TW201238975A

TW201238975A - Antibody molecules which bind IL-17A and IL-17F

Info

Publication number: TW201238975A
Application number: TW101101182A
Authority: TW
Inventors: Ralph Adams; Terence Seward Baker; Alastair David Griffiths Lawson
Original assignee: Ucb Pharma Sa
Priority date: 2011-01-14
Filing date: 2012-01-12
Publication date: 2012-10-01
Also published as: JP2014505474A; US11919950B2; TN2013000292A1; UA110358C2; LTPA2022501I1; MY162790A; US9988446B2; WO2012095662A1; PT2663577T; BR112013017951A2; LT2663577T; MA34907B1; CL2013002044A1; SG10201510762YA; NZ613286A; HUS2200001I1; US20180346561A1; US8580265B2; ES2632583T3; KR101950306B1

Description

201238975 六、發明說明：【發明所屬之技術領域】本發明係有關於對IL-17A及IL-17F二者的抗原性決定子具有特異性之抗體分子。本發明亦有關於抗體分子之治療用途及其製造方法。【先前技術】 IL-17A(原先定名為CTLA-8及也稱作為IL-17)為發炎前期細胞激素及IL-17家族的創始成員（R0uvier等人 1993，J. Immunol. 150:5445-5456)。隨後已經識別另外五個家族成員（IL-17B至IL-17F)包含最密切相關的 IL-17F (ML-1)，其係與IL-17A共享約55%胺基酸序列同源性（Moseley等人’ 2003，細胞激素生長因子綜論 14:155-174)。IL-17A及IL-17F係由近來界定的自體免疫相關T助手細胞子集T h 1 7表現，T h 1 7也表現IL - 21 及IL-22特徵細胞激素（Korn等人，2009，Annu. Rev. Immunol. 27:485-5 1 7.:485-5 17)。IL-17A 及 IL-17F 係表示為.同質二元體，但也可表示為IL -1 7 A/F異質二元體 (Wright 等人 2008，J. Immunol· 18 1:2799-2805)。IL-17A 及F係經由受體IL-17R、IL-17RC或IL-17RA/RC受體複體傳遞信號（Gaffen 2008’細胞激素。43:402-407)。 IL-17A及IL-17F二者也引發多種自體免疫疾病。因此之故，對於用於治療IL-1 7媒介的疾病，IL-1 7A 及IL-1 7F之雙重拮抗劑較單獨拮抗劑更為有效。結合 IL-17A及IL-17F之抗體已經描述於W02007/106769、 W02008/047134、WO2009/136286 及 W02010/025400。 -3- 201238975 【發明内容】本發明提供可以高度親和力結合至IL - 1 7 A及 IL_1 7F二者之改良式中和抗體。更明確言之，本發明之抗體可特異性地結合至IL-ΠΑ及IL-17TF二者，亦即抗體不會結合至IL_n之其它同質異形體。較佳地本發明之抗體也結合IL-17A/IL-17F異質二元體。較佳地，本發明之抗體令和IL -1 7 A及IL -1 7 F二者之活性。於一個具體例申’本發明之抗體也中和IL-17A/IL-17F異質二兀體之活性。因此本發明之抗體具有優異性質，可抑制 L 17A及IL-17F二者之生物活性。因此之故，本發明也提供此等抗體用於治療及/或預防由IL-17A或IL-17F中之任一者或二者所媒介之疾病，諸如自體免疫病或發炎病或癌症，之用途。【實施方式】如此處使用，「中和抗體」一詞描述可中和IL -1 7 A 及IL-1 7F二者之生物傳訊活性之抗體，其作用方式例如係藉由阻斷IL-17A及IL-17F接合至其受體中之一者或一者’及藉阻斷IL-17A/IL-17F異質二元體結合至其受體中之一者或二者。須瞭解如此處使用「中和」一詞係指生物傳§fL活性的減低，可以是部分或全部。又，須暸解 IL-17A及IL-17F活性藉抗體的中和程度町相同或相異。於一個具體例中，iL_17a/il_17F異質二元體活性之中和程度可與IL-17A或IL-17F活性之中和程度相同或相異。於一個具體例中，本發明之抗體特異性地、纟吉合至 IL-17A及IL-17F。更明確言之，結合表示抗體對Π^-17Α 201238975 及 IL-17F $ β & τ 甘〜夕太（匕s a_17A/IL-17F異質二元體）比較對其匕多肽有®古却夺尺同親和力。較佳IL-17A及IL-17F多肽為人頌。於其#g u\ _l. TT 具肢例中’抗體也結合馬來猴IL-17A及 .nj_ ^ 7A或1L_17F多肽或二者之混合物或表現該等多肽中之一去 _ s tL 双一者之細胞可用來產生抗體，該等抗體特異性地辨@ 識兩種多肽。IL-17多肽（IL-17A及IL-17F) 可以是「成熟,多狀·^甘α 1 、」爹狀或其生物活性片段或衍生物，其較佳包含受體4士入^Γ $ + 、。〇位置0較佳IL-17多肽為成熟多肽。IL-17 多肽可藉技缻Χρα + π — β界已知方法從包括表現系統之基因工程處「'寻夕佰主細胞製備，或可從天然生物來源回收。本案卜、狀」5司包含肽類、多肽類及蛋白質類。除非另行，月否則係互換使用。於某些情況下，IL_丨7多肽可、疋大里蛋自f諸如融合蛋白質之一部分例如肖來融合至親和‘籤。對此等多肽所產生的抗體於需要動物體免疫接種時，可使用眾所周知的常規協定，經由將多狀投予動物體較佳為非人動物而獲得例如參考免疫學實驗手冊’ D_M. Weir(編輯），第4期，布萊克威（BlackweU) 科學出版社，英國牛津，1 986年）。許多溫血動物諸如兔小乳、大鼠、羊、牛或豬可經免疫接種。但通常以小鼠、兔、豬及大鼠為佳。用於本發明之抗體包含全抗體及其功能活性片段或其衍生物，可以是但非限於單株、多價、多特異性、二特異性、人類化抗體或嵌合抗體、功能部位抗體例如 VH、VL、VHH、單鏈抗體、Fv、Fab 片段、Fab，及 F(ab，）2 .201238975 片段及前述任一者之抗原上突結合片段。其它抗體片段包含描述於國際專利申請案 W02005003 169 、 W02005003170及W02005 003 171者。其它抗體片段包含分別描述於W02009040562及W02010035012中之

Fab-Fv及Fab-dsFv片段。抗體片段及其製造方法為技藝界眾所周知，例如參考Verm a等人，1998，免疫學方法期刊 ’ 216’ 165-181; Adair 及 Lawson，2005。治療性抗體’藥物設計综論-線上2(3):209-217。用於本發明之抗體包含免疫球蛋白分子及免疫球蛋白分子之免疫活性部分’亦即含有抗原結合位置特異性結合抗原之分子。本發明之免疫球蛋白分子可屬於免疫球蛋白分子之任何類別（例如IgG、IgE、IgM、IgD及IgA) 或其亞類。單株抗體可藉技藝界已知之任一種方法製備，諸如融合瘤技術（Kohler & Milstein， 1 975 ，自然， 2 5 6 :4 9 5 - 4 9 7)、二元融合瘤（t r i 〇 m a)技術、人類B -細胞融合瘤技術（Kozbor等人，1983，今日免疫學，4:72)及EBV-融合瘤技術（Cole等人，單株抗體及癌症治療，p77-96， Alan R Liss，Inc.，1 985)。用於本發明之抗體可使用單一淋巴細胞抗體方法產生，藉例如 Babcook，J.等人，1996，Proc. Natl. Acad. Sci. USA 93(1 5):7843-7848 1;W092/0255 1;W02004/051268 及國際專利申請案號W02004/10 63 77所述方法，從選用來製造特異性抗體之單一淋巴細胞所產生的免疫球蛋白可變區cDNAs經由選殖及表現而產生。 201238975 人類化抗體為具有得自非人類物種之一或多個互補决疋區（CDRs)及得自人類&疫球蛋白分？之框架結構的得自非人類物種之抗體分子（例如參考us 5,585,〇89; WO91/09967)。嵌合抗體為藉免疫球蛋白基因編碼的抗體，該等抗體經過基因工程處理使得輕鏈基因及重鏈基因係由屬於不同種的免疫球蛋白基因節段組成。此等嵌合抗體可能抗原性較低。藉技藝界已知方法可製造二價抗體（Milstein等人， 1983 ’ 自然 305.537-539; WO 93/08829，Traunecker 等人，199 1，EMBO J· 10:3655-365 9)。多價抗體可包括多重特異性或可以是單一特異性（例如參考W092/22853及 WO05/1 1 3605)。用於本發明之抗體也可使用技藝界已知之各種噬菌體表現技術產生’及包含由Brinkman等人（免疫方法期刊1 995，1 82:41 -50)，Ames等人（免疫方法期刊1995, 184:177-1 86)，Kettleborough 等人（Eur.J.Immunol. 1994, 24:952-958)，Persic 等人（基因，1997 1 87 9-18)，Burton 等人（免疫學進展 1994，57:1 9 1-280)及 W090/02809; WO9 1/10737； W092/01047； W092/18619； W093/1 1236 ； W095/15982； WO95/2040 1 \ A US 5,698,426； 5,223,409； 5,403,484； 5,580,717； 5,427,908； 5,750,753； 5,821,047 ； 5,57 1,698； 5,427,908； 5,5 16,637； 5,780,225； 5,658,727 ； 5,733,743及5,969,108所揭示者。用以製造單鏈抗體之技術諸如述於US 4,946,778也適合製造單鏈抗體其係結 201238975 合至IL-17A& IL_i7F。又’基因轉殖小鼠或以其它體包含其它哺乳動物也可用來表現人類化抗體。抗體的篩檢可使用測量結合至人類il_17a及人類 IL-17F之檢定分析進行，例如此處實施例所述的拜爾号 (BIAC〇reTM)檢定分析。適當中和檢定分析為技藝界= 知，例如參考W〇2〇〇8/〇47 134及其中之實施例。，抗體可變功能部位的殘基習知係依據Kabat等人設計的系統編號。此種系統陳述於Kabat等人，1987，於免疫學關注的蛋白質序列，美國衛生及人類服務部國家衛生院（NIH) ’美國（後文稱作為「Kabat等人（參見上文）」）。除非另行指示，否則此種編號系統係用於本說明書。

