NO334659B1 - 10,10-dialkylprostanoinsyre-derivater, fremgangsmåte for fremstilling av slike, farmasøytisk produkt omfattende slike samt anvendelse av slike som midler for å senke intraokulært trykk - Google Patents

10,10-dialkylprostanoinsyre-derivater, fremgangsmåte for fremstilling av slike, farmasøytisk produkt omfattende slike samt anvendelse av slike som midler for å senke intraokulært trykk Download PDF

Info

Publication number
NO334659B1
NO334659B1 NO20053715A NO20053715A NO334659B1 NO 334659 B1 NO334659 B1 NO 334659B1 NO 20053715 A NO20053715 A NO 20053715A NO 20053715 A NO20053715 A NO 20053715A NO 334659 B1 NO334659 B1 NO 334659B1
Authority
NO
Norway
Prior art keywords
hydroxy
dimethyl
oxo
enyl
hept
Prior art date
Application number
NO20053715A
Other languages
English (en)
Other versions
NO20053715L (no
NO20053715D0 (no
Inventor
Yariv Donde
Jeremiah H Nguyen
Original Assignee
Allergan Inc
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Priority claimed from US10/365,369 external-priority patent/US6875787B2/en
Application filed by Allergan Inc filed Critical Allergan Inc
Publication of NO20053715D0 publication Critical patent/NO20053715D0/no
Publication of NO20053715L publication Critical patent/NO20053715L/no
Publication of NO334659B1 publication Critical patent/NO334659B1/no

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/12—Ketones
    • A61K31/122—Ketones having the oxygen directly attached to a ring, e.g. quinones, vitamin K1, anthralin
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D333/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one sulfur atom as the only ring hetero atom
    • C07D333/50—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one sulfur atom as the only ring hetero atom condensed with carbocyclic rings or ring systems
    • C07D333/52—Benzo[b]thiophenes; Hydrogenated benzo[b]thiophenes
    • C07D333/62—Benzo[b]thiophenes; Hydrogenated benzo[b]thiophenes with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to carbon atoms of the hetero ring
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/557—Eicosanoids, e.g. leukotrienes or prostaglandins
    • A61K31/5575—Eicosanoids, e.g. leukotrienes or prostaglandins having a cyclopentane, e.g. prostaglandin E2, prostaglandin F2-alpha
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P27/00—Drugs for disorders of the senses
    • A61P27/02—Ophthalmic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P27/00—Drugs for disorders of the senses
    • A61P27/02—Ophthalmic agents
    • A61P27/06—Antiglaucoma agents or miotics
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C405/00—Compounds containing a five-membered ring having two side-chains in ortho position to each other, and having oxygen atoms directly attached to the ring in ortho position to one of the side-chains, one side-chain containing, not directly attached to the ring, a carbon atom having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, and the other side-chain having oxygen atoms attached in gamma-position to the ring, e.g. prostaglandins ; Analogues or derivatives thereof
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D333/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one sulfur atom as the only ring hetero atom
    • C07D333/50—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one sulfur atom as the only ring hetero atom condensed with carbocyclic rings or ring systems
    • C07D333/52—Benzo[b]thiophenes; Hydrogenated benzo[b]thiophenes
    • C07D333/54—Benzo[b]thiophenes; Hydrogenated benzo[b]thiophenes with only hydrogen atoms, hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals, directly attached to carbon atoms of the hetero ring
    • C07D333/56—Radicals substituted by oxygen atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D409/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D409/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings
    • C07D409/08—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings linked by a carbon chain containing alicyclic rings

Abstract

Foreliggende oppfinnelse tilveiebringer en fremgangsmåte for behandling av okulær hypertensjon eller glaukom, som omfatter å administrere til et dyr som har okulær hypertensjon eller glaukom en terapeutisk effektiv mengde av en forbindelse representert ved den generelle formel (I); hvor den stiplede linjen indikerer nærvær eller fravær av en binding, den skraverte kilen indikerer a- (ned) konfigurasjonen, og det fylte triangelet indikerer ß- (opp) konfigurasjonen; B er en enkel, dobbel eller trippel kovalent binding; n er 0-6; X er CH2, S eller O; Y er et hvilket som heist farmasøytisk akseptabelt salt av CO2H, eller CO2R, CONR2, CONHCH2CH2OH, CON(CH2CH2OH)2, CH2OR, P(O)(OR)2, CONRSO2R, SONR2, eller formel (la) R er H, C1-6-alkyl eller C2-6-alkenyl; R2 og R3 er lineært C1-6-alkyl som kan være like eller forskjellige, og kan være bundet til hverandre slik at de danner en ring som innlemmer karbonatomet som de i fellesskap er festet til.

