TW201247218A - Suspension type topical formulations comprising cyclic depsipeptide - Google Patents

Description

201247218 六、發明說明： 【發明所屬之技術領域】 本發明係關於新穎局部用醫藥組合物，其中活性劑係下 式（II)之環縮肽：

且係關於製造該等組合物之方法。 【先前技術】 式（Π)之環縮肽係用於治療並預防發炎性及/或過度增生 性及瘙癢性皮膚病（例如，異位性皮膚炎、牛皮癬、膿皰 型牛皮癬、酒渣鼻、瘢痕瘤、肥大性瘢痕、痤瘡、内塞頓 症候群（Netherton’s syndrome)或其他瘙癢性皮膚病（例如， 結節性癢疹、老年人之未明瘙癢））以及具有上皮屏障功能 障礙之其他疾病（例如，老化皮膚）。 式（Π)之化合物係闡述於國際專利申請案w〇 2009024527中。 期望鑒定出可提高效率、生物可用度、穩定性及/或患 者可接受性之組合物及該等組合物之用法。 該等目的係藉由以下來達成：提供本文所述組合物，提 供本文所述之用於在疾病中使用、尤其用於治療皮膚疾病 163159.doc 201247218 之組合物，及提供產生本文所述組合物之製程。 本發明之其他態樣係揭示於說明書及獨立申請專利範圍 中，較佳實施例係揭示於說明書及從屬申請專利範圍中。 【發明内容】 式（π)化合物呈現與局部投與及局部用蓋侖氏（galenic)組 合物相關之高度特異性困難，特定而言，包括特定穩定性 問題。 式（Π)之化合物僅顯示在水及水性緩衝液中之中度溶解 度及在親脂性賦形劑中之低溶解度。在極性有機溶劑中， 觀察到良好溶解度。式（11)之化合物在親水環境（例如水及 極性有機溶劑/共溶劑）中有降解之趨勢，且在水的存在下 遭受水解。 為治療及預防上文所提及之疾病，特異性滲透及透過特 徵係有利# ’以便達成皮膚中式（II)環縮肽之高濃度，同 時限制透過皮膚且從而降低全身性暴露。該等特異性要求 使研發非習用劑型成為必要。 依照本發明，已發現可獲得包含具有適宜㈣及透過特 徵之式(II)環縮肽之穩定醫藥組合物。因A，潛在不期望 副作用及/或活性劑儲左办 則储存時腐化之發生之風險得以減弱且 可降低療法之總成本。 說明書中所用術語具有以下含義： 亦意 意欲 活性 、.斤用'舌11劑」意指式（II)環縮肽。「活性 欲代表非晶形及結晶形式（例如，多型）。「活性劑 代表其溶劑合物、其醫藥可接受之鹽及其混合4 163159.doc 201247218 劑」亦意欲代表展示具體固態性質（例如「活性劑」之具 體晶形及/或碾磨形式）、例如呈微粉化形式之物質。 本文所用「溶劑合物」意指另外含有化學計算界定量之 一或多種類型之溶劑分子（例如乙酸乙酯、乙腈 '水、乙 酸異丙酯）之化合物之晶形。較佳地，溶劑合物在晶格中 含有一種類型之溶劑分子。 本文所用術語「醫藥上可接受之鹽」係指活性劑之無毒 酸或鹼土金屬鹽。該等鹽可在化合物之最終分離及純化期 間原位製備，或藉由各別使鹼或酸官能團分別與適宜有機 或無機酸或驗反應製備。代表性鹽包括（但不限於）以下 鹽.乙酸鹽、己二酸鹽、海藻酸鹽、檸檬酸鹽、天冬胺酸 鹽、苯曱酸鹽、苯磺酸鹽、硫酸氫鹽、丁酸鹽、樟腦酸 鹽、樟腦磺酸鹽、二葡萄糖酸鹽、環戊烷丙酸鹽、十二烷 基硫酸鹽'乙磺酸鹽、葡庚糖酸鹽、甘油磷酸鹽、半硫酸 鹽、庚酸鹽、己酸鹽、富馬酸鹽、鹽酸鹽'氫溴酸鹽、氫 碘酸鹽' 2-羥基乙磺酸鹽、乳酸鹽、馬來酸鹽、甲磺酸 鹽、於鹼酸鹽、2-蔡磺酸鹽、草酸鹽、雙羥萘酸鹽、果膠 醋酸鹽、過硫酸鹽、3·苯基丙酸鹽、苦味酸鹽、新戍酸 鹽、丙酸鹽、琥珀酸鹽 '硫酸鹽 '酒石酸鹽、硫氰酸鹽、 對甲苯磺酸鹽及十一烷酸鹽。同#，可用諸如下列劑使鹼 性含氮基團四級化：烷基齒，例如甲基、乙基、丙基及丁 基之氣化物、溴化物及碘化物；二烷基硫酸醋，例如硫酸 二甲醋、硫酸二^旨、硫酸二丁酿及硫酸二以旨；長鍵齒 化物，例如癸基、月桂基、肉豆謹基及硬脂醯基之氣化 I63159.doc 201247218 物、溴化物及碘化物；芳烷基齒化物，例如苄基溴及苯乙 基溴；及其他劑。