CN111511736B - 含氮6元环化合物 - Google Patents

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Abstract

本发明提供一种新型化合物或其盐、以及含有该化合物或其盐作为有效成分的、可用于促进骨形成和骨折的治疗和/或治愈促进等的药物，所述新型化合物具有优异的EP4受体激动活性，由下述通式(1)所示。

Description

含氮6元环化合物
技术领域
本发明涉及一种新型含氮6元环化合物和以该化合物作为有效成分的药物。
背景技术
骨折是由于事故或跌倒而受到外力使骨部分或完全地断开或变形的状态。骨折被分为完全骨折(折断的情况)和不完全骨折(裂缝的情况)、单纯骨折(骨折线为1条的情况)和粉碎骨折(骨复杂粉碎的情况)、闭合骨折(骨折部在体外不露出的情况)和开放骨折(骨折部在体外露出的情况)等。骨折对患者的日常生活动作带来很大障碍，尽管骨折的治愈根据骨折部位或有无骨的错位(移位)而不同，但治愈仍需要相当长期的时间。在移位未被矫正的状态下的骨愈合状态被称为“变形治愈”。另外，尽管根据部位、骨折的种类而不同，但骨折可能由于增龄、糖尿病、吸烟等各种原因而产生在受伤后即使经过3～9个月仍不愈合的“迁延愈合”、在受伤后即使经过9个月仍未得到骨愈合且治愈转机疑似停止的“假关节”之类的症状。变形治愈、迁延治愈以及假关节之类的病例中，伴有疼痛和不适感，不能恢复骨折部位的正常功能，因此骨折患者的QOL显著降低。
骨折治疗中特别成为问题的是伴随骨质疏松症的骨折。伴随骨质疏松症的骨折好发于四肢骨的骨干端部和脊椎，特别是股骨颈部骨折、脊椎椎体压迫骨折、桡骨远位端骨折以及上臂骨近位端骨折为骨质疏松症中的4大骨折的好发部位。伴随骨质疏松症的骨折中，由于其骨脆弱性而难以重整，存在即使实施骨接合术也难以获得充分的固定性的问题，不适当的固定会成为变形治愈、迁延治愈、以及假关节的原因。另外，在骨折治疗期间日常动作受到限制，因此废用性的骨量降低和肌萎缩进展，诱发新的摔倒、骨折这样的负面的旋涡。特别是从椎体骨折或股骨颈部骨折恢复正常的延迟使得患者只能卧床，这些患者中，伴随全身废止使用的肌力降低、关节挛缩、褥疮、痴呆、尿路感染症、心肺功能降低等多种严重的并发症的患病率极高，据报告受伤后的存活率显著降低(非专利文献1)。
这种骨折、特别是伴随骨质疏松症的骨折对QOL的降低、严重并发症的诱发、以及生命预后也产生较大影响，因此医疗费用、看护负担的增大等成为极其深刻的社会问题。目前的骨折治疗是以下述目标进行的：使骨的状态恢复固定在解剖学上的正常位置，通过正常的骨修复转机来预防变形治愈、迁延治愈、假关节等并发症，尽可能恢复至受伤前的功能水平。
作为积极地促进骨折治愈的治疗，使用超声波骨折治疗器，作为治疗药，骨形态发生蛋白(BMP)制剂、甲状旁腺激素制剂、成纤维细胞增殖因子(FGF)制剂等被用于临床、或尝试了临床应用。但是，尽管像这样使用、或尝试使用多种药剂，骨折等骨疾病的患者数仍在逐年增加，例如股骨颈部骨折的患者数在1990年当时在世界范围中推定为170万人，在2050年预计增加至630万人。从这个意义上讲，希望开发出具有骨折等骨疾病的预防和/或治疗效果的划时代的新药。
已知前列腺素E2(以下简称为PGE2)具有致痛作用、子宫收缩作用等多种生理作用，还广泛已知其在骨代谢中发挥出重要的作用。将PGE2添加至骨髓细胞培养体系中时，可提高钙化骨样结节形成和作为成骨细胞的分化标记物的碱性磷酸酶活性。另外，实际上已经明确，在将PGE2施用至大鼠等实验动物或人时，会使骨形成亢进、骨量增加。此外，在将PGE2以缓释剂的形式局部施用至骨时，可促进该部位的骨形成，因此可期待PGE2具有全身性和局部性积极地促进骨形成的效果。
但是，如上所述，PGE2具有致痛作用、子宫收缩作用等在长时间持续施用时应该回避的副作用，因此希望开发出对骨组织安全且有效地起作用的选择性的PGE2衍生物。例如，作为PGE2的受体，截至目前在小鼠、大鼠、犬和人等中报告了EP1、EP2、EP3、EP4这4种受体，它们的表达部位、活性细胞内信息传递体系各不相同，因此进行了各亚型具有选择性的化合物的研发。
PGE2起作用的4种受体中，已经暗示出EP2和EP4受体在细胞和动物中在骨代谢中发挥出重要的作用，均可与Gs蛋白质共轭而增加成骨细胞内cAMP。截至目前开发出了EP2选择性激动剂、EP4选择性激动剂、或EP2/EP4激动剂，它们均在动物模型中通过全身或局部施用而显示出显著的骨形成作用或促进骨折治愈效果。作为作用于PGE受体的化合物，例如已知有专利文献1～8中记载的化合物。
现有技术文献
专利文献
专利文献1：国际公开第WO02/24647号小册子
专利文献2：国际公开第WO02/42268号小册子
专利文献3：国际公开第WO03/007941号小册子
专利文献4：国际公开第WO03/035064号小册子
专利文献5：国际公开第WO2004/063158号小册子
专利文献6：国际公开第WO2004/085430号小册子
专利文献7：美国专利第6747037号小册子
专利文献8：国际公开WO2006/080323号小册子
非专利文献
非专利文献1：C.Cooper et.al,Am.J.Epidemiol.137.1001-1005.1993
发明内容
发明所要解决的课题
本发明所要解决的课题在于提供一种具有优异的EP4受体激动活性的新型化合物。优选提供一种具有EP4受体选择性的优异的激动活性的新型化合物。另外，本发明的其他课题在于提供一种作为用于预防和/或治疗EP4受体激动相关疾病的药物的有效成分有用的新型化合物、例如作为用于对骨折进行治疗和/或治愈促进的药物的有效成分有用的新型化合物。本发明进一步的课题在于提供含有该化合物的药物。
用于解决课题的手段
本发明人为了解决上述课题进行了深入研究，结果发现，下述式(1)所表示的本发明的化合物具有优异的EP4受体激动活性，特别是在本发明的某一方式中具有EP4受体选择性的优异的激动活性，这些化合物可用于EP4受体激动相关疾病的预防和/或治疗、例如可用于骨折的治疗和/或治愈促进，从而完成了本发明。出于以下原因，认为提供具有EP4受体选择性的激动活性的化合物是优选的。即，在人培养成骨细胞和骨组织中，在成骨细胞和破骨细胞中确认到EP4受体，与之相对，未确认到EP2受体的表达(P.Sarrazin,G et al,Prostaglandins Leukot.Essent.Fatty Acids 64.203-210.2001、I.Fortier et al,Prostaglandins Leukot.Essent.Fatty Acids 70.431-439.2004)，因此可认为，PGE2在骨组织中的作用中，最重要的靶向为EP4受体，在骨再生治疗中，EP4受体选择性的激动剂可构成安全且有效的药品。当然，具有EP2受体激动活性的化合物也不排除在本发明的化合物之外。
即，作为本发明，可以举出下述方案。
[1]由下述通式(1)所表示的化合物或其盐：
[化1]
Figure BDA0002552068800000041
[式(1)中，
R1表示-H或卤素；
Ar1表示不带取代或者带有选自由-F和甲基组成的组中的1～3个相同或不同的取代基取代的选自G1组中的任一种取代基且其中不包括
[化2]
Figure BDA0002552068800000042
此处，G1组为由
[化3]
Figure BDA0002552068800000043
组成的组(a、b表示键合方向)；
Ar2表示不带取代或者带有选自由氰基、-Cl、甲基、甲氧基以及苯基组成的组中的1～3个相同或不同的取代基取代的选自G2组中的任一种取代基且其中不包括
[化4]
Figure BDA0002552068800000051
此处，G2组为由苯基、噻吩基、呋喃基以及噻唑基组成的组；
*表示不对称碳原子]。
[2]如上述[1]中所述的化合物或其盐，其中，R1为-H、-Cl或-Br。
[3]如上述[2]中所述的化合物或其盐，其中，Ar1为选自由
[化5]
Figure BDA0002552068800000052
组成的组中的任一种取代基。
[3-2]如上述[1]或[2]中所述的化合物或其盐，其中，Ar1为选自由
[化6]
Figure BDA0002552068800000053
组成的组中的任一种取代基。
[3-3]如上述[1]或[2]中所述的化合物或其盐，其中，Ar1为选自由
[化7]
Figure BDA0002552068800000054
组成的组中的任一种取代基。
[4]如上述[2]中所述的化合物或其盐，其中，Ar1为
[化8]
Figure BDA0002552068800000055
[4-2]如上述[1]或[2]中所述的化合物或其盐，其中，Ar1为
[化9]
Figure BDA0002552068800000061
[4-3]如上述[1]或[2]中所述的化合物或其盐，其中，Ar1为
[化10]
Figure BDA0002552068800000062
[4-4]如上述[1]或[2]中所述的化合物或其盐，其中，Ar1为
[化11]
Figure BDA0002552068800000063
/>
[5]如上述[3]或[4]中所述的化合物或其盐，其中，Ar2为选自由
[化12]
Figure BDA0002552068800000064
组成的组中的任一种取代基。
[5-2]如上述[1]～[4-4]中任一项所述的化合物或其盐，其中，Ar2为选自由
[化13]
Figure BDA0002552068800000071
组成的组中的任一种取代基。
需要说明的是，如上述[1]～[4-4]那样引用的项目号以范围示出、在该范围内配置有具有[3-2]等分支号的项的情况下，意味着还引用了具有[3-2]等分支号的项。下文中也相同。
[6]如上述[3]或[4]中所述的化合物或其盐，其中，Ar2为选自由
[化14]
Figure BDA0002552068800000072
组成的组中的任一种取代基。
[6-2]如上述[1]～[4-4]中任一项所述的化合物或其盐，其中，Ar2为选自由
[化15]
Figure BDA0002552068800000073
选自由组成的组中的任一种取代基。
[7]如上述[3]或[4]中所述的化合物或其盐，其中，Ar2为选自由
[化16]
Figure BDA0002552068800000074
/>
组成的组中的任一种取代基。
[7-2]如上述[1]～[4-4]中任一项所述的化合物或其盐，其中，Ar2为选自由
[化17]
Figure BDA0002552068800000081
组成的组中的任一种取代基。
[7-3]如上述[1]～[4-4]中任一项所述的化合物或其盐，其中，Ar2为选自由
[化18]
Figure BDA0002552068800000082
组成的组中的任一种取代基。
[7-4]如上述[1]～[4-4]中任一项所述的化合物或其盐，其中，Ar2为
[化19]
Figure BDA0002552068800000083
[7-5]如上述[1]～[4-4]中任一项所述的化合物或其盐，其中，Ar2为
[化20]
Figure BDA0002552068800000084
[7-6]如上述[1]～[4-4]中任一项所述的化合物或其盐，其中，Ar2为
[化21]
Figure BDA0002552068800000085
[7-7]如上述[1]～[4-4]中任一项所述的化合物或其盐，其中，Ar2为
[化22]
Figure BDA0002552068800000091
[8]如上述[7]中所述的化合物或其盐，其中，R1为-H。
[8-2]如上述[1]～[7-7]中任一项所述的化合物或其盐，其中，R1为-H。
[9]如上述[7]中所述的化合物或其盐，其中，R1为-Cl。
[9-2]如上述[1]～[7-7]中任一项所述的化合物或其盐，其中，R1为-Cl。
[10]如上述[7]中所述的化合物或其盐，其中，R1为-Br。
[10-2]如上述[1]～[7-7]中任一项所述的化合物或其盐，其中，R1为-Br。
[11]如上述[1]中所述的化合物或其盐，其中，
R1为-H、-Cl或-Br；
Ar1为选自由
[化23]
Figure BDA0002552068800000092
组成的组中的任一种取代基；
Ar2为选自由
[化24]
Figure BDA0002552068800000093
组成的组中的任一种取代基。
[11-2]如上述[1]中所述的化合物或其盐，其中，
R1为-H、-Cl或-Br；
Ar1为选自由
[化25]
Figure BDA0002552068800000101
组成的组中的任一种取代基；
Ar2为选自由
[化26]
Figure BDA0002552068800000102
组成的组中的任一种取代基。
[11-3]如上述[1]中所述的化合物或其盐，其中，
R1为-H、-Cl或-Br；
Ar1为选自由
[化27]
Figure BDA0002552068800000103
组成的组中的任一种取代基；
Ar2为选自由
[化28]
Figure BDA0002552068800000104
组成的组中的任一种取代基。
[11-4]如上述[1]中所述的化合物或其盐，其中，
R1为-H、-Cl或-Br；
Ar1为选自由
[化29]
Figure BDA0002552068800000111
组成的组中的任一种取代基；
Ar2为选自由
[化30]
Figure BDA0002552068800000112
组成的组中的任一种取代基。
[12]选自下述组中的任一种化合物或其盐。
[化31]
Figure BDA0002552068800000113
[13]下述化合物或其盐。
[化32]
Figure BDA0002552068800000121
[14]下述化合物或其盐。
[化33]
Figure BDA0002552068800000122
[15]下述化合物或其盐。
[化34]
Figure BDA0002552068800000123
[16]下述化合物或其盐。
[化35]
Figure BDA0002552068800000124
[17]下述化合物或其盐。
[化36]
Figure BDA0002552068800000131
[18]下述化合物或其盐。
[化37]
Figure BDA0002552068800000132
[19]下述化合物或其盐。
[化38]
Figure BDA0002552068800000133
/>
[20]一种药物，其包含上述[1]～[19]中任一项所述的化合物或其可药用盐作为有效成分。
[21]如上述[20]中所述的药物，其用于预防和/或治疗EP4受体激动相关疾病。
[22]如上述[20]中所述的药物，其用于促进骨形成。
[23]如上述[20]中所述的药物，其用于骨折的治疗和/或治愈促进。
[24]如上述[20]中所述的药物，其用于骨缺损的治疗和/或治愈促进。
[25]如上述[20]中所述的药物，其用于促进骨愈合。
[25-2]如上述[25]中所述的药物，其用于促进脊椎固定术中的骨愈合。
[26]一种EP4激动剂，其包含上述[1]～[19]中任一项所述的化合物或其可药用盐作为有效成分。
[27]一种药物组合物，其是用于骨折的治疗的药物组合物，其包含上述[1]～[19]中任一项所述的化合物或其可药用盐以及可药用载体。
[28]一种微球制剂，其含有上述[1]～[19]中任一项所述的化合物或其可药用盐以及乳酸-乙醇酸共聚物。
[29]如上述[1]～[19]中任一项所述的化合物或其可药用盐，其用于骨折的治疗。
[30]一种对哺乳动物的骨折进行治疗的方法，其包括将有效量的上述[1]～[19]中任一项所述的化合物或其可药用盐施用至该哺乳动物的步骤。
发明的效果
“式(1)所表示的化合物或其盐”(下文中有时简记为“本发明的化合物”)具有优异的EP4激动活性。另外，本发明的化合物能够作为用于预防和/或治疗EP4受体激动相关疾病、例如用于骨折的治疗和/或治愈促进的药物的有效成分。作为其他方式，本发明的化合物能够作为具有EP4激动活性的试剂使用。
具体实施方式
下面对本发明进行具体说明。
本说明书中，有时将碳原子简单表示为“C”，将氢原子表示为“H”，将氧原子表示为“O”，将硫原子表示为“S”，并且将氮原子表示为“N”。另外，有时将羰基简单表示为“-C(O)-”，将羧基表示为“-COO-”，将亚磺酰基表示为“-S(O)-”，将磺酰基表示为“-S(O)2-，将醚键表示为“-O-”，将硫醚键表示为“-S-”(这种情况下的“-”表示键合)。
本说明书中，碳原子数1～4个的烷基表示甲基、乙基、丙基、丁基以及它们的异构体[正(n)、异(iso)、仲(sec)、叔(t)等]。
本说明书中，碳原子数2～6个的酰基表示乙酰基、丙酰基、丁酰基、戊酰基、己酰基以及它们的异构体。
本说明书中，碳原子数1～4个的烷氧基表示甲氧基、乙氧基、丙氧基、丁氧基以及它们的异构体。
本说明书中，作为卤素，表示氟(-F)、氯(-Cl)、溴(-Br)或碘(-I)。
本发明中，只要没有特别指示，则包含全部的异构体。例如，烷基、链烯基、炔基、烷氧基、烷硫基、亚烷基、亚烯基以及亚炔基中包括直链状的基团和支链状的基团。此外，基于双键、环或稠环的异构体(E或Z异构体、或者顺式或反式异构体)、基于不对称碳原子的存在等的异构体(R-或S-异构体、基于α-或β-构型的异构体、对映异构体或非对映异构体等)、具有旋光性的光学活性体(D-或L-型、或者d-或l-型)、基于经色谱分离判断极性差异的异构体(高极性体或低极性体)、平衡化合物、旋转异构体、或者这些物质的任意比例的混合物或外消旋混合物全部包含在本发明中。
本说明书中，只要不特别声明，如本领域技术人员所知，符号
[化39]
Figure BDA0002552068800000151
表示键合在纸面的背面侧(即α-构型)，符号
[化40]
Figure BDA0002552068800000152
表示键合在纸面的前面侧(即β-构型)，符号
[化41]
Figure BDA0002552068800000153
表示α-构型或β-构型中的任一者或它们的混合物，符号
[化42]
Figure BDA0002552068800000154
表示α-构型和β-构型的混合物。
下面对式(1)所表示的化合物或其盐进行详细说明。
作为R1，可例示出-H或卤素。作为其他方式，可例示出-H、-Cl或-Br。作为进一步的其他方式，可例示出-H。
作为Ar1，可例示出不带取代或者带有选自由-F和甲基组成的组中的1～3个相同或不同的取代基取代的选自G1组中的任一种取代基且其中不包括
[化43]
Figure BDA0002552068800000161
此处，G1组为由
[化44]
Figure BDA0002552068800000162
组成的组(a、b表示键合方向)。
作为上述由-F和甲基组成的组中的其他方式，可例示出-F，作为进一步的其他方式，可例示出甲基。
作为G1组的其他方式，可例示出
[化45]
Figure BDA0002552068800000163
作为Ar1的另一方式，可例示出选自由
[化46]
Figure BDA0002552068800000164
组成的组中的任一种取代基。
作为Ar1的进一步的其他方式，可例示出选自由
[化47]
Figure BDA0002552068800000165
组成的组中的任一种取代基。
作为Ar1的进一步的其他方式，可例示出
[化48]
Figure BDA0002552068800000171
作为Ar1的进一步的其他方式，可例示出
[化49]
Figure BDA0002552068800000172
作为Ar1的进一步的其他方式，可例示出
[化50]
Figure BDA0002552068800000173
Ar1带有选自由-F和甲基组成的组中的1～3个相同或不同的取代基取代的情况下，作为其他方式，可例示出带有选自由-F和甲基组成的组中的1个或2个相同或不同的取代基取代的情况，作为进一步的其他方式，可例示出带有1个-F或甲基取代的情况。无取代也是优选方式之一。
作为Ar2，可例示出不带取代或者带有选自由氰基、-Cl、甲基、甲氧基以及苯基组成的组中的1～3个相同或不同的取代基取代的选自G2组中的任一种取代基且其中不包括
[化51]
Figure BDA0002552068800000174
此处，G2组为由苯基、噻吩基、呋喃基以及噻唑基组成的组。
作为上述由氰基、-Cl、甲基、甲氧基以及苯基组成的组中的其他方式，可例示出氰基。
作为G2组的其他方式，可例示出由噻吩基和呋喃基组成的组。
作为G2组的进一步的其他方式，可例示出噻吩基。
作为Ar2的其他方式，可例示出选自由
[化52]
Figure BDA0002552068800000181
组成的组中的任一种取代基。
作为Ar2的进一步的其他方式，可例示出选自由
[化53]
Figure BDA0002552068800000182
组成的组中的任一种取代基。
作为Ar2的进一步的其他方式，可例示出选自由
[化54]
Figure BDA0002552068800000183
组成的组中的任一种取代基。
作为Ar2的进一步的其他方式，可例示出选自由
[化55]
Figure BDA0002552068800000184
组成的组中的任一种取代基。
作为Ar2的进一步的其他方式，可例示出
[化56]
Figure BDA0002552068800000191
作为Ar2的进一步的其他方式，可例示出
[化57]
Figure BDA0002552068800000192
作为Ar2的进一步的其他方式，可例示出
[化58]
Figure BDA0002552068800000193
作为Ar2的进一步的其他方式，可例示出
[化59]
Figure BDA0002552068800000194
Ar2带有选自由氰基、-Cl、甲基、甲氧基以及苯基组成的组中的1～3个相同或不同的取代基取代的情况下，作为其他方式，可例示出带有选自由氰基、-Cl、甲基、甲氧基以及苯基组成的组中的1个或2个相同或不同的取代基取代的情况，作为进一步的其他方式，可例示出带有1个氰基、-Cl、甲基、甲氧基或苯基取代的情况。无取代也是优选方式之一。
作为包含在本发明中的具体化合物，可例示出下述化合物。
[化60]
Figure BDA0002552068800000201
另外，作为包含在本发明中的具体化合物的其他方式，可例示出下述化合物。
[化61]
Figure BDA0002552068800000211
本说明书中，作为“式(1)所表示的化合物”，通常可理解为式(1)所表示的游离状的化合物。另外，作为其盐，可以举出以下的盐。
即，作为式(1)所表示的化合物的盐，对其种类没有特别限定，可以为酸加成盐或碱加成盐中的任一种，也可以取分子内抗衡离子的形态。特别是作为药物的有效成分时，作为该盐，优选可药用盐。本说明书中，在与药物用途相关进行公开的情况下，作为式(1)所表示的化合物的盐，通常理解为可药用盐。作为酸加成盐，例如包括与盐酸、氢溴酸、氢碘酸、硫酸、硝酸或磷酸等无机酸的酸加成盐，或者与甲酸、乙酸、丙酸、草酸、丙二酸、琥珀酸、甲磺酸、乙磺酸、苯磺酸、柠檬酸、苹果酸、酒石酸、二苯甲酰酒石酸、扁桃酸、马来酸、富马酸、天冬氨酸或谷氨酸等有机酸的酸加成盐。作为碱加成盐，可例示出例如与钠、钾、镁、钙、铝等无机碱的碱加成盐、与甲胺、2-氨基乙醇、精氨酸、赖氨酸或鸟氨酸等有机碱的碱加成盐等。不过，对盐的种类没有限定，不消说本领域技术人员可以适宜地选择。
本发明的化合物包括水合物的形态。另外，本发明的化合物也包括无水物的形态。
本发明的化合物包括溶剂化物的形态。另外，本发明的化合物也包括无溶剂化物的形态。
本发明的化合物包括结晶的形态。另外，本发明的化合物也包括非晶态的形态。
若更具体地记载，则本发明的化合物包括“式(1)所表示的化合物”的无水物且无溶剂化物、或者其水合物和/或溶剂化物，或者进一步包括它们的结晶。
另外，本发明的化合物包括“式(1)所表示的化合物的盐”的无水物且无溶剂化物、或者其盐的水合物和/或溶剂化物，或者进一步包括它们的结晶。
本发明的化合物有时也包括“式(1)所表示的化合物”的可药用前药。作为可药用前药，是具有通过加溶剂分解或在生理学条件下可转换为氨基、羟基、羧基等的基团的化合物。例如，关于羟基和氨基，作为形成前药的基团，例如可例示出酰基、烷氧羰基。另外，关于羧基，作为形成前药的基团，例如可例示出甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基、氨基、甲基氨基、乙基氨基、二甲氨基或二乙基氨基。
例如可以使用相应的卤化物等前药化试剂，按照常规方法在本发明的化合物中的选自羟基和氨基中的1个以上的任意基团上导入适宜形成前药的基团，然后根据期望适宜地按照常规方法进行分离精制，由此制造出该前药。另外，也可以按照常规方法使用相应的醇或胺等的前药化试剂在本发明的化合物中的羧基上导入适宜形成前药的基团。
本发明的化合物有时具有不对称碳原子。对这些不对称碳原子的立体构型没有特别限定，可以为S构型或R构型中的任一者、或者为两者的混合物。基于这些不对称碳原子的光学纯形态的光学异构体或非对映异构体等立体异构体、立体异构体的任意的混合物、外消旋体等均包括在本发明的化合物中。
特别式(1)中的“*”所表示的不对称碳原子中，对其立体构型没有特别限定，以下所示的立体构型为优选方式之一。
[化62]
Figure BDA0002552068800000221
上述立体构型中，Ar1为G1组中的苯环的情况下为S构型，Ar1为G1组中的噻吩环的情况下为R构型。
<本发明的化合物的制造方法>
本发明的化合物为文献中未记载的新型化合物。本发明的化合物例如可通过下述方法制造，但本发明的化合物的制造方法并不限于下述的方法。
在各反应中，对反应时间没有特别限定，由于能够通过后述的分析手段容易地追踪反应的进行状态，因此在目的物的产率达到最大的时刻终止反应即可。另外，各反应可以根据需要在例如氮气流下或氩气流下等惰性气体气氛下进行。在各反应中，在需要进行利用保护基的保护及其后的脱保护的情况下，可以通过利用后述的方法适宜地进行反应。
作为本发明中使用的保护基，可以举出下述基团。即，可以举出针对羧基(-COOH)的保护基、针对羟基(-OH)的保护基、针对炔基的保护基和针对氨基(-NH2)的保护基等。
作为针对羧基的保护基，例如可以举出碳原子数1～4个的烷基、碳原子数2～4个的链烯基、带有碳原子数1～4个的烷氧基取代的碳原子数1～4个的烷基、带有1～3个卤素取代的碳原子数1～4个的烷基等，具体地说，可以举出甲基、乙基、叔丁基、烯丙基、甲氧基乙基、三氯乙基等。
作为针对羟基的保护基，例如可以举出碳原子数1～4个的烷基、碳原子数2～4个的链烯基、带有碳原子数1～4个的烷氧基取代的碳原子数1～4个的烷基、带有1～3个卤素取代的碳原子数1～4个的烷基、带有3个相同或不同的碳原子数1～4个的烷基或者苯基取代的甲硅烷基、四氢吡喃基、四氢呋喃基、炔丙基、三甲基甲硅烷基乙基等，具体地说，可以举出甲基、乙基、叔丁基、烯丙基、甲氧基甲基(MOM)、甲氧基乙基(MEM)、三氯乙基、苯基、甲基苯基、氯苯基、苄基、甲基苄基、氯苄基、二氯苄基、氟苄基、三氟甲基苄基、硝基苄基、甲氧基苯基、N-甲基氨基苄基、N,N-二甲氨基苄基、苯甲酰甲基、三苯甲基、1-乙氧基乙基(EE)、四氢吡喃基(THP)、四氢呋喃基、炔丙基、三甲基甲硅烷基(TMS)、三乙基甲硅烷基(TES)、叔丁基二甲基甲硅烷基(TBDMS)、叔丁基二苯基甲硅烷基(TBDPS)、乙酰基(Ac)、新戊酰基、苯甲酰基、烯丙氧基羰基(Alloc)、或2,2,2-三氯乙氧基羰基(Troc)等。
作为针对炔基的保护基，可以举出三甲基甲硅烷基、2-羟基-2-丙基等。
作为针对氨基的保护基，例如可以举出苄基、甲基苄基、氯苄基、二氯苄基、氟苄基、三氟甲基苄基、硝基苄基、甲氧基苯基、N-甲基氨基苄基、N,N-二甲氨基苄基、苯甲酰甲基、乙酰基、三氟乙酰基、新戊酰基、苯甲酰基、烯丙氧基羰基、2,2,2-三氯乙氧基羰基、苄氧基羰基、叔丁氧基羰基(Boc)、1-甲基-1-(4-联苯)乙氧基羰基(Bpoc)、9-芴基甲氧基羰基、苄氧基甲基(BOM)、或2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基甲基(SEM)等。
保护基可以通过在制造工序的途中或者在最终阶段与制造同时或依次进行脱保护化而转换成目标化合物。保护/脱保护反应可以按照公知的方法、例如按照刊行物Protective Groups in Organic Synthesis,John Wiley and Sons(2007年版)中记载的方法等来进行即可，例如可通过如下所示的(1)～(6)中举出的方法等来实施。
