)溶於甲醇(15mL)，將苄胺(1mL)加入上述溶液中，室溫下反應3小時。LC-MS監測原料轉化完全，停止反應，加入乙酸乙酯(50mL)，分別用1N的鹽酸(30mL x 2)飽和氯化鈉(30mL)洗滌，有機相無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液濃縮，得N1-苯甲基-N2-(2-((4-(4-(3-溴-4-氟苯基)-5-羰基-4,5-二氫-1,2,4-噁二唑-3-基)-1,2,5-噁二唑-3-基)胺基)乙基)氧醛醯胺4b(190mg)，收率82.0%。
MS m/z(ESI)：546.0,548.0(M,M+2).
步驟二：((Z)-N 1 -苯甲基-N 2 -(2-((4-(N-(3-溴-4-氟苯基)-N'-羥基胺基甲亞胺醯基)-1,2,5-噁二唑-3-基)胺基)乙基)氧醛醯胺4
在100mL單口瓶中將N1-苯甲基-N2-(2-((4-(4-(3-溴-4-氟苯基)-5-羰基-4,5-二氫-1,2,4-噁二唑-3-基)-1,2,5-噁二唑-3-基)胺基)乙基)氧醛醯胺(190mg，0.35mmol)溶於四氫呋喃/甲醇(8mL/8mL)，將氫氧化鈉(100mg,2.5mmol)溶於水(4mL)加入上述溶液中，室溫下反應2小時。LC-MS監測原料轉化完全，停止反應。加入飽和氯化銨溶液(30mL)，用乙酸乙酯(30mL x 2)萃取，合併有機相用飽和氯化鈉(30mL)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾 液濃縮，藉由製備矽膠板分離純化(展開劑：二氯甲烷/甲醇=10/1；洗脫劑：乙酸乙酯/甲醇=10/1)得(Z)-N1-苯甲基-N2-(2-((4-(N-(3-溴-4-氟苯基)-N'-羥基胺基甲亞胺醯基)-1,2,5-噁二唑-3-基)胺基)乙基)氧醛醯胺4(60.9mg)，收率39.0%。
MS m/z(ESI)：520.0,522.0(M,M+2).
1H NMR(400MHz,DMSO-d6,ppm)δ 11.42(s,1 H),9.35(t,J=6.0Hz,1H),,8.87(m,2H),7.30(m,2H),7.24(m,2H),6.74(m,1H),6.33(t,J=6.0Hz,1H),4.33(d,J=6.4Hz,2H),3.38(m,4H).
實施例五 (Z)-N-(2-((4-(N-(3-溴-4-氟苯基)-N'-羥基胺基甲亞胺醯基)-1,2,5-噁二唑-3-基)胺基)乙基)-2-N-嗎啉基-2-羰基乙醯胺(5)
步驟一：N-(2-((4-(4-(3-溴-4-氟苯基)-5-羰基-4,5-二氫-1,2,4-噁二唑-3-基)-1,2,5-噁二唑-3-基)胺基)乙基)-2-N-嗎啉基-2-羰基乙醯胺5b.
在100mL單口瓶中將2-((2-((4-(4-(3-溴-4-氟苯基)-5-羰基-4,5-二氫-1,2,4-噁二唑-3-基)-1,2,5-噁二唑-3-基)胺基)乙基)胺基)-2-羰基乙酸甲基酯(170mg，0.36mmol)溶於甲醇(15mL)，將嗎啡啉(1mL)加入上述溶液中，室溫下 反應3小時。LC-MS監測原料轉化完全，停止反應。加入乙酸乙酯(50mL)，分別用1N的鹽酸(30mL x 2)飽和氯化鈉(30mL)洗滌，有機相無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液濃縮，得N-(2-((4-(4-(3-溴-4-氟苯基)-5-羰基-4,5-二氫-1,2,4-噁二唑-3-基)-1,2,5-噁二唑-3-基)胺基)乙基)-2-嗎啉代-2-羰基乙醯胺5b(120mg)，收率63.4%。
MS m/z(ESI)：526.0,528.0(M,M+2).
步驟二：(Z)-N-(2-((4-(N-(3-溴-4-氟苯基)-N'-羥基胺基甲亞胺醯基)-1,2,5-噁二唑-3-基)胺基)乙基)-2-N-嗎啉基-2-羰基乙醯胺5.
在100mL單口瓶中將N-(2-((4-(4-(3-溴-4-氟苯基)-5-羰基-4,5-二氫-1,2,4-噁二唑-3-基)-1,2,5-噁二唑-3-基)胺基)乙基)-2-N-嗎啉基-2-羰基乙醯胺(120mg，0.23mmol)溶於四氫呋喃/甲醇(8mL/8mL)，將氫氧化鈉(50mg,1.25mmol)溶於水(4mL)加入上述溶液中，室溫下反應2小時。LC-MS監測原料轉化完全，停止反應，加入飽和氯化銨溶液(30mL)，用乙酸乙酯(30mL x 2)萃取，合併有機相用飽和氯化鈉(30mL)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液濃縮，藉由製備矽膠板分離純化(展開劑：二氯甲烷/甲醇=10/1；洗脫劑：乙酸乙酯/甲醇=10/1)得(Z)-N-(2-((4-(N-(3-溴-4-氟苯基)-N'-羥基胺基甲亞胺醯基)-1,2,5-噁二唑-3-基)胺基)乙基)-2-N-嗎啉基-2-羰基乙醯胺5(30.7mg)，收率30.1%。
MS m/z(ESI)：500.0,502.0(M,M+2).
1H NMR(400MHz,DMSO-d6,ppm)δ 11.45(s,1 H),8.89(s,1H),8.83(m,1H),7.20(t,J=8.8Hz,1H),7.11(dd,J1=6.0Hz,J2=2.8Hz,1H),6.77(m,1H),6.24(t,J=6.0Hz,1H),3.58(m,4H),3.48(m,4H),3.36(m,4H).
實施例六 (Z)-N 1 -(2-((4-(N-(3-溴-4-氟苯基)-N'-羥基胺基甲亞胺醯基)-1,2,5-噁二唑-3-基)胺基)乙基)-N 2 -甲氧基氧醛醯胺(6)
步驟一：2-((2-((4-(4-(3-溴-4-氟苯基)-5-羰基-4,5-二氫-1,2,4-噁二唑-3-基)-1,2,5-噁二唑-3-基)胺基)乙基)胺基)-2-羰基乙酸乙基酯6b.
在100mL單口瓶中將3-(4-((2-胺基乙基)胺基)-1,2,5-噁二唑-3-基)-4-(3-溴-4-氟苯基)-1,2,4-噁二唑-5(4H)-酮氫碘化11(2.5g,4.88mmol)，溶於四氫呋喃(30mL)，冰浴下加入乙基2-氯-2-羰基乙酸乙基酯(730mg,5.37mmol)，隨後加入三乙胺(1.23g,12.2mmol)，反應2小時，加入水(50mL)，固體析出。乙酸乙酯萃取(50mL x 2)，合併有機相，飽和食鹽水洗，無水硫酸鈉過濾，藉由快速色譜管柱得到乙基2-((2-((4-(4-(3-溴-4-氟苯基)-5-羰基-4,5-二氫-1,2,4- 噁二唑-3-基)-1,2,5-噁二唑-3-基)胺基)乙基)胺基)-2-羰基乙酸乙基酯6b(1.1g)，收率46.5%。
MS m/z(ESI)：484.9(M,M+H)+.
步驟二：(Z)-2-((2-((4-(N-(3-溴-4-氟苯基)-N'-羥基胺基甲亞胺醯基)-1,2,5-噁二唑-3-基)胺基)乙基)胺基)-2-羰基乙酸6c.
在100mL單口瓶中將2-((2-((4-(4-(3-溴-4-氟苯基)-5-羰基-4,5-二氫-1,2,4-噁二唑-3-基)-1,2,5-噁二唑-3-基)胺基)乙基)胺基)-2-羰基乙酸乙基酯(700mg，1.44mmol)溶於乙醇(10mL)加入2N氫氧化鈉(1ml,2.0mmol)，90℃反應3小時。LC-MS監測原料轉化完全，將反應液濃縮。用乙酸乙酯萃取，水洗，飽和食鹽水洗，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液濃縮，得(Z)-2-((2-((4-(N-(3-溴-4-氟苯基)-N'-羥基胺基甲亞胺醯基)-1,2,5-噁二唑-3-基)胺基)乙基)胺基)-2-羰基乙酸6c(600mg)，收率97.0%。
MS m/z(ESI)：429.0(M-H)-.
步驟三：2-((2-((4-(4-(3-溴-4-氟苯基)-5-羰基-4,5-二氫-1,2,4-噁二唑-3-基)-1,2,5-噁二唑-3-基)胺基)乙基)胺基)-2-羰基乙酸6d.
在50mL單口瓶中將(Z)-2-((2-((4-(N-(3-溴-4-氟苯基)-N'-羥基胺基甲亞胺醯基)-1,2,5-噁二唑-3-基)胺基)乙基)胺基)-2-羰基乙酸(600mg,1.39mmol)溶於乙酸乙酯(20mL)加入CDI(271mg,1.67mmol)，60℃反應1小時。LC-MS監測原料轉化完全。用1N鹽酸洗，水洗，飽和食鹽水洗， 無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液濃縮，得2-((2-((4-(4-(3-溴-4-氟苯基)-5-羰基-4,5-二氫-1,2,4-噁二唑-3-基)-1,2,5-噁二唑-3-基)胺基)乙基)胺基)-2-羰基乙酸6d(370mg)，收率58.3%。
MS m/z(ESI)：454.9(M-H)-.
步驟四：N 1 -(2-((4-(4-(3-溴-4-氟苯基)-5-羰基-4,5-二氫-1,2,4-噁二唑-3-基)-1,2,5-噁二唑-3-基)胺基)乙基)-N 2 -甲氧基氧醛醯胺6e.
在50mL單口瓶中將2-((2-((4-(4-(3-溴-4-氟苯基)-5-羰基-4,5-二氫-1,2,4-噁二唑-3-基)-1,2,5-噁二唑-3-基)胺基)乙基)胺基)-2-羰基乙酸(100mg，0.22mmol)溶於DMF(5mL)加入O-甲基羥胺鹽酸(20mg,0.22mmol)，HATU(130mg,0.33mmol),DIPEA(70mg,0.55mmol)室溫下反應過夜。LC-MS監測原料轉化完全。用乙酸乙酯萃取，水洗，飽和食鹽水洗，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液濃縮，經快速色譜管柱得N1-(2-((4-(4-(3-溴-4-氟苯基)-5-羰基-4,5-二氫-1,2,4-噁二唑-3-基)-1,2,5-噁二唑-3-基)胺基)乙基)-N2-甲氧基氧醛醯胺6e(30mg)，收率28.1%。
MS m/z(ESI)：484.0(M-H)-.
步驟五：(Z)-N 1 -(2-((4-(N-(3-溴-4-氟苯基)-N'-羥基胺基甲亞胺醯基)-1,2,5-噁二唑-3-基)胺基)乙基)-N 2 -甲氧基氧醛醯胺6.
在50mL單口瓶中將N1-(2-((4-(4-(3-溴-4-氟苯基)-5-羰基-4,5-二氫-1,2,4-噁二唑-3-基)-1,2,5-噁二唑-3-基)胺基) 乙基)-N2-甲氧基氧醛醯胺(30mg，0.06mmol)溶於乙醇(5mL)加入2N氫氧化鈉(0.3ml,0.6mmol)，室溫下反應過夜。LC-MS監測原料轉化完全。用乙酸乙酯萃取，水洗，飽和食鹽水洗，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液濃縮，經快速薄層色譜得(Z)-N1-(2-((4-(N-(3-溴-4-氟苯基)-N'-羥基胺基甲亞胺醯基)-1,2,5-噁二唑-3-基)胺基)乙基)-N2-甲氧基氧醛醯胺6(6.0mg)，收率21.7%。
MS m/z(ESI)：457.9.0(M-H)-.
1H NMR(400MHz,CD3OD,ppm)δ 7.0(m,1 H),6.94(m,1H),6.74(m,1H),3.63(s,3H),3.42(4,2H),3.33(m,2H).
