TW200427670A - EP4 receptor agonist, compositions and methods thereof - Google Patents

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200427670 玖、發明說明： 【發明所屬之技術領域】 本發明係關於有效的選擇性前列腺素E2受體ep4次 動劑’其用途或在治療青光眼其他病情的調配物，此 情與病人眼内壓升高有關。 、％ 【先前技術】 青光眼是眼睛的退行性疾病，其中眼内壓是高到眼睛不 “揮正㊉功能。其結果是，可能於視神經頭發生損害， 導致視功能發生不能恢復的損失。如不治療，青光眼:至 會導刻盲。/見在大多數眼科學者相信眼高金壓，即眼内 壓升咼而無視神經受損傷的病情或明顯的青光眼視域缺 失，只代表青光眼發生的最早期。 、 過去多數用以治療青光眼的藥物都註明不能令人滿意。 現在治療青光眼的方法包括使用治療劑，如毛果芸香驗， 碳酸針酶抑制劑，阻斷劑，前列腺素等。但此等治療常 發生不需要的局部作用。如所週知，現在是有治療青光眼 2高眼内壓的現代治療，但此等劑的效果及副作用都不理 心所以現在仍需新的且有效的極少或無副作用的治療。 【發明内容】 發明概述 =毛明仏關於有效的選擇性前列腺素E2受體Bp*次型激 動d /、用途或在治療青光眼其他病情的調配物，此等病 It /、病人眼内壓升高有關。具體地說，本發明係關於一系 列1,6 一取代的听m 3,4_二取代的1，3-。惡嗪烷_2-酮， 921l8.doc 200427670 3,4-二取代的1，3-噻嗪烷-2-酮及4 5 -仏， y ’ 一取代的嗎福琳-3-酮 付生物’及其用以治療眼睛及病的 网日]用逆及提供哺乳動物， 特別是人，的眼睛的神經保護效果。 ^ 旯具體地說，本發明 係關於有構造式I的新穎EP4激動劑： 〇

式I 或其西藥上可接文的鹽，其對映體，非鏡像立體異構物， 藥前體或混合物，其中 U代表Η，C1-3烷基或當W是=〇時沒有· W代表ΟΗ或=〇,先決條件是當％是=〇沒有υ; Ζ代表（CH2)n，或 CH=CH ; R1 代表（CH2)p羥基，（(CH2)pC〇2Rl0，或（CH2)n雜環基，該 雜％基疋未經取代的或以丨至3個Ra取代的，且視需要含酸 性羥基； R獨立代表烷基（CH2)mC6_1()芳基，（CH2)mC5_1()雜環 基，（CH2)mC3_1G雜環烷基，（CH2)mCH環烷基，該烷基，環 烷基，雜裱烷基，芳基或雜環基是未經取代的或以丨至3個 Ra取代的； R及R獨立代表氩，鹵素，或cN6烷基； R代表氫’或Ci_4烧基， R代表氫’ Cl-ίο烧基’ C3-10環烧基，（CH2)pC6-lG芳基， 92118.doc 200427670 (CH2)pc5_1Q 雜環基；

Ra代表Ci_6烧氧基，Ci_6烧基，CF3，硝基，胺基，氰基， Cu烧基胺基，鹵素，或Ra還代表芳基及雜環基，烧基， sc6_1()芳基，SC5_1G雜環基，OC6_1()芳基，〇c5_1G雜環基， C02R6，CH20CW烧基，CE^SCm烧基，ch2〇芳基，ch2S 芳基； 二二代表雙鍵或單鍵； P代表0-3 ; ， η代表0-4 ;及 m代表〇至8。 本發明此方面及其他方面在研究過本發明全部後會了 解0 本發明詳述 除非另有說明，今以如下界定的各詞說明本發明。 此處所謂”治療有效量”一詞意謂式][之Ep4受體次型激動 劑，或其他本發明活性劑，的量在以根據所需治療方案給 予％會產生所治療效果或反應或提供所需利益。治療有 關不正常骨吸收的治療有效量是骨生成刺激量。同樣，治 療有關眼高血壓或青光眼的治療有效量是能減低眼内壓及 /或治療眼南血壓及/或青光眼的量。 此處所謂，，醫藥上可接受的"一詞意謂，從毒性或安全觀 點言一般適於給予哺乳動物，包括人。 ’’藥前體’’ -詞意謂藥物前體化合物，其在給予並吸收後 於活體内經某種代謝過程釋出聲稱的藥物。本發明化合物 92118.doc 200427670 藥前體的非限制性例會是吡咯烷酮基的酸，此酸官能度之 構造使其在給予病人後易於水解。舉例性的藥前體包括乙 酸衍生物，其為非麻醉劑，製痛劑/非類固醇，抗炎藥物， 有自由態CHzCOOH基（其可視需要為醫藥上可接受的鹽的 形式，例如-CH2C〇〇-Na+)，一般是聯於環系統上，較佳是 芳香環或雜芳香環系統。 π燒基’f一詞是指衍生自含1至10個碳原子的烴屬單價基 團。可為直鏈的分支的或環形的。較佳的烷基包括甲基4 乙基，丙基，異丙基，丁基，第三-丁基，環戊基，及環己 基。當說烷基是經烷基取代的烷基時，此是與”分支的烷基，， 一詞互交換使用。 環烷基疋含3至15個碳原子的烷基，碳原子間無更迭或共 振雙鍵。其可有丨至4個稠合的環。環烷基的例是環丙基， 環丁基，環戊基，環己基，及環庚基。 烷氧基疋指烷基-〇-，如此處所述，其烷基是視需 要經取代的。烷氧基的例是甲氧基，乙氧基，丙氧基，丁 氧基，及其異構基團。 齒素（_ )是氯，氟，碘或溴。 八方基疋指芳香環，例如苯基，經取代的苯基等，以及稠 口的％，例如奈基，菲基等。是以芳基含至少一個有至少6 個原子的裱，可能有達五個這樣的環，其内含達22個原子， 在相鄰二碳原子或適宜的雜原子間有更迭（共振）雙鍵。強佳 的芳基是笨基 述經取代的。 ’蔡基及菲基等。芳基基團也可是如此處所 較佳的經取代的芳基包括苯基及萘基。 92118.doc 200427670 雜％烷基”一闹是指有3至1 0個碳原子的環，其中環内的 一個碳原子是以選自〇，S或Ν的雜原子所取代，且其中可 有達二個另外的碳原子是經雜原子取代的。 %烷基”一詞疋只有3至10個碳原子的環形烷基（非芳禾 族）。 曰 ’’雜原子，，一詞意謂〇，s，，是獨立選出的。 雜方基” 一詞意謂單環芳香烴屬基團，有5或6個環原 子，或是有8至10個原子的雙環芳香基團，含至使一個 或Ν的雜原子，其中一個碳或氮原子為聯接點，且其中另外 一或二個碳原子是視需要以選自〇或3的雜原子取代的，又 其中有1至3個妷原子是視需要以氮雜原子取代的，該雜芳 基是視需要如此處所述經取代的。此型的例是㈣"比咬， 惡哇’噻唑’四唑，及噁嗪。就本發明目的言，四唑，包 括所有的互交異構形式。另外的氮原子可與第一氮及氧或 硫共同出現，形成，例如，噻二唑。 此處所謂雜環基或雜環代表安定的弘至7_員的單環或 疋的8至11 -員的雙環雜環形環，其是飽和的或不飽和的 並疋由兔原子及_至四個選自Ν，。及㈣雜原子，並包 任何又％基團，其中上述任一雜環形環是稠合於苯環上 =雜ί衣形壤可聯於任何雜原子或碳原子上，形成安定的 /成周〇的雜5衣系統可包括碳環形環且需只包括一個雜 形環。雜環或雜環形包括雜芳基分子團。此類雜環形要 的例包括，作不服Μ ν ^ 不限於，°丫庚因基，苯并咪唑基，苯并異 唑基，笨并呋咱I —、， 目I ’本开。喃基，苯并噻吡喃基，苯并 92118.doc 10 200427670 喃基，苯并噻唑基，笨并噻吩基，苯并噁唑基，笨并二氡 处喃基，噌啉基，二氫笨并呋喃基，二氫苯并噻吩基，二 氫苯并噻吡喃基，二氳苯并噻吡喃基颯，丨，夂二氧茂烷基， 呋喃基，咪唑啉基，咪唑烷基，咪唑基，吲哚啉基，吲哚 基，異苯并二氫u比喃基，異吲哚啉基，異喹啉基，異噻唑 烷基，異噻唑基，異噻唑烷基，嗎福啉基，二氮雜萘基， 噁二唑基，2-噁吖庚因基，噁唑基，孓噁哌嗪基，2_噁哌啶 基，2-噁σ比洛烧基，派啶基，派嗪基，。比σ定基，吡嗓基1 吡唑烷基，吡唑基，噠嗪基，嘧啶基，吡咯烷基，吡咯基， 喹唑啉基，喹啉基，喹喏啉基，四氫呋喃基，四氫異喹啉 基，四氫喹啉基，四唑基，噻嗎福啉基，噻嗎福啉基亞砜， 噻唑基，噻唑啉基，噻吩并呋喃基，噻吩并噻吩基，噻吩 基，及噻唑基。 就本發明目的言，含酸性羥基的雜環基是有酸性羥基原 子及pKa在3至7間的酸性雜環基。含酸性羥基的非限制性雜 環基的例是：