藉此獲得水或油可溶性或可分散性產 物。驗加成鹽可在化合物之最終分離及純化期間原位製 備，或各別藉由使羧酸部分與適宜鹼（例如醫藥上可接受 之金屬陽離子的氫氧化物、碳酸鹽或碳酸氫鹽）或與氨或 有機一級、二級或三級胺反應製備。醫藥上可接受之鹽包 括（但不限於）基於鹼金屬及鹼土金屬之陽離子鹽，例如鈉 鹽、鋰鹽、鉀鹽、鈣鹽、鎂鹽、鋁鹽及諸如此類；以及無 毒銨、四級銨及胺陽離子，包括（但不限於）銨、四甲基 銨、四乙基銨、甲基胺、二曱基胺、三曱基胺、三乙基 胺、乙基胺及諸如此類之鹽。可用於形成鹼加成鹽之其他 代表性有機胺包括二乙基胺、乙二胺、乙醇胺、二乙醇 胺、六氫吡嗪、吡啶、甲基吡啶、三乙醇胺及諸如此類； 及驗性胺基酸，例如精胺酸、離胺酸及烏胺酸。 本文所用之「局部用醫藥組合物」為業内已知（例如， 參見歐洲藥典（European Pharmacopoeia)，6.3，01/2009 0132)，且特定而言，在本發明之上下文中係指懸浮型之 組合物。該等組合物包含i)活性劑及π)基質。基質 (matrix)(亦稱為「基質（base)」）含有醫藥上可接受之賦形 劑且經調適以局部投與。此外，可將本發明組合物調配為 包括凝膠之半固體、貼劑、發泡體、酊劑、溶液、（唇膏） 棒、或噴霧；其各自呈懸浮液類型。因此，本發明組合物 之黏度可在較寬範圍内變化，其通常為半固體或液體，較 佳為半固體。懸浮液類型之組合物之特徵在於活性劑係懸 163159.doc 201247218 浮於基質中；較佳呈 本: 物。 性）、 疏水軟膏」形 」形式β

.....鳥及諸如此類。在某些實施例中，個體係靈長動物》 在又其他實施例中，個體係人類。 個體」係指動物。通常動物係哺乳動 例如）靈長動物（例如人類，男性或女 w羊、馬、狗、貓、兔、大鼠、小鼠、 本文所用術語「抑制

inhibiting」）係指減輕或阻抑給定病狀、症狀或病症或 疾病，或顯著降低生物活性或過程之基線活性。 本文所用術語「治療 treatment」）任何疾病或病症在一實施例中係指改善疾 病或病症（即，減緩或遏製或減輕疾病或其臨床症狀中之 至少一者之發展）。在另一實施例中，「治療」（「treat」' treating」或「treatment」）係指緩和或改善至少一個包 括彼等患者可無法辨別者之物理參數。在再一實施例中， 治療」（「treat」'「treating」或「treatment」）係指在物 理上調節疾病或病症（例如，穩定可辨別症狀）、在生理上 調節疾病或病症（例如，穩定物理參數）或兩者皆有。在再 實施例中’「治療」（「treat」、「treating」或「treatment」） 係指預防或延遲疾病或病症之發作或發展或進展。 如本文所用，若個體會在生物學上、在醫學上或在生活 品質上受益於治療，則該個體「需要」該治療。 除非本文另外指明或上下文明顯矛盾，否則在本發明之 上下文中（尤其在申請專利範圍之上下文中）所用之本文所 163l59.doc 201247218 用術語「一」（「a」或「an」）、「該」（「the」）及類似術 語應理解為覆蓋單數以及複數。 在本說明書通篇及以下申請專利範圍中，除非上下文另 有要求’否則單詞「包含」（r c〇mprise」）或諸如「包 含」（「comprises」或「comprising」）等變化形式以及單 詞「含有」或諸如「含有」（「contains」或「c〇ntaining」） 等變化形式將理解為暗指包括所述整數或步驟或整數或步 驟之群組’但不排除任何其他整數或步驟或整數或步驟之 群組。 此外應理解’在說明書及申請專利範圍中所提供/揭示 之本發明的各實施例、優先性及範圍可與其他指定特徵組 合以提供其他實施例。 在第一態樣中，本發明提供包含式（II)環縮肽、疏水基 質及稠度劑之局部用醫藥組合物。其通常係懸浮型組合 物。 活性劑在親水環境（例如，水及極性有機溶劑/共溶劑）中 有降解之趨勢降解，且在水之存在下遭受水解。 已發現，包含式（II)環縮肽、疏水基質及稠度劑之局部 用醫藥組合物允許將活性劑調配成穩定組合物且達成適宜 滲透及透過特徵；尤其鑒於活性劑係懸浮於基質中且從而 僅一小部分之分子被溶解並可用於滲透之事實。