TW201545744A - 治療胰臟癌之醫藥配方及其應用 - Google Patents

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Abstract

一種使用一醫藥配方於製備藥劑的用途，其中該藥劑係用於治療胰臟癌，且該醫藥配方係包含(Z)-亞丁基苯酞((Z)-butylidenephthalide)，且實質上不包含(E)-亞丁基苯酞((E)-butylidenephthalide)。

Description

治療胰臟癌之醫藥配方及其應用
本發明係關於一種含有(Z)-亞丁基苯酞((Z)-butylidenephthalide)之醫藥配方的應用，尤其關於該醫藥配方於治療胰臟癌之應用。
胰臟為位於生物體後腹膜腔之一柔軟長形腺體。一般而言，人體的胰臟長度約15公分至20公分，寬度約2.5公分，重量約75公克至100公克。「胰臟癌」是指由胰臟細胞所生成的惡性腫瘤。在所有胰臟癌中，胰臟管腺癌佔約90%，且其中有80%是發生在胰臟的前端。
胰臟癌通常好發於中老年人，且男性罹病率約為女性的二倍。初期的胰臟癌通常是不會表現明顯症狀，但隨著胰臟腫瘤漸漸擴大，病患會陸續發生上腹痛、背痛、黃疸、體重減輕、及下痢等症狀。此外，典型的胰臟癌會出現組織纖維化、以及周圍組織黏連現象，且由於胰臟癌細胞經常發生滲透至週邊神經及/或侵襲血管的現象，因此，幾乎90%以上的胰臟癌，發現時都已無法透過手術治療。胰臟癌病患五年的存活率低於5%，為一預 後極差的疾病。
目前臨床上對於胰臟癌的治療方式主要包括外科手術、化學藥物治療、及放射線照射治療等。一般而言，若胰臟癌病患之病況尚能進行手術時，則會以手術為優先治療方式，以提高病患存活機率；關於化學藥物治療方法，通常係依胰臟癌臨床分期不同，選擇單一或多種藥物組合來進行治療，例如使用5-fluorouracil(5-FU)或吉西他濱(gemcitabine)等抗代謝藥物(anti-metabolites)，但化學藥物治療效果仍偏低，且在胰臟癌復發的情況中，傳統化學治療亦幾乎無效；至於放射線照射治療，由於無法治癒非切除性胰臟腫瘤，故放射線照射治療通常僅作為治療胰臟癌過程中的輔助性治療。鑒於此，目前臨床上仍需要一種可治療胰臟癌的藥物。
本案發明人研究後發現，(Z)-亞丁基苯酞(Z-butylidenephthalide，Z-BP)可抑制胰臟癌細胞生長，而可用於治療胰臟癌。尤其，當以緩釋劑型使用時，可於胰臟癌病患進行手術開刀治療之後，將含有(Z)-亞丁基苯酞之緩釋藥劑植入病患胰臟癌區域，達成局部穩定高劑量，滲透周圍胰臟組織，以殺死“侵潤性殘餘癌細胞”，達到治療效果。
本發明之一目的，在於提供一種使用一醫藥配方於製備藥劑的用途，其中該藥劑係用於治療胰臟癌，且該醫藥配方係包含(Z)-亞丁基苯酞((Z)-butylidenephthalide，Z-BP)，且實質上不包含(E)-亞丁基苯酞((E)-butylidenephthalide，E-BP)。 較佳地，於該醫藥配方中，(Z)-亞丁基苯酞係併於生物可相容聚合物基質中，以緩釋劑型方式提供該藥劑。
本發明之另一目的，在於提供一種於一個體中治療胰臟癌的方法，包含投予該個體有效量的一醫藥配方，其中該醫藥配方包含(Z)-亞丁基苯酞，且實質上不包含(E)-亞丁基苯酞。較佳地，於該醫藥配方中，(Z)-亞丁基苯酞係併於生物可相容聚合物基質中，以緩釋劑型方式使用該醫藥配方。
本發明之詳細技術內容及部分實施態樣，將描述於以下內容中，以供本發明所屬領域具通常知識者據以明瞭本發明之特徵。
