TW200529822A - Novel ketoamides with cyclic p4's as inhibitors of ns3 serine protease of hepatitis c virus - Google Patents

Description

200529822 九、發明說明： 【發明所屬之技術領域】 本發明係關於新穎C型肝炎病毒（"HCV")蛋白酶抑制劑， 含有一或多種此種抑制劑之醫藥組合物，製備此種抑制劑 之方法，及使用此種抑制劑以治療C型肝炎及相關病症之 方法。本發明另外揭示新穎大環化合物作為HCVNS3/NS4a 絲胺酸蛋白酶之抑制劑。本申請案係請求得自2004年2月27 曰提出申請之美國臨時專利申請案序號60/548,506之優先 權。 【先前技術】 C型肝炎病毒（HCV)為（+)-有意義單股RNA病毒，其已被牽 連為非A型、非B型肝炎（NANBH)中之主要病因劑，特別是 在血液有關聯之NANBH (BB-NANBH)中（參閱國際專利申請 案公報案號WO 89/04669與歐洲專利申請案公報案號 EP 381 216)。NANBH係與其他類型之病毒所引致之肝病有區 別，譬如A型肝炎病毒（HAV)、B型肝炎病毒（HBV)、5型肝 炎病毒（HDV)、巨細胞病毒（CMV)及愛氏噸-巴爾（Epstein-Barr) 病毒（EBV)，>以及其他肝病形式，譬如酒精中毒與原發性膽 硬化。 最近，多肽處理與病毒複製所必須之HCV蛋白酶已被確 認、無性繁殖及表現（參閱，例如美國專利5,712，145)。此種 大約3000胺基酸之多蛋白，從胺基末端至羧基末端，係含 有殼包核酸蛋白質（C)、包膜蛋白質（E1與E2)及數種非結構 性蛋白質（NS1，2, 3, 4a，5a及5b)。NS3為大約68 kda蛋白質，被 99030-1 200529822 HCV基因組之大約1893個核苷酸編碼，且具有兩個獨特功 能部位：⑻絲胺酸蛋白酶功能部位，包含大約200個N-末端 胺基酸；與（b) RNA依賴性ATPase功能部位在蛋白質之Ο末 端處。由於蛋白質順序、整體三次元結構及催化作用機制 上之類似性，故NS3蛋白酶被認為是胰凝乳蛋白酶原族群 之一個成員。其他似胰凝乳蛋白酶原酵素為彈性蛋白酶、 Xa因子、凝血酶、胰蛋白酶、血纖維蛋白溶酶、尿激酶、 tPA及PSA。HCVNS3絲胺酸蛋白酶係負責多肽（多蛋白）在 NS3/NS4a、NS4a/NS4b、NS4b/NS5a 及 NS5a/NS5b 接合處之蛋白 水解，且因此負責在病毒複製期間產生四種病毒蛋白質。 這已使得HCVNS3絲胺酸蛋白酶成為抗病毒化學療法之吸 引人之標的。本發明化合物可抑制此種蛋白酶。其亦可調 制C型肝炎病毒（HCV)多肽之處理。 已測定出NS4a蛋白質，一種大約6kda之多肽，係為NS3 之絲胺酸蛋白酶活性之輔因子。NS3/NS4a接合處藉由 NS3/NS4a絲胺酸蛋白酶之自動分裂係以分子内方式（意即順 式）發生，然而其他分裂位置係以分子間方式（意即反式） 進行。 一 HCV蛋白酶之天然分裂位置之分析，揭發半胱胺酸存在 於P1處，而絲胺酸存在於ΡΓ處，且此等殘基係在NS4a/ NS4b、NS4b/NS5a 及 NS5a/NS5b 接合處嚴格地保守。NS3/NS4a 接合處含有蘇胺酸在P1處，與絲胺酸在P11處。NS3/NS4a處 之Cys— Thr取代被主張係負責此接合處之順式處理之要求 條件，而非反式。參閱，例如Pizzi等人(1994) Proc. Natl. Acad. Sci 99030-1 200529822 (USA) 91： 888-892 ^ Failla 箄人 Π996)折疊輿設計 1 : 35-42 〇 NS3/NS4a分裂位置亦比其他位置較容許致突變。參閱，例 如 Kollykhalov 等人(1994U. Virol. 68 : 7525-7533。亦已發現在分 裂位置上游區域中之酸性殘基係為有效分裂所需要。參 閱，例如 Komoda 箄人（1994) J. Virol. 68 : 7351-7357。 已經報告之HCV蛋白酶抑制劑，包括抗氧化劑（參閱國際 專利申請案公報案號WO 98/14181)、某些肽與肽類似物（參閱 國際專利申請案公報案號WO 98/17679，Landro等人（1997) Biochem. 36 : 9340-9348，Ingallinella 箄人 Π998) Biochem. 37 : 8906-8914, Llinas-Brunet 等人 Π998) Bioorg. Med. Chem. Lett· 8: 1713-1718)、 以70-胺基酸多肽也葛林c (eglinc)為基礎之抑制劑（Martin等 人（1998) Biochem. 37 : 11459-11468)，親和力抑制劑，選自人類 胰分泌胰蛋白酶抑制劑（hPSTI-C3)與微小物體存庫（MBip) (Dimasi 等人（1997) J. Virol· 71 : 7461-7469)，cVHE2 (π 駱駝化 π 可變 功能部位抗體片段 XMartin 等人 Π 997) Protein Eng. 10 ·· 607-614) 及αΐ-抗胰凝乳蛋白酶原（ACT)(Elzouki等人（1997) J. Hepat. 27 ： 42-28) 〇經設計以選擇性地破壞C型肝炎病毒RNA之核糖酵 素最近已被揭示（參閱BioWorld Today 9(217) : 4 (1998年11月10 曰））。 亦參考PCT公報案號1998年4月30日公告之WO 98/17679 (Vertex醫藥公司）；1998年5月28日公告之WO 98/22496 (F. Hoffmann-La Roche AG);及 1999 年 2 月 18 日公告之 WO 99/07734 (Boehringer Ingelheim Canada 公司）。 HCV係牽連肝硬化及誘發肝細胞癌。對於患有HCV感染 99030-1 200529822 之病患之預後，目前是很貧乏的。HCV感染比其他肝炎形 式更難以治療，此係由於缺乏與HCV感染有關聯之免疫或 緩解所致。目前資料顯示，肝硬化診斷後第四年低於50% 之存活率。被診斷患有局部可切除肝細胞癌之病患具有 10-30%之五年存活率，然而患有局部不可切除肝細胞癌者 具有低於1%之五年存活率。 參考 WO 00/59929 (US 6,608,027，讓受人：Boehringer Ingelheim (Canada)公司；2000年10月12日公告），其係揭示下式肽衍生

參考A. Marchetti等人，办《/故，紅，1000-1002 (1999)，其係描述 HCVNS3蛋白酶抑制劑之雙環狀類似物之合成。其中所揭示 之一種化合4勿具有下式：

亦參考 W· Hm 等 k，Bioorganic & Medicinal Chem. Lett, (2000)边， 711-713，其係描述含有烯丙基與乙基官能基之某些α-酮醯 99030-1 -10- 200529822 胺、α-酮酯類及α-二酮類之製備。 亦參考 WO 00/09558 (讓受人·· Boehringer Ingelheim 有限公司； 2000年2月24日公告），其係揭示下式肽衍生物： /2

Ζι

其中各種構件係定義於其中。該系列之一種說明性化合物 為·

亦參考 WO 00/09543 (讓受人·· Boehringer Ingelheim 有限公司； 2000年2月24日公告），其係揭示下式肽衍生物： 99030-1 -11- 200529822

其中各種構件係定義於其中。該系列之一種說明性化合物

亦參考 U.S· 6,608,027 (Boehringer Ingelheim，Canada)，其係揭示 以下類型之NS3蛋白酶抑制劑：

R3 X J R4、〆 其中各種部份基團係定義於其中。 99030-1 -12- 200529822 C型肝炎之現行療法包括干擾素-a (INFa)，及使用三唑 核甞與干擾素之組合療法。參閱，例如Beremguer等人（1998) Proc. Assoc. Am. Physicians 110(2) : 98-112。此等療法遭遇到低持 續回應率及頻繁之副作用。參閱，例如Hoofoagle等人（1997) N. Engl. J. Med. 336 : 347。目前，無疫苗可用於HCV感染。 進一步參考WO 01/74768 (讓受人：Vertex醫藥公司），2001 年10月11曰公告，其係揭示某些下列通式化合物（R係定義 於其中）作為C型肝炎病毒之NS3-絲胺酸蛋白酶抑制劑：

前文所提及之WO 01/74768中所揭示之一種特定化合物具 有下式：

PCT 公報 W0 01/77113 ； W0 01/081325 ； WO 02/08198 ； W0 02/08256 ； WO 02/08187 ； W0 02/08244 ； WO 02/48172 ； WO 02/08251 ;及2002年1月18曰提出申請之待審美國專利申 99030-1 * 13 - 200529822 請案序號10/052,386，係揭示各種類型之肽及/或其他化合 物’作為C型肝炎病毒之NS-3絲胺酸蛋白酶抑制劑。此等 申請案之揭示内容均併於本文供參考。 仍需要關於HCV感染之新穎治療藥品與療法。仍需要可 用於治療或預防或改善C型肝炎之一或多種病徵之化合 物。 仍需要治療或預防或改善C型肝炎之一或多種病徵之方 法。 仍需要使用本文中所提供之化合物調制絲胺酸蛋白酶活 性之方法’特別是HCV NS3/NS4a絲胺酸蛋白酶。 仍需要使用本文中所提供之化合物調制HCV多肽處理之 方法。 【發明内容】 在本發明之許多具體實施例中，其係提供新穎種類之 HCV蛋白酶抑制劑，含有一或多種此等化合物之醫藥組合 物，製備包含一或多種此種化合物之醫藥配方之方法，及 使用或多種此種化合物或一或多種此種配方治療或預防 HCV或改善C型肝炎之_或多種病徵之方法。本發明亦提 供❹jHCV多肽與醫蛋白酶交互作用之方法。在本文中 所提供之化合物中，會抑制HCV卿爬如絲胺酸蛋白酶活性 ::合物為較佳。本發明係揭示化合物，以及該化合物之 藥學上可接受鹽類、溶劑合物或酯類，該化合物具有結構 式1中所示之一般結構： 99030-1 -14· 200529822

其中：

R1為 Η、0R8、NR9RW 或 chr9r10，其中r8、r9&r1〇 可為 相同或不同，各獨立選自包括H、烷基-、烯基_、炔基_、 芳基-、雜烷基_、雜芳基_、環烷基_、雜環基-、芳烷基_ 及雜芳烷基； A與Μ可為相同或不同，各獨立選自r'or'nhr'nrr、 SR、SO#及鹵基；或八與乂係互相連接（換言之，a_e_l_m 一起採用），以致使上文式I中所示之部份基團：

Μ、 A

係形成無論-是三，四，六，七或八-員環烷基、四至八-員雜環 基、六至十-員芳基或五至十-員雜芳基； E 為 C(H)或 C(R); L 為 C(H)、C(R)、CH2C(R)或 C(R)CH2 ; R、W、R2及R3可為相同或不同，各獨立選自包括H、烧 基-、稀基-、炔基-、環烧基-、雜院基-、雜環基·、芳基-、 雜芳基-\(環烷基）烷基-、（雜環基）烷基.、芳基_院基·及雜 99030-1 -15- 200529822 芳基·•烧基·；或者，NRR，中之尺與尺，係互相連接，以致使^^，

且Y係選自下列部份基團·· R19 〇 R19 R15 八 N 形成四至八-員雜環基；

^>16 R17R18

Ri〇Rl7R18

R16 R20 R17R r20 r17 R18

R16 ^16 R17 R18

"1rAR17R18

其中 G 為 NH 或 0，且 Ri 5、Ri 6、r1 7、r1 8、r1 9 及 r2 〇 可為 相同或不同’各獨立選自包括H、Ci_Ci(^基、c「Ci。雜烧 基、C2-C1G烯基、c2-Cig雜烯基、c2_CiG炔基、c2_Ci❹雜炔基、 烷基、CpCs雜環基、芳基、雜芳基，或者：⑴無論 疋R與R 6可互相連接，以形成四至八-員環烷基或雜環 基’或R15與Rb係互相連接，以形成五至人m基或雜 每基，或R"與r2〇係互相連接，以形成五至八_員環烷基或 雜裱基，與⑻同樣地，獨立地，R17與R18係互相連接，以 形成三至八·員環烷基或雜環基， 其中各該烷基、芳基、雜芳基、環烷基或雜環基可為未 經取代，或視情況獨立被一或多個部份基團取代，取代基 99030-1 -16- 200529822 選自包括：羥基、烷氧基、芳氧基、硫基、烷硫基、芳基 硫，、胺基、醯胺基、烷胺基、芳胺基、&基磺醯基、芳 基磺醯基、磺醯胺基、烷基磺醯胺基、芳基磺醯胺基、_ 基、羧基、烷氧羰基、羧醯胺基、烷氧羰基胺基、烷氧羰 基氧基、烷基脲基、芳基脲基、_基、氰基及硝基。 上文所指之陳述’ "A與Μ係互相連接，以致上文式I中所 示之部份基團：

A

係形成無論是三，四，六，七或八·員環烷基、四至八_員雜環 基六至十-員芳基或五至十_員雜芳基"，可如下述以非限制 f生方式說明。因此，例如，在A與M係連接以致使上文式j 中所示之部份基團：

99030，! -17- 200529822

(意即M-L_E-A —起採用）係連接而形成三、四、七或八-員 環烷基、四至八-員雜環基、六至十-員芳基或五至十_員雜 芳基時’具有此藝中之一般技術者將明瞭可達成式I之類似 描述。 在上文所指之R、R，、R2及R3定義中，較佳烷基係由一至 十個碳原子所製成，較佳烯基或炔基係由二至十個碳原子 所製成，較佳環烷基係由三至八個碳原子所製成，而較佳 雜烷基、雜芳基或雜環烷基具有一至六個氧、氮、硫或磷 原子。 以式I表示之化合物，本身或併用本文中所揭示之一或多 種其他適當藥劑，可用於治療疾病，例如HCV、HIV、AIDS(後 天免疫不全徵候簇）及相關病症，以及調制C型肝炎病毒 (HCV)蛋白酶之活性、預防HCV或改善c型肝炎之一或多種 病徵。此種調制、治療、預防或改善，可以本發明化合物， 以及包含此種，化合物之醫藥組合物或配方達成。不受限於 理論，咸認HCV蛋白酶可為聰或奶如蛋白酶。本發明化合 物可抑制此種蛋白酶。其亦可調制c型肝炎病毒(He》多肤 之處理。 詳細說明 於一項具體實施例中，本發明係揭示以結構式丨表示之 化合物’或其藥學上可接受之鹽、溶劑合物或酯，其中各 種部份基®均如上文定義。 99030-1 -18 - 200529822 於另一項具體實施例中，R1為NR9R10，且R9為H，Rl0為 Η、烷基、芳基、雜烷基、雜芳基、環烷基、烷基_芳基、 烷基·雜芳基、芳基-烷基、烯基、炔基或雜芳基-烧基。 於另一項具體實施例中，R10係選自包括： 1-4

ίοη，Ί:，

卜 OH, \-OMe, j y^OMe

於另一項具體實施例中 民2係選自包括下列部份基團 99030-1 一 19 一 200529822

於另一項具體實施例中，R3係選自包括： 99030-1 -20- 200529822

99030-1 -21 - 200529822

其中R31為OH或0-烷基；且 R32 為 Η、C(0)CH3、C(0)0tBii 或 C(0)N(H)tBu。 於另一項具體實施例中，R3係選自包括下列部份基團：

99030-1 -22- 200529822

99030-1 -23- 200529822

其中γ3〇與γ31係選自包括：

99030-1 -24- 200529822

99030-1 -25- 200529822

99030-1 -26- 200529822

Y32係選自包括： ，Μ，丫、丫、

〆，mrWY、 且 Y12 係選自 Η、COOH、COOMe、CONH2、OMe、OH、 OCF3、OCH(CH3)2、OC(CH3)3、F、Cl、Br、NH2、NHS02CH3、 NHC(0)CH3、NHC02CH3、N02、S02NH2、CF3、Me、Et、異 丙基、環丙基、第三-丁基、苯基。 於另一項具體實施例中，部份基團：

Μ A \ / L—E

係選自下列結構： 99030-1 -27- 200529822

99030-1 -28- 200529822

於另一項具體實施例中，部份基團：

Μ A

L—E

99030-1 -29- 200529822

Me

於又其他具體實施例中，部份基團：

Μ A \ / L—E

係選自下列結構： 99030-1 -30- 200529822

自包括： η，、，，Αμζ，，/κ \ ^ 1-4 1-4 ，

M … 1-3 1-3 1·3

Me Me Me

Me

R2係選自包括下列部份基團： -31 - 99030-1 200529822

R3係選自包括下列部份基團： 99030-1 -32- 200529822

γ係選自包括：

各獨立選自包括： 其中Y3G與γ31可為相同或不同 99030-1 -33- 200529822

99030-1 -34- 200529822

99030-1 -35- 200529822 其中Y32係選自包括： - Μβ^ , , ΥΧ ΥΧ 〇-\ γχ χχ rr\rr^ 且 Υ12 係選自 Η、COOH、COOMe、CONH2、〇Me、ΟΗ、 OCF3、OCH(CH3)2、OC(CH3)3、F、Cl、Br、NH2、NHS02CH3、 NHC(0)CH3、NHC02CH3、N02、S02NH2、CF3、Me、a、異

丙基、環丙基、第三-丁基或苯基；且以下部份基團：

係為：

〇 展示優越HCV蛋白酶抑制活性之本發明代表性化合物， 係稍後列示於表1與2之描述中，伴隨著其在HCV連續檢測 中之生物學活性（Ki*值範圍係以毫微莫耳濃度11]^表示）。 於另一項具體實施例中，本發明係揭示表3中之下列化 合物： 99030-1 36- 200529822

表3 >^τΝψΝ^ ,V °^〇 ΟγΝ LJ Μ 〇<^Ν k "'ά α^τΝΛΝ^ Ρ Ο^Ν k 〇^Ν V 4。 0^ α^τΝΑΝ^ x^r ν 0 ν ν,Τ 0¾ 99030-1 -37- 200529822

99030-1 -38- 200529822

哺乳動物π係意謂人類及其他哺乳動物。 ’’烷基”係意謂脂族烴基，其可為直鏈或分枝狀，且包含 、、’勺1至約20個奴原子在此鏈中。較佳烧基含有約1至約a個 碳原子在此鏈中。更佳烷基含有約丨至約6個碳原子在此鏈 中。分枝狀係意謂一或多個低碳烷基譬如甲基、乙基或丙 基，被連接至線性烷基鏈。”低碳烷基"係意謂具有約i至 約6個碳原子之基團在此鏈中，其可為直鏈或分枝狀。，，經 取代之烷基’’ 一詞，係意謂烷基可被一或多個可為相同或不 同之取代基取代，各取代基係獨立選自包括_基、烧基、 芳基、環炫基、氰基、經基、院氧基、烧硫基、胺基、(烧 基）、-NH(環烧基）、-N(烧基h、-N(烧基)2、叛基及_c(〇)〇_烧 基。適當烷基之非限制性實例包括曱基、乙基、正_丙基、 異丙基及第三-丁基。 ’’烯基n係意謂含有至少一個碳-碳雙鍵之脂族烴基，且其 可為直鏈或分枝狀，並包含約2至約15個碳原子在此鏈中。 較佳烯基具·有約2至約12個碳原子在此鏈中；且更佳為約2 99030-1 -39- 200529822 至約6個碳原子在此鏈中。分枝狀係意謂一或多個低碳烷基 譬如曱基、乙基或丙基，被連接至線性烯基鏈。”低碳烯基 "係意謂約2至約6個碳原子在此鏈中，其可為直鏈或分枝 狀。π經取代之烯基"一詞，係意謂烯基可被一或多個可為 相同或不同之取代基取代，各取代基係獨立選自包括鹵 基、烧基、芳基、環烷基、氰基、烷氧基及_s(烷基）。適當 烯基之非限制性實例，包括乙烯基、丙烯基、化丁烯基、 3-甲基丁 -2-烯基、Ν-戊烯基、辛烯基及癸烯基。 π炔基”係意謂含有至少一個碳-碳參鍵之脂族烴基，且其 可為直鏈或分枝狀，並包含約2至約15個碳原子在此鏈中。 較佳炔基具有約2至約12個碳原子在此鏈中；且更佳為約2 至約4個碳原子在此鏈中。分枝狀係意謂一或多個低碳烷 基，譬如甲基、乙基或丙基，被連接至線性炔基鏈。"低碳 炔基”係意謂約2至約6個碳原子在此鏈中，其可為直鏈或 分枝狀。適當炔基之非限制性實例，包括乙炔基、丙炔基、 2-丁炔基及3-甲基丁炔基。”經取代之炔基"一詞，係意謂炔 基可被一或多侗可為相同或不同之取代基取代，各取代基 係獨立選自包括烷基、芳基及環烷基。 ”芳基”係意謂芳族單環狀或多環狀環系統，包含約6至 約14個碳原？，較佳為約6至約關碳原？。芳基可視情況 被-或多個”環系統取代基，，取代，纟可為相同或不同，且 均如本文疋義。適當芳基之非限制性實例，包括苯基與苯 基。 丁 ，'雜芳基m胃芳族單環狀或多環狀㈣統，包含約5 99030-1 -40- 200529822 至約14個環原子，較佳為約5至約⑽個環原子，其中一或多 個環原子為碳以外之元素，例域、氧或硫，單獨或併用。 較佳雜芳基含有約5至約6個環原子。"雜芳基”可視情況被 -或多個”環系統取代基"取代，其可為相同或不同，且均 如本文定義。雜芳基字根名稱前之字首氮、氧或硫，係意 謂至少一個氮、氧或硫原子個別存在作為環原子。雜芳基 之-個氮原子可視情況被氧化成其相應之N•氧化物。適當 雜芳基之非限制性實例，包括吡啶基、吡畊基、呋喃基、 嘍吩基、嘧啶基、吡啶酮（包括队取代之吡啶酮）、異嘮唑 基、異噻唑基、嘢唑基、嘍唑基、吡唑基、呋咕基、吡咯 基、吡唑基、三唑基、U，4-嘍二唑基、吡啡基、嗒呼基、 喹喏啉基、呔畊基、噚啕哚基、咪唑并[^a]吡啶基、咪唑 并[2，1七]嘍唑基、苯并呋咕基、吲哚基、氮吲哚基、苯并咪 唑基、苯并嘍吩基、喹啉基、咪唑基、噻吩并吡啶基、喹 唑啉基、嘧吩并嘧啶基、吡咯并吡啶基、咪唑并吡啶基、 異喳啉基、苯并氮^丨哚基、1，2,4_三畊基、苯并嘍唑基等。，， 雜芳基’’ 一詞亦指部份飽和雜芳基部份基團，例如四氫異喳 啉基、四氫喳啉基等。 π芳烷基π或π芳基烷基”係意謂芳基-烧基-基團，其中芳 基與烷基均如前文所述。較佳芳烷基係包含低碳烷基。適 當芳烷基之非限制性實例，包括芊基、2-苯乙基及萘基甲 基。對母體部份基團之鍵結係經過炫基。 π烷基芳基”係意謂烷基-芳基-基團，其中烷基與芳基均 如前文所述。較佳烷基芳基係包含低碳烷基。適當烷基芳 99030-1 -41 - 200529822 基之非限制性實例為甲苯基。斜母體都 対甘體°卩份基團之鍵結係經 過芳基。 ”環烷基”係意謂非芳族單-或多環狀環系統，包含約3至 約10個碳原子，較佳為約5至約1〇個碳原子。較佳環烷基環 含有約5至約7個環原子。環烷基可視情況被一或多個f，環 系統取代基11取代，其可為相同或不同，且均如上文定義。 適當單環狀環烷基之非限制性實例，包括環丙基、環戊基、 環己基、環庚基等。適當多環狀環烷基之非限制性實例， _ 包括丨_十氫莕基、正狺基、金鋼烷基等，以及部份飽和物 種，例如氫茚基、四氫莕基等。 π鹵素"或π鹵基"係意謂氟、氯、溴或破。較佳為氟、氣 及溴。 π環系統取代基”係意謂連接至芳族或非芳族環系統之取 代基，其例如係置換環系統上之可取用氫。環系統取代基 可為相同或不同’各獨立選自包括烧基、稀基、炔基、芳 基、雜芳基、芳烷基、烷基芳基、雜芳烷基、雜芳基烯基、 ® 雜芳基炔基、稼基雜芳基、經基、經烧基、烧氧基、芳氧 基、芳烷氧基、醯基、芳醯基、齒基、硝基、氰基、羧基、 烷氧羰基、芳氧基羰基、芳烷氧基羰基、烷基磺醯基、芳 基磺醯基、雜芳基磺醯基、烷硫基、芳基硫基、雜芳基硫 基、芳烷硫基、雜芳烷基硫基、環烷基、雜環基、 -C(=N-CN)-NH2、-C(=NH)-NH2、-C(=NH)-NH(烷基）、YiYaN-、 ΥιΥ2Ν-烷基-、YiYzNCCO)-、YtYJSCV 及-SC^NYiY〗，其中 Yi與γ2可為·相同或不同，且獨立選自包括氫、烷基、芳基、 99030-1 -42- 200529822 ί哀烷基及芳烷基。"環系統取代基”亦可意謂單一部份基 團，其同時置換環系統上兩個相鄰碳原子上之兩個可採用 氫（一個Η在每一個碳上）。此種部份基團之實例為亞甲二 氧基、次乙二氧基、_C(CH3)2_及其類似物，其係形成例如 以下之部份基團：

