SU1254381A1 - Способ определени хлоксила в биологических объектах - Google Patents

Abstract

Изобретение относитс  к способам определени  хлоксила в биологических объектах. Цель изобретени  повышение чувствительности способа. Хом кам ввод т хлоксил. Содержание препарата определ ют в крови многократно . Производ т экстрагирование н-гексаном. В системе, содержащей н-гексан очистку провод т хромато- графическим разделением на silufol UV-254. Хроматограмму высушивают 1-2 мин при ЮО с. Положение п тен на хроматограмме определ ют при облучении ультрафиолетовым светом. Затем провод т элюцию хлоксила смесЫо вода - 10%-ный раствор н-бутанола в гексане при соотношении 1:4. Верхний слой элюата подвергают спектро- фотометрии. Расчет содержани  препа- рата провод т по калибровочному гра фику. Табл. 2.

Description

Изобретение относитс  к медицине в частности к способам определени  антигельминтика хлоксила в биологических ткан х и жидкост х.

Цель изобретени  - повьпиение чувствительности способа за счет использовани  в качестве растворител  н-гексана, -проведени  хромато- графического разделени  на silufol UV-254 и элюции хлоксила смесью вода/ 10%-ньй раствор н-бутанола в гек сане при определенном соотношении компонентов.

Пример 1.

Хом кам ввод т хлоксил или его лекарственную форму перорально в 2%-ном крахмальном клейстере в дозе 0,5 г/кг. Содержание препарата определ ют в крови Через 1, 2, 4, 6, 8, 24 и 48 ч после его введени . Определение провод т не менее чем трехкратно .

1-2 мл крови (точный об ьем) собирают во флаконы с притертой пробкой добавл ют 0,1 мл 15%-ного раствора лимоннокислого натри  и экстрагируют н-гексаном в соотношении 1:5 в течение 1 мин. Экстракты собирают ппеткой в круглодонные колбы вместимостью 50 мл и выпаривают досуха на роторном испарителе. Остаток смывают с колбы сначала 0,2 мл ацетона а затем повторно 0,1 мл ацетона. Полученные растворы постепенно нанос т на хроматографическую пластинку в виде одной линии длиной около 1-2 см. Пластинку помещают в камеру содержащую н-гексан, и хроматогра- фируют восход щим способом. Когда фронт растворител  пройдет не менее 3/4 пластинки, ее вынимают и сушат на воздухе 10 мин и помещают в сушильный шкаф при на 1 мин. Положение п тен на xpoMaTorpaMi-ie определ ют при облучении УФ-светом с длиной волны около 250 нм по тушени флуоресценции пластинки (Rf хлоксила около О,75). П тна смачивают с помощью капилл ра 50%-ным раствором этанола и akKypaTHo соскабливают с пластинки, помеща  в пробирку с притертой пробкой вместимостью 10 м Затем добавл ют 1 мл дистиллированной , воды и 4 мл 10%-но о раствора н-бутанола в н-гексане. Экстрагирую

однократно в течение 3 мин. Верхний слой гексана/отдел ют после йтстаи- вани  в течение 2-3 мин и спектро- фотометрируют при длине волны

238+2 нм в кювете с толщиной поглощающего сло  10 мм, относительно 10%-ного раствора н-бутанола в н-гексане предварительно насьпценно- го водой. Расчет содержани  препарата провод т по калибровочному графику.

С целью доказательства полноты зкстрагируемости хлоксила из биологического объекта при введении его

хом кам перорально, в виде взвеси в крахмальном клейстере, в дозе 0,5 г/кг, проводили его повторную экстракцию н-гексаном. В табл. 1 приведены данные, полученные при определении хлоксила через 4 ч после его введени . Предел обнаружени  п тен хлоксила на хроматограмме 1 мкг. Чувствительность обнаружени  хлоксила в пробе 2,5 мкг по способупрототипу - 15 мкг).

Выбор оптимальных условий обнаружени  п тен хлоксила на хромато- ррамме показан в табл. 2.

Из данных, приведенньк в табл. 2, i

видно, что оптимальные услови  де- текции хлоксила достигаютс  при

нагревании пластинки 1-2 мин при .

35

Claims (1)

1. Формула изобретени 

   Способ определени  хлоксила в биологических объектах путем экстрак- ции органическим растворителем, очистки экстракта с последующей спектрофотометрией, отличающийс  .тем, что, с целью повышени  чувствительности способа, в ка

   честве экстрагента используют н-гексан , .очистку провод т хроматографи- ческим разделением на silufol UV-254 в системе, содержащей н-гексан, после чего хроматограмму высушивают 1-2 мин при , вы вл ют зону расположени  хлоксила с последующими элюцией хлоксила смесью вода - 10%-ньй раствор н-бутанола в гекса- не при соотношении 1:4 и спектрофог тометрией верхнего сло  элюата.

   Таблица 1