實施例七 (Z)-N 1 -(2-((4-(N-(3-溴-4-氟苯基)-N'-羥基胺基甲亞胺醯基)-1,2,5-噁二唑-3-基)胺基)乙基)-N 2 -環丙基氧醛醯胺(7)
步驟一：2-((2-((4-(4-(3-溴-4-氟苯基)-5-羰基-4,5-二氫-1,2,4-噁二唑-3-基)-1,2,5-噁二唑-3-基)胺基)乙基)胺基)-2-羰基乙酸甲基酯7b.
在100mL單口瓶中將3-(4-((2-胺基乙基)胺基)-1,2,5-噁二唑-3-基)-4-(3-溴-4-氟苯基)-1,2,4-噁二唑-5(4H)-酮11(385mg,1.0mmol)，草酸二甲酯(141.6mg，1.2mmol)溶於甲醇(15mL)，加入甲醇鈉(130mg,2.4mmol)，室溫反 應過夜。LC-MS監測原料轉化完全，停止反應。加入飽和氯化銨溶液(30mL)，用乙酸乙酯(50mL x 2)萃取，合併有機相用飽和氯化鈉(50mL)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液濃縮，得2-((2-((4-(4-(3-溴-4-氟苯基)-5-羰基-4,5-二氫-1,2,4-噁二唑-3-基)-1,2,5-噁二唑-3-基)胺基)乙基)胺基)-2-羰基乙酸甲基酯7b(200mg)，收率50.0%。
MS m/z(ESI)：471.0,473.0(M,M+2).
步驟二：(Z)-N 1 -(2-((4-(N-(3-溴-4-氟苯基)-N'-羥基胺基甲亞胺醯基)-1,2,5-噁二唑-3-基)胺基)乙基)-N 2 -環丙基氧醛醯胺7.
在封口瓶中將2-((2-((4-(4-(3-溴-4-氟苯基)-5-羰基-4,5-二氫-1,2,4-噁二唑-3-基)-1,2,5-噁二唑-3-基)胺基)乙基)胺基)-2-羰基乙酸甲基酯(100mg，0.21mmol)溶於乙醇(5mL)，將環丙胺(0.5mL)加入上述溶液中，90℃下反應過夜。LC-MS監測原料轉化完全，停止反應。加入水(30mL)，用乙酸乙酯(30mL x 2)萃取，合併有機相用飽和氯化鈉(30mL)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液濃縮，藉由製備矽膠板分離純化得(Z)-N1-(2-((4-(N-(3-溴-4-氟苯基)-N'-羥基胺基甲亞胺醯基)-1,2,5-噁二唑-3-基)胺基)乙基)-N2-環丙基氧醛醯胺7(30mg)，收率30.3%。
MS m/z(ESI)：470.0(M+H)+.
1H NMR(400MHz,CD3OD,ppm)δ 8.87(s,1 H),8.77(s,1H),7.18(m,1H),7.15(m,1H),6.72(m,1H),6.34(m,1H),2.75(m,1H),0.62(m,4H).
實施例八 (Z)-N 1 -(2-((4-(N-(3-溴-4-氟苯基)-N'-羥基胺基甲亞胺醯基)-1,2,5-噁二唑-3-基)胺基)乙基)-N 2 -羥基氧醛醯胺(8)
步驟一：2-((2-((4-(4-(3-溴-4-氟苯基)-5-羰基-4,5-二氫-1,2,4-噁二唑-3-基)-1,2,5-噁二唑-3-基)胺基)乙基)胺基)-2-羰基乙酸乙基酯8b.
在100mL單口瓶中將3-(4-((2-胺基乙基)胺基)-1,2,5-噁二唑-3-基)-4-(3-溴-4-氟苯基)-1,2,4-噁二唑-5(4H)-酮氫碘化11(2.5g,4.88mmol)，溶於四氫呋喃(30mL)，冰浴下加入2-氯-2-羰基乙酸乙基酯(730mg,5.37mmol)，隨後加入三乙胺(1.23g,12.2mmol)，反應2小時，加入水(50mL)，固體析出。乙酸乙酯萃取(50mL x 2)合併有機相，飽和食鹽水洗，無水硫酸鈉過濾，快速色譜管柱得到化合物，得2-((2-((4-(4-(3-溴-4-氟苯基)-5-羰基-4,5-二氫-1,2,4-噁二唑-3-基)-1,2,5-噁二唑-3-基)胺基)乙基)胺基)-2-羰基乙酸乙基酯8b(1.1g)，收率46.5%。
MS m/z(ESI)：484.9(M,M+H)+.
步驟二：N 1 -(2-((4-(4-(3-溴-4-氟苯基)-5-羰基-4,5-二氫-1,2,4-噁二唑-3-基)-1,2,5-噁二唑-3-基)胺基)乙基)-N 2 -羥基 氧醛醯胺8c
在單口瓶中將2-((2-((4-(4-(3-溴-4-氟苯基)-5-羰基-4,5-二氫-1,2,4-噁二唑-3-基)-1,2,5-噁二唑-3-基)胺基)乙基)胺基)-2-羰基乙酸乙基酯(70mg，0.14mmol)溶於甲醇(5mL)，冰浴下將50%羥胺的水溶液(0.1mL)加入上述溶液中，滴加飽和的氫氧化鈉的甲醇溶液(0.2ml)，在0℃下反應30分鐘。LC-MS監測原料轉化完全，停止反應，濃縮，用2N鹽酸調PH至中性，加水，用乙酸乙酯(30mL x 2)萃取，合併有機相用飽和氯化鈉(30mL)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液濃縮，得N1-(2-((4-(4-(3-溴-4-氟苯基)-5-羰基-4,5-二氫-1,2,4-噁二唑-3-基)-1,2,5-噁二唑-3-基)胺基)乙基)-N2-羥基氧醛醯胺8c(60mg)。
MS m/z(ESI)：472.0(M+H)+.
步驟三：(Z)-N 1 -(2-((4-(N-(3-溴-4-氟苯基)-N'-羥基胺基甲亞胺醯基)-1,2,5-噁二唑-3-基)胺基)乙基)-N 2 -羥基氧醛醯胺8.
在50mL單口瓶中將N1-(2-((4-(4-(3-溴-4-氟苯基)-5-羰基-4,5-二氫-1,2,4-噁二唑-3-基)-1,2,5-噁二唑-3-基)胺基)乙基)-N2-羥基氧醛醯胺(60mg,0.13mmol)溶於乙醇(5mL)加入2N氫氧化鈉(0.2ml,0.4mmol)，室溫下反應過夜。LC-MS監測原料轉化完全。用乙酸乙酯萃取，水洗，飽和食鹽水洗，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液濃縮，經快薄層色譜得(Z)-N1-(2-((4-(N-(3-溴-4-氟苯基)-N'-羥基胺基甲亞胺醯基)-1,2,5-噁二唑-3-基)胺基)乙基)-N2-羥基氧醛醯胺8(24.0mg)，收率41.5%。
MS m/z(ESI)：444.0(M-H)-.
1H NMR(400MHz,MeCD3OD,ppm)δ 7.04(m,1 H),6.94(m,1H),6.71(m,1H),3.43(m,2H),3.36(m,2H).
實施例九 (Z)-N 1 -(2-((4-(N-(3-溴-4-氟苯基)-N'-羥基胺基甲亞胺醯基)-1,2,5-噁二唑-3-基)胺基)丙基)氧醛醯胺(9)
步驟一：N 1 -(2-((4-(4-(3-溴-4-氟苯基)-5-羰基-4,5-二氫-1,2,4-噁二唑-3-基)-1,2,5-噁二唑-3-基)胺基)丙基)氧醛醯胺9b.
在25mL單口瓶中將3-(4-((1-胺基丙烷-2-基)胺基)-1,2,5-噁二唑-3-基)-4-(3-溴-4-氟苯基)-1,2,4-噁二唑-5(4H)-酮氫碘化11(2.5g,4.88mmol)，溶於DMF(3mL)，加入2-胺基-2-羰基乙酸(18.6mg,0.21mmol)，隨後加入HATU(108mg,0.29mmol)，DIPEA(49mg,0.38mmol)，室溫下反應過夜，加入水(50mL)，固體析出，乙酸乙酯萃取(15mL x 2)合併有機相，飽和食鹽水洗，無水硫酸鈉過濾，濃縮得N1-(2-((4-(4-(3-溴-4-氟苯基)-5-羰基-4,5-二氫-1,2,4-噁二唑-3-基)-1,2,5-噁二唑-3-基)胺基)丙基)氧醛醯胺9b(36mg)，收率40.0%。
MS m/z(ESI)：470.0(M+H)+.
步驟二：(Z)-N 1 -(2-((4-(N-(3-溴-4-氟苯基)-N'-羥基胺基甲亞 胺醯基)-1,2,5-噁二唑-3-基)胺基)丙基)氧醛醯胺9
在50mL單口瓶中將N1-(2-((4-(4-(3-溴-4-氟苯基)-5-羰基-4,5-二氫-1,2,4-噁二唑-3-基)-1,2,5-噁二唑-3-基)胺基)丙基)氧醛醯胺(36mg，0.07mmol)溶於乙醇(5mL)加入2N氫氧化鈉(0.2mL,0.4mmol)，室溫下反應過夜。LC-MS監測原料轉化完全。用乙酸乙酯萃取，水洗，飽和食鹽水洗，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液濃縮，經快薄層色譜得(Z)-N1-(2-((4-(N-(3-溴-4-氟苯基)-N'-羥基胺基甲亞胺醯基)-1,2,5-噁二唑-3-基)胺基)丙基)氧醛醯胺9(13.0mg)，收率41.8%。
MS m/z(ESI)：444.0(M+H)+.
1H NMR(400MHz,CD3OD,ppm)δ 7.02(m,1 H),6.94(m,1H),6.71(m,1H),3.70(m,1H),3.36(m,2H),1.15(m,3H).
實施例十 (Z)-N-(3-溴-4-氟苯基)-N'-羥基-4-((4-(胺磺醯胺基)環己基)胺基)-1,2,5-噁二唑-3-碳雜氧雜脒(10)
步驟一：4-胺基-N'-羥基-N-(4-羥基環己基)-1,2,5-噁二唑-3-碳雜氧雜脒10b
將化合物4-胺基-N-羥基-1,2,5-噁二唑-3-碳雜亞胺醯基氯(9g，55mmol)溶於乙酸乙酯(100ml)，在0℃下，緩慢加入4-胺基環己烷-1-醇(7.0g,61mmol)。反應液在0℃下攪拌30分鐘，緩慢加入三乙胺(11.5ml,82.5mmol)，反應液再在0℃下攪拌30分鐘。反應液加入到水中，有機相分離，飽和食鹽水洗滌，有機相用無水硫酸鈉乾燥後真空濃縮蒸乾，得到粗產品。粗產品用二氯甲烷(30ml)重結晶，得到化合物4-胺基-N'-羥基-N-(4-羥基環己 基)-1,2,5-噁二唑-3-碳雜氧雜脒10b(12g)，收率89%。
1H NMR(400MHz,DMSO-d 6,ppm)：δ 10.7(s,1H),6.25-6.35(br,2H),5.67(d,1H),4.50(d,1H),3.65-3.75(m,1H)3.28-3.38(m,1H),1.69-1.83(m,4H),1.25-1.40(m,2H),1.05-1.20(m,2H).
步驟二：N'-羥基-4-((4-羥基環己基)胺基)-1,2,5-噁二唑-3-碳雜氧雜脒10c
將化合物4-胺基-N'-羥基-N-(4-羥基環己基)-1,2,5-噁二唑-3-碳雜氧雜脒10b(12g,49.8mmol)懸浮於水(60ml)中，緩慢加入KOH(8.3g,0.15mol)。反應液加熱回流48小時，然後冷卻到室溫。乙酸乙酯(50ml x 3)萃取，飽和食鹽水洗滌，有機相用無水硫酸鈉乾燥後真空濃縮蒸乾，得到N'-羥基-4-((4-羥基環己基)胺基)-1,2,5-噁二唑-3-碳雜氧雜脒10c(3.6g)，收率30%。
1H NMR(400MHz,DMSO-d 6,ppm)：δ 10.5(s,1H),6.19-6.25(br,2H),5.96(d,1H),4.58(d,1H),3.40-3.48(m,1H)3.20-3.30(m,1H),1.98-2.08(m,2H),1.78-1.88(m,2H),1.22-1.32(m,4H).
