SU1440921A1 - Штамм бактерий BacILLUS меGатеRIUм-продуцент металлопротеиназы - Google Patents
Штамм бактерий BacILLUS меGатеRIUм-продуцент металлопротеиназы Download PDFInfo
- Publication number
- SU1440921A1 SU1440921A1 SU874258893A SU4258893A SU1440921A1 SU 1440921 A1 SU1440921 A1 SU 1440921A1 SU 874258893 A SU874258893 A SU 874258893A SU 4258893 A SU4258893 A SU 4258893A SU 1440921 A1 SU1440921 A1 SU 1440921A1
- Authority
- SU
- USSR - Soviet Union
- Prior art keywords
- strain
- metalloproteinase
- producer
- medium
- bacillus megaterium
- Prior art date
Links
Landscapes
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Abstract
Изобретение относитс к биотех- . нологии и может примен тьс в различных отрасл х народного хоз йства и медицине. ГГредлагаетс штамм Bacillus megateriun BKIIM В-ЗЧ37-продуцент металлопротеиназы, получен с помощью селекционных методов из штамма В.те- gaterium ЦМ1М В-603 с использованием молочного агара с добавкой дрож- жеполисахаридной среды в качестве селективного фактора. Штамм-продуцент BKIIM-3937 за 23-25 ч культивировани при 30°С с интенсивной аэрацией и перемешиванием секретирует металлопротеиназу в количестве 500 мг/л культуральной жидкости, что в 2 раза больше по сравнению с из - BectHbM штаммом В.negaterшто-проду- центом металлопротеиназыо Специфическа металлопротеиназа, выдел ема культурой B.megaterium, может быть использована при производстве аспартама-пищевого подсластител , которьй в 200 раз слаще сахара. (Л . 4 О ;О to
Description
Изобретение относитс к биотехнологии , в частности к производству ферментов, и касаетс нового штамма бактерий, продуцирующего внеклеточную металлопротеиназу (нейтральную протеиназу).
Металлопротеиназы IimpoKo используютс в народном хоз йстве и могут примен тьс в медицине и парфюмерии при производстве пищевых продуктов и напитков., кожевенной промьгашен- ности.
Штамм Bacillus megaterium ВКПМ В-3937 получен из штамма Bacillus megaterium ЦМПМ В-603 в результате применени селекционньзс методов с использованием молочного агара с добавлением дрожжеполисахаридной среды в качестве селективного фактора.
При культивировании на дрожжеполисахаридной среде в течение 23-25 ч при штамм BKIIM В-3937 вьщел ет только один фермент - металлопротеиназу , активность которого по,гидролзу азоказеина достигает 160 ед/мл, а при определении на синтетическом субстрате 1,8 ед/мл, что соответствует продукции 500 мг фермента на 1 л культуральной жидкости. Протео- литическа активность на казеиновом субстрате по модифицированному -методу Ансона составл ет в среднем 9,4 ед/мл (с колебани ми активности от 7,6 до 12,6 ед/мп),
Металлопротеиназа (нейтральна протеиназа), продуцируема с помощь штамма BKIM В-3937, обладает устойчивостью к ингибированию высокими концентраци ми реагентов, что отличает ее от металлопротеиназ, секре- тируемых другими видами микроорганимов . Эта специфическа особенность фермента вл етс важной дл ее использовани в народном хоз йстве при синтезе интенсивного подсластител - аспартама.
Культурально-морфологические принаки штамма Boinegaterium ВКПМ В-393
Морфологи . Грамположительна палочка размером 2,0x5,0x1,,5 мкм. Образует овальные споры с центральным расположением в клетке.
М со-пептонный агар (МПА) без глюкозы. На 4-е сут роста при 30°С образует плоские шероховатые проз рачные колонии диаметром 9-10 мм с ровными кра ми, пигмент не вьщел ет , споры не образует.
0
5
0
5
0
5
0
5
0
5
М со-пептонный агар с 1%-ной глюкозы и агар Хоттингера с 1%-ной глюкозы . На 4-е сут роста при 30 С образует приподн тые над субстратом колонии диаметром 7-8 мм гладкие-; блест щие с ровными кра ми беловато- серого цвета, пигмент в среду не вьщел ет, обильно спорулирует.
Среда Bergey № 1 с дрожжевым экстрактом. На 4-е сут роста при 30 С образует матовые плоские в центре мелкоскладчатые к краю колонии диаметром 9-10 мм с фестончатыми кра ми белого цвета, пигмент в среду не вьщел ет, споры не образует.
