TW201206955A - Monoclonal antibodies that bind to hGM-CSF and medical compositions comprising same - Google Patents
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Description
201206955 六、發明說明： 【發明所屬之技術領域】 本發明係關於結合人類顆粒性白血球-巨噬細胞集落 刺激因子（亦稱為「hGM-CSF」）且中和hGM-CSF活性之 單株抗體、包括一或更多上述單株抗體之組合物以及應 用上述單株抗體與組合物的方法。 【先刚技術】 將可在試管内促進骨髓顆粒性白血球與巨噬細胞之遠 祖細胞增瘦且促進顆粒性白血球與巨嗟細胞集落形成之 體液因子界定為顆粒性白血球-巨嗟細胞集落刺激因子 (GM-CSF) 〇 當前已知GM-CSF為廣泛細胞類型的刺激因子。其引 誘顆粒性白血球-巨噬細胞世系血球細胞的分化與增 殖、提高抗原呈現細胞的功能、維持某些類型之上皮細 胞的功能且引發肺泡巨噬細胞的功能（諸如，提高介面活 性物質的分解作用、殺菌功能與Fc受體呈現）（The
Cytokine Handbook，第 4版 ’ Thomson，Α·等人（編輯）’ Academic Press，2003) ° 已知GM-CSF可造成不同疾病，包括丨）過敏性疾病， 諸如氣喘、異位性皮膚炎（atopy)與花粉熱、2)移植排斥 與移植物對抗宿主疾病（GVHD)及3)自體免疫疾病，例如 類風濕性關節炎。 201206955 例如’人類GM-CSF (hGM-CSF)係過度表現於過敏性 受試者的肺與類風濕性關節炎患者的關節中；hGM-CSF mRNA係過度表現於過敏性受試者的皮膚中。亦已經有 報導指出GM- C SF產物可提高單核白血球（異位性皮膚炎 中導致發炎的細胞）的存活（Bratton，D.L.等人， Granulocyte macrophage colony-stimulating factor contributes to enhanced monocyte survival in chronic • atopic dermatitis. J· Clin· Invest.，95 : 211-218，1995)。 此外’已經顯示出GM-CSF刺激白血病細胞的增殖。 因此，GM-CSF被視為導致白血病的因子。 具有治療人類GM-CSF導致之疾病與症狀的方法係有 用的。一種治療上述疾病與症狀之方法係結合hGM-CSF 並抑制其生物活性。這可藉由例如施加抗_hGM-CSF單株 抗體加以完成，抗-hGM-CSF單株抗體針對hGM-CSF.具 有高度親合力與足夠的中和活性但不會引發免疫反應。 • 然而’目前揭露之hGM-CSF-抑制抗體並無針對 hGM-CSF的足夠中和活性。再者，現有的抗_hGM_cSF 單株抗體非常有可能在受者中引發不欲之免疫反應。 此外’治療上述疾病需要長時間的施藥而可能引發問 題’例如施加藥物中之少量雜質可能引起的安全問題。 由效力、安全與醫學費用的觀點來看，比現有那些抗體 具有較大中和活性的抗體係有用於治療。 【發明内容】 201206955 本發明至少部分係基於發明者發現某些抗-人類 GM-CSF單株抗體之特徵為其針對hGM-CSF非常高的 中和活性。出乎意料地，這些抗體的中和活性係高於根 據其對hGM-CSF之結合親合力所預測者。這些抗 -hGM-CSF單株抗體的其中兩個在此稱為EV1018與 EV1019。 一態樣中，本發明提供結合並中和hGM-CSF之抗 -hGM-CSF抗體與其之片段。 一實施例中，提供單離的抗-hGM-CSF單株抗體或其之 抗原結合片段，其中抗體或其之抗原結合片段辨別 hGM-CSF(其之胺基酸序列於序列編號：1中提出）中的 ELYK (序列編號：2)與TMMASHYKQH (序列編號：3)。 一實施例中，抗體包括： (a)重鏈，其包括含有VH-CDR1之共有序列、含有 VH-CDR2之共有序列及含有VH-CDR3之共有序列，其 中： (i)含有 Vh-CDR1 之共 有 序 列 為 FTFS(Y/H)(G/A)MH (序列編號： 314)， (ii)含有 Vh-CDR2 之共 有 序 列 為 (L/V)(T/I)(Y/W)HXGX(R/K)K(F/Y)YADSV(R/K)G (序列 編號：315)，及 (iii)含有 Vh-CDR3 之共 有 序 列 為 EX(M/V)G(A/G)XXDX (序列編號 ：316) ;及 (b)輕鏈，其包括含有VL-CDR1之共有序列、含有 201206955 VL-CDR2之共有序列及含有VL-CDR3之共有序列，其中： (i)含有 Vl-CDR1 之 共 有 序 列 為 XGNXXNIGS(H/Y)AVG (序列編號： 317) ， (Π)含有 Vl-CDR2 之 共 有 序 列 為 G(R7K)SP(A/P)SG (序列編號：318) ，及 (iii)含有 Vl-CDR3 之 共 有 序 列 為 STWDS(R/S)LSAV(V/L)(序列編號：319)， 且抗體或其之抗原結合片段專一性結合hGM-CSF。 一實施例中，提供單離的抗-hGM-CSF單株抗體或其 之抗原結合片段，其中抗體或其之抗原結合片段辨別 hGM-CSF(其之胺基酸序列於序列編號：1中提出）中的 ELYK (序列編號：2)與TMMASHYKQH (序列編號：3)。 一實施例中，抗體包括： (a) 重鏈，其包括 VH-CDR1、VH-CDR2 與 VH-CDR3， 其中： (i) VH-CDR1的胺基酸序列係選自SYGMH (序列 編號：10)與SHAMH (序列編號：333)， (ii) Vh-CDR2 的胺基酸序列係選自 LTYHHGNRKFYADSVRG (序列編號：5)與 VIWHDGSKKYYADSVKG (序列編號：334)，及 (iii) VH-CDR3的胺基酸序列係選自ESMGAINDN (序列編號：6)與EWVGGTCDS (序列編號：335);及 (b) 輕鏈，其包括 VL-CDR1、VL-CDR2 與 VL-CDR3， 其中： 6 201206955 (i) Vl-CDR1 的胺基酸序列係選自 IGNNNNIGSHAVG (序列編號：7)與 SGNSSNIGSYAVG (序列編號：330)， (ii) VL-CDR2的胺基酸序列係選自GRSPPS (序列 編號：8)與GKSPAS (序列編號：331)，及 (iii) Vl-CDR3 的胺基酸序列係選自 STWDSSLSAVV (序列編號：9)與 STWDSRLSAVL (序列 編號：332)， 且抗體或其之抗原結合片段專一性結合hGM-CSF » 例如’上述之抗體或其之抗原結合片段以小於400 pM 的KD、更佳為小於160 pM的KD結合人類GM-CSF。 本文所述之抗體或其之抗原結合片段中和hGM-CSF 活性，以致抗體或其之抗原結合片段的IC50值小於1 〇〇 ρΜ (諸如，小於30 pM、小於20 pM)，由本文所述在ED80 下的TF-1增殖試驗所確定。 任一實施例中，抗體或其之抗原結合片段可包括γι、 γ2、γ3或γ4的重鏈。重鏈可選自序列編號：10-33、38-80、 160-183 與 222-245 。 任一實施例中，抗體或其之抗原結合片段可包括χ輕 鏈的輕鏈。某些實施例中，λ輕鏈可包括一或兩者參照 野生型序列的下列胺基酸取代：R100G與A153G。一實 施例中’輕鏈可選自序列編號：34-37與202-221 ^輕鏈 可為λ輕鍵或κ輕鍵。某些實施例中，重鏈係γι、γ2、γ3 或丫4而輕鏈係λ輕鏈。任一實施例中，重鏈可包含一或 7 201206955 更多參照野生型序列選自下列所構成之群組的胺基酸取 代：T97A ' T97V、N95D、N95E、N95K、N95Q、 N93Q/N95T、K144R、L164A、L165A 與 K144R。某些實 施例中，抗體或其之抗原結合片段包括重鏈，其含有一 或更多選自下列所構成之群組的胺基酸取代：T97A、 T97V、N95D、N9 5E、N95K、N95Q、N93Q/N95T、K144R、 L164A、L165A與K144R ;及輕鏈，其含有一或兩者下 列胺基酸取代：R100G與A153G。 本文所述之抗體或其之抗原結合片段可包括 VH-CDR1，其之胺基酸序列為SYGMH (序列編號：4)或 SHAMH；(序列編號：333)。本文所述之抗體或其之抗原 結合片段可包括 VH-CDR2，其之胺基酸序列為 LTYHHGNRKFYADSVRG (序列編號：5)或 VIWHDGSKKYYADSVKG (序列編號：334)。本文所述之 抗體或其之抗原結合片段可包括VH-CDR3，其之胺基酸 序列為ESMGAINDN (序列編號：6)或EWVGGTCDS (序 列編號：335)。本文所述之抗體或其之抗原結合片段可 包括Vl-CDR1，其之胺基酸序列為IGNNNNIGSHAVG (序 列編號：7)或SGNSSNIGSYAVG (序列編號：330)。本文 所述之抗體或其之抗原結合片段可包括VL-CDR2，其之 胺基酸序列為GRSPPS (序列編號：8)或GKSPAS (序列 編號：331)。本文所述之抗體或其之抗原結合片段可包 括VL-CDR3，其之胺基酸序列為STWDSSLSAVV (序列 編號：9)或STWDSRLSAVL (序列編號：332)。 201206955 某些實施例中，專一性結合hGM-CSF之抗體或其之抗 原結合片段包括6個不同CDR，其之序列係於序列編 號：4-9中提出。 某些實施例中，專一性結合hGM-CSF之抗體或其之抗 原結合片段包括6個不同CDR，其之序列係於序列編 號：330-335中提出。 本文所提供的任一實施例中，抗體可包括γι、γ2、γ3 或Ύ4的重鏈及Κ或λ的輕鍵。 某些實施例中，本文所述之抗體或抗原結合片段可更 包括信號序列，諸如序列編號·· 324、325與326中顯示 的那些序列。 有關野生型與其變型之實施例係包含於本發明中。某 些實施例中，抗體或其之片段包括重鏈，其係序列編號： 10或選自序列編號：11-33、38-80之變體；並亦包括輕 鏈’其係序列編號：34或選自序列編號：35-3 7之變體。 某些實施例中’重鏈係序列編號：160或選自序列編號： 1 61 -245之變體；而輕鏈係序列編號：202或選自序列編 號：203-221之變體。 某些實施例中，抗體或其之抗原結合片段包括重鏈變 異區與輕鍵變異區，其中重鍵變異區係序列編號：152 或其之變體（諸如，序列編號：153_159)，而輕鏈變異區 係序列編號：184或其之變體（諸如’序列編號：185-201)。 某些實施例中，抗體或其之抗原結合片段包括重鏈變 異區與輕鏈變異區’其中重鏈變異區係序列編號：348 201206955 或其之變體（諸如，序列編號：349-363)，而輕鏈變異區 係序列編號：348。 本文揭露之能夠結合hGM-CSF (hGM-CSF)與中和 hGM-CSF之生物活性的抗-hGM-CSF單株抗體或其之抗 原結合部分的特徵在於其之互補決定區（CDR)係一或更 多選自序列編號：4-9與序列編號：330- 335所構成之群 組的胺基酸序列。某些實施例中，可在CDR中取代、刪 除、插入或附加一或更多胺基酸。本文所述之抗 ® -hGM-CSF單株抗體或其之抗原結合部分的特徵在於當 hGM-CSF弓1發TF-1細胞增殖時，抗-hGM-CSF單株抗體 或其之抗原結合部分在約14 pM的濃度下抑制約50%的 TF-1細胞增殖。某些實施例中，抗-hGM-CSF單株抗體 或其之抗原結合部分抑制周圍血液樹突細胞的增殖。 一實施例中，本文所述之抗-hGM-CSF單株抗體或其之 抗原結合部分具有針對hGM-CSF的高度親合力，其之 φ KD值係4xl0_1() Μ或更小。 某些實施例中，本文所述之抗-hGM-CSF單株抗體或其 之抗原結合部分屬於IgG! (λ)類型（亞型）。某些實施例 中，本發明之抗-hGM-CSF單株抗體係人類單株抗體。 本發明亦思及套組，其包括：（a)本發明之抗體或其之 抗原結合片段；及（b)—或更多包含抗體或其之抗原結合 片段的容器。 本發明提供之組合物包括結合並中和hGM-CSF之抗 -hGM-CSF抗體或其之片段。上述組合物可為藥學組合物 10 201206955 (例如，藥劑），其包括抗-hGM-CSF抗體與/或其之片段（或 上述之組合）及藥學可接受載體。包括任何上述實施例的 抗體或其之抗原結合片段。 進一步實施例中，組合物包括超過一種本文提供之各 個抗-GM-CSF抗體、片段或上述之組合。例如，組合物 可進一步包括結合hGM-CSF的第二單離抗體或其之抗 原結合片段，以致組合物包括超過一種/類型（複數個）結 合GM-CSF之各個抗體、其之抗原結合片段或上述之組 _ 合。某些實施例中，複數個結合hGM-CSF之抗體、其之 抗原結合片段或上述之組合的至少一者係選自序列編 號：10-80、152-245、320-323 與 348-3 65 所構成之群組 的聚胜肽。 本發明亦關於適合用於治療hGM-CSF導致之疾病的 醫藥組合物，其包括：根據本文任何一個實施例之抗 -hGM-CSF單株抗體或抗原結合部分及藥學可接受載 φ 體。過度產生hGM-CSF導致之疾病的實例包括：（a)過 敏疾病，諸如氣喘、異位性皮膚炎與花粉熱（過敏性鼻 炎；乾草熱）；（b)移植排斥，移植物對抗宿主疾病 (GVHD);及（c)自體免疫疾病，例如類風濕性關節炎。 上述之組合物或獸醫藥物組合物可包括複數種專一於 相同特定抗原的抗-hGM-CSF單株抗體或其抗原結合部 分及藥學可接受載體。 某些實施例中，醫藥組合物或獸醫藥物組合物的特徵 在於複數種抗-hGM-CSF單株抗體或其抗原結合部分包 11 201206955 括二或更多類型的抗體或其抗原結合部分，其可選自下 列（a)與（b): (a) 抗-hGM-CSF單株抗體或其之抗原結合部分，其之 CDR係由序列編號：4-9、序列編號：330-335、序列編 號：336-341或序列編號：342-347的胺基酸序列所代表， 且其專一於hGM-CSF， (b) (a)的抗-hGM-CSF單株抗體或其之抗原結合部 分，其之胺基酸序列中有一或更多胺基酸被取代、刪除、 插入或附加’且其專一於hGM-CSF。 當hGM-CSF引發TF-1細胞增殖時，上述之醫藥組合 物或獸醫藥物組合物可各自在約55 pM的濃度下抑制約 80%的TF-1細胞增殖。 本發明之態樣亦思及套組，其包括本文包含之任何一 種組合物及一或更多容器。某些實施例中，套組更包括 操作指南。某些實施例中，套組更包括標籤、操作指南 或標籤與操作指南兩者。 亦提供本文所述之抗體或其之抗原結合片段或包含上 述抗體或片段之組合物的應用。本文所述之任一抗 -hGM-CSF抗體或其之抗原結合片段或組合物可用來製 造或製備於患者中治療與hGM_CSF過度表現相關之疾 病或異常的藥劑，其中抗體或其之抗原結合片段結合 hGM-CSF並能夠中和hGM_CSF活性。某些實施例中， 疾病或異常係選自下列所構成之群組：慢性阻塞性肺病 (COPD)、氣喘、囊狀纖維化症（cystic咖〇士）、間質性 12 201206955 肺病（interstitial lung disease)、鼻炎、關節炎與相關之關 節病、牛皮癖、骨趙性白血病、多發性硬化症。 爲了上述之應用’以不超過最大容忍劑量的劑量將抗 體或抗原結合片段施加至患者，其中最大容忍劑量係約 每劑500 mg。 本發明之態樣包括上方任一實施例所述之抗體或其之 抗原結合片段或組合物的應用’用於治療患者中與 hGM-CSF過度表現相關之疾病或異常，其中抗體或其之 抗原結合片段結合hGM_CSF並能夠中和hGM_cSF活 性。例如，疾病或異常可為慢性阻塞性肺病（c〇pD)、氣 喘、囊狀纖維化症、間質性肺病、鼻炎 '關節炎與相關 之關卽病牛皮癬 '骨髓·性白血病或多發性硬化症。上 述應用包括以不超過最大容忍劑量的劑量將本發明所述 之抗體或其之抗原結合片段或包含抗體或其之抗原結合 片段之組合物施加至患者，其中最大容忍劑量係約每劑 500 mg。 本發明亦提供利用抗_hGM_CSF抗體或其之片段治療 具有疾病或異常(與h G M _ C s F異常表現相關)之患者的方 法。方法包括對診斷有或有機率罹患與hGM_csF異常表 現（例如’過度表現）相關之疾病或異常的患者施加一有 效劑量之組合物以得到患者中的至少一治療效果，組合 物包含可活體内中和hGM_CSF活性的抗抗體 或其之抗原結合片段。 13 201206955 本發明亦包括提高抗_hGM_CSF抗體介導之hGM_csF_ 中和活的方法，其特徵在於同時施加專一於相同特定 抗原之複數種抗-hGM-CSF單株抗體或其抗原結合部 分。某些實施例中，兩個或更多類型的抗體或其抗原結 合部分係選自下列（a)與: (a) 抗-hGM-CSF單株抗體或其之抗原結合部分，其之 CDR係由序列編號：4_9、序列編號：33〇_335、序列編 號：336-341或序列編號：342_347的胺基酸序列所代表， 其專一於hGM-CSF ;及 (b) (a)的抗-hGM-CSF單株抗體或其之抗原結合部 分’其胺基酸序列中有一或更多胺基酸被取代、刪除、 插入或附加，其專一於hGM-CSF。 包含提南活性方法之態樣的特徵在於當hGM-CSF引 發TF-1細胞增殖時，兩個或更多類型的抗體或其抗原結 合部分各自以約55 pM的濃度抑制約80%的TF-1細胞增 殖。 本發明亦提供本文所述之抗體與其之抗原結合片段所 辨別之hGM-CSF的表位。hGM-CSF之表位的聚胜肽係 於序列編號：2與3中提出’其中表位由根據本揭露之 抗體或其之抗原結合片段所辨別，且其中聚胜肽序列呈 現hGM-CSF的間斷片段（根據序列編號：1)β表位係人 類GM-CSF的間斷片段，其中表位包括所有或一部分的 人類GM-CSF (序列編號：1)胺基酸殘基77-80與人類 GM-CSF (序列編號：1)胺基酸殘基95-104，且其由包括 201206955 六個不同CDR(如序列編號：4-9或序列編號：330-335 所示）之抗-hGM-CSF單株抗體或其之抗原結合片段所辨 別。 本發明亦提供本發明之表位的應用。本發明亦包括篩 選與/或辨別專一性結合本文所述之表位（由本文提供之 抗體與其之抗原結合片段所辨別）的分子。與本文所述辨 別結合表位之分子的方法相關之某些實施例包括：⑴利 用包含表位之探針_選生物樣本或胜肽庫；單離專一 性結合探針的分子；及（iii)辨別分子。例如，結合表位 之分子可為抗-hGM-CSF單株抗體或其之抗原結合片 段。某些實施例思及探針更包括可偵測的標記。某些實 施例中，方法包括固定的探針。 亦提供產生抗-hGM-CSF抗體與其之抗原結合片段的 方法或處理。本發明包括在宿主細胞内產生結合 hGM-CSF之抗-hGM-CSF單株抗體或其之抗原結合片段 的方法’其中抗體或其之抗原結合片段包括至少一含有
Vh-CDR1之共有序列、含有vH_cDR2之共有序列、含有 VH-CDR3之共有序列、含有Vl CDR1之共有序列、含有 VL-CDR2之共有序列及含有Vl CDR3之共有序列。方法 包括下列步驟： ⑴取得包含編碼至少—含有VH_CDR1之共有序列、 含有VH-CDR2之共有序列、含有Vh_CDR3之共有序列、 含有vl-cdri之共有序列、含有Vl_CDR2之共有序列 與3有VL-CDR3之共有序列的至少一 DNA序列之宿主 15 201206955 細胞； (ii)在宿主細胞中表現DNA，其中： 含有VH-CDR1之共有序列為FTFS(Y/H)(G/A)MH (序列編號：314)、 含 有 Vh-CDR2 之共有 序列為 (L/V)(T/I)(Y/W)HXGX(R/K)K(F/Y)YADSV(R/K)G (序列 編號：315)、 含 有 Vh-CDR3 之共有 序列為 • EX(M/V)G(A/G)XXDX (序列編號：316)、 含 有 Vl-CDR1 之共有 序列為 XGNXXNIGS(H/Y)AVG (序列編號：317)、 含有 VL-CDR2之共有序列為G(R/K)SP(A/P)SG (序列編號：318)及 含 有 Vl-CDR3 之共有 序列為 STWDS(R/S)LSAV(V/L)(序列編號：319);及 φ (iii)在適合DNA表現與抗體或其之抗原結合片段產 生的條件下培養宿主細胞。 某些實施例中，至少一 DNA編碼重鏈或其之部分及輕 鏈或其之部分，其中重鏈或其之部分係選自序列編號： 10-33、3 8-80、348-3 63、152-183 與 222-245 所構成之群 組；而其中輕鏈或其之部分係選自序列編號：34-37、 3 64、3 65與184-221所構成之群組。 上方處理更包括單離抗體或其之抗原結合片段。 16 201206955 上方處理更包括製備包含上述抗體或其之抗原結合片 段及藥學可接受載體之組合物。 亦提供包含編碼本文所述之抗體或其之抗原結合片段 的至少一部分之DNA的載體。亦包括表現上述載體的宿 主細胞。 某些實施例中，載體包括編碼VH-CDR1、VH-CDR2及 VH-CDR3 之 DNA，其中：
Vh-CDR1係SYGMH (序列編號：4)或SHAMH (序列 編號：333)、 VH-CDR2 係 LTYHHGNRKFYADSVRG (序列編號：5) 或 VIWHDGSKKYYADSVKG (序列編號：334)及
Vh-CDR3 係 ESMGAINDN (序列編號：6)或 EWVGGTCDS (序列編號：335)。 某些實施例中，載體包括編碼Vl-CDR1、VL-CDR2及 VL-CDR3 之 DNA，其中
Vl-CDR1 係 IGNNNNIGSHAVG (序列編號：7)或 SGNSSNIGSYAVG (序列編號：330)、 VL-CDR2 係 GRSPPSG (序列編號：8)或 GKSPASG (序 列編號：331)及 VL-CDR3 係 STWDSSLSAVV (序列編號：9)或 STWDSRLSAVL (序列編號：332)。 本發明某些實施例中，編碼能夠結合hGM-CSF並中和 hGM-CSF之生物活性之抗-hGM-CSF單株抗體或其之抗 原結合部分的單離DNA之特徵在於單離DNA編碼包括 17 201206955 至少一選自序列編號：4-9所構成之群組的胺基酸序列。 某些實施例中，編碼能夠結合hGM-CSF並中和hGM-CSF 之生物活性之抗-hGM-CSF單株抗體或其之抗原結合部 分的單離DNA之特徵在於單離〇ΝΑ編碼包括至少一選 自序列編號：330-335所構成之群組的胺基酸序列。單離 DNA能夠在嚴格條件下與上述〇ΝΑ雜合。本發明之態 樣包括包含任一上述DNA之載體以及表現重組表現載 體之宿主細胞。 【實施方式】 多株抗體與單株抗體通常係衍生自實驗動物，諸如小 鼠、兔子與山羊》然而，取得之抗體具有其之生產所用 之動物類型的序列特徵。若將其施加至人類，人類免疫 系統會將抗體辨別為外來物，並接著引發人類抗_動物抗 體反應（即’抗體產生其本生的抗體）。 • 如本文所述’從衍生自原發性肺泡蛋白沉著症 (idiopathic alveolar proteionosis)病患之血液的抗體產生 細胞取得抗-hGM-CSF單株抗體。從衍生自原發性肺泡蛋 白沉著症病患之血液的抗體產生細胞取得本發明中之抗 -hGM-CSF單株抗體或其之抗原結合部分。因此，本發明 中之抗-hGM-CSF單株抗體或其之抗原結合片段係完全 的人類單株抗體。因此，其在抗體製備物施加至人體時 使促發免疫原性（immunogenicity)的可能性最小。 18 201206955 本發明即將解決的問題如下：本發明著重在提供 GM-CSF-結合單株抗體與其之gm-CSF-結合片段，其針 對hGM-CSF呈現改進的中和能力或活性；及組合物，其 包括至少一種類或類型的上述單株抗體或其之片段；以 及治療與hGM-CSF過度表現（比起沒有罹患症狀、疾病 或異常之個體，hGM-CSF水平在罹患症狀、疾病或異常 之個體中較尚）相關之症狀或疾病的方法。 _ 本揭露描述之抗-hGM-CSF單株抗體或其之抗原結合 片段專一性結合hGM-CSF(其之異常表現會導致不同疾 病）並減少或排除（中和）其之生物活性。抗_hGM-CSF單 株抗體呈現中和活性（針對hGM—CSF)，其係高於以前存 在之抗-hGM-CSF單株抗體的中和活性。明確地說，本發 明之抗-hGM-CSF單株抗體係不具有免疫原性且不引發 免疫反應的人類單株抗體。 「專一性結合」意指抗體的高度結合力/或 • 高度親合力結合特定聚胜肽，例如蛋白（例如，人類 GM CSF蛋白）的表位。抗體結合至此特定聚胜肽上的表 位較佳係強於相同抗體結合至任一其他表位（特別是關 注之特定聚胜肽有關之分子中或相同樣本中存在的那些 表位），例如更強地結合蛋白（例如，GM_CSF)之表位片 段，以致調整結合條件可讓抗體幾乎專門地結合至所欲 蛋白之表位位置或片段，例如GM_CSF處理而暴露但在 :同亞型之相關因子上沒有暴露的表位片段。本發明之 單離抗體較佳係免疫反應且免疫專一於特定物種。例 201206955 如’本發明之抗體辨別人類GM-CSF但不辨別鼠科對應 物。應當理解本發明此態樣所述之抗體與其之抗原結合 片段辨別天然結構或實質相近於其天然結構的抗原表 位，以致讓抗原的間斷片段於整體抗原（例如，hGM-CSF) 中相當接近（如結構研究中所發現），藉此共同形成本發 明抗體辨別之表位（例如’抗原表面上的「袋」）^因此， 本發明此態樣中描述之抗體或其之抗原結合片段不與非 GM-CSF(含有上述形成表位之兩者聚胜狀序列）蛋白交 互作用。應當理解抗體-抗原結合的含義中，藉由交互作 用性質的結合視為「專一性」。因此，「結合GM-CSF的 抗體」應理解成以專一性結合抗原（即，GM-CSF)。 本文所用之詞囊「抗體」意指其中4個聚胜肽鍵（2個 重鏈與2個輕鏈）藉由雙硫鍵交互連結的免疫球蛋白。可 藉由單株或重組技術來產生單株抗體。該領域熟悉該項 技術。本文交替應用詞彙「抗原結合部分」與r抗原結 合片段」來描述較佳對抗原（例如，hGM-CSF)呈現專_ 性抗原結合活性的抗體任何縮短變形。明確地說，本發 明之片段係與各個單株抗體結合相同表位來結合 hGM-CSF的片段。例如’片段可為Fab片段或任何呈現 上述特徵的其他片段。此外，抗體片段更包括單鏈抗體 (scFV)，其中包括抗體變異區與互補決定區（CDR);雙專 一性抗體與多專一性抗體。 本文所用之「生物活性」與生物的活性同義。因此， 「hGM-CSF的生物活性」係活體内或細胞式試驗（例如， 20 201206955 本文所述之那些試驗）中確定或測量之hGM-CSF的生物 功能。更明確地說，可在細胞增殖試驗中測量的hGM-CSF 生物活性。應用已知對GM-CSF反應的適當細胞株。一 般針對人類細胞系統而言，人類紅白血病細胞株TF - 1係 用來執行增殖試驗。TF-1係由具有紅白血病之患者建立 的細胞株。試驗係基於GM-CSF刺激之TF-1細胞增殖的 抑制且技術建立相當完善。其他細胞株亦適合。熟悉技 術之人士可以採用適當的試驗系統或條件。 在不同濃度的野生型重組人類GM-CSF (稱為 rhGM-CSF)存在下執行TF-1增殖試驗。根據這些數據， 可得到劑量依賴性曲線。引出TF-1細胞中增殖之最大生 物反應的80%所需之GM_CSF濃度在此界定成ed80或 ED80。因此，ED80代表最大反應「80%的有效劑量」。 相似地，在生物試驗中帶來最大反應的一半所需之
GM-CSF濃度係表示成εε>5〇或ED50。一般而言，GM_CSF 的ED50值在利用人類生長因子-依賴性TF-1細胞株之細 胞增殖試驗中測量為〇.〇2 - 〇.2 ng/m 1。 此或任何其他相似試驗系統可用來辨別或確定 hGM-CSF抑制劑或擷抗劑的活性。例如，增殖試驗系統 可用來測量抗體針對hGM-CSF的中和能力。測量生物 GM-CSF功能之試驗的其他實例包括IL_8分泌試驗與表 面CDllb/Macl誘導試驗。 詞彙「中和」、「中和化」等代表生物活性因子（例如， hGM-CSF)之生物活性的抑制。因此，針對hGM csF且 21 201206955 = 此力或中和活性之抗體意指抗體能結合並對抗 :戈抵銷hGM-CSF在生物系統(例如，TF- i細胞)中的增殖 效應’藉此實質抑制或排除hGM-CSF的生物活性。 諸如/抑制效應」、「抑制」、「能夠抑制」與「抑制作 用」等同意指目標抗原導致之生物活性51〇〇%的抑制， 不限於其之來源。爲了治療目的，刪-CSF生物活性的 理想抑制應介於50%與1〇〇%之間。 φ 一般而言，ICw係化合物抑制生物或生化功能效力的 測量此疋量測量指出需要多少量的特定藥物或其他試 劑（抑制劑）來抑制一半的已知生物處理（或處理的部分， 即酵素、細胞、細胞受體或微生物）。換句話說，其係物 質最大抑制濃度（ic)的一半（50%)(50%IC或IC5〇)e在藥 物學研究中其通常當作擷抗藥物效力的測量。根據美國 食品藥物管理局採用的指導方針，IC5〇代表試管内5〇% 抑制所需的藥物濃度。 _ 因此’可藉由構築劑量依賴性曲線來測定針對 hGM-CSF之中和抗體的IC5。並檢驗不同濃度的中和抗體 顛倒hGM-CSF增殖能力的效應。可藉由確定抑制促效劑 最大生物反應一半所需的濃度來計算已知擷抗劑的iCw 值。 根據不同實施例，抗-hGM-CSF單株抗體或其抗原結合 片&之IC50值低於20 pM、低於30 pM、低於40 pM、 低於50 pM、低於60 pM、低於70 pM、低於8〇 pM、低 於90 PM或低於1〇〇 PM，各個實例在ED8〇下增殖試驗 22 201206955 中確定。特定實施例中，抗體或其之抗原結合片段之IC50 值低於20 pM或低於30 pM，在ED80下TF-1增殖試驗 中確定。 本揭露中之抗-hGM-CSF單株抗體包括免疫球蛋白分 子，其包括2個重鏈與2個輕鏈。各個重鏈包括重鏈變 異區（適當地縮寫成「HCVR」或「VH」）與重鏈恆定區（重 鏈恆定區具有3個區塊，縮寫成「CH1」、「CH2」與 「CH3」）。各個輕鏈包括輕鍵變異區（適當地縮寫成 「LCVR_」或「vL」）與輕鏈恆定區（輕鏈恆定區具有1個 區塊，縮寫成「CL」）。HCVR與LC VR對抗體的結合專 一性特別重要。 變異區的胺基酸序列負責大部分抗體與抗原間之交互 作用。因此’當表現載體構築成包含變異區序列（衍生自 天然抗體）於框架序列（衍生自具有不同特性之不同抗體） 中時，得到之載體可表現模擬天然抗體特性的重組抗 • 體。因此，在產生完整重組抗體（具有與原本抗體相似的 結合特性）時不必得到特定抗體的完整序列。覆蓋變異區 之重鏈與輕鏈的部分序列有時足以達成此項目的。
抗體與目標抗原交互作用主要係透過LCVR與HCVR 的胺基酸殘基。因此， ’變異區中胺基酸序列較抗體中變
(CDR)」<=HCVR與LCVR各自分別由3 個CDR與4個 23 201206955 FR所構成。其順序由胺基端至羧基端為FRl、CDRl、 FR2、CDR2、FR3、CDR3 與 FR4。 領域中熟悉確定或預測對應各個抗體結構區塊（包括 高度可變區，例如CDR)胺基酸殘基的方法。某些時常應 用的方法包括Chothia、AbM與Kabat。 一般而言，抗體以至少約1χ1〇-7 M的親合性結合抗 原，並以相對非專一性抗原（諸如，B s A、酿蛋白）至少兩 倍的高度親合性結合特定抗原。 針對某些IgG抗體的辭彙「高度親合力」意指抗體之 結合親合力至少約1χ1〇-7 M、較佳係至少約1χ1〇·8 M、 更佳係至少lxl〇-9M且更佳係至少1x10-igm。 不同抗體亞型之「高度親合力」的定義不同。例如， 當IgM亞型之結合親合力至少1χ1〇·7Μ的時候其被界 定成具有「高度親合力」。 本發明之抗體 如本文所述，本發明關於抗_人類gm_csf (抗 -hGM-CSF)單株抗體與其之片段，其對hGM_csF之中和 能力高於現存單株抗體（高於目前可取得的軍株抗體）針 對hGM-CSF之能力。可應用或施加本文所述之—類型或 種類的抗-hGM-CSF單株抗體或其之片段。 或者’可-起應用或施加超過—種類型或種類的抗 -hGM-CSF單株抗體。發明者發現當_起應用超過一種類 型或種類的單株抗體時，其提供較高的中和活性⑼如， 24 201206955 較高的細胞生長抑制能力）。再者，可搭配除了抗 -hGM-CSF或其之片段以外的一或多種類型或種類之抗 -GM-CSF單株抗體或片段與/或非抗體的治療劑（諸如， 小分子、RNAi或胜肽）來應用或施加一或多種類型或種 類的抗-hGM-CSF單株抗體或其之片段。
一態樣中，提供辨別與專一性結合hGM-CSF之單離單 株抗體或其之抗原結合片段。本文描述的是結合 hGM-CSF且呈現針對hGM-CSF生物活性之中和能力或 中和活性的單離抗-hGM-CSF單株抗體與其之抗原結合 片段（結合hGM-CSF之抗-hGM-CSF單株抗體，與結合 hGM-CSF之其抗原結合片段）。另一實施例係結合 hGM-CSF並呈現針對hGM-CSF之中和能力或活性的單 離抗-hGM-CSF單株抗體與其之抗原結合片段，其中單株 抗體與其之抗原結合片段辨別下列：hGM-CSF (序列編 號：1)中的ELYK (序列編號：2)與TMMASHYKQH (序 列編號：3)。結合hGM-CSF之單離抗-hGM-CSF單株抗 體與其之抗原結合片段呈現針對hGM-CSF活性的中和 能力或活性且可用來治療與預防與hGM-CSF過度表現 相關之疾病、症狀與異常，其中單株抗體與其之抗原結 合片段辨別下列：hGM-CSF中的ELYK (序列編號：2) 與TMMASHYKQH (序列編號：3)。特定實施例係結合 hGM-CSF的單離抗-hGM-CSF單株抗體或其之抗原結合 片段，其中抗體或抗原結合片段辨別序列編號：1所界 定之hGM-CSF的下列間斷表位（相對胺基酸）：hGM-CSF 25 201206955 中位置77-80的ELYK (序列編號：2)與hGM-CSF中位置 95-104的TMMASHYKQH (序列編號：3)。本文所述之單 離抗-hGM-CSF單株抗體與其之抗原結合片段專一性結 合hGM-CSF。其不與GM-CSF以外之蛋白交互作用。 更明確地說，本文所述係專一性結合hGM-CSF且具有 中和hGM-CSF生物活性之能力的單株抗體。將四個本文 上述之抗體標為 EV1018、EV1019、EV1003 與 EV1007， 如實施例中表1與2中所概述。因此，EV1018、EV1019、 EV1003 與 EV1007 結合 hGM-CSF 並能夠中和 hGM-CSF 之生長促進效應。更詳細地描述，EV1018與EV1019抗 體辨別hGM-CSF蛋白上相同或實質重疊表位。 本發明進一步包括抗-hGM-CSF單株抗體或其之抗原 結合部分，其特徵在於抗-hGM-CSF單株抗體或其之抗原 結合部分之胺基酸序列，其中互補決定區（CDR)中有一或 更多胺基酸被取代、刪除、插入或附加。 進一步態樣中，單離的去氧核糖核酸（DNA)編碼能夠 結合hGM-CSF並中和hGM-CSF生物活性之抗-hGM-CSF 單株抗體或其之抗原結合部分，其特徵在於單離的DNA 編碼之胺基酸序列包括選自序列編號：4-9所構成之群組 的至少一者。 本發明之一實施例係關於能夠結合hGM-CSF (hGM-CSF)且中和hGM-CSF (hGM-CSF)生物活性之抗 -hGM-CSF單株抗體或抗原結合部分，其特徵在於抗 -hGM-CSF單株抗體或抗原結合部分之互補決定區（CDR) 26 201206955 係由至少一選自序列編號：4-9所構成之群組的胺基酸序 列所代表。 本發明另一實施例係關於能夠結合hGM-CSF並中和 hGM-CSF生物活性之抗_hGM-CSF單株抗體或抗原結合 部分，其特徵在於抗-hGM-CSF單株抗體或抗原結合部分 之互補決定區（CDR)係由至少一選自序列編號：330-335 所構成之群組的胺基酸序列所代表。 本發明中，互補決定區（CDR)由一或更多選自序列編 號：4-9所構成之群組的胺基酸序列所代表之抗 -hGM-CSF單株抗體、及互補決定區（CDR)由一或更多選 自序列編號：330-335所構成之群組的胺基酸序列所代表 之抗-hGM-CSF單株抗體被視為不同類型的抗_hGM-CSF 單株抗體》 本發明將包括互補決定區（CDR)中有一或更多胺基酸 被刪除、取代、插入或附加之單株抗體或其之抗原結合 部分，只要其專一性結合並中和hGM-CSF之生物活性。 本發明包括能夠結合hGM-CSF並中和hGM-CSF生物 活性之單株抗體或其之抗原結合部分，其中抗_hGM-CSF 單株抗體或其之抗原結合部分的CDR區塊係選自下列所 構成之群組： (a) 輕鏈（L鏈）CDR1區塊，其之胺基酸序列為序列編 號：7， (b) 輕鏈（L鏈）CDR2區塊，其之胺基酸序列為序列編 號：8， 27 201206955 (C)輕鏈（L鏈）CDR3區塊，其之胺基酸序列為序列編 號：9。 相同的方式，本發明包括能夠結合hGM-CSF並中和 hGM-CSF生物活性之單株抗體或其之抗原結合部分，其 中抗-hGM-CSF單株抗體或其之抗原結合部分的CDR區 塊係選自下列所構成之群組： (d) 輕鏈（L鏈）CDR1區塊，其之胺基酸序列為序列編 號：330 ， (e) 輕鏈（L鏈）CDR2區塊，其之胺基酸序列為序列編 號：331 ， (f) 輕鏈（L鏈）CDR3區塊，其之胺基酸序列為序列編 號：332。 當下列抗-hGM-CSF單株抗體或其之抗原結合部分專 一性結合且中和hGM-CSF生物活性時，其亦包括於本發 明中：抗-hGM-CSF單株抗體或其之抗原結合部分，其中 上述互補決定區（CDR)的輕鏈係藉由刪除、取代、插入或 附加一或更多胺基酸加以修飾。 本發明包括能夠結合hGM-CSF並中和hGM-CSF生物 活性之抗-hGM-CSF單株抗體或其之抗原結合部分，其 中抗-hGM-CSF單株抗體或其之抗原結合部分的CDR區 塊係選自下列所構成之群組： (a)重鏈（H鏈）CDR1區塊，其之胺基酸序列為序列編 號：4， 28 201206955 (b) 重鏈（Η鏈）CDR2區塊，其之胺基酸序列為序列編 號：5， (c) 重鏈（Η鏈）CDR3區塊，其之胺基酸序列為序列編 號：6。 相同的方式，本發明包括能夠結合hGM-CSF並中和 hGM-CSF生物活性之單株抗體或其之抗原結合部分，其 中抗-hGM-CSF單株抗體或其之抗原結合部分的CDR區 塊係選自下列所構成之群組： (a) 重鏈（H鏈）CDR1區塊，其之胺基酸序列為序列編 號：333 ， (b) 重鏈（H鏈）CDR2區塊，其之胺基酸序列為序列編 號：334 ， (c) 重鏈（H鏈）CDR3區塊，其之胺基酸序列為序列編 號：335 。 當下列抗-hGM-CSF單株抗體或其之抗原結合部分專 一性結合且中和hGM-CSF生物活性時，其亦包括於本發 明中： 抗-hGM-CSF單株抗體或其之抗原結合部分，其中上述 互補決定區（CDR)的重鏈係藉由删除、取代、插入或附加 一或更多胺基酸加以修飾。 GM-CSF表位 hGM-CSF的表位也是本文的主題，其係人類GM-CSF 的間斷片段，其中表位包括人類GM-CSF (序列編號：1) 29 201206955 之胺基酸殘基77-8 0與人類GM-CSF (序列編號：1)之胺 基酸殘基95-1 04，且由序列編號：2與序列編號：3提出 的聚胜肽序列所界定，表位係由抗-hGM-CSF單株抗體或 其之抗原結合片段所辨別，抗-hGM-CSF單株抗體或其之 抗原結合片段包括序列編號：4-9或序列編號：330-335 提出的6個不同CDR。 更詳細地於實施例中描述，藉由表位定位研究來確認 單株抗體EV1018與EV1019所辨別的hGM-CSF表位。 已經發現EV1 018與EV1 019兩者辨別hGM-CSF抗原的 相同（或實質重疊）位置’對應於根據GenBank登錄號： NP—000749所確定之胺基酸殘基77-80與95-104 〇結構 研究已經指出雖然兩個片段在一級序列中係間斷的，但 聚胜肽的兩個片段在在摺疊時相當接近而共同形成構造 上的表位。跟EV1018與EV1019兩者辨別相同或實質重 疊表位的發現一致，EV1018與EV1019之CDR序列的 分析顯示實質相似性。比較這兩個抗體之CDR的胜肽序 列而取得下列共有序列（例如，式），代表包含各個CDR 之重疊（例如，相同）殘基： 關於 VH-CDR1 : FTFS(Y/H)(G/A)MH (序列編號：3 14); 關 於 Vh-CDR2 : (L/V)(T/I)(Y/W)HXGX(R/K)K(F/Y)YADSV(R/K)G (序列 編號：315); 關於 VH-CDR3 : EX(M/V)G(A/G)XXDX (序列編號： 316);及 30 201206955 關於 VL-CDR1 : XGNXXNIGS(H/Y)AVG (序列編號： 317)； 關於 VL-CDR2 : G(R/K)SP(A/P)SG (序列編號：318); 及 關於 VL-CDR3 : STWDS(R/S)LSAV(V/L)(序列編號： 319)。 各個共有式中，以傳統單字母方式顯示包含對應CDR 之胺基酸殘基。顯示EV1018與EV1019兩者共有的相同 殘基。此外，以括號中利用斜線符號的來顯示兩個抗體 之間不同的殘基。 因此，本文另一實施例係結合hGM-CSF並呈現針對 hGM-CSF之中和能力或活性的單離抗-hGM-CSF單株抗 體或其之抗原結合片段，其中抗體或其之抗原結合片段 包括（a)重鏈或重鏈的部分（如果係抗體片段），其包括 Vh-CDR1 、 Vh-CDR2 與 Vh-CDR3 ，其中式 FTFS(Y/H)(G/A)MH (序列編號：3 14)代表包含 Vh-CDR1 . - · 之共 有序列 ； 式 (L/V)(T/I)(Y/W)HXGX(R/K)K(F/Y)YADSV(R/K)G (序列 編號：315)代表包含VH-CDR2之共有序列；及式 EX(M/V)G(A/G)XXDX (序列編號：316)代表包含 VH-CDR3之共有序列；及（b)輕鏈或輕鏈的部分（如果係 抗體片段），其包括 VL-CDR1、VL-CDR2 與 VL-CDR3， 其中式XGNXXNIGS(H/Y)AVG (序列編號：317)代表包 含VL-CDR1之共有序列；式G(R/K)SP(A/P)SG (序列編 31 201206955 號：318)代表包含VL-CDR2之共有序列；及式 STWDS(R/S)LSAV(V/L)(序列編號：319)代表包含 VL-CDR3之共有序列；且其中抗體或其之片段辨別 hGM-CSF 中的 ELYK (序列編號：2)與 TMMASHYKQH (序列編號：3)。特定實施例中，抗-hGM-CSF單株抗體 或其之抗原結合片段結合下列的間斷表位：hGM-CSF中 的ELYK (序列編號：2)與TMMASHYKQH (序列編號： 3)。 本文所述之另一實施例係結合hGM-CSF的單離抗 -hGM-CSF單株抗體或結合hGM-CSF的其之抗原結合片 段，其中抗體或其之片段包括（a)重鏈或重鏈的部分（如果 係抗體片段），其包括Vh-CDR1、Vh-CDR2與VH-CDR3， 其中 Vh-CDR1 包括 FTFS(Y/H)(G/A)MH (序列編號： 314) ； Vh-CDR2 包 括 (L/V)(T/I)(Y/W)HXGX(R/K)K(F/Y)YADSV(R/K)G (序列 編號：315);及 VH-CDR3 包括 EX(M/V)G(A/G)XXDX (序 列編號：316);及（b)輕鏈或輕鏈的部分（如果係抗體片 段），其包括 VL-CDR1、VL-CDR2 與 VL-CDR3，其中 VL-CDR1 包括 XGNXXNIGS(H/Y)AVG (序列編號：3 17); VL-CDR2 包括 G(R/K)SP(A/P)SG (序列編號：318);及 Vl-CDR3 包括 STWDS(R/S)LSAV(V/L)(序列編號： 319)，且其中抗體或其之片段以不超過400 pM的KD結 合hGM-CSF，另一實施例中KD係低於160 pM，根據實 施例11描述的技術藉此確定KD。 32 201206955 另一實施例中，抗-hGM-CSF單株抗體或其之抗原結合 片段的特徵在於抗-hGM-CSF單株抗體或其之抗原結合 片段抑制周圍血液樹突細胞的增殖。因此，進一步實施 例係結合hGM-CSF的單離抗-hGM-CSF單株抗體或結合 hGM-CSF的其之抗原結合片段，抗-hGM-CSF單株抗體 或其之片段包括重鏈或其之部分與輕鏈或其之部分。重 鏈或重鏈的部分（如果係抗體片段）可包括Vh-CDR1、 Vh-CDR2與Vh-CDR3。某些實施例中，共有序列係由式 FTFS(Y/H)(G/A)MH (序列編號：314)所代表，其包含 Vh-CDR1 。相 似地， 式 (L/V)(T/I)(Y/W)HXGX(R/K)K(F/Y)YADSV(R/K)G (序列 編號：315)代表包含乂11-00112之共有序列；而式 EX(M/V)G(A/G)XXDX (序列編號：316)代表包含 VH-CDR3之共有序列。輕鏈或輕鏈的部分（如果係抗體片 段）可包括VL-CDR1、VL-CDR2與VL-CDR3。上述實施 例中，式XGNXXNIGS(H/Y)AVG (序列編號：317)代表 包含VL-CDR1之共有序列；式G(R/K)SP(A/P)SG (序列 編號：318)代表包含 VL-CDR2之共有序列；而式 STWDS(R/S)LSAV(V/L)(序列編號：319)代表包含 VL-CDR3之共有序列。 任一實施例中，抗體或其之片段中和hGM-CSF活性。 特定實施例中，抗-hGM-CSF單株抗體或其之片段中和 hGM-CSF活性，以致抗體或片段在增殖抑制試驗中的 IC50值小於20 pM、小於30 pM、小於40 pM、小於50 33 201206955 pM、小於60 pM、小於70 pM、小於80 pM、小於90 pM 或小於100 pM’各個實例係在ED80下執行TF-1增殖試 驗（如實施例12所述）來確定。特定實施例中，所請之抗 -hGM-CSF單株抗體或其之抗原結合片段的IC5〇值係低
於20 PM，如上述在ED80下TF-1增殖試驗中確定。進 一步實施例中，本發明提供之抗_hGM-CSF單株抗體或其 之抗原結合片段的特徵在於，當hGM-CSF引發TF-1細 胞增殖時，抗-hGM-CSF單株抗體或其之抗原結合片段在 約14 pM的濃度下抑制約5〇%的tf-1細胞增殖。 更詳細地驗證於實施例中，Ev丨〇丨8與EV丨〇 19兩者有 效地中和hGM-CSF生物活性。因為上述這些抗體實質共 有相同的構造表^立，有可能利用表位來筛選辨別表位的 額外分子’例如單株抗體或其之片段1此，本發明亦 〜及篩選方法’其中hGM_CSF的表位係由序列編號：2 與序列編號：3所提出之聚胜肽序列所界定，且由 EV1018 EV1019或上述之變體所辨別。上述方法包括⑴ 利用包括表位之探針篩選生物樣本或胜肽庫；⑹單離專 -性結合探針的分子；及㈣辨別分子1些實施例中， 利用方法辨別之分子係抗_hGM csF單株抗體或其之抗 :結合片段。某些實例中，探針更包括可㈣標記，包 實ίΓ:限於）、標記、色素、親合性標籤等。根據某些 π可固定探針以例如筛選結合分子。熟悉技術： 士1知且可一般地取得筛選方法。 34 201206955 上述任一實施例中，抗體或其之抗原結合片段可為免 疫球蛋白任一亞型，例如IgG類型的IgGl、IgG2與IgG4。 因此上述任一實施例中，例如重鏈可為γ類型，諸如γι、 丫2、丫3或丫4。上述任一實施例中，重鏈可選自（重鏈之胺 基酸殘基可選自）下列所構成之群組：序列編號：10-33、 3 8-80、152-245與348-363提出之聚胜肽。某些實施例 中’可應用重鏈的部分，包括重鏈的變異區。本揭露描 述之重鏈變異區的非限制實例係提供於序列編號： 152-159 與 348-363 。 抗-hGM-CSF單株抗體與其之抗原結合片段中，輕鏈可 為λ輕鏈或κ輕鏈或上述之一部分。特定實施例中，例 如申請專利範圍第7項所述之抗-hGM-CSF單株抗體或 其之抗原結合片段’ λ輕鍵包含一或兩者下列胺基酸取 代：R100G與A153G。（包含R100G取代、A153G取代 或R100G與A153G取代兩者）。應當注意本文所述之抗 體鏈之胺基酸序列中的取代係藉由參照適當參考胺基酸 序列加以描述’藉此任一輕鏈或其之片段中位置100與 15 3的指定應根據本發明藉由比較序列編號：3 5與序列 編號：3 4而加以確定，因為若與序列編號：3 4的序列相 比.這些對應序列編號：35胺基酸位置之胺基酸位置中r 係由G且Α係由G分別取代。例如，上方實例中，χ輕 鏈可包含一或兩者上述之胺基酸取代，參考胺基酸序列 係EV1018輕鏈（EV1018-野生型-原始；序列編號：34)。 R100G代表EV1018輕鏈中位置100處的R (精胺酸）由 35 201206955 G (甘胺酸）所取代；A153G代表EV1018輕鏈中位置153 處的A(丙胺酸）由G (甘胺酸）所取代。 特定實施例中，諸如申請專利範圍第2-8項任一項所 述之抗-hGM-CSF單株抗體或其之抗原結合片段，輕鍵係 選自下列所構成之群組：序列編號：34-37、184-221與 3 64-3 65提出之聚胜肽（其之胺基酸殘基）。本文所述之輕 鏈變異區的實例係提供於序列編號：184-201與364-365。
結合hGM-CSF之抗-hGM-CSF單株抗體的重鏈或其之 抗原結合片段可包括一或更多胺基酸取代，諸如T97A、 T97V、N95D、N95E、N95K、N95Q、N93Q/N95T、K144R、 L164A、L165A與K144R。應當注意本文所述之抗體鏈 的胺基酸序列之取代係參照適當的參考胺基酸序列，且 爲了確定位置應當應用上述R100G與A153G取代中的相 同原則。例如’上方實例中，重鏈可包含一或更多所述 之胺基酸取代，參考胺基酸序列為EV1018重鏈 (EV1018 ;序列編號：1〇)。例如，T97A表示EV1018重 鏈中位置97處的T (蘇胺酸）由A (丙胺酸）所取代；L164A 表示EV1018重鏈中位置164處的L(白胺酸）由A(丙胺 酸）所取代。 重鏈可包括一或者二或更多這些胺基酸取代之組合以 及其他不實質危及抗體或其之抗原結合片段結合且中和 hGM-CSF活性之能力的取代。 本發明更詳細的實施例係列舉於下： 36 201206955
一實施例中，抗-hGM-CSF單株抗體或其之片段如同申 請專利範圍第2項所請求般，其中重鏈包括一或更多選 自下列所構成之群組的胺基酸取代或者其之一或組合： T97A、T97V、N95D、N95E、N95K、N95Q、N93Q/N95T、 K144R、L164A、L165A 與 K144R。進一步實施例中，抗 -hGM-CSF單株抗體或其之抗原結合片段如同申請專利 範圍第2項所請求般，其中重鏈包括一或更多選自下列 所構成之群組的胺基酸取代：T97A、T97V、N95D、N95E、 N95K、N95Q、N93Q/N95T、K144R、L164A、L165A 與 K144R，且其中輕鏈包含一或兩者下列胺基酸取代 R100G 與 A153G。 進一步實施例係結合hGM-CSF的抗-hGM-CSF單株抗 體或結合hGM-CSF的其之抗原結合片段，例如申請專利 範圍第2-12項任一項所請求般，其中VH-CDR1包括胺 基酸殘基SYGMH (序列編號：4)或SHAMH (序列編號： 333)。 結合 hGM-CSF的抗-hGM-CSF單株抗體或結合 hGM-CSF的其之抗原結合片段，例如申請專利範圍第 2-13項任一項所請求般，其中VH-CDR2包括胺基酸殘基 LTYHHGNRKFYADSVRG (序列編號：5)或 VIWHDGSKKYYADSVKG (序列編號：334)係本文所述之 進一步實施例。 結合 hGM-CSF 的抗-hGM-CSF單株抗體或結合 hGM-CSF的其之抗原結合片段，例如申請專利範圍第 37 201206955 2-14項任一項所請求般，其中VH-CDR3包括胺基酸殘基 ESMGAINDN (序列編號：6)或EWVGGTCDS (序列編 號：335)亦為本文所述之實施例。 本發明進一步實施例係如下： 結合 hGM-CSF的抗-hGM-CSF單株抗體或結合 hGM-CSF的其之抗原結合片段，例如申請專利範圍第 2-15項任一項所請求般，其中VL-CDR1包括胺基酸殘基 IGNNNNIGSHAVG (序列編號：7)或 SGNSSNIGSYAVG (序列編號：330); 結合 hGM-CSF 的抗-hGM-CSF 單株抗體或結合 hGM-CSF的其之抗原結合片段，例如申請專利範圍第 2-16項任一項所請求般，其中VL-CDR2包括胺基酸殘基 GRSPPS (序列編號：8)或GKSPAS (序列編號：331);及 結合 hGM-CSF的抗-hGM-CSF單株抗體或結合 hGM-CSF的其之抗原結合片段，例如申請專利範圍第 φ 2-17項任一項所請求般，其中¥!^-0〇113包括胺基酸殘基 STWDSSLSAVV (序列編號：9)或 STWDSRLSAVL (序列 編號：332)。 本發明額外實施例係關於結合 hGM-CSF 的抗 -hGM-CSF單株抗體或結合hGM-CSF的其之抗原結合片 段，如申請專利範圍第2-20項任一項所請求般，更包括 信號序列。 信號序列可為多種熟悉技術人士習知的信號序列，例 如用於允許或提高表現與/或傳送編碼產物離開細胞（產 38 201206955 生仏號之地）的任何信號序列，包括（但不限於）選自下列 所構成之群組的信號序列··序列編號：324、325與326。 所有實施例中，抗_hGM_CSF單株抗體可為人類抗體、 人類化抗體或單鏈抗體。例如，抗-hGM-CSF單株抗體或 其之抗原結合片段可如同申請專利範圍第12〇項任一項 所請求般，其中抗體係人類抗體、人類化抗體或單鏈抗 體。 抗體的結合活性 出乎意料地，如本揭露之實施例中所示，各個這些抗 體針對抗原（hGM-CSF)所測得之結合親合力並未與其之 中和能力（例如，中和hGM-CSF生物活性的能力）線性相 關。此發現與較高的親合力對應較高的中和能力這種普 遍想法相反。如表7所示，發現到本發明之抗體（即，利 用本文所述之CDR來辨別本文所述之表位的抗體，例如 EV1018)在TF-1試驗中顯示的抑制超出先前技術抗體 100倍，但結合親合力係低於先前技術抗體的5。這 與憶刪/122797的教示相反，其顯示較高抗體親合力 具有TF-1試驗中較高的活性。 抗體的中和活性 人類周圍血液單核細胞與腫瘤細胞株tf_〗可回應 hGM-CSF刺激而增殖。藉由測量對其增殖的抑制效應來 確認抗-hGM-CSF單株抗體或其之抗原結合片段的中和 39 201206955 活性。已知在hGM-CSF存在下培養時，人類周圍血液單 核白血球與TF-1細胞會增殖。可藉由將本發明之抗 -hGM-CSF單株抗體或其之抗原結合片段加入培養系 統，或者藉由首先將hGM-CSF與本發明之抗-hGM-CSF 單株抗體或其之抗原結合片段反應接著將其加入培養系 統來抑制上述增殖。例如，本發明之抗-hGM-CSF單株抗 體或其之抗原結合片段在約2 ng/ml (約14 pM)的濃度 下，相對於陰性患者（31 pg/ml的hlgG)可具有40-60% (約50%)的細胞靜止率作為hGM-CSF引發細胞增殖中針 對TF-1細胞的中和活性。 本發明中之抗-hGM-CSF單株抗體或其之抗原結合片 段具有針對hGM-CSF的中和能力，其高於現存抗 -hGM-CSF單株抗體。因此，預期可以較少數量或劑量將 其當作治療劑來治療hGM-CSF引起的不同疾病，諸如過 敏性皮膚炎、自體免疫疾病、慢性阻塞性肺病（COPD)、 氣喘、囊狀纖維化症、間質性肺病、鼻炎、關節炎與相 關之關節病、類風濕性關節炎、牛皮癣、骨髓性白血病、 多發性硬化症。 治療組合物、套組與治療應用 本文揭露之抗-hGM-CSF抗體與抗原結合片段有效於 中和hGM-CSF的生物活性，並因此用來治療個體中與 hGM-CSF異常表現相關（例如，其所引發）之醫學症狀（例 40 201206955 如，疾病或異常）。因此’上述治療應用應包含於本 明中。 本文所用之詞彙「與hGM-CSF過度表現相關之疾病或 異常」應通常代表「hGM-CSF導致的疾病」《詞彙應包 括個體具有GM- C S F時任何導致或加劇病狀的疾病。, 彙亦包括其他導致或加劇病生理學的疾病。預期抑制 GM-CSF的生物活性可減緩GM_CSF導致的疾病症狀與/ 或可減緩疾病進展。
本文交替應用詞彙「疾病」、「異常」與「症狀广這些 包括（但不限於）：呼吸疾病、不同起因的阻塞性肺病、 不同起因的肺氣腫、限制性肺病、間質性肺部疾病、間 質性肺病、囊狀纖維化症、不同起因的支氣管炎、支^ 管擴張、ARDS (成人啤μ迫症候群）與所有形式的肺水 腫’阻塞性肺病，其選自c〇pD (慢性阻塞性肺病）、氣 喘、支氣管氣喘、小兒氣喘、嚴重型氣喘、急性氣喘發 作與慢性支氣管炎之中；肺氣腫，其之起因在於⑺扣 (陵佳阻塞肺病）或α1•蛋白酶抑制物不^ ;限制性肺 選自過敏性肺泡炎、工作相關有毒物質引發的限 （諸如’石棉沈著症或石夕肺病）與肺癌引起的限 如，入侵轉移性淋巴瘤（lymphangiosis 二:：a)、支氣管肺泡細胞癌與淋巴瘤);感染引起 的肺炎(諸如，病毒、細菌、真菌、原生動 他病原體感染)、不同因子引起的肺炎(例 ： 心臟不足症)、輕射引起的肺炎或纖維化、膠原：症 41 201206955 (C〇llagenoses)(例如，紅斑性狼瘡）、全身硬皮症或類肉 瘤（sarcoidosis)、肉芽腫（例如，伯克氏症（B〇eck,s disease)、原發性間質性肺炎或原發性肺纖維化症 (ΪΡΡ);枯液粘稠病（mucoviscidosis)、細菌或病毒感染引 起的支氣管炎、過敏性支氣管炎與毒性支氣管炎；支氣 管擴張；肺水腫，例如呼吸或吸入毒性物質與外來物質 之後的毒性肺水腫；鼻炎、關節炎與相關之關節病、牛 皮癖、骨髓性白血病、多發性硬化症、阿滋海默症、腎 絲球腎炎與慢性異位性皮膚炎。. 本文所用之詞彙「治療」通常意指對個體施加治療以 取得所有或任一下列結果：減緩或改善與人類gM_csf 異常表現與/或活性相關之疾病、異常或症狀的進展、嚴 重性與/或周期、或改善一或多個起因於施加一或多個治 療（例如，GM-CSF抗體）的其之症候。 本文所用之詞彙「治療有效劑量」意指治療（例如，免 疫專一性結合人類GM-CSF的抗體）的劑量足以減少與人 類GM-CSF異常表現與/或活性相關之異常的嚴重性、減 少與人類GM-CSF異常表現與/或活性相關之異常的持續 時間、改善與人類GM-CSF異常表現與/或活性相關之異 常的一或多個徵候、預防與人類GM-CSF異常表現與/ 或活性相關之異常的進展、造成與人類GM-CSF異常表 現與/或活性相關之異常的復原或提高或改善另一治療 的治療效應。 42 201206955 施加之抗-hGM-CSF單株抗體的數量（例如，藉由施加 本文所述之組合物）將取決於下列原因而有所變化：即將 治療的症狀、疾病或異常；接受治療之受試者（個體）的 年紀、性別與健康狀態；與即將治療之症狀、疾病或異 常的嚴重性或其之進展程度。利用習知方法並參照受試 者需求可實驗性地決定適當劑量。一般而言，以不超過 500 mg/劑的劑量將抗_hGM-CSF單株抗體或抗原結合片 段施加至受試者。亦可施加較小劑量。 其他實施例中，可結合上列的任一抗體與片段。某些 實施例中，可結合2、3、4、5或更多上述抗體、片段或 上述之組合。 某些實施例中’可將上述任一實施例進一步結合一或 更多先前已知的抗-GM-CSF抗體、片段或上述之組合。 另一實施例係包括（一，至少一）本文所述之抗 •hGM_CSF單株抗體或其之抗原結合片段的治療組合 物。一實施例中，治療組合物包括一或更多抗_hGM-CSF 單株抗體或抗原結合片段（辨別下列hGM-CSF中的 ELYK (序列編號：2)與TMMASHYKQH (序列編號：3)) 與藥學可接受載體。治療組合物可包括任一本文所述之 抗-hGM-CSF單株抗體或其之抗原結合片段，個別地（治 療組合物中一種類型或種類的抗_hGM-CSF單株抗體或 其之抗原結合片段）或組合地，諸如二或更多種類或類型 之抗-hGM-CSF單株抗體的組合；二或更多種類或類型之 其抗原結合片段的組合；一或更多種類或類型之抗 43 201206955 -hGM-CSF單株抗體與二或更多種類或類型之其抗原結 合片段的組合；或者二或更多種類或類型之抗-hGM-CSF 單株抗體與一或更多種類或類型之其抗原結合片段的組 合。 特定實施例係包括（一或超過一）結合hGM-CSF之抗 -hGM-CSF單株抗體或其之抗原結合片段與藥學可接受 載體的治療組合物，抗體或其之抗原結合片段包括（a)重 鏈或重鏈的部分（如果係抗體片段），其包括VH-CDR1、 VH-CDR2 與 VH-CDR3，其中式 FTFS(Y/H)(G/A)MH (序 列編號：314)代表包含VH-CDR1之共有序列；其中式 (L/V)(T/I)(Y/W)HXGX(R/K)K(F/Y)YADSV(R/K)G (序列 編號：315)代表包含VH-CDR2之共有序列；而其中式 EX(M/V)G(A/G)XXDX (序列編號：316)代表包含 VH-CDR3之共有序列；及（b)輕鍵或輕鍵的部分（如果係 抗體片段），其包括 VL-CDR1、VL-CDR2 與 VL-CDR3， 其中式XGNXXNIGS(H/Y)AVG (序列編號：317)代表包 含VL-CDR1之共有序列；其中式G(R/K)SP(A/P)SG (序 列編號：318)代表包含VL-CDR2之共有序列；而其中式 STWDS(R/S)LSAV(V/L)(序列編號：319)代表包含 VL-CDR3之共有序列，其中抗-hGM-CSF單株抗體或其 之片段辨別下列hGM-CSF中的ELYK (序列編號：2)與 TMMASHYKQH (序列編號：3)。 本文所述之組合物包括二或更多結合hGM-CSF的抗 -hGM-CSF單株抗體、二或更多結合hGM-CSF的其之抗 44 201206955 原結合片段或上述之組合；與藥學可接受載體，其中一 或更多抗-hGM-CSF單株抗體或一或更多其之抗原結合 片段辨別hGM-CSF中的間斷表位ELYK (序列編號：2) 與TMMASHYKQH (序列編號：3)。 本文所述之進一步實施例的組合物包括二或更多結合 hGM-CSF的抗-hGM-CSF單株抗體、二或更多其之抗原 結合片段、或上述之組合；與藥學可接受載體，其中一 或更多抗體或一或更多其之抗原結合片段包括⑷重 鏈，其包括Vh-CDR1、VH-CDR2與VH-CDR3，其中式 FTFS(Y/H)(G/A)MH (序列編號：314)代表包含 Vh-CDR1 之共 有序列 ； 其中式 (L/V)(T/I)(Y/W)HXGX(R/K)K(F/Y)YADSV(R/K)G (序列 編號：315)代表包含VH-CDR2之共有序列；而其中式 EX(M/V)G(A/G)XXDX (序列編號：316)代表包含 VH-CDR3之共有序列；及（b)輕鏈或輕鏈的部分（如果係 抗體片段），其包括 VL-CDR1、VL-CDR2 與 VL-CDR3， 其中式XGNXXNIGS(H/Y)AVG (序列編號：317)代表包 含VL-CDR1之共有序列；其中式G(R/K)SP(A/P)SG (序 列編號：318)代表包含VL-CDR2之共有序列；而其中式 STWDS(R/S)LSAV(V/L)(序列編號：319)代表包含 VL-CDR3之共有序列，其中抗-hGM-CSF單株抗體或其 之片段辨別下列hGM-CSF中的ELYK (序列編號：2)與 TMMASHYKQH (序列編號：3)。 45 201206955 本文所述之進一步主題係申請專利範圍第26或27項 之組合物，其中二或更多結合hGM-CSF之抗-hGM-CSF 單株抗體的至少一者之聚胜肽係選自下列所構成之群 組：序列編號：10-33、38-80、152-183、34-37、184-221、 222-245、320-323與348-365。除了 一或更多本文所述之 抗-hGM-CSF單株抗體之外，組合物可包括其他抗 -hGM-CSF單株抗體，例如先前描述之那些抗體。（參見， 諸如 PCT申請國際公開案 WO2006/122797 A2 (Morphosys) ; PCT 申請國際公開案 WO 2007/092939 A2 (Morphotek);及 PCT 申請國際公開案 w〇 2006/1 1353 A2)) 〇 套組 可將本文揭露之抗-hGM-CSF抗體或其之抗原結合片
段以及包括上述抗體之組合物提供成套組，其因此包含 於本發明中。可將套組提供成不同型式，且除了藥劑（治 療組合物）之外，套組亦可包括藥物或手段（通常來自醫 生的處方籤）的包裝與/或標籤。套組通常包括印好的操 作指南資料。某些實施例中，將配方組合物（例如，藥劑） 提供於-或更多容Hi些實施例中，容器可為用於配 ^施加之藥劑的裝置。例如，可將本發明之藥劑預先測 置（例如’分配）於單一使用分配者並提供成套細。某些 實例中，容器係注射器。可選擇性預先充填注射器。某 些實例中’單-應用容器係預先充填、預先密封與抛棄 46 201206955 型的。取決於特定藥劑的施加路徑與施加模式，套組可 包括適當的成分。 藥劑 本文所用之「藥劑可接受載體」包括任一或全部的生 理相容溶液、分配媒介、塗覆劑、抗微生物劑或抗真菌 劑、滲壓調整劑與吸收延緩劑。藥劑可接受載體的實例 &括一或複數種試劑’諸如水、鹽水溶液、磷酸鹽緩衝 液、葡萄糖、甘油、乙醇與上述之組合。許多實例中， 組合物較佳包括有滲壓調整劑，諸如糖、多s醇或氣化 納。多70醇可包括甘露醇或山梨醇。再者，藥劑可接受 載體可包括少量的輔助物質，諸如濕潤劑、乳化劑、防 腐劑與緩衝劑。辅助物質可提高抗_hGM_CS]p單株抗體或 其之抗原結合片段之組合物中的保存或效力。 適於非腸胃施加的醫藥組合物可包括本發明之抗 • _hGM_CSF單株抗體或抗原結合片段。當施加一種類型之 抗-hGM-CSF單株抗體或其之抗原結合片段時，較佳係將 抗-hGM-CSF單株抗體或其之抗原結合片段調節成注射 溶液中之抗體含量為〇·1〜250 mg/ml。另一方面，當混合 與應用複數種類型之抗體時，較佳係將抗體調節成注射 ;谷液中之抗體含量為0.001〜lOmg/mL。再者，可任音地 以其任何比例混合複數種類型的抗體β 可在火石或琥珀瓶、安瓿或預填注射器中製備注射溶 液成液體或束乾劑。可在pH 1 5.0〜7.0 (ρΗ6·〇係最適人） 47 201206955 之間應用L-組胺酸作為缓衝劑。最合適的L-組胺酸濃度 係5-10 mM。適合作為緩衝劑的其他試劑可為（但不限於） 琥珀酸鈉、檸檬酸鈉、磷酸鈉或磷酸鉀。可將0~3 00mM 濃度（就形成為液體的劑量而言，最適合的係150mM)的 氣化鈉施加至缓衝劑以移除溶液中的毒性《凍乾劑型可 包括冷凍保護劑；主要係0〜10%比例（最適合的比例係 〇·5〜1·〇°/〇)的蔗糖。適合作為冷凍保護劑的其他試劑可為 _ 漏蘆糖與乳糖。凍乾劑型可包括膨脹劑，主要係包括 1〜10%比例（最適合的比例係2〜4%)的甘露醇。作為穩定 劑’可將濃度1〜5〇 mM (最適合的係5〜10 mM)的主要L-甲硫胺酸施加至液體或凍乾劑兩者。其他適當膨脹劑中 包括甘胺酸與精胺酸。可包括比例〇〜0·05% (最適合的比 例係0.005〜0.01%)的聚山梨醇酯（polys〇rbate) 8〇作為介 面活性劑。其他介面活性劑包括（但不限於）聚山梨醇酯 20與BRIJ介面活性劑。 • 許多劑型可應用於本發明之組合物。例如，組合物之 劑型應有液體、半固體與固體。包括有溶液（諸如，注射 或灌注溶液）、分散液、懸浮液、藥片、藥丸、藥粉、脂 質體與栓劑。劑型較佳係取決於施加方法與治療實例。 組合物之劑型較佳係能夠注射的液體與灌注液。例如， 組合物可包括其他應用至人類被動免疫作用的抗體。組 合物較佳係用於非腸胃施加（諸如，顯示有靜脈内施加、 皮下施加、腹部施加與肌肉内施加卜較佳實施例中，透 48 201206955 過靜脈内灌庄/谷液或靜脈内注射來施加抗體。另一較佳 實施例中，透過肌肉内注射或皮下注射來施加抗體。
通常應在無菌且穩定狀態下產生與存放治療組合物。 可將,且口物才曰定成適合高藥物濃度的溶液、微乳液分 散亦月曰質體或其他結構。藉由下列步驟配置能夠注射 的…、菌冷液將所需數量的活性化合物（明確地說，抗 GM CSF單株抗體或其之抗原結合片段）混合於適當溶 劑中。若有需要，將—或上述化合物之組合與活性化合 物-起混合於適當溶劑中’接著藉由過遽來消毒以便製 備办液 I而έ，將基本分散媒介與活性化合物混合 於包括其他所需化合物（來自上述媒介）的無菌容器中。 當應用無菌康乾粉來製備無菌注射溶液時，較佳係應用 真空乾燥與健乾料料製備方法。透過製備方法， 可自活性成分粉與詩過遽之無菌溶液取得任何其他所 欲組合物。藉由下列手段適當地維持溶液的流動性。手 二Τ料(例如，脂)、維持分散液所需 之微粒尺寸並應用介面活性劑。組合物包括藥學吸收延 =如，單硬脂酸與明膝)，藉此可讓人體長 收注射組合物。 °透過技術1知之不同方法施加本發 -蘭-CSF單株抗體或其之抗原結合片段。諸抗 射、靜脈内注射或液體灌注之施加路徑/方 = 於不同治療中。施加路徑/方法取決於 /係應用 υμ ^ , , β之結果。熟奉 技術人士可理解施加路徑/方 包括植入、經皮貼片與藥 49 201206955 物輸送系統。一實施例中，亦與製備活性化合物一起應 用抗體（例如，控制釋放之藥劑，其可控制化合物的釋 放）。生物相容之聚合物係生物可分解的。製備物可包括 生物相容聚合物，諸如乙烯-醋酸乙烯共聚物、聚酸酐、 聚乙醇酸、膠原、聚原酸脂（P〇ly〇rtito ester)與聚乳酸 (polylactate)。製備這些藥劑的不同方法準以專利，且為 熟悉技術之人士所習知。 一實施例中，口服施加抗_hGM_CSF單株抗體或其之抗 原結合片段與例如非活性稀釋劑或食用與吸收載體。亦 可將化合物（與其他成分，若想要的話）裝入硬或軟的明 膠膠囊中、壓縮於藥片中或直接混合於受試者的食物 中。用於治療的口服中，可將化合物與賦形劑混合並以 能夠攝取的形式應用，諸如藥片、口頰錠'片劑（tr〇che)、 膠囊、酏劑（elixir)、懸浮液、藥漿與藥圓（〇blate)。爲了 藉由非腸胃途徑以外之途徑施加本發明之化合物，必須 將化合物塗覆在避免其喪失活性的材料中，並同時施加 化合物與材料。 組合式治療 有可能在組合物中額外地包括額外活性化合物，其中 額外活性化合物不包括針對非GM CSF之抗原的抗體。 一實施例中，將本發明中之抗_hC}M_CSF單株抗體或其之 抗原結合片段與一或更多種類用於治療GM_CSF引起之 疾病的其他治療劑一起給藥或與其他治療劑同時施加， 50 201206955 其中其他治療劑不是針對非GM-CSF之蛋白的抗體。例 如’將本發明之抗-hGM-CSF單株抗體或其之抗原結合片 段與一或更多其他抗-GM-CSF抗體一起给藥。組合式治 療的優點在於少量治療劑的有效作用。治療劑能夠避免 毒性或併發症，兩者可伴隨不同的單一治療出現。 應廣泛地解釋本文所用之「同時施加」。例如，當將二 或更多種類的抗-GM-CSF單株抗體或抗原結合片段施加