〇 G是-C(Rc)3, 一，-N(Re)2,〇 3及 ORd 92H8.doc 200427670 每一 Rd獨立是Η，Cj_4烷基， 或醫藥上可接受的陽離子； 每一 Re獨立是 Η，-C(=0)-Rf， 或-S02Re，其中Rf是Cn4線性 烧基或苯基 此處所用，’激動劑”一詞意謂式EP4次型化合物，與天然的 激動劑PGE2相較，其與EI>4受體作用產生最大的、超大的或 次大的效果。見 Goodman and Gilman，The Phannac〇l〇glcal Basis of Therapeutics，第 9版，1996，第二章。 _ 在R是（CH2)pC〇2R1G或（CH2)n雜環基時可了解到本發明 一具體實施例，該雜環基是未經取代的或以1至3個113基團 取代的，其他變數如前述。 當R係為（CH2)mC5_1Q雜環基時為本發明另一具體實例， 該雜環基未經取代或經1至3個5^基團所取代，而所有其他 •交數係如原始定義。在R2是（CH2)mc6·⑶芳基時，可了解到 本發明另一具體實施例，該芳基是未經取代的或以1至3個 Ra基團取代的，其他變數如前述。 在R是（CH2)pC〇2R1G或（CH2)p-四唑基時，可了解到本發 明次具體實施例，該四唑基是未經取代的或以Ra*團取代 的’其他變數如前述。R2是苯基時可了解到本發明又一具 體貫施例’該苯基是未經取代的或以1至3個Ra基團取代 的，其他變數如前述。 在R1是（CH2)p-四唑基及r2是苯基時，可了解到本發明又 一具體實施例，該四唑基是未經取代的或以Ra*團取代 的’而苯基是未經取代的或以1至3個1^基團取代的，其他 變數如前述。 在U是Η及W是OH時，可了解到本發明又一具體實施例。 92118.doc -12- 200427670 疋未經取代的或以1至3個Ra基團取代的，其他變數如前述。 在R1是（CH2)P-四唑基及R2是苯基時，可了解到本發明又 一具體貫施例，該四唑基是未經取代的或以Ra基圑取代 的，而苯基是未經取代的或以1至3個Ra基團取代的，其他 變數如前述。 在U是Η及W是OH時，可了解到本發明又一具體實施例。 在US CN3烧基及W是ΟΗ時，可了解到本發明又一具體實 施例。 ， 本發明化合物是： 7-{(2R)-2-[(lE，3R)-4,4-二氟-3-羥基-4-笨基丁 | 稀 基]-6-氧旅咬-l-基}庚酸； 異丙基7-{(2R)-2-[(lE，3R)-4,4-二氟-3-經基<笨基丁小 烯基]-6-氧哌啶-1-基}庚酸酯； 異丙基（5Z)-7-{(2R)-2-[(lE，3R)-4,4-二氟—3-羥基 _4 苯基 丁 -1 -坤-1 -基]-6 -氧派咬-1 -基}庚-5 -烤酸S旨； (5Z)-7-{(2R)-2-[(lE，3R)-4,4-二氟-3_羥基-4-笨基丁 _卜稀 _ 1-基]-6 -乳旅°定-1-基}庚-5-細酸， 7-{[(2-R)-2-(3R)-3-羥基-4-苯基-丁基]-6-氧-哌。定_卜基} 庚酸； 異丙基 7-{(2R)-2-[(lE)-4,4-二氟-3-氧-4-笨基丁 _卜稀 基]-6-氧哌啶-1-基}庚酸酯； 6-[(3R)-3-羥基-4-苯基-丁基]-1-[6-(1Η-四唑，5_基）一己 基]-哌啶-2-酮； (6S)-6-[(lE，3R)-4,4-二氟-3-羥基-4-笨基橋 92118.doc -13- 200427670 基]-1-[6-(2Η-四唑-5-基）-己基]-哌嗪-2-酮； (6R)-6-[(lE，3R)-4,4-二氟-3-羥基-4-苯基丁 -1-稀 基]-1-[6-(2Η-四唑-5-基）-己基]-哌嗪-2-酮； 7-{(211)-2-[(311)-4-(3-溴苯基）-4,4-二氟-3-羥基丁基]-6- 氧哌啶-l-基}庚酸； 或其醫藥上可接受的鹽，對映體，非鏡像立體異構物， 藥前體或混合物。 本發明另一具體實施例係導向於含式I之ep4激動劑及視 需要加入的醫藥上可接受的載劑的組合物。 又，本發明另一具體實施例係導向於藉給予，較佳是局 部給予或腦芎隆内給予含式EP4激動劑及視需加的醫藥上 可接受的載劑的組合物以降低升高的眼内壓或治療青光眼 的方法。式I化合物在製成藥物以治療升高的眼内壓或青光 眼或此二者上的用途也包括於本發明内。 本發明還關於製造含式I化合物的醫藥組合物的方法。 本發明還關於製造含式I化合物及醫藥上可接受的載劑 的醫藥組合物的方法。 此等申請專利的化合物強力結合於並作用於PGE2受體， 特別是EP4次型受體上，所以可用作預防及/或治療青光眼 及高眼内壓。 眼睛乾燥是一種常見的眼球表面疾病。雖則眼睛乾燥似 是由數種不相關的因素形成，但其最終結果卻都是淚膜的 破裂，而此是由曝露於外面的眼睛表面脫水所致。（Lemp， Report 〇f the Nation Eye Institute/Industry Workshop on 92118.doc ,, 200427670

Clinical Trials in Dry Eyes, The CLAO Journal, 21(4): 221-23 1(1995))。現已由人結膜上皮發現功能性EP4受體（見 美國專利6,344,477號，今全文附上供參考），現並已知人角 膜上皮細胞（Progress in Retinal and Eye Research， 16:81-98(1997))及結膜細胞（Dam 等人，L〇cllzati〇n 〇f nerves adjacent to goblet cells in rat conjunctiva. Current Eye Research，14:993-1000(1 995))都能分泌粘蛋白。所以式 I化合物可用於治療眼睛乾燥。 ， 黃斑水腫即是在眼後極之重要的視中心區之視網膜膨籲 脹。現相信降低IOP的EP4激動劑可用於治療黃斑病，如黃 斑水腫或黃斑退行性病變。所以，本發明另一方面是治療 黃斑水腫或黃斑退行性病變的方法。 青光眼的特點是視神經的進行性萎縮，常伴有升高的眼 内壓（IOP)。但使用有神經保護效果的藥物不須影響I0p也 可治療青光眼。見 Arch. Ophthalmol. VoL 112, jan 1 994，pp.37-44;

Investigadve Ophthamol. & Vlsual Science, 32, 5, April 1991 pp « 1593-99。現相信降低I0P的EP4激動劑可用以提供神經保 護。藉了降低IOP，其對增加視網膜及視神經頭的血液流速 及增加視網膜及視神經的氧也有效果，藉了此二種作用， 有益於視神經健康。結果是，藉了使用式ί Ep4激動劑，本. 發明還關於增加視神經頭血液流速的方法，或增加視㈣ v 及視神經氧的張力或提供神經伴谨 作、工1示°隻效果或同時具此等效 果。 本發明生產的化合物易於盥镝皆 勿π興適且的及已知的醫藥上可接 92118.doc 15 200427670 受的賦形劑合併製成組合物，此等組合物可給予哺乳動 物，包括人，有效地降低I〇p。所以，本發明也關於治療眼 咼血壓’青光眼，黃斑水腫，紅斑退行性病變，增加視網 膜及視神經頭血流速，增加視網膜及視神經氧張力，提供 神經保護效果，或此等混合病情，的組合物及方法，此係 藉將式I化合物單獨或與下述活性劑一起給予有此需要的 病人’ /3 -腎上腺素能阻斷劑如嗟馬洛爾（timolol)，環丙甲 氧心安（betaxolol) ’左旋環丙甲氧心安（levobetaxolol)，卡 替洛爾（carteolol)，左布諾洛爾（lev〇bimolol)，擬副交感神 經劑如毛果芸香鹼（pilocarpines)， 擬交感神經劑如腎上腺 素’艾晋羅里定（iopidine)，溴莫尼定（brimonidine)，可樂 定（clonidine)，對胺基可樂尼定（para-aminoclonidine)，碳 酸酐酶抑制劑如多佐胺（dorzolamide)，乙醯佐胺 (acetazolamide)，甲氮酿胺（metazolamide)或布領佐胺 (brinzolamide)，COSOPT®，一種 Maxi-K通道阻斷劑如品尼 存A(Penitrem A)，帕司帕里辛（Paspalicine)，差蕊多托辛 (charybdotoxin)，依伯里托辛（iberiotoxin)，帕克西蘭（Paxicillan)， 阿扶里特蘭（Aflitram)，夫羅庫勒真（Verroculogen)，及如W〇 03/1 05868(USSN 60/3 89,205), WO 03/105724(60/389,222) ^ WO 03/105847(60/458,981)，60/424790，2002.年 11 月 8 日歸檔 (Attorney docket 21260PV)，60/42808, 2002年 11月 8 日歸檔 (Attorney docket 21281PV)，09/765716, 2001 年元月 17 日歸 檔，09/764738，2001年元月17日歸檔及PCT公告WO 02/077 168及WO 02/02060863，今全文附上供參考，特別是 921l8.doc -16- 200427670