第1A圖為顯示(E)-亞丁基苯酞對於胰臟癌細胞株之細胞存活率之影響的長條圖；第1B圖為顯示(Z)-亞丁基苯酞對於胰臟癌細胞株之細胞存活率之影響的長條圖；第2圖為製備p(CPP-SA)共聚物的流程圖；第3圖為p(CPP-SA)-Z-BP圓盤的照片；第4圖為p(CPP-SA)-Z-BP圓盤於第0至25天持續緩慢釋放Z-BP的吸光值曲線圖；第5A圖為顯示p(CPP-SA)-Z-BP降低PACA-2細胞存活率的長條圖；第5B圖為顯示p(CPP-SA)-Z-BP誘發PACA-2細胞凋亡的照片； 第6A圖顯示經Z-BP處理不同時間後，胰臟癌細胞株內細胞凋亡相關之基因表現量增加的電泳圖；第6B圖顯示經不同濃度Z-BP處理後，胰臟癌細胞株內細胞凋亡相關基因表現量增加的電泳圖；第7A圖顯示以Nurr1微小RNA處理PACA-2，而抑制經Z-BP誘導之Nurr1表現量的電泳圖；第7B圖顯示以Nurr1微小RNA處理PACA-2，而回復經Z-BP抑制之細胞存活率的長條圖；第8A圖為顯示Z-BP處理可增加胰臟癌細胞中Nur77基因相關路徑中相關蛋白質之表現量的電泳圖；第8B圖為顯示Z-BP處理可增加胰臟癌細胞中細胞凋亡路徑相關蛋白質之表現量的電泳圖
第9圖為顯示將p(CPP-SA)-Z-BP經由皮下植入小鼠體內後，胰臟腫瘤尺寸的曲線圖；以及第10圖為顯示將p(CPP-SA)-Z-BP經由皮下植入小鼠體內後，小鼠體重的曲線圖。
以下將具體地描述根據本發明之部分具體實施態樣；惟，在不背離本發明精神下，本發明尚可以多種不同形式之態樣來實踐，不應將本發明保護範圍解釋為限於說明書所陳述者。此外，除非文中有另外說明，於本說明書中(尤其是在後述專利申請範圍中)所使用之「一」、「該」及類似用語應理解為包含單數及複數形式；所謂「治療」係指投予一有效量的醫藥配方 給病患，該病患有腫瘤、腫瘤徵兆、由腫瘤衍生的疾病或症狀、或為易患腫瘤的體質，以達到治癒、緩和、減輕、醫治或改善腫瘤、腫瘤徵兆、由腫瘤衍生的疾病或症狀或易患腫瘤的體質的目的；所謂「有效量」，係指投予至個體時，可有效至少部分改善懷疑個體之狀況的化合物數量；所謂「個體」係指哺乳動物，哺乳動物可為人類或非人的動物；所謂「毫克/公斤體重」係指個體每公斤體重所須的劑量(毫克)；所謂「緩釋劑型」(controlled release dosage form)係指於投予至一個體後可緩慢且持續釋放所含活性成分的劑型。
亞丁基苯酞(butylidenephthalide；BP)可由當歸(Angelica sinensis)中萃取而得。本案發明人研究發現，於亞丁基苯酞中，相較於(E)-亞丁基苯酞，(Z)-亞丁基苯酞(即，下式(I)化合物)具有明顯優異的抑制胰臟癌細胞生長的功效，可用於治療胰臟癌：
因此，本發明提供一種醫藥配方，該醫藥配方係包含(Z)-亞丁基苯酞，且實質上不包含(E)-亞丁基苯酞。適用於本發明的(Z)-亞丁基苯酞可由商業上購得(例如可購自景明化工股份有限公司，台灣)或由天然材料中萃取而得，或者由當歸的氯仿萃取物分離出來。此外，於使用萃取分離之(Z)-亞丁基苯酞以前，可進一步採用例如驟沸塔層析法(flash column chromatography)、高效液相層析法、或結晶法之純化方法以處理(Z)-亞丁基苯酞，提高(Z)-亞丁基苯酞的純度。
視需要地，可於本發明之醫藥配方中更包含一生物可相容之聚合物基質，(Z)-亞丁基苯酞併含於該基質中，從而以緩釋劑型使用該醫藥配方，提供持續性治療胰臟癌的效果。合宜的生物可相容之聚合物基質通常為疏水性且具合宜的降解特性。較佳地，該生物可相容之聚合物基質係選自以下群組：聚(乳酸-共聚合-乙醇酸)、聚葡萄胺糖(chitosan)、膠原、水凝膠、聚酸酐、以及前述之組合。透過緩釋劑型之使用方式，可於該醫藥配方投予至生物體內後，在一段長時間內(例如，20、30、35、40、50、60天內)在投藥部位緩慢且持續釋放出(Z)-亞丁基苯酞至鄰近組織，以達到持續性治療胰臟癌的功效。
於本發明一具體實施態樣中，係將(Z)-亞丁基苯酞併含於聚酸酐中，以緩釋劑型方式使用(Z)-亞丁基苯酞。較佳地，該聚酸酐係以下單體(A)與單體(B)之共聚合物： 其中m為1至10之整數，且n為0至20之整數。較佳地，m為2至8之整數，且n為3至10之整數。此外，較佳地，單體(A)之二苯環上的羧基係同時位於鄰位、間位或對位的位置，更佳係 同時位於對位的位置。