步驟三：N-羥基-4-((4-羥基環己基)胺基)-1,2,5-噁二唑-3-碳雜亞胺醯基氯10d
將化合物N'-羥基-4-((4-羥基環己基)胺基)-1,2,5-噁二唑-3-碳雜氧雜脒10c(3.6g,14.9mmol)懸浮於6NHCl(30ml)中，不斷攪拌得到澄清溶液，在0℃下，加入氯化鈉(2.62g，44.8mmol)。在0℃下，緩慢加入亞硝酸鈉(1.03g, 14.9mmol)水溶液(5ml)到反應液中，反應液在0℃下攪拌2小時。將反應液過濾，收集固體，乾燥後得到N-羥基-4-((4-羥基環己基)胺基)-1,2,5-噁二唑-3-碳雜亞胺醯基氯1d(3.1g)，收率79%。
MS m/z(ESI)：259(M-H).
步驟四：N-(3-溴-4-氟苯基)-N'-羥基-4-((4-羥基環己基)胺基)-1,2,5-噁二唑-3-碳雜氧雜脒10e
將化合物N-羥基-4-((4-羥基環己基)胺基)-1,2,5-噁二唑-3-碳雜亞胺醯基氯10d(2.4g,9.2mmol)和3-溴-4-氟苯胺(1.75g,9.2mmol)懸浮於水(35ml)中，然後加熱到60℃，保持5分鐘。在60℃下，一次性加碳酸氫鈉(1.16g,13.8mmol)到反應液中。反應液在60℃攪拌20分鐘，冷卻到室溫。乙酸乙酯(50ml x 3)萃取，飽和食鹽水洗滌，有機相用無水硫酸鈉乾燥後真空濃縮蒸乾，得到N-(3-溴-4-氟苯基)-N'-羥基-4-((4-羥基環己基)胺基)-1,2,5-噁二唑-3-碳雜氧雜脒10e(3.8g)。
MS m/z(ESI)：413(M+H).
步驟五：4-(3-溴-4-氟苯基)-3-(4-((4-羥基環己基)胺基)-1,2,5-噁二唑-3-基)-1,2,4-噁二唑-5(4H)-酮10f
將化合物N-(3-溴-4-氟苯基)-N'-羥基-4-((4-羥基環己基)胺基)-1,2,5-噁二唑-3-碳雜氧雜脒10e(3.8g，粗產品)溶於乙酸乙酯(40ml)中，在0℃下，緩慢加入N,N-羰基二咪唑(1.47g,9.2mmol)，反應液在0℃攪拌2小時，緩慢升至室溫，飽和食鹽水洗滌，有機相用無水硫酸鈉乾燥 後真空濃縮蒸乾，得到粗產品。粗產品用二氯甲烷(30ml)再結晶，得到4-(3-溴-4-氟苯基)-3-(4-((4-羥基環己基)胺基)-1,2,5-噁二唑-3-基)-1,2,4-噁二唑-5(4H)-酮10f(3.76g)，收率92%。
MS m/z(ESI)：438(M-H).
步驟六：4-((4-(4-(3-溴-4-氟苯基)-5-羰基-4,5-二氫-1,2,4-噁二唑-3-基)-1,2,5-噁二唑-3-基)胺基)環己基甲磺酸酯10g
將化合物4-(3-溴-4-氟苯基)-3-(4-((4-羥基環己基)胺基)-1,2,5-噁二唑-3-基)-1,2,4-噁二唑-5(4H)-酮10f(1.36g,3.1mmol)溶於乙酸乙酯(20ml)中，在0℃下，加入甲磺醯氯(0.36ml,4.63mmol)。反應液在0℃下攪拌5分鐘，然後三乙胺(1.3ml,9.3mmol)緩慢加入。反應液在0℃下攪拌60分鐘，飽和食鹽水洗滌，有機相用無水硫酸鈉乾燥後真空濃縮蒸乾，得到粗產品。粗產品管柱分離(石油醚：乙酸乙酯=1：1)得到4-((4-(4-(3-溴-4-氟苯基)-5-羰基-4,5-二氫-1,2,4-噁二唑-3-基)-1,2,5-噁二唑-3-基)胺基)環己基甲磺酸酯10g(1.3g)，收率85%。
1H NMR(400MHz,DMSO-d 6,ppm)：8.01-8.07(m,1H),7.55-7.70(m,2H),6.25(d,1H),4.55-4.65(m,1H),3.33-3.43(m,1H)3.20(s,3H),1.92-2.08(m,4H),1.43-1.68(m,4H).
步驟七：3-(4-((4-疊氮環己基)胺基)-1,2,5-噁二唑-3-基)-4-(3-溴-4-氟苯基)-1,2,4-噁二唑-5(4H)-酮10h
將化合物甲磺酸4-((4-(4-(3-溴-4-氟苯基)-5-羰基-4,5-二氫-1,2,4-噁二唑-3-基)-1,2,5-噁二唑-3-基)胺基)環己基酯 10g(0.9g,1.74mmol)溶於N，N-二甲基甲醯胺(10ml)，然後加入疊氮化鈉(340mg,5.21mmol)。反應液加熱到90℃攪拌60分鐘，TLC顯示反應完全，真空濃縮蒸乾得到粗產品3-(4-((4-疊氮環己基)胺基)-1,2,5-噁二唑-3-基)-4-(3-溴-4-氟苯基)-1,2,4-噁二唑-5(4H)-酮10h(800mg)。
步驟八：3-(4-((4-胺基環己基)胺基)-1,2,5-噁二唑-3-基)-4-(3-溴-4-氟苯基)-1,2,4-噁二唑-5(4H)-酮10i
將化合物3-(4-((4-疊氮環己基)胺基)-1,2,5-噁二唑-3-基)-4-(3-溴-4-氟苯基)-1,2,4-噁二唑-5(4H)-酮10h(350mg)溶於冰乙酸(10ml)中，然後加入鋅粉(490g,7.5mmol)，室溫攪拌2小時。反應液真空濃縮蒸乾，然後加入乙酸乙酯(25ml)，飽和碳酸氫鈉水溶液洗滌，飽和食鹽水洗滌，濾去固體，有機相用無水硫酸鈉乾燥後真空濃縮蒸乾，得到粗產品。粗產品管柱分離(石二氯甲烷：甲醇=30：1)得到3-(4-((4-胺基環己基)胺基)-1,2,5-噁二唑-3-基)-4-(3-溴-4-氟苯基)-1,2,4-噁二唑-5(4H)-酮10i(250mg)，收率76%。
MS m/z(ESI)：439(M+H).
步驟九：(N-(4-((4-(4-(3-溴-4-氟苯基)-5-羰基-4,5-二氫-1,2,4-噁二唑-3-基)-1,2,5-噁二唑-3-基)胺基)環己基)胺磺醯)胺基甲酸第三-丁基酯10j
將化合物氯磺醯異氰酸酯(126mg,0.89mmol)溶於二氯甲烷(5ml)中，在0℃下，加入第三丁醇(65mg,0.89mmol)，攪拌20分鐘得到中間體溶液A。將化合物3-(4-((4- 胺基環己基)胺基)-1,2,5-噁二唑-3-基)-4-(3-溴-4-氟苯基)-1,2,4-噁二唑-5(4H)-酮10i(260mg,0.59mmol)溶於二氯甲烷(10ml)中，在0℃下，加入中間體溶液A，攪拌5分鐘，然後加入三乙胺(0.25ml,1.78mmol)，0℃下攪拌30分鐘。然後加入乙酸乙酯(50ml)，飽和食鹽水洗滌，有機相用無水硫酸鈉乾燥後真空濃縮蒸乾，得到粗產品。粗產品管柱分離(石油醚：乙酸乙酯=1：1)得到化合物(N-(4-((4-(4-(3-溴-4-氟苯基)-5-羰基-4,5-二氫-1,2,4-噁二唑-3-基)-1,2,5-噁二唑-3-基)胺基)環己基)胺磺醯)胺基甲酸第三-丁基酯10j(140mg)，收率38%。
MS m/z(ESI)：616(M-H).
步驟十：3-(4-((4-(胺磺醯胺基)環己基)胺基)-1,2,5-噁二唑-3-基)-4-(3-溴-4-氟苯基)-1,2,4-噁二唑-5(4H)-酮10k
將化合物(N-(4-((4-(4-(3-溴-4-氟苯基)-5-羰基-4,5-二氫-1,2,4-噁二唑-3-基)-1,2,5-噁二唑-3-基)胺基)環己基)胺磺醯)胺基甲酸第三-丁基酯10j(120mg)溶於二氯甲烷(3ml)，在0℃下，緩慢加入三氟乙酸(3ml)。反應液在0℃下攪拌30分鐘，然後真空濃縮蒸乾，得到粗產品3-(4-((4-(胺磺醯胺基)環己基)胺基)-1,2,5-噁二唑-3-基)-4-(3-溴-4-氟苯基)-1,2,4-噁二唑-5(4H)-酮10k(120mg，棕色粘稠物)。
步驟十一：(Z)-N-(3-溴-4-氟苯基)-N'-羥基-4-((4-(胺磺醯胺基)環己基)胺基)-1,2,5-噁二唑-3-碳雜氧雜脒10
將化合物3-(4-((4-(胺磺醯胺基)環己基)胺基)-1,2,5-噁 二唑-3-基)-4-(3-溴-4-氟苯基)-1,2,4-噁二唑-5(4H)-酮10k(100mg，粗產品)溶於甲醇(2ml)，氫氧化鈉(15mg，0.375mmol，2M水溶液)加入到反應液中，然後室溫攪拌30分鐘。反應液用1N鹽酸調節PH至7。反應液用乙酸乙酯萃取，飽和食鹽水洗滌。有機相用無水硫酸鈉乾燥，真空濃縮得到粗產品。粗產品用二氯甲烷再結晶，得到化合物(Z)-N-(3-溴-4-氟苯基)-N'-羥基-4-((4-(胺磺醯胺基)環己基)胺基)-1,2,5-噁二唑-3-碳雜氧雜脒10(50mg，白色固體)，收率53%。
MS m/z(ESI)：490(M-H).
1H NMR(400MHz,DMSO-d 6,ppm)：11.6(s,1H),8.91(s,1H),7.18-7.22(m,1H),7.10-7.15(m,1H),6.79-6.85(m,1H)，6.51(s,2H),6.43(d,1H),6.06(d,1H),3.43-3.50(m,1H),3.23-3.33(m,1H),1.62-1.85(m,8H).
實施例十一 (Z)-N-(3-溴-4-氟苯基)-N'-羥基-4-((3-(胺磺醯胺基)環丁基)胺基)-1,2,5-噁二唑-3-碳雜氧雜脒(11)
步驟一：3-胺基環丁烷-1-醇三氟乙酸鹽11b
將(3-羥基環丁基)胺基甲酸第三-丁基酯11a(9g,48mmol)溶於二氯甲烷(20ml)，在0℃下，緩慢加入三氟乙酸(20ml)。反應液在室溫下攪拌3小時，真空濃縮蒸乾，得到3-胺基環丁烷-1-醇三氟乙酸鹽11b(9g)，收率100%。
1H NMR(400MHz,MeOD,ppm)：5.43-5.49(m,1H),4.43-4.49(m,0.7H),3.99-4.06(m,1H),3.84-3.91(m,0.7H),2.67-2.78(m,4.3H),2.33-2.47(m,3.4H).
步驟二：4-胺基-N'-羥基-N-(3-羥基環丁基)-1,2,5-噁二唑-3- 碳雜氧雜脒11d
將化合物3-胺基環丁烷-1-醇三氟乙酸鹽11b(9g,48mmol)溶於乙酸乙酯(25ml)，緩慢加入碳酸鉀(13.5g,97mmol)，室溫攪拌10分鐘，除去固體，得到游離1b溶液。將化合物4-胺基-N-羥基-1,2,5-噁二唑-3-碳雜亞胺醯基氯(6.6g,40mmol)溶於乙酸乙酯(25ml)中，在0℃下，緩慢加入游離3-胺基環丁烷-1-醇三氟乙酸鹽1b溶液。反應液在0℃下攪拌30分鐘，緩慢加入三乙胺(16.7ml,120mmol)，在0℃下攪拌30分鐘。反應液加入到水中，有機相分離，飽和食鹽水洗滌，有機相用無水硫酸鈉乾燥後真空濃縮蒸乾，得到粗產品。粗產品經管柱分離純化(石油醚：乙酸乙酯=1：1)得到4-胺基-N'-羥基-N-(3-羥基環丁基)-1,2,5-噁二唑-3-碳雜氧雜脒11d(4.2g)，收率49%。
1H NMR(400MHz,DMSO-d 6,ppm)：δ 10.7(s,1H),6.25-6.30(m,3H),4.92(d,1H),4.43-4.53(m,1H)4.18-4.27(m,1H),2.15-2.24(m,2H),2.03-2.09(m,2H).