’’雜環基”係意謂非芳族飽和單環狀或多環狀環系統，包 含約3至約1〇個環原子，較佳為約5至約1〇個環原子，其中 在此環系統中之一或多個原子為碳以外之元素，例如氮、 乳或硫，單獨或併用。沒有相鄰氧及/或硫原子存在於此環 系統中。較佳雜環基含有約5至約6個環原子。在雜環基字 根名稱前之字首氮、氧或硫，係意謂至少—個氮、氧或硫 原子個別存在作為環原子。雜環基環中之任何_nh可經保 護存在，例如作成-N(B〇c)、_N(CBz)、_N(T〇s)基團等；此種保 濩亦被認為是本發明《一部❾。雜環基可視情況被一或多 環系統取代基"取代，其可為相同或不同，且均如本文 定義雜ί衣i t氮或硫原子可視情況被氧化成其相應之N_ 氧化物、s_氧化物或s，s-二氧化物。適當單環狀雜環基環之 非限制性實例包括六氫心基、四氫料基、六氫心井基、 嗎福啉基、硫代嗎福啉基、噻唑啶基、丨，4_二氧陸圜基、四 氫呋喃基、四氫硫苯基、内醯胺、内酯等。 基在鄰近N·、 應注意的是，在本發明含有雜原子之環系統中，沒有羥

99030-1 -43- 200529822 近另一個雜原子之碳上。因此，例如在以下環中

沒有-OH直接連接至標記2與5之碳。 亦應’主忍的是，互變異構形式，例如以下部份基團： (χ

Η 與 N 'OH # 於本發明之某些具體實施例中被認為是相等的。 M炔基烷基”係意謂炔基-烷基-基團，其中炔基與烷基均 如刖文所述。較佳炔基烷基含有低碳炔基與低碳烷基。對 母體部份基團之鍵結係經過烷基。適當炔基烷基之非限制 性實例包括炔丙基甲基。 雜芳烷基’’係意謂雜芳基-烷基-基團，其中雜芳基與烷 基均如前文所述。較佳雜芳烷基含有低碳烷基。適當芳烷 基之非限制性實例，包括吡啶基甲基與喳啉基甲基。對 % 母體部份基團之鍵結係經過烷基。 n經烧基”-係意謂HO-烷基-基團，其中烷基係如前文定 義。較佳羥烷基含有低碳烷基。適當羥烷基之非限制性實 例，包括羥甲基與2-羥乙基。 ”醯基11係意謂H-C(O)-、烷基-C(O)-或環烷基-C(O)-基團， 其中各種基團係如前文所述。對母體部份基團之鍵結係經 過羰基。較佳醯基含有低碳烷基。適當醯基之非限制性實 例，包括甲醯基、乙醯基及丙醯基。 99030-1 -44- 200529822 "芳醯基”係意謂芳基_c(0)_基團，其中芳基係如前文所 述。對母體部份基團之鍵結係經過羰基。適當基團之非限 制性實例’包括笨甲醯基與茶甲醯基。 ，烷氧基π係意謂烷基基團，其中烷基係如前文所述。 適當烷氧基之非限制性實例，包括甲氧基、乙氧基、正 丙氧基、Μ氧基及正-丁氧基。對母體部份基團之鍵結係 經過醚氧。 π芳氧基π係意謂芳基基團，其中芳基係如前文所述。 適當芳氧基之非限制性實例，包括苯氧基與莕氧基。對母 體部份基團之鍵結係經過醚氧。 芳烷氧基”係意謂芳烷基基團，其中芳烷基係如前文 所述。適當芳烷氧基之非限制性實例，包括苄氧基與丨_或 2-奈甲氧基。對母體部份基團之鍵結係經過醚氧。 烷硫基”係意謂烷基各基團，其中烷基係如前文所述。 烷硫基之非限制性實例適當，包括甲硫基與乙硫基。對母 體部份基團之鍵結係經過硫。 π芳基硫基”:係意謂芳基-S-基團，其中芳基係如前文所 述。適當芳基硫基之非限制性實例，包括苯硫基與萘基硫 基。對母體部份基團之鍵結係經過硫。 芳烷硫基’’係意謂芳烷基基團，其中芳烷基係如前文 所述適^务院硫基之非限制性實例為爷硫基。對母體部 份基團之鍵結係經過硫。 烧氧~基係意謂烧基-0-CO-基團。適當烧氧羰基之非 限制丨生實例，包括甲氧幾基與乙氧幾基。對母體部份基團 99030-1 -45- 200529822 之鍵結係經過羰基。 "芳氧基羰基"係意謂芳基_0_c(0>基團。適當芳氧基羰基 之非限制性實例’包括苯氧基幾基與審氧基録。對母體 部份基團之鍵結係經過幾基。 Π芳烷氧基羰基’’係意謂芳烷基-〇-C(〇)_基團。適當芳烷氧 基羰基之非限制性實例為苄氧羰基。對母體部份基團之鍵 結係經過羰基。 •’烷基磺醯基”係意謂烷基4(02)_基團。較佳基團係為其 中烷基為低碳烷基者。對母體部份基團之鍵結係經過磺醯 基。 ' 方基石兴醯基係忍谓芳基_S(〇2)_基團。對母體部份基團 之鍵結係經過磺醯基。 ff經取代”一詞，係意謂在所指定原子上之一或多個氫係 被選自所指示之基團取代，其條件是，不會超過所指定原 子於存在情況下之正常價鍵，且此取代會造成安定化合 物。取代基及/或變數之組合，只有在此種組合會造成安定 化合物下才可允許。所謂，’安定化合物”或”安定結構，，，係 意指化合物足夠強健而自反應混合物中留存著，單離至有 用純度，及調配成有效治療劑。 π 一或多個π或11至少一個” 一詞，當表示取代基、化合 物、組合劑等之數目時，係指至少一個，且至高達化學上 及物理上允許之存在或添加之取代基、化合物、組合劑等 之隶大數目，依内文而定。此種技術與知識係為相關技師 之技術範圍内所習知。 99030-1 •46- 200529822 "視情況經取代"一詞，係意謂以特定基團、原子團或部 份基團之選用取代。 關於化合物之"經單離"或"呈單離形式"術語，係指該化 合物自合成方法或天然來源或其組合單離後之物理狀離。 關於化合物之"經純化”或”呈純化形式”術語，係指該化合 物得自本文中所述或熟練技師所習知之一或多種純化方法 後之物理狀態，其係呈充分純度，可藉由本文中所述或熟 練技師所習知之標準分析技術特徵鑒定。 亦應注意的是，在本文之内文、圖式、實例及表格中， 具有未滿足價鍵之任何碳或雜原子係被假定為具有氫原 子，以滿足該價鍵。 當化合物中之官能基被稱為”經保護”時，這意謂該基團 係呈經改質形式，以在化合物接受反應時，排除經保護位 置處之不想要副反應。適當保護基係為具有此藝中之一般 技術者以及參考標準教科書所明瞭，例如Τ· w· Greene等人， 才滅合4 之保護基（1991)，Wiley，New York。 當任何變數C例如芳基、雜環、R2等）在任何成份中或在 式Ϊ中出現超過一次時，其在各存在處之定義係與其在每一 個其他存在處之定義無關。 於本文中使用之’’組合物π —詞，係意欲涵蓋一種以特定 量包含特定成份之產物，以及直接或間接由特定成份以特 疋里組合所形成之任何產物。 本發明化合物之前體藥物與溶劑合物，亦意欲被涵蓋於 此處。當於本文中採用時，"前體藥物，，一詞係表示一種藥 99030-1 -47- 200529822 物先質之化合物，其在投予病患時，係藉由代謝或化學過 程進行化學轉化，而產生式〗化合物或其鹽及/或溶劑合 物。前體藥物之討論係提供於T.Higuchi與V.Stella，#邀## 作4#蘑/##肩裁（i987)ii，A.C.S·論集系列，與在藥物設計 中之生物可逆載劑，（1987) EdwardB· Roche編著，美國醫藥協會 與Pergamon出版社中，此兩者均併於本文供參考。 π溶劑合物”係意謂本發明化合物與一或多種溶劑分子之 物理締合。此物理締合係涉及不同程度之離子與共價鍵 ® 結，包括氫鍵。在某些情況中，溶劑合物能夠隔離，例如 當一或多個溶劑分子被併入結晶性固體之晶格中時。f，溶劑 合物’’係涵蓋溶液相與可隔離之溶劑合物。適當溶劑合物之 非限制性實例包括乙醇化物、甲醇化物等。”水合物，，為溶 劑合物，其中溶劑分子為H2〇。 有效量”或”治療上有效量”，係意欲描述本發明化合物 或組合物有效抑制CDK之量，且因此產生所要之治療、改 g 善、抑制或預防效果。 出。當於本文中採用時， 一詞係表示以無機及/或有機

内。藥學上可接受（意即無毒性、 式I化合物可形成鹽，其亦在本發明之範圍内。於本文中 指稱之式I化合物，應明瞭係包括指稱其鹽，㈣另有指 芝不限於叛酸時，可形成 本文中使用之π鹽” 一詞 生理學上可接受）之鹽為 99030-1 • 48 - 200529822 較佳，惟其他鹽亦可使用。式i化合物之鹽可例如經由使气 I化合物與某一數量之酸或鹼，譬如等量，在媒質中，壁汝 鹽會沉澱於其中者，或在水性媒質中反應，接著冷康乾燥 而形成。 舉例之酸加成鹽，包括醋酸鹽、抗壞血酸鹽、苯甲酸魄、 苯磺酸鹽、酸性硫酸鹽、硼酸鹽、丁酸鹽、檸檬酸鹽、 T平 腦酸鹽、樟腦磺酸鹽、反丁烯二酸鹽、鹽酸鹽、氫漠酸_、 氫碘酸鹽、乳酸鹽、順丁烯二酸鹽、甲烷磺酸鹽、茶續酸 鹽、硝酸鹽、草酸鹽、磷酸鹽、丙酸鹽、柳酸鹽、琥辑酸 鹽、硫酸鹽、酒石酸鹽、硫氰酸鹽、甲苯續酸鹽 (toluenesulfonate)(亦稱為甲苯磺酸鹽（t0Sylate))等。此外，一般 被認為適合由驗性醫藥化合物形成藥學上可使用鹽之酸 類，係由例如P· Stahl等人，Camille G.(編著）誊赛鹽手滞從 f、選# 及苈途，（2002) Zurich : Wiley-VCH ; S. Berge 等人，夢襄 科學期刊{\9ΊΊ、66(111-19 ； P. Gould, M m M ^ ^ m (1986) 31 201-217 ; Anderson等人，夢藥允學實務（1996)，大學出版社，

New York ;及#.皮#(食品藥物管理局，Washingt〇n，D C在其網 站上）討論。此等揭示内容均併於本文供參考。 舉例之鹼性鹽包括銨鹽，鹼金屬鹽，譬如鈉、鋰及鉀鹽， 鹼土金屬鹽，譬如鈣與鎂鹽，與有機鹼（例如有機胺類）之 鹽，該鹼類譬如二環己基胺類、第三-丁基胺類，及與胺基 酸之鹽’該胺基酸譬如精胺酸、離胺酸等。驗性含氮基團 可以作用劑四級化，譬如低碳烷基鹵化物（例如甲基、乙基 及丁基氣化物、、/臭化物及礙化物）、二烧基硫酸鹽（例如二 99030-1 •49- 200529822 甲基、二乙基及二丁基硫酸鹽）、長鏈_化物（例如癸基、 月桂基及硬脂基氣化物、溴化物及碘化物）、芳烷基函化物 (例如苄基與苯乙基溴化物）及其他。 所有此種酸鹽與鹼鹽係意欲成為本發明範圍内之藥學上 可接受鹽，且對本發明之目的而言，所有酸與鹼鹽係被認 為相當於相應化合物之自由態形式。 本發明化合物之藥學上可接受酯類包括下列基團：⑴羧 酸酯類，藉由羥基之酯化作用所獲得，其中酯族群之羧酸 4份之非羰基部份基團，係選自直鏈或分枝鏈烷基（例如乙 醯基、正·丙基、第三_丁基或正叮基）、烷氧烷基（例如甲 氧基甲基）、芳烷基（例如苄基）、芳氧基烷基（例如苯氧基 甲基）、芳基（例如苯基，視情況被例如_素、Ci 4烷基或 ci-4烷氧基或胺基取代）；（2)磺酸酯類，譬如烷基-或芳烷基 κ酿基（例如甲烧石黃醯基）；⑶胺基酸酯類（例如l-異綠草胺 醯基或異白胺醯基）；（4)膦酸酯類，及（5)單_、二-或三磷 酸酯類。磷酸酯可藉由例如Ci^醇或其反應性衍生物，或 藉由2,3_二（c：6·24)蕴基甘油進一步酯化。 式I化合物及其鹽、溶劑合物、酯類及前體藥物，可以其 互變異構形式存在（例如作為醯胺或亞胺基醚）。所有此種 互變異構形式係意欲被涵蓋在本文中，作為本發明之一部 份。 本發明化合物（包括化合物之鹽、溶劑合物、醋類及前體 藥物以及前體藥物之鹽與溶劑合物)之所有立體異構物(例 如幾何異構物、光學異構物等）’譬如可由於不同取代基上 99〇3〇-i -50- 200529822 之不對所致而存在者，包括對掌異構物形式（其甚至可 於不對稱碳不存在下存在）、旋轉異構形式、非向性異構物 及非對映異構物形式，係意欲被涵蓋在本發明之範圍内， 作為位置異構物（例>4_峨咬基與^卜定基）。本發明化合物 之個別立體異構物可例如實質上不含其他異構物，或可例 如經混合成為外消旋物，或與所有其他或其他經選擇之立 體異構物混合。本發明之對掌中心可具有如由職c腦建 議所定義之8或尺組態。，，鹽"、"溶劑合物”、”前體藥物" 等術》。之使用’係意欲同樣地適用於本發明化合物之對掌 異構物、立體異構物、旋轉異構物、互變異構物、位置異 構物、外消旋物或前體藥物之鹽、溶劑合物及前體藥物。 弋化δ物及式I化合物之鹽、溶劑合物、醋類及前體藥 物之多晶形式，欲被包含於本發明中。 應明瞭的是，式I化合物關於本文令所討論之治療應用之 制性，係適用於單獨各化合物，或一或多種式【化合物之 •―或多種組合’例如在下-緊接段落中所示者。相同之瞭 解亦適用於包含一或多種此種化合物之醫藥組合物及涉 及或夕種此種化合物之治療方法。 根據本發明之化合物可具有藥理學性質；特定言之，式I 化合物可為HCV蛋白酶之抑㈣，單獨之各化合物，或— 或f種式I化合物可與選自式丨内之一或多種化合物併用。 此等化合物可用於治療疾病，例如HCV、HIV、（AIDS，後 天免疫不全徵候簇）及相關病症，以及調制C型肝炎病毒 (HCV)蛋白酶之活性，預防HCv，或改善c型肝炎之一或多 99030-1 -51 - 200529822 種病徵。 式I化合物可用於製造藥劑，以治療與Hcv蛋白酶有關聯 之病症’例如此方法包括使幻化合物密切接觸 受之載劑。 於另-項具體實施例中’本發明係提供包含本發明一或 多種化合物作為活性成份之醫藥組合物。此等醫藥組合物 通常另外包含至少-種藥學上可接受、賦形 劑或載劑（於本文中總稱為載劑物質）。由於此種醫藥植八 物之HCV抑制活性，故其在治療C型肝炎及相關病症上具 有利用性。

於又另-項具體實施例中，本發明係、揭示製備包含本發 明，合物作為活性成份之醫藥組合物之方法。在本發明之 2藥組合物與方法中’活性成份典型上係與適當載劑物質 又予適胃地針對所意欲之投藥形式作選擇，意即口 服片劑、膠囊（無論是固體充填、半固體充填或液體充填）、 供賦形用之粉末、口服凝膠、酏劑、可分散顆粒、糖漿、 〜/予液等並與習用醫藥實務一致。例如，對於呈片劑或 J囊形式ί、口服投藥而言’可將活性藥物成份與任何口服 :毒性藥學上可接受之惰性載劑合併，譬如乳糖、殿粉、 f糖、纖、准素、硬脂酸鎖、麟酸二妈、硫酸妈、滑石、甘 路醇、乙醇(液體形式)等。再者，當想要或需要時，適當 黏口 d /間滑劑、崩解劑及著色劑亦可被摻人混合物中。 粉末與片劑可包含約5至約95百分比之本發明組合物。 適田黏合劑包括澱粉、明膠、天然糖類、玉米增甜劑， 99030-1 -52· 200529822 天然與合成膠質，譬如阿拉伯膠、海藻酸鈉、羧甲基纖維 素、聚乙二醇及蠛類。在潤滑劑中，特別可指出侧酸、苯 甲酸鈉、醋酸鈉、氣化鈉等供使用於此等劑型。崩解劑包 括澱粉、甲基纖維素、瓜爾膠等。 亦可加入。一些 潤滑劑、黏合劑 增甜與矯味劑及防腐劑，在適當情況下 上文指出之術語’意即崩解劑、稀釋劑、 等’係更詳細地討論於下文。

此外，本發明之組合物可被調配在持續釋出形式中，以 提供任一種或多種組份或活性成份之速率受控釋出，以使 治療作用意即HCV抑制活性等達最佳化。供持續釋出之適 當劑型，包括層合片劑’其含有數層不同崩解速率層，或 受控釋出聚合體基質，其細活性成份浸潰，且被製成片 發J形式或含有此種經浸潰或包覆多孔性聚合體基質之膠 囊0 液體形式製劑包括溶液、懸浮液及乳化液。以下述作為 實例，可指出水或水·丙三醇溶液，用於非經腸注射液，或 添加增甜劑與鎮靜劑，用於口服溶液、懸浮液及乳化液。 液體形式製劑亦可包括供鼻内投藥之溶液。 I用於吸入之氣溶膠製劑可包括溶液及呈粉末形式之固 體其可併肖t學上可接受之冑齊！，譬如惰性麼縮氣體， 例如氮。 為製備技劑，係首先使低熔點蠟熔解，譬如脂肪酸甘油 酯之混合物，譬如可可豆脂，並藉由攪拌或類似混合，使 活f生成伤均勻地分散於其中。然I，將熔融態均勻混合物 99030-1 •53- 200529822 倒入合宜大小模具中，使其冷卻及藉以固化。 亦包括固體形式製劑，其係意欲在使用之前不久，被轉 化成液體形式製劑，無論是供口服或非經腸投藥。此種液 體形式包括溶液、懸浮液及乳化液。 本發明化合物亦可以經皮方式傳輸n組合物可採取 乳膏、洗劑、氣溶膠及/或乳化液之形式，並可被包含在基 質或儲器型之經皮貼藥中，如同此項技藝中習用於此項目 的之方式。 • 本發明化合物亦可以經口方式、靜脈内方式、鼻内方式 或皮下方式投藥。 本發明化合物亦可包括呈單位劑型之製劑。在此種形式 中，製劑係被再分成適當大小之單位劑量，含有適當量之 活性成份，例如達成所要目的之有效量。 本發明活性組合物在單位劑量製劑中之量可以一般方式 改變或調整，從約L0毫克至約毫克，較佳為約1〇至約 _ 950毫克’更佳為約1〇至約5〇〇毫克，及典型上為約1至約25〇 毫克’根據特定應用而定。所採用之實際劑量可依病患之 年令丨生別、體重及被治療症狀之嚴重性而改變。此種技 術係為熟諳此藝者所習知。 一般而言，含有活性成份之人類口服劑型可每天投予i 或2次。投藥之量與頻率係根據負責臨床師之判斷作調整。 供口服投藥之一般建議每日劑量服法在單一或分離劑量 中’可涵蓋從每天約le0毫克至約MOO毫克之範圍。 一些可使用之術語係描述於下文： 99030-1 -54- 200529822 膠囊係扣特殊容器或封閉物，製自甲基纖雉素、聚乙烯 醇或變性明膠或殿粉，用以容納或含有包含活性成份之組 合物：硬殼膠囊典型上係製自相對較高凝膠強度骨質與豬 皮明膠之摻合物。膠囊本身可含有少量染料、不透明化劑、 增塑劑及防腐劑。 片劑-係指含有活性成份與適當稀釋劑之經壓縮或模製 口體d聖。片劑可藉由壓縮混合物或藉由濕式造粒、乾式 造粒所獲得之粒化物或藉由壓實製成。 口服凝膠-係指經分散或增溶於親水性半固體基質中之 活性成份。 賦形用粉末係指含有活性成份與適當稀釋劑之粉末摻合 物，其可被懸浮於水或汁液中。 稀釋劑-係指經常構成組合物或劑型之主要部份之物 質。適當稀釋劑包括糖類，譬如乳糖、蔗糖、甘露醇及花 楸醇；澱粉，衍生自小麥、玉米、稻米及馬鈴薯；及纖維 素’譬如微晶性纖維素。稀釋劑在組合物申之量可涵蓋從 約10至約90% <範圍，以全部組合物之重量計，較佳為約25 至約75%，更佳為約3〇至約6〇重量％，又更佳為約12至約 60%。 朋解劑·係指被添加至組合物中，以幫助其破裂開來（崩 解）並釋出藥劑之物質。適當崩解劑包括澱粉；”冷水溶性，， 變性澱粉，譬如羧甲基澱粉鈉；天然與合成膠質，譬如刺 槐豆、刺梧桐、瓜爾膠、西黃蓍樹膠及瓊脂；纖維素衍生 物’譬如曱基纖維素與羧甲基纖維素鈉；微晶性纖維素與 99030-1 -55- 200529822 譬如交聯羧甲基纖維素鈉；海藻酸鹽， 交聯微晶性纖維素 譬如海藻酸與海蘿舱H L _ /喿^納，黏土，譬如膨土；及起泡混合物。 朋解在組合物中之量可涵蓋從約2至約之範圍，以組 合物之重量計，更佳為約4至約10重量％。 、

