SU726479A1 - Способ количественного определени зеараленона в ткан х животных - Google Patents
Способ количественного определени зеараленона в ткан х животных Download PDFInfo
- Publication number
- SU726479A1 SU726479A1 SU772522203A SU2522203A SU726479A1 SU 726479 A1 SU726479 A1 SU 726479A1 SU 772522203 A SU772522203 A SU 772522203A SU 2522203 A SU2522203 A SU 2522203A SU 726479 A1 SU726479 A1 SU 726479A1
- Authority
- SU
- USSR - Soviet Union
- Prior art keywords
- detected
- acetone
- zearalenone
- sample
- thin layer
- Prior art date
Links
Landscapes
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
Description
Изобретение относитс к аналитической химии, а именно к способам количественного определени микотоксина Ф-2-зеараленона лактона б-(10-оксй -б-йксо-транс-1-ундеценил) р -резорциновой кислоты в ткан х животных.
Известен способ определени микотоксинов в кормах, заключагацийс .в обработке анализируемой пробы хлороформом с последующей обработкой хлороформного сло гексаном и бензолом , дальнейшей очисткой на колонке, заполненной силикагелем, и хромато- графированием остатка в тонком слое силикагел 1.
Таким способом невозможно определить зеараленон.
: К предлагаемому способу наиболее близок способ количественного определени зеараленона в ткан х животных, заключающийс в обработке анализируемой пробы хлороформом, очистке полученного раствора на колонке, запелненной силикагелем, с последующим элюированием зеараленона смесью бензола и ацетона, концентрировании элюата с хроматографированием концент рата в тонком слое силикагел 2.
Недостатками такого способа вл ютс низкие чувствительность (0, 5 . / мг/кг)и избирательность определени .
Целью изобретени вл етс повышение избирательности и чувствительности определени .
Цель достигаетс способом количесвенного определени зеараленона в ткан х животных, заключающимс в обработке анализируемой пробы ацетоном очистке полученно1го раствора на колонке , заполненной окисью алюмини , с элюированием зеараленона смесью ацетона и воды, вз тых, в объемном соотношении 8,9-9,05:0,95-1,1, концентрировании элюата и хроматографировании концентрата в тонком слое силикагел с последующей обработкой тонкослойной хроматограммы п-нитро- , фенилдиазойий тётрафторборатом.
Отличием предлагаемого способа вл етс использование в качестве органического растворител ацетона, 3 качестве адсорбента окиси алюмини 1раведение элюировани смесью ацеточа и воды, вз тых: в объемном соотношении 8,9-9,05:0,95-1,1 и, последующа обработка тонкослойной хроматогграммы п-нитрофенилдиазоний тетрафторборатрм . Пример . Дл определени эеараленона 10- г гомогенизированного .образца (мышечна ткань, печень,почки , кровь, патологический материал) внос т в колбу емкостью 250 мл. Зате в нее вливают 60 мл ацетона и встр хивают на игуттель-аппарате в течение 2 ч. Экстракт фильтруют через бумажный фильтр в колбу с притертой пробкой . Извлечение токсина повтор ют, использу еще 60 мл ацетона. Объединенный экстракт перенос т в фарфоровую чашку 13 и выпаривают на кип п ей вод ной бане досуха. Получен ный остаток очищают от коэкстрактивных веществ на колонке окиси алюмини П степени активности дл хроматографировани . Колонку дл хроматографировани готов т следующим образом. В нижнюю часть колонки помещают тампон ваты высотой 1 см, затем внос т 5 г окиси алюмини и промывают колонку 20 мл ацетона квалификации о.с.ч.,х.ч. или после дистилл ции. Остаток в чашке после выпаривани элюата.