舉例言之，但不以此為限，單體(A)可以為雙(對羧基苯氧基)乙烷、雙(鄰羧基苯氧基)乙烷、雙(間羧基苯氧基)乙烷、雙(對羧基苯氧基)丙烷、雙(鄰羧基苯氧基)丙烷、雙(間羧基苯氧基)丙烷、雙(對羧基苯氧基)丁烷、雙(鄰羧基苯氧基)丁烷、雙(間羧基苯氧基)丁烷、雙(對羧基苯氧基)戊烷、雙(鄰羧基苯氧基)戊烷、雙(間羧基苯氧基)戊烷、雙(對羧基苯氧基)己烷、雙(鄰羧基苯氧基)己烷、雙(間羧基苯氧基)己烷、雙(對羧基苯氧基)庚烷、雙(鄰羧基苯氧基)庚烷、雙(間羧基苯氧基)庚烷、雙(對羧基苯氧基)辛烷、雙(鄰羧基苯氧基)辛烷、以及雙(間羧基苯氧基)辛烷之一或多者；較佳為雙(對羧基苯氧基)乙烷、雙(對羧基苯氧基)丙烷、雙(對羧基苯氧基)丁烷、雙(對羧基苯氧基)戊烷、雙(對羧基苯氧基)己烷、雙(對羧基苯氧基)庚烷、以及雙(對羧基苯氧基)辛烷之一或多者。於本發明一具體實施態樣中，係使用雙(對羧基苯氧基)丙烷為單體(A)。
適用於本發明之單體(B)可以為，舉例言之，但不以此為限，以下之一或多者：丙二酸、丁二酸、戊二酸、己二酸、庚二酸、辛二酸、壬二酸、以及癸二酸。於本發明一具體實施態樣中，係使用辛二酸為單體(B)。
較佳地，於作為生物可相容之聚合物基質之聚酸酐中，單體(A)與單體(B)之含量比，以重量計，為約1：2至約1：10，更佳為約1：3至約1：6。此外，較佳地，係以單體(A)與單體(B)之嵌段共聚物為該聚合物基質。於本發明一具體實施態樣 中，所使用之聚合物基質係由雙(對羧基苯氧基)丙烷與癸二酸以1：4用量比為所提供之嵌段共聚物，其為聚酸酐。
適用於本發明醫藥配方之生物可相容聚合物可為商業上購得或經由本發明領域所知之合成方法製備而得。以由雙(對羧基苯氧基)丙烷與癸二酸所提供之聚酸酐為例，係分別將癸二酸以及雙(對羧基苯氧基)丙烷在醋酸酐迴流，而單獨獲得癸二酸預聚物以及雙(對羧基苯氧基)丙烷預聚物，接著，再經由熔融聚縮合法將該二預聚物共聚合而提供一嵌段共聚物(簡稱『p(CPP-SA)共聚物』)，其為聚酸酐。所涉熔融聚縮合法，可參見Domb等人，Journal of Polymer science,1987,25：3373-3386，該文獻全文併於此處以供參考。
於本發明之醫藥配方中，可視實際應用需求，調整配方中之(Z)-亞丁基苯酞的比例。舉例言之，以該醫藥配方之總重為基準，(Z)-亞丁基苯酞的重量百分比可例如為約1%至約40%，較佳為約2%至約30%。
本發明醫藥配方可用以提供呈任何合宜形式之藥劑，從而以任何合宜之方式施用該醫藥配方。舉例言之，但不以此為限，所提供之藥劑可呈圓盤(wafer)、粉末、膜片、薄片、棒狀、微球、奈米球、糊狀、或膠狀的形態。此外，該醫藥配方可經由例如口服、皮下植入、組織間植入、胰臟內植入、鼻腔或靜脈內等投藥方式施用至個體上。
以製備適於口服投藥之劑型為例，本發明醫藥配方中可另含有不會不利影響所含活性成分之活性的醫藥可接受載劑，例如：溶劑、油性溶劑、稀釋劑、安定劑、吸收延遲劑、崩 散劑、乳化劑、抗氧化劑、黏合劑、潤滑劑、吸濕劑等。可利用任何合宜之方法，將該醫藥配方製成適於口服投藥的劑型，例如：錠劑、膠囊劑、顆粒劑、散劑、流浸膏劑、溶液劑、糖漿劑、懸液劑、乳劑、及酊劑等等。
至於製備適於皮下或靜脈注射之劑型，則可於該醫藥配方中另含有一或多種例如等張溶液、鹽類緩衝液(如磷酸鹽緩衝液或檸檬酸鹽緩衝液)、增溶劑、乳化劑、以及其他載劑等成分，以製成如靜脈輸注液、乳劑靜脈輸注液、乾粉注射劑、懸液注射劑、或乾粉懸液注射劑等。
視使用形式及用途而定，本發明醫藥配方可包含一或多種醫藥上可接受之載劑。除了上述載劑以外，本發明醫藥配方可視需要更含有其他調味劑、調色劑、著色劑等添加劑，以提高所得藥劑服用時的口適感及視覺感受；另可添加合宜用量之保存劑、防腐劑、抗菌劑、抗真菌劑等，以改善所得藥劑的儲存性。視需要地，可於該醫藥配方中併含一或多種其他活性成分，例如抗氧化劑(如維他命E)、化學藥劑、免疫調節劑(immune modulators)等，以進一步加強所得藥劑的功效或增加製劑配方的運用靈活性與調配度，只要該其他活性成分對(Z)-亞丁基苯酞之效益沒有不利的影響即可。