至患者時，可將或不可將各個或某些抗體或其之片段提 供成單一藥劑（例如，組合物）。某些實施例中，單一藥 劑（例如，組合物）包括施加至受試者所有不同種類的抗_ GM-CSF單株抗體或其之抗原結合片段，以致抗體或其 之抗原結合片段以混合物同時呈現給患者。然而某些實 施例中’將包括一或更多種類之抗體或抗原結合片段的 二或更多藥劑（例如，組合物）分別地施加至受試者。當 「分別地」施加時，可依序施加藥劑，例如—個接著一 個。只要第一藥劑的效應與後繼藥劑（第二、第三等）的 效應在時間上與受試者之目標細胞/組織内重疊而藉此 招致增加(例如，)的治療結果的話，則將其理 「同時」施加。 。。特別疋當應用超過一種類型之本發明的抗 單：抗體時，有可能提供遠高於醫藥組合物中一種類型 之早株抗體所能提供的細胞成長抑制活性(中和生物活 陡）。因此，有可能以較小數量來提供所需的治療劑。 51 201206955 因此提供提两活性的方法，其特徵在於同時施加2或 更多種類的抗-GM-CSF單株抗體，或者醫藥組合物或獸 醫藥學組合物之特徵在於包括2或更多種類的抗 -hGM-CSF單株抗體或其之抗原結合片段，2或更多種類 的抗體選自下列（a)與（b): (a) 抗-hGM-CSF單株抗體或其之抗原結合片段，其之 互補決定區（CDR)由序列編號：4_9、序列編號：33〇_335、 序列編號：336-341或序列編號：342_347的胺基酸序列 所代表’且其係專一於hGM-CSF， (b) (a)的抗-hGM-CSF單株抗體或其之抗原結合片 段’其之胺基酸序列中有一或更多胺基酸被取代、刪除、 插入或附加’且其係專一於hGM-CSF。 相同的方式，本發明亦包括提高活性之方法，其之特 徵在於同時施加複數種不同種類（此後稱為複數種）的本 發明之抗-hGM-CSF單株抗體，或者醫藥組合物或獸醫藥 學組合物包括複數種本發明之抗-hGM-CSF抗體。 任一實施例中，組合物可包括一類型或種類能夠中和 hGM-CSF活性的抗_hGM_CSF單株抗體或其之抗原結合 片段。或者任一實施例中，組合物可包括二或更多類型 或種類能夠中和hGM-CSF活性的抗-hGM-CSF單株抗體 或其之抗原結合片段。除了本文揭露之一或更多抗體或 其之片段以外’上述組合物中的單株抗體與/或其之片段 可包括先前揭露之抗-hGM-CSF單株抗體與/或其之片 段°抗-hGM-CSF單株抗體與其之抗原結合片段、與包含 52 201206955 上述抗體與/或其之抗原結合片段的治療組合物、醫藥組 合物與藥學組合物可用來治療或預防hGM-CSF引起與/ 或與其過度表現（相對於對照組（例如，不具有疾病、症 狀或異常的受試者）中的hGM-CSF表現水平）相關之疾 病、異常或症狀。本文交替地應用詞彙疾病、異常與症 狀這些包括（但不限於）：呼吸疾病、不同起因的阻塞 性肺病、不同起因的肺氣腫、限制性肺病、間質性肺部 φ 疾病、間質性肺病、囊狀纖維化症、不同起因的支氣管 炎、支氣管擴張、ARDS (成人呼吸窘迫症候群）與所有形 式的肺水腫，阻塞性肺病，選自C〇pd.(慢性阻塞性肺 病）、氣喘、支氣管氣喘、小兒氣喘、嚴重型氣喘、急性 氣喘發作與慢性支氣管炎之中；肺氣腫，其之起因於 COPD (隍性阻塞性肺病）或α丨蛋白酶抑制物不足；限制 性肺病，其選自過敏性肺泡炎、工作相關有毒物質引發 的限制性肺病（諸如，石棉沈著症或矽肺病）與肺癌引起 • &限制（諸如，入侵轉移性淋巴瘤、支氣管肺泡細胞癌與 淋巴瘤）；感染引起的肺炎（諸如，病毒、細菌、真菌、 原生動物、蛔蟲或其他病原體感染）、不同因子引起的肺 炎（例如，呼吸與左心臟不足症）、輻射引起的肺炎或纖 維化、膝原化症（例如，紅斑性狼瘡）、全身硬皮症或類 肉瘤、肉芽腫（例如，伯克氏症、原發性間質性肺炎或原 發性肺纖維化症（IPF);㈣㈣病、細菌或病毒感染引 起的支氣管炎 '過敏性支氣管炎與#性支氣管炎；支氣 管擴張；肺水腫，例如呼吸或吸入毒性物質與外來物質 53 201206955 之後的毒性肺水腫；鼻炎、關節炎與相關之關節病、牛 皮癖、骨髓性白血病、多發性硬化症、阿滋海默症、腎 絲球腎炎與慢性異位性皮膚炎。 在抗-hGM-CSF單株抗體或其之抗原結合片段中包括 藥學可接受載體之醫藥組合物被視為可有效對抗 hGM-CSF引起的疾病。hGM-CSF過度表現引起的疾病可 描述如下 (a) 過敏性疾病，諸如氣喘、異位性皮膚炎與花粉熱， (b) 移植排斥，移植物對抗宿主疾病（GVHD)及 (c) 自體免疫疾病，例如類風濕性關節炎。 不預期受限於任一特定機制，咸信GM-CSF過度表現 至少部分地引起大量例如本文所列之那些疾病或異常。 然而，亦有可能上述臨床症狀係由其他相關生物途徑受 損而引起的，諸如，對應受體的正向調節（up-regulation) 或一或更多受動途徑中的突變。因此，「與hGM-CSF過 度表現相關之疾病或異常」應包括上述導致與hGM-CSF 過度表現等效結果的症狀。 製造/製備 應用抗-hGM-CSF單株抗體或其之抗原結合片段（例 如，本文所述者）製造或製備治療hGM-CSF過度表現 (GM-CSF引起的水平）相關之疾病或異常的藥劑亦是實 施例，其中抗體或其之抗原結合片段結合hGM-CSF並能 夠中和hGM-CSF活性。上述抗-hGM-CSF單株抗體與其 54 201206955 之抗原結合片段可為本文所述之任一者，諸如申請專利 範圍第1-22項任一者所述。 應用辨別hGM-CSF中的ELYK (序列編號：2)與 TMMASHYKQH (序列編號：3)之抗體或其之抗原結合片 段來製造或製備藥劑係進一步的實施例。 進一步實施例係應用抗-hGM-CSF單株抗體與/或其之 抗原結合片段來製造或製備藥劑，其中抗體或其之片段 包括（a)重鏈，其包括 VH-CDR1、VH-CDR2 與 VH-CDR3， 其中式FTFS(Y/H)(G/A)MH (序列編號：314)代表包含 Vh-CDR1 之共 有序列 ； 其中式 (L/V)(T/I)(Y/W)HXGX(R/K)K(F/Y)YADSV(R/K)G (序列 編號：315)代表包含VH-CDR2之共有序列；而其中式 EX(M/V)G(A/G)XXDX (序列編號：316)代表包含 VH-CDR3之共有序列；及（b)輕鏈、或者輕鏈或其之部分 (如果係抗體片段），其包括VL-CDR1、VL-CDR2與 VL-CDR3，其中式 XGNXXNIGS(H/Y)AVG (序列編號： 317)代表包含 Vl-CDR1 之共有序列；其中式 0(11/1〇8?(八/?)80(序列編號：318)代表包含¥1^00112之 共有序列；而其中式STWDS(R/S)LSAV(V/L)(序列編 號：319)代表包含VL-CDR3之共有序列。 進一步態樣中，本發明提供單離的抗-hGM_CSF抗體或 上述抗體之抗原結合片段於製造藥劑。這些藥劑用於治 療與hGM-CSF異常表現（例如，過度表現）相關之疾病、 55 201206955 症狀或異常。爲了此目的，可用本文所述之任一抗 -hGM-CSF單株抗體或其之抗原結合片段來製造藥劑。 抗體或抗原結合片段辨別hGM-CSF中的ELYK (序列 編號：2)與TMMASHYKQH (序列編號：3)。 某些實施例中，抗體或其之抗原結合片段包括（a)重 鏈，其包括VH-CDR1、VH-CDR2與VH-CDR3，其中式 FTFS(Y/H)(G/A)MH (序列編號：314)代表包含 Vh-CDR1 之共 有序列 ； 其中式 (L/V)(T/I)(Y/W)HXGX(R/K)K(F/Y)YADSV(R/K)G (序列 編號：315)代表包含VH-CDR2之共有序列；而其中式 EX(M/V)G(A/G)XXDX (序列編號：316)代表包含 VH-CDR3之共有序列；及（b)輕鏈、或者輕鏈或其之部分 (如果係抗體片段），其包括VL-CDR1、VL-CDR2與 VL-CDR3，其中式 XGNXXNIGS(H/Y)AVG (序列編號： 317) 代表包含 VL-CDR1 之共有序列；其中式 G(R/K)SP(A/P)SG (序列編號：318)代表包含 VL-CDR2 之 共有序列；而其中式STWDS(R/S)LSAV(V/L)(序列編 號：319)代表包含VL-CDR3之共有序列。一實施例中， 抗體或其之抗原結合片段以不超過400 pM的KD結合 hGM-CSF，另一實施例中KD小於約 160 pM (諸如， EV1018或EV1019)，根據實施例所述之技術藉此確定 KD。 本發明亦包括單離的抗-hGM-CSF單株抗體或其之抗 原結合片段，以製造用於治療與hGM-CSF過度表現相關 56 201206955 之疾病或異常的藥劑，其中抗體或其之抗原結合片段具 有下列特徵。抗體或抗原結合片段包括（a)重鏈、或者重 鏈或其之部分（如果係抗體片段），其包括VH-CDR1、 VH-CDR2 與 VH-CDR3，其中式 FTFS(Y/H)(G/A)MH (序 列編號：314)代表包含VH-CDR1之共有序列；其中式 (L/V)(T/I)(Y/W)HXGX(R/K)K(F/Y)YADSV(R/K)G (序列 編號：315)代表包含VH-CDR2之共有序列；而其中式 EX(M/V)G(A/G)XXDX (序列編號：316)代表包含 VH-CDR3之共有序列；及（b)輕鏈、或者輕鏈或其之部分 (如果係抗體片段），其包括 Vl-CDR1、VL-CDR2與 VL-CDR3，其中式 XGNXXNIGS(H/Y)AVG (序列編號： 317)代表包含 VL-CDR1 之共有序列；其中式 G(R/K)SP(A/P)SG (序列編號：318)代表包含 VL-CDR2 之 共有序列；而其中式STWDS(R/S)LSAV(V/L)(序列編 號：319)代表包含VL-CDR3之共有序列，且其中抗體或 其之抗原結合片段中和hGM-CSF活性。不同實施例中， 抗-hGM-CSF單株抗體或其抗原結合片段之增殖抑制試 驗的IC50值係小於20 pM、小於30 pM、小於40 pM、 小於50 pM、小於60 pM、小於70 pM、小於80 pM、小 於90 pM或小於1〇〇 PM，各個實例在ED80下執行TF-1 增殖抑制試驗中確定且如同實施例所描述。特定實施例 中，抗體或其之抗原結合片段之IC50值係小於20 pM或 小於30 pM，在ED80下的TF-1增殖試驗中確定。 57 201206955 產生抗體與片段的dna與載體 下述為辨別本發明提供之間斷表位之起始抗體的產 生；然而’不應理解成受限於特定方法。技術領域中可 替換所述特徵而不悖離本發明之範圍。 本發明之抗-hGM-CSF單株抗體與其之抗原結合部分 係透過下列步驟衍生自取自原發性肺泡蛋白沈著症患者 的血液：離析細胞株以產生抗體、自取得的抗體產生細 _ 胞庫中挑選抗體陽性細胞、並藉由親合力純化作用純化 得自抗體陽性細胞之懸浮液的抗體。 1) 分離對抗hGM-CSF之完整人類抗體產生細胞株 自罹患原發性肺泡蛋白沈著症（IPAP)且血清中具有高 水平抗-hGM-CSF單株抗體之患者血液中單離&淋巴 球。接著誘使B-淋巴球增殖。習知誘使增殖的方法。例 如，將癌症誘導因子「Epstein-Barr病毒」（此後稱為EBV) 應用在轉型方法（D.Kozbor等人）以誘使增殖。更明確地 | 說，以EBV感染B-淋巴球，並誘使增殖。將增殖細胞存 放成抗體產生細胞庫。 2) 自抗體產生細胞庫單離單株抗體 應用通常用於產生單株抗體之已知方法，自绣使增瘦 之細胞中挑出單株細胞。 自抗體產生細胞庫選出淋巴球以產生結合hGM-CSF 之抗體。更明確地說，藉由限制稀釋法挑選產生結合 hGM-CSF之抗體的細胞族群（株較佳係利用hGM-CSF 與鼠抗-hlgG抗體（經標記以偵測結合hGM_CSF的部分） 58 201206955 來應用eLISA。藉由反覆地培養選擇之抗體陽性細胞並 薛選以取得僅產生所欲抗體之細胞族群（株）。直到「單 離抗體產生細胞株」的步驟係描述於第i圖所示之流程 3)利用A蛋白或G蛋白的親合力純化 在純化抗-hGM-CSF單枝始栌吐士 平体抗體時，有可能將選擇之永生
化細胞培養於R0Uer.(2升攪拌瓶）或其他培養系統。過 濾並濃縮懸浮液。接著’藉由具冑A蛋白_瓊脂糖凝膠 (Sephar〇Se)或〇蛋白-瓊脂糖凝膠等（NeW Jersey， Piscataway，Pharmacia c〇rp )之親合力層析來純化蛋 白。在將緩衝溶液換成PBS之後，以28〇nm的〇d或較 佳藉由懸液計分析來測量蛋白濃度。藉由針對亞型抗原 的抗原特定方法來確定抗體亞型。 得到之抗-hGM-CSF單株抗體係完全人類抗體，其係由 人體中敏化之淋巴球所產生，藉此抗_hGM_CSF單株 抗體很少顯示針對抗體的免疫反應。當選殖抗體產生細 胞時，以EB病毒感染B-淋巴球並藉由EB病毒活性誘使 其增殖。因此，特徵在於藉由應用上述EB病毒活性來 選殖抗體產生細胞。EB病毒方法的優點係在人體中產生 天然抗體及取得高親合力抗體。例如，抗-hGM-CSF單株 抗體的親合力係人工免疫小鼠產生之抗體的1〇1〇〇倍 高°庫包括一群EB病毒感染而增殖的B_淋巴球。有可 能自庫單離特定抗體產生細胞株並取得人類抗體。 59 201206955 如上所示，技術領域中可取代或轉換所述特徵而不，障 離本發明之範圍。核酸、載體與宿主細胞可表現本發明 中之重組抗體或其之抗原結合部分。這些亦包 明中。 、 下表顯示的是EV1018之重鏈變體與輕鏈變體及 EVHU9之重鏈變體與輕鏈變體。表分別提供之 重鏈與輕鏈變體及EV1G19之重鍵與輕鏈變體，並使其 可能確定EVl〇18與EV1019各個之重鏈與輕鏈所有可^ 的組合。熟悉技術之人士可利用技術習知方法與本文提 供的資訊來產生任一組合。 進步態樣中，本文揭露產生抗-hGM-CSF單株抗體或 其之抗原結合片段之處理（方法）。—般而言，產生抗 -hGM-CSF單株抗體或其之抗原結合片段之方法包括取 得或產生實質由編碼免疫球蛋白（由重鏈與輕鏈或Fab區 所構成）之DNA所構成之DNA;將產生之DNA以讓其操 作性連接至適當啟動子的方式插入可複製之表現載體， 藉此產生包括操作性連接至適當啟動子之DNa的載 體；將載體導入宿主細胞，藉此產生包含載體之宿主細 胞；在適合DNA表現與產生編碼之胜肽與抗_hGM_CSF 早株抗體或抗原結合片段的條件下培養宿主細胞。可藉 由技術中習知方法自宿主細胞或宿主細胞培養基重新取 得得到之抗-hGM-CSF單株抗體或抗原結合片段。 更明確地說’處理包括產生至少VH_CDR1、Vh-CDR2 與 Vh-CDR3 及 Vl-CDR1、Vl-CDR2 與 Vl-CDR3 於宿主 60 201206955 細胞中。方法包括將編碼 Vh-CDR1、VH-CDR2、 VH-CDR3、VL-CDR1、VL-CDR2 與 VL-CDR3 之 DNA 導 入適當的宿主細胞，將得到之宿主細胞（宿主細胞包含編 碼 Vh-CDIU、VH-CDR2、VH-CDR3、VL-CDIU、VL-CDR2、 VL-CDR3之DNA)維持於適合表現DNA (產生編碼之胜 肽)的條件下，且形成/組裝抗-hGM-CSF單株抗體或抗原 結合片段，藉此產生抗-hGM-CSF單株抗體或抗原結合片 段。特定實施例中，VH-CDR1呈現於FTFS(Y/H)(G/A)MH (序 列編號 ：314) 、 Vh-CDR2 呈現於 (L/V)(T/I)(Y/W)HXGX(R/K)K(F/Y)YADSV(R/K)G (序列 編號：315)、VH-CDR3 呈現於 EX(M/V)G(A/G)XXDX (序 列編號：316)、VL-CDR1 呈現於 XGNXXNIGS(H/Y)AVG (序列編號：317)、VL-CDR2 呈現於 G(R/K)SP(A/P)SG (序 列編號：318)且 VL-CDR3 呈現於 STWDS(R/S)LSAV(V/L) (序列編號：319);且產生之抗-hGM-CSF單株抗體或抗 原結合片段結合hGM-CSF。編碼VH-CDR1、VH-CDR2、 VH-CDR3、VL-CDR1、VL-CDR2 與 VL-CDR3 之 DNA 可 為一或多個單元（諸如，所有VH/VL成分可由一 DNA所 編碼’某些或所有成分可由不同DNA所編碼）。 例如，第一 DNA可編碼完整的重鏈而第二DNA可編 碼完整的輕鏈。完整的重鏈可選自序列編號：10-33、 3 8-80、160-183、222-245、320 與 322 所構成之群組而 完整的輕鏈可選自序列編號：34-37、202-221、321與 323所構成之群組。申請專利範圍第40項呈現一實施 61 201206955 例，其中完整的重鏈係選自序列編號：10-33、38-80、 160-183、222-245、3 20與322所構成之群組而完整的輕 鏈可選自序列編號：34-37、202-221、321與323所構成 之群組。 申請專利範圍第40或41項之處理可更包括單離抗 -hGM-CSF單株抗體或其之抗原結合片段。 包括編碼Vh-CDR1與/或VH-CDR2與/或VH-CDR3之 DNA的載體亦係本文之主題。VH-CDR1可為SYGMH (序 列編號：4)或SHAMH (序列編號：333)、VH-CDR2係 LTYHHGNRKFYADSVRG (序列編號：5)或 VIWHDGSKKYYADSVKG (序列編號：334)而 VH-CDR3 係ESMGAINDN (序列編號：6)或EWVGGTCDS (序列編 號：335)。 載體包括編碼VL-CDR1、VL-CDR2及VL-CDR3之 DNA，其中 Vl-CDR1 係 IGNNNNIGSHAVG (序列編號： 7)或 SGNSSNIGSYAVG (序列編號：330)、VL-CDR2 係 GRSPPS (序列編號：8)或GKSPAS (序列編號：331)而 Vl-CDR3 係 STWDSSLSAVV (序列編號：9)或 STWDSRLSAVL (序列編號：332)。 例如，重鏈與輕鏈的引導序列在蛋白成熟處理中被切 除。切除之引導序列對最終抗體特性沒有影響。爲了補 足刪除之序列，在連接或PCR擴增方法中將選殖之cDNA 併入合成寡核苷酸。本文可交替應用詞彙「引導序列」 與「信號序列」。 62 201206955 替代處理中，可用一組短的重疊寡核苷酸合成整個變 異區’接著以PCR擴增方法擴增寡核苷酸，以便完全得 到變異區的人工克隆。
本發明另一態樣係關於編碼能夠結合hGM-CSF並中 和hGM-CSF生物活性之抗_hGM_CSF單株抗體或其之抗 原結合片段的單離去氧核糖核酸（DNA)，其中單離的 DNA之核苷酸序列編碼的胺基酸序列包括選自序列編 號.4-9所構成之群組的至少一者。本發明亦包括單離的 DNA，其中核苷酸序列編碼之胺基酸序列包括選自序列 編號：330-335所構成之群組的至少一者。 當單離的去氧核糖核酸（DNA)編碼能夠結合h(JM_cSF 並中和hGM-CSF生物活性之抗_hGM_CSF單株抗體或其 之抗原結合片段時，下列的抗_hGM_CSF單株抗體或其之 抗原結合片段亦包括於本發明中： 能在嚴格條件下與上述之DNA雜和的單離dna。 下列載體與宿主細胞亦包括於本發明中： U 包括單離DNA之載體， 2)與重組表現載體合併的宿主細胞。 再者，亦可藉由表現多變的scFv (變異區的單鏈片段） 抗體來取得特定抗體，這係藉由利用#前發展的嗟菌體 呈現方法(利用基因工程技術表現重組抗體於噬菌體表 面）人工重組乂11與&基因成噬菌體融合蛋白而達成。 可藉由熟悉技術人士習知的方法取得本發明之抗體片 段，諸如編碼抗體之DNA的截短型所編碣之片段=重組 63 201206955 表現、或蛋白質分解抗體胺基酸鏈，藉此熟悉技術人士 應用払準生物试驗（例如，本文所述）來確定哪個片段維 持抗體結合功能或中和活性。 本發明之特定抗體 本發明提供EV1018抗體本身及多種變形的EV1018抗 體（例如，變體）概述於表A。某些實施例中，重鏈包含一 或更多相對野生型重鏈序列之胺基酸取代。某些實施例 中’輕鏈包含一或更多相對野生型EV1 〇 1 8輕鏈序列之 胺基酸取代。某些實施例中，重鏈與輕鏈各自包含一或 更多胺基酸取代。
某些實施例中，抗體或其之抗原結合片段包括輕鏈 EV101 8-野生型-原型（序列編號：34)與一下列重鏈變 體：EV1018 (序列編號：10)、EV1018-野生型-IgGIKO (序 列編號：11)、EV1018-T97A-IgGlKO(序列編號·· 12)、 EV1018-T97V-IgGlKO(序 列 編 號： 13)、 EV1018-N95D_IgGlKO(序列編號：14)、EV1018-N95E IgGIKO(序列編號：15)、EV1018-N95K IgGIKO (序列編 號：16)、EV1018-N95Q IgGIKO (序列編號：17)、 EV1018-N93Q-N95T IgGIKO (序列編號：18)、EV1018-野生型-IgGLBI (序列編號：19)、EV1018-T97A IgGl-BI (序列編號：20)、EV1018-T97VIgGl-BI (序列編號：21)、 EV1018-N95D IgGl-BI (序列編號：22)、EV1018-N95E
IgGl-BI (序列編號：23)、EV1018-N95K igG^1 (序列 201206955 編號：24)、EV1018-N95Q IgGl-BI (序列編號 EV1018-N93Q-N95T IgGl-BI (序列編號： EV1018-T97A IgGl-原型-恆定（序列編號： EV1018-T97V IgGl-原型-恆定（序列編號： EV1018-N95D IgGl -原型-恆定（序列編號： EV1018-N95E IgG卜原型-恆定（序列編號： EV1018-N95K IgGl-原型-恆定（序列編號： EV1018-N95Q IgGl-原型-恆定（序列編號： EV1018-N93Q-N95T IgGl-原型-恆定（序列編號 EV1018-野生型-IgGl-KO-QVQL (序列編號： EV1018-T97A-IgGl-KO-QVQL (序列編號： EV1018-T97V-IgGl-KO-QVQL (序列編號： EV1018-N95D-IgGl-KO-QVQL (序列編號： EV1018-N95E IgGl-KO-QVQL (序列編號： EV1018-N95K IgGl-KO-QVQL (序列編號： EV1018-N95Q IgGl-KO-QVQL (序列編號： EV1018-N93Q-N95T IgGl-KO-QVQL (序列編號 EV1018-野生型-IgGl-QVQL-BI (序列編號： EV1018-T97A IgGl-QVQL-BI (序列編號： EV1018-T97V IgGl-QVQL-BI (序列編號： EV1018-N95D IgGl-QVQL-BI (序列編號： EV1018_N95E IgGl-QVQL-BI (序列編號·· EV1018-N95K IgGl-QVQL-BI (序列編號： EV1018-N95Q IgGl-QVQL-BI (序列編號： :25)、 26) ' 27) ' 28) 、 29) 、 30) 、 31) 、 32) 、 :33)、 38) ' 39) 、 40) 、 41) 、 42) 、 43) 、 44) ' :45)、 46) ' 47) 、 48) 、 49) ' 50) 、 51) 、 52) ' 65 201206955 EV1018-N93Q-N95T IgGl-QVQL-BI (序列編號：53)、 EV1018-IgG2 (序歹丨J 編號：54)、EV1018-野生型-IgG2 (序 列編號：55)、EV1018-T97A-IgG2 (序列編號：56)、 EV1018-T97V-IgG2 (序列編號：57)、EV1018-N95D-IgG2 (序列編號：58)、EV1018-N95E-IgG2 (序列編號：59)、 EV1018-N95K-IgG2 (序列編號：60)、EV1018-N95Q-IgG2 (序列編號：61)、EV1018-N93Q-N95T-IgG2 (序列編號： 62)、EV1018-IgG4 (序列編號：63)、EV1018-野生型-IgG4 • (序列編號：64)、EV1018-T97A-IgG4 (序列編號：65)、 EV1018-T97V-IgG4 (序列編號：66)、EV1018-N95D-IgG4 (序列編號：67)、EV1018-N95E-IgG4 (序列編號：68)、 EV1018-N95K-IgG4 (序列編號：69)、EV1018-N95Q-IgG4 (序列編號：70)、EV1018-N93Q-N95T-IgG4 (序列編號： 71)、EV1018-IgG4-SP (序列編號：72)、EV1018-野生型 -IgG4-SP (序列編號：73)、EV1018-T97A-IgG4-SP (序列 赢 編號：74)、EV1018-T97V-IgG4-SP (序列編號：75)、 EV1018-N95D-IgG4-SP ( 序 列 編 號 ：76) ' EV1018-N95E-IgG4-SP ( 序 列 編 號 ：77) ' EV1018-N95K-IgG4-SP ( 序 列 編 號 ：78)、 EV1018-N95Q-IgG4-SP ( 序 列 編 號 :79)與 EV1018-N93Q-N95T-IgG4-SP (序列編號：80)。 某些實施例中，抗體或其之抗原結合片段包括輕鏈 EV1018-野生型-BI (序列編號：35)與一下列重鏈變體： EV1018 (序列編號：10)、EV1018-野生型-IgGIKO (序列 66 201206955 編號：11)、EV1018-T97A-IgGlKO (序列編號：12)、 EV1018-T97V-IgGlKO(序 列編號：13)、 EV1018-N95D-IgGlKO (序列編號：14)、EV1018-N95E IgGIKO(序列編號：15)、EV1018-N95K IgGIKO (序列編 號：16)、EV1018-N95Q IgGIKO (序列編號·· 17)、 EV1018-N93Q-N95T IgGIKO (序列編號：18)、EV1018- 野生型-IgG卜BI (序列編號：19)、EV1018-T97A IgGl-BI (序列編號：20)、EV1018-T97V IgGl-BI (序列編號：21)、 EV1018-N95D IgGl-BI (序列編號：22)、EV1018-N95E IgGl-BI (序列編號：23)、EV1018-N95K IgGl-BI (序列 編號：24)、EV1018-N95Q IgGl-BI (序列編號：25)、 EV1018-N93Q-N95T IgG 卜 BI (序列編號：26)、 EV1018-T97A IgGl-原型-恆定（序列編號：27)、 EV1018-T97V IgGl -原型-恆定（序列編號：28)、 EV1018-N95D IgGl-原型-恆定（序列編號：29)、 EV1018-N95E IgGl-原型-恆定（序列編號：30)、 EV1018-N95K IgGl-原型-恆定（序列編號：31)、 EV1018-N95Q IgGl-原型-恆定（序列編號：32)、 EV1018-N93Q-N95T IgGl-原型-恆定（序列編號：33)、 EV1018-野生型-IgGl-KO-QVQL (序列編號：38)、 EV1018-T97A-IgGl-KO-QVQL (序列編號：39)、 EV1018-T97V-IgGl-KO-QVQL (序列編號：4〇)、 EV1018-N95D-IgGl-KO-QVQL (序列編號：4U、 EV1018-N95E IgGl-KO-QVQL (序列編號：42)、 67 201206955 EV1018-N95K IgGl-KO-QVQL (序列編號：43)、 EV1018-N95Q IgGl-KO_QVQL (序列編號：44)、 EV1018-N93Q-N95T IgGl-KO-QVQL (序列編號：45)、 EV1018-野生型-IgGl-QVQL-BI (序列編號：46)、 EV1018-T97A IgGl-QVQL-BI (序列編號：47)、 EV1018-T97V IgGl-QVQL-BI (序列編號：48)、 EV1018-N95D IgGl-QVQL-BI (序列編號：49)、 EV1018-N95E IgGl-QVQL-BI (序列編號：50)、 EV1018-N95K IgGl-QVQL-BI (序列編號：51)、 EV1018-N95Q IgGl-QVQL-ΒΙ (序列編號：52)、 EV1018-N93Q-N95T IgGl-QVQL-BI (序列編號：53)、 EV1018-IgG2 (序列編號：54)、EV1018-野生型-IgG2 (序 列編號：55)、EV1018-T97A-IgG2 (序列編號：56)、 EV1018-T97V-IgG2 (序列編號：57)、EV1018-N95D-IgG2 (序列編號·· 58)、EV1018-N95E-IgG2 (序列編號：59)、 EV1018-N95K-IgG2 (序列編號：60)、EV1018-N95Q-IgG2 (序列編號：61)、EV1018-N93Q-N95T-IgG2 (序列編號： 62)、EV1018-IgG4 (序列編號：63)、EV1018-野生型-IgG4 (序列編號：64)、EV1018-T97A-IgG4 (序列編號：65)、 EV1018-T97V-IgG4 (序列編號：66)、EV1018-N95D-IgG4 (序列編號：67)、EV1018-N95E-IgG4 (序列編號：68)、 EV1018-N95K-IgG4 (序列編號：69)、EV1018-N95Q-IgG4 (序列編號：70)、EV1018-N93Q-N95T-IgG4 (序列編號： 71)、EV1018-IgG4-SP (序列編號：72)、EV1018-野生型 68 201206955 -IgG4-SP (序列編號：73)、EV1018-T97A-IgG4-SP (序列 編號：74)、EV1018-T97V-IgG4-SP (序列編號：75)、 EV1018-N95D-IgG4-SP ( 序 列 編 76) > EV1018-N95E-IgG4-SP ( 序 列 編 號 ： 77) ' EV1018-N95K-IgG4-SP ( 序 列 編 號 ： 78)、 EV1018-N95Q-IgG4-SP ( 序 列 編 號 ： 79)與 EV1018-N93Q-N95T-IgG4-SP (序列編號：80)。 某些實施例中，抗體或其之抗原結合片段包括輕鏈 EV1018-野生型-BI2 (G1)(序列編號：36)與一下列重鏈 變體：EV1018 (序列編號：10)、EV1018-野生型-IgGIKO (序列編號：11)、EV1018-T97A-IgGlKO (序列編號：12)、 EV1018-T97V-IgGlKO (序列編號：13)、 EV1018-N95D-IgGlKO (序列編號：14)、EV1018-N95E IgGIKO(序列編號：15)、EV1018-N95K IgGIKO (序列編 號：16)、EV1018-N95Q IgGIKO (序列編號：17)、 EV1018-N93Q-N95T IgGIKO (序列編號：18)、EV1018-野生型-IgGl-BI (序列編號：19)、EV1018-T97A IgGl-BI (序列編號：20)、EV1018-T97V IgGl-BI (序列編號：21)、 EV1018-N95D IgGl-BI (序列編號：22)、EV1018-N95E IgGl-BI (序列編號：23)、EV1018-N95K IgGl-BI (序列 編號：24)、EV1018-N95Q IgGl-BI (序列編號：25)、 EV1018-N93Q-N95T IgGl-BI (序列編號：26)、 EV1018-T97A IgGl-原型-恆定（序列編號：27)、 EV1018-T97V IgGl-原型-恆定（序列編號：28)、 69 201206955 EV1018-N95D IgGl-原型-恆定（序列編號：29)、 EV1018-N95E IgGl-原型-恆定（序列編號：30)、 EV1018-N95K IgGl-原型-恆定（序列編號：31)、 EV1018-N95Q IgGl-原型-恆定（序列編號：32)、 EV1018-N93Q-N95T IgGl-原型-怪定（序列編號：33)、 EV1018-野生型-IgGl-KO-QVQL (序列編號：38)、 EV1018-T97A-IgGl-KO-QVQL (序列編號：39)、 EV1018-T97V-IgGl-KO-QVQL (序列編號：40)、 EV1018-N95D-IgGl-KO-QVQL (序列編號：41)、 EV1018-N95E IgGl-KO-QVQL (序列編號：42)、 EV1018-N95K IgGl-KO-QVQL (序列編號：43)、 EV1018-N95Q IgGl-KO-QVQL (序列編號：44)、 EV1018-N93Q-N95T IgGl-KO-QVQL (序列編號：45)、 EV1018-野生型-IgGl-QVQL-BI (序列編號：46)、 EV1018-T97A IgGl-QVQL-BI (序列編號：47)、 EV1018-T97V IgGl-QVQL-BI (序列編號：48)、 EV1018-N95D IgGl-QVQL-BI (序列編號：49)、 EV1018-N95E IgGl-QVQL-BI (序列編號：50)、 EV1018-N95K IgGl-QVQL-BI (序列編號：51)、 EV1018-N95Q IgGl-QVQL-BI (序列編號：52)、 EV1018-N93Q-N95T IgG卜QVQL-BI (序列編號：53)、 EV1018-IgG2 (序列編號：54)、EV1018-野生型-IgG2 (序 列編號：55)、EV1018-T97A-IgG2 (序列編號：56)、 EV1018-T97V-IgG2 (序列編號：57)、EV1018-N95D-IgG2 201206955 (序列編號·· 58)、EV1018-N95E-IgG2 (序列編號·· 59)、 EV1018-N95K-IgG2 (序列編號：60)、EV1018-N95Q-IgG2 (序列編號：61)、EV1018-N93Q-N95T-IgG2 (序列編號： 62)、EV1018-IgG4 (序列編號：63)、EV1018-野生型-IgG4 (序列編號：64)、EV1018-T97A-IgG4 (序列編號：65)、 EV1018-T97V-IgG4 (序列編號：66)、EV1018-N95D-IgG4 (序列編號：67)、EV1018-N95E-IgG4 (序列編號：68)、 EV1018-N95K_IgG4 (序列編號：69)、EV1018-N95Q-IgG4 _ (序列編號：70)、EV1018-N93Q-N95T-IgG4 (序列編號： 71)、EV1018-IgG4-SP (序 列編號 • 72)、 EV1018 -野生 型 -IgG4-SP (序列編號：73) 、EV1018 -T97A-IgG4-SP (序 列 編號：74)、EV1018-T97V-IgG4 -SP (序 列編號 ：75) EV1018-N95D-IgG4-SP (序 列 编 號 ： 76) > EV1018-N95E-IgG4-SP (序 列 編 號 ： 77) EY1018-N95K-IgG4-SP (序 列 編 號 ： 78) X EV1018-N95Q-IgG4-SP (序 列 編 號 ： 79) 與 EV1018-N93Q-N95T-IgG4-SP (序列編號：80)。 某些實施例中，抗體或其之抗原結合片段包括輕鏈 EV1 01 8-野生型-原型-恆定（序列編號：37)與一下列重鏈 變體：EV1018 (序列編號：10)、EV1018-野生型-IgGIKO (序列編號：11)、EV1018-T97A-IgGlKO (序列編號·· 12)、 EV1018-T97V-IgGlKO (序列編號：13)、 EV1018-N95D-IgGlKO (序列編號：14)、EV1018-N95E IgGIKO (序列編號：15)、EV1018-N95K IgGIKO (序列 71 201206955 編號：16)、EV1018-N95Q IgGIKO (序列編號·· 17)、 EV1018-N93Q-N95T IgGlKO (序列編號：18)、EV1018-野生型-IgGl-BI (序列編號：19)、EV1018-T97A IgGl-BI (序列編號：20)、EV1018-T97V IgGl-BI (序列編號：21)、 EV1018-N95D IgGl-BI (序列編號：22)、EV1018-N95E IgGl-BI (序列編號：23)、EV1018-N95K IgG卜BI (序列 編號：24)、EV1018-N95Q IgGl-BI (序列編號：25)、 EV1018-N93Q-N95T IgG 卜 BI (序列編號：26)、 # EV1018-T97A IgGl-原型-恆定（序列編號：27)、 EV1018-T97V IgGl-原型-恆定（序列編號：28)、 EV1018-N95D IgGl-原型-恆定（序列編號：29)、 EV1018-N95E IgGl-原型-恆定（序列編號：30)、 EV1018-N95K IgGl-原型-恆定（序列編號：31)、 EV1018-N95Q IgGl-原型-恆定（序列編號：32)、 EV1018-N93Q-N95T IgGl-原型-恆定（序列編號：33)、 _ EV1018-野生型-IgGl-KO-QVQL (序列編號：38)、 EV1018-T97A-IgGl-KO-QVQL (序列編號·· 39)、 EV1018-T97V-IgGl-KO-QVQL (序列編號：40)、 EV1018-N95D-IgGl-KO-QVQL (序 列 編 號 :41)、 EV1018-N95E IgGl-KO-QVQL (序 列 編 號 ：42)、 EV1018-N95K IgGl-KO-QVQL (序 列 編 號 ：43)、 EV1018-N95Q IgGl-KO-QVQL (序 列 編 號 ：44)、 EV1018-N93Q-N95T IgGl-KO-QVQL (序列編號：45)、 EV1018-野生型-IgGl-QVQL-BI (序列編號：46)、 72 201206955 EV1018-T97A IgGl-QVQL-BI (序列編號：47)、 EV1018-T97V IgGl-QVQL-BI (序列編號：48)、 EV1018-N95D IgGl-QVQL-BI (序列編號：49)、 EV1018-N95E IgGl-QVQL-BI (序列編號：50)、 EV1018-N95K IgGl-QVQL-BI (序列編號：51)、 EV1018-N95Q IgGl-QVQL-BI (序列編號：52)、 EV1018-N93Q-N95T IgGl-QVQL-BI (序列編號：53)、 EV1018-IgG2 (序列編號：54)、EV1018-野生型-IgG2 (序 列編號：55)、EV1018-T97A-IgG2 (序列編號：56)、 EV1018-T97V-IgG2 (序列編號：57)、EV1018-N95D-IgG2 (序列編號：58)、EV1018-N95E-IgG2 (序列編號：59)、 EV1018-N95K-IgG2 (序列編號：60)、EV1018-N95Q-IgG2 (序列編號：61)、EV1018-N93Q-N95T-IgG2 (序列編號： 62)、EV1018-IgG4 (序列編號：63)、EV1018-野生型-IgG4 (序列編號：64)、EV1018-T97A-IgG4 (序列編號：65)、 EV1018-T97V-IgG4 (序列編號：66)、EV1018-N95D-IgG4 (序列編號：67)、EV1018-N95E-IgG4 (序列編號：68)、 EV1018-N95K-IgG4 (序列編號：69)、EV1018-N95Q-IgG4 (序列編號：70)、EV1018_N93Q-N95T-IgG4 (序列編號： 71)、EV1018-IgG4-SP (序列編號：72)、EV1018-野生型 -IgG4-SP (序列編號：73)、EV1018-T97A-IgG4-SP (序列 編號：74)、EV1018-T97V-IgG4-SP (序列編號：75)、 EV1018-N95D-IgG4-SP (序列編號：76)、 EV1018-N95E-IgG4-SP (序列編號：77)、 73 201206955 EV1018-N95K-IgG4-SP (序列編號：78)、 EV1018-N95Q-IgG4-SP (序列編號：79)與 EV1018-N93Q-N95T-IgG4-SP (序列編號：80)。 本發明提供抗體EV1019本身與許多的EV1019抗體之 變形概述於表B。某些實施例中，重鏈包含一或更多相 對野生型重鏈序列之胺基酸取代。某些實施例中，輕鏈 包含一或更多相對野生型EV1 01 9輕鏈序列之胺基酸取 代。某些實施例中，重鏈與輕鏈各自包含一或更多胺基 酸取代。 本發明某些實施例中，抗體或其之抗原結合片段包括 重鏈EV101 9 (序列編號：160)及選自下列所構成之群組 的輕鏈：EV1019-野生型-原型（序列編號：202)、EV1019-野生型-BI (序列編號：203)、EV1019-野生型-BI2 (序列 編號：204)、EV1019-野生型-原型-恆定（序列編號：205)、 EV1019-N25S (序列編號：206)、EV1019-N25S-BI2 (序 列編號：207)、EV1019-N25G (序列編號：208)、 EV1019-N2 5G-BI2 (序列編號：209)、EV1019-N25T (序 列編號：210)、EV1019-N25T-BI2 (序列編號：211)、 EV1019-N25R (序列編號：212)、EV1019-N25R-BI2 (序 列編號：213)、EV1019-N25Q (序列編號：214)、 EV1019-N25Q-BI2 (序列編號：215)、EV1019-S27N (序 列編號：216)、EV1019-S27N-BI2 (序列編號：217)、 EV1019-S27G (序列編號：218)、EV1019-S27G-BI2 (序 74 201206955 列編號：219)、EV1019-S27A (序列編號：220)與 EV1019-S27A-BI2 (序列編號：221)。 本發明某些實施例中，抗體或其之抗原結合片段包括 重鏈EV1019-野生型-IgGl-BI (序列編號：161)及選自下 列所構成之群組的輕鏈：EV1 019-野生型-原型（序列編 號：202)、EV1019-野生型-BI (序列編號：203)、EV1019-野生型-BI2 (序列編號：204)、EV1019-野生型-原型-恆 定（序列編號：205)、EV1019-N25S (序列編號：206)、 EV1019-N25S-BI2 (序列編號：207)、EV1019-N25G (序 列編號：208)、EV1019-N25G-BI2 (序列編號：209)、 EV1019-N25T (序列編號：210)、EV1019-N25T-BI2 (序 列編號：211)、EV1019-N25R (序列編號：212)、 EV1019-N25R-BI2 (序列編號：213)、EV1019-N25Q (序 列編號：214)、EV1019-N25Q-BI2 (序列編號：215)、 EV1019-S27N (序列編號：216)、EV1019-S27N-BI2 (序 列編號：217)、EV1019-S27G (序列編號：218)、 EV1019-S27G-BI2 (序列編號：219)、EV1019-S27A (序 列編號：220)與 EV1019-S27A-BI2 (序列編號：221)。 本發明某些實施例中’抗體或其之抗原結合片段包括 重鍵EV1019-野生型-IgGIKO (序列編號：162)及選自下 列所構成之群組的輕鏈：EV1019-野生型-原型（序列編 號：202)、EV1019-野生型-BI (序列編號：2〇3)、EV1019-野生型-BI2 (序列編號：204)、EV1019-野生型-原型-恆 定（序列編號：205)、EV1019-N25S (序列編號：206)、 75 201206955 EV1019-N25S-BI2 (序列編號：207)、EV1019-N25G (序 列編號：208)、EV1019-N25G-BI2 (序列編號·· 209)、 EV1019-N25T (序列編號：210)、EV1019-N25T-BI2 (序 列編號：211)、EV1019-N25R (序列編號：212)、 EV1019-N25R-BI2 (序列編號·· 213)、EV1019_N25Q (序 列編號：214)、EV1019-N25Q-BI2 (序列編號：215)、 EV1019-S27N (序列編號：216)、EV1019-S27N-BI2 (序 列編號：217)、EV1019-S27G (序列編號：218)、 EV1019-S27G-BI2 (序列編號：219)、EV1019-S27A (序 列編號：220)與 EV1019-S27A-BI2 (序列編號：221)。 本發明某些實施例中，抗體或其之抗原結合片段包括 重鏈EV1019-C105G (序列編號：163)及選自下列所構成 之群組的輕鏈：EV1019-野生型-原型（序列編號：202) ' EV1019-野生型-BI (序列編號：203)、EV1019-野生型-BI2 (序列編號：204)、EV1 01 9-野生型-原型-恆定（序列編號： 205)、EV1019-N25S (序列編號：206)、EV1019-N25S-BI2 (序列編號：207)、EV1019-N25G (序列編號：208)、 EV1019-N25G-BI2 (序列編號：209)、EV1019-N25T (序 列編號：210)、EV1019-N25T-BI2 (序列編號：211)、 EV1019-N25R (序列編號：212)、EV1019-N25R-BI2 (序 列編號：213)、EV1019-N25Q (序列編號：214)、 EV1019-N25Q-BI2 (序列編號：215)、EV1019-S27N (序 列編號：216)、EV1019-S27N-BI2 (序列編號：217)、 76 201206955 EV1019-S27G (序列編號：218)、EV1019-S27G-BI2 (序 列編號：219)、EV1019-S27A (序列編號：220)與 EV1019-S27A-BI2 (序列編號：221)。 本發明某些實施例中，抗體或其之抗原結合片段包括 重鏈EV1019-C105G-IgGl-BI (序列編號：164)及選自下 列所構成之群組的輕鏈：EV1019-野生型-原型（序列編 號：202)、EV1019-野生型-BI (序列編號：203)、EV1019-野生型-BI2 (序列編號：204)、EV1019-野生型-原型-恆 定（序列編號：205)、EV1019-N25S (序列編號：206)、 EV1019-N25S-BI2 (序列編號：207)、EV1019-N25G (序 列編號：208)、EV1019-N25G-BI2 (序列編號：209)、 EV1019-N25T (序列編號：210)、EV1019-N25T-BI2 (序 列編號：211)、EV1019-N25R (序列編號·· 212)、 EV1019-N25R-BI2 (序列編號：213)、EV1019-N25Q (序 列編號：214)、EV1019-N25Q-BI2 (序列編號：215)、 EV1019-S27N (序列編號：216)、EV1019-S27N-BI2 (序 列編號：217)、EV1019-S27G (序列編號：218)、 EV1019-S27G-BI2 (序列編號：219)、EV1019-S27A (序 列編號：220)與 EV1019-S27A-BI2 (序列編號：221)。 本發明某些實施例中，抗體或其之抗原結合片段包括 重鏈EV1019-C105G-IgGlKO (序列編號：165)及選自下 列所構成之群組的輕鏈：EV1 01 9-野生型-原型（序列編 號：202)、EV1019-野生型-BI (序列編號：203)、EV1019-野生型-BI2 (序列編號：204)、EV1019-野生型-原型-恆 77 201206955 定（序列編號：205)、EV1019-N25S (序列編號：206)、 EV1019-N25S-BI2 (序列編號：207)、EV1019-N25G (序 列編號：208)、EV1019-N25G-BI2 (序列編號：209)、 EV1019-N25T (序列編號：210)、EV1019-N25T-BI2 (序 列編號：211)、EV1019-N25R (序列編號：212)、 EV1019-N25R-BI2 (序列編號：213)、EV1019-N25Q (序 列編號：214)、EV1019-N25Q-BI2 (序列編號：215)、 EV1019-S27N (序列編號：216)、EV1019-S27N-BI2 .(序 列編號：217)、EV1019-S27G (序列編號：218)、 EV1019-S27G-BI2 (序列編號：219)、EV1019-S27A (序 列編號：220)與 EV1019-S27A-BI2 (序列編號：221)。 本發明某些實施例中，抗體或其之抗原結合片段包括 重鏈EV1019-C105S (序列編號：166)及選自下列所構成 之群組的輕鏈·· EV1019-野生型-原型（序列編號：202)、 £¥1019-野生型-；61(序列編號：203)、£¥1019-野生型-312 (序列編號：204)、EV1019-野生型-原型-恆定（序列編號： 205)、EV1019-N25S (序列編號：206)、EV1019-N25S-BI2 (序列編號：207)、EV1019-N25G (序列編號：.208)、 EV1019-N25G-BI2 (序列編號：209)、EV1019-N25T (序 列編號：210)、EV1019-N25T-BI2 (序列編號：211)、 EV1019-N25R (序列編號：212)、EV1019-N25R-BI2 (序 列編號：213)、EV1019-N25Q (序列編號：214)、 EV1019-N25Q-BI2 (序列編號：215)、EV1019-S27N (序 列編號：216)、EV1019-S27N-BI2 (序列編號：217)、 78 201206955 EV1019-S27G (序列編號：218)、EV1019-S27G-BI2 (序 列編號：219)、EV1019-S27A (序列編號：220)與 EV1019-S27A-BI2 (序列編號：221)。 本發明某些實施例中，抗體或其之抗原結合片段包括 重鏈EV1019-C105S-IgGl-BI (序列編號：167)及選自下 列所構成之群組的輕鏈：EV1019-野生型-原型（序列編 號：202)、EV1019-野生型-BI (序列編號：203)、EV1019-野生型-BI2 (序列塢號：204)、EV1019-野生型-原型-恆 定（序列編號：205)、EV1019-N25S (序列編號：206)、 EV1019-N25S-BI2 (序列編號：207)、EV1019-N25G (序 列編號：208)、EV1019-N25G-BI2 (序列編號：209)、 EV1019-N25T (序列編號：210)、EV1019-N25T-BI2 (序 列編號：211)、EV1019-N25R (序列編號：212)、 EV1019-N25R-BI2 (序列編號：213)、EV1019-N25Q (序 列編號：214)、EV1019-N25Q-BI2 (序列編號：215)、 EV1019-S27N (序列編號：216)、EV1019-S27N-BI2 (序 列編號：217)、EV1019-S27G (序列編號：218)、 EV1019-S27G-BI2 (序列編號：219)、EV1019-S27A (序 列編號：220)與 EV1019-S27A-BI2 (序列編號：221)。 本發明某些實施例中，抗體或其之抗原結合片段包括 重鏈EV1019-C105S-IgGlKO (序列編號：168)及選自下 列所構成之群組的輕鏈：EV1019-野生型-原型（序列编 號：202)、EV1019-野生型-BI (序列編號：203)、EV1019-野生型-BI2 (序列編號：204)、EV1019-野生型-原型-恆 79 201206955 定（序列編號：205)、EV1019-N25S (序列編號：206)、 EV1019-N25S-BI2 (序列編號：207)、EV1019-N25G (序 列編號：208)、EV1019-N25G-BI2 (序列編號：209)、 EV1019-N25T (序列編號：210)、EV1019-N25T-BI2 (序 列編號：211)、EV1019-N25R (序列編號：212)、 EV1019-N25R-BI2 (序列編號：213)、EV1019-N25Q (序 列編號：214)、EV1019-N25Q-BI2 (序列編號：215)、 EV1019-S27N (序列編號：216)、EV1019-S27N-BI2 (序 列編號：217)、EV1019-S27G (序列編號：218)、 EV1019-S27G-BI2 (序列編號：219)、EV1019-S27A (序 列編號：220)與 EV1019-S27A-BI2 (序列編號：221)。 本發明某些實施例中，抗體或其之抗原結合片段包括 重鏈EV1019-C105A (序列編號：169)及選自下列所構成 之群組的輕鏈：EV1019-野生型-原型（序列編號：202)、 EV1019-野生型-BI (序列編號：203)、EV1019-野生型-BI2 (序列編號：204)、EV1019-野生型-原型-恆定（序列編號： 205)、EV1019-N25S (序歹丨J 編號：206)、EV1019-N25S-BI2 (序列編號：207)、EV1019-N25G (序列編號：208)、 EV1019-N25G-BI2 (序列編號：209)、EV1019-N25T (序 列編號：210)、EV1019-N25T-BI2 (序列編號：211)、 EV1019-N25R (序列編號：212)、EV1019-N25R-BI2 (序 列編號：213)、EV1019-N25Q (序列編號：214)、 EV1019-N25Q-BI2 (序列編號：215)、EV1019-S27N (序 列編號：216)、EV1019-S27N-BI2 (序列編號：217)、 80 201206955 EV1019-S27G (序列編號：218)、EV1019-S27G-BI2 (序 列編號：219)、EV1019-S27A (序列編號：220)與 EV1019-S27A-BI2 (序列編號：221)。 本發明某些實施例中，抗體或其之抗原結合片段包括 重鏈EV1019-C105A-IgGl-BI (序列編號：17〇)及選自下 列所構成之群組的輕鏈：EV1019-野生型-原型（序列編 號：202)、EV1019-野生型-BI (序列編號：203)、EV1019-野生型-BI2 (序列編號：204)、EV1019-野生型-原型-恆 定（序列編號：205)、EV1019-N25S (序列編號：206)、 EV1019-N25S-BI2 (序列編號：207)、EV1019-N25G (序 列編號：208)、EV1019-N25G-BI2 (序列編號：209)、 EV1019-N25T (序列編號：210)、EV1019-N25T-BI2 (序 列編號：211)、EV1019-N25R (序列編號：212)、 EV1019-N25R-BI2 (序列編號：213)、EV1019-N25Q (序 列編號：214)、EV1019-N25Q-BI2 (序列編號：215)、 EV1019-S27N (序列編號：216)、EV1019-S27N-BI2 (序 列編號：217)、EV1019-S27G (序列編號：218)、 EV1019-S27G-BI2 (序列編號：219)、EV1019-S27A (序 列編號：220)與 EV1019-S27A-BI2 (序列編號：221)。 本發明某些實施例中，抗體或其之抗原結合片段包括 重鏈EV1019-C105A-IgGlKO (序列編號：171)及選自下 列所構成之群組的輕鏈：EV1019-野生型-原型（序列編 號：202)、EV1019-野生型-BI (序列編號：203)、EV1019-野生型-BI2 (序列編號：204)、EV1019-野生型-原型-恆 81 201206955 定（序列編號：205)、EV1019-N25S (序列編號：206)、 EV1019-N25S-BI2 (序列編號：207)、EV1019-N25G (序 列編號：208)、EV1019-N25G-BI2 (序列編號：209)、 EV1019-N25T (序列編號：210)、EV1019-N25T-BI2 (序 列編號：211)、EV1019-N25R (序列編號：212)、 EV1019-N25R-BI2 (序列編號：213)、EV1019-N25Q (序 列編號：214)、EV1019-N25Q-BI2 (序列編號：215)、 EV1019-S27N (序列編號：216)、EV1019-S27N-BI2 (序 列編號·· 217)、EV1019-S27G (序列編號：218)、 EV1019-S27G-BI2 (序列編號：219)、EV1019-S27A (序 列編號：220)與 EV1019-S27A-BI2 (序列編號：221)。 本發明某些實施例中，抗體或其之抗原結合片段包括 重鏈EV1019-C105Q (序列編號：172)及選自下列所構成 之群組的輕鏈：EV1019-野生型-原型（序列編號：202)、 EV1019-野生型-BI (序列編號：203)、EV1019-野生型-BI2 (序列編號：204)、EV1019-野生型-原型-恆定（序列編號： 205)、EV1019-N25S (序列編號：206)、EV1019-N25S-BI2 (序列編號：207)、EV1019-N25G (序列編號：208)、 EV1019-N25G-BI2 (序列編號：209)、EV1019-N25T (序 列編號：210)、EV1019-N25T-BI2 (序列編號：211)、 EV1019-N25R (序列編號：212)、EV1019-N25R-BI2 (序 列編號：213)、EV1019-N25Q (序列編號：214)、 EV1019-N25Q-BI2 (序列編號：215)、EV1019-S27N (序 列編號：216)、EV1019-S27N-BI2 (序列編號：217)、 82 201206955 EV1019-S27G (序列編號：218)、EV1019-S27G-BI2 (序 列編號：219)、EV1019-S27A (序列編號：220)與 EV1019-S27A-BI2 (序列編號：221)。 本發明某些實施例中，抗體或其之抗原結合片段包括 重鏈EV1019-C105Q-IgGl-BI (序列編號：173)及選自下 列所構成之群組的輕鏈：EV1 0 19 -野生型-原型（序列編 號：202)、EV1019-野生型-BI (序列編號：203)、EV1019-野生型-BI2 (序列編號：204)、EV1019-野生型-原型-恆 定（序列編號·· 205)、EV1019-N25S (序列編號：206)、 EV1019-N25S-BI2 (序列編號：207)、EV1019-N25G (序 列編號：208)、EV1019-N25G-BI2 (序列編號：209)、 EV1019-N2 5T (序列編號：210)、EV1019-N25T-BI2 (序 列編號：211)、EV1019-N25R (序列編號：212)、 EV1019-N25R-BI2 (序列編號：213)、EV1019-N25Q (序 列編號：214)、EV1019-N25Q-BI2 (序列編號：215)、 EV1019-S27N (序列編號：216)、EV1019-S27N-BI2 (序 列編號：217)、EV1019-S27G (序列編號：218)、 EV1019-S27G-BI2 (序列編號：219)、EV1019-S27A (序 列編號：220)與 EV1019-S27A-BI2 (序列編號·· 221)。 本發明某些實施例中，抗體或其之抗原結合片段包括 重鏈EV1019-C105Q-IgGlKO (序列編號：174)及選自下 列所構成之群組的輕鏈：EV1019-野生犁-原型（序列編 號：202)、EV1019-野生型-BI (序列編號 _· 203)、EV1019-野生型-BI2 (序列編號：204)、EV1019-野生型-原型-恆 83 201206955 定（序列編號：205)、EV1019-N25S (序列編號：206)、 EV1019-N25S-BI2 (序列編號：207)、EV1019-N25G (序 列編號：208)、EV1019-N25G-BI2 (序列編號：209)、 EV1019-N25T (序列編號：210)、EV1019-N25T-BI2 (序 列編號：211)、EV1019-N25R (序列編號：212)、 EV1019-N25R-BI2 (序列編號：213)、EV1019-N25Q (序 列編號：214)、EV1019-N25Q-BI2 (序列編號：215)、 EV1019-S27N (序列編號：216)、EV1019-S27N-BI2 (序 列編號：217)、EV1019-S27G (序列編號：218)、 EV1019-S27G-BI2 (序列編號：219)、EV1019-S27A (序 列編號：220)與 EV1019-S27A-BI2 (序列編號：221)。 本發明某些實施例中，抗體或其之抗原結合片段包括 重鏈EV1019-C105T (序列編號：175)及選自下列所構成 之群組的輕鏈：EV1019-野生型-原型（序列編號：202)、 EV1019-野生型-BI (序列編號：203)、EV1019-野生型-BI2 (序列編號：204)、EV1019-野生型-原型-恆定（序列編號： 205)、EV1019-N25S (序列編號：206)、EV1019-N25S-BI2 (序列編號：207)、EV1019-N25G (序列編號：208)、 EV1019-N25G-BI2 (序列編號：209)、EV1019-N25T (序 列編號：210)、EV1019-N25T-BI2 (序列編號·· 211)、 EV1019-N25R (序列編號：212)、EV1019-N25R-BI2 (序 列編號：213)、EV1019-N25Q (序列編號：214)、 EV1019-N25Q-BI2 (序列編號·· 215)、EV1019-S27N (序 列編號：216)、EV1019-S27N-BI2 (序列編號：217)、 84 201206955 EV1019-S27G (序列編號：218)、EV1019-S27G-BI2 (序 列編號：219)、EV1019-S27A (序列編號：220)與 EV1019-S27A-BI2 (序列編號：221)。 本發明某些實施例中，抗體或其之抗原結合片段包括 重鏈EV1019-C105T-IgGl-BI (序列編號：176)及選自下 列所構成之群組的輕鏈1 EV1019-野生型-原型（序列編 號：202)、EV1019-野生型-BI (序列編號：203)、EV1019-野生型-BI2 (序列編號：204)、EV1019-野生型-原型-恆 定（序列編號：205)、EV1019-N25S (序列編號：206)、 EV1019-N25S-BI2 (序列編號：207)、EV1019-N25G (序 列編號：208)、EV1019-N25G-BI2 (序列編號：209)、 EV1019-N25T (序列編號：210)、EV1019-N25T-BI2 (序 列編號：211)、EV1019-N25R (序列編號：212)、 EV1019-N25R-BI2 (序列編號：213)、EV1019-N25Q (序 列編號：214)、EV1019-N25Q-BI2 (序列編號：215)、 EV1019-S27N (序列編號：216)、EV1019-S27N-BI2 (序 列編號：217)、EV1019-S27G (序列編號：218)、 EV1019-S27G-BI2 (序列編號：219)、EV1019-S27A (序 列編號：220)與 EV1019-S27A-BI2 (序列編號：221)。 本發明某些實施例中，抗體或其之抗原結合片段包括 重鏈EV1019-C105T-IgGlKO (序列編號：177)及選自下 列所構成之群組的輕鏈：EV1019-野生型-原型（序列編 號：202)、EV1019-野生型-BI (序列編號：203)、EV1019-野生型-BI2 (序列編號：204)、EV1019-野生型-原型-恆 85 201206955 定（序列編號：205)、EV1019-N25S (序列編號：206)、 EV1019-N25S-BI2 (序列編號：207)、EV1019-N25G (序 列編號：208)、EV1019-N25G-BI2 (序列編號：209)、 EV1019-N25T (序列編號：210)、EV1019-N25T-BI2 (序 列編號：211)、EV1019-N25R (序列編號：212)、 EV1019-N25R-BI2 (序列編號：213)、EV1019-N25Q (序 列編號：214)、EV1019-N25Q-BI2 (序列編號：215)、 EV1019-S27N (序列編號：216)、EV1019-S27N-BI2 (序 列編號：217)、EV1019-S27G (序列編號：218)、 EV1019-S27G-BI2 (序列編號：219)、EV1019-S27A (序 列編號：220)與 EV1019-S27A-BI2 (序列編號：221)。 本發明某些實施例中，抗體或其之抗原結合片段包括 重鏈EV1019-C105M (序列編號：178)及選自下列所構成 之群組的輕鏈：EV1019-野生型-原型（序列編號：202)、 £乂1019-野生型-81(序列編號：203)、£乂1019-野生型-612 (序列編號：204)、EV1019-野生型-原型-恆定（序列編號： 205)、EV1019-N25S (序列編號：206)、EV1019-N25S-BI2 (序列編號：207)、EV1019-N25G (序列編號：208)、 EV1019-N25G-BI2 (序列編號：209)、EV1019-N25T (序 列編號：210)、EV1019-N25T-BI2 (序列編號·· 211)、 EV1019-N25R (序列編號：212)、EV1019-N25R-BI2 (序 列編號：213)、EV1019-N25Q (序列編號：214)、 EV1019-N25Q-BI2 (序列編號：215)、EV1019-S27N (序 列編號：216)、EV1019-S27N-BI2 (序列編號：217)、 86 201206955 EV1019-S27G (序列編號：218)、EV1019-S27G-BI2 (序 列編號：219)、EV1019-S27A (序列編號：220)與 EV1019-S27A-BI2 (序列編號：221)。 本發明某些實施例中，抗體或其之抗原結合片段包括 重鏈EV1019-C105M-IgGl-BI (序列編號：179)及選自下 列所構成之群組的輕鏈：EV1019-野生型-原型（序列編 號：202)、EV1019-野生型-BI (序列編號：203)、EV1019-野生型-BI2 (序列編號：204)、EV1019-野生型-原型-恆 定（序列編號：205)、EV1019-N25S (序列編號：206)、 EV1019-N25S-BI2 (序列編號：207)、EV1019-N25G (序 列編號：208)、EV1019-N25G-BI2 (序列編號：209)、 EV1019-N25T (序列編號：210)、EV1019-N25T-BI2 (序 列編號：211)、EV1019-N25R (序列編號：212)、 EV1019-N25R-BI2 (序列編號：213)、EV1019-N25Q (序 列編號：214)、EV1019-N25Q-BI2 (序列編號：215)、 EV1019-S27N (序列編號：216)、EV1019-S27N-BI2 (序 列編號：217)、EV1019-S27G (序列編號：218)、 EV1019-S27G-BI2 (序列編號：219)、EV1019-S27A (序 列編號：220)與 EV1019-S27A-BI2 (序列編號：221)。 本發明某些實施例中，抗體或其之抗原結合片段包括 重鏈EV1019-C105M-IgGlKO (序列編號：180)及選自下 列所構成之群組的輕鏈：EV1019-野生型-原型（序列編 號：202)、EV1019-野生型-BI (序列編號：203)、EV1019-野生型-BI2 (序列編號：204)、EV1019-野生型-原型-恆 87 201206955 定（序列編號：205)、EV1019-N25S (序列編號·· 206) ' EV1019-N25S-BI2 (序列編號：207)、EV1019-N25G (序 列編號·· 208)、EV1019-N25G-BI2 (序列編號·· 209)、 EV1019-N25T (序列編號：210)、EV1019-N25T-BI2 (序 列編號：211)、EV1019-N25R (序列編號：212)、 EV1019-N25R-BI2 (序列編號：213)、EV1019-N25Q (序 列編號：214)、EV1019-N25Q-BI2 (序列編號：215)、 EV1019-S27N (序列編號：216)、EV1019-S27N-BI2 (序 列編號：217)、EV1019-S27G (序列編號·· 218)、 EV1019-S27G-BI2 (序列編號：219)、EV1019-S27A (序 列編號：220)與 EV1019-S27A-BI2 (序列編號：221)。 本發明某些實施例中，抗體或其之抗原結合片段包括 重鏈EV1019-C105L (序列編號：181)及選自下列所構成 之群組的輕鏈：EV1019-野生型-原型（序列編號：202)、 £乂1019-野生型-81(序列編號：203)4¥1019-野生型-312 (序列編號：204)、EV1019-野生型-原型-恆定（序列編號： 205)、EV1019-N25S (序列編號：206)、EV1019-N25S-BI2 (序列編號：207)、EV1019-N25G (序列編號：208)、 EV1019-N25G-BI2 (序列編號：209)、EV1019-N25T (序 列編號：210)、EV1019-N25T-BI2 (序列編號：211)、 EV1019-N25R (序列編號：212)、EV1019-N25R-BI2 (序 列編號：213)、EV1019-N25Q (序列編號：214)、 EV1019-N25Q-BI2 (序列編號：215)、EV1019-S27N (序 列編號：216)、EV1019-S27N-BI2 (序列編號：217)、 88 201206955 EV1019-S27G (序列編號：218)、EV1019-S27G-BI2 (序 列編號：219)、EV1019-S27A (序列編號：220)與 EV1019-S27A-BI2(序列編號：221)。 本發明某些實施例中，抗體或其之抗原結合片段包括 重鏈EV1019-C105L-IgGl-BI (序列編號·· 182)及選自下 列所構成之群組的輕鏈：EV1019-野生型-原型（序列編 號：202)、EV1019-野生型-BI (序列編號：203)、EV1019-野生型-BI2 (序列編號：204)、EV1019-野生型-原型-恆 定（序列編號：205)、EV1019-N25S (序列編號：206)、 EV1019-N2 5S-BI2 (序列編號：207)、EV1019-N25G (序 列編號：208)、EV1019-N25G-BI2 (序列編號：209)、 EV1019-N25T (序列編號：210)、EV1019-N25T-BI2 (序 列編號：211)、EV1019-N25R (序列編號：212)、 EV1019-N2 5R-BI2 (序列編號：213)、EV1019-N25Q (序 列編號：214)、EV1019-N25Q-BI2 (序列編號：215)、 EV1019-S27N (序列編號：216)、EV1019-S27N-BI2 (序 列編號：217)、EV1019-S27G (序列編號：218)、 EV1019-S27G-BI2 (序列編號：219)、EV1019-S27A (序 列編號：220)與 EV1019-S27A-BI2 (序列編號：221)。 本發明某些實施例中，抗體或其之抗原結合片段包括 重鏈EV1019-C105L-IgGlKO (序列編號：183)及選自下 列所構成之群組的輕鏈：EV1019-野生型·原型（序列編 號：202)、EV1019-野生型-BI (序列編號：203)、EV1019-野生型-BI2 (序列編號：204)、EV1019-野生型-原型-恆 89 201206955 定（序列編號：205)、EV1019-N25S (序列編號：206)、 EV1019-N25S-BI2 (序列編號：207)、EV1019-N25G (序 列編號：208)、EV1019-N25G-BI2 (序列編號：209)、 EV1019-N25T (序列編號：210)、EV1019-N25T-BI2 (序 列編號：211)、EV1019-N25R (序列編號：212)、 EV1019-N25R-BI2 (序列編號：213)、EV1019-N25Q (序 列編號：214)、EV1019-N25Q-BI2 (序列編號：215)、 EV1019-S27N (序列編號：216)、EV1019-S27N-BI2 (序 列編號：217)、EV1019-S27G (序列編號：218)、 EV1019-S27G-BI2 (序列編號：219)、EV1019-S27A (序 列編號：220)與 EV1019-S27A-BI2 (序列編號：221)。 本發明某些實施例中，抗體或其之抗原結合片段包括 重鏈EV1019-IgG2 (序列編號：222)及選自下列所構成之 群組的輕鏈：EV1019-野生型-原型（序列編號：202)、 EV1019-野生型-BI (序列編號：203)、EV1019-野生型-BI2 (序列編號：204)、EV1019-野生型-原型-恆定（序列編號： 205)、EV1019-N25S (序列編號：206)、EV1019-N25S-BI2 (序列編號：207)、EV1019-N25G (序列編號：208)、 EV1019-N25G-BI2 (序列編號：209)、EV1019-N25T (序 列編號：210)、EV1019-N25T-BI2 (序列編號：211)、 EV1019-N25R (序列編號：212)、EV1019-N25R-BI2 (序 列編號：213)、EV1019-N25Q (序列編號：214)、 EV1019-N25Q-BI2 (序列編號：215)、EV1019-S27N (序 列編號：216)、EV1019-S27N-BI2 (序列編號：217)、 90 201206955 EV1019-S27G (序列編號：218)、EV1019-S27G-BI2 (序 列編號：219)、EV1019-S27A (序列編號：220)與 EV1019-S27A-BI2 (序列編號：221)。 本發明某些實施例中，抗體或其之抗原結合片段包枯 重鏈EV1019-野生型-IgG4 (序列編號：223)及選自下列 所構成之群組的輕鏈：EV1019-野生型-原型（序列編號： 202)、EV1019-野生型-BI (序列編號：203)、EV1019-野 生型-BI2 (序列編號：204)、EV1019-野生型-原型-恆定（序 列編號：205)、EV1019-N25S (序列編號：206)、 EV1019-N25S-BI2 (序列編號：207)、EV1019-N25G (序 列編號：208)、EV1019-N25G-BI2 (序列編號：209)、 EV1019-N25T (序列編號：210)、EV1019-N25T-BI2 (序 列編號：211)、EV1019-N25R (序列編號：212)、 EV1019-N25R-BI2 (序列編號：213)、EV1019-N25Q (序 列編號：214)、EV1019-N25Q-BI2 (序列編號：215)、 EV1019-S27N (序列編號：216)、EV1019-S27N-BI2 (序 列編號：217)、EV1019-S27G (序列編號·· 218)、 EV1019-S27G-BI2 (序列編號：219)、EV1019-S27A (序 列編號：220)與 EV1019-S27A-BI2 (序列編號：221)。 本發明某些實施例中’抗體或其之抗原結合片段包括 重鏈EV1019-野生型-IgG4SP (序列編號：224)及選自下 列所構成之群組的輕鏈：EV1019-野生型-原型（序列編 號：202)、EV1019-野生型-BI (序列編號：203)、Ενι〇19-野生型-ΒΙ2 (序列編號：204)、EV1019-野生型-原型-恆 91 201206955 定（序列編號：205)、EV1019-N25S (序列編號：206)、 EV1019-N25S-BI2 (序列編號：207)、EV1019-N25G (序 列編號：208)、EV1019-N25G-BI2 (序列編號：209)、 EV1019-N25T (序列編號：210)、EV1019-N25T-BI2 (序 列編號：211)、EV1019-N25R (序列編號：212)、 EV1019-N25R-BI2 (序列編號：213)、EV1019-N25Q (序 列編號：214)、EV1019-N25Q-BI2 (序列編號：215)、 EV1019-S27N (序列編號：216)、EV1019-S27N-BI2 (序 列編號：217)、EV1019-S27G (序列編號：218)、 EV1019-S27G-BI2 (序列編號：219)、EV1019-S27A (序 列編號：220)與 EV1019-S27A-BI2 (序列編號：221)。 本發明某些實施例中，抗體或其之抗原結合片段包括 重鏈EV1019-C105G-IgG2 (序列編號：225)及選自下列所 構成之群組的輕鏈：EV1019-野生型-原型（序列編號： 202)、EV1019-野生型-BI (序列編號：203)、EV1019-野 生型-BI2 (序列編號：204)、EV1019-野生型-原型-恆定（序 列編號：205)、EV1019-N25S (序列編號：206)、 EV1019-N25S-BI2 (序列編號：207)、EV1019-N25G (序 列編號：208)、EV1019-N25G-BI2 (序列編號：209)、 EV1019-N25T (序列編號：210)、EV1019-N25T-BI2 (序 列編號：211)、EV1019-N25R (序列編號：212)、 EV1019-N25R-BI2 (序列編號：213)、EV1019-N25Q (序 列編號：214)、EV1019-N25Q-BI2 (序列編號：215)、 EV1019-S27N (序列編號：216)、EV1019-S27N-BI2 (序 92 201206955 列編號：217)、EV1019-S27G (序列编號：218)、 EV1019-S27G-BI2 (序列編號：219)、EV1019-S27A (序 列編號：220)與 EV1019-S27A-BI2 (序列編號：221)。 本發明某些實施例中，抗體或其之抗原結合片段包括 重鏈EV1019-C105G-IgG4 (序列編號：226)及選自下列所 構成之群組的輕鏈：EV1019-野生型-原型（序列編號： 202)、EV1019-野生型-BI (序列編號：203)、EV1019-野 生型-BI2 (序列編號：204)、EV1019-野生型-原型-恆定（序 • 列編號：205)、EV1019-N25S (序列編號：206)、 EV1019-N25S-BI2 (序列編號·· 207)、EV1019-N25G (序 列編號：208)、EV1019-N25G-BI2 (序列編號：209)、 EV1019-N25T (序列編號：210)、EV1019-N25T-BI2 (序 列編號：211)、EV1019-N25R (序列編號：212)、 EV1019-N25R-BI2 (序列編號：213)、EV1019-N25Q (序 列編號·· 214)、EV1019-N25Q-BI2 (序列編號：215)、 φ EV1019-S27N (序列編號：216)、EV1019-S27N-BI2 (序 列編號：217)、EV1019-S27G (序列編號：218)、 EV1019-S27G-BI2 (序列編號：219)、EV1019-S27A (序 列編號：220)與 EV1019-S27A-BI2 (序列編號：221)。 本發明某些實施例中，抗體或其之抗原結合片段包括 重鏈EV1019-C105G-IgG4SP (序列編號：227)及選自下 列所構成之群組的輕鏈：EV1019-野生型-原型（序列編 號：202)、EV1019-野生型-BI (序列編號：203)、EV1019-野生型-BI2 (序列編號：204)、EV1019-野生型-原型-怪 93 201206955 定（序列編號：205) ' EV1019-N25S (序列編號：206)、 EV1019-N25S-BI2 (序列編號：207)、EV1019-N25G (序 列編號：208)、EV1019-N25G-BI2 (序列編號：209)、 EV1019-N25T (序列編號：210)、EV1019-N25T-BI2 (序 列編號：211)、EV1019-N25R (序列編號：212)、 EV1019-N25R-BI2 (序列編號：213)、EV1019-N25Q (序 列編號：214)、EV1019-N25Q-BI2 (序列編號：215)、 EV1019-S27N (序列編號：216)、EV1019-S27N-BI2 (序 列編號：217)、EV1019-S27G (序列編號：218)、 EV1019-S27G-BI2 (序列編號：219)、EV1019-S27A (序 列編號：220)與 EV1019-S27A-BI2 (序列編號：221)。 