TW200425906A - Material for inhibiting enamel decalcification - Google Patents

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200425926 玖、發明說明： 【發明戶斤屬之技術領域3 發明領域 本發明係有關於一種前花青素類之多酚，特別是來自 5 於未成熟蘋果果實或啤酒花之前花青素類之多酚作為有效 成分的抑制琺瑯質脫鈣素材及其用途。 L先前技2 發明背景 齲齒，即，所謂蛀牙，根據日本厚生勞動省平成11年 10 牙周病實態調查的結果顯示，擁有恆齒的曰本人中大致8成 都有鱗齒，可說是一種國民疾病。 齲齒是因細菌而引起的疾病。即，最初存在於口腔中 的腐钱性細菌之等變形鏈球菌，就是 所謂「牙菌」，會利用蔗糖的黏著性，生成非水溶性的葡聚 15 糖，且前述菌體會同時附著在牙齒的表面而形成齒垢。接 著，由於在齒垢中的牙菌等種種細菌繁殖，且因菌的代謝 而生成的有機酸，故會使牙齒表面的pH降低、牙齒中的5法 瑯質溶出（脫鈣）、牙齒產生空隙而造成齲齒。即，齲齒是可 說是經過齒垢形成、細菌繁殖、因細菌產生酸、琺瑯質持 20 續脫鈣等一連續過程而發病者。 又，預防齲齒的方法，已知有使用氟以達到齒質強化 之方法；使用對抗牙菌之抗菌物質之方法；取代蔗糖而使 用不生成葡聚糖之代糖之方法；使用可生成非水溶性葡聚 糖之酵素抑制劑之方法等。但是，不論哪種方法在效果、 200425926 價格及營養的影響等方面，都是有利有弊，且考量齲齒罹 患率事貫上並沒有減少，目前也很難說是有完善的方法。 近年來，日本的醫療費總額約30兆日圓，而齒科的醫 療費也高達2兆5000億日圓。因此，不僅是從增進健康、提 5升而言，即使從醫療費的控制、降低等觀點來看，若 開發可有效預防齲齒發病、簡便且優異的方法，對產業上 也有很大的意義。 10 20

對於使用多盼之抗㈣果，已經有提出綠茶萃取物（曰 本公開公報第01-9922號、日本公開公報第〇1_9〇124號）、烏 龍余卒取物（日本公開公報03-284625號）等報告。又，本發 明人等也已對由未成熟的蘋果果實及啤酒花而形成之多 紛，使其對#垢形成抑制效果更加明確化（日本公開公報第 〇7-285876號、日本公開公報第G9-295944號）。該等抗虹效 果的根據’可藉由多驗對牙菌具有抗菌活性（專利文獻 1 -3) ’或夕私可抑制生成非水溶㈣雜之酵素(gtf)(專利 文獻4-6)，來抑制齒垢的形成。