(1)基于碱水解的脱保护反应例如通过在极性溶剂中与碱反应来进行。作为此处所用的碱，例如可以举出氢氧化钠、氢氧化钾、氢氧化锂、氢氧化钡、氢氧化钙、碳酸钠、碳酸钾、甲醇钠或叔丁醇钾等碱金属类碱、三乙胺等有机碱。关于它们的用量，相对于反应物，在碱金属类碱的情况下，可例示出通常为1～20倍摩尔量、优选为1～10倍摩尔量，另外，在有机碱的情况下，可例示出1倍摩尔～大过量。关于反应溶剂，优选在通常不妨碍反应的惰性介质、优选极性溶剂中进行反应。作为极性溶剂，可以举出水、甲醇、乙醇、四氢呋喃或二氧六环等，可以根据需要将它们混合使用。关于反应温度，例如选择-10℃～溶剂回流温度中的适当温度。关于反应时间，在使用碱金属类碱的情况下，可例示出通常为0.5～72小时、优选为1～48小时，在使用有机碱的情况下，可例示出通常为5小时～14天，出于可通过薄层色谱法(TLC)、高效液相色谱法(HPLC)等追踪反应历程的原因，通常在目标化合物的产率达到最大时适宜地终止反应即可。
(2)酸性条件下的脱保护反应如下进行：在例如有机溶剂(二氯甲烷、氯仿、二氧六环、乙酸乙酯或苯甲醚等)中，在有机酸(乙酸、三氟乙酸、甲磺酸或对甲苯磺酸等)、路易斯酸(三溴化硼、三氟化硼、溴化铝或氯化铝等)或无机酸(盐酸或硫酸等)或者这些的混合物(溴化氢/乙酸等)中，在-10～100℃的温度下进行该反应。另外还有添加乙硫醇或1,2-乙二硫醇等作为添加剂的方法。
(3)基于加氢分解的脱保护反应如下进行：在例如溶剂[醚系(四氢呋喃、二氧六环、二甲氧基乙烷或二乙醚等)、醇系(甲醇或乙醇等)、苯系(苯或甲苯等)、酮系(丙酮或甲基乙基酮等)、腈系(乙腈等)、酰胺系(二甲基甲酰胺等)、酯系(乙酸乙酯等)、水、乙酸或这些的两种以上的混合溶剂等]中，在催化剂(钯碳粉末、氧化铂(PtO2)、活性化镍等)的存在下，在常压或加压下的氢气、甲酸铵或水合肼等氢源存在下，在-10～60℃的温度进行该反应。
(4)甲硅烷基的脱保护反应如下进行：在例如可与水混合的有机溶剂(四氢呋喃或乙腈等)中，使用氟化四正丁基铵等，在-10～60℃的温度进行该反应。
(5)使用金属的脱保护反应如下进行：在例如酸性溶剂(乙酸、pH4.2～7.2的缓冲液或这些溶液与四氢呋喃等有机溶剂的混合液)中，在粉末锌的存在下，施加超声波或不施加超声波，在-10～60℃的温度进行该反应。
(6)使用金属络合物的脱保护反应如下进行：在例如有机溶剂(二氯甲烷、二甲基甲酰胺、四氢呋喃、乙酸乙酯、乙腈、二氧六环或乙醇等)、水或这些的混合溶剂中，在捕获试剂(氢化三丁基锡、三乙基硅烷、双甲酮、吗啉、二乙胺或吡咯烷等)、有机酸(乙酸、甲酸或2-乙基己酸等)和/或有机酸盐(2-乙基己酸钠、或2-乙基己酸钾等)的存在下，在膦系试剂(三苯基膦等)的存在下或不存在下，使用金属络合物[四(三苯基膦)钯(0)、二氯化双(三苯基膦)钯(II)、乙酸钯(II)或氯化三(三苯基膦)铑(I)等]，在-10～60℃的温度进行该反应。
式(1)所表示的本发明的化合物例如可按照下述的反应路径来制造。下述路线中，“STEP”是指步骤，例如“STEP1-1”表示步骤1-1。
步骤1-1
[化63]
Figure BDA0002552068800000251
式(1)所表示的化合物可通过将式(2)[式(2)中，“Pro1”表示式(1)中的羧基的保护基]所表示的化合物中的保护基Pro1脱保护来制造。脱保护反应可按照公知的方法、例如刊行物Protective Groups in Organic Synthesis,John Wiley and Sons(2007年版)中记载的方法等来进行。
Pro1只要为上述羧基的保护基就没有特别限定，例如可以举出碳原子数1～4个的烷基。
[化64]
Figure BDA0002552068800000261
步骤1-2
式(2)所表示的化合物可以通过将式(3)[式(3)中，“Pro2”表示式(1)中的羟基的保护基。“Pro1”与上述含义相同]所表示的化合物中的保护基脱保护来制造。脱保护反应可按照公知的方法、例如按照刊行物Protective Groups in Organic Synthesis,JohnWiley and Sons(2007年版)中记载的方法等来进行。
Pro2只要为上述羟基的保护基就没有特别限定，为了从式(5)中的TMS中选择性地进行脱保护，Pro2优选为TMS以外。作为Pro2，例如可以举出叔丁基、MOM基、MEM基、THP基、乙酰基或TBDMS基。
步骤1-3
式(3)所表示的化合物可以通过使式(4)[式(4)中，“Pro1”、“Pro2”与上述含义相同]所表示的化合物与式(11)[式(11)中，“hal1”表示溴或碘]所表示的化合物在碱和钯催化剂的存在下进行偶联来制造。在使式(4)所表示的化合物与式(11)所表示的化合物反应时，关于式(11)所表示的化合物的用量，相对于式(4)所表示的化合物可以使用1/5至20当量，优选为1/2当量至10当量，更优选为1当量至5当量。其中，考虑式(4)所表示的化合物的纯度、收率、精制效率等适宜地设计式(11)所表示的化合物的用量即可。
作为碱，例如可使用碳酸铯、碳酸钠或碳酸钾等，优选碳酸铯。碱的用量相对于作为原料的式(4)所表示的化合物可以使用当量至过量，例如可例示出1当量至10当量，优选为1当量至5当量。
作为钯催化剂，例如可以将四(三苯基膦)钯、四(甲基二苯基膦)钯、二氯双(三苯基膦)钯、二氯双(三邻甲苯基膦)钯、二氯双(三环己基膦)钯、二氯双(三乙基膦)钯、乙酸钯、氯化钯、氯化双(乙腈)钯、双(二亚苄基丙酮)钯、三(二亚苄基丙酮)二钯、氯化双(二苯基膦基二茂铁)钯等市售的催化剂直接加入到反应体系中，也可以添加由乙酸钯、三(二亚苄基丙酮)二钯等与任意的配体另行制造、分离出的催化剂。另外可以通过将乙酸钯、三(二亚苄基丙酮)二钯等与任意的配体混合来制备在反应体系中被认为实际参与反应的催化剂。钯的价数可以为0价、也可以为+2价。特别可以举出氯化双(乙腈)钯作为优选的示例。
作为从任意的配体制备钯催化剂的情况下所使用的配体，可例示出三苯基膦、三(邻甲苯基)膦、三(环己基)膦、三(叔丁基)膦、二环己基苯基膦、1,1’-双(二叔丁基膦基)二茂铁、2-二环己基膦-2’-二甲氨基-1,1’-联苯、2-(二叔丁基膦基)联苯、2-(二环己基膦基)联苯、2,2’-双(二苯基膦基)-1,1’-联萘、4,5-双(二苯基膦)-9,9-二甲基氧杂蒽、三(叔丁基)膦等膦配体。或者还可例示出2-二环己基膦-2’,6’-二甲氧基联苯、2-二环己基膦-2’,4’,6’-三异丙基联苯、1,2,3,4,5-五甲基-1’(二叔丁基膦基)二茂铁)等，可以优选举出2-二环己基-2’,4’,6’-三异丙基联苯。
所使用的钯催化剂的当量数可以为等量、也可以为催化剂量，相对于原料化合物优选为0.01mol％以上，特别是更优选为0.10-50.0mol％。作为反应中使用的溶剂，例如可以举出N,N-二甲基甲酰胺、N,N-二甲基乙酰胺、乙腈、二甲苯、甲苯、1,4-二氧六环或四氢呋喃等，可以举出乙腈作为优选的示例。另外，也可以将这些溶剂2种以上混合使用。关于反应温度，可以在通常-40℃至100℃进行反应，优选为-20℃至60℃。对反应时间没有特别限定，通常可例示出0.5小时至48小时，可以举出1小时至24小时作为优选的示例。
步骤1-4
式(4)所表示的化合物可以通过使式(5)[式(5)中“Pro1”、“Pro2”与上述含义相同]所表示的化合物中的TMS选择性地脱保护来进行制造。脱保护反应可按照公知的方法、例如按照刊行物Protective Groups in Organic Synthesis,John Wiley and Sons(2007年版)中记载的方法等来进行。
具体地说，例如可以通过使式(5)所表示的化合物在有机溶剂中与无机碱作用来制造。作为无机碱，例如可以使用氢氧化钠、氢氧化钾、碳酸铯、碳酸钠或碳酸钾等，优选碳酸钾。碱的用量相对于作为原料的式(5)所表示的化合物可以以当量至过量使用，例如可例示出1当量至10当量，优选1当量至5当量。作为反应中使用的溶剂，可以举出甲醇、乙醇，可以举出甲醇作为优选的示例。关于反应温度，通常可以在-20℃至60℃进行反应，优选0℃至40℃。对反应时间没有特别限定，通常可例示出0.5小时至48小时，可以举出1小时至24小时作为优选的示例。
步骤1-5
式(5)所表示的化合物可以通过使式(6)[式(6)中，“Pro1”、“Pro2”与上述含义相同。式(6)中，“hal2”表示溴或碘]所表示的化合物与式(13)所表示的化合物在无机碱存在下在有机溶剂中进行偶联来制造。可以按照与步骤1-3相同的方法制造，此时，式(13)所表示的化合物的用量相对于式(6)所表示的化合物可以使用1/5至20当量，优选为1/2当量至10当量、更优选为1当量至5当量。
步骤1-6
式(6)所表示的化合物可以通过对式(7)[式(7)中，“Pro1”、“hal2”与上述含义相同]所表示的化合物的羟基进行保护来制造。羟基的保护反应可按照公知的方法、例如按照刊行物Protective Groups in Organic Synthesis,John Wiley and Sons(2007年版)中记载的方法等来进行。作为羟基的保护基，只要为上述的羟基的保护基就没有特别限定，例如可以使用叔丁基、MOM基、MEM基、THP基、乙酰基或TBDMS基等。
步骤1-7
式(7)所表示的化合物可以通过在有机溶剂中使还原剂作用于式(9)所表示的化合物[式(9)中，“Pro1”、“hal2”与上述含义相同]来制造。作为还原剂，例如可以使用硼氢化钠、硼氢化锂、三乙酰氧基硼氢化物、氰基硼氢化物等，优选硼氢化钠。还原剂的用量相对于作为原料的式(9)所表示的化合物可以使用1/4当量至过量，例如可例示出1/4当量至10当量，优选1当量至5当量。作为反应中使用的有机溶剂，可以举出甲醇、乙醇、异丙醇或这些溶剂与四氢呋喃的混合溶剂，可以举出甲醇作为优选的示例。关于反应温度，通常可以在-20℃至60℃进行反应，优选为0℃至40℃。对反应时间没有特别限定，通常可例示出0.5小时至48小时，可以举出1小时至24小时作为优选的示例。
步骤1-8
式(9)所表示的化合物可以通过使式(14)所表示的化合物[式(14)中，“hal2”与上述含义相同]作用于式(10)所表示的化合物[式(10)中，“Pro1”与上述含义相同]来制造。式(14)所表示的化合物的用量相对于作为原料的式(10)所表示的化合物可以使用当量至过量，例如可例示出当量至10当量，优选为1当量至5当量。作为反应中使用的溶剂，可以举出甲醇、乙醇、异丙醇或它们与水的混合溶剂，作为优选的示例可以举出乙醇。关于反应温度，通常可以在0℃至120℃进行反应，优选40℃至100℃。对反应时间没有特别限定，通常可例示出0.5小时至48小时，可以举出1小时至24小时作为优选的示例。
步骤1-9
[化65]
Figure BDA0002552068800000291
式(3)所表示的化合物有时也可按照与步骤1-3相同的方法由式(6)[式(6)中，“Pro1”、“Pro2”、“hal2”与上述含义相同]所表示的化合物与通式(12)所示的化合物来制造。此时，式(12)所表示的化合物的用量相对于式(6)所表示的化合物可以使用1/5至20当量，优选为1/2当量至10当量、更优选为1当量至5当量。
步骤1-10
[化66]
Figure BDA0002552068800000292
式(2)所表示的化合物有时也可按照与步骤1-7相同的方法由式(8)[式(8)中，“Pro1”与上述含义相同]所表示的化合物来制造。
步骤1-11
[化67]
Figure BDA0002552068800000301
式(8)所表示的化合物通过使式(9)[式(9)中，“Pro1”与上述含义相同]所表示的化合物中的“hal2”为碘原子的化合物与式(12)所表示的化合物在碱、铜催化剂以及钯催化剂的存在下进行偶联来制造。在使式(9)所表示的化合物与式(12)所表示的化合物反应时，式(12)所表示的化合物的用量相对于式(9)所表示的化合物可以使用1/5至20当量，优选为1/2当量至10当量、更优选为1当量至5当量，考虑式(8)所表示的化合物的纯度、收率、精制效率等适宜地设计即可。
作为碱，例如可以使用三乙胺、二乙胺、二异丙胺、二异丙基乙胺、吗啉、哌啶、吡啶等，优选二酯胺。碱的用量相对于作为原料的式(9)所表示的化合物可以使用当量至过量，例如可例示出1当量至10当量，优选1当量至5当量。
作为铜催化剂，例如可以举出碘化铜(I)、溴化铜(I)、氯化铜(I)等，优选碘化铜(I)。
所使用的铜催化剂的当量数可以为等量也可以为催化剂量，相对于原料化合物优选为0.01mol％以上，特别优选为0.10-50.0mol％。
作为钯催化剂，例如可以将四(三苯基膦)钯、四(甲基二苯基膦)钯、二氯双(三苯基膦)钯、二氯双(三邻甲苯基膦)钯、二氯双(三环己基膦)钯、二氯双(三乙基膦)钯、乙酸钯、氯化钯、氯化双(乙腈)钯、双(二亚苄基丙酮)钯、三(二亚苄基丙酮)二钯、氯化双(二苯基膦基二茂铁)钯等市售的催化剂直接加入到反应体系中，也可以添加由乙酸钯、三(二亚苄基丙酮)二钯等与任意的配体另行制造、分离出的催化剂。另外可以通过将乙酸钯、三(二亚苄基丙酮)二钯等与任意的配体混合来制备在反应体系中被认为实际参与反应的催化剂。钯的价数可以为0价、也可以为+2价。特别可以举出四(三苯基膦)钯作为优选的示例。在由任意的配体制备钯催化剂的情况下，可以使用与步骤1-3中例示出的配体同样的配体。
所使用的钯催化剂的当量数可以为等量也可以为催化剂量，相对于原料化合物优选为0.01mol％以上、特别是更优选为0.10-50.0mol％。
作为反应中使用的溶剂，例如可以举出N,N-二甲基甲酰胺、N,N-二甲基乙酰胺、乙腈、二甲苯、甲苯、1,4-二氧六环或四氢呋喃等，并且也可以在无溶剂下进行反应。作为优选的示例，可以举出无溶剂。关于反应温度，通常可以在-40℃至100℃进行反应，优选-20℃至60℃。对反应时间没有特别限定，通常可例示出0.5小时至48小时，可以举出1小时至24小时作为优选的示例。
步骤1-12
[化68]
Figure BDA0002552068800000311
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式(8)所表示的化合物有时也可以按照与步骤1-8相同的方法由式(10)[式(10)中，“Pro1”与上述含义相同]所表示的化合物与式(15)所表示的化合物来制造。
[化69]
Figure BDA0002552068800000312
步骤2-1
式(10)所表示的化合物可以通过在有机溶剂中使碱作用于式(A1)[式(A1)中，“Pro1”与上述含义相同]所表示的化合物来制造。作为碱，例如可以使用氢氧化钠、氢氧化钾、碳酸铯、碳酸钠、碳酸氢钠或碳酸钾等，优选碳酸氢钠。碱的用量相对于作为原料的式(10)所表示的化合物可以使用当量至过量，例如可例示出1当量至20当量，优选为1当量至10当量。作为添加剂可以使用碘化钠，其用量相对于作为原料的式(10)所表示的化合物可以使用当量至过量，例如可例示出1当量至10当量，优选1当量至5当量。作为反应中使用的有机溶剂，可以举出N,N-二甲基甲酰胺、N,N-二甲基乙酰胺、乙腈、甲苯、四氢呋喃、1,4-二氧六环、二乙醚或它们的混合溶剂，可以举出乙腈作为优选的示例。关于反应温度，通常可以在0℃至100℃进行反应，优选20℃至60℃。对反应时间没有特别限定，通常可例示出0.5小时至48小时，可以举出1小时至24小时作为优选的示例。
步骤2-2
式(A1)所表示的化合物可以通过将式(A2)[式(A2)中，“Pro1”与上述含义相同]所表示的化合物中的保护基脱保护来制造。脱保护反应可按照公知的方法、例如按照刊行物Protective Groups in Organic Synthesis,John Wiley and Sons(2007年版)中记载的方法等来进行。
步骤2-3
式(A2)所表示的化合物可以通过在碱的存在下使氯硫代甲酸(2-氯乙基)酯等氯硫代甲酸酯作用于式(A3)[式(A3)中，“Pro1”与上述含义相同]所表示的化合物来制造。所使用的氯硫代甲酸酯相对于作为原料的式(A2)所表示的化合物可以使用当量至过量，例如可例示出1当量至5当量，优选1当量至2当量。作为所使用的碱，例如可以使用碳酸钠、碳酸钾、碳酸氢钠、碳酸铯、氢氧化钠、二异丙基乙胺或三乙胺等，优选碳酸氢钠。作为反应中使用的溶剂，可以举出二氯甲烷、甲苯、四氢呋喃、1,4-二氧六环、乙腈等，优选二氯甲烷。关于反应温度，可以在0℃至100℃进行反应，优选10℃至30℃。对反应时间没有特别限定，通常可例示出1小时至24小时，可以举出2小时至4小时作为优选的示例。
步骤2-4
式(A3)所表示的化合物可以在碱的存在下使叔丁氧基羰基肼作用于式(A4)[式(A4)中，“Pro1”与上述含义相同]所表示的化合物来制造。作为所使用的碱，例如可以使用碳酸钠、碳酸钾、碳酸氢钠、碳酸铯、氢氧化钠、二异丙基乙胺或三乙胺等，优选碳酸氢钠。碱的用量相对于作为原料的式(A4)所表示的化合物可例示出1当量至20当量，优选3当量至5当量。作为添加剂，可以使用碘化钠等。作为反应中使用的溶剂，可以使用乙腈、丙腈、N,N-二甲基甲酰胺、二甲基亚砜或N-甲基吡咯烷酮等，可以举出乙腈作为优选的示例。关于反应温度，通常可以在室温至150℃进行反应，优选70℃至100℃。对反应时间没有特别限定，可例示出3小时至36小时，可以举出6小时至18小时作为优选的示例。
步骤2-5
式(A4)所表示的化合物可以通过将式(A5)[式(A5)中，“Pro1”与上述含义相同]所表示的化合物的羟基取代为溴来制造。向溴的取代反应例如可以在三苯基膦等的存在下与四溴化碳或N-溴琥珀酰亚胺等发生作用来进行。三苯基膦的用量相对于作为原料的式(A5)所表示的化合物可例示出1当量至5当量，优选1当量至2当量。另外，四溴化碳等的用量相对于作为原料的式(A5)所表示的化合物可例示出1当量至5当量，优选1当量至2当量。作为反应中使用的溶剂，可以举出二氯甲烷、甲苯、四氢呋喃、1,4-二氧六环或乙腈等，优选二氯甲烷。关于反应温度，通常可以在-20℃至40℃进行反应，优选-10℃至10℃。对反应时间没有特别限定，通常可例示出3小时至36小时，可以举出12小时至20小时作为优选的示例。
步骤2-6
式(A5)所表示的化合物可以通过将式(A6)所表示的化合物的羟基的保护基脱保护来制造。脱保护可按照公知的方法、例如按照刊行物Protective Groups in OrganicSynthesis,John Wiley and Sons(2007年版)中记载的方法等来进行。
步骤2-6
式(A5)所表示的化合物可以通过将式(A6)所表示的化合物的羧酸转换成酯、并且将羟基的保护基脱保护来制造。反应可以在酸的存在下在醇溶剂中进行。作为反应中使用的酸，可以举出硫酸、氯化氢、甲磺酸、对甲苯磺酸或三氟乙酸等，可以优选举出硫酸。作为溶剂，可以使用甲醇或乙醇等，可以举出甲醇作为优选的示例。关于反应温度，通常可以在室温至140℃进行反应，优选50℃至80℃。对反应时间没有特别限定，通常可例示出2小时至24小时，可以举出8小时至16小时作为优选的示例。
步骤2-7
式(A6)所表示的化合物可以在使强碱作用于式(A7)所表示的化合物后使二氧化碳等与其反应来制造。作为强碱，可以使用二异丙基氨基锂或六甲基二硅氮锂等氨基锂等，另外，R1为氢的情况下，还可以使用正丁基锂、仲丁基锂或正丙基锂等低级烷基锂，优选使用二异丙基氨基锂。强碱的用量相对于作为原料的式(A7)所表示的化合物可例示出1当量至3当量，优选1当量至2当量。作为反应中使用的溶剂，可以举出四氢呋喃、二乙醚、1,4-二氧六环等，优选四氢呋喃。关于与强碱的反应温度，通常可以在-100℃至-20℃进行反应，优选-80℃至-60℃。接下来的与二氧化碳等的反应通常可以在-40℃至40℃进行，优选-20℃至10℃。对于与强碱的反应时间没有特别限定，通常可例示出0.2小时至3小时，可以举0.5小时至1小时作为优选的示例出。对于与二氧化碳等的反应时间没有特别限定，通常可例示出0.5小时至24小时，可以举出0.75小时至2小时作为优选的示例。
步骤2-8
式(A7)所表示的化合物可以通过将式(A8)所表示的化合物的羟基利用TBDMS保护来制造。羟基的保护可以使用与步骤1-6相同的方法来进行。
需要说明的是，式(A8)中的R1为H的化合物为市售的化合物(2-(噻吩-2-基)乙醇：东京化成公司制造)。因此，式(A8)中的R1为H的情况下，不需要以下的步骤。
步骤2-9
式(A8)所表示的化合物可以通过将式(A9)[式(A9)中，“Pro3”表示式(A8)中的羧基的保护基]所表示的化合物的酯基还原来制造。即，作为Pro3，例如可以使用碳原子数1～4个的烷基。
作为还原剂，可以使用例如氢化锂铝、氢化二异丁基铝、三乙基硼氢化锂等，优选氢化锂铝。关于还原剂的用量，可例示出相对于作为原料的式(A9)所表示的化合物以例如0.5摩尔当量至5摩尔当量使用，优选为1摩尔当量至2摩尔当量。
作为反应中使用的溶剂，可以举出四氢呋喃、二乙醚、甲苯或它们的混合溶剂，可以举出四氢呋喃或二乙醚作为优选的示例。关于反应温度，通常可以在-10℃至20℃进行反应，优选-5℃至5℃。对反应时间没有特别限定，通常可例示出0.08小时至0.5小时，可以举出0.15小时至0.3小时作为优选的示例。
步骤2-10
式(A9)所表示的化合物可以通过将式(A10)所表示的化合物在例如酸的存在下在醇中进行加溶剂分解来制造。作为酸，可以使用硫酸、甲磺酸或氯化氢等，优选硫酸。硫酸的用量可例示出相对于作为原料的式(A10)所表示的化合物为0.0001摩尔当量至0.005摩尔当量，优选为0.0002摩尔当量至0.001摩尔当量。关于作为溶剂使用的醇，例如可以使用乙醇、甲醇、正丙醇、正丁醇、异丁醇等。对反应时间没有特别限定，通常可例示出6小时至48小时，可以举出16小时至24小时作为优选的示例。
步骤2-11
式(A10)所表示的化合物可以通过使氢氰酸盐作用于式(A11)所表示的化合物来制造。作为氢氰酸盐，例如可以使用氰化钠、氰化钾等。氢氰酸盐的用量可例示出相对于作为原料的式(A10)所表示的化合物为1当量至5当量，优选为1当量至2当量。作为反应中使用的溶剂，可以使用四氢呋喃、乙腈、二甲基亚砜、N,N-二甲基乙酰胺或N,N-二甲基甲酰胺等，可以举出乙腈与二甲基亚砜的混合溶剂作为优选的示例。关于反应温度，通常可以在0℃至60℃进行反应，优选10℃至40℃。对反应时间没有特别限定，可例示出0.5小时至20小时，可以举出2小时至6小时作为优选的示例。
步骤2-12
式(A11)所表示的化合物可以通过将式(A12)所表示的化合物的羟基转换成溴来制造。向溴的转换与步骤2-5同样地进行即可。
步骤2-13
式(A12)所表示的化合物可以通过式(A13)所表示的市售的化合物的羧基还原成羟基来制造。作为还原剂，可以使用例如硼烷-二甲基硫醚、硼烷-四氢呋喃等，优选硼烷-四氢呋喃。还原剂的用量可例示出相对于作为原料的式(A13)所表示的化合物为1摩尔当量至5摩尔当量，优选为1摩尔当量至2摩尔当量。
作为反应中使用的溶剂，可以使用四氢呋喃、二乙醚等，可以举出四氢呋喃作为优选的示例。关于反应温度，通常可以在0℃至60℃进行反应，优选10℃至40℃。对反应时间没有特别限定，可例示出4小时至24小时，可以举出10小时至18小时作为优选的示例。
需要说明的是，作为式(A13)所表示的市售的化合物，例如可例示出3-氯噻吩-2-羧酸或3-溴噻吩-2-羧酸等，例如可以从SIGMA-ALDRICH公司购入。
步骤3-1
[化70]
Figure BDA0002552068800000361
式(15)所表示的化合物可以通过在有机溶剂中使乙烯基化试剂作用于式(W1)所表示的化合物来制造。作为乙烯基化试剂，例如可以使用乙烯基溴化镁、乙烯基氯化镁或乙烯基锂等，优选乙烯基溴化镁或乙烯基氯化镁。乙烯基溴化镁和乙烯基氯化镁可以以四氢呋喃、二乙醚或甲苯溶液的形式使用，优选为四氢呋喃溶液。乙烯基化试剂的用量相对于作为原料的式(W1)所表示的化合物可以使用当量至过量，例如可例示出1当量至10当量，优选1当量至5当量。作为反应中使用的溶剂，可以举出甲苯、四氢呋喃、1,4-二氧六环、二乙醚、1,2-二甲氧基乙烷或它们的混合溶剂，可以举出四氢呋喃或1,2-二甲氧基乙烷作为优选的示例。关于反应温度，通常可以在-78℃至0℃进行反应，优选-50℃至0℃。对反应时间没有特别限定，通常可例示出0.5小时至24小时，可以举出1小时至12小时作为优选的示例。
步骤3-2
[化71]
Figure BDA0002552068800000362
式(W1)所表示的化合物可以按照与步骤1-3相同的方法由式(W2)[式(W2)中，“hal2”与上述含义相同]所表示的化合物和式(12)所表示的化合物来制造。此时，式(12)所表示的化合物的用量相对于式(W2)所表示的化合物可以使用1/5至20当量，优选1/2当量至10当量、更优选1当量至5当量。
步骤3-3
[化72]
Figure BDA0002552068800000363
式(W2)所表示的化合物可以通过在有机溶剂中使N,O-二甲基羟胺盐酸盐在碱和脱水缩合剂的存在下与式(W3)[式(W3)中，“hal2”与上述含义相同]所表示的化合物反应来制造。使式(W3)所表示的化合物与N,O-二甲基羟胺盐酸盐反应时，N,O-二甲基羟胺盐酸盐的用量相对于式(W3)所表示的化合物可以使用当量至过量，例如可例示出1当量至10当量，优选1当量至5当量，考虑式(W3)所表示的化合物的纯度、收率、精制效率等适宜地设计即可。
作为碱，例如可以使用三乙胺、二异丙基乙胺、1,4-二氮杂双环[2,2,2]辛烷或N,N-二甲基-4-氨基吡啶等，优选二异丙基乙胺。关于碱的用量，相对于作为原料的式(W3)所表示的化合物的当量与N,O-二甲基羟胺盐酸盐的当量之和可以使用当量至过量，例如可例示出1当量至10当量，优选1当量至5当量。
作为脱水缩合剂，可以使用N,N’-二环己基碳化二亚胺、1-乙基-3-(3-二甲氨基丙基)碳化二亚胺、N,N’-二异丙基碳化二亚胺、N-环己基-N’-(2-吗啉代乙基)碳化二亚胺对甲苯磺酸盐、N,N’-羰基二咪唑、4-(4,6-二甲氧基-1,3,5-三嗪-2-基)-4-甲基吗啉鎓氯化物、1H-苯并三唑-1-基氧基-三(二甲基鏻)六氟磷酸盐、1H-苯并三唑-1-基氧基-三吡咯烷基鏻六氟磷酸盐、O-(苯并三唑-1-基)-N,N,N’,N’-四甲基脲六氟磷酸盐、O-(7-氮杂苯并三唑-1-基)-N,N,N’,N’-四甲基脲六氟磷酸盐等，优选1-乙基-3-(3-二甲氨基丙基)碳化二亚胺。脱水缩合剂的用量相对于作为原料的式(W3)所表示的化合物的当量可以使用当量至过量，例如可例示出1当量至10当量，优选1当量至5当量。
作为活性化剂可以添加N,N-二甲基-4-氨基吡啶等。活性化剂的用量相对于作为原料的式(W3)所表示的化合物的当量可以使用催化剂量至过量，例如可例示出0.01当量至5当量，优选0.1当量至1当量。
作为反应中使用的溶剂，例如可以举出N,N-二甲基甲酰胺、N,N-二甲基乙酰胺、乙腈、二甲苯、甲苯、1,4-二氧六环、二氯甲烷、氯仿、1,2-二氯乙烷或四氢呋喃等，可以举出二氯甲烷作为优选的示例。另外，也可以将这些溶剂2种以上混合使用。关于反应温度，通常可以在0℃至100℃进行反应，优选20℃至60℃。对反应时间没有特别限定，通常可例示出0.5小时至48小时，可以举出1小时至24小时作为优选的示例。
步骤3-4
[化73]
Figure BDA0002552068800000381
式(14)所表示的化合物可以按照与步骤3-1相同的方法由式(W2)[式(W2)中，“hal2”与上述含义相同]所表示的化合物来制造。
[化74]
Figure BDA0002552068800000382
步骤3-5
式(W3)所表示的化合物可以通过将式(W4)[式(W4)中，“hal2”与上述含义相同]所表示的化合物在稀硫酸中加热来制造。反应中使用的稀硫酸可以将浓硫酸或稀硫酸适宜地稀释来使用，其浓度可例示出例如0.1摩尔/升至15摩尔/升，优选1摩尔/升至10摩尔/升。稀硫酸的用量相对于式(W4)所表示的化合物可以使用过量，考虑收率、精制效率等适宜地设计即可。关于反应温度，通常可以在20℃至100℃进行反应，优选60℃至100℃。对反应时间没有特别限定，通常可例示出0.5小时至48小时，可以举出1小时至24小时作为优选的示例。
另外，式(W3)所表示的化合物中，3-溴苯基乙酸、3-碘苯乙酸、3-溴-4-氟苯基乙酸为市售的化合物，可由东京化成公司获得。2-(4-溴噻吩-2-基)-乙酸为市售的化合物，可由APOLLO公司获得。
步骤3-6
式(W4)所表示的化合物可以通过使氰化合物作用于式(W5)[式(W5)中，“hal2”与上述含义相同]所表示的化合物来制造。作为氰化合物，可以使用氰化钠、氰化钾、氰化铜等，优选氰化钠、氰化钾。氰化合物的用量相对于作为原料的式(W5)所表示的化合物可以使用当量至过量，例如可例示出1当量至10当量，优选1当量至5当量。作为反应中使用的溶剂，例如可以举出甲醇、乙醇、异丙醇、水或它们的混合溶剂等，可以举出乙醇和水以2比1的比例混合的混合溶剂作为优选的示例。关于反应温度，通常可以在0℃至100℃进行反应，优选20℃至100℃。对反应时间没有特别限定，通常可例示出0.5小时至24小时，可以举出1小时至12小时作为优选的示例。
步骤3-7
