TR201815668T4

TR201815668T4 - Obezite tedavisine yönelik bileşikler ve bunların kullanım metotları.

Info

Publication number: TR201815668T4
Application number: TR2018/15668T
Authority: TR
Inventors: Ozcan Umut; Majzoub Joseph; Mazitschek Ralph; Cakir Isin; Cabi Serkan
Original assignee: Childrens Medical Ct Corp; Massachusetts Gen Hospital
Priority date: 2012-09-27
Filing date: 2013-09-26
Publication date: 2018-11-21
Also published as: US20210275482A1; EP2900230A1; CN104822374A; RU2650646C2; AU2018256619A1; CA3030272A1; LT2900230T; RU2018112067A; HUE040496T2; PT2900230T; US20210008019A1; JP6480864B2; BR112015006848A2; AU2016247206A1; CN111529535A; AU2018256619B2; AU2013323528A1; SI2900230T1; JP2015531376A; US10653654B2

Abstract

Burada pentasiklik triterpen zayıflatıcı ajanlar sağlanmaktadır. Burada ayrıca zayıflatıcı ajanlardan bir ya da daha fazlasının veya bunların farmasötik olarak kabul edilebilir tuzları veya ön ilaçlarının terapötik olarak etkili bir miktarını, bir ya da daha fazla farmasötik olarak kabul edilebilir eksipiyanla kombinasyon halinde içeren farmasötik formülasyonlar sağlanmaktadır. Farmasötik formülasyonlar kilo kaybını başlatmak, vücuttaki yağı azaltmak, besin alımını azaltmak, glükoz homeostazisini geliştirmek, obeziteyi önlemek veya bunların bir kombinasyonu için bir pre-obez, obez veya hastalıklı düzeyde obez bir hastaya uygulanabilir. Kilo kaybı ajanları ayrıca leptin veya bir leptin analogu ile birlikte uygulanabilir.

Description

TARIFNAME OBEZITE TEDAVISINE YÖNELIK BILESIKLER VE BUNLARIN KULLANIM METOTLARI BULUSUN ALANI Mevcut bulusun konusu obezite düzenleyici bilesiklerle ve bunlarin yapilma ve kullanilma metotlariyla ilgilidir.

BULUSUN ARKAPLANI Obezite, fazla vücut yaginin, saglik üzerinde olumsuz bir etki yaratabilecegi ve yasam beklentisinin azalmasina ve/veya saglik sorunlarinin artmasina neden olacagi ölçüde biriktigi tibbi bir durumdur. Vücut kitle indeksi (VKI), kilo ve boyu karsilastiran bir ölçüm olup, VKI düzeyi 25 ile 30 kg/m2 arasinda olan insanlari asiri kilolu (pre-obez veya asiri kilolu) ve 30 kg/mî'nin üzerinde olan insanlari obez olarak tanimlar. Obezite, yetiskinlerde ve çocuklarda yayginligin artmasiyla, dünya çapinda önde gelen önlenebilir ölüm nedenidir ve yetkililer bunu 21. yüzyilin en ciddi halk sagligi sorunlarindan biri olarak görmektedir.

Obezite, birçok fiziksel ve zihinsel bozukluk riskini artirir. Asiri vücut agirligi, özellikle kardiyovasküler hastaliklar, diabetes mellitus tip 2, obstrüktif uyku apnesi, belirli kanser türleri ve osteoartrit gibi çesitli hastaliklarla iliskilidir. Bu hastaliklar ya dogrudan obezitenin neden oldugu ya da zayif bir diyet ve/veya hareketsiz yasam tarzi gibi ortak bir nedeni paylasan mekanizmalar araciligiyla dolayli olarak iliskilidir. En güçlü baglardan biri tip 2 diyabet iledir. Fazla vücut yagi, erkeklerde diyabet vakalarinin %64'ünü ve kadinlarda %77'sini kapsamaktadir. Vücut yaglarinda artislar insüline karsi potansiyel olarak insülin direncine yol açan vücudun tepkisini degistirir.

Obezite en sik olarak asiri enerji alimi, fiziksel aktivite eksikligi ve genetik yatkinligin birlesiminden kaynaklanir, ancak birkaç olgu öncelikle genler, endokrin bozukluklar, ilaçlar veya psikiyatrik hastaliklardan kaynaklanir. 1994 yilinda leptinin kesfedilmesinden bu yana, istah ve gida aliminin düzenlenmesi, yag dokusunun depolanma sekilleri ve girelin, insülin, oreksin, PYY 3-36, kolesistokinin. ve adiponektin dahil olmak üzere insülin direncinin gelisimine katilan birçok baska hormonal mekanizma açiklanmistir.

Adipokinler, adipoz doku tarafindan üretilen aracilardir; bunlarin eylemlerinin birçok obezite ile iliskili hastaligi degistirdigi düsünülmektedir. Leptin ve girelin, istah üzerindeki etkilerinde tamamlayici olarak kabul edilmekte olup, mide tarafindan üretilen girelin kisa süreli istah kontrolünü modüle eder (örnegin, mide bos oldugu zaman yemek yemek ve mide gerildiginde durmak). Leptin, vücuttaki yag depolama rezervlerini isaretlemek için yag dokusu tarafindan üretilir ve uzun süreli istah kontrollerine aracilik eder (yani, yag depolari yüksek oldugunda daha az yemek ve düsük oldugunda daha fazla yemek). Leptin uygulamasi leptin eksikligi olan obez bireylerin küçük bir alt kümesinde etkili olabilse de, çogu obez hastanin leptine dirençli oldugu ve yüksek leptin seviyelerine sahip oldugu düsünülmektedir. Bu direncin, kismen, çogu obez insanda, leptin uygulamasinin neden istahi bastirmakta etkili olmadigini açikladigi düsünülmektedir.

Leptin ve girelin periferik olarak üretilirken, merkezi sinir sistemi üzerindeki etkileriyle istahi kontrol ederler. Özellikle, leptin ve girelin ve istahla ilgili diger hormonlar, besin alimi ve enerji harcamasinin düzenlenmesi için beynin merkezi olan hipotalamus üzerinde etkilidir.

Hipotalamus içinde, istahi bütünlestirme rolüne katkida bulunan, en iyi anlasilan melanokortin yolu ile çesitli döngülert vardir. Döngü, hipotalamusun, sirasiyla beynin beslenme ve tokluk merkezleri olan lateral hipotalamusa ve ventromedial hipotalamusa çiktilari olan bir bölgesiyle Arkuat nükleus iki farkli nöron grubu içerir. Birinci grup, nöropeptid Y (NPY) ve agouti ile iliskili peptidi (AgRP) birlikte ifade eder` ve VMH'ye karsi LH ve inhibitör girislerine uyarici girdilere sahiptir. Ikinci grup, pro- opiomelanokortin (POMC) ve kokain ve amfetaminle düzenlenmis transkripti (CART) birlikte ifade eder ve VMH'ye stimülatör girislere ve LH'ye inhibitör girislere sahiptir. Sonuç olarak, NP/AgRP nöronlari beslenmeyi stimüle eder ve toklugu inhibe ederken, POMC/CART nöronlari ise toklugu stimüle eder ve beslenmeyi inhibe eder. Her iki arkuat nükleus nöron grubu da kismen leptin tarafindan düzenlenir. Leptin, POMC/CART grubunu uyarirken NPY/AgRP grubunu inhibe eder. Dolayisiyla, leptin eksikligi veya leptin direnci vasitasiyla leptin sinyallemesinde bir eksiklik olmasi asiri beslenmeye yol açar.

Bu, bazi genetik ve kazanilmis obezite formlarini açiklayabilir.

Diyet ve fiziksel egzersiz, obezite tedavisinin temelidir. Bu aktiviteleri desteklemek için veya basarisizlik durumunda istahi azaltmak veya yag emilimini engellemek için anti- obezite ilaçlari alinabilir. Siddetli vakalarda, ameliyat yapilir veya mide hacmini ve/veya bagirsak uzunlugunu azaltmak için intragastrik bir balon yerlestirilir ve bunun sonucunda daha erken doyma saglanir ve besinlerden besin maddelerini emebilme yetenegi azaltilir. Bu kilo kaybini korumak çogu zaman zordur ve çogu zaman bir kisinin yasam tarzinin kalici bir parçasi olarak egzersiz yapmasini ve daha düsük besin enerjili bir diyete uymasini gerektirir. Yasam tarzi degisiklikleri ile uzun süreli kilo verme bakiminin basari oranlari %2-20 arasinda degismektedir.

Obezitenin tedavisi için sinirli sayida ilaç mevcuttur. Yan etkileri ile ilgili endiseler, istahi bastirici ilaçlar, özellikle de ciddi risk tasiyan ve piyasadan çekilebilen fenfluramin, sibutramin ve fenterminle ilgili istekleri azaltmistir. Fentermin sadece kisa süreli kullanim için onaylanmistir. Orlistat (Xenical) diyet yaginin emilimini engelleyen ve ayrica uzun süreli kullanim için onaylanmis bir ilaçtir. Bununla birlikte, hos olmayan yan etkilere (yagli diski) neden olur ve yagda çözünen vitaminlerle takviye gerektirir.

Ameliyat (örnegin mide baypasi) obezite tedavisinde son seçenek olmasina ragmen, son derece etkili olabilir. Ancak, deneyimli bir cerrahi merkezde yapilmalidir, çünkü bu operasyonlar özellikle postoperatif dönemde önemli riskler tasiyabilir. Üzerinde uzlasilan öneriler, cerrahi terapilerin morbid düzeyde obezitesi olan hastalarla sinirlandirilmasidir (BMI> 40, BMI> 35 arti ko-morbiditeler veya BMI> 30 arti kontrol edilemeyen diyabet) cerrahi tedavileri sinirlamaktir.

Yerel eczaneler, süpermarketler veya saglik gida magazalarinda çesitli kilo kaybi haplari mevcuttur. Daha fazla seçenek internette mevcuttur. Bunlarin çogu etkili olmamistir ve bazilari tehlikeli olabilir. Tablo 1 (asagida), yaygin kilo verme haplarini ve bunlarin etkililik ve güvenlikleri ile ilgili arastirmalarin neler oldugunu göstermektedir.

Bitkisel Özler genellikle saf degildir ve çok fazla farkli madde içermekte olup, karisimin bir bütün olarak etkili olup olmadigini ve etkili bir dozun ne oldugunu degerlendirmek zordur. Karisimdaki yüzlerce veya daha fazla farkli bilesikle, etkinlik için gerekli olan birden fazla bilesik veya baska bir bilesigin bir bilesik inhibe edici aktivitesi olabilir, bu nedenle orijinal kaynak malzemenin kaynagi ve islenmesi etkisiz veya hatta tehlikeli bir ürünle sonuçlanabilir.

Tablo 1: Kilo Kaybi için Anekdotal Ürünler. Kaynaklar: U.S.

Food and Drug Administration, 2010; Natural Medicines Comprehensive Database, 2010 Ürün Iddia Etkililik Güvenlik Alii -Diyet yagininEtkili; kilo kaybiFDA reçeteli ilaçemilimini miktarlari tipikarastirmasi Orlistat'in azaltir olarak reçeteyekaraciger (Xenical) OTC karsi OTC için dahahasarini versiyonu azdir bildirmektedi Aci portakal Yakilan Derecelendirmek içinMuhtemelen kaloriyi yetersiz düzeydegüvenli degil artirir güvenilir kanit Kitosan Diyet yagininDerecelendirmek içinMuhtemelen emilimini yetersiz düzeydegüvenli engeller güvenilir kanit Krom Yakilan Derecelendirmek içinMuhtemelen kaloriyi yetersiz düzeydegüvenli arttirir, güvenilir kanit istahi azaltir olusturur Konjüge Vücut yaginiMuhtemelen etkili Muhtemelen linoleik asitazaltir ve kas güvenli (CLA) olusturur Kirsal yetersiz düzeydegüvenli degil ve yakilan ebegümeci güvenilir kanit ve FDA kaloriyi (heartleaf) tarafindan yasakli Efedra Istahi azaltir Muhtemelen etkili Muhtemelen güvenli degil tarafindan yasakli Yesil çay özüKalori ve yagiDerecelendirmek içinMuhtemelen metabolizmasini yetersiz düzeydegüvenli arttirir vegüvenilir kanit istahi azaltir Guar zamki Diyet yagininMuhtemelen etkisiz Muhtemelen emilimini güvenli engeller ve dolgunluk Derecelendirmek için yetersiz düzeydeYetersiz Hoodia Istahi azaltir güvenilir kanit bilgi Bu nedenle mevcut bulusun bir amaci, kilo kaybini gerçeklestirmek için güvenli, iyi karakterize edilmis ve etkili bilesikleri ve bunlarin kullanim yöntemlerini saglamaktir.

Mevcut bulusun diger bir amaci, kilo kaybinin desteklenmesi için› oral dozaj formlari gibi dozaj formlarinin ve bunlarin kullanim yöntemlerinin saglanmasidir.

US 5,650,167'de, hepatit B'nin tedavisinde kullanim için pentasiklik triterpenler, özellikle de celastrol içeren formülasyonlar açiklanmaktadir.

Ji Eun Lee ve dig., The Korean Journal of Nephrology, 1 Ocak farelerde vücut agirligini azaltici ve nefroprotektiflik faktörüne göre 1 mg/kg'lik nefroprotektiflik faktörünü obez farelerde, selestrolün anti-hiperglisemik etkisi ile ilgili arastirmalari tarif etmektedir.

BULUSUN ÖZETI Kilo kaybini desteklemek için aktif ajanlar ve ayni zamanda bu aktif ajanlari içeren formülasyonlar ve bunlarin kullanimina yönelik metotlar burada tarif edilmektedir. Mevcut bulus kilo kaybini baslatmaya veya vücuttaki yag miktarini azaltmaya veya bunlarin bir kombinasyonuna yönelik olarak kullanilmak üzere istem l'e göre farmasötik formülasyonlar saglar. Örnek niteligindeki kilo kaybi ajani (zayiflatici ajan) Formül 1 ile tanimlanan bilesik: Formül I veya bunun farmasötik olarak kabul edilebilir bir tuzudur.

Burada ayrica bir zayiflatici ajanin veya bunun farmasötik olarak kabul edilebilir bir tuzu veya ön ilacinin terapötik olarak etkili bir miktarini, bir ya da daha fazla farmasötik olarak kabul edilebilir eksipiyanla kombinasyon halinde içeren farmasötik formülasyonlar tarif edilmektedir. Farmasötik formülasyonlar bir pre-obez, obez veya hastalikli (morbid) düzeyde obez hastada kilo kaybini baslatmak, bir pre-obez, obez veya hastalikli düzeyde obez hastada Vücuttaki yag düzeyini azaltmak, bir pre-obez, obez veya hastalikli düzeyde obez hastada besin alimini azaltmak, bir pre-obez, obez veya hastalikli düzeyde obez hastada glükoz homeostazisini gelistirmek veya bunlarin kombinasyonlarini saglamak için uygulanabilir.