Maxi-K通道阻斷劑如1-(1-異丁基-6-甲氧基-1H-吲唾 基）-2-甲基丙烷-卜酮；l-[l-(2,2-二甲基丙基）-6-甲氧基_1H_ 吲唑-3-基]-2-曱基丙烷-1-酮；環己基曱基）-6-甲氧基_ lH-α引唑-3-基]-2-曱基丙烷-1-酮；1-(1-己基-6-甲氧基 吲唑-3-基）-2-曱基丙烷-1-酮；l-[l-(2-乙基己基）-6-甲氧基_ lH-α弓|唑-3-基]-2-甲基丙烷-1-酮；1-(3-異丁醯基-6-甲氧基· ΙΗ-α引唑-1-基）-丁烷-2-酮；1-(3-異丁醯基-6-甲氧基-1H-, 唑-1-基）-3,3-二甲基丁烷-2-酮；1-(3-環戊基羰基）-6-甲氧基^ 111-°弓丨嗤-1-基）-3,3-二曱基丁烧-2-嗣；1-(3,3-二甲基-2-氧丁 基）-6-甲氧基-1H-吲唑-3-羧酸；及1-[3-(3-羥基丙醯基）_6· 甲氧基-111-11弓丨°坐-1-基]-3,3-二曱基丁烧-2-顯]，前列腺素如 拉坦前列素（latanoprost)，特拉瓦前列素（travaprost)，優前 列通（unoprostone)，異丙基烏拉前列酮（rescula)，S1033(美 國專利 5,889,052 ; 5,296,504 ; 5,422,3 68 ;及 5，151，444 號所 述化合物）；降血壓脂如魯米甘（lumigan)及美國專利 5,352,708號所述化合物；美國專利4,690,931號所揭示的神 經保護劑，特別是依利普洛抵（eliprodil)及WO 94/13275號 所述R-依利普洛抵（R-eliprodil)，包括美金胺（memantine); 及/或5-HT2受體激動劑，如PCT/US00/31247號所述，特別 是1-(2-胺基丙基）-3-甲基-1H-咪唑-6-醇富馬酸酯及2-(3-氯 -6-甲氧基叫|唑-1-基）-1-甲基-乙基胺。 式I化合物在製造藥物在治眼高血壓，青光眼，黃斑水 腫，黃斑退行性病變上的用途，在增加視網膜及視神經頭 jk流速上的用途，在增加視網膜及視神經氧張力上的用 92118.doc 200427670 或同時治療此等症上 途，在提供神經保護效果上的用途 的用途，也包括在本發明内。 本發明所用队激動劑可以有效治療量作靜脈内，皮下， 局部，經皮’非經腸或任何此技藝已知的方法給予。眼科 醫藥組合物較佳是以溶液，懸浮液，[霜或固體插入劑 的形式作局部給予至眼睛。此化合物的眼用調配物可含 〇·謝至W，特別是㈣^1%的藥物。可用較高劑量， 例如’達約10%或較低劑量，？、錢量能有效地降低眼内 壓’治療青光眼，增進血流速或氧張力即可。單—劑量時， 人眼可用0.001至5.0毫克，較佳是〇〇〇5至2〇毫克特別是 〇·〇〇5至1.0毫克化合物。 、含此化合物的醫藥製劑可以習用方法與無毒的醫藥有機 載劑或無毒的醫藥無機載劑混合。典型的醫藥上可接受的 載劑是’例如’水，水及可於水相混溶的溶劑如烧醇或芳 烷醇，植物油，花生油，聚二醇，以石油為基礎的凍膠， 乙基纖維素，油酸乙酯，羧曱基纖維素，聚乙烯吡咯酮， 異丙基肉豆蔻酸酯，及其他習用的可接受的載劑。醫藥製 Μ也可含無毒的助劑如乳化劑，防腐劑，濕潤劑，增稠劑 等，例如聚乙二醇2〇〇, 3〇〇, 400及600,聚乙二醇（carb〇waxes) 1，〇〇〇，1，500，4,000，6,000及10,〇〇〇，抗菌成分如四級銨 化合物，已知有冷滅菌性質的使用不會造成損壞的苯基汞 鹽’乙基采硫代水揚酸鈉，曱基及丙基對羥基苯甲酸酯， 爷基醇’笨基乙醇，緩衝劑成分如爛酸鈉，乙酸納，葡糖 酸鹽緩衝劑，及其他習用的成分如月桂酸山梨糖醇，三乙 92118.doc 200427670 s子月女油馱鹽’單棕櫚酸聚氧乙烯山梨糖醇，磺丁二酸— 辛基鈉’單硫代甘油，硫代山梨糖醇，伸乙基二胺四乙^ 等。此外，本發明也可用適宜的眼科用載體作為載劑介：， 包括白用的磷酸鹽緩衝劑载體系、统’等張硼酸载體，等 氣化鈉載體’等張硼酸鈉載體，"。醫藥製劑也; 粒調配物形式。醫藥製劑也可是固體插入物形式。例如可 :固體水溶性聚合物作為醫藥的載體。用以形成插入物的 水σ物可k水m無毒聚合物’例如’纖維素衍生物如 甲基纖維素’緩甲基纖維素鈉，m基低院基纖維素），經基 ^基纖維素，羥基丙基纖維素，羥基丙基甲基纖維素二 稀酸鹽如聚丙烯酸鹽，乙基丙烯酸鹽，聚乙酿胺；天然產 物，如明膠，藻酸鹽，果膠，黃f膠，刺梧桐（karaya)，角 叉菜（chondnxs)，瓊膠，阿拉伯膠；澱粉衍生物，如乙酸澱 粉，經機曱基澱粉醚，羥基丙基澱粉，以及其他合成衍生 物’如聚乙烯醇，$乙烯吡咯酮，聚乙烯曱基醚，聚環氧 乙烯’中和㈣丙稀酸及黃原勝，吉籃糖膠，及該聚合物 的混合物。 給予本發明調配物的適宜的病主包括靈掌類，人及其他 動物’特別是人及家畜如貓，兔，及狗。 此醫藥製劑可含無毒性助劑如使用無害的抗菌成分，例 如，硫柳汞，氣苄烷銨，甲基及丙基對羥基笨曱酸酯，溴 化T基木知辛（benzyldodecinium bromide)，苄基醇，或笨 基乙醇；緩衝成分如氣化鈉，硼酸鈉，乙酸鈉，檸檬酸鈉， 或葡糖酸鹽緩衝劑，及其他習用的成分如單月桂酸山梨糖 921l8.doc -19- 200427670 醇，三乙醇胺，聚氧乙烯山梨糖醇單棕櫚酸酯，伸乙基二 胺四乙酸，等等。 此眼科用溶液或懸浮液可如需要使用以維持眼睛内可接 受的IOP量。一般認為每天可給予哺乳物眼一至三次。 供局部眼内給予時，本發明新穎調配物可以是溶液，凝 膠，膏，懸浮液或固體插入物的形式，製成其單位劑量含 治療有效量的活性成分，需要混合治療時可以是其數倍。 關於眼疾病的治療，式I激動劑一般的EC5()值是約0.001 nM至約 100 μΜ，視劑量及給予途徑而異，也可用活性超出此範圍的激動 劑。於本發明次類中，激動劑之EC5〇值為約0·01 μΜ至約10 μΜ。 於又一些本發明次類中，激動劑之EC5〇值為約0·1μΜ至約10 μΜ。 EC5〇是一般此技藝者週知的激動劑活性的測定，其定義是需要產 生一半，即50%，最大效果時激動劑濃度或劑量。見Goodmanand Gilman's^The Pharmacologic Basis of Therapeutics, 9 edition, 1996, chapter 2?E.M.Ross? Pharmacodynamics, Mechanisms of Drug Action and the Relationship between Drag Concentration and Effect，及 PCT US99/23757，1999年10月12日歸檔，今全文附上供參考。 【實施方式】 此處的實例用以說明而非限制本發明申請範圍。每一申 請專利的化合物都是EP4激動劑，可用於數種生理眼睛及骨 疾病。

本發明化合物可以根據美國專利6,043,275號，EP 0855389， WO 03/047417 (USSN 60/337228) ^ WO 03/047513(USSN 60/338，117)，USSN 60/406,530 (Merck Docket No· MC060)及 WO 92118.doc -20- 200427670 〇所述方法稍加修改製備，今都全文附上供參考。下 列非限制性方案及實例是用以說明本發明。 製備實例1