在本發明醫藥配方含有所述生物可相容之聚合物的情況中，為使醫藥配方可於投予至生物體內之後，緩慢釋放所含(Z)-亞丁基苯酞至投藥部位周圍的組織，以達到局部穩定高劑量治療功效，本發明醫藥配方較佳係呈供皮下植入、組織間植入、或胰臟內植入之劑型，例如圓盤(wafer)，以使該醫藥配方可供直 接植入至患者體內的腫瘤(例如，胰臟腫瘤)周圍，從而於一段特定時間內(例如，20、30、35、40、50、60天內)，緩慢且持續的釋放出(Z)-亞丁基苯酞，以達到持續治療胰臟癌及/或降低胰臟癌復發率的功效。
以製備適於皮下植入、組織間植入、或胰臟內植入之劑型為例，可於本發明醫藥配方中另含有不會不利影響所含活性成分之活性的醫藥可接受載劑，例如賦形劑、安定劑、緩衝劑等，以製成一可供皮下植入、組織間植入、或胰臟內植入之劑型，例如圓盤、錠劑、丸劑、膠囊等。於根據本發明之一實施態樣中，係將(Z)-亞丁基苯酞與p(CPP-SA)共聚物混合，並將所得混合物溶於二氯甲烷中，再將混合物乾燥形成粉末，接著，將粉末裝填於一模具中，於輕微壓力下壓縮該乾燥粉末，以形成一供皮下植入、組織間植入、或胰臟內植入之圓盤劑型。於胰臟癌之病患完成腫瘤切割之後，將該圓盤劑型之含有(Z)-亞丁基苯酞與p(CPP-SA)共聚物之醫藥配方植入病患之患部，以更徹底治療胰臟癌、降低胰臟癌復發率。有關前述製備圓盤劑型的方法可參見實施例之說明以及Walter等人，Cancer Res.1994,54(8)：2207-12，該文獻全文併於此處以供參考。
可以一日一次、一日多次、或數日一次等不同投藥頻率施用由本發明醫藥配方所製備之藥劑，端視投予個體之需求而異。舉例言之，當使用於人體以治療胰臟癌時，藥劑之用量，以(Z)-亞丁基苯酞計，為每天約10毫克/公斤體重至約1000毫克/公斤體重，較佳為每天約50毫克/公斤體重至約500毫克/公斤體重。惟，對於急性患者而言，其用量可視實際需要而酌增，例 如增加至數倍或數十倍。
本發明另提供一種於一個體中治療胰臟癌的方法，包含投予該個體有效量的一醫藥配方，其中該醫藥配方包含(Z)-亞丁基苯酞((Z)-butylidenephthalide)，且實質上不包含(E)-亞丁基苯酞((E)-butylidenephthalide)。其中，該醫藥配方之組成及特性、以及(Z)-亞丁基苯酞((Z)-butylidenephthalide)之功效及用量，皆如前文所述。
茲以下列實施例進一步例示說明本發明。其中該等實施例僅提供作為說明，而非用以限制本發明之保護範圍。本發明保護範圍係如後附申請專利範圍所示。
[實施例] [實施例1](Z)-亞丁基苯酞對不同胰臟癌細胞株之致死效果
使用MTT(噻唑藍，3-[4,5-dimethylthiahiazo-2-yl]-2,4-dipheny-tetrazolium bromide)細胞存活分析方法來研究(Z)-亞丁基苯酞對不同胰臟癌細胞株之致死效果。於一96孔微量孔盤中，每個孔中分別培養3×103個人類胰臟癌細胞株PANC-1及PACA-2，培養至隔天再將不同濃度之(Z)-亞丁基苯酞(0微克/毫升、10微克/毫升、25微克/毫升、50微克/毫升、75微克/毫升、或100微克/毫升)或(E)-亞丁基苯酞(0微克/毫升、50微克/毫升、100微克/毫升、200微克/毫升、400微克/毫升、或800微克/毫升)、或50微莫耳濃度吉西他濱(傳統用於治療胰臟癌之藥物，作為對照組)沿96孔微量孔盤之內壁滴入孔中。培養24小時後，將培養 液吸出，加入含500微克/毫升MTT的培養液(200微升)繼續培養4小時，將培養液吸出後，加入200微升二甲基亞碸，然後用微量孔盤分光光度計測量其在570奈米波長下的吸光值，據此計算細胞之存活率，以及(Z)-亞丁基苯酞與(E)-亞丁基苯酞對各胰臟癌細胞株達到50%致死率的濃度值(IC50)。試驗結果顯示於第1A圖((E)-亞丁基苯酞)及第1B圖((Z)-亞丁基苯酞)。