Belirli uygulamalarda, zayiflatici ajan leptin veya bir leptin analoguyla, örnegin Amylin Pharmaceuticals (San Diego, Calif.) sirketinden alinabilecek olan r-metHuLeptin (A-lOO, METRELEPTIN®) ile birlikte uygulanir.

Bazi durumlarda, zayiflatici ajanlardan bir ya da daha fazlasini içeren farmasötik bir formülasyon, pre-obez, obez veya hastalikli düzeyde obez bir hastaya kilo kaybini uyarmak için terapötik olarak etkili bir miktarda, tercihen Vücut kütlesini veya vücuttaki yagi en az %10, daha çok tercih edilen biçimde en az %15, en çok tercih edilen biçimde en az etkili bir miktarda ve uygulama süresince uygulanir.

Bazi durumlarda, zayiflatici ajanlardan bir ya da daha fazlasini içeren farmasötik bir formülasyon pre-obez, obez veya hastalikli düzeyde obez bir hastaya, besin alimini, istahi veya bunlarin kombinasyonlarini azaltacak sekilde terapötik olarak etkili bir miktarda, tercihen ortalama günlük besin alimini (kalori bakimindan) en az %15, %17, 20, %22, terapötik olarak etkili bir miktarda uygulanir.

Bazi durumlarda, zayiflatici ajanlardan bir ya da daha fazlasini içeren farmasötik bir formülasyon pre-obez, obez veya hastalikli düzeyde obez bir hastaya, glukoz homeostazisini gelistirmek. için terapötik olarak etkili bir miktarda, tercihen ortalama açlik plazma kan sekerini en az için terapötik olarak etkili bir miktarda uygulanir.

Farmasötik formülasyonlarin kan sekerini normalize etmek üzere uygulandigi durumlarda, formülasyonlar tercihen kan sekeri düzeylerini yaklasik 180 mg/dL'nin altina düsürmede etkili bir miktarda uygulanir. Formülasyonlar, gerektigi takdirde, glukoz homeostazisini gelistirmek için diger anti-diyabetik terapilerle birlikte uygulanabilir.

SEKILLERIN KISA AÇIKLAMASI Sekiller 1A-D, yüksek yagli diyetle beslenen (HFD-fcd) obez farelerin gida alimi, vücut agirligi ve kan glukoz seviyeleri üzerinde intraperitoneal olarak (ip) uygulanan celastrolün etkisini göstermektedir. Sekil 1A, HFD ile beslenmis obez farelerin vücut agirliklarinin (gram cinsinden), farkli dozlarda celastrolle yapilan tedavide zamanin (gün) bir fonksiyonu olarak çizildigi bir grafigidir (vehikül kontrol (karo), günde bir kez intraperitoneal 10 ug/kg celastrol (daire), günde bir kez intraperitoneal 50 ug/kg celastrol (üçgen) ve günde bir kez intraperitoneal 100 ug/kg celastrol (kare))- Sekil lB, HFD ile beslenmis obez farelerin vücut agirliklarindaki (gram cinsinden) azalma yüzdesinin, farkli dozlarda celastrolle yapilan tedavide zamanin (gün) bir fonksiyonu olarak çizildigi bir grafigidir (vehikül kontrol (karo), günde bir kez intraperitoneal 10 ug/kg celastrol (daire), günde bir kez intraperitoneal 50 ug/kg celastrol (üçgen) ve günde bir kez intraperitoneal 100 ug/kg celastrol (kare)). Sekil lc, farkli dozlarda celastrol ile muamele sirasinda HFD ile beslenmis obez farelerin besin alimini (gram/gün cinsinden) gösteren bir çubuklu grafiktir (soldan saga dogru, vehikül kontrol, günde bir kez intraperitoneal lO ug/kg celastrol, günde bir kez intraperitoneal 50 ug/kg ve günde bir kez intraperitoneal lOO ug/kg celastrol). Sekil lD, farkli dozlarda celastrol ile iki haftalik muamelenin sonunda, HFD ile beslenmis obez farelerde 6 saat açlik kan sekeri düzeyini (mg/dL cinsinden) gösteren bir çubuklu grafiktir (soldan saga dogru, vehikül kontrol, günde bir kez intraperitoneal lO ug/kg celastrol, günde bir kez intraperitoneal 50 ug/kg ve günde bir kez intraperitoneal lOO ug/kg celastrol). Tüm vakalarda, her grupta n : 5. Student t- ilk üç gün boyunca alinan günlük gida alim verilerine dayanmaktadir.

Sekiller 2A-2C, intraperitoneal olarak (ip) verilen celastrolün, yagsiz farelerin gida alimina, vücut agirligina ve kan sekeri seviyelerine etkisini göstermektedir. Sekil 2A, yagsiz farelerin vücut agirliklarinin (gram cinsinden), farkli dozlarda celastrolle yapilan tedavide zamanin (gün) bir fonksiyonu olarak çizildigi bir grafigidir (vehikül kontrol (karo), günde bir kez intraperitoneal 50 ug/kg celastrol (daire), günde bir kez intraperitoneal 100 ug/kg celastrol (üçgen) ve günde bir kez intraperitoneal 500 ug/kg celastrol (kare)). Sekil 2B, farkli dozlarda celastrol ile muamele sirasinda yagsiz farelerin besin alimini (gram/gün cinsinden) gösteren bir çubuklu grafiktir (soldan saga dogru, vehikül kontrol, günde bir kez intraperitoneal 50 ug/kg celastrol, günde bir kez intraperitoneal lOO ug/kg ve günde bir kez intraperitoneal 500 ug/kg celastrol). Sekil 2C, farkli dozlarda celastrol ile iki haftalik muamelenin sonunda, yagsiz farelerde 6 saat açlik kan sekeri düzeyini (mg/dL cinsinden) gösteren bir çubuklu grafiktir (soldan saga dogru, vehikül kontrol, günde bir kez intraperitoneal 10 ug/kg celastrol, günde bir kez intraperitoneal 50 pg/kg ve günde bir kez intraperitoneal lOO ug/kg celastrol). Tüm vakalarda, her grupta n = 5. Student t-testine göre *, p<0.05; **, p<0.0l; Sekiller 3A-3C, intraperitoneal olarak (ip) verilen celastrolün, leptin eksikligi olan (ob/ob) farelerin gida alimina, vücut agirligina ve kan sekeri seviyelerine etkisini göstermektedir. Sekil 3A, ob/ob farelerin (gram cinsinden) vücut agirliklarinin farkli dozlarda celastrolle yapilan tedavide zamanin (gün) bir fonksiyonu olarak çizildigi bir grafiktir (vehikül kontrol (karo), günde bir kez intraperitoneal olarak 25 ul DMSO içinde 100 ug/kg celastrol (kare)). Sekil 3B, celastrol ile muamele sirasinda ob/ob farelerinin besin alimini (gram/gün olarak) gösteren bir çubuklu grafiktir (sol çubuk, vehikül kontrolü; sag çubuk, günde bir kez i.p. lOO ug/kg celastrol). Sekil 3C, celastrol ile iki hafta muamele sonunda ob/ob farelerin 6 saat açlik kan glukoz seviyesini (mg/dL olarak) gösteren bir çubuklu grafiktir (sol çubuk, vehikül kontrolü; sag çubuk, lOO pg/kg celastrol i.p. günde bir kez). Tüm vakalarda, her grupta n = . Student t-testine göre *, p<0.05; **, p<0.0l; ***, p<0.00l.

NS = istatistiksel olarak anlamli degil.

Sekiller 4A-2C, intraperitoneal olarak (ip) verilen celastrolün, leptin reseptörü eksik (db/db) farelerin gida alimina, vücut agirligina ve kan sekeri seviyelerine etkisini göstermektedir. Sekil 4A, db/db farelerin (gram cinsinden) vücut agirliklarinin farkli dozlarda celastrolle yapilan tedavide zamanin (gün) bir fonksiyonu olarak çizildigi bir grafiktir (vehikül kontrol (karo), günde bir kez intraperitoneal olarak 25 ul DMSO içinde 100 ug/kg celastrol (kare)). Sekil 4B, celastrol ile muamele sirasinda db/db farelerinin besin alimini (gram/gün olarak) gösteren bir çubuklu grafiktir (sol çubuk, vehikül kontrolü; sag çubuk, günde bir kez i.p. lOO ug/kg celastrol). Sekil 4G, celastrol ile iki hafta muamele sonunda db/db farelerin 6 saat açlik kan glukoz seviyesini (mg/dL olarak) gösteren bir çubuklu grafiktir (sol çubuk, vehikül kontrolü; sag çubuk, lOO ug/kg celastrol i.p. günde bir kez). Tüm vakalarda, her grupta n = Sekiller 5A-5F, HFD ile beslenen obez farelerin gida alimi, Vücut agirligi ve kan glukoz seviyeleri üzerinde oral olarak uygulanan celastrolun etkisini göstermektedir. Sekil 5A, HFD ile beslenmis obez farelerin (gram cinsinden) vücut agirliklarinin farkli dozlarda celastrolle yapilan tedavide zamanin (gün) bir fonksiyonu olarak çizildigi bir grafiktir (vehikül kontrol (karo), günde bir kez oral olarak 10 ug/kg celastrol (kare)). Sekil 5B, celastrol ile muamele sirasinda HFD ile beslenmis obez farelerin besin alimini (gram/gün olarak) gösteren bir çubuklu grafiktir (sol çubuk, vehikül kontrolü; sag çubuk, günde bir kez 10 ug/kg celastrol, oral olarak). Sekil 5C, celastrol ile iki hafta muamele sonunda HFD ile beslenmis farelerin 6 saat açlik kan glukoz seviyesini (mg/dL olarak) gösteren bir çubuklu grafiktir (sol çubuk, vehikül kontrolü; sag çubuk, lO ug/kg celastrol i.p. günde bir kez). Sekil 5D, yagsiz farelerin (gram cinsinden) vücut agirliklarinin farkli dozlarda celastrolle yapilan tedavide zamanin (gün) bir fonksiyonu olarak çizildigi bir grafiktir (vehikül kontrol (karo), günde bir kez oral olarak 10 ug/kg celastrol (kare)). Sekil 5E, celastrol ile Hmamele sirasinda yagsiz farelerin besin alimini (gram/gün olarak) gösteren bir çubuklu grafiktir (sol çubuk, vehikül kontrolü; sag çubuk, günde bir kez 10 ug/kg celastrol, oral olarak). Sekil 5F, celastrol ile iki hafta muamele sonunda yagsiz farelerin 6 saat açlik kan glukoz seviyesini (mg/dL olarak) gösteren bir çubuklu grafiktir (sol çubuk, vehikül kontrolü; sag çubuk, lO pg/kg celastrol i.p. günde bir kez). Tüm vakalarda, her grupta n = 5. Student t-testine göre *, p<0.05; **, p<0.0l; ***, Sekiller 6A-6D, ob/ob ve db/db farelerin gida alimi, vücut agirligi ve kan glukoz seviyeleri üzerinde oral olarak uygulanan celastrolün etkisini göstermektedir. Sekil 6A, ob/ob farelerin (gram cinsinden) vücut agirliklarinin farkli dozlarda celastrolle yapilan tedavide zamanin (gün) bir fonksiyonu olarak çizildigi bir grafiktir (vehikül kontrol (üçgen), günde bir kez oral olarak 10 ug/kg celastrol (kare)).

Sekil 68, db/db farelerin (gram cinsinden) vücut agirliklarinin farkli dozlarda celastrolle yapilan tedavide zamanin (gün) bir fonksiyonu olarak çizildigi bir grafiktir (vehikül kontrol (üçgen), günde bir kez oral olarak 10 ug/kg celastrol (kare)). Sekil 6G, celastrol ile Hmamele sirasinda ob/ob farelerin besin alimini (gram/gün olarak) gösteren bir çubuklu grafiktir (sol çubuk, vehikül kontrolü; sag çubuk, günde bir kez 10 ug/kg celastrol, oral olarak). Sekil 6D, celastrol ile 2 haftalik. muamelenin sonunda db/db farelerin besin alimini (gram/gün olarak) gösteren bir çubuklu grafiktir (sol çubuk, vehikül kontrolü; sag çubuk, günde bir kez 10 Sekiller 7A-7D, birlikte verilen leptin ve celastrolün farelerin vücut agirligi ve gida alimi üzerindeki etkisini göstermektedir. Sekil 7A, HFD ile beslenmis obez farelerin (gram cinsinden) kümülatif besin aliminin, yalnizca celastrol, yalnizca leptin ve kombinasyon halinde celastrol ve leptin ile tedavi sirasinda zamanin (saat) bir fonksiyonu olarak çizimini gösteren bir grafiktir (vehikül kontrol (DMSO+salin, karo), yalnizca leptin (kare), yalnizca celastrol (üçgen) ve celastrol ve leptin (-X-)). Sekil 7B, yagsiz ve HFD ile beslenmis farelerde leptin enjeksiyonundan 6 saat sonra besin alimindaki azalma yüzdesini gösteren bir çubuklu grafiktir (soldan saga dogru, celastrolsüz yagsiz fareler, celastrollü yagsiz fareler, celastrolsüz HFD ile beslenmis obez fareler ve celastrollü HFD ile beslenmis fareler). Sekil 7C, yagsiz farelerin (gram cinsinden) kümülatif besin aliminin, yalnizca celastrol, yalnizca leptin ve kombinasyon halinde celastrol ve leptin ile tedavi sirasinda zamanin (saat) bir fonksiyonu olarak çizimini gösteren bir grafiktir (vehikül kontrol (DMSO+salin, karo), yalnizca leptin (kare), yalnizca celastrol (üçgen) ve celastrol ve leptin (-x-)). Sekil 7D, yagsiz ve HFD ile beslenmis obez farelerde yalnizca celastrol, yalnizca leptin ve kombinasyon halinde celastrol ve leptinle muamele sirasinda 24 saatlik bir süre boyunca vücut agirliklarindaki (gram cinsinden) degisikligi gösteren bir çubuklu grafiktir (soldan saga dogru, vehikül kontrollü yagsiz fareler (DMSO+salin), yalnizca leptinli yagsiz fareler, yalnizca celastrollü yagsiz fareler, hem celastrol heni de leptin ile isleme tabi tutulmus yagsiz fareler, vehikül kontrollü (DMSO+salin) HFD ile beslenmis obez fareler, yalnizca leptinli HFD ile beslenmis obez fareler, yalnizca celastrollü HFD ile beslenmis obez fareler, hem celastrol hem de leptin ile isleme tabi tutulmus HFD ile beslenmis obez fareler). Tüm vakalarda, her grupta n = 3. Sekiller 8A-8D, celastrolün, HFD ile beslenen farelerin yag kütlesini (yani Vücut yagini) seçici bir sekilde azaltma kabiliyetini göstermektedir. Sekil 8A, HFD ile beslenmis obez farelerin, farkli dozlarda celastrol ile iki haftalik muamelenin ardindan dual emisyon x-isini absorptiyometre (DEXA) ile ölçülen yagsiz kütlelerini (gram cinsinden) gösteren bir çubuklu grafiktir (soldan saga dogru, vehikül kontrol, günde bir kez intraperitoneal lO ug/kg celastrol, günde bir kez intraperitoneal 50 ug/kg ve günde bir kez intraperitoneal 100 ug/kg celastrol). Sekil 8B, HFD ile beslenmis obez farelerin, farkli dozlarda celastrol ile iki haftalik muamelenin ardindan DEXA ile ölçülen yag kütlelerini (gram cinsinden) gösteren bir çubuklu grafiktir (soldan saga dogru, vehikül kontrol, günde bir kez intraperitoneal lO ug/kg celastrol, günde bir kez intraperitoneal 50 ug/kg ve günde bir kez intraperitoneal 100 ug/kg' celastrol). Sekil 8C, HFD ile beslenmis obez farelerin, farkli dozlarda celastrol ile iki haftalik muamelenin ardindan DEXA ile ölçülen Vücuttaki yagi yüzdelerini gösteren bir çubuklu grafiktir (soldan saga dogru, vehikül kontrol, günde bir kez intraperitoneal 10 ug/kg celastrol, günde bir kez intraperitoneal 50 ug/kg ve günde bir kez intraperitoneal 100 ug/kg celastrol). Sekil 8D, bir leptine özgü ELISA kiti kullanilarak Ölçülen plazma leptin düzeyini (ng/mL cinsinden), celastrol ile yapilan islemin zamana bagli bir fonksiyonu (gün) olarak gösteren bir grafiktir (vehikül kontrol (karo), günde bir kez intraperitoneal lOO ug/kg celastrol (kare)).