Description

Oppfinnelsens område.
Foreliggende oppfinnelse vedrører 10,10-dialkylprostanoinsyre-derivater, fremgangsmåte for fremstilling av slike, farmasøytisk produkt omfattende slike samt anvendelse av slike som midler for å senke intraokulært trykk og spesielt som kraftige okulære hypotensiver egnet for behandling av glaukom.
Bakgrunn for oppfinnelsen.
Beskrivelse av beslektet fagkunnskap.
Okulære hypotensive midler er nyttige ved behandling av flere forskjellige okulære hypertensive tilstander, så som post-kirurgisk og post-laser-trabekul-ektomi ved okulære hypertensive tilfeller, glaukom, og som pre-kirurgiske hjelpemidler.
Glaukom er en sykdom i øyet som er kjennetegnet ved økt intraokulært trykk. På basis av dens etiologi er glaukom blitt klassifisert som primær eller sekundær. For eksempel kan primært glaukom hos voksne (medfødt glaukom) være enten åpenvinkelglaukom eller akutt eller kronisk vinkelblokadeglaukom. Sekundært glaukom er et resultat av forhåndseksisterende okulære sykdommer, så som uveitt, intraokulær tumor, eller en forstørret katarakt.
De underliggende årsakene til primært glaukom er ennå ikke kjent. Den økte intraokulære spenning skyldes obstruksjon av kammervann-utstrømming. Ved kronisk åpenvinkelglaukom synes fremre kammer og dets anatomiske strukturer normale, men drenering av kammervannet er hindret. Ved akutt eller kronisk vinkelblokadeglaukom er fremre kammer grunt, filtreringsvinkelen er innsnevret og iris kan tilstoppe det trabekulære nettverk ved inngangen til Schlemms kanal. Utvidelse av pupillen kan skyve irisroten fremover mot vinkelen, og kan produsere pupilleblokkering og således skape et akutt anfall. Øyne med snevre fremre kammervinkler er predisponert for akutt vinkelblokadeglaukom-anfall med forskjellig alvorlighetsgrad.
Sekundært glaukom er forårsaket av en forstyrrelse av strømmen av kammervann fra bakre kammer til fremre kammer, og deretter til Schlemms kanal. Inflammatorisk sykdom i fremre segment kan forhindre at vann unnslipper, ved å forårsake fullstendig bakre syneki i irisbombé, og kan tilstoppe dreneringskanalen med eksudater. Andre vanlige årsaker er intraokulære tumorer, forstørrede katarakter, sentral retinavene-okklusjon, traume mot øyet, operative prosedyrer og intraokulær blødning.
Hvis alle typer sees under ett, opptrer glaukom hos omtrent 2% av alle personer over en alder på 40, og kan være asymptomatisk i år før det utvikler seg til hurtig synstap. I tilfeller hvor kirurgi ikke er indikert, har topiske b-adreno-reseptor-antagonister tradisjonelt vært medikamentene valgt for behandling av glaukom.
Visse eikosanoider og deres derivater er blitt rapportert å være i besittelse av okulær hypotensiv aktivitet, og er blitt anbefalt for anvendelse ved behandling av glaukom. Eikosanoider og derivater innbefatter tallrike biologisk viktige forbindelser, så som prostaglandiner og deres derivater. Prostaglandiner kan beskrives som derivater av prostanoinsyre, som har følgende strukturformel:
Forskjellige typer av prostaglandiner er kjent, avhengig av strukturen og substituentene på den alicykliske ringen på prostanoinsyre-skjelettet. Videre klassifisering er basert på antallet umettede bindinger i sidekjeden, indikert ved indekserte tall etter den generiske type av prostaglandin [for eksempel prostaglandin E: (PGEO, prostaglandin E2(PGE2)], og på konfigurasjonen av substituentene på den alicykliske ring indikert med a eller p [for eksempel prostaglandin F2ct(PGF2p)].
Prostaglandiner ble tidligere ansett som kraftige okulære hypertensiver, men fakta oppsamlet det siste tiåret viser at noen prostaglandiner er meget effektive okulære hypotensive midler, og er ideélt egnet for langvarig medisinsk behandling av glaukom (se for eksempel Bito, L.Z., Biological Protection with Prostaglandins, Cohen, M.M., redaktør Boca Raton, Fla, CRC Press Inc., 1985, s. 231-252, og Bito, L.Z., Applied Pharmacology in the Medical Treatment of Glaucomas, Drance, S.M. og Neufeld, A.H., redaktører, New York, Grune & Stratton, 1984, s. 477-505. Slike prostaglandiner innbefatter PGF2a, PGFia, PGE2, og visse lipidløselige estere, så som Ci- til C2-alkylestere, for eksempel 1-isopropylester, av slike forbindelser.
Selv om den nøyaktige mekanisme ennå ikke er kjent, indikerer forsøksresultater at den prostaglandin-induserte reduksjon av intraokulært trykk er et resultat av økt uveoskleral utstrømming [Nilsson et. al., Invest. Ophthalmol. Vis. Sei. (suppl), 284(1987)].
Isopropylesteren av PGF2aer blitt vist å ha signifikant høyere hypotensiv effekt enn stamforbindelsen, formodentlig som et resultat av dens mer effektive gjennomtrengning av hornhinnen. 11987 ble denne forbindelsen beskrevet som "det kraftigste okulære hypotensive middel som noen gang er blitt omtalt" [se for eksempel Bito, L.Z., Arch. Ophthalmol. 105, 1036 (1987), og Siebold et al., Prodrug5 3(1989)].
Mens prostaglandiner synes å være blottet for betydelige intraokulære bivirkninger, er okulær overflate- (bindehinne) hyperemi og fremmedlegemefølelse konsekvent blitt forbundet med den topiske okulære anvendelse av slike forbindelser, særlig PGF2«og dets promedikamenter, for eksempel dets 1-isopropylester, hos mennesker. Det kliniske potensiale for prostaglandiner for behandling av tilstander forbundet med økt okulært trykk, for eksempel glaukom, er sterkt begrenset på grunn av disse bivirkningene.
I en serie av samtidig verserende US-patentsøknader overdratt til Allergan, Inc., er prostaglandinestere med økt okulær hypotensiv aktivitet som ikke følges av noen, eller i det vesentlige reduserte, bivirkninger, beskrevet. Samtidig verserende USSN 596,430 (innlevert 10. oktober 1990, nå US-patent nr. 5.446.041), vedrører visse 11-acyl-prostaglandiner, så som 11-pivaloyl, 11-acetyl, 11 -isobutyryl, 11 -valeryl og 11 -isovaleryl-PGF2a- Intraokulært trykk som reduserer 15-acyl-prostaglandiner er beskrevet i samtidig verserende søknad USSN 175,476 (innlevert 29. desember 1993). Likeledes er 11,15-, 9,15- og 9,11 -diestere av prostaglandiner, for eksempel 11,15-dipivaloyl-PGF2a, kjent for å ha okulær hypotensiv aktivitet. Se samtidig verserende patentsøknader USSN nr. 385,645
(innlevert 7. juli 1989, nå US-patent nr. 4.994.274), 584,370 (innlevert 18. september 1990, nå US-patent nr. 5.028,624) og 585,284 (innlevert 18. september 1990, nå US-patent nr. 5.034.413). Nylig har vi også vist at 17-naftyl-og benzotienyl-prostaglandinforbindelser også har okulær hypotensiv aktivitet (USSN 859,770, innlevert 17. mai 2001 Visse 15,15-dimetyl-prostaglandiner med antihypertensive, magesyre-sekresjonshemmende og glatt muskel-stimulerende egenskaper, er kjent for å ha forbedret metabolsk stabilitet. Disse er beskrevet av Pernet et al i US-patent nr. 4.117.014 (innlevert 23. desember 1976).
Oppsummering av oppfinnelsen.
Foreliggende oppfinnelse vedrører forbindelser representert ved Formel I:
hvor den stiplede linjen indikerer en binding, de skraverte kilene indikerer a- (ned) konfigurasjonen, og de fylte trianglene indikerer p- (opp) konfigurasjonen;
B er en enkel, dobbel eller trippel kovalent binding;
n er 0-6;
X er Chb, S eller O hvor begge X-grupper er identiske;
Y er et hvilket som helst farmasøytisk akseptabelt salt av C02H, C02R, CONHR,
CONHCH2CH2OH eller
R er H eller Ci.6alkyl;
R<2>og R3 C1-6 alkyl;
R<4>og R5 er hydrogen;
R<6>er H, fenyl, benzotien-2-yl eller 3-klorbenzotien-2-yl.
I et annet aspekt vedrører foreliggende oppfinnelse et farmasøytisk produkt som omfatter en beholder tilpasset til å tømme ut sitt innhold på oppmålt måte; og en oftalmisk løsning deri, som definert ovenfor.
I et annet aspekt er visse av forbindelsene representert ved ovennevnte formel, beskrevet nedenfor og anvendt i fremgangsmåten ifølge foreliggende oppfinnelse, nye og ikke nærliggende.
I et ytterligere aspekt er visse elementer av fremgangsmåtene for fremstilling av forbindelsene representert ved formelen ovenfor, og beskrevet her, nye og ikke nærliggende.
Kort beskrivelse av de tegnede figurene.
Skjemaer 1-8 illustrerer mulige måter å fremstille forbindelsene ifølge oppfinnelsen på.
Detaljert beskrivelse av oppfinnelsen.
Foreliggende oppfinnelse vedrører forbindelse representert ved Formel I:
hvor den stiplede linjen indikerer en binding, de skraverte kilene indikerer a- (ned) konfigurasjonen, og de fylte trianglene indikerer p- (opp) konfigurasjonen;
B er en enkel, dobbel eller trippel kovalent binding;
n er 0-6;
X er CH2, S eller 0 hvor begge X-grupper er identiske;
Y er et hvilket som helst farmasøytisk akseptabelt salt av C02H, C02R, CONHR,
CONHCH2CH2OH eller
R er H eller Ci-6alkyl;
R<2>og R3 Ci_6 alkyl;
R<4>og R5 er hydrogen;
R<6>er H, fenyl, benzotien-2-yl eller 3-klorbenzotien-2-yl.
Som anvendt her, refererer symbolene "Me" og "Et" til enhetene vanlig referert til som "metyl" og "etyl" av dem med alminnelig kunnskap på fagområdet.
En annen foretrukket gruppe innbefatter forbindelser med formel III:
hvor Y er CO2R, eller et hvilket som helst farmasøytisk akseptabelt salt av CO2H.
En annen foretrukket gruppe innbefatter forbindelser med formel IV:
hvor Y er CO2R eller hvilket som helst farmasøytisk akseptabelt salt av CO2H; og R6 er fenyl.
I ovennevnte formler er substituentene og symbolene som definert ovenfor. I formlene ovenfor: er Y fortrinnsvis et hvilket som helst farmasøytisk akseptabelt salt av CO2H eller C02R. Mer foretrukket er Y C02H eller C02Me.
n er fortrinnsvis 2.
En annen foretrukket gruppe innbefatter forbindelser med formel XIII:
hvor B representerer en enkelt- eller dobbeltbinding;
og R6 er fenyl.
I et annet aspekt av denne oppfinnelsen er visse elementer i fremgangsmåten for fremstilling av forbindelsene ifølge oppfinnelsen nye og ikke nærliggende
Fremstilling av 2,2-dialkylcyklopentan-1,3-dioner er velkjent på fagområdet. Én bekvem måte som et stort utvalg av disse forbindelsene kan fremstilles på, er ved base-mediert alkylering av karbon-2 i cyklopentan-1,3-dion ved anvendelse av et alkylhalogenid eller tilsvarende forbindelse. Denne typen omsetning er velkjent på fagområdet. Fremstillingen av tre generelle typer av 2,2-dialkylcyklopentan-1,3-dioner ved anvendelse av denne alkyleringsreaksjonen er illustrert i skjema 1. Forbindelser hvor én av alkylgruppene er metyl kan fremstilles ved en enkel alkyleringsreaksjon fra kommersielt tilgjengelig 2-metylcyklopentan-1,3-dion 1 (ligning 1). I det tilfelle at ingen av alkylgruppene i 2,2-dialkylcyklopentan-1,3-dionet er metyl (forbindelse 2b), kan disse forbindelsene bli fremstilt av cyklopentan-1,3-dion ved to påfølgende alkyleringsreaksjoner (ligning 2). I det tilfelle hvor de to alkylgruppene i 2,2-dialkylcklopentan-1,3-dionet er de samme, kan disse alkyleringsreaksjonene utføres i en ett-kar-prosedyre. I det tilfelle hvor de to alkylgruppene som skal danne en cyklisk forbindelse som innlemmer C2i cyklopentanonet i ringen, ellers kjent som et spiroketon, kan disse forbindelsene bli fremstilt ved anvendelse av et dihalogenalkan eller ekvivalent forbindelse for å utføre en intermolekylær alkylering, fulgt av en intermolekylær alkylering (ligning 3), som kunne bli utført i en ett- eller to-kar-prosess. De med kunnskap på fagområdet vil vite at det finnes mange måter å fremstille 2,2-dialkylcyklopentan-1,3-dioner på, og reaksjonene i skjema 1 er tatt med for å illustrere at disse forbindelsene lett kan fremstilles eller oppnås av dem med kunnskap på fagområdet, og er ikke ment å begrense rammen for oppfinnelsen på noen måte.