藉由使用 稠度劑，可將皮膚中活性劑之含量增加至醫藥上有益含 量，而無皮膚刺激。然而，活性劑穿過皮膚之透過極低， 導致無全身性暴露或極低之全身性暴露，從而使副作用之 163159.doc 201247218 風險最小化。此外，該等組合物顯示良好的物理及化學穩 疋性。本發明之此態樣將在下文中進一步詳細解釋： /舌性劑可根據WO 2009024527中所闡述之方法來獲得。 尤其適宜於本發明組合物者係呈微粉化形式（χ9〇<2〇微米） 之本發明活性劑。活性劑在本發明組合物中之量可在較寬 範圍内變化’其通常係以有效量來提供。有效量係指活性 劑在投與給哺乳動物（較佳人類）時足以實現下文所定義之 〜療之量。活性劑之適宜量可由熟習此項技術者在常規實 驗中確定；其通常係在〇.1 wt.%至5 wt.%、較佳〇_5 wt·%至 2.0 wt.0/〇之範圍内’例如 〇 5 wt.0/〇、0.8 wt.0/〇或 1.0 wt.%。 疏水基質：根據本發明之此態樣，該基質含有石蠟（硬 石蟻、液體石蠟、輕質液體石蠟）、植物油、動物脂肪、 合成甘油酯、蠟、全氟碳化物、半全氟碳化物及/或液體 聚石夕氧烧。通常’疏水基質僅可吸收少量水^較佳地，疏 水基質含有一或多種類型之烴；較佳至少兩種類型之烴。 已發現’該基質分散大量活性劑並產生穩定組合物。適宜 烴為業内已知且可由熟習此項技術者選擇以與最終醫藥組 合物相容。適宜烴包括固體及液體烴，其可為直鏈及/或 具支鍵烴。該等烴係醫藥組合物之已知賦形劑且可自市場 購得（例如個別組份之混合物）。適宜烴包括「礦物油」、 「石蠟脂」、「微晶蠟適宜疏水基質可含有多達66 wt.〇/。 礦物油、較佳20 至40 wt.%礦物油。適宜疏水基質可 含有多達98 wt.%石蠟脂、較佳40 wt.%至60 wt.%石壤脂。 適宜疏水基質可含有多達25 wt·%微晶蠟、較佳5糾.％至2〇 163I59.doc .10- 201247218

Wt.%微晶蠟。適宜疏水基質可含有礦物油及石蠟脂介於 1:1至1:3、較佳1:1_5至1:2 〇之間之比率。此外，適宜疏水 基質可含有礦物油及微晶蠟介於1:〇 2至1:1、較佳1:〇.33至 1:0_66之間之比率。 稠度劑.如本發明中所用，改變稠度之劑（亦稱為稠度 改良劑）為業内已知。熟習此項技術者可選擇與最終醫藥 組合物相谷之適宜化合物。應理解，可使用一或多種該等 劑。尤其適且者係選自由飽和脂肪酸及飽和脂肪酸酯組成 之群之稠度劑。較佳者係飽和C6至C3〇脂肪酸、脂肪酸 酉旨；尤佳者係C10至C20脂肪酸、脂肪酸醋。此外，直鏈 脂肪酸、脂肪酸醋較佳。對於酷，门至以烷基較佳。在 i等稠度劑中，肉豆謹酸異丙自旨尤其適宜。稠度劑在本發 明組合物中之量可在寬_内變化，其通常係以有效量提 i、祠度劑之適且量可由熟習此項技術者在常規實驗中確 定；其通常係、介於總組合物之2.5娜至2〇 wt%之間，較 佳2.5 wt%至1〇 wt%之間。 貫包例巾纟發明係關於本發明此態樣之組合物， -不3其他賦形劑。因此，本發明組合物僅含有（即， 組成或基本上由...組成)活性劑、-或多種烴及稠度 J。認為該等組合物有利於(例如)簡單製造及，或有利於且 有南皮膚刺激/可能對其他賦形劑過敏之患者群體。八 在另實施例中’本發明係關於本發明此態樣之組合 且=含有一或多種其他賦形劑。該等賦形劑為業内已知 可由熟習此項技術者容易地確^適宜賦形劑可選自由 163159.doc 201247218 抗氧化劑、膠凝劑' 調卽劑/緩衝液、滲透促進劑、防 腐劑、（共）溶劑及穩定劑4成 k ^ 成之群。該等賦形劑為業内已 ° 自市場購得·^可根據標準教材來#定，例如α #A<Handbo〇k 〇f Pharmaceutical Excipients 〇 ηψ 組合物有利於根攄製造商或患者之需要進行特殊調整並由 此改良產物性質（例如存架壽命或患者順應性）。下文解釋 其他適宜賦形劑： 抗氧化劑為業内已知且可由熟習此項技術者來選擇以與 最終醫藥組合物相容。