SU734263A1 - Штамм вниигенетика-6,продуцирующий глюкоамилазу - Google Patents

Description

(54) ШТАММ ЛбРЕКЦгиииЗ NIGER ВНИИГЕНЕТИКА-6, ПРОДУЦИРУЮЦЩЙ ГЛЮКОАМИЛАЗУ

Изобретение относитс  к микробиологической промышленности, а именно, к производству ферментов, и касаетс  получени  штаммов, продуцирующих г.пюкоамилазу .

Глюкоамилаза используетс  дл  гидролиза крахмального сырь  и находит широкое применение в народном хоз йстве, главным образом, в хлебопекарной , крахмало-паточной, пищевой, текстильной промышленности. Известны способы производства глюкос1милазы, основанные на микробиологическом синтезе этого фермента, осуществл емом различными штаммами культуры 15 .

Наиболее близким по технической сущности к изобретению  вл етс  штамм Kepei g ieeus niger , т-33, продуцируизщйй глюкоамилазу с активностью в 20 пределах 50-80 ед/мл на 144 ч роста (по глюкозооксидазному методу). Штамм Т-33 хранитс  в Центральном музее промьаштенных микроорганизмов института ВНИИгенетика под регистрационным 25 номером ЦМПМ F -95 1.

Одним, из недостатков использовани  известных штаммов Лар&гд|еСи5 1 8ег при промышленном получении глюкоамилазы  вл етс  обильное споро-30

образование, которое загр зн ет культурную жидкость и окружающую среду кониди ми.

Использование олигоспорогенных (со значительно ослабленным образованием конидий) штаммов позволит совершенствовать технологию выделени  и очистки глюкоамилазы из культурной жидкости, улучшит качество готовых препаратов и уменьшит загр зненность окружающей среды,

Цель изобретени  заключаетс  в создании высокоактивного, олигоспорогенного отечественного штамма, образующего глюкоамилазу в количестве, достаточном дл  ее производства методом микробиологического синтеза в промьшшенном масштабе.

Предложенный штамм ВНИИгенетика-6 Aspergillus niger  вл етс  олигоспорогенным мутантом исходного штамма и получен в результате применени  генетико-селекционных методов . Штамм хранитс  в Центральном музее промышленных микроорганизмов и имеет регистрационный номер ЦМПМ F - 104.