раствор ют в 20 мл ацетона и внос т в колонку. После того, как экстракт опуститс до верхнего кра столбика адсорбента, через колонку пропускают 150 мл чистого ацетона и затем 50 мл ацетона, содержащего 1% воды. Токсин элюируют 50 мл смеси ацетон-дистиллированна вода (9 si по объему). Элюат собирают в чашку № 10 и выпаривают на вод ной бане досуха. Ост.Чток в чашке раствор ют в 30 мл ацетона и фильтруют через бумажный фильтр в чистую фарфоровую чашку 10. Фильтрат выпаривают на вод ной бане досуха. Полученный после выпаривани раст ворител остаток в чашке раствор ю в 1 мл бензола и полностью в 2-3 при ема нанос т на пластинку силуфола микропипеткой, использу струю гор чего воздуха. Одновременно готов т свидетели т.е. нанос т на плйстинку 10; 20; 30; 50 и 100 мкл раствора зеараленона в бензоле, что соответсггвует 1;2;3;5 и 10 мкг зеараленона и выпаривают растворитель. Образцы нанос т на пластинку в/следующей последовательности: повторность, свидетели, 2 повторность. Размер п тен не должен превышать 0,5 см. Места нанесени проб располагают на рассто нии 1,5-2 см от нижнего и боковых краев пластинки и друг от друга. В камеру дл хроматографировани внос т 100 мл смеси гексана и диэтилового эфира (в соотношении 1:3 по объему) и через 20 мин помещ ют пластинку в вертикальном положени после того как растворитель подниметс на высоту 10-12 см, пластинку вынимают, отмечают фронт растворите л и помещают в сушильный шкаф HS 3 мин при 105 С. Затем пластинку опрыскивают , свежеприготовленным 0,05%-ным раствором прочного красного Ж в 50%-ном этаноле и снова помещают в сушильный шкаф при этой же температугма на 5-7 мин. Зеараленон про вл етс в виде рко желтого п тна на белом фоне с R 0,47 + 0,01. Количество токсина в пробе определ ют, сравнива интенсивность окраски и площадь п тен свидетел и образца. В случае, если содержание микотоксина в пробе превышает 10 мкг, то получают хроматограмму стандартов большей концентрации (10-20 мкг). Концентрацию Ф-2 в образце рассчитывают по формуле: А У : - -, , где X - содер)1;аниё зеараленона в исследуемой пробе, мг/кг; А - количество токсина в навеске, мкг ; Р - вес пробы, г. Чувствительность определени зеараленона в органах и ткан х животных при навеске 10 г составл ет 100 мкг/кг (0,1 мг/кг). Абсолютна чувствительность обнаружени стандартного вещества в тонком слое силикагел (силуфола) составл ет 0,25 мкг. Степень извлечени зеараленона зависит от соотношени между массой образца и объемом органического раЪтворител , а также от времени экстракции . Если 10 г пробы встр хивать в течение 2 ч с 60 мл ацетона, то извлечение-Ф-2 составл ет 45-«:3%. Увеличение времени экстракций повышает выход токсина только на 5-7%. Двукратна обработка проб ацетоном порци ми по 60 мл повышает извлечение зеараленона до 75-80%, а при дальнейшей экстракции выход токсина возрастает незначительно (до 82-85%). Причем аналогична обработка проб хлороформом приводит к извлечению не более 60% токсина. Установл ено, что зеараленон прочно удерживаетс на колонке окиси алюмини . Применение силикагел было малоэффективным из-за мешающего вли ни коэкстрактивных веществ и слабой адсорбции зеараленона. При этом значительную роль играет элюент. Так, при десорбции зеараленона смесью ацетона и .