式(W5)所表示的化合物可以通过式(W6)[式(W6)中，“hal2”与上述含义相同]所表示的化合物溴化来制造。作为溴化剂，可以举出N-溴代丁二酰亚胺、1,3-二溴-5,5-二甲基乙内酰脲，优选N-溴代丁二酰亚胺。溴化剂的用量相对于作为原料的式(W6)所表示的化合物可以使用当量至过量，例如可例示出1当量至10当量，优选1当量至5当量。作为与溴化剂同时添加的活性化剂，可以举出过氧化苯甲酰、叔丁基过氧化氢、偶氮二异丁腈，优选过氧化苯甲酰。活性化剂的用量相对于作为原料的式(W6)所表示的化合物的当量可以使用催化剂量至过量，例如可例示出0.01当量至2当量，优选0.05当量至1当量。作为反应中使用的溶剂，例如可以举出四氯化碳、氯仿、1,2-二氯乙烷、或它们的混合溶剂等，可以举出四氯化碳作为优选的示例。关于反应温度，通常可以在20℃至90℃进行反应，优选60℃至90℃。对反应时间没有特别限定，通常可例示出0.5小时至24小时，可以举出1小时至12小时作为优选的示例。
需要说明的是，作为式(W6)所表示的化合物，可例示出2-溴-1,4-二甲基苯或1-溴-3,5-二甲基苯等，它们可以作为市售的化合物从例如东京化成公司购入。
步骤3-8
[化75]
Figure BDA0002552068800000391
式(12)所表示的化合物可以通过使α-重氮膦酸酯化合物与无机碱一起作用于式(W7)所表示的化合物来制造。作为α-重氮膦酸酯化合物与无机碱的组合，例如可以举出(重氮甲基)膦酸二甲酯与叔丁醇钾、(重氮甲基)膦酸二甲酯与叔丁醇钠、(1-重氮-2-氧代丙基)膦酸二甲酯与碳酸钾、或者(1-重氮-2-氧代丙基)膦酸二甲酯与碳酸钠，优选(1-重氮-2-氧代丙基)膦酸二甲酯与碳酸钾。α-重氮膦酸酯的用量相对于作为原料的式(W7)所表示的化合物可以使用当量至过量，例如可例示出1当量至10当量，优选1当量至5当量。无机碱的用量相对于所使用的α-重氮膦酸酯可以使用当量至过量，例如可例示出1当量至5当量，优选1当量至3当量。作为反应中使用的溶剂，例如可以举出甲醇、乙醇、异丙醇、叔丁醇或它们的混合溶剂等，可以举出甲醇作为优选的示例。关于反应温度，通常可以在-20℃至80℃进行反应，优选0℃至60℃。对反应时间没有特别限定，通常可例示出0.5小时至24小时，可以举出1小时至12小时作为优选的示例。
另外，式(12)所表示的化合物中，3-乙炔基噻吩、2-乙炔基噻吩为市售的化合物，可由东京化成公司获得。
步骤3-9
式(W7)所表示的化合物之中，4-苯基噻吩-3-羧醛可以通过在碱和钯催化剂的存在下在溶剂中使4-甲酰基噻吩-3-硼酸和溴苯反应来制造。
作为钯催化剂的示例，可以将四(三苯基膦)钯、四(甲基二苯基膦)钯、二氯双(三苯基膦)钯、二氯双(三邻甲苯基膦)钯、二氯双(三环己基膦)钯、二氯双(三乙基膦)钯、乙酸钯、氯化钯、氯化双(乙腈)钯、双(二亚苄基丙酮)钯、三(二亚苄基丙酮)二钯、氯化双(二苯基膦基二茂铁)钯等市售的催化剂直接加入到反应体系中，也可以添加由乙酸钯、三(二亚苄基丙酮)二钯等与任意的配体另行制造、分离出的催化剂。另外可以通过将乙酸钯、三(二亚苄基丙酮)二钯等与任意的配体混合来制备在反应体系中被认为实际参与反应的催化剂。钯的价数可以为0价、也可以为+2价。特别可以举出三(二亚苄基丙酮)二钯(0)、乙酸钯(II)等作为优选的示例。
作为从任意的配体制备钯催化剂的情况下所使用的配体，可例示出三呋喃基膦、三(邻甲苯基)膦、三(环己基)膦、三(叔丁基)膦、二环己基苯基膦、1,1’-双(二叔丁基膦基)二茂铁、2-二环己基膦-2’-二甲氨基-1,1’-联苯、2-(二叔丁基膦基)联苯、2-(二环己基膦基)联苯、2,2’-双(二苯基膦基)-1,1’-联萘、4,5-双(二苯基膦)-9,9-二甲基氧杂蒽、三(叔丁基)膦、2-二环己基膦-2’,6’-二甲氧基联苯、2-二环己基-2’-4’-6’-三异丙基联苯、1,2,3,4,5-五甲基-1’-(二叔丁基膦基)二茂铁)等膦配体，可以优选举出2-二环己基膦-2’,6’-二甲氧基联苯等。
所使用的钯催化剂的当量数可以为等量也可以为催化剂量，相对于原料化合物优选为0.01mol％以上，特别是更优选为0.10-50.0mol％。作为碱，例如可以举出叔丁醇钠、碳酸铯、磷酸钾等，可以优选举出磷酸钾。所使用的碱的当量数可以为等量、也可以为过量，例如可例示出1当量至5当量，优选1当量至3当量。作为反应中使用的溶剂，例如可以举出四氢呋喃、1,4-二氧六环、1,2-二甲氧基乙烷等醚系溶剂、甲苯、N,N-二甲基甲酰胺、N,N-二甲基乙酰胺、正丁醇、水、或它们的混合溶剂等，可以举出正丁醇和水以5比1混合的混合溶剂作为优选的示例。关于反应温度，通常可以在-20℃至120℃进行反应，优选0℃至100℃。对反应时间没有特别限定，通常可例示出0.5小时至48小时，可以举出1小时至24小时作为优选的示例。
本发明的化合物的制造方法并不限于此处所记载的方法。例如，本发明的化合物可以通过将通常的化学文献等中所述的反应一个或多个组合而对于作为其前体的化合物的取代基进行修饰/转换来制造。
本发明的化合物中，作为包含不对称碳原子的化合物的制造法的示例，可以举出基于不对称还原的制造方法、使用预先使与不对称碳原子相应的部分为光学活性的市售的(或者可利用公知的方法制备或基于公知的方法制备的)原料化合物的方法等。另外还存在将本发明的化合物或其前体利用常规方法以光学活性异构体的形式进行分离的方法。作为该方法，例如存在下述方法：基于使用光学活性柱的高效液相色谱(HPLC)的方法；形成光学活性试剂和盐并使用拆分结晶等进行分离后解除该盐的形成的古典光学拆分结晶法；或者对于与光学活性试剂缩合而生成的非对映异构体进行分离精制后再次进行分解的方法；等等。分离前体制成光学活性体的情况下，其后实施前面所示的制造法，由此可以制造出光学活性的本发明的化合物。
本发明的化合物中，在化合物中包含羧基、酚羟基或四唑环等酸性官能团的情况下，也可以通过公知的手段制成可药用盐(例如与钠等的无机盐或者与三乙胺等的有机盐)。例如，在得到无机盐的情况下，优选将本发明的化合物溶解在含有与所期望的无机盐相应的至少1当量的氢氧化物、碳酸盐、碳酸氢盐等的水中。该反应中，可以混合甲醇、乙醇、丙酮或二氧六环等水混合性的惰性有机溶剂。例如，通过使用氢氧化钠、碳酸钠或碳酸氢钠而得到钠盐的溶液。
另外，本发明的化合物中，还可以通过公知的手段与化合物中包含的氨基、或者除此以外与包含碱性官能团的情况下的碱性官能团、或者与包含其自身具有碱性性质的芳香环(例如吡啶环等)的情况下的芳香环形成可药用盐(例如与盐酸等无机酸的盐、或者与乙酸等有机酸的盐)。例如，在得到与无机酸的盐的情况下，优选将本发明的化合物溶解在含有至少1当量所期望的无机酸的水溶液中。该反应中还可以混合甲醇、乙醇、丙酮或二氧六环等水混合性的惰性有机溶剂。例如，通过使用盐酸，得到盐酸盐的溶液。
在期望为固形盐的情况下，可以对该溶液进行蒸发，或进一步加入正丁醇、乙基甲基酮等有一定程度极性的水混和性有机溶剂，得到其固体盐。
本发明中所述的各种化合物可以通过公知的方法、例如通过各种色谱法(色谱柱、快速色谱柱、薄层、高效液相)进行精制。
本发明的化合物的某一方式具有EP4激动活性，可以作为EP4激动剂使用。即，本发明的化合物的某一方式可以作为用于预防和/或治疗EP4受体激动相关疾病的药物使用。关于EP4受体激动相关疾病，若详细说明，则EP4受体激动相关疾病为通过EP4受体激动而起到功效的疾病，更具体地说，只要为可通过升高成骨细胞内cAMP产生量而进行预防和/或治疗的疾病就没有特别限定。
EP4激动活性例如可通过以下所示的方法测定。即，可以举出对人EP4受体表达细胞中的cAMP产生亢进进行确认的方法。另外，作为其他方式，可以举出在大鼠骨髓细胞中在环加氧酶-2(COX-2)抑制剂的存在下确认由cAMP产生亢进所致的骨形成促进作用的方法。此外，作为其他方式，可以举出对人EP4受体的结合活性进行确认的方法。作为确认由cAMP产生亢进所致的骨形成促进作用的方法，具体地说，可例示出下述试验例1中记载的方法。
作为可通过试验例1中记载的方法确认的EP4激动活性，可例示出10nM以下，优选1nM以下、更优选0.6nM以下、进一步优选0.3nM以下、特别优选0.1nM以下、最优选0.05nM以下。
本发明的化合物的某一方式中显示出对EP4的高特异性(选择性)。对EP4的选择性例如可如下进行评价：从人EP1、EP2以及EP3受体中适宜地选择，使用表达各受体的细胞进行激动剂活性测定和受体结合试验，计算出IC50值(本发明的化合物将[3H]PGE2与受体的结合抑制50％的浓度)或Ki值的比例，由此进行评价。具体地说，可例示出试验例2中记载的方法。
IC50值的比例(倍)＝针对各受体的IC50/针对EP4的IC50
Ki值的比例(倍)＝针对各受体的解离常数Ki/针对EP4的解离常数Ki
从避免副作用的观点出发，本发明的化合物的某一方式优选针对EP4显示出高选择性。例如可例示出IC50值或Ki值的比例为10倍以上、优选为100倍以上、更优选为1000倍以上、进一步优选为3000倍以上、特别优选为10000倍以上。
本发明的化合物的某一方式中，还优选选择性地作用或结合于EP4受体，不作用或结合于EP1受体、EP2受体以及EP3受体、DP受体、FP受体、IP受体、TP受体、PPARα受体、PPARδ受体、PPARγ受体、S1P受体(例如S1P1受体、S1P2受体、S1P3受体等)、LTB4受体(例如BLT1、BLT2等)、LPA受体(例如LPA1受体、LPA2受体、LPA3受体等)或大麻素受体(例如CB1受体、CB2受体等)、或者针对这些受体的作用或结合弱于针对EP4受体的作用或结合。
EP4受体激动相关疾病只要为通过EP4受体激动而起到功效的疾病就没有特别限定，具体地说，可例示出例如骨折或骨缺损。
本发明的化合物的某一方式中，如后述的试验例所示，具有骨形成促进作用，作为药物的有效成分是有用的。特别是本发明的化合物的某一方式用于骨折或骨缺损的治疗和/或治愈促进，优选用于骨折的治疗和/或治愈促进。作为其他方式，优选用于骨缺损的治疗和/或治愈促进。
本发明的药物的某一方式对于骨折或骨缺损的治疗和/或治愈促进有用这一点可通过例如闭合骨折模型、或者长管骨的部分/大部分缺损模型来确认。具体地说，可例示出试验例5中记载的方法。
本发明的药物的某一方式中，可期待显示出全身性骨密度增加和骨强度增加作用、或者显示出局部性促进骨诱导/骨再生的作用。本发明的化合物的某一方式所具有的骨形成促进作用例如可以使用从大鼠等实验动物或人采集并培养的骨髓细胞并以所形成的钙化骨样结节数或作为成骨细胞的分化标记物的碱性磷酸酶活性等作为指标来进行评价。另外，可以使用疾病模型动物、例如使用实施了坐骨神经切除和卵巢摘除术的骨量减少症模型大鼠等，以四肢骨的骨密度或骨强度等为指标来进行评价。另外，也可以利用大鼠的长管骨闭合骨折模型或基于侵入性手术的截骨模型、或者以任意的范围制作了骨缺损的模型等并以骨形成、骨愈合率、修复骨的骨强度等为指标来进行评价。
骨折是指骨受到外力而部分地或完全地断开或变形的状态。只要为骨组织受到损伤的患者，对部位就没有特别限定，例如为颜面骨(眼眶骨、颧骨、下颚骨)、躯干骨(肋骨、骨盆骨、颈椎、胸椎、腰椎、骶骨、尾骨)、上肢骨(肩胛骨、锁骨、臂骨、肘、桡骨、尺骨、舟骨、钩骨、掌骨、指骨)、下肢骨(髋关节、股骨、胫骨、腓骨、足关节、跟骨、舟骨、跖骨)等，作为对象的骨中，任何部位均可应用。另外，骨组织的损伤的形态没有特别限定，也包括骨折(完全骨折、不完全骨折、单纯骨折、粉碎骨折等)，并且还包括作为外科治疗手段之一的适应性截骨术或骨延长手术中的有意切断的骨的愈合促进。另外，以骨质疏松症作为原因疾病的股骨颈部骨折、脊椎椎体压迫骨折、桡骨远位端骨折、臂骨近位端骨折等也包括在上述骨折的范围内。
骨缺损是指骨肿瘤、骨髓炎、外伤、慢性关节疾病、骨折后的迁延治愈或人工关节松懈等各种骨疾病本身、或者在其治疗中通过以外科方式切除病变部而使骨产生缺损的状态。只要是不得已患有骨缺损的患者，对部位就没有特别限定，例如为颜面骨(眼眶骨、颧骨、下颚骨)、躯干骨(肋骨、骨盆骨、颈椎、胸椎、腰椎、骶骨、尾骨)、上肢骨(肩胛骨、锁骨、臂骨、肘、桡骨、尺骨、舟骨、钩骨、掌骨、指骨)、下肢骨(髋关节、股骨、胫骨、腓骨、足关节、跟骨、舟骨、跖骨)等，作为对象的骨中，任何部位均可应用。另外，骨缺损的形态没有特别限定，也包括例如骨的中间部分大范围缺损的状态或者由于粉碎骨折等而使骨部分缺损的状态等任何骨缺损的形态。
本发明的药物的某一方式可以作为外科治疗行为时的骨愈合促进剂使用。例如可适用于作为医疗行为例示的脊椎(颈椎·胸椎·腰椎)固定术、改性侧弯症手术、关节置换术、脊柱管扩大术、截骨术、骨延长术、头盖骨缺损填补术、头盖形成术、利用骨性支持的髂骨空间固定术、异种骨移植术、同种骨移植术、自体骨移植术或骨移植代替疗法，以及原发性恶性肿瘤或骨转移灶的外科摘除后的骨修复术和/或骨重建术等。
本发明的药物的某一方式优选用作骨形成促进药。另外，本发明的药物的某一方式更优选用于骨折或骨缺损的治疗和/或治愈促进。此外，本发明的药物的某一方式非常优选用于骨折的预防和/或治疗。需要说明的是，本领域技术人员可以容易地理解，本发明中的用于预防和/或治疗的药物范围包括根据情况用于阻止或抑制病情发展的药物。
本发明的药物的某一方式可以以包含式(1)所表示的化合物或其可药用盐作为有效成分的药物的形式来制备，例如以前药形式给药的化合物或其可药用盐在生物体内经代谢生成式(1)所表示的化合物或其可药用盐的情况也包含在本发明的药物的范围中。
本发明的药物的某一方式的给药途径没有特别限定，例如可以从经口给药、皮下给药、皮内给药、肌肉注射、静脉内给药、经鼻给药、经阴道给药、经直肠内给药或者患部局部给药等中适宜地选择。患部局部给药是优选的给药途径之一。
作为本发明的药物，可以直接使用式(1)所表示的化合物或其可药用盐，优选向式(1)所表示的化合物或其可药用盐中添加1种或2种以上的可药用载体来制备药物组合物进行给药。另外，作为本发明的药物的有效成分，可以使用式(1)所表示的化合物或其可药用盐的水合物或溶剂化物。
作为用于上述药物组合物的制剂化的剂型，可以举出片剂、散剂、颗粒剂、糖浆剂、悬浮剂、胶囊剂、吸入剂或注射剂等，为了制造这些剂型，可使用适于这些制剂的各种载体。例如，作为口服剂的载体，可以举出赋形剂、粘合剂、滑润剂、流动性促进剂或着色剂。作为吸入剂，可以举出直接吸入药物组合物的粉末或者药物组合物溶解或悬浮在溶剂中而成的试剂，或者使用被称为雾化器或喷雾吸入器的喷雾器制成雾状进行吸入的方法等。另外，在制成注射剂等的情况下，作为稀释剂通常可以使用注射用蒸馏水、生理盐水、葡萄糖水溶液、注射用植物油、丙二醇或聚乙二醇等。此外，根据需要，可以加入杀菌剂、防腐剂、稳定剂、等张剂或无痛化剂等。也可以将本发明的化合物包合于环糊精中制备成包合物来作为本发明的药物。
在给予本发明的药物的某一方式时，适宜地选择适当的剂型，以适当的路径进行给药即可。例如可以以片剂、散剂、颗粒剂、糖浆剂、悬浮剂或胶囊剂等形式口服给药。另外，可以以吸入剂的形式进行气管给药。另外可以以包括点滴的注射剂的形式进行皮下、血管、肌肉或腹腔给药。另外，可以以舌下片剂或栓剂等形式粘膜给药，可以以凝胶剂、洗剂、软膏剂、乳膏剂或喷雾剂等形式透皮给药。另外，还可以制成持续型制剂例如缓释型注射剂或制成植入制剂(例如膜制剂等)进行给药。
将本发明的药物的某一方式局部给药的情况下，可以对骨折部位等局部直接给药。这样的情况下，可以将化合物与适当的非亲水性溶剂一起直接注射到局部，或者将化合物混配在生物体内分解性高分子聚合物等适当的载体中，制成调整为棒状、针状、球状、膜状等的状态的药物；或者制成软膏、乳膏或凝胶状形态的药物；以及制成缓释性制剂的形态的药物，包埋或注入到骨折部位等局部来使用。作为生物体内分解性高分子聚合物，例如可以举出脂肪酸聚酯(α-羟基羧酸类、羟基二羧酸类、乳酸己内酯、戊内酯等的1种以上的聚合物或共聚物、或者这些的混合物)或其衍生物(聚乳酸、聚乙醇酸和聚乙二醇的嵌段聚合物等)、聚-α-氰基丙烯酸酯、聚-β-羟基丁酸、聚草酸乙烯酯、聚原酸酯、聚原碳酸酯、聚碳酸酯类、聚氨基酸类、透明质酸酯类、聚苯乙烯、聚甲基丙烯酸、丙烯酸与甲基丙烯酸的共聚物、聚氨基酸、癸炔硬脂酸酯、乙基纤维素、乙酰纤维素、硝酸纤维素、马来酸酐系共聚物、乙烯基乙酸乙烯酯系共聚物、聚乙酸乙烯酯、聚丙烯酰胺、胶原、明胶、纤维素、骨粉或骨粘固粉等。
生物体内分解性高分子聚合物可以是1种，也可以是2种以上的共聚物或复合体或简单的混合物，聚合的形式可以是无规、嵌段、接枝的任意形式。
另外，还可以将本发明的药物的某一方式与适当的溶剂或适当的载体一起涂布或吸附至由生物体适应性优异的材料(金属、钙、陶瓷、高分子材料等)构成的人工骨(植入)或骨填充材料(羟基磷灰石、β-磷酸三钙等)等，或者包埋于其中，由此进行局部给药。
对本发明的药物的某一方式的给药期间没有特别限定，以在判断出疾病表现出临床症状的期间进行给药为原则，通常持续给药几周到一年。可以根据病情进一步延长给药时间，或者还可以在临床症状恢复后进一步继续给药。另外，即使在没有表现出临床症状的状态下，也可根据临床医生的判断进行预防性给药。对本发明的药物的某一方式的给药量没有特别限定，例如将本发明的药物对于骨折部位等局部直接给药的情况下，通常成人可以每次给予0.01～1000μg的有效成分。这种情况下的给药频率可以是6个月1次到每日给药，优选1次/3个月到1次/月或1次/周。
1日和/或1次的给药量、给药期间、给药频率可根据患者的年龄、体重、身体健康程度以及应治疗的疾病的种类或严重程度、给药途径、剂型(载体所具有的有效成分的缓释性等)等条件来适当增减。
将本发明的药物的某一方式用于骨折或骨缺损的治疗/或治愈促进、或者用于骨折的预防和/或治疗的情况下，可以将本发明的药物的某一方式与选自由骨活性化药、骨形成促进药、骨吸收抑制药、骨代谢改善药、性激素制剂以及钙制剂组成的组中的1或2种以上的药剂同时使用、或在不同时间合用。此外，本发明的药物的某一方式还可以与上述例示的药剂一起制备成所谓复方制剂后进行给药。作为该复方制剂，不仅包括典型的组合物那样的活性成分的完全混合物形式的给药形态，还包括从分配各活性成分的2个以上的容器中分别给药的基于非混合型组合的给药形态、试剂盒、包装(packaging)。
作为可与本发明的药物的某一方式合用的骨活性化药，例如可以举出骨化三醇、阿法骨化醇、OCT、2MD或ED-71等维生素D或维生素D衍生物，作为骨形成促进药，例如可以举出四烯甲萘醌、特立帕肽、生长激素、类胰岛素生长因子-I(IGF-I)、骨形态发生蛋白(BMPs)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、转化生长因子-β(TGF-β)、EP2激动剂、LRP5激动剂、抗SOST抗体、GSK-3抑制剂、Dkk1抑制剂、溶钙剂或生长激素促分泌素等，作为骨吸收抑制药，例如可以举出依降钙素、鲑鱼降钙素、依替膦酸盐、帕米膦酸盐、氯屈膦酸盐、阿仑膦酸盐、因卡膦酸盐、利塞膦酸盐、米诺膦酸盐、伊班膦酸盐、组织蛋白酶K抑制剂、骨保护素、或者抗RANKL抗体等，作为骨代谢改善药，例如可以举出氟化盐、雷尼酸锶、或者伊普黄酮等，作为性激素制剂，例如可以举出雌三醇、雌二醇、共轭雌激素、黄体酮、安宫黄体酮、睾酮、甲基化睪固酮、氢甲睾酮、司坦唑酮、美替诺龙、诺龙、选择性雌激素受体调节剂(SERM：雷洛昔芬、拉索昔芬、巴多昔芬、奥培密芬、阿佐昔芬、CHF4227、PSK-3471等)、或者选择性雄激素受体调节剂(SARM)等，作为钙制剂，例如可以举出碳酸钙、乳酸钙、葡萄糖酸钙、乙酸钙、氯化钙、柠檬酸钙、磷酸氢钙或L-天冬氨酸钙等。此外，还可以与将来研制的各种骨疾病用药剂合用。这些合用药只要是具有临床意义的组合，就没有特别限制。
本发明的化合物的某一方式包含安全性(各种毒性、安全性药理)、药代动力性能等优异的化合物，例如可通过以下所示的方法确认作为药物的有效成分的有用性。
作为与安全性相关的试验，例如包括以下列举的试验，但并不限于该例示。包括细胞毒性试验(使用HL60细胞、肝细胞的试验等)、遗传毒性试验(Ames试验、小鼠淋巴瘤TK试验、染色体异常试验、微核试验等)、皮肤敏感性试验(标乐法、GPMT法、APT法、LLNA试验等)、皮肤光敏感性试验(Adjuvant and Strip法等)、眼刺激性试验(单次滴眼、短期连续滴眼、反复滴眼等)、对心血管系统的安全性药理试验(遥测法、APD法、hERG阻断评价法等)、对中枢神经系统的安全性药理试验(FOB法、Irwin的改良法等)、对呼吸系统的安全性药理试验(利用呼吸功能测定装置的测定法、利用血液气体分析装置的测定法等)、一般毒性试验、生殖发育毒性试验等。
另外，作为药代动力性能相关的试验，例如包括以下列举的试验，但并不限于这些例示。包括细胞色素P450酶的阻断或诱导试验、细胞透过性试验(使用了CaCO-2细胞、MDCK细胞等的试验)、药物转运体ATPase assay、经口吸收性试验、血中浓度推移测定试验、代谢试验(稳定性试验、代谢分子种类试验、反应性试验等)、溶解性试验(基于浊度法的溶解度试验等)等。
本发明的化合物的某一方式作为药物的有效成分有用这一点可通过进行例如细胞毒性试验来确认。作为细胞毒性试验，可举出使用各种培养细胞(例如作为人白血病前期细胞的HL-60细胞、肝脏细胞的原代分离培养细胞、由人末梢血制备的嗜中性白细胞组分等)的方法。可以通过以下所述的方法实施本试验，但不仅限于该记载。将细胞制备成105个至107个/ml的细胞悬液，将0.01mL至1mL的悬液分注于微管或微板等中。在其中添加细胞悬液的1/100倍量至1倍量的化合物经溶解形成的溶液，在37℃、5％CO2的条件下，在化合物的最终浓度为例如0.001μM至1000μM的细胞培养液中培养30分钟至数日。培养结束后，使用MTT法或WST-I法(Ishiyama,M.,et al.,In VitroToxicology,8,p.187,1995)等对细胞存活率进行评价。通过测定化合物对细胞的细胞毒性，能够确认作为药物的有效成分的有用性。
本发明的化合物的某一方式作为药物的有效成分有用这一点可以通过例如进行遗传毒性试验来确认。作为遗传毒性试验，可以举出Ames试验、小鼠淋巴瘤TK试验、染色体异常试验和微核试验等。Ames试验是指如下方法：使用指定菌种的沙门氏菌、大肠杆菌等，在混入有化合物的培养皿上等对菌进行培养，由此判定回复突变(参照1999年日本医药审第1604号“遗传毒性试验指导原则”中的II-1.遗传毒性试验等)。另外，小鼠淋巴瘤TK试验是指以小鼠淋巴瘤L5178Y细胞的胸苷激酶基因作为靶向的基因突变能检测试验(参照1999年日本医药审第1604号“遗传毒性试验指导原则”中的II-3.小鼠淋巴瘤TK试验；Clive,D.et al.,Mutat.Res.,31,pp.17-29,1975；Cole,J.,et al.,Mutat.Res.,111,pp.371-386,1983等)。另外，染色体异常试验是指如下方法：将哺乳类培养细胞与化合物共存培养后，将细胞固定，通过进行染色体的染色、观察来判定引起染色体异常的活性(参照1999年日本医药审第1604号“遗传毒性试验指导原则”中II-2.使用哺乳类培养细胞的染色体异常试验等)。进而，微核试验是一种评价由染色体异常所引起的微核形成能的试验，包括使用啮齿类的方法(活体内试验)(参照1999年日本医药审第1604号“遗传毒性试验指导原则”中II-4.使用啮齿类的微核试验；Hayashi,M.et al.,Mutat.Res.,312,pp.293-304,1994；Hayashi,M.et al.,Environ.Mol.Mutagen.,35,pp.234-252,2000)、使用培养细胞的方法(体外试验)(Fenech,M.et al.,Mutat.Res.,147,pp.29-36,1985；Miller,B.,et al.,Mutat.Res.,392,pp.45-59,1997)等。通过使用这些中的任意一种方法或两种以上方法来明确化合物的遗传毒性，能够确认作为药物有效成分的有用性。
本发明的化合物的某一方式作为药物的有效成分有用这一点可以通过例如进行皮肤敏感性试验来确认。皮肤敏感性试验中，作为使用了豚鼠的皮肤敏感性试验，有标乐法(Buehler,E.V.Arch.Dermatol.,91,pp.171-177,1965)、GPMT法(最大值法(Magnusson,B.etal.,J.Invest.Dermatol.,52,pp.268-276,1969))或者APT法(佐剂&贴片法(Sato,Y.et al.,Contact Dermatitis,7,pp.225-237,1981))等。进而，作为使用了小鼠的皮肤敏感性试验，有LLNA(局部淋巴结实验)法(OECD Guideline forthe testing of chemicals429,skin sensitization 2002；Takeyoshi,M.et al.,Toxicol.Lett.,119(3),pp.203-8,2001；Takeyoshi,M.et al.,J.Appl.Toxicol.,25(2),pp.129-34,2005)等。通过使用这些中的任意一种方法或两种以上方法来明确化合物的皮肤敏感性，能够确认作为药物有效成分的有用性。
本发明的化合物的某一方式作为药物的有效成分有用这一点可以通过例如进行皮肤光敏感性试验来确认。作为皮肤光敏感性试验，可举出使用了豚鼠的皮肤光敏感性试验(参照“医药品非临床试验指导原则解说2002”日本药事日报社2002年刊1-9：皮肤光敏感性试验等)等，作为其方法，可举出佐剂&角质剥离法(Ichikawa,H.et al.,J.Invest.Dermatol.,76,pp.498-501,1981)、Harber法(Harber,L.C.,Arch.Dermatol.,96,pp.646-653,1967)、horio法(Horio,T.,J.Invest.Dermatol.,67,pp.591-593,1976)、Jordan法(Jordan,W.P.,Contact Dermatitis,8,pp.109-116,1982)、Kochever法(Kochever,I.E.et al.,J.Invest.Dermatol.,73,pp.144-146,1979)、Maurer法(Maurer,T.et al.,Br.J.Dermatol.,63,pp.593-605,1980)、Morikawa法(Morikawa,F.et al.,"Sunlight and man",TokyoUniv.Press,Tokyo,pp.529-557,1974)、Vinson法(Vinson,L.J.,J.Soc.Cosm.Chem.,17,pp.123-130,1966)等。通过使用这些中的任意一种方法或两种以上方法来明确化合物的皮肤光敏感性，能够确认作为药物的有效成分的有用性。
本发明的化合物的某一方式作为药物的有效成分有用这一点可以通过例如进行眼刺激性试验来确认。作为眼刺激性试验，可以举出使用兔眼、猴眼等的单次滴眼试验法(仅1次滴眼)、短期连续滴眼试验法(在短时间以定间隔多次滴眼)、反复滴眼试验法(在数日到数十日期间间歇地反复滴眼)等，具有根据改良德莱塞分数(Fukui,N.et al.,GendainoRinsho,4(7),pp.277-289,1970)等对于滴眼后的一定时间的眼刺激症状进行评价的方法。通过使用这些中的任意一种方法或两种以上方法来明确化合物的眼刺激性，能够确认作为药物的有效成分的有用性。
本发明的化合物的某一方式作为药物的有效成分有用这一点可以通过例如进行针对心血管系统的安全性药理试验来确认。作为针对心血管系统的安全性药理试验，可举出遥测法(对于无麻醉下的化合物给药对心电图、心率、血压、血流量等的影响进行测定的方法(菅野茂、局博一、中田义礼编用于基础和临床的动物的心电图、超声心动、血压、病理学检查平成15年刊丸善(株)))、APD法(测定心肌细胞活动电位持续时间的方法(Muraki,K.et al.,AM.J.Physiol.,269,H524-532,1995；Ducic,I.et al.,J.Cardiovasc.Pharmacol.,30(1),pp.42-54,1997))、hERG阻断评价法(膜片钳法(Chachin,M.et al.,Nippon Yakurigaku Zasshi,119,pp.345-351,2002)、结合分析法(Gilbert,J.D.et al.,J.Pharm.Tox.Methods,50,pp.187-199,2004)、Rb+efflex assay法(Cheng,C.S.et al.,Drug Develop.Indust.Pharm.,28,pp.177-191,2002)、膜电位分析法(Dorn,A.et al.,J.Biomol.Screen.,10,pp.339-347,2005)等)等。过使用这些中的任意一种方法或两种以上方法来明确化合物针对心血管系统的作用，能够确认作为药物的有效成分的有用性。