應理解’可使用—或多種抗氧化 劑°已發現抗氧化劑可穩定本發明藥劑β較佳地，抗氧化 劑選自由以下組成之群：酚衍生物（例如丁基化羥基甲苯 (ΒΗΤ)' 丁基化羥基苯甲醚（ΒΗΑ));抗壞血酸衍生物（例如 抗壞血酸 '抗壞血酸棕搁酸酯）' 生育酚衍生物（例如維生 素Ε、維生素E TPGS)、亞硫酸氫鹽衍生物（亞硫酸氫心' 偏亞硫酸氫Na)及硫脲。更佳地，抗氧化劑選自由以下組 成之群：丁基化羥基甲苯（BHT)、丁基化羥基苯曱醚 (BHA) ct-生月紛、抗壞丘酸或其混合物。尤佳地抗氧 化劑係BHT。適宜組合物可含有多達2 wt %抗氧化劑、較 佳 0_005 wt.%至 〇.5 wt.〇/。。 膠凝劑為業内已知且可由熟習此項技術者來選擇以與最 終醫藥組合物相容。應理解，可使用一或多種膠凝劑。本 發明組合物中包括膠凝劑以調節黏度。適用於親脂性調配 物之膠凝劑，例如氣相二氧化矽（aerosil)、聚乙烯及鋁 皂。適宜組合物可含有多達10 wt·%膠凝劑、較佳〇 〇2 163159.doc 12 201247218

Wt.%至 2 wt.%。 調節PH或提供pH緩衝液之試劑為業内已知。適當緩衝 液可由熟習此項技術者來選擇以與最終醫藥組合物相容。 應理解，可使用一或多種該等緩衝劑。適宜組合物可含有 該等緩衝液以將本發明組合物之pH調節於4至8、較佳為^ 至7之範圍内，例如6 · 5 ◊ 渗透促進劑為業内已知且可由熟習此項技術者來選擇以 與最終醫藥組合物相容。應理解，可使用一或多種防腐 劑本文所用術語「滲透促進劑」係指當局部地（經表皮） 扠與至皮膚或黏膜（例如投與至皮膚）時促進（即改良）活性 劑之渗透之物質。可使用廣泛範圍之滲透促進劑。適宜滲 透促進劑可例如選自由以下組成之群： 醇’例如乙醇、2·丙醇、丙二醇、油醇、次亞麻醇； 月曰肪酸g曰，例如乙酸丁酯、甘油單月桂酸酯、油酸二乙 一'醇S旨， -脂肪酸，例如油酸； -皂素 •胺，例如尿素、N，N_二乙基·間·甲苯甲醯胺； •表面活性劑’例如 Brij 36T、Pluronic(R) F68 , 其他，例如萜烯、二甲亞颯、1>3_二氧雜環烷（SEpA)、氮 嗣（aZ〇ne)、二乙二醇單乙醚、己二酸二曱基異丙基酿、二 甲基-異山梨糖醇。 0透促進劑在本發明組合物中之量可在較寬範圍内變 其通常係以有效量來提供。較高渗透亦可促進透過， 163159.doc -13- 201247218 例如促進透過皮膚。較佳地，不增強或不顯著增強活性劑 至體循環中之遞送（無透過或無顯著透過滲透促進劑之 適宜量可由熟習此項技術者在常規實驗中確定；其通常係 介於總組合物之2.5 wt_。/。至20 wt·%之間，較佳為2.5 wt〇/〇 至 10 wt.%。 防腐劑為業内已知且可由熟習此項技術者來選擇以與最 終醫藥組合物相容。應理解，可使用一或多種防腐劑。本 發明醫藥組合物中包括防腐劑以延長存架壽命。較佳地， 防腐劑係選自醇（例如，苯甲醇）、酚及對羥基苯甲酸酯之 群》更佳地，防腐劑係選自對羥基苯甲酸酯（paraben)、 醇、雙胍、汞鹽、咪唑烷基腺。適宜組合物可含有多達$ wt.°/。、較佳 〇.〇1 %至 3 wt 0/〇。 共溶劑及溶劑為業内已知且可由熟f此項技術者來選擇 =與最終醫藥組合物相容；其表示可溶解本發明藥劑（部 刀或凡全）且與水具有高互溶性之賦形劑。溶劑係可溶解 本發明藥劑但與水具有低互溶性之賦形劑。因此，端視組 合物類型及存在的其他賦形劑，特定化合物可用作溶劑或 共溶劑。應理解，可使用一或多種共溶劑/溶齊卜 ，活！ 生Μ可如國際專利中請案w〇細搬4527中所闊述來 其可包括其他溶劑，例如可用於純化或如其中所提 及呈鹽形式之溶劑。 依照本發明，以本發明細人私+去旦 货月、.且σ物之重量計，活性劑可以自 (例如）約0.05重眚。乂 5夕，去认〜< ^ 量至夕達約20重量〇/〇之量存在。活性劑較 佳係以組合物之〇 5重量 里置/。至5重量％之量存在，更佳係以 163159.doc 201247218 組合物之0.2重量。/。至}重量％之量存在。 在第二態樣中，本發明係關於製造本文所述組合物之方 法’其包含以下步驟·’合併本文所述賦形劑以獲得疏水基 質，將由此獲得之基質與活性劑合併。 • 纟發明組合物可藉由本身已知但尚未用於本發明組合物 之製程來製備，該等製程由此形成新製程。一般而言，醫 ^ 藥組合物之製造採用標準醫藥製程’其包含藉由（例如）混 合、溶解及/或凌乾來將活性劑與基質合併之步驟。該等 步驟亦可包含加熱或冷卻所用物質。如上文所概述，活性 劑可根據已知製程獲得；基質之個別組份係本身已知或可 根據已知製程獲得。 在-實施例中，本發明係關於製造本發明第—態樣中所 述組合物（即，懸浮液類型之組合物）之方法，其包含以下 步驟： 在，I於30 C至95 C之溫度下合併所有賦形劑以獲得炫 體， 較佳在^於3G C至95 C之溫度下添加活性劑以獲得懸浮 ，液， •將所獲得之組合物均質化。 視需要冷卻所獲得之組合物。 【實施方式】 藉由以下實例來闡釋本發明。 縮寫： 〇C 攝氏度 163159.doc 15 201247218 轉/分鐘 重量百分數 兆* 貝克（mega Becquerel) 相對濕度 rpm wt.%或重量％ MBq RH 實例 1.醫藥組合物 藉由將下文所示之賦形劑與式II化合物合併來製備軟膏 (懸浮型）。具體而言，合併除式π化合物以外之所有下文 所示組份，並在攪拌的同時加熱至80°C以獲得熔體。在此 溫度下添加式II化合物並攪拌所得混合物，直至式Π化合 物完全潤濕為止。在80°C下利用ultra turrax於24000 rpm下 將懸浮液均質化5 min。將所獲得之組合物緩慢冷卻至25 °C以獲得懸浮型之組合物。 軟膏變化形 式 A [%] 軟膏變化形 式 B [%] 軟膏變化形 式 C [%] 軟膏變化形 式 D [%] 式II化合物 0.5 1.0 0.2 0.1 白色凡士林(white Vaseline)(石蠍脂） 54 53.5 54.3 54.4 液體石蠟(礦物油） 30 30 30 30 微晶躐(烴） 12.5 12.5 12.5 12.5 肉豆蔻酸異丙酯 3.0 3.0 3.0 3.0 2.穩定性測試 2a)化學穩定性 測試上文所製備醫藥組合物之化學穩定性《在5°C、室 163159.doc •16· 201247218 溫及40°C下儲存5個月後’檢測到小於〇.丨％之降解產物。 在5°C、25°C/65% RH及3 0°C/65% RH下儲存12個月後，並 在40°C下儲存6個月後，檢測到〇. 1 %之降解產物。發現， 在5°C及12個月之長期條件以及25。〇/60% RH及6個月之加 速條件下’組合物之化學穩定性係令人滿意的。發現組合 物之化學穩定性極佳》 2b)物理穩定性 測試上文所製備醫藥組合物之物理穩定性。在5 °C、室 溫及40°C下儲存5個月後，在所有儲存條件下發現適宜粒 徑。在 5°C、25。(： /65% RH及 30°C /65% RH下儲存 12個月 後’並在40°C下儲存6個月後’在所有儲存條件下發現適 宜粒徑分佈。發現’在5°C及12個月之長期條件以及25°C/ 60% RH及6個月之加速條件下，組合物之物理穩定性係令 人滿意的。發現組合物之物理穩定性極佳。 2c)溫度循環測試 在溫度循環測試中測試醫藥組合物（變化形式B及c) ^在 4〇°C與5°C之間以24小時間隔將樣品循環！個月。然後，分 析樣品之物理特性。 未觀測到視覺及微觀外觀之變化。可觀測到軟膏之黏度 明顯增加。 2d)冷凍及解凍測試 在冷束及解凍測試中測試醫藥組合物（變化形式B及C)。 將樣品儲存4個在-20〇C下6天隨後在25°C /60% RHt i天之 完整冷;東解凍循環。在28天後取出樣品，並分析樣品之物 163159.doc •17· 201247218 理特性。未觀測到視覺及微觀外觀之變化且軟膏之黏度未 改變。 2e)使用測試（in_usetest) 在使用測試中測試醫藥組合物（變化形式Β) β 將樣品放置於白色鋁管（丨〇 g)中，該等白色鋁管内部具 有保護性漆，無壓印，具有膜，配備有具有内置點之白色 螺帽》 每天兩次（早晨及下午晚些時候）自1〇 g管移除大約〇1 g 軟膏，持續7個及14個工作日。每一次移除軟膏之後，將 管緊密封閉並儲存於251下直至下一次移除為止。 在25°C下7天及Μ天之使用時期之後，對式（11)之化合物 之分析保持不變。 