Kabat殘基標示並非經常性地直接與胺基酸殘基的線性編说相對應。貫際線性胺基酸序列可含有比較嚴格 Kabat編號更少或更多的胺基酸，相對應於基本可變功能部位結構之系構或互補決定區（C D R)短缺或插入一個結構成分。殘基的正確Kabat編號藉由將抗體序列中的均質殘基與「標準」Kabat編號序列對齊而針對一個給定抗體決定。重鏈可變功能部位之CDR依據Kabat編號系統係位在殘基 31-35(CDR-H1)、殘基 50-65(CDR-H2)及殘基 95-102(CDR-H3)。但依據 Chothia (Chothia，C.及 Lesk, A.Μ· J. Mol· Biol·，196，901-917 (1987))，相當於 CDR-H1 之環係從殘基26延伸至殘基32。如此處使用「CDR-H1」包括殘基26至35，如Kabat編號系統及Chothia的位相 .201238975 環定義所述。依據Kabat編號系統，輕鏈可變功能部位之cdr係立在殘基24-34 (CDR-L1)、殘基5〇_56 (CDR L2)及殘基 89-97 (CDR-L3)。於-個具體例中’本發明提供一種中和抗體特別具么有人類IL-17A及人類IL_17F，包括輕鏈，其中輕鏈之可變功能部位包括針對CDR-L1列舉於SEQ ID N0:4之序列、針對CDR-L2列舉於SEQ⑴n〇:5之序列及針對 CDR-L3列舉於SEQ m N〇:6之序列（參考第卜圖卜本如明之抗體分子較佳包括互補重鏈。如此，於一個具體例中，本發明提供一種對人類 IL_ 1 7A及人類IL-1汀具有特異性之中和抗體，進一步包括重鏈’其中該重鏈可變區包括具有針對cdr_hi於seq ID N0.1給疋序列之CDR、針對cdr h2於叫⑴N〇 2 、、’。疋序列之CDR及針對CDR H3於SEQ⑴N〇:3給定序列之CDR中之至少_者(參考第ic圖）。；於另一個具體例中，本發明提供對人類α_17Α及人類IL- ] 7F具有特異性之中和抗體，包括重鍵，盆中該重鏈可變區之CDR-H卜CDR_H2及CDR H3中之^少二者係選自下列.針對CDR_H1給定於sEQ ID Ν〇:ι之序列；針對CDR_H2給定於SEQ ID NO:2之序列及針對CDR-H3 。疋於SEQ ID NO:3之序列。例如，抗體可包括一個重鍵其中CDR.H1具有SEQIDN。：〗給定之具有SEQ則〇:2給定之序列。另夕卜，抗體可包括—個重鏈其中CDR-H1具有SEQ m N〇:1給定之序列及 -9 - .201238975 ’或抗體可包括 :2給定之序列及為了避免疑問， CDR-H3具有SEQ m ν〇:3給^之序列一個重鏈其中CDR_H2具有seq ι〇 n〇 CDR'H3 *有SEQ ID NO:3給定之序列。須瞭解包含全部移位置換。個具體例中’本發明提供一種對人…Μ =類1“仰具有特異性之中和抗體 ^中該重鍵之可變區包括針對CDR_m於_ — :疋之序列、針對CDR_h^SEQidn〇及針對咖-H3於SEQidn〇:3給定之序列。於個具體例中，依據本發明之抗體包括重鍵，宜中該重鍵可變區包括針對cdr_h1給定於_⑴紙、i ^ ^，針對CDR_H2給定於seq m n〇:2之序列及針 / CDR-H3給定於SEQ m N〇:3之序列及—輕輕鏈可變區包括針對CDR_L1於SEQidn〇:4給定之序 ^、針對CDR_L2於SEQ ID N〇:5給定之序列及針對 CDR-L3於SEQ ID NO:6給定之序列。於一個具體例中，本發明所提供之抗體為單株抗體。於-個具體例中’本發明所提供之抗體為包括於 p ID ΝΟ··1至6所提供之各個cdr之⑽接枝抗體 /刀子。如此處使用’「咖_接枝抗體分子」-詞係指抗 2刀子，其_重鏈及/或輕鏈含有得自施體抗體（例如鼠單株抗體）之CDR(若有所需包含一或多個改性cdr)接枝於受體抗體（例如人類抗體）之重鏈及/或輕鏈可變區框 =。有關其綜論請參考Vaughan等人，自然生物技術， — 53 5-539 ’ 1998。於一個具體例中’並非移轉整個 -10- 201238975 CDR，只有得自此處所述CDR中之任一者特別決基中之一或多者係移轉至人類抗體框架（例如參 Kashmiri 等人，2005,方法，36, 25 34)β 於一個且例中，只有得自前文描述之CDR中之一或多者的特；定殘基係移轉至人類抗體框架。⑨另_個具體例中，有得自前文說明之各個CDR之特異性決定殘基係移轉人類抗體框架。當CDR或特異性決定殘基被接枝時，可使用任何當受體可變區框架序列，有關從其巾衍生CDR之施體體類別/類型，包含小鼠、靈長類及人類框架@，可使任一種適當受體可變區框架序列。較佳，依據本發明 C D R接才支抗體具有彳變功能部位包括丨類受體框架區 CDR或前述特異性決定殘基中之一或多者。如此，於個具體例中提供一種中和CDR接枝抗體，其中可變功部位包括人類受體框架區及非人類施體CDR。可用於本發明之人類框架實施例為、NEWM REI、EU、TUR、TEI、LAY 及 P0M (Kabat 等人，參上文）。例如’ KOL及NEWM可用於重鏈，rei可用輕鏈’及EU、LAY及POM可用於重鏈及輕鏈。另外可使用人類種糸序列；此等序列可得自於 http://vbase.mrc-cpe.cam.ac.uk/。於本發明之CDR接枝抗體中’受體重鏈及輕鏈無衍生自相同抗體，為了所需可包括複合鏈具有衍生自同鏈的框架區。本發明之C D R接枝抗體之重鏈的較佳框架區係衍殘考體決只至適抗用之及能見於需不生 -11- 201238975 自人類亞群VH3序列1-3 3-07連同JH4，如先前敛述於 W02008/047134。據此，提供包括至少一種非人類施體 CDR之中和CDR接枝抗體，其中重鏈框架區係衍生自人類亞群序列1-3 3-07連同JH4。人類JH4之序列為如下： (YFDY)WGQGTLVTVSS。YFDY 部分為 CDR-H3 之一部分而非為框架4之一部分（Ravetch，JV_等人，^8}，細胞，27 ， 583-591)。如前文於W02008/047 134所述，本發明之CDR接枝抗體之輕鏈的較佳框架區係衍生自人類種系亞群VK t 序列2-1-(1) L4連同JK1。如此，提供包括至少一個非人施體CDR之中和CDR接觸抗體，其中輕鏈框架區係衍生自人類亞群序列VK1 2-1-(1) L4連同jKi。JK1序列為如下：（WT)FGQGTKVEIK。WT部分為CDR_L3之一部分而非為框架4之一部分（Hieter，PA.等人，1982， J. Biol. Chem.，257，1 5 16-1 522)。又’於本發明之CDR接枝抗體中，框架區無需具有確切與受體抗體之序列相同的序列。舉例言之，不尋常殘基可改變為該受體鏈類別或型別更常見的殘基。另外，於受體框架區之擇定殘基可經改變，使得其相對應於施體抗體相同位置所出現的殘基（例如參考Reichmann 等人，1998，自然，332 , 323_324)。此等改變須維持為回復施體親和力所需的最小改變。於需要改變的受體框架區選擇殘基之一項協定係列舉於WO 91/09967。較佳’於本發明之CDR接枝抗體分子中，若受體重鍵具有人類VH3序列卜3 3_〇7連同jH4，則除了 —或多 -12- 201238975 個施體CDR外，重鏈之受體框架區包括施體殘基於至少位置94 (依據Kabat等人（參見上文））。因此之故，提供 CDR接枝抗體，其中於重鏈可變區的位置94至少該殘基為施體殘基。較佳地’於依據本發明之CDR接枝抗體分子，若受體輕鏈具有人類亞群VK1序列2-1-(1) L4連同JK1，則不轉移施體殘基，換言之，只轉移C D R。於是提供c D R 接枝抗體其中只有C D R轉移至施體框架。施體殘基為得自施體抗體的殘基，亦即CDR原先衍生自其中之該抗體。於本發明中’稱作為CA028_0496(原先描述於 W02008/047134)之抗體係藉變更輕鏈的五個殘基改良。二個殘基係在CDR及兩個殘基係在框架。因此於一個具體例中’輕鏈可變區包括精胺酸殘基於位置,絲胺酸殘基於位置54，異白胺酸殘基於位置56，天冬酸殘基於位置60及精胺酸殘基於位置72。因此於一個具體例中，本發明之抗體包括輕鏈，其中fe鏈之可變功能部位包括SEQ ID N〇:7 給定之序列。於另一個具體例中，本發明之抗體包括輕鏈，其中輕鏈之可變區包括與SEQIDN〇:7給定序列具有96%相同度之序列。於另一個具體例中，本發明之抗體包括輕鏈，其中輕鏈之可變區包括與SEQidn〇:7給定序列具有至少97 ' 98或99%相同度之序列。於一個具體例中，本發明之抗體包括重鏈，其中重 -13- 201238975 鏈之可變功能部位包括SEQ ID NO:9 (gH9)給定之序列。於另一個具體例中，本發明之抗體包括重鏈，其中重鏈之可變區包括與SEQ ID NO:9給定序列具有6〇。/0相同度之序列。於另一個具體例中，本發明之抗體包括重鏈，其中重鏈之可變區包括與SEq Π) NO:9給定序列具有至少 70%、80%、90%、95%、96、97、98 或 99%相同度之序列。於一個具體例中，本發明之抗體包括重鏈，其中重鏈之可變功能部位包括SEQ ID N〇:9給定之序列及輕鏈，其中該輕鏈可變區包括SEQ ID NO :7給定之序列。於本發明之另一個具體例中，該抗體包括一重鏈及一輕鏈，其中該重鏈可變功能部位包括於SEQ ID NO:9 給定之序列具有至少60%相同度或相似度之序列，及該輕鏈可變功能部位包括與SEQ id NO:7給定之序列具有至少9 6 相同度之序列。較佳地，該抗體包括—重鏈，其中該重鏈之可變功能部位包括與SEQ ID NO :9給定之序列具有至少 70%、80% ' 90%、95%、96%、97%、98 或99%相同度或相似度之序列及一輕鏈，其中該輕鏈之可變功能部位包括與SEQ ID NO:7給定之序列具有至少 96、97、98或99%相同度之序列。「相同度」用於此處指示於排齊序列中的任何特定位置，二序列間的胺基酸殘基為相同。「相似度」如此處使用指示於排齊序列之任何特定位置，在二序列間之胺基酸殘基屬於相似類別。舉例言之，白胺酸可取代異白胺酸或绳胺酸。常用來取代彼此的其它胺基酸包含但非 -14- 201238975 限於： -苯基丙胺酸、路胺酸及色胺酸（具有芳香族支鏈之胺基酸）； -離胺酸、精胺酸及組胺酸（具有鹼性支鏈之胺基酸）； -天冬酸鹽及麵胺酸鹽（具有酸性支鏈之胺基酸）； -天冬酿胺及麵胺（具有醯胺支鏈之胺基酸）；及 -半胱胺酸及蛋胺酸（具有含硫支鏈之胺基酸）。相同度及相似度程度容易計算（計算分子生物學，Lesk，A.M· 編輯’牛津大學出版社’紐約，1 9 8 8 ;生物計算’資訊及基因體§十畫’史密斯D.W.編輯，學術出版社，紐約 1 993 ;序列資料電腦分析，第1部分，Griffin, Α,Μ·及