I et annet nytt og ikke nærliggende aspekt ved denne oppfinnelsen, blir forbindelser ifølge oppfinnelsen, representert ved formel VIII, fremstilt ved hjelp av en fremgangsmåte som omfatter følgende trinn:
i) å omsette en forbindelse med formel IX med en forbindelse med formel X i nærvær av en egnet base, hvilket gir en forbindelse med formel XI; ii) å koble en forbindelse med formel XI med en forbindelse med formel XII; og
iii) å fjerne beskyttelsesgruppene og skille diastereomerene, hvilket gir
de ønskede produkter;
hvor de skraverte kilene indikerer a- (ned) konfigurasjonen, de fylte trianglene indikerer p- (opp) konfigurasjonen, og de bølgede linjene indikerer enten cis- (Z) eller trans- (z) konformasjonen;
n er 0-6;
B er en enkel, dobbel, eller trippel kovalent binding;
J er en beskyttelsesgruppe som lett kan fjernes, hvilket gir den respektive hydroksydgruppen uten å påvirke resten av molekylet;
Rer Ci-e-alkyl;
R<2>og R3 er Ci-e-alkyl;
X er S eller 0 hvor begge X-grupper er identisk; og
M er en gruppe som omfatter ett eller flere metallatomer.
Alle forbindelsene omfattet av denne oppfinnelsen kan fremstilles ved anvendelse av fremgangsmåtene beskrevet ovenfor, supplert med fremgangsmåter kjent for dem med kunnskap på fagområdet. Syntesen av flere forbindelser ifølge oppfinnelsen er illustrert på skjemaer 2-7. Disse skjemaene som er innbefattet her. Selv om det finnes flere måter, kan reduksjonen av forbindelsene med formel VI til formel VII bli innlemmet i syntesen av disse forbindelsene, og én bekvem måte å utføre dette på er vist på skjema 2. Imidlertid vil de med kunnskap på fagområdet vite at det finnes mange måter som reduksjonen kan anvendes på for å fremstille forbindelsene ifølge denne oppfinnelsen.
Forbindelsene navngitt nedenfor, og illustrert i tabell 1, er særlig foretrukne representanter for forbindelsene ifølge foreliggende oppfinnelse: (3-{(1R,4S,5S)-5-(3-klorbenzo[b]tiofen-2-yl)-3-hydroksypent-1-enyl]-4-hydroksy-3,3-dimetyl-2-okso-cyklopentylsulfanyl}propylsulfanyl)eddiksyre-metylester (21,22),
(3-{(1R,4S,5S)-5-(3-klorbenzo[b]tiofen-2-yl)-3-hydroksypent-1-enyl]-4-hydroksy-3,3-dimetyl-2-okso-cyklopentylsulfanyl}propylsulfanyl)eddiksyre (23,24), (Z)-7-[(1R,4S,5R)-5-[(E)-5-(3-klorbenzo[b]tiofen-2-yl)-3-hydroksypent-1-enyl]-4-hydroksy-3,3-dimetyl-2-okso-cyklopentyl}hept-5-ynsyre-metylester (34, 35), (Z)-7-[(1R,4S,5R)-5-[(E)-5-(3-klorbenzo[b]tiofen-2-yl)-3-hydroksypent-1-enyl]-4-hydroksy-3,3-dimetyl-2-okso-cyklopentyl}hept-5-ynsyre (36, 37), (Z)-7-[(1R,4S,5R)-5-[(E)-5-(3-klorbenzo[b]tiofen-2-yl)-3-hydroksypent-1-enyl]-4-hydroksy-3,3-dimetyl-2-okso-cyklopentyl}hept-5-ensyre-metylester (38, 39), (Z)-7-[(1R,4S,5R)-5-[(E)-5-(3-klorbenzo[b]tiofen-2-yl)-3-hydroksypent-1-enyl]-4-hydroksy-3,3-dimetyl-2-okso-cyklopentyl}hept-5-ensyre (40, 41), 7-[(1R,4S,5R)^-hydroksy-5-((E)-(S)-3-hydroksy-okt-1-enyl)-3,3-dimetyl-2-okso-cyklopentyl]hept-5-ynsyre-metylester (42),
7-[(1R,4S,5R)^-hydroksy-5-((E)-(S)-3-hydroksy-okt-1-enyl)-3,3-dimetyl-2-okso-cyklopentyl]hept-5-ynsyre (43),
(Z)-7-[(1R,4S,5R)^-hydroksy-5-((E)-(S)-3-hydroksy-okt-1-enyl)-3,3-dimetyl-2-okso-cyklopentyl]hept-5-ensyre (44),
(Z)-7-[(1R,4S,5R)^-hydroksy-5-((E)-(S)-3-hydroksy-okt-1-enyl)-3,3-dimetyl-2-okso-cyklopentyl]hept-5-ensyre-metylester (45),
(Z)-7-[(1R,4S,5R)^-hydroksy-5-((E)-3-hydroksy^-fenylbut-1-enyl)-3,3-dimetyl-2-okso-cyklopentyl]hept-5-ensyre (46,47),
(Z)-7-[(1R,4S,5R)^-hydroksy-5-((E)-3-hydroksy^-fenylbut-1-enyl)-3,3-dimetyl-2-okso-cyklopentyl]hept-5-ensyre-metylester (48,49),
(Z)-7-[(1R,4S,5R)^-hydroksy-5-((E)-3-hydroksy-5-fenylpent-1-enyl)-3,3-dimety okso-cyklopentyl]hept-5-ensyre-metylester (50, 51),
(Z)-7-[(1R,4S,5R)^-hydroksy-5-((E)-3-hydroksy-5-fenylpent-1-enyl)-3,3-dimetyl-2-okso-cyklopentyl]hept-5-ensyre (52, 53),
(Z)-7-[(1R,4S,5R)-5-((E)^-benzo[b]tiofen-2-yl-3-hydroksybut-1-enyl)^-hydroksy-3,3-dimetyl-2-okso-cyklopentyl]hept-5-ensyre (54, 55),
7-[(1R,4S,5R)-5-((E)^-benzo[b]tiofen-2-yl-3-hydroksybut-1-enyl)^-hydroksy-3,3-dimetyl-2-okso-cyklopentyl]heptansyre (56, 57),
(Z)-7-[(1R,4S,5R)-5-(4-benzo[b]tiofen-2-yl-3-hydroksybutyl)^-hydroksy-3,3-dimetyl-2-okso-cyklopentyl]hept-5-ensyre (58, 59),
(Z)-7-[(1R,4S,5R)-5-((E)^-benzo[b]tiofen-2-yl-3-hydroksybut-1-enyl)^-hydroksy-3,3-dimetyl-2-okso-cyklopentyl]hept-5-ensyre-etylamid (60, 61), (Z)-7-[(1R,4S,5R)-5-((E)^-benzo[b]tiofen-2-yl-3-hydroksybut-1-enyl)^-hydroksy-3,3-dimetyl-2-okso-cyklopentyl]hept-5-ensyre-dietylamid (62, 63), (Z)-7-[(1R,4S,5R)-5-((E)^-benzo[b]tiofen-2-yl-3-hydroksybut-1-enyl)^-hydroksy-3,3-dimetyl-2-oksocyklopentyl]hept-5-ensyre (2-hydroksyetyl)amid) (64, 65), (3S,4R,5R)-4-((E)-4-benzo[b]tiofen-2-yl-3-hydroksybut-1-enyl)-3-hydroksy-2,2-dimetyl-5-[(Z)-6-(1 -H-tetrazol-5-yl)heks-2-enyl]cyklopentanon (66, 67), (Z)-7-[(1R,4S,5R)-5-((E)^-benzo[b]tiofen-2-yl-3-hydroksybut-1-enyl)^-hydroksy-3,3-dimetyl-2-okso-cyklopentyl]hept-5-ensyre-amid (68, 69), (Z)-7-[(1R,4S,5R)-5-((E)^-benzo[b]tiofen-2-yl-3-hydroksybut-1-enyl)^-hydroksy-3,3-dimetyl-2-okso-cyklopentyl]hept-5-ensyre-metylester (70, 71), 7-[(1R,4S,5R)-5-((E)^-benzo[b]tiofen-2-yl-3-hydroksybut-1-enyl)^-hydroksy-3,3-dimetyl-2-okso-cyklopentyl]hept-5-ynsyre-metylester (72, 73), 7-[(1R,4S,5R)-5-((E)^-benzo[b]tiofen-2-yl-3-hydroksybut-1-enyl)^-hydroksy-3,3-dimetyl-2-okso-cyklopentyl]hept-5-ynsyre (74, 75).
Farmasøytiske preparater kan fremstilles ved å kombinere en terapeutisk effektiv mengde av minst én forbindelse i henhold til foreliggende oppfinnelse, eller et farmasøytisk akseptabelt syreaddisjonssalt derav, som en aktiv ingrediens, med konvensjonelle, oftalmisk akseptable farmasøytiske eksipienter, og ved fremstilling av enhetsdoseformer som er egnet for topisk okulær anvendelse. Den terapeutisk effektive mengden er typisk mellom omtrent 0,0001 og omtrent 5%
(vekt/volum), fortrinnsvis omtrent 0,001 til omtrent 1,0% (vekt/volum) i flytende formuleringer.
For oftalmisk anvendelse blir det fortrinnsvis fremstilt løsninger ved anvendelse av av en fysiologisk saltvannsoppløsning som hovedvehikkel. pH i slike oftalmiske løsninger bør fortrinnsvis holdes mellom 6,5 og 7,2, med et passende buffersystem. Formuleringene kan også inneholde konvensjonelle, farmasøytisk akseptable konserveringsmidler, stabiliseringsmidler og overflateaktive midler.
Foretrukne konserveringsmidler som kan anvendes i de farmasøytiske preparatene ifølge foreliggende oppfinnelse innbefatter benzalkoniumklorid, klorbutanol, timerosal, fenylkvikksølvacetat og fenylkvikksølvnitrat. Et foretrukket overflateaktivt middel er for eksempel Tween 80. Likeledes kan forskjellige foretrukne vehikler anvendes i de oftalmiske preparatene ifølge foreliggende oppfinnelse. Disse vehiklene innbefatter polyvinylalkohol, povidon, hydroksypropyl-metylcellulose, poloksamerer, karboksymetylcellulose, hydroksyetylcellulose og renset vann.
Tonisitetsjusterende midler kan tilsettes om nødvendig eller passende. De innbefatter salter, særlig natriumklorid, kaliumklorid, mannitol og glycerol, eller et hvilket som helst annet egnet, oftalmisk akseptabelt tonisistetsjusterende middel.
Forskjellige buffere og måter å justere pH på kan anvendes, så lenge det resulterende preparatet er oftalmisk akseptabelt. Følgelig innbefatter buffere acetatbuffere, citratbuffere, fosfatbuffere og boratbuffere. Syrer eller baser kan anvendes til å justere pH i disse formuleringene etter behov.
På lignende måte innbefatter en oftalmisk akseptabel antioksydant for anvendelse i foreliggende oppfinnelse natrium-metabisulfitt, natriumtiosulfat, acetylcystein, butylert hydroksyanisol og butylert hydroksytoluen.
Andre eksipient-bestanddeler som kan innbefattes i de oftalmiske preparatene, er chelateringsmidler. Det foretrukne chelateringsmiddel er edentat-dinatrium, selv om andre chelateringsmidler også kan anvendes istedenfor eller sammen med det.
Ingrediensene anvendes vanligvis i følgende mengder:
Den faktiske dose av de aktive forbindelsene ifølge foreliggende oppfinnelse avhenger av den spesifikke forbindelsen, og av tilstanden som skal behandles; utvelgelsen av den passende dose ligger godt innenfor kunnskapen til fagpersonen på området.
De oftalmiske formuleringene ifølge foreliggende oppfinnelse blir passende pakket i former som er egnet for oppmålt anvendelse, så som i beholdere utstyrt med en dråpeteller ("dropper"), for å lette påføringen på øyet. Beholdere egnet for dråpevis påføring er vanligvis laget av egnet, inert, ikke-toksisk plastmateriale, og inneholder generelt mellom omtrent 0,5 og omtrent 15 ml løsning.
Syntetiske eksempler.
Fremgangsmåtene for fremstilling av forbindelser ifølge denne oppfinnelsen er videre illustrert med de følgende, eksempler, som er oppsummert i reaksjonsskjemaene på fig. 1-7, hvor forbindelsene er identifisert ved hjelp av samme designator både i eksemplene og på figurene.
2- alkvlcvklopentan- 1, 3- dion ( 1a). En blanding av 1,3-cyklopentandion (89,4 mmol, Aldrich), l-R2 (96,4 mmol, Aldrich) og KOH (5,097 g, 90,8 mmol) i H20 (25 ml)/dioksan (75 ml) blir oppvarmet ved tilbakeløp. Etter 5 timer blir en løsning av KOH (2 g) og l-R2 (2 mmol) i H20 (5 ml)/dioksan (15 ml) tilsatt, og etter enda 3 timer ved tilbakeløp får løsningen omrøres ved romtemperatur over natten. Om morgenen blir reaksjonen fortsatt ved tilsetning av en løsning av KOH (2 g) og l-R<2>(2,4 mmol) i H20 (5 ml)/dioksan (15 ml) og oppvarmet ved tilbakeløp. Etter 4 timer
får blandingen avkjøles til romtemperatur og blir ekstrahert med eter (1 x 100 ml, 3 x 75 ml). De kombinerte eterekstrakter blir avdampet, residuet blir slått sammen med HCI (50 ml 10%), og den resulterende blandingen blir plassert i et 120°C oljebad inntil koking blir observert (ca. 15 min.). Blandingen får deretter avkjøles til romtemperatur, blir nøytralisert ved tilsetning av NaHCCvløsning (150 ml, mettet), og den resulterende blandingen blir deretter ekstrahert med CH2CI2(4 x 75 ml). Den sammenslåtte ChbCb-løsningen blir tørket (MgS04), filtrert og avdampet, hvilket etterlater en brun olje som blir anvendt direkte i neste trinn.