Sekiller 9A-9D, HFD ile beslenen obez farelerde celastrolün glukoz homeostazisi üzerindeki etkisini göstermektedir. Sekil 9A, D-glükoz enjeksiyonundan sonraki 7. günde bir glükoz tolerans testi (GTT) yapilan HFD ile beslenmis farelerde, plazma kan sekeri düzeylerinin zamanin bir fonksiyonu (dakika) olarak gösterildigi bir grafiktir (vehikül kontrol (karo), günde bir kez intraperitoneal lOO ug/kg celastrol (kare)).

Sekil 9B, Sekil 9A'daki hem vehikül kontrol (sol çubuk) hem de celastrol (100 ug/kg celastrol, sag çubuk) için imgelerin egri altindaki alanlarin (AUC, dakika mg/dL olarak) gösteren bir çubuklu grafiktir. Sekil 9G, insülin enjeksiyonundan sonraki 7. günde bir insülin tolerans testi (ITT) yapilan HFD ile beslenmis farelerde, plazma kan sekeri düzeylerinin zamanin bir fonksiyonu (dakika) olarak gösterildigi bir grafiktir (vehikül kontrol (karo), günde bir kez intraperitoneal lOO ug/kg celastrol (kare)). Sekil 9D, Sekil 9C'deki hem vehikül kontrol (sol çubuk) hem de celastrol (100 ug/kg celastrol, sag çubuk) için imgelerin egri altindaki alanlarin (AUC, dakika mg/dL olarak) gösteren bir çubuklu grafiktir. Tüm vakalarda, her grupta n = 5. Student t-testine göre *, p<0.05; **, Sekiller lOA-lOC, HFD ile beslenmis obez farelerde, 3 haftalik i.p. celastrol uygulamasinin sonunda (günde bir kez intraperitoneal 100 ug/kg celastrol) nicel PCR ile belirlendigi üzere, celastrol uygulamasinin glukoneojenik enzimlerin hepatik mRNA ifadesi üzerindeki etkisini göstermektedir. Sekil lOA, üç hafta boyunca celastrol muamelesinin ardindan HFD ile beslenmis obez farelerde glükoz 6-fosfatazin (G6paz, keyfi birimler) hepatik mRNA ifade düzeyini gösteren. bir çubuklu grafiktir (sol çubuk, 'vehikül kontrol; sag çubuk, celastrol uygulama). Sekil lOB, üç hafta boyunca celastrol muamelesinin ardindan HFD ile beslenmis obez farelerde fosfoenolpiruvat karboksikinazin (PEPCK, keyfi birimler) hepatik mRNA ifade düzeyini gösteren bir çubuklu grafiktir (sol çubuk, vehikül kontrol; sag çubuk, celastrol uygulama). Sekil lOC, üç hafta boyunca celastrol muamelesinin ardindan HFD ile beslenmis obez farelerde peroksizom proliferatörüyle aktiflestirilmis reseptör gama koaktivatör 1- alfanin (PGCla, keyfi birimler) hepatik mRNA ifade düzeyini gösteren bir çubuklu grafiktir` (sol çubuk, vehikül kontrol; sag çubuk, celastrol uygulama).

Sekiller llA-llB, HFD ile beslenmis obez farelerde, 3 haftalik i.p. celastrol uygulamasinin sonunda (günde bir kez intraperitoneal lOO ug/kg celastrol) ELISA ile belirlendigi üzere, celastrol uygulamasinin alanin transaminaz (ALT) ve aspartat transaminaz (AST) serum düzeyleri üzerindeki etkisini göstermektedir. Sekil llA, üç hafta boyunca celastrol ile muamele edildikten sonra HFD ile beslenmis obez farelerde serum ALT (U/L) düzeyini gösteren bir çubuklu grafiktir (sol çubuk, vehikül kontrol; sag çubuk, celastrol uygulama). Sekil llB, üç hafta boyunca celastrol ile muamele edildikten sonra HFD ile beslenmis obez farelerde serum AST (U/L) düzeyini gösteren bir çubuklu grafiktir (sol çubuk, vehikül kontrol; sag çubuk, celastrol uygulama). Tüm vakalarda, her grupta n = . Student t-testine göre *, p<0.05; **, p<0.0l; ***, p<0.00l.

Sekiller 12A-12B, 3 hafta boyunca i.p. celastrol uygulamasinin sonunda (günde bir kez intraperitoneal 100 ug/kg celastrol) HFD ile beslenmis obez farelerde, celastrol uygulamasinin tiroid. hormonlari triodotrionin (T3) ve tiroksin (T4) serum düzeyleri üzerindeki etkisini göstermektedir. Sekil 12A, üç hafta boyunca celastrol ile muamele edildikten sonra HFD ile beslenmis obez farelerde seruni T3 (ng/mL) düzeyini gösteren bir çubuklu grafiktir (sol çubuk, vehikül kontrol; sag çubuk, celastrol uygulama). Sekil 128, üç hafta boyunca celastrol ile muamele edildikten sonra HFD ile beslenmis obez farelerde serum T4 (ng/mL) düzeyini gösteren bir çubuklu grafiktir (sol çubuk, vehikül kontrol; sag çubuk, celastrol uygulama). Tüm vakalarda, her grupta n = 5. Student t-testine göre *, p<0.05; Sekil 13, günde bir kez intraperitoneal olarak 100 ug/kg dozda uygulanan› dört farkli celastrol türeviyle muamele için, HFD ile beslenmis obez farelerin Vücut agirligi/baslangiç Vücut agirligi oranlarini zamana (gün) bagli olarak gösteren bir grafiktir (mCSl (karo), mCSZ (kare), mCS3 (üçgen) ve mCS4 Sekil 14, HFD ile beslenmis obez farelerin vücut agirligi/baslangiç Vücut agirligi oranlarini zamana (gün) bagli olarak gösteren bir grafiktir (vehikül kontrol (karo), günde bir kez intraperitoneal lOO ug/kg celastrol (kare)).

Leptin, celastrol tedavisinin 17. gününden baslayarak, grafigin x ekseninin üzerinde bulunan çubukta gösterildigi gibi artan dozlarda (l Hg/kg, 2 ng/kg ve 4 ng/kg) birlikte uygulanmistir.

Sekil 15, dört C57BL/6 faresinin (standart diyet ve vehikül kontrol alan fareler (karo), standart diyet ve günde bir kez intraperitoneal lOO ug/kg celastrol alan fareler (kare), vehikül kontrol alan HFD ile beslenmis fareler (üçgen) ve günde bir kez intraperitoneal 100 ug/kg celastrol alan HFD ile beslenmis fareler (Çarpi)) ortalama Vücut agirliklarini (gram) muamele zamanina (gün) bagli olarak gösteren bir grafiktir.

Vehikül kontrolü alan HFD ile beslenen fareler obezite gelistirmis, diger fareler ise gelistirmemistir.

Sekiller 16A ve l6B, karanlik ve isik döngülerinde kontrol ve celastrol için. x (Sekil 16A) ve y (Sekil 16B) yönlü ayakta hareketi gösteren grafiklerdir. Toksisite, Columbus Monitoring System kullanilarak degerlendirilmistir.

Hayvanlarin lokomotor aktivitesi ölçülmüstür. Sekillerde görüldügü gibi, hem karanlik hem de isik döngülerinde hayvanlarin x xma y dogrultularindaki ayakta hareket sayilari önemli ölçüde farkli degildir. Bu, ilaçla tedavi edilen farelerin letarjik. olmadigini ve herhangi bir gözle görülür hastalik ve toksisite belirtisi göstermedigini gösterir.

BULUSUN AYRINTILI AÇIKLAMASI Burada kullanildigi sekliyle "birlikte uygulama", es zamanli ve sirali uygulamayi içerir. Sirali uygulama için uygun bir zaman süreci, bir hastanin hastaliginin niteligi ve hastanin durumu gibi faktörlere göre doktor tarafindan seçilebilir.

Burada kullanildigi sekliyle, "farmasötik olarak kabul edilebilir" ifadesi, saglam tibbi muhakeme kapsaminda, insanlarin ve hayvanlarin dokulariyla temas halinde, beklenmedik toksisite, tahris, alerjik tepki ve benzeri problem ya da komplikasyon olmadan kullanima uygun olan ve makul bir yarar/risk oranina uygun olan bilesikler, malzemeler, bilesimler ve/veya dozaj biçimlerini belirtir.

Burada kullanilan sekliyle "ön ilaç" terimi, bir hastaya aktif olmayan (veya önemli ölçüde daha az aktif olan) bir formda uygulanan bir farmakolojik maddeye (ilaç) atifta bulunur. Bir kez uygulandiginda, ön ilaç vücutta (in vivo) istenen farmakolojik aktiviteye sahip bir bilesige dönüsecek sekilde metabolize edilir.

Burada kullanilan "Obez" terimi, 30 kg/mZ'den daha büyük bir vücut kitle indeksine sahip bir hastaya karsilik gelir. Burada kullanildigi sekliyle "Asiri kilolu" ve "Pre-Obez" terimleri, vücut kitle indeksi 25 kg/m2'den büyük olan hastalara karsilik gelir. "Hastalikli (morbid) düzeyde obez" terimi, burada kullanildigi sekliyle, vücut kütle indeksi 40 kg/m2'den fazla olan, vücut kütle indeksi 35 kg/m2'den fazla olan ve bununla birlikte bir' ya da daha fazla. morbiditesi daha olan, vücut kütle indeksi 30 kg/m2'den fazla olan ve bununla birlikte kontrol edilemeyen diyabeti olan veya bunlarin kombinasyonlari olan bir hastayi belirtir.

Burada kullanilan sekliyle "etkili miktar" veya "terapötik olarak etkili miktar" ifadeleri, bir zayiflatici ajanin› bir pre-obez, obez veya hastalikli düzeyde obez hastada kilo kaybini baslatmada, bir pre-obez, obez veya hastalikli düzeyde obez hastada vücuttaki yagi azaltmada, bir pre-obez, obez veya hastalikli düzeyde obez hastada besin alimini azaltmada, bir pre-obez, obez veya hastalikli düzeyde obez hastada glukoz homeostazisini gelistirmede, bir normal, pre-obez, obez veya hastalikli düzeyde obez hastada kilo alimini önlemede ve/veya vücut kütle indeksinin artmasini Önlemede veya bunlarin kombinasyonlarini saglamada etkili olan bir miktari belirtir.

Kilo kaybini, vücut yaginin azaltilmasini, gida aliminin azaltilmasini, glukoz homeostazisinin iyilestirilmesini veya bunlarin kombinasyonlarini tesvik etmek için verilebilen pentasiklik triterpenler burada saglanmaktadir.

Mevcut bulus kilo kaybini baslatmaya veya vücuttaki yag miktarini azaltmaya veya bunlarin bir kombinasyonuna yönelik olarak kullanilmak üzere istem l'e göre farmasötik formülasyonlar saglar.

Zayiflatici ajan Formül 1 ile tanimlanan bir bilesik: Formül I veya bunun farmasötik olarak kabul edilebilir bir tuzudur.

Genellikle, farmasötik olarak kabul edilebilir tuzlar, yukarida tarif edilen bir bilesigin serbest asit ya da baz biçimlerinin, uygun baz veya asidin su içinde, organik bir çözücü içinde veya bu ikisinin bir karisimi içinde stoikiyometrik bir miktariyla tepkimeye sokulmasiyla hazirlanabilir. Genellikle, eter, etil asetat, etanol, izopropanol veya asetonitril gibi susuz ortamlar tercih edilir. Uygun tuzlarin listesi Remington's Pharmaceutical Sciences, 20th ed., Lippincott Williams & Wilkins, Baltimore, MD, 2000, s. 704; ve "Handbook of Pharmaceutical Salts: Properties, Selection, and Use," P. Heinrich Stahl and Camille G. Wermuth, Eds., Wiley-VCH, Weinheim, 2002 belgelerinde Uygun farmasötik olarak kabul edilebilir asit katilma tuzlari arasinda, inorganik asitlerden, örnegin hidroklorik, hidrobromik, hidroflorik, borik, floroborik, fosforik, metafosforik, nitrik, karbonik, sülfonik ve sülfürik asitten ve organik asitlerden, örnegin asetik, benzensülfonik, benzoik, sitrik, etansülfonik, fumarik, glukonik, glikolik, izotiyonik, laktik, laktobiyonik, maleik, malik, metansülfonik, triflorometansülfonik, süksinik, tolüensülfonik, tartarik ve trifloroasetik asitlerden türetilenler bulunur.