Griffin，H.G.編輯’修瑪拿（Humana)出版社，紐澤西， 19 94 ;分子生物學之序列分析，v〇n Heinje，G，學術出版社1987 ;及序列分析引子，Gribskov，M.及Devereux， J_編輯’安斯同（M Stockton)出版社，紐約1 99 1) » 本發明之抗體分子可包括具有全長重鏈及輕鏈或其片段之完整抗體分子’諸如功能部位抗體例如V η、V L、 VHH、Fab、改性 Fab、Fab，、F(ab，）2、Fv 或 scFv 片段。其它抗體片段包含分別描述於W〇2〇〇9〇40562及 W02010035012 之 Fab-Fv 及 Fab_dsFv 片段。於一個具體例中’本發明之抗體片段係選自於由Fab、F ab，、F (ab，）2、 scFv及Fv片段所組成之組群。須瞭解本發明之抗體，特別為前述抗體片段可結合於其它机體格式，例如多重特異性抗體格式，諸如二_ 或三-特異性抗體格式，於該處一個特異性係由本發明之 201238975 抗體提供亦即針對IL-17A及IL-17F(包含IL-17A/F異質二元體）之特異性。多重特異性抗體格式之實施例包含二價、三價或四價抗體、Bis-scFv、二價抗體（diabodies)、三價抗體 (triabodies)、四價抗體（tetrabodies)、二價抗體（bibodies) 及二 4貝 4几體（tribodies)(例如參考 Holliger 及 Hudson， 2005,自然生技 23(9):1 126-1 136; Schoonjans 等人 20(H，生物分子工程’ 17(6)，1 93-202)。其它多重特異性抗體格式包含 Fab-Fv 、 Fab-dsFv 、 Fab-Fv-Fv 。 Fab-Fv-Fc 及 Fab-dsFv-PEG 片段，分別敘述於 W02009040562、 W02010035012、W02011/08609、W02011/030107 及 W0201 1/06 1492。本發明之抗體分子之恆定區功能部位若存在時可有關所提示的抗體分子功能做選擇，特別係就可能要求的效應物功能做選擇。舉例言之，恆定區功能部位可以是人類IgA、IgD、IgE、IgG或IgM功能部位。更明確言之’當抗體分子意圖用於治療用途且需要抗體效應物功能時，可使用人類IgG恆定區功能部位，特別為IgG1 及IgG3同型基因。另外’當抗體分子意圖用於治療目的而不要求抗體效應物功能時，例如單純用於阻斷IL_丄7 活性，則可使用IgG2及IgG4同型基因。須瞭解也可使用此等恆定區功能部位之序列變異體。舉例言之，可使用其中在位置24 1的絲胺酸已經改變成脯胺酸之IgG4分子’如描述於Angal等人’分子免疫學，1993，30(1)， 1 05-108。特佳為IgGl恆定功能部位。熟諳技藝人士也 -16- 201238975 須瞭解抗體可進行多種轉譯後修鋥产經當# &玉认^«七* 一又。此等修改之類型及枉度厶φ保取決於用來表現抗體 — 彼 ,,^,, 伤主細胞系及培養條件。此4修改可包含糖基化、蛋 ^ ,. . . 胺s夂氧化、二酮基哌啩形成、天冬酸鹽異構化及天冬醯胺去醯胺化之變化。常見之修改為由於羧基肽酶的作 F W長失竣基終端鹼性殘基 (諸如離胺酸及精胺酸)(說明於Η_，rj，層析術期刊紙129-134’1995)。因此’可能不存在有抗體重鏈之c 端離胺酸，諸如給定於第2(a)圖，seqidno:15。於一個具體例中，抗體重鏈包括CH1功能部位及抗體輕鏈包括CL功能部位，包含kappa或lambda。於較佳具體例中，本發明提供之抗體為對人類 IL-17A及人類IL-17F具有特異性之中和抗體，其中重鏈恆定區包括人類IgG 1恆定區。因此，本發明提供抗體其中重鏈包括或由SEQ ID NO: 15給定之序列組成（參考第 2a 圖）。於本發明之一個具體例中，抗體包括重鏈，其中該重鏈包括與SEQ ID NO: 15所給定之序列具有至少60% 相同度或相似度之一序列。較佳地，該抗體包括重鏈，其中該重鏈包括與SEQ ID NO: 15所給定之序列具有至少 7 0 %、8 0 %、9 0 % ' 9 5 %、9 6 %、9 7 %、9 8 % 或 9 9 % 相同度或相似度之一序列。於一個具體例中，本發明之抗體分子包括SEQ ID NO: 11給定序列之輕鏈（參考第1 d圖）。於本發明之一個具體例中，抗體包括輕鏈，其中該輕鏈包括與SEQ ID NO: 11所給定之序列具有至少60〇/〇 -17- 201238975 相同度或相似度之一序列。較佳地，該抗體包括輕鏈’ 其中該輕鏈包括與SEQ ID ΝΟ:11所給定之序列具有至少70%、80%、90%、95%或98%相同度或相似度之一序列。於一個具體例中，本發明提供一種抗體其中重鏈包括或由SEQ ID NO: 15給定之序列組成及輕鏈包括或由 SEQ ID ΝΟ:11給定之序列組成。於本發明之一個具體例中，抗體包括重鏈及輕鏈，其中該重鏈包括與SEQ ID NO: 15所給定之序列具有至少60%相同度或相似度之一序列及包括與sEQ ID NO: 11 給定之序列具有至少6 0 %相同度或相似度之一序列。較佳地’該抗體包括一重鏈，其中該重鏈包括與SEQ ID NO: 15所給定之序列具有至少70%、8〇%、90%、95%或 9 8 %相同度或相似度之一序列，及一輕鏈，其中該輕鏈包括與SEQ id ΝΟ:11給定序列具有至少70%、80%、 90%、95%或98%相同度或相似度之一序列。本發明之任何態樣之抗體分子較佳具有高度結合親和力’較佳為皮莫耳濃度。須瞭解依據本發明之抗體對人類IL-17A之結合親和力可與相同抗體對人類IL_i7F 及/或IL-17A/F異質二元體之結合親和力不同。於一個實施例中’本發明之抗體分子具有對IL-1 7 A之親和力係大於對IL-1 7F之親和力。於一個實施例中，本發明之抗體分子具有對IL-17A之親和力至少大於其對IL-17F之結合親和力的5倍》於一個實施例中’本發明之抗體分子具有對IL-ΠΑ之親和力係與其對IL-17F之親和力相 201238975 :;於;個實施例中’本發明之抗體分子具有對及L-1 7F二者之皮莫耳濃度親和力。親和力可使用技藝界已知之任— ^人《植適當方法測量， I 3拜爾蔻，描述於此處實施例壬妙、弋去z 〜里日守使用已分離的天…、、或重組IL-17A及IL-17F，二者係在爷'保存在為同質二元季父佳本發明之抗體分，，之結合親和力為50 ΡΜ或以下。於一個具體例中，丁本發明之抗體分 '、對IL_ 1 7Α之結合親和力為20 ρμ或以下。於一個具體例中，本發明之抗體分子具有對iL i7a之結合親和力為1〇 PM或以下。於一個具體例中，本發明之抗體分子八有對IL-17A之結合親和力為5 pM或以下。於一個具體例中，本發明之抗體分子具有對IL17A之結合親矛力為3_2pM或以下。較佳本發明之抗體分子具有對IL_17F之結合親和力為100 PM或以下。於一個具體例中，本發明之抗體具有對IL-17F之親和力為50 pM或以下。於一個具體例中，本發明之抗體具有對IL_17F之親和力為23 pM或以下。須瞭解本發明所提供之抗體親和力可使用技藝界已知之任一種適當方法變更。因此本發明係關於本發明之抗體分子之變異體，對IL_17A及/或IL-17F具有改良親和力。此等變異體可藉多種親和力成熟協定獲得，包含突變 CDR (Yang 等人，j.Mol. Biol., 254. 392-403, 1 9 9 5)，鏈穿梭（μ arks等人，生物/技術，过，7 7 9 - 7 8 3， 19 92) ’使用大腸桿菌（E c〇li)之突變種系（L〇w等人，j. -19* 201238975

Mol. Biol·，2iJL 359-3 68, 1996)，DNA 穿梭（Patten 等人， Curr. Opin. Biotechnol·，L 724-733, 1997)，噬菌體顯示 (Thompson 等人，J. Mol. Biol.，256. 77-88，1996)及性 PCR (Crameri 等人，自然，也，288-291 · 1998)° Vaughan %'人（參見上文）討論此等親和力成熟方法。若有所需，用於本發明之抗體可軛合至一或多個效應物分子。須瞭解效應物分子可包括單一效應物分子或二或多個此等效應物分子鏈接來形成單一部分可附接至本發明之抗體。當期望獲得抗體片段鏈接至效應物分子時’可藉標準化學或重組DNA程序製備，其中該抗體片段係直接地或透過偶合劑而鏈接至效應物分子。此等效應物分子耗合至抗體之技術為技藝界眾所周知（例如參考Hellstrom等人，控制藥物遞送，第2版，Robinson 4 人編輯 ’ 1987’ 623-53 頁，Thorpe 等人，1982，Immunol. Rev·，62:1 1 9-58 ;及 Dubowchik 等人，1999，藥理學及治療學，83，67-123)。特定化學程序例如包含 w〇 93/0623 1、WO 92/22583、WO 89/00195、WO 89/01476 及W00303 1581所述之化學程序。另外，當效應物分子為蛋白質或多肽時，可使用重組DNA程序達成鏈結，例如敘述於 WO 86/0 1 533 及 EP0392745。效應物分子一詞用於此處例如包含抗腫瘤劑、藥物、毒素、生物活性蛋白質例如酵素、其它抗體或抗體片段、合成或天然出現聚合物、核酸類及其片段例如 DNA、RNA及其片段、放射性核種、特別為放射性碘、放射性同位素、螯合金屬、奈米粒子及通報子基諸如螢 -20- .201238975 光化合物或可藉NMR或ESR光譜術檢測之化合物。效應物分子之實施例包含胞毒素及胞毒性劑包含任何對細胞有害（例如殺死）的任何作用劑。實施例包含康柏靜止素（combrestatins)、朵拉靜止素（dolastatins)、愛波席隆（epothilones)、史陶波林（staurosporin)、美坦席諾 (maytansinoids)、史邦靜止素（spongistatins)、喜佐金 (rhizoxin)、哈里康真（halichondrins)、羅瑞丁（roridins)、海米特林（hemiasterlins)、紫杉醇（taxol)、赛妥卡拉辛 (cytochalasin) B、葛米希定（gramicidin) D、溴化乙鏽 (ethidium bromide)、伊美庭（emetine)、米妥黴素 (mitomycin)、伊妥波賽（etoposide)、特諾波赛 (tenoposide)、文克斯丁（Vincristine)、文布斯丁 (vinblastine)、秋水仙素、多索比辛（doxorubicin)、道諾比辛（daunorubicin)、二羥基蒽環素二酮（dihydroxy anthracin dione)、米妥桑崇（mitoxantrone)、米沙黴素 (mithramycin)、愛提諾黴素（actinomycin) D、1 -去氫睪固酮I 、糖皮質激素、普羅卡因（procaine)、特查卡因 (tetracaine)、利度卡因（lidocaine)、波帕諾羅 (propranolol)、及普羅黴素及其類似物或其同系物。效應物分子也包含但非限於抗代謝產物（例如米索崔賽（methotrexate)、6-毓基嘌呤、6-巯基鳥嘌呤、喜塔拉賓（cytarabine)、5 -氟尿嘧啶、德卡巴金（decarbazine))、炫化劑（例如美克沙明（mechlorethamine)、席埃帕 (thioepa)、克蘭布喜（chlorambucil)、梅法蘭（melphalan)、卡木斯丁（carmustine)(BSNU)及洛木斯丁（lomustine) -2 1- 201238975 (CCNU)、賽克索法麥（cyclothosphamide)、布沙方 (busulfan)、二漠甘露糖醇、史托佐辛（streptozotocin)、米妥黴素 C、及順式-二氣二胺鉑（II)(DDP)(西鉑丁 (cisplatin))、蒽環素類（anthracyclines)(例如道諾比辛（前稱道諾黴素（daunomycin))及多索比辛）、抗生素類（例如達提諾黴素（dactinomycin)(前稱愛提諾黴素）、布里黴素 (bleomycin)、米沙黴素 '安沙黴素（anthramycin)(AMC)、卡里開徽素（calicheamicins)或杜卡黴素（duocarmycines)、及抗有絲分裂劑（例如文克斯丁及文布斯丁）。其它效應物分子可包含螯合放射性核種諸如111 In 及 90Y、Lu177、Bi213、Cf2 52、Ir192 及 w188/Re188;或藥物諸如但非限於烷基磷膽鹼類、拓樸異構酶I抑制劑、紫杉類及蘇拉明（suramin)。其它效應物分子包含蛋白質類、肽類及酶類。關注的酵素類包含但非限於蛋白質分解酵素' 水解酶、溶解酶、異構酶、轉移酶。關注的蛋白質類、多肽類及肽類包含但非限於免疫球蛋白類、毒素類諸如相思豆毒素、蓖麻毒素A、假單胞桿菌外毒素、或白喉毒素、蛋白質諸如騰島素、腫瘤壞死因子、α•干擾素、p_干擾素、神經生長因子、血小板衍生生長因子或組織胞質素原活化劑、血拴劑或抗血管新生劑，諸如血管靜止素（angi〇statin) 或内皮靜止素（endostatin)、或生物反應改性劑諸如淋巴激素、介白素-1 、介白素_2 (IL_2)、介白素_6 (IL_6)、顆粒球巨噬細胞群落刺激因子（gm_csf)、顆粒球群落刺激因子（G-CSF)、神經生長因子（NGF)或其它生 -22- 201238975 長因子及免疫球蛋白。其匕效應物分子可包含例如·5ρ田^^八哲叮4 用於私斷的可檢測物資。可檢測物質之實施例包含夂 ^ ^ 』I 3各種酵素類、修復基團、發光物質、發光物質、生物發光物f、放射活性核種、 1 25 13 1

In及正子發射金屬（用於正子發射斷層掃描術）、及非放射性順磁性金屬離子。大致上參考美國專利案第（Μ，· 號之金屬離子可軛合至抗生素用於診斷。此等酵素類包含辣根過氧化酶、鹼性磷酸酶、卜半乳糖苷酶、或乙醯基膽鹼酯酶；適當修復基團包含鏈絲菌抗生物素、抗生物素及生物素；適當螢光物質包含繳形酮、螢光素 '螢光素異硫氰酸酯、若丹明（rhodamine)、二氯三哜基胺螢光素、一曱基胺萘續醢基氣（dansyl chloride)及溪紅蛋白 (phycoerythrin);適當發光物質包含盧米諾（lurninol);適當生物發光物質包含蟲螢光素酶、蟲螢光素、及亞夸靈 (aequorin);及適當放射性核種包含 99Tc 〇於另一個實施例中，效應物分子可延長抗體於活體内的半生期，及/或減少抗體的免疫原性及/或提升抗體遞送通過表皮障壁至免疫系統。此類塑適當效應物分子之實施例包含聚合物、白蛋白、白蛋白結合蛋白質或白蛋白結合化合物諸如WOO5/1 17984所述。當效應物分子為聚合物時，通常可以是合成或天然聚合物，例如選擇性地經取代之直鏈或分支鏈聚伸烷基、聚烯或聚氧烯聚合物或分支或未分支多醣例如同質-或異質-多醣。 -23- 201238975 可存在於前述合成聚合物之特定選擇性取一或多個羥基、甲基或甲氧基。土 3 合成聚合物之特定實施例包含經選擇性取代之直鏈或分支鏈聚（乙二醇）' 聚（丙二醇）、聚（乙烯醇）或苴行生物，特別為選擇性經取代之聚（乙二醇）諸如甲氧基聚二醇）或其衍生物。 & 特定天然聚合物包含乳糖、戊糖、葡萄聚糖、肝糖或其衍生物。何生物」一詞用於此處意圖包含反應性衍生物，例如硫醇選擇性反應基諸如順了烯二醯亞胺^反應性基團可直接或透過鏈接子節段而鏈接至聚合物。須瞭解於某些情況下’此等基團殘基形成產品之一部分成為抗生素片段與聚合物間的鏈接基。聚合物大小可視需要改變，但通常係於平均分子大 J 500 Da 至 50000 Da’ 較佳 5000 至 40000 Da 及更佳 20000至40000 Da之範圍。聚合物大小特別係基於產品之期望用途選用，例如侷限在某些組織之能力諸如腫瘤或延長循環半生期（有關綜論參考Chapman，2〇〇2，進階藥物遞送综論’ 54，53卜⑷)。如此例如當產物意圖離開血循環及穿透組織時，例如用於腫瘤之治療，可優異地使用小分子量聚合物，例如具有約5000 Da之分子量。用於產品留在血循環之用途，優異地使用較高分子量聚合物’例如具有2〇〇〇〇 Da至40000 Da範圍之分子量。特佳聚合物包含聚伸烷基聚合物諸如聚（乙二醇）或特別為甲氧基聚（乙二醇）或其衍生物，特別具有約丄5〇〇〇 -24- 201238975