酒石酸

(R)-2-甲基哌啶酸 1 於（仏）-2-甲基派,定酸（395克，3 〇6莫耳）於Me〇H(18公升） 内的泥樣物内於6〇t加L-酒石酸（459克，3.06莫耳）。將泥樣 物加熱至回流1小時。再將泥樣物冷至23。〇，過濾，所需H 曱基旅啶酸/L-酒石酸濾餅以Me〇H(200毫升）洗。再將濾餅 氣乾，分離白色固體。以85-89%ee鑑定-2-甲基哌啶酸酒石 酸鹽。 將鹽（3 83克）於2:1 H20/丙酮（3 80毫升/190毫升）内的泥樣 物加熱至回流（60-65°C )至所有固體溶解。用2小時加丙酮 (1330毫升），同時維持回流。任泥樣物冷至i5-2(Tc —小時， 然後過濾，用4:1丙酮/h2〇（3 80毫升）洗，然後真空下氣乾。 分離出313克2-甲基哌啶酸酒石酸鹽（〉99%ee)。 於此（R)-2-甲基哌啶酸酒石酸鹽（312克）於MeOH(3.0公 升）内的泥樣物中用0.5小時加28%NH4OH(83毫升，1·1當 量）。將此白色泥樣物於週邊溫度老化0.5小時，然後濾出酒 石酸銨沉澱物。濾餅用MeOH(3 00毫升）洗。將合併之濾過 物及洗液濃縮成白色固體（1)。 921l8.doc 200427670 製備實例2

於2-曱基哌啶酸（109.7克）及BOC2〇（222.4克）於1:1四氫呋 喃（THF)/H2〇（550/550毫升）内的泥樣物中加50% NaOH(45 毫升）。將此泥樣物加熱至回流五小時。將此溶液冷至23 °C，然後用庚烷（550毫升）洗以除去未反應的BOC2〇。水層 用5NHC1 (170毫升）酸化至pH4-5。所得泥樣物用550毫升第 三-丁基甲基醚（MTBE)萃取。將有機層於Na2S〇4上乾燥， 濃縮成白色固體（2)。 製備實例3

於N-BOC-2-甲基哌啶酸（166.5克，726毫莫耳）於500毫升 二曱基甲醯胺（DMF)内之溶液中加Mel(123.7克，871毫莫 耳）&K2C03(100.4克，726莫耳）。0.5小時後任反應混合物 於週邊溫度老化4小時並放熱至40°C。加MTBE(830毫升）， 92ll8.doc -22- 200427670 然後用H2〇（2x830毫升）及20%鹽水（300毫升）洗。有機層於 Na2S04上乾燥並濃縮成油體（3)。 製備實例4

於丁氧基羰基（Boc)-Me酯（152.6克，627毫莫耳）於 MeCN(305毫升）内的溶液中加RuC13(2.6克，12.5毫莫耳）。 費2小時加NaBrO3(142.0克，941毫莫耳）於H2O(760毫升）内 的溶液。將此溶液於週邊溫度老化12小時。加Et〇Ac(760 毫升），切開水層。暗色有機層用10%Na2S〇3(305毫升）洗， 時有機層轉澄清’水層轉渾濁灰色。有機層用飽和鹽水（15 〇 毫升）洗，然後於Na2S04上洗，得油體（4)。 製備實例5

於BOC-内醯胺（135·4克，526毫莫耳）於135毫升異丙基醇 (ΙΡΑ)内之溶液中費時15分鐘加於263毫升/1316毫莫耳異丙 基醇（ΙΡΑ)内的5Ν HC1。有氣體猛烈排出1 5分鐘，再將此溶 92U8.doc -23- 200427670 液於週邊溫度老化2.5小時。加Et〇Ac(800毫升），用15% Na2CO3(3 50毫升）洗。水層用Et〇Ac(400毫升）萃取。合併之 有機層於Na2S04上乾燥，濃縮成油體。對映體純度以 〉99%ee鑑定。 製備實例6

於内醯胺酯（8.10克，51.7毫莫耳）於無水乙醇（5〇〇毫升） 内的溶液中費時30分鐘加硼氫化鈉（2·5克，ι·2當量），每次 加〇·5克。此溶液於室溫攪拌3·5小時。此混合物再以冰醋酸 (2.8當置）處理，用矽藻土柱過濾出沉澱物。將濾過物真空 濃縮，所得油體於真空靜置固化。將粗製產物溶於 CH2C12(50毫升），用KHC〇3(15當量）處理，老化i小時，用 矽藻土塞過濾，所得濾過物真空濃縮，得標題化合物6，直 接用於次一步驟，不必純化。 製備實例7 〇 〇 Awu TBSCI，咪唑 人…

92118.doc -24- 200427670 於内醯胺醇（10克，77·5毫莫耳，1·〇當量）於無水CH2C12(50 毫升）内之溶液中於0°C在N2下加咪σ坐（6.9克，100.8毫莫 耳，1.3當量，（此咪唑量在此前用Ac0H調整成中性）及14 克/93.0毫莫耳/1.2當量第三-丁基二甲基曱矽烷基氯 (TBSC1)。將所得混合物力口熱至室溫（RT)，並老化4小時。 待判斷反應完了後，加CH2Cl2(l〇〇毫升），再加IN HC1溶液 (30毫升）。分離有機層，水層用CH2C12(2x50毫升）反萃取。 合併之有機層用20% NaHC03溶液（40毫升），鹽水洗，於 MgS〇4上乾燥，過濾並真空濃縮，得所需化合物，為白色 固體。含矽的副產物可用冷庚烷（3毫升/克）於-78°C洗固體 除去，得標題化合物7。 製備實例8

於15°(：的内醯胺7(2.0克，8.22毫莫耳）於11肝（^<200 ppm)内的溶液中加於於2〇毫升四氫呋喃（THF)内的19〇克 /9.04¾莫耳固體鉀雙[三甲基甲矽烷基]醯胺（KHMDS)，於 室溫老化10分鐘。於此淨油體的溶液中加新製備的甲磺酸 鹽（0.93克，8.22¾莫耳，KF<800 ppm)，並將此反應物於5〇 (：加熱老化2.5-3.5小時。再將反應物冷至室溫，以]^[丁]5£(2〇 毫升）及水（20毫升）稀釋，分出水層，有機物用飽和鹽水（ι〇 毫升）洗於Na2S〇4上乾燥，除去溶劑，得粗製油體8。 92I18.doc -25- 200427670 製備實例9 〇 〇

於第三-丁基二甲基苯甲磺酸酯（TBS)保護的内醯胺（10 克，24.2毫莫耳，1當量）於無水MTBE(40毫升）内的溶液中 在氮氣下於0°(：費時15分鐘加70%1^*吡啶（4.84克，169毫 莫耳，7當量）。任所得混合物升至室溫老化12小時，以HPLC 判斷反應已完成，作1HNMR分析。再將混合物以MTBE(100 毫升）稀釋，用冷H2O(30毫升）洗。有機層用飽和Na2C〇3(25 毫升），鹽水處理，於MgS04上乾燥，過濾，真空濃縮。所 得油體（9)直接用於下一步骤。如有必要，此醇可用Si〇2膠 閃柱色層分析純化（40:1 CH2Cl2:MeOH)。 製備實例10 〇 〇

广人 _ so3-Pyr, dmso ^^-^COOiPr H_ 鹼 ch2ci2 h 於醇9(9.46克，31.6毫莫耳）〇]^8〇（237.3毫莫耳，16.9毫 升，7·5當量），及Hunig鹼（16.5毫升，94·9毫莫耳，3當量） 於二氣曱烷内的冷（〇°C )溶液中費時15分鐘加固體S〇3 ·吡 92118.doc -26 - 200427670 唆（15克，94.9毫莫耳，3當量）。所得溶液於〇°C老化1.5小 時，此時觀察到起始物質已消耗。然後用EtOAc( 1 50毫升） 將反應混合物稀釋，用4N HC1(3 5毫升）水溶液及鹽水洗。 分離有機層，相繼用飽和NaHC〇3處理。再將溶液於MgS〇4 上乾燥，過濾，真空濃縮，得對應的醛（7.8克，83%產出率）， 直接用於下一步驟，不必純化。 製備實例11 膦酸納14之製備 步驟1

DAST, 15-45 °C _2¾_^ —7謂％產出

於曱基笨曱醯基甲酸酯（PhC0C02Me，25克，0.15莫耳， 1當ΐ )之淨溶液中於1 5。〇在氮氣下加淨三氟化二乙基胺基 硫（DAST，34,4克，〇·21莫耳，1·4當量），加入速度須維持 内溫低於451：。加完後，任所得棕色溶液冷至室溫並再老 化3小時，此時以高效液體色層分析（HPLC)及氣體色層分析 /質禮（GC/MS)觀察到起始物質已完全消耗。然後將反應混 合物緩慢倒於冰/H2〇混合物内（注意：放熱！}，以MTBE(3x) 萃取產物。再將合併之有機層以冷的2〇% NazCO3水溶液緩 慢中和至pH7(注意：有氣體排出），用鹽水洗，於MgS〇4i 乾燥，過濾，真空濃縮。粗製產物作真空蒸餾純化（沸點 = l〇3-l〇5°C，於24-25毫米汞柱），得所需產物（13)，為淺黃 92118.doc •27- 200427670 色油體。 步驟2

MeCK Me〇〆 Ο ιι :P-Me

1. NaHMDS, THF •78 °C, 30 分鐘 p F P

MeO- Me〇"