本發明某些實施例中，抗體或其之抗原結合片段包括 重鏈EV1019-C105S-IgG2 (序列編號：228)及選自下列所 構成之群組的輕鏈：EV1019-野生型-原型（序列編號： 202)、EV1019-野生型-BI (序列編號：203)、EV1019-野 生型-BI2 (序列編號：204)、EV1019-野生型-原型-恆定（序 列編號：205)、EV1019-N25S (序列編號：206)、 EV1019-N25S-BI2 (序列編號：207)、EV1019-N25G (序 列編號：208)、EV1019-N25G-BI2 (序列編號：209)、 EV1019-N25T (序列編號：210)、EV1019-N25T-BI2 (序 列編號：211)、EV1019-N25R (序列編號：212)、 EV1019-N25R-BI2 (序列編號：213)、EV1019-N25Q (序 列編號：214)、EV1019-N25Q-BI2 (序列編號：215)、 EV1019-S27N (序列編號：216)、EV1019-S27N-BI2 (序 94 201206955 列編號：217)、EV1019-S27G (序列編號：218)、 EV1019-S27G-BI2 (序列編號：219)、EV1019-S27A (序 列編號：220)與 EV1019-S27A-BI2 (序列編號：221)。 本發明某些實施例中，抗體或其之抗原結合片段包括 重鏈EV1019-C105S-IgG4 (序列編號：229)及選自下列所 構成之群組的輕鏈：EV1019-野生型-原型（序列編號： 202)、EV1019-野生型-BI (序列編號：203)、EV1019-野 生型-BI2 (序列編號：204)、EV1019-野生型-原型-恆定（序 列編號：205)、EV1019-N25S (序列編號：206)、 EV1019-N25S-BI2 (序列編號：207)、EV1019-N25G (序 列編號：208)、EV1019-N25G-BI2 (序列編號：209)、 EV1019-N25T (序列編號：210)、EV1019-N25T-BI2 (序 列編號：211)、EV1019-N25R (序列編號：212)、 EV1019-N25R-BI2 (序列編號：213)、EV1019-N25Q (序 列編號：214) ' EV1019-N25Q-BI2 (序列編號：215)、 EV1019-S27N (序列編號：216)、EV1019-S27N-BI2 (序 列編號：217)、EV1019-S27G (序列編號：218)、 EV1019-S27G-BI2 (序列編號：219)、EV1019-S27A (序 列編號：220)與 EV1019-S27A-BI2 (序列編號：221)。 本發明某些實施例中，抗體或其之抗原結合片段包栝 重鏈EV1019-C105S-IgG4SP (序列編號：230)及選自下列 所構成之群組的輕鏈：EV1 019-野生型-原型（序列編號： 202)、EV1019-野生型-BI (序列編號：203)、EV1019-野 生型-BI2 (序列編號：204)、EV1019-野生型-原型-恆定（序 95 201206955 列編號：205)、EV1019-N25S (序列編號：206)、 EV1019-N25S-BI2 (序列編號：207)、EV1019-N25G (序 列編號：208)、EV1019-N25G-BI2 (序列編號：209)、 EV1019-N25T (序列編號：210)、EV1019-N25T-BI2 (序 列編號：211)、EV1019-N25R (序列編號：212)、 EV1019-N25R-BI2 (序列編號：213)、EV1019-N25Q (序 列編號：214)、EV1019-N25Q-BI2 (序列編號：215)、 EV1019-S27N (序列編號：216)、EV1019-S27N-BI2 (序 列編號：217)、EV1019-S27G (序列編號：218)、 EV1019-S27G-BI2 (序列編號：219)、EV1019-S27A (序 列編號：220)與 EV1019-S27A-BI2 (序列編號：221)。 本發明某些實施例中，抗體或其之抗原結合片段包括 重鏈EV1019-C105A-IgG2 (序列編號：231)及選自下列所 構成之群組的輕鏈：EV1019-野生型-原型（序列編號： 202)、EV1019-野生型-BI (序列編號：203)、EV1019-野 生型-BI2 (序列編號：204)、EV1019-野生型-原型-恆定（序 列編號：205)、EV1019-N25S (序列編號：206)、 EV1019-N25S-BI2 (序列編號：207)、EV1019-N25G (序 列編號：208)、EV1019-N25G-BI2 (序列編號：209)、 EV1019-N25T (序列編號：210)、EV1019-N25T-BI2 (序 列編號：211)、EV1019-N25R (序列編號：212)、 EV1019-N25R-BI2 (序列編號：213)、EV1019-N25Q (序 列編號：214)、EV1019-N25Q-BI2 (序列編號：215)、 EV1019-S27N (序列編號：216)、EV1019-S27N-BI2 (序 96 201206955 列編號：217)、EV1019-S27G (序列編號：218)、 EV1019-S27G-BI2 (序列編號：219)、EV1019-S27A (序 列編號：220)與 EV1019-S27A-BI2 (序列編號：221)。 本發明某些實施例中，抗體或其之抗原結合片段包括 重鏈EV1019-C105A-IgG4 (序列編號：23 2)及選自下列所 構成之群組的輕鏈：EV1019-野生型-原型（序列編號： 202)、EV1019-野生型-BI (序列編號：203)、EV1019-野 生型-BI2 (序列編號：2〇4)、EV1019-野生型-原型-恆定（序 列編號：205)、EV1019-N25S (序列編號：206)、 EV1019-N25S-BI2 (序列編號：207)、EV1019-N25G (序 列編號：208)、EV1019-N25G-BI2 (序列編號：209)、 EV1019-N25T (序列編號：210)、EV1019-N25T-BI2 (序 列編號：211)、EV1019-N25R (序列編號：212)、 EV1019-N25R-BI2 (序列編號：213)、EV1019-N25Q (序 列編號：214)、EV1019_N25Q-BI2 (序列編號：215)、 EV1019-S27N (序列編號：216)、EV1019-S27N-BI2 (序 列編號：217)、EV1019-S27G (序列編號：218)、 EV1019-S27G-BI2 (序列編號·· 219)、EV1019-S27A (序 列編號：220)與 EV1019-S27A-BI2 (序列編號：221)。 本發明某些實施例中，抗體或其之抗原結合片段包括 重鏈EV1019-C105A-IgG4SP (序列編號·· 233)及選自下 列所構成之群組的輕鏈：EV1019-野生型-原型（序列編 號：202)、EV1019-野生型-BI (序列編號：203)、EV1019-野生型-BI2 (序列編號：204)、EV1019-野生型-原型-恆 97 201206955 定（序列編號：205)、EV1019-N25S (序列編號：206)、 EV1019-N25S-BI2 (序列編號：207)、EV1019-N25G (序 列編號：208)、EV1019-N25G-BI2 (序列編號：209)、 EV1019-N25T (序列編號：210)、EV1019-N25T-BI2 (序 列編號：211)、EV1019-N25R (序列編號：212)、 EV1019-N25R-BI2 (序列編號：213)、EV1019-N25Q (序 列編號：214)、EV1019-N25Q-BI2 (序列編號：215)、 EV1019-S27N (序列編號：216)、EV1019-S27N-BI2 (序 列編號：217)、EV1019-S27G (序列編號：218)、 EV1019-S27G-BI2 (序列編號：219)、EV1019-S27A (序 列編號：220)與 EV1019-S27A-BI2 (序列編號：221)。 本發明某些實施例中，抗體或其之抗原結合片段包括 重鏈EV1019-C105Q-IgG2 (序列編號：234)及選自下列所 構成之群組的輕鏈：EV1 019-野生型-原型（序列編號： 202)、EV1019-野生型-BI (序列編號：203)、EV1019-野 生型-BI2 (序列編號：204)、EV1019-野生型-原型-恆定（序 列編號：205)、EV1019-N25S (序列編號：206)、 EV1019-N25S-BI2 (序列編號：207)、EV1019-N25G (序 列編號：208)、EV1019-N25G-BI2 (序列編號♦· 209)、 EV1019-N25T (序列編號：210)、EV1019-N25T-BI2 (序 列編號：211)、EV1019-N25R (序列編號：212)、 EV1019-N25R-BI2 (序列編號：213)、EV1019-N25Q (序 列編號：214)、EV1019-N25Q-BI2 (序列編號：215)、 EV1019-S27N (序列編號：216)、EV1019-S27N-BI2 (序 98 201206955 列編號：217)、EV1019-S27G (序列編號：218)、 EV1019-S27G-BI2 (序列編號：219)、EV1019-S27A (序 列編號：220)與 EV1019-S27A-BI2 (序列編號：221)。 本發明某些實施例中，抗體或其之抗原結合片段包括 重鏈EV1019-C105Q-IgG4 (序列編號：235)及選自下列所 .構成之群組的輕鏈：EV1019-野生型-原型（序列編號： 202)、EV1019-野生型-BI (序列編號：203)、EV1019-野 生型-BI2 (序列編號：204)、EV1019-野生型-原型-恆定（序 列編號·· 205)、EV1019-N25S (序列編號：206)、 EV1019-N25S-BI2 (序列編號：207)、EV1019-N25G (序 列編號：208)、EV1019-N25G-BI2 (序列編號：209)、 EV1019-N25T (序列編號：210)、EV1019-N25T-BI2 (序 列編號：211)、EV1019-N25R (序列編號：212)、 EV1019-N25R-BI2 (序列編號：213)、EV1019-N25Q (序 列編號：214)、EV1019-N25Q-BI2 (序列編號：215)、 EV1019-S27N (序列編號：216)、EV1019-S27N-BI2 (序 列編號：217)、EV1019-S27G (序列編號：218)、 EV1019-S27G-BI2 (序列編號：219)、EV1019-S27A (序 列編號：220)與 EV1019-S27A-BI2 (序列編號：221)。 本發明某些實施例中，抗體或其之抗原結合片段包括 重鏈£乂1019-(：105(^-1经〇48?(序列編號：23 6)及選自下 列所構成之群組的輕鏈：EV1 019-野生型-原型（序列編 號·· 202)、EV1019-野生型-BI (序列編號：203)、EV1019-野生型-BI2 (序列編號：204)、EV1019-野生塑-原型-恆 99 201206955 定（序列編號：205)、EV1019-N25S (序列編號：206)、 EV1019-N25S-BI2 (序列編號：207)、EV1019-N25G (序 列編號：208)、EV1019-N25G-BI2 (序列編號·· 209)、 EV1019-N25T (序列編號：210)、EV1019-N25T-BI2 (序 列編號：211)、EV1019-N25R (序列編號：212)、 EV1019-N25R-BI2 (序列編號：213)、EV1019-N25Q (序 列編號：214)、EV1019-N25Q-BI2 (序列編號：215)、 EV1019-S27N (序列編號：216)、EV1019-S27N-BI2 (序 列編號：217)、EV1019-S27G (序列編號：218)、 EV1019-S27G-BI2 (序列編號：219)、EV1019-S27A (序 列編號：220)與 EV1019-S27A-BI2 (序列編號：221)。 本發明某些實施例中，抗體或其之抗原結合片段包括 重鏈£¥1019-€1051'-1经〇2(序列編號：23 7)及選自下列所 構成之群組的輕鏈：EV1019-野生型-原型（序列編號： 202)、EV1019-野生型-BI (序列編號：203)、EV1019-野 生型-BI2 (序列編號：204)、EV1019-野生型-原型-恆定（序 列編號：205)、EV1019-N25S (序列編號：206)、 EV1019-N2 5S-BI2 (序列編號：207)、EV1019-N25G (序 列編號：208)、EV1019-N25G-BI2 (序列編號：209)、 EV1019-N25T (序列編號：210)、EV1019-N25T-BI2 (序 列編號：211)、EV1019-N25R (序列編號：212)、 EV1019-N25R-BI2 (序列編號：213)、EV1019-N25Q (序 列編號：214)、EV1019-N25Q-BI2 (序列編號：215)、 EV1019-S27N (序列編號：216)、EV1019-S27N-BI2 (序 100 201206955 列編號：217)、EV1019-S27G (序列編號：218)、 EV1019-S27G-BI2 (序列編號：219)、EV1019-S27A (序 列編號：220)與 EV1019-S27A-BI2 (序列編號·· 221)。 本發明某些實施例中，抗體或其之抗原結合片段包括 重鏈EV1019-C105T-IgG4 (序列編號：238)及選自下列所 構成之群組的輕鏈：EV1019-野生型-原型（序列編號： 202)、EV1019-野生型-BI (序列編號：203)、EV1019-野 生型-BI2 (序列編號：204)、EV1019-野生型-原型-恆定（序 列編號：205)、EV1019-N25S (序列編號：206)、 EV1019-N25S-BI2 (序列編號·· 207)、EV1019-N25G (序 列編號：208)、EV1019-N25G-BI2 (序列編號：209)、 EV1019-N25T (序列編號：210)、EV1019-N25T-BI2 (序 列編號：211)、EV1019-N25R (序列編號：212)、 EV1019-N25R-BI2 (序列編號：213)、EV1019-N25Q (序 列編號：214)、EV1019-N25Q-BI2 (序列編號：215)、 EV1019-S27N (序列編號：216)、EV1019-S27N-BI2 (序 列編號：217)、EV1019-S27G (序列編號：218)、 EV1019-S27G-BI2 (序列編號：219)、EV1019-S27A (序 列編號：220)與 EV1019-S27A-BI2 (序列編號：221)。 本發明某些實施例中’抗體或其之抗原結合片段包括 重鏈丑\^1019-(：105丁-1§648?(序列編號：23 9)及選自下列 所構成之群組的輕鏈·· EV1019_野生型-原型（序列編號·· 202)、EV1019-野生型 (序列編號：203)、EV1019-野 生型-BI2 (序列編號：204)、EV1019-野生型-原型-怪定（序 101 201206955 列編號：205)、EV1019-N25S (序列編號：206)、 EV1019-N25S-BI2 (序列編號·· 207)、EV1019-N25G (序 列編號：208)、EV1019-N25G-BI2 (序列編號：209)、 EV1019-N25T (序列編號：210)、EV1019-N25T-BI2 (序 列編號：211)、EV1019-N25R (序列編號·· 212)、 EV1019-N25R-BI2 (序列編號：213)、EV1019-N25Q (序 列編號：214)、EV1019-N25Q-BI2 (序列編號：215)、 EV1019-S27N (序列編號：216)、EV1019-S27N-BI2 (序 列編號：217)、EV1019-S27G (序列編號：218)、 EV1019-S27G-BI2 (序列編號：219)、EV1019-S27A (序 列編號：220)與 EV1019-S27A-BI2 (序列編號：221)。 本發明某些實施例中，抗體或其之抗原結合片段包括 重鏈EV1019-C105M-IgG2 (序列編號：240)及選自下列 所構成之群組的輕鏈·· EV1019-野生型-原型（序列編號： 202)、EV1019-野生型-BI (序列編號：203)、EV1019-野 生型-BI2 (序列編號：204)、EV1019-野生型-原型-恆定（序 列編號：205)、EV1019-N25S (序列編號：206)、 EV1019-N25S-BI2 (序列編號：207)、EV1019-N25G (序 列編號：208)、EV1019-N25G-BI2 (序列編號：209)、 EV1019-N25T (序列編號：210)、EV1019-N25T-BI2 (序 列編號：211)、EV1019-N25R (序列編號：212)、 EV1019-N25R-BI2 (序列編號：213)、EV1019-N25Q (序 列編號：214)、EV1019-N25Q-BI2 (序列編號：215)、 EV1019-S27N (序列編號：216)、EV1019-S27N-BI2 (序 102 201206955 列編號：217)、EV1019-S27G (序列編號：218)、 EV1019-S27G-BI2 (序列編號：219)、EV1019-S27A (序 列編號：220)與 EV1019-S27A-BI2 (序列編號：221)。 本發明某些實施例中，抗體或其之抗原結合片段包括 重鏈EV1019-C105M-IgG4 (序列編號：241)及選自下列 所構成之群組的輕鏈·· EV1019-野生型-原型（序列編號： 202)、EV1019-野生型-BI (序列編號：203)、EV1019-野 生型-BI2 (序列編號：204)、EV1019-野生型-原型-恆定（序 列編號：205)、EV1019-N25S (序列編號：206)、 EV1019-N25S-BI2 (序列編號：207)、EV1019-N25G (序 列編號：208)、EV1019-N25G-BI2 (序列編號：209)、 EV1019-N25T (序列編號：210)、EV1019-N25T-BI2 (序 列編號：211)、EV1019-N25R (序列編號：212)、 EV1019-N25R-BI2 (序列編號：213)、EV1019-N25Q (序 列編號：214)、EV1019-N25Q-BI2 (序列編號：215)、 EV1019-S27N (序列編號：216)、EV1019-S27N-BI2 (序 列編號：217)、EV1019-S27G (序列編號：218)、 EV1019-S27G-BI2 (序列編號：219)、EV1019-S27A (序 列編號：220)與 EV1019-S27A-BI2 (序列編號：221)。 本發明某些實施例中，抗體或其之抗原結合片段包括 重鏈EV1019-C105M-IgG4SP (序列編號：242)及選自下 列所構成之群組的輕鏈：EV1019-野生型-原型（序列編 號：202)、EV1019-野生型-BI (序列編號：203)、EV1019-野生型-BI2 (序列編號：204)、EV1019-野生型-原型-恆 103 201206955 定（序列編號：205)、EV1019-N25S (序列編號：206)、 EV1019-N25S-BI2 (序列編號：207)、EV1019-N25G (序 列編號：208)、EV1019-N25G-BI2 (序列編號：209)、 EV1019-N25T (序列編號：210)、EV1019-N25T-BI2 (序 列編號：211)、EV1019-N25R (序列編號：212)、 EV1019-N25R-BI2 (序列編號：213)、EV1019-N25Q (序 列編號：214)、EV1019-N25Q-BI2 (序列編號：215)、 EV1019-S27N (序列編號：216)、EV1019-S27N-BI2 (序 列編號：217)、EV1019-S27G (序列編號：218)、 EV1019-S27G-BI2 (序列編號：219)、EV1019-S27A (序 列編號：220)與 EV1019-S27A-BI2 (序列編號：221)。 本發明某些實施例中，抗體或其之抗原結合片段包括 重鏈EV1019-C105L-IgG2 (序列編號：243)及選自下列所 構成之群組的輕鏈：EV1019-野生型-原型（序列編號： 202)、EV1019-野生型-BI (序列編號：203)、EV1019-野 生型-BI2 (序列編號：204)、EV1019-野生型-原型-恆定（序 列編號：205)、EV1019-N25S (序列編號：206)、 EV1019-N25S-BI2 (序列編號：207)、EV1019-N25G (序 列編號：208)、EV1019-N25G-BI2 (序列編號：209)、 EV1019-N25T (序列編號：210)、EV1019-N25T-BI2 (序 列編號：211)、EV1019-N25R (序列編號：212)、 EV1019-N25R-BI2 (序列編號：213)、EV1019-N25Q (序 列編號：214)、EV1019-N25Q-BI2 (序列編號：215)、 EV1019-S27N (序列編號：216)、EV1019-S27N-BI2 (序 104 201206955 列編號：217)、EV1019-S27G (序列編號：218)、 EV1019-S27G-BI2 (序列編號：219)、EV1019-S27A (序 列編號：220)與 EV1019-S27A-BI2 (序列編號：221)。 本發明某些實施例中，抗體或其之抗原結合片段包括 重鏈EV1019-C105L-IgG4 (序列編號：244)及選自下列所 構成之群組的輕鏈：EV1 0 1 9-野生型-原型（序列編號： 202)、EV1019-野生型-BI (序列編號：203)、EV1019-野 生型-BI2 (序列編號：204)、EV1019-野生型-原型-恆定（序 列編號：205)、EV1019-N25S (序列編號·· 206)、 EV1019-N25S-BI2 (序列編號：207)、EV1019-N25G (序 列編號：208)、EV1019-N25G-BI2 (序列編號：209)、 EV1019-N25T (序列編號：210)、EV1019-N25T-BI2 (序 列編號：211)、EV1019-N25R (序列編號：212)、 EV1019-N25R-BI2 (序列編號：213)、EV1019-N25Q (序 列編號：214)、EV1019-N25Q-BI2 (序列編號：215)、 EV1019-S27N (序列編號：216)、EV1019-S27N-BI2 (序 列編號：217)、EV1019-S27G (序列編號：218)、 EV1019-S27G-BI2 (序列編號：219)、EV1019-S27A (序 列編號：220)與 EV1019-S27A-BI2 (序列編號：221)。 本發明某些實施例中，抗體或其之抗原結合片段包括 重鏈EV1019-C105L-IgG4SP (序列編號：245)及選自下列 所構成之群組的輕鏈：EV1019-野生型-原型（序列編號： 202)、EV1019-野生型-BI (序列編號：203)、EV1019-野 生型-BI2 (序列編號：204)、£¥1019-野生型-原型-恆定（序 105 201206955 列編號：205)、EV1019-N25S (序列編號：206) ' EV1019-N25S-BI2 (序列編號：207)、EV1019-N25G (序 列編號·· 208)、EV1019-N25G-BI2 (序列編號：209)、 EV1019-N25T (序列編號：210)、EV1019-N25T-BI2 (序 列編號：211)、EV1019-N25R (序列編號：212)、 EV1019-N25R-BI2 (序列編號：213)、EV1019-N25Q (序 列編號：214)、EV1019-N25Q-BI2 (序列編號：215)、 EV1019-S27N (序列編號：216)、EV1019-S27N-BI2 (序 列編號：217)、EV1019-S27G (序列編號：218)、 EV1019-S27G-BI2 (序列編號：219)、EV1019-S27A (序 列編號：220)與 EV1019-S27A-BI2 (序列編號：221)。 此外，可組合重鏈之變異區與輕鏈之變異區以產生結 合抗原之F ab片段。上述保有相同或等效抗原結合能力 之組合可用於產生不同的抗體結合片段形式，例如單鏈 變異片段（scFv)。ScFv係免疫球蛋白之重鏈與輕鏈之變 異區的融合，其係由短的連接子（通常係絲胺酸、甘胺酸） 連接在一起’且習知於技術中。因此，可將Εν 1 〇 18重 鏈之變異區與EV1018輕鏈之變異區組合。某些實施例 中’重鏈與/或輕鏈之變異區可為變體，其包含一或更多 相對於鏈之野生型序列的胺基酸改變。相似地，可將 EV1019重鏈之變異區與EV1〇19輕鏈之變異區組合。某 些實施例中，重鏈與/或輕鏈之變異區可為變體，其包含 一或更多相對於鏈之野生型序列的胺基酸改變。 106 201206955 某些實施例中，任一下列1018重鏈變異區（諸如，野 生型與其之變體）可與輕鏈變異區EV1 0 1 8-VL-野生型-原 型（序列編號：364)組合以形成結合hGM-CSF之抗原結 合片段：EV1018-VH (序列編號：348)、EV1018-VH-野 生型-(序列編號：349)、EV1018-VH-T97A (序列編號： 350) 、 EV1018-VH-T97V (序列編號·· 351)、 EV1018-VH-N95D (序列編號：352)、EV1018-VH-N95E (序列編號：353)、EV1018-VH-N95K (序列編號：354)、 ® EV1018-VH-N95Q (序列編號 355)、 EV1018-VH-N93Q-N95T (序列編號：356)、 EV1018-VH-T97A IgGl-原型-恆定（序列編號：357)、 EV1018-VH-T97V IgGl-原型-恆定（序列編號：358)、 EV1018-VH-N95D IgGl-原型-恆定（序列編號：359)、 EV1018-VH-N95E IgGl-原型-恆定（序列編號：360)、 EV1018-VH-N95K IgGl-原型-恒定（序列編號：361)、 | EV1018-VH-N95Q IgG卜原型·恆定（序列編號：362)與 EV1018-VH-N93Q-N95T IgGl-原型-恆定（序列編號： 363)。 某些實施例中，任一下列1018重鏈變異區（諸如，野 生型與其之變體）可與輕鏈變異區EV1018-VL-野生型-BI (序列編號：365)組合以形成結合hGM-CSF之抗原結 合片段：EV1018-VH (序列編號：348)、EV1018-VH-野 生型-(序列編號：349)、EV1018-VH-T97A (序列編號： 350) 、EV1018-VH-T97V (序列編號：351)、 107 201206955 EV1018-VH-N95D (序列編號：352)、EV1018-VH-N95E (序列編號：353)、EV1018-VH-N95K (序列編號：354)、 EV1018-YH-N95Q (序 列編號 ： 355)、 EV1018-VH-N93Q-N95T (序列編號：356)、 EV1018-VH-T97A IgGl-原型-恆定（序列編號：357)、 EV1018-VH-T97V IgGl-原型-恆定（序列編號：358)、 EV1018-VH-N95D IgG卜原型-恆定（序列編號：359)、 EV1018-VH-N95E IgGl-原型-恆定（序列編號：360)、 EV1018-VH-N95K IgGl-原型-恆定（序列編號：361)、 EV1018-VH-N95Q IgGl-原型-恆定（序列編號：362)與 EV1018-VH-N93Q-N95T IgGl-原型-恆定（序列編號： 363)。 同樣地，某些實施例中，EV1019之抗原結合片段包括 重鏈變異區EV1019-VH-野生型-(序列編號：152)及選自 下列所構成之群組的輕鏈變異區：EV1019-VL-野生型 -(序列編號：184)、EV1019-VL-BI (序列編號：185)、 EV1019-VL-N25S (序列編號：186)、EV1019-VL-BI-N25S (序列編號：187)、EV1019-VL-N25G (序列編號：188)、 EV1019-VL-BI-N25G (序列編號：189)、EV1019-VL-N25T (序列編號：190)、EV1019-VL-BI-N25T (序列編號：191)、 EV1019-VL-N2 5R (序列編號：192)、EV1019-VL-BI-N25R (序列編號：193)、EV1019-VL-N25Q (序列編號：194)、 EV1019-VL-BI-N25Q (序列編號：195)、EV1019-VL-S27N (序列編號：196)、EV1019-VL-BI-S27N(序列編號：197)、 108 201206955 EV1019-VL-S27G (序列編號：198)、EV1019-VL-BI-S27G (序列編號：199)、EV1019-VL-S27A (序列編號：200)、 EV1019-VL-BI-S27A (序列編號：201)。 某些實施例中，EV1019之抗原結合片段包括重鏈變 異區EV1019-VH-C105G (序列編號：153)及選自下列所 構成之群組的輕鏈變異區：EV1019-VL-野生型-(序列編 號：184)、EV1019-VL-BI (序列編號：185)、 EV1019-VL-N25S (序列編號：186)、EV1019-VL-BI-N25S (序列編號：187)、EV1019-VL-N25G (序列編號：188)、 EV1019-VL-BI-N25G (序列編號：189)、EV1019-VL-N25T (序列編號：190)、EV1019-VL-BI-N25T (序列編號·· 191)、 EV1019-VL-N25R (序列編號：192)、EV1019-VL-BI-N25R (序列編號：193)、EV1019-VL-N25Q (序列編號：194)、 EV1019-VL-BI-N25Q (序列編號：195)、EV1019-VL-S27N (序列編號：196)、£乂1019-乂1^41-8271^(序列編號：197)、 EV1019-VL-S27G (序列編號：198)、EV1019-VL-BI-S27G (序列編號：199)、EV1019-VL-S27A (序列編號：200)、 EV1019-VL-BI-S27A (序列編號：201)。 某些實施例中，EV1019之抗原結合片段包括重鏈變 異區EV1019-VH-C105S (序列編號：154)及選自下列所 構成之群組的輕鏈變異區：EV1019-VL-野生型-(序列編 號：184)、EV1019-VL-BI (序列編號：185)、 EV1019-VL-N25S (序列編號：186)、EV1019-VL-BI-N25S (序列編號：187)、EV1019-VL-N25G (序列編號：188)、 109 201206955 EV1019-VL-BI-N25G (序列編號：189)、EV1019-VL-N25T (序列編號·· 190)、EV1019-VL-BI-N25T (序列編號：191)、 EV1019-VL-N25R (序列編號：192)、EV1019-VL-BI-N25R (序列編號：193)、EV1019-VL-N25Q (序列編號：194)、 EV1019-VL-BI-N25Q (序列編號·· 195)、EV1019-VL-S27N (序列編號：196)4¥1019-¥1^81-827>1(序列編號：197)、 EV1019-VL-S27G (序列編號：198)、EV1019-VL-BI-S27G (序列編號·· 199)、EV1019-VL-S27A (序列編號·· 200)、 EV1019-VL-BI-S27A (序列編號：201)。 某些實施例中，EV1019之抗原結合片段包括重鏈變 異區EV1019-VH-C105A (序列編號：155)及選自下列所 構成之群組的輕鏈變異區：EV1019-VL-野生型-(序列編 號：184)、EV1019-VL-BI (序列編號：185)、 EV1019-VL-N25S (序列編號：186)、EV1019-VL-BI-N25S (序列編號·· 187)、EV1019-VL-N25G (序列編號：188)、 EV1019-VL-BI-N25G (序列編號：189)、EV1019-VL-N25T (序列編號：190)、EV1019-VL-BI-N25T (序列編號：191)、 EV1019-VL-N25R (序列編號：192)、EV1019-VL-BI-N25R (序列編號·· 193)、EV1019-VL-N25Q (序列編號：194)、 EV1019-VL-BI-N25Q (序列編號：195)、EV1019-VL-S27N (序列編號：196)、EV1019-VL-BI-S27N(序列編號：197)、 EV1019-VL-S27G (序列編號：198)、EV1019-VL-BI-S27G (序列編號：199)、EV1019-VL-S27A (序列編號：200)、 EV1019-VL-BI-S27A (序列編號：201)。 110 201206955 某些實施例中，EV1019之抗原結合片段包括重鏈變異 區EV1019-VH-C105T (序列編號：156)及選自下列所構 成之群組的輕鏈變異區：EV1019-VL-野生型-(序列編 號：184)、EV1019-VL-BI (序列編號：185)、 EV1019-VL-N25S (序列編號：186)、EV1019-VL-BI-N25S (序列編號：187)、EV1019-VL-N25G (序列編號：188)、 EV1019-VL-BI-N25G (序列編號：189)、EV1019-VL-N25T (序列編號：190)、EV1019-VL-BI-N25T (序列編號：191)、 EV1019-VL-N25R (序列編號：192)、EV1019-VL-BI-N25R (序列編號：193)、EV1019-VL-N25Q (序列編號：194)、 EV1019-VL-BI-N25Q (序列編號：195)、EV1019-VL-S27N (序列編號：196)、EV1019-VL-BI-S27N(序列编號：197)、 EV1019-VL-S27G (序列編號：198)、EV1019-VL-BI-S27G (序列編號：199)、EV1019-VL-S27A (序列編號：200)、 EV1019-VL-BI-S27A (序列編號：201)。
某些實施例中，EV 1019之抗原結合片段包括重鏈變異 區EV1019-VH-C105M (序列編號：157)及選自下列所構 成之群組的輕鍵變異區：EV 1019-VL-野生型-(序列編 號：184)、EV1019-VL-BI (序列編號：185)、 EV1019-VL-N25S (序列編號：186)、EV1019-VL-BI-N25S (序列編號：187)、EV1019-VL-N25G (序列編號：188)、 EV1019-VL-BI-N25G (序列編號：189)、EV1019-VL-N25T (序列編號：190)、EV1019-VL-BI-N25T (序列編號：191)、 EV1019-VL-N25R (序列編號：192)、EV1019-VL-BI-N25R 111 201206955 (序列編號：193)、EV1019-VL-N25Q (序列編號：194)、 EV1019-VL-BI-N25Q (序列編號：195)、EV1019-VL-S27N (序列編號：196)、EV1019-VL-BI-S27N(序列編號：197)、 EV1019-VL-S27G (序列編號：198)、EV1019-VL-BI-S27G (序列編號：199)、EV1019-VL-S27A (序列編號：200)、 EV1019-VL-BI-S27A (序列編號：201)。 某些實施例中，EV10 19之抗原結合片段包括重鏈變異 區EV1019-VH-C105Q (序列編號：158)及選自下列所構 成之群組的輕鏈變異區：EV1019-VL-野生型-(序列編 號：184)、EV1019-VL-BI (序列編號：185)、 EV1019-VL-N25S (序列編號：186)、EV1019-VL-BI-N25S (序列編號：187)、EV1019-VL-N25G (序列編號：188)、 EV1019-VL-BI-N25G (序列編號：189)、EV1019-VL-N25T (序列編號：190)、EV1019-VL-BI-N25T (序列編號：191)、 EV1019-VL-N25R (序列編號：192)、EV1019-VL-BI-N25R (序列編號：193)、EV1019-VL-N25Q (序列編號：194)、 EV1019-VL-BI-N25Q (序列編號：195)、EV1019-VL-S27N (序列編號：196)、EV1019-VL-BI-S27N(序列編號：197)、 EV1019-VL-S27G (序列編號：198)、EV1019-VL-BI-S27G (序列編號：199)、EV1019-VL-S27A (序列編號：200)、 EV1019-VL-BI-S27A (序列編號：201)。 某些實施例中，EV 1019之抗原結合片段包括重鏈變 異區EV1019-VH-C105L (序列編號：159)及選自下列所 構成之群組的輕鏈變異區：EV1019-VL-野生型-(序列編 112 201206955
號：184)、EV1019-VL-BI (序列編號：185)、 EV1019-VL-N25S (序列編號：186)、EV1019_VL_BI_N25S (序列編號：187)、EV1019-VL-N25G (序列編號：188)、 EV1019-VL-BI-N25G (序列編號：1 89)、EV1019-VL-N25T (序列編號：190)、EV1019-VL-BI-N25T (序列編號：191)、 EV1019-VL-N25R (序列編號：192)、EV1019-VL-BI-N25R (序列編號：193)、EV1019-VL-N25Q (序列編號：194)、 EV1019-VL-BI-N25Q (序列編號：195)、EV1019-VL-S27N (序列編號：196)、EV1019-VL-BI-S27N(序列編號：197)、 EV1019-VL-S27G (序列編號：198)、EV1019-VL-BI-S27G (序列編號：199)、EV1019-VL-S27A (序列編號：200)、 EV1019-VL-BI-S27A (序列編號：201)。 本發明中之變形 本發明包括全長抗-hGM-CSF抗體或其抗原結合部 分、或抗-hGM-CSF抗體的部分（當同時施加2或更多種 類時）。因此，辨別hGM-CSF之雙專一性抗體與多專一 性抗體亦包括於本發明中。 抗-hGM-CSF單株抗體或其抗原結合部分之變形係說 明於上方說明書中’但可在技術領域中替換或轉換所述 特徵而不悖離本發明之範圍。 也就是說’本發明之範圍内包括下列抗體或其之抗原 結合部.分： (I)全長抗體與其之抗原結合部分， 113 201206955 (II) 抗體的部分，及 (III) 能夠專一性結合並中和hGM-CSF生物活性之重 組人類單株抗體、單株抗體（包括嵌合抗體與人類化抗體） 或其之抗原結合部分，其中重組人類單株抗體係藉由任 何習知技術根據序列編號：4-9與330-335(代表變異區與 CDR)之胺基酸序列而取得。 當應用上方之方法根據至少一選自本文所述之序列編 號：4-9或330-335構成之各個群組的胺基酸序列而產生 之特定抗體或其之抗原結合部分時，抗體或其之抗原結 合部分亦包括於本發明中。 抗體變體的列表 下方提供之表分別列出EV1018與EV1019抗體之有用 的抗體鏈與片段。
表A:EV 10 18抗體之重鏈與輕鏈的變體與變異區的列表。 EV1018重鏈變體 EV1018輕鏈變體 EV1018 序列編號：10 EV1018-野生型-原型 序列編號：34 EV1018-野生型-IgGIKO 序列編號：11 EV1018-野生型-BI 序列編號：35 EV1018-T97A-IgGlKO 序列編號：12 EV1018-野生型-BI2(G1) 序列编號：36 EV1018-T97V-IgGlKO 序列編號：13 EV1018-野生型-原型-恆定 序列編號：37 EV1018-N95D-igGlKO 序列編號：14 EV1018-VL-野生型-原型 序列編號：364 EV1018-N95E IgGIKO 序列編號：15 EV1018-VL-野生型-BI 序列編號：365 EV1018-N95KIgGlKO 序列編號：16 EV1018-N95Q IgGIKO 序列編號：17 EV1018-N93Q-N95T IgGIKO 序列編號：18 EV1018-野生型-IgGl-BI 序列編號：19 EV1018-T97AIgGl-BI 序列編號：20 EV1018-T97V IgGl-BI 序列編號：21 EV1018-N95D IgGl-BI 序列編號：22 114 201206955
EV1018重鏈變體 EV1018輕鏈變體 EV1018-N95E IgGl-BI 序列編號：23 EV1018-N95K IgGl-BI 序列編號：24 EV1018-N95QIgGl-BI 序列編號：25 EV1018-N93Q-N95T IgGl-BI 序列編號：26 EV1018-T97A IgGl -原型-恆定 序列編號：27 EV1018-T97V IgGl -原型-恆定 序列編號：28 EV1018-N95DIgGl-原型-恆定 序列編號：29 EV1018-N95EIgGl-原型-恆定 序列編號：30 EV1018-N95KIgGl-原型·恆定 序列編號：31 EV1018-N95Q IgGl-原型-恆定 序列編號：32 E V1018-N93 Q-N95T IgG 1 -原型-恆定 序列編號：33 EV1018-野生型-IgG 1-KO-QVQL· 序列編號：38 EV1018-T97A-IgGl-KO-QVQL 序列編號：39 EV1018-T97V-IgG 1 -KO-QVQL 序列編號：40 E V1018-N95D-IgG 1 -KO-Q VQL 序列編號：41 EV1018-N95E IgGl-KO-QVQL 序列編號：42 EV1018-N95K IgGl-KO-QVQL 序列編號：43 EV1018-N95Q IgGl-KO-QVQL 序列編號：44 EV1018-N93Q-N95T IgGl-KO-QVQL 序列編號：45 EV 1018-野生型-IgG 1 -QVQL-BI 序列編號：46 EV1018-T97AIgGl-QVQL-BI 序列編號：47 EV1018-T97V IgGl-QVQL-BI 序列編號：48 EV1018-N95D IgGl-QVQL-BI 序列編號：49 EV1018-N95E IgGl-QVQL-BI 序列編號：50 EV1018-N95K IgGl-QVQL-BI 序列編號：51 EV1018-N95Q IgGl-QVQL-BI 序列編號：52 EV1018-N93Q-N95T IgGl-QVQL-BI 序列編號：53 EV1018-IgG2 序列編號：54 EV1018-野生型-IgG2 序列編號：55 EV1018-T97A-IgG2 序列編號：56 EV1018-T97V-IgG2 序列編號：57 EV1018-N95D-IgG2 序列編號：58 EV1018-N95E-IgG2 序列編號：59 EV1018-N95K-IgG2 序列編號：60 EV1018-N95Q-IgG2 序列編號：61 EV 1018-N93 Q-N95T-IgG2 序列編號：62 EV1018-IgG4 序列編號：63 EV1018-野生型-IgG4 序列編號：64 EV1018-T97A-IgG4 序列編號：65 EV1018-T97V-IgG4 序列編號：66 EV1018-N95D-IgG4 序列編號：67 115 201206955
EV1018重鏈變體 EV1018輕鏈變逋 EV1018-N95E-IgG4 序列編號：68 EV1018-N95K-igG4 序列编號：69 EV1018-N95Q-IgG4 序列編號：70 E V1018-N93 Q-N95T-IgG4 序列編號：71 EV1018-IgG4-SP 序列編號：72 EV1018-野生型-IgG4-SP 序列編號：73 EV1018-T97A-IgG4-SP 序列編號：74 EV1018-T97V-IgG4-SP 序列編號：75 EV1018-N95D-IgG4-SP 序列編號：76 EV1018-N95E-IgG4-SP 序列編號：77 EV1018-N95K-IgG4-SP 序列編號：78 EV1018-N95Q-IgG4-SP 序列編號：79 E V1018-N93 Q-N95T-igG4-SP 序列編號：80 EV1018 序列編號：81 EV1018-野生型-IgGIKO 序列編號：82 EV1018-T97A-IgGlKO 序列編號：83 EV1018-T97V-IgGlKO 序列編號：84 EV1018-N95D-IgGlKO 序列編號：85 EV1018-N95E IgGIKO 序列編號：86 EV1018-N95KIgGlKO 序列編號：87 EV1018-N95Q IgGIKO 序列編號：88 EV1018-N93Q-N95T IgGIKO 序列編號：89 EV1018-野生型-IgGl-BI 序列編號：90 EV1018-T97AIgGl-BI 序列編號：91 EV1018-T97VIgGl-BI 序列編號：92 EV1018-N95D IgGl-BI 序列編號：93 EV1018-N95E IgGl-BI 序列編號：94 EV1018-N95K IgGl-BI 序列編號：95 EV1018-N95Q IgGl-BI 序列編號·· 96 EV1018-N93Q-N95T IgGl-BI 序列編號：97 EV1018-T97AIgGl-原型-恆定 序列編號：98 EV1018-T97V IgG 1 -原型-恆定 序列编號：99 EV1018-N95DIgGl-原型-恆定 序列編號：100 EV1018-N95E IgGl -原型-恆定 序列編號：101 EV1018-N95KIgGl-原型-恆定 序列編號：102 EV1018-N95QIgGl-原型·恆定 序列編號：103 EV1018-N93Q-N95TIgGl·原型-恆定 序列編號：104 EV1018·野生型-IgG 1 -KO-Q VQL 序列編號：109 EV1018-T97A-IgG 1 -KO-Q VQL 序列編號：110 E V1018-T97V-IgG 1 -KO-QVQL 序列編號：111 EV 1018-N95D-IgGl -KO-Q VQL 序列編號：112 116 201206955
EV1018重鏈變體 EV1018輕鏈變體 EV1018-N95E IgGl-KO-QVQL 序列編號：113 EV1018-N95K IgGl-KO-QVQL 序列編號：114 EV1018-N95Q IgGl-KO-QVQL 序列編號：115 EV1018-N93Q-N95T IgGl-KO-QVQL 序列编號：116 EV1018-野生型-IgG l-QVQL-BI 序列編號：117 E V1018-T97 A IgG 1 -QVQL-BI 序列編號：118 EV1018-T97V IgGl-QVQL-BI 序列編號：119 EV1018-N95D IgGl-QVQL-BI 序列編號：120 EV1018-N95E IgGl-QVQL-BI 序列編號：Π1 EV1018-N95K IgGl-QVQL-BI 序列編號：122 EV1018-N95Q IgGl-QVQL-BI 序列編號：123 EV1018-N93Q-N95T IgGl-QVQL-BI 序列編號：124 EV1018-IgG2 序列編號：125 EV1018-野生型-IgG2 序列編號：126 EV1018-T97A-IgG2 序列編號：127 EV1018-T97V-IgG2 序列編號：128 EV1018-N95D-IgG2 序列編號：129 EV1018-N95E-IgG2 序列編號：130 EV1018-N95K-IgG2 序列編號：131 EV1018-N95Q-IgG2 序列編號：132 EV1018-N93 Q-N95T-IgG2 序列編號：133 EV1018-IgG4 序列編號：134 EV1018-野生型-IgG4 序列編號：135 EV1018-T97A-IgG4 序列編號：136 EV1018-T97V-IgG4 序列編號：137 EV1018-N95D-IgG4 序列編號：138 EV1018-N95E-IgG4 序列編號：139 EV1018-N95K-IgG4 序列編號：140 EV1018-N95Q-IgG4 序列編號：141 EV1018-N93Q-N95T-IgG4 序列編號：142 EV1018-IgG4-SP 序列編號：143 EV1018-野生型-IgG4-SP 序列編號：144 EV1018-T97A-IgG4-SP 序列編號：145 EV1018-T97V-IgG4-SP 序列編號：146 EV1018-N95D-IgG4-SP 序列編號：147 EV1018-N95E-IgG4-SP 序列編號：148 EV1018-N95K-IgG4-SP 序列編號：149 EV1018-N95Q-IgG4-SP 序列編號：150 EV 1018-N93Q-N95T-IgG4-S 序列編號：151 EV1018-VH 序列編號：348 EV1018-VH-野生型 序列編號：349 117 201206955
EV1018重鏈變逋 —一.·· EV1018 Μ鍵變體 EV1018-VH-T97A 序列編號：350 EV1018-VH-T97V 序列編號：351 ---—-- EV1018-VH-N95D 序列編號：352 EV1018-VH-N95E 序列编號：353 EV1018-VH-N95K 序列編號：354 -一· EV1018-VH-N95Q 序列编號：355 EV1018-VH-N93Q-N95T 序列编號：356 EV1018-VH-T97AIgGl-原型-恆定 序列編號：357 EV1018-VH-T97VIgGl-原型·恆定 序列编號：358 __ ------- EV1018-VH-N95D IgGl-原型·恆定 序列编號：359 一--- EV1018-VH-N95E IgGl·原型-恆定 序列編號：360 __----- EV1018-VH-N95K IgGl-原型-恆定 序列编號：361 ------ EV1018-VH-N95Q IgGl-原型-恆定 序列編號：362 EV1018-VH-N93Q-N95T IgGl-原型-恆 序列编號：363 定 表B:EV1019抗體 EV1019重鏈變體 之重鏈與輕鏈的變體與變異區jjjiA EV1019 fe鏈變殖 EV1019-VH-野生型 序列編號：152 EV1019-VL-野生型 序列编號：184
EV1019-VH-C105G EV1019-VH-C105S EV1019-VH-C105A
序列编號：153 EV1019-VL-BI
EV1019-VH-C105L EV1019
EV1019-野生型-IgGlKO EV1019-C105G EV1019-C105G-IgGl-BI EV1019-C105G-IgGlKO EV1019-C105S IV1019-C105S-IgGl-BI i；V1019-C105S-IgGlKO iV1019-C105A iV1019-C105A-IgGl-BI iV1019-C105A-IgGlKO iV1019-C105Q
序列煸號：154 EV1019-VL-N25S 序列編號：155 EV1019-VL-BI-N25S 序列煸號：186 序列編號：187 EV1019-VH-C105T EV1019-VH-C105M EV1019-VH-C105Q EV1019·野生型-IgGl-BI
序列煸號：167 序列編號：W8 EV1019-VL-BI-S27G EV1019-VL-S27A 序列煸號：200 序列編號：201
序列煸號：169 EV1019-VL-BI-S27A 序列編號：170 EV1019-野生型·原型 : 171 ~ EV1019-野生型·ΒΙ : 172~~ EV1019·野生型-ΒΙ2 序列編號：202 序列編號：203 序列編號：204 118 201206955
--— KV1019 #姑蟧體 EV1019輕鏈變艎 EV1019-C105Q-IgGl-BI 序列編號：173 EV1019-野生型-原型-恆定 序列编號.205 EV1019-C105Q-IgGlKO 序列煸號：174 EV1019-N25S 序列編號.206 EV1019-C105T 序列编號：175 EV1019-N25S-BI2 序列編號.207 EV1019-C105T-IgGl-BI 序列編號：176 EV1019-N25G 序列編號.208 EV1019-C105T-IgGlKO 序列編號：177 EV1019-N25G-BI2____ 序列编號：209 號：210 EV1019-C105M 序列編號：178 EV10I9-N25T EV1019-C105M-IgGl-BI 序列編號：179 EV1019-N25T-BI2 序列編號：211 EV1019-C105M-IgGlKO 序列煸號：180 ------- EV1019-N25R_________ 序列编號· 212 序列編號：213 EV1019-C105L 序列煸號：181 EV1019-N25R-BI2 EV1019-C105L-IgGl-BI 序列煸號：182 EV1019-N25Q 序列煸號：214 EV1019-C105L-IgGlKO 序列煸號：183 EV1019-N25Q-BI2 序列编蛛.215 EV1019-IgG2 序列編號：222 EV1019-S27N 序列编號：216 EV1019-野生型-IgG4 序列煸號：223 EV1019-S27N-BI2 序列編號：2Π EV1019-野生型-IgG4SP 序列編號：224 EV1019-S27G 序列编號：218 EV1019-C105G-IgG2 序列編號.225 EV1019-S27G-BI2 序列編號：219 EV1019-C105G-IgG4 序列編號：226 EV1019-S27A 序列编號：220 EV1019-C105G-IgG4SP 序列編號：227 EV1019-S27A-BI2 序列编號：221 EV1019-C105S-IgG2 序列編號：228 EV1019·野生型-原型 序列编號：270 EV1019-C105S-IgG4 序列编號：229 EV1019-野生型-BI 序列编號：271 EV1019-C105S-IgG4SP 序列编號：230 EV1019-野生型-BI2 序列编號：272 EV1019-C105A-IgG2 序列編號：231 EV1019-野生型·原型-恆定 序列編號：273 EV1019-C105A-IgG4 序列編號：232 EV1019-N25S 序列編號：274 EV1019-C105A-IgG4SP 序列编號：233 EV1019-M25S-BI2 序列煸號：275 EV1019-C105Q-IgG2 序列煸號：234 EV1019-N25G 序列編號：276 EV1019-C105Q-IgG4 序列編號.235 EV1019-N25G-BI2 序列煸號：277 EV1019-C105Q-IgG4SP 序列编號：236 EV1019-N25T 序列煸號：278 EV1019-C105T-IgG2 序列编號：237 EV1019-N25T-BI2 序列編號：279 EV1019-C105T-IgG4 序列编號：238 EV1019-N25R 序列煸號：280 EV1019-C105T-IgG4SP 序列編號：239 EV1019-N25R-BI2 序列編號：281 EV1019-C105M-lgG2 序列編號：240 EV1019-N25Q 序列編號：282 EV1019-C105M-IgG4 序列煸號：241 EV1019-N25Q-BI2 序列编號：283 EV1019-C105M-IgG4SP 序列编號：242 EV1019-S27N 序列编號：284 EV1019-C105L-IgG2 序列煸號：243 EV1019-S27N-BI2 序列编號：285 EV1019-C105L-IgG4 序列編號：244 EV1019-S27G 序列编號：286 EV1019-C105L-IgG4SP 序列煸號：245 EV1019-S27G-BI2 序列煸號：287 EV1019 序列編號：246 EV1019-S27A 序列煸號：288 EV1019-野生型-IgGl-BI 序列编坡：247 EV1019-S27A-B12 序列煸號：289 EV1019-野生型-IgGlKO 序列编號：248 EV1019-C105G 序列编號：249 EV1019-C105G-IgGl-BI 序列编號：250 EV1019-C105G-IgGlKO 序列編號.251 119 201206955
EV1019重鏈變體 EV1019輕鏈變體 EV1019-C105S 序列編號：252 EV1019-C105S-IgGl-BI 序列編號：253 EV1019-C105S-IgGlKO 序列編號：254 EV1019-C105A 序列編號：255 EV1019-C105A-IgGl-BI 序列編號：256 EV1019-C105A-IgGlKO 序列編號：257 EV1019-C105Q 序列編號：258 EV1019-C105Q-IgGl-BI 序列編號：259 EV1019-C105Q-IgGlKO 序列編號：260 EV1019-C105T 序列編號：261 EV1019-C105T-IgGl-BI 序列編號：262 EV1019-C105T-IgGlKO 序列編號：263 EV1019-C105M 序列編號：264 EV1019-C105M-IgGl-BI 序列編號：265 EV1019-C105M-IgGlKO 序列編號：266 EV1019-C105L 序列編號：267 EV1019-C105L-IgGl-BI 序列編號：278 EV1019-C105L-IgGlKO 序列編號：269 EV1019-IgG2 序列編號：290 EV1019-野生型-IgG4 序列編號：291 EV1019-野生型-IgG4SP 序列編號：292 EV1019-C105G-IgG2 序列編號：293 EV1019-C105G-IgG4 序列編號：294 EV1019-C105G-IgG4SP 序列編號：295 EV1019-C105S-IgG2 序列編號：296 EV1019-C105S-IgG4 序列編號：297 EV1019-C105S-IgG4SP 序列編號：298 EV1019-C105A-IgG2 序列編號：299 EV1019-C105A_IgG4 序列編號：300 EV1019-C105A-IgG4SP 序列編號：301 EV1019-C105Q-IgG2 序列編號：302 EV1019-C105Q-IgG4 序列編號：303 EV1019-C105Q-IgG4SP 序列編號：304 EV1019-C105T-IgG2 序列編號：305 EV1019-C105T-IgG4 序列編號：306 EV1019-C105T-IgG4SP 序列編號：307 EV1019-C105M-IgG2 序列編號：308 EV1019-C105M-IgG4 序列編號：309 EV1019-C105M-IgG4SP 序列編號：310 EV1019-C105L-IgG2 序列編號：311 EV1019-C105L-IgG4 序列編號：312 120 201206955 EV1019重鏈變體 EV1019輕鏈變體 EV1019-C105L-IgG4SP 序列编號：313 本發明之不同實施例 更詳細地描述於本發明之下列實施例中。以專利申請 範圍撰寫者習知的方式組織實施例的描述，因為這似乎 有用於將此即將取得之專利申請案給予的保護範圍之教 示舉例說明於說明書中。 項目1. 一實施例係單離的抗-hGM-CSF單株抗體 或其之抗原結合片段，其中抗體或其之抗原結合片段辨 別hGM-CSF (序列編號：1)中的ELYK (序列編號：2)與 TMMASHYKQH (序列編號：3)。 項目2.另一實施例係單離的抗-hGM-CSF單株抗 體或其之抗原結合片段，其包括： (a)重鏈，其包括 VH-CDR1、VH-CDR2 與 VH-CDR3， 其中式FTFS(Y/H)(G/A)MH (序列編號：314)代表包含 Vh-CDR1 之共 有序列 ； 其中式 (L/V)(T/I)(Y/W)HXGX(R/K)K(F/Y)YADSV(R/K)G (序列 編號：315)代表包含VH-CDR2之共有序列；而其中式 EX(M/V)G(A/G)XXDX (序列編號：316)代表包含 VH-CDR3之共有序列；及（b)輕鏈、或者輕鏈或其之部分 (如果係抗體片段），其包括 VL-CDR1、VL-CDR2與 VL-CDR3，其中式 XGNXXNIGS(H/Y)AVG (序列編號： 317)代表包含 VL-CDR1 之共有序列；其中式 121 201206955 G(R/K)SP(A/P)SG (序列編號：318)代表包含 Vl_CDR2 之 共有序列；而其中式STWDS(R/S)LSAV(V/L)(序列編 號：3 19)代表包含VL-CDR3之共有序列，其中抗體或其 之抗原結合片段專一性結合hGM-CSF。 項目3.另—實施例係項目1或2下揭露之抗體或抗 原結合片段，其除了項目1或2下提供之特徵外，更以 小於160 pM的KD結合人類GM-CSF。 項目4.另一實施例係項目1_3任一者下揭露之抗 體或其之抗原結合片段’其中抗體或抗原結合片段中和 hGM-CSF活性，以致抗體或其之抗原結合片段的IC5〇 值小於30 pM(在ED80下之TF-1增殖試驗中確定）。 項目5.另一實施例係項目4下揭露之抗體或其之 抗原結合片段’其中IC50值係小於20 pM。 項目6.另一實施例係項目2-5任一者下揭露之抗 體或其之抗原結合片段’其中重鏈係h或丫4。 項目7.另一實施例係項目2-6任一者下揭露之抗 體或其之抗原結合片段’其中重鏈係選自序列編號： 10-33、3 8-80與160-245所提出之聚胜肽構成的群組。 項目8.另一實施例係項目2-7任一者下揭露之抗 體或其之抗原結合片段，其中輕鏈係λ輕鏈。 項目9.另一實施例係項目8下揭露之抗體或其之 抗原結合片段，其中λ輕鏈包含一或兩者下列之胺基酸 取代：R100G 與 A153G。 項目10.另一實施例係項目2_9任一者下揭露之抗 122 201206955 體，其中輕鏈係選自序列編號：34-37與202-221所提出 之聚胜肽構成的群組。 項目11.另一實施例係項目2-10任一者下揭露之抗 體或其之抗原結合片段，其中輕鍵係κ輕鏈。 項目12.另一實施例係項目2-11任一者下揭露之抗 體或其之抗原結合片段，其中重鍵包含一或更多選自下 列所構成之群組的胺基酸取代：T97A、T97V、N95D、 N95E、N95K、N95Q、N93Q/N95T、K144R、L164A、L165A 與 K144R。 項目13·另一實施例係項目2-12任一者下揭露之抗 體或其之抗原結合片段，其中重鏈包含一或更多選自下 列所構成之群組的胺基酸取代：T97A、T97V、N95D、 N95E、N95K、N95Q、N93Q/N95T、K144R、L164A、L165A 與K144R，且其中輕鏈包含一或兩者下列之胺基酸取 代：R100G 與 A153G。 項目14.另一實施例係項目2-13任一者下揭露之抗 體或其之抗原結合片段，其中VH-CDR1包括胺基酸殘基 SYGMH (序列編號：4)或SHAMH (序列編號：333)。 項目15.另一實施例係項目2-14任一者下揭露之抗 體或其之抗原結合片段，其中VH-CDR2包括胺基酸殘基 LTYHHGNRKFYADSVRG (序列編號：5)或 VIWHDGSKKYYADSVKG (序列編號：334)。 項目16.另一實施例係項目2-15任一者下揭露之抗 體或其之抗原結合片段，其中VH-CDR3包括胺基酸殘基 123 201206955 ESMGAINDN (序列編號：6)或EWVGGTCDS (序列編 號：335)。 項目17.另一實施例係項目2-16任一者下揭露之抗 體或其之抗原結合片段，其中VL-CDR1包括胺基酸殘基 IGNNNNIGSHAVG (序列編號：7)或 SGNSSNIGSYAVG (序列編號：330)。 項目18·另一實施例係項目2-17任一者下揭露之抗 體或其之抗原結合片段，其中VL-CDR2包括胺基酸殘基 GRSPPS (序列編號：8)或GKSPAS (序列編號：331)。 項目19.另一實施例係項目2-18任一者下揭露之抗 體或其之抗原結合片段，其中VL-CDR3包括胺基酸殘基 STWDSSLSAVV (序列編號：9)或 STWDSRLSAVL (序列 編號：332)。 項目20.另一實施例係專一性結合hGM-CSF的單離 抗-hGM-CSF單株抗體或其之抗原結合片段，其中抗體或 其之抗原結合片段包括6個不同CDR，其中6個CDR係 序列編號：4-9所提出之聚胜肽。 項目2 1.另一實施例係專一性結合hGM-CSF的單離 抗-hGM-CSF單株抗體或其之抗原結合片段，其中抗體或 其之抗原結合片段包括6個不同CDR，其中6個CDR係 序列編號：327-332所提出之聚胜肽。 項目22.另一實施例係任一項目下所揭露之抗體或 其之抗原結合片段，其更包括信號序列。 項目23.另一實施例係任一項目下所揭露之抗體或 124 201206955 其之抗原結合片段’其中信號序列係選自序列編號： 324、325與3 26所構成之群組。 項目24.另一實施例係單離的抗_hGM-CSF單株抗 體或其之抗原結合片段，其包括重鏈與輕鏈，其中重鏈 係EV1018 (序列編號：10)或選自序列編號：、38_8〇 之變體’而其中輕鏈係EV1 018-野生型-原型（序列編號： 34)或選自序列編號：35-37之變體。 項目25.另一實施例係單離的抗-hGM-CSF單株抗 體或其之抗原結合片段，其包括重鏈與輕鏈，其中重鏈 係EV1019 (序列編號：160)或選自序列編號：161-183 與222-245之變體’且其中輕鏈係EV1019-野生型-原型 (序列編號：202)或選自序列編號：203-221之變體。 項目26.另一實施例係包括重鏈變異區與輕鏈變異 區之抗體或其之抗原結合片段，其中重鏈變異區係 EV1018-VH (序列編號：348)或選自序列編號：349-363 之變體，且其中輕鏈變異區isEV1018-VL-野生型-原型 (序列編號：364)或EV1018-VL-野生型-BI (序列編號： 365)。 項目27.另一實施例係包括重鏈變異區與輕鏈變異 區之抗體或其之抗原結合片段，其中重鏈變異區係 EV1019-VH-野生型-(序列編號：152)或選自序列編號： 153-159之變體，且其中輕鏈變異區係EV1019-VL-野生 型-(序列編號：184)或選自序列編號：185-201之變體。 項目28.另一實施例係套組，其包括：（a)項目1-25 125 201206955 任-者下揭露之抗體或其之抗原結合片段；及㈨一或更 多容器。 項目29.另-實施例係組合物，其包括任一項目下揭 露之抗體或其之抗原結合片段及藥學可接受載體。 項目30.另一實施例係項目29中揭露之組合物，其 更包括結合hGM-CSF的第-罝銼籽μ > a ^ ,, Α 〜乐一早離抗體或其之抗原結合 片段，以致組合物包括複數個結合hGM csF的抗體、其 之才几原結合片段或上述之組合。
項目31·另一實施例係項目3〇中揭露之組合物，其 中該複數結合hGM-CSF的抗體、其之抗原結合片段或上 述之組合的至少一者係選自序列編號：丨〇-8〇、丄52_245 與320-3 23構成之群組的聚胜肽。 項目32.另一實施例係套組，其包括項目29_31任一 者下揭露之組合物及一或更多容器。 項目3 3.另一實施例係項目3 2中揭露之套組，其更 包括操作指南。 項目34.另一實施例係項目1_27與29_31任一者下 揭露之抗體或其之抗原結合片段或組合物，用於治療受 试者中與hGM-CSF過度表現相關之疾病或異常，.其中抗 體或其之抗原結合片段結合hGM-CSF並能夠中和 hGM-CSF活性’且另一實施例係項目1 _27與29-3 1任一 者下揭露之抗體或其之抗原結合片段或組合物，用於製 造或製備治療受試者中與hGM-CSF過度表現相關之疾 病或異常的藥劑，其中抗體或其之抗原結合片段結合 126 201206955 hGM-CSF並能夠中和hGM-CSF活性。 項目35.另一實施例係項目34中揭露之應用，其中 疾病或異常係選自下列所構成之群組：慢性阻塞性肺病 (COPD)、氣喘、囊狀纖維化症、間質性肺病、鼻炎、關 節炎與相關之關卽病、牛皮癣、骨骑性白血病、多發性 硬化症。 項目36.另一實施例係項目34或35任一者下揭露之
應用，其中抗體或抗原結合片段係以不超過最大容忍劑 量之劑量被施加至受試者，其中最大容忍劑量係約5〇〇 mg/劑。 項目37·另一實施例係項目1-27與29 31任一者下 揭露之抗體或其之抗原結合片段或組合物，用於治療受 試者中與hGM-CSF過度表現相關之疾病μ常，其中抗 體或其之抗原結合片段結合hGM_CSF並能夠中和 hGM-CSF 活性。