步驟三：N'-羥基-4-((3-羥基環丁基)胺基)-1,2,5-噁二唑-3-碳雜氧雜脒11e
將化合物4-胺基-N'-羥基-N-(3-羥基環丁基)-1,2,5-噁二唑-3-碳雜氧雜脒11d(4.2g,19.7mmol)懸浮於水(20ml)中，緩慢加入KOH(3.3g,59.1mmol)。反應液加熱到回流48小時，然後冷卻到室溫。乙酸乙酯(50ml x 3)萃取，飽和食鹽水洗滌，有機相用無水硫酸鈉乾燥後真空濃縮蒸乾，得到N'-羥基-4-((3-羥基環丁基)胺基)-1,2,5-噁二 唑-3-碳雜氧雜脒11e(2.2g)，收率52%。
MS m/z(ESI)：212(M-H).
步驟四：N-羥基-4-((3-羥基環丁基)胺基)-1,2,5-噁二唑-3-碳雜亞胺醯基氯11f
將化合物N'-羥基-4-((3-羥基環丁基)胺基)-1,2,5-噁二唑-3-碳雜氧雜脒11e(1.8g,8.4mmol)懸浮於6N HCl(30ml)中，不斷攪拌得到澄清溶液，在0℃下，加入氯化鈉(1.46g,25.2mmol)。在0℃下，緩慢加入亞硝酸鈉(0.58g,8.4mmol)水溶液(2ml)到反應液中，反應液在0℃下攪拌2小時。乙酸乙酯(50ml x 3)萃取，飽和食鹽水洗滌，有機相用無水硫酸鈉乾燥後真空濃縮蒸乾，得到N-羥基-4-((3-羥基環丁基)胺基)-1,2,5-噁二唑-3-碳雜亞胺醯基氯11f(1.95g)，收率100%。
MS m/z(ESI)：231(M-H).
步驟五：N-(3-溴-4-氟苯基)-N'-羥基-4-((3-羥基環丁基)胺基)-1,2,5-噁二唑-3-碳雜氧雜脒11g
將化合物N-羥基-4-((3-羥基環丁基)胺基)-1,2,5-噁二唑-3-碳雜亞胺醯基氯11f(1.95g,8.4mmol)和3-溴-4-氟苯胺(1.59g,8.4mmol)懸浮於水(25ml)中，然後加熱到60℃後，保持5分鐘。在60℃下，一次性加碳酸氫鈉(1.06g,12.6mmol)到反應液中。反應液在60℃攪拌20分鐘，冷卻到室溫。乙酸乙酯(50ml x 3)萃取，飽和食鹽水洗滌，有機相用無水硫酸鈉乾燥後真空濃縮蒸乾，得到N-(3-溴-4-氟苯基)-N'-羥基-4-((3-羥基環丁基)胺基)-1,2,5- 噁二唑-3-碳雜氧雜脒11g(3.24g，粗產品)。
步驟六：4-(3-溴-4-氟苯基)-3-(4-((3-羥基環丁基)胺基)-1,2,5-噁二唑-3-基)-1,2,4-噁二唑-5(4H)-酮11h
將化合物N-(3-溴-4-氟苯基)-N'-羥基-4-((3-羥基環丁基)胺基)-1,2,5-噁二唑-3-碳雜氧雜脒11g(3.24g，粗產品)溶於乙酸乙酯(20ml)中，在0℃下，緩慢加入N,N-羰基二咪唑(1.36g,8.4mmol)，在0℃攪拌2小時，緩慢升到室溫，飽和食鹽水洗滌，有機相用無水硫酸鈉乾燥後真空濃縮蒸乾，得到粗產品。粗產品經管柱分離純化(石油醚：乙酸乙酯=1：1)得到4-(3-溴-4-氟苯基)-3-(4-((3-羥基環丁基)胺基)-1,2,5-噁二唑-3-基)-1,2,4-噁二唑-5(4H)-酮11h(1.66g)，收率47%。
1H NMR(400MHz,DMSO-d 6,ppm)：δ 8.02-8.05(m,1H),7.65-7.69(m,1H),7.57-7.62(m,1H),6.60(d,1H),5.07(d,1H),4.20-4.28(m,1H)3.96-4.06(m,1H),2.21-2.25(m,2H),2.10-2.16(m,2H).
步驟七：甲磺酸3-((4-(4-(3-溴-4-氟苯基)-5-羰基-4,5-二氫-1,2,4-噁二唑-3-基)-1,2,5-噁二唑-3-基)胺基)環丁基酯11i
將化合物4-(3-溴-4-氟苯基)-3-(4-((3-羥基環丁基)胺基)-1,2,5-噁二唑-3-基)-1,2,4-噁二唑-5(4H)-酮1h(0.5g,1.2mmol)溶於乙酸乙酯(10ml)中，在0℃下，加入甲磺醯氯(0.14ml,1.8mmol)。反應液在0℃下攪拌5分鐘，然後三乙胺(0.51ml,3.6mmol)緩慢加入。反應液在0℃下攪拌60分鐘，飽和食鹽水洗滌，有機相用無水硫酸鈉乾燥 後真空濃縮蒸乾，得到粗產品。粗產品管柱分離(石油醚：乙酸乙酯=1：1)得到甲磺酸3-((4-(4-(3-溴-4-氟苯基)-5-羰基-4,5-二氫-1,2,4-噁二唑-3-基)-1,2,5-噁二唑-3-基)胺基)環丁基酯11i(0.56g)，收率94%。
1H NMR(400MHz,DMSO-d 6,ppm)：δ 8.07-8.09(m,1H),7.69-7.73(m,1H),7.57-7.62(m,1H),6.86(d,1H),5.14-5.19(m,1H)4.14-4.19(m,1H),3.18(s,3H),2.57-2.61(m,4H).
步驟八：3-(4-((3-疊氮環丁基)胺基)-1,2,5-噁二唑-3-基)-4-(3-溴-4-氟苯基)-1,2,4-噁二唑-5(4H)-酮11j
將化合物甲磺酸3-((4-(4-(3-溴-4-氟苯基)-5-羰基-4,5-二氫-1,2,4-噁二唑-3-基)-1,2,5-噁二唑-3-基)胺基)環丁基酯11i(504mg,1.03mmol)溶於N，N-二甲基甲醯胺(5ml)，然後加入疊氮化鈉(198mg,3.09mmol)。反應液加熱到在90℃下攪拌60分鐘，TLC顯示反應完全，然後真空濃縮蒸乾得到粗產品3-(4-((3-疊氮環丁基)胺基)-1,2,5-噁二唑-3-基)-4-(3-溴-4-氟苯基)-1,2,4-噁二唑-5(4H)-酮11j(450mg)。
MS m/z(ESI)：435(M-H).
步驟九：3-(4-((3-胺基環丁基)胺基)-1,2,5-噁二唑-3-基)-4-(3-溴-4-氟苯基)-1,2,4-噁二唑-5(4H)-酮11k
將化合物3-(4-((3-疊氮環丁基)胺基)-1,2,5-噁二唑-3-基)-4-(3-溴-4-氟苯基)-1,2,4-噁二唑-5(4H)-酮11j(450mg)溶於冰乙酸(10ml)中，然後加入鋅粉(670g,10.3mmol)，室溫攪拌2小時。反應液真空濃縮蒸乾，然後加入 乙酸乙酯(25ml)，飽和碳酸氫鈉水溶液洗滌，飽和食鹽水洗滌，濾去固體，有機相用無水硫酸鈉乾燥後真空濃縮蒸乾，得到粗產品。粗產品管柱分離(二氯甲烷：甲醇=30：1)得到3-(4-((3-胺基環丁基)胺基)-1,2,5-噁二唑-3-基)-4-(3-溴-4-氟苯基)-1,2,4-噁二唑-5(4H)-酮11k(350mg)，收率82%。
MS m/z(ESI)：409(M-H).
步驟十：(N-(3-((4-(4-(3-溴-4-氟苯基)-5-羰基-4,5-二氫-1,2,4-噁二唑-3-基)-1,2,5-噁二唑-3-基)胺基)環丁基)胺磺醯)胺基甲酸第三-丁基酯11l
將化合物氯磺醯異氰酸酯(102mg,0.72mmol)溶於二氯甲烷(5ml)中，在0℃下，加入第三丁醇(54mg,0.72mmol)，攪拌20分鐘得到中間體溶液A。將化合物3-(4-((3-胺基環丁基)胺基)-1,2,5-噁二唑-3-基)-4-(3-溴-4-氟苯基)-1,2,4-噁二唑-5(4H)-酮11k(200mg,0.48mmol)溶於二氯甲烷(10ml)中，在0℃下，加入中間體溶液A，攪拌5分鐘，然後加入三乙胺(0.20ml,1.44mmol)，0℃下攪拌30分鐘。然後加入乙酸乙酯(50ml)，飽和食鹽水洗滌，有機相用無水硫酸鈉乾燥後真空濃縮蒸乾，得到粗產品。粗產品管柱分離(石油醚：乙酸乙酯=1：1)得到化合物(N-(3-((4-(4-(3-溴-4-氟苯基)-5-羰基-4,5-二氫-1,2,4-噁二唑-3-基)-1,2,5-噁二唑-3-基)胺基)環丁基)胺磺醯)胺基甲酸第三-丁基酯11l(110mg)，收率26%。
MS m/z(ESI)：588(M-H).
步驟十一：3-(4-((3-(胺磺醯胺基)環丁基)胺基)-1,2,5-噁二唑-3-基)-4-(3-溴-4-氟苯基)-1,2,4-噁二唑-5(4H)-酮11m
將化合物(N-(3-((4-(4-(3-溴-4-氟苯基)-5-羰基-4,5-二氫-1,2,4-噁二唑-3-基)-1,2,5-噁二唑-3-基)胺基)環丁基)胺磺醯)胺基甲酸第三-丁基酯11l(110mg)溶於二氯甲烷(3ml)，在0℃下，緩慢加入三氟乙酸(3ml)。反應液在0℃下攪拌30分鐘，然後真空濃縮蒸乾，得到粗產品3-(4-((3-(胺磺醯胺基)環丁基)胺基)-1,2,5-噁二唑-3-基)-4-(3-溴-4-氟苯基)-1,2,4-噁二唑-5(4H)-酮11m(90mg)。
MS m/z(ESI)：488(M-H).
步驟十二：(Z)-N-(3-溴-4-氟苯基)-N'-羥基-4-((3-(胺磺醯胺基)環丁基)胺基)-1,2,5-噁二唑-3-碳雜氧雜脒11
將化合物3-(4-((3-(胺磺醯胺基)環丁基)胺基)-1,2,5-噁二唑-3-基)-4-(3-溴-4-氟苯基)-1,2,4-噁二唑-5(4H)-酮11m(90mg，粗產品)溶於甲醇(2ml)，氫氧化鈉(15mg,0.375mmol,2M水溶液)加入到反應液中，然後室溫攪拌30分鐘，用1N HCl調節PH至7。反應液用乙酸乙酯萃取，飽和食鹽水洗滌。有機相用無水硫酸鈉乾燥，真空濃縮得到粗產品。粗產品用二氯甲烷(1ml)再結晶，得到(Z)-N-(3-溴-4-氟苯基)-N'-羥基-4-((3-(胺磺醯胺基)環丁基)胺基)-1,2,5-噁二唑-3-碳雜氧雜脒11(11mg)，收率13%。
MS m/z(ESI)：462(M-H).
1H NMR(400MHz,MeOD,ppm)：δ 7.01-7.03(m,1H),6.93-6.97(m,1H),6.72-6.76(m,1H),3.62-3.70(m,1H) 3.48-3.57(m,1H),2.71-2.79(m,2H),1.83-1.93(m,2H).