於二曱基曱基膦酸酯（28克，0.23莫耳，1.05當量）於無水 THF(400毫升，KF = 30 ppm)内的溶液中在氮氣下於-78°C費 時15分鐘緩慢加2M的鈉雙（三甲基甲矽烷基）醯胺於 THF(115毫升，0.23莫耳，1.05當量）内的溶液。任所得溶液 老化30分鐘，然後用淨曱基二氟酯（PhCF2C02Me，40克， 0.22莫耳，1.0當量）處理15分鐘。此反應混合物於-78°C老 化1小時，緩慢升至室溫，濃縮成其原始容積的四分之一， 用時0.5小時加MTBE(400毫升）。再將所得懸浮液於室溫老 化0.5小時，過濾。濕餅用MTBE(100毫升）洗，在氮氣流下 真空乾燥。分離產物，為白色固體（14)。 製備實例12 化合物16之製備 步驟1

2.0當量K2S2〇8 ίο 當量 H2SCD4 10毫升/克IPA 2毫升/克 ί。， 92118.doc -28 200427670 於水（250毫升），ipA(i250毫升）及濃硫酸（600毫升，11.1， 1莫耳）之10°C溶液中一次加固體過硫酸鉀（600克，2.22莫 耳）。將環庚烷酮（131.5毫升）用IPA稀釋至總容積250毫升， 此溶液用加入漏斗費時1 5分鐘加於過硫酸鹽泥樣物内，加 入過程中維持溫度<15。(：。此反應物於15它老化16-2〇小 時。待環庚烷酮完全反應後，過濾移除鹽，維持濾過物冷。 此濾過物用MTBE(1250毫升），飽和鹽水（1公升），及水（500 毫升）稀釋，同時維持溫度<30°C。再移入分離漏斗時，任 各相分離，分離水層。有機層用飽和Na2C03(2xl公升）洗， 或直至水層成鹼性。真空除去溶劑，真空蒸硫餾油體，得 純酯（16)。（沸點125°C，於4毫米汞柱） 步驟2

1.15 當 1 MsCI 1.5當量ΤΈΑ 10毫升/克THF

MsO,

於酯（10克，0.05莫耳）及三乙基胺（1L1毫升，〇〇8莫耳） 於無水THF( 100耄升）内的- ίο °c的溶液中加甲烧磺驢氯 (MsCl - 4.75毫升，〇·〇6莫耳）（以THF1:1稀釋），加人過程中 維持溫度<10°C。將反應物於〇-5 X：老化30分鐘。完了後， 反應物用己烧（100¾升）稀釋，用水（5〇毫升）停止反應。分 出水層，有機層於NasSO4乾燥30分鐘。真空除去溶劑，得 黃色油體（16)。此甲烷磺酸鹽須與内醯胺烷基化前臨時製備 以使雜質減至最少。 92118.doc -29- 200427670 實例1 7-{(211)-2-[(化）-4,4-二氟-3-氧-4-笨基丁-1-烯-1-基]-6-氧 娘σ定-1 -基}庚酸異丙酯

於膦酸鈉14(13.7克，45 ·7毫莫耳，1.4當量）於THF(1 30毫 升）内的溶液中於(TC在氮氣下加ZnCl2(3.33克，24.5毫莫 耳，〇·75當量）。所得混合物於室溫攪拌丨5分鐘，然後用醛 1〇(9·7克，32.66毫莫耳，1當量）於THF(1〇毫升）内的溶液處 理。將所得懸浮液加熱至5(TC 50小時，可觀察到有9心97%已 轉化。再將此混合物濃縮至其容積的三分之

Et〇Ac(130毫升）稀釋 層於MgS〇4上乾燥，過濾，濃縮，得黃 Si02膠閃色層分析純化（19: 1—9: 1甲 實例2 用H2〇(3〇毫升）及鹽水洗。再將有機 色油體（11)，此可以 求：丙銅）。 7-{(2R)-2-[(lE，3R)-4,4-二氟-3,羥基 基]-6-氧哌啶-i-基}庚酮（12) -4-苯基丁 -1-稀-1、 〇

92118.doc 0

200427670 於烯W(450^克’ 1¾莫耳’ ι·〇當量）於〇·5Μ/〜4·5毫升/ 克無水PI1CH3或二氯曱烷（DCM)内的溶液中在氮氣下於室 溫加Et3N(0.14毫升，1毫莫耳，1〇當量）&hc〇2H(〇〇5毫 升，1.2毫莫耳，1.2當量）。將所得溶液攪拌1〇分鐘，然後 以固體（R，RH-)-Ru-TsDPEN-繳花烴複合物ι(19毫克，〇·〇3毫 莫耳，0.03當夏）一次處理。然後將此反應混合物於室溫老 化2小時，此時觀察到所有起始物質已消耗。加第三-丁基 曱基醚-ΜΤΒΕ(5毫升），再加iNHC1(2毫升）。分離有機層， 用飽和Na2C〇3，鹽水洗，於MgSCU上乾燥，過濾，真空濃 縮，得終化合物，為粘性油體。（40-60:1非鏡像立體異構物 比’ 8 3 - 8 5 %鑑定產出）。 催化劑也可現場藉將〇·〇2莫耳當量[RuCi2(p-繳花烴）2]及 〇.〇4莫耳當量（义，1^)-1^-曱苯績醯基_1，2-二苯基伸乙基-1，2-一胺於DCM(一氯曱烧）内在有〇〇4莫耳當量的iM KOtBu之 存在下於THF(四氫呋喃）製備。於室溫老化1〇分鐘後，加 Et3N，再加HC02H及烯酮於DCM内的溶液。 此催化劑是藉將1莫耳當量[RuCljp-繳花烴）2]，2莫耳當 里（R，R)-N-甲本石頁酿基- i，2 -二苯基伸乙基-i，2 -二胺及4·2莫 耳當量Et;N於iPrOH内於80°C混合1小時製備。除去溶劑 後，固體用冷H2〇洗，用Me0H重結晶，得催化劑，為橘色 固體。（65-75%產出率）。 貫例 3 : 7-{(2R)-2-[(lE，3R)-4,4-二氟-3-羥基冰笨基丁小 烯-1-基]-6-氧娘淀- l- 基}庚酸 92118.doc 200427670 方案1

步驟1 :異丙基7-[(2R)-2-({[第三-丁基（二甲基）甲矽烷基] 氧基}甲基）-6-氧哌啶-1-基]庚酸酯

於 7(1.0 克，4.1 毫莫耳，根據 Synthesis 1998 1141-1144 工序 分七步驟製備）於12毫升DMF(二甲基甲醯胺）内的溶液中加 60%氫化鈉（172毫克，4.3毫莫耳），所得溶液於50°C攪拌30 分鐘，同時加異丙基-7-碘庚酸酯，17，（1.9克，1.6毫升， 8.2毫莫耳）及碘化四丁基銨（50毫克）。此溶液於5(TC攪拌過 夜，然後冷至室溫，緩慢倒入飽和氣化銨溶液内，用醚萃 92118.doc -32- 200427670 取。合併有機相，相繼用H2〇，鹽水洗，於Na2S〇4上乾燥， 過濾，真空濃縮。化合物以閃色層分析用75-100%醋酸乙酯 /己烷純化，得9,為無色油體。lHNMR(500 MHz，丙酮-d6) ·· 5 4.95(m，lH)，3.75(m，3H)，3.50(m，lH)，2.97(m，lH)，2.25(2t，4H)， 2.00(m，lH)，1.93(m，lH)，1.82(m，lH)，1.7(M.56(m，4H)，1.52(m，lH)， l，40-1.28(m，4H)，1.22 (2s，6H)，0.93(s，9H)，0.11(s，6H)。 步驟2 :異丙基7-[(2R)-2-(羥基甲基）-6-氧哌啶-1-基]庚酸酯

於8(0.80克，2.3毫莫耳）10毫升溶液内於室溫加氟化TBAF-四丁基銨（0.25毫升，1M於THF内的溶液並攪拌18小時。然 後用飽和NaHC03停止反應，用醋酸乙酯萃取。合併有機 層，用水洗，再用鹽水洗，於MgS04上乾燥，過濾，真空 濃縮，得9，為無色油體。1H NMR(500 MHz，丙酮-d6): 5 4.95(m，6H)，3.97(t，1H，0H)，3.76(m，lH)，3.66(m，2H)，3.48(m，lH)， 2.98(m，lH)，2.24 (m，4H)，2.08(m，lH)，1.90(m，lH)，1.79(m，lH)， 1.70-1.56(m，4H)，1·50(ιη，1Η)，1.4(M.27(m，4H)，1.22(2s，6H)。 步驟3 :異丙基7-{(2R)-2-[(lE)-4,4-二氟-3-氧-4-苯基丁-l-烯-l-基l·6-氧哌啶-l-基}庚酸酯 92118.doc -33- 200427670