> ^ m m ^ ^ γ 疾病或異常係選自下列所構成之群μ:慢性阻塞性肺病 LC〇PD)、氣喘、囊狀纖維化症、間質性肺病、鼻炎、關 郎炎與相關之關節病、牛.、愈 干皮癬、骨髓性白血病、多發性 硬化症。 應用，其中抗體或抗原結合# 〇 〇月奴係以不超過最大容忍劑 虿之劑量被施加至受試者，苴 mg/劑。 '、最大谷忍劑量係約50( 127 201206955 項目40.另一實施例係序列編號·· 2與3提出之聚胜 肽中hGM-CSF的表位，其中表位由項目20或21任一者 下揭露之抗體或其之抗原結合片段所辨別，且其中聚胜 肽序列代表hGM-CSF (序列編號：1)的間斷片段。 項目41.另一實施例係表位，其係人類GM-CSF的 間斷片段，其中表位包括所有或一部分的人類GM-CSF (序列編號：1)之胺基酸殘基77-80與人類GM-CSF (序列 編號：1)之胺基酸殘基95-104，且表位由包括6個不同 CDR(如序列編號：4-9或序列編號：330-335所提出）之 抗-hGM-CSF單株抗體或其之抗原結合片段所辨別。 項目42.另一實施例係在宿主細胞中產生結合 hGM-CSF之抗-hGM-CSF單株抗體或其之抗原結合片段 (包括至少 VH-CDR1 、VH-CDR2 與 VH-CDR3 及 VL-CDR1、VL-CDR2與VL-CDR3)的方法，該方法包括： ⑴取得具有至少一編碼至少VH-CDR1、VH-CDR2、 VH-CDR3、VL-CDIU、VL-CDR2 與 VL-CDR3 之 DNA 的 宿主細胞，及 (ii)在宿主細胞中表現DNA，其中： 式FTFS(Y/H)(G/A)MH (序列編號：314)代表包含 VH-CDR1之共有序列； 其中式 (L/V)(T/I)(Y/W)HXGX(R/K)K(F/Y)YADSV(R/K)G (序列 編號：315)代表包含VH-CDR2之共有序列； 其中式EX(M/V)G(A/G)XXDX (序列編號：316)代表 128 201206955 包含VH-CDR3之共有序列； 其中式XGNXXNIGS(H/Y)AVG (序列編號：317)代表 包含VL-CDR1之共有序列； 其中式G(R/K)SP(A/P)SG (序列編號：318)代表包含 VL-CDR2之共有序列；及 其中式STWDS(R/S)LSAV(V/L)(序列編號：319)代表 包含VL-CDR3之共有序列； (iii)在適合DNA表現與抗體或其抗原結合片段產生 ® 的條件下培養宿主細胞。 項目43.另一實施例係項目42中揭露之方法，其中 至少一 DNA編碼重鏈與輕鏈，其中重鏈係選自序列編 號：10-33、3 8-80、160-183、222-245 所構成之群組； 而其中輕鏈係選自序列編號：34-37、202-221所構成之 群組。 項目44.另一實施例係項目42或43任一者下揭露之 φ 方法，其更包括單離抗體或其之抗原結合片段。 項目45.另一實施例係包括編碼 VH-CDR1、 VH-CDR2及VH-CDR3之DNA的載體，其中： VH-CDR1係SYGMH (序列編號：4)或SHAMH (序列 編號：333); VH_CDR2 係 LTYHHGNRKFYADSVRG (序列編號： 5)或 VIWHDGSKKYYADSVKG (序列編號：334);及 VH-CDR3 係 ESMGAINDN (序列編號：6)或 EWVGGTCDS (序列編號：335)。 129 201206955 項目46.另一實施例係包括編碼 VL-CDRl、 VL-CDR2及VL-CDR3之DNA的載體，其中： VL-CDR1 係 IGNNNNIGSHAVG (序列編號：7)或 SGNSSNIGSYAVG (序列編號：330); VL-CDR2 係 GRSPPS (序列編號：8)或 GKSPAS (序 列編號：331);及 VL-CDR3 係 STWDSSLSAVV (序列編號：9)或 STWDSRLSAVL (序列編號：332)。 • 項目47.另一實施例係辨別結合項目40或41任一者 下揭露之表位的分子之方法， (i) 利用包括表位之探針篩選生物樣本或胜肽庫， (ii) 單離專一性結合探針的分子，及 (iii) 辨別分子。 項目48_另一實施例係項目47中揭露之方法，其中 分子係抗_hGM-CSF單株抗體或其之抗原結合片段。 φ 項目49.另一實施例係項目47或46任一者下揭露之 方法，其中探針更包括可偵測標記。 項目50.另一實施例係項目47-49任一者下揭露之 方法，其中探針係固定的。 項目51·另一實施例係能夠結合 hGM-CSF (hGM-CSF)並中和hGM-CSF (hGM-CSF)生物活性之抗 hGM-CSF單株抗體或其之抗原結合部分，其特徵在於抗 -hGM-CSF單株抗體或其之抗原結合部分的互補決定區 130 201206955 (CDR)係由一或更多選自序列編號：4-9構成之群組的胺 基酸序列所代表。 項目52.另一實施例係能夠結合hGM-CSF並中和 hGM-CSF生物活性之抗-hGM-CSF單株抗體或其之抗原 結合部分，其特徵在於抗-hGM-CSF單株抗體或其之抗原 結合部分的互補決定區（CDR)係由一或更多選自序列編 號：330-335構成之群組的胺基酸序列所代表。 項目53 ·另一實施例係項目5 1或52任一者下揭露之 抗-hGM-CSF單株抗體或其之抗原結合部分，其特徵在於 抗-hGM-CSF單株抗體或其之抗原結合部分的胺基酸序 列中互補決定區（CDR)内有一或更多胺基酸被取代、刪 除、插入或附加。 項目54.另一實施例係項目51-53任一者下揭露之 抗-hGM-CSF單株抗體或其之抗原結合部分，其特徵在於 當hGM-CSF引起TF-1細胞增殖時，抗-hGM-CSF單株 抗體或其之抗原結合部分以約14 pM的濃度抑制約50% 的TF-1細胞增殖。 項目55.另一實施例係項目54中揭露之抗 -hGM-CSF單株抗體或其之抗原結合部分，其特徵在於抗 -hGM-CSF單株抗體或其之抗原結合部分抑制周圍血液 樹突細胞的增殖。 項目56.另一實施例係項目 54 中揭露之抗 -hGM-CSF單株抗體或其之抗原結合部分，其特徵在於抗 131 201206955 -hGM-CSF單株抗體或盆夕p 次其之抗原結合部分對hGM-CSF呈 有高親合力，其之Kd值係4χ1〇_10 M或更小。 、 項目57.另一實施例係項目η %任—者下揭露之 抗-hGM-CSF單株抗體或其之抗原結合部分，其特徵在於 抗體屬於IgGi (λ)類型（亞型）。 .項目58.另一實施例係項目51_57任一者下揭露之 抗-hGM-CSF單株抗體咨装夕卜Λ 干怀机篮：¾具之抗原結合部分，其特徵在於 抗-hGM-CSF單株抗體係人類單株抗體。 項目59.另一實施例係hGM_CSF引起之疾病的醫藥 組合物’其包括：項目51_58任一者下揭露之抗_hGMcsF 單株抗體或抗原結合部分及藥學可接受載體。 項目60‘另一實施例係項目59中揭露之醫藥組合 物，其特徵在於hGM-CSF過度表現引起之疾病係選自下 列構成之群組的任一者： (a) 過敏疾病，諸如氣喘、異位性皮膚炎與花粉熱， (b) 移植排斥’移植物對抗宿主疾病（Gvhd)， (c) 自體免疫疾病，例如類風濕性關節炎。 項目ό 1.另一實施例係編碼能夠結合hGM-CSF並中 和hGM-CSF生物活性之抗_hGM-CSF單株抗體或其之抗 原結合部分的單離去氧核糖核酸（DNA)，其特徵在於單 離的DNA編碼之胺基酸序列包括選自序列編號：4 9構 成之群組的至少一者。 項目62.另一實施例係編碼能夠結合hGM-CSF並中 和hGM-CSF生物活性之抗-hGM-CSF單株抗體或其之抗 132 201206955 原結合部分的單離DNA，其特徵在於單離的DNA編碼 之胺基酸序列包括選自序列編號：33〇-335構成之群組的 至少一者。 項目6 3 ·另一實施例係成夠在嚴格條件下與項目61 或項目62所述之DNA雜合的單離DNA。 項目64.另一實施例係載體，其特徵在於項目61_63 任一者所述之单離DNA係併於其中。 項目65.另一實施例係宿主細胞，其特徵在於項目 _ 64中揭露之重組表現載體係導入其中。 項目6 6 ·另一實施例係提高活性的方法，其特徵在於 複數種類專一於相同特定抗原的抗-hGM-CSF單株抗體 或其抗原結合部分係同時施加。 項目67.另一實施例係項目66中揭露之提高活性的 方法，其特徵在於複數種類的抗-hGM-CSF單株抗體或其 抗原結合部分包括二或更多選自下列（a)與（b)類型的抗 φ 體或其抗原結合部分： (a) 抗-hGM-CSF單株抗體或其之抗原結合部分，其之 互補決定區（CDR)係由序列編號：4_9、序列編號： 330-335、序列編號：336-341或序列編號：342-347的胺 基酸序列所代表，且其係專一於hGM-CSF， (b) (a)的抗-hGM-CSF單株抗體或其之抗原結合部 刀，其之胺基酸序列中有一或更多胺基酸被取代、刪除、 插入或附加，且其係專一於hGM_CSF。 133 201206955 項目68.另一實施例係項目67十揭露之提高活性的 方法，其特徵在於當hGM-CSF引發TF-1細胞增殖時， 一或更多類型的抗體或其抗原結合部分各自以約55 pM 的濃度抑制將近80% TF-1細胞增殖。 項目69.另一實施例係醫藥組合物或獸醫藥學組合 物，其包括： 複數種類專一於相同特定抗原的抗_hGM_CSF單株抗 籲 體或其抗原結合部分及藥學可接受載體。 項目70.另一實施例係項目69中揭露之醫藥組合物 或獸醫藥學组合物，其特徵在於複數種類的抗_hGMcsF 單株抗體或其抗原結合部分包括二或更多選自下列（a) 與（b)類型的抗體或其抗原結合部分： (a) 抗-hGM-CSF單株抗體或其之抗原結合部分，其之 互補決疋區（CDR)係由序列編號：4_9、序列編號： 3 30-335、序列編號：336 341或序列編號：342 347的胺 鲁 &酸序列所代表，且其係專-於hGM-CSF， (b) (a)的抗-hGM-CSF單株抗體或其之抗原結合部 分，其之胺基酸序列中有一或更多胺基酸被取代、刪除、 插入或附加’且其係專一於hGM-CSF。 項目71.另一實施例係項目70中揭露之醫藥組合物 或獸醫藥學組合物，其特徵在於當hGM CSF引發th 細胞增殖時’二或更多類型的抗體或其抗原結合部分各 自以約55 pM的濃度抑制將近8〇% TF_i細胞增殖。 134 201206955 之後’更明確地插述本發明之實施例，但實施例並不 限制本發明之範圍。 實施例 實施例1.單離產生針對hGM-CSF (hGM-CSF)之完全人 類抗體的細胞株 第1圖顯示單離抗體產生細胞株的流程圖。自捐贈者 的血液（其之血清具有高的抗-GM-CSF單株抗體效價）單 離B-淋巴球’接著以EBV感染。將EBV感染後的增殖 細胞作為抗體產生細胞庫。 將抗體產生細胞庫的細胞分散於96孔盤上並培養3_4 週。篩選各個孔之培養懸浮液是否存在抗_hGM-CSF單株 抗體。藉由ELISA利用塗覆有重组hGM-CSF (rhGM-CSF) 之96孔盤來執行篩選。將孔中產生抗體的陽性細胞植於 新的96孔盤上並培養3-4週，接著各個孔之培養懸浮液 接受第二次篩選抗-hGM-CSF單株抗體是否存在。孔中產 生抗體的陽性細胞接受限數稀釋培養於96孔盤上3_5 週。之後’確定各孔的培養懸浮液是否存在抗體，且最 終自1細胞/孔配置的孔中取得抗體產生細胞株。 實施例2. 抗體之同型（isotype)與亞型的辨別 發明者辨別三個抗體產生細胞株EV1007、EV1 01 8與 EV1019 (表1)產生之抗體的同型與亞型。藉由與篩選培 135 201206955 養懸浮液中抗體產生物所用實質相同的ELISA來進行辨 別’其利用培養懸浮液作為第一抗體而同型與亞型專一 性抗體作為第二抗體。 表1顯示新取得的三個抗_hGM-CSF單株抗體與單株 抗體J1 5 8 4C (之後稱為EV1 003，其報導於國際PCT公 開案WO 07/049472)的抗體名稱與其亞型。 表1 抗體編號 亞型 EV1007 Ig〇! λ EV1018 Ig〇! λ EV1019 IgG! λ EV1003 IgG! λ
實施例3.自抗體產生細胞選殖抗體基因 自抗體產生細胞選殖抗體基因》自抗體產生細胞萃取 整體RNA ’並藉由利用募_dT引子與逆轉錄酶來合成其 之 cDNA。 藉由利用cDNA為模板，可藉由PCR擴增編碼人類抗 體之基因。根據抗體基因的DNA序列資料庫來設計引子 以便5’端包含轉錄起始位置而3,端包含轉譯終止位置。 實施例4.根據核苷酸序列確定抗體的胺基酸序列 136 201206955 將抗體基因（EV1007、EV1018與EV1019,各自係由（Η) 重鏈與（L)輕鏈基因所構成）之cDNA選殖入質體載體，並 藉由定序機（ABI)來分析其之核苷酸序列。根據取得的核 苷酸序列來確定其之胺基酸序列。針對抗體（EV1007、 EV1018、EV1019與EV1003)之互補決定區（CDR)的分析 應用Kabat法。藉由序列編號：4-9與330-347表示四個 抗體的CDR序列。明確地說，EV1018的L-鏈CDR1、 L-鏈 CDR2、L-鏈 CDR3、H-鏈 CDR1、H-鏈 CDR2 與 H-鏈CDR3分別提出於序列編號：4-9。EV1019的L-鏈 CDRJ、L-鏈 CDR2、L-鏈 CDR3、H-鏈 CDIU、H-鏈 CDR2 與H-鏈CDR3分別提出於序列編號：33 0-33 5。EV1003 的 L-鏈 CDR1、L-鏈 CDR2、L-鏈 CDR3、H-鏈 CDR1、 H-鏈CDR2與 H-鏈CDR3分別提出於序列編號： 336-341°EV1007 的 L-鏈 CDIU'L-鏈 CDR2、L-鏈 CDR3、 H-鏈CDR1、H-鏈CDR2與H-鏈CDR3分別提出於序列 編號：342-347 ° 實施例5.確認取得之抗體基因編碼抗-hGM-CSF單株抗 體 將編碼三個抗體（各自係由Η與L鏈構成）之基因插入 表現載體中。利用 Lipofectamine與Plus試劑（Invitrogen) 將編碼各個抗體之L與Η鏈基因的質體暫時轉染入293T 細胞並試驗暫時抗體表現。 137 201206955 轉染後兩天，收集含有分泌之抗體的細胞培養懸浮 液。藉由ELISA偵測培養懸浮液中的人類IgG與抗 -GM-CSF單株抗體以確認人類抗體與抗-GM-CSF單株抗 體的暫時表現。 實施例6.建立表現抗-hGM-CSF單株抗體之穩定的 CHO-轉染細胞 如上述般將編碼抗-GM-CSF單株抗體之表現載體轉染 入CHO-K1細胞。轉染後兩天，將細胞植入96-孔盤並培 養於含有適當篩選標記之篩選培養基約兩週。藉由 ELISA篩選各個孔之培養懸浮液中的抗-hGM-CSF單株 抗體。將孔中抗體表現陽性的單一細胞配置於96-孔盤 的孔中。以表現抗-GM-CSF單株抗體來篩選生長於篩選 培養基中的單一細胞並取得穩定表現抗-GM-CSF單株抗 體之細胞株。 實施例7.抗體的純化 將穩定表現抗-GM-CSF單株抗體之CHO細胞株培養 於無血清培養基中。在各個表現週期後，收集培養懸浮 液並透過親合力層析根據製造者指南利用 HiTrap rProtein A FF預裝管柱（Amersham)來單離抗體。藉由 ELISA證實單離的抗體具有對hGM-CSF的結合活性且 藉由SDS-PAGE證實單離的抗體係由抗體約50 kDa H-鏈與約25 kDa L-鏈所構成。 138 201206955 實施例8· 抗-GM-CSF單株抗體的親合力分析 爲了計算重組hGM-CSF結合抗-hGM-CSF單株抗體的 親合力常數，在BiacoreSystemTM上執行表面電漿共振 子（SPR)(第2圖）。 分析抗體與抗原間之交互作用的方法中，透過與G蛋 白（固定於感應晶片表面）的交互作用而在感應晶片上獲 得純化的抗體，接著將重組抗原注至感應晶片。應用純 化的抗體並將重組hGM-CSF當作抗原。 衍生自酵母菌（Leukine Berlex)與大腸桿菌（peprotech) 之重組hGM-CSF對抗-hGM-CSF單株抗體的平衡解離常 數（KD)係顯示於表2中。 表2. 抗體編號 平衡解離常數（KD ((Μ)) Leukine Peprotech EV1007 1.2 χ ΙΟ*9 9.3 χ 10·10 EV1018 2.3 χ ΙΟ'10 1.5 χ 10·10 EV1019 3.6 χ ΙΟ"10 1.5 χ ΙΟ-10 EV1003 2.3 χ ΙΟ'10 9.5 χ 10·11 此試驗中，就對酵母菌GM-CSF (Leukine)之KD值而 言 ’ EV1007 係 1.2 X 1〇·9 Μ、EV1018 係 2.3 X ΙΟ·10 Μ 而 EV1019係3·6 X 1〇_10 Μ。先前已經產生之單株抗體 EV1003 的 KD 值係 2.3 X ΙΟ·10 Μ。 139 201206955 就對大腸桿菌（Peprotech)類的KD值而言，EV1007係 9·3 X 10·1。Μ、EV1018 係 1.5 X ΙΟ-10 Μ、EV1019 係 1.5 X 1010Μ而EV1003係9.5 X ΙΟ·11 Μ。產生的所有四個 hGM-CSF單株抗體均以高親合力結合重組hGM-CSF。 實施例9.抗-GM-CSF單株抗體對周圍血液樹突細胞增 殖的抑制效應 利用 Blood Dendritic Cell Isolation Kit II Human (Militenyi Biotech)自7 x 107個人類單核細胞取得5 x 個包含類漿細胞DC與骨髓DC的樹突細胞（DC)。 將取得的DC懸浮於RPMI 1640培養基（Gibco)中，該 培養基附加有 10% FCS、rGM-CSF (1 ng/mL， Peprotech)、TNF-α (10 ng/mL)與抗-GM-CSF 單株抗體（1 pg/mL)，並以2 x 104細胞/孔的濃度將其植入96_孔平底 盤中且培養10天。 將發明者已經產生之抗-GM-CSF多株抗體（抗 -GM-CSF pAbs，R&D) (lpg/mL)與人類抗-人類巨細胞病 毒單株抗體（hlgG) (lpg/mL)作為對照組。結果顯示於第 3圖中。 如第3圖所示，EV1003、EV1018與EV1019抑制 GM-CSF-依賴性DC增殖《相對地，EV10〇7並無顯示抑 制。另一方面’抗-GM-CSF pAb抑制GM-CSF-依賴性 DC增殖，但hlgG則無。 140 201206955
EV1003、EV1018 與 EV1019 可單獨地阻礙 GM-CSF 依賴性DC增殖。 實施例10.利用TF-1細胞來評估抗-GM-CSF單株抗 體的中和潛力 發明者利用TF-1細胞（其取決於hGM-CSF存在而增瘦） 來試驗純化的抗-hGM-CSF單株抗體（EV1007、EV1018 與EV1 0 19)與先前產生的EV1003之中和能力，顯示於第 4與5圖中。 將純化的抗體與重組hGM-CSF預先培養並將混合物 加入TF-1細胞培養基。培養2天後，藉由比色試驗來確 定TF-1細胞的增殖狀態。具有GM-CSF-中和活性之抗體 可阻礙添加之重組GM-CSF的活性，造成抑制GM-CSF-依賴性TF- 1細胞生長。 第4與5圖分別顯示抗體對TF-1細胞增殖（分別由酵 母菌 hGM-CSF (Leukine)與大腸桿菌 hGM-CSF (Peprotech)所刺激）的抑制效應（中和活性）。 獨立地確定各個抗體之抑制效應並將抗-GM-CSF pAb 與hlgG作為對照（如實施例9所述）。 在2 pg/mL至3 1 pg/mL的濃度範圍試驗四個連續稀釋 倍數的抗體。應用最終濃度0.5 ng/mL的rhGM-CSF於所 有試驗。40小時培養後，藉由利用Cell Counting Kit ('\¥'81'-1試驗’00>11]^)之入45 0/代£.八495的色彩密度來評 估TF -1細胞的生長。 141 201206955 第4與5圖的y軸中，將具有31 Pg/mL對照hlgG之 TF-1細胞的生長设為1〇〇%，並將不具有rhGM CSF之 TF 1細胞的生長设為〇%。在圖示底部指出試驗之抗體 並在圖示下側指出其之濃度。 利用濃度0.5 ng/mL的酵母菌rhGM_CSF 刺激TF-1細胞增殖並將各個抗_hGM CSF單株抗體之中 和月b力的結果顯示於第4圖中。雖然陰性對照的hIgG在 2 Kg/mL高濃度下顯示非專一性抑制細胞生長，但其在 低於2 pg/mL濃度下並無顯示抑制作用。抗_h(}M_csF 多株抗體（抗-GM-CSF pAbs)顯示依靠125 ng/mL或高於 125 ng/mL抗體濃度的細胞生長抑制。 純化的單株抗體之中，EVl〇〇3在M ng/mL的濃度下 抑制TF1細胞生長至陽性對照的6〇%，且在 高於31 ng/niL發現濃度依賴性生長抑制。Ενι〇ι8與 EV1019分別在〇.5 ng/mL或高於〇 5⑽社與2吨就 或高於2 ng/mL的濃度下顯示約5〇%的抑制。證實 EV1018與EV1019對hGM-CSF具有極高的中和活性。 EV1007在0.5 pg/mL或高於〇.5 pg/mL的濃度下清楚的 顯示細胞生長抑制，這表示其之中和能力相當低。 利用濃度0.5 ng/mL的大腸桿菌rhGM-CSF (pepj^eej^ 來刺激TF-1細胞增殖並將各個抗_hGM_CSF單株抗體之 中和能力的結果顯示於第5圖中。此試驗中’陰性對照 的hlgG在2 ^/mL高濃度下顯示非專—性抑制細胞生 長，但其在低於2 pg/mL濃度下並無顯示抑制作用。抗 142 201206955 -hGM-CSF多株抗體（抗-GM-CSF pAbs)顯示仿靠3i ng/mL或高於3 1 ng/mL抗體濃度的細胞生長抑制。 純化的單株抗體之中’ EV1003在31 ng/mL或高於31 ng/mL顯示明顯的濃度依賴性TF1細胞增殖抑制。
EV1018 與 EV1019 分別在 0.5 ng/mL 或高於 0.5 ng/mL 與2 ng/mL或高於2 ng/mL的濃度下顯示高於約5〇%的 抑制。證實EV 1 01 8與EV1 0 19的中和活性極高。 EV1007在0.5 pg/mL或高於0.5 pg/mL的濃度下清楚 地顯示細胞生長抑制，這表示其之中和能力相對於 EV1018與EV1019而言非常低。 確定兩個抗體之組合的中和活性（第6與7圖）。將混 合抗體的五種組合列於表3中。 表3. 混合-1 EV1003+hIgG 混合-2 EV1003+EY1007 混合-3 EV1003+ EV1018 混合-4 EV1003+ EV1019 混合-5 EV1018+ EV1019 藉由4 pg/mL至62 pg/mL的濃度範圍中連續四個倍數 稀釋來配置各個抗體的試驗溶液，並混合相同濃度的兩 個抗體（最終濃度顯示於第6與7圖中）。藉由利用Cell 143 201206955
Counting Kit (WST-1 試驗，D0JIN)之 A450/ref· A495 的 色彩密度來評估TF-1細胞生長。 如第4與5圖中所示，第6與7圖之y轴中，將具有 31 Pg/mL對照hlgG之TF-1細胞的生長設為1〇〇%，並 將不具有rhGM-CSF之TF-1細胞的生長設為〇%。將具 有3 1 pg/mL對照hlgG之TF 1細胞生長的結果顯示於第 4與5圖中，而不顯示於第6與7圖中。在圖示底部指 出抗體混合之組合並在圖示下側指出其之濃度。 # 這些組合之中，相對於各個抗體的單一應用，混合_2: EV1003 + 1007、混合-3 : EV10〇3 + 1〇18 與混合 _4 : EV1003 + 1019的抑制效應係增加非常多的。例如第6圖 中所示，混合-4 : EV1003 + 1019在各個抗體濃度係8 ng/mL (約55 PM)下抑制TF1細胞生長至陽性對照的 10%。 如第4圖所不，濃度8 ng/mL的單獨EV1003沒有顯示 φ TF1細胞增殖抑制而濃度8 ng/mL的單獨EV1019僅顯示 5 0%的抑制。這些結果指出兩個抗體的組合呈現相當高 的中和活性。 雖然EV1007單一應用的抑制效應非常低，但各個抗 體濃度8 ng/mL (約55 pM)的混合_2 : EV1003 + 1007抑制 TF1細胞生長至陽性對照的1〇%，如第6與7圖所示。 如第7圖所示，當應用大腸桿菌rhGM_CS]p (卩邛⑺伙化) 來刺激TF-1細胞增殖時，細胞生長近乎完全受到各個濃 度 3 1 ng/mL 或南於 3 1 ng/mL 的混合 _2 : EV1003 +1007、 144 201206955 混合-3 . EVl〇〇3 + l〇i8 與混合 _4 : EV1003 + 1019 所抑制。 證實抗體的組合附加呈現相當強的中和活性。 另一方面’相對於單一應用之抗體（如第4與5圖所 示），混合-5 : EV1018 + 1019的抑制效應以濃度依賴性方 式而提南’但是提高的效應低於混合_2_4的效應。 混合-5 : EV1018+1019的實例中，其混合效應並不明 顯，兩者抗體在單一應用的劑量依賴性曲線（中和效應圖 案）係相似的。 如第4與5圖所示’四個抗體（Evl〇〇3、evi007、Ev1()18 與EV1019)之間’ 2 pg/ml濃度的eVi〇03單一應用顯示 最強的抑制，但即便在此高農度下仍殘留約2〇%的細 胞。相對地，31-125 ng/mL·濃度範圍的混合_2、混合_3 與混合-4近乎完全地抑制細胞生長。暗示這三種組合（混 合-2、混合-3與混合-4)呈現相當高的中和活性。 相對於其單一應用’組合應用抗_gm_csf單株抗體 (EV1003)與抗_CMV抗體（hIgG)的混合_丨並無提高抗體 的抑制效應。 本發明取得之三種抗體之中，兩種抗體（EV1〇18與 EV1019)在單一應用與組合應用中顯示極高的中和活 性。表3所列之抗體組合中，某些組合呈現高於兩者抗 體累加效應的中和活性。 如上產生之抗-GM-CSF單株抗體或其抗原結合部分能 夠專一性結合hGM-CSF(造成不同疾病）並去活化（中 和）hGM-CSF的生物活性。因此，抗體或其之抗原結合部 145 201206955 分對hGM-CSF之中和活性高於目前為止已經製造（現有） 的抗-hGM-CSF單株抗體。因為抗體或其之抗原結合部分 係人類單株抗體，其並無顯示免疫原性且不會引發免疫 反應。 此外相對於其之單一應用，抗_GM_CSF單株抗體或其 之抗原結合部分的同時組合應用呈現對細胞生長相當高 的抑制效應（即，中和活性）。
考量k些特性，本發明中所述之抗_hGM_CSF單株抗體 或其之抗原結合部分在低劑量可有效作為gm csf引起 之疾病的預防或治療試劑，疾病包括（但不限於）：過敏 疾病，諸如氣喘、C0PD、囊狀纖維化症、間質性肺病、 鼻炎、異位性皮膚炎與花粉熱、移植排斥、移植物對抗 伤主疾病（GVHD)、關節炎與相關之之關節病、牛皮癬、 骨髓性白血病、多發性硬化症、阿滋海默症與類風濕性 關節炎。
Evm8的重鏈天生包含歸化位置於框架3。這顯示 於例如序列編號：10中對應於殘基95_97。因此，產生 Evum重鍵的變體並檢驗其之中和活性。如第8圖所提 供，結果指出在移除重鏈之框架3中的N—連接醣化位置 後仍維持EV1018的生物活性。圖示顯示相對於WT EV1〇18重鏈（含# N_餹化位置）’兩個酿化位置序列變體 (分別稱為N95K與T97A)的ED50值。如所述實質地於 TF-1 s式驗中確定各個純化的IgG之ed5〇值。 146 201206955 實施例11. Biac〇re HgM-CSF中抗-GM-CSF單株抗體 的親合力測量 應用小鼠抗-人類Biacore晶片（GE Healthcare)來固定 各個抗體並讓商業上取得的溶解純化GM-CSF (Biomol) 結合。这些實驗中應用的hGM-CSF係同於下述生物試驗 中所應用者。利用Biacore軟體確定結合親合力並將結 果概述於表4中。
表4
抗體 ka ,kd Kd EV1003 1，05x106±0.01 2，15xl〇4±〇_〇i 203 + 2 pM EV1019 8,13x10s ±0.19 1,21x1ο·4+ 0.01 152+1 pM EV1018 1，11x106±0.03 1，44x1〇^±〇.37 112±6pM EV1018的結合能力高於EV1019且遠高於EV1003。 EV1018的所有變體之結合能力相同於野生型Evl〇18的 結合能力。 與來自其他物種（恆河猴、小鼠、狨猴）之GM-CSF交 互作用 怪/可狼GM-CSF序列呈現於公開資料庫（例如， GenBank登錄號NP_001028121)並用來將表現殖株設計 成Fc融合蛋白。導入蛋白酶切割位置以釋出未標記之怪 河猴GM-CSF蛋白。得到之蛋白具有良好的生物活性（見 下一節）並可由所有的抗-GM-CSF單株抗體（Ev 1〇18、 EV1019、EV1003)於西方墨點法中辨別（資料未顯示 147 201206955 執行Biacore測量（利用上述1.1相同設定）並將結果於表 5中提出。 表5.恆河猴GM-CSF/單株抗-GM-CSF單株抗體結合研究
沉m ka kd KD EV1003 5,39x105 ±0.06 3^1(^0.04 661 ± 14pM EV1019 批次 1 2,91x105±0.23 2，14xl〇4±0.01 739±57pM 批次2 3,04x105 ±0.13 1,65x1ο·4 ±0.17 543 ± 34 pM EV1018 5,56x10s ±0.52 2,1^10^10.06 381 ± 16 pM
所有實例中，與恒河猴GM-CSF的交互作用良好（所有 抗-GM-CSF單株抗體辨別恆河猴GM-CSF蛋白的係數係 差於hGM-CSF約2-3)。與此，恆河猴提供良好的非人類 靈長類模式來發展上述揭露之抗-GM-CSF單株抗體。 執行小鼠 GM-CSF (PeproTech 與 Biomol ;例如， GenBank登錄號NP—034099)的測量並將結果概述於表6
表6.小鼠GM-CSF/單株抗-GM-CSF單株抗體的結合研究
抗體 ka kd Kd EV1003 n.d. n.d. n.d. EV1019 I，lxl05±0.1 6x1(T3±2 62 ± 27 nM EV1018 1,9x105±0.2 3,4xl〇-2±1.7 193±60nM 所有實例中，與小鼠GM-CSF的交互作用係非常差 148 201206955 的。此數據提供致力辨別抗-GM-CSF單株抗體結合之 hGM-CSF表位的貫驗之基礎，其中已經確定雜合於小鼠 與人類之間的GM-CSF蛋白。 產生與上述恆河猴 GM-CSF表現殖株相似的狨猴 GM-CSF表現殖株。將純化蛋白用於Biacore測量並將結 果概述於表7中。 表7.狨猴GM-CSF/抗-GM-CSF單株抗體的結合研究
抗體 ka ka KD EV1003 n.d. n.d. n.d. EV1019 2，1x105±0.1 2,14x1ο·4 ±0.01 1，4±0.1 nM EV1018 3,64x105±0.01 7^1(^0.3 2，1 ±0.1 nM 與狨猴GM-CSF之交互反應性係明顯的。所有抗 -GM-CSF單株抗體辨別恆河猴GM-CSF蛋白之係數係差 於hGM-CSF約2-3。如同恆河猴之實例般，狨猴提供良 好的動物模式以發展上述揭露之抗-GM-CSF單株抗體。 實施例12.生物活性：GM-CSF生物活性的中和 TF-1增殖試驗（人類、恆河猴、狨猴GM-CSF) TF-1人類細胞株的增殖係取決於生長因子。技術中習 知此細胞株為研究生長因子之生物效應的良好基礎。 149 201206955 發明者在此利用不同物種的重組 GM-CSF (rGM-CSF)，諸如⑴藉由技術中習知標準技術表現於大 腸桿菌（Fa. Biomol #2514)中之hGM-CSF的重組 hGM_CSF (rhGM-CSF)，或（ii)怪河猴 GM-CSF (例如， GenBank登錄號NP—001028121)的重組恆河猴GM_csf (rrGM-CSF)或（ii)狨猴 GM-CSF (例如，GenBank 登錄號 B0KWQ4)之重組狨猴GM-CSF (rmGM-CSF)，利用技術 習知標準技術將兩者表現於HEK 293中。 TF-1細胞生長於細胞培養基（rpmi 1640 (Cat.3 1870 Fa. Gibco)、lx Glutamax lOOx (Cat.35050-038 Fa. Gibco)、
ImM Sodium Pyrovat lOOmM (Cat. 1 13 60-03 9 Fa. Gibco))、10mM Hepes 1M (Cat. 15690-056 Fa. Gibco)、 10% FCS (Cat. 10500-064 Fa. Gibco) ' 2ng/ml rGM-CSF (Cat.200-005L Fa. ReliaTech GmbH)。以 PBS 清洗細胞 3 次並以1E5細胞/ml的濃度將細胞植入96孔盤
(Cat.167008 Fa· Nunc)中試驗培養基内（不具有rGM-CSF 的細胞培養基）》將抗體-溶液與GM-CSF-溶液稀釋於稀 釋培養基（不具有FCS且不具有rGM-CSF的細胞培養基） 並分別加至10 μΐ的體積。在37°C下與濕潤室5% C02 中培養細胞3天。根據套組（CellTiter 96 Aqueous One Solution Cell Proliferation Assay, Fa. Promega, Cat. No. G3581)的操作指南將20 μΐ MTS加入來測量細胞活性。 150 201206955 陰性對照組係不具有GM-CSF與抗體的TF-1細胞。陽性 對照組係不具有抗體的TF-1細胞。 在試驗抗體之中和活性以前，確定人類、恆河猴與狨 猴GM-CSF促進增殖的ED80 (表8)。能夠促進TF-1增 殖的人類與恆河猴GM-CSF係有效的（ED80[人**]: 1.5 ng/ml ; ED8〇[.ii 河狼]:7 ng/ml)，然而械猴 GM-CSF 係較不 有效的TF-1增殖促進者。因此，人類細胞株TF-1適合 用來試驗針對人類與恆河猴GM-CSF的中和活性，但並 不適合用來試驗衍生自狨猴的GM-CSF。 表8: TF-1增殖試驗中人類、恆河猴與狨猴GM-CSF的ED8 0 物種 GM-CSF ED80 人類 rhGM-CSF (衍生自大腸桿菌） 1.5 ng/ml 恆河猴 rrGM-CSF(衍生自HEK細胞） 7 ng/ml 狨猴 rmGM-CSF (衍生自HEK細胞） lpg/ml # 在ED80濃度下執行抗體IC5 0的確定。亦應用商業上 可取得之具有習知中和活性的抗體，大鼠抗-hGM-CSF IgG2a 抗體（BVD2-23B6, Fa.BD Pharmingen #5 5 4501)(表 9)。同型對照抗體大鼠 IgG2a (R35-95, Fa. BD #554687) 並無顯示細胞增殖的抑制（數據未顯示）。 表9 : TF-1增殖試驗中IC50的比較 151 201206955 以ng/ml與pM來提供結果（假設抗體分子量係150 kD)。
抗體 針對 hGM-CSF 的 IC50 針對恆河猴GM-CSF的IC50 EV1018 2.3 ng/ml 1.7 ng/ml 15 pM llpM EV1019 5.7 ng/ml 2.8 ng/ml 38 pM 19 pM EY1003 71.1 ng/ml 6.6 ng/ml 474 pM 44 pM BVD2-23B6 5.3 ng/ml 38 ng/ml 35 pM 253 pM EV1018 變體 1 32 pM EV1018 變體 2 33.3 pM
EV1018與EV1019具有對人類重組GM-CSF的良好中 和活性。EV1018的中和活性超過BVD2-23B6。 利用重組恆河猴 GM-CSF之實驗中，單株抗體 EV1018、EV1019與EV1003的中和化性遠高於衍生自大 鼠的BVD2-23B6。然而兩種類型的實驗中，EV1018明 顯優於試驗的所有抗體。EV1018的所有變體與野生型 EV1 018具有相同的中和活性。 提出表7中之結果的試驗中，不可能應用商業上可取 得之大鼠-抗-人類-GM-CSF IgG2a BVD2-21C11 (Fa. BD， #5 5 45 03)，因為在規定ED80濃度（即，1.5ng/ml劑量的 rGM-CSF)下無法取得可靠的結果。爲了測量抗體 21C11，需要下表10中提出的較小rGM-CSF劑量。 僅藉由比較IC50值而於不同實驗室中比較抗體的效 力是不可能的，因為IC50值強烈取決於試驗條件，例如 152 201206955 應用刺激物的數量。藉由比較標準抗體與關注之抗體間 例如IC50值（如上述於TF—i試驗中取得，但係以不同 rGM-CSF標示劑量）的比例而有可能達成較可靠的比 較。例如，WO2006/122797 (表8，第56與57頁）揭露其 最佳抗體係比商業上可取得之抗體大鼠-抗-人類 -GM-CSF(殖株BVD2-21C11)好上35倍。商業上可取得 之抗-人類-GM-CSF單株抗體（殖株5¥〇2_21(：11)與
EVHH8間之IC50比例係4n。因此，根據與商業上標 準的比較，EV 1018的中和活性係約高出1〇倍（如表1〇 所示）。這是令人訝異的’因為W〇2〇〇6/l22797教導熟 悉技術人士抗-GM-CSF單株抗體的中和活性與其芦人 GM-CSF的能力強烈相關（WO2006/122797，改善結合親 合力（第50頁表4中顯示）與因此改善之中和潛力（第 52-54頁表6與7上顯示）相關）。 比較 MOR04357 之結合能力（WO2006/122797，第 50 頁表4 : MOR04357-Fab的結合能力係7 pM)與EV1018 之結合能力’發明者了解EV1018結合GM-CSF係比 MOR04357結合GM-CSF小約16倍。然而相較於 MOR04357’ EV1018的中和活性係高出10倍，這表示中 和活性不一定與結合GM-CSF的能力相關。 表10 : EV1018與先前技術抗體之TF-1試驗中的相對中和 活性 第1與2列：來自WO2006/122797第56與57頁表 153 201206955 的數據；第3與4列ϋ明者的數據 TF-1 試驗 s- HGM-CSF (大腸桿菌） _ 試驗條件 GM-CSF最終濃度 比例： 參考抗體比上關 注之抗體 1 參考抗體 BVD2-21C11 1668 ' 0.25 ng/ml 2 MOR04357(IgGl) 48 0.25 ng/ml 35 3 參考抗體 BVD2-21C11 (Fa. BD, #554503) 8260 ~ 1.0 ng/ml 4 EV1018 20 1.0 ng/ml 413 U937細胞中的IL-8分泌試驗（人類與恆河猴GM-CSF) IL-8 係前趨發炎細胞激素（proinflammatory cytokine)。其係嗜中性白血球發炎的重要因子且牵涉於 大多數的發炎反應中。GM-CSF活性的目標細胞係骨髓 細胞世系的細胞。前單核白血球細胞株U937係骨髓來源 並在GM-CSF刺激後分泌前趨發炎細胞激素IL-8。 U93 7 (ATCC : CRL-15 93.2)生長於細胞培養基（RPMI 1640 (Cat.3 1870 Fa. Gibco) ' IX Glutamax 100x (Cat.35050-038 Fa. Gibco) > 10% FCS (Cat. 10500-064 Fa. Gibco)、1% PenStrep 中。將 100 μΐ 細胞懸浮液以 1E5 細胞/ml植入並加入10 μΐ的抗體溶液與10 μΐ的GM-CSF 溶液。在37°C下與濕潤室5% C02中培養細胞24小時。 利用 OptEIA Human IL-8 Elisa Set (Fa.BD Bioscience， Cat. No. 555244)來確定IL-8細胞激素水平。 陰性對照組係不添加抗體與不添加GM-CSF的U937 細胞，陽性對照組係不具有抗體溶液的U937細胞。確定 154 201206955 人類與恆河猴GM-CSF的ED80濃度（表9)並用此濃度來 確定不同抗- GM-CSF單株抗體的IC50 (表11)。 表11 : U937十IL-8分泌之ED80的確定 GM-CSF ED80 人類(衍生自大腸桿菌，Fa. Biomol #2514) 1.2 ng/ml 恒河猴(衍生自HEK細胞，内 部） 5.0 ng/ml
表12 : U937 IL-8分泌試驗中IC50的比較。以ng/ml與pM (假設抗體的分子量係150 kD)來提出結果。
抗體 奸對 hGM-CSF 的 IC50 針對恆河猴GM-CSF的IC50 EV1018 0.9 ng/ml 0.8 ng/ml 6pM 5.6 pM EV1019 4.7 ng/ml 2.4 ng/ml 31.3 pM 16 pM EV1003 14.6 ng/ml 1.7 ng/ml 97.3 pM 11.5 pM BVD2-23B6 3.5 ng/ml 45 ng/ml 23.3 pM 300 pM 此細胞試驗中，所有三個抗體非常有效地中和人類 GM-CSF與恆河猴GM-CSF。EV1018的中和活性高於 EV1019且遠高於EV1003 «EV1018的所有變體與野生型 EV1018呈現相同的中和活性。 實施例13.表面CDllb/Macl的誘導 顆粒性白血球係骨髏世系細胞的亞群且係GM-CSF生 物活性的目標細胞。除了其他作用功能外，GM-CSF誘 155 201206955 導顆粒性白血球表面上的黏著分子CD 11 b/Mac 1。骨趙細 胞世系之細胞表面上CD 11 b/Mac 1的誘導係細胞自周圍 企液進入發炎組織之遷移的必需步驟。具有慢性發炎氣 管疾病（如COPD與氣喘）的患者在唾液與肺泡沖出液中 具有數目提南的顆粒性白血球。因此，試驗抗-GM-CSF- 抗體對GM-CSF-介導之初級顆粒性白血球上黏附標記 CDllb/Macl誘導的功效。 將80 μΐ健康供應者的凝結抑制週邊血液與預先和
rhGM-CSF (Fa Biomol，#2514)培養 20 分鐘之抗-GM-CSF 單株抗體或同型抗體（人類IgG，# 1-2511 ; Fa. Sigma-Aldrich)在37。(：下培養15分鐘。陰性對照組係與 預先和PBS、01% BSA培養20分鐘之同型抗體在37〇c 下培養15分鐘的凝結抑制血液。 爲了定量CDllb/Macl表現，根據供應商的操作指南 來應用才示5己有植物赤鮮素（phyt〇erythrin) (Fa : Pharmingen; Cat: 333142)之抗 _CDub 抗體。簡短地說， 將20 μΐ的抗-CDllb抗體溶液加入細胞中，在黑暗中室 溫下培養30分鐘。藉由加入2 ml裂解溶液（Fa: bD ; Cat 3 49202)來裂解紅血球（紅血球細胞）並在黑暗中室溫下另 外培養10分鐘。以PBS、〇1 % BSA清洗兩次後，將白 血球細胞懸浮於 500 μΐ Cellfix (Fa : BD ; Cat 340181)。 爲了分析，應用LSRII流式細胞儀與DIVA6 j」軟體來 刀析FACS數據（兩者係Fa BD)。利用前向與側向散佈 將顆粒性白血球細胞群體限制於點狀圖中並設為1〇〇 156 201206955 。/〇。利用30 PM的rhGM-CSF來刺激顆粒性白血球表面 上的CDllb/Macl。67 pM的EV1018足以完全阻礙 GM-CSF 引起 CDllb/Macl 〇 這些數據指出EV1018有效地中和發炎過程高度明顯 (包括顆粒性白血球數目的提高）背景（例如C〇pD與氣喘） 中的GM-CSF生物活性。 籲 實施例14. C57BL/6J小鼠暴露於香菸煙霧後的肺炎 香於煙霧係發展COPD的最重要因子動物物種（如大 鼠與小鼠）長時間暴露於香菸煙霧造成許多相當於人類 疾病的病生理解剖傷害（Fujita與Nakanishi 2007)。COPD 的一個重要特徵係慢性支氣管炎，其包括數目增加的嗜 中性白血球與巨噬細胞進入肺中。爲了證實GM_CSF在 煙霧引發細胞湧進肺中扮演重要角色，在小鼠長期香煙 煙霧模式中應用抗-GM-CSF單株抗體。 # 將C57BL/6J小鼠（18_23g)暴露在香煙煙霧中4天。小 鼠在第1與2天暴露在6根香煙中、第3天暴露在8根 香煙中而第4天暴露在1〇根香煙中。每根香煙暴露持續 16分鐘接著為8分鐘的新鮮空氣。對每一第二根香煙實 施額外中斷的24分鐘新鮮空氣。將沒有暴露在香煙煙霧 的小鼠作為陰性對照組。 在第1天與第3天煙霧方案前2小時腹膜内應用3 〇〇叫 的大鼠抗-小鼠 GM-CSF IgG2a (殖株 MPI-22E9，Fa. 157 201206955 EBioScienses，#16-733 1)或適當的同型抗體、3〇〇吨（大 鼠 IgG2a，Fa· EBioSciences，# 16-4321)或 300 μΐ 載體 (PBS，10 mM NaCl)。最後一次暴露後18小時，使動物 安樂死並以2 X 0.8ml Hanks溶液（具有EDTA)清洗肺。 藉由離心將支氣管肺泡沖洗液（BALF)分成細胞片狀物與 懸浮液。確定片狀物中的骨髓過氧化酶（MPO)活性係骨 髓細胞湧入的因素。使500 μΐ的沖洗液樣本在485 X g、 4°C下旋轉向下10分鐘。將片狀物重新懸浮於2〇〇 μ1 0.5% 的十六烷基三曱基溴化銨 (hexadecyl-trimethyl-ammonium bromide, HTAB)。將 50 μΐ的懸浮液轉移至96-孔微滴定盤。將250μΐ的基質溶液 (50 mM ΚΗ2Ρ04 ’ 5 mM Na2HP04，〇.2 mg/ml 〇-聯大茴香 胺二鹽酸鹽（o-dianisidin dihydrochloride)，0.2 μΐ/ml H2〇2)加入各個孔以開始酵素反應。確定450 nm下的消 光（extinction)90秒。在酵素反應穩定狀態中計算骨髓過 氧化酶（MPO)活性。活性表示成每分鐘千分之活性單位 [mAU/分]。 藉由流式細胞儀（LSR II，Becton Dickinson)上的多次 分析偵測確定BALF懸浮液中的細胞激素MCP-1與 ΜΙΡ-1 α。根據 Bender MedSystems (Flow Cytomix)的操 作指南來執行試驗。簡短地說，將25 μΐ的BALF懸浮液 與 25 μΐ 的 1χ 試驗緩衝液（Basic Kit BMS8440FF)、25 μΐ 的微珠混合物（MCP-1 與 MIP-la 單一套組 BMS86005FF、BMS86013FF的混合物）與50μ1的生物素 158 201206955 耦合混合物（包含於單—套組内）混合並在室溫下5〇〇 rpm的微盤搖動器上培養2小時。以試驗緩衝液清洗兩 次後，將微珠重新溶解於1〇〇 μ1試驗缓衝液並加入5〇 μ1 卵白素-PE-溶液（包含於基本套組中）。微珠在室溫下5〇〇 rpm的微盤搖動器上培養丨小時。以試驗緩衝液清洗微 珠兩次。將微珠重新溶解於5〇〇 μΐ試驗緩衝液並藉由流 式細胞技術利用Bender MedSystems提供的 Fl〇WCyt〇miXpr〇2.2軟體分析。爲了定量，根據供應者 (Bender MedSystems)的操作指南製備標準（包含於單一 套組内）的連續稀釋。根據這些標準來確定細胞激素的濃 度。 確定總細胞數與特別細胞數（第9圖）。與皮質類固醇 (如地塞米松（dexamethasone) (3 mg))相比，抑制細胞湧 入26 %。第10圖顯示之結果證實GM CSF在香煙煙霧 引發之發炎中扮濟重要角色且GM-C S F的中和可明顯減 少小鼠長時間暴露於香煙煙霧引發之細胞滲透物。 實施例15· hGM-CSF表位定位 檢驗包含小鼠、人類、恆河猴與狨猴GM-CSF胜肽之 胜肽陣列以尋找是否可發現GM_CSF中作為探討抗體所 辨別之表位的特定線性序列。 試驗下列抗體： BIBH1 (辨別FAP的無關人類化IgGi陰性對照抗體） (參見 US20030103968 「Use 〇f alpha specific antib〇dy 159 201206955 BIBHl in the treatment of cancer 」 (jittp://www.asco.org/AS CO/Abstracts + & + Virtual+Meetin R/Abstracts?&vmview=abst detail view&confID = l O&abs tractID=1028>>、EV1 0 1 8、EV1 0 19 與 EV1 003。
胜肽陣列的結果指出雖然固定之GM-CSF與人類IgG 陽性對照組提供強健信號，但並無發現陰性對照抗體超 出水平的特定結合。由於可辨別適當摺疊的GM-CSF但 無法辨別GM-CSF衍生之胜肽，發明者認為試驗之抗 -GM-CSF抗體辨別非線性或結構專—表位。這與文獻（例 如，W〇2〇〇7/〇92939)中已知的許多其他抗_GM—CSF抗體 相反。 應用下列方法： 在JPT (Berlin，Germany)合成定製陣列並印在玻璃片 上。在室溫輕微搖動下以PBS + 1%BSA + 〇 1%Tween2() 阻塞陣列3小時。將抗體於探針緩衝液（PBS，5 mM MgCl2，〇·5 mM DTT，〇 〇5% Trit〇n χ_1〇〇，5%甘油， BSA)中稀釋至5 μ§/ιη1並在4〇c下於陣列上培養小 時。接著以探針緩衝液清洗陣列三次（每次清洗置於冰上 1分鐘）並在4〇C下以Cy5標記之山羊抗人類邮（〇,5 μ_ι)培養i小時。再度如上述般清洗，藉由離心⑽〇g) 而乾燥並在PerkinW Proscan微陣列掃描器中以具 有過濾套組的固定PMT掃描。
亦執行透過直系同源取代的表位定位。由於試驗之抗 體辨別結構上或間斷的表位，僅可在適當摺疊的·CSF 160 201206955 背景中確定各個表位。如上述Biacore結果所示，探討 之抗體僅輕微地（若真的有）結合小鼠GM-CSF。因此，發 明者設計GM-CSF的嵌合型式，其中以對應小鼠序列取 代人類GM-CSF的選定區域。由於人類與小鼠GM-CSF 推定具有相似的三維結構但僅有73%相同，嵌合蛋白應 保有適當的GM-CSF摺疊，與丙胺酸掃描方法相反（以聚 丙胺酸延伸取代，會影響蛋白的折疊）。以小鼠序列取代 表位或其之部分的嵌合體應無法結合探討之抗體（或顯 示結合降低）。將序列定位回已知人類GM-CSF三維結構 可讓人重新建構包含表位之胺基酸的空間位置。無法以 此方法分析人類與小鼠GM-CSF間保存之胺基酸。 設計Η 種不同嵌合體，其中個別與組合地取代七種 線性胜肽序列。針對各個嵌合體，以粗體來指出小鼠 GM-CSF胺基酸。以底線標示嵌合體間不同的預測N—鍵 結醣化位置。將各個嵌合體表現於HEK 293細胞中呈兔 Fc融合蛋白以透過兔FC部分進行純化與定量。利用針 對兔Fc之抗體的融合蛋白’對照西方墨點法顯示不同的 GM-CSF嵌合融合蛋白以相同數量負載於膠上。不同嵌 合體間的移動性轉移係因為人類與小鼠GM-CSF間之醣 化的差異。 以EV1003進行的GM-CSF嵌合體西方墨點法顯示嵌 合體3、6、9與10顯示極少或沒有結合。嵌合體9係嵌 合體3與6的組合而嵌合體1〇係嵌合體2與6的組合。 因此，EV1003不會辨別包含這些嵌合體3與6所呈現位 161 201206955 置中的小氣胺基酸或包含一或兩者這些區域之組合的戶斤 有嵌合體。因此這些代表EV1003表位。將嵌合體3與6 空間定位在GM-CSF的3維結晶結構顯示這些嵌合體在 GM-C SF分子之一面彼此相近，這與這些發現相當一致 此表;面代表EV10〇3所辨別的間斷表位。 以EV1019進行的GM-CSF敌合體西方墨點法顯示嵌 合體4、5與11顯示輕微的結合而嵌合體8近乎沒有顯 示結合。嵌合體11係嵌合體1與5的組合而後合體8係 嵌合體4與5的組合。因此，包含嵌合體4 4 5所呈現 的這些位置中之小鼠胺基酸的所有嵌合體顯示輕微結合 EV1019。包含嵌合體4房5所呈現的這些位置中之小鼠 胺基酸组合的嵌合體8無法由EV1019所辨別。因此， 敌合體4與5的組合代表EV1019表位。將嵌合體4與5 空間定位於GM-CSF的3維結晶結構上顯示這些欲合體 在GM-CSF分子之一面上彼此相近，這與這些發現相當 一致。此表面代表EV1019所辨別的間斷表位。由於 EV1019的商親合力結合需要兩者區域，間斷表位必需係 由GM-CSF表面上或附近（並因此影響表面暴露的胺基酸 殘基）彼此相近的變體4與5的胺基酸所構成。這些分別 係胺基酸 60-63 (ELYK)與 78-87 (TMMASHYKQH)。胺基 酸76 (P)可能有所貢獻。因為嵌合體4與5間之介面包 含大距離，嵌合體4中胺基酸68-69 (SL)不太可能在結 合表位中扮演重要角色，然而並無法完全排除這種可能 性。 162 201206955 以EV1018進行的GM-CSF嵌合體西方墨點法顯示欲 合體4、5與11顯示輕微的結合而嵌合體8顯示近乎沒 有的結合。嵌合體11係嵌合體1與5的組合而谈合體8 係欲合體4與5的組合。因此，包含後合體4或5所呈 現的這些位置中之小鼠胺基酸的所有嵌合體顯示輕微結 合EV1018。包含嵌合體4房5所呈現的這些位置中之小 鼠胺基酸組合的嵌合體8無法由EV1 01 8所辨別。因此， 嵌合體4與5的組合代表EV1018表位。將嵌合體4與5 空間定位於GM-CSF的3維結晶結構上顯示這些嵌合體 在GM-CSF分子之一面上彼此相近，這與這些發現相當 一致。此表面代表EV1018所辨別的間斷表位。由於 EV 1 0 1 8的高親合力結合需要兩者區域，間斷表位必需係 由GM-CSF表面上或附近（並因此影響表面暴露的胺基酸 殘基）彼此相近的變體4與5的胺基酸所構成。這些分別 係胺基酸「ELYK」與「TMMASHYKQH」。 這些結果指出EV1 018與EV1 019辨別相同或非常相近 的GM-CSF分子間斷表位。 【圖式簡單說明】 第1圖顯示單離抗體產生細胞株的流程圖。 第2圖顯示抗-GM-CSF單株抗體之親合力分析的圖 解。 第3圖顯示抗-GM-CSF單株抗體在GM-CSF存在下對 163 201206955 周圍血液樹突細胞增殖之抑制效應的評估。 第4圖顯示抗-GM-CSF單株抗體在酵母菌hGM-CSF (Leukine)存在下對TF-1細胞增殖:之抑制效應的評估。 第5圖顯示抗-GM-CSF單株抗體在大腸桿菌hGM-CSF (Peprotech)存在下對TF -1細胞增殖之抑制效應的評估。 第6圖顯示兩種抗-GM-CSF單株抗體之組合應用在酵 母菌hGM-CSF (Leukine)存在下對TF-1細胞增殖之抑制 效應的評估。 _ 第7圖顯示兩種抗-GM-CSF單株抗體之組合應用在大 腸桿菌hGM-CSF (Peprotech)存在下對TF-1細胞增殖之 抑制效應的評估。 第8圖係描繪劑量依賴性抑制的兩個圖示：人類 GM-CSF (8A)與恆河猴 GM-CSF (8B)。 第9圖係描述鼠科模式中支氣管肺泡沖洗液之細胞數 目的條狀圖。 ^ 【主要元件符號說明】 164 201206955 序列表
全長 hGM-CSF 5 1 mwlqsllllg tvacsisapa rspspstqpw ehvnaiqear rllnlsrdta aemnetvevi 61 semfdlqept clqtrlelyk qglrgsltkl kgpltmmash ykqhcpptpe tscatqiitf 121 esfkenlkdf llvipfdcwe pvqe 10 (序列編號：1)
EV1018 & EV1019的間斷表位
ELYK 15 (序列編號：2)殘基77_8〇
TMMASHYKQH (序列編號：3)殘基95-104 20 EV1018變異區序列<CDRs)
EV1018 HC CDR1 SYGMH (序列編號：4)
EV1018 HC CDR2 LTYHHGNRKFYADSVRG (序列編號：5> 30 EV1018 HC CDR3 ESMGAINDN (SEQ ID NO:6) EV1018 LC CDR1 35 IGNNNNIGSHAVG (序列編號：刀 -2- 201206955 EV1018 LC CDR2 GRSPPS (序列編號： 5 EV1018 LC CDR3
STWDSSLSAVV (序列編號：9) 不具有信號序列之EV1018重鏈 10 >EV1018
QVQLVESGGGMVQPGMPLRLSCVASGFTFSSYGMHWVRQAPGKGLEWVALTYHHGNRKFYADSVRGRF
TISRDNSNNTLYLQMTSLRAEDTAVyFCARESMGAINDNVJGQGTLVIVSSASTKGPSVFPLAPSSKST
SGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSWTVPSSSLGTQTYICNVN 15
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EVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKA
KGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLY
SKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK (序列編號：10) 20
25 30
>EVl018-wt IgGIKO
QVELVESGGGMVQPGMPLRLSCVASGFTFSSYGMHWVRQAPGKGLEWVALTYHHGNRKFYADSVRGRF
TISRDNSNNTLYLQMTSLRAEDTAVYFCARESMGAINDNWGQGTLVIVSSASTKGPSVFPLAPSSKST
SGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVN
HKPSNTKVDKRVEPKSCDKTHTCPPCPAPEAAGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVWDVSHEDP
EVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKA
KGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLY
SKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK (序列編號：11>
>EV1018-T97A IgGIKO qvelvesgggmvqpgmplrlscvasgftfssygmhwvrqapgkglewvaltyhhgnrkfyadsvrgrf
TISRDNSNN^LYLQMTSLRAEDTAVYFCARESMGAINDNWGQGTLVIVSSASTKGPSVFPLAPSSKST
SGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVN
HKPSNTKVDKRVEPKSCDKTHTCPPCPAPEAAGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVWDVSHEDP
EVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKA 35 201206955
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SKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK (序列編號：12 >
5 >EV1018-T97V IgGlKO
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15 >EV1018-N95D IgGlKO qvelvesgggmvqpgmplrlscvasgftfssygmhwvrqapgkglewvaltyhhgnrkfyadsvrgrf TISRDNSDNTLYLQMTSLRAEDTAVYFCARESMGAINDNWGQGTLVIVSSASTKGPSVFPLAPSSKST SGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVN HKPSNTKVDKRVEPKSCDKTHTCPPCPAPEAAGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCWVDVSHEDP 20 EVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKA KGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLY SKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK (序列編號：14)
25 >EV1018-N95E IgGlKO qvelvesgggmvqpgmplrlscvasgftfssygmhwvrqapgkglewvaltyhhgnrkfyadsvrgrf TISRDNS竺NTLYLQMTSLRAEDTAVYrcARESMGAINDNWGQGTLVIVSSASTKGPSVFPLAPSSKST SGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVN HKPSNTKVDKRVEPKSCDKTHTCPPCPAPEAAGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCWVDVSHEDP 30 EVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKA KGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLY SKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK (序列編號：15)
35 >EV1018-N95K IgGlKO qvelvesgggmvqpgmplrlscvasgftfssygmhwvrqapgkglewvaltyhhgnrkfyadsvrgrf
TISRDNS^NTLYLQMTSLRAEDTAVYFCARESMGAINDNWGQGTLVIVSSASTKGPSVFPLAPSSKST -4- 201206955 SGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVN HKPSNTKVDKRVEPKSCDKTHTCPPCPAPEAAGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDP EVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKA KGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLY 5 SKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK (序列編號：16)
>EV1018-N95Q IgGIKO qvelvesgggmvqpgmplrlscvasgftfssygmhwvrqapgkglewvaltyhhgnrkfyadsvrgrf
10 TISRDNSgNTLYLQMTSLRAEDTAVYFCARESMGAINDNWGQGTLVIVSSASTKGPSVFPLAPSSKST SGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVN HKPSNTKVDKRVEPKSCDKTHTCPPCPAPEAAGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDP EVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKA KGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLY 15 SKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK (序列編號：17)
>EV1018-N93Q-N95T IgGIKO QVELVESGGGMVQPGMPLRLSCVASGFTFSSYGMHWVRQAPGKGLEWVALTYHHGNRKFYADSVRGRF 20 TISRDgS^NTLYLQMTSLRAEDTAVYFCARESMGAINDNWGQGTLVIVSSASTKGPSVFPLAPSSKST SGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVN HKPSNTKVDKRVEPKSCDKTHTCPPCPAPEAAGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVWDVSHEDP EVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKA KGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLY 25 SKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK (序列編號：18)
>EV1018-wt 工gGl-BI
QVELVESGGGMVQPGMPLRLSCVASGFTFSSYGMHWVRQAPGKGLEWVALTYHHGNRKFYADSVRGRF 30 TISRDNSNNTLYLQMTSLRAEDTAVYFCARESMGAINDNWGQGTLVIVSSASTKGPSVFPLAPSSKST SGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVN hkpsntkvdkrvepkscdkthtcppcpapellggpsvflfppkpkdtlmisrtpevtcvwdvshedp EVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRWSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNiCALPAPIEKTISKA KGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSD工AVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLY 35 SKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK (序列編號：19) 201206955
>EV1018-X97A IgGl-BI qvelvesgggmvqpgmplrlscvasgftfssygmhwvrqapgkglewvaltyhhgnrkfyadsvrgrf TISRDNSNNALYLQMTSLRAEDTAVYFCARESMGAINDNWGQGTLVIVSSASTKGPSVFPLAPSSKST SGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVN 5 HKPSNTKVDKRVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVWDVSHEDP EVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKA KGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLY SKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK (序列編號：20) 10
>EV1018-T97V IgGl-BI
QVELVESGGGMVQPGMPLRLSCVASGFTFSSYGMHWVRQAPGKGLEWVALTYHHGNRKFYADSVRGRF TISRDNSNNVLYLQMTSLRAEDTAVYFCARESMGAINDNWGQGTLVIVSSASTKGPSVFPLAPSSKST SGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVN 15 HKPSNTKVDKRVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDP EVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRWSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKA KGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLY SKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK (序列編號：21) 20
>EV1018-N95D IgGl-BI QVELVESGGGMVQPGMPLRLSCVASGFTFSSYGMHWVRQAPGKGLEWVALTYHHGNRKFYADSVRGRF TISRDNSQNTLYLQMTSLRAEDTAVYFCARESMGAINDNWGQGTLVIVSSASTKGPSVFPLAPSSKST SGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVN 25 HKPSNTKVDKRVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVWDVSHEDP EVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKA KGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLY SKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK (序列編號：22 > 30
>EV1018-N95E IgGl-BI
QVELVESGGGMVQPGMPLRLSCVASGFTFSSYGMHWVRQAPGKGLEWVALTYHHGNRKFYADSVRGRF TISRDNS^NTLYLQMTSLRAEDTAVYFCARESMGAINDMWGQGTLVIVSSASTKGPSVFPLAPSSKST SGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVN 35 HKPSNTKVDKRVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVWDVSHEDP EVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKA 201206955
KGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLY
SKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK (序列編號：23)
5 >EV1018-N95K IgGl-BI
QVELVESGGGMVQPGMPLRLSCVASGFTFSSYGMHWVRQAPGKGLEWVALTYHHGNRKFYADSVRGRF tisrdns^ntlylqmtslraedtavyfcaresmgaindnwgqgtlvivssastkgpsvfplapsskst
SGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVN hkpsntkvdkrvepkscdkthtcppcpapellggpsvflfppkpkdtlmisrtpevtcvvvdvshedp
10 EVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKA KGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLY SKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK (序列編號：24)
15 >EV1018-N95Q IgGl-BI QVELVESGGGMVQPGMPLRLSCVASGFTFSSYGMHWVRQAPGKGLEWVALTYHHGNRKFYADSVRGRF TISRDNSgNTLYLQMTSLRAEDTAVYFCARESMGA工NDNWGQGTLV工VSSASTKGPSVFPLAPSSKST SGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSWTVPSSSLGTQTYICNVN HKPSNTKVDKRVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVWDVSHEDP 20 EVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKA KGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLY SKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK (序列編號：25)
25 >EV1Ο18-N93Q-N95T IgGl-BI QVELVESGGGMVQPGMPLRLSCVASGFTFSSYGMHWVRQAPGKGLEWVALTYHHGNRKFYADSVRGRF TISRDgS^NTLYLQMTSLRAEDTAVYFCARESMGAINDNWGQGTLVIVSSASTKGPSVFPLAPSSKST SGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVN HKPSNTKVDKRVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDP 30 EVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKA KGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLY SKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK (序列編號：26) 35 >EV1018-T97A IgGl-原型-恆定
QVQLVESGGGMVQPGMPLRLSCVASGFTFSSYGMHWVRQAPGKGLEWVALTYHHGNRKFYADSVRGRF
TISRDNSNN^LYLQMTSLRAEDTAVYFCARESMGAINDNWGQGTLVIVSSASTKGPSVFPLAPSSKST -7- 201206955 SGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVN HKPSNTKVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDP EVKFMWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKA KGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESMGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLY 5 SKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK (序列編號：27) >EV1018-T97V IgGl-原型-恆定
QVQLVESGGGMVQPGMPLRLSCVASGFTFSSYGMHWVRQAPGKGLEWVALTYHHGNRKFYADSVRGRF 10 TISRDNSNNVLYLQMTSLRAEDTAVYFCARESMGAINDNWGQGTLVIVSSASTKGPSVFPLAPSSKST SGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVN HKPSNTKVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDP EVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKA KGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLY 15 SKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK (序列編號：28) >EV1018-N95D IgGl-原型-恆定 QVQLVESGGGMVQPGMPLRLSCVASGFTFSSYGMHV7VRQAPGKGLEWVALTYHHGNRKFYADSVRGRF 20 TISRDNSDNTLYLQMTSLRAEDTAVYFCARESMGAINDNWGQGTLVIVSSASTKGPSVFPLAPSSKST SGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVN HKPSNTKVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVWDVSHEDP EVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKA KGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLY 25 SKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK (序列編號：29) >EV1018-N95E IgGl-原型-恆定 QVQLVESGGGMVQPGMPLRLSCVASGFTFSSYGMHWVRQAPGKGLEWVALTYHHGNRKFYADSVRGRF 30 TISRDNSENTLYLQMTSLRAEDTAVYFCARESMGAINDNWGQGTLVIVSSASTKGPSVFPLAPSSKST SGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVN HKPSNTKVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVWDVSHEDP EVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKA KGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLY 35 SKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK (序列編號：30) -8- 201206955 >EV1018-N95K IgGl-原型-恒定 QVQLVESGGGMVQPGMPLRLSCVASGFTFSSYGMHWVRQAPGKGLEWVALTYHHGNRKFYADSVRGRF TISRDNSKNTLYLQMTSLRAEDTAVYFCARESMGAINDNWGQGTLVIVSSASTKGPSVFPLAPSSKST SGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVN 5 HKPSNTKVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVWDVSHEDP EVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRWSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKA KGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLY SKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK (序列編號：31) 10 >EV1018-N95Q IgGl-原型-恆定
QVQLVESGGGMVQPGMPLRLSCVASGFTFSSYGMHWVRQAPGKGLEWVALTYHHGNRKFYADSVRGRF TISRDNSgNTLYLQMTSLRAEDTAVYFCARESMGAINDNWGQGTLVIVSSASTKGPSVFPLAPSSKST SGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVN 15 HKPSNTKVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVWDVSHEDP EVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKA KGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLY SKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK (序列編號：32) 20 >EV1018-N93Q-N95T IgGl-原型定 QVQLVESGGGMVQPGMPLRLSCVASGFTFSSYGMHWVRQAPGKGLEWVALTYHHGNRKFYADSVRGRF TISRDgSTNTLYLQMTSLRAEDTAVYFCARESMGAINDNWGQGTLVIVSSASTKGPSVFPLAPSSKST SGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVN 25 HKPSNTKVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVWDVSHEDP EVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKA KGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLY SKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK (序列編號：33) 30 不具有信號序列之EV1018輕鏈 >EV1018-野生型-原型