本发明的化合物的某一方式作为药物的有效成分有用这一点可以通过例如进行针对中枢神经系统的安全性药理试验来确认。作为针对中枢神经系统的安全性药理试验，可以举出FOB法(功能观察综合评价法(Mattson,J.L.et al.,J.American College ofTechnology,15(3),pp.239-254,1996))、Irwin的改良法(评价一般症状和行动观察的方法(Irwin,S.Comprehensive Observational Assessment(Berl.)13,pp.222-257,1968)等。通过使用这些中的任意一种方法或两种以上方法来明确化合物针对中枢神经系统的作用，能够确认作为药物的有效成分的有用性。
本发明的化合物的某一方式作为药物的有效成分有用这一点可以通过例如进行针对呼吸系统的安全性药理试验来确认。作为针对呼吸系统的安全性药理试验，可以举出利用呼吸功能测定装置的测定法(测定呼吸数、1次换气量、分时换气量等)(Drorbaugh,J.E.et al.,Pediatrics,16,pp.81-87,1955；Epstein,M.A.et al.,Respir.Physiol.,32,pp.105-120,1978)、利用血液气体分析装置的测定法(测定血液气体、血红蛋白氧饱和度等)(Matsuo,S.Medicina,40,pp.188,2003)等通过使用这些中的任意一种方法或两种以上方法来明确化合物针对呼吸系统的作用，能够确认作为药物的有效成分的有用性。
本发明的化合物的某一方式作为药物的有效成分有用这一点可以通过例如进行一般毒性试验来确认。一般毒性试验是指下述方法：使用大鼠、小鼠等啮齿类或者猴、犬等非啮齿类动物，通过将溶解或悬浮在适当溶剂中的化合物单次或反复(多日内)口服给药或静脉内给药等，由此对给药动物的一般状态的观察、临床化学上的变化、病理学上的组织变化等进行评价。通过使用这些方法明确化合物的一般毒性，能够确认作为药物有效成分的有用性。
本发明的化合物的某一方式作为药物的有效成分有用这一点可以通过例如进行生殖发育毒性试验来确认。生殖发育毒性试验是使用大鼠、小鼠等啮齿类或猴、犬等非啮齿类来研究化合物在诱发生殖发育过程中的不良影响的试验(参照“医药品非临床试验指导原则解说2002”日本药事日报社2002年刊1-6：生殖发育毒性试验等)。作为生殖发育毒性试验，可举出有关受精能力和着床前的初期胚胎发育的试验、有关出生前和出生后的发育以及母体机能的试验、有关胚胎/胎儿发育的试验(参照2000年日本医药审第1834号附件“医药品毒性试验法指导原则”[3]生殖发育毒性试验”)等)等。通过使用这些试验方法明确化合物的生殖发育毒性，能够确认作为药物有效成分的有用性。
本发明的化合物的某一方式作为药物的有效成分有用这一点可以通过例如进行细胞色素P450酶的阻断或诱导试验(Gomez-Lechon,M.J.et al.,Curr.Drug Metab.5(5),pp.443-462,2004)来确认。作为细胞色素P450酶的阻断或诱导试验，例如可举出使用从细胞精制的或用基因重组体制备的各分子种类的细胞色素P450酶或人P450表达系微粒体，在试管内测定化合物是否阻断其酶活性的方法(Miller,V.P.et al.,Ann.N.Y.Acad.Sci.,919,pp.26-32,2000)、使用人肝微粒体或细胞破碎液测定各分子种类的细胞色素P450酶的表达和酶活性的变化的方法(Hengstler,J.G.etal.,Drug Metab.Rev.,32,pp.81-118,2000)、或者从暴露于化合物中的人肝细胞提取RNA并与对照组比较mRNA表达量以研究化合物的酶诱导能的方法(Kato,M.et al.,Drug Metab.Pharmacokinet.,20(4),pp.236-243,2005)等。通过使用这些中的任意一种方法或两种以上方法来明确化合物针对细胞色素P450的酶阻断或酶诱导的作用，能够确认作为药物的有效成分的有用性。
本发明的化合物的某一方式作为药物的有效成分有用这一点可以通过例如进行细胞透过性试验来确认。作为细胞透过性试验，例如可以举出使用CaCO-2细胞在试验管内细胞培养系中测定化合物的细胞膜透过能的方法(Delie,F.et al.,Crit.Rev.Ther.DrugCarrier Syst.,14,pp.221-286,1997；Yamashita,S.et al.,Eur.J.Pham.Sci.,10,pp.195-204,2000；Ingels,F.M.et al.,J.Pham.Sci.,92,pp.1545-1558,2003)、或者使用MDCK细胞在试验管内细胞培养系中测定化合物的细胞膜透过能的方法(Irvine,J.D.etal.,J.Pham.Sci.,88,pp.28-33,1999)等。通过使用这些中的任意一种方法或两种以上方法来明确化合物的细胞透过性，能够确认作为药物的有效成分的有用性。
本发明的化合物的某一方式作为药物的有效成分有用这一点可以通过例如进行作为ATP-结合盒(ABC)转运体的药物转运体ATP酶分析来确认。作为药物转运体ATP酶分析，可以举出使用P-糖蛋白(P-gp)杆状病毒表达体系来研究化合物是否为P-gp的底物的方法(Germann,U.A.,Methods Enzymol.,292,pp.427-41,1998)等。另外，可以通过例如使用从非洲爪蟾(Xenopus laevis)采集的卵母细胞(Oocytes)作为溶质转运载体(SLC)转运体进行传输试验来确认。作为传输试验，可以举出使用OATP2表达卵母细胞来研究化合物是否为OATP2的底物的方法(Tamai I.et.al.,PharmRes.2001Sep；18(9)：1262-1269)等。通过使用这些方法来明确化合物针对ABC转运体或SLC转运体的作用，能够确认作为药物的有效成分的有用性。
本发明的化合物的某一方式作为药物的有效成分有用这一点可以通过例如进行经口吸收性试验来确认。作为经口吸收性试验，可以举出下述方法等：使用啮齿类、猴或犬等，将一定量的化合物溶解或悬浮在适当的溶剂中，经时测定口服给药后的血药浓度，利用LC-MS/MS法(原田健一等编“用于生命科学的最新质谱法”讲谈社科学2002年刊等)对于化合物基于口服给药的血中转运性进行评价。通过使用这些方法来明确化合物的经口吸收性，能够确认作为药物的有效成分的有用性。
本发明的化合物的某一方式作为药物的有效成分有用这一点可以通过例如进行血中浓度推移测定试验来确认。作为血中浓度推移测定试验，可以举出下述方法等：将化合物对啮齿类、猴或犬等以经口或非经口(例如，静脉内、肌肉内、腹腔内、皮下、经皮、滴眼或经鼻等)方式给药后，利用LC-MS/MS法(原田健一等编“用于生命科学的最新质谱法”讲谈社科学2002年刊等)对于化合物在血中的浓度推移进行测定。通过使用这些方法明确化合物的血中浓度推移，能够确认作为药物的有效成分的有用性。特别是在非经口给药中的局部给药的情况下，从避免副作用的方面出发，有时优选本发明的化合物的某一方式在给药后的血药浓度低。
本发明的化合物的某一方式作为药物的有效成分有用这一点可以通过例如进行代谢试验来确认。作为代谢试验，可以举出血中稳定性试验法(由化合物在人或其他动物种类的肝微粒体中的代谢速度来预测在活体内的代谢清除率的方法(参照Shou,W.Z.etal.,J.Mass Spectrom.,40(10),pp.1347-1356,2005；Li,C.et al.,Drug Metab.Dispos.,34(6),901-905,2006)等)、代谢分子种类试验法、反应性代谢物试验法等。通过使用这些中的任意一种方法或两种以上方法来明确化合物的代谢分布，能够确认作为药物的有效成分的有用性。
本发明的化合物的某一方式作为药物的有效成分有用这一点可以通过例如进行溶解性试验来确认。在水中的溶解性的评价可例示出在酸性条件、中性条件或碱性条件下确认的方法，进而还包括基于有无胆汁酸来确认溶解性的变化。作为溶解性试验，可以举出基于浊度法的溶解度试验法(Lipinski,C.A.et al.,Adv.Drug Deliv.Rev.,23,pp.3-26,1997；Bevan,C.D.et al.,Anal.Chem.,72,pp.1781-1787,2000)等。通过使用这些方法来明确化合物的溶解性，能够确认作为药物的有效成分的有用性。
本发明的化合物的某一方式作为药物的有效成分有用这一点可以通过例如研究上消化道障碍、肾功能障碍等来确认。作为针对上消化道的药理试验，可以使用绝食大鼠胃粘膜损伤模型，研究对胃粘膜的作用。作为针对肾功能的药理试验，可以举出肾血流量·肾小球过滤量测定法[生理学第18版(分光堂)、1986年、第17章]等。通过使用这些中的任意一种方法或两种以上方法来明确化合物对于上消化道、肾功能的作用，能够确认作为药物的有效成分的有用性。
实施例
以下通过实施例、参考例、制剂例以及试验例(下文中有时称为“实施例等”)进一步具体说明本发明，但本发明的范围并不限于以下的实施例等。
实施例等中，薄层色谱法(TLC)使用Precoated silica gel60F254(默克公司制造、产品编号5715-1M)。利用氯仿甲醇(1:0～1:1)、乙腈：乙酸：水(200:1:1～100:4:4)或乙酸乙酯：己烷(1:0～1:1)展开后，照射UV(254nm或365nm)，通过利用碘溶液、高锰酸钾水溶液、磷钼酸(乙醇溶液)等的显色来确认。
有机溶剂的干燥使用无水硫酸镁或无水硫酸钠。
柱色谱使用山善公司制造Multi Prep YFLC或MORITEX公司制造2ch平行精制装置“Purif-α2(50F)”。柱为Multi Prep YFLC的情况下，使用山善公司制造的Ultrapac Si-40A、40B或40D中的任一者，Purif-α2(50F)的情况下，使用MORITEX公司制造的PurifPack-Si系列。
快速柱色谱使用Silica Gel 60N(球状、中性、40-100μm、关东化学公司制造)。
制备薄层色谱法(以下有时称为PTLC)中，根据试样的量使用1片或数片PLC板silica gel 60F254、20×20cm、层厚2mm、带有浓缩区(4cm)(默克公司制造、产品编号13793-1M)来进行。
关于HPLC精制，使用日本Waters公司制造的制备型精制装置，柱使用DevelosilC-30-UG-5(野村化学公司制造)等，洗脱液使用含有0.1％乙酸的水-乙腈溶剂。
在使用HPLC进行精制的情况下，只要没有特别声明，则通过冷冻干燥法除去溶剂来得到目标化合物。核磁共振光谱(NMR)的测定中使用Gemini-300(FT-NMR,Varian公司)或AL-300(FT-NMR,JEOL公司制造)。只要没有特别记载，则溶剂使用氘代氯仿，关于化学位移，使用四甲基硅烷(TMS)作为内标，以δ(ppm)来表示，并且偶合常数以J(Hz)来表示。
关于LCMS，利用液相色谱质谱(LC-MS)来测定质谱。只要不特别声明，作为质谱仪使用单四级杆质谱仪UPLC/SQD系统(Waters公司制造)，通过电喷雾电离(ESI)法进行测定。液相色谱法装置使用Waters公司制造的Acquity Ultra Performance LC系统。分离柱使用ACQUITY UPLC BEH C18 1×50mm 1.7μm(Waters公司制造)。
但是，在以下的FLC-1的LC条件中，作为质谱仪使用单四级杆质谱仪Platform-LC(Waters公司制造)，通过电喷雾电离(ESI)法进行测定。另外，液相色谱装置使用GILSON公司制造的306PUMP系统。此外，分离柱使用Develosil C30-UG-550×4.6mm(野村化学公司制造)。
关于LC条件，对于特别记载了LC条件的实施例或参考例，表示利用下述溶剂条件进行测定。另外，m/z表示质谱的数据(同时记载了MH+、M+NH4+或MH-)。
(LC-1)流速0.6mL/分钟，A液＝水[含有0.1％(v/v)乙酸]，B液＝乙腈[含有0.1％(v/v)乙酸]，在0分钟至2.0分钟以B液为5～90％(v/v)线性梯度、在2.0分钟至2.5分钟以B液为90～98％(v/v)线性梯度进行洗脱，在该条件下进行测定。
(LC-6)流速0.6mL/分钟，A液＝水[含有0.1％(v/v)乙酸]，B液＝乙腈[含有0.1％(v/v)乙酸]，在0分钟至2.0分钟以B液为70～90％(v/v)线性梯度、在2.0分钟至2.5分钟以B液为90～98％(v/v)线性梯度进行洗脱，在该条件下进行测定。
(NLC-1)流速0.6mL/分钟，A液＝10mM乙酸铵水溶液，B液＝乙腈，在0分钟至2.0分钟以B液为5～90％(v/v)线性梯度、在2.0分钟至2.5分钟以B液为90～98％(v/v)线性梯度进行洗脱，在该条件下进行测定。
(NLC-6)流速0.6mL/分钟，A液＝10mM乙酸铵水溶液，B液＝乙腈，在0分钟至2.0分钟以B液为70～90％(v/v)线性梯度洗脱、在2.0分钟至2.5分钟以B液为90～98％(v/v)线性梯度洗脱，在该条件下进行测定。
(FLC-1)流速2mL/分钟，A液＝水[含有0.1％(V/V)乙酸]，B液＝乙腈[含有0.1％(V/V)乙酸]，0分钟至5分钟以B液为5～98％(V/V)线性梯度、5分钟至6分钟以B液98％(V/V)保持、6分钟至6.01分钟以B液为98～5％(V/V)线性梯度、6.01分钟至7.5分钟保持在5％(V/V)，在该洗脱条件下进行测定。
关于手性LC，利用高效液相色谱法(HPLC)测定保持时间。关于手性LC条件，对于特别记载了手性LC条件的实施例或参考例，表示利用下述测定条件进行测定。
(手性LC-1)作为分离柱使用CHIRALCEL OD-H 4.6×250mm 5μm(Daicel公司制造)，流速0.6mL/分钟，A液＝正己烷，B液＝乙醇，以B液为5％(v/v)等强度进行洗脱，在该条件下进行测定。
(手性LC-2)作为分离柱使用CHIRALCEL OJ-H4.6×250mm 5μm(Daicel公司制造)，流速1.0mL/分钟，利用添加了0.1％(v/v)的三氟乙酸的乙醇进行洗脱，在该条件下进行测定。
关于所使用的试剂的厂家，有时以下述简写符号来表示厂家：
东京化成公司制造：TCI、SIGMA-ALDRICH公司制造：ALDRICH、关东化学公司制造：KANTO、和光纯药公司制造：WAKO、Maybridge公司制造：MAYBRIDGE、APOLLO公司制造：APOLLO、Combi-Blocks公司制造：COMBI-BLOCKS、高砂香料公司制造：TAKASAGO、JhonsonMatthey公司制造：JOHNSON、日本化学工业公司制造：日本化学、日本EnviroChemicals公司制造：日本Enviro Chemicals
文中的简写符号表示下述含义。
n：正、i：异、s：仲、t：叔、c：环、Me：甲基、Et：乙基、Pr：丙基、Bu：丁基、Pen：戊基、Hex：己基、Hep：庚基、Ph：苯基、Bn：苄基、Py：吡啶基、Ac：乙酰基、CHO：甲酰基、COOH：羧基、NO2：硝基、DMA：二甲氨基、NH2：氨基、CF3：三氟甲基、F：氟、Cl：氯、Br：溴、OMe：甲氧基、OH：羟基、TFA：三氟乙酰基、SO2：磺酰基、CO：羰基、THF：四氢呋喃、DMF：N,N-二甲基甲酰胺、DMSO：二甲基亚砜、DME：二甲氧基乙烷
在各取代基前面添加的数字表示取代位置。在芳香环的简写符号前面以连字符添加的数字表示该芳香环的取代位置。化合物名称或结构式中标记的(S)表示作为对象的不对称碳原子为S构型，(R)表示为R构型。另外，在为具有不对称碳原子的化合物但没有(R)或(S)的表示的情况下，表示为(R)体与(S)体以任意比例混合存在的混合物。作为该化合物，可以为(R)体与(S)体的外消旋混合物。
在实施例化合物的合成步骤中需要脱保护的情况下，按照公知的方法、例如按照Protective Groups in Organic Synthesis、John Wiley and Sons刊(2007年版)中记载的方法等来进行。
参考例A-2：叔丁基二甲基(2-(噻吩-2-基)乙氧基)硅烷(中间体A-2)
[化76]
Figure BDA0002552068800000561
在冰冷却下向2-(噻吩-2-基)乙醇(4g：TCI)的N,N-二甲基甲酰胺(312mL)溶液中依次加入咪唑(4.3g)、叔丁基二甲基氯硅烷(7.05g)、N,N-二甲基-4-氨基吡啶(763mg)，在室温下搅拌2.75小时。向反应混合溶液中加入乙酸乙酯，利用1mol/L盐酸、饱和食盐水、饱和碳酸氢钠水溶液、饱和食盐水依次清洗后，将有机相干燥。减压下蒸馏除去溶剂，得到标题化合物(7.32g)。
(中间体A-2Rf(TLC)＝0.70(己烷：乙酸乙酯＝4:1))
参考例A-3：5-(2-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)乙基)噻吩-2-甲酸(中间体A-3)
[化77]
Figure BDA0002552068800000562
在氮气气氛下将中间体A-2(7.15g)的四氢呋喃(111mL)溶液冷却至-78℃。向反应混合溶液中滴加正丁基锂(2.6mol/L己烷溶液，14.3mL：KANTO)并在该状态下搅拌0.75小时。将反应混合溶液加热至-5℃，然后分次少量加入干冰(125g)，添加结束后进一步搅拌0.75小时。向反应混合溶液中加入饱和氯化铵水溶液，在室温下搅拌。加入乙酸乙酯进行萃取，将有机相依次用饱和氯化铵水溶液、饱和食盐水清洗后进行干燥。减压下蒸馏除去溶剂，得到标题化合物(9.03g)。
(中间体A-3LCMS：m/z287.0(MH+)；保持时间：1.35分钟；LC条件：NLC-1)
参考例A-4：甲基5-(2-羟基乙基)噻吩-2-甲酸酯(中间体A-4)
[化78]
Figure BDA0002552068800000571
将中间体A-3(9.03g)的甲醇(64mL)溶液冷却至0℃，分次少量添加浓硫酸(3.2mL)，在该状态下搅拌5分钟。将反应混合溶液加热至70℃并搅拌24小时后，冷却至0℃，分次少量添加饱和碳酸氢钠水溶液直至反应液的液性达到中性为止。加入乙酸乙酯进行萃取，将有机相依次用饱和碳酸氢钠水溶液、饱和食盐水清洗后进行干燥。减压下蒸馏除去溶剂，将残渣用柱色谱(己烷/乙酸乙酯)精制，得到标题化合物(4.61g)。
(中间体A-4Rf(TLC)＝0.33(己烷：乙酸乙酯＝1:1))
参考例A-5：甲基5-(2-溴乙基)噻吩-2-甲酸酯(中间体A-5)
[化79]
Figure BDA0002552068800000572
向中间体A-4(4.61g)的二氯甲烷(200mL)溶液中加入三苯基膦(9.8g)后冷却至0℃。向反应混合溶液中分次少量加入四溴化碳(12.3g)，升温至室温后搅拌13.5小时。将反应混合溶液减压，蒸馏除去溶剂后，将残渣用柱色谱(己烷/乙酸乙酯)精制，得到标题化合物(5.4g)。
(中间体A-5Rf(TLC)＝0.70(己烷：乙酸乙酯＝1:1))
参考例A-6：叔丁基2-(2-(5-(甲氧基羰基)噻吩-2-基)乙基)肼甲酸酯(中间体A-6)
[化80]
Figure BDA0002552068800000581
向中间体A-5(6.2g)的乙腈(125mL)溶液中依次加入肼基甲酸叔丁酯(16.5g：TCI)、碳酸氢钠(10.5g)、碘化钠(700mg)，在90℃搅拌13小时。将反应混合溶液冷却至0℃，加入乙酸乙酯(155mL)，依次用1mol/L盐酸、饱和碳酸氢钠水溶液、饱和食盐水清洗后，将有机相干燥。减压下蒸馏除去溶剂，将残渣用柱色谱(己烷/乙酸乙酯)精制，得到标题化合物(5.1g)。
(中间体A-6LCMS：m/z301.1(MH+)；保持时间：1.42分钟；LC条件：NLC-1)
1H-NMR(CDCl3)：δ(ppm)7.64(1H,d,J＝4.0Hz),6.87(1H,d,J＝4.0Hz),3.86(3H,s),3.18(2H,t,J＝7.2Hz),3.02(2H,t,J＝7.2Hz),2.60-1.90(2H,br),1.64(9H,s)
参考例B-3：S-(2-氯乙基)硫代羰酰氯(中间体B-3)
[化81]
Figure BDA0002552068800000582
在氩气氛下将硫化乙烯(320g：TCI)和吡啶(4.3mL)的混合溶液利用冰浴冷却，分次少量添加三光气(474g：TCI)，在该状态下搅拌4小时。将反应混合溶液利用减压蒸馏(0.7kPa～0.8kPa,50℃～52℃)精制，得到标题化合物(281g)。
1H-NMR(CDCl3)：δ(ppm)3.72(2H,t,J＝7.0Hz),3.30(2H,t,J＝7.0Hz)
参考例Z-1：叔丁基2-(((2-氯乙基)硫基)羰基)-2-(2-(5-(甲氧基羰基)噻吩-2-基)乙基)肼甲酸酯(中间体Z-1)
[化82]
Figure BDA0002552068800000583
向中间体A-6(140.3g)的二氯甲烷(660mL)溶液中加入水(330mL)、碳酸氢钠(78.09g)，搅拌10分钟后，在将反应混合溶液的内温保持在20℃～25℃的同时分次少量添加中间体B-3(81.71g)。在该状态下搅拌1小时后，将有机相用饱和食盐水清洗，进行干燥。减压下蒸馏除去溶剂，得到标题化合物(199.5g)。
(中间体Z-1Rf(TLC)＝0.43(己烷：乙酸乙酯＝2:1))
参考例Z-2：甲基5-(2-(1-(((2-氯乙基)硫基)羰基)肼基)乙基)噻吩-2-甲酸酯(中间体Z-2)
[化83]
Figure BDA0002552068800000591
向中间体Z-1(199g)中加入4mol/L氯化氢二氧六环溶液(800mL)，在室温下搅拌18小时。减压下蒸馏除去溶剂后，加入二氯甲烷(6L)和饱和碳酸氢钠水溶液(2L)，进行萃取。将有机相用饱和食盐水(2L)清洗，干燥后在减压下蒸馏除去溶剂，得到标题化合物(172g)。
(中间体A-4Rf(TLC)＝0.49(庚烷：乙酸乙酯＝1:1))
参考例Z-3：甲基5-(2-(2-氧代-1,3,4-噻二嗪-3-基)乙基)噻吩-2-甲酸酯(中间体Z-3)
[化84]
Figure BDA0002552068800000592
向中间体Z-2(172g)的乙腈(3.4L)溶液中依次加入碳酸氢钠(223g)、碘化钠(397g)，在75℃搅拌15小时。进一步在83℃搅拌15小时后，冷却到室温。将反应混合溶液用滤纸过滤，将滤纸上的残渣用乙腈(1L)清洗，与滤液合并，进行减压浓缩。向浓缩后的残渣中加入二氯甲烷(3L)后，用滤纸过滤，将滤纸上的残渣用二氯甲烷(1L)清洗，与滤液合并，进行减压浓缩。将所得到的残渣用柱色谱(己烷/乙酸乙酯)精制后进行减压浓缩。将残渣加热溶解在乙酸乙酯(1L)中后，添加庚烷进行冰冷却。将析出的固体过滤，得到标题化合物(97g)。
1H-NMR(CDCl3)：δ(ppm)7.64(1H,d,J＝3.8Hz),6.88(1H,d,J＝3.8Hz),3.86(3H,s),3.85(2H,t,7.0Hz),3.30(2H,t,J＝7.0Hz),3.25-3.17(4H,m),3.16(2H,t,J＝7.0Hz)
参考例C-2：2-(3-溴苯基)-N-甲氧基-N-甲基乙酰胺(中间体C-2)
[化85]
Figure BDA0002552068800000601
将二异丙基乙胺(800mL)的二氯甲烷(1.8L)溶液进行冰冷却，依次加入3-溴苯基乙酸(313g：TCI)、N,O-二甲基羟胺盐酸盐(284g)、1-乙基-3-(3-二甲氨基丙基)碳化二亚胺盐酸盐(334g)、N,N-二甲基-4-氨基吡啶(18g)，在室温下搅拌12.5小时。向反应混合溶液中加入水(630mL)和二氯甲烷(630mL)后，依次用2mol/L盐酸(630mL)清洗2次、用饱和碳酸氢钠水溶液(630mL)清洗1次、用饱和食盐水(630mL)清洗1次。将有机相干燥后，减压下蒸馏除去溶剂，得到标题化合物(372g)。
(中间体C-2LCMS：m/z257.9(MH+)；保持时间：1.37分钟；LC条件：NLC-1)
1H-NMR(CDCl3)：δ(ppm)7.46-7.44(1H,m),7.39-7.36(1H,m),7.25-7.15(2H,m),3.74(2H,s),3.64(3H,s),3.20(3H,s)
参考例C-3：1-(3-溴苯基)丁-3-烯-2-酮(中间体C-3)
[化86]
Figure BDA0002552068800000602
将中间体C-2(104.2g)的四氢呋喃(2.1L)溶液在氮气气氛下冷却至-45℃。用时30分钟向反应混合溶液中滴加乙烯基溴化镁(1mol/L四氢呋喃溶液，605mL：Aldrich)，升温至0℃后搅拌1.5小时。将反应混合溶液加入到冰水(1L)和2mol/L盐酸(1L)的混合液中，搅拌1分钟。加入异丙醚(2L)萃取，将有机相依次用1mol/L盐酸(1L)、水(1L)、饱和食盐水(1L)清洗，进行干燥。减压下蒸馏除去溶剂，得到标题化合物(92.1g)。
(中间体C-3Rf(TLC)＝0.74(庚烷：乙酸乙酯＝2:1))
参考例C-2-2：2-(3-碘苯基)-N-甲氧基-N-甲基乙酰胺(中间体C-2-2)
[化87]
Figure BDA0002552068800000611
按照参考例C-2中记载的方法，使用3-碘苯乙酸(2.85g)来代替3-溴苯基乙酸，由此合成出中间体C-2-2，得到标题化合物(3.07g)。
(中间体C-2-2Rf(TLC)＝0.42(己烷：乙酸乙酯＝1:2))
需要说明的是，在按照上述方法合成化合物的情况下，可以按照本领域技术人员的常识，根据所使用的原料的当量适宜变更所使用的试剂量、溶剂量、反应时间等。
以下相同。
参考例C-3-2：1-(3-碘苯基)丁-3-烯-2-酮(中间体C-3-2)
[化88]
Figure BDA0002552068800000612
中间体C-3-2按照参考例C-3中记载的方法并使用中间体C-2-2(100mg)代替中间体C-2来进行合成，得到标题化合物(58.7mg)。
(中间体C-3-2Rf(TLC)＝0.60(己烷：乙酸乙酯＝1:2))
参考例Z-4：甲基5-(2-(4-(4-(3-溴苯基)-3-氧代丁基)-2-氧代-1,3,4-噻二嗪-3-基)乙基)噻吩-2-甲酸酯(中间体Z-4)
[化89]
Figure BDA0002552068800000613
向中间体Z-3(44.4g)的乙醇(444mL)溶液中加入中间体C-3(92.1g)，在110℃搅拌40小时。将反应混合溶液减压，蒸馏除去溶剂。将所得到的残渣用柱色谱(甲苯/乙酸乙酯)精制，得到标题化合物(75.9g)。
(中间体Z-4LCMS：m/z511.2(MH+)；保持时间：1.75分钟；LC条件：NLC-1)
参考例Z-4-2：甲基5-(2-(4-(4-(3-碘苯基)-3-氧代丁基)-2-氧代-1,3,4-噻二嗪-3-基)乙基)噻吩-2-甲酸酯(中间体Z-4-2)
[化90]
Figure BDA0002552068800000621
中间体Z-4-2按照参考例Z-4中记载的方法并使用中间体C-3-2(680.2mg)代替中间体C-3来进行合成，得到标题化合物(120.1mg)。
(中间体Z-4-2Rf(TLC)＝0.50(己烷：乙酸乙酯＝1:2),
LCMS：m/z559.0(MH+)；保持时间：1.84分钟；LC条件：LC-1)
参考例Z-5：甲基5-(2-(4-(4-(3-溴苯基)-3-羟基丁基)-2-氧代-1,3,4-噻二嗪-3-基)乙基)噻吩-2-甲酸酯(中间体Z-5)
[化91]
Figure BDA0002552068800000622
将中间体Z-4(75.7g)的甲醇(1.14L)溶液冷却至0℃，分次少量添加硼氢化钠(7.47g)。在0℃搅拌1小时后，分次少量添加稀盐酸至反应混合溶液的液性达到中性为止。减压下蒸馏除去有机溶剂后，加入乙酸乙酯(2L)，冷却至0℃，分次少量添加饱和碳酸氢钠水溶液(1L)并搅拌5分钟。萃取有机相并使其干燥后，减压下蒸馏除去溶剂，得到标题化合物(71.0g)。
(中间体Z-5 LCMS：m/z513.15(MH+)；保持时间：1.70分钟；LC条件：LC-1)
参考例Z-14:甲基5-(2-(2-氧代-4-(3-氧代-4-(3-(噻吩-3-基乙炔基)苯基)丁基)-1,3,4-噻二嗪-3-基)乙基)噻吩-2-甲酸酯(中间体Z-14)
[化92]
Figure BDA0002552068800000631
向中间体Z-4-2(86.6mg)中依次添加二乙胺(78μL)、3-乙炔基噻吩(21μL)、碘化铜(I)(0.8mg)、四(三苯基膦)钯(1.1mg)，在室温下搅拌2小时。进一步依次添加二乙胺(600μL)、碘化铜(I)(1.5mg)、四(三苯基膦)钯(2.0mg)，在室温下搅拌12小时。向反应混合溶液中加入二乙醚、1mol/L盐酸(0.5mL)，将有机相依次用1mol/L盐酸(1mL)清洗5次、用饱和碳酸氢钠水溶液(0.5mL)清洗1次，使其干燥。减压下蒸馏除去溶剂，将所得到的残渣用柱色谱(己烷/乙酸乙酯)精制，得到标题化合物(31.7mg)。
(中间体Z-14Rf(TLC)＝0.12(己烷：乙酸乙酯＝1:2),
LCMS：m/z539.1(MH+)；保持时间：1.95分钟；LC条件：LC-1)