Da至約40000 Da範圍之分子量。於一個實施例中，用於本發明之抗生素係附接至聚 (乙二醇）（PEG)部分。於一個特定實施例中’抗體為抗體片段，PEG分子可經由位在於抗體片段之任何可用胺基酸支鏈或終端胺基酸官能基，例如任何自由態胺基、亞胺基、硫醇基、羥基或羧基。此等胺基酸可天然出現於抗體片段或可使用重組DNA方法經過基因工程處理進

入片段（例如參考 US 5,219,996; US 5,667,425; WO 9 8/2597 1)。於一個實施例中，本發明之抗體分子為改性 Fab片段，其中改性係添加一或多個胺基酸至其重鏈的c 終端來允許附接效應物分子。較佳地，額外胺基酸形成改性鉸接區含有一或多個半胱胺酸殘基，效應物分子圩附接至該殘基。多個位置可用來附接二 ^ / 較佳一分子係經由位在於抗體片：=二個半胱胺酸殘基的硫醇基而共價附接。附接片段之各個聚合物分子而共價鏈接。各個體片段之聚合物分子可共價鏈接至位在片二酸殘基的硫原子。共價鍵聯通“雙硫 +胱胺鍵。當硫醇基係用作為適备次特別為硫-甎時，例如可使用硫醇選擇性二=物分子的附接點及半脱胺酸衍生物。活性聚合物可=丁綿二酿亞胺改性抗體片段製備中之起始物料。乍=如前述聚合物有硫醇基之任何聚合物，，。活性聚合物可以是含醯胺、醯亞胺例如順丁稀二酿亞胺、乙：：，例如0 物。此4起始物料可於土钱或二瑞化、。〃上獲得（例如得自内克塔 -25- 201238975 (Nektar) ’前身為席爾瓦特聚合物公司（shearwater Polymers Inc·)’美國阿拉巴馬州漢茲維爾）或可從市售起始物料使用習知化學程序製備。特定PEG分子包含20K 甲氧基-PEG-胺（得自内克塔，前身為席爾瓦特；瑞波利莫（Rapp Polymere);及桑百歐（SunBi〇))及 M_PEG_SPA (得自内克塔，前名席爾瓦特）。於一個具體例中，抗體為經修改的Fab片段其為經 PEG化，亦即例如依據EP 0948544揭示之方法具有 PEG(聚（乙二醇））共價附接於其上[例如參考「聚（乙二醇）化學、生物技術及生醫應用」，1 992，J. Milton Harris(編輯）’普雷能出版社（Plenum Press)，紐約；「聚（乙二醇）化學及生物應用」’ 1997，J. Milton Harris 及 S. Zalipsky (編輯），美國化學會，華盛頓特區；及「生物軛合蛋白處用於生醫科學之偶合技術」，1998，M. Aslam及A.

Dent ’ 葛拉芙出版社（Grove Publisher)，紐約；chapman， A. 2002 ’進階藥物遞送綜論2002，54 : 53 1 -545]。於一個實施例中’ PEG係附接至鉸接區之半胱胺酸。於一個貫施例中’ PEG改性Fab片段具有於改性鉸接區共價鏈結至單一硫醇基的順丁烯二醯亞胺區。離胺酸殘基係共價鏈結至順丁烯二醯亞胺基，及離胺酸殘基的各個胺基可附接具有分子量約2〇,〇〇〇Da之曱氧基聚（乙二醇）二合物。因此附接至Fab片段的PEG總分子量約為4〇,〇叩 Da 〇於一個具體例中，本發明提供對人類IL_17A及人類 IL-17F具有特異性之中和抗體分子’其為改性片段 -26- 201238975 具有包括SEQ ID NO:9所給定之序列的重鏈及包括SEQ ID NO:7給定序列之輕鏈，其具有在其重鏈之C終端一個改性絞接區含有至少一個半胱胺酸殘基其上附接效應物分子。較佳地，效應物分子為PEG ’使用（WO98/2597 1 及W020〇4〇72116)所述方法附接，藉此離胺醯基-順丁烯二醯亞胺基係附接至重鏈C終端的半胱胺酸殘基，離胺酸殘基之各個胺基具有共價鏈接分子量約20，〇〇〇 Da的甲氧基聚（乙二醇）殘基。因此附接至抗體之PEG總分子量約為40,000 Da。於另一個實施例中’效應物分子可使用國際專利申請案 W02005/003169，W02005/003170 及 W02005/ 003 1 7 1所述方法附接至抗體片段。本發明也提供編碼本發明之抗體分子的重鏈及/或輕鏈之分離DNA片段。較佳地，DNA序列編碼本發明之抗體分子之重鏈或輕鏈。本發明之DNA序列可包括合成DNA，例如藉化學加工產生的合成DNA、cDNA、基因體DNA或其任一種組合。編碼本發明之抗體分子之DNA序列可藉熟諳技藝人士眾所周知之方法獲得。例如編碼部分或全部抗體重鏈及輕鏈之DNA序列ι a — > A + 吁N可攸所決定之DNA序列或基於相對應的胺基酸序列合成。編碼受體框架序尹丨夕 ΠΜ Λ -h -ktc. 2J. 4* 夕J之DNA為热諳技藝人士可宽卢利用’且方便基於复P 土十t丨人汽 /、已知胺基酸序列合成分子生物學標準技術可用夾制m Μ 求製備編碼本發明抗體分子之Λ 序列。期望的DNA戽而丨m + •I可使用券核苷酸合成技術完全合 -27- 201238975 成或h er & β位置取肖冑冑發生及聚合酶連 (P C R)技術可適當使用。鎖反應適當序列之實施你丨彳έ 列係提供於SEQ ID ΝΟ:8 . ςΡη π

ΝΟ:10； SEQIDN0:13; SPn τγλ Q D ，SEQ ID NO:14 ; SEQ id Nn ” _IDn〇:18a SEQidn〇 i9。 N〇:n’ 本毛明也係關於包括—或多個本發明之之選殖載體或表現載體。如此，提供包括-或多個：本發明抗體之職序列之選殖載體或表現載；個扁地，選殖載體或表現載體包括兩個腿序：抗體分子之輕鏈及重鏈分別連同適當信號序列本：地，依據本發明之載體包括SEQ ID NO:14及SE〇\n N〇:1 8、給定之序列。於-個具體例中，依據本發明之向重包括SEQ ID NO: 13及SEQ ID NO: 17給定之序列。可組成載體之一般方法、轉染方法及培養方法為熟诸技藝人士眾所周知。就此方面而言，可參考「分子生物學之目前協定」，1 999, F.M· Ausubel(編輯），1利科技公司（Wiley lnterscience)，紐約及馬尼亞提（Μ&η^^) 手冊’冷泉港出版社出版。也提供包括一或多個選殖或表現載體之宿主細胞，該載體包括編碼本發明抗體之一或多個DNA序列。任何適當佰主細胞/載體系統皆可用於表現編碼本發明之抗體分子之DNA序列。細菌性系統諸如大腸桿菌及其它微生物系統可使用’也可使用真核，例如哺乳動物、宿主細胞表現系統。適當哺乳動物宿主細胞包含Ch〇、骨髓瘤或融合瘤細胞。本發明也提供一種用以製造依據本發明之抗體分子 -28- .201238975 之方法，包括於適合導引您铯丨攸、.扁碼本發明之抗體分子 DNA表現蛋白質的條件下，+立莫A丄 i。養含有本發明載體之宿細胞，及分離抗體分子。抗體分子可只包括重赫七々里鍵或鉍鏈多肽，於該種情下，只需使用編碼重鏈戎鈿如夕 4 1鍵多肽序列來轉染宿主胞。為了製造包括重鏈及細处哎次每鏈之產物，細胞系可以兩載體轉染’第一載體編碼輕絲夕队β时 ^拉鏈多肽及第二載體編碼重多肽。另外’可使用單—葡邮 ^ ^ Α 載體’該載體包括編碼輕鏈重鏈多肽序列。因本發明之抗體可用於治療及/或預防病理狀況，發明也提供-種醫藥或診斷組成物包括本發明之抗體子組合醫藥上可接受之賦形劑、稀釋劑或載劑中之一多者。如此，提供依據本發明之抗體用於製造藥物之途。組成物通常也可呈無菌醫藥組成物之一部分供給該組成物通常包含醫藥上可接受之載劑。本發明之醫組成物可額外地包括醫藥上可接受之輔劑。本發明也提供一種製備醫藥或診斷組成物之方法包括添加及混合本發明之抗體分子與醫藥上可接受之形劑、稀釋劑或載劑中之一或多者。抗體分子可以是醫藥或診斷組成物中之唯一活性分’或可以伴隨有其它活性成分包含其它抗體成分諸抗TNF、抗IL-Ιβ、抗τ細胞、抗ΙρΝγ或抗Lps抗體或非抗體成分諸如黃嘌呤類或小分子抑制物。醫藥組成物較佳包括治療上有效量之本發明抗體如此處使帛「治療上有效量」一詞係指需要用來治療之主況細種鏈及本分或用藥賦成如 -29- 201238975 改善或預防目標疾病或病況，或具有可檢測治療效果或預防效果之數量。針對任何抗體，治療上有效量初步可在細胞培養檢定分析或在動物模型特別在齧齒類、兔類、犬類、豬類或靈長類估計。動物模型也可用來決定 j當投藥濃度範圍及投藥途徑。此等資訊然後可用來決定投予人類之有用劑量及途徑。用於人類之精確治療上有效量係取決於病況嚴重程度、個體之一般健康狀況、個體之年齡、體重及性別、 =食' 投㈣間及頻率、藥物組合物、反應敏感度及對療之耐叉性/反應。此種量可藉例行實驗決定，且係在臨床醫師的判定範圍。通常治療上有效量係於〇〇1毫克千克至50毫克/千克，較佳〇1毫克/千克至毫克/千克之範圍。醫藥組成物彳方便地以每劑含有㉟定量之本發明活性劑之單位劑型形式呈現。、.且成物可個別地投予病人或可組合（例如同時、循序或分開）連同其它藥劑、藥物或激素投予。本發日月之抗ϋ分子之齊彳量係取決於欲治療之病況的質、所存在的發炎程度以及抗體分子係用於預防或治療既存的病況而投予。 '哈樂頻率將取決於 ^間。若抗體分子的半生期短（例如2小時至ig小時），生：曰需給予一劑或多劑。另外，若抗體分子具有長半劑貝“要母曰投予-劑、每週- 飞甚至母一或兩個月投予一次。醫樂上可接受之載劑本身不應誘導對接受該組成物 -30- 201238975 的個體有害的抗體產生也不應有毒。適當載劑可以型代謝緩慢的巨分子諸如蛋白質類、多肽類、微脂啦多膽類、聚乳酸類、聚乙醇酸類、聚合物胺基酸類基酸共聚物類及無活性病毒粒子。可使用醫藥上可接受之鹽類，例如無機酸鹽類氫氣酸鹽類、氫溴酸鹽類、磷酸鹽類及硫酸鹽類、機酸鹽類諸如乙酸鹽類、丙酸鹽類、丙二酸鹽類及酸鹽類。於治療組成物中之醫藥上可接受之載劑可額外液體諸如水、食鹽水、甘油及乙醇。此外，輔助物如濕潤劑或乳化劑或pH緩衝物質可存在於此種物。此等載劑允許將醫藥組成物調配成錠劑、丸粒糖衣錠、膠囊劑、液劑、凝膠劑、糖漿劑、漿液劑浮液劑，用於由病人口服攝食。較佳投藥形式包含適合腸道外投藥例如藉注射注例如藉大劑量注射或連續輸注投藥形式。當產物於注射或輸注時’可呈於油性或水性載媒劑之懸劑、溶液劑或乳液劑劑型，且可含有配方劑諸如懸浮保藏劑、安定劑及/或分散劑。另外，抗體分子可呈劑型用來於使用前以適當無菌液體調配。一旦調配時，本發明組成物可直接投予個體。療之個體可以是動物。但較佳組成物適合投予人類拖本發明之醫藥組成物可藉任何途徑投予，包含限於經口、經靜脈、肌肉、動脈内、髓内、勒内、室穿皮、經皮（例如參考WO 98/20734)、皮下、腹内、| 是大 L類、、胺諸如或有苯曱含有質諸組成劑、及懸或輸係用浮液劑、乾燥欲治】體。但非内、内、 -31 - 201238975 腸道、局部、舌下、陰道内或直腸途徑。喷霧劑來投予本發明之醫藥組成物。典蜇地’治療性組製備成注射劑，注射劑可以是溶液劑或懸浮液劑製備適合在注射前溶解於或懸浮於液體載媒劑之型。組成物之直接遞送通常係藉注射包含皮下注内注射、靜脈注射或肌肉注射，或遞送至組織的間達成。組成物也可投予病灶。治療劑量可以是程·或多劑療程。須瞭解組成物内之活性成分將為抗體分子。對於在胃腸道之分解敏感。如此，若組成物係欲過胃腸道途徑投予，則組成物將須含有免於抗體虽組成物已經從胃腸道吸收時將釋放出抗體的作醫藥上可接受之載劑的徹底瞭解可於雷明頓本（麥克出版公司，紐澤西州1 9 9 1年）獲得。於一個具體例中，調配物係提供為包含吸入投藥配方。適當吸入製劑包含吸入性散劑、含有推進劑叶ΐ式喷霧劑、或從推進劑氣體釋放出之吸入劑。依據本揭示之吸入性散劑含有活性物質可以有前述活性物f，或前述活性物質與生理上可接形劑之混合物。此等吸入性散劑可包含單醣(例如葡萄糖或糖）、雙醣類（例如乳糖、蔗糖、麥芽糖）、寡醣及如葡萄聚糖）、多元醇類（例如山梨糖醇、甘露糖也可用成物可。也可固體劑射、腹間質空單劑療如此，使用經分解但用劑。製藥科之局部氣體之性溶液單獨含受之赋阿拉伯备醣（例醇、木 -32- 201238975 糖醇）、鹽類（例如氣化鈉、碳酸或此等彼此、泥合物。單聰類及雙醣類適合使用，乳糖或葡萄糖特別1曰非互斥地以其水合物形式使用。沈積於肺臟的粒子要求粒子大小小於10微米，諸如 1至9微米，例如〇.丨至5微米，特別為！至5微米。性成分（例如抗體或片段）之粒子大小特別重要。可用來製備吸入性噴霧劑之推進劑氣體為技藝界已知。適當推進劑氣體係選自烴類諸如正丙烷、正丁斤或異丁烷及鹵化烴類諸如曱烷、乙烷、丙烷、丁垸、= 丙烧或裒丁院之氣化及/或氟化衍生物。前述推進$ S 可以其本身或以其混合物使用。軋體特別適當之推進劑氣體為選自於TGll、TGi2、