2- alkvl- 2- metylcvklopentan- 1, 3- dion ( 2a). En blanding av 2-metyl-1,3-cyklopentandion (10,025 g, 89,4 mmol, Aldrich), l-R<2>(96,4 mmol, Aldrich) og KOH (5,097 g, 90,8 mmol) i H20 (25 ml)/dioksan (75 ml) blir oppvarmet ved tilbakeløp. Etter 5 timer blir en løsning av KOH (2 g) og l-R<2>(2 mmol) i H2O (5 ml)/dioksan (15 ml) tilsatt, og etter enda 3 timer ved tilbakeløp får løsningen omrøres ved romtemperatur over natten. Om morgenen blir reaksjonen fortsatt ved tilsetning av en løsning av KOH (2 g) og l-R2 (2,4 mmol) i H20 (5 ml)/dioksan (15 ml) og oppvarming ved tilbakeløp. Etter 4 timer får blandingen avkjøles til romtemperatur og blir ekstrahert med eter (1 x 100 ml, 3 x 75 ml). De sammenslåtte eterekstrakter blir avdampet, residuet slått sammen med HCI (50 ml 10%), og den resulterende blandingen blir plassert i et 120°C oljebad inntil koking blir observert (ca. 15 min.). Blandingen får deretter avkjøles til romtemperatur, blir nøytralisert ved tilsetning av NaHC03-løsning (150 ml, mettet), og den resulterende blandingen blir deretter ekstrahert med CH2CI2(4 x 75 ml). Den sammenslåtte CH2Cl2-løsningen blir tørket (MgS04), filtrert og avdampet, hvilket etterlater en brun olje som blir anvendt direkte i neste trinn.
2, 2- dialkvlmetvl- cvklopentan- 1, 3- dion ( 2b). En blanding av2-alkyl-1,3-cyklopentandion 1a (89,4 mmol, Aldrich), l-R<3>(96,4 mmol, Aldrich) og KOH (5,097 g, 90,8 mmol) i H2O (25 ml)/dioksan (75 ml) blir oppvarmet ved tilbakeløp. Etter 5 timer blir en løsning av KOH (2 g) og l-R<3>(2 mmol) i H20 (5 ml)/dioksan (15 ml) tilsatt, og etter enda 3 timer ved tilbakeløp får løsningen omrøres ved romtemperatur over natten. Om morgenen blir reaksjonen fortsatt ved tilsetning av en løsning av KOH (2 g) og l-R3 (2,4 mmol) i H20 (5 ml)/dioksan (15 ml) og
oppvarming ved tilbakeløp. Etter 4 timer får blandingen avkjøles til romtemperatur og blir ekstrahert med eter (1 x 100 ml, 3 x 75 ml). De sammenslåtte eterekstrakter blir avdampet, residuet slått sammen med HCI (50 ml 10%), og den resulterende blandingen blir plassert i et 120°C oljebad inntil koking blir observert (ca. 15 min.). Blandingen får deretter avkjøles til romtemperatur, blir nøytralisert ved tilsetning av NaHCCvløsning (150 ml, mettet), og den resulterende blandingen blir deretter ekstrahert med CH2CI2(4 x 75 ml). Den sammenslåtte CH2Cl2-løsningen blir tørket (MgSC^), filtrert og avdampet, hvilket etterlater en brun olje som blir anvendt direkte i neste trinn.
Spiror2. 41heptan- 4, 7- dion ( 2c). En blanding av 2-alkyl-1,3-cyklopentandion 1a (89,4 mmol, Aldrich), 1,2-dibrometan (120 mmol, Aldrich) og KOH (5,097 g, 90,8 mmol) i H2O (25 ml)/dioksan (75 ml) blir oppvarmet ved tilbakeløp i 24 timer. Blandingen får avkjøles, og råproduktet blir ekstrahert med eter (1 x 100 ml, 3 x 75 ml). De sammenslåtte eterekstrakter blir avdampet, residuet slått sammen med HCI (50 ml 10%), og den resulterende blandingen blir plassert i et 120°C oljebad inntil koking blir observert (ca. 15 min.). Blandingen får deretter avkjøles til romtemperatur, blir nøytralisert ved tilsetning av NaHC03-løsning (150 ml, mettet), og den resulterende blandingen blir deretter ekstrahert med CH2CI2(4 x 75 ml). Den sammenslåtte CH2Cl2-løsningen blir tørket (MgS04), filtrert og avdampet, hvilket etterlater en brun olje som blir anvendt direkte i neste trinn.
2, 2- dimetvl- cvklopentan- 1, 3- dion ( 2). Den publiserte prosedyren ble fulgt.
(Agosta, W. C; Smith, A.B., J. Org. Chem. 1970, 35, 3856). En blanding av 2-metyl-1,3-cyklopentandion (10,025 g, 89,4 mmol, Aldrich), metyljodid (6,0 ml, 96,4 mmol, Aldrich) og KOH (5,097 g, 90,8 mmol) i H20 (25 ml)/dioksan (75 ml) ble oppvarmet ved tilbakeløp. Etter 5 timer ble en løsning av KOH (2 g) og Mel (2,4 ml) i H20 (5 ml)/dioksan (15 ml) tilsatt, og etter enda 3 timer ved tilbakeløp fikk løsningen omrøres ved romtemperatur over natten. Om morgenen ble reaksjonen fortsatt ved tilsetning av en løsning av KOH (2 g) og Mel (2,4 ml) i H20 (5 ml)/- dioksan (15 ml) og oppvarming ved tilbakeløp. Etter 4 timer fikk blandingen avkjøles til romtemperatur og ble ekstrahert med eter (1 x 100 ml, 3 x 75 ml). De sammenslåtte eterekstrakter ble avdampet, residuet slått sammen med HCI (50
ml 10%), og den resulterende blandingen ble plassert i et 120°C oljebad inntil koking ble observert (ca. 15 min.). Blandingen fikk deretter avkjøles til romtemperatur, ble nøytralisert ved tilsetning av NaHC03-løsning (150 ml, mettet), og den resulterende blandingen ble deretter ekstrahert med CH2CI2(4 x 75 ml). Den sammenslåtte ChbCb-løsningen ble tørket (MgS04), filtrert og avdampet, hvilket etterlater en brun olje (10,474 g, 83 mmol, 93%) som ble anvendt direkte i neste trinn.
( S)- 3- hvdroksv- 2, 2- dimetvlcvklopentanon ( 3). Den publiserte prosedyren ble fulgt. (Brooks, D.W.; Hormoz, M.; Grothaus, P.G., J. Org. Chem. 1987, 52, 3223). En 35°C (indre temperatur) løsning av D-glukose (106,73 g, 592 mmol, Aldrich) i H20 (690 ml) i en 4 liter Erlenmeyer ble behandlet med Bakers-gjær (71,065 g, Fleischmann's). Blandingen fikk fermentere i 2 timer, deretter ble 2,2-dimetylcyklopentan-1,3-dion (2) (7,316 g, 58 mmol) tilsatt.
Blandingen ble omrørt i 48 timer og deretter filtrert gjennom celitt, idet det ble vasket med omtrent 1 liter CH2CI2. Filtreringen var vanskelig på grunn av den tykke konsistensen på gjæren, og det hjalp å kontinuerlig tilsette CH2CI2til blandingen og skrape toppen av celittlaget med en spatel. Filtratet ble overført til en skilletrakt, og 100 ml saltoppløsning ble tilsatt og lagene ble skilt. Saltoppløsning (400 ml) ble tilsatt til det vandige laget og den resulterende løsningen ekstrahert videre med CH2CI2(3 x 500 ml). Den sammenslåtte CH2CI2-løsningen ble tørket (MgS04), filtrert og avdampet, hvilket etterlot en gul olje. Flash-kromatografi (11 x 5 cm, 20% EtOAc/heks -> 25% -> 30% -> 40% -> 50%) ga alkohol 3 (2,435 g, 19 mmol, 33%).
Det enantiomere overskuddet av 3 ble analysert ved hjelp av<1>H NMR av den tilsvarende Mosher's ester som ble fremstilt ved behandling av alkohol 3 (11 mg, 0,09 mmol) i dikloretan (0,3 ml, Aldrich) med pyridin (27 ul, 0,33 mmol, Aldrich) og (R)-a-metoksy-a-trifluormetylfenyl-eddiksyreklorid (58 ul, 0,31 mmol, Fluka). Blandingen ble omrørt over natten og deretter fordelt mellom vann (10 ml) og eter (10 ml). Eterlaget ble vasket med 1M HCI (10 ml) og mettet NaHC03-løsning, og ble deretter tørket (MgS04), filtrert og avdampet. 1H NMR-analyse ble gjort på den rå esteren.
( S)- 3-( tert) butvldimetvl- silanvloksv- 2, 2- dimetvl- cvklopentanon ( 4). En løsning av alcohol 3 (520 mg, 4,1 mmol) og 2,6-lutidin (0,56 ml, 4,8 mmol, Aldrich) i CH2CI2(8,0 ml, Aldrich) ble behandlet med TBSOTf (1,0 ml, 4,3 mmol, Aldrich). Etter 5,5 time ble mettet NaHCCVIøsning (20 ml) tilsatt, og blandingen ble ekstrahert med CH2CI2(20 ml). ChbCb-løsningen ble vasket med 20 ml hver av 1M HCI, mettet NaHCCvløsning og saltoppløsning, og ble deretter tørket (MgS04), filtrert og avdampet. Flash-kromatografi (5x5 cm, 10% Et20/pentan) ga TBS-eter 4 (698 mg, 2,9 mmol, 70%).
( S)- 3-( tert) butvldimetvl- silanvloksv- 2, 2- dimetvl- 5- fenvlselanvl- cyklopentanon (5). En løsning av TBS-eter 4 (1,496 g, 6,2 mmol) i THF (2 ml, Aldrich) ble dråpevis tilsatt til en -78°C løsning av LDA (4,9 ml, 7,3 mmol, 1,5M/cykloheksan, Aldrich) i THF (22 ml, Aldrich), idet det ble skyllet med 2 ml THF. Etter 15 min. ble en løsning av PhSeCI (1,424 g, 7,4 mmol, Aldrich) i THF (2 ml) raskt tilsatt ved hjelp av kanyle, idet det ble skyllet med 2 ml THF. Løsningen ble omrørt i 10 min., og deretter fordelt mellom 50 ml 0,5M HCI og 75 ml eter. Eterlaget ble vasket med 30 ml hver av vann, mettet NaHCCvløsning og saltoppløsning, og ble deretter tørket (MgSC^), filtert og avdampet. Flash-kromatografi (2% EtOAc/heks -» 4%) ga fenylselenid 5 (1,641 g, 4,1 mmol, 67%) sammen med 476 mg av blandede fraksjoner inneholdende en lavere Rrforurensning.
( S)- 4-( tert) butvldimetvl- silanvloksv- 5, 5- dimetvlcyklopent- 2- enon ( 6). En løsning av selenid 5 (1,641 g, 4,1 mmol) og pyridin (0,62 ml, 7,7 mmol, Aldrich) i CH2CI2(13 ml, Aldrich) ble behandlet med H20 (1 ml) og 30% H202(1,1 ml, Aldrich). Blandingen ble omrørt i 30 min., og ble deretter fordelt mellom 25 ml CH2CI2og 25 ml mettet NaHCCvløsning. Det vandige laget ble ekstrahert med 25 ml CH2CI2og den sammenslåtte CH2Cl2-løsningen vasket med 1M HCI (2 x 25 ml) og saltoppløsning (50 ml). Løsningen ble deretter tørket (MgSC^), filtrert og avdampet, hvilket etterlater en oransje olje. Flash-kromatografi (6x4 cm, 10% eter/pentan) ga enon 6 (572 mg, 2,4 mmol, 59%).
( 3- merkapto- propvlsulfanvl) eddiksvre- metvlester ( 8). En iskald løsning av 1,3-ditian (2,0 ml, 19,9 mmol) i THF (40 ml) ble behandlet med NaH (819 mg, 20,5
mmol). Etter 30 min. ble metylbromacetat (1,9 ml, 20,0 mmol) tilsatt og blandingen omrørt i 3,5 time ved romtemperatur. Reaksjonen ble stanset ved tilsetning av MeOH og deretter 50 ml 1M HCI. Blandingen ble ekstrahert med eter (2 x 50 ml) og den sammenslåtte eterløsningen vasket med mettet natriumbikarbonatløsning (50 ml) og saltoppløsning (50 ml), og ble deretter tørket (MgSC^), filtrert og avdampet. Rensing ved flash-kromatografi på silikagel (10-15% etylacetat/heksaner) ga 971 mg (5,38 mmol, 27%) av tiolen.
( 3- r( S)- 3-( tert) butvldimetvl- silanvloksv)- 4, 4- dimetvl- 5- okso- cvklopent- 1-enylsulfanvllpropvlsulfanvDeddiksvre- metylester ( 10). En løsning av enon 6 (156 mg, 0,65 mmol) i MeOH (4,3 ml) ble behandlet med 30% H202(0,21 ml) og 1M NaOH (32 ul). Etter 4 timer ble 20 ml mettet ammoniumkloridløsning tilsatt, og blandingen ble ekstrahert med diklormetan (3x10 ml). Den sammenslåtte diklormetanløsningen ble tørket (Na2S04), filtrert og avdampet under vakuum.
En løsning av tiol 8 (110 mg, 0,61 mmol) i diklormetan (3 ml) ble tilsatt til det rå epoksydet (9) med kanyle, idet det ble skyllet med 1,2 ml. Basisk aluminiumoksyd (628 mg) ble tilsatt og blandingen omrørt i 16 timer. Løsningsmidlet ble avdampet og rensing av residuet med flash-kromatografi på silikagel (15% etylacetat/heksaner) ga 129 mg (0,31 mmol, 48%) av det koblede enon (10).
( 3- klorbenzo[ b1tiofen- 2- yl) metanol ( 1 2 ). Til en iskald løsning av 10,0 g (47,0 mmol) 3-klorbenzo[b]tiofen-2-karboksylsyre (11) i 200 ml THF ble det tilsatt 47 ml LiAIH4(47 mmol, 1M/THF). Etter 3 timer ble reaksjonen stanset ved tilsetning av MeOH (ca. 40 ml). De flyktige stoffene ble avdampet, og residuet ble behandlet med 50 ml 1M HCI. Etter omrøring i 10 min. ble blandingen ekstrahert med CH2CI2(3 x 150 ml). Den sammenslåtte CH2CI2-løsningen ble tørket (MgS04), filtrert og avdampet. Rensing ved flash-kromatografi på silikagel (10-20% etylacetat/heksan) ga 4,32 g (21,6 mmol, 46%) av alkoholen (12).
3- klorbenzofbltiofen- 2- karbaldehvd ( 13). En løsning av alkohol 12 (4,32 g, 21,6 mmol) i 40 ml CH2CI2ble behandlet med 4A molekylsikter, NMO (3,81 g, 32,5 mmol) og TPAP (381 mg, 1,08 mmol). Reaksjonen ble omrørt i 10 min., og ble
deretter avdampet til tørrhet. Rensing ved flash-kromatografi på silikagel (2% etylacetat/heksan) ga 3,52 g (18,3 mmol, 84%) av aldehydet (13).
( E)- 3-( 3- klorbenzo[ b1tiofen- 2- vl) akrvlsvre- metylester ( 14). En løsning av 3,52 g (18,3 mmol) av 13 i 50 ml toluen ble behandlet med metyl(trifenylfosfor-anyliden)acetat (7,48 g, 21,9 mmol). Etter 4 timer ble en mettet NaHCCVIøsning (50 ml) tilsatt og blandingen ekstrahert med etylacetat (2 x 75 ml). Den sammenslåtte etylacetatløsningen ble vasket med saltoppløsning (50 ml), tørket (Na2S04), filtrert og avdampet. Rensing ved flash-kromatografi på silikagel (5% etylacetat/heksan) ga 3,60 g (14,6 mmol, 80%) av enoatet (14).