参考例Z-17：甲基5-(2-(4-(3-羟基-4-(3-(噻吩-3-基乙炔基)苯基)丁基)-2-氧代-1,3,4-噻二嗪-3-基)乙基)噻吩-2-甲酸酯(中间体Z-17)
[化93]
Figure BDA0002552068800000632
中间体Z-17按照参考例Z-5中记载的方法并使用中间Z-14(31.7mg)代替中间体Z-4来合成，得到标题化合物(31.8mg)。
(中间体Z-17LCMS：m/z541.1(MH+)；保持时间：1.90分钟；LC条件：LC-1)
实施例1：5-(2-(4-(3-羟基-4-(3-(噻吩-3-基乙炔基)苯基)丁基)-2-氧代-1,3,4-噻二嗪-3-基)乙基)噻吩-2-甲酸
[化94]
Figure BDA0002552068800000641
向中间体Z-17(31.8mg)的四氢呋喃(884μL)溶液中加入水(221μL)、2mol/L氢氧化锂水溶液(442μL)，在50℃搅拌17.5小时。将反应混合溶液冷却至0℃，加入2mol/L盐酸(660uL)后，用乙酸乙酯萃取。减压下蒸馏除去溶剂，将所得到的残渣用薄层色谱法(己烷/乙酸乙酯)精制，得到标题化合物(22.7mg)。
(LCMS：m/z527.2(MH+)；保持时间：1.68分钟；LC条件：LC-1)
参考例A-10：(3-溴噻吩-2-基)甲醇(中间体A-10)
[化95]
Figure BDA0002552068800000642
将3-溴噻吩-2-甲酸(3.0g：Aldrich)的四氢呋喃(46mL)溶液在氮气气氛下冷却至0℃，用时15分钟滴加硼烷四氢呋喃络合物的1mol/L四氢呋喃溶液(26.1mL)后，在室温下搅拌21.5小时。将反应混合溶液冷却至0℃，加入冰水、1mol/L盐酸、乙酸乙酯进行搅拌。减压下蒸馏除去有机溶剂后，加入乙酸乙酯，依次用1mol/L盐酸、饱和碳酸氢钠水溶液、饱和食盐水清洗，将其干燥。减压下蒸馏除去溶剂，得到标题化合物(2.87g)。
(中间体A-10Rf(TLC)＝0.42(己烷：乙酸乙酯＝2:1))
参考例A-11：3-溴-2-(溴甲基)噻吩(中间体A-11)
[化96]
Figure BDA0002552068800000643
中间体A-10(7.14g)的二氯甲烷(169mL)溶液冷却至0℃，加入三苯基膦(13.3g)、四溴化碳(13.45g)，在室温下搅拌2.75小时。向反应混合溶液中滴加饱和碳酸氢钠水溶液后，减压下蒸馏除去有机溶剂。加入乙酸乙酯后，依次用饱和碳酸氢钠水溶液、饱和食盐水清洗，将其干燥。减压下蒸馏除去有机溶剂后，向所得到的残渣中加入己烷：乙酸乙酯＝8:1的混合溶剂，制成悬浮液，将其用铺有硅胶的滤纸过滤。将滤液减压下蒸馏除去溶剂，得到标题化合物(9.70g)。
(中间体A-11 Rf(TLC)＝0.64(己烷：乙酸乙酯＝8:1))
参考例A-12：2-(3-溴噻吩-2-基)乙腈(中间体A-12)
[化97]
Figure BDA0002552068800000651
向中间体A-11(9.70g)中加入二甲基亚砜(28mL)、乙腈(140mL)，冷却至0℃后，加入氰化钠(2.15g)，在室温下搅拌16小时。向反应混合溶液中加入饱和碳酸氢钠水溶液进行搅拌，然后在减压下将溶液浓缩。将溶液用铺有硅藻土的滤纸过滤，用乙酸乙酯清洗硅藻土上的残渣。将滤液与洗液混合，依次用饱和碳酸氢钠水溶液、饱和食盐水清洗，将其干燥。减压下蒸馏除去有机溶剂后，将所得到的残渣用柱色谱(己烷/乙酸乙酯)精制，得到标题化合物(3.89g)。
(中间体A-12 Rf(TLC)＝0.18(己烷：乙酸乙酯＝8:1))
参考例A-13：乙基2-(3-溴噻吩-2-基)乙酸酯(中间体A-13)
[化98]
Figure BDA0002552068800000652
向中间体A-12(3.89g)的乙醇(32.3mL)溶液中加入水(0.4mL)，冷却至0℃后，分次少量添加浓硫酸(5.63mL)。将反应混合溶液在85℃搅拌115小时后，冷却至0℃，加入饱和碳酸氢钠水溶液至液性达到中性为止。加入乙酸乙酯搅拌后，减压下将溶液浓缩。向溶液中加入乙酸乙酯，依次用饱和碳酸氢钠水溶液、饱和食盐水清洗，将其干燥。减压下蒸馏除去溶剂，得到标题化合物(4.40g)。
(中间体A-13 Rf(TLC)＝0.33(己烷：乙酸乙酯＝8:1))
参考例A-14:2-(3-溴噻吩-2-基)乙醇(中间体A-14)
[化99]
Figure BDA0002552068800000661
将中间体A-13(4.40g)的四氢呋喃(88.5mL)溶液在氮气气氛下冷却至0℃，加入氢化锂铝(672mg)，搅拌0.6小时。向反应混合溶液中加入冰水、1mol/L盐酸、乙酸乙酯，搅拌后依次用1mol/L盐酸、饱和碳酸氢钠水溶液、饱和食盐水清洗，将其干燥。减压下蒸馏除去溶剂，将所得到的残渣用柱色谱(己烷/乙酸乙酯)精制，得到标题化合物(2.69g)。
(中间体A-14 Rf(TLC)＝0.23(己烷：乙酸乙酯＝4:1))
参考例A-2-2：(2-(3-溴噻吩-2-基)乙氧基)(叔丁基)二甲基硅烷(中间体A-2-2)
[化100]
Figure BDA0002552068800000662
中间体A-2-2按照参考例A-2中记载的方法并使用中间体A-14(2.69g)代替2-(噻吩-2-基)乙醇来进行合成，得到标题化合物(3.93g)。
(中间体A-2-2Rf(TLC)＝0.76(己烷：乙酸乙酯＝4:1))
参考例A-3-2：4-溴-5-(2-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)乙基)噻吩-2-甲酸(中间体A-3-2)
[化101]
Figure BDA0002552068800000663
中间体A-3-2按照参考例A-3中记载的方法按并使用中间体A-2-2(293mg)代替中间体A-2、使用二异丙胺锂(1.09mol/L己烷-四氢呋喃溶液，928μL：KANTO)代替正丁基锂(2.6mol/L己烷溶液：KANTO)来进行合成，得到标题化合物(339mg)。
(中间体A-3-2 Rf(TLC)＝0.12(己烷：乙酸乙酯＝1:1))
参考例A-4-2：甲基4-溴-5-(2-羟基乙基)噻吩-2-甲酸酯(中间体A-4-2)
[化102]
Figure BDA0002552068800000671
中间体A-4-2按照参考例A-4中记载的方法并使用中间体A-3-2(377mg)代替中间体A-3来进行合成，得到标题化合物(217mg)。
(中间体A-4-2 Rf(TLC)＝0.53(己烷：乙酸乙酯＝1:1))
参考例A-5-2：甲基4-溴-5-(2-溴乙基)噻吩-2-甲酸酯(中间体A-5-2)
[化103]
Figure BDA0002552068800000672
中间体A-5-2按照参考例A-5中记载的方法并使用中间体A-4-2(217mg)代替中间体A-4来进行合成，得到标题化合物(315mg)。
(中间体A-5-2Rf(TLC)＝0.44(己烷：乙酸乙酯＝8:1))
参考例A-6-2：叔丁基2-(2-(3-溴-5-(甲氧基羰基)噻吩-2-基)乙基)肼甲酸酯(中间体A-6-2)
[化104]
Figure BDA0002552068800000673
中间体A-6-2按照参考例A-6中记载的方法并使用中间体A-5-2(315mg)代替中间体A-5来进行合成，得到标题化合物(168mg)。
(中间体A-5-2 Rf(TLC)＝0.48(己烷：乙酸乙酯＝1:1))
参考例Z-1-2：叔丁基2-(2-(3-溴-5-(甲氧基羰基)噻吩-2-基)乙基)-2-(((2-氯乙基)硫基)羰基)肼甲酸酯(中间体Z-1-2)
[化105]
Figure BDA0002552068800000681
向中间体A-6-2(1.98g)的二氯甲烷(13.1mL)溶液中加入碳酸氢钠(880mg)，冷却至0℃后，分次少量添加中间体B-3(993mg)。在室温下搅拌0.5小时后，向反应混合溶液中加入水和乙酸乙酯，将有机相依次用饱和碳酸氢钠水溶液、饱和食盐水清洗，进行干燥。减压下蒸馏除去溶剂，得到标题化合物(796mg)。
(中间体Z-1-2Rf(TLC)＝0.53(甲苯：乙酸乙酯＝8:1))
参考例Z-2-2：甲基4-溴-5-(2-(1-(((2-氯乙基)硫基)羰基)肼基)乙基)噻吩-2-甲酸酯(中间体Z-2-2)
[化106]
Figure BDA0002552068800000682
向中间体Z-1-2(796mg)中加入4mol/L氯化氢二氧六环溶液(7.5mL)，在室温下搅拌17.6小时。向反应混合溶液中加入乙酸乙酯、5mol/l氢氧化钠水溶液后，加入饱和碳酸氢钠水溶液至溶液达到碱性为止。将有机相依次用饱和碳酸氢钠水溶液、饱和食盐水清洗，将其干燥后，减压下蒸馏除去溶剂，得到标题化合物(594mg)。
(中间体Z-2-2Rf(TLC)＝0.42(甲苯：乙酸乙酯＝8:1))
参考例Z-3-2：甲基4-溴-5-(2-(2-氧代-1,3,4-噻二嗪-3-基)乙基)噻吩-2-甲酸酯(中间体Z-3-2)
[化107]
Figure BDA0002552068800000683
向中间体Z-2-2(594mg)的乙腈(14.9mL)溶液中依次加入碳酸氢钠(626mg)、碘化钠(1.12g)，在85℃搅拌120小时。将反应混合溶液冷却到室温后，加入乙酸乙酯、水进行萃取。将有机相依次用饱和碳酸氢钠水溶液、饱和食盐水清洗，将其干燥后，减压下蒸馏除去溶剂，将所得到的残渣用柱色谱(己烷/乙酸乙酯)精制，得到标题化合物(374mg)。
(中间体Z-3-2 Rf(TLC)＝0.13(己烷：乙酸乙酯＝2:1))
参考例C-4：N-甲氧基-N-甲基-2-(3-(噻吩-3-基乙炔基)苯基)乙酰胺(中间体C-4)
[化108]
Figure BDA0002552068800000691
向中间体C-2-2(1.0g)的乙腈(26mL)溶液中依次加入氯化双(乙腈)钯(43mg)、2-二环己基膦-2’,4’,6’-三异丙基联苯(243mg)、碳酸铯(2.1g)、3-乙炔基噻吩(650μL)，在氮气气氛下在60℃搅拌14小时。将反应混合溶液利用铺有硅藻土的滤纸过滤，将硅藻土上的残渣用乙酸乙酯清洗。将滤液与洗液混合，减压下蒸馏除去有机溶剂后，将所得到的残渣用柱色谱(己烷/乙酸乙酯)精制，得到标题化合物(850mg)。
(中间体C-4 Rf(TLC)＝0.40(己烷：乙酸乙酯＝1:1)，
LCMS：m/z286.13(MH+)；保持时间：1.70分钟；LC条件：LC-1)
参考例Z-14-2：甲基4-溴-5-(2-(2-氧代-4-(3-氧代-4-(3-(噻吩-3-基乙炔基)苯基)丁基)-1,3,4-噻二嗪-3-基)乙基)噻吩-2-甲酸酯(中间体Z-14-2)
[化109]
Figure BDA0002552068800000692
将中间体C-4(117mg)的1,2-二甲氧基乙烷(2.3mL)溶液在氮气气氛下冷却至0℃。向反应混合溶液中加入乙烯基溴化镁(1mol/L四氢呋喃溶液，620μL：Aldrich)，搅拌3小时。向反应混合溶液中加入2mol/L盐酸，搅拌1分钟。加入乙酸乙酯进行萃取，将其干燥后，减压下蒸馏除去溶剂。向所得到的残渣中加入乙醇(3mL)、水(3mL)、Z-3-2(100mg)，在110℃搅拌18小时。向反应混合溶液中加入饱和食盐水、氯仿进行萃取，将有机相干燥后，减压下蒸馏除去溶剂。将所得到的残渣用柱色谱(己烷/乙酸乙酯)精制，得到标题化合物(156.1mg)。
(中间体Z-14-2LCMS：m/z617.2(MH+)；保持时间：2.08分钟；LC条件：LC-1)
实施例2：4-溴-5-(2-(4-(3-羟基-4-(3-(噻吩-3-基乙炔基)苯基)丁基)-2-氧代-1,3,4-噻二嗪-3-基)乙基)噻吩-2-甲酸
[化110]
Figure BDA0002552068800000701
将中间体Z-14-2(156.1mg)的甲醇(3mL)溶液冷却至0℃，分次少量添加硼氢化钠(17.3mg)。在0℃搅拌1小时后，分次少量添加稀盐酸至反应混合溶液的液性达到中性为止。减压下蒸馏除去有机溶剂后，加入乙酸乙酯(2L)，冷却至0℃，分次少量添加饱和碳酸氢钠水溶液(1L)，搅拌5分钟。萃取有机相使其干燥后，减压下蒸馏除去溶剂。向所得到的残渣中加入四氢呋喃(4.6mL)、甲醇(4.6mL)、1mol/L氢氧化钠水溶液(4.6mL)，在室温下搅拌3小时。将反应混合溶液冷却至0℃，加入2mol/L盐酸后，用乙酸乙酯萃取，将其干燥。减压下蒸馏除去溶剂，将所得到的残渣用柱色谱(氯仿/甲醇)精制，得到标题化合物(140mg)。
(LCMS：m/z605.1(MH+)；保持时间：1.78分钟；LC条件：LC-1)
参考例Z-14-3：甲基5-(2-(2-氧代-4-(3-氧代-4-(3-(噻吩-2-基乙炔基)苯基)丁基)-1,3,4-噻二嗪-3-基)乙基)噻吩-2-甲酸酯(中间体Z-14-3)
[化111]
Figure BDA0002552068800000702
中间体Z-14-3按照参考例Z-14中记载的方法并使用2-乙炔基噻吩(33.6mg：MAYBRIDGE)代替3-乙炔基噻吩来进行合成，得到标题化合物(32.9mg)。
(中间体Z-14-3LCMS：m/z539.0(MH+)；保持时间：2.00分钟；LC条件：LC-1)
实施例3：5-(2-(4-(3-羟基-4-(3-(噻吩-2-基乙炔基)苯基)丁基)-2-氧代-1,3,4-噻二嗪-3-基)乙基)噻吩-2-甲酸
[化112]
Figure BDA0002552068800000711
将中间体Z-14-3(32.9mg)的甲醇(0.6mL)溶液冷却至0℃，分次少量添加硼氢化钠(3.6mg)。在0℃搅拌1.5小时后，用乙酸乙酯稀释，加入稀盐酸(1.5mL)。加入饱和碳酸氢钠水溶液至溶液的液性达到中性为止。用乙酸乙酯萃取，干燥后在减压下蒸馏除去溶剂。向所得到的残渣中加入四氢呋喃(920μL)、水(230μL)、2mol/L氢氧化钠水溶液(460μL)，在50℃搅拌14小时。将反应混合溶液冷却至0℃，静置5.5小时后，加入2mol/L盐酸，用乙酸乙酯萃取，将其干燥。减压下蒸馏除去溶剂，将所得到的残渣用液相色谱法(乙腈/水)精制，得到标题化合物(3.6mg)。
(LCMS：m/z527.0(MH+)；保持时间：1.79分钟；LC条件：LC-1)
参考例Z-6：甲基5-(2-(4-(4-(3-溴苯基)-3-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)丁基)-2-氧代-1,3,4-噻二嗪-3-基)乙基)噻吩-2-甲酸酯(中间体Z-6)
[化113]
Figure BDA0002552068800000712
向中间体Z-5(1.0g)的N,N-二甲基甲酰胺(19.5mL)溶液中加入咪唑(265mg)、叔丁基二甲基氯硅烷(596mg)，在30℃搅拌15小时。向反应混合溶液中加入饱和碳酸氢钠水溶液，用乙酸乙酯萃取。将有机相用饱和食盐水清洗后进行干燥，减压下蒸馏除去溶剂，将所得到的残渣用柱色谱(己烷/乙酸乙酯)精制，得到标题化合物(1.16g)。
(中间体Z-6LCMS：m/z627.0(MH+)；保持时间：2.53分钟；LC条件：LC-1)
参考例Z-21：甲基5-(2-(4-(3-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-4-(3-((三甲基甲硅烷基)乙炔基)苯基)丁基)-2-氧代-1,3,4-噻二嗪-3-基)乙基)噻吩-2-甲酸酯(中间体Z-21)
[化114]
Figure BDA0002552068800000721
向中间体Z-6(300mg)的乙腈(15.3mL)溶液中依次加入氯化双(乙腈)钯(12.4mg)、2-二环己基膦-2’,4’,6’-三异丙基联苯(68.3mg)、碳酸铯(311mg)、乙炔基三甲基硅烷(331μL)，在氮气气氛下在60℃搅拌19小时。向反应混合溶液中加入乙炔基三甲基硅烷(199μL)、氯化双(乙腈)钯(6.2mg)、2-二环己基膦-2’,4’,6’-三异丙基联苯(34.1mg)、碳酸铯(187mg)，在60℃搅拌3.75小时。将反应混合溶液在减压下蒸馏除去溶剂后，将所得到的残渣用柱色谱(己烷/乙酸乙酯)精制，得到标题化合物(245mg)。
(中间体Z-21LCMS：m/z645.4(MH+)；保持时间：2.35分钟；LC条件：LC-6)
参考例Z-22：甲基5-(2-(4-(3-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-4-(3-乙炔基苯基)丁基)-2-氧代-1,3,4-噻二嗪-3-基)乙基)噻吩-2-甲酸酯(中间体Z-22)
[化115]
Figure BDA0002552068800000722
向中间体Z-21(225mg)的甲醇溶液(3.6mL)中加入碳酸钾(50mg)，在室温下搅拌1小时。将反应混合溶液过滤，将滤纸上的残渣用甲醇清洗，将滤液与洗液一起浓缩。将所得到的残渣用柱色谱(己烷/乙酸乙酯)精制，得到标题化合物(198mg)。
(中间体Z-22LCMS：m/z573.3(MH+)；保持时间：1.37分钟；LC条件：LC-6)
实施例4：5-(2-(4-(3-羟基-4-(3-((4-甲基噻吩-3-基)乙炔基)苯基)丁基)-2-氧代-1,3,4-噻二嗪-3-基)乙基)噻吩-2-甲酸
[化116]
Figure BDA0002552068800000723
[步骤a]
甲基5-(2-(4-(3-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-4-(3-((4-甲基噻吩-3-基)乙炔基)苯基)丁基)-2-氧代-1,3,4-噻二嗪-3-基)乙基)噻吩-2-甲酸酯(中间体Z-7-4)
[化117]
Figure BDA0002552068800000731
向中间体Z-22(10mg)的乙腈(280μmL)溶液中依次加入氯化双(乙腈)钯(0.5mg)、2-二环己基膦-2’,4’,6’-三异丙基联苯(2.5mg)、碳酸铯(6.8mg)、3-溴-4-甲基噻吩(9.3mg：TCI)，在氮气气氛下在60℃搅拌4小时。将反应混合溶液用铺有硅藻土的滤纸过滤，将硅藻土上的残渣用乙酸乙酯清洗。将滤液与洗液混合，依次用水、饱和食盐水清洗后进行干燥。减压下蒸馏除去溶剂后，将所得到的残渣用柱色谱(己烷/乙酸乙酯)精制，得到标题化合物(7.4mg)。
(中间体Z-7-4LCMS：m/z699.4(MH+)；保持时间：2.18分钟；LC条件：LC-6)
[步骤b]
5-(2-(4-(3-羟基-4-(3-((4-甲基噻吩-3-基)乙炔基)苯基)丁基)-2-氧代-1,3,4-噻二嗪-3-基)乙基)噻吩-2-甲酸
将中间体Z-7-4(7.4mg)的四氢呋喃(390μL)溶液冷却至0℃，加入四丁基氟化铵(1mol/L四氢呋喃溶液：33μL)，在室温下搅拌2.5小时。向反应混合溶液中加入甲醇(390μL)、1mol/L氢氧化钠水溶液(390μL)，在室温下搅拌2小时。向反应混合溶液中加入2mol/L盐酸(100μL)、水(400μL)，用乙酸乙酯(1mL)萃取5次后，将其干燥。减压下蒸馏除去溶剂，将所得到的残渣用柱色谱(氯仿/甲醇)精制，得到标题化合物(4.9mg)。
(LCMS：m/z541.2(MH+)；保持时间：1.74分钟；LC条件：LC-1)
实施例5：5-(2-(4-(4-(3-((2-氯噻吩-3-基)乙炔基)苯基)-3-羟基丁基)-2-氧代-1,3,4-噻二嗪-3-基)乙基)噻吩-2-甲酸
[化118]
Figure BDA0002552068800000741
按照实施例4中记载的方法并使用3-溴-2-氯噻吩(20.7mg：TCI)代替3-溴-4-甲基噻吩来进行合成，得到标题化合物(12.9mg)。
(LCMS：m/z561.1(MH+)；保持时间：1.77分钟；LC条件：LC-1)
实施例6：5-(2-(4-(3-羟基-4-(3-((5-甲基噻吩-3-基)乙炔基)苯基)丁基)-2-氧代-1,3,4-噻二嗪-3-基)乙基)噻吩-2-甲酸
[化119]
Figure BDA0002552068800000742
[步骤a]
甲基5-(2-(4-(3-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-4-(3-((5-甲基噻吩-3-基)乙炔基)苯基)丁基)-2-氧代-1,3,4-噻二嗪-3-基)乙基)噻吩-2-甲酸酯(中间体Z-7-6)
[化120]
Figure BDA0002552068800000743
向中间体Z-22(20mg)的乙腈(1120μL)溶液中依次加入氯化双(乙腈)钯(0.9mg)、2-二环己基膦-2’,4’,6’-三异丙基联苯(5.0mg)、碳酸铯(13.7mg)、3-溴-5-甲基噻吩(18.5mg：TCI)，在氮气气氛下在60℃搅拌4小时。将反应混合溶液用铺有硅藻土的滤纸过滤，将硅藻土上的残渣用氯仿：甲醇＝9:1的混合溶剂清洗。将滤液与洗液混合，减压下蒸馏除去溶剂后，将所得到的残渣用柱色谱(己烷/乙酸乙酯)精制，得到标题化合物(16.2mg)。
(中间体Z-7-6LCMS：m/z699.4(MH+)；保持时间：2.20分钟；LC条件：LC-6)
[步骤b]
5-(2-(4-(3-羟基-4-(3-((5-甲基噻吩-3-基)乙炔基)苯基)丁基)-2-氧代-1,3,4-噻二嗪-3-基)乙基)噻吩-2-甲酸
将中间体Z-7-6(16.2mg)的四氢呋喃(850μL)溶液冷却至0℃，加入四丁基氟化铵(1mol/L四氢呋喃溶液：73μL)，在室温下搅拌2.5小时。向反应混合溶液中加入1mol/L氢氧化钠水溶液(66μL)，在室温下搅拌5小时。向反应混合溶液中加入1mol/L盐酸(500μL)，用乙酸乙酯(1mL)萃取5次后，用饱和食盐水(500μL)清洗，将其干燥。减压下蒸馏除去溶剂，得到标题化合物(22.1mg)。
(LCMS：m/z541.2(MH+)；保持时间：1.76分钟；LC条件：LC-1)
实施例7：5-(2-(4-(4-(3-((4-氰基噻吩-3-基)乙炔基)苯基)-3-羟基丁基)-2-氧代-1,3,4-噻二嗪-3-基)乙基)噻吩-2-甲酸
[化121]
Figure BDA0002552068800000751
按照实施例6中记载的方法并使用4-溴噻吩-3-甲腈(18.9mg：COMBI-BLOCKS)代替3-溴-5-甲基噻吩来进行合成，得到标题化合物(3.8mg)。
(LCMS：m/z552.1(MH+)；保持时间：1.52分钟；LC条件：LC-1)
实施例8：5-(2-(4-(4-(3-((2-氰基噻吩-3-基)乙炔基)苯基)-3-羟基丁基)-2-氧代-1,3,4-噻二嗪-3-基)乙基)噻吩-2-甲酸
[化122]
Figure BDA0002552068800000752
按照实施例6中记载的方法并使用3-溴噻吩-2-甲腈(18.9mg：APOLLO)代替3-溴-5-甲基噻吩来进行合成，得到标题化合物(5.5mg)。
(LCMS：m/z552.2(MH+)；保持时间：1.56分钟；LC条件：LC-1)
实施例9：5-(2-(4-(3-羟基-4-(3-(噻唑-4-基乙炔基)苯基)丁基)-2-氧代-1,3,4-噻二嗪-3-基)乙基)噻吩-2-甲酸
[化123]
Figure BDA0002552068800000761
按照实施例6中记载的方法并使用4-溴噻唑(17.2mg：ALDRICH)代替3-溴-5-甲基噻吩来进行合成，得到标题化合物(14.3mg)。
(LCMS：m/z528.2(MH+)；保持时间：1.38分钟；LC条件：LC-1)
实施例10：5-(2-(4-(4-(3-(呋喃-3-基乙炔基)苯基)-3-羟基丁基)-2-氧代-1,3,4-噻二嗪-3-基)乙基)噻吩-2-甲酸
[化124]
Figure BDA0002552068800000762
按照实施例6中记载的方法并使用3-溴呋喃(15.4mg：TCI)代替3-溴-5-甲基噻吩来进行合成，得到标题化合物(13.2mg)。
(LCMS：m/z511.2(MH+)；保持时间：1.57分钟；LC条件：LC-1)
实施例11：5-(2-(4-(4-(3-(呋喃-2-基乙炔基)苯基)-3-羟基丁基)-2-氧代-1,3,4-噻二嗪-3-基)乙基)噻吩-2-甲酸
[化125]
Figure BDA0002552068800000763
按照实施例6中记载的方法并使用2-溴呋喃(14.8mg：ALDRICH)代替3-溴-5-甲基噻吩来进行合成，得到标题化合物(4.5mg)。
(LCMS：m/z511.2(MH+)；保持时间：1.58分钟；LC条件：LC-1)
实施例12：5-(2-(4-(4-(3-((5-氰基噻吩-3-基)乙炔基)苯基)-3-羟基丁基)-2-氧代-1,3,4-噻二嗪-3-基)乙基)噻吩-2-甲酸
[化126]
Figure BDA0002552068800000771
[步骤a]
甲基5-(2-(4-(3-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-4-(3-((5-氰基噻吩-3-基)乙炔基)苯基)丁基)-2-氧代-1,3,4-噻二嗪-3-基)乙基)噻吩-2-甲酸酯(中间体Z-7-12)
[化127]
Figure BDA0002552068800000772
向中间体Z-22(14mg)的乙腈(400μL)溶液中依次加入氯化双(乙腈)钯(0.7mg)、2-二环己基膦-2’,4’,6’-三异丙基联苯(3.6mg)、碳酸铯(12.3mg)、4-溴噻吩-2-甲腈(18.9mg：COMBI-BLOCKS)，在氮气气氛下在60℃搅拌6小时。减压下蒸馏除去溶剂后，将所得到的残渣用柱色谱(己烷/乙酸乙酯)精制，得到标题化合物(6.4mg)。
(中间体Z-7-12LCMS：m/z680.4(MH+)；保持时间：1.71分钟；LC条件：LC-6)
[步骤b]
5-(2-(4-(4-(3-((5-氰基噻吩-3-基)乙炔基)苯基)-3-羟基丁基)-2-氧代-1,3,4-噻二嗪-3-基)乙基)噻吩-2-甲酸
将中间体Z-7-12(6.4mg)的四氢呋喃(330μL)溶液冷却至0℃，加入四丁基氟化铵(1mol/L四氢呋喃溶液：28μL)，在室温下搅拌4小时。向反应混合溶液中加入1mol/L氢氧化钠水溶液(30μL)，在室温下搅拌2小时。向反应混合溶液中加入1mol/L盐酸，用乙酸乙酯萃取后，将其干燥。减压下蒸馏除去溶剂，将所得到的残渣用柱色谱(氯仿/甲醇)精制，得到标题化合物(0.7mg)。
(LCMS：m/z552.2(MH+)；保持时间：1.60分钟；LC条件：LC-1)
实施例13：5-(2-(4-(3-羟基-4-(3-(噻唑-2-基乙炔基)苯基)丁基)-2-氧代-1,3,4-噻二嗪-3-基)乙基)噻吩-2-甲酸
[化128]
Figure BDA0002552068800000781
按照实施例6中记载的方法并使用2-溴噻唑(16.5mg：TCI)代替4-溴噻吩-2-甲腈来进行合成，得到标题化合物(0.4mg)。
(LCMS：m/z528.2(MH+)；保持时间：1.43分钟；LC条件：LC-1)
实施例14:5-(2-(4-(4-(3-((3-氰基噻吩-2-基)乙炔基)苯基)-3-羟基丁基)-2-氧代-1,3,4-噻二嗪-3-基)乙基)噻吩-2-甲酸
[化129]
Figure BDA0002552068800000782
[步骤a]
甲基5-(2-(4-(3-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-4-(3-((3-氰基噻吩-2-基)乙炔基)苯基)丁基)-2-氧代-1,3,4-噻二嗪-3-基)乙基)噻吩-2-甲酸酯(中间体Z-7-14)
[化130]
Figure BDA0002552068800000783
/>
向中间体Z-22(16mg)的乙腈(1mL)溶液中依次加入氯化双(乙腈)钯(0.7mg)、2-二环己基膦-2’,4’,6’-三异丙基联苯(4.0mg)、碳酸铯(10.9mg)、2-溴噻吩-3-甲腈(15.7mg：MAYBRIDGE)，在氮气气氛下在60℃搅拌18小时。将反应混合溶液用铺有硅藻土的滤纸过滤，将硅藻土上的残渣用氯仿：甲醇＝9:1的混合溶剂清洗。将滤液与洗液混合，减压下蒸馏除去溶剂后，将所得到的残渣用柱色谱(己烷/乙酸乙酯)精制，得到标题化合物(7.9mg)。
(中间体Z-7-14LCMS：m/z680.5(MH+)；保持时间：2.52分钟；LC条件：LC-1)
[步骤b]
5-(2-(4-(4-(3-((3-氰基噻吩-2-基)乙炔基)苯基)-3-羟基丁基)-2-氧代-1,3,4-噻二嗪-3-基)乙基)噻吩-2-甲酸
将中间体Z-7-14(7.9mg)的四氢呋喃(1mL)溶液冷却至0℃，加入四丁基氟化铵(1mol/L四氢呋喃溶液：0.5mL)，在室温下搅拌18小时。向反应混合溶液中加入甲醇(0.5mL)、1mol/L氢氧化钠水溶液(0.5mL)，在室温下搅拌2.5小时。向反应混合溶液中加入1mol/L盐酸，用乙酸乙酯萃取，将其干燥。减压下蒸馏除去溶剂，将所得到的残渣用柱色谱(氯仿/甲醇)精制，得到标题化合物(3.0mg)。