由第1A圖及第1B圖所示之數據計算可知，(E)-亞丁基苯酞對於PANC-1胰臟癌細胞株的IC50為約257.1微克/毫升(約1367微莫耳濃度)，對PACA-2胰臟癌細胞株的IC50為約162.5微克/毫升(約864.5微莫耳濃度)；而(Z)-亞丁基苯酞對於PANC-1胰臟癌細胞株的IC50為約45微克/毫升(約234微莫耳濃度)，對PACA-2胰臟癌細胞株的IC50為約25微克/毫升(約133微莫耳濃度)。前述實驗結果顯示，(Z)-亞丁基苯酞對於胰臟癌細胞株的IC50遠低於(E)-亞丁基苯酞。
[實施例2]製備含有(Z)-亞丁基苯酞之緩釋劑型
(1)製備SA預聚物
以乙醇再結晶癸二酸(SA)單體兩次。添加2.7公克SA單體於60毫升醋酸酐中，於135℃至140℃下真空(10-4托耳)下迴流30分鐘，接著，移除未反應的醋酸酐，以獲得SA預聚物。使SA預聚物在真空下於60℃下乾燥，接著溶於乾燥甲苯中，再將此溶液與無水乙醚與石油醚的混合物(1：1體積/體積)以體積比1：10的量混合，靜置過夜，以沈澱SA預聚物(10：1體積 /體積)。接著，移除乙醚及石油醚，在真空下乾燥SA預聚物。
(2)製備CPP預聚物
混合3公克雙(對羧基苯氧基)丙烷(CPP)單體與50毫升醋酸酐，於150℃下在真空(10-4托耳)下迴流30分鐘。冷卻後，過濾該反應混合物。藉由移除未反應的醋酸酐而濃縮濾液，再於0℃使該CPP預聚物結晶。接著，移除未反應的醋酸酐，以獲得CPP預聚物。以醚清洗該CPP預聚物，並在真空下乾燥。接著，將二甲基甲醯胺及無水乙醚(體積比為二甲基甲醯胺：無水乙醚=1：9)依序添加至該CPP預聚物。經過12小時之後，移除二甲基甲醯胺及乙醚，再於真空下乾燥該CPP預聚物晶體。
(3)製備p(CPP-SA)共聚物
將莫耳濃度比例20：80的CPP預聚物及SA預聚物填入一玻璃試管(2×20公分)內，於180℃下在一油浴內加熱1分鐘，再將壓力降至10-4毫米汞柱。在整個聚合過程中，每15分鐘消除真空。以二氯甲烷清洗該試管，再添加石油醚，以使CPP預聚物及SA預聚物的共聚物(簡稱『p(CPP-SA)共聚物』)沈澱出來。接著，以無水乙醚清洗p(CPP-SA)共聚物，並於真空之下乾燥。前述製備流程如第2圖所示。
藉由紅外光譜(IR)及核磁共振光譜(1H NMR)來觀察所製得之p(CPP-SA)共聚物的特徵(數據未顯示)。實驗結果顯示，在p(CPP-SA)共聚物的IR光譜圖中，於1812.76cm-1下可觀察到酸酐鍵的特徵信號。在p(CPP-SA)共聚物的1H NMR光譜 圖中，於6.9至8.2ppm下可觀察到CPP的芳香族部分的特徵信號，且於1.3ppm下可測得SA的亞甲基部分的特徵信號。此外，根據該1H NMR光譜圖中的CPP及SA的特徵峰強度，鑑別出該p(CPP-SA)共聚物中的CPP及SA的比例為約1：4至約1：5。
(4)製備p(CPP-SA)-Z-BP醫藥配方
以(Z)-亞丁基苯酞(購自景明化工股份有限公司，台灣)之重量比例佔總重0重量%、17.5重量%、或25重量%的比例，混合p(CPP-SA)共聚物及(Z)-亞丁基苯酞，以提供含有p(CPP-SA)共聚物與(Z)-亞丁基苯酞的混合物。將該混合物以10%(重量/體積)的濃度溶於二氯甲烷中。在真空下乾燥該溶液72小時，獲得一乾燥粉末。利用不銹鋼模(內徑，13毫米)在Carver Press的輕微壓力之下於200psi下壓縮該乾燥粉末，以形成一呈圓盤(100毫克/圓盤)，該圓盤含有(Z)-亞丁基苯酞與p(CPP-SA)共聚物的醫藥配方(簡稱『p(CPP-SA)-Z-BP』)。圓盤外觀如第3圖所示。
[實施例3]p(CPP-SA)-Z-BP醫藥配方之藥物釋放動力學試驗
將實施例2所製備之p(CPP-SA)-Z-BP圓盤(含有17.5% Z-BP或25% Z-BP)置於添加有1.0毫升0.1莫耳濃度磷酸鹽緩衝食鹽水(pH 7.4)及1.0毫升正辛醇的閃爍瓶內，並於37℃下培養。於各不同時間點以新鮮緩衝液替換該溶液，並利用一光譜儀測量溶液於310奈米波長下的吸光度，以測量(Z)-亞丁基苯酞於該緩衝液中的濃度。前述試驗方法可參見Weingart等人， Int.J.Cancer.1995,62(5)：605-9，該文獻全文併於此處以供參考。