3·家豬之過敏性接觸性皮膚炎（ACD): 對於致敏，以分開體積將500 口丨之1〇% 2,4_二硝基氟苯 (DNFB，溶解MDMSO:丙酮：橄欖油[1:5:3, ν/ν/ν]中）經表皮 施用於兩隻耳朵之内側面上及基部處及兩個腹股溝上。工 週後，在刮過的背外側背上之12個至16個位置處利用丨5 μ1 1%DNFB引發皮膚過敏反應。將測試位置（大小為7⑽巧頭 尾向地佈置於兩背側上。在第8天攻擊之後Q5小時及6小 時，將55微升調配物樣品施用於2個均在右側 < 測試位置 上。以類似方式僅用媒劑（安慰劑）處理對側的左側。在攻 擊後24小時炎症達到頂點時，對測試位置進行臨床檢查。 以〇至4之等級對變化打分（表3_1},每個指定位置所允許之 最大合併分數為12。 I63l59.doc 201247218 表3-1受ACD影響之測試位置之臨床症狀的得分 分數 紅斑/強度 紅斑/範圍 硬結 0 無 無 無 1 幾乎不可見 小斑點 幾乎不可觸知 2 輕度 大斑點 輕度硬化 3 顯著 融合 顯著硬化 4 重度(或變紫） 測試位置均勻發紅 測試位置之硬化 顯著且增強 將結果概述於表3 - 2中。 表3-2藉由化合物製劑抑制臨床ACD分數 製劑 與媒劑處理之控制相 比之抑制％ 統計顯著性 0.5%乳膏+亞麻油酸* 22 p<0.01 0.5%乳膏-亞麻油酸** 13 ns 0.5%軟膏變化形式A 16 p < 0.05 1.0%軟膏變化形式B 38 p< 0.001 1.0%，存於丙二醇/乙醇7/3 (v/v)中 33 ρ<0·01 * 0.5%乳膏+亞麻油酸-組份：式II化合物：0.50%，無水甘 油：64.45°/。，Miglyol 812(三酸甘油酯 mikett) : 25.00%， Sedefos 75 : 9.00%，丁基羥基曱苯：0.05°/〇，亞麻油酸： 1.00% "0.5%乳膏-亞麻油酸-組份：式II化合物：0.50%，無水 甘油：65.45%，Miglyol 812(三酸甘油 g旨 mikett): 25.00%，Sedefos 75 : 9.00%，丁基羥基曱苯：0.05% 4.懸浮型調配物在豬中之活體内皮膚滲透/透過性研究 為測定在活體内條件下經表皮施用之化合物進入真皮之 通量（滲透），在解剖之前8小時、4小時、2小時及1小時， 用化合物調配物處理豬之背外側背上之4 cm2大小區域。 163159.doc -19- 201247218 在熱分離之後自所切除皮膚移除表皮，且分析來自去表皮 皮膚之1 mm厚真皮薄片之6 mm打孔樣品的化合物濃度。 此程序使能夠可罪地測定真皮中之藥物含量，且分析物沒 有被經處理皮膚表面上所存在或表層角質層中所截留之殘 留未吸收藥物污染之風險》 將真皮中所獲得之藥物含量列示於表4-1中。 表4-1在活體内局部施用之後豬真皮中之藥物含量 軟膏變化形式B (1.0%) 軟膏變化形式A (0.5%) 時間[hr] 平均濃度(pg/g) SEM⑻ 平均濃度 (μκ/β) SEM (η) 1 0.399 0.102 (8) 0.077 0.025 2 0.496 0.209 (8) 0.216 0.069 4 0.199 0.049 (8) 0.284 0.126 8 0.426 0.177 (8) 0.281 0.062 在1小時至8小時期間施用1%及〇.5。/0軟膏之後皮膚中所 達到之濃度係與活體内皮膚滲透分析中4 8小時之後整個皮 膚中所達到之含量相當。（參見下文）。 活體内滲透至豬皮唐之角質層中 用軟膏變化形式B (1.0%)局部處理家豬之大腿外側2小 時且處理對側0.5小時，然後解剖經處理皮膚樣品。藉由 利用紙巾擦栻來移除過量的所施用物質。使用氣壓驅動柱 塞以獲得均勻壓力，使用D squame®膠帶（直徑為2·2 cm， CuDerm)連續移除40個連續層之角質層。分析化合物含量 並將其正規化至所剝離之皮膚面積。 角質層中之化合物含量（40個膠帶條提取物之和）總計為 在施用軟膏變化形式B (1.0%)後〇.5小時及2小時分別為3 6 Mg/m2及 7.5 pg/cm2之總數。 