3-( 3- klorbenzo[ b1tiofen- 2- vllpropionsvre- metylester ( 15). En løsning av 3,60 g (14,6 mmol) av 14 i 50 ml THF ble behandlet med Wilkinsons katalysator (3,35 g, 3,62 mmol). Blandingen omrørt under 1 atm. H2i 18 timer, og ble deretter filtrert gjennom celitt. Løsningsmidlet ble avdampet og residuet renset ved flash-kromatografi på silikagel (0-2% etylacetat/heksan), hvilket gir 3,63 g (14,3 mmol, 99%) av den mettede esteren (15).
3-( 3- klorbenzorbltiofen- 2- vl) propan- 1 - ol ( 16). En iskald løsning av 3,63 g (14,3 mmol) av 15 i 60 ml eter ble behandlet med LiBH4(621 mg, 28,5 mmol) og metanol (2 ml). Etter 30 min. ble 30 ml 0,5M NaOH-løsning tilsatt. Blandingen ble ekstrahert med etylacetat (2 x 25 ml), og den sammenslåtte etylacetatløsningen vasket med saltoppløsning (50 ml), tørket (MgS04), filtrert og avdampet. Residuet ble renset ved flash-kromatografi på silikagel (5-20% etylacetat/heksan), hvilket gir 2,57 g (11,3 mmol, 79%) av alkoholen (16).
3-( 3- klorbenzo[ b1tiofen- 2- vl) propionaldehyd ( 17). En -78°C løsning av oksalylklorid (1,73 g, 13,6 mmol) i diklormetan (20 ml) ble behandlet med DMSO (20 ml). Etter 5 min. ble en løsning av alkohol 16 (2,57 g, 11,3 mmol) i diklormetan (20 ml) tilsatt. Etter ytterligere 15 min. ble trietylamin (7,1 ml, 50,6 mmol) tilsatt. Reaksjonsblandingen ble omrørt ved -78°C i 5 min., og fikk deretter oppvarmes til romtemperatur. Etter 30 min. ble 100 ml vann tilsatt og blandingen ekstrahert med diklormetan (3 x 60 ml). Den sammenslåtte diklormetanløsningen
ble tørket (Na2S04), filtrert og avdampet. Rensing ved flash-kromatografi på silikagel (10% etylacetat/heksan) ga 2,11 g (9,4 mmol, 83%) av aldehydet (17).
5-( 3- klorbenzo[ b1tiofen- 2- yl) pent- 1 - yn- 3- ol ( 18). En løsning av aldehyd 17 (2,11 g, 9,4 mmol) i 15 ml THF ble tilsatt til en løsning av etynylmagnesiumbromid (28,2 ml, 14,1 mmol, 0,5M THF) ved 0°C. Etter 1,5 time ble mettet NH4CI-løsning (75 ml) tilsatt, og blandingen ble ekstrahert med etylacetat (3 x 50 ml). Den sammenslåtte etylacetatløsningen ble vasket med saltoppløsning (50 ml), og ble deretter tørket (Na2S04), filtrert og avdampet. Rensing ved flash-kromatografi (5-20% etylacetat/heksan) ga 2,20 g (8,78 mmol, 93%) av alkoholen (18).
Tert- butvl{ 1-[ 2-( 3- klorbenzo[ b1tiofen- 2- vl) etvllprop- 2- vnvloksv) dimetylsilan ( 19). En løsning av alkohol 18 (2,20 g, 8,78 mmol) i diklormetan (15 ml) ble behandlet med DMAP (215 mg, 1,8 mmol), TBSCI (1,59 g, 10,5 mmol) og trietylamin (1,8 ml, 13,2 mmol). Reaksjonsblandingen ble omrørt i 24 timer, og deretter ble mettet natriumbikarbonatløsning (50 ml) tilsatt. Blandingen ble ekstrahert med diklormetan (2 x 50 ml), og den sammenslåtte diklormetanløsningen tørket (Na2S04), filtrert og avdampet. Rensing ved flash-kromatografi (4% etylacetat/heksan) ga 3,06 g (6,4 mmol, 73%) av den beskyttede alkoholen (19).
( 3- f( 1R, 4S, 5S)^-( tert- butvldimetvl- silanvloksv)- 5- r( E)- 3-( tert- butvldimetvl-silanvloksv)- 5-( 3- klorbenzorbltiofen- 2- vl) pent- 1- envll- 3, 3- dimetvl- 2- okso- cvklo-pentylsulfanvDpropvlsulfanvDeddiksvre- metylester ( 20). En løsning av alkyn 19 (105 mg, 0,28 mmol) i THF (1,2 ml) ble behandlet med bis(cyklopentadienyl)-zirkoniumklorid-hydrid (91 mg, 0,35 mmol). Reaksjonsblandingen ble omrørt i 30 min., ble deretter avkjølt til -78°C og behandlet med metyllitium (0,46 ml, 0,64 mmol, 1,4M i eter). Etter 10 min. ble en forhåndsavkjølt (-78°C) løsning av litium-2-tienylcyanokuprat (1,3 ml, 0,33 mmol, 0,25M i THF) tilsatt med kanyle. Reaksjonsblandingen ble omrørt i 45 min., og deretter ble enonet 10 (61 mg, 0,15 mmol) i 0,2 ml THF tilsatt med kanyle, idet det ble skyllet med 0,2 ml THF. Etter 1 time ble reaksjonen stanset med tilsetning av 20 ml 1:1 mettet ammoniumkloridløsning/konsentrert ammoniumhydroksyd. Blandingen ble omrørt
i 45 min., og ble deretter ekstrahert med etylacetat (3 x 20 ml). Den sammenslåtte etylacetatløsningen ble tørket (Na2S04), filtrert og avdampet. Rensing ved flash-kromatografi på silikagel (10% etylacetat/heksaner) ga 51 mg (0,064 mmol, 43%) av det koblede produktet (20).
( 3- f( 1R, 4S, 5S)- 5-( 3- klorbenzorbltiofen- 2- vl)- 3- hvdroksvpent- 1- envll- 4-hvdroksv- 3, 3- dimetvl- 2- okso- cvklopentvlsulfanvl) propylsulfanvl) eddiksvre-metvlester ( 21, 22). En løsning av 20 (51 mg, 0,064 mmol) i CH3CN (1,6 ml) ble behandlet med HF-pyridin (0,26 ml). Reaksjonsblandingen ble omrørt i 24 timer, og ble deretter stanset ved tilsetning av 15 ml mettet natriumbikarbonatløsning. Blandingen ble ekstrahert med diklormetan (3x10 ml), og den sammenslåtte diklormetanløsningen ble tørket (Na2S04), filtrert og avdampet. Rensing ved preparativtynnsjiktskromatografi på silikagel (40% etylacetat/heksaner) ga 12 mg (0,023 mmol, 71%) av hver diastereomer.
( 3- f( 1R, 4S, 5S)- 5-( 3- klorbenzorbltiofen- 2- vl)- 3- hvdroksvpent- 1- envll- 4-hvdroksv- 3, 3- dimetvl- 2- okso- cvklopentvlsulfanvl) propylsulfanvl) eddiksvre ( 23, 24) Kaninlever-esterase (9 mg) ble tilsatt til en løsning av den lavere Rresteren 21 (11 mg, 0,021 mmol) i fosfatbuffer med pH 7,2 (0,5 ml)/CH3CN (0,1 ml). Blandingen ble omrørt natten over, og deretter ble 10 ml 0,5M HCI tilsatt sammen med noen få ml saltoppløsning. Blandingen ble ekstrahert med etylacetat (3x10 ml), og den sammenslåtte etylacetatløsningen tørket (Na2S04), filtrert og avdampet. Rensing ved flash-kromatografi på silikagel (3-5% MeOH/CH2CI2) ga 4 mg (0,0078 mmol, 37%) av syren (23). 300 MHz<1>H NMR (CDCI3, ppm) 8 7,73 (2H, d, J = 8,4 Hz), 7,4-7,3 (2H, m), 5,9-5,8 (1H, m), 5,8-5,7 (1H, m), 4,4-4,3 (1H, m), 3,63 (1H, d, J = 9,7 Hz), 3,21 (2H, s), 3,1-2,4 (11H, overlapper m), 2,1-1,7 (4H, overlapper m), 1,12 (3H, s), 1,03 (3H, s).
Den høyere Rresteren ble hydrolyser! på samme måte, med unntak av at en løsning av kaninlever-esterase (10 mg) i 0,5 ml fosfatbuffer med pH 7,2 ble tilsatt til en løsning av esteren (10 mg, 0,019 mmol) i CH3CN (0,2 ml). Reaksjonsblandingen ble omrørt i 22 timer, og deretter opparbeidet og renset som ovenfor. Dette ga 7 mg (0,013 mmol, 71%) av syren (24). 300 MHz<1>H NMR (CDCI3, ppm) 8 7,73 (2H, d, J = 8,8 Hz), 7,44-7,31 (2H, m), 5,9-5,8 (1H, m), 5,8- 5,7 (1H, m), 4,4^,3 (1H, m), 3,64 (1H, d, J = 9,7 Hz), 3,3-2,3 (13H, overlapper m), 2,1-1,7 (4H, overlapper m), 1,12 (3H, s), 1,03 (3H, s).
Tert- butylheks- 5- vnvloksv- dimetylsilan ( 26).
7-( tert- butvldimetvl- silanvloksv) hept- 2- vn- 1 - ol ( 27).
Eddiksvre- 7-( tert- butvldimetvl- silanvloksv) hept- 2- vnylester ( 28). En løsning av 7-(tert-butyldimetyl-silanyloksy)hept-2-yn-1-ol 27 (4,507 g, 21 mmol) i pyridin (20 ml) ble behandlet med eddiksyreanhydrid (3,0 ml, 31,8 mmol). Etter 18 timer ble løsningsmidlet avdampet og residuet avdampet samtidig med toluen. Residuet ble anvendt direkte i neste trinn.
7- acetoksy- hept- 5- vnsyre ( 29). En løsning av rå 28 i aceton (100 ml) ble behandlet med Jones Reagent (18,0 ml, 41,4 mmol, 2,3M). Blandingen ble varm og ble derfor avkjølt med et isbad. Etter 1 time ved romtemperatur ble 10 ml isopropylalkohol tilsatt og blandingen omrørt videre i 15 min. Blandingen hadde fremdeles en brun farge, så ytterligere 10 ml isopropylalkohol ble tilsatt. Etter ytterligere 15 min. hadde fargen ikke endret seg, så blandingen ble filtrert gjennom celitt og filtratet avdampet under vakuum. Residuet ble fordelt mellom 100 ml eter og 100 ml mettet ammoniumkloridløsning. Det vandige laget ble ekstrahert med 100 ml eter og den sammenslåtte eterløsningen vasket med saltoppløsning, og ble deretter tørket (MgS04), filtrert og avdampet, hvilket etterlater en gul olje (6,333 g) som ble anvendt direkte i neste trinn.
7- hydroksv- hept- 5- vnsvre- metylester ( 30). Den rå syren 29 (6,333 g) ble behandlet med en 1% løsning av acetylklorid i metanol (60 ml). Etter 16 timer ble natriumbikarbonat (1,966 g, 23,4 mmol) tilsatt. Blandingen ble tørket (MgSC^), filtrert gjennom celitt og avdampet under vakuum. Rensing ved flash-kromatografi på silikagel (30-40% etylacetat/heksaner) ga 7-hydroksy-hept-5-ynsyre-metylester 30 (3,022 g, 19,3 mmol, 92% fra 7-(tert-butyldimetyl-silanyloksy)hept-2-yn-1-ol
27). 7- iod- hept- 5- ynsvre- metylester ( 31). En løsning av 30 (1,347 g, 8,6 mmol) i 5 ml diklormetan ble tilsatt til en blanding av trifenylfosfin (2,725 g, 10,4 mmol), imidazol (726 mg, 10,7 mmol) og jod (2,602 g, 10,3 mmol) i 34 ml diklormetan, idet det ble skyllet med 5 ml diklormetan. Etter 40 min. ble diklormetanet avdampet under vakuum til noen få ml og den resulterende blandingen filtrert gjennom basisk aluminiumoksyd, idet det ble vasket med 10% etylacetat/heksaner. Rensing ved flash-kromatografi på silikagel (10% etylacetat/heksaner) ga 1,878 g (7,1 mmol, 83%) av propargyljodidet.
Tert- butvl- f( E)- 1- f2-( 3- klorbenzofbltiofen- 2- vnetvll- 3- iodallvloksv) dimetvl-silan ( 32). En løsning av alkyn 19 (5,547 g, 15,2 mmol) i diklormetan (50 ml) ble behandlet med Cp2ZrHCI (5,794 g, 22,5 mmol). Reaksjonsblandingen ble omrørt i 45 min., og deretter ble N-jodsuksinimid (4,966 g, 22,1 mmol) tilsatt. Etter 15 min. ble mettet natriumbikarbonatløsning (200 ml) tilsatt, og blandingen ble ekstrahert med diklormetan (2 x 100 ml). Den sammenslåtte diklormetanløsningen ble tørket (MgS04), filtrert og avdampet. Rensing ved flash-kromatografi på silikagel (0-5% etylacetat/heksaner) ga 6,608 g (13,1 mmol, 86%) av vinyljodidet (32).
7- 1( 1 R, 4S, 5R)^-( tert- butvldimetvl- silanvloksv)- 5- r( E)- 3-( tert- butvldimetvl-silanvloksv)- 5-( 3- klorbenzorbltiofen- 2- vl) pent- 1- envll- 3, 3- dimetvl- 2- okso- cvklo-pentvl) hept- 5- vnsvre- metvlester ( 33). En -78°C løsning avjodid 32 (675 mg, 1,34 mmol) i THF (2,0 ml) ble behandlet med tert-butyllitium (1,73 ml, 2,94 ml, 1,7M/- pentan). Den mørkerøde blandingen ble omrørt i 25 min., og deretter ble dimetylsink (0,80 ml, 1,6 mmol, 2M/toluen) tilsatt. Løsningen ble omrørt ved 0°C i 15 min., og deretter igjen avkjølt til -78°C. På dette tidspunkt ble en løsning av enon 6 (208 mg, 0,87 mmol) i THF (1,0 ml) tilsatt i løpet av 2 timer med sprøytepumpe, idet det ble skyllet med 0,5 ml THF. Etter 30 min. ble HMPA (1,34 ml, destillert fra CaH2) tilsatt, fulgt av en løsning av propargyljodid 31 (1,286 g, 4,83 mmol) i THF (1,0 ml). Løsningen ble omrørt i et -40°C bad over natten, og deretter ble 20 ml mettet ammoniumkloridløsning og 10 ml vann tilsatt. Blandingen ble ekstrahert med diklormetan (20 ml) og etylacetat (2 x 20 ml). De sammenslåtte organiske ekstrakter ble tørket (MgS04), filtrert og avdampet. Rensing ved flash-kromatografi på silikagel (5-10% etylacetat/heksaner) ga 198 mg (0,27 mmol, 31%) av 33.
fZ)- 74MR. 4S. 5R)^ 4fE)- 5-( 3- klorbenzorb1tiofen- 2- vn- 3- hvdroksvpent- 1-envl1- 4- hvdroksv- 3, 3- dimetvl- 2- okso- cvklopentvl) hept- 5- vnsvre- metylest^ ( 34, 35). En løsning av 33 (198 mg, 0,27 mmol) i CH3CN (6,5 ml) ble behandlet med HF-pyridin (1,2 ml). Løsningen ble omrørt i 3 timer, og mettet