Синтетическа среда Green и Slepecka. На 4-е сут роста при образует белые блест щие колонии диаметром 3-4 мм с ровными кра ми, образует споры.
Молочна среда. На 4-е сут роста при 30 С образует плоские шероховатые колонии диаметром 7-9 мм матовые белого цвета с poBHbihm кра ми, пигмент в среду не вьдел ет, споры образует.
Среда L + глюкоза 1%. На 4-е сут роста при 30 С образует плоские шероховатые матовые колонии диаметром 13-15 мм белого цвета с ровными кра ми , пигмент в среду не вьщел ет, споры образует.
Казеинова среда. На 2-е сут роста при 30°С образует гладкие блест щие колонии диаметром 13-14 мм белого цвета с ровными кра ми, пигмент в среду не вьщел ет, обильно спорулируето На 3- 4-е сут отмечаетс лизис культуры.
Посев уколом в столбик с казеиновой средой. Сплошной рост на поверхности столбика, внутри агара рост отсутствует - аэроб.
Рост в жидких питательных средах. При посеве на жидкую питательную -сред;у МПВ с глюкозой и среду Bergey № 1 с глюкозой без встр хивани наблюдаетс слабое помутнение среды, пленка отсутствует, образуетс осадок скудньш рыхльй слизистьм.
Картофель. Рост обильньй, поверхность слизиста серовато-белого цвета , пигментаци отсутствует.
Биохимические свойства.
Желатину активно разжижает.
Молоко пептонизирует и коагулирует о
1440921 нитриты.
Нитраты восстанавливает в
Крахмал гидролизует.
Отношение к углеводам и спиртам. сваивает арабинозу, глюкозу, ксило у, маннозу,- лактозу, мальтозу, гаактозу , сахарозу, маннит, глицерин.
На 6-7 день роста при 30 С на глюкозе, глицерине, сахарозе, мальтозе и арабинозе сильно подкисл ет среду, на лактозе, галактозе и ман- ните подкисление среды слабое, на аннозе и ксилозе рН не мен етс . ост на ксилозе и галактозе сопровождаетс вьщелением газа.
Отношение к лизolц мy. Воздействие л,изрцимом в концентрации 40 мг/мл в течение 1 ч при 37°С вызывает гибель 63% клетоко
Штамм хран т в виде лиофильно высушенной культуры, а также на ага- изованной картофельной среде с 2%- ной глюкозы, среде L с 1%-ной глюкозы , под вазелиновым маслом и в гли- - церине.
Пример 1. Штамм B.megaterium КПМ В-3937 выращивают в течение 4-5 сут на картофельном агаре - срее с картофельным отваром (300 г картофел на 1 л воды), : содержащем % глюкоза 2,0, агар-агара 2,0, осталь-, ное картофельный отвар до 1л, рН 7.О..
Засев питательной среды провод т ли вегетативными клетками, или суспензией спор, которую подвергают предварительной термообработке при 65 С в течение 15 мин в количестве 10 на 1 МП среды.
В качестве ферментационной среды используют дрожже-полисахаридную (ДПС) среду следующего состава, мас.%:
Велково-витаминный
концентрат из дрож- . жей2,5-3,0
си ло ра 10 пр су с та 15 пр по до
20
к во но 25 об
пр но ку
ни ср но сп не та
зр
35
40
Ф
ВК ин
1
Кукурузна мука 2,0 CaCli0,3
Вода - До 1 л рН 7,5-7,6 до стерилизации,
Через 23 ч культивировани максимальный уровень накоплени метал- лопротеиназы в супернатанте куль.ту- ральной жидкости составл ет 1,8 ед/мл при определении на синтетическом субстрате DNP-Gly-Gly-Ile-Arg и 160 ед/мл при определении активности с использованием в качестве субстрата азоказеина, что соответствует продукции 500 мг на 1л. Активность по модифицированному методу Анеона достигает 9,4 ед/мл.
Пример 2. Выращенную в колбах по примеру 1 культуральную жидкость B.megaterium ВК1ГМ В-3937 6-часового возраста пересевают в 10-лит-. ровьй ферментер на опытно-промышленной установке в количестве 10% по объему.
Культивирование в аппарате ведут при аэрации 1:1 и перемешивании 800 об/мин при . В качестве пе- ногасител используют ниоген. Через 27 ч роста количество фермента в культуральной жидкости составл ет 500 мг/л.