實施例十二 (Z)-(N-(4-((4-(N-(3-溴-4-氟苯基)-N'-羥基胺基甲亞胺醯基)-1,2,5-噁二唑-3-基)胺基)環己基)胺磺醯)胺基甲酸第三-丁基酯(12)
將化合物(N-(4-((4-(4-(3-溴-4-氟苯基)-5-羰基-4,5-二氫-1,2,4-噁二唑-3-基)-1,2,5-噁二唑-3-基)胺基)環己基)胺磺醯)胺基甲酸第三-丁基酯12a(17mg,0.027mmol)溶於甲醇(0.3ml)，氫氧化鈉(2.2mg,0.054mmol,2M水溶液)加入到反應液中，然後室溫攪拌30分鐘。真空濃縮得到粗產品。粗產品用水洗滌得到(Z)-(N-(4-((4-(N-(3-溴-4-氟苯基)-N'-羥基胺基甲亞胺醯基)-1,2,5-噁二唑-3-基)胺基)環己基)胺磺醯)胺基甲酸第三-丁基酯12(11mg)，收率69%。
MS m/z(ESI)：590(M-H).
1H NMR(400MHz,DMSO-d 6,ppm)：11.6(s,1H),8.91(s,1H),7.18-7.22(m,1H),7.10-7.15(m,1H),6.79-6.85(m,1H),6.02-6.12(m,1H),3.43-3.50(m,1H),3.23-3.33(m,1H),1.62-1.85(m,8H),1.36(s,9H).
實施例十三 (Z)-N-(3-溴-4-氟苯基)-N'-羥基-4-((2-(S-甲基-N-(4-甲基苯 磺醯)磺亞胺醯胺基)乙基)胺基)-1,2,5-噁二唑-3-碳雜氧雜脒(13)
步驟一：甲亞磺醯氯13b
將化合物1,2-二甲基二硫烷(3.4g,36mmol)溶於乙酸(4.34g,72mmol)中，在-20℃下，緩慢滴加磺醯氯(14.6g,108mmol)。反應液在-20℃下攪拌30分鐘，然後緩慢升到室溫攪拌2小時，在35℃下攪拌1小時。在真空下，濃縮除去揮發組分，得到甲亞磺醯氯13b(6g)，收率48%。
步驟二：N-對甲苯磺醯甲磺亞胺醯基氯13c
將化合物氯胺T(1.5g,6.7mmol)加入到甲苯(50ml)，加熱到回流5小時，同時用分水器除去水，然後冷卻到室溫。甲亞磺醯氯1b(1g,10mmol)加入到反應液中，在80℃下加熱2小時，然後冷卻到室溫，除去固體。將反應液真空濃縮得到N-甲苯磺醯甲磺亞胺醯基氯13c(1.5g)，收率79%。
1H NMR(400MHz,CDCl3,ppm)：δ 7.88(d,2H),7.33(d, 2H),3.78(s,3H),2.45(s,3H).
步驟三：N-(((2-((4-(4-(3-溴-4-氟苯基)-5-羰基-4,5-二氫-1,2,4-噁二唑-3-基)-1,2,5-噁二唑-3-基)胺基)乙基)胺基)(甲基)(羰基)-16-硫烷亞基)-4-甲基苯磺醯胺13e
將化合物N-對甲苯磺醯甲磺亞胺醯基氯(175mg,0.65mmol)溶於四氫呋喃(10ml)中，在0℃下，緩慢加入3-(4-((2-胺基乙基)胺基)-1,2,5-噁二唑-3-基)-4-(3-溴-4-氟苯基)-1,2,4-噁二唑-5(4H)-酮(402mg,1.05mmol)。反應液在0℃下攪拌30分鐘後，加入水中，乙酸乙酯(15ml x 3)萃取分離。有機相用無水硫酸鈉乾燥後真空濃縮蒸乾，得到粗產品。粗產品用製備薄層板分離(二氯甲烷：甲醇=15：1)得到N-(((2-((4-(4-(3-溴-4-氟苯基)-5-羰基-4,5-二氫-1,2,4-噁二唑-3-基)-1,2,5-噁二唑-3-基)胺基)乙基)胺基)(甲基)(羰基)-16-硫烷亞基)-4-甲基苯磺醯胺13e(140mg)，收率37%。
1H NMR(400MHz,DMSO-d 6,ppm)：δ 8.08(m,1H),7.98-8.02(br,1H),7.69(d,2H),7.60(m,1H)7.32(d,2H),7.26(br,1H),6.6(m,1H),3.37-3.44(m,2H),3.22-3.28(m,5H),2.36(s,3H).
步驟四：(Z)-N-(3-溴-4-氟苯基)-N'-羥基-4-((2-(S-甲基-N-(4-甲基苯磺醯)磺亞胺醯胺基)乙基)胺基)-1,2,5-噁二唑-3-碳雜氧雜脒13.
將化合物N-(((2-((4-(4-(3-溴-4-氟苯基)-5-羰基-4,5-二氫-1,2,4-噁二唑-3-基)-1,2,5-噁二唑-3-基)胺基)乙基)胺 基)(甲基)(羰基)-16-硫烷亞基)-4-甲基苯磺醯胺13e(35mg，0.056mmol)溶於甲醇(1ml)，氫氧化鈉(5mg,0.114mmol,2M水溶液)加入到反應液中，然後室溫攪拌1小時。反應液用1N鹽酸調節pH至8。反應液用乙酸乙酯萃取，飽和食鹽水洗滌。有機相用無水硫酸鈉乾燥，真空濃縮得到粗產品。粗產品用二氯甲烷再結晶，得到化合物(Z)-N-(3-溴-4-氟苯基)-N'-羥基-4-((2-(S-甲基-N-(4-甲基苯磺醯)磺亞胺醯胺基)乙基)胺基)-1,2,5-噁二唑-3-碳雜氧雜脒13(28mg)，收率84%。
MS m/z(ESI)：590.0.
1H NMR(400MHz,DMSO-d 6,ppm)：δ 11.5(s,1H),8.92(s,1H),8.02(m,1H),7.69(d,2H),7.32(d,2H),7.14(m,1H),7.09(m 1H),6.74(m,1H),3.37-3.44(m,2H),3.22-3.28(m,5H),2.36(s,3H).
實施例十四 (Z)-N-(3-溴-4-氟苯基)-N'-羥基-4-((2-(S-甲基-N-(甲磺醯)磺亞胺醯基)乙基)胺基)-1,2,5-噁二唑-3-碳雜氧雜脒(14)
步驟一：4-(3-溴-4-氟苯基)-3-(4-((2-(甲硫基)乙基)胺基)-1,2,5-噁二唑-3-基)-1,2,4-噁二唑-5(4H)-酮14b.
在100mL單口瓶中將甲磺酸2-((4-(4-(3-溴-4-氟苯基)-5-羰基-4,5-二氫-1,2,4-噁二唑-3-基)-1,2,5-噁二唑-3-基)胺基)乙基酯11(2.6g,5.60mmol)溶於N，N-二甲基甲醯胺(25mL)，冰浴冷卻至0℃，加入甲硫醇鈉(43.1mg,6.16mmol)，在冰浴下攪拌20分鐘。LC-MS監測原料轉化完全，停止反應，加入水(50mL)淬滅反應，用乙酸乙酯(50mL x 2)萃取，合併有機相，用飽和氯化鈉(50mL)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液加矽膠，直接旋乾管柱層析，石油醚/乙酸乙酯(5/1到3/1)，得4-(3-溴-4-氟苯基)-3-(4-((2-(甲硫基)乙基)胺基)-1,2,5-噁二唑-3-基)-1,2,4-噁二唑-5(4H)-酮14b(1.0g)，收率42.8%.
MS m/z(ESI)：416.0,418.0(M,M+2).
1H NMR(400MHz,CDCl3,ppm)δ 7.62(dd,J1=5.6Hz,J2=2.4Hz,1H),7.33(m,2H),5.68(t,J=5.2Hz,1H),3.60(dd,J1=12.8Hz,J2=6.4Hz,2H),2.80(t,J=6.4Hz,2H),2.15(s,3H).
步驟二：4-(3-溴-4-氟苯基)-3-(4-((2-(甲基亞硫醯基)乙基)胺基)-1,2,5-噁二唑-3-基)-1,2,4-噁二唑-5(4H)-酮14c.
在100mL單口瓶中將4-(3-溴-4-氟苯基)-3-(4-((2-(甲硫基)乙基)胺基)-1,2,5-噁二唑-3-基)-1,2,4-噁二唑-5(4H)-酮(1.0g,2.41mmol)溶於二氯甲烷(30mL)，用乾冰丙酮浴冷卻至-40℃，將間氯過氧化苯甲酸(457mg,2.65mmol)溶 於5mL二氯甲烷滴加入上述溶液中，滴加完後撤去乾冰丙酮浴，大約20分鐘後溫度緩慢升至室溫，室溫下繼續攪拌40分鐘，LC-MS監測原料轉化完全，停止反應，加入水(50mL)，用乙酸乙酯(50mL x 2)萃取，合併有機相用飽和氯化鈉(60mL)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液旋乾得4-(3-溴-4-氟苯基)-3-(4-((2-(甲基亞硫醯基)乙基)胺基)-1,2,5-噁二唑-3-基)-1,2,4-噁二唑-5(4H)-酮14c(0.9g)，收率90%.
MS m/z(ESI)：432.0,434.0(M,M+2).
步驟三：4-(3-溴-4-氟苯基)-3-(4-((2-(S-甲基磺亞胺醯基)乙基)胺基)-1,2,5-噁二唑-3-基)-1,2,4-噁二唑-5(4H)-酮14d.
在100mL單口瓶中將4-(3-溴-4-氟苯基)-3-(4-((2-(甲基亞硫醯基<亞磺醯>)乙基)胺基)-1,2,5-噁二唑-3-基)-1,2,4-噁二唑-5(4H)-酮(0.9g，2.08mmol)溶於氯仿(30mL)，加入疊氮化鈉(275.0mg,4.16mmol)，用冰浴冷卻至0℃，加入濃硫酸(0.5mL)，撤去冰浴，油浴加熱到42℃，攪拌反應過夜。LC-MS監測原料轉化完全，停止反應，加入飽和碳酸氫鈉溶液(50mL)，用乙酸乙酯(50mL x 2)萃取，合併有機相用飽和氯化鈉(50mL)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液旋乾得4-(3-溴-4-氟苯基)-3-(4-((2-(S-甲基磺亞胺醯基)乙基)胺基)-1,2,5-噁二唑-3-基)-1,2,4-噁二唑-5(4H)-酮14d(0.7g)，收率75.3%.
MS m/z(ESI)：447.0,449.0(M,M+2).
步驟四：N-((2-((4-(4-(3-溴-4-氟苯基)-5-羰基-4,5-二氫 -1,2,4-噁二唑-3-基)-1,2,5-噁二唑-3-基)胺基)乙基)(甲基)(羰基)-6-硫烷亞基)甲磺醯胺14e.
在100mL單口瓶中將4-(3-溴-4-氟苯基)-3-(4-((2-(S-甲基磺亞胺醯基)乙基)胺基)-1,2,5-噁二唑-3-基)-1,2,4-噁二唑-5(4H)-酮(1.5g,3.36mmol)溶於二氯甲烷(30mL)，加入甲磺醯氯(1mL,10mmol)，在室溫下攪拌15分鐘，然後加入三乙胺(1.5mL,10mmol)攪拌反應過夜。LC-MS監測原料轉化完全，停止反應，加入飽和碳酸氫鈉溶液(50mL)，用乙酸乙酯(50mL x 2)萃取，合併有機相用飽和氯化鈉(50mL)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液加矽膠，直接旋乾管柱層析，乙酸乙酯/甲醇(30/1到20/1得到N-((2-((4-(4-(3-溴-4-氟苯基)-5-羰基-4,5-二氫-1,2,4-噁二唑-3-基)-1,2,5-噁二唑-3-基)胺基)乙基)(甲基)(羰基)-6-硫烷亞基)甲磺醯胺14e(0.65g)，收率36.8%.
MS m/z(ESI)：525.0,527.0(M,M+2).
