SU1738852A1 - Штамм бактерий BacILLUS Sp.-продуцент @ -циклодекстринтрансферазы - Google Patents
Штамм бактерий BacILLUS Sp.-продуцент @ -циклодекстринтрансферазы Download PDFInfo
- Publication number
- SU1738852A1 SU1738852A1 SU904827231A SU4827231A SU1738852A1 SU 1738852 A1 SU1738852 A1 SU 1738852A1 SU 904827231 A SU904827231 A SU 904827231A SU 4827231 A SU4827231 A SU 4827231A SU 1738852 A1 SU1738852 A1 SU 1738852A1
- Authority
- SU
- USSR - Soviet Union
- Prior art keywords
- strain
- bacillus
- ase
- cgt
- cyclodextrin
- Prior art date
Links
Landscapes
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Enzymes And Modification Thereof (AREA)
Abstract
Использование: биотехнологи . Сущность изобретени : штамм Bacillus sp. BKM В-1973Д выделен из почвы Дуванского района Башкирии. Продуцирует / -циклодекст- ринглюканотрансферазу (ЦГТ-азу) на минеральных средах с небольшим количеством белковых добавок, используемых в качестве источников витаминов. Активность ЦГТ-азы в культуральной жидкости 30,5- 38,0 ед./л после 60-72 ч культивировани . 2 табл., 1 ил.
Description
Изобретение относитс к биотехнологии , а именно к новому штамму - продуценту циклодекстринглюканотрансферазы (а-1,4-глюкан-4-гликозилтрансфераза цик- лизующа , КФ 2.4.1.19; ЦГТ-аза), фермента, который катализирует образование цикло- декстринов из глюканов, перенос часть цепи 1,4-глюкана на нередуцирующий конец собственной молекулы и удал таким образом часть молекулы глюкана в форме кольца .
Известен штамм Bacillus clrculans, селектирующий ЦГТ-азу, котора преимущественно образует / -циклодекстрин.
Существенный недостаток этого штамма в том. что он, кроме ЦГТ-азы, продуцирует протеолитические ферменты, которые значительно снижают активность ЦГТ-азы, гидролизу ее. При использовании ЦГТ-азы, продуцируемой В. clrculans, необходимо избавл тьс от протеаз, что вл етс дорогим и трудоемким процессом.
Известны п тьалкалофильных штаммов Bacillus sp. 38-2. Bacillus sp. 135, Bacillus sp. 169, Bacillus sp. 13. Bacillus sp. 17-1, a также штамм В. megaterium T5. продуцирующие ЦГТ-азы, образующие преимущественно р-циклодекстрин.
Недостатком известных штаммов вл етс то, что они обладают невысокой продуктивностью по ЦГТ-азе. При этом они способны к секреции ЦГТ-азы только на сложных питательных средах, содержащих большое количество белковых компонентов , таких как пептон, дрожжевой экстракт (автолизат), концентрированный настой зерен кукурузы и т. д., что повышает стоимость процесса ферментации.
Целью изобретени вл етс получение нового алкалофильного штамма, обладающего высокой продуктивностью по ЦГТ-азе, преимущественно образующей /3-циклодекстрин .
(Л
С
XI
со оо
00
ел
ND
Предлагаемый штамм-Bacillus sp. 6.6.3 депонирован во Всесоюзной коллекции микроорганизмов под номером ВКМ Б- 1793Д, продуцирует ЦГТ-азу, преимущественно образующую ft -циклодекстрин, на минеральной среде с небольшим количеством белковых добавок в качестве источников витаминов, с высокой активностью.
Штамм выделен из почвы Дуванского района Башкирии.
Культурально-морфологические признаки . Единичные, иногда в парах, палочки шириной 0,5-0,7 мкм, длиной 2-5 мкм. Окраска по Граму - вариабельна, клетки обра- зуют споры в спорангии - центральна или терминальна , клетки подвижны. Штамм при росте на м сопентонном агаре через 48 ч при 37°С образует единичные колонии с четким, ровным краем, размером в диамет- ре 3-6 мм, поверхность колонии гладка , колони полупрозрачна , белеса . При росте на картофельно-глюкозном агаре (рН 9,0) штамм образует через 48 ч при 37°С единичные колонии с ровным краем, размером 4-9 мм, поверхность колонии гладка консистенци в зка (на МПА маслоподобна ), профиль колонии выпуклый (на МПА плоский ), колони полупрозрачна , матово-белеса .
Биохимические признаки.