QSALTQETSVSGTVGQKVTLSCIGNNNNIGSHAVGWYQQISRGAPKMVLFGRSPPSGVPDRFSGSKSG 35 TTASLIISGLQPEDEADYYCSTWDSSLSAWFGGGTKLTVLRQPKAAPSVTLFPPSSEELQANKATLV CLISDFYPGAVTVAWKADSSPVKAGVETTTPSKQSNNKYAASSYLSLTPEQWKSHRSYSCQVTHEGST VEKTVAPTECS -9- 201206955 (序列編號：34)
>EV1018-野生型-BI QSALTQETSVSGTVGQKVTLSCIGNNNNIGSHAVGWYQQISRGAPKMVLFGRSPPSGVPDRFSGSKSG 5 TTASLIISGLQPEDEADYYCSTWDSSLSAWFGGGTKLTVLGQPKAAPSVTLFPPSSEELQANKATLV CLISDFYPGAVTVAWKGDSSPVKAGVETTTPSKQSNNKYAASSYLSLTPEQWKSHRSYSCQVTHEGST VEKTVAPTECS (序列編號：35) 10 >EV1018-野生型-BI-G1 QSALTQETSVSGTVGQKVTLSCIGNNNNIGSHAVGWYQQISRGAPKMVLFGRSPPSGVPDRFSGSKSG TTASLIISGLQPEDEADYYCSTWDSSLSAVVFGGGTKLTVLGQPKAAPSVTLFPPSSEELQANKATLV CLISDFYPGAVTVAWKADSSPVKAGVETTTPSKQSNNKYAASSYLSLTPEQWKSHRSYSCQVTHEGST VEKTVAPTECS 15 (序列編號：36) >EV1018-野生型-原型-恆定 QSALTQETSVSGTVGQKVTLSCIGNNNNIGSHAVGWYQQISRGAPKMVLFGRSPPSGVPDRFSGSKSG TTASLIISGLQPEDEADYYCSTWDSSLSAWFGGGTKLTVLRQPKAAPSVTLFPPSSEELQANKATLV 20 CLISDFYPGAVTVAWKADSSPVKAGVETTTPSKQSNNKYAASSYLSLTPEQWKSHRSYSCQVTHEGST VEKTVAPTECS (序列編號：3*7) 不具有信號序列之EV1018重鏈
25
>EV1018-野生型-IgGl-KO-QVQL QVQLVESGGGMVQPGMPLRLSCVASGFTFSSYGMHWVRQAPGKGLEWVALTYHHGNRKFYADSVRGRF TISRDNSNNTLYLQMTSLRAEDTAVYFCARESMGAINDNWGQGTLVIVSSASTKGPSVFPLAPSSKST SGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVN 30 HKPSNTKVDKRVEPKSCDKTHTCPPCPAPEAAGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDP EVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKA KGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLY SKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK (序列編號：38 >
>EV1018-T97A-IgGl-KO-QVQL 35 -10- 201206955 QVQLVESGGGMVQPGMPLRLSCVASGFTFSSYGMHWVRQAPGKGLEWVALTYHHGNRKFYADSVRGRF TISRDNSNNALYLQMTSLRAEDTAVYFCARESMGAINDNWGQGTLVIVSSASTKGPSVFPLAPSSKST SGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVN HKPSNTKVDKRVEPKSCDKTHTCPPCPAPEAAGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVWDVSHEDP 5 EVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKA KGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLY SKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK (序列編號：39)
10 >EVl018-T97V-IgGl-KO-QVQL
QVQLVESGGGMVQPGMPLRLSCVASGFTFSSYGMHWVRQAPGKGLEWVALTYHHGNRKFYADSVRGRF TISRDNSNNVLYLQMTSLRAEDTAVYFCARESMGAINDNWGQGTLVIVSSASTKGPSVFPLAPSSKST SGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVN HKPSNTKVDKRVEPKSCDKTHTCPPCPAPEAAGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDP 15 EVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKA KGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLY SKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK (序列編號：40)
20 >EVl018-N95D-IgGl-KO-QVQL QVQLVESGGGMVQPGMPLRLSCVASGFTFSSYGMHWVRQAPGKGLEWVALTYHHGNRKFYADSVRGRF TISRDNSDNTLYLQMTSLRAEDTAVYFCARESMGAINDNWGQGTLVIVSSASTKGPSVFPLAPSSKST SGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVN HKPSNTKVDKRVEPKSCDKTHTCPPCPAPEAAGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVWDVSHEDP 25 EVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKA KGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSD工AVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLY SKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK (序列編號：41)
30 >EV1018-N95E IgGl-KO-QVQL
QVQLVESGGGMVQPGMPLRLSCVASGFTFSSYGMHWVRQAPGKGLEWVALTYHHGNRKFYADSVRGRF TISRDNSENTLYLQMTSLRAEDTAVYFCARESMGAINDNWGQGTLVIVSSASTKGPSVFPLAPSSKST SGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVN HKPSNTKVDKRVEPKSCDKTHTCPPCPAPEAAGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDP 35 EVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKA KGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLY SKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK 201206955 (序列編號：42)
>EV1018-N95K IgGl-KO-QVQL
QVQLVESGGGMVQPGMPLRLSCVASGFTFSSYGMHWVRQAPGKGLEWVALTYHHGNRKFYADSVRGRF 5 TISRDNSKNTLYLQMTSLRAEDTAVYFCARESMGAINDNWGQGTLVIVSSASTKGPSVFPLAPSSKST SGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVN hkpsntkvdkrvepkscdkthtcppcpapeaaggpsvflfppkpkdtlmisrtpevtcvvvdvshedp EVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKA KGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLY 10 SKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK (序列編號：43)
>EV1018-N95Q IgGl-KO-QVQL QVQLVESGGGMVQPGMPLRLSCVASGFTFSSYGMHWVRQAPGKGLEWVALTYHHGNRKFYADSVRGRF 15 TISRDNSQNTLYLQMTSLRAEDTAVYFCARESMGAINDNWGQGTLVIVSSASTKGPSVFPLAPSSKST SGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVN HKPSNTKVDKRVEPKSCDKTHTCPPCPAPEAAGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVWDVSHEDP EVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKA KGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLY 20 SKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK (序列編號：44)
>EV1018-N93Q-N95T IgGl-KO-QVQL QVQLVESGGGMVQPGMPLRLSCVASGFTFSSYGMHWVRQAPGKGLEWVALTYHHGNRKFYADSVRGRF 25 TISRDQSTNTLYLQMTSLRAEDTAVYFCARESMGAINDNWGQGTLVIVSSASTKGPSVFPLAPSSKST SGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSWTVPSSSLGTQTYICNVN HKPSNTKVDKRVEPKSCDKTHTCPPCPAPEAAGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVWDVSHEDP EVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRWSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKA KGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLY 30 SKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK (序列編號：45)
>EV1018-wt IgGl-QVQL-BI
QVQLVESGGGMVQPGMPLRLSCVASGE'TFSSYGMHWVRQAPGKGLEWVALTYHHGNRKE'YADSVRGRF 35 TISRDNSNNTLYLQMTSLRAEDTAVYFCARESMGAINDNWGQGTLVIVSSASTKGPSVFPLAPSSKST SGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSWTVPSSSLGTQTYICNVN HKPSNTKVDKRVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVWDVSHEDP -12- 201206955
EVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLMGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKA
KGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLY
SKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK (序列編號M6) 5
>EV1018-T97A IgGl-QVQL-BI QVQLVESGGGMVQPGMPLRLSCVASGFTFSSYGMHWVRQAPGKGLEWVALTYHHGNRKFYADSVRGRF TISRDNSNNALYLQMTSLRAEDTAVYFCARESMGAINDNWGQGTLVIVSSASTKGPSVFPLAPSSKST SGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVN 10 HKPSNTKVDKRVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVWDVSHEDP EVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKA KGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLY SKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK (序列編號：47) 15
>EV1018-T97V IgGl-QVQL-BI
QVQLVESGGGMVQPGMPLRLSCVASGFTFSSYGMHWVRQAPGKGLEWVALTYHHGNRKFYADSVRGRF
TISRDNSNNVLYLQMTSLRAEDTAVYFCARESMGAINDNWGQGTLVIVSSASTKGPSVFPLAPSSKST
SGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSWTVPSSSLGTQTYICNVN 20 hkpsntkvdkrvepkscdkthtcppcpapellggpsvflfppkpkdtlmisrtpevtcvwdvshedp EVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRWSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKA KGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLY SKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK (序列編號：48)
25
>EV1018-N95D IgGl-QVQL-BI
QVQLVESGGGMVQPGMPLRLSCVASGFTFSSYGMHWVRQAPGKGLEWVALTYHHGNRKFYADSVRGRF
TISRDNSDNTLYLQMTSLEIAEDTAVYFCARESMGAINDNWGQGTLVIVSSASTKGPSVFPLAPSSKST
SGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVN 30 hkpsntkvdkrvepkscdkthtcppcpapellggpsvflfppkpkdtlmisrtpevtcvwdvshedp
EVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRWSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKA KGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLY SKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK (序列編號：49) >EV1018-N95E IgGl-QVQL-BI 35 -13 - 201206955
QVQLVESGGGMVQPGMPLRLSCVASGFTFSSYGMHWVRQAPGKGLEWVALTYHHGNRKFYADSVRGRF
TISRDNSENTLYLQMTSLRAEDTAVYFCARESMGAINDMWGQGTLVIVSSASTKGPSVFPLAPSSKST
SGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVN
HKPSNTKVDKRVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDP
EVKF丽YVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKA
KGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLY
SKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK (序列編號：50)
10 >EV1018-N95K IgGl-QVQL-BI
QVQLVESGGGMVQPGMPLRLSCVASGFTFSSYGMHWVRQAPGKGLEWVALTYHHGNRKFYADSVRGRF TISRDNSKNTLYLQMTSLRAEDTAVYFCARESMGAINDNWGQGTLVIVSSASTKGPSVFPLAPSSKST SGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVN HKPSNTKVDKRVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVWDVSHEDP 15 EVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKA KGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLY SKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK (序列編號：51)
20 >EV1018-N95Q IgGl-QVQL-BI QVQLVESGGGMVQPGMPLRLSCVASGFTFSSYGMHWVRQAPGKGLEWVALTYHHGNRKFYADSVRGRF TISRDNSQNTLYLQMTSLRAEDTAVYFCARESMGAINDNWGQGTLVIVSSASTKGPSVFPLAPSSKST SGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVN HKPSNTKVDKRVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVWDVSHEDP 25 EVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRWSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKA KGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLY SKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK (序列編號：52)
30 >EV1018-N93Q-N95T IgGl-QVQL-BI
QVQLVESGGGMVQPGMPLRLSCVASGFTFSSYGMHWVRQAPGKGLEWVALTYHHGNRKFYADSVRGRF
TISRDQSTNTLYLQMTSLRAEDTAVYFCARESMGAINDNWGQGTLVIVSSASTKGPSVFPLAPSSKST
SGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVN hkpsntkvdkrvepkscdkthtcppcpapellggpsvflfppkpkdtlmisrtpevtcvwdvshedp
35 EVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKA KGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLY SKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK -14- 201206955 (序列編號：53) >EV1018-IgG2 QVQLVESGGGMVQPGMPLRLSCVASGFTFSSYGMHWVRQAPGKGLEWVALTYHHGNRKFYADSVRGRF 5 TISRDNSNNTLYLQMTSLRAEDTAVYFCARESMGAINDNWGQGTLVIVSSASTKGPSVFPLAPCSRST SESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSNFGTQTYTCNVD HKPSNTKVDKTVERKCCVECPPCPAPPVAGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVQF NWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTFRVVSVLTVVHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPAPIEKTISKTKGQP REPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPMLDSDGSFFLYSKLT 10 VDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK (序列編號：5叫
>EV1018-野生型-IgG2 QVELVESGGGMVQPGMPLRLSCVASGFTFSSYGMHWVRQAPGKGLEWVALTYHHGNRKFYADSVRGRF 15 TISRDNSNNTLYLQMTSLRAEDTAVYFCARESMGAINDNWGQGTLVIVSSASTKGPSVFPLAPCSRST SESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSNFGTQTYTCNVD HKPSNTKVDKTVERKCCVECPPCPAPPVAGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVWDVSHEDPEVQF NWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTFRVVSVLTVVHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPAPIEKTISKTKGQP REPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPMLDSDGSFFLYSKLT 20 VDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK (序列編號：55) >EV1018-T97A-IgG2 QVELVESGGGMVQPGMPLRLSCVASGFTFSSYGMHWVRQAPGKGLEWVALTYHHGNRKFYADSVRGRF 25 TISRDNSNNALYLQMTSLRAEDTAVYFCARESMGAINDNWGQGTLVIVSSASTKGPSVFPLAPCSRST SESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSNFGTQTYTCNVD HKPSNTKVDKTVERKCCVECPPCPAPPVAGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVQF NWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTFRVVSVLTVVHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPAPIEKTISKTKGQP REPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPMLDSDGSFFLYSKLT 30 VDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK (序列編號：56) >EV1018-T97V-IgG2
QVELVESGGGMVQPGMPLRLSCVASGFTFSSYGMHWVRQAPGKGLEWVALTYHHGNRKFYADSVRGRF 35 TISRDNSNNVLYLQMTSLRAEDTAVYFCARESMGAINDNWGQGTLVIVSSASTKGPSVFPLAPCSRST SESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSNFGTQTYTCNVD HKPSNTKVDKTVERKCCVECPPCPAPPVAGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVWDVSHEDPEVQF -15- 201206955 NWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTFRWSVLTVVHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPAPIEKTISKTKGQP REPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPMLDSDGSFFLYSKLT VDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK (序列編號：5*7 > 5 >EV1018-N95D-IgG2
QVELVESGGGMVQPGMPLRLSCVASGFTFSSYGMHWVRQAPGKGLEWVALTYHHGNRKFYADSVRGRF TISRDNSDNTLYLQMTSLRAEDTAVYFCARESMGAINDNWGQGTLVIVSSASTKGPSVFPLAPCSRST SESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSNFGTQTYTCNVD 10 HKPSNTKVDKTVERKCCVECPPCPAPPVAGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCWVDVSHEDPEVQF NWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTFRVVSVLTVVHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPAPIEKTISKTKGQP REPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPMLDSDGSFFLYSKLT VDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK (序列編號：58) 15 >EV1018-N95E-IgG2
QVELVESGGGMVQPGMPLRLSCVASGFTFSSYGMHWVRQAPGKGLEWVALTYHHGNRKFYADSVRGRF TISRDNSENTLYLQMTSLRAEDTAVYFCARESMGAINDNWGQGTLVIVSSASTKGPSVFPLAPCSRST SESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSWTVPSSNFGTQTYTCNVD 20 HKPSNTKVDKTVERKCCVECPPCPAPPVAGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVWDVSHEDPEVQF NWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTFRVVSVLTVVHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPAPIEKTISKTKGQP REPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPMLDSDGSFFLYSKLT VDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK (序列編號：59)
25 >EV1018-lSl95K-IgG2 QVELVESGGGMVQPGMPLRLSCVASGFTFSSYGMHWVRQAPGKGLEWVALTYHHGNRKFYADSVRGRF TISRDNSKNTLYLQMTSLRAEDTAVYFCARESMGAINDNWGQGTLVIVSSASTKGPSVFPLAPCSRST SESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSWTVPSSNFGTQTYTCNVD 30 HKPSNTKVDKTVERKCCVECPPCPAPPVAGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVQF NWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTFRVVSVLTVVHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPAPIEKTISKTKGQP REPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPMLDSDGSFFL^SKLT VDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK (序列編號：60) >EV1018-N95Q-IgG2 35 -16- 201206955 QVELVESGGGiy[VQPGMPLRLSCVASGFTFSSYGMHWVRQAPGKGLEWVALTYHHGNRKFYADSVRGRF TISRDNSQNTLYLQMTSLRAEDTAVYFCARESMGAINDNWGQGTLVIVSSASTKGPSVFPLAPCSRST SESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSNFGTQTYTCNVD HKPSNTKVDKTVERKCCVECPPCPAPPVAGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCWVDVSHEDPEVQF 5 NWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTFRVVSVLTVVHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPAPIEKTISKTKGQP REPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSD工AVEWESNGQPENNYKTTPPMLDSDGSFFLYSKLT VDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK (序列編號：61) 10 >EVl018-N93Q-N95T-IgG2 qvelvesgggmvqpgmplrlscvasgftfssygmhwvrqapgkglewvaltyhhgnrkfyadsvrgrf
TISRDQSTNTLYLQMTSLRAEDTAVYE'CARESMGAINDNWGQGTLVIVSSASTKGPSVFPLAPCSRST SESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSNFGTQTYTCNVD HKPSNTKVDKTVERKCCVECPPCPAPPVAGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVQF 15 NWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTFRVVSVLTVVHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPAPIEKTISKTKGQP REPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPMLDSDGSFFLYSKLT VDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK (序列編號：62) 20 >EV1018-IgG4 QVQLVESGGGMVQPGMPLRLSCVASGFTFSSYGMHWVRQAPGKGLEWVALTYHHGNRKFYADSVRGRF TISRDNSNNTLYLQMTSLRAEDTAVYFCARESMGAINDNWGQGTLVIVSSASTKGPSVFPLAPCSRST SESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTKTYTCNVD HKPSNTKVDKRVESKYGPPCPSCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQ 25 FNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRWSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQ PREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRL TVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGK (序列編號：63) 30 >EV1018-野生型-IgG4
QVELVESGGGMVQPGMPLRLSCVASGFTFSSYGMHWVRQAPGKGLEWVALTYHHGNRKFYADSVRGRF TISRDNSNNTLYLQMTSLRAEDTAVYFCARESMGAINDNWGQGTLVIVSSASTKGPSVFPLAPCSRST SESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTKTYTCNVD HKPSNTKVDKRVESKYGPPCPSCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQ 35 FNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRWSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQ PREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYECTTPPVLDSDGSFFLYSRL TVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGK -17- 201206955 (序列編號：64) >EV1018-T97A-IgG4 QVELVESGGGMVQPGMPLRLSCVASGFTFSSYGMHWVRQAPGKGLEWVALTYHHGNRKFYADSVRGRF 5 TISRDNSNNALYLQMTSLRAEDTAVYFCARESMGAINDNWGQGTLVIVSSASTKGPSVFPLAPCSRST SESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTKTYTCNVD HKPSNTKVDKRVESKYGPPCPSCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVWDVSQEDPEVQ FNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQ PREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRL 10 TVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGK (序列編號：65)
>EV1018-T97V-IgG4 QVELVESGGGMVQPGMPLRLSCVASGFTFSSYGMHWVRQAPGKGLEWVALTYHHGNRKFYADSVRGRF 15 TISRDNSNNVLYLQMTSLRAEDTAVYFCARESMGAINDNWGQGTLVIVSSASTKGPSVFPLAPCSRST SESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTKTYTCNVD HKPSNTKVDKRVESKYGPPCPSCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVWDVSQEDPEVQ FNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRWSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQ PREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRL 20 TVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGK (序列編號：66> >EV1018-N95D-IgG4 QVELVESGGGMVQPGMPLRLSCVASGFTFSSYGMHWVRQAPGKGLEWVALTYHHGNRKFYADSVRGRF 25 TISRDNSDNTLYLQMTSLRAEDTAVYFCARESMGAINDNWGQGTLVIVSSASTKGPSVFPLAPCSRST SESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTKTYTCNVD HKPSNTKVDKRVESKYGPPCPSCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVWDVSQEDPEVQ FNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQ PREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRL 30 TVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGK (序列編號：67) >EV1018-N95E-IgG4
QVELVESGGGMVQPGMPLRLSCVASGFTFSSYGMHWVRQAPGKGLEWVALTYHHGNRKFYADSVRGRF 35 TISRDNSENTLYLQMTSLRAEDTAVYFCARESMGAINDNWGQGTLVIVSSASTKGPSVFPLAPCSRST SESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTKTYTCNVD HKPSNTKVDKRVESKYGPPCPSCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQ -18- 201206955
FNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQ
PREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRL
TVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGK (序列編號：68 > 5 >EV1018-N95K-IgG4
QVBLVESGGGMVQPGMPLRLSCVASGFTFSSYGMHWVRQAPGKGLEWVALTYHHGNRKFYADSVRGRF TISRDNSKNTLYLQMTSLRAEDTAVYFCARESMGAIMDNWGQGTLVIVSSASTKGPSVFPLAPCSRST SESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTKTYTCNVD 10 HKPSNTKVDKRVESKYGPPCPSCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVWDVSQEDPEVQ FNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQ PREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRL TVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGK (序列編號：69) 15 >EV1018-N95Q-IgG4
QVELVESGGGMVQPGMPLRLSCVASGFTFSSYGMHWVRQAPGKGLEWVALTYHHGNRKFYADSVRGRF TISRDNSQNTLYLQMTSLRAEDTAVYFCARESMGAINDNWGQGTLVIVSSASTKGPSVFPLAPCSRST SESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSWTVPSSSLGTKTYTCNVD 20 HKPSNTKVDKRVESKYGPPCPSCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVWDVSQEDPEVQ FNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRWSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQ PREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRL TVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGK (序列編號：70> 25 >EV1018-N93Q-N95T-IgG4 QVELVESGGGMVQPGMPLRLSCVASGFTFSSYGMHWVRQAPGKGLEWVALTYHHGNRKFYADSVRGRF TISRDQSTNTLYLQMTSLRAEDTAVYFCARESMGAINDNWGQGTLVIVSSASTKGPSVFPLAPCSRST SESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTKTYTCNVD 30 HKPSNTKVDKRVESKYGPPCPSCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVWDVSQEDPEVQ FNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQ PREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRL TVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGK (序列編號：71)
>EV1018-IgG4-SP 35 -19- 201206955 QVQLVESGGGMVQPGMPLRLSCVASGFTFSSYGMHWVRQAPGKGLEWVALTYHHGNRKFYADSVRGRF TISRDNSNNTLYLQMTSLRAEDTAVYFCARESMGAINDNWGQGTLVIVSSASTKGPSVFPLAPCSRST SESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTKTYTCNVD HKPSNTKVDKRVESKYGPPCPPCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVWDVSQEDPEVQ 5 FNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRWSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQ PREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRL TVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGK (序列編號:72>
10 >EV1018-野生型-IgG4-SP qvelvesgggmvqpgmplrlscvasgftfssygmhwvrqapgkglewvaltyhhgnrkfyadsvrgrf
TISRDNSNNTLYLQMTSLRAEDTAVYFCARESMGAINDNWGQGTLVIVSSASTKGPSVFPLAPCSRST SESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTKTYTCNVD HKPSNTKVDKRVESKYGPPCPPCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVWDVSQEDPEVQ 15 FNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQ PREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRL TVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGK (序列編號：73)
20 >EV1018-T97A-IgG4-SP QVELVESGGGMVQPGMPLRLSCVASGFTFSSYGMHWVRQAPGKGLEWVALTYHHGNRKFYADSVRGRF TISRDNSNNALYLQMTSLRAEDTAVYFCARESMGAINDNWGQGTLVIVSSASTKGPSVFPLAPCSRST SESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTKTYTCNVD HKPSNTKVDKRVESKYGPPCPPCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVWDVSQEDPEVQ 25 FNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRWSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQ PREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRL TVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGK (序列編號：74 )
30 >EV1018-T97V-IgG4-SP
QVELVESGGGMVQPGMPLRLSCVASGFTFSSYGMHWVRQAPGKGLEWVALTYHHGNRKFYADSVRGRF TISRDNSNNVLYLQMTSLRAEDTAVYFCARESMGAINDNWGQGTLVIVSSASTKGPSVFPLAPCSRST SESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTKTYTCNVD HKPSNTKVDKRVESKYGPPCPPCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVWDVSQEDPEVQ 35 FNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRWSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQ PREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRL TVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGK -20- 201206955
(序列編號：75) >EV1018-N95D-IgG4-SP QVELVESGGGMVQPGMPLRLSCVASGFTFSSYGMHWVRQAPGKGLEWVALTYHHGNRKFYADSVRGRF 5 TISRDNSDNTLYLQMTSLRAEDTAVYFCARESMGAINDNWGQGTLVIVSSASTKGPSVFPLAPCSRST SESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTKTYTCNVD HKPSNTKVDKRVESKYGPPCPPCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVWDVSQEDPEVQ FNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRWSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQ PREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRL 10 TVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGK (序列編號：*76)
>EV1018-N95E-IgG4-SP qvelvesgggmvqpgmplrlscvasgftfssygmhwvrqapgkglewvaltyhhgnrkfyadsvrgrf 15 TISRDNSENTLYLQMTSLRAEDTAVYFCARESMGAINDNWGQGTLVIVSSASTKGPSVFPLAPCSRST SESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTKTYTCNVD HKPSNTKVDKRVESKYGPPCPPCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVWDVSQEDPEVQ FNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRWSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQ PREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRL 20 TVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGK (序列編號：77 )
>EV1018-N95K-IgG4-SP QVELVESGGGMVQPGMPLRLSCVASGFTFSSYGMHWVRQAPGKGLEWVALTYHHGNRKFYADSVRGRF 25 TISRDNSKNTLYLQMTSLRAEDTAVYFCARESMGAINDNWGQGTLVIVSSASTKGPSVFPLAPCSRST SESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTKTYTCNVD HKPSNTKVDKRVESKYGPPCPPCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVWDVSQEDPEVQ FNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRWSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQ PREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRL 30 TVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGK (序列編號：78)
>EV1018-N95Q-IgG4-SP
QVELVESGGGMVQPGMPLRLSCVASGFTFSSYGMHWVRQAPGKGLEWVALTYHHGNRKFYADSVRGRF 35 TISRDNSQNTLYLQMTSLRAEDTAVYFCARESMGAINDNWGQGTLVIVSSASTKGPSVFPLAPCSRST SESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTKTYTCNVD HKPSNTKVDKRVESKYGPPCPPCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVWDVSQEDPEVQ -21 - 201206955
FNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRWSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGIiPSSIEKTISKAKGQ PREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRL TVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGK (序列編號：79) >EVl018-N93Q-N95T-IgG4-SP qvelvesgggmvqpgmplrlscvasgftfssygmhwvrqapgkglewvaltyhhgnrkfyadsvrgrf
TISRDQSTNTLYLQMTSLRAEDTAVYFCARESMGAINDNWGQGTLVIVSSASTKGPSVFPLAPCSRST
SESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTKTYTCNVD 10
HKPSNTKVDKRVESKYGPPCPPCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVWDVSQEDPEVQ
FNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQ
PREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRL
TVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGK (序列編號：80> 15 具有信號序列之EV1018重鏈 >EV1018
MEFGLIWVFLVTLLRGVQCQVQLVESGGGMVQPGMPLRLSCVASGFTFSSYGMHWVRQAPGKGLEWVA 20 25
LTYHHGNRKFYADSVRGRFTISRDNSNNTLYLQMTSLRAEDTAVYFCARESMGAINDNWGQGTLVIVS
SASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSS
VVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLM
ISRTPEVTCVWDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYK
CKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPE
NNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK (序列編號：81)
>EV1018-野生型-IgGlKO MGWSCIILFLVATATGVHSQVELVESGGGMVQPGMPLRLSCVASGFTFSSYGMHWVRQAPGKGLEWVA 30 LTYHHGNRKFYADSVRGRFTISRDNSNNTLYLQMTSLRAEDTAVYFCARESMGAINDNWGQGTLVIVS SASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSS WTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKRVEPKSCDKTHTCPPCPAPEAAGGPSVFLFPPKPKDTLM ISRTPEVTCVWDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYK CKVSNKALPAPIEKT工SKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPE 35 NNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK (序列編號：82) -22- 201206955
>EV1018-T97A-IgGlKO MGWSCIILFLVATATGVHSQVELVESGGGMVQPGMPLRLSCVASGFTFSSYGMHWVRQAPGKGLEWVA LTYHHGNRKFYADSVRGRFTISRDNSNNALYLQMTSLRAEDTAVYFCARESMGAINDNWGQGTLVIVS SASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSS 5 vvtvpssslgtqtyicnvnhkpsntkvdkrvepkscdkthtcppcpapeaaggpsvflfppkpkdtlm ISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYK CKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPE NNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK (序列編號：83) 10
>EV1018-T97V-IgGlKO
MGWSCIILFLVATATGVHSQVELVESGGGMVQPGMPLRLSCVASGFTFSSYGMHWVRQAPGKGLEWVA
LTYHHGNRKFYADSVRGRFTISRDNSNNVLYLQMTSLRAEDTAVYFCARESMGAINDNWGQGTLVIVS
SASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSS 15 vvtvpssslgtqtyicnvnhkpsntkvdkrvepkscdkthtcppcpapeaaggpsvflfppkpkdtlm ISRTPEVTCVWDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYK CKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPE NNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK (序列編號：84> 20
>EV1018-N95D-IgGIKO
MGWSCIILFLVATATGVHSQVELVESGGGMVQPGMPLRLSCVASGFTFSSYGMHWVRQAPGKGLEWVA LTYHHGNRKFYADSVRGRFTISRDNSDNTLYLQMTSLRAEDTAVYFCARESMGAINDNWGQGTLVIVS SASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSS 25 VVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKRVEPKSCDKTHTCPPCPAPEAAGGPSVFLFPPKPKDTLM ISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYK CKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPE NNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK (序列編號：85) 30
>EV1018-N95E IgGIKO
MGWSCIILFLVATATGVHSQVELVESGGGMVQPGMPLRLSCVASGFTFSSYGMHWVRQAPGKGLEWVA LTYHHGNRKFYADSVRGRFTISRDNSENTLYLQMTSLRAEDTAVYFCARESMGAINDNWGQGTLVIVS SASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSS 35 VVTVPSSSLGTQTYICNVMHKPSMTKVDKRVEPKSCDKTHTCPPCPAPEAAGGPSVFLFPPKPKDTLM ISRTPEVTCVWDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYK -23- 201206955 CKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPE NNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK (序列編號：86>
5 >EV1018-N95K IgGIKO
MGWSCIILFLVATATGVHSQVELVESGGGMVQPGMPLRLSCVASGFTFSSYGMHWVRQAPGKGLEWVA LTYHHGNRKFYADSVRGRFTISRDNSKNTLYLQMTSLRAEDTAVYFCARESMGAINDNWGQGTLVIVS SASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSS VVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKRVEPKSCDKTHTCPPCPAPEAAGGPSVFLFPPKPKDTLM 10 ISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYK CKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPE NNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK (序列編號：87)
15 >EV1018-N95Q IgGIKO MGWSCIILFLVATATGVHSQVELVESGGGMVQPGMPLRLSCVASGFTFSSYGMHWVRQAPGKGLEWVA LTYHHGNRKFYADSVRGRFTISRDNSQNTLYLQMTSLRAEDTAVYFCARESMGAIND厕GQGTLVIVS SASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSS VVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKRVEPKSCDKTHTCPPCPAPEAAGGPSVFLFPPKPKDTLM 20 ISRTPEVTCVWDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYK CKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPE NNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK (序列編號：88)
25 >EV1018-N93Q-N95T IgGIKO MGWSCIILFLVATATGVHSQVELVESGGGMVQPGMPLRLSCVASGFTFSSYGMHWVRQAPGKGLEWVA LTYHHGNRKFYADSVRGRFTISRDQSTNTLYLQMTSLRAEDTAVYFCARESMGAINDNWGQGTLVIVS SASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSS VVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKRVEPKSCDKTHTCPPCPAPEAAGGPSVFLFPPKPKDTLM 30 ISRTPEVTCVWDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYK CKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPE NNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK (序列編號：89) 35 >EV1018-wt IgGl-B工
MGWSCIILFLVATATGVHSQVELVESGGGMVQPGMPLRLSCVASGFTFSSYGMHWVRQAPGKGLEWVA
LTYHHGNRKFYADSVRGRFTISRDNSNNTLYLQMTSLRAEDTAVYFCARESMGAINDNWGQGTLVIVS -24- 201206955 SASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSS VVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKRVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLM 工SRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYK CKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPE 5 NNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK (序列編號：90)
>EV1018-T97A IgGl-BI
MGWSCIILFLVATATGVHSQVELVESGGGMVQPGMPLRLSCVASGFTFSSYGMHWVRQAPGKGLEWVA 10 LTYHHGNRKF'YADSVRGRFTISRDNSNNALYLQMTSLRAEDTAVYFCARESMGAINDNWGQGTLVIVS SASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSS VVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKRVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLM 工SRTPEVTCVWDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYK CKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPE 15 NNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK (序列編號：91)
>EV1018-T97V IgGl-BI 20 25 MGWSCIILFLVATATGVHSQVELVESGGGMVQPGMPLRLSCVASGFTFSSY6MHWVRQAPGKGLEWVA LTYHHGNRKFYADSVRGRFTISRDNSNNVLYLQMTSLRAEDTAVYFCARESMGAINDNWGQGTLVIVS SASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSS VVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKRVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLM 工SRTPEVTCVWDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYK CKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPE NNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK (序列編號：92)
>EV1018-N95D IgGl-BI MGWSCIILFLVATATGVHSQVELVESGGGMVQPGMPLRLSCVASGFTFSSY6MHWVRQAPGKGLEWVA 30 LTYHHGNRKFYADSVRGRFTISRDNSDNTLYLQMTSLRAEDTAVYFCARESMGAINDNWGQGTLVIVS SASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSS VVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKRVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLM ISRTPEVTCVWDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYK CKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPE 35 NNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK (序列編號：93) -25- 201206955
>EV1018-N95E IgGl-BI
MGWSCIILFLVATATGVHSQVELVESGGGMVQPGMPLRLSCVASGFTFSSYGMHWVRQAPGKGLEWVA LTYHHGNRKFYADSVRGRFTISRDNSENTLYLQMTSLRAEDTAVYFCARESMGAINDNWGQGTLVIVS SASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSS 5 VVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKRVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLM ISRTPEVTCVWDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYK CKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPE NNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK
(序列編號：9W 10 ,
>EV1018-N95K IgGl-BI
MGWSCIILFLVATATGVHSQVELVESGGGMVQPGMPLRLSCVASGFTFSSYGMHWVRQAPGKGLEWVA LTYHHGNRKFYADSVRGRFTISRDNSKNTLYLQMTSLRAEDTAVYFCARESMGAINDNWGQGTLVIVS SASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSS 15 VVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKRVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLM 工SRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYK CKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPE NNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK (序列編號：95) 20
>EV1018-N95Q IgGl-BI