步驟五：(Z)-N-(3-溴-4-氟苯基)-N'-羥基-4-((2-(S-甲基-N-(甲磺醯)磺亞胺醯基)乙基)胺基)-1,2,5-噁二唑-3-碳雜氧雜脒14.
在100mL單口瓶中將N-((2-((4-(4-(3-溴-4-氟苯基)-5-羰基-4,5-二氫-1,2,4-噁二唑-3-基)-1,2,5-噁二唑-3-基)胺基)乙基)(甲基)(羰基)-6-硫烷亞基)甲磺醯胺(0.65g,1.24mmol)溶於四氫呋喃/甲醇(8mL/8mL)，將氫氧化鈉(250mg,6.20mmol)溶於水(4mL)加入上述溶液中，室溫下反應2小時。LC-MS監測原料轉化完全，停止反應，加入 飽和氯化銨溶液(30mL)，用乙酸乙酯(30mL x 2)萃取，合併有機相用飽和氯化鈉(50mL)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液加矽膠，直接旋乾管柱層析，乙酸乙酯/甲醇(30/1到10/1)，得(Z)-N-(3-溴-4-氟苯基)-N'-羥基-4-((2-(S-甲基磺亞胺醯基)乙基)胺基)-1,2,5-噁二唑-3-碳雜氧雜脒14(345mg)，收率55.0%.
MS m/z(ESI)：499.0,501.0(M,M+2).
1H NMR(400MHz,DMSO-d6,ppm)δ 11.45(s,1 H),8.92(s,1H),7.18(t,J=8.8Hz,1H),7.12(dd,J1=6.0Hz,J2=2.8Hz,1H),6.77(m,1H),6.57(t,J=6.0Hz,1H),3.92(m,1H),3.80(m,3H),3.48(s,3H),3.01(s,3H).
實施例十五 (Z)-N-(3-溴-4-氟苯基)-4-((2-(N-(環丙基磺醯)-S-甲基磺亞胺醯基)乙基)胺基)-N'-羥基-1,2,5-噁二唑-3-碳雜氧雜脒(15)
步驟一：N-((2-((4-(4-(3-溴-4-氟苯基)-5-羰基-4,5-二氫-1,2,4-噁二唑-3-基)-1,2,5-噁二唑-3-基)胺基)乙基)(甲基)(羰基)-16-硫烷亞基)環丙磺醯胺15b.
在100mL單口瓶中將4-(3-溴-4-氟苯基)-3-(4-((2-(S-甲基磺亞胺醯基)乙基)胺基)-1,2,5-噁二唑-3-基)-1,2,4-噁二 唑-5(4H)-酮(1.5g,3.36mmol)溶於吡啶(30mL)，加入環丙基磺醯氯(1.42g,10mmol),DMAP(41mg,3.36mmol)，在室溫下攪拌反應過夜，停止反應，加入飽和碳酸氫鈉溶液(50mL)，用乙酸乙酯(50mL x 2)萃取，合併有機相用飽和氯化鈉(50mL)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液加矽膠，直接旋乾管柱層析，乙酸乙酯/甲醇(30/1到20/1得到N-((2-((4-(4-(3-溴-4-氟苯基)-5-羰基-4,5-二氫-1,2,4-噁二唑-3-基)-1,2,5-噁二唑-3-基)胺基)乙基)(甲基)(羰基)-16-硫烷亞基)環丙磺醯胺15b(0.65g)，收率32.7%.
MS m/z(ESI)：551.0,553.0(M,M+2).
步驟二：(Z)-N-(3-溴-4-氟苯基)-4-((2-(N-(環丙基磺醯)-S-甲基磺亞胺醯基)乙基)胺基)-N'-羥基-1,2,5-噁二唑-3-碳雜氧雜脒15.
在100mL單口瓶中將N-((2-((4-(4-(3-溴-4-氟苯基)-5-羰基-4,5-二氫-1,2,4-噁二唑-3-基)-1,2,5-噁二唑-3-基)胺基)乙基)(甲基)(羰基)-16-硫烷亞基)環丙磺醯胺(0.65g,1.18mmol)溶於四氫呋喃/甲醇(10mL/10mL)，將氫氧化鈉(236mg,5.95mmol)溶於水(5mL)加入上述溶液中，室溫下反應2小時。LC-MS監測原料轉化完全，停止反應，加入飽和氯化銨溶液(50mL)，用乙酸乙酯(50mL x 2)萃取，合併有機相用飽和氯化鈉(50mL)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液加矽膠，直接旋乾管柱層析，乙酸乙酯/甲醇(30/1到10/1)，得(Z)-N-(3-溴-4-氟苯基)-4-((2-(N-(環丙基磺醯)-S-甲基磺亞胺醯基)乙基)胺基)-N'-羥基-1,2,5-噁二 唑-3-碳雜氧雜脒15(350mg)，收率54.0%.
MS m/z(ESI)：525.0,527.0(M,M+2).
1H NMR(400MHz,DMSO-d6,ppm)δ 11.43(s,1 H),8.90(s,1H),7.18(t,J=8.8Hz,1H),7.12(dd,J1=6.0Hz,J2=2.8Hz,1H),6.77(m,1H),6.55(t,J=6.0Hz,1H),3.93(m,1H),3.80(m,3H),3.47(s,3H),2.64(m,1H),0.95(m,4H).
實施例十六 (Z)-N-(3-溴-4-氟苯基)-4-((2-(N,S-二甲基磺亞胺醯基)乙基)胺基)-N'-羥基-1,2,5-噁二唑-3-碳雜氧雜脒(16)
步驟一：4-(3-溴-4-氟苯基)-3-(4-((2-(N,S-二甲基磺亞胺醯基)乙基)胺基)-1,2,5-噁二唑-3-基)-1,2,4-噁二唑-5(4H)-酮16b
100mL單口瓶中加入4-(3-溴-4-氟苯基)-3-(4-((2-(S-甲基磺亞胺醯基)乙基)胺基)-1,2,5-噁二唑-3-基)-1,2,4-噁二唑-5(4H)-酮(40mg,0.09mmol)，三甲基氧鎓四氟硼酸(20mg,0.13mmol)，二氯甲烷(8mL)，室溫下攪拌15分鐘，加入碳酸鈉(57.3mg,0.54mmol)，室溫反應過夜。停止反應，加入水(20mL)，用乙酸乙酯(20mL x 2)萃取，合併有機相用飽和氯化鈉(30mL)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液濃縮，藉由製備矽膠板分離純化(展開劑：二 氯甲烷/甲醇=10/1；洗脫劑：乙酸乙酯/甲醇=10/1)得4-(3-溴-4-氟苯基)-3-(4-((2-(N,S-二甲基磺亞胺醯基)乙基)胺基)-1,2,5-噁二唑-3-基)-1,2,4-噁二唑-5(4H)-酮16b(20mg，50%)。
MS m/z(ESI)：461.0,463.0(M,M+2).
1H NMR(400MHz,DMSO-d6,ppm)δ 8.11(dd,J1=6.4Hz,J2=2.8Hz,1H),7.74(m,1 H),7.60(t,J=8.8Hz,1H),7.05(t,J=6.0Hz,1H),3.66(dd,J1=12.4Hz,J2=6.4Hz,2H),3.37(t,J2=6.4Hz,2H),2.99(s,3H),2.65(s,3H).
步驟二：(Z)-N-(3-溴-4-氟苯基)-4-((2-(N,S-二甲基磺亞胺醯基)乙基)胺基)-N'-羥基-1,2,5-噁二唑-3-碳雜氧雜脒16
在100mL單口瓶中將4-(3-溴-4-氟苯基)-3-(4-((2-(N,S-二甲基磺亞胺醯基)乙基)胺基)-1,2,5-噁二唑-3-基)-1,2,4-噁二唑-5(4H)-酮(20mg，0.43mmol)溶於四氫呋喃/甲醇(6mL/6mL)，將氫氧化鈉(9mg,0.22mmol)溶於水(2mL)加入上述溶液中，室溫下反應2小時。LC-MS監測原料轉化完全，停止反應，加入飽和氯化銨溶液(10mL)，用乙酸乙酯(15mL x 2)萃取，合併有機相用飽和氯化鈉(20mL)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液濃縮，藉由製備矽膠板分離純化(展開劑：二氯甲烷/甲醇=10/1；洗脫劑：乙酸乙酯/甲醇=10/1)得(Z)-N-(3-溴-4-氟苯基)-4-((2-(N,S-二甲基磺亞胺醯基)乙基)胺基)-N'-羥基-1,2,5-噁二唑-3-碳雜氧雜脒16(13.0mg，68%)。
MS m/z(ESI)：435.0,437.0(M,M+2).
1H NMR(400MHz,CDCl3,ppm)δ 7.18(dd,J1=6.0Hz,J2=3.6Hz,1H),7.18(dd,J1=5.6Hz,J2=2.8Hz,1H),7.02(t,J=8.4Hz,1H),6.90(m,1H),6.76(t,J=6.0Hz,1H),3.90(m,2H),3.58(m,2H),3.09(s,3H),2.83(s,3H).
實施例十七 (Z)-N-(3-溴-4-氟苯基)-N'-羥基-4-((2-(N-甲基乙基磺亞胺醯基)乙基)胺基)-1,2,5-噁二唑-3-碳雜氧雜脒(17)
步驟一：4-(3-溴-4-氟苯基)-3-(4-((2-(N-甲基乙基磺亞胺醯基)乙基)胺基)-1,2,5-噁二唑-3-基)-1,2,4-噁二唑-5(4H)-酮17b
100mL單口瓶中加入4-(3-溴-4-氟苯基)-3-(4-((2-(S-乙基磺亞胺醯基)乙基)胺基)-1,2,5-噁二唑-3-基)-1,2,4-噁二唑-5(4H)-酮(300mg,0.65mmol)，三甲基氧鎓四氟硼酸(115mg,0.78mmol)，二氯甲烷(30mL)，室溫下攪拌15分鐘，加入碳酸鈉(414mg,3.9mmol)，室溫反應過夜。停止反應，加入水(50mL)，用乙酸乙酯(50mL x 2)萃取，合併有機相用飽和氯化鈉(50mL)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液濃縮，藉由製備矽膠板分離純化(展開劑：二氯甲烷/甲醇=15/1；洗脫劑：乙酸乙酯/甲醇=15/1)得4-(3-溴-4-氟苯基)-3-(4-((2-(N-甲基乙基磺亞胺醯基)乙基)胺基)-1,2,5-噁二唑-3-基)-1,2,4-噁二唑-5(4H)-酮17b(130 mg，42.1%)。
MS m/z(ESI)：475.0,477.0(M,M+2).
1H NMR(400MHz,DMSO-d6,ppm)δ 8.12(dd,J1=6.0Hz,J2=2.8Hz,1H),7.74(m,1 H),7.60(t,J=8.8Hz,1H),7.00(t,J=6.0Hz,1H),3.63(dd,J1=12.8Hz,J2=6.4Hz,2H),3.40(m,1 H),3.30(m,1 H),3.16(m,2H),2.64(s,3H),1.22(t,J=7.2Hz,3H).
步驟二：(Z)-N-(3-溴-4-氟苯基)-4-((2-(N,S-二甲基磺亞胺醯基)乙基)胺基)-N'-羥基-1,2,5-噁二唑-3-碳雜氧雜脒17
在100mL單口瓶中將4-(3-溴-4-氟苯基)-3-(4-((2-(N-甲基乙基磺亞胺醯基)乙基)胺基)-1,2,5-噁二唑-3-基)-1,2,4-噁二唑-5(4H)-酮(130mg，0.27mmol)溶於四氫呋喃/甲醇(8mL/8mL)，將氫氧化鈉(55mg,1.36mmol)溶於水(5mL)加入上述溶液中，室溫下反應2小時。LC-MS監測原料轉化完全，停止反應，加入飽和氯化銨溶液(30mL)，用乙酸乙酯(30mL x 2)萃取，合併有機相用飽和氯化鈉(30mL)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液濃縮，藉由製備矽膠板分離純化(展開劑：二氯甲烷/甲醇=10/1；洗脫劑：乙酸乙酯/甲醇=10/1)得(Z)-N-(3-溴-4-氟苯基)-4-((2-(N,S-二甲基磺亞胺醯基)乙基)胺基)-N'-羥基-1,2,5-噁二唑-3-碳雜氧雜脒17(76.6mg，63.2%)。
MS m/z(ESI)：448.0,450.0(M,M+2).
