SU543672A1

SU543672A1 - Штамм метилотрофных бактерий -продуцент формиатдегидрогеназы

Info

Publication number: SU543672A1
Application number: SU2325857A
Authority: SU
Inventors: Николай Сергеевич Егоров; Елена Николаевна Кондратьева; Илья Васильевич Березин; Ольга Сергеевна Троян; Лидия Сергеевна Платоненкова; Елена Владимировна Захарова; Александр Иванович Нетрусов; Алексей Михайлович Егоров; Юрий Васильевич Родионов; Владимир Васильевич Карзанов
Priority date: 1976-02-16
Filing date: 1976-02-16
Publication date: 1977-01-25

Description

церин, маннит, сорбит. Не усваивает изопропиловый , бутиловый спирты, дульцит, инозит.

Отношение к органическим кислотам. Усваивает ацетат, бутират, пируват, лактат, аксалоацетат,

пшколат. Не усваивает пропионат, кетоглутарат, сукцинат, фумарат, мапат, цитрат, тартат, бензонат. В таблице приведены значени активности формиатдегидрогеназы у различных штаммов.

Пример. Культуру метилотрофных бактерий Bacterium species № 101 выращивают в полупроизвод ственных услови х в 100 л ферментерах на минеральной среде следующего состава (в г/л),КН2Р042 ,0; (NN4)2504-2,0; NaCI-0,5; Мд5047Н2 О0 ,025; ,01, вода дистиллированна . рН среды после стерилизации 7,2. Во врем посева внос т 1 % метанола и 0,2мл 10%-ного раствора дрожжевого автолизатана 1 л среды. Посевной материал внос т в количестве 2-3%. Режим ферментации : температура 28°С,расходвоздуха 1:1,избыточное давление 0,5 атм стерилизаци 120 С в течение 2 час паракультуру вьфашивают 45-52 час. Выход биомассы 250-300 г сырых клеток с ферментера, т.е. 500-700мг сухих клеток на 1 л среды,

Очищенный на 95% препарат формиатдегидрогеназы из клеток штамма Bacterium species № 101 вьщел ют следующим образом.

Клетки собирают центрифугированием при 6000 об/мин в течение 30 мин, суспендируют в 0,1М фосфатном буфере при рН7,5; разрушают при 22 кГц в течение 15 мин и вновь центрифугируют при 200006 в течение 30 мин. Супернатант обрабатывают сульфатом аммони (40% от насыщени ;. Осадок отбрасывают , а супернатант вновь обрабатьтают сульфатом аммони (60% от насьпцени ). Через 36 час центрифугируют, осадок раствор ют в 0,ОЗМ фосфатном буфере с рН 7,8 и диализуют против того же буфера, Полученный препарат нанос т на колонку с ДЭАЭ - целлюлозой. Колонку промывают 0,ОЗМ фосфатным буфером, рН 7,8 фермент элюируют 0,1М раствором NaCl.

Получают препарат, который на 95% состоит из формиатдегидрогеназы. Выход фермента по активности составл ет 30% при 20-кратной очистке.

Claims

Формула изобретени

Штамм метилотрофных бактерий Bacterium species № 101 - продуцент формиатдегидрогеназы. Хранитс в коллекции кафедры микробиологии МГУ.

Морфологические признаки. Колонии мелкие, белые, блест щие, гладкие. Величина клеток двухсуточной культзфы на синтетической среде с метанолом 1,0-1,5x0,5-0,7 мкм. Неподвижные палочки, грамотрицательные, спор не образуют.

Физиологические признаки. Строгий аэроб. Пигмент не образует. Желатину не разжижает, молоко не пептонизирует. Нитраты не восстанавливает, глн козу не сбраживает. Растет на сусло-агаре. Не растет на бульоне и на м со-пептонном агаре. Некнслотоустойчив . Не использует метиламины.

Отношение к углеводам. Усваивает глюкозу, фруктозу, сахарозу, ксилозу, рибозу.

Отнощение к спиртам. Усваивает метиловый, этиловый, пропиловый, изобутиловый спирты, глицерин , маннит, сорбит.

Отношение к органическим кислотам. Усваивает ацетат, бутират, пируват, лактат, акселоацетат, гликолат.

Источники информации, прин тые во внимание при экспертизе:

1, Патент Великобритании № 1370892, кл, С 6 F, от 16.10,1974.
2. Johnson, Jones- Mortimer а QaayCe, (964. Use pur-ifieA bacterfcaP formate

dehydrofienoise fhe m-fcrocstimation of formSte, B-( etBiopfiys, ActcK. 89., p. 35.(прототип).