SU467932A1 - Штамм узлт-1-продуцент липолитических ферментов - Google Patents

Description

3

Среда Чапека., С пептоном (). КолоНИИ суточной культуры состо т из:бесцеБе ного ползучего волокнистого мицели . Высота войлока до 1-1,5 см,. На вторые, третьи сутки колонии станов тс  бежевыми . Мицелий нежный, ломкий и не смачиваетс  водой. , , , . ,, Сусло-агар. Колонии суточной культурыбелые , пушистые. Мицелий ползучий и на Вторые сутки занимает всю поверхность чашки Петри.I На вторые сутки колонии станов тс  темно-серого цвета, а на по- верхности в центре колонии остаетс  войлок высотой около 0,5 см светло-серого цвета.

Пшеничные отруби. Через сутки отруби

полностью пронизаны белым мицелием -..к серыми спорами.

Жидкие среды. На вышеуказанных жидких средах штамм образует мицелий в виде толстой войлочной пленки белого цвета, котора  после с 1Орообраз6ванн  становитс  серой.

Отношение к источнику азота. Ассими- ;. лирует органический азот в виде пептона, кукурузного экстракта, дрожжевого автолизата , желатины, казеина. Наилучший рост и биосинтез липолитических ферментов происходит на среде, содержащей в качестве источника азота кукурузный экстракт , слабее - с пептоном или дрожжевым автолизатом, а еш:е слабее - на средах, содержаших другие источники азота.

Слабо растет на средах, содержаших минеральный источник азота.

Отношение к источнику углерода. Штамм

использует глюкозу, сахарозу, мальтозу, лактозу, глицерин, инозит, крахмал, а таке различные жиры и масла: хлопковое, ливковое, сливочное, касторовое, гов жий.

Процесс

Белок, мг

Активность, ед

удельна  обша  Культуральна  868О565,14 жидкосчъ Осаждение изопропиловым спиртом (1:6) 37411106,8 Осажденио сернокислым иммонием (ЗО-90%) 5494,4817,75

4

бараний, рыбий, костный жиры. Растет на средах, оодержащих хлопковый шрот, uieлуху , соапсток, саломас.

; Отмечаетс  слабый рост на эвквалиптовом масле.

Растет при температуре 25-52°С, оптимум 42-47°С, рН среды 2,О-8,О, оптимум 5,O-6jO.

Гриб целесообрзно выращивать на жидкой среде, содержащей 5% хлопкового шрота при рН 5,О-5,О в течение 15-2О час. Липолитическа  активность на данной среде равна 10-12 мл 0,1 и КОН на 1 мл.

При определении активности культуральную жидкость необходимо разводить водой в 25-50 раз.

Штамм Pihixopus microsporws УзЛТвыращивают в глубинных услови х при 45°С на среде, состо щей из 2% кукурузного экстракта, 1% хлопкового масла и водопроводной воды при рН 5,5 в течение 24-48 час.

Липолитическую активность определ ют по методу Микико Иваи.

Активность липазы выражают в милли- литрау. ОД Н раствора щелочи, израсходованной на титрирование жирных кислот, полученных при гидролизе оливкового масла под действием 1 мл культуралыюй жидкости в услови х опыта,

Липолитическа  активность ку ьтуральной жидкости гриба при выращивании на вышеуказанной среде составл ет 35О мл ОД н. КОН на 10О мл культуральной жидкости .

Ферментный препарат липазы получают из культуральной жидкости методом осаждени  изопропиловым спиртом, вз том в сортнощении 1:6, а также высаливанием (фракци  30-9О%) сернокислым аммонием.

Выход и активность полученных препаратов представлены в таблице.

Выход АКТИВНОСТЬ, по белку,% 49О5О68,01ОО10О 4140538,843,8 84,5 4493042,363,391,6