13 4a及TG227之鹵化烷衍生物。前述鹵化烴類中，、G TG134a (I1，1，2.四氣乙烷）及 TG227 (1，1，1，2,3,3 3- 乂丙烷）及其混合物為特別適當。，，-七氟含推進劑氣體之適當喷霧劑也可含有其它成分諸共溶劑、安定劑、表面活性劑(界面活性劑）、抗氧。潤滑劑及調整PH之手段。全部此等成分皆為技藝〇丨匕有至例如 2%重 10/〇重依據本發明含推進劑氣體之吸入性喷霧劑可含夕5 /〇重里比活性成分。依據本發明之噴霧劑含有 0/02至5%重量比、〇〇1至3%重量比，〇〇15至量比’ 0,1至2%重量比，0.5至2%重量比或〇·5至量比活性成分。另外，局部投予肺臟也可利用液體溶液劑或懸浮液 -33- 201238975 劑配方投予，例如採用裝置如喷霧器，例如連結至壓縮機的噴霧器（例如連結至沛銳呼吸設備公司（Pari Respiratory Equipment，Inc.)，維吉尼亞州里奇蒙製造的沛銳麥特（Pari Master)壓縮機的沛銳LC-傑特普拉 (LC-Jet Plus)喷霧器）。本發明之抗體可分散於溶劑例如呈溶液劑型或懸浮液劑型投予。本發明抗體可懸浮於適當生理溶液例如時鹽水或其它藥理上可接受之溶劑或緩衝溶液。技藝界已知之缓衝溶液每1毫升水可A含有〇 05毫克至〇.15毫克EDTA二鈉，8·0毫克至9.0毫克NaCl，0.15毫克至 0.25毫克波利索貝（p〇lys〇rbate)、〇 25毫克至〇川毫克無水才寧才蒙酸，乃η 4 s直· ju — • 宅克至〇·55毫克檸檬酸鈉，因而達 5 · 〇之Ρ Η。懸浮劑例如可採用凍乾抗體。本發明之治療性懸浮液或溶液配方可含有一或多種賦形劑。賦形齋丨成枯蔽一 _ ^ 為技衣界眾所周知及包含緩衝劑（例如檸檬酸鹽緩衝劑、$样睡緩衝劑、π 緩衝劑、乙酸鹽緩衝劑及碳酸氫 ®緩询劑）、胺某醯錮蛋白質類_ 醇類、抗壞血酸、磷脂類、

皮曰貞類（例如灰清白I 甘露糖醇, ）、EDTA、氣化納、微脂粒、 I路螗知、山梨糖醇、及膠於微脂粒或可生物 ’。劑或心洋液劑可包造方法以實質上無g形式提供。 _無菌氣液滅菌，抗體慮用於配方之經緩衝的溶劑/溶該配方藉熟諸技：人於無菌緩衝溶劑溶液，及將攸锞本文所揭示之 ° ^ 贺霧配方例如可提供為包 -34- 201238975 鋁箔包内的單一劑量（例如密封塑膠容器或小瓶）。各小瓶含有例如2毫升體積溶劑/溶液緩衝劑之單位劑量。此處揭示之抗體可適合經喷霧遞送。也涵盍本發明抗體可使用基因治療投予。為了達成此項目的，於適當DNA成分控制下，編碼抗體分子之重鏈及輕鏈的DNA序列可導入病人，使得抗體鏈從dna 序列表現及原位組裝。本發明也提供用於控制發炎疾病之抗體分子。較佳地，抗體分子可用來減少發炎過程或預防發炎過程。本發明也提供本發明之抗體分子用於治療或預防由 IL-17A及/或IL_17F所媒介或與IL_nA及/或江—pF之升高濃度相聯結的病理症狀。較佳地，病理狀況係選自於由下列所組成之組群：感染（病毒性、細菌性、真菌性及寄生蟲性）、感染相聯結的内毒性休克、關節炎、類風 =性關節炎、乾癖性關節炎、系統性發作幼年型自發關郎炎（JIA)、系統性紅斑性狼瘡（SLE)、&喘、慢性阻塞性啤吸道疾病（C〇AD)、慢性阻塞性肺病（c〇pD)、急性肺損傷、骨盆發炎疾病、阿兹海默氏病、克隆氏病、發炎性腸病、腸躁症、潰瘍性大腸炎、卡色門氏(castie_，s) :、僵直性脊椎炎及其它脊椎關節病、皮肌炎、心肌炎、 :萄膜炎、凸眼症、自冑免疫性甲狀腺炎、佩羅尼氏 (e:e，S)病、腹腔病、膽囊病、藏毛病、腹膜炎、乾二-位性皮炎、血管炎、手術性沾黏、中風、自體免疫性糖尿病、第一型糖尿病、萊姆柢爲· 關即炎、腦膜炎 '中及周邊神經系統之免疫媒介的發炎病症諸如多發性硬 -35- 201238975 化症及吉蘭-巴利症候群、其它自體免疫病、胰腺炎、創傷（手術）、移植物抗宿主病、移植排斥、纖維化病症包含肺纖維化、肝纖維化、腎纖維化、硬皮病或系統性硬化症、癌症（實體腫瘤諸如黑素瘤、肝母細胞瘤、肉瘤、鱗狀細胞癌、移行細胞癌、卵巢癌及血液惡性病及特別為急性骨髓性白血病、慢性骨髓性白血病、慢性淋巴細胞性白血病、胃癌及大腸癌）、心臟病包含缺血性疾病諸如心肌梗塞以及動脈粥狀硬化症、血管内凝血、骨質再吸收、骨質疏鬆症、牙周炎及胃酸過少。於一個具體例中，本發明之抗體係用於選自於由下列所組成之組群之病理病症·的治療或預防：關節炎、類風濕性關節炎、乾癬、乾癬性關節炎、系統性發作幼年型自發關節炎（JIA)、系統性紅斑性狼瘡（SLE)、氣喘、慢性阻塞性呼吸道疾病、慢性阻塞性肺病、異位性皮膚炎、硬皮病、系統性硬化症、肺纖維化、發炎性腸病、僵直性脊椎炎及其它僵直性關節病變及其它脊椎關節病變及癌症。於一個具體例中，本發明之抗體係用於選自於由下列所組成之組群之病理病症的治療或預防：關節炎風濕性關節炎、乾癖、乾癖性關節炎、系統性發作幼型自發關節炎（JIA)、系統性紅斑性狼瘡（Sle)、$山氣喘、慢性阻塞性呼吸道疾病、慢性阻塞性肺病、異位、『生膚炎、硬皮病、系統性硬化症、肺纖維化、克隆氏病瘍性大腸炎、僵直性脊椎炎及其它僵直性關節病變及$ 它脊椎關節病變及癌症。 ^ -36- 201238975 於一個具體例令，本發明之抗體係用於選自於连列所組成之組群之病理病症的治療或預防：關節炎、風濕性關節炎、乾癬、乾癣性關節炎、系統性發作幼型自發關節炎（JIA)、系統性紅斑性狼瘡（SLE)、氣喘慢性阻塞性呼吸道疾病、慢性阻塞性肺病、異位性皮炎、硬皮病、系統性硬化症、肺纖維化、克隆氏病、瘍性大腸炎、僵直性脊椎炎及其它僵直性關節病變及它脊椎關節病變及癌症。於一個具體例中，該病理病症為類風濕性關節炎於一個具體例中，該病理病症為克隆氏病。於一個具體例中，該病理病症為潰瘍性大腸炎。於一個具體例令，本發明之抗體係用於治療發炎免疫相關疾病。於一個實施例中，該發炎或免疫相關病係選自於由類風濕性關節炎、克隆氏病及潰瘍性大炎所組成之組群。本發明也提供依據本發明之抗體分子用於疼痛，別為發炎引發之疼痛之治療或預防。 —本發明進一步提供依據本發明之抗體分子用於製藥物之用途，s亥藥物係用於由il_i7a及/或所 ”或由IL-17A及/或IL_17F之濃度升高所引發之病理症的，。療或預防。較佳地，病理病症為前述醫療情況之者。本發明進—步提供依據本發明之抗體分子用製造疼痛特別為發炎弓丨益^+ 人引發疼痛之治療或預防用藥物之途0 本叙明之抗體分子可用於期望減少il_17a及/ 下類年 \ 膚潰其或疾腸特造媒病中於用或 -37- 201238975 IL-17F於人體或動物體影響的任一種治療。IL_17A及/ 或IL- 1 7F可在體内循環或可能以非期望的高濃度局部存在於身體特定位置，例如發炎部位。依據本發明之抗體分子較佳係用於控制發炎疾病、自體免疫疾病或癌症。本發明也提供一種治療患有或有風險由IL_丨7 A及/ 或IL -1 7 F所媒介之病症之人體或動物體。該方法包括對該個體投予有效量之本發明抗體分子。依據本發明之抗體分子也可用於診斷，例如涉及 IL-17A及/或IL-17F之疾病狀態之活體内診斷及成像。進一步於下列實施例參考附圖舉例說明本發明，附圖中：第1圖 a) 抗體CA02 8_49 6g3之輕鏈可變區（SEQ ID NO:7) b) 抗體CA028_4 96g3之重鏈可變區（SEQ ID NO:9) c) 抗體 CA028_496g3 之 CDRH1 (SEQ ID ΝΟ:1)、 CDRH2 (SEQ ID NO:2) ' CDRH3 (SEQ ID NO:3) ' CDRL1 (SEQ ID NO:4)、CDRL2 (SEQ ID NO:5)、 CDRL3 (SEQ ID NO:6)。 d) 抗體 CA028_496g3 之輕鏈（SEQIDNO:ll) e) 抗體 CA028_496g3 之輕鏈含信號（SEQ ID NO:12) 第2圖 a) 抗體 CA028_496g3 之重鏈（SEQ ID NO:15) b) 抗體 CA028_496g3 之重鏈含信號（SEQ ID NO:16) c) DNA編碼抗體CA028_496g3之輕鏈（無信號序 -38- 201238975 列）（SEQ Π) NO:⑺ 第3圖 a) DNA編碼抗體cA028_496g3之輕鏈含信號序列 (SEQ ID N〇：l4) b) DNA編碼抗體CA028_496g3之輕鏈可變區（SEQ ID NO :8) c) DNA編碼抗體cA028_496g3之重鏈可變區（SEQ ID NO: 10) 第4圖：DNA(包含外顯子）編碼抗體CA028_496g3之重鏈不含信號序列（SEQ ID NO: 17) 第5圖：DNA編碼抗體CA〇28_496g3之重鏈含信號序列及外顯子（SEQ ID NO: 18) 第6圖：cDNA編碼抗體CA028一496g3之重鏈含信號序列（SEQ ID NO:19)。第7圖：抗體CA028_04 96 (圖說中標示為496gl)及 CA02 8 —004 96.g3(圖說中標示為496.g3)對人類 IL-17F誘導從Hela細胞製造IL-6之效果。實施例1 :結合IL-17A及IL-17F之改良式中和抗體之製造抗體CA028_0496之分離及人類化先前已經描述於