於以N2(克）清潔過的燒瓶内加CH2C12(40毫升），其内再加二 甲基亞颯（0.115克，〇.1〇毫升，丨.48毫莫耳）。將此溶液冷至 -78°C，在強烈攪拌下滴加草醯氯（〇·ΐ7克，012毫升，i 3 毫莫耳）。30分鐘後用漏管加9(0.35克，1·2毫莫耳）於5毫升 CH2C12内的溶液。繼續於-78t再攪拌3〇分鐘。滴加三乙基 胺（〇·31克，0.43毫升，3·1毫莫耳），攪拌15分鐘後真空濃縮， 不用浴。用1 : 1二乙醚/醋酸乙酯（1〇〇毫升）濾除三乙基胺 鹽，將溶液真空濃縮。此粗製酸，1 〇，以5毫升THF稀釋， 於0C加於（2-氧-3-苯基-丙基）-膦酸二甲基酯（〇·34克，ι·4 毫莫耳）及60%氫化鈉（52毫克，1.3毫莫耳）於15毫升tHF内 的浴液’此溶液於1小時前混合。加氯化辞（χ毫升，1Μ於 THF内的溶液），此反應混合物於5(rc攪拌過夜。以飽和氯 化銨水溶液停止反應，用醋酸乙酯萃取。合併有機相，相 繼用H2〇，鹽水洗，於Ναβ〇4上乾燥，真空濃縮。化合物 以閃色層分析純化，使用50-80%醋酸乙酯/己烧，得11 ,為 無色油體。1Η NMR(400 MHz，丙酮-d6): 5 7.65-7.55(m，5H)， 7.11(dd，lH)，6.67(d，lH)，4.95(m，lH)，4.40(m，lH)，3.78(m,lH)， 9211S.doc -34- 200427670 2.60(m，lH)，2.25(m，4H)，2·02 (m，lH)，1.90(m，lH)，1.68(m，2H), 1·53-1·36(ηι，4Η)，1.35-1.17(m，10H)。 步驟4 :異丙基7-{(2R)-2-[(lE，3R)-4,4-二氟-3-羥基-4-苯基 丁 -1-烯-1-基]-6-氧哌啶- l-基}庚酸酯

A. 丁基_(S)-CBS於曱苯内的合成：於（s)-CBS配位體 (11.5 3克，45 ·5毫莫耳）於曱苯（11〇毫升）内的溶液中加丁基 _ （5.1克，4 7 · 8宅莫耳），此混合物以d e an - s t ark法回流過 夜。所得溶液為0·48Μ，直接使用。 Β·還原：於兒茶酚硼烧（3.35毫升，3 1.4毫莫耳）於甲苯（400 毫升）内的冷至-78 °C的溶液中在氮氣下加68毫升（32.6毫莫 耳）（S)-2-丁基-CBS^氮删烧（oxazab〇r〇iidine)溶液，此混合 物於此溫度攪拌一小時。於1小時内在氮氣下滴加酮u (7 克，15.6毫莫耳）於甲苯（420毫升）内的溶液，此混合物於此 溫度拌至所有起始物質都消失（一般約3〇分鐘）。然後於此混 合物内加200毫升1NHC1，在強烈攪拌下任此混合物回至室 溫。此混合物以醋酸乙酯萃取（萃取中發展成乳液，此懸浮 液用石夕藻土過渡除去乳液）。粗製產物用閃色層分析純化。 用EA/己烧（70-100%)洗離，得所需醇，為二種12:丨的非鏡 像立體異構物混合物。此混合物用Pak八〇(1)柱，以己烧内 92118.doc -35- 200427670 50% iPrOH作洗離劑，作製備HPLC(高 離（於又214 111111£測）。先分離出的是非 出的是所需異構物12。 致液體色層分析）分 所需異構物，後分離 巾 NMR(400 MHz，丙酮-d6): 5 7.6-7 、m，2H)，7.5-7.4(m，3H)， 5.80(dd，lH)，5.6(dd，lH)，5·0-4·9(ιη，2Η) 47 / Λ ^4·6(ιη，1Η)，4.10-4.0 (m，lH)，3·8-3·7(ιη，1Η)，2.6-2.5(m，lH)， (m，lH)，1·75-1·55(ιη，5Η)，1.55-1.4(m,2H)， (d，6H) 〇 2·3、2.2(ιη，4Η)，1.9-1.8 14，1·22 (m，4H)，1·22 步驟 5 : 7-{(2R)-2-[(lE，3R)-4,4-二 -1-基]-6 -氧旅咬-1-基}庚酸 氟_3_羥基-4-苯基丁-1-烯

Li〇H

於12(39毫克’ 0.089毫莫耳）於2·75毫升2.5:2.5:1的 THF:MeOH:水内的溶液中於〇°C加氫氧化鋰（145微升―於 水内的溶液），任所得溶液回至室溫並攪拌過夜。於此溶液 中加1Μ HC1水溶液（1毫升），此溶液用醋酸乙酯萃取。合併 有機相，用鹽水洗，於MgS〇4上乾燥，過濾，真空濃縮。 化合物以閃色層分析純化，用49-45%/1-5%/1滴CH2C12/曱醇 /醋酸，得18，為無色油體。1H NMR (500 MHz，丙酮-d6): 5 7·6-7·5(ιη，5Η)，5.8(dd，lH)，5.6(dd，lH)，5.6(bs，lH)，4.6(m，lH), 4·1(χη，1Η)，3.7(m，lH)，2·6 (m，lH)，2.4-2.2(m，4H)，1.9-1.2(m，12H)。 92118.doc -36- 200427670 以實例1 -3方法略作修正可製得 實例4 下述實例4至1 3 〇 -3-羥基丁基;氧 7-[(2R)-2- (3R)-4-(3-溴笨基）·4 4-二气

5 弗L 派咬-1 -基}庚酸 MS(+ESI):M/Z 490.1(M+1) +

實例5 7-{[(211)-2-(311)-3-經基-4-苯基-丁基]-6_氧旅咬-1-基}庚 酸 lH NMR(400 MHz, CD3OD): 5 7.3-7.l(m55H)5 3.8-3.7(m52H)? 3.4(m，lH)，2.9-2.7(m，3H)，2.3(m，4H)，1.9-1.3(m，6H); MS(-ESI): M/Z374,2(M-1)·

實例6 5-{3-[(211)-2-((1£)-(33)-3-羥基-4-苯基-丁-1-烯基）-6-氧 92118.doc -37- 200427670 哌啶-1-基]-丙基卜噻吩-2-羧酸曱酯 !H NMR(400 MHZ? CDCL3)： (5 7.6(d,lH)? 7.2-7.1 (m?5H)? 6.7(d，lH)，5.5(m，2H)，4.3(m，lH)，3.8-3.7(m，2H)，3.8(s，3H)， 2.8-2.6(m，6H)，2.3-2.2(m，2H)，1.9-1.2(m，6H)·

實例7 5-{3-[(211)-2-((化)-(3 3)-3-羥基-4-苯基-丁-1-烯基）-6-氧 旅咬-1 -基]-丙基} -σ塞吩-2 -竣酸 lH NMR(400 MHZ?CD3OD): (5 7.6(D51H)5 7.2-7.1 (M?5H)5 6.9(D，1H)，5.5(M，2H)，4.3(M，1H)， 3.9(M，1H)， 3.7(M，1H)， 2·9-2·6(Μ，5Η)，2·2(Μ，2Η)，1·9-1·5(Μ，6Η); MS(-ESI):M/Z 412·1(Μ-1)-

實例8 5-{3-[(2R)-2-((3S)-3-經基-4 -笨基-丁基）_6_ 氧 σ底 σ定 _丨_基]一 200427670 丙基卜噻吩-2-羧酸 4 NMR(400 MHZ，CD3〇D): 5 7.6(D，1H)，7·3-7·1(Μ，5Η)，6.9(D， 1Η)，3·8(Μ，2Η)，3,4(Μ，1Η)，3.0-2·9(Μ，1Η)，2·8-2.5(Μ，4Η)，2·3 (Μ?2Η)? 2.0-1.3(M510H); MS(-ESI):M/Z 414.1(Μ-1)~

實例9 5_{3-[(2R)-2-((lE)-(3S)-3-羥基-4-苯基-丁 -1-烯基）-6-氧 旅咬-1 -基]-丙基} -α塞吩-2 -竣酸異丙酉旨 lH NMR(400 MHZ，CDCl3):5 7.6(d，lH)，7.3-7.1(m，5H)，6.8(d，lH)， 5.5(m?2H), 5.1(m，lH)，4·4(ιη，1Η)，3·9-3·8(ιη，2Η)，3.3(br s，lH)， 2.8(m，4H)，2.7(m，lH)，2.3(m，2H)，1.9-1.6(m，6H)， 1.3(dd，6H);MS (+ESI): M/Z 456.4(M+1)+ #

實例10 5-{3-[(2R)-2-((3S)-3 -羥基-4-苯基-丁基）-6-氧哌啶-1- 92118.doc -39- 200427670 丙基卜噻吩-2-羧酸異丙酯 !H NMR(400 MHZ，CDCl3):5 7.6(d，lH)，7.3-7.1(m，5H)，6.8(d,lH)， 5.2(m，lH)，3.9-3.8(m，2H)，3.3(m，lH)，2.9-2.8(m，4H)，2.7-2.6(m，lH)， 2·4-2·3(τη，3Η)，2.0-1.2(m，10H)，1.3(d，6H); MS(+ESI): M/Z 458·2 (M+l)+