Реакци Фогес-Проскауэра отрицательна ; каталазна активность положительна ; анаэробный рост слабый; штамм образует кислоту при росте на углеводах - глюкозе, ксилозе, рибозе, мальтозе, лактозе , арабинозе, раффинозе, мелицитозе, рамнозе, галактозе, сахарозе и спирте-инозите; газ из выше приведенных углеводов и спирта не образует; гидролизует крахмал; очень слабо гидролизует казеин и желатину; цитрат и пропионат не утилизирует; тирозин и фенилаланин не разлагает; восстанавливает нитраты; реакци на лецитиназу отсутствует; индол не образует; дегидрокси- ацетон не образует; рост в питательном бульоне с 5 и 7% NaCt отсутствует; услови роста: рН среды 7,0-10,0, температура 20- 46°С. Штамм 6.6.3(ВКМ В-1793Д) продуци- рует на жидких средах ЦГТ-азу, образующую преимущественно / -циклодекстрин . Услови хранени : периодически выращиваема культура инкубируетс на картофельно-глюкозном агаре рН 9,0, при температуре 37-40°С в течение 4 сут, хранитс на этой же среде при 4°С в течение 6 мес.. ,,
Штамм Bacillus Sp. 6.6.3 {ВКМ В - 1793Д) был испытан в лабораторных услови х.
П р и м е р 1, Инокул т штамма Bacillus sp. 6.6.3 (ВКМ В-1793Д), выращенный на чашках Петри с картофельно-глюкозным агаром (рН 9,0) в течение 7 сут при 37°С, смывают стерильной водой из расчета 10 мл воды на одну чашку и внос т в колбы объемом 500 мл, содержащие по 100 мл стерильных сред.
Состав сред приведен в табл. 1 (соотношение инокул та и питательной среды 1:10, культивирование осуществл ют на качалках со скоростью встр хивани 180 мин , температура выращивани 37°С).
Через каждые 12 ч культивировани отбирают пробу культуральной жидкости в которой определ ют ЦГТ-азу известным методом.
Динамика накоплени ЦГТ -азы в культуральной жидкости приведена в табл. 2, В пробах, отобранных через 48 и 96 ч культивировани , измер ют протеазную активность известным методом. Штамм Bacillus sp. 6.6.3 на средах А, В и С не продуцирует протеазы.
Пример 2. Специфичность ЦГТ-азы определ ют по продуктам реакции этого фермента с крахмалом. Анализ продуктов ферментативной конверсии крахмала провод т методом высокоэффективной жидкостной хроматографии. Услови реакции: 2 мл 3%-ного раствора крахмала в 0,05 М трис-НС буфере, рН 8,0 смешивают с 1 мл раствора фермента, смесь помещают в термостат на 30 мин при температуре 40°С. Реакцию останавливают изгревом смеси до 100°С в течение 3 мин. Услови хроматогра- фировани : элюент- 65%-ный водный аце- тонитрил, колонка дл разделени продуктов реакции SEPARON NH2, детектор -дифференциальный рефрактометр, скорость подачи элюента 0,5 мл/мин, хроматог- рамма продуктов реакции представлена на чертеже. Соотношение продуктов конверсии крахмала ЦГТ-азой штамма Bacillus sp. 6.6.3 (В КМ Б-1793Д) составл ет, %: а -циклодекстрин 6,0;/ -циклодекстрин 83,0; у-цик- лодекстрин 11,0. В реакцию вступило 92% крахмала. В качестве раствора фермента используетс культуральна жидкость выращенного на среде С штамма 6.6.3, разведенна в 5 раз буфером 0,05 М трис- HCt, рН 8,0.
Таким образом, штамм Bacillus sp. 6.6.3 (ВКМ В-1793) обладает более высокой продуктивностью по ЦГТ-азе на сложных питательных средах, чем известные алкалофильные штаммы, а также, продуцирует ЦГТ-азу в значительных количествах
(80% от максимальной продуктивности) на среде с небольшим количеством белковых добавок в качестве источников витаминов, что позвол ет экономить дорогие компоненты питательной среды: пептон и дрожжевой автолизат экстракт в 80 раз и концентрированный настой зерна кукурузы в 800 раз с учетом снижени активности культуры при выращивании на этой среде. Кроме того, штамм 6.6.3 не обладает проте- азнрй активностью, культура продуцирует
0
ЦГТ-азу, образующую преимущественно циклодекстрин, который имеет наибольшее применение в фармакологии, медицине, пищевой промышленности и других област х индустрии.