但，如前所述，麵 + 、㈤會的形成，是從齒垢形成、細菌繁 殖、因細菌產生酸、抹功R ^ 卩貝持續脫鈣等一連續的形成過程 所產生的結果。舉例來％ 水况，即使利用具有抗菌活性之多酚， 也不易完全消除牙菌， # 思者時間經過牙菌又會在口中繁 殖，況且，利用GTF的抑制 1和政果雖可大幅地抑制齒垢形成， 但從微量形成之齒垢，夏 /、设、、哭步驟會發展進而造成虫主牙過 程來看，雖然暫時減少d 宁牙菌，有效地抑制齒垢形成， 但也不能作為抑制蛀牙 %成的直接證據。因此，本發明之 6 200425926 目的，係提供一種可抑制齒垢形成並同時可有效地抑制蛀 牙形成之抗虫主素材。 【發明内容】 發明概要 5 本發明人等，對上述問題專心致力討論的結果發現， 來自於啤酒花或未成熟蘋果果實之前花青素類之多酚，不 僅可抑制齒垢形成，也可有效地抑制細菌繁殖、因細菌產 生酸、及ί法瑯質持續脫妈等蛀牙形成的過程之物質。更， 可將該物質作成抗蛀素材，並使用於飲食品及口腔用劑， 10 以完成本發明。 在此所謂的多酚，主要是指在植物中所包含的分子 内，具有複數多S分性羥基之化合物的總稱，又，前花青素 類之多酚是指一種多酚，且該多酚為可利用加水分解產生 紅色色素之花色素（花青素、花翠素或原花葵苷）之化合物。 15 即，本發明係有關於一種琺瑯質脫鈣素材，其中，第1 係前花青素類之多酚；第2係來自於未成熟蘋果果實之前花 青素類之多酚；第3係來自於啤酒花之前花青素類之多酚。 圖式簡單說明 第1圖係人工口腔裝置中心部分之截面圖。 20 第2圖係顯示使用試驗後在綠瑯質齒片上的非 水溶性葡聚糖(相當於人工形成之齒垢）量之比較圖表。相較 於對照例（左），在添加實施例3所獲得之琺瑯質脫鈣素材 時，非水溶性葡聚糖的量會減少。 第3圖係顯示使用試驗後在綠瑯質齒片上的 7 5 非水溶性帛聚_目切人謂紅絲）量之啸圖表。相 較於對關(左）’麵加實關3賴得之料質脫飼素材 時，非水溶性葡聚糖的量會減少。 第4圖係顯不使射試驗後在㈣質齒片上的牙 菌（&麵叫菌體量之比較圖表。相較於對照例⑷，在天 加實施例3所獲得之珠螂質賴素材時⑻，牙g的菌體量 會減=。這顯示可抑制在人μ垢中牙g附著及繁殖。 10 15 弟5圖係顯不使用成驗後在5¾螂質齒片上的 牙菌…菌體量之比較圖表。相較於對照例⑷，在 添加實施例3所獲得之_質簡素材日_，牙菌的菌體 量會減少。這顯示可抑制在人4垢中牙_著及繁殖。 第6圖係顯示在使則__試驗中所形成之人工齒垢 士下方的平面電極pH變化之圖表。相較於對照例，在添加 實施例3所獲得之如咖前材時(左），PH值變化程度少 _二太會降低）。這騎人工齒垢中的牙g產生酸 的生成夏會減少。 弟7圖係顯示在使狀咖_試驗中所形成之人工齒 垢正下方的平面電極pH變化之圖表。相較於對照例，在添 加實施例3賴得之簡素材時⑷，幽變化程度 2〇 _值不曰太會降低）。這顯示利用人工齿垢中的牙菌產生 6$L的生成1會減少。 弟8圖係顯示在伽·試驗中，試驗前後綠鄉質 I的硬度變化。相較於對照例(左），在添加實施例3所獲 付之㈣質簡素材時(右），可抑制料質的硬度變化。 200425926 所备=圖係顯示在使财·▲·咖試驗中，試驗前後珠鄉 二的硬f變化。相較於對照例(左），在添加實施例3所 隻^之_質脫射材時(右），可抑祕螂質的硬度變化。 【實施方式】 5 10 15 實施發明之最佳型態 二本發明原料之未成熟頻果果實，係指在蘋果果實成孰 則’經人為摘下或因掉落等從蘋果果樹自_掉落者。 又，本發明原料之啤酒花，係指從啤酒花果實中去除 蛇痲素Μ"0成分所獲得者，-般而言，是在粉碎啤酒花 果實後’藉㈣分錄其巾㈣麻素齡％ 但是，近來在相釀造巾1 了節«分、去时酒Γ的 複雜手Μ，不去除對啤酒釀造沒有作用之啤酒花，而是直 接將啤酒花果實作成雌狀，且，形成相絲粒 啤酒釀造。因此，本發明之原料只要含有啤喊，其他並 原料。 狀相絲實及顆粒作為 又’可利用展方本拔、本 、、方树找以乙醇水溶液等萃取該等 原料而成為含有琺螂質脫鈣素枯 末使用，亦可視其Μ，舰^夜也可直接作成粉 、，將缺螂質蘭素材利用埴 多紛具有親和性之粒狀樹脂 度來使用。 “主編製，以提升精製 前述所得到之鞋螂質簡素材可使用於點心類、食品 類、飲料別以”在縣1 ㈣ 糖、口香糖等口腔”時間較長的飲食品為佳。此外，也 20 200425926 可添加於漱口液、牙貧等口腔用劑來使用。在該等飲食品、 口腔用劑添加抗蛀性素材時，可直接添加抗蛀性素材粉 末，但最好是將抗蛀性素材作成丨〜〕％水溶液，或者是作成 乙醇水溶液或乙醇溶液，對於飲食品或口腔用劑，最終濃 5度以1〜5000PPm為佳，並以添加至100〜2〇〇〇ppm更為理想。 以下，雖喊示貫施例，但本發明不限於此。 貫施例1(從未成熟蘋果果實調製琺瑯質脫鈣素材） 將4〇Og未成熟蘋果果實（平均重量5〇3g)與含有1%鹽 S曼之酸性甲g》同時進行均質化後，加熱回流並同時進行萃 10取(3次），再減壓濃縮前述萃取液、顧去甲醇後，加入氯 (200ml)進仃分配(2次）、回收水層、過渡後，以蒸德水混 成200m卜接著，藉由使用§〒㈣⑶之固相萃取法加 精衣冷/東乾無，以獲得〇 Sg之黃色磁鄉質脫妈素材。 产 戶、轭例2 (從啤酒花調製琺瑯質脫鈣素材） 15、，將％啤酒花置於100ml、4〇%甲醇水溶液中，並在: 雕 、60分鐘的條件進行萃取，並在過濾後將. 月豆積減壓濃纟宿$ 乙烯-乙X 1111 ’再將該濃縮液流至填充有l5〇ml 20