t63t59.doc •20- 201247218 5·人類屍體腹部皮膚中之活體外皮膚滲透/透過 皮膚製備 自 West Hungarian Regional Tissue Bank, Gy6r，Hungary 獲得冷凍的人類屍體腹部皮膚（批次編號為090620-9(=第1 批次）及090609-8(=第2批次），分別來自69歲及61歲之女性 供體）。在開始實驗之前，將皮膚在-20°C下保持大約4個 月。利用 Aesculap 皮刀（Aesculap AG，Tuttlingen，Germany) 自解凍的皮膚樣品取500 μηι之厚度，切割以與擴散面積相 適合，並於弗朗茲擴散池（diffusion Franz cell，Franz 1975)之供體室與受體室之間組裝。 - 皮膚完整性之測定 藉由評價氚化水（3H2〇)穿過皮膚之透過來測定皮膚之完 整性；將400 μί之3H2〇(0.1 MBq/mL)施用於皮膚之表面β 平衡30 min之後，用棉簽將3仏0自皮膚移除；取2 mL受體 相（下文所述受體流體之組合物）樣品，以量測透過皮膚之 3ηζο之分率。在液體閃爍系統2500 TR(Packard instr公 司，Meriden，CT，USA)中，藉由液體閃爍計數量測受體相 之放射性。對於淬滅校正，使用外標準法。藉助密封標準 物（Packard Instr.)建立淬滅校正曲線。 對活體外透過皮膚及滲透至皮膚中之測定 使用皮膚作為隔開手動靜態弗朗茲池（大約7 3 mL之體 積，16 mm内徑）之供體室及受體室之膜。用受體流體（b叫 78 [Volp，之〇·5%水溶液）填充受體室’以模擬人類生理 條件及藥物自皮膚之全身性移除。受體流體另夕卜含有⑽ 163159.doc 201247218 U/mL之1 /。青黴素/鍵黴素混合物以防止微生物污染。 用於擴散之有效皮膚面積及接收器隔室之體積分別係在 1.78心2至2.14(^2(平均值為2〇1£^2)及6 98灿至754 mL之範圍内。使用34±rc之擔環水浴使池之溫度保持值 定。在整個實驗期間持續使用磁力攪拌器棒以確保受體均 勻性。 樣品之收集及處置 以單一劑量將量為243 mg至305 mg之調配物3至〇(表5)及 0.300 mL之調配物施用於安裝於弗朗兹擴散池（對應於取 樣時間=0 h，3個至4個池/調配物）上之皮膚樣品上。將調 配物留於皮膚上48 h。為避免調配物之蒸發及乾燥，利用 含有洞之石蠟膜（Parafilm® M)半堵塞弗朗兹池之供體隔 室。測定透過皮膚之活性劑’在施用後4 h、7 h' 2〇 h、 25.5 h、28 h' 31 h、44 h及48 h自受體隔室收集若干份 200 μί之受體流體。每次用相同體積之新鮮受體流體代替 取自受體隔室之體積，以使總受體流體體積在整個分析時 期保持恆定。 —在處理時期結束時（施用後48 h)，利用棉簽棒小心移除 每-皮膚樣品之表面上之殘留調配物，且利用含有水之棉 花清洗施用區域並利用新棉棒輕輕弄乾。將該程序重複三 次。然後藉由21個使用市售黏膠帶（Sc〇tch® 55〇, 之膠 帶條自皮膚分離角質層。丢掉第丨個條以避免來自調配物 之潛在污染’且將其餘20個條置於小瓶（條編號2至6、7至 利用1.2 cm直徑打孔 11、12至16、17至21彙集在一起）中 163159.doc •22- 201247218 器對所剝離皮膚之處理區域進行生檢並稱重°將受體流 體、膠帶條及所剝離皮膚樣品冷凍並保持在_20°c下直至 分析為止。藉由有效的LC-MS/MS分析測定樣品中式（II)環 縮肽之濃度；量化之下限係〇.5 ng/mL (受體流體及條）或5 ng/g (皮膚樣品）。 