Новый штамм ВНИИгенетика-6 отличаетс  от прототипа морфологией колоний , интенсивностью гидролиза крахмала и желатины, скорост.ью роста на ломтиках картофел  и более высокой глюкоамилаэной активностью при сокращении времени культивировани . Исходный штамм Т-33 характеризует с  обильным кончдиеобраэованием, черным цветом колоний, крахмал гидролизует на 3-й сутки, желатину на 15-е сутки, на ломтиках картофел  слабый рост на 5-е сутки, максимальный уровень образовани  глЮкоамилазы составл ет 50-80 ед/мл к 144 ч ферментации при вырагдивании на среде, содержащей 10% крахмала. В отличие от прототипа за вленный ;штамм ВНИИгенетика-6 характеризуетс  ослабленным конидиеобразованием, светло-коричневым цветом колоний, крахмал гидролизует на 2-е сутки, же латину - на 12-е сутки, на ломтиках картофел  хороший рост на 2-е сутки, спороношение на 5-е сутки, максималь ный уровень образовани  глюкоамилазы составл ет 80-110 ед/мл к 120 ч ферментации при выращивании на среде, содержащей 7% крахмала. Культурно-морфологические свойства .Синтетическа  среда Чапэка с са харозой. На 10-е сутки роста при диаметр колоний 63-70 KIM.Поверх ность колоний сильно склгщчата  плос ка , край ровный.Воздушный мицелий ОЛИгоспоровый,слабо развит;цвет коло нии коричневато-серый по кра м желтый .Конидии светло-коричневого цвета , локализованы в основном в центре колонии. Среда не окрашена. Синтетическа  среда Чапека с крах малом. Диаметр колоний 78-80 мм. Поверхность колоний плоска , ровна , в центре складчата , край колонии ровн Воздушный мицелий олигоспоровый, слабо развит, цвет колонии сероватожелтый . Конидии светло-коричневого цвета, расположены в основном в центре колонии. Среда не окрашена. Сусло-агар. Диаметр колоний б2-68 Поверхность колонии сильносклащчата  в центре выпукла , край колонии неро ный; цвет коричневато-серый, по кра  колонии желтый. Воздушный мицелий ол госпоровый, развит слабо. Конидии светло-коричневого цвета, расположены в основном в центре колонии в р диусе 13-15 мм. На ломтиках картофел  на 2-е сутки роста субстратный мицелий хорЬшо развит, желтого цвета, на 5-е сутки роста конидии в небольшом количестве светло-коричневого цвета. Ломтики не .окрашены. Физиологические признаки. Желатину разжижает послойно на 12-е сутки Молоко пептонизйрует к 12-м суткам. Нитраты не восстанавливает. Крахмал гидролизует на 2-е сутки. Отношение к источникам углерода, Глюкозу, галактозу, лактозу, фруктозу , мальтозу, ксилозу, маннозу, амнозу, сахарозу, арабиноэу, сорбит, лицерин ассимилирует. Пример. Использование штамма НИИгенетика-6 дл  получени  глюкоамиазы .. Дл  получени  исходного посевного атериала культуру выращивают на скоенном агаре (среда сусло-агар) при 33°С Б течение 14 сут. Со скошенного сусло-агара культуру еренос т в жидкую питательную среду ледующего состава %: Крахмал кукурузный 10,0 Кукурузный экстракт 2,0 Дрожжи пивные1,0 Бактериальна  амилаза1 (ед. А с/г крахмала ) Ортофосфорна   кислота0,05 рН доводитс  водным раствором аммиака до 5,6. Культуру выращивают в колбах Эрленмейера емкостью 750 мл, сСдержащих 100 мл средда, на качалке (220 об/мин) в течение 18 ч при . Инокул т (в количестве 5%) перенос т в ферментационную среду следующего состава,%: Крахмал кукурузный Мука кукурузна  Мука соева  ( HH).j НРОд Бактериазна  1 (ед.А с/г амилаза крахмала) Вода водопроводна  (рН 5,6) Остальное. Процесс ферментации провод т в колбах Эрленмейера емкостью 750 мл при объеме среды 100 мл на качалке (220 об/мин) при 33°С. Через 120 ч ферментации уровень активности глюкоамилазы при определении глюкозооксидазным методом составл ет 80-110 ед/мл. Таким образом, предлагаемый штамм ВНИИгенетика-6 характеризуетс  также способностью синтезировать более высокий уровень фермента за более короткий срок ферментации. Формула изобретени  Штамм. ftspergieeus вниигенетика-6 , продуцирующий глюкоамилазу, Хранитс  в Центральном музее промьпаленных микроорганизмов института ВНИИгенетика, регистрационный номер ЦМПМ F-104. --- Морфологические признаки.Синтетическа  среда Чапека с сахарозой.На 10-е сутки роста диаметр колоний 63-70 мм, поверхность колонии сильно складчата , плоска , край ровный.

Воздушный мицелий слабо развит. Цвет колоний коричневато-серый по кра м желтый. Мицелий олигоспоровый, конидии йвйтло-коричневого цвета, локапизрваны преимущественн j в центре Колонии, Среда не окрашена.

Синтетическа  среда Чапека с крахмалом . На 10-е сутки роста диаметр колоний 78-80 мм, поверхность колонии плоска , ровна , в центре складчата , край ромый. Воздушный мицелий слабо развит цвет колонии серовато-желтый . :Мицелий олигоспоровый , конидии светло-коричневого цвета, локализованы в основном в центре; Среда не окрашена.

Сусло-агар. На 10-е сутки роста диаметр полоний 62-68 мм. Поверхност колонии плоска , сильно складчата , в центре слегка выпукла , край колонии неровн- й. Воздушный мицелий слабо развит. Мицелий олигоспоровый, конидии светло- коричневого цвета, локализованы в основном в центре колонии . Среда не окрашена.