結果如第4圖所示，p(CPP-SA)-Z-BP圓盤可於0至144小時持續緩慢釋放，顯示p(CPP-SA)-Z-BP圓盤可用以提供(Z)-亞丁基苯酞之緩釋劑型。因此，當將p(CPP-SA)-Z-BP圓盤植入生物體內，Z-BP可緩慢且持續釋放至鄰近的組織，達到持續治療的功效。
[實施例4]細胞實驗：p(CPP-SA)-Z-BP醫藥配方之細胞毒性作用(cytotoxic effect)
進行細胞培養試驗，分別以含有0重量%(控制組)、17.5重量%、或25重量%(Z)-亞丁基苯酞的p(CPP-SA)-Z-BP處理人類胰臟癌PACA-2細胞株24小時後，觀察腫瘤細胞形態與細胞存活率。
第5A圖顯示，相較於控制組(即，不含(Z)-亞丁基苯酞的p(CPP-SA))，含有17.5重量%或25重量%(Z)-亞丁基苯酞的p(CPP-SA)-Z-BP可有效降低PACA-2細胞株的存活率；第5B圖顯示PACA-2細胞株經過17.5重量%或25重量%(Z)-亞丁基苯的p(CPP-SA)-Z-BP處理後會發生細胞凋亡。前述實驗結果顯示，本發明p(CPP-SA)-Z-BP醫藥配方可有效抑制胰臟癌細胞生長。
[實施例5]細胞實驗：Z-BP所誘發的細胞凋亡作用
(1)mRNA表現量分析
已知細胞內孤兒受體-1(orphan receptors，NOR-1)、Nurr1、及Nur77的表現量的表現量上升與細胞凋亡作用有關。本 實驗以100微克/毫升Z-BP處理PANC-1及PACA-2胰臟癌細胞株，分別於處理0、1、3、6、及24小時後，進行反轉錄聚合酶連鎖反應實驗(第6A圖)；或者，以不同濃度升Z-BP處理PANC-1及PACA-2胰臟癌細胞株3小時後，進行反轉錄聚合酶連鎖反應實驗(第6B圖)，以檢測Z-BP處理對於胰臟癌細胞株內NOR-1、Nurr1及Nur77之基因表現量的影響。實驗以甘油醛3-磷酸脫氫酶(GAPDH)作為控制組。
如第6A圖所示，PANC-1及PACA-2胰臟癌細胞株在經過Z-BP處理後1至3小時後，細胞內NOR-1及Nurr1的mRNA表現量明顯提升；如第6B圖所示，PANC-1及PACA-2胰臟癌細胞株在經過不同濃度Z-BP處理3小時後，細胞內Nurr1的mRNA表現量明顯提升。顯示Nurr1表現量提升可能是Z-BP於PANC-1及PACA-2細胞內誘發細胞凋亡的初期現象。
(2)微小RNA干擾試驗
利用微小RNA干擾技術抑制人類胰臟癌細胞PACA-2中Nurr1之RNA的表現後，再以133微莫耳濃度Z-BP處理細胞。接著，進行反轉錄聚合酶連鎖反應，以檢測細胞中Nurr1 RNA表現量的變化。實驗結果如第7A圖所示，當以50奈莫耳濃度Nurr1微小RNA處理人類胰臟癌細胞PACA-2後，可抑制約50%經Z-BP誘導的Nurr1，顯示Z-BP處理確實會增加Nurr1的表現量。
此外，以Nurr1微小RNA(10奈莫耳濃度或50奈莫耳濃度)處理人類胰臟癌細胞PACA-2後，再以133微莫耳濃 度Z-BP處理細胞。接著，以如實施例4所述之細胞實驗方法，檢測細胞存活率。實驗結果如第7B圖所示，當以50奈莫耳濃度Nurr1微小RNA處理人類胰臟癌細胞PACA-2後，可回復經Z-BP抑制的PACA-2的細胞存活率，顯示Z-BP處理確實會造成PACA-2的細胞存活率下降。
(3)西方氏墨漬法試驗
本實驗以Z-BP處理人類胰臟癌細胞PACA-2不同時間後(0、30、60、120、或180分鐘)，利用西方氏墨漬法分析Z-BP所誘發之Nur77基因所涉之訊息傳遞路徑中相關蛋白質的表現量變化，包括Pan-PKC、AKT、ERK、及JNK等蛋白質(第8A圖)；以及分析與細胞凋亡機制相關之蛋白質的表現量，包括聚腺苷二磷酸核醣聚合酶((poly(ADP-ribose)polymerase，PARP)、細胞質聚腺苷二磷酸核醣聚合酶(cPARP)及凋亡蛋白酶-3等蛋白質(第8B圖)。實驗以β-肌動蛋白作為對照組。