黏合劑-係指使粉末結合或，，膠黏”在一起，並藉由形成顆 粒使彼等内聚之物質，因此在配方中充作”黏著劑”。黏合 劑會增加已可取用於稀釋劑或膨鬆劑中之内聚強度。適當 黏合劑包括糖類，譬如嚴糖；澱粉，衍生自小麥、玉米^ Τ:及馬鈴薯’天然膠質，譬如阿拉伯膠、明膠及西黃蓍 樹膠，海何生物，譬如海藻酸、海藻酸納及藻酸錢約； 纖、准素物貝’譬如甲基纖維素與緩甲基纖維素納及經丙甲 基纖維素，聚乙烯基四氫< ρ各酮；及無機物質，譬如石夕酸 鎮銘黏合劑在組合物中之量可涵蓋從約2至約聽之範 圍以組合物之重量計，更佳為約3至約1〇重量％ ,又更佳 為約3至約6重量〇/0。 潤滑劑-係指被加入劑型中以使得片劑、顆粒等在被壓縮 後能夠藉由❹摩擦或磨損，而自模具或模口釋出之物 貝適田潤/月劑包括金屬硬脂酸鹽，譬如硬脂酸鎂、硬脂 酸約或硬脂酸鉀；硬脂酸；高溶㈣類；及水溶性潤滑劑， 譬^氣化納、苯甲酸鈉、醋酸鈉、油酸m二醇及孤 白胺i。潤滑劑經常在壓縮前之那個最後步驟添加，因其 必須存在於顆粒之表面上，及位在彼等與壓片機配件之 間。满滑劑在組合物中之量可涵蓋從約〇.2至約5%之範圍， 以組合物之重量計，較佳為約〇.5至約2%，更佳為約〇·3至 99030-1 -56- 200529822 約1.5重量％。 滑劑·預防成塊並改良粒化物之流動特性之物質，以致使 流動平滑且均勻。適當滑劑包括二氧化矽與滑石。滑劑在 組a物中之1，可涵蓋從全部組合物之約〇1%至約5重量％ 之範圍，較佳為約〇·5至約2重量％。

著色劑-對組合物或劑型提供著色之賦形劑。此種賦形劑 可包括食品級染料，及被吸附至適當吸附劑譬如黏土或氧 化鋁上之食品級染料。著色劑之量可從約〇1改變至約5%， 以組合物之重量計，較佳為約0.1至約1〇/〇。 生物利用率-係指當與標準物或對照組比較時，活性藥物 成伤或/〇療部伤基團從所投予之劑型被吸收至系統循環中 之速率與程度。 製備片劑之習用方法係為已知。此種方法包括乾式方 法，譬如直接壓縮及藉由壓實所製成粒化物之壓縮，或濕 式方法或其他特殊程序。製造其他投藥形式例如膠囊、检 劑等之習用方法，亦為習知。 本發月之另項具體實施例，係揭示上文所揭示之本發 明化合物或醫藥組合物於治療疾病例如C型肝炎等之用 逆此方法包括對患有此一或多種疾病且需要此種治療之 病患’投^治療上有效量之本發明化合物或醫藥組合物。 於又另-項具體實施财，本發明化合物可在人類中用 於治療HCV，其係在單一療法模式中，或在組合療法（例如 雙重口 一重組合等）模式中，例如併用抗病毒及/或免 疫巧㈣。此種抗病毒及/或免疫調制劑之實例包括三峻核 99030-1 -57- 200529822

答（得自 Schering-Plough 公司，Madison，New Jersey)與 LevovirinT M (得自ICN醫藥，CostaMesa，Califomia)、VP50406TM(得自 Viropharma 公司，Exton，Pennsylvania)、ISIS 14803TM(得自 ISIS 醫 藥，Carlsbad，California) 、HeptazymeTM(得自 Ribozyme 醫藥， Boulder, Colorado) 、VX 497T M (得自 Vertex 醫藥，Cambridge， Massachusetts) 、ThymosinTM(得自 SciClone 醫藥，San Mateo, California)、MaxamineTM(Maxim 醫藥，SanDiego，Califomia)、分枝 紛酸莫非替（mycophenolate mofetil)(得自 Hoffman-LaRoche，Nutley， New Jersey)、干擾素（例如干擾素-a、PEG-干擾素α共輛物） 等。"PEG-干擾素a共軛物”係為以共價方式連接至PEG分子 之干擾素a分子。說明性PEG-干擾素a共軛物包括干擾素a -2a (RoferonT M，得自 Hoffman La-Roche，Nutley，New Jersey)，呈 PEG 化干擾素a-2a形式（例如以商標名PegasysTM銷售），干擾素a -2b (IntronTM，得自 Schering-Plough 公司），呈 PEG 化干擾素 a-2b 形式（例如以商標名PEG-IntronTM銷售），干擾素a-2c (Berofor Alpha7 M，得自 Boehringer Ingelheim，Ingelheim，Germany)， 或同感干擾素.，如藉由天然生成干擾素α之同感順序測定 所定義者（InfergenT M，得自 Amgen，Thousand Oaks，California)。 【實施方式】 如前文陳述，本發明亦包括本發明化合物之互變異構 物、旋轉異構物、對掌異構物及其他立體異構物。因此， 正如熟諳此藝者所明瞭，一些本發明化合物可以適當異構 形式存在。此種變型係意欲被涵蓋在本發明之範圍内。 本發明之另一項具體實施例係揭示一種製造本文中所揭 99030-1 -58- 200529822 不化合物之方法。此等化合物可藉由此項技藝中已知之數 種技術製備。說明性程序係概述於下列反應圖式中。此等 說明不應被解釋為限制本發明之範圍，該範圍係被定義於 隨文所附之請求項中。替代之機制途徑與類似結構，將為 熟諳此藝者所顯而易見。 應明瞭的是，雖然下述說明性合成圖式係描述少數代表 性本發明化合物之製備，但任何天然與非天然胺基酸類兩 者之適當取代，將會造成所要化合物之形成，以此種取代 為基礎。此種變型係意欲被涵蓋在本發明之範圍内。 對於下文所述之程序，係使用下列縮寫： 縮寫 使用於下文圖式、製備及實例描述中之縮寫為： THF :四氫吱喃 DMF : N，N-二甲基甲醯胺 EtOAc :醋酸乙酯 AcOH :醋酸 HOOBt : 3-羥基-1，2,3_苯并三畊-4(3H)-酮 EDCI : 1-(3-二甲胺基丙基）-3-乙基碳化二亞胺鹽酸鹽 NMM: N-甲基嗎福啉 ADDP : 1，1’-(偶氮二羰基）雙六氫吡啶 DEAD :偶氮二羧酸二乙酯 DIAD :偶氮二羧酸二異丙酯

MeOH ··曱醇

EtOH :乙醇 ^ 99030-1 -59- 200529822

Et2 Ο :乙醚 DMSO :二曱亞颯 HOBt : Ν-羥基苯并三唑

PyBrOP ··六氟填酸漠-參-四氫外匕口各基鱗 DCM :二氣甲烷 DCC ·· 1，3-二環己基碳化二亞胺 TEMPO : 2,2,6,6_四甲基-1-六氫吡啶基氧基

Phg :苯基甘胺酸

Chg :環己基甘胺酸

Bn :爷基

Bz :爷基

Et :乙基

Ph:苯基 iBoc :異丁氧基羰基 iPr :異丙基 tBu或Bu11 :第三-丁基 Boc :第三-丁氧羰基 Cbz :芊氧羰基 Cp :環戊二烯基 Ts :對-甲苯磺醯基 Me :甲基

Ms或Mesyl :曱烧磺醯基 HATU ··六氟磷酸0-(7-氮苯并三唑小基）-1，1，3,3-四甲基錁 DMAP : 4-N，N-二甲胺基吡啶 99030-1 -60 - 200529822

Bop :苯并三唑小基-氧基-參（二甲胺基）六氟磷酸鹽 PCC :氯鉻酸吡鍵 DIBAL-H :二異丙基氫化鋁 rt或RT :室溫 定量：定量產率 h或hr :小時 min :分鐘 TFA :三氟醋酸 • 製備標的化合物之一般圖式 本發明化合物係使用下文所述之一般圖式（方法A-E)合 成。

方法A N-Boc官能基1.01於酸性條件下之去除保護係提供其鹽酸 鹽1.02，接著，使其在肽偶合操作法下，與N-Boc-第三-白胺 酸偶合，而得1.03。於N-Boc去除保護後，係接著以適當異 氰酸酯處理，獲得脲1.05。曱酯之水解作用係提供酸1.06。 ® 酸1.06與適當h -P’ 一級醯胺部份基團之肽偶合，係提供羥基 醯胺1.07。氧化作用（Moffatt氧化作用或相關方法-參閱 Τ· T. Tidwell，办加心治，1990, 857)或 Dess-Martin 過峨烧（J· Og·· CAem.， (1983)超，4155)造成標的化合物1.08。 99030-1 -61 - 200529822

1.04 1.05

1.08

方法B 酸1.06與適當Pi -P’二級醯胺部份基團之肽偶合，係提供羥 基醢胺1.09。氧化作用（Moffatt或Dess-Martin)造成標的化合物 1.10。 99030-1 -62- 200529822

方法c 在另一種變型中，N-B0C-P2-P3 -酸U7與適當Pl _p，醯胺部份 基團之肤偶合’係k供經基酿胺1 · 11。氧化作用或 Dess-Martin)會造成酮醯胺U2。N-Boc官能基之去除保護係獲 得其鹽酸鹽1.13。以適當異氰酸酯（或異氰酸酯相當物）處 理，造成標的化合物1.14。

方法D 在又另一種變型中，係經由與氣甲酸4-硝基苯酯反應 99030-1 •63- 200529822 使該鹽酸鹽U3轉化成胺基 胺（或胺鹽酸鹽）之後續處理

1.13

甲酸4-硝基苯酯1J5。以所選擇 ’ k供標的化合物114。 V

1.15 "cap-NH2"

1.14

方法E 在又另一種變型中，係如上述使二肽鹽酸鹽1〇3轉化成 胺基曱酸4-硝基苯酯。以所選擇之胺（或胺鹽酸鹽）處理，提 供脲衍生物1.05。水解作用及按方法A/B中所述谁此w 义％ —步精巧

地完成，係提供標的化合物U4。

中藺物之製備 中間物10.11與10.12之f備： 步驟1 : 99030-1 -64- 200529822

10.02 使酮亞胺10·01(50克，187.丨毫莫耳）在無水THF(4〇〇毫升） 中之經攪拌溶液，於N2下冷卻至…^，並以KJBu〇(22〇毫

升，U5當量）在THF中之丨“溶液處理。使反應混合物溫熱 至〇 C，並攪拌1小時，且以溴基甲基環丁烷（28毫升， 毫莫耳）處理。將反應混合物於室溫下攪拌48小時，並在真 空中濃縮。使殘留物溶於段2〇(300毫升）中，並以Ηα水溶液 (2 Μ，300毫升）處理。將所形成之溶液於室溫下攪拌5小 時，並以Et2〇(l升）萃取。以NaOH(50%水溶液）使水層呈鹼 性至pH〜12-14，並以O^Cl2 (3x300毫升）萃取。使合併之有機 層脫水乾燥（MgS04)，過濾，及濃縮，而得純胺（10.02，18 克）’為無色油。

10.02 10.03 將胺10.02 (18克，105.2毫莫耳）在CH2C12(350毫升）中之溶 液’於0°C下，以二碳酸二-第三-丁酯（23克，105.4毫莫耳） 處理，並在室溫下攪拌12小時。於反應完成後（TLC)，使反 應混合物在真空中濃縮，並使殘留物溶於THF/H20 (200毫 升，1 : 1)中，且以LiOH · H20 (6.5克，158.5毫莫耳）處理，及 99030-1 -65- 200529822 在室溫下攪拌3小時。濃縮反應混合物，並以Et2〇萃取鹼性 水層。以濃HC1使水層酸化至pH〜1-2，並以CH2C12萃取。使 合併之有機層脫水乾燥（MgS04)，過濾，及在真空中濃縮， 而產生10.03，為無色黏稠油，將其用於下一步驟，無需任 何進一步純化。 步驟3 〇 〇 BOCHN.A BocHN ,〇Me X Me 10.03 10.04

將酸10.03 (15.0克，62毫莫耳）在CH2C12 (250毫升）中溶液， 以BOP試劑（41.1克，93毫莫耳）、N-甲基嗎福啉（27毫升）、 N，0二甲基羥基胺鹽酸鹽（9.07克，93毫莫耳）處理，並於室 溫下攪拌過夜。將反應混合物以1NHC1水溶液（250毫升）稀 釋，並分離液層，且以CH2C12(3x300毫升）萃取水層。使合 併之有機層脫水乾燥（MgS04)，過濾，並在真空中濃縮，及 藉層析純化职〇2，丑〖〇八〇/己烷2:3)，而產生醯胺10.04(15.0 克），為無色，體。 步驟4 〇 II 〇 BocHN^JJ^ .OMe BocHN^A X Me •、 10.04 10.05 於〇°C下，將醯胺10·04 (15克，52.1毫莫耳）在無水THF (200 毫升）中之漆液，以LiAlH4溶液（1 Μ，93毫升，93毫莫耳）逐 99030-1 -66- 200529822 滴處理。將反應混合物於室溫下攪拌1小時，並在o°c下， 以KHS04溶液（10%水溶液）小心地使反應淬滅，及攪拌0.5小 時。將反應混合物以HC1水溶液（1M，150毫升）稀釋，並以 CH2C12(3x200毫升）萃取。將合併之有機層以HC1水溶液 (1 M)、飽和NaHC03、鹽水洗滌，及脫水乾燥（MgS04)。混合 物過遽，並於真空中濃縮，而產生10.05，為黏稠無色油（14 克）。 步驟5

10.05 10.06

將醛10.05 (14克，61_6毫莫耳）在CH2C12(50毫升）中之溶 液，以Et3N(10_73毫升，74.4毫莫耳）與2-氰化丙醇（10.86克， 127.57毫莫耳）處理，並於室溫下攪拌24小時。使反應混合 物於真空中濃縮，並以HC1水溶液（1M，200毫升）稀釋，及 萃取在CH2C12(3x200毫升）中。將合併之有機層以H20、鹽水 洗滌，脫水乾燥（MgS04)，過濾，於真空中濃縮，並藉層析 純化（Si02，EtOAc/己烷1 : 4)，而產生10.06 (10.3克），為無色 液體。

10.06 10.07 99030-1 -67- 200529822 於〇°C下，將經由使HC1氣體起泡經過CH3OH所製成之以 HC1飽和之甲醇* (700毫升），以氰醇10.06處理，並加熱至回 流，歷經24小時。使反應物在真空中濃縮，而產生10.07， 將其使用於下一步驟，無需純化。 *或者，亦可使用藉由添加AcCl至無水甲醇中所製成之 6MHC1。 步驟7

OH BocHN

10.07 10.08

於-78°C下，將胺鹽酸鹽10.07在CH2C12中之溶液（200毫 升），以Et3N(45.0毫升，315毫莫耳）與Boc20(45.7克，209毫 莫耳）處理。然後，將反應混合物於室溫下攪拌過夜，並以 HC1 (2M，200毫升）稀釋，及萃取在CH2C12。使合併之有機 層脫水乾燥（MgS04)，過濾，在真空中濃縮，並藉層析純化 (EtOAc/己烧1 : 4)，而產生羥基S旨10·08。 步驟8

OH BocHN

10.09 將曱自旨10.08 (3克，10.5毫莫耳）在THF/H20 (1 ·· 1)中之溶液， 以LiOH · H20 (645毫克，15.75毫莫耳）處理，並於室溫下攪拌 2小時。以HC1水溶液（1M，15毫升）使反應混合物酸化，並 99030-1 -68- 200529822 於真二中/辰縮。使殘留物於真空中乾燥，而得•⑽，定量 產率。 步驟9

OH BocHN

10.10

將酸10.09 (得自上文）在CH2 Cl2 (5〇毫升）與DMF (25毫升）中 之溶液，以 NH4C1(2.94 克，55.5 毫莫耳）、EDCI(315 克，165 毫莫耳）、HOOBt(2.69克，16_5毫莫耳）及NMM(44克，44毫 莫耳）處理。將反應混合物於室溫下攪拌3天。於真空下移 除溶劑，並將殘留物以HC1水溶液（250毫升）稀釋，及以 〇12〇2萃取。將合併之有機層以飽和NaHC〇3水溶液洗滌， 脫水乾燥（MgS〇4)，過濾，在真空中濃縮，獲得1〇·1〇，將其 以本身使用於下文步驟。（或者，10·10亦可於〇〇c下，經由 使10.06 (4.5克’ 17.7毫莫耳）與h2 〇2水溶液（1〇毫升）、· AO (820毫克，20.8毫莫耳），在50毫升CH3〇H中反應〇·5小 時而直接獲f)。 步驟10

cih3n

OH

10.10 10.11 使前一步驟中所獲得之10·10溶液溶於二氧陸圜中之 4NHC1内，並在室溫下攪拌2小時。使反應混合物於真空中 99030-1 -69- 200529822 濃縮，獲得中間物10.11，為固體，使用之而無需進一步純 化0

10.09

10.12 所需要之中間物10.12係基本上使用上文在步驟9、10中 所述之程序，以適當試劑，得自化合物10.09。

中間物11.01之製備 步驟1

,〇H 11.02 C〇2tBu -► 11.03 於 4-戊快-1-醇 11.02 溶液（4.15 克；Aldrich)中，添加 Dess-Martin 過碘烷（30.25克；Aldrich)，並將所形成之混合物攪拌45分 鐘，然後添加（.第三-丁氧羰基亞甲基）三苯基磷烷（26.75克； Aldrich)。將所形成之暗反應物攪拌過夜，以EtOAc稀釋，以 亞硫酸納水溶液、飽和NaHC03水溶液、水、鹽水洗滌，及 脫水乾燥。於減壓下移除揮發性物質，並使殘留物藉矽膠 管柱層析純化，使用己烧中之1% EtOAc作為溶離劑，而得 所要之化合物11.03 (3.92克）。亦獲得一些不純溶離份，但此 時放在一旁。 步驟2 99030-1 -70- 200529822

使用正-丙醇（20毫升；Aldrich))中之烯烴11·03 (1·9克）、正-丙醇（40毫升）中之胺基甲酸芊酯（4.95克；Aldrich)、水（79毫 升）中之NaOH (1.29克）、次氣酸第三-丁酯（3.7毫升）、正-丙醇 (37.5毫升）中之(DHQ)2PHAL (0.423克；Aldrich)及餓酸鉀：脫水 物（0_ 1544 克；Aldrich)，以及 CT^m. /咐·及/· (1998)，35, (23/24)，第2813-7頁中所提出之程序，獲得粗產物，使其藉矽 膠管柱層析純化，使用EtOAc :己烷（1 : 5)，而得所要之胺 基醇11.04 (1.37克，37%)，為白色固體。 步驟3

於酯11.04 (0.700克）中，添加二氧陸圜中之4MHC1 (20毫 升；Aldrich)，並使所形成之混合物在室溫下靜置過夜。於 減壓下移除揮發性物質，獲得酸11.05 (0.621克），為白色固 體0 步驟4 99030-1 71 200529822 CBZHN.