Uygun organik asitler genel olarak örnegin, alifatik, sikloalifatik, aromatik, aralifatik, heterosiklik, karboksilik ve sülfonik organik asit siniflarini içerir. Uygun organik asitlerin spesifik örnekleri arasinda asetat, trifloroasetat, format, propiyonat, süksinat, glikolat, glukonat, diglukonat, laktat, malat, tartarik asit, sitrat, askorbat, glukuronat, maleat, fumarat, piruvat, aspartat, glutamat, benzoat, antranilik asit, mezilat, stearat, salisilat, p- hidroksibenzoat, fenilasetat, mandelat, embonat (pamoat), metansülfonat, etansülfonat, benzensülfonat, pantotenat, tolüensülfonat, 2-hidroksietansülfonat, sufanilat, siklohekzilaminosülfonat, aljenik asit, ß-hidroksibütirik asit, galaktarat, galakturonat, adipat, aljinat, bütirat, kamforat, kamforsülfonat, siklopentanpropiyonat, dodesilsülfat, glikoheptanoat, gliserofosfat, heptanoat, hekzanoat, nikotinat, 2-naftalsülfonat, oksalat, palmoat, pektinat, 3-fenilpropiyonat, pikrat, pivalat, tiyosiyanat, Bazi durumlarda, farmasötik olarak kabul edilebilir tuz alkali metal tuzlarini, örnegin sodyum ya da potasyum tuzlari; toprak alkali. metal tuzlari, örn., kalsiyuni ya da Inagnezyum tuzlari; ve uygun organik ligandlarla olusturulan tuzlari, Örn., dördüncül amonyum tuzlarini içerebilir. Baz tuzlari ayrica toksik olmayan tuzlar olusturan bazlardan olusturulabilmekte olup, bunlarin arasinda alüminyum, arginin, benzatin, kolin, dietilamin, diolamin, glisin, lizin, meglumin, olamin, trometamin ve çinko tuzlari bulunur.

Organik tuzlar sekonder, tersiyer ya da kuaterner amin tuzlarindan, örnegin trometamin, dietilamin, N,N'- dibenziletilendiamin, kloroprokain, kolin, dietanolamin, etilendiamin, meglumin (N-metilglukamin) ve prokainden yapilabilir. Bazik azot içeren gruplar ayrica örnegin düsük alkil (cak) halojenürler (örn., metil, etil, propil ve bütil klorürler, bromürler` ve iyodürler), dialkil sülfatlar (örn., dimetil, dietil, dibütil ve diamil sülfatlar), uzun Zincirli halojenürler (örn., desil, lauril, miristil ve stearil klorürler, bromürler ve iyodürler), arilalkil halojenürler (örn., benzil ve fenetil bromürler) ve digerleri gibi ajanlarla kuaternize edilebilir.

Burada tarif edilen sekilde, zayiflatici ajan, yukarida tarif edilen bilesiklerden herhangi birinin farmasötik olarak kabul edilebilir bir ön ilaci olabilir. Ön ilaçlar, in vivo metabolize edildiklerinde istenen farmakolojik aktiviteye sahip olan bilesiklere dönüsen bilesiklerdir. Ön ilaçlar yukarida tarif edilen bilesiklerde bulunan uygun fonksiyonelliklerin, örnegin Il. Bundgaar, Design of Prodrugs (1985) belgesinde tarif edilen "pro-parçalar" ile degistirilmesiyle hazirlanabilir. Ön ilaçlarin örnekleri arasinda, yukarida tarif edilen bilesiklerin ester, eter ya da amit türevleri, yukarida tarif edilen bilesiklerin polietilen glikol türevleri, N-asil amin türevleri, dihidropiridin piridin türevleri, polipeptitlere konjüge amino içeren türevler, 2-hidroksibenzamit türevleri, karbamat türevleri, biyolojik olarak aktif aminlere indirgenen N-oksitlerin türevleri ve N-mannich baz türevleri bulunur. Ön ilaçlarla ilgili daha fazla tartisma için, örnegin, bkz. Rautio, J. ve A. Hazirlama Metotlari Yukarida tarif edilen zayiflatici ajanlar teknikte bilinen metotlar kullanilarak hazirlanabilir. Belirli aktif ajanlarin hazirlanisina yönelik temsili metodolojiler asagida tarif edilmektedir. Belirli bir zayiflatici ajanin uygun sentez yolu, fonksiyonel gruplarin uyumlulugu, koruyucu grup stratejileri ve kararsiz baglarin varligi ile ilgili oldugundan dolayi, bilesigin genel yapisi dikkate alinarak seçilebilir. Asagida tartisilan sentetik metodolojilerin yani sira, burada açiklanan kreatin bilesiklerinin hazirlanisinda kullanisli olan alternatif tepkimeler ve stratejiler de teknikte bilinmektedir. Örnegin, bkz., March, "Advanced Organic Chemistry," 5. Baski, 2001, Wiley- Interscience Publication, New York).

Celastrol ticari kaynaklardan elde edilebilir veya bitkilerden, örn. Tripterygium wilfordii'den teknikte bilinen metotlarla izole edilebilir. Örnegin, bkz., Kutney, Can. J. 21:592 (1986).

Burada tarif edilen bir zayiflatici ajanin veya bunun farmasötik olarak kabul edilebilir bir tuzunun terapötik olarak etkili bir miktarini, bir ya da daha fazla farmasötik olarak kabul edilebilir eksipiyanla kombinasyon halinde içeren farmasötik formülasyonlar saglanmaktadir. Temsili eksipiyanlar arasinda çözücüler, seyrelticiler, pH düzenleyici ajanlar, koruyucular, antioksidanlar, süspanse edici ajanlar, islatici ajanlar, viskozite modifiye ediciler, toniklik ajanlari, dengeleyici ajanlar ve bunlarin kombinasyonlari bulunur. Uygun farmasötik olarak kabul edilebilir eksipiyanlar tercihen genel olarak güvenli oldugu kabul edilen (GRAS) malzemeler arasindan seçilir ve bir bireye, istenmeyen biyolojik yan etkilere veya istenmeyen etkilesimlere neden olmadan uygulanabilir.

A Ilave Terapötikler Bazi durumlarda, farmasötik formülasyon ayrica bir ya da daha fazla ilave aktif ajan içerebilir. Belirli uygulamalarda, farmasötik formülasyonlar ayrica leptin, bir leptin analogu veya bunlarin kombinasyonlarini içerir.

Leptin, besin alimini ve Vücut agirligini in vivo olarak düzenleyen bir negatif geribildirim döngüsünde aferent sinyal görevi gören bir hormondur. Islenmemis insan leptini in vivo olarak bir 167 amino asit, l6 kDa protein hormonu olarak sentezlenir. islenmemis leptin, bir N-terminal 21-amino asit sinyal sekansi içerir' ve bu da polipeptidin. geri kalanindan ayrilarak olgun, dolasimda bir leptin elde edilir (l46 amino asit içerir). Burada kullanilan "leptin" ve "leptin analogu" terimleri dogal olarak meydana gelen insan leptini, bir fare veya siçan gibi insan disi bir tür tarafindan üretilen dogal olarak meydana gelen leptin, rekombinant olarak üretilen olgun leptin, örnegin. metreleptin (yani, 146 amino asitli, olgun, dolasimdaki insan leptinine bir metiyoninin genetigi degistirilmis N-terminal eklenmesiyle üretilen 147 amino asitli bir leptin olan rekombinant metiyonil insan leptini veya r-metHuLeptin) ve ayni zamanda leptin fragmanlari, leptin varyantlari, leptin füzyon proteinleri ve bunun teknikte biyolojik aktiviteye sahip oldugu bilinen diger türevlerini Örnek niteligindeki leptin analoglari ve bunlarin türevleri, içerir. Örnek niteligindeki leptin varyantlari, 43 pozisyonundaki amino asidin Asp veya Glu ile ornatildigi; 48 pozisyonundaki amino asidin Ala ile ornatildigi; 49 pozisyonundaki amino asidin Glu ile ornatildigi veya eksik oldugu; 75 pozisyonundaki amino asidin Ala ile ornatildigi; 89 pozisyonundaki amino asidin Leu ile ornatildigi; 93 pozisyonundaki amino asidin Asp veya Glu ile ornatildigi; 98 pozisyonundaki amino asidin Ala ile ornatildigi; 117 pozisyonundaki amino asidin ser ile ornatildigi, 139 pozisyonundaki amino asidin Leu ile ornatildigi, 167 pozisyonundaki amino asidin Ser ile ornatildigi varyantlari ve bunlarin herhangi bir kombinasyonunu içerir.

Belirli uygulamalarda, farmasötik formülasyon Amylin Pharmaceuticals (San Diego, Calif.) sirketinden alinabilecek olan r-metHuLeptin'i (A- içerir.

Farmasötik formülasyonlar ayrica bir ya da daha fazla Vitamin, mineral, besin takviyesi, nutrasötik ajan, örnegin proteinler, karbohidratlar, amino asitler, yag asitleri, antioksidanlar ve bitki ya da hayvan ekstraktlari ya da bunlarin kombinasyonlarini içerebilir. Uygun vitaminler, mineraller, nutrasötik ajanlar ve besin takviyeleri teknikte bilinmektedir ve örnegin Roberts ve ark. (Nutriceuticals: The Complete Encyclopedia of Supplements, Herbs, Vitamins, and Healing Foods, American Nutriceutical Association, 2001) tarafindan açiklanmaktadir. Nutrasötik ajanlar ve besin takviyeleri ayrica Physicians' Desk Reference for Nutritional Supplements, 1. Baski (2001) ve The Physicians' Desk Reference for Herbal Medicines, 1. Baski (2001) belgelerinde açiklanmaktadir. a Enteral Formülasyonlar Uygun oral dozaj biçimleri arasinda tabletler, kapsüller, çözeltiler, süspansiyonlar, suruplar ve pastiller bulunur.

Tabletler teknikte iyi bilinen sikistirma veya kaliplama teknikleri kullanilarak yapilabilir. Jelatin veya jelatin olmayan kapsüller sert veya yumusak kapsüllü kabuklar olarak hazirlanir ve teknikte iyi bilinen teknikler kullanilarak sivi, kati ve yari kati dolgu malzemelerini kapsayabilir.

Formülasyonlar bir ya da daha fazla farmasötik olarak kabul edilebilir eksipiyan kullanilarak hazirlanabilmekte olup, bunlarin arasinda seyrelticiler, koruyucular, baglayicilar, kayganlastiricilar, parçalayicilar, sisirici ajanlar, dolgular, stabilizörler ve bunlarin kombinasyonlari bulunur.

Plastiklestiriciler, pigmentler, renklendiriciler, dengeleyici ajanlar ve yapismayi önleyicileri içeren eksipiyanlar da ayrica enteral uygulama için kapli bilesimler olusturmak üzere kullanilabilir. Gecikmeli salimli dozaj formülasyonlari standart referanslarda tarif edilen sekilde hazirlanmakta olup, örnegin "Pharmaceutical dosage form tablets", eds. Liberman ve ark., (NeW' York, Marcel Dekker, pharmacy", 20. baski, Lippincott Williams & Wilkins, Baltimore, MD, 2000 ve "Pharmaceutical dosage forms and drug delivery systems", 6. Baski, Ansel ve ark. (Media, PA: Williams and Wilkins, 1995) belgelerinde tarif edilir. Bu referanslar tabletler ve kapsüllerin ve gecikmeli salimli tablet, kapsül, ve granüllü dozaj biçimlerinin, eksipiyanlari, malzemeleri, ekipmanlari ve prosesleri üzerine bilgi saglamaktadir.

Uygun kaplama malzemelerinin örnekleri arasinda, sinirlandirma olmaksizin, selüloz polimerler, örnegin selüloz asetat ftalat, hidroksipropil selüloz, hidroksipropil metilselüloz, hidroksipropil metilselüloz ftalat ve hidroksipropil metilselüloz asetat süksinat; polivinil asetat ftalat, akrilik asit polimerler ve kopolimerler ve EUDRAGIT® markasi altinda piyasada bulunabilen metakrilik reçineler (Roth Pharma, Westerstadt, Almanya), zein, gomalak ve polisakkaritler bulunur.

Ayni zamanda "dolgular" olarak da adlandirilan seyrelticiler tipik olarak bir kati dozaj biçiminin gövde yogunlugunu arttirmak ve böylece tabletlerin sikistirilmasi veya tanecikler veya granüllerin olusturulmasi için uygulanabilir bir büyüklügün olusturulmasi için gereklidir. Uygun seyrelticiler arasinda, sinirlandirma olmaksizin, dikalsiyum fosfat dihidrat, kalsiyum sülfat, laktoz, sukroz, manitol, sorbitol, selüloz, mikrokristalli selüloz, kaolin, sodyum klorür, kuru nisasta, hidrolize nisastalar, prejelatinize nisasta, silikon dioksit, titanyum oksit, magnezyum alüminyum silikat ve toz haline getirilmis seker bulunur.

Bir kati dozaj formülasyonuna yapiskan özellikler saglamak için baglayicilar kullanilir ve böylece dozaj biçimlerinin olusumunun ardindan bir tablet veya tanecik veya granülün saglam kalmasi saglanir. Uygun baglayici malzemeler arasinda, sinirlandirma olmaksizin, nisasta, prejelatinize nisasta, jelatin, sekerler (örnegin sukroz, glükoz, dekstroz, laktoz ve sorbitol), polietilen glikol, parafinler, dogal ve sentetik zamklar, örnegin akasya, kitre, sodyum aljinat, selüloz, örnegin hidroksipropilmetilselüloz, hidroksipropilselüloz, etilselüloz ve veegum ve sentetik polimerler, örnegin akrilik asit ve metakrilik asit kopolimerler, metakrilik asit kopolimerler, metil metakrilat kopolimerler, aminoalkil metakrilat kopolimerler, poliakrilik asit/polimetakrilik asit Tablet üretimini kolaylastirmak için kayganlastiricilar kullanilir. Uygun kayganlastiricilarin örnekleri arasinda, sinirlandirma olmaksizin, magnezyum stearat, kalsiyum stearat, stearik asit, gliserol behenat, polietilen glikol, talk ve mineral yag bulunur. Dozaj biçimi parçalanmasinin veya uygulamanin ardindan "kirilmasinin" kolaylastirilmasi için bozundurucular kullanilir ve genel olarak bunlarin arasinda, sinirlandirma olmaksizin, nisasta, sodyum nisasta glikolat, sodyum karboksimetil nisasta, sodyum karboksimetilselüloz, hidroksipropil selüloz, prejelatinize nisasta, kil, selüloz, aljinin, zamklar ya da çapraz bagli polimerler, örnegin çapraz bagli PVP (Polyplasdone® XL, GAF Chemical Corp) bulunur.