MGWSCIILFLVATATGVHSQVELVESGGGMVQPGMPLRLSCVASGFTFSSYGMHWVRQAPGKGLEWVA LTYHHGNRKFYADSVRGRFTISRDNSQNTLYLQMTSLRAEDTAVYFCARESMGAINDNWGQGTLVIVS SASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSS 25 VVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKRVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLM ISRTPEVTCVWDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYK CKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKMQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPE NNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK (序列編號：96) 30
>EV1018-N93Q-N95T IgGl-BI
MGWSCIILFLVATATGVHSQVELVESGGGMVQPGMPLRLSCVASGFTFSSYGMHWVRQAPGKGLEWVA LTYHHGNRKFYADSVRGRFTISRDQSTNTLYLQMTSLRAEDTAVYFCARESMGAINDNWGQGTLVIVS SASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSS 35 WTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKRVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLM ISRTPEVTCVWDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYK -26- 201206955 CKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPE NNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK (序列編號：97) 5 >EV1018-T97A IgGl-原型-恆定
MGWSCIILFLVATATGVHSQVQLVESGGGMVQPGMPLRLSCVASGFTFSSYGMHWVRQAPGKGLEWVA LTYHHGNRKFYADSVRGRFTISRDNSNNALYLQMTSLRAEDTAVYFCARESMGAINDNWGQGTLVIVS SASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSS VVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLM 10 ISRTPEVTCVWDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYK CKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLT.CLVKGFYPSDIAVEWESNGQPE NNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK (序列編號：98) 15 >EV1018-T97V IgGl-原型-恆定 MGWSCIILFLVATATGVHSQVQLVESGGGMVQPGMPLRLSCVASGFTFSSYGMHWVRQAPGKGLEWVA LTYHHGNRKFYADSVRGRFTISRDNSNNVLYLQMTSLRAEDTAVYFCARESMGAIMDNWGQGTLVIVS SASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSS VVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLM 20 ISRTPEVTCVWDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYK CKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPE NNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK (序列編號：99) 25 >EV1018-M95D IgGl-原型-恆定 MGWSCIILFLVATATGVHSQVQLVESGGGMVQPGMPLRLSCVAS6FTFSSYGMHWVRQAPGKGLEWVA LTYHHGtmKFYADSVRGRFTISRDNSDMTLYLQMTSLRAEDTAVYFCARESMGAINDNWGQGTLVIVS SASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSS VVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLM 30 ISRTPEVTCVWDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYK CKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESMGQPE NNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK (序列編號：100) 35 >EV1018-N95E IgGl-原型-恆定
MGWSCIILFLVATATGVHSQVQLVESGG6MVQPGMPLRLSCVASGFTFSSYGMHWVRQAPGKGLEWVA
LTYHHGNRKFYADSVRGRFTISRDNSENTLYLQMTSLRAEDTAVYFCARESMGAINDNWGQGTLVIVS -27- 201206955 SASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSS VVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLM ISRTPEVTCVWDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYK CKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPE 5 NNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK (序列編號：101) >EV1018-N95K IgGl-原型-恆定
MGWSCIILFLVATATGVHSQVQLVESGGGMVQPGMPLRLSCVASGFTFSSYGMHWVRQAPGKGLEWVA 10 LTYHHGNRKFYADSVRGRFTISRDNSKNTLYLQMTSLRAEDTAVYFCARESMGAINDNWGQGTLVIVS SASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSS VVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLM ISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYK CKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPE 15 NNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK (序列編號：102) >EV1018-N95Q IgGl-原型-恆定 MGWSCIILFLVATATGVHSQVQLVESGGGMVQPGMPLRLSCVASGFTFSSYGMHWVRQAPGKGLEWVA 20 LTYHHGNRKFYADSVRGRFTISRDNSQNTLYLQMTSLRAEDTAVYFCARESMGAINDNWGQGTLVIVS SASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSS VVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLM ISRTPEVTCVWDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYK CKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPE 25 NNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK (序列編號：103) >EV1018-N93Q-N95T IgGl-原型-恆定
MGWSCIILFLVATATGVHSQVQLVESGGGMVQPGMPLRLSCVASGFTFSSYGMHWVRQAPGKGLEWVA 30 LTYHHGNRKFYADSVRGRFTISRDQSTNTLYLQMTSLRAEDTAVYFCARESMGAINDNWGQGTLVIVS SASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSS VVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLM ISRTPEVTCVWDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYK CKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPE 35 NNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK (序列編號：104) -28-201206955 具有信號序列之EV1018輕鏈 >EV1018-野生型-原型 MAWTPLLLQLLTLCSGSWAQSALTQETSVSGTVGQKVTLSCIGNNNNIGSHAVGWYQQISRGAPKMVL 5 FGRSPPSGVPDRFSGSKSGTTASLIISGLQPEDEADYYCSTWDSSLSAWFGGGTKLTVLRQPKAAPS VTLFPPSSEELQANKATLVCLISDFYPGAVTVAWKADSSPVKAGVETTTPSKQSNNKYAASSYLSLTP EQWKSHRSYSCQVTHEGSTVEKTVAPTECS (序列編號：105 >
10 >EV1018-野生型-BI MGWSCIILFLVATATGVHSQSALTQETSVSGTVGQKVTLSCIGNNNNIGSHAVGWYQQISRGAPKMVL FGRSPPSGVPDRFSGSKSGTTASLIISGLQPEDEADYYCSTWDSSLSAVVFGGGTKLTVLGQPKAAPS VTLFPPSSEELQANKATLVCLISDFYPGAVTVAWKGDSSPVKAGVETTTPSKQSNNKYAASSYLSLTP EQWKSHRSYSCQVTHEGSTVEKTVAPTECS 15 (序列編號：106) >EV1018-野生型-BI2 (Gl> MGWSCIILFLVATATGVHSQSALTQETSVSGTVGQKVTLSCIGNNNNIGSHAVGWYQQISRGAPKMVL FGRSPPSGVPDRFSGSKSGTTASLIISGLQPEDEADYYCSTWDSSLSAWFGGGTKLTVLGQPKAAPS 20 VTLFPPSSEELQANKATLVCLISDFYPGAVTVAWKADSSPVKAGVETTTPSKQSNNKYAASSYLSLTP EQWKSHRSYSCQVTHEGSTVEKTVAPTECS (序列編號：l〇7) >EV1018-野生型-原型-恆定
25
MGWSCIILFLVATATGVHSQSALTQETSVSGTVGQKVTLSCIGNNNNIGSHAVGWYQQISRGAPKMVL
FGRSPPSGVPDRFSGSKSGTTASLIISGLQPEDEADYYCSTWDSSLSAVVFGGGTKLTVLRQPKAAPS
VTLFPPSSEELQANKATLVCLISDFYPGAVTVAWKADSSPVKAGVETTTPSKQSNNKYAASSYLSLTP
EQWKSHRSYSCQVTHEGSTVEKTVAPTECS (序列編號：108 > 30 具有信號序列之EV1018重鏈
>EV1018-野生型-IgGl-KO-QVQL
MGWSCIILFLVATATGVHSQVQLVESGGGMVQPGMPLRLSCVASGFTFSSYGMHWVRQAPGKGLEWVA 35 LTYHHGNRKFYADSVRGRFTISRDNSNNTLYLQMTSLRAEDTAVYFCARESMGAINDNWGQGTLVIVS SASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSS VVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKRVEPKSCDKTHTCPPCPAPEAAGGPSVFLFPPKPKDTLM -29- 201206955
ISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYK
CKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPE
NNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK (序列編號：109) 5
>EVl018-T97A-IgGl-K〇-QVQL
MGWSCIILFLVATATGVHSQVQLVESGGGMVQPGMPLRLSCVASGFTFSSYGMHWVRQAPGKGLEWVA LTYHHGNRKFYADSVRGRFTISRDNSNNALYLQMTSLRAEDTAVYFCARESMGAINDNWGQGTLVIVS SASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSS 10 VVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKRVEPKSCDKTHTCPPCPAPEAAGGPSVFLFPPKPKDTLM ISRTPEVTCVWDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYK CKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPE NNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK (序列編號：ll〇> 15
>EVl018-T97V-IgGl-KO-QVQL
MGWSCIILFLVATATGVHSQVQLVESGGGMVQPGMPLRLSCVASGFTFSSYGMHWVRQAPGKGLEWVA
LTYHHGNRKFYADSVRGRFTISRDNSNNVLYLQMTSLRAEDTAVYFCARESMGAINDNWGQGTLVIVS
SASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSS 20 vvtvpssslgtqtyicnvnhkpsntkvdkrvepkscdkthtcppcpapeaaggpsvflfppkpkdtlm ISRTPEVTCVWDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRWSVLTVLHQDWLNGKEYK CKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPE NNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK (序列編號：111) 25
>EVl018-N95D-IgGl-KO-QVQL MGWSCIILFLVATATGVHSQVQLVESGGGMVQPGMPLRLSCVASGFTFSSYGMHWVRQAPGKGLEWVA LTYHHGNRKFYADSVRGRFTISRDNSDNTLYLQMTSLRAEDTAVYFCARESMGAINDNWGQGTLVIVS SASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSS 30 VVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKRVEPKSCDKTHTCPPCPAPEAAGGPSVFLFPPKPKDTLM ISRTPEVTCVWDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYK CKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPE NNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK (序列編號：112 >
>EV1018-N95E IgGl-KO-QVQL 35 -30- 201206955 MGWSCIILFLVATATGVHSQVQLVESGGGMVQPGMPLRLSCVASGFTFSSYGMHWVRQAPGKGLEWVA LTYHHGNRKFYADSVRGRFTISRDNSENTLYLQMTSLRAEDTAVYE'CARESMGAINDNWGQGTLVIVS SASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSS VVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKRVEPKSCDKTHTCPPCPAPEAAGGPSVFLFPPKPKDTLM 5 ISRTPEVTCVWDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYK CKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPE NNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK (序列編號：113}
10 >EV1018-N95K IgGl-KO-QVQL
MGWSCIILFLVATATGVHSQVQLVESGGGMVQPGMPLRLSCVASGFTFSSYGMHWVRQAPGKGLEWVA LTYHHGNRKFYADSVRGRFTISRDNSKNTLYLQMTSLRAEDTAVYFCARESMGAINDNWGQGTLVIVS SASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSS VVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKRVEPKSCDKTHTCPPCPAPEAAGGPSVFLFPPKPKDTLM 15 ISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNVJYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYK CKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPE NNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK (序列編號：114)
20 >EV1018-N95Q IgGl-KO-QVQL Μ6ν^<：ΙΙΙίΓΙινΑΤΑΤ〇νΗ3〇νζ^νΕ5660Μν〇ΡΟΜΡΙ^Ι^(：νΑ36Ε1ΤΗ133ΥΟΜΗνΐνΐΙ〇ΑΡαΚΟΙίΕΝνΑ
LTYHHGNRKFYADSVRGRFTISRDNSQNTLYLQMTSLRAEDTAVYFCARESMGAINDNWGQGTLVIVS
SASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSS wtvpssslgtqtyicnvnhkpsntkvdkrvepkscdkthtcppcpapeaaggpsvflfppkpkdtlm 25 ISRTPEVTCVWDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYK CKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPE NNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK (序列編號：115)
30 >EV1018-N93Q-N95T IgGl-KO-QVQL
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(序列編號：116) >EV1018-wt IgGl-QVQL-BI MGWSCIILFLVATATGVHSQVQLVESGGGMVQPGMPLRLSCVASGFTFSSYGMHWVRQAPGKGLEWVA 5 ltyhhgnrkfyadsvrgrftisrdnsnntlylqmtslraedtavyfcaresmgaindnwgqgtlvivs SASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSS vvtvpssslgtqtyicnvnhkpsntkvdkrvepkscdkthtcppcpapellggpsvflfppkpkdtlm ISRTPEVTCVWDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYK CKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPE 10 NNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK (序列編號：11*7)
>EV1018-T97A IgGl-QVQL-BI MGWSCIILFLVATATGVHSQVQLVESGGGMVQPGMPLRLSCVASGFTFSSYGMHWVRQAPGKGLEWVA 15 LTYHHGNRKFYADSVRGRFTISRDNSNNALYLQMTSLRAEDTAVYFCARESMGAINDNWGQGTLVIVS SASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSS VVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKRVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLM ISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYK CKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPE 20 NNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK (序列編號：118)
>EV1018-T97V IgGl-QVQL-BI MGWSCIILFLVATATGVHSQVQLVESGGGMVQPGMPLRLSCVASGFTFSSYGMHWVRQAPGKGIiEWVA 25 LTYHHGNRKFYADSVRGRFTISRDNSNNVLYLQMTSLRAEDTAVYFCARESMGAINDNWGQGTLVIVS SASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSS VVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKRVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLM ISRTPEVTCVWDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRWSVLTVLHQDWLNGKEYK CKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPE 30 NNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK (序列編號：119)
>EV1018-N95D IgGl-QVQL_BI
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>EV1018-N95E IgGl-QVQL-BI
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>EV1018-N95K IgGl-QVQL-BI MGWSCIILFLVATATGVHSQVQLVESGGGMVQPGMPLRLSCVASGFTFSSYGMHWVRQAPGKGLEWVA LTYHHGNRKFYADSVRGRFTISRDNSKNTLYLQMTSLRAEDTAVYFCARESMGAINDNWGQGTLVIVS SASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSS 20 VVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKRVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLM ISRTPEVTCVWDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYK CKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPE NNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK (序列編號：122) 25
>EV1018-N95Q IgGl-QVQL-BI
MGWSCIILFLVATATGVHSQVQLVESGGGMVQPGMPLRLSCVASGFTFSSYGMHWVRQAPGKGLEWVA
LTYHHGNRKFYADSVRGRFTISRDNSQNTLYLQMTSLRAEDTAVYFCARESMGAINDNWGQGTLVIVS
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>EV1018_N93Q-N95T IgGl-QVQL-BI 35 -33- 201206955
MGWSCIILFLVATATGVHSQVQLVESGGGMVQPGMPLRLSCVASGFTFSSYGMHWVRQAPGKGLEWVA ltyhhgnrkfyadsvrgrftisrdqstntlylqmtslraedtavyfcaresmgaindnwgqgtlvivs SASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSS VVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKRVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLM 5 ISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYK CKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPE NNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK (序列編號：124) 10 >EV1018-IgG2
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>EV1018-N95D-IgG2 MGWSCIILFLVATATGVHSQVELVESGGGMVQPGMPLRLSCVASGFTFSSYGMHWVRQAPGKGLEWVA 15 LTYHHGNRKFYADSVRGRFTISRDNSDNTLYLQMTSLRAEDTAVYFCARESMGAINDNWGQGTLVIVS SASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSS VVTVPSSNFGTQTYTCNVDHKPSNTKVDKTVERKCCVECPPCPAPPVAGPSVFLFPPKPKDTLMISRT PEVTCVWDVSHEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTFRVVSVLTVVHQDWLNGKEYKCKVS NKGLPAPIEKTISKTKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYK 20 TTPPMLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK (序列編號：129) >EVl018-N95E-IgG2 MGWSC 工工 LFLVATATGVHSQVELVESGGGMVQPGMPLRLSCVASGFTFSSYGMHWVRQAPGKGLEWVA 25 LTYHHGNRKF'YADSVRGRFTISRDNSENTLYLQMTSLRAEDTAVYFCARESMGAINDNWGQGTLVIVS SASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSS VVTVPSSNFGTQTYTCNVDHKPSNTKVDKTVERKCCVECPPCPAPPVAGPSVFLFPPKPKDTLMISRT PEVTCVWDVSHEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTFRWSVLTWHQDWLNGKEYKCKVS NKGLPAPIEKTISKTKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYK 30 TTPPMLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK (序列編號：130) >EV1018-N95K-IgG2
MGWSCIILFLVATATGVHSQVELVESGGGMVQPGMPLRLSCVASGFTFSSYGMHWVRQAPGKGLEWVA 35 LTYHHGNRKFYADSVRGRFTISRDNSKNTLYLQMTSLRAEDTAVYE'CARESMGAINDNWGQGTLVIVS SASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSS VVTVPSSNFGTQTYTCNVDHKPSNTKVDKTVERKCCVECPPCPAPPVAGPSVFLFPPKPKDTLMISRT -35- 201206955 PEVTCVVVDVSHEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTFRVVSVLTVVHQDWLNGKEYKCKVS NKGLPAPIEKTISKTKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYK TTPPMLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK (序列編號：131) 5 >EV1018-N95Q-IgG2
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MGWSCIILFLVATATGVHSQVELVESGGGMVQPGMPLRLSCVASGFTFSSYGMHWVRQAPGKGLEWVA LTYHHGNRKFYADSVRGRFTISRDQSTNTLYLQMTSLRAEDTAVYFCARESMGAINDNWGQGTLVIVS SASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSS 20 VVTVPSSNFGTQTYTCNVDHKPSNTKVDKTVERKCCVECPPCPAPPVAGPSVFLFPPKPKDTLMISRT PEVTCVWDVSHEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTFRVVSVLTVVHQDWLNGKEYKCKVS NKGLPAPIEKTISKTKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYK TTPPMLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK (序列編號：133) 25 >EV1018-IgG4 MEFGLIWVFIjVTLLRGVQCQVQLVESGGGMVQPGMPLRLSCVASGFTFSSYGMHWVRQAPGKGLEWVA LTYHHGNRKFYADSVRGRFTISRDNSNNTLYLQMTSLRAEDTAVYFCARESMGAINDNWGQGTLVIVS SASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSS 30 VVTVPSSSLGTKTYTCNVDHKPSNTKVDKRVESKYGPPCPSCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISR TPEVTCWVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKV SNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNY KTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGK (序列編號：134 > >E VI018 -野生型-1 gG4 35 -36- 201206955 MGWSCIILFLVATATGVHSQVELVESGGGMVQPGMPLRLSCVASGFTFSSYGMHWVRQAPGKGLEWVA LTYHHGNRKFYADSVRGRFTISRDNSNNTLYLQMTSLRAEDTAVYFCARESMGAINDNWGQGTLVIVS SASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSS VVTVPSSSLGTKTYTCNVDHKPSNTKVDKRVESKYGPPCPSCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISR 5 TPEVTCWVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRWSVLTVLHQDWLNGKEYKCKV SNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNY KTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGK (序列編號：135) 10 >EV1018-T97A-IgG4
MGWSCIILFLVATATGVHSQVELVESGGGMVQPGMPLRLSCVASGFTFSSYGMHWVRQAPGKGLEWVA LTYHHGNRKFYADSVRGRFTISRDNSNNALYLQMTSLRAEDTAVYFCARESMGAINDNWGQGTLVIVS SASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSS VVTVPSSSLGTKTYTCNVDHKPSNTKVDKRVESKYGPPCPSCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISR 15 TPEVTCWVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRWSVLTVLHQDWLNGKEYKCKV SNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNY KTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGK (序列編號：136> 20 >EV1018-T97V-IgG4 MGWSCIILFLVATATGVHSQVELVESGGGMVQPGMPLRLSCVASGFTFSSYGMHWVRQAPGKGLEWVA LTYHHGNRKFYADSVRGRFTISRDNSNNVLYLQMTSLRAEDTAVYFCARESMGAINDNWGQGTLVIVS SASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSS VVTVPSSSLGTKTYTCNVDHKPSNTKVDKRVESKYGPPCPSCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISR 25 TPEVTCWVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKV SNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNY KTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGK (序列編號：137) 30 >EV1018-N95D-IgG4
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>EV1018-N95K-IgG4 MGWSCIILFLVATATGVHSQVELVESGGGMVQPGMPLRLSCVASGFTFSSYGMHWVRQAPGKGLEWVA 15 LTYHHGNRKFYADSVRGRFTISRDNSKNTLYLQMTSLRAEDTAVYFCARESMGAINDNWGQGTLVIVS SASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSS VVTVPSSSLGTKTYTCNVDHKPSNTKVDKRVESKYGPPCPSCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISR TPEVTCWVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRWSVLTVLHQDWLNGKEYKCKV SNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNY 20 KTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGK (序列編號：140} >EV1018-N95Q-IgG4 MGWSCIILFLVATATGVHSQVELVESGGGMVQPGMPLRLSCVASGFTFSSYGMHWVRQAPGKGLEWVA 25 LTYHHGNRKFYADSVRGRFTISRDNSQNTLYLQMTSLRAEDTAVYFCARESMGAINDNWGQGTLVIVS SASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSS VVTVPSSSLGTKTYTCNVDHKPSNTKVDKRVESKYGPPCPSCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISR TPEVTCWVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKV SNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNY 30 KTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGK (序列編號：141) >EV1018-N93Q-N95T-IgG4
MGWSC工工LFLVATATGVHSQVELVESGGGMVQPGMPLRLSCVASGFTFSSYGMHWVRQAPGKGLEWVA 35 LTYHHGNRKFYADSVRGRFTISRDQSTNTXiYLQMTSLRAEDTAVYFCARESMGAINDNWGQGTLVIVS SASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSS VVTVPSSSLGTKTYTCNVDHKPSNTKVDKRVESKYGPPCPSCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISR -38- 201206955 TPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKV SNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNY KTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGK (序列編號：142) 5
>EV1018-IgG4-SP
MEFGLIWVFLVTLLRGVQCQVQLVESGGGMVQPGMPLRLSCVASGFTFSSYGMHWVRQAPGKGLEWVA LTYHHGNRKFYADSVRGRFTISRDNSNNTLYLQMTSLRAEDTAVYFCARESMGAINDNWGQGTLVIVS SASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSS 10 VVTVPSSSLGTKTYTCNVDHKPSNTKVDKRVESKYGPPCPPCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISR TPEVTCWVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRWSVLTVLHQDWLNGKEYKCKV SNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNY KTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGK (序列編號：143) 15
>EV1018-野生型-IgG4-SP MGWSCIILFLVATATGVHSQVELVESGGGMVQPGMPLRLSCVASGFTFSSYGMHWVRQAPGKGLEWVA LTYHHGNRKFYADSVRGRFTISRDNSNNTLYLQMTSLRAEDTAVYFCARESMGAINDNWGQGTLVIVS SASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSS 20 WTVPSSSLGTKTYTCNVDHKPSNTKVDKRVESKYGPPCPPCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISR TPEVTCWVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRWSVLTVLHQDWLNGKEYKCKV SNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNY KTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGK (序列編號：144) 25
>EV1018-T97A-IgG4-SP MGWSC工工LFLVATATGVHSQVELVESGGGMVQPGMPLRLSCVASGFTFSSYGMHWVRQAPGKGLEWVA LTYHHGNRKFYADSVRGRFTISRDNSNNALYLQMTSLRAEDTAVYFCARESMGAINDNWGQGTLVIVS SASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSS 30 VVTVPSSSLGTKTYTCNVDHKPSNTKVDKRVESKYGPPCPPCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISR TPEVTCWVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKV SNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNY KTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGK (序列編號：145)
>EV1018-T97V-IgG4-SP 35 -39- 201206955 MGWSC 工工 lflvatatgvhsqvelvesgggmvqpgmplrlscvasgftfssygmhwvrqapgkglewva LTYHHGNRKFYADSVRGRFTISRDNSNNVLYLQMTSLRAEDTAVYFCARESMGAINDNWGQGTLVIVS SASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSS VVTVPSSSLGTKTYTCNVDHKPSNTKVDKRVESKYGPPCPPCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISR 5 TPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKV SNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNY KTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGK (序列編號：146)
10 >EV1018-N95D-IgG4-SP
MGWSCIILFLVATATGVHSQVELVESGGGMVQPGMPLRLSCVASGFTFSSYGMHWVRQAPGKGLEWVA LTYHHGNRKFYADSVRGRFTISRDNSDNTLYLQMTSLRAEDTAVYFCARESMGAINDNWGQGTLVIVS SASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSS WTVPSSSLGTKTYTCNVDHKPSNTKVDKRVESKYGPPCPPCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISR 15 TPEVTCWVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRWSVLTVLHQDWLNGKEYKCKV SNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENMY KTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGK (序列編號：147)
20 >EV1018-N95E-IgG4-SP MGWSCIILFLVATATGVHSQVELVESGGGMVQPGMPLRLSCVASGFTFSSYGMHWVRQAPGKGLEWVA LTYHHGNRKFYADSVRGRFTISRDNSENTLYLQMTSLRAEDTAVYFCARESMGAINDNWGQGTLVIVS SASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSS VVTVPSSSLGTKTYTCNVDHKPSNTKVDKRVESKYGPPCPPCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISR 25 TPEVTCVWDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKV SNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNY KTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGK (序列編號：148)
30 >EV1018-N95K-IgG4-SP
MGWSCIILrLVATATGVHSQVELVESGGGMVQPGMPLRLSCVASGFTFSSYGMHWVRQAPGKGLEWVA LTYHHGNRKFYADSVRGRFTISRDNSKNTLYLQMTSLRAEDTAVYFCARESMGAINDNWGQGTLVIVS SASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSS VVTVPSSSLGTKTYTCNVDHKPSNTKVDKRVESKYGPPCPPCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISR 35 TPEVTCWVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKV SNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNY KTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGK -40- 201206955
(序列編號：149) >EV1018-N95Q-IgG4-SP MGWSCIILFLVATATGVHSQVELVESGGGMVQPGMPLRLSCVASGFTFSSYGMHWVRQAPGKGLEWVA 5 LTYHHGNRKFYADSVRGRFTISRDNSQNTLYLQMTSLRAEDTAVYFCARESMGAINDNWGQGTLVIVS SASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSS VVTVPSSSLGTKTYTCNVDHKPSNTKVDKRVESKYGPPCPPCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISR TPEVTCWVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKV SNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNY 10 KTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSGSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGK (序列編號：150)
>EV1018-N93Q-N95T-IgG4-SP MGWSCIILFLVATATGVHSQVELVESGGGMVQPGMPLRLSCVASGFTFSSYGMHWVRQAPGKGLEWVA 15 LTYHHGNRKFYADSVRGRFTISRDQSTNTLYLQMTSLRAEDTAVYFCARESMGAINDNWGQGTLVIVS SASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSS VVTVPSSSLGTKTYTCNVDHKPSNTKVDKRVESKYGPPCPPCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISR TPEVTCWVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKV SNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNY 20 KTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGK (序列編號：151) 不具有信號序列之EV1019重鏈
25-. >EV1019-VH-wt
QAQLVESGGGWKPGGSLRLSCISSKFTFSSHAMHWVRQAPGKGLEWVAVIWHDGSKKYYADSVKGRF
SVSRDNSKNTLFLQMDSLRAEDTAVYFCGKEWVGGTCDSWGQGTLVIVSS (序列編號：152)
30 >EV1019-VH-C105G
QAQLVESGGGWKPGGSLRLSCISSKFTFSSHAMHWVRQAPGKGLEWVAVIWHDGSKKYYADSVKGRF
SVSRDNSKNTLFLQMDSLRAEDTAVYFCGKEWVGGTGDSWGQGTLVIVSS (序列編號：153)
35 >EV1019-VH-C105S
QAQLVESGGGVVKPGGSLRLSCISSKFTFSSHAMHWVRQAPGKGLEWVAVIWHDGSKKYYADSVKGRF
SVSRDNSKNTLFLQMDSLRAEDTAVYFCGKEWVGGTSDSWGQGTLVIVSS -41 - 201206955 (序列編號：154)
>EV1019-VH-C105A QAQLVESGGGWKPGGSLRLSCISSKFTFSSHAMHWVRQAPGKGLEWVAVIWHDGSKKYYADSVKGRF 5 SVSRDNSKNTLFLQMDSLRAEDTAVYFCGKEWVGGTADSWGQGTLVIVSS (序列編號：155)
>EV1019-VH-C105T
QAQLVESGGGWKPGGSLRLSCISSKFTFSSHAMHWVRQAPGKGLEWVAVIWHDGSKKYYADSVKGRF 10 SVSRDNSKNTLFLQMDSLRAEDTAVYFCGKEWVGGTTDSWGQGTLVIVSS (序列編號：156)
QAQLVESGGGWKPGGSLRLSCISSKFTFSSHAMHWVRQAPGKGLEWVAVIWHDGSKKYYADSVKGRF 15 SVSRDNSKNTLFLQMDSLRAEDTAVYFCGKEWVGGTMDSWGQGTLVIVSS (序列編號：157)
>EV1019-VH-C105Q QAQLVESGGGVVKPGGSLRLSCISSKFTFSSHAMHWVRQAPGKGLEWVAVIWHDGSKKYYADSVKGRF 20 SVSRDNSKNTLFLQMDSLRAEDTAVYFCGKEWVGGTQDSWGQGTLVIVSS (序列編號：158)
>EV1019-VH-C105L
QAQLVESGGGWKPGGSLRLSCISSKFTFSSHAMHWVRQAPGKGLEWVAVIWHDGSKKYYADSVKGRF 25 SVSRDNSKNTLFLQMDSLRAEDTAVYFCGKEWVGGTLDSWGQGTLVIVSS (序列編號：159) >EV1019 QAQLVESGGGWKPGGSLRLSCISSKFTFSSHAMHWVRQAPGKGLEWVAVIWHDGSKKYYADSVKGRF 30 SVSRDNSKNTLFLQMDSLRAEDTAVYFCGKEWVGGTCDSWGQGTLVIVSSASTKGPSVFPLAPSSKST SGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVN HKPSNTKVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVWDVSHEDP EVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKA KGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLY 35 SKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK (序列編號：1G0) -42- 201206955 >EV1019-野生型-IgGl-B 工 QAQLVESGGGVVKPGGSLRLSCISSKFTFSSHAMHWVRQAPGKGLEWVAVIWHDGSKKYYADSVKGRF SVSRDNSKNTLFLQMDSLRAEDTAVYFCGKEWVGGTCDSWGQGTLVIVSSASTKGPSVFPLAPSSKST SGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVN 5 HKPSNTKVDKRVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVWDVSHEDP EVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSMKALPAPIEKTISKA KGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLY SKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK (序列編號：161) 10
>EV1019-野生型-IgGlKO
QAQLVESGGGWKPGGSLRLSCISSKFTFSSHAMHWVRQAPGKGLEWVAVIWHDGSKKYYADSVKGRF
SVSRDNSKNTLFLQMDSLRAEDTAVYFCGKEWVGGTCDSWGQGTLVIVSSASTKGPSVFPLAPSSKST
SGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVN 15 hkpsntkvdkrvepkscdkthtcppcpapeaaggpsvflfppkpkdtlmisrtpevtcvwdvshedp EVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAP工EKTISKA KGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLY SKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK (序列編號：162) 20
>EV1019-C105G QAQLVESGGGVVKPGGSLRLSCISSKFTFSSHAMHWVRQAPGKGLEWVAVIWHDGSKKYYADSVKGRF SVSRDNSKNTLFLQMDSLRAEDTAVYFCGKEWVGGTGDSWGQGTLVIVSSASTKGPSVFPLAPSSKST SGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVN 25 HKPSNTKVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVWDVSHEDP EVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKA KGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLY SKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK (序列編號：163) 30
>EV1019-Cl05G-IgGl-BI
QAQLVESGGGWKPGGSLRLSCISSKFTFSSHAMHWVRQAPGKGLEWVAVIWHDGSKKYYADSVKGRF SVSRDNSKNTLFLQMDSLRAEDTAVYFCGKEWVGGTGDSWGQGTLVIVSSASTKGPSVFPLAPSSKST SGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVN 35 HKPSNTKVDKRVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVWDVSHEDP EVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKA -43 - 201206955
KGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLY
SKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK (序列編號：164) 5
>EV1019-C105G-IgGlKO QAQLVESGGGVVKPGGSLRLSCISSKFTFSSHAMHWVRQAPGKGLEWVAVIWHDGSKKYYADSVKGRF SVSRDNSKNTLFLQMDSLRAEDTAVYFCGKEWVGGTGDSWGQGTLVIVSSASTKGPSVFPLAPSSKST SGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVN 10 HKPSNTKVDKRVEPKSCDKTHTCPPCPAPEAAGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDP EVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKA KGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLY SKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK (序列編號：165) 15
>EV1019-C105S QAQLVESGGGWKPGGSLRLSCISSKFTFSSHAMHWVRQAPGKGLEWVAVIWHDGSKKYYADSVKGRF SVSRDNSKNTLFLQMDSLRAEDTAVYFCGKEWVGGTSDSWGQGTLVIVSSASTKGPSVFPLAPSSKST SGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSWTVPSSSLGTQTYICNVN 20 HKPSNTKVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVWDVSHEDP EVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRWSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKA KGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLY SKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK (序列編號：166>
25
>EV1019-C105S-IgGl-BI QAQLVESGGGWKPGGSLRLSCISSKFTFSSHAMHWVRQAPGKGLEWVAVIWHDGSKKYYADSVKGRF SVSRDNSKNTLFLQMDSLRAEDTAVYFCGKEWVGGTSDSWGQGTLVIVSSASTKGPSVFPLAPSSKST SGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSWTVPSSSLGTQTYICNVN 30 HKPSNTKVDKRVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVWDVSHEDP EVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRWSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKA KGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLY SKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK (序列編號：167>
>EV1019-C105S-IgGlKO 35 -44 - 201206955 QAQLVESGGGWKPGGSLRLSCISSKFTFSSHAMHWVRQAPGKGLEWVAVIWHDGSKKYYADSVKGRF SVSRDNSKNTLFLQMDSLRAEDTAVYFCGKEWVGGTSDSWGQGTLVIVSSASTKGPSVFPLAPSSKST SGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVN HKPSNTKVDKRVEPKSCDKTHTCPPCPAPEAAGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDP 5 EVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKA KGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLY SKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK (序列編號：168)
10 >EV1019-C105A
QAQLVESGGGWKPGGSLRLSCISSKFTFSSHAMHWVRQAPGKGLEWVAVIWHDGSKKYYADSVKGRF SVSRDNSKNTLFLQMDSLRAEDTAVYFCGKEWVGGTADSWGQGTLVIVSSASTKGPSVFPLAPSSKST SGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVN HKPSNTKVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVWDVSHEDP 15 EVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKA KGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLY SKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK (序列編號：169)
20 >EV1019-C105A-IgGl-BI QAQLVESGGGWKPGGSLRLSCISSKFTFSSHAMHWVRQAPGKGLEWVAVIWHDGSKKYYADSVKGRF SVSRDNSKNTLFLQMDSLRAEDTAVYFCGKEWVGGTADSWGQGTLVIVSSASTKGPSVFPLAPSSKST SGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVN HKPSNTKVDKRVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDP 25 EVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRWSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKA KGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLY SKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK (序列編號：170)
30 >EV1019-C105A-IgGIKO
QAQLVESGGGWKPGGSLRLSCISSKFTFSSHAMHWVRQAPGKGLEWVAVIWHDGSKKYYADSVKGRF SVSRDNSKNTLFLQMDSLRAEDTAVYFCGKEWVGGTADSWGQGTLVIVSSASTKGPSVFPLAPSSKST SGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVN HKPSNTKVDKRVEPKSCDKTHTCPPCPAPEAAGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVWDVSHEDP 35 EVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKA KGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLY SKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK -45- 201206955
(序列編號：171) >EV1019-C105Q QAQLVESGGGWKPGGSLRLSCISSKFTFSSHAMHWVRQAPGKGLEWVAVIWHDGSKKYYADSVKGRF 5 SVSRDNSKNTLFLQMDSLRAEDTAVYFCGKEWVGGTQDSWGQGTLVIVSSASTKGPSVFPLAPSSKST SGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVN HKPSNTKVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVWDVSHEDP EVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKA KGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLY 10 SKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK (序列編號：172}
>EV1019-C105Q-IgGl-BI QAQLVESGGGWKPGGSLRLSCISSKFTFSSHAMHWVRQAPGKGLEWVAVIWHDGSKKYYADSVKGRF 15 SVSRDMSKNTLFLQMDSLRAEDTAVYFCGKEWVGGTQDSWGQGTLVIVSSASTKGPSVFPLAPSSKST SGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVN HKPSNTKVDKRVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVWDVSHEDP EVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRWSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKA KGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLY 20 SKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK (序列編號：173)
>EV1019-C105Q-IgGlKO QAQLVESGGGWKPGGSLRLSCISSKFTFSSHAMHWVRQAPGKGLEWVAVIWHDGSKKYYADSVKGRF 25 SVSRDNSKNTLFLQMDSLRAEDTAVYFCGKEWVGGTQDSWGQGTLVIVSSASTKGPSVFPLAPSSKST SGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVN HKPSNTKVDKRVEPKSCDKTHTCPPCPAPEAAGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDP EVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKA KGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLY 30 SKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK (序列編號：174)
>EV1019-C105T
QAQLVESGGGWKPGGSLRLSCISSKFTFSSHAMHWVRQAPGKGLEWVAVIWHDGSKKYYADSVKGRF 35 SVSRDNSKNTLFLQMDSLRAEDTAVYFCGKEWVGGTTDSWGQGTLVIVSSASTKGPSVFPLAPSSKST SGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVN HKPSNTKVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVWDVSHEDP -46- 201206955
EVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKA
KGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLY
SKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK (序列編號：175> 5
>EVl019-C105T-IgGl-BI
QAQLVESGGGWKPGGSLRLSCISSKFTFSSHAMHWVRQAPGKGLEWVAVIWHDGSKKYYADSVKGRF SVSRDNSKNTLFLQMDSLRAEDTAVYFCGKEWVGGTTDSWGQGTLVIVSSASTKGPSVFPLAPSSKST SGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVN 10 HKPSNTKVDKRVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVWDVSHEDP EVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKA KGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLY SKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK (序列編號：176> 15
