SU734272A1

SU734272A1 - Штамм 705-57-продуцент молокосвертывающего фермента

Info

Publication number: SU734272A1
Application number: SU772568594A
Authority: SU
Inventors: Татьяна Васильевна Емцева; Зоя Михайловна Геберович; Сергей Александрович Коновалов; Ирина Владимировна Карманова; Татьяна Анатольевна Харитонова
Priority date: 1977-12-27
Filing date: 1977-12-27
Publication date: 1980-05-15

Description

(54) ШТАММ BACILLUS. POUVMVXK

705-57-ПРОДУЦЕНТ МОЛОКОСЬЕРТЫВАКЩЕГО

12 Изобретение относитс к ферментной отрасли микробиологической промышленности и представл ет собой новый штамм бактерий, который может быть использован дл получени ферментного препарата,Зс1мен ю цего сычужный фермент, примен емый в сыр делии . Известен штамм BaciIIus polymyxa 13-13, характеризующийс тем, что он обладает молокосвертывающей активностью культуральнбй жидкости 3500 ед/мл и протеолитической активностью - 0,80 ед/мл 1. Недостатком штамма вл етс его недостаточно высока активность дл рентабельного производства ферментного препарата. Наиболее близким.по технической сущности к изобрютению вл етс исх ный штамм Вас.polymyxa 705, полученный из Всесоюзной коллекции микр организмов. Подробного описани кул турально-морфологических свойств нет. Указаний на активность молокосвертывающего фермента нет. По Данным исследователей активность молокосвертывакщего фермента,определенного по методу П тницкого Н,П и П тницкой И.Н., составл ет 5000ФЕРМЕНТА 6000 ед/мл и продолжительность культивировани 32 ч 2 . Целью изобретени вл етс получение нового штамма мутанта культуры Bac.polyroyxa 705, с повышенным биосинтезом молокосвертывающего фермента при глубинном способе культивировани . Использование штамма Вас.polymyxa 705-57 даст возможность получать активный комплекс молокосвертывающего фермента при глубинном способе культивировани , тем самым, интенсифицировать производство молокосвертывающего фермента. Штамм Вас.polymyxa 705-57 - продуцент молокосвертывающего фермента получен из штамма Вас.ро- lymyxa 705 путем индуцированной селекции с применением комбинированного воздействи этиленимина в концентрации 1:5000 при экспозиции 30 мин и УФ-лучей в дозе 4000 эрг/мм. Выделенный активный мутант подвергали проверке ферментативной активности при хранении и при пересевах на свежую питательную среду. Культивирование мутанта Вас.polymyxa 705-57 в глубинных услови х проводили на жидкой питательной среде, содержащей крахмал картофельный растворимый , лиэаты дрожжей, ), , MgSO МпЗОд , СаСОз, FeSO .

Рост штамма на указанной среде в услови х глубинного культивировани на качалке (со скоростью вращени 160-180 об/мин) при 26°С в колбах емкостью 750 мл со 100 мл питательно средфл интенсивный, культура имеет вид густой, слизистой бактериальной массы. Максимальное образование молокосвертывак цего фермента в культуральной жидкости навлюдаетс к 32 ч роста. Показатели активности молокосвертывающего фермента, определ емого по методу П тницкого Н.П. и

Л тницкой И.Н. составл ет 8000 ед/мл культуральной жидкости и протеазы 0,8-0,9 ед/мл (стандартный метод ГОСТ 202642-74).

Исследовани ми, проведенными в течение 6 мес., установлено, что при хранении и пассировании на среде с ломтикаки картофел высокий уровень активности молокосвертывающего фермента у мутанта Bac.polymyxa 70557 не снижаетс .