W02008/047134 中。CA028_0496 為結合 IL-17A 及 IL-17F 一者之人類化中和抗體’包括已接枝可變區gL7及gH9, 其序列係提供於W02008/047134中。重鏈受體框架為人類種糸序列VH3 1-3 3- 07’具有來自人類JH區種系jh4 之此一部分的框架4。輕鏈受體框架為人類種系序列VK1 2-l-(l)L4，具有框架4係來自人類JK-區種系JK1之此 -39- 201238975 一部分。抗體CA028_00496具有成熟親和力來改良抗體對 IL-17F之親和力同時保有對iL_17A之親和力。與抗體 CA028_004 96相反，稱作為cA02 8_00496.g3之親和力成熟抗體係表現為IgGl而非IgG4。基因經改性來藉寡核苷酸指導突變發生產生親和力成熟型。親和力成熟輕鏈可變區（gL57)基因序列係次選殖入uCB Celltech人類輕鏈表現載體ρΚΗΙΟ.1，其含有編碼人類c-κ恆定區之 DNA(Km3別型）。未經變更的重鏈可變區（gH9)序列係次選殖入UCB赛泰克表現載體pvhgl FL，其含有編碼人類重鏈γ-1怪定區之DNA。質體係使用製造商使用說明書InVitrogen，型錄號碼 1 1 668)使用里波菲它明 (Lipofectamine) 2000程序共同轉染入CHO細胞。抗體CA028_00496.g3之親和力成熟可變區之最終序列係列舉於第1 a及lb圖。於抗體CA028_〇〇496 g3 中，重鏈可變區係與親代抗體CA028 —00496之重鏈可變區相同。相反地，輕鏈可變區差別5個胺基酸。抗體 CA028 — 00496與抗體CA028_00496.g3間輕鏈差異的5 個殘基在第1 a圖中下方晝線。實施例2 :拜爾蔻（BIACORE) 如後文說明’檢定分析格式係藉制動化抗人IgG 特異性抗體捕捉抗體CA028_00496.g3，接著於所捕捉的表面上滴定人類IL-17A及人類IL-17F。生物分子互動分析係使用拜爾蔻3000 (拜_缝公司）進行。檢定分析係於2 5 °C執行。親和純質f(ab，）2片丰a -40- 201238975 山羊抗人類IgG Fc特異性（捷克森免疫研究公司（Jacks〇n ImmunoResearch))係透過胺偶合化學而制動於CM5感測器晶片（拜爾蔻公司）上至約6〇〇〇反應單位（Ru)程度。

HBS-EP 缓衝液（1〇 mM HEPES pH7.4,0.15MNaCl，3 mM EDTA’ 0.005%界面活性劑P2〇，拜爾蔻公司）用作為流動緩衝液，流速為1 〇微升/分鐘（min)。注入i 〇微升濃度 0.5微克/毫升之CA028一00496.g3係用來藉制動抗人類 IgG Fc捕捉。人類il-].7A (於業界由UCB產生）係以30 微升/分鐘之流速歷經3分鐘時間從5 nM而於所捕捉之 CA028 —00496.g3上滴定，接著為20分鐘溶解。人類 IL-17F(R&D系統公司）係於CA028_00496.g3上滴定，從 1 0 nM以30微升/分鐘流速歷經3分鐘接著為5分鐘溶解。藉庄入10微升40mMHCl接著為注入5微升5mM NaOH而以1 〇微升/分鐘流速再生表面。表！CA028_4 96.g3對人類IL-17F及IL-17A之親和力 ka Icd(s·') (M) K3>(pM)~| hIL-17F 2.49E+06 8.74E-05 3.51E41 35 3.49E+06 5.0SE-05 Ϊ.46Ε-11 15 hIL-17A 4.66Ε+06 2.04E-05 4.38E-12 4.4 4.52Ε+06 8.66E-06 1.92E-12 1.9 扣除結合曲線之雙重參考背景係遵照標準程序使用 BIA 評估軟體（BIAevaluation software)(4.1 版）分析。動態參數係從匹配演算法決定。資料詳細列舉於表1，平 -4 1- 201238975 均值以灰色表示。針對原先抗體CA028_0496結合IL-17A所決定之親和力值為16 pM，而針對IL-17F決定為1750 pM。相反地，改良抗體CA028_0496 g3具有對IL-17A之親和力為

3·2 pM 及對 IL-17F 為 23 pM。抗體 CA028_0496 對 IL-17F 之親和力改良70倍而不減低抗體對IL-1 7A之親和力。實際上對IL-17A之親和力增加。 CA028 — 0496 g3 針對 IL-17A/F 異質二元體（如 W02008/047 134所述製造）之親和力也改良，於該處親和力發現為26 pM(資料未顯示）。實施例3 CA028_00496.gl(先前描述於 W02008/047 1 34)及 CA028 —00496.g3用於中和人類IL-17F之強度係使用 HeLa細胞生物檢定分析決定。HeLa細胞係得自 ATCC 的細胞存庫（ATCC CCL-2)。細胞生長於補充有1 〇%胎牛血清、青黴素（penicillin)、健它黴素 (gentamycin)及麵胺之杜別可（Dulbecco)改性鷹式（Eagle)培養基（DMEM)。 1X 104個細胞接種於9 6孔平底組織培養孔板内。細胞培養隔夜，於檢定分析緩衝液内洗一次。HeLa細胞係在不等濃度之抗體存在下使用人類IL-17F(125奈克/毫升）及腫瘤壞死因子-α (TNF-α) (1奈克/毫升）之組合刺激48小時。於HeLa細胞系中，IL-17F與TNF-a協力而誘導IL-6 的製造，可使用特定M S D檢定分析套件組加以量化。所分泌的IL-6數量係使用美索（Meso)尺規發現（Scale Discovery) (MSD)檢定分析技術測量及計算ic50值。 -42- 201238975 CA028_00496.gl 及 CA028_00496.g3 於 HeLa 細胞檢定分析（第7圖）中測量顯示劑量相依性對IL -1 7 F生物活性< 抑制作用。於HeLa檢定分析中，CA028_00496.gl及 CA028_00496.g3之活性係表示為要求抑制50% IL-17J? 活性需要的劑量（IC5〇)。CA028_00496.gl之ic5〇為92毫克/毫升及CAO 496.g3之IC5G為4奈克/毫升。如先前於 W02008/047134 中對 CA028_00496.gi 所述，CA028_00496.g3中和IL-17A之能力係使用相同檢定分析證實，其中IL-17F係以IL-17A置換（資料未顯示）。【圖式簡單說明】 ' ° 進一步於下列實施例參考附圖舉例說明本發明， n 附圖中：第1圖 a) 抗體CA028_4 96g3之輕鏈可變區（SEQ ID N〇:7) b) 抗體CA028_4 9 6g3之重鏈可變區（SEQ ID N〇:9) c) 抗體 CA028 —496g3 之 CDRH1 (SEQ ID Ν〇.ι)、 CDRH2 (SEQ ID NO:2)、CDRH3 (SEQ ID N〇:3)、 CDRL1 (SEQ ID NO:4)、CDRL2 (SEQ ID n〇:5)、 CDRL3 (SEQ ID NO:6)。 d) 抗體 CA028_496g3 之輕鏈（SEQIDNO:U) e) 抗體 CA02 8_49 6g3 之輕鏈含信號（SEQ ID N〇:i2) 第2圖 a) 抗體 CA028_496g3 之重鏈（SEQ ID N0:15) b) 抗體 CA028_496g3 之重鏈含信號（SEQ ID N〇:16) c) DNA編碼抗體CA028—496g3之輕鏈（無信號序 -43- .201238975 列）（SEQ iD n0:13) 第3圖 a) DNA編碼抗體CA〇28-496g3之輕鏈含信號序列 (SEQ ID Ν〇： Η) b) dna編碼抗體CA028-496g3之輕鏈可變區（SEQ ID NO:8) c) DNA編蝎抗體cA〇28_496g3之重鏈可變區（seQ ID NO:10) 第4圖：DNA(包含外顯子）編碼抗體CA028_496g3之重鏈不含信號序列（SEQ ID NO: 17) 第5圖：DNA編碼抗體CA028_496g3之重鏈含信號序列及外顯子（SEQ ID NO: 18) 第6圖：cDNA編碼抗體CA028_496g3之重鏈含信號序列（SEQ ID NO: 19)。第7圖：抗體CA028_0496(圖說中標示為 496gi)及 CA028 —00496.g3(圖說中標示為496.g3)對人類 IL-17F誘導從Hela細胞製造IL-6之效果。【主要元件符號說明】無0 -44- 201238975 序列表 <110> UCB Pharma S.A. Adams, Ralph

Baker, Terence Lawson, Alastair <120>結合IL-17A及IL-17F之抗體分子 <i30> G0141 <160> 19 <170> Patentln version 3.5 <210> 1 <21i> 10 <212> PRT <213>人造 <220> <223> CDRH1 <400> i

Gly Phe Thr Phe Ser Asp Tyr Asn Met Ala 1 5 10 <210> 2 <211> 17 <212> PRT 人造 1 <220> <223> CDRH2 <400> 2

Thi* lie Thx Tyr Glu Gly Arg Asn Tin· Tyr Tyr Arg Asp Ser Val Lys 1 5 10 15

Gly <210〉 3 <211〉 16 <212> PRT <213>人造 <220> <223> CDRH3 201238975 <400> 3

Ro Pro Gin Tyr Tyr Glu Gly Ser lie Tyr Ar£ Leu Tip Phe Ala His I 5 10 15 <210> 4 <21 i> π <212> PRT <213>人造 <220> <223> CDRL1 <400> 4

Arg Ala Asp Glu Ser Val Arg Thr Leu Met His 1 5 10

<210> 5 <211> 7 <2i2> PRT <213>人造 <22〇> <223> CDRL2 <400> 5

Leu Val Ser Asn Ser Glu He <210〉 6 <211> 9 <212> PRT <213；>人造 <220> <223> CDRL3 <400> 6

Gin Gin Thr Trp Ser Asp Pro Trp Thr 1 5 <2i0> 7 <211> 107 <212> PRT <2D>人造 <220> <223〉輕鏈可變區 201238975 <400> 7

Ala lie Gin Leu Tiu Gin Sex Ro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 15 10 15

Asp Ai-g Val Ή«· He Thr Cys Arg Ala Asp Glu Ser Val Arg Thr Leu 20 25 30

Met His Tip Tyr Gin Gin Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu lie 35 40 45

Tyr Leu Val Ser Asn Ser Glu lie Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser Gly 50 55 60

Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Arg Leu Thr De Ser Ser Leu Gin Pi〇 65 70 75 80

Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gin Gin Thr Trp Ser Asp Pro Trp 85 90 95

Thr Phe Gly Gin Gly Thr Lys Val Glu De Lys 100 105

<210> S <211> 321 <212> DNA <2D> DNA編碼輕鏈可變區 <220>

<223> CDR <400> 8 60 120 180 240 300 gccatccagc tgacccagag cccttcctct ctcagcgcca gtgtcggaga cagagtgact attacctgca gggctgacga aagcgtgaga acattgatgc actggtacca acagaagcct ggcaaagccc ccaagctcct gatctatctg gtttccaatt cggagattgg agtccccgac aggttcagcg gcagtgggtc tggaactgac tttcgcctga caatctcctc actccagccc gaagatttcg ccacctacta ttgccagcag acttggagcg acccttggac atttggacag ggcacaaaag tggagatcaa g 321 <210> 9 <211> 125 -3 - 201238975 <212> PRT <213>人造 <220> <223>重鏈可變區 <400> 9

Glu Val Gin Leu Val GIu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gin Pio Gly Gly 15 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Tlir Phe Ser Asp Tyr 20 25 30

Asn Met Ala Trp Val Arg Gin Ala Pio Gly Lys Gly Leu GIu Trp Val 35 40 45

AlalhxBem-TVrGluGlyAr.AsnTl.TvrTyrArgAspSer^

Lys Gly Ai*g Phe Tlir lie Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr 65 70 75 80