>EV1019-C105T-IgGlKO QAQLVESGGGWKPGGSLRLSCISSKFTFSSHAMHWVRQAPGKGLEWVAVIWHDGSKKYYADSVKGRF SVSRDNSKNTLFLQMDSLRAEDTAVYFCGKEWVGGTTDSWGQGTLVIVSSASTKGPSVFPLAPSSKST SGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSWTVPSSSLGTQTYICNVN 20 HKPSNTKVDKRVEPKSCDKTHTCPPCPAPEAAGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVWDVSHEDP EVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKA KGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLY SKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK (序列編號：177) 25
>EV1019-C105M QAQLVESGGGWKPGGSLRLSCISSKFTFSSHAMHWVRQAPGKGLEWVAVIWHDGSKKYYADSVKGRF SVSRDNSKNTLFLQMDSLRAEDTAVYFCGKEWVGGTMDSWGQGTLVIVSSASTKGPSVFPLAPSSKST SGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVN 30 HKPSNTKVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVWDVSHEDP EVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRWSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKA KGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLY SKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK (序列編號：178)
>EVl019-C105M-IgGl-BI 35 -47- 201206955 qaqlvesgggvvkpggslrlscisskftfsshamhwvrqapgkglewvaviwhdgskkyyadsvkgrf SVSRDNSKNTLFLQMDSLRAEDTAVYFCGKEWVGGTMDSWGQGTLVIVSSASTKGPSVFPLAPSSKST SGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVN HKPSNTKVDKRVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVWDVSHEDP 5 EVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKA KGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLY SKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK (序列編號：179)
10 >EV1019-Cl05M-IgGlKO
QAQLVESGGGVVKPGGSLRLSCISSKFTFSSHAMHWVRQAPGKGLEWVAVIWHDGSKKYYADSVKGRF SVSRDNSKNTLFLQMDSLRAEDTAVYFCGKEWVGGTMDSWGQGTLVIVSSASTKGPSVFPLAPSSKST SGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVN HKPSNTKVDKRVEPKSCDKTHTCPPCPAPEAAGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVWDVSHEDP 15 EVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKA KGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSD工AVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLY SKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK (序列編號：180)
20 >EV1019-C105L QAQLVESGGGWKPGGSLRLSCISSKFTFSSHAMHWVRQAPGKGLEWVAVIWHDGSKKYYADSVKGRF SVSRDNSKNTLFLQMDSLRAEDTAVYFCGKEWVGGTLDSWGQGTLVIVSSASTKGPSVFPLAPSSKST SGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVN HKPSNTKVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVWDVSHEDP 25 EVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKA KGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLY SKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK (序列編號：181)
30 >EV1019-Cl05L-IgGl-BI
QAQLVESGGGWKPGGSLRLSCISSKFTFSSHAMHWVRQAPGKGLEWVAVIWHDGSKKYYADSVKGRF SVSRDNSKNTLFLQMDSLRAEDTAVYFCGKEWVGGTLDSWGQGTLVIVSSASTKGPSVFPLAPSSKST SGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSWTVPSSSLGTQTYICNVN HKPSNTKVDKRVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVWDVSHEDP 35 EVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRWSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKA KGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLY SKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK -48- 201206955
(序列編號：182) >EV1019-C105L-IgGlKO QAQLVESGGGWKPGGSLRLSCISSKFTFSSHAMHWVRQAPGKGLEWVAVIWHDGSKKYYADSVKGRF 5 SVSRDNSKNTLFLQMDSLRAEDTAVYFCGKEWVGGTLDSWGQGTLVIVSSASTKGPSVFPLAPSSKST SGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVN HKPSNTKVDKRVEPKSCDKTHTCPPCPAPEAAGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVWDVSHEDP EVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKA KGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLY 10 SKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK (序列編號：183)
不具有信號序列之EV1019 15 >EV1019-VL-wt
QPALTQEASVSGTVGQTVTLLCSGNSSNIGSYAVGWYQQISRGAPKIWFGKSPASGIPDRFSGSKSG
TTASLLVSGLQPEDEADYYCSTWDSRLSAVLFGGGTKLTVLR (序列編號：I84)
20 >EV1019-VL-BI QPALTQEASVSGTVGQTVTLLCSGNSSNIGSYAVGWYQQISRGAPKIWFGKSPASGIPDRFSGSKSG TTASLLVSGLQPEDEADYYCSTWDSRLSAVLFGGGTKLTVLG (序列編號：185)
25 >EV1019-VL-N25S
QPALTQEASVSGTVGQTVTLLCSGSSSNIGSYAVGWYQQISRGAPKIVVFGKSPASGIPDRFSGSKSG
TTASLLVSGLQPEDEADYYCSTWDSRLSAVLFGGGTKLTVLR (序列編號：l86)
30 >EV1019-VL-BI-N25S
QPALTQEASVSGTVGQTVTLLCSGSSSNIGSYAVGWYQQISRGAPKIVVFGKSPASGIPDRFSGSKSG
TTASLLVSGLQPEDEADYYCSTWDSRLSAVLFGGGTKLTVLG (序列編號：I87)
35 >EV1019-VL-N25G
QPALTQEASVSGTVGQTVTLLCSGGSSNIGSYAVGWYQQISRGAPKIWFGKSPASGIPDRFSGSKSG
TTASLLVSGLQPEDEADYYCSTWDSRLSAVLFGGGTKLTVLR -49- 201206955 (序列編號：188)
>EV1019-VL-BI-N25G
QPALTQEASVSGTVGQTVTLLCSGGSSNIGSYAVGWYQQISRGAPKIVVFGKSPASGIPDRFSGSKSG
TTASLLVSGLQPEDEADYYCSTWDSRLSAVLFGGGTKLTVLG (序列編號：189 >
>EV1019-VL-N25T QPALTQEASVSGTVGQTVTLLCSGTSSNIGSYAVGWYQQISRGAPKIVVFGKSPASGIPDRFSGSKSG 10 TTASLLVSGLQPEDEADYYCSTWDSRLSAVLFGGGTKLTVLR (序列編號：190>
>EV1019-VL-BI-N25T QPALTQEASVSGTVGQTVTLLCSGTSSNIGSYAVGWYQQISRGAPKIVVFGKSPASGIPDRFSGSKSG 15 TTASLLVSGLQPEDEADYYCSTWDSRLSAVLFGGGTKLTVLG (序列編號：191)
>EV1019-VL-N25R
QPALTQEASVSGTVGQTVTLLCSGRSSNIGSYAVGWYQQISRGAPKIVVFGKSPASGIPDRFSGSKSG 20 TTASLLVSGLQPEDEADYYCSTWDSRLSAVLFGGGTKLTVLR (序列編號：I92)
>EV1019-VL-BI-N25R QPALTQEASVSGTVGQTVTLLCSGRSSNIGSYAVGWYQQISRGAPKIVVFGKSPASGIPDRFSGSKSG 25 TTASLLVSGLQPEDEADYYCSTWDSRLSAVLFGGGTKLTVLG (序列編號：193)
>EV1019-VL-N25Q QPALTQEASVSGTVGQTVTLLCSGQSSNIGSYAVGWYQQISRGAPKIWFGKSPASGIPDRFSGSKSG 30 TTASLLVSGLQPEDEADYYCSTWDSRLSAVLFGGGTKLTVLR (序列編號：194>
>EV1019-VL-BI-N2 5Q QPALTQEASVSGTVGQTVTLLCSGQSSNIGSYAVGWYQQISRGAPKIWFGKSPASGIPDRFSGSKSG 35 TTASLLVSGLQPEDEADYYCSTWDSRLSAVLFGGGTKLTVLG (序列編號：195) -50- 201206955
>EV1019-VL-S27N
QPALTQEASVSGTVGQTVTLLCSGNSNNIGSYAVGWYQQISRGAPKIVVFGKSPASGIPDRFSGSKSG
TTASLLVSGLQPEDEADYYCSTWDSRLSAVLFGGGTKLTVLR (序列編號：196> 5
>EV1019-VL-BI-S27N
QPALTQEASVSGTVGQTVTLLCSGNSNNIGSYAVGWYQQISRGAPKIVVFGKSPASGIPDRFSGSKSG
TTASLLVSGLQPEDEADYYCSTWDSRLSAVLFGGGTKLTVLG (序列編號：197) 10
>EV1019-VL-S27G
QPALTQEASVSGTVGQTVTLLCSGNSGNIGSYAVGWYQQISRGAPKIVVFGKSPASGIPDRFSGSKSG
TTASLLVSGLQPEDEADYYCSTWDSRLSAVLFGGGTKLTVLR (序列編號：198) 15
>EV1019-VL-BI-S27G
QPALTQEASVSGTVGQTVTLLCSGNSGNIGSYAVGWYQQISRGAPKIVVFGKSPASGIPDRFSGSKSG
TTASLLVSGLQPEDEADYYCSTWDSRLSAVLFGGGTKLTVLG (序列編號：199) 20
>EV1019-VL-S27A
QPALTQEASVSGTVGQTVTLLCSGNSANIGSYAVGWYQQISRGAPKIVVFGKSPASGIPDRFSGSKSG
TTASLLVSGLQPEDEADYYCSTWDSRLSAVLFGGGTKLTVLR (序列編號：200)
25
>EV1019-VL-BI-S27A
QPALTQEASVSGTVGQTVTLLCSGNSANIGSYAVGWYQQISRGAPKIVVFGKSPASGIPDRFSGSKSG
TTASLLVSGLQPEDEADYYCSTWDSRLSAVLFGGGTKLTVLG (序列編號：201) 30 >EV1019-野生型-原型 QPALTQEASVSGTVGQTVTLLCSGNSSNIGSYAVGWYQQISRGAPKIVVFGKSPASGIPDRFSGSKSG TTASLLVSGLQPEDEADYYCSTWDSRLSAVLFGGGTKLTVLRQPKAAPSVTLFPPSSEELQANKATLV CLISDFYPGAVTVAWKADSSPVKAGVETTTPSKQSNNKYAASSYLSLTPEQWKSHRSYSCQVTHEGST 35 VEKTVAPTECS (序列編號：2〇2) -51 - 201206955
>EV1019-野生型-BI QPALTQEASVSGTVGQTVTLLCSGNSSNIGSYAVGWYQQISRGAPKIVVFGKSPASGIPDRFSGSKSG TTASLLVSGLQPEDEADYYCSTWDSRLSAVLFGGGTKLTVLGQPKAAPSVTLFPPSSEELQANKATLV CLISDFYPGAVTVAWKGDSSPVKAGVETTTPSKQSNNKYAASSYLSLTPEQWKSHRSYSCQVTHEGST 5 VEKTVAPTECS (序列編號：203) >EV1019-野生型-BI2 QPALTQEASVSGTVGQTVTLLCSGNSSNIGSYAVGWYQQISRGAPKIVVFGKSPASGIPDRFSGSKSG 10 TTASLLVSGLQPEDEADYYCSTWDSRLSAVLFGGGTKLTVLGQPKAAPSVTLFPPSSEELQANKATLV CLISDFYPGAVTVAWKADSSPVKAGVETTTPSKQSNNKYAASSYLSLTPEQWKSHRSYSCQVTHEGST VEKTVAPTECS (序列編號：204) 15 >EV1019-野生型-原型-恆定 QPALTQEASVSGTVGQTVTLLCSGNSSNIGSYAVGWYQQISRGAPKIVVFGKSPASGIPDRFSGSKSG TTASLLVSGLQPEDEADYYCSTWDSRLSAVLFGGGTKLTVLRQPKAAPSVTLFPPSSEELQANKATLV CLISDFYPGAVTVAWKADSSPVKAGVETTTPSKQSNNKYAASSYLSLTPEQWKSHRSYSCQVTHEGST VEKTVAPTECS 20 (序列編號：205>
>EV1019-N25S
QPALTQEASVSGTVGQTVTLLCSGSSSNIGSYAVGWYQQISRGAPKIVVFGKSPASGIPDRFSGSKSG
TTASLLVSGLQPEDEADYYCSTWDSRLSAVLFGGGTKLTVLRQPKAAPSVTLFPPSSEELQANKATLV 25
CLISDFYPGAVTVAWKADSSPVKAGVETTTPSKQSNNKYAASSYLSLTPEQWKSHRSYSCQVTHEGST
VEKTVAPTECS (序列編號：206) >EV1019-N25S-BI2 30 QPALTQEASVSGTVGQTVTLLCSGSSSNIGSYAVGWYQQISRGAPKIVVFGKSPASGIPDRFSGSKSG TTASLLVSGLQPEDEADYYCSTWDSRLSAVLFGGGTKLTVLGQPKAAPSVTLFPPSSEELQANKATLV CLISDFYPGAVTVAWKADSSPVKAGVETTTPSKQSNNKYAASSYLSLTPEQWKSHRSYSCQVTHEGST VEKTVAPTECS (序列編號：207)
>EV1019-N25G 35 -52- 201206955 QPALTQEASVSGTVGQTVTLLCSGGSSNIGSYAVGWYQQISRGAPKIVVFGKSPASGIPDRFSGSKSG TTASLLVSGLQPEDEADYYCSTWDSRLSAVLFGGGTKLTVLRQPKAAPSVTLFPPSSEELQANKATLV CLISDFYPGAVTVAWKADSSPVKAGVETTTPSKQSNNKYAASSYLSLTPEQWKSHRSYSCQVTHEGST VEKTVAPTECS 5 (序列編號：208) >EV1019-N25G-BI2
QPALTQEASVSGTVGQTVTLLCSGGSSNIGSYAVGWYQQISRGAPKIVVFGKSPASGIPDRFSGSKSG TTASLLVSGLQPEDEADYYCSTWDSRLSAVLFGGGTKLTVLGQPKAAPSVTLFPPSSEELQANKATLV 10 CLISDFYPGAVTVAWKADSSPVKAGVETTTPSKQSNNKYAASSYLSLTPEQWKSHRSYSCQVTHEGST VEKTVAPTECS (序列編號：209)
>EV1019-N25T 15 QPALTQEASVSGTVGQTVTLLCSGTSSNIGSYAVGWYQQISRGAPKIVVFGKSPASGIPDRFSGSKSG TTASLLVSGLQPEDEADYYCSTWDSRLSAVLFGGGTKLTVLRQPKAAPSVTLFPPSSEELQANKATLV CLISDFYPGAVTVAWKADSSPVKAGVETTTPSKQSNNKYAASSYLSLTPEQWKSHRSYSCQVTHEGST VEKTVAPTECS (序列編號：210) 20 >EV1019-N25T-BI2 QPALTQEASVSGTVGQTVTLLCSGTSSNIGSYAVGWYQQISRGAPKIWFGKSPASGIPDRFSGSKSG TTASLLVSGLQPEDEADYYCSTWDSRLSAVLFGGGTKLTVLGQPKAAPSVTLFPPSSEELQANKATLV CLISDFYPGAVTVAWKADSSPVKAGVETTTPSKQSNNKYAASSYLSLTPEQWKSHRSYSCQVTHEGST 25 VEKTVAPTECS (序列編號：211)
>EV1019-N25R QPALTQEASVSGTVGQTVTLLCSGRSSNIGSYAVGWYQQISRGAPKIVVFGKSPASGIPDRFSGSKSG 30 TTASLLVSGLQPEDEADYYCSTWDSRLSAVLFGGGTKLTVLRQPKAAPSVTLFPPSSEELQANKATLV CLISDFYPGAVTVAWKADSSPVKAGVETTTPSKQSNNKYAASSYLSLTPEQWKSHRSYSCQVTHEGST VEKTVAPTECS (序列編號：212) 35 >EV1019-N25R-BI2
QPALTQEASVSGTVGQTVTLLCSGRSSNIGSYAVGWYQQISRGAPKIVVFGKSPASGIPDRFSGSKSG
TTASLLVSGLQPEDEADYYCSTWDSRLSAVLFGGGTKLTVLGQPKAAPSVTLFPPSSEELQANKATLV -53- 201206955
CLISDFYPGAVTVAWKADSSPVKAGVETTTPSKQSNNKYAASSYLSLTPEQWKSHRSYSCQVTHEGST
VEKTVAPTECS (序列編號：213)
5 >EV1019-N25Q QPALTQEASVSGTVGQTVTLLCSGQSSNIGSYAVGWYQQISRGAPKIVVFGKSPASGIPDRFSGSKSG TTASLLVSGLQPEDEADYYCSTWDSRLSAVLFGGGTKLTVLRQPKAAPSVTLFPPSSEELQANKATLV CLISDFYPGAVTVAWKADSSPVKAGVETTTPSKQSNNKYAASSYLSLTPEQWKSHRSYSCQVTHEGST VEKTVAPTECS 10 (序列編號：214) >EV1019-：N25Q-BI2 QPALTQEASVSGTVGQTVTLLCSGQSSNIGSYAVGWYQQISRGAPKIVVFGKSPASGIPDRFSGSKSG TTASLLVSGLQPEDEADYYCSTWDSRLSAVLFGGGTKLTVLGQPKAAPSVTLFPPSSEELQANKATLV 15 CLISDFYPGAVTVAWKADSSPVKAGVETTTPSKQSNNKYAASSYLSLTPEQWKSHRSYSCQVTHEGST VEKTVAPTECS (序列編號：215)
>EV1019-S27N 20 QPALTQEASVSGTVGQTVTLLCSGNSNNIGSYAVGWYQQISRGAPKIVVFGKSPASGIPDRFSGSKSG TTASLLVSGLQPEDEADYYCSTWDSRLSAVLFGGGTKLTVLRQPKAAPSVTLFPPSSEELQANKATLV CLISDFYPGAVTVAWKADSSPVKAGVETTTPSKQSNNKYAASSYLSLTPEQWKSHRSYSCQVTHEGST VEKTVAPTECS (序列編號：216)
>EV1019-S27N-BI2 qpaltqeasvsgtvgqtvtllcsgnsnnigsyavgwyqqisrgapkivvfgkspasgipdrfsgsksg TTASLLVSGLQPEDEADYYCSTWDSRLSAVLFGGGTKLTVLGQPK7UVPSVTLFPPSSEELQANKATLV CLISDFYPGAVTVAWKADSSPVKAGVETTTPSKQSNNKYAASSYLSLTPEQWKSHRSYSCQVTHEGST 30 VEKTVAPTECS (序列編號：217 >
>EV1019-S27G
QPALTQEASVSGTVGQTVTLLCSGNSGNIGSYAVGWYQQISRGAPKIVVFGKSPASGIPDRFSGSKSG 35 TTASLLVSGLQPEDEADYYCSTWDSRLSAVLFGGGTKLTVLRQPKAAPSVTLFPPSSEELQANKATLV CLISDFYPGAVTVAWKADSSPVKAGVETTTPSKQSNNKYAASSYLSLTPEQWKSHRSYSCQVTHEGST VEKTVAPTECS -54- 201206955 (序列編號：218) >EV1019-S27G-BI2 QPALTQEASVSGTVGQTVTLLCSGNSGNIGSYAVGWYQQISRGAPKIVVFGKSPASGIPDRFSGSKSG 5 TTASLLVSGLQPEDEADYYCSTWDSRLSAVLFGGGTKLTVLGQPKAAPSVTLFPPSSEELQANKATLV CLISDFYPGAVTVAWKADSSPVKAGVETTTPSKQSNNKYAASSYLSLTPEQWKSHRSYSCQVTHEGST VEKTVAPTECS (序列編號：219)
10 >EV1019-S27A QPALTQEASVSGTVGQTVTLLCSGNSANIGSYAVGWYQQISRGAPKIVVFGKSPASGIPDRFSGSKSG TTASLLVSGLQPEDEADYYCSTWDSRLSAVLFGGGTKLTVLRQPKAAPSVTLFPPSSEELQANKATLV CLISDFYPGAVTVAWKADSSPVKAGVETTTPSKQSNNKYAASSYLSLTPEQWKSHRSYSCQVTHEGST VEKTVAPTECS 15 (序列編號：220) >EV1019-S27A-BI2 QPALTQEASVSGTVGQTVTLLCSGNSANIGSYAVGWYQQISRGAPKIVVFGKSPASGIPDRFSGSKSG TTASLLVSGLQPEDEADYYCSTWDSRLSAVLFGGGTKLTVLGQPKAAPSVTLFPPSSEELQANKATLV 20 CLISDFYPGAVTVAWKADSSPVKAGVETTTPSKQSNNKYAASSYLSLTPEQWKSHRSYSCQVTHEGST VEKTVAPTECS (序列編號：221) 不具有信號序列之EV1019重鏈
>EV1019-IgG2 QAQLVESGGGVVKPGGSLRLSCISSKFTFSSHAMHWVRQAPGKGLEWVAVIWHDGSKKYYADSVKGRF SVSRDNSKNTLFLQMDSLRAEDTAVYFCGKEWVGGTCDSWGQGTLVIVSSASTKGPSVFPLAPCSRST SESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSNFGTQTYTCNVD 30 HKPSNTKVDKTVERKCCVECPPCPAPPVAGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVQF NWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTFRVVSVLTVVHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPAPIEKTISKTKGQP REPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPMLDSDGSFFLYSKLT VDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK (序列編號：222) >EV1019-野生型-IgG4 35 -55- 201206955
QAQLVESGGGVVKPGGSLRLSCISSKFTFSSHAMHWVRQAPGKGLEWVAVIWHDGSKKYYADSVKGRF
SVSRDNSKNTLFLQMDSLRAEDTAVYFCGKEWVGGTCDSWGQGTLVIVSSASTKGPSVFPLAPCSRST
SESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTKTYTCNVD
HKPSNTKVDKRVESKYGPPCPSCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQ
FNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQ
PREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRL
TVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGK (序列編號：223>
10 >EV1019-野生型-IgG4SP
QAQLVESGGGWKPGGSLRLSCISSKFTFSSHAMHWVRQAPGKGLEWVAVIWHDGSKKYYADSVKGRF SVSRDNSKNTLFLQMDSLRAEDTAVYFCGKEWVGGTCDSWGQGTL▽工 VSSASTKGPSVFPLAPCSRST SESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTKTYTCNVD HKPSNTKVDKRVESKYGPPCPPCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVWDVSQEDPEVQ 15 FNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRWSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQ PREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRL TVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGK (序列編號：224) 20 >EV1019-C105G-IgG2 QAQLVESGGGVVKPGGSLRLSCISSKFTFSSHAMHWVRQAPGKGLEWVAVIWHDGSKKYYADSVKGRF SVSRDNSKNTLFLQMDSLRAEDTAVYFCGKEWVGGTGDSWGQGTLVIVSSASTKGPSVFPLAPCSRST SESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSWTVPSSNFGTQTYTCNVD HKPSNTKVDKTVERKCCVECPPCPAPPVAGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCWVDVSHEDPEVQF 25 NWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTFRVVSVLTVVHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPAPIEKTISKTKGQP REPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPMLDSDGSFFLYSKLT VDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK (序列編號：225) 30 >EV1019-C105G-IgG4
QAQLVESGGGVVKPGGSLRLSCISSKFTFSSHAMHWVRQAPGKGLEWVAVIWHDGSKKYYADSVKGRF SVSRDNSKNTLFLQMDSLRAEDTAVYFCGKEWVGGTGDSWGQGTLVIVSSASTKGPSVFPLAPCSRST SESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTKTYTCNVD HKPSNTKVDKRVESKYGPPCPSCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVWDVSQEDPEVQ 35 FNWYVDGVEVHMAKTKPREEQFNSTYRWSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQ PREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRL TVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGK -56- 201206955
(序列編號：226) >EV1019-C105G-IgG4SP QAQLVESGGGVVKPGGSLRLSCISSKFTFSSHAMHWVRQAPGKGLEWVAVIWHDGSKKYYADSVKGRF 5 SVSRDNSKNTLFLQMDSLRAEDTAVYFCGKEWVGGTGDSWGQGTLVIVSSASTKGPSVFPLAPCSRST SESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTKTYTCNVD HKPSNTKVDKRVESKYGPPCPPCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQ FNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRWSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQ PREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRL 10 TVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGK (序列編號：227)
>EV1019-C105S-IgG2 QAQLVESGGGWKPGGSLRLSCISSKFTFSSHAMHWVRQAPGKGLEWVAVIWHDGSKKYYADSVKGRF 15 SVSRDNSKNTLFLQMDSLRAEDTAVYFCGKEWVGGTSDSWGQGTLVIVSSASTKGPSVFPLAPCSRST SESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSWTVPSSNFGTQTYTCNVD HKPSNTKVDKTVERKCCVECPPCPAPPVAGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCWVDVSHEDPEVQF NWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTFRVVSVLTVVHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPAPIEKTISKTKGQP REPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPMLDSDGSFFLYSKLT 20 VDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK (序列編號：228) >EV1019-C105S-IgG4 QAQLVESGGGWKPGGSLRLSCISSKFTFSSHAMHWVRQAPGKGLEWVAVIWHDGSKKYYADSVKGRF 25 SVSRDNSKNTLFLQMDSLRAEDTAVYFCGKEWVGGTSDSWGQGTLVIVSSASTKGPSVFPLAPCSRST SESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTKTYTCNVD HKPSNTKVDKRVESKYGPPCPSCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVWDVSQEDPEVQ FNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRWSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQ PREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRL 30 TVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGK (序列編號：229)
>EV1019-C105S-IgG4SP
QAQLVESGGGWKPGGSLRLSCISSKFTFSSHAMHWVRQAPGKGLEWVAVIWHDGSKKYYADSVKGRF 35 SVSRDNSKNTLFLQMDSLRAEDTAVYFCGKEWVGGTSDSWGQGTLVIVSSASTKGPSVFPLAPCSRST SESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSWTVPSSSLGTKTYTCNVD HKPSNTKVDKRVESKYGPPCPPCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVWDVSQEDPEVQ -57- 201206955 FNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRWSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQ PREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRL TVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGK (序列編號：230) 5 >EVl019-C105A-IgG2
QAQLVESGGGWKPGGSLRLSC工SSKFTFSSHAMHWVRQAPGKGLEWVAVIWHDGSKKYYADSVKGRF svsrdnskntlflqmdslraedtavyfcgkewvggtadswgqgtlvivssastkgpsvfplapcsrst
SESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSNFGTQTYTCNVD 10 HKPSNTKVDKTVERKCCVECPPCPAPPVAGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCWVDVSHEDPEVQF NWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTFRVVSVLTVVHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPAPIEKTISKTKGQP REPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPMLDSDGSFFLYSKLT VDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK (序列編號：231> 15 >EVl019-C105A-IgG4
QAQLVESGGGWKPGGSLRLSCISSKFTFSSHAMHWVRQAPGKGLEWVAVIWHDGSKKYYADSVKGRF SVSRDNSKNTLFLQMDSLRAEDTAVYFCGKEWVGGTADSWGQGTLVIVSSASTKGPSVFPLAPCSRST SESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSWTVPSSSLGTKTYTCNVD 20 HKPSNTKVDKRVESKYGPPCPSCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVWDVSQEDPEVQ FNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRWSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQ PREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRL TVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGK (序列編號：232> 25
>EVl019-C105A-IgG4SP QAQLVESGGGWKPGGSLRLSCISSKFTFSSHAMHWVRQAPGKGLEWVAVIWHDGSKKYYADSVKGRF SVSRDNSKNTLFLQMDSLRAEDTAVYFCGKEWVGGTADSWGQGTLVIVSSASTKGPSVFPLAPCSRST SESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTKTYTCNVD 30 HKPSNTKVDKRVESKYGPPCPPCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVWDVSQEDPEVQ FNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRWSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQ PREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRL TVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGK (序列編號：233> >EVl019-C105Q-IgG2 35 201206955 QAQLVESGGGVVKPGGSLRLSCISSKFTFSSHAMHWVRQAPGKGLEWVAVIWHDGSKKYYADSVKGRF SVSRDNSKNTLFLQMDSLRAEDTAVYFCGKEWVGGTQDSWGQGTLVIVSSASTKGPSVFPLAPCSRST SESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSNFGTQTYTCNVD HKPSNTKVDKTVERKCCVECPPCPAPPVAGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCWVDVSHEDPEVQF 5 NWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTFRVVSVLTVVHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPAPIEKTISKTKGQP REPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPMLDSDGSFFLYSKLT VDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK (序列編號：234) 10 >EVl019-Cl05Q-IgG4
QAQLVESGGGWKPGGSLRLSCISSKFTFSSHAMHWVRQAPGKGLEWVAVIWHDGSKKYYADSVKGRF SVSRDNSKNTLFLQMDSLRAEDTAVYFCGKEWVGGTQDSWGQGTLVIVSSASTKGPSVFPLAPCSRST SESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTKTYTCNVD HKPSNTKVDKRVESKYGPPCPSCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQ 15 FNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRWSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQ PREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRL TVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGK (序列編號：235)
20 >EV1019-C105Q-IgG4SP QAQLVESGGGWKPGGSLRLSCISSKFTFSSHAMHWVRQAPGKGLEWVAVIWHDGSKKYYADSVKGRF SVSRDNSKNTLFLQMDSLRAEDTAVYFCGKEWVGGTQDSWGQGTLVIVSSASTKGPSVFPLAPCSRST SESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSWTVPSSSLGTKTYTCNVD HKPSNTKVDKRVESKYGPPCPPCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVWDVSQEDPEVQ 25 FNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRWSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQ PREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRL TVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGK (序列編號：236) 30 >EVl019-C105T-IgG2
QAQLVESGGGVVKPGGSLRLSCISSKFTFSSHAMHWVRQAPGKGLEWVAVIWHDGSKKYYADSVKGRF SVSRDNSKNTLFLQMDSLRAEDTAVYFCGKEWVGGTTDSWGQGTLVIVSSASTKGPSVFPLAPCSRST SESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSWTVPSSNFGTQTYTCNVD HKPSNTKVDKTVERKCCVECPPCPAPPVAGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCWVDVSHEDPEVQF 35 NWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTFRWSVLTWHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPAPIEKTISKTKGQP REPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPMLDSDGSFFLYSKLT VDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK -59- 201206955 (序列編號：237) >EV1019-C105T-IgG4 QAQLVESGGGVVKPGGSLRLSCISSKFTFSSHAMHWVRQAPGKGLEWVAVIWHDGSKKYYADSVKGRF 5 SVSRDNSKNTLFLQMDSLRAEDTAVYFCGKEWVGGTTDSWGQGTLVIVSSASTKGPSVFPLAPCSRST SESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTKTYTCNVD HKPSMTKVDKRVESKYGPPCPSCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCWVDVSQEDPEVQ FNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRWSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQ PREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRL 10 TVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGK (序列編號：238)
>EV1019-C105T-IgG4SP QAQLVESGGGWKPGGSLRLSCISSKFTFSSHAMHWVRQAPGKGLEWVAVIWHDGSKKYYADSVKGRF 15 SVSRDNSKNTLFLQMDSLRAEDTAVYFCGKEWVGGTTDSWGQGTLVIVSSASTKGPSVFPLAPCSRST SESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTKTYTCNVD HKPSNTKVDKRVESKYGPPCPPCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVWDVSQEDPEVQ FNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRWSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQ PREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRL 20 TVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGK (序列編號：239) >EV1019-C105M-IgG2 QAQLVESGGGVVKPGGSLRLSCISSKFTFSSHAMHWVRQAPGKGLEWVAVIWHDGSKKYYADSVKGRF 25 SVSRDNSKNTLFLQMDSLRAEDTAVYFCGKEWVGGTMDSWGQGTLVIVSSASTKGPSVFPLAPCSRST SESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSNFGTQTYTCNVD HKPSNTKVDKTVERKCCVECPPCPAPPVAGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCWVDVSHEDPEVQF NWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTFRVVSVLTVVHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPAPIEKTISKTKGQP REPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPMLDSDGSFFLYSKLT 30 VDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK (序列編號：240) >EV1019-C105M-]：gG4
QAQLVESGGGWKPGGSLRLSCISSKFTFSSHAMHWVRQAPGKGLEWVAVIWHDGSKKYYADSVKGRF 35 svsrdnskntlflqmdslraedtavyfcgkewvggtmdswgqgtlvivssastkgpsvfplapcsrst
SESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSWTVPSSSLGTKTYTCNVD
HKPSNTKVDKRVESKYGPPCPSCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVWDVSQEDPEVQ -60- 201206955 FNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQ PREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRL TVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGK (序列編號：241> 5
>EV1019-C105M-IgG4SP
QAQLVESGGGVVKPGGSLRLSC工SSKFTFSSHAMHWVRQAPGKGLEWVAVIWHDGSKKYYADSVKGRF SVSRDNSKNTLFLQMDSLRAEDTAVYFCGKEWVGGTMDSWGQGTLVIVSSASTKGPSVFPLAPCSRST SESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTKTYTCNVD 10 HKPSNTKVDKRVESKYGPPCPPCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVWDVSQEDPEVQ FNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQ PREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRL TVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGK (序列編號：242> 15 >EV1019-C105L-IgG2 QAQLVESGGGWKPGGSLRLSCISSKFTFSSHAMHWVRQAPGKGLEWVAVIWHDGSKKYYADSVKGRF SVSRDNSKNTLFLQMDSLRAEDTAVYFCGKEWVGGTLDSWGQGTLVIVSSASTKGPSVFPLAPCSRST SESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSNFGTQTYTCNVD 20 HKPSNTKVDKTVERKCCVECPPCPAPPVAGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCWVDVSHEDPEVQF NWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTFRWSVLTVVHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPAPIEKTISKTKGQP REPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPMLDSDGSFFLYSKLT VDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK (序列編號：243> 25 >EV1019-C105L-IgG4 QAQLVESGGGVVKPGGSLRLSCISSKFTFSSHAMHWVRQAPGKGLEWVAVIWHDGSKKYYADSVKGRF SVSRDNSKNTLFLQMDSLRAEDTAVYFCGKEWVGGTLDSWGQGTLVIVSSASTKGPSVFPLAPCSRST SESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTKTYTCNVD 30 HKPSNTKVDKRVESKYGPPCPSCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVWDVSQEDPEVQ FNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRWSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQ PREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRL TVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGK (序列編號：244)
>EV1019-C105L-IgG4SP 35 -61- 201206955 QAQLVESGGGWKPGGSLRLSCISSKFTFSSHAMHWVRQAPGKGLEWVAVIWHDGSKKYYADSVKGRF SVSRDNSKNTLFLQMDSLRAEDTAVYFCGKEWVGGTLDSWGQGTLVIVSSASTKGPSVFPLAPCSRST SESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTKTYTCNVD HKPSNTKVDKRVESKYGPPCPPCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVWDVSQEDPEVQ 5 FNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQ PREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRL TVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGK (序列編號：245) 10 具有信號序列之EV1019重鏈 >EV1019
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>EV1019-野生型-IgGIKO
MGWSCIILFLVATATGVHSQAQLVESGGGVVKPGGSLRLSCISSKFTFSSHAMHWVRQAPGKGLEWVA VIWHDGSKKYYADSVKGRFSVSRDNSKNTLFLQMDSLRAEDTAVYFCGKEWVGGTCDSWGQGTLVIVS 35 SASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSS VVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKRVEPKSCDKTHTCPPCPAPEAAGGPSVFLFPPKPKDTLM ISRTPEVTCVWDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYK -62- 201206955 CKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPE NNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK (序列編號：248)
5 >EV1019-C105G
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15 >EV1019-C105G-IgGl-BI MGWSCIILFLVATATGVHSQAQLVESGGGVVKPGGSLRLSCISSKFTFSSHAMHWVRQAPGKGLEWVA VIWHDGSKKYYADSVKGRFSVSRDNSKNTLFLQMDSLRAEDTAVYFCGKEWVGGTGDSWGQGTLVIVS SASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSS VVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKRVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLM 20 ISRTPEVTCVWDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYK CKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESMGQPE NNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK (序列編號：250)
25 >EV1019-C105G-IgGlKO
MGWSCIILFLVATATGVHSQAQLVESGGGWKPGGSLRLSCISSKFTFSSHAMHWVRQAPGKGLEWVA
VIWHDGSKKYYADSVKGRFSVSRDNSKNTLFLQMDSLRAEDTAVYFCGKEWVGGTGDSWGQGTLVIVS
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35 >EV1019-C105S
MEFGLSWVFLAALLRGVQCQAQLVESGGGWKPGGSLRLSCISSKFTFSSHAMHWVRQAPGKGLEWVA
VIWHDGSKKYYADSVKGRFSVSRDNSKNTLFLQMDSLRAEDTAVYFCGKEWVGGTSDSWGQGTLVIVS -63- 201206955 SASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSS VVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLM 工SRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYK CKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPE 5 NNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK (序列編號：252)
>EV1019-C105S-IgGl-BI
MGWSCIILFLVATATGVHSQAQLVESGGGWKPGGSLRLSCISSKFTFSSHAMHWVRQAPGKGLEWVA 10 VIWHDGSKKYYADSVKGRFSVSRDNSKNTLFLQMDSLRAEDTAVYFCGKEWVGGTSDSWGQGTLVIVS SASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSS VVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKRVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLM ISRTPEVTCVWDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYK CKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPE 15 NNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK (序列編號：253)
>EV1019-C105S-IgGlKO
MGWSCIILFLVATATGVHSQAQLVESGGGVVKPGGSLRLSCISSKFTFSSHAMHWVRQAPGKGLEWVA 20 VIWHDGSKKYYADSVKGRFSVSRDNSKNTLFLQMDSLRAEDTAVYFCGKEWVGGTSDSWGQGTLVIVS SASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSS vvtvpssslgtqtyicnvnhkpsntkvdkrvepkscdkthtcppcpapeaaggpsvflfppkpkdtlm 工 SRTPEVTCVWDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRWSVLTVLHQDWLNGKEYK CKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPE 25 NNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK (序列編號：254)
>EV1019-C105A MEFGLSWVFLAALLRGVQCQAQLVESGGGWKPGGSLRLSCISSKFTFSSHAMHWVRQAPGKGLEWVA 30 VIWHDGSKKYYADSVKGRFSVSRDNSKNTLFLQMDSLRAEDTAVYFCGKEWVGGTADSWGQGTLVIVS SASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSS VVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLM ISRTPEVTCVWDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYK CKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPE 35 NNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK (序列編號：255) -64- 201206955
>EV1019-C105A-IgGl-BI MGWSCIILFLVATATGVHSQAQLVESGGGWKPGGSLRLSCISSKFTFSSHAMHWVRQAPGKGLEWVA VIWHDGSKKYYADSVKGRFSVSRDNSKNTLFLQMDSLRAEDTAVYFCGKEWVGGTADSWGQGTLVIVS SASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSS 5 VVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKRVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLM ISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYK CKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPE NNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK (序列編號：256) 10
>EV1019-C105A-IgGlKO
MGWSCIILFLVATATGVHSQAQLVESGGGVVKPGGSLRLSCISSKFTFSSHAMHWVRQAPGKGLEWVA VIWHDGSKKYYADSVKGRFSVSRDNSKNTLFLQMDSLRAEDTAVYFCGKEWVGGTADSWGQGTLVIVS SASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSS 15 VVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKRVEPKSCDKTHTCPPCPAPEAAGGPSVFLFPPKPKDTLM ISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYK CKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPE NNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK (序列編號：257) 20
>EV1019-C105Q MEFGLSWVFLAALLRGVQCQAQLVESGGGWKPGGSLRLSCISSKFTrSSHAMHWVRQAPGKGIiEWVA VIWHDGSKKYYADSVKGRFSVSRDNSKNTLFLQMDSLRAEDTAVYFCGKEWVGGTQDSWGQGTLVIVS SASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSS 25 VVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLM ISRTPEVTCVWDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYK CKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPE NNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK (序列編號：258 > 30
>EV1019-C105Q-IgGl-BI
.MGWSCIILFLVATATGVHSQAQLVESGGGWKPGGSLRLSCISSKFTFSSHAMHWVRQAPGKGLEWVA VIWHDGSKKYYADSVKGRFSVSRDNSKNTLFLQMDSLRAEDTAVYFCGKEWVGGTQDSWGQGTLVIVS SASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSS 35 VVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKRVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLM ISRTPEVTCVWDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRWSVLTVLHQDWLNGKEYK -65- 201206955 CKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPE NNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK (序列編號：259)
5 >EVl019-C105Q-IgGlKO
MGWSCIILFLVATATGVHSQAQLVESGGGVVKPGGSLRLSCISSKFTFSSHAMHWVRQAPGKGLEWVA VIWHDGSKKYYADSVKGRFSVSRDNSKNTLFLQMDSLRAEDTAVYFCGKEWVGGTQDSWGQGTL▽工 VS SASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSS VVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKRVEPKSCDKTHTCPPCPAPEAAGGPSVFLFPPKPKDTLM 10 ISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYK CKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPE NNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK (序列編號：260)
15 >EV1019-C105T MEFGLSWVFLjVALLRGVQCQAQLVESGGGWKPGGSLRLSCISSKFTFSSHAMHWVRQAPGKGLEWVA VIWHDGSKKYYADSVKGRFSVSRDNSKNTLFLQMDSLRAEDTAVYFCGKEWVGGTTDSWGQGTLVIVS SASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSS VVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLM 20 ISRTPEVTCVWDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYK CKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPE NNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK (序列編號：261)
25 >EV1019-C105T-IgGl-BI MGWSCIILFLVATATGVHSQAQLVESGGGWKPGGSLRLSCISSKFTFSSHAMHWVRQAPGKGLEWVA VIWHDGSKKYYADSVKGRFSVSRDNSKNTLFLQMDSLRAEDTAVYFCGKEWVGGTTDSWGQGTLVIVS SASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSS WTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKRVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLM 30 ISRTPEVTCVWDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYK CKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPE NNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK (序列編號：262 >
35 >EVl019-C105T-IgGlKO
MGWSCIILFLVATATGVHSQAQLVESGGGWKPGGSLRLSCISSKFTFSSHAMHWVRQAPGKGLEWVA
VIWHDGSKKYYADSVKGRFSVSRDNSKNTLFLQMDSLRAEDTAVYFCGKEWVGGTTDSWGQGTLVIVS -66- 201206955 SASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSS VVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKRVEPKSCDKTHTCPPCPAPEAAGGPSVFLFPPKPKDTLM ISRTPEVTCVWDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYK CKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPE 5 NNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK (序列編號：263 >
>EV1019-C105M
MEFGLSWVFLAAIiLRGVQCQAQLVESGGGVVKPGGSLRLSCISSKFTFSSHAMHWVRQAPGKGLEWVA 10 VIWHDGSKKYYADSVKGRFSVSRDNSKNTLFLQMDSLRAEDTAVYFCGKEWVGGTMDSWGQGTLVIVS SASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSS VVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLM ISRTPEVTCVWDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYK CKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPE 15 NNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK (序列編號：264)