natriumbikarbonatløsning (120 ml) ble tilsatt. Blandingen ble ekstrahert med diklormetan (3 x 50 ml), og den sammenslåtte diklormetanløsningen tørket (Na2S04), filtrert og avdampet. Rensing ved flash-kromatografi (50% etylacetat/heksan), fulgt av preparativ TLC (55% etylacetat/heksan), ga 55 mg (0,11 mmol, 41%) av den mindre polare diastereomeren (34) og 51 mg (0,10 mmol, 37%) av den mer polare diastereomeren (35).
( Z)- 7-(( 1R, 4S, 5R)- 5- r( E)- 5-( 3- klorbenzorbltiofen- 2- vl)- 3- hvdroksypent- 1-envll- 4- hvdroksv- 3, 3- dimetvl- 2- okso- cvklopentvl) hept- 5- vnsvre ( lav Rrdiastereomer, 36). En løsning av 34 (9 mg, 0,017 mmol) og kaninlever-esterase (1 mg) i fosfatbuffer med pH 7,2 (2 ml)/CH3CN (0,1 ml) ble omrørt i 17 timer. Blandingen ble deretter avdampet samtidig med CH3CN for å fjerne vann, og residuet renset ved flash-kromatografi på silikagel (3-7% MeOH/CH2CI2), hvilket gir 8 mg (0,016 mmol, 93%) av syren (36).
( Z)- 7-(( 1R, 4S, 5R)- 5- r( E)- 5-( 3- klorbenzorbltiofen- 2- vl)- 3- hvdroksypent- 1-envll- 4- hvdroksv- 3, 3- dimetvl- 2- okso- cvklopentvl) hept- 5- vnsvre ( høv Rrdiastereomer, 37). En løsning av 35 (12 mg, 0,023 mmol) og kaninlever-esterase (1 mg) i fosfatbuffer med pH 7,2 (2 ml)/CH3CN (0,1 ml) ble omrørt i 17 timer. TLC viste nærvær av utgangsmateriale, så ytterligere 2 mg av esterasen ble tilsatt. Etter omrøring i enda 24 timer var reaksjonen fullført. Opparbeiding og rensing som ovenfor for 36, ga 8 mg (0,016 mmol, 69%) av syren (37).
( Z)- 7-(( 1R, 4S, 5R)- 5- r( E)- 5-( 3- klorbenzorbltiofen- 2- vl)- 3- hvdroksypent- 1-envll- 4- hvdroksv- 3, 3- dimetvl- 2- okso- cvklopentvl) hept- 5- ensvre- metvlester ( lav Rrdiastereomer, 38). Etanol (95%, 2,5 ml) ble tilsatt til NiCI2(50 mg, 0,39 mmol) og NaBhU (7 mg, 0,19 mmol). Den resulterende, sorte løsningen ble omrørt i 5 min., og deretter ble etylendiamin (41 ul, 0,61 mmol) tilsatt. Etter 15 min. ble en løsning av alkyn 34 (40 mg, 0,077 mmol) i 0,5 ml 95% etanol tilsatt, idet det ble skyllet med 0,5 ml etanol. Kolben ble spylt med H2og fikk omrøres under 1 atm. H2i 22
timer. Blandingen ble deretter filtrert gjennom celitt og renset ved flash-kromatografi på silikagel (55% etylacetat/heksaner), hvilket gir 17 mg (0,032 mmol, 43%) av alkenet (38).
( Z)- 7-(( 1R. 4S. 5R)- 5- f( E)- 5-( 3- klorbenzofbltiofen- 2- vn- 3- hvdroksvpent- 1-envl1- 4- hvdroksv- 3, 3- dimetvl- 2- okso- cvklopentvl) hept- 5- ensvre- metylester ( høv Rr diastereomer, 39). Den samme prosedyren som for 36 ble fulgt, hvilket gir 17 mg (0,032 mmol, 41%) av 39.
( Z)- 7-(( 1R, 4S, 5R)- 5- r( E)- 5-( 3- klorbenzorbltiofen- 2- vl)- 3- hvdroksypent- 1-envll- 4- hvdroksv- 3, 3- dimetvl- 2- okso- cvklopentvl) hept- 5- ensvre ( lav Rrdiastereomer, 40). Den samme prosedyren som ovenfor for 36 ble fulgt, hvilket gir 9 mg (0,018 mmol, 85%) av syre 40. 300 MHz<1>H NMR (CDCI3, ppm) 5 7,73 (2H, d, J 8,4 Hz), 7,45-7,30 (2H, m), 5,8-5,6 (2H, m), 5,4-5,3 (2H, m), 4,3-4,1 (1H, m), 3,57 (1H, d, J = 9,7 Hz), 3,1-2,9 (2H, m), 2,5-1,9 (10H, m), 1,7-1,6 (2H, m), 1,09 (3H, s), 0,89 (3H, s).
( Z)- 7-(( 1R, 4S, 5R)- 5- r( E)- 5-( 3- klorbenzorbltiofen- 2- vl)- 3- hvdroksypent- 1-envll- 4- hvdroksv- 3, 3- dimetvl- 2- okso- cvklopentvl) hept- 5- ensvre ( høv Rrdiastereomer, 41). Den samme prosedyren som ovenfor for 36 ble fulgt, hvilket ga 9 mg (0,018 mmol, 85%) av syre 41. 300 MHz<1>H NMR (CDCI3, ppm) 5 7,73 (2H, d, J 8,8 Hz), 7,45-7,30 (2H, m), 5,8-5,6 (2H, m), 5,45-5,30 (2H, m), 4,3-4,2 (1H, m), 3,61 (1H, d, J = 9,7 Hz), 3,1-3,0 (2H, m), 2,5-1,9 (10H, m), 1,7-1,6 (2H, m), 1,10 (3H, s), 0,90 (3H, s).
( Z)- 7- r( 1R, 4S, 5R)- 5-(( E)- 4- benzorbltiofen- 2- vl)- 3- hvdroksvbut- 1- envl)^-hvdroksv- 3, 3- dimetvl- 2- okso- cvklopentvllhept- 5- ensvre ( 2- hvdroksvetvl) amid ( 65). En løsning av syre 55 (fremstilt på samme måte som syre 41, 7 mg, 0,015 mmol) i DMF (0,5 ml) ble behandlet med N-hydroksysuksinimid (6,9 mg, 0,056 mmol). Blandingen ble omrørt i 5 minutter og 1-[3-(dimetylamino)propyl]-3-etylkarbodi-imid-hydroklorid (EDCI, 20,7 mg, 0,11 mmol) ble tilsatt. Etter omrøring i 7 timer ble 2-aminoetanol (5 ul, 0,083 mmol) tilsatt, og blandingen omrørt videre i 16 timer. Etylacetat (50 ml) ble tilsatt, og blandingen ble vasket med vann (3 x 50 ml)
og saltoppløsning (50 ml). Det organiske laget ble tørket (Na2S04), filtrert og avdampet. Rensing ved flash-kromatografi på silikagel (5% metanol/diklormetan), fulgt av preparativ tynnsjikts-kromatografi (10% metanol/diklormetan) ga amid 65 (5 mg, 0,010 mmol, 65%).
( Z)- 7- r( 1R, 4S, 5R)- 5-(( E)- 4- benzorbltiofen- 2- vl)- 3- hvdroksvbut- 1- envll- 4-hvdroksv- 3, 3- dimetvl- 2- okso- cvklopentvllhept- 5- ensvre- amid ( 69). En løsning av syre 55 (9 mg, 0,02 mmol) i diklormetan (0,2 ml) ble behandlet med trietylamin (15 ul, 0,11 mmol). Løsningen ble avkjølt til 0°C og etter 10 minutter ble etylklorformiat (7 ul, 0,073 mmol) tilsatt. Løsningen ble omrørt videre i 1 time ved 0°C, og deretter ble konsentrert, vandig ammoniumhydroksydløsning tilsatt (10 ul, 0,26 mmol). Reaksjonen fikk omrøres ved romtemperatur over natten, og ble deretter stanset ved tilsetning av 0,5M HCI (7 ml). Blandingen ble ekstrahert med etylacetat (3 x 30 ml), og den sammenslåtte etylacetatløsningen ble vasket med mettet NaHCCvløsning (20 ml) og saltoppløsning (20 ml), og ble deretter tørket (Na2S04), filtrert og avdampet. Rensing ved flash-kromatografi på silikagel (2%-6% metanol/diklormetan) ga tittel-amidet (2,6 mg, 28%).
Fremgangsmåtene for screening av forbindelsene ifølge denne oppfinnelsen for den ønskede biologisk aktivitet, er illustrert i de følgende, ikke-begrensende eksempler. Resultatene for eksempler på forbindelser ifølge denne oppfinnelsen er tatt med i tabell 2. Disse resultatene er presentert kun for illustrative formål, og er ikke ment å begrense rammen for oppfinnelsen på noen måte.
Radioligandbinding.
Celler som stabilt uttrykker EPi-, EP?-, EP4- og FP- reseptorer.
HEK-293-celler som stabilt uttrykker human- eller felin-FP-reseptoren, eller EPi-, EP2- eller EP4-reseptorer, ble vasket med TME-buffer, skrapet fra bunnen av kolben, og homogenisert i 30 sekunder ved anvendelse av et Brinkman PT 10/35 polytron. TME-buffer ble tilsatt for å oppnå et endelig volum på 40 ml i sentrifugeringsrørene (sammensetningen av TME er 100 mM TRIS-base, 20 mM MgCI2, 2M EDTA; 10N HCI blir tilsatt for å oppnå en pH på 7,4).
Celle-homogenatet ble sentrifugert ved 19000 r.p.m. i 20 min. ved 4°C ved anvendelse av en Beckman Ti-60-rotor. Den resulterende pelleten ble gjenopp-slemmet i TME-buffer, hvilket giren endelig 1 mg/ml protein-konsentrasjon, som bestemt ved hjelp av Biorad-måling. Radioligand-bindingskonkurranse-målinger mot [<3>H-]17-fenyl PGF2a (5 nM) ble utført i et 100 ul volum i 60 min. Bindingsreaksjoner ble startet ved tilsetning av plasmamembranfraksjon. Reaksjonen ble avsluttet ved tilsetning av 4 ml iskald TRIS-HCI-buffer og hurtig filtrering gjennom glassfiber GF/B-filtre ved anvendelse av en Brandel-cellehøster. Filtrene ble vasket 3 ganger med iskald buffer og ovnstørket i én time.
[<3>H-] PGE2(spesifikk aktivitet 180 Ci mmol) ble anvendt som radioligand for EP-reseptorer. [<3>H-] 17-fenyl PGF2a ble anvendt for FP-reseptorbindingsstudier. Bindingsstudier som anvender EP^, EP2-, EP4- og FP-reseptorer ble utført in duplo i minst tre separate forsøk. Et 200 ul målingsvolum ble anvendt. Inkubasjoner var i 60 min. ved 25°C, og ble avsluttet ved tilsetning av 4 ml iskald 50 mM TRIS-HCI, fulgt av hurtig filtrering gjennom Whatman GF/B-filtre og tre ytterligere 4 ml utvaskinger i en cellehøster (Brandel). Konkurransestudier ble utført ved anvendelse av en endelig konsentrasjon av 5 nM [<3>H]-PGE2, eller 5 nM [<3>H] 17-fenyl PGF^ og ikke-spesifikk binding bestemt ved 10"<5>M av umerket PGE2, eller 17-fenyl PGF2a, i henhold til reseptor-undertypestudier.
Fremgangsmåter for FLIPR™- studier.
(a) Cellekultur.
HEK-293(EBNA)-celler, som stabilt uttrykker én type eller undertype av rekombinante humant prostaglandin-reseptorer (prostaglandin-reseptorer uttrykt: hDP/Gqs5; hEPi; hEP2/Gqs5; hEP3A/Gqi5; hEP4/Gqs5; hFP; hIP; hTP), ble dyrket i 100 mm dyrkningsskåler i høy-glukose DMEM-medium inneholdende 10% føtalt bovint serum, 2 mM l-glutamin, 250ug/ml geneticin (G418) og 200 ug/ml hygromycin B som utvelgelsesmarkører, og 100 enheter/ml penicillin G, 100 ug/ml streptomycin og 0,25ug/ml amphothericin B. (b) Kalsiumsignalstudier på FLIPR™
Celler ble kimsatt i en tetthet på 5x10<4>celler pr. brønn i Biocoat<®>Poly-D-lysin-belagte, sortveggede, klarbunnede 96-brønners plater (Becton-Dickinson), og fikk feste seg over natten i en inkubator ved 37°C. Cellene ble deretter vasket to ganger med HBSS-HEPES-buffer (Hanks Balanced Salt Solution uten bikarbonat og fenol rød, 20 mM HEPES, pH 7,4) ved anvendelse av en Denley Cellwash platevasker (Labsystems). Etter 45 minutter av fargepåsetting i mørke, ved anvendelse av den kalsiumsensitive fargen Fluo-4 AM i en endelig konsentrasjon på 2 nM, ble platene vasket fire ganger med HBSS-HEPES-buffer for å fjerne overskudd av farge, hvilket etterlater 100 ul i hver brønn. Platene ble gjen-ekvilibrert til 37°C i noen få minutter.
Celler ble eksitert med en Argon-laser ved 488 nm, og emisjon ble målt gjennom et emisjonsfilter (FLIPR™, Molecular Devices, Sunnyvale, CA) med en båndvidde på 510-570 nm. Medikamentløsning ble tilsatt i et 50 ul volum til hver brønn, hvilket gir den ønskede, endelige konsentrasjon. Toppøkningen i fluorescerende intensitet ble registrert for hver brønn. På én plate tjente fire brønner hver som negative (HBSS-HEPES-buffer) og positive kontroller (standard agonister: BW245C (hDP); PGE2(hEPi; hEP2/Gqs5; hEP3A/Gqi5; hEP4/Gqs5); PGF2a(hFP); carbacyklin (hIP); U-46619 (hTP), avhengig av reseptor). Fluorescens-toppendringen i hver medikamentholdige brønn ble deretter uttrykt i forhold til kontrollene.
Forbindelser ble testet i et høy-gjennomførings- (HTS) eller konsentrasjon-respons- (CoRe) format. I HTS-formatet ble førtifire forbindelser pr. plate undersøkt in duplo ved en konsentrasjon på 10"<5>M. For å frembringe konsentrasjon-respons-grafer, ble fire forbindelser pr. plate testet in duplo i et konsentrasjonsområde mellom 10"<5>og 10"<11>M. Gjennomsnittet av duplikatverdiene ble utregnet. I begge ble HTS- eller CoRe-format for hver forbindelse testet på minst 3 separate plater ved anvendelse av celler fra forskjellige passasjer, hvilket gir en n > 3.
Foregående beskrivelse angir i detalj spesifikke fremgangsmåter og preparater som kan anvendes til å praktisere foreliggende oppfinnelse, og representerer den beste måten som kan tenkes. Imidlertid er det åpenbart for en med alminnelig kunnskap på fagområdet at ytterligere forbindelser med de ønskede farmakologiske egenskaper kan fremstilles på analog måte, og at de beskrevne forbindelser også kan oppnås av forskjellige utgangsforbindelser via forskjellige kjemiske reaksjoner. Likeledes kan forskjellige farmasøytiske preparater fremstilles og anvendes med vesentlig det samme resultat. Beskyttelsesområdet for foreliggende oppfinnelse styres kun av de lovmessig oppsatte, medfølgende kravene.