Leu Gb Met Asn Ser I-eu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95

Ala Ser Pro Ro Gin Tyr Tyr Glu Gly Ser lie Tyr Arg Leu Ttp Phe m 105 110 A]a His TVp Gly Gin Gly Thr Leu Val Ttn· Val Ser Se+r. 115 120 125 <210> 10 <211> 375 <212> DNA <2i3>人造 <220> <223> DNA編碼重鏈可變區 <400> 10 gaggttcagc tc£ttgaatc cggaggcgga ctcgtgcagc ctgggggctc cttgcggctg 60 agctgcgctg ccagtggctt cactttcagc gattacaata tggcctgggt gcgccaggcc 120 ccaggcaagg gtctggagtg ggtggccaca attacctatg agggcagaaa cacttattac 180 201238975 cgggattcag igaaagggcg atttaccatc agcagggata atgcaaagaa cagtctgtac 240 ctgcagatga actctctgag agctgaggac acc£ctgtct actattgtgc aagcccaccc 300 cagtactatg agggctcaat ctacagattg tggtttgccc attggggcca gggaacactg 360 gtgaccgtct cgagc 375

<210> 11 <211> 214 <212> PRT <213>人造 <220> <223> 抗體 CA028_496g3 之輕鏈 <400> 11

Ala Ee Gin Leu Thr Gin Sei· Pro Sei· Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly L 5 10 15

Asp Arg Val Thr De Thr Cys Arg Ala Asp Glu Ser Val Ai-g Thr Leu 20 25 30

Met His Tip Tyr Gin Gin Lys fto Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ue 35 40 45

Tyr Leu Val Ser Asn Ser Glu He Gly Val Pro Asp Ai-g Phe Ser Gly 50 55 60

Ser Gly Ser Gly Thi· Asp Hie Arg Leu Thr De Ser Ser Leu Gin Pro 65 70 75 80

Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gin Gin Tlir Tip Ser Asp Plo Tip 85 90 95

Thr Phe Gly Gin Gly Thr Lys Val Glu lie Lys Arg Thr Val Ala Ala 100 105 110

Pro Ser Val Phe lie Pbe Rx> Pro Ser Asp Glu Gin Leu Lys Ser Gly 115 120 125 Ήιι· Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Ai*g Glu Ala 130 135 140 -5- 201238975

Lys Val Gin Tip Lys Val Asp Asn Ala Leu Gin Ser Gly Asn Ser Gin 145 150 155 160

Glu Ser Val Tin- Glu Gin Asp Ser Lys Asp Ser Thi* Tyr Ser Leu Ser 165 170 175

Ser ΊΤιτ Leu Thi- I^u Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr 180 185 190

Ala Cys Glu Val Thr His Gin Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser 1.95 200 205

Phe Asn Arg Gly Glu Cys 210

<21Q> 12 <211> 234 <212> PRT 人造 <220> <223>抗體CA028_496g3之輕鏈含信號序列 <400〉 12

Met Ser Val Pro Thr Gin Val Leu Gly Leu Leu I>eu Leu Tip Leu Thr i 5 10 15

Asp Ala Arg Cys Ala lie Gin Leu Thr Gin Ser Pro Ser Ser Leu Sec 20 25 30

AlaSerValOyAsp^Vaim-Bem-CysAxsAlaAspOluSer

Val Arg Thi· Uu Met His Tip Tyr Gin Gta Lys Pro Gly Lys Ala Pro 50 55 60

Lys Leu Leu lie Tyr Leu Val Ser Asn Ser Glu De Gly Val Pro Asp 65 70 75 80

Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thi· Asp Phe Arg Leu Thi- Be Ser 85 90 95

Ser Leu Gin Pro Glu Asp Phe Ala Tk Tyr Tyr Cys Gin Gin ThrTrp 201238975 100 105 110

Ser Asp Pro Trp Thi- Phe Gly Gin Gly Thr Lys Val Glu He Lys Arg 115 120 125

Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe De Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gin 130 135 140

Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr 145 150 155 160

Pro Arg Glu Ala Lys Val Gin Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gin Ser 165 170 175

Gly Asn Ser Gin Glu Ser Val Thr Glu Gin Asp Ser Lys Asp Ser Ihr 180 185 190

Tyc Set' Leu Ser Ser Thr Leu Thi* Leu Ser Lys Ala Asp Tyi* Glu Lys 195 m 205

His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gin Gly Leu Ser Ser ho 210 215 220

Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys 225 230

<210> 13 <211〉 645 <212> DNA dl3>人造 <220> <223>DNA編碼抗體CA028_496g3之輕鏈 3 <400> 13 gccatccagc tgacccagag cccttcctct ctcagcgcca gtgtcggaga cagagtgact 60 attacctgca gggctgacga aagcgtgaga acatigaigc actggiacca acagaagcct 120 ggcaaagccc ccaagctcct gatctatctg gtltccaatt cggagattgg agtccccgac 180 aggttcagcg gcagtgggtc tggaactgac tttcgcctga caatctcctc actccagccc 240 gaagatttcg ccacctacta ttgcca£cag acttggagcg acccttggac atttggacag 300 ggcacaaaag tggagatcaa gcgiacggta gcggccccat ctgicitcal cttcccgcca 360 201238975 tctgatgagc agttgaaatc tggaactgcc tctgttgtgt gcctgctgaa taacttctat 420 cccagagagg ccaaagtaca gtggaaggtg gataacgccc tccaatcggg taactcccag 480 gagagtgtca cagagcagga cagcaaggac agcacctaca gcctcagcag caccctgacg 540 ctgagcaaag cagactacga gaaacacaaa gtctacgcct gcgaagtcac ccatcagggc 600 ctgagctcgc ccgtcacaaa gagcttcaac aggggagagt gttag 645 <210> 14 <211> 705 <212> DNA <213>人造 <220> <223> DNA編碼抗體CA028_496g3之輕鏈含信號序列 <400〉 14 atgtcagttc ccacacaggt gctgggcctg cttctgttgt ggctcaccga tgctaggtgt 60 gccatccagc tgacccagag ccxittcctct ctca^cgcca gtgtcggaga cagagtgact 120 attacctgca gggctgacga aagcgtgaga acattgatgc actggtacca acagaagcct 180 ggcaaagccc ccaagctcct gatctatctg gtttccaatt cggagattgg agtccccgac 240 aggttcagcg gcagtgggtc tggaactgac tttcgcctga caatctcctc actccagccc 300 gaagatttcg ccacctacta ttgccagcaji acttggagcg acccttggac atttggacag 360 ggcacaaaag tggagatcaa gcgtacggta gcggccccat ctgtcttcat cttcccgcca 420 tcigatgagc agttgaaatc tggaactgcc tctgttgtgt gcctgctgaa taacttctat 480 cccagagagg ccaaagtaca gtggaaggtg gataacgccc tccaatcggg taactcccag 540 gagagtgtca cagagcagga cagcaaggac agcacctaca gcctcagcag caccctgacg 600 ct^gcaaag cagactacga gaaacacaaa gtctacgcct gcgaagtcac ccatcagggc 660 ctgagctcgc ccgtcacaaa gagcttcaac aggggagagt gttag 705 <210> 15 <211> 455 <212> PRT <213>人造 <220> <223> 抗體 CA028_496g3 之重鏈 <4(X)> 15 -8 - 201238975

Glu Val Gin Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gin Pio Gly Gly 15 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asp Tyr 20 25 30

Asn Met Ala Tip Val Arg Gin Ala Pra Gly Lys Gly Leu Glu Tip Val 35 恥 45

Ala Thr lie Hu Tyr Glu Gly Arg Asn Thi* Tyr Tyr Aig Asp Ser Val 50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr lie Ser Aig Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr 65 70 75 80

Leu Gin Met Asn Ser I-eu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr C^s 85 90 95

Ala Ser Pro Pro Gin Tyr Tyr Glu Gly Ser lie Tyr Arg Leu T15 Phe 100 105 110

Ala His Τφ Gly Gin Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr 115 120 125

Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser 130 135 140

Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyi- Phe Pro Glu 145 150 155 160

Pro Val. Thr Val Sei* Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Sei· Gly Val His 165 170 175

Ttir Phe Ro Ala Vsl Leu Gin Ser Ser Gly Leu T>r Ser Leu Ser Ser ISO 185 190

Val Val Thr Val Pio Ser Sec Sei* Leu Gly Thr Gin Thr Tyi* lie Cys 195 200 205

Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Tin Lys Val Asp Lys Lys Val Glu 210 215 220 -9 - 201238975

Pro Lys Ser Cy s Asp Lys Thi* His Thr Cys Pro Ro Cys Pio Ala Pio 225 230 235 240

Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser \^al Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys 245 250 255

Asp Thr Leu Met He Ser Arg Thr Pro Gla Val Thr Cys Val Val Val 260 265 270

Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Tip Tyr Val Asp 275 280 285

Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Tlir Lys Pro Arg Glu Glu Gin Tyi· 290 295 300

Asn Ser Tlir Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gin Asp 305 310 315 320

Ti*p Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu 325 330 335

Pro Ala Pro Ik Gb Lys Thr He Sei· Lys Ala Lys Gly Gin Pro Arg 340 345 350

Glu Pro Gin Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Ai*g Asp Glu Leu Thr Lys 355 360 365

Asn Gin Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Ro Ser Asp 370 375 380

He Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gin Ro Glu Asn Asn Tyi- Lys 385 390 395 400

Thr Thr Pro Pio Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser 405 410 415

Lys Leu IQir Vai Asp Lys Ser Ai*g Trp Gb Gin Gly Asn Val Phe Ser 420 425 430

Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gin Lys Ser -10- 201238975 435 440 445

Leu Scr Leu Ser Pro Gly Lys 450 455 <210> 16 <211> 474 <212> PRT <213>人造 <220> <223>抗體CA028_496g3之重鏈含信號序列 <400> 16

Met Gin Trp Ser Trp Val Phe Leu Phe Phe Leu Ser Val Thi* Hu* Gly 15 10 15

Val His Ser Glu Val Gin I-eu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gin 20 25 30

PiX) Gly Gly Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe 35 40 45

Ser Asp Tyr Asn Met Ala Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu 50 55 60

Glu Trp Val Ala Hit De Thr Tyr Glu Gly Arg Asn Thr Tyr Tyr Aig 65 70 75 80

Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr lie Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn 85 90 95

Ser Leu Tyr Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val 100 105 110 TVr T^rCys Ala Ser Ro Pro Gin Tyr Tyr Glu Gly Ser De Tyr Arg

Leu Trp Phe Ala His Tip Gly Gin Gly Thr Leu Val Thi- Val Ser Ser 130 135 140

Ala Ser Thr Lys Gly Ro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys 145 150 155 160 201238975

Ser Thi Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr 165 170 .175

Phe Pio Glu Plo Val Tk Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Uu Thi* Ser 180 185 190

Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gin Ser Ser Gly Leu Tyr Ser 195 200 205

Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser I^u Giy Thr Gin Thi 210 215 220

Tyr lie Cys Asn Val Asn His Lys R*o Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys 225 230 235 240

Lys Val Glu Fro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His llir Cys Pro Pro Cys 245 250 255

Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro 260 265 270

Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met lie Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys 275 280 285

Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Τηρ 290 295 300

Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thi- Lys Pro Arg Glu 305 310 315 320

Glu Gin Tyr Asn Ser Thi- Tyr Arg Val Val Ser Val Leu 'Phr Val Leu 325 330 335

His Gin Asp Tip Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn 340 345 350

Lys Ala Leu Pro Ala Pro lie Glu Lys Thr He Ser Lys Ala Lys Gly 355 360 365

Gin Pro Arg Glu Ro Gin Val Tyr Thr Leu ]Ριό Pro Ser Arg Asp Glu -12- 201238975 370 375 380

Leu Thr Lys Asa Gin Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr 385 390 395 400

Pro Ser Asp He Ala Val Glu Tip Glu Ser Asn Gly Gin Pro Glo Asn 405 410 415

Asn Tyr Lys rfhi* ΓΠιτ Pro Pro Vai Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe 420 425 430