70^之^ I烯基笨樹脂（三菱化學社製Sepabis70(^八匕、、一 水二ΐ同再— 以，_水洗淨。接著，將5°%、600邪 以得到讀中，並回收同一洗提液、冷凌乾燥 末。又，^御質脫舞素材之無臭並略帶苦味之淡黃心 给/欠卑酒花所獲得的產率為3.4% 〇 二二，3 (使用超遽膜之綠瑯質脫#5素材再精製） 、知例2同樣進行所獲得之5g琺螂質脫鈣素材^ 10 200425926 解於500ml、50%曱醇水溶液中，並以截留分子量（molecular weight cut-off) 10,000的超濾膜處理。將未通過該膜的殘留 液濃縮後，進行冷准乾燥，以得到由前述黃色粉末再精製 之2.2g琺瑯質脫鈣素材棕色粉末。 5 實施例4(牙膏） 第2磷酸鈣 42.0 甘油 18.0 鹿角菜膠 0.7 月桂基硫酸鈉 1.29 10 對羥基苯甲酸丁酯 0.005 實施例1所得之素材 0.005 香料 1.0 水 37.0 合計 100.0 15 使用上述各成分之各重量份，並依習知方法作成牙 膏。又，可同樣地得到添加實施例2及實施例3所得到之素 材，取代實施例1所得之素材的牙膏。 實施例5(漱口液） 甘油 7.0 20 山梨糖醇 5.0 乙醇 15.0 月桂基硫酸鈉 0.9 1-薄荷醇 0.05 香料 0.045 200425926 實施例1所得之素材 0.⑻5 水 72.0 合計 100.0 使用上述各成分之各重量份，並依習知方法作成漱口 5 液。又，可同樣地得到添加實施例2及實施例3所得到之素 材，取代實施例1所得之素材的漱口液。 實施例6(錠劑） 阿拉伯樹膠 6.0 硬酯酸鎂 3.0 10 木糖醇 73.0 麥芽糖醇 17.6 第2磷酸鈉 0.2 第1磷酸鈉 0.1 香料 0.095 15 實施例1所得之素材 0.005 合計 100.0