如第8A圖所示，以Z-BP處理PACA-2細胞180分鐘後，PACA-2細胞內磷酸化JNK(Pi-SAPK/JNK)、及磷酸化AKT(Pi-AKT)的表現量明顯上升，顯示Z-BP處理會增加胰臟癌細胞中Nur77基因相關路徑中蛋白的表現量。如第8B圖所示，以Z-BP處理PACA-2細胞24小時或48小時後，PACA-2細胞中凋亡蛋白酶-3、PARP及cPARP的蛋白質表現量上升，顯示Z-BP處理會增加胰臟癌細胞中細胞凋亡路徑相關蛋白質的表現量。
[實施例6]動物實驗：p(CPP-SA)-Z-BP降低小鼠體內胰臟腫瘤的尺寸
使免疫缺陷裸小鼠(nude mice)(6隻/組)接受1×106個PACA-2人類胰臟癌細胞的皮下背部植入體(subcutaneous back implants)。接著，由PACA-2細胞植入部位分別將含有0%(控制組)、17.5%、或25% Z-BP的p(CPP-SA)-Z-BP經由皮下植入小鼠體內。之後，每兩天利用測徑器測量小鼠體內的腫瘤大小並量測小鼠體重。腫瘤體積之計算方式為：長度×高度×寬度×0.5236(L×H×W×0.5236)(立方毫米)。實驗結果顯示於第9圖及第10圖。
如第9圖所示，控制組小鼠(經不含Z-BP之p(CPP-SA)-Z-BP處理的小鼠)於實驗進行30天後，小鼠體內胰臟腫瘤之相對尺寸快速擴大至超過1000，而經含有17.5%或25% Z-BP之p(CPP-SA)-Z-BP治療的實驗組小鼠體內腫瘤之相對尺寸則為約200，惟各組小鼠的體重則無明顯變化(第10圖)。前述實驗結果顯示，p(CPP-SA)-Z-BP治療可有效抑制小鼠體內胰臟腫瘤生長。
以上實驗結果顯示，本發明之含有(Z)-亞丁基苯酞的醫藥配方可有效抑制胰臟癌細胞生長，故可用於治療胰臟癌。此外，本發明醫藥配方可另含一疏水性生物可相容聚合物，以形成一緩釋劑型，提供緩慢且持續之治療胰臟癌的功效。
上述實施例僅係用以例示說明本發明之原理及功效，而非用於限制本發明。任何熟於此項技藝之人士均可在不違背本發明之技術原理及精神的情況下，對上述實施例進行修改及變化。因此，本發明之權利保護範圍應如後附申請專利範圍所界定者。

Claims (15)

  1. 一種使用一醫藥配方於製備藥劑的用途，其中該藥劑係用於治療胰臟癌，且該醫藥配方係包含(Z)-亞丁基苯酞((Z)-butylidenephthalide)，且實質上不包含(E)-亞丁基苯酞((E)-butylidenephthalide)。
  2. 如請求項1之用途，其中該醫藥配方更包含一生物可相容之聚合物基質，(Z)-亞丁基苯酞係併含於該基質中。
  3. 如請求項2之用途，其中該生物可相容之聚合物基質係選自以下群組：聚(乳酸-共聚合-乙醇酸)、聚葡萄胺糖(chitosan)、膠原、水凝膠、聚酸酐、以及前述之組合。
  4. 如請求項2之用途，其中該生物可相容之聚合物基質係一聚酸酐，其係下式單體(A)與單體(B)之共聚物： 其中m為1至10之整數，且n為0至20之整數。
  5. 如請求項4之用途，其中m為2至8之整數，且n為3 至10之整數。
  6. 如請求項4之用途，其中該生物可相容之聚合物基質係單體(A)與單體(B)之嵌段共聚物。
  7. 如請求項5之用途，其中單體(A)為雙(對羧基苯氧基)丙烷且單體(B)為癸二酸。
  8. 如請求項4之用途，其中以重量計，單體(A)與單體(B)之含量比為約1：2至約1：10。
  9. 如請求項8之用途，其中單體(A)之含量與單體(B)之含量比為約1：3至約1：6。
  10. 如請求項1至9中任一項之用途，其中以該醫藥配方之總重為基準，(Z)-亞丁基苯酞的重量百分比為約1%至約40%。
  11. 如申請專利範圍第10項之用途，其中(Z)-亞丁基苯酞的重量百分比為約2%至約30%。
  12. 如請求項1至9中任一項之用途，其中該藥劑係呈圓盤(wafer)、粉末、膜片、薄片、棒狀、微球、奈米球、糊狀、或膠狀的形態。
  13. 如請求項1至9中任一項之用途，其中該藥劑係以如下一或多種方式投藥至一病患體內：皮下植入、組織間植入、以及胰臟內植入。