Stabilizörler ilaç dekompozisyon tepkimelerini inhibe etmede veya geciktirmede kullanilmakta olup, bunlarin arasinda, örnek olarak oksidatif tepkimeler bulunur. Uygun stabilizörler arasinda, sinirlandirma olmaksizin, antioksidanlar, bütillenmis hidroksitolüen (BHT); askorbik asit, bunun tuzlari ve esterleri; E Vitamini, tokoferol ve bunun tuzlari; sülfitler, örnegin sodyum metabisülfit; sistein ve bunun türevleri; sitrik asit; propil galat ve bütillenmis hidroksianizol (BHA) bulunur. 1. Kontrollü salimli formülasyonlar Oral dozaj biçimleri, örnegin kapsüller, tabletler, çözeltiler ve süspansiyonlar kontrollü salim için formüle edilebilir. Örnegin, bir ya da daha fazla bilesik ve istege bagli bir ya da daha fazla ilave aktif ajan nanoparçaciklar, mikroparçaciklar` ve bunlarin kombinasyonlari halinde formüle edilebilir ve bir yumusak veya sert jelatin veya jelatinsiz bir kapsül içinde kapsüllenebilir veya. bir oral süspansiyon veya surup olusturmak üzere bir dagitici ortam. içine dagilabilir. Parçaciklar ilaç ve kontrollü salimli bir polimer veya matristen olusturulabilir. Alternatif olarak, ilaç parçaciklari nihai dozaj biçimine dahil edilmeden önce bir ya da daha fazla kontrollü salim kaplamasiyla kaplanabilir.

Bir baska uygulamada, bir ya da daha fazla bilesik ve istege bagli bir ya da daha fazla ilave aktif ajan bir matris malzemesi içine dagitilabilir ve bu malzeme bir sulu ortamla, örnegin fizyolojik sivilarla temas ettiginde jellesir veya emülsifiye olur- Jellerde, matris siser ve aktif ajanlari içine alir ve bunlar zamanla difüzyon yoluyla ve/Veya matris malzemesinin bozunmasiyla birlikte yavasça salinir. Bu tür matrisler tabletler halinde veya sert ve yumusak kapsüller için dolgu malzemeleri olarak formüle edilebilir.

Yine bir baska uygulamada, bir ya da daha fazla bilesik ve istege bagli bir ya da daha fazla ilave aktif ajan bir kati oral dozaj biçimi, örnegin bir tablet veya kapsül halinde formüle edilebilir ve kati dozaj biçimi bir ya da daha fazla kontrollü salimli kaplamayla, örnegin bir gecikmeli salimli kaplama veya uzatilmis salimli kaplamayla kaplanir. Kaplama veya kaplamalar ayrica bilesikleri ve/veya ilave aktif ajanlari içerebilir.

Uzatilmis salimli formülasyonlar Uzatilmis salimli formülasyonlar genellikle difüzyon veya ozmotik sistemler olarak hazirlanmakta olup, örnegin "Remington - The science and. practice of pharmacy" (20th ed., Lippincott. Williams & Wilkins, Baltimore, MD, 2000) belgesinde tarif edilir. Bir difüzyon sistemi tipik olarak iki tür cihazdan, yani bir rezervuar ve bir matristen olusur ve teknikte iyi bilinen ve tarif edilen bir sistemdir. Matris cihazlari genellikle ilacin yavasça çözünen bir polimer tasiyici ile bir tablet biçimine sikistirilmasiyla hazirlanir. Matris cihazlarinin hazirlanisinda kullanilan üç ana malzeme türü çözünmez plastikler, hidrofilik polimerler ve yagli bilesiklerdir.

Plastik matrisler arasinda, sinirlandirma olmaksizin, metil akrilat-metil metakrilat, polivinil klorür ve polietilen bulunur. Hidrofilik polimerler arasinda, sinirlandirma olmaksizin, selülozik polimerler, örnegin metil ve etil selüloz, hidroksialkilselülozlar, örnegin hidroksipropil- selüloz, hidroksipropil-metilselüloz, sodyum karboksimetilselüloz ve Carbopol® 934, polietilen oksitler ve bunlarin karisimlari bulunur. Yagli bilesikler arasinda, sinirlandirma olmaksizin, çesitli parafinler, örnegin carnauba mumu ve gliseril tristearat ve mum tipi maddeler, örnegin hidrojenlenmis hintyagi veya hidrojenlenmis bitkisel yag veya bunlarin karisimlari bulunur.

Belirli uygulamalarda, plastik malzeme farmasötik olarak kabul edilebilir bir akrilik polimer, örnegin, sinirlandirma olmaksizin, akrilik asit ve metakrilik asit kopolimerler, metil metakrilat, metil metakrilat kopolimerler, etoksietil metakrilatlar, siyanoetil metakrilat, aminoalkil metakrilat kopolimer, poli(akrilik asit), poli(metakrilik asit), metakrilik asit alkilamin kopolimer poli(metil metakrilat), poli(metakrilik asit)(anhidrit), polimetakrilat, poliakrilamit, poli(metakrilik asit anhidrit) ve glisidil metakrilat kopolimerler bulunur. Belirli uygulamalarda, akrilik polimer bir ya da daha fazla amonyum metakrilat kopolimerden olusur. Amonyum metakrilat kopolimerler teknikte iyi bilinir ve NF XVII'de, akrilik ve metakrilik asit esterlerin düsük kuaterner amonyum gruplari olan tamamiyla polimerize kopolimerleri olarak tarif edilmektedir.

Bir uygulamada, akrilik polimer* bir akrilik reçine lakesi, örnegin Rohm Pharma'dan EUDRAGITG markasiyla alinabilecek olan bir polimerdir. Diger tercih edilen uygulamalarda, akrilik polimer, Rohm Pharma'dan alinabilecek olan sirasiyla EUDRAGIT® RL3OD ve EUDRAGIT ® RSBOD markalariyla satilan iki akrilik reçine lakesinin bir karisimini içerir. EUDRAGIT® RL3OD ve EUDRAGIT®. RS3OD akrilik ve metakrilik esterlerin düsük kuaterner amonyum gruplu kopolimerleri olup, amonyum gruplarinin geriye kalan nötr (met)akrilik esterlere molar orani EUDRAGIT® RL3OD'da 1:20 ve EUDRAGIT® RS3OD'da 1:40'tir.

Ortalama moleküler agirlik yaklasik 150.000'dir. EUDRAGIT ® S- 100 ve EUDRAGIT® L-lOO ayrica tercih edilir. Kod adlandirmalari RL (yüksek geçirgenlik) ve RS (düsük geçirgenlik) bu ajanlarin geçirgenlik özelliklerini belirtir.

EUDRAGIT® RL/RS karisimlari suda ve sindirim sivilarinda çözünmez. Ancak bunlari içerecek sekilde olusturulan çok parçacikli sistemler sisebilirdir ve sulu çözeltiler ve sindirim sivilarinda geçirimlidir.

Yukarida tarif edilen EUDRAGITC> RL/RS gibi polimerler arzu edilen bir çözünme profiline sahip bir sürekli salimli formülasyonu nihai olarak elde etmek için istenen herhangi bir oranda karistirilabilir. Arzu edilen sürekli salimli çok parçacikli sistemler, örnegin %100 EUDRAGIT®RL, %50 EUDRAGIT® RL ve %50 EUDRAGIT® RS ve %10 EUDRAGIT® RL ve %90 EUDRAGIT® RS'den elde edilebilir. Teknikte uzman bir kisi, Örnegin, EUDRAGIT®L gibi baska akrilik polimerlerin de kullanilabilecegini kabul edecektir.

Alternatif olarak, uzatilmis salimli formülasyonlar ozmotik sistemler kullanilarak 'veya dozaj formuna yari geçirgen. bir kaplama uygulanarak hazirlanabilir. Ikinci durumda, istenen ilaç salma profili, düsük geçirgen ve yüksek geçirgen kaplama malzemelerinin uygun bir oranda birlestirilmesiyle elde edilebilir.

Yukarida tarif edilen farkli ilaç salma mekanizmalarina sahip cihazlar, tekli veya çoklu birimler içeren bir son dozaj formunda birlestirilebilir. Çoklu birimlerin örnekleri arasinda, bunlarla sinirli olmamakla birlikte, çok katmanli tabletler ve tabletler, boncuklar veya granüller içeren kapsüller yer alir.Çabuk salimli bir porsiyon, uzatilmis salimli sisteme, bir kaplama veya sikistirma prosesi kullanilarak uzatilmis salimli çekirdegin üzerine bir çabuk salimli bir katmanin uygulanmasiyla veya uzatilmis ve çabuk salimli tanecikler barindiran bir kapsül gibi çok birimli bir sistem kullanilarak eklenebilir. Hidrofilik polimerler içeren uzatilmis salimli tabletler, dogrudan sikistirma, islak granülasyon veya kuru granülasyon gibi teknikte yaygin olarak bilinen tekniklerle hazirlanir. Bunlarin formülasyonlari genellikle aktif farmasötik bilesenlerin yani sira polimerleri, seyrelticileri, baglayicilari ve kayganlastiricilari içerir. Her zamanki seyrelticiler arasinda, nisastalar, toz halindeki selüloz, özellikle kristal ve mikrokristal selüloz, fruktoz, mannitol ve sükroz gibi sekerler, tahil unlari ve benzer yenilebilir tozlar gibi inert toz haline getirilmis maddeler bulunur. Tipik seyrelticiler arasinda çesitli tiplerde nisasta, laktoz, mannitol, kaolin, kalsiyum fosfat veya sülfat, sodyum klorür ve toz haline getirilmis seker gibi inorganik tuzlar bulunur. Toz haline getirilmis selüloz türevleri de yararlidir. Tipik tablet baglayicilari arasinda nisasta, jelatin ve laktoz, fruktoz ve glukoz gibi sekerler bulunur. Akasya, aljinatlar, metilselüloz ve polivinilpirolidon dahil olmak üzere dogal ve sentetik zamklar da kullanilabilir. Polietilen glikol, hidrofilik polimerler, etilselüloz ve mumlar da baglayici olarak kullanilabilir. Tabletin ve pançlarin kaliba yapismasini önlemek için bir tablet formülasyonunda bir kayganlastirici madde gereklidir. Kayganlastirici, talk, magnezyum ve kalsiyum stearat, stearik asit ve hidrojenlenmis bitkisel yaglar gibi kaygan katilardan seçilir.

Balmumu materyalleri ihtiva eden uzatilmis salimli tabletler, genel olarak, dogrudan bir harman yöntemi, bir katilasma yöntemi ve bir sulu dispersiyon yöntemi gibi teknikte bilinen yöntemler kullanilarak› hazirlanir. Katilasma yönteminde ilaç bir balmumu materyali ile karistirilir ve spreyle katilastirilir ya da katilastirilip elekten geçirilir ve islenir.

Gecikmeli salimli formülasyonlar Gecikmeli salim formülasyonlari, kati bir dozaj formunun, midenin asidik ortaminda çözünmeyen ve ince bagirsagin nötr ortaminda çözünebilen bir polimer film ile kaplanmasiyla olusturulabilir. Gecikmeli salimli dozaj birimleri, örnegin, bir ilacin veya ilaç içeren bir bilesimin seçilmis bir kaplama malzemesi ile kaplanmasiyla hazirlanabilir. Ilaç içeren bilesim, örnegin, bir kapsül içine dahil edilmek üzere bir tablet, bir "kapli çekirdek" dozaj formunda› bir iç çekirdek olarak kullanilmak üzere bir tablet veya bir tablet ya da kapsül içine dahil edilmek üzere çoklu sayida ilaç içeren tanecikler, parçaciklar veya granüller olabilir. Tercih edilen kaplama malzemeleri arasinda biyolojik olarak asinabilir, kademeli olarak hidrolize edilebilir, kademeli olarak suda çözünür ve/veya enzimatik olarak parçalanabilir polimerler bulunur ve geleneksel "enterik" polimerler olabilir. Teknikte uzman kisilerce takdir edilecegi gibi enterik polimerler, alt gastrointestinal sistemin daha yüksek pH ortaminda çözünür hale gelir veya dozaj formu gastrointestinal kanaldan geçerken yavasça asinirken, enzimatik olarak bozunabilir polimerler, alt gastrointestinal kanalda, özellikle kolonda mevcut bulunan bakteriyel enzimler tarafindan parçalanirlar. Gecikmeli salimi saglamak için uygun kaplama malzemeleri arasinda, sinirlandirma olmaksizin selülozik polimerler, örnegin hidroksipropil selüloz, hidroksietil selüloz, hidroksimetil selüloz, hidroksipropil metil selüloz, hidroksipropil metil selüloz asetat süksinat, hidroksipropilmetil selüloz ftalat, metilselüloz, etil selüloz, selüloz asetat, selüloz asetat ftalat, selüloz asetat trimelitat ve karboksimetilselüloz sodyum; tercihen akrilik asit, metakrilik asit, metil akrilat, etil akrilat, metil metakrilat ve/veya etil metakrilattan olusturulan akrilik asit polimerler ve kopolimerler ve ticari ad olarak Eudragit® (Rohm Pharma; Westerstadt, Almanya), örnegin Eudragit® L3OD-55 ve LlOO-55 (pH 5.5 ve üzerinde çözünür), Eudragit® L-lOO (pH 5.5 ve üzerinde çözünür), Eudragit® S @HI 7.0 ve üzerinde çözünür, daha yüksek derece esterifikasyon sonucunda) ve Eudragits® NE, RL ve RS (farkli derecelerde geçirgenlik ve genlesebilirlige sahip suda çözünmez polimerler) adlariyla piyasada bulunabilecek olan diger metakrilik reçineler; vinil polimerler ve kopolimerler, örnegin polivinil pirolidon, vinil asetat, Vinilasetat ftalat, Vinilasetat krotonik asit kopolimer ve etilen-Vinil asetat kopolimeri; enzimatik olarak parçalanabilir polimerler, örnegin azo polimerler, pektin, kitosan, amiloz ve guar sakizi; zein ve gomalak bulunur. Farkli kaplama malzemelerinin kombinasyonlari da kullanilabilir. Farkli polimerler kullanilan çok katmanli kaplamalar da uygulanabilir. Özel kaplama malzemeleri için tercih edilen kaplama agirliklari, farkli miktarlarda çesitli kaplama malzemeleriyle hazirlanan tabletler, boncuklar` ve granuller için ayri ayri ayirma profillerini degerlendirmek suretiyle teknikte uzman kisilerce kolaylikla belirlenebilir. Istenen salim karakteristiklerini üreten lezeme, metot ve uygulama biçimi kombinasyonu yalnizca klinik çalismalar sonucunda belirlenebilir.