實例11 6-[(3R)-3-羥基-4-苯基-丁基]-l-[6-(lH-四唑-5-基）-己 基]-旅淀-2 - _ NMR(400 MHZ?CD3OD): 5 7.3-7.1(m?5H), 3.8-3.7(m?2H), 3·3(ιη，1Η)，2.9-2.7(m，5H)，2.3(m，2H)，1.9-1.3(m，16H);MS(+ESI): M/Z 400_3(M+1)+

實例12 (52)-7-{(211)-2-[(1£，311)-4,4-二氟-3-經基-4-苯基丁-1-烯 92118.doc -40- 200427670 -1 -基]-6 -氧°底°定-1 -基}庚-5 -細酸異丙画旨 MS( + ESI): M/Z 450.3(M+1)

實例13 (5Z)-7-{(2R)-2-[(lE，3R)-4,4-二氟-3-羥基-4-苯基丁 -1-烯 -1-基]-6-氧哌啶-l-基}庚-5-烯酸 MS(-ESI): m/z 406.1(M-1)·

I.於兔及猴EP4激動劑對眼内壓（IOP)之效果 動物 此研究使用第一次使用藥物的雄性Dutch Bel ted兔及雌 性cynomolgus狼。於此研究中動物的照顧及處理與National Institute of Health(NIH)及 Association for Research in Vision and Ophthalmology(ARVO)所規定的動物研究相一 致。所有實驗工序都由 Institutional Animal Care and Use Committee of Merck and Company扣匕準。 92ll8.doc 41 200427670 藥物製備及給予 藥物濃度是以活性成分（基）表示。將本發明化合物，使用 於兔者，以0·01，0.001，〇 〇〇〇1%比溶於生理食鹽水内，使 用於猴者，以〇.〇5，0.005%比溶於生理食鹽水内。將整數 份（25微升）藥物或載體局部單側或雙側給予。單側給予者， 另一側眼接受等量的鹽水。作張力測量前給予角膜丙對卡 因（proparacaine) (0.5%)以使不適達最低。眼内壓（jop)是以 氣動張力計（Alcon Applanation Pneumatonograph)或類似儀 器記錄。 分析 結果以在給予藥物或載體前的測得的基本水平與IOP改 變表示，代表平均值加或減去標準誤差。用Student，s 試 驗就以藥物治療的及以載體治療的動物之非成對的 (non-paired)數據作統計比較及就同側的及對側的眼於可比 車乂的％間間隔成對的數據作統計比較。數據的意義也以 卜〇值的差別用Dunnet，s，，t”試驗測定。星號代表p<0 05含義 量。 A· 兔之眼内壓測定 將重2·5-4·0公斤的雄性Dutch Belted兔維持於12小時光/ 暗循％，給以兔食物。所有實驗都於白天同一時間進行以 使與白晝有關的變化減至最小。在治療前測定IOP，然後在 ;本毛月化合物或載體滴入（25微升一滴）一或二個眼内後 30，60 ’ 12〇 ’ 18〇，24〇，3〇〇及 36〇分鐘測定咖。有時， 只坪估相等數目的兩側眼都以載體治療的動物，作為平行 92118.doc -42- 200427670 對照比較以藥物治療的動物。 B · 猴之眼内壓測定 以Lee等的方法〇985)使用氬氣雷射系統（Coherent NOVUS 2000，pai〇 Alt〇，USA)將重 2 至 3 公斤的雌性 cynomolgus猴的右眼作小梁網眼的光凝固使其右眼發生單 側眼壓升高。長期眼内壓（I0P)升高導致視神經頭發生與青 光眼病人見的到的類似的視神經頭變化。 作IOP測定時，在整個實驗中使猴以坐姿固定於椅子上。 於約每一 IOP測定前五分鐘給猴肌肉内注射鹽酸氣胺酮 (3-5毫克/公斤）使其輕度麻醉，在記錄I〇p前滴一滴〇5%丙 對卡因。使用氣動張力計（Alc〇n AppHcati〇n 或

Digilab 氣動張力計（Bi〇_Rad pphthalmic Division， Cambridge，MA，USA)測定 IOP 〇 治療前測定IOP，一般於治療後3〇，60，124，18〇，3〇〇， 及360分鐘後測定IOP。於治療前二或三天於此等時間點取 得基線值。治療包括滴入一滴25微升的本發明化合物（〇 〇5 及0.005 %)或載體（鹽水）。於同一動物試驗前至少用一星期 洗出（washout)期。正常張力（n〇rm〇tensive)(高壓對側）眼以 確貫與咼壓眼相似的方式處理。用兩個眼的I〇p測定值與同 一時間點對應的基線值作比較。以毫米汞柱平均值加-或一 減誤差表達結果。用於眼睛的本發明化合物的活性範圍為 0.01 至 100,000 nM 〇 II·放射配位體結合鑑定： 用以試驗此等化合物的鑑定主要是如下述完成： 92118.doc -43- 200427670

Abramovitz M，Adam M，Boie Y，Carriere M, Denis D. Godbout C，Lmontagne S，Rochette C，Sawyer N，Tremblay NM，Belley M，Galllant M，Dufresne C，Gareau Y，Ruel R， Juteau H，Labelle M，Ouimet N，Metters KM。以類前列腺素 受體檢測前列腺素及相關類似物的親和性及選擇性。 Biochim Biophys Acta 2000 Jan 17 ; 1483(2):285-293，討論 如下： 人胚胎腎（HEK)293(EBNA)細胞系類前列腺素受體之安 定表達 將對應於全長編碼排序的類前列腺素受體（PG)cDNA亞 克隆於哺乳動物表達載體pCEP4 (Invitro gen)的適宜位置， 根據製造廠說明書用Qiagen質粒製備套件（QIAGEN)製備 pCEP4PG 質粒 DNA，並用 LipofectAMINE@(GIBCO-BRL)轉 移入HEK293(EBNA)細胞。將表達cDNA並有潮黴素抗性基 因的HRK293(EBNA)細胞選入加有1 0%熱去活化的胎牛血 清，1 mM丙酮酸鈉，100單位/毫升青黴素G，100微克/毫升 鏈黴素硫酸鹽，250微克/毫升活性GENETICINtm(G418)都 購自Life Technologies, Inc./BRL)及200微克/毫升潮黴素 (Calbiochem)的 Dulbecco’s Modified Eagle Medium(DMEN) 内。在選擇下生長2-3星期後用克隆環（cloning ring)法分離 個別克隆，再平展（expanded)入克隆細胞系。以受體結合鑑 定評估受體cDNA的表達。 將HEK293(EBNA)細胞於37°C種於6%C〇2的濕氣的有添 加物的DMEM完整培養基内，然後收穫，並以差速離心（1〇〇〇 92118.doc -44 - 200427670 \8 10分鐘之後160,00(^8 3 0分鐘，皆於4°(：下，細胞隨後於 800磅/吋2下於冰上在蛋白酶抑制劑（2 mM笨基甲基磺醯 氟，10 μΜ E-64，ΙΟΟμΜ亮抑蛋白酶肽及0.05毫克/毫升抑 胃酶肽）存在下以氮氣空腔化（cavitation)30分鐘進行分解， 而製備膜。將160, OOOxg小丸藉D ounce同質化（D ounce A ; 10衝程）以約5-10毫克/毫升蛋白質再懸浮於含1 mM EDTA 的10 mM HEPES/KOH(pH 7.4)内，於液態氮冰凍並儲於 -80〇C。 類前列腺素受體結合鑑定 類前列腺素受體結合鑑定是於終容基0.2毫升的10 mM MeS/KOH(pH6.0)(EP次型，FP及 TP)或 10 mM HEPES/KOH (pH7.4)(DP及IP)内完成，其内含 mMEDTA， 0 mM MgCl2(EP 次型）或10 mM MnCl2 (DP，FP，IP及TP)與放射配位體[EP 次型者 0.5-1.0 nM [3H]PGE2(181居里/毫莫耳），DP者 0·7 nM [3H] PGD2(115居里/毫莫耳），FP 者 0.95 nM [3H]PGF2a(170 居里/毫莫耳），IP者5 nM [3H]iloprost(16居里/毫莫耳）及TP 者 1.8 nM [3H]SQ29548(46居里 / 毫莫耳）]°ΕΡ3 鑑定也含 100 μΜ GTPr S。加得自160,000xg部分的膜蛋白（EP!者約30微克， EP2者約20微克，EP3者約2微克，EP4者約10微克，FP者約 60微克，DP者約30微克，IP者約1〇微克，及TP者約10微克）。 將配位體加於二甲基亞颯（Me2SO)内，於所有培養都維持於 1 %(容積/容積）。在有1 # Μ對應的非放射類前列腺素之存下 測定非特異結合。培養60分鐘（ΕΡ次型，FP及IP)或於3(TC 培養30分鐘（DP及TP)(EP次型，DP，FP，及TP)或室溫（IP)， 92118.doc -45 - 200427670 用不含EDTA的鑑定緩衝液預濕的96-凹的UniHlter GF/C( Canberra Packard)快速過渡（於 4 °C)及用 Tomtec Mach III-96凹半自動細胞收穫器終止培養。用3-4毫升相同的緩 衝液洗過濾器，於55°C乾燥90分鐘，以1450 MicroBeta (Wallac)加 50微升 Ultima Gold F(Canberra Packard)作閃爍 計數測定結合於各過濾器上的放射活性。由總結合減去非 特異結合計算出特異結合。特異結合代表90-95%的總結 合，與所用放射配位體及蛋白質濃度成正比。總結合代表 5-10%的加於培養基内的放射配位體。 用於骨的本發明化合物的活性範圍為0.01至100,000 nM。 92118.doc 46-