  14. 如請求項1至9中任一項之用途，其中該藥劑之用量，以(Z)-亞丁基苯酞計，為每天約10毫克/公斤體重至1000毫克/公斤體重。
  15. 如請求項14之用途，其中該藥劑之用量，以(Z)-亞丁基苯酞計，為每天約50毫克/公斤體重至500毫克/公斤體重。
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* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US10987339B2 (en) 2015-08-19 2021-04-27 Everfront Biotech Inc. Uses of butylidenephthalide
JP2017530113A (ja) * 2015-08-19 2017-10-12 長弘生物科技股▲ふん▼有限公司 ブチリデンフタリドの使用
US10688128B2 (en) 2016-05-23 2020-06-23 Everfront Biotech Inc. Use of Z-butylidenephthalide in activating autoimmune system
EP3801378A4 (en) 2018-05-24 2022-02-23 Celanese EVA Performance Polymers LLC IMPLANTABLE DEVICE FOR THE DELAYED RELEASE OF A MACROMOLECULAR DRUG COMPOUND
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CN113383029B (zh) 2019-01-10 2023-10-24 积水化学工业株式会社 酯化合物、树脂组合物、固化物及积层膜
WO2021143754A1 (zh) * 2020-01-14 2021-07-22 长弘生物科技股份有限公司 用于癌症治疗的组合及其应用

Family Cites Families (9)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
TWI298259B (en) 2004-10-08 2008-07-01 Tzu Chi Buddhist General Hospital Pharmaceutical composition for inhibiting/treating brain cancer
CN1943606B (zh) * 2005-10-08 2010-05-12 财团法人佛教慈济综合医院 正-亚丁基苯肽在制备治疗癌症药物中的应用
JP5161239B2 (ja) * 2007-01-19 2013-03-13 チェン、フェイ フタリド化合物のダイマーの抗腫瘍作用
CN101835899A (zh) * 2007-10-22 2010-09-15 威斯特研究所 调节端粒酶活性的化合物的鉴定方法
CN101264271A (zh) 2008-05-04 2008-09-17 北京中科仁和科技有限公司 一种治疗胰腺癌的中药组合物及其制备方法
WO2010131733A1 (ja) 2009-05-15 2010-11-18 中外製薬株式会社 抗axl抗体
TW201106947A (en) 2009-08-28 2011-03-01 Tzyy-Wen Chiou Anticancer formulation
DK2343051T3 (da) * 2010-01-05 2014-10-27 Nat Univ Dong Hwa Anti-cancer formulering
CN102641477A (zh) 2012-05-14 2012-08-22 许俊斋 一种治疗胰腺癌的药物

Also Published As

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