Применение штамма с использованием простой относительно дешевой среды позвол ет увеличить рентабельность промьшшенного производства специфической металлопротеиназы, необходимой дл производства аспар- тама„
Claims (1)
- Формула изобретениШтамм бактерий Bacillus megaterium ВКПМ В-3937 - продуцент металлопротеиназы .Редактор М.Недолуженко Техред А.КравчукЗаказ 6143/29Тираж 520ПодписноеВНИИПИ Государственного комитета СССРпо делам изобретений и открытий 113035, Москва, Ж-35, Раушска наб., д. 4/5Корректор Л.Патай
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
SU874258893A SU1440921A1 (ru) | 1987-06-09 | 1987-06-09 | Штамм бактерий BacILLUS меGатеRIUм-продуцент металлопротеиназы |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
SU874258893A SU1440921A1 (ru) | 1987-06-09 | 1987-06-09 | Штамм бактерий BacILLUS меGатеRIUм-продуцент металлопротеиназы |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
SU1440921A1 true SU1440921A1 (ru) | 1988-11-30 |
Family
ID=21309654
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
SU874258893A SU1440921A1 (ru) | 1987-06-09 | 1987-06-09 | Штамм бактерий BacILLUS меGатеRIUм-продуцент металлопротеиназы |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
SU (1) | SU1440921A1 (ru) |
-
1987
- 1987-06-09 SU SU874258893A patent/SU1440921A1/ru active
Non-Patent Citations (1)
Title |
---|
Авторское свидетельство СССР № 1240056, кл. С 12 N 9/54, 1984. Люблинска Л.А. и др. Синтез и использование хромофорных динитро- фенильных субстратов металлопроте- иназ, Биоорганическа хими . 1987, т.13, № 10, с.1331-1337. Микробиологическа промьшшенность, Экспресс-информаци , вып. 11, М., 1981, с.22. * |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
US4284722A (en) | Heat and acid-stable alpha-amylase enzymes and processes for producing the same | |
AU650487B2 (en) | Process for preparing trehalulose and isomaltulose | |
Uma et al. | Production and properties of invertase from a Cladosporium cladosporioides in SmF using pomegranate peel waste as substrate | |
Shamala et al. | Preliminary studies on the production of high and low viscosity dextran by Leuconostoc spp. | |
KR100271137B1 (ko) | 신규 미생물 트리코스포로노이데스 마디다 디에스911 및 이 균주를 이용한 에리스리톨의 제조방법 | |
SU1440921A1 (ru) | Штамм бактерий BacILLUS меGатеRIUм-продуцент металлопротеиназы | |
Wang et al. | Improved extracellular transferase enzyme production by Aspergillus foetidus for synthesis of isooligosaccharides | |
JPH0449396B2 (ru) | ||
JP3957132B2 (ja) | 低濁性醤油乳酸菌の分離用培地、同培地を用いる低濁性醤油乳酸菌の分離法及び同乳酸菌を用いる清澄度の高い醤油の製造法 | |
US3663373A (en) | Process for the preparation of iodinin | |
RU2744107C1 (ru) | Штамм бактерий Xanthomonas fuscans - продуцент ксантановой камеди | |
JP2785323B2 (ja) | β―グルコシダーゼ及びその製造法 | |
KR0177478B1 (ko) | 에리스리톨 생성능을 갖는 칸디다속 균주 및 이를 이용한 에리스리톨의 제조방법 | |
KR0136299B1 (ko) | 미생물세포벽 용해효소와 그의 생산 미생물 | |
SU721484A1 (ru) | Штамм вниигенетика-42-продуцент- -амилазы | |
SU382677A1 (ru) | ||
SU1738852A1 (ru) | Штамм бактерий BacILLUS Sp.-продуцент @ -циклодекстринтрансферазы | |
SU958498A1 (ru) | Способ получени @ -маннаназы | |
RU2126831C1 (ru) | Штамм гриба pleurotus ostreatus - продуцент белковой биомассы | |
NIHARIKA et al. | ANALYSING THE BIOCATALYTIC ASPECT OF AMYLASE FROM PLANT AND MICROBIAL SOURCES FOR INDUSTRIAL APPLICATION | |
Majumder et al. | Optimization of culture conditions of a novel glucan producing glucansucrase from Leuconostoc dextranicum NRRL B-1146 | |
SU961379A1 (ru) | Штамм SснWаNNIомYсеS aLLUVIUS-1167 - продуцент @ -галактозидазы | |
SU734263A1 (ru) | Штамм вниигенетика-6,продуцирующий глюкоамилазу | |
KR0178085B1 (ko) | 트리코스포로노이데스 속 변이균주 및 이를 이용한 에리스리톨의 제조방법 | |
KR0162168B1 (ko) | 에리스리톨의 제조방법 |