Claims (19)

1. Forbindelse representert ved Formel I:
hvor den stiplede linjen indikerer en binding, de skraverte kilene indikerer a- (ned) konfigurasjonen, og de fylte trianglene indikerer p- (opp) konfigurasjonen; B er en enkel, dobbel eller trippel kovalent binding; n er 0-6; X er CH2, S eller 0 hvor begge X-grupper er identiske; Y er et hvilket som helst farmasøytisk akseptabelt salt av C02H, C02R, CONHR, CONHCH2CH2OH eller R er H eller Ci-6alkyl; R<2>og R3 Ci_6 alkyl; R<4>og R5 er hydrogen; R<6>er H, fenyl, benzotien-2-yl eller 3-klorbenzotien-2-yl.
2. Forbindelse ifølge krav 1, hvor forbindelsen med formel I videre er representert ved formel III
hvor Y er CO2R, eller et hvilket som helst farmasøytisk akseptabelt salt av CO2H.
3. Forbindelse ifølge krav 2, hvor Y er CO2H eller CC^Me.
4. Forbindelse ifølge krav 3, hvor R6 er 3-klorbenzotien-2-yl.
5. Forbindelse ifølge krav 4, hvor n er 2.
6. Forbindelse ifølge krav 5, hvor B er en enkeltbinding.
7. Forbindelse ifølge krav 1, hvor forbindelsen med formel I videre er representert ved Formel IV
hvor Y er CO2R eller hvilket som helst farmasøytisk akseptabelt salt av CO2H; og R6 er fenyl.
8. Forbindelse ifølge krav 7, hvor Y er CO2H eller CC^Me.
9. Forbindelse ifølge krav 8, hvor B er en dobbeltbinding.
10. Forbindelse ifølge krav 9, hvor R6 er 3-klorbenzotien-2-yl.
11. Forbindelse ifølge krav 10, hvor B er en dobbelt- eller trippelbinding.
12. Forbindelse ifølge krav 1, hvor nevnte forbindelse er valgt fra gruppen bestående av (3-{(1f?,4S,5S)-5-(3-klor-benzo[b]tiofen-2-yl)-3-hydroksy-pent-1-enyl]-4-hydroksy- 3,3-dimetyl-2-okso-cyklopentylsulfanyl}-propylsulfanyl)-eddiksyre-metylester (21, 22); (3-{(1R,4S,5S)-5-(3-klor-benzo[b]tiofen-2-yl)-3-hydroksy-pent-1-enyl]-4-hydroksy-3,3-dimetyl-2-okso-cyklopentylsulfanyl}-propylsulfanyl)-eddiksyre (23, 24); (Z)-74(1R,4S,5R)-5-[(£)-5-(3-klor-benzo[b]tiofen-2-yl)-3-hydroksy-pent-1-enyl]-4-hydroksy-3,3-dimetyl-2-okso-cyklopentyl}-hept-5-ynsyre-metylester (34, 35); (Z)-74(1R,4S,5R)-5-[(£)-5-(3-klor-benzo[b]tiofen-2-yl)-3-hydroksy-pent-1-enyl]-4-hydroksy-3,3-dimetyl-2-okso-cyklopentyl}-hept-5-ynsyre (36,37); (Z)-74(1R,4S,5R)-5-[(£)-5-(3-klor-benzo[b]tiofen-2-yl)-3-hydroksy-pent-1-enyl]-4-hydroksy-3,3-dimetyl-2-okso-cyklopentyl}-hept-5-ensyre-metylester (38, 39); (Z)-74(1R,4S,5R)-5-[(£)-5-(3-klor-benzo[b]tiofen-2-yl)-3-hydroksy-pent-1-enyl]-4-hydroksy-3,3-dimetyl-2-okso-cyklopentyl}-hept-5-ensyre (40,41); (Z)-7-[(1R,4S,5R)^-hydroksy-5-((E)-3-hydroksy-5-fenyl-pent-1-enyl)-3,3-dimetyl-2-okso-cyklopentyl]-hept-5-ensyre-metylester (50,51) (Z)-7-[(1R,4S,5R)^-hydroksy-5-((E)-3-hydroksy-5-fenyl-pent-1-enyl)-3,3-dimetyl-2-okso-cyklopentyl]-hept-5-ensyre (52,53) (Z)-7-[(1R,4S,5R)-5-((£)^-benzo[b]tiofen-2-yl-3-hydroksy-but-1-enyl)-4-hydroksy-3,3-dimetyl-2-okso-cyklopentyl]-hept-5-ensyre (54,55) 7-[(1R,4S,5R)-5-((£)-4-benzo[b]tiofen-2-yl-3-hydroksy-but-1-enyl)-4-hydroksy-3,3-dimetyl-2-okso-cyklopentyl]-heptansyre (56,57) (Z)-7-[(1R,4S,5R)-5-(4-benzo[b]tiofen-2-yl-3-hydroksy-butyl)-4-hydroksy-3,3-dimetyl-2-okso-cyklopentyl]-hept-5-ensyre (58,59) (Z)-7-[(1R,4S,5R)-5-((£)^-benzo[b]tiofen-2-yl-3-hydroksy-but-1-enyl)-4-hydroksy-3,3-dimetyl-2-okso-cyklopentyl]-hept-5-ensyre etylamid (60,61) (Z)-7-[(1R,4S,5R)-5-((£)^-benzo[b]tiofen-2-yl-3-hydroksy-but-1-enyl)-4-hydroksy-3,3-dimetyl-2-okso-cyklopentyl]-hept-5-ensyre dietylamid (62,63) (Z)-7-[(1R,4S,5R)-5-((£)^-benzo[b]tiofen-2-yl-3-hydroksy-but-1-enyl)-4-hydroksy-3,3-dimetyl-2-okso-cyklopentyl]-hept-5-ensyre (2-hydroksy-etyl)-amid (64,65) (3S,4R,5R)-4-((£)-4-benzo[b]tiofen-2-yl-3-hydroksy-but-1-enyl)-3-hydroksy-2,2-dimetyl-5-[(Z)-6-(1-H-tetrazol-5-yl)-heks-2-enyl]-cyklopentanon (66,67) (Z)-7-[(1R,4S,5R)-5-((£)^-benzo[b]tiofen-2-yl-3-hydroksy-but-1-enyl)-4-hydroksy-3,3-dimetyl-2-okso-cyklopentyl]-hept-5-ensyre amid (68,69) (Z)-7-[(1R,4S,5R)-5-((£)^-benzo[b]tiofen-2-yl-3-hydroksy-but-1-enyl)-4-hydroksy- 3,3-dimetyl-2-okso-cyklopentyl]-hept-5-ensyre-metylester (70,71) 7-[(1R,4S,5R)-5-((£)-4-benzo[b]tiofen-2-yl-3-hydroksy-but-1-enyl)-4-hydroksy-3,3-dimetyl-2-okso-cyklopentyl]-hept-5-ynsyre-metylester (72,73) 7-[(1R,4S,5R)-5-((£)-4-benzo[b]tiofen-2-yl-3-hydroksy-but-1-enyl)-4-hydroksy-3,3-dimetyl-2-okso-cyklopentyl]-hept-5-ynsyre (74,75)
13. Forbindelse ifølge krav 1, hvor forbindelsen med formel I videre er representert ved Formel XIII
hvor B representerer en enkelt- eller dobbeltbinding; og R6 er fenyl.
14. Forbindelse ifølge krav 13, hvor B er en dobbeltbinding.
15. Forbindelse ifølge krav 13, hvor B er en enkeltbinding.
16. Oftalmisk løsning omfattende en terapeutisk effektiv mengde av en forbindelse som definert i hvilket som helst av de foregående krav.
17. Farmasøytisk produkt, omfattende en beholder tilpasset dispens-innholdet av nevnte beholder i oppmålt form; og en oftalmisk løsning ifølge krav 16 i nevnte beholder.
18. Fremgangsmåte for fremstilling av forbindelser med formel VIII omfattende: i) omsetning av en forbindelse med formel IX med en forbindelse med formel X i nærvær av en egnet base for å danne en forbindelse med formel XI; ii) kobling en forbindelse med formel XI med en forbindelse med formel XII; og iii) fjerning av beskyttelsesgruppene og separasjon av diastereomerene for å oppnå det ønskede produkt; hvor de skraverte kilene indikerer a- (ned) konfigurasjonen, og de fylte trianglene indikerer p- (opp) konfigurasjonen; og de bølge linjer enten indikerer cis (Z) eller trans (Z) konformasjon; n er 0-6; B er en enkel, dobbel eller trippel kovalent binding; J er en beskyttelsesgruppe som lett kan fjernes for å danne den respektive hydroksid gruppe uten å påvirke resten av molekylet; Rer C1-6 alkyl; R<2>og R<3>er Ci-6 alky; R<6>er R6 er H, fenyl, benzotien-2-yl eller 3-klorbenzotien-2-yl; X er S eller 0 hvor begge X-grupper er identisk; og M er en gruppe som omfatter én eller flere metallatomer.
19. Forbindelse som definert i hvilket som helst av kravene 1-15 for anvendelse ved en metode for behandling av okulær hypertensjon eller glaukom hos et pattedyr.
NO20053715A 2003-02-11 2005-08-01 10,10-dialkylprostanoinsyre-derivater, fremgangsmåte for fremstilling av slike, farmasøytisk produkt omfattende slike samt anvendelse av slike som midler for å senke intraokulært trykk NO334659B1 (no)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US10/365,369 US6875787B2 (en) 2003-02-11 2003-02-11 10,10-dialkyl prostanoic acid derivatives as agents for lowering intraocular pressure
US10/772,720 US20040235958A1 (en) 2003-02-11 2004-02-04 10,10-dialkyl prostanoic acid derivatives as agents for lowering intraocular pressure
PCT/US2004/003433 WO2004071428A2 (en) 2003-02-11 2004-02-06 10,10-dialkyl prostanoic acid derivatives as agents for lowering intraocular pressure