(LCMS：m/z552.0(MH+)；保持时间：1.57分钟；LC条件：LC-1)
实施例15：5-(2-(4-(3-羟基-4-(3-(苯基乙炔基)苯基)丁基)-2-氧代-1,3,4-噻二嗪-3-基)乙基)噻吩-2-甲酸
[化131]
Figure BDA0002552068800000791
按照实施例14中记载的方法并使用溴苯(12.3mg：TCI)代替2-溴噻吩-2-甲腈来进行合成，得到标题化合物(2.4mg)。
(LCMS：m/z521.0(MH+)；保持时间：1.71分钟；LC条件：LC-1)
实施例16：5-(2-(4-(3-羟基-4-(3-((2-甲氧基苯基)乙炔基)苯基)丁基)-2-氧代-1,3,4-噻二嗪-3-基)乙基)噻吩-2-甲酸
[化132]
Figure BDA0002552068800000792
按照实施例14中记载的方法并使用1-溴-2-甲氧基苯(14.7mg：WAKO)代替2-溴噻吩-2-甲腈来进行合成，得到标题化合物(1.6mg)。
(LCMS：m/z551.3(MH+)；保持时间：1.64分钟；LC条件：LC-1)
参考例A-10-2：(3-氯噻吩-2-基)甲醇(中间体A-10-2)
[化133]
Figure BDA0002552068800000801
将3-氯噻吩-2-甲酸(4.47g：ALDRICH)的四氢呋喃(88.1mL)溶液在氮气气氛下冷却至0℃，滴加硼烷四氢呋喃络合物的1mol/L四氢呋喃溶液(49.7mL)后，在室温下搅拌22小时。将反应混合溶液冷却至0℃，加入甲醇、水、乙酸乙酯进行搅拌。减压下蒸馏除去有机溶剂后，加入乙酸乙酯，依次用饱和碳酸氢钠水溶液、饱和食盐水清洗，将其干燥。减压下蒸馏除去溶剂，得到标题化合物(4.62g)。
(中间体A-10-2Rf(TLC)＝0.40(己烷：乙酸乙酯＝2:1))
参考例A-11-2：3-氯-2-(溴甲基)噻吩(中间体A-11-2)
[化134]
Figure BDA0002552068800000802
将中间体A-10-2(4.62g)的二氯甲烷(110mL)溶液冷却至0℃，加入三苯基膦(10.8g)、四溴化碳(10.9g)，在室温下搅拌1小时。向反应混合溶液中加入水、饱和食盐水、乙酸乙酯，搅拌后在减压下蒸馏除去有机溶剂。加入乙酸乙酯后，用饱和食盐水依次清洗，进行干燥。减压下蒸馏除去有机溶剂后，向所得到的残渣中加入己烷：乙酸乙酯＝9:1的混合溶剂制成悬浮液，用铺有硅胶的滤纸进行过滤。将滤液在减压下蒸馏除去溶剂，得到标题化合物(9.09g)。
(中间体A-11-2Rf(TLC)＝0.56(己烷：乙酸乙酯＝8:1))
参考例A-12-2：2-(3-氯噻吩-2-基)乙腈(中间体A-12-2)
[化135]
Figure BDA0002552068800000811
向中间体A-11-2(9.09g)中加入二甲基亚砜(42mL)、乙腈(126mL)，冷却至0℃后，加入氰化钠(2.46g)，在室温下搅拌2小时。向反应混合溶液中加入水、饱和食盐水、乙酸乙酯，搅拌后用减饱和食盐水清洗，将其干燥。减压下蒸馏除去溶剂后，将所得到的残渣用柱色谱(己烷/乙酸乙酯)精制，得到标题化合物(3.41g)。
(中间体A-12-2Rf(TLC)＝0.20(己烷：乙酸乙酯＝8:1))
参考例A-13-2：乙基2-(3-氯噻吩-2-基)乙酸酯(中间体A-13-2)
[化136]
Figure BDA0002552068800000812
向中间体A-12-2(3.41g)的乙醇(36mL)溶液中加入水(0.46mL)，冷却至0℃后，分次少量添加浓硫酸(6.3mL)。将反应混合溶液在85℃搅拌88小时后，冷却至0℃，加入饱和碳酸氢钠水溶液至液性达到中性为止。加入乙酸乙酯搅拌后，减压下将溶液浓缩。向溶液中加入乙酸乙酯，依次用饱和碳酸氢钠水溶液、饱和食盐水清洗，将其干燥。减压下蒸馏除去溶剂，得到标题化合物(4.56g)。
(中间体A-13-2Rf(TLC)＝0.31(己烷：乙酸乙酯＝8:1))
参考例A-14-2：2-(3-氯噻吩-2-基)乙醇(中间体A-14-2)
[化137]
Figure BDA0002552068800000813
将中间体A-13-2(4.56g)的四氢呋喃(108mL)溶液在氮气气氛下冷却至0℃，加入氢化锂铝(1.48g)搅拌0.7小时。向反应混合溶液中加入水、二乙醚、1mol/L盐酸，搅拌后依次用1mol/L盐酸、饱和碳酸氢钠水溶液、饱和食盐水清洗，将其干燥。减压下蒸馏除去溶剂，得到标题化合物(3.67g)。
(中间体A-14-2 Rf(TLC)＝0.13(己烷：乙酸乙酯＝4:1))
参考例A-2-3：(2-(3-氯噻吩-2-基)乙氧基)(叔丁基)二甲基硅烷(中间体A-2-3)
[化138]
Figure BDA0002552068800000821
中间体A-2-3按照参考例A-2中记载的方法并使用中间体A-14-2(3.67g)代替2-(噻吩-2-基)乙醇来代替来进行合成，得到标题化合物(4.29g)。
(中间体A-2-3 Rf(TLC)＝0.61(己烷：乙酸乙酯＝4:1))
参考例A-3-3：4-氯-5-(2-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)乙基)噻吩-2-甲酸(中间体A-3-3)
[化139]
Figure BDA0002552068800000822
中间体A-3-3按照参考例A-3中记载的方法并使用中间体A-2-3(3.03g)代替中间体A-2来进行合成，得到标题化合物(3.41g)。
(中间体A-3-3Rf(TLC)＝0.11(己烷：乙酸乙酯＝4:1))
参考例A-4-3：甲基4-氯-5-(2-羟基乙基)噻吩-2-甲酸酯(中间体A-4-3)
[化140]
Figure BDA0002552068800000823
中间体A-4-3按照参考例A-4中记载的方法并使用中间体A-3-3(4.35g)代替中间体A-3来进行合成，得到标题化合物(2.23g)。
(中间体A-4-3Rf(TLC)＝0.38(己烷：乙酸乙酯＝1:1))
参考例A-5-3：甲基4-氯-5-(2-溴乙基)噻吩-2-甲酸酯(中间体A-5-3)
[化141]
Figure BDA0002552068800000831
中间体A-5-3按照参考例A-5中记载的方法并使用中间体A-4-3(2.23g)代替中间体A-4来进行合成，得到标题化合物(3.18g)。
(中间体A-5-3 Rf(TLC)＝0.52(己烷：乙酸乙酯＝2:1))
参考例A-6-3：叔丁基2-(2-(3-氯-5-(甲氧基羰基)噻吩-2-基)乙基)肼甲酸酯(中间体A-6-3)
[化142]
Figure BDA0002552068800000832
中间体A-6-3按照参考例A-6中记载的方法并使用中间体A-5-3(3.18g)代替中间体A-5来进行合成，得到标题化合物(3.29g)。
(中间体A-5-3 Rf(TLC)＝0.24(己烷：乙酸乙酯＝2:1))
参考例Z-1-3：叔丁基2-(2-(3-氯-5-(甲氧基羰基)噻吩-2-基)乙基)-2-(((2-氯乙基)硫基)羰基)肼甲酸酯(中间体Z-1-3)
[化143]
Figure BDA0002552068800000833
中间体Z-1-3按照参考例Z-1-2中记载的方法并使用中间体A-6-3(1.79g)代替中间体A-6-2来进行合成，得到标题化合物(2.36g)。
(中间体Z-1-3 Rf(TLC)＝0.24(己烷：乙酸乙酯＝4:1))
参考例Z-2-3：甲基4-氯-5-(2-(1-(((2-氯乙基)硫基)羰基)肼基)乙基)噻吩-2-甲酸酯(中间体Z-2-3)
[化144]
Figure BDA0002552068800000841
中间体Z-2-3按照参考例Z-2-2中记载的方法并使用中间体Z-1-3(2.36g)代替中间体Z-1-2来进行合成，得到标题化合物(1.73g)。
(中间体Z-2-3Rf(TLC)＝0.69(己烷：乙酸乙酯＝1:1))
参考例Z-3-3：甲基4-氯-5-(2-(2-氧代-1,3,4-噻二嗪-3-基)乙基)噻吩-2-甲酸酯(中间体Z-3-3)
[化145]
Figure BDA0002552068800000842
中间体Z-3-3按照参考例Z-3-2中记载的方法并使用中间体Z-2-3(1.73g)代替中间体Z-2-2来进行合成，得到标题化合物(1.04g)。
(中间体Z-3-3Rf(TLC)＝0.23(己烷：乙酸乙酯＝1:1))
参考例Z-4-3：甲基4-氯-5-(2-(4-(4-(3-碘苯基)-3-氧代丁基)-2-氧代-1,3,4-噻二嗪-3-基)乙基)噻吩-2-甲酸酯(中间体Z-4-3)
[化146]
Figure BDA0002552068800000843
中间体Z-4-3按照参考例Z-4中记载的方法并使用中间体Z-3-3(0.30g)代替中间体Z-3、使用中间体C-3-2(参考例C-3-2所记载的方法中，使用原料C-2-2(2.56g)制造、获得的中间体C-3-2的总量)代替中间体C-3来进行合成，得到标题化合物(0.64g)。
(中间体Z-4-3Rf(TLC)＝0.31(己烷：乙酸乙酯＝1:1))
参考例Z-14-4：甲基4-氯-5-(2-(2-氧代-4-(3-氧代-4-(3-(噻吩-3-基乙炔基)苯基)丁基)-1,3,4-噻二嗪-3-基)乙基)噻吩-2-甲酸酯(中间体Z-14-4)
[化147]
Figure BDA0002552068800000851
向中间体Z-4-3(429mg)中依次加入二乙胺(3.62mL)、3-乙炔基噻吩(93μL)、碘化铜(I)(13.8mg)、四(三苯基膦)钯(41.8mg)，在氮气气氛下在室温下搅拌3.5小时。向反应混合溶液中加入1mol/L盐酸，用乙酸乙酯萃取2次。将有机相用饱和食盐水、依次用饱和碳酸氢钠水溶液、饱和食盐水清洗，将其干燥。减压下蒸馏除去溶剂，将所得到的残渣用柱色谱(氯仿/甲醇)精制，得到标题化合物(290.4mg)。
(中间体Z-14-4 LCMS：m/z573.2(MH+)；保持时间：2.03分钟；LC条件：LC-1)
参考例Z-17-17：甲基4-氯-5-(2-(4-(3-羟基-4-(3-(噻吩-3-基乙炔基)苯基)丁基)-2-氧代-1,3,4-噻二嗪-3-基)乙基)噻吩-2-甲酸酯(中间体Z-17-17)
[化148]
Figure BDA0002552068800000852
向中间体Z-14-4(290mg)的甲醇(5mL)溶液中加入四氢呋喃(1mL)后冷却至0℃，分次少量添加硼氢化钠(28.8mg)。在室温下搅拌1.6小时后，加入水，进一步分次少量添加1当量盐酸直至反应混合溶液的液性达到弱酸性为止。用乙酸乙酯萃取2次后，将有机相依次用饱和碳酸氢钠水溶液、饱和食盐水清洗，将其干燥。减压下蒸馏除去溶剂，将所得到的残渣用柱色谱(氯仿/甲醇)精制，得到标题化合物(183mg)。
(中间体Z-17-17 LCMS：m/z575.2(MH+)；保持时间：1.98分钟；LC条件：LC-1)
实施例17：4-氯-5-(2-(4-(3-羟基-4-(3-(噻吩-3-基乙炔基)苯基)丁基)-2-氧代-1,3,4-噻二嗪-3-基)乙基)噻吩-2-甲酸
[化149]
Figure BDA0002552068800000861
向中间体Z-17-17(183mg)的四氢呋喃(2mL)溶液加入甲醇(2mL)后冷却至0℃，加入水(2.38mL)、4mol/L氢氧化锂水溶液(2.38mL)。在室温下搅拌1小时后，向反应混合溶液中加入水，进一步分次少量添加2当量盐酸直至反应混合溶液的液性达到弱酸性为止。用乙酸乙酯萃取2次后，将有机相依次用饱和碳酸氢钠水溶液、饱和食盐水清洗，将其干燥。减压下蒸馏除去溶剂，将所得到的残渣用柱色谱(氯仿/甲醇)精制，得到标题化合物(129mg)。
(LCMS：m/z561.25(MH+)；保持时间：1.72分钟；LC条件：LC-1)
参考例C-1：2-(3-溴-4-甲基苯基)乙腈(中间体C-1)
[化150]
Figure BDA0002552068800000862
向2-溴-1,4-二甲基苯(2g：TCI)的四氯化碳(21.6mL)溶液中加入N-溴代丁二酰亚胺(1.06g)、过氧化苯甲酰(56.7mg)，在85℃搅拌1.5小时。向反应混合溶液中加入N-溴代丁二酰亚胺(1.06g)、过氧化苯甲酰(56.7mg)，在85℃进一步搅拌4.5小时。将反应混合溶液冷却到室温后，用滤纸过滤，将滤纸上的残渣用二氯甲烷清洗。将滤液与洗液混合，减压下蒸馏除去溶剂。向所得到的残渣中加入乙醇(10.8mL)、水(5.4mL)、氰化钾(2.1g)，在100℃搅拌5小时。将反应混合溶液冷却到室温，用乙酸乙酯萃取后，将有机相干燥。减压下蒸馏除去溶剂，将所得到的残渣用柱色谱(己烷/乙酸乙酯)精制，得到标题化合物(576mg)。
(中间体C-1 Rf(TLC)＝0.58(己烷：乙酸乙酯＝2:1))
1H-NMR(CDCl3)：δ(ppm)7.51(1H,s),7.24(1H,d,J＝7.5Hz),7.18(1H,d,J＝7.5Hz),3.70(2H,s),2.40(3H,s)
参考例C-2-4：2-(3-溴-4-甲基苯基)-N-甲氧基-N-甲基乙酰胺(中间体C-2-4)
[化151]
Figure BDA0002552068800000871
向中间体C-1(300mg)中加入水(7.1mL)，冷却至0℃，分次少量添加浓硫酸(5.7mL)后，在105℃搅拌15小时。将反应混合溶液冷却至室温后，加入乙酸乙酯进行萃取。向水相中加入己烷进行萃取后，进一步用二乙醚萃取。将所得到的有机相混合，将有机相用饱和碳酸氢钠水溶液清洗，进行干燥。在减压下蒸馏除去溶剂，向所得到的残渣中依次加入N,N-二甲基甲酰胺(14.3mL)、N,O-二甲基羟胺盐酸盐(557mg)、1-乙基-3-(3-二甲氨基丙基)碳化二亚胺盐酸盐(821mg)、N,N-二甲基-4-氨基吡啶(17mg)、二异丙基乙胺(1.2mL)，在室温下搅拌17小时。向反应混合溶液中加入二乙醚后，用1mol/L盐酸清洗3次、用饱和食盐水清洗1次，将其干燥。减压下蒸馏除去溶剂，将所得到的残渣用柱色谱(己烷/乙酸乙酯)精制，得到标题化合物(221mg)。
(中间体C-2-4 LCMS：m/z272.3(MH+)；保持时间：1.57分钟；LC条件：LC-1)
参考例Z-4-4：甲基5-(2-(4-(4-(3-溴-4-甲基苯基)-3-氧代丁基)-2-氧代-1,3,4-噻二嗪-3-基)乙基)噻吩-2-甲酸酯(中间体Z-4-4)
[化152]
Figure BDA0002552068800000872
将中间体C-2-4(142.6mg)的二甲氧基乙烷(2.85mL)溶液在氮气气氛下冷却至0℃。向反应混合溶液中加入乙烯基溴化镁(1mol/L四氢呋喃溶液，790μL：ALDRICH)，搅拌4小时。向反应混合溶液中加入2mol/L盐酸，搅拌1分钟。加入乙酸乙酯进行萃取，将有机相干燥。减压下蒸馏除去溶剂，向所得到的残渣中加入乙醇(3mL)、水(3mL)、中间体Z-3(100mg)，在110℃搅拌过夜。向反应混合溶液中加入饱和食盐水，用氯仿萃取。将有机相干燥，减压下蒸馏除去溶剂。将所得到的残渣用柱色谱(己烷/乙酸乙酯)精制，得到标题化合物(151.9mg)。
(中间体Z-4-4 LCMS：m/z525.1(MH+)；保持时间：1.87分钟；LC条件：LC-1)
参考例Z-6-4：甲基5-(2-(4-(4-(3-溴-4-甲基苯基)-3-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)丁基)-2-氧代-1,3,4-噻二嗪-3-基)乙基)噻吩-2-甲酸酯(中间体Z-6-4)
[化153]
Figure BDA0002552068800000881
向中间体Z-4-4(152mg)的甲醇(2.9mL)溶液中加入四氢呋喃(5mL)，冷却至0℃，加入硼氢化钠(16.4mg)。在0℃搅拌1小时后，分次少量添加稀盐酸直至反应混合溶液的液性达到弱酸性为止。减压下蒸馏除去有机溶剂后，加入乙酸乙酯进行萃取，将有机相干燥后，减压下蒸馏除去溶剂。向所得到的残渣中依次加入N,N-二甲基甲酰胺(1.4mL)、咪唑(98mg)、叔丁基二甲基氯硅烷(131mg)，在室温下搅拌过夜。向反应混合溶液中加入2mol/L盐酸，用乙酸乙酯萃取。将有机相依次用水、饱和食盐水清洗后，进行干燥。减压下蒸馏除去溶剂，将所得到的残渣用柱色谱(己烷/乙酸乙酯)精制，得到标题化合物(165.7mg)。
(中间体Z-6-4 LCMS：m/z641.2(MH+)；保持时间：2.02分钟；LC条件：LC-6)
参考例Z-7-18：甲基5-(2-(4-(3-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-4-(4-甲基-3-(噻吩-3-基乙炔基)苯基)丁基)-2-氧代-1,3,4-噻二嗪-3-基)乙基)噻吩-2-甲酸酯(中间体Z-7-18)
[化154]
Figure BDA0002552068800000882
中间体Z-7-18按照参考例C-4中记载的方法并使用中间体Z-6-4(20.0mg)代替中间体C-2-2来进行合成，得到标题化合物(23.4mg)。
(中间体Z-7-18 LCMS：m/z669.3(MH+)；保持时间：2.25分钟；LC条件：LC-6)
实施例18：5-(2-(4-(3-羟基-4-(4-甲基-3-(噻吩-3-基乙炔基)苯基)丁基)-2-氧代-1,3,4-噻二嗪-3-基)乙基)噻吩-2-甲酸
[化155]
Figure BDA0002552068800000891
将中间体Z-7-18(23.4mg)的四氢呋喃(0.93mL)溶液冷却至0℃，加入四丁基氟化铵(1mol/L四氢呋喃溶液：93μL)，在室温下搅拌1.5小时。向反应混合溶液中加入四丁基氟化铵(1mol/L四氢呋喃溶液：93μL)，在室温下进一步搅拌1.5小时。向反应混合溶液中加入甲醇(0.93mL)、1mol/L氢氧化钠水溶液(0.93mL)，在室温下搅拌过夜。向反应混合溶液中加入1mol/L盐酸，用乙酸乙酯萃取，将其干燥。减压下蒸馏除去溶剂，将所得到的残渣用柱色谱(氯仿/甲醇)精制，得到标题化合物(17.3mg)。
(LCMS：m/z541.2(MH+)；保持时间：1.74分钟；LC条件：LC-1)
参考例C-1-2：2-(3-溴-5-甲基苯基)乙腈(中间体C-1-2)
[化156]
Figure BDA0002552068800000892
中间体C-1-2按照参考例C-1中记载的方法并使用1-溴-3,5-二甲基苯(4.00g：TCI)代替2-溴-1,4-二甲基苯来进行合成，得到标题化合物(2.34g)。
(中间体C-1-2 Rf(TLC)＝0.64(己烷：乙酸乙酯＝2:1))
1H-NMR(CDCl3)：δ(ppm)7.31(1H,m),7.28(1H,m),7.09(1H,m),3.69(2H,s),2.35(3H,s)
参考例C-2-5：2-(3-溴-5-甲基苯基)-N-甲氧基-N-甲基乙酰胺(中间体C-2-5)
[化157]
Figure BDA0002552068800000901
中间体C-2-5按照参考例C-2-4中记载的方法并使用中间体C-1-2(500mg)代替中间体C-1来进行合成，得到标题化合物(553mg)。
(中间体C-2-5LCMS：m/z272.3(MH+)；保持时间：1.57分钟；LC条件：LC-1)
参考例Z-4-5：甲基5-(2-(4-(4-(3-溴-5-甲基苯基)-3-氧代丁基)-2-氧代-1,3,4-噻二嗪-3-基)乙基)噻吩-2-甲酸酯(中间体Z-4-5)
[化158]
Figure BDA0002552068800000902
中间体Z-4-5按照参考例Z-4-4中记载的方法并使用中间体C-2-5(142.6mg)代替中间体C-2-4来进行合成，得到标题化合物(149.9mg)。
(中间体Z-4-5LCMS：m/z525.1(MH+)；保持时间：1.88分钟；LC条件：LC-1)
参考例Z-6-5：甲基5-(2-(4-(4-(3-溴-5-甲基苯基)-3-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)丁基)-2-氧代-1,3,4-噻二嗪-3-基)乙基)噻吩-2-甲酸酯(中间体Z-6-5)
[化159]
Figure BDA0002552068800000903
中间体Z-6-5按照参考例Z-6-4中记载的方法并使用中间体Z-4-5(149.9mg)代替中间体Z-4-4来进行合成，得到标题化合物(163.0mg)。
(中间体Z-6-5 LCMS：m/z641.3(MH+)；保持时间：2.00分钟；LC条件：LC-6)
参考例Z-7-19：甲基5-(2-(4-(3-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-4-(3-甲基-5-(噻吩-3-基乙炔基)苯基)丁基)-2-氧代-1,3,4-噻二嗪-3-基)乙基)噻吩-2-甲酸酯(中间体Z-7-19)
[化160]
Figure BDA0002552068800000911
中间体Z-7-19按照参考例C-4中记载的方法并使用中间体Z-6-5(20mg)代替中间体C-2-2来进行合成，得到标题化合物(19.2mg)。
(中间体Z-7-19LCMS：m/z669.3(MH+)；保持时间：2.25分钟；LC条件：LC-6)
实施例19：5-(2-(4-(3-羟基-4-(3-甲基-5-(噻吩-3-基乙炔基)苯基)丁基)-2-氧代-1,3,4-噻二嗪-3-基)乙基)噻吩-2-甲酸
[化161]
Figure BDA0002552068800000912
按照实施例18中记载的方法并使用中间体Z-7-19(19.2mg)代替中间体Z-7-18来进行合成，得到标题化合物(13.5mg)。
(LCMS：m/z541.2(MH+)；保持时间：1.74分钟；LC条件：LC-1)
参考例C-2-6：2-(3-溴-4-氟苯基)-N-甲氧基-N-甲基乙酰胺(中间体C-2-6)
[化162]
Figure BDA0002552068800000921
向2-(3-溴-4-氟苯基)乙酸(500mg)的二氯甲烷(43mL)溶液中依次加入N,O-二甲基羟胺盐酸盐(419mg)、1-乙基-3-(3-二甲氨基丙基)碳化二亚胺盐酸盐(494mg)、N,N-二甲基-4-氨基吡啶(26mg)、二异丙基乙胺(1.2mL)，在室温下搅拌过夜。将反应混合溶液在减压下蒸馏除去溶剂，加入乙酸乙酯后，依次用1mol/L盐酸、饱和食盐水清洗，将其干燥。减压下蒸馏除去溶剂，将所得到的残渣用柱色谱(己烷/乙酸乙酯)精制，得到标题化合物(449mg)。
(中间体C-2-6LCMS：m/z276.2(MH+)；保持时间：1.37分钟；LC条件：LC-1)
参考例Z-4-6：甲基5-(2-(4-(4-(3-溴-4-氟苯基)-3-氧代丁基)-2-氧代-1,3,4-噻二嗪-3-基)乙基)噻吩-2-甲酸酯(中间体Z-4-6)
[化163]
Figure BDA0002552068800000922
中间体Z-4-6按照参考例Z-4-4中记载的方法并使用中间体C-2-6(450.5mg)代替中间体C-2-4来进行合成，得到标题化合物(562.8mg)。
(中间体Z-4-6LCMS：m/z529.1(MH+)；保持时间：1.78分钟；LC条件：LC-1)
参考例Z-6-6：甲基5-(2-(4-(4-(3-溴-4-氟苯基)-3-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)丁基)-2-氧代-1,3,4-噻二嗪-3-基)乙基)噻吩-2-甲酸酯(中间体Z-6-6)
[化164]
Figure BDA0002552068800000923
中间体Z-6-6按照参考例Z-6-4中记载的方法并使用中间体Z-4-6(562.8mg)代替中间体Z-4-4来进行合成，得到标题化合物(719.7mg)。
(中间体Z-6-6 LCMS：m/z645.3(MH+)；保持时间：1.64分钟；LC条件：LC-6)
参考例Z-7-20：甲基5-(2-(4-(3-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-4-(4-氟-3-(噻吩-3-基乙炔基)苯基)丁基)-2-氧代-1,3,4-噻二嗪-3-基)乙基)噻吩-2-甲酸酯(中间体Z-7-20)
[化165]
Figure BDA0002552068800000931
中间体Z-7-20按照参考例C-4中记载的方法并使用中间体Z-6-6(15.0mg)代替中间体C-2-2来进行合成，得到标题化合物(15.3mg)。
(中间体Z-7-20LCMS：m/z673.4(MH+)；保持时间：1.87分钟；LC条件：LC-6)
实施例20：5-(2-(4-(4-(4-氟-3-(噻吩-3-基乙炔基)苯基)-3-羟基丁基)-2-氧代-1,3,4-噻二嗪-3-基)乙基)噻吩-2-甲酸
[化166]
Figure BDA0002552068800000932
将中间体Z-7-20(15.3mg)的四氢呋喃(345μL)溶液冷却至0℃，加入四丁基氟化铵(1mol/L四氢呋喃溶液：69μL)，在室温下搅拌4小时。向反应混合溶液中加入四丁基氟化铵(1mol/L四氢呋喃溶液：70μL)、四氢呋喃(350μL)，在室温下进一步搅拌2.5小时。向反应混合溶液中加入甲醇(345μL)、1mol/L氢氧化钠水溶液(345μL)，在室温下搅拌过夜。向反应混合溶液中加入1mol/L盐酸、乙酸乙酯进行萃取后，将有机相用1mol/L盐酸清洗，将其干燥。减压下蒸馏除去溶剂，将所得到的残渣用阴离子交换树脂精制，得到标题化合物(15.3mg)。
(LCMS：m/z545.2(MH+)；保持时间：1.67分钟；LC条件：LC-1)
参考例X-1：4-苯基噻吩-3-甲醛(中间体X-1)
[化167]
Figure BDA0002552068800000941
向(4-甲酰基噻吩-3-基)硼酸(0.5g：COMBI-BLOCKS)的正丁醇(32mL)溶液中依次加入溴噻吩(1.0mL：TCI)、水(6.4mL)、乙酸钯(36mg)、2-二环己基膦-2’,6’-二甲氧基联苯(132mg)、磷酸钾(1.36g)，在氮气气氛下在95℃搅拌过夜。向反应混合溶液中加入二乙醚后，用水清洗，将其干燥。减压下蒸馏除去溶剂，将所得到的残渣用柱色谱(己烷/乙酸乙酯)精制，得到标题化合物(445mg)。
(中间体X-1 LCMS：m/z189.0(MH+)；保持时间：1.54分钟；LC条件：LC-1)
参考例X-2：3-乙炔基-4-苯基噻吩(中间体X-2)
[化168]
Figure BDA0002552068800000942
向(1-重氮-2-氧代丙基)膦酸二甲酯(727mg：TCI)的甲醇(14.9mL)溶液中加入中间体X-1(445mg)，冷却至0℃。向反应混合溶液中分次少量加入碳酸钾(686mg)，在室温下搅拌过夜。向反应混合溶液中加入饱和氯化铵水溶液，用二乙醚萃取。将有机相干燥后，减压下蒸馏除去溶剂，将所得到的残渣用柱色谱(己烷/乙酸乙酯)精制，得到标题化合物(384mg)。
(中间体X-2 LCMS：m/z185.1(MH+)；保持时间：1.81分钟；LC条件：LC-1)
参考例Z-7-21：甲基5-(2-(4-(3-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-4-(3-((4-苯基噻吩-3-基)乙炔基)苯基)丁基)-2-氧代-1,3,4-噻二嗪-3-基)乙基)噻吩-2-甲酸酯(中间体Z-7-21)
[化169]
Figure BDA0002552068800000951
将中间体Z-7-21按照参考例C-4中记载的方法并使用中间体Z-6(15.0mg)代替中间体C-2-2、使用中间体X-2(9.4mg)代替3-乙炔基噻吩来进行合成，得到标题化合物(15.2mg)。
(中间体Z-7-21 LCMS：m/z731.21(MH+)；保持时间：2.41分钟；LC条件：LC-6)
实施例21：5-(2-(4-(3-羟基-4-(3-((4-苯基噻吩-3-基)乙炔基)苯基)丁基)-2-氧代-1,3,4-噻二嗪-3-基)乙基)噻吩-2-甲酸
[化170]
Figure BDA0002552068800000952
按照实施例18中记载的方法并使用中间体Z-7-21(15.2mg)代替中间体Z-7-18来进行合成，得到标题化合物(5.7mg)。
(LCMS：m/z603.0(MH+)；保持时间：1.87分钟；LC条件：LC-1)
参考例T-2：2-(4-溴噻吩-2-基)-N-甲氧基-N-甲基乙酰胺(中间体T-2)
[化171]
Figure BDA0002552068800000953