LeuTyr^LysI.umValAspLysS.Arg^^

Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr 450 455 460

Gin Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys 465 470 <210> 17 <211> 1365 <212> DNA <213>人造 <220> <223> DNA(含外顯子)編碼抗體CA028_496g3之重鏈 <400> 17 gaggttcagc tcgttgaatc cggaggcgga ctcgtgcagc ctgggggctc cttgcggctg 60 agctgcgctg ccagtggctt cactttcagc gattacaata tggcctgggt gcgccaggcc 120 ccaggcaagg gtctggagtg ggtggccaca attacctatg agggcagaaa cacttattac 180 cgggattcag tgaaagggcg atttaccatc agcagggata atgcaaagaa cagtctgtac 240 otgcagatga actctctgag agctgaggac accgctgtct actattgtgc aagcccaccc 300 cagtactatg agggctcaat ctacagattg tggtttg(xc atrggggcca gggaacactg 360 gtgacc^tct cgagcgcttc tacaaagggc ccatcggtct tccccctggc accctcctcc 420 aagagcacct ctgggggcac agcggccctg ggctgcctgg tcaaggacta cttccccgaa 480 ccggtgacgg tgtcgtggaa ctcaggcgcc ctgaccagcg gcgigcacac cncccggct 540 gtcctacagt cctcaggact ctactccctc agcagcgtgg tgaccgtgcc ctccagcagc 600 -13- 201238975 ttgggcaccc agacctacat ctgcaacgtg aatcacaagc ccagcaacac caaggtcgac 660 aagaaagttg agcccaaatc ttgtgacaaa actcacacat gcxcaccgtg cccagcacct 720 gaactcctgg ggggaccgtc agtcttcctc ttccccccaa aacccaagga caccctcatg 780 atctcccgga cccctgaggt cacatgcgtg gtggtggacg tgagccacga agaccctgag 840 gtcaagttca actggtacgt ggacggcgtg gaggtgcata atgccaagac aaagccgcgg 900 gaggagcagt acaacagcac gtaccgtgtg gtcagcgrcc icaccgtcct gcaccaggac 960 tggctgaatg gcaaggagta caagtgcaag gtctccaaca aagcxtccc agcccccatc 1020 gagaaaacca tctccaaagc caaagcgcag ccccgagaac cacaggtgta caccctgccc 1080 ccatcccggg atgagctgac caagaaccag gccagcctga cctgcctggt caaaggcttc 1.140 tatcccagcg acatcgccgt ggagtgggag agcaatgggc agcxggagaa caactacaag 1200 aocacgcctc ccgtgclgga ctccgacggc tccttcttoc tctacagcaa gctcaccgtg 1260 gacaagagca ggtggcagca ggggaacgtc ttctcatgct ccgtgatgca tgaggctctg 1320 cacaaccact acacgcagaa gagcctctcc ctgtctccgg gtaaa 1365 <210> 18 <211> 1422 <212> DNA <213>人造 <220> <223> DNA(含外顯子)編碼抗體CA028_496g3之重鏈含信號序列 <400> 18 atggaatggt cctgggtctt cctgtttttc ctttctgtca caaccggggt gcacagcgag 60 gttcagctcg ttgaatccgg aggcggactc gtgcagcctg ggggctcctt gcggctgagc 120 tgcgctgcca gtggcttcac tttcagcgat tacaatatgg cctgggtgcg ccaggcccca 180 ggcaagggtc tggagtgggt ggccacaatt acctatgagg gcagaaacac ttattaccgg 240 gattcagtga aagggc^itt taccatcagc agggataatg caaagaacag tctgtacctg 300 cagatgaact ctctgagagc tgaggacacc gctgtctact attgtgcaag cccaccccag 360 taciatgagg gctcaatcta cagattgtgg tttgcccatt ggggccaggg aacactggtg 420 accgtctcga gcgcttctac aaaggsccca tcggtcttcc ccctggcacc ctcctccaag 480 agcacctctg ggggcacagc ggccctgggc tgcctggtca aggactactt ccccgaaccg 540 201238975 gigacggtgt cgtggaactc aggcgccctg accagcggcg tgcacacctt cccggctgtc 600 ctaca£tcct caggactcta ctccctcagc agcgtggtga ccgtgccctc cagcagcttg 660 ggcacccaga cctacatctg caacgtgaat cacaagccca gcaacaccaa ggtcgacaag 720 aaagttgagc ccaaatcttg tgacaaaact cacacatgcc caccgtgccc agcacctgaa 780 ctcctggggg gaccgtcagt cttcctcttc ccxccaaaac ccaaggacac cctcatgatc 840 tcccggaccc ctgaggtcac atgcgtggtg gtggacgtga gccacgaaga ccctgaggtc 900 aagttcaact ggtacgtgga cggcgtggag g^cataatg ccaagacaaa gccgcgggag 960 gagcagtaca acagcacgta ccgtgtggtc agcgtcctca ccgtcctgca ccaggactgg 1020 ctgaatggca aggagtacaa gtgcaaggtc tccaacaaag ccctcccagc ccccatcgag 1080 aaaaccatct ccaaagccaa agcgcagccc cgagaaccac aggtgtacac cctgccccca 1140 tcccgggatg a£ctgaccaa gaaccaggtc agcctgacct gcctggtcaa aggcttctat 1200 cccagcgaca tcgccgtgga gtgggagagc aatgggcagc cggagaacaa ctacaagacc 1260 acgcctcccg tgctggactc cgacggctcc Itcttcctct acagcaagct caccgtggac 1320 aagagcai£t ggcagcaggg gaacgtcttc tcatgctccg tgatgcatga ggctctgcac 1380 aaccactaca cgcagaagag cctctccctg tctccgggta aa 1422

<210> 19 <211> 1422 <212> DNA <213>人造 <220> <223>CDNA編碼抗體CA028_496g3之重鏈含信號序列 <400> 19 atggaatggt cctgggtctt cctgtttttc ctttctgtca caaccggggt gcacagcgag 60 gttcagctcg ttgaatccgg aggcgpcic gtgcagcclg ggggctcctt gcggcigagc 120 rgcgctgcca gtggcttcac tttcagcgat tacaatatgg cctgggtgcg ccaggcccca 180 ggcaagggtc tggagtgggt ggccacaatt acctatgagg gcagaaacac ttatlaccgg 240 gattcagtga aagggcgatt taccatcagc agggataatg caaagaacag tctgtaccts 300 cagatgaact ctctgagagc tgaggacacc gctgtctact attgtgcaag cccaccccag 360 tactatgagg gctcaatcta cagattglgg tttgcccatt ggggccaggg aacactggtg 420 accgtctcga gcgcttctac aaagggccca tcggtcttcc ccctggcacc ctcctccaag 480 -15- 201238975 agcacctctg ggggcacagc ggccctgggc tgcctggtca aggactactt ccccgaaccg 540 gtgacggtgt cgtggaactc aggcgccctg accagcggcg tgcacacctt cccggctgtc 600 ctacagtcct oaggactcta ctccctcagc agcgtggtga ccgtgccctc cagcagcttg 660 ggcacccaga cctacatctg caacgtgaat cacaagccca gcaacaccaa ggtcgacaag 720 aaagttgagc ccaaatcttg tgacaaaact cacacatgcc caccgtgccc agcaccisaa 780 ctcctggggg £accgtcagt cttcctcttc cccccaaaac ccaaggacac cctcatgatc 840 tcccggaccc c^aggtcac atgcgtggtg gtggacgtga gccacgaaga ccctgaggtc 900 aagttcaact ggtacgtgga cggcgtggag gtgcataatg ccaagacaaa gccgcgggag 960 gagcagtaca acagcacgta ccgtgtggtc agcgtcctca ccgtcctgca ccaggactgg 1020 ctgaatggca aggagtacaa gtgcaaggtc tccaacaaag ccctcccagc ccccatcgag 1080 aaaaccatct ccaaagccaa agcgcagccc cgagaaccac aggtgtacac cctgccccca 1140 tcccgggatg agctgaccaa gaaccaggtc agcctgacct gcctggtcaa aggcttctat 1200 cccagcgaca tcgccgtgga gtgggagagc aatgggcagc cggagaacaactacaagacc 1260 acgcctcccg tgctggactc cgacggctcc ttcttcctct acagcaagct caccgtggac 1320 aagagcaggt ggcagcaggg gaacgtcttc tcatgctccg tgatgcatga ggctctgcac 1380 aaccactaca cgcagaagag cctctccctg tctccgggta aa 1422

Claims

201238975 七、申請專利範圍： 1. 一種具有一輕鏈之結合人類IL_17A及人類[ 中和抗體，其中該輕鏈之可變功能部位包括於 N 0:7所給定的序列。 2. 如申請專利範圍第丨項之中和抗體，其係額外一重鏈，其中該重鏈之可變功能部位包括 CDR-H1之SEq ID N〇:1所給定的序列、 CDR_H2之SEQ ID NO:2所給定的序列、 CDR_H3之SEQ ID NO:3所給定的序列。 3·如申請專利範圍第2項之中和抗體，其中該重變功能部位包括於SEq ID N0:9所給定的序歹、 4. 如申請專利範圍第丨至3項中任一項之中和抗也係結合IL-17A/IL-17F異質二元體。 5. —種結合人類IL-17A及人類L-17F之中和抗具有一包括於SEQ ID NO: 15所給定的序列之一包括於SEQ ID ΝΟ··11所給定的序列之輕鏈 6 ·如申睛專利範圍第1至4項中任一項之抗體，抗體為一完整抗體或其功能活性片段。 7. 如申請專利範圍第6項之抗體，其中該抗體片自於由 Fab、Fab’、F(ab，）2、scFv 及 Fv 片段之組群。 8. —種多特異性抗體，其係包括如申請專利範圍之抗體片段。 9. 一種分離Dna序列，其係編碼如申請專利範至8項中任一項之抗體之輕鏈。 17F 之 SEQ ID 地包括於針對於針對於針對鏈之可 I ° ，體，其體，其重鏈及〇其中該段係選所組成第7項圍第1 201238975 10-一種分離DNA序列，i6 s，丄其係編碼如申請專利範至8項中任一圓第 1 之抗妝的重鏈及輕鏈。 Π. —種選殖或表現載體， ^ 1Λ E 八你包括如申凊專利範圍第9 或10項之DNA序列。 12.如申請專利範圍第 _則0:13及咖^載體’其中該載體包括於 η 一 & — SEQ ID Ν〇··ΐ7所給定之序列。 13· —種宿主細胞，|在 1 2項之選殖^ 或多個如巾料利範圍第、之選殖或表現載體。 14. 一種製造如申喑之方法，立^ 範圍第1至8項中任一項之抗體 ,ι括培養如申請專利範圍第1 3項之宿主細胞及分離抗體。 ,疋佰主 1 5 _ —種醫藥組成物，复項中任一項夕 > ，、係包括如申請專利範圍第1至δ 劑、稀二其組合以醫藥上可接收性賦形 16. ;:申：Γ載劑中之-或多者。申μ專利範圍第〗< 包括其它活性成八項之醫藥組成物，其係額外地 17. 如申請專利範圍專利範圍第15或1至8項中任一項之抗體或如申請 18. 如申請專S U項之醫藥組成物，其係用於療法。專利範圍第丨5。、至8項中任一項之抗體或如申請於下列所組成或1 6項之醫藥組成物’其係用於選自染（病I ,14 之、、且群中之病理狀況的治療或預防：咸結的内毒性休克、真鹵性及寄生蟲性）、感染相聯關節炎、έ ^ 、關節炎、類風濕性關節炎、乾癬性乐統性取紅斑性狼瘡（si^作幼年型自發關節炎（ΠΑ)、系統性 )、氣喘、慢性阻塞性呼吸道疾病 * 2 - 201238975 (COAD)、慢性阻塞性肺盆發炎疾病、阿茲海點* 心性肺彳貝傷、骨 r ^ ^ 海.、、大氏病、克隆氏病、發炎性腸病、腸％症、潰瘍性大腸炎、人卞色門氏（Castleman，s)病、僵直性脊椎炎及其它脊 # +… 匕方椎關即病、皮肌炎、心肌炎、葡“炎，、凸眼症、自體免疫性甲狀腺炎、佩羅尼氏 eyrome s)病、腹腔病、膽囊病、藏毛病、腹膜炎、乾癬異位性皮炎、血管炎、手術性沾黏、中風、自體免疫性糖床病、帛—型糖尿病、萊姆關節炎、腦膜炎、中樞及周邊神㈣統之免疫媒介的發炎病症諸如多發性硬化症及吉蘭_巴利症候群、其它自體免疫病、胰腺炎、創傷（手術）、移植物抗宿主病' 移植排斥、纖維化病症包含肺纖維化、肝纖維化、腎纖維化、硬皮病或系統性硬化症、癌症（實體腫瘤諸如黑素瘤、肝母細胞瘤、肉瘤、鱗狀細胞癌、移行細胞癌、卵巢癌及血液惡性病及特別為急性骨髓性白血病、慢性骨髓性白血病、慢性淋巴細胞性白血病、胃癌及大腸癌）、心臟病包含缺血性疾病諸如心肌梗塞以及動脈粥狀硬化症、血管内凝血、骨質再吸收、骨質疏鬆症、牙周炎及胃酸過少。 19. 一種由IL-17A及/或IL-17F所媒介的、或與IL-17A 及/或IL -17 F之增高濃度相聯結的病理病況之治療或預防用藥物之製造之用途，其係使用如申請專利範圍第1至8項中任一項之抗體或如申請專利範圍第1 5 或16項之醫藥組成物。