C02H 、〇H

OH u

11.05

於室溫下，將BOP試劑（3.65克；Sigma)，接著是三乙胺（3.45 毫升），添加至羧酸11.05 (2·00克）與烯丙基胺（0.616毫升）之二 氣甲烷（20毫升）溶液中，並將所形成之混合物攪拌過夜。 使反應混合物於EtOAc與10% HC1水溶液之間作分液處理。 將有機相分離，以飽和碳酸氫鈉水溶液，水洗滌，脫水乾 燥（硫酸鎂）。使粗製反應產物藉矽膠管柱層析純化，使用 (EtOAc:己烷；70: 30)作為溶離劑，提供所要之醯胺11.01 (1.73 克），為黏稠黃色油。 中間物12.03與12.04之製備 步驟1

〇

BocHN^A〇h 12.01 12.02 使用基本上關於中間物10.11步驟3-8所述之程序，使化合 物12.01轉化成所需要之物質12·02。 步驟2 ΟΗ

ΟΗ

ΝΗ2 使用基本上關於中間物10.11步驟9、10所述之程序，使化 合物12.02轉化成所需要之中間物12.03。 99030-1 -72- 200529822 步驟3

OH

使用基本上關於中間物10.12步驟11所述之程序，使化合 物12.02轉化成所需要之中間物12β〇3。 中間物13.01之備 步驟1

ο2ν^^\ 13.02

OH

13.03 於1-硝基丁烷13.02(16.5克，0·16莫耳）與乙醛酸在吒〇(281 克，0.305莫耳）與MeOH (122毫升）中之經攪拌溶液内，在〇〇c 一 5°C下，逐滴添加三乙胺（93毫升，〇·667莫耳），歷經2小時。 使溶液溫熱至室溫，授拌過夜，及濃縮至乾涸，而得油狀 物然後，使油溶於Η2〇中，並以1〇%HC1酸化至pH = i，接

著以EtOAc萃取。將合併之有機溶液以鹽水洗滌，以 脫水乾燥，過渡，及》農縮至乾酒，料產物13•❶3(281克， 99%產率）。

於化合物13.03(240克，1.35 步驟2 莫耳）在醋酸（1.25升）中之經攪 99030-1 '73、 200529822 拌溶液内，添加10%Pd/C(37克）。使所形成之溶液於59psi 下氫化3小時，然後在6〇 psi下過夜。接著蒸發醋酸，並與 甲苯共沸3次，然後以MeOH及醚研製。接著過濾溶液，並 與甲苯共沸兩次，而得13.04，為灰白色固體（131克，0.891 莫耳，66%)。 步驟3

於胺基酸13·04(2·0克，13.6毫莫耳）在二氧陸圜（10毫升）與 Η2〇(5毫升）中之經攪拌溶液内，在下，添加1NNa〇H溶 液(4.3毫升，14.0毫莫耳）。將所形成之溶液攪拌1〇分鐘，接 著添加二碳酸二-第三-丁酯（0·110克，14 〇毫莫耳），並於 下授拌15分鐘。然後，使溶液溫熱至室溫，授拌45分鐘， 並在冷卻器中保持過夜，及濃縮至乾涸，獲得粗製物質。 於此粗製物質在EtOAc (1〇〇毫升）與冰中之溶液内，添加 KHS〇4(3.36克）與H2〇 (32毫升），並攪拌4-6分鐘。接著分離 有機層，並以EtOAc將水層萃取兩次，且將合併之有機層以 水、鹽水洗滌，以NazSO4脫水乾燥，過濾，及濃縮至乾酒， 而得產物13.05，為透明膠質（3.0克，89%產率）。 步驟4

13.05 13.01 99030-1 -74- 200529822 使用基本上關於10.12中間物步驟11所述之程序，使化合 物13.05轉化成所需要之中間物13.01。 中間物14.01之製備 步驟1

OH

14.02

使用基本上關於13.01中間物步驟1-3所述之程序，使化合 物14.02轉化成所需要之物質14.03。 步驟2

OH

使用基本上關於10·12中間物步驟11所述之程序，使化合 物14.03轉化成所需要之中間物14.01。

中間物15.01之製備 步驟1 -- o2n/Vs'^xcf3 1502 15.03 於亞硝酸銀（9克，58·5毫莫耳）在乙醚（25毫升）中之懸浮 液内，在o°c下，經過添液漏斗，慢慢添加（約15分鐘）4_峨 基-1，1，1-三氟丁烷15.02 (10克，42.0毫莫耳）在乙醚（25毫升）中 之溶液。將所形成之混合物於〇t：下激烈攪拌，並溫熱至室 溫。50小時-後，經過矽藻土墊濾出固體物質。使所形成之 99030-1 -75· 200529822 乙醚溶液於真空中濃縮，獲得15.03，為無色油，使用之而 無需進一步純化。 步驟2

使用基本上關於13.01中間物步驟1-3所述之程序，使化合 物15.03轉化成所需要之物質15.04。

步驟3

15.04 15.01 使化合 使用基本上關於10.12中間物步驟11所述之程序 物15·04轉化成所需要之中間物15·01。 中間物16.01之製備 〇

ΌΗ 16.02

OH

BocHN

F2C 按上述（中間物10.12之製備）處理酸16·〇2 (Winkler，D·; Burger，K·，办加心地，1996, 1419)，而得期望之中間物16·01 〇 中間物20,01之製備 ("^C〇2CH3

H.HCI 20.01 99030-1 -76- 200529822 胺基西旨20.01係按照R. Zhang與J. S. Madalengoitia之方法 (/· (9rg. C7^m· 1999X 330)製成，惟經由使Boc-保護之胺基酸與 甲醇性HC1反應，而使Boc基團分裂（亦採用二氧陸圜中之 4M HC1，以進行去除保護）。在所報告合成之變型中，係將 锍亞烷基化合物以其相應之鱗亞烷基化合物置換。 中間物20.04之製備 步驟1 ch3^ch3

將市售胺基酸Boc-Chg-OH 20·02 (Senn化學品，6.64克，24.1 毫莫耳）與胺鹽酸鹽20.01 (4.5克，22毫莫耳）在CH2C12(100毫 升）中之溶液，於〇°C下，以BOP試劑處理，並在室溫下攪 拌15小時。使反應混合物於真空中濃縮，然後將其以1MHC1 水溶液稀釋，並萃取在EtOAc (3x200毫升）中。將合併之有機 層以飽和NaHC03(200毫升）洗滌，脫水乾燥（MgS04)，過濾， 並在真空中濃縮，及層析（Si02，EtOAc/己烷3 : 7)，獲得20.03 (6.0克），為無色固體。 步驟2 99030-1 -77- 200529822 ch3 CH,

o 20.03

20.04

將甲酯20.03 (4.0克，9.79毫莫耳）在THF/H20 (1 ·· 1)中之溶 液，以ϋΟΗ·Η2Ο(401毫克，9.79毫莫耳）處理，並於室溫下 攪拌3小時。以HC1水溶液使反應混合物酸化，並於真空中 濃縮，獲得所需要之中間物自由態酸20.04。 中間物20.08之製備 步驟1

BocHN

20.05

使Boc-第三-Leu20.05(Fluka，5.0克，21·6毫莫耳）在無水 CH2C12/DMF(50毫升，1: 1)中之溶液冷卻至0°C，並以胺鹽 20.01 (5.3 克，一25.7 毫莫耳）、NMM (6.5 克，64.8 毫莫耳）及 BOP 試劑（1L6克，25.7毫莫耳）處理。將反應物於室溫下攪拌24 小時，以HC1水溶液（1M)稀釋，並以CH2C12萃取。將合併之 有機層以HC1 (水溶液，1M)、飽和NaHC03、鹽水洗滌，脫 水乾燥（MgS04)，過濾，並在真空中濃縮，及藉層析純化 (Si02，丙酮/己院1 : 5)，而產生20.06，為無色固體。 步驟2 99030-1 -78- 200529822

BocHN

OCH3 个 20.06

OCHq HC\.H2N^X〇 0

20.07 使甲酯20·06溶液（4.0克，10·46毫莫耳）溶於二氧陸圜中之 4MHC1内，並在室溫下攪拌3小時。使反應混合物於真空中 濃縮’獲得胺鹽酸鹽20.07，使用之而無需純化。

步驟3

20.07

o2n

20.08

使胺鹽20.07(840毫克，2.64毫莫耳）在THF(14毫升）/乙腈（2 耄升）中之溶液冷卻至〇°C。添加氣甲酸4_硝基苯酯（8〇〇毫 克，3·96毫莫耳），接著是峨σ定(〇·64毫升，7·92毫莫耳）。當 TLC顯示反應完成時，使反應物慢慢溫熱至室溫，歷經3小 時。添加乙琴（50毫升），並濾出所形成之沉澱物。將濾液 以飽和氣化銨浴液（1 X)、鹽水（1 χ)洗滌，脫水乾燥^^^2s〇4)， 及浪縮。使殘留物藉急驟式層析純化，使用20/80 Et0AC/己 炫’提供1.15克所需要之中間物20.08。 中間物21.01之製借 步驟1 99030-1 -79- i200529822

^n^c〇2h I Boc 21.02 於N-Boc-3,4-脫氫脯胺酸21.02 (5.0克，23.5毫莫耳）、二碳酸 一-弟二-丁酉曰（7·5克’ 34·4宅莫耳）及4-N，N-二曱胺基p比π定（0.40 克’ 3.33毫莫耳）在乙腈（1〇〇毫升）中之經攪拌溶液内，在室 溫下，添加三乙胺（5·0毫升，35.6毫莫耳）。將所形成之溶液 於此溫度下攪拌18小時，然後在真空中濃縮。使深褐色殘 留物藉急驟式管柱層析純化，以10-25% EtOAc/己烷溶離，而 得產物21.03，為淡黃色油（5.29克，84%)。步驟2 ^N^C02tBu I Boc 21.03 於脫氫脯胺酸衍生物21.03 (10.1克，37·4毫莫耳）、节基三 乙基氣化銨（1.60克，7·02毫莫耳）在氣仿（120毫升）中之經授 拌洛液内’在室溫下，添加5〇%氫氧化納水溶液（12〇克）。 於此溫度下激取攪拌24小時後，以CH2C12(200毫升）與乙醚 (600毫升）稀釋暗色混合物。分離液層後，以CH2Cl2/Et2〇 (1 : 2 ’ 3x600毫升）萃取水溶液。使有機溶液脫水乾燥 (MgS〇4) ’並濃縮。使殘留物藉急驟式管柱層析純化，使用 5_20% EtOAc/己烷，而得9.34克（71%) 21.04，為灰白色固體。步驟3 C02tBu

Boc 21.03

Ck XI

C〇2 圯 U Boc 21.04 99030-1 -80 - 200529822

C02tBu I Boc

Cl v

Cl /—\ cf3co2h ^n^co2h 21.04 21.05

將 21.04 (9·34 克，26.5 毫莫耳）在 CH2 Cl2 (25 毫升）與 CF3 C02H (50毫升）中之溶液於室溫下攪拌4·5小時，然後在真空中濃 縮’獲得褐色殘留物21.05，將其使用於步驟4,無需進一步 純化。

步驟4

cf3co2h

HCI 21.01 C02Me

將濃鹽酸（4·5毫升）添加至得自步騍3之殘留物21·〇5在甲 醇（7〇毫升）中之溶液内，並使所形成之混合物在油浴中溫 熱至65 C。18小時後，使混合物於真空中濃縮，獲得褐色 油21.01，進一步使用之而無需純化。 iAi勿22.01之製借 1

將鉀雙（二甲基矽烷基）胺（158毫升，甲苯中之〇·5Μ溶液； 79毫莫耳）添加至環丙基三苯基_演化鱗（3312克；86·4毫莫 耳）在無水四氫呋喃（130毫升）中之經攪拌懸浮液内，並將所 形成之橘色混合物於氮大氣及室溫下攪拌丨小時期間，然後 99030-1 -81- 200529822 添加THF (8毫升）中之醛22·02 (9·68克；42.2毫莫耳）。接著， 使反應物於氮大氣下回流2小時期間。於冷卻後，添加甲 醇、乙醚及Rochelles鹽。將有機相分離，以鹽水洗滌，脫水 乾燥，及在減壓下濃縮。使粗製反應產物藉矽膠管柱層析 純化，使用EtOAc-己烷（1 : 99)至EtOAc-己烷（5 : 95)，提供烯 烴22.03 (8.47克），為黃色油。 步驟2

tBoc、

1.HC1 (水溶液） 2. tBoc-Gly-OSu, Et3N 22,03

厂 NHtBoc HN

22.04

HO 製備1M HC1在MeOH/MeOAc中之溶液，其方式是將14.2毫

升氣化乙醯逐滴添加至冷甲醇中，並於室溫下，將所形成 之溶液稀釋至200毫升。使胺基甲酸酯22.03 (9.49克；37_5毫 莫耳）溶於甲醇（12毫升）中，並添加至MeOH/MeOAc中之1M HC1 (150毫升）内，同時在冰浴中冷卻。使所形成之混合物 於此溫度下保持1小時，然後移除冰浴，並在室溫下持續攪 掉過夜。於減壓下移除揮發性物質，而產生黃色油，將其 使用於下一步驟，無需純化。 使黃色油溶於THF (30毫升）與MeOH (20毫升）之混合物 中，並以三乙胺（15毫升；1〇8毫莫耳）處理，直到溶液阳值 -9-10為止。放置在冰浴中後，以N_B〇c_Gly_〇Su⑴22克； 耄莫耳）處理混合物。抽離冰浴，並將反應物於室溫下授拌 1小日可。於減壓下移除揮發性物質，並使殘留物藉矽膠管柱 層析純化，使用二氣甲烷中之甲醇（1_3%)，提供所要之醯胺 99030-1 • 82 - 200529822 22.04 (9·09 克）。 步驟3

2, 2-二甲氧基丙烷 BF3:OEt2 /—·NHtBoc HNT^v HO^ 22.04 使醇22.04 (9.09克；33.6毫莫耳）溶於丙酮（118.5毫升）中， 並以2,2_二甲氧基丙烷（37.4毫升；304毫莫耳）與BF3 : Et20

(0.32毫升，2.6毫莫耳）處理，且將所形成之混合物在室溫下 攪拌5.5小時期間。將反應溶液以數滴三乙胺處理，並於減 壓下移除揮發性物質。使殘留物藉矽膠管柱層析純化，使 用己烷中之5-25% EtOAc，提供N，0-縮醛22.05 (8.85克）。 步驟4

使胺基甲藏酯22·05 (8.81克；28.4毫莫耳）溶於乙腈（45毫 升）中，並使溶液在氮大氣下冷卻至_4〇°C。添加吡啶（6·9毫 升’ 85.3毫莫耳），接著是四氟棚酸亞銷（6.63克；56.8毫莫 耳），並使所形成之反應混合物保持低於0^，直到TLC顯示 無起始物質殘留為止（約2·25小時）。添加四氫吡咯（2〇毫 升；240毫莫耳），並抽離冷卻浴，及在室溫下持續攪拌} 小時’然後於減壓下移除揮發性物質。使殘留物快速地通 99030] •83- 200529822 過石夕膠塾’提供黃色油。使黃色油溶於無水苯(22〇毫升） 中，並添加醋酸鈀（〇.317克；L41毫莫耳），然後，在氮大氣 下’將所形成之混合物加熱至回流，歷經1 5小時期間。於 冷卻後，在減壓下移除揮發性物質，並使暗殘留物藉矽膠 管柱層析純化，使用Et0Ac_己烷（1: 4)，提供D反式_四氫吡 咯酮22.06 (1.94克），接著是i〇順式·四氫吡咯酮22•❶7 (1 97克）。 步驟5

將剛製成之MeOAc/MeOH中之1MHC1 (10毫升；如上述）添 加至N，0-縮醛22.06中，並於室溫下攪拌i小時。於減壓下移 除溶劑，並使殘留物藉矽膠管柱層析純化，使用二氣甲烷 中之0-4% MeOH作為溶離劑，提供所要之醇22·〇8 (142克）， 黃色油。 步驟6

於内醯胺22.08 (1.29克；8.44毫莫耳）在無水四氫吱喃（μ毫 升）中之溶液内，添加氫化鋰鋁（2.40克；63.2毫莫耳），並使 所形成之混合物回流8小時。於冷卻後，添加水，接著是 99030-1 -84 - 200529822

提供四氫吡咯，使用之而無需純化。 於-60°C及氮大氣下，將Hunig氏鹼（4·5毫升；25.8毫莫耳）

吡咯及HATU(2.89克；7·6毫莫耳）在無水二氣甲烷（5〇毫升） 中之混合物内。使所形成之反應物慢慢地回復至室溫過 夜。添加EtOAc，並將黃色溶液以稀Ηα水溶液、飽和碳酸 氫鈉水溶液、水、鹽水洗滌。使有機層脫水乾燥，並於減 壓下濃縮。使殘留物藉矽膠管柱層析純化，使用Et〇Ac :己 烷（1 : 3)，而得所要之醯胺22.09 (2.00克）。

使醇22.09 (2.00克；5·67毫莫耳）溶於丙酮（116毫升）中，並 在冰浴中冷卻1〇分鐘。然後，將此溶液添加至已冷卻之J〇nes 試劑（14.2毫升；約2毫莫耳/毫升）中，並將所形成之混合物 5°C下攪拌0.5小時，且移除冰浴。將反應物於室溫下再攪拌 2小時，接著添加至EtOAc (100毫升）中之硫酸鈉（28·54克）、 矽藻土（15克）内。1分鐘後添加異丙醇（15毫升），然後再攪 拌10分鐘，並過濾。使濾液於減壓下濃縮，提供褐色油， 99030-1 -85- 200529822 使其洛於EtOAc中。將此溶液以水、3%檸檬酸水溶液、鹽 水洗滌’脫水乾燥，及濃縮，提供所要之羧酸22·〇1 (1.64克）， 為白色固體。 也間物23·01之隼』傷 步驟1

於醋23·02 (6.0克）與分子篩（5·2克）在無水二氣甲烷（35毫 升）中之混合物内’添加四氫ρ比洛（5.7毫升，66.36毫莫耳）。 將所形成之褐色漿液於室溫及Ν2下攪拌24小時，過濾，並 以無水CH3 CN洗滌。濃縮合併之濾液，而產生所要之產物 23.03。 步驟2

0

CI

Nal, K2C03

於得自前一步驟之產物23.03在CHsCN (35毫升）中之溶液 内，添加無水&(：〇3、氣化甲基烯丙烷（2·77克，30.5毫莫耳）、 Nal (1.07克，6.7毫莫耳）。將所形成之漿液於環境溫度及& 下攪拌24小時。添加50毫升冰冷水，接著是2NKHS04溶液， 直到pH值1為止。添加EtOAc (100毫升），並將混合物搜拌0 75 99030-1 -86- 200529822 小時。收集合併之有機層，並以鹽水洗滌，以MgS04脫水乾 燥，及蒸發，而產生所要之產物23·04。 步驟3

ΟΗ

使得自前一步驟之產物23.04 (2.7克，8·16毫莫耳）溶於二氧 陸圜（20毫升）中，並以剛製成21NLi0H (9毫升）處理。將反 應混合物於環境溫度及^下攪拌20小時。使反應混合物溶 於EtOAc中’並以％ 〇洗滌。使合併之水相冷卻至〇°c，並 使用1NHC1酸化至ρΗ1·65。以EtOAc(2xl〇〇毫升）萃取混濁混 合物。將合併之有機層以鹽水洗滌，以MgS〇4脫水乾燥，及 濃縮，而得所要之酸23.05 (3.40克）。 步驟4

0W T^v、 NaBH(0Ac)3 、->γ〇Η - [ΓΥ^〇Λ〇° 23.05 於NaBH(OAc)3 (3·93克，18·5毫莫耳）在CIi2 % (μ毫升）中之 芯浮液内，添加得自前一步驟之產物23·〇5在無水Cuckoo 毫升）與醋酸（2毫升）中之溶液。將漿液於環境溫度下攪拌 20小時。將冰冷水（100毫升）添加至漿液中，並攪拌1/2小 時。將有機層分離，過遽，脫水乾燥，並蒸發，而產生所 99030-1 -87- 200529822 要之產物23.06。 步驟5

CH2N2 / Et20 / MeOH

OMe

將得自前一步驟之產物23.06 (1·9克）在MeOH (40毫升）中 之溶液’以過量CH2N2/Et2 Ο溶液處理，並攪拌過夜。使反 應混合物濃縮至乾涸，而產生粗製殘留物。使殘留物於矽 膠上層析’以EtOAc/己烷之梯度液溶離，獲得1〇7克所要之 純產物23.07。 步驟6

OMe BF3 . Me20 / CH2CI2

OMe 於得自前一步驟之產物2丄07(1.36克）在無水CH2Cl2(4〇* 升）中之溶液内，以BF3 .Me2〇 (0.7毫升）處理。將反應混合物 於環境溫度下攪拌20小時，並以飽和NaHC〇3 (3〇毫升）使反 應淬滅，且攪拌1/2小時。分離有機層，並將合併之有機層 以鹽水洗滌，以MgS〇4脫水乾燥，濃縮，而得粗製殘留物。 使殘留物於矽膠上層析，以Et〇Ac/己烷之梯度液溶離，而 得0.88克所要之化合物23.08。 99030-1 -88- 200529822 ±M1

、〇 23.08

〇Me 〇

H2 -10% Pd 1C

O

OMe 丨〇 23.01 於得自前一步驟之產物23.08 (0.92克）在MeOH (30毫升）中 之溶液内，在室溫下，添加10% Pd/C (0.16克），並於環境溫 度及1大氣壓力下氫化。將反應混合物攪拌4小時，並濃縮 至乾涸，而產生所要之化合物23.01。 中間物5〇·01之掣備 步驟1 .co2h ,co2ch3 50.02 50.03 於50.02(15克）在MeOH(150毫升）中之溶液内，添加濃Ηα (3-4耄升）’並使混合物回流16小時。使反應混合物冷卻至 室溫，並濃縮。使殘留物溶於乙鱗（25〇毫升）中，並以冷飽 和碳酸氫鈉溶液及鹽水洗滌。使有機層脫水乾燥MhSW)， 及濃縮，而得甲酯50.03 (12.98克），進行之無需進一步純化。 步驟2

\^C02CH3 、八

、〇H 50·03 50.04 使得自上文之甲酯50.03溶於二氣曱烷（1〇〇毫升）中，並在 氣大氣下冷卻至-78 C。逐滴添加DIBAL (二氯甲炫中之ι·〇μ 99030-1 -89 - 200529822 溶液，200毫升），歷經2小時期間。使反應混合物溫熱至室 溫’歷經16小時。使反應混合物冷卻至，並逐滴添加 MeOH (5-8毫升）。慢慢添加1〇%酒石酸鈉鉀水溶液（2〇〇毫 升），並攪拌。以二氣甲烷（100毫升）稀釋，並分離有機層（伴 隨著一些白色沉澱物）。將有機層以1NHC1 (25〇毫升）、鹽水 (200毫升）洗滌，脫水乾燥（Na2S04)，及濃縮，提供醇50.04 (11.00克），為透明油。 步驟3

50·04 50.05 使得自上文之醇50.04溶於二氣甲烷（4〇〇毫升）中，並在氮 大氣下冷卻至Ot。分次添加PCC (22·2克），並使反應混合物 f又U /JDL熱至至溫’歷經16小時。將反應混合物以乙鍵（5〇〇 宅升）稀釋’並經過矽藻土墊過濾。濃縮濾液，並使殘留物 溶於乙鱗（500毫升）中。使其通過矽膠墊，並濃縮濾液，提

供醛50.05 步驟4 進行之無需進一步純化。

HCl.HsN^^H

[ΐθ] 50.01 基本上使用 Chakraborty 等人之方法（TetrahediOn，1995, 51 (33)， 9179-90) ’使得自上文之醛5〇·〇5轉化成所要之物質5〇·〇1。 中間物51.01之臀, 99030-1 -90- 200529822 Η 〇 ^^CH3 51.02

51.01 所需要之中間物51·01係使用文獻所述之程序（T.K.Chakraborty 等人，1995, 51 (33)，9179-90)，得自酸51·02。 化合物5000之製備：

5000a 5000b 於N-Boc-(S)-纈胺醇5000a (10.0克，49.2毫莫耳）、鄰苯二甲 醯亞胺（7.40克，50·3毫莫耳）及三苯膦（13.0克，49.6毫莫耳） 在無水THF (100毫升）中之經攪拌溶液内，在0°C下，添加偶 氮二羧酸二異丙酯（DIAD，9.8毫升，49.4毫莫耳）。然後， 在濃縮至乾之前，將所形成之溶液於室溫下攪拌18小 時。使殘留物溶於CH2C12中，並藉矽膠急驟式層析純化（己 烷中之10-40% EtOAc)，獲得產物5000b。 步驟2 〇

5000b 5000c 於5000b (8_8克，26.5毫莫耳）在甲醇（100毫升）中之經攪拌 99030-1 -91 - 200529822 浴液内，在至溫下，添加耕單水合物（1·4毫升，28.8毫莫耳）， 並將所形成之溶液於室溫下攪拌18小時。添加另外之肼單 水合物（0.5毫升，10.3毫莫耳），並使混合物升溫至回流，及 攪拌4小時’然後使其冷卻至室溫。濾出沉澱物，並使溶液 濃縮至乾洞。使殘留物溶於CH2C12*，並再一次濾出沉澱 物。於濃縮後’獲得黃色油（8·〇克，定量）。 步驟3

於5000c (1.0克，4.94毫莫耳）在CH2C12(100毫升）中之溶液 内，於-30°C下，在丙酮浴中，添加氣化3-氣基丙基磺醯（〇.6〇 毫升，4.93毫莫耳）與三乙胺（ΐ·ι〇毫升，7·89毫莫耳）。使所 形成之溶液伴隨著浴液溫熱至室溫，並攪拌18小時。添加 另外之CH2%與INNazCO3溶液，並分離液層。將水溶液以 012¾(2x100毫升）萃取。將有機溶液合併，過濾，脫水乾 燥（MgS〇4)，及濃縮。使殘留物藉急驟式管柱層析純化，使 用10-40%丙酮/己烷，而得1·〇克（59%) 5000d。 步驟4