уксусной кислоты происходит разложение токсина и вьвквание большого количества мешающих анализу веществ, Элюирование ацетоном с добавкой пщроксида натри также приводит к одновременной десорбции коэкстрактивных веществ. Наиболее приемлемым элюентом вл етс смесь ацетона и дистиллированной воды в соотношении 8,9-9, 05; 0,95-1,1, При меньшей содержании воды в ацетоне десорбции Ф-2 практически не происходит , или она очень слаба , а при высоком соотношении между ацетоном и водой на результаты анализа вли ют коэкстрактивные вещества. Масса адсо,рбен: а в колонке оказывает действие на адсорбцию токсина и других соединений. Испытаны колонки с 2, 3, 5, 7 и 10 г окиси алюмини . Наилучшие результаты по степени десорбции Ф-2 и удерживани примесей получены с массой адсорбента, равной 5г. С целью избирательного определени зеараленона испытаны различные реакции с образованием окрашенных комплексов . Установлено, что Ф-2. про вл ет свойства фенола, вступа в реак ции сочетани с 4-аминоантипирицом, дназореактивами, реагирует с реактивом Фолина-Чокальтеу. Однако чувствительность обнаружени Ф-2 посредст вом 4-аминоантипирина и реактива Фолина-Чокальтеу не превышает 3-5.мк Ф-2 наиболее четко про вл етс диазо реактивом -п-нитрофенилдиазоний. тетрафторборатом. При этом на белом фоне пл,астинки наблюдают рко желтые компактные, не обесцвечивающиес при хранении хроматограг/ мы п тна вещества без мешающего вли ни коэкстрактивных веществ. Интенсивность окраски п тен возрастает в интервале 0,25-20 мкг, а минимально определ емое количество микотоксина в тонком слое силикагел оказываетс равным : 0,25 мкг. Чувствительность обнаружени зеараленона в ткан х животных достигает 100мкг/кг, что в 5 раз выше по сравнению с известным способом. При облучении хроматограмм, полученных по предлагаемому способу, УФ-светом (256 им) не наблюдают флуоресцирующих п тен, за исключением зон, соответствующих Ф-2, в то врем как при. экспозиции к УФ-свету (256 нм) хроматограмм, полученных по известному способу, про вл етс множество п тен, флуоресцирующих голубым , синим и зеленым цветом, а идентификаци зеараленона становитс невозможной . При этом свидетель-зеараленон после вторичного оёлучени не флуоресцирует. Преимущества способа согласно изобретению по сравнению с известным приведеныв таблице.
Мышечна ткань
0,05 кролика, 10 г
кролика,
0,05 0,10 0,50 1,00
кролика. Юг
0,05 0,10
0,50 1,00
Claims (1)
- Формула изобретени Способ количественного определени зеараленона в ткан х животных путем обработки анализируемой пробы органическим растворителем, очисткиНе обнаружен Не обнаружен Не обнаружен.Не обнаруженНе обнаружен Не обнаруженТо жеТо же О, 07- -0,40 0,35Следы 0,80 0,80Не обнаружен Не обнаружен То же 0,07 0,50 0,400,801,00полученного раствора на,колонке, заполненной адсорбентом, с последующим элюированием зеараленона, концентрированием элюата и хроматографированием концентрата в тонком слое, от7 :72647 ли чающийс тем, что, с целью повышени избирательности и чувстви: TenbMocfH определени ,.в качестве органического растворител испольэуют ацетон, в качестве адсорбента- окйСь алймнни и элюирование прово-, д т смесью ацетона и воды, вз тых в рб емнрм соотношении 8,9-9,05:0,95-1,1, с последующей обработкой тонкослойной хроматограммы п-нитрофенилдиазоНИИ тетрафторборатом.... 9 8 Источники информации, прин тые во внимание при экспертизе V . 1. Авторское свидетельство СССР 389446, кл. G 01 N 31/08, 1973, опублик. 2, R. W. Eppley,Screeming method for F-2, aflatoxins and pchratoxin, j. Association office Analytical CKemists, vol 51, 1, p. 74, 1968 ( прототип) .