将2-(4-溴噻吩-2-基)乙酸(1.0g)的二氯甲烷(9mL)溶液冷却至0℃，加入N,O-二甲基羟胺盐酸盐(882mg)、1-乙基-3-(3-二甲氨基丙基)碳化二亚胺盐酸盐(1.04g)、N,N-二甲基-4-氨基吡啶(55mg)、二异丙基乙胺(3.38mL)、接着加入二异丙基乙胺(0.35mL)，在室温下搅拌41小时。将反应液浓缩后，加入乙酸乙酯和水，加入1mol/L盐酸进行分配，进一步用乙酸乙酯萃取2次。依次用1mol/L盐酸、水、饱和碳酸氢钠水溶液、水、饱和食盐水清洗，用硫酸镁干燥，减压下浓缩，得到标题化合物(891mg)。
(中间体T-2 LCMS：m/z264.2,266(MH+)；保持时间：1.36分钟；LC条件：LC-1)
参考例T-3：1-(4-溴噻吩-2-基)-4-(甲氧基(甲基)氨基)丁烷-2-酮(中间体T-3)
[化172]
Figure BDA0002552068800000961
将中间体T-2(200mg)的1,2-二甲氧基乙烷(7mL)溶液在氮气气氛下冷却至0℃。向反应混合溶液中加入乙烯基溴化镁(1mol/L四氢呋喃溶液，1.1mL：ALDRICH)，在该温度下搅拌2小时50分钟。保持0℃加入1mol/L盐酸使其成为酸性后，用乙酸乙酯萃取3次。将有机层用水、饱和食盐水清洗，用硫酸镁干燥后，减压下浓缩，得到标题化合物(172.8mg)。
(中间体T-3 LCMS：m/z292.1,294(MH+)；保持时间：1.55分钟；LC条件：LC-1)
参考例T-4：甲基5-(2-(4-(4-(4-溴噻吩-2-基)-3-氧代丁基)-2-氧代-1,3,4-噻二嗪-3-基)乙基)噻吩-2-甲酸酯(中间体T-4)
[化173]
Figure BDA0002552068800000962
将中间体T-3(172.8mg)和中间体Z-3(181mg)溶解在乙醇(5mL)中，加入水(5mL)在105℃搅拌16.5小时。将饱和食盐水用水稀释，向所得到的溶液中注入反应液，用氯仿萃取3次。将有机层用饱和食盐水清洗，用硫酸镁干燥后，减压下蒸馏除去溶剂。将所得到的残渣用柱色谱(正己烷/乙酸乙酯)精制，得到标题化合物(112.0mg)。
(中间体T-4 LCMS：m/z517.0,519.1(MH+)；保持时间：1.76分钟；LC条件：LC-1)
参考例T-5：甲基5-(2-(4-(4-(4-溴噻吩-2-基)-3-羟基丁基)-2-氧代-1,3,4-噻二嗪-3-基)乙基)噻吩-2-甲酸酯(中间体T-5)
[化174]
Figure BDA0002552068800000971
将中间体T-4(112mg)的甲醇(2mL)溶液冷却至0℃，分次少量添加硼氢化钠(12.3mg)。在室温下搅拌3小时后，将反应液注入到水中，用乙酸乙酯萃取3次。将有机层用水、接着用饱和食盐水清洗，用硫酸镁干燥后，在减压下蒸馏除去溶剂，得到标题化合物(99.6mg)。
(中间体T-5 LCMS：m/z519.08,521.08(MH+)；保持时间：1.70分钟；LC条件：LC-1)
参考例T-6：甲基5-(2-(4-(3-乙酰氧基-4-(4-溴噻吩-2-基)丁基)-2-氧代-1,3,4-噻二嗪-3-基)乙基)噻吩-2-甲酸酯(中间体T-6)
[化175]
Figure BDA0002552068800000972
将中间体T-5(95.7mg)的二氯甲烷(1.8mL)溶液冷却至0℃，加入乙酸酐(348μL)和吡啶(741μL)，在室温下搅拌17小时后，加入乙酸酐(348μL)进一步在室温下搅拌4小时。向反应液中加入水后，用氯仿萃取3次。将有机层用饱和碳酸氢钠水溶液、接着用饱和食盐水清洗，用硫酸镁干燥后，减压下蒸馏除去溶剂。将所得到的残渣用柱色谱(正己烷/乙酸乙酯)精制，得到标题化合物。
(中间体T-6 LCMS：m/z561.1,563.1(MH+)；保持时间：1.89分钟；LC条件：LC-1)
实施例22：5-(2-(4-(3-羟基-4-(4-(噻吩-3-基乙炔基)噻吩-2-基)丁基)-2-氧代-1,3,4-噻二嗪-3-基)乙基)噻吩-2-甲酸
[化176]
Figure BDA0002552068800000981
[步骤a]
甲基5-(2-(4-(3-乙酰氧基-4-(4-(噻吩-3-基乙炔基)噻吩-2-基)丁基)-2-氧代-1,3,4-噻二嗪-3-基)乙基)噻吩-2-甲酸酯(中间体T-7)
[化177]
Figure BDA0002552068800000982
向中间体T-6(17.5mg)的乙腈(1mL)溶液中依次加入氯化双(乙腈)钯(1.2mg)、2-二环己基膦-2’,4’,6’-三异丙基联苯(6.7mg)、碳酸铯(13.2mg)、3-乙炔基噻吩(5.6μL)，在氩气气氛下在60℃搅拌17小时。用铺有硅藻土的滤纸将反应混合溶液过滤，将硅藻土上的残渣用乙酸乙酯清洗。将滤液与洗液混合，减压下蒸馏除去溶剂后，将所得到的残渣用柱色谱(正己烷/乙酸乙酯)精制，得到中间体T-6和标题化合物的混合物(18.6mg)。向所得到的混合物的乙腈(2mL)溶液中依次加入氯化双(乙腈)钯(1.2mg)、2-二环己基膦-2’,4’,6’-三异丙基联苯(6.7mg)、碳酸铯(13.2mg)、3-乙炔基噻吩(6.14μL)，在氩气气氛下在60℃搅拌19小时。用铺有硅藻土的滤纸将反应混合溶液过滤，将硅藻土上的残渣用乙酸乙酯清洗。将滤液与洗液混合，减压下蒸馏除去溶剂后，将所得到的残渣用柱色谱(正己烷/乙酸乙酯)精制，得到标题化合物(14.2mg)。
(中间体T-7 LCMS：m/z589.1(MH+)；保持时间：2.03分钟；LC条件：LC-1)
[步骤b]
5-(2-(4-(3-羟基-4-(4-(噻吩-3-基乙炔基)噻吩-2-基)丁基)-2-氧代-1,3,4-噻二嗪-3-基)乙基)噻吩-2-甲酸
向中间体T-7(14.2mg)的四氢呋喃(0.36mL)溶液中加入1mol/L氢氧化锂水溶液(0.36mL)，在室温下搅拌过夜。将反应混合溶液冷却至0℃，加入1mol/L盐酸(0.36mL)。将混合物用水稀释，用氯仿萃取3次后，用饱和食盐水清洗，用硫酸镁干燥，减压下蒸馏除去溶剂。将所得到的残渣用柱色谱(氯仿/甲醇)精制，得到标题化合物(3.5mg)。
(LCMS：m/z533.0(MH+)；保持时间：1.64分钟；LC条件：LC-1)
实施例23：(S)-5-(2-(4-(3-羟基-4-(3-(噻吩-3-基乙炔基)苯基)丁基)-2-氧代-1,3,4-噻二嗪-3-基)乙基)噻吩-2-甲酸
[化178]
Figure BDA0002552068800000991
[步骤a]
(S)-甲基5-(2-(4-(3-羟基-4-(3-(噻吩-3-基乙炔基)苯基)丁基)-2-氧代-1,3,4-噻二嗪-3-基)乙基)噻吩-2-甲酸酯(中间体Z-17-S)
[化179]
Figure BDA0002552068800000992
将中间体Z-17(592mg)用安装有手性柱的HPLC进行分离(HPLC装置：日本Waters公司制造分离精制装置、手性柱：CHIRALCEL AD-H(Daicel公司制造)、洗脱液：乙醇、流速：0.5mL/分钟、保持时间：14.91分钟)，得到标题化合物(194.2mg)。
[步骤b]
(S)-5-(2-(4-(3-羟基-4-(3-(噻吩-3-基乙炔基)苯基)丁基)-2-氧代-1,3,4-噻二嗪-3-基)乙基)噻吩-2-甲酸
按照实施例1中记载的方法并使用中间体Z-17-S(41.4mg)代替中间体Z-17来进行合成，得到标题化合物(31.8mg)。
(LCMS：m/z527.2(MH+)；保持时间：1.68分钟；LC条件：LC-1)
参考例U：(S)-甲基5-(2-(4-(4-(3-溴苯基)-3-羟基丁基)-2-氧代-1,3,4-噻二嗪-3-基)乙基)噻吩-2-甲酸酯(中间体U)
[化180]
Figure BDA0002552068800001001
将中间体Z5(1g)用安装有手性柱的HPLC进行分离(HPLC装置：日本Waters公司制造分离精制装置、手性柱：CHIRALCEL OJ-H(Daicel公司制造)、洗脱液：甲醇、流速：0.5mL/分钟、保持时间：20.72分钟)，得到标题化合物(309mg)。
参考例V-1：(S)-甲基5-(2-(4-(4-(3-溴苯基)-3-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)丁基)-2-氧代-1,3,4-噻二嗪-3-基)乙基)噻吩-2-甲酸酯(中间体V-1)
[化181]
Figure BDA0002552068800001002
按照参考例Z-6中记载的方法并使用中间体U(299.3mg)代替中间体Z-5来进行合成，得到标题化合物(333.9mg)。
(中间体V-1 LCMS：m/z627.35、629.35(MH+)；保持时间：1.79分钟；LC条件：NLC-1)
参考例V-2：(S)-甲基5-(2-(4-(3-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-4-(3-((三甲基甲硅烷基)乙炔基)苯基)丁基)-2-氧代-1,3,4-噻二嗪-3-基)乙基)噻吩-2-甲酸酯(中间体V-2)
[化182]
Figure BDA0002552068800001003
按照参考例Z-21中记载的方法并使用中间体V-1(333.9mg)代替中间体Z-6来进行合成，得到标题化合物(91.3mg)。
(中间体V-2 LCMS：m/z645.49(MH+)；保持时间：2.38分钟；LC条件：NLC-6)
参考例V-3：(S)-甲基5-(2-(4-(3-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-4-(3-乙炔基苯基)丁基)-2-氧代-1,3,4-噻二嗪-3-基)乙基)噻吩-2-甲酸酯(中间体V-3)
[化183]
Figure BDA0002552068800001011
按照参考例Z-22中记载的方法并使用中间体V-2(91.3mg)代替中间体Z-21来进行合成，得到标题化合物(91.6mg)。
(中间体V-3 LCMS：m/z573.45(MH+)；保持时间：1.41分钟；LC条件：NLC-6)
实施例24：(S)-5-(2-(4-(4-(3-((2-氰基噻吩-3-基)乙炔基)苯基)-3-羟基丁基)-2-氧代-1,3,4-噻二嗪-3-基)乙基)噻吩-2-甲酸
[化184]
Figure BDA0002552068800001012
[步骤a]
(S)-甲基5-(2-(4-(3-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-4-(3-((2-氰基噻吩-3-基)乙炔基)苯基)丁基)-2-氧代-1,3,4-噻二嗪-3-基)乙基)噻吩-2-甲酸酯(中间体Z-24-1)
[化185]
Figure BDA0002552068800001021
向中间体V-3(50.6mg)的乙腈(1mL)溶液中依次加入氯化双(乙腈)钯(2.0mg)、2-二环己基膦-2’,4’,6’-三异丙基联苯(11.2mg)、碳酸铯(51.1mg)、3-溴噻吩-2-甲腈(73.8mg)，在氮气气氛下在60℃搅拌0.75小时。将反应混合溶液用铺有硅藻土的滤纸过滤，将硅藻土上的残渣用氯仿：甲醇＝9:1的混合溶剂清洗。将滤液与洗液混合，减压下蒸馏除去溶剂后，将所得到的残渣用柱色谱(己烷/乙酸乙酯)精制，得到标题化合物(10.1mg)。
(中间体Z-24-1 LCMS：m/z680.44(MH+)；保持时间：1.73分钟；LC条件：NLC-6)
[步骤b]
(S)-甲基5-(2-(4-(4-(3-((2-氰基噻吩-3-基)乙炔基)苯基)-3-羟基丁基)-2-氧代-1,3,4-噻二嗪-3-基)乙基)噻吩-2-甲酸酯(中间体Z-24-2)
[化186]
Figure BDA0002552068800001022
向中间体Z-24-1(10.1mg)的四氢呋喃(0.5mL)溶液中加入四丁基氟化铵(1mol/L四氢呋喃溶液：44.6μL)，在室温下搅拌1小时。将反应混合溶液用柱色谱(己烷/乙酸乙酯)精制，得到标题化合物(9.3mg)。
(中间体Z-24-2 LCMS：m/z566.35(MH+)；保持时间：1.77分钟；LC条件：NLC-6)
[步骤c]
(S)-5-(2-(4-(4-(3-((2-氰基噻吩-3-基)乙炔基)苯基)-3-羟基丁基)-2-氧代-1,3,4-噻二嗪-3-基)乙基)噻吩-2-甲酸
向中间体Z-24-2(9.3mg)的四氢呋喃(400μL)溶液中加入1mol/L氢氧化钠水溶液(197μL)，在室温下搅拌60小时。向反应混合溶液中加入1mol/L盐酸(400μL)，用氯仿萃取3次后，用饱和食盐水清洗，将其干燥。减压下蒸馏除去溶剂。将所得到的残渣用柱色谱(甲醇/氯仿)精制，得到标题化合物(7.5mg)。
(LCMS：m/z552.30.2(MH+)；保持时间：1.23分钟；LC条件：NLC-1)
实施例25：(S)-5-(2-(4-(3-羟基-4-(3-(噻唑-4-基乙炔基)苯基)丁基)-2-氧代-1,3,4-噻二嗪-3-基)乙基)噻吩-2-甲酸
[化187]
Figure BDA0002552068800001031
[步骤a]
(S)-甲基5-(2-(4-(3-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-4-(3-(噻唑-4-基乙炔基)苯基)丁基)-2-氧代-1,3,4-噻二嗪-3-基)乙基)噻吩-2-甲酸酯(中间体Z-25-1)
[化188]
Figure BDA0002552068800001032
按照实施例24的步骤a记载的方法并使用4-溴噻唑(28.6μL)代替3-溴噻吩-2-甲腈来进行合成，得到标题化合物(21.0mg)。
(中间体Z-25-1 LCMS：m/z656.43(MH+)；保持时间：1.37分钟；LC条件：NLC-1)
[步骤b]
(S)-5-(2-(4-(3-羟基-4-(3-(噻唑-4-基乙炔基)苯基)丁基)-2-氧代-1,3,4-噻二嗪-3-基)乙基)噻吩-2-甲酸
向中间体Z-25-1(21.0mg)的四氢呋喃(1mL)溶液中加入四丁基氟化铵(1mol/L四氢呋喃溶液：92.6μL)，在室温下搅拌3小时。将反应混合溶液用柱色谱(己烷/乙酸乙酯)精制，并在由此得到的中间体(12.2mg)的四氢呋喃(540μL)和甲醇(270μL)的溶液中加入1mol/L氢氧化钠水溶液(270μL)，在室温下搅拌16小时。向反应混合溶液中加入1mol/L盐酸，用乙酸乙酯萃取5次后，用饱和食盐水清洗，将其干燥。减压下蒸馏除去溶剂，得到标题化合物(12.5mg)。
(LCMS：m/z528.29(MH+)；保持时间：1.08分钟；LC条件：NLC-1)
实施例26：(S)-5-(2-(4-(4-(3-(呋喃-3-基乙炔基)苯基)-3-羟基丁基)-2-氧代-1,3,4-噻二嗪-3-基)乙基)噻吩-2-甲酸
[化189]
Figure BDA0002552068800001041
按照实施例25中记载的方法并使用3-溴呋喃(31.2mg)代替4-溴噻唑来进行合成，然后用柱色谱(甲醇/氯仿)精制，得到标题化合物(5.1mg)。
(LCMS：m/z511.35(MH+)；保持时间：1.23分钟；LC条件：NLC-1)
参考例Z-27：(E)-甲基5-(2-(4-(3-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-4-(3-(2-(噻吩-3-基)乙烯基)苯基)丁基)-2-氧代-1,3,4-噻二嗪-3-基)乙基)噻吩-2-甲酸酯(中间体Z-27)
[化190]
Figure BDA0002552068800001042
向中间体Z-6(50.0mg)的1,4-二氧六环(637μL)溶液中依次加入(E)-4,4,5,5-四甲基-2-(2-(噻吩-3-基)乙烯基)-1,3,2-二氧杂硼烷(22.6mg：ALDRICH)、氯化双(三苯基膦)钯(5.6mg)、碳酸钠(21.1mg)、水(199μL)，在氮气气氛下在85℃搅拌11小时。向反应混合溶液中加入水，用乙酸乙酯萃取。将有机相干燥后，减压下蒸馏除去溶剂，将所得到的残渣用柱色谱(己烷/乙酸乙酯)精制，得到标题化合物(44.5mg)。
(中间体Z-27LCMS：m/z657.3(MH+)；保持时间：1.93分钟；LC条件：LC-6)
实施例27：(E)-5-(2-(4-(3-羟基-4-(3-(2-(噻吩-3-基)乙烯基)苯基)丁基)-2-氧代-1,3,4-噻二嗪-3-基)乙基)噻吩-2-甲酸
[化191]
Figure BDA0002552068800001051
按照实施例18中记载的方法并使用中间体Z-27(24.8mg)代替中间体Z-7-18来进行合成，得到标题化合物(17.8mg)。
(LCMS：m/z529.1(MH+)；保持时间：1.63分钟；LC条件：LC-1)
参考例Z-14-5：甲基4-氯-5-(2-(2-氧代-4-(3-氧代-4-(3-(吡啶-2-基乙炔基)苯基)丁基)-1,3,4-噻二嗪-3-基)乙基)噻吩-2-甲酸酯(中间体Z-14-5)
[化192]
Figure BDA0002552068800001052
向中间体Z-4-3(100mg)中依次加入二乙胺(850μL)、2-乙炔基吡啶(22.8μL)、碘化铜(I)(2.9mg)、四(三苯基膦)钯(3.9mg)，在氮气气氛下在室温下搅拌15.5小时。将反应混合溶液用乙酸乙酯稀释后，蒸馏除去溶剂，将所得到的残渣用柱色谱(甲苯/乙腈)精制，得到标题化合物(47.6mg)。
(中间体Z-14-5LCMS：m/z570.425(MH+)；保持时间：4.86分钟；LC条件：FLC-1))
实施例28：4-氯-5-(2-(4-(3-羟基-4-(3-(吡啶-2-基乙炔基)苯基)丁基)-2-氧代-1,3,4-噻二嗪-3-基)乙基)噻吩-2-甲酸
[化193]
Figure BDA0002552068800001061
向中间体Z-14-5(47.6mg)的甲醇(840μL)溶液中分次少量添加硼氢化钠(4.8mg)。在室温下搅拌0.5小时后，加入水、乙酸乙酯，将有机相依次用饱和碳酸氢钠水溶液、饱和食盐水清洗，将其干燥。减压下蒸馏除去溶剂后，加入四氢呋喃(640μL)、甲醇(640μL)、2mol/L氢氧化钠水溶液(640μL)。将反应混合溶液在室温下搅拌1.8小时后，冷却至0℃，分次少量添加2mol/L盐酸(640μ)。向反应混合溶液中加入乙酸乙酯，将有机相用饱和食盐水清洗，将其干燥。减压下蒸馏除去溶剂，将所得到的残渣用薄层色谱法(甲苯/乙醇/乙酸)精制，得到标题化合物(15.0mg)。
(LCMS：m/z556.023(MH+)；保持时间：4.49分钟；LC条件：FLC-1)
参考例Z-29-1：2-叔丁基1-(2-氯乙基)1-(2-(5-(甲氧基羰基)噻吩-2-基)乙基)肼-1,2-二甲酸酯(中间体Z-29-1)
[化194]
Figure BDA0002552068800001062
向中间体A-6(5.0g)的乙腈(165mL)溶液中加入碳酸钾(0.46g)，冷却至0℃。缓慢地加入氯甲酸2-氯乙酯(2.07mL)，在该温度下搅拌1小时。向反应液中加入水，使其成为室温，用乙酸乙酯萃取3次。将有机相用水、接着用饱和食盐水清洗，干燥后在减压下蒸馏除去溶剂，得到标题化合物(8.34g)。
(中间体Z-29-1 LCMS：m/z307.14、309.11(MH+-Boc)；保持时间：1.64分钟；LC条件：LC-1)
参考例Z-29-2：叔丁基3-(2-(5-(甲氧基羰基)噻吩-2-基)乙基)-2-氧代-1,3,4-噁二嗪-4-甲酸酯(中间体Z-29-2)
[化195]
Figure BDA0002552068800001071
将中间体Z-29-1(8.34g)的DMF(140mL)溶液冷却至0℃，用时30分钟一点点地加入氢化钠(55％、0.87g)，搅拌2小时。使其成为室温，搅拌1小时后，再次在0℃加入氢化钠(55％、0.1g)，然后在室温下搅拌15小时。冷却至0℃，加入水，用乙酸乙酯萃取4次。将有机相用水清洗2次、用饱和食盐水清洗1次，干燥后在减压下蒸馏除去溶剂。将所得到的残渣用柱色谱(己烷/乙酸乙酯)精制，得到标题化合物(1.75g)。
(中间体Z-29-2LCMS：m/z371.3(MH+)；保持时间：1.51分钟；LC条件：LC-1)
参考例Z-29-3：甲基5-(2-(2-氧代-1,3,4-噁二嗪-3-基)乙基)噻吩-2-甲酸酯(中间体Z-29-3)
[化196]
Figure BDA0002552068800001072
/>
将中间体Z-29-2(1.75g)的二氯甲烷(25mL)溶液冷却至0℃，加入三氟乙酸(12.5mL)，在室温下搅拌1小时。冷却至0℃，用5M氢氧化钠水溶液中和后，用氯仿萃取3次。将有机相用水清洗后，进行干燥，在减压下蒸馏除去溶剂。利用硅胶短柱(用氯仿、接着用乙酸乙酯)精制后，将析出的固体用二乙醚清洗，得到标题化合物(0.90g)。
(中间体Z-29-3 LCMS：m/z271.2(MH+)；保持时间：0.94分钟；LC条件：LC-1)
参考例Z-29-4：甲基5-(2-(4-(4-(3-碘苯基)-3-氧代丁基)-2-氧代-1,3,4-噁二嗪-3-基)乙基)噻吩-2-甲酸酯(中间体Z-29-4)
[化197]
Figure BDA0002552068800001081
将中间体C-2-2(250mg)的DME(5mL)溶液在氮气流下冷却至0℃，加入乙烯基溴化镁(1M溶液、1.2mL)，在该温度下搅拌2小时。加入2M盐酸使其为酸性后，加入水，用乙酸乙酯萃取3次。将有机相用水清洗2次，干燥后在减压下蒸馏除去溶剂。
向加入了中间体Z-29-3(110.7mg)和水(3.3mL)的烧瓶中加入上述得到的残渣的乙醇(3.3mL)溶液，在外温110℃搅拌15小时。使其为室温后，将反应液注入到水中，用乙酸乙酯萃取3次。将有机相用饱和食盐水清洗，干燥后在减压下蒸馏除去溶剂。将所得到的残渣用柱色谱(己烷/乙酸乙酯)精制，得到标题化合物(126.2mg)。
(中间体Z-29-4LCMS：m/z541.2(MH+)；保持时间：1.66分钟；LC条件：LC-1)
参考例Z-29-5：甲基5-(2-(4-(3-羟基-4-(3-碘苯基)丁基)-2-氧代-1,3,4-噁二嗪-3-基)乙基)噻吩-2-甲酸酯(中间体Z-29-5)
[化198]
Figure BDA0002552068800001082
向中间体Z-29-4(58.1mg)的甲醇(1mL)溶液中加入硼氢化钠(6.1mg)，在室温下搅拌1小时。加入水，用乙酸乙酯萃取3次。将有机相用饱和食盐水清洗，干燥后在减压下蒸馏除去溶剂，得到标题化合物(61.4mg)。
(中间体Z-29-5 LCMS：m/z545.2(MH+)；保持时间：1.60分钟；LC条件：LC-1)
参考例Z-29-6：甲基5-(2-(4-(3-乙酰氧基-4-(3-碘苯基)丁基)-2-氧代-1,3,4-噁二嗪-3-基)乙基)噻吩-2-甲酸酯(中间体Z-29-6)
[化199]
Figure BDA0002552068800001091
将中间体Z-29-5(61.4mg)溶解在二氯甲烷(2mL)中，加入乙酸酐(0.27mL)和吡啶(0.23mL)，在室温下搅拌5.5小时。向反应液中加入水，用氯仿萃取3次。将有机相用水清洗，干燥后在减压下蒸馏除去溶剂。将残渣用短柱色谱精制，得到标题化合物(71.8mg)。
(中间体Z-29-6 LCMS：m/z587.26(MH+)；保持时间：1.82分钟；LC条件：LC-1)
参考例Z-29-7：甲基5-(2-(4-(3-乙酰氧基-4-(3-(噻吩-3-基乙炔基)苯基)丁基)-2-氧代-1,3,4-噁二嗪-3-基)乙基)噻吩-2-甲酸酯(中间体Z-29-7)
[化200]
Figure BDA0002552068800001092
按照参考例Z-14中记载的方法并使用中间体Z-29-6(71.8mg)代替中间体Z-4-2来进行合成，得到标题化合物(66.4mg)。
(中间体Z-29-7 LCMS：m/z567.36(MH+)；保持时间：1.94分钟；LC条件：LC-1)
实施例29：5-(2-(4-(3-羟基-4-(3-(噻吩-3-基乙炔基)苯基)丁基)-2-氧代-1,3,4-噁二嗪-3-基)乙基)噻吩-2-甲酸
[化201]
Figure BDA0002552068800001093
按照实施例22的步骤b中记载的方法并使用中间体Z-29-7(66.4mg)代替中间体T-7来进行合成，得到标题化合物(45.6mg)。
(LCMS：m/z509.2(MH+)；保持时间：1.53分钟；LC条件：LC-1)
参考例D-2：甲基4-(3-溴苯基)-3-氧代丁酸酯(中间体D-2)
[化202]
Figure BDA0002552068800001101
向丙二酸单甲酯钾盐(0.885kg)中加入THF(4.077kg)、氯化镁(0.47kg)，在50℃搅拌10分钟。向其中加入在3-溴苯基乙酸(1.005kg)的THF(2.023kg)溶液中添加羰基二咪唑(0.801kg)的DMF(4.025kg)溶液并在室温下搅拌1小时所得到的反应液。进一步加入THF(0.508kg)，在50℃搅拌30分钟。将反应混合液冷却到室温，加入乙酸乙酯(8.071kg)，利用20％柠檬酸水溶液(6.032kg)清洗2次后，在减压下蒸馏除去溶剂，得到浓缩液(2.358kg)。向其中加入乙酸乙酯(1.011kg)，得到包含中间体D-2的溶液(3.369kg)。将包含中间体D-2的溶液与利用同样的操作得到的溶液混合，向其中(6.770kg)加入乙酸乙酯(6.063kg)，加入5％碳酸氢钠水溶液(10.055kg)、氯化钠(0.506kg)进行清洗。进一步加入5％碳酸氢钠水溶液(10.054kg)、氯化钠(0.503kg)进行清洗。进一步用20％食盐水(10.064kg)清洗，加入乙酸乙酯(1.01kg)后，减压下蒸馏除去溶剂，得到标题化合物(2.52kg)。
(LCMS：m/z268.9,270.9(MH-)；保持时间：1.44分钟；LC条件：NLC-1)
参考例D-3：甲基(S)-4-(3-溴苯基)-3-羟基丁酸酯(中间体D-3)
[化203]
Figure BDA0002552068800001102
向中间体D-2(2.52kg)中加入甲醇(14.325kg)、水(0.237kg)、[NH2Me2][(RuCl((S)-dm-segphos))2(u-Cl)3](82.46g：TAKASAGO)，在氢气氛下在60℃搅拌6小时后，减压下蒸馏除去溶剂。加入甲苯(20.70kg)、QuadraSil AP(0.60kg：JOHNSON)，在60℃搅拌1小时后，将反应混合液过滤，将过滤物用甲苯(2.066kg)清洗。将滤液在减压下蒸馏除去溶剂，制成浓缩液(5.68kg)后，在10℃用时15分钟加入正庚烷(1.22kg)，进一步在5℃用时50分钟加入正庚烷(1.22kg)。将反应混合液在该状态下在5℃搅拌45分钟后进行过滤。将滤物用正庚烷(0.48kg)、甲苯(0.24kg)的混合液清洗，将过滤物干燥，得到标题化合物(1.923kg)。
(LCMS：m/z273.0,275.1(MH+)；保持时间：1.36分钟；LC条件：NLC-1)
(手性LC：保持时间：21.1分钟；LC条件：手性LC-1)
参考例D-35：甲基(S)-3-羟基-4-(3-(噻吩-3-基乙炔基)苯基)丁酸酯(中间体D-35)
[化204]
Figure BDA0002552068800001111
向中间体D-3(558g)中加入乙腈(1386g)、碳酸铯(665.7g)、X-Phos(48.7g：日本化学)、双(乙腈)二氯钯(II)(13.28g：TCI)，在氮气气氛下用时30分钟加入3-乙炔基噻吩(287.3g)的乙腈(277.2g)溶液。将反应混合液在40℃搅拌30分钟后，在60℃搅拌90分钟。将反应混合液冷却到室温，加入甲苯(1208.3g)、水(3488.2g)，搅拌20分钟后，使用硅藻土进行过滤。将过滤物用甲苯(2416.3g)清洗，将滤液搅拌10分钟后，静置至分成有机层和水层为止，弃掉水层。将有机层用水(2232.3g)清洗后，减压下蒸馏除去溶剂，得到标题化合物(753.9g)。
(LCMS：m/z301.2(MH+)；保持时间：1.65分钟；LC条件：NLC-1)
参考例D-50：甲基(S)-3-((2-甲氧基乙氧基)甲氧基)-4-(3-(噻吩-3-基乙炔基)苯基)丁酸酯(中间体D-50)
[化205]
Figure BDA0002552068800001112