使用上述各成份之各重量份，並以習知方法作成錠 劑。又，可同樣地得到添加實施例2及實施例3所得到之素 材，取代實施例1所得之素材的錠劑。 20 實施例7(糖） 木糖醇 20.0 麥芽糖醇 70.0 水 9.5 色素 0.45 12 200425926 香料 0.045 實施例1所得之素材 0.005 合計 100.0 使用上述各成份之各重量份，並以習知方法作成糖。 5 又，可同樣地得到添加實施例2及實施例3所得到素材，取 代實施例1所得之素材的糖。 實施例8( 口香糖） 橡膠基底 20.0 碳酸鈣 2.0 10 木糖醇 77.0 甜菊糠 0.095 實施例1所得之素材 0.005 香料 0.9 合計 100.0 15 使用上述各成份之各重量份，並以習知方法作成口香 糖。又，可同樣地得到添加實施例2及實施例3所得到之素 材，取代實施例1所得之素材的口香糖。 實施例9(果汁） 木糖醇 20.0 20 檸檬酸 0.2 香料 0.1 色素 0.15 抗壞血酸鈉 0.048 實施例1所得之素材 0.002 13 200425926 79.5 合計 100.0 5 水 使用上述各成份之各重量份，並以習知方法作成果 汁。又，可同樣地得到添加實施例2及實施例3所得到之素 材，取代實施例1所得之素材的果汁。 10 實施例10(餅乾） 低筋麵粉 32.0 全蛋 16.0 奶油 16.0 麥芽糖醇 25.0 水 10.8 發酵粉 0.198 實施例1所得之素材 0.002 合計 100.0

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使用上述各成份之各重量份，並以習知方法作成餅 乾。又，可同樣地得到添加實施例2及實施例3所得到之素 材，取代實施例1所得之素材的餅乾。 20 實施例11(牛奶糖） 木糖醇 31.0 麥芽糖醇 20.0 奶粉 40.0 硬化油 5.0 食鹽 0.6 香料 0.025 14 200425926 實施例1所得之素材〇.0〇5 水 3.37 合計 10CK0 使用上述各成份之各重量份，並以習知方法作成牛奶 糠。又，可同樣地得到添加實施例2及實施例3所得到之素 材，取代實施例1所得之素材的牛奶糖。 實施例12(對於使用人工口腔而形成齲齒等一連串步 驟之評估試驗） 10 15 對於貫施例3所得之素材，檢討使用牛齒之人工口腔裝 (M.Hinolde，et ai，jpnJ 〇ral Bi〇1 26 288 29i(i984))，造成 具' 代表性的M c 囷似及义而形成齒垢、細菌繁道、酸產斗 之PH值降低及琺瑯質脫鈣等效果。 4片$人工口腔裝置係概略地顯示於第1圖。該裝置係一種將 P貝切片（3.5x3.5xl.5mm)安裝於電極周圍，藉由從配 罝於該裝置上t 、、、 & 万之5根試管A〜β，如下地滴下液體，可重現 、膝内的牙菌形成之裝置。 滴下物質

20 式管 A Ρ τττ ， ΗΙ+2.5%蔗糖(在電極上i%蔗糖)(冷卻） °式g B，D電極1 PBS(冷卻） 電極2 0·125%ΗΒΤ於PBS(在電極上 〇.〇5%ΗΒΤ) (試管 Ε為 ATCC25175 時） 或者0·05%ΗΒΤ於PBS(在電極上 0.02%ΗΒΤ) 15 200425926 (試管E為腿^6715時）