Kaplama bilesimi, plastiklestiriciler, pigmentler, renklendiriciler, stabilize edici maddeler, kayganlastiricilar Vb. geleneksel katki maddelerini içerebilir. Kaplamanin kirilganligini azaltmak için normal olarak bir plastiklestirici mevcut olup, genellikle polimerin kuru agirligina göre yaklasik agirlikça %10 ila agirlikça %50 arasinda bulunur. Tipik plastiklestiricilerin örnekleri arasinda polietilen glikol, propilen glikol, triasetin, dimetil ftalat, dietil ftalat, dibütil ftalat, dibütil sitrat, hintyagi ve asetillenmis monogliseritler bulunur.

Dispersiyondaki parçaciklari stabilize etmek için tercihen bir dengeleyici ajan kullanilir. Tipik dengeleyici ajanlar iyonik olmayan emülgatörler, Örnegin sorbitan esterler, polisorbatlar ve polivinilpirolidondur. Yapismayi önleyiciler, film olusumu ve kurutma sirasinda yapisma etkilerini azaltmak için tavsiye edilir ve genellikle kaplama çözeltisinde polimer agirliginin yaklasik olarak agirlikça %25'i ila agirlikça %lOO'ünü temsil eder. Etkili bir yapismayi önleyici talktir. Diger yapismayi önleyiciler, örnegin magnezyum stearat ve gliserol monostearat da kullanilabilir. Titanyum dioksit gibi pigmentler de kullanilabilir. Az miktarda köpüklenmeyi önleyici ajan, örnegin bir silikon da (örn-, simetikon) kaplama bilesimine eklenebilir.

Aralikli Salim Formülasyon burada açiklanan bilesiklerden bir ya da daha fazlasinin aralikli (pulsatil) dagitimini saglayabilir. sayida ilaç dozunun zaman aralikli olarak salinmasidir. Genel olarak, dozaj formunun yutulmasinin ardindan, baslangiç dozunun salimi büyük ölçüde hemen gerçeklesir, yani, ilk ilaç salim "atimi", yutmadan sonra yaklasik bir saat içinde gerçeklesir. Bu ilk atimi, dozaj formundan çok az veya hiç ilacin salindigi bir ilk zaman araligi (gecikme süresi) takip eder, ardindan ikinci bir doz daha sonra serbest birakilir.

Benzer sekilde, ikinci ve üçüncü ilaç salim atimlari arasinda ikinci bir neredeyse salimsiz aralik tasarlanabilir. Neredeyse salimsiz zaman araliginin süresi, dozaj form tasarimina, Örnegin günde iki kerelikr bir dozlama, profiline, günde üç kerelik bir dozlama profiline, Vb. bagli olarak degisecektir.

Günde iki kerelik dozaj profili saglayan dozaj formlari için, neredeyse salimsiz zaman araligi, birinci ve ikinci doz arasinda yaklasik 3 saat ila 14 saat arasinda bir süreye sahiptir. Günde üç kerelik profil saglayan dozaj formlari için, neredeyse salimsiz zaman araligi, üç dozun her biri arasinda yaklasik 2 saat ila 8 saat arasinda bir süreye sahiptir.

Bir uygulamada, pulsatil salim profili, kapsül içindeki her bir dozaj ünitesinin farkli bir ilaç salim profili sagladigi, en az iki ilaç içeren "dozaj birimi" barindiran kapali ve tercihen yalitimli kapsüller olan dozaj formlari ile elde edilir. Gecikmeli salimli dozaj birimlerinin kontrolü, dozaj birimi üzerindeki kontrollü salimli bir polimer kaplamasi ile veya aktif maddenin kontrollü salimli polimer matrisine katilmasiyla gerçeklestirilir. Her bir dozaj birimi, kapsül içindeki her bir tabletin farkli bir ilaç salim profili sagladigi, sikistirilmis veya kaliplanmis bir tablet içerebilir. Dozlama formlari için günde iki kez dozlama profilini taklit. eden dozaj formlari için, ilk› tablet dozaj formunun alinmasini takiben neredeyse hemen ilaci salmakta, ikinci bir tablet ise dozaj formunun alinmasini takiben yaklasik 3 saat ila 14 saatten daha az bir sürede ilaci salmaktadir. Günde üç kerelik dozlama profilini taklit eden dozaj formlari için, ilk tablet, dozaj formunun yutulmasini takiben neredeyse hemen bir ilaç salmakta, ikinci bir tablet, dozaj formunun alinmasini takiben yaklasik 3 saat ila 10 saatten az bir süre sonra ilaci salmakta ve üçüncü tablet, dozaj formunun alinmasini takiben en az 5 saat ila yaklasik 18 saat sonra ilaci salmaktadir. Dozaj formunun üçten fazla tablet içermesi mümkündür. Dozaj formu genellikle üçüncü bir tabletten daha fazlasini içermeyecek olmakla birlikte, üçten fazla tablet barindiran dozaj formlari kullanilabilir.

Alternatif olarak, kapsül içindeki her bir dozaj birimi, çok sayida ilaç içeren tanecik, granül veya parçacik içerebilir.

Teknikte bilindigi gibi, ilaç içeren "tanecikler", ilaç ve bir veya daha fazla eksipiyan veya polimer ile yapilan tanecikleri ifade eder. Ilaç içeren tanecikler, ilacin, ilaçla kaplanmis inert seker tanecikleri veya her iki ilaci ve bir veya daha fazla eksipiyani içeren bir "çekirdek" yaratarak, inert bir destege uygulanmasiyla üretilebilir. Bilindigi gibi, ilaç içeren "granüller" ve "parçaciklar", bir veya daha fazla ek eksipiyan veya polimeri içerebilen veya içermeyen ilaç partikülleri içerir. Ilaç içeren taneciklerin aksine, granüller ve parçaciklar inert bir destek içermez. Granüller genellikle ilaç parçaciklarini içerir ve daha fazla islem gerektirir. Genel olarak, parçaciklar granüllerden daha küçüktür ve daha fazla islenmezler. Tanecikler, granüller ve partiküller hemen salim saglamak için formüle edilebilmesine ragmen, gecikmeli salimi saglamak için genellikle tanecikler ve granüller kullanilir. 2. Sivi Fbrmülasyonlar Sivi formülasyonlar, bir sivi farmasötik tasiyici içinde çözülmüs veya süspansiyon haline getirilmis bir veya daha Uygun sivi tasiyicilar arasinda, sinirlandirma olmaksizin, damitilmis su, deiyonize su, saf ya da ultrasaf su, salin ve tuzlar ve/veya tamponlar içeren diger fizyolojik olarak kabul edilebilir sulu çözeltiler, örnegin fosfat tamponlu salin (PBS), Ringer çözeltisi ve izotonik sodyum klorür ya da bir hayvan veya insana uygulanmasi kabul edilebilir olan herhangi bir baska sulu çözelti bulunur.

Tercihen, sivi formülasyonlar fizyolojik akiskanlara göre izotoniktir ve yaklasik olarak ayni pH degerinde olup, örnegin yaklasik pH 4.0 ila yaklasik pH 7.4 arasinda, daha çok tercih edilen biçimde yaklasik pH 6.0 ila pH 7.0 arasindadir. Sivi farmasötik. tasiyici, bir fosfat tampounu gibi bir veya daha fazla fizyolojik uyumlu tampon içerebilir. Teknikte uzman bir kisi, pulmoner uygulama amaciyla sulu bir çözelti için uygun bir salin içerigini ve pH degerini kolayca belirleyebilir.

Sivi formülasyonlar, selüloz türevleri, sodyum aljinat, polivinilpirrolidon, kitre veya lesitin gibi bir veya daha fazla süspanse edici madde içerebilir. Sivi formülasyonlar ayrica etil veya n-propil p-hidroksibenzoat gibi bir veya daha fazla koruyucu içerebilir.

Bazi durumlarda sivi formülasyon, etanol, aseton, etil asetat, tetrahidofuran, etil eter ve propanol gibi düsük toksisiteli organik (yani susuz) sinif 3 artik çözücüler olan bir veya daha fazla çözücü içerebilir. Bu çözücüler, formülasyonu kolayca aerosol haline getirme yeteneklerine göre seçilebilir. Sivi formülasyonda bulunan bu gibi herhangi bir çözücü, sivi formülasyonda bulunan bir veya daha fazla aktif madde ile zararli sekilde reaksiyona girmemelidir. Çözücü, çözelti veya süspansiyonun bir aerosolünün olusmasini saglamak için yeterince uçucu olmalidir. Freon, alkol, glikol, poliglikol veya yag asidi gibi ilave çözücüler veya aerosol haline getirme maddeleri, uçuculugu arttirmak ve/veya çözeltinin veya süspansiyonun aerosol haline getirme davranisini degistirmek için arzu edildigi gibi sivi formülasyona dahil edilebilir. Sivi formülasyonlar ayrica az miktarda polimer, yüzey aktif madde veya teknikte iyi bilinen diger yardimci maddeler içerebilir. Bu baglamda, "az miktarlar", akcigerlerdeki bir veya daha fazla aktif maddenin alinmasini ters yönde etkileyebilecek hiçbir yardimci madde mevcut olmadigi anlamina gelir.

V. Tedavide kullanim için formülasyonlar Burada tarif edilen zayiflatici ajanlardan bir ya da daha fazlasini içeren farmasötik formülasyonlar bir pre-obez, obez veya hastalikli düzeyde obez hastada kilo kaybini baslatmak, bir pre-obez, obez veya hastalikli düzeyde obez hastada vücuttaki yag düzeyini azaltmak, bir pre-obez, obez veya hastalikli düzeyde obez hastada. besin alimini azaltmak, bir pre-obez, obez veya hastalikli düzeyde obez hastada glukoz homeostazisini gelistirmek, bir normal, pre-obez, obez veya hastalikli düzeyde obez hastada kilo alimini önlemek ve/veya vücut kütle indeksindeki bir artisi önlemek veya bunlarin kombinasyonlarini saglamak için uygulanabilir.

Belirli uygulamalarda, farmasötik formülasyonlar obezite (örn. bir* pro-obez, obez ya da hastalikli bir sekilde obez hasta) bir obezite ile iliskili hastalik ya da bozukluk, diyabet, insülin direnci sendromu, lipodistrofi, alkolik olmayan steatohepatit, bir kardiyovasküler hastalik, polikistik over sendromu veya bir metabolik sendromu olan bir hastaya uygulanir.

Farmasötik formülasyonlarin kan sekerini normalize etmek üzere uygulandigi durumlarda, formülasyonlar tercihen kan sekeri düzeylerini yaklasik 180 mg/dL'nin altina düsürmede etkili bir miktarda uygulanir. Formülasyonlar, gerektigi takdirde, glükoz homeostazisini gelistirmek için diger anti- diyabetik terapilerle birlikte uygulanabilir. Farmasötik formülasyonlar ayrica, obeziteye neden olan veya bir hastanin Bardet-Biedl sendromu veya melanokortin reseptörü 4 (MC4R) proteinini kodlayan gendeki bir mutasyon gibi obez olmaya egilimli olan bir hastalik veya rahatsizligi olan hastalara da verilebilir (örn. bir MC4R mutasyonu).

A Dozajlar Bir hastaya verilen kesin dozaj, hastanin fiziksel özellikleri (örnegin, agirlik), tedavi edilecek hastaligin veya bozuklugun siddet derecesi ve diger karmasik hastaliklarin veya rahatsizliklarin varligi veya yoklugu dahil olmak 'üzere birçok faktöre bagli olacaktir` ve reçete yazan hekim tarafindan kolayca belirlenebilir.

Zayiflatici ajan kg vücut agirligi basina günde 0.005 mg ile mg arasinda, örnegin kg Vücut agirligi basina günde 0.05 mg ile 1.0 mg arasinda; daha çok tercih edilen biçimde kg Vücut agirligi basina günde yaklasik 0.05 mg ile yaklasik 10 mg arasinda, örnegin kg Vücut agirligi basina günde 0.05 mg ile 1.0 mg arasinda veya kg Vücut agirligi basina günde 0.5 mg ile 0.1 mg arasinda bir oral dozajda uygulanir. Zayiflatici ajan kg vücut agirligi basina günde yaklasik 0.1 mg ile yaklasik 10 mg arasinda, örnegin kg vücut agirligi basina günde yaklasik 1.0 mg ile 5.0 mg arasinda bir oral dozajda uygulanabilir.

Bazi durumlarda, zayiflatici ajanlardan bir ya da daha fazlasini içeren farmasötik bir formülasyon pre-obez, obez veya hastalikli düzeyde obez bir hastaya kilo kaybini uyarmak için terapötik olarak etkili bir miktarda uygulanir. Belirli uygulamalarda, zayiflatici ajanlardan bir ya da daha fazlasini içeren farmasötik. bir formülasyon pre-obez, obez veya hastalikli düzeyde obez bir hastaya, Vücut kütlesini en az edilen biçimde en az %20 oraninda azalmak için terapötik olarak etkili bir miktarda uygulanir.

Bazi durumlarda, zayiflatici ajanlardan bir ya da daha fazlasini içeren farmasötik bir formülasyon pre-obez, obez veya hastalikli düzeyde obez bir hastaya vücuttaki yagi azaltmak için terapötik olarak etkili bir miktarda uygulanir.

Belirli uygulamalarda, zayiflatici ajanlardan bir ya da daha fazlasini içeren farmasötik bir formülasyon pre-obez, obez veya hastalikli düzeyde obez bir hastaya, Vücuttaki yagi en az edilen biçimde en az %20 oraninda azalmak için terapötik olarak etkili bir miktarda uygulanir.

Bazi durumlarda, zayiflatici ajanlardan bir ya da daha fazlasini içeren farmasötik bir formülasyon pre-obez, obez veya hastalikli düzeyde obez bir hastaya, besin alimi, istah veya bunlarin kombinasyonlarini azaltmak için terapötik olarak etkili bir miktarda uygulanir. Belirli uygulamalarda, zayiflatici ajanlardan bir ya da daha fazlasini içeren farmasötik bir formülasyon pre-obez, obez veya hastalikli düzeyde obez bir hastaya, ortalama günlük besin alimini olarak etkili bir miktarda uygulanir.