表5結果（平均值±8〇丨範圍】’ π = 1至4) 軟膏變化形式 軟膏變化形式A 軟膏變化形式 1°/〇 1存於 調配物/式(II)環縮肽 D(0.1%) (0.5%) (1.0%) 丙二醇/乙醇 7/3(v/v)中 角質層中之濃度：2 3270 [2730至 5330 ±3730 4920 ±3180 50.3 ±62.1 個至21個條(ng/cm2) 3810] P090至 10600] [1250至6680] [0.00 至 120] 48 h後之皮膚濃度 2.17 ±3.68 11.4±15.1 20.8 ± 32.4 185±196 (ng/cm2) [0.187 至 7.69] [1.02 至 33.7] [0.479至 68.5] [1.32 至 391] 0.330 ±0.013a 3.90 ± 0.2598 4.91 ± 0.7498 48 h後之皮膚濃度 48,1 ±83.3 204 ±300 [16.9 370 ±606 3520 ±3620 (ng/g) [5.08 至 173] 至652] [9.63 至 1270] [39.4 至7260] 6.40 ± 0.144a 54.7±3.36a 70.1±10.38 通量[範圍](ng/cm2/h) 0.825 ± 1.65 0.970 ± 1.94 4.63 ± 9.26 25·0 ± 26.0 [0.00 至 3.30] [0.00 至 3.88] [0.00 至 18.5] [〇.〇〇至 51.8] 0.00 ± 0.00a 0_00 ± 〇.〇〇a 0_00 ± 0_00a 延遲時間(h) 0.422 15.4 13.2 17.9 NCa NCa NCa

不包括最高值（離群值），針對η>2計算SD 163159.doc -23·

Claims (1)

1. 201247218 七、申請專利範圍： 1. 一種局部用醫藥組合物，其包含下式（π)之環縮肽

   (II)， 疏水基質及稠度劑。 2·如請求項1之醫藥組合物，其呈疏水軟膏形式。 3. 如請求項1或2之醫藥組合物，其中該疏水基質包括一或 多種選自由以下組成之群之化合物：石蠟、植物油、動 物脂肪、合成甘油酯、蠟、全氟碳化物、半全氟碳化物 及液體聚矽氧烷》 4. 如請求項1或2之組合物，其中該疏水基質包括至少兩種 類型選自礦物油、石蠟脂及微晶蠟之烴。 5. 如請求項1或2之組合物，其中該稠度劑係肉豆蔻酸異丙 酯。 6·如明求項1或2之組合物，其進一步包含一或多種選自由 以下組成之群之賦形劑：抗氧化劑、膠凝劑、ph調節劑/ 緩衝液、滲透促進劑、防腐劑、（共）溶劑及穩定劑。 7.如明求項1或2之組合物，其進一步包含一或多種滲透促 進劑。 8·如睛求項1或2之組合物，其中該式（π)之環縮肽係以介 於總組合物之0.1 %.%至5 wt.%之間之量存在，該稠度 163159.doc 201247218 劑係以"於總組合物之2 5 wt %至2〇 %之間之量存 在且該疏水基質含有多達66 wt.%礦物油、多達98 wt·%石蠛脂、多達乃wt %微晶蠟。 9.如吻求項丨或2之組合物，其用於治療發炎性及/或過度增 生ί1生及瘙疼性皮膚病，例如痤瘡、異位性皮膚炎、牛皮 癖膿皰型牛皮癬、酒造鼻（rosacea)、瘢痕瘤、肥大性 ;f内塞頓症候群（Netherton's syndrome)或其他瘙療 性皮膚病，例如結節性癢疹.、老年人之未明癌癢；以及 有上皮屏障功能障礙之其他疾病，例如老化皮膚。 1 〇·如凊求項1或2之組合物，其用於治療發炎性及/或過度增 生性及瘙癢性皮膚病，例如異位性皮膚炎、牛皮癖、膿 皰型牛皮癬 '酒渣鼻、瘢痕瘤、肥大性瘢痕、痤瘡、内 塞頓症候群或其他瘙癢性皮膚病，例如結節性癢疹、老 年之未明瘙癢，以及有上皮屏障功能障礙之其他疾 病’例如老化皮膚。 η·:種如請求項1至8中任一項之組合物之用途，其用於製 造用於治療皮膚疾病或病狀之藥劑。 12. -種如請求項1至8中任一項之組合物之用途，其用於製 造用於治療以下之藥劑：選自以下之發炎性及/或過度增 生性及瘙癢性皮膚病：異位性皮膚炎、牛皮癖、膿皰型 牛皮癬、酒逢鼻、瘢痕瘤、肥大性瘢痕、痤瘡、内塞頓 症候群或其他瘙癢性皮膚病，包括結節性嘻療、老年人 之未明療疼；及有上皮屏障功能障礙之疾病:包括老化 皮膚。 163159.doc 201247218 四、指定代表圖： (一) 本案指定代表圖為：（無） (二) 本代表圖之元件符號簡單說明·· 五、本案若有化學式時，請揭示最能顯示發明特徵的化學式：

   163159.doc