試管 E & mwiaw ATCC25175 或&⑽fcn>zw6715 的 PBS 懸浮液(OD5〇〇=2.0)(冷卻並攪拌） 流速：6ml/hr/tube 5 溫度：37°C(水浴溫度37.5。〇 10 對上述評估，可將形成於琺瑯質切片上的生物薄膜回 收，亚測定非水溶性葡聚糖的量、牙菌量。另外，可對因 酉夂產生在電極平面上的pH降低情形，及業已回收之綠鄉質 切片的硬度變化加以評估。x，非水溶性葡聚糖的量可以 -分瓜西夂法而牙囷里可利用在54〇細中之濁度進行測定，而 琺螂質切片的硬度可以硬度計（(株心心製奶 力 シ))進行測定。 15 例圖。㈣於侧，由於添加實施 貝间片上的非水溶性葡聚糖 圖)，以及牙菌的菌體量(第4 / · “垢的！ ’第2、3 片上婦降低情形(第^ 相較於對照例會大幅地 ：，可、収的了解，此時， 20 程度小⑽、9圖），故可確實^例3㈣螂質硬度降低 楚地了解，|4由、^ 卩制琺瑯質脫鈣。即，可清 』月午稭由添加貫施例3 垢形成、細菌繁殖、因細 /、 ’可有效地抑制齒 菌形成的整體過程。 馱琺瑯g持續脫鈣等牙 16 5 【圖式簡草說明】 第1圖係人工口腔裝置中心部分之截面圖。 第2圖係顯示使用&臟_5試驗後在珠瑯質齒片上的非 水岭性葡聚糖(相當於人謂成之絲）量之比較圖表。相較 、例（左）’在添加實施例3所獲得之ϊ法瑯質脫鈣素材 呀，非水溶性葡聚糖的量會減少。 第3圖係顯示使用—奶試驗後在ί法瑯質齒片上的 =水溶性葡聚糖(相當於人工形成之齒垢）量之比較圖表。相 10 =於對例(左）’在添加實施例3所獲得之鱗質脫弼素材 捋，非水溶性葡聚糠的量會減少。 弟4圖係顯示你雨 — 忧用&__仏式驗後在琺瑯質齒片上的牙 球__胸量之比較圖表。相㈣對 :=;〜質脫街時(右)，牙菌的菌體量 15 韌;^可抑制在人工齒垢中牙菌附著及繁殖。 弟i圖係頭不倍用 h · 用5似試驗後在琺瑯質齒片上的 牙囷（叉如6rm似）菌體量 添加實施例3_|^㈣表。相較於對照例(左），在 量會減少。這顯示可::伽酬時⑻，繼 第6圖係顯示在使P在人工齒垢中牙菌附著及繁殖。 20 正下方的平面^ 似試驗中所形成之人工齒垢 止下万的十面甩極_變 實施例3所獲得之琢 '、。目較於對照例，在添加 _值不太會賴素料(左），_變化程度少 的生成量會減少。^不利用人垢中的牙菌產生酸 第7圖係頌示在使 用^試驗中所形成之人工齒 17 200425926 垢正下方的平面電極PH變化之圖表。相較於對照例，在添 加實施例3所獲得之琺螂質脫鈣素材時(左），pH值鐵 少(PH值不太會降低)。這顯示利用人工齒垢中的：菌產： 酸的生成量會減少。 第8圖係顯示在使試驗中，試驗前後珠鄉質 =片的硬度變化。相較於對照例(左），在添加實施例3所择 件之鞋螂質朗素材時(右），可抑制5法螂質的硬度變化。又 ίο 質音，係顯示在使狀遍_試驗中，賴前後私郎 獲得之ϊ!更度又化。相較於對照例(左），在添加實施例3所 t _二挪質脫㉝素材時(右)，可抑制❹卩質的硬度變化。 無气之主要元件代表符號表】

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Claims (1)

10 拾、申請專利範圍： 1· 一種抑制琺螂質脫鈣素材，^ 有效成分者。 ，係以前花青素類之多酚作為 2·如申請專利範圍第i 於未成熟縣果實。抑㈣《贿素材，係來自 3. 如申請專利範圍第i項之抑制珠 於啤酒花。 4. 一種飲食品， ，質脫鈣素材，係來自 脫鈣素材者。 5· —種飲食品 脫約素材者 係含有申請專利範圍第1項之抑制琺 ’係含有巾請專利範圍第2項之抑制鞋 螂質 螂質 係含有申請專利範圍第3 脫鈣素材者。 心仰制琺螂 15 6· —種飲食品， 質 種月工用劑，係含有申請專利範圍第 質脫鈣素材者。 、之抑制琺螂 種月工用劍，係含有申請專利範圍第 質脫鈣素材者。 、<抑制琺螂 種月工用劑，係含有申請專利範圍第3 質脫約素材者。 、抑制ϊ法螂 19