Bazi durumlarda, zayiflatici ajanlardan bir ya da daha fazlasini içeren farmasötik. bir formülasyon pre-obez, obez veya hastalikli düzeyde obez bir hastaya glükoz homeostazisini gelistirmek için terapötik olarak etkili bir miktarda uygulanir. Belirli uygulamalarda, zayiflatici ajanlardan bir ya da daha fazlasini içeren farmasötik. bir formülasyon pre- obez, obez veya hastalikli düzeyde obez bir hastaya, ortalama miktarda uygulanir. Farmasötik. formülasyonlarin kan sekerini normalize etmek. üzere uygulandigi durumlarda, formülasyonlar tercihen kan sekeri düzeylerini yaklasik 180 mg/dL'nin altina, daha çok tercih edilen biçimde yaklasik 160 mg/dL'nin altina, daha çok tercih edilen biçimde yaklasik 140 mg/dL'nin altina düsürmede etkili bir miktarda uygulanir. a Terapötik Uygulama Farmasötik formülasyonlar, örnegin, tek bir dozajda, sürekli bir dozajda, günde bir ya da daha fazla kez veya daha az siklikla, örnegin haftada bir kez uygulanabilir. Farmasötik formülasyonlar günde bir kez veya günde bir kereden fazla, örnegin günde iki kez, günde üç kez, günde dört kez veya daha fazla kez uygulanabilir. Belirli uygulamalarda, formülasyonlar oral olarak günde bir kez veya daha az uygulanir.

Farmasötik formülasyonlar istenen terapötik yarari saglamak üzere etkili bir miktarda ve etkili bir süre boyunca uygulanir. Belirli uygulamalarda, farmasötik formülasyon günde bir kez, haftada iki kez, haftada bir kez, ayda iki kez veya ayda bir kez olacak sekilde, en az bir hafta, iki hafta, üç hafta, dört hafta, bir ay, iki ay, üç ay, dört ay, bes ay, alti ay, yedi ay, sekiz ay, dokuz ay, on ay, on bir ay, bir yil veya daha uzun bir süre boyunca uygulanir.

Farmasötik formülasyonlar ayrica profilaktik olarak, örnegin diyabet veya obezite gibi bir hastalik ya da bozukluk riskinde olan hastalar veya deneklere uygulanabilir. Dolayisiyla, metotlar ayrica, formülasyonlarin uygulanmasindan önce diyabet veya obezite riski olan hastalarin tanimlanmasini da içerebilir.

Formülasyonlarin gereken tam miktari hastadan hastaya, hastanin türüne, yasina, cinsiyetine, kilosuna ve genel durumuna, hastaligin kapsamina, uygulama yoluna, diger ilaçlarin. rejime katilip katilmadigina. ve benzerlerine bagli olarak degisir. Bu nedenle, her formülasyon için mutlak dozajlarin belirlenmesi mümkün degildir. Bununla birlikte, yalnizca rutin deneyler kullanilarak teknikte siradan uzmanliga sahip bir kisi tarafindan uygun bir dozaj belirlenebilir. Örnegin, bilesimlerin uygulanmasi için etkili dozajlar ve planlar deneysel olarak belirlenebilir ve bu tür belirlemeler teknikte uzman kisiler tarafindan yapilabilir.

Dozaj degisiklik gösterebilir ve günde bir ya da daha fazla doz uygulamasi bir veya birkaç gün boyunca yapilabilir. Bu konuda belirli farmasötik ürün siniflarinin uygun dozajlariyla ilgili kilavuzluk literatürde bulunabilir. 1. Aktif Ajanlarla Birlikte Uygulama Diger uygulamalarda, burada açiklanan bilesikler bir ya da daha fazla ilave terapötik, profilaktik veya tanilayici ajanla birlikte uygulanabilir. Birlikte uygulama, burada kullanildigi sekliyle, ayni dozaj biçimi içinde veya farkli dozaj biçimleri içinde uygulamayi içerir. Burada tarif edilen bilesikler ve bir ya da daha fazla ilave terapötik, profilaktik veya tanilayici ajanin farkli dozaj biçimlerinde uygulandigi uygulamalarda, dozaj biçimleri eszamanli olarak (örn., ayni zamanda veya büyük ölçüde ayni zamanda) veya art arda uygulanabilir. "Büyük ölçüde ayni zamanda" ifadesi, burada kullanildigi sekliyle genel olarak, on dakika içinde, tercihen bes dakika içinde, daha çok tercih edilen biçimde iki dakika içinde, en çok tercih edilen biçimde bir dakika içinde anlamina gelir. Art arda uygulanan dozaj biçimleri birbirlerine göre birkaç saat içinde, örnegin, on saat, dokuz saat, sekiz saat, yedi saat, alti saat, bes saat, dört saat, üç saat, iki saat, bir saat, 30 dakika, 20 dakika ya da 15 dakika içinde uygulanabilir.

Belirli uygulamalarda, burada tarif edilen zayiflatici ajan leptin veya bir leptin analoguyla birlikte uygulanir. Bu durumlarda, leptin veya bir leptin analogu, tedavi süresinin bir kismi için veya tedavi periyodunun tamami boyunca kilo verme ajanlari ile birlikte uygulanabilir. Tercih edilen uygulamalarda, zayiflatici ajanlar, Amylin Pharmaceuticals'dan (San Diego, CA) temin edilebilen r-metHuLeptin (A-lOO, METRELEPTIN®) ile birlikte uygulanir.

Bazi uygulamalarda hastalar diyabet hastasidir. Bu durumlarda, burada açiklanan zayiflatici ajanlar, diyabet için bir veya daha fazla tedavi ile birlikte uygulanabilir. Örnekler Örnek 1: Obez farelere celastrol uygulamasi Celastrol piyasadan elde edilmistir. C57Bl/6J fareleri, 16 haftalik yüksek yagli diyet (HFD; Research Diets, D12451,45 kcal %yag) almistir. Obezite ve leptin direncinin olusturulmasindan sonra farelere ilk olarak farkli dozlarda (günde bir kez 25 ul DMSO içinde 10, 50 ve celastrol ve intraperitonal (i.p.) enjeksiyon yoluyla vehikül (DMSO, 25 ul) verilmistir. Hayvanlar aksi belirtilmedikçe gida ve suya serbest erisime sahip olmustur.

Tüm deneylerde, ilaç uygulamasindan dört gün önce, hayvanlar i.p. enjeksiyonunun yarattigi stres etkisini azaltmak için salin (25 ul) verildigi bir alistirma döneminden geçirilmistir. Dört gün süren alistirmayi takiben, celastrol, pl DMSO içinde üç hafta boyunca artan dozlarda (10, 50 ve 100 ug/kg) i.p. enjeksiyon yoluyla günlük olarak HFD ile beslenen obez farelere tatbik. edilmistir. Bir kontrol grubu i.p. enjeksiyonu ile ayni hacimde DMSO almistir.

Sekil lA'da gösterildigi gibi, celastrolün i.p. uygulamasi Vücut agirligini (Sekil 1A, p<0.001, 100 ug/kg; Sekil lB beslenen obez farelerin gida alimini doza bagli bir sekilde önemli ölçüde azaltmistir (Sekil lC, p<0.0l, ilaç uygulamasinin ilk haftasi içinde üç günün ortalamasi).

Denemenin 14. gününde farelerin 6 saatlik açlik kan sekeri ölçülmüstür. Sekil lD'de gösterildigi gibi, celastrol, obez farelerin kan glukozunu düsürmüstür. Örnek 2: Celastrolün yagsiz farelere uygulanmasi Celastrol, yukarida tarif edilen ayni protokol kullanilarak i.p. enjeksiyonlari ile üç hafta boyunca 50, 100 veya 500 ug/kg standart diyet alan yagsiz farelere verilmistir. Sekil 2A ve Sekil 2B'de gösterildigi gibi, celastrol gida aliminda önemli fakat küçük bir azalma saglamis olup; bununla birlikte, obez farelerde Vücut agirligini azaltmak için etkili olandan bes kat daha yüksek dozlarda yagsiz fareler uygulandiginda bile yagsiz farelerde vücut agirligi kaybina neden olmamistir.

Bu bulgular, celastrolün anorektik etkisinin obez hayvanlarla sinirli oldugunu düsündürmektedir. Yagsiz farelerde, test edilen en yüksek doz (500 ug kg), 2 haftalik ilaç enjeksiyonlarinin ardindan kan sekerinde önemli bir düsüse neden olmustur (Sekil 2C, p<0.05).

Birlikte ele alindiginda, bu bulgular, celastrolün, obez farelerde Vücut agirligi kaybini indüklemek için etkili bir miktarda (örnegin, bu çalismalarda lOO ug/kg) uygulanabildigini, ancak zayif farelerde uygulanamayacagini göstermektedir. Örnek 3: Celastrol aktivitesinin leptin bagimliliginin incelenmesi.

Celastrol ( leptin eksikligi (ob/ob) ve leptin reseptör eksikligi (db/db) olan fare obezite modellerine uygulanmistir. Bu fare modellerinin hiçbirinde, celastrol uygulamasi üzerine istahta belirgin bir azalma görülmemistir (ob/ob fareleri, Sekil 3; db/db fareleri, Sekil 4). Hem ob/ob hem de db/db farelerinde, vücut agirligi, kontrol (vehikül ile Hmamele edilen) grubuna benzer sekilde artmaya devam etmistir (ob/ob, Sekil 3A; db/db Sekil 4A). Ilaveten, celastrol, 2 haftalik ilaç enjeksiyonlarindan sonra ob/ob (Sekil SC) veya db/db (Sekil 4C) farelerinde 6 saatlik açlik kan glikozunu düsürememistir.

Agiz yoluyla uygulandiginda, celastrolün anti-obezite etkileri gösterme kabiliyeti de incelenmistir. Celastrol, HFD ile beslenen obez farelerde vücut agirliginda (Sekil 5A, p <0.00l) ve gida aliminda (Sekil 5B, p <0.00l), kaptisol süspansiyonunda 10 mg/kg'lik bir dozda oral olarak uygulandiginda saglam ve belirgin bir düsüse neden olmustur.

Ayrica oral celastrol, HFD ile beslenen obez farelerin (Sekil 5C, p <0.00l, hipoglisemik seviyelere indirgenmis glikoz) 6 saatlik açlik kan glukoz seviyelerini düsürmüstür. Bununla birlikte, yagsiz fareler oral olarak celastrol ile tedavi edildiginde, gida alimi (Sekil 5D) veya vücut agirliginda (Sekil SE) önemli bir degisiklik gözlenmemistir. Bu dozda, oral celastrol uygulamasi, üç haftalik tedaviden sonra zayif farelerin kan glukoz seviyelerinde küçük fakat anlamli bir düsüse neden olmustur (Sekil 5F). Ayrica, ob/ob ve db/db fareleri oral celastrol tedavisine tamamen yanit vermemistir (Sekil 6A-D).

Celastrolün, HFD ile beslenen obez farelerde vücut agirligini ve gida alimini azalttigi ancak ob/ob veya db/db farelerinde azaltmadigi gerçegi, celastrolün anorektik etkisinin, leptin sinyallemesine aracilik ettigini düsündürmektedir. HFD ile beslenen obez fareler yüksek leptin seviyelerine sahip olsalar da, leptin direnci gelistirirler ve eksojen leptin uygulamasina cevap vermezler. Bu nedenle, celastrolün, HFD ile beslenen obez farelerin beynindeki leptin duyarliligini arttirarak anti-obezite etkileri gösterdigi varsayilmistir. Bu hipotezi test etmek için, leptin, celastrol veya vehikül ile tedavi edilen HFD ile beslenen obez hayvanlara uygulanmistir.

Celastrol uygulamasiyla meydana gelen kilo kaybinin veya azalan gida aliminin olasi bir leptin duyarlilastirici etkisini önlemek için, asagida tarif edildigi gibi akut celastrol tedavisi üzerine leptin enjeksiyonlari gerçeklestirilmistir.

Yagsiz ve HFD ile beslenen obez fareler dört gruba ayrilmistir: 1) DMSO + salin, 2) DMSO + leptin, 3) selasrol + salin ve 4) celastrol + leptin (grup basina n = 3). Farelere, karanlik döngüden (gün sifir) bir saat önce 100 ug/kg celastrol veya vehikül (DMSO) enjekte edilmistir (i.p.). 24 saat sonra, farelere ikinci bir kez, celastrol veya DMSO (1. gün) enjekte edilmis ve tüm hayvanlar daha sonra 24 saat aç birakilmistir. Ikinci günde, 21 saat aç birakilan fareler, son DMSO veya celastrol enjeksiyonunu almistir. Karanlik döngüsünden 30 dakika önce, 23.5 saatlik açlikta, farelere tek bir i.p. leptin enjeksiyonu (10 mg/kg, salin içinde çözülmüs) veya salin verilmistir. 30 dakika sonra (24 saatlik açligin sonu) farelere önceki diyetleri (ya düzenli yemek ya da HFD) serbest. yemleme ile verilmistir. 1, 3, 6, 15 've 24 saatlik besin alimi ve 24 saatlik vücut agirligi degisiklikleri kaydedilmistir (Sekil 7A). 6 saatlik zaman noktasinda, leptin, DMSO ile tedavi edilen zayif ve HFD ile beslenen obez gruplarda gida alimini yaklasik %40 azaltmistir. Celastrol ile muamele edilmis yagsiz fareler, leptin enjeksiyonu üzerine gida aliminda %60'lik bir düsüs gösterirken, HFD ile beslenen fareler, leptin enjeksiyonu sonrasinda gida aliminda %80'lik bir azalma göstermistir (Sekil 7B). 24 saatlik serbest yemleme ile beslenme dönemi boyunca, tüm yagsiz fareler ve vehikül ile tedavi edilmis HFD ile beslenen obez fareler agirlik kazanirken, celastrol ile tedavi edilen HFD ile beslenen obez fareler kilo vermeye devam etmistir. Bu kilo kaybi leptin uygulamasi ile daha da artmistir (yaklasik iki kat) (Sekil 7D). Celastrol ile tedavi edilen farelerin besin alimi yüzde degerleri ile hesaplandigi zaman bu açikça görülmektedir (Sekil 7B). Ek olarak, HFD ile beslenen obez fareler, celastrol almadikça leptinin agirlik azaltma etkisine karsi dirençli olmustur (Sekil 7D). Not olarak, tek basina celastrol, beklendigi gibi, muhtemelen zaten HFD ile beslenen obez farelerin yükselmis leptin düzeylerine bagli olarak, ekzojen leptin uygulamasinin yoklugunda HFD ile beslenen obez farelerin kilo alimini azaltmistir.

Celastrol tedavisi sirasinda vücut kompozisyonundaki degisimi analiz etmek. için (i.p. lOO ug/kg), çift emisyonlu X-isini Absorpsiyometri (DEXA) kullanilarak yagsiz kütle ve yag kütlesi ölçülmüstür. Iki haftalik kronik celastrol uygulamasindan sonra yagsiz kütle degismemistir (Sekil 8A).

