SU676610A1 - Способ получени инфекционного материала - Google Patents

Description

1

Изобретение относитс  к области сельскохоз йственной микробиологии и фитопатологии . Оно может быть использовано дл  получени  инфекционного материала фитопатогенных грибов с целью искусственного заражени  сельскохоз йственных растений дл  получени  высокоустойчивых сортов путем создани  инфекционного фона.

Известен способ получени  инфекционного материала грибов на твердом субстрате 1.

Известен также способ получени  инфекционного материала фитопатогенных грибов выращиванием их на зерновом материале 2.

Однако р д грибов, в том числе Thielaviopsis , почти не дают роста на зерновом материале (усваиваютс  лишь имеющиес  в небольшом количестве простые сахара и аминокислоты, а полисахариды и белки зерна не усваиваютс ).

Целью изобретени   вл етс  производственный способ получени  инфекционного материала, не требующий отделени  био.массы от субстрата, обеспечивающий сохранение жизнеспособности материала и его вирулентности в течение длительного периода времени, повышающий выход эндоконидий и хламидоспор.

Поставленна  цель достигаетс  тем, что гриб Thielaviopsis basicola выращивают на пшене, пропитанном в соотношении 1 : 1 раствором , содержащим ферментативные гидролизаты казеина, дрожжей и/или крови в количестве 100-150 мг % аминного азота и дрожжевой экстракт в количестве 0,05- 0,1% к весу пшена.

Питательной средой могут служить: 1) смесь картофельного отвара и белкового гидролизата, например, гидролизата крови - аминопептида - при следующем соотношении компонентов:

Пшено0,9-1,1 кг

Картофельный отвар

(200 г/л)750-850 мл

Аминопептид190-210 мл

2) смесь дрожжевого экстракта и белкового гидролизата, например аминопептида при соотношении компонентов:

Пшено0,9-1,1 кг

Дрожжевой экстракт0,9-1,1 г

Аминопептид190-210 мл

Вода дистиллированна  750-850 мл Пример. 1 кг пшена заливают 200 мл аминопептида и 800 мл картофельного отвара (200 г/л), либо 200 мл аминопептида и 1 г дрожжевого экстракта в 800 мл воды и кип т т в закрытом сосуде на слабом огн

в течение 15-20 мин до полного поглощени  жидкости пшеном. После этого пшено рассыпают в кюветы, охлаждают, разминают образовавшиес  комки и помещают в стерильные сосуды, предназначенные дл  выращивани  - колбы, бутыли. Сосуды заполн ют пшеном на 30-40% объема и закрывают ватными пробками или тампонами . Стерилизуют при 1,2 ати в течение 45 мин. Стерильный субстрат равномерно инокулируют (из расчета 200 мл на 1 кг пшена) 24-36-часовой вегетативной культурой гриба, полученной глубинным методом на смеси картофельного отвара (либо дрожжевого экстракта) н аминонептида, вз тых в той же пропорции, что и дл  импрегнировани  зерна.

Культуру Thielaviopsis вырашивают при 24-36°С в течение 10 суток нри перемешивании встр хиванием в первые трое суток. После завершени  выращивани  культуру гриба вместе с пшеном сущат одним из известных способов, а нри тепловой сушке - нри температуре не выше 40°С, растирают комочки. Жизнеспособность полученного препарата определ ют проращиванием на картофельно-глюкозном агаре.

Препарат, полученный описанным способом , обладает высокой вирулентностью по

отношению к растени м при длительном хранении (сухого препарата) в обычных услови х.

Claims (2)

1.Калун нц К. А. и др. Ферменты, получение и применение в народном хоз йстве. Труды ВНИИсинтезбелок, вып. 1. М., 1972,

с. 270.

2.Мирзаев М. Н. Роль почвенной микрофлоры в токсикозе винограда, пораженного филлоксерой. Автореф. канд. дисс. М., 1973, с. 5.