SU1175874A1

SU1175874A1 - Способ определени витамина @ в трав ной муке

Info

Publication number: SU1175874A1
Application number: SU843684777A
Authority: SU
Inventors: Игорь Анатольевич Ионов; Петр Федорович Сурай; Марк Самойлович Жедек; Александр Николаевич Стефанович
Original assignee: Украинский научно-исследовательский институт птицеводства
Priority date: 1984-01-02
Filing date: 1984-01-02
Publication date: 1985-08-30

Description

ч

О1

00

4

11

Изобретение относитс к химичесим методам определени витамина К j филлохинона) с Применением, хроматографических методов очистки, в частности тонкослойной хроматографии, и ожет быть использовано в различных аналитических лаборатори х при определении содержани витамина К в кормах и других продуктах растительного происхождени и кормовых препаратах,

Цель изобретени - сокращение у длительности определени и повышение чувствительности способа.

Изобретение иллюстрируетс следующими примерами.

Пример 1, Берут 500 мг трав ной муки, внос т в пробирку с притертой пробзсой, заливают 10 мл экстрагирующей смеси - бензол с 2% (объем) н-бутан®ла к 10 мл бензола добавл ют 0,2 мл н-бутанола и. хорошо перемешивают . Пробирку став т в темное место на 3 ч. Заполн ют колошсу диаметром 10 см слоем силикагел

(2 см и сверху него насыпают 1 см безводного сульфата натри . Содержимое пробирки пропускают через -колонку , а пробирку .ополаскивают п тью порци ми по 5 мл экстрагирующей смеси , которые также пропускают через колошсу. Фильтрат вьтаривают на роторном испарителе при 80°С и сухой остаток раствор ют в 0,2 мл бензола,

Затем с помощью микропипетки перенос т полученный раствор (0,2 мл) на пластинку Силуфол, размером 15x15 см, и по обе стороны.образовавшейс полости нанос т свидетель-раствор - 3 мкг филлохинона в 0,1 мл хлороформа,

Развитие хроматограммы провод т в камере (180x70x170 см), насыщенной в течение 30 мин парами смеси раствоОпределение оптимальной концентрации боргидрида натри дл востановлени Филлохинона

{Используема концентраци боргидрида натри в этаноле, %

175874

рителей гексан-хлороформ, вз тых в объемном соотношении 50:50. После тго , Kaic фронт подвижной Аазы поднимаетс на высоту 15 см, пластинку ; вынимают из камеры, просушивают и быстро определ ют положение витамина К j по свидетелю под ультрафиолетовой лампой (про вл етс в виде текгаой полосы j,

П тно силикагел с адсорбированным на нем витамином К, соскабливают с пластинки, перенос т в пробирку с притертой пробкой, заливают 3 мл 96%-ного этилового спирта и ств т в темное место на 30 мин. Затем отфильтровьшают раствор через бумажньШ фильтр (красна полоса), смоченный .этиловым спиртом, пробирку ополаскивают 1 мл этанола, который перенос т на этот же фильтр,

Далее к элюату добавл ют 0,1 мл 0 1%-ного раствора боргидрида натри в этаноле. Содержимое пробирки быстро перемешивают, перенос т в кювету дл измерений и через 20 с после внесегаш боргидрида натри провод т первое фотометрирование элюата на длине волны 243 нм. Затем после достижени максимума экстинции (через 3-4 мин провод т повторное фотометрирование и по разнице показаний между начальным и конечным измерени ми наход т прирост экстинцин и определ ют к.оличество витамина Ki по калибровочной кривой.

Пример 2, Осуществл ют определение витамина К j, аналогично примеру 1 с раствором боргидрида натри различной концентрации .с целью установлени оптимальных количеств используемого восстановител . Результаты представлены в табл, 1.

Таблица 1

)

В каждом варианте добавл ли по 0,1 раствора.

Пример 3. Осутцествл ют

ределение витамина К аналогично . ты примеру I , анализиру усредненный табл.2.

Данные табл. 1 свидетельствуют о том, что оптимальной концентрацией раствора боргидрида натри в этаноле вл етс . 0,1-0,2%. .добавлении низких концентраций (0,02-0,05%) прирост экстинций идет очень медлен 1758744

оп- образец люцерновой муки. Результаэкспериментов представлены в

Таблица 2.

но и весь наход щийс в растворе витамин К, не определ етс . В случае добавлени к исследуемому элюату витамина КI избытка боргидрида натри злюат мутнеет, что делает невозможным фотометрировакие.

Claims

£7) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ВИТАМИНА К( В ТРАВЯНОЙ МУКЕ путем экстракции его из анализируемой пробы бензолом, содержащим н-бутанол, с последующим тонкослойным хроматографированием экстракта в системе растворителей гексан-хлороформ, удалением целевого компонента с пластинки и экстракции его этиловым спиртом с последующим фот.ометрированием экстракта, о т л и ч а ю щ и й с я тем, что_?с целью сокращения длительности определения и повышения чувствительности способа, экстракт перед фотометрированием обрабатывают 0,1-0,2%-ным раствором боргидрида натрия в этаноле. . _о