1H NMR(400MHz,DMSO-d6,ppm)δ 11.45(s,1 H),8.89(s,1 H),7.18(t,J=8.8Hz,1H),7.10(dd,J1=6.0Hz,J2 =2.8Hz,1H),6.76(m,1 H),6.56(t,J=6.0Hz,1H),3.58(dd,J1=12.8Hz,J2=6.4Hz,2H),3.31(m,2H),2.63(s,3H),1.22(t,J=7.2Hz,3H).
實施例十八 (R,Z)-N-(3-溴-4-氟苯基)-4-((2-(N-(環丙基磺醯)-S-甲基磺亞胺醯基)乙基)胺基)-N'-羥基-1,2,5-噁二唑-3-碳雜氧雜脒(18-(R,Z))和(S,Z)-N-(3-溴-4-氟苯基)-4-((2-(N-(環丙基磺醯)-S-甲基磺亞胺醯基)乙基)胺基)-N'-羥基-1,2,5-噁二唑-3-碳雜氧雜脒(18-(S,Z))
製備方法如下：
本發明採用製備設備(日本YMC公司K-Prep LAB100S型超臨界流體色譜製備儀)和大賽璐手性管柱(AD-H 4.6*250，填料粒徑5um)對實施例15化合物2.3457g(檢測譜圖見附第1圖)進行手性異構體分離，分別收集8.56min和9.69min的樣品溶液，旋轉蒸發除去溶劑，得到8.56min的光學異構體① 0.9744g(ee%值：99.322%，檢測譜圖見附第2圖)和9.69min的光學異構體②0.9552g(ee%值：98.676%，檢測譜圖見附第3圖)。
製備洗脫劑：(A：乙醇，B：0.1%DEA正己烷，A：B=30：70，體積比)；檢測波長：214nm；管柱溫：20℃。
手性純度檢測分析方法如下：
旋光測定如下：
旋光測試儀：珀金埃爾默(PE)型號Perkin Elmer 341，測定結果如下：空白：
樣品：
生物學評價 一、IDO活性抑制的酶學測試
人的吲哚胺2,3-雙加氧酶(IDO)購自BPS Bioscience Inc。人吲哚胺(idoleamine)2,3-雙加氧酶(IDO)酶學反應在96孔板進行，反應體積為20μL，反應條件為：40nM IDO酶，0.2mM L-色胺酸，50mM KPB(pH6.5)緩衝液，20mM L-抗壞血酸鈉，10μM亞甲藍，0.2mg/mL過氧化氫酶，溶劑為二甲基亞碸的<1%不同濃度的化合物。在30℃反應60分鐘後，每孔加入5μL 30%(W/V)三氯乙酸(50mM KPB緩衝液配製)，50℃孵育30分鐘使N-甲醯基-犬尿胺酸水解為犬尿胺酸。每孔加入25μL 2%(W/V)p-(二甲基胺基)苯甲醛(p-DMBA)/冰醋酸溶液，用BioTek Synergy H1酶標儀(Molecular Devices)讀取490nm吸光值。
待測化合物貯備溶液用二甲基亞碸配製為10mM，實驗時用用二甲基亞碸稀釋至試驗最高濃度，然後進行1：3梯度稀釋，一般稀釋成8到10個濃度點，每個濃度點設複孔，每次實驗均包含1個參照化合物。分析酶標儀讀取490nm吸光值原始資料，計算受試化合物不同濃度點對IDO酶活性的抑制，採用GraphPad Prism軟體對抑制百分比資料進行非線性擬合分析得到化合物的半數抑制濃度IC50值。
二、IDO活性抑制的細胞模型測試
干擾素γ可誘導Hela細胞表達IDO，這一模型被用來測試化合物對吲哚胺2,3-雙加氧酶(IDO)的抑制活性。Hela 細胞(ATCC)的培養液為含100μM L-色胺酸的不含酚紅的RPMI-1640。待測化合物貯備溶液用二甲基亞碸配製為10mM，實驗時用二甲基亞碸稀釋至試驗最高濃度，實驗時用培養基進行3倍系列稀釋，一般稀釋成8到10個濃度點，每個濃度點設複孔。DMSO終濃度為0.5%，每次實驗均包含內參化合物。
試驗的程式為：在96孔培養板上每孔加入20，000個Hela細胞(ATCC)過夜培養，24小時後將干擾素γ(終濃度為50ng/mL)和不同濃度的待測化合物和內參化合物加到培養的細胞。24時後，將140μL上清液/孔轉移至一個新的96孔板中，每孔加入10μL 6.1N的三氯乙酸，50℃孵育30分鐘使N-甲醯基-犬尿胺酸水解為犬尿胺酸。反應混合物離心(轉速為2500轉/分鐘離心10分鐘)去除沉澱物，將上清液100μL轉移至另一個新的96孔板中，每孔加入100μL 2%(W/V)p-(二甲基胺基)苯甲醛(p-DMBA)/冰醋酸溶液，用BioTek Synergy H1酶標儀(Molecular Devices)讀取490nm吸光值。
分析酶標儀讀取490nm吸光值原始資料，計算受試化合物不同濃度點對IDO酶活性的抑制，採用GraphPad Prism軟體對抑制百分比資料進行非線性擬合分析得到化合物的半數抑制濃度IC50值。
本發明實施例化合物藉由以上兩個試驗方法分別進行測定，酶學及細胞學IDO抑制活性IC50值結果見下表：
試驗結果證明：本發明實施例化合物具有良好的酶學及細胞學IDO抑制活性。
三、大鼠血漿PK分析
測試化合物的藥物代謝動力學試驗是用SD大鼠(上海史萊克)進行的。
■給藥方式：單次灌胃給藥。
■給藥劑量：20mg/10mL/kg。
■製劑處方：3%二甲基乙醯胺和20%羥丙基-β-環糊精。
■取樣點：給藥前和給藥後15分鐘、0.5、1、2、4、6、8、24小時。
■血漿採樣與樣品處理：
1)頸靜脈採血0.2ml，置於EDTA-2K試管中，4℃下以轉速6000轉/分鐘離心5分鐘分離血漿，於-80℃保存。
2)將160μL乙腈加入到40μL血漿樣品、標品、和內參，渦旋3分鐘，轉速4000轉/分鐘離心10分鐘，取100μL上清液，然後再加入100μL無離子水混勻，取10μL進行LC/MS/MS分析，血漿LC/MS/MS分析所用儀器為AB Sciex API 4000。
■液相分析：
˙液相條件：Shimadzu LC-20AD泵
˙色譜管柱：phenomenex Gemiu 5um C18 50 X 4.6mm
˙移動相：A液為0.1%甲酸水溶液，B液為乙腈
˙流速：0.8mL/min
˙洗脫時間：0-3.01分鐘，洗脫液如下：
■質譜分析：質譜儀設置條件：陽離子電噴霧電離(ESI)模式。
■試驗結果：藥物代謝動力學的主要參數用WinNonlin 6.1計算得到，實驗結果見下表：
試驗結果證明：本發明實施例化合物明顯優於參照化合物(INCB-24360)，具有更好的藥代動力學，主要藥物代謝動力學參數最大血藥濃度(Cmax)、藥物暴露量(AUC)相對於參照化合物(INCB-24360)均有很大幅度的提高。
四、實施例化合物在PAN02荷瘤小鼠模型的抑瘤作用
本發明採用在PAN02荷瘤小鼠模型來測試實施例化合物抑瘤作用。該PAN02荷瘤小鼠模型為：小鼠胰腺癌細胞系PAN02購自廣州吉妮歐生物科技有限公司，使用的培養液是含有10%胎牛血清的DMEM。用於荷瘤的小鼠品系是C57/BL6，購自上海斯萊克實驗動物有限公司。種植時，將處於對數生長期的PAN02細胞收集，與降低生長因子的BDMatrigel基質膠混勻至5千萬/毫升，每隻小鼠皮下種植100微升5百萬細胞。待腫瘤長到約100立方毫米時將動物隨機分組，每組8隻動物，開始給藥(D0)。
給藥方式：灌胃給藥，每天2次。
給藥劑量：50mg/10mL/kg。
製劑處方：3%二甲基乙醯胺和20%羥丙基-β-環糊精。
■給藥週期與腫瘤測量：給藥週期為13天，每週3次測瘤體積，稱鼠重，記錄資料。腫瘤體積(V)計算公式為：V=1/2axb2其中a、b分別表示長、寬。T/C的計算公式為：T/C(%)=100 x△T/△C。抑瘤率(%)=1-T/C(%)。
■試驗結果：實施例15化合物對PAN02荷瘤小鼠模型的抑瘤效果見下表。
從表中可以看出，在50mg/kg給藥劑量下，實施例15化合物在PAN02荷瘤小鼠中的抑瘤率可達74.8%，顯著高於參照陽性化合物INCB 24360(抑瘤率39.7%)。
五、實施例化合物在Colon26荷瘤小鼠模型的抑瘤作用
本發明進一步採用了在Colon26荷瘤小鼠模型來測試實施例化合物抑瘤作用。該Colon26荷瘤小鼠模型為：小鼠直結腸癌細胞系Colon26購自廣州吉妮歐生物科技有限公司，使用的培養液是含有10%胎牛血清的RPMI1640，用於荷瘤的小鼠品系是Balb/c，購自上海西普爾-必凱實驗動物有限公司。種植時，將處於對數生長期的Colon26細胞收集混勻至1千萬/毫升，每隻小鼠皮下種植100微升一百萬細胞。待腫瘤長到約100立方毫米時將動物隨機分組，每組8隻動物，開始給藥(D0)。
給藥方式：灌胃給藥，每天2次。
給藥劑量：50mg/10mL/kg。
製劑處方：3%二甲基乙醯胺和20%羥丙基-β-環糊精。
■給藥週期與腫瘤測量：給藥週期為13天，每週3次測瘤體積，稱鼠重，記錄資料。腫瘤體積(V)計算公式為：V=1/2axb2其中a、b分別表示長、寬。T/C的計算公式為：T/C(%)=100 x△T/△C。抑瘤率(%)=1-T/C(%)。
■試驗結果：實施例15化合物對Colon26荷瘤小鼠模型的抑瘤效果見下表。
從表中可以看出，在25mg/kg給藥劑量下，實施例15化合物在Colon26荷瘤小鼠中的抑瘤率可達94.6%，顯著高於參照陽性化合物INCB 24360(抑瘤率78.4%)。
在相同實驗條件下，調整給藥劑量，實施例15及其光學異構體18-①和18-②對Colon26荷瘤小鼠模型的抑瘤效果見下表：
從表中結果可以看出，實施例15經拆分得到的光學純化合物18在Colon26荷瘤小鼠中的抑瘤率效果相當，具有良好的抑制效果。

Claims (21)