Claims (1)

1. 200427670 拾、申請專利範圍： 1. 一種式I構造的化合物： 〇 〇C^r;2 w u 式I 或其醫藥上可接受的鹽，對映體，非鏡像立體異構物，藥 前體或其混合物，其中， U代表Η ’ C1-3烧基或當W是=〇時沒有· W代表ΟΗ或=〇，先決條件是當％是=〇沒有口 ； Ζ代表（CH2)n，或 CH=CH ; R1 代表（CH2)P羥基，（(CH2)pC〇2Rl〇，或（CH2)n雜環基，該 雜環基是未經取代的或以丨至3個^取代的’且視需要含 酸性經基； R獨立代表Cl·10烷基（CH2)mC6_1〇芳基，（CH2)mC5_1()雜環 基’（CH2)mC3_1()雜環烷基，（CH2)mC3-8環烷基，該烷基， 壞烧基’雜環烷基，芳基或雜環基是未經取代的或以1至 3個Ra取代的； R3及R4獨立代表氫，鹵素，或Ci6烷基； r6代表氫，或烷基， R0代表氫’ Cl-1G烷基，c3，環烷基，（CH2)pC6 i()芳基， (CH2)PC5_1G雜環基； R代表CU6烷氧基，c16烷基，cf3，硝基，胺基，氰基， 92118.doc 200427670 Ci-6烧基胺基，鹵素， 烷基，SCno芳基，sc 環基，C02R6，CH20Cu ch2s芳基； 或11還代表芳基及雜環基，SC Μ 5-10雜環基，〇C6_10芳基，〇c5_l0雜 6烧基’ CH2SCN6烷基，ch20芳基， 1_二代表雙鍵或單鍵； ρ代表0 - 3 ; η代表0-4 ;及 m代表0至8。 2·根據申請專利範圍第1項之化合物，其中Rl是 (CH2)pC02R10，R3及 R4是鹵素，及 R2是（CH2)mC6 芳基， 該芳基是未經取代的或經1至3個Ra基團取代的。 3. 一種化合物，其為： 7-{(211)-2-[(1£，311)-4,4-二氟-3-羥基-4-苯基丁小烯基]-6- 氧基哌啶-1-基庚酸； 7-{(2R)-2-[(lE，3R)-4,4-二氟-3-羥基-4-苯基丁-l-烯基]-6-氧哌啶-l-基}庚酸異丙酯； (5Z)-7-{(2R)-2-[(lE，3R)-4,4-二氟-3-羥基-4-苯基丁 -1-烯 -1-基]-6-氧旅咬-1-基}庚-5-烯酸異丙酯； (5Z)-7-{(2R)-2-[(lE，3R)-4,4-二氟小羥基-4-苯基 丁小烯 -1-基]-6-氧°底咬-1-基}庚-5-烯酸， 7-{[(2-R)-2-(3R)-3-羥基-4-苯基-丁基 l·6·氧-哌啶-1_基} 庚酸； 7-{(211)-2-[(^)-4,4-二氟-3-氧-4-苯基丁-1-烯基]-6-氧哌 啶-l-基}庚酸異丙酯； 921l8.doc 200427670 6- [(311)-3-經基-4-苯基-丁基]-1-[6-(11~1-四唾-5-基）-己基]- 娘唆-2 -酮； (6S)-6-[(lE，3R)-4,4-二氣-3-經基-4-苯基丁 稀 基]-1-[6-(211-四唾-5-基）己基]旅喚_2-_ ; (6R)-6-[(lE，3R)-4,4-二氟-3-經基-4-苯基丁 _；μ 稀 基]-1-[6-(2Η-θ^-5-基）己基]旅喚-2-酿I ; 7- {(211)-2-[(311)-4-(3-溴苯基）-4,4-二氟-3-經基丁基]-6-氧 哌啶-1-基}庚酸； 或其醫藥上可接受的鹽’對映體，非鏡像立體異構物， 藥前體或混合物。 4· 一種用於治療眼高血壓或青光眼的醫藥組合物，其包含 治療有效量的根據申請專利範圍第1項的化合物。 5· 一種醫藥組合物，其包含醫藥上可接受的載劑及根據申 請專利範圍第1項的化合物，該組合物是作為溶液或懸浮 液的局部用調配物給予。 6·根據申請專利範圍第5項之組合物，其中一或多種活性成 籲 刀屬於由：召-腎上腺能阻斷劑，擬副交感神經劑，擬交感 神經劑，碳酸酐酶抑制劑，Maxi-K通路阻斷劑，及前列 腺素所構成的群，及低壓脂，神經保護劑，及5 激動 劑加於此局部調配物内。 · 7·根據申請專利範圍第ό項之組合物，其中石·腎上腺素能阻 · 斷劑是噻馬洛爾（tim〇l〇l)，環丙曱氧心安（betaxolol)，左 方疋壤丙甲氧心安（levobetaxolol)，卡替洛爾（carte〇1〇1)，左 布諾洛爾（levobunolol)，擬副交感神經劑是毛果芸香鹼 92U8.doc 200427670 (pilocarpines)，擬交感神經劑是腎上腺素，溴莫尼定 (brimonidine)，艾普羅里定（iopidine)，可樂定（clonidine)， 對胺基可樂尼定（para-aminoclonidine)，碳酸酐酶抑制劑如 多佐胺（dorzolamide)，乙醯佐胺（acetazolamide)，甲氮醯胺 (metazolamide)或布領佐胺（brinzolamide)，COSOPT⑧，一 種Maxi-K通道阻斷劑是品尼存A(Penitrem A)，帕司帕里 辛（Paspalicine)，差蕊多托辛（charybdotoxin)，依伯里托 辛（iberiotoxin)，帕克西蘭（Paxicillan)，阿扶里特蘭 (Aflitram)，夫羅庫勒真（Verroculogen)，1-(1-異丁基-6-曱氧基-1Η-σ引唾-3-基）-2-甲基丙烧-1-酮；l-[l-(2,2-二甲 基丙基）-6-曱氧基-1H-吲唑-3-基]-2-甲基丙烷-1-酮； 1-Π-(環己基甲基）-6-甲氧基-1H-吲唑-3-基]-2-曱基丙烷-1-酮；1-(-己基-6-甲氧基_1H-吲唑-3-基）-2-曱基丙烷-1-酮；1-[ 1-(2-乙基己基）-6-甲氧基-1H-吲唑-3-基]-2-曱基丙 烷-1-酮；1-(3-異丁醯基-6-甲氧基-1H-吲唑-1-基）丁烷-2-酮；1-(3-異丁醯基-6-甲氧基-1H-吲唑-1-基）-3,3-二甲基丁 烷-2-酮；1-(3-環戊基羰基）-6-曱氧基-1H-吲唑-1-基）-3,3-二甲基丁烷-2-酮；1-(3,3-二甲基-2-氧丁基）-6-甲氧基-1H-吲唑-3-羧酸；及1-[3-(3-羥基丙醯基）-6-甲氧基-1H-吲唑-1-基]-3,3 -二曱基丁烧，前列腺素是拉坦前列素 (latanoprost)，特拉瓦前歹丨J素（travaprost)，優前歹丨J通 (unoprostone)，異丙基烏拉前列酮（rescula)或S1033，降 血壓脂如魯米甘（lumigan)，神經保護劑是依利普洛抵 (eliprodil)，R-依利普洛抵（R-eliprodil)或美金胺 92118.doc 200427670 (memantme);及5-HT2受體激動齊丨是1-(2_胺基丙基）_3岬 基-1 H-咪唑-6-醇富馬酸酯及2-(3_氯甲氧基_吲唑小 基）-1- f基-乙基胺。 8· 一種用於治療黃斑水腫或黃斑退化的、治療眼睛乾燥、 增進視網膜及視神經頭血流速、增進視網膜及視神經氧 張力的或提供神經保護的醫藥組合物，其包含治療有效 量的根據申請專利範圍第丨項的化合物。 9·根據申請專利範圍第4項之醫藥合物，其中式j化合物是用 作局部調配物施用及活性成分屬於石·腎上腺能阻斷劑， 擬副父感神經劑，擬交感神經劑，碳酸酐酶抑制劑， COSOPT® ’ Maxi-K通路阻斷劑及前列腺素所組成之群， 低血壓脂，神經保護劑，及5-HT2受體激動劑加於該調配 物0 1〇·根據申請專利範圍第6項之醫藥組合物，其中此局部調配 物視需要含有黃蓍膠或吉蘭糖膠。 92118.doc 200427670 柒、指定代表圖： (一) 本案指定代表圖為：（無）。 (二) 本代表圖之元件代表符號簡單說明·· 捌、本案若有化學式時，請揭示最能顯示發明特徵的化學式： 〇

   92118.doc