將5000d (1.0克，2.92毫莫耳）與氫化鈉（〇·32克，60%，8.0 毫莫耳）在無水DMF (100毫升）中之懸浮液，於室溫下搜拌8 99030-1 -92- 200529822 小時。冷卻至0°C後，小心添加5°/。磷酸溶液（110毫升），接 著是EtOAc (150毫升）。分離液層，並將有機溶液以5%磷酸 溶液（100毫升）及飽和碳酸氫鈉溶液（2 X 100毫升）洗滌，然後 脫水乾燥，過濾，及濃縮。使殘留物藉矽膠急驟式層析純 化（己烷中之0-40%丙酮），獲得0.63克產物5000e (70%)。 步驟5

將5000e (0.62克，2.02毫莫耳）在二氧陸圜中之4NHC1内之 溶液，於室溫下攪拌4小時。然後使其在真空中濃縮至乾 涸，而得0.60克產物5000 (定量）。 式5001化合物之製備 步驟1

NH? HCI 5001

化合物5001a係根據關於製備化合物5000d所述之程序，製 自5000c與氣化4-溴基丁醯。 步驟2 99030-1 -93- 200529822 〇

NHBoc 5001a 〇

nh2 hci 5001 式5002製備之化合物 〇

5002 步驟1 ο • Η2Ν-γΝΗΒο° .Λ NHBoc τ 5000c 5002a 化合物5002a係根據關於製備化合物5000d所述之程序，製 自5000c與2-溴基氯甲酸乙酯。 步驟2

Br 5002a 5002b 化合物5002b係根據關於製備化合物5000e所述之程序，製 自 5002a 。 步驟3

5002b 5002 化合物5002係根據關於製備化合物5000所述之程序（步驟 5)，製自 5002b 。 99030-1 -94- 200529822 式5003化合物之製備 〇

步驟1

HO /\.NHBoc 5003a

化合物5003b係根據關於製備化合物5000b所述之程序（步 驟1)，製自N-Boc_(S)_第三-白胺醇5003a。 步驟2 〇 〇

5003b 5003 化合物5003係根據關於製備化合物5000所述之程序（步驟 5)，製自 5003b 。

式5004化合物之製備

^.NH2 HCI 4- 5004 步驟1 〇

5003b 5004a 化合物5004a係根據關於製備化合物5000c所述之程序（步 99030-1 -95- 200529822 驟2)，製自5003b。 步驟2

Cl 5004b

5004a h2n 化合物5004b係根據關於製備化合物5000d所述之程序（步 驟3)，製自5004a 。

化合物5004c係根據關於製備化合物5000e所述之程序（步 驟4)，製自5004b 。 步驟4

化合物5004係根據關於製備化合物5000所述之程序（步驟 5)，製自 5004c 。 式5005化合物之製備

步驟1 99030-1 -96- 200529822 〇

Br 5004a 5005a 化合物5005a係根據關於製備化合物5002a所述之程序（步 驟1)，製自5004a 。 步驟2

Br 5005a 5005b 化合物5005b係根據關於製備化合物5002b所述之程序（步 驟2)，製自5005a。 步驟3

5005b

化合物5005係根據關於製備化合物5000所述之程序（步驟 5)，製自 5005b 。 式5006化合物之製備 步驟1

NH2 HCI 5006

99030-1 -97- 200529822 化合物5006a係根據關於製備化合物5000d所述之程序，製 自5004a與氣化4-溴基丁醯。 步驟2

νη2· hci 5006 〇

^N0f^HB〇C 5006a 化合物5006係根據關於製備化合物5000所述之程序（步驟 5)，製自 5006a 。

式5007化合物之製備

步驟1

5007a h2n NHBoc 木 5004a 化合物5007a係根據關於製備化合物5000d所述之程序，製 自5004a與氣_化’2-甲氧羰基各嘧吩磺醯。 步驟2

5007a 5007b 於酯5007a (4.65克，1U毫莫耳）在無水甲苯（40毫升）中之 溶液内，在-78°C下，添加DIBAL-H在甲苯中之溶液（23.0毫 升，34.5毫莫耳）。將混合物於-78°C下攪拌20分鐘，並在室 99030-1 -98- 200529822 溫下2小時。添加甲醇（20毫升），接著是ι〇%檸檬酸水溶液 (100毫升）。攪拌5分鐘後，添加EtOAc (200毫升），並分離液 層。以EtOAc (2 X 1〇〇毫升）萃取水溶液。將有機溶液合併， 脫水乾燥（MgS04)，過濾，及濃縮。使殘留物藉急驟式管柱 層析純化，使用10-50%丙酮/己烷，獲得4.6克（定量）5007b。 步驟3

5007b 5007c

於5007b (1·04克，2.65毫莫耳）在CH2C12(50毫升）中之溶液 内，在-0°c下，添加氣化甲烷磺醯（0.23毫升，2.97毫莫耳） 與三乙胺（0.80毫升，5.74毫莫耳）。使混合物伴隨著冰浴溫 熱至室溫，並攪拌18小時。添加EtOAc (200毫升）與5% H3P〇4 溶液（100毫升），並分離液層。將有機溶液以IN碳酸鈉溶液 (100毫升）洗滌，然後脫水乾燥（MgS04)，過濾，及濃縮。使 殘留物藉急驟式管柱層析純化，使用10-50%丙酮/己烷，而 得 〇·80 克（73%) 5007c。 步驟4

5007c

將5007d(1.17克，2·85毫莫耳）與碳酸鉋（1.40克，4·30毫莫 耳）在無水DMF (100毫升）中之懸浮液，於室溫下攪拌18小 時。添加水(50毫升）、鹽水（50毫升）及EtOAc (300毫升），並 99030-1 -99- 200529822 分離液層。將有機溶液以水（3 x 150毫升）洗滌，然後脫水乾 燥，過濾，及濃縮，獲得0.99克所要之產物5007d (93%)。 步驟5

化合物5007係根據關於製備化合物5000所述之程序，製自 5007d 。

式5008化合物之Μ備

步驟1

5003a 〇

Ο 5008a

化合物5008b係根據關於化合物5000b所述之程序製備，製 自 5003a 與 5008a 。 步驟2

5008b 〇

化合物5008係根據關於製備化合物5000所述之程序，製 自 5008b 。 式5009化合物之製備 99030-1 -100- 200529822 〇

5009

〇

5009a

於5008b (1.02克，2.93毫莫耳）在CH2C12(50毫升）中之溶液 内，在-18°C下，添加間-氣基過氧苯甲酸（3.03克，17.6毫莫 耳），並將所形成之溶液於-18°C下攪拌1小時，然後在冷卻 器中放置過夜（16小時）。於室溫下再攪拌6小時後，添加另 外之CH2C12，並以10%NaHSO4及lNNa2C03洗滌溶液。使有機 溶液脫水乾燥（MgS04)，過濾，及濃縮。使殘留物藉急驟式 管柱層析純化，使用5-60%丙酮/己烷，而得0.49克（46%)產物 5009a 。 步驟2

〇

5009 化合物5009係根據關於製備化合物5000所述之程序，製 自 5009a 。 式5010化合物之製備

99030-1 -101 - 200529822 步驟1 h2n

5010a 化合物5010a係根據關於製備化合物5000d所述之程序，製 自5004a與2-(氣基磺醯基）苯甲酸甲酯。 步驟2

5010a

化合物5010b係根據關於製備化合物5007b所述之程序，製 自 5010a 。 步驟3

化合物5010c係根據關於製備化合物5007c所述之程序，製 自 5010b 〇 _ 步驟4

NHBoc 5010d 化合物5010d係根據關於製備化合物5007d所述之程序，製 自 5010c 〇 步驟5 99030-1 -102- 200529822

化合物5010係根據關於製備化合物5000所述之程序，製 自 5010d 。 式5011化合物之製備

步驟1

C〇2Me 5010a

將5010a(0.60克，1·45毫莫耳）與碳酸铯（0.707克，2.17毫莫 耳）在無水DMF中之懸浮液，於40°C下攪拌18小時。添加水 (50毫升）、鹽水（50毫升）及EtOAc (150毫升），並分離液層。 將有機溶液以水（3 X 80毫升）洗滌，然後使其脫水乾燥，過 濾，及濃縮」護得0.17克所要之產物5011a (31%)。 步驟2

NHBoc 5011a

化合物5011係根據製備化合物5000步驟5中所述之程序， 製自5011a 。 式5012化合物之製備 99030-1 -103- 200529822 〇

步驟1 /\.NHBoc 木 5003a

〇

5012a

HO 化合物5012a係根據關於製備化合物5000b所述之程序，製 自5003a與戊二醯亞胺。 步驟2

5012a 5012 化合物5012係根據關於製備化合物5000所述之程序，製 自 5012a 。 式5013化合物之盥備

步驟1

使胺 5004a (3·0 克，13.9 毫莫耳）與 1，4-丁 烷沙同（butanesultone) (L8毫升，17.7毫莫耳）在無水THF (25毫升）中之溶液回流16 99030-1 -104- 200529822 小時。添加更多沙同（sultone)(0.6毫升，5.89毫莫耳），並使混 合物再回流4小時。添加氯化磷醯（2.6毫升，27.9毫莫耳）， 並將此溶液於室溫下攪拌4小時。冷卻至0°C後，伴隨著水 (30毫升）慢慢添加50% w/wNaOH溶液，直到pH值大於12為 止。然後添加醚（200毫升），並分離液層。將水溶液以THF/ 乙醚（1 : 1，150毫升）萃取兩次。將有機溶液合併，脫水乾 燥（MgS04)，過濾，及濃縮。使殘留物藉急驟式管柱層析純 化，使用10-50%丙酮/己烷，而得1.49克5013a (32%)。 步驟2

5013a 5013 化合物5013係根據關於製備化合物5000所述之程序，製 自 5013a 。 式5014化合物之製備

步驟1 H〇2C、/NHBoc H2N〇C\/NHBoc 5014b 5014a 於 5014a (10·0 克，41.1 毫莫耳）、HOOBt (8.7 克，53.3 毫莫耳）、 EDCI (10.0克，52.2毫莫耳）及氣化銨（8.90克，166毫莫耳）在 無水DMF (400毫升）中之懸浮液内，在室溫下，添加4-曱基 99030-1 -105- 200529822

嗎福啉（22.5毫升，204.5毫莫耳）。將混合物於室溫下攪拌70 小時。添加鹽水（150毫升）與5%磷酸溶液（150毫升），接著是 EtOAc (800毫升）。分離液層，並將有機溶液以5%磷酸溶液 (400毫升）及飽和碳酸氫鈉溶液（2 x400毫升）洗滌，然後使其 脫水乾燥，過濾，及濃縮，獲得8.35克產物5014b (84%)。 步驟2 H2NOCx/NHBoc 0 5014b 5014c 於醯胺5014b (8.35克，34·5毫莫耳）在無水THF (100毫升）中 之溶液内，在室溫下，添加棚烧硫化曱烧複合物在甲苯中 之溶液（43.0毫升，86·0毫莫耳），並使混合物回流4小時。添 加更多THF (100毫升），並慢慢添加3NHC1溶液，直到未發現 氣體釋出為止。於混合物中，慢慢添加50% w/wNaOH溶液， 直到pH值大於12為止。然後添加醚（200毫升），並分離液 層。將水溶液以THF/乙醚（1 : 1，150毫升）萃取兩次。將有 機溶液合併，脫水乾燥（MgS04)，過濾，及濃縮，而得6.50 克產物 5014c (83%)。 步驟3 〇 ^M-C02Et Ο 5014c 5014d 5014e

於胺5014c (0.80克，3.50毫莫耳）與N-乙氧羰基鄰苯二甲醯 亞胺5014d (0.90克，4.11毫莫耳）在無水THF (50毫升）中之溶液 内，在室溫下，添加三乙胺（1.0毫升，7.17毫莫耳）。將混合 99030-1 -106- 200529822 物於室溫下攪拌18小時。添加EtOAc (100毫升）與5%磷酸溶 液（100毫升），並分離液層。將有機溶液以5%磷酸溶液（80 毫升）洗滌，並脫水乾燥，過濾，及濃縮。使殘留物藉矽膠 急驟式層析純化（己烷中之5-50% EtOAc)，獲得0.82克產物 5014e(65%)。 步驟4

化合物5014係根據關於製備化合物5000所述之程序，製 自 5014e 。 式5015化合物之製備

化合物5015係根據關於製備化合物5007步驟1-5所述之程 序，製自5014c.。 式5016化合物之製備

步驟1

5016a 5016b 99030-1 -107- 200529822 化合物5016b係根據關於製備化合物5014b步驟1所述之 程序， 製自5016a 。 步驟2 H2NOCv.NHBoc rA ' Η2Ν^γΝΗΒο° U 5016b 0 5016c 化合物5016c係根據關於製備化合物5014c步驟2所述之程 序，製自5016b 。

步驟3-7

〇. 〇

化合物5016係根據關於製備化合物5010步驟3-7所述之程 序，製自5016c 。 式5017化合物之製備

步《«驟1-2

化合物5017係根據關於製備化合物5013步驟1-2中所述之 程序，製自 5016c 與 1，4-丁烧沙同（butanesultone)。 式5018化合物之製備 99030-1 -108- 200529822 〇 *

5018 nh2 hci 步驟1-2

化合物5018係根據關於製備化合物5012步驟1-2中所述之 程序，製自5003a與嗎福啉3,5-二酮。 式5019化合物之製備

nh2 hci 5019

化合物5019係根據關於製備化合物5012步驟1-2中所述之 程序，製自5003a與3,3-二曱基戊二醯亞胺。 式5020化合物之製備 ΗΧ-γΝΗ2·Η。丨 5020 步驟1 99030-1 -109- 200529822

CbzHNS〇2CI

5020a 5020b

BnOH + 0=C=NS02CI

於異氰酸氣基續醯酯（〇·8〇毫升，9.25毫莫耳）在無水 CH2C12(20毫升）中之溶液内，在οίτ，慢慢添加爷醇（〇96 毫升，9.25毫莫耳）。將所形成之溶液於〇°c下攪拌3〇分鐘， 然後在0°C下，將其慢慢添加至胺5020a (2.0克，9.25毫莫耳） 在無水CH^Cl2中之溶液内。將混合物於〇°c下攪拌1小時， 並於室溫下再一小時，接著使其濃縮至乾涸。使殘留物溶 於EtOAc中’並以IN HC1溶液洗滌兩次，及鹽水洗滌一次。 然後使其脫水乾燥，過濾，及濃縮。使產物藉矽膠急驟式 層析純化（己烷中之20-70%丙酮），而得產物5020b (3·11克， 78%) 〇 步驟2

5020b

5020c 於5020b (1.60克，3·73毫莫耳）、三苯膦（丨.46克，5·57毫莫 耳）及3-溴基-1-丙醇（〇·36毫升，4.12毫莫耳）在無水CH2C12(40 笔升）中之溶液内，在0°C下，添加偶氮二羧酸二異丙酯 (DIAD，ΐ·ι〇毫升，5.55毫莫耳）。然後，使其在真空中濃縮 至乾涸之前，將所形成之溶液於室溫下攪拌2小時。使殘留 物藉矽膠急驟式層析純化（己烧中之1〇_4〇%丙酮），獲得產 99030-1 -110- 200529822 物 5020c(1.62 克，79%)。 步驟3

5020c 5020d 將5020d (1.61克，2.93毫莫耳）與碳酸鉋（1.43克，4.39毫莫 耳）在無水DMF (100毫升）中之懸浮液，於室溫下攪拌18小 時。添加水（50毫升）、鹽水（50毫升）及EtOAc (300毫升），並 分離液層。將有機溶液以水（3 X 150毫升）洗滌，然後使其脫 水乾燥，過濾，及濃縮，而得所要之產物5020d (1.40克，定 量）。 步驟4 ΗδχΒ。。 〇、、々〇

Cbz、N么 n^YNHBoc 5020d 5020e

將5020d (1·40克，2.98毫莫耳）與10% Pd-C (潮濕為基準）在 無水乙醇（50毫升）與甲醇（50毫升）中之混合物，於室溫下激 烈攪拌2.5小時。經過矽藻土墊濾出觸媒，獲得產物5020e (1.10克，定量）。 步驟5

5020e 5020 將5020e在二氧陸圜中之4NHC1内之溶液於室溫下攪拌4 99030-1 -111 - 200529822 小時。然後使其在真空中濃縮至乾涸，而得產物5020。 式5021化合物之製備

化合物5021係根據關於製備化合物5012步驟1-2中所述之 程序，製自5003a與四亞甲基戊二醯亞胺。 式5022化合物之製備 〇

步驟1

NHBoc 使酐5022a與胺5004a在無水曱苯中之混合物升溫至回 流，並攪拌46小時，然後使其冷卻，及在真空中濃縮。使 殘留物藉矽膠急驟式層析純化（己烷中之5-40% EtOAc)，獲得 產物 5022b (2.90 克，79%)。 步驟2 99030-1 -112- 200529822 〇 〇

將化合物5022b於室溫下以4N HC1處理30分鐘，並在真空 中濃縮，而得產物5022。 製備實例 化合物5146之製備

步驟1

5051a 於5020b (2.0克，4.66毫莫耳）、三苯膦（1·83克，6.99毫莫耳） 及2-溴-乙醇（0.31毫升，5_12毫莫耳）在無水CH2C12(30毫升）中 之溶液内，在0°C下，添加偶氮二羧酸二異丙酯（DIAD，0.996 毫升，6.99毫莫耳）。然後，使其在真空中濃縮至乾涸之前， 將所形成之溶液於室溫下攪拌2小時。使殘留物藉矽膠急驟 式層析純化（己烷中之10-40%丙酮），而得產物5051a (1·50 克，63%)。 步驟2 99030-1 -113- 200529822

5051 a

將5051a (1·5克，2.79毫莫耳）與碳酸鉋（1.36克，4·19毫莫耳） 在無水DMF (100毫升）中之懸浮液於室溫下攪拌18小時。添 加水（50毫升）、鹽水（50毫升）及EtOAc (300毫升），並分離液 層。將有機溶液以水（3 X 150毫升）洗滌，然後使其脫水乾 燥，過濾，及濃縮，而得1.37克粗產物。經由急驟式管柱純 化（10-30% 丙酮-己烷），獲得 0.98 克 5051b (82%)。 步驟3

5051b 5051c

於化合物5051b (0.98克，2.15毫莫耳，1當量）中，在室溫 下，添加二氧陸圜中之4MHC1(25毫升）。攪拌1小時。TLC 未顯示起始物質。蒸離溶劑，並與己烷共沸，然後與醚共 沸。以醚洗除非極性物質，並在高真空下保持度過週末， 而得產物，為淡黃色固體（842毫克，定量）。使用此產物而 無需純化。 步驟4

1.04

5051 d 99030-1 -114- 200529822 於二氯甲烷（50毫升）中之胺鹽酸鹽1·04 (3克，9.4毫莫耳） 内，添加50毫升飽和NaHC03。於冰溫下激烈攪:拌5分鐘。 停止攪拌，並將光氣（2當量，20%，在甲苯，10毫升）注入 下層，且立即恢復激烈攪拌。有時檢查TLC，並於2小時後， 顯示起始物質完全消耗，然後分離液層。將水層以二氯甲 烧（3毫升）再一次洗務，並以無水硫酸納脫水乾燥。過滤， 並於減壓下，使用迴轉式蒸發器而無需熱浴，使溶劑蒸發 至一半體積，接著以N2沖洗15分鐘。以二氯甲烷稀釋至33.5 毫升，並以0.28M溶液使用，供進一步偶合。 步驟5

於DCM (10毫升）中按先前描述製成之胺5051c (741毫克， 2.09毫莫耳，4當量）内，在冰溫下，添加DIPEA (8當量，2.19 毫升，12.54毫莫耳）。於N2下大氣壓添加異氰酸酯5051d (1 當量，7.46 0.028M溶液），並在冰溫下攪拌30分鐘，及室溫 下90分鐘。以10%檸檬酸使反應淬滅，並以EtOAc萃取，且 以鹽水洗滌。以無水硫酸鈉脫水乾燥，並過濾，及蒸發溶 劑。使粗產物經由急驟式管柱純化（10-40%丙酮-己烷），而 得 800 毫克 5051e，為白色固體（58%)。1H NMR (CDC13，300 MHz) 99030-1 -115 - 200529822 5 7·4 (m，5H)，5.3 (bs，2H)，4.4 (d，2H)，4-3.6 (m，6H)，3.6 (s，3H)，3·25 (m， 2H)，3 (m，2H)，1.02-0.98 (m，25H)· 步驟6

將 5051e (0.600 克，0.904 毫莫耳）與 10% Pd-C (10 重量 ％，60 毫克）在甲醇（10毫升）中之混合物於室溫下激烈攪拌1·5小 時。經過Celite®墊片過濾反應混合物，獲得產物5051f (0.45 克，94%)。 步驟7

於DMF (10毫升）中之磺醯胺5051f (400毫克，0.756毫莫耳， 1當量）内，在冰溫及氮大氣下，添加Cs2C03 (368毫克，1.5 當量，1_134毫莫耳）與Mel (3.78毫莫耳，5當量，0.355毫升）。 於室溫下攪拌過夜。當TLC與LCMS未顯示起始物質時，以 水使反應淬滅，並以EtOAc萃取。以水洗滌4次，並以鹽水 洗滌，且以無水硫酸鈉脫水乾燥。過濾，並蒸發溶劑，及 經由急驟式管柱純化（20-40%丙酮-己烷），而得390毫克 5051g (95%)。1H NMR (CDC13，300 MHz)4.4 (d，1H)，3.99-4.01 (d，1H)， 3.8 (d，2H)，3.7 (s，3H)，3.6 (m，2H)，3.25 (m，2H)，3.01 (m，3H)，2·8 (s，3H)， 99030-1 -116- 200529822 1.4 (m，1Η)·1·2 (m，1Η)，1·〇〇-〇·98 (m，24H)· 步驟8

5051 g

5051 h 於二氧陸圜（10毫升）中之甲酯5051g(300毫克，0.607毫莫 耳’ 1¾里）内’添加LiOH (1·8宅升，IN，在水中，3當量）， 並攪拌過夜。以1NHC1使反應淬滅，並以Et0Ac萃取。以鹽 水洗滌，並以無水硫酸鈉脫水乾燥。過濾，並蒸發溶劑， 獲得粗產物（290毫克，90%)。 步驟9

5051 i 於按先前所述製成之胺1〇·11 (16.51毫克，0.079毫莫耳，1.2 當量）與5051h (35毫克，0.066毫莫耳，1當量）在DMF (10毫升） 中之溶液内，在〇°C下，添加HATU (1.2當量，0.079毫莫耳， 30.18毫克），接著是DIpEA⑴當量，92·44微升，0.529毫莫耳）。 於冰溫下攪拌1小時，然後在室溫下2小時。以IN HC1使反 99030-1 -117- 200529822 應淬滅，並以EtOAc萃取。以飽和碳酸氫鈉，接著以鹽水洗 滌。以無水硫酸鈉脫水乾燥，過濾，並蒸發溶劑，而得產 物（52 毫克，100%)。 步驟10