Claims (1)
- Формула изобретени Штамм бактерий Bacillus sp. В KM B1793Д - продуцент /J-циклодекстринтрансферазы.Примечание. Вода дистиллированна до 1 л доводитс во всех средах после навескикомпонентов.Таблица 1Таблица 2
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| SU904827231A SU1738852A1 (ru) | 1990-05-21 | 1990-05-21 | Штамм бактерий BacILLUS Sp.-продуцент @ -циклодекстринтрансферазы |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| SU904827231A SU1738852A1 (ru) | 1990-05-21 | 1990-05-21 | Штамм бактерий BacILLUS Sp.-продуцент @ -циклодекстринтрансферазы |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| SU1738852A1 true SU1738852A1 (ru) | 1992-06-07 |
Family
ID=21515278
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| SU904827231A SU1738852A1 (ru) | 1990-05-21 | 1990-05-21 | Штамм бактерий BacILLUS Sp.-продуцент @ -циклодекстринтрансферазы |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| SU (1) | SU1738852A1 (ru) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5786343A (en) * | 1997-03-05 | 1998-07-28 | Immudyne, Inc. | Phagocytosis activator compositions and their use |
-
1990
- 1990-05-21 SU SU904827231A patent/SU1738852A1/ru active
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| Патент US № 4477568, кл. С 12 N9/10, опублик. 1984. Патент US №4135977, кл. С 12 N 9/10, опублик. 1979. Патент US № 3923598, кл. С 12 N 9/10, опублик. 1979. * |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5786343A (en) * | 1997-03-05 | 1998-07-28 | Immudyne, Inc. | Phagocytosis activator compositions and their use |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US4284722A (en) | Heat and acid-stable alpha-amylase enzymes and processes for producing the same | |
| Grootwassink et al. | Non-specific β-fructofuranosidase (inulase) from Kluyveromyces fragilis: Batch and continous fermentation, simple recovery method and some industrial properties | |
| Singh et al. | Production, purification and characterization of thermostable α-amylase from soil isolate Bacillus sp. strain B-10. | |
| EP0140610B1 (en) | A process for producing thermostable alpha-amylases by culturing micro-organisms at elevated temperatures | |
| Nakamatsu et al. | Microbial production of glucose oxidase | |
| Kobayashi et al. | Purification and characterization of a new type of α-glucosidase from paecilomyces lilacinus that has transglucosylation activity to produce α-1, 3-and α-1, 2-linked… | |
| Cortezi et al. | Temperature effect on dextransucrase production by Leuconostoc mesenteroides FT 045 B isolated from Alcohol and Sugar Mill Plant | |
| CA2019756C (en) | Novel thermoduric and aciduric pullulanese enzyme and method for its production | |
| Dunican et al. | Extracellular polysaccharide synthesis by members of the genus Lactobacillus: conditions for formation and accumulation | |
| IL22367A (en) | Production of amyloglucosidase | |
| CN106754486B (zh) | 一株高产海藻糖合酶的假单胞菌及其发酵产酶方法 | |
| CN107118980A (zh) | 来自海洋的解角质素微杆菌mcda02及其产酶方法与产品 | |
| SU1738852A1 (ru) | Штамм бактерий BacILLUS Sp.-продуцент @ -циклодекстринтрансферазы | |
| CN100374555C (zh) | 一种利用酵母生产β-环糊精的方法 | |
| WO2023000618A1 (zh) | 一种小溪芽孢杆菌及其应用 | |
| Sabioni et al. | Cyclodextrin glycosyltransferase production by alkalophilic Bacillus lentus. | |
| Ramakrishna et al. | Evaluation of solid, slurry, and submerged fermentations for the production of cyclodextrin glycosyl transferase by Bacillus cereus | |
| Varbanets et al. | Marine actinobacteria–producers of enzymes with Α-l-rhamnosidase activity | |
| RU2312135C2 (ru) | Штамм бактерий paenibacillus campinasensis - продуцент циклодекстринглюканотрансферазы | |
| US3804718A (en) | Method of producing beta-amylase by bacterial fermentation | |
| Oyewole et al. | Biotechnologies/fermentation technologies for large-scale industrial enzyme production for the food and beverage industry | |
| RU2455352C1 (ru) | ШТАММ Bacillus amyloliquefaciens - ПРОДУЦЕНТ АЛЬФА-АМИЛАЗЫ Bacillus amyloliquefaciens | |
| Iizuka et al. | Synthesis of Fructan and Oligosaccharides by Microbial and Plant Fructosyltransf erasest | |
| US5356805A (en) | Gamma-polyglutamate hydrolase | |
| El-Sayed et al. | Semicontinuous penicillin production by two Penicillium chrysogenum strains immobilized in calcium alginate beads |