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
SU772522203A SU726479A1 (ru) | 1977-07-29 | 1977-07-29 | Способ количественного определени зеараленона в ткан х животных |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
SU772522203A SU726479A1 (ru) | 1977-07-29 | 1977-07-29 | Способ количественного определени зеараленона в ткан х животных |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
SU726479A1 true SU726479A1 (ru) | 1980-04-05 |
Family
ID=20724046
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
SU772522203A SU726479A1 (ru) | 1977-07-29 | 1977-07-29 | Способ количественного определени зеараленона в ткан х животных |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
SU (1) | SU726479A1 (ru) |
Cited By (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO1989003037A1 (en) * | 1987-09-28 | 1989-04-06 | The Texas A&M University System | Selective immobilization and detection of mycotoxins in solution |
CN106383187A (zh) * | 2016-08-31 | 2017-02-08 | 山东西王食品有限公司 | 一种植物油中玉米赤霉烯酮的检测方法 |
CN106908544A (zh) * | 2017-03-18 | 2017-06-30 | 福州大学 | 一种用于动物源样品中痕量f‑2毒素代谢分析的方法 |
-
1977
- 1977-07-29 SU SU772522203A patent/SU726479A1/ru active
Cited By (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO1989003037A1 (en) * | 1987-09-28 | 1989-04-06 | The Texas A&M University System | Selective immobilization and detection of mycotoxins in solution |
CN106383187A (zh) * | 2016-08-31 | 2017-02-08 | 山东西王食品有限公司 | 一种植物油中玉米赤霉烯酮的检测方法 |
CN106908544A (zh) * | 2017-03-18 | 2017-06-30 | 福州大学 | 一种用于动物源样品中痕量f‑2毒素代谢分析的方法 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
Trucksess et al. | Thin layer chromatographic determination of deoxynivalenol in wheat and corn | |
SU726479A1 (ru) | Способ количественного определени зеараленона в ткан х животных | |
Radomski et al. | The electron capture detector in the analysis of chlorinated hydrocarbon pesticides in tissues with and without clean-up | |
SU1109631A1 (ru) | Способ определени витамина @ | |
Takeshita | Application of column and thin-layer chromatography to the detection of artificial sweeteners in foods | |
SU1725109A1 (ru) | Способ жидкостно-хроматографического определени пол рных органических веществ | |
RU2034295C1 (ru) | Способ определения остаточных количеств пестицида в молоке и мясе | |
Lambou | Mobilities of Some Polyols, Sugars, Acids, and Other Compounds | |
SU1374126A1 (ru) | Способ хроматографического определени витамина А в смес х веществ | |
Der Marderosian et al. | THE ISOLATION AND IDENTIFICATION OF THE ERGOLINE ALKLALOIDS FROM IPOMOEA MUELLERI | |
Maher et al. | Determination of Polycyclic Aromatic Hydrocarbons in Marine Sediments, using Solvent Extraction, Thin-Layer Chromatography and SpectrofIuorimetry | |
SU1254381A1 (ru) | Способ определени хлоксила в биологических объектах | |
SU1196772A1 (ru) | Способ определени фоксима в секционном материале | |
Lussman et al. | The separation of some of the cinchona alkaloids by paper partition chromatography | |
SU1223095A1 (ru) | Способ определени кодеина в лекарственных смес х | |
SU1165984A1 (ru) | Способ определени производных бензимидазола в биологических объектах | |
RU2056044C1 (ru) | Способ количественного определения патулина в пищевых продуктах | |
SU1332223A1 (ru) | Способ определени @ -Токоферола | |
SU940069A1 (ru) | Способ количественного определени ванилилминдальной кислоты в моче | |
SU828082A1 (ru) | Способ определени нитрофенилпроиз-ВОдНыХ пОлупРОдуКТОВ СиНТЕзА лЕВОМицЕТиНАВ ВОдЕ | |
RU2269137C1 (ru) | Способ определения оксибензола и его монометильных производных в биологическом материале | |
RU2151391C1 (ru) | Способ раздельного определения о-хлорфенола и 2,6-дихлорфенола | |
SU1175874A1 (ru) | Способ определени витамина @ в трав ной муке | |
SU787986A1 (ru) | Способ определени остатков пенициллина в молоке | |
Agthe et al. | Determination of aflatoxins in food by absorption spectrometry |