>EV1019-C105M-IgGl-BI MGWSCIILFLVATATGVHSQAQLVESGGGWKPGGSLRLSCISSKrTFSSHAMHWVRQAPGKGLEWVA 20 VIWHDGSKKYYADSVKGRFSVSRDNSKNTLFLQMDSLRAEDTAVYFCGKEWVGGTMDSWGQGTLVIVS SASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSS WTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKRVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLM ISRTPEVTCVWDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYK CKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPE 25 NNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK (序列編號：2沾）
>EV1019-C105M-IgGlKO MGWSCIILFLVATATGVHSQAQLVESGGGWKPGGSLRLSCISSKFTFSSHAMHWVRQAPGKGLEWVA 30 VIWHDGSKKYYADSVKGRFSVSRDNSKNTLFLQMDSLRAEDTAVYFCGKEWVGGTMDSWGQGTLVIVS SASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSS VVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKRVEPKSCDKTHTCPPCPAPEAAGGPSVFLFPPKPKDTLM ISRTPEVTCVWDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRWSVLTVLHQDWLNGKEYK CKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPE 35 NNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK (序列編號：266) -67- 201206955
>EV1019-C105L MEFGLSWVFLAALLRGVQCQAQLVESGGGVVKPGGSLRLSCISSKFTFSSHAMHWVRQAPGKGLEWVA VIWHDGSKKYYADSVKGRFSVSRDNSKNTLFLQMDSLRAEDTAVYFCGKEWVGGTLDSWGQGTLVIVS SASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSS 5 VVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLM ISRTPEVTCVWDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYK CKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPE NNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK (序列編號：267) 10
>EV1019-C105L-IgGl-BI
MGWSCIILFLVATATGVHSQAQLVESGGGVVKPGGSLRLSCISSKFTFSSHAMHWVRQAPGKGLEWVA VIWHDGSKKYYADSVKGRFSVSRDNSKNTLFLQMDSLRAEDTAVYFCGKEWVGGTLDSWGQGTLVIVS SASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSS 15 VVTVPSSSLGTQTYICMVNHKPSMTKVDKRVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLM ISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYK CKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPE NNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK (序列編號：268> 20
>EV1019-C105L-IgGlKO
MGWSCIILFLVATATGVHSQAQLVESGGGWKPGGSLRLSCISSKFTFSSHAMHWVRQAPGKGLEWVA VIWHDGSKKYYADSVKGRFSVSRDNSKNTLFLQMDSLRAEDTAVYFCGKEWVGGTLDSWGQGTLVIVS SASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSS 25 VVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKRVEPKSCDKTHTCPPCPAPEAAGGPSVFLFPPKPKDTLM ISRTPEVTCVWDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRWSVLTVLHQDWLNGKEYK CKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPE NNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK (序列編號：269) 30 具有信號序列之EV1019輕鏈 >EV1019-野生型-原型
MAWTPLLLQLLTLCSGSWAQPALTQEASVSGTVGQTVTLLCSGNSSNIGSYAVGWYQQISRGAPKIVV 35 FGKSPASGIPDRFSGSKSGTTASLLVSGLQPEDEADYYCSTWDSRLSAVLFGGGTKLTVLRQPKAAPS VTLFPPSSEELQANKATLVCL工SDFYPGAVTVAWKADSSPVKAGVETTTPSKQSNNKYAASSYLSLTP EQWKSHRSYSCQVTHEGSTVEKTVAPTECS -68- 201206955 (序列編號：270)
>EV1019-野生型-BI MGWSCIILFLVATATGVHSQPALTQEASVSGTVGQTVTLLCSGNSSNIGSYAVGWYQQISRGAPKIVV FGKSPASG工PDRFSGSKSGTTASLLVSGLQPEDEADYYCSTWDSRLSAVLFGGGTKLTVLGQPKAAPS VTLFPPSSEELQANKATLVCLISDFYPGAVTVAWKGDSSPVKAGVETTTPSKQSNNKYAASSYLSLTP EQWKSHRSYSCQVTHEGSTVEKTVAPTECS (序列編號：271) 10 >EV1019-野生型-BI2
MGWSCIILFLVATATGVHSQPALTQEASVSGTVGQTVTLLCSGNSSNIGSYAVGWYQQISRGAPKIVV FGKSPASGIPDRFSGSKSGTTASLLVSGLQPEDEADYYCSTWDSRLSAVLFGGGTKLTVLGQPKAAPS VTLFPPSSEELQANKATLVCLISDFYPGAVTVAWKADSSPVKAGVETTTPSKQSNNKYAASSYLSLTP EQWKSHRSYSCQVTHEGSTVEKTVAPTECS 15 (序列編號：272) >EV1019-野生型-原型-恆定 MGWSCIILFLVATATGVHSQPALTQEASVSGTVGQTVTLLCSGNSSNIGSYAVGWYQQISRGAPKIVV FGKSPASGIPDRFSGSKSGTTASLLVSGLQPEDEADYYCSTWDSRLSAVLFGGGTKLTVLRQPKAAPS 20 VTLFPPSSEELQANKATLVCLISDFYPGAVTVAWKADSSPVKAGVETTTPSKQSNNKYAASSYLSLTP EQWKSHRSYSCQVTHEGSTVEKTVAPTECS (序列編號：273)
>EV1019-N25S 25 MGWSCIILFLVATATGVHSQPALTQEASVSGTVGQTVTLLCSGSSSNIGSYAVGWYQQISRGAPKIVV FGKSPASGIPDRFSGSKSGTTASLLVSGLQPEDEADYYCSTWDSRLSAVLFGGGTKLTVLRQPKAAPS VTLFPPSSEELQANKATLVCLISDFYPGAVTVAWKADSSPVKAGVETTTPSKQSNNKYAASSYLSLTP EQWKSHRSYSCQVTHEGSTVEKTVAPTECS (序列編號：274) 30 >EV1019-N25S-BI2 MGWSCIILFLVATATGVHSQPALTQEASVSGTVGQTVTLLCSGSSSNIGSYAVGWYQQISRGAPKIW FGKSPASGIPDRFSGSKSGTTASLLVSGLQPEDEADYYCSTWDSRLSAVLFGGGTKLTVLGQPKAAPS VTLFPPSSEELQANKATLVCLISDFYPGAVTVAWKADSSPVKAGVETTTPSKQSNNKYAASSYLSLTP 35 EQWKSHRSYSCQVTHEGSTVEKTVAPTECS (序列編號：275) -69- 201206955
>EV1019-N25G MGWSCIILFLVATATGVHSQPALTQEASVSGTVGQTVTLLCSGGSSNIGSYAVGWYQQISRGAPKIVV FGKSPASGIPDRFSGSKSGTTASLLVSGLQPEDEADYYCSTWDSRLSAVLFGGGTKLTVLRQPKAAPS VTLFPPSSEELQANKATLVCLISDFYPGAVTVAWKADSSPVKAGVETTTPSKQSNNKYAASSYLSLTP 5 EQWKSHRSYSCQVTHEGSTVEKTVAPTECS (序列編號：276) >EV1019-N25G-BI2 MGWSCIILFLVATATGVHSQPALTQEASVSGTVGQTVTLLCSGGSSNIGSYAVGWYQQISRGAPKIVV 10 FGKSPASGIPDRFSGSKSGTTASLLVSGLQPEDEADYYCSTWDSRLSAVLFGGGTKLTVLGQPKAAPS VTLFPPSSEELQANKATLVCLISDFYPGAVTVAWKADSSPVKAGVETTTPSKQSNNKYAASSYLSLTP EQWKSHRSYSCQVTHEGSTVEKTVAPTECS (序列編號：277)
15 >EV1019-N25T MGWSCIILFLVATATGVHSQPALTQEASVSGTVGQTVTLLCSGTSSMIGSYAVGWYQQISRGAPKIVV FGKSPASGIPDRFSGSKSGTTASLLVSGLQPEDEADYYCSTWDSRLSAVLFGGGTKLTVLRQPKAAPS VTLFPPSSEELQANKATLVCLISDFYPGAVTVAWKADSSPVKAGVETTTPSKQSNNKYAASSYLSLTP EQWKSHRSYSCQVTHEGSTVEKTVAPTECS 20 (序列編號：27 8) >EV1019-N25T-BI2
MGWSC 工 ILFLVATATGVHSQPALTQEASVSGTVGQTVTLLCSGTSSNIGSYAVGWYQQISRGAPKIVV FGKSPASGIPDRFSGSKSGTTASLLVSGLQPEDEADYYCSTWDSRLSAVLFGGGTKLTVLGQPKAAPS 25 VTLFPPSSEELQANKATLVCLISDFYPGAVTVAWKADSSPVKAGVETTTPSKQSNNKYAASSYLSLTP EQWKSHRSYSCQVTHEGSTVEKTVAPTECS (序列編號：279)
>EV1019-N25R 30 MGWSCIILFLVATATGVHSQPALTQEASVSGTVGQTVTLLCSGRSSNIGSYAVGWYQQISRGAPKIVV FGKSPASGIPDRFSGSKSGTTASLLVSGLQPEDEADYYCSTWDSRLSAVLFGGGTKLTVLRQPKAAPS VTLFPPSSEELQANKATLVCLISDFYPGAVTVAWKADSSPVKAGVETTTPSKQSNNKYAASSYLSLTP EQWKSHRSYSCQVTHEGSTVEKTVAPTECS (序列編號：280) >EV1019-N25R-BI2 35 -70- 201206955 MGWSC 工工 LFLVATATGVHSQPALTQEASVSGTVGQTVTLLCSGRSSNIGSYAVGWYQQISRGAPKIVV FGKSPASGIPDRFSGSKSGTTASLLVSGLQPEDEADYYCSTWDSRLSAVLFGGGTKLTVLGQPKAAPS VTLFPPSSEELQANKATLVCLISDFYPGAVTVAWKADSSPVKAGVETTTPSKQSNNKYAASSYLSLTP EQWKSHRSYSCQVTHEGSTVEKTVAPTECS 5 (序列編號：281)
>EV1019-N25Q
MGWSCIILFLVATATGVHSQPALTQEASVSGTVGQTVTLLCSGQSSNIGSYAVGWYQQISRGAPKIW FGKSPASGIPDRFSGSKSGTTASLLVSGLQPEDEADYYCSTWDSRLSAVLFGGGTKLTVLRQPKAAPS 10 VTLFPPSSEELQANKATLVCLISDFYPGAVTVAWKADSSPVKAGVETTTPSKQSNNKYAASSYLSLTP EQWKSHRSYSCQVTHEGSTVEKTVAPTECS (序列編號：282) >EV1019-N25Q-BI2 15 MGWSCIILFLVATATGVHSQPALTQEASVSGTVGQTVTLLCSGQSSNIGSYAVGWYQQISRGAPKIW FGKSPASGIPDRFSGSKSGTTASLLVSGLQPEDEADYYCSTWDSRLSAVLFGGGTKLTVLGQPKAAPS VTLFPPSSEELQANKATLVCLISDFYPGAVTVAWKADSSPVKAGVETTTPSKQSNNKYAASSYLSLTP EQWKSHRSYSCQVTHEGSTVEKTVAPTECS (序列編號：283) 20
>EV1019-S27N MGWSCIILFLVATATGVHSQPALTQEASVSGTVGQTVTLLCSGNSNNIGSYAVGWYQQISRGAPKIVV FGKSPASGIPDRFSGSKSGTTASLLVSGLQPEDEADYYCSTWDSRLSAVLFGGGTKLTVLRQPKAAPS VTLFPPSSEELQANKATLVCLISDFYPGAVTVAWKADSSPVKAGVETTTPSKQSNNKYAASSYLSLTP 25 EQWKSHRSYSCQVTHEGSTVEKTVAPTECS (序列編號：284) >EV1019-S27N-BI2 MGWSCIILFLVATATGVHSQPALTQEASVSGTVGQTVTLLCSGNSNNIGSYAVGWYQQISRGAPKIVV 30 FGKSPASGIPDRFSGSKSGTTASLLVSGLQPEDEADYYCSTWDSRLSAVLFGGGTKLTVLGQPKAAPS VTLFPPSSEELQANKATLVCLISDFYPGAVTVAWKADSSPVKAGVETTTPSKQSNNKYAASSYLSLTP EQWKSHRSYSCQVTHEGSTVEKTVAPTECS (序列編號：285)
35 >EV1019-S27G
MGWSCIILFLVATATGVHSQPALTQEASVSGTVGQTVTLLCSGNSGNIGSYAVGWYQQISRGAPKIVV
FGKSPASGIPDRFSGSKSGTTASLLVSGLQPEDEADYYCSTWDSRLSAVLFGGGTKLTVLRQPKAAPS -71 - -71 -201206955
VTLFPPSSEELQANKATLVCLISDFYPGAVTVAWKADSSPVKAGVETTTPSKQSNNKYAASSYLSLTP
EQWKSHRSYSCQVTHEGSTVEKTVAPTECS (序列編號：286) 5 >EV1019-S27G-BI2 MGWSCIILFLVATATGVHSQPALTQEASVSGTVGQTVTLLCSGNSGNIGSYAVGWYQQISRGAPKIVV FGKSPASGIPDRFSGSKSGTTASLLVSGLQPEDEADYYCSTWDSRLSAVLFGGGTKLTVLGQPKAAPS VTLFPPSSEELQANKATLVCLISDFYPGAVTVAWKADSSPVKAGVETTTPSKQSNNKYAASSYLSLTP EQWKSHRSYSCQVTHEGSTVEKTVAPTECS 10 (序列編號：287)
>EV1019-S27A mgwsciilflvatatgvhsqpaltqeasvsgtvgqtvtllcsgnsanigsyavgwyqqisrgapkivv FGKSPASGIPDRFSGSKSGTTASLLVSGLQPEDEADYYCSTWDSRLSAVLFGGGTKLTVLRQPKAAPS 15 VTLFPPSSEELQANKATLVCLISDFYPGAVTVAWKADSSPVKAGVETTTPSKQSNNKYAASSYLSLTP EQWKSHRSYSCQVTHEGSTVEKTVAPTECS (序列編號：288) >EV1019-S27A-BI2
20 MGWSC 工工 LFLVATATGVHSQPALTQEASVSGTVGQTVTLLCSGNSANIGSYAVGWYQQISRGAPKIVV
FGKSPASGIPDRFSGSKSGTTASLLVSGLQPEDEADYYCSTWDSRLSAVLFGGGTKLTVLGQPKAAPS VTLFPPSSEELQANKATLVCLISDFYPGAVTVAWKADSSPVKAGVETTTPSKQSNNKYAASSYLSLTP EQWKSHRSYSCQVTHEGSTVEKTVAPTECS (序列編號：28W
具有信號序列之EV1019重鐽 >EV1019-IgG2 MEFGLSWVFLAALLRGVQCQAQLVESGGGVVKPGGSLRLSCISSKFTFSSHAMHWVRQAPGKGLEWVA 30 VIWHDGSKKYYADSVKGRFSVSRDNSKNTLFLQMDSLRAEDTAVYFCGKEWVGGTCDSWGQGTLVIVS SASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSS VVTVPSSNFGTQTYTCNVDHKPSNTKVDKTVERKCCVECPPCPAPPVAGPSVFLETPKPKDTLMISRT PEVTCVWDVSHEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTFRVVSVLTVVHQDWLNGKEYKCKVS NKGLPAPIEKTISKTKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYK 35 TTPPMLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK (序列編號：290) -72- 201206955 >EV1019-野生型-IgG4 MGWSCIILFLVATATGVHSQAQLVESGGGWKPG6SLRLSCISSKFTFSSHAMHWVRQAPGKGLEWVA VIWHDGSKKYYADSVKGRFSVSRDNSKNTLFLQMDSLRAEDTAVYFCGKEWVGGTCDSWGQGTLVIVS SASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSS 5 VVTVPSSSLGTKTYTCNVDHKPSNTKVDKRVESKYGPPCPSCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISR TPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRWSVLTVLHQDWLNGKEYKCKV SNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNY KTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGK (序列編號：291) 10
>EV1019-野生型-IgG4SP
MGWSCIILFLVATATGVHSQAQLVESGGGVVKPGGSLRLSCISSKFTFSSHAMHWVRQAPGKGLEWVA VIWHDGSKKYYADSVKGRFSVSRDNSKNTLFLQMDSLRAEDTAVYFCGKEWVGGTCDSWGQGTLVIVS SASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSS 15 VVTVPSSSLGTKTYTCNVDHKPSNTKVDKRVESKYGPPCPPCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISR TPEVTCVWDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKV SNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSD工AVEWESNGQPENNY KTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGK (序列編號：292) 20 >EV1019-C105G-IgG2
MEFGLSWVFIiAALLRGVQCQAQLVESGGGWKPGGSLRLSCISSKFTFSSHAMHWVRQAPGKGLEWVA VIWHDGSKKYYADSVKGRFSVSRDNSKNTLFLQMDSLRAEDTAVYFCGKEWVGGTGDSWGQGTLVIVS SASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSS 25 VVTVPSSNFGTQTYTCNVDHKPSNTKVDKTVERKCCVECPPCPAPPVAGPSVFLFPPKPKDTLMISRT PEVTCVVVDVSHEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTFRVVSVLTVVHQDWLNGKEYKCKVS NKGLPAPIEKTISKTKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYK TTPPMLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK (序列編號：293) 30 >EVl019-C105G-IgG4
MGWSCIILFLVATATGVHSQAQLVESGGGVVKPGGSLRLSCISSKFTFSSHAMHWVRQAPGKGLEWVA VIWHDGSKKYYADSVKGRFSVSRDNSKNTLFLQMDSLRAEDTAVYFCGKEWVGGTGDSWGQGTLVIVS SASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSS 35 WTVPSSSLGTKTYTCNVDHKPSNTKVDKRVESKYGPPCPSCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISR TPEVTCWVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRWSVLTVLHQDWLNGKEYKCKV -73_ 201206955
SNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNY
KTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGK (序列編號：294>
5 >EV1019-C105G-IgG4SP
MGWSCIILFLVATATGVHSQAQLVESGGGWKPGGSLRLSCISSKFTFSSHAMHWVRQAPGKGLEWVA VIWHDGSKKYYADSVKGRFSVSRDNSKNTLFLQMDSLRAEDTAVYFCGKEWVGGTGDSWGQGTLVIVS SASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSS VVTVPSSSLGTKTYTCNVDHKPSNTKVDKRVESKYGPPCPPCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISR 10 TPEVTCWVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKV SNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNY KTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGK (序列編號：295) 15 >EV1019-Cl05S-IgG2 MEFGLSWVFLAALLRGVQCQAQLVESGGGWKPGGSLRLSCISSKFTFSSHAMHWVRQAPGKGLEWVA VIWHDGSKKYYADSVKGRFSVSRDNSKNTLFLQMDSLRAEDTAVYFCGKEWVGGTSDSWGQGTLVIVS SASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSS VVTVPSSNFGTQTYTCNVDHKPSNTKVDKTVERKCCVECPPCPAPPVAGPSVFLFPPKPKDTLMISRT 20 PEVTCVWDVSHEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTFRVVSVLTVVHQDWLNGKEYKCKVS NKGLPAPIEKTISKTKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYK TTPPMLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK (序列編號：296) 25 >EV1019-C105S-IgG4 MGWSCIILFLVATATGVHSQAQLVESGGGWKPGGSLRLSCISSKFTFSSHAMHWVRQAPGKGLEWVA VIWHDGSKKYYADSVKGRFSVSRDNSKNTLFLQMDSLRAEDTAVYFCGKEWVGGTSDSWGQGTLVIVS SASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSS VVTVPSSSLGTKTYTCNVDHKPSNTKVDKRVESKYGPPCPSCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISR 30 TPEVTCWVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKV SNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNY KTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGK (序列編號：297)
35 >EV1019-C105S-IgG4SP
MGWSCIILFLVATATGVHSQAQLVESGGGWKPGGSLRLSCISSKFTFSSHAMHWVRQAPGKGLEWVA
VIWHDGSKKYYADSVKGRFSVSRDNSKNTLFLQMDSLRAEDTAVYFCGKEWVGGTSDSWGQGTLVIVS -74- 201206955 SASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSS VVTVPSSSLGTKTYTCNVDHKPSNTKVDKRVESKYGPPCPPCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISR TPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKV SNKGLPSS工EKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNY 5 KTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGK (序列編號：298) >EV1019-C105A-IgG2
MEFGLSWVFLAALLRGVQCQAQLVESGGGWKPGGSLRLSCISSKFTFSSHAMHWVRQAPGKGLEWVA 10 VIWHDGSKKYYADSVKGRFSVSRDNSKNTLFLQMDSLRAEDTAVYFCGKEWVGGTADSWGQGTLVIVS SASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSS VVTVPSSNFGTQTYTCNVDHKPSNTKVDKTVERKCCVECPPCPAPPVAGPSVFLFPPKPKDTLMISRT PEVTCVWDVSHEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTFRVVSVLTVVHQDWLNGKEYKCKVS NKGLPAPIEKTISKTKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYK 15 TTPPMLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK (序列編號：299> >EV1019-C105A-IgG4
MGWSCIILFLVATATGVHSQAQLVESGGGWKPGGSLRLSCISSKFTFSSHAMHWVRQAPGKGLEWVA 20 viwhdgskkyyadsvkgrfsvsrdnskntlflqmdslraedtavyfcgkewvggtadswgqgtlvivs SASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSS VVTVPSSSLGTKTYTCNVDHKPSNTKVDKRVESKYGPPCPSCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISR TPEVTCVWDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRWSVLTVLHQDWLNGKEYKCKV SNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNY 25 KTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGK (序列編號：300)
>EVl019-C105A-IgG4SP MGWSCIILFLVATATGVHSQAQLVESGGGVVKPGGSLRLSCISSKFTFSSHAMHWVRQAPGKGLEWVA 30 VIWHDGSKKYYADSVKGRFSVSRDNSKNTLFLQMDSLRAEDTAVYFCGKEWVGGTADSWGQGTLVIVS SASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSS VVTVPSSSLGTKTYTCNVDHKPSNTKVDKRVESKYGPPCPPCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISR TPEVTCWVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRWSVLTVLHQDWLNGKEYKCKV SNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSD工AVEWESNGQPENNY 35 KTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGK (序列編號：301) -75- 201206955 >EV1019-C105Q-IgG2 MEFGLSWVFLAALLRGVQCQAQLVESGGGVVKPGGSLRLSCISSKFTFSSHAMHWVRQAPGKGLEWVA VIWHDGSKKYYADSVKGRFSVSRDNSKNTLFLQMDSLRAEDTAVYFCGKEWVGGTQDSWGQGTL▽工VS SASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSS 5 VVTVPSSNFGTQTYTCNVDHKPSNTKVDKTVERKCCVECPPCPAPPVAGPSVFLFPPKPKDTLMISRT PEVTCVWDVSHEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTFRVVSVLTVVHQDWLNGKEYKCKVS NKGLPAPIEKTISKTKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYK TTPPMLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK (序列編號：302) 10 >EV1019-C105Q-IgG4
MGWSCIILFLVATATGVHSQAQLVESGGGWKPGGSLRLSCISSKFTFSSHAMHWVRQAPGKGLEWVA VIWHDGSKKYYADSVKGRFSVSRDNSKNTLFLQMDSLRAEDTAVYFCGKEWVGGTQDSWGQGTLVIVS SASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSS 15 VVTVPSSSLGTKTYTCNVDHKPSNTKVDKRVESKYGPPCPSCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISR TPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKV SNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSD工AVEWESNGQPENNY KTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGK (序列編號：303) 20
>EV1019-C105Q-IgG4SP
MGWSCIILFLVATATGVHSQAQLVESGGGWKPGGSLRLSCISSKFTFSSHAMHWVRQAPGKGLEWVA VIWHDGSKKYYADSVKGRFSVSRDNSKNTLFLQMDSLRAEDTAVYFCGKEWVGGTQDSWGQGTLVIVS SASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSS 25 VVTVPSSSLGTKTYTCNVDHKPSNTKVDKRVESKYGPPCPPCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISR TPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKV SNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNY KTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGK (序列編號：304) 30 >EV1019-C105T-IgG2
MEFGLSWVFLAALLRGVQCQAQLVESGGGWKPGGSLRLSCISSKFTFSSHAMHWVRQAPGKGLEWVA VIWHDGSKKYYADSVKGRFSVSRDNSKNTLFLQMDSLRAEDTAVYFCGKEWVGGTTDSWGQGTLVIVS SASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSS 35 VVTVPSSNFGTQTYTCNVDHKPSNTKVDKTVERKCCVECPPCPAPPVAGPSVFLFPPKPKDTLMISRT PEVTCVVVDVSHEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTFRVVSVLTVVHQDWLNGKEYKCKVS -76- 201206955
NKGLPAPIEKTISKTKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYK
TTPPMLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK (序列編號：3〇5) 5 >EVl019-Cl05T-IgG4
MGWSC工工LFLVATATGVHSQAQLVESGGGWKPGGSLRLSCISSKFTFSSHAMHWVRQAPGKGLEWVA VIWHDGSKKYYADSVKGRFSVSRDNSKNTLFLQMDSLRAEDTAVYFCGKEWVGGTTDSWGQGTLVIVS SASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSS VVTVPSSSLGTKTYTCNVDHKPSNTKVDKRVESKYGPPCPSCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISR 10 TPEVTCVWDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRWSVLTVLHQDWLNGKEYKCKV SNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNY KTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGK (序列編號：306)
15 >EV1019-C105T-IgG4SP MGWSCIILFLVATATGVHSQAQLVESGGGVVKPGGSLRLSCISSKFTFSSHAMHWVRQAPGKGLEWVA VIWHDGSKKYYADSVKGRFSVSRDNSKNTLFLQMDSLRAEDTAVYFCGKEWVGGTTDSWGQGTLVIVS SASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSS VVTVPSSSLGTKTYTCNVDHKPSNTKVDKRVESKYGPPCPPCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISR 20 TPEVTCVWDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRWSVLTVLHQDWLNGKEYKCKV SNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNY KTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGK (序列編號：307) 25 >EV1019-C105M-IgG2
MEFGLSWVFLAALLRGVQCQAQLVESGGGVVKPGGSLRLSCISSKFTFSSHAMHWVRQAPGKGLEWVA viwhdgskkyyadsvkgrfsvsrdnskntlflqmdslraedtavyfcgkewvggtmdswgqgtlvivs SASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSS VVTVPSSNFGTQTYTCNVDHKPSNTKVDKTVERKCCVECPPCPAPPVAGPSVFLFPPKPKDTLMISRT 30 PEVTCVWDVSHEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTFRVVSVLTWHQDWLNGKEYKCKVS NKGLPAPIEKTISKTKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYK TTPPMLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK (序列編號：308) 35 >EV1019-C105M-IgG4
MGWSCIILFLVATATGVHSQAQLVESGGGWKPGGSLRLSCISSKFTFSSHAMHWVRQAPGKGLEWVA
VIWHDGSKKYYADSVKGRFSVSRDMSKNTLFLQMDSLRAEDTAVYFCGKEWVGGTMDSWGQGTLVIVS -77- 201206955 SASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSS VVTVPSSSLGTKTYTCNVDHKPSNTKVDKRVESKYGPPCPSCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISR TPEVTCWVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRWSVLTVLHQDWLNGKEYKCKV SNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNY 5 KTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGK (序列編號：309)
>EV1019-C105M-IgG4SP
MGWSCIILFLVATATGVHSQAQLVESGGGVVKPGGSLRLSCISSKFTFSSHAMHWVRQAPGKGLEWVA 10 VIWHDGSKKYYADSVKGRFSVSRDNSKNTLFLQMDSLRAEDTAVYFCGKEWVGGTMDSWGQGTLVIVS SASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSS VVTVPSSSLGTKTYTCNVDHKPSNTKVDKRVESKYGPPCPPCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISR TPEVTCVWDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRWSVLTVLHQDWLNGKEYKCKV SNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNY 15 KTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGK (序列編號：310) >EV1019-C105L-IgG2 MEFGLSWVFLAALLRGVQCQAQLVESGGGVVKPGGSLRLSCISSKFTFSSHAMHWVRQAPGKGLEWVA 20 viwhdgskkyyadsvkgrfsvsrdnskntlflqmdslraedtavyfcgkewvggtldswgqgtlvivs SASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSS VVTVPSSNFGTQTYTCNVDHKPSNTKVDKTVERKCCVECPPCPAPPVAGPSVFLFPPKPKDTLMISRT PEVTCVWDVSHEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTFRVVSVLTVVHQDWLNGKEYKCKVS NKGLPAPIEKTISKTKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYK 25 TTPPMLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK (序列編號·· 311) >EV1019-C105L-IgG4 MGWSCIILFLVATATGVHSQAQLVESGGGVVKPGGSLRLSCISSKFTFSSHAMHWVRQAPGKGLEWVA 30 VIWHDGSKKYYADSVKGRFSVSRDNSKNTLFLQMDSLRAEDTAVYFCGKEWVGGTLDSWGQGTLVIVS SASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSS VVTVPSSSLGTKTYTCNVDHKPSNTKVDKRVESKYGPPCPSCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISR TPEVTCWVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRWSVLTVLHQDWLNGKEYKCKV SNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNY 35 KTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGK (序列編號：312) -78- 201206955
>EVl019-C105L-IgG4SP 5 MGWSCIILFLVATATGVHSQAQLVESGGGWKPGGSLRLSCIS SKFT FS SHAMHWVRQAPGKGLEWVA VIWHDGSKKYYADSVKGRFSVSRDNSKNTLFLQMDSLRAEDTAVYFCGKEWVGGTLDSWGQGTLVIVS SASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSS VVTVPSSSLGTKTYTCNVDHKPSNTKVDKRVESKYGPPCPPCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISR TPEVTCWVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKV SNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNY KTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGK (序列編號：313) 10
EV1018 S EV1019的共有序歹IJ
Vh-CDR1 FTFS(Y/H)(G/A)MH (序列編號：314)
Vh-CDR2 (L/V)(T/I)(Y/W)HXGX(R/K)K(F/Y)YADSV(R/K)G (序列編號：315)
Vh-CDR3 EX(M/V)G(A/G)XXDX 20 (序列編號：316>
Vl-CDR1 XGNXXNIGS(H/Y)AVG (序列編號：317)
Vl-CDR2 G(R/K)SP(A/P)SG
25 (序列編號：318)
Vl-CDR3 STWDS(R/S)LSAV(V/L) (序列編號：319) 30 EV1003 & EV1007 序列 EV1003 HC (IqGl) aa
MDWTWRILFLVAAATGARSLVQLVQSEAEVKKPGASVRISCRTSGYIFPTFALHWVRQAPGQSLEWVG SINTASGKTKFSTKFQDRLTLSSNTSATTVYMDLSGLTLDDTALYYCARDRFQNIMATILDVWGQGTL 35 VTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLY SLSSWTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPK DTLMISRTPEVTCVWDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNG -79- 201206955 KEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESN GQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK (序列編號：320) 5 EV1003 LC (Kappa) aa 序列 METPAQLLFLLLLWLPGTTGDIVLTQSPGTLSLSPGERVTVSCRASHRVSSNYLAWYQQRPGQSPRLL 工FGASNRATGVPDRFSGSGSGTDFALTISRLEPDDFAVYYCQQYASSPVTFGGGTKLEIKRTVAAPSV FIFPPSDEQLKSGTASWCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSK ADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC 10 (序列編號：321) EV1007 HC (IgGl) aa 序歹ϋ MDWTWRILFLVAAATGAPSQVHLVQSGSELKKPGASVKVSCKASGYSFSRYGIKWVRQAPGQGLEWMG WINTRSGVPAYAQGFTGRFVFSLDTSVDTAFLEISSLKTEDTGIYTCATRPPRFYDKTEYWEDGFDVW 15 GRGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQ SSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLF PPKPKDTLMISRTPEVTCWVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQ DWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAV EWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEGLHNHYTQKSLSLSPGK 20 (序列編號：322) EV1007 1.C (Lambda) aa 序列
MAGFPLLLTLLTHCAGSWAQSVLTQPPSASGTPGQSVNISCSGSSSNIGNSYVYWYQQLPGTAPKLLI YRNNRRPSGVPDRFSGSKSDTSASLAISGLRSEDEADYYCATWDDSLSGRLFGGGTKLTVLGQPKAAP 25 SVTLFPPSSEELQANKATLVCLISDFYPGAVTVAWKADGSPVKAGVETTTPSKQSNNKYAASSYLSLT PEQWKSHRSYSCQVTHEGSTVEMTVAPTECS (序列編號：323) 信號序列 >EV1018 MEFGLIWVFLVTLLRGVQC (序列編號：324 >
35 >EV1018-wt 工gGIKO MGWS C ：[工 L FL VATATGVH S (序列編號：325) -80- 201206955
EV1018 wt-原型 MAWTPLLLQLLTLCSGSWA (序列編號：326) 優先權文觸露 TGTSSDVENYNLVS (序列編號：327) 10
EGSKRPS (序列編號：328) CSYAGSSVVV 15 (序列編號：329) SGNSSNIGSYAVG (序列編號：330)
20 GKSPAS (序列編號：331) STWDSRLSAVL (序列編號：332)
SHAMH (序列編號·· 333) VIWHDGSKKYYADSVKG 30 (序列編號：33釣 EWVGGTCDS (序列編號：335) 35 SGSSSNIGNSYVY (序列編號：336) -81 - 201206955 RNNRRPS (序列編號：337) ATWDDSLSGRL 5 (序列編號：338)
RYGIK (序列編號：339> 10 WINTRSGVPAYAQGFTG (序列編號：340) RPPRFYDKTEYWEDGFDV (序列編號：341> 15 RASHRVSSNYLA (序列編號：342)
GASNRAT 20 (序列編號：Μ3) QQYASSPVT (序列編號：344)
25 TFALH (序列編號：345) SINTASGKTKFSTKFQD (序列編號：346) 30 DRFQNIMATILDV (序列編號：347) 35
Claims (1)
- 201206955 七、申請專利範圍： 1. 一種單離的抗-hGM-CSF單株抗體或其之抗原結合片 段，其中該抗體或其之抗原結合片段結合hGM_CSF (序列 編號：1)之一表位，其包括ELYK (序列編號：2)與 TMMASHYKQH (序列編號：3) 〇 2. —種單離的抗-hGM-CSF單株抗體或其之抗原結合片 段，該抗體包括： (a)—重鍵，包括一含有VH-CDR1之共有（consensus)序 列、一含有VH-CDR2之共有序列及一含有vH-CDR3之共 有序列，其中： (i)該含有 Vh-CDR1 之 共 有 序 列 係 FTFS(Y/H)(G/A)MH (序列編號：314)， (ii)該含有 Vh-CDR2 之 共 有 序 列 係 (L/V)(T/I)(Y/W)HXGX(R/K)K(F/Y)YADSV(R/K)G (序列編 號：315)，及 (iii)該含有 Vh-CDR3 之 共 有 序 列 係 EX(M/V)G(A/G)XXDX (序列編號：316);及 (b)—輕鏈，包括一含有VL-CDR1之共有序列、一含有 VL-CDR2之共有序列及一含有VL-CDR3之共有序列，其中： (i) 該含有 Vl-CDR1 之共有序列係 XGNXXNIGS(H/Y)AVG (序列編號：317)， (ii) 該含有VL-CDR2之共有序列係G(R/K)SP(A/P)SG 201206955 (序列編號：318)，及 有序列 hGM-CSF。 係 (出）該含有 VL-CDR3之共 STWDS(R/S)LSAV(V/L)(序列編號· 319); 其中該抗體或其之抗原結合片段專一性結合 3·如申請專利範圍第1或2項所诚夕y种十甘 人z哨尸/Γ迷之抗體或其之抗原結合 片段’其中該抗體或其之抗Κέ士人i ^ 八穴〜仇你、..口 σ片丰又以小於400 pM的一 Kd結合人類GM-CSF。 4_如申請專利範圍第3項所述之抗體或其之抗原結合片 段，其中該KD係小於1 60 pM。 5.如申請專利範圍第1-4項任何一項所述之抗體或其之抗 原結合片段，其中該抗體或其之抗原結合片段中和 hGM-CSF活性，以致該抗體或其之抗原結合片段之—ic5〇 值小於100 pM(在ED80下之TF-1增殖試驗中確定）。 6·如申請專利範圍第5項所述之抗體或其之抗原結合片 段，其中該IC50值係小於30 pM。 7. 如申請專利範圍第5項所述之抗體或其之抗原結合片 段，其中該IC50值係小於20 pM。 8. 如申請專利範圍第2_7項任何一項所述之抗體或其之抗 201206955 原結合片^又’其中該重鍵係選自下丨、γ2、γ3^ 丫4。 9. 如申請專利範圍第2-8項任何一項所述之抗體或其之抗 原結合片段，其中該重鏈的胺基酸序列係選自序列編號： 10-33、38-80、160-183 與 222_245 所構成之群組。 10. 如申請專利範圍第2-9項任何一項所述之抗體或其之 抗原結合片段，其中該輕鏈係一 χ輕鍵。 11. 如申請專利範圍第10項所述之抗體或其之抗原結合片 段’其中該λ輕鏈包含至少一選自R1〇〇G與A153G的胺基 酸取代。 12. 如申請專利範圍第2-11項任何一項所述之抗體或其之 抗原結合片段，其中該輕鏈的胺基酸序列係選自序列編 籲 號：34_37與2〇2_2；21所構成之群組。 13. 如申請專利範圍第2-9項任何一項所述之抗體或其之 抗原結合片段，其中該輕鏈係一 χ輕鏈或一 κ輕鍵。 14·如申請專利範圍第2_13項任何一項所述之抗體或其之 抗原結合片段’其中該重鏈係選自、γ2、Υ3與γ4，且其 中該輕鍵係一 λ輕鍵。 3 201206955 15. 如申請專利範圍第2-13項任何一項所述之抗體或其之 抗原結合片段，其中該重鏈包含一或更多選自下列所構成 之群組的胺基酸取代：T97A、T97V、N95D、N95E、N95K、 N95Q、N93Q/N95T、K144R、L164A、L165A 與 K144R。 16. 如申請專利範圍第2-15項任何一項所述之抗體或其之 抗原結合片段，其中該重鏈包括一或更多選自下列所構成 之群組的胺基酸取代：T97A、T97V、N95D、N95E、N95K、 N95Q、N93Q/N95T、K144R、L164A、L165A 與 K144R， 且其中該輕鏈包括至少一選自R100G與A153G的胺基酸取 代。 17. 如申請專利範圍第2-16項任何一項所述之抗體或其之 抗原結合片段，其中該 VH-CDR1包括該胺基酸序列 SYGMH (序列編號：4)或SHAMH (序列編號：333)。 18. 如申請專利範圍第2-17項任何一項所述之抗體或其之 抗原結合片段，其中該 VH-CDR2包括該胺基酸序列 LTYHHGNRKFYADSVRG (序 列編號 ：5)或 VIWHDGSKKYYADSVKG (序列編號：334)。 19.如申請專利範圍第2-18項任何一項所述之抗體或其之 抗原結合片段，其中該 VH-CDR3包括該胺基酸序列 ESMGAINDN (序列編號：6)或EWVGGTCDS (序列編號： 201206955 335)。 20.如申請專利範圍第2-19項任何一項所述之抗體或其之 抗原結合片段，其中該 VL-CDR1包括該胺基酸序列 IGNNNNIGSHAVG (序列編號：7)或 SGNSSNIGSYAVG (序 列編號：330)。 2 1.如申請專利範圍第2-20項任何一項所述之抗體或其之 • 抗原結合片段，其中該 VL-CDR2包括該胺基酸序列 GRSPPS (序列編號：8)或GKSPAS (序列編號：331)。 22. 如申請專利範圍第2-21項任何一項所述之抗體或其之 抗原結合片段，其中該 VL-CDR3包括該胺基酸序列 STWDSSLSAVV (序列編號：9)或 STWDSRLSAVL (序歹ij 編 號：332)。 23. 一種專一性結合hGM-CSF的單離抗-hGM-CSF單株抗 體或其之抗原結合片段，其中該抗體或其之抗原結合片段 包括6個不同的CDR，其中該6個CDR序列係序列編號： 4-9 〇 24.如申請專利範圍第23項所述之抗體或其之抗原結合片 段，其中該抗體或其之抗原結合片段包括一重鏈，其係選 自γι、γ2、γ3與γ4;及一輕鍵，其係一 κ輕鏈或一 λ輕鏈。 5 201206955 25. 一種專一性結合hGM-CSF的單離抗-hGM-CSF單株抗 體或其之抗原結合片段，其中該抗體或其之抗原結合片段 包括6個不同的CDR，其中該6個CDR序列係序列編號： 330-335 ° 26. 如申請專利範圍第25項所述之抗體或其之抗原結合片 段，其中該抗體包括一重鏈，其係選自γι、γ2、丫3與γ4 ; 及一輕鍵，其係一 κ輕键或一 λ輕鍵。 27. 如申請專利範圍第2-21項任何一項所述之抗體或其之 抗原結合片段，其更包括一信號序列。 28·如申請專利範圍第27項所述之抗體或其之抗原結合片 段’其中該信號序列係選自序列編號：324、325與326所 構成之群組。 ， 29. —種單離的抗_hGM-CSF單株抗體或其之抗原結合片 段，其包括一具有一重鏈序列之重鏈與一具有一輕鍵序列 之輕鏈’其中該重鏈序列係序列編號：1〇或選自序列編號： 11-33與38-80的一變體，且其中該輕鏈序列係序列編號： 34或選自序列編號：35-37的一變體。 30· —種單離的抗_hGM_CSF單株抗體或其之抗原結合片 201206955 段’其包括一具有一重鏈序列之重鏈與一具有一輕鏈序列 之輕鏈，其中該重鏈序列係序列編號：1 60或選自序列編 號：161 - 2 4 5的一變體’且其中該輕鏈序列係序列編號：2 〇 2 或選自序列編號：203-221的一變體。 31· —種單離的抗-hGM-CSF單株抗體或其之抗原結合片 段，其包括一具有一重鏈變異區序列之重鏈變異區與一具 有一輕鏈變異區序列之輕鏈變異區，其中該重鏈變異區序 列係序列編號：1 5 2或其之一變體，且其中該輕鍵變異區 序列係序列編號：1 84或其之一變體。 32.如申請專利範圍第3 1項所述之抗體或其之抗原結合片 段’其中該序列編號：152之變體係選自序列編號： 1 53-159’且其中該序列編號：184之變體係選自序列編號： 185-201 。 33. —種單離的抗-hGM-CSF單株抗體或其之抗原結合片 段，其包括一具有一重鏈變異區序列之重鏈變異區與一具 有一輕鏈變異區序列之輕鏈變異區，其中該重鏈變異區序 列係序列編號· 3 4 8或其之一變體，且其中該輕鏈變異區 序列係選自序列編號：364與序列編號：365 » 3 4.如申請專利範圍第3 3項所述之抗體或其之抗原結合片 段，其中該序列編號：348之變體係選自序列編號： 201206955 349-363 ° 35. —種套組’其包括 枯·（a)申請專利範圍第ι_34項任何一 項所述之抗體或其之在乂 s ^人 、抗原七合片段；及（b)—或更多容器， 包含該抗體或其之抗原結合片段。 種組合物，其包括申請專利範圍第 3 6. 一 '-π 字匕固牙> 1 - j Η π 卞t 1 口J 一 所述之抗體或其之;u 抗原、、·。合片段、及一藥學可接受載體37.如申請專利範圍第36項所述之組合物，其更包括—結 合hGM-CSF的第二單離抗體或其之抗原結合片段，以致該 組合物包括複數個各自結合hGM CSF之抗體、其之抗原結 合片段或上述之組合。 38.如申請專利範圍第37項所述之組合物，其中該複數個 結合hGM-CSF之抗體、其之抗原結合片段或上述之組合的 至少一者係一聚胜肽，該聚胜肽之序列係選自序列編號： K-80、152-245、320-323 與 348-365 所構成之群組。 39· 一種套組’其包括申請專利範圍第3 6_3 8項任何一項 所述之組合物、及一或更多包含該組合物之容器。 40.如申請專利範圍第39項所述之套組，其更包括一操作 指南。 201206955 •一種以申請專利範圍第卜34與36_38項任何一項所述 之抗體或其之抗原結合片段或組合物來製造或製備一藥劑 之應用，該藥㈣用m受試者巾與hGM_csF過度表 現相關之-疾病或異常，其中該抗體或其之抗原結合片段 結合hGM-CSF並能夠中和hGM-CSF活性。 42_如申請專利範圍第41項所述之應用，其中該疾病或異 常係選自下列所構成之群組：慢性阻塞性肺病（C〇pD)、氣 喘、囊狀纖維化症、間質性肺病、鼻炎、關節炎與相關之 關節病、牛皮癬、骨髓性白血病、多發性硬化症。 43. 如申請專利範圍第41或42項所述之應用，其中該抗 體或抗原結合片段係以不超過500 mg之一劑量被施加至 該受試者。 44. 一種申請專利範圍第1-34與36-38項任何一項所述之 抗體或其之抗原結合片段或組合物之應用，其用於治療一 受試者中與hGM-CSF過度表現相關之一疾病或異常，其中 該抗體或其之抗原結合片段結合hGM-CSF並能夠中和 hGM-CSF 活性。 45.如申請專利範圍第44項所述之應用’其中該疾病或異 常係選自下列所構成之群組：慢性阻塞性肺病（C0PD) '氣 201206955 喘、囊狀纖維化症、間質性肺病、鼻炎、關節炎與相關之 關節病、牛皮癬、骨髓性白血病、多發性硬化症。 46. 如申請專利範圍第43或44項所述之應用，其中該抗 體或抗原結合片段係以不超過500 mg之一劑量被施加至 該受試者。 47. —種hGM-CSF之表位，其位於序列編號：2與3中提 •出之聚胜肽’其中該表位係由申請專利範圍第23或25項 所述之抗體或其之抗原結合片段所辨別，且其中該聚胜肽 序列代表hGM-CSF (序列編號：1)之一間斷片段。 4 8. —種表位’其係人類GM-CSF之一間斷片段，其中該 表位包括所有或一部分的人類GM-CSF (序列編號：1)之胺 基酸殘基77-80與人類GM-CSF (序列編號：1)之胺基酸殘 φ 基？5-104 ’且該表位係由一包含6個不同CDR(序列編號： 4-9或序列編號：330-335中提出）之抗_hGM-CSF單株抗體 或其之抗原結合片段所辨別。 49. 一種在一宿主細胞中產生—結合hGM-CSF之抗 -hGM-CSF單株抗體或其之抗原結合片段的方法，其中該抗 體或其之抗原結合片段包括至少一含有之共有 序列、一含有VH-CDR2之共有序列、一含有Vh_CDR3之 共有序列、一含有vl-cdri之共有序列、一含有Vl_CDR2 201206955 之共有序列及一含有VL-CDR3之共有序列，該方法包括： (i) 取得該包括至少一 DNA序列之宿主細胞，該至少一 DNA序列至少編碼該含有VH-CDR1之共有序列、該含有 VH-CDR2之共有序列、該含有VH-CDR3之共有序列、該含 有VL-CDR1之共有序列、該含有VL-CDR2之共有序列與 該含有VL-CDR3之共有序列； (ii) 在該宿主細胞中表現該DNA，其中： 該含有VH-CDR1之共有序列係FTFS(Y/H)(G/A)MH • (序列編號：314)， 該含有 Vh-CDR2 之共 有序列 係 (L/V)(T/I)(Y/W)HXGX(R/K)K(F/Y)YADSV(R/K)G (序列編 號：315)， 該含有 Vh-CDR3 之共 有 序 列 係 EX(M/V)G(A/G)XXDX (序列編號 ：316)， 該含有 Vl-CDR1 之共 有 序 列 係 XGNXXNIGS(H/Y)AVG (序列編號：317)， 該含有VL-CDR2之共有序列係G(R/K)SP(A/P)SG (序 列編號：318)，及 該含有 Vl-CDR3 之共有序列係 STWDS(R/S)LSAV(V/L)(序列編號：319);及 (iii)在適合DNA表現與該抗體或其之抗原結合片段產 生的條件下培養該宿主細胞。 5 0.如申請專利範圍第49項所述之方法，其中該至少一 11 201206955 DNA編碼一重鏈或其之部分與一輕鏈或其之部分，其中該 重鏈或其之部分的序列係選自序列編號：10-33、38-80、 15 2-183、222-245與3 48-3 63所構成之群組，且其中該輕 鏈或其之部分的序列係選自序列編號：34-37、184-221、 3 64與3 65所構成之群組。 5 1.如申請專利範圍第49或50項所述之方法，其更包括 單離該抗體或其之抗原結合片段。 5 2.如申請專利範圍第49-51項任何一項所述之方法，其 更包括製備一包含該抗體或其之抗原結合片段與一藥學可 接受載體之組合物。 53. —種載體，其包括一編碼一 Vh-CDR1、一 VH-CDR2及 一 VH-CDR3之DNA序列，其中： ^ VH-CDR1係SYGMH (序列編號：4)或SHAMH (序列編 號：333)， VH-CDR2 係 LTYHHGNRKFYADSVRG (序列編號：5)或 VIWHDGSKKYYADSVKG (序列編號：334)，及 Vh-CDR3 係 ESMGAINDN (序列編號：6)或 EWVGGTCDS (序列編號：335)。 54. 一種載體，其包括一編碼一 Vl-CDR1、一 VL-CDR2及 一 VL-CDR3之DNA序列，其中 12 201206955 Vl-CDR1 係 IGNNNNIGSHAVG (序列編號：7)或 SGNSSNIGSYAVG (序列編號：330); VL-CDR2 係 GRSPPSG (序列編號：8)或 GKSPASG (序列 編號：331);及 Vl-CDR3 係 STWDSSLSAVV (序列編號：9)或 STWDSRLSAVL (序列編號：332)。 55. —種辨別一結合申請專利範圍第47或48項所述之表 • 位之分子的方法，其包括 (i) 以一包括該表位之探針接觸一生物樣本或一胜肽庫； (ii) 單離一專一性結合該探針的分子；及 (iii) 辨別該分子。 56. 如申請專利範圍第55項所述之方法，其中該分子係一 抗-hGM-CSF單株抗體或其之抗原結合片段。 57. 如申請專利範圍第55或56項所述之方法，其中該探 針更包括一可偵測標記。 58. 如申請專利範圍第55-57項任何一項所述之方法，其 中該探針係固定的。 59. —種能夠結合 hGM-CSF (hGM-CSF)且中和 hGM-CSF (hGM-CSF)生物活性之抗_hGM-CSF單株抗體或其之抗原 13 201206955 結合部分，其特徵在於該抗-hGM-CSF單株抗體或其之抗原 結合部分的一互補決定區（CDR)係由一或更多選自序列編 號：4-9所構成之群組的胺基酸序列所代表。 60. —種能夠結合hGM-CSF且中和hGM-CSF生物活性之 抗-hGM-CSF單株抗體或其之抗原結合部分，其特徵在於該 抗-hGM-CSF單株抗體或抗原結合部分的一互補決定區 (CDR)係由一或更多選自序列編號：330-335所構成之群組 Φ 的胺基酸序列所代表。 61. 如申請專利範圍第59或60項所述之抗-hGM-CSF單株 抗體或其之抗原結合部分，其特徵在於該抗-hGM-CSF單株 抗體或其之抗原結合部分的一胺基酸序列中，該互補決定 區（CDR)中有一或更多胺基酸被取代、刪除、插入或附加。 I 62.如申請專利範圍第 59-61項任何一項所述之抗 -hGM-CSF單株抗體或其之抗原結合部分，其特徵在於當 hGM-CSF弓|發TF-1細胞增殖時，該抗-hGM-CSF單株抗體 或其之抗原結合部分在約14 pM的濃度下抑制約50 %的 TF-1細胞增殖。 63.如申請專利範圍第62項所述之抗-hGM-CSF單株抗體 或其之抗原結合部分，其特徵在於該抗-hGM-CSF單株抗體 或其之抗原結合部分抑制周圍血液樹突細胞的增殖。 14 201206955 64.如申請專利範圍第62項所述之抗_11(；}1^_(：317單株抗體 或其之抗原結合部分，其特徵在於該抗_hGM_CSF單株抗體 或其之抗原結合部分具有一對hGM CSF的高親合力其之 KD值係4xl(T1Q Μ或更小。 65·如申請專利範圍第59_64項任何一項所述之抗 -hGM-CSF單株抗體或其之抗原結合部分，其特徵在於該抗 鲁 體屬於IgGi (λ)類型（亞型）。 66.如申請專利範圍第59-65項任何一項所述之抗 -hGM-CSF單株抗體或其之抗原結合部分，其特徵在於該抗 -hGM-CSF單株抗體係一人類單株抗體。 67·種hGM-CSF引起之一疾病的醫藥組合物，其包括： φ 申專利範圍第59-66項任何一項所述之抗_hGM-CSF單株 抗體或抗原結合部分、及一藥學可接受載體。 68.如申請專利範圍第67項所述之醫藥組合物，其特徵在 於該hGM-CSF -過度表現引起之疾病係選自下列所構成 之群組的任何一者： (a) 過敏疾病，諸如氣喘、異位性皮膚炎與花粉熱， (b) 移植排斥，移植物對抗宿主疾病， 0)自體免疫疾病，例如類風濕性關節炎。 15 201206955 69. 一種編碼一能夠結合hGM-CSF且中和hGM-CSF生物 活性之抗-hGM-CSF單株抗體或其之抗原結合部分的單離 去氧核糖核酸（DNA)，其特徵在於該單離DNA編碼之一胺 基酸序列包括選自序列編號：4-9所構成之群組的至少一 者。 70. —種編碼一能夠結合hGM-CSF且中和hGM-CSF生物 活性之抗-hGM-CSF單株抗體或其之抗原結合部分的單離 DNA，其特徵在於該單離DNA編碼之一胺基酸序列包括選 自序列編號：330-335所構成之群組的至少一者。 71. —種單離的DNA，其能夠在嚴格條件下與申請專利範 圍第69或70項所述之DNA雜合。 72. —種載體，其特徵在於申請專利範圍第69-71項任何 一項之單離DNA係併於其中。 73 · —種宿主細胞，其特徵在於申請專利範圍第72項之重 組表現載體係導入其中。 74. —種提高活性的方法，其特徵在於同時施加該專一於 一相同特定抗原之複數種類的抗-hGM-CSF單株抗體或其 之抗原結合部分。 16 201206955 R如申請專利範圍第74項所述之提高活性方法，其特徵 在於該複數種類的抗_hGM_CSF單株抗體或其之抗原結合 部分包括二或更多選自下列⑷與（b)類型的抗體或其之抗 原結合部分： ⑷一抗·hGM —CSF單株抗體或其之抗原結合部分，其之 一互補決定區（CDR)係由序列編號：4_9、序列編號： 330-335、序列編號：336-341、或序列編號：342_347之一 _ 胺基酸序列所代表，且其係專一於hGM-CSF， (b) —⑷的抗-hGM-CSF單株抗體或其之抗原結合部 分，其之胺基酸序列中有一或更多胺基酸被取代、刪除' 插入或附加，且其係專一於hGM-CSF。 76. 如申請專利範圍第75項所述之提高活性方法，其特徵 在於當hGM-CSF引發TF-1細胞增殖時，該二或更多類型 φ 的抗體或其之抗原結合部分各自以一約55 pM的濃度抑制 80 %的TF-1細胞增殖。 77. —種醫藥組合物或一獸醫藥物組合物，其包括： 複數種類專一於一相同特定抗原之抗_hGM-CSF單株抗 體或其之抗原結合部分、及一藥學可接受載體。 78. 如申請專利範圍第77項所述之醫藥組合物或獸醫藥物 組合物，其特徵在於該複數種類的抗_hGM-CSF單株抗體或 17 201206955 其之抗原結合部分包括二或更多選自下列⑷與㈨類型的 抗體或其之抗原結合部分： (a) —抗-hGM-CSF單株抗體或其之抗原結合部分，其之 一互補決定區（CDR)係由序列編號：4_9、序列編號： 330-335、序列編號：336_341、或序列編號：342 347之— 胺基酸序列所代表，且其係專一於hGM_CSF， (b) —（a)的抗-hGM-CSF單株抗體或其之抗原結合部 刀，其之胺基酸序列中有一或更多胺基酸被取代、刪除、 插入或附加，且其係專—於hGM CSF。 79.如申请專利範圍第78項所述之醫藥組合物或獸醫藥物 組合物’其特徵在於當hGM_CSF引發TF1細胞增瘦時， 該二或更多類型的抗體或其之抗原結合部分各自以一約55 PM的濃度抑制80%的TF-1細胞增殖。18
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