5146 於DMF/甲苯1 : 1混合物（6毫升）中之羥基醯胺5051i (60毫 克，0.087毫莫耳，1當量）内，在冰溫度下，添加EDCI.HC1 (167 毫克，10當量，0.878毫莫耳）與二氣醋酸（36.29微升，5當量， 0.439毫莫耳），並攪拌5分鐘。然後於室溫下再攪拌3小時。 以鹽水使反應淬滅，並以1NHC1，接著以飽和NaHC03，及 再一次以鹽水洗滌。以無水硫酸鈉脫水乾燥，過濾，並蒸 發溶劑。使粗產物藉預備之TLC純化（40%丙酮-己烷），獲得 25·2 毫克 5146 (43%)。LRMS，m/z 682 [(M+1)]，375. 式5237化合物之製備

99030-1 -118- 200529822 步驟1

於甲醇中之化合物5051b (1_16克，2.5毫莫耳）内，在N2大 氣下，於抽氣後，添加Pd/C (5%重量，116毫克）。再一次抽 氣，並於H2下攪拌90分鐘。TLC顯示起始物質完全消耗。 過濾，並蒸發溶劑，而得5052a (819毫克，100%)。

步驟2

於DMF (10毫升）中之胺基化合物（285毫克，1當量）内，在 冰溫下，添加2-碘化丙烷（5當量）與碳酸鉋（1.5當量），並攪 拌過夜。使反應混合物之溫度慢慢升高至室溫。以水使反 應淬滅，並以EtOAc萃取，並將合併之有機萃液以鹽水洗 滌。以無水硫乘鈉脫水乾燥，過遽，並蒸發溶劑。將粗產 物5052b以各身用於下一步驟（310毫克，96%)。iHNMRCCDCl;， 300 MHz) 4.5 (d，1H)，3.8-3.6 (m，2H)，3.4-3.2 (m，2H)，3.01-2.8 (m，2H)， 1.9 (m，1H)，1.4 (s，9H)，1.2 (dd，6H)，0.98 (s，9H). 步驟3

99030-1 -119- 200529822 於室溫下，使化合物5052b溶於二氧陸圜中之4NHC1内， 並將溶液攪拌1小時。TLC未顯示起始物質。蒸離溶劑，並 與己烷共沸，然後與醚共沸。保持在高真空下過夜，而得 221 毫克 5052c (96%)。 步驟4

5052c 5052d 使胺鹽（180毫克，0.60毫莫耳，1當量）溶於DCM (5毫升） 中，並在冰溫下添加5毫升NaHC03(飽和）。激烈攪拌2分 鐘。停止攪拌，並將光氣（2當量）注入反應混合物中，且恢 復激烈攪拌。90分鐘後，分離液層，並以無水硫酸鈉脫水 乾燥。過濾，並於真空下蒸發溶劑，無需熱浴。以DCM稀 釋，並保持為0.02M儲備溶液。 步驟5

於酸1.17 (500毫克，1.37毫莫耳，1當量）與胺鹽酸鹽（317.8 毫克，1.37毫莫耳，1當量）在DMF中之混合物内，在冰溫及 N2下，添加HATU (1.2當量，619毫克）與DIPEA (6當量，8·15 99030-1 -120- 200529822 毫莫耳，1.42毫升），並攪拌過夜。使溫度慢慢升溫至室溫。 以IN HC1使反應淬滅，並以EtOAc萃取。以NaHC03 (飽和）洗 滌，然後以鹽水洗滌。以冰冷水（5 X 20毫升）洗滌，並以鹽 水再一次洗滌。以無水Na2S04脫水乾燥。過濾，並蒸發溶 劑，而得580毫克5052e (77%)。

5052e 个

於DCM (15毫升）中之粗製羥基醯胺5052e (1·05毫莫耳，580 毫克，1當量）内，在室溫下，添加Dess-Martin過埃烧（897毫 克，2.11毫莫耳，2當量）。於室溫下攪拌5小時。以飽和 NaHC03與亞硫酸氫鈉使反應淬滅，並以EtOAc萃取。以鹽水 洗滌，並以無水硫酸鈉脫水乾燥。過濾，並蒸發溶劑。使 粗產物藉急驟式管柱純化（10-40%丙酮-己烷），獲得450毫克 酮醯胺產物。‘使產物溶於二氧陸圜中之4NHC1溶液内，並 在室溫下搜~拌3小時，然後在真空中濃縮至乾涸，而得5052f (0.40 克，77%)。 步驟7 99030-1 -121 - 200529822

5237

於DCM (5毫升）中之胺鹽5052f (20毫克，0.041毫莫耳，1當 量）内，在冰溫下，添加DIPEA (6當量）。於N2大氣壓下添加 異氰酸酯5052d (1.1當量，0.045毫莫耳，2.27毫升0.02M溶液）， 並在冰溫度下攪拌30分鐘，及在室溫下90分鐘。以擰檬酸 使反應淬滅，並以EtO Ac萃取，及以鹽水洗滌。以無水硫酸 納脫水乾燥，並過滤，及蒸發溶劑。使粗產物經由急驟式 管柱純化（10-40%丙酮-己烷），獲得12毫克5237 (40%)。 化合物5250之數備

5250 步驟1 99030-1 -122- 200529822

5250a

5250b

化合物5250a係根據關於製備20.08所述之程序，製自化合 物20.03。於胺5010 (0.817克，2·68毫莫耳）與胺基甲酸酯 5250a (0.976克，2.06毫莫耳）在無水DCM (60毫升）中之溶液 内，在0°C下，添加DIPEA (0.90毫升，5.15毫莫耳）。使溶液 伴隨著冰浴溫熱至室溫，並攪拌18小時，然後濃縮。使殘 留物溶於EtOAc中，並以5% H3 P04溶液及飽和碳酸氫鈉溶液 洗滌。使產物藉矽膠急驟式層析純化，而得產物5250b (1.07 克，86%)。 步驟2

將甲酯 5250b (1.06 克，1.76 毫莫耳）與 LiOH (0.105 克，4.40 毫 莫耳）在THF/Me0H/H20 (1 : 1 : 1，30毫升）中之溶液，於室溫 99030-1 -123- 200529822 下攪拌4小時。於減壓下移除甲醇與THF。使用1NHC1水溶 液（50毫升）使水溶液酸化至PH〜2，並以固體氣化鈉飽和， 然後以EtOAc (3x150毫升）萃取。將有機溶液合併，脫水乾燥 (MgS〇4)，過濾，及在真空中濃縮，獲得白色固體525〇c (定 量）。 步驟3

於 5250c (0_052 克，0.088 毫莫耳）、HOOBt (0.022 克，0.132 毫 莫耳）、EDCI (0.027克，0.141毫莫耳）及胺鹽酸鹽13·01 (〇〇3〇 克，0.132毫莫耳）在無水DMF (6毫升）與DCM (6毫升）中之懸 浮液内，在-20°C下，添加4-甲基嗎福啉（〇_〇3〇毫升，0.273毫 莫耳）。將混合物於-20°C下攪拌20分鐘，然後在冷卻器中18 小時。添加鹽水（30毫升）與5%磷酸溶液（3〇毫升），接著是 EtOAc (100毫升）。分離液層，並將有機溶液以5%填酸溶液（5〇 毫升）及飽和碳酸氫鈉溶液（2 X 50毫升）洗滌，然後使其脫水 乾燥，過濾，及濃縮，而得產物5250d (定量）。 步驟4 99030^1 -124- 200529822

將羥基醯胺5250d與Dess_Martin過碘烷（克）在CH2C12中之 混合物攪拌2小時，以飽和Na2S203溶液與飽和NaHC03溶液 使反應淬滅。分離液層後，以DCM將有機溶液萃取兩次， 並使合併之有機溶液脫水乾燥，過濾，及濃縮，獲得產物 5250 (0.048 克，72%，兩個步驟）。 化合物5648之製備

步驟1

(S)-第三-白胺醇 5500a 於（S)-第三-白胺醇（5.0克，42.7毫莫耳）在CH2C12(100.0毫升） 中之已冷卻溶液（〇°C )内，添加氣曱酸苄酯（6.7毫升，47.0毫 莫耳），接著是Hunig氏鹼（9.3毫升，53.3毫莫耳）。使反應混 合物溫熱至室溫過夜，以醋酸乙酯（500毫升）稀釋，以10% 99030-1 -125- 200529822 ΚΗ2Ρ04，接著以飽和NaHC03及鹽水洗滌。使有機層以MgS04 脫水乾燥，及濃縮，而產生5500a (10.7克，100%)。 步驟2

MsCI, Py 5500a

Ms〇 -^NHCBz 5500b

於5500a (10.7克，42.7毫莫耳）在CH2C12 (100.0毫升）中之已 冷卻溶液（〇°C )内，添加吡啶（20.0毫升），接著是氣化甲烷磺 醯（3_63毫升，47.0毫莫耳）。使反應混合物溫熱至室溫過夜， 濃縮，再溶解於醋酸乙酯（500毫升）中，以飽和NaHC03及鹽 水洗滌。使有機層以MgS04脫水乾燥，濃縮，並於Si02上藉 急驟式層析純化，使用醋酸乙酯/己烷（1 : 4)，而產生5500b (14.0 克，100%)。 步驟3

MsO ^s^NHCBz 5500b 經基吡啶 TBAB, K2C03 ^NHCB2 5500c

於5500b (3.1克，9.9毫莫耳）在含有水（400微升）之PhMe (72 毫升）中之溶液内，添加TBAB (582毫克，1.8毫莫耳）、K2C03 (2.72克，1·97毫莫耳）、1-羥基吡啶（937毫克，9.85毫莫耳）。 使反應混合物回流過夜，並攪拌，過濾，蒸發，及濃縮。 使粗製物於Si02上藉急驟式層析純化，使用醋酸乙酯/ CH2C12(1 ·· 9 至 1 : 1)，而產生 5500c(1.15 克，35%)。 步驟4 99030-1 -126- 200529822

於5500c (1·15克）在MeOH (50毫升）中之溶液内，添加Pd/C (10% w/w，450毫克），並於氫大氣（40psi)下放置在帕爾振盪 器中。5500d係在使反應停止後1.2小時定量形成，而5500e 係於4小時後定量形成。在任一情況中，於矽藻土短墊片上 過濾反應混合物，而產生其相應之胺。

步驟5

〇

將飽和NaHCO3(7.0毫升）添加至5500d(194.0毫克，1毫莫耳） 在CH2C12 (7毫升）中之冰冷溶液内。將反應混合物激烈攪拌 10分鐘，並將COCl2(曱苯中之1.85M溶液，1.35毫升）添加至 其中，及在室溫下持續攪拌1小時。使有機層以MgS04脫水 乾燥，過濾，.及濃縮至一半體積，而產生5500f，為CH2C12 中之溶液〃將5500f以CH2C12中之0.05M溶液儲存。 步驟6

5500e 5500g 化合物5500g係使用製備5500中步驟5之程序合成。 步驟7 99030-1 -127- 200529822

於酸（1·17，368.5 毫克）與（10.11，565.3 毫克）在 DMF(10.0 毫 升）中之已冷卻溶液（〇°C )内，添加HATU(1.03克），接著是 DIPEA (1.382毫升）。將反應混合物於0°C下攪拌1小時，並在 室溫下2小時，以醋酸乙酯（20.0毫升）稀釋，以IN HC1、鹽 水洗滌，以NaHC03脫水乾燥，過濾，濃縮。於PhMe/DMSO (10.0 毫升，1 : 1)中之粗製物内，在0°C下，添加EDCI (5·2克）， 接著是二氣醋酸(447微升）。移除冰浴，並將反應物於室溫 下攪拌2小時。於其中添加EtOAc (75毫升），將反應混合物 以H2O(25.0毫升）洗滌，以飽和NaHC03及鹽水洗滌，然後於 Si02上純化，使用丙酮/己烷（1 : 9至9 : 1)，而產生5500h。 步驟9

nh2 5500i 使化合物5500h溶於二氧陸圜中之4 N HC1 (25毫升）内。將 反應物於室溫下攪拌30分鐘，並濃縮，而產生白色固體 5500i (350.0 毫克）。 步驟10 99030-1 -128- 200529822 61 了, 5500f

於胺鹽酸鹽5500i (25.0毫克，〇·〇51毫莫耳）在CH2C12(2.0毫 升）中之已冷卻溶液（0°C )内，添加5500f (2.5毫升，0.135毫莫 耳），接著是DIPEA(68微升0.4毫莫耳）。將反應混合物於室 溫下攪拌1.2小時，以醋酸乙酯（20.0毫升）稀釋，以3%檸檬 酸、鹽水洗滌，以NaHC03脫水乾燥，過濾，及在si〇2上純 化，使用丙酮-己烷（1: 9)，而產生5648 (10.0毫克）。LCMS 641.2 (M+H). 化合物5644之數備

V

NH. 步驟11 99030-1 -129- 200529822

化合物5644係使用關於製備5648所述之程序合成。LCMS 645.0 (M+H).

表2中所述5644之多種類似物，係使用製備5644中所述之 程序，製自5500g。 化合物5632之製備

步驟1

5632a

nh2 化合物5632a係根據製備5500g中之程序（步驟1-6)，製自 (S)-N-boc纈胺醇。化合物5632係根據關於製備5648所述之程 99030-1 -130- 200529822 序合成。LCMS : 631.1 (M+H) 表2中化合物5632之多種類似物係使用如製備5632中之 相同程序，製自5632a。 化合物5665之數備

步驟1

CI 5022a

〇

5520a

於胺5004a (560.0毫克，2·58毫莫耳）在CH2C12(15.0毫升）中 之已冷卻（〇°C )溶液内，添加氯基異氰酸丙酯（Aldrich，531 毫升，5·16毫莫耳），並將反應混合物在室溫下攪拌12小時， 以飽和NaHC03、鹽水洗滌，以MgS04脫水乾燥，過濾，濃 縮，及在Si02上純化，使用醋酸乙酯-己烷（1: 1)，而產生5520a (660毫克，t.91毫莫耳，76%)。 步驟2

5520a 5520b 於5520a (660.0毫克，1·96毫莫耳）在THF (30毫升）中之已冷 卻溶液内，添加NaH (在礦油中之60%分散液，313.0毫克， 99030-1 -131 - 200529822 7.84宅莫耳）。使反應混合物溫熱至室溫，歷經4小時，以 冰冷水小心地使反應淬滅，以CHS%萃取。將有機層以鹽 水洗滌，以MgS〇4脫水乾燥，過濾，及濃縮。使粗製物於沿〇2 上純化，使用醋酸乙酯-己烷（1:丨），而產生552〇b (22〇 〇毫克， 1.0毫莫耳）。 步驟3

於5520b (660.0毫克，1.96毫莫耳）中，添加二氧陸圜中之 4NHC1 (25毫升）。將反應物於室溫下攪拌3〇分鐘，並濃縮， 而產生白色固體，使其溶於CH/CUao毫升）中，及將飽和 NaHC〇3(7.0毫升）添加至其中。於攪拌激烈1〇分鐘後，使液 層分離，並將光氣（2.5當量）以一次注射添加至有機層中。 立即恢復激烈攪拌，移除冰浴，並持續攪拌丨小時，分離液 層。使有機層以MgS〇4脫水乾燥，過濾，並濃縮至其體積之 一半，且將5520c以0¾¾中之〇·〇5Μ溶液儲存。 步驟4 一 99030-1 132- 200529822

5665

於胺鹽酸鹽5500i (25·0毫克，0.051毫莫耳）在CH2C12(2.0毫 升）中之已冷卻溶液（〇°C )内，添加5520c (2.5毫升，0.135毫莫 耳），接著是DIPEA (68微升0.4毫莫耳）。將反應混合物於室 溫下攪拌1.2小時，以醋酸乙酯（20.0毫升）稀釋，以3%檸檬 酸、鹽水洗滌，以NaHC03脫水乾燥，過滤，濃縮，及在Si02 上純化，使用丙酮-己烷（1 : 9)，而產生5665 (10·0毫克）。 LCMS 646.2 (Μ+Η). 表2中所述5665之多種類似物，係根據關於製備5648所述 之程序，使用5520c製成。 化合物5688之數備

步驟1

5004a 5030a 使用製備5648中步驟5之程序，使胺5004a (998Ό毫克，4.6 99030-1 -133- 200529822 毫莫耳）轉化成其相應之異氰酸酯5030a。 步驟2

5030b 5030a 5530c

於CH2C12中之異氰酸酯（10.0毫升）内，添加N-曱基氣基丙 胺5030b (Aldrich，490.0毫克，4·6毫莫耳），並將反應混合物 在室溫下攪拌12小時，以飽和NaHC03、鹽水洗滌，以MgS04 脫水乾燥，過濾，濃縮，及在Si02上純化，使用醋酸乙酯/ 己烷，獲得5530c (1.6克，4.6毫莫耳），100%產率。 步驟3

使用製備化合物5665中步驟2與步驟3之實驗程序，使化 合物5530c轉化.成5530d。 步驟4 ^

5688 99030-1 -134- 200529822 於胺鹽酸鹽5500i (25.0毫克，0.051毫莫耳）在CH2C12(2.0毫 升）中之已冷卻溶液（0°C )内，添加5530d (2.5毫升，0.135毫莫 耳），接著是DIPEA (68微升，0.4毫莫耳）。將反應混合物於 室溫下攪拌1.2小時，以醋酸乙酯（20.0毫升）稀釋，以3%檸 檬酸、鹽水洗滌，以NaHC03脫水乾燥，過濾，濃縮，及在 Si02上純化，使用丙酮-己烷（1 : 9)，而產生5688 (17.0毫克）。 LCMS 660.2 (M+H).

表2中化合物5688之多種類似物係使用上述程序，製自 5530d 。 化合物5700之褽備

V

/—OCOCI ^CI 步驟1

5540a 5540b 使用製備5648中步驟5之程序，使化合物3-氣-丙醇（181微 升，2.51毫莫耳）轉化成其相應之氣甲酸酯5540b。 步驟2

OCOCI CI

H2N 5540b __^^NHBOc 水 5004a

5540c 於THF中之冰冷氯甲酸酯（10·0毫升）内，添加胺5004a (543.0 99030-1 -135- 200529822 毫克，2.51毫莫耳），並將反應混合物在室溫下攪拌12小時， 以EtOAc (250.0毫升）稀釋，以飽和NaHC03、鹽水洗滌，以 MgS04脫水乾燥，過濾，濃縮，而產生5540c(664毫克，1.97 毫莫耳）。將粗製物直接使用於下一步驟。 步驟3

使用得自製備化合物5665中步驟2與步驟3之實驗程序， 使化合物5540c轉化成5540d。 步驟4

於胺鹽酸鹽5500i (30.0毫克，0·0·6毫莫耳）在CH2C12(2.0毫 升）中之已冷卻溶液（〇°C )内，添加5540d (2_6毫升，0.131毫莫 耳），接著是DIPEA(91微升，0.52毫莫耳）。將反應混合物於 室溫下攪拌1.2小時，以醋酸乙酯（20.0毫升）稀釋，以3%檸 檬酸、鹽水洗滌，以NaHC03脫水乾燥過濾，濃縮，及在Si02 上純化，使用丙酮-己烷（1 : 9)，而產生5700 (28·0毫克）。 99030-1 -136- 200529822 LCMS 647.2 (M+H). 表2中5700之多種類似物使用上述程序，係製自5540d。 標的化合物5743之製備

5743 步驟1

於5003b (1·0克，2.9毫莫耳）在MeOH中之溶液内，在-4°c 下，添加NaBH4(11.52毫莫耳，430·0毫克）。攪拌20分鐘後， 以CH2C12/飽和NaHC03(l : 1，60毫升）使反應淬滅。將水層 以DCM (3x20毫升）萃取。使有機層以MgS04脫水乾燥，及濃

縮，而產生白色固體，將其直接使用於下一步驟。使得自 前一步驟之粗·製物再溶於EtOH (50.0毫升）中，並添加Pd/C (10 重量％，200毫克）。將反應混合物於H2大氣下攪拌12小時， 在矽藻土墊上過濾，及濃縮，而產生5550a (0.99克）。 步驟2

使用得自製備化合物5665中步驟3之實驗程序，使化合物 99030-1 -137- 200529822

5550a 轉化成 5550b。

於胺鹽酸鹽5550d (45.0毫克，0.094毫莫耳）在CH2C12(2.0毫 升）中之已冷卻溶液（〇°C )内，添加5550b (2.8毫升，2.0毫莫 耳），接著是DIPEA (100微升0.52毫莫耳）。將反應混合物於 室溫下攪拌1.2小時，以醋酸乙酯（0·0毫升）稀釋，以3%檸檬 酸、鹽水洗滌，以NaHC03脫水乾燥過濾，濃縮，及在Si02 上純化，使用EtOAc-CH2Cl2(l :9至9: 1)，而產生產物5743 (32.0 毫克）。LCMS 705.2 (M+H)· 表2中5743之多種類似物係使用上述程序，製自5550b。 化合物5754之盥備

步驟1 99030-1 -138- 200529822 〇

〇

異氰酸酯5754a係根據關於從5052c製備5052d所述之程 序，製自胺5019。 步驟2

產物5754係根據關於製備化合物5237所述之程序，製自 5754a 與 5052f。

表2中5754之多種類似物係使用上述程序，製自5754a。 化合物5812之製備 步驟1

5812 99030-1 -139- 200529822 B〇CHN^\

BocHNVs^x\

NCO 5812a 5004a

於DCM (50毫升）中之胺（1.2克，5.5毫莫耳，1當量）内，添 加50毫升飽和NaHC03。於冰溫下激烈攪拌5分鐘。停止攪 拌，並將光氣（2當量，11.09毫莫耳，20%，在曱笨中，5.96 毫升）注入下層中，且立即恢復激烈攪拌。1小時後分離液 層。將水層以DCM (3毫升）再一次洗務，並以硫酸納脫水乾 燥。過濾，並於高真空下無需熱浴，蒸發至一半體積，然 後以N2滌氣15分鐘。在DCM中稀釋至100毫升。以本身使用 於進一步反應。 步驟2

5812b 5812a 5812c

於曱醇（20毫升）中之胺5812b (Aldrich，0.5克，4.2毫莫耳， 1當量）内，添加異氰酸酯（5.5毫莫耳，1.3當量）與三乙胺（3.4 毫升，6當量，、25.2毫莫耳），並使反應混合物在90°C下回流 48小時。於100°C下再持續攪拌5小時。使混合物濃縮，並 經過急驟式管柱層析純化，獲得產物5812c，96.7%產率。 步驟3

5812c

5812d 於化合物5812c (650毫克）中，添加4M HC1/二氧陸圜（25毫 99030-1 -140- 200529822 升），並在室溫下攪拌0.5小時。蒸離溶劑，並與己烷共沸， 然後與醚共沸。於高真空下保持4小時，而得產物，定量產 率〇 步驟4

於DCM (5毫升）中之胺鹽酸鹽（20毫克，0.08毫莫耳，1.3 當量）内，在0°C下，添加DIPEA (6當量）。於N2大氣下添加 異氰酸酯（3亳升，0.02M，在DCM中）。於0°C下攪拌30分鐘 後，在室溫下90分鐘。以檸檬酸使反應淬滅，並以Et〇Ac 萃取’且以鹽水洗滌。以無水硫酸鈉脫水乾燥，並過濾， 及蒸發溶劑。使粗產物經由急驟式管柱層析純化（1〇-4〇%丙 酉同-己烷），獲得化合物5；812 , 41%產率。