在氮气气氛下向中间体D-35(753.5g)中加入甲苯(2588.1g)、二异丙基乙胺(334.3g)、2-甲氧基乙氧基氯甲烷(322.2g)，在80℃搅拌150分钟。将反应混合液冷却，加入水(3107.7g)搅拌10分钟后过滤。将过滤物用甲苯(1031.6g)清洗，将滤液静置直至分成有机层和水层，除去水层。将有机层用水(2071.9g)清洗后，减压下蒸馏除去溶剂，得到包含中间体D-50的油状物质(915.8g)。向该包含中间体D-50的油状物质(915.4g)中加入甲醇(2310.7g)、活性炭SHIRASAGI A(292.3g：日本EnviroChemicals)，在室温下搅拌1小时后，使用滤纸过滤。将过滤物用甲醇(928.8g)清洗后，将滤液用孔径0.5μm的膜过滤器过滤，将过滤物用甲醇(464.2g)清洗。将滤液浓缩，加入甲苯(2479.1g)、QuadraSil MTU(349.6g：JOHNSON)在40℃搅拌1小时后，使用滤纸过滤。将过滤物用甲苯(1008.0g)清洗后，将滤液用孔径0.5μm的膜过滤器过滤，将过滤物用甲苯(503.8g)清洗。将滤液在减压下浓缩，得到标题化合物(710.9g)。
(LCMS：m/z406.2(M+NH4+)；保持时间：1.88分钟；LC条件：NLC-1)
参考例D-60：(S)-3-((2-甲氧基乙氧基)甲氧基)-4-(3-(噻吩-3-基乙炔基)苯基)丁醛(中间体D-60)
[化206]
Figure BDA0002552068800001121
在氮气气氛下向中间体D-50(355.3g)中加入甲苯(2740.1g)，冷却至-83℃。用时90分钟向其中加入二异丁基氢化铝的1mol/L甲苯溶液(571.6g)。向反应混合液中加入1mol/L盐酸(1884.1g)，在室温下搅拌1小时，加入甲苯(64.3g)搅拌10分钟后，静置至分成有机层和水层，弃掉水层。将有机层依次用1mol/L盐酸(1004.9g)、1％碳酸氢钠水溶液(1997.8g)、水(1978.1g)清洗后，利用孔径0.5μm的膜过滤器过滤。将过滤物用甲苯(214.3g)清洗，得到包含标题化合物(248.5g)的甲苯溶液(4061.0g)。
(LCMS：m/z376.2(M+NH4+)；保持时间：1.80分钟；LC条件：NLC-1)
参考例Z-70：甲基(S)-5-(2-(4-(3-((2-甲氧基乙氧基)甲氧基)-4-(3-(噻吩-3-基乙炔基)苯基)丁基)-2-氧代-1,3,4-噻二嗪-3-基)乙基)噻吩-2-甲酸酯(中间体Z-70)
[化207]
Figure BDA0002552068800001131
在氮气气氛下向中间体Z-3(286.3g)中加入甲苯(1959.6g)、乙酸(474.5g)、三乙酰氧基硼氢化钠(498.5g)。将包含中间体D-60(460.28g)的甲苯溶液(7927.0g)在减压下蒸馏除去溶剂，制成中间体D-60浓缩液(1503.9g)，在室温下用时50分钟添加该浓缩液。加入甲苯(245g)搅拌2小时后，依次用5％碳酸氢钠水溶液(7326.6g)、5％碳酸氢钠水溶液(7327.2g)、水(7071.4g)清洗。减压下蒸馏除去溶剂，得到标题化合物(903.8g)。
(LCMS：m/z629.29(MH+)；保持时间：2.05分钟；LC条件：NLC-1)
参考例Z-17-S：甲基(S)-5-(2-(4-(3-羟基-4-(3-(噻吩-3-基乙炔基)苯基)丁基)-2-氧代-1,3,4-噻二嗪-3-基)乙基)噻吩-2-甲酸酯(中间体Z-17-S)
[化208]
Figure BDA0002552068800001132
向中间体Z-70(903.5g)中加入甲醇(4293.5g)、活性炭SHIRASAGI A(90.35g：日本EnviroChemicals)，在40℃搅拌1小时后，将反应混合液过滤，将滤物用甲醇(715.1g)清洗。向滤液中加入36％盐酸(588.6g)，在40℃搅拌6小时后，加入甲苯(2406.8g)，冷却到室温。将反应混合液依次用5％碳酸氢钠水溶液(9765.4g)、水(1685.1g)清洗后，减压下蒸馏除去溶剂。将所得到的残渣用柱色谱(正庚烷/乙酸乙酯)精制，得到标题化合物(471.6g)。
(LCMS：m/z541.19(MH+)；保持时间：1.87分钟；LC条件：NLC-1)
实施例30：(S)-5-(2-(4-(3-羟基-4-(3-(噻吩-3-基乙炔基)苯基)丁基)-2-氧代-1,3,4-噻二嗪-3-基)乙基)噻吩-2-甲酸
[化209]
Figure BDA0002552068800001141
向中间体Z-17-S(469.5g)中加入THF(2393.3g)、活性炭SHIRASAGI A(94.0g：日本EnviroChemicals)，在室温下搅拌1小时后，将反应混合液过滤，将过滤物用THF(1597.1g)清洗。向滤液中加入THF(378.9g)、甲醇(1421.8g)、1mol/L氢氧化钠水溶液(1728.2g)，搅拌17小时。向反应混合液中加入甲苯(2331.5g)、水(1346.5g)进行搅拌，静置至分成有机层和水层，弃掉有机层。向水层中加入甲苯(2332g)、THF(1596g)、甲醇(710g)的混合液，进行搅拌，静置至分成有机层和水层，弃掉有机层。其后同样地进行3次利用甲苯、THF、甲醇的混合液的清洗。向水层中加入甲苯(4663.3g)，进行搅拌，静置至分成有机层和水层，弃掉有机层。向水层中加入1mol/L盐酸至pH达到7.0后，加入乙酸乙酯(2425.9g)，进一步加入1mol/L盐酸至pH达到2.2为止，搅拌10分钟后，静置至分成有机层和水层，弃掉水层。向有机层中加入乙酸乙酯(1347.1g)、水(897.5g)，搅拌10分钟后，静置至分成有机层和水层，弃掉水层。将有机层在减压下蒸馏除去溶剂，得到包含标题化合物的残渣(358.6g)。向该包含标题化合物的残渣(358.3g)中加入甲醇(1860.0g)活性炭SHIRASAGI A(47.6g：日本EnviroChemicals)，在室温下搅拌1小时后，利用孔径0.5μm的膜过滤器过滤，将过滤物用甲醇(2231.2g)清洗。向滤液中加入活性炭SHIRASAGI A(188.6g：日本EnviroChemicals)，在室温下搅拌1小时后，用滤纸过滤，将过滤物用甲醇(1490.5g)清洗。将滤液用孔径0.2μm的膜过滤器过滤，将过滤物用甲醇(743.7g)清洗。向滤液中加入活性炭SHIRASAGI A(94.0g：日本EnviroChemicals)，在室温下搅拌1小时后，将滤液用孔径0.2μm的膜过滤器过滤，将过滤物用甲醇(2231.2g)清洗。向滤液中加入活性炭SHIRASAGI A(94.1g：日本EnviroChemicals)，在室温下搅拌1小时后，将滤液用孔径0.2μm的膜过滤器过滤，将过滤物用甲醇(742.9g)清洗。将滤液在减压下蒸馏除去溶剂，得到标题化合物(160.1g)。
(LCMS：m/z527.2(MH+)；保持时间：1.26分钟；LC条件：NLC-1)
(手性LC：保持时间：21.3分钟；LC条件：手性LC-2)
需要说明的是，本实施例30意味着与实施例23相同的化合物。
比较例1：4-(2-(4-(4-(3-溴苯基)-3-羟基丁基)-2-氧代-1,3,4-噻二嗪-3-基)乙基)苯甲酸
[化210]
Figure BDA0002552068800001151
可以利用国际公开第WO2006/080323号(专利文献8)中记载的实施例IAH-H072的制造方法得到标题化合物。
制剂例1
向聚乳酸-羟基乙酸共聚物(RESOMERRG504、Evonik Industries公司制造)2.0g中加入二氯甲烷20mL，使用超声波清洗器将其溶解，进一步加入实施例23的化合物1.6mg使其溶解。将该溶液使用均质混合机(Primix株式会社制造、MARK II)在3,000rpm搅拌，缓慢地加入到0.1％聚乙烯醇水溶液300mL中，在室温下搅拌10分钟，得到o/w乳液。将该o/w乳液在室温下搅拌16小时，使二氯甲烷挥发，使油层固化后，使用离心分离机进行离心分离(3,000rpm、20℃、15分钟)。除去上清后，利用0.1％(w/v)Tween80溶液分散，使用53μm和20μm的筛过筛，将留在20μm的筛上的试样进行离心分离(3,000rpm、20℃、15分钟)。除去上清后，加入纯净水，再次进行离心分离(3,000rpm、20℃、15分钟)，除去上清。将沉淀物在-80℃冷冻后，进行减压干燥(48小时)，由此得到药物封入率0.06％的含药物微球1.2g。
制剂例2
向聚乳酸-羟基乙酸共聚物(RESOMERRG504、Evonik Industries公司制造)2.0g中加入二氯甲烷20mL，使用超声波清洗器溶解，进一步加入实施例23的化合物20mg使其溶解。将该溶液使用均质混合机(Primix株式会社制造、MARK II)在3,000rpm搅拌，缓慢地加入到0.1％聚乙烯醇水溶液300mL中，在室温下搅拌10分钟，得到o/w乳液。将该o/w乳液在室温下搅拌16小时，使二氯甲烷挥发，使油层固化后，使用离心分离机进行离心分离(3,000rpm、20℃、15分钟)。除去上清后，利用0.1％(w/v)Tween80溶液分散，使用53μm和20μm的筛过筛，将留在20μm的筛上的试样进行离心分离(3,000rpm、20℃、15分钟)。除去上清后，加入纯净水再次进行离心分离(3,000rpm、20℃、15分钟)，除去上清。将沉淀物在-80℃冷冻后，进行减压干燥(48小时)，由此得到药物封入率0.8％的含药物微球1.3g。
制剂例3
向聚乳酸-羟基乙酸共聚物(RESOMERRG504、Evonik Industries公司制造)2.0g中加入二氯甲烷20mL，使用超声波清洗器将其溶解，进一步加入实施例23的化合物124mg使其溶解。将该溶液使用均质混合机(Primix株式会社制造、MARK II)在3,000rpm搅拌，缓慢地加入到0.1％聚乙烯醇水溶液300mL中，在室温下搅拌10分钟，得到o/w乳液。将该o/w乳液在室温下搅拌16小时，使二氯甲烷挥发，使油层固化后，使用离心分离机进行离心分离(3,000rpm、20℃、15分钟)。除去上清后，用0.1％(w/v)Tween80溶液分散，使用53μm和20μm的筛过筛，将留在20μm的筛上的试样进行离心分离(3,000rpm、20℃、15分钟)。除去上清后，加入纯净水再次进行离心分离(3,000rpm、20℃、15分钟)，除去上清。将沉淀物在-80℃冷冻后，进行减压干燥(48小时)，由此得到药物封入率3.7％的含药物微球1.1g。
<试验例1EP4激动活性的测定>
为了研究本发明的化合物的EP4受体激动剂活性，使用稳定表达人EP4受体的HEK293进行cAMP的产生的测定。
(1)测定方法
利用Refseq Database检索前列腺素E受体(Prostaglandin E Receptor)，结果获得人EP4(NM＿000958)受体的基因信息。以这些序列信息为基础，通过以人cDNA为模板的PCR法，依据常规方法进行人EP4受体基因的克隆，建立稳定表达人EP4受体的HEK293。在将冷冻保存后的该细胞解冻来使用的情况下，使用含有10％FBS和50单位的青霉素、链霉素的Dulbecco’s改良伊格尔培养基(Dulbecco’s Modified Eagle’s Medium，下文中有时将其简称为DMEM)，在一定期间(1～2周左右)内进行3次以上的传代，使用所得到的细胞。将传代培养的该细胞以2×104～2.5×104个/孔接种在96孔的多聚-D-赖氨酸包被板上，培养1天。吸除各孔的培养基后，加入DMEM 80μL，在37℃温育15分钟。然后添加加入有PGE2或试验化合物(最终浓度的5倍浓度)的检测培养基(包含100mM HEPES、1mM IBMX的DMEM)20μL，开始反应，在37℃反应30分钟后，吸引除去培养基，添加包含在cAMP筛选试剂盒(Screen Kit)(Applied Biosystems公司制造)中的Assay/Lysis Buffer 100μL，使反应停止。然后将在37℃温育30分钟的样品作为cAMP定量用样品，按照cAMP筛选试剂盒中记载的方法对样品中的cAMP量进行定量。使用Kaleida Graph，通过化合物浓度与cAMP量的非线形回归计算出使cAMP升高至最大增加量的50％所需要的化合物的浓度(EC50值)。
(2)测定结果
如表1所示，本发明的化合物显示出优异的EP4激动活性。特别是与比较例1(Comparative Example 1)(其是与本发明的化合物近似的公知化合物)相比也显示出优异的EP4激动活性。
需要说明的是，关于测定了2次以上EP4激动活性的化合物，必要时示出它们的平均值。另外，表中的Exp.No.表示实施例编号。
[表1]
Exp.No. EC50(nM)
1 0.045
2 0.035
3 0.13
4 0.34
5 0.3
6 0.56
7 0.09
8 0.08
9 0.09
10 0.065
11 0.09
12 0.6
13 0.34
14 0.3
15 0.63
16 0.4
17 0.026
18 0.1
19 0.1
20 0.07
21 0.5
22 0.055
23 0.033
24 0.3
25 0.095
26 0.17
27 0.09
28 0.087
29 0.16
比较例1 2.5
<试验例2使用了人EP受体表达细胞的受体结合试验>
为了评价对各EP受体亚型的选择性，进行了试验化合物针对稳定表达了人EP2、人EP3以及人EP4受体的细胞膜的[3H]PGE2结合抑制活性的测定。
(1)测定方法
关于前列腺素E受体EP2、EP3、EP4的膜组分，分别使用10.0μg蛋白/管的MerckMillipore公司的HTS185M、HTS092M、HTS142M。将该膜组分与包含试验化合物和[3H]PGE2的反应液(250μL/管)一同在25℃温育60分钟。关于[3H]PGE2的最终浓度，在EP2测定系中为2.56nmol/L、EP3测定系中为1.54nmol/L、EP4测定系中为1.24nmol/L。反应后，用细胞收集器将膜组分回收到滤纸上，将滤纸移至测定小药瓶中，利用液体闪烁计数器进行测定。
非特异性结合是以在过量(10μM)的非标记PGE2的存在下的结合的形式而求出的。基于试验化合物的[3H]PGE2结合抑制活性的测定是以各种浓度添加试验化合物来进行的。需要说明的是，反应中使用下述缓冲液。
EP2用缓冲液；包含5mmol/L MgCl2、1mmol/L CaCl2和0.2％BSA的50mmol/L HEPES-NaOH(pH7.4)
EP3用缓冲液；包含10mmol/L MgCl2和1mmol/L EDTA的50mmol/L Tris-HCl(pH7.4)
EP4用缓冲液；包含5mmol/L MgCl2、1mmol/L CaCl2和0.2％BSA的50mmol/L HEPES-NaOH(pH7.4)
关于试验化合物的[3H]PGE2结合抑制活性，制作剂量效应曲线，计算出试验化合物将[3H]PGE2与受体的结合抑制50％的浓度(IC50值)。
(2)测定结果
如表2所示，本发明的化合物显示出优异的EP4选择性。
需要说明的是，表中的Exp.No.表示实施例编号。
[表2]
Figure BDA0002552068800001191
/>
<试验例3大鼠股骨中的新生骨形成作用>
为了研究本发明的化合物的骨形成促进作用，使化合物作用于大鼠股骨，对所形成的新生骨进行评价。
(1)测定方法
对于8周龄的雌性SD大鼠(日本Charles River公司)，在3种混合麻醉(盐酸美托咪定、咪达唑仑、酒石酸布托啡诺)下保持侧卧位。用理发推将左大腿部的毛剃除，用70％乙醇消毒后，将试验化合物溶解在原位固化凝胶溶液(具体地说为聚乳酸-羟基乙酸共聚物(RESOMERRG502H、Evonik Industries公司制造)/聚乳酸-羟基乙酸共聚物-聚乙二醇嵌段共聚物(5050DLGmPEG5000、Lakeshore Biomaterials公司制造)/N-甲基-2-吡咯烷酮(Wako公司制造)(47％/3％/50％重量比))中并填充在1mL注射器中、并将21G注射针与该注射器连结，将针经皮从股四头肌刺入到股骨骨干部中心附近的骨膜处。然后在股四头肌与骨膜之间进行注入，试验化合物量为100μg，给药体积为50μL，拔出注射针。对照组单独给予上述的原位固化凝胶溶液。试剂给药1周后，对动物实施3种混合麻醉，通过固定于仰卧位进行放血而对其实施安乐死。摘出左股骨，除去肌肉等周围组织，利用骨盐量测定装置DCS-600EX(ALOKA公司制造)测定股骨整体的骨盐量，接着将其沿长轴3等分，评价正中部位(骨干部)的骨盐量。以各组6例实施试验。
(2)测定结果
在本发明的代表性化合物给药组中，与对照组相比，左股骨骨干部的骨盐量得到了增加(表3～5)。另一方面，对未实施试剂给药的右股骨骨干部的骨盐量无影响。由该结果确认到，本发明的化合物通过局部给药，作为骨形成促进剂是有用的。另外，在任一化合物给药组中均无死亡例，也未观察到由于PGE2给药所观察到的副作用，显示出本发明的化合物能够安全地给药。
需要说明的是，对每一试验记载了试验结果。
[表3]
Figure BDA0002552068800001201
[表4]
Figure BDA0002552068800001211
[表5]
Figure BDA0002552068800001212
<试验例4犬股骨中的新生骨形成作用>
为了研究本发明的化合物的骨形成促进作用，关于将含有试验化合物的微球给药至犬的股骨附近的影响，通过测定在给药后形成的新生骨来评价骨形成促进作用。
(1)测定方法
将盐酸氯胺酮(KETALAR 500mg，第一三共制药株式会社)和甲苯噻嗪(Selactar2％注射液，拜耳药品株式会社)的1:1混合液以约0.5mL/kg对于9至11月龄的雌性比格犬(北山Labes株式会社)给药，进行麻醉，为了维持麻醉，利用吸入麻醉器IMPAC6(VetEquipInc)使用日本药典异氟烷(Elucaine，Mylan制药株式会社)。将右后肢的股骨周边剃毛，消毒后使用1mL的注射注射器和21G的注射针，对于股骨骨干部的骨膜周围经皮给予将含有试验化合物(实施例23)的微球(根据制剂例1或制剂例2中记载的方法制造出)悬浮在CMC溶液中而得到的微球悬浮液350μL。试验化合物的给药量分别为0.01、0.1、1.0、10或100μg/位点，使用与这些量分别相当的量的上述微球。作为对照组，单独给予将不含有试验化合物的微球悬浮在350μL的CMC溶液中而得到的试剂。试剂给药4周后，通过将动物在戊巴比妥钠(Somnopentyl)麻醉下放血使其安乐死。摘出左右的股骨后，浸渍在10％中性缓冲甲醛液中进行保存。股骨的骨盐量利用DiscoveryX射线骨密度测定装置(东洋Medic株式会社制造)进行测定。以各组4例实施试验。
(2)测定结果
将上述微球悬浮液对于犬的股骨骨干部给药4周后，与对照组相比，通过以试验化合物的给药量计为1.0μg、10μg和100μg的给药，股骨的骨盐量给药量依赖性地增加(表6)。由该结果确认到，本方式化合物通过局部给药，作为骨形成促进剂是有用的。另外，在任一给药组中均无死亡例，也未观察到由于PGE2给药通常观察到的副作用，显示出含有本方式化合物的上述微球制剂能够安全地给药。
[表6]
Figure BDA0002552068800001221
<试验例5大鼠股骨闭合骨折模型中的骨折治愈促进作用>
为了研究本发明化合物的骨折治愈促进作用，对于将含有试验化合物的微球注射至大鼠股骨闭合骨折模型的骨折部位的影响进行确认。
(1)测定方法
将13周龄的雌性SD大鼠(日本SLC公司)在3种混合麻醉(盐酸美托咪定、咪达唑仑、酒石酸布托啡诺)下保持在侧卧位。利用理发推从左膝到大腿部剃毛，利用日本药典聚维酮碘(动物用碘液、明治制果药业株式会社；1mL中日本药典聚维酮碘20mg)消毒后，将膝部位的皮肤和膝盖骨侧部的股内侧肌切开，将膝盖骨从股骨头移开。将前端安装有钻头的穿孔器对准所露出的股骨头的髁间窝，通过手动旋转进行穿孔。从该孔将预先切成长度31mm、直径1.2mm的Kirschner钢线(Mizuho株式会社)插入到股骨的髄腔内。然后将左大腿部固定于小型台式万能试验机(EZ Test、(株式会社)岛津制作所)的3点弯曲试验夹具，通过施加力学负荷使股骨骨干部发生闭合骨折。是否导入骨折通过下述情况来确认：通过软X射线发生装置(M-100W、Softex(株式会社))和数字X射线传感器(NX-04、(株式会社)RF)，根据X射线图像，在股骨骨干部得到完全的横骨折。将含有试验化合物(实施例23)的微球(根据制剂例3中记载的方法制造)悬浮在CMC溶液中而得到的微球悬浮液中，将作为给药体积的100μL(以试验化合物量计含有100或300μg)注入到骨折部。作为对照组，将不含有上述试验化合物的微球悬浮在100μL的CMC溶液中并将所得到的试剂单独给药。在骨折1、2、3周后，在异氟烷麻醉下拍摄软X射线，使用Image J对于X射线图像的骨痂部位的面积进行定量。骨折4周后，在3种混合麻醉下拍摄软X射线，然后通过固定于仰卧位进行放血使其安乐死，摘出左股骨。对于骨折4周后的软X射线图像，通过在盲检下确认有无骨痂的连续性来判定骨愈合。股骨样品进行冷冻保存直至实施骨强度试验，在试验当日使用骨强度测定装置(MZ-500S、(株式会社)Maruto)测定扭转强度。
需要说明的是，也可以将大鼠换成犬，按照本试验的方法进行试验。
(2)测定结果
与对照组相比，试验化合物给药组中，在骨折2周后以后确认到了骨折骨痂面积的增加(表7)，在骨折25天后通过X射线图像判定的骨愈合率显著改善(表8)。另外，与对照组相比，在从试验化合物给药组摘出的骨折4周后的股骨中确认到了基于扭转试验的骨强度(最大旋转力)的增加(表8)。由该结果确认到，本方式化合物在骨折治愈过程中作为骨愈合的促进剂是有用的。另外，在任一化合物给药组中均无死亡例，也未观察到由于PGE2给药所通常观察到的副作用，显示出含有本方式化合物的上述微球制剂能够安全地给药。
[表7]
Figure BDA0002552068800001231
[表8]
25天后的骨愈合率(％) 最大旋转力(N·cm)
对照组 61.1 18.8±6.1
100μg 90.0 20.4±7.1
300μg 85.7 26.3±11.7
<试验例6犬腰椎后侧方固定模型中的骨愈合促进作用>
为了研究本发明的化合物在脊椎固定中的骨愈合促进作用，使用犬的腰椎后侧方固定模型，对于在自体骨移植时混合含有试验化合物的微球的影响进行确认。
(1)测定方法
将盐酸氯胺酮(KETALAR 500mg、第一三共制药株式会社)和甲苯噻嗪(Selactar2％注射液、拜耳药品株式会社)的1:1混合液以约0.5mL/kg的用量对于12个月至13个月龄的雄性比格犬(北山Labes株式会社)给药，进行麻醉导入后，通过利用吸入麻醉器IMPAC6(VetEquip Inc)吸入日本药典异氟烷(Elucaine、Mylan制药株式会社)来维持麻醉状态。将动物固定于腹卧位，将位于左右的从髂后上棘到髂嵴的周边和腰背部的大范围的被毛剃除，利用日本药典聚维酮碘(动物用碘液、明治制果药业株式会社；1mL中日本药典聚维酮碘20mg)和消毒用乙醇液(和光纯药工业株式会社)消毒。使用手术刀从髂后上棘沿着髂嵴将皮肤和软部组织切开后，将覆盖髂嵴的肌肉剥离到骨膜下，将髂嵴露出。使用咬骨钳和骨剪刀将左右各自的髂骨采集大约2g，进行压迫止血。将采集的髂骨剥离软部组织后，用骨剪刀剪得细碎，制成1mm大小的片状，左右分别制作2g的移植骨。接着，将皮肤沿着腰背部的棘突起用手术刀切开，切开左右的腰背肌膜后，将多裂肌-最长肌的肌膜间剥离，切开并将第4和第5腰椎的横突起露出。将附着于横突起的软部组织剥离后，将横突起表面的皮质骨用电钻头(OS-40MV2、长田电机工业株式会社)进行皮质剥除，制作骨移植母床。将与试验化合物(实施例23)10μg、30μg或100μg相当的量的微球(依据制剂例1中记载的方法进行制造)悬浮在800μL的CMC溶液中并将所得到的微球悬浮液与前面制作的移植骨(2g)充分混合，埋植在左右第4和第5腰椎的横突起和横突起间的移植骨母床中。自体骨埋植后，将腰背肌膜、皮下组织和皮肤，对术部进行消毒。手术12周后利用戊巴比妥酸钠(Somnopentyl、共立制药株式会社)的过量给药(30mg/kg)使其安乐死，然后摘出腰椎。在盲检下在第4和第5腰椎中从1个方向进行基于利用徒手的可动性确认(Manural Palpation)的骨愈合判定和使用SoftexM-60型(Softex株式会社)的软X射线拍摄。根据软X射线图像按照表9的评价基准由1人在盲检下对各图像进行评价。以各组5例实施试验。
[表9]
Figure BDA0002552068800001251
(2)测定结果
取出腰椎标本，由软X射线像通过钙化的程度对骨形成进行评价，结果在将不含有试验化合物的微球混合在自体移植髂骨中的对照组中，5例中的5例在第4-第5腰椎间确认到可动性，在软X射线像中未确认到横突起间的钙化。另一方面，在含有试验化合物的上述微球给药组中，在10μg、30μg或100μg的各给药量下，各组5例中有1例在第4-第5腰椎间判定为有可动性，但余下的各4例均判定为无可动性。在软X射线图像中，在任一给药量下均在第4-第5腰椎横突起间确认到骨形成的促进和骨性的连续性，即连续性分数为2分以上。另外，该分数给药量依赖性地增加(表10中依次为2.4±0.5、2.6±0.5、2.8±0.4)。
由该结果确认到，本方式化合物在基于自体骨移植的脊椎固定术中作为骨愈合的促进剂是有用的。需要说明的是，在任一给药组中均无死亡例，也未观察到通过PGE2给药通常观察到的副作用，显示出含有本方式化合物的上述微球在脊椎固定手术中能够安全地给药。
[表10]
Figure BDA0002552068800001252
/>

Claims (22)

1.由下述通式(1)所表示的化合物或其盐：
[化1]
Figure FDA0002781803500000011
通式(1)中，
R1表示-H或卤素；
Ar1表示不带取代或者带有选自由-F和甲基组成的组中的1～3个相同或不同的取代基取代的选自G1组中的任一取代基且其中不包括
[化2]
Figure FDA0002781803500000012
此处，G1组为由
[化3]
Figure FDA0002781803500000013
组成的组，其中的a、b表示键合方向；
Ar2表示不带取代或者带有选自由氰基、-Cl、甲基、甲氧基以及苯基组成的组中的1～3个相同或不同的取代基取代的选自G2组中的任一种取代基且其中不包括
[化4]
Figure FDA0002781803500000014
此处，G2组为由苯基、噻吩基、呋喃基以及噻唑基组成的组；
*表示不对称碳原子。
2.如权利要求1所述的化合物或其盐，其中，R1为-H、-Cl或-Br。
3.如权利要求2所述的化合物或其盐，其中，Ar1为选自由
[化5]
Figure FDA0002781803500000021
组成的组中的任一种取代基。
4.如权利要求2所述的化合物或其盐，其中，Ar1为
[化6]
Figure FDA0002781803500000022
5.如权利要求3或4所述的化合物或其盐，其中，Ar2为选自由
[化7]
Figure FDA0002781803500000023
组成的组中的任一种取代基。
6.如权利要求3或4所述的化合物或其盐，其中，Ar2为选自由
[化8]
Figure FDA0002781803500000024
组成的组中的任一种取代基。
7.如权利要求3或4所述的化合物或其盐，其中，Ar2为选自由
[化9]
Figure FDA0002781803500000031
组成的组中的任一种取代基。
8.如权利要求7所述的化合物或其盐，其中，R1为-H。
9.如权利要求7所述的化合物或其盐，其中，R1为-Cl。
10.如权利要求7所述的化合物或其盐，其中，R1为-Br。
11.如权利要求1所述的化合物或其盐，其中，
R1为-H、-Cl或-Br；
Ar1为选自由
[化10]
Figure FDA0002781803500000032
组成的组中的任一种取代基；
Ar2为选自由
[化11]
Figure FDA0002781803500000033
组成的组中的任一种取代基。
12.选自下述组中的任一种化合物或其盐：
[化12]
Figure FDA0002781803500000041
13.下述化合物或其盐：
[化13]
Figure FDA0002781803500000042
14.下述化合物或其盐：
[化14]
Figure FDA0002781803500000043
15.下述化合物或其盐：
[化15]
Figure FDA0002781803500000051
16.下述化合物或其盐：
[化16]
Figure FDA0002781803500000052
17.下述化合物或其盐：
[化17]
Figure FDA0002781803500000053
18.下述化合物或其盐：
[化18]
Figure FDA0002781803500000054
19.下述化合物或其盐：
Figure FDA0002781803500000061
20.一种药物，其包含权利要求13～19中任一项所述的化合物或其可药用盐作为有效成分。
21.如权利要求20所述的药物，其用于骨折的治疗和/或治愈促进。
22.如权利要求20所述的药物，其用于促进脊椎固定术中的骨愈合。
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