Publications (3)

Publication Number Publication Date
NO20053715D0 NO20053715D0 (no) 2005-08-01
NO20053715L NO20053715L (no) 2005-10-27
NO334659B1 true NO334659B1 (no) 2014-05-12

Family

ID=32871611

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
NO20053715A NO334659B1 (no) 2003-02-11 2005-08-01 10,10-dialkylprostanoinsyre-derivater, fremgangsmåte for fremstilling av slike, farmasøytisk produkt omfattende slike samt anvendelse av slike som midler for å senke intraokulært trykk

Country Status (12)

Country Link
EP (1) EP1608309B1 (no)
JP (1) JP5319065B2 (no)
KR (1) KR101077461B1 (no)
AU (1) AU2004211936B2 (no)
BR (1) BRPI0407400A (no)
CA (1) CA2515631C (no)
MX (1) MXPA05008431A (no)
NO (1) NO334659B1 (no)
NZ (1) NZ541352A (no)
PL (1) PL209130B1 (no)
RU (1) RU2336081C2 (no)
WO (1) WO2004071428A2 (no)

Families Citing this family (12)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US7855226B2 (en) * 2003-02-11 2010-12-21 Allergan, Inc. Treatment of inflammatory bowel disease
EP1805139A2 (en) * 2004-10-26 2007-07-11 Allergan, Inc. Therapeutic and delivery methods of prostaglandin ep4 agonists
AU2012200514B2 (en) * 2005-03-17 2014-03-06 Allergan, Inc. Treatment of inflammatory bowel disease
CN105566192B (zh) * 2006-10-02 2019-01-22 于崇曦 具有快速皮肤穿透速度的带正电荷的水溶性的前列腺素及相关化合物的前药
JP5378219B2 (ja) * 2006-10-02 2013-12-25 テックフィールズ バイオケム カンパニー リミテッド 非常に高い皮膚浸透率を有するプロスタグランジン及び関連化合物の正荷電水溶性プロドラッグ
US8455547B2 (en) * 2008-02-05 2013-06-04 Allergan, Inc. Substituted cyclopentanes having prostaglandin activity
US7732443B2 (en) * 2008-03-18 2010-06-08 Yariv Donde Therapeutic substituted cyclopentanes
EP2285790A1 (en) * 2008-05-09 2011-02-23 Allergan, Inc. Therapeutic compounds
NZ599128A (en) 2009-10-14 2014-02-28 Gemmus Pharma Inc Combination therapy treatment for viral infections
SG187653A1 (en) * 2010-07-30 2013-03-28 Allergan Inc Compounds and methods for skin repair
BR112013003600A2 (pt) * 2010-08-17 2016-08-16 Allergan Inc agonistas ep2 ou ep4 para o tratamento de névoa da córnea
CN105979959B (zh) 2013-08-09 2021-11-30 阿德利克斯公司 用于抑制磷酸盐转运的化合物和方法

Family Cites Families (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4117014A (en) * 1976-01-09 1978-09-26 Abbott Laboratories Prostaglandin derivatives
JPS59101458A (ja) * 1982-12-01 1984-06-12 Nippon Iyakuhin Kogyo Kk 新規なチアプロスタグランジン誘導体及びその製法
JPS632972A (ja) * 1986-06-20 1988-01-07 Nippon Iyakuhin Kogyo Kk 新規プロスタグランジンｅ↓１誘導体及びその製法
US5462968A (en) * 1994-01-19 1995-10-31 Allergan, Inc. EP2 -receptor agonists as agents for lowering intraocular pressure
US5877211A (en) * 1997-11-21 1999-03-02 Allergan EP2 receptor agonists as neuroprotective agents for the eye
US6410591B1 (en) * 2001-05-08 2002-06-25 Allergan Sales, Inc. 3,7 or 3 and 7 thia or oxa prostanoic acid derivatives as agents for lowering intraocular pressure
US6531504B2 (en) * 2001-05-17 2003-03-11 Allergan, Inc. Prostanoic acid derivatives as agents for lowering intraocular pressure
JP4520738B2 (ja) * 2001-06-14 2010-08-11 アラーガン インコーポレイテッド 眼圧降下剤としての３、７、または３および７チアまたはオキサプロスタン酸誘導体

Also Published As

Publication number Publication date
MXPA05008431A (es) 2005-10-19
RU2005129072A (ru) 2006-02-27
PL209130B1 (pl) 2011-07-29
CA2515631C (en) 2013-08-20
JP2006517587A (ja) 2006-07-27
EP1608309B1 (en) 2012-07-11
RU2336081C2 (ru) 2008-10-20
EP1608309A2 (en) 2005-12-28
NO20053715L (no) 2005-10-27
KR20050101202A (ko) 2005-10-20
NO20053715D0 (no) 2005-08-01
AU2004211936A1 (en) 2004-08-26
KR101077461B1 (ko) 2011-10-26
PL378421A1 (pl) 2006-04-03
BRPI0407400A (pt) 2006-02-21
JP5319065B2 (ja) 2013-10-16
CA2515631A1 (en) 2004-08-26
WO2004071428A2 (en) 2004-08-26
WO2004071428A3 (en) 2005-11-10
NZ541352A (en) 2007-12-21
AU2004211936B2 (en) 2008-09-11

Similar Documents

Publication Publication Date Title
EP2803358B1 (en) 10,10-Dialkyl prostanoic acid derivatives as agents for lowering intraocular pressure
NO334659B1 (no) 10,10-dialkylprostanoinsyre-derivater, fremgangsmåte for fremstilling av slike, farmasøytisk produkt omfattende slike samt anvendelse av slike som midler for å senke intraokulært trykk
US9637467B2 (en) Treatment of inflammatory bowel disease
EP1814848B9 (en) 2,3,4-substituted-cyclopentanones as therapeutic agents
WO2005100339A1 (en) 10-hydroxy-11-dihydroprostaglandin analogs as selective ep4 agonists
EP1812387A1 (en) 2,3,4-substituted cyclopentanones as therapeutic agents
WO2006022966A1 (en) 2-heteroarylalkenylcyclopentane heptan- (ene) -oic acid derivatives as therapeutic agents
CA2546013A1 (en) Novel prostamides for the treatment of glaucoma and related diseases
AU2004245492B2 (en) 3-oxa-8-azaprostaglandin analogs as agents for lowering intraocular pressure
AU2012200514B2 (en) Treatment of inflammatory bowel disease

Legal Events

Date Code Title Description
MM1K Lapsed by not paying the annual fees