50 nM ;種類 B > 50 nM。 99030-1 -141 . 200529822 表1

化合物 編號 結構 Ki* 分子量 5106 S 〇 O^NH °6χ A 652.86009 5107 >ν^〇° V0 。好： A 678.89833 5108 >V^〇〇 S 〇 0 丫 NH f+f Λ NH CL 0 B 720.85847 5109 ,Anh2 >^0° V 〇〇 °rNH ^ e〇c A 638.833 99030-2 -142- 200529822

5110 >^Λ0〇 k 〇 。好： A 652.86009 5111 S0 ΟγΝΗ k ΛγΝΗ A 680.91427 5112 >ν^〇° S 0 owo VH ^ ^N^VNH A 694.94136 5113 ,Ανη2 >ν^〇° \>° ，〇、,〇 0rΝΗ 一 ό^χΝΗ A 652.86009 5114 >V"〇0 ν° 0、，0 QYNH ^ A 692.92542 99030-2 -143- 200529822

5115 >^Λ〇〇 ^ 〇 〇、,〇 0rNH A 680.91427 5116 >V"00 VP 〇、/0 〇TNH □ 己n^nh A 666.88718 5117 >V^〇〇 v° 〇、,〇 0rNH ^ A 666.88718 5118 >V"〇0 S 0 ，qp 0rNH f七f 一 ό^ΝΗ A 708.84732 5119 >v^〇〇 S0 〇,,〇 VH F^F ^n^nh A 734.88556 99030-2 -144- 200529822

5120 X Η, ,(nVNANH2 >v^〇° S 0 〇、,〇ΟγΝΗ ^n^nh A 640.84894 5121 >V"〇° S0 qwp °rNH 〇〇^H A 694.94136 5122 >v^〇° S0 〇、,〇 0rNH A 654.87603 5123 >v^〇° s0 〇w〇 °rNH 一 δ〇^ΝΗ A 668.90312 5124 >v^〇〇 S0 〇,,〇 °YNH k ^Ν-γΝΗ A 668.90312 99030-2 -145 - 200529822

5125 S 〇 VH ii dNH A 690.90948 5126 O^NH I 〔V Cr A 709.95603 5127 O^NH V >1 NH A 721.96718 5128 O^NH 1 、nh A 683.91779 5129 0 〇 〇 O^NH «Ν^νΝΗ c/4 A 816.03767 99030-2 -146- 200529822

5130 cyNH ^ A 681.90185 5131 ΝΗ □ νη A 695.92894 5132 0 丫 ΝΗ k 认NH 〔\.〇 Cr A 723.98312 5133 於 owo °γΝΗ ^ A 720.9796 5134 〇wo °TNH A 706.95251 99030-2 -147- 200529822

5135 〇、,〇 0rΝΗ ν ^ν-υνη A 718.96366 5136 α$τΗΛ" 〇w〇 °γΝΗ A 680.91427 5137 0 丫 NH 丨 >ι,Ά A 669.8907 5138 〇,,〇 °rNH ΰ 一 ό^ΝΗ A 692.92542 5139 Ο^ΝΗ ' >L ]jH N-S=0 A 734.98463 99030-2 -148- 200529822

5140 〇 〇 °rNH > A 678.89833 5141 〇,,〇 °rNH 士 dNH A 760.9238 5142 〇^吩、 〇w〇 °rNH v A 692.92542 5143 〇w〇 °YNH 1=1 一 s〇^NH A 732.99075 5144 >^〇° Vi° 〇w〇 °YNH U A 706.95251 99030-2 -149- 200529822

5145 >^Α〇〇 k 〇 °rNH II όγ A 692.92542 5146 q,0 °rNH A 681.90185 5147 勒π 〇〇 0丫 NH 、亡ΝγΗ A 667.87476 5148 、QP 0丫 ΝΗ ΗΝ 乂 ΝΗ A 667.87476 5149 qp °γΝΗ Hr^N/^NH A 653.84767 99030-2 -150- 200529822

5150 qp 0丫 ΝΗ 、亡ΝγΗ A 695.92894 5151 Ο^ΝΗ V >1 丫]ΙΗ N-S=0 A 706.93045 5152 0 Lh Ll *v\:0 A 720.95754 5153 〇^.NH V ，>1 丫 NH Ν」έ=ο A 746.99578 5154 ΟγΝΗ k >1 丫 NH V\=。 A 749.01172 99030-2 -151 - 200529822

5155 0 0 O^NH W A 705.92415 5156 。滅 〇ρ O^NH ΗΝχδΝ-^γΝΗ A 691.89706 5157 00 〇丫nh pyF CjC A 749.90023 5158 ' q,〇 °rNH 一、Ν^ορΝΗ A 707.94009 5159 Q,P VNH O^nh A 721.96718 99030-2 -152- 200529822

5160 ΟγΝΗ k 〔& A 683.91779 5161 ΟγΝΗ k >1 丫]IH A 708.94639 5162 o.P 〇vnh 1 A 742.94233 5163 .^ΛΝΗ2 、0·、Ρ ΟγΝΗ □ 了 A 728.91524 5164 Q.P 〇VNH k 〇£ΝγΗ A 742.98596 99030-2 -153 - 200529822

5165 A办、 o.P °γΝΗ ^ 了 Η A 740.97002 5166 0、0 0丫ΝΗ F ff 、己ΝγΗ A 723.86199 5167 0 0 〇 丫 ΝΗ 、亡N^jC A 681.90185 5168 ·' Χτ：Η 丨 〔& ? H I A 719.95124 5169 ΟγΝΗ I N一 S=0 A 744.97984 99030-2 -154- 200529822

5170 df^NH ] A 738.95408 5171 O.P O^NH I A 728.95887 5172 Q,〇 〇γΝΗ V 0^Ν 丫 A 700.90469 5173 〇、ρ 〇丫ΝΗ 〇 A 714.93178 5174 0. ρ °γΝΗ 亡^ 〇5^νη A 754.99711 99030-2 -155- 200529822

5175 0丫 NH 丨 >1 丫 NH 0° A 720.9796 5176 ΟγΝΗ >k,NH 〔0。 A 732.99075 5177 ^sp °rNH A 761.02287 5178 ο^τνΗΛ^ '°'s °ΤΝΗ ^ 了 Η A 775.04996 5179 Ο,Ρ 〇γΝΗ V 於了 Η A 773.03402 99030-2 -156- 200529822

5180 Ο,Ρ ΟγΝΗ 〇 A 787.06111 5181 >^ψΝΗ2 〇"〇 0 丫ΝΗ k A 702.92063 5182 〇 ΝΗ U >L IlH C ¢0 0 A 747.01784 5183 O^NH k -' ^1.0 0 A 735.00669 5184 α^τ^τ Ο,Ρ ΟγΝΗ U <ζΙ> 丫 A 746.99578 99030-2 -157- 200529822

5185 X Ο.Ρ 〇γΝΗ V A 732.96869 5186 Ο^ΝΗ V? >L ΝΗ 〔0。 A 692.92542 5187 ν ΝΗ 0 火〔δ。 A 706.95251 5188 ,·' ΛΝΗ 1 1 £〇 0 A 730.97481 5189 0 丫 ΝΗ k ACNHP〇 0 A 694.94136 99030-2 -158- 200529822

5190 ,^VnHAnH^ >V^〇0 V,0 %° °TNH 口 A 720.9796 5191 i >v^〇° S 0 9SP °YNH ^ A 708.96845 5192 α^τ 〇,P 〇γΝΗ k ζ]^Ν^γΗ A 734.98463 5193 >V^〇° V,0 .9^,0 ΟγΝΗ Q A 680.91427 5194 3° °rNH ill <〇CN 了H A 771.01808 99030-2 -159- 200529822

5195 >^Λ0〇 k 〇 >° °rNH ιι A 704.93657 5196 >ν^〇0 ν>° %° °ΤΝΗ β A 706.95251 5197 9,0 ΟγΝΗ ί> A 666.88718 5198 7 c^H Ύ q,0 °rNH 一 ί!/Ν"ΥΝΗ A 762.03251 5199 γ 丫 9、.〇 〇rNH ύΗ^Η A 707.94009 99030-2 -160- 200529822

5200 X Ηχ >v^NANH2 9,0 〇γΝΗ k A 668.90312 5201 A 749.97773 5202 对H A 723.93949 5203 0 QP O^NH 一 A 亡n^nh A 709.9124 5204 I QP °VNH ^N^n^s^NH A 750.02136 99030-2 -161 - 200529822

5205 丄 Q、,〇 °νΝΗ 、ό^ΝΗ A 738.01021 5206 ΟγΝΗ k QNH9 、-s=0 A 761.02287 5207 ΟγΝΗ V Qn5 N - s、=0 B 759.00693 5208 ΟγΝΗ 1 ' QNH〇 一 kN^° A 746.99578 5209 ^°rNH ill 〇cNV N-S A 756.99099 99030-2 -162- 200529822

5210 為ΝΗί I qp VNH A 709.95603 5211 O^NH V7 A 718.9416 5212 ΟγΝΗ 〇 QNH〇〇 4 A 732.96869 5213 i >SA〇〇 k 〇 W%9 °γΝΗ V B 707.94009 5214 〇vnh 、 A 720.95754 99030-2 -163- 200529822

5215 >V^〇〇 v,0 必'0 〇rNH V A 667.87476 5216 I >V"〇〇 S 0 w%° °rNH B 695.92894 5217 I $VRAnH— >^Λ〇〇 卜 〇 必。〇rNH k B 709.95603 5218 I q.o 0丫NH -〆Vs N〜nh ^不 A 695.92894 5219 柄z i q.o 0丫NH /VS.N 八丫^nh A 723.98312 99030-2 -164- 200529822

5220 1 q,〇 °γΝΗ A 709.95603 5221 WH ιι ur〇 、N-S=0 A 764.99232 5222 ΟγΝΗ k UXN9 ^N-S=0 A 769.0242 5223 • ^ 〇γΝΗ ' 、U、〔NHQ Vs、=0 义） A 754.99711 5224 Ji° °rNH (^N-v NH 0 A 720.9796 99030-2 -165- 200529822

5225 Λ·° °γΝΗ ^ ^N-yNH ό A 735.00669 5226 >^ϊβΛΝΗ2 ^ ΟγΝΗ 1> U〔NHQ A 726.94293 5227 V 恭xff ^ O^NH Ll kj'丫 NH A 740.97002 5228 • 9p 〇vnh V A 732.99075 5229 ^ ΟγΝΗ V UTNH9 N- S=0 A 767.00826 99030-2 -166- 200529822

5230 Λ° °rNH ill (^Ν-^γΝΗ 0 A 730.97481 5231 Λ·° ν \ Gn^n A 692.93 5232 Λ·° v b Gn^n A 706.95 5233 .Ο,Υ ^ 〔N% -^ B 781.04 5234 Jl ° v b 0^N B 747.02 99030-2 -167- 200529822

5235 5236 5237 5238 5239

N 735.99

&NA'

A 708.97

X 〇〆 QP °YN 735.99

c:

748.01 762.03 99030-2 -168- 200529822

5240 +4。 Ο- A 750.02 5241 AV 斗丫 N〇 A 735.99 5242 、0rN ill 44-〇 A 745.99 5243 α^τΝΛΝ • \v A 707.94009 5244 CX^TNAN 〇YN □ A 721.96718 99030-2 -169- 200529822

5245 ^N-S=〇 A 763.03881 5246 X 。， A 783.82184 5247 。飞N A 750.79191 5248 α^τΝ^ Ο.//0 0VN k A 769.0242 5249 ο^νΛνΓ" ^//° 〇vN V A 767.00826 99030-2 •170- 200529822

5250 〇s//° 〇νΝ ' 〇>^N A 754.99711 5251 〇s//° 〇vN k 〇i-N^N A 757.01305 5252 %，。麵’ {XyN*^N A 789.8476 5253 α^τΝΛΝ 〇s//° 〇vN ^ :CX>^N A 726.94293 5254 α^τΝΑΝ Rw/° 〇vn U 〇>^N A 740.97002 99030-2 • 171 - 200529822

5255 α^τΝΛΝ^ °γ^ ' A 775.04996 5256 {XyN^N A 789.07705 5257 α$τΝΛΝ^ A 781.03535 5258 ycN^N A 783.05129 5259 A 737.00057 99030-2 -172- 200529822

5260 ο$τνΛν^ A 769.0242 5261 {XyN^N A 787.06111 5262 v O^N Ο u- A 761.02287 5263 〇sP 〇vN U 0>^N A 781.03535 99030-2 173 - 200529822 表2

化合物 編號 結構 Ki* 分子量 5603 〇暴々 00CT A 612.77596 5604 〇在女 όα丫 A 626.80305 5605 〇 όοτ A 640.83014 5606 〇 όα丫士 A 694.80143 99030-2 174- 200529822

5607 Β 652.84129 5608 〇在 όα丫 Β 656.87317 5609 〇在f Β 658.88911 5610 〇 όα丫 u A 654.85723 5611 ,ΥύνΑν 。 ύΝΧ A 604.75306 99030-2 -175- 200529822

5612 X 0 ,(nVnAn 。 A 618.78015 5613 ^ϊνΛν^ ,V k °^〇 A 720.91717 5614 〇 6:χτ A 670.90026 5615 〇 6α丫 B 666.86838 5616 9 °ΥΝ fTf 心:χΝ A 686.77853 99030-2 -176- 200529822

5617 0 °γΝ ^ A 646.83433 5618 A 678.8359 5619 >^νΛν^ 0¾ A 706.89008 5620 在令A ,V ύ A 644.86202 5621 在 ,V k B 658.88911 99030-2 -177- 200529822

5622 ,V A 630.83493 5623 A 656.87317 5624 1 V A 604.79669 5625 〇iiNAN 〇γΝ V ，》Ν B 674.84488 5626 0¾ A 666.82475 99030-2 -178- 200529822

5627 A 646.83433 5628 ,v u A 632.80724 5629 ,V ^ A 618.78015 5630 >^νΛν^ O^N fArF • J F ' t： A 700.80562 5631 ,V k A 660.86142 99030-2 -179- 200529822

5632 丫 A 630.83493 5633 〇 όοτ A 644.86202 5634 >^ϊνΛν^ ,V ^ A 718.90123 5635 ν 。参々、 .〔Ν{ 〇Αο A 692.86299 5636 ,V $5。 A 670.85663 99030-2 -180- 200529822

5637 ,ν % A 658.84548 5638 ,V V A 630.7913 5639 %。 A 644.81839 5640 ,ν π • Ac> A 644.81839 5641 〇善々’ ⑽丫 A 670.90026 99030-2 -181 - 200529822

5642 〇在☆’ A 684.92735 5643 (¾丫 A 630.83493 5644 〇為令 00fT A 644.86202 5645 〇 ：6n^y A 658.88911 5646 〇fc° A 618.78015 99030-2 -182- 200529822

5647 為ΝψΝ〜 ,v k %。 A 672.87257 5648 〇 ^nAn A 640.83014 5649 〇為令 όγιΝ A 626.80305 5650 0 ^τΝψΝ^ :0Ν^Υ A 654.85723 5651 ο在 6ΤίΝ 、 A 668.88432 99030-2 -183- 200529822

5652 〇 A 672.9162 5653 v A 694.87893 5654 αγΐΝ ι1 A 668.88432 5655 〇 ：6^Υ A 666.86838 5656 νΛν^νυΝ π ν_° B 671.88784 99030-2 -184- 200529822

5657 ^ °yn ν A 693.85057 5658 >^νΛν^ A 719.88881 5659 >^νΛν ^ °ΥΝ ° A 693.85057 5660 >^υνΛν °ΥΝ ^ A 679.82348 5661 >^ΤΝ*Ν °ΥΝ A 667.81233 99030-2 -185- 200529822

5662 〇在ψ’ A 712.8604 5663 〇 Ν 人 NW ^ 冬。 A 673.90378 5664 〇 NiqcT A 659.87669 5665 ο Λ令 .¾丫 A 645.8496 5667 ο Λ* A 631.82251 99030-2 -186- 200529822

5668 6%丫 A 680.89547 5669 ,V ill >*'丫 N 〔n{ 〇Λο A 716.88529 5670 A 684.88372 5671 |V 、.々Λ 。0 A 672.87257 5672 y >^νΛν^ O^N U "Χλ 0<J A 698.91081 99030-2 -187- 200529822

5673 v i°rN k A 686.89966 5674 。晏N々N Y。 0¾ A 644.81839 5675 ,v u 々0 ob A 658.84548 5676 在ΨΝ ,v k 〇ύ A 646.83433 5677 v 〇<^N k Q1, 〇4) B 732.92832 99030-2 -188- 200529822

5678 v 在令a 〇^N ' 〇4> A 718.90123 5679 v 在々A ox& B 730.91238 5680 〇^N k Q：T〇 N又 °^o A 692.86299 5681 • c?) ， N又 〇^) A 690.84705 5682 v ΟγΝ U Q；T〇 A 704.87414 99030-2 -189- 200529822

5683 〇在亡’ 丫 k Β 687.93087 5684 、όο^ΝγΝ Β 685.91493 5685 〇 、0C|C丫 Β 673.90378 5686 〇在々 •、N^y^丫 v A 645.8496 5687 X 〇 丫 Β 699.94202 99030-2 -190- 200529822

5688 〇在夺 A 659.87669 5689 V ' 0 ,N-X^N A 674.84488 5690 I WnAn— 〇^°° \° °^N A 688.87197 5691 I 〇vNrVN— M々。。V H^N A 686.85603 5692 〇在V B 727.87507 99030-2 -191 - 200529822

5693 〇 B 699.94202 5694 I 0。V A 700.88312 5695 〇在¥ ύΝγ^Ν A 660.86142 5696 >^νΛν^ .c?: Ίι ， ηΛ °^〇 A 728.89644 5697 ,WNrVN 0 >SA0〇 1 〇 ^ °YN 口 〇4νΎ 0 + A 660.81779 99030-2 -192- 200529822

5698 X 。 〇 A 632.80724 5699 I WnAn ^ 〇^°° \° A 648.80664 5700 〇在旮 A 646.83433 5701 :好 0 + A 646.7907 5702 〇 4^’ 0¾丫 A 672.87257 99030-2 -193- 200529822

5703 〇 ▲々’ 〇 人 nW ^ U冬〇 A 674.88851 5704 J 〇ν Ν 1 A 698.91081 5705 J °γΝ ^ % A 712.9379 5706 、NiC|CiN 11 B 683.89899 5707 ο A 706.93371 99030-2 -194- 200529822

5708 〇个 A 710.92196 5709 A 684.88372 5710 X 。— ο α^τΝΛΝ A 684.92735 5711 0 ·ύΝΐ：Υ A 671.88784 5712 〇為令’ iqcT A 685.91493 99030-2 -195 - 200529822

5713 〇 C^TN*N N人NW A 685.91493 5714 〇 α^ΝΛΝ 6qcT A 696.9385 5715 α^τΝΛΝ J 〇J > A 670.85663 5716 X 。， 〇 c^y 和 A 698.95444 5717 χ 。， 〇 α^ΝύΝ 0飞丫 A 710.96559 99030-2 -196- 200529822

5718 c% A 692.86299 5719 〇 αέτΝΛΝ" A 686.94329 5720 〇 ό}丫 F "F A 738.89864 5721 X 。， 〇 α^ΓΝ*Ν :6狀 π A 694.92256 5722 〇 iqcT A 730.95601 99030-2 -197- 200529822

5723 A 724.95 5724 。 的丫 A 718.94 5725 。 A 732.97 5726 • II A 729.93 5727 A 731.94 99030-2 -198- 200529822

5728 ΝόΝ1 丫 、 A 733.96 5729 0 A 720.96 5730 ? 6¾丫 ^ A 698.95 5731 〇 A 684.93 5732 6¾丫 A 696.94 99030-2 -199- 200529822

5733 % A 720.92 5734 〇在 A 660.91 5735 0 ^NX>V A 658.89 5736 ο ..6及Ν A 710.97 5737 知X A 734.94 99030-2 -200- 200529822

5738 B 746.96 5739 A 732.93 5740 〇 〇^ίΝ " A 694.92 5741 _。。泰 • Q^I III A 730.91 5742 ,V B 692.91 99030-2 -201 - 200529822

5743 ,°rN ν A 704.92 5744 ,ν 口 〔么 X) Β 718.94 5745 ,ν 〔:Ί A 664.85 5746 ,ν k • .^ Β 694.92256 5747 ,ν 士 A 746.87791 99030-2 •202- 200529822

5748 辦N A 706.93371 5749 私’ ,°γΝ III 〔:Ί A 702.90183 5750 ν ,°γΝ ill A 690.89068 5751 ,V .化 . X) A 718.94486 5752 χ 。^ % A 727.73554 99030-2 -203 - 200529822

5753 〇^N k A A 714.95384 5754 〇^N V A 712.9379 5755 y "5 A 726.96499 5756 KXr^ : A 755.78972 5757 〇^N 丨 A 700.92675 99030-2 -204- 200529822

5758 〇^N k 0¾ A 702.94269 5759 A 710.92196 5760 K 0^ν々ν 0 + A 761.75305 5761 V A 672.87257 5762 Ο^Ν U 0¾ A 686.89966 99030-2 -205 - 200529822

5763 X xr1 α^τΝΛΝ ,°YN F如 A 772.91615 5764 V ^ 〇jy々N n4> A 728.94007 5765 ,v k A 732.97195 5766 :¢) A 718.94486 5767 ,V k 〔匕 "Ο A 720.9608 99030-2 -206- 200529822

5768 ,V ^ A 730.95601 5769 ν4> A 744.9831 5770 〇^Ν ' A 723.87706 5771 ν Ο^Ν k 絶。 、。^} 0' A 737.90415 5772 〇VN ^ +.〔1。 。4} 0' A 735.88821 99030-2 -207- 200529822

5773 。4) b~ A 695.82288 5774 +?:。 。4) 〇 A 709.84997 5775 屯N A 738.97614 5776 :艰 A 726.96499 5777 A 740.99208 99030-2 -208 - 200529822

5778 or1 α〇 A 714.95384 5779 cx^N^N 111 C>0 A 724.94905 5780 01丫 11 A 708.94965 5781 〇 :6义丫 、 A 712.98153 5782 〇去亡’ 6飞丫 A 710.96559 99030-2 -209- 200529822

5783 X 。， 〇 α^Ν^Ν A 698.95444 5784 οα$τΝΛΝ y^N °rN ° A 712.9379 5785 1 A 736.9602 5786 α^τΝΛΝ A 698.91081 5787 的丫 1 3 ^ VN 1 A 728.94007 99030-2 -210- 200529822

5788 A 753.00323 5789 6^N A 718.94486 5790 〇 α^τΝΛΓ A 700.97038 5791 。 0CfT 、 A 720.9608 5792 。 A 698.95444 99030-2 -211 - 200529822

5793 X 〇 / 〇今 A 779.04147 5794 ◦今 A 767.03032 5795 X 〇 / α^τΝΛΝ A 781.05741 5796 〇^Ν β .沙 A 738.97614 5797 X 。， 。翁β 〇 j A 765.01438 99030-2 -212- 200529822