Среда Сабуро. На 10-е сутки рбста

.диаметр колонии 58-60 мм.Поверхность

колонии плоска ,слабоскладчата ,край

колонии ровный.Воздушный мицелий плохо развит,белого цвета,в центре колонии окрашен в желтовато-коричневый цвет.Мицелий олигоспоровый,цвет конидий светло-коричневый.

Ломтики картофел . На 2-е сутки роста субстратный мицелий хорошо развит, желтого цвета, на 5-е сутки роста конидий в небольшом количестве светло-коричневого цвета. Ломтики не окрашены.

o

Физиологические признаки.Желатину разжижает.Молоко пептонизирует.Нитраты не восстанавливает.Крахмал гйдроОтношение к источникам углерода.

5 Глюкозу,галактозу,лактозу,фруктозу, мальтозу,ксилозу,маинозу,рамнозу,сахарозу , арабинозу, сорбит, гли11ерин, ассимилирует.

0

Источники инфор««ации, прин тые во внимание при экспертизе

1. Штамм I Ac,pergieeue Т-33. Хранитс  в Центральном музее npo№miленных микроорганизмов института

5 ВНИИгенетика под регистрацио ньм номером ЦМПМ Р-95.

Claims (1)

1. Формула ' изобретения

   Штамм. Aspergiaeus ntger БНИИгенетика-6, продуцирующий глюкоамилазу. Хранится в Центральном музее промышленных микроорганизмов института ВНИИгенетика, регистрационный номер ЦМПМ F-104.

   --- Морфологические признаки .Синтетическая среда Чапека с сахарозой.На 10-е сутки роста диаметр колоний 63-70 мм, поверхность колонии сильно складчатая, плоская, край ровный.

   Воздушный мицелий слабо развит. Цвет колоний коричневато-серый по краям желтый. Мицелий олигоспоровый, конидии Светло-коричневого цвета, локализованы преимущественн j в центре колонии. Среда не окрашена.

   Синтетическая среда Чапека с крахмалом.' На 10-е сутки роста диаметр колоний 78-80 мм, поверхность колонии плоская, ровная, в центре складчатая, край ровный. Воздушный мицелий слабо развит^ цвет колонии серовато-желтый. ^Мицелий олигоспоровый, конидйи светло-коричневого цвета, локализованы в основном в центре; Среда не окрашена.

   Сусло-агар. На 10-е сутки роста диаметр колоний 62-68 мм. Поверхность колонии Плоская, сильно складчатая, в центре слегка выпуклая, край колонии неровный. Воздушный мицелий слабо развит. Мицелий олигоспоровый, конидии светло- коричневого цвета, локализованы в основном в центре колонии. Среда не окрашена.

   Среда Сабуро. На 10-е сутки рбста диаметр колонии 58-60 мм.Поверхность колонии плоская,слабоскладчатая,край колонии ровный.Воздушный мицелий плохо развит,белого цвета,в центре колонии окрашен в желтовато-коричневый цвет.Мицелий олигоспоровый,цвет конидий светло-коричневый.

   5 Ломтики картофеля. На 2-е сутки роста субстратный мицелий хорошо развит, желтого цвета, на 5-е сутки роста конидий в небольшом количестве светло-коричневого цвета. ЛомтиIQ ки не окрашены.

   Физиологические признаки.Желатину разжижает.Молоко пептонизирует.Нитраты не восстанавливает.Крахмал гидролизует.

   ^5 . Отношение к источникам углерода.

   Глюкозу,галактозу,лактозу,фрук тозу, мальтозу,ксилозу,маннозу,рамнозу,сахарозу, арабинозу,сорбит,глицерин, ассимилирует.

   >

   20 Источники информации, принятые во внимание при экспертизе

   1. Штамм 5 Aspergieeus niger Т-33. Хранится в Центральном музее промышленных микроорганизмов института

   25 ВНИИгенетика под регистрационным номером ЦМПМ Р-95.