  1. 一種具有如下式(I)結構的N'-羥基-N-苯基甲脒衍生物、其立體異構體或其藥學上可接受鹽， 其中：為Z型和E型；X選自C1-8烷基或C3-8環烷基，視需要進一步被一個或多個選自氘、鹵素、羥基、巰基、氰基、硝基、疊氮基、C1-8烷基、C2-8鏈烯基、C2-8鏈炔基、鹵取代C1-8烷基、C3-8環烷基、3-8員雜環基、3-8員雜環基氧基、3-8員雜環基硫基、C5-10芳基、C5-10芳基氧基、C5-10芳基硫基、5-10員雜芳基、5-10員雜芳基氧基、5-10員雜芳基硫基、-C0-8-S(O)rR4、-C0-8-O-R5、-C0-8-C(O)OR5、-C0-8-C(O)R6、-C0-8-O-C(O)R6、-C0-8-NR7R8、-C0-8-C(O)NR7R8、-N(R7)-C(O)R6或-N(R7)-C(O)OR5的取代基所取代；R1選自如下結構： Y選自-S(O)2-或-C(O)-C(O)-；Z選自鍵、O、S或-NR7-； R2選自氫、氘、C1-8烷基、C2-8鏈烯基、C2-8鏈炔基、C3-8環烷基、3-8員雜環基、C5-10芳基、5-10員雜芳基或C0-8烷基羰基，視需要進一步被一個或多個選自鹵素、羥基、巰基、氰基、硝基、疊氮基、C1-8烷基、C2-8鏈烯基、C2-8鏈炔基、鹵取代C1-8烷基、C3-8環烷基、3-8員雜環基、3-8員雜環基氧基、3-8員雜環基硫基、C5-10芳基、C5-10芳基氧基、C5-10芳基硫基、5-10員雜芳基、5-10員雜芳基氧基、5-10員雜芳基硫基、-C0-8-S(O)rR4、-C0-8-O-R5、-C0-8-C(O)OR5、-C0-8-C(O)R6、-C0-8-O-C(O)R6、-C0-8-NR7R8、-C0-8-C(O)NR7R8、-N(R7)-C(O)R6或-N(R7)-C(O)OR5的取代基所取代；R3選自氫、氘、羥基、胺基、C1-8烷基、C2-8鏈烯基、C3-8環烷基、3-8員雜環基、C5-10芳基、5-10員雜芳基、C1-8烷氧基、C3-8環烷氧基、3-8員雜環基氧基、C5-10芳基氧基、5-10員雜芳基氧基、-C0-8-S(O)rR4、-C0-8-C(O)OR5、-C0-8-O-C(O)R6、-C0-8-NR7R8、-C0-8-C(O)NR7R8、-N(R7)-C(O)R6或-N(R7)-C(O)OR5，視需要進一步被一個或多個選自鹵素、羥基、巰基、氰基、硝基、疊氮基、C1-8烷基、C2-8鏈烯基、C2-8鏈炔基、鹵取代C1-8烷基、C3-8環烷基、3-8員雜環基、3-8員雜環基氧基、3-8員雜環基硫基、C5-10芳基、C5-10芳基氧基、C5-10芳基硫基、5-10員雜芳基、5-10員雜芳基氧基、5-10員雜芳基硫基、-C0-8-S(O)rR4、-C0-8-O-R5、 -C0-8-C(O)OR5、-C0-8-C(O)R6、-C0-8-O-C(O)R6、-C0-8-NR7R8、-C0-8-C(O)NR7R8、-N(R7)-C(O)R6或-N(R7)-C(O)OR5的取代基所取代；R4選自氫、氘、C1-8烷基、C2-8鏈烯基、C3-8環烷基、鹵取代C1-8烷基、苯基、對甲基苯基、胺基、單C1-8烷基胺基、二C1-8烷基胺基或C1-8烷醯胺基；R5選自氫、氘、C1-8烷基、C3-8環烷基、鹵取代C1-8烷基或羥取代C1-8烷基；R6選自氫、氘、C1-8烷基、C1-8烷氧基、C3-8環烷基、C3-8環烷氧基、鹵取代C1-8烷基、鹵取代C1-8烷氧基、羥取代C1-8烷基或羥取代C1-8烷氧基；R7、R8、R9、R10各自獨立的選自氫、氘、羥基、C1-8烷基、C1-8羥烷基、C1-8烷氧基、C2-8鏈烯基、C2-8鏈炔基、C3-8環烷基、3-8員雜環基、C5-10芳基、5-10員雜芳基或C1-8烷醯基，或者，R7與R8、R9與R10和所連接的氮原子形成3-8員雜環烷基，視需要進一步被一個或多個選自鹵素、羥基、巰基、氰基、硝基、乙醯胺基、疊氮基、磺醯基、甲磺醯基、C1-8烷基、三氟甲基、C2-8鏈烯基、C2-8鏈炔基、C3-8環烷基、3-8員雜環基、C1-8烷氧基、C1-8烷氧羰基、C1-8烷基羰基、C1-8烷基羰基氧基、3-8員雜環基氧基、3-8員雜環基硫基、C5-10芳基、C5-10芳基氧基、C5-10芳基硫基、5-10員雜芳基、5-10員雜芳基氧基、5-10員雜芳基硫基、胺基、單C1-8烷基胺基或二C1-8烷基胺基的取 代基所取代；r為0至2。
  2. 如申請專利範圍第1項所述的式(I)化合物、其立體異構體或其藥學上可接受鹽，其中，為Z型。
  3. 如申請專利範圍第1項所述的式(I)化合物、其立體異構體或其藥學上可接受鹽，其選自式(II)化合物： 其中：X選自C1-6烷基或C3-8環烷基，視需要進一步被一個或多個選自氘、鹵素、羥基、巰基、氰基、硝基、疊氮基、C1-8烷基、鹵取代C1-8烷基或C3-8環烷基的取代基所取代；R7、R9、R10各自獨立的選自氫、氘、羥基、C1-8烷基、C1-8羥烷基、C1-8烷氧基、C2-8鏈烯基、C2-8鏈炔基、C3-8環烷基、3-8員雜環基、C5-10芳基、C1-8烷基取代的C5-10芳基、5-10員雜芳基、C1-8烷醯基或-C0-8-C(O)OR5，或者，R9與R10和所連接的氮原子形成5-6員雜環烷基，視需要進一步被一個或多個選自鹵素、羥基、巰基、氰基、硝基、乙醯胺基、疊氮基、磺醯基、甲磺醯基、C1-8烷基、三氟甲基、C3-8環烷基、3-8員雜環基、C1-8烷氧基、C1-8烷氧羰基、C1-8烷基羰基、C1-8烷基羰基氧基、3-8員雜環基氧基、3-8員雜環基硫基、C5-10 芳基、C5-10芳基氧基、C5-10芳基硫基、5-10員雜芳基、5-10員雜芳基氧基、5-10員雜芳基硫基、胺基、單C1-8烷基胺基或二C1-8烷基胺基的取代基所取代。
  4. 如申請專利範圍第1項所述的式(I)化合物、其立體異構體或其藥學上可接受鹽，其選自式(ⅡA)或(ⅡB)化合物： 其中：X選自乙基、環丁基或環己基，視需要進一步被一個或多個選自氘、鹵素、羥基、巰基、氰基、硝基、三氟甲基、C1-8烷基或C3-8環烷基的取代基所取代；R7、R9、R10各自獨立的選自氫、氘、羥基、C1-8烷基、C1-8羥烷基、C1-8烷氧基、C3-8環烷基、3-8員雜環基、C5-10芳基、C1-8烷基取代的C5-10芳基、5-10員雜芳基、C1-8烷醯基或-C0-8-C(O)OR5，或者，R9與R10和所連接的氮原子形成5-6員雜環烷基。
  5. 如申請專利範圍第1至4項中任一項所述的式(I)化合物、其立體異構體或其藥學上可接受鹽，其選自如下化合物：
  6. 如申請專利範圍第1項所述的式(I)化合物、其立體異構體或其藥學上可接受鹽，其選自式(III)化合物： Z選自鍵或-NR7-；R2選自氫、氘或C1-8烷基；R3選自氘、羥基、胺基、C1-8烷基、C3-8環烷基、3-8員雜環基、C5-10芳基、5-10員雜芳基、C1-8烷氧基、C3-8環烷氧基、3-8員雜環基氧基、C5-10芳基氧基、5-10員雜芳基氧基、-C0-8-S(O)rR4、-C0-8-C(O)OR5或-C0-8-O-C(O)R6；R4選自氫、氘、C1-8烷基、C2-8鏈烯基、C3-8環烷基、 鹵取代C1-8烷基、苯基、對甲基苯基、胺基、單C1-8烷基胺基、二C1-8烷基胺基或C1-8烷醯胺基；R5選自氫、氘、C1-8烷基、C3-8環烷基、鹵取代C1-8烷基或羥取代C1-8烷基；R6選自氫、氘、C1-8烷基、C1-8烷氧基、C3-8環烷基、C3-8環烷氧基、鹵取代C1-8烷基、鹵取代C1-8烷氧基、羥取代C1-8烷基或羥取代C1-8烷氧基；r為0至2。
  7. 如申請專利範圍第6項所述的式(I)化合物、其立體異構體或其藥學上可接受鹽，其選自如下通式化合物： 其中：Z、R2和R3如申請專利範圍第6項所述。
  8. 如申請專利範圍第7項所述的式(I)化合物、其立體異構體或其藥學上可接受鹽，其選自如下化合物：
  9. 一種製備申請專利範圍第6項所述的式(III)化合物、其立體異構體或其藥學上可接受鹽的中間體，其特徵在於，如通式(IV)所示的化合物、其立體異構體或其藥學上可接受鹽： 其中：Z、R2和R3如申請專利範圍第6項所述。
  10. 一種申請專利範圍第1至8項中任一項所述的式(I)化合 物、其立體異構體或其藥學上可接受鹽的製備方法，其包括如下製備步驟： 通式(IV)化合物在鹼性條件下開環得到通式(III)化合物；其中：X、R2和R3如申請專利範圍第6項所述。
  11. 一種醫藥組成物，其包括治療有效劑量的申請專利範圍第1至8項中任一項所述的式(I)化合物、其立體異構體或其藥學上可接受鹽及可藥用的載體。
  12. 一種申請專利範圍第1至8項中任一項所述的式(I)化合物、其立體異構體或其藥學上可接受鹽、或申請專利範圍第11項所述的醫藥組成物在製備藥物中的應用，該藥物用於抑制吲哚胺2,3-雙加氧酶的活性或者用於抑制患者的免疫抑制。
  13. 一種申請專利範圍第1至8項中任一項所述的式(I)化合物、其立體異構體或其藥學上可接受鹽、或申請專利範圍第11項所述的醫藥組成物在製備藥物中的應用，該藥物用於治療或預防患者的癌症或腫瘤、病毒感染、抑鬱症、神經變性病症、創傷、年齡相關的白內障、器官移植排斥或自身免疫疾病。
  14. 如申請專利範圍第13項所述的應用，其中，該癌症或 腫瘤選自肺癌、骨癌、胃癌、胰腺癌、皮膚癌、頭頸癌、子宮癌、卵巢癌、睾丸癌、子宮癌、輸卵管癌、子宮內膜癌、子宮頸癌、陰道癌、外陰癌、直腸癌、結腸癌、肛門區癌、乳腺癌、食管癌、小腸癌、內分泌系統癌、甲狀腺癌、甲狀旁腺癌、腎上腺癌、尿道癌、陰莖癌、前列腺癌、胰腺癌、腦癌、睾丸癌、淋巴癌、移行細胞癌、膀胱癌、腎癌或輸尿管癌、腎細胞癌、腎盂癌、霍奇金病、非霍奇金淋巴瘤、軟組織肉瘤、兒童實體瘤、淋巴細胞性淋巴瘤、中樞神經系統(CNS)腫瘤、原發性中樞神經系統淋巴瘤、腫瘤血管生成、脊柱腫瘤、腦幹神經膠質瘤、垂體腺瘤、黑素瘤、卡波西肉瘤、表皮樣癌、鱗狀細胞癌、T細胞淋巴瘤、慢性或急性白血病和該等癌的組合。
  15. 如申請專利範圍第12至14項中任一項所述的應用，其中，將治療有效劑量-的申請專利範圍第1至8項中任一項所述的式(I)化合物、其立體異構體或其藥學上可接受鹽、或申請專利範圍第11項所述的醫藥組成物與抗CTLA-4抗體、抗PD-1抗體、抗PD-L1抗體、抗病毒劑、化療劑、免疫抑制劑、輻射、抗腫瘤疫苗、抗病毒疫苗、細胞因子療法或酪胺酸激酶抑制劑進行聯合用藥。
  16. 如申請專利範圍第15項所述的應用，其中，該細胞因子為IL-2、IL-3、IL-4或IL-5。
  17. 如申請專利範圍第15項所述的應用，其中，該化療劑 為細胞毒性劑。
  18. 如申請專利範圍第15項所述的應用，其中，該PD-1抗體為Keytruda抗體。
  19. 一種調節吲哚胺2,3-雙加氧酶活性的方法，該方法包括將治療有效劑量的申請專利範圍第1至8項中任一項所述的式(I)化合物、其立體異構體或其藥學上可接受鹽、或申請專利範圍第11項所述的醫藥組成物與吲哚胺2,3-雙加氧酶接觸。
  20. 如申請專利範圍第19項所述的方法，其中，該調節為抑制作用。
  21. 一種抑制患者的免疫抑制的方法，該方法包括將治療有效劑量的申請專利範圍第1至8項中任一項所述的式(I)化合物、其立體異構體或其藥學上可接受鹽，或申請專利範圍第11項所述的醫藥組成物給予患者。
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