5798 厂^ 〇rN ^ Qn>n 0今 A 726.96499 5799 °rN A 712.9379 5800 。感f /-< °rN ^ Q-χ 0 + A 724.94905 5801 a^TNANrJ :部 0今 A 740.99208 5802 °rN k 0七 A 755.01917 99030-2 -213- 200529822

5803 o + A 753.00323 5804 °r^ 1ι 〇个 A 669.82827 5805 Q ▲ w 〆 〇rN k n^n_Y 〇个 A 673.86015 5806 O^N 丨 .A ，jX A 700.92675 5807 °rN k O + A 716.96978 99030-2 -214- 200529822

5808 0小 A 743.00802 5809 〇今 A 740.99208 5810 C^NX>NfJ 0冬 A 767.03032 5811 Λ °rN ..打 A 631.77888 5812 >^νΛν^ λ °γΝ ιι Ν"：χ A 683.85536 99030-2 -215- 200529822

5813 ^ °rN k 〇个 A 687.88724 5814 Λ °rN 〇 y\- A 671.84421 5815 Λ °rN N^rN 〇小 A 685.8713 5816 Λ °rN 、‘ Ν々ΎΝ、 〇小 A 685.8713 5817 ,V k 〇ίχ A 740.99208 99030-2 -216- 200529822

99030-2 -217- 200529822 本發明係關於新穎HCV蛋白酶抑制劑。此利用性可以其 抑制HCVNS2/NS4a絲胺酸蛋白酶之能力証明。關於此種証實 之一般程序係藉由下述活體外檢測說明。 HCV蛋白酶抑制活性之檢測： 分光光度測定檢測:對HCV絲胺酸蛋白酶之分光光度測定 檢測可在本發明化合物上，按照由R· Zhang等人，Analytical Biochemistry, 270 (1999) 268-275所述之程序進行，其揭示内容係 併於本文供參考。以色原質酯受質之蛋白水解為基礎之檢 測，係適用於連續監測HCVNS3蛋白酶活性。該受質係衍生 自 NS5A_NS5B 接合順序之 P 側（Ac-DTEDWX(Nva)，其中 X = A 或P)。其C-末端羧基係以四種不同發色團醇類（3-或4-硝基 酚、7-羥基-4-曱基-香豆素或4-苯基偶氮酚）之一酯化。下文 所示者為此等新穎分光光度測定酯受質之合成、特徵鑒 定，及應用至HCVNS3蛋白酶抑制劑之高通過量篩檢與詳細 動力學評估。 物質與方法： 物質：供檢:測相關緩衝劑用之化學試劑係得自Sigma化學 公司（St. Louis，Missouri)。供肽合成用之試劑係得自Aldrich化學 品，Novabiochem (San Diego, California) 、Applied Biosystems (Foster City, California) Perseptive Biosystems (Framingham, Massachusetts) ° 肽係以手動方式或在自動化ABI431A型合成器（得自Applied Biosystems)上合成。UV/VIS分光計LAMBDA 12型係得自 Perkin Elmer (Norwalk，Connecticut)，而 96-井 UV 板係得自 Coming (Coming，New York)。預熱板塊可得自 USA 科學（Ocala，Florida)， 99030-3 -218- 200529822 而96-井板旋渦器係得自Labline儀器（Melrose Park，Illinois)。具有 單色計之Spectramax Plus微滴定板讀取器係得自Molecular裝置 (Sunnyvale，California) 〇 酵素製備:重組異種二聚體HCVNS3/NS4A蛋白酶（菌種la) 係利用先前發表之程序（D. L· Sali等人，所oc/zem欣7，泣_(1998) 3392-3401)製成。蛋白質濃度係藉由Biorad染色方法，使用先 前藉由胺基酸分析定量之重組HCV蛋白酶標準物測定。在 檢測引發之前，利用BioradBio-SpinP-6預填充柱，將酵素儲 存緩衝液（50 mM磷酸鈉pH 8.0, 300 mM NaCl，10%甘油，0.05%月 桂基麥芽甞及10 mM DTT)交換成檢測緩衝液（25 mM MOPS pH 6.5, 300 mM NaCl，10% 甘油，0.05% 月桂基麥芽苷，5 //M EDTA 及 5 //M DTT)。 受質合成與純化:受質之合成係按由R· Zhang等人（同前出 處）所報告進行，並經由使用標準擬案，將Fmoc-Nva-OH固定 至氣化2-氣基三苯甲烷樹脂而引發（K. Barlos等人，/加.J·戶印ί· ProtoVz i^·，11(1991)，513-520)。接著使用 Fmoc化學，將肽組合 在一起，無缔是以手動方式或在自動ABI431型肽合成器 上。使經N-乙醯化及完全保護之肽片段自樹脂分裂，無論 是藉由二氣曱烷（DCM)中之10%醋酸（HOAc)與10%三氟乙醇 (TFE)，歷經30分鐘，或藉由DCM中之2%三氟醋酸（TFA)， 歷經10分鐘。使合併之濾液與DCM洗液以共沸方式蒸發（或 藉由Na2C03溶液重複萃取），以移除使用於分裂中之酸。使 DCM相以Na2S04脫水乾燥，並蒸發。 使用標準酸-醇偶合程序，將酯受質組合在一起 99030-3 -219· 200529822 (Κ· Holmber 等人，也to C/zem. Scam/·，B33 Π979) 410_412)。使肽片段 溶於無水吡啶（30-60毫克/毫升）中，於其中添加10莫耳當量 發色團與催化量（0.1當量）之對-甲苯磺酸(pTSA)。添加二環 己基碳化二亞胺（DCC，3當量），以引發偶合反應。產物形 成係藉HPLC監控，並可在室溫下反應12-72小時之後發現完 成。於真空下蒸發吡啶溶劑，並藉由與甲苯共沸蒸發而進 一步移除。使肽酯以DCM中之95% TFA去除保護兩小時，並 以無水乙醚萃取三次，以移除過量發色團。使經去除保護 之受質於C3或C8管柱上藉由逆相HPLC，以30%至60%乙腈 梯度液（使用六份管柱體積）純化。在HPLC純化後之總產率 可為大約20-30%。分子質量可藉由電喷霧離子化作用質量 光譜確認。將受質於乾燥下以乾粉形式儲存。 受質與產物之光譜:受質及其相應發色團產物之光譜，係 在pH 6.5檢測緩衝液中獲得。消光係數係使用多重稀釋液， 在1公分比色杯中之最適宜偏離峰波長（對3-Np與HMC為 340毫微米，對PAP為370毫微米，及對4-Np為400毫微米）下 測得。最適茸‘偏離峰波長係被定義為在受質與產物間之吸 光率上產生最大分率差異（產物OD-受質OD)/受質OD)之波 長。 蛋白酶檢測:HCV蛋白酶檢測係於30°C下，在96-井微滴定 板中，使用200微升反應混料進行。使檢測緩衝液條件 (25 mM MOPS pH 6.5, 300 mMNaCl，10% 甘油，0.05% 月桂基麥芽 甞，5 //Μ EDTA及5 //M DTT)，對NS3/NS4A異種二聚體達最佳 化（D· L· Sali等人，同前出處）。典型上，係將150微升緩衝劑、 99030-3 -220- 200529822 受質及抑制劑之混合物放置在井中（DMS0之最後濃度$ 4 % v/v) ’並允許在30°C下預培養大約3分鐘。然後，使用五 十微升檢測緩衝液中之預先溫熱蛋白酶（12 _，3〇°c )，以 引發反應（最後體積200微升）。板係使用裝有單色計之 SpectromaxPlus微滴定板讀取器，監測適當波長（對3_Np與 HMC為340毫微米，對PAP為370毫微米，及對4-Np為400毫 微米）下之吸光率變化，歷經檢測長度（6〇分鐘）（可接受之結 果可以利用截止遽器之板讀取器獲得）。於Nva與發色團間 之酯鏈結蛋白分解之分裂作用係於適當波長下，對著作為 對照組進行非酵素水解作用之無酵素空白試驗進行監測。 文質動力學參數之評估係涵蓋3〇倍受質濃度範圍（〜6·2〇〇 //Μ)進行。初速度係使用線性回歸測得，而動力學常數係 經由使用非線性回歸分析，使數據吻合至Michadis-Menten方 程式而獲得（Mac曲線吻合u，K· Raner)。計算轉換數火^)， 假設酵素為完全活性。 失活劑之評估••競爭性抑制劑入⑼-①-㈣心

HCha)-C-OH (27)、Ac-DTEDWA(Nva)-OH 及 Ac-DTEDWP(Nva)-OH 之抑制常數（K〇，係於酵素與受質之固定濃度下，根據關 於斯< 爭性抑制動力學之重排Michaelis-Menten方程式：V()/Vi = 1+ + [S]〇/Km))，其中v。為未被抑制之初速度，％為在 任何特定抑制劑濃度（[I]。）之抑制劑存在下之初速度，而[S]。 為所使用之受質濃度，經由將v〇/Vi對抑制劑濃度（⑴。）作 圖，以實驗方式測得。使用線性回歸，使所形成之數據吻 合，並使用所形成之斜率1/(&(1+[8]。/^)計算&值。本發明 99030-3 -221 - 200529822 一些化合物之Ki*值（以毫微莫耳濃度表示）係在下列表4 中：

表4 化合物 編號 結構 Ki* 5619 I V 11 5652 〇在ψ’ iqc丫 、 19 5705 cAN於 J °γΝ ^ % 3 5724 〇 19 99030-3 -222- 200529822

5731 〇在V 6¾丫 15 5753 O^N k A 4 5754 >^ινΛν^ 〇νΝ V 0¾ 4 5755 0¾ 7 5775 O^TNxj/ 5 99030-3 -223 - 200529822

雖然本發明已搭配上文所提出之特殊具體實施例加以描

述，但其許多替代方式、修正及其他變異將為一般熟諳此 項技藝者所明瞭。所有此種替代 务 - ②代方式、修正及變異，均意 欲洛在本發明之精神與範圍内。 99030-3 -224-

Claims (1)

1. 200529822 十、申請專利範圍·· 1· 一種化合物，或該化合物之對掌異構物、立體異構物 '旋 轉異構物、互變異構物及外消旋物或該化合物之藥學上可 接受鹽、溶劑合物或酯，該化合物具有式I中所示之一般 結構

   其中 R1為 Η、OR8、NR9R10 或 CHR9R10 ,其中 R8、R9 及 R10 可 為相同或不同，各獨立選自包括H、烷基-、烯基·、炔基_、 芳基-、雜烷基_、雜芳基_、環烷基_、雜環基_、芳烷基_

   及雜芳烷基； Α與Μ可為相同或不同，各獨立選自R、〇R、NHR、 、SR、S〇2R及鹵基；或八與Μ係互相連接（換言之， A-E-L-M —起採用），以致使上文式1中所示之部份基團： MwA

   系幵/成無娜是三，四，六，七或八_員環烷基、四至八-員雜環 基/、至十-員芳基或五至十-員雜芳基； 99030.3 200529822 E 為 C(H)或 C(R); L 為 C(H)、C(R)、CH2C(R)或 C(R)CH2 ; R、Rf、R2及R3可為相同或不同，各獨立選自包括Ή 烧基_、浠基_、炔基_、環烧基_、雜烧基-、雜環基、— 基-、雜芳基-、（環院基）院基-、（雜環基）烧基-、芳夷广 基-及雜芳基-烷基或者NRR’中之以與尺，係互相連接，以 致使NRR’形成四至八-員雜環基； 且Υ係選自下列部份基團

   ρ19 I16r^18 Ri〇Rl7R18

   〇 R19 R15AN-\Gv I2〇r17r18

   其中 G 為 NH 或 O，且 Rl 5、Rl 6、Rl 7、Rl 8、Rl 9 及 r2〇 可 為相同或不同，各獨立選自包括H、C1_C10烧基、C1_C10 雜烧基、C2-C10烯基、（：2-(：10雜烯基、c2_Ci〇炔基、c2-Ci〇 雜炔基、c3-c8環院|、C3_C8雜環基、芳基、雜芳基，或 者：（i)無論是R15與R16可互相連接，以形成四至八·員環 烷基或雜環基’或R15與Rl9係互相連接，以形成五至八_ 99030-3 -2- 200529822 員環貌基或雜環基，ϋ! 5 v I或尺與R20係互相連接，以形成五至 八-貝壞烧基或雜淨其，访 衣基與⑻同樣地，獨立地，7與Rl 8 係互相連接’以形成三至八-員環炫基或雜環基， 其中各該炫基、芳基、雜芳基、環炫基或雜環基可為 未’·工取代或視凊况獨立被一或多個部份基團取代，取代 基選自包括：經基、炫氧基、芳氧基、硫基、院硫基、芳 基硫基、胺基、醯胺基、烧胺基、芳胺基、烧基績酿基、

   芳基磺醯基、磺醯胺基、烷基磺醯胺基、芳基磺醯胺基、 酮基、羧基、烷氧羰基、羧醯胺基、烷氧羰基胺基、烷氧 羰基氧基、烷基脲基、芳基脲基、南基、氰基及硝基。 2·如請求項1之化合物，其中“為^^^ ,且妒為H，尺1〇為 Η、烷基、芳基、雜烷基、雜芳基、環烷基、烷基_芳基、 烷基-雜芳基、芳基-烷基、烯基、炔基或雜芳基_烧基。 3.如請求項2之化合物，其中R10係選自包括： Me 1-4 V4 1-3 1-3 1-3 . \丄，Μ ,从 \〆 ,ΟΗ

   OH 〇1-3 99030-3 200529822

   99030-3 -4- 200529822

   99030-3 200529822

   其中R31為OH或0-烷基；且 R32 為 Η、C(0)CH3、C(0)0tBu 或 C(0)N(H)tBu。 6.如請求項5之化合物，其中R3係選自包括下列部份基團： 99030-3 200529822

   %/vw CH3入 CH3 CH3〆 CH^3

   ch3 ch3

   ch3/、ch3 r31

   7. 如請求項1之化合物，其中G為NH。 8. 如請求項1之化合物，其中Y係選自包括：

   99030-3 200529822

   99030-3 200529822

   99030-3 200529822

   99030-3 -10- 200529822

   Y32係選自包括： ΗΑ , Μ，、，V、，丫、丫、/

   Α ΥΥΐΥΥ) 且 Υ12 係選自 Η、COOH、COOMe、CONH2、OMe、ΟΗ、 OCF3、OCH(CH3)2、OC(CH3)3、F、α、Br、ΝΗ2、NHS02CH3、 NHC(0)CH3、NHC02CH3、N02、S02NH2、CF3、Me、Et、異 丙基、環丙基、第三-丁基及苯基。

   9.如請求項8之化合物，其中Y係選自包括：

   其中Y3G與Y31係選自包括： 99030-3 -11 - 200529822

   99030-3 -12- 200529822

   Y32係選自包括： ΗΑ，Μ，、，V、，丫、丫、 99030-3 -13- 200529822 且 Y12 係選自 Η、COOH、COOMe、CONH2、OMe、OH、 〇CF3、〇CH(CH3)2、OC(CH3)3、F、a、Br、NH2、NHS02CH3、 NHC(0)CH3、NHC02CH3、N02、S02NH2、CF3、Me、Et、異 丙基、環丙基、第三-丁基及苯基。 1〇·如請求項1之化合物，其中部份基團：

   14 99030-3 200529822

   99030-3 -15- 200529822 11·如請求項1〇之化合物，其中部份基團·· Μ A

   係選自下列結構：

   99030-3 -16 · 200529822 12·如請求項11之化合物，其中部份基團： Μ A \ / L—E

   係選自下列結構：

   ^係選自包 99030-3 - 17- 200529822

   99030-3 -18- 200529822

   R3係選自包括下列部份基團：

   Y係選自包括： 99030-3 -19- 200529822

   99030-3 -20- 200529822

   99030-3 -21 - 200529822

   其中Y32係選自包括：

   ΗΑ . Μ，、，Ο · 丫、丫、〆 σ^\ Tx ΎΥ\ Yrx 且 Υ12 係選自 Η、COOH、COOMe、CONH2、OMe、OH、 OCF3、OCH(CH3)2、OC(CH3)3、F、Q、Br、NH2、NHS02CH3、 NHC(0)CH3、NHC02CH3、N02、S02NH2、CF3、Me、Et、異 丙基、環丙基、第三-丁基或苯基； 且以下部份基團： 99030-3 -22- 200529822

   14. 項1之化合物作 一種醫藥組合物，其包含至少一種如請求 為活性成份。 關聯之 15·如請求項14之醫藥組合物，其係用於治療與Hcv有 病症。

   月求項15之醫藥組合物，其另外包含至少一種藥學上可 接受之栽劑。 月東項16之醫藥組合物，其另外含有至少一種抗病毒 劑。 月求項17之醫藥組合物，其又另外含有至少一種干擾 素0 19·如明求項18之醫藥組合物，其中該至少一種抗病毒劑為三 唑核茌，而該至少一種干擾素為α•干擾素或經pEG化之干 擾素。 20. —種如請啦 項1之化合物於藥劑製造上之用途，該藥劑係 99030-3 -23- 200529822 治療與HCV有關聯之病症。 21. 22.

   一種製備用於治療與Hcv有關聯病症之醫藥組合物之 法，該方法包括使至少一種如請求項1之化合物盥至小: 種藥學上可接受之載劑密切物理接觸。 一 -種顯示HCV蛋白酶抑制活性之化合物，或該化合物之對 掌異構物、立體異構你 再物、疑轉異構物、互變異構物及外消 旋物，或該化合物之藥凤 ^ 糸予上可接受鹽、溶劑合物或酯，该

   化合物係選自下文列 示結構之化合物：

   99030-3 -24- 200529822

   99030-3 -25- 200529822

   99030-3 -26- 200529822

   99030-3 -27- 200529822

   99030-3 -28- 200529822

   99030-3 -29- 200529822

   99030-3 -30- 200529822

   ▲於 o.P 〇vnh 1 ΟγΝΗ >ίνΝΗ 〔go Ο qp 〇γΝΗ V 0ΪΝ 丫 ^•s? °rNH ζ]〇Ν 了 Η 0. ρ ΟγΝΗ Ο 0i> 了 Η Q.P 〇γΝΗ k <ζΚΝ^ΝΗ >^τΒΛ^ Q,.p 0丫 ΝΗ、 □ Ο.Ρ ΟγΝΗ V <ζΐ!；Ν^ΝΗ 〇^τβΛβ- Ο.Ρ ΟγΝΗ 〇 於了 Η Ο,Ρ ΟγΝΗ 矽 (1>丫 99030-3 -31 - 200529822

   99030-3 •32- 200529822

   99030-3 -33- 200529822

   99030-3 -34- 200529822

   ΟγΝΗ V QN〇〇 >v^〇o S ° w%° °rm 1 <^N-n^NH ΟγΝΗ 0 QNH〇〇 kN-S；° I 5VnHyV^ >V^〇〇 S 〇 ^-° °rNH ^ ◦ν-^νη ><Λ〇0 V.0 R?s·0 °rNH v 丄 QP ΟγΝΗ v ΟγΝΗ * V Q:¥ 丄 Q.O 〇γΝΗ 勒L 丄 Q，P 0γΝΗ 〜NH Λ° °γΝΗ < (^Ν-γΝΗ ό 99030-3 -35- 200529822

   99030-3 •36- 200529822

   99030-3 -37- 200529822

   99030-3 -38- 200529822

   99030-3 -39- 200529822

   99030-3 -40- 200529822

   99030-3 -41 - 200529822

   99030-3 -42- 200529822

   99030-3 -43- 200529822

   99030-3 -44- 200529822

   99030-3 -45- 200529822

   99030-3 -46- 200529822

   X 。 |V v ,V k 々0 〇b 在古·^ 〇γΝ □ \Νλ >^ϊνΛν^ 〇^N k 0:^0 N又 °^o v |V ^ v 〇^N 1 QT〇 〇4) i°rN ， o^J V ci> 〇4> 私N 〇V*N k 〇：1。 。毛 〇善^1 、ic^丫 -47- 99030-3 200529822

   C^o 。毛 〇在々 、00[ΓίΝ O^N U QV N又 〇Λο 〇 α^ΝψΝ’ 、ύ〇[^ΝγΝ ^ ο善旮 、00|C丫 丫 N · J V ' 0 Ν·^νΝ X 0 1 (N\rNrVN^ 〇^°° V 04νΎ 0 + 0 °ύγΐΝ 99030-3 -48- 200529822

   99030-3 -49- 200529822

   99030-3 -50- 200529822

   99030-3 -51 - 200529822

   99030-3 -52- 200529822

   99030-3 -53- 200529822

   99030-3 -54- 200529822

   99030-3 -55- 200529822

   99030-3 -56-

   200529822

   99030-3 -57- 200529822

   99030-3 •58-

   200529822

   99030-3 -59- 200529822

   99030-3 •60-

   200529822

   Λ °rN k ν5νύν、 〇 ^ °rN Λ °rN Ν々ΎΝ 〇小 ,V k Λ °rN ν^ν"Ύν ο o + Λ °rN n?"^n、‘ 〇小 23. —種治療與C型肝炎病毒（nHCV”）有關聯病症之醫藥組合 物，該組合物包含治療上有效量之一或多種如請求項22 Ιί 之化合物，及藥學上可接受之載劑。 24. 如請求項23之醫藥組合物，其另外含有至少一種抗病毒 劑。 25. 如請求項24之醫藥組合物，其另外含有至少一種干擾素或 99030-3 -61 - 200529822 PEG-干擾素α共軛物（，，經PEG化之干擾素，，）。 26·如明求項25之醫藥組合物，其中該至少一種抗病毒劑為三 唑核甞，而該至少一種干擾素為α-干擾素或經PEG化之干 擾素。 27· —種如睛求項22之化合物於藥劑製造上之用途，該藥劑係 用於治療C型肝炎病毒有關聯之病症。 28·種β周制C型肝炎病毒（HCV)蛋白酶活性之活體外方法，其 包括使HCV蛋白酶與一或多種如請求項22之化合物接觸。 29. —種如請求項22之化合物於藥劑製造上之用途，該藥劑係 治療、預防或改善C型肝炎之一或多種病徵。 30·如請求項29之用途，其中Hcv蛋白酶為NS3/NS4a蛋白酶。 31.如請求項30之用途，其中一或多種化合物會抑制 HCVNS3/NS4a 蛋白酶。 32· 一種調制C型肝炎病毒（HCV)多肽之處理之活體外方法，其 包括使含有HCV多肽之組合物，於其中該多肽係經處理之 狀態下，與一或多種如請求項22之化合物接觸。 33· —種至少一種化合物或該化合物之對掌異構物、立體異構 物、旋轉異構物、互變異構物及外消旋物或該化合物之藥 學上可接受鹽、溶劑合物或酯於藥劑製造上之用途，該藥 劑係治療與HCV有關聯之病症，其中該化合物係選自下 列： 99030-3 -62- 200529822

   99030-3 -63 - 200529822

   34.如請求項1之化合物，其係呈經純化形式。 99030-3 -64- 200529822 七、指定代表圖： (一) 本案指定代表圖為：（無） (二) 本代表圖之元件符號簡單說明·· 八、本案若有化學式時，請揭示最能顯示發明特徵的化學式：

   式I 〇

   R1 R2 Ο

   99030-1