Сравнительные данные молокосвер:Тываю1дей и протеолитической активностей штаммов Bac.polymyxa приведены в табл. 1. . . Таблица

Полученный мутант Bac.polymyxa 7 57 имеет следующие морфологические и физиологические, признаки. Морфологические признаки.Гpa вIoложительные палочки с згжругленными . концами соединены по две или одиноч ные.Размер (2,3-5}Х(0,б-0,7) мкм.На 5 сутки встречаютс клетки со спора ми клостридиального типа. Дес тисуточна культура состоит из спор размером (1,2-1, 4)Х(0, 7-0, 7 Культуральные признаки. Сусло агаррост обильный, колонии белого цвета выпуклые, слизистые, блест щие, поверхность бугриста . Край колоний неровный, консистенци в зка , упру га . Среда без изменении. Картофельный агар-характер роста как и на сусло агаре. Эшби агар-рост диффузный или совсем отсутствует. МПА-рост слабый, в виде тонкого плоского налета, гладкий. Слизь не образуетс . Край колонии фестончаты поверхность неровна . Среда без види мых изменений. Среда Чапека-колонии мелкие, про рачные, слизистые, беловато-серого цвета. Ломтики картофел -рост обильный, колонии белые, слизистые, выпуклые за счет пузырьков газа. Картофель разм гчаетс . Ломтики моркови-рост слизистый очень обильный, прозрачный, слегка желтоватым оттенком. МПБ-рост слабый. Пленки не образует . На поверхности диффузионный налет. На дне рыхлый осадок. В середине столбика рост в виде тонкого стержн . Филиологические признаки.Среда Гетчинсона-рост отсутствует,клетчатка не разрушаетс . Молоко створаживаетс через сутки . Сыворотка отстает и хорс ио отдел етс по всей толще столбика. Желатина-рост на поверхности и в глубине по уколу.; Разжижение кратеровидное . Крахмал гидролизуетс , рост пышОтношение к источникам углерода. Глюкозу, сахарозу, лактозу, ксилозу, арабинозу, маннит, глицерин усваивает . Инозит не усваивает, рамнозу усва- ивает очень слабо. Отношение к температуре. Развиваетс при температуре от 10 до 45с с оптимумом при . Максимальное образование молокосвертывающего фермента при . Нитраты восстанавливает в нитриты. Отношение к кислороду - факультативный анаэроб. Пригодность фермента, синтезируемого Bac.polymyxa 705-57, дл свертывани молока в сыроделии проводили по методу быстрой пробы, который дает возможность предсказать органолептические свойства сыра, приготовленного с заменителем сычужного фермента .

Штамм Bac.polymyxa 705-57 по результатам быстрой пробы пригоден дл свертывани молока в сьцроделии. Дл свертывани -равного количества молока требуетс в 2,5 раза меныле раствора , продуцируемого

предлагаеквлм штаммом, чем штаммоманалогом .

Штамм Bac.polymyxa 705-57 обладаej более высоким отношением молокосвертывгиощей активности к протеоли|Тической (данные приведены в табл.2),

Таблица2

Claims

Формула изобретения

Штамм Bacillus polymyxa 705-57 продуцент молокосвертывающего фермента. Хранится в коллекции культур микроорганизмов Всесоюзного научно-исследовательского института генетики и селекции промышленных микроорганизмов, регистрационный номер ЦМПМ-В-1531. 45

Морфологические признаки. Клетки грамположительные, палочки с закругленными концами величиной 2,3-5*0,60,7 мкм.Размер спор 1,2-1,4χ0,70,75 мкм.

Культуральные признаки. Сусло-агаррост обильный, колонии белого цвета, выпуклые, слизистые, блестящие. Край колонии неровный, консистенция вязкая, упругая.

Картофельный агар-характер роста как и на сусло-агаре.

Эшби агар-рост диффузионный или совсем отсутствует. МПА-рост слабый, в виде плоского налета, гладкий, 30 слизь не образуется.

Край колонии фестончатый,- поверхность неровная. Среда без видимых изменений.

МПБ-рост слабый, пленка отсутству35 ет, на поверхности очень слабый диф-г фузионный налет. На дне рыхлый осадок. Физиологические признаки. Среда Гетчинсона - рост отсутствует. Клетчатка не разрушается.

Молоко створаживает через сутки. Сыворотка отстает и хорошо отделяется по всей толще столбика.

Отношение к источникам углерода. Усваивает глюкозу, сахарозу, лактозу, ксилозу, арабинозу, маннит, глицерин; не усваивает.- инозит, очень слабо усваивает рамнозу.

Крахмал гидролизует.

Нитраты в нитриты восстанавливает.

Отношение к температуре-развивает50 ;я при температуре от Ю^до 45°С с оптимумом при 30°С. Максимальное образование фермента при 26°C.