Bu, yagsiz kütlenin korunmasindan dolayi, anoreksiye neden olan zehirli bir etkiye sahip olmayan celastrol ile tutarlidir. Bununla birlikte, celastrol ile tedavi edilen HFD ile beslenen hayvanlarda yag kütlesi ve yag yüzdesi anlamli olarak azalmistir (Sekil 8B-8C). Azalan adipoz kitlesi ile uyumlu olarak, kronik septisrol uygulamasi sirasinda leptin düzeylerinin kademeli olarak azaldigi gösterilmistir (Sekil 8D). Ek olarak, HFD ile beslenen obez farelerin gida alimi, endojen leptin seviyeleri azaldikça çalismanin sonuna dogru yavas yavas yükselmistir. Bu bulgu, celastrolün anoreksik etkisinin leptin sinyaline bagli oldugu hipotezini desteklemektedir.

Lokomotor aktivitesi, celastrol ile tedavi edilen farelerde de normal olmustur. Bu, celastrol ile anoreksiye ve kilo kaybina yol açan toksik etkiye sahip degildir, çünkü bu durum azalan lokomotor aktivitesi ile iliskili olacaktir. Örnek 4: Celastrol uygulamasinin glikoz homeostazisine etkisi.

Yukarida tarif edildigi gibi, celastrolün i.p. ve oral olarak uygulanmasi, HFD ile beslenen obez farelerde kan glukoz seviyelerinde güçlü bir düsüse neden olur. Celastrolün glukoz homeostazisi üzerindeki etkisini incelemek için, kronik i.p. celastrol uygulamasi (lOO pg/kg) ile Glukoz Tolerans Testleri (GTT) ve Insülin Tolerans Testleri (ITT) yapilmistir. GTT için, fareler bir hafta boyunca celastrol tedavisini takiben gece boyunca aç birakilmis ve sabah bir D-glukoz (0.75 g/kg) i.p. enjeksiyonu yapilmistir. ITT için, 16 günlük celastrol tedavisinin ardindan, fareler 6 saat boyunca aç birakilmis (sabah 8'den ögleden sonra Z'ye kadar) ve rekombinant insan insülin (1 IU/kg, Eli Lilly'den) intraperitoneal olarak enjekte edilmistir.

Her iki islemde de, kan glukozu, enjeksiyondan 0, 15, 30, 60, 90 ve 120 dakika sonra kuyruk ven kanindan ölçülmüstür.

Sekil 9A'da gösterildigi gibi, bir haftalik celastrol tedavisinden sonra, glikoz homeostazisi, GTT'nin Egri Altindaki Alandaki (AUC) farkla kanitlandigi gibi, araçla tedavi edilen farelere kiyasla, celastrol ile tedavi edilen farelerde önemli ölçüde iyilesmistir (Sekil 9B, p<0.00l). 16. günde ITT gerçeklestirilmistir. HFD ile beslenen obez fareler ayrica gelismis insülin duyarliligi sergilemistir (Sekil 9G- 9D, p <0.01). Iyilestirilmis glukoz homeostazisi ile tutarli olarak, celastrolle tedavi edilen fareler, glukoneojenik enzimler olan Fosfoenolpiruvat karboksinaz (PEPCK), Glukoz 6- fosfataz (G6Paz) ve Peroksizom proliferatörü ile aktive edilen reseptör gamma koaktivatörü 1-alfanin (PGCla) hepatik mRNA ifadesinde azalma göstermistir (Sekil 10). Örnek 5: Celastrol uygulamasinin karaciger, böbrek ve tiroid fonksiyonlarina etkisi.

Celastrol uygulamasinin karaciger fonksiyonu üzerindeki etkisini arastirmak için, üç haftalik celastrol tedavisinden aspartat transaminaz (AST) serum seviyeleri ölçülmüstür. ALT ve AST, enzim baglantili bir immünosorbent deney (ELISA) kiti (Bio Scientific'den) kullanilarak ölçülmüstür.

Sekil 11'de gösterildigi gibi, celastrol uygulamasi, HFD ile beslenen obez farelerin ALT ve AST seviyelerini azaltarak, karaciger fonksiyonunu gelistirdigini gösterir. Bu bulgu histolojik olarak da dogrulanmistir. Bu farelerden hasat edilen karaciger dokusu, formalin içinde gece boyunca sabitlenmis, kesitlere ayrilmis ve Hematoksilin ve Özin (H & E) ile boyanmistir. HFD ile beslenen obez hayvanlarda hepatosteatoz, celastrol tedavisi ile azaltilmistir. Celastrol ile tedavi edilen farelerden elde edilen karaciger kesitleri, yagsiz farelerin karacigerlerine hemen hemen ayni görünür.

Benzer sekilde, bu farelerin böbrek morfolojisinde saptanabilir bir degisiklik görülmemistir. Bu sonuçlar, celastrol tedavisinin hepatosteatozu da azalttigini göstermektedir.

Tiroid hormonlarinin bazal metabolik hizi arttirdigi ve dolayisiyla enerji tüketimini artirdigi bilinmektedir. Tiroid hormonlarinin yükselmis seviyelerinin, çesitli istenmeyen yan etkilerle vücut agirligini azalttigi bilinmektedir. Tiroit hormonlarinin celastrolün anorektik etkisinde rol oynayabilecegini incelemek için, 3 haftalik celastrol tedavisinden (100 ug/kg, i.p.) sonra, HFD ile beslenen obez farelerin. plazma. T3 ve T4 seviyeleri ölçülmüstür. T3 ve T4 dahil tiroid hormonlarinin, HFD ile beslenen obez hayvanlarda yükseldigi bilinmektedir.

Sekil 12'de gösterildigi gibi, celastrol, HFD ile beslenen obez farelerde T3 ve T4 seviyelerini azaltir. Bu düsüs muhtemelen kilo kaybinin bir sonucudur ve celastrolün agirlik azaltma etkisine artan tiroid hormon aktivitesinin aracilik etmedigini düsündürmektedir. Örnek 6: Celastrol türevlerinin hazirlanmasi ve aktivitesi Celastrol bir Michael akseptörüdür ve proteinlerin sistein kalintilari gibi nükleofiller ile Michael eklenme ürünleri olusturabilir. Celastrolün dört türevi (mCSl-mCS4), Celastrolün (Formül I'in C6-karbon atomu) reaktif pozisyonunda Michael eklenme ürünlerinin olusumunu bloke eden bir ikame edici ihtiva eder. Bu türevlerin artik Michael akseptörleri olarak islev görmesi beklenemez. mCSl'in hazirlanmasi mg (0.0378 mmol) celastrol, oda sicakliginda l mL etanol içerisinde çözündürülmüstür. 50 ul 2-merkaptoetanol eklenmis ve reaksiyon 30 dakika oda sicakliginda karistirilmistir.

Reaksiyon süresi boyunca, reaksiyon karisiminin rengi parlak turuncudan renksiz hale dönüsmüstür. Baslangiç malzemesinin tam tüketimi LC/MS ile dogrulanmistir. Çözücü daha sonra düsük basinç altinda çikarilmis ve sonuç olarak soluk turuncu film olarak nicel verimde mCSlml elde edilmistir. Daha fazla saflastirma silika jel üzerinde gerçeklestirilebilir.

MCSZ'nin hazirlanmasi mg (0.0189 mmol) celastrol, oda sicakliginda 1 mL etanol içerisinde çözündürülmüstür. 3 mg sistamin eklenmis ve reaksiyon karistirilmistir. 10 dakika içinde parlak turuncudan neredeyse renksiz bir hale degisimi gözlemlenmistir. Gece boyunca oda sicakliginda karistirildiktan sonra, mCSZ çökeltilmis, süzülerek izole edilmis ve düsük basinçta kurutulmustur. mC53 hazirlanmasi mg (0.0189 mmol) celastrol, oda sicakliginda 1 mL etanol içerisinde çözündürülmüstür. 5 ml 3-merkaptopropiyonik asit eklenmis ve reaksiyon karistirilmistir. 1 saat oda sicakliginda karistirilma sirasinda parlak turuncudan neredeyse renksiz bir hale degisimi gözlenmistir. Çözücü düsük basinç altinda uzaklastirilmis ve mCS3'ü soluk turuncu film halinde nicel verimle vermistir. mCS4'ün hazirlanmasi mg (0.0189 mmol) celastrol, oda sicakliginda l mL etanol içerisinde çözündürülmüstür. 5 mg D-sistein eklenmis ve reaksiyon oda sicakliginda karistirilmistir. 1 saat oda sicakliginda karistirilma sirasinda parlak turuncudan neredeyse renksiz bir hale degisimi gözlenmistir. Çözücü düsük basinç altinda çikarilarak mCS4'ün nicel verimle kirli beyaz bir kati halinde elde edilmesi saglanmistir. mCSl-mCS4 aktivitesi Dört celastrol türevi (mCSl-mCS4), HFD ile beslenen obez farelere (25 gün boyunca 100 ug/kg/gün, i.p.) uygulanmistir.

Sekil 13'de gösterilen sekilde, mCSl-mCS4, celastrol için benzer etkinlik ile vücut agirligini azaltmistir. Örnek 7: Celastrol ve Leptinin Birlikte Uygulanmasi Obez farelerin vücut agirligini azaltmak için celastrol ve leptin birlikte uygulanmistir. C57Bl/6J fareleri, 16 hafta boyunca yüksek yagli bir diyetle beslenmistir. Daha sonra celastrol 40 günlük. bir süre boyunca (100 ug/kg/gün, i.p.) uygulanmistir.

Sekil 14'te gösterildigi gibi, celastrolle tedavi edilen farelerin vücut agirligi yavas yavas azalmis ve yaklasik olarak 17 günde bir düzlüge ulasmistir. Bu noktada, hem kontrol hem de celastrol gruplarina leptin (1 mg/kg/gün, i.p.) uygulanmistir. Sekil l4'te gösterildigi gibi, celastrol ile tedavi edilen fareler, leptine, vücut agirligindaki bir azalma ile cevap vermis; bu, artan dozlarda leptin ile güçlendirilmistir. Örnek 8: Obeziteyi önlemek için celastrol uygulamasi Dört grup C57BL/6 fareleri 3 haftalikken sütten kesilmistir.

Gruplardan ikisi düzenli yemleme diyetine tabi tutulmus ve iki grup yüksek yagli diyete alinmistir. Her diyetten bir grup günlük celastrol enjeksiyonlari (lOO ug/kg/gün, i.p.) almis ve her diyetten diger grup 6 aydan fazla bir süre boyunca kontrol olarak vehikül enjeksiyonlari (günde 25 ul DMSO, i.p.) almistir. Çalisma boyunca ölçülen vücut agirliklari ekli sekilde bildirilmistir. Sekil 15'te gösterildigi gibi, vehikül-HFD grubu obezite gelistirirken, diger gruplar bunu yapmamistir. Sekiller 16A ve l6B, karanlik ve isik döngülerinde kontrol ve celastrol için x (Sekil 16A) ve y (Sekil l6B) yönlü ayakta hareketi gösteren grafiklerdir.

Toksisite, Columbus Instruments Comprehensive Lab Animal Monitoring System kullanilarak degerlendirilmis ve hayvanlarda lokomotor aktivitesi ölçülmüstür. Sekillerde görüldügü gibi, hem karanlik hem de isik döngülerinde hayvanlarin x ve y dogrultularindaki ayakta hareket sayilari önemli ölçüde farkli degildir. Bu, ilaçla tedavi edilen farelerin letarjik olmadigini, dolayisiyla herhangi bir görünür hastalik ve toksisite belirtisi göstermedigini gösterir.

Claims

ISTEMLER

1. Bir pre-obez, obez veya hastalikli düzeyde obez hastada bir zayiflatici ajanin kg Vücut agirligi basina günde 0,05 ila 10 mg arasinda bir miktarda oral uygulamasi yoluyla kilo kaybini baslatmak veya vücuttaki yagi azaltmak veya bunlarin bir kombinasyonunu saglamak amaciyla kullanima yönelik bir farmasötik formülasyon olup, özelligi; formülasyonun Formül I ile tanimlanan bir bilesik olan bir zayiflatici ajan: Formül I veya bunun farmasötik olarak kabul edilebilir bir tuzunu içermesidir.

2. Istem l'e göre kullanim için bir formülasyon olup, özelligi; Formül I'in bilesiginin bireye kg Vücut agirligi basina günde 0,005 mg ila 1,0 mg arasinda bir dozajda oral olarak uygulanmasidir.

3.Istem 1 veya 2'ye göre kullanim için bir formülasyon olup, özelligi; Formül I'in bilesiginin bireye kg Vücut agirligi basina günde 0,05 mg ila 1,0 mg arasinda bir dozajda oral olarak uygulanmasidir.

4.Istemler 1 ila 3'ten herhangi birine göre kullanima yönelik bir formülasyon olup, özelligi; Formül I'in bilesiginin bireye kg Vücut agirligi basina günde 0,05 mg ila 0,1 mg arasinda bir dozajda oral olarak uygulanmasidir.

5.Istemler 1 ila 4'ten herhangi birine göre kullanima yönelik bir formülasyon olup, özelligi; formülasyonun ayrica leptin içermesidir.

6.Istemler 1 ila 4'ten herhangi birine göre kullanima yönelik bir formülasyon olup, özelligi; farmasötik formülasyonun vücut kütlesini en az %10, daha çok tercih edilen biçimde en az %15, en çok tercih edilen biçimde en az %20 oraninda azaltacak kadar etkili bir miktarda uygulanmasidir.

7.Istemler 1 ila 4'ten herhangi birine göre kullanima yönelik bir formülasyon olup, özelligi; farmasötik formülasyonun vücuttaki yagi en az %10, daha çok tercih edilen biçimde en az kadar etkili bir miktarda uygulanmasidir.

8.Istemler 1 ila 7'den herhangi birine göre kullanima yönelik bir formülasyon olup, özelligi; vücut kütle indeksi 40 kg/mz'den fazla olan bir hastanin tedavisinde kullanim için olmasidir.

9.Istemler 1 ila 8'den herhangi birine göre kullanima yönelik bir formülasyon olup, özelligi;hastalikli düzeyde obez olan bir hastanin tedavisinde kullanim için olmasidir.

10. Istemler 1 ila 4'ten herhangi birine göre kullanima yönelik bir formülasyon olup, özelligi;leptine dirençli bir hastanin tedavisinde kullanim için olmasidir.

11. Istemler 1 ila 4'ten herhangi birine göre kullanima yönelik bir formülasyon olup, özelligi;leptin düzeyi artmis